FI106864B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten indolopyrrolokarbatsolijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

n 1CCC64

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten indolopyrrolo-karbatsolijohdannaisten valmistamiseksi Tämä keksintö on käyttökelpoinen lääketieteen alal-5 la, ja se koskee uusien indolopyrrolokarbatsolijohdannaisten valmistusta, jotka inhiboivat kasvainten vastaisten solujen lisääntymistä ja osoittavat kasvainten vastaista vaikutusta, niiden valmistusmenetelmää ja käyttöä.

Syöpäkemoterapian alalla, monia yhdisteitä on jo 10 asetettu käyttöön kasvainten vastaisina aineina. Niiden vaikutus erilaisiin kasvaimiin ei kuitenkaan ole aina riittävä, ja kasvainsolujen resistenssiongelma näitä lääkkeitä vastaan tekee näiden kasvainten vastaisten aineiden kliinisen käytön hankalaksi [viittaus, The 47th Japan 15 Society of Cancer General Meeting Article, sivut 12 - 15 (1988)].

Tällaisessa asiantilassa, uusien karsinostaattisten aineiden kehitystä tehdään aina syöpäterapian alalla. Erityisesti, tarvitaan aineita, jotka voittavat resistenssin 20 olemassa olevia karsinostaattisia aineita vastaan ja osoittavat vaikutusta tämän kaltaisia syöpiä vastaan, joihin olemassa olevat karsinostaattiset aineet eivät voi - osoittaa riittävää vaikutusta.

Tällaisen asiantilan valossa nämä keksijät seuloi-25 vat laajalti mikrobiologisia metabolisia tuotteita, tuloksena, he löysivät uuden kasvainten vastaista aktiivisuutta omaavan yhdisteen BE-13793C (12,13-dihydro-l,11-dihydrok-si-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbatsoli-5,7(6H)-dio-ni) , ja esittivät sen [viittaus japanilaiseen laid-open 30 -patenttijulkaisuun nro 20277/1991 ja J. Antibiotics, 44. w 723 - 728 (1991) ] .

j · t

Sen jälkeen nämä keksijät loivat indolopyrrolokar-batsoliyhdisteitä, joilla on erinomainen kasvainten vastainen aktiivisuus, modifioimalla kemiallisesti BE-13793C, 35 ja esittivät ne (viittaus PCT/W091/18003).

2 106864

Yhdisteiden, joilla on vielä erinomaisempi kasvainten vastainen aktiivisuus, luomista varten kemiallisesti modifioimalla aikaisemmin esitettyjä indolopyrrolokarbat-soli kasvainten vastaisia yhdisteitä, nämä keksijät synte-5 tisoivat useita indolopyrrolokarbatsolijohdannaisia, tut kivat niiden kasvainten vastaista aktiivisuutta, ja tuloksena, havaitsivat nyt, että sarja yhdisteitä, jotka esitetään seuraavalla yleisellä kaavalla, ovat uusia yhdisteitä, joilla on erittäin erinomainen kasvainten vastainen 10 akt i ivi suus.

Termi "alempi", jota käytetään tässä keksinnössä, tarkoittaa, että ryhmän tai yhdisteen, johon tämä termi on liittynyt, hiililukumäärä on 6 tai pienempi, edullisesti 4 tai pienempi.

15 "Alempi alkyyliryhmä" on haarautumattoman ketjun tai haarautuneen ketjun alkyyliryhmä, jolla on 1-6 hiiliatomia, ja esimerkkejä siitä ovat metyyliryhmä, etyyli-ryhmä, propyyliryhmä, isopropyyliryhmä, butyyliryhmä, iso-butyyliryhmä, see-butyyliryhmä, tert-butyyliryhmä, pentyy-20 liryhmä, isopentyyliryhmä, neopentyyliryhmä, heksyyliryhmä jne.

"Alempi alkenyyliryhmä" sisältää haarautumattoman ‘ ketjun tai haarautuneen ketjun aikenyyliryhmän, jolla on 3-6 hiiliatomia, ja esimerkkejä siitä ovat propenyyli-; 25 ryhmä, 2-butenyyliryhmä, 3-butenyyliryhmä, 3-pentenyyli- ryhmä, 4-heksenyyliryhmä jne.

"Alempi alkynyyliryhmä" voi olla haarautumattoman ketjun tai haarautuneen ketjun alkynyyliryhmä, jolla on 3-6 hiiliatomia, ja esimerkkejä siitä ovat propynyyli-30 ryhmä, 2-butynyyliryhmä, 3-butynyyliryhmä, 3-pentynyyli- ryhmä, 4-heksynyyliryhmä jne.

"Sykioalkyyliryhmä" sisältää 3 - 6-jäsenisen syk-loalkyyliryhmän, ja esimerkkejä siitä ovat syklopropyyli-ryhmä, sykiobutyyliryhmä, syklopentyyliryhmä, sykloheksyy-35 liryhmä jne.

3 106864 "Sykloalkyyli(alempi alkyyli)ryhmä" tarkoittaa al-kyyliryhmää, joka on substituoitu sykloalkyyliryhmällä, jossa sykloalkyyli- ja alempi alkyyli -osalla on edellä mainitut merkitykset, vastaavasti, ja esimerkkejä siitä 5 ovat syklopropyylimetyyliryhmä, syklobutyylimetyyliryhmä, syklopentyylimetyyliryhmä, sykioheksyylimetyyliryhmä, 1-syklopropyylietyyliryhmä, 2-syklopropyylietyyliryhmä, 1-syklobutyylietyyliryhmä, 2-syklobutyylietyyliryhmä, 1-syk-lopentyylietyyliryhmä, 2-syklopentyylietyyliryhmä, 1-syk-10 loheksyylietyyliryhmä, 3-sykloheksyylipropyyliryhmä, 3- syklopentyylipropyyliryhmä, 4-sykloheksyylibutyyliryhmä, 4-syklopentyylibutyyliryhmä jne., ja edullisesti, syklo-alkyylialkyyliryhmällä on 4 - 10 hiiliatomia yhteensä.

"Aryyliryhmä" voi olla monosyklinen tai polysykli-15 nen, ja aryyliryhmistä, joilla on 6 - 12 hiiliatomia, voidaan mainita sellaiset, kuten fenyyliryhmä, naftyyliryhmä j a tetrahydronaftyyliryhmä.

"Aralkyyliryhmä" tarkoittaa alempaa alkyyliryhmää, joka on substituoitu aryyliryhmällä, jossa aryyli- ja 20 alempi alkyyli -osilla on edellä mainitut merkitykset, vastaavasti, ja aralkyyliryhmistä, joilla on 7 - 15 hiili-atomia, voidaan mainita sellaiset, kuten esimerkiksi bent-syyliryhmä, fenetyyliryhmä, fenyylipropyyliryhmä, fenyyli-butyyliryhmä, fenyylipentyyliryhmä, naftyylimetyyliryhmä ; 25 ja naftyylietyyliryhmä.

"Heterosyklinen ryhmä" sisältää 5- tai 6-jäsenisen heterosyklisen ryhmän, joka sisältää 1-4 heteroatomia, jotka valitaan ryhmästä, joka koostuu typpiatomeista, happiatomeista ja rikkiatomeista, ja voidaan mainita aromaat-30 tisia heterosyklisiä ryhmiä, kuten esimerkiksi pyrrolyyli- * '' ryhmä, furyyliryhmä, tienyyl iryhmä, oksat solyyl iryhmä, iso-oksatsolyyliryhmä, tiatsolyyliryhmä, isotiatsolyyli-ryhmä, imidatsolyyliryhmä, pyratsolyyliryhmä, oksadiatso-lyyli, tiadiatsolyyliryhmä, triatsolyyliryhmä, tetratso-35 lyyliryhmä, furatsanyyliryhmä, pyridyyliryhmä, pyridat- 4 106864 sinyyliryhmä, pyrimidinyyliryhmä, pyratsinyyliryhmä ja triatsinyyliryhmä; ja ei-aromaattisia heterosyklisiä ryhmiä, kuten esimerkiksi dihydrotienyyliryhmä, tetrahydro-tienyyliryhmä, pyrrolinyyliryhmä, pyrrolidinyyliryhmä, 5 imidatsolidinyyliryhmä, imidatsolinyyliryhmä, piperi- dinoliryhmä, piperatsinyyliryhmä, oksatsoiinyyliryhmä, oksatsolidinyyliryhmä, iso-oksatsolinyyliryhmä, iso-oksat-solidinyyliryhmä, tiatsolinyyliryhmä, tiatsolidinyyliryh-mä, isotiatsolinyyliryhmä, isotiatsolidinyyliryhmä, 1,2-10 ditiolanyyliryhmä, 1,3-ditiolanyyliryhmä, 1,2-ditiolyyli- ryhmä, 1,3-ditiolyyliryhmä, dihydrotiopyranyyliryhmä, tet-rahydrotiopyranyyliryhmä, 1,4-ditianyyliryhmä, 1,4-di-tiinyyliryhmä, 1,4-oksatiinyyliryhmä ja tiomorfoiinyyliryhmä .

15 "Mono (alempi alkyyli) aminoryhmistä" voidaan mainita esimerkiksi metyyliaminoryhmä, etyyliaminoryhmä, propyy-liaminoryhmä, isopropyyliaminoryhmä, butyyliaminoryhmä, pentyyliaminoryhmä, heksyyliaminoryhmä, jne., ja "di(alempi alkyyli)aminoryhmistä" voidaan mainita esimerkiksi di-20 metyyliaminoryhmä, etyylimetyyliaminoryhmä, dietyyliamino- ryhmä, etyylipropyyliaminoryhmä, dipropyyliaminoryhmä, butyylimetyyliaminoryhmä, dibutyyliaminoryhmä, butyyli-etyyliaminoryhmä, metyylipentyyliaminoryhmä, heksyyli-metyyliaminoryhmä, etyyliheksyyliaminoryhmä jne.

25 "Aryyliaminoryhmä" tarkoittaa aminoryhmää, joka on substituoitu aryyliryhmällä, jossa aryyliosalla on edellä mainitut merkitykset, ja aryyliaminoryhmistä voidaan mainita esimerkiksi fenyyliaminoryhmä ja naftyyliaminoryhmä.

"Halogeeniatomit" sisältävät fluoriatomin, kloo-30 riatomin, bromiatomin ja jodiatomin.

"Alemmista alkylideeniryhmistä" voidaan mainita ' · · haarautumattoman tai haarautuneen ketjun alkylideeniryh-miä, joilla on 1 - 6 hiiliatomia, kuten esimerkiksi mety-leeniryhmä, etylideeniryhmä, propylideeniryhmä, isopropy-35 lideeniryhmä, butylideeniryhmä, isobutylideeniryhmä, see- 5 106864 butylideeniryhmä, pentylideeniryhmä, isopentylideeniryhmä, neopentylideeniryhmä ja heksylideeniryhmä.

"Alempi alkoksiryhmä" tarkoittaa (alempi alkyyli)-O-ryhmää, jossa alempi alkyyli -osalla on edellä mainittu 5 merkitys, ja esimerkkejä siitä ovat metoksiryhmä, etoksi-ryhmä, propoksiryhmä, isopropoksiryhmä, butoksiryhmä, iso-butoksiryhmä, see-butoksiryhmä, tertbutoksiryhmä, pentok-siryhmä, isopentoksiryhmä, neopentoksiryhmä, heksoksiryhmä jne.

10 "Alempi alkyloksikarbonyyliryhmä" tarkoittaa (alem pi alkoksi)-CO-ryhmää, jossa alempi alkoksi -osalla on edellä mainittu merkitys, ja esimerkkejä siitä ovat metok-sikarbonyyliryhmä, etoksikarbonyyliryhmä, propyloksikar-bonyyliryhmä, isopropyloksikarbonyyliryhmä, butyloksikar-15 bonyyliryhmä, isobutyloksikarbonyyliryhmä, pentyloksikar-bonyyliryhmä, heksyloksikarbonyyliryhmä jne.

"Aralkoksiryhmä" tarkoittaa alempaa aikoksi ryhmää, joka on substituoitu aryyliryhmällä, jossa aryyli- ja alempi alkoksi -osilla on edellä mainitut merkitykset, 20 vastaavasti, ja esimerkkejä siitä ovat bentsyylioksiryhmä, fenetyylioksiryhmä, fenyylipropoksiryhmä, α-naftyylimetok-siryhmä, β-naftyylimetoksiryhmä, naftyylietoksiryhmä, tet-rahydronaftyylimetoksiryhmä jne.

Esimerkkeinä suojaryhmistä "mahdollisesti substi-• ; 25 tuoidussa hydroksyyliryhmässä" mainitaan alkanoyyliryhmät, joilla on 2-6 hiiliatomia, kuten asetyyliryhmä, pro-pionyyliryhmä ja butyryyliryhmä; aroyyliryhmät, kuten bentsoyyliryhmä; substituoidut tai substituoimattomat aralkyyliryhmät, kuten bentsyyliryhmä ja 4-metoksibentsyy-30 liryhmä; ryhmät, jotka muodostavat asetaalin, kuten ase-tonidi; jne.

"Pentoosiryhmä" ja "heksoosiryhmä" tarkoittavat pentoosiryhmää ja heksoosiryhmää, jonka hydroksyyliryhmät voivat olla substituoituja samalla tai eri 1-3 ryhmällä, 35 jotka valitaan ryhmästä, joka koostuu vetyatomeista, alem- 6 106864 tuista alkyyliryhmistä, alemmista alkyyl ikarbonyy li oksi ryhmistä, alemmista alkoksiryhmistä ja aminoryhmistä, tai hapetettuja, ja voidaan mainita ryhmiä, jotka johdetaan pentooseista, kuten esimerkiksi riboosi, arabinoosi, ksy-5 loosi ja 2-deoksiriboosi, ja ryhmiä, jotka johdetaan hek-sooseista, kuten esimerkiksi alloosi, glukoosi, mannoosi, galaktoosi, glukosamiini, galaktoSamiini, 2-deoksiglukoo-si, 4-O-metyyliglukoosi, ramnoosi ja glukuronihappo.

Tämän keksinnön tarjoaman edellä mainitun kaavan 10 [I] mukaisista yhdisteistä edullisia ovat yhdisteet, jotka esitetään seuraavalla kaavalla R‘L .f?1 i

N

15 0=^ N=o iStMiöi CIa] G' 20 jossa R11 ja R21 kumpikin toisistaan riippumatta merkitsevät vetyatomia, alempaa alkyyliryhmää, alempaa alkenyyli-ryhmää, aryyliryhmää, aralkyyliryhmää, pyrrolyyliryhmää, 25 oksatsolyyliryhmää, iso-oksatsolyyliryhmää, tiatsolyyli-ryhmää, imidatsolyyliryhmää, pyridyyliryhmää, pyrimidinyy-liryhmää, oksatsoiinyyliryhmää, oksatsolidinyyliryhmää, imidatsolinyyliryhmää, imidatsolidinyyliryhmää, pyrroli-dinyyliryhmää, piperatsinyyliryhmää, tiätsinyyliryhmää, 30 tiatsolidinyyliryhmää (alemmalla alkyyliryhmällä, alemmalla alkenyyliryhmällä, aryyliryhmällä, aralkyyliryhmällä ja • · · heterosyklisellä ryhmällä voi olla 1-5 substituenttia, jotka valitaan ryhmästä, joka koostuu karboksyyliryhmistä, karbamoyyliryhmistä, syanoryhmistä ja hydroksyyliryhmis-3 5 tä) , tai ryhmää, jolla on kaava -Y-R31, ja siinä Y merkit- 7 106864 see karbonyyliryhmää, tiokarbonyyliryhmää tai sulfonyyli-ryhmää, ja R31 merkitsee vetyatomia, alempaa alkyyliryhmää, aryyliryhmää (alemmalla alkyyliryhmällä ja aryyliryhmällä voi olla 1-4 substituenttia, jotka valitaan ryhmästä, 5 joka koostuu halogeeniatomeista, mahdollisesti suojatuista hydroksyyliryhmistä, aminoryhmistä ja karboksyyliryhmistä) , aminoryhmää, hydratsinoryhmää, aryyliaminoryhmää, alempaa aikoksiryhmää, karbamoyyliryhmää, pyrrolyyliryhmää, oksatsolyyliryhmää, iso-oksatsolyyliryhmää, tiatso-10 lyyliryhmää, imidatsolyyliryhmää, pyridyyliryhmää, pyrimi-dinyyliryhmää, oksatsolinyyliryhmää, oksatsolidinyyliryh-mää, imidatsolinyyliryhmää, imidatsolidinyyliryhmää, pyrrol idinyyliryhmää, piperatsinyyliryhmää, tiatsinyyliryhmää tai tiätsoiidinyyliryhmää; tai 15 R11 ja R21 yhdistyvät, jolloin ne merkitsevät alempaa alkylideeniryhmää, jolla mahdollisesti on karboksyyliryhmä (-ryhmiä), tai R11 ja R21 yhdistyvät typpiatomin kanssa, johon ne sitoutuvat, jolloin muodostuu pyrroidinyyliryhmä, imidat-20 solidinyyliryhmä, imidatsoiinyyliryhmä, piperidinoryhmä tai, piperatsinyyliryhmä (näillä heterosyklisillä ryhmillä voi olla renkaassa alempi aikyyliryhmä(-ryhmiä), joka on mahdollisesti substituoitu hydroksiryhmällä(-ryhmillä)), G1 merkitsee ryhmää, jolla on kaava 25 • « i . <T“

qRt tai OH OH

30 «« • · ja siinä R7 merkitsee vetyatomia tai alempaa alkyyliryhmää ja R8 merkitsee hydroksyyliryhmää tai aminoryhmää, ja X11 ja X21 sitoutuvat indolopyrrolokarbatsolirenkai-35 siin 1- tai 2-asemaan ja 10- tai 11-asemaan, vastaavasti, β 106864 ja kumpikin toisistaan riippumatta merkitsevät halogeeni-atomia, hydroksyyliryhmää, alempaa alkoksiryhmää tai aral-koksiryhmää.

Lisäksi edullisia yhdisteitä ovat ne, jotka esite-5 tään seuraavalla kaavalla "V"·

N

10 tIbl l G' 15 jossa R12 merkitsee vetyatomia tai alempaa alkyyliryhmää, R22 merkitsee vetyatomia, alempaa alkyyliryhmää (alemmalla aikyyliryhmällä voi olla 1-5 substituenttia, jotka valitaan ryhmästä, joka koostuu karboksyyliryhmistä, 20 karbamoyyliryhmistä, hydroksyyliryhmistä ja syanoryhmis- tä), aryyliryhmää, aralkyyliryhmää (aryyliryhmällä ja ar-alkyyliryhmällä voi olla 1-4 substituenttia, jotka valitaan ryhmästä, joka koostuu hydroksyyliryhmistä ja karboksyyliryhmistä) , pyridyyliryhmää, imidatsolyyliryhmää, imi-. 25 datsolinyyliryhmää, tiatsolyyliryhmää, pyrrolidinyyliryh- mää, piperatsinyyliryhmää tai ryhmää, jolla on kaava -Y-R32, ja siinä Y merkitsee karbonyy li ryhmää, tiokarbonyyli-ryhmää tai sulfonyyliryhmää, ja kun Y on karbonyyliryhmä tai tiokarbonyyliryhmä, R32 merkitsee vetyatomia, alempaa 30 alkyyliryhmää, aryyliryhmää (alemmalla alkyyliryhmällä ja aryyliryhmällä voi olla 1-4 substituenttia, jotka väli-taan ryhmästä, joka koostuu halogeeniatomeista, mahdollisesti suojatuista hydroksyyliryhmistä, aminoryhmistä ja karboksyyliryhmistä), aminoryhmää, hydratsinoryhmää, aryy-35 liaminoryhmää, alempaa alkoksiryhmää, karbamoyyliryhmää, pyridyyliryhmää, pyrimidinyyliryhmää, imidatsolinyyliryh- 9 106864 mää tai pyrrolidinyyliryhmää, ja kun Y on sulfonyyliryhmä, R32 merkitsee alempaa alkyyliryhmää tai aryyliryhmää; tai R12 ja R22 yhdistyvät, jolloin ne merkitsevät alempaa alkylideeniryhmää, jolla on karboksyyliryhmä(-ryhmiä); tai 5 R12 ja R22 yhdistyvät typpiatomin kanssa, johon ne sitoutuvat, jolloin muodostuu pyrrolidinyyliryhmä, piperi-dinoryhmä tai piperatsinyyliryhmä (näillä heterosyklisillä ryhmillä voi olla renkaassa alempi alkyyliryhmä{-ryhmiä), jolla mahdollisesti on hydroksyyliryhmä(-ryhmiä)), ja 10 G1, X11 ja X21 merkitsevät samaa kuin on määritelty edellä kaavassa [Ia].

