JPS61233655A - バラニマイシン及びその誘導体、並びにそれらの製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は新規抗生物質バラニマイシン（Ｖａｌａｎｉｍ
ｙｃｉｌ及びその誘導体、並びにそれらの　製造法に関
する。

発明の開示 本発明は式（１） 〔式中、Ｙは−Ｃ二ＣＨ２又は−ＣＨ−Ｃ１１２ＮＨＲ
ＣＯ□ＨＣｏ２Ｈ （式中、Ｒは水素原子又は低級アルキル基である）で表
される基である〕で表されるバラニマイシン及びその誘
導体〔以下、化合物（１）という。〕に関する。式（Ｉ
）のＲの定義中、低級アルキル基は炭素数１−６の直鎮
状もしくは分枝状アルキル基、例えばメチル、エチノベ
ｎ−プロピノペｎ−ブチル等を包含する。

式（Ｉ）においてＹが−Ｃ＝ＣＨ２である場合Ｃｏ２Ｈ の化合物を本発明者らはバラニマイシンと命名した。バ
ラニマイシンは次の理化学的性質を示す。

（１）外　観　　　無色油状物質 （２）　’　ＨＮＭＲ（４００ＭＨ２，０２０）　　　
第１図（３）　　１３Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ２０）　　　　　
　第２図、）　　　（４）ＩＲ（ＫＢｒ）　　　　　第
３図（５）［ＪＶ　　　　末端吸収 （６）溶解性　　　水、メタノール、エタノール、酢酸
エチルに可溶；クロロホル ム、ｎ−ヘキサンに不溶 （７）呈色反応　　過マンガン酸カリ試験、モリブデン
・硫酸反応、ニンヒドリン 反応、Ｂ、Ｃ０Ｇ、反応、ライドン・ スミス反応に陽性；２，４−ジニ トロフェニルヒドラジン試験に 陰性 （８）安定性　　　減圧下で不安定、又常温常圧下でも
不安定な傾向があり、塩、 例えばリン酸ナトリウムの共存 下で安定である。

（９）　　反応性　　　アミンと容易に反応して付加体
をつくる。

次に式（Ｉ＞中、Ｙが−ＣＨＣＨ２ＮＨＲＯ２Ｈ である化合物〔以下、化合物（Ｉ−１）という〕の理化
学的性質を示す。アンモニア付加体（Ｒ−Ｈの場合）の
場合は以下の通りである。

（１）外　観　　　白色粉末 （２）　　’Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、　Ｄ２０）　
　　第４図（３）　　”Ｃ−ＮＭＲ（Ｄ２０）　　　　
　　第５図（４）ＩＲ（ＫＢｒ）　　　　　第６図（５
）元素分析値（Ｃ１ｄｌ＋５Ｎ３０３として）（％）Ｃ
ＨＮ 実測値　　　４４．２９　　　７．９３　　　２２．３
３計算値　　　４４．４３　　　７．９９　　　２２．
２１（６）分子量　　１９０　（Ｍ＋ＩＩ）”　　（３
１ＭＳ法）（乃　融　点　　１５０．５℃（分解）２２
０（５４００）　　（酸性）、２２３（４９５０）　（
中性）、２２０−（ｓｈ、）　（アルカリ性） σ■　溶解性　　水、メタノールに可溶；アセトン、酢
酸エチノペジメチルスルホキシ ト、クロロホルム、ｎ−へキサン に不溶 ａＩ）呈色反応　ニンヒドリン反応、トレンス反応、ト
リフェニルテトラゾリウムクロ ライド反応、モリブデン・硫酸反 応、ライドン・スミス反応に陽性 ；２，４−ジニトロフェニルヒドラ ジン試験に陰性 化合物（Ｉｉ）中、Ｒがメチル、エチル、ｎ−プロピル
、ｎ−ブチルである化合物の赤外吸収スペクトル（ＫＢ
ｒ）をそれぞれ第７−１０図に示す。又、Ｕ■　λｍａ
ｘｎｍ　（ε）を第１表に示す。

