FI67876C - Foerfarande foer framstaellning av antimikrobiellt och antitumoert verkande derivat av tallysomycin a och tallysomycin b - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av antimikrobiellt och antitumoert verkande derivat av tallysomycin a och tallysomycin b Download PDFInfo
- Publication number
- FI67876C FI67876C FI802198A FI802198A FI67876C FI 67876 C FI67876 C FI 67876C FI 802198 A FI802198 A FI 802198A FI 802198 A FI802198 A FI 802198A FI 67876 C FI67876 C FI 67876C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- tallysomycin
- tallycomycin
- derivative
- och
- derivatives
- Prior art date
Links
- 108700003774 talisomycin Proteins 0.000 title claims description 60
- VUPBDWQPEOWRQP-RTUCOMKBSA-N [(2R,3S,4S,5R,6R)-2-[(2R,3S,4S,5S,6S)-2-[(1S,2S)-3-[[(2R,3S)-5-[[(2S,3R)-1-[[2-[4-[4-[[4-amino-6-[3-(4-aminobutylamino)propylamino]-6-oxohexyl]carbamoyl]-1,3-thiazol-2-yl]-1,3-thiazol-2-yl]-1-[(2S,3R,4R,5S,6S)-5-amino-3,4-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-2-hydroxyethyl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-hydroxy-5-oxopentan-2-yl]amino]-2-[[6-amino-2-[(1S)-3-amino-1-[[(2S)-2,3-diamino-3-oxopropyl]amino]-3-oxopropyl]-5-methylpyrimidine-4-carbonyl]amino]-1-(1H-imidazol-5-yl)-3-oxopropoxy]-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl] carbamate Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](NC(=O)C[C@H](O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)c1nc(nc(N)c1C)[C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)[C@H](O[C@@H]1O[C@@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](OC(N)=O)[C@@H]1O)c1cnc[nH]1)C(=O)NC(O[C@@H]1O[C@@H](C)[C@@H](N)[C@@H](O)[C@H]1O)C(O)c1nc(cs1)-c1nc(cs1)C(=O)NCCCC(N)CC(=O)NCCCNCCCCN VUPBDWQPEOWRQP-RTUCOMKBSA-N 0.000 title claims description 6
- JBMBADLYKKSXRS-FUATYRKLSA-N [(2R,3S,4S,5R,6R)-2-[(2R,3S,4S,5S,6S)-2-[(1R,2S)-2-[[6-amino-2-[(1S)-3-amino-1-[[(2S)-2,3-diamino-3-oxopropyl]amino]-3-oxopropyl]-5-methylpyrimidine-4-carbonyl]amino]-3-[[(2R,3S)-5-[[(2S,3R)-1-[[2-[4-[4-[3-(4-aminobutylamino)propylcarbamoyl]-1,3-thiazol-2-yl]-1,3-thiazol-2-yl]-1-[(2S,3R,4R,5S,6S)-5-amino-3,4-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-2-hydroxyethyl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-hydroxy-5-oxopentan-2-yl]amino]-1-(1H-imidazol-5-yl)-3-oxopropoxy]-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl] carbamate Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](NC(=O)C[C@H](O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)c1nc(nc(N)c1C)[C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)[C@@H](O[C@@H]1O[C@@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](OC(N)=O)[C@@H]1O)c1cnc[nH]1)C(=O)NC(O[C@@H]1O[C@@H](C)[C@@H](N)[C@@H](O)[C@H]1O)C(O)c1nc(cs1)-c1nc(cs1)C(=O)NCCCNCCCCN JBMBADLYKKSXRS-FUATYRKLSA-N 0.000 title description 5
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 21
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 16
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims description 15
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 13
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 11
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 241000203644 Streptoalloteichus hindustanus Species 0.000 claims description 7
- KIDHWZJUCRJVML-UHFFFAOYSA-N putrescine Chemical compound NCCCCN KIDHWZJUCRJVML-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 125000000954 2-hydroxyethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])O[H] 0.000 claims description 3
- 239000005700 Putrescine Substances 0.000 claims description 3
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 2
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 27
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 27
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 20
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 18
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical class N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 15
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 14
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 14
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 13
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 13
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 11
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 9
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 8
- -1 amine compound Chemical class 0.000 description 8
- VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N ammonium formate Chemical compound [NH4+].[O-]C=O VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 7
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 7
- QRBLKGHRWFGINE-UGWAGOLRSA-N 2-[2-[2-[[2-[[4-[[2-[[6-amino-2-[3-amino-1-[(2,3-diamino-3-oxopropyl)amino]-3-oxopropyl]-5-methylpyrimidine-4-carbonyl]amino]-3-[(2r,3s,4s,5s,6s)-3-[(2s,3r,4r,5s)-4-carbamoyl-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)- Chemical compound N=1C(C=2SC=C(N=2)C(N)=O)CSC=1CCNC(=O)C(C(C)=O)NC(=O)C(C)C(O)C(C)NC(=O)C(C(O[C@H]1[C@@]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)(C)O[C@H]1[C@@H]([C@](O)([C@@H](O)C(CO)O1)C(N)=O)O)C=1NC=NC=1)NC(=O)C1=NC(C(CC(N)=O)NCC(N)C(N)=O)=NC(N)=C1C QRBLKGHRWFGINE-UGWAGOLRSA-N 0.000 description 6
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 6
- DPEYHNFHDIXMNV-UHFFFAOYSA-N (9-amino-3-bicyclo[3.3.1]nonanyl)-(4-benzyl-5-methyl-1,4-diazepan-1-yl)methanone dihydrochloride Chemical compound Cl.Cl.CC1CCN(CCN1Cc1ccccc1)C(=O)C1CC2CCCC(C1)C2N DPEYHNFHDIXMNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- LTQCLFMNABRKSH-UHFFFAOYSA-N Phleomycin Natural products N=1C(C=2SC=C(N=2)C(N)=O)CSC=1CCNC(=O)C(C(O)C)NC(=O)C(C)C(O)C(C)NC(=O)C(C(OC1C(C(O)C(O)C(CO)O1)OC1C(C(OC(N)=O)C(O)C(CO)O1)O)C=1NC=NC=1)NC(=O)C1=NC(C(CC(N)=O)NCC(N)C(N)=O)=NC(N)=C1C LTQCLFMNABRKSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010035235 Phleomycins Proteins 0.000 description 5
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 5
- 231100001274 therapeutic index Toxicity 0.000 description 5
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 4
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 4
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 4
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 4
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 4
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 4
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 description 4
- WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N propylamine Chemical compound CCCN WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 4
- XFNJVJPLKCPIBV-UHFFFAOYSA-N trimethylenediamine Chemical compound NCCCN XFNJVJPLKCPIBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 3
- 208000006552 Lewis Lung Carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 241000187480 Mycobacterium smegmatis Species 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 3
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 3
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 3
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 3
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- 108700039493 victomycin Proteins 0.000 description 3
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 3
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 2
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000015914 Non-Hodgkin lymphomas Diseases 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 206010061924 Pulmonary toxicity Diseases 0.000 description 2
- 208000006268 Sarcoma 180 Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241001147844 Streptomyces verticillus Species 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KTUQUZJOVNIKNZ-UHFFFAOYSA-N butan-1-ol;hydrate Chemical compound O.CCCCO KTUQUZJOVNIKNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 2
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000012847 fine chemical Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 2
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000001320 lysogenic effect Effects 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 231100000374 pneumotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000007047 pulmonary toxicity Effects 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- FKJVYOFPTRGCSP-UHFFFAOYSA-N 2-[3-aminopropyl(2-hydroxyethyl)amino]ethanol Chemical compound NCCCN(CCO)CCO FKJVYOFPTRGCSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YYAYTNPNFKPFNG-UHFFFAOYSA-N 3-(2-methylpiperidin-1-yl)propan-1-amine Chemical compound CC1CCCCN1CCCN YYAYTNPNFKPFNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RMUAXNHYNCXOIU-UHFFFAOYSA-M 3-aminopropyl(dimethyl)sulfanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[S+](C)CCCN RMUAXNHYNCXOIU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 4-[[(3ar,5ar,5br,7ar,9s,11ar,11br,13as)-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-3a-[(5-methylpyridine-3-carbonyl)amino]-2-oxo-1-propan-2-yl-4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a-dodecahydro-3h-cyclopenta[a]chrysen-9-yl]oxy]-2,2-dimethyl-4-oxobutanoic acid Chemical compound N([C@@]12CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]5C(C)(C)[C@@H](OC(=O)CC(C)(C)C(O)=O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC[C@@H]3C1=C(C(C2)=O)C(C)C)C(=O)C1=CN=CC(C)=C1 QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 108010015899 Glycopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000002068 Glycopeptides Human genes 0.000 description 1
