ES2768610T3

ES2768610T3 - Inhibidores macrocíclicos de las interacciones proteína/proteína PD-1/PD-L1 y CD80(B7-1)/PD-L1

Info

Publication number: ES2768610T3
Application number: ES14776949T
Authority: ES
Inventors: Michael Matthew Miller; Claudio Mapelli; Martin Patrick Allen; Michael S Bowsher; Eric P Gillis; David R Langley; Eric Mull; Maude A Poirier; Nishith Sanghvi; Li-Qiang Sun; Daniel J Tenney; Kap-Sun Yeung; Juliang Zhu; Kevin W Gillman; Qian Zhao; Katharine A Grant-Young; Paul Michael Scola; Lyndon Cornelius
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2014-09-11
Filing date: 2014-09-11
Publication date: 2020-06-23
Anticipated expiration: 2034-09-11
Also published as: IL250964B; EA034496B1; MX2017003201A; AU2014405919A1; JP2017536330A; MA40132B1; CN106999536A; EP3191113A1; IL250964A0; KR102330652B1; CA2960778C; US10538555B2; MA40132A1; SG11201701896RA; JP6405457B2; EP3191113B1; KR20170054450A; PH12017500441A1; EA201790539A1; BR112017003718B1

Abstract

Un compuesto seleccionado entre:**Fórmula** y**Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

Description

DESCRIPCIÓN

Inhibidores macrocíclicos de las interacciones proteína/proteína PD-1/PD-L1 y CD80(B7-1)/PD-L1

La presente divulgación proporciona nuevos péptidos macrocíclicos que inhiben la interacción proteína/proteína PD-1/PD-L1 y CD80/PD-L1 y, por tanto, son útiles para el alivio de diversas enfermedades, incluyendo cáncer y enfermedades infecciosas.

La proteína Muerte programada 1 (PD-1) es un miembro inhibidor de la familia de receptores CD28, que también incluye CD28, CTLA-4, ICOS y BTLA. PD-1 se expresa en linfocitos B activados, Linfocitos T y células mieloides (Agata y col., citado anteriormente; Okazaki y col., Curr. Opin. Immunol., 14:779-782 (2002); Bennett y col., J. Immunol., 170:711-718 (2003)).

La proteína PD-1 es una proteína transmembrana de tipo I de 55 kDa que forma parte de la superfamilia del gen de Ig (Agata y col., Int. Immunol., 8:765-772 (1996)). PD-1 contiene un motivo inhibidor de tirosina de inmunorreceptor (ITIM) proximal de membrana y un motivo de conmutación basado en tirosina (ITSM) distal de membrana (Thomas, M.L., J. Exp. Med., 181:1953-1956 (1995); Vivier, E. y col., Immunol. Today, 18:286-291 (1997)). Aunque es estructuralmente similar a CTLA-4, PD-1 carece del motivo MYPPY que es clave para la unión de CD80 CD86 (B7-2). Se han identificado dos ligandos para PD-1, PD-L1 (B7-H1) y PD-L2 (b7-DC). Se ha mostrado que la activación de linfocitos T que expresan PD-1 se regula negativamente tras la interacción con células que expresan PD-L1 o PD-L2 (Freeman y col., J. Exp. Med., 192:1027-1034 (2000); Latchman y col., Nat. Immunol., 2:261-268 (2001); Carter y col., Eur. J. Immunol., 32:634-643 (2002)). Tanto PD-L1 como PD-L2 son miembros de la familia de proteínas ^b7 que se unen a PD-1, pero no se unen a otros miembros de la familia de CD28. El ligando PD-L1 es abundante en diversos cánceres humanos (Dong y col., Nat. Med., 8:787-789 (2002)). La interacción entre PD-1 y PD-L1 da como resultado una disminución de linfocitos infiltrantes de tumores, una disminución de la proliferación mediada por receptores de linfocitos T y evasión inmunitaria por las células cancerosas (Dong y col., J. Mol. Med., 81:281-287 (2003); Blank y col., Cancer Immunol. Immunother., 54:307-314 (2005); Konishi y col., Clin. Cancer Res., 10:5094-5100 (2004)). La supresión inmunitaria puede invertirse inhibiendo la interacción local de PD-1 con PD-L1 y el efecto es aditivo cuando también se bloquea la interacción de PD-1 con PD-L2 (Iwai y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 99:12293-12297 (2002); Brown y col., J. Immunol., 170:1257-1266 (2003)).

También se ha mostrado que PD-L1 interactúa con CD80 (Butte, M.J. y col., Immunity, 27:111-122 (2007)). Se ha mostrado que la interacción PD-L1/CD80 en células inmunitarias con expresión es inhibidora. Se ha mostrado que el bloqueo de esta interacción anula esta interacción inhibidora (Paterson, A.M. y col., J. Immunol., 187:1097-1105 (2011); Yang, J. y col., J. Immunol., 187(3):1113-1119 (1 de agosto de 2011)).

Cuando los linfocitos T que expresan PD-1 entran en contacto con células que expresan sus ligandos, las actividades funcionales en respuesta a estímulos antigénicos, incluyendo la proliferación, secreción de citocinas y citotoxicidad, se reducen. Las interacciones de PD-1/PD-L1 o PD-L2 regulan negativamente las respuestas inmunitarias durante la resolución de una infección o tumor o durante el desarrollo de autotolerancia (Keir, M.E. y col., Annu. Rev. Immunol., 26:Epub (2008)). La estimulación antigénica crónica, tal como la que se produce durante la enfermedad tumoral o infecciones crónicas, da como resultado linfocitos T que expresan niveles elevados de PD-1 y son disfuncionales con respecto a la actividad hacia el antígeno crónico (revisado en Kim y col., Curr. Opin. Imm. (2010)). Esto se denomina "agotamiento de linfocitos T". Los linfocitos B también presentan supresión y "agotamiento" de PD-1/PD-ligando.

Se ha mostrado que el bloqueo del ligamiento PD-1/PD-L1 usando anticuerpos contra PD-L1 restaura y aumenta la activación de linfocitos T en muchos sistemas. Los pacientes con cáncer avanzado se benefician de la terapia con un anticuerpo monoclonal contra PD-L1 (Brahmer y col., New Engl. J. Med. (2012)). Modelos animales preclínicos de tumores e infecciones crónicas han mostrado que el bloqueo de la ruta PD-1/PD-L1 mediante anticuerpos monoclonales puede mejorar la respuesta inmunitaria y dar como resultado el rechazo del tumor o el control de la infección. La inmunoterapia antitumoral a través del bloqueo de PD-1/PD-L1 puede aumentar la respuesta inmunitaria terapéutica a una serie de tumores histológicamente distintos (Dong, H. y col., "B7-H1 pathway and its role in the evasion of tumor immunity", J. Mol. Med., 81(5):281-287 (2003); Dong, H. y col., "Tumor-associated B7-H1 promotes T-cell apoptosis: a potential mechanism of immune evasion", Nat. Med., 8(8):793-800 (2002)).

La interferencia con la interacción PD-1/PD-L1 provoca mayor actividad de linfocitos T en sistemas con infección crónica. El bloqueo de PD-L1 provocó mayor eliminación vírica y restableció la inmunidad en ratones con infección por el virus de la coriomeningitis linfocítica crónica (Barber, D.L. y col., "Restoring function in exhausted CD8 T cells during chronic viral infection", Nature, 439(7077):682-687 (2006)). Los ratones humanizados infectados con VIH-1 muestran una protección mejorada contra la viremia y el agotamiento vírico de linfocitos T de CD4+ (Palmer y col., J. Immunol. (2013)). El bloqueo de PD-1/PD-L1 a través de anticuerpos monoclonales contra PD-L1 puede restaurar la funcionalidad específica de antígeno in vitro para linfocitos T de pacientes con VIH (Day, Nature 2006; Petrovas, J. Exp. Med. (2006); Trautman, Nature Med. (2006); D'Souza, J. Immunol. (2007); Zhang, Blood (2007); Kaufmann, Nature Imm. (2007); Kasu, J. Immunol. (2010); Porichis, Blood (2011)), pacientes con VHC (Golden-Mason, J. Virol. (2007); Jeung, J. Leuk. Biol. (2007); Urbani, J. Hepatol. (2008); Nakamoto, PLoS Path. (2009); Nakamoto, Gastroenterology (2008)) y HBV patients (Boni, J. Virol. (2007); Fisicaro, Gastro. (2010); Fisicaro y col., Gastroenterology (2012); Boni y col., Gastro. (2012); Penna y col., J. Hep. (2012); Raziorrough, Hepatology (2009); Liang, World J. Gastro. (2010); Zhang, Gastro. (2008)).

También se ha mostrado que el bloqueo de la interacción PD-L1/CD80 estimula la inmunidad (Yang, J. y col., J. Immunol., 187(3):1113-1119 (1 de agosto de 2011)). Se ha mostrado que la estimulación inmunitaria resultante del bloqueo de la interacción PD-L1/CD80 se potencia a través de la combinación con el bloqueo de interacciones PD-1/^pD-L1 o PD-1/PD-L2 adicionales.

Se ha planteado la hipótesis de que las alteraciones en los fenotipos de las células inmunitarias son un factor importante en el choque séptico (Hotchkiss, y col., Nat. Rev. Immunol. (2013)). Estos incluyen mayores niveles de PD-1 y PD-L1 (Guignant, y col., Crit. Care (2011)), Las células de pacientes con choque séptico con mayores niveles de PD-1 y PD-L1 presentan un mayor nivel de apoptosis de linfocitos T. Los anticuerpos dirigidos a p D-L1, pueden reducir el nivel de apoptosis de células inmunitarias (Zhang y col., Crit. Care (2011)). Asimismo, los ratones que carecen de expresión de PD-1 son más resistentes a los síntomas de choque séptico que los ratones de tipo silvestre. Yang, J. y col., J. Immunol., 187(3):1113-1119 (1 de agosto de 2011)). Los estudios han revelado que el bloqueo de las interacciones de anticuerpos que usan PD-L1 puede suprimir respuestas inmunitarias inapropiadas y aliviar síntomas de enfermedad.

Además de mejorar las respuestas inmunológicas a antígenos crónicos, también se ha demostrado que el bloqueo de la ruta PD-l/PD-LI mejora las respuestas a la vacunación, incluyendo la vacunación terapéutica en el contexto de la infección crónica (Ha, S.J. y col., "Enhancing therapeutic vaccination by blocking PD-1-mediated inhibitory signals during chronic infection", J. Exp. Med., 205(3):543-555 (2008); Finnefrock, A.C. y col., "PD-1 blockade in rhesus macaques: impact on chronic infection and prophylactic vaccination", J. Immunol., l82(2):980-987 (2009); Song, M.-Y. y col., "Enhancement of vaccine-induced primary and memory CD8+ t-cell responses by soluble PD-1", J. Immunother., 34(3):297-306 (2011)).

Las moléculas descritas en el presente documento demuestran la capacidad de bloquear la interacción de PD-L1 con PD-1, en sistemas tanto bioquímicos como experimentales basados en células. Estos resultados son coherentes con un potencial de administración terapéutica para mejorar la inmunidad en cáncer o infección crónica, incluyendo la vacuna terapéutica.

Los péptidos macrocíclicos descritos en el presente documento son capaces de inhibir la interacción de PD-L1 con PD-1 y con CD80. Estos compuestos han demostrado unión altamente eficaz con PD-L1, bloqueo de la interacción de PD-L1 con PD-1 o CD80 y son capaces de promover mayor actividad funcional de linfocitos T, haciéndolos de esta manera candidatos para formulaciones de liberación parenteral, oral, pulmonar, nasal, bucal y sostenida.

De acuerdo con un primer aspecto, la presente invención se refiere a un compuesto seleccionado entre el Ejemplo 3211, Ejemplo 32l2, Ejemplo 3213, Ejemplo 3216, Ejemplo 3217, Ejemplo 3218, Ejemplo 3219, Ejemplo 3220, Ejemplo 322l, Ejemplo 3222, Ejemplo 3223, Ejemplo 3224, Ejemplo 3225, Ejemplo 3227, Ejemplo 3228, Ejemplo 3229, Ejemplo 3231, Ejemplo 3236, Ejemplo 3237, Ejemplo 3238, Ejemplo 3239, Ejemplo 3240, Ejemplo 324l, Ejemplo 3242, Ejemplo 3243, Ejemplo 3244, Ejemplo 3245, Ejemplo 3246, Ejemplo 3614, Ejemplo 3616, Ejemplo 36l7, Ejemplo 3618, Ejemplo 3628, Ejemplo 3637, Ejemplo 3639, Ejemplo 3640, Ejemplo 364l, Ejemplo 3642, Ejemplo 3643, Ejemplo 3644, Ejemplo 3645, Ejemplo 3646, Ejemplo 3647, Ejemplo 3648, Ejemplo 9188, Ejemplo 9189, Ejemplo 9190, Ejemplo 9191, Ejemplo 9l92, Ejemplo 9193, Ejemplo 9194, Ejemplo 9l95, Ejemplo 9196, Ejemplo 92I3, Ejemplo 9214, Ejemplo 9215, Ejemplo 92l6, Ejemplo 92l7, Ejemplo 9218, Ejemplo 9219, Ejemplo 9220, Ejemplo 9221, Ejemplo 9222, Ejemplo 9223, Ejemplo 9224, Ejemplo 9225, Ejemplo 9226, Ejemplo 9227, Ejemplo 9228, Ejemplo 9229, Ejemplo 9230, Ejemplo 9231, Ejemplo 9232, Ejemplo 9233, Ejemplo 9234, Ejemplo 9235, Ejemplo 9236, Ejemplo 9237, Ejemplo 9238, Ejemplo 9239, Ejemplo 9240, Ejemplo 9249, Ejemplo 9251, Ejemplo 9252, Ejemplo 9264, Ejemplo 9265, Ejemplo 9266, Ejemplo 9267, Ejemplo 9268, Ejemplo 9269, Ejemplo 9270, Ejemplo 9271, Ejemplo 9272, Ejemplo 9273, Ejemplo 9274, Ejemplo 9275, Ejemplo 9276, Ejemplo 9277, Ejemplo 9278, Ejemplo 9279, Ejemplo 9280, Ejemplo 9281, Ejemplo 9282, Ejemplo 9283, Ejemplo 9284, Ejemplo 9285, Ejemplo 9286, Ejemplo 9287, Ejemplo 9288, Ejemplo 9289, Ejemplo 9290, Ejemplo 929l, Ejemplo 9292, Ejemplo 9293, Ejemplo 9294, Ejemplo 9295, Ejemplo 9296, Ejemplo 9297, Ejemplo 9298, Ejemplo 9299, Ejemplo 9300, Ejemplo 9301, Ejemplos 9302, Ejemplo 9303, Ejemplo 9304, Ejemplo 9305, Ejemplo 9306, Ejemplo 9307, Ejemplo 9308, Ejemplo 9309, Ejemplo 93l0, Ejemplo 9311, Ejemplo 9312, Ejemplo 9313, Ejemplo 9314, 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Ejemplo 10069, Ejemplo 10070, Ejemplo 10071, Ejemplo 10072, Ejemplo 10073, Ejemplo 10074, Ejemplo 10075, Ejemplo 10076, Ejemplo 10077, Ejemplo 10078, Ejemplo 10079, Ejemplo 10080, Ejemplo 10081, Ejemplo 10082, Ejemplo 10083, Ejemplo 10084, Ejemplo 10085, Ejemplo 10086, Ejemplo 10087, Ejemplo 10088, Ejemplo 10089, Ejemplo 10090, Ejemplo 10091, Ejemplo 10092, Ejemplo 10093, Ejemplo 10094, Ejemplo 10095, Ejemplo 10096, Ejemplo 10097, Ejemplo 10098, Ejemplo 10099, Ejemplo 10100, Ejemplo 10102, Ejemplo 10103, Ejemplo 10104, Ejemplo 10105, Ejemplo 10106, Ejemplo 10107, Ejemplo 10108, Ejemplo 10109, Ejemplo 10110, Ejemplo 10111, Ejemplo 10112, Ejemplo 10113, Ejemplo 10114, Ejemplo 10115, Ejemplo 10116, Ejemplo 10117, Ejemplo 10118, Ejemplo 10119, Ejemplo 10120, Ejemplo 10121, Ejemplo 10148, Ejemplo 10149, Ejemplo 10150, Ejemplo 10151, Ejemplo 10152, Ejemplo 10153, Ejemplo 10154, Ejemplo 10155, Ejemplo 10156, Ejemplo 10157, Ejemplo 10158, Ejemplo 10159, Ejemplo 10160, Ejemplo 10161, Ejemplo 10162, Ejemplo 10163, Ejemplo 10164, Ejemplo 10165, Ejemplo 10166, Ejemplo 10167, Ejemplo 10168, Ejemplo 10169, Ejemplo 10170, Ejemplo 10171, Ejemplo 10172, Ejemplo 10173, Ejemplo 10174, Ejemplo 10175, Ejemplo 10176, Ejemplo 10177, Ejemplo 10178, Ejemplo 10179, Ejemplo 10180, Ejemplo 10181, Ejemplo 10182, Ejemplo 10183, Ejemplo 10184, Ejemplo 10185, Ejemplo 10186, Ejemplo 10187, Ejemplo 10188, Ejemplo 10189, Ejemplo 10190, Ejemplo 10191, Ejemplo 10192, Ejemplo 10193, Ejemplo 10194, Ejemplo 10195, Ejemplo 10533, Ejemplo 10535, Ejemplo 10542, Ejemplo 10543, Ejemplos 10551, Ejemplo 10640, Ejemplo 10556, Ejemplo 10557, Ejemplo 10558, Ejemplo 10559, Ejemplo 10560, Ejemplo 10561, Ejemplo 10562, Ejemplo 10563, Ejemplo 10564, Ejemplo 10565, Ejemplo 10566, Ejemplo 10567, Ejemplo 10568, Ejemplo 10569, Ejemplo 10570, Ejemplo 10571, Ejemplo 10572, Ejemplo 10573, Ejemplo 10574, Ejemplo 10575, Ejemplo 10576, Ejemplo 10577, Ejemplo 10578, Ejemplo 10579, Ejemplo 10580, Ejemplo 10581, Ejemplo 10582, Ejemplo 10583, Ejemplo 10584, Ejemplo 10585, Ejemplo 10586, Ejemplo 10587, Ejemplo 10588, Ejemplo 10589, Ejemplo 10590, Ejemplo 10591, Ejemplo 10592, Ejemplo 10593, Ejemplo 10594, Ejemplo 10595, Ejemplo 10596, Ejemplo 10597, Ejemplo 10598, Ejemplo 10599, Ejemplo 10600, Ejemplo 10601, Ejemplo 10602, Ejemplo 10603, Ejemplo 10604, Ejemplo 10605, Ejemplo 10606, Ejemplo 10607, Ejemplo 10609, Ejemplo 10611, Ejemplo 10610, Ejemplo 10612, Ejemplo 10613, Ejemplo 10614, Ejemplo 10615, Ejemplo 10616, Ejemplo 10617, Ejemplo 10618, Ejemplo 10619, Ejemplo 10620, Ejemplo 10621, Ejemplo 10622, Ejemplo 10623, Ejemplo 10624, Ejemplo 10625, Ejemplo 10626, Ejemplo 10627, Ejemplo 10628, Ejemplo 10629, Ejemplo 10630, Ejemplo 10631, Ejemplo 10632, Ejemplo 10633, Ejemplo 10634, Ejemplo 10635, Ejemplo 10636, Ejemplo 10637 y Ejemplo 10638; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