第　　　１　　　表 化合物（Ｉ）は抗菌活性及び抗腫瘍活性を有する。

ブイヨン培地（ｐＨ７）を用い寒天希釈法によるバラニ
マイシンの各種微生物に対する最小発育阻止濃度（Ｍ　
Ｉ　Ｃ）　　（Ｊ１ｇ／ｍｌ　）は第２表に示す通りで
ある。

第　　　２　　　表 被検菌　　　　　ＭＩＣ（■／ｍ１） スタフィロコッカス・アウレウス２０９Ｐ　　　　１０
／ノ　　　　　アウレウスＳｍ１ｔｈ　　　１０ミクロ
コツカス・フラバスＰＤへ１６１０〃　　　　ルテウス
ｌＰＯ３３３３１Ｇミクロコツカス・ルテウスＰＣＩ１
００Ｉ　　　　　　５バチルス・アントラシス　　　　
　　　　　　１０〃　　　・ズブチリスＮＲＲＬ　Ｂ−
５５８１０〃　　　・ズブチリスＰＣＩ２１９　　　　
１０〃　　　・セリウスＡＴＣＣ１０７０２＞　１０ク
リネバクテリウム・ボビス１８１０　　　　　１０エシ
エリヒア・コリＮＩＩＩＪ　　　　　　　　　　　２．
５〃　　　　　・　コ　リ　Ｋ１２　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　１．２　５〃　　　　・　コ　リ
　ＭＬ１６２９　　　　　　　　　　　　　　　２．５
シゲラ・ディセンテリエＪＳ１１９１０　　　　　　　
２．５〃　・フレクスネリ４ｂＪＳ１１８１１　　　　
　　２．５〃　・ゾネイ　ＪＳ１１７４６　　　　　　
　　　　２．５サルモネラ・ティフィＴ−６３２，５ 〃　　　・エンテリテイディス１Ｂ９１　　　　２．５
プロテウス・バルガリス０Ｘ１９　　　　　　　５〃　
　・ミラビリスＩＦＭ　０Ｍ−９２，５〃　　　・レッ
トゲリ　ＧＮ３１１　　　　　　　　２．５〃　　　・
レットゲリ　ＧＮ４６６　　　　　　　　５被検菌　　
　　　ＭＩＣ（μｇ／ｍｌ）セラチア・マルセッセンス
　　　　　　　　１０シユードモナス・エルギノーザＡ
３　　　　１０クレブシエラ・ニューモニエＰＣ１６０
２１０ミコバクテリウム・スメグマチスＡＴＣＣ６０７
＞１０エシエリヒア・コリ　ＢＩＥ１１２１　　　　　
　　　０．０７８〃　　　　　　・　コ　リ　　８Ｂ１
１８６　　　　　　　　　　　　　　０．３１２〃　　
　　　　・　コ　リ　　ＢＥＭｌｌ　　　　　　　　　
　　　　　　　１．２５次にバラニマイシンによるイン
ビトロでのマウス白血病細胞の成長阻害を第３表に、バ
ラニマイシンのアミン付加体によるインビトロでのＬ１
２１０細胞の成長阻害を第４表に示す。

第　　　３　　　表 ＊１　細胞増殖を５０％阻害する濃度 ＊２　アドリアマイシ感受性 ＊３　アドリアマイシン抵抗性 第　　　４　　　表 エールリッヒ腹水癌細胞又はＬ１２１０細胞をｔＪ［し
たｄｄｙ雄性マウスでのバラニマイシンの抗腫瘍活性（
対照群を１００％とした場合の延命効果）を第５表に示
す。

第　　　５　　　表 次に化合物（Ｉ）の製造法について説明する。

バラニマイシンはストレプトマイセス属にＩＩ、、バラ
ニマイシン生産能を有する微生物を培地に培養し、培養
物中にバラニマイシンを蓄積させ、培養物からバラニマ
イシンを採取することにより製造することができる。バ
ラニマイシン生産性微生物としてはストレプトマイセス
属に属し・、バラニマイシン生産能を有する微生物であ
ればい、ずれの微生物でもよいが、具体的にはＭＧ４５
６−ｈＦｌｏ（微工研菌寄第８１４６号）（寄託日：昭
和６０年３月１５日）が用いられる。この生産菌は昭和
５６年９月、新潟県佐渡郡羽茂町の土壌より分離された
。ＭＧ４５６−ｈＦｌｏ株の菌学的性状は次の通りであ
る。

