FI113265B - Menetelmä uusien, verihiutaleiden aggregaatiota estävien 2,5-dioksoimidatsolidinyylijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Menetelmä uusien, verihiutaleiden aggregaatiota estävien 2,5-dioksoimidatsolidinyylijohdannaisten valmistamiseksi Download PDF

Info

Publication number
FI113265B
FI113265B FI962043A FI962043A FI113265B FI 113265 B FI113265 B FI 113265B FI 962043 A FI962043 A FI 962043A FI 962043 A FI962043 A FI 962043A FI 113265 B FI113265 B FI 113265B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
methyl
phenyl
group
mmol
dioxo
Prior art date
Application number
FI962043A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI962043A0 (fi
FI962043A (fi
Inventor
Wolfgang Koenig
Gerhard Breipohl
Jochen Knolle
Gerhard Zoller
Melitta Just
Otmar Klingler
Bernd Jablonka
Hans-Ulrich Stilz
Original Assignee
Hoechst Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from DE4338944A external-priority patent/DE4338944A1/de
Application filed by Hoechst Ag filed Critical Hoechst Ag
Publication of FI962043A0 publication Critical patent/FI962043A0/fi
Publication of FI962043A publication Critical patent/FI962043A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI113265B publication Critical patent/FI113265B/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/66—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/72—Two oxygen atoms, e.g. hydantoin
    • C07D233/76—Two oxygen atoms, e.g. hydantoin with substituted hydrocarbon radicals attached to the third ring carbon atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/021—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)n-C(=0)-, n being 5 or 6; for n > 6, classification in C07K5/06 - C07K5/10, according to the moiety having normal peptide bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Description

