FI61187C - Foerfarande foer framstaellning av antitumoera 1,2-5,6-dianhydro-3,4-di-0-acylgalaktitolderivat - Google Patents

Description

Γ-ιΤτ-'-Ί Γηΐ KUULUTUSjULKAISU *ΛΛΆΠ «Γφ IBJ (11) UTLAGGNINGSSKRIFT O 1 10/ C (45)Patentti oydnnetty 10 05 1932 Patent meddelat V ' V (51) Kv.lk.3/lm.ci.3 C 0? D 303/16 SUOH |_FINLAND (21) P»M«ttlh»k*imi· — ht«MMtknln| 75361)3 (22) Hikamlsptlvt — Ana(Mcntnpd*c 23· 12.75 (23) Alkupllvi —GHtl|h«tad«g 23.12.75 (41) Tullut luikituksi — Bllvlt offtntllg 25.06.76

Pentti, ja rekisterihallitut NlhtMlulp™*, |. kuuL|ulktl*m pvm.-

Patent- och registerstyrelsen ' Antekan utiagd och uti.tkrifun publicerad 26.02.82

(32)(33)(31) Pyydwty atuolkeu» — Baglrd priorttat 2h.12.7U

Unkari-Ungera(HU) MA-263O

(71) Chinoin Gyogyszer es Vegyeszeti Termekek Gyära RT., To u. 1-5» Budapest IV, Unkari-Ungem(HU) (72) Läszlö Ötvös, Budapest, Sandor Eckhardt, Budapest, Anna Szabolcs, Budapest, Ilona Elekes, Budapest, Zsuzsa Somfai, Budapest, Jänos Sugär, Budapest, Laszlo Institoris, Budapest, Sändor Viräg, Budapest, Ägoston David, Budapest, Unkari-Ungern(HU) (7I4) Oy Kolster Ab (51)) Menetelmä kasvainten vastaisten 1,2-5 ,6-dianhydro-3,U-di-0-asyyli- galaktitolijohdannaisten valmistamiseksi - Förfarande för framställning av antitumöra l,2-5,6-dianhydro-3,^-di-0-acylgalaktitolderivat

Keksinnön kohteena on menetelmä kasvainten vastaisten 1,2-

5,6-dianhydro-3,4-di-0-asyyligalaktitolijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava I

1 /° CH ^ I 0 I "

CH-O-C-R

I I

CH-O-C-R

I ; CH>.

I> CH/ i 2 61187 jossa R on 1-3 hiiliatomia sisältävä alkyyli, joka voi olla substi-tuoitu halogeenilla fenyylillä tai metoksikarbonyylillä? syklohek-syyli, fenyyli tai 2-furyyli.

Diepoksidi-tyyppiset alkoholien dianhydrojohdannaiset, kuten L-l,2,3,4-diepoksibutanoli, erikoisesti kuusiatomisten alkoholien johdannaiset, kuten 1,2-5,6-dianhydro-D-mannitolin ja 1,2-5,6-di-anhydro-dulsitolin johdannaiset ovat hyvin tunnettuja niiden anti-tumoorisen vaikutuksen vuoksi. (Jarman, M. Ross, W. X. j, The formation of epoxides from substituted hexitols, Carbohydrate Research 9 (1969) 139? Jarman, M. Ross W. CJ. Formation of 1,2- 5,6-dianhydro-D-mannitol from 1,6-dibromo- and 1,6-dimethanesulpho-noksy-l,6-dideoksy-D-mannitol, Chem. Ind. 42 (1967)1788? Elson, A. L., Jarman, M. Ross W. C. J., Toxity, haematological effects and antitumor activity of epoksides derived from disubstituted hexitols, Eurp. J. Cancer 4, (1968) 617. Tehokkain niistä on 1,2-5,6-dianhydro-dulsitoli (Nämeth, L. , Tnstitöris, L. , Somfai, S. , GS.1, F. , Pälyi, 1., SugSr, J., Csuka, O. Szentirmay, Z., Kellner, B., Pharmacology and antitumoral effect of dulcitoldiepoxside (1,2-5,6-dianhydro-galactitol, NSC-132 313), Cancer Chemotherapy Rep, T. 56 (1972) 593? InstitÖris, L., NSmeth, L., Somfai, s., BSl, F., Hercsel, I., Zaka, 5., Kellner, B., Investigation into the Correlation of Cytostatic Activity with the in vitro Diepokside Formation on some Terminally Substituted Hexitols, Neiplasma 17 (1970), 1, 15-24. Kuitenkin vapaiden hydroksyyliryhmien johdosta ja epoksidirenkaiden välisten intranukleaaristen reaktioiden vuoksi, vieläpä ilman biologista väliainetta, yhdisteessä tapahtuu muutoksia puskuroidussa vesiliuoksessa. Nämä reaktiot muodostavat sytostaattisen vaikutuksen suhteen epäedullisia tai myrkyllisiä metaboliitteja.

yhdisteen suojaamiseksi odottamattomilta muutoksilta, siihen voidaan lisätä suojaryhmiä, jotka poistuvat biologisessa ympäristössä ja muodostuu diepoksiyhdiste aktiivisena metaboliittina.

