FI67709C

FI67709C - Foerfarande foer framstaellning av antibakteriska halvsyntetiska 4"-sulfonylamino-oleandomycin-derivat

Info

Publication number: FI67709C
Application number: FI781478A
Authority: FI
Inventors: Arthur Adam Nagel
Original assignee: Pfizer
Priority date: 1977-05-11
Filing date: 1978-05-10
Publication date: 1985-05-10
Also published as: AR219529A1; NL174254C; DK205878A; NO145384C; CS199728B2; PL111988B1; EG13371A; DK148845B; GB1590162A; PT68019B; LU79638A1; NO145384B; SE7804080L; PT68019A; FR2390453A1; IE46839B1; DE2820411A1; DD135907A5; IL54688A; AU500587B1

Description

Ig W 6770 9 ^ ^ (51) KrJk!/taLCX* C 07 H 17/08 SUOMI—FINLAND P1) Ρκ-mjh^^781478 (22) HU»i»hpll»I —Awfllwlnt^tg 10.05.78 ' 7 (23) AMnpavI—GHdcMadag 10.05-78 (41) TwNmjulklMkal — WhrtteffmtRg 12.11.78

Ntaittl. ja rekisterihallitus N«MrfM*ao*). ks^lulleu..

fateut- oeh ragteantyralNn Awekw wd^d edi udjfcrWiw piA#wrid 31.01.85 (32X33X31) <*yrdt*r«»oHmi· Βη«ηpierut 11.05.77 06.03.78 USA(US) 795850, 883608 (71) Pfizer Inc., 235 East 42nd Street, New York, N.Y., USA(US) (72) Arthur Adam Nagel, Gales Ferry, Connecticut, USA(US) (7A) Oy Kolster Ab

Menetelmä antibakteeriSten puolisynteettisten 4"-sulfonyyliamino--oleandomysiini-johdannaiSten valmistamiseksi - Förfarande för fram-ställning av antibakteriska haivsyntetiska 4"-suIfonylamino-oleando-myein-deri vat Tämän keksinnön kohteena on menetelmä uusien 4"-deoksi-U gulfonyyliamino-oleandomysiini -johdannaisten ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi.

Oleandomysiini, sen valmistus ravintoliemissä fermentoimalla ja sen käyttö bakteerinvastaisena aineena on kuvattu US-patenttijulkaisussa 2 757 123. Luonnossa esiintyvällä yhdisteellä tiedetään olevan seuraava rakenne: 2 N(CH„)0 8^0 HO 2-F 3 2 67709 "T^j “ ’ Ά 0i,1°^ iiiii null 2 /'n* ^kL 3 3 s^p \t, 0 A """°«, 6" 5” ίν^ ΝΑ/ ° on! J4" 3 "l ΌΗ 0CH3

Oleandomysiinin ja samankaltaisten yhdisteiden tavallisesti hyväksytty numerointi ja stereokemiallinen rakenne on esitetty monissa eri julkaisuissa.

US-patenttijulkaisussa 3 884 902 on patentoitu 4"-erytromy-siinisulfonaattiestereitä ja US-patenttijulkaisussa 3 983 103 N-sul-fonyylierytromysyyliamiineja, joiden biologiset profiilit eroavat esillä olevan keksinnön mukaisten yhdisteiden biologisesta profiilista .

Tunnetaan oleandomysiinin monia eri synteettisiä muunnoksia, joista voidaan mainita varsinkin sellaiset, joissa 2’-, 4"- ja 11-asemissa olevista vapaista hydroksyyliryhmistä on 1-3 esteröity ase-tyyliestereinä. Lisäksi US-patenttijulkaisussa 3 022 219 on kuvattu samankaltaisia muunnoksia, joissa edellä mainittujen esterien ase-tyyli on korvattu muulla, edullisesti haarautumattomalla, alemmalla alkanoyyliryhmällä, jossa 3-6 hiiliatomia.

Tämän keksinnön kohteena on menetelmä yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaavat 67709 NCCH ) ^ N(CH3)2

HOvV r?> H0 ',X

v< XX γΧ XX

k-'° .oX X-° ^

\ (X Y

SX "'vy 'X \v 0 ^ j j

^p^NHSOjR

1 0C“3 2 0CK3 ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi, joissa kaavoissa R on 1-3 hiiliatomia sisältävä alkyyli; pyridyyli; 1,1,1-trifluorietyyli; fenyyli; monosubstituoitu fe-nyyli, jossa on substituenttina fluori, kloori, bromi,jodi, hydrok-si, metoksi, syaani, karboksamido, nitro, karbometoksi, karbobents-yylioksi, trifluorimetyyli, 1-H hiiliatomia sisältävä alkyyli tai asetamido; disubstituoitu fenyyli, jonka substituentit valitaan seuraavista: kloori, nitro, amino, metoksi ja metyyli; trikloori-fenyyli, hydroksidikloorifenyyli; bentsyyli; naftyyli; tienyyli; klooritienyyli; 2-asetamido-5-tiatsolyyli; 2-asetamido-4-metyyli-5-tiatsolyyli; 2-bentsimidatsolyyli; dimetyyli-2-pyrimidinyyli; pyrryyli; furyyli; monosubstituoitu tienyyli, pyrryyli tai furyyli, jonka substituentti on karbometoksi tai 1-2 hiiliatomia sisältävä alkyyli; tai l-metyyli-5-karbometoksi-3-pyrryyli; on 2-3 hiili-atomia sisältävä alkanoyyli; ja R^ on fenyyli; tienyyli; monosubstituoitu fenyyli, jonka substituenttina on kloori, fluori, metyyli, metoksi tai trifluorimetyyli; tai alkyylisubstituoitu tienyyli, jonka alkyylissa on 1-2 hiiliatomia. Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että kaavan 4 67709 6 H,), 3 2 fCH3>2 γΚ ' f } ri°^ ky0 n0.,„y y'° ° tai \"v\ η x n px 0 'XpV^NH2 γ^ΝΗ2 och3 och3 1' 21 mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan reaktioinertissä liuottimessa huoneen lämpötilassa happoa sitovan aineen läsnäollessa 1 moolin kanssa happohalogenidia, jolla on kaava

RS02W tai R2S02W

joissa kaavoissa W on halogeeni.

Keksinnön mukaisten yhdisteiden valmistukseen käytetyt amii-nilähtöaineet koostuvat synteettisestä valmistusmenetelmästään johtuen kahdesta 4"-epimeeristä. Siten myös niistä valmistetut keksinnön mukaiset sulfonamido-yhdisteet koostuvat epimeeriseoksesta. Kokeellisesti on todettu, että lopputuotteessa on molempia epimeerisiä sulfonamideja vaihtelevissa suhteissa riippuen välituoteamiinien synteesimenetelmästä. Jos eristetty tuote sisältää pääasiassa toista epimeereistä, niin tämä voidaan puhdistaa vakiosulamispisteeseen toistuvasti kiteyttämällä sopivasta liuottimesta. Toista epimeeriä, jota alunperin eristetyssä kiinteässä materiaalissa oli pienempi määrä, on tällöin vallitsevasti emäliuoksessa. Se voidaan saada siitä talteen alalla tunnetuin menetelmin, esimerkiksi haihduttamalla emäliuos ja kiteyttämällä jäännös useita kertoja, kunnes saadaan vakiosulamispiste, tai kromatografoimalla.

5 67709

Vaikka epimeeriseos voidaan jakaa alalla tunnetuin menetelmin, niin käytännössä tätä seosta käytetään edullisimmin sellaisena kuin se on eristetty reaktioseoksesta. Usein on kuitenkin edullista puhdistaa epimeeriseos ainakin kerran kiteyttämällä sopivasta liuottimesta, pylväskromatografiällä, jakaantumiskromatografi-alla tai trituroimalla sopivassa liuottimessa. Tällaisella puhdistuksella, vaikkei se välttämättä erotakaan epimeerejä, saadaan poistettua ylimääräiset aineet, kuten lähtöaine ja ei-toivotut sivutuotteet .

Epimeerien absoluuttista stereokemiallista rakennetta ei ole täysin selvitetty. Tietyn yhdisteen molemmilla epimeereillä on kuitenkin samantyyppinen bakteerinvastainen aktiviteetti.

Kaavan 1 mukaisista yhdisteitä ovat edullisia sellaiset, joissa R on tienyyli tai substituoitu tienyyli, jonka substituent-tina on 1-2 hiiliatomia sisältävä alkyyli tai karbometoksi.

Kaavan 2 mukaisista yhdisteistä edullisia ovat sellaiset, joissa R£ on fenyyli, tienyyli tai substituoitu tienyyli, jonka substituenttina on 2-3 hiiliatomia sisältävä alkyyli.

Antibakteerisen aktiivisuutensa vuoksi edullisia ovat näistä ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-(2-tienyylisulfonyyliamino)oleandomy-siini, ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-(3-tienyylisulfonyyliamino)olean-domysiini, ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-(3-metyyli-2-tienyyylisulfonyyliamino )oleandomysiini, 4"-deoksi-4"-(p-kloorifenyylisulfonyyliamino) oleandomy s iini , 4"-deoksi-4"-(2-tienyylisulfonyy1iamino)-oleandomysiini, 4"-deoksi-4"-(3~tienyylisulfonyyliamino)oleandomy siini ja 4"-deoksi-4"-(3-metyy1i-2-tienyylisulfonyyliamino)oiean-donmysiini.

