FI66842C - Foerfarande foer framstaellning av som analgetiska medel anvaendbara enkelfalinanaloger - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av som analgetiska medel anvaendbara enkelfalinanaloger Download PDFInfo
- Publication number
- FI66842C FI66842C FI782971A FI782971A FI66842C FI 66842 C FI66842 C FI 66842C FI 782971 A FI782971 A FI 782971A FI 782971 A FI782971 A FI 782971A FI 66842 C FI66842 C FI 66842C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- mixture
- acid
- added
- butyloxycarbonyl
- stirred
- Prior art date
Links
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 64
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 23
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 21
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 claims description 20
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 17
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 15
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims description 8
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 claims description 5
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 5
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 claims description 3
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims description 3
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims description 3
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 99
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 69
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 58
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 53
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 44
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 37
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N N,N′-Dicyclohexylcarbodiimide Substances C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- 239000000047 product Substances 0.000 description 31
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 24
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 24
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 24
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 23
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 21
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 20
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 20
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 20
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- -1 for example Chemical class 0.000 description 19
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 16
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 13
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 13
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 13
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 12
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 12
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 10
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 159000000021 acetate salts Chemical class 0.000 description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 10
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 10
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 10
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 10
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 10
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 10
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 9
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 9
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 8
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 8
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 7
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 7
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 7
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 6
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 6
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 6
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 5
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 5
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 description 5
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 5
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 229910000069 nitrogen hydride Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 5
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 5
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 4-[[(3ar,5ar,5br,7ar,9s,11ar,11br,13as)-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-3a-[(5-methylpyridine-3-carbonyl)amino]-2-oxo-1-propan-2-yl-4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a-dodecahydro-3h-cyclopenta[a]chrysen-9-yl]oxy]-2,2-dimethyl-4-oxobutanoic acid Chemical compound N([C@@]12CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]5C(C)(C)[C@@H](OC(=O)CC(C)(C)C(O)=O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC[C@@H]3C1=C(C(C2)=O)C(C)C)C(=O)C1=CN=CC(C)=C1 QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 4
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 4
- 238000005984 hydrogenation reaction Methods 0.000 description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 4
- 125000006503 p-nitrobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1[N+]([O-])=O)C([H])([H])* 0.000 description 4
- NTTOTNSKUYCDAV-UHFFFAOYSA-N potassium hydride Chemical compound [KH] NTTOTNSKUYCDAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910000105 potassium hydride Inorganic materials 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NFDXQGNDWIPXQL-UHFFFAOYSA-N 1-cyclooctyldiazocane Chemical compound C1CCCCCCC1N1NCCCCCC1 NFDXQGNDWIPXQL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEZNGIUYQVAUSS-UHFFFAOYSA-N 18-crown-6 Chemical compound C1COCCOCCOCCOCCOCCO1 XEZNGIUYQVAUSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 3
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 3
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 3
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N benzenesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940092714 benzenesulfonic acid Drugs 0.000 description 3
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 3
- 239000012973 diazabicyclooctane Substances 0.000 description 3
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N homoserine Chemical compound OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 3
- KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N oxidanium;4-methylbenzenesulfonate Chemical compound O.CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 3
- ZYJPUMXJBDHSIF-NSHDSACASA-N (2s)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ZYJPUMXJBDHSIF-NSHDSACASA-N 0.000 description 2
- 125000000453 2,2,2-trichloroethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C(Cl)(Cl)Cl 0.000 description 2
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 2-aminopentanoic acid Chemical compound CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 150000001351 alkyl iodides Chemical class 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- UIERETOOQGIECD-ARJAWSKDSA-N angelic acid group Chemical group C(\C(\C)=C/C)(=O)O UIERETOOQGIECD-ARJAWSKDSA-N 0.000 description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 238000009903 catalytic hydrogenation reaction Methods 0.000 description 2
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 2
- HVTICUPFWKNHNG-UHFFFAOYSA-N iodoethane Chemical compound CCI HVTICUPFWKNHNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PVWOIHVRPOBWPI-UHFFFAOYSA-N n-propyl iodide Chemical compound CCCI PVWOIHVRPOBWPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=C2C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=C1 PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000003140 primary amides Chemical class 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GYNQVPIDAQTZOY-ROUUACIJSA-N (2s)-2-[[2-[[2-[[(2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]acetyl]amino]acetyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound C([C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 GYNQVPIDAQTZOY-ROUUACIJSA-N 0.000 description 1
- RUBYQYMLYZMHQR-ZETCQYMHSA-N (2s)-2-amino-n-phenylpropanamide Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NC1=CC=CC=C1 RUBYQYMLYZMHQR-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVSFQJZRHXAUGT-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethylpropanoyl chloride Chemical compound CC(C)(C)C(Cl)=O JVSFQJZRHXAUGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-hydroxy-7-methoxychromen-4-one Chemical compound C=1C(OC)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 2-[2,4-di(pentan-2-yl)phenoxy]acetyl chloride Chemical class CCCC(C)C1=CC=C(OCC(Cl)=O)C(C(C)CCC)=C1 NGNBDVOYPDDBFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N Adamantane Natural products C1C(C2)CC3CC1CC2C3 ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JXYACYYPACQCDM-UHFFFAOYSA-N Benzyl glycinate Chemical compound NCC(=O)OCC1=CC=CC=C1 JXYACYYPACQCDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- 150000008541 D-alanines Chemical class 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 108010092674 Enkephalins Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical group 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- OBSIQMZKFXFYLV-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine amide Chemical group NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 OBSIQMZKFXFYLV-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 150000008547 L-phenylalanines Chemical class 0.000 description 1
- URLZCHNOLZSCCA-VABKMULXSA-N Leu-enkephalin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=CC=C1 URLZCHNOLZSCCA-VABKMULXSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010022337 Leucine Enkephalin Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- YFGBQHOOROIVKG-FKBYEOEOSA-N Met-enkephalin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=CC=C1 YFGBQHOOROIVKG-FKBYEOEOSA-N 0.000 description 1
- 108010042237 Methionine Enkephalin Proteins 0.000 description 1
- SCIFESDRCALIIM-UHFFFAOYSA-N N-Me-Phenylalanine Natural products CNC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 SCIFESDRCALIIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SCIFESDRCALIIM-VIFPVBQESA-N N-methyl-L-phenylalanine Chemical compound C[NH2+][C@H](C([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 SCIFESDRCALIIM-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical compound O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHHGXPLMPWCGHP-UHFFFAOYSA-N Phenethylamine Chemical compound NCCC1=CC=CC=C1 BHHGXPLMPWCGHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000959554 Tabanus atratus Adipokinetic hormone Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940124277 aminobutyric acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 125000000051 benzyloxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- YSMHTFWPDRJCMN-UHFFFAOYSA-N butan-2-yl carbonochloridate Chemical compound CCC(C)OC(Cl)=O YSMHTFWPDRJCMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003857 carboxamides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000001733 carboxylic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 150000003983 crown ethers Chemical class 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide dmf Chemical compound CN(C)C=O.CN(C)C=O UXGNZZKBCMGWAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000012259 ether extract Substances 0.000 description 1
- RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N ethyl chloroformate Chemical compound CCOC(Cl)=O RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002333 glycines Chemical class 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 229910003480 inorganic solid Inorganic materials 0.000 description 1
- INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N iodomethane Chemical compound IC INQOMBQAUSQDDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- URLZCHNOLZSCCA-UHFFFAOYSA-N leu-enkephalin Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1CC(N)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)NC(C(=O)NC(CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 URLZCHNOLZSCCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000005171 mammalian brain Anatomy 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 229910017604 nitric acid Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000005740 oxycarbonyl group Chemical group [*:1]OC([*:2])=O 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 150000002993 phenylalanine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000000405 phenylalanyl group Chemical group 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- WHRNULOCNSKMGB-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran thf Chemical compound C1CCOC1.C1CCOC1 WHRNULOCNSKMGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/1016—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
I55F1 [B] (^KUULUTUSJULKAISU £ £ Q Λ O
JX§Ka lJ ' ') UTLACCN INCSSKRIFT ooo4z +¾¾¾ c (45) Patentti cyönneUy 10 12 1904 ^ T ^ (51) Kv.ik?/IM.CL3 C 07 C 103/52 SUOMI —FINLAND (21) IWtUhdwmw-PMwwweknln* 782971 (22) HikamtapUvt —AnaOkninfKUf 29.09.78 (23) AHctipahrl—GIHtflMtsdag 29.09.78 (41) Tullut JulklMlal — Blhrlt affamNf η<^
Patentti· ja rakistarihallitu· (44) Nthtftvtksipanon kuuLJvrikfttsun pvm. — ,, no ΟΛ
Patent- och registarstyralMd Anrtkan Utkgd odi utl-skrtftM pabHcarad i 1 ·Uö ·04 (32)(33)(31) ΡχΤ«··«Τ •taelkeu·—β^«ηΙ prior** 03.10.77 USA(US) 838516 (71) Eli Lilly and Company, 307 East McCarty Street, Indianapolis,
Indiana A6206, USA(US) (72) Edward Lee Smithwick, Jr., Indianapolis, Indiana,
Robert Curtis Arthur Frederickson, Indianapolis, Indiana,
Robert Theodore Shuman, Greenwood, Indiana, USA(US) (7^) Oy Kolster Ab (5*0 Menetelmä ana 1geettisina aineina käyttökelpoisten enkelfaliini-analogien valmistamiseksi ~ Förfarande för framstä11 ning av som analgetiska medel användbara enkelfalinanaloger Tämä keksintö koskee menetelmää analgeettisina aineina käyttökelpoisten enkelfaliinianalogien valmistamiseksi, joilla on kaava I, (L)
OO O R.R.O
Hv (L) Il (D) K K [4|5|| '>N-CH-C-NH-CH-C-NH-CH_-C-N-C-C-NH„ (I) 1 I 2 I 2 CH0 CH- CH~ Φ 0
OH
jossa L ja D, soveltuvassa tapauksessa, määrittelevät kiertosuunnan; ja jossa R4 on -C^-alkyyli; ja R& on vety tai -C-^-alkyyli; _____ - Γ“ 2 66842 ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien, myrkyttömien happo-additiosuolojen valmistamiseksi. Tämän uuden yhdisteluokan yhdisteillä on parenteraalisesti annettaessa merkittävä ja osoitettavissa oleva analgeettinen vaikutus.
Nisäkkäiden aivo- tai aivo-selkäydinnesteestä (csf) on hiljattain uutettu sisäsyntyisiä aineita, joilla on morfiilin kaltaisia ominaisuuksia. Nämä aineet, joista käytetään nimitystä enkefa-liini, Hughes ym. (Nature 258 (1975) 577) ovat identifioineet pentapeptideiksi, joiden kaavat ovat seuraavat:
K-Tvr-GIy-Gly-Phe-Met-OH
H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Lcu-OH.
Näistä yhdisteistä käytetään nimitystä metioniini-enkefalii-ni ja vastaavasti leusiini-enkefaliini.
Vaikkakin näillä yhdisteillä on osoitettu olevan analgeet-tista vaikutusta aivokammionsisäisesti hiirelle annettuna /Buscher ym., Narute 261 (1976) 423j, niillä ei ole käytännöllisesti katsoen lainkaan käyttökelpoista analgeettista vaikutusta parenteraalisesti annettuna.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle uusien, kaavan I mukaisten enkelfaliinianalogien valmistamiseksi on tunnusomaista, että vastaavasti suojatusta yhdisteestä, jolla on kaava II
(L)
0 0 0 R LO
R2 il) li (D) li il |V|| "-ÖrN-CH-C-NH-CH-C-NH-CH _-C-N-C-C-NH0 (II)
Rf^" ! » 2 I 2 f2 CH3 f 2 O f) 'k'/
OH
jossa ja toisistaan riippumatta merkitsevät vetyä tai cx-aminosuojaryhmää, kuten tert.-butyy1ioksikarbonyyliä, ja R^ ja R merkitsevät samaa kuin edellä, lohkaistaan suojaryhmät happo-väliaineella, kuten trifluorietikkahapolla, jääetikkahapolla, jossa on HCl-kaasua tai muurahaishapolla.
