ELI LILLY AND COMPANY
<EMI ID=1.1>
présentant une activité analgésique par administration parentérale.
Récemment, des substances endogènes ayant des propriétés du type morphine ont été extraites du cerveau ou du liquide cérébro- <EMI ID=2.1> par Hughes et al., Nature, 258, 577 (1975) comme étant des pentapeptides de formules suivantes :
H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-OH
H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-OH.
Ces composés sont appelés respectivement méthionine-enképhaline et leucine-enképhaline.
Bien que ces composés aient montré une activité analgésique chez les souris par administration dans les ventricules cérébraux
<EMI ID=3.1>
exempts de toute activité analgésique utile quand on les administre par voie parentérale.
On a maintenant découvert une nouvelle catégorie de composés qui présente une activité analgésique significative et démontrable quand on les administre de façon générale. C'est cette catégorie de composés que concerne cette invention.
Cette invention concerne donc une catégorie de composés de formule générale
<EMI ID=4.1>
et leurs sels d'addition d'acide non toxiques pharmaceutiquement
<EMI ID=5.1> <EMI ID=6.1>
un atome d'hydrogène ;
R3 est un atome d'hydrogène ou un groupement alkyle primaire
<EMI ID=7.1>
<EMI ID=8.1>
<EMI ID=9.1>
R6 est un atome d'hydrogène ou un groupement alkyle primaire
<EMI ID=10.1>
R7 est un atome d'hydrogène ou un groupement alkyle primaire
<EMI ID=11.1>
Y est un atome d'hydrogène ou un groupement acétyle ;
0
<EMI ID=12.1>
<EMI ID=13.1>
<EMI ID=14.1>
Une catégorie préférée de composes comprend ceux dans lesquels W est un groupement -CH2-X-CH3 et dans cette catégorie les composés dans lesquels X est le soufre.
<EMI ID=15.1>
acceptable3 compris dans le domaine des composés de formule (I) sont les sels d'addition d'acides organiques et minéraux, par exemple ceux préparés à partir des acides comme les acides chlorhydrique, sulfurique, sulfonique, tartrique, fumarique, bromhydrique, glycoli-
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hydrique, de l'acide acétique ou de l'acide succinique. Tous les sels précédents sont préparés par des procédés classiques.
Comme on le verra en se reportant à la définition des divers
<EMI ID=17.1> <EMI ID=18.1>
acide des pentapeptides de cette invention sont numérotés successivement en partant du reste ayant la fonction amine terminale., L'asymétrie des restes amino-acides, en lisant de la position 1 à la position 5, est ainsi L, D, L, L et L. Quand les composés qui sont définis par la formule (I) constituent un tétrapeptide, la séquence d'asymétrie précédente s'applique à l'exception que le reste amino-acide qui représente initialement la position 5 est omis. En outre, on notera que le reste en position 3 est défini de façon à comprendre un groupement glycine. Dans ce cas évidemment, il n'existe aucune asymétrie en ce qui concerne ce reste. Il est simplement important de noter que, quand la position 3 définit un reste amino-acide ayant une asymétrie, cette asymétrie doit être L.
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isopropyle.
<EMI ID=20.1>
définis de façon à comprendre les groupements "alkyle primaire en
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un groupement éthyle. Par le tprme "aralkyle", on designs les groupements aralkyle non substitués et substitués, et de préférence
<EMI ID=22.1> <EMI ID=23.1>
j-
quand il y en a un, est placé en position para. Un substituant très nettement préféré est le groupement méthoxy, et le groupement
<EMI ID=24.1>
En ce qui concerne la position particulière des restes de tétrapeptides et de pentapeptides de formule (I), les considérations suivantes prévalent :
(A). Position 1 .
Cette position représente la portion terminale à groupement amino du peptide. Le reste est celui qui vient de la L-tyrosine ou de la L-(O-acétyl-)tyrosine. Dans l'un ou l'autre des cas, le reste
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deux des atomes d'hydrogène. Il peut être substitué par un groupe-
<EMI ID=26.1>
reste peut être substitué par un ou deux groupements alkyle
<EMI ID=27.1>
est présent en position 1 du peptide de formule (I) n'est pas substitué sur l'azote. En outre, on préfère que le reste soit un reste tyrosyle .
(B). Position 2.
Le reste amino-acide qui est présent en deuxième position
<EMI ID=28.1>
quelconque de plusieurs restes d'amino-acide. Ils comprennent les
<EMI ID=29.1>
<EMI ID=30.1>
<EMI ID=31.1>
par N-méthyl-, N-éthyl- et N-n-propyl-. De préférence, l'aminoacide en position 2 n'est pas substitué sur l'azote, c'est-à-dire que R- est un atome d'hydrogène.
(C). Position 3.
<EMI ID=32.1>
provenant de la glycine (Gly) ou de l'un quelconque d'un groupe de L-amino-acides. Les amino-acides comprennent les suivants :
<EMI ID=33.1>
L-norleucine, L-leucine et L-isoleucine. De préférence, le reste en cette position du peptide est celui provenant de la glycine.
(D). Position 4.
Le reste d'amino-acide présent en cette position est celui
<EMI ID=34.1>
N-éthyl- ou N-n-propyl: De préférence, le reste n'est pas substitué
<EMI ID=35.1>
(E). Position 5.
(1). Pentapeptide.
En ce qui concerne les composés de formule (1) qui définissent
0
<EMI ID=36.1> <EMI ID=37.1>
substituants N-mêthyl-, N-éthyl-, et N-n-propyl-. De préférence,
<EMI ID=38.1>
<EMI ID=39.1>
représente l'amino-acide à groupement carboxyle terminal, il est présent sous forme d'un amide. De préférence, l'amide est non
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Cependant, le groupement amide peut être N-monosubstitué, le
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groupement amide terminal est un groupement N-méthyl-, N-éthyl-, N-n-propyl- ou N-isopropyl-.
(2). Tétrapeptide.
Il est également possible selon cette invention d'éliminer le
<EMI ID=42.1> <EMI ID=43.1>
fluorobenzylthio) éthyle.
Dans cette description, on utilise les abréviations suivantes dont la plupart sont bien connues et sont couramment utilisées dans la technique :
<EMI ID=44.1>
Ala - alanine Cys - cystéine Gly - glycine Hse - homosérine Ile - isoleucine Leu - leucine Met - méthionine
<EMI ID=45.1>
Nva - norvaline Phe - phénylalanine Ser - sérine Tyr - tyrosine Val - valide Ac - acétyle Me - méthyle Et - éthyle Ip - isopropyle Pr - n-propyle Bu - n-butyle i-Bu - isobutyle t-Bu - t-butyle
<EMI ID=46.1>
<EMI ID=47.1>
les suivants <EMI ID=48.1>
H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe-L-Met-NH2;
H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe-L-(N-Me)Met-NH2;
<EMI ID=49.1>
H-L-Tyr-D-Ala-L-Ala-L-Phe-L-(N-Me)Met-NH2;
H-L-Tyr-D-Ala-L-Abu-L-Phe-L-Met-NH2;
<EMI ID=50.1>
<EMI ID=51.1>
H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe-NH(�-pentyl):
H-L-Tyr-D-(N-Me)Ala-Gly-L-Phe-L-Met-NH2;
<EMI ID=52.1> Met-NH2;
(N-Me,N-Et)-L-Tyr(Ac)-D-(N-Pr)Nle-L-Ala-L-Phe-
L-(N-Me)Met-NH2;
(N,N-Di-Me)-L-Tyr(Ac)-D-(N-Et)Ile-L-Val-L-Phe-
L-(N-Pr)Met-NH2;
(N-Me)-L-Tyr(Ac)-D-(N-Me)Leu-Gly-L-Phe-L-(N-Et)-
Nle-NH2;
(N-Me)-L-Tyr(Ac)-D-(N-Me)Nva-L-Nva-L-Phe-L-
(N-Me) Hse (Me) -NH2;
<EMI ID=53.1>
methylthiopropyl);
(N-Pr)-L-Tyr(Ac)-D-(N-Me)Val-L-Leu-L-Phe-NH(n-
pentyl) ;
<EMI ID=54.1>
H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-(N-Pr)Phe-L-(N-Me)Hse(Me)-
NH2;
<EMI ID=55.1>
<EMI ID=56.1> <EMI ID=57.1>
H-L-Tyr-D-Abu-Gly-L-Phe-L-(N-Me)Leu-NH2;
H-L-Tyr-D-Nva-Gly-L-Phe-L-(N-Me)Leu-NH2;
<EMI ID=58.1>
<EMI ID=59.1>
chloro-Bzl)-NH 2;
H-L-Tyr(Ac)-D-Ala-Gly-L-Phe-L-Ser(m-trifluoro-
<EMI ID=60.1>
Bzl)-NH�:
(N-Allyl)-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe-L-(N-Me)Leu-NH2;
(N-Et)-L-Tyr-D-Abu-L-Ala-L-Phe-L-(N-Et)Leu-NH2;
(N,N-di-Pr)-L-Tyr-D-Val-L-Ala-L-Phe-L-(N-Me)-
Leu-NH2 ;
<EMI ID=61.1>
(N,N-Di-Et)-L-Tyr-D-(N-Pr)Abu-L-Ala-L-Phe-L-
Leu-NH2;
(N-Me,N-Et)-L-Tyr(Ac)-D-(N-Pr)Nle-L-Ala-L-Phe-
<EMI ID=62.1>
Leu-NH 2;
(N-Me)-L-Tyr(Ac)-D-(N-Me)Nva-L-Nva-L-Phe-L-
<EMI ID=63.1>
méthylthioêthyl);
(N-Pr)-L-Tyr(Ac)-D-(N-Me)Val-L-Leu-L-Phe-N(Me)(3-
<EMI ID=64.1>
H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe-L-Ser(Et)-NH(Me);
H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe-L-(N-Me)Leu-NH(Me) ;
H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe-L-(N-Et)Leu-NH(Me);
<EMI ID=65.1>
H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe-L-(N-Et)Leu-NH(Et);
H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe-L-(N-Me)Leu-NH(Me);
<EMI ID=66.1>
NH(Pr);
H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe-L-(N-Pr)Leu-NH(Me);
H-L-Tyr-D-Ala-Gly-L-Phe-L-Cys(Ip)-NH(Pr);
<EMI ID=67.1>
L-(N-Me)Leu-NH(Me);
(N-Me)-L-Tyr-D-Ala-L-Val-L-{N-Me)Phe-L-(N-Pr)-
Ser(Bzl)-NH(Me);
<EMI ID=68.1> <EMI ID=69.1>
Phe-L-(N-Pr)Leu-NH(Et); et
(N-Me)-L-Tyr(Ac)-D-(N-Pr)Leu-L-Abu-L-(N-Me)Phe-
<EMI ID=70.1>
On prépare les composés de formule (I) par des procédés classiques pour la synthèse des peptides. Il est possible pendant la synthèse de certains des composés de formule (I) qu'une racémisation partielle puisse se produire. Cependant, le degré de racémisation s'il se produit n'est pas suffisant pour modifier de façon sérieuse l'activité analgésique des composes de formule (I).
