JP2008540362A

JP2008540362A - 抗腫瘍性テトラヒドロピリミジン

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Publication number: JP2008540362A
Application number: JP2008509372A
Authority: JP
Inventors: ホセ、フェルナンド、レジェス、ベニテス; マリア、デル、カルメン、クエバス、マルチャンテ; ダビ、モンタルボ、ロボ; マリア、ヘスス、マルティン、ロペス; マリア、クリスティーナ、マテオ、ウルバノ; アンドレス、フランセスク、ソリョーソ
Original assignee: Pharma Mrs sA
Current assignee: Pharma Mrs sA
Priority date: 2005-05-03
Filing date: 2006-05-03
Publication date: 2008-11-20
Also published as: US20100216817A1; CN101171236A; EA200702397A1; KR20080007640A; IL186781A0; EA013160B1; NZ563054A; EP1879870A1; CA2605784A1; AU2006243407A1; MX2007013683A; WO2006117197A1; NO20076162L

Abstract

迷路サンゴ、メアンドリニダエ科メアンドリナ属メアンドリテス種から得られる式（Ｉ）の抗腫瘍性化合物またはその誘導体は、抗腫瘍薬として有用である。

（式中、ｘはＯ、ＳまたはＮｒａである）

Description

発明の背景

発明の分野
本発明は、新規な抗腫瘍性化合物、それらを含有する医薬組成物およびそれらの抗腫瘍剤としての使用に関する。

背景技術
Kourany-Lefoll et al. (J. Org. Chem. 1992, 57, 3832-3835）は、二環式１，２，３，４−テトラヒドロ−６Ｈ−ピロロ［１，２−α］ピリジニウム環系の初めての天然種であり、深海海綿フロエオディクチョン（Phloeodictyon）種の未記載種から得られたフロエオディクティン（Phloeodictine）Ａ（１）およびフロエオディクティンＢ（２）：

の生物活性について開示している。

これには、化合物１および２が数種の細菌に対して有意な活性を示し、次の個々のＭＩＣ（μｇ／ｍＬ）を有していたことが記載されている：糞便連鎖球菌（Streptococcus fecalis）（５、＞１５）、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）（１、３）、大腸菌（Escherichia coli）（１、３０）および緑膿菌（Pseudomonas aeruginosa）（１０、＞３０）。

さらに、これらのアルカロイドは、ＫＢヒト鼻咽頭癌細胞に対してin vitro細胞傷害性を示し、１および２のＩＣ_５０はそれぞれ１．５および１１．２μｇ／ｍＬであった。

また、Kourany-Lefoll et al. (Tetrahedron 1994, 50, 3415-3426）は、その後、さらなる研究において同じ海綿からの生物活性剤として単離された、ピロロ［１，２−α］ピリミジンであって、フロエオディクティンＡ１〜Ａ７（３〜９）およびＣ１〜Ｃ２（１０および１１）と称されるものを記載している。総ての化合物がin vitroにおいて抗菌活性を示し、ＫＢ細胞に対して中程度の細胞傷害性を示した。

フロエオディクティンＡ、Ｂ、Ａ１〜Ａ７およびＣ１〜Ｃ２の混合物は広汎なスペクトラムの活性を有し、それぞれ以下のＭＩＣ（μｇ／ｍＬ）を有していた：黄色ブドウ球菌（３、３０、１、３）、大腸菌（３、３０、３、＞３０）、緑膿菌(Pseudomonas aeruginosa)（３０、＞３０、３０、＞３０）、ウェルシュ菌(Clostridium perfringens)（３０、＞３０、１、＞１００）、バクテロイデス・フラギリス(Bacteroides fragilis)（１、＞３０、３、＞１００）およびペプトコッカス・アサッカロリチカス(Peptococcus assaccharolyticus)（１０、＞３０、３、＞１００）。さらに、これらの物質はまた、ＫＢヒト鼻咽頭癌細胞に対するin vitro細胞傷害性を示し、フロエオディクティンＡ、Ｂ、Ａ１〜Ａ７、およびＣ１〜Ｃ２のＩＣ_５０はそれぞれ２．２、３．５、０．６および１．８μｇ／ｍＬであった。

米国特許第４，２９２，４２９号には、１−［２−［２−（２−クロロフェニル）−２−イミダゾリン−１−イル］−エチル］−３−（ｐ−トリル）−尿素、１−［２−［２−（４−ピリジル）−２−イミダゾリン−１−イル］−エチル］−３−（−４−カルボキシ−フェニル）−尿素および１−［２−［２−（クロロアニリノメチル）−２−イミダゾリン−１−イル］−エチル］−３−（ｐ−トリル）−尿素について、シリアンゴールデンハムスターの肺、気管および喉頭におけるジエチルニトロサミン（ＤＡＥＮＡ）により誘導される類表皮癌に対する活性、またはマウスにおけるＥｒｈｌｉｃｈ腹水腫に対する活性が開示されている。

他方、他の数種の１，２−二置換環式アミドが、先行技術と関連のない分野で開示されている。具体的には、米国特許第２，７４３，２５５号は、化学反応体として有用な樹脂の製造方法を開示している。この樹脂の製造において、下記の化合物Ｒが好適な反応体として開示されている。

癌は動物およびヒトの主要な死因である。癌に苦しむ患者に投与する有効かつ安全な抗腫瘍剤を得るための取り組みが今までになされ、現在も行われている。本発明が解決する課題は、癌の治療に有用なさらなる化合物を提供することである。

発明の概要

一つの態様によれば、本発明は、一般式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩、誘導体、互変異性体、プロドラッグもしくは立体異性体に関する。

［式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_５は各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯＯアルキル、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、置換または非置換Ｃ_４−Ｃ_１８アリール、置換または非置換Ｃ_４−Ｃ_１８複素環基、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_１２アルコキシおよび置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アシルからなる群から選択されものであり、
Ｙは、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_１２アルキレン、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニレン、および置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニレンからなる群から選択されるものであり、
Ｘは、Ｏ、ＳおよびＮＲ_ａからなる群から選択されるものであり、
Ｒ_ａは、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯＯアルキル、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、置換または非置換Ｃ_４−Ｃ_１８アリール、置換または非置換Ｃ_４−Ｃ_１８複素環基、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_１２アルコキシ、および置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アシルからなる群から選択されるものであり、
Ｒ_４は、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_３０アルキル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_３０アルケニル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_３０アルキニル、および置換または非置換Ｃ_４−Ｃ_３０アルケニニルからなる群から選択されるものであり、かつ
点線は、Ｒ_１が存在しない場合にはＮ_ａ−Ｃ_ｂに、Ｒ_５が存在しない場合にはＣ_ｂ−Ｘに、またはＲ_２が存在しない場合にはＣ_ｂ−Ｎ_ｃに位置する任意の追加の結合を表す］
（ただし、下記式の化合物Ｒ：