Edullinen G1 on yleensä

rV

OH

OR7 ja edullisesti X11 ja X21 merkitsevät hydroksyyliryhmiä, 20 jotka ovat sitoutuneet indolopyrrolokarbatsolirenkaan 1-ja 11-asemaan, vastaavasti.

Tämän keksinnön yhdisteet voivat esiintyä farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen muodossa. Tällaisiin suoloihin kuuluvat additiosuolat epäorgaanisten happojen ;* 25 kanssa, kuten esimerkiksi kloorivetyhappo ja rikkihappo, ja orgaanisten happojen kanssa, kuten esimerkiksi etikka-happo, sitruunahappo, viinihappo ja maleiinihappo. Lisäksi, siinä tapauksessa, että tämän keksinnön yhdisteet sisältävät happoryhmän, se voi olla alkalimetallisuolojen 30 muodossa, kuten esimerkiksi kaliumsuolan ja natriumsuolan; - maa-alkalimetallisuolojen, kuten esimerkiksi magnesium- >•1 suolan ja kalsiumsuolan, muodossa; ja suolat orgaanisten emästen kanssa, kuten etyyliamiinisuola ja arginiinisuola.

10 106864

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet valmistetaan keksinnön mukaisesti patenttivaatimuksessa 1 kuvatulla tavalla.

Yhdiste, jolla on kaava [I] , joka julkaistaan tässä keksinnössä, voidaan valmistaa saattamalla seuraavalla 5 kaavalla esitetty yhdiste tai sen johdannainen, jossa funktionaaliset ryhmät on suojattu, reagoimaan

Y

10 cn] x g H ** tai 15 = c> = [E] 2 0 1 o jossa Y merkitsee vetyatomia tai substituoitua tai subs-tituoimatonta alempaa alkyyliryhmää, ja X1, X2 ja G merkit-• ‘ 25 sevät samaa kuin on määritelty edellä yhdisteelle, joka esitetään seuraavalla yleisellä kaavalla, tai sen johdannaiselle, missä siinä tapauksessa, että R13 ja R23 sisältävät funktionaalisen ryhmän, jokainen funktionaalinen ryhmä on suojattu 30 R13 HJ-/ tIV] 2 V3 n 106864 jossa R13 ja R23 kumpikin toisistaan riippumatta merkitsevät vetyatomia, alempaa alkyyliryhmää, alempaa alkenyyli-ryhmää, alempaa aikynyyliryhmää, aryyliryhmää, aralkyyli-5 ryhmää tai heterosyklistä ryhmää (alemmalla alkyyliryhmällä, alemmalla alkenyyliryhmällä, alemmallla alkynyyliryh-mällä, aryyliryhmällä, aralkyyliryhmällä tai heterosykli-sellä ryhmällä voi olla 1-5 substituenttia, jotka valitaan ryhmästä, joka koostuu karboksyyliryhmistä, karbamo-10 yyliryhmistä, sulforyhmistä, aminoryhmistä, syanoryhmistä, mono(alempi alkyyli)aminoryhmistä, di(alempi alkyyli)aminoryhmistä, hydroksyyliryhmistä ja halogeeniatomeista), tai ryhmää, jolla on kaava -Y-R3, ja tässä Y merkitsee kar-bonyyliryhmää, tiokarbonyyliryhmää tai sulfonyyliryhmää, 15 ja R3 merkitsee vetyatomia, alempaa alkyyliryhmää, sykloal-kyyliryhmää, sykloalkyylialkyyliryhmää, aryyliryhmää, ar-alkyyliryhmää, alempaa alkoksiryhmää, hydratsinoryhmää, aminoryhmää, aryyliaminoryhmää, tai karbamoyyliryhmää tai heterosyklistä ryhmää (alemmalla alkyyliryhmällä, sykloal-20 kyyliryhmällä, sykloalkyylialkyyliryhmällä, aryyliryhmäl-lä, aralkyyliryhmällä ja heterosyklisellä ryhmällä voi kullakin olla 1-4 substituenttia, jotka valitaan ryhmäs-• tä, joka koostuu halogeeniatomeista, mahdollisesti suoja- tuistahydroksyyliryhmistä, aminoryhmistä, karboksyyliryh-·· ' 25 mistä, karbamoyyliryhmistä, syanoryhmistä ja alemmista alkoksikarbonyyliryhmistä, ja aminoryhmä ja karbamoyyli-ryhmä voi olla kumpikin mono- tai disubstituoituja alemmalla alkyyliryhmällä(-ryhmillä), joka on mahdollisesti substituoitu ryhmällä (ryhmillä), joka valitaan ryhmästä, 30 joka koostuu halogeeniatomeista, hydroksyyliryhmistä, aminoryhmistä, karboksyyliryhmistä, karbamoyyliryhmistä ja • * _ alemmista alkoksikarbonyyliryhmistä); tai R13 ja R23 yhdistyvät typpiatomin kanssa, johon ne sitoutuvat, jolloin muodostuu heterosyklinen ryhmä (hete-35 rosyklisellä ryhmällä voi olla renkaassa alempi alkyyli- 12 106864 ryhmä (-ryhmiä), joka on mahdollisesti substituoitu ryhmällä (ryhmillä), joka valitaan ryhmästä, joka koostuu amino-ryhmistä, hydroksyyliryhmistä, karboksyyliryhmistä ja sul-foryhmistä); jos tarpeen, poistaen suojaryhmän(-ryhmät), 5 joka on tuotteessa, jolloin valmistetaan yhdiste, joka esitetään yleisellä kaavalla v

N

io γ=ο tIcl

X G H

15 jossa R13, R23, X1, X2, G merkitsevät samaa kuin edellä on määritelty; tai joko formyloiden, alkyloiden, alkenyloiden, alkynyloi-20 den, aralkynyloiden, karbamoyloiden, tiokarbamoyloiden, ( /r13 N\ alkanoyloiden tai sulfonyloiden aminoryhmä | -Ni )

V R V

. . - 25 edellä olevan kaavan [Ie] mukaisessa yhdisteessä tai sen johdannaisessa, missä funktionaaliset ryhmät ovat suojattuja, kun R13 ja R23 merkitsevät vetyatomia, tai kondensoi-den edellä oleva yhdiste tai johdannainen yhdisteen kans-30 sa, joka esitetään seuraavalla kaavalla tai sen johdannai-.· sella, jossa funktionaalinen ryhmä on suojattu OHC-R6 [V] 13 106864 jossa R6 merkitsee vetyatomia tai karboksyyliryhmää, tai alempaa alkyyliryhmää, jolla on mahdollisesti 1-4 subs-tituenttia, jotka valitaan ryhmästä, joka koostuu amino-ryhmistä, mono(alempi alkyyli)aminoryhmistä, di(alempi 5 alkyyli)aminoryhmistä, hydroksyyliryhmistä, karboksyyli- ryhmistä ja sulforyhmistä, ja jos tarpeen, poistaen suojaryhmät, jotka ovat tuotteessa; tai pelkistäen kaksoissidoksia kaavan [Ie] mukaisessa yhdisteessä, kun R13 ja/tai R23 sisältävät kaksoissidoksen 10 tai yhdisteessä, joka valmistetaan kondensoimalla yhdiste [Ie] ja yhdiste [V], tai sen johdannaisessa, jossa funktionaaliset ryhmät ovat suojattuja, ja jos tarpeen poistaen suojaryhmät, jotka ovat tuotteessa; ja jos tarpeen, muuttaen saatu kaavan [I] mukainen yhdiste farmaseuttises-15 ti hyväksyttäväksi suolaksi.

Tässä, termit alkylointi, alkenylointi, alkynyloin-ti, aralkylointi, alkanoylointi ja sulfonylointi tulkitaan laajasti, ja ne tarkoittavat kaikkia niitä reaktiota, jolloin liitetään substituentteja, jotka vastaavat R3:tä ja 20 R2:ta, tämän keksinnön yhdisteiden rakenteeseen, ja esimer kiksi alkylointi merkitsee substituoidun tai substituoi-mattoman alkyyliryhmän, joka kuuluu tähän keksintöön, r liittämistä.

Kaavan [II] tai [III] mukaisen yhdisteen (tämän · ' 25 jälkeen sisältäen sen johdannaisen, johon on liitetty ♦ funktionaalinen ryhmä) reaktio kaavan [IV] mukaisen yhdisteen kanssa (tämän jälkeen sisältäen sen johdannaisen, jossa funktionaaliset ryhmät ovat suojattuja) voidaan toteuttaa sinänsä tunnetun imidin tai happoanhydridin reak-30 tion mukaan hydratsiinin tai hydratsiinijohdannaisen kanssa, ja voidaan, esimerkiksi, totetuttaa liuottimen poissa ollessa tai inertissä liuottimessa, esimerkiksi sellainen liuotin, kuten Ν,Ν-dimetyyliformamidi lämpötilassa välillä noin 0 °C - liuottimen kiehumispiste, edul-35 lisesti alueella noin huoneenlämpötila - noin 80 °C.

14 106864

Kaavan [IV] mukaisen yhdisteen käyttömäärä yhdisteelle, jolla on kaava [II] tai [III] ei ole erityisen rajoitettu, ja sitä voidaan muuntaa laajalla alueella yhdisteen lajin, reaktio-olosuhteiden jne. mukaan, mutta 5 yleensä, on sopiva käyttää kaavan [IV] mukaista yhdistettä määräalueella vähintään 1 mooli, edullisesti 1-10 moolia, erityisesti 3-5 moolia kaavan [II] tai [III] mukaisen yhdisteen moolia kohti. Lisäksi, kun kaavan [IV] mukainen yhdiste on neste reaktiolämpötilassa, on myös 10 mahdollista käyttää yhdistettä suuresti ylimäärin, esimerkiksi määrissä 10 - 40 moolia kaavan [II] tai [III] mukaisen yhdisteen moolia kohti niin, että se toimii liuottimena.

Siten, voidaan saada edellä olevan kaavan [Ie] mu-15 kaista yhdistettä, jossa olemassa olevat funktionaaliset ryhmät ovat joskus sopivasti suojattuja.

Näin saatu kaavan [Ie] mukainen yhdiste siinä tapauksessa, että R13 ja R23 merkitsevät vetyatomia, tai sen johdannainen, jossa sen funktionaaliset ryhmät ovat suo-20 jattuja (tämän jälkeen viitataan yleisesti yhdisteeseen [Ic-1]), voidaan formyloida, alkyloida, alkenyloida, al-kynyloida, aralkyloida, karbamoyloida, tiokarbamoyloida, alkanoyloida tai sulfonyloida, jolloin saadaan vastaava kaavan [Ie] mukainen yhdiste siinä tapauksessa, että vä-; 25 hint ään yksi R13 ja R23 merkitsee ryhmää, lukuun ottamatta vetyatomia, joka on määritelty näille ryhmille.

Kaavan [Ic-1] mukaisen yhdisteen formylointi voidaan toteuttaa tavallisesti aminoryhmän formyloinnissa käytetyn menetelmän mukaan, ja voidaan, esimerkiksi, to-30 teuttaa kuumentamalla sitä yhdessä muurahaishapon, forma-.· midin, dimetyyliformamidin tai niiden kaltaisten kanssa, tai menetelmällä, jolloin saatetaan se reagoimaan muurahaishapon ja happoanhydridin seoksen kanssa liuottimessa, jolla ei ole huonoa vaikutusta, tai ilman mitään liuotin-35 ta, tai toisilla keinoilla.

1S 106864

Kaavan [Ic-1] mukaisen yhdisteen reaktio muurahaishapon, formamidin, diemtyyliformamidin tai niiden kaltaisten kanssa toteutetaan yleensä lämpötila-alueella 30 °C -liuottimen kiehumispiste, mutta jos tarpeen, se voidaan 5 myös toteuttaa lämpötilassa, joka on yli tai alle tällaisen lämpötilan, ja reaktioaika on yleensä alueella 30 minuuttia - 2 vuorokautta. Edullisesti, reaktio toteutetaan yleensä happokatalyytin, kuten kloorivetyhapon tai rikkihapon, läsnä ollessa.

10 Formylointi käyttäen muurahaishapon ja happoanhyd- ridin seosta toteutetaan yleensä verrattain alhaisessa lämpötilassa alueella -5 °C - huoneenlämpötila, mutta voidaan, jos tarpeen, toteuttaa alueella, joka on tämän ala-tai yläpuolella. Lisäksi, reaktioaika on yleensä 10 mi-15 nuuttia - 5 tuntia, mutta sitä voidaan, jos tarpeen, pidentää tai lyhentää.

Kaavan [Ic-1] mukaisen yhdisteen alkylointi, alke-nylointi, alkynylointi ja aralkylointi voidaan toteuttaa sinänsä tunnetun menetelmän mukaan, esimerkiksi reaktio 20 alkylointiaineen, alkenylointiaineen, alkynylointiaineen tai aralkylointiaineen kanssa, kuten alkyylihalogenidi, alkenyylihalogenidi, alkynyylihalogenidi, aralkyylihalo-genidi, alkyylimesylaatti, alkenyylimesylaatti, aralkyyli-mesylaatti, alkyylitosylaatti tai aralkyylitosylaatti/ tai . ' 25 menetelmällä, jolla kondensoidaan se aldehydiyhdisteen tai ketoniyhdisteen kanssa ja pelkistetään saatu kondensaatti; tai sen kaltaisilla. Pelkistysreaktio voidaan toteuttaa menetelmän mukaan, joka käyttää muurahaishappoa, metallia tai metallihydridiä tai tavanomaista menetelmää, kuten 30 katalyyttistä pelkistysmenetelmää käyttäen palladium-hii- .♦ lellä tai sen kaltaisia.

Kaavan [Ic-1] mukaisen yhdisteen karbamoylaatio ja tiokarbamoylaatio voidaan toteuttaa saattamalla se reagoimaan vastaavan isosyanaattiyhdisteen tai tioisosyanaat-35 tiyhdisteen kanssa liuottimen poissa ollessa tai sopivassa 16 106864 liuottimessa. Reaktiolämpötila voi olla alueella noin -20 °C - liuottimen kiehumispiste, edullisesti noin 0 -50 °C.

Kaavan [Ic-1] mukaisen yhdisteen alkanoylointi voi-5 daan toteuttaa menetelmällä, jolla saatetaan se reagoimaan vastaavan happohalogenidin tai happoanhydridin kanssa liuottimen ollessa poissa tai sopivassa liuottimessa. Reaktio voidaan yleensä toteuttaa lämpötilassa, joka on alueella noin -5 °C - liuottimen kiehumispiste, ja jos 10 tarpeen, se voidaan toteuttaa myös lämpötilassa, joka on tämän alapuolella.

Happohalogenidia tai happoanhydridiä käytetään yleensä pienenä ylimääränä yhdisteelle, jolla on kaava [Ic-1], mutta voidaan, jos tarpeen, käyttää määrinä, jotka 15 ovat tämän ala- tai yläpuolella, ja reaktioaika voi yleensä olla 30 minuuttia - 2 vuorokautta.

Kaavan [Ic-1] mukaisen yhdisteen sulfonylointi voidaan suorittaa saattamalla se reagoimaan sellaisen rea-genssin kanssa, kuten vastaava orgaaninen sulfonihappoan-20 hydridi tai orgaaninen sulfonyylihalogenidi emäksen läsnä tai poissa ollessa. Reaktiolämpötila voi yleensä olla riittävä alueella noin -10 - 50 °C, mutta se voi olla, jos tarpeen, tämän ala- tai yläpuolella, ja reaktioaika voi yleensä olla 30 minuuttia - 3 vuorokautta. Reagenssia, ·. ' 25 kuten orgaanista sulfonihappoanhydridia tai orgaanista sulfonyylihalogenidia, käytetään yleensä pienenä ylimääränä, mutta voidaan käyttää myös, määrinä, jotka ovat tämän ylä- tai alapuolella.

Lisäksi, kaavan [Ic-1] mukaisen yhdisteen konden-30 saatioreaktio edellä olevan kaavan [V] mukaisen yhdisteen .· (sisältäen sen johdannaisen, jossa funktionaaliset ryhmät ovat suojattuja) kanssa on niin kutsuttu Schiff-emäsmuo-dostusreaktio, ja se voidaan, esimerkiksi, yleensä toteuttaa liuottimessa, joka on inertti reaktiolle, esim. sel-35 laisessa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraani, lämpöti- 17 106864 lassa, joka on välillä 0 °C - liuottimen kiehumispiste, edullisesti alueella huoneenlämpötila - 50 °C. Reaktioaika on yleensä alueella 30 minuuttia - 2 vuorokautta, mutta se voi, jos tarpeen, olla tämän ylä- tai alapuolella.

5 Kaavan [V] mukaisen yhdisteen käyttömäärä kaavan [Ic-1] mukaiselle yhdisteelle ei ole ankarasti rajoitettu, mutta yleensä, on sopivaa käyttää kaavan [V] mukaista yhdistettä määränä 1-50 moolia, erityisesti 3-10 moolia kaavan [Ic-1] mukaisen yhdisteen moolia kohti.

10 Edellä olevalla reaktiolla saatu hydratsoni voidaan altistaa tavanomaiselle katalyyttiselle hydrausreaktiolle käyttäen palladium-hiilellä-katalyyttiä tai sen kaltaisia, jolloin saadaan kaavan [I] mukainen yhdiste, jossa R1 ja R2 merkitsevät vetyatomia.

15 Edellä mainituissa menetelmissä, funktionaalisten ryhmien suojaus raaka-aineyhdisteissä ja muodostuneissa yhdisteissä olevien suojaryhmien poisto voidaan toteuttaa käyttäen tavanomaisia ja valinnaisia menetelmiä, joita tunnetaan laajalti kemian alalla.

20 Lisäksi, edellä olevilla reaktioilla tuotettujen yhdisteiden eristys ja puhdistus voidaan toteuttaa sinänsä orgaanisen sunteesikemian alalla tunnettujen menetelmien . mukaan, esimerkiksi saostusmenetelmät, liuotinuuttomene- telmät, uudelleenkiteytys, kromatografia jne.

25 Edellä olevan kaavan [II] mukainen yhdiste, jota käytetään lähtöaineena edellä mainituissa menetelmissä, voidaan valmistaa glykosidoimalla yhdiste, joka esitetään yleisellä kaavalla

Y

30 N ^

H H

18 106864 jossa X1, X2 ja Y merkitsevät samaa kuin edellä on määritelty, joka valmistetaan sinänsä tunnetulla menetelmällä [viittaus J. Chem. Soc. Perkin Transactions I. s. 2475 - 2480 5 (1990)], tai sen johdannainen, jossa funktionaaliset ryh mät ovat suojattuja.

Kaavan [VI] mukaisen yhdisteen tai sen johdannaisen, jossa funktionaaliset ryhmät ovat suojattuja, gly-kosidointi voidaan toteuttaa sinänsä tunnetulla menetel-10 mällä [viittaus J. Am. Chem. Soc. 60, 2559 (1938)], esi merkiksi kondensoimalla se pentoosin tai heksoosin reaktiivisen johdannaisen kanssa, jossa hydroksyyliryhmät ovat suojattuja, esim. l-bromi-2,3,4,6-O-tetra-asetyyliglukoo-si, käyttäen aktivointiaineena elohopeasyanidia, hopeakar-15' bonaattia, hopeaoksidia tai niiden kaltaisia, edullisesti hopeaoksidia, aproottisessa liuottimessa, esim. sellainen liuotin, kuten bentseeni, tolueeni tai metyleenikloridi, lämpötilassa noin 0 - 100 °C, edullisesti noin 80 °C.

Vaihtoehtoisesti, kaavan [II] mukainen yhdiste voi-20 daan valmistaa myös menetelmän mukaan, joka on esitetty edellä mainitussa patenttihakemuksessa PCT/W091/18003.

Lisäksi, kaavan [III] mukainen yhdiste voidaan valmistaa käsittelemällä emäksellä näin saatu kaavan [II] mukainen yhdiste tai sen johdannainen, jossa funktionasii-25 set ryhmät ovat suojattuja.

Emäs on edullisesti kaliumhydroksidin vesiliuos, ja käsittely tällä emäksellä voidaan yleensä toteuttaa huoneenlämpötilassa, mutta joissakin tapauksissa, voidaan myös suorittaa kuumentamalla noin 50 °C lämpötilaan.

30 Reaktioseoksen neutralointi tai hapon muodostus V voidaan, jos tarpeen, suorittaa käyttäen kloorivetyhappoa, •.

ja siten on mahdollista saostaa kaavan [III] mukainen yhdiste kiteinä.

Kaavan [I] mukaisilla yhdisteillä, jotka tarjotaan 35 tässä keksinnössä, on erinomainen kasvainten vastainen »· · 19 106864 toiminta, kuten on osoitettu seuraavissa farmakologisissa koe-esimerkeissä.