, 113265
Menetelmä uusien, verihiutaleiden aggregaatiota estävien 2,5-dioksoimidatsolidinyylijohdannaisten valmistamiseksi
Esillä oleva keksintö koskee patenttivaatimuksessa 5 1 määriteltyä menetelmää uusien, verihiutaleiden aggregaa
tiota estävien 2,5-dioksoimidatsolidinyylijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on yleinen kaava I
R"fl O R O
R'^A^-C''Cv'N--CH—C—N—CH—(CH2)£-C—R10 (I) *-N-\ jossa samanaikaisesti 10 A merkitsee 1,4-fenyleeniryhmää; R ja R° merkitsevät toisistaan riippumatta vetyä tai (C1-4) alkyyliä; R1 on H2N-C(=NH), H2N-C (=NH) -NH tai H2N-CH2; R3 merkitsee ryhmää CONHR14, ryhmää CONHR15, substituoima- 15 tonta fenyyli- tai naftyyliryhmää, fenyyli- tai naftyyli- ryhmää, joka on substituoitu yhdellä, kahdella tai kolmel- j *t·* la samanlaisella tai erilaisella ryhmällä valittuna seu- *:* raavista: (C1-4) alkyyli, (C1-4) alkoksi, hydroksi, halogeeni, trifluorimetyyli, nitro, metyleenidioksi, hydroksikarbo- : 20 nyyli, (C1-4) alkoksikarbonyyli, aminokarbonyyli, syaani, . ,·, fenyyli, fenoksi ja bentsyylioksi, pyridyyliryhmää,
Ji! (C1-4) alkyyliryhmää, (C2-4) alkenyyliryhmää, (C2-4) alkynyyli- • · · ryhmää tai (C5-6) sykloalkyyliryhmää; R10 merkitsee hydroksia tai (Ci-s) alkoksia; • ·* 25 R merkitsee (C1-6) alkyyliä, (C3-7) sykloalkyyliä tai bent- • * · • · ’...· syyliä; ;*·,· R14 merkitsee metyyliä, joka on substituoitu fenyylillä ja hydroksikarbonyylillä, tai metyyliä, joka on substituoitu 1 · • fenyylillä ja (Ci-β) alkoksikarbonyylillä; 1 * * * * 15 ’ 30 R merkitsee adamantyyliryhmää tai adamantyylimetyyliryh- : .· mää; ja h on 1 tai 2; ja niiden fysiologisesti hyväksyttävien suolojen valmista miseksi.
2 113265 EP-hakemusjulkaisuissa 449 079, 530 505, 566 919 ja 5 patenttijulkaisussa WO-A-93/18 057 on kuvattu hydanto-iinijohdannaisia, joilla on trombosyyttien aggregaatiota estäviä vaikutuksia. EP-hakemusjulkaisu 512 831 mainitsee pyrrolidonijohdannaiset, jotka estävät fibrinogeenin sitoutumisen verihiutaleisiin ja täten ne estävät verihiutalei-10 den aggregaation. Muut tutkimukset osoittivat, että myös esillä olevan keksinnön mukaisesti saatavat yhdisteet estävät voimakkaasti verihiutaleiden aggregaatiota, jopa tehokkaammin kuin läheisintä tunnettua tekniikkaa edustavat, EP-hakemus julkaisusta 530 505 tunnetut yhdisteet.
15 (C3-7) sykloalkyyliryhmiä ovat syklopropyyli, syklo- butyyli, syklopentyyli, sykloheksyyli ja sykloheptyyli.
Alkyyliryhmät voivat olla suoraketjuisia tai haarautuneita. Tämä pätee myös, jos ne sisältävät substituent-teja tai esiintyvät muiden ryhmien substituentteina, esi-20 merkiksi alkoksi- tai alkoksikarbonyyliryhmissä. Vastaava koskee myös alkenyyliryhmiä. Esimerkkejä sopivista Ci-s-al-kyyliryhmistä ovat: metyyli, etyyli, propyyli, butyyli, ·;· pentyyli, heksyyli, heptyyli, oktyyli, isopropyyli, isopen- «m tyyli, neopentyyli, isoheksyyli, 3-metyylipentyyli, sek.- .·, ; 25 butyyli, tert. -butyyli, tert.-pentyyli. Edullisena pidetty- • » » jä alkyyliryhmiä ovat metyyli, etyyli, propyyli, isopropyy-li, butyyli, isobutyyli, sek.-butyyli ja tert .butyyli. Esi-* merkkejä alkenyyliryhmistä ovat metyleeni, etyleeni, tri-, tetra-, penta- ja heksametyleeni.
: 30 Myös alkenyyli- ja alkynyyliryhmät voivat olla suo- ·,,,· raketjuisia ja haarautuneita. Esimerkkejä alkenyyliryhmistä : ovat vinyyli, 1-propenyyli, allyyli, butenyyli ja 3-me- .tyyli-2-butenyyli ja aikynyyliryhmistä etinyyli, 1-propinyyli ja propargyyli.
35 Edullisena pidettyjä ryhmiä R15 ovat 1- ja 2- : V adamantyyliryhmät.
3 113265
Ryhmä R3 voi olla fenyyli tai naftyyli, jolloin 1-naftyyliä, 2-naftyyliä ja erityisesti fenyyliä pidetään edullisena. Fenyyli- ja naftyyliryhmät, erityisesti fenyy-liryhmät voivat olla kerran, kaksi tai kolme kertaa substi-5 tuoituja samanlaisilla tai erilaisilla, seuraavasta ryhmästä peräisin olevalla ryhmillä: (C1-4) alkyyli, (C1-4) alkoksi, halogeeni, nitro, trifluorimetyyli, hydroksi, metyleeni-dioksi, syaani, hydroksikarbonyyli, aminokarbonyyli, (C1-4) alkoksikarbonyyli, fenyyli, fenoksi ja bentsyylioksi.
10 Esimerkkejä pyridyylistä ovat 2-pyridyyli, 3-pyridyyli ja 4-pyridyyli.
Monosubstituoiduissa fenyyliryhmissä voi substi-tuentti olla 2, 3 tai 4-asemassa, jolloin 3 ja 4-asemaa pidetään edullisena. Jos fenyyli on substituoitu kaksi ker- 15 taa, niin silloin substituentit voivat olla 1,2-, 1,3- tai 1,4-asemassa toisiinsa nähden. Edullisena pidetään sitä, että kahdesti substituoiduissa fenyyliryhmissä molemmat substituentit ovat järjestäytyneet 3 ja 4-asemaan liitty-miskohtaan nähden.
20 Halogeeni on edullisesti fluori, kloori, bromi tai jodi, erityisesti fluori tai kloori.
Γ ; Yleisen kaavan I mukaisten yhdisteiden fysiologi- *;· sesti hyväksyttäviä suoloja ovat erityisesti farmaseutti- • •Il sesti käytettävät tai ei-toksiset suolat.
.·. : 25 Yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet, jotka sisältä- vät happamia ryhmiä, esimerkiksi karboksin, muodostavat • * · ;;; tällaisia suoloja alkali- tai maa-alkalimetallien kanssa, • · · • kuten esim. Na:n, K:n, Mg:n ja Ca:n kanssa, sekä fysiologi sesti käytettävien orgaanisten amiinien, kuten esim. tri- » · · ·* .* 30 etyyliamiinin, etanoliamiinin tai tris-(2-hydroksietyyli)- amiinin kanssa.
I Yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet, jotka sisältä- vät emäksisiä ryhmiä, esim. aminoryhmän, amidinoryhmän tai . guanidinoryhmän, muodostavat suoloja epäorgaanisten happo- ' * 35 jen, kuten esim. suolahapon, rikkihapon tai fosforihapon I · I 1 V kanssa, ja orgaanisten karboksyyli- tai sulfonihappojen, 4 113265 kuten esim. etikkahapon, sitruunahapon, bentsoehapon, male-iinihapon, tumaarihapon, viinihapon, metaanisulfonihapon tai p-tulueenisulfonihapon kanssa.
Keksinnön mukaisesti saatavat yleisen kaavan I mu-5 kaiset yhdisteet voivat sisältää optisesti aktiivisia hiiliatomeja, joilla voi olla toisistaan riippumatta R- tai S-konfiguraatio, ja täten ne voivat esiintyä puhtaina enan-tiomeereinä tai puhtaina diastereomeereinä tai enantiomee-riseoksina tai diastereomeeriseoksina. Sekä puhtaat enan-10 tiomeerit ja enantiomeeriseokset että myös diastereomeerit ja diastereomeeriseokset ovat esillä olevan keksinnön kohteena .
Keksinnön mukaisesti saatavat yleisen kaavan I mukaiset yhdisteet voivat tämän lisäksi sisältää liikkuvia 15 vetyatomeja, siis olla erilaisina tautomeerisina muotoina. Myös nämä tautomeerit ovat esillä olevan keksinnön kohteena.
Edullisina keksinnön mukaisesti saatavina yleisen kaavan I mukaisina yhdisteinä pidetään niitä yhdisteitä, 20 joissa samanaikaisesti A on 1,4-fenyleeniryhmä; , : R ja R° merkitsevät toisistaan riippumatta vetyä tai ·· (C1-4) alkyyliä, erityisesti vetyä, metyyliä tai etyyliä; * t * > R1 on H2N-C(=NH), H2N-C (=NH)-NH tai H2N-CH2; ♦ · : 25 R3 merkitsee substituoimatonta fenyyliryhmää tai fenyyli- » 1 · , ‘ ryhmää, joka on substituoitu yhdellä, kahdella tai kolmel- la samanlaisella tai erilaisella ryhmällä valittuna seu- • » 1 ' raavista: (C1-4) alkyyli, (C1-4) alkoksi, hydroksi, halogeeni, trifluorimetyyli, nitro, metyleenidioksi, hydroksikarbo- .* 30 nyyli, (C1-4) alkoksikarbonyyli, aminokarbonyyli, syaani, fenyyli, fenoksi ja bentsyylioksi; * 10 R on hydroksi tai (Ci-s) alkoksi, edullisesti (C1-4) alkoksi; i · l R13 on (C1-6) alkyyli, (C3-7) sykloalkyyli tai bentsyyli, eri- . tyisesti metyyli; ja * 35 h on 1 tai 2, edullisesti 1.
5 113265
Edullisena pidetyistä yleisen kaavan I mukaisista yhdisteistä, pidetään aivan erityisen edullisina sellaisia, joissa samanaikaisesti A merkitsee 1, 4-fenyleeniryhmää; 5 R merkitsee vetyä; R° merkitsee vetyä; R1 2 on H2N-C(=NH); R3 merkitsee substituoimatonta fenyyliryhmää; R10 merkitsee hydroksia, nietoksia, etoksia tai isopropok-10 siä; R13 merkitsee metyyliä; ja h on 1; ja edullisesti kiraliteettikeskuksella imidatsolidiinirenkaan 4-asemassa ja sillä kiraalisella hiiliatomilla, johon ryh-15 mä R3 on liittynyt, on kulloinkin yhtenäinen konfiguraatio, erityisesti sillä kiraalisella hiiliatomilla, johon ryhmä R3 on liittynyt, on S-konfiguraatio.
Myös kaikissa edullisena pidetyissä suoritusmuodoissa käsittää esillä oleva keksintö luonnollisesti, kuten 20 jo edellä mainittiin, yhdisteiden fysiologisesti käytettävät suolat.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle uusien, kaavan I >';· mukaisten 2,5-dioksoimidatsolidinyyli johdannaisten ja,nii- tili den fysiologisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi /, ; 25 on tunnusomaista, että suoritetaan yleisen kaavan II mu kaisen yhdisteen fragmenttikondensaatio ;T: , Rv13 f) R^A-<^C^N-CHrG (H) V χΝ—c.
R0/
: R O
* I t l » ;”· yleisen kaavan III mukaisen yhdisteen kanssa 30 ! : » t 2 I » 6 113265 ? i? H—N—CH-(CH2)-C—R10 (III) R3 jolloin A, R, R°, R1, R3, R10, R13 ja h merkitsevät samaa kuin edellä ja G merkitsee hydroksikarbonyyliä, (Ci-6)al-5 koksikarbonyyliä tai aktivoituja karboksyylihappojohdannaisia, kuten happoklorideja, aktiiviestereitä tai seka-anhydridejä, ja haluttaessa muutetaan saatu kaavan I mukainen yhdiste fysiologisesti hyväksyttäväksi suolaksi.
Yleisen kaavan II mukaisten yhdisteiden kondensoi-10 miseksi yleisen kaavan III mukaisten yhdisteiden kanssa käytetään edullisesti sinänsä tunnettuja peptidikemian kyt-kentämenetelmiä (katso esim. Houben-Weyl, Methoden der Or-ganischen Chemie, Band 15/1 ja 15/2, Stuttgart, 1974) . Tätä varten on yleensä tarpeellista suojata esiintyvät, ei-15 reagoivat aminoryhmät palautuvilla suojaryhmillä kondensaa-tion aikana. Sama koskee kaavan III mukaisten yhdisteiden karboksyyliryhmiä, jotka ovat edullisesti (Ci-6) alkyyli-, bentsyyli- tai tert.-butyyliesterinä. Aminoryhmien suojaa-: minen on tarpeetonta, jos muodostettavat aminoryhmät ovat -;· 20 vielä nitro- tai syanoryhminä ja muodostuvat vasta kytken- nän jälkeen hydraamalla. Kytkennän jälkeen esiintyvät suo- * » - .·. : jaryhmät lohkaistaan sopivalla tavalla. Esimerkiksi NO2- , ryhmät (guanidinosuojaus), bentsyylioksikarbonyyliryhmät ja • · · (!! bentsyyliesterit voidaan hydrata. Tert.-butyylityypin suo- • · · * 25 jaryhmät lohkaistaan happamesti, kun taas 9-fluorenyyli- metyylioksikarbonyyliryhmä poistetaan sekundäärisillä amii-’ ·’ neilla.
» * t ...·’ Aminofunktion guanyloinnissa ja nitroguanyloinnissa | voidaan käyttää seuraavia reagensseja: * · 30 1. O-metyyli-isoureaa (S. Weiss und H. Kromer, Chemiker- » · • Zeitung 98 (1974) 617 - 618), t « · ' * 2. S-metyyli-isotioureaa (R. F. Borne, M. L. Forrester und ; '.· I. W. Waters, J. Med. Chem. 20 (1977) 771 - 776), 7 113265 3. Nitro-S-metyyli-isotioureaa (L. S. Hafner und R. E. Evans, J. Org. Chem. 24 (1959) 1157), 4. Formamidiinisulfonihappoa (K. Kim, Y.-T. Lin und H. S. Mosher, Tetrahedron Lett. 29 (1988) 3183 - 3186), 5 5. 3,5-dimetyyli-l-pyratsolyyli-formamidinium-nitraattia (F. L. Scott, D. G. 0' Donovan und J. Reilly, J. Amer. Chem. Soc. 75 (1953) 4053 - 4054), 6. N,N'-di-tert.-butyylioksikarbonyyli-S-metyyli-isotio-ureaa (R. J. Bergeron und J. S. McManis, J. Org. Chem. 52 10 (1987) 1700 - 1703), 7. N-alkoksikarbonyyli-, N,N'-dialkoksikarbonyyli-, N-al-kyylikarbonyyli- ja N,N'-dialkyylikarbonyyli-S-metyyli-iso-tioureaa (H. Wollweber, H. Rolling, E. Niemers, A. Widding, P. Adrews, H.-P. Schulz und H. Thomas, Arzneim.
15 Forsch./Drug Res. 34 (1984) 531 - 542).
Amidiineja voidaan valmistaa vastaavista syaaniyh-disteistä liittämällä alkoholit (esim. metanoli tai etanoli) happamessa väliaineessa (esim. dioksaanissa, metanolis-sa tai etanolissa) ja suorittamalla tämän jälkeen aminolyy-20 si, esim. käsittelemällä ammoniakilla alkoholeissa, kuten esim. isopropanolissa, etanolissa tai metanolissa (G. Wag-ner, P. Richter und Ch. Garbe, Pharmazie 29 (1974) 12 - • » :· 15). Toinen menetelmä amidiinien valmistamiseksi on H2S:n »li i liittäminen syaaniryhmään, ja tämän jälkeen muodostuneen : 25 tioamidin metylointi ja lopuksi reaktio ammoniakin kanssa (DDR-patentti nro 235 866).
! Yleisen kaavan I mukaisia yhdisteitä ja niiden fy siologisesti käytettäviä suoloja voidaan antaa eläimelle, edullisesti imettäväisille, ja erityisesti ihmisille lääke-.* 30 aineina yksinään, seoksina keskenään tai farmaseuttisina valmisteina, jotka mahdollistavat enteraalisen tai parente-raalisen käytön ja jotka sisältävät aktiivisena aineosana vaikuttavan annoksen vähintään yhtä yleisen kaavan I mu-• kaista yhdistettä tai sen suolaa, tavanomaisten farmaseut- ‘ · 35 tisesti moitteettomien kantaja- ja lisäaineiden ohella.
I t t 8 113265
Valmisteet sisältävät normaalisti noin 0,5 - 90-painopro-senttia terapeuttisesti vaikuttavaa yhdistettä.
Lääkeaineet voidaan antaa suun kautta, esim. pillereinä, tabletteina, lakkatabletteina, lääkerakeina, rakei-5 na, kova- ja pehmeägelatiinikapseleina, liuoksina, siirappeina, emulsioina tai suspensioina tai aerosoliseoksina. Anto voi tapahtua myös rektaalisesti eli peräsuolen kautta, esimerkiksi peräpuikkoina tai parenteraalisesti, esimerkiksi injektioliuoksina tai infuusionaliuoksina, mikrokapse-10 leina tai sauvoina, ihon kautta, esim. salvoina tai tink-tuuroina tai nenän kautta, esim. nenäspraynä.
Farmaseuttisten valmisteiden valmistus tapahtuu sinänsä tunnetulla tavalla, jolloin käytetään farmaseuttisesti inerttejä epäorgaanisia tai orgaanisia kantaja-aineita. 15 Pillereiden, tablettien, lääkerakeiden ja kovagelatiinikap-selien valmistukseen voidaan käyttää esim. laktoosia, mais-sitärkkelystä tai sen johdannaisia, talkkia, steariinihap-poa tai sen suoloja jne. Pehemeägelatiinikapseleissa ja peräpuikoissa käytettäviä kantaja-aineita ovat esim. rasvat, 20 vahat, puolikiinteät ja nestemäiset polyolit, luonnon tai kovetetut öljyt jne. Liuosten ja siirappien valmistuksessa käytettäviksi kantaja-aineiksi soveltuvat esim. vesi, sak- ·· karoosi, inverttisokeri, glukoosi, polyolit jne. Injek- > » tioliuosten valmistuksessa käytettäviksi kantaja-aineiksi • r » .: 25 soveltuvat vesi, alkoholit, glyseroli, polyolit, kasvisöl- * · » » , .·, jyt jne. Mikrokapseleissa, implantaateissa tai sauvoissa * · ♦ käytettäviksi kantaja-aineiksi soveltuvat glykolihaposta ja ’ · · maitohaposta peräisin olevat sekapolymeraatit.
Farmaseuttiset valmisteet voivat sisältää vaikutta- » · ; ·’ 30 vien aineiden ja kantaja-aineiden ohella vielä muita lisä- * * t aineita, kuten esim. täyteaineita, sivelyaineita, hajotus- ‘.j aineita, sideaineita, liukuaineita, kostutusaineita, stabi- * · loimisaineita, emulgointiaineita, säilöntäaineita, makeu- * » • tusaineita, väriaineita, makuaineita tai aromiaineita, pak- im· ’ ’ 35 sunnosaineita, laimennusaineita, puskuriaineita, edelleen ; \* liuottimia tai liukenemista välittäviä aineita tai depot- 9 113265 vaikutuksen saavuttamiseksi käytettäviä aineita sekä suoloja osmoottisen paineen muuttamiseksi, päällystysaineita tai antioksidantteja eli hapetuksen estoaineita. Ne voivat myös sisältää kahta tai useampaa yleisen kaavan I mukaista yh-5 distettä tai niiden farmakologisesti hyväksyttävää suolaa ja vielä yhtä tai useampaa muuta terapeuttisesti vaikuttavaa ainetta.
Tällaisia muita terapeuttisesti vaikuttavia aineita ovat esimerkiksi verenkiertoa edistävät aineet, kuten di-10 hydroergokristiini, nikergoliini, bufeniini, nikotiinihappo ja sen esterit, pyridyylikarbinoli, bensyklaani, sinnarit-siini, naftidrofuryyli, raubasiini ja vinkamiini; positiivisesti inotrooppiset yhdisteet, kuten digoksiini, asetyy-lidigoksiini, metiilidigoksiini ja lanato-glykosidit; ko-15 ronaaridilataattorit eli selvaltimoita laajentavat aineet, kuten karbokromeeni; dipyridamoli, nifedipiini ja perheksi-liini; antianginaalisesti vaikuttavat yhdisteet, kuten isosorbididinitraatti, isosorbidimononitraatti, glyseryy-linitraatti, molsidomiini ja verapamiili; β-salpaajat, ku-20 ten propranololi, oksprenololi, atenololi, metoprololi ja penbutololi. Tämän lisäksi yhdisteet voidaan yhdistää esi-: merkiksi myös nootrooppisesti vaikuttaviin aineisiin, kuten g* esim. pirasetaamiin tai keskushermostoa aktivoiviin ainei- « s t * siin, kuten pirlindoliin, sulpiridiin jne.
.·, : 25 Annos voi vaihdella suuresti ja on jokaisessa yk- • * · sittäisessä tapauksessa sovitettava yksilöllisten vallitse-vien tilanteiden mukaiseksi. Yleensä suun kautta tapahtu- * · · * vassa annossa päivittäinen annos on noin 0,1 - 1 mg/kg, edullisesti 0,3 - 0,5 mg/kg haluttujen tulosten saavuttami- • « · : 30 seksi, intravenöösissä annossa päivittäinen annos on yleen- • · · ·...’ sä noin 0,01 - 0,3 mg/kg, edullisesti 0,05 - 0,1 mg/ kg.
Päivittäinen annos voidaan jakaa, erityisesti suurempia määriä annettaessa, useampiin, esim. kahteen, kolmeen tai • neljään osa-annokseen. Kulloinkin aina yksilöllisen vasteen * * 35 mukaan voi mahdollisesti olla tarpeellista poiketa ilmoite- • tusta päivittäisestä annoksesta ylös tai alaspäin. Far- 10 113265 maseuttiset valmisteet sisältävät normaalisti 0,2 - 50 mg, edullisesti 0,5 - 10 mg yleisen kaavan I mukaista vaikuttavaa ainetta tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävää suolaa annosta kohti.
5 Keksinnön mukaisesti saatavilla yleisen kaavan I
mukaisilla yhdisteillä on kyky estää solujen välinen adheesio eli solujen tarttuminen toisiinsa, mikä johtuu Arg-Gly-Asp:ia sisältävien proteiinien, kuten fibronektiinin, fib-rinogeenin tai Willebrand-tekijän vuorovaikutuksesta niin 10 sanottujen integriinien kanssa. Integriinit ovat transmem-braani-glykoproteiineja, reseptoreja Arg-Gly-Asp:ia sisältäville proteiineille (E. Ruoslahti und M. D. Piersch-bacher, Science 238 (1987) 491 - 497; D. R Phillips, I. F. Charo, L. V. Pärise und L. A. Fitzgerald, Blood 71 (1988) 15 831 - 843). Tämän lisäksi ne estävät muiden yhteenkiinnit- tyneiden proteiinien, kuten vitronektiinin, kollageenin ja laminiinin sitoutumisen vastaaviin reseptoreihin eri solu-tyyppien pinnalla.
Keksinnön mukaisesti saatavat yleisen kaavan I mu-20 kaiset yhdisteet estävät trombosyyttien aggregaatiota, syöpäsolujen metastasointia sekä osteoklastien sitoutumista • ',·* luun pinnalle.
_ Yleisen kaavan I mukaisia yhdisteitä käytetään : ' ; akuutisti, kun vaarana on tromboosin kehittyminen tai kroo- : 25 nisesti arterioskleroosin ja tromboosin ennaltaehkäisyssä, • · . esim. valtimoverisuonien sairauksien hoidossa ja ennalta- ehkäisyssä, kuten akuutissa sydänlihasinfarktissa, sydänli- • · » hasinfarktin myöhemmässä ehkäisyssä, uudelleen tukkeutumisen ennaltaehkäisyssä liuotushoidon ja dilataation jälkeen, •( *’ 30 epästabiilissa angina pectoriksessa, ohimenenevissä iskee- misissä kohtauksissa, halvauskohtauksissa, sepelvaltimoiden :*·,{ ohitusleikkauksissa, mukaan lukien uudelleen tukkeutumisen « · ennaltaehkäisy ohitusleikkauksessa, keuhkoemboliassa, peri-* # feeristen valtimoiden tukkeutumasairauksissa, valtimonpul- 35 listumassa, joka irrottaa valtimon seinämäkerrokset toisis- * · · : .* taan; laskimoiden ja mikroverenkiertoon kuuluvien ve- 11 113265 risuonisairauksien, kuten syvän laskimotromboosin, laajalle alueelle levinneen intravaskulaarisen hyytymän, leikkauksen jälkeisen ja synnytyksen jälkeisen trauman, kirurgisen tai infektion aiheuttaman shokin, verenmyrkytyksen tai yli-5 reagoivien trombosyyttien sairauksien, pienten verisuonten tukoksista ja verihiutaleiden puutteesta johtuvan purpuran, raskausmyrkytyksen esiasteen, kuukautisia edeltävän oireyhtymän, dialyysin tai ruumiin ulkopuolisen (veren)kierron hoidossa; toinen käyttöalue on syövän hoidossa, esim. syö-10 päleikkauksien aikana ja myös syövän ennalta ehkäisevä hoito. Edelleen voidaan ehkäistä osteoporoosia estämällä os-teoklastien sitoutuminen luun pinnalle.
Yhdisteiden tutkimus kohdistuu ennen kaikkea siihen, miten ne estävät verihiutaleiden aggregaatiota ja fib-15 rinogeenin tarttumista verihiutaleisiin (tällöin käytetään ihmisluovuttajan verestä saatuja geelisuodatettuja verihiutaleita, jotka aktivoidaan ADP:llä tai trombiinilla) sekä miten ne vaikuttavat in vivo trombosyyttien aggregaation estoon ja tromboosin estymiseen.
20 Testimenetelmä 1
Toiminnallisena testinä mitataan geelisuodatettujen l humaani-trombosyyttien aggregaation estyminen keksinnönmu- ·· kaisten yhdisteiden vaikutuksesta ADP- tai trombiini- stimulaation jälkeen. Tällöin ilmoitetaan estymisen IC50- 1 1 * .·, : 25 arvo [kirjallisuus: Marguerie, G. A. et ai., J. Biol. Chem.
• · # 254, 5357 - 5363 (1979); Marguerie, G. A. et ai., J. Biol. Chem. 255, 154 - 161 (1980)].