De acuerdo con un segundo aspecto, la presente invención se refiere a un compuesto seleccionado entre el Ejemplo 1240, Ejemplo 1241, Ejemplo 1244, Ejemplo 1245, Ejemplo 1246, Ejemplo 1247, Ejemplo 1248, Ejemplo 1250, Ejemplo 1251, Ejemplo 1252, Ejemplo 1255, Ejemplo 1256, Ejemplo 1257, Ejemplo 1258, Ejemplo 1259, Ejemplo 1260, Ejemplo 1261, Ejemplo 1262, Ejemplo 1272, Ejemplo 1273, Ejemplo 1275, Ejemplo 1276, Ejemplo 1277, Ejemplo 1278, Ejemplo 1279, Ejemplo 1280, Ejemplo 1281, Ejemplo 1282, Ejemplo 1283, Ejemplo 1285, Ejemplo 1289, Ejemplo 1306, Ejemplo 1309, Ejemplo 1501, Ejemplo 1502, Ejemplo 1503, Ejemplo 1504, Ejemplo 1505, Ejemplo 1506, Ejemplo 1507, Ejemplo 1508, Ejemplo 1509, Ejemplo 1510, Ejemplo 1511, Ejemplo 1512, Ejemplo 1513, Ejemplo 1514, Ejemplo 1519, Ejemplo 1520, Ejemplo 1522, Ejemplo 1523, Ejemplo 1525, Ejemplo 1526, Ejemplo 1528, Ejemplo 1529, Ejemplo 1530, Ejemplo 1531, Ejemplo 1532, Ejemplo 1533, Ejemplo 1534, Ejemplo 1535, Ejemplo 1536, Ejemplo 1537, Ejemplo 1538, Ejemplo 1541, Ejemplo 1542, Ejemplo 5148, Ejemplo 5150, Ejemplo 5151, Ejemplo 5152, Ejemplo 5154, Ejemplo 5156, Ejemplo 5157, Ejemplo 5158, Ejemplo 5159, Ejemplo 5160, Ejemplo 5161, Ejemplo 5162, Ejemplo 5164, Ejemplo 5165, Ejemplo 5167, Ejemplo 5169, Ejemplo 5170, Ejemplo 5174, Ejemplo 5175, Ejemplo 5177, Ejemplo 5178, Ejemplo 5179, Ejemplo 5182, Ejemplo 5183, Ejemplo 5184, Ejemplo 5186, Ejemplo 5189, Ejemplo 5190, Ejemplo 5191, Ejemplo 5196, Ejemplo 5198, Ejemplo 5200, Ejemplo 5201, Ejemplo 5202, Ejemplo 5204, Ejemplo 5205, Ejemplo 5207, Ejemplo 5208, Ejemplo 5209, Ejemplo 5211, Ejemplo 5214, Ejemplo 5215, Ejemplo 5216, Ejemplo 5218, Ejemplo 5219, Ejemplo 5221, Ejemplo 5223, Ejemplo 5224, Ejemplo 5225, Ejemplo 5228, Ejemplo 5229, Ejemplo 5230, Ejemplo 5232, Ejemplo 5233, Ejemplo 5234, Ejemplo 5236, Ejemplo 5237, Ejemplo 5240, Ejemplo 5242, Ejemplo 5243, Ejemplo 5245, Ejemplo 5246, Ejemplo 5247, Ejemplo 5248, Ejemplo 5249, Ejemplo 5251, Ejemplo 5252, Ejemplo 5255, Ejemplo 5256, Ejemplo 5257, Ejemplo 5260, Ejemplo 5261, Ejemplo 5262, Ejemplo 5265, Ejemplo 6168, Ejemplo 6262, Ejemplo 6272, Ejemplo 7067, Ejemplo 7068, Ejemplo 7069, Ejemplo 7070, Ejemplo 7071, Ejemplo 7072, Ejemplo 7073, Ejemplo 7075, Ejemplo 7077, Ejemplo 7078, Ejemplo 7079, Ejemplo 7080, Ejemplo 7081, Ejemplo 7082, Ejemplo 7083, Ejemplo 7084, Ejemplo 7085, Ejemplo 7086, Ejemplo 7087, Ejemplo 7088, Ejemplo 7088, Ejemplo 7089, Ejemplo 7090, Preparación de Ejemplo 7091, Ejemplo 7092, Ejemplo 7093, Ejemplo 7094, Ejemplo 7095, Ejemplo 7096, Ejemplo 7097, Ejemplo 7098, Ejemplo 7099, Ejemplo 7100, Ejemplo 7101, Ejemplo 7102, Ejemplo 7103, Ejemplo 7104, Ejemplo 7105, Ejemplo 7106, Ejemplo 7107, Ejemplo 7108, Ejemplo 7109, Ejemplo 7110, Ejemplo 7111, Ejemplo 7112, Ejemplo 7113, Ejemplo 7114, Ejemplo 7115, Ejemplo 7117, Ejemplo 7118, Ejemplo 7119, Ejemplo 7120, Ejemplo 7121, Ejemplo 7122, Ejemplo 7123, Ejemplo 7124, Ejemplo 7125, Ejemplo 7127, Ejemplo 7128, Ejemplo 7129, Ejemplo 7130, Ejemplo 7131, Ejemplo 7132, Ejemplo 7133, Ejemplo 7134, Ejemplo 7135, Ejemplo 7136, Ejemplo 7137, Ejemplo 7138, Ejemplo 7139, Ejemplo 7152, Ejemplo 9115, Ejemplo 9116, Ejemplo 9117, Ejemplo 9118, Ejemplo 9119, Ejemplo 9120, Ejemplo 9121, Ejemplo 9122, Ejemplo 9123, Ejemplo 9124, Ejemplo 9125, Ejemplo 9126, Ejemplo 9127, Ejemplo 9128, Ejemplo 9129, Ejemplo 9130, Ejemplo 9131, Ejemplo 9132, Ejemplo 9133, Ejemplo 9134, Ejemplo 9135, Ejemplo 9136, Ejemplo 9137, Ejemplo 9138, Ejemplo 9139, Ejemplo 9140, Ejemplo 9141, Ejemplo 9142, Ejemplo 9143, Ejemplo 9144, Ejemplo 9145, Ejemplo 9146, Ejemplo 9147, Ejemplo 9150, Ejemplo 9155, Ejemplo 9156, Ejemplo 9157, Ejemplo 9158, Ejemplo 9159, Ejemplo 9160, Ejemplo 9161, Ejemplo 9162, Ejemplo 9163, Ejemplo 9164, Ejemplo 9165, Ejemplo 9168, Ejemplo 9169, Ejemplo 9170, Ejemplo 9171, Ejemplo 9172, Ejemplo 9173, Ejemplo 9174, Ejemplo 9175, Ejemplo 9176, Ejemplo 9177, Ejemplo 9178, Ejemplo 9179, Ejemplo 9180, Ejemplo 9181, Ejemplo 9182, Ejemplo 9183, Ejemplo 9184, Ejemplo 9185, Ejemplo 9186, Ejemplo 9187, Ejemplo 10012, Ejemplo 10013, Ejemplo 10014, Ejemplo 10015, 10016, Ejemplo 10017, Ejemplo 10018, Ejemplo 10019, Ejemplo 10020, Ejemplo 10021, Ejemplo 10022, Ejemplo 10023, Ejemplo 10024, Ejemplo 10025, Ejemplo 10034, Ejemplo 10035, Ejemplo 10036, Ejemplo 10037, Ejemplo 10042, Ejemplo 10043, Ejemplo 10044, Ejemplo 10045, Ejemplo 10047, Ejemplo 10049, Ejemplo 10050, Ejemplo 10051, Ejemplo 10052, Ejemplo 10123, Ejemplo 10132, Ejemplo 10136, Ejemplo 10137, Ejemplo 10138, Ejemplo 10139, Ejemplo 10140, Ejemplo 10141, Ejemplo 10142, Ejemplo 10143, Ejemplo 10144, Ejemplo 10145, Ejemplo 10146, Ejemplo 10147, Ejemplo 10530, Ejemplo 10531, Ejemplo 10532, Ejemplo 10534, Ejemplo 10552, Ejemplo 10553, Ejemplo 10554, Ejemplo 10555, Ejemplo 11001, Ejemplo 11002, Ejemplo 11003 y Ejemplo 11004; o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

De acuerdo con un tercer aspecto, la presente invención se refiere a un compuesto seleccionado entre el Ejemplo 1290, Ejemplo 1291, Ejemplo 1292, Ejemplo 1293, Ejemplo 1294, Ejemplo 1295, Ejemplo 1296, Ejemplo 1297, Ejemplo 1298, Ejemplo 1299, Ejemplo 1300, Ejemplo 1301, Ejemplo 1302, Ejemplo 1303, Ejemplo 1304, Ejemplo 1305, Ejemplo 5153, Ejemplo 5155, Ejemplo 5163, Ejemplo 5166, Ejemplo 5168, Ejemplo 5171, Ejemplo 5176, Ejemplo 5180, Ejemplo 5181, Ejemplo 5187, Ejemplo 5192, Ejemplo 5199, Ejemplo 5203, Ejemplo 5213, Ejemplo 5220, Ejemplo 5222, Ejemplo 5226, Ejemplo 5227, Ejemplo 5231, Ejemplo 5238, Ejemplo 5241, Ejemplo 5253, Ejemplo 5254, Ejemplo 5259, Ejemplo 6118, Ejemplo 6n9 , Ejemplo 6128, Ejemplo 6134, Ejemplo 6135, Ejemplo 6136, Ejemplo 6137, Ejemplo 6140, Ejemplo 6141, Ejemplo 6146, Ejemplo 6156, Ejemplo 6158, Ejemplo 6162, Ejemplo 6170, Ejemplo 6172, Ejemplo 6176, Ejemplo 6180, Ejemplo 6183, Ejemplo 6184, Ejemplo 6185, Ejemplo 6189, Ejemplo 6201, Ejemplo 6202, Ejemplo 6203, Ejemplo 6204, Ejemplo 6207, Ejemplo 6209, Ejemplo 6213, Ejemplo 6216, Ejemplo 6224, Ejemplo 6228, Ejemplo 6236, Ejemplo 6244, Ejemplo 6247, Ejemplo 6249, Ejemplo 6250, Ejemplo 6258, Ejemplo 6266, Ejemplo 6267, Ejemplo 6269, Ejemplo 6274, Ejemplo 6276, Ejemplo 6283, Ejemplo 6284, Ejemplo 6288, Ejemplo 6289, Ejemplo 6293, Ejemplo 6296, Ejemplo 6297, Ejemplo 6301, Ejemplo 6303, Ejemplo 6309, Ejemplo 6310, Ejemplo 6324, Ejemplo 6331, Ejemplo 6334, Ejemplo 6335, Ejemplo 6338, Ejemplo 6344, Ejemplo 6347, Ejemplo 6350, Ejemplo 6361, Ejemplo 6363, Ejemplo 6365, Ejemplo 6369, Ejemplo 6370, Ejemplo 6372, Ejemplo 6380, Ejemplo 6383, Ejemplo 6384, Ejemplo 6389, Ejemplo 6390, Ejemplo 6391, Ejemplo 6392, Ejemplo 6393, Ejemplo 6394, Ejemplo 6395, Ejemplo 6396, Ejemplo 6397, Ejemplo 6398, Ejemplo 6399, Ejemplo 6400, Ejemplo 6401, Ejemplo 6402, Ejemplo 6403, Ejemplo 6404, Ejemplo 6405, Ejemplo 6406, Ejemplo 6407, Ejemplo 6408, Ejemplo 6409, Ejemplo 6410, Ejemplo 6411, Ejemplo 6412, Ejemplo 6415, Ejemplo 6416, Ejemplo 7140, Ejemplo 7141, Ejemplo 7142, Ejemplo 7143, Ejemplo 7144, Ejemplo 7145, Ejemplo 7146, Ejemplo 7147, Ejemplo 7148, Ejemplo 7151, Ejemplo 7153 y Ejemplo 7154.

En otro aspecto, la presente invención se refiere a al menos un péptido macrocíclico de acuerdo con la invención para su uso en la mejora, estimulación y/o aumento de la respuesta inmunitaria en un sujeto que lo necesite. En una realización, el uso comprende además administrar un agente adicional antes de, después o simultáneamente con el péptido o péptidos macrocíclicos descritos en el presente documento. En otra realización, el agente adicional es un agente antimicrobiano, un agente antivírico, un agente citotóxico y/o un modificador de la respuesta inmunitaria. En otro aspecto, la presente invención se refiere dirigida a uno o más péptidos macrocíclicos de acuerdo con la invención para su uso en la inhibición del crecimiento, proliferación o metástasis de células cancerosas en un sujeto que lo necesite. En una realización el cáncer se selecciona entre melanoma, carcinoma de células renales, cáncer de pulmón no microcítico (CPNM) escamoso, CPNM no escamoso, cáncer colorrectal, cáncer de próstata resistente a la castración, cáncer de ovario, cáncer gástrico, carcinoma hepatocelular, carcinoma de páncreas, carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello, carcinomas de esófago, del tracto gastrointestinal y de mama y una neoplasia maligna hematológica.

En otro aspecto, la presente invención se refiere a al menos un péptido macrocíclico de acuerdo con la invención para su uso en el tratamiento de una enfermedad infecciosa en un sujeto que lo necesita. En otra realización, la enfermedad infecciosa es causada por un virus. En una realización el virus se selecciona entre VIH, hepatitis A, hepatitis B, hepatitis C, virus del herpes y gripe.

En otro aspecto, la presente invención se refiere a al menos un péptido macrocíclico de acuerdo con la invención para su uso en el tratamiento del choque séptico en un sujeto que lo necesite.

En otro aspecto, la presente invención se refiere a al menos un péptido macrocíclico de acuerdo con la invención para bloquear la interacción de PD-L1 con PD-1 y/o CD80 en un sujeto.

En una realización la presente divulgación proporciona un compuesto de fórmula (I)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:

A se selecciona entre un enlace,

en donde:

representa el punto de unión al grupo carbonilo y r representa el punto de unión al átomo de nitrógeno; n es 0 o 1;

R14 y R15 se seleccionan independientemente entre hidrógeno y metilo; y

R16 se selecciona entre

hidrógeno, -CHR17C(O)NH2, -CHR17C(O)NHCHR18C(O)NH2,

y -CHR17 C(O)NHCHR18C(O)NHCH2C(O)NH2; en donde R17 se selecciona entre hidrógeno y -CH2OH y en donde R18 se selecciona entre hidrógeno y metilo;

Rc, Rf, Rh, Ri, Rm y Rn son hidrógeno;

Ra, Re, Rj y Rk, cada uno de se selecciona independientemente entre hidrógeno y metilo;

R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, y R13 se seleccionan independientemente entre una cadena lateral de aminoácido natural y una cadena lateral de aminoácido no natural o forman un anillo con el correspondiente grupo vecinal R como se describe a continuación;

Re y R k pueden cada uno formar un anillo con el correspondiente grupo R vecinal y los átomos a los que están unidos se seleccionan entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno a cuatro grupos seleccionados independientemente entre amino, ciano, metilo, halo e hidroxi;

Rb es metilo o, Rb y R2, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo seleccionado entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno a cuatro grupos seleccionados independientemente entre amino, ciano, metilo, halo e hidroxi; Rd es hidrógeno o metilo, o, Rd y R4, junto con los átomos a los que están unidos, pueden formar un anillo seleccionado entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno a cuatro grupos seleccionados independientemente entre amino, ciano, metilo, halo, hidroxi y fenilo;

Rg es hidrógeno o metilo o Rg y R7, junto con los átomos a los que están unidos, pueden formar un anillo seleccionado entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno a cuatro grupos seleccionados independientemente entre amino, bencilo opcionalmente sustituido con un grupo halo, benciloxi, ciano, ciclohexilo, metilo, halo, hidroxi, isoquinoliniloxi opcionalmente sustituido con un grupo metoxi, quinoliniloxi opcionalmente sustituido con un grupo halo y tetrazolilo; y en donde el anillo de pirrolidina y de piperidina están opcionalmente condensados a un grupo ciclohexilo, fenilo o indol; y

R1 es metilo o, R1 y R 12, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo seleccionado entre azetidina y pirrolidina, en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno a cuatro seleccionados independientemente entre amino, ciano, metilo, halo e hidroxi.

En otra realización la presente divulgación proporciona un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde A es

Rd es metilo o, Rd y R4, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo seleccionado entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre amino, ciano, metilo, halo, hidroxi y fenilo;

Rg es metilo o, Rg y R7, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo seleccionado entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre amino, bencilo opcionalmente sustituido con un grupo halo, benciloxi, ciano, ciclohexilo, metilo, halo, hidroxi, isoquinoliniloxi opcionalmente sustituido con un grupo metoxi, quinoliniloxi opcionalmente sustituido con un grupo halo y tetrazolilo; y en donde el anillo de pirrolidina y de piperidina están opcionalmente condensados a un grupo ciclohexilo, fenilo o indol; y Rk es metilo o, R k y R 11, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo seleccionado entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre amino, ciano, metilo, halo e hidroxi.

Rd y R4, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo seleccionado entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre amino, ciano, metilo, halo e hidroxi;

Rg y R7, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo de pirrolidina, en donde dicho anillo está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre amino, bencilo opcionalmente sustituido con un grupo halo, benciloxi, ciano, ciclohexilo, metilo, halo, hidroxi, isoquinoliniloxi opcionalmente sustituido con un grupo metoxi, quinoliniloxi opcionalmente sustituido con un grupo halo y tetrazolilo; y en donde el anillo de pirrolidina y de piperidina están opcionalmente condensados a un grupo ciclohexilo, fenilo o indol; y

Rk es metilo.

Rg y R7, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo de pirrolidina, en donde dicho anillo está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre amino, bencilo opcionalmente sustituido con un grupo halo, benciloxi, ciano, ciclohexilo, metilo, halo, hidroxi, isoquinoliniloxi opcionalmente sustituido con un grupo metoxi, quinoliniloxi opcionalmente sustituido con un grupo halo y tetrazolilo; y en donde el anillo de pirrolidina y de piperidina están opcionalmente condensados a un grupo ciclohexilo, fenilo o indol;

Rk es metilo; y

R8 se selecciona entre:

azaindolilalquilo C1-C3, benzotiazolilalquilo C1-C3, benzotienilalquilo C1-C3, benciloxialquilo C1-C3, difenilmetilo, furanilalquilo C1-C3, imidazolilalquilo C1-C3, naftilalquilo C1-C3, piridinilalquilo C1-C3, tiazolilalquilo C1-C3, tienilalquilo C1-C3; y

indolilalquilo C1-C3, en donde la parte indolilo está opcionalmente sustituido con un grupo seleccionado entre alquilo C1-C3, ciano, halo e hidroxi.

Rk es metilo; y

R8 es 3-indolilalquilo C1-C3 opcionalmente sustituido con un grupo seleccionado entre alquilo C1-C3, halo, hidroxi o ciano.

En otra realización la presente divulgación proporciona un compuesto de fórmula (II)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:

A se selecciona entre un enlace,

en donde:

/ representa el punto de unión al grupo carbonilo y / representa el punto de unión al átomo de nitrógeno; n es 0 o 1;

R14 y R15 se seleccionan independientemente entre hidrógeno y metilo; y

R16 se selecciona entre

hidrógeno, -CH R17C(O)NH2, -CH R17C(O)NHCHR18C(O)NH2,

y -CH R17C(O)NHCHR18C(O)NHCH2C(O)NH2;

en donde R17 se selecciona entre hidrógeno y -CH2OH y en donde R18 se selecciona entre hidrógeno y metilo; Ra, Rf, Rj, R k, R1 y Rm son hidrógeno;

Rb y Rc son metilo;

Rg se selecciona entre hidrógeno y metilo;

R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R 10, R 11, y R12 se seleccionan independientemente entre una cadena lateral de aminoácido natural y una cadena lateral de aminoácido no natural o forman un anillo con el correspondiente grupo vecinal R como se describe a continuación;

Rd se selecciona entre hidrógeno y metilo, o, Rd y R4, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo seleccionado entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno a cuatro grupos seleccionados independientemente entre amino, ciano, metilo, halo, halometilo e hidroxi;

Re se selecciona entre hidrógeno y metilo, o, Re y R5, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo seleccionado entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno a cuatro grupos seleccionados independientemente entre amino, ciano, metilo, halo, halometilo e hidroxi;

Rh se selecciona entre hidrógeno y metilo, o, R h y R8, junto con los átomos a los que están unidos, forman un anillo seleccionado entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno a cuatro grupos seleccionados independientemente entre amino, ciano, metilo, halo, halometilo e hidroxi; y

Ri se selecciona entre hidrógeno y metilo, o, Ri y R9, junto con los átomos a los que están unidos se seleccionan entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno a cuatro grupos seleccionados independientemente entre amino, ciano, metilo, halo, halometilo e hidroxi.

En otra realización la presente divulgación proporciona un compuesto de fórmula (II) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde A es

Rd es metilo, o, Rd y R4, junto con los átomos a los que están unidos se seleccionan entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre amino, ciano, metilo, halo, halometilo e hidroxi;

Rg es metilo; y

Ri es metilo, o, R i y R9, junto con los átomos a los que están unidos se seleccionan entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre amino, ciano, metilo, halo, halometilo e hidroxi.

Rg es metilo;

Ri es metilo, o, R i y R9, junto con los átomos a los que están unidos se seleccionan entre azetidina, pirrolidina, morfolina, piperidina, piperazina y tetrahidrotiazol; en donde cada anillo está opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados independientemente entre amino, ciano, metilo, halo, halometilo e hidroxi; y

R7 es fenilalquilo C1-C3 opcionalmente sustituido con un grupo fluoro.

En otra realización, la presente divulgación proporciona al menos un péptido macrocíclico descrito en el presente documento para su uso en la mejora, estimulación y/o aumento de la respuesta inmunitaria en un sujeto que lo necesite. En otra realización, el uso comprende además administrar un agente adicional antes de, después o simultáneamente con el péptido o péptidos macrocíclicos descritos en el presente documento. En otra realización, el agente adicional es un agente antimicrobiano, un agente antivírico, un agente citotóxico y/o un modificador de la respuesta inmunitaria.

En otra realización la presente divulgación proporciona uno o más péptidos macrocíclicos descritos en el presente documento para su uso en la inhibición del crecimiento, proliferación o metástasis de células cancerosas en un sujeto que lo necesite. En otra realización, el cáncer se selecciona entre melanoma, carcinoma de células renales, cáncer de pulmón no microcítico (CPNM) escamoso, CPNM no escamoso, cáncer colorrectal, cáncer de próstata resistente a la castración, cáncer de ovario, cáncer gástrico, carcinoma hepatocelular, carcinoma de páncreas, carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello, carcinomas de esófago, del tracto gastrointestinal y de mama y una neoplasia maligna hematológica.

En otra realización, la presente divulgación proporciona al menos un péptido macrocíclico descrito en el presente documento para su uso en el tratamiento de una enfermedad infecciosa en un sujeto que lo necesite. En otra realización, la enfermedad infecciosa es causada por un virus. En otra realización, el virus se selecciona entre VIH, hepatitis A, hepatitis B, hepatitis C, virus del herpes y gripe.

En otra realización, la presente divulgación proporciona uno o más péptidos macrocíclicos descritos en el presente documento para su uso en el tratamiento del choque séptico en un sujeto que lo necesite.

En otra realización, la presente divulgación proporciona al menos un péptido macrocíclico descrito en el presente documento para su uso en el bloqueo de la interacción de PD-L1 con PD-1 y/o CD80 en un sujeto.

En los compuestos de fórmula (I) y (II) en donde las cadenas laterales R son parte de un anillo que está sustituido con metilo, se entiende que el grupo metilo puede estar en cualquier átomo de carbono sustituible en el anillo, incluido el carbono que está parte de la estructura primaria macrocíclica.

En compuestos de fórmula (I), las cadenas laterales R 1 preferidas son: fenilalanina, tirosina, 3-tien-2-ilo, 4-metilfenilalanina, 4-clorofenilalanina, 3-metoxifenilalananie, isotriptófano, 3-metilfenilalanina, 1-naftilalanina, 3,4-difluorofenilalanina, 4-fluorofenilalanina, 3,4-dimetoxifenilalanina, 3,4-diclorofenilalanina, 4-difluorometilfenilalanina, 2-metilfenilalanina, 2-naftilalanina, triptófano, 4-piridinilo, 4-bromofenilalanina, 3-piridinilo, 4-trifluorometilfenilalanina, 4-carboxifenilalanina, 4-metoxifenilalanina, bifenilalanina y 3-clorofenilalanina; y 2,4-diaminobutano.

En compuestos de fórmula (I) en donde R2 no es parte de un anillo, las cadenas laterales R2 preferidas son: alanina, serina y glicina.

En compuestos de fórmula (I), las cadenas laterales R3 preferidas son: asparagina, ácido aspártico, ácido glutámico, glutamina, serina, ornitina, lisina, histidina, treonina, leucina, alanina, 2,3-diaminopropano y 2,4-diaminobutano. En compuestos de fórmula (I) en donde R4 no es parte de un anillo, las cadenas laterales R4 preferidas son: valina, alanina, isoleucina y glicina.

En compuestos de fórmula (I), las cadenas laterales R5 preferidas son: histidina, asparagina, 2,3-diaminopropano, serina, glicina, 2,4-diaminobutano, treonina, alanina, lisina, ácido aspártico, alanina y 3-tiazolilalanina.

En compuestos de fórmula (I), las cadenas laterales R6 preferidas son: leucina, ácido aspártico, asparagina, ácido glutámico, glutamina, serina, lisina, 3-ciclohexano, treonina, ornitina, 2,4-diaminobutano, alanina, arginina y ornitina (CO CH3).

En compuestos de fórmula (I) en donde R7 no es parte de un anillo, las cadenas laterales R7 preferidas son: glicina, 2,4-diaminobutano, serina, lisina, arginina, ornitina, histidina, asparagina, glutamina, alanina y 2,4-diaminobutano (C(O)ciclobutano).

En compuestos de fórmula (I), las cadenas laterales R8 preferidas son triptófano y 1,2-benzoisotiazolinilalanina.

En compuestos de fórmula (I), las cadenas laterales R9 preferidas son: serina, histidina, lisina, ornitina, 2,4-dibutilamina, treonina, lisina, glicina, ácido glutámico, valina, 2,3-diaminopropano, arginina, ácido aspártico y tirosina. En compuestos de fórmula (I), las cadenas laterales R10 preferidas son: triptófano, benzoisotiazolilalanina, 1-naptilalanina, 5-flurotriptófano, metionina, 7-metiltriptófano, 5-clorotriptófano y -metiltriptófano.

En compuestos de fórmula (I), las cadenas laterales R11 preferidas son: norleucina, leucina, asparagina, fenilalanina, metionina, etoximatano, alanina, triptófano, isoleucina, fenilpropano, ácido glutámico, hexano y heptano.

En compuestos de fórmula (I) en donde R12 no es parte de un anillo, las cadenas laterales R12 preferidas son: norleucina, alanina, etoximatano, metionina, serina, fenilalanina, metoxietano, leucina, triptófano, isoleucina, ácido glutámico, hexano, heptano y glicina.