Farmaseuttisesti hyväksyttäviä myrkyttömiä happoadditiosuo-loja ovat orgaaniset ja epäorgaaniset happoadditiosuolat, esimerkiksi suolat, jotka on valmistettu selliaisista hapoista kuin suo- 66842 lahappo, rikkihappo, sulfonihappo, viinihappo, fumaarihappo, bromi-vetyhappo, glykolihappo, sitruunahappo, maleiinihappo, fosfori-happo, meripihkahappo, etikkahappo, typpihappo, betnsoehappo, as-korbiinihappo, p-tolueenisulfonihappo, bentseenisulfonihappo, naf-taleenisulfonihappo, ja propionihappo. Happoadditiosuolat ovat edullisesti suoloja, jotka on valmistettu suolahaposta, etikkahapos-ta tai meripihkahaposta. Kaikkia edellä mainittuja suoloja valmistetaan tavanomaisin menetelmin.
Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden oleellinen ominaisuus on niiden stereokonfiguraatio. Mukavuussyistä modifioitujen kaavan (I) mukaisten tetrapeptidien aminohappotähteet on numeroitu pääteami-noryhmätähteestä alkaen. Aminohappotähteiden kierto asemasta 1 asemaan 3 on L, D, ei kiertoa. Asemassa 3 oleva tähde on glysiini-osa, ja näin ollen tämän tähteen osalta ei esiinny kiertoa. Aseman 4 osalta (C-pääteasema), jossa on primäärinen amidi, sen kierto määrittyy siksi, joka on vastaavalla oletetulla L-aminohappotähteel-lä.
Kaavan (I) mukaisten modifioitujen tetrapeptidien kussakin asemassa olevien määrättyjen tähteiden osalta pätevät seuraavat tärkeät seikat: (A) . Asema 1.
Tämä asema edustaa peptidin amino-pääteosaa. Tähde on peräisin L-tyrosiinista tai L-(O-asetyyli)tyrosiinista; edullisesti tähteenä on tyrosyyli.
(B) . Asema 2.
Kaavan (I) mukaisen peptidin toisessa asemassa olevan aminohappotähteen on oltava D-stereoisomeeri ja edullisesti se on D-alaniinin (Ala) johdannainen.
(C) . Asema 3.
Tässä asemassa oleva aminohappotähde on glysiinin (Gly) johdannainen .
(D) . Asema 4.
C-pääteasemassa oleva tähde on L-fenyylialaniinin (Phe) johdannainen. Tähde on primäärinen amidi (Phe-NH^).
Tähteen aminotyppi on substituoitu (R^). Tähteessä oleva N-substituentti, on N-metyyli, N-etyyli tai N-n-propyyli, edullisesti N-metyyli. Lisäksi tähteen c*.-hiilessä voi olla substituentti 4 Γ7 66842 (Rg); tällöin R,- voi olla metyyli, etyyli tai n-propyyli, edullisesti metyyli.
Tässä julkaisussa käytetään seuraavia lyhenteitä, joista useimmat ovat alalla hyvin tunnettuja ja yleisesti käytettyjä:
Avu- «--aminovoihappo
Ala - alaniini
Gys - kysteiini
Gly - glysiini
Hse - homoseriini
Ile - isoleusiini
Leu - leusiini
Met - metioniini
Nle - norleusiini
Nva - norvaliini
Phe - fenyylialaniini
Phe-Nf^ - fenyylialaniini-amidi
Ser - seriini
Tyr - tyrosiini
Vai - väliini
Ac - asetyyli
Me - metyyli
Et - etyyli BOC - t.-butyylioksikarbonyyli Bzl - bentsyyli DCC - N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidi HBT - 1-hydroksibentsotriatsoli DMF - N,N-dimetyyliformamidi TFA - trifluorietikkahappo THF - tetrahydrofuraani DEAE - dietyyliaminoetyyli DCHA - disykloheksyyliamiini
Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä valmistetaan totunnaisin menetelmin, joita käytetään peptidejä syntesoitaessa. On mahdollista, että eräiden kaavan (I) mukaisten yhdisteiden syntesoinnin aikana voi tapahtua osittaista rasemoitumista. Mikäli tällaista ra-semoitumista tapahtuu, sitä ei kuitenkaan tapahdu sellaisessa määrässä, että se muuttaisi arveluttavasti kaavan (I) mukaisen yhdisteiden analgeettista vaikutusta.
5 66842
Kaavan (I) raukaisten yhdisteiden valmistusmenetelmiin sisältyy aminohappojen tai peptidiosien kytkeminen toisiinsa antamalla toisen karboksyyliryhmän reagoida toisen aminoryhmän kanssa, jolloin syntyy amidisidos. Jotta kytkeytyminen saadaan tehokkaaksi, on toivottavaa, ensiksi, että kaikki reaktiokykyiset ryhmät, jotka eivät suoraan osallistu reaktioon, inaktivoidaan käyttämällä sopivia suojaryhmiä, ja toiseksi, että kytkettävä karboksyyliryhmä aktivoidaan sopivalla tavalla kytkentäreaktion edistämiseksi. Tämä kaikki edellyttää sekä reaktiosarjän että reaktio-olosuhteiden huolellista valintaa samoin kuin spesifisten suojaryhmien käyttämistä siten, että halutun peptidituotteen valmistus voidaan toteuttaa. Kutakin aminohappoa, jota käytetään kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseen ja jossa on erityisesti valitut suojaryhmät ja/tai aktivoivat ryhmät, valmistetaan käyttämällä peptidialalla hyvin tunnettuja menetelmiä.
Kussakin kaavan (I) mukaisten yhdisteiden kokonaissynteesin kohdassa käytetään valittuja suojaryhmäydhistelmiä. Näiden erikois-yhdistelmien on todettu toimivan erittäin luontevasti. Muutkin yhdistelmät voivat olla käyttökelpoisia kaavan (I) mukaisia yhdisteitä syntesoitaessa, joskin, ehkä, heikommalla menestyksellä.
Täten kaavan (I) mukaisten yhdisteiden synteesissä aminosuojaryh-minä voidaan käyttää eri tavoin, esimerkiksi, bentsyylioksikarbo-nyyliä (CBz), t-butyylioksikarbonyyliä (BOC), t-amyylioksikarbonyy-liä (AOC), p-metoksibentsyylioksikarbonyyliä (MBOC), adamantyyli-oksikarbonyyliä (AdOC), ja isobornyylioksikarbonyyliä. Lisäksi tyrosyyli-tähteen hydroksi-suojaryhmänä käytetään tavallisesti bentsyyliä (Bzl) siitäkin huolimatta, että voidaan hyvin käyttää muitakin ryhmiä, kuten p-nitrobentsyyliä (PNB) , p-metoksibentsyyliä (PMB).
Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistuksessa käytettävät karboksyyli-suojaryhmät voivat olla mitä tahansa tyypillisiä esterin muodostavia ryhmiä, mukaan luettuina, esimerkiksi, metyyli, etyyli, bentsyyli, p-nitrobentsyyli, p-metoksibentsyyli, ja 2,2,2-trikloorietyyli.
Sopivasti suojatun N-blokeeratun aminohapon tai peptidiosan kytkemiseen sopivasti suojatun karboksi-blokeeratun aminohapon tai peptidiosan kanssa kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi ___ - Γ 6 66842 sisältyy aminohapon tai peptidiosan vapaan karboksyyliryhmän aktivointi kytkentäreaktiota varten. Tämä voidaan suorittaa käyttämällä mitä tahansa monista hyvin tunnetuista menetelmistä. Erääseen tällaiseen aktivointimenetelmään sisältyy karboksyyliryhmän muuttaminen seka-anhydridiksi. Vapaa karboksyyliryhmä aktivoidaan antamalla sen reagoida toisen hapon, tavallisesti karboksyylihappojohdannaisen, kuten happokloridijohdannaisen kanssa. Esimerkkejä seka-anhyd-ridien muodostamiseen käytetyistä happoklorideista ovat etyylikloo-riformiaatti, tenyyliklooriformiaatti, sek .-butyyliklooriformiaat-ti, isobutyyliklooriformiaatti ja pivaloyylikloridi. Edullisesti käytetään isobutyyliklooriformiaattia.
Toisena menetelmänä karboksyyliryhmän aktivoimiseksi kytken-täreaktion suorittamista varten on sen muuttaminen aktiiviseksi esterijohdannaiseksi. Sellaisia aktiivisia estereitä ovat esimerkiksi, 2,4,5-trikloorifenyyliesteri, pentakloorifenyyliesteri, ja p-nitrofenyyliesteri. Toinen käytettävissä oleva kytkentäreaktio on hyvin tunnettu atsidi-kytkentäreaktio.
Ensisijaiseen kytkentämenetelmään kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiskesi sisältyy N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidin (DCC) käyttö vapaan karboksyyliryhmän aktiovimiseen, mikä mahdollistaa kytkeytymisen. Tämä aktivointi - ja kytkentämenetelmä suoritetaan käyttämällä DCC:tä aminohappoon tai peptidiosaan nähden ekvimoolimäärän ja suoritetaan ekvimolaarisen 1-hydroksibensto-triatsoli (HBT)-määrän lsänäollessa. HBT:n läsnäolo ehkäisee ei-toivotut sivureaktiot, rasemioitumismahdollisuus mukaan luettuna.
Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä valmistettaessa käytettävän synteesisarjän tietyissä kohdissa on lohkaistava valittuja blokee-raavia ryhmiä. Peptidisynteesialan tuntevan kemistin on helppo valita edustavista suojaryhmistä ryhmät, jotka ovat sopivia siinä mielessä, että tuotteen selektiivinen lohkaiseminen voidaan suorittaa poistamalla yksi tai useampia, mutta ei kaikkia läsnäolevia aminohapon tai peptidiosan suojaryhmiä. Nämä mentelmät ovat hyvin tunnettuja peptidialalla. Täydellisempi selostus menetelmistä, jotka ovat käytettävissä selektiivisen lohkaisun suorittamiseksi, on saatavissa kirjallisuudesta, Schröder and Lubke, The Peptides, Volume I, Academic Press, New York, (1965), ja erityisesti siinä sivuilla 72-75 esitetystä taulukosta.
7 66842
Karboksyylisuojaryhmien lohkaiseminen voidaan suorittaa alkalisen saippuoinnin avulla. Suojatun karboksyylin esterin lohkaiseminen suoritetaan yleensä suhteellisen ankarissa aikalisissä olosuhteissa, tyyppillisesti käyttämällä alkalimetallihydroksidia, kuten natriumhydroksidia, kaliumhydroksidia tai litiumhydroksidia. Alan asiantuntijat tuntevat hyvin reaktio-olosuhteet, joissa saip-puointi suoritetaan. Karboksyylin suojaryhmät voidaan poistaa myös hydraamalla katalyyttisesti, mukaan luettuna, esimerkiksi, hydraaminen katalyytin, kuten palladiumhiilen läsnäollessa. Lisäksi tapauksissa, joissa karboksyylin suojaryhmänä on p-nitrobentsyy-li tai 2,2,2-trikloorietyyli, suojauksen poistaminen voidaan suorittaa pelkistämällä sinkin ja suolahapon läsnäollessa.
Aminosuojaryhmät lohkaistaan käsittelemällä suojattua aminohappoa tai peptidiä hapon, kuten muurahaishapon, trifluorietikka-hapon (TFA), p-tolueenisulfonihapon (TSA), bentseenisulfonihapon (BSA) tai naftaleenisulfonihapon kanssa vastaavan happoadditiosuo-latuotteen muodostamiseksi. Aminosuojaryhmän lohkaiseminen voidaan suorittaa myös käsittelemällä suojattua aminohappoa tai peptidiä HBr:n tai HCl:n ja etikkahapon seoksella vastaavan hydrobromidi-tai hydrokloridi-happoadditiosuolan muodostamiseksi. Käytettävä erikosmentelmä tai reagenssi riippuu spesifisessä suojauksen pois-tamisreaktiossa käytettävien aineiden kemiallisista tai fysikaalisista omianisuuksista.
On todettu, että kun suojaus on poistettava peptidistä, jossa on ainakin kolme amonohappotähdettä, on erittäin suotavaa, että peptidin suojaryhmän lohkaiseminen suoritetaan trifluorietikkaha-polla tai muurahaishapolla, jolloin saadaan vastaavaa happoadditio-suolaa. Suola voidaan muuttaa farmaseuttisesti hyväksyttävämpään muotoon käsittelemällä sopivalla ioninvaihtohartsilla, kuten tuotteilla DEAE Sephadex® A25 tai Amberlyst® A27.
