EA013160B1

EA013160B1 - Противоопухолевые тетрагидропиримидины

Info

Publication number: EA013160B1
Application number: EA200702397A
Authority: EA
Inventors: Хосе Фернандо Реес Бенитес; Мария дель Кармен Куэвас Марчанте; Дэвид Монтальво Лобо; Ма Хесус Мартин Лопес; Мария Кристина Матео Урбано; Андрес Франсесч Сольосо
Original assignee: Фарма Мар, С.А.
Priority date: 2005-05-03
Filing date: 2006-05-03
Publication date: 2010-02-26
Also published as: NO20076162L; US20100216817A1; WO2006117197A1; NZ563054A; IL186781A0; JP2008540362A; KR20080007640A; CN101171236A; EP1879870A1; AU2006243407A1; EA200702397A1; CA2605784A1; MX2007013683A

Abstract

Противоопухолевые соединения формулы I, где X является О, S или NR, которые получены из семейства Meandrinidae, род Meandrina, вид meandrites, или их производные являются пригодными в качестве противоопухолевых агентов

Description

Данное изобретение относится к новым противоопухолевым соединениям, содержащим их фармацевтическим композициям и их применению в качестве противоопухолевых агентов.

Уровень техники изобретения

Коигапу-ЬеГоЦ с1 а1. (1. Отд. СНсш. 1992, 57, 3832-3835) описали биологическую активность флоеодиктина А (1) и флоеодиктина В (2), первых природных членов бициклических 1,2,3,4-тетрагидро-6Нпирроло[1,2-а]пиримидиниевых кольцевых систем, полученных из неописанного вида глубоководных губок Р111оеоб1с1уоп 5р.

Описано, что соединения 1 и 2 проявляют значительную активность против некоторых бактерий со следующими соответствующими значениями М1С (минимальная доза ингибирования) (мк/мл): 81гер1ососси5 ГесаЙ5 (5, >15), §1арйу1ососси8 аитеик (1, 3), ЕксйейсШа сой (1, 30) и Ркеиботопак аетидшока (10, >30).

Помимо этого, данные алкалоиды проявляют цитотоксичность ίη νίΙΐΌ против клеток карциномы носоглотки человека с 1С₅₀ 1,5 и 11,2 мк/мл для соединений 1 и 2 соответственно.

Также Коигапу-ЬеГоИ е1 а1. (Тейайебгоп 1994, 50, 3415-3426) позже описали пирроло[1,2-а]пиримидины, названные флоеодиктины А1-А7 (3-9) и С1-С2 (10 и 11), выделенные при дальнейшем поиске биоактивных агентов из подобных видов губок.

Все соединения проявляли ίη уйго противобактериальную активность и были умеренно цитотоксичны против клеток КВ

- 1 013160

Смеси флоеодиктинов А, В, А1-А7 и С1-С2 имеют широкий спектр активности со следующими соответствующими значениями М1С (мк/мл): 81арйу1ососси8 аитеиз (3, 30, 1, 3), ЕзсйепсЫа со11 (3, 30, 3, >30), Рзеийошопаз аетидшоза (30, >30, 30, >30), С1о81пйшш регГппдещ (30, >30, 1, >100), Вас1егснйе8 1гад1118 (1, >30, 3, >100) и РерЮсоссив а88ассйато1уйси8 (10, >30, 3, >100). Помимо этого, данные соединения также проявляют цитотоксичность ίη уйто против клеток карциномы носоглотки человека с 1С₅₀ 2,2, 3,5, 0,6 и 1,8 мк/мл для флоеодиктина А, В, А1-А7 и С1-С2 соответственно.

И8 4292429 описывает активность

1-[2-[2-(2-хлорфенил)-2-имидазолин-1-ил]этил]-3-(п-толил)мочевины,

1-[2-[2-(4-пиридил)-2-имидазолин-1 -ил]этил]-3 -(4-карбоксифенил)мочевины и

1-[2-[2-(хлороанилинометил)-2-имидазолин-1-ил] этил]-3-(п-толил)мочевины против эпидермоидной карциномы, индуцированной диэтилнитрозамином (ΌΑΕΝΑ) в легких, трахеи и гортани у сирийских золотистых хомячков или против асцитной карциномы Эрлиха у мышей.

С другой стороны, были описаны некоторые другие 1,2-дизамещенные циклические амиды, не имеющие отношения к данному уровню техники. В частности, И8 2743255 описывает процесс получения смол, которые являются ценными в качестве химических реагентов

Рак является лидером в качестве причин смерти у животных и людей. В целях получения активных и безопасных противоопухолевых агентов для лечения пациентов, страдающих от рака, предпринимались и предпринимаются различные меры. Задачей, на решение которой направлено настоящее изобретение, является обеспечение нижеуказанными соединениями, которые пригодны для лечения рака.

Сущность изобретения

В одном аспекте настоящее изобретение касается соединений общей формулы I или их фармацевтически приемлемых солей, таутомеров или стереоизомеров

где К.1, К₂, К₃ и К₅, каждый независимо, выбран из группы, состоящей из Н, ΝΟ₂, СН СОО-алкила, замещенного или незамещенного С1-С1₂-алкила, замещенного или незамещенного С₂-С1₂-алкенила, замещенного или незамещенного С₂-С1₂-алкинила и замещенного или незамещенного С₂-С1₂-ацила;

Υ выбран из группы, состоящей из замещенного или незамещенного С₂-С1₂-алкилена, замещенного или незамещенного С2-С12-алкенилена и замещенного или незамещенного С2-С12-алкинилена;

X выбран из группы, состоящей из О, 8 и ΝΚ,,;

К_а выбран из группы, состоящей из Н, ΝΟ₂, ΟΝ, СОО-алкила, замещенного или незамещенного С1-С1₂-алкила, замещенного или незамещенного С₂-С1₂-алкенила, замещенного или незамещенного С₂-С1₂-алкинила и замещенного или незамещенного С₂-С1₂-ацила;

К₄ выбран из группы, состоящей из замещенного или незамещенного С1-Сз₀-алкила, замещенного или незамещенного С₂-С₃₀-алкенила, замещенного или незамещенного С₂-С₃₀-алкинила и замещенного или незамещенного С4-С30-алкенинила; и пунктирная линия обозначает необязательно дополнительную связь, которая расположена при НтСь, если отсутствует К_ь при С_ь-Х, если отсутствует К₅ или при С_ь-Н, если отсутствует К₂;

за исключением соединения К формулы

Настоящее изобретение также относится к выделению соединений формулы I из мозаичного коралла семейства Меапйпшйае, род Меапйппа, вид шеапйтйез и образованию производных из этих соединений.

В другом аспекте настоящее изобретение также направленно на использование соединений формулы I, включая соединение К, или их фармацевтически приемлемых солей, таутомеров или стереоизоме ров для лечения рака или для получения лекарственного средства для лечения рака.

В другом аспекте настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим соединение формулы I, включая соединение К, или их фармацевтически приемлемые соли, таутомеры или стереоизомеры совместно с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем.

- 2 013160

Подробное описание предпочтительного варианта осуществления изобретения

Настоящее изобретение относится к соединениям общей формулы I, согласно вышеприведенному определению.

В этих соединениях заместители могут быть выбраны согласно следующим указаниям.