• » · • * · * Tätä tarkoitusta varten runsaasti verihiutaleita sisältävästä ihmisen plasmasta (PRP) saadut trombosyytit • ·’ 30 eristettiin geelisuodattamalla Sepharose 2 B:llä. Saatu * » 1 *...· geelisuodatettujen verihiutaleiden (GFP) suspensio, joka sisälsi 3*108 verihiutaletta/ml, aktivoitiin 1 mg/ml fibri-nogeenia läsnä ollessa joko 10 pM:llä ADP:tä tai 0,1 U/ml * · * _ trorabiinia ja sekoitettiin 37 °C:ssa kierrosnopeuden olles- 35 sa 1 000 rpm aggregometrissa (PAP 4, Biodata, Hatboro, PA, .* USA). Aggregaation mittana mitataan valon läpäisevyyden 12 113265 maksimaalinen lisääntyminen. Testiaineet laitettiin GFP:hen 37 °C:ssa 2 minuuttia ennen ADPrllä tai trombiinilla tapahtuvaa aktivointia. Aggregaation estyminen ilmoitetaan IC50-arvona, so. keskimääräisenä testiainekonsentraationa, joka 5 tarvitaan kahden - neljän eri luovuttajan GFP-näytteiden 50-%:iseen estoon (puolilogaritminen annos-vaikutus-suhde).
Tässä testissä saatiin seuraavien esimerkkien yhdisteille seuraavat tulokset, joiden yhteydessä on esitetty vertailuna myös trombosyyttien aggregaation estyminen lä-10 heisintä tunnettua tekniikkaa edustavien, patenttijulkaisun EP-A-0 530 505 esimerkkien 5 ja 6 mukaisten yhdisteiden vaikutuksesta ADP-stimulaation jälkeen: EP-A-0 530 505 ADP:llä stimuloitu 15 Esimerkki XC50 (pH) 5 0,2 6 5,5 20 Esimerkki ADP:llä stimuloitu Trombiinilla stimuloitu . IC50 (pH) IC50 (pH) * · • · ' !t 1 0,04 0,05 6 2,5 0,8 ';··[ 25 7 0,3 0,3 *’· d 8 0, 15 0,1 9 1,0 0,5 : 10 0,15 0,06 13 0,2 0,2 30 20 2,0 1,0 • · :*·; 21 0,8 0,5 ]·’. 22 0,025 0,05 '· '· 23 0,03 0,05 24 0,055 0,08 ·:· : 35 25 0,03 0,05 26 0,02 0,04 21 0,025 0,04 13 113265 28 0,025 0,04 29 0,05 0,04 30 0,5 0,4 31 3 0,6 5 32 0,2 0,15 33 0,5 0,2 34 2,5 1,5 35 0, 1 0,3 36 0,2 0,15 10 37 0,1 0,2 38 0,3 0,35 39 0,08 0,15 40 0,4 0,25 41 0,1 0,15 15 42 0,3 0,2 43 0,5 0,5 44 0,4 0,2 45 0,2 0,2 20 Esimerkki ADP:llä stimuloitu Trombiinilla stimuloitu ; , , IC5o (pH) IC5o (pM) * · * 46 0, 1 0,1 47 0, 1 0, 15 25 48 2,0 0,8 » * · *· / 49 0,6 0,2 50 0, 55 0,4 V : 52 0,5 0,4 56 0,1 0,06 :*·*: 30 57 6 5 58 0, 02 0, 025 . 59 50 40 ** 60 5 4 : 67 0,08 0,2 35 68 0, 05 0, 045 :*·*: 69 0,025 0,045 70 0,065 0,07 i4 113265
Testimenetelmä 2 Tällöin tutkitaan miten fibrinogeenin sitoutuminen sen reseptoriin (glykoproteiini Ilb/IIIa) estyy koskemattomissa, geelisuodatetuissa humaani-trombosyyteissä keksinnön 5 mukaisten yhdisteiden vaikutuksesta. Tällöin ilmoitetaan 125I-fibrinogeenin sitoutumisen estymisen Ki-arvo ADP:llä (10 μΜ) stimuloinnin jälkeen [kirjallisuus: Bennett, J. S.; Vilaire, G. J. Clin. Invest. 64, 1393 - 1401 (1979); Kor-necki, E. et. ai., J. Biol. Chem. 256, 5696 - 5701 (1981)]. 10 Tätä tarkoitusta varten runsaasti verihiutaleita sisältävästä ihmisen plasmasta (PRP) saadut trombosyytit eristettiin geelisuodattamalla Sepharose 2 B:llä. Saatiin geelisuodatettujen verihiutaleiden (GFP) suspensio, joka o sisälsi 4-10 verihiutaletta/ml. Verihiutaleita inkuboitiin 15 40 nmol/ml 125I-f ibrinogeenia, 10 μΜ ADP:tä ja eri tes-tiainekonsentraatioiden läsnä ollessa 30 minuutin ajan huoneenlämpötilassa. Sitten tasaosat 100 piistä lisättiin 20-%:iseen sukroosiin ja verihiutaleita sedimentoitiin sentrifugoimalla 2 minuutin ajan kierrosnopeudella 12 000 20 rpm. Päällä oleva kerros dekantoitiin varovasti ja täydellisesti ja jäljelle jäänyt pohjasakka mitattiin gammalaski- • ‘ : jalla. Vähentämällä sitoutuminen ylimäärän (10 μΜ) leimaa- :· matonta fibrinogeenia läsnä ollessa koko sitoutuneesta ra- dioaktiivisuudesta saatiin selville spesifinen sitoutumi- * 12 S · : 25 nen. Sitoutuminen ilmoitetaan fmoliina I-fxbrmogee-
• » Q
, ,·, nia/10 verihiutaletta. Testiaineen dissosiaatiovakio Ki » ’ t määritettiin syrjäytymiskokeista 125I-fibrinogeeni verrattu- * * * ' na (leimaamattomaan) testiaineeseen sitoutumisarvojen tie tokoneanalyysillä (sigma-kuvaaja).
• ·’ 30 Tässä testissä saatiin seuraavien esimerkkien yh- • * · *...* disteille seuraavat tulokset: « · * * * * · · • · » » I * » · 15 113265
Esimerkki: Κι (μΜ) , ADP:llä stimuloitu 1 0,0132 56 0,0218 57 1,97 5 58 0,0092
Testimenetelmä 3
Tutkitaan keksinnönmukaisten yhdisteiden aikaansaama fibrinogeenin sitoutumisen estyminen sen reseptoriin 10 (glykoproteiini Ilb/IIIa) eristetyssä reseptorissa, joka eristettiin humaani-trombosyyteistä ja immobilisoitiin eli tehtiin liikkumattomaksi mikrotiitteri-levyillä. Tällöin ilmoitetaan I-fibrinogeenin sitoutumisen estymisen Kj.-ar-vo [kirjallisuus: Fitzgerald, L.A. et ai., Anal. Biochem.
15 151, 169 - 177 (1985), Pytela, R. et ai., Science 231, 1559 - 1562 (1986); Charo, I. F. et ai., J. Biol. Chem. 266, 1415 - 1421 (1991); Scarborough, R. M. et ai., J. Biol.
Chem. 266, 9359 - 9362 (1991)].
Tässä testissä saatiin seuraavien esimerkkien yh-20 disteille seuraavat tulokset:
Esimerkki: K± (nM) , ADP:llä stimuloitu ;· 1 0,172 13 0,748 25 21 1,9 * * t Λ·.' 22 0, 15 25 0,175 • * · 26 0,117 27 0,107 30 28 0,078 * ♦ t 39 0,948 40 1,99 46 1,23 * φ 56 0,486 35 57 37,3 7 58 0,172
Esimerkit
Tuotteet identifioitiin massaspektrejä ja/tai NMR- spektrejä käyttäen.
ie 113265
Esimerkki 1 5 ((R, S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyy- li-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspartyyli-L-fenyyliglysiini
Ia. (R,S)-4-(4-syaanifenyyli)-4-metyyli-2,5-diokso-imidatsolidiini 10 20 g (138 mmol) p-asetyylibentsonitriiliä, 115,6 g ammoniumkarbonaattia (1,21 mol) ja 11,6 g kaliumsyanidia (178 mmol) liuotetaan 600 ml:aan seosta, jossa on 50 % etanolia ja 50 % vettä. Seosta sekoitetaan 5 tuntia 55 °C:ssa ja annetaan seistä yön ajan huoneenlämpötilassa. Liuoksen 15 pH saatetaan 6 N HCl:llä arvoon 6,3 ja tämän jälkeen sekoitetaan kaksi tuntia huoneenlämpötilassa. Sakka imusuodate-taan, pestään vedellä ja kuivataan fosforipentoksidilla korkeavakuumissa.
Saanto: 22,33 g (75 %).
20 Ib. ((R,S)-4-(4-syaanifenyyli)-4-metyyli-2,5-diok- soimidatsolidin-l-yyli) -etikkahappo-metyyliesteri :’1 : 1,068 g natriumia (46, 47 mmol) liuotetaan typpiat- ;· mosfäärissä 110 ml:aan abs. metanolia. Kirkkaaseen liuok- tili seen lisätään 10 g (R,S)-4-(4-syaanifenyyli)-4-metyyli-2,5- t t t ,·, : 25 dioksoimidatsolidiinia (46, 47 mmol) ja seosta keitetään pa- • t · t’/ luu jäähdyttäen 2 tunnin ajan. Sitten tähän lisätään 7,75 g (46, 68 mmol) kaliumjodidia ja 1 tunnin sisällä tähän tipu- • i 1 ' tetaan liuos, jossa on 4,53 ml kloorietikkahappo-metyyli- esteriä (51,3 mmol) 5 ml:ssa metanolia. Sitten kuumennetaan • 1 < 30 6 tuntia kiehuvana, annetaan seistä yön ajan huoneenlämpö- I t ,,,· tilassa ja haihdutetaan. Öljymäinen jäännös kromatografioi- : daan silikageelillä käyttäen metyleenikloridi/etikka- ,happoetyyliesteriä (9:1).
. Saanto: 8,81 g (66 %).
» » ♦ » 17 113265
Ie. ((R,S)-4-(4-(etoksi-imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -etikkahappo-metyy-liesteri-hydrokloridi
Suspensio, jossa on 4 g ((R,S)-4-(4-syaanifenyyli)-5 4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo- metyyliesteriä (13,92 mmol) 60 ml:ssa abs. etanolia, jäähdytetään 0 °C:seen. Kuivaa HCl-kaasua johdetaan suspensioon, jolloin lämpötila pidetään jatkuvasti 10 °C:n alapuolella, kunnes nitriili-bandia ei enää havaita IR-10 spektrissä. Etanolipitoiseen liuokseen lisätään 200 ml di-etyylieetteriä ja annetaan seistä yön ajan 4 °C:ssa. Sakka imusuodatetaan ja kuivataan korkeavakuumissa.
Saanto: 3,96 g (77 %).
ld. ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-15 metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-metyy- 1ies teri-hydrokloridi 3,96 g ((R,S)-4-(4-(etoksi-imino-metyyli)-fenyyli)- 4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-me-tyyliesteri-hydrokloridia (10,7 mmol) suspendoidaan 20 40 ml:aan isopropanolia ja sitten tähän lisätään 11,9 ml 2 N ammoniakkiliuosta isopropanolissa. Reaktioseosta sekoi-: tetaan 2 tuntia 50 °C:ssa. Seos jäähdytetään ja sitten sii- ;· hen lisätään 200 ml dietyylieetteriä. Sakka imusuodatetaan ; ja kuivataan korkeavakuumissa.
25 Saanto: 3,27 g (89 %) .
» le. ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4- „ metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-hydro- * « > kloridi 3,27 g ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)- ·’ 30 4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-me- tyyliesteri-hydrokloridia (9,6 mmol) liuotetaan 50 ml:aan ’,· konsentroitua suolahappoa. Liuosta kuumennetaan 6 tuntia • · kiehuvana ja sitten haihdutetaan.
•, Saanto: 2,73 g (87 %).
! t ( » i » 1 » 18 ^13265 lf. ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dxoksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspar-tyyli-L-fenyyliglysiini-di-tert.-butyyliesteri-hydrokloridi
Liuokseen, jossa on 1 g ((R,S)-4-(4-(amino-imino-5 metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yy-li)-etikkahappo-hydrokloridia (3,06 mmol), 1,27 g H-Asp-(OBut)-Phg-OB^-hydrokloridia (3,06 mmol) ja 413 mg H0Bt:tä 10 ml:ssa dimetyyliformamidia, lisätään 0 °C:ssa 673 mg DCC:tä (3,06 mmol). Sitten sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa ja 10 4 tuntia huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen seoksen anne taan seistä viikonlopun yli jäähdytyshuoneessa, sakka imusuodatetan ja suodos haihdutetaan. Puhdistusta varten aine kromatografioidaan silikageelillä käyttäen metyleeni-kloridi/metanoli/jääetikka/vettä (8,5:1,5:0,15:0,15).
15 Saanto: 920 mg öljyä (sisältää vielä etikkahappoa).
lg. ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspar-tyyli-L-fenyyliglysiini 920 mg ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)- 20 4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspar- tyyli-L-fenyyliglysiini-di-tert.-butyyliesteri-hydroklori- ; dia liuotetaan seokseen, jossa on 5,4 ml trifluorietikka- happoa, 0,6 ml vettä ja 0,6 ml dimerkaptoetaania. Annetaan , seistä 1 tunnin ajan huoneenlämpötilassa ja haihdutetaan . 25 vesisuihkuvakuumissa. Puhdistusta varten aine kromatografi- » * · oidaan Sephadex LH20:llä käyttäen jääetikan, n-butanolin ja veden seosta. Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdu- • · * '·* * tetaan. Jäännös liuotetaan veteen ja jäädytyskuivataan.
Saanto: 390 mg * · » ; ',·* 30 [a]D = 1,3 °C (c = 1, metanolissa, 25 °C) .
i · > · · t » • · · • I · » · k I * • i k ' t k > k » k i9 1 13265
Esimerkki 2: ( (R, S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-3,4-di-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspar-tyyli-L-fenyyliglysiini 5 2a- ((R,S)-4-(4-syaanifenyyli)-3,4-dimetyyli-2,5- dioksoimi datsolidin-l-yyli) -etikkahappo-metyyliesteri 3 g ((R,S)-4-(4-syaanifenyyli)-4-metyyli-2,5-diok-soimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-metyyliesteriä (10,4 ramol) liuotetaan argonatmosfäärissä 15 ml:aan vede-10 töntä dimetyyliformamidia. Argon-vastavirtauksessa lisätään 275,5 mg natriumhydridi-dispersiota mineraaliöljyssä (11,4 mmol). Reaktioseosta sekoitetaan 15 minuutin ajan huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen tähän lisätään 721 μΐ metyylijodidia (11,4 mmol). Sekoitetaan 4 tuntia huoneen-15 lämpötilassa ja sitten annetaan seistä yön ajan huoneenlämpötilassa. Liuos konsentroidaan. Puhdistusta varten aine kromatografioidaan silikageelillä käyttäen metyleeniklori-di/etikkahappoetyyliesteriä (9,5:0,5). Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan.
20 Saanto: 2,14 g öljyä (68 %) .
2b. ((R, S) -4- (4- (etoksi-imino-metyyli) -fenyyli) - : : 3,4-dimetyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo- ;* metyyliesteri-hydrokloridi \ Liuos, jossa on 2,56 g ((R, S)-4-(4-syaanifenyyli)- .·.: 25 3,4-dimetyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo- • I » metyyliesteriä (8,5 mmol) 40 ml:ssa abs. etanolia, jäähdy-tetään 0 °C:seen. Kuivaa HCl-kaasua johdetaan liuokseen, • * ' * ' jolloin lämpötila pidetään jatkuvasti 10 °C:n alapuolella, kunnes nitriili-bandia ei enää havaita IR-spektrissä. Eta- » · « ·' 30 nolipitoinen liuos haihdutetaan 20 ml:aan ja siihen lisä- tään 200 ml dietyylieetteriä. Suspensio haihdutetaan ja : kuivataan korkeavakuumissa.
* * ·
Saanto: 2,27 g (76 %) .
20 1 13 2 6 5 2c. ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-3,4-dime tyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-me-tyy1iesteri-hydrokloridi 2,26 g ((R,S)-4-(4-(etoksi-imino-metyyli)-fenyyli)-5 3,4-dimetyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo- metyyliesteri-hydrokloridia (6,4 mmol) suspendoidaan 25 ml:aan isopropanolia ja sitten tähän lisätään 7,2 ml 2 N ammoniakkiliuosta isopropanolissa. Reaktioseosta sekoitetaan 2,5 tuntia 50 °C:ssa. Seos jäähdytetään ja sitten siilo hen lisätään 200 ml dietyylieetteriä. Sakka imusuodatetaan ja kuivataan korkeavakuumissa.
Saanto: 1,03 g (45 %) .
2d. ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-3,4-dimetyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-hyd-15 rokloridi 1 g ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-3,4-dimetyyli-2, 5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-me-tyyliesteri-hydrokloridia (3,14 mmol) liuotetaan 20 ml:aan konsentroitua suolahappoa. Liuosta kuumennetaan 6 tuntia 20 kiehuvana ja sitten haihdutetaan.
Saanto: 770 mg (81 %).
: 2e. ((R,S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyyli) -3,4- · dimetyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspar- ; . tyyli-L-fenyyliglysiini-di-tert.-butyyliesteri-hydrokloridi ♦ * t .·, ; 25 Liuokseen, jossa on 340 mg ( (R, S)-4-(4-(amino- • · · imino-metyyli)-fenyyli)-3,4-dimetyyli-2,5-dioksoimidatsoli-*!' din-l-yyli)-etikkahappo-hydrokloridia (1 mmol), 415 mg H- • Asp (OBufc)-Phg-OB^-hydrokloridia (1 mmol) ja 135 mg HOBt:tä 7 ml:ssa dimetyyliformamidia, lisätään 0 °C:ssa 220 mg 30 DCC:tä (1 mmol). Sitten lisätään 0,13 ml N-etyyli-morfoliinia, kunnes pH on 5,0 ja tämän jälkeen sekoitetaan .*. : 1 tunti 0 °C:ssa ja 2 tuntia huoneenlämpötilassa. Tämän • · jälkeen seoksen annetaan seistä viikonlopun yli jäähdytys- * » • huoneessa, sakka imusuodatetan ja suodos haihdutetaan. Puh- * · 35 distusta varten aine kromatografioidaan Sephadex LH20:llä • ’.·* käyttäen jääetikan, n-butanolin ja veden seosta. Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan. Jäännös liuote taan veteen ja jäädytyskuivataan.
Saanto: 377 mg (57 %).
21 113265 2f. ((R, S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-3,4-5 dimetyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-as-partyyli-L-fenyyliglysiini 370 mg ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)- 3,4-dimetyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspartyyli-L-fenyyliglysiini-di-tert.-butyyliesteri-hydro-10 kloridia (0,53 mmol) liuotetaan seokseen, jossa on 3,6 ml trifluorietikkahappoa, 0,4 ml vettä ja 0,4 ml dimerkapto-etaania. Annetaan seistä 1 tunnin ajan huoneenlämpötilassa ja haihdutetaan vesisuihkuvakuumissa. Puhdistusta varten aine kromatografioidaan Sephadex LH20:llä käyttäen jääeti-15 kan, n-butanolin ja veden seosta. Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan. Jäännös liuotetaan veteen ja j äädytys kuivataan.
Saanto: 210 mg valkoista kiinteätä ainetta (72 %) [a]D = -2,8 °C (c = 1, metanolissa, 23 °C) .
20 Esimerkki 3: ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyy- I ·· | > ’ li-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyli-L-aspartyyli-L- ; · fenyyliglysiini-dimetyyliesteri-hydrokloridi * f
Liuokseen, jossa on 1,47 g ((R,S)-4-(4-(4-amino- : 25 imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin- • » · , ’ 1-yyli)-etikkahappo-hydrokloridia (4,4 mmol), 1,45 g Hasp- (OMe)-Phg-OMe-hydrokloridia (4,4 mmol) ja 600 mg HOBt:tä 15 • ► · * t · ' ml:ssa dimetyyliformamidia, lisätään 0 °C:ssa 977 mg DCC:tä (5,66 mmol). Sitten sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa ja 8 tun- i » t ·’ 30 tia huoneenlämpötilassa. Sitten sakka imusuodatetan ja suo- * i » dos haihdutetaan. Puhdistusta varten aine kromatograf ioi- J.tj daan silikageelillä käyttäen metyleenikloridi/metanoli/- • » jääetikka/vettä (8:2:0,15:0,15) ja tämän jälkeen metyleeni-- kloridi/metanoli/jääetikassa (30:10:0,5). Puhdasta ainetta ' ’ 35 sisältävät fraktiot haihdutetaan.
; *.· Jäännös liuotetaan veteen ja jäädytys kuivataan.
22 113265
Saanto: 437 mg valkoista kiinteätä ainetta (16 %).
Esimerkki 4 ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli -2 ,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspartyyli-L-5 fenyyliglysiini-di-isopropyyliesteri-hydrokloridi 4a. (N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-fenyyliglysiini-isopropyyliesteri 20 g Z-Phg-0H:ta (70 mmol) liuotetaan seokseen, jossa on 26 ml isopropanolia ja 26 ml pyridiiniä. Tähän li-10 sätään liuos, jossa on 31,5 ml 50 % propaanifosfonihappoan-hydridiä etikkahappoetyyliesterissä ja 350 mg DMAP:tä ja sekoitetaan 24 tuntia huoneenlämpötilassa. Seos haihdutetaan tämän jälkeen vakuumissa ja jäännös jaetaan etikkahap-poetyyliesterin ja veden välillä. Orgaanista faasia ravis-15 teilaan kaliumvetysulfaattiliuoksen (100 g kaliumsulfaattia ja 50 g kaliumvetysulfaattia liuotettuna 1 litraan vettä), natriumvetykarbonaattiliuoksen ja veden kanssa. Orgaaninen faasi kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan.
Saanto: 16,74 g öljyä (73 %).
20 4b. L-fenyyliglysiini-isqpropyyliesteri-hydroklori- di 16,74 g (N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-fenyyligly-··· siini-isopropyyliesteriä (51 mmol) liuotetaan metanoliin ja hydrataan katalyyttisesti Pd/aktiivihiilellä autobyretissä ·, j 25 lisäten 2 N metanolipitoista HCl:ää pH:n ollessa 4,6. Kata-> · lysaattori imusuodatetaan piimään kautta ja suodos haihdu-tetaan. Jäännöstä hierretään dietyylieetterin kanssa.
• » « ’ * Saanto: 9,21 g valkoista kiinteätä ainetta (79 %).
4c. L-asparagi inihappo - Cb - i s opropyy 1 ie s ter i -hydro - : 30 kloridi :1>f’ 1 000 ml isopropanolia jäähdytetään -10 °C:seen ja : tähän lisätään hitaasti 31 ml (0,16 moolia) tionyyliklori- dia. Liuokseen lisätään 40 g L-asparagiinihappoa (0,3 mol).
• » . Seosta sekoitetaan 6 tuntia 40 °C:ssa. Tämän jälkeen seok- * * 35 sen annetaan seistä viikonlopun yli huoneenlämpötilassa.
• *,· Liuos haihdutetaan 250 ml:n tilavuuteen ja tähän lisätään 113265 23 500 ml dietyylieetteriä. Sakka imusuodatetaan. Suodos haihdutetaan edelleen ja raakatuote saostetaan lisäämällä dietyylieetteriä. Puhdistusta varten 20 g raakatuotetta puhdistetaan pylväässä, jossa on 1 kg hapanta alumiinioksidia.
5 Saanto: 8,55 g.
4d. (N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiinihappo-Cfi-isopropyyliesteri-sykloheksyyliamiinisuola 8,55 g L-asparagiinihappo-Cjj-isopropyyliesteri-hyd-rokloridia (48,8 mmol) liuotetaan seokseen, jossa on 110 ml 10 vettä ja 110 ml dioksaania ja tähän lisätään 4,1 g (48,8 mmol) natriumvetykarbonaattia. Sitten tähän lisätään 13,4 g N-(bentsyylioksikarbonyyli-oksi)-sukkinimidiä (53,8 mmol) ja sekoitetaan 1 tunti huoneenlämpötilassa. Sen jälkeen, kun on lisätty 10 g natriumvetykarbonaattia, pH saatetaan 15 arvoon 8. Seosta sekoitetaan 5 tuntia huoneeenlämpötilassa ja sitten haihdutetaan. Jäännös jaetaan etikkahappoetyy-liesterin ja 2 N HCl:n välillä. Orgaanista faasia ravistellaan veden kanssa, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Saatu öljy (12,35 g) liuotetaan 300 ml:aan dietyy-20 lieetteriä. Liuokseen tiputetaan sykloheksyyliamiinia, kun nes pH on 8,0. Sakka imusuodatetaan ja pestään dietyylieet-.* : terillä.
:· Saanto: 12,84 g (64 %) .
4e. (N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiinihappo-. : 25 Cfl-isopropyyliesteri , 12,84 g (N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiini- • $ ! ! happo-Cfi-isopropyyliesteri-sykloheksyyliamiinisuolaa • - » * (31,4 mmol) suspendoidaan 250 ml:aan etikkahappoetyylieste-riä. Suspensiota ravistellaan 15,7 ml: n 2 N rikkihappoa ·“ 30 (31,4 mmol) ja veden kanssa, kunnes muodostuu kirkas liuos.
t I | ',,,· Orgaaninen faasi pestään kaliumvetysulfaattiliuoksella (100 g kaliumsulfaattia ja 50 g kaliumvetysulfaattia liuotettuna 1 litraan vettä), kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdute- * taan.
’ * 35 Saanto: 8,22 g öljyä (85 %).
1 · 24 113 2 6 5 4f. (N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiinihappo-CB-isopropyyliesteri-L-fenyyliglysiini-isopropyyliesteri
Liuokseen, jossa on 8 g Z-L-Asp(OiPr)-OH:ta (25,86 mmol), 5,94 g H-Phg-OiPr:ää (25,86 mmol) ja 3,49 g HOBtrtä 5 100 ml:ssa dimetyyliformamidia, lisätään 0 °C:ssa 3,36 ml N-etyylimorfoliinia ja 5,69 g DCC:tä (25,86 mmol). Sitten sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa ja 4 tuntia huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen seoksen annetaan seistä yön ajan, sakka imusuodatetan ja suodos haihdutetaan. Jäännös liuotetaan 10 etikkahappoetyyliesteriin ja orgaanista faasia ravistellaan kaliumvetysulfaattiliuoksen (100 g kaliumsulfaattia ja 50 g kaliumvetysulfaattia liuotettuna 1 litraan vettä), natrium-vetykarbonaattiliuoksen ja veden kanssa. Sitten kuivataan vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Öljyinen 15 jäännös kromatografioidaan silikageelillä käyttäen n-heptaani/etikkahappoetyyliesteriä (7:3).