En compuestos de fórmula (I) las cadenas laterales R13 preferidas: arginina, ornitina, alanina, 2,4-diaminobutano, 2.3- diaminopropano, leucina, ácido aspártico, ácido glutámico, serina, lisina, treonina, ciclopropilmetano, glicina, valina, isoleucina, histidina y 2-aminobutano.

En compuestos de fórmula (II), las cadenas laterales R1 preferidas son: fenilalanina, 3-metoxifenilalanina, 2-fluorofenilalanina, 3-fluorofenilalanina, 4-fluorofenilalanina, 3,4-difluorofenilalanina, 3,5-difluorofenilalanina, 3,4,5-trifluorofenilalanina, 3-fluoro,4-clorofenilalanina, 3-cloro,4-fluorofenilalanina, 3-clorofenilalanina, 4-clorofenilalanina, 3.4- diclorofenilalanina, 3,5-diclorofenilalanina, 3,5-dicloro,4-fluorofenilalanina, 3-cloro,4,5-difluorofenilalanina, 4-bromofenilalanina, 4-nitrofenilalanina, 3-trifluorometilfenilalanina, 4-trifluoometilfenilalanina y 3-piridilalanina.

En compuestos de fórmula (II), las cadenas laterales R2 preferidas son: fenilalanina, alanina, histidina, tirosina, triptófano, ácido glutámico, 1-naftilalanina, 2-naftilalanina, 2-benzotiazolilalanina, 3-piridinilalanina y 4-piridinilalanina. En compuestos de fórmula (II), las cadenas laterales R3 preferidas son: norleucina, alanina, tirosina, ácido glutámico, leucina e isoleucina.

En compuestos de fórmula (II) en donde R4 no es parte de un anillo, las cadenas laterales R4 preferidas son: glicina y alanina.

En compuestos de fórmula (II) en donde R5 no es parte de un anillo, las cadenas laterales R5 preferidas son: ácido aspártico, ácido glutámico, arginina, lisina, asparagina, serina, 2,4-diaminobutano, 2,3-diaminopropano y 2-aminobutano.

En compuestos de fórmula (II) las cadenas laterales R6 preferidas son: valina, leucina, isoleucina, N-metiltreonina y ciclohexilmetano.

En compuestos de fórmula (II) las cadenas laterales R7 preferidas son: fenilalanina y 3-fluorofenilalanina.

En compuestos de fórmula (II) en donde R8 no es parte de un anillo, las cadenas laterales R8 preferidas son: tirosina, 3-yodotirosina, leucina, arginina, ácido glutámico, glutamina, pentafluorofenilalanina, 4-aminofenilalanina, 4-aminometilfenilalanina, 3,4-dimetoxifenilalanina, triptófano, 5-clorotriptófano, 5-hidroxitriptófano, isotriptófano, lisina, ornitina y 2,3-diaminopropano.

En compuestos de fórmula (II) las cadenas laterales R10 preferidas son: triptófano, 5-clorotriptófano, 7-azatriptófano, isotriptófano, 3-benzotiazolilalanina y 1 -naptilalanina.

En compuestos de fórmula (II) las cadenas laterales R11 preferidas son tirosina, 4-fluorofenilalanina, 4-aminometilfenilalanina, 4-aminofenilalanina y 3,4-dihidroxifenilalanina.

En compuestos de fórmula (II) las cadenas laterales R12 preferidas son: leucina, tirosina, arginina, lisina, ornitina, ácido glutámico, fenilalanina, 4-metilfenilalanina, 4-clorofenilalanina, 4-aminometilfenialanina, norleucina, ciclohexilalanina, 2,4-diaminobutano y 2,3-diaminopropano.

En compuestos de fórmula (II), cuando R4 y R9 son parte de un anillo, la estereoquímica preferida es la del isómero D y cuando R5 y R8 son parte de un anillo, la estereoquímica preferida es la del isómero L.

Una realización del tema descrito en el presente documento se refiere a un polipéptido que comprende una secuencia de Fórmula I(a):

A es un enlazador orgánico o peptídico entre Xaa1 y Xaa14, proporcionando de ese modo un péptido macrocíclico; Xaa1 es un aminoácido aromático o heteroaromático o alquilo o heteroarilalquilo que se produce de forma natural o no natural;

Xaa2 es un alquilo o alquilaminoácido N-metilado que se produce de forma natural o no natural;

Xaa3 es un aminoácido hidrófilo o alquilo o polar que se produce de forma natural o no natural;

Xaa4 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural, un alquilaminoácido o alquilaminoácido N-metilado;

Xaa5 es un aminoácido heteroaromático o un aminoácido de carga positiva o un alquil aminoácido que se produce de forma natural o no natural;

Xaa6 es un aminoácido hidrófilo o hidrófobo que se produce de forma natural o no natural o con carga positiva o negativa;

Xaa7 es un aminoácido hidrófilo o hidrófobo o de carga positiva o negativa N-metilado o no N-metilado que se produce de forma natural o no natural;

Xaa8 es un aminoácido aromático o heteroaromático o arilalquilo o heteroarilalquilo que se produce de forma natural o no natural;

Xaa9 es un aminoácido hidrófilo o hidrófobo o con carga positiva o negativa que se produce de forma natural o no natural;

Xaa10 es un aminoácido aromático o heteroaromático o arilalquilo o heteroarilalquilo o alquilo o heteroalquilo que se produce de forma natural o no natural;

Xaa11 es un aminoácido aromático o heteroaromático o alquilo o heteroalquilo N-metilado o no-N-metilado que se produce de forma natural o no natural;

Xaa12 es un aminoácido aromático o heteroaromático o alquilo o heteroalquilo N-metilado o no-N-metilado o no metilado que se produce de forma natural o no natural;

Xaa13 es un aminoácido hidrófilo o hidrófobo o con carga positiva o negativa que se produce de forma natural o no natural;

Xaa14 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que posee un grupo funcional que puede activarse adecuadamente para reaccionar con un extremo del conector A para producir un péptido cíclico;

Xaa15 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural o un espaciador seguido de una etiqueta o un espaciador seguido de un elemento solubilizante o potenciador de PK.

En otra realización, el tema descrito en el presente documento se refiere a un polipéptido que comprende una secuencia de Fórmula I(b):

A es un resto electrófilo tal como un aceptor Michael o un grupo cloro o bromoacetilo que es capaz de reaccionar con un grupo sulfhidrilo presente en el residuo Xaa14 para formar un enlace tioéter covalente, produciendo de ese modo un péptido macrocíclico; en donde dicho enlace tioéter puede o no oxidarse a los correspondientes sulfóxidos diastereoméricos; y en donde A puede estar opcionalmente presente; y en donde, si A está presente, puede ser un Gly u otro espaciador con una amina libre, la cual puede usarse para ciclar el péptido mediante la formación de enlaces amida con un grupo carboxilo en la cadena lateral de Xaa14, proporcionando de esa manera un péptido cíclico de lactama de extremo N a cadena lateral; y en donde, si A no está presente, el grupo amino N-terminal del residuo Xaai se puede usar para ciclar el péptido mediante la formación de enlaces amida con un grupo carboxilo en la cadena lateral de Xaai4, proporcionando de esa manera un péptido cíclico de lactama de extremo N a cadena lateral; y en donde, si A está presente, puede ser un Gly u otro espaciador con una amina libre, la cual puede usarse para ciclar el péptido mediante la formación de enlaces amida con el grupo a-carboxilo C-terminal de Xaai5, proporcionando de esa manera un péptido cíclico cabeza a cola;

y en donde, si A no está presente, el grupo amino N-terminal del aminoácido Xaai puede usarse para ciclar el péptido mediante la formación de enlaces amida con el grupo a-carboxilo C-terminal de Xaai5, proporcionando de esa manera un péptido cíclico cabeza a cola;

Xaai es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende L-Phe, L-Ala, L-Trp, L-Tyr, L-Phe(4-OMe), L-Phe(4-F), L-Phe(4-Cl), L-Phe(4-Br), L-Phe(4-Me), L-Phe(4-CFa), L-Phe(4-f-Bu), L-Phe(penta-F), L-i-Nal, L-2-Nal, L-Bip, L-mPhe, L-Tic, L-3-Pya, L-4-Pya, L-Tza, L-3-Tha;

Xaa2 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural seleccionado del grupo que consiste en L-Ala, L-mAla, mGly, L-mVal;

Xaa3 se selecciona entre el grupo que consiste en Gly, L-Asn y L-Ala;

Xaa4 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende L-Pro, L-Ala, L-a-Me-Pro, L-Pro(4R-OH), L-Pro(4R-OBzl), L-Pro(4R-NH2), L-Pro(3R-Ph), L-Pro(4S-Ph), L-Pro(5R-Ph), L-Azt, L-Pip, L-Oic, L-2,3-Metano-Pro, L-3,4-Metano-Pro, L-Val, L-Leu, L-Ile, L-mAla, L-mVal, L-mleu, L-Tza;

Xaa5 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural seleccionado del grupo que consiste en L-His, L-Ala, L-Tza, L-Arg, L-Lys, L-Orn, L-Dab y L-Dap;

Xaa6 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende L-Leu, L-Ala, L-Arg, L-His, L-Glu y L-Asp;

Xaa7 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende mGly, Gly, L-mAla, D-mAla, L-Pro, L-Ser, L-mSer L-Dab, L-Arg y L-His;

Xaa8 es L-Trp, L-Phe, L-Tyr, L-His, L-Phe(penta-F), L-Tza, L-Bzt, L-i-Nal, L-2-Nal, L-2-Pya, L-3-Pya, L-4-Pya; Xaa9 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende L-Ser, L-Ala, L-Arg y D-Asn; Xaaio es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural seleccionado del grupo que consiste en L-Trp, L-Ala, L-Met, L-Nle, L-Leu y L-Ile, L-Phe, L-Tyr, L-His, L-Phe(penta-F), L-Tza, L-Bzt, L-i-Nal, L-2-Nal, L-2-Pya, L-3-Pya, L-4-Pya;

Xaaii es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende L-mNle, L-Nle, L-mAla, L-Ala, L-Phe, L-mPhe y L-mleu, L-Ser, D-Nle y L-Pro;

Xaai2 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende L-mNle, L-Nle, L-mAla, L-Ala, L-Phe, L-mPhe, L-mleu y L-Pro;

Xaai3 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende L-Arg, L-Ala, L-Leu, L-Lys, L-Asp, L-Glu, L-His;

Xaai4 se selecciona entre el grupo que consiste en L-Cys, D-Cys, Asp, Glu, Gly, L-homo-Cys, D-homo-Cys, L-Pen, D-Pen, L-mCys y D-mCys;

Xaai5 e Gly o Gly seguido de un espaciador de PEG compuesto de al menos dos unidades de etilenglicol, o Gly seguido de un espaciador de PEG compuesto de al menos dos unidades de etilenglicol seguido de una etiqueta como biotina o Gly seguido de un espaciador seguido de un elemento potenciador de PK;

en donde Xaai5 está opcionalmente presente y en donde el carbono carbonilo C-terminal de dicho aminoácido está unido a un grupo hidroxilo para formar un ácido carboxílico o a un nitrógeno para formar una carboxamida (NH2), una alquil carboxamida (NHRi), o una dialquilcarboxamida (NRiR2);

en donde cada uno de Ri y R2 es un grupo alquilo o arilalquilo;

en donde, si Xaai5 no está presente, el carbono carbonilo C-terminal de Xaai4 está unido a un nitrógeno para formar una carboxamida (NH2), una alquil carboxamida (NHRi), o una dialquilcarboxamida (NRiR2);

en donde cada uno de Ri y R2 es un grupo alquilo o arilalquilo.

En otra realización, el tema descrito en el presente documento se refiere a un polipéptido que comprende una secuencia de Fórmula I(c):

en donde:

A es un resto electrófilo tal como un aceptor Michael o un grupo cloro o bromoacetilo que es capaz de reaccionar con un grupo sulfhidrilo presente en el residuo Xaai4 para formar un enlace tioéter covalente, produciendo de ese modo un péptido macrocíclico; en donde dicho enlace tioéter puede o no oxidarse a los correspondientes sulfóxidos diastereoméricos;

y en donde A puede estar opcionalmente presente; y en donde, si A está presente, puede ser un Gly u otro espaciador con una amina libre, la cual puede usarse para ciclar el péptido mediante la formación de enlaces amida con un grupo carboxilo en la cadena lateral de Xaai4, proporcionando de esa manera un péptido cíclico de lactama de extremo N a cadena lateral; y en donde, si A no está presente, el grupo amino N-terminal del residuo

i4

Xaai se puede usar para ciclar el péptido mediante la formación de enlaces amida con un grupo carboxilo en la cadena lateral de Xaa14, proporcionando de esa manera un péptido cíclico de lactama de extremo N a cadena lateral; y en donde, si A está presente, puede mediante un Gly u otro espaciador con una amina libre, la cual puede usarse para ciclar el péptido mediante la formación de enlaces amida con el grupo a-carboxilo C-terminal de Xaai5, proporcionando de esa manera un péptido cíclico cabeza a cola; y en donde, si A no está presente, el grupo amino N-terminal del aminoácido Xaai puede usarse para ciclar el péptido mediante la formación de enlaces amida con el grupo a-carboxilo C-terminal de Xaai5, proporcionando de esa manera un péptido cíclico cabeza a cola;

Xaa3 se selecciona entre el grupo que consiste en Gly, L-Asn y L-Ala;

Xaa4 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende L-Pro, L-Ala, L-a-Me-Pro, L-Pro(4R-OH), L-Pro(4R-NH2), L-Pro(4S-Ph), L-Azt, L-Pip y L-Oic;

Xaa5 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural seleccionado del grupo que consiste en L-His y L-Ala; Xaa6 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende L-Leu, L-Ala, L-Arg y L-Asp;

Xaa9 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende L-Ser, L-Ala, L-Arg y D-Asn; Xaaio es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural seleccionado del grupo que consiste en L-Trp, L-Ala, L-Met, L-Leu y L-Ile;

Xaaii es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende L-mNle, L-Nle, L-mAla, L-Ala, L-Phe, L-mPhe y L-mleu, L-Ser y D-Nle;

Xaai2 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende L-mNle, L-Nle, L-mAla y L-Ala;

Xaai3 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende L-Arg, L-Ala y L-Leu;

Xaai4 se selecciona entre el grupo que consiste en L-Cys, D-Cys, Asp, Glu y Gly;

Xaai5 e Gly o Gly seguido de un espaciador de PEG compuesto de al menos dos unidades de etilenglicol, o Gly seguido de un espaciador de PEG compuesto de al menos dos unidades de etilenglicol seguido de una etiqueta como biotina;

en donde Xaai5 está opcionalmente presente y en donde el carbono carbonilo C-terminal de dicho aminoácido está unido a un nitrógeno para formar una carboxamida (NH2), una alquil carboxamida (NHRi), o una dialquilcarboxamida (NRiR2);

en donde cada uno de Ri y R2 es un grupo alquilo o arilalquilo;

en donde cada uno de Ri y R2 es un grupo alquilo o arilalquilo.

En otra realización, Una realización del tema descrito en el presente documento se refiere a un polipéptido que comprende una secuencia de Fórmula II(a):

A es un enlazador orgánico o peptídico entre Xaai y Xaai3, proporcionando de ese modo un péptido macrocíclico; Xaai es un aminoácido aromático o heteroaromático o alquilo o heteroarilalquilo que se produce de forma natural o no natural;

Xaa2 es un alquilo o un aminoácido N-metilado aromático que se produce de forma natural o no natural;

Xaa3 es un aminoácido N-metilado hidrófobo que se produce de forma natural o no natural;

Xaa4 es un aminoácido N-metilado hidrófobo que se produce de forma natural o no natural;

Xaa5 es un alquilaminoácido o un aminoácido cargado positiva o negativamente que se produce de forma natural o no natural;

Xaa6 es un aminoácido hidrófobo que se produce de forma natural o no natural;

Xaa7 es un aminoácido aromático o heteroaromático o alquil o heteroarilalquil-amino aromático o heteroaromático o alquil o heteroarilalquil que se produce de forma natural o no natural;

Xaa8 es un aminoácido aromático o heteroaromático o arilalquilo o heteroarilalquilo o un alquilácido que se produce de forma natural o no natural;

Xaa9 es un aminoácido aromático o heteroaromático o alquil o heteroarilalquil-amino aromático o heteroaromático

i5

o alquil o heteroarilalquil que se produce de forma natural o no natural;

Xaaio es un aminoácido aromático o heteroaromático o arilalquilo o heteroarilalquilo o alquilo o heteroalquilo que se produce de forma natural o no natural;

Xaa11 es un aminoácido aromático o heteroaromático o arilalquilo o heteroarilalquilo o alquilo o heteroalquilo que se produce de forma natural o no natural;

Xaa12 es un aminoácido aromático o heteroaromático o arilalquilo o heteroarilalquilo o alquilo o heteroalquilo que se produce de forma natural o no natural;

Xaa13 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que posee un grupo funcional que puede activarse adecuadamente para reaccionar con un extremo del conector A para producir un péptido cíclico;

Xaa14 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural o un espaciador o un espaciador seguido de una etiqueta o un espaciador seguido de un elemento solubilizante o potenciador de PK.

En otra realización, el tema descrito en el presente documento se refiere a un polipéptido que comprende una secuencia de Fórmula II(b):

en donde:

A es un resto electrófilo tal como un aceptor Michael o un grupo cloro o bromoacetilo que es capaz de reaccionar con un grupo sulfhidrilo presente en el residuo Xaa13 ara formar un enlace tioéter covalente, produciendo de ese modo un péptido macrocíclico; en donde dicho enlace tioéter puede o no oxidarse a los correspondientes sulfóxidos diastereoméricos; y en donde A puede estar opcionalmente presente; y en donde, si A está presente, puede ser un Gly u otro espaciador con un terminal amino libre, el cual puede usarse para ciclar el péptido mediante la formación de enlaces amida con un grupo carboxilo en la cadena lateral de Xaa13, proporcionando de esa manera un péptido cíclico de lactama de extremo N a cadena lateral; y en donde, si A no está presente, el grupo amino N-terminal del residuo Xaa1 se puede usar para ciclar el péptido mediante la formación de enlaces amida con un grupo carboxilo en la cadena lateral de Xaa13, proporcionando de esa manera un péptido cíclico de lactama de extremo N a cadena lateral; y en donde, si A está presente, puede ser un Gly u otro espaciador con un terminal amino libre, el cual puede usarse para ciclar el péptido mediante la formación de enlaces amida con el grupo a-carboxilo C-terminal de Xaa14, proporcionando de esa manera un péptido cíclico cabeza a cola; y en donde, si A no está presente, el grupo amino N-terminal del aminoácido Xaa1 puede usarse para ciclar el péptido mediante la formación de enlaces amida con el grupo a-carboxilo C-terminal de Xaa14, proporcionando de esa manera un péptido cíclico cabeza a cola;

Xaa1 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende Phe y Ala;

Xaa2 es un aminoácido que se produce

forma natural o no natural que comprende mPhe y mAla;

Xaa3 es un aminoácido que se produce

forma natural o no natural que comprende mNle y mAla;

Xaa4 es un aminoácido que se produce

forma natural o no natural que comprende mGly, Gly y mAla; Xaa5 es un aminoácido que se produce

forma natural o no natural que comprende Asp y Ala;

Xaa6 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende Val (preferida) y Ala; Xaa7 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende mPhe y Phe;

Xaa8 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural seleccionado del grupo que consiste en L-Tyr y Ala;

Xaa9 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende mGly mAla y Gly;

Xaa11 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende Tyr y Ala;

Xaa12 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende Leu y Ala;

Xaa13 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que comprende L-Cys, D-Cys, Asp, Glu y Gly;

Xaa14 es Gly o Gly seguido de un espaciador de PEG compuesto de al menos dos unidades de etilenglicol, o Gly seguido de un espaciador de PEG compuesto de al menos dos unidades de etilenglicol seguido de una etiqueta como biotina,

en donde Xaa14 está opcionalmente presente y en donde el carbono carbonilo C-terminal de dicho aminoácido está unido a un nitrógeno para formar una carboxamida (NH2), una alquil carboxamida (NHR1), o una dialquilcarboxamida (NR1R2);

en donde cada uno de R1 y R2 es un grupo alquilo o arilalquilo;

en donde, si Xaa14 no está presente, el carbono carbonilo C-terminal de Xaa13 está unido a un nitrógeno para formar una carboxamida (NH2), una alquil carboxamida (NHR1), o una dialquilcarboxamida (NR1R2);

en donde cada uno de R1 y R2 es un grupo alquilo o arilalquilo.

En otra realización, Una realización del tema descrito en el presente documento se refiere a un polipéptido que comprende una secuencia de Fórmula III(a):

A es un enlazador orgánico o peptídico entre Xaai y Xaai2, proporcionando de ese modo un péptido macrocíclico; Xaai es un aminoácido aromático o heteroaromático o alquilo o heteroarilalquilo que se produce de forma natural o no natural;

Xaa2 es un alquilo o un aminoácido cargado o aromático que se produce de forma natural o no natural;

Xaa3 es un aminoácido aromático o heteroaromático o alquilo o heteroarilalquilo que se produce de forma natural o no natural;

Xaa4 es un aminoácido aromático o heteroaromático o alquilo o heteroarilalquilo que se produce de forma natural o no natural;

Xaa5 es un alquilo o heteroalquilo o un heteroarilalquil aromático o heteroaromático que se produce de forma natural o no natural;

Xaa6 es un aminoácido heteroaromático o con carga positiva que se produce de forma natural o no natural;

Xaa7 es un aminoácido polar o cargado que se produce de forma natural o no natural;

Xaa8 es un aminoácido con carga positiva que se produce de forma natural o no natural;

Xaa9 es un alquilo o heteroalquilo o un heteroarilalquil aromático o heteroaromático que se produce de forma natural o no natural;

Xaa11 es un aromático o heteroaromático o arilalquilo o heteroarilalquilo o heteroalquilo que se produce de forma natural o no natural o un aminoácido con carga positiva;

Xaa12 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural que posee un grupo funcional que puede activarse adecuadamente para reaccionar con un extremo del conector A para producir un péptido cíclico;

Xaa13 es un aminoácido que se produce de forma natural o no natural o un espaciador o un espaciador seguido de una etiqueta o un espaciador seguido de un elemento solubilizante o potenciador de PK.

En otra realización, el tema descrito en el presente documento se refiere a un polipéptido que comprende una secuencia de Fórmula III(b):

en donde:

A es un resto electrófilo tal como un aceptor Michael o un grupo cloro o bromoacetilo que es capaz de reaccionar con el grupo sulfhidrilo de Cys12 para formar un enlace tioéter covalente, produciendo de ese modo un péptido macrocíclico; en donde dicho enlace tioéter puede o no oxidarse a los correspondientes sulfóxidos diastereoméricos;

Xaa1 se selecciona entre Phe y D-Phe;

Xaa2 se selecciona entre Leu, Arg y Phe;

Xaa3 se selecciona entre Ile, Leu y Phe;

Xaa4 se selecciona entre Val, Tyr y Phe;

Xaa5 se selecciona entre Ile y Val;

Xaa6 se selecciona entre Arg y His;

Xaa8 se selecciona entre Arg;

Xaa9 se selecciona entre Val, Leu, Tyr y Phe;

Xaa11 se selecciona entre Arg y Tyr;

Xaa13 es Gly o Gly seguido de un espaciador de PEG compuesto de al menos dos unidades de etilenglicol, en donde Xaa13 está opcionalmente presente y en donde el carbono carbonilo C-terminal de dicho aminoácido está unido a un nitrógeno para formar una carboxamida (NH2), una alquil carboxamida (NHR1), o una dialquilcarboxamida (NR1R2);

en donde cada uno de R1 y R2 es un grupo alquilo o arilalquilo;

en donde, si Xaa13 no está presente, el carbono carbonilo C-terminal de Cys12 está unido a un nitrógeno para formar una carboxamida (NH2), una alquil carboxamida (NHR1), o una dialquilcarboxamida (NR1R2);

en donde cada uno de R1 y R2 es un grupo alquilo o arilalquilo.