１、形　態 ＭＧ４５６−ｈＦｌ　０株は、顕微鏡下で分枝した基中
菌糸よりまっすぐ〜かぎ状の気菌糸を形成し、輪生枝は
みとめられない。成熟した胞子鎖は１０個以上の胞子の
連鎖をみとめ、胞子の大きさは、０．４〜０．６　Ｘ　
Ｏ，８〜１．２ミクロン位である。胞子の表面は平滑で
ある。

２、各種培地における生育状態 色の記載について〔〕内に示す標準は、コンテイナー・
コーポレーション・オブ・アメリ力ノカラー・ハーモニ
イ・マニュアル（Ｃｏｎｔａｉ−ｎｅｒ　　Ｃｏｒｐｏ
ｒａｔｉｏｎ　　ｏｆ　　八ｍｅｒｉｃａの　Ｃｏ１ａ
ｒ　　ｈａｒｍｏｎｙｍａｎｕａｌ　）を用いた。

（１）　　シュークロース・硝酸塩寒天培地（２７℃培
養） うす黄の生育上に、明るいオリーブ灰 （１ｙ２ｉｇ、　０１ｉｖｅ　Ｇｒａｙ）の気菌糸を着
生し、溶解性色素はみとめられない。

（２）グルコース・アスパラギン寒天培地（２７℃培養
） うす黄茶［：３ｇａ、　Ｍｅｌｏｎ　Ｙｅｌｌｏｗ’］
の生育上に、茶白〜明るい茶灰（２ｉｇ、　５ｌａｔｅ
　Ｔａｎ　：］の気菌糸を着生し、溶解性色素はみとめ
られない。

（３）グリセリン・アスパラギン寒天培地（ｒｓｐ−培
地５．２７℃培養） 黄茶Ｃ３１ｃ、　Ａｍｂｅｒ〕の生育上に、明るい茶灰
Ｃ２ｉｇ、　５ｌａｔｅ　Ｔａｎ　）の気菌糸を着生し
、黄色味の溶解性色素を産生ずる。

（４）スターチ・無機塩寒天培地（ＩＳＰ−培地４゜２
７℃培養） うす黄（２ｊｌ！ｅ、　Ｍｕｓｔａｒｄ）の生育上に、
オリーブ灰［：ｌ　ｉｈ、　０ｌｉｖｅ　Ｇｒａｙ）の
気菌糸を着生し、溶解性色素はわずかに黄色味をおびる
程度である。

（５）チロシン寒天培地（ＩｓＰ−培地７，２７℃培養
）うす苗条［？２ｃ、　Ｇｏｌｄ　〕の生育上に灰味茶
［３ｉｇ、　Ｂｅｉｇｅ　Ｂｒｏｗｎ：］の気菌糸を着
生し、溶解性色素はわずかに黄色味をおびる程度である
。

（６）栄養寒天培地（２７℃培養） 苗条〔３βｃ、　八ｍｂｅｒ：］の生育上に、わずかに
白色の気菌糸を着生し、茶色味の溶解性色素を産生ずる
。

（７）イースト・麦芽寒天培地（ＩＳＰ−培地２，２７
℃培養） 苗条［：５Ａｃ、　Ｃｏｐｐｅｒ　）の生育上に、条内
〜オリーブ灰（ｌ　＋ＡＩｉ、　Ｌｔ　［］１ｉｖｅ　
Ｄｒａｂ　〕の気菌糸を着生し、黄金色の溶解性色素を
産生ずる。

（８）オートミール寒天培地（ＩＳＰ−培地３，２７℃
培養） うす黄［２ｐｅ、　Ｍｕｓｔａｒｄ　Ｇｏｌｄ　：］の
生育上に、灰味茶［３ｉｇ、　Ｂｅｉｇｅ　Ｂｒｏｗｎ
）の気菌糸を着生し、溶解性色素は黄色味を呈する。

（９）グリセリン・硝酸塩寒天培地（２７℃培養）苗条
［５ｎｅ、　Ｔｉ１ｅ　Ｒｅｄ　］の生育上に、条内［
：３ｈａ、　Ｐｅａｒｌｌの気菌糸を着生し、黄色味の
溶解性色素を産生ずる。