Saanto: 10,28 g (82 %).
4g. L-asparagiinihappo-Cs-isopropyyliesteri-L-fe-nyyliglysiini-isopropyyliesteri-hydrokloridi 20 10,28 g (N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiini- happo-Cfi-isopropyyliesteri-L-fenyyliglysiini-isopropyylies-: teriä (21,2 mmol) liuotetaan 250 ml:aan metanolia ja hydra- ;· taan katalyyttisestä Pd/aktiivihiilellä autobyretissä lisä- . ’. ten 2 N metanolipitoista HCl:ää pH:n ollessa 4,6. Kataly- ,· : 25 saattori imusuodatetaan piimään kautta ja suodos haihdute taan. Jäännös liuotetaan veteen ja jäädytyskuivataan.
Saanto: 6,56 g valkoista kiinteätä ainetta (80 %).
• » · 4h. ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-di.oksodmidatsolidin-l-yyli) -asetyyli-L-aspar-·' 30 tyyli-L-fenyyliglysiini-di-isopropyyliesteri-hydrokloridi i t » ...· Liuokseen, jossa on 2 g ( (R, S)-4-(4-(amino-imino- » : metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yy- » · li)-etikkahappo-hydrokloridia (6,12 mmol), 2,37 g H-• Asp(OiPr)-Phg-OiPr-hydrokloridia (6,12 mmol) ja 826,3 mg ’ * 35 HOBt:tä 15 ml:ssa dimetyyliformamidia, lisätään 0 °C:ssa • ’.· 1,35 g DCC:tä (6,12 mmol). Sitten sekoitetaan 1 tunti 25 1 13265 O °C:ssa ja 5 tuntia huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen seoksen annetaan seistä yön ajan jäähdytyshuoneessa, sakka imusuodatetan ja suodos haihdutetaan. Puhdistusta varten aine kromatografioidaan silikageelillä käyttäen metyleeni-5 kloridi/metanoli/jääetikka/vettä (8,5:1,5:0,15:0,15). Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan. Jäännös liuotetaan veteen ja jäädytyskuivataan.
Saanto: 1,03 g valkoista kiinteätä ainetta (27 %) [ex]d = -9,3 °C (c = 1, metanolissa, 24 °C) .
10 Esimerkki 5: ((R, S) -4- (4- (metoksikarbonyyliamino-imino-metyyli) -fenyyli) -4-metyyli-2,5-dioksoimi datsolidin-l-yyli) -asetyy-li-L-aspartyyli-L-fenyyliglysiini-di-isopropyyliesteri 700 mg ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-15 4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-as-partyyli-L-fenyyliglysiini-di-isopropyyliesteri-hydroklo-ridia (1,1 mmol; katso esimerkki 4) liuotetaan 15 ml:aan dimetyyliformamidia ja tähän lisätään 457,4 μΐ (3,3 mmol) trietyyliamiinia ja 212,6 μΐ kloorimuurahaishappometyylies-20 teriä (2,75 mmol). Sekoitetaan 8 tuntia huoneenlämpötilassa ja tämän jälkeen annetaan seistä yön ajan huoneenlämpöti- • ·' lassa. Reaktioseos suodatetaan ja suodos haihdutetaan.
;· Jäännös liuotetaan natriumvetykarbonaattiliuokseen ja vesi- : 'j pitoista faasia ravistellaan kolme kertaa etikkahappoetyy- : 25 liesterin kanssa. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan , >·, natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Puhdistusta varten • · amorfinen aine kromatografioidaan silikageelillä käyttäen • · · metyleenikloridi/metanolia (20:1). Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan. Öljyistä jäännöstä hierretään • · · • ·* 30 dietyylieetterin kanssa ja sakka imusuodatetaan.
Saanto: 410 mg valkoista kiinteätä ainetta (55 %) .
* » · > s · MM» * · > » 26 113265
Esimerkki 6: 3-(( (R, S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-me tyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliamino)-2-bentsyylioksikarbonyyliamino-propionihappo 5 6a. 3-amino-2-L-bentsyylioksikarbonyyliamino-propi- onihappo-tert-butyyliesteri 5 g 3-amino-2-L-bentsyylioksikarbonyyliamino-propi-onihappoa (21 mmol; Bachem Chemie) suspendoidaan 50 ml:aan dioksaania ja tähän lisätään jäähdyttäen 5 ml konsentroitua 10 rikkihappoa. Hieman kellertävä liuos jäähdytetään kuiva-jäällä ja siihen lisätään 50 ml kondensoitua isobutyleeniä. Sitten ravistellaan 3 päivän ajan huoneenlämpötilassa autoklaavissa typpiatmosfäärissä 20 atmosfäärin paineessa. Tämän jälkeen ylimäärä isobutyleeniä poistetaan typpivirral-15 la. Liuoksen pH saatetaan 2 M natriumkarbonaattiliuoksella (noin 70 ml) arvoon 10 ja ravistellaan kolme kertaa kulloinkin 200 ml:n kanssa dietyylieetteriä. Orgaaninen faasi pestään vedellä, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan.
20 Saanto: 4,31 g öljyä (70 %) .
6b. 3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)- • t ·* 4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyliamino) -2- • bentsyylioksikarbonyyliamino-propionihappo-tert. butyyli- : esteri-hydrokloridi : 25 Liuokseen, jossa on 600 mg ( (R, S)-4-(4-(amino- • » , , ·, imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin- * ! · §.';! 1-yyli)-etikkahappo-hydrokloridia (1,84 mmol; katso esi- # e * merkki 1), 542 mg 3-amino-2-L-bentsyylioksikarbonyyliamino-propionihappo-tert-butyyliesteriä (1,84 mmol) ja 249 mg 30 HOBt:tä 5 ml:ssa dimetyyliformamidia, lisätään 0 °C:ssa 405 mg DCC:tä (1,84 mmol). Sitten sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa ;'·tj ja 6 tuntia huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen seoksen an- > · netaan seistä yön ajan jäähdytyshuoneessa, sakka imusuoda- > _ tetan ja suodos haihdutetaan. Puhdistusta varten aine kro- > · * » 35 matografioidaan silikageelillä käyttäen metyleeniklori- i > · ’ · 27 1 13 2 6 5 di/metanoli/jääetikka/vettä (8,5 : 1,5 : 0,15 : 0,15).
Saanto: 680 mg öljyä (sisältää vielä etikkahappoa).
6c. 3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)- 4-metyyli-2,5-dioksoimi datsolidin-l-yyli)-asetyyliamino)-2-5 bentsyylioksikarbonyyliamino-propionihappo 670 mg 3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliamino) -2-bentsyylioksikarbonyyliamino-propionihappo-tert.bu-tyyliesteri-hydrokloridia liuotetaan seokseen, jossa on 3,6 10 ml trifluorietikkahappoa, 0,4 ml vettä ja 0,4 ml dimerkap-toetaania. Sen jälkeen, kun on annettu seistä 1 tunnin ajan huoneenlämpötilassa, haihdutetaan vesisuihkuvakuumissa. Jäännös liuotetaan veteen ja vesipitoinen faasi uutetaan kolme kertaa dietyylieetterillä. Orgaaninen faasi pestään 15 kerran vedellä ja yhdistetyt vesipitoiset faasit jäädytys-kuivataan. Puhdistusta varten aine kromatografioidaan Sephadex LH20:llä käyttäen jääetikan, n-butanolin ja veden seosta. Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan. Jäännös liuotetaan veteen ja jäädytyskuivataan.
20 Saanto: 350 mg [a]D = -12,4 °C (c = 1, metanolissa, 25 °C).
·’ ; Esimerkki 7
• I
;· 2-amino-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy- t I 1 ; li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami- .5 : 25 no)-propionihappo-hydrokloridi , 7a. 2-amino-3- ( ( (R,S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) - * ♦ · fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyy- * * · liamino) -propionihappo-tert.butyyliesteri-dihydrokloridi 930 mg 3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-> 30 li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami- t i » ‘,, ,* no)-2-bentsyylioksikarbonyyliamino-propionihappo-tert.bu- : tyyliesteri-hydrokloridia (katso esimerkki 6b) liuotetaan * · 25 ml:aan metanolia ja hydrataan katalyyttisesti Pd/aktii- « · > vihiilellä autobyretissä lisäten 2 N metanolipitoista 35 HCl:ää pH:n ollessa 4,6. Katalysaattori imusuodatetaan pii- i · t : maan kautta ja suodos jäädytyskuivataan. Puhdistusta varten 28 113265 aine kromatografioidaan silikageelillä käyttäen metyleeni-kloridi/metanoli/jääetikka/vettä (9:4:0,3:0,65).
Saanto: 300 mg valkoista kiinteätä ainetta (42 %).
7b. 2-amino-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-5 fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyy-liamino)-propionihappo-hydrokloridi 290 mg 2-amino-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli) -fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-ase-tyyliamino)-propionihappo-tert.butyyliesteri-dihydroklori-10 dia liuotetaan seokseen, jossa on 3,6 ml trifluorietikka-happoa, 0,4 ml vettä ja 0,3 ml dimerkaptoetaania. Sekoitetaan 1 tunti huoneenlämpötilassa ja haihdutetaan vesisuih-kuvakuumissa. Jäännös liuotetaan veteen ja vesipitoinen faasi uutetaan kolme kertaa dietyylieetterillä. Orgaaninen 15 faasi pestään kerran vedellä ja yhdistetyt vesipitoiset faasit jäädytyskuivataan. Puhdistusta varten aine kromatografioidaan Sephadex LH20:llä käyttäen jääetikan, n-butanolin ja veden seosta. Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan. Jäännös liuotetaan veteen ja jäädy-20 tyskuivataan.
Saanto: 39 mg valkoista kiinteätä ainetta (15 %).
Esimerkki 8 ((R,S)-4-(4-(aminometyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5- : H-i ηΙτΑΛΪιιιι Hätäni i H·i n-1 -yyl i ) -i -T.-agparfyyl i -T.-fftnyy- • j 25 liglysiini * · , ·, 8a. ((R,S) -4- (4- (aminometyyli) -fenyyli) -4-metyyli- * 1 · 2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-metyyliesteri- • * * asetaatti 1 g ((R,S)-4-(4-syaanifenyyli)-4-metyyli-2,5-diok- 30 soimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-metyyliesteriä (3,48 '...· mmol; katso esimerkki 1) liuotetaan seokseen, jossa on 8 ml ,\j etanolia ja 2 ml 50-%:ista etikkahappoa. Liuokseen lisätään * · 200 mg 10-%:ista Pd/C:tä ja hydrataan 2 tunnin ajan huo- * · t neenlämpötilassa ravisteluautoklaavissa 3 baarin paineessa.
35 Katalysaattori imusuodatetaan piimään kautta ja suodos * » » > · 29 1 13265 haihdutetaan, öjymäinen jäännös kromatografioidaan silika-geelillä käyttäen metyleenikloridi/metanolia (8:2).
Saanto: 800 mg (79 %).
8b. ((R,S)-4-(4-(aminometyyli)-fenyyli)-4-metyyli-5 2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-hydrokloridi 750 mg ((R,S)-4-(4-(aminometyyli)-fenyyli)-4-metyy-li-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-metyylies-teri-asetaattia (2,57 mmol) liuotetaan 15 ml:aan konsentroitua HCl:ää. Liuosta kuumennetaan 6 tunnin ajan kiehuvana 10 ja sitten haihdutetaan. Jäännös liuotetaan veteen ja jäädy-tyskuivataan.
Saanto: 700 mg (87 %).
8c. ((R,S)-4-(4-(tert.-butoksikarbonyyliaminometyy- li)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-15 etikkahappo 300 mg ((R,S)-4-(4-(aminometyyli)-fenyyli)-4-me-tyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-hydro-kloridia (0,96 mmol) liuotetaan seokseen, jossa on 2 ml dioksaania ja 1 ml vettä. Liuoksen pH saatetaan 1 N 20 NaOH:lla (noin 1 ml) arvoon 8 ja tämän jälkeen jäähdytetään 0 °C:seen. Sitten tähän lisätään sekoittaen 230 mg di-tert-.* butyyli-dikarbonaattia (1,05 mmol). Reaktioseoksen annetaan :· lämmetä huoneenlämpötilaan ja sekoitetaan edelleen 3 tun- ♦ v t tia. Tällöin pH pidetään arvossa 8,0, lisäämällä jatkuvasti : 25 1 N NaOH:ta (noin 1,2 ml). Reaktioseos konsentroidaan va- , kuumissa. Jäännöksen pH saatetaan jäähdyttäen (0 °C) ka- !!! liumvetysulfaattiliuoksella (100 g kaliumsulfaattia ja 50 g • * · kaliumvetysulfaattia liuotettuna 1 litraan vettä) arvoon 2,0. Vesipitoinen faasi uutetaan kolme kertaa etikkahap- * * • ·* 30 poetyyliesterillä. Yhdistyneitä orgaanisia faaseja ravis- teilaan veden kanssa ja kuivataan vedettömällä natriumsul- ;‘.t{ faatilla. Orgaaninen faasi haihdutetaan. Jäännös liuotetaan » · pieneen määrään vettä ja jäädytys kuivataan.
» · * i Saanto: 340 mg (94 %).
35 8d. ((R,S)-4-(4-(tert.-butoksikarbonyyliaminome- tyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)- jo 113265 asetyyli-L-aspartyyli-L-fenyyliglysiini-di-tert.-butyyli-esteri
Liuokseen, jossa on 300 mg ((R,S)-4-(4-(tert.-butoksikarbonyyliaminometyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-diok-5 soimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappoa (0,8 mmol), 332 mg H-Asp (0Bufc)-Phg-OB^-hydrokloridia (0,8 mmol) ja 108 mg HOBtrtä 3 ml:ssa dimetyyliformamidia, lisätään 0 °C:ssa 104 μΐ N-etyylimorfoliinia ja 176 mg DCC:tä (0,9 mmol). Sitten sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa ja 4,5 tuntia huoneenlämpöti-10 lassa. Tämän jälkeen seoksen annetaan seistä yön ajan jääh-dytyshuoneessa, sakka imusuodatetan ja suodos haihdutetaan. Puhdistusta varten aine kromatografioidaan silikageelillä käyttäen metyleenikloridi/metanolia (20:1).
Saanto: 320 mg öljyä (54 %).
15 8e. ((R,S)-4-(4-(aminometyyli)-fenyyli)-4-metyyli- 2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyli-L-aspartyyli-L-fenyyliglysiini 270 mg ((R, S)-4-(4-(tert.-butoksikarbonyyliamino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yy-20 li)-asetyyli-L-aspartyyli-L-fenyyliglysiini-di-tert.-butyy-liesteriä (0,51 mmol) liuotetaan seokseen, jossa on 1,8 ml • : trifluorietikkahappoa, 0,2 ml vettä ja 0,2 ml dimerkapto- etaania. Sen jälkeen, kun on annettu seistä 1 tunnin ajan • ‘ huoneenlämpötilassa, haihdutetaan vesisuihkuvakuumissa.
; 25 Puhdistusta varten aine kromatografioidaan Sephadex , LH20:llä käyttäen jääetikan, n-butanolin ja veden seosta.
.’!! Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan. Jäännös • » » • · » ‘ liuotetaan veteen ja jäädytyskuivataan.
Saanto: 160 mg (59 %) 1 ·* 30 [a]D = +1,7 °C (c = 1, metanolissa, 23 °C) .
« * ·
Esimerkki 9 3- (((R,S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -bentsyyli) - » » ,,,,: 2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliamino)-2-bentsyyli-
* I
oksikarbonyyliamino-propionihappo : : 35 » > i ' » si 113265 9a. 3-(( (R, S)-4-(4-(amino-imino-metyy1i)-bentsyy-li)-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliamino)-2-bentsyylioksikarbonyyliamino-propionihappo-tert.butyyli-esteri 5 Liuokseen, jossa on 726 mg ((R,S)-4-(4-(amino- imino-metyyli)-bentsyyli)-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-hydrokloridia (2,5 mmol; katso EP-hakemus-julkaisu 0 530 505) , 736 mg 3-amino-2-L-bentsyylioksi- karbonyyliamino-propionihappo-tert-butyyliesteriä (2,5 10 mmol) ja 338 mg HOBt:tä 10 mlrssa dimetyyliformamidia, lisätään 0 °C:ssa 550 mg DCC:tä (2,7 mmol). Sitten sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa ja 3 tuntia huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen seoksen annetaan seistä yön ajan jäähdytyshuo-neessa, sakka imusuodatetan ja suodos haihdutetaan. Jään-15 nöstä hierretään natriumvetykarbonaattiliuoksen ja tämän jälkeen veden kanssa. Jäljelle jäävä öljy liuotetaan me-tanoliin ja liukenematon jäännös (urea) suodatetaan erilleen. Liuos haihdutetaan.
Saanto: 1,2 g (85 %).
20 9b. 3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-bentsyy li) -2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliamino)-2-bent-' syylioksikarbonyyliamino-propionihappo 1,2 g 3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-bentsyyli) -2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliamino)-2-bent- i 25 syylioksikarbonyyliamino-propionihappo-tert.butyyliesteriä ) » , ·, liuotetaan seokseen, jossa on 10,8 ml trifluorietikkahappoa * · J ja 0,8 ml vettä. Sen jälkeen, kun on annettu seistä 1 tun- • · nin ajan huoneenlämpötilassa, haihdutetaan vesisuihkuvakuu-missa. Jäännöstä hierretään dietyylieetterin kanssa. Sakka 4 » · * ·' 30 imusuodatetaan. Puhdistusta varten aine (380 mg) kromato- 1(1 grafioidaan Sephadex LH20:llä käyttäen jääetikan, n- ,*‘•.1 butanolin ja veden seosta. Puhdasta ainetta sisältävät • · fraktiot haihdutetaan. Jäännös liuotetaan veteen ja jäädy- * · * > tyskuivataan.
35 Saanto: 56 mg (5 %).
* i t » » 32 1 13265
Esimerkki 10 ((R,S)-4-(4-guanidino-fenyyli)-4-metyyli-2,5-diok-soimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspartyyli-L-fenyyli-glysiini 5 10a. ((R,S)-4-(4-bentsyylioksikarbonyyli-guanidino- fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyy-li-L-aspartyyli-L-fenyyliglysiini-di-tert.-butyyliesteri 300 mg (0, 625 mmol) ((R,S)-4-(4-bentsyylioksikar-bonyyli-guanidino-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsoli-10 din-1-yyli)-etikkahappoa (esimerkki lie) liuotetaan 50 ml:aan dimetyyliformamidia ja tähän lisätään 0 °C:ssa 145 mg (0,7 mmol) DCC:tä ja 85 mg (0, 625 mmol) HOBtitä. Sitten sekoitetaan edelleen 1 tunnin ajan, lisätään 260 mg (0, 625 mmol) Η-Asp (OBufc)-Phg-OBut-hydrokloridia ja 86,4 mg 15 (0,75 mmol) N-etyylimorfoliinia. Sekoitetaan 4 tuntia huo neenlämpötilassa, haihdutetaan, liuotetaan etikkaesteriin, imusuodatetaan ja orgaaninen faasi pestään natriumvetykar-bonaattiliuoksella ja kaliiumvetysulfaattiliuoksella, kuivataan ja haihdutetaan. Jäännöstä hierretään eetterin kans-20 sa ja imusuodatetaan.
Saanto: 370 mg (74 %).
10b. ((R,S)-4-(4-guanidino-fenyyli)-4-metyyli-2,5- :’· dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyli-L-aspartyyli-L-fenyy- » liglysiini ,·, : 25 370 mg (0,46 mmol) ( (R, S)-4-(4-bentsyylioksikarbo- , ,·, nyyli-guanidino-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin- (! 1-yyli) -asetyyli-L-aspartyyli-L-fenyyliglysiini-di-tert. - * < · butyyliesteriä sekoitetaan 3,7 ml:n kanssa 90-%:ista trif-luorietikkahappoa 1 tunnin ajan huoneenlämpötilassa ja tä- t · : ·' 30 män jälkeen liuos haihdutetaan korkeavakuumissa. Jäännös liuotetaan 50 ml: aan metanolia, tähän lisätään 50 mg . l 10-%:ista Pd:tä hiilen pinnalla ja hydrataan huoneenlämpö- tilassa. Täydellisen reaktion jälkeen suodatetaan kataly-• saattorista erilleen, haihdutetaan ja jäännös kromatografi- ‘ ' 35 oidaan puhdistusta varten Sephadex LH20:llä käyttäen jää- ; ’,· etikan, n-butanolin ja veden seosta. Puhdasta ainetta si- 33 113265 sältävät fraktiot haihdutetaan. Jäännös liuotetaan veteen ja jäädytyskuivataan.
Saanto: 123 mg (48 %)
Sulamispiste: 180 °C.
5 Esimerkki 11 ((R,S)-4-(4-bentsyylioksikarbonyyli-guanidino-fe-nyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspartyyli-L-fenyyliglysiini-dimetyyliesteri lla. (R,S)-4-(4-nitro-fenyyli)-4-metyyli-2,5-diok-10 soimidatsolidiini 20,8 g (0,32 mmol) kaliumsyanidia ja 96,1 g (1 mol) ammoniumkarbonaattia liuotetaan 250 ml:aan vettä, ja tämä lisätään varovasti 49,5 g:aan (0,3 mol) 4-nitroasetofeno-nia, liuotettuna 250 ml:aan etanolia. Sekoitetaan 5 tuntia 15 50 °C:ssa, jäähdytetään ja saostunut tuote imusuodatetaan ja pestään edelleen dietyylieetterillä.
Saanto: 56,2 g (80 %)
Sulamispiste: 237 - 240 °C.
llb. ((R,S)-4-(4-nitro-fenyyli)-4-metyyli-2,5-diok-20 soimidatsolidin-l-yyli) -etikkahappo-metyyliesteri 3,5 g (0,15 mol) natriumia liuotetaan typpiatmo- : sfäärissä 400 ml:aan metanolia. Sitten lisätään 35,3 g (0,15 mol) 4-((R,S)-4-nitro-fenyyli)-4-metyyli-2,5-diokso- imidatsolidiinia ja kuumennetaan 2 tunnin ajan paluujääh- ,· ; 25 dyttäen. Sen jälkeen, kun on lisätty 24,9 g (0,15 mol) ka- liumjodidia ja 16,3 g (0,15 mol) kloorietikkahappometyy- , liesteriä, kuumennetaan edelleen 6 tunnin ajan paluujääh- • · * dyttäen, sitten jäähdytetään ja imusuodatetaan. Suodos haihdutetaan ja jäännöstä hierretään tert.-butyyli- * ♦ • 30 metyylieetterin kanssa, imusuodatetaan ja kuivataan.
Saanto: 37,9 g (82 %) j Sulamispiste: 177 - 178 °C.
» · llc. ((R,S) -4- (4-amino-fenyyli) -4-metyyli-2,5-diok-soimidatsolidin-l-yyli) -etikkahappo-metyyliesteri ’ * 35 Suspensioon, jossa on 7,4 g kalsiumkloridia, 37 g i sinkkipölyä, 11 ml vettä ja 7,4 ml etikkahappoa, lisätään 113265 34 varovasti 22,2 g (72,2 mmol) ((R,S)-4-(4-nitro-fenyyli) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-metyy-liesteriä 600 ml:ssa etanolia. Seosta kuumennetaan 4 tunnin ajan paluujäähdyttäen. Suodatetaan kuumassa, suodos haihdu-5 tetaan ja jäljellejäävään jäännökseen lisätään etikkahap-poetyyliesteriä ja natriumvetykarbonaattia. Orgaaninen faasi erotetaan ja haihdutetaan.
Saanto: 12,2 g (61 %).
lid. ((R,S)-4-(4-bentsyylioksikarbonyyli-guanidino-10 fenyyli) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -etikka-happo-me tyyliesteri 3,0 g (10,8 mmol) ((R,S)-4-(4-amino-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-metyy-liesteriä ja 2,4 g (10,8 mmol) bentsyylioksikarbonyyli-S-15 metyyli-isotioureaa sekoitetaan 30 ml:ssa metanolia ja 2,2 mlrssa etikkahappoa 24 tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Haihduttamisen jälkeen jäännös liuotetaan etikkahappoetyy-liesteriin, orgaaninen faasi uutetaan happamella vedellä, pestään neutraaliksi ja haihdutetaan. Jäännös kromatografi-20 oidaan silikageelillä käyttäen etikkaesterirmetanolia = 9:1.
; Saanto: 2,85 g (58 %) .
I · lie. ((R,S)-4-(4-bentsyylioksikarbonyyli-guanidino- fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikka- . * ; 25 happo • » · 2,81 g (6,2 mmol) ((R,S)-4-(4-bentsyylioksikarbo- • · ; ! nyyli-guanidino-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin- • · *·’ ' 1-yyli)-etikkahappo-metyyliesteriä sekoitetaan 23 ml:n vet tä, 15 ml:n 6 N suolahappoa ja 60 ml:n etikkahappoa kanssa • · · : .* 30 3 tunnin ajan 85 °C:ssa. Haihduttamisen jälkeen jäännös jäädytyskuivataan. Tuote kromatografioidaan puhdistusta : varten Sephadex LH20:llä käyttäen jääetikan, n-butanolin ja • t t ,.ti; veden homogeenista seosta.