En otra realización, el tema descrito en el presente documento se refiere a un polipéptido que comprende una secuencia de Fórmula I(d):

A es un grupo cloroacetilo unido a la a-amina del residuo Xaai N-terminal que es capaz de reaccionar con un grupo sulfhidrilo presente en el residuo Xaa14 para formar un enlace tioéter covalente, proporcionando de ese modo un péptido macrocíclico; en donde dicho enlace tioéter puede o no oxidarse a los correspondientes sulfóxidos diastereoméricos; y en donde,

Xaa1 se selecciona entre el grupo que consiste en L-Phe, L-Trp, L-Tyr, L-Phe(4-OMe), L-Phe(4-F), L-Phe(4-Cl), L-Phe(4-Br), L-Phe(4-Me), L-Phe(4-CFa), L-1-Nal, L-2-Nal, L-Bip, L-3-Pya, L-4-Pya, L-3-Tha;

Xaa2 se selecciona entre el grupo que consiste en L-Ala, L-mAla, mGly;

Xaa3 se selecciona entre el grupo que consiste en L-Ala y L-Asn;

Xaa4 se selecciona entre el grupo que consiste en L-Pro, L-Ala, L-a-Me-Pro, L-Pro(4-OH), L-Pro(4-NH2), L-Pro(4S-Ph), L-Azt, L-Pip y L-Oic;

Xaa5 se selecciona entre el grupo que consiste en L-Ala, L-His y L-Leu;

Xaa6 se selecciona entre el grupo que consiste en L-Ala, L-Arg, L-Asp, L-His y L-Leu;

Xaa7 se selecciona entre el grupo que consiste en mGly, Gly, L-mAla, D-mAla, L-Pro, L-Ser, L-mSer, L-Dab, L-Arg y L-His; Xaa9 se selecciona entre el grupo que consiste en L-Ala, L-Arg y L-Ser;

Xaaio se selecciona entre el grupo que consiste en L-Trp, L-Met y L-Bzt;

Xaaii se selecciona entre el grupo que consiste en L-Nle, L-mNle, L-mAla, L-Phe, L-mPhe y L -mleu y L-mSer; Xaai2 se selecciona entre el grupo que consiste en L-mNle y L-mAla;

Xaai3 se selecciona entre el grupo que consiste en L-Ala, L-Arg y L-Leu;

Xaai4 se selecciona entre el grupo que consiste en L-Cys y D-Cys;

Xaai5 es Gly o Gly seguido de un espaciador de PEG compuesto por doce unidades de etilenglicol;

en donde Xaai5 está opcionalmente presente y en donde el carbono carbonilo C-terminal de dicho aminoácido está unido a un nitrógeno para formar una carboxamida (CONH2);

en donde, si Xaai5 no está presente, el carbono carbonilo C-terminal de Xaai4 se une a un nitrógeno para formar una carboxamida (CONH2).

En otra realización, el tema descrito en el presente documento se refiere a un polipéptido que comprende una secuencia de Fórmula II(c):

A es un grupo cloroacetilo unido a la a-amina del residuo Xaai N-terminal que es capaz de reaccionar con un grupo sulfhidrilo presente en el residuo Cysi3 para formar un enlace tioéter covalente, produciendo de ese modo un péptido macrocíclico; en donde dicho enlace tioéter puede o no oxidarse a los correspondientes sulfóxidos diastereoméricos; y en donde,

Xaa2 se selecciona entre el grupo que consiste la y L-mPhe;

Xaa3 se selecciona entre el grupo que consiste la y L-mNle;

Xaa4 se selecciona entre el grupo que consiste e a;

Xaa5 se selecciona entre el grupo que consiste a y L-Asp;

Xaa6 se selecciona entre el grupo que consiste a y L-Val;

Xaa7 se selecciona entre el grupo que consiste e y L-mPhe;

Xaa8 se selecciona entre el grupo que consiste a y L-Tyr;

Xaa9 se selecciona entre el grupo que consiste e

a;

Xaai2 se selecciona entre el grupo que consiste en L-Leu y L-Ala;

Xaai4 es Gly o Gly seguido de un espaciador de PEG compuesto por doce unidades de etilenglicol,

en donde el carbono carbonilo C-terminal de Xaai4 o de Xaai4 seguido de un espaciador de PEG se une a un nitrógeno para formar una carboxamida (CONH2).

En otra realización, el tema descrito en el presente documento se refiere a un polipéptido que comprende una secuencia de Fórmula III(c):

i8

en donde:

A es un grupo cloroacetilo unido a la a-amina del residuo L-Phe N-terminal que es capaz de reaccionar con un grupo sulfhidrilo presente en el residuo L-Cys12 para formar un enlace tioéter covalente, produciendo de ese modo un péptido macrocíclico;

y en donde,

Xaa2 se selecciona entre L-Leu, L-Arg y L-Phe;

Xaa3 se selecciona entre L-Ile y L-Phe;

Xaa4 se selecciona entre L-Phe, L-Tyr y L-Val;

Xaa5 se selecciona entre L-Ile y L-Val;

Xaa9 se selecciona entre L-Leu, L-Phe, L-Tyr y L-Val;

en donde el carbono carbonilo C-terminal de Gly13 se une a un nitrógeno para formar una carboxamida (CONH2). La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula I.

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula I(a).

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula I(b).

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula I(c).

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula I(d).

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula II.

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula II (a).

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula II (b).

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula II(c).

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula III.

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula III(a).

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula III(b).

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula III(c).

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula IV.

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula V.

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula VI.

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia proporcionada en la Fórmula VII.

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia seleccionada del grupo que consiste en: los compuestos n.° 1, 2, 3, 4, 71 y 99.

La presente divulgación también se refiere a péptidos macrocíclicos que comprenden una secuencia seleccionada de las descritas en el presente documento.

La presente divulgación también se refiere a los péptidos macrocíclicos de la presente divulgación para su uso para mejorar y/o tratar trastornos hiperproliferativos y/o trastornos virales.

La presente divulgación también se refiere a un método para modular una respuesta inmunitaria en un sujeto que comprende administrar al sujeto uno o más péptidos macrocíclicos que comprenden la secuencia seleccionada de los péptidos descritos en el presente documento.

La presente divulgación también se refiere a un método para mejorar, estimular o aumentar la respuesta inmunitaria en el sujeto que comprende administrar al sujeto uno o más péptidos macrocíclicos que comprenden la secuencia seleccionada de las descritas en el presente documento.

La presente divulgación también se refiere a un método para promover la inhibición del sistema inmune del crecimiento de células tumorales en un sujeto, que comprende administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más péptidos macrocíclicos que comprenden la secuencia seleccionada de los péptidos descritos en el presente documento.

La presente divulgación también se refiere a un método para tratar una enfermedad infecciosa en un sujeto, que comprende administrar a un sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de uno o más péptidos macrocíclicos que comprende la secuencia seleccionada de los péptidos descritos en el presente documento.

La presente divulgación también se refiere a combinaciones que comprenden una secuencia seleccionada de los péptidos macrocíclicos descritos en el presente documento, con otro agente, tal como terapia antimicrobiana, terapia antivírica, una terapia inmunomoduladora adicional, una vacuna o un agente quimioterapéutico contra el cáncer. De acuerdo con la presente divulgación, los inventores han descubierto péptidos que se unen específicamente a PD-L1 y son capaces de inhibir la interacción de PD-L1 con PD-1 y CD80. Estos péptidos macrocíclicos presentan eficacia inmunomoduladora in vitro, lo que los hace candidatos terapéuticos para el tratamiento de diversas enfermedades, incluyendo cáncer y enfermedades infecciosas.

Las expresiones "unión específica" o "unirse específicamente" se refieren a la interacción entre una proteína y una molécula de unión, tal como un compuesto o ligando. La interacción depende de la presencia de una estructura particular (es decir, un sitio de unión a enzimas, un determinante antigénico o epítopo) de la proteína que es reconocida por la molécula de unión. Por ejemplo, si un compuesto tiene una unión específica para el sitio de unión a proteínas "A", la presencia del compuesto en una reacción que contiene una proteína que incluye el sitio de unión A, y un péptido marcado que se une específicamente al sitio de unión a la proteína A reducirá la cantidad de péptido marcado unido a la proteína. Por el contrario, la unión no específica de un compuesto a la proteína no da como resultado un desplazamiento dependiente de la concentración del péptido marcado de la proteína.

Otras realizaciones incluyen polipéptidos que comprenden las siguientes estructuras:

Otra realización es una composición farmacéutica que comprende un polipéptido de Fórmula I(a), I(b), I(c), II(a), II(b), III(a), III(b), IV, V, VI o VII, o un péptido que comprende al menos uno de los péptidos macrocíclicos descritos en el presente documento.

Otra realización se refiere a una combinación farmacéutica que comprende un polipéptido de Fórmula I(a), I(b), I(c), II(a), II(b), III(a), III(b), IV, V, VI o VII o un péptido macrocíclico descrito en el presente documento, y al menos un agente terapéutico seleccionado del grupo que consiste en un antimicrobiano, un antivírico, antineoplásico, agente antidiabético, un agente antiobesidad, un agente antihipertensivo, un agente antiateroesclerótico y un agente hipolipemiante.

Otra realización se refiere a una combinación farmacéutica de un polipéptido de Fórmula I(a), I(b), I(c), II(a), II(b), III(a), III(b), IV, V, VI o VII, o un péptido macrocíclico descrito en el presente documento, con otro agente divulgado en el presente documento.

Otra realización se refiere a un método para tratar o retrasar la progresión o aparición de cáncer y/o trastorno de virología, que comprende administrar a una especie de mamífero que necesita tratamiento una cantidad terapéuticamente efectiva de un polipéptido de Fórmula I(a), I(b), I(c), II(a), II(b), III(a), III(b), IV, V, VI o VII, o un péptido macrocíclico descrito en el presente documento.

Se pretende que la presente divulgación incluya todos los isótopos de átomos que aparecen en los presentes compuestos. Los isótopos incluyen los átomos que tienen el mismo número atómico pero diferentes números másicos. A modo de ejemplo general y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen deuterio y tritio. Los isótopos de carbono incluyen 13C y 14C. Los compuestos de la invención marcados isotópicamente se pueden preparar generalmente mediante técnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia o por procedimientos análogos a los descritos en el presente documento, usando un reactivo marcado isotópicamente apropiado en lugar del reactivo no marcado empleado de otro modo. Dichos compuestos pueden tener diversos usos potenciales, por ejemplo, como patrones y reactivos para determinar la actividad biológica. En el caso de isótopos estables, tales compuestos pueden tener el potencial de modificar favorablemente las propiedades biológicas, farmacológicas o farmacocinéticas.

Un aspecto adicional de la materia objeto descrita en el presente documento es el uso de los péptidos desvelados como ligandos radiomarcados para el desarrollo de ensayos de unión a ligandos o para la supervisión de adsorción in vivo, metabolismo, distribución, unión u ocupación del receptor o disposición de compuestos. Por ejemplo, un péptido macrocíclico descrito en el presente documento puede prepararse usando el isótopo radiactivo 125I y el péptido radiomarcado resultante puede usarse para desarrollar un ensayo de unión o para estudios de metabolismo. Como alternativa, y para el mismo fin, un péptido macrocíclico descrito en el presente documento puede convertirse en una forma radiomarcada mediante tritiación catalítica usando métodos conocidos por los expertos en la materia. Los péptidos macrocíclicos de la presente divulgación también se pueden usar como agentes de captura de imágenes de PET añadiendo un marcador radioactivo usando métodos conocidos por los expertos en la materia. Los péptidos preferidos incluyen al menos uno de los péptidos macrocíclicos proporcionados en el presente documento y estos péptidos pueden incluirse en composiciones y combinaciones farmacéuticas.

Las definiciones proporcionadas en el presente documento se aplican, sin limitación, a los términos como se usan a lo largo de esta memoria descriptiva, a menos que se limite de otro modo en casos específicos.

Los expertos en la materia de la química de aminoácidos y péptidos son conscientes de que un aminoácido incluye un compuesto representado por la estructura general:

L o S-a-aminoácido D o R-a-aminoácido

(si R = H) (si R = H)

en donde R y R' son como se discuten en el presente documento.

A menos que se indique otra cosa, el término "aminoácido" como se emplea en el presente documento, solo o como parte de otro grupo, incluye, sin limitación, un grupo amino y un grupo carboxilo unido al mismo carbono, denominado como carbono "a", en donde R y/o R' puede ser una cadena lateral natural o no natural, que incluye hidrógeno. La configuración absoluta "S" en el carbono "a" se conoce comúnmente como la configuración "L" o "natural". En el caso en donde los sustituyentes "R" y "R '" (prima) sean iguales a hidrógeno, el aminoácido es glicina y no es quiral.

La expresión "cadena lateral de aminoácido que aparece de manera natural", como se usa en el presente documento, se refiere a una cadena lateral de cualquier aminoácido que aparece de manera natural (es decir, alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, cisteína, glutamina, ácido glutámico, glicina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptófano, tirosina y valina) usualmente en la configuración S (es decir, el L aminoácido).

La expresión "cadena lateral de aminoácido que aparece de manera no natural", como se usa en el presente documento, se refiere a una cadena lateral de cualquier aminoácido que aparece de manera natural normalmente en la configuración R (es decir, el D aminoácido) o a un grupo distinto de una cadena lateral de aminoácido que aparece de manera natural en la configuración R o S (es decir, el D o L aminoácido, respectivamente) se selecciona entre:

alquenilo C2-C7, alcoxi C-i-Caalquilo C1-C3, alcoxicarbonil Cr Caalquilo C1-C3, alquilo C1-C7, alquil C1-Casulfanilalquilo C1-C3, amidoalquilo C1-C3, aminoalquilo C1-C3, azaindolilalquilo C1-C3, benzotiazolilalquilo C1-C3, benzotienilalquilo C1-C3, benciloxialquilo C1-C3, carboxialquilo C1-C3, cicloalquil C3-C6alquilo C1-C3, difenilmetilo, furanilalquilo C1-C3, imidazolilalquilo C1-C3, naftilalquilo C1-C3, piridinilalquilo C1-C3, tiazolilalquilo C1-C3, tienilalquilo C1-C3;

bifenilalquilo C1-C3 en donde el bifenilo está opcionalmente sustituido con un grupo metilo;

indolilalquilo C1-C3, en donde la parte indolilo está opcionalmente sustituido con un grupo seleccionado entre alquilo C1-C3, carboxialquilo C1-C3, halo, hidroxi y fenilo, en donde el fenilo está además opcionalmente sustituido con uno, dos o tres grupos seleccionados independientemente entre alcoxi C1-C3, alquilo C1-C3 y halo;

NRaRbalquilo C1-C7), en donde Ra y Rb se seleccionan independientemente entre hidrógeno, alqueniloxicarbonilo C2-C4, alquilo C1-C3, alquilcarbonilo C1-C3, cicloalquilcarbonilo C3-C6, furanilcarbonilo y fenilcarbonilo. Cuando el enlazador de alquilo contiene más de un carbono, un grupo NRaRb adicional puede estar en la cadena.

NRcRdcarbonilalquilo C1-C3, en donde Rc y Rd se seleccionan independientemente entre hidrógeno, alquilo C1-C3 y trifenilmetilo;

fenilalquilo C1-C3 en donde la parte fenilo está opcionalmente sustituido con uno, dos, tres, cuatro o cinco grupos seleccionados independientemente entre alcoxi C1-C4, alquilo C1-C4, alquilsulfonilamino C1-C3, amido, amino, aminoalquilo C1-C3, aminosulfonilo, carboxi, ciano, halo, haloalquilo C1-C3, hidroxi, -NC(NH2)2, nitro y -OP(O)(OH)2; y

fenoxialquilo C1-C3 en donde el fenilo está opcionalmente sustituido con un grupo alquilo C1-C3.

La expresión "alquenilo C2-C4", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo de cadena lineal o ramificada de dos a cuatro átomos de carbono que contiene al menos un doble enlace carbono-carbono.

La expresión "alquenilo C2-C7", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo de cadena lineal o ramificada de dos a siete átomos de carbono que contiene al menos un doble enlace carbono-carbono.

La expresión "alqueniloxi C2-C4", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquenilo C2-C4 unido al resto molecular parental a través de un átomo de oxígeno.

La expresión "alcoxi C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo C1-C3 unido al resto molecular parental a través de un átomo de oxígeno.

La expresión "alcoxi C1-C4", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo C1-C4 unido al resto molecular parental a través de un átomo de oxígeno.

La expresión "alcoxi C1-Ca", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo C1-C6 unido al resto molecular parental a través de un átomo de oxígeno.

La expresión "alcoxi C1-C3alquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alcoxi C1-C3 unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3.

La expresión "alcoxicarbonilo C1-Ca", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alcoxi C1-Ca unido al resto molecular parental a través de un grupo carbonilo.

La expresión "alcoxicarbonil C1-Caalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alcoxicarbonilo C1-Ca unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3.

La expresión "alquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo obtenido a partir de un hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificada que contiene de uno a tres átomos de carbono.

La expresión "alquilo C1-C4", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo obtenido a partir de un hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificada que contiene de uno a cuatro átomos de carbono.

La expresión "alquilo C1-Ca", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo obtenido a partir de un hidrocarburo saturado de cadena lineal o ramificada que contiene de uno a seis átomos de carbono.

La expresión "alquilcarbonilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo C1-C3 unido al resto molecular parental a través de un grupo carbonilo.

La expresión "alquilsulfanilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo C1-C3 unido al resto molecular parental a través de un átomo azufre.

La expresión "alquilsulfanil Ci-C3alquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilsulfanilo C1-C3 unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3.

La expresión "alquilsulfonilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo C1-C3 unido al resto molecular parental a través de un grupo sulfonilo.

La expresión "alquilsulfonilamino C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilsulfonilo C1-C3 unido a un resto molecular parental a través de un grupo amino.

El término "amido", como se usa en el presente documento, se refiere a -C(O)NH2.

La expresión "amidoalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo amido unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3.

El término "amino", como se usa en el presente documento, se refiere a -NH2.

La expresión "aminoalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo amino unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3.

El término "aminosulfonilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo amino unido a un grupo molecular parental a través de un grupo sulfonilo.

La expresión "azaindolilalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo azaindolilo unido a un resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3. El grupo azaindolilo puede unirse al resto alquilo a través de cualquier átomo sustituible en el grupo.

La expresión "benzotiazolilalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo benzotiazolilo unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3. El grupo benzotiazolilo puede unirse al resto alquilo a través de cualquier átomo sustituible en el grupo.

La expresión "benzotienilalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo benzotienilo unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3. El grupo benzotienilo puede unirse al resto alquilo a través de cualquier átomo sustituible en el grupo.

El término "benciloxi", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo bencilo unido al resto molecular parental a través de un átomo de oxígeno.

La expresión "benciloxialquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo benciloxi unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3.

La expresión "bifenilalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo bifenilo unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3. El grupo bifenilo puede unirse al resto alquilo a través de cualquier átomo sustituible en el grupo.

El término "carbonilo", como se usa en el presente documento, se refiere a -C(O)-.

El término "carboxi", como se usa en el presente documento, se refiere a -CO2H.

La expresión "carboxialquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo carboxi unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3.

El término "ciano", como se usa en el presente documento, se refiere a -CN.

La expresión "cicloalquilo C3-C6", como se usa en el presente documento, se refiere a un sistema de anillo de hidrocarburo, monocíclico, saturado que tiene de tres a seis átomos de carbono y cero heteroátomos.

La expresión "cicloalquil C3-C6alquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo cicloalquilo C3-C6unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3.

La expresión "cicloalquilcarbonilo C3-C6", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo cicloalquilo C3-C6 unido al resto molecular parental a través de un grupo carbonilo.

La expresión "furanilalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo furanilo unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3. El grupo furanilo puede unirse al resto alquilo a través de cualquier átomo sustituible en el grupo.

El término "furanilcarbonilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo furanilo unido al resto molecular parental a través de un grupo carbonilo.

Los términos "halo" y "halógeno", como se usa en el presente documento, se refieren a F, Cl, Br o I.

La expresión "haloalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo C1-C3 sustituido con uno, dos o tres átomos de halógeno.

El término "halometilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo metilo sustituido con uno, dos o tres átomos de halógeno.

El término "hidroxi", como se usa en el presente documento, se refiere a -OH.

La expresión "imidazolilalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo imidazolilo unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3. El grupo imidazolilo puede unirse al resto alquilo a través de cualquier átomo sustituible en el grupo.

La expresión "indolilalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo indolilo unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3. El grupo indolilo puede unirse al resto alquilo a través de cualquier átomo sustituible en el grupo.

La expresión "naftilalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo naftilo unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3. El grupo naftilo puede unirse al grupo alquilo a través de cualquier átomo sustituible en el grupo.

El término "nitro", como se usa en el presente documento, se refiere a -NO2.

El término "NRaRb", como se usa en el presente documento, se refiere a dos grupos, Ra y Rb, que están unidos al resto molecular parental a través de un átomo de nitrógeno. Ra y Rb se seleccionan independientemente entre hidrógeno, alqueniloxicarbonilo C2-C4, alquilcarbonilo C1-C3, cicloalquilcarbonilo C3-C6, furanilcarbonilo y fenilcarbonilo.

La expresión "NRaRbalquilo (C1-C3)", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo NRaRb unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3.

El término "NRcRd", como se usa en el presente documento, se refiere a dos grupos, Rc y Rd, que están unidos al resto molecular parental a través de un átomo de nitrógeno. Rc y Rd se seleccionan independientemente entre hidrógeno, alquilo C1-C3 y trifenilmetilo.

El término "NRcRdcarbonilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo NRcRd unido al resto molecular parental a través de un grupo carbonilo.

La expresión "NRcRdcarbonilalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo NRcRdcarbonilo unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3.

El término "fenoxi", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo fenilo unido al resto molecular parental a través de un átomo de oxígeno.

La expresión "fenoxialquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo fenoxi unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3.

La expresión "fenilalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo fenilo unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3.

El término "fenilcarbonilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo fenilo unido al resto molecular parental a través de un grupo carbonilo.

La expresión "piridinilalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo piridinilo unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3. El grupo piridinilo puede unirse al grupo alquilo a través de cualquier átomo sustituible en el grupo.

El término "sulfanilo", como se usa en el presente documento, se refiere a -S-.

El término "sulfonilo", como se usa en el presente documento, se refiere a -SO2-.

La expresión "tiazolilalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo tiazolilo unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3. El grupo tiazolilo puede unirse al grupo alquilo a través de cualquier átomo sustituible en el grupo.