αＱ　スターチ寒天培地（２７℃培養）うす黄〔２ｅａ
、　Ｌｔ　１ｌｌｈｅａｔ　：］の生育上に、オリーブ
灰［：ｌｉｈ、　０１ｉｖｅ　Ｇｒａｙ　〕の気菌糸を
着生し、溶解性色素はわずかに黄色味をおびる程度であ
る。

０１）リンゴ酸石灰寒天培地（２７℃培養）うす黄［，
３Ｉ２ｅ、　Ｃｉｎｎａｍｏｎ　）の生育上に、明るい
オリーブ灰［：１　％ｇｅ、　Ｌｔ　０１ｉｖｅ　Ｇｒ
ａｙ　〕の気菌糸を着生し、うすピンクの溶解性色素を
産生ずる。

面　セルロース（Ｐ紙片添加合成液、２７℃培養）Ｐ紙
片上にうす黄の生育をし、明るいオリーブ灰の気菌糸を
着生する。溶解性色素はみとめられない。

０３）ゼラチン穿刺培養 単純ゼラチン培地（２０℃培養）では、生育はうす黄、
気菌糸は着生せず、溶解性色素は茶色を呈する。

グルコース・ペプトン・ゼラチン培地（２７℃培養）で
は、生育はうす黄、わずかに白色の気菌糸を着生し、溶
解性色素は茶色を呈する。

０４）脱脂牛乳（３７℃培養） 生育はうず苗条、気菌糸を着生せず、溶解性色素は茶色
を呈する。

３、生理的性質 （１）生育温度範囲 グルコース・アスパラギン寒天を用い、２０℃、２４℃
、２７℃、３０℃、３７℃、５０℃の各温度で試験の結
果、５０℃を除いて、そのＣ）ずれの温度でも生育した
が、最適温度は２７℃〜３７℃付近と思われる。

（２）ゼラチンの液化（１５％単純ゼラチン、２０℃培
養；グルコース・ペプトン・ゼラチン、２７℃培養） 単純ゼラチン培地では１０日目頃から、グルコース・ペ
プトン・ゼラチン培地では１５日目頃から液化が始まっ
た。その作用はともに中等度〜弱い方である。

（３）スターチの加水分解（スターチ・無機塩寒天培地
及びスターチ寒天培地、２７℃培養）。

いずれの培地でも培養後５日目頃から氷解性がみとめら
れ、その作用は中等度〜強い方である。

（４）脱脂牛乳の凝固、ペプトン化（脱脂牛乳、３７℃
培養） 培養後５日目頃より凝固がはじまり、直ちに完了後ペプ
トン化が始まる。ペプトン化Ｉｔ培養後１５日目頃に完
了する。その作用はともに中等度〜強い方である。

（５）メラニン様色素の生成（トリプトン・イースト・
ブロス、ｌ５Ｐ−培地１；ペプトン・イースト・鉄寒天
、ｌ５Ｐ−培地６；チロシン寒天、ｌ５Ｐ−培地７；２
７℃培養）いずれの培地においても、メラニン様色素の
生成は観察されない。

（６）炭素源の利用（プリドハム・ゴ）　ＩＪ−ブ寒天
培地、ｌ５Ｐ−培地９，２７℃培養）Ｌ−アラビノース
、Ｄ−グルコース、Ｄ−フラクトース、Ｄ−マンニトー
ルを利用して生育し、Ｄ−キシロース、シュクロース、
イノシトール、Ｌ−ラムノース、ラフィノースを利用し
ない。

（７）リンゴ酸石灰の溶解（リンゴ酸石灰寒天・２７℃
培養） 培養後７日目頃から発育周辺のリンゴ酸石灰を溶解し、
その作用は、中等度〜強い方である。

（８）硝酸塩の還元反応（０，１％硝酸カリ含有ゝプト
ン水、ｌ５Ｐ−培地８．２７℃培養）陰性である。

以上の性状を要約するとＭＧ４５６−ｈＦｌ　０株は、
胞子能を持たず、気菌糸はまっすぐ〜かぎ状で、輪生波
はみとめられない。胞子の表面は平滑である。種々の培
地でうす黄〜苗条の生育」−に、白〜灰味茶あるいはオ
リーブ灰の気菌糸を着生し、培地によっては比較的強い
黄色味の溶解性色素を産生ずる。メラニン様色素の生成
は陰性、淡白分解力は、中等度、スターチの氷解性は中
等度〜強い方である。