- 208000017604 Hodgkin disease Diseases 0.000 description 1
- 208000010747 Hodgkins lymphoma Diseases 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000005045 Interdigitating dendritic cell sarcoma Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 208000008342 Leukemia P388 Diseases 0.000 description 1
- 208000028018 Lymphocytic leukaemia Diseases 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010057150 Peplomycin Proteins 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- 241000186992 Streptomyces bikiniensis Species 0.000 description 1
- 241000201744 Streptosporangium violaceochromogenes Species 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 229910052770 Uranium Inorganic materials 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 238000002814 agar dilution Methods 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- LHIJANUOQQMGNT-UHFFFAOYSA-N aminoethylethanolamine Chemical compound NCCNCCO LHIJANUOQQMGNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- XXWCODXIQWIHQN-UHFFFAOYSA-N butane-1,4-diamine;hydron;dichloride Chemical compound Cl.Cl.NCCCCN XXWCODXIQWIHQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 150000001879 copper Chemical class 0.000 description 1
- 150000004699 copper complex Chemical group 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010565 inoculated fermentation Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000010699 lard oil Substances 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 208000003747 lymphoid leukemia Diseases 0.000 description 1
- 208000025036 lymphosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L magnesium sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O WRUGWIBCXHJTDG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 230000000684 melanotic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- NQONXAAXIFYYMX-UHFFFAOYSA-N n'-(1-phenylethyl)propane-1,3-diamine Chemical compound NCCCNC(C)C1=CC=CC=C1 NQONXAAXIFYYMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- QIMGFXOHTOXMQP-GFAGFCTOSA-N peplomycin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCCN[C@@H](C)C=1C=CC=CC=1)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1NC=NC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C QIMGFXOHTOXMQP-GFAGFCTOSA-N 0.000 description 1
- 229950003180 peplomycin Drugs 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- AMLFJZRZIOZGPW-UHFFFAOYSA-N prop-1-en-1-amine Chemical compound CC=CN AMLFJZRZIOZGPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QBIAZVPERXOGAL-UHFFFAOYSA-N prop-1-ene-1,3-diamine Chemical compound NCC=CN QBIAZVPERXOGAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 208000029922 reticulum cell sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 231100000456 subacute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 201000002131 testis sarcoma Diseases 0.000 description 1
- XDLNRRRJZOJTRW-UHFFFAOYSA-N thiohypochlorous acid Chemical compound ClS XDLNRRRJZOJTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052718 tin Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 241001446247 uncultured actinomycete Species 0.000 description 1
- MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N vancomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- RZLVQBNCHSJZPX-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O RZLVQBNCHSJZPX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108010059327 zorbamycin Proteins 0.000 description 1
- UJKRUPHWCPAJIL-CPLCKGKLSA-N zorbamycin Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](CCO)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@H](C(=O)NCCC=1SC[C@@H](N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC(N)=N)C(C)(C)O)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C UJKRUPHWCPAJIL-CPLCKGKLSA-N 0.000 description 1
- UJKRUPHWCPAJIL-UHFFFAOYSA-N zorbamycin Natural products N=1C(C=2SC=C(N=2)C(=O)NCCC(N)=N)CSC=1CCNC(=O)C(C(C)(C)O)NC(=O)C(C)C(O)C(CCO)NC(=O)C(C(OC1C(C(O)C(O)C(C)O1)OC1C(C(OC(N)=O)C(O)C(CO)O1)O)C=1NC=NC=1)NC(=O)C1=NC(C(CC(N)=O)NCC(N)C(N)=O)=NC(N)=C1C UJKRUPHWCPAJIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K9/001—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence having less than 12 amino acids and not being part of a ring structure
- C07K9/003—Peptides being substituted by heterocyclic radicals, e.g. bleomycin, phleomycin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
Description
|·α£^·Ί FBI tt«KUULUTUSJULKAISU s n an s
l J (11) UTLÄGGNINGSSKRIFT O/O/O
C (45) Patentti myönnetty 10 C6 1935-Patent oeddelat (51) Kv.lk.4/lnt.Ci.* C 12 P 19/58, C 07 H 15/26 SUOMI —FINLAND (21) Patenttihakemus — Patentansökning 802198 (22) Hakemispäivä — Ansökningsdag 09.07.80 {Fh * * (23) Alkupäivä — Giltighetsdag 09.07.80 (41) Tullut julkiseksi — Blivit offentlig ] Q] g-|
Patentti- ja rekisterihallitus Nähtäväksi panon ja kuul.julkaisun pvm.- _
Patent- och registerstyrelsen ' ' Ansökan utlagd och utl.skriften publicerad 28.02.85 (32)(33)(31) Pyydetty etuoikeus—Begärd prioritet 13.07-79 USA(US) 057528 Toteennäytetty-Styrkt (71) Bristol-Myers Company, 3^5 Park Avenue, New York, New York 10022, USA(US) (72) Takeo Miyaki, Yokohama, Osamu Tenmyo, Yokohama, Masataka Konishi,
Yokohama, Hiroshi Kawaguchi, Tokyo, Japani-Japan(JP) (7*0 Oy Kolster Ab
(5^) Menetelmä antimikrobisesti ja kasvainten vastaisesti vaikuttavien tailysomysiini A;n ja tailysomysiini B:n johdannaisten valmistamiseksi - Förfarande för framställning av antimikrobiel1t och anti-tumört verkande der ivat av tallysomycin A och tallysomycin B
Tämä keksintö koskee uusien semibiosynteettisten tallysomysii-nijohdannaisten valmistusta, joilla on edullisia antimikrobisia ja kasvaintenvastaisia ominaisuuksia.
Vaikka tunnetaankin joukko glykopeptidiantibiootteja, joista joillakin on estovaikutusta imettäväisten kasvainten kasvuun, niin kuitenkin on olemassa edelleen tarve kehittää uusia antimikrobisia ja kasvaintenvastaisia aineita. Erityisen tarpeellisia ovat kas-vaintenvastaiset aineet, joilla on parantunut aktiviteetti ja/tai laajempi vaikutusspektri kuin nykyisin tunnetuilla aineilla ja lisäksi vähemmän ei-toivottuja sivuvaikutuksia. Seuraavassa esitetään lyhyt katsaus tärkeimpiin glykopeptidiantibiootteihin.
Bleomysiinit ovat vesiliukoisia glykopeptidejä, joita tuotetaan fermentoimalla lajia Streptomyces verticillus. Ne on ensimmäisenä kuvanneet Umezawa et ai., J. Antibiotics 19A:200 (1966), ks. myös US-patentti 3 681 491. Bleomysiinikompleksi on erotettu useaksi 2 67876 komponentiksi, joita ovat A^, A^, A,. ja B^. Bleomysiinikompleksia markkinoidaan käytettäväksi erilaisia ihmisen neoplasmoja vastaan, joita ovat mm. levyepiteelisolusarkooma, lymfosarkooma, retikkeli-solusarkooma, kivessarkooma ja Hodgkin'in tauti. H. Umezawa et ai., J. Antibiotics 31: 80-1-804 (1978), ovat julkaisseet bleomysiinien korjatun rakenteen.
Fleomysiiniantibioottiryhmän, joita antibiootteja saadaan fermentoimalla toista Streptomyces verticillus-kantaa, ovat esittäneet Maeda et ai., J. Antibiotics, voi. A9, 82-85 (1956); voi. A12, 111 (1959); voi. A12, 285-289 (1959); voi. A17, 194-199 (1964).
Kuten bleomysiinikompleksi myös fleomysiini on jaettu useaksi komponentiksi, jotka voivat esiintyä sekä kuparivapaina että kupari-kelatoituina muotoina.
Zorbamysiini ja sen lähisukuiset antibiootit zorbonomysiini B ja C on esitetty julkaisussa J. Antibiotics 24(8): 543-557 (1971) ja GB-patenttijulkaisussa 1 277 150. Nämä antibiootit, jotka on eristetty Streptomyces bikiniensis var. zorbonensis-viljelmistä, ovat lähisukuisia bleomysiini- ja fleomysiiniantibiooteille.
Eräs fleomysiini-bleomysiiniryhrnään kuuluva antibioottiryhmä on eristetty Streptomyces himidus-viljelmästä, ja sille on annettu nimitys YA-56. YA-56 kompleksi ja sen aktiiviset komponentit YA-56X ja YA-56Y on kuvattu julkaisussa J. Antibiotics 24(10): 727-731 (1971) ja J. Antibiotics 26 : 77-83 (1973) .
Antibioottikompleksi XK 49 ja sen pääkomponentti viktomysiini (nimitetään myös XK 49-1-B-2:ksi) on esitetty julkaisussa J. Antibiotics 28: 358-371 (1975). Viktomysiini eristettiin sporangeja muodostavasta aktinomykeetista Streptosporangium violaceochromogenes MK 49, ja se näyttää olevan samankaltainen bleomysiinien ja zoebonomysiini B:n kanssa.
Glykopeptidiantibioottikompleksi Bu-2231 ja sen komponentit Bu-2231 A ja B (tästä lähtien niistä käytetään nimityksiä tallyso-mysiini ja tallysomysiini A ja B) on kuvattu US-patenttijulkaisussa 4 051 237, ks. myös J. Antibiotics, voi. 30, 779-805 (1977) ja voi. 31, 667-674 (1978). Tallysomysiinit eristettiin tiettyjen Strepto-alloteichus hindustanus kantojen fermentointiliemestä, ja niillä on osoitettu olevan vahvaa antimikrobista ja kasvaintenvastaista aktiviteettia .
Il 67876 US-patenteissa 3 984 390 ja 3 846 400 on esitetty erilaisten fleomysiinin ja bleomysiinin semibiosynteettisten johdannaisten valmistus fermentoimalla prekursorien läsnäollessa. Tässä menetelmässä mikro-organismeja, jotka pystyvät tuottamaan fleomysiiniä tai bleomysiiniä, viljellään fermentointiväliaineessa amiiniprekursorin läsnäollessa, jolloin saadaan uusia fleomysiini- tai bleomy-siinijohdannaisia, joiden sivuketjussa on lisätyn amiinin rakenne. GB-hakemusjulkaisussa 2 001 962 A on esitetty 3-/”(S)-1 '-fenyyli-etyyliamino/propyyliaminobleomysiinin (pepleomysiini) valmistus, joka bleomysiinijohdannainen on erityisen edullinen semibiosyn-teettinen bleomysiinijohdannainen, koska sille on ominaista vahva kasvaintenvastainen aktiviteetti ja samalla vähäinen keuhkomyrky1-lisyys.