は除かれる）。

本発明はまた、メアンドリニダエ(Meandrinidae)科メアンドリナ(Meandrina)属メアンドリテス(meandrites)種の迷路サンゴ(maze coral)からの式Ｉの化合物の単離、およびこれらの化合物由来の誘導体の形成に関する。

別の態様によれば、本発明はまた、癌治療における、または癌治療用の薬剤の製造における、化合物Ｒを含む式Ｉの化合物、またはその医薬上許容される塩、互変異性体、誘導体、プロドラッグもしくは立体異性体を対象とする。

別の態様によれば、本発明はまた、化合物Ｒを含む式Ｉの化合物、またはその医薬上許容される塩、互変異性体、誘導体、プロドラッグもしくは立体異性体と、医薬上許容される担体または希釈剤とを共に含んでなる医薬組成物を対象とする。

発明の具体的説明

本発明は、上記で定義されたような一般式Ｉの化合物に関する。
これらの化合物において、置換基は次の指針に従って選択することができる。
アルキル、アルキレンおよびアルコキシ基は、好ましくは１〜３０個の炭素原子を有する。アルキル、アルキレンおよびアルコキシ基のより好ましい種は１〜１２個の炭素原子を有し、さらに好ましいアルキル、アルキレンおよびアルコキシ基は１〜約６個の炭素原子を有し、さらに好ましいアルキル、アルキレンおよびアルコキシ基は１〜約４個の炭素原子を有する。メチル、エチル、プロピル（イソプロピルを含む）およびブチルは、本発明の化合物において特に好ましいアルキル基である。メトキシ、エトキシ、プロポキシ（イソプロポキシを含む）およびブトキシ（ｔｅｒｔ−ブチルを含む）は、本発明の化合物において特に好ましいアルコキシ基である。アルキルおよびアルキレン基の別のより好ましい種は４〜約１２個の炭素原子、より好ましくは、５〜約８個の炭素原子を有する。ペンチル、ヘキシル、ヘプチルまたはオクチルは、本発明の化合物において特に好ましいアルキル基である。アルキル基の別の好ましい種は１〜約２０個の炭素原子、より好ましくは、６〜約１８個の炭素原子を有する。本明細書において、アルキルとは、特に断りのない限り、環式基と非環式基の双方を指すが、環式基は少なくとも３個の炭素環員を含む。

アルケニニル基とは、１以上の二重結合と１以上の三重結合とを含むアルキル基として定義され、好ましいアルケニニル基は４〜約３０個の炭素原子を有するものである。アルケニニル基のより好ましい種は６〜約１８個の炭素原子を有する。

本発明の化合物における好ましいアルケニル、アルキニル、アルケニレンおよびアルキニレン基は、１以上の不飽和結合と２〜約３０個の炭素原子とを有する。アルケニル、アルキニル、アルケニレンおよびアルキニレン基のより好ましい種は４〜約２０個の炭素原子、さらに好ましくは、６〜１８個の炭素原子を有する。本明細書においてアルケニル、アルキニル、アルケニレンおよびアルキニレン基とは、環式基と非環式基の双方を意味し、環式基は少なくとも３個の炭素環員を含む。本発明の化合物においてアルケニル、アルキニル、アルケニレンおよびアルキニレン基の別の好ましい種は２〜１２個の炭素原子、さらに好ましくは、２〜６個の炭素原子を有する。

アルキル、アルケニル、アルキニル、アルケニニル、アルキレン、アルケニレンおよびアルキニレン基は、ＯＨ、ＮＯ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、所望により置換されたＣ_１−Ｃ_１２アルコキシ、所望により置換されたＣ_１−Ｃ_１２アルカノイルオキシ、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１９アロイルオキシ、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１６アラルカノイルオキシ、ハロゲン、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１８アリール、アミノ、モノ−（Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル）アミノおよびジ−（Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル）アミノ、所望により置換されたグアニジン、所望により置換されたＣ_１−Ｃ_１２アルコキシカルボニル、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１１アリールオキシカルボニル、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１１アラルキルオキシカルボニル、カルバモイル、Ｎ−（Ｃ_１−Ｃ_２０アルキル）カルバモイルおよびＮ，Ｎ−ジ−（Ｃ_１−Ｃ_２０アルキル）カルバモイルから選択される基によって所望により置換されていてもよい。

本発明の化合物における好適なアリール基は、単環式基または多環式基を含み、独立もしくは縮合アリールまたはヘテロアリール環を含有する多環式基を含む。典型的なアリール基は１〜３環および４〜約１８個の炭素環原子を含む。特に好ましいアリール基としては、置換または非置換フェニル、ナフチル、ビフェニル、フェナントリルおよびアントラシルが挙げられる。

好適な複素環基としては、芳香族複素環基(heteroaromatic group)および脂環式複素環基(heteroalicyclic group)が挙げられる。本発明の化合物において好適な芳香族複素環基は、Ｎ、ＯおよびＳ原子から選択される１個、２個または３個のヘテロ原子を含み、例えば、クマリニル（８−クマリニルを含む）、キノリニル（８−キノリニルを含む）、ピリジル、ピラジニル、ピリミジル、フリル、ピロリル、チエニル、チアゾリル、オキサゾリル、イミダゾリル、インドリル、ベンゾフラニルおよびベンゾチアゾール基が挙げられる。本発明の化合物において好適な脂環式複素環基は、Ｎ、ＯおよびＳ原子から選択される１個、２個または３個のヘテロ原子を含み、例えば、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル、モルホリノおよびピロリジニル基が挙げられる。

好適なアシル基は、２〜約１２個の炭素原子、より好ましくは、２〜約８個の炭素原子、さらにより好ましくは２〜約６個の炭素原子、さらに一層好ましくは２個の炭素原子を有する。