Tämän lisäksi hydroksyyliryhmiin liittyneet suojaryhmät vaikuttavat useissa tapauksissa edullisesti erittäin vesiliukoisen heksitoli-diepoksidin liukoisuuteen suurentaen mainitun yhdisteen sytostaattista vaikutusta. Eräillä näistä yhdisteistä suoritetut eläinkokeet osoittavat, että niillä on vielä eräitä muita edullisia vaikutuksia, esim. myrkyllisyyden voimakas aleneminen ja näillä aineilla voidaan edullisesti vaikuttaa kasvainspektrin muutoksiin. Keksinnön mukainen menetelmä kohdistuu uusiin yhdisteisiin, joita ei tähän menne s ·* 3 611 87 sä ole valmistettu, niiden valmistamiseen. Tähän mennessä ei kirjallisuudessa tunneta 1,2-5,6-dianhydro-D-mannitolin ja 1,2-5,6-di-anhydrodulsitoilin johdannaisia, jotka on monoasyloitu 3- tai 4-asemassa tai diasyloitu 3,4-asemassa. Diasyylijohdannaisissa voi olla kaksi samanlaista tai erilaista asyylioksiryhmää. Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että 1,2,5,6-dianhydro-galaktitoli asyloidaan kaavan R-CO-X mukaisella asylointiaineella, jossa kaavassa R merkitsee samaa kuin edellä, X on halogeeni tai OR1, jossa R' on alkyyli-, aryyli-, aralkyyli- tai -CO-R-ryhmä tai p-nitrofenyyliryhmä, jolloin reaktio suoritetaan edullisesti bentseenissä, tolueenissa tai dikloorietaanissa, edullisesti lämpö-tilavälillä huoneen lämpötilasta 50°C:seen ja käyttäen happoa sitovana aineena vedetöntä trietyyliamiinia, pyridiiniä tai kalium-karbonaattia, jolloin ylimäärin käytetty orgaaninen emäs voi myös toimia liuottimena. Esillä olevan keksinnön mukaista menetelmää käytettäessä valmistetaan uudet, antitumoorisen vaikutuksen omaavat yhdisteet seuraavalla tavalla: 1 mooli 1,2-5,6-dianhydrogalaktitolia liuotetaan orgaaniseen liuottimeen, edullisesti bentseeniin tai sen homologiin suhteessa 40 tilavuusyksikköä painoyksikköä kohti. Liuokseen lisätään sitten 2,0-3,1 moolia orgaanista happoa sitovaa emästä tai epäorgaanista happoa sitovaa ainetta. Määrätyissä tapauksissa happoa sitovaa ainetta, esim. trietyyliamiinia tai pyridiiniä voidaan käyttää suuri ylimäärä, jos ylimäärä toimii liuottimena. Happoa sitovaa ainetta sisältävään dianhydrogalaktitoliliuokseen lisätään noin 2 moolia asyloivaa ainetta annoksittain 0,5-molaari-sena liuoksena sellaisella nopeudella, että lämpötila pysyy seoksen kiehumispisteen alapuolella. Edullisia lämpötila on 20-50°C. Reaktio-seosta sekoitetaan sitten tässä lämpötilassa noin 10-180 minuuttia. Eräissä tapauksissa noin 10-24 tunnin jälkisekoitus voi olla tarpeen. Jatkokäsittely riippuu käytetyn asylointiaineen tyypistä.

a) Käytettäessä happohalogenidia asyloivana aineena muodostuneet suolat suodatetaan erilleen reaktioseoksesta ja pestään vedettömällä orgaanisella liuottimena, edullisesti bentseenillä. Liuos väkevöidään pieneen tilavuuteen 50°C:n alapuolella, laimennetaan sitten metanolilla. tai jollain muulla liuottimella, edullisesti eetterin ja metyyliasetaatin seoksella tai muulla seoksella ja jäähdytetään. Muodostuneet kiteet suodatetaan erilleen. Väkevöimäl- 61187 4 lä emäliuos tai käyttäen saostavaa liuotinta voidaan muodostaa myös toinen saanto kiteistä tuotetta. Tämä on noin 10-20 % alkuperäisestä tuotteesta.