(1) Terapeuttinen vaikutus hiiren kasvainta (P388) vastaan 5 Tämän keksinnön yhdisteiden terapeuttinen vaikutus hiiren kasvainta (P388) vastaan esitetään taulukoissa 1 ja 2.

Taulukko 1 10 Esimerkin 2 yhdisteen vaikutus P388:a vastaan

Kasvain(1) Annos<2), i.p. MST(3) (vrk) T/C (%) <4) (mg/kg/injektio) 0 12,3 ± 1,06 100 1 15,8 ± 0,84 128 P388 3 17,8 ± 1,92 145 15 10 >26,4 ± 18,82 >245 30 >42,2 ± 24,38 >343 100 >47,2 ± 18,90 >384 • t tl · · .

20 106864

Taulukko 2

Esimerkin 5 yhdisteen vaikutus P388:a vastaan

Kasvain11’ Annos<2), i.p. MST(3) (vrk) T/C (%)(4) (mg/kg/injektio) 0 12,3 ± 0,95 100 5 1 16,8 ± 0,84 137 P388 3 17,8 ± 1,92 145 10 >26,2 ± 10,18 >213 30 >23,4 ± 9,74 >190 100 >36,4 ± 8,05 >296 10 (Taulukoiden 1 ja 2 yläviitteet) (1) Kasvainsiirrostus: 106 syöpäsolua siirrostettiin vatsa-kalvon sisäisesti.

(2) Annos: Kasvaimen siirrostuksen jälkeen, jokainen annos 15 annettiin vatsakalvon sisäisesti kerran vuorokaudessa ensimmäisestä päivästä kymmenenteen päivään.

(3) MST: selviytymisvuorokausien keskiarvo (4) T/C (%): (hoitoryhmän MST / kontrollin MST) x 100 (5) Standardi: siinä tapauksessa, että T/C > 125, koeyh-20 disteellä arvoitiin olevan huomattava kasvaimenvastainen vaikutus sillä annoksella.

(2) Solujen lisääntymisen inhibitioaktiivisuus hiiren leukemiasoluja vastaan Mittausmenetelmä: 25 100 μΐ annoksia soluviljelyväliainetta (10 % naudan : sikiöseerumia sisältävä RPMI 1640 väliaine), joka sisältää 3 x 103 hiiren leukemiasolua (P388) laitettiin 96-kuoppai-selle mikrolevylle, soluja viljeltiin käyttäen 5-%:ista C02:ta 37 °C:ssa 24 tuntia, 10 μΐ jokaista koeliuosta, jot-30 ka sisälsivät vastaavia koeyhdisteitä, lisättiin vastaavasti, ja soluja viljeltiin vielä käyttäen 5-%:ista C02:ta 21 106864 37 °C:ssa 24 tuntia. 10 μΐ annoksia 0,5-%:ista Thiazoyl Blueta lisättiin viljelmälihaliemeen, ja inkubointi suoritettiin käyttäen 5-%:ista C02:ta 37 °C:ssa 2 tuntia, jolloin toteutui entsymaattinen reaktio. 20-%:ista natriumdo-5 dekyylisulfaattia (SDS) lisättiin reaktion pysäyttämiseksi, inkubointia jatkettiin vielä 37 °C:ssa 4 tuntia muodostuneen värin liuottamiseksi, ja mitattiin absorbanssi 550 nm:ssä ja verrattiin sitä kontrolliryhmään. Tulokset on esitetty taulukossa 3.

10

Taulukko 3

Solujen lisääntymisen inhibointiaktiivisuus hiiren leuke-miasolua (P388) vastaan

Koeyhdiste 50 % inhiboiva pitoisuus (IC50, μΜ) 15 Esimerkin 1 yhdiste < 0,030

Esimerkin 2 yhdiste 0,29

Esimerkin 3 yhdiste 0,065

Esimerkin 4 yhdiste 0,096

Esimerkin 5 yhdiste 0,28 20 Esimerkin 6 yhdiste 0,059

Esimerkin 7 yhdiste 0,091

Esimerkin 8 yhdiste 0,30

Esimerkin 9 yhdiste 0,028

Esimerkin 10 yhdiste 0,46 • _ ____________ ^^^^Mmb_..-a^~ • 25 Esimerkin 11 yhdiste < 0,026

Esimerkin 12 yhdiste 0,042

Esimerkin 13 yhdiste 0,22 • · · <- 106864 22

Koeyhdiste 50 % inhiboiva pitoisuus (IC50, μΜ)

Esimerkin 14 yhdiste < 0,027

Esimerkin 15 yhdiste 0,31

Esimerkin 17 yhdiste 0,044

Esimerkin 22 yhdiste 0,11 5 Esimerkin 23 yhdiste < 0,025

Esimerkin 24 yhdiste 0,001

Esimerkin 25 yhdiste 0,048

Esimerkin 27 yhdiste 0,027

Esimerkin 28 yhdiste < 0,029 10 Esimerkin 29 yhdiste 0,005

Esimerkin 30 yhdiste 0,003

Esimerkin 31 yhdiste 0,011

Esimerkin 33 yhdiste 0,11

Esimerkin 34 yhdiste 0,019 15 Esimerkin 35 yhdiste 0,17

Esimerkin 36 yhdiste 0,002

Esimerkin 37 yhdiste 0,095

Kuten edellä olevista farmakologisesta kokeesta 20 nähdään, tämän keksinnön yhdisteet osoittavat erinomaista m'. kasvainten vastaista toimintaa, ja ne ovat käyttökelpoisia kasvainten vastaisena aineena sairauksien hallintaa ja ehkäisemistä varten, erityisesti syöpien hoitoa varten. Kun tämän keksinnön yhdistettä käytetään tällaisissa käytöis-25 sä, se yleensä formuloidaan farmaseuttiseksi valmisteeksi, 23 106864 joka sisältää vaikuttavan määrän sitä ja farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan tai laimentimen.

Antamismuodoista tämän keksinnön käyttöhetkellä voidaan valita useita muotoja, ja voidaan mainita oraali-5 set aineet, kuten esimerkiksi, tabletti, kapselit, jauheet, rakeet tai nesteet, tai steriloidut nestemäiset pa-renteraaliset aineet, kuten esimerkiksi liuokset tai suspensiot, tai peräpuikot, voiteet, tai niiden kaltaiset.

Kiinteitä valmisteita voidaan valmistaa, kuten ne 10 ovat, tablettien, kapselien, rakeiden tai jauheiden muodossa, tai niitä voidaan valmistaa myös käyttäen sopivia lisäaineita. Tällaisia lisäaineita voivat olla lisäaineet, joita yleensä käytetään, ja ne sisältävät sakkarideja, kuten esimerkiksi laktoosi ja glukoosi; tärkkelyksiä, ku-15 ten esimerkiksi, maissi, vehnä ja riisi; rasvahappoja, kuten esimerkiksi steariinihappo; epäorgaanisia suoloja, kuten esimerkiksi magnesiummetasilikaattialuminaatti ja vedetön kalsiumfosfaatti; syntetisoituja makromolekyylejä, kuten esimerkiksi polyvinyylipyrrolidoni ja polyalky-20 leeniglykoli; rasvahapposuoloja, kuten esimerkiksi kal-siumstearaatti ja magnesiumstearaatti; alkoholeja, kuten esimerkiksi stearyylialkoholi ja bentsyylialkoholi; syntetisoituja selluloosajohdannaisia kuten esimerkiksi metyy-liselluloosa, karboksimetyyliselluloosa, etyyliselluloosa 25 ja hydroksipropyylimetyyliselluloosa; ja vielä gelatiinia, • * - ..

talkkia, kasvisöljyjä, arabikumia jne.

Kiinteät valmisteet, kuten nämä tabletit, kapselit, rakeet ja jauheet, sisältävät vaikuttavaa ainesosaa yleensä 0,1 - 100 paino-%, edullisesti 5 - 100 paino-%.

30 Nestemäiset valmisteet valmistetaan sellaisissa *· muodoissa, kuten suspensioina, siirappimaisina aineina, injektioina tai tippoina käyttäen sopivia lisäaineita, joita yleensä käytetään nestemäisissä valmisteissa, kuten vettä, alkoholeja tai öljyjä, jotka ovat peräisin kasvik 24 106864 sista, kuten esimerkiksi soijaöljy, maapähkinäöljy ja see-samiöljy.

Erityisesti, sopivia liuottimia parenteraalisen antamisen tapauksessa lihasruiskeen, laskimoruiskeen tai 5 ihonalaisen ruiskeen muodossa ovat esimerkiksi tislattu vesi injektiota varten, vesipitoiset lidokaiinivetyklori-di-liuokset (lihaksensisäistä ruisketta varten), fysiologinen suolaliuos, vesipitoinen glukoosiliuos, etanoli, polyetyleeniglykoli, nesteet laskimonsisäistä ruisketta 10 varten (esim. vesipitoiset sitruunahappoliuokset ja nat-riumsitraatti jne.), elektrolyyttiliuokset (laskimonsisäistä tiputusta ja ruisketta varten) jne., ja niiden sekoitetut liuottimet.

Nämä injektiot voivat olla muodoissa, joissa itse 15 jauhe tai joihin on lisätty sopivia lisäaineita, liuotetaan käyttöhetkellä, sellaisten muotojen lisäksi, joissa ainesosat liuotetaan etukäteen. Tällainen ruiske sisältää yleensä 0,1 - 10 paino-%, edullisesti 1-5 paino-% vaikuttavaa ainesosaa.

20 Lisäksi, suspensio, siirappimainen aine tai niiden kaltainen nestemäinen aine oraalista antamista varten, voi yleensä sisältää 0,5 - 10 paino-% vaikuttavaa ainesosaa.

Tämän keksinnön yhdisteiden edullinen annos voi vaihdella käytetyn yhdisteen laadun, sekoitetun koostumuk-25 sen käyttötaajuuden, määritetyn hoitokohdan, sairauksien asteen, potilaiden iän, lääkärien diagnoosin, kasvaimen laadun jne. mukaan, mutta arvioituna standardina, annos vuorokaudessa aikuista kohti voi, esimerkiksi olla alueella 10 - 500 mg oraalisen antamisen tapauksessa, ja alueel-30 la 10 - 100 mg parenteraalisen antamisen tapauksessa, t edullisesti laskimonsisäisenä ruiskeena. Antamistaajuus vaihtelee riippuen antamismenetelmistä ja oireista, mutta on 1 - 5 kertaa vuorokaudessa. Lisäksi, voi olla myös omaksuttuja antamismenetelmiä, kuten ajottainen antaminen, 25 106864 esim. joka toinen päivä antaminen tai joka kolmas päivä antaminen.

Tämä keksintö kuvataan tarkemmin alla olevissa esimerkeissä, mutta se ei rajoitu näihin esimerkkeihin.

5 Esimerkki A

Yhdiste, joka esitetään kaavalla o °=^ N=o 10 ψ*

OH

15 3,4 g 12,13-dihydro-l,ll-dihydroksi-13-(B-D-gluko- pyranosyyl i) - 5H- indolo [ 2,3-a ] pyrrolo [3,4-c]karbatsoii-5,7-(6H)-dionia liuotettiin 120 ml:aan 10-%:ista kaliumhydrok-sidin vesiliuosta, ja liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Reaktioliuos neutraloitiin lisäämällä 20 120 ml 2 N kloorivetyhappoa, ja saostuneet punaiset kiteet suodatettiin, pestiin vedellä ja kuivattiin, jolloin saatiin 3,0 g otsikon yhdistettä.

FAB-MS(m/z): 520 (M) + , 521 (M+H)* ^-NMR (400 MHz, DMSO-d6), δ (ppm): 3,42 (1H, m), 3,56 -25 3,70 (2H, m), 3,76 (1H, m), 3,95 - 4,10 (2H, m), 4,95 (1H, d, J = 4,6 Hz), 5,24 (1H, d, J = 5,4 Hz), 5,32 (1H, dd, J = 4,9, 5,1 Hz), 7,06 (2H, dd, J = 7,6, 7,8 Hz), 7,09 (1H, d, J - 8,0 Hz), 7,20 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,40 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,36 (1H, d, J = 7,6 Hz), 8,51 (1H, d, J = . 30 7,6 Hz), 10,13 (lH,s), 10,52 (lH,s), 11,11 (lH,s).

i m r <

Esimerkki B

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 26 106864 °=/N=° ci J ce

ffoH

10 och3 50 mg rebekkamysiiniä liuotettiin 5 ml:aan N,N-di-metyyliformamidia, 5 ml 2 N vesipitoista natriumhydroksi-diliuosta lisättiin, ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa 3 tuntia. 60 ml vettä lisättiin reaktioliuokseen, seos jääh-15 dytettiin jäällä, ja saostunut keltainen sakka otettiin talteen suodattamalla. Tällä suoritettiin pylväskromato-grafia silikageelillä (sisähalkaisija 1,5 cm, pituus 45 cm), pylväs pestiin kloroformilla, eluointi suoritettiin kloroformi-tetrahydrofuraanilla (10:1), ja fraktio, 20 joka sisälsi haluttua tuotetta väkevöitiin kuiviin. Saatu keltainen jauhe pestiin kloroformilla, jolloin saatiin 6,4 mg otsikon yhdistettä.

Rf-arvo: 0,51 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254 , kehitysliuotin; kloroformi:metanoli: tetrahydrofuraa-·· 25 ni :etikkahappo = 10:1:1:0,2) FAB-MS(m/z): 571 [M+H]+ 1H-NMR (300 MHz, DMS0-d6), δ (ppm): 10,9 (1H, s), 9,07 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,92 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,78 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,53 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,50 (1H, d, J = 7,8 30 Hz), 7,03 (1H, d, J = 8,9 Hz), 3,96 (2H,m), 3,87 (1H, m), .* . 3,61 (3H, s), 3,54 - 3,73 (3H, m).

• ·

Esimerkki 1

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 27 106864 nh2 jl a)

"°*iL

10 h°/^°

OH

3,51 g 12,13-dihydro-l,ll-dihydroksi-l3-(S-D-gluko-pyranosyyli )-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbatsoli-5, 7-(6H)-dionia liuotettiin 8 ml:aan hydratsiinihydraattia 15 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)/ ja reaktio suoritettiin huoneenlämpötilassa 2 tunnin ajan. Reaktion jälkeen, 180 ml puhdistettua vettä lisättiin, liuoksen pH säädettiin arvoon 5,0 väkevällä kloorivetyhapolla, seosta jäähdytettiin riittävästi jäällä, ja saatu sakka otettiin 20 talteen suodattamalla, pestiin puhtaalla vedellä ja kuivattiin käyttäen alipainetta, jolloin saatiin 3,51 g otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (1). (saanto: 97 %) FAB-MS(m/z): 535 (M+H)* 25 1H-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6 (ppm): 10,9 (1H, leveä s), 10,4 (1H, s), 10,0 (1H, s), 8,72 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,54 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,19 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,19 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,05 (1H, d, J = 9,3 Hz), 7,02 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,00 (1H, d, J = 7,8 Hz), 5,42 (1H, leveä d, J = J - 30 5,8 Hz), 5,35 (1H, leveä s), 5,22 (1H, leveä d, J = 4,4 . Hz), 4,96 (2H, leveä s), 4,91 (1H, leveä d, J = 5,3 Hz), 4,01 (2H, m), 3,73 (1H, m), 3,63 (2H, m), 3,39 (1H, m).

♦

Esimerkki 2

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 28 106864

N = CH - COOH

(2)

OH

3,47 g esimerkissä 1 saatua yhdistettä liuotettiin 20 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia (DMF), kun liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa, 20 ml 100 mg/ml glyoksyy-15 lihappoliuosta (Sigma Co.) lisättiin erittäin, ja näin muodostui sakka ja kiinteytyi geelinkaltaiseen tilaan. Lisäksi, lisättiin 200 ml puhdasta vettä, reaktioliuos jäähdytettiin jäällä, ja saatu sakka otettiin talteen suodattamalla, pestiin puhtaalla vedellä ja kuivattiin käyt-20 täen alipainetta, jolloin saatiin 3,85 g otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (2). (Saanto: 100 %) FAB-MS (m/z): 591 (M+H)* 1H-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6 (ppm): 11,1 (1H, leveä s), 10,5 (1H, leveä s), 10,1 (1H, leveä s), 9,01 (1H, s), 8,69 ..I 25 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,53 (1H, d, 3 = 7,8 Hz), 7,23 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,10 (1H, d, J = 9,3 Hz), 7,06 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,04 (1H, d, J = 7,8 Hz), 5,44 (1H, leveä s), 5,34 (1H, leveä s), 5,24 (1H, leveä s), 4,95 (1H, leveä d, J = 5,9 Hz), 4,02 (2H, m), 3,76 (1H, m), 3,64 (2H, m), 30 3,40 (1H, m).

• ( ·<

Esimerkki 3

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 29 106864

N = CH - OfeCH - COOH

f!l f®

Xpn.

10 ho^h

OH

24 mg esimerkissä 1 saatua yhdistettä liuotettiin 0,5 ml:aan Ν,Ν-dimetyyliformamidia (DMF), kun liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa, 0,2 ml 15-%lista suk-15 kiinisemialdehydiä (Aldrich Chemical Co. ) lisättiin, ja tunti myöhemmin, 5 ml puhdistettua vettä lisättiin. Reaktion jälkeen liuos jäähdytettiin jäällä, ja saatu sakka otettiin talteen suodattamalla, pestiin puhdistetulla vedellä ja kuivattiin käyttäen alipainetta, jolloin saatiin 20 25,3 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (3).

(Saanto: 91 %) FAB-MS (m/z): 619 (M+H)+ 1H-NMR (400 MHz, DMS0-d6), δ (ppm): 12,1 (1H, leveä s), 11,0 (1H, leveä s), 10,4 (1H, leveä s), 10,0 (1H, leveä ·' 25 s), 8,69 (1H, leveä s), 8,68 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,51 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,19 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,07 (1H, d, J = 9,3 Hz), 7,04 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,01 (1H, d, J = 7,8 Hz), 5,43 (1H, leveä d, J = 5,4 Hz), 5,33 (1H, leveä s), 5,22 (1H, leveä s), 4,93 (1H, leveä d, J = 4,9 Hz), 30 4,01 (2H, m), 3,74 (1H, m), 3,63 (2H, m), 3,40 (1H, m).

Esimerkki 4

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 30 106864 NHj

N

(4)

| ^OH

10 HO

OCHj 511 mg rebekkamysiiniä [yhdiste on kuvattu julkaisussa J. Antibiotics Ml, 668 - 678 (1987)] liuotettiin 3 ml:aan hydratsiinihydraattia (Wako Pure Chemical Indust-15 ries, Ltd.), ja liuoksen annettiin seistä huoneenlämpötilassa yksi tunti. Lisättiin 200 ml puhdistettua vettä, ja saatu sakka otettiin talteen suodattamalla, pestiin 100 ml:lla puhdistettua vettä ja kuivattiin käyttäen alipainetta, jolloin saatiin 497 mg otsikon 6-N-aminorebekka-20 mysiiniä, joka esitetään kaavalla (4). (Saanto: 95 %) FAB-MS (m/z): 585 (M+H)* 1H-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 10,64 (1H, leveä s), 9,24 (1H, d, J = 7,8 Hz), 9,07 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,70 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,45 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,42 (1H, 25 d, J = 7,8 Hz), 6,93 (1H, d, J = 8,8 Hz), 5,42 (1H, d, J = 5,8 Hz), 5,33 (1H, t, J = 5,4 Hz), 5,03 (3H, leveä s), 3,97 (2H, m), 3,84 (1H, m), 3,59 (3H, s), 3,50 ~ 3,70 (3H, m).

3i 106864

Esimerkki 5

Yhdiste, joka esitetään kaavalla

NH-CHO

°<s=° (5)

OH

[Menetelmä A] 5 g esimerkissä 1 saatua yhdistettä liuotettiin 60 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 1,8 ml väkevää kloorivety-15 happoa lisättiin, seosta kuumennettiin 60 °C:ssa 4 tuntia, lisättiin vielä 0,8 ml väkevää kloorivetyhappoa, ja seosta lämmitettiin 37 °C:ssa 16 tuntia. Tämä sekoitettiin 1 l:n kanssa etyyliasetaattia, seos pestiin peräkkäin 2 %:lla natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja vedellä, ja sitten 20 etyyliasetaattikerros dehydratoitiin vedettömällä natrium-sulfaatilla ja väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 3,3 g oranssia jauhetta. Tämä liuotettiin metanoliin, ja suoritettiin pylväskromatografia Sephadex LH 20:11a (sisähal-kaisija 3 cm, pituus 54 cm, eluointi metanolilla), ja 25 fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 2413,6 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (5) oranssina jauheena.