アリール基、複素環基およびアシル基は、１以上の適用可能な位置で、ＯＨ、ＯＲ’、＝Ｏ、ＳＨ、ＳＲ’、ＳＯＲ’、ＳＯ_２Ｒ’、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＮＨＲ’、Ｎ（Ｒ’）_２、＝ＮＲ’、ＮＨＣＯＲ’、Ｎ（ＣＯＲ’）_２、ＮＨＳＯ_２Ｒ’、ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）ＮＨ_２、ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）ＮＨＲ’、ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）ＮＲ’_２、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯ_２Ｒ’、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ’などの１以上の好適な基により置換されていてもよく、ここで、各Ｒ’基は独立に、ＯＨ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、＝Ｏ、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ_３、ＣＯ_２Ｈ、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、および置換または非置換アリールからなる群から選択されるものである。このような基がそれ自体置換されている場合、それらの置換基は上記の一覧から選択することができる。

本発明の化合物において好適なハロゲン置換基としては、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒおよびＩが挙げられる。

「医薬上許容される塩、誘導体、プロドラッグ」とは、医薬上許容される塩、エステル、溶媒和物、水和物またはその他のいずれかの化合物であって、レシピエントに投与した際に、本明細書に記載の化合物を（直接または間接的に）提供し得るものを意味する。しかしながら、医薬上許容されない塩も、医薬上許容される塩の製造に有用であり得ることから、本発明の範囲内にあると認められる。塩、プロドラッグおよび誘導体の製造は当技術分野で公知の方法により行うことができる。

例えば、本発明で提供される化合物の医薬上許容される塩は、従来の化学法により塩基性部分または酸性部分を含む親化合物から合成される。一般に、このような塩は、例えば、これらの化合物の遊離酸または遊離塩基の形態を、水または有機溶媒または両者の混合物中で化学量論量の適当な塩基または酸と反応させることにより製造される。一般に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリルのような非水性媒体が好ましい。酸付加塩の例としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などの無機酸付加塩、ならびに例えば、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩およびｐ−トルエンスルホン酸塩などの有機酸付加塩が挙げられる。アルカリ付加塩の例としては、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウムおよびアンモニウム塩などの無機塩、および、例えば、エチレンジアミン、エタノールアミン、Ｎ、Ｎ−ジアルキレンエタノールアミン、トリエタノールアミンおよび塩基性アミノ酸塩などの有機アルカリ塩が挙げられる。

互変異性体とは、定義された化合物の２以上の構造異性体のうちの１つを意味し、構造異性体は平衡状態にあり、アミド−イミド、ラクタム−ラクチムなどのように、ある異性型から別の異性型へ容易に変換される。

本発明の化合物は、遊離化合物として、または溶媒和物（例えば、水和物）として結晶形態であってもよく、両形態とも本発明の範囲内にあるものとする。溶媒和の方法は当技術分野で一般に知られている。

式Ｉの化合物のプロドラッグである化合物はいずれも本発明の範囲および精神内にある。「プロドラッグ」は広義で用いられ、in vivoで本発明の化合物へ変換される誘導体を包含する。このような誘導体は当業者ならば容易に思い浮かび、例えば、遊離ヒドロキシ基がエステル誘導体に変換される化合物が挙げられる。

上記の式Ｉで表される本発明の化合物は、数種の鏡像異性体を含み得る。二重結合についての異性性も存在し得るので、ある場合には、分子は（Ｅ）−または（Ｚ）−異性体として存在し得る。単独の異性体および異性体混合物は本発明の範囲内にある。

本発明の好ましい化合物は、Ｙが置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_６アルキレン、より好ましくは、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキレンである化合物である。メチレン、エチレン、プロピレン、イソプロピレンおよびブチレンがより好ましい。非置換Ｃ_４アルキレン鎖がさらに好ましい。

より好ましいＲ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_５は各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯＯアルキル、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、および置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_６アシルからなる群から選択されるものである。一実施形態では、それらは総てＨである。

好ましい実施形態によれば、ＸはＮＲ_ａであり、ここで、Ｒ_ａは、好ましくは、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯＯアルキル、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、および置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_６アシルからなる群から選択されるものであり、ＨおよびＣＯＯアルキルがより好ましい。

本発明のより好ましい化合物は、Ｒ_４が

である化合物である：
［式中、ｎは、１〜１２、より好ましくは１〜８の整数であり、
ｍは、１〜１０、より好ましくは１〜５の整数であり、
Ｒ_６は、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、所望により置換されたＣ_１−Ｃ_１２アルコキシ、所望により置換されたＣ_１−Ｃ_１２アルカノイルオキシ、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１８アロイルオキシ(aroyloxy)、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１６アラルカノイルオキシ(aralkanoyloxy)、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１８アリール、アミノ、モノ−（Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル）アミノ、ジ−（Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル）アミノ、所望により置換されたグアニジン、所望により置換されたＣ_１−Ｃ_１２アルコキシカルボニル、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１１アリールオキシカルボニル、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１１アラルキルオキシカルボニル、カルバモイル、Ｎ−（Ｃ_１−Ｃ_２０アルキル）カルバモイル、およびＮ，Ｎ−ジ−（Ｃ_１−Ｃ_２０アルキル）カルバモイルからなる群から選択されるものであり、
点線は追加の一重結合または二重結合を表す］。
より好ましくは、二重結合がＣ_１−Ｃ_２間に位置し、三重結合がＣ_３−Ｃ_４間に位置する。

より好ましくは、追加の結合は、Ｒ_１が存在しない場合にはＮ_ａ−Ｃ_ｂに、Ｒ_５が存在しない場合にはＣ_ｂ−Ｘに、またはＲ_２が存在しない場合にはＣ_ｂ−Ｎ_ｃに位置し、さらに好ましくは、Ｒ_５が存在しない場合にＣ_ｂ−Ｘ間に位置する。

より詳しくは、本発明は、式ＩＩで示される化合物、またはその医薬上許容される塩、互変異性体、誘導体、プロドラッグもしくは立体異性体を提供する：

［式中、Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３は各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯＯアルキル、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、置換または非置換Ｃ_４−Ｃ_１８アリール、置換または非置換Ｃ_４−Ｃ_１８複素環基、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_１２アルコキシ、および置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アシルからなる群から選択されるものであり、
Ｙは、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_１２アルキレン、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニレン、および置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニレンからなる群から選択されるものであり、
Ｘは、Ｏ、ＳおよびＮＨからなる群から選択されるものであり、かつ
Ｒ_４は、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_３０アルキル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_３０アルケニル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_３０アルキニル、および置換または非置換Ｃ_４−Ｃ_３０アルケニニルからなる群から選択されるものである］。