なお、全菌体中に含まれる２、６−ジアミノピメリン酸
はＬＬ−型であった。これらの性状より、ＭＧ４５６−
ｈＦｌ０株はストレプトミセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ　）属に属する放線菌と考えられる。

さらに、ストレプトミセス属の既知菌種でＭＧ４５６−
ｈＦｌ０株に近縁の種を検索して、ストレプトミセス・
ビリディファシェンス（Ｓｔｒｅｐｔｏ−ｍｙｃｅｓ　
ｖｉｒｉｄｉｆａｃｉｅｎｓ、　　文献１）　Ｉｎｔｅ
ｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｓｙｓｔｅ
ｍａｔｉｃ　ＢａＣｔｅｒｉＯ１０ｇ！／　２２巻。

３６８頁、　　１９７２年；　文献２）　Ｕｎｉｔｅｄ
　５ｔａｔｅｓ　Ｐａｔｅｎｔ２．７１２，５１７．、
１９５５年〕があげられた。

次に示す表は、ストレプトミセス・ビリディファシェン
ス（当研究所保管〉とＭＧ４５６−ｈＦｌ０株との比較
試験の成績である。

表から明らかなように、ＭＧ４５６−ｈＦ１０株とスト
レプトミセス・ビリディファシェンスＩＭＣＳ−０６７
９（ＩＳＰ　５２３９）株とは、炭素源すなわち、Ｄ−
１シロース、シュクロース、Ｄ−マンニトールの利用性
に相違点がみられる。

ストレプトミセス・ビリディファシェンスは、１９５４
年に、ストレプトミセス・アラレオファシェンス（Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ａｕｒｅｏｆａｃｉｅｎｓ　）
とは異なる、テトラサイクリン生産菌として記載された
ものである。その名前からも想像されるが、ビリディフ
ァシェンスは、特定な培地で黄味縁の溶解性色素を生産
し、アラレオファシェンスにはそれがみられないことか
ら、区別されたものである。

しかし、それから３０年後の現在、比較に用いられたビ
リディファシェンスには、その色素産生の気配はみられ
なかった。又、その当時の記載には、糖の利用の成績は
認められず、この表にみられる三つの糖の利用性の違い
は、確かなものと言えよう。しかし、その他の点では、
両者はよく一致している。

これらのことから、ＭＧ４５６−ｈＦ１０株をストレプ
トミセス・ビリディファシェンス（Ｓｔｒｅｐ−ｔｏｍ
ｙｃｅｓ　ｖｉｒｉｄｉｆａｃｉｅｎｓ）類縁の菌種と
同定した。

本発明によるバラニマイシン生産菌の培養には、放線菌
の培養に用いられる各種の培地が用いられる。

たとえば炭素源としてはグルコース、デキストリン、シ
ュクロース、マルトース等が、また窒素源としてはペプ
トン、肉エキス、酵母エキス、コーンステイープリカー
、大豆粕、硫酸アンモニウム等が用いられる。また食塩
、硫酸マグネシウム、炭酸カルシウム等の無機塩を併用
することもあり、必要により消泡剤を添加することもあ
る。

また、バラニマイシンの生産性を高める物質、例えばバ
リン、アラニン等を添加して培養してもよい。

培養方法としては振盪培養法、深部通気攪拌培養等の液
体培養を使用する方法が適当である。培養温度は１０〜
３５℃の範囲で選択され、培養日数は１〜５日が適当で
ある。バラニマイシンは主として培養液内に蓄積される
。