Алкильные, алкиленовые и алкоксильные группы предпочтительно имеют от 1 до 30 атомов углерода. Еще один предпочтительный класс алкильных, алкиленовых или алкоксильных групп имеет от 1 до 12 атомов углерода, особенно предпочтительные алкильные, алкиленовые и алкоксильные группы имеют от 1 до 6 атомов углерода и особенно наиболее предпочтительные алкильные, алкиленовые и алкоксильные группы имеют от 1 до 4 атомов углерода. Особенно предпочтительными алкильными группами в соединениях настоящего изобретения являются метил, этил, пропил, включая изопропил, и бутил. Особенно предпочтительными алкоксильными группами в соединениях настоящего изобретения являются метокси, этокси, пропокси, включая изопропокси, и бутокси, включая трет-бутил. Другой особенно наиболее предпочтительный класс алкильных и алкиленовых групп имеет от 4 до 12 атомов углерода, хотя более предпочтительно от 5 до 8 атомов углерода. Особенно предпочтительными алкильными группами в соединениях настоящего изобретения являются пентил, гексил, гептил или октил. Другой предпочтительный класс алкильных групп имеет от 1 до 20 атомов углерода, хотя более предпочтительно от 6 до 18 атомов углерода. Используемый в данном описании термин алкил, если не определено иначе, относится как к циклическим, так и нециклическим группам, хотя циклические группы должны содержать, по крайней мере, кольцо из трех углеродных членов.

Алкенинильная группа определяется как алкильная группа, содержащая одну или более двойных связей и одну или более тройных связей, и предпочтительными алкенинильными группами являются такие группы, которые имеют от 4 до 30 атомов углерода. Еще один предпочтительный класс алкенинильных групп имеет от 6 до 18 атомов углерода.

Предпочтительные алкенильные, алкинильные, алкениленовые и алкиниленовые группы в соединениях настоящего изобретения имеют одно или более ненасыщенных звеньев и от 2 до примерно 30 атомов углерода. Еще один предпочтительный класс алкенильных, алкинильных, алкениленовых и алкинилиновых групп имеет от 4 до примерно 20 атомов углерода и наиболее предпочтительно от 6 до 18 атомов углерода. Термины алкенил, алкинил, алкенилен и алкинилин, используемые в данном описании, относятся как к циклическим, так и нециклическим группам, хотя циклические группы должны содержать, по крайней мере, кольцо из трех углеродных членов. Другие предпочтительные классы алкенильных, алкинильных, алкениленовых и алкиниленовых групп в соединениях настоящего изобретения имеют от 2 до 12 атомов углерода, еще более предпочтительно от 2 до 6 атомов углерода.

Алкильные, алкенильные, алкинильные, алкенинильные, алкиленовые, алкениленовые и алкиниленовые группы необязательно могут быть замещены группой, выбранной из ОН, ΝΟ₂, 8Н, ΟΝ, галогена, С(=О)Н, необязательно замещенного С1-С1₂-алкоксила, необязательно замещенного

С1-С1₂-алканоилоксила, необязательно замещенного С₄-С₁₉-ароилоксила, необязательно замещенного С₄-С1₆-аралканоилоксила, галогена, необязательно замещенного С₄-С₁₈-арила, амина, моно(С1-С12-алкил)амина и ди(С1-С12-алкил)амина, необязательно замещенного гуанидина, необязательно замещенного С1-С1₂-алкоксикарбонила, необязательно замещенного С₄-Сц-арилоксикарбонила, необязательно замещенного С₄-С₁₁-аралкилоксикарбанила, карбамоила, ^(С/-СТ₀-алкил)карбамоила и Ν,Ν-диШ! -С₂₀-алкил)карбамоила.

Арильные группы, подходящие для соединений настоящего изобретения, включают группы с одним и несколькими кольцами, включая группы с несколькими кольцами, которые содержат разделенные или конденсированные арильные или гетероарильные кольца. Типичные арильные группы содержат от 1 до 3 колец и от 4 до примерно 18 атомов углерода в кольце. Особенно предпочтительные арильные группы включают замещенный или незамещенный фенил, нафтил, бифенил, фенантрил и антрацил.

Подходящие ацильные группы имеют от 2 до примерно 12 атомов углерода, более предпочтительно от 2 до примерно 8 атомов углерода, еще более предпочтительно от 2 до примерно 6 атомов углерода и наиболее предпочтительно 2 атома углерода.

Арильная и ацильная группы могут быть замещены при одном или нескольких доступных положениях одной или несколькими группами, например ОН, ОК', =О, 8Н, 8К', 8ОК', 8О₂К', ΝΟ₂, ΝΗ₂, ΝΗΚ'. Ν(Κ')₂, =ΝΚ', МНСОК.Ъ[(СОК')₂, Ν ЛОЗС МН(С=МН)1\1Н₂, МН(С=№)МНВ, МН(С=№)МК'₂, ΟΝ, галоген, С(=О)Н, С(=О)К⁴, СО2Н, СО2К', ОС(=О)К⁴, где каждая из К' групп независимо выбрана из группы, состоящей из ОН, NΟ2, ЯН₂, 8Н, СИ, галогена, =О, С(=О)Н, С(=О)СН₃, СО₂Н, замещенного или незамещенного С₁-С₁₂-алкила, замещенного или незамещенного С₂-С₁₂-алкинила, замещенного или незамещенного С₂-С₁₂-алкинила или замещенного или незамещенного арила, где данные группы сами замещены, причем заместители могут быть выбраны из вышеуказанного списка.

Подходящие галоидные заместители в соединениях настоящего изобретения включают Е, С1, Вг и I.

Термин «фармацевтически приемлемые соли, производные, пролекарства» относятся к любой фармацевтически приемлемой соли, сложному эфиру, сольвату, гидрату или любому другому соединению, которое, при введении пациенту, способно обеспечивать (прямо или косвенно) таким соединением, как описано здесь. Однако следует понимать, что фармацевтически неприемлемые соли также находятся в

- 3 013160 рамках изобретения, так как они могут быть пригодны для приготовления фармацевтически приемлемых солей. Получение солей, пролекарств и производных можно проводить способами, известными в данной области техники.

Например, фармацевтически приемлемые соли соединений, приведенных в данном описании, синтезированы исходя из исходных соединений, которые содержат основные или кислотные остатки, посредством стандартных химических методов. Например, в основном такие соли получены взаимодействием свободной кислоты или свободного основания со стехиометрическим количеством соответствующего основания или кислоты в воде, или органическом растворителе, или в их смеси, образуя данные соединения. В основном предпочтительными являются неводные среды, такие как эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил. Примеры кислотно-аддитивных солей включают аддитивные соли минеральных кислот, например, такие как гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, сульфат, нитрат, фосфат, и соли присоединения органических кислот, например, такие как ацетат, трифторацетат, малеат, фумарат, цитрат, оксалат, сукцинат, тартрат, соль яблочной кислоты, соль миндальной кислоты, метансульфанат и п-толуолсульфанат. Примеры основно-аддитивных солей включают неорганические соли, например, такие как натриевые, калиевые, кальциевые и аммониевые соли, и соли органических оснований, например, такие как этилендиамин, этаноламин, Ν,Ν-диалкиленэтаноламин, триэтаноламин, и основные соли аминокислот.

Термин «таутомер» относится к двум или более структурным изомерам определенного соединения, которые существуют в виде равновесных форм и быстро переходят из одной изомерной формы в другую, например, как амид-имид, лактам-лактим и т. д.