[Menetelmä B] 25,9 mg esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin 30 0,5 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 15,0 mg formohydratsi- dia lisättiin ja seosta sekoitettiin 70 °C:ssa 2 tuntia. • ·. * Tämä sekoitettiin 70 ml:n kanssa etyyliasetaattia ja seos pestiin vedellä (20 ml). Etyyliasetaattikerros dehydratoitiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja väkevöitiin kui-35 viin, jolloin saatiin 26,9 mg oranssia jauhetta. Tämä • · 32 106864 liuotettiin metanoliin, ja suoritettiin pylväskromatogra-fia Sephadex LH 20:11a (sisähalkaisija 1,5 cm, pituus 48 cm, eluointi metanolilla), ja fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saa-5 tiin 16,3 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (5) oranssina jauheena.

Rf-arvo: 0,35 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi-metanoli-tetrahydrofuraani = 2:1:1).

10 FAB-MS (m/z): 562 (M)* 1H-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 11,0 (1H, leveä s), 10,8 (1H, s), 10,4 (1H, s), 10,0 (1H, s), 8,64 (1H, d, J = 8,3 Hz), 8,47 (1H, d, J « 8,3 Hz), 8,44 (1H, s), 7,21 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,06 (1H, d, J = 9,7 Hz), 7,05 (1H, d, J = 15 7,8 Hz), 7,02 (1H, d, J = 7,8 Hz), 5,43 (1H, d, J = 5,8

Hz), 5,36 (1H, leveä s), 5,22 (1H, d, J = 5,4 Hz), 4,92 (1H, d, J = 5,4 Hz), 4,02 (2H, m), 3,75 (1H, m), 3,62 (2H, m), 3,39 (1H, m).

Esimerkki 6 20 Yhdiste, joka esitetään kaavalla NH-COCH3 N =

yL H

H0

OH

30 30 ml etikkahappoa ja 2 ml etikkahappoanhydridiä .. lisättiin 510 mg:aan esimerkissä 1 saatua yhdistettä ja yhdiste liuotettiin siihen kuumentaen 90 eC:ssa. Siihen lisättiin vettä, jolloin seosta oli 300 ml, ja reaktiotuote adsorboitiin Diaion HP 20 -pylvääseen (sisähal- 35 kaisija 3 cm, pituus 13,5 cm) ja kun pylväs oli pesty 600 > · 33 106864 ml:11a vettä, eluoitiln 300 ml:11a metanolia. Metanolielu-aatti väkevöitiin kuiviin, jäännös liuotettiin 50 ml:aan metanolia, ja liuos väkevöitiin noin 5 ml:aan. Siihen lisättiin 100 ml etyyliasetaattia, seoksen annettiin seistä 5 yön yli 4 °C:ssa, ja saatu oranssi sakka otettiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 426 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (6).

Rf-arvo: 0,43 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi-metanoli-tetrahydrofuraa-10 ni = 2:1:1).

FAB-MS (m/z): 576 (M)+ ^-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 11,0 (1H, s), 10,7 (1H, s), 10,4 (1H, leveä s), 10,05 (1H, s), 8,64 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,47 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,20 (2H, t, J = 7,8 15 Hz), 7,01 - 7,06 (3H, m), 5,35 - 5,45 (2H, m), 5,23 (1H, leveä s), 4,92 (1H, leveä s), 4,02 (2H, m), 3,74 (1H, m), 3,58 - 3,70 (2H, m), 3,40 (1H, m), 2,10 (3H, s).

Esimerkki 7

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 20 nh-ch3 ί (7)

Vr 25 |"| ”1

OH

72,5 mg esimerkissä 1 saatua yhdistettä liuotettiin 30 seokseen, jonka muodostivat 8 ml tetrahydrofuraania ja 5 ml metanolia, lisättiin 140 μΐ 2 N kloorivetyhappoa ja 13,2 μΐ 37-%:ista formaldehydin vesiliuosta, ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tuntia ja väkevöitiin kuiviin. Tämä liuotettiin 5 ml:aan N,N-dimetyyliformami-35 dia, 80 mg 10-%:ista palladiumia-hiilellä, ja seos altis- 9 9 34 106864 tettiin pelkistykselle käyttäen vetykaasua huoneenlämpötilassa 2 tuntia ja suodatettiin sitten Celitellä. Lisättiin 80 ml etyyliasetaattia saatuun suodokseen, seos pestiin peräkkäin 2 %:isella natriumbikarbonaatin vesiliuoksella 5 ja vedellä, ja sitten saatu etyyliasetaattikerros dehydra-toitiin ja väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 28,8 mg oranssia jauhetta. Tämä liuotettiin pieneen määrään me-tanolia ja liuoksella suoritettiin pylväskromatografia Sephadex LH-20:lla (sisähalkaisija 1,5 cm, pituus 90 cm, 10 eluointi metanolilla), jolloin saatiin 17,1 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (7) oranssina jauheena.

Rf-arvo: 0,49 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi-metanoli-tetrahydrofuraani-etikkahappo = 20:10:10:1).

15 FAB-MS (m/z): 549 (M+H)* 1H-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6 (ppm): 10,9 (1H, s), 10,4 (1H, s), 9,98 (1H, s), 8,72 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,54 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,19 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,00 - 7,06 (3H, m), 5,73 (1H, q, J = 5,4 Hz), 5,43 (1H, d, J = 5,7 Hz), 20 5,35 (1H, leveä s), 5,22 (1H, d, J = 5,4 Hz), 4,90 (1H, d, J = 5,4 Hz), 3,96 - 4,03 (2H, m), 3,74 (1H, m), 3,58 - 3,70 (2H, m), 3,40 (1H, m), 2,74 (3H, d, J = 5,4 Hz).

Esimerkki 8

Yhdiste, joka esitetään kaavalla .* . 25 nhch2cooh

N

N=o 30 Y] hi''']

HO sf OH

OH

500 mg esimerkissä 2 saatua yhdistettä liuotettiin 35 6 ml:aan Ν,Ν-dimetyyliformamidia (DMF), 75 mg 10~%:ista « 106864 35 palladiumia-hiilellä (Pd-C) lisättiin, ja hydraus suoritettiin huoneenlämpötilassa 3,5 tuntia sekoittaen. Reak-tioseos suodatettiin käyttäen suodatinpaperia, jolle levitettiin piimaata poistamaan Pd-C, ja 150 ml vettä lisät-5 tiin suodokseen. Seos säädettiin pH-arvoon 5 1 N NaOH:lla, ja uutettiin sitten etyyliasetaatilla (200 ml x 5). Etyy-liasetaattikerros väkevöitiin, ja saostuneet kiteet otettiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 182,3 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (8).

10 FAB-MS (m/z): 593 (M+H) + 1H-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6 (ppm): 12,6 (1H, leveä s), 10.9 (1H, s), 10,4 (1H, s), 10,0 (1H, s), 8,69 (1H, d, J = 8,3 Hz), 8,52 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,18 (2H, t, J = 7,8 Hz), 6,99 ~ 7,05 (3H, m), 5,90 (1H, leveä s), 5,42 (1H, d, 15 J = 5,4 Hz), 5,35 (1H, t, J = 5,4 Hz), 5,21 (1H, d, J = 4.9 Hz), 4,89 (1H, d, J = 5,4 Hz), 4,03 (2H, m), 3,83 (2H, s), 3,74 (1H, m), 3,63 (2H, m), 3,39 (1H, m).

Esimerkki 9

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 20 nhconh2

N

o=S y=o (9)

·· 25 jfj HL

OH

30 ml metanolia lisättiin 501,7 mg:aan esimerkissä 30 A saatua yhdistettä ja 501,7 mg:aan semikarbatsidihydro-kloridia, sitten lisättiin 0,325 ml trietyyliamiinia, ja seosta palautusjäähdytettiin kuumentaen 8 tuntia. Reaktion jälkeen, reaktioliuos väkevöitiin kuiviin, 300 ml metyy-lietyyliketonia (MEK) ja 200 ml vettä lisättiin, uutto-35 operaatio toteutettiin, ja vielä 300 ml MEK:iä lisättiin « 36 106864 vesikerrokseen, jolloin suoritettiin uudelleenuutto. MEK-kerrokset yhdistettiin ja väkevöitiin kuiviin, 300 ml me-tanolia lisättiin jäännökseen liuottamaan se, liuos vietiin Sephadex LH-20 kromatografiapylvääseen (3 x 28 cm), 5 ja eluointi suoritettiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 461 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (9) punaisena kiteisen kaltaisena jauheena.

Rf-arvo: 0,15 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 10 60F254, kehitysliuotin; kloroformirmetanoli:tetrahydrofuraa ni = 2:1:1).

FAB-MS (m/z): 577 (M)* ^-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 11,0 (1H, s), 10,4 (1H, s), 10,0 (1H,s), 8,68 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,66 (1H, leveä 15 s), 8,51 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,20 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,01 ~ 7,07 (3H, m), 6,41 (2H, leveä s), 5,44 (1H, d, J = 5,4 Hz), 5,38 (1H, leveä s), 5,23 (1H, d, J = 4,9 Hz), 4,91 (1H, leveä s), 4,00 ~ 4,09 (2H, m), 3,75 (1H, m), 3,60 ~ 3,68 (2H, m), 3,39 (1H, m).

20 Esimerkki 10

Yhdiste, joka esitetään kaavalla nhcsnh2

N

N=o 25 ^-s

OH

4 ml metanolia lisättiin 22 mg:aan esimerkissä A saatua yhdistettä ja 20 mg:aan tiosemikarbatsidia, ja seosta palautusjäähdytettiin kuumentaen 22 tuntia. Reak-tioliuos väkevöitiin kuiviin, jäännös liuotettiin 4 ml:aan 35 metanolia, liuos vietiin Sephadex LH-20 kromatografiapyl- -·« * « > i 3-1 106864 vääseen (1,8 x 35 cm), ja eluointi suoritettiin metanolil-la. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöi-tiin kuiviin, jolloin saatiin 10,7 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (10).

5 Rf-arvo: 0,29 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi:metanoli:tetrahydrofuraa-ni = 2:1:1).

FAB-MS (m/z): 594 (M+H)* ^-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 11,0 (1H, s), 10,4 (1H, 10 leveä s), 10,1 (1H, leveä s), 9,73 (1H, leveä s), 8,65 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,49 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,27 (2H, S), 7,21 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,01 - 7,12 (3H, m), 5,45 (1H, leveä s), 5,37 (1H, leveä s), 5,24 (1H, leveä s), 4,91 (1H, leveä s), 3,97 ~ 4,10 (2H, m), 3,74 (1H, m), 15 3,62 (2H, m), 3,40 (1H, m).

Esimerkki 11

Yhdiste, joka esitetään kaavalla nhso2ch3 i 20 °<>0 (οζ^θ6) (u) " "

OH

9,5 mg esimerkissä 1 saatua yhdistettä liuotettiin 2 ml:aan tetrahydrofuraania (THF), liuokseen lisättiin 30 mg metaanisulfonihappoanhydridiä (Aldrich Chemical 30 Co.), ja seoksen annettiin seistä huoneenlämpötilassa 48 tuntia. Reaktioliuos väkevöitiin kuiviin, ja jäännös liuotettiin 2 ml:aan metanolia, vietiin Sephadex LH-20 kromatografiapylvääseen (1,8 x 34 cm), ja eluoitiin meta-nolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, W Ψ ♦ 38 106864 väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 8,3 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (11).

Rf-arvo: 0,48 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi:metanoli:tetrahydrofuraa-5 ni = 2:1:1).

FAB-MS (m/z): 612 (M)*

Hl-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 11,0 (1H, s), 10,5 (1H, leveä s), 10,4 (1H, s), 10,1 (1H, s), 8,67 (1H, d, J = 7,9 Hz), 8,50 (1H, d, J = 7,7 Hz), 7,22 (2H, t, J = 7,6 Hz), 10 7,02 ~ 7,07 (3H, m), 5,43 (1H, d, J = 5,8 Hz), 5,36 (1H, leveä s), 5,22 (1H, d, J = 5,2 Hz), 4,89 (1H, d, J = 4,8 Hz), 4,03 (2H, m), 3,75 (1H, m), 3,63 (2H, m), 3,40 (1H, m).

Esimerkki 12 15 Yhdiste, joka esitetään kaavalla nhcoch2ch3 20 (12)

OH

* 25 1 ml metanolia ja 2 ml tetrahydrofuraania lisättiin 11,7 mg:aan esimerkissä 1 saatuaa yhdistettä, jolloin muodostui liuos, 0,1 ml propionihappoanhydridiä (Aldrich Chemical Co.) lisättiin, ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 4 tuntia. 2 ml vettä ja 3 ml metanolia lisät-30 tiin reaktioliuokseen, seoksen annettiin seistä 30 minuuttia ja väkevöitiin sitten kuiviin, ja 3 ml metanolia lisättiin, jotta muodostuisi liuos. Liuos vietiin Sephadex LH-20 kromatografiapylvääseen (1,8 x 30 cm) ja eluoitiin metanolilla, ja fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuo- 39 1 0 6 8 6 4 tetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 6,2 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (12).

Rf-arvo: 0,55 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi: metanoli: tetrahydrofuraa-5 ni = 2:1:1).

^-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6 (ppm): 11,0 (1H, s), 10,6 (1H, leveä s), 10,4 (1H, leveä s), 10,0 (1H, s), 8,64 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,47 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,20 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,00 ~ 7,08 (3H, m), 5,30 ~ 5,45 (2H, m), 5,21 10 (1H, m), 4,92 (1H, m), 4,02 (2H, m), 3,75 (1H, m), 3,62 (2H, m), 3,38 (1H, m), 2,39 (2H, q, J = 9,3 Hz), 1,16 (3H, t, J = 7,3 Hz).

Esimerkki 13

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 15 NHCOCF, (13)

20 Jl* H

&

OH

9,9 mg esimerkissä 1 saatua yhdistettä liuotettiin - 25 2 ml: aan tetrahydrof uraania, 0,06 ml trifluorietikkahappo- anhydridiä (Aldrich Chemical Co. ) lisättiin, ja seoksen annettiin seistä huoneenlämpötilassa 15 minuuttia. Reak-tioliuokseen lisättiin 2 ml vettä, seos väkevöitiin kuiviin, 2 ml vettä ja 10 ml etyyliasetaattia lisättiin, uut-30 to-operaatio toteutettiin, ja saatu etyyliasetaattikerros väkevöitiin kuiviin. Saatu raaka aine liuotettiin 3 ml:aan metanolia, suoritettiin Sephadex LH-20 pylväskromatografia (1,8 x 30 cm) ja eluoitiin metanolilla, ja fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin ' · « 40 106864 saatiin 9,5 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (13).

Rf-arvo: 0,53 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi:metanoli:tetrahydrofuraa-5 ni = 2:1:1).

FAB-MS (m/z): 630 (M) + *H-NMR (500 MHz, DMS0-d6), δ (ppm): 12,7 (1H, leveä s), 11,0 (1H, leveä s), 10,5 (1H, leveä s), 10,1 (1H, leveä s), 8,61 (1H, d, J = 7,6 Hz), 8,45 (1H, d, J = 7,9 Hz), 10 7,21 (2H, t, J = 7,6 Hz), 7,02 ~ 7,07 (3H, m), 5,42 (1H, d, J = 5,8 Hz), 5,35 (1H, leveä s), 5,21 (1H, leveä s), 4,91 (1H, d, J = 5,5 Hz), 4,02 (2H, m), 3,76 (1H, m), 3,61 (2H, m), 3,39 (1H, m).

Esimerkki 14 15 Yhdiste, joka esitetään kaavalla NHCHjCONH2

N

20 <14)

- - OH

*.25 4 ml metanolia ja 4 ml bentseeniä lisättiin 31,6 mgtaan esimerkissä 8 saatua yhdistettä, jolloin saatiin liuos, 0,15 ml trimetyylisilyylidiatsometaania (10-%:inen heksaaniliuos, Tokyo Kasei Co.) lisättiin, ja seoksen an-30 nettiin seistä huoneenlämpötilassa 10 minuuttia ja väke-vöitiin kuiviin, jolloin saatiin 29,3 mg esimerkissä 8 saadun yhdisteen metyyliesteriä. Tämä liuotettiin 5 ml:aan metanolia, 0,6 ml väkevää ammoniakkivettä lisättiin, ja , seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 16 tuntia. Reak- 35 tioliuos väkevöitiin kuiviin, 3 ml metanolia lisättiin > · t 41 106864 jäännökseen, jolloin saatiin liuos, ja liuos vietiin Sep-hadex LH-20 (1,8 x 36 cm) kromatografiapylvääseen ja elu-oitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 16,9 mg 5 otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (14).

Rf-arvo: 0,22 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi:metanoli:tetrahydrofuraa-ni = 2:1:1).

FAB-MS (m/z): 592 (M+H) + 10 ^-NMR (400 MHz, DMS0-d6), δ (ppm): 10,9 (1H, s), 10,4 (1H, leveä s), 10,0 (1H, leveä s), 8,69 (1H, d, J = 7,3 Hz), 8,52 (1H, d, J * 8,3 Hz), 7,77 (1H, leveä s), 7,39 (1H, leveä s), 7,19 (2H, t, J = 7,8 Hz), 6,98 ~ 7,05 (3H, m), 6,25 (1H, t, J = 3,9 Hz), 5,41 (1H, d, J = 5,4 Hz), 5,35 15 (1H, leveä s), 5,20 (1H, d, J = 5,4 Hz), 4,87 (1H, d, J = 5,4 Hz), 4,02 (2H, m), 3,74 (1H, m), 3,68 ~ 3,70 (4H, m), 3,39 (1H, m).

Esimerkki 15 20

N

o=S N=o (Ön^GÖ) 05) 25 J| h'|/

HO OH

T

OH 1 2 3 4 5 6

2 ml metanolia lisättiin 11 mg:aan esimerkissä A

2 ·* saatua yhdistettä ja 10 mg:aan 2-hydratsinopyridiiniä 3 (Aldrich Chemical Co.), jotta saatiin liuos, ja liuosta 4 palautusjäähdytettiin kuumentaen 1,5 tuntia. Reaktioliuos 5 väkevöitiin kuiviin, 30 ml vettä ja 50 ml etyyliasetaattia 6 lisättiin, vesikerros säädettiin pH-arvoon 5 1 N kloorive- 42 106864 tyhapolla, uutto-operaatio toteutettiin, ja saatu etyy-liasetaattikerros väkevöitiin kuiviin. Saatu raaka aine liuotettiin 2 ml:aan metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,8 x 36 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metano-5 lilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 10 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (15).

Rf-arvo: 0,46 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi:metanoli:tetrahydrofuraa-10 ni = 2:1:1).

FAB-MS (m/z): 612 (M+H)* 1H-NMR (400 MHz, DMS0-d6), δ (ppm): 11,0 (1H, s), 10,4 (1H, s), 10,0 (1H, s), 9,34 (1H, s), 8,65 (1H, d, J = 8,3 Hz), 8,48 (1H, d, J - 7,8 Hz), 7,95 (1H, d, J = 4,9 Hz), 7,62 15 (1H, t, J = 7,8 Hz), 7,18 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,00 ~ 7,08 (3H, m), 6,86 (1H, d, J = 7,8 Hz), 6,78 (1H, dd, J = 4,9, 7,8 Hz), 5,44 (1H, d, J = 5,8 Hz), 5,37 (1H, leveä s), 5,23 (1H, d, J = 5,8 Hz), 4,92 (1H, leveä s), 4,02 (2H, m), 3,76 (1H, m), 3,64 (2H, m), 3,41 (1H, m).

20 Esimerkki 16

Yhdiste, joka esitetään kaavalla

NH XO>-C00H

N

25 0=/j>=0 a® yf- ^ 30 ho^h

. OH

4 ml metanolia lisättiin 24 mg:aan esimerkissä A saatua yhdistettä ja 4-hydratsinobentsoehappoa (Aldrich Chemical Co.), ja seosta palautusjäähdytettiin kuumentaen 35 2 tuntia. Reaktioliuos vietiin Sephadex LH-20 (1,8 x 43 106864 44 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 20,9 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (16) punaisena kiteisen kaltaisena jau-5 heena.

Rf-arvo: 0,31 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi:metanoii: tetrahydrofuraani = 2:1:1).

FAB-MS (m/z): 655 (M+H)+ 10 1H-NMR (500 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 11,0 (1H, s), 10,5 (1H, leveä s), 10,1 (1H, leveä s), 9,11 (1H, s), 8,65 (1H, d, J = 7,9 Hz), 8,48 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,80 (2H, d, J = 8,3 Hz), 7,18 (2H, t, J = 7,6 Hz), 7,01 ~ 7,08 (3H, m), 6,84 (2H, d, J = 8,3 Hz), 5,20 ~ 5,60 (3H, leveä s), 4,96 15 (1H, leveä s), 4,03 (2H, m), 3,76 (1H, m), 3,65 (2H, m), 3,41 (1H, m).