Tämän keksinnön kohteena on täten menetelmä uusien semibio-synteettisten tallysomysiinijohdannaisten valmistamiseksi. Näitä ovat tallysomysiini A:n johdannaiset, joilla on kaava: 0 0
C0-nh2 NH2 il H
I hn_A/NH2 c-nh-(ch2)3-ch-ch2-c-r N^N 0 n n—NH? NN ., 0 11 I 5 i
Η,Ν T Γ 0 1 ” T H (1H
V γΛ»Λ,Η o
IKL 0 H ferV
Γ H,N OH
OH
HO X
0"vnh2 Ia jossa R on -NK-(CH2)3-NH2 -nh-(ch2)3-s®(ch3)2 -nh-(ch2)3-nh-ch2-ch2oh -nh-(ch2)3-n(ch2ch2oh)2 -NH-{CH2)4-NH2 -NH-(CH2)3-NH-CH3
tai .NH.(CH2)3-NH-CHhQ
ch3 4 67876 ja tallysomysiini B:n johdannaiset, joilla on kaava: CO-NH2 NHj 0
A 0 0 *,-AJ
H3C hn » I 0 1 H OH
HC; CH3 Q
>£v
OH I H*N 0H
y-'-'v-^-oH
ho x 0'vnh2 Ib jossa R on: -NH-(CH2)3-NH2 -nh-(ch2)3-s®(ch3)2 -nh-(ch2)2-nh2 -nh-ch2-ch-ch2-nh2
OH
-nh-(ch2)2-nh-ch2-(jh-ch3
OH
-NH-(CH2)3-NH-CH2-CH20H
-NH-(CH2)3’N(CH3)2 -NH-(CH2)3-N(CH2CH2OH)2
-NH-(CH2)2-NH-CH2-CH2OH
-NH-(CH2)4-NH2 -NH-(CH2)3-NH-CH3 -ΝΗ-ίΟΗ,ϊ,-Ν^Ο 2 1 \_f -NH-(CH2)3-rQ tai CH3
-nh-(ch2)3-nh-ch^Q
K
5 67876 sekä näiden johdannaisten farmaseuttisesti hyväksyttävät happoaddi-tiosuolat. Edellä mainitut yhdisteet voivat olla kuparikelaatteina tai kuparivapaina muotoina.
Erityisen edullinen keksinnön mukainen yhdiste on tallysomy-siini B:n johdannainen, jolla on kaava: C0-NH2 nh2 0
Chx n ! H—jt-C-NH-(CH2)4-NH2 xl H S CH-CH-O^
H>c hYn^h!°hAhj 0 0H
? 1* jj tallysomysiini S,n, I I h2n oh OH 2 U.Q---^·0Η HO J? o-^nh2
Alustavat koe-eläimillä suoritetut tutkimukset osoittavat, että tallysomysiini S10tj:llä (sekä kuparivapaana että kuparikelatoi-tuna ja farmaseuttisesti hyväksyttävinä suoloina) on erittäin vahva laajaspektrinen kasvaintenvastainen aktiviteetti monia pahanlaatuisia kasvaimia vastaan ja samalla huomattavasti vähäisemmät ei-toivotut sivuvaikutukset (esim. munuaismyrkyllisyys) kuin ilman prekursoria saaduilla tallysomysiini A:11a ja B:llä.
US-patenttissa 4 051 237 on kuvattu kahden uuden glykopepti-diantibiootin valmistus ja eristäminen, joille antibiooteille annettiin nimet Bu-2231 A ja B. Myöhemmät tutkimukset osoittivat, että Bu-2231 A:11a ja B:llä (joista nykyisin käytetään nimityksiä tallysomysiini A ja B) on seuraavat rakennekaavat: 67876 6 ί0-^ Γ2 νη, 8 8
Lhn-^'V'""2 n__C-NH-(CH, ).-ch-ch7-c-nh X 0 o «,vv nh2 <X 3
«.n-Vv» «VYVirTt'H
v γΛίΛί I (ch2)4 » Ani
v‘0'^-^’0H tallysomysiini A
ho R
0"xNH2 C0-NH2 NH2 o
Chn-^VNH2 N-rC-NH(CH2)3-NH-(CH2)4-NH2 X 0 „ 0 ilHT^ •'^ΧΤΧΓΓ2 "^£v izt Γ i h2n oh
OH I
tallysomysiini B
y-'-'X^OH
HO A
0- NH2
Edellä mainitut tallysomysiinit ovat tallysomysiiniä tuottavan kannan Streptoalloteichus hindustanus viljelyssä saadut pääasialliset komponentit, ja niiden eristäminen voidaan suorittaa tavanomaisin kromarografiamenetelmin.
Nyt on havaittu, että keksinnön mukaisesti suorittamalla US-patentin 4 051 237 mukainen fermentointiprosessi tiettyjen amiini-prekursorien läsnäollessa saadaan uusia tallysomysiini A:n ja B:n 67876 7 johdannaisia, joilla on arvokkaita antimikrobisia ja kasvainten-vastaisia ominaisuuksia.
Keksinnön mukaisessa menetelmässä noudatetaan US-patenttien 3 984 390 ja 3 846 400 yleisesti esittämää amiiniprekursoria käyttävää fermentointimenetelmää. Esillä olevan keksinnön mukaisessa menetelmässä amiiniyhdistettä lisätään US-patenttijulkaisun 4 051 237 esittämään tallysomysiini-fermentointiliemeen, jolloin se fermentoinnin kuluessa liittyy tallysomysiini A:n ja/tai B:n pääteasemassa olevan amiiniryhmään, jolloin saadaan uusia semibio-synteettisiä johdannaisia, joissa on amiinipäätteinen sivuketju, joka vastaa prekursoriamiinia. Näin saatujen johdannaisten eristäminen ja puhdistaminen voidaan suorittaa tavanomaisin kromatografia-menetelmin, joita on kuvattu US-patenttijulkaisussa 4 051 237. Seu-raavassa esitetään menetelmän yksityiskohtaisempi kuvaus ja sitä valaisevia esimerkkejä.
Esillä olevan keksinnön menetelmä suoritetaan viljelmällä vesipitoisessa viljelyväliaineessa tallysomysiiniä tuottavaa Streptoalloteichus hindustanus-kantaa (joka on kuvattu US-patentti-julkaisussa 4 051 237), edullisesti kantaa Streptoalloteichus hindustanus E 465-94, ATCC 31158. Viljelyväliaine sisältää assimiloituvaa hiilen lähdettä (esim. glukoosi, riboosi, galak-toosi, fruktoosi, mannoosi, sakkaroosi, laktoosi, liukoinen tärkkelys tai glyseroli) ja assimiloituvaa typen lähdettä (esim. kala-jauho, soijapapujauho, puuvillasiemenjauho, maissinliuotusliemi, peptonit, lihauute, maapähkinäjauhe, hiivauute tai ammoniumsuolat), ja tarvittaessa epäorgaanisia suoloja, kuten natriumkloridia, kalium-kloridia, magnesiumsulfaattia, kalsiumkarbonaattia, fosfaatteja jne. Haluttaessa lisätään hivenaineita, kuten kuparia, mangaania, rautaa, sinkkiä jne, tai niitä tulee viljelyliemeen muiden aineosien epäpuhtauksina.
Edellä kuvattujen, tavanomaisten viljelyväliaineen aineosien lisäksi väliaineeseen lisätään seuraavassa määriteltyä prekursori-amiiniyhdistettä vapaana emäksenä tai happoadditiosuolana. Prekursori-amiiniyhdistettä käytetään yleensä neutraloidun vesiliuoksen muodossa. Seuraavassa on lueteltu esillä olevassa keksinnössä käytettäviksi sopivat prekursoriamiiniyhdisteet sekä vastaavan tallysomysiini johdannaisen koodinimi: 8 67876
Kemiallinen nimi Amiini Rakenne Tallysomysiini- lopputuote x 1.2- diaminoetaani NH^-(CH2)2~^^2 S 3b 1.3- diaminopropaani N^-(CH^)3^^2 ^la’ ^lb 1.4- diaminobutaani NH2-()4^^2 ^10a’ ^ 1 Ob 1,3-diamino-2-hydroksi- NH -CH9-(JH-CH9-NH9 S,, propaani 2 2 | d d
OH
N- ( (b -hydroksietyyli) - 1.2- diaminoetaani NH^-(CH2) CH2-CH2OH Sgb N-( (b -hydroksipropyyli)- 1.2- diaminoetaani NH2~(CH2)2-NH-CH2-CH-CH3 S5b
OH
N-metyyli-1,3-di- NH2-(CH2)3-NH-CH3 ^lla’ ^llb aminopropaani N- (fb -hydroksietyyli) - NH?-(CH?)3-NH-CH2-CH20H Sga, Sgb 1.3- diaminopropaani ^ c ^ N- (1 ’-fenyylietyyli) - NH9-(CH9) .-NH-CH-(f=^ S,. , S14b 1.3- diaminopropaani 2 2' 3 1 |4a 140 CH3 Ν,Ν-diraetyyli-l, 3-di- NH2"(CH2)3-N(CH3)2 Syb aminopropaani N,N-di (/¾-hydroksi- NH,-(CH9),-N(CH--CH?OH)? ’ S8b etyyli)-1,3-diaminopro- d d o pääni N- (3-aminopropyyli) - NH9-(CH9 )-,-(/^0 $12b morfoliini d do \—/ N-(3-aminopropyyli)-2- NH2-(CH2)2“^^ / ^13b
pipekoliini CH
3-aminopropyyli-dime- NH9-(CH9)3-S (OH-)- S2a» S2b
tyylisulfoniumkloridi L
67876 9 x) Tallysomysiinijohdannaisille on annettu nimet prekursori-amiiniyhdisteelle annetun numeron mukaan, jolloin tallysomysiini-lopputuotteella on terminaaliamiinin numero ja kirjain a tai b riippuen siitä, onko kyseessä tallysomysiini A:n tai B:n johdannainen. Esimerkiksi tallysomysiini on tallysomysiini B:n johdan nainen, jonka pääteasemassa oleva amiini on 1,4-diaminobutaani.
Vapaina emäksinä tai happoadditiosuoloina, jossa happona on mineraalihappo, kuten HBr tai HC1, käytetyt amiinit lisätään viljelyväliaineeseen edullisesti pitoisuuteen noin 0,05-0,5 % (paino/tilavuus), edullisemmin noin 0,1-0,2 % (paino/tilavuus) fermentoinnin alussa, vaikkakin hyviä tuloksia saadaan myös lisäämällä amiiniliuosta annoksittain fermentoinnin varhaisessa vaiheessa.