培養液中からのバラニマイシンの単離精製は一般の抗生
物質の場合に常用される手段によればよいが、−例を以
下に示す。

培養終了後、培養液を濾過し、炉液をｐＨ３にし、酢酸
ブチルで抽出し、ついで１０ｍＭリン酸バッファー（ｐ
　Ｈ７，０）に転溶する。酢酸ブチルを留去後、ダウエ
ックスｌＸ８（ＣＡ’−型）に通塔し、ｌＱｍＭリン酸
バッフｙ−（ｐＨ７，０）で洗浄後、同バッファー中、
Ｏ−１，０Ｍ　　ＮａＣｊ！で濃度勾配溶出を行う。活
性画分を集め、ｐＨ３に調整したのち酢酸エチルで抽出
し、濃縮後、５０％メタノール／１０ｍＭリン酸バッフ
ァー（ｐ　Ｈ７，０）を加え、同溶媒で平衡化したセフ
ァデックスＬＨ−２０のカラムにチャージ゛し、同溶媒
で溶出する。活性画分を集め、メタノ−・ルを留去した
後ｐＨ３に調整して酢酸エチルで抽出する。

酢酸エチル層を濃縮すると無色油状のバラニマイシンが
得られる。上記精製工程中、活性画分の検出はエシェリ
ヒア・コリＢＥ１１２１株を被検菌とするバイオアッセ
イによる。

バラニマイシンのアンモニアもしくは低級アルキルアミ
ン付加体である化合物（Ｉ−１）の製造をアンモニア付
加体（Ｒ＝Ｈ）の場合について説明する。バラニマイシ
ンを２Ｎ　　ＮＨ，ＯＨに溶解した溶液、又は前記セフ
ァデックスＬＨ−２０の溶出画分く活性成分：バラニマ
イシン）に濃アンモニア水を加えてＮＨ，ＯＨ濃度を２
規定にした溶液を室温で攪拌し、ついで未反応のアンモ
ニアを蒸発させる。ついでダウエックス５０ＷＸ８（Ｈ
＋）に通塔し、水で洗浄し、２Ｎ　　ＮＨ，ＯＨで溶出
する。溶出液を濃縮し、凍結乾燥すると白色粉末として
アンモニア付加体が得られる。低級アルキルアミン付加
体も同様に製造できる。

次に本発明の実施例を示す。実施例において得られた各
目的化合物の理化学的性質は前述の通りである。

実施例１． ５００ｍｌの三角フラスコ中の下記組成の培地１００ｍ
ｌに、十分生育したＭｃ４５６−ｈｐｌ。

株の胞子−白金耳を植菌し、２７℃、１８０ｒｐｍで４
０−４５時間振盪培養する。培養力価は２２０−５０Ｊ
ｉ／ｍｌである。

培地組成：マルトース２．０　ｇ　／　ｄβ、ペプトン
０、５　ｇ　／　ｄβ、肉エキス０．５　ｇ　／　ｄβ
、酵母エキス０．３ｇ／ｄＡ’５ＮａＣｊ！　　０．３
ｇ／ｄ１、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００、Ｉｇ／ｄβ、微量
金属塩、ｐＨ７，０（ＮａＯＨ） 上記培養の数１０本分をあわせ、濾過して得た炉液５１
をｐＨ３にし、酢酸ブチル２．５１を加えて３０分間攪
拌する。酢酸ブチル層を１βの１０ｍＭリン酸バッファ
ー（ｐＨ７，０）に転溶し、酢酸ブチルをエバポレータ
ーで留去した後、１００ｍ１のダウエックス１ｘ３（（
１−型、１００−２００メツシ＝）に通塔する。１０ｍ
ＭｊＪン酸バッファー（ｐＨ７，０）で十分洗浄した後
、同バッファー中、０−１．ＯＭ　　ＮａＣＪ！（各５
００ｍ１）で濃度勾配溶出を行う。活性画分を集め、ｐ
　Ｈを３に調整した後、Ｚ容量の酢酸エチルで抽出し、
酢酸エチル層を乾固しない程度に濃縮する。濃縮物に５
０％　ＭｅＯＨ／１０ｍＭリン酸バッファー　（ｐｉ４
７．０）　５ｍ］を加え、同溶媒で平衡化したセファデ
ックスＬＨ−２０（２，７ｃｍφＸ１００ｃｍ）のカラ
ムにチャージし、同溶媒で溶出し、５ｍｌずつ分画する
。活性画分を集め、メタノールを留去した後ｐ）１３に
調整して、Ｚ容量の酢酸エチルで抽出する。酢酸エチル
層を濃縮すると無色油状のバラニマイシン約４Ｏｎ＋ｇ
が得られる。