La expresión "tienilalquilo C1-C3", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo tienilo unido al resto molecular parental a través de un grupo alquilo C1-C3. El grupo tienilo puede unirse al grupo alquilo a través de cualquier átomo sustituible en el grupo.

El término "tratar" se refiere a: (i) prevenir que una enfermedad, trastorno o afección se produzca en un paciente que puede estar predispuesto a la enfermedad, trastorno y/o afección, pero al que aún no se le ha diagnosticado que la tenga; (ii) inhibir la enfermedad, trastorno o afección, es decir, detener su desarrollo; y (iii) aliviar la enfermedad, trastorno o afección, es decir, provocar la regresión de la enfermedad, trastorno y/o afección y/o síntomas asociados con la enfermedad, trastorno y/o dolencia.

A menos que se indique otra cosa, el término "alquilo" como se emplea en el presente documento solo o como parte de otro grupo incluye, sin limitación, ambos hidrocarburos de cadena lineal o ramificada, que contienen 1 a 40 átomos de carbono, preferentemente 1 a 20 átomos de carbono, más preferentemente 1 a 8 átomos de carbono, en la cadena normal, tal como metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, t-butilo, isobutilo, pentilo, hexilo, isohexilo, heptilo, 4,4-dimetilpentilo, octilo, 2,2,4-trimetilpentilo, nonilo, decilo, undecilo, dodecilo, los diversos isómeros de cadena ramificada de los mismos y similares. Además, grupos alquilo, como se definen en el presente documento, opcionalmente pueden estar sustituidos en cualquier átomo de carbono disponible con uno o más grupos funcionales comúnmente unidos a tales cadenas, tales como, pero sin limitación alquilo, arilo, alquenilo, alquinilo, hidroxi, arilalquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, alcoxi, arilalquiloxi, heteroariloxi, heteroarilalquiloxi, alcanoílo, halo, hidroxilo,

O

tio, nitro, ciano, carboxilo, carbonilo (II), carboxamido, amino, alquilamino, dialquilamino, amido, alquilamino, arilamido, heteroarilamido, azido, guanidino, amidino, fosfónico, fosfínico, sulfónico, sulfonamido, haloarilo, CF3, OCF2, OCF3, ariloxi, heteroarilo, cicloalquilalcoxialquilo, cicloheteroalquilo y similares para formar grupos alquilo, tales como trifluorometilo, 3-hidroxihexilo, 2-carboxipropilo, 2-fluoroetilo, carboximetilo, cianobutilo y similares.

A menos que se indique otra cosa, el término "cicloalquilo" como se emplea en el presente documento solo o como parte de otro grupo incluye, sin limitación, grupos hidrocarburos cíclicos saturados o parcialmente insaturados (que contienen 1 o 2 dobles enlaces) que contienen de 1 a 3 anillos, unidos o condensados, incluyendo alquilo monocíclico, alquilo bicíclico y alquilo tricíclico, que contienen un total de 3 a 20 átomos de carbono formando los anillos, preferentemente 4 a 7 átomos de carbono, que forman cada anillo; el cual puede condensarse a 1 amillo aromático como se describe para arilo, que incluye ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, ciclooctilo, ciclodecilo, ciclododecilo, ciclohexenilo,

cualquiera de los grupos puede estar opcionalmente sustituido a través de cualquier átomo de carbono disponible con 1 o más grupos seleccionados entre hidrógeno, halo, haloalquilo, alquilo, haloalquilo, alcoxi, haloalcoxi, alquenilo, trifluorometilo, trifluorometoxi, alquinilo, cicloalquilalquilo, fluorenilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo, ariloxi, ariloxialquilo, arilalcoxi, ariltio, arilazo, heteroarilalquilo,

O

heteroarilalquenilo, heteroarilheteroarilo, heteroariloxi, hidroxi, nitro, oxo, ciano, carboxilo, carbonilo (II), carboxamido, amino, amino sustituido en donde el amino incluye 1 o 2 sustituyentes (los cuales son alquilo, arilo o cualquiera de los otros compuestos de arilo mencionado en las definiciones), amido, azido, guanidino, amidino, fosfónico, fosfínico, sulfónico, sulfonamido, tiol, alquiltio, ariltio, heteroariltio, ariltioalquilo, alcoxiariltio, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alquilaminocarbonilo, arilaminocarbonilo, alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, arilsulfinilo, arilsulfinilalquilo, arilsulfonilamino o arilsulfonaminocarbonilo, o cualquiera de los sustituyentes de alquilo que se muestran anteriormente.

El término "arilo" como se emplea en el presente documento solo o como parte de otro grupo, se refiere, sin limitación, a grupos aromáticos monocíclicos y bicíclicos que contienen 6 a 10 átomos de carbono en la porción del anillo (tal como fenilo o naftilo) y puede incluir opcionalmente uno a tres anillos adicionales fusionados a "arilo" (tales como anillos arilo, cicloalquilo, heteroarilo o hetecicloalquilo) y puede estar sustituido opcionalmente mediante cualesquiera átomos de carbono disponibles con 1 o más grupos seleccionados entre hidrógeno, alquilo, halo, haloalquilo, alcoxi, haloalcoxi, alquenilo, trifluorometilo, trifluorometoxi, alquinilo, cicloalquilalquilo, fluorenilo, heterocicloalquilo, heterocicloalquilalquilo, arilo, heteroarilo, arilalquilo, ariloxi, ariloxialquilo, arilalcoxi, ariltio, arilazo, heteroarilalquilo, heteroarilalquenilo, heteroariloxi, heteroarilalquiloxi, heteroarilalquilooxialquilo, hidroxi, nitro, oxo, ciano, amino, aminosustituido en el que el amino incluye 1 o 2 sustituyentes (que son alquilo, cicloalquilo, heterocicloalquilo, heteroarilo o arilo o cualquiera de los otros compuestos de arilo mencionados en las definiciones), tiol, alquiltio, ariltio, heteroariltio, ariltioalquilo, alcoxiariltio, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, alquilaminocarbonilo, cicloalquilaminocarbonilo, arilaminocarbonilo, heteroarilaminocarbonilo, heteroarilalquiloaminocarbonil alcoxicarbonilo, aminocarbonilo, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, arilsulfinilo, arilsulfinilalquilo, arilsulfonilamino o arilsulfonaminocarbonilo, o cualquiera de los sustituyentes de alquilo que se muestran anteriormente.

El término "arilalquilo" como se usa en el presente documento solo o como parte de otro grupo, se refiere, sin limitación, a grupos alquilo como se ha definido anteriormente que tienen un sustituyente arilo, tal como bencilo, fenetilo o naftilpropilo, en donde dichos grupos arilo y/o alquilo pueden estar sustituidos opcionalmente como se ha definido anteriormente.

El término "alcoxi", "ariloxi", "heteroariloxi", "arilalquiloxi" o "heteroarilalquiloxi" como se emplea en el presente documento solo o como parte de otro grupo incluye, sin limitación, un grupo alquilo o arilo como se ha definido anteriormente unido a través de un átomo de oxígeno.

El término "heterociclo", "heterociclo", "heterociclilo" o "heterocíclico", como se usa en el presente documento, representa, sin limitación, un sistema de anillo monocíclico, de 4, 5, 6 o 7 miembros estable, sin sustituir o sustituido que puede estar saturado o insaturado, y que consiste en átomos de carbono y de uno o cuatro heteroátomos seleccionados entre nitrógeno, azufre, oxígeno y/o un grupo SO o SO2, en donde los heteroátomos de nitrógeno y azufre pueden oxidarse opcionalmente y el heteroátomo de nitrógeno puede cuaternizarse opcionalmente. El anillo heterocíclico puede estar unido a cualquier heteroátomo o átomo de carbono que dé como resultado la creación de una estructura estable. Los ejemplos de dichos grupos heterocíclicos incluyen, pero sin limitación, tetrahidrofuranilo, tetrahidrotiofenilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, oxopirrolidinilo, oxopiperazinilo, oxopiperidinilo y oxadiazolilo. Opcionalmente un grupo heterociclo puede estar sustituido con uno o más grupos funcionales, tal como los descritos para "alquilo" o "arilo".

El término "heterocicloalquilo" como se usa en el presente documento solo o como parte de otro grupo, se refiere, sin limitación, a grupos alquilo como se ha definido anteriormente que tiene un sustituyente heterocicloalquilo, en donde dicho "heterociclo" y/o grupos alquilo pueden estar sustituidos opcionalmente como se ha definido anteriormente.

El término "heteroarilo" como se usa en el presente documento, se refiere, sin limitación, a un anillo heterocíclico aromático, de 5, 6 o 7 miembros que contiene uno o más heteroátomos seleccionados entre nitrógeno, azufre, oxígeno y/o un grupo SO o SO2. Tales anillos pueden condensarse a otro anillo arilo o heteroarilo e incluyen posibles N-óxidos; ejemplos de tales grupos heteroarilo incluyen, pero sin limitación, furano, pirrol, tiofeno, piridina, pirimidina, pirazina, piridazina, isoxazol, oxazol, imidazol y similares. Opcionalmente un grupo heteroarilo puede estar sustituido con uno o más grupos funcionales unidos comúnmente a dichas cadenas, tal como los descritos para "alquilo" o "arilo".

El término "heteroarilalquilo" como se usa en el presente documento solo o como parte de otro grupo, se refiere, sin limitación, a grupos alquilo como se ha definido anteriormente que tienen un sustituyente heteroarilo, en donde dicho heteroarilo y/o grupos alquilo pueden estar sustituidos opcionalmente como se ha definido anteriormente.

Se entiende que la "concentración inhibidora" del inhibidor de PD-1/PD-L1 significa la concentración a la que un compuesto explorado en un ensayo de la divulgación inhibe un porcentaje medible de la interacción de PD-1 con PD-L1. Los ejemplos de valores de "concentración inhibidora" varían de CI50 a CI90 y son, preferiblemente, CI50, CI60, CI70, CI80 o CI90, que representan 50 %, 60 %, 70 %, 80 % o 90 % de reducción en la actividad de unión de PD-1/PD-L1, respectivamente. Más preferentemente, la "concentración inhibidora" se mide como el valor de CI50. Se entiende que otra designación para CI50 es la concentración inhibidora semimáxima.

La unión de los péptidos macrocíclicos a PD-L1 se puede medir, por ejemplo, mediante métodos tales como fluorescencia con resolución temporal homogénea (HTRF), resonancia de plasmón superficial (SPR), calorimetría de titulación isotérmica (ITC), espectroscopia de resonancia magnética nuclear (RMN) y similares. Además, la unión de los péptidos macrocíclicos a PD-L1 expresado en la superficie de células se puede medir como se describe en el presente documento en ensayos de unión celular.

La administración de un agente terapéutico descrito en el presente documento incluye, sin limitación, la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de agente terapéutico. La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" como se usa en el presente documento se refiere, sin limitación, a una cantidad de un agente terapéutico para tratar o prevenir una afección tratable mediante la administración de una composición de los inhibidores de unión a PD-1/PD-L1 descritos en el presente documento. Esta cantidad es la cantidad suficiente para presentar un efecto terapéutico o preventivo o de mejora detectable. El efecto puede incluir, por ejemplo y sin limitación, el tratamiento o la prevención de las afecciones enumeradas en el presente documento. La cantidad eficaz precisa para un sujeto dependerá de la talla y la salud del sujeto, la naturaleza y el alcance de la afección que se está tratando, las recomendaciones del médico a cargo del tratamiento y los productos terapéuticos o combinación de productos terapéuticos seleccionados para administración. Por tanto, no es útil especificar una cantidad efectiva exacta por adelantado.

Los péptidos macrocíclicos de la presente divulgación muestran potente actividad de unión a PD-L1, tanto en ensayos de HTRF, como ensayos de unión celular. Además, los péptidos macrocíclicos también demuestran actividad biológica en recuerdo de CMV y ensayos de Elispot de VIH que demuestran su utilidad para aliviar y/o tratar trastornos hiperproliferativos, tales como cáncer e indicaciones de virología, incluyendo VIH.

En otro aspecto, la divulgación se refiere a métodos para inhibir el crecimiento de células tumorales en un sujeto que usa los péptidos macrocíclicos de la presente divulgación. Como se demuestra en el presente documento, los péptidos macrocíclicos de la presente divulgación son capaces de unirse a PD-L1, alterar la interacción entre PD-L1 y PD-1, competir con la unión de PD-L1 con anticuerpos monoclonales anti-PD-1 que se sabe que bloquean la interacción con PD-1, potenciar la secreción de IPN^ypor parte de linfocitos T específicos de CMV y potenciar la secreción de IFNg de linfocitos T específicos de VIH. Como resultado, Los péptidos macrocíclicos de la presente divulgación son útiles para modificar una respuesta inmunitaria, tratar enfermedades tales como cáncer o enfermedades infecciosas, estimular una respuesta autoinmunitaria protectora o estimular respuestas inmunitarias específicas de antígeno (por ejemplo, mediante coadministración de péptidos de bloqueo de PD-L1 con un antígeno de interés).

Con el fin de que se pueda entender más fácilmente la presente divulgación, se definen en primer lugar determinados términos. Se exponen definiciones adicionales a lo largo de la descripción detallada.

Las expresiones "Ligando de muerte programada 1", "Ligando de muerte celular programada 1", "Proteína PD-L1", "PD-L1", "PDL1", "PDCDL1", "hPD-L1", "hPD-LI", "CD274" y "B7-H1"se usan indistintamente e incluyen variantes, isoformas, homólogos de especies de PD-L1 humana y análogos que tienen al menos un epítopo común con PD-L1. La secuencia completa de PD-L1 puede encontrarse con el número de referencia de GENBANK® NP_054862. Las expresiones "Muerte programada 1", "Muerte celular programada 1", "Proteína PD-1", "PD-1", "PD1", "PD CD1", "hPD1" y "hPD-I" se usan indistintamente e incluyen variantes, isoformas, homólogos de especies de PD-1 humana y análogos que tienen al menos un epítopo común con PD-1. La secuencia completa de PD-1 puede encontrarse con el número de referencia de GEN b A n K® U64863.

Las expresiones "antígeno 4 asociado a linfocitos T citotóxicos", "CTLA-4", "CTLA4", "antígeno CTLA-4" y "CD152" (véase, por ejemplo, Murata, Am. J. Pathol., 155:453-460 (1999)) se usan indistintamente e incluyen variantes, isoformas, homólogos de especies de CTLA-4 humana y análogos que tienen al menos un epítopo común con CTLA-4 (véase, por ejemplo, Balzano, Int. J. Cancer Suppl., 7:28-32 (1992)). La secuencia de ácido nucleico completa de CTLA-4 puede encontrarse con el número de referencia de GENBANK® L15006.

La expresión "respuesta inmunitaria" se refiere a la acción de, por ejemplo, linfocitos, células presentadoras de antígenos, células fagocíticas, granulocitos y macromoléculas solubles producidas por las células anteriores o el hígado (incluyendo péptidos macrocíclicos, citocinas y complemento) que da como resultado daño selectivo sobre, destrucción de o eliminación del cuerpo humano de patógenos invasores, células o tejidos infectados por patógenos, células cancerosas o, en casos de autoinmunidad o inflamación patológica, células o tejidos humanos normales. Una "ruta de transducción de señal" se refiere a la relación bioquímica entre diversas moléculas de transducción de señales que desempeñan un papel en la transmisión de una señal de una parte de una célula a otra parte de una célula. Como se usa en el presente documento, la expresión "receptor de superficie celular" incluye, por ejemplo, moléculas y complejos de moléculas que pueden recibir una señal y la transmisión de dicha señal a través de la membrana plasmática de una célula. Un ejemplo de un "receptor de superficie celular" de la presente divulgación es el receptor PD-1.

La expresión "derivados de péptidos macrocíclicos" se refiere a cualquier forma modificada de los péptidos macrocíclicos desvelados en el presente documento, por ejemplo, mutaciones, isoformas, péptidos con cadenas principales del conector alteradas, conjugados con un anticuerpo y/u otro agente, etc.

Como se usa en el presente documento, se entiende que un péptido macrocíclico de la presente divulgación que "se une específicamente a PD-L1 humano" se refiere a un péptido macrocíclico que se une a PD-L1 humano con una CI 50 de menos de aproximadamente 200 nM, menos de aproximadamente 150 nM, menos de aproximadamente 100 nM, menos de aproximadamente 80 nM, menos de aproximadamente 60 nM, menos de aproximadamente 40 nM, menos de aproximadamente 20 nM, menos de aproximadamente 15 nM, menos de aproximadamente 10 nM, menos de aproximadamente 5 nM, menos de aproximadamente 1 nM o menos. En este contexto, se interpretará que el término "aproximadamente" significa cualquiera entre ± 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 o 20 nM más o menos que la cantidad citada.

El término "tratamiento" o "terapia" se refiere a la administración de un principio activo con el fin de curar, sanar, aliviar, mitigar, alterar, remediar, recuperar, mejorar o afectar a una afección (por ejemplo, una enfermedad), los síntomas de la afección o prevenir o retardar la aparición de los síntomas, complicaciones, indicios bioquímicos de una enfermedad, o detener o inhibir el desarrollo adicional de la enfermedad, afección o trastorno de una manera estadísticamente significativa.

Un "evento adverso" (AE) como se usa en este documento es cualquier signo desfavorable y generalmente no deseado, incluso indeseable (incluido un hallazgo anormal de laboratorio), síntoma o enfermedad asociados con el uso de un tratamiento médico. Por ejemplo, un acontecimiento adverso puede estar asociado con la activación del sistema inmunitario o la expansión de células del sistema inmunitario (por ejemplo, linfocitos T) en respuesta a un tratamiento. Un tratamiento médico puede tener uno o más AA asociados y cada AA puede tener el mismo o diferente nivel de gravedad. La referencia a métodos capaces de "alterar los acontecimientos adversos" significa un régimen de tratamiento que reduce la incidencia y/o gravedad de uno o más acontecimientos adversos asociados con el uso de un régimen de tratamiento diferente.

Como se usa en el presente documento, la "enfermedad hiperproliferativa" se refiere a afecciones en donde el crecimiento celular aumenta por encima de niveles normales. Por ejemplo, las enfermedades o trastornos hiperproliferativos incluyen enfermedades malignas (por ejemplo, cáncer de esófago, cáncer de colon, cáncer biliar) y enfermedades no malignas (por ejemplo, ateroesclerosis, hiperplasia benigna e hipertrofia prostática benigna). Como se usa en el presente documento, "aproximadamente" o "que comprende esencialmente" significa dentro de un intervalo de error aceptable para el valor particular determinado por un experto habitual en la materia, que dependerá en parte de cómo se mide o determina el valor, es decir, de las limitaciones del sistema de medida. Por ejemplo, "aproximadamente" o "que comprende esencialmente" pueden significar dentro de una o más de una desviación típica según la práctica en la técnica. Como alternativa, "aproximadamente" o "que comprende esencialmente" puede significar un intervalo de hasta 20 %. Asimismo, en particular con respecto a sistemas o procesos biológicos, los términos pueden significar hasta un orden de magnitud o hasta 5 veces de un valor. Cuando se proporcionan valores particulares en la solicitud y las reivindicaciones, salvo que se indique otra cosa, debe suponerse que el significado de "aproximadamente" o "que comprende esencialmente" está dentro de un intervalo de error aceptable para ese valor particular.

Como se describe en el presente documento, cualquier intervalo de concentración, intervalo de porcentaje, intervalo de relación o intervalo de número entero se entiende que incluye el valor de cualquier número entero dentro del intervalo citado y, cuando sea adecuado, fracciones del mismo (tal como una décima y una centésima de un número entero), a menos que se indique otra cosa.

Ensayos de competencia

La presente divulgación también está dirigida a péptidos macrocíclicos que son capaces de competir con la unión de un anticuerpo anti-PD-L1 de referencia (MDX-1105) en al menos aproximadamente 20%, al menos aproximadamente 30 %, al menos aproximadamente 40 %, al menos aproximadamente 50 %, al menos aproximadamente 60 %, al menos aproximadamente 70 %, al menos aproximadamente 80 %, al menos aproximadamente 90 % y al menos aproximadamente 100%. Dichos péptidos macrocíclicos pueden compartir homología estructural con uno o más péptidos macrocíclicos desvelados en el presente documento, incluyendo mutantes, sustitución conservadora, sustitución funcional y formas de eliminación, siempre que se unan específicamente a PD-L1. Por ejemplo, si un péptido macrocíclico se une sustancialmente a la misma región de PD-L1 como un anticuerpo anti-PD-L1 de referencia, el péptido macrocíclico debería unirse a un epítopo de PD-L1 que al menos solapa con el epítopo de PD-L1 al que se une el anticuerpo monoclonal anti-PD-L1. La región solapante puede variar desde un resto de aminoácido hasta varios cientos de restos de aminoácidos. El péptido macrocíclico debería después competir y/o bloquear la unión del anticuerpo monoclonal anti-PD-L1 a PD-L1 y, por lo tanto, reducir la unión del anticuerpo monoclonal anti-PD-L1 a PD-L1, preferentemente, en al menos aproximadamente 50 % en un ensayo de competición.

Se conocen en la técnica anticuerpos anti-PD-L1 que pueden usarse como anticuerpos de referencia para fines de ensayos de competición. Por ejemplo, se pueden usar los siguientes anticuerpos anti-PD-L1 representativos: MDX-1105 (BMS); L01X-C (Serono), L1X3 (Serono), MSB-0010718C (Serono) y PD-L1 Probody (CytomX) y los anticuerpos de PD-L1 descritos en el documento WO 2007/005874 del mismo propietario que la presente.

Se conocen en la técnica anticuerpos anti-PD-1 que pueden usarse como anticuerpos de referencia para fines de ensayos de competición. Por ejemplo, se pueden usar los siguientes anticuerpos anti-PD-1 representativos: nivolumab (BMS); 17D8, 2D3, 4H1, 4A11, 7d 3 y 5F4, cada uno desvelado en la Patente de los Estados Unidos del mismo propietario que la presente n.° 8.008.449 (BMS), MK-3475 (Merck, desvelado en la patente de los Estados Unidos N.° 8.168.757) y los anticuerpos desvelados en la patente de los Estados Unidos N.° 7.488.802.

Péptidos macrocíclicos variantes

En otra realización más, un péptido macrocíclico de la divulgación comprende secuencias de aminoácidos que son homólogas a las secuencias de aminoácidos de los péptidos macrocíclicos descritos en este documento, y en donde los péptidos macrocíclicos retienen las propiedades funcionales y/o biológicas deseadas del péptido macrocíclico de la divulgación.

Por ejemplo, la divulgación proporciona un péptido macrocíclico, o una porción de unión a antígeno del mismo, que comprende: una secuencia de aminoácidos que es al menos 80% homóloga a una secuencia de aminoácidos seleccionada de los compuestos descritos en el presente documento; y el péptido macrocíclico presenta una o más de las siguientes propiedades:

(a) el péptido macrocíclico se une a la PD-L1 humana con un CI50 de 200 nM o menos;

(b) el péptido macrocíclico no se une sustancialmente a CD28, CTLA-4 o ICOS humanos;

(c) el péptido macrocíclico aumenta la secreción de IFNy de células T específicas de CMV;

(d) el péptido macrocíclico aumenta la secreción de IFNy de células T específicas de VIH;

(e) el péptido macrocíclico se une a la PD-1 humana y a uno o más de los siguientes: mono cynomolgus PD-1; marmota PD-1 y/o ratón PD-1;

(f) el péptido macrocíclico inhibe la unión de PD-L1 y/o PD-L2 a PD-1;

(g) el péptido macrocíclico es capaz de competir con la unión de anticuerpos monoclonales anti-PD-1, incluyendo nivolumab (BMS-936558, MDX-1106);

(h) el péptido macrocíclico inhibe el crecimiento de células tumorales en un ensayo celular y / o ensayo in vivo; y/o

(i) el péptido macrocíclico inhibe el VIH en un ensayo celular y/o un ensayo in vivo.