Fermentointi suoritetaan noudattaen US-patenttijulkaisussa 4 051 237 kuvattua menetelmää. Inkubaatio voidaan siten suorittaa missä tahansa lämpötilassa, jossa tallysomysiiniä tuottava kanta pystyy kasvamaan, esim. 20-54°C:ssa, edullisesti fermentointi suoritetaan 25-35°C:ssa ja edullisimmin 27-32°C:ssa. Viljelyväliaineen lähtö-pH on edullisesti lähes neutraali, esim. noin 6-7, ja antibiootin tuottaminen kestää yleensä noin 2-10 vrk. Tavallisesti optimituotto saadaan 3-7 vrk:ssa. Suhteellisen pienten määrien tuottamiseen voidaan käyttää ravistuspullo- ja pintaviljelmiä, mutta suuressa mittakaavassa tuotanto tapahtuu edullisesti submersisti aerobisena viljelmänä steriileissä tankeissa. Tankkifermentointia varten tuotetaan mielellään vegetatiivinen ymppi ravintoliemessä ymppäämällä ravintoliemi tuotantoon käytetetyn organismin itiöillä. Kun on saatu nuori vegetatiivinen ymppi, se siirretään aseptisesti fermentointitankkiväliaineeseen. Tankkien ja pullojen ilmastus voidaan suorittaa puhaltamalla ilmaa fermentointiväliaineen lävitse tai pinnalle. Tankkien sekoitukseen voidaan käyttää mekaanisia sekoittimia ja viljelyväliaineeseen voidaan tarvittaessa lisätä vaahdonestoainetta, kuten laardiöljyä.
Halutun tallysomysiini-johdannaisen muodostumista viljely-väliaineessa fermentoinnin kuluessa voidaan seurata paperikiekko-agardiffuusiomenetelmällä, jossa koe-organismina on Mycobacterium smegmatis kanta M6-3.
Kun viljelyliemen antibioottinen teho on saavuttanut optimi- 10 67876 arvonsa (määritetty esim. edellä kuvatulla kokeella), huovasto ja liukenemattomat jäännökset erotetaan fermentointiliemestä tavanomaisin keinoin, kuten suodattamalla tai linkoamalla. Antibiootti-aktiviteetti on suodoksessa, ja se voidaan saada talteen siitä tavanomaisella adsorptiotekniikalla; ks. esim. J. Antibiotics 30 (10) : 779-788 (1977).
Edullisessa suoritusmuodossa suodos ensin adsorboidaan kationirvaihtajahartsille, esimerkiksi sen tyyppiselle hartsille, jota Rohm & Haas Company markkinoi tavaramerkillä Amberlite IRC-50 (NH^+-muoto). Hartsi pestään vedellä, ja tallysomysiinifraktiot eluoidaan vesipitoisella mineraalihapolla, esim. 0,1-n HCl:llä. Eluaattifraktiot, jotka sisältävät antibioottiaktiivisuutta, neutraloidaan vesipitoisella ammoniakilla ja edullisesti niitä käsitellään aktiivihiilellä. Hiili suodatetaan pois, pestään vedellä ja eluoidaan sitten vesipitoisella butanolilla (butanoli:laimea HC1, 1:1 tilav./tilav.) happamessa pH:ssa (esim. pH 2). Eluentin vesi-kerros neutraloidaan emäksisellä anionivaihtajahartsilla ja konsentroidaan tyhjössä. IRC-50:stä saatu (hiiliadsorptiovaihe voidaan jättää suorittamatta) tai aktivoidusta hiilestä saatu konsentroitu eluaatti liuotetaan sitten veteen, liuos adsorboidaan Diaion HP-20 hartsille (tavaramerkki, makrohuokoinen, ioniton adsorbenttihartsi, joka koostuu styreeni-divinyylibentseenikopolymeerista, tuottaja: Mitsubishi Chemical Co., Japani) ja eluoidaan vedellä, jolloin saadaan seoksena epäpuhtaita tallysomysiinejä kuparikelaatteina.
Prekursoria käyttävässä fermentoinnissa muodostuneiden haluttujen tallysomysiinijohdannaisten erottaminen ja puhdistaminen voidaan suorittaa adsorboimalla saatu raaka tallysomysiinikompleksi kationiseen ioninvaihtajaan,joka on modifioitu dekstraanijohdannainen, esimerkiksi modifioidulle polysakkaridekstraanille, jota myy Pharmacia Fine Chemicals Inc. tavaramerkillä CM-Sephadex C-25. Tallysomysiini johdannainen tai -johdannaiset eluoidaan vaiheittain vesipitoisella ammoniumformiaattiliuoksella, jonka konsentraatio vaihtelee välillä 1-7 %. Samaa johdannaista sisältävät fraktiot yhdistetään, niistä poistetaan suola aktiivihiiliadsorptiolla (eluointi happopitoisella vesi-butanoliseoksella) ja ne lyofilisoidaan, jolloin saadaan puhdasta tallysomysiinijohdannaista kuparikelaatin muo- 67876 11 dossa. Lisäpuhdistus voidaan haluttaessa suorittaa tavanomaisella kromatografia- ja/tai geelisuodatustekniikalla.
Keksinnön mukaiset tallysomysiinijohdannaiset pystyvät muodostamaan kelaatteja kuparin kanssa samoin kuin tallysomysiini A ja B, ja siten nämä uudet johdannaiset ja niiden happoadditiosuolat voivat olla joko kuparikompleksien muodossa tai kuparivapaina. Kuparivapaita tallysomysiinijohdannaisia voidaan valmistaa vastaavista kuparikompleksimuodoista tunnetuilla menetelmillä, esimerkiksi US-patenttijulkaisussa 4 051 237 ja GB-hakemusjulkaisussa 2 001 962 kuvatuilla menetelmillä.
Keksinnön mukaiset tallysomysiinijohdannaiset, jotka ovat vapaina emäksinä, voidaan muuttaa tavanomaisin menetelmin farmaseuttisesti hyväksyttäviksi happoadditiosuoloiksi. Esimerkkejä tällaisista suoloista ovat myrkyttömät, orgaanisten ja epäorgaanisten happojen, kuten kloorivetyhapon, rikkihapon, fosforihapon, etikka-hapon, muurahaishapon, steariinihapon, maleiinihapon, bentsoehapon, meripihkahapon ja bromivetyhapon suolat.
Antimikrobinen aktiviteetti
Keksinnön mukaisten semibiosynteettisten tallysomysiinijohdannaisten minimiestoväkevyydet (MIC) määritettiin sieniä ja gram-positiivisia ja gram-negatiivisia sekä happoja kestäviä bakteereja vastaan kaksinkertaisella agarlaimennusmenetelmällä. Bakteereilla käytettiin ravintoagaria ja sienillä Saboraudagaria. Tulokset nähdään seuraavassa taulukossa, jossa vertailuna on myös tallysomysiini A: 11a ja B:llä saadut arvot.
Tallysomysiinijohdannaisten antimikrobinen aktiviteetti 12 67876
Staphylococcus Sareina Bacillus Myco-Tallyso- aurejjs lutea subtil is bacterium mysiini Smith PCI1001 PCI 219 607 A 0,1 0,05 <0,003 0,2 B 0,1» 0,U 0,006 0,2
Sla 0.1» 0,1 <0,003 0,012 S1b 1,6 1,6 <0,05 <0,05 S2a 0,2 0,8 <0,05 <0,05 S2b 1,6 6,3 <0,05 0,2 S3b 0,8 1,6 0,013 0,05 S4b 0,8 3,1 0,006 0,003 S5b 6,3 12,5 0,025 0,2 ς 0,8 1,6 0,03 0,1» oa
Sgb 6,3 12,5 0.02 0,2 S7b 6,3 12.5 0,1 3,1
Sga 0,2 0,1» 0,006 0,1 S8b 0,1» 0,8 0,013 0,1
Sgb 0,1» 0,8 0,013 0,1 S]0a 1,6 O.u 0,01» 0,2 S1Qb 6,3 3,1 0,2 0.2
Slla 0,8 0,2 0,025 0,1 sllb 3,1 0,8 0,1 0,1 S12b 12,5 12,5 O.U 0,2 S13b 6,3 6,3 0,8 0.2 S14a 0,8 0,8 0,1 0,1 S14fc) 3.1 3,1 0.1» 0,2
Tallysomysiinijohdannaisten antimikrobinen aktiviteetti 13 67876
Escherichia Proteus Candida Aspergillus TaTTyso- coli mirabii is albicans fumigatus mysiini NIHJ A9554 IAM 4888 IAM 2593 A ' , 0,05 0,U 12,5 1,6
B
0,2 0,2 6,3 0,8
Sla 0,1 O.U 3,1 0,8
Slb o.U 1,6 12,5 1,6
S2a <0,05 0,2 6,3 o.U
S2b O.U 1,6 25 0,8 S3b 0.1 0.2 12,5 0,8 S4b 0,U O.U 25 0,8
S5b O.U 3,1 25 0,U
Sc 0,U 1,6 6,3 0,2 oa S6b o,U 3,1 25 0,8
S7b 0,U 6,3 >50 0,U
S8a 0,1 0,U 12,5 0,8 s8b 0,2 0,8 >50 1,6 S9b 0,1 0,8 25 1,6 S10a o.U 0,8 3,1 1,6 S10b 0,8 3,1 12,5 6,3 S-j-jg 0,1 0,2 1,6 0,8
Sllb 0,2 1,6 12,5 6,3 S12b 1,6 50 >100 25 S-,3b O.U 12,5 >100 12,5 S]4a 0.2 3,1 50 3,1 S14b 0,U 25 >100 25 14 67876
Tallysomyslinijohdannaisten suhteellinen antibakteerinen teho (tallysomyslini A-standardi = 1Q00 ^ug/mg) määritettiin paperi-kiekko-agar-diffuusiomenetelmällä käyttäen koe-organismina Mycobacterium smegmatis kantaa M6-3. Tulokset nähdään seuraavassa taulukossa.