Les procédés de préparation des composés de formule (I) comprennent la copulation d'aminc-acidesou de fragments peptidiques par réaction de la fonction carboxyle de l'un avec la fonction amine de l'autre pour produire une liaison amide. Pour effectuer de façon efficace la copulation, il est d'abord indiqué que toutes les fonctions réactives ne participant pas directement à la réaction soient inactivées par l'utilisation de groupements de blocage appropriés et ensuite que la fonction carboxyle qui doit être liée soit activée de façon appropriée pour permettre à la copulation de se faire. Tout ceci nécessite une sélection soigneuse de l'ordre des réactions et des conditions de réaction ainsi que
<EMI ID=71.1>
<EMI ID=72.1>
<EMI ID=73.1>
choisis de façon particulière, est préparé en utilisant des
<EMI ID=74.1> <EMI ID=75.1>
carbonyle (AdOC) et isobornyloxycarbonyle comme groupements de blocage du groupement amine dans la synthèse des composes de formule (I). En outre, le groupement benzyle .(Bzl) est généralement utilisé comme groupement protecteur du groupement hydroxy du reste
<EMI ID=76.1>
ments comme les groupements p-nitrobenzyle (PNB) et p-méthoxybenzyle (PMB).
Les groupements de blocage des groupements carboxyle utilisés pour préparer les composés de formule (I) peuvent être l'un quelconque des groupements types formant des esters, par exemple
<EMI ID=77.1>
<EMI ID=78.1>
La copulation du fragment peptidique ou de l'amine-acide N-bloqué,protégé de façon appropriée,avec un amino-acide ou un fragment peptidique à groupement carboxy protégé de façon appropriée, dans la préparation des composés de formule (I), consiste à rendre la fonction carboxyle libre de l'amino-acide ou du fragment peptidique,active vis-à-vis de la réaction de copulation. Ceci peut être effectué en utilisant l'une quelconque de plusieurs techniques bien connues. Une telle technique d'activation comprend
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mixte. On active la fonction carboxylique libre par réaction avec un autre acide, typiquement un-dérivé d'acide carbonique, comme un chlorure d'acide. Des exemples des chlorures d'acide utilisés pour former des anhydrides mixtes sont le chloroformiate d'éthyle, le chloroformiate de phényle, le chloroformiate de s-butyle, le chloroformiate d'isobutyle et le chlorure de pivaloyle. On utilise de préférence le chloroformiate d'isobutyle.
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dans le but d'effectuer la réaction de copulation est sa transformation en un de ses dérivés ester actif. De tels esters actifs
<EMI ID=81.1>
autre procédé de copulation dont on dispose est le procédé bien connu de copulation par l'azide.
<EMI ID=82.1> d'activation et de copulation est mise en oeuvre en utilisant
une quantité équimolaire de DCC par rapport à l'amino-acide.ou au fragment peptidique et on la met en oeuvre en présence d'une quantité équimolaire de 1-hydroxybenzotriazole (HBT). La présence de HBT supprime les réactions secondaires indésirables, y compris la possibilité de racémisation.
La coupure de groupements de blocage choisis est nécessaire à des moments particuliers de la séquence de synthèse utilisée dans la préparation des composés de formule (I). Un chimiste ayant des connaissances dans la synthèse des peptides peut facilement déterminer parmi les groupements protecteurs types les groupements qui sont compatibles, au sens que la coupure sélective du produit peut être effectuée en permettant l'élimination de l'un ou plusieurs
<EMI ID=83.1>
acide ou le fragment peptidique. Ces techniques sont bien connues dans le domaine. On trouvera une discussion plus complète des techniques dont on dispose pour la coupure sélective dans
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(1965), et en particulier dans le tableau pages 72 et 75 de cet ouvrage.
On peut effectuer par saponification alcaline la coupure des groupements protecteurs du groupement carboxyle. On utilise généralement pour désestérifier le groupement carboxyle protégé des conditions alcalines relativement fortes,en utilisant typiquement un hydroxyde de métal alcalin, comme 1'hydroxyde de sodium, l'hydroxyde de potassium et l'hydroxyde de lithium. Les conditions de réaction dans lesquelles s'effectue la saponification sont bien connues dans la technique. Les groupement e blocage
du groupement carboxyle peuvent également être éliminés par
<EMI ID=85.1>
on peut effectuer le déblocage par réduction en présence de zinc
<EMI ID=86.1>
<EMI ID=87.1>
sel d'addition d'acide correspondant. La coupure du groupement blocage du groupement aminé peut également être effectuée en traitant l'amino-acide ou le peptide bloqué, par un mélange de
<EMI ID=88.1>
ou chlorhydrate correspondant. Tous ces agents de déblocage sont donc un milieu acide essentiellement sec. Le procédé ou le réactif particulier que l'on utilisera dépendra des caractéristiques chimiques ou physiques des substances utilisées dans la réaction de déblocage particulière. On a découvert, dans le cas où le
<EMI ID=89.1>
un peptide contenant au moins trois restes amino-acides, qu'il est nettement préféré que le peptide soit débloqué par l'acide trifluoroacêtique ou l'acide formique pour produire le sel d'addition d'acide correspondant. Le sel peut être transformé en une forma
<EMI ID=90.1>
Amberlyst A27.
<EMI ID=91.1>
reste tyrosyle peut être conserve sur le peptide pendant toute sa préparation, en étant éliminé pendant l'étape de synthèse finale en même temps que la coupure du groupement de blocage du groupement
<EMI ID=92.1>
du groupement de blocage du groupement carboxyle, il peut être enlevé plus tôt dans la séquence de préparation. Quand le groupement carboxyle est coupé par saponification alcaline, le groupement protecteur du groupement hydroxy n'est pas affecte ;
<EMI ID=93.1>
<EMI ID=94.1>
<EMI ID=95.1>
<EMI ID=96.1> <EMI ID=97.1>
illustrant la préparation d'un pentapeptide de formule (I), peut être décrite comme suit. Dans la séquence de réaction, le symbole AA représente le reste d'amino-acide, et le numéro accolé représent la position de l'amino-acide dans la séquence peptidique finale.
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Le schéma précédent représente seulement une séquence de préparation des composés de formule (I). On dispose d'autres séquences de réaction. Un autre procédé que l'on peut utiliser comprend l'addition séquentielle par étapes d'amino-acides séparés dans la construction de la chaîne peptidique, en commençant par l'amino-acide terminal à groupement carboxamide. Un autre procédé que l'on peut encore utiliser comprend la synthèse peptidique en phase solide. Le reste à C-terminal est fixé à un support polymère approprié et on prolonge le peptide d'un reste à chaque fois jusqu'à ce qu'on ait synthétisé le peptide désiré toujours fixé au polymère. Le peptide est enlevé du polymère par un agent de déblocage approprié. Par exemple, un amino-acide N-méthylé à
<EMI ID=99.1>
t-butyloxycarbonyle, peut être copulé à un polymère de benzhydrylamine par activation par le dicyclohexylcarbodiimide. On enlève le groupement N-t-butyloxycarbonyle par réaction du reste fixé sur le polymère et de l'acide trifluoroacétique dans.le chlorure de méthylène. La neutralisation du sel polymère par une base tertiaire appropriée et l'addition d'un second résidu s'effectue de la même manière. Le peptide bloqué est enlevé du polymère par traitement
<EMI ID=100.1>
conditions particulières de cette synthèse sont connues de l'homme de l'art. On pourrait utiliser des techniques de réaction comme celles décrites précédemment dans cette séquence de réaction ainsi
<EMI ID=101.1>
Dans certains des composés de formule (I), un ou plusieurs des
<EMI ID=102.1>
<EMI ID=103.1>
<EMI ID=104.1>
<EMI ID=105.1>
<EMI ID=106.1>
Comme le schéma précédent le montre, on traite d'abord l'amino-acide par l'hydrure de potassium en présence d'un éther en couronne approprié, pour former le dianion. On traite ensuite l'intermédiaire par l'iodure d'alkyle ou d'allyle approprié pour
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alcalines comme celles que l'on utilise dans le procédé d'alkylation précédent. Le degré de racëmisation peut varier selon l'amino-acide particulier qui est. utilisé. On peut minimiser la racémisation en utilisant un excès de l'agent d'alkylation et en maintenant la
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même dans le cas où il peut se-produire une racëmisation excessive, on peut purifier le produit par recristallisation sous forme du sel d'une amine asymétrique appropriée, par exemple sous forme du
<EMI ID=109.1>
<EMI ID=110.1>
<EMI ID=111.1>
disubstituée désirée par le schéma suivant :
<EMI ID=112.1>
<EMI ID=113.1> <EMI ID=114.1>
décrit ci-dessus.