Esimerkki 17

Yhdiste, joka esitetään kaavalla NHCOCONHj, 20 0 ^0 (17)

OH

6 ml 50-%:ista metanolia lisättiin 26 mg:aan esi-30 merkissä A saatua yhdistettä ja 38 mg:aan oksaamihydrat- • · ... siinia (Aldrich Chemical Co. ), ja seosta sekoitettiin kuu mentaen 80 °C:ssa 20 tuntia. Reaktioliuos väkevöitiin kuiviin, 15 ml vettä ja 50 ml etyyliasetaattia lisättiin, . seos säädettiin pH-arvoon 2 1 N kloorivetyhapolla, ja uut- 35 to-operaatio toteutettiin. Etyyliasetaattikerros väkevöi- « 106864 tiin ja saostuneet kiteet otettiin talteen suodattamalla, jolloin saatiin 10 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (17).

Rf-arvo: 0,38 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 5 60F254, kehitysliuotin; kloroformi :metanoli: tetrahydrofuraa ni = 2:1:1).

FAB-MS (m/z): 606 (M+H)+ XH-NMR (500 MHz, DMSO-d6), δ (ppm): 11,4 (1H, s), 11,0 (1H, S), 10,4 (1H, s), 10,0 (1H, s), 8,63 (1H, d, J = 7,9 Hz), 10 8,46 (1H, d, J = 7,9 Hz), 8,38 (1H, s), 8,11 (1H, s), 7,21 (2H, t, J = 7,9 Hz), 7,02 ~ 7,07 (3H, m), 5,41 (1H, d, J = 5,8 Hz), 5,35 (1H, t, J = 5,8 Hz), 5,19 (1H, d, J = 5,2 Hz), 4,89 (1H, d, J = 5,5 Hz), 4,03 (2H, m), 3,76 (1H, m), 3,63 (2H, m), 3,40 (1H, m).

15 Esimerkki 18

Yhdiste, joka esitetään kaavalla

NHCOCH2CH2COOH

A

0=^ N=0 20 \_ί (is) yp" 25 H0

OH

26,7 mg esimerkissä 1 saatua yhdistettä ja 5,5 mg:aa sukkiinihappoanhydridiä liuotettiin 0,5 ml:aan pyri-diiniä, ja liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 18 30 tuntia. Tämä väkevöitiin kuiviin käyttäen alipainetta ja * jäännös liuotettiin pieneen määrään N,N-dimetyyliformami- dia ja suoritettiin korkean erotuskyvyn kromatografia (HP-LC) [Chromatolex ODS, 20 x 250 mm, liikkuva faasi: 20-%:inen asetonitriili]. Fraktiot, jtka sisälsivät halut-35 tua tuotetta, väkevöitiin, asetonitriilin poistamiseksi, 45 106864 säädettiin pH arvoon 2 ja uutettiin 100 ml:11a etyyliasetaattia. Etyyliasetaattikerros dehydratoitiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin metanoliin ja suoritettiin Sephadex LH-20 pylväs-5 kromatografia (sisähalkaisija 1,5 cm, pituus 90 cm, elu-ointi «»etanolilla), ja fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 9,7 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (18), oranssina j auheena.

10 HPLC; Rt, 5,3 minuuttia (kolonni: Chromatolex ODS, sisähalkaisija 4,6 mm, pituus 250 mm, detektio; UV 305 nm, virtausnopeus; 1 ml/minuutti, liikkuva faasi; 27,5-%:inen asetonitriili : trifluorietikkahappo = 1000:1).

FAB-MS (m/z): 657 (M+Na)+ 15 ^-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 11,0 (1H, s), 10,7 (1H, leveä s), 10,4 (1H, leveä s), 10,1 (1H, leveä s), 8,64 (1H, d, J = 7,9 Hz), 8,47 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,19 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,01 - 7,07 (3H, m), 5,42 (2H, leveä s), 5,22 (1H, leveä s), 4,92 (1H, leveä s), 4,02 (2H, m), 3,75 20 (1H, m), 3,63 (2H, m), 3,40 (1H, m), 2,65 (2H, t, J * 7,3

Hz), 2,52 (2H, t, J = 7,3 Hz).

Esimerkki 19

Yhdiste, joka esitetään kaavalla N^CH3 25 ,"CH3 (19)

30 HO J OH

-r

OH

30 mg esimerkissä 1 saatua yhdistettä liuotettiin 35 0,5 mlraan N,N-dimetyyliformamidia, 0,1 ml metyylijodidia 46 1 0 6 8 6 4 lisättiin, ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 18 tuntia. Tämä sekoitettiin 50 ml:n kanssa etyyliasetaattia, seos pestiin peräkkäin l-%:isella natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja sitten vedellä, ja etyyliasetaattikerros 5 dehydratoitiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja väkevöi-tiin kuiviin. Jäännös liuotettiin metanoliin ja suoritettiin Sephadex LH-20 (1,5 x 90 cm, eluointi metanolilla) pylväskromatografia, ja fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 18,0 mg 10 otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (19), oranssina jauheena.

Rf-arvo: 0,51 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi:metanoli:tetrahydrofuraani :etikkahappo = 20:10:10:1).

15 FAB-MS (m/z): 563 (M+H )* 1H-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6 (ppm): 10,9 (1H, s), 10,3 (1H, s), 9,95 (lH, s), 8,70 (1H, d, J = 8,3 Hz), 8,53 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,18 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,00 ~ 7,06 (3H, m), 5,41 (1H, d, J = 5,4 Hz), 5,34 (1H, t, J = 5,4 Hz), 20 5,19 (1H, d, J = 5,4 Hz), 4,86 (1H, d, J = 5,4 Hz), 4,02 (2H, m), 3,75 (1H, m), 3,62 (2H, m), 3,39 (1H, m), 3,02 (6H, s).

Esimerkki 20

Yhdiste, joka esitetään kaavalla ” 25 nhcoch2nh2 A o (om^qQ) (20) :: 30 Yj h| Ύ

OH

47 106864 82,1 mg t-butyylioksikarbonyyli-(Boc)-glysiiniä liuotettiin 1 ml:aan metyleenikloridia, liuosta sekoitettiin käyttäen jää-jäähdytystä 15 minuuttia, 96,7 mg disyk-loheksyylikarbodi-imidiä, joka oli liuotettu 1 ml:aan me-5 tyleenikloridia, lisättiin, ja seosta sekoitettiin käyttäen jää-jäähdytystä 15 minuuttia. Tähän lisättiin 227,6 mg esimerkissä 1 saatua yhdistettä, joka oli liuotettu 6 ml:aan pyridiiniä, ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 17 tuntia. Reaktioliuos väkevöitiin kuiviin, 10 jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin, liuos pestiin peräkkäin kylläisellä suolaliuoksella, happamalla vedellä (pH 2) ja sitten vedellä, ja etyyliasetaattikerros dehyd-ratoitiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja väkevöitiin kuiviin. Jäännöksellä suoritettiin silikageelipylväskroma-15 tografia (1,5 x 55 cm, eluointi tolueeni:metanolilla = 6:1), ja fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 105,2 mg otsikon yhdisteen, joka esitetään kaavalla (20), Boc-johdannaista oranssina jauheena. Tämä liuotettiin 1,2 ml:aan trifluori-20 etikkahappoa, ja liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 30 minuuttia, jolloin Boc-ryhmä poistui. Reaktioliuos väkevöitiin kuiviin, jäännös liuotettiin 15 ml:aan vettä, ja liuos säädettiin pH-arvoon 7,5 - 8 ja uutettiin n-butano-lilla. 40 ml vettä lisättiin n-butanolikerrokseen (50 ml), . 25 ja seos säädettiin pH-arvoon 2 laimealla kloorivetyhapolla ja väkevöitiin kuiviin. Saatu oranssi jauhe liuotettiin metanoliin ja suoritettiin Sephadex LH-20 pylväskromato-grafia (1,5 x 38 cm, eluointi metanolilla), ja fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, 30 jolloin saatiin 63,7 mg otsikon yhdisteen, joka esitetään kaavalla (20), hydrokloridia oranssina jauheena.

HPLC; Rt, 8,7 minuuttia (kolonni: Chromatolex ODS, sisähalkaisija 4,6 mm, pituus 250 mm, detektio; UV 305 nm, virtausnopeus; 1 ml/minuutti, liikkuva faasi; 20-%:inen 35 asetonitriili : trifluorietikkahappo = 1000:1 -► 70-%:inen 48 106864 asetonitriili : trifluorietikkahappo = 1000:1, 30 minuutin lineaarinen gradientti).

FAB-MS (m/z): 592 (M+H)+ 1H-NMR (vetykloridi, 400 MHz, DMS0-d6), 6 (ppm): 11,3 (1H, 5 leveä s), 11,0 (1H, leveä s), 10,5 (1H, s), 10,1 (1H, s), 8,62 (1H, d, J = 8,3 Hz), 8,46 (1H, d, J = 8,3 Hz), 8,31 (2H, s), 7,19 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,03 - 7,08 (3H, m), 5,46 (1H, leveä s), 5,34 (1H, leveä s), 5,27 (1H, leveä s), 4,91 (1H, leveä d, J = 4,9 Hz), 4,03 (2H, m), 3,98 10 (2H, s), 3,76 (1H, m), 3,64 (2H, m), 3,40 (1H, m).

Esimerkki 21

Yhdiste, joka esitetään kaavalla

OH OH

ΗΝ/γ^γ^0Η

15 ^ OH OH

o=S N= o e»

OH

40,0 mg esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin 3 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 42,2 mg 1-deoksi-l-hyd-25 ratsino-D-sorbitolia ja 0,1 ml trietyyliamiinia lisättiin, ja seosta palautusjäähdytettiin kuumentaen 16 tuntia. Tämä tuotiin takaisin huoneenlämpötilaan, vietiin Sephadex LH-20 (1,8 x 20 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin me-tanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, 30 väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 20,0 mg otsikon yh- • · ... distettä, joka esitetään kaavalla (21).

FAB-MS (m/z): 699 (M+H)+ 1H-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 10,91 (1H, s), 10,35 (1H, leveä s), 9,96 (1H, leveä s), 8,73 (1H, d, J = 8,9 35 Hz), 8,54 (1H, d, J = 8,9 Hz), 7,20 (2H, t, J = 8,4 Hz), 49 106864 7,00 - 7,10 (3H, m), 5,76 (1H, t, J = 3,8 Hz), 5,42 (1H, d, J * 5,5 Hz), 5,37 (1H, leveä s), 5,22 (1H, d, J = 5,5

Hz), 4,89 (1H, leveä s), 4,67 (1H, d, J = 3,4 Hz), 4,45 (1H, d, J * 5,1 Hz), 4,37 (1H, d, J = 7,0 Hz), 4,25 - 4,43 5 (2H, m), 4,00 (2H, m), 3,55 - 3,80 (7H, m), 3,44 - 3,52 (2H, m), 3,35 - 3,44 (2H, m), 3,05 - 3,20 (2H, ra).

Esimerkki 22

Yhdiste, joka esitetään kaavalla

10 X

HN^^NHNH,

N

o=S N=o is |ϋο^ο0| “

Xl ηοΊ&

OH

20 100 mg esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin 5 ml:aan Ν,Ν-dimetyyliformamidia, 100 mg karbohydratsidia lisättiin,, ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa 3 tuntia ja väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin metanoliin ja liukenemattomat aineet poistettiin Celite-suodatuksella.

25 Saatu suodos väkevöitiin, ja jäännös liuotettiin pieneen määrään metanolia, vietiin Sephadex LH-20 kromatografia-pylvääseen (1,5 x 20 cm) ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 91,2 mg otsikon yhdistettä, joka 30 esitetään kaavalla (22).

• · ... Rf-arvo: 0,1 (vvalmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi-metanoli-tetrahydrofuraani = 2:1:1).

FAB-MS (m/z): 593 (M+H)* 50 106864 XH-NMR (400 MHz, DMSO-d6), 6(ppm): 10,96 (1H, s), 10,40 (1H, s), 10,01 (1H, s), 8,95 (1H, s), 8,65 (1H, d, J = 8,2 Hz), 8,50 (1H, d, J = 8,2 Hz), 7,90 (1H, s), 7,17 (2H, t, J = 6,9 Hz), 7,00 - 7,10 (3H, m), 5,43 (1H, d, J = 4,1 5 Hz), 5,38 (1H, leveä s), 5,20 (1H, s), 4,90 (1H, s), 4,39 (2H, leveä s), 4,04 (2H, m), 3,75 (1H, m), 3,55 - 3,70 (2H, m), 3,38 (1H, m).

Esimerkki 23

Yhdiste, joka esitetään kaavalla rw N=o 15 ίϋΐ^ΟΟ) · <23)

OH

20 15,0 mg esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin 1 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 32 mg 3-hydroksibentsyy-lihydratsiinidihydrokloridia ja 0,1 ml 10-%:ista natriumbikarbonaatin vesiliuosta lisättiin, ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa 4 tuntia. Tämä sekoitettiin 50 ml:n kanssa • - 25 etyyliasetaattia, seos pestiin peräkkäin 0,2 N kloorivety- hapolla ja sitten kylläisellä suolaliuoksella, ja etyy-liasetaattikerros dehydratoitiin vedettömällä natriumsul-faatilla ja väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin pieneen määrään metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,8 x 30 15 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metanolilla.

. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 15,3 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (23).

51 106864

Rf-arvo: 0,22 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi-metanoli-tetrahydrofuraani = 5:1:1).

FAB-MS (m/z): 641 (M+H)* 5 ^-NMR (200 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 10,90 (1H, s), 10,38 (1H, s), 9,99 (1H, s), 9,30 (1H, s), 8,70 (1H, d, J = 8,1 Hz), 8,53 (1H, d, J = 8,5 Hz), 6,86 - 7,22 (8H, m), 6,61 (1H, dd, J = 2,2, 8,4 Hz), 6,03 (1H, t, J = 5,1 Hz), 5,43 (1H, d, J = 5,4 Hz), 5,35 (1H, t, J = 5,0 Hz), 10 5,22 (1H, d, J = 5,4 Hz), 4,89 (1H, d, J = 5,4 Hz), 4,19 (2H, d, J = 5,1 Hz), 4,00 (2H, m), 3,72 (1H, m), 3,53 -3,70 (2H, m), 3,38 (1H, m).

Esimerkki 24

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 15

„__/CN

N = 20 C4)

H° J H ÄH

4r

OH

‘V 25 64,6 mg esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin 2 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 30 mg 2-syanoetyylihyd-ratsiinia, ja seosta sekoitettiin 90 °C:ssa 1,5 tuntia. 50 ml 0,2 N kloorivetyhappoa lisättiin reaktioliuokseen, ja seos uutettiin etyyliasetaatilla (50 ml x 2). Etyy-30 liasetaattikerros väkevöitiin kuiviin, ja jäännös liuotettiin pieneen määrään metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,8 x 30 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metano-lilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 45,0 mg otsikon yhdistet-35 tä, joka esitetään kaavalla (24).

52 106864

Rf-arvo: 0,39 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi: met anoi i = 3:1).

FAB-MS (m/z): 588 (M+H)+ ^i-NMR (200 MHz, DMS0-d6), 6 (ppm): 10,91 (1H, s), 10,36 5 (1H, s), 9,98 (1H, s), 8,70 (1H, d, J = 8,4 Hz), 8,53 (1H, d, J = 8,4 Hz), 7,18 (2H, t, J = 8,4 Hz), 6,95 - 7,10 (3H, m), 6,15 (1H, t, J = 4,2 Hz), 5,42 (1H, d, J = 5,7 Hz), 5,34 (1H, leveä s), 5,23 (1H, d, J = 4,4 Hz), 4,91 (1H, d, J = 5,3 Hz), 4,00 (2H, m), 3,72 (1H, m), 3,55 - 3,70 (2H, 10 m), 3,39 (1H, m), 3,30 (2H, t d, J = 4,2, 6,2 Hz), 2,69 (2H, t, J = 6,2 Hz).

Esimerkki 25

Yhdiste, joka esitetään kaavalla N—v 15 Jf)

HN

l h · hc e

Ns.

(cDO^nö) (25> 20

H0 d H °H

OH

*·· 25 1,09 g esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin 35 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia - 2 ml vettä, 455 mg 2-hydratsino-2-imidatsoliinihydrobromidia ja 211 mg natriumbikarbonaattia lisättiin, ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa 2 tuntia ja väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 300 30 ml:aan 0,2 N kloorivetyhappoa ja uutettiin n-butanolilla » “ (11x2). Butanoiikerros väkevöitiin kuiviin, ja jäännös liuotettiin pieneen määrään metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (3,0 x 80 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, 53 106864 väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 650 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (25).

Rf-arvo: 0,55 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; n-butanoli:etikkahappo:vesi = 5 4:1:1).

FAB-MS (m/z): 603 (M+H)+ ^-NMR (400 MHz, DMS0-d6), δ (ppm): 11,2 (1H, s), 10,90 (1H, leveä s), 10,50 (1H, s), 10,14 (1H, s), 9,42 (1H, leveä s) 8,92 (1H, leveä s), 8,62 (1H, d, J = 10,6 Hz), 10 8,45 (1H, d, J - 9,5 Hz), 7,22 (2H, t, J = 6,5 Hz), 7,02 - 7,10 (3H, m), 5,48 (1H, d, J = 4,7 Hz), 5,32 (2H, leveä m), 4,94 (1H, d, J = 3,5 Hz), 4,04 (2H, m), 3,70 - 3,90 (5H, m), 3,54 - 3,70 (2H, m), 3,41 (1H, m).

Esimerkki 26 15 Yhdiste, joka esitetään kaavalla

OH

S

Λ 20 *sl = (26)

·' 25 HO yj OH

OH

48,3 mg esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin . 30 1 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 14,3 mg l-amino-4-(2- hydroksietyyli)piperatsiinia ja 0,1 ml kylläistä natriumbikarbonaatin vesiliuosta lisättiin, ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa 2 tuntia. Tämä jaettiin 50 ml:n etyyliasetaattia ja 50 ml:n vettä kesken, 5 ml 0,2 N kloorive-35 tyhappoa lisättiin vesikerrokseen, ja seos uutettiin n- 54 106864 butanolilla (100 ml x 2). Butanolikerros väkevöitiin kuiviin, ja jäännös liuotettiin pieneen määrään metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,8 x 30 cm) kromatografiapylvää-seen ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät 5 haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 22 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (26).

Rf-arwo: 0,53 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254 , kehitysliuotin; n-butanoli:etikkahappo:vesi 4:1:1).

10 FAB-MS (m/z): 648 (M+H)+ 1H-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 10,92 (1H, s), 10,50 (2H, leveä s), 10,10 (1H, s), 8,66 (1H, d, J = 7,2 Hz), 8,50 (1H, d, J = 8,9 Hz), 7,18 (2H, t, J = 7,2 Hz), 7,02 - 7,12 (3H, m), 5,46 (1H, d, J = 5,6 Hz), 5,25 - 5,40 (3H, 15 leveä m), 4,86 (1H, d, J = 5,6 Hz), 3,95 - 4,20 (4H, m), 3,70 - 3,90 (4H, m), 3,55 - 3,70 (4H, m), 3,20 - 3,50 (6H, m).

Esimerkki 27

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 20 0 HN-^^O--

N

o=^ N=o ·· *5 <27)

HO J OH

4r

OH

30 24 mg esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin .* 0,6 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 10 mg t-butyylikarbat- sinaattihappoa lisättiin, ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa 6 tuntia. Tämä sekoitettiin 50 ml:n kanssa etyyliasetaattia, seos pestiin peräkkäin vedellä (30 ml x 2) ja kylläi-35 sellä suolaliuoksella, ja etyyliasetaattikerros dehydra- 55 1C6864 toitiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 1 ml:aan metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,6 x 20 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua 5 tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 27,2 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (27).

Rf-arvo: 0,42 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi: met ano li = 4:1).

FAB-MS (m/z): 634 (M+H) + 10 ^-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6 (ppm): 10,99 (1H, s), 10,42 (1H, s), 10,02 (1H, s), 9,82 (1H, leveä s), 8,65 (1H, d, J = 7,7 Hz), 8,49 (1H, d, J = 7,7 Hz), 7,18 (2H, t, J = 7,7 Hz), 7,00 - 7,10 (3H, m), 5,42 (1H, leveä s), 5,35 (1H, leveä s), 5,21 (1H, leveä s), 4,90 (1H, leveä s), 15 4,02 (2H, m), 3,72 (1H, m), 3,56 - 3,70 (2H, m), 3,40 (1H, m), 1,50 (9H, s).