Keksinnön mukaista menetelmää kaavojen 1 ja 2 mukaisten an-tibakteeristen 4"-deoksi , 4"-sulfonyyliamino-oleandomysiini-johdannaisten valmistamiseksi lähtien 4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiinis-tä tai sen 11-alkanoyyli-johdannaisesta voidaan esittää seuraavasti: 6 67709 ^ w(ch3)2 ~ X H N(CH3>2 h^<XX jf\Xx >^'CL~> \jr£r Γ 2 5 'S-X1'*' nhso.r OCH, I 1 b OCH, 1 -4 _ N(CH->), XP RV < H N(OH3)2 # .rka +> w f x V CX Χχχχ och3 I 2 och3 2 joissa kaavoissa R, ja R^ merkitsevät samaa kuin edellä.

Nämä reaktiot suoritetaan 4"-deoksi-4"-amino-oleandomysii-nin ja sopivan sulfonyylihalogenidin kesken sopivan happoa sitovan aineen läsnäollessa reaktioinertissä liuottimessa.

Käytännössä reaktio suoritetaan saattamalla 1 mooli 4"-ami-no-oleandomysiiniä reagoimaan 1 moolin + 2-3 %:n ylimäärän kanssa sulf onyy lihalogenid-ia. Happoa sitovaa ainetta, joka voi olla epäorgaaninen tai orgaaninen yhdiste, käytetään 1 mooli + 4-6 % ylimäärin .

Happoa sitovana aineena voi olla alkalimetalli- tai maa-alkalimetallihydroksidi, -hydridi tai -karbonaatti tai myös ter-tiäärinen orgaaninen amiini. Lisäksi voidaan käyttää sellaisia sekundäärisiä amiineja, kuten di-isopropyyliamiinia, jotka ovat riittävän estettyjä reagoidakseen käytetyn sulfonyylihalogenidi- n 7 67709 reaktantin kanssa. Erityisen sopiva happoa sitova aine on trietyy-liamiini.

Edellä olevassa menetelmässä käytetyn reaktioinertin liuottimen tulisi olla sellainen, joka liuottaa riittävästi reaktion osanottajia eikä reagoi huomattavammassa määrin kummankaan reaktion osanottajan tai muodostuneen tuotteen kanssa. Edullisia ovat polaariset liuottimet, jotka ovat veden kanssa sekoittuvia tai sekoittamattomia. Erityisen edullisia ovat metyleenikloridi ja asetoni-vesi .

Koska amino-oleandomysiinit kuumennettaessa jonkin verran hajoavat, on edullista suorittaa kaavojen 1 ja 2 mukaisten yhdisteiden valmistus 0-25°C:ssa. Erityisen edullista on suorittaa reaktio huoneen lämpötilassa.

Reaktioaika ei ole kriittinen, ja se riippuu reaktiolämpö-tilasta, lähtöreagenssien pitoisuuksista ja reaktiokyvystä toistensa suhteen. Kun reaktiot suoritetaan huoneen lämpötilassa ja käyttäen seuraavassa ilmoitettuja reagenssien pitoisuuksia, niin reaktio on käytännöllisesti katsoen päättynyt 2-48 tunnissa.

Reaktion päätyttyä reaktioseosta voidaan käsitellä kahdella eri tavalla, joista kumpikin on alalla tunnettu. Toisessa menetelmässä reaktioseokseen lisätään vettä, erotetaan veden kanssa sekoittamaton liuotin, joka sisältää halutun tuotteen, minkä jälkeen raaka tuote erotetaan liuottimesta. Kun reaktioinerttinä liuottimena käytetään veden kanssa sekoittuvaa liuotinta, niin tuote uutetaan reaktioseoksesta, johon on lisätty vettä, veden kanssa sekoittumattomalla liuottimena, kuten metyleenikloridilla.

Toisessa menetelmässä reaktioseos haihdutetaan kuiviin ja tuote erotetaan uuttamalla asetonilla suolasta, joka on muodostunut happoa sitovasta aineesta ja halogeenivety-sivutuotteesta. Asetoniuute voidaan sitten haihduttaa kuiviin, jolloin saadaan raakatuote.

Raakatuote tai sen asetoniliuos puhdistetaan tunnetulla menetelmällä kromatografoimalla silikageelillä, tai kiteyttämällä.

8 67709

Esillä olevan keksinnön antibakteeristen aineiden valmistuksessa käytetyt 4"-amino-lähtöaineet syntetisoidaan hapettamalla luonnon oleandomysiini ja sen jälkeen aminoimalla saatu ketoni jäljempänä kuvatulla tavalla.

Käytettäessä hyväksi niiden esillä olevan keksinnön yhdisteiden kemoterapeuttista aktiviteettia, jotka muodostavat suoloja, on tietenkin edullista käyttää farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja. Vaikka veteen liukenemattomuus, korkea myrkyllisyys tai kiteisen luonteen puuttuminen saattavat tehdä jonkin suolalajin sopimattomaksi tai vähemmän toivotuksi farmaseuttiseen käyttöön sellaisenaan, niin veteen liukenemattomat ja myrkylliset suolat voidaan muuttaa vastaaviksi farmaseuttisesti hyväksyttäviksi emäksisiksi hajottamalla ne sopivalla emäksellä, tai ne voidaan muuttaa miksi tahansa halutuksi farmaseuttisesti hyväksytyksi happoaddi-tiosuolaksi.

Esimerkkejä hapoista, jotka muodostavat farmaseuttisesti hyväksyttäviä anioneja, ovat kloorivety-, bromivety-, jodivety-, typpi-, rikkihappo tai rikkihapoke, fosfori-, etikka-, maito-, sitruuna-, viini-, meripihka-, maleniini-, glukoni-, aspartiini-, gluta-miini-, pyroglutamiini- ja lauryylirikkihappo.

Uusilla tässä kuvatuilla 4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiini-johdannaisilla on in vitro aktiivisuutta monia eri gram-postiivisia mikro-organismeja vastaan, kuten Staphylococcus aureus'ta ja Streptococcus pyogenes'ta vastaan, ja tiettyjä gram-negatiivisia mikro-organismeja vastaan, kuten pallomaisia ja elliptisiä mikro-organismeja (cocci) vastaan. Niiden aktiivisuus voidaan helposti osoittaa erilaisilla mikro-organismeilla suoritetuilla in vitro kokeilla aivo-sydän-infuusioväliaineessa tavallisella kaksinkertaisen laimennuksen tekniikalla. Jotta voitaisiin osoittaa kaavojen 1 ja 2 mukaisten yhdisteiden edullisuus aikaisemmin tunnettuihin yhdisteisiin nähden suoritettiin in vitro-kokeita useiden gram-po-sitiivisten ja gram-negatiivisten bakteerien eri kantojen suhteen määrittämällä minimi-konsentraatio-esto (MIC) käyttäen vertailuun DE-hakemusjulkaisun 2 421 488 esimerkin 3 yhdistettä, jonka kaava on 11 9 67709 n H N(CH.)0 vo 1 3 2 0 <*.AoX- H° I V^%oso2ch3 0 ^ V"0CH3

Esimerkiksi useiden Staphylococcus aureus-kantojen suhteen keksinnön mukaisen esimerkin 3 yhdisteen MIC-arvot olivat 0,025 mcg/ml ja esimerkin 27 yhdisteen 0,10-0,20 mcg/ml, kun ne vertailuyhdis-teellä olivat suuruusluokkaa 0,4-1,5 mcg/ml. Vastaavasti useiden gram-negatiivisten bakteerien, kuten Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Salmonella typhimurium kantojen suhteen keksinnön mukaisten yhdisteiden MIC-arvot olivat selvästi edullisempia.

In vitro aktiivisuutensa vuoksi uudet yhdisteet ovat käyttökelpoisia paikalliseen käyttöön salvoina, voiteina ym., sterilointiin, esim. sairaalavälineiden sterilointiin, ja teollisina antimik-robeina, esim. veden käsittelyyn, Ilmantorjuntaan sekä maalin ja puun säilöntäaineina.

In vitro käyttöön, esim. paikallisesti käytettäväksi, on usein sopiva muodostaa tuote valitusta yhdisteestä farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan kanssa, kuten kasvi- tai mineraaliöljyn tai voidepohjan kanssa. Yhdiste voidaan myös liuottaa tai disper-goida nestemäiseen kantajaan tai liuottimeen, kuten veteen, alkoholiin, glykoleihin tai näiden seoksiin, tai muihin farmaseuttisesti hyväksyttäviin inertteihin väliaineisin, so. väliaineisiin, joilla ei ole haitallista vaikutusta aktiiviseen aineosaan. Aktiivista ainetta käytetään näihin tarkoituksiin yleensä noin 0,01-noin 10 paino-% koostumuksen painosta.