式ＩＩの好ましい化合物は、Ｙが置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_６アルキレン、より好ましくは、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_４アルキレンである化合物である。メチレン、エチレン、プロピレン、イソプロピレンおよびブチレンがさらに好ましい。非置換Ｃ_４アルキレン鎖がさらに好ましい。

より好ましいＲ_１、Ｒ_２およびＲ_３は各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯＯアルキル、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、および置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_６アシルからなる群から選択されるものである。一実施形態では、それらは総てＨである。
好ましい実施形態では、ＸはＮＨである。

本発明のより好ましい化合物は、Ｒ_４が、

である化合物である：
［式中、ｎは、１〜１２、より好ましくは１〜８の整数であり、
ｍは、１〜１０、より好ましくは１〜５の整数であり、
Ｒ_６は、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、所望により置換されたＣ_１−Ｃ_１２アルコキシ、所望により置換されたＣ_１−Ｃ_１２アルカノイルオキシ、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１８アロイルオキシ、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１６アラルカノイルオキシ、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１８アリール、アミノ、モノ−（Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル）アミノ、ジ−（Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル）アミノ、所望により置換されたグアニジン、所望により置換されたＣ_１−Ｃ_１２アルコキシカルボニル、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１１アリールオキシカルボニル、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１１アラルキルオキシカルボニル、カルバモイル、Ｎ−（Ｃ_１−Ｃ_２０アルキル）カルバモイル、およびＮ，Ｎ−ジ−（Ｃ_１−Ｃ_２０アルキル）カルバモイルからなる群から選択されるものであり、
点線は追加の一重結合または二重結合を表す］。
より好ましくは、二重結合がＣ_１−Ｃ_２間に位置し、三重結合がＣ_３−Ｃ_４間に位置する。

本発明のより好ましい化合物は、以下のものである。

化合物Ａは、迷路サンゴ(maze coral)メアンドリニダエ科メアンドリナ属メアンドリテス種３１７１２の小サンプルから単離された海洋天然物である。このサンゴはカリブ海モタグア川付近の深度４０ｍでスキューバダイビングにより採取したものであり［ＵＴＭ／ＮＡＤ１９２７（ＮｏｒｔｈＡｍｅｒｉｃａｎＤａｔｕｍ１９２７、区域１５および１６）Ｘ座標：３６２６４２；Ｙ座標：１７５１９２８］、その説明は次の通りである：その群体は波(meandroid)形または扇(flabelloid)形の大きな構造体であり、石灰骨格中にポリープを有する。大きさは直径３０ｃｍに達し、淡黄色または褐色である。

さらに、化合物Ａはスキーム１の合成方法に従って合成された。

スキーム１

この方法は、以下の一連の重要な工程を含む。
ａ）オレイン酸メチルに対して、炭素−炭素二重結合の酸化切断を行い、対応するアルデヒド１２を得た。
ｂ）アルデヒド１２を、標準的な文献の手順に従ってヨウ化ビニル１３へ変換した。
ｃ）ヨードアルケニル１３と１−オクチンとの間でソノガシラ（Ｓｏｎｏｇａｓｈｉｒａ）カップリング反応を行った後、塩基性媒体中でエニン１４のエステル基を加水分解し、酸１５を得た。
ｄ）標準的な文献の条件下で、酸１５と脱保護スペルミジン誘導体１６との間のカップリング反応を行い、対応するアミド１７を得た。
ｅ）ＴｉＣｌ_４の存在下で１７を環化し、１，４，５，６−テトラヒドロピリミジン誘導体１８を得た。
ｆ）１８とＮ，Ｎ^’−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチル−２−チオシュードウレア(N,N’-bis(tert-butoxycarbonyl)-2-methyl-2-thiopseudourea)とのカップリング反応の後、１９のＢｏｃ基を脱保護し、化合物Ａを得た。

この化合物から合成有機化学の通常の手順により、種々の官能基または置換基を有する類似体が合成できる。例えば、加水分解、オゾン分解、シャープレス(Sharpless)エポキシ化、またはディールス・アルダー(Diels-Alder)反応などによる。さらに、類似体は、適切な中間体を用い、スキーム１に開示される手順を用いて合成することもできる。

式ＩおよびＩＩの上記化合物の重要な特徴は、それらの生物活性、特にそれらの細胞傷害活性である。本発明において、発明者らは、細胞傷害活性を有する一般式ＩおよびＩＩの化合物の新規な医薬組成物、ならびにそれらの抗腫瘍剤としての使用が提供している。よって、本発明はさらに、本発明の化合物、その医薬上許容される塩、誘導体、プロドラッグまたは立体異性体と、医薬上許容される担体とを含んでなる医薬組成物を提供する。

医薬組成物の例としては、経口投与、局所投与または非経口投与用の固体（錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒など）または液体（溶液、懸濁液またはエマルション）組成物が挙げられる。

本発明の化合物または組成物の投与は、静脈内注入、経口製剤、ならびに腹腔内および静脈内投与などの好適な方法によるものであり得る。本発明者らによれば、２４時間までの注入時間が好ましく、より好ましくは２〜１２時間、さらに好ましくは２〜６時間である。一晩入院せずに処置が行える短い注入時間が特に望ましい。しかし、注入は、必要であれば、１２〜２４時間、またはさらに長くてもよい。注入は、例えば、１〜４週間の好適な間隔で行えばよい。本発明の化合物を含有する医薬組成物は、例えば、リポソームもしくはナノスフェア封入体により、または徐放性処方物により、または他の標準的な送達手段により送達することができる。

これらの化合物の厳密な用量は、特定の処方物、適用様式、および処置する特定の部位、宿主および腫瘍によって異なる。宿主の齢、体重、性別、食餌、投与時間、排泄率、宿主の状態、薬剤の組合せ、疾病の反応感受性および重篤度などの他の因子も考慮しなければならない。投与は最大許容量の範囲内で持続的または定期的に行うことができる。