Saanto: 850 mg (31 %) » · 1 t 113265 35
Ilf. ((R, S)-4-(4-bentsyylioksikarbonyyli-guanidino-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyy-li-L-aspartyyli-L-fenyyliglysiini-dimetyyliesteri 500 mg (1,13 mmol) ((R,S)-4-(4-bentsyylioksikarbo-5 nyyli-guanidino-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-1-yyli)-etikkahappoa liuotetaan 30 ml:aan dimetyyliformami-dia. Sen jälkeen, kun on jäähdytetty 0 °C:seen, tähän lisätään 153 mg (1,13 mmol) HOBt:tä ja 256 mg (1,24 mmol) DCC:tä. Sitten sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa, tähän lisätään 10 374 mg (1,13 mmol) Η-Asp(OMe)-Phg-OMe-hydrokloridia ja 0,17 ml (1,36 mmol) N-etyylimorfoliinia ja sekoitetaan yön ajan huoneenlämpötilassa. Saostunut disykloheksyyliurea suodatetaan erilleen, suodos haihdutetaan korkeavakuumissa, jäännös liuotetaan etikkahappoetyyliesteriin ja orgaaninen faa-15 si pestään natriumvetykarbonaattiliuoksella ja kaliumvety-sulfaattiliuoksella, kuivataan ja haihdutetaan. Jäännös kromatografioidaan silikageelillä käyttäen metyleeniklori-din ja metanolin seosta (9:1). Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan ja jäädytyskuivataan.
20 Saanto: 620 mg (77 %).
Esimerkki 12 (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-; no) -3-fenyyli-propionihappo-metyyliesteri-hydrokloridi
t I
.· : 25 Liuokseen, jossa on 653 mg ( (R, S)-4-(4-(amino- • t * >’ imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin- ! ! 1-yyli)-etikkahappo-hydrokloridia (2 mmol), 358 mg (R,S)-3- * * * amino-3-fenyyli-propionihappo-metyyliesteriä (2 mmol) ja 270 mg H0Bt:tä 10 ml:ssa dimetyyliformamidia, lisätään • *' 30 0 °C:ssa 440 mg DCC:tä (2 mmol). Sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa ja 3 tuntia huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen • *. j seoksen annetaan seistä yön yli, sakka imusuodatetaan ja * · suodos haihdutetaan. Puhdistusta varten aine (1,8 g) kroma- » · • tografioidaan Sephadex LH20:llä käyttäen jääetikan, n- 35 butanolin ja veden seosta. Puhdasta ainetta sisältävät 36 113265 fraktiot haihdutetaan. Jäännös liuotetaan veteen ja jäädytys kuivataan.
Saanto: 597 mg (61 %) .
Esimerkki 13 5 (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy- li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-no)-3-fenyyli-propionihappo-hydrokloridi 580 mg (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyy-10 liamino)-3-fenyyli-propionihappo-metyyliesteri-hydroklori-dia (1,19 mmol) liuotetaan 55 ml:aan konsentroitua suolahappoa ja annetaan seistä 5,5 tunnin ajan huoneenlämpötilassa. Liuos haihdutetaan. Puhdistusta varten aine (540 mg) kromatografioidaan Sephadex LH20:llä käyttäen jääetikan, n-15 butanolin ja veden seosta. Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan. Jäännös liuotetaan veteen ja jäädytys kuivataan.
Saanto: 477 mg (85 %) [a]o = +2,5 °C (c = 1, vedessä, 23 °C).
20 Esimerkki 14 ((R,S)-4-(4-guanidino-fenyyli)-4-metyyli-2,5-diok-soimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspartyyli-L-fenyyli-glysiini-dimetyyliesteri-hydrokloridi.
: Esimerkki 15 ; : 25 ((R,S)-4-(4-metoksikarbonyyli-guanidino-fenyyli)-4- , . . metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyli-L-aspar- * » 11! tyyli-L-fenyylialaniini-dietyyliesteri.
• * ·
Esimerkki 16 Να-tert. -butoksikarbonyyli-Nfl- ( ( (R, S) -4- (4-guanidi-·* 30 no-fenyyli)-4-metyylx-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-ase- tyyli) -hydratsino-etikkahappo.
« · * > » * · t » 37 113265
Esimerkki 17
Na-bentsyylioksikarbonyyli-Νβ- ( ( (R,S) -4- (4-bentsyy-lioksikarbonyyli-guanidino-fenyyli)-4-metyyli-2,5-diokso-imidatsoiidin-1-yyli)-asetyyli)-hydratsino-etikkahappo-5 metyyliesteri.
Esimerkki 18 Νβ-tert. -butyylioksikarbonyyli-Na- ( ( (R, S) -4- (4-bentsyylioksikarbonyyli-guanidino-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli)-hydratsino-10 etikkahappo.
Esimerkki 19 (S)-2-tert.-butyylioksikarbonyyliamino-6-((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-diokso-imidatsolidin-l-yyli)-heksaanihappo.
15 Esimerkki 20
Na-((4-(4-(amino-imino-metyyli)-bentsylideeni)-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyli) -Νβ- (tert. -butyyli-oksikarbonyyli)-hydratsino-etikkahappo.
Esimerkkien 21 ja 22 yhdisteet ovat diastereomeere- 20 jä.
Esimerkki 21 ((S tai R) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyyli) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspar-: tyyli-L-fenyyliglysiini.
. ' , : 25 Oiastereomeeri I
( (R, S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyyli) -4-metyy-,'!! li-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyli-L-aspartyyli-L- • t » * fenyyliglysiinin (esimerkki 1) diastereomeeri-seos erotetaan kromatografioimalla LiChroprep-RP-18-käänteisfaasi- • f · : ·* 30 kolonnilla (10 pm) käyttäen vesi/asetonitriili-seosta *...· (880 ml vettä; 120 ml asetonitriiliä; 1 ml trifluorietikka- : happoa) eluointiaineena. Fraktiot, jotka sisältävät kolon- • · nista ensiksi eluoituvan piikin, yhdistetään. Jäännös liuo- • k tetaan pieneen määrään vettä ja jäädytyskuivataan.
‘ ‘ 35 [a]D = -14 °C (c = 1, vedessä, 30 °C).
; FAB-MS: 539 (M + H)+.
38 113265
Esimerkki 22 ((R tai S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyyli) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspar-tyyli-L-fenyyliglysiini.
5 Diastereomeeri II
Vastaavasti, kutem esimerkissä 21 diastereomeeri II eristetään ( (R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspar-tyyli-L-fenyyliglysiinin diastereomeeri-seoksesta kromato-10 grafioimalla LiChroprep-RP-18-käänteisfaasi-kolonnilla (10 pm) . Tätä tarkoitusta varten yhdistetään ne fraktiot, jotka sisältävät toisena kolonnista eluoituvan piikin. Jäännös liuotetaan pieneen määrään vettä ja jäädytyskuivataan.
15 [α]ϋ = +20 °C (c = 1, vedessä, 30 °C).
FAB-MS: 539 (M + H)+.
Esimerkki 23 ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyy-li-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspartyyli-L-20 fenyyliglysiini-metyyliesteri FAB-MS: 553 (M + H)+.
• Esimerkki 24 ( (R,S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyyli) -3-etyy-li-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyli-L-25 aspartyyli-L-fenyyliglysiini FAB-MS: 466 (M + H) + .
Esimerkki 25
• I
* 1 ((R, S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyyli) -3-bent-syyli-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L- » · • ·’ 30 aspartyyli-L-f enyyliglysiini FAB-MS: 629 (M + H)+.
* 1 • · f • 1 · • · • i • % i · i k · » 1 » · ' ft * » 39 113 2 6 5
Esimerkki 26 ( (R, S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-syklo-propyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspar-tyyli-L-fenyyliglysiini 5 26a. 4-syaanifenyyli-syklopropyyli-metanoni 22,5 g 4-bromifenyyli-syklopropyyli-metanonia (100 mmol) ja 10,3 g CuCN:ää (100 mmol) liuotetaan 15 ml:aan DMF:ää ja kuumennetaan 4 tuntia sekoittaen ja paluu-jäähdyttäen. Annetaan jäähtyä 70 °C:seen ja suspensio kaa-10 detaan liuokseen, joka koostuu 40 g:sta rauta-(III)-kloridia, 10 ml:sta kons. HClrää ja 60 ml:sta vettä. Sitten sekoitetaan 20 minuuttia 70 °C:ssa. Uutetaan kolme kertaa kulloinkin 90 ml:11a tolueenia. Yhdistetyt orgaaniset faasit pestään 250 ml:11a 2N suolahappoa sekä 250 ml:11a 2N 15 natronlipeätä ja haihdutetaan. Kiinteätä jäännöstä hierretään petrolieetterin kanssa ja imusuodatetaan.
Saanto: 14,57 g (85 %) FAB-MS: 172 (M + H)+.
26b. ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-2 0 syklopropyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspartyyli-L-fenyyliglysiini : : Synteesi tapahtuu lähtien 4-syaanifenyyli- ;· syklopropyyli-metanonista vastaavasti, kuten esimerkissä 1.
. FAB-MS: 565 (M + H)+.
. 25 Esimerkki 27 • < t ·’ ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-etyy- li-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspartyyli-L- • · • » fenyyliglysiini
Synteesi tapahtuu lähtien 1-(4-bromifenyyli)-1- i > · : .* 30 propanonista vastaavasti, kuten esimerkissä 26.
t i i FAB-MS: 553 (M + H)+.
: Esimerkki 28 • · ((R,S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyyli) -4-bent- • · • syyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspartyy-
Tili 35 li-L-fenyyliglysiini 40 1 13 2 6 5
Synteesi tapahtuu lähtien 2-fenyyli-l-(4-bromife-nyyli)-1-etanonista vastaavasti, kuten esimerkissä 26. FAB-MS: 615 (M + H)+.
Esimerkki 29 5 ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-tert.- butyyli-2,5-dioksoi mi datsolidin-l-yyli)-asetyyli-L-aspar-tyyli-L-fenyyliglysiini 29a. 4-bromifenyyli-tert.-butyyli-metanoni 21 g:n juuri jauhettua, vedetöntä kaliumhydroksidia 10 (375 mmol) päälle pannaan 50 ml vedetöntä tolueenia. Tähän lisätään 20 mg 18-kruunu-6:ta (0,75 mmol) sekä 9,95 g 4-bromiasetofenonia (50 mmol). Sitten lämmitetään 70 °C:seen. Reaktioliuokseen lisätään hitaasti 24,94 ml jo-dimetaania (395 mmol) ja sekoitetaan 3,5 tuntia 70 °C:ssa. 15 Orgaaninen faasi uutetaan vedellä. Vesipitoinen faasi uutetaan kaksi kertaa dietyylieetterillä. Orgaaniset faasit yhdistetään, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Raakatuote (11,46 g) alkyloidaan vielä kerran edellä olevan menetelmän mukaisesti, koska reaktio ei ollut vielä täydel-20 linen. Saatu tuote (10,86 g) puhdistetaan korkeavakuumitis-lauksella hopeavaippakolonnin avulla, j j: Saanto: 3,9 g (32 %).
;'· FAB-MS: 242 (M + H)+.
‘•t : 29b. ((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4- .·, 25 tert. -butyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyli-L- , aspartyyli-L-fenyyliglysiini » · * il Synteesi tapahtuu lähtien 4-bromifenyyli-tert.- » < * ' butyyli-metanonista vastaavasti, kuten esimerkissä 26.
FAB-MS: 581 (M + H)+.
30 Esimerkki 30 * · > ·...· (R,S) -3- ( ( (R,S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyy- •. : li) -4-metyyli-2,5-diioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyliami- » · ,,,,: no) -2 -pentyylikarbonyyliamino-propionihappo I » · i > * * 35 FAB-MS: 475 (M + H)+.
41 1 13265
Esimerkki 31 (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-3,4-dimetyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-amino)-2-pentyylikarbonyyliamino-propionihappo 5 FAB-MS: 489 (M + H)+.
Esimerkki 32 (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyy-liamino)-2-butyylisulfonyyliamino-propionihappo 10 FAB-MS: 497 (M + H)+.
Esimerkki 33 (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-3,4-dimetyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-amino)-2-butyylisulfonyyliamino-propionihappo 15 FAB-MS: 511 (M + H)+.
Esimerkki 34 2-((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-me-tyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-N-((R,S)-1-bentsyy-lioksikarbonyyli-2-(3-fenyyliureidosulfonyyli)-etyyli)-2 0 asetamidi FAB-MS: 650 (M + H)+.
·’ Esimerkki 35 ;· (R, S) -3- ( ( (R, S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyy li) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-.: 25 no)-3-(3-hydroksi-4-metoksi-fenyyli)-propionihappo FAB-MS: 484 (M + H)+.
• · t· _ Esimerkki 36 • ♦ (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(ami no-imino-metyy1i)-fenyyli) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami- » * • ** 30 no)-3-(4-hydroksi-3-metoksi-fenyyli)-propionihappo * 5 » FAB-MS: 484 (M + H)+.
Esimerkki 37 • * (R,S) -3- (((R,S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyyli) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami- • t * ; » 35 no)-3-(4-etoksi-fenyyli)-propionihappo i FAB-MS: 482 (M + H)+.
42 1 13 2 6 5
Esimerkki 38 (R, S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyy1i)-fenyy-li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-no)-3-(1-naftyyli)-prppionihappo 5 FAB-MS: 488 (M + H)+.
Esimerkki 39 (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-no)-3-(3-nitro-fenyyli)-propionihappo 10 FAB-MS: 483 (M + H)+.
Esimerkki 40 (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-no)-3-(4-hydroksikarbonyyli-fenyyli)-propionihappo 15 FAB-MS: 482 (M + H)+.
Esimerkki 41 (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-no)-3-(3-bentsyylioksi-fenyyli)-propionihappo 20 FAB-MS: 544 (M + H)+.
Esimerkki 42 l (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy- ; · li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami- *. no)-3-(3-hydroksikarbonyyli-fenyyli)-propionihappo 25 FAB-MS: 482 (M + H) + .
* < ·
Esimerkki 43 • I a (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy- • * a • > t ‘ li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami- no)-3-(3-fenoksi-fenyyli)-propionihappo : 30 FAB-MS: 530 (M + H)+.
» · a
Esimerkki 44 : (R/S) -3- ( ( (R,S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyy- ..,,; li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami- no)-3-(3,4,5-trimetoksi-fenyyli)-propionihappo ‘ » a 35 FAB-MS: 528 (M + H)+.
113265 43
Esimerkki 45 (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-no)-3-(4-hydroksi-fenyyli)-propionihappo 5 FAB-MS: 454 (M + H)+.
Esimerkki 46 (R, S) -3- (((R, S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyy-li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-no)-3-(4-fenyyli-fenyyli)-propionihappo 10 FAB-MS: 514 (M + H)+.
Esimerkki 47 (R, S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyliami-no)-3-(3-pyridyyli)-propionihappo 15 FAB-MS: 439 (M + H)+.
Esimerkki 48 (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-no)-voihappo 20 FAB-MS: 376 (M + H)+.
Esimerkki 49 (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy- li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami- : no)-3-sykloheksyyli-propionihappo ./; 25 FAB-MS: 444 (M + H)+.
* > · , Esimerkki 50 • · » !!; (R,S) -3- (((R,S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyy- ' li)-3,4-dimetyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyy- liamino)-3-fenyyli-propionihai^>o ί 30 FAB-MS: 452 (M + H)+.
• * »
Esimerkki 51 j (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy- .,,, · li)-3,4-dimetyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyy- • · liamino)-3-fenyyli-propionihappo-etyyliesteri-hydrokloridi 35 FAB-MS: 480 (M + H)+.
Il » * I * • · 44 1 13 2 6 5
Esimerkki 52 (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-3-etyyli-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-1-yyli)-asetyyli amino)-3-fenyyli-propionihappo 5 FAB-MS: 466 (M + H)+.
Esimerkki 53 (R, S) -3- ( ( (R, S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyy-li)-3-etyyli-4-metyyli-2,5-dioksoimi datsolidin-l-yyli)-asetyyliamino)-3-fenyyli-propionihappo-etyyliesteri-10 hydrokloridi FAB-MS: 494 (M + H)+.
Esimerkki 54 (R, S) -3- (((R, S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyy-li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-15 no)-3-fenyyli-propionihappo-etyyliesteri-hydrokloridi FAB-MS: 466 (M + H)+.
Esimerkki 55 (S) -3- (((R tai S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-20 no)-3-fenyyli-propionihappo-efcyyliesfceri-hydrokloridi
Yhdiste on johdettu esimerkin 58 diastereomeeristä : H· ;· 340 mg (S) —3— ( ( (R tai S)-4-(4-(amino-imino- . . metyyli) fenyyli) -4-metyyli-2, 5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) - , ; 25 asetyyliamino)-3-fenyyli-propionihappoa (0,78 mmol) (esi- / merkki 58) liuotetaan 60 ml:aan 2N etanolipitoista HC1- liuosta ja annetaan seistä 2 tuntia huoneenlämpötilassa.
» 1 · * ’ Sitten haihdutetaan ja jäännös liuotetaan veteen. Liuos suodatetaan ja jäädytyskuivataan.
' .* 30 Saanto: 375 mg valkoista kiinteätä ainetta (96 %).
» s » ',,,· [a]D = -55,5 °C (c = 1, vedessä, 21 °C) .
\ : FAB-MS: 466 (M + H)+.
» · * * 45 113265
Esimerkki 56 (S)-3-(((R,S)-4-(4-(ami no-imino-metyyli)-fenyyli)- 4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliamino)-3-fenyyli-propionihappo-hydrokloridi 5 12,37 g (S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)- fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliamino) -3-fenyyli-propionihappo-etyyliesteri-hydrokloridia (26,6 mmol) (esimerkki 71) liuotetaan 200 ml:aan konsentroitua suolahappoa ja annetaan seistä 7,5 tunnin ajan huo-10 neenlämpötilassa. Liuos haihdutetaan. Jäännökseen lisätään 200 ml konsentroitua suolahappoa, annetaan seistä 7,5 tunnin ajan huoneenlämpötilassa ja liuos haihdutetaan. Saadaan 11,6 g raakatuotetta.
Puhdistusta varten osa ainetta (255 mg) kromatogra-15 fioidaan Sephadex LH20:llä käyttäen jääetikan, n-butanolin ja veden seosta. Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan. Jäännös liuotetaan veteen ja jäädytyskuivataan. Saanto: 232 mg (61 %) .
FAB-MS: 438 (M + H)+.
20 Esimerkki 57
Diastereomeeri I: : (S)-3-(((S tai R)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy- • · li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami- *. no)-3-fenyyli-propionihappo ,> : 25 (S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)- * , ’ 4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliamino)-3- * · i I fenyyli-propionihappo-hydrokloridin diastereomeeri-seos * · * * (esimerkki 56) erotetaan kromatografioimalla LiChroprep-RP- 18-käänteisfaasi-kolonnilla (10 um) käyttäen ve- • · · : .· 30 si/asetonitriili-seosta (920 ml vettä; 80 ml asetonitrii- » · · liä; 1 g ammoniumasetaattia) eluointiaineena. Tätä tarkoi-: tusta varten täytetään kolonniin, jonka täyttötilavuus on 450 ml kulloinkin 500 mg diastereomeeri-seosta. Fraktiot, * · . jotka sisältävät ensiksi kolonnista eluoituvan piikin, yh- » ·' · 35 distetään. Ammoniumasetaatti poistetaan jäädytyskuivaamalla • kolme kertaa.
46 113265
Eräkohtainen saanto: 245 mg (49 %) .
[of]d = -110,4 °C (c = 1, vedessä, 30 °C) .
FAB-MS: 438 (M + H)+.
Esimerkki 58 5 Diastereomeeri II: (S)-3-(((R tai S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-no)-3-fenyylipropionihappo
Vastaavasti, kuten esimerkissä 57 diastereomeeri II 10 eristetään (S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-no)-3-fenyyli-propionihappo-hydrokloridin diastereomeeri-seoksesta (esimerkki 56) kromatografioimalla LiChroprep-RP-18-käänteisfaasi-kolonnilla (10 pm) . Tätä tarkoitusta var-15 ten yhdistetään fraktiot, jotka sisältävät toisena kolonnista eluoituvan piikin. Ammoniumasetaatti poistetaan jää-dytyskuivaamalla kolme kertaa.
Eräkohtainen saanto: 200 mg (40 %).
[a]D = -62,8 °C (c = 1, vedessä, 30 °C) .
20 FAB-MS: 438 (M + H)+.
Esimerkki 59 Diastereomeeri III: ;· (R)-3-(((S tai R) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyy- li) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyliami-,· ; 25 no)-3-fenyyli-propionihappo 145 mg (R)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-f! fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyy- ‘ liamino)-3-fenyyli-propionihappo-hydrokloridin diastereo- meeri-seosta (esimerkki 61) erotetaan kromatografioimalla • » · - ·' 30 LiChroprep-RP-18-käänteisfaasi-kolonnilla (10 pm) vastaa- * i · *...· vasti, kuten esimerkissä 57. Fraktiot, jotka sisältävät en- .*. : siksi kolonnista eluoituvan piikin, yhdistetään. Ammonium- » t asetaatti poistetaan jäädytyskuivaamalla kolme kertaa.
» · • Saanto: 60 mg (41 %).
‘ · 35 [a]D = +92,7 °C (c = 1, vedessä, 30 °C).
: FAB-MS: 438 (M + H)+.
47 1 13 2 6 5
Esimerkki 60 Diastereomeeri IV: (R)-3-(((R tai S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-Xi)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-5 no)-3-fenyyli-propionihappo
Vastaavasti, kuten esimerkissä 59 diastereomeeri IV eristetään (R)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-4-metyyli-2, 5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-no)-3-fenyyli-propionihappo-hydrokloridin diastereomeeri-10 seoksesta (esimerkki 61) kromatografioimalla LiChroprep-RP-18-käänteisfaasi-kolonnilla (10 pm) . Tätä tarkoitusta varten yhdistetään fraktiot, jotka sisältävät toisena kolonnista eluoituvan piikin. Ammoniumasetaatti poistetaan jää-dytyskuivaamalla kolme kertaa.
15 Saanto: 63 mg (43 %).
[ot] d = + 51,4 °C (c = 1, vedessä, 30 °C) .
FAB-MS: 438 (M + H)+.
Esimerkki 61 (R)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-2 0 4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliamino)-3-fenyyli-propionihappo-hydrokloridi I : Ainetta valmistetaan vastaavasti, kuten esimerkeis sä 71 ja 56. Tällöin lähdetään (S)-fenyyliglysiinin syntee-> . sistä.
* I
.· : 25 FAB-MS: 438 (M + H)+.
• I