Lisäksi monet keksinnön mukaisista yhdisteistä ovat aktiivisia gram-postiivisia mikro-organismeja vastaan oraalisti ja/tai parenteraalisti annettuina eläimille, myös ihmisille. In vivo herk 10 67709 kien mikro-organismien on rajoitetumpi, ja se voidaan määrittää tavanomaisin menetelmin tartuttamalla olennaisesti samanpainoisiin hiiriin koeorganismia ja käsittelemällä hiiriä sitten oraalisti tai ihonalaisesti koeyhdisteellä. Käytännössä koe suoritetaan siten, että hiirille (esim. 10 kpl) annetaan intraperitoneaalisti sopivasti laimennettua ymppiä, joka sisältää 1-10 kertaisesti LD^^-mää-rän (alhaisin mikro-organismin pitoisuus, jolla aikaansaadaan 100-%:inen kuolema) mikro-organismeja. Samanaikaisesti suoritetaan kontrollikokeita, joissa hiirille annetaan laimennetumpia ymppejä, koeorganismin elinvoiman mahdollisen vaihtelun kontrolloimiseksi. Koeyhdistettä annetaan 0,5 tuntia tartuttamisen jälkeen, ja anto toistetaan neljän, 24 ja 48 tunnin kuluttua. Henkiin jääneitä hiiriä tarkkaillaan neljä vuorokautta viimeisen käsittelyn jälkeen ja henkiin jääneiden lukumäärä merkitään muistiin.

In vivo käytettyinä näitä uusia yhdisteitä voidaan antaa oraalisti tai parenteraalisti, esim. ihonalaisena tai lihaksensisäisenä injektiona, annoksena noin 1 - noin 200 mg/kehon-kg vuorokaudessa. Edullinen annostusalue on noin 2-100 mg/kg vrk:ssa ja kaikkien edullisin alue on noin 2 - noin 50 mg/kg vrk:ssa.

Seuraavien esimerkkien tarkoituksena on valaista keksintöä.

Esimerkki 1 ll-asetyyli-4ll-deoksi-4 "-(2-tienyylisulfonyyliamino)oleando- mys iini 30 ml:aan kuivaa metyleenikloridia lisätään 2,9 g (4,0 mmoo-lia) ll-asetyyli-4"-deoksi-4,,-amino-oleandomysiiniä, 740 mg (4,1 mmoolia) 2-tienyylisulfonyylikloridia ja 0,58 ml (4,2 mmoolia) tri-etyyliamiinia, ja reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 18 tuntia. Reaktioseos kaadetaan 50 ml:aan vettä, ja se pestään sitten kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan natriumsulfaatilla. Liuotin poistetaan alennetussa paineessa, ja jäännöksenä saatu vaahto puhdistetaan kromatografoimalla silikageeliä sisältävällä pylväällä ja käyttämällä liuottimena ja eluenttina asetonia. Tuotetta sisältävät fraktiot yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin tyhjössä, saadaan 1,3 g.

NMR (6 , CDC13): 2,03 (3H)s; 2,30 (6H)s; 2,63 (2H)d; 3,16 (3H)s ja 6,8-7,8 (3H)m.

Esimerkki 2

Kun esimerkin 1 menetelmässä käytetään lähtöaineina 11-ase-tyyli-4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiiniä ja sopivaa sulfonyyliklo-ridia, saadaan seuraavat yhdisteet: 67709 ro n(ch3)2 ch3co ,t & w>v/^vHnhso2r OCH3 NMR (δ, CDC1..) R j 2,08 (3H)s; 2,30 (6H)s; 2,67 (2H)m; Jj ^ 3,23 (3H)s ja 6.87 ja 7.45 (2H)s.

O _γΌΗ 2,09 (3H>s; 2,42 (6H)a; 2,70 (2H)m CH3CTh4^- ja 3,26 (3H)S.

O N —v 2.0 (3H)s; 2.33 (6H)s; 2,40 (3H)s; ΓΗ ΓΝΗ-ί > 2,66 (2H)d; 3'33 (3H)S 33 7’86 L 3L S (1H) s .

I |J 2,03 (3H)s; 2P 33 (6H)s; 2,66 (2H)d; _ ^ 3,03 (3H)s ja 7.40-9,16 (4H)m.

H ' aN\ 2.06 (3H)s; 2,36 (6H)s; 2,71 (2H)s; 3,28 (3H)s ja 7.36-7.56 7,66- 1 7,92 (4H)m.

CH. N

I| "Y 2.08 (3H)s; 2.31 (6H)s; 2.59 (6H)s; N 2.65 (2H)s; 3.01 (3H)s ja 7.11 (l)s.

ch3 12 67709 2,07 (3H)s; 2,32 (6H)s; 2.67 (2H)sj jj-ζ 3,20 ( 3H) s ; 7,32 (lH)mj 7,43 (lH)m > S ' ja 8.02 (lH)m.

2.06 (3H)s; 2,29 (6H)s; 2,64 (2H)m; 3,2 6 (3H)s ; 6,5 2 (lH)m-, 6,7 7 (lH)m f ja 7.29 (lH)m.

H

,—/ 2,07 (3H)s ; 2.62 (6H)s; 3.25 (3H)s; J! ') 3,83 (3H)s; 3,95 (3H)s ja 7,30 (2H)m.

CH3°2C f ΓΗ 3 2.08 (3H^i 2.31 (6H)s; 2.68 (2H)m; 3.25 (3H)s ; 6.74 (lH)m; 7,48 (lH)m 0 j a 8.0 0 (lH)m.

Esimerkki 3 ll-asetyyli-4n-deoksi-4t'-(p-kloorifenyylisulfonyyliamino)- oleandomysiini

Liuokseen, jossa on 2,91 g (4,0 mmoolia) ll-asetyyli-4"-de-oksi-4"-amino-oleandomysiiniä ja 528 μΐ (4,2 mmoolia) trietyyliamii-nia 20 ml:ssa metyleenikloridia, lisätään annoksittain 865 mg (4,1 mmoolia) p-kloorifenyylisu Tfonyylikloridia, ja reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Seos haihdutetaan kuiviin tyhjössä, ja jäännöstä käsitellään 10 ml:11a asetonia. Suspensio suodatetaan, ja suodos kromatografoidaan 160 g :11a silikageeliä käyttäen asetonia eluenttina. Kootaan 10 ml:n fraktioita, joista fraktiot 51-63 otetaan talteen ja haihdutetaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan 857 mg puhdasta tuotetta. Fraktiot 42-52 ja 6^,92 sisältävät 1,21 g vähemmän puhdasta tuotetta.

NMR (£ , CDC13): 2,13 (3H)s; 2,36 (6H)s; 2,73 (2H)d; 3,13 (3H)s ja 7,3 - 8,2 (4H)q.

Samalla tavalla saadaan 20 g:sta ll-asetyyli-4" -deoksi-1^"-amino-oleandomysiiniä, 7,24 g:sta p-kloorifenyylisulfonyylikloridia ja 5,36 g:sta trietyyliamiinia asetonin (350 ml) ja veden (350 ml) seoksesta 17,1 g haluttua tuotetta, joka kiteytyi reaktioseoksesta, sp. 202 - 203,5°C. Analyyttinen näyte kiteytetään etanoli/vesiseok-sesta.

Esimerkki 4 Käyttämällä esimerkin 3 menetelmää ja siinä lähtöaineina sopivaa sulfonyylikloridia ja ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-amino-oleandomysii-niä, saadaan seilraavat yhdisteet:

II

67709 H N(CH3)2 CH3CO ( ΙΤ^'Γ^Ύ och3 R NMR (δ, CDC13) /=\ 2f08 (3H)s.; 2,33 (6H)s; 2,70 (2H)d; X~\ // 3.11 (3H)s; ja 7,3-8,2 (4H)q.

2,08 (3H)s; 2,31 (6H)s; 2,66 (2H)d; F_/ V 3,06 (3H)s ja 7,0-8,4 (4H)m.

Cl W\ 2,03 (3H)s; 2,33 (6H)s; 2,66 (2H)d; L 3,10 (3H)s; ja 7,3-8,0 (4H)m.

Cl f=\_ 2,03 (3H)s; 2,33 (6H)s; 2,63 (2H)d; \v // 3,23 (3H)s ja 7,2-8,4 (4H)m.

F

/=^ 2,13 (3H)s; 2,35 (6H)s; 2,70 (2H)d; \\ /)- 2,90 (3H)s ja 7,0-8,2 (4H)ra.

/^X 2,10 (3H)s; 2,33 (6H)s; 2.66 (2H)d;

Br ~\v, /f~ 3,10 (3H)s ja 7,5-7,93 (4H)m.

14 67709

Esimerkki 5 11-asetyy li-4 "-deoks i-4(o-tolyylisulfonyyliamino )olear..do- IPysiinj

Liuosta, jossa on 2,9 g (4,0 mmoolia) ll-asetyyli-4"-deok-si-4"-amino-oleandomysiiniä, 780 mg (4,1 mmoolia) o-tolyylisulfo-nyylikloridia ja 0,58 ml (4,2 mmoolia) trietyyliamiinia 30 ml:ssa metyleenikloridia, sekoitetaan huoneen lämpötilassa 48 tuntia. Reak-tioseos kaadetaan 50 ml:aan vettä, erotettu orgaaninen faasi pestään kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan natriumsulfaati1-la. Liuotin poistetaan tyhjössä ja jäännöksen saatu keltainen vaahto kromatografoidaan 3 cm läpimittaisessa pylväässä 200 g:11a si-likageeliä. Tuote eluoidaan pylväästä asetonilla, jolloin kootaan 10 ml:n fraktioita. Ohutkerroskromatografiällä todetut puhdasta tuotetta sisältävät fraktiot yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa, jolloin saadaan 3,1 g otsikon yhdistettä.