Tuotteet - ensimmäinen ja toinen saanto - puhdistetaan uudel-leenkiteytyksellä. Toinen saanto vaatii useimmin toistetun uudel-leenkiteytyksen.

b) Käytettäessä happoanhydridejä tai -estereitä asyloivana aineena väkevöidään reaktion päätyttyä reaktioseos noin puoleen sen alkuperäisestä tilavuudesta ja reaktioseos lisätään noin 2-3 kertai-seen tilavuusmäärään jään ja veden seosta sekoittaen. Vesifaasi eristetään orgaanisesta faasista. Jos vesifaasin reaktio on hapan, orgaaninen faasi pestään neutraaliksi, edullisesti uutettuna natriumvety-karbonaattiliuoksella (5-10-%). Kun orgaaninen faasi on erotettu pesuliuoksesta se väkevöidään kuiviin tyhjiössä. Jäännöstä käsitellään edelleen kohdan a) mukaisesti.

Lähtöaineena käytetään 1,2-5,6-dianhydrogalaktitolia (sulamispiste 98,5°C, - +2° vedessä, c = 1,25). Se valmistetaan sinänsä tunnettujen menetelmien avulla (Jarman, M, Ross, W. C. J., Formation of 1,2-5,6-dianhydro-D-mannitol from 1,6-dibromo- and 1,6-dimethane-sulphono-l,6-dideoxy-D-mannitol, Chem. Ind. 42 (1967) 1789.

Väliaineena tai liuottimena voidaan käyttää sellaisia vedettömiä orgaanisia liuottimia, jotka eivät vaikuta kemiallisesti reak-tioaineosiin. Suositeltavia liuottimia ovat alifaattisten, sykloal-kyyli- ja aromaattisten hiilivetyjen homologit sekä hiilivetyhalo-genidit. Myös orgaaninen, happoa sitova emäs, esim. trietyyliamiini tai pyridiini voi toimia liuottimena, jos sitä käytetään sopivasti ylimäärin. Suodattamalla erotettu suola täytyy pestä vedettömällä liuottimena, jona tarkoituksenmukaisesti käyttäen samaa kuin aikaisemmin liuotinseosten muodostumisen estämiseksi. Tällaiset liuotin-seokset aiheuttavat vaikeuksia reaktioseosta valmistettaessa. Happoa sitovana aineena voidaan käyttää tertiäärisiä amiineja, trialkyyli-amiineja, näiden homologeja ja alkalikarbonaatteja. Trietyyliamiini on suositeltava happoa sitova aine, koska se liuottaa hyvin 1,2-5,6-dianhydroheksitolia ja saostuneet suolat voidaan erottaa helposti.

Asylointi voidaan yleensä suorittaa 20-50°C:n lämpötilassa, paitsi käytettäessä happohalogenideja, jotka on substituoitu suuril- 5 61187 la ryhmillä OC -asemassa, jolloin reaktioajan täytyy olla 1-3 tuntia 50°C:ssa hyvän saannon saavuttamiseksi. Lämpötila ei saa olla korkeampi kuin liuottimen kiehumispiste. Lämpötilaa säädetään yleensä asyloivan aineen syötön avulla. Ulkoinen jäähdytys on tarpeen vain, jos asylointiainetta lisätään liian suurella nopeudella.

On oleellista, että lähtöaineet, liuottimet, happoa sitovat aineet ja asyloivat aineet ovat täysin vedettömiä. Ennen niiden käyttöä ne täytyy tutkia ja tarvittaessa tislata ja puhdistaa. Keksinnön mukaisesti valmistettujen diepoksi-diasyyli-galaktitoli-johdannaisten antitumoorinen vaikutus tutkittiin istutettuja eläin-kasvaimia käyttäen. Jokainen näin valmistettu yhdiste rajoittaa istutettujen kasvaimien kasvua annostuksen määrästä riippuen.

Vertailu suoritettiin 1,2-5,6-dianhydro-3,4-diasetyyligalaktitolin ja alkuperäisen 1,2-5,6-dianhydro-galaktitolin (DAD) toksikologisten ja antitumooristen vaikutusten välillä erilaisissa koesysteemeissä. Symbolit: DAD = 1,2-5,6-dianhydrogalaktitoli

Diac-DAD = 1,2-5,6-dianhydro-3,4-(diasetyyli)-galaktitoli DS-DAD = 1,2-5,6-dianhydro-3,4-di-(- β-karbometoksipropio-galaktitoli FB-DAD = 1,2-5,6-dianhydro-3,4-di( ^-fenyylibutyryyli)-galaktitoli FP-DAD = 1,2-5,6-dianhydro-3,4-di(β-fenyylipropionyyli)-galaktitoli CA-DAD = 1,2-5,6-dianhydro-3,4-di(klooriasetyyli)-galaktitoli Akuutti myrkyllisyys

Akuutti myrkyllisyys tutkittiin sveitsiläisillä hiirillä. Kuolemantapaukset havaittiin yhden annoksen jälkeen 21 vuorokauden kuluessa.