本発明の化合物および組成物は、他の薬剤とともに用いてよく、併用療法としてもよい。他の薬剤は同じ組成物の一部としてもよいし、あるいは同時にまたは時を異にして投与する別個の組成物として提供してもよい。

これらの化合物の抗腫瘍活性としては、白血病、肺癌、結腸癌、腎臓癌、前立腺癌、卵巣癌、乳癌、膵臓癌、子宮頸癌(cervix cancer)、肉腫および黒色腫が挙げられる。

実施例１：サンゴおよび採取について
迷路サンゴ、メアンドリニダエ科メアンドリナ属メアンドリテス種３１７１２のサンプルは、カリブ海モタグア川付近の深度４０ｍ［ＵＴＭ／ＮＡＤ１９２７（ＮｏｒｔｈＡｍｅｒｉｃａｎＤａｔｕｍ１９２７、区域１５および１６）Ｘ座標：３６２６４２；Ｙ座標：１７５１９２８］でスキューバダイビングにより採取したものである。

実施例２：化合物Ａの単離
実施例１の冷凍検体（１６４６ｇ）を摩砕し、イソプロパノールで２回十分抽出した。合わせた抽出液を濃縮し、粗生成物８．６７ｇを得た。この物質をＨ_２Ｏ（５００ｍＬ）に再懸濁させ、ヘキサン（３×５００ｍＬ、収量１．１８ｇ）、ＥｔＯＡｃ（３×５００ｍＬ、収量８７ｍｇ）、およびｎ−ＢｕＯＨ（２×２５０ｍＬ、収量３９４ｍｇ）で抽出した。

半分取ＨＰＬＣ（ＳｙｍｍｅｔｒｙＰｒｅｐＣ−１８７μｍ、７．８×１５０ｍｍカラム、Ｈ_２Ｏ（０．０５％ＴＦＡ）：ＣＨ_３ＣＮ（０．０５％ＴＦＡ）勾配、ＵＶ検出）を繰り返して、活性ｎ−ＢｕＯＨ画分から化合物Ａ（１．２ｍｇ）を単離した。

化合物Ａ：淡黄色油状物。ＨＲＦＡＢＭＳｍ／ｚ４３０．３９１７［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_２６Ｈ_４８Ｎ_５の理論値４３０．３９１０）。^１Ｈ（５００ＭＨｚ）および^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ）表１参照。

実施例３：化合物Ｂの合成

−７８℃にて、ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ（１．０ｍＬ：０．１ｍＬ）中、化合物Ａ（８．０ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）の溶液にＯ_３流を、混合物が青色になるまで通した。この反応物に−７８℃で１０分間アルゴン流を通した後、ジメチルスルフィド（１４μＬ、０．１９ｍｍｏｌ）を加えた。この反応物を２３℃で３０分間攪拌した後、真空下で溶媒を蒸発させて残渣を得、ＨＰＬＣ（ＳｙｍｍｅｔｒｙＰｒｅｐＣ−１８７μｍ、７．８×１５０ｍｍカラム、Ｈ_２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）：ＣＨ_３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）勾配、ＵＶ検出）により精製し、化合物Ｂ（２．８ｍｇ、４６％）を得た。
^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ３．５１（ｍ，４Ｈ），３．３８（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．５５（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），２．０４（ｍ，２Ｈ），１．７５（ｍ，２Ｈ），１．６３（ｍ，６Ｈ），１．３８（ｍ，１４Ｈ）．
^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ１６５．１，１６２．９，５２．４，４７．１，４２．０，３９．９，３２．４，３０．８，３０．５，３０．２，３０．０，２９．９，２７．９，２６．８，２５．９，１９．９．
ＨＲＭＳ（ＭＡＬＤＩ）：３２４．２７５７［Ｍ＋Ｈ］^＋（Ｃ_１７Ｈ_３４Ｎ_５Ｏ_１の理論値３２４．２７６３）。

実施例４：化合物Ａの合成
無水ＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍＬ）中、オレイン酸メチル（１０．０ｇ、３３．７ｍｍｏｌ）の溶液を−７８℃まで冷却し、この反応混合物に、その溶液がやや青色になるまで（１０分）Ｏ_３流を通した。この混合物にアルゴンを通し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（１００ｍＬ）中、ＰＰｈ_３（１９．７ｇ、７５．１ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくり加えた。この反応混合物を２３℃まで温め、１８時間攪拌した。溶媒を蒸発乾固させ、固体を冷ヘキサン（８０ｍＬ）を用いて摩砕した。濾過したものを蒸発させ、黄色油状物を得た。この油状物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２：Ｈｅｘ１：１、次いで、ＣＨ_２Ｃｌ_２：Ｅｔ_２Ｏ１：１）により精製し、予測された２種のアルデヒド、ノナナール（４．８０ｇ、１００％）と８−ホルミルオクタン酸メチル１２（６．２８ｇ、１００％）を、双方とも無色の油状物として得た。
^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ９．７６（ｓ，１Ｈ），３．６６（ｓ，３Ｈ），２．４１（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．３０（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），１．６１（ｍ，４Ｈ），１．３１（ｍ，６Ｈ）．
^１３ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ２０２．４，１７３．８，５１．１，４３．５，３３．７，２８．７，２８．６，２８．５，２４．５，２１．７．
ＭＳ（ＡＰＣＩ）：１８７（Ｍ＋１）^＋．Ｒｆ＝０．２（ＣＨ_２Ｃｌ_２）．