Соединения изобретения могут находиться в кристаллической форме как в виде свободных соединений, так и в виде сольватов (например, гидратов), и предполагается, что обе эти формы находятся в рамках настоящего изобретения. Способы растворения общеизвестны в данной области техники.

Соединения настоящего изобретения, представляемые вышеописанной формулой I, могут включать некоторые типы энантиомеров. Помимо этого, возможна изомерия у двойной связи, следовательно, в некоторых случаях молекула может существовать в виде (Е)- или (2)-изомера. Одиночный изомер и смесь изомеров находятся в рамках и соответствуют сущности изобретения.

Предпочтительными соединениями изобретения являются такие, у которых Υ является замещенным или незамещенным С1-Сб-алкиленом, более предпочтительно замещенным или незамещенным С1-С4-алкиленом. Особенно предпочтительными являются метилен, этилен, пропилен, изопропилен и бутилен. Наиболее предпочтительной является незамещенная С₄-алкиленовая цепь.

Особенно предпочтительны Κ₁, Κ₂, К₃ и Κ₅, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из Н, ОН, ΝΟ₂, ΝΗ₂, 8Н, ΕΝ, галогена, С(=О)Н, СО₂Н, СОО-алкила, замещенного или незамещенного С₁-С₆-алкила, замещенного или незамещенного С₂-С₆-ацила. В варианте осуществления изобретения все они являются Н.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения X является ΝΚ_α, где ΝΚ,, предпочтительно выбран из группы, состоящей из Н, ОН, NΟ₂, ХН₂. 8Н, ΕΝ, галогена, С(=О)Н, СО₂Н, СОО-алкила, замещенного или незамещенного С₁-С₆-алкила, замещенного или незамещенного С₂-С₆-ацила, причем особенно предпочтительно наличие Н и СОО-алкила.

Особенно предпочтительными соединениями изобретения являются такие, где К₄

η целое число от 1 до 12, более предпочтительно от 1 до 8;

т целое число от 1 до 10 и особенно предпочтительно от 1 до 5;

К.₆ выбран из группы, состоящей из Н, ОН, галогена, С(=О)Н, необязательно замещенного С1-С1₂-алкоксила, необязательно замещенного С1-С1₂-алканоилоксила, амина, моно(С1-С1₂-алкил)амина, ди(С1-С1₂-алкил)амина, гуанидина, С₁-С₁₂-алкоксикарбонила, карбамоила, Х-(С/-С.’₂₀-алкил)карбамоила и ^^ди^-С^-алкил^арбамоила; и пунктирная линия обозначает дополнительную одинарную или двойную связь.

Особенно предпочтительно расположение двойной связи между С₁-С₂ и тройной связи между С3-С4.

Особенно предпочтительно присутствие дополнительной связи, расположенной при Ν,,-ΟΈ если отсутствует Κι, при С_ь-Х, если отсутствует Κ₅, или при Ο,-Ν₀, если отсутствует К.₂, и наиболее предпочтительно при С_ь-Х, если отсутствует Κ₅.

- 4 013160

Более детально изобретение представляет соединения формулы II

где Κι, К₂ и К₃, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из Н, ΝΟ₂, ΟΝ, СОО-алкила, замещенного или незамещенного С1-С1₂-алкила, замещенного или незамещенного С₂-С₁₂-алкенила, замещенного или незамещенного С₂-С₁₂-алкинила и замещенного или незамещенного С₂-С₁₂-ацила;

Υ выбран из группы, состоящей из замещенного или незамещенного С₁-С₁₂-алкилена, замещенного или незамещенного С₂-С₁₂-алкенилена и замещенного или незамещенного С₂-С₁₂-алкинилена;

X выбран из группы, состоящей из О, 3 и ΝΗ; и

К₄ выбран из группы, состоящей из замещенного или незамещенного С₁-С₃о-алкила, замещенного или незамещенного С₂-С₃₀-алкенила, замещенного или незамещенного С₂-С₃₀-алкинила и замещенного или незамещенного С4-С3о-алкенинила;

или их фармацевтически приемлемую соль, таутомер или стереоизомер.

Предпочтительными соединениями по формуле II являются такие соединения, у которых Υ является замещенным или незамещенным С|-С₆-алкиленом. более предпочтительно замещенным или незамещенным С₁-С₄-алкиленом. Особенно предпочтительными являются метилен, этилен, пропилен, изопропилен и бутилен. Наиболее предпочтительной является незамещенная С₄-алкиленовая цепь.

Особенно предпочтительны К₁, К₂ и К₃, каждый из которых независимо выбран из группы, состоящей из Н, ОН, ΝΟ₂, ΝΗ₂, 3Η, ΟΝ, галогена, С(=О)Н, СО₂Н, СОО-алкила, замещенного или незамещенного С₁-С₆-алкила, замещенного или незамещенного С₂-С₆-ацила. В варианте осуществления изобретения все они являются Н.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения X является ΝΗ.

Особенно предпочтительными соединениями изобретения являются такие, у которых К₄ где η целое число от 1 до 12, более предпочтительно от 1 до 8;

К₆ выбран из группы, состоящей из Н, ОН, галогена, С(=О)Н, необязательно замещенного С₁-С₁₂-алкоксила, необязательно замещенного С₁-С₁₂-алканоилоксила, амина, моно(С₁-С₁₂-алкил)амина, ди(С₁-С₁₂-алкил)амина, гуанидина, С₁-С₁₂-алкоксикарбонила, карбамоила, Н-Пл-СЧ-алкил/карбамоила и НЧ-диНл-СЧ-алкил/карбамоила; и пунктирная линия обозначает дополнительную одинарную или двойную связь.

Особенно предпочтительными соединениями изобретения являются следующие:

Соединение А является морским природным продуктом, выделенным из небольшого образца мозаичного коралла семейства Меапбпшбае, род Меапбппа, вид теапбтйек 31712. Данный коралл был собран в ходе подводного погружения в Карибском море рядом с Мотагуа на глубине 40 м [υΤΜ/ΝΑΌ 1927 (североамериканская система координат 1927, зоны 15 и 16) координата X: 362642; координата Υ: 1751928] и его описание следующее: колонии являются массивными структурами с меандройдной или флабелойдной формой и с полипами в известковом скелете. Размер может достигать 30 см в диаметре с бледножелтой или коричневой окраской.

- 5 013160

Кроме того, соединение А было синтезировано согласно процессу синтеза по схеме 1.

Данный процесс включает в себя следующие последовательные ключевые стадии:

a) Метилолеат был подвергнут окислительному расщеплению углерод-углеродной двойной связи, давая соответствующий альдегид 12;

b) альдегид 12 был превращен в винилиодид 13, следуя стандартным, описанным в литературе методикам;

c) реакция сочетания Соногашира между йодоалкинилом 13 и 1-октином с последующим гидролизом сложноэфирной группы енина 14 в основной среде дала кислоту 15;

ά) реакция сочетания между кислотой 15 и деблокированным производным спермидина 16 при стандартных, описанных в литературе условиях приводила к соответствующему амиду 17;

е) циклизация соединения 17 в присутствии Т1С1₄ давала 1,4,5,6-тетрагидропиримидиновое производное 18 и

1) реакция сочетания 18 с Н,И'-бис-(трет-бутоксикарбонил)-2-метил-2-тиопсевдомочевиной с последующим снятием защитных Вос групп в соединении 19 приводила к соединению А.