NMR (e), CDClg): 2,06 (3H)s; 2,33 (6H)s; 2,46 (2H)d; 2,73 (3H)s ja 7,1 - 8,2 (4H)m.

Esimerkki 6

Esimerkin 5 menetelmä toistetaan käyttäen lähtöaineina sopivaa sulfonyylikloridia ja ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-amino-olean-domysiiniä, jolloin saadaan seuraavat yhdisteet: 67709 N (CH3)2 ch3co νΑΛ 'ν^Οΰ och3 NMR (<5, CDC1-) K.

/^=\ 2,03 (3H)s; 2,30 (6H)s; 2.66 CH 0~\\ ,V (2H)d; 3,06 (3H)s; 3,83 (3H)s; 3 '—y 6,8-8,2 (4H)ra.

2.03 (3H)s; 2,33 (6H)s; 2,66 ,rH , r _/ V (2H)d; 3,06 (3H)s; 7,3- (CH3)3C 8,0 (4H)m.

0CH3 r=/ 2,08 (3H)s; 2,30 (6H)s; 2,66 / Λ- (2H)d; 2,83 (3H)s; 4,03 (3H)s; V 7 6,8-8,2 (4H)m.

r=\ 2,06 (3H)s; 2,30 (6H)s; 2,43 CH V (3H)s; 3,10 (3H)s; 2,66 (2H)d; J \—/ 7,23-7,40 (2H)d; 7,76- 7,93 (2H)d.

67709 16

Esimerkki 7 ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-f enyy li s'u If oil y’yliairii no-ole andomy- siini Jäähauteella jäähdytettyyn liuokseen, jossa on 2,91 g (4,0 mmoolia) ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiiniä ja 424 mg (4,2 mmoolia) trietyyliamiinia 30 ml:ssa metyleenikloridia, lisätään 722 mg (4,1 mmoolia) bentseenisulfonyylikloridia. 10 minuutin kuluttua jäähaude poistetaan ja reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Reaktioon kaadetaan 50 ml vettä, orgaaninen faasi pestään kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan natrium-sulfaatilla. Poistamalla liuotin, saadaan raakatuote, joka puhdistetaan edelleen kromatografoimalla 160 g:11a silikageeliä käyttäen eluo-miseen asetonia. Ohutkerroskromatografiällä todetaan fraktioiden (10 ml kukin) 61-93 sisältävän puhdasta tuotetta, nämä fraktiot yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa, jolloin saadaan 1,5 g haluttua tuotetta.

NMR (S , CDC13): 2,06 (3H)s; 2,30 (6H)s; 2,63 (2H)d; 3,06 ( 3 K) s ; ja 7,3 - 8,2 (5H)m.

Esimerkin 7 menetelmällä valmistetaan sopivista lähtöaineista myös seuraavat yhdisteet: ll-asetyyli-4"-deoksi-4tl- ( 2-naftyylisulfonyyliamino)olean-domys iini NMR («f, CDC13): 2,03 (3H)s; 2,26 (6H)s; 2,65 (2H)d; 2,96 (3H); ja 7,4 - 8,6 (7H)m; ja ll-asetyyli-4"-deoksi-4l,-bent syylisulfonyyliamino-oleando- mys iini NMR (J , CDC13): 2,00 (3H)s; 2,30 (6H)s; 2,63 (2H)d; 3,46 (3H)s; 4,33 (2H)s; ja 7,36 (5H)s.

Esimerkki 8 ll-asetyyli-4l,-deoksi-4"- (p-bentsyylioksikarbonyylifenyyli-sulfonyyliamino)oleandomysiini

Liuosta, jossa on 2,55 g (3,5 mmoolia) ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-amiho-oleandomysiiniä, 1,12 g (3,6 mmoolia) p-bentsyylioksi-karbo-nyylifenyylisulfonyylikloridia ja 379 mg (3,75 mmoolia) trietyyliamiinia 25 ml:ssa metyleenikloridia, sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Liuotin poistetaan tyhjössä, ja jäännöstä trituroidaan 10 ml:ssa asetonia. Kiinteä aine suodatetaan, ja suodos kromatogra-

II

17 67709 foidaan 280 ml :11a silikageeliä käyttäen eluointiin asetonia ja kooten 10 ml:n fraktioita. Fraktiot 90-203, jotka ohutkerroskroma-tografian mukaan sisältävät eniten puhdasta tuotetta, yhdistetään ja haihdutetaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan 1,25 g haluttua tuotetta.

N MR (<f , CDC1 j) : 2,04 (3H)s; 2,30 (6H)s; 2,66 (2H)d; 3,01 ( 3H) s ·, 5,48 (2H) s; 7,50 (5H)s; ja 8,03 - 8,53 (4H)m.

Esimerkki 9 Käyttäen lähtöaineina sopivaa sulfonyylikloridia ja 11-aset-yyli-4"-deoks.i-4 "-amino-oleandomysiiniä ja noudattaen esimerkin 8 menetelmää, saadaan seuraavat yhdisteet: 67709 18 K (CH3>2 ΓΟ H , J 2

^ JC

- Υ<ΛΑ CHyO,,, s ^y* ^ 'λ

O | ^-NHS02R

0CH3 R NMR (δ, CDC13) 2,06 (3H)s; 2.30 (6H)s; 2,66 / V (2H)d; 3.03 (3H)s; 3,96 (3H) V 7 s; ja 7,3-9.0 (4H)m.

o=c N0CH3 y-V 2,05 (3H)s; 2,30 (6H)s; 2r65 (/ \\ (2H)d; 3.01 (3H) s; 5,43 (2H)d; y/ 7,46 (5H) s; ja 7.33-8,70 (4H)m.

0=C

NOCH20 0 ΓΗ nr 2,06 (3H)s; 2r30 (6H>s: 2r66 3 \\ //- (2H)d; 3,06 (3H)s; 4,0 (3H)s; ja 7,8-8,4 (4H)m.

/=\ 2,10 (3H)sj 2,30 (6H)s; 2.70 \\ /)- (2H)d; 3,0 (3H)s; ja 4,10 N ( (3H)s .

C=0 CH 0/ 19 67709

Esimerkki 10 ll-asetyyli-|4t>-deoksi-U" - (o-nitrofenyylisulfonyyliamino)-oleandomysiini 50 ml:aan metyleenikloridia lisätään 5 g (6,8 mmoolia) 11-asetyyli-4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiiniä, 1,5 g (7,0 mmoolia) o-nitrobentseenisulfonyylikloridia ja 0,98 ml trietyyllamiinia, ja seosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 4-8 tuntia. Reaktioseokseen kaadetaan sama tilavuusmäärä vettä, orgaaninen faasi pestään kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan vaahtomaista raakatuotetta. Se puhdistetaan kromatografoimalla 140 g :11a sili-kageeliä 3 cm läpimittaisessa pylväässä ja eluoimalla asetonilla. Fraktiot 20-30 (50 ml kukin) kootaan, yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin, jolloin saadaan 3,4 g haluttua tuotetta.

NMR (£, CDC13): 2,10 (3H)s; 2,33 (6H)s; 4,36 (2H)d; 2,90 (3H)s; ja 7,4 - 8,4 (4H)m.

Vastaavalla tavalla käyttäen sopivia lähtöaineita ja edellä olevaa menetelmää, saadaan seuraavat yhdisteet: ll-asetyyli-4,r-deoksi-9’'- (m-ni tr of enyy lisulf onyyliamino) -oleandomys iini NMR (/ , CDC13) : 2,06 (3H)s; 2,30 (6H)s-, 2,66 (2H)d; 3,06 (3H)s; ja 7,4 - 9,0 (4H)m ja ll-asetyyli-4ll-deoksi-9,l- (p-nitrof enyy lisulf onyy li amino ) -oleandomysiini NMR (J , CDC13): 2,10 (3H)s; 2,35 (6H)s; 2,68 (2H)d; 3,06 (3H)s; ja 8,0 - 8,6 (4H)m.

Esimerkki 11 ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-(p-hydroks ifenyylisulfonyyliamino)-oleandomys iini

Liuosta, jossa on 2,55 g (3,5 mmoolia) ll-asetyyli-4"-deok-si-4"-amino-oleandomysiiniä, 701 mg (3,65 mmoolia) p-hydroksifenyy-lisulfonyylikloridia ja 51,8 jsl trietyyliamiinia 25 ml:ssa metylee-nikloridia, sekoitetaan huoneen lämpötialssa 48 tuntia. Liuotin poistetaan tyhjössä, ja jäännöstä käsitellään 10 ml:lla asetonia. Liukenematon aines suodatetaan, ja suodos kromatografoidaan 200 g:11a silikageeliä ja eluoidaan asetonilla. Fraktiot 116-175, jotka ohutkerroskromatografiän mukaan sisältävät puhdasta tuotetta, yhdis 20 67709 tetään ja haihdutetaan kuiviin alennetussa painessa, jolloin saadaan 550 mg haluttua tuotetta.

NMR (J , CDC13): 2,0 (3H)s; 2,33 (6H)s; 2,68 (2H)d; 3,06 (3H)s; ja 6,6 - 8,0 (4H)m.