Taulukko I.

Akuutti myrkyllisyys

Yhdiste Molekyylipaino LD^i .p. LD^gi.p. LD50P’°" (mg/kg) (m-mooli/kg) (mg/kg) DAD 146 15 1,03 18

Diac-DAD 230 34 1,48 50 DS-DAD 347 120 3,20 100 FB-DAD 438 110 2,52 100 FP-DAD 410 160 3,8 ei määrätty 6 6118 7

Myrkyllisyys on likimain kääntäen verrannollinen molekyyli-painon kasvuun. Kuolema tapahtui intraperitoneaalisen samoin kuin oraalisen toksikoosin vaikutuksesta 5.-9. päivänä siitä, kun tutkittava yhdiste oli annettu. Tämä tarkoittaa myös sitä, että kaikki kyseiset yhdisteet voivat absorboitua hyvin myös gastrointes-tinaaliseen alueeseen.

Taulukko II

Myrkkyvaikutuksen kerääntyminen

Yhdiste Annos Kuolleisuus Kumulatiivinen (mg/kg) (yksilöä) jäännös (%) DAD ixLDgQ 18 9/10 90 1xLD80/2 9 0/10 0 2xLDg0/2 9+9/48h 4/10 0 45 2xLDq0/2 9+9/96h 0/10 40 0

Diac-DAD lxLD80 38 5/6 83 1xLDq0/2 19 0/6 0 2xLDq0/2 19+19/48h 1/6 17 20 2xLDg0/2 l9+19/96h 0/6 0 0 DS-DAD 1xLD80 L1° 5/6 83 1xLDq0^2 56 0/6 0 2xLDq0/2 55+55/40h 0/6 0 0 2.LDq0/2 55+55/96h 1/6 17 20 CA-DAD 1xLD80 5/6 83 lxLDg0^2 24 0/6 0 2xLDg0/2 24+24/48h 0/6 0 0 2xLD80/2 55+55/96h 1/6 17 20 61187 b) Intramuskulaarinen Walker 256-karslnosarkooma 20 miljoonan syöpäsolun istutuksen jälkeen seurasi kerta-käsittely. Terapeuttisen indeksin määritykseen käytettiin pienintä annosta, joka antoi suuremman kuin 90-prosenttisen kasvaimen estovaikutuksen 10. päivänä suoritetussa tutkimuksessa.

Taulukko IV

Vaikutus intramuskulaariseen Walker 256-karsinosarkoomaan

Yhdiste Annos Kasvaimen esto (%) Terapeuttinen Raja-annos (mg/kg indeksi (mg) (ld50/ed90)

Diac-DAD 1x5 97 1 x 2,6 94 7,6 1 x 1,75 94 1 x 1,25 4 34/1,70 = 10,4 FD-DAD 1 X 30 92 1 x 15 92 22 1 x 10 97 110/10 = 11 22 1 x 7,5 73 1 x 5,0 51 DS-DAD 1 x 30 95 1 x 15 90 120/7,5 = 16 19 1 x 7,5 94 1 x 6,0 53 FP-DAD 1 X 30 98 1 x 15 99 1 x 10 100 160/7,5 = 21 18 1 x 7,5 90 1x5,0 88 DAD 1 x 40 92 1 x 2,0 98 1 x 1,5 96 1 x 1,25 80 15/1,5 = 10 10,3 1 x 1,0 53 1 x 0,75 79 61187 8

Taulukko IV jatkuu

Vaikutus intramuskulaariseen Walker 256-karsinosarkoomaan CA-DAD 1 x 10 98 1x5 91 45/2,5 = 18 8,3 1 x 2,5 96 1 x 1,25 4

Kaikki tutkitut yhdisteet olivat erittäin tehokkaita. Yhdisteillä Diac-DAD ja CA-DAD sekä substituoimattomalla DAD:llä raja-annos on 8-10 mm ja yhdisteillä DR-, FB- ja FP-DAD kaksinkertainen. Diasyylidiepoksien merkittävä myrkyllisyyden aleneminen saatiin aikaan ainoastaan kohtalaisen antitumoorisen vaikutuksen pienenmisen kustannuksella.

Vaikutus Hardlng-Passen subkutaanlseen melanoomaan Hitaasti kasvava, vain hieman sensitiivinen kasvain muodostettiin hiiren elimistöön siirtämällä siihen palanen kasvainkudosta. Käsittely aloitettiin 24 tunnin kuluttua siirrosta. Tulokset määritettiin kokeen 21. päivänä.