Аналоги с различными функциональными группами или заместителями могут быть синтезированы из данных соединений с помощью обычных методик синтетической органической химии, которые хорошо известны специалисту в данной области. Например, с помощью гидролиза, озонолиза, эпоксидирования по Шарплесу или реакции Дильса-Альдера. Помимо этого, аналоги могут также быть синтезированы, используя методики, которые описаны в схеме 1, с подходящими интермедиатами.

Важной чертой описанных выше соединений по формуле I и II является их биологическая активность и в особенности их цитотоксическая активность. Данное изобретение обеспечивает новыми фармацевтическими композициями соединений общей формулы I и II, которые обладают цитотоксической активностью, и их применением в качестве противоопухолевых агентов. Таким образом, далее настоящее изобретение обеспечивает фармацевтические композиции, содержащие соединение данного изобретения, его фармацевтически приемлемые соли, производные, пролекарства или стереоизомеры с фармацевтически приемлемым носителем.

Примеры фармацевтических композиций включают в себя любые твердые (таблетки, пилюли, капсулы, гранулы и т.д.) или жидкие (растворы, суспензии или эмульсии) композиции для перорального, местного или парентерального применения.

Применение соединений или композиций настоящего изобретения может осуществляться любым подходящим способом, например, таким как внутривенная инфузия, с помощью препарата для перорального приема и внутрибрюшинное и внутривенное введение.

Предпочтительно, чтобы используемое время инфузии составляло до 24 ч, более предпочтительно 2-12 ч, с наибольшим предпочтением от 2-6 ч. Короткие времена инфузии, которые позволяют проводить лечение без ночевки в госпитале, являются чрезвычайно нежелательными. Однако, если необходимо, время инфузии может быть от 12 до 24 ч и даже более. Инфузия может проводиться с подходящими интервалами, например от 1 до 4 недель. Фармацевтические композиции, содержащие соединения изобретения, могут быть доставлены, например, с помощью липосом или инкапсуляции в наносферах в случае составов с замедленным высвобождением или с помощью других стандартных способов доставки.

- 6 013160

Точные дозировки соединений будут изменяться в соответствии со спецификой лекарственной формы, способа применения и специфики места, пациента и опухоли, которую необходимо обработать. Необходимо принимать во внимание и другие факторы, такие как возраст, вес тела, пол, питание, время применения, скорость экскреции, состояние пациента, совместное применение лекарств, чувствительность реакции и тяжесть заболевания. Применение можно проводить непрерывно или периодически в пределах максимально переносимой дозы.

Соединения и композиции настоящего изобретения могут быть использованы с другими лекарственными средствами для обеспечения комбинированной терапии. Другие лекарственные средства могут составлять часть той же композиции или использоваться в качестве отдельной композиции для одновременного применения или применения в разное время.

Противоопухолевая активность данных соединений включает лейкемию, рак легких, рак толстой кишки, рак почек, рак простаты, рак яичников, рак молочной железы, рак поджелудочной железы, рак шейки матки, саркомы и меланомы.

Примеры

Пример 1. Описание коралла и место сбора.

Образцы мозаичного коралла семейства Меапбпшбае, род Меапбтша, вид шеаибтйек 31712 собирают в ходе подводного погружения в Карибском море рядом с Мотагуа на глубине 40 м [υΤΜ/ΝΑΌ 1927 (североамериканская система координат 1927, зоны 15 и 16) координата X: 362642; координата Υ: 1751928].

Пример 2. Выделение соединения А.

Замороженный образец (1646 г) примера 1 измельчают в порошок и дважды тщательно экстрагируют изопропанолом. Объединенные экстракты концентрируют, получая 8,67 г сырья. Это вещество заново суспензируют в Н₂О (500 мл) и экстрагируют гексаном (3x500 мл, выход 1,18 г), ЕЮАс (3x500 мл, выход 87 мг) и н-ВиОН (2x250, выход 394 мг).

Соединение А (1,2 мг) выделяют из активной н-ВиОН фракции с помощью многократной полупрепаративной ВЭЖХ (8утте1туРгер С-187 мкм, 7,8x150 мм колонка, Н₂О (0,05% ТФК): СНзСN (0,05% ТФК) градиент, УФ-детекция).

Соединение А: бледно-желтое масло. НВРАВМ8, т/ζ 430,3917 [М+Н]⁺ (посчитано для С₂₆Н₄₈Щ 430,3910). Ή (500 МГц) и ¹³С (125 МГц), см. табл. 1.

Таблица 1 'Н и ¹³С ЯМР данные для соединения А (СЭС1₃)

И’	¹³С δ	»Н δ Гм, чЛ(Гц)1	СО8У	кнмвс
1	158,7	-	-	Н-2
2	42,0	3,22 (т,7,0)	н-з	Н-З, Н-4
3	26,8	1,63 (м\|	Н-2, Н-4	Н-2, Н-4, Н-5
4	25,9	1,77 (м)	Н-З, Н-5	Н-2, Н-З, Н-5
5	52,4	3,50 (м)	Н-4	Н-З, Н-4, Н-6
6	47,1	350(м)	Н-7,Н-8	Н-5, Н-7, Н-8
7	19,9	2,02 (кв,6,0)	Н-6, Н-8	Н-6, Н-8
8	39,9	3,36 (т,6,О)	Н-6, Н-7	Н-6, Н-7
9	165,0	-	-	Н-5, Н-б, Н-8, Н-10, Н-11
10	32,4	2,54 (т.8,0)	Н-11, Н-12	Н-11
11	28,0	1,63 (м)	Н-10	Н-10
12	30,2*	1,40 (м)	Н-11	Н-10, Н-11
13	30,1*	1,40 (м)	-	-
14	30,1*	1,40 (м)	-	-
15	30,0	1,40 (м)	-	Н-16, Н-17
16	31,0	2,27 (м)	Н-15, Н-17	Н-17, Н-18
17	142,8	5,79 (дт, 10,5, 7,5)	Н-16, Н-18	Н-15, Н-16
18	110,8	5,41 (д, 10,5)	Н-17, Н-21	Н-16
19	78,4	-	-	Н-17, Н-21
20	110,8	-	-	Н-18, Н-21, Н-22
21	20,1	2,31 (дт, 6,5, 2,0)	Н-18, Н-22	Н-22
22	30,0	1,50 (м)	Н-21, Н-23	Н-21, Н-23
23	29,6	1,40 (м)	Н-22	Н-22
24	32,5	1,32 (м)	Н-25	Н-22, Н-23, Н-25, Н-26
25	23,7	1,32 (м)	Н-24, Н-26	Н-23, Н-24, Н-26
26	14,4	0.91 (т,7,0\|	Н-25	Н-25

*Отнесение может быть изменено.

- 7 013160

Пример 3. Синтез соединения В

Соединение А Соединение В

Через раствор соединения А (8,0 мг, 0,015 ммоль) в СН₂С1₂:МеОН (1,0 мл:0,1 мл) барботируют поток О₃ при -78°С до тех пор, пока смесь не станет голубой. Затем при -78°С в течение 10 мин через реакцию барботируют поток аргона, добавляют диметилсульфид (14 мкл, 0,19 ммоль). Реакцию перемешивают при 23°С в течение 30 мин и затем растворитель упаривают под вакуумом, получая остаток, который очищают с помощью ВЭЖХ (8утше1туРтер С-18 7 мкм, 7,8x150 мм колонка, Н₂О (0,1% ТФК): СН₃СЫ (0,1 % ТФК) градиент, УФ-детекция), получая соединение В (2,8 мг, 46%).