Esimerkki 62 i Yhdiste on johdettu esimerkin 57 diastereomeeristä • - · I.
,, (S)-3-(((S tai R) -4-(4- (amino-imino-metyyli)-fenyy- * j> · 30 li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-’... 1 no)-3-fenyyli-propionihappo-etyyliesteri-hydrokloridi FAB-MS: 466 (M + H)+.
* i · 1 · » » I I 1 I I » 48 1 13265
Esimerkki 63
Yhdiste on johdettu esimerkin 58 diastereomeeristä II.
(S)-3-(((R tai S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-5 li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-no)-3-fenyyli-propionihappo-metyyliesteri-hydrokloridi FAB-MS: 452 (M + H)+.
Esimerkki 64
Yhdiste on johdettu esimerkin 58 diastereomeeristä 10 II.
(S)-3-(((R tai S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliami-no)-3-fenyyli-propionihappo-isopropyyliesteri-hydrokloridi FAB-MS: 480 (M + H)+.
15 Esimerkki 65 (R, S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-li) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyli- (N-metyyli-amino)) -3- (3-pyridyyli) -propionihappo FAB-MS: 453 (M + H)+.
20 Esimerkki 66 (R,S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy-l : li) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyli- (N- : · metyyli-amino)) -3~fenyyli-propionihappo :···. FAB-MS: 452 (M + H)+.
: 25 Esimerkki 67 • * * . ,·, (R, S) -3- (((R,S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyy- li) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyliami- • » a no) -3- (3,4-metyleenidioksi-fenyyli-propionihappo FAB-MS: 482 (M + H)+.
• » · ·* 30 Esimerkki 68
IM
*...· (2- ( (R,S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyyli) -4- '. t: metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyli) -L-aspar- tyyli-l-adaman tyyli-amidi 68a. (N-bensyylioksikarbonyyli)-L-asparagiinihappo- lii· 35 Cfl-tert. -butyyliesteri-l-adaman tyyli-amidi 113265 49
Suspensioon, jossa on 4,2 g Z-L-Asp (OBu^ -OH: ta (13 mmol) , 1,97 g 1-aminoadamantaania (13 mmol) ja 1,7 6 g HOBt:tä (13 mmol) 140 ml:ssa dimetyyliformamidia, lisätään 0 °C:ssa 1,69 ml N-etyylimorfoliinia (13 mmol) ja 2,86 g 5 DCC:tä (13 mmol). Sitten sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa ja 3 tuntia huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen seoksen annetaan seista yön ajan, sakka imusuodatetaan ja suodos haihdutetaan. Jäännös liuotetaan natriumvetykarbonaattiliuokseen ja vesipitoista faasia ravistellaan etikkahappoetyyliesterin 10 kanssa. Orgaanista faasia ravistellaan kaliumvetysulfaatti-liuoksen (100 g kaliumsulfaattia ja 50 g kaliumvetysulfaat-tia liuotettuna 1 litraan vettä), natriumvetykarbonaatti-liuoksen ja veden kanssa. Sitten kuivataan vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutetaan.
15 Saanto: 6,21 g (raakatuote).
68b. L-asparagiinihappo-Cfi-tert. -butyyliesteri-l-adamantyyli-amidi -hydroklor idi 6,21 g (N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiini-happo-Cfi-tert.-butyyliesteri-l-adamantyyli-amidia (raaka-
20 tuote) liuotetaan 50 ml:aan metanolia ja hydrataan kata-lyytt isesti Pd/aktiivihiilellä autobyretissä lisäten 2 N
• .* metanolipitoista HCl:ää pH: n ollessa 4,6. Katalysaattori ; imusuodatetaan piimään kautta ja suodos haihdutetaan. Jään- ; i nöstä hierretään dietyylieetterin kanssa, imusuodatetaan ja .* : 25 kuivataan.
, Saanto: 4 g (85 % laskettuna käytetyn Z-L-Asp (OBu11)-OH: n > » t määrästä); FAB-MS (M + H)+ = 323.
• » · * 68c. (2- ((R,S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyyli) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli)-L-as- ·’ 30 partyyli-Cfl-tert.-butyyliesteri-l-adamantyyli-amidi- » * » ...: hydrokloridi ;'.(j Suspensioon, jossa on 654 mg (2-( (R, S)-4-(4-(amino- • · imino-metyyli) -fenyyli) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-
» I
• _ 1-yyli)-etikkahappo-hydrokloridia (2 mmol; katso esimerkki * * » > i ' 35 1), 718 mg L-asparagiinihappo-Cu-tert.-butyyliesteri-1- ; ’,· adamantyyli-amidi-hydrokloridia (2 mmol) ja 270 mg HOBt:tä 113265 50 (2 mmol) 20 ml:ssa dimetyyliformamidia, lisätään 0 °C:ssa 0,26 ml N-etyylimorfoliinia (2 mmol) ja 440 mg DCC:tä (2 mmol). Sitten sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa ja 3 tuntia huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen seoksen annetaan seistä 5 yön ajan huoneenlämpötilassa, sakka imusuodatetaan ja suo-dos haihdutetaan. Jäännös liuotetaan natriumvetykarbonaat-tiliuokseen ja vesipitoista faasia ravistellaan pentanolin kanssa. Orgaanista faasia ravistellaan kaliumvetysulfaatti-liuoksen ja veden kanssa. Sitten kuivataan vedettömällä 10 natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Jäännöstä hierretään dietyylieetterin kanssa, imusuodatetaan ja kuivataan.
Saanto: 1,35 g (raakatuote).
68d. (2-((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)- 4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli)-L-as-15 partyyli-l-adamantyyli-amidi 1,35 g (2-((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli)-L-aspartyyli-Cij-tert. -butyyliesteri-l-adamantyyli-amidi-hyd-rokloridia liuotetaan seokseen, jossa on 12,15 ml trif-20 luorietikkahappoa, 1,35 ml vettä ja 1,35 ml dimerkaptoetaa-nia. Sen jälkeen, kun on pidetty 1 tunti huoneenlämpötilas-j : sa, haihdutetaan vesisuihkuvakuumissa. Jäännöstä hierretään • dietyylieetterin kanssa, imusuodatetaan ja kuivataan. Puh- . . distusta varten aine kromatografioidaan Sephadex LH20:llä : 25 käyttäen jääetikan, n-butanolin ja veden seosta. Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan. Jäännös liuote- i * ! i taan veteen lisäten vähän etikkahappoa ja jäädytyskuiva- taan.
Saanto: 1,02 g ; FAB-MS (M + H)+ = 539.
ί 30 J * ill* ’ : » > » si 113265
Esimerkki 69 (2-((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimida.t.solidin-l-yyli) -asetyyli) -L-aspar-tyyli-2 -adamantyyli-amidi 5 69a. (N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiinihap- po-Ca-tert. -butyyliesteri-2-adaman tyyli-amidi
Suspensioon, jossa on 4,2 g Z-L-Asp (OBufc)-OH: ta (13 mmol), 2,44 g 2-aminoadamantaani-hydrokloridia (13 mmol) ja 1,76 g HOBt:tä (13 mmol) 40 ml:ssa dimetyyliforma-10 midia, lisätään 0 °C:ssa 1,69 ml N-etyylimorfoliinia (13 mmol) ja 2,86 g DCCrtä (13 mmol). Sitten sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa ja 3 tuntia huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen seoksen annetaan seistä yön ajan, sakka imusuodatetaan ja suodos haihdutetaan. Jäännös liuotetaan natriumvetykarbo-15 naatti-liuokseen ja vesipitoista faasia ravistellaan etik-kahappoetyyliesterin kanssa. Orgaanista faasia ravistellaan kaliumvetysulfaattiliuoksen, natriumvetykarbonaattiliuoksen ja veden kanssa. Sitten kuivataan vedettömällä natriumsul-faatilla ja haihdutetaan.
20 Saanto: 6,32 g (raakatuote).
69b. L-asparagiinihappo-Cfi-tert. -bufcyyliesteri-2-: adamantyyli-amidi-hydrokloridi • 6,32 g (N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiini- » r ; happo-Cfi-tert.-butyyliesteri-2-adamantyyli-amidia (raaka- j 25 tuote) liuotetaan 50 ml:aan metanolia ja hydrataan kata- » 1 ·
lyyttisesti Pd/aktiivihiilellä autobyretissä lisäten 2 N
• · : ; metanolipitoista HCl:ää pH:n ollessa 4,6. Katalysaattori • imusuodatetaan piimään kautta ja suodos haihdutetaan. Jään nöstä liuotetaan dietyylieetteriin ja haihdutetaan. Saadaan * # · l 30 amorfinen kiinteä aine.
M#
Saanto: 4 g (85 % laskettuna käytetyn Z-L-Asp (OBu1)-OH: n *. määrästä); FAB-MS (M + H)+ = 323.
• M
• · • · tili» 113265 52 69c. (2-((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli)-L-as-partyyli-Ca-tert. -butyyliesteri-2-adamantyyli-amidi-hydro-kloridi 5 Suspensioon, jossa on 654 mg 2-((R,S)-4-(4-(amino- imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2, 5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-etikkahappo-hydrokloridia (2 mmol; katso esimerkki 1), 718 mg L-asparagiinihappo-Cfi-tert.-butyyliesteri-2- adamantyyli-amidi-hydrokloridia (2 mmol) ja 270 mg HOBt:tä 10 (2 mmol) 20 ml:ssa dimetyyliformamidia, lisätään 0 °C:ssa 0,26 ml N-etyylimorfoliinia (2 mmol) ja 440 mg DCC:tä (2 mmol). Sitten sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa ja 2 tuntia huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen seoksen annetaan seistä yön ajan huoneenlämpötilassa, sakka imusuodatetaan ja suo-15 dos haihdutetaan. Jäännös liuotetaan natriumvetykarbonaat-tiliuokseen ja vesipitoista faasia ravistellaan pentanolin kanssa. Orgaanista faasia ravistellaan kaliumvetysulfaatti-liuoksen ja veden kanssa. Sitten kuivataan vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Jäännöstä hierretään 20 dietyylieetterin kanssa, imusuodatetaan ja kuivataan.
Saanto: 1,27 g (raakatuote).
: 69d. (2-((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)- 4 -metyyli -2,5 -dioksoimidatsolidin-1 -yyli ) -asetyyli)-L-as-partyyli-2 -adaman tyyli-amidi : 25 1,27 g (2-((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy- , li)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli)-L- aspartyyli-Cu-tert. -butyyliesteri-2-adamantyyli-amidi-hyd-rokloridia liuotetaan seokseen, jossa on 11,43 ml trif-luorietikkahappoa, 1,27 ml vettä ja 1,27 ml dimerkaptoetaa-: ** 30 nia. Sen jälkeen, kun on pidetty 1 tunti huoneenlampötilas-
Ml • · sa, haihdutetaan vesisuihkuvakuumissa. Jäännöstä hierretään dietyylieetterin kanssa, imusuodatetaan ja kuivataan. Puh-distusta varten aine kromatografioidaan Sephadex LH20:llä • t käyttäen jääetikan, n-butanolin ja veden seosta. Puhdasta 1 ! * i · 35 ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan. Jäännös liuote- 113265 53 taan veteen lisäten vähän etikkahappoa ja jäädytyskuiva-taan.
Saanto: 615,8 mg ; FAB-MS (M + H)+ = 539.
Esimerkki 70 5 (2-((R, S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4- metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyli) -L-aspar-tyyli- (1-adamantyylimetyyli) -amidi 7 0a. (N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiinihap-po-Cfi-tert. -butyyliesteri- (1-adamantyylimetyyli) -amidi 10 Suspensioon, jossa on 3,91 g Z-L-Asp (OBu1)-OH: ta (12,1 mmol), 2 g 1-aminometyyli-adamantaania (12,1 mmol) ja 1,63 g HOBt:tä (12,1 mmol) 60 ml:ssa dimetyyliformamidia, lisätään 0 °C:ssa 2,66 g DCC:tä (12,1 mmol). Sitten sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa ja 2 tuntia huoneenlämpötilassa. 15 Tämän jälkeen seoksen annetaan seistä yön ajan, sakka imusuodatetaan ja suodos haihdutetaan. Jäännös liuotetaan natriumvetykarbonaattiliuokseen ja vesipitoista faasia ravistellaan etikkahappoetyyliesterin kanssa. Orgaanista faasia ravistellaan kaliumvetysulfaattiliuoksen, natriumbikar-20 bonaattiliuoksen ja veden kanssa. Sitten kuivataan vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutetaan.
* *' Saanto: 6 g (raakatuote) .
70b. L-asparagiin.ihappo-CB-tert.-butyyliesteri-(l-adamantyylimetyyli)-amidi-hydrokloridi F. : 25 6 g (N-bentsyylioksikarbonyyli)-L-asparagiinihappo- . Cfl-tert.-butyyliesteri-(1-adamantyylimetyyli)-amidia (raa- * t · ι·_ _ katuote) liuotetaan 50 ml: aan metanolia ja hydrataan kata- lyyttisesti Pd/aktiivihiilellä autobyretissä lisäten 2 N metanolipitoista HCl:ää pH:n ollessa 4,6. Katalysaattori * ·’ 30 imusuodatetaan piimään kautta ja suodos haihdutetaan. Jään- * * t nöstä hierretään dietyylieetterin kanssa, imusuodatetaan ja kuivataan.
Saanto: 3,85 g (85 % laskettuna käytetyn Z-L-Asp (OBu1)-OH:n * · • > määrästä); FAB-MS (M + H)+ = 337.
» 35 113265 54 70c. (2-((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli)-L-as-partyyli-Ca-tert. -butyyliesteri- (1-adamantyylimetyyli) -amidi-hydxokloridi 5 Suspensioon, jossa on 654 mg 2-((R,S)-4-(4-(amino- imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -etikkahappo-hydrokloridia (2 mmol; katso esimerkki 1), 746 mg L-asparagiinihappo-Cjj-tert.-butyyliesteri-(1- adamantyyli-metyyli)-amidi-hydrokloridia (2 mmol) ja 270 mg 10 HOBtrtä (2 mmol) 20 ml:ssa dimetyyliformamidia, lisätään 0 °C:ssa 0,26 ml N-etyylimorfoliinia (2 mmol) ja 440 mg DCC:tä (2 mmol). Sitten sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa ja 3 tuntia huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen seoksen annetaan seistä yön ajan huoneenlämpötilassa, sakka imusuodatetaan 15 ja suodos haihdutetaan. Jäännös liuotetaan natriumvetykar-bonaattiliuokseen ja vesipitoista faasia ravistellaan pen-tanolin kanssa. Orgaanista faasia ravistellaan kaliumvety-sulfaattiliuoksen ja veden kanssa. Sitten kuivataan vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Jäännöstä hier-20 retään dietyylieetterin kanssa, imusuodatetaan ja kuivataan.
I : Saanto: 1,28 g (raakatuote).
70d. (2- ( (R,S) -4- (4- (amino-imino-metyyli) -fenyyli) -: ’ ; 4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli)-L-as- .· : 25 partyyli-(1-adamantyylimetyyli)-amidi ,,, 1,28 g (2-((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyy- * * » ‘ li) -4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -asetyyli) -L- t » > ' aspartyyli-Cjj-tert. -butyyliesteri- (1-adamantyylimetyyli) - amidi-hydrokloridia liuotetaan seokseen, jossa on 11,52 ml 30 trifluorietikkahappoa, 1,28 ml vettä ja 1,28 ml dimerkapto-etaania. Sen jälkeen, kun on pidetty 1 tunti huoneenlämpö- tilassa, haihdutetaan vesisuihkuvakuumissa. Jäännöstä hier- ; retään dietyylieetterin kanssa, imusuodatetaan ja kuiva taan. Puhdistusta varten aine kromatografioidaan Sephadex * ‘ 35 LH20:llä käyttäen jääetikan, n-butanolin ja veden seosta.
.* Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan. Jäännös 55 113265 liuotetaan veteen lisäten vähän etikkahappoa ja jäädytys-kuivataan.
Saanto: 841,1 mg; FAB-MS (M + H)+ = 553.
Esimerkki 71 5 (S)-3-(((R,S)-4-(4-(amino-imino-metyyli)-fenyyli)- 4-me tyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyliamino)-3-fenyy1i-propionihappo-etyyliesteri-hydrokloridi 71a. (R)-2-amino-2-fenyylietanoli 20 g (920 mmol) litiumboorihydridiä liuotetaan 10 420 ml:aan absoluuttista tetrahydrofuraania. Tähän tipute taan sekoittaen 233,5 ml (1,84 mol) trimetyylikloorisilaa-nia ja tämän jälkeen lisätään annoksittain 4 tunnin sisällä 69,5 g (0,46 mol) (R)-fenyyliglysiiniä. Reaktioseosta sekoitetaan yön ajan huoneenlämpötilassa. Sitten tähän lisä-15 tään 690 ml metanolia, sekoitetaan 2 tunnin ajan huoneenlämpötilassa ja haihdutetaan vakuumissa. Jäännös liuotetaan sekoittaen 690 ml:aan 20-%:ista vesipitoista kaliumhydrok-sidiliuosta. Vesipitoinen faasi uutetaan kolme kertaa etik-kahappoetyyliesterillä. Yhdistetyt orgaaniset faasit pes-20 tään vedellä, kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan vakuumissa.
, Saanto: 41,2 g (65,3 %) ; FAB-MS (M + H)+ = 138.
·· 71b. (R) -2-ben.tsyylioksikarbonyyliamino-2-f enyyli- etanoli * · , : 25 40,5 g (295 mmol) (R)-2-amino-2-fenyylietanolia t / liuotetaan 385 ml:aan absoluuttista dimetyyliformamidia.
* # .M Tähän lisätään sekoittaen 0 °C:ssa 73,5 g N-(bentsyyliok- • » » • * sikarbonyyli-oksi)-sukkinimidiä (295 mmol) ja sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa. Jäähaude poistetaan ja seoksen annetaan • t t .· 30 seistä 48 tuntia huoneenlämpötilassa. Reaktioliuos haihdu- t · i tetaan vakuumissa ja jäännös liuotetaan tämän jälkeen .·. : 500 ml:aan etikkahappoetyyliesteriä. Orgaaninen faasi pes- * · tään kaksi kertaa 10-%:isella vesipitoisella sitruunahappo- * · . liuoksella sekä kerran vedellä. Sitten kuivataan vedettö- ' * 35 mällä natriumsulfaatilla ja haihdutetaan. Saatu kiteinen raakatuote (82,3 g) liuotetaan uudelleen etikkahappoetyy- 113265 56 liesteriin. Orgaaninen faasi pestään kaksi kertaa 10-%:isella vesipitoisella sitruunahappoliuoksella sekä kerran vedellä. Tämän jälkeen kiteytetään uudelleen etikka-happoetyyliesteri/petrolieetteristä.
5 Saanto: 74,6 g (93,3 %); FAB-MS (M + H)+ = 272.
71c. ( (R) -2-bentsyylioksikarbonyyliainino-2-fenyyli- etyyli)-4-metyy1ifenyylisulfonaatti 53,9 g (R)-2-bentsyylioksikarbonyyliamino-2-fenyy-lietanolia (198,7 mmol) liuotetaan seokseen, jossa on 10 500 ml metyleenikloridia sekä 80,3 ml (993,5 mmol) pyri- diiniä. Tähän lisätään sekoittaen 0 °C:ssa 45,5 g (238,4 mmol) tosyylikloridia 240 ml:ssa metyleenikloridia ja sekoitetaan 7 tuntia huoneenlämpötilassa. Sitten lisätään edelleen 11,36 g tosyylikloridia (59,61 mmol). Sekoitetaan 15 5 tuntia 0 °C:ssa. Seoksen annetaan sitten seistä yön ajan huoneenlämpötilassa ja haihdutetaan vakuumissa. Jäännös liuotetaan etikkahappoetyyliesteriin. Orgaaninen faasi pestään kolme kertaa 10-%:isella vesipitoisella sitruunahappoliuoksella ja kaksi kertaa vedellä, kuivataan magnesiumsul-20 faatilla ja haihdutetaan vakuumissa. Jäännöstä hierretään dietyylieetterin kanssa, imusuodatetaan, pestään dietyyli-; eetterillä ja kuivataan fosforipentoksidilla. Saanto: 60,9 g (72 %) . Emäliuos haihdutetaan, liuotetaan n- * ; ; i heptaani/etikkahappoetyyliesteriin (6:4) ja kromatografioi-.·, ; 25 daan silikageelillä. Saanto: 3,5 g (4,2 %) .
> < t
Kokonaissaanto: 64,4 g (76,2 %); FAB-MS (M + H)+ = 426.
• » * ^ 71d. (S)-3-bentsyylioksikarbonyyliamino-3-fenyyli- • * · • propionitriili 60,5 g ((R)-2-bentsyylioksikarbonyyliamino-2-fenyy- • » · : 30 li-etyyli)-4-metyylifenyylisulfonaattia (142,2 mmol) liuo- • t * ·...· tetaan 675 ml:aan dimetyyliformamidia. Sitten tähän lisä- .·. : tään 13,9 g kaliumsyanidia (213,3 mmol), 5,64 g 18-kruunu- • · 6:ta (21,33 mmol) ja 520 mg kaliumjodidia (3,13 mmol) ja . sekoitetaan 20 tunnin ajan 50 °C:ssa. Reaktioliuos kaade- * ’ 35 taan 500 ml:aan jäävettä ja tämän jälkeen sekoitetaan 5 ; V tuntia 0 °C:ssa. Sitten imusuodatetaan ja sakka liuotetaan 113265 57 etikkahappoetyyliesteriin. Orgaaninen faasi pestään kolme kertaa vedellä, kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan vakuumissa. Jäännöstä hierretään dietyylieetterin kanssa, imusuodatetaan, pestään dietyylieetterillä ja kui-5 vataan fosforipentoksidilla.
Saanto: 25,3 g (63,5 %); FAB-MS (M + H)+ = 281.
71e. (S)-3-bentsyylioksikarbonyyliamino-3-fenyyli-propionihappo-etyyliesteri 15 g (S)-3-bentsyylioksikarbonyyliamino-3-fenyyli-10 propionitriiliä (53,51 mmol) suspendoidaan seokseen, jossa on 110 ml absoluuttista etanolia ja 30 ml dioksaania. Sekoittaen ja jäähdyttäen johdetaan 10 - 15 °C:ssa HCl- kaasua. Lyhyen ajan kuluttua muodostuu kirkas liuos. Jäähdyttäen johdetaan sitten edelleen HCl-kaasua, kunnes ohut-15 kerroskromatogrammissa ei voida enää osoittaa lähtöainetta. Sitten reaktioliuoksen läpi johdetaan 15 minuutin ajan typpeä ja tämän jälkeen haihdutetaan vakuumissa. Jäännökseen lisätään vettä, kunnes samentuminen on pysyvää. Sekoitetaan 30 minuutin ajan huoneenlämpötilassa ja tämän jälkeen vesi-20 pitoinen faasi uutetaan kolme kertaa etikkahappoetyylieste-rillä. Yhdistetyt orgaaniset faasit pestään vedellä, kuiva-.* : taan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan vakuumissa. Jään nös liuotetaan etikkahappoetyyliesteri/ petrolieetteriin ; (1:1) ja kromatografioidaan silikageelillä.
/ : 25 Saanto: 10,55 g (60 %); FAB-MS (M + H)+ = 328.
, *, 71f. (S)-3-amino-3-fenyyli-propionihappo-etyylies- t » teri-hydrokloridi 10,29 g (S)-3-bentsyylioksikarbonyyliamino-3-fenyy- li-propionihappo-etyyliesteriä (31,44 mmol) liuotetaan 125 ' · • ·’ 30 ml:aan etanolia ja hydrataan katalyyttisesti Pd/aktiivi-
I > I
hiilellä autobyretissä lisäten 2 N etanolipitoista HCl:ää | pH:n ollessa 4. Katalysaattori imusuodatetaan piimään kaut- ta ja suodos haihdutetaan. Jäännöstä hierretään dietyyli-• eetterin kanssa, imusuodatetaan, pestään dietyylieetterillä ' * 35 ja kuivataan fosforipentoksidilla.
: Saanto: 5,05 g (70 %); FAB-MS (M + H)+ = 194.
113265 58 71g. (S)-3-(((R,S)-A-(A-(amino-imino-metyyli)-fe-nyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli)-asetyyli-amino) -3-fenyyli-propionihappo-etyyliesteri-hydrokloridi
Liuokseen, jossa on 26,14 g ((R,S)-4-(4-(amino-5 imino-metyyli)-fenyyli)-4-metyyli-2,5-dioksoimidatsolidin-l-yyli) -etikkahappo-hydrokloridia (80 mmol) (esimerkki 1), 18,37 g (S)-3-amino-3-fenyyli-propionihappo-etyyliesteri-hydrokloridia (80 mmol) ja 10,8 g HOBt:tä 400 ml:ssa dime-tyyliformamidia, lisätään 0 °C:ssa 10,4 ml N-etyyli-10 morfoliinia (80 mmol) sekä 17,6 g DCC:tä (80 mmol). Sitten sekoitetaan 1 tunti 0 °C:ssa ja 3 tuntia huoneenlämpötilassa. Tämän jälkeen seoksen annetaan seistä yön ajan, sakka imusuodatetaan ja suodos haihdutetaan. Puhdistusta varten öljymäinen jäännös (89 g) kromatografioidaan Sephadex 15 LH20:llä käyttäen jääetikan, n-butanolin ja veden seosta. Puhdasta ainetta sisältävät fraktiot haihdutetaan. Jäännös liuotetaan veteen ja jäädytyskuivataan.
Saanto: 35 g (94 %); FAB-MS (M + H)+ = 466.
r · • ·
* I
» » > > · • · • ·
• I
< ‘ · * »
t * I
* ·
> I
• I
< * ·
J ’ I
> · »