Taulukko V

Vaikutus Harding-Passeyn subkutaanlseen melanoomaan

Yhdiste Annos Kasvaimen Vertailu) Muutos Kuoleman Tutkimus- (mg/- paino esto paino pernan tapausten päivä kg/- (mg) (%) (mg) painos- lukumäärä aika) sa (%) DAD 5x2,5/72h 181 43 320 -30 0/6 21 16x2,5/24h 73 85 493 -42 0/6 25 12x5/96h - 100 493 -30 1/6 20

Diac- 14x8/24h 240 90 2 555 -78 2/6 20 DAD 13x6/24h 197 76 812 -62 0/6 18 14x4/24h 697 73 2 555 -63 0/6 20 13x4/24h 278 66 812 -29 0/6 18 14x2/24h 1 085 58 2 555 -66 0/6 20 CA-DAD 16x8/24h 307 28 3 317 -72 0/6 24 15xl0/24h 215 86 1 527 -54 2/6 23 FB-DAD 13x20 425 73 1 572 - 6 0/6 18 9 61 1 87

Taulukko V jatkuu

Vaikutus Hardlng-Passeyn subkutaaniseen melanoomaan DS-DAD 8x30/24h 323 90 3 317 -20,0 2/0 24 FP-DAD 16x25/24h 430 87 3 317 -60 1/6 24 5x30/24h 208 87 1 572 -11 1/6 24

Uudet keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet osoittautuivat tehoavan tämän hitaasti kasvavaan, vain heikosti sensitiiviseen kasvaimeen paljon paremmin kuin ne alkuperäiset diepoksi-yhdisteet, joihin niitä on verrattu.

Taulukko VI

_Vaikutus Guärin-karsinoomaan__

Yhdiste Annos Kasvaimen Pernan paino Kehon paino (mg/kg/aika) paino esto (mg) (%-muutos) (%-muutos) (g) (%)

Diac-DAE 8xu/24h 4,66 1 087 75,2 +1,8 +25,4 +3,16 +308 8x6/24h 6,07 _ 857 -19,8 +23 . 67,7 + 15,5 >0 8x4/24h 18,0 943 3,0 +7,5 -12,0 +14 +165

Vertaili 18,7 - 1 068 - +29 +9,4 t355 FD-DAD 14x20/24h 4,3 480 89.0 -65,0 +48 +2,8 FP-DAD 14x20/24h 1,74 435 96.0 -68,0 -1,2 t1'1 DS-DAD 14x20/24h 2,88 543 93.0 -60 -6,7 +2,6

Vertaili 39,18 1 370 - +29 +10,1 10 61187

Yhdisteen Diac-DAD vaikutus on suoraan verrannollinen käytettyyn annostukseen. Muiden aineiden vaikutus on samalla annosmäärällä yhtä edullinen.

Yhteenvetona voidaan sanoa, että tutkittujen diepoksigalakti-toli-yhdisteiden myrkyllisyys osoittautui pienemmäksi kuin alkuperäisten epoksidien. Näiden aineiden antitumoorinen vaikutus voidaan osoittaa lukuisten siirrettävien kasvaimien avulla (Ehrlich/asklites, Walkerkarrinosartooma, Harding-Passey-melanooma, Buerinkarsinooma) ja eräissä tapauksissa niiden vaikutus oli suurempi kuin alkuperäisen t | yhdisteen. Terapeuttiset indeksit laskettiin sen vaikutuksen mukaan, joka eri yhdisteillä oli Walker-karsinosarkoomaan. Terapeuttiset aineet absorboituivat hyvin ruuansulatuskanavassa. Antitumoorisen i vaikutuksen omaavia uusia 1,2-5,6-dianhydrcgalaktitolin asyylijohdannaisia voidaan terapeuttisesti käyttää eri tavoin. Oraalisesti annettaessa aktiivista aineosaa tai sen seosta yleisesti käytettyjen lisäaineiden, kuten laktoosin, tärkkelyksen ja talkin kanssa käytetään esimerkiksi tabletteina ja suonensisäisesti annettaessa liuoksena tai suspensiona.

Intraperitoneaalisesti tai intrasevitaalisesti annettaessa käytetään liuosta tai suspensiota.

Paikallisesti käytettäessä yhdistettä levitetään iholle tai muuhun käsittelykohtaan sellaisenaan tai yhdessä tavanomaisten anti-bakteeristen ja haavan tervehtymistä edistävien aineiden kanssa (sulfonamidit, kortikoidit, vitamiinit).

Yhdisteen pitoisuus eri valmisteissa on seuraava: liuoksissa 1-10 % suspensioissa 1-70 % ja tableteissa 20-90 %.

Seuraavat esimerkit kuvaavat valmistusmenetelmää .