Esimerkki 28

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 20 <28)

·· ' 25 HO s) OH

OH

ja yhdiste, joka esitetään kaavalla

N

(6r)2o6) <29>

35 I

HO Sf OH

4r

OH

56 1 0 6 8 6 4 177 mg esimerkissä 1 saatua yhdistettä liuotettiin 6 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 0,68 ml allyylibromidia lisättiin, ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 1 vuorokausi. 200 ml vettä lisättiin seokseen, seos uutet-5 tiin etyyliasetaatilla (200 ml x 3), ja etyyliasetaatti-kerros dehydratoitiin kylläisellä suolaliuoksella ja väke-vöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 3 ml:aan metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (2,5 x 40 cm) kromatografiapylvää-seen ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät 10 haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 42,1 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (28) ja 67,5 mg yhdistettä, joka esitetään kaavalla (29).

Yhdiste, joka esitetään kaavalla (28)

Rf-arvo: 0,68 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 15 60F254, kehitysliuotin; kloroformi:metanoli = 2:1).

FAB-MS (m/z): 575 (Μ+ΗΓ ^-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 10,90 (1H, s), 10,38 (1H, s), 9,98 (1H, s), 8,70 (1H, d, J = 9,0 Hz), 8,52 (1H, d, J = 10,2 Hz), 7,20 (2H, t, J = 7,7 Hz), 6,95 - 7,08 20 (3H, m), 5,92 (2H, m), 5,40 (1H, d, J = 6,4 Hz), 5,32 (1H, m), 5,20 (2H, m), 5,05 (1H, d, J = 11,5 Hz), 4,88 (1H, d, J = 5,8 Hz), 4,00 (2H, m), 3,67 - 3,78 (3H, m), 3,58 - 3,65 (2H, m), 3,35 (1H, m).

Yhdiste, joka esitetään kaavalla (29) ,, " 25 Rf-arvo: 0,75 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitsliuotin; kloroformi: met anoi i = 2:1).

^-NMR (400 MHz, DMS0-d6), δ (ppm): 10,91 (1H, s), 10,40 (1H, leveä s), 10,00 (1H, leveä s), 8,66 (1H, d, J = 9,4

Hz), 8,50 (1H, d, J = 9,4 Hz), 7,18 (2H, t, J = 8,0 Hz), 30 7,00 - 7,10 (3H, m), 5,90 (2H, ddt, J = 6,3, 10,2, 17,0 Hz), 5,42 (1H, d, J = 5,3 Hz), 5,33 (1H, leveä s), 5,23 (2H, d, J = 17,0 Hz), 5,22 (1H, leveä s), 5,04 (2H, d, J = 10,2 Hz), 4,91 (1H, leveä s), 4,02 (2H, m), 3,97 (4H, d, J = 6,3 Hz), 3,70 (1H, m), 3,51 - 3,66 (2H, m), 35 3,35 (1H, m).

57 106864

Esimerkki 29

Yhdiste, joka esitetään kaavalla , <§rrp 0=\ / 0 (m 4r

OH

ja yhdiste, joka esitetään kaavalla

TP

°=S N=o 20 00

HO sf OH

4r

OH

25 20 mg esimerkissä 1 saatua yhdistettä liuotettiin 1 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 0,3 ml bentsyylibromidia lisättiin, ja seosta sekoitettiin yön yli. Tämä sekoitettiin 40 ml:n kanssa etyyliasetaattia, seos pestiin peräkkäin vedellä (30 ml x 2) ja sitten kylläisellä suolaliuok- ,, 30 sella, ja etyyliasetaattikerros dehydratoitiin vedettömäl- » «, lä natriumsulfaatilla ja väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 1 ml:aan metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,6 x 30 cm) kromatogiafiapylvääseen ja eluoitiin me-tanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttuja tuotteita 35 vastaavasti, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 13,2 mg 106864 58 otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (30) ja 7,2 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (31).

Yhdiste, joka esitetään kaavalla (30)

Rf-arvo: 0,44 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 5 60F254, kehitysliuotin; kloroformi:metanoli = 3:1.

FAB-MS (m/z): 715 (M+H)+ 1H-NMR (200 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 10,85 (1H, s), 10,35 (1H, s), 9,96 (1H, s), 8,65 (1H, d, J = 8,5 Hz), 8,45 (1H, d, J = 9,0 Hz), 7,50 - 7,65 (4H, m), 7,10 - 7,40 (8H, m), 10 6,95 - 7,10 (3H, m), 5,40 (1H, d, J = 5,4 Hz), 5,30 (1H, leveä s), 5,18 (1H, d, J = 4,9 Hz), 4,83 (1H, d, J = 4,9 Hz), 4,58 (2H, s), 4,55 (2H, s), 4,00 (2H, m), 3,46 - 3,80 (3H, m), 3,36 (1H, m).

Yhdiste, joka esitetään kaavalla (31) 15 Rf-arvo: 0,38 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254 , kehitysliuotin; kloroformi:metanoli = 3:1).

FAB-MS (m/z): 625 (M+H)+ ^-NMR (300 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 10,88 (1H, s), 10,40 (1H, leveä s), 10,00 (1H, leveä s), 8,67 (1H, d, J = 7,9 20 Hz), 8,51 (1H, d, J = 7,3 Hz), 7,50 (2H, d, J = 6,9 Hz), 7,30 (2H, t, J = 6,9 Hz), 7,21 (1H, t, J = 6,9 Hz), 7,16 (2H, t, J = 7,3 Hz), 6,96 - 7,07 (3H, m), 6,13 (1H, t, J = 5,3 Hz), 5,42 (1H, d, J = 5,9 Hz), 5,21 (1H, d, J = 5,3 Hz), 4,91 (1H, leveä s), 4,55 (1H, leveä s), 4,28 (2H, d, 25 J = 5,3 Hz), 4,02 (2H, m), 3,72 (1H, m), 3,55 - 3,70 (2H, m), 3,40 (1H, m).

Esimerkki 30

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 0 30 HN-^^OMe

N

o N=o

35 HO S7 OH

(32)

OH

59 1 0 6 8 6 4 1,4 g esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin 30 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 1 g metyylikarbatsi-naattia lisättiin, ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa 2 tuntia. 400 ml vettä lisättiin seokseen, ja seos uutettiin 5 etyyliasetaatilla (500 ml x 3). Saatu etyyliasetaattiker-ros väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 5 ml:aan me-tanolia, vietiin Sephadex LH-20 (3,0 x 80 cm) kromatogra-fiapylvääseen ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin 10 saatiin 1,3 g otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (32).

Rf-arvo: 0,18 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60f254/ kehitysliuotin; kloroformi: met anoi i = 4:1).

FAB-MS (m/z): 592 (Μ+ΗΓ 15 1H-NMR (300 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 11,00 (1H, s), 10,42 (1H, leveä s), 10,18 (1H, s), 10,04 (1H, leveä s), 8,64 (1H, d, J - 7,6 Hz), 8,47 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,20 (2H,t, J = 8,3 Hz), 7,00 - 7,10 (3H, m), 5,42 (1H, leveä s), 5,35 (1H, leveä s), 5,21 (1H, leveä s), 4,91 (1H, leveä s), 20 4,02 (2H, m), 3,75 (3H, s), 3,50 - 3,70 (3H, m), 3,40 (1H, m).

Esimerkki 31

Yhdiste, joka esitetään kaavalla

• - 25 q <rV

• 30 (33)

HO s} 0H

OH

60 106864 90 mg esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin 1 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 67 mg (2R,3S)-3,4-0-iso-propylideeni-2,3,4-trihydroksibutaanikarbohydratsidia, j a seosta sekoitettiin 80 °C:ssa 7 tuntia ja sitten huoneen-5 lämpötilassa 3 vuorokautta. 50 ml vettä lisättiin seokseen ja seos uutettiin etyyliasetaatilla (50 ml x 2). Saatu etyyliasetaattikerros väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 3 ml:aan metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,8 x 25 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metanolilla. 10 Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 112 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (33).

Rf-arvo: 0,14 (valmistanut Merck Go., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi: met anoi i = 4:1).

15 FAB-MS (m/z): 692 (M+H)* 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6), 6 (ppm): 11,01 (1H, s), 10,70 (1H, s), 10,45 (1H, s), 10,05 (1H, s), 8,75 (1H, d, J = 7.4 Hz), 8,47 (1H, d, J = 7,4 Hz), 7,21 (2H, t, J = 7.4 Hz), 7,00 - 7,10 (3H, m), 6,26 (1H, d, J = 6,7 Hz), 20 5,44 (1H, d, J = 5,9 Hz), 5,39 (1H, leveä s), 5,24 (1H, d, J = 5,9 Hz), 4,93 (1H, d, J = 5,9 Hz), 4,31 (1H, dd, J = 6,7, 11,9 Hz), 4,22 (1H, t, J = 6,7 Hz), 4,10 (1H, ddd, J = 6,7, 6,7, 11,9 Hz), 4,05 (2H, m), 3,91 (1H, t, J = 6,7 Hz), 3,76 (1H, m), 3,57 - 3,71 (2H, m), 3,40 (1H, m), ·« 25 1,45 (3H, s), 1,36 (3H, s).

Esimerkki 32

Yhdiste, joka esitetään kaavalla o .. 30 "Hl·®- o=S N= o 1

OH

<34)

HO s) OH

ei 106864 25 mg esimerkissä 1 saatua yhdistettä liuotettiin 5 ml:aan vedetöntä tetrahydrofuraania, 10 mg p-tolueeni-sulfonihappoanhydridiä lisättiin, ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 1 vuorokausi. Reaktioliuos väkevöitiin 5 kuiviin, ja jäännös liuotettiin 1 ml:aan metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,8 x 20 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 12,3 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (34). 10 Rf-arvo: 0,49 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi:metanoli:tetrahydrofuraani = 3:1:1).

FAB-MS (m/z): 688 (Μ+ΗΓ 1H-NMR (300 MHz, DMS0-d6), 6 (ppm): 10,98 (1H, s), 10,87 15 (1H, s), 10,42 (1H, s), 10,05 (1H, s), 8,54 (1H, d, J = 7.9 Hz), 8,38 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,84 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,44 (2H, d, J = 8,7 Hz), 7,19 (2H, t, J = 7.9 Hz), 7,00 - 7,08 (3H, m), 5,43 (1H, d, J = 4,7 Hz), 5,35 (1H, leveä s), 5,23 (1H, d, J = 4,9 Hz), 4,90 (1H, d, 20 J = 4,4 Hz), 4,04 (2H, m), 3,75 (1H, m), 3,55 - 3,70 (2H, m), 3,40 (1H, m), 2,42 (3H, s).

Esimerkki 33

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 25 HNX^> ili H o=^ N=o 100¾¾ <1>

30 I

:: ho sf oh 4r

OH

. 20 mg esimerkissä 1 saatua yhdistettä liuotettiin 35 2 ml:aan tetrahydrofuraania, 0,1 ml fenyyli-isosyanaattia 62 106864 lisättiin, ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Reaktioliuos väkevöitiin kuiviin, ja jäännös liuotettiin 1 ml:aan metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,6 x 30 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metanolilla. 5 Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 12 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (35).

Rf-arvo: 0,38 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi: metanoli: tetrahydrofuraa-10 ni = 2:1:1).

FAB-MS (m/z): 653 (M+H)* 1H-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6 (ppm): 11,00 (1H, s), 10,40 (1H, leveä s), 10,10 (1H, leveä s), 9,48 (1H, s), 9,50 (1H, s), 8,67 (1H, d, J = 8,3 Hz), 8,50 (1H, d, J = 15 8,3 Hz), 7,48 (2H, d, J = 7,8 Hz), 7,27 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,20 (2H, t, J - 7,8 Hz), 6,95 - 7,10 (4H, m), 5,43 (1H, d, J = 4,2 Hz), 5,30 (1H, leveä s), 5,23 (1H, leveä s), 4,95 (1H, leveä s), 4,03 (2H, m), 3,75 (1H, m), 3,58 - 3,70 (2H, m), 3,38 (1H, m).

20 Esimerkki 34

Yhdiste, joka esitetään kaavalla V 25 0=O=° (36)

IHO s) OH

.. 30 «iJr

OH

15 mg esimerkissä 1 saatua yhdistettä liuotettiin 2 ml:aan tetrahydrofuraania, 16 μΐ bentsoyylikloridia lisättiin, ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tun-35 tia. Liuotin tislattiin pois, ja jäännös liuotettiin 1 • · 1 63 106864 ml:aan metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,6 x 20 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 12 mg otsikon yhdistettä, joka esi-5 tetään kaavalla (36),

Rf-arvo: 0,57 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi :metanoli:tetrahydrofuraani = 2:1:1).

FAB-MS (m/z): 639 (M+H) + 10 ^-NMR (200 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 11,35 (1H, leveä s), 11,04 (1H, s), 10,45 (1H, leveä s), 10,08 (1H, leveä s), 8,66 (1H, d, J = 8 Hz), 8,49 (1H, d, J = 8,5 Hz), 8,04 (2H, d, J - 7,1 Hz), 7,55 - 7,78 (3H, m), 7,20 (2H, t, J = 8,5 Hz), 7,00 - 7,15 (3H, m), 5,45 (2H, leveä s), 5,25 15 (1H, leveä s), 4,97 (1H, leveä s), 4,02 (2H, m), 3,55 - 3,82 (3H, m), 3,41 (1H, m).

Esimerkki 35

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 0

20 il .NL

jIJP

(ÖT)2q0) (37) 25 I H} 0h

f ''OH

OH

25 mg esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin 30 1,5 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 30 mg a-pikolinohyd- V. ratsidia lisättiin, ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa 2 tuntia. Tämä sekoitettiin 50 ml:n kanssa etyyliasetaattia, ja seos pestiin peräkkäin vedellä ja sitten kylläisellä suolaliuoksella, dehydratoitiin vedettömällä natriumsul-35 faatilla, ja väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 1 64 106864 ml:aan metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,8 x 15 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 30 mg otsikon yhdistettä, joka esi-5 tetään kaavalla (37).

Rf-arvo: 0,58 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformirmetanoli:tetrahydrofuraani = 2:1:1).

FAB-MS (m/z): 640 (M+H)+ 10 1H-NMR (300 MHz, DMS0-d6), δ (ppm): 11,43 (1H, s), 11,02 (1H, s), 10,45 (1H, s), 10,07 (1H, s), 8,82 (1H, d, J = 4,2 Hz), 8,75 (1H, d, J = 7,3 Hz), 8,48 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,12 (2H, m), 7,75 (1H, m), 7,20 (2H, t, J = 7,0 Hz), 7,00 - 7,15 (3H, m), 5,45 (1H, d, J = 6,3 Hz), 15 5,40 (1H, leveä s), 5,25 (1H, d, J = 6,3 Hz), 4,96 (1H, leveä s), 4,04 (2H, m), 3,76 (1H, m), 3,55 - 3,72 (2H, m), 3,42 (1H, m).

Esimerkki 36

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 20 i o 25 <38)

H°J OH

»'T

OH

30 30 mg esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin 1 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 30 mg 2-hydratsinoetanolia lisättiin, ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa 2 tuntia. Tämä väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 1 ml:aan metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,8 x 20 cm) kromatografia- 35 pylvääseen ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka si-

• · I

65 106864 sälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 32 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (38).

Rf-arvo: 0,32 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 5 60F254, kehitysliuotin; kloroformi:metanoli = 2:1).

1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6), 6 (ppm): 10,91 (1H, s), 10,35 (1H, leveä s), 9,98 (1H, leveä s), 8,70 (1H, d, J = 6,7 Hz), 8,53 (1H, d, J = 6,9 Hz), 7,18 (2H, t, J = 7,6 Hz), 6,99 - 7,06 (3H, m), 5,76 (1H, t, J = 5,2 Hz), 10 5,41 (1H, d, J = 5,6 Hz), 5,32 (1H, leveä s), 5,20 (1H, d, J = 5,2 Hz), 4,90 (1H, leveä s), 4,51 (1H, t, J = 4,9 Hz), 3,96 - 4,06 (2H, m), 3,73 (1H, m), 3,55 - 3,70 (4H, m), 3,39 (1H, m), 3,12 (2H, m).

Esimerkki 37 15 Yhdiste, joka esitetään kaavalla

O

A o 20

25 0H

40 mg esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin 2 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 10 mg 1-aminopyrrolidiini-hydrokloridia ja 0,1 ml natriumbikarbonaatin vesiliuosta lisättiin, ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa 2 tuntia.

30 40 ml vettä lisättiin siihen ja seos uutettiin etyyliin asetaatilla (40 ml x 2). Saatu etyyliasetaattikerros de- hydratoitiin vedettömällä natriumsulfaatilla, ja väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 1 ml:aan metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,8 x 20 cm) kromatografiapylvääseen 35 ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät ha- 66 106864 luttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 10,0 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (39).

Rf-arvo: 0,33 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformirmetanoli = 4:1).

5 FAB-MS (m/z): 589 (M+H) + ^-NMR (300 MHz, DMS0-d6), 6 (ppm): 10,91 (1H, s), 10,35 (1H, s), 9,95 (1H, s), 8,78 (1H, d, J = 8,3 Hz), 8,52 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,16 (2H, t, J = 7,6 Hz), 6,98 - 7,06 (3H, m), 5,40 (1H, d, J = 5,5 Hz), 5,33 (1H, t, J = 5,7 Hz), 10 5,18 (1H, d, J = 5,5 Hz), 4,85 (1H, d, J = 4,8 Hz), 4,02 (2H, m), 3,74 (1H, m), 3,53 - 3,68 (2H, m), 3,30 - 3,42 (5H, m), 1,97 (4H, m).

Esimerkki 38

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 15 NH,

N

o=S y=o 20 hTJ H Ih (40)

I h°H

Hc/S/

K NHj-HCi OH

25 90 mg 6-bentsyylioksimetyyli-l,11-dibentsyylioksi- 12,13-dehydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbatsoli-4,7(6H)-dionia, yhdiste joka esitetään patentissa PCT/W0-91/18003, 1,3 g hopeaoksidia ja 550 mg 0,4 nm (4A) mole-kyyliseuloja suspendoitiin 30 ml:aan vedetöntä bentseeniä. 30 Sen jälkeen, kun oli palautusjäähdytetty kuumentaen 20 minuuttia, liuos, jonka muodosti 416,4 mg a-bromi-3-deok-si-3-atsido-2,4,6-triasetyyli-D-glukoosia 5 ml:ssa vedetöntä bentseeniä, lisättiin tipoittaan 10 minuutin aikana. Palautusjäähdytettiin kuumentaen vielä 2 vuorokautta, jon-35 ka jälkeen liukenemattomat aineet suodatettiin käyttäen • · 106864 67

Celiteä. Suodos väkevöitiin kuiviin, ja jäännös liuotettiin 150 ml:aan etyyliasetaattia, pestiin peräkkäin 0,2 N kloorivetyhapolla, vedellä ja sitten kylläisellä suolaliuoksella, dehydratoitiin vedettömällä natriumsulfaatilla, 5 ja väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 5 ml:aan kloroformia, vietiin Sephadex LH-20 (3,0 x 80 cm) kromatogra-fiapylvääseen ja eluoitiin kloroformilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, ja jäännös puhdistettiin preparatiivisella ohutkerroskroma-10 tografiällä [n-heksaani:asetoni:tetrahydrofuraani » 3:1:0,1 (Rf: 0,5), sitten tolueeni:asetoni = 10:1 (Rf: 0,5)], jolloin saatiin 9,2 mg 6-bentsyylioksimetyyli-l,11-dibentsyylioksi-12,13-dehydro-13-(B-D-glukopyranosyyli )-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbatsoli-5,7(6H)-dionia. 15 9,2 mg saatua yhdistettä liuotettiin 1 ml:aan hyd- ratsiinimonohydraattia, ja liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 4 tuntia. Tämä sekoitettiin 30 ml:n kanssa etyyliasetaattia, ja seos pestiin peräkkäin 0,2 N kloorivetyhapolla, vedellä ja sitten kylläisellä suolaliuoksel-20 la, dehydratoitiin vedettömällä natriumsulfaatilla, ja väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 0,5 ml:aan tetrahydrof uraania - 1 ml metanolia, palladium-mustaa lisättiin, ja seosta sekoitettiin, käyttäen vetyvirtaa, huoneenlämpötilassa 3 tuntia. Liukenemattomat aineet suoda-• 25 tettiin käyttäen Celiteä, 1,5 ml 10-%:ista vetykloridi- metanolia lisättiin suodokseen, ja seos väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin 0,5 ml:aan metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,0 x 15 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua 30 tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 2,0 mg otsikon yhdistettä, joka on esitetty kaavalla (40).

·»

Rf-arvo: 0,5 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; n-butanoli:etikkahappo:vesi = 4:1:1).