On transforme en son amide la portion à C terminal des peptides de formule (I). Dans les pentapeptides de formule (I) , l'amide est non substitué ou N-monosubstitué. Dans les tétrapeptides de formule (I), l'amide est N-monosubstitué ou N,N-disubstitué. La transformation en amide est effectuée en activant le groupement carboxyle de l'amino-acide par le N,N'-dicyclohexylcarbodiimide
<EMI ID=115.1>
l'ester de HBT. Dans la production des pentapeptides de formule
(I), on fait ensuite réagir l'ester avec l'ammoniac ou l'amine primaire appropriée pour obtenir l'amide non substitué ou l'amide N-monosubstitué. Des exemples des-amines primaires appropriées pour la préparation des pentapeptides de formule (I) comprennent
<EMI ID=116.1>
la N- [pound]3- (méthoxy ) propylj -N-propylamine , la N-n-pentyl-N-propylamine,
<EMI ID=117.1> <EMI ID=118.1>
la 2-benzylthioêthylamine,
<EMI ID=119.1>
On prépare les composés de formule (I) dans laquelle Y est un groupement acétyle à partir du peptide correspondant dans lequel Y est un atome d'hydrogène et le groupement amino terminal est bloqué de façon appropriée. On traite ce dernier composé par l'anhydride acétique en présence de pyridine pour former le
<EMI ID=120.1>
mélange d'acide chlorhydrique et d'acide acétique, on obtient le composé désiré.
Les composés de formule (I) sont des agents pharmaceutiques intéressants. Ils présentent une activité analgésique et ils sont particulièrement utiles par administration parentérale chez les mammifères y compris l'homme.
Les composés de formule (I) peuvent être administrés tels quels, ou bien ils peuvent être prépares selon des préparations pharmaceutiques, sous des formes posologiques unitaires pour l'administration parentérale. Dans la préparation, on peut utiliser des solides et/ou des liquides- organiques ou minéraux qui sont des supports pharmaceutiquement acceptables. De tels supports appropriés sont bien connus de l'homme de l'art. Les compositions peuvent prendre la forme de comprimés, de granules de poudre, de capsules, de suspensions, de solutions et d'autres formes appropriées.
Les composés de formule (I) , administrés en quantité efficace,
<EMI ID=121.1>
générale d'environ 0,1 mg à environ 100 mg par kilogramme de poids corporel du patient. L'intervalle de dose préféré est généralement
<EMI ID=122.1>
<EMI ID=123.1>
<EMI ID=124.1>
être considérés comme limitant le domaine de l'invention.
<EMI ID=125.1>
Exemple 1
Préparation du chlorhydrate de L-tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-phényl-
<EMI ID=126.1>
monohydraté, on ajoute 25 g (0,281 mole) de D-alanine. On porte
le mélange à reflux et on en élimine/ par voie azéotrope dans un appareil Dean-Stark. On chauffe le mélange pendant 15 h puis on le refroidit jusqu'à la température ambiante et on le dilue avec de l'ëther. On recueille le précipité résultant et on le recristallise dans un mélange de méthanol et d'éther, ce qui donne 55,3 g (56 %) du composé cité en titre, p.f. 112-115[deg.]C.
Analyse, calculée pour C17H21N05S (351,42) :
C, 58,10 ; H, 6,02 ; N, 3,99
Trouvée, C, 58,19 ; H, 6,06 ; N, 3,82
<EMI ID=127.1>
<EMI ID=128.1>
et on le refroidit à 0[deg.]C et l'on ajoute 11,2 g (0,1 mole) de diazabicyclooctane (DABCO). On agite le mélange pendant 10 mn à 0[deg.]C
<EMI ID=129.1>
<EMI ID=130.1>
température ambiante pendant 24 h. Puis on refroidit le mélange à 0[deg.]C, on filtre la suspension résultante et on concentre le filtrat sous vide. On dissout de nouveau ensuite le résidu résultant dans
<EMI ID=131.1>
de l'eau, de l'acide citrique froid à 0,75 N et de J'eau. Puis on <EMI ID=132.1> <EMI ID=133.1>
d'eau, on ajoute 31,2 g (0,06 mole) du produit de la partie B. On refroidit à 0[deg.]C la solution résultante et on ajoute lentement
13,2 ml (1,1 équivalent) d'hydroxyde de sodium 5N. On agite le mélange résultant et on le laisse se réchauffer lentement jusqu'à
la température ambiante. Après 5 h, on répartit le mélange entre
de l'eau et de l'éther. On sépare la couche aqueuse et on la refroidit, on ajuste le pH à 2 par addition d'acide citrique et on extrait le mélange avec de l'acétate d'éthyle. On lave avec de l'eau l'extrait d'acétate d'éthyle, on le sèche sur sulfate de magnésium, on le filtre et on le dilue avec de l'éther. On recueille le précipité résultant et l'on obtient 17,7 g (67 %) du composé
<EMI ID=134.1>
Analyse, calculée pour C24H30N206 (442,51) :
C, 65,14 ; H, 6,83 ; N, 6,63
Trouvée, C, 64,73 ; H, 6,70 ; N, 6,20
<EMI ID=135.1>
de benzyle.
<EMI ID=136.1>
p-toluènesulfonique du glycinate de benzyle. On refroidit à 0[deg.]C le mélange résultant et on ajoute 2,24 g (0,020 mole) de DABCO. On agite le mélange pendant quelques minutes puis on ajoute 8,84 g
(0,020 mole) du produit de la partie C, puis 2,7 g (0,020 mole) de HBT et 4,12 g (0,020 mole) de DCC. On agite le mélange réactionnel pendant 2 h à 0[deg.]C puis pendant-24 h à la température ambiante. On refroidit à 0[deg.]C la suspension résultante, on la filtre et on concentre le filtrat sous vide. On dissout dans de l'acétate d'éthyle le résidu résultant et on le lave successivement avec du
<EMI ID=137.1>
froid et de l'eau. On sèche sur sulfate de magnésium la phase
<EMI ID=138.1>
<EMI ID=139.1>
du composé cité en titre pur, p.f. 145-147[deg.]C.
Analyse, calculée pour C33H39N307 (589,69) :
<EMI ID=140.1>
<EMI ID=141.1>
l'azote et on introduit de l'hydrogène par un tube de dispersion de <EMI ID=142.1>
<EMI ID=143.1>
par filtration le catalyseur. On concentre le filtrat sous vide. La trituration du résidu avec de l'éther donne 5,4 g (75 %) du composé cité en titre sous forme d'un solide amorphe.
<EMI ID=144.1>
C, 69,94 ; H, 5,87 ; N, 6,27
Trouvée, C, 70,08 ; H, 5,82 ; N, 6,16
<EMI ID=145.1>
carbonyl-L-méthionine (17,2 g, 0,04 mole) entre de l'acétate d'éthyle et de l'acide citrique 0,75 N froid. On sépare la phase organique résultante, on la lave avec de l'eau, on la sèche sur sulfate de magnésium, on la filtre et on la concentre sous vide jusqu'à un résidu huileux. On dissout le résidu dans un mélange de
<EMI ID=146.1>
<EMI ID=147.1>
au mélange refroidi résultant en 30 mn. On ajoute 2,49 ml
(0,04 mole) d'iodure de méthyle, et on agite le mélange pendant
24 h à la température ambiante. Puis on refroidit le mélange
<EMI ID=148.1>
puis on le répartit entre de 1 [deg.] eau et de l'éther. On lave la couche
<EMI ID=149.1>
<EMI ID=150.1>
acidifie à pH 2 et on les extrait avec de l'acétate d'éthyle. On sèche sur sulfate de magnésium l'extrait d'acétate d'éthyle, on filtre et on évapore sous vide, ce qui donne 8,4 g d'un produit
<EMI ID=151.1>
<EMI ID=152.1>
<EMI ID=153.1>
<EMI ID=154.1>
<EMI ID=155.1>
fractions provenant de la colonne et la combinaison ultérieure en fonction du profil en CCM donnent, après concentration sous vide, un produit que l'on recristallise deux fois dans un mélange d'éther et d'éther de pétrole pour obtenir 4,1 g (39 %) du composé cité en titre, p.f. 75-78[deg.]C.