Tallysomysiinijohdannaisten antibakteerinen teho
Antibakteerinen Tallysomysiini teho (u/mq) Ä 1 000 B 900 sia 1 075 slb 1 000 s2a 350 S2b 300 S3b 725 S4b k°5 S5b 500
e hSO
^6a S 3^0 ^6b C 380 a7b r 550 b8a e 370 ^8b c 380 59b c 1 ^50 HOa ς 1 100 b10b S 570 b11a S U50 *11 b S12b 390 si3b 1 090 S14a sHb 1 390 15 67876
Kasvaintenvastäinen aktiviteetti
Lysogeenisen bakteerin E. coli W17Q9 (X) profaagi-induk-tioaktiviteetti määritettiin Lein'in et ai., Nature 196: 783-784 (1962) esittämällä menetelmällä. Plakkiluku määritettiin koe-yhdistettä (t) sisältävillä agarlevyillä ja kontrollilevyillä (c). Plakkiluvun t/c-suhde yli 3,0 määriteltiin merkitseväksi lysogeenisen induktioaktiviteetin tasoksi (ILB-aktiviteetti), ja se ilmoitettiin koeyhdisteen minimi-indusoivana konsentraationa. Tulokset nähdään seuraavassa taulukossa.
Tailysomysiinijohdannaisten ILB-aktiviteetti 67876 16
Tallysomysiini ILB-aktivi- _ teetti ixg/m 1) A 0,00125 B 0,01 sla °·16 S,b 0,31 S2a 0,31 S2b 0,63 S3b °’31 S4b S5b 0,08 S 0.02 ^6a S6b °’°8 S7b °'°8
So 0,005 ^8a S 0,02 58b s o, 16 *9b s o, 16 noa s o, 31 b10b s]la °·08
Sllb °·63 S12b °'31· S,3b 0.08 S14a °'01
SHb °'oU
9 17 67876
Tallysomysiinijohdannaisten kasvaintenvastaista aktiviteettia tutkittiin hiirillä neljällä eri kasvainsysteemillä. Lym-fosyyttinen leukemia P388 ja Lewis-keuhkokarsinooma intraperitoneaa-lisesti kumpaakin sukupuolta oleviin BDF,-hiiriin, jolloin edellis- 5 , 1 5 tä istutettiin 3 x 10 solua ja jälkimmäistä 5 x 10 solua hiirtä kohti. Sarkooma 180 askiittikasvainsoluja istutettiin intraperito- 16 neaalisesti urospuolisiin dd-kannan hiiriin 2,5 x 10 solua hiirtä kohti. Melanoottista melanoomaa B16 istutettiin subkutaanisesti 5 BDF^-hiiriin 5 x 10 solua hiirtä kohti. 24 tuntia kasvainsolujen istutuksen jälkeen hiirille annettiin intraperitoneaalisesti as-teettain suurenevina annoksina koeyhdisteitä injektiotilavuuden ollessa 0,2 ml/10 g kehon painoa. Koeyhdisteitä annettiin kerran vrkrssa 9 vrk:n ajan (qd 1 9 ohjelma) paitsi hiirille, joihin oli tartutettu Lewis-keuhkokarsinooma, jotka saivat koeyhdisteitä 11 vrk (qd 1 -* 11). Käsiteltyjen ja käsittelemättömien eläinten elossa pysyminen ja kuoleminen merkittiin muistiin päivittäin ajanjaksona 45 vrk kasvainsolujen istutuksesta lähtien, ja kullekin koeryhmälle (T) ja kontrolliryhmälle (C) laskettiin keskimääräinen hengissäpy-symisaika. Vähintään 125 %:n T/C-arvo osoittaa, että koeyhdisteellä on merkitsevää kasvaintenvastaista aktiviteettia leukemia P388:n ja Lewis-keuhkokarsinooman suhteen. Annos, jolle T/C on 125 % arvioitiin lineaarisella regressioanalyysillä, ja sitä merkittiin tehokkaaksi annokseksi 125 eli ED^25* Sarkooma 180:n suhteen käytettiin arvioitua tehokasta annosta 150 · Bl6-melamooma-ko- keessa mitattiin kasvainnaisen koko 16 vrk istutuksen jälkeen, ja 50-%risen kasvaimen kasvun estovaikutuksen aikaansaama annos (IDj.q) laskettiin regressiokäyristä. Koeyhdisteiden kasvaintenvas-täiset aktiviteetit on esitetty seuraavassa taulukossa.
Kasvaintenvastainen aktiviteetti (mg/kg/vrk, ip) 67876 18 P388 SI 80 B16 Lewis-keuhko
TaHysomysllni x (EPlzs) (EDnil) (1Dsa) (£°u5) A (Cu-vapaa) 0,26 0,07 0,27 0,13 B (Cu-vapaa) 0,89 0,06 0,82 0,11
s]a 1,2 0,07 0,8U
S1b 2,0 0,11 0,15 0,12
S2a >3,0 0,07 0,17 0,lU
S2b 0,91 0,12 0,33 0,65 S3b 0,32 0,06 0,20 0,26 S4b >3,0 0,13 0,50
Sc. 0,66 0,10 0,31 0,38 00
Sga 0,70 0,09 0,12 0,1+7 S6b 2,2 0,08 0,22 0,17 S?b 2,1 0,lU 0,16 S8a 0,78
Sgb 1,5 0,25 0,26 0,12 >3,0 0-,1+2 0,29 0,1+1 s1Qa 0,28 o,08 0,39 S10b - °’03 °·59 S1Qb (Cu- vapaa O.hT 0,02 0,?5 0,21 slla °·60
Sllb 0,28 0,20 0,70 0,32 S]2b 1,30 0,06 1,30 S]3b 0,70 0,33 0,23 SKa - 5 14b 3,0 0,08 0,1+3 0,29 x kuparikelatoitu muoto, jollei muuta ilmoiteta 67876 19
Koeyhdisteitä annettiin asteittain suurenevina annoksina intraperitoneaalisesti ryhmälle hiiriä. Injektio annettiin vain kerran tai kerran päivässä yhdeksänä peräkkäisenä päivänä. Eläinten hengissä pysyminen tai kuoleminen merkittiin muistiin 30 vrk viimeisen annoksen jälkeen, ja tuloksista laskettiin yhden tai useamman injektion keskimääräinen kuolettava annos (LD^q). Tulokset nähdään seuraavassa taulukossa.
Tallysomysiinijohdannaisten akuutti ja subakuutti myrkyllisyys LD5Q (mg/kg/vrk. ip)
Tallysomysiini x yksi annos Useampi annoa(qd 1 A (Cu- vapaa) ig ^ ,U
B (Cu- vapaa) i+6
Sla 25
5lb W
S2a « S2b 32 2,0 S3b 19 S4b 13
s5b « M
s6a 15 S6b 30 S 7 b 30 3 8a k2 S8b 30 S9b 32 S10a 21 S10b 23
S,Ob (Cu- vapaa) u2 k.O
67876 20 LD50 (rcg/kg/ vrk,ip)
Tallysomy siini x Yksl_annQs η^^·,· annns (qd 1 -» 9) S11 a 18 S11b 21 s12b >5° S13b 35 s14a S14b - 16 x kuparikelatoitu muoto, jollei muuta ilmoiteta
Kunkin johdannaisen kasvaintenvastainen terapeuttinen indeksi laskettiin myrkyllisyyden ja kasvaintenvastaisen aktiviteetin suhteesta. Kuten seuraavasta taulukosta voidaan todeta, monilla uusista semibiosynteettisistä tallysomysiinijohdannaisista on joissakin kasvainkoesysteemeissä parempi terapeuttinen indeksi kuin ilman prekursoria saaduilla tallysomysiini A:lla ja B:llä.
Tallysomysiinijohdannaisten kasvaintenvastainen terapeuttinen indeksi
Kasvaintenvastainen terapeuttinen indeksi xx
Tallysomysiini χ £388 SI 80 B16 . Lewis-keuhko A (Cu-vapaa) 73 271 ^ 3-46 B (Cu-vapaa) 52 767 5o 4i8 1 21 357 30 I 8 $lb 10 173 127 158 S2a <8 357 147 179 S2b 35 267 97 49 S3b 59 317 95 73 S4b <1 190 26
XX
67876 21
Kasvaintenvastainen terapeuttinen indeksi
Tai 1 ysomy siini x SI80 B16_ Lewis -keuhko
Sr, 70 U60 1U8 121 5b S6a 21 167 125 32 S-, 1*4 375 136 176 6b ς iL 21U 188 /b S8a 5t s 20 120 115 250 8b c <11 76 110 78 ^9b S10ä 96 338 69 s,ob - 900 U6 S10b (Cu-vapaa) 89 2100 50 200 ς 30 Ί13 S 75 105 30 66 I ib S,0. >38 >833 >38 1 Zb S 50 106 152 13b S14a S14b x kuparikelatoitu muoto, jollei muuta ilmoiteta xx yhden annoksen myrkyllisuus (LD^q)/kas vain tenvas-taisesti tehokas annos (EDi25 EI>150 tai ID50^ 22 67876
Tallysomysiini S]_Qb:n munuaismyrkyllisuus tutkittiin hiirillä käyttäen BUN-mittausta loppupisteenä sekä keuhkomyrkylli-syys käyttäen keuhko-hydroksiproliini-mallia (ks. Cancer Res.
35:787 (1978). Tallysomysiini siQb:n munuaismyrkyllisyys ei ekvi-toksisina annoksina ollut suurempi kuin bleomysiinin. Tallysomysiini aiheutti keuhkojen hydroksiproliinin lisääntymistä, mikä viittaa keuhkomyrky11isyyteen. Annosvastekäyrä oli kuitenkin loivempi kuin bleomysiinillä, ja suurilla annoksilla koe-eläinten hydroksiproliinimäärä oli pienempi kuin eläimillä, joita käsiteltiin ekvitoksisilla bleomysiiniannoksi11a.