Ή ЯМР (500 МГц, С1ГО1)) δ 3,51 (м, 4Н), 3,38 (т, 1=6,0 Гц, 2Н), 2,55 (т, 1=7,8 Гц, 2Н), 2,04 (м, 2Н), 1,75 (м, 2Н), 1,63 (м, 6Н), 1,38 (м, 14Н).

¹³С ЯМР (125 МГц, С1ГО1)) δ 165,1, 162,9, 52,4, 47,1, 42,0, 39,9, 32,4, 30,8, 30,5, 30,2, 30,0, 29,9, 27,9, 26,8, 25,9, 19,9.

НВМ8 (ΜΑΕΌΙ): 324,2757 [М+Н]⁺ (посчитано для С1₇Н₃₄Х₅О1 324,2763).

Пример 4. Синтез соединения А.

Раствор метилолеата (10,0 г, 33,7 ммоль) в безводном СН₂С1₂ (100 мл) охлаждают до -78°С и барботируют поток О3 через реакционную смесь до тех пор, пока раствор не станет светло-голубым (10 мин). Через реакционную смесь барботируют аргон и медленно добавляют раствор РРй₃ (19,7 г, 75,1 ммоль) в СН₂С1₂ (100 мл). Реакционную смесь нагревают до 23°С и перемешивают 18 ч. Растворитель упаривают досуха и твердое вещество растирают в порошок с холодным гексаном (80 мл). Фильтрат упаривают, получая желтое масло. Масло очищают с помощью хроматографии на силикагеле (СН₂С1₂:гексан, 1:1 и затем СН₂С1₂:Е1₂О, 1:1), получая два ожидаемых альдегида, нональ (4,80 г, 100%) и метил-8формилоктанат 12 (6,28 г, 100%), оба в виде бесцветных масел.

Ή ЯМР (300 МГц, СЭС1₃) δ 9,76 (с, 1Н), 3,66 (с, 3Н), 2,41 (т, 1=7,3 Гц, 2Н), 2,30 (т, 1=7,3 Гц, 2Н), 1,61 (м, 4Н), 1,31 (м, 6Н).

¹³С ЯМР (75 МГц, СЭС1₃) δ 202,4, 173,8, 51,1, 43,5, 33,7, 28,7, 28,6, 28,5, 24,5, 21,7.

М8 (АРС1): 187 (Μ+1)⁺. ΚΙ'0.2 (СН₂С1₂).

К раствору (йодометил)трифенилфосфонийиодида (39,89 г, 75,3 ммоль) в безводном ТГФ (300 мл) по каплям добавляют ΝαΠΜΟδ (75,3 мл, 1,0 М в ТГФ, 75,3 ммоль) и перемешивают в течение 10 мин при 23°С. Реакционную смесь охлаждают до -60°С и по каплям добавляют 1,3-диметил-3,4,5,6тетрагидро-2(1Н)-пиримидинон (15,3 мл, 126,4 ммоль) и немедленно охлаждают до -78°С. К полученному раствору медленно, в течение 30 мин, прибавляют раствор метил-8-формилоктаноата 12 (5,6 г, 30,1 ммоль) в ТГФ (290 мл), перемешивают 5 мин при -78°С и нагревают до 23°С. Спустя 2 ч смесь разбавляют гексаном (300 мл) и промывают насыщенным раствором №1С1 (300 мл). Водный слой экстрагируют гексаном (3x300 мл) и объединенные органические слои высушивают над Ыа₂8О₄, фильтруют и упаривают. После очистки с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (СН₂С1₂:гексан, 1:1) получают (2)-метил-10-йододек-9-еноат 13 (7,21 г, 77%) в виде бесцветного масла.

Ή ЯМР (300 МГц, СЭС1₃) δ 6,16-6,12 (м, 2Н), 3,66 (с, 3Н), 2,30 (т, 1=7,3 Гц, 2Н), 2,13 (м, 2Н), 1,60 (м, 2Н), 1,40-1,20 (м, 8Н).

¹³С ЯМР (75 МГц, СЭС1₃) δ 174,3, 141,3, 82,2, 51,4, 34,6, 34,0, 29,7, 29,0, 28,8, 27,8, 24,9.

М8 (АРС1): 184 (М-128)⁺. Ш=0,25 (СН₂С1₂:гексан, 1:1).

К суспензии (2)-метил-10-йододек-9-еноата 13 (7,21 г, 22,9 ммоль), Рб(РРй₃)₂С1₂ (1,56 г, 2,29 ммоль) и Си1 (1,31 г, 6,88 ммоль) в безводном ацетонитриле:Е1₃Ы (170 мл, 34 мл) в течение 4 ч при -20°С прибавляют раствор 1-октина (4,06 мл, 27,51 ммоль) в ацетонитриле :Εΐ₃Ν (50 мл, 10 мл). Реакционную смесь

- 8 013160 нагревают до 23°С. Спустя 18 ч добавляют НС1 1н. (200 мл) и смесь экстрагируют СН₂С1₂ (3x250 мл). Объединенные органические слои высушивают над №ь8О₄. фильтруют и упаривают. После очистки с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (СН₂С1₂:гексан. от 10:1 до 1:1) получают (2)-метилоктадек-9-ен-11-иноат 14 (5.41 г. 81%) в виде бесцветного масла.

Ή ЯМР (300 МГц. СССТ) δ 5.80 (дт. 1=10.3 и 7.3 Гц. 1Н). 5.43 (д. 1=10.3 Гц. 1Н). 3.66 (с. 3Н). 2.352.23 (м. 6Н). 1.61-1.40 (м. 6Н). 1.40-1.25 (м. 12Н). 0.89 (ушир.т. 3Н).

¹³С ЯМР (75 МГц. СОСГ) δ 174.3. 142.4. 109.4. 94.5. 77.3. 51.4. 34.1. 31.3. 29.9. 29.1. 29.0. 28.9. 28.8. 28.7. 28.5. 24.9. 22.5. 19.5. 14.0.

М8 (АРС1): 293 (М+1)⁺. Κί=0.30 (СН₂С1₂:гексан. 1:1).

К раствору (2)-метилоктадек-9-ен-11-иноата 14 (2.26 г. 8.12 ммоль) в метаноле (8.5 мл) добавляют раствор 10 М №1ОН (1.62 мл. 16.2 ммоль) при 23°С. Раствор перемешивают в течение 3 ч. затем еще добавляют 10 М №1ОН (1.62 мл. 16.2 ммоль) и спустя 2 ч прибавляют новый 10 М №1ОН (1.62 мл. 16.2 ммоль). Спустя 2 ч после последнего добавления реакция завершается. и растворитель упаривают под вакуумом. Остаток разбавляют Н₂О и подкисляют с помощью 1н. НС1 до рН 2. Водный слой экстрагируют СН₂С1₂ (2x200 мл). объединенные органические слои высушивают над безводным Να₂80.₄. фильтруют и упаривают досуха. получая (2)-октадек-9-ен-11-иновую кислоту 15 (2.0 г. 89%) в виде бесцветного масла. которое используется без дальнейшей очистки.