<EMI ID=156.1>
<EMI ID=157.1>
<EMI ID=158.1>
C, 50,36 ; H, 8,45 ; N, 10,68
Trouvée, C, 50,59 ; H, 8,24 ; N, 10,87
G. N*-t-butl,-loxycarbonyl-L-phénylalanyl-Nck-méthyl-L-méthionylamide.
On prépare un mélange de 20 ml d'acide acétique glacial, de
2 ml d'anisole, de 2 ml de triéthylsilane et de 3,8 g (0,0144 sole} du produit de la partie F. On fait barboter du gaz chlorhydrique
<EMI ID=159.1>
<EMI ID=160.1>
<EMI ID=161.1>
refroidit le mélange à 0[deg.]C et on ajoute 2,9 ml (0,0146 mole) de
<EMI ID=162.1>
<EMI ID=163.1>
(0,0146 mole) de DCC. On agite le mélange résultant pendant 2 h à 0[deg.]C puis pendant 24 h à la température ambiante. On refroidit à 0[deg.]C le mélange et on le filtre. Puis on concentre BOUS vide le filtrat résultant. On redissout le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on
<EMI ID=164.1>
de l'eau, de l'acide citrique 0,75 N et de l'eau. On sèche ensuite sur sulfate de magnésium la solution d'acétate d'éthyle et on
<EMI ID=165.1> et de méthanol. L'analyse par CCM des fractions de la colonne et la
<EMI ID=166.1> <EMI ID=167.1>
A un mélange de 20 ml d'acide acétique glacial, de 3 ml d'anisole et de 3 ml de triéthylsilane, on ajoute 2,2 g
(5,37 mmoles) du produit de la partie G. On fait barboter du gaz chlorhydrique sec dans le mélange pendant 30 mn. On ajoute de l'éther au mélange et il précipite un solide que l'on filtre et que l'on sèche sous vide. On dissout le solide (1,75 g, 5 mmoles) dans 30 ml de DMF sec et on refroidit le mélange à 0[deg.]C. On neutralise alors le chlorhydrate par addition de 0,99 ml (5 mmoles) de dicyclohexylamine. Après 5 mn, on ajoute 2,05 g (5 mmoles) du produit de la partie E, puis 0,68 g (5 mmoles) de HBT et 1,0 g
(5 mmoles) de DCC. Puis on agite le mélange pendant 24 h à 4[deg.]C.
On élimine par filtration la substance insoluble résultante et on évapore le filtrat sous vide. On redissout dans de l'acétate d'éthyle le résidu résultant, et on lave l'acétate d'éthyle successivement avec du bicarbonate de sodium aqueux 111, de l'acide
<EMI ID=168.1>
sur sulfate de magnésium et on l'applique sur une colonne de 3 x 50 cm de gel de silice (74-250 � ) et on élue avec du
<EMI ID=169.1>
L'analyse par CCM des fractions provenant de la colonne et la combinaison ultérieure en se basant sur le profil de CCM donnant
<EMI ID=170.1>
On purifie d avantage le premier lot par chromatographie prëparative sur couche épaisse sur gel de silice (chloroforme:méthanol 9:1) et l'on obtient 0,62 g du composé cité en titre sous forme d'un solide amorphe.
<EMI ID=171.1> <EMI ID=172.1> ajoute 0,72 g (1,03 mmole) du composé du titre de la partie H. On fait ensuite barboter dans le mélange pendant 20 mn du gaz chlorhydrique anhydre. On lyophilise le mélange et l'on obtient 0,74 g du composé cité en titre, Rf 0,3.
On sèche sous vide à 100[deg.]C un échantillon analytique du produit.
<EMI ID=173.1>
C, 54,66 ; H, 6,49 ; N, 13,19
Trouvée, C, 54,36 ; H, 6,19 : N, 13,00
Analyse des amino-acides, trouvée : Tyr, 1,01 ; Ala, 0,99 ;
<EMI ID=174.1>
Exemple 2
Préparation du monoacétate du sesqui-chlorhydrate de L-tyrosyl-D-
<EMI ID=175.1>
du dérivé de D-alinate. Rendement 73 %, p.f. 155-156[deg.]C.
Analyse, calculée pour C20H27N05S (393,50) :
<EMI ID=176.1>
<EMI ID=177.1>
<EMI ID=178.1>
benzyle
<EMI ID=179.1>
<EMI ID=180.1>
(0,020 mole) de DABCO. On agite le mélange pendant 5 mn puis on
<EMI ID=181.1>
<EMI ID=182.1>
<EMI ID=183.1>
<EMI ID=184.1> <EMI ID=185.1>
C, 71,06 ; H, 7,37 ; N, 4,87
Trouvée, C, 71,30 ; H, 7,15 ; N, 4,79
<EMI ID=186.1>
<EMI ID=187.1>
la partie B. Après addition de 20 ml d'eau, on refroidit à 0[deg.]C le mélange résultant, et on ajoute lentement 7,25 ml (0,0145 mole) d'hydroxyde de sodium 2N. Une fois l'addition terminée, on agite le mélange à 0[deg.]C pendant 30 mn puis à la température ambiante pendant 4 h. On répartit ensuite le mélange réactionnel entre de l'eau et de l'éther. On sépare la phase aqueuse, on la refroidit à 0[deg.]C, on l'acidifie à pH 2 avec HC1 IN froid et on l'extrait avec de l'acétate d'éthyle. Puis on lave à l'eau l'extrait d'acétate d'éthyle, on le sèche sur sulfate de magnésium, on le filtre et
on le concentre sous vide ce qui donne un résidu sirupeux. On cristallise le résidu dans un mélange d'éther et d'éther de pétrole, et l'on obtient 6,4 g (95 %) du composé cité en titre, p.f. 90-94[deg.]C.
<EMI ID=188.1>
C, 66,92 ; H, 7,49 ; N, 5,78
Trouvée, C, 67,14 ; H, 7,38 ; N, 5,76
<EMI ID=189.1>
de benzyle.
On prépare un mélange de 3,37 g (0,010 mole) du p-toluènesulfonate de glycinate de benzyle et de 1,12 g (0,010 mole) de
<EMI ID=190.1>
(0,010 mole) du composé de la partie C. Puis on refroidit le mélange à 0[deg.]C et on ajoute 1,35 g (0,010 mole) de HBT et 2,06 g
(0,010 mole) de DCC. On agite le mélange résultant pendant 2 h à 0[deg.]C puis pendant 24 h à la température ambiante. On refroidit le mélange à 0[deg.]C, on le filtre et on concentre le filtrat sous vide.
<EMI ID=191.1>
lave la solution d'acétate d'éthyle successivement avec du bicarbonate de sodium IN, de l'eau, de l'acide citrique 0,75 N
<EMI ID=192.1> <EMI ID=193.1>
A 5 ml de DMF anhydre, on ajoute 3,9 g (0,006 mole) du composé de la partie D, puis 1,5 g de Pd/C à 5 %. Au mélange on ajoute alors 40 ml d'éthanol, on le purge avec de l'azote et on introduit de l'hydrogène pendant 5 h, en maintenant le mélange à la pression atmosphérique et à la température ambiante. Puis on filtre le catalyseur du mélange et l'on évapore le filtrat sous vide. On cristallise le résidu résultant dans un mélange d'éther et d'acétate d'éthyle, et l'on obtient 2,3 g (85 %) du composé cité en titre, p.f. 189-190[deg.]C.
<EMI ID=194.1>
C, 58,52 ; H, 7,37 ; N, 9,31
Trouvée, C, 58,79 ; H, 7,48 ; N, 9,39
<EMI ID=195.1>
comme dans la partie H de l'Exemple 1) et 0,903 g (0,002 mole) du produit de la partie E. On refroidit à 0[deg.]C le mélange résultant et
<EMI ID=196.1>
0,27 g (0,002 mole) de HBT et 0,412 g (0,002 mole) de DCC. Puis on agite le mélange à 0[deg.]C pendant 2 h puis à 4[deg.]C pendant 24 h. On enlève par filtration le précipité résultant et on concentre le filtrat sous vide jusqu'à un résidu que l'on dissout alors dans de l'acétate d'éthyle. On lave la solution d'acétate successivement
<EMI ID=197.1>
0,75 N froid et de l'eau. Puis on sèche la phase organique sur sulfate de magnésium, on la filtre et on concentre le filtrat sous vide. On applique le résidu sur deux plaques de chromatographie prêparatives sur couche épaisse, et on élue les plaques avec un
<EMI ID=198.1> <EMI ID=199.1>
Gly, 1,00 ; Phe, 0,99
G. Monoacétate du sesquichlorhydrate de L-tyrosyl-D-leucyl-
<EMI ID=200.1>
A 5 ml d'acide acétique glacial contenant 0,3 ml d'anisole, on ajoute 0,900 g (0,0012 mole) du composé de la partie F. On fait barboter dans le mélange pendant 20 mn du gaz chlorhydrique sec. Puis on chasse le solvant par lyophilisation de l'acide acétique aqueux et l'on obtient le composé cité en titre sous forme d'un solide amorphe.
<EMI ID=201.1>
C, 53,93 ; H, 6,79 ; N, 11,10 Cl, 7,02 Trouvée, C, 54,30 ; H, 6,64 ; N, 11,32 ; Cl, 6,96 Analyse des amino-acides, trouvée : Tyr, 0,99 ; Leu, 1,03 ; Gly, 0,99 ; Phe, 0,99
Exemple 3
<EMI ID=202.1>
<EMI ID=203.1>
méthyle.