Kuten edellä olevista koetuloksista voidaan päätellä, niin keksinnön mukaiset tallysomysiinijohdannaiset ovat käyttökelpoisia antimikrobisia aineita, jotka estävät sellaisten mikro-organismien sekä bakteerien että sienien kasvua, jotka ovat patogeenisiä eläimille ja kasveille. Niitä voidaan myös käyttää imettäväisten kasvainten kasvun estämiseen. Yhdisteitä voidaan antaa lääkkeeksi samalla tavalla kuin kaupallisesti saatavissa olevaa bleomysiiniä, ja optimiannostuksen kussakin tapauksessa voi alan asiantuntija määrätä käyttäen tavanomaisia annoksen määrittämiseen käytettyjä kokeita ja edelle esitettyjä koetuloksia.
Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä.
67876 23
Esimerkki 1 - Sn ja S~, - 2a J 2b
Mallasagarvinoviljelmä ympättiin Streptoalloteichus hindustanus ATCC 31158 - kannalla, ja viljelmää inkuboitiin viikon ajan 28°C:ssa. Vinoviljelmällä ympättiin 100 ml 500 ml:n erlen-meyerissä olevaa siemenviljelyväliainetta, jolla oli seuraava koostumus: glukoosi 1,5 % hiivauute 0,2 polypeptoni 0,5 K2HP04 0,05
MgS04.7H20 0,05
CaC03 0,5
Ennen viljelyväliaineen sterilointia sen pH säädettiin arvoon 7,2. Siemenviljelmiä inkuboitiin 33°C:ssa 48 tuntia kierto-ravistimessa (230 r/min). Saatua siemenviljelmää siirrettiin 100 ml:aan 500 ml:n erlenmeyrissä olevaa fermentointiväliainetta käyttäen 10 % (tilav./tilav.) ymppiä. Fermentointiväliaineella oli seuraava koostumus: sakkaroosi 2,5 % glukoosi 0,5 "Pharmamedia" 3,0 (puuvillasiemenjauhe) 3,0 liukeneva tislaamo-jäte 3,0 (NH4)2S04 0,3
ZnS04.7H20 0,003
CuS04-5H20 0,01
CaC03 0,4
Ennen fermentointiväliaineen sterilointia siihen lisättiin 0,1 % (paino/tilav.) neutraloitua 3-aminopropyylidimetyylisulfonium-kloridin hydrokloridisuolan vesiliuosta. Ennen sterilointia pH säädettiin arvoon 7,0. Ympättyjä fermentointipulloja inkuboitiin 28°C:ssa 5 vrk kiertoravistimessa (250 r/min). Fermentaation edistymistä seurattiin paperikiekkoagardiffuusiokokeella käyttäen koe-organismina M. smegmatis kantaa M6-3.
67876 24
Tallysomysiini S2a - ja S21;)-pitoiseen fermentointiliemeen sekoitettiin suodatusapuainetta ja suodosta ( 20 1) sekoitettiin Amberlite IRC-50:n (60 % NH^+ -muodossa, 3,5 1) kanssa. Hartsi pestiin vedellä, ja sitten aktiivinen aine eluoitiin 0,2-n HCl:llä (3x4 1). Eluaatin pH säädettiin arvoon 6,0, ja eluaattia sekoitettiin aktiivihiilen (400 g) kanssa. Aktiivihiileen adsorboituneet bioaktiiviset komponentit eluoitiin sekoittamalla hiiltä kolme kertaa n-butanolin ja veden seoksen kanssa, jolloin eluoitaessa pH pidettiin arvossa 2,0. Yhdistetty vesipitoinen eluaatti neutraloitiin ja haihdutettiin tyhjössä noin 100 mlrksi, ja saatu konsentraat-ti kromatografoitiin Diaion HP-20-hartsia (1,2 1) sisältävällä kolonnilla. Kolonni kehitettiin vedellä, jolloin saatiin sinisiä tallysomysiinifraktioita. Haihduttamalla sopivat fraktiot saatiin epäpuhdasta tallysomysiiniseosta (4,85 g), joka kromatografoitiin CM-Spehadex C-25-hartsia (330 ml) sisältävässä kolonnissa kasvava-konsentraatioisella ammoniumformiaattiliuoksella. Tallysomysiini ^2b' ^2a -^a B e^uoivat peräkkäin 2-%:isella HCOONH^-liuoksella ja tallysomysiini A eluoitui 4-%:isella HCOONH4-liuoksella. Kustakin antibioottifraktiosta poistettiin suola adsorboimalla aktiivi-hiilelle ja eluoimalla sitten happopitoisella n-butanoli-vesiseok-sella. Lyofilisoimalla vesieluaatit saatiin tallysomysiini S2a:ta (156 mg) ja S^rtä (570 mg) sekä tallysomysiini A: ta (210 mg) ja B:tä (540 mg), jotka kaikki olivat kuparikelaatteina.
Esimerkki 2 - Sc ja S,,
Esimerkin 1 fermentaatio toistettiin käyttämällä kuitenkin prekursoriamiinina N-[A -hydroksietyyli)-1,3-diaminopropaania (HCl-suola). Saatu viljelyliemi (11 1) suodatettiin käyttäen suo-datinapuainetta. Suodoksen antibioottiaktiivisuus adsorboitiin Amberlite IRC-50-hartsille (60 % NH4+-muodossa, 2,4 1) ja eluoitiin hartsilta 0,1-n HCl:llä. Eluaatin pH säädettiin arvoon 6,5, ja eluaatti laskettiin Diaion HP-20-kolonnin lävitse (2 1 hartsia). Kolonni eluoitiin vedellä. Tallysomysiiniä sisältävät fraktiot konsentroitiin tyhjössä ja lyofilisoitiin, jolloin saatiin sinistä kiinteätä ainetta (824 mg). Tallysomysiinit erotettiin toisistaan kromatografoimalla CM-Sephadex C-25:ä (200 ml) sisältävällä kolonnilla ja eluoimalla 67876 25 ammoniumformiaatin vesiliuoksella. Tallysomysiini Sg^ eluoitui 2- %:isella HCOONH^-liuoksella, Sga ja B eluoituivat 3-%:isella HCOONH^-liuoksella ja lopuksi A 5-%:isella HCOONH^-liuoksella. Kutakin fraktiota käsiteltiin suolan poistamiseksi aktiivihiilellä. Kuparikelatoituja tallysomysiinejä saatiin seuraavasti: A 61 mg, B 31 mg, Sga 201 mg ja Sg^ 288 mg.
Esimerkki 3 - SQa ja Sgb
Esimerkin 1 fermentaatio toistettiin käyttämällä kuitenkin prekursoriamiinina N,N-di(β-hydroksietyyli)-1,3-diaminopropaania (HCl-suola) 0,2 % (paino/tilav.). Saatu viljelyliemi suodatettiin. Viljelysuodoksessa olevat tallysomysiinikomponentit adsorboitiin Amberlite IRC-50-hartsille (60 % NH4+-muodossa, 2,2 1) ja eluoitiin laimealla HCl-liuoksella. Aktiivinen eluaatti neutraloitiin ja vietiin Diaion HP-20 (2 1) sisältävään kolonniin, joka eluoitiin vedellä. Bioaktiiviset fraktiot konsentroitiin tyhjössä, jolloin saatiin 1,16 g epäpuhtaita tallysomysiinejä. Ne kromatografoitiin CM-Sephadex C-25 (300 ml) sisältävässä kolonnissa. Ensin eluoitui tallysomysiini Sg^ 2-%:isella HCOONH^-liuoksella, sitten Sga ja B
3- %:isella HCOONH4“liuoksella ja lopuksi A 5-%:isella HCOONH^-liuoksella. Kuparikelatoitujen tallysomysiinien saannot olivat: A 184 mg, B 171 mg, Sga 63 mg ja Sg^ 248 mg.
Esimerkki 4 - S^Qa ja
Esimerkin 1 fermentaatio toistettiin käyttämällä kuitenkin prekursoriamiinina 1,4-diaminobutaanidihydrokloridia. Fermentoitu liemi (35 1, pH 7,5) lingottiin huovastokakun erottamiseksi. Saatua kirkasta päällä olevaa nestettä sekoitettiin Amberlite IRC-50 hartsin (60 % NH4+-muodossa, 6 1) kanssa 30 minuuttia. Hartsi pestiin kahdella 30 litran erällä vettä ja eluoitiin sitten kolmella 10 litran annoksella happopitoista vettä, jolloin eluoinnin aikana pH pidettiin arvossa 2,0. Eluaatit yhdistettiin, pH säädettiin arvoon 7,8 ja eluaattiin sekoitettiin aktiivihiiltä (800 g). Aktiivianne eluoitiin n-butanolin ja happopitoisen veden seoksella (5 1 kumpaakin, pH 2,0), ja eluointi toistettiin kolme kertaa. Vesikerrokset yhdistettiin, neutraloitiin Amberlite IR-45 hartsilla 67876 26 (OH-muoto, anioninen ioninvaihtohartsi, jota tuottaa Rohm & Haas Co., USA) ja konsentroitiin tyhjössä 300 mlrksi. Konsentraatti vietiin Diaion HP-20 (2 1) hartsia sisältävään kolonniin, joka kehitettiin vedellä. Eluointia seurattiin biokokeella, ja bioaktiiviset fraktiot konsentroitiin, jolloin saatiin sinisenä kiinteänä aineena (6 g) tallysomysiinien seosta. Kiinteä aine kromatogra-foitiin CM-Sephadex C-25 (300 ml) hartsia sisältävässä kolonnissa, joka oli esikäsitelty l-%:isella HCOONH4-liuoksella. Kolonni eluoitiin kasvavia määriä ammoniumformiaattia (1 % —»3 %) sisältävillä vesiliuoksilla. Ensimmäiset 3-%:isella HCOONH.-liuoksella 4 eluoöut bioaktiiviset fraktiot yhdistettiin (250 ml), ja niitä sekoitettiin aktiivihiilen (30 g) kanssa. Hiili erotettiin, pestiin vedellä ja eluoitiin kahdesti n-butanolin ja happopitoisen veden 1:1 seoksella (120 ml kumpaakin). Vesipitoiset eluaatit neutraloitiin Amberlite IR-45 (OH-muoto)-harsilla ja haihdutettiin sitten kuiviin, jolloin saatiin puolipuhdasta tallysomysiini (1,60 g). Se kromatografoitiin uudelleen Amberlite XT-2 hartsilla (240 ml, tuottaja Rohm & Haas Co., USA. Makrohuokoinen, ioniton styreeni-divinyylibentseenikopolymeeri-adsorptiohartsi, hieno raekoko) käyttäen eluointiin vettä. Bioaktiiviset eluaatit yhdistettiin, konsentroitiin ja lyofilisoitiin, jolloin saatiin puhdasta kuparikelatoitua tallysomysiini S^g^ttä (1,25 g). Tallysomysiini S10a 3a B eluoitu;i-vat peräkkäin CM-Sephadex-kolonnista 3-%:isella HCOONH^-liuoksella, jolloin saatiin kuparikelaattina tallysomysiini S10a:ta (360 mg) ja tallysomysiini B:tä (370 mg). Eluoitaessa 5-%:isella HCOONH^-liuoksella saatiin jälkiä tallysomysiini A:sta.