Claims (7)

59 1 13 2 6 5
1. Menetelmä uusien, verihiutaleiden aggregaatiota estävien 2,5-dioksoimidatsolidinyylijohdannaisten valmis-5 tamiseksi, joilla on yleinen kaava I R-fl OR O R^a^C^<^'N—CHj-C—N-CH-fCH^C—R10 (I) N-C I3 Ra/n \ R R O jossa samanaikaisesti A merkitsee 1,4-fenyleeniryhmää; R ja R° merkitsevät toisistaan riippumatta vetyä tai 10 (Ci_4) alkyyliä; R1 on H2N-C(=NH), H2N-C (=NH)-NH tai H2N-CH2; R3 merkitsee ryhmää CONHR14, ryhmää CONHR15, substituoima-tonta fenyyli- tai naftyyliryhmää, fenyyli- tai naftyyli-ryhmää, joka on substituoitu yhdellä, kahdella tai kolmel-15 la samanlaisella tai erilaisella ryhmällä valittuna seu-raavista: (Ci_4) alkyyli, (Ci-4) alkoksi, hydroksi, halogeeni, • » • .·' trif luorimetyyli, nitro, metyleenidioksi, hydroksikarbo- nyyli, (Ci-4) alkoksikarbonyyli, aminokarbonyyli, syaani, : fenyyli, fenoksi ja bentsyylioksi, pyridyyliryhmää, | 20 (Ci-4) alkyyliryhmää, (C2-4) alkenyyliryhmää, (C2_4) alkynyyli- • · . ryhmää tai (C5-6) sykloalkyyliryhmää; • · R10 merkitsee hydroksia tai (Ci_8) alkoksia; • * · R13 merkitsee (Ci_6) alkyyliä, (C3_7) sykloalkyyliä tai bent-, syyliä; • ·' 25 R14 merkitsee metyyliä, joka on substituoitu fenyylillä ja • 1 ’··* hydroksikarbonyylillä, tai metyyliä, joka on substituoitu fenyylillä ja (Ci-s) alkoksikarbonyylillä; R15 merkitsee adamantyyliryhmää tai adamantyylimetyyliryh-• _ mää; ja I i M t 30. on 1 tai 2; I I I t · 113265 ja niiden fysiologisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että suoritetaan yleisen kaavan II mukaisen yhdisteen fragmenttikondensaatio 1 ^ R^A —CHj-G (II) -C. Ro/ 5 yleisen kaavan III mukaisen yhdisteen kanssa f ff „ H—N—^H—(CH2)jpC—R° (III) R3 10 jolloin A, R, R°, R1, R3, R10, R13 ja h merkitsevät samaa kuin edellä ja G merkitsee hydroksikarbonyyliä, (Ci_6) alkoksikarbonyyliä tai aktivoituja karboksyylihappo-johdannaisia, kuten happoklorideja, aktiiviestereitä tai » > · ! 15 seka-anhydridejä, ja haluttaessa muutetaan saatu kaavan I . mukainen yhdiste fysiologisesti hyväksyttäväksi suolaksi.
: ,,: 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, ;,· tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukai- » · : nen yhdiste, jossa samanaikaisesti 20. merkitsee 1,4-fenyleeniryhmää; R ja R° merkitsevät toisistaan riippumatta vetyä tai (Ci_4) alkyyliä, erityisesti vetyä, metyyliä tai etyyliä; R1 on H2N-C(=NH), H2N-C(=NH)-NH tai H2N-CH2; * % ;· R3 merkitsee substituoimatonta fenyyliryhmää tai fenyyli- > · ·*/.: 25 ryhmää, joka on substituoitu yhdellä, kahdella tai kolmel- la samanlaisella tai erilaisella ryhmällä valittuna seu-raavista: (C1-4) alkyyli, (C1-.4) alkoksi, hydroksi, halogeeni, i · ,. , trifluorimetyyli, nitro, metyleenidioksi, hydroksikarbo- • I 113265 nyyli, (Ci_4) alkoksikarbonyyli, aminokarbonyyli, syaani, fenyyli, fenoksi ja bentsyylioksi; R10 merkitsee hydroksia tai (Ci-β) alkoksia, erityisesti (C1-4) alkoksia ja R10 on edullisesti hydroksi, metoksi, 5 etoksi, propoksi tai isopropoksi; R13 merkitsee (Ci_6) alkyyliä, (C3_7) sykloalkyyliä tai bent- syyliä, erityisesti metyyliä; ja h on 1 tai 2, edullisesti 1; tai sen fysiologisesti hyväksyttävä suola.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa samanaikaisesti A merkitsee 1,4-fenyleeniryhmää; R merkitsee vetyä;
15 R° merkitsee vetyä; R1 on H2N-C(=NH); R3 merkitsee substituoimatonta fenyyliryhmää; R10 merkitsee hydroksia, metoksia, etoksia tai isopropok-sia;
20 R13 merkitsee metyyliä; ja h on 1; ja edullisesti kiraliteettikeskuksella imidatsolidiinirenkaan ;· 4-asemassa ja sillä kiraalisella hiiliatomilla, johon ryh- . mä R3 on liittynyt, on kulloinkin yhtenäinen konfiguraa- ; 25 tio, tai sen fysiologisesti hyväksyttävä suola. ,‘,’i
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, » * · * tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukai nen yhdiste, jossa R10 on hydroksi, imidatsoliinirenkaan * · · .* 30 4-aseman kiraliteettikeskus on S-konfiguraatiossa ja sillä · · ·,,,· kiraalisella hiiliatomilla on S-konfiguraatio, johon ryhmä j*. : R on liittynyt, tai sen fysiologisesti hyväksyttävä suo- la· .
5. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, *' 35 tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukai- : V nen yhdiste, jossa R10 on hydroksi, imidatsoliinirenkaan 113265 4-aseman kiraliteettikeskus on R-konfiguraatiossa ja sillä kiraalisella hiiliatomilla on S-konfiguraatio, johon ryhmä R3 on liittynyt, tai sen fysiologisesti hyväksyttävä suola.
6. patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa R10 on etoksi, imidatsoliinirenkaan 4-aseman kiraliteettikeskus on S-konfiguraatiossa ja sillä kiraalisella hiiliatomilla on S-konfiguraatio, johon ryhmä 10 R3 on liittynyt, tai sen fysiologisesti hyväksyttävä suola .
7. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa R10 on etoksi, imidatsoliinirenkaan 4-15 aseman kiraliteettikeskus on R-konfiguraatiossa ja sillä kiraalisella hiiliatomilla on S-konfiguraatio, johon ryhmä R3 on liittynyt, tai sen fysiologisesti hyväksyttävä suola. i · » * t t * · t t « » · · * t • · * · t > » » I · » I ' · t S · 113265
FI962043A 1993-11-15 1996-05-14 Menetelmä uusien, verihiutaleiden aggregaatiota estävien 2,5-dioksoimidatsolidinyylijohdannaisten valmistamiseksi FI113265B (fi)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4338944 1993-11-15
DE4338944A DE4338944A1 (de) 1993-11-15 1993-11-15 Substituierte 5-Ring-Heterocyclen, ihre Herstellung und ihre Verwendung
DE4427979 1994-08-08
DE4427979A DE4427979A1 (de) 1993-11-15 1994-08-08 Substituierte 5-Ring-Heterocyclen, ihre Herstellung und ihre Verwendung
PCT/EP1994/003491 WO1995014008A1 (de) 1993-11-15 1994-10-24 Substituierte 5-ring-heterocyclen, ihre herstellung und ihre verwendung
EP9403491 1994-10-24