Esimerkki 12 11-asetyy li-4"-deok's i— M-IT — (m-karboksamidof enyylisulfonyyli-amino)oleandomysiini 20 ml:aan metyleenikloridia, jossa on 2,91 g (4,0 mmoolia) ll-asetyyli-4"-deoksi~4"-amino-oleandomysiiniä ja 434 mg (4,2 mmoolia) trietyyliamiinia, lisätään 898 mg (4,1 mmoolia) m-karboksami-dof enyyl.isulf onyylikloridia , ja reakt ioseosta sekoitetaan 48 tuntia. Liuotin haihdutetaan tyhjössä, ja jäännöstä käsitellään 25 ml:11a asetonia. Trietyyliamiinihydrokloridi suodatetaan pois, ja suodos kromatografoidaan 160 g:11a silikageeliä. Kootaan 50 ml:n fraktioita, joista ohutkerroskromatografialla määritetään tuotteen puhtaus. Fraktiot 66-93 yhdistetään ja haihdutetaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan 800 mg haluttua tuotetta.

NMR (</ , CDC13): 2,06 (3H)s; 2,33 (6H)s; 2,70 (2H)s; 3,10 (3H)s; ja 7,4 - 9,0 (4H)m.

Esimerkki 13 11-asetyyli-4"-deoksi-4"-(p-asetamidofenyylisulfonyyliami-no)oleandomysiini

Liuosta, jossa on2,91 g (4,0 mmoolia) ll-asetyyli-4"-deok-si-4"-amino-oleandomysiiniä, 955 mg (4,1 mmoolia) p-asetamidofen-yylisulfonyylikloridia ja 424 mg (4,2 mmoolia) trietyyliamiinia 20 ml:ssa metyleenikloridia, sekoitetaan huoneen lämpötilassa 48 tuntia. Reaktioseos haihdutetaan alennetussa paineessa, ja saatua vaahtoa käsitellään 10 ml :11a asetonia. Liukenematon trietyyliamii-nihydrokloridi suodatetaan, ja suodos kromatografoidaan 160 g:11a silikageeliä ja eluoidaan asetonilla. Fraktiot 42-86, jotka ohutker-roskoromatografiän mukaan sisältävät puhdasta tuotetta, haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 1,2 g haluttua tuotetta.

NMR (S , CDC13): 2,06 (3H)s; 2,23 (3H)s; 2,35 (6H)s; 2,70 (2H)s; 3,13 (3H)s; ja 7,6 - 8,2 (4H)m.

Esimerkki 14 11-asetyyli-4"-deoks 1-4(p-syaanif enyylisuflonyyliamino)-oleandomys iini

Liuosta, jossa on 2,55 g (3,5 mmoolia) ll-asetyyli-4"-deok- 21 67709 si-4"-amino-oleandomysiiniä, 734 rag (3,65 ramoolia) p-syaanifenyyli-sulfonyylikloridia ja 518 (3,75 mmoolia) trietyyliamiinia 25 ml:ssa raetyleenikloridia, sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Liuotin poistetaan tyhjössä, ja jäännöstä käsitellään 10 ml :11a asetonia. Liukenematon aines suodatetaan, ja suodos kromatografoidaan 120 g:11a silikageeliä käyttäen asetonia eluointiin. Kootaan 10 ml:n fraktioita, joista fraktiot 47-83 yhdistetään ja haihdutetaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan 281 mg haluttua tuotetta.

NMR (d , CDC13): 2,10 (3H)s; 2,36 (6H)s; 2,71 (2H)d; 3,06 (3H)s; ja 7,7 - 8,4 (4H)m.

Esimerkki 15 ll-asetyyli-4 ''-deoksi-4 " - (p-trif luorlmetyylif enyylisulfon-yyliamino)oleandomysiini

Liuokseen, jossa on 2,55 g (3,5 mmoolia) 11-asetyyli-4"-de-oksi-4"-amino-oleandomysiiniä ja 518 jul (3,75 mmoolia) trietyyli-amiinia 25 ml:ssa metyleenikloridia, lisätään 891 mg (3,65 mmoolia) p-trifluorimetyylifenyylisulfonyylikloridia, ja reaktioseosta sekoitetaan 18 tuntia. Liuos haihdutetaan alennetussa painessa ja jäännöstä trituroidaan 15 ml:ssa asetonia. Kiinteä aines suodatetaan ja suodos kromatografoidaan silikageelillä, jolloin saadaan 287 mg haluttua tuotetta.

NMR (J , CDC13): 2,03 (3H)s; 2,31 (6H)s; 2,63 (2H)d; 3,40 (3H)s; ja 7,15 - 8,3 (4H)m.

Esimerkki 15 ll-asetyyli-411-deoksi-4"-(2,2,2-trifluorietyyli suIfonvvli-amino)oleandomysiini

Liuosta, jossa on 2,55 g (3,5 mmoolia) ll-asetyyli-4"-deok-si-4"-amino-oleandomysiiniä, 666 mg (3,65 mmoolia) 2,2,2-trifluori-etyylisulfonyylikloridia ja 379 mg (3,75 mmoolia) trietyyliaraiinia 25 ml:ssa metyleenikloridia, sekoitetaan 30 tuntia huoneen lämpötilassa. Seokseen lisätään vielä 3 33 mg sulfonyylikloridia ja 27 0 ^μΐ trietyyliamiinia, ja sekoitusta jatketaan neljä tuntia. Liuotin poistetaan tyhjössä ja jäännöstä käsitellään 20 ml:na asetonia. Kiinteä aine suodatetaan ja suodos kromatografoidaan 110 mg:Ha silikageeliä käyttäen eluointiin asetonia ja keräten lo ml:n fraktioita. Fraktiot 50-80 yhdistetään ja haihdutetaan, jolloin saadaan 385 mg haluttua tuotetta.

22 6770 9 NMR (Λ , CDC13): 2,06 (3H)s; 2,26 (6H)s; 2,60 (2H)d; ja 3,36 (3H)s.

Esimerkki 17 ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-(metyylisulfonyyliamino)oleandomysii-ni

Liuosta, jossa on 2,91 g (k,0 mmoolia) ll-asetyyli-4"-deoksi-4"- amino-oleandomysiiniä, 467 mg (4,1 mmoolia) metyylisulfonyyli-kloridia ja 424 mg (4,2 mmoolia) trietyyliamiinia 25 ml:ssa metylee-nikloridia, sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Liuotin poistetaan alennetussa paineessa, ja jäännöstä käsitellään 20 ml :11a asetonia. Trietyyliamiinihydrokloridi suodatetaan ja tuotteen sisältävä suodos kromatografoidaan 180 g:11a silikageeliä käyttäen asetonia eluointiin ja kooten 6 ml:n fraktioita. Fraktiot 67-133 yhdistetään ja haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 1,2 g haluttua tuotetta.

NMR (ci', CDC13) : 2,06 (3H)s; 2,28 (6H)s; 3,06 (3H)s; 2,61 (2H)d; ja 8,40 (3H)s.

Esimerkki 18 ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-(3,4-dikloorifenyylisu1fonyyliami-no)oieandomys i ini ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiiniä (2,9 g, 4,0 mmoolia), 1,0 g (4,1 mmoolia) 3,4-dikloorifenyylisulfonyylikloridia ja 0,57 ml (4,2 mmoolia) trietyyliamiinia 30 mlrssa metyleeni-kloridia sekoitetaan huoneen lämpötilassa 18 tuntia. Reaktioseok-seen lisätään 50 ml vettä, orgaaninen faasi pestään kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutetaan tyhjössä, ja jäännös kromatografoidaan silikageelillä käyttäen asetonia eluointiin. Fraktiot, joiden ohutkerroskromatografial-la todetaan sisältävän tuotetta, yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin, jolloin saadaan 1,3 g haluttua tuotetta.

NMR (S , CDC13): 2,0 (3H)s; 2,30 (6H)s; 2,60 (2H)d; 3,06 (3H)s; ja 7,2 - 8,1 (3H)m.

Esimerkki 19

Noudattamalla esimerkin 18 menetelmää ja käyttämällä siinä sopivia reagensseja, saadaan seuraavat yhdisteet: tt 23 67709 n H H (CH„)„ -7~0 ~\ \ J 1 o vs V^i

ChJJcO ι,γ '">1 KoV<\^ ΚΛ [ !

d ^f^^NHSO R

och3 R NMR (J , CPC13) _ ^'C1 2.0 (3H)s; 2,3 6 (6H)s; 2.7 0 \ /— (2H)d; 3.33 (3H)s; ja 7.3- 8.6 (3H)m.

Cl 2.10 (3H)s; 2,31 (6H)s; 2.66 /—\ (2H)d; 3.30 (3H)s; ja 7.2- C1 8.4 (3H)m.

CH3 2,03 (3H)s; 2.30 (6H)s; 2.66

Cl /~\ (3H)s; 3,10 (3H)s; ja 7,1- 8,1 (3H)m1.

v\_ // _^ 2.06 (3H)s; 2,33 (6H)s; 2,70

Cl—(v /V- (2H)d; 3,13 (3H)s; ja 7,4-9,6 (3H)m.

) /

NO

2 N0 2,06 (3H)s; 2.40 (6H)s; 2.66 /=/ 2 (2H)d; 3.25 (3H)s; ja 7.2-8,6 (3H)m1.

C1 -4 > 2.06 (3H)si 2,33 (6H)s; 2.63

/NO

2 (2H)d; 2.81 (3H)s; 3,63 (3H)s;

ru Π / V

3 //' ja 7.0-8.2 (3H)m 1 .