Esimerkki 5
Olennaisesti samalla menetelmällä kuin esimerkeissä 1-4 valmistettiin seuraavat semibiosynteettiset tallysomysiinijohdannaiset käyttämällä amiiniprekursorifermentaatiota.
67876 27
Tallysomysiini- Araiinihydrokloridi- Fermentaatio- Saanto (mg) johdannainen prekursoriyhdiste liemen tila vuus (1) 1,3-diaminopropaani g η jälkiä
Sla 70 blb ς 1,2-diaminoetaani 1,9 6 ^3b ς 1,3-diamino-2-hydroksi- 8,5 17 ^4b propaani c 32
Sr. N- (/3 -hydroksipropyyli) - J
1,2-diaminoetaani S N,N-dimetyyli-l,3-diami- ^ 7t> nopropaani 236 N-(β -hydroksietyyli)-1, 2-diaminoetaani r 3 2 S-|-ja N-metyyli-1,3-diamino- ' propaani
Sllh " 259 11b „ 7 ? 94 S,„. N-(3-aminopropyyli)morfo- 12d liini . 10 <37 ^13)3 N- (3-aminopropyyli) -2- pipekoliini 4 20 ^14a N-(1’-fenyylietyyli)-1,3- diaminopropaani „ S c u H4b
Esimerkki 6 Käsittelemällä esimerkeissä 1-5 saatuja kuparikelatoituja tallysomysiini johdannaisia I^Sillä metanolissa siten kuin LJS-pa-tentin 3 646 197 esimerkissä 1 on kuvattu, saatiin vastaavat kuparivapaat tallysomysiinijohdannaiset.
Esimerkeissä 1-5 valmistettujen tallysomysiinijohdannaisten fysikokemialliset ominaisuudet on esitetty seuraavassa taulukossa.
67876 28
Uusien tallysomysiinijohdannaisten fysikokemialliset ominaisuudet___ TLC HPLC++
Tai 1 ysomysiini S-102 S-123 (Viipymisaika ) S-| 0,50 0,23 6'2h" S-j b 0,65 0,37 U'Ue" S2a 0,2U 0,15 6'30" S25 0,38 0,3U 5'18" s3b 0,59 0,51 fc'U9" S4b 0,66 0,Uo U'l*7" S 0,50 0,58 U'5U" 5b S. 0,U2 0,22 6'18"
Del S., 0,50 0,U0 U'Us" 6b S7b 0,UU 0,25 *4'5^"
Sga 0,56 0,i<0 6'2U"
Sgb 0,70 0,5U U'U8"
Sgb 0,56 0,U8 k'32" S1Qa 0,U3 0,2U 6120" S1Qb 0,6l 0,39 i*'U7" S1]a 0,27 0,16
Sllb 0,^9 0,35 S12b 0,U9 0,60 h’U7" s13b 0,146 0,36 5'37" S14a 0.52 0,37 S14b 0,62 0,50 7-05" 67876 29
Uusien tallysomysiinijohdannaisten fysikokemialliset ominaisuudet __ ,H2°„m ,rl* \ Anal. saatu
Tallysomysiini Xmax C H N
Sla 21*2(126), 292(102) slb 2U2(108), 290(9**) 39,51» 5,1*5 15,01 s2a 2Uo(120), 290(108) s2b 2l»l*.5(129),292(10U) 38,51 5,51 lU.30 S3b 21*0(123), 291(112) S4b 21*2(120), 290(103)
Scu 2UU(12U), 290(102) U0.17 6,05 15,02 5b S6a 21*3(105), 291(83) 39,T3 6,39 15.35 S6b 21*3(128), 291(103) 39,81 6,00 15,21 S7b 21*5(120), 290(96) 1*0,89 6,oU il»,51
Sga 21*3(107), 291(85) s8b 21*3(111*), 290(92) 1*0,73 6,18 li*,79 S9b 21*3(101*), 290(87) 39,80 5,97 15,1*2 S1Qa 2UU(iU2), 292(112) 39.76 5,91* 15,58 S1n. 2l*U(lUi), 292(116) 38,81 5.85 li*.71* lub S]la 2UU(62), 292(53) S]lb 2UI*(112), 292(91) 1*0,16 5,1*8 15.01*
S12b 21*5(71*), 292(59) 31*, 98 5,09 13.0U
Sj3b 2l*3(ll*2), 292(111*) 39,li* 5,85 13,63 S14a 21*3(102), 292(72) S 2l*3(ll*3), 292(109) 4b 67876 30 xx Ohutkerroskromatografiasysteemissä S-102 käytettiin Kieselgel 60F2^^~levyja (Merck) ja liuotinsysteeraiä metanoli : 10-%:inen ammoniumasetaattivesiliuos (1:1 tilav./tilav.); TLC-systeemissä S-123 käytettiin Kieselgel öOF^^^-levyjä (Merck) ja liuotinsysteemiä metanoli: 10-%:inen ammoniumasetaatti:10-%:inen ammoniumhydroksidi (10:9:1 tilav./tilav.). Toteaminen suoritettiin Dual-aaltopituus TLC ilmaisijalla (Shimadzu GS-910) aaltopituudella 290 nm.
++ Laitteisto: Waters Associates Model ALC 204 ja tyyppiä U6K oleva injektori. Kolonni: Waters Associates pBondapak C^g (4 x 300 mm), esipesty 0,5-%:isella EDTA-liuoksella. Liikkuva faasi: CHgCt^I^O (3:7 tilav./tilav.), joka sisälsi Waters Associates reagenssia PIC B-7.
Ilmaisija: Model 440 UV detektori, aaltopituus 254 nm. Virtausnopeus: 1,0 ml/min (paine 5500 kPa). Injektoitu näytekoko: 1 ui liuosta, joka sisälsi 2 mg/ml.
Tätä keksintöä voidaan soveltaa teollisesti.
Claims (3)
1. Menetelmä antimikrobisesti ja kasvainten vastaisesti vaikuttavan, kaavan (Ia) mukaisen tallysomysiini A johdannaisen 0 0 CO-NH2 NH2 „ Il Chn^VNH2 n__C-NH-(CH2)3-CH-CH2-C-R n' N ° o fi ij NH2 oHY^rNY^a/ ' H,C HN " I 0 1 H 0H
3 HCf^CHj 0 (la) I i h2n oh OH Υ-'Τ^-οη HO A. 0' NH2 jossa R on -NH-(CH2)3-*^Η2 -nh-(ch2)3-s®(ch3)2 -nh-(ch2)3-nh-ch2-ch2oh -nh-(ch2)3-n(ch2ch2oh)2 -MH-(CH2)4-NH2 -NH-(CH2)3-NH-CH3 tai -nh-(ch2)3-nh-ch-Q ch3 sekä kaavan (Ib) mukaisen tallysomysiini B johdannaisen 67876 32 CO-NH2 NH2 0 Sr Λ'™2 «τί·» rs h o HiN'W o"VrV»/e'i sJ H3C HN " 1 O 1 H OH V^n^WhotN:h3 „ OH | H2N 0H Υ-^Τ^-ΟΗ HO X 0"xNH2 jossa R on -NH-(CH2)3-NH2 -nh-(ch2)3-s0(ch3)2 -nh-(ch2)2-nh2 -NH-CH,-CH-CH,,-NH, l \ li OH -NH-(CH2)2-NH-CH2-(jH-CH3 OH -nh-(ch2)3-nh-ch2-ch2oh -nh-(ch2)3-n(ch3)2 -NH-(CH2)3-N(CH2CH20H)2 -NH-(CH2)2-NH-CH2-CH20H -NH-{CH2)4-NH2 -HH-(CH2)3-NH-CH3 -NH-(CH0)tN/ 'o ά 6 \_/ -NH-(CH2)3-nP tai CH3 -mi- (ch2) 3-nh-ch— ΓΗ 3 33 67876 tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi viljelemällä tallysomysiiniä tuottavaa Strepto-alloteichus hindustanus kantaa vesipitoisessa ravintoväliaineessa, tunnettu siitä että viljely suoritetaan amiiniprekursori-yhdisteen läsnäollessa, jolla on kaava: nh2-(ch2)2-nh2, nh2-{ch2)3-nh2, nh2-(ch2)4-nh2, NH2-CH2-CH-CH2-NH2, OH NH?-(CH2)2-NH-CH2-CH2OH, NH2-(CH2)2-NH-CH2-CH-CH3, OH NH2-(CH2)3-NH-CH3, NH2-(CH2)3-NH-CH2-CH2OH, nh2-(ch2)3-nh-ch^) , ch3 NH2-(CH2)3-N(CH3)2, Nh2~(ch2)3“n(CH2CH20H)2 * NH2-(ch2)3-\3> , s Z"”'v tai NH2-(CH2)3-N)_) C»3 nh2-(ch2)3-s®(ch3)2, Cl0 tai tällaisen prekursoriyhdisteen epäorgaanisen hapon kanssa muodostelman suolan läsnäollessa, kunnes organismi on muodostanut vil-jelyväliaineeseen olennaisen määrän haluttua tallysomysiinijohdannaista, ja haluttu tallysomysiinijohdannainen otetaan talteen vil-jelyväliaineesta olennaisesti puhtaassa muodossa. 67876 34
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että tallysomysiiniä tuottava kanta on Streptoalloteichus hindustanus ATCC 31158.