Tyrosyyli-tähteessä oleva hydroksi-suojaryhmä voidaan säilyttää peptidissä koko valmistussarjan ajan, jolloin se poistetaan viimeisen synteesivaiheen aikana samassa yhteydessä kuin aminosuo-jaryhmäkin lohkaistaan. Karboksyylisuojaryhmän poistamiseen käytettävistä olosuhteista riippuen se voidaan kuitenkin poistaa aikaisemmassa valmistusvaiheessa. Kun karboksyyliryhmä lohkaistaan alkalilla saippuoimalla, hydroksi-suojaryhmä säilyy; kuitenkin käy- _ _ - T“ 8 66842 tettäessä katalyyttistä hydrausta karboksyylisuojaryhmän poistamiseksi, hydroksi-suojaryhmäksin voi lohjeta. Viimeksi mainittu tilanne ei edusta vakavaa huolen aihetta sillä kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistaminen voidaan suorittaa tyrosyylitähteen läsnäollessa, jossa on vapaa hydroksyyliryhmä.
Ensisijaiseen spesifiseen kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistusmenetelmään sisältyy erikseen valmistetun N-päätteisen tripeptidin kytkeminen erikseen valmistettuun V-päätteiseen fenyy-lialanyyliamidiin, minkä jälkeen lohkaistaan sopivalla tavalla kaikki jäljellä olevat suojaryhmät.
Vaihtoehtoisesti erikseen valmistettu C-päätteinen fenyyli-alanyyli-yhdiste, jonka annetaan reagoida N-päätteisen tripeptidin kanssa, voi olla siten konstruoitu, että siinä on ryhmä, joka vastaa amidiosan edeltävää ryhmää. Yleinen reaktiosarja, joka kuvaa kaavan (I) mukaisen tetrapeptidin valmistusta, voidaan esittää seu-raavan piirroksen avulla. Reaktiosarjassa symboli AA vastaa aminohappotähdettä, ja alanumero vastaa aminohapon asemaa lopullisessa peptidituoteketjussa.
9 66842 A. Tripeptidi-osan valmistus.
OOC-L-Tyr-OH + H-D-(AA)a-OBzI
°Bzl DCC
HBT
\ /
BOC-L-Tyi—D-(AA)2~0DzI I
OBz I
0H_ \ /
BOC-L-Ty I—D-(AA)2-OH I
OBz I
H—G ty-OBzI DCC HBT
\ /
BOC-L-Ty I—D-(AA)2-GIy-OBzI I
OBz I
Hz NaOH
Pd/C THF/HzO
\ / \ /
BOC-L-Tyi D-(AA)a-GIy-OH BOC-L-Tyr-D-(AA)2~GIy-OH
I I
OH OBzI
- - r: 10 66842 B. Tripeptidin ja fenyylialanyyli-pääteosan kytkentä.
R.R-
II
BOC-L-Tyr-D-(AA)~-Gly-OH + HN-C-Q
I I
OY CH
DCC I
Ph
HBT
r.r- I 4 I5
BOC-L-Tyr-D-(AA) -Gly-N-C-Q
I ! OY CH- I 2
Ph
Edellä esitetyssä reaktiossa Ph vastaa fenyyliä ja Q on
O O
Il il -C-NH2, -C-OCH2Ph, ja muu näiden kaltainen ryhmä.
Kun Q vastaa bentsyyliesteriä tai muuta esteriä, jossa hyd-raamalla helposti poistettavissa oleva ryhmä, se voidaan muuttaa vapaaksi hapoksi hydraamalla palladium-hiilen läsnäollessa. Vapaa happo on muutettavissa amidiksi käsittelemällä ammoniakin kanssa DCC:n ja HBT:n läsnäollessa.
Valmistettaessa edellä selostetun menetelmäsarjän avulla kaavan (I) mukaisia yhdisteitä on erittäin suositeltavaa käyttää, 0
II
C-pääte-reagenssina, yhdistettä, jossa Q on -C-NH2.
Kun on saatu valmistetuksi haluttua modifioitua tetrapepti-diä, jossa on C-pääteryhmä, tyrosyylin O-suojaryhmä (mikäli sellainen on läsnä) voidaan poistaa hydraamalla ja N-BOC-suojaryhmä käsittelemällä trifluorietikkahapolla.
Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistukseen voidaan käyttää myös monia muita menetelmiä.
Erääseen sisältyy vaihettainen, sarjana tapahtuva yksittäisten aminohappojen tai niiden johdannaisten lisääminen peptidiket-jun runkoon alkaen karboksiamidi-pääteosasta. Tässä, samoin kuin missä tahansa muussa vamistusmenetelmässä, voidaan käyttää esimerkiksi edellä selostetun kaltaisia reaktiomenetelmiä.
66842
Koska on C^-C^-alkyyli, voidaan valmistusarjassa käyttää sopivaa N-substituoitua aminohappoa. Mitä tahansa N-substituoi-duista aminohapoista voidaan valmistaa samalla mentelmällä, joka on esitetty seuraavalla tavalla käyttämällä lähtöaineena N-suojat-tua aminohappoa: H KH K+ I v I- _ +
BOC-N- (AA) -COOH --------------τ> BOC-N - (AA)-COO K
18-kruunu-6-eetteri THF C^-C^ primäärinen DMF ψ alkyylijodidi
R
la
BOC-N-(AA)-COOH
Kuten edellä oleva reaktiovaihe osoittaa, N »-suojattua aminohappoa käsitellään ensin kaliumhydridillä sopivan kruunu-eetterin läsnäollessa dianionin muodostamiseksi. Väliyhdistettä käsitellään sitten sopivalla alkyylijodidilla, jolloin saadaan haluttua N-substituoitua aminohappoa.
Peptidisynteesi-alan asiantuntijoille on selvää, että «.-hiilen rasemoituminen voi tapahtua vahvasti aikalisissä olosuhteissa, jollaisia käytetään edellä esitetyssä alkylointimenetelmässä. Ra-semoitumisaste voi vaihdella kyseisestä aminoyhdisteestä riippuen. Rasemoituminen saadaan mahdollisimman vähäiseksi käyttämällä alky-lointiainetta ylimäärin ja pitämällä reaktioaika mahdollisimman lyhyenä. Siitä huolimatta silloinkin'kun tapahtuu liiallista rase-moitumista, tuote voidaan puhdistaa kiteyttämällä uudelleen sopivan kierron omaavan amiinin suolana, esimerkiksi d(+) «-fenyylietyyli-amiinin suolana.
Muodostunut aminohappo, jossa R^ on C^-C^-alkyyli, voidaan muuttaa vastaavaksi amidikseen millä tahansa edellä selostetulla menetelmällä.
Eräissä kaavan (I) mukaisissa yhdisteissä ryhmä on C^-C^-alkyyli. Tällöin valmistusvaiheessa käytetään sopivaa «-hiili-subs-tituoitua aminohappoa tai sen vastaavaa esteri- tai amidijohdannais-ta. Tiettyä «-hiili-substituoitua fenyylialaniinia voidaan valmistaa käyttämällä mentelmää, joka on esitetty artikkelissa Stein ym., 12 66842
Journal of the American Chemical Society 77 (1955) 700-703. Ra-seemisen seoksen hajoittaminen suoritetaan artikkelin Turk ym., J. Org. Chem. 40 (1975) 953-955 mukaisesti. Muodostunut ot-substi-tuoitu fenyylialaniini voidaan muuttaa vastaavaksi amidiksi edellä selostettujen menetelmien mukaisesti. Tämä voidaan suorittaa joko ennen sen käyttämistä tetrapeptidiketjun valmistuksessa tai sen jälkeen; erityisen suositeltavaa on kuitenkin, että se suoritetaan ennen tetrapeptidin valmistusta.
Kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia analgeet-tisina aineina. Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden analgeettinen vaikutus osoitetaan hiirellä kuumalla levyllä suoritettavassa kokeessa. Tässä kokeessa hiiri pannaan pystyasennossa olevaan akryy-lisylinteriin, jonka pohjana on kuuma levypinta, joka pidetään 52°C:ssa. Tässä kokeessa hiirelle annetaan, ihonalaisena ruiskeena, edeltä käsin määrätty määrä kokeiltavaa yhdistettä liuotettuna tai suspendoituna sopivaan kantajaan. Koeyhdisteen annon jälkeen annetaan kulua edeltäkäsin määrätty aika, ja sen jälkeen hiiri sijoitetaan kuumalle levypinnalle. Sitten tallennetaan viipymisajat sekunneissa kummankin kahden erillisen ilmiön ilmaantumiseen. Ensiksi mitataan viipymisaika kunnes hiiri nuolaisee takakäpäläänsä, ja toiseksi mitataan viipumisaika kunnes hiiri hypähtää kuumalta levypinnalta. Analgeettista vaikutusta omaava aine pidentää näitä viipymisaikoja verrattuna kontrollihiirillä, jotka ovat saaneet ruiskeena vain kantajaa, mitattuihin viipymisaikoihin. Tämän on tapahduttava annosalueessa, joka ei aiheuta liikehermon yhteistoi-mintahäiriötä tai toimintakyvyttömyyttä. Seuraavissa taulukoissa ovat tulokset, jotka on saatu tässä kokeessa, verrattuna suola-liuoskontrollikokeen antamiin arvoihin. Taulukossa I ovat takakä-pälän nuolemiseen kuluneet ajat, ja taulukossa II ovat hypähtämi-seen kuluneet ajat. Vakuttavan analgeettisen vaikutuksen kriteerio-na ovat seuraavat seikat: ajan, joka kuluu käsitellyltä eläimeltä takakäpälän nuolemiseen tai hypähdykseen on oltava yhtä pitkä tai pitempi kuin kontrollieläimillä keskimäärin kuluneen ajan ja kahden standardikeskiarvopoikkeaman summa. Kukin seuraavissa taulukoissa I ja II esiintyvä tulos vastaa keskiarvoa plus tai miinus standardivirhe.
Il 66842
Koeyhdisteet: A. L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysyyli-N- ot-metyyli-L-fenyyliala-nyyli-amidi, asetaattisuola.
B. L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysyyli-L- <*—metyyli-fenyylialanyy-li-amidi, asetaattisuola.
C. L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysyyli-N- cst-n-propyyli-L-fenyyliala-nyyli-amidi, asetaattisuola.
D. L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysyyli-N ct-etyyli-L-fenyylialanyy-li-amidi, asetaattisuola.
I 1 I I I I I 1 I
14 66842 o
CO
04 rH
<T» H 04 • · rH ro m σ\ xr uo · · · · O 04 rH r- CO 04 h +1 i +1 +1 +1 +1 I I +1
cn cm o OJ
• · · « · · Ν' H H va cn o rH o r- n· cn cn
(C 1-1 rH
m <U n m +J cn <o G · H cn n-
Λί ci + I + I l I I I I I I
1) (N I—I
03 G · • cn 00 ,. O' ΙΊ <f
G
Ö5 M N
3 -H
+-> co ε 3 cn H X +>
•H 3 03 H CN
G G 0 I + I I I I I I I I
0 > 3 G cn
Μ Ή G
G G ^ G O) X rn
Ή G
G -H G
G 4-) <33
Eh 4-) (1) rH
<U tn r- m a) ή ·
Di E cn ι-t -πω <n I I I I I I + I + I i
G iH . T O
GO O · <C G σ\ -3· G cn cn
G
:G Hr^iHCNr'-cj'icrirHcrir^ rH rH ····«·· ·
:03 rHrHCOfNtNOOCOHrH
a 0 +| +1+1 +1+1 +1+1 +1+1 :G Girin’TrocNCNcjioo X 44.........
G CiDrHcnCNOOOOiDLnoO
OcNcncncncNcNCNCNCN G 4-) «
Eh G
G -G G
G
G-H-h ιηιηιηοοοιηιηο
WG E iHi—IrHcniOiTirHrHCN
rH
<13 +) 03 <
*H
Ό X!
X
I I I I I I I I I II II
15 66842 o rn rn ro
<D O rH
• · rH 00 σ> <£) <D rH
CM O · · rH
o rH i—i ro rn m r-π un o ή +| I +1+1 I +I+I+I+I I +1 I +1 ^ ο Ή CO rH o m crv m h ο ld co o ό ld «ζτ mrocN(N un cm
n (N CM rH
m c- r- cm fO * * .