Esimerkki 1 1,2-5,6-dianhydro-3,4-diasetyyligalaktitolin valmistus käyttäen asetyylibromidia asyloivana aineena Dianhydrogalaktitolia (1,46 g, 10 mmoolia) absoluuttisessa bentseenissä (60 ml) sekoitettiin huoneenlämpötilassa 10 minuuttia kolmekaulaisessa, 100 millilitran vetoisessa pullossa, joka oli varustettu sekoittajalla, jäähdyttäjällä ja tiputussuppilolla. Tämän jälkeen lisättiin absoluuttista trietyyliamiinia (2,8 ml, 20 mmoolia) 11 61187 tai vedetöntä kaliumkarbonaattia (1,4 g, 20 mmoolia) ja asetyylibro-midia (2,46 g, 20 millimoolia) edellämainittuun liuokseen ja sekoitusta jatkettiin huoneenlämpötilassa vielä 20 minuuttia.Kiteinen tri-etyyliamiini suodatettiin sitten erilleen G3-lasisuodatinta käyttäen ja pestiin perusteellisesti absoluuttisella bentseenillä. Yhdistetyt suodokset väkevöitiin tyhjiössä ja absoluuttista metanolia (5 ml) ja absoluuttista eetteriä (15 ml) lisättiin saatuun siirappimaiseen aineeseen. Reaktioseos jäähdytettiin sitten, jolloin tapahtui välittömästi kiteytyminen. Liuos pidettiin jääkaapissa yön yli, ja muodostuneet kiteet suodatettiin erilleen ja kiteytettiin uudestaan metano-lista. Otsikossa mainittu yhdiste kiteytyi valkeina neulasina. Saanto oli 1,65 g (71,7 %), sulamispiste 91°C. Rf = 0,63 (määritetty bentsee-ni/metanoli-liuoksesta, suhde 90:15)

Analyysit: C laskettu = 67,79 %, C mitattu = 67,75 % H" =5,0%,H" =5,3%.

Esimerkki 2 1,2-5,6-dianhydro-3,4-diasetyyligalaktitolin valmistus käyttäen etikkahappoanhydridiä asyloivana aineena Dianhydrogalaktitolia (1,46 g, 10 mmoolia) absoluuttisessa benseenissä (60 ml) tai vedettömässä tolueenissa sekoitettiin huoneenlämpötilassa 10 minuuttia kolmekaulaisessa, 100 millilitran vetoisessa pullossa, joka oli varustettu sekoittajalla, jäähdyttäjällä ja tiputussuppilolla, Absoluuttista trietyyliamiinia (2,8 ml, 20 mmoolia) ja juuri tislattua etikkahappoanhydridin liuosta (2,4 g, 2 ml, 20 mmoolia) bentseenissä (5 ml) lisättiin sitten tähän liuokseen ja sekoitettiin huoneenlämpötilassa yksi tunti sekä 50°C:ssa edelleen kaksi tuntia. Liuos väkevöitiin kuiviin tyhjiössä, liuotettiin veteen (20 ml) ja uutettiin bentseenillä (30 ml). Bentseenifaasi pestiin NaHCO^-liuoksella (10-%:inen), kuivattiin MgSO^:lle, suodatettiin ja väkevöitiin. Saatuun siirappimaiseen aineeseen lisättiin absoluuttista eetteriä (15 ml) ja absoluuttista metanolia (10 ml).

Seos jäähdytettiin sitten, jolloin kiteytyminen tapahtui välittömästi. Liuosta pidettiin jääkaapissa yön, ja muodostuneet kiteet suodatettiin erilleen ja kiteytettiin uudestaan metanolista. Otsikossa mainittu yhdiste kiteytyi valkoisina neulasina.

Saanto: 1,65 g (71,7 %), sulamispiste = 91°C Rf = 0,63 (benseeni: metanoli = 90:15).