無水ＴＨＦ（３００ｍＬ）中、（ヨードメチル）トリフェニルホスホニウムヨージド（３９．８９ｇ、７５．３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮａＨＭＤＳ（７５．３ｍＬ、ＴＨＦ中１．０Ｍ、７５．３ｍｍｏｌ）を滴下し、２３℃で１０分間攪拌した。この反応混合物を−６０℃で冷却し、１，３−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２（１Ｈ）−ピリミジノン（１５．３ｍＬ、１２６．４ｍｍｏｌ）を滴下し、すぐに−７８℃まで冷却した。このイリド溶液に、ＴＨＦ（２９０ｍＬ）中、８−ホルミルオクタン酸メチル１２（５．６ｇ、３０．１ｍｍｏｌ）の溶液を３０分かけてゆっくり加え、−７８℃で５分間攪拌し、２３℃まで温めた。２時間後、この混合物をヘキサン（３００ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＣｌ水溶液（３００ｍＬ）で洗浄した。水層をヘキサンで抽出し（３×３００ｍＬ）、合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ヘキサン１：１）を（Ｚ）−メチル１０−ヨードデク−９−エノエート１３（７．２１ｇ、７７％）を無色の油状物として得た。
^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ６．１６−６．１２（ｍ，２Ｈ），３．６６（ｓ，３Ｈ），２．３０（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．１３（ｍ，２Ｈ），１．６０（ｍ，２Ｈ），１．４０−１．２０（ｍ，８Ｈ）．
^１３ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１７４．３，１４１．３，８２．２，５１．４，３４．６，３４．０，２９．７，２９．０，２８．８，２７．８，２４．９．
ＭＳ（ＡＰＣＩ）：１８４（Ｍ−１２８）^＋．Ｒｆ＝０．２５（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ヘキサン，１：１）．

無水アセトニトリル：Ｅｔ_３Ｎ（１７０ｍＬ：３４ｍＬ）中、（Ｚ）−メチル１０−ヨードデク−９−エノエート１３（７．２１ｇ、２２．９ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_２Ｃｌ_２（１．５６ｇ、２．２９ｍｍｏｌ）、およびＣｕＩ（１．３１ｇ、６．８８ｍｍｏｌ）の懸濁液に、−２０℃にて、アセトニトリル：Ｅｔ_３Ｎ（５０ｍＬ：１０ｍＬ）中、１−オクチン（４．０６ｍＬ、２７．５１ｍｍｏｌ）の溶液を４時間かけて加えた。この反応混合物を２３℃まで温めた。１８時間後、ＨＣｌ１Ｎ（２００ｍＬ）を加え、この混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（３×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ヘキサン、１０：１〜１：１）により、（Ｚ）−メチルオクタデク−９−エン−１１−イノエート１４（５．４１ｇ、８１％）を無色の油状物として得た。
^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ５．８０（ｄｔ，Ｊ＝１０．３および７．３Ｈｚ，１Ｈ），５．４３（ｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ），３．６６（ｓ，３Ｈ），２．３５−２．２３（ｍ，６Ｈ），１．６１−１．４０（ｍ，６Ｈ），１．４０−１．２５（ｍ，１２Ｈ），０．８９（ｂｒｔ，３Ｈ）．
^１３ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１７４．３，１４２．４，１０９．４，９４．５，７７．３，５１．４，３４．１，３１．３，２９．９，２９．１，２９．０，２８．９，２８．８，２８．７，２８．５，２４．９，２２．５，１９．５，１４．０．
ＭＳ（ＡＰＣＩ）：２９３（Ｍ＋１）^＋．Ｒｆ＝０．３０（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ヘキサン，１：１）．

２３℃にて、メタノール（８．５ｍＬ）中、（Ｚ）−メチルオクタデク−９−エン−１１−イノエート１４（２．２６ｇ、８．１２ｍｍｏｌ）の溶液に、１０ＭＮａＯＨ（１．６２ｍＬ、１６．２ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。この溶液を３時間攪拌した後、１０ＭＮａＯＨ（１．６２ｍＬ、１６．２ｍｍｏｌ）を添加し、２時間後、新たに１０ＭＮａＯＨ（１．６２ｍＬ、１６．２ｍｍｏｌ）の添加を行った。最後の添加から２時間後に反応が完了し、溶媒を真空下で蒸発させた。この残渣をＨ_２Ｏで希釈し、１ＮＨＣｌでｐＨ＝２まで酸性化した。水層をＣＨ_２Ｃｌ_２（２×２００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させ、（Ｚ）−オクタデク−９−エン−１１−イン酸１５（２．０ｇ、８９％）を無色の油状物として得、これを精製せずに用いた。
^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ５．７９（ｄｔ，Ｊ＝１０．６および７．３Ｈｚ，１Ｈ），５．４２（ｂｒｄ，Ｊ＝１０．６Ｈｚ，１Ｈ），２．３７−２．２４（ｍ，６Ｈ），１．６５−１．４０（ｍ，６Ｈ），１．４０−１．２３（ｍ，１２Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）．
^１３ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１７９．９，１４２．４，１０９．４，９４．５，７７．３，３４．０，３１．３，２９．９，２９．０，２８．９（２），２８．８，２８．７，２８．５，２４．６，２２．６，１９．５，１４．０．
ＭＳ（ＡＰＣＩ）：２７９（Ｍ＋１）^＋．Ｒｆ＝０．４０（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ，１０：１）．

ＴＨＦ（１００ｍＬ）中、スペルミジン（３．０ｇ、２０．６ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃にて、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中、２−（Ｂｏｃ−オキシイミノ）−２−フェニルアセトニトリル（１０．１４ｇ、２０．６ｍｍｏｌ）の溶液をゆっくり加えた。この反応混合物を０℃で１時間攪拌した後、真空下で溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルで濾過し、ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＥｔＯＡｃ７：３、次いで、ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ１：１で溶出し、４−（３−（ｔｅｒｔ−ブチルカルバメート）プロピル）ブチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル１６（５．３ｇ、＞１００％）を無色の油状物として得た。
^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ３．１５（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．０８（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．００（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，４Ｈ），１．８３（ｍ，２Ｈ），１．６９（ｍ，２Ｈ），１．５５（ｍ，２Ｈ），１．４４（ｂｓ，１８Ｈ）．
ＭＳ（ＡＰＣＩ）：３４６（Ｍ＋１）^＋．Ｒｆ＝０．１８（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ，８：２）．

２３℃にて、ＣＨ_２Ｃｌ_２（５０ｍＬ）中、１５（１．０１ｇ、３．６５ｍｍｏｌ）、および１６（１．８９ｇ、５．４７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｅｔ_３Ｎ（２．５８ｍＬ、１８．６ｍｍｏｌ）およびベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（２．４２ｇ、５．４７ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を２３℃で３時間攪拌した後、ＣＨ_２Ｃｌ_２で希釈し、１ＭＨＣｌおよび飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄した。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。得られた残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＥｔＯＡｃ６：１から３：１）により精製し、化合物１７（２．１４ｇ、９６％）を無色の油状物として得た。
^１ＨＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ５．７９（ｄｔ，Ｊ＝１０．５および７．５Ｈｚ，１Ｈ），５．４０（ｂｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，１Ｈ），３．３４（ｍ，４Ｈ），３．０７−３．０１（ｍ，４Ｈ），３．３５−２．２５（ｍ，４Ｈ），１．７６−１．３１（ｍ，１６Ｈ），１．４３（ｓ，２８Ｈ），０．９０（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）．
^１３ＣＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ１７５．５，１７５．２，１５８，１４２．９，１１０．７，９５．０，７８．４，３２．４，３０．９，３０．５，３０．４，３０．３，３０．１，２９．９，２９．９，２９．５，２８．８，２３．６，２０．１，１４．４．
ＭＳ（ＡＰＣＩ）：６２８（Ｍ＋２３）^＋．