•r—> CM CM cm c- 0) ro+1+Ιιιιιιιι I +1 I +1
-P 03 Γ- in CM CM
C .
3 σ' LO O m A! a: m -r mm 3 0) P cn u>
* E
-*-* to mm rä 3 fö w in tr en •f-1 +j λ; o .
3 Ή C>-i<n <Nm
,, AI (0 C l+llllllll -Hl + | I
M -H <C 00 rr (N
I Π3 -P . .
O > 3 •'T (N (N
a; G m m n*
Ai G 3 3 m ή •H C 3
3 -A M (V) fO
fO -P σ, m E-i 4-1 . .
- Ή (N CM
2i3 ro 1 I I I + I I I I I -Hl + I I
3 S o *
JS ΐ H (N (N
< g ” mm
<D
^ Γ^Γ^-σ'σ'σ'ΌΌ'^'Γ^οοΓ^Γ'^Η H ···♦····...·.
Z> rHrHU^UDrHCMCNi—I *H »H <—I Csl^H
+ 1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 £ CMH'COCOOOOr^O CM Γ"' Ιίζ, *
,» <TlrHa>0>LnOO<H00 ν£> ο 1C
:ίβ CMPOCMCMCMiHrnCMCM CM CM Cl (N
On +) (C 3 jO 3 (Ö c ^ mmoouioooo mm mm /3 'dg "-(^Hmmi-imcrNrsim γΗγη «h .-h W 10 Ή t—i 0)
w « U Q
H
Ό
G
iH
__ ” r ............
16 66842
° I I I I I I I I I I I I I
m
rH
r—I rH *3* Γ-* rH I—( CO N Π rH Γ" .
I—I Γ’*- * * 00 o · • · (N TT · . ^ r-H Γ—( cr> cm i—ι Ή cn r- + | I + | + | o fli + I + I -f t t- I I I + | γμ m^· i~l CM fO <N Ο <Ν Γ' · .
• · · · . vo co o
CM Τ' m lil Ο «J· CM rM CO
cm ro as o r-t o cm cm
i’N ("N rH rH ·—{ rH
^ iH rH
-r7 -H in in cm 00 O .
o-i g cn I—i (—i
3 ^ ή +1 +1 l I
·* m+l+llllllll mt ro *; fT3 —I 'vf .
ω ... CM «3* CT· ΡΊ Ο ιΛ
rn " X ΓΟ *T H rH
3 M σ ^ M m
H 3 « E
X 05 , 0 -H +J O lt, ^
y 5 5 5 -H I Μ I I I I I l I I I + | I I
3 > d «j ^ s s s s d S .5 * - -
-M C
4J 0) «, 0) <D ™ _ ω en
Cn M ' M
3 * h «;
rr ooilllll+l+ll I I I I
3 4 o "· ° >i ^
Xi ™ O
O —i —·
^ o·") vO VO
(p Γ~- i—l-vf-rHOOCOO'ii—I CM U0 ...
pj . o m· rr
vrcnr^cooocovocri··^ ιτ> .h i iH
+ 1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 +1 'Tr-irMCMininr—r^oo οοσνοοοο cocNOOOororoo'i ro cm n ro *3>νΟΟΟνΟΟΟΟΟΓ'νΟνΟ 'Ο'νΟΓ'Γ^ 4J ' d e d ra · r-H ^ C uo m o o p .,-1 h uo un in o o o uo m o i .-i ro vo
'—li—I*—I CO CD CTi i—li—I (N
rH
V
+J
Ui
•H
rQ << PQ
Jd 1 I I i t i I ii 66842 17 ro ΓΟ r-i <N Γ\! <N f- ,-m • m oo ·
m . . rH · '—I
Η Γ" 1/) H CJ O
I i I -i-1 +1 ϊ- I I -hl I +1
o ro rH *s£> O
•—i · · · * ♦ ♦ ’]' O) Τ'" o -- co cd o cm m vr
.p—j f—\ rH C -i C'J
CD
4J r-l rH
c ^ l'J
^ Z· KD
^ fl) '—* r~^ cn lllll I 4- I I 4- i -X Ό o vr ® 3 ij · m oo ~ 4j O1 in 3 ·Η -4 1 I nj Η Λ! 3 ^
Η -H fT* rH rH
G +J £ <N o 0 > 3 · 44 C w M- in
44 C D O rH rH
3 δ h c -· 1 1 1 I I +1 I +1 I
rH G 3 G VD rH
3 -H .* < · rj 4 o in B 4 C fM oo
0) (U rH rH
dJ (D
en tn 1—I CN CN
h a; oo m r- 3 >i · · G T3 m mm
,G rH (—I f—I
:¾ +1 +1 I +1 i
Qj '’I t— I I I I CTH <N
>1 · ·
,G o n oo rH
O m rH cn
44 rH rH rH
3
d, -H
rH ,-, oo oo r~ in m r- r- I—1 . . . · . · . · .
O oi m in in i.r 4' in r~ r- G l· I 4 I 4-1 4- I -r I 4 I 4- 1 4 I 4- i
4J r~- f-J rs| -T co r~ ID 00 rH
G.........
O o tn m oi O'. m m mcr\ io m m p> id o γ- ιοι-'
-U
3 G ' 3 3· ή 44 (.: 3 -H ..h m o o o o m m m m
£4 3 £ Ή ID OH (N CN i—l i—I rHrH
Ή i—1
<D
4J
tfl
-H
'S m o a
Sl
>H
18 66842
Taulukoiden I ja II viite a:
Yläviitteinä esiintyvät numerot "1", "2" ja "3'' osoittavat, että tulos on merkitsevä arvoon PL 0,001, PL 0,01 ja vastaavasti arvoon PL 0,05.
Kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat siis arvokkaita farmaseuttisia aineita. Niillä on analgeettista vaikutusta, ja erityisesti ne ovat hyödyllisiä annettuna parenteraalisesti nisäkkäille, ihmiset mukaan luettuna.
Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan antaa sellaisinaan, tai niitä voidaan sekoittaa ja formuloida farmaseuttiksiksi, annos-yksikkömuodossa oleviksi parenteraalisesti annettaviksi valmisteiksi. Seoksia tehtäessä ja formuloinnissa voidaan käyttää orgaanisia tai epäorgaanisia kiinteitä aineita ja/tai nesteitä, jotka ovat farmaseuttisesti hyväksyttäviä kantajia. Alan asiantuntijat tuntevat hyvin sellaisiksi sopivat kantajat. Seokset voivat olla tablettien, jauheiden, rakeiden, kapselien, suspensioiden, liuosten ja näiden kaltaisten valmisteiden muodossa.
Tehoavin määrin annettuna kaavan (I) mukaiset yhdisteet aiheuttavat analgeettisen vaikutuksen. Annosmäärät voivat yleensä olla välillä noin 0,1 milligrammaa - noin 100 milligrammaa saajan kehon painon kiloa kohden. Ensisijainen annosalue on tavallisesti välillä noin 1,0 milligrammaa - noin 20 milligrammaa saajan kehon painon kiloa kohden.
Seuraavat esimerkit kuvaavat kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistusta.
Esimerkki 1 L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysyyli-N ^-metyyli-L-fenyylialanyy-li-amidin asetaattisuolan valmistus.
A. Bentsyyli-D-alinaatti p-tolueenisulfonaatti.
Seokseen, jossa oli 100 ml bentsyylialkoholia ja 200 ml bentseeniä ja jossa oli 55,1 g (0,29 moolia) p-tolueenisulfoni-happo-monohydraattia, lisättiin 25 g (0,281 moolia) D-alaniinia. Seos lämmitettiin kiehuvaksi, ja vettä poistettiin atseotrooppises-ti Dean-Stark-laitteella. Seosta lämmitettiin viisitoista tuntia ja sen jälkeen se jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja laimennettiin eetterillä. Muodostunut sakka koottiin talteen ja kiteytettiin uudelleen metanoli/eetteri-seoksesta, jolloin saatiin 55,3 g 19 66842 (56 %) otsikon yhdistettä, sp. 112-115°C.
Analyysi, laskettu yhdisteelle ci7H21N05S (351,42): C, 58,10; H, 6,02; N, 3,99; saatu: C, 58,19; H, 6,06; N, 3,82.
B. Bentsyyli-N ^-t-butyylioksikarbonyyli-O-bentsyyli-L-tyrosyyli-D-alinaatti.
200 ml:aan kuivaa Ν,Ν-dimetyyliformamidia (DMF) lisättiin 35,1 g (0,1 moolia) osan A tuotetta. Saatua seosta sekoitettiin ja jäähdytettiin 0°C:een, ja lisättiin 11,2 g (0,1 moolia) diatsa-bisyklo-oktaania (DABCO). Seosta sekoitettiin kymmenen minuuttia 0°C:ssa, ja lisättiin 37,1 g (0,1 moolia N°^-t-butyylioksikarbonyy-li-O-bentsyyli-L-tyrosiinia ja sen jälkeen 13,5 g (0,1 moolia) 1-hydroksi-bentsotriatsolia (HBT) ja 20,6 g (0,1 moolia) Ν,Ν'-di-sykloheksyylikarbodi-imidiä (DCC). Muodostunutta seosta sekoitettiin 0°C:ssa kolme tuntia ja sitten huoneen lämpötilassa kaksikymmentäneljä tuntia. Sitten seos jäähdytettiin 0°C:een, muodostunut suspensio suodatettiin ja suodos konsentroitiin vakuumissa. Saatu jäännös liuotettiin sitten uudelleen etyyliasetaattiin ja pestiin peräkkäin 1-n NaHC03:11a, vedellä, 0,75-n kylmällä sitruunahapolla, ja vedellä. Sen jälkeen orgaaninen kerros kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Saatu jäännös liuotettiin sitten kuumaan etanoliin. Jäähtymisen seurauksena tapahtui kiteytyminen. Kerran etanolista suoritetun uusintakiteytyksen jälkeen saatiin 41,5 g (80 %) puhdasta otsikon yhdistettä, sp. 121-123°C.
Analyysi, laskettu yhdisteelle Cor.H_,~N„0, (520,63):
jU jb L· O
C, 69,21; H, 6,97; N, 5,38; saatu: C, 68,99; H, 6,75; N, 5,17.
C. N ^-t-butyylioksikarbonyyli-O-bentsyyli-L-tyrosyyli-D-alaniini.
Seokseen, jossa oli 200 ml tetrahydrofuraania (THF) ja 20 ml vettä, lisättiin 31,2 g (0,06 moolia) osan B tuotetta. Saatu liuos jäähdytettiin 0°C:een, ja lisättiin hitaasti 13,2 ml (1,1 ekvivalenttia) 5-norm. natriumhydroksidia. Saatua seosta sekoitettiin ja sen annettiin lämmetä hitaasti huoneen lämpötilaan. Viiden tunnin _____— — T— ' ' ' 20 66842 kuluttua seos jaettiin veteen ja eetteriin liukeneviin osiin.
Vesikerros eroitettiin ja jäähdytettiin, pH säädettiin arvoon 2 lisäämällä sitruunahappoa, ja seos uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiuute pestiin vedellä, kuivattiin magesiumsulfaatil-la, suodatettiin, ja laimennettiin eetterillä. Muodostunut sakka koottiin talteen, jolloin saatiin 17,7 g (67 %) otsikon yhdistettä, sp. 160-162°C.
Analyysi, laskettu yhdisteelle C24H30N2^6 (442'51): C, 65,14; H, 6,83; N, 6,63.
saatu: C, 64,73; H, 6,70; N, 6,20.
D. Bentsyyli-N -t-butyylioksikarbonyyli-O-bentsyyli-L-tyro-syyli-D-alanyyli-glysinaatti.
70 ml:aan kuivaa DMF:a lisättiin 6,74 g (0,02 moolia) bent-syyliglysinaatin p-tolueenisulfonihapposuolaa. Saatu seos jäähdytettiin 0°C:een ja lisättiin 2,24 g (0,020 moolia) DABCOrta. Seosta sekoitettiin muutama minuutti, ja lisättiin 8,84 g (0,020 moolia) osan C tuotetta ja sen jälkeen 2,7 g (0,020 moolia) HBT:tä ja 4,12 g (0,020 moolia) DCC:tä. Reaktioseosta sekoitettiin kaksi tuntia 0°C:ssa ja sitten kaksikymmentäneljä tuntia huoneen lämpötilassa. Muodostunut suspensio jäähdytettiin 0°C:een, suodatettiin, ja suodos haihdutettiin kuiviin vakuumissa. Saatu jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin ja pestiin peräkkäin 1-norm. natriumvety-karbonaatilla, vedellä, kylmällä 0,75-norm. sitruunahapolla ja vedellä. Orgaaninen faasi kuivattiin magnesiumsulfaatilla, suodatettiin ja konsentroitiin vakuumissa. Saatu jäännös kiteytettiin etanolista, jolloin saatiin 10,8 g (92 %) puhdasta otsikon yhdistettä, sp. 145-147°C.