<EMI ID=204.1>
de L-méthionate de méthyle. On refroidit le mélange à 0[deg.]C et on
<EMI ID=205.1>
13,5 g (0,1 mole) de HBT et 20,6 g (0,1 mole) de DCC. On agite le mélange résultant à 0[deg.]C pendant 2 h puis à la température ambiante pendant 24 h. On refroidit à nouveau le mélange à 0[deg.]C et on enlève par filtration le précipité résultant. On concentre le filtrat sous vide. On dissout alors le résidu dans de l'acétate
<EMI ID=206.1>
<EMI ID=207.1>
A 60 ml de méthanol, on ajoute 13,0 g (0,032 mole) du composé de la partie A. On place la suspension résultante dans un récipient sous pression équipé d'un barreau d'agitation magnétique. On refroidit le mélange à -78[deg.]C et on ajoute 60 ml d'ammoniac liquide anhydre. On ferme le récipient de réaction et on le laisse se réchauffer jusqu'à la température ambiante. On agite le mélange pendant 24 h à la température ambiante. On refroidit de nouveau lentement le récipient à -78[deg.]C et on l'ouvre. On évapore l'ammoniac résiduel en chauffant le mélange et on recristallise dans le
<EMI ID=208.1>
obtient 9,7 g (77 %) du composé cité en titre, p.f. 192-195[deg.]C.
Analyse, calculée pour C19H29N304S (395,52) :
C, 57,70 ; H, 7,39 ; N, 10,62
Trouvée, C, 57,41 ; H, 7,17 ; N- 10,37
C. Chlorhydrate de L-phênylalanyl-L-méthionylamide.
A 150 ml d'acide acétique glacial contenant 10 ml d'anisole et 10 ml de triéthylsilane, on ajoute 9,6 g (0,024 mole) du produit de la partie B. Puis on introduit du gaz chlorhydrique anhydre par un tube de dispersion de gaz. Au bout de 30 mn, on dilue avec de l'éther le mélange réactionnel. On recueille le précipité résultant et on le recristallise dans un mélange d'éthanol et d'éther, ce qui donne 7,5 g (94 %) du composé cité en titre, p.f.,214-216[deg.]C.
<EMI ID=209.1>
C, 50,67 ; H, 6,68 ; N, 12,66
Trouvée, C, 50,75 ; H, 6,84 ; N, 12,54
<EMI ID=210.1>
méthionylamide.
A 40 ml de DMF, on ajoute 1,66 g (0,005 mole) du produit de la partie C. On ajoute 0,99 ml (0,005 mole) de dicyclohexylamine et on
<EMI ID=211.1>
0,68 g (0,005 mole) de HBT et 1,03 g (0,005 mole) de DCC. On agite le mélange résultant pendant 2 h à 0[deg.]C puis à la température ambiante pendant 24 h. Après un nouveau refroidissement du mélange
<EMI ID=212.1>
filtrat sous vide. On dissout dans de l'acétate d'éthyle le résidu
<EMI ID=213.1>
de magnésium, on la filtre et on l'évapore sous vide. Puis on <EMI ID=214.1> la cristallisation. On filtre le gel et l'on sèche le solide
<EMI ID=215.1>
que monohydraté et on agite le mélange pendant 5 h. On recueille par filtration le précipité résultant et on le sèche, ce qui donne
<EMI ID=216.1>
<EMI ID=217.1>
0,336 g (0,003 mole) de DABCO puis, après 10 mn, 0,8 g
<EMI ID=218.1>
<EMI ID=219.1>
<EMI ID=220.1>
<EMI ID=221.1>
<EMI ID=222.1>
<EMI ID=223.1>
<EMI ID=224.1>
l'eau, de l'acide citrique 0,75 N froid et de l'eau. On sécha la phase organique sur sulfate de magnésium, on la filtre et on la concentre sous vide. On dissout le résidu résultant dans de
<EMI ID=225.1> <EMI ID=226.1>
précipite qui s'est formé et on concentre le filtrat sous vide. Puis on dissout le résidu résultant dans du n-butanol et on lave la solution successivement avec du bicarbonate de sodium IN, de l'eau, de l'acide citrique froid 0,75 N et de l'eau. Puis on sèche sur sulfate de magnésium la phase organique et on la filtre, et on concentre le filtrat sous vide. Des essais de recristallisation du résidu dans l'acétate d'éthyle ou dans l'êthanol donnent des gels. On dissout alors le résidu dans du méthanol chaud et on applique la solution sur une plaque de chromatographie préparative sur couche épaisse et on élue avec un mélange 9:1 de chloroforme et de
<EMI ID=227.1>
trait avec le mélange chloroforme-méthanol. On évapore le solvant sous vide, ce qui donne 0,270 g (21 %) du composé cité en titre,
<EMI ID=228.1>
Analyse des amino-acides, trouvée : Tyr, 1,00 ; Ala, 1,02 ;
<EMI ID=229.1>
introduit du gaz chlorhydrique anhydre par un tube de dispersion de gaz pendant 20 mn. Puis on congèle le mélange résultant et on
<EMI ID=230.1>
<EMI ID=231.1>
<EMI ID=232.1>
<EMI ID=233.1>
L'analyse indique la présence du suif oxyde de méthionine.
Exemple
<EMI ID=234.1> <EMI ID=235.1> d'iodure de méthyle., On poursuit l'agitation à la température ambiante pendant 24 h. Puis on verse le mélange sur de la glace pilée et on l'extrait avec de l'éther. On acidifie la phase aqueuse à pH 2 avec de l'acide citrique puis on l'extrait avec de l'acétate d'éthyle. On lave alors la phasè organique avec de l'eau, on la sèche sur sulfate de magnésium et on la concentre sous vide, ce qui donne un sirop qui ne cristallise pas. Le spectre RMN du sirop est compatible avec le dérivé attendu :
<EMI ID=236.1>
l'éther et on ajoute 4,0 ml de dicyclohexylamine. Des cristaux se forment par refroidissement. On recueille le précipité et on le recristallise dans un mélange de méthanol et d'éther, ce qui donne 6,8 g (74 %) du composé cité en titre, p.f. 171-174[deg.]C.
<EMI ID=237.1>
C, 70,40 ; H, 9,63 ; N, 6,08
Trouvée, C, 70,60 ; H, 9,49 ; N, 6,19
<EMI ID=238.1>
L-mêthionylamide.
<EMI ID=239.1>
<EMI ID=240.1>
<EMI ID=241.1>
<EMI ID=242.1>
(0,010 mole) de DCC. On agite le mélange résultant pendant 2 h à 0[deg.]C puis pendant 24 h à la température ambiante. On élimine par filtration le précipité résultant et on concentre le filtrat sous vide jusqu'à un sirop que l'on redissout dans de l'acétate
<EMI ID=243.1>
<EMI ID=244.1>
mole) du produit de la partie-B. On introduit du -gaz chlorhydrique anhydre par un tube de dispersion de gaz pendant 30 mn, puis on dilue le mélange réactionnel avec de l'éther. On recueille le précipité résultant et on le sèche (1,1 g) puis on le redissout dans 40 ml de DMF. On refroidit alors à 0[deg.]C le mélange réactionnel et on ajoute 1,27 g (0,031 mole) du produit de la partie E de l'Exemple 1, 0,420 g (0,0031 mole) de HBT et 0,640 g (0,0031 mole)
<EMI ID=245.1>
amine et on poursuit l'agitation à 0[deg.]C pendant 2 h puis à 4[deg.]C pendant 48 h. On élimine par filtration le précipité résultant et on concentre le filtrat -sous vide jusqu'3 un résidu sirupeux que l'on dissout alors à nouveau dans de l'acétate d'éthyle. On lave la solution d'acétate d'éthyle successivement avec du bicarbonate
<EMI ID=246.1>
l'eau puis on la sèche sur sulfate de magnésium, on la filtre et on concentre sous vide, ce qui donne 2,0 g de produit brut. On dissout le produit dans du chloroforme et on l'applique à une
<EMI ID=247.1>
avec du chloroforme puis un mélange 9:1 de chloroforme et de méthanol. L'analyse par CCM des fractions provenant de la colonne et la combinaison ultérieure de ces fractions en se basant sur le profil de CCM donnent, après concentration sous vide, 1,1 g (47 %) du composé cité en titre non cristallisé.
<EMI ID=248.1>
d'anisole, on ajoute 0,70 g (0,001 mole) du produit de la partie C.
On introduit du gaz chlorhydrique sec par un tube de dispersion
<EMI ID=249.1>
<EMI ID=250.1>
C, 51,08 ; H, 7,0 ; N, 11,91
Trouvée, C, 51,13 ; H, 6,97 ; N, 11,72
Analyse des amino-acides, trouvée : Tyr, 1,03 ; Ala, 1,01 ; Gly, 0,96.
Exemple 5
Préparation du mono-acétate du chlorhydrate (1,25 HC1) du L-
<EMI ID=251.1>
alinate de benzyle.