Ή ЯМР (300 МГц. ССС1_;) δ 5.79 (дт. 1=10.6 и 7.3 Гц. 1Н). 5.42 (ушир.д. 1=10.6 Гц. 1Н). 2.37-2.24 (м. 6Н). 1.65-1.40 (м. 6Н). 1.40-1.23 (м. 12Н). 0.88 (т. 1=7.0 Гц. 3Н).

¹³С ЯМР (75 МГц. СОСГ) δ 179.9. 142.4. 109.4. 94.5. 77.3. 34.0. 31.3. 29.9. 29.0. 28.9 (2). 28.8. 28.7. 28.5. 24.6. 22.6. 19.5. 14.0.

М8 (АРС1): 279 (М+1)⁺. Κί=0.40 (СН₂С1₂:МеОН. 10:1).

К раствору спермидина (3.0 г. 20.6 ммоль) в ТГФ (100 мл) медленно добавляют раствор 2-(Вос-оксиамино)-2-фенилацетонитрила (10.14 г. 20.6 ммоль) в ТГФ (20 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают при 0°С в течение 1 ч и затем растворитель упаривают под вакуумом. Остаток пропускают через силикагель и элюируют СН₂С1₂:Е1ОАе 7:3 и затем СН₂С1₂:МеОН 1:1. получая трет-бутил4-(3-(трет-бутилкарбамат)пропил)бутилкарбамат 16 (5.3 г. >100%) в виде бесцветного масла.

Ή ЯМР (300 МГц. С1ТО1)) δ 3.15 (т. 1=6.8 Гц. 2Н). 3.08 (т. 1=6.8 Гц. 2Н). 3.00 (т. 1=6.8 Гц. 4Н). 1.83 (м. 2Н). 1.69 (м. 2Н). 1.55 (м. 2Н). 1.44 (ушир.с. 18Н).

М8 (АРС1): 346 (М+1)⁺. Κί=0.18 (СН₂С1₂:МеОН. 8:2).

К раствору 15 (1.01 г. 3.65 ммоль) и 16 (1.89 г. 5.47 ммоль) в СН₂С1₂ (50 мл) при 23°С добавляют Εΐ₃Ν (2.58 мл. 18.6 ммоль) и бензатриазол-1-илокси-трис-(диметиламино)фосфонийгексафторфосфат (2.42 г. 5.47 ммоль). Реакционную смесь перемешивают 3 ч при 23°С. затем разбавляют СН2С12 и промывают 1 М НС1 и насыщенным раствором №С1. Объединенные органические слои сушат над №ь8О₄. фильтруют и упаривают. Полученный остаток очищают с помощью флэш-хроматографии на силикагеле (СН₂С1₂:Е1ОАе от 6:1 до 3:1). выделяя соединение 17 (2.14 г. 96%) в виде бесцветного масла.

Ή ЯМР (500 МГц. С1ТО1)) δ 5.79 (дт. 1=10.5 и 7.5 Гц. 1Н). 5.40 (ушир.д. 1=9.5 Гц. 1Н). 3.34 (м. 4Н). 3.07-3.01 (м. 4Н). 3.35-2.25 (м. 4Н). 1.76-1.31 (м. 16Н). 1.43 (с. 28Н). 0.90 (т. 1=6.8 Гц. 3Н).

¹³С ЯМР (125 МГц. С1ТО1)) δ 175.5. 175.2. 158. 142.9. 110.7. 95.0. 78.4. 32.4. 30.9. 30.5. 30.4. 30.3. 30.1. 29.9. 29.9. 29.5. 28.8. 23.6. 20.1. 14.4.

М8 (АРС1): 628 (М+23)⁺.

К суспензии 17 (542 мг. 0.89 ммоль) в безводном ксилене (16 мл) при 23°С медленно прибавляют Т1С1₄ (98 мк. 0.98 ммоль). Смесь нагревают при 165°С в течение 1 ч. После охлаждения реакционной смеси до 23°С добавляют раствор №1ОН (270 мг. 6.75 ммоль) в МеОН (15 мл). фильтруют через Се1йе® и промывают МеОН (20 мл). Фильтрат концентрируют досуха. добавляют концентрированный водный раствор №1С1 (50 мл) и смесь экстрагируют СН₂С1₂ (3x50 мл). Объединенные органические слои высушивают над безводным №1₂8О₂. фильтруют и концентрируют. Полученное вещество очищают с помощью хроматографии на ПН₂-селикагеле (СН₂С1₂:МеОН от 16:1 до 1:1). получая (2)-4-(2-(пентадек-6-ен-8инил)-5.6-дигидропиримидин-1(4Н)-ил)бутан-1-амин 18 (131 мг. 38%) в виде желтого масла.

Ή ЯМР (300 МГц. С1ТО1)) δ 5.80 (дт. 1=10.5 и 7.6 Гц. 1Н). 5.41 (д. 1=10.3 Гц. 1Н). 3.49 (м. 4Н). 3.37 (м. 2Н). 2.71 (т. 1=7.0 Гц. 2Н). 2.54 (т. 1=7.8 Гц. 2Н). 2.32 (м. 4Н). 2.02 (м. 2Н) 1.69-1.30 (м. 22Н) 0.92 (т. 1=6.8 Гц. 3Н).

¹³С ЯМР (75 МГц. СОСГ) δ 163.1. 142.0. 109.2. 94.3. 76.9. 51.2. 45.7. 40.9. 38.5. 31.1. 29.7. 29.4. 28.8. 28.7. 28.5. 28.3. 27.3. 27.2. 25.2. 22.3. 19.3. 19.0. 13.8. (два сигнала ¹³С не наблюдались).

М8 (АРС1): 388 (М+1)⁺. Κί=0.32 (δΐ-ΝΉ^ СН₂С1₂:МеОН. 8:1).

К раствору 18 (18 мг. 0.046 ммоль) в безводном ТГФ (0.6 мл) при 23°С добавляют 1.3-бис-(третбутоксикарбонил)-2-метил-2-тиопсевдомочевину (20 мг. 0.069 ммоль). Реакционную смесь нагревают при 65°С в течение 5 ч. затем охлаждают до 23°С. Упаривание под вакуумом дает вещество. которое очищают хроматографией на силикагеле (СН₂С1₂:МеОН от 99:1 до 9:1). получая 19 (7.8 мг. 28%) в виде бесцветного масла.

- 9 013160

Ή ЯМР (300 МГц, СЭ₃ОЭ) δ 5,79 (дт, 1=11,0 и 7,5 Гц, 1Н), 5,41 (м, 1Н), 3,52 (м, 4Н), 3,41 (т, 1=6,5 Гц, 2Н), 3,37 (т, 1=6,0 Гц, 2Н), 2,55 (т, 1=7,5 Гц, 2Н), 2,31 (тд, 1=7,0 и 2,0 Гц, 2Н), 2, 7 (т, 1=7,0 Гц, 2Н), 2,02 (м, 2Н), 1,72 (м, 2Н), 1,61 (м, 4Н), 1,52 (с, 9Н), 1,46 (с, 9Н), 1,49-1,28 (м, 8Н), 0,91 (1, 1=7,0 Гц, 3Н).

¹³С ЯМР (75 МГц, СЭ₃ОЭ) δ 165,0, 164,5, 157,7, 154,2, 142,8, 110,8, 95,1, 84,5, 80,4, 78,4, 52,5, 47,1, 40,9, 39,9, 32,5, 32,4, 30,9, 30,1, 30,0, 29,59, 28,6, 28,55, 27,9, 27,1, 25,8, 23,7, 20,1, 20,0, 14,4.