Analyysi, laskettu yhdisteelle C^H^gN^O^ (589,69): C, 67,22; H, 6,67; N, 7,13.
saatu: C, 67,32; H, 6,83; N, 6,91.
E. N ^ -t-butyylioksikarbonyyli-O-bentsyyli-L-tyrosyyli-D-alanyyliglysiini.
150 ml:aan seosta, jossa oli suhteessa 9:1 tetrahydrofuraa-nia ja vettä, lisättiin 15,95 g (27 mmoolia) osan D tuotetta. Seos jäähdytettiin 0°C:een sekoittaen ja saatuun seokseen lisättiin 21 66842 tiputtamalla 30 ml 1-n natriumhydroksidia. Seosta sekoitettiin tiputtamalla tapahtuneen lisäyksen päätyttyä 2 tuntia ja sitten uutettiin kahdesti eetterillä. Eroitettu vesikerros tehtiin happa-meksi (pH 2,5) lisäämällä 30 ml 1-n suolahappoa. Otsikon yhdiste kiteytyi, koottiin talteen suodattamalla ja kiteytettiin uudelleen kerran metanolin ja veden seoksesta ja kahdesti etyyliasetaatista, jolloin saatiin 11,43 g tuotetta (85 % teoreettisesta), sp. 104-107°C, + 31,4° (C = 0,5, MeOH) .
Analyysi, laskettu yhdisteelle C26H33N3^7 (499,54): C, 62,51; H, 6,66; N, 8,41; saatu: C, 62,31; H, 6,83; N, 8,12.
F. N°^-t-butyylioksikarbonyyli-N°^-metyyli-L-fenyylialaniinin d-(+) 00 -metyylibentsyylialamiini-suola.
75 ml:aan tetrahydrofuraania lisättiin 13,26 g (0,05 moolia) Nö^-t-butyylioksikarbonyyli-L-fenyylialaniinia. Saatu seos lisättiin tiputtamalla 30 minuutin aikana mekaanisesti sekoitettuun suspensioon, jossa oli 0,15 moolia kaliumhydridiä ja 0,5 grammaa 18-kruumi-6-eetteriä 0°C:ssa typen suojaamana. Seosta sekoitettiin vielä tunnin ajan 0öC:ssa 15 minuutin kuluessa lisättiin tiputtamalla liuos, jossa oli 6,23 ml (0,1 moolia) metyylijodidia 15 ml:ssa tetrahydrofuraania. Seosta pidettiin näin 2 tuntia, ja lisättiin tiputtamalla seos, jossa oli 10 ml etikkahappoa ja 10 ml tetrahydrof uraania, ja sen jälkeen 20 ml etanolia. Seos kaadettiin sitten 400 ml:aan jäitä. Saadun vesifaasin pH kohotettiin sitten arvoon 12-13 lisäämällä 2-n natriumhydroksidia. Vesiseos uutettiin kahdesti eetterillä ja tehtiin sitten happameksi (pH 3,0) lisäämällä kiinteätä sitruunahappoa. Sen jälkeen vesiseos uutettiin kolme kertaa 200 ml:lla eetteriä. Eetteriuutteet yhdistettiin, uutettiin vedellä, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, ja haihdutettiin vakuu-missa siirapiksi. Siirappi liuotettiin 50 ml:aan eetteriä ja lisättiin 6,44 ml (0,05 moolia) d(+)-06-metyylibentsyyliamiinia. Saatu liuos laimennettiin 350 ml:11a heksaania ja raaputettiin. Tuote koottiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 15,83 g (79 % teoreettisesta) otsikon yhdistettä. Kiteytettäessä uudelleen etyyliasetaatista saatiin 13,70 g (68 % teor.) otsikon yhdistettä, sp. 136-139°C. /o^5 - 28,2° (C = 1, EtOH) .
--- - Γ 22 66842
Analyysi, laskettu yhdisteelle C23H32N204 (400'5°)? C, 68,97; H, 8,05; N, 6,99; saatu: C, 68,75; H, 7,81; n, 6,74.
G. N^-t-butyylioksikarbonyyli-N ^metyyli-L-fenyylialanyy-liamidi.
N oC-t-butyylioksikarbonyyli-No<- -metyyli-L-f enyylialaniinia (4,0 g; 0,01 moolia; valmistettu tekemällä d(+)-06-metyylibentsyy-liamiinisuola happameksi ja uuttamalla eetteriin) liuotettiin 20 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia (DMF). Seos jäähdytettiin -15°C:een ja lisättiin 1,56 ml (0,012 moolia) isobutyyliklooriformiaattia ja sen jälkeen 1,32 ml (0,012 moolia) N-metyylimorfoliinia. Reak-tioseosta sekoitettiin 10 minuuttia -15°C:ssa, ja reaktioseokseen johdettiin 1,5 tunnin ajan kuplina kuivaa ammoniakkia. Saatua seosta sekoitettiin tunnin ajan -15°C:ssa ja sen jälkeen seos kaadettiin astiaan, jossa oli 200 ml jäitä. Vesiliuos uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros eroitettiin ja pestiin peräkkäin 1,5-norm. sitruunahapolla, vedellä, 1-norm. natriumvetykarbonaatil-la ja vedellä. Sen jälkeen etyyliasetaattiliuos kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin vakuumissa siirapiksi, joka kiteytettiin eetterin ja petrolieetterin seoksesta, jolloin saatiin 2,12 g (76 % teor.) otsikon yhdistettä, sp. 91-92°C, £bC7^5 -111,2° (C = 0,5 CHC13).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C15H22N2°3 (278'33): C, 64,73; H, 7,97; N, 10,06; saatu: C, 64,95; H, 7,81; N, 9,79.
H. N<^-t-butyylioksikarbonyyli-0-bentsyyli-L-tyrosyyli-D-alanyyliglysyyli-N -metyyli-L-fenyylialanyyliamidi.
20 ml:aan vastavalmistettua jääetikkahappoa, jossa oli kuivaa kloorivetyä (1-n) ja 2 ml anisolia, lisättiin 1,95 g (0,007 moolia) N °6-t-butyylioksikarbonyyli-N^-metyyli-L-fenyylialanyy-liamidia. Saatua seosta sekoitettiin huoneen länpötilassa 30 minuuttia. Sitten seos kaadettiin eetteriin, ja muodostunut sakka koottiin talteen ja kuivattiin (1,5 g). Sitten hydrokloridisuola liuotettiin 30 ml:aan DMF:a. Liuos jäähdytettiin 0°C:een, ja lisättiin 1,4 ml (0,007 moolia) disykloheksyyliamiinia. Seosta sekoitet- 23 66842 tiin muutaman minuutin ajan, ja lisättiin 3,5 g (0,007 moolia N Oz-t-butyylioksikarbonyyli-O-bentsyyli-L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysiiniä, 950 mg (0,007 moolia) HBT:tä ja 1,4 g (0,007 moolia) DCC:tä. Reaktioseosta sekoitettiin sitten 0°C:ssa 2 tuntia ja sen jälkeen 4°C:ssa 24 tuntia. Seos jäähdytettiin 0°C:een ja suodatettiin. Suodos konsentroitiin vakuumissa öljyksi, joka liuotettiin uudelleen etyyliasetaattiin. Etyyliasetaattiliuos uutettiin peräkkäin 1-n natriumvetykarbonaatilla, vedellä, kylmällä 0,75-n sitruunahapolla ja vedellä. Orgaaninen faasi kuivattiin magnesium-sulfaatilla ja konsentroitiin vakuumissa öljyksi. Öljy kromatogra-fioitiin 40 cm x 3 cm:n pylväässä, jossa oli piigeeliä (Crace and Davison Grade 62 silica gel) kloroformissa. Tuote eluoitiin astettaisesti kloroformin määrää lisäten seoksella, jossa oli lopuksi 10 % metanolia kloroformissa.
Tuote eristettiin otetuista fraktioista ohutkerros-kromato-graafisten arvojen perusteella, jolloin saatiin 3,55 g (77 % teor.) otsikon yhdistettä. £<*.7q~ -9,2° (C = 0,5 MeOH) .
Analyysi, laskettu yhdisteelle C^gH^^N^O^ (659,8); C, 65,54; H, 6,57; N, 10,61; saatu: C, 65,46; H, 6,58; N, 10,36.
I. N -t-butyylioksikarbonyyli-L-tyrosyyli-D-alanyyli-gly-syyli-N °^-metyyli-L-fenyylialanyyliamidi.
Osan J tuote (3,2 g; 0,0485 moolia) liuotettiin 60 ml:aan etanolia, ja seokseen lisättiin vesilietteenä 1,5 grammaa 5 % palladiumhiiltä. Reaktioseokseen johdettiin kaasundispergoin-tiputken läpi kuplina noin 5 minuutin ajan typpeä ja sen jälkeen vetykaasua 6 tunnin ajan. Sen jälkeen reaktioseos huuhdeltiin typellä, ja palladium-katalyytti poistettiin suodattamalla. Seos konsentroitiin vakuumissa siirapiksi. Siirappi liuotettiin kloroformiin ja absorboitiin silikageelille 40 cm x 3 cm:n kromatogra-fiointipylvääseen, jossa oli Grace and Davison Grade 62 silicagel-valmistetta. Tuote eluoitiin lisäämällä asteettain kloroformin määrää seoksella, jossa oli lopuksi 10 % metanolia kloroformissa, ja eristettiin otetuista fraktioista ohutkerros-kromatograafisten arvojen perusteella, jolloin saatiin 2,0 g (74 % teor.) tuotetta.
“9'9° (c = 0,5 MeOH).
___ - r 24 6 6 8 4 2
Aminohappoanalyysi, saatu: Gly, 1,01; Ala, 0,99; Tyr, 0,99; NH3, 1,14.
J. L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysyyli-N -metyyli-L-fenyyli-alanyyliamidi, asetaattisuola.
Osan I tuotetta (1,6 g; 0,00281 moolia) liuotettiin 10 ml jaan trifluorietikkahappoa, jossa oli 0,5 ml anisolia. Seosta sekoitettiin 0°C:ssa 30 minuuttia. Seos kaadettiin sitten eetteriin, ja muodostunut sakka koottiin talteen ja kuivattiin (1,1 g). Kiinteä aine liuotettiin niin riittävään määrään puskurin vesiliuosta (1 % pyridiiniä ja 0,05 % etikkahappoa), että tilavuudeksi tuli 15 ml, ja liuos kaadettiin 2,5 cm x 99 cm:n pylvääseen, jossa oli valmistetta DEAE-Sephadex A-25 (asetaattia), joka oli tasapainoi-tettu samalla puskurilla. Eluaattia tarkkailtiin kohdalla 280 nm, ja sopivat fraktiot yhdistettiin ja pakkaskuivattiin. Lyofilisoimalla uudelleen 10-prosenttisesta etikkahaposta, ja lyofilisoimalla sen jälkeen veden ja asetonitriilin seoksesta (75:25) saatiin 0,84 g 2 5 o otsikon yhdistettä. /οί_7^ + 27,8 (C = 1, 1-n HC1) . Aminohappo- analyysi, saatu: Tyr, 0,98; Ala, 1,03; Gly, 1,00; NH^, 1,05.
Esimerkki 2 L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysyyli-L-oC-metyyli-fenyylialanyy-li-amidin, asetaattisuolan valmistus.
A. L-oC-metyylifenyylialaniinin bentsyyliesterin tosylaatti- suola.
100 ml:aan bentseeniä lisättiin 3,0 grammaa (0,0168 moolia) L- o6-metyylifenyylialaniinia. Saatuun suspensioon lisättiin 3,5 grammaa (1,1 ekvivalenttia) p-tolueenisulfonihappo-hydraattia ja 10 ml bentsyylialkoholia. Seosta kiehutettiin Dean-Stark-loukkua käyttäen neljä päivää. Sitten seos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan, ja tosylaattisuolan saostamiseksi lisättiin eetteriä. Muodostunut sakka koottiin talteen ja kuivattiin, jolloin saatiin 7,0 grammaa (94 %) otsikon yhdistettä, sp. 129-131°C. 10,7° (C = 0,5 1-nMeOH) .