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI962043A0 FI962043A0 (fi) 1996-05-14
FI962043A FI962043A (fi) 1996-05-14
FI113265B true FI113265B (fi) 2004-03-31

Family

ID=25931237

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI962043A FI113265B (fi) 1993-11-15 1996-05-14 Menetelmä uusien, verihiutaleiden aggregaatiota estävien 2,5-dioksoimidatsolidinyylijohdannaisten valmistamiseksi

Country Status (22)

Country Link
US (2) US5981492A (fi)
EP (1) EP0729460B1 (fi)
JP (1) JP3813983B2 (fi)
KR (1) KR100402192B1 (fi)
CN (1) CN1069316C (fi)
AT (1) ATE217615T1 (fi)
AU (1) AU693811B2 (fi)
CA (1) CA2169643A1 (fi)
CY (1) CY2385B1 (fi)
CZ (1) CZ292573B6 (fi)
DE (2) DE4427979A1 (fi)
DK (1) DK0729460T3 (fi)
ES (1) ES2176261T3 (fi)
FI (1) FI113265B (fi)
HU (1) HU223806B1 (fi)
IL (1) IL111622A (fi)
PL (1) PL180906B1 (fi)
PT (1) PT729460E (fi)
RU (1) RU2151143C1 (fi)
SK (1) SK284471B6 (fi)
TW (1) TW326040B (fi)
WO (1) WO1995014008A1 (fi)

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4427979A1 (de) 1993-11-15 1996-02-15 Cassella Ag Substituierte 5-Ring-Heterocyclen, ihre Herstellung und ihre Verwendung
DE19515177A1 (de) * 1995-04-28 1996-10-31 Cassella Ag Hydantoinderivate als Zwischenprodukte für pharmazeutische Wirkstoffe
JP3895792B2 (ja) * 1995-12-08 2007-03-22 プロスケリア・エス・ア・エス 骨形成促進剤
EP0796855B1 (de) 1996-03-20 2002-02-06 Hoechst Aktiengesellschaft Inhibitoren der Knochenresorption und Vitronectinrezeptor-Antagonisten
DE19622489A1 (de) * 1996-06-05 1997-12-11 Hoechst Ag Salze des 3-(2-(4-(4-(Amino-imino-methyl)-phenyl)-4- methyl-2,5-dioxo-imidazolidin-1-yl)-acetylamino)-3- phenyl-propionsäure-ethylesters
DE19624604A1 (de) * 1996-06-20 1998-01-02 Hoechst Ag Verfahren zur Herstellung chiraler, nicht racemischer (4-Aryl-2,5-dioxoimidazolidin-1-yl)essigsäuren
DE19629816A1 (de) * 1996-07-24 1998-01-29 Hoechst Ag Neue Cycloalkyl-Derivate als Inhibitoren der Knochenresorption und Vitronectinrezeptor-Antagonisten
DE19629817A1 (de) * 1996-07-24 1998-01-29 Hoechst Ag Neue Imino-Derivate als Inhibitoren der Knochenresorption und Vitronectinrezeptor-Antagonisten
PL323130A1 (en) * 1996-11-15 1998-05-25 Hoechst Ag Application of heterocyclic compounds in production of a pharmaceutic agent, novel heterocyclic compounds and pharmaceutic agent as such
DE19647381A1 (de) 1996-11-15 1998-05-20 Hoechst Ag Neue Heterocyclen als Inhibitoren der Leukozytenadhäsion und VLA-4-Antagonisten
KR100697959B1 (ko) * 1996-11-15 2007-07-09 훽스트 게엠베하 백혈구부착의억제제및vla-4길항제로서의헤테로사이클
DE19647380A1 (de) * 1996-11-15 1998-05-20 Hoechst Ag 5-Ring-Heterocyclen als Inhibitoren der Leukozytenadhäsion und VLA-4-Antagonisten
DE19741235A1 (de) * 1997-09-18 1999-03-25 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
DE19741873A1 (de) * 1997-09-23 1999-03-25 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Neue 5-Ring-Heterocyclen, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
DE19751251A1 (de) * 1997-11-19 1999-05-20 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Substituierte Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmezeutische Präparate
DE19821483A1 (de) * 1998-05-14 1999-11-18 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
DE19922462A1 (de) 1999-05-17 2000-11-23 Aventis Pharma Gmbh Spiro-imidazolidinderivate, ihre Herstellung ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
US6624187B1 (en) * 2000-06-12 2003-09-23 Health Research, Inc. Long wave length absorbing bacteriochlorin alkyl ether analogs
DE10111877A1 (de) 2001-03-10 2002-09-12 Aventis Pharma Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung, ihre Verwendung und sie enthaltende pharmazeutische Präparate
DE10137595A1 (de) * 2001-08-01 2003-02-13 Aventis Pharma Gmbh Neue Imidazolidinderivate, ihre Herstellung und ihre Verwendung
CN107383147A (zh) * 2017-07-14 2017-11-24 广东食品药品职业学院 一种β‑谷甾醇与依帕司他偶联物及其制备方法和用途
JP7365358B2 (ja) * 2018-04-12 2023-10-19 モーフィック セラピューティック，インコーポレイテッド ヒトインテグリンα４β７のアンタゴニスト
WO2020113094A1 (en) 2018-11-30 2020-06-04 Nuvation Bio Inc. Pyrrole and pyrazole compounds and methods of use thereof
WO2021076890A1 (en) 2019-10-16 2021-04-22 Morphic Therapeutic, Inc. INHIBITING HUMAN INTEGRIN α4β7
CN117800921A (zh) * 2024-02-28 2024-04-02 南京市鸿舜医药科技有限公司 一种咪唑烷二酮类hdac抑制剂、制备方法及应用

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3300510A (en) * 1964-03-06 1967-01-24 American Home Prod Hydantoins
DE2714655A1 (de) * 1977-04-01 1978-10-05 Bayer Ag Verfahren zur herstellung von hydantoinen
EP0006352A1 (en) * 1978-06-15 1980-01-09 Beecham Group Plc Hydantoins and thiohydantoins, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
GB2032419B (en) * 1978-09-05 1983-01-19 Wellcome Found Hydantoin prostaglandin analogues
DE4009506A1 (de) * 1990-03-24 1991-09-26 Hoechst Ag Hydantoinderivate
WO1992019595A1 (en) * 1991-05-07 1992-11-12 Merck & Co., Inc. Fibrinogen receptor antagonists
DE4126277A1 (de) * 1991-08-08 1993-02-11 Cassella Ag Hydantoinderivate
DE4207254A1 (de) * 1992-03-07 1993-09-09 Cassella Ag 4-oxo-2-thioxoimidazolidin-derivate
DE4213634A1 (de) * 1992-04-24 1993-10-28 Cassella Ag 2,4-Dioxo-imidazolidin-Derivate
DE4224414A1 (de) * 1992-07-24 1994-01-27 Cassella Ag Phenylimidazolidin-derivate, ihre Herstellung und ihre Verwendung
DE4301747A1 (de) * 1993-01-23 1994-07-28 Cassella Ag Substituierte Aminoverbindungen, ihre Herstellung und ihre Verwendung
DE4308034A1 (de) * 1993-03-13 1994-09-15 Cassella Ag Neue Heterocyclen, ihre Herstellung und ihre Verwendung
DE4309867A1 (de) 1993-03-26 1994-09-29 Cassella Ag Neue Harnstoffderivate, ihre Herstellung und Verwendung
DE4427979A1 (de) 1993-11-15 1996-02-15 Cassella Ag Substituierte 5-Ring-Heterocyclen, ihre Herstellung und ihre Verwendung

Also Published As

Publication number Publication date
ES2176261T3 (es) 2002-12-01
CA2169643A1 (en) 1995-05-26
KR960705786A (ko) 1996-11-08
JP3813983B2 (ja) 2006-08-23
RU2151143C1 (ru) 2000-06-20
HU223806B1 (hu) 2005-01-28
CN1069316C (zh) 2001-08-08
DK0729460T3 (da) 2002-08-19
CY2385B1 (en) 2004-06-04
EP0729460B1 (de) 2002-05-15
SK58596A3 (en) 1997-05-07
SK284471B6 (sk) 2005-04-01
PL314306A1 (en) 1996-09-02
PT729460E (pt) 2002-10-31
FI962043A0 (fi) 1996-05-14
HUT74736A (en) 1997-02-28
CZ292573B6 (cs) 2003-10-15
FI962043A (fi) 1996-05-14
KR100402192B1 (ko) 2004-04-08
US5981492A (en) 1999-11-09
AU693811B2 (en) 1998-07-09
CN1134696A (zh) 1996-10-30
IL111622A (en) 2000-10-31
ATE217615T1 (de) 2002-06-15
CZ116296A3 (en) 1996-10-16
HU9601300D0 (en) 1996-07-29
WO1995014008A1 (de) 1995-05-26
JPH09505062A (ja) 1997-05-20
DE4427979A1 (de) 1996-02-15
PL180906B1 (pl) 2001-04-30
US6191282B1 (en) 2001-02-20
DE59410120D1 (de) 2002-06-20
EP0729460A1 (de) 1996-09-04
TW326040B (en) 1998-02-01
AU7939794A (en) 1995-06-06
IL111622A0 (en) 1995-01-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI113265B (fi) Menetelmä uusien, verihiutaleiden aggregaatiota estävien 2,5-dioksoimidatsolidinyylijohdannaisten valmistamiseksi
KR100379051B1 (ko) 신규한헤테로사이클릭화합물,이의제조방법및이를함유하는약제학적제제
DE69829879T2 (de) Indolderivate als faktor xa inhibitoren
HU220767B1 (hu) Fenil-imidazolidin-származékok, ilyen vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények, valamint eljárás előállításukra
SK39293A3 (en) 2,4-dioxo-imidazolidine derivatives
HU218922B (hu) Hidantoinszármazékok, ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás előállításukra
KR100418144B1 (ko) 신규한 우레아 유도체,이의 제조방법 및 이를 포함하는 약제학적 제제
CZ20012379A3 (cs) Nové deriváty malonové kyseliny, způsoby jejich přípravy, použití a farmaceutické přípravky obsahující tyto deriváty (inhibitory aktivity faktoru Xa)
HU217430B (hu) 4-Oxo-2-tioxo-imidazolidin-származékok, ilyeneket tartalmazó gyógyszerkészítmények, és eljárás előállításukra
RU2174119C2 (ru) Соли этилового эфира 3-(2-(4-(4-(аминоиминометил)фенил)-4-метил-2,5-диоксоимидазолидин-1-ил)ацетиламино)-3-фенилпропионовой кислоты, способ их получения и фармацевтическая композиция на их основе
EP0680468B1 (de) Substituierte aminoverbindungen, ihre herstellung und ihre verwendung als hemmstoffe der thrombozytenaggregation
KR100991678B1 (ko) 이미다졸리딘 유도체, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 약제학적 조성물
CA2373433C (en) Spiroimidazolidine derivatives, their preparation, their use and pharmaceutical preparations comprising them
KR100227730B1 (ko) 트롬빈 억제제로서 유용한 신규한 벤즈아미딘계 하이덴토인 유도체

Legal Events

Date Code Title Description
MA Patent expired