35 FAB-MS (m/z): 534 (M+H)+ * · · .

68 106864 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6), 6 (ppm): 10,80 (1H, s), 10,48 (1H, s), 10,20 (1H, s), 8,79 (1H, d, J = 7,9 Hz), 8,52 (3H, leveä), 8,50 (1H, d, J = 9,2 Hz), 7,61 (1H, d, J = 6,6 Hz), 7,16 (1H, dd, J = 9,2, 9,2 Hz), 7,10 (1H, dd, J = 5 9,2, 9,2 Hz), 7,05 (1H, dd, J = 9,2, 9,2 Hz), 7,00 (1H, dd, J = 9,2, 9,2 Hz), 6,42 (1H, d, J = 5,2 Hz), 6,16 (1H, d, J = 3,9 Hz), 5,18 (1H, leveä), 4,93 (1H, leveä), 4,40 (1H, m), 4,16 (1H, m), 4,03 (1H, m), 3,78 (1H, m), 3,68 (1H, m), 3,42 (1H, m).

10 Esimerkki 39

Yhdiste, joka esitetään kaavalla hnX-cn

A

15 o=r^N=o (41) % ^ 20

OH

30 mg esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin 1,5 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 60 mg syanoasetohyd-ratsidia lisättiin, ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa 9 25 tuntia. Tämä sekoitettiin 30 ml:n kanssa etyyliasetaattia, seos pestiin peräkkäin vedellä ja sitten kylläisellä suolaliuoksella, ja etyyliasetaattikerros dehydratoitiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin pieneen määrään metanolia, vietiin 30 Sephadex LH-20 (1,5 x 15 cm) kromatografiapylvääseen ja V eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 27,8 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (41).

·· . „ ..

69 106864

Rf-arvo: 0,53 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi: metanoii: tetrahydrofuraani = 3:1:0,1).

FAB-MS (m/z): 601 (M+H)* 5 lH-NMR (300 MHz, DMS0-d6), δ (ppm): 11,14 (1H, s), 11,01 (1H, s), 10,42 (1H, S), 10,04 (1H, s), 8,65 (1H, d, J = 7.6 Hz), 8,47 (1H, d, J = 7,6 Hz), 7,21 (2H, t, J = 7.6 Hz), 7,05 (3H, t, J = 7,6 Hz), 5,41 (2H, d, J = 4,5 Hz), 5,19 (1H, d, J = 6,8 Hz), 4,90 (1H, d, J = 10 6,8 Hz), 4,13 (2H, s), 4,04 (2H, leveä), 3,75 (1H, m), 3,64 (2H, m), 3,43 (1H, m).

Esimerkki 40

Yhdiste, joka esitetään kaavalla NH, 15 o=^NN=o (42)

20 Hs f^OH

«4*

OH

1 g 12,13-dihydro-l,ll-dihydroksi-13-(8-D-glukopy-ranosyyli )-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbatsoli-5,7-25 (6H)-dionia liuotettiin 25 ml:aan tetrahydrofuraania, lisättiin eetteriliuos, jossa oli ylimäärä diatsometaania, seosta sekoitettiin 4 °C:ssa yön yli, ja muodostunut keltainen sakka otettiin talteen suodattamalla. Tämä liuotettiin 3 ml:aan hydratsiinimonohydraattia, ja liuos altis-30 tettiin reaktiolle huoneenlämpötilassa 1,5 tuntia. Reaktion jälkeen 200 ml puhdistettua vettä lisättiin, ja saatu sakka otettiin talteen suodattamalla, pestiin peräkkäin puhdistetulla vedellä ja sitten metanolilla, ja kuivattiin käyttäen alipainetta, jolloin saatiin 683,4 mg otsikon 35 yhdistettä, joka esitetään kaavalla (42).

• ♦ < 70 1 0 6 8 6 4 HPLC; Rt, 10,5 minuuttia (kolonni: Chromatolex ODS, sisähalkaisija 4,6 nun, pituus 250 mm, detektio; UV 305 nm, virtausnopeus; 1 ml/minuutti, liikkuva faasi; metanoli:vesi = 6:4).

5 FAB-MS (m/z): 563 (M+H)+ XH-NMR (300 MHz, DMS0-d6), δ (ppm): 10,9 (1H, s), 8,87 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,65 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,35 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7,23 (1H, t, J = 7,8 Hz), 7,25 (1H, d, J = 7.8 Hz), 7,18 (1H, d, J = 7,8 Hz), 6,90 (1H, d, J = 10 9,3 Hz), 5,40 (1H, leveä s), 5,18 (1H, leveä s), 5,00 (2H, leveä s), 4,90 (2H, leveä s), 4,06 (6H, s), 4,00 (2H, m), 3,78 (1H, m), 3,63 (2H, m), 3,42 (1H, m).

Esimerkki 41

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 15 n=ch-cooh <43)

20 I H I

H3eW

I ^OH

Η0(ΰίΗ

OH

708,8 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaaval-25 la (43), saatiin 679 mg:sta esimerkissä 40 saatua yhdistettä esimerkin 2 menetelmän mukaan.

HPLC; Rt, 10,9 minuuttia (kolonni: Chromatolex ODS, sisähalkaisija 4,6 mm, pituus 250 mm, detektio; UV 310 nm, virtausnopeus; 1 ml/minuutti, liikkuva faasi; asetonitrii-30 li:vesi = 2,8 -» asetonitriili:vesi = 6:4, 30 minuutin li-J... neaarinen gradientti ).

FAB-MS (m/z): 618 [M]+ XH-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6 (ppm): 13,5 (1H, leveä s), 11,1 (1H, s), 9,01 (1H, s), 8,83 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,63 35 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,39 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,37 (1H, 71 106864 t, J = 7,8 Hz), 7,29 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,22 (1H, d, J = 7,8 Hz), 6,94 (1H, d, J = 9,3 Hz), 5,43 (1H, d, J = 5,4 Hz), 5,22 (1H, d, J = 5,4 Hz), 5,01 (1H, leveä s), 4,93 (1H, d, J = 5,4 Hz), 4,07 (6H, s), 4,05 (1H, m), 3,96 5 (1H, m), 3,79 (1H, m), 3,60 (2H, m), 3,44 (1H, m).

Esimerkki 42

Yhdiste, joka esitetään kaavalla

NH-CH,-C00H

10 o L

(gxPöp <«> S-” *

OH

704 mg esimerkissä 41 saatua yhdistettä liuotettiin 20 10 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 60 mg 10-%:ista palla dium-hiilellä (Pd-C) lisättiin, ja seos altistettiin hyd-raukselle huoneenlämpötilassa 6 tunnin ajan sekoittaen. Reaktioseos suodatettiin käyttäen suodatinpaperiarkkia, jolle Celite levitettiin poistamaan Pd-C, 200 ml etyy-25 liasetaattia lisättiin suodokseen, ja seos uutettiin 50 ml:11a natriumbikarbonaatin vesiliuosta (pH 8). Vesikerros säädettiin pH-arvoon 2 ja uutettiin etyyliasetaatilla (500 ml). Etyyliasetaattikerros uutettiin 2-%:isella natriumbikarbonaatin vesiliuoksella (70 ml). 2-%:isen nat-30 riumbikarbonaatin vesiliuoskerros väkevöitiin käyttäen • · alipainetta, adsorboitiin Diaion HP 20 -pylvääseen (sisä-halkaisija 3 cm, pituus 30 cm), pestiin vedellä, ja sitten eluoitiin 300 ml:11a metanolia. Metanolieluaatti väkevöi-. tiin kuiviin, jäännös liuotettiin pieneen määrään N,N-di- 35 metyyliformamidia, ja liuos vietiin preparatiiviselle 106864 72 HPLC:lle (kolonni: Chromatolex ODS, sisähalkaisija 20 mm, pituus 250 mm, detektio; UV 310 nm, virtausnopeus; 9 ml/minuutti, liikkuva faasi; asetonitriili:vesi = 25:75). Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin 5 kuiviin, ja jäännös liuotettiin pieneen määrään vettä, suoritettiin Sephadex G-15 pylväskromatografia (sisähalkaisija 3 cm, pituus 63 cm) ja eluoitiin seoksella vesi tmetanoli = 9:1. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin ja sitten pakkaskuivattiin, jolloin 10 saatiin 84,2 mg otsikon yhdisteen, joka esitetään kaavalla (44), natriumsuolaa.

HPLC; Rt, 8,9 minuuttia (kolonni: Chromatolex ODS, sisähalkaisija 4,6 mm, pituus 250 mm, detektio; UV 310 nm, virtausnopeus; 1 ml/minuutti, liikkuva faasi; asetonitrii-15 li:vesi:trifluorietikkahappo = 300:700:1).

FAB-MS (m/z): 643 (M+Na)* ^-NMR (400 MHz, DMS0-d6), δ (ppm): 10,9 (1H, leveä s), 8,85 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,63 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,33 (1H, t, J = 7,8 Hz), 7,31 (1H, t, J = 7,8 Hz), 7,24 (1H, 20 d, J = 7,8 Hz), 7,16 (1H, d, J = 7,8 Hz), 6,89 (1H, d, J = 9,3 Hz), 5,63 (1H, leveä s), 5,42 (1H, leveä s), 5,10 (1H, leveä s), 4,99 (1H, leveä s), 4,06 (6H, s), 4,02 (2H, m), 3,80 (1H, m), 3,67 (1H, t, J = 8,8 Hz), 3,58 (1H, m), 3,42 (1H, t, J = 8,3 Hz), 3,34 (2H, s).

25 Esimerkki 43

Yhdiste, joka esitetään kaavalla

N = CH - C00H

A

30 °=^ ^=° (45) och3 35 73 1 0 6 8 6 4 23,8 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (45) , saatiin 70 mg:sta esimerkissä 4 saatua yhdistettä saman menetelmän mukaan kuin esimerkissä 2.

FAB-MS (m/z): 641 (M+H)* 5 1H-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 10,8 (1H, s), 9,26 (1H, d, J = 7,8 Hz), 9,09 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,94 (1H, s), 7,78 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,74 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,50 (2H, t, J = 7,8 Hz), 6,98 (1H, d, J = 9,3 Hz), 5,44 (1H, d, J = 5,9 Hz), 5,33 (1H, leveä s), 5,09 (1H, d, J = 5,4 10 Hz), 3,96 (2H, m), 3,85 (1H, m), 3,67 (2H, m), 3,59 (3H, s), 3,56 (1H, m).

Esimerkki 44

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 15 nh-ch2-cooh

A

o=^ N=o (βπΟηβι m 20 Yj Hj och3 « V. 25 210 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (46) , saatiin 1 g:sta esimerkissä 43 saatua yhdistettä saman menetelmän mukaan kuin esimerkissä 42.

FAB-MS (m/z): 643 (M+H)+ 1H-NMR (500 MHz, DMS0-d6), δ (ppm): 10,7 (1H, s), 9,26 (1H, 30 d, J = 7,8 Hz), 9,09 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,74 (1H, d, J = 7.8 Hz), 7,71 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,46 (2H, t, J = 7.8 Hz), 6,93 (1H, d, J = 9,2 Hz), 6,00 (1H, leveä s), 5,42 (1H, leveä s), 5,31 (1H, leveä s), 5,03 (1H, leveä s), 3,96 (2h, leveä s), 3,85 (2H, s), 3,83 (1H, m), 3,59 35 (3H, s), 3,50 - 3,70 (3H, m).

• < • < 74 106864

Esimerkki 45

Yhdiste, joka esitetään kaavalla

NHCHO

N

5 o=^ y=o (47) och3 48,2 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (47), saatiin 51,4 mg:sta esimerkissä 4 saatua yhdistettä 15 saman menetelmän mukaan kuin esimerkissä 5.

FAB-MS (m/z): 613 (M+H)* ^-NMR (400 MHz, DMS0-d6), δ (ppm): 10,9 (1H, leveä s), 10,8 (1H, leveä s), 9,20 (1H, m), 9,03 (1H, m), 8,48 (1H, s), 7,75 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,70 (1H, d, J = 7,8 Hz), 20 7,45 (2H, t, J = 7,8 Hz), 6,93 (1H, leveä t, J = 9,3 Hz), 5,41 (2H, m), 5,04 (1H, d, J = 5,9 Hz), 3,99 (2H, leveä s), 3,86 (1H, m), 3,60 (3H, s), 3,52 - 3,67 (3H, m). Esimerkki 46

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 25 NHCOCH,

N

ο=ζ N= o 30 (38}

Xl -I

och3 » · i · 75 1 0 6 8 6 4 13 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (48), saatiin 14,1 mg:sta esimerkissä 4 saatua yhdistettä saman menetelmän mukaan kuin esimerkissä 6.

FAB-MS (m/z): 627 (M+H)* 5 ^-NMR (500 MHz, DMS0-d6), δ (ppm): 10,8 (2H, s), 9,20 (1H, m), 9,04 (1H, m), 7,74 (2H, m), 7,47 (2H, m), 6,93 (1H, m) 5,41 (1H, m), 5,32 (1H, leveä s), 5,04 (1H, m), 3,96 (2H, leveä s), 3,85 (1H, m), 3,58 (3H, s), 3,50 - 3,70 (3H, m), 2,12 (3H, s).

10 Esimerkki 47

Yhdiste, joka esitetään kaavalla nh2 A o (49)

ftL

20 HO^

OH

1 ml hydratsiinimonohydraattia lisättiin 3,2 mg:aan 12,13-dihydro-2,10-dihydroksi-13-(β-D-glukopyranosyyli )-: 25 5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbatsoli-5,7( 6H )-dionia, ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Tämä jaettiin etyyliasetaatti - 0,2 N kloorivetyhapolla, ja etyyliasetaattikerros pestiin peräkkäin vedellä, sitten kylläisellä suolaliuoksella, ja väkevöitiin kuiviin. Jään- 30 nös liuotettiin pieneen määrään metanolia, vietiin Sepha-.... dex LH-20 kromatografiapylvääseen (1,0 x 5 cm) ja eluoi- tiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 3,0 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (49).

» · * « 76 1 0 6 8 6 4

Rf-arvo: 0,22 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi:metanoli:tetrahydrofuraa-ni = 3:1:1).

FAB-MS (m/z): 534 [M]+ 5 ^-NMR (300 MHz, DMS0-d6), 6 (ppm): 11,16 (1H, s), 9,76 (1H, s), 9,73 (1H, s), 8,90 (1H, d, J = 7,3 Hz), 8,82 (1H, d, J = 7,3 Hz), 7,18 (1H, d, J = 2,0 Hz), 6,98 (1H, d, J = 2,0 Hz), 6,83 (2H, dt, J = 2,0, 7,3 Hz), 5,97 (1H, d, J = 7.2 Hz), 5,84 (1H, t, J = 3,3 Hz), 5,32 (1H, d, J = 10 5,3 Hz), 5,10 (1H, d, J = 5,3 hz), 4,93 (1H, d, J = 5.2 Hz), 4,90 (2H, s), 4,04 - 3,86 (2H, m), 3,78 (1H, m), 3,60 - 3,35 (3H, m).

Esimerkki 48

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 15 HNCH0 (50)

20 F'/NXY

OH

’* 25 0,4 ml hydratsiinihydraattia lisättiin 7,1 mg:aan 2,10-difluori-12,13-dihydro-13-(β-D-glukopyranosyyli)-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbatsoli-5,7(6H)-dionia, ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 40 minuuttia. 1,34 ml väkevää kloorivetyhappoa lisättiin siihen, ja seos 30 uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattikerros pestiin ... vedellä ja väkevöitiin. Jäännös liuotettiin 3,7 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia ja 0,37 ml:aan väkevää kloorivetyhappoa, ja liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa yön yli. Tämä jaettiin etyyliasetaatin ja veden välille, ja 35 etyyliasetaattikerros väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuo- « .

„ 106864 tettiin pieneen määrään etanolia, vietiin Sephadex LH-20 kromatografiapylvääseen ja eluoitiin etanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 4,6 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään 5 kaavalla (50).

FAB-MS (m/z): 566 [M]* lH-NMR (400 MHz, DMS0-d6), 6(ppm): 11,9 (1H, s), 10,8 (1H, leveä s), 9,07 (1H, dd, J = 5,8, 8,8 Hz), 9,01 (1H, dd, J = 5,9, 8,8 Hz), 8,45 (1H, s), 7,93 (1H, leveä d, J = 8,8 10 Hz), 7,44 (1H, leveä d, J * 8,8 Hz), 7,27 (2H, m), 6,28 (1H, d, J = 8,8 Hz), 6,20 (1H, leveä s), 5,42 (1H, leveä s), 5,13 (1H, leveä d, J = 5,4 Hz), 4,96 (1H, d, J = 5,4 Hz), 4,09 (1H, leveä d, J = 7,3 Hz), 3,94 (2H, m), 3,83 (1H, leveä d, J * 7,3 Hz), 3,58 (1H, m), 3,45 (1H, m).

15 Esimerkki 49

Yhdiste, joka esitetään kaavalla nh2 0_/N o 20 )-\ (51) - BnO OBn

“TA

25 W

OH OH

jossa Bn merkitsee bentsyyliryhmää.

100 mg 6-bentsyylioksimetyyli-l,11-dibentsyylioksi-30 12,13-dihydro-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbatsoli- 5,7(6H)-dionia, 1,4 g hopeaoksidia ja 0,7 g 0,4 nm (4A) molekyyliseuloja suspendoitiin 40 ml:aan vedetöntä bent-seeniä, suspensiota palautusjäähdytettiin kuumentaen 20 minuuttia, ja sitten liuos, jonka muodosti l-bromi-2,3,5-35 tri-O-asetyyli-D-riboosi 10 ml:ssa vedetöntä bentseeniä, 78 106864 lisättiin tipoittain 10 minuutin aikana. Seosta palautus-jäähdytettiin kuumentaen vielä 3 tuntia, ja liukenemattomat aineet suodatettiin käyttäen Celiteä.

Suodos väkevöitiin kuiviin, ja jäännös liuotettiin 5 100 ml:aan etyyliasetaattia ja liuos pestiin peräkkäin 0,2 N kloorivetyhapolla, vedellä ja sitten kylläisellä suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, ja väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin kloroformiin, vietiin Sephadex LH-20 (2,5 x 20 cm) kromatografiapylvää-10 seen ja eluoitiin kloroformilla. Fraktiot, jotka sisälsi vät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jäännös vietiin silikageelikromatografiapylvääseen (2,5 x 25 cm) ja eluoitiin tolueeni-etyyliasetaatilla (3:1), ja fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin. 15 Jäännös puhdistettiin vielä preparatiivisella ohutkerros- kromatografiällä (tolueeni-etyyliasetaatti = 5:1 (Rf = 0,6)), jolloin saatiin 20,8 mg 6-bentsyylioksimetyyli- 1,ll-dibentsyylioksi-12,13-dihydro-13-(β-D-ribofurano-syyli)-5H-indolo[2,3-a]pyrrolo[3,4-c]karbatsoli-5,7( 6H)-20 dionia.

20,8 mg tätä yhdistettä liuotettiin 2 ml:aan hyd-ratsiinimonohydraattia, ja liuosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 2 tuntia. Tämä sekoitettiin 30 ml:n kanssa etyyliasetaattia, seos pestiin peräkkäin 0,2 N kloorivety-. 25 hapolla, vedellä ja sitten kylläisellä suolaliuoksella, ja väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin metanoliin, vietiin Sephadex LH-20 (1,0 x 15 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, ja jäännös puhdis-30 tettiin preparatiivisella ohutkerroskromatografiällä (kloroformi-met anoli = 10:1 (Rf = 0,5)), jolloin saatiin 2,9 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (51).

Rf-arvo: 0,5 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi:metanoli = 10:1).

35 FAB-MS (m/z): 684 [M]1 < * i 79 1 0 6 8 6 4 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6), 6 (ppm): 10,45 (1H, s), 8,90 (1H, d, J = 0,75 Hz), 8,68 (1H, d, J = 0,75 Hz), 7,18 (2H, d, J = 0,75 Hz), 7,11 (2H, d, J = 0,75 Hz), 7,20 - 7,50 (11H, m), 5,35 - 5,45 (5H, m), 5,17 (1H, d, J = 0,38 Hz), 5 5,10 (1H, d, J = 0,45 Hz), 4,98 (2H, s), 3,90 - 4,00 (2H, m), 3,60 - 3,70 (2H, m).

Esimerkki 50

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 0

10 hnx^°H

(52)

15 HO J H OH

-r

OH

33,0 mg esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin 20 3 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 8,4 mg hydroksiasetohyd- ratsidia lisättiin, ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa 2 vuorokautta. Tämä väkevöitiin kuiviin, ja jäännös liuotet-’ tiin pieneen määrään metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,5 x 25 cm) kromatografiapylvääseen, ja eluoitiin meta-·'- 25 nolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, ja jäännös liuotettiin 30 ml:aan etyyliasetaattia. Liuos pestiin vedellä, ja etyyliasetaat-tikerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja väkevöitiin kuiviin. Jäännös liuotettiin pieneen määrään 30 metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,5 x 15 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metanolilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saatiin 29,0 mg otsikon yhdistettä, joka esitetään kaavalla (52).