Analyysi, laskettu yhdisteelle C24H27N05S (441,5): N, 3,17; saatu: N, 2,87.
25 66842 B. N^-t-butyylioksikarbonyyli-O-bentsyyli-L-tyrosyyli-D-alanyyliglysyyli-L-ö6-metyylifenyylialaniinin bentsyyliesteri.
80 ml:aan DMF:a lisättiin 5,74 grammaa (0,013 moolia) osan A tuotetta. Saatua seosta jäähdytettiin 0°C:ssa 5 minuuttia, ja lisättiin 6,5 grammaa (13 mmoolia) N^-t-butyylioksikarbonyyli-O-bentsyyli-L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysiiniä (valmistettu kuten esimerkissä 1), 1,8 grammaa (13 mmoolia) HBT:tä, ja 2,7 grammaa (13 mmoolia) DCC:tä. Seosta sekoitettiin 0°C:ssa kaksi tuntia ja sitten huoneen lämpötilassa 24 tuntia. Sitten seos jäähdytettiin o 0 C:een, ja muodostunut sakka poistettiin suodattamalla. Suodos haihdutettiin vakuumissa kuiviin. Saatu jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, ja etyyliasetaattiliuos uutettiin peräkkäin 1-n natriumvetykarbonaatilla, vedellä, 0,75-norm. sitruunahapolla ja vedellä. Orgaaninen faasi kuivattiin sitten magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin vakuumissa öljyksi, öljy kiteytettiin eetteristä ja kiteytettiin uudelleen etyyliasetaatin ja eetterin seoksesta, 25 o jolloin saatiin 7,0 grammaa (72 %) otsikon yhdistettä. £oOJD +7,9 (C = 0,5 MeOH).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C43H5oN4®8 (750,86): C, 68,78; H, 6,71; N, 7,46.
saatu: C, 68,75; H, 6,46; N, 7,21.
C. N°C-t-butyylioksikarbonyyli-L-tyrosyyli-D-alanyyli-gly-syyli-L- oC-metyylifenyylialaniinin disykloheksyyliamiini-suola.
50 ml:aan etanolia lisättiin 4,0 grammaa (0,0053 moolia) osan B tuotetta. Sitten lisättiin liete, jossa oli 2,0 grammaa 5-prosenttista palladium-hiiltä DMF:ssa. Seokseen johdettiin kuplina 5 minuutin ajan kaasun dispergointiputken kautta typpeä ja sen jälkeen vetykaasua 4 tunnin ajan. Sitten seos huuhdellaan typellä, ja palladium-katalyytti poistettiin suodattamalla. Suodos konsentroitiin vakuumissa siirapiksi. Siirappi kaadettiin klorofomissa 1o cm x 2 cm:n pylvääseen, jossa oli valmistetta Grade and Davison Grade 62 silica gel. Pylväs eluoitiin lisäämällä asteettain kloroformin määrää kunnes kloroformi-metanolisuhde , oli 9,5:0,5. Pääfraktiot yhdistettiin ja liuotin haihdutettiin pois. Saatu öljy liuotettiin etyyliasetaattiin ja lisättiin 1 ml disykloheksyyliamiinia. Muodostunut sakka koottiin talteen ja kuivattiin, jolloin saatiin 2,6 grammaa (65 %) otsikon yhdistettä, sp. 142-146°C, +46,3° ____ - Γ 26 66842 (C = 0,5 MeOH).
D. N*^ -t-butyylioksikarbonyyli-L-tyrosyyli-D-alanyyli-gly-syyli-L- OC -metyylif enyylialanyyli-amidi.
Esimerkin C tuote (2,0 grammaa; 0,0027 moolia) neutraloitiin etyyliasetaatin ja 0,75-norm. sitruunahapon seoksella. Saatu orgaaninen kerros erotettiin, uutettiin vedellä, kuivattiin magnesiumsulfaatilla, ja haihdutettiin vakuumissa öljyksi (1,5 grammaa). Saatu vapaa happo liuotettiin 30 ml:aan DMF:a, ja liuos jäähdytettiin 0°C:een painepullossa. Lisättiin DCC:tä (560 mg; 0,0027 moolia), ja seosta sekoitettiin 4 tuntia 0°C:ssa ja sitten 3 tuntia huoneen lämpötilassa. Sitten pullo jäähdytettiin -78°C:een ja lisättiin 30 ml kuivaa ammoniakkia. Pullo suljettiin uudelleen, ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 48 tuntia. Seos jäähdytettiin -78°C:een, pullo avattiin ja ammoniakin annettiin haihtua huoneen lämpötilassa. Sitten liuotin haihdutettiin pois vakuumissa. Saatu jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, ja etyyliasetaatti-liuos uutettiin ensin 0,75-norm. sitruunahapolla ja sitten vedellä. Liuos kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja liuotin haihdutettiin pois vakuumissa. Jäännös liuotettiin kloroformiin ja kaadettiin 3 cm x 45 cm:n pylvääseen, jossa oli valmistetta Grace and Davison Grade 62 silica gel. Pylväs eluoitiin lisäämällä asteettain kloroformin määrää kunnes suhde kloroformi:metanoli oli 9:1. Fraktiot yhdistettiin ohutkerros-kromatograafisten arvojen perusteella.
Liuottimen haihduttamisen jälkeen saatiin 1,1 grammaa (72 %) 25 o otsikon yhdistettä </o6_7d “26 (C = 0,4 MeOH). Aminohappoanalyysi; saatu: Gly, 0,99; Ala, 1,00; Tyr, 0,99; NH3, 1,12.
E. L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysyyli-L-pj,-metyyli-fenyyli-alanyyli-amidin asetaattisuola.
20 ml:aan seosta, jossa oli 1-norm. kaasumaisen kloorivedyn jääetikkahappoliuosta, jossa oli 0,3 ml anisolia, lisättiin 900 mg (0,0016 moolia) osan D tuotetta. Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia ja sen jälkeen se kaadettiin eetteriin. Muodostunut sakka koottiin talteen ja kuivattiin (720 mg). Kiinteä aine liuotettiin niin riittävään määrään puskurin vesiliuosta (1 % pyridiiniä ja 0,05 % etikkahappoa), että tilavuudeksi saatiin 5 ml, ja liuos kaadettiin 2,5 x 99 cm:n pylvääseen, jossa oli DEAE-Sephadex®A-25 (asetaattia), joka oli aikaisemmin tasapainoitettu 27 66842 samalla puskurilla. Eluaattia tarkkailtiin kohdalla 280 nm, ja sopivat fraktiot yhdistettiin ja pakkaskuivattiin. 10-prosenttises-ta etikkahaposta suoritetun uusinta-lyofilisoinnin jälkeen lyofili-soitiin veden ja asetonitriilin seoksesta (75:25), jolloin saatiin 400 mg otsikon yhdistettä, + 23,9° (C = 0,5 1-n HC1) .
Analyysi, laskettu yhdisteelle C26H35N5^7 (529,60): C, 58,97; H, 6,66; N, 13,22; O, 21,15; saatu: C, 59,02; H, 6,36; N, 12,99; O, 21,41.
Aminohappoanalyysi: saatu Tyr, 0,96; Ala, 1,01; Gly, 1,00; NH3, 1,03.
Esimerkki 3 L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysyyli-N^-propyyli-L-fenyyliala-nyyliamidin asetaattisuolan valmistus.
A. N-t-butyylioksikarbonyyli-N^-n-propyyli-L-fenyyliala- niini.
70 ml:aan tetrahydrofuraania lisättiin 10,6 g (0,04 moolia) N°^-t-butyylioksikarbonyyli-L-fenyylialaniinia. Saatu seos lisättiin tiputtamalla 30 minuutin aikana mekaanisesti sekoitettuun suspensioon, jossa oli 0,12 moolia kaliumhydridiä 220 ml:ssa tetrahydrofuraania ja 0,5 g 18-kruunu-6-eetteriä 0°C:ssa typpiatmosfäärin suojaamana. Seosta sekoitettiin vielä 10 minuuttia 0°C:ssa.
20 minuutin kuluessa lisättiin tiputtamalla liuos, jossa oli 23,3 ml (0,24 moolia) 1-jodipropaania 40 ml:ssa tetrahydrofuraania.
Seosta pidettiin 2,5 tuntia 0°C:ssa, ja seokseen lisättiin tiputtamalla vielä 11,5 ml (0,12 moolia) 1-jodipropaania. Seosta sekoitettiin vielä 2 tuntia 0°C:ssa, lisättiin 10 ml jääetikkahappoa ja seosta sekoitettiin 10 minuuttia. Seos kaadettiin sitten murskattuihin jäihin. Saadun vesifaasin pH kohotettiin sitten arvoon 8,0 2-n natriumhydroksidilla. Vesiseos uutettiin kahdesti eetterillä, ja sen jälkeen se tehtiin happameksi pH-arvoon 2,5 lisäämällä kylmää 2-nHCl:a. Sen jälkeen vesiseos uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyli-asetaattiuute uutettiin kerran vedellä, kuivattiin (MgSO^:lla), ja haihdutettiin vakuumissa siirapiksi. Siirappi liuotettiin 200 ml:aan eetteriä, ja lisättiin 8 ml (0,04 moolia) DCHA:ta. Sakka suodatettiin erilleen ja suodos uutettiin kerran 1,5-norm. sitruunahapolla, ja vedellä. Eetterikerros kuivattiin (MgSO^:lla) ja haihdutettiin 28 66842 vakuumissa öljyksi. Öljy kromatografioitiin 40 cm x 3 cm:n pylväässä, jossa oli valmistetta Grace and Davison Grade 62 silica gel kloroformissa. Tuote eluoitiin lisäämällä asteettain kloroformin määrää seokseksi, jossa oli 5 % metanolia kloroformissa. Tuote eristettiin koottujen fraktioiden ohutkerros-kromatograafisten arvojen perusteella. Saatiin 3,6 g (31 % teor.) otsikon yhdistettä. C^_7q5 - 153,3 (C = 1, MeOH) . NMR ά (-C02H) = 10,47; S (Me3C-) = 1,50.
Analyysi, laskettu yhdisteelle ci7H25N04 (307,4): C, 66,43; H, 8,20; N, 4,56; saatu: C, 66,16; H, 7,99; N, 4,45.
B. N-t-butyylioksikarbonyyli-N^-n-propyyli-L-fenyyliala-nyyliamidi.
N <26-t-butyylioksikarbonyyli-N c£-n-propyyli-L-f enyylialaniini (valmistettu osassa A) liuotettiin N,N-dimetyyliformamidiin (DMF). Seos jäähdytettiin -15°C:een ja lisättiin yksi ekvivalentti iso-butyyliklooriformiaattia ja sen jälkeen yksi ekvivalentti N-metyyli-morfoliinia. Seosta sekoitettiin 10 minuuttia -15°C:ssa, ja seokseen johdettiin kuplina kuivaa ammoniakkia 30 minuutin ajan. Saatua seosta sekoitettiin tunnin ajan -15°C:ssa, ja sitten seos kaadettiin astiaan, jossa oli 200 ml jäitä. Vesiliuos uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros eroitettiin ja pestiin peräkkäin 1,5-norm. sitruunahapolla, vedellä, 1-n natriumvetykarbonaatilla ja vedellä. Sitten etyyliasetaattiliuos kuivattiin (MgSO^:llä) ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin otsikon yhdistettä.
C. N^-t-butyylioksikarbonyyli-L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysyyli-NO^-n-propyyli-L-fenyylialanyyli-amidi.