実施例２゜ ５００ｍ１の三角フラスコ中の下記組成の培地１０　Ｑ
ｍｌに、十分生育したＭＧ４５６−ｈＦｌｏの胞子−白
金耳を植菌し、２７℃、１８Ｄｒｐｍで２４時間振盪培
養する。

培地組成；マルトース　２．０ｇ／ｄＣペプトン０．０
５．ｇ／ｄＡ、肉エキス０．０５ｇ／ｄＡ、酵母エキス
０．０３ｇ／ｄｊ！、ＮａＣｎ　　Ｏ，３ｇ／ｄＪｌ！
、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２００，１ｇ　／　ｄβ、微量金属
塩、ｐＨ７，０（ＮａＯＨ） ついでバリンおよびアラニン各０．０５ｇ／ｄＣ又はバ
リン０．０５ｇ／４ｊ！を添加し、その後さらに２７℃
、２０−２４時間振盪培養する。培養力価は１００−１
５０μｇ／ｍｌである。

実施例３゜ バラニマイシン１５ｍｇをｌ　Ｑｍｌの２Ｎ　　Ｎ８４
０Ｈに溶解し、室温で１時間攪拌する。ついでロータリ
ーエバポレーク−で未反応アンモニアを除去した後、液
量を１０ｍ１に調整して５ｍｌのダウエックス５０ＷＸ
８（Ｈ”、１００−２００メツシ５）のカラムに通塔す
る。カラムを十分水洗した後、３Ｑｍｌの２Ｎ　　ＮＨ
４ＯＨで溶出する。溶出液を濃縮し、凍結乾燥すること
により、白色粉末としてバラニマイシンのアンモニア付
加体１３　ｍｇカ得られる。

なお、低級アルキルアミン付加体も上記と略同様の方法
で得ることができる。

発明の効果 バラニマイシン及びその誘導体である化合物（Ｉ）は抗
菌活性及び抗腫瘍活性を有する。

【図面の簡単な説明】

第１−３図はそれぞれバラニマイシンの’Ｈ−ＮＭＲ，
１３Ｃ−ＮＭＲ及びＩＲスペクトルを示す。 第４−６図はそれぞれバラニマイシンのアンモニア付加
体の’Ｈ−ＮＭＲ，１３Ｃ−ＮＭＲ及びＩＲスペクトル
を示す。第７−１０図はそれぞれバラニマイシンのメチ
ルアミン付加体、エチルアミン付加体、η−プロピルア
ミン付加体及びｎ−ブチルアミン付加体のＩＲスペクト
ルを示す。 ・靭 〜 ンー啼 Ｚご 符開昭６ｌ−２３３６５５（９） 〜−ＪＬ 特開昭６１−２３３　Ｇ　５５　（１０）二 ミニ 七−λ 特開昭Ｇｌ−２３３６５５（１４） （自発的）手続補正書 昭和６１年５月７′日 昭和６０年　特許　願第６１３８５号 ２、発明の名称　バラニマイシン及びその誘導体、並び
にそれらの製造法 ３、　補正をする者 事件との関係　特許出願人 住　所　　　東京部品用区上犬崎３−１４−２３氏　名
銘称）財団法人　微生物化学研究会代表者　会長　市　
川　篤　二 ４・　代　理　人　　電話　。３−３５３−５５２□８
、補正の内容 （１）　　明細書第９頁１０行、「微工研菌寄第８１４
６号」を「微工研条寄第１００３号」に補正する。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. （１）式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｙは▲数式、化学式、表等があります▼又は▲
   数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒは水素原子又は低級アルキル基である）で表
   される基である〕で表されるバラニマイシン及びその誘
   導体。
2. （２）ストレプトマイセス属に属し、バラニマイシン生
   産能を有する微生物を培地に培養し、培養物中にバラニ
   マイシンを蓄積させ、培養物からバラニマイシンを採取
   することを特徴とするバラニマイシンの製造法。