М8 (АРС1): 630 (М+1)⁺. Κί=0,10 (СН₂С1₂:МеОН, 94:6).

Раствор 19 (22 мг, 3,65 ммоль) в этиленгликоле (2,2 мл) нагревают при 200°С в течение 2 мин. Реакционную смесь охлаждают до 23 °С, разделяют между СН₂С1₂ и насыщенным водным раствором ЫаС1, капая 3 М ΝαΟΗ (рН 14). Водный органический слой экстрагируют СН₂С1₂ и объединенные органические слои высушивают над №₂8О₄, фильтруют и упаривают под вакуумом, получая 31 мг неочищенного соединения А, которое подвергают очистке с помощью ВЭЖХ (8утте1гуРгер С-18 7 мкл, 7,8x150 мм колонка, Н₂О (0,1% ТФК):СН₃СN (0,1% ТФК) градиент, УФ-детекция), получая соединение А (6,1 мг, 32%), которое по всем параметрам идентично соединению, полученному в примере 2.

Пример 5. Определение биологической активности для противоопухолевого исследования.

Конечным этапом настоящих исследований является оценка торможения роста «ίη νίΐτο» культуры опухолевых клеток под действием продолжительного воздействия исследуемых образцов на клетки (табл. 2).

- 10 013160

Таблица 2

Линии клеток

Название	№ АТСС	Вид	Ткань	Характеристики
А549	ССЬ-185	человек	легкое	карцинома легкого «МЗСЪ»
5Κ-ΜΕΣ-28	НТВ-72	человек	меланома	злокачественная меланома
НТ29	НТВ-38	человек	толстая кишка	аденокарцинома толстой кишки
ЬоУо	ССЬ-229	человек	толстая кишка	аденокарцинома толстой кишки
Βονο-ϋοκ		человек	толстая кишка	аденокарцинома толстой кишки (МЕК)
ϋυ-145	НТВ-81	человек	простата	карцинома простаты без андрогенного рецептора
Ι,Ν-саР	СКЬ- 1740	человек	простата	карцинома простаты с андрогенным рецептором
ЗК-ВКЗ	НТВ-30	человек	молочная железа	аденокарцинома молочной железы, Нег2/пеи⁺(плевральный выпот)
ΙΕΚΟν		человек	яичник	аденокарцинома яичников
Ι6Κ0ν-ΕΤ		человек	яичник	аденокарцинома яичников, характеризующаяся ЕТ- 743 резистентными клетками
НеЬа	СС1-2	человек	шейка матки	эпителиодная карцинома шейки матки
НеЬа-АРЬ	ССЪ-3	человек	шейка матки	эпителиодная карцинома шейки матки, характеризующаяся резистентными клетками Аплидин
ΡΑΝΟ1	СКЪ- 1469	человек	поджелуд очная железа	Эпителиодная карцинома поджелудочной железы
ΜϋΑ	НТВ-26	человек	молочная железа	аденокарцинома молочной железы

Ингибирование роста клеток при колориметрическом анализе

Колориметрический тип анализа, с использованием реакции сульфородамина В (8КБ), был адаптирован для количественного измерения роста и выживаемости клеток [используемый метод описан Ρΐιίΐίρ 8кс11ап с1 а1. (1990), №\ν со1оптс1пс су!о1ох1сйу аккау Гог апйсапсег бгид ксгеешпд, 1. №111. Сапкег 1пк1. 82: 1107-1112].

В данном типе анализа используют 96-луночные микроплашки клеточных культур диаметром 9 мм (Мокткпп, 1983; Бапс1о1й, 1988). Большинство линий клеток получены от Американской коллекции типовых культур (АТСС), происходящих от различных типов рака человека.

Клетки выдерживают при 1640 об/мин с 10% БВ8, смешивают с 0,1 г/л пенициллина и 0,1 г/л стрептомицинсульфата и затем инкубируют при 37°С, 5% СО₂ и 98% влажности. Для экспериментов клетки собирают из субконфлюэнтных культур, используя трипсин, и перед выращиванием ресуспензируют в свежей среде.

- 11 013160

Клетки высеивают в 96-луночные микротитровальные плашки из расчета 5х10³ клеток в лунке в 195 мк аликвоте среды и их оставляют присоединяться к поверхности плашки, инкубируя в течение 18 ч в среде без лекарства. После этого образцы добавляют в различные 5 мк аликвоты в диапазоне от 10 до 10^-8 мкг/мл, растворенные в ДМСО:Е1ОН:фосфатно-буферный физиологический раствор (0,5:0,5:99). После 48-часового воздействия измеряют противоопухолевый эффект по 8КВ методике: клетки фиксируют добавлением 50 мкл холодной 50% (вес./об.) трихлоруксусной кислоты (ТХК) и инкубируют в течение 60 мин при 4°С. Плашки промывают деионизированной водой и высушивают. В каждую микротитровальную лунку добавляют 100 мкл раствора 8КВ (0,4% вес./об. в 1% уксусной кислоты) и инкубируют в течение 10 мин при комнатной температуре. Не связавшийся 8КВ удаляют, промывая 1% уксусной кислотой. Плашки сушат на воздухе и связанный остаток растворяют в Тп5 буфере. Оптическую плотность регистрируют с помощью автоматического спектрофотометрического устройства при одной длине волны 490 нм.

Значения среднего +/- стандартного отклонения данных рассчитываются, исходя из трех лунок. Могут быть рассчитаны некоторые параметры клеточного ответа: С1=ингибирование роста, ТС1=полное ингибирование роста (цитотоксический эффект) и ЬС=гибель клеток (цитотоксический эффект).

Табл. 3 иллюстрирует данные биологической активности соединений А, В и 19.

Таблица 3

Данные активности (молярные)

	Простата	Яичники	молочная	Меланома
ои-145	ЬИ-саР	1СНОУ	ΕΟΗΟν-ΕΤ	5К-ВКЗ	8К-МЕЬ-28
Соединение А.	0150 ТС1 ЬС5О	4,24Е-7 8.80Е-7 1,83Е-б	З.ЗЗЕ-7 6,73 Е-7 1,37Е-б\|	5.79Е-7 1.53Е-6 5.31Е-6	4.63Е-7 1.26Е-6 4.42Е-6	7.89Е-7 1,20Е-б Ц81Е-6	6.49Е-7 2.49Е-6 7.66Е-6
Соединение В	0150 ΤΟΙ ЬС5О	>9,29Е-6 >9,29Е-б >9,29Е-6		>9,29Е-6 >9,29Е-6 >9,29Е-6	>9,29Е-6 >9,29Е-6 >9,29Е-6	>9,29Е-6 >9,29Е-6 >9,29Е-6	>9,29Е-б >9,29Е-б >9,29Е-б
		Поджелудочная	Толстая кишка	Шейка матки
А549	РАЯС1	НТ29	ЬОТО	ЬОνοοοχ	НЕЬА	НЕЫ-АРЬ
Соединение А	С15О ΤΟΙ ЪС50	1.22Е-6 3.61Е-6 Ц25Е-5	5,35Е-7 1,16Е-6 2,91 Е-6	Ι,ΟΙΕ-6 2.98Е-6 8.42Е-6	4,75Е-7 8.17Е-7 1,41 Е-6	1,78Е-6 5,14Е-6 1,ЗОЕ-5	8.01Е-7 2.42Е-6 1.04Е-6	5.40Е-7 1.07Е-6 2.11Е-6
Соединение В	0150 ΤΟΙ ЬС50	>9,29Е-6 >9,29Е-6 >9,29Е-6	>9,29Е-6 >9,29Е-6 >9,29Е’б	>9,29Е-б >9,29Е-6 >9,29Е-6	>9,29Е-6 >9,29 Е-6 >9,29Е-6	>9,29Е-6 >9,29Е-6 >9,29Е-6	>9,29Е-6 >9,29Е-6 >9,29Е-6	>9,29Е-б >9,29Е-6 >9,29Е-6