3. Patenttivaatimuksen Ί tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että amiiniprekursoriyhdiste on 1,4-di-aminobutaani tai sen epäorgaanisen hapon kanssa muodostama suola, ja saatu tallysomysiinijohdannainen on tallysomysiini S10fc), jolla on kaava; CO-NH, NH2 g [ hn^v/nh2 II A s o njC.Nh.(ch2)4.Nh2 H^i'VS50 0 Η<Υ~Υ'Ιγ^Ν-'|Η" HjC γλίλ;! oh >£V Ί& OH I H2N 0H V-o*^Y*OH y^v^-oH HO X 0'vNH2 35 Patentkrav: 6 7 8 7 6
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/057,528 US4246400A (en) | 1979-07-13 | 1979-07-13 | Tallysomycin compounds |
| US5752879 | 1979-07-13 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI802198A7 FI802198A7 (fi) | 1981-01-14 |
| FI67876B FI67876B (fi) | 1985-02-28 |
| FI67876C true FI67876C (fi) | 1985-06-10 |
Family
ID=22011128
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI802198A FI67876C (fi) | 1979-07-13 | 1980-07-09 | Foerfarande foer framstaellning av antimikrobiellt och antitumoert verkande derivat av tallysomycin a och tallysomycin b |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4246400A (fi) |
| JP (1) | JPS5659793A (fi) |
| AU (1) | AU533469B2 (fi) |
| BE (1) | BE884291A (fi) |
| CA (1) | CA1144494A (fi) |
| CH (1) | CH646982A5 (fi) |
| CY (1) | CY1317A (fi) |
| DE (1) | DE3026425A1 (fi) |
| DK (1) | DK151633C (fi) |
| ES (1) | ES493350A0 (fi) |
| FI (1) | FI67876C (fi) |
| FR (1) | FR2460961A1 (fi) |
| GB (1) | GB2053221B (fi) |
| GR (1) | GR82324B (fi) |
| HK (1) | HK8286A (fi) |
| IE (1) | IE50020B1 (fi) |
| IL (1) | IL60541A (fi) |
| IT (1) | IT1174296B (fi) |
| LU (1) | LU82612A1 (fi) |
| MY (1) | MY8800097A (fi) |
| NL (1) | NL8003970A (fi) |
| NO (1) | NO155701C (fi) |
| NZ (1) | NZ193921A (fi) |
| SE (1) | SE449751B (fi) |
| YU (1) | YU43218B (fi) |
| ZA (1) | ZA804150B (fi) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4650765A (en) * | 1981-02-23 | 1987-03-17 | American Cyanamid Company | Biologically pure culture of Streptoverticillium stramineum sp. nov. |
| EP0058838A1 (en) * | 1981-02-23 | 1982-09-01 | American Cyanamid Company | Antibiotic LL BO1208 alpha and LL BO1208 beta |
| JPH02267083A (ja) * | 1989-04-07 | 1990-10-31 | Nissan Motor Co Ltd | 自動車のフロントボデー補強構造 |
| US5420228A (en) * | 1991-04-05 | 1995-05-30 | University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education | Fluorescent-labelled bleomycin analogues |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1038242A (en) * | 1963-03-05 | 1966-08-10 | Zaidan Hojin Biseibutsu | Bleomycin and processes for preparation thereof |
| US3846400A (en) * | 1969-02-15 | 1974-11-05 | Microbial Chem Res Found | Novel process for producing antibiotics bleomycin |
| GB1292081A (en) * | 1969-02-15 | 1972-10-11 | Zaidan Hojin Biseibutsu | Process for producing bleomycin antibiotics |
| US3814796A (en) * | 1969-10-09 | 1974-06-04 | Upjohn Co | Antibiotics zorbonomycin and zorbonomycin b and process for the preparation thereof |
| US3922262A (en) * | 1971-04-28 | 1975-11-25 | Nippon Kayaku Kk | N-Substituted derivatives of bleomycins |
| JPS5739751B2 (fi) * | 1972-03-03 | 1982-08-23 | ||
| US4051237A (en) * | 1975-08-28 | 1977-09-27 | Bristol-Myers Company | Glycopeptide antibiotics bu-2231 a and b and process for producing same |
| US4195018A (en) * | 1977-07-01 | 1980-03-25 | Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha | 3-[(S)-1'-Phenylethylamino]propylaminobleomycin, non-toxic salt thereof, and method for producing same |
-
1979
- 1979-07-13 US US06/057,528 patent/US4246400A/en not_active Expired - Lifetime
-
1980
- 1980-05-27 CA CA000352782A patent/CA1144494A/en not_active Expired
- 1980-05-28 GR GR62069A patent/GR82324B/el unknown
- 1980-05-29 YU YU1435/80A patent/YU43218B/xx unknown
- 1980-06-04 NZ NZ193921A patent/NZ193921A/xx unknown
- 1980-06-10 AU AU59190/80A patent/AU533469B2/en not_active Ceased
- 1980-07-04 JP JP9080680A patent/JPS5659793A/ja active Granted
- 1980-07-07 IT IT49183/80A patent/IT1174296B/it active
- 1980-07-08 NO NO802048A patent/NO155701C/no unknown
- 1980-07-09 NL NL8003970A patent/NL8003970A/nl not_active Application Discontinuation
- 1980-07-09 FI FI802198A patent/FI67876C/fi not_active IP Right Cessation
- 1980-07-09 CH CH526780A patent/CH646982A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1980-07-10 DK DK297980A patent/DK151633C/da not_active IP Right Cessation
- 1980-07-10 IL IL60541A patent/IL60541A/xx unknown
- 1980-07-10 FR FR8015370A patent/FR2460961A1/fr active Granted
- 1980-07-10 ZA ZA00804150A patent/ZA804150B/xx unknown
- 1980-07-11 IE IE1444/80A patent/IE50020B1/en unknown
- 1980-07-11 ES ES493350A patent/ES493350A0/es active Granted
- 1980-07-11 CY CY1317A patent/CY1317A/en unknown
- 1980-07-11 GB GB8022703A patent/GB2053221B/en not_active Expired
- 1980-07-11 LU LU82612A patent/LU82612A1/fr unknown
- 1980-07-11 SE SE8005134A patent/SE449751B/sv not_active IP Right Cessation
- 1980-07-11 BE BE0/201391A patent/BE884291A/fr not_active IP Right Cessation
- 1980-07-11 DE DE19803026425 patent/DE3026425A1/de active Granted
-
1986
- 1986-02-05 HK HK82/86A patent/HK8286A/xx unknown
-
1988
- 1988-12-30 MY MY97/88A patent/MY8800097A/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH0637508B2 (ja) | 抗生物質Ａ４０９２６複合体およびその純粋な因子ＰＡ、ＰＢ、Ａ、ＢおよびＢｏ | |
| US4547488A (en) | Antibiotic M43D, pharmaceutical compositions and method of use | |
| CA1334655C (en) | De-mannosyl teicoplanin derivatives | |
| FI67876C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av antimikrobiellt och antitumoert verkande derivat av tallysomycin a och tallysomycin b | |
| EP0287110B1 (en) | Glycopeptide antibiotics pa-45052 | |
| US4326054A (en) | Cleomycins and process for producing same | |
| FI71765C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av arfamenin. | |
| Miyaki et al. | TALLYSOMYCIN, A NEW ANTITUMOR ANTIBIOTIC COMPLEX RELATED TO BLEOMYCIN V. PRODUCTION, CHARACTERIZATION AND ANTITUMOR ACTIVITY OF TALLYSOMYCIN S 10b, A NEW BIOSYNTHETIC TALLYSOMYCIN DERIVATIVE | |
| US4548924A (en) | Antibiotics M43B and M43C, pharmaceutical composition and method of use | |
| DE3003624A1 (de) | Antibiotica c-19393 s tief 2 und h tief 2 | |
| US4956293A (en) | Nocardia sp. ATCC 53492, or an antibiotic A 42867 producing mutant or variant thereof | |
| GB2048855A (en) | Istamycins | |
| US4908351A (en) | Antibiotic a 42867 derivative | |
| US4314028A (en) | Fermentation process for producing tallysomycin compounds | |
| Katayama et al. | SPERABILLINS, NEW ANTIBACTERIAL ANTIBIOTICS WITH POTENT IN VIVO ACTIVITY TAXONOMY, FERMENTATION, ISOLATION AND BIOLOGICAL ACTIVITY | |
| US5451581A (en) | Antibiotic LL-14E605β and O-methyl-LL-14E605β | |
| CN1231340A (zh) | 一种抗肿瘤抗生素和其微生物发酵生产法 | |
| US4816559A (en) | Biologically active peptides TAN-866 | |
| KR100199650B1 (ko) | 신규 만노실 테이코플라닌 아글리콘 및 만노실 테이코플라닌유도체의 제조방법 | |
| PL80573B1 (fi) | ||
| CS207457B2 (en) | Method of preparation of the mixture of the antibioticum a-35512 | |
| US4565861A (en) | Serirubicum | |
| HORI et al. | A NEW ANTITUMOR ANTIBIOTIC, CHROMOXYMYCIN II. PRODUCTION, ISOLATION, CHARACTERIZATION AND ANTITUMOR ACTIVITY | |
| JPS61233655A (ja) | バラニマイシン及びその誘導体、並びにそれらの製造法 | |
| JPS5924998B2 (ja) | 抗生物質ｓｕｍ−３およびその製造法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: BRISTOL-MYERS CO |