__/N02 2.0 6 ( 3 H) s ·, 2,3 6 (6H)s; ja 02N-^ 8.4-9.0 (3H)m1.

NMR: DMSO/CDCl3 24 67709

Esimerkki 20 ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-(2,3,4-trikloorifenyylisuIfonyylearning )oleandomysiini

Liuosta, jossa on 2,9 g (4,0 mmoolia) 11-asetyyli-4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiiniä. 1,15 g (4,1 mmoolia) 2,3,4-trikloorifen-yylisulfonyylikloridia ja 0,57 ml (4,2 mmoolia) trietyyliamiinia 30 ml:ssa metyleenikloridia, sekoitetaan huoneen lämpötilassa 18 tuntia. Orgaaninen kerros pestään vedellä (1 x 50 ml) ja kyllästetyllä suolaliuoksella (1 x 50 ml) ja kuivataan sitten natriumsul-faatilla. Liuotin haihdutetaan tyhjössä, ja jäännös kromatografoi-daan 150 g:11a silikageeliä ja eluoidaan asetonilla keräten 7 ml:n fraktioita. Fraktiot 60-100 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin, jolloin saadaan 800 mg haluttua tuotetta.

NMR (J, CDC13): 2,06 (3H)s; 2,33 (6H)s; 2,63 (2H)d; 3,2 (3H)s; ja 7,2- 8,2 (2H)m.

Noudattamalla edellä olevaa menetelmää ja käyttämällä siinä sopivia lähtöaineita, saadaan seuraavat yhdisteet: li-asetyyli-4"-deoksi-4"-(3,4,5-trikloorifenyylisulfonyyliamino)oleandomysiini, ll-propionyyli-4"-deoksi-4'!-( 2,4,6-trikloor if enyy li sul f onyy liamino ίο leandomys iin i j a ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-(2,3,5-trikloorifenyyli-sulfonyyliamino)oleandomysiini.

Esimerkki 21 ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-(2-hydroksi-3 ,5-dikloorifenyylisul-fonyyliamino)oleandomysiini

Toistetaan esimerkin 20 menetelmä käyttäen lähtöaineina 11-asetyyli-4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiiniä 2,55 g (3,5 mmoolia), 954 mg (3,65 mmoolia) 2-hydroksi-3,5-dikloorifenyylisulfonyyliklo-ridia ja 518 yul (3,75 mmoolia) trietyyliamiinia 25 ml:ssa metylee-nikloridia, jolloin kromatografoimalla silikageelillä (220 g), saadaan 483 mg haluttua tuotetta.

NMR ( J , CDC13/DMR0): 2,03 (3H)s; 2,50 (6H)s·, 3,05 (3H)s; ja 7,2 - 7,8 (2H)m.

Esimerkki 22 ll-asetyyli-4,,-deoksi-4,,-(3-amino-4-kloorifenyylisulfonyyli- amino)oleandomysiini

Suspensiota, jossa on 500 mg 10-%:ista palladium-hiiltä 50 ml:ssa etyyliasetaattia, joka sisältää 1,0 g ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-(3-nitro-4-kloorif enyylisulfonyy1i amino)oleandomys i iniä, rav i s-

II

25 67709 teilaan vetykehässä alkupaineella 345 kPa huoneen lämpötilassa yön yli. Katalysaattori suodatetaan pois,ja suodos haihdutetaan tyhjössä. Jäännöksenä saatu valkea vaahto kromatografoidaan 160 g:lla silika-geeliä, ja eluoidaan asetonilla keräten 50 ml:n fraktioita. Tuotetta sisältävät fraktiot yhdistetään ja haihdutetaan alennetussa naineessa, jolloin saadaan 450 mg haluttua tuotetta.

NMR (c* , CDC1 g > : 2,03 (3H)s; 2,33 (5H)s; 2,66 (2H)d^ 3,16 (3H)s; ja 7,2 - 8,0 (3H)m.

Samalla tavalla valmistetaan käyttäen sopivaa, esimerkissä 10 valmistettua nitroyhdistettä: ll-asetyyli-4,,-deoksi-4,,-(m-aminofenyvlisuifonyy1iamino)- oleandomysiini NMR ( / > CDC12) : 2,03 (3H)s; 2,30 (6H)S-, 2,63 (2H)d; 3,10 (3H)s; ja 7,0 - 7,8 (4H)m ja ll-asetyyli-4,f-deoksi-4"-(p-aminofenyviisuifcnVyiiamino)- oleandomysiini NMR, (<3' , CDC12) : 2,06 (3H)s; 2,31 (6H)s; 3,02 (3H)s; ja 6,4 - 7,8 (4H)dd.

Esimerkki 23 ll-asetyyli-4"-deoksi-4tl-( 3-metyyli-2-tienvylisulfonyyliami-no )oleandomysiini 100 g:aan (0,13 moolia) ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-amino-olean-domysiiniä 900 ml:ssa metyleenikloridia lisätään 593 ml trietyvli-amiinia, ja liuosta sekoitetaan 10 minuuttia. Sitten lisätään ti-poittain yhden tunnin kuluessa 3-metyyli-2-tienyylisulfonyyliklo-ridia (41,9 g, 0,213 moolia) 300 mlrssa metyleenikloridia, ja reak-tioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa us tuntia. Reaktioseos kaadetaan kahteen litraan vettä, orgaaninen kerros erotetaan, pestään peräkkäin vedellä (2 x 250 ml) ja suolaliuoksella (1 x 250 mi) ja kuivataan natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutetaan tyhjössä ja jäännös kromatografoidaan 1,5 kg:lla silikageeliä 105 x 6,5 cm pylväässä. Eluoidaan asetonilla, jolloin tuote saadaan fraktioihin välillä 2,3 - 6 1. Nämä yhdistetään, liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan vaahto. Vaahtoa käsitellään dietyylieet-terillä, jolloin saadaan 66,4 g haluttua tuotetta, sp. 184 - 185,5°C.

NMR (J, CDC13): 2,04 (3H)s; 2,41 (6H)s; 2,46 (3H)s; 2,62 (2H)m; 3,02 (3H)s; 6,84 ja 7,32 (2H).

2 g:aan edellä saatua vapaata emästä 15 ml:ssa etyyliasetaat- ___ 1.

26 67709 tia, lisätään 0,12 ml fosforihappoa, ja saatua liuosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa. 20 minuutin kuluttua alkaa muodostua kiteitä, jotka kahden tunnin kuluttua suodatetaan, pestään etyyliasetaatilla ja kuivataan, jolloin saadaan 1,3 g ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-(3-metyyli- 2-tienyylisulfonyyllamino)olea'ndömysiinifosfaattia .

NMR ( J , CD30D): 2,01 (3H)s; 2,15 (3H)sj 2,56 (2H)m; 2,83 (6H)s; 3,0 (3H)s; 6,88 ja 7,42 (2H).

Esimerkki 24

Toistetaan esimerkin 23 menetelmä käyttäen lähtöaineena sopivaa sulfonyylikloridia ja 11-asetyy1i-4"-deoksi-4"-araino-olean-domysiiniä, jolloin saadaan seuraavat yhdisteet: n (ch ) 67709 H0<,„A.

o r i V"xi n-^"'0'v N x ^ λΛ' '.-! Ί O "*r' ,\W" o 1 i \^r·.

""o K0/ r 0 V0'·,-

V'V

I NHSO R och3 NMR (J , CDC13 2,08 ( 3 H) s ; 2.33 ( 6 H ) s ; 2.38 ( 3 H ) s ·, A q\ 2.6 8 (2H)m; 3.27 (3H)s; 6.08 ja CK3 6 . 9 2 ( 2 H).

2.0 8 (3H)s ; 2,3 6 (6H)s; 2,68 (2H)m; 3,30 (3H)s; 3.71 (3H)s; 6,44-6,70 CH3 (lH)m ja 7.18-7.39 (2H)m.

CH3N_> 2.03 (3H)s; 2,25 (3H)s; 2,51 (6H)s; \SV— 2.61 ( 2 H) m ·, 3,15 (3H)s; 7,07 (lH)m ja 7,38 (lH)m.

c H \\_ 2,06 (3H)s; 2,33 (6H)s; 2,65 (2H)m; 25 S" 3,2 2 ' ( 3H)s ·, 6.73 ja 7 ,45 (2H) .

__2,08 (3H)s; 2,34 (6H)s; 2,54 (3H)s; CH3 2,6 7 (2H)s; 3.2 5 (3H)s; 6,7 3 ja 7.46 C2H).

28 67709

Esimerkki 25 11—asetyyli—4"-deoksi—4"-(5-karbometoksi-2-pyrryylisulfonyy-liamino)oleandomys iini

Liuosta, jossa on 2,96 g (0,0041 moolia) ll-asetyyli-4"-de-oksi-4"-amino-oleandomysiiniä ja 0,62 ml trietyyliamiinia 50 ml:ssa kuivaa metyleenikloridia, jäähdytetään jäähauteella ja käsitellään annoksittain 1,0 g:11a (0,0044 moolia) 2-karbometoksi-5-pyrryyli-sulfonyylikloridia. Reaktioseos saa lämmetä huoneen lämpötilaan ja sitä sekoitetaan 3,5 tuntia, sitten se kaadetaan 200 ml:aan vettä. Vesikerroksen pH säädetään arvoon 9,5 1-n vesipitoisella natrium-hydroksidiliuoksella, ja metyleenikloridikerros erotetaan, pestään peräkkäin vedellä ja kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan natriumsulfaatilla. Liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan 3,8 g raakatuotetta valkeana vaahtona. Saatu vaahto kromatografoidaan silikageelillä 3,25 x 38 cm pylväässä ja eluoidaan asetonilla. Kootaan noin 10-12 ml:n fraktioita, ja fraktiot 40-220 yhdistetään. Niistä haihdutetaan liuotin tyhjössä, jolloin saadaan 3,4 g haluttua tuotetta valkeana vaahtona.