			Соединение А
Молочная железа	МЦА-МВ-231	СГэо	6,19Е-6
ТО1	6,51 Е-6
ЬСбо	6.83Е-6
Толстая кишка	НТ29	С1$о	2.70Е-6
ТО1	3.65Е-6
ЬС₅О	4.92Е-6
Н8СЬ	А549	СИ$о	5.56Е-6
ТСН	7,62Е-6
ЕСм)	1.05Е-5

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims

1. Соединение общей формулы I где К.₁, К₂, К₃ и К₅, каждый независимо, выбран из группы, состоящей из Н, ΝΟ₂, СИ, СОО-алкила, замещенного или незамещенного С1-С1₂-алкила, замещенного или незамещенного С₂-С1₂-алкенила, замещенного или незамещенного С₂-С1₂-алкинила и замещенного или незамещенного С₂-С1₂-ацила;

Υ выбран из группы, состоящей из замещенного или незамещенного С₂-С1₂-алкилена, замещенного или незамещенного С₂-С1₂-алкенилена и замещенного или незамещенного С₂-С1₂-алкинилена;

X выбран из группы, состоящей из О, 8 и ΝΡ,,;

К_а выбран из группы, состоящей из Н, ΝΟ₂, СИ, СОО-алкила, замещенного или незамещенного С1-С1₂-алкила, замещенного или незамещенного С₂-С1₂-алкенила, замещенного или незамещенного С₂-С1₂-алкинила и замещенного или незамещенного С₂-С1₂-ацила;

К₄ выбран из группы, состоящей из замещенного или незамещенного С1-С₃₀-алкила, замещенного или незамещенного С₂-С₃₀-алкенила, замещенного или незамещенного С₂-С₃₀-алкинила и замещенного или незамещенного С₄-С₃₀-алкенинила; и

- 12 013160 пунктирная линия обозначает необязательно дополнительную связь, которая расположена при Ν,,-ί'ι,. если отсутствует В^ при Ο,-Х, если отсутствует В₅, или при Сь-Ы_с, если отсутствует В₂;

где алкильные. алкенильные. алкинильные, алкенинильные, алкиленовые. алкениленовые и алкиниленовые группы необязательно замещены группой. выбранной из ОН. ΝΟ₂. 8Н, СП галогена. С(=О)Н, С1-С1₂-алкоксила, С1-С1₂-алканоилоксила, С₄-С₁₉-ароилоксила, С₄-С₁₆-аралканоилоксила, С₄-С₁₈-арила, амина. моно(С₁-С₁₂-алкил)амина и ди(С₁-С₁₂-алкил)амина, гуанидина, С₁-С₁₂-алкоксикарбонила, С₄-С₁₁-арилоксикарбонила, С₄-С₁₁-аралкилоксикарбанила, карбамоила, №(С/-С_2и-алкил)карбамоила и Ν,Ν-диСС! -С₂₀-алкил)карбамоила;

где ацильные группы могут быть замещены при одном или нескольких доступных положениях одной или несколькими подходящими группами, выбранными из ОН, ОВ', =О, 8Н, 8В', 8ОВ', 8О₂В', ΝΟ₂, ΝΗ₂, ΝΗΚ', Ν^, =ΝΒ', ]\1НСОВ'. НСОВ')₂, NН8Ο₂В', NН(С=NН)NН₂, NН(С=NН)NНВ', ΝΗ^ΝΗΝ^, ΟΝ, галоген, С(=О)Н, С(=О)В', СО₂Н, СО₂В' и ОС(=О)В', где каждая из В' групп независимо выбрана из группы, состоящей из Он, NΟ₂, ΝΗ₂. 8Н, СН галогена, =О, С(=О)Н, С(=О)СН₃, СО₂Н, С₁-С₁₂-алкила, С₂-С₁₂-алкенила, С₂-С₁₂-алкинила и С₄-С₁₈-арила;

или его фармацевтически приемлемая соль, таутомер или стереоизомер.

2. Соединение по п.1, имеющее следующую формулу II:

II где В₁, В₂, В₃, В₄ и Υ определены в п.1 и X выбран из группы, состоящей из О, 8 и ΝΗ.

3. Соединение по п.1 или 2, где Υ является замещенным или незамещенным С₁-Сб-алкиленом и X является ΝΗ.

4. Соединение по п.3, где Υ является незамещенным С₄-алкиленом.

5. Соединение по п.1, где В₁, В₂, В₃ и В₅, каждый независимо, выбирают из группы, состоящей из Н, NΟ₂, ϋΝ, СОО-алкила, замещенного или незамещенного С₁-Сб-алкила или замещенного или незамещенного С₂-С₆-ацила.

6. Соединение по п.5, где В₁, В₂, В₃ и В₅ представляют собой Н.

7. Соединение по п.2, где В₁, В₂ и В₃, каждый независимо, выбран из группы, состоящей из Н, NΟ₂, СИ замещенного или незамещенного С₁-С₆-алкила или замещенного или незамещенного С₂-С₆-ацила.

8. Соединение по п.5, где В₁, В₂, В₃ представляют собой Н.

9. Соединение по любому из пп.1-8, где В₄ является где η целое число от 1 до 12;

т целое число от 1 до 10;

В₆ выбирают из группы, состоящей из Н, ОН, галогена, С(=О)Н, С₁-С₁₂-алкоксила, С₁-С₁₂-алканоилоксила, амина, моно(С₁-С₁₂-алкил)амина, ди(С₁-С₁₂-алкил)амина, гуанидина, С₁-С₁₂-алкоксикарбонила, карбамоила, N-(С₁-С₂₀-алкил)карбамоила и N,N-ди(С₁-С₂₀-алкил)карбамоила; и пунктирная линия обозначает дополнительную одинарную или двойную связь.

10. Соединение по п.9, где η целое число от 1 до 8, т целое число от 1 до 5 и двойная связь находится между С₁-С₂ и тройная связь находится между С₃-С₄.

11. Соединение по п.1 или 2, имеющее следующее формулу:

II или его фармацевтически приемлемая соль, таутомер или стереоизомер.

12. Соединение по п.1 или 2, имеющее следующее формулу:

- 13 013160

13. Соединение по п.1, имеющее следующее формулу:

14. Соединение по любому из предшествующих пунктов, где соединение представляет собой трифторацетатную соль.

15. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из пп.1-14 или его фармацевтически приемлемую соль, таутомер или стереоизомер и фармацевтически приемлемый разбавитель или носитель.

16. Применение соединения по любому из пп.1-14 или его фармацевтически приемлемой соли, таутомера или стереоизомера для получения лекарственного средства.

17. Применение по п.16, где лекарственное средство предназначено для лечения рака.