A une solution de 3,19 g (0,010 mole) du p-toluènesulfonate d'alinate de benzyle dans 30 ml de DMF sec, on ajoute 4,43 g
(0,010 mole) du produit de la partie B de' l'Exemple 1.'On refroidit à 0[deg.]C le mélange résultant et on ajoute 1,12 g (0,010 mole) puis en 10 mn 1,135 g (0,010 mole) de HBT et 2,06 g (0,010 mole) ce DCC. On agite le mélange résultant à 0[deg.]C pendant 2 h puis à la
<EMI ID=252.1>
précipité résultant et on évapore le filtrat sous vide jusqu'à un sirop. On dissout à nouveau le sirop dans de l'acétate d'éthyle et on lave la solution d'acétate d'éthyle successivement avec du bicarbonate de sodium IN, de l'eau, de l'acide chlorhydrique 0,75 N froid et de l'eau. Puis on sèche la phase organique sur sulfate de magnésium et on la filtre, et on concentre le filtrat sous vide, ce qui donne un résidu qui ne cristallise pas dans l'éthanol ou l'éther. La dilution de la solution éthérée avec de l'éther de pétrole donne un gel que l'on recueille par filtration et que l'on sèche sous vide. On applique le solide amorphe impur
(4,0 g) sur une colonne de 3 x 50 cm de gel de silice (74-250
<EMI ID=253.1>
<EMI ID=254.1>
<EMI ID=255.1>
<EMI ID=256.1>
solvant sous vide donnent un résidu sirupeux. On dissout ce
<EMI ID=257.1>
<EMI ID=258.1>
A 5 ml de DMF sec, on ajoute 2,9 g (0,0048 mole) du produit de la partie A. Au mélange, on ajoute alors 1,0 g de Pd/C à 5 % puis 50 ml d'éthanol. On introduit de l'hydrogène à la pression atmosphérique et à la température ambiante par un tube de dispersion de gaz, pendant 6 h. Puis on purge avec de l'azote le récipient de réaction, on recueille le catalyseur par-filtration et on concentre le filtrat sous vide. On dissout le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on dilue la solution avec de l'éther. On recueille par filtration le précipité résultant et on le sèche sous vide, ce qui donne 1,5 g (74 %) du composé cité en titre sous forme d'un solide amorphe.
<EMI ID=259.1>
Analyse, calculée pour C20H29N307 (423,47) :
C, 56,73 ; H, 6,90 ; N, 9,92
<EMI ID=260.1>
<EMI ID=261.1>
connue dans la partie H de l'Exemple 1). On refroidit le mélange à 0[deg.]C et on ajoute 0,28 ml (0,002 mole) de triêthylamine. On agite le mélange réactionnel pendant 10 mn, et on ajoute 0,846 g (0,002 mole) du produit de la partie B, puis 0,270 g (0,002 mole) de HBT et 0,412 g (0,002 mole) de DCC. On agite le mélange résultant à 0[deg.]C pendant 2 h puis à la température ambiante pendant 48 h. Après un nouveau refroidissement du mélange à 0[deg.]C, on le filtre et on concentre le filtrat sous vide. On redissout le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on lave la solution d'acétate d'éthyle
<EMI ID=262.1>
l'acide citrique 0,75 N froid et de l'eau. Puis on sôche la phase
<EMI ID=263.1>
<EMI ID=264.1>
le produit dans du chloroforme et on l'applique sur deux plaques
<EMI ID=265.1>
<EMI ID=266.1>
<EMI ID=267.1> <EMI ID=268.1>
<EMI ID=269.1>
MeOH)
<EMI ID=270.1>
C, 58,80 ; H, 7,05 ; N, 11,76
Trouvée, C, 58,60 ; H, 6,87 ; N, 11,53
D. Mono-acétate du chlorhydrate de L-tyrosyl-D-alanyl-L-
<EMI ID=271.1>
A 5 ml d'acide acétique glacial contenant 0,5 ml d'anisole, on ajoute 0,880 g (0,0011 mole) du produit de la partie C. On introduit du gaz chlorhydrique anhydre par un. tube de dispersion de gaz pendant 20 mn. Puis on congèle le mélange réactionnel et on le lyophilise, ce qui donne 0,704 g du composé cité en titre ;
<EMI ID=272.1>
<EMI ID=273.1>
C, 53,43 ; H, 6,45 ; N, 11,68 ; Cl, 6,16 Trouvée, C, 53,48 ; H, 6,47 ; N, 11,62 ; Cl, 6,50 Analyse des amino-acides, trouvée : Tyr, 1,00 ; Ala, 1,99 ; Phe, 1,01.
Exemple 6
Préparation de l'acétate de L-tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-
<EMI ID=274.1>
nel 44,8 ml (0,336 mole) de tétraméthylguanidine et 66,8 ml
(0,336 mole) de dicyclohexylamine. Puis on ajoute goutte à goutte
<EMI ID=275.1>
<EMI ID=276.1>
<EMI ID=277.1>
couche aqueuse. On sépare et on rejette la couche organique. Puis
<EMI ID=278.1> <EMI ID=279.1>
<EMI ID=280.1>
159[deg.]C.
<EMI ID=281.1>
Analyse, calculée pour C22H42N204S (430,6) :
C, 61,36 ; H, 9,83 ; N, 6,51
Trouvée, C, 61,37 ; H, 9,98 ; N, 6,26
<EMI ID=282.1>
par neutralisation du produit de la partie A et extraction dans de l'acétate d'éthyle). On ajoute goutte à goutte en 30 mn le mélange résultant à une suspension mécaniquement agitée de 42,45 g d'une suspension d'hydrure de potassium (22,1 % de KH dans l'huile minérale ; 0,234 mole de KH) dans 375 ml de THF à 0[deg.]C et contenant 0,5 g d'éther (6) en couronne (18). On ajoute goutte à goutte en
15-20 minutes 9,25 ml (0,149 mole) d'iodure de méthyle dans 20 ml
<EMI ID=283.1>
<EMI ID=284.1>
5 ml d'éthanol. Puis on verse sur de la glace le mélange réactionnel résultant et on ajuste le pH du mélange à environ 9 par addition d'hydroxyde de sodium 2N. On extrait avec de l'éther la solution aqueuse résultante. Puis on ajuste à 3 le pH de la couche aqueuse par addition d'acide citrique solide et on extrait à nouveau avec trois portions de 300 ml d'éther. On réunit: les extraits éthérés, on les extrait en retour avec de l'eau, on les sèche sur sulfate de magnésium et on les concentre sous vide. On dissout le résidu résultant dans 200 ml d'éther, et on ajoute
<EMI ID=285.1>
mélange et on ajoute 500 ml d'éther de pétrole. Il ne se produit
<EMI ID=286.1>
<EMI ID=287.1>
On dissout le produit (6,5 g, 0,025 mole) dans 80 ml de DMF et <EMI ID=288.1>
on refroidit le mélange à -15[deg.]C. On ajoute 3,6 ml (0,027 mole) de
<EMI ID=289.1>
morpholine. On agite le mélange résultant pendant 10 mn à -15[deg.]C puis on fait barboter de l'ammoniac anhydre dans le mélange réactionnel pendant 1 h. On agite le mélange 4 h supplémentaires
à -15[deg.]C puis on le verse sur un mélange de glace et de bicarbonate de sodium IN. On extrait avec de l'éther la couche aqueuse froide. On extrait ensuite l'extrait éthéré avec de l'acide citrique 0,75 N froid et de l'eau, on sèche sur sulfate de magnésium et on concentre sous vide, ce qui donne un résidu qui cristallise dans un mélange d'éther et d'éther de pétrole en donnant 1,7 g (26 %) du composé cité en titre, p.f. 56-59[deg.]C.
<EMI ID=290.1>
<EMI ID=291.1>
<EMI ID=292.1>
<EMI ID=293.1>
<EMI ID=294.1>
<EMI ID=295.1>
cystêinylamide.
<EMI ID=296.1>
<EMI ID=297.1>
<EMI ID=298.1>
barboter dans le mélange pendant 30 mn du gaz chlorhydrique sec
<EMI ID=299.1>
(1,8 g). On dissout le précipite dans 25 ml de DMF. On refroidit
<EMI ID=300.1> <EMI ID=301.1>
<EMI ID=302.1>
combinaison des fractions appropriées et évaporation du solvant sous vide, 3,0 g du composé cité en titre.
<EMI ID=303.1>
<EMI ID=304.1>
C, 58,65 ; H, 7,63 ; N, 10,26
<EMI ID=305.1>
<EMI ID=306.1>
On dissout dans 150 ml d'alcool isopropylique le produit de l'hydrogénolyse (selon le procédé de la partie.E de l'Exemple 1)
<EMI ID=307.1>
glycinate de benzyle, et on ajoute 16 ml (0,081 mole) de dicyclohexylamine. On ajoute de l'éther pour porter le volume à environ 1,5 1. On triture la masse semi-solide jusqu'à ce qu'elle soit
<EMI ID=308.1>
<EMI ID=309.1>
<EMI ID=310.1>
d'alcool isopropylique. On réduit le volume de la solution, sous courant d'azote, à environ 150 ml. Par refroidissement, la cristallisation commence. On laisse le mélange reposer pendant une nuit et on recueille le précipité que l'on sèche, ce qui donne
41,44 g (88 %) du composé cité en titre, p.f. 198-200,5[deg.]C.