２３℃にて、無水キシレン（１６ｍＬ）中、１７（５４２ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ）の懸濁液にＴｉＣｌ_４（９８μＬ、０．８９ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。この混合物を１６５℃で１時間加熱した。この反応混合物を２３℃まで冷却した後、ＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中、ＮａＯＨ（２７０ｍｇ、６．７５ｍｍｏｌ）の溶液を加え、セライト^（商標）で濾過し、ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）で洗浄した。濾液を濃縮乾固し、飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）を加え、この混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（３×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残渣を、シリカ−ＮＨ_２ゲルでのクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ１６：１から１：１）にて精製し、（Ｚ）−４−（２−（ペンタデク−６−エン−８−イニル）−５，６−ジヒドロピリミジン−１（４Ｈ）−イル）ブタン−１−アミン１８（１３１ｍｇ、３８％）を黄色油状物として得た。
^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ５．８０（ｄｔ，Ｊ＝１０．５および７．６，１Ｈ），５．４１（ｄ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ），３．４９（ｍ，４Ｈ），３．３７（ｍ，２Ｈ），２．７１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），２．５４（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），２．３２（ｍ，４Ｈ），２．０２（ｍ，２Ｈ），１．６９−１．３０（ｍ，２２Ｈ），０．９２（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）．
^１３ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ１６３．１，１４２．０，１０９．２，９４．３，７６．９，５１．２，４５．７，４０．９，３８．５，３１．１，２９．７，２９．４，２８．８，２８．７，２８．５，２８．３，２７．３，２７．２，２５．２，２２．３，１９．３，１９．０，１３．８（２つの^１３Ｃシグナルは認められなかった）
ＭＳ（ＡＰＣＩ）：３８８（Ｍ＋１）^＋．Ｒｆ＝０．３２（Ｓｉ−ＮＨ_２，ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ，８：１）．

２３℃にて、無水ＴＨＦ（０．６ｍＬ）中、１８（１８ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）の溶液に、１，３−ビス（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチル−２−チオシュードウレア（２０ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を６５℃で５時間加熱した後、２３℃まで冷却した。真空下で蒸発させて残渣を得、シリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ９９：１〜９：１）により精製し、無色の油状物として１９（７．８ｍｇ、２８％）を得た。
^１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ５．７９（ｄｔ，Ｊ＝１１．０および７．５，１Ｈ），５．４１（ｍ，１Ｈ），３．５２（ｍ，４Ｈ），３．４１（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），３．３７（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．５５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．３１（ｔｄ，Ｊ＝７．０および２．０，２Ｈ），２．２７（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），２．０２（ｍ，２Ｈ），１．７２（ｍ，２Ｈ），１．６１（ｍ，４Ｈ），１．５２（ｓ，９Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．４９−１．２８（ｍ，８Ｈ），０．９１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）．
^１３ＣＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ１６５．０，１６４．５，１５７．７，１５４．２，１４２．８，１１０．８，９５．１，８４．５，８０．４，７８．４，５２．５，４７．１，４０．９，３９．９，３２．５，３２．４，３０．９，３０．１，３０．０，２９．５９，２８．６，２８．５５，２７．９，２７．１，２５．８，２３．７，２０．１，２０．０，１４．４．
ＭＳ（ＡＰＣＩ）：６３０（Ｍ＋１）^＋．Ｒｆ＝０．１０（ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ，９４：６）．

エチレングリコール（２．２ｍＬ）中、１９（２２ｍｇ、３．６５ｍｍｏｌ）の溶液を２００℃で２分間加熱した。この反応混合物を２３℃まで冷却し、ＣＨ_２Ｃｌ_２と、３ＭＮａＯＨ（ｐＨ１４）を数滴加えた飽和ＮａＣｌ水溶液とで分液した。水性有機層をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出し、合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、真空下で蒸発させ、３１ｍｇの粗化合物Ａを得、ＨＰＬＣ（ＳｙｍｍｅｔｒｙＰｒｅｐＣ−１８７μｍ、７．８×１５０ｍｍカラム、Ｈ_２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）：ＣＨ_３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）勾配、ＵＶ検出）により精製して化合物Ａ（６．１ｍｇ、３２％）を得た、これは総てのパラメーターにおいて実施例２で得られたものと同じであった。

実施例５：抗腫瘍スクリーニングの生物検定
これらのアッセイの最終目標は、細胞を供試サンプルに継続的に曝すことにより、「in vitro」腫瘍細胞培養物の増殖を阻害することである。

細胞系

比色アッセイによる細胞増殖の阻害
細胞増殖および活性の定量測定に、スルホローダミンＢ（ＳＲＢ）反応を用いた比色型アッセイを採用した（Philip Skehan et al. (1990), New colorimetric cytotoxicity assay for anticancer drug screening, J. Natl. Cancer Inst. 82:1107-1112に記載の手法に従う）。

この形式のアッセイでは９ｍｍ径の９６穴細胞培養マイクロプレートを用いる(Mosmann, 1983; Faircloth, 1988)。大部分の細胞系は、種々のヒト癌種由来のAmerican Type Culture Collection (ATCC)から得られる。

細胞を、０．１ｇ／Ｌペニシリンおよび０．１ｇ／Ｌ硫酸ストレプトマイシンを添加したＲＰＭＩ１６４０１０％ＦＢＳ中で維持した後、３７℃、５％ＣＯ_２および湿度９８％で培養する。試験のため、密集前の培養物からトリプシンを用いて細胞を採取し、新鮮な培地に再懸濁させた後、プレーティングした。