35 FAB-MS (m/z): 593 [M+H]+ « 80 106864 XH-NMR (300 MHz, DMSO-d6), 6(ppm): 11,00 (1H, s), 10,55 (1H, s), 10,41 (1H, s), 10,02 (1H, s), 8,63 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,47 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,20 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,04 (3H, m), 5,88 (1H, t, J = 7,0 Hz), 5,41 (1H, d, 5 J = 6,2 Hz), 5,35 (1H, leveä), 5,20 (1H, d, J = 6,2 Hz), 4,90 (1H, d, J = 6,2 Hz), 4,16 (2H, d, J = 5,7 Hz), 4,03 (2H, m), 3,74 (1H, m), 3,59 - 3,68 (2H, m), 3,39 (1H, m). Esimerkki 51

Yhdiste, joka esitetään kaavalla 10

A

15 (53)

HO J OH

Η0^Η

OH

20 35 mg esimerkissä A saatua yhdistettä liuotettiin 1,0 ml:aan N,N-dimetyyliformamidia, 35,0 mg etyylihydrat-siinioksalaattia ja 0,5 ml kylläistä natriumbikarbonaatin vesiliuosta lisättiin, ja seosta sekoitettiin 80 °C:ssa 1 25 vuorokausi. Tämä väkevöitiin kuiviin, ja jäännös liuotettiin pieneen määrään metanolia, vietiin Sephadex LH-20 (1,5 x 15 cm) kromatografiapylvääseen ja eluoitiin metano-lilla. Fraktiot, jotka sisälsivät haluttua tuotetta, väkevöitiin kuiviin, jolloin saaatiin 20,8 mg otsikon yhdis-30 tettä, joka esitetään kaavalla (53).

Rf-arvo: 0,5 (valmistanut Merck Co., Kiesel geeli 60F254, kehitysliuotin; kloroformi:metanoli:tetrahydrofuraani = 2:1:1).

FAB-MS (m/z): 563 [M+H]* > « » · M 106864 ^-NMR (300 MHz, DMSO-d6), 6 (ppm): 10,90 (1H, s), 10,35 (1H, s), 9,96 (1H, s), 8,72 (1H, d, J = 7,9 Hz), 8,54 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,17 (2H, t, J = 7,9 Hz), 7,03 (3H, m), 5,72 (1H, t, J = 4,8 Hz), 5,41 (1H, d, J = 6,3 Hz), 5,35 5 (1H, t, J = 4,0 Hz), 5,21 (1H, d, J = 4,0 Hz), 4,87 (1H, d, J = 6,3 Hz), 3,96 - 4,09 (2H, m), 3,73 - 3,77 (1H, m), 3,58 - 3,67 (2H, m), 3,37 - 3,45 (1H, m), 3,07 (2H, m), 1,09 (3H, t, J = 7,1 Hz).

Esimerkki 52 10 50 g esimerkin 5 yhdistettä liuotettiin liuokseen, jossa 600 g Japanese Pharmacopoeian makrogol 400 oli liuotettu 400 g:aan tislattua vettä injektiota varten, ja liuos suodatettiin bakteerien poistamiseksi käyttäen 0,2 pm suodatinta. Pestyt ja steriloidut viaalit täytet-15 tiin 5 ml:n annoksilla suodosta tavanomaisen menetelmän mukaan, ja viaalit suljettiin ja korkitettiin, jolloin saatiin injektio, joka sisältää 250 mg esimerkin 5 yhdistettä viaalia kohti. Antaminen suoritetaan käyttäen ainetta laskimonsisäistä tiputusta varten, johon lisättiin 5 -20 10 ml tätä injektiota (250 - 500 mg esimerkin 5 yhdistet tä) ja laimennettiin 500 ml:11a infuusiota, kuten 5-%:ista glukoosia.

» « » ·

Claims (9)

1. 82 106864 Patenttivaatimukset;
2. 1. Menetelmä kaavan [I] mukaisten, terapeuttisesti käyttökelpoisten indolopyrrolokarbatsolijohdannaisten tai 5 niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, Rt ,R’ N = G jossa
3. 15 R1 ja R2 kumpikin toisistaan riippumatta merkitsevät vetyatomia, alempaa alkyyliryhmää, alempaa aikenyyliryhmää, alempaa alkynyyliryhmää, aryyliryhmää, aralkyyliryhmää tai heterosyklistä ryhmää (alempi alkyyliryhmä, alempi aikenyyliryhmä, alempi alkynyyli-20 ryhmä, aryyliryhmä, aralkyyliryhmä ja heterosyklinen ryhmä voi kukin sisältää 1-5 substituenttia, jotka on valittu karboksyyliryhmistä, karbamoyyliryhmistä, sulforyhmistä, aminoryhmistä, syanoryhmistä, mono(alempi alkyyli)amino-ryhmistä, di(alempi alkyyli)aminoryhmistä, hydroksyyliryh-25 mistä ja halogeeniatomeista), tai ryhmää, jolla on kaava -Y-R3, jossa Y merkitsee karbonyyliryhmää, tiokarbonyyli-ryhmää tai sulfonyyliryhmää, ja R3 merkitsee vetyatomia, alempaa alkyyliryhmää, sykloalkyyliryhmää, sykloalkyyli-alkyyliryhmää, aryyliryhmää, aralkyyliryhmää, alempaa • « . 30 alkoksiryhmää, hydratsinoryhmää, aminoryhmää, aryyliamino-ryhmää, karbamoyyliryhmää tai heterosyklistä ryhmää (alempi alkyyliryhmä, sykloalkyyliryhmä, sykloalkyyli-alkyyliryhmä, aryyliryhmä, aralkyyliryhmä ja heterosyklinen ryhmä voi kukin sisältää 1-4 substituenttia, jotka > Λ 83 106864 on valittu halogeeniatomeista, mahdollisesti suojatuista hydroksyyliryhmistä, aminoryhmistä, karboksyyliryhmistä, karbamoyyliryhmistä, syanoryhmistä ja alemmista alkoksi-karbonyyliryhmistä, ja aminoryhmä ja karbamoyyliryhmä 5 voivat kumpikin olla mono- tai disubstituoituja alemmalla alkyyliryhmällä (-ryhmillä), joka on mahdollisesti substituoitu substituentilla (substituenteilla), joka on valittu halogeeniatomeista, hydroksyyliryhmistä, aminoryhmistä, karboksyyliryhmistä, karbamoyyliryhmistä ja 10 alemmista alkoksikarbonyyliryhmistä); tai R1 ja R2 yhdessä merkitsevät alempaa alkyli-deeniryhmää (alempi alkylideeniryhmä voi sisältää 1-4 substituenttia, jotka on valittu aminoryhmistä, mono(alempi alkyyli)aminoryhmistä, di(alempi alkyyli)aminoryhmistä, 15 hydroksyyliryhmistä, karboksyyliryhmistä ja sulfonyyli-ryhmistä); tai R1 ja R2 yhdessä typpiatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet, muodostavat heterosyklisen ryhmän (heterosyklinen ryhmä voi sisältää renkaassa alemman 20 alkyyliryhmän, (-ryhmiä), joka (jotka) on mahdollisesti substituoitu ryhmällä (ryhmillä), joka on valittu aminoryhmistä, hydroksyyliryhmistä, karboksyyliryhmistä ja sulforyhmistä), G merkitsee pentoosiryhmää tai heksoosiryhmää, ja 25 X1 ja X2 merkitsevät kumpikin toisistaan riippumatta vetyatomia, halogeeniatomia, aminoryhmää, mono(alempi alkyyli)aminoryhmää, di(alempi alkyyli)aminoryhmää, hydroksyyliryhmää, alempaa alkoksiryhmää, aral-koksiryhmää, karboksyyliryhmää, alempaa alkoksikarbonyyli-30 ryhmää tai alempaa alkyyliryhmää, tunnettu siitä, että kaavan [II] tai [III] mukainen yhdiste tai sen johdannainen, jossa funktionaaliset ryhmät ovat suojattuja, ♦ « 84 106864 Y ι N χί^δ^χ, G tai ° rQTAOVjgj c mj X , H X» joissa 15. merkitsee vetyatomia tai substituoitua tai substituoimatonta alempaa alkyyliryhmää, ja X1, X2 ja G merkitsevät samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan kaavan [IV] mukaisen yhdisteen tai sen johdannaisen kanssa, jossa siinä tapauksessa, että R13 ja R23 sisältävät funktio-20 naalisen ryhmän, kukin funktionaalinen ryhmä on suojattu R13 H2N-<„23 [1V] 25 jossa R13 ja R23 kumpikin toisistaan riippumatta merkitsevät vetyatomia, alempaa alkyyliryhmää, alempaa aikenyyliryhmää, alempaa aikynyyliryhmää, aryyliryhmää, aralkyyliryhmää tai heterosyklistä ryhmää (alempi alkyy-30 liryhmä, alempi alkenyyliryhmä, alempi alkynyyliryhmä, aryyliryhmä, aralkyyliryhmä tai heterosyklinen ryhmä voi sisältää 1 - 5 substituenttia, jotka on valittu karboksyyliryhmistä, karbamoyyliryhmistä, sulforyhmistä, aminoryhmistä, syanoryhmistä, mono(alempi alkyyli)amino- « 106864 8 5 ryhmistä, di(alempi alkyyli)aminoryhmistä, hydroksyyli-ryhmistä ja halogeeniatomeista), tai ryhmää, jolla on kaava -Y-R3, jossa Y merkitsee karbonyyliryhmää, tiokarbo-nyyliryhmää tai sulfonyyliryhmää, ja R3 merkitsee 5 vetyatomia, alempaa alkyyliryhmää, sykloalkyyliryhmää, sykloalkyylialkyyliryhmää, aryyliryhmää, aralkyyliryhmää, alempaa alkoksiryhmää, hydratsinoryhmää, aminoryhmää, aryyliaminoryhmää, tai karbamoyyliryhmää tai hetero-syklistä ryhmää (alempi alkyyliryhmä, sykloalkyyliryhmä, 10 sykloalkyylialkyyliryhmä, aryyliryhmä, aralkyyliryhmä ja heterosyklinen ryhmä voi kukin sisältää 1-4 substi-tuenttia, jotka on valittu halogeeniatomeista, mahdollisesti suojatuista hydroksyyliryhmistä, aminoryhmistä, karboksyyliryhmistä, karbamoyyliryhmistä, syano-15 ryhmistä ja alemmista alkoksikarbonyyliryhmistä, ja aminoryhmä ja karbamoyyliryhmä voivat olla kumpikin mono-tai disubstituoituja alemmalla alkyyliryhmällä(-ryhmillä), joka (jotka) on mahdollisesti substituoitu ryhmällä (ryhmillä), joka (jotka) on valittu halogeeniatomeista, 20 hydroksyyliryhmistä, aminoryhmistä, karboksyyliryhmistä, karbamoyyliryhmistä ja alemmista alkoksikarbonyyliryhmistä) ; tai R13 ja R23 yhdessä typpiatomin kanssa, johon ne « • . ovat liittyneet, muodostavat heterosyklisen ryhmän 25 (heterosyklinen ryhmä voi sisältää renkaassa alemman alkyyliryhmä(-ryhmiä), joka (jotka) on mahdollisesti substituoitu ryhmällä (ryhmillä), joka (jotka) on valittu aminoryhmistä, hydroksyyliryhmistä, karboksyyliryhmistä ja sulforyhmistä); 30 tarvittaessa, poistetaan suojaryhmä (-ryhmät), jolloin saadaan yhdiste, jolla on yleinen kaava [Ie] 86 106864 R’VR” N s (οΓ@Τδ) tlcl G jossa R13, R23, X1, X2 ja G merkitsevät samaa kuin edellä on 10 määritelty; tai formyloidaan, alkyloidaan, alkenyloidaan, alkyny-loidaan, aralkyloidaan, karbamoyloidaan, tiokarbamoyloi-daan, ( /R'3 ^ 15 alkanoyloidaan tai sulfonyloidaan aminoryhmä ( "^\R23 J edellä olevan kaavan [Ie] mukaisessa yhdisteessä tai sen johdannaisessa, jossa funktionaaliset ryhmät ovat suojattuja, kun R13 ja R23 merkitsevät vetyatomia, tai 20 kondensoidaan kaavan [Ic-1] mukainen yhdiste tai sen johdannainen NH i 2 X G kaavan [V] mukaisen yhdisteen tai sen johdannaisen kanssa, jossa funktionaalinen ryhmä on suojattu, 30 . OHC-R6 [V] jossa R6 merkitsee vetyatomia tai karboksyyliryhmää, tai . alempaa alkyyliryhmää, jossa on mahdollisesti 1-4 subs-35 tituenttia, jotka on valittu aminoryhmistä, mono(alempi alkyyli)aminoryhmistä, di(alempi alkyyli)aminoryhmistä, • Γ • I 87 106864 hydroksyyliryhmistä, karboksyyliryhmistä ja sulforyhmistä, jolloin saadaan kaavan [Id] mukainen yhdiste i*=HC-R6 . Ns 5 °=Cr° cid] 10 joka haluttaessa pelkistetään kaavan [Ie] mukaiseksi yhdisteeksi, jossa R13 on vetyatomi ja R23 on -CH2-R6, ja haluttaessa poistetaan suojaryhmät, tai pelkistetään kaksoissidokset kaavan [Ie] mukaisessa yhdisteessä, kun R13 ja/tai R23 sisältävät kaksoissidoksen, tai yhdisteessä, 15 joka on valmistettu kondensoimalla kaavan [Ie] mukainen yhdiste kaavan [V] mukaisen yhdisteen tai sen johdannaisen kanssa, jossa funktionaaliset ryhmät ovat suojattuja, ja tarvittaessa poistetaan suojaryhmät, ja tarvittaessa muutetaan saatu kaavan [I] mukainen yhdiste farmaseut-20 tisesti hyväksyttäväksi suolaksi.
4. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jolla ' on kaava [Ia] R" >.R”
5. 25 N X^I G1 30 jossa :: R11 ja R21 kumpikin toisistaan riippumatta merkitsevät vetyatomia, alempaa alkyyliryhmää, alempaa alkenyyliryhmää, aryyliryhmää, aralkyyliryhmää, pyrrolyy-liryhmää, oksatsolyyliryhmää, iso-oksatsolyyliryhmää, 35 tiatsolyyliryhmää, imidatsolyyliryhmää, pyridyyliryhmää, pyrimidinyyliryhmää, oksatsolinyyliryhmää, oksatsolidinyy- 88 106864 liryhmää, imidatsolinyyliryhmää, imidatsolidinyyliryhmää, pyrrolidinyyliryhmää, piperatsinyyliryhmää, tiatsinyyli-ryhmää, tiatsolidinyyliryhmää (alempi alkyyliryhmä, alempi alkenyyliryhmä, aryyliryhmä, aralkyyliryhmä ja hetero-5 syklinen ryhmä voi sisältää 1-5 substituenttia, jotka on valittu karboksyyliryhmistä, karbamoyyliryhmistä, syano-ryhmistä ja hydroksyyliryhmistä), tai ryhmää, jolla on kaava -Y-R31, jossa Y merkitsee karbonyyliryhmää, tiokarbonyyliryhmää tai sulfonyyliryhmää, ja R31 merkitsee io vetyatomia, alempaa alkyyliryhmää, aryyliryhmää (alempi alkyyliryhmä ja aryyliryhmä voi sisältää 1 - 4 subs tituenttia, jotka on valittu halogeeniatomeista, mahdollisesti suojatuista hydroksyyliryhmistä, amino-ryhmistä ja karboksyyliryhmistä), aminoryhmää, hydratsino-15 ryhmää, aryyliaminoryhmää, alempaa alkoksiryhmää, karbamo-yyliryhmää, pyrrolyyliryhmää, oksatsolyyliryhmää, iso-oksatsolyyliryhmää, tiatsolyyliryhmää, imidatsolyyli-ryhmää, pyridyyliryhmää, pyrimidinyyliryhmää, oksatsolyyliryhmää, oksatsolidinyyliryhmää, imidatsolinyyli-20 ryhmää, imidatsolidinyyliryhmää, pyrrolidinyyliryhmää, piperatsinyyliryhmää, tiatsinyyliryhmää tai tiatsolidinyyliryhmää; tai R11 ja R21 yhdessä merkitsevät alempaa alkylideeni-ryhmää, jossa mahdollisesti on karboksyyliryhmä(-ryhmiä), 25 tai R11 ja R21 yhdessä typpiatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet muodostavat pyrrolidinyyliryhmän, imidatsolidinyyliryhmän, imidatsolinyyliryhmän, piperi-dinoryhmän tai piperatsinyyliryhmän (nämä heterosykliset 30 ryhmät voivat sisältää renkaassa alemman alkyyliryhmän (-ryhmiä), joka (jotka) on mahdollisesti substituoitu hydroksiryhmällä(-ryhmillä)), G1 merkitsee ryhmää, jolla on kaava r* ''j-1 iff 0H0H 89 106864 jossa R7 merkitsee vetyatomia tai alempaa alkyyliryhmää ja R8 merkitsee hydroksyyliryhmää tai aminoryhmää, ja X11 ja X21 ovat sitoutuneet indolopyrrolokarbat-solirenkaan 1- tai 2-asemaan ja 10- tai 11-asemaan, 5 vastaavasti, ja kumpikin merkitsee toisistaan riippumatta halogeeniatomia, hydroksyyliryhmää, alempaa alkoksiryhmää tai aralalkoksiryhmää.
6. 3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jolla 10 on kaava [Ib] R'L ,ΨΡ M"N= tIbl HY<’' G1 jossa R12 merkitsee vetyatomia tai alempaa alkyyliryhmää, R22 merkitsee vetyatomia, alempaa alkyyliryhmää 20 (alempi alkyyliryhmä voi sisältää 1-5 substituenttia, jotka on valittu ryhmästä, joka koostuu karboksyyli-ryhmistä, karbamoyyliryhmistä, hydroksyyliryhmistä ja * syanoryhmistä), aryyliryhmää, aralkyyliryhmää (aryyliryhmä ja aralkyyliryhmä voi sisältää 1-4 substituenttia, jotka ... 25 on valittu hydroksyyliryhmistä ja karboksyyliryhmistä) , pyridyyliryhmää, imidatsolyyliryhmää, imidatsolinyyli-ryhmää, tiatsolyyliryhmää, pyrrolidinyyliryhmää, pipe-ratsinyyliryhmää tai ryhmää, jolla on kaava -Y-R32, ja siinä Y merkitsee karbonyyliryhmää, tiokarbonyyliryhmää 30 tai sulfonyyliryhmää, ja kun Y on karbonyyliryhmä tai ·· tiokarbonyyliryhmä, R32 merkitsee vetyatomia, alempaa alkyyliryhmää, aryyliryhmää (alempi alkyyliryhmä ja aryyliryhmä voi sisältää 1-4 substituenttia, jotka on . valittu halogeeniatomeista, mahdollisesti suojatuista 35 hydroksyyliryhmistä, aminoryhmistä ja karboksyyliryhmistä) , aminoryhmää, hydratsinoryhmää, aryyliaminoryhmää, 90 106864 alempaa aikoksiryhmää, karbamoyyliryhmää, pyridyyliryhmää, pyrimidinyyliryhmää, imidatsolinyyliryhmää tai pyrroli-dinyyliryhmää, ja kun Y on sulfonyyliryhmä, R32 merkitsee alempaa alkyyliryhmää tai aryyliryhmää; tai 5 R12 ja R22 yhdessä merkitsevät alempaa alkylideeniryhmää, jossa on karboksyyliryhmä(-ryhmiä); tai R12 ja R22 yhdessä typpiatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet, muodostavat pyrrolidinyyliryhmän, piperi-dinoryhmän tai piperatsinyyliryhmän (nämä heterosykliset 10 ryhmät voivat sisältää renkaassa alempia alkyyliryhmiä, joissa mahdollisesti on hydroksyyliryhmä(-ryhmiä)), ja G1, X11 ja X21 merkitsevät samaa kuin patenttivaatimuksessa 2.
7. 4. Kaavan [III] mukainen yhdiste tai sen 15 johdannainen, jossa funktionaaliset ryhmät ovat suojattuja 0 o Cinl I H X1 G jossa X1, X2 ja G merkitsevät samaa kuin patenttivaatimuksessa 1.
8. 5. Menetelmä patenttivaatimuksen 4 mukaisen, yleisen kaavan [III] mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että kaavan [II] mukaiselle yhdisteelle tai sen johdannaiselle, jossa funktionaaliset ryhmät ovat suojattuja . 30 T \ N J1&L
9. 35 G m 91 106864 jossa kaavassa Y merkitsee vetyatomia tai substituoitua tai substituoimatonta alempaa alkyyliryhmää, ja X1, X2 ja G merkitsevät samaa kuin patenttivaatimuksessa 1, suoritetaan emäskäsittely ilmakehän olosuhteissa. 1 · « 92 106864