12 611 87

Esimerkki 3 1.2- 5,6-dianhydro-3,4-diasetyyligalaktltolin valmistus käyttäen p-nitrofenyyliasetaattia asylolvana aineena Dianhydrogalaktitolia (1,46 g, 10 mmoolia) absoluuttisessa bentseenissä (80 ml) tai vedettömässä trikloorietaanissa (60 ml) sekoitettiin huoneenlämpötilassa 10 minuuttia kolmekaulaisessa 10 ml:n vetoisessa pullossa, joka oli varustettu jäähdyttäjällä, tiputussuppi-lolla ja sekoittajalla. Liuokseen lisättiin sitten absoluuttista tri-etyyliamiinia (2,8 ml, 20 mmoolia) ja p-nitrofenyyliasetaattia g, 20 mmoolia) ja näitä sekoitettiin yhdessä 50°C:ssa 6 tuntia. Liuosta pidettiin sitten huoneenlämpötilassa yön yli. Liuos uutettiin vedellä (20 ml) ja kuivattiin MgSO^:lla. Saatuun siirappimaiseen aineeseen lisättiin absoluuttista eetteriä (15 ml) ja seos jäähdytettiin. Sitä pidettiin jääkaapissa yön yli, ja muodostuneet kiteet suodatettiin erilleen G3-lasisuodatinta käyttäen. Tuotteen paino oli 2,5 g. Sulamispiste oli 72-78°C. Saadut keltaiset kiteet puhdistettiin seuraavasti: Kiteille lisättiin bentseeniä (20 ml) ja dietyyli-aminopropyyliamiinia. Tunnin kuluttua liuos uutettiin vedellä (10 ml) ja vesifaasin poistamisen jälkeen uutos uusittiiin. Bentseenifaasi kuivattiin MgSO^:lla ja väkevöitiin. Saatuun siirappiin lisättiin absoluuttista eetteriä (15 ml) ja abfiDluuttista metanolia (5 ml). Liuosta pidettiin jääkaapissa yön yli ja suodatettiin sitten. Paino: 1,58 g (69 %) , sulamispiste = 90°C.

Rf = 0,63 (bentseenirmetanoli = 90:15)

Analyysi: C laskettu 67,79 %, C mitattu 67,75 % H” 5,0%,H" 5,3%.

Esimerkki 4 1.2- 5,6-dianhydro-3,4-di-klooriasetyyligalaktitolin valmistus Dianhydrogalaktitolia (5 g, 34 ml) absoluuttisessa bentseenissä (150 ml) sekoitettiin 4 tuntia kolmikaulaisessa 100 ml:n vetoisessa pullossa, joka oli varustettu jäähdyttäjällä, tiputussuppilolla ja sekoittajalla. Seokseen lisättiin sitten absoluuttista pyridiiniä (5,7 ml) ja liuos, joka sisälsi 6 ml juuri tislattua klooriasetyyli-kloridia absoluuttisessa bentseenissä (6 ml), lisättiin tipottain 5 minuutin kuluessa. Liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 30 minuuttia ja trietyyliamiinihydrokloridi suodatettiin erilleen G3-lasisuo-datinta käyttäen ja pestiin huolellisesti bentseenillä. Yhdistetyt suodokset väkevöitiin tyhjiössä ja saatuun siirappiin lisättiin 13 61187 absoluuttista eetteriä (15 ml) ja absoluuttista metanolia (5 ml). Reaktioseos jäähdytettiin sitten, jolloin tapahtui kiteytyminen välittömästi. Liuosta pidettiin jääkaapissa yön yli, ja muodostuneet kiteet suodatettiin erilleen sekä kiteytettiin uudestaan metanolista. Otsikon yhdiste kiteytyi valkoisina neulasina. Paino = 4,4 g (43 %), sulamispiste = 102°C.

Analyysi: C laskettu = 40,0 %, C mitattu = 40,0 % H” = 4,0% H " =4,4%

Esimerkki 5 1,2-5,6-dianhydro-3,4-dlbentsoyyligalaktitoli

Dianhydrogalaktitolia (1,46 g, 10 mmoolia) absoluuttisessa bentseenissä (60 ml) tai vedettömässä trietyvliamiinissa (60 ml) sekoitettiin huoneenlämpötilassa 10 minuuttia kolmikaulaisessa, 200 ml:n vetoisessa pullossa, joka oli varustettu sekoittajalla, jäähdyt-täjällä ja tiputussuppilolla. Tämän jälkeen lisättiin absoluuttista trietyyliamiinia (2,8 ml, 20 mmoolia) ja sitten tipottain 5 millilit-ran liuos juuri tislattua bentsoyylikloridia (2,8 g, 20 mmoolia, 2,32 ml) absoluuttisessa bentseenissä 10 minuutin aikana. Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 1 tunti ja sitten 50°C:ssa 1 tunti, ja sitä pidettiin huoneenlämpötilassa yön yli. Muodostuneet trietyyli-amiinihydrokloridi-kiteet suodatettiin erilleen G3-lasisuodatinta käyttäen ja pestiin huolellisesti bentseenillä. Yhdistetyt suodokset väkevöitiin tyhjiössä ja saatuun siirappiin lisättiin absoluuttista metanolia (10 ml). Reaktioseos jäähdytettiin sitten ja muodostuneet kiteet suodatettiin erilleen ja kiteytettiin uudestaan bentseeni: petroolieetteristä.

Paino: 2,7 g (76,2 %) , sulamispiste = 171°C.

Analyysi: C laskettu = 67,79 %, C mitattu = 67,9 % H" =5,0%,H" =5,2%

Rf = 0,75 (bentseeni: metanoli = 90:15).