NMR (J , CDC13): 2,05 (3H)s; 2,58 (6H)sj 2,67 (2H)m; 3,25 (3H)s; 3,90 (3H)s; 7,20 (IH)m ja 7,52 (lH)m.

Esimerkki 26

Noudattamalla esimerkin 25 menetelmää ja käyttämällä siinä sopivaa sulfonyylikloridia ja ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiiniä, saadaan seuraavat analogit:

II

29 67709 N(CU1)_ HO I 2 v<" Λ O T I ,0 o CH3CO u,,^ \.··''' ; a T IsHSO^R 0CH3 R NTMR (6,CDC13) j~~\ 2.09 (3H)s: 2.32 (6H)s; 2,69 (2H)m: CH O C -M y~ 3,22 (311) s; 3.95 (3H)s; 7.61 ja J 7.75 (2H).

CH O C

N-y 2.11 (3H)s; 2.34 (6H)s; 2.70 (2H)m; (/ \)_ 3.24 (3H) s; 3 r 94 (3H)s; 8,06 ja S 8.28 (2H).

j-y 2.08 (3H)s; 2.29 (6H)s; 2.67 (2H)s; CH O C—H Λ_ 318 (3H) s; 3.94 (3H)s; 7.02 ja J 1 0 7,20 (2H).

30 67709

Esimerkki 27 4"-deoksi-4”- (p-kloori f enyy1isu1fonyyliamino )oleandomysiini

Liuosta, jossa on 3,0 g 4,T-deoksi-4"-amino-oleandomysiiniä, 865 mg p-kloorifenyylisulfonyylikloridia ja 424 mg trietyyliamiinia 25 ml:ssa metyleenikloridia, sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Liuotin poistetaan tyhjössä, ja jäännöstä käsitellään 20 ml:Ha asetonia. Lidkenematon trietyyliamiinihydrokloridi suodatetaan ja suodos kromatografoidaan 180 g:11a silikageeliä, ja eluoidaan asetonilla keräten 50 ml:n fraktioita. Fraktiot 18-27 yhdistetään ja haihdutetaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan 1,10 g haluttua tuotetta.

N MR (oT, CDC13): 2,33 (6H); 2,83 (2H)d; 3,06 (3H)s; ja 7,2 - 8,4 (UH)m.

Esimerkki 28 H-deoksi-H"-(p-tolueenisulfonyyliamino)oleandomysiini

Samankaltaisella menetelmällä kuin esimerkissä 27, saatiin 30 g (4,0 mmoolia) 4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiiniä, 782 g (u,l mmoolia) p-tolueenisulfonyylikloridia ja 424 mg (4,2 mmoolia) trietyy liamiinia 25 ml:ssa metyleenikloridia reagoimaan sekoittamalla yön yli huoneen lämpötilassa. Raakatuotteen jatkokäsittelyllä kro-matografoimalla 180 g:11a silikageeliä ja keräämällä 10 ml:n fraktioita, saadaan yhdistämällä fraktiot 90-148 ja haihduttamalla ne kuiviin 1,4 g haluttua tuotetta.

NMR (oT , CDC13) : 2,33 (6H)s; 2,46 (3H)s; 2,83 (2H)d; 3,10 (3H)s; ja 7,10 - 8,0 (4H)m.

Vastaavalla menetelmällä saadaan myös 4lt-deoksi-4"-(2-tien-yylisu1fonyyliamino)oleandomysiiniä.

NMR (ä , CDC13) : 2,29 (BH)s-, 2,88 (2H)m; 3,2 <3H)s; 5,6 (lH)m ja 7,33 (3H)m.

Esimerkki 29 ll-asetyyli-4"-deoksi-4''- ( 2-t ienyy li su 1 f onyyliamino )olean-domysiinifosfaatti

Liuokseen, jossa on 15,0 g ll-asetyyli-4"-deoksi-4"-(2-tienyylisulfonyyliamino)oleandomysiiniä 100 ml:ssa etyyliasetaattia, lisätään 1,0 ml fosforihappoa. Saatua suspensiota sekoitetaan neljä tuntia huoneen lämpötilassa. Kiinteä aine suodatetaan, pestään etyyliasetaatilla ja kuivataan, jolloin saadaan 12,5 g haluttua suolaa, sp. 16 8°C (haj.).

31 67709

Vastaavalla tavalla valmistetaan 11-asetyyli-VT-deoksi-4”-(3-metyyli-2-tienyylisulfonyyliamino)oleandomysiinifosfaatti, sp. 184-188°C ja ll-asetyyli-i4"-deoksi-M·"- (p-kloorif enyylisulfonyyli-amino )oleandomysiinifosfaatti, sp. 204-2Q5°C.

Valmistus A

4 "-deoksi-H’'-okso-oleandomysiinit I. 11-asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini a . 11,2' -diasetyyli-41’-deoksi-4,t-okso-oleandomys i ini

Kuivassa, magneettisekoittajalla ja typen sisäänjohtoputkel-la varustetussa pullossa olevaan N-kloorisukkinimidin (4,5 g), bentseenin (50 ml) ja tolueenin (150 ml) -5°C:seen jäähdytettyyn seokseen lisätään 3,36 ml dimetyylisulfidia. Sekoitetaan 0°C:ssa 20 minuuttia, pullon sisältö jäähdytetään sitten -25°C:seen ja siihen lisätään 5,0 g 11,2'-diasetyylioleandomysiiniä 100 ml:ssa tolueenia. Jäähdytystä ja sekoitusta jatketaan kaksi tuntia, sitten lisätään 4,73 ml trietyyliamiinia. Reaktioseosta sekoitetaan 0°C:ssa 15 minuuttia, sitten seos kaadetaan 500 ml:aan vettä, pH säädetään 1-n vesipitoisella natriumhydroksidiliuoksella 9,5:een, orgaaninen kerros erotetaan, pestään vedellä ja suolaliuoksella ja kuivataan natriumsulfaatill a. Liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 4,9 g haluttua tuotetta vaahtona.

NMR U , CDC13): 3,48 (3H)s; 2,61 (2H)m; 2,23 (6H)s ja 2,03 (6H)s.

b. ll-asetyyli-4l,-deoksi-4M-okso-oleandomysiini

Liuosta, jossa on 4,0 g 11,2 '-diasetyyli-4"-deoksi-4"-okso-ole-andomysiiniä 75 ml:ssa metanolia, sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Reaktioseos haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa, jolloin saadaan haluttu tuote vaahtona. Haihdutusjäännös liuotetaan die-tyylieetteriin, liuosta käsitellään heksaanilla, jolloin saadaan 2,6 g tuotetta valkeana kiinteänä aineena, sp. 112-117°C.

NMR (J, CDC13): 3,43 (3H)s; 2,60 (2H)m; 2,23 (6H)s ja 2,01 ( 3H) s .

Vastaavasti käyttämällä edellä olevassa menetelmässä ll,2'-dip~ ropionyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä tai ll-propionyyli-2'-asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä, saadaan 11-propionyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä.

67709 II. 4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini a. 2 * -asetyyli-M^-deoksi-^-okso-oleandomysiini N-kloorisukkinimidin (467 mg) sameaan -5°C:seen jäähdytettyyn liuokseen 20 ml:ssa tolueenia ja 6 ml:ssa bentseeniä lisätään typpikehässä dimetyylisulfidia (0,337 ml). Sekoitetaan 0°C:ssa 20 minuuttia, sitten seos jäähdytetään -25°C:seen, ja siihen lisätään 1,46 g 2'-asetyylioleandomysiiniä ja 15 ml tolueenia. Sekoitusta jatketaan kaksi tuntia -20°C:ssa, sitten seokseen lisätään 0,46 ml trietyyliamiinia. Reaktioseos saa olla -20°C:ssa vielä viisi minuuttia, sitten se saa lämmetä 0°C:seen. Seos kaadetaan sekoittaen 50 mitään vettä ja 50 mitään etyyliasetaattia. Vesiseoksen pH säädetään arvoon 9,5 lisäämällä vesipitoista natriumhydroksidiliuosta. Orgaaninen kerros erotetaan, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin tyhjössä, jolloin saadaan valkeaa vaahtoa (1,5 g). Trituroimalla dietyylieetterissä, saadaan 864 mg raakatuotetta, josta kiteyttämällä kaksi kertaa metyleenikloridi-dietyylieette-ristä, saadaan 212 mg puhdasta tuotetta, sp. 183 - 185,5°C.

Analyysi kaavalle C^^Hg^O^gN: C 61,1 H 8,5 N 1 ,9

Saatu: C 60,9 H 8,4 N 1 ,9 NMR (f, CDC13): 5,60 (1H)m; 3,50 (3H)s; 2,73 (2H)m; 2,23 (6H)s ja 2,03 (3H)s.

b. 4l'-deoksi-4ll-okso-oleandomysiini

Liuosta, jossa on 1,0 g 2 ’-asetyyli-4T,-deoksi-4"-okso-olean-domysiiniä 20 mltssa metanolia, sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Liuos haihdutetaan kuiviin tyhjössä, jolloin saadaan haluttu tuote valkeana vaahtona, 937 mg.