En otras realizaciones, las secuencias de aminoácidos del péptido macrocíclico pueden ser aproximadamente del 80 %, aproximadamente del 85 %, aproximadamente del 86 %, aproximadamente del 87 %, aproximadamente del 88 %, aproximadamente del 89 %, aproximadamente del 90 %, aproximadamente del 91 %, aproximadamente del 92 %, aproximadamente del 93 %, aproximadamente del 94 %, aproximadamente del 95 %, aproximadamente del 96 %, aproximadamente del 97 %, aproximadamente del 98 % o aproximadamente del 99 % homólogo a las secuencias expuestas anteriormente. En este contexto, el término "aproximadamente" se interpretará en el sentido de entre 1, 2, 3, 4 o 5 por ciento más o menos que la cantidad citada. Se puede obtener un péptido macrocíclico de la presente divulgación que tiene secuencias con alta identidad (es decir, 80 % o más) a las secuencias expuestas anteriormente, mutando las secuencias durante la síntesis química, por ejemplo, seguido de la prueba del péptido macrocíclico alterado para función retenida (es decir, las funciones establecidas en (a) a (i) anteriormente) usando los ensayos funcionales descritos en este documento. La actividad biológica y/o funcional de las secuencias de aminoácidos del péptido macrocíclico variante puede ser al menos aproximadamente 1x, 2x, 3x, 4x, 5x, v 6x, 7x, 8x, 9x o 10x más que el péptido macrocíclico de referencia en el cual la variante está basada. En este contexto, el término "aproximadamente" se interpretará en el sentido de entre 0,1x, 0,2x, 0,3x, 0,4x, 0,5x, 0,6x, 0,7x, 0,8x o 0,9x más o menos que la cantidad citada.

Como se usa en el presente documento, el porcentaje homólogo entre dos secuencias de aminoácidos es equivalente al porcentaje de identidad entre las dos secuencias. El porcentaje de identidad entre las dos secuencias es una función del número de posiciones idénticas compartidas por las secuencias (es decir, % de homología = n.° de posiciones idénticas/número total de posiciones. 100 veces), teniendo en cuenta el número de espacios y la longitud de cada espacio, que necesita introducirse para un alineamiento óptimo de las dos secuencias. La comparación de secuencias y la determinación del porcentaje de identidad entre dos secuencias puede realizarse usando un algoritmo matemático, como se describe en los ejemplos no limitantes a continuación).

El porcentaje de identidad entre dos secuencias de aminoácidos se puede determinar utilizando el algoritmo de Meyers E. y col., (Comput. Appl. Biosci., 4:11-17 (1988)) el cual e ha incorporado al programa ALIGN (versión 2.0), usando una tabla de residuos de peso PAM120, una penalización de longitud de hueco de 12 y una penalización de hueco de 4. Además, el porcentaje de identidad entre dos secuencias de aminoácidos se puede determinar usando Needleman y col. (J. Mol. Biol., 48:444-453 (1970)), algoritmo que se ha incorporado al programa GAP en el paquete de software GCG® (disponible en www.gcg.com), usando una matriz Blossum 62 o un Matriz PAM250 y un peso de separación de 16, 14, 12, 10, 8, 6 o 4 y un peso de longitud de 1, 2, 3, 4, 5 o 6.

Péptidos macrocíclicos con modificaciones conservadoras

Por ejemplo, la divulgación proporciona un péptido macrocíclico, o una porción de unión a antígeno del mismo, que comprende: una secuencia de aminoácidos que es al menos homóloga al 80 % a una secuencia de aminoácidos seleccionada de los péptidos macrocíclicos descritos en el presente documento, en donde uno o más aminoácidos han sido sustituidos con un aminoácido conservador; y el péptido macrocíclico presenta una o más de las siguientes propiedades:

(a) el péptido macrocíclico se une a la PD-L1 humana con un CI50 de 200 nM o menos

(c) el péptido macrocíclico aumenta la secreción de IFN^yde células T específicas de CMV;

(e) el péptido macrocíclico se une a la PD-L1 humana y a uno o más de los siguientes: mono cynomolgus PD-L1; marmota PD-L1 y/o ratón PD-L1;

(f) el péptido macrocíclico inhibe la unión de PD-L1 y/o PD-L2 a PD-1;

Como se usa en el presente documento, la expresión "modificaciones de secuencia conservadoras" pretende referirse a modificaciones de aminoácidos que no afectan o alteran significativamente las características de unión del péptido macrocíclico que contiene la secuencia de aminoácidos. Tales modificaciones conservadoras incluyen sustituciones, adiciones y deleciones de aminoácidos. Las modificaciones pueden introducirse en un anticuerpo de la divulgación mediante técnicas estándar conocidas en la técnica, tales como la sustitución de amiditas peptídicas durante la síntesis química, mutagénesis dirigida al sitio y mutagénesis mediada por PCR. Las sustituciones conservadoras de aminoácidos son aquellas en las que el residuo de aminoácido se reemplaza con un residuo de aminoácido que tiene una cadena lateral similar. Se han definido en la técnica familias de restos de aminoácidos que tienen cadenas laterales similares. Estas familias incluyen aminoácidos con cadenas laterales básicas (por ejemplo, lisina, arginina, histidina), cadenas laterales ácidas (por ejemplo, ácido aspártico, ácido glutámico), cadenas laterales polares no cargadas (por ejemplo, glicina, asparagina, glutamina, serina, treonina, tirosina, cisteína, triptófano), cadenas laterales no polares (por ejemplo, alanina, valina, leucina, isoleucina, prolina, fenilalanina, metionina), cadenas laterales beta-ramificadas (por ejemplo, treonina, valina, isoleucina) y cadenas laterales aromáticas (por ejemplo, tirosina, fenilalanina, triptófano, histidina). Por tanto, uno o más residuos de aminoácidos dentro de las regiones de unión a antígeno de péptidos macrocíclicos de la divulgación se pueden reemplazar con otros residuos de aminoácidos de la misma familia de cadenas laterales y se puede analizar la función retenida del anticuerpo alterado (es decir, las funciones establecidas en (a) hasta (i) anterior) usando los ensayos funcionales descritos en el presente documento. Las sustituciones conservadoras de aminoácidos también se pueden seleccionar de uno o más aminoácidos no naturales descritos en el presente documento.

Composiciones farmacéuticas

La divulgación se refiere además a los polipéptidos descritos en el presente documento en los que la secuencia comprende una o más deleciones de aminoácidos desde el extremo C y/o el extremo N.

En realizaciones preferidas, los siguientes polipéptidos de deleción del compuesto N-terminal n.° 99 están abarcados por la presente divulgación: X1-X13, X2-X13, X3-X13, X4-X13, X5-X13, X6-X13, X7-X13, X8-X13, X9-X13, X10-X13, XI 1-X13 y/o X12-X13 del compuesto n.° 99, en donde cada X es representativo de un aminoácido en la posición indicada para cada péptido como se muestra en el presente documento. La presente divulgación también abarca formas cíclicas de estos mutantes de deleción que usan las químicas de enlace descritas en otra parte del presente documento.

En realizaciones preferidas, los siguientes polipéptidos de deleción del compuesto C-terminal n.° 99 están abarcados por la presente divulgación: X1-X13, X1-X12, X1-X11, X1-X10, X1-X9, X1-X8, X1-X7, X1-X6, X1-X5, X1-X4 y/o X1-X3 del compuesto n.° 99, en donde cada X es representativo de un aminoácido en la posición indicada para cada péptido como se muestra en el presente documento. La presente divulgación también abarca formas cíclicas de estos mutantes de deleción que usan las químicas de enlace descritas en otra parte del presente documento.

En realizaciones preferidas, los siguientes polipéptidos de deleción del compuesto N-terminal n.° 1 están abarcados por la presente divulgación: X1-X15, X2-X15, X3-X15, X4-X15, X5-X15, X6-X15, X7-X15, X8-X15, X9-X15, X10-X15, XI 1-X15 y/o X12-X15 del compuesto n.° 1, en donde cada 1 es representativo de un aminoácido en la posición indicada para cada péptido como se muestra en el presente documento. La presente divulgación también abarca formas cíclicas de estos mutantes de deleción que usan las químicas de enlace descritas en otra parte del presente documento.

En realizaciones preferidas, los siguientes polipéptidos de deleción del compuesto C-terminal n.° 1 están abarcados por la presente divulgación: X1-X15, X1-X14, X1-X13, X1-X12, X1-X11, X1-X10, X1-X9, X1-X8, X1-X7, X1-X6, X1-X5, X1-X4 y/o X1-X3 del compuesto n.° 1, en donde cada X es representativo de un aminoácido en la posición indicada para cada péptido como se muestra en el presente documento. La presente divulgación también abarca formas cíclicas de estos mutantes de deleción que usan las químicas de enlace descritas en otra parte del presente documento.

En realizaciones preferidas, los siguientes polipéptidos de deleción del compuesto N-terminal n.° 71 están abarcados por la presente divulgación: X1-X14, X2-X14, X3-X14, X4-X14, X5-X14, X6-X14, X7-X14, X8-X14, X9-X14, X10-X14, XI 1-X14 y/o X12-X14 del compuesto n.° 71, en donde cada X es representativo de un aminoácido en la posición indicada para cada péptido como se muestra en el presente documento. La presente divulgación también abarca formas cíclicas de estos mutantes de deleción que usan las químicas de enlace descritas en otra parte del presente documento.

En realizaciones preferidas, los siguientes polipéptidos de deleción del compuesto C-terminal n.° 71 están abarcados por la presente divulgación: X1-X14, X1-X13, X1-X12, X1-X11, X1-X10, X1-X9, X1-X8, X1-X7, X1-X6, X1-X5, X1-X4 y/o X1-X3 del compuesto n.° 71, en donde cada X es representativo de un aminoácido en la posición indicada para cada péptido como se muestra en el presente documento. La presente divulgación también abarca formas cíclicas de estos mutantes de deleción que usan las químicas de enlace descritas en otra parte del presente documento. En otro aspecto, la presente divulgación proporciona una composición, por ejemplo, una composición farmacéutica, que contiene uno o una combinación de péptidos macrocíclicos o parte(s) de unión a antígeno de los mismos, de la presente divulgación, formulados junto con un vehículo farmacéuticamente aceptable. Dichas composiciones pueden incluir uno o una combinación de (por ejemplo, dos o más diferentes) péptidos macrocíclicos o inmunoconjugados o moléculas biespecíficas de la divulgación. Por ejemplo, una composición farmacéutica de la divulgación puede comprender una combinación de péptidos macrocíclicos (o inmunoconjugados o biespecíficos) que se unen a diferentes epítopos en el antígeno diana o que tienen actividades complementarias.

Las composiciones farmacéuticas de la divulgación también pueden administrarse en terapia de combinación, es decir, combinadas con otros agentes. Por ejemplo, la terapia de combinación puede incluir un péptido macrocíclico combinado con al menos otro agente antiinflamatorio o inmunosupresor. Los ejemplos de agentes terapéuticos que pueden usarse en terapia de combinación se describen con mayor detalle a continuación en la sección sobre usos de los péptidos macrocíclicos de la divulgación.

Como se usa en el presente documento, el "vehículo farmacéuticamente aceptable" incluye todos y cada uno de los disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes isotónicos y retardantes de la absorción, y similares, que son fisiológicamente compatibles. Preferentemente, el portador es adecuado para intravenosa, intramuscular, subcutánea, parenteral, espinal o epidérmica (por ejemplo, mediante inyección o infusión). Dependiendo de la vía de administración, el compuesto activo, es decir, un péptido macrocíclico, inmunoconjugado o molécula biespecífica, se puede recubrir con un material para proteger el compuesto de la acción de ácidos y otras condiciones naturales que pueden inactivar el compuesto.

Los compuestos farmacéuticos de la divulgación pueden incluir una o más sales farmacéuticamente aceptables. Una "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal que conserva la actividad biológica deseada del compuesto parental y que no produce ningún efecto toxicológico indeseado (véase, por ejemplo, Berge, S.M. y col., J. Pharm. Sci., 66:1-19 (1977)). Los ejemplos de dichas sales incluyen sales de adición de ácidos y sales de adición de bases. Las sales de adición de ácidos incluyen las derivadas de ácidos inorgánicos no tóxicos, tales como clorhídrico, nítrico, fosfórico, sulfúrico, bromhídrico, yodhídrico, fosforoso y similares, así como de ácidos orgánicos no tóxicos, tales como ácidos alifáticos mono- y dicarboxílicos, ácidos alcanoicos sustituidos con fenilo, ácidos hidroxialcanoicos, ácidos aromáticos, ácidos sulfónicos alifáticos y aromáticos y similares. Las sales de adición de bases incluyen las derivadas de metales alcalinotérreos, tales como sodio, potasio, magnesio, calcio y similares, así como de aminas orgánicas no tóxicas, tales como N,N'-dibenciletilendiamina, W-metilglucamina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilendiamina, procaína y similares.

Una composición farmacéutica de la divulgación también puede incluir un antioxidante farmacéuticamente aceptable. Los ejemplos de antioxidantes farmacéuticamente aceptables incluyen: (1) antioxidantes hidrosolubles, tales como ácido ascórbico, clorhidrato de cisteína, bisulfato de sodio, metabisulfito de sodio, sulfito de sodio y similares; (2) antioxidantes oleosolubles, tales como palmitato de ascorbilo, hidroxianisol butilado (BHA), hidroxitolueno butilado (BHT), lecitina, galato de propilo, alfa-tocoferol y similares; y (3) agentes quelantes de metales, tales como ácido cítrico, ácido etilendiaminotetraacético (EDTA), sorbitol, ácido tartárico, ácido fosfórico y similares.

Los ejemplos de vehículos acuosos y no acuosos adecuados que pueden emplearse en las composiciones farmacéuticas de la divulgación incluyen agua, etanol, polioles (tales como glicerol, propilenglicol, polietilenglicol y similares) y mezclas adecuadas de los mismos, aceites vegetales, tales como aceite de oliva y ésteres orgánicos inyectables, tales como oleato de etilo. La fluidez adecuada se puede mantener, por ejemplo, mediante el uso de materiales de recubrimiento, tales como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula necesario en caso de dispersiones y mediante el uso de tensioactivos.

Estas composiciones también pueden contener adyuvantes tales como conservantes, agentes humectantes, agentes emulsionantes y agentes dispersantes. La prevención de la presencia de microorganismos puede garantizarse mediante procedimientos de esterilización, mencionados anteriormente, y mediante la inclusión de diversos agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo, parabeno, clorobutanol, fenol de ácido sórbico y similares. También puede ser deseable incluir agentes isotónicos, tales como azúcares, cloruro sódico y similares en las composiciones. Además, puede proporcionarse absorción prolongada de la forma farmacéutica inyectable mediante la inclusión de agentes que retardan la absorción, tales como monoestearato de aluminio y gelatina.

Los vehículos farmacéuticamente aceptables incluyen soluciones o dispersiones acuosas estériles y polvos estériles para la preparación extemporánea de soluciones o dispersiones inyectables estériles. El uso de dichos medios y agentes para sustancias farmacéuticamente activas es conocido en la materia. Excepto en la medida en que cualquier medio o agente convencional sea incompatible con el compuesto activo, se contempla su uso en las composiciones farmacéuticas de la divulgación. Los compuestos activos complementarios también se pueden incorporar en las composiciones.

Las composiciones farmacéuticas normalmente deben ser estériles y estables en las condiciones de fabricación y almacenamiento. La composición se puede formular como una solución, microemulsión, liposoma u otra estructura ordenada adecuada para alta concentración de fármaco. El vehículo puede ser un disolvente o medio de dispersión que contiene, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicol líquido, y similares) y mezclas adecuadas de los mismos. La fluidez apropiada puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de un recubrimiento tal como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partículas requerido en el caso de dispersión y mediante el uso de tensioactivos. En muchos casos, será preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, polialcoholes tales como manitol, sorbitol o cloruro sódico en la composición. Puede proporcionarse absorción prolongada de las composiciones inyectables mediante la inclusión en la composición de un agente que retarde la absorción, por ejemplo, sales de monoestearato y gelatina.

Pueden prepararse soluciones inyectables estériles mediante la incorporación del compuesto activo en la cantidad necesaria en un disolvente adecuado con uno o una combinación de ingredientes enumerados anteriormente, según sea necesario, seguido de esterilización por microfiltración. En general, se preparan dispersiones mediante la incorporación del compuesto activo en un vehículo estéril que contiene un medio de dispersión básico y los otros ingredientes necesarios de los enumerados anteriormente. En el caso de polvos estériles para la preparación de soluciones inyectables estériles, los métodos de preparación preferidos son secado al vacío y criodesecación (liofilización) que producen un polvo del principio activo más cualquier ingrediente adicional deseado a partir una solución del mismo previamente esterilizada por filtración.

La cantidad de principio activo que se puede combinar con un material de vehículo para producir una única forma de dosificación variará dependiendo del sujeto que se esté tratando y del modo particular de administración. La cantidad de ingrediente activo que puede combinarse con un material de vehículo para producir una forma de dosificación individual generalmente será esa cantidad de la composición que produce un efecto terapéutico. En general, del cien por ciento, esta cantidad variará desde aproximadamente 0,01 por ciento a aproximadamente noventa y nueve por ciento de principio activo, preferentemente de aproximadamente 0,1 por ciento a aproximadamente 70 por ciento, lo más preferentemente de aproximadamente 1 por ciento a aproximadamente 30 por ciento de principio activo en combinación con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

Los regímenes de dosificación se ajustan para proporcionar la respuesta óptima deseada (por ejemplo, una respuesta terapéutica). Por ejemplo, se puede administrar una única embolada, se pueden administrar varias dosis divididas a lo largo del tiempo o se puede reducir o aumentar proporcionalmente la dosis según indiquen las exigencias de la situación terapéutica. Es especialmente ventajoso formular las composiciones parenterales en forma de dosificación unitaria para facilitar la administración y uniformidad de la dosificación. La forma de dosificación unitaria usada en el presente documento se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias para los sujetos para tratar; cada unidad contiene una cantidad predeterminada de compuesto activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado en asociación con el vehículo farmacéutico necesario. La especificación para las formas de dosificación unitaria de la divulgación está dictada por y depende directamente de (a) las características únicas del compuesto activo y el efecto terapéutico concreto que se vaya a conseguir y (b) las limitaciones inherentes en la técnica de composición de dicho compuesto activo para el tratamiento de la sensibilidad en individuos.

Para administración del péptido macrocíclico, la dosificación varía de aproximadamente 0,0001 a 100 mg/kg, y más habitualmente de 0,01 a 5 mg/kg, del peso corporal del hospedador. Por ejemplo, las dosificaciones pueden ser de 0,3 mg/kg de peso corporal, 1 mg/kg de peso corporal, 3 mg/kg de peso corporal, 5 mg/kg de peso corporal o 10 mg/kg de peso corporal o estar en el intervalo de 1-10 mg/kg. Un régimen de tratamiento ilustrativo implica la administración una vez al día, cada dos semanas, cada tres semanas, semanales, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas, una vez cada cuatro semanas, una vez al mes, una vez cada 3 meses o una vez cada tres a 6 meses. Los regímenes de dosificación preferidos para un péptido macrocíclico de la divulgación incluyen 1 mg/kg de peso corporal o 3 mg/kg de peso corporal mediante administración intravenosa, proporcionándose el anticuerpo mediante el uso uno de los siguientes programas de dosificación: (i) cada cuatro semanas para seis dosificaciones, después cada tres meses; (ii) cada tres semanas; (iii) 3 mg/kg de peso corporal una vez seguido de 1 mg/kg de peso corporal cada tres semanas.

En algunos métodos, se administran simultáneamente dos o más péptidos macrocíclicos con diferentes especificidades de unión, en cuyo caso la dosificación de cada compuesto administrado queda dentro de los intervalos indicados. Los compuestos se administran habitualmente en múltiples ocasiones. Los intervalos entre dosificaciones individuales pueden ser, por ejemplo, semanales, mensuales, cada tres meses o anuales. Los intervalos también pueden ser irregulares como indica la medición de los niveles en sangre de péptido macrocíclico para el antígeno diana en el paciente. En algunos métodos, la dosificación se ajusta para lograr una concentración de anticuerpos en plasma de aproximadamente 1-1000 pg/ml y en algunos métodos aproximadamente 25 300 pg/ml.

Como alternativa, el péptido macrocíclico puede administrarse como una formulación de liberación sostenida, en cuyo caso es necesaria administración menos frecuente. La dosificación y frecuencia varían según la semivida del péptido macrocíclico en el paciente. La dosificación y frecuencia de administración pueden variar dependiendo de si el tratamiento es profiláctico o terapéutico. En aplicaciones profilácticas, se administra una dosificación relativamente baja a intervalos relativamente infrecuentes durante un periodo de tiempo largo. Algunos pacientes continúan recibiendo tratamiento durante el resto de sus vidas. En aplicaciones terapéuticas, en ocasiones es necesaria una dosis relativamente alta a intervalos relativamente cortos hasta que la progresión de la enfermedad se reduzca o termine y preferentemente hasta que el paciente muestre un alivio parcial o completo de los síntomas de la enfermedad. A continuación, se puede administrar al paciente un régimen profiláctico.

Los niveles reales de dosificación de los principios activos en las composiciones farmacéuticas de la presente divulgación pueden variarse para obtener una cantidad del principio activo que sea eficaz para conseguir la respuesta terapéutica deseada para un paciente, composición y modo de administración particular, sin que sean tóxicos para el paciente. El nivel de dosificación seleccionado dependerá de diversos factores incluyendo la actividad de las composiciones particulares de la presente divulgación empleada, o el éster, sal o amida de las mismas, la vía de administración, el momento de administración, la tasa de secreción del compuesto particular que se emplea, la duración del tratamiento, otros fármacos, compuestos y/o materiales usados en combinación con las composiciones particulares empleadas, la edad, el sexo, el peso, la condición, el estado de salud general e historial médico previo del paciente que se está tratando, y factores similares bien conocidos en la técnica médica.

Una "dosificación terapéuticamente eficaz" de un péptido macrocíclico de la divulgación da como resultado preferiblemente una reducción de la gravedad de los síntomas de la enfermedad, un aumento de la frecuencia y duración de los periodos exentos de síntomas de la enfermedad o una prevención del deterioro o discapacidad debido a la enfermedad. Por ejemplo, para el tratamiento de tumores, una "dosificación terapéuticamente eficaz" inhibe preferentemente el crecimiento celular o el crecimiento tumoral en al menos aproximadamente 20 %, más preferentemente en al menos aproximadamente 40 %, aún más preferentemente en al menos aproximadamente 60 % y aún más preferentemente en al menos aproximadamente 80 % en relación con sujetos no tratados. La capacidad de un compuesto para inhibir el crecimiento tumoral y/o VIH puede evaluarse en un sistema modelo animal predictivo de la eficacia en tumores humanos o eficacia vírica. Como alternativa, esta propiedad de una composición puede evaluarse examinando la capacidad del compuesto para inhibir, dicha inhibición in vitro mediante ensayos conocidos por el facultativo experto. Una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto terapéutico puede reducir el tamaño tumoral, reducir la carga vírica o de otra manera aliviar los síntomas en un sujeto. Un experto habitual en la materia podría determinar dichas cantidades basándose en factores como el tamaño del sujeto, la gravedad de los síntomas del sujeto y la composición particular o vía de administración seleccionada.