<EMI ID=311.1>
<EMI ID=312.1>
<EMI ID=313.1>
<EMI ID=314.1> le filtrat sous vide. On dissout le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on extrait la solution d'acétate d'éthyle avec du bicarbonate de sodium IN, de l'eau, de l'acide citrique 0,75 N et de l'eau. On sèche la phase organique sur sulfate de magnésium et on l'évapore sous vide, ce qui donne 3,5 g du composé cité en titre brut. On dissout le produit dans du chloroforme et on l'applique sur une colonne 3 x 45 cm de gel de silice de qualité
62 de chez Grace and Davidson et on élue avec un gradient disconti-
<EMI ID=315.1>
les fractions en se basant sur leur profil en ÇCM et on les évapore sous vide, ce qui donne 2,4 g (62 %) du composé cité en
<EMI ID=316.1>
<EMI ID=317.1>
C, 58,27 ; H, 6,90 ; N, 11,99
<EMI ID=318.1>
<EMI ID=319.1>
A 20 ml d'acide acétique glacial contenant 2 ml d'anisole et 2 ml de triéthylsilane, on ajoute 2,2 g (3 mmoles) du produit de la partie E. On fait barboter du gaz chlorhydrique sec dans le mélange réactionnel pendant 25 mn. Puis on ajoute de l'éther au mélange et on le refroidit. On filtre et on sèche le précipite résultant (2,0 g). On dissout une portion du précipité (1,2 g) dans suffisamment de tampon (1 % de pyridine et 0,05 % d'acide acétique dans de l'eau) pour obtenir un total de 10 ml. On dépose la solution sur une colonne 2,5 x 99 cm de DEAE-Sephadex A 25
<EMI ID=320.1> <EMI ID=321.1>
Exemple 7
Préparation de l'acétate de L-tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-phënyl-
<EMI ID=322.1>
oxycarbonyl-L-leucine hydratée. On sèche le mélange sur sulfate de magnésium et on le concentre sous vide. On dissout le résidu dans
75 ml de THF et on ajoute la solution résultante goutte à goutte en 35 ion à une suspension refroidie (0[deg.]C) mécaniquement agitée de
<EMI ID=323.1>
<EMI ID=324.1>
contenant 0,25 g d'éther (6) en couronne (18). On ajoute goutte à
<EMI ID=325.1>
maintient le mélange à 0[deg.]C pendant 3 h puis on ajoute goutte
<EMI ID=326.1>
<EMI ID=327.1>
<EMI ID=328.1>
On extrait la solution aqueuse avec de l'éther puis on l'acidifie
à pH 3 par addition d'acide citrique solide. On extrait ensuite la suspension aqueuse acidifiée avec de l'éther. On lave les extraits ethérés réunis avec de l'eau, on les sèche sur sulfate de magnésium
<EMI ID=329.1>
<EMI ID=330.1>
indique la présence d'une certaine quantité de substance de départ n'ayant pas réagi . On dissout le produit dans de l'éther et on ajoute 5,25 ml (0,05 mole) de t-butylamine. On dilue la solution éthérée avec de l'éther de pétrole et on la refroidit
<EMI ID=331.1>
<EMI ID=332.1>
<EMI ID=333.1>
<EMI ID=334.1>
<EMI ID=335.1>
produit de la partie A avec de l'acide citrique et extraction dans l'éther). On refroidit le mélange à -15[deg.]C puis on ajoute 6,7 ml
(0,052 mole) de chloroformiate d'isobutyle et 5,7 ml (0,052 mole) de N-méthylmorpholine. On agite le mélange pendant 10 mn à -15[deg.]C et on fait barboter de l'ammoniac anhydre dans le mélange réactionnel pendant 1 heure. On poursuit l'agitation pendant 4 h
à -15[deg.]C. On verse le mélange réactionnel sur un mélange de
<EMI ID=336.1>
avec de l'éther. Puis on extrait la couche éthérée avec de l'acide citrique 0,75 N et de l'eau, on la sèche sur sulfate de magnésium et on l'évapore sous vide. On cristallise le résidu dans un mélange d'éther et d'éther de pétrole, ce qui donne 5,5 g (48 'il du
<EMI ID=337.1>
<EMI ID=338.1>
C, 58,99 ; H, 9,90 ; N, 11,47
Trouvée, C, 59,17 ; H, 9,66 ; N, 11,21
<EMI ID=339.1>
amide
<EMI ID=340.1>
3 ml de triéthylsilane, on ajoute 5,0 g (0,02 mole) du produit de la partie B. On fait barboter du gaz chlorhydrique sec dans le mélange réactionnel pendant 25 mn. Puis on ajoute de l'éther et on refroidit le mélange. On recueille et on sèche le précipité résultant (3,6 g). On dissout le chlorhydrate recueilli dans 60 ml de DMF. On refroidit la solution résultante à 0[deg.]C et on ajoute 3,99 ml (0,02 mole) de dicyclohexylamine. On agite le mélange à 0[deg.]C
<EMI ID=341.1>
<EMI ID=342.1>
0[deg.]C puis à la température ambiante pendant 24 h. On refroidit le
<EMI ID=343.1>
<EMI ID=344.1>
<EMI ID=345.1>
<EMI ID=346.1>
l'applique sur une colonne 3 x 45 cm de gel de silice qualité 62 <EMI ID=347.1>
<EMI ID=348.1>
réunit les fractions en se basant sur leur profil en CCM et l'on obtient, après évaporation du solvant, 5,7 g (73 %) du composé
<EMI ID=349.1>
<EMI ID=350.1>
alanyl-N�-mêthyl-L-leucylamide.
<EMI ID=351.1>
glacial contenant 1 ml d'anisole, on ajoute 2,0 g du produit de la partie C. On maintient le mélange à la température ambiante pendant
30 mn puis on ajoute de l'éther. On refroidit le mélange, et on recueille le précipité résultant que l'on sèche (1,63 g). On
<EMI ID=352.1>
<EMI ID=353.1>
carbonyl-L-tyrosyl-D-alanyl-glycine. On agite le mélange pendant
15 mn à 0[deg.]C et on ajoute 0,675 g (0,005 mole) de HBT et 1,3 g
(0,005 mole) de DCC. On agite alors le mélange réactionnel pendant
24 h à 4[deg.]C. On recueille le précipité résultant et on concentre le filtrat sous vide. On dissout le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on extrait la solution d'acétate d'éthyle avec du bicarbonate de sodium IN, de l'eau, de l'acide citrique 0,75 N et de l'eau. Puis on sèche la solution d'acétate d'éthyle sur sulfate de magnésium et on la concentre sous vide. On dissout dans du chloroforme le résidu résultant et on dépose la solution chloroformique sur une colonne 3 x 45 cm de gel de silice Woelm de qualité III. On élue
<EMI ID=354.1>
sur leur profil en CCM. Après évaporation du solvant, on obtient 2,3 g (67 %) du composa cité en titre.
<EMI ID=355.1>
Analyse, calculée pour C35H50N608 (682,8) :
C, 61,57 ; H, 7,38 ; N, 12,31
<EMI ID=356.1>
<EMI ID=357.1>
de triéthylsilane, on ajoute 1,8 g (0,003 mole) du produit de la <EMI ID=358.1>
3 h. Puis on dilue le mélange réactionnel avec de l'éther et on le laisse reposer pendant 1 heure. On décante l'éther de l'huile résultante et on dissout l'huile dans de l'éthanol. L'addition d'éther donne un précipité que l'on filtre.et que l'on sèche, ce qui donne 0,9 g du composé cité en titre brut. On dissout le produit dans suffisamment de solution tampon (1 % de pyridine et 0,05 % d'acide formique dans de l'eau) pour faire un total de
5,0 ml. On applique la solution sur une colonne 2,5 x 100 cm de DEAE-Sephadex A-25 (formiate) et on élue avec le même tampon. On réunit les fractions appropriées en se basant sur leur profil
<EMI ID=359.1>
sations dans de l'acide acétique à 10 % et dans un mélange à 75:25 d'eau et d'acétonitrile donnent 0,852 g du composé cité en titre.
<EMI ID=360.1>
Analyse des amino-acides, trouvée : Tyr, 1,02 ; Ala, 1,00 Gly, 1,01 ; Phe, 0,96 ; NH3, 1,03.
Exemple 8
Préparation du chlorhydrate de L-tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-phënyl-
<EMI ID=361.1>
refroidi résultant, on ajoute 2,88 ml (0,022 mole) de chloroformiate d'isobutyle et 2,42 ml (0,022 mole) de N-méthylmorpholine. Après 15 mn, on fait barboter de l'ammoniac anhydre dans le mélange réactionnel pendant 1,5 h. On poursuit l'agitation à -15[deg.]C pendant 2 heures supplémentaires. On verse le mélange réactionnel dans un mélange de glace et de bicarbonate de sodium IN. On extrait la
<EMI ID=362.1>
citrique 0,75 N et de l'eau. Puis on sèche la couche organique sur sulfate de magnésium et on la concentre sous vide. On recristallise
<EMI ID=363.1>
<EMI ID=364.1>
Analyse, calculée pour C16H24N204S (340,4) :
<EMI ID=365.1> <EMI ID=366.1>
cystêinylamide.