細胞を、９６穴マイクロタイタープレートに１９５μＬアリコート(aliquot)の培地中、１穴当たり５×１０^３細胞で播種し、それらを薬剤フリー培地中で１８時間増殖させることにより、プレート表面に付着させる。その後、サンプルを５μＬアリコート中、ＤＭＳＯ：ＥｔＯＨ：ＰＢＳ（０．５：０．５：９９）に１０〜１０^−８μｇ／ｍＬの範囲で溶解させて加える。４８時間曝した後、ＳＲＢ法により抗腫瘍効果を測定する。すなわち、細胞を、５０μＬの冷５０％（ｗｔ／ｖｏｌ）トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）を加えることにより固定し、４℃で６０分インキュベートする。プレートを脱イオン水で洗浄し、乾燥させる。各マイクロタイターウェルにＳＲＢ溶液１００μＬ（１％酢酸中、０．４％ｗｔ／ｖｏｌ）を加え、室温で１０分間インキュベートする。結合しなかったＳＲＢを、１％酢酸で洗浄することにより除去する。プレートを風乾し、結合した染色剤をトリスバッファーで可溶化する。光学密度を自動分光光度プレートリーダーにて、４９０ｎｍｍの単一波長で読み取る。

３反復の穴からデータの平均＋／−ＳＤの値を算出する。細胞応答の数種のパラメーター：ＧＩ＝増殖阻害、ＴＧＩ＝総増殖阻害（細胞傷害作用）およびＬＣ＝細胞死滅（細胞傷害性作用）を算出することができる。

表２は化合物Ａ、Ｂおよび１９の生物活性に関するデータを示す。

Claims

一般式Ｉの化合物、またはその医薬上許容される塩、互変異性体、誘導体、プロドラッグもしくは立体異性体：

［式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_５は各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯＯアルキル、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、置換または非置換Ｃ_４−Ｃ_１８アリール、置換または非置換Ｃ_４−Ｃ_１８複素環基、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_１２アルコキシ、および置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アシルからなる群から選択されるものであり、
Ｙは、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_１２アルキレン、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニレンおよび置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニレンからなる群から選択されるものであり、
Ｘは、Ｏ、ＳおよびＮＲ_ａからなる群から選択されるものであり、
Ｒ_ａは、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯＯアルキル、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルケニル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アルキニル、置換または非置換Ｃ_４−Ｃ_１８アリール、置換または非置換Ｃ_４−Ｃ_１８複素環基、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_１２アルコキシおよび置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_１２アシルからなる群から選択されるものであり、
Ｒ_４は、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_３０アルキル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_３０アルケニル、置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_３０アルキニル、および置換または非置換Ｃ_４−Ｃ_３０アルケニニルからなる群から選択されるものであり、かつ、
点線は、Ｒ_１が存在しない場合にはＮ_ａ−Ｃ_ｂに、Ｒ_５が存在しない場合にはＣ_ｂ−Ｘに、またはＲ_２が存在しない場合にはＣ_ｂ−Ｎ_ｃに位置する任意の追加の結合を表す］
（ただし、下記式の化合物Ｒ：

は除かれる）。
下式ＩＩを有する、請求項１に記載の化合物：

［式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４およびＹは請求項１で定義された通りであり、Ｘは、Ｏ、ＳおよびＮＨからなる群から選択されるものである］。
Ｙが置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_６アルキレンであり、ＸがＮＨである、請求項１または２に記載の化合物。
Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３およびＲ_５が各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯＯアルキル、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_６アルキルおよび置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_６アシルからなる群から選択されるものである、請求項１に記載の化合物。
Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_３が各々独立に、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ_２、ＮＨ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、ＣＯ_２Ｈ、ＣＯＯアルキル、置換または非置換Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、および置換または非置換Ｃ_２−Ｃ_６アシルからなる群から選択されるものである、請求項２に記載の化合物。
Ｒ_４が、

である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物：
［式中、ｎは、１〜１２の整数であり；
ｍは、１〜１０の整数であり；
Ｒ_６は、Ｈ、ＯＨ、ＮＯ_２、ＳＨ、ＣＮ、ハロゲン、Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、所望により置換されたＣ_１−Ｃ_１２アルコキシ、所望により置換されたＣ_１−Ｃ_１２アルカノイルオキシ、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１８アロイルオキシ、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１６アラルカノイルオキシ、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１８アリール、アミノ、モノ−（Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル）アミノ、ジ−（Ｃ_１−Ｃ_１２アルキル）アミノ、所望により置換されていてもよいグアニジン、所望により置換されたＣ_１−Ｃ_１２アルコキシカルボニル、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１１アリールオキシカルボニル、所望により置換されたＣ_４−Ｃ_１１アラルキルオキシカルボニル、カルバモイル、Ｎ−（Ｃ_１−Ｃ_２０アルキル）カルバモイルおよびＮ，Ｎ−ジ−（Ｃ_１−Ｃ_２０アルキル）カルバモイルからなる群から選択されるものであり、
点線は追加の一重結合または二重結合を表す］。
ｎが１〜８の整数であり、ｍが１〜５の整数であり、Ｃ_１−Ｃ_２間に二重結合が存在し、Ｃ_３−Ｃ_４間に三重結合が存在する、請求項６に記載の化合物。
下式を有する、請求項１または２に記載の化合物、またはその医薬上許容される塩、互変異性体、誘導体、プロドラッグもしくは立体異性体。
下式を有する、請求項１または２に記載の化合物、またはその医薬上許容される塩、互変異性体、誘導体、プロドラッグもしくは立体異性体。
下式を有する請求項１に記載の化合物、またはその医薬上許容される塩、互変異性体、誘導体、プロドラッグもしくは立体異性体。
トリフルオロ酢酸塩の形態である、先行するいずれかの請求項に記載の化合物。
サンゴのメアンドリナ・メアンドリテスからの抽出および単離を含む、先行するいずれかの請求項で定義された化合物を得る方法。
化合物Ｒ、またはその医薬上許容される塩、互変異性体、誘導体、プロドラッグもしくは立体異性体と、医薬上許容される希釈剤または担体とを含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物を含んでなる医薬組成物。
薬剤の製造における、化合物Ｒ、またはその医薬上許容される塩、互変異性体、誘導体、プロドラッグもしくは立体異性体を含む請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物の使用。
薬剤の製造が癌の治療のためである、請求項１４に記載の使用。