20 ml:aan vasta valmistettua jääetikkahappoa, jossa oli kuivaa kloorivetyä (1-norm.) ja 2 ml anisolia, lisättiin yksi ekvivalentti N <3^-t-butyylioksikarbonyyli-N ^-n-propyyli-L-f enyyliala-nyyli-amidia. Saatua seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia. Sitten seos kaadettiin eetteriin, ja muodostunut sakka koottiin talteen ja kuivattiin. Sen jälkeen hydrokloridisuola liuotettiin 30 ml:aan DMF:a. Liuos jäähdytettiin 0°C:een, ja lisättiin yksi ekvivalentti disykloheksyyliamiinia. Seosta sekoitettiin muutama minuutti, ja lisättiin yksi ekvivalentti N #-t-butyylioksi- 29 6 6 8 4 2 karbonyyli-O-bentsyyli-tyrosyyli-D-alanyyliglysiiniä (valmistettu kuten esimerkissä IE), yksi ekvivalentti HBT:tä, ja yksi ekvivalentti DCC:tä. Sen jälkeen reaktioseosta sekoitettiin 0°C:ssa 2 tuntia ja sitten 4°C:ssa 24 tuntia. Seos jäähdytettiin 0°C:een ja suodatettiin. Suodos konsentroitiin vakuumissa öljyksi, joka liuotettiin uudelleen etyyliasetaattiin. Etyyliasetaattiliuos uutettiin peräkkäin 1-n natriumvetykarbonaatilla, vedellä, kylmällä 0,75-norm. sitruunahapolla, ja vedellä. Orgaaninen faasi kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja konsentroitiin vakuumissa öljyksi, öljy kromatografioitiin 40 cm x 3 cm:n pylväässä, jossa oli valmistetta Grace and Davison Grade 62 silica gel kloroformissa. Tuote eluoitiin lisäämällä asteettain kloroformia seokseksi, jossa oli 10 % metanolia kloroformissa. Tuote eristettiin koottujen fraktioiden ohutkerros-kromatograafisten arvojen perusteella. Saatiin N 01 -t-butyylioksikarbonyyli-O-bentsyyli-L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysyyli-N <*· -n-propyyli-L-fenyylialanyyli-amidia.
Edellisessä kappaleessa saatu tuote liuotettiin 60 ml:aan etanolia, ja seokseen lisättiin vesilietteenä 1,5 g 5-prosenttista palladiumhiiltä. Reaktioseokseen johdettiin kuplina noin 5 minuutin ajan kaasun dispergointiputken läpi noin 5 minuutin ajan typpeä ja sen jälkeen vetykaasua 6 tunnin ajan. Sen jälkeen reaktio-seos huuhdeltiin typellä, ja palladiumkatalyytti poistettiin suodattamalla. Seos konsentroitiin vakuumissa siirapiksi. Siirappi liuotettiin kloroformiin ja absorboitiin 40 cm x 3 cm:n kromatograf ointipylvääseen, jossa oli valmistetta Grade and Davison Grade 62 silica gel. Tuote eluoitiin lisäämällä asteettain kloroformin määrää kunnes seoksessa oli 10 % metanolia kloroformissa ja eristettiin koottujen fraktioiden ohutkerros-kromatograafisten arvo-jen perusteella. Saatiin otsikon yhdistettä, D -34,8 (C = 0,5, MeOH).
Analyysi, laskettu yhdisteelle (597,7): C, 62,29; H, 7,25; N, 11,72; saatu: C, 62,13; H, 7,24; N, 11,70.
D. L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysyyli-N4* -n-propyyli-L-fenyyli-alanyyliamidin asetaattisuola.
Osan C tuote (800 mg; 1,34 mmoolia) liuotettiin 10 ml:aan _ ” τ~.
30 66842 trifluorietikkahappoa, jossa oli 0,5 ml anisolia. Seosta sekoitettiin 0°C:ssa 30 minuuttia. Reaktioseos pakkaskuivattiin. Kiinteä aine liuotettiin niin riittävään määrään puskurin vesiliuosta (1 % pyridiiniä ja 0,05 % etikkahappoa), että tilavuudeksi saatiin 10 ml, ja liuos pantiin 2,5 cm x 99 cm:n kolonniin, jossa oli valmistetta DEAE-Sephadex^A-25 (asetaatti), joka oli tasapainoitettu samalla puskurilla. Eluaattia tarkkailtiin kohdalla 280 nm, ja sopivat fraktiot yhdistettiin ja pakkaskuivattiin. Lyofiilisoimalla uudelleen 1-molaarisesta etikkahaposta saatiin 655 mg otsikon yhdistettä. ~ 11,0° (C = 0,5, 1-n HC1) .
Analyysi, laskettu yhdisteelle ^gH^gN^O^ (557,6): C, 60,31; H, 7,05; N, 12,56; saatu: C, 60,23; H, 6,98; N, 12,49.
Aminohappoanalyysi, saatu: Tyr, 0,99; Ala, 1,00; Gly, 1,01; NH3, 0,96.
Esimerkki 4 L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysyyli-N0^ -etyyli-L-fenyylialanyy-li-amidin asetaattisuolan valmistus.
A. N-butyylioksikarbonyyli-N ^C-etyyli-L-fenyylialaniini.
70 ml:aan tetrahydrofuraania lisättiin 10,6 g (0,04 moolia) No^-butyylioksikarbonyyli-L-fenyylialaniinia. Saatu seos lisättiin tiputtamalla 30 minuutin aikana mekaanisesti sekoitettuun suspensioon, jossa oli 0,12 moolia kaliumhydridiä 220 ml:ssa tetrahydro-furaania ja 0,5 g 18-'kruunu-6-eetteriä 0°C:ssa typpiatmosfäärin suojaamana. Seosta sekoitettiin vielä 10 minuuttia 0°C:ssa. 20 minuutin kuluessa lisättiin tiputtamalla liuos, jossa oli 19,4 ml (0,24 moolia) etyylijodidia 40 ml:ssa tetrahydrofuraania. Seosta pidettiin neljä tuntia 0°C:ssa. Seokseen lisättiin kahtena yhtä suurena eränä vielä toiset 19,4 ml (0,24 moolia) etyylijodidia. Seosta sekoitettiin vielä kaksi tuntia 0°C:ssa, ja sitten lisättiin 10 ml jääetikkahappoa. Kun seosta oli sekoitettu 10 minuuttia, se kaadettiin 400 ml:aan murskattuja jäitä. Saadun vesifaasin pH kohotettiin arvoon 8,0 lisäämällä 2-n natriumhydroksidia. Vesiseos uutettiin kahdesti eetterillä ja tehtiin sitten happameksi pH-arvoon 2,5 lisäämällä kylmää 2-nsuolahappoa. Sitten vesiseos uutettiin etyyliasetaatilla. Uute pestiin vedellä, kuivattiin (MgSO^), ja 66842 haihdutettiin vakuumissa siirapiksi. Siirappi liuotettiin 200 ml:aan eetteriä, ja lisättiin 8 ml (0,04 moolia) DCHAita. Sakka suodatettiin erilleen ja suodos uutettiin 1,5-norm. sitruunahapolla, ja vedellä. Eetterikerros kuivattiin (MgS04:llä) ja haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin 4,6 g (39 % teoreettisesta) otsikon yhdistettä. 0 NMR <$ (fenyyli) = 7,2; <i(Me3COC-) = 1,4.
B. N°k-t-butyylioksikarbonyyli-N ^-etyyli-L-fenyylialanyyli- amidi.
N Oi -t-butyylioksikarbonyyli-N -etyyli-L-f enyylialaniinia (4,3 g, 0,0146 moolia; valmistettu osassa A) liuotettiin 60 ml:aan Ν,Ν-dimetyyliformamidia (DMF). Seos jäähdytettiin 0°C:een, ja lisättiin 3,0 g (0,0146 moolia) N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidiä (DCC). Reaktioseosta sekoitettiin kaksi tuntia 0°C:ssa ja sitten 72 tuntia huoneen lämpötilassa. Sitten seos jäähdytettiin 0°C:een ja suodatettiin. Suodos konsentroitiin vakuumissa öljyksi, joka liuotettiin uudelleen etyyliasetaattiin. Liuos uutettiin 1-n natrium-vetykarbonaatilla, vedellä, kylmällä 1,5-norm. sitruunahapolla ja vedellä. Orgaaninen faasi kuivattiin (MgS04:llä) ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 3,93 g (91 % teor.) otsikon yhdistettä. £Ö0J^ -101,51° (C = 1, MeOH) .
Analyysi, laskettu yhdisteelle ci6H24N2^3 ^292,4): C, 65,73; H, 8,27; N, 9,58; saatu: C, 66,03; H, 8,13; N, 9,85.
C. N o~ -etyyli-L-fenyylialanyyli-amidi hydrokloridisuola.
N ^-t-butyylioksikarbonyyli-N °^-etyyli-L-fenyylialanyyli- amidia (3,5 g; 11,95 mmoolia; valmistettu osassa B) liuotettiin 40 ml:aan vasta valmistettua jääetikkahappoa, jossa oli kuivaa kloorivetyä (1-norm.) ja 1,5 ml anisolia, sekä 1,5 ml yhdistettä (C2H3)3SiH. Saatua seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia. Sitten seos kaadettiin eetteriin, ja muodostunut sakka koottiin talteen ja kuivattiin, jolloin saatiin 2,6 g (96 % teor.) otskon yhdistettä, sp. 276-277°C.
Analyysi, laskettu yhdisteelle ciiHi6N2OC1 (227,7): C, 58,02; H, 7,08; N, 12,30; saatu: C, 57,97; H, 7,26; N, 12,54.
_______ ΤΓ 32 66842 D. N^-t-butyylioksikarbonyyli-L-tyrosyyli-D-alanyyli-gly-syyli-N0^-etyyli-L-fenyylialanyyli-amidi.
50 ml:aan DMF:a lisättiin 1,14 g (0,005 moolia) N00-etyyli-L-f enyylialanyyli-amidin hydrokloridisuolaa (valmistettu osassa C). Seos jäähdytettiin 0°C:een ja sitten lisättiin 2,95 g (0,005 moolia) N-t-butyylioksikarbonyyli-L-tyrosyyli-D-alanyyli-gly-siinin DCHA-suolaa. Seosta sekoitettiin 0°C:ssa 5 minuuttia, ja sitten lisättiin 675 mg (0,005 moolia) HBT:tä ja 1,03 g (0,005 moolia) DCC:tä. Reaktioseosta sekoitettiin 0°C:ssa 6,5 tuntia ja sitten huoneen lämpötilassa 20 tuntia. Seos jäähdytettiin 0°C:een ja suodatettiin. Suodos konsentroitiin vakuumissa öljyksi, joka liuotettiin uudelleen etyyliasetaattiin, uutettiin 1-n natriumvety-karbonaatilla, vedellä, kylmällä 1,5-norm. sitruunahapolla ja vedellä. Orgaaninen faasi kuivattiin (MgSO^rllä) ja konsentroitiin vakuumissa öljyksi, öljy kromatografioitiin 40 cm x 3 cm:n pylväässä, jossa oli valmistetta Grace and Davison Grade 62 silica gel. Tuote eluoitiin asteettain kloroformin määrää kunnes seoksessa oli 15 % metanolia kloroformissa. Tuote eristettiin koottujen fraktioiden ohutkerros-kromatograafisten arvojen perusteella. Saatiin 1,13 g (39 % teor.) otsikon yhdistettä, -21,0° (C = 0/5,
MeOH).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C3(jH4iN507 (583,7): C, 61,73* H, 7,08* N, 12,00* saatu: C, 60,35* H, 7,26* N, 11,25.
E. L-tyrosyyli-D-alanyyli-glysyyli-N -etyyli-L-fenyylialanyyli-amidin asetaattisuola.
Osan D tuote (1 g; 1,71 mmoolia) liuotettiin 20 ml:aan tri-fluorietikkahappoa, jossa oli 3 ml anisolia ja 3 ml yhdistettä (C2H^)2SiH. Seosta sekoitettiin 0°C:ssa 30 minuuttia. Sitten seos kaadettiin eetteriin, ja muodostunut sakka koottiin talteen ja kuivattiin (660 mg). Kiinteä aine liuotettiin niin riittävään määrään puskurin vesiliuosta (1 % pyridiiniä ja 0,05 % etikkahappoa), että tilavuudeksi tuli 10 ml, ja liuos pantiin 2,5 x 90 cm:n kolonniin, jossa oli valmistetta DEAE-Sephadex®A-25 (asetaatti), joka oli tasapainotettu samalla puskurilla. Eluaattia tarkkailtiin kohdalla 280 nm, ja sopivat fraktiot yhdistettiin ja pakkaskuivattiin. Kiinteä aine liuotettiin 0,2-mol. etikkahappoon (10 ml) ja liuos kro- 33 66842 matografioitiin 2,5 cm x 99 cm:n pylväässä, jossa oli G-10 Sephadej^®'ia, joka oli tasapainoitettu samalla liuottimena. Elu-aattia tarkkailtiin kohdalta 280 nm, ja sopivat fraktiot yhdistettiin ja pakkaskuivattiin, jolloin saatiin 448 mg (48 % teor) otsikon yhdistettä, -10,fe° (C = 0,5, 1-n HC1) .