En otro aspecto, la divulgación instantánea proporciona un kit farmacéutico de partes que comprende un péptido macrocíclico y un anticuerpo anti-CTLA-4, como se describe en el presente documento. El kit también puede comprender además instrucciones para su uso en el tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa (tal como cáncer como se describe en el presente documento) y/o enfermedad antivírica.

Una composición de la presente divulgación se puede administrar a través de una o más vías de administración usando uno o más de diversos métodos conocidos en la técnica. Como apreciarán lo expertos en la materia, la vía y/o el modo de administración variarán dependiendo de los resultados deseados. Las rutas de administración preferidas para péptidos macrocíclicos de la divulgación incluyen rutas de administración intravenosa, intramuscular, intradérmica, intraperitoneal, subcutánea, espinal u otras vías parenterales, por ejemplo mediante inyección o infusión. La expresión "administración parenteral" como se usa en el presente documento significa modos de administración distintos de administración oral y tópica, habitualmente mediante inyección, e incluye, sin limitación, intravenosa, intramuscular, intraarterial, intratecal, intracapsular, intraorbital, intracardíaca, intradérmica, intraperitoneal, transtraqueal, subcutánea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaracnoidea, intraespinal, epidural e intraesternal e infusión.

Como alternativa, un péptido macrocíclico de la divulgación se puede administrar a través de una vía no parenteral, tal como una vía de administración tópica, epidérmica o mucosa, por ejemplo, por vía intranasal, por vía oral, por vía vaginal, por vía rectal, por vía sublingual o por vía tópica.

Los compuestos activos pueden prepararse con vehículos que protegerán el compuesto contra su liberación rápida, tal como una formulación de liberación controlada, incluyendo implantes, parches transdérmicos y sistemas de suministro microencapsulados. Se pueden usar polímeros biocompatibles y biodegradables, tales como acetato de etilenvinilo, polianhídridos, ácido poliglicólico, colágeno, poliortoésteres y ácido poliláctico. Muchos métodos para la preparación de dichas formulaciones están patentados o son conocidos en general por los expertos en la materia. Véase, por ejemplo, Robinson, J.R., ed., Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, Marcel Dekker, Inc., Nueva York (1978).

Las composiciones terapéuticas se pueden administrar con dispositivos médicos conocidos en la técnica. Por ejemplo, en una realización preferida, una composición terapéutica de la divulgación se puede administrar con un dispositivo de inyección hipodérmica sin aguja, tal como los dispositivos desvelados en las patentes de los Estados Unidos n.° 5.399.163, 5.383.851, 5.312.335, 5.064.413, 4.941.880, 4.790.824 o 4.596.556. Los ejemplos de implantes y módulos bien conocidos útiles en la presente divulgación incluyen: patente de los Estados Unidos n.° 4.487.603, que desvela una bomba de microinfusión implantable para distribuir medicamento a una velocidad controlada; patente de los Estados Unidos n.° 4.486.194, que desvela un dispositivo terapéutico para administrar medicamento a través de la piel; patente de los Estados Unidos n.° 4.447.233, que desvela una bomba de infusión de medicamento para suministrar medicamento a una tasa de infusión precisa; patente de los Estados Unidos n.° 4.447.224, que desvela un aparato de infusión implantable de flujo variable para el suministro continuo de fármaco; patente de los Estados Unidos n.° 4.439.196, que desvela un sistema de suministro osmótico de fármaco que tiene compartimentos multicámara; y la patente de los Estados Unidos n.° 4.475.196, que desvela un sistema de suministro osmótico de fármaco. Estas patentes se incorporan en el presente documento como referencia. Muchos otros de estos implantes, sistemas de administración y módulos son conocidos por los expertos en la materia.

En determinadas realizaciones, los péptidos macrocíclicos de la divulgación pueden formularse para garantizar una distribución adecuada in vivo. Por ejemplo, la barrera hematoencefálica (BHE) excluye muchos compuestos altamente hidrófilos. Para garantizar que los compuestos terapéuticos de la divulgación crucen la BHE (si se desea), se pueden formular, por ejemplo, en liposomas. Para métodos de fabricación de liposomas, véase, por ejemplo, las patentes de los Estados Unidos n.° 4.522.811, 5.374.548 y 5.399.331. Los liposomas pueden comprender uno o más restos que se transportan de manera selectiva a células u órganos específicos, mejorando de este modo la administración dirigida de fármaco (véase, por ejemplo, Ranade, V.V., J. Clin. Pharmacol., 29:685 (1989)). Los grupos de direccionamiento a modo de ejemplo incluyen folato o biotina (véase, por ejemplo, patente de los Estados Unidos n.° 5.416.016 de Low y col.); manósidos (Umezawa y col., Biochem. Biophys. Res. Commun., 153:1038 (1988)); péptidos macrocíclicos (Bloeman, P.G. y col., FEBS Lett., 357:140 (1995); Owais, M. y col., Antimicrob. Agents Chemother., 39:180 (1995)); receptor de proteína A tensioactivo (Briscoe y col., Am. J. Physiol., 1233:134 (1995)); p120 (Schreier y col., J. Biol. Chem., 269:9090 (1994)); véase también Keinanen, K. y col., FEBS Lett., 346:123 (1994); Killion, J.J. y col., Immunomethods 4:273 (1994).

Usos y métodos de la divulgación

Los péptidos macrocíclicos, composiciones y métodos de la presente divulgación tienen numerosas utilidades in vitro e in vivo que implican, por ejemplo, detección de PD-L1 o mejora de la respuesta inmunitaria por bloqueo de PD-L1. Por ejemplo, estas moléculas se pueden administrar a células en cultivo, in vitro o ex vivo, o a sujetos humanos, por ejemplo, in vivo, para potenciar la inmunidad en diversas situaciones. En consecuencia, en un aspecto, la divulgación proporciona un método para modificar una respuesta inmunitaria en un sujeto que comprende administrar al sujeto el anticuerpo, o parte de unión a antígeno del mismo, de la divulgación de manera que se modifique la respuesta inmunitaria en el sujeto. Preferentemente, la respuesta se potencia, se estimula o se regula positivamente. En otros aspectos, el péptido macrocíclico puede tener actividad terapéutica y de unión anti-cino, anti ratón y/o anti-marmota.

Como se usa en el presente documento, se entiende que el término "sujeto" incluye seres humanos y animales no humanos. Los animales no humanos incluyen todos los vertebrados, por ejemplo, mamíferos y no mamíferos, tales como primates no humanos, ovejas, perros, gatos, vacas, caballos, pollos, marmotas, anfibios y reptiles, aunque se prefieren mamíferos, tales como primates no humanos, ovejas, perros, gatos, vacas y caballos. Los sujetos preferidos incluyen pacientes humanos que necesitan potenciar una respuesta inmunitaria. Los métodos son particularmente adecuados para tratar pacientes humanos que tienen un trastorno que puede tratarse aumentando la respuesta inmunitaria mediada por linfocitos T. En una realización particular, los métodos son particularmente adecuados para el tratamiento de células cancerosas in vivo. Para conseguir una mejora específica de antígeno de la inmunidad, los péptidos macrocíclicos pueden administrarse junto con un antígeno de interés. Cuando los péptidos macrocíclicos para PD-L1 se administran junto con otro agente, los dos se pueden administrar en cualquier orden o simultáneamente.

La divulgación proporciona además métodos para detectar la presencia de antígeno PD-L1 humano, marmota, cino y/o ratón en una muestra, o medir la cantidad de antígeno humano-marmota, cino y/o ratón PD-L1, que comprenden poner en contacto la muestra, y una muestra de control, con un anticuerpo monoclonal de referencia, o una porción de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente a la PD-L1 humana, marmota, cino y/o ratón, en condiciones que permiten la formación de un complejo entre el anticuerpo o una porción de la misma y la PD-L1 humana, marmota, cino y/o ratón. Después se detecta la formación de un complejo, en donde una formación de complejo diferente entre la muestra en comparación con la muestra de control es indicativa de la presencia de antígeno PD-L1 humano, de marmota, de cyno y/o de ratón en la muestra.

Dada la unión específica de los péptidos macrocíclicos de la divulgación para PD-L1, en comparación con CD28, ICOS y CTLA-4, los péptidos macrocíclicos de la divulgación pueden usarse para detectar específicamente la expresión de PD-L1 en la superficie de células y, por otra parte, pueden usarse para purificar PD-L1 mediante purificación de inmunoafinidad.

Cáncer

El bloqueo de PD-1 por péptidos macrocíclicos puede potenciar la respuesta inmunitaria a células cancerosas en el paciente. El ligando para PD-1, PD-L1, no se expresa en células humanas normales, pero es abundante en diversos cánceres humanos (Dong y col. Nat. Med., 8:787-789 (2002)). La interacción entre PD-1 y PD-L1 da como resultado una disminución de linfocitos infiltrantes de tumores, una disminución de la proliferación mediada por receptores de linfocitos T y evasión inmunitaria por las células cancerosas (Dong y col., J. Mol. Med., 81:281-287 (2003); Blank y col., Cancer Immunol. Immunother., 54:307-314 (2005); Konishi y col., Clin. Cancer Res., 10:5094-5100 (2004)). La supresión inmunitaria puede invertirse inhibiendo la interacción local de PD-1 con PD-L1 y el efecto es aditivo cuando la interacción de PD-1 con PD-L2 también se bloquea (Iwai y col., Proc. Natl. Acad. Sci., 99:12293-12297 (2002); Brown y col., J. Immunol., 170:1257-1266 (2003)). Si bien los estudios anteriores han mostrado que la proliferación de linfocitos T puede restaurarse inhibiendo la interacción de PD-1 con PD-L1, no se ha señalado un efecto directo sobre el crecimiento tumoral del cáncer in vivo mediante el bloqueo de la interacción PD-1/PD-L1. En un aspecto, la presente divulgación se refiere al tratamiento de un sujeto in vivo usando un péptido macrocíclico de manera que se inhiba el crecimiento de tumores cancerosos. Un péptido macrocíclico puede usarse solo para inhibir el crecimiento de tumores cancerosos. Como alternativa, un péptido macrocíclico puede usarse junto con otros agentes inmunogénicos, tratamientos convencionales contra el cáncer u otros péptidos macrocíclicos, como se describe a continuación.

En consecuencia, en una realización, la divulgación proporciona un procedimiento para inhibir el crecimiento de células tumorales en un sujeto, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de un péptido macrocíclico o una porción de unión a antígeno del mismo.

Los cánceres preferidos cuyo crecimiento puede inhibirse usando los péptidos macrocíclicos de la divulgación incluyen cánceres que normalmente responden a la inmunoterapia. Los ejemplos no limitantes de cánceres preferidos para tratamiento incluyen melanoma (por ejemplo, metastásico melanoma maligno), carcinoma de células renales (por ejemplo, carcinoma de células claras), cáncer de próstata (por ejemplo, adenocarcinoma de próstata resistente a hormonas y cáncer de próstata resistente a la castración), cáncer de mama, cáncer colorrectal y cáncer de pulmón (por ejemplo, cáncer de pulmón no microcítico escamoso y no escamoso). Adicionalmente, la divulgación incluye neoplasias resistentes o recurrentes cuyo crecimiento se puede inhibir usando los péptidos macrocíclicos de la divulgación.

Los ejemplos de otros cánceres que pueden tratarse usando los métodos de la divulgación incluyen cáncer de hueso, cáncer de páncreas, cáncer de piel, cáncer de cabeza o cuello, melanoma maligno cutáneo o intraocular, cáncer de útero, cáncer de ovario, cáncer de colon, cáncer rectal, cáncer de la región anal, cáncer de estómago/gástrico, cáncer testicular, cáncer de útero, carcinoma de las trompas de Falopio, carcinoma del endometrio, carcinoma del cuello uterino, carcinoma de la vagina, carcinoma de la vulva, enfermedad de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, cáncer del esófago, cáncer del intestino delgado, cáncer del sistema endocrino, cáncer de la glándula tiroides, cáncer de la glándula paratiroidea, cáncer de la glándula suprarrenal, sarcoma de tejidos blandos, cáncer de la uretra, cáncer del pene, leucemias crónicas o agudas, incluyendo leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crónica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica, tumores sólidos de la infancia, linfoma linfocítico, cáncer de la vejiga, cáncer del riñón o del uréter, carcinoma de la pelvis renal, neoplasia del sistema nervioso central (SNC), linfoma primario del SNC, angiogénesis tumoral, tumor del eje espinal, glioma del tronco encefálico, adenoma hipofisario, sarcoma de Kaposi, cáncer epidermoide, cáncer de células escamosas, linfoma de linfocitos T, cánceres de inducción ambiental incluyendo los inducidos por amianto y combinaciones de dichos cánceres. La presente divulgación también es útil para el tratamiento de cánceres metastásicos, especialmente cánceres metastásicos que expresan PD-L1 (Iwai y col., Int. Immunol., 17:133-144 (2005)).

Opcionalmente, los péptidos macrocíclicos para PD-L1 se pueden combinar con un agente inmunogénico, tal como células cancerosas, antígenos tumorales purificados (incluyendo proteínas recombinantes, péptidos y moléculas de carbohidratos), células y células transfectadas con genes que codifican citocinas inmunoestimulantes (He y col., J. Immunol., 173:4919-4928 (2004)). Los ejemplos no limitativos de vacunas tumorales que se pueden usar incluyen péptidos de antígenos de melanoma, tales como péptidos de gp100, antígenos de MAGE, Trp-2, MART1 y/o tirosinasa, o células tumorales transfectadas para expresar la citocina GM-CSF (analizada más adelante).

En seres humanos, se ha mostrado que algunos tumores son inmunogénicos tales como melanomas. Se anticipa que al elevar el umbral de la activación de linfocitos T por bloqueo de PD-L1, se puede esperar activar respuestas tumorales en el hospedador.

Es probable que el bloqueo de PD-L1 sea más eficaz cuando se combina con un protocolo de vacunación. Se han ideado muchas estrategias experimentales para vacunación contra tumores (véase Rosenberg, S., Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62 (2000); Logothetis, C., ASCO Educational Book Spring: 300-302 (2000); Khayat, D., ASCO Educational Book Spring: 414-428 (2000); Foon, K., ASCO Educational Book Spring: 730-738 (2000); véase también Restifo, N. y col., Cáncer Vaccines, Capítulo 61, págs. 3023-3043, en DeVita, V. y col., eds., Cancer: Principles and Practice of Oncology, Quinta Edición (1997)). En una de estas estrategias, se prepara una vacuna usando células tumorales autólogas o alogénicas. Se ha demostrado que estas vacunas celulares son más eficaces cuando las células tumorales se transducen para expresar GM-CSF. Se ha demostrado que el GM-CSF es un activador potente de la presentación de antígenos para la vacunación contra tumores (Dranoff y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 90: 3539-3543 (1993)).

El estudio de la expresión génica y los patrones de expresión génica a gran escala en diversos tumores ha conducido a la definición de los denominados antígenos específicos de tumores (Rosenberg, S.A., Immunity, 10:281-287 (1999)). En muchos casos, estos antígenos específicos de tumores son antígenos de diferenciación expresados en los tumores y en la célula de la que se originó el tumor, por ejemplo, antígenos de melanocitos gp100, antígenos de MAGE y Trp-2. Los que es aún más importante, se puede mostrar que muchos de estos antígenos son las dianas de linfocitos T específicos de tumores hallados en el hospedador. El bloqueo de PD-L1 puede usarse junto con una colección de proteínas recombinantes y/o péptidos expresados en un tumor con el fin de generar una respuesta inmunitaria a estas proteínas. Estas proteínas son normalmente vistas por el sistema inmunitario como antígenos propios y, por lo tanto, son tolerantes a ellos. El antígeno tumoral también puede incluir la proteína telomerasa, que es necesaria para la síntesis de telómeros de cromosomas y que se expresa en más del 85 % de los cánceres humanos y solo en un número limitado de tejidos somáticos (Kim, N. y col., Science, 266:2011-2013 (1994)). (Estos tejidos somáticos pueden protegerse del ataque inmunitario por diversos medios). El antígeno tumoral también puede ser "neo-antígenos" expresados en células cancerosas debido a mutaciones somáticas que alteran la secuencia proteica o crean proteínas de fusión entre dos secuencias no relacionadas (es decir, bcr-abl en el cromosoma Filadelfia), o idiotipo de tumores de linfocitos B.

Otras vacunas contra tumores pueden incluir las proteínas de virus implicados en cánceres humanos tales como virus del papiloma humano (VPH), virus de la hepatitis (VHB y VHC) y virus del herpes de sarcoma de Kaposi (KHSV). Otra forma de antígeno específico de tumor que puede usarse junto con el bloqueo de PD-L1 son las proteínas de choque térmico purificadas (HSP) aisladas del propio tejido tumoral. Estas proteínas de choque térmico contienen fragmentos de proteínas de las células tumorales y estas HSP son altamente eficaces en el suministro a células presentadoras de antígenos para inducir inmunidad tumoral (Suot, R. y col., Science, 269:1585-1588 (1995); Tamura, Y. y col., Science, 278:117-120 (1997)).

Las células dendríticas (CD) son potentes células presentadoras de antígenos que pueden usarse para preparar respuestas específicas de antígeno. Las CD pueden producirse ex vivo y cargarse con diversos antígenos proteicos y peptídicos, así como con extractos de células tumorales (Nestle, F. y col., Nat. Med., 4:328-332 (1998)). Las CD también pueden ser transducidas por medios genéticos para expresar también estos antígenos tumorales. Las CD también se han fusionado directamente con células tumorales para fines de inmunización (Kugler, A. y col., Nat. Med., 6:332-336 (2000)). Como método de vacunación, la inmunización por CD puede combinarse eficazmente con el bloqueo de PD-L1 para activar respuestas antitumorales más potentes.

El bloqueo de PD-L1 también puede combinarse con tratamientos convencionales contra el cáncer. El bloqueo de PD-L1 puede combinarse eficazmente con regímenes quimioterapéuticos. En estos casos, tal vez sea posible reducir la dosis de reactivo quimioterapéutico administrado (Mokyr, M. y col., Cancer Res., 58:5301-5304 (1998)). Un ejemplo de dicha combinación es un péptido macrocíclico en combinación con dacarbazina para el tratamiento de melanoma. Otro ejemplo de dicha combinación es un péptido macrocíclico en combinación con interleucina-2 (IL-2) para el tratamiento de melanoma. El razonamiento científico detrás del uso combinado de bloqueo de PD-L1 y quimioterapia es que la muerte celular, que es una consecuencia de la acción citotóxica de la mayoría de los compuestos quimioterapéuticos, debería dar como resultado mayores niveles de antígeno tumoral en la ruta de presentación de antígenos. Otras terapias combinadas que pueden dar como resultado sinergia con el bloqueo de PD-L1 mediante muerte celular son radiación, cirugía y privación de hormonas. Cada uno de estos protocolos crea una fuente de antígeno tumoral en el hospedador. Los inhibidores de la angiogénesis también se pueden combinar con bloqueo de PD-L1. La inhibición de la angiogénesis conduce a la muerte de células tumorales que pueden aportar antígeno tumoral a rutas de presentación de antígenos del hospedador.

Los péptidos macrocíclicos que bloquean PD-L1 también pueden usarse en combinación con péptidos macrocíclicos biespecíficos que dirigen células efectoras que expresan receptores Fc alfa o Fc gamma a células tumorales (véase, por ejemplo, patentes de los Estados Unidos n.° 5.922.845 y 5.837.243). Se pueden usar péptidos macrocíclicos biespecíficos para dirigirse a dos antígenos separados. Por ejemplo, se han usado péptidos macrocíclicos biespecíficos del receptor anti-Fc/antígeno anti-tumor (por ejemplo, Her-2/neu) para dirigir macrófagos a sitios de tumor. Este direccionamiento puede activar más eficazmente respuestas tumorales específicas. La rama de linfocitos T de estas respuestas se aumentaría mediante el uso de bloqueo de PD-L1. Como alternativa, el antígeno puede suministrarse directamente a las CD mediante el uso de péptidos macrocíclicos biespecíficos que se unen al antígeno tumoral y un marcador de superficie celular específico de células dendríticas.

Los tumores evaden la vigilancia inmunitaria del hospedador por una gran diversidad de mecanismos. Muchos de estos mecanismos pueden ser superados por la inactivación de proteínas que son expresadas por los tumores y que son inmunosupresoras. Estos incluyen, entre otros, TGF-beta (Kehrl, J. y col., J. Exp. Med., 163:1037-1050 (1986)), IL-10 (Howard, M. y col., Immunology Today, 13:198-200 (1992)) y ligando Fas (Hahne, M. y col., Science, 274:1363-1365 (1996)). Los péptidos macrocíclicos de cada una de estas entidades pueden usarse en combinación con anti-PD-L1 para contrarrestar los efectos del agente inmunosupresor y favorecer respuestas inmunitarias de tumores por parte del hospedador.

Otros péptidos macrocíclicos que pueden usarse para activar la sensibilidad inmunitaria del hospedador pueden usarse en combinación con anti-PD-L1. Estos incluyen moléculas en la superficie de células dendríticas que activan la función de CD y presentación de antígenos. Los péptidos macrocíclicos anti-CD40 pueden sustituir eficazmente la actividad auxiliar de linfocitos T (Ridge, J. y col., Nature, 393:474-478 (1998)) y puede usarse junto con anticuerpos de PD-1 (Ito, N. y col., Immunobiology, 201(5):527-540 (2000)). Los péptidos macrocíclicos activadores de moléculas coestimuladoras de linfocitos T tales como CTLA-4 (por ejemplo, patente de los Estados Unidos n.° 5.811.097), OX-40 (Weinberg, A. y col., Immunol., 164:2160-2169 (2000)), 4-1BB (Melero, I. y col., Nat. Med., 3:682-685 (1997) e ICOS (Hutloff, A. y col., Nature, 397:262-266 (1999)) también pueden proporcionar niveles aumentados de activación de linfocitos T.

El trasplante de médula ósea se utiliza actualmente para tratar diversos tumores de origen hematopoyético. Mientras que la enfermedad de injerto contra hospedador es una consecuencia de este tratamiento, puede obtenerse beneficio terapéutico a partir de respuestas de injerto contra tumor. El bloqueo de PD-L1 puede usarse para aumentar la eficacia de los linfocitos T específicos de tumor injertados donantes.

También hay varios protocolos de tratamiento experimental que implican activación y expansión ex vivo de linfocitos T específicos de antígenos y transferencia adoptiva de estas células a receptores para linfocitos T específicos de antígenos contra tumor (Greenberg, R. y col., Science, 285:546-551 (1999)). Estos métodos también se pueden usar para activar respuestas de linfocitos T a agentes infecciosos tales como CMV. Se puede esperar que la activación ex vivo en presencia de péptidos macrocíclicos aumente la frecuencia y actividad de los linfocitos T transferidos de manera adoptiva.