On fait barboter du gaz chlorhydrique anhydre dans une solution de 4,1 g (0,012 mole) du produit de la partie A dans
45 ml d'acide acétique glacial, 5 ml d'anisole et 5 ml de triéthylsilane. Au bout de 20 mn, on ajoute de l'éther et l'on recueille le précipité résultant que l'on sèche (3,3 g). On dissout le chlorhydrate recueilli dans 50 ml de DMF et on ajoute 2,92 g (0,012 mole) de dicyclohexylamine, 3,19 g (0,012 mole) de
<EMI ID=367.1>
HBT. On agite le mélange pendant 10 mn à 0[deg.]C et on ajoute 2,47 g
(0,012 mole) de DCC. Au bout de 2 h à 0[deg.]C, on agite le mélange réactionnel à la température ambiante pendant 24 h puis on le refroidit à 0[deg.]C. On filtre le précipité résultant. On concentre le filtrat sous vide et on dissout le résidu résultant dans de l'alcool n-butylique. On extrait la solution avec du bicarbonate de sodium IN et de l'eau puis on la sèche sur sulfate de magnésium et on l'évapore sous vide. On recristallise le résidu résultant dans l'éthanol, ce qui donne 4,95 g (85 %) du composé cité en
<EMI ID=368.1>
<EMI ID=369.1>
C, 61,58 : H, 6,82 ; N, 8,62
Trouvée, C, 61,78 ; H, 6,78 ; N, 8,28
<EMI ID=370.1>
On fait barboter du gaz chlorhydrique anhydre dans une solution de 1,3 g (0,027 mole) du produit de la partie B dans 40 ml d'acide acétique glacial, 4 ml d'anisole et 4 ml de triéthylsilane. Au bout de 20 mn, on ajoute de l'éther au mélange et on recueille
<EMI ID=371.1>
<EMI ID=372.1>
l'acide citrique 0,75 N et de l'eau. Puis on sèche l'extrait sur Sulfata de magnésium et on le concentre sous vide. On dissout le résidu résultant dans de l'acétate d'éthyle et on le purifie par chromatographie sur colonne sèche sur du gel de silice de qualité
62 de chez Grâce and Davidson. On réunit les fractions en se basant sur leur profil en CCM et on les concentre, ce qui donne 1,1 g
<EMI ID=373.1>
<EMI ID=374.1>
<EMI ID=375.1>
C, 60,14 ; H, 6,14 ; N, 10,79
Trouvée, C, 59,95 ; H, 6,24 ; N, 10,53
Analyse des amino-acides, trouvée : Tyr, 0,98 ; Ala, 1,03 ;
<EMI ID=376.1>
D. Chlorhydrate de L-tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-phénylalanyl-S-
<EMI ID=377.1>
<EMI ID=378.1>
<EMI ID=379.1>
<EMI ID=380.1>
Trouvée, C, 56,85 ; H, 6,06 ; N, 11,48 ; Cl, 5,21
Analyse des amino-acides, trouvée ; Tyr, 0,99 ; Ala, 1,01 ;
<EMI ID=381.1> <EMI ID=382.1>
puis 40 ml d'éthanol. On agite le mélange pendant 30 mn puis on le verse sur 2 1 de glace. On ajuste le pH du mélange aqueux à 7 avec de l'hydroxyde de potassium 2N. On entrait le mélange aqueux trois fois avec 400 ml d'éther puis on l'acidifie à pH 3 avec de l'acide citrique solide. On extrait le mélange trois fois avec 500 ml d'éther. On réunit les extraits éthérés, on les extrait, on les sèche sur sulfate de magnésium et on les évapore sous vide jusqu'à un sirop (44,76 g, 84 % du rendement théorique). On dissout le sirop dans 450 ml d'acétate d'éthyle et on ajoute 25,78 ml
<EMI ID=383.1>
frottement, la cristallisation se fait. On recueille par filtration le composé cité en titre, 51,05 g (66 %), p.f. 131-134[deg.]C.
<EMI ID=384.1>
<EMI ID=385.1>
C, 59,35 ; H, 8,39 ; 'il, 7,29
<EMI ID=386.1>
<EMI ID=387.1>
l'éther). On refroidit la solution à -15[deg.]C et on ajoute 18,3 ml
(0,14 mole) de chloroformiate d'isobutyle et 15,4 ml (0,14 mole)
<EMI ID=388.1>
et on fait barboter de l'ammoniac anhydre dans le mélange par un tube de dispersion de gaz pendant 1 heure. On agite le mélange
<EMI ID=389.1>
<EMI ID=390.1>
aqueuse avec de l'éther. On lave l'extrait éthéré avec de l'eau, de l'acide citrique 0,75 N froid et de l'eau, on le sèche sur
<EMI ID=391.1> <EMI ID=392.1>
du produit de la partie B. On fait barboter du gaz chlorhydrique anhydre dans le mélange résultant pendant 27 mn. Puis on verse le mélange dans de l'éther, et on recueille et on sèche le précipité résultant (9,9 g). On dissout le chlorhydrate dans 200 ml dé DMF. On refroidit le mélange à 0[deg.]C et on ajoute 9,9 ml (0,05 mole) de dicyclohexylamine. Après 10 mn d'agitation, on ajoute 6,8 g
<EMI ID=393.1>
phénylalanine et 10,3 g (0,05 mole) de DCC. On agite le mélange
<EMI ID=394.1>
ambiante. On refroidit le mélange à 0[deg.]C et on le filtre. On concentre ensuite sous vide le filtrat résultant jusqu'à une huile. On redissout l'huile dans de l'acétate d'éthyle et on lave la
<EMI ID=395.1>
<EMI ID=396.1>
<EMI ID=397.1>
vide, ce qui donne un résidu qui cristallise dans l'éther, 16,4 g
<EMI ID=398.1>
<EMI ID=399.1>
<EMI ID=400.1>
<EMI ID=401.1>
Trouvée, C, 58,76 ; H, 7,42 ; N, 10,30
<EMI ID=402.1>
A un mélange de 20 ml d'acide acétique glacial, de 2 ml d'anisole et de 2 ml de triéthylsilane, on ajoute 3,5 g (8,56 mmoles) du produit de la partie C. On fait barboter du gaz chlorhydrique anhydre dans le mélange pendant 25 mn. On ajoute de l'éther au mélange et on précipite le chlorhydrate que l'on filtre
<EMI ID=403.1>
<EMI ID=404.1> <EMI ID=405.1>
sulfate de magnésium et on 1[deg.] évapore sous vide. On chromatographie le résidu sur gel de silice Grace and Davidson de qualité 62, ce
<EMI ID=406.1>
<EMI ID=407.1>
Analyse, calculée pour C34H48N608S (700,86) :
<EMI ID=408.1>
Trouvée, C, 58,05 ; H, 6,62 ; N, 11,73
Analyse des amino-acides, trouvée : Tyr, 1,00 ; Ala, 1,01 ; Gly, 0,99 ; Phe, 1,00 ; NH3, 1,01.
<EMI ID=409.1>
A 15 ml de thioanisole, on ajoute 8,3 g (0,012 mole) du produit de la partie D. On refroidit le mélange à 0[deg.]C et on ajoute
<EMI ID=410.1>
<EMI ID=411.1>
<EMI ID=412.1>
<EMI ID=413.1>
<EMI ID=414.1>
<EMI ID=415.1>
de DEAE Sephadex A-25 (forme acétate) préalablement équilibrée
<EMI ID=416.1>
<EMI ID=417.1>
le tampon. On dissout le résidu dans environ 200 ml d'acide acétique
<EMI ID=418.1>
un mélange 3:1 d'eau et d'acëtonitrile donne 6,64 g (83 %) du
<EMI ID=419.1>
<EMI ID=420.1>
<EMI ID=421.1>
<EMI ID=422.1>
<EMI ID=423.1>
<EMI ID=424.1>
L'activité analgésique des composés de formule I est démontrée par l'essai de la plaque chaude sur la sciais. Dans cet essaie une
<EMI ID=425.1> <EMI ID=426.1>
d'essai puis on place la sourie sur-la surface de la plaque chaude. On note alors le temps de latence, en secondes jusqu'à apparition de chacun de deux phénomènes différents. On mesure d'abord le temps de latence jusqu'à ce que la souris soulève ses pattesarriêres et ensuite le temps de latence jusqu'à ce que la souris saute de la surface de la plaque chaude. Un agent présentant une activité analgésique produit une augmentation de ces deux temps de latence par rapport à ceux de souris témoins qui ne reçoivent en injection que le support. Ceci doit se produire pour un intervalle de dose qui ne produit pas d'incoordination ou d'incapacité motrices. Les tableaux suivants donnent les résultats obtenus dans cet essai,
en les comparant avec un témoin, avec l'enképhaline naturelle et avec l'enképhaline naturelle transformée en amide. Le tableau I donne le temps de latence pour le soulèvement de la patte arriêre ; le tableau II donne le temps de latence jusqu'au saut marquant la
<EMI ID=427.1>
pourcentage des animaux dans chaque groupe d'essai qui présentent un effet analgésique. Le critère permettant d'affirmer qu'il y a effet analgésique est le suivant : le temps de latence pour le soulèvement des pattes arrière ou le saut chez un animal traité doit être égal ou supérieur au temps de latence témoin moyen plus deux écarts standard de la moyenne. Chaque résultat fourni dans les tableaux I et II représente la valeur moyenne plus ou moins l'erreur type et le tableau III donne le pourcentage obtenu pour un nombre de souris donnant au moins 9 jusqu'à 40.
<EMI ID=428.1>
<EMI ID=429.1>
<EMI ID=430.1>
<EMI ID=431.1>
<EMI ID=432.1>
<EMI ID=433.1>
<EMI ID=434.1>
<EMI ID=435.1>
<EMI ID=436.1>
<EMI ID=437.1>
<EMI ID=438.1>
<EMI ID=439.1>
Notes
a. A moins d'indication contraire, les essais sont effectués en utilisant un témoin qui est la solution saline. Les numéros "1" et "2" apparaissant en indices supérieurs indiquent que le
<EMI ID=440.1>
<EMI ID=441.1>
présent sous forme de suspension.
c. Les désignations se réfèrent aux composés suivants :
A. Chlorhydrate de L-tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-phénylalanyl-
<EMI ID=442.1>
B. Chlorhydrate de L-tyrosyl-D-alanyl-glycyl-L-phénylalanylL-méthionylamide (Exemple 3)
C. Monoacétate du chlorhydrate(1,25 HC1) du L-tyrosyl-D-
<EMI ID=443.1>
5).
<EMI ID=444.1>
<EMI ID=445.1>
EJ = saut d'évasion
e. Quand on l'essaie à 0,3 mg/kg, le temps de latence pour le soulèvement des pattes arrière est 33,9 + 2,3 secondes, le temps de
<EMI ID=446.1>
réponse analgésique est 10 % pour HPL et 60 % pour EJ.