Esimerkit 6-13

Seuraavat esimerkit 6-13 on selvyyden vuoksi esitetty taulukoituina, jolloin kaikki lopputuotteet valmistettiin edelläolevien esimerkkien mukaisesti. Kaikki karakteristiset piirteet voidaan löytää seuraavista taulukoista.

14 61 1 87

<N tn 00 rH

VO LH Γ"· Γ'·*· VO

' ^ s s % I

^ O 0 0 0 *0 I . u in ib i «p * h ui to (J ή m o> in oo in m vo 3 -H ·η Ο θ' vo r» o m oo o oo

W K Ql " rH rH rH

Bin " " Tn

r—I in TT

c ^ ^ %

ra ^ oo m (N in o rH vo rH

ib <jp oo vo tr r~~ vo vo vo tr tn —'

-P

Jm o m m r~ Q t^iooomror-cNin 4J C ^ ·» ^ h v v *«.

Q ·Η Ό ^ 1—1 VO rH O CN CN rH

5 « Dl rH rH rH

£h A w ? ^.h ?t ?, ?2 τί tr tr rH tr o tr -h tr ib tr tö tr ro tr m ** *" Q ' ·Η t I—I ' & r O' "(O * <0

m-rim-P η α r> Sh m-h m-h m .h m rH

6q is ie ti 6¾ ht tϊ tR

|5 1¾ l-H |.s £3 ϊί 1¾ li Ig* |§ It II !& 13 SS1 Is.h ltd IS IS 13·* Ij?

?l φ Hz ?| H fäs 'U

m vo r-ι vo C vo 43 -h voS-rt vo S vo K VOiO-HVOm w m t m-h m nj 3 in § 3 in Sh in Sh in ^ ^ in h 4 AfS ΛΥ3 ΛΥ5 ΛΥΒ ΛΥ3

£ hS Hä H^Sl rH Q. & rH^’S r-H<Q. ‘S H^ & H »S

- .

I s 3 <ö Ti § m o o o g td '—tr. s vo b b (N oo l--:-d-0- m o K rl O CHS E S E E ms -1----——- η λ m tr E (O * *· E -h tr o o o co o — I-H «HCMOOr^VOCNEs --.-m-3--m— ^ Cd 00 CN 00 (N VO vo σι CP *» ·» ·* *>. %. *,*.

'-"CP rH CN H CN m CNCN

———— Ή , rH . _ iH <H

« -5 rH -Iti) i t -h td 1¾¾

s 1 | L 1|| IL 13 13 SLIP

m -h tn >i oiJ ρ a 3 g o 'o cp cp ijäo λλ vi

rHO -H pH "β ·Η (3 -H Ti φ·Η·Η 3>i 53 >1 3 Q H O P O

J» t, I fä n nt v&8 v|ä Via v|& ai s

P *$| *2 P & 3 ^3» S C QT_ &3 ^ΛΡ *3. Λ P ”V3 3 in1 c rH

3-- S ^ vo

H E (O <N CN

H ·Η 4J -H -H * * > m il i h r—t H' o o m tr o 3J <D O 2 g ή n» ro m rH = = 5 3 ·5 b h S m ν' rH vo vo 2 m >, -P E vo tr oo rH o tr tr 3·η:0£3'=' >· ' « - t v ^ r^p-Plg^ S'-1 1/1 1/1 1/1 1-1 ~ 1-1 S w ^ 81 ^ vo n- oo σι o rH «n m

- — — eH- - -iH rH I-H

Claims (1)

15 61187 Patenttivaatimus Menetelmä kasvainten vastaisten l,2-5,6-dianhydro-3,4-di-O-asyyligalaktitolijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava I ch2 CH'/^0 CH-O-C-R CH-O-C-R I CH 0 \ O CHf jossa R on 1-3 hiiliatomia sisältävä alkyyli, joka voi olla substi-tuoitu halogeenilla, fenyylillä tai metoksikarbonyylillä; syklo-heksyyli, fenyyli tai 2-furyyli, tunnettu siitä, että 1,2-5,6-dianhydrogalaktitoli asyloidaan kaavan R-CO-X mukaisella asylointiaineella, jossa kaavassa R merkitsee samaa kuin edellä, X on halogeeni tai OR1, jossa R' on alkyyli-, aryyli-, aralkyyli-tai -CO-R-ryhmä tai p-nitrofenyyliryhmä, jolloin reaktio suoritetaan edullisesti bentseenissä, tolueenissa tai dikloorietaanissa, edullisesti lämpötilavälillä huoneen lämpötilasta 50°C:seen ja käyttäen happoa sitovana aineena vedetöntä trietyyliamiinia, pyri-diiniä tai kaliumkarbonaattia, jolloin ylimäärin käytetty orgaaninen emäs voi myös toimia liuottimena.