NMR («S, CDC13) : 5,60 (1H)m; 3,50 (3H)s; 2,85 (2H)m ja 2,26 (6H)s.

Valmistus B

4tl-deoks i-4 "-amino-oleandomys iin it 1. 11 -asetyyli-4"-deoksi-4"-amino-oleandomys.iini

Suspensioon, jossa on 10 g 10-%:ista palladiumhiiltä 100 mltssa metanolia, lisätään 21,2 g ammoniumasetaattia, ja suspensiota käsitellään sitten liuoksella, jossa on 20 g 11-asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä 100 mltssa metanolia. Suspensiota 67709 ravistellaan huoneen lämpötilassa vetykaasussa alkupaineella 345 kPa. 1,5 tunnin kuluttua katalysaattori suodatetaan pois, ja suo-dos lisätään sekoittaen veden (1 200 ml) ja kloroformin (500 ml) seokseen. pH säädetään arvoon 6,4 - 4,5, ja orgaaninen kerros erotetaan. Vesikerros uutetaan vielä kerran 500 ml :11a kloroformia, sitten sitä käsitellään 500 ml:lla etyyliasetaattia ja sen pH säädetään 1-n natriumhydroksidilla 9,5 reen. Etyyliasetaattikerros erotetaan, ja vesikerros uutetaan vielä kerran etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiuutteet yhdistetään, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin, jolloin saadaan keltaista vaahtoa (18,6 g), josta kiteyttämällä di-isopropyylieetteristä saadaan 6,85 g puhdasta tuotetta, sp. 157,5 - 160°C.

NMR (S, CDC13): 3,41 (3H)s; 2,70 (2H)m; 2,36 (6H)s ja 2,10 (3H)s.

Toinen epimeeri, jota on vaahtomaisessa raakatuotteessa 20-25 %, saadaan asteittain väkevöimällä ja suodattamalla emä-liuoksista.

Samalla tavalla käyttämällä edellä olevassa menetelmässä lähtöaineena 11 -propionyyli-4"-deoksi-4,'-okso-oleandomysiiniä , saadaan 11-propionyyli-4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiiniä.

II. 4"-deoksi-4”-amino-oleandomysiini

Liuosta, jossa on 20 g 2'-asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-olean-domysiiniä 125 ml:ssa metanolia, sekoitetaan yön yli huoneen lämpötilassa, sitten siihen lisätään 21,2 g ammoniumasetaattia. Liuos jäähdytetään jäähauteessa ja siihen lisätään 1,26 g natriumsyaani-boorihydridiä. Jäähdytyshaude poistetaan, ja reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa kaksi tuntia. Reaktioseos kaadetaan 600 ml:aan vettä ja 600 ml:aan dietyylieetteriä, pH säädetään arvoon 8,3 - 7,5. Eetterikerros erotetaan ja vesikerros uutetaan etyyliasetaatilla. Uutteet otetaan talteen ja vesifaasin pH säädetään arvoon 8,25. Tässä pHrssa uutetut dietyylieetteri- ja etyyliasetaattiuutteet otetaan samoin talteen, ja vesifaasin pH säädetään 9,9:ksi. Tässä pHrssa uutetut dietyylieetteri- ja etyyliasetaattiuutteet yhdistetään, pestään peräkkäin vedellä (1 x) ja kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan natriumsulfaatilla. Viimeksi saadut (pH 9,9:ssä) uutteet haihdutetaan kuiviin, ja saatu 34 67709 vaahto kromatografoidaan 160 g:11a silikageeliä, jolloin liuottimena ja ensimmäisenä eluenttina käytetään kloroformia. Kun on kerätty 11 kpl 12 ml:n fraktiota, eluentti vaihdetaan metanoli-klo-roformiksi (5:95). Fraktion 370 jälkeen eluenttina käytetään me-tanoli-kloroformia (10:90) ja fraktion 440 jälkeen metanoli-kloro-formia (15:85). Fraktiot 85-260 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin tyhjössä, jolloin saadaan 2,44 g haluttua tuotetta.

NMR (b, CDC13): 5,56 (1H)m; 3,36 (3H)s; 2,9 (2H)m ja 2,26 ( 6H) s .

Claims

35 67709 1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten antibakteeris-ten 4"-sulfonyyliamino-oleandomysiini-johdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaavat N(CH ) HO , ‘3 2 ^CH3>2 , Vl --0 0 -.0 n f Λ 'V V /xxo- '· 0v^ 1 1 v| L\\ o ho , L> o 0 x 1 !‘ Λ I Γγ ’ o γ ^ ^ 0 . o O#1"1 o "i r o Y“v V \ γ-^MHSO P I MR I 2 2 0CHq 2 0CH3 1 3 2 ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi, joissa kaavoissa R on 1-3 hiiliatomia sisältävä alkyyli; pyridyyli ;1,1,1 ,-trif luorietyyli ; fenyyli; monosubstituoitu fenyyli, jossa on substituenttina fluori, kloori, bromi, jodi, hydr-oksi, metoksi, syaani, karboksamido, nitro, karbometoksi, karbobent-syylioksi, trifluorimetyyli, 1-4 hiiliatomia sisältävä alkyyli tai asetamido; disubstituoitu fenyyli, jonka substituentit valitaan seu-raavista: kloori, nitro, amino, metoksi ja metyyli; trikloorifenyyli, hydroksidikloorifenyyli ; bentsyyli; naftyyli; tienyyli ; klooritienyyl ; 2-asetamido-5-tiatsolyyli ; 2-asetamido-L‘-metyyli-5-tiatsolyyli ; 2-bentsimidatsolyyli; dimetyyli-2-pyrimidinyyli; pyrryyli; furyyli; monosubstituoitu tienyyli, pyrryyli tai furyyli, jonka substituent-ti on karbometoksi tai 1-2 hiiliatomia sisältävä alkyyli; tai 1-metyyli-5-karbometoksi-3-pyrryyli ; R^ on 2-3 hiiliatomia sisälxävä alkanoyyli; ja R£ on fenyyli; tienyyli; monosubstituoitu fenyyli, jonka substituenttina on kloori, fluori, metyyli, metoksi tai tri-fluorimetyyli; tai alkyylisubstituoitu tienyyli, jonka alkyylissa on 1-2 hiiliatomia, tunnettu siitä, että kaavan 67709 M ( CH ) 3;2 N (CH„) -Ό KO i ; d 1 0„rJ< YN, -o H0'"-- , I K·, Λ n S ο^. -χ I I Ri°Y ho 4 γ,. κ'χ Λ j f' "'Ί 1¾. tai "I 0. V n η\ Y ^-NH V OCH„ OCH„ z 1' 2’ 3 mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan reaktioinertissä liuottimessa huoneen lämpötilassa happoa sitovan aineen läsnäollessa 1 moolin kanssa happohalogenidia, jolla on kaava RSO2W tai R^SO^W joissa kaavoissa W on halogeeni. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sulfonyylihalogenidi on kaavan RSO^Cl mukainen sulfo-nyylikloridi. 3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että happoa sitova aine on trietyyliamiini. 4·. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktioinertti liuotin on metyleenikloridi. 5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että R on asetyyli, ja R on 2-tienyyli, 3-tienyyli tai 3-metyyli-2-tienyyli. Il 37 67709

1. Förfarande för framställning av terapeutiskt användbara antibakteriska H"-sulfonylamino-oleandomycin-derivat med formlerna t-q Hn Ψ( CH3}

2 NCCH„) 0 °γ< '-Λ °yM° ΗΟ,,Χ 3 2 h°J V O-— il lO '' f’,,, I γζ ΊΓ I NHS02R J^^NHS02R2 0CH„ * 3 0CH3 1 2 och farmaceutiskt godtagbara syraadditionssalter därav, i vilka formler R är alkyl med 1-3 kolatomer; pyridyl; 1,1,1-trifluoretyl; fenyl; monosubstituerad fenyl, väri substituenten är fluor, klor, brom, jod, hydroxi, metoxi, cyan, karboxamido, nitro, karbometoxi, karbobensyloxi, trifluormetyl, alkyl med 1-4 kolatomer eller acetamido; disubstituerad fenyl, väri substituenterna är klor, nitro, amino, metoxi eller metyl; triklorfenyl; hydroxidiklorfenyl; bensyl; naftyl; tienyl; klortienyl; 2-acetamido-5-tiazolyl; 2-acetamido-4-metyl-5-tiazolyl ; 2-bensimidazolyl; dimetyl-2-pyrimidinyl; pyrryl; furyl; monosubstituerad tienyl, pyrryl eller furyl, väri substituenten är karbometoxi eller alkyl med 1-2 kolatomer; eller l-metyl-5-karbo-metoxi-3-pyrryl; R^ är alkanoyl med 2-3 kolatomer; och R2 är fenyl; tienyl; monosubstituerad fenyl, väri nämnda substituent är klor, fluor, metyl, metoxi eller trifluormetyl; eller alkylsubstituerad tienyl, varvid nämnda alkyl har 1-2 kolatomer, känneteck-n a t därav, att man omsätter en förening med formeln