Analyysi, laskettu yhdisteelle ^γΗ^Ν,-Ο^ (543,6): C, 59,65; H, 6,86; N, 12,88; saatu: C, 59,41; H, 7,26; N, 13,18.
Aminohappoanalyysi: saatu: Tyr, 1,03; Ala, 0,99; Gly, 0,97; NH3, 0,98.
Claims (2)
- 000 R,RK0 (L) |l (D) || || I 413II J>N-CH-C-NH-CH-C-NH-CH--C-N-C-C-NH0 (II) Ri I I
- 2 I 2 CH0 CH., CH0 Φ 0 OH jossa R^ ja R^ toisistaan riippumatta merkitsevät vetyä tai ot-aminosuojaryhmää, kuten tert.-butyylioksikarbonyyliä, ja R^ ja R^ merkitsevät samaa kuin edellä, lohkaistaan suojaryhmät happo-väliaineella, kuten trifluoroietikkahapolla, jääetikkahapolla, jossa on HCl-kaasua tai muurahaishapolla. Il34 66842 Patenttivaatimus Menetelmä analgeettisina aineina käyttökelpoisten enke-faliinianalogien valmistamiseksi, joilla on kaava I, (L)000 R,RcO H (L) Il (D) Il II |4|b|| J1N-CH-C-NH-CH-C-NH-CH.-C-N-C-C-NH0 (I) I | 2 I 2 CH_ Ch CH„ JL i Φ o OH jossa L ja D, soveltuvassa tapauksessa, määrittelevät kiertosuunnan; ja jossa on -C^-alkyyli; ja R^ on vety tai -C^-alkyyli; ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien, myrkyttömien happoaddi-tiosuolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että vastaavasti suojatusta yhdisteestä, jolla on kaava II (L)
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US05/838,516 US4264491A (en) | 1977-10-03 | 1977-10-03 | Analgesic compounds |
| US83851677 | 1977-10-03 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI782971A7 FI782971A7 (fi) | 1979-04-04 |
| FI66842B FI66842B (fi) | 1984-08-31 |
| FI66842C true FI66842C (fi) | 1984-12-10 |
Family
ID=25277291
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI782971A FI66842C (fi) | 1977-10-03 | 1978-09-29 | Foerfarande foer framstaellning av som analgetiska medel anvaendbara enkelfalinanaloger |
Country Status (33)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4264491A (fi) |
| EP (1) | EP0001684B1 (fi) |
| JP (1) | JPS5459247A (fi) |
| AR (1) | AR224238A1 (fi) |
| AT (1) | AT367028B (fi) |
| AU (1) | AU520315B2 (fi) |
| BE (1) | BE870819A (fi) |
| BG (1) | BG31224A3 (fi) |
| CA (1) | CA1156219A (fi) |
| CH (1) | CH635571A5 (fi) |
| CS (1) | CS235072B2 (fi) |
| DD (1) | DD139710A5 (fi) |
| DE (1) | DE2861019D1 (fi) |
| DK (1) | DK149231C (fi) |
| EG (1) | EG13636A (fi) |
| ES (1) | ES473925A1 (fi) |
| FI (1) | FI66842C (fi) |
| FR (1) | FR2404629B1 (fi) |
| GB (1) | GB2005688B (fi) |
| GR (1) | GR71651B (fi) |
| HU (1) | HU182866B (fi) |
| IE (1) | IE47378B1 (fi) |
| IL (1) | IL55650A (fi) |
| IT (1) | IT1100839B (fi) |
| LU (1) | LU80316A1 (fi) |
| NZ (1) | NZ188521A (fi) |
| PH (1) | PH14660A (fi) |
| PL (1) | PL114271B1 (fi) |
| PT (1) | PT68598A (fi) |
| RO (1) | RO76176A (fi) |
| SU (1) | SU908246A3 (fi) |
| YU (1) | YU231578A (fi) |
| ZA (1) | ZA785564B (fi) |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FI770219A7 (fi) | 1976-02-02 | 1977-08-03 | Sandoz Ag | |
| US4331593A (en) * | 1977-10-03 | 1982-05-25 | Smithwick Jr Edward L | Analgesic compounds |
| US4265808A (en) * | 1979-12-17 | 1981-05-05 | Eli Lilly And Company | Pharmacologically active peptides |
| US4283330A (en) * | 1979-12-17 | 1981-08-11 | Eli Lilly And Company | Pharmacologically active peptides |
| US4333873A (en) | 1979-12-17 | 1982-06-08 | Eli Lilly And Company | Pharmacologically active peptides |
| JPS5692846A (en) * | 1979-12-27 | 1981-07-27 | Takeda Chem Ind Ltd | Tetrapeptide derivative and its preparation |
| FR2488253A1 (fr) * | 1980-08-08 | 1982-02-12 | Roques Bernard | Nouveaux peptides et leur application en therapeutique |
| JPS5785349A (en) * | 1980-11-14 | 1982-05-28 | Earth Chem Corp Ltd | Tripeptide alkylamide derivative |
| JPS5738756A (en) * | 1980-08-18 | 1982-03-03 | Earth Chem Corp Ltd | Tripeptide alkylamide derivative |
| US4322340A (en) * | 1980-10-20 | 1982-03-30 | Eli Lilly And Company | Pharmacologically active peptides |
| JPS5772950A (en) * | 1980-10-24 | 1982-05-07 | Takeda Chem Ind Ltd | Tetrapeptide derivative, its preparation and analgesic agent |
| EP0076557B1 (en) * | 1981-06-22 | 1985-11-13 | Imperial Chemical Industries Plc | Peptides and pseudopeptides in which the n terminus bears two substituents |
| US4448717A (en) * | 1982-11-12 | 1984-05-15 | Eli Lilly And Company | Pharmacologically active peptides |
| US4495178A (en) * | 1983-10-06 | 1985-01-22 | G. D. Searle & Co. | Enkephalin analogs |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1042487A (en) * | 1964-06-25 | 1966-09-14 | Ici Ltd | Polypeptide derivatives |
| DE2703109A1 (de) * | 1976-01-26 | 1977-08-04 | Wellcome Found | Biologisch wirksame amide |
| GB1532181A (en) * | 1976-02-02 | 1978-11-15 | Beckman Instruments Inc | Pentapetides and a method of preparing them |
| FI770219A7 (fi) * | 1976-02-02 | 1977-08-03 | Sandoz Ag | |
| US4028319A (en) * | 1976-05-07 | 1977-06-07 | G. D. Searle & Co. | 2 and 3-substituted enkephalins |
| FR2359817A1 (fr) * | 1976-07-27 | 1978-02-24 | Reckitt & Colmann Prod Ltd | Nouveaux peptides, leur procede de preparation et composition therapeutique les contenant |
| DE2732451A1 (de) * | 1976-07-27 | 1978-02-02 | Reckitt & Colmann Prod Ltd | Peptidverbindungen, verfahren zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende arzneipraeparate |
| US4259234A (en) * | 1976-09-27 | 1981-03-31 | Eli Lilly And Company | Analgesic compounds |
-
1977
- 1977-10-03 US US05/838,516 patent/US4264491A/en not_active Expired - Lifetime
-
1978
- 1978-09-26 IE IE1926/78A patent/IE47378B1/en unknown
- 1978-09-26 CA CA000312073A patent/CA1156219A/en not_active Expired
- 1978-09-27 PT PT68598A patent/PT68598A/pt unknown
- 1978-09-27 NZ NZ188521A patent/NZ188521A/xx unknown
- 1978-09-27 DE DE7878300420T patent/DE2861019D1/de not_active Expired
- 1978-09-27 AU AU40247/78A patent/AU520315B2/en not_active Expired
- 1978-09-27 GB GB7838386A patent/GB2005688B/en not_active Expired
- 1978-09-27 EP EP78300420A patent/EP0001684B1/en not_active Expired
- 1978-09-27 IL IL55650A patent/IL55650A/xx unknown
- 1978-09-28 JP JP11984778A patent/JPS5459247A/ja active Pending
- 1978-09-28 CS CS786285A patent/CS235072B2/cs unknown
- 1978-09-28 BE BE1009078A patent/BE870819A/xx not_active IP Right Cessation
- 1978-09-29 FI FI782971A patent/FI66842C/fi not_active IP Right Cessation
- 1978-09-29 HU HU78EI814A patent/HU182866B/hu unknown
- 1978-09-29 PH PH21652A patent/PH14660A/en unknown
- 1978-09-29 FR FR7827954A patent/FR2404629B1/fr not_active Expired
- 1978-10-02 AT AT0708778A patent/AT367028B/de not_active IP Right Cessation
- 1978-10-02 DK DK434778A patent/DK149231C/da not_active IP Right Cessation
- 1978-10-02 GR GR57355A patent/GR71651B/el unknown
- 1978-10-02 ZA ZA785564A patent/ZA785564B/xx unknown
- 1978-10-02 YU YU02315/78A patent/YU231578A/xx unknown
- 1978-10-02 IT IT28359/78A patent/IT1100839B/it active
- 1978-10-02 SU SU782669396A patent/SU908246A3/ru active
- 1978-10-02 CH CH1020578A patent/CH635571A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1978-10-02 BG BG040985A patent/BG31224A3/xx unknown
- 1978-10-02 RO RO7895316A patent/RO76176A/ro unknown
- 1978-10-03 LU LU80316A patent/LU80316A1/xx unknown
- 1978-10-03 ES ES473925A patent/ES473925A1/es not_active Expired
- 1978-10-03 EG EG585/78A patent/EG13636A/xx active
- 1978-10-03 AR AR273938A patent/AR224238A1/es active
- 1978-10-03 DD DD78208248A patent/DD139710A5/de unknown
- 1978-10-03 PL PL1978210045A patent/PL114271B1/pl unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI66842C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av som analgetiska medel anvaendbara enkelfalinanaloger | |
| FI70228C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av en enkefalin-analog-peptid | |
| DE3044793A1 (de) | N-adamentansubstituierte tetrapeptidamide und deren pharmakologisch vertraegliche salze | |
| CS204011B2 (en) | Process for preparing substituted pentapeptides | |
| US4540682A (en) | Pharmaceutical peptides, preparation, use and intermediates | |
| US4407746A (en) | Cyclohexyl and phenyl substituted enkephalins | |
| NZ198628A (en) | Enkephalin analogues | |
| GB2086912A (en) | Enkephalin derivatives production thereof and pharmaceutical compositions | |
| US4092304A (en) | 4-Substituted enkephalin derivatives | |
| KR840001668B1 (ko) | 펩티드의 제조방법 | |
| EP0103077B1 (en) | Substituted dipeptides, methods for their production, pharmaceutical compositions containing them, method for making such pharmaceutical compositions | |
| FR2471972A1 (fr) | Tetrapeptides homologues des enkephalines, leur preparation et leur utilisation therapeutique | |
| US4474767A (en) | Peptide and pseudopeptide derivatives | |
| Salvadori et al. | Synthesis and pharmacological activity of partially modified retro-inverso dermorphin tetrapeptides | |
| EP0112036A1 (en) | Pharmacologically active peptides | |
| Salvadori et al. | Synthesis and opioid activity of dermorphin tetrapeptides bearing D-methionine S-oxide at position 2 | |
| US4331593A (en) | Analgesic compounds | |
| US4204991A (en) | Sarcosine1 dehydroalanine8 angiotensin II derivatives | |
| EP0005248B1 (en) | Tetrapeptidehydrazide derivatives and process for their preparation | |
| CA1131217A (en) | Psycho-pharmacological peptides | |
| KR820001616B1 (ko) | 테트라펩타이드의 제조방법 | |
| PERSEO et al. | Synthesis of tryptophyllin‐7 and analogues | |
| FI90532C (fi) | Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten oktahydroindolijohdannaisten valmistamiseksi | |
| Stewart | Use of N-2-cyanoethylglycine derivatives in the synthesis of peptides of N-2-carboxamidoethylglycine, an isomer of glutamine | |
| BE859026A (fr) | Composes analgesiques |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: ELI LILLY AND CO |