Enfermedades infecciosas

Otros métodos de la divulgación se usan para tratar pacientes que han estado expuestos a toxinas o patógenos particulares. En consecuencia, otro aspecto de la divulgación proporciona un método para tratar una enfermedad infecciosa en un sujeto que comprende administrar al sujeto un péptido macrocíclico de la presente divulgación, o una porción de unión a antígeno del mismo, de modo que el sujeto sea tratado por la enfermedad infecciosa. Preferentemente, el anticuerpo es un péptido macrocíclico humano anti-PD-L1 humano (tal como cualquiera de los péptidos macrocíclicos descritos en el presente documento). Adicionalmente, o como alternativa, el anticuerpo puede ser un anticuerpo quimérico o humanizado.

De manera similar a su aplicación a tumores como se ha analizado anteriormente, el bloqueo de PD-L1 mediado por anticuerpos se puede usar solo o como adyuvante, en combinación con vacunas, para estimular la respuesta inmunitaria a patógenos, toxinas y selfantígenos. Los ejemplos de patógenos para los que este enfoque terapéutico puede ser particularmente útil, incluyen patógenos para los que actualmente no existe una vacuna eficaz o patógenos para los que las vacunas convencionales no llegan a ser completamente eficaces. Estos incluyen, pero sin limitación, VIH, hepatitis (A, B y C), gripe, herpes, Giardia, malaria (Butler, N.S. y col., Nature Immunology, 13:188-195 (2012); Hafalla, J.C.R., y col., PLOS Pathogens (2 de febrero de 2012)), Leishmania, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa. El bloqueo de PD-L1 es particularmente útil contra infecciones establecidas por agentes tales como el VIH que presentan antígenos alterados durante el transcurso de las infecciones. Estos nuevos epítopos son reconocidos como extraños en el momento de la administración de anti-PD-L1 humano, provocando de este modo una fuerte respuesta de linfocitos T que no se amortigua por señales negativas a través de PD-L1.

Algunos ejemplos de virus patógenos que provocan infecciones tratables mediante métodos de la divulgación incluyen VIH, hepatitis (A, B o C), virus del herpes (por ejemplo, VZV, HSV-1, HAV-6, HSV-II y CMV, virus de Epstein Barr), adenovirus, virus de la gripe, flavivirus, ecovirus, rinovirus, virus coxsackie, cornovirus, virus sincitial respiratorio, virus de las paperas, rotavirus, virus del sarampión, virus de la rubéola, parvovirus, virus vaccinia, virus HTLV, virus del dengue, virus del papiloma, virus del molusco, poliovirus, virus de la rabia, virus JC y virus de la encefalitis arbovírica.

Algunos ejemplos de bacterias patógenas que provocan infecciones tratables mediante métodos de la divulgación incluyen clamidia, bacterias rickettsiales, micobacterias, estafilococos, estreptococos, neumonococos, meningococos y conococos, klebsiela, proteus, serratia, pseudomonas, legionela, difteria, salmonela, bacilos, cólera, tétanos, botulismo, carbunco, peste, leptospirosis y bacterias de la enfermedad de Lyme.

Algunos ejemplos de hongos patógenos que provocan infecciones tratables mediante los métodos de la divulgación incluyen Candida (albicans, krusei, glabrata, tropicalis, etc.), Cryptococcus neoformans, Aspergillus (fumigatus, niger, etc.), género Mucorales (mucor, absidia, rhizophus), Sporothrix schenkii, Blastomyces dermatitidis, Paracoccidioides brasiliensis, Coccidioides immitis e Histoplasma capsulatum.

Algunos ejemplos de parásitos patógenos que provocan infecciones tratables mediante métodos de la divulgación incluyen Entamoeba histolytica, Balantidium coli, Naegleria fowleri, Acanthamoeba sp., Giardia lambía, Cryptosporidium sp., Pneumocystis carinii, Plasmodium vivax, Babesia microti, Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Leishmania donovani, Toxoplasma gondi y Nippostrongylus brasiliensis.

En todos los métodos anteriores, el bloqueo de PD-L1 puede combinarse con otras formas de inmunoterapia tales como tratamiento con citocinas (por ejemplo, interferones, agentes que se dirigen a la actividad de VEGF o receptores de VEGF, GM-CSF, G-CSf , IL-2) o terapia de anticuerpos biespecíficos, que proporciona una presentación de antígenos tumorales mejorada (véase, por ejemplo, Holliger, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:6444-6448 (1993); Poljak, Structure, 2:1121-1123 (1994)).

Reacciones autoinmunitarias

Los péptidos macrocíclicos pueden provocar y amplificar respuestas autoinmunitarias. De hecho, la inducción de respuestas antitumorales usando vacunas de células tumorales y péptidos revela que muchas respuestas antitumorales implican reactividades contra uno mismo (despigmentación observada en melanoma B16 modificado con anti-CTLA-4+GM-CSF en van Elsas y col., citado anteriormente; despigmentación en ratones vacunados con Trp-2 (Overwijk, W. y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 96:2982-2987 (1999)); prostatitis autoinmunitaria provocada por vacunas de células tumorales TRAMP (Hurwitz, A., citado anteriormente (2000)), vacunación con antígenos peptídicos de melanoma y vitíligo observado en ensayos clínicos en seres humanos (Rosenberg, S.A. y col., J. Immunother. Emphasis Tumor Immunol., 19(1):81-84 (1996)).

Por lo tanto, es posible considerar el uso del bloqueo anti-PD-L1 junto con diversas proteínas propias para diseñar protocolos de vacunación para generar eficazmente respuestas inmunitarias contra estas proteínas propias para tratamiento de la enfermedad. Por ejemplo, la enfermedad de Alzheimer implica acumulación inadecuada de péptido A.beta. en depósitos amiloides en el cerebro; las respuestas de anticuerpos contra el amiloide son capaces de eliminar estos depósitos amiloides (Schenk y col., Nature, 400:173-177 (1999)).

Otras proteínas propias también pueden usarse como dianas tales como IgE para el tratamiento de alergia y asma y TNF.alfa. para la artritis reumatoide. Finalmente, pueden inducirse respuestas de anticuerpos a diversas hormonas mediante el uso de los macrociclos desvelados en el presente documento. Para anticoncepción se pueden usar respuestas de anticuerpos neutralizantes a hormonas reproductivas. La respuesta de anticuerpos neutralizantes a hormonas y otros factores solubles que son necesarios para el crecimiento de tumores particulares también pueden considerarse posibles dianas de vacunación.

Pueden usarse métodos análogos como se ha descrito anteriormente para el uso de macrociclos anti-PD-L1 para la inducción de respuestas terapéuticas autoinmunitarias para tratar pacientes que tienen una acumulación inapropiada de otros auto-antígenos, tales como depósitos amiloides, incluyendo A.beta. en la enfermedad de Alzheimer, citocinas tales como TNF.alfa. e IgE.

Vacunas

Los péptidos macrocíclicos pueden usarse para estimular respuestas inmunitarias específicas de antígeno mediante coadministración de un macrociclo anti-PD-1 con un antígeno de interés (por ejemplo, una vacuna). En consecuencia, en otro aspecto, la divulgación proporciona un método para mejorar una respuesta inmune a un antígeno en un sujeto, que comprende administrar al sujeto: (i) el antígeno; y (ii) un macrociclo anti-PD-1, o una porción de unión a antígeno del mismo, de modo que se potencia una respuesta inmune al antígeno en el sujeto. El antígeno puede ser, por ejemplo, un antígeno tumoral, un antígeno vírico, un antígeno bacteriano o un antígeno de un patógeno. Los ejemplos no limitativos de tales antígenos incluyen los analizados en las secciones anteriores, tales como los antígenos tumorales (o vacunas tumorales) analizados anteriormente o antígenos de los virus, bacterias u otros patógenos descritos anteriormente.

Rutas adecuadas de administración de las composiciones (por ejemplo, péptidos macrocíclicos, moléculas e inmunoconjugados multiespecíficos y biespecíficos) de la divulgación in vivo e in vitro son bien conocidas en la técnica y pueden ser seleccionadas por los expertos habituales en la materia. Por ejemplo, las composiciones pueden administrarse mediante inyección (por ejemplo, intravenoso o subcutáneo). Las dosificaciones adecuadas de las moléculas usadas dependerán de la edad y el peso del sujeto y la concentración y/o formulación de la composición.

Como se ha descrito previamente, los péptidos macrocíclicos de la divulgación pueden coadministrarse con uno u otros agentes terapéuticos más, por ejemplo, un agente citotóxico, un agente radiotóxico o un agente inmunosupresor. El péptido puede estar unido al agente (como un inmunocomplejo) o puede administrarse separado del agente. En el último caso (administración separada), el péptido se puede administrar antes, después o simultáneamente con el agente o puede coadministrarse con otras terapias conocidas, por ejemplo, una terapia antineoplásica, por ejemplo, radiación. Dichos agentes terapéuticos incluyen, entre otros, agentes antineoplásicos tales como doxorrubicina (adriamicina), bleomicina sulfato de cisplatino, carmustina, clorambucilo, dacarbazina y ciclofosfamida hidroxiurea que, por sí solos, son solamente eficaces a niveles que son tóxicos o subtóxicos para un paciente. Se administra cisplatino por vía intravenosa como una dosis de 100 mg/dosis una vez cada cuatro semanas y se administra adriamicina por vía intravenosa como una dosis de 60-75 mg/ml una vez cada 21 días. La coadministración de los péptidos macrocíclicos, o fragmentos de unión a antígeno de los mismos, de la presente divulgación con agentes quimioterapéuticos proporciona dos agentes anticancerosos que actúan a través de diferentes mecanismos que producen un efecto citotóxico a células tumorales humanas. Dicha coadministración puede resolver problemas debidos al desarrollo de resistencia a fármacos o a un cambio en la antigenicidad de las células tumorales que las hará no reactivas con los péptidos.

También dentro del alcance de la presente divulgación hay kits que comprenden las composiciones de la divulgación (por ejemplo, péptidos macrocíclicos, moléculas biespecíficas o multiespecíficas o inmunoconjugados) e instrucciones de uso. El kit puede contener además al menos un reactivo adicional o uno o más péptidos macrocíclicos adicionales de la divulgación (por ejemplo, un anticuerpo humano que tiene una actividad complementaria que se une a un epítopo en el antígeno PD-L1 distinto del macrociclo). Los kits incluyen normalmente una etiqueta que indica el uso pretendido del contenido del kit. El término etiqueta incluye cualquier material escrito o grabado suministrado en o con el kit o que de otro modo acompaña al kit.

Terapia de combinación

La combinación de los péptidos macrocíclicos de la presente divulgación con otro antagonista de PD-L1 y/o antagonista de CTLA-4 es útil para potenciar una respuesta inmunitaria contra una enfermedad hiperproliferativa mediante el bloqueo de PD-L1 y CTLA-4. Por ejemplo, estas moléculas se pueden administrar a células en cultivo, in vitro o ex vivo, o a sujetos humanos, por ejemplo, in vivo, para potenciar la inmunidad en diversas situaciones. En consecuencia, en un aspecto, la divulgación proporciona un método para modificar una respuesta inmune en un sujeto que comprende administrar al sujeto una combinación de anticuerpos, o una combinación de porciones de unión a antígeno de los mismos, de la divulgación de manera que se modifique la respuesta inmunitaria en el sujeto. Preferentemente, la respuesta se potencia, se estimula o se regula positivamente. En otra realización, la presente divulgación proporciona un método para alterar los eventos adversos asociados con el tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa con un agente terapéutico inmunoestimulador, que comprende administrar un péptido macrocíclico de la presente divulgación y una dosis subterapéutica de anticuerpo anti-CTLA-4 a un sujeto.

El bloqueo de PD-L1 y CTLA-4 por péptidos macrocíclicos puede potenciar la respuesta inmunitaria a las células cancerosas en el paciente. Los cánceres cuyo crecimiento puede inhibirse usando los péptidos macrocíclicos de la presente divulgación incluyen cánceres que normalmente responden a la inmunoterapia. Los ejemplos representativos de cánceres para tratamiento con la terapia de combinación de la presente divulgación incluyen melanoma (por ejemplo, melanoma maligno metastásico), cáncer renal, cáncer de próstata, cáncer de mama, cáncer de colon y cáncer de pulmón. Los ejemplos de otros cánceres que pueden tratarse usando los métodos de la presente divulgación incluyen cáncer de hueso, cáncer de páncreas, cáncer de piel, cáncer de cabeza o cuello, melanoma maligno cutáneo o intraocular, cáncer de útero, cáncer de ovario, cáncer rectal, cáncer de la región anal, cáncer de estómago, cáncer testicular, cáncer de útero, carcinoma de las trompas de Falopio, carcinoma del endometrio, carcinoma del cuello uterino, carcinoma de la vagina, carcinoma de la vulva, enfermedad de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, cáncer del esófago, cáncer del intestino delgado, cáncer del sistema endocrino, cáncer de la glándula tiroides, cáncer de la glándula paratiroidea, cáncer de la glándula suprarrenal, sarcoma de tejidos blandos, cáncer de la uretra, cáncer del pene, leucemias crónicas o agudas, incluyendo leucemia mieloide aguda, leucemia mieloide crónica, leucemia linfoblástica aguda, leucemia linfocítica crónica, tumores sólidos de la infancia, linfoma linfocítico, cáncer de la vejiga, cáncer del riñón o del uréter, carcinoma de la pelvis renal, neoplasia del sistema nervioso central (SNC), linfoma primario del SNC, angiogénesis tumoral, tumor del eje espinal, glioma del tronco encefálico, adenoma hipofisario, sarcoma de Kaposi, cáncer epidermoide, cáncer de células escamosas, linfoma de linfocitos T, cánceres de inducción ambiental incluyendo los inducidos por amianto y combinaciones de dichos cánceres. La presente divulgación también es útil para el tratamiento de cánceres metastásicos.

En determinadas realizaciones, la combinación de agentes terapéuticos que contienen al menos un péptido macrocíclico analizado en el presente documento puede administrarse simultáneamente como una única composición en un vehículo farmacéuticamente aceptable o simultáneamente como composiciones separadas en donde cada agente puede administrarse secuencialmente. Por ejemplo, un anticuerpo anti-CTLA-4 y un péptido macrocíclico de la presente divulgación se pueden administrar secuencialmente, tal administrándose anti-CTLA-4 en primer lugar y el péptido macrocíclico en segundo lugar o administrándose el péptido macrocíclico en primer lugar y anti-CTLA-4 en segundo lugar. Asimismo, si se administra secuencialmente más de una dosis de la terapia combinada, el orden de la administración secuencial puede invertirse o mantenerse en el mismo orden en cada punto temporal de administración, las administraciones secuenciales pueden combinarse con administraciones simultáneas o cualquier combinación de las mismas. Por ejemplo, la primera administración de una combinación de anticuerpo anti-CTLA-4 y el péptido macrocíclico puede ser simultánea, la segunda administración puede ser secuencial con anti-CTLA-4 primero y el péptido macrocíclico segundo y la tercera administración puede ser secuencial con el péptido macrocíclico primero y anti-CTLA-4 segundo, etc. Otro esquema de dosificación representativo puede implicar una primera administración que es secuencial con el péptido macrocíclico primero y anti-CTLA-4 segundo y las administraciones posteriores pueden ser simultáneas.

Opcionalmente, la combinación del péptido macrocíclico y el agente anti-CTLA-4 puede combinarse adicionalmente con un agente inmunogénico, tal como células cancerosas, antígenos tumorales purificados (incluyendo proteínas recombinantes, péptidos y moléculas de carbohidratos), células y células transfectadas con genes que codifican citocinas inmunoestimulantes (He y col., J. Immunol., 173:4919-4928 (2004)). Los ejemplos no limitantes de vacunas tumorales que se pueden usar incluyen péptidos de antígenos de melanoma, tales como péptidos de gp100, antígenos de MAGE, Trp-2, MART1 y/o tirosinasa, o células tumorales transfectadas para expresar la citocina GM-CSF (analizada más adelante).

Un péptido macrocíclico de PD-L1 y bloqueo de CTLA-4 combinados pueden combinarse adicionalmente con un protocolo de vacunación. Se han ideado muchas estrategias experimentales para vacunación contra tumores (véase Rosenberg, S., Development of Cancer Vaccines, ASCO Educational Book Spring: 60-62 (2000); Logothetis, C., ASCO Educational Book Spring: 300-302 (2000); Khayat, D., ASCO Educational Book Spring: 414-428 (2000); Foon, K., ASCO Educational Book Spring: 730-738 (2000); véase también Restifo y col., Cancer Vaccines, Capítulo 61, págs. 3023-3043 en DeVita y col., eds., Cancer: Principles and Practice of Oncology, Quinta Edición (1997)). En una de estas estrategias, se prepara una vacuna usando células tumorales autólogas o alogénicas. Se ha demostrado que estas vacunas celulares son más eficaces cuando las células tumorales se transducen para expresar GM-CSF. Se ha demostrado que el GM-CSF es un activador potente de la presentación de antígenos para la vacunación contra tumores (Dranoff y col., Proc. Natl. Acad. Sci. USA., 90:3539-3543 (1993)).

El estudio de la expresión génica y los patrones de expresión génica a gran escala en diversos tumores ha conducido a la definición de los denominados antígenos específicos de tumores (Rosenberg, Immunity, 10:281-287 (1999)). En muchos casos, estos antígenos específicos de tumores son antígenos de diferenciación expresados en los tumores y en la célula de la que se originó el tumor, por ejemplo, antígenos de melanocitos gp100, antígenos de MAGE y Trp-2. Los que es aún más importante, se puede mostrar que muchos de estos antígenos son las dianas de linfocitos T específicos de tumores hallados en el hospedador. En determinadas realizaciones, un péptido macrocíclico de PD-L1 y bloqueo de CTLA-4 combinados usando las composiciones de anticuerpos descritas en el presente documento pueden usarse junto con una colección de proteínas y/o péptidos recombinantes expresados en un tumor para generar una respuesta inmunitaria a estas proteínas. Estas proteínas son normalmente vistas por el sistema inmunitario como autoantígenos y son, por lo tanto, tolerantes a ellas. El antígeno tumoral también puede incluir la proteína telomerasa, que es necesaria para la síntesis de telómeros de cromosomas y que se expresa en más del 85 % de los cánceres humanos y solo en un número limitado de tejidos somáticos (Kim y col., Science, 266:2011-2013 (1994)). (Estos tejidos somáticos pueden protegerse del ataque inmunitario por diversos medios). El antígeno tumoral también puede ser "neo-antígenos" expresados en células cancerosas debido a mutaciones somáticas que alteran la secuencia proteica o crean proteínas de fusión entre dos secuencias no relacionadas (es decir, bcr-abl en el cromosoma Filadelfia), o idiotipo de tumores de linfocitos B.

Otras vacunas contra tumores pueden incluir las proteínas de virus implicados en cánceres humanos tales como virus del papiloma humano (VPH), virus de la hepatitis (VHB y VHC) y virus del herpes de sarcoma de Kaposi (KHSV). Otra forma de antígeno específico de tumor que puede usarse junto con el bloqueo de péptidos macrocíclicos de PD-L1 son las proteínas de choque térmico purificadas (HSP) aisladas del propio tejido tumoral. Estas proteínas de choque térmico contienen fragmentos de proteínas de las células tumorales y estas HSP son altamente eficaces en el suministro a células presentadoras de antígenos para inducir inmunidad tumoral (Suot y col., Science, 269:1585-1588 (1995); Tamura y col., Science, 278:117-120 (1997)).

Las células dendríticas (CD) son potentes células presentadoras de antígenos que pueden usarse para preparar respuestas específicas de antígeno. Las CD pueden producirse ex vivo y cargarse con diversos antígenos proteicos y peptídicos, así como con extractos de células tumorales (Nestle y col., Nat. Med., 4:328-332 (1998)). Las CD también pueden ser transducidas por medios genéticos para expresar también estos antígenos tumorales. Las CD también se han fusionado directamente con células tumorales para fines de inmunización (Kugler y col., Nat. Med., 6:332-336 (2000)). Como método de vacunación, la inmunización con CD puede combinarse eficazmente con un péptido macrocíclico anti-PD-L1 combinado y el bloqueo de CTLA-4 para activar respuestas antitumorales más potentes.

Un péptido macrocíclico anti-PD-L1 combinado y el bloqueo de CTLA-4 también se pueden combinar además con tratamientos convencionales contra el cáncer. Por ejemplo, un péptido macrocíclico combinado y el bloqueo de CTLA-4 pueden combinarse eficazmente con regímenes quimioterapéuticos. En estos casos, como se observa con la combinación de un péptido macrocíclico y un agente anti-CTLA-4, tal vez sea posible reducir la dosis de otro reactivo quimioterapéutico administrado con la combinación de la presente divulgación (Mokyr y col., Cancer Res., 58:5301-5304 (1998)). Un ejemplo de dicha combinación es una combinación de un péptido macrocíclico y un agente anti-CTLA-4 además en combinación con decarbazina para el tratamiento del melanoma. Otro ejemplo es una combinación de un péptido macrocíclico y un agente anti-CTLA-4 además en combinación con interleucina-2 (IL-2) para el tratamiento del melanoma. El razonamiento científico detrás del uso combinado del péptido macrocíclico de PD-L1 y el bloqueo de CTLA-4 con quimioterapia es que la muerte celular, que es una consecuencia de la acción citotóxica de la mayoría de los compuestos quimioterapéuticos, debería dar como resultado mayores niveles de antígeno tumoral en la ruta de presentación de antígenos. Otras terapias combinadas que pueden dar como resultado sinergia con un péptido macrocíclico anti-PD-LI y bloqueo de CTLA-4 combinado a través de la muerte celular incluyen radiación, cirugía o privación hormonal. Cada uno de estos protocolos crea una fuente de antígeno tumoral en el hospedador. Los inhibidores de la angiogénesis también pueden combinarse con un bloqueo combinado de PD-L1 y CTLA-4. La inhibición de la angiogénesis conduce a la muerte de células tumorales, que también puede ser una fuente de antígeno tumoral para aportar a las rutas de presentación de antígeno del hospedador.

También se puede usar una combinación de agentes de bloqueo de PD-L1 y CTLA-4 en combinación con péptidos macrocíclicos biespecíficos que dirigen células efectoras que expresan receptores Fc.alfa. o Fc.gamma. a células tumorales (véase, por ejemplo, patentes de los Estados Unidos n.° 5.922.845 y 5.837.243). Se pueden usar péptidos macrocíclicos biespecíficos para dirigirse a dos antígenos separados. Por ejemplo, se han usado péptidos macrocíclicos biespecíficos del receptor anti-Fc/antígeno anti-tumor (por ejemplo, Her-2/neu) para dirigir macrófagos a sitios de tumor. Este direccionamiento puede activar más eficazmente respuestas tumorales específicas. La rama de linfocitos T de estas respuestas se aumentaría mediante el uso de un bloqueo combinado de PD-1 y CTLA-4. Como alternativa, el antígeno puede suministrarse directamente a las CD mediante el uso de péptidos macrocíclicos biespecíficos que se unen al antígeno tumoral y un marcador de superficie celular específico de células dendríticas. En otro ejemplo, se puede usar una combinación de un péptido macrocíclico y un agente anti-CTLA-4 junto con agentes macrocíclicos antineoplásicos, tales como RITUXAN® (rituximab), HERCEPTIN® (trastuzumab), BEXXAR® (tositumomab), ZEVALIN® (ibritumomab), CAMPATH® (alemtuzumab), Lymphocide (eprtuzumab), AVASTIN® (bevacizumab) y TARCEVA® (erlotinib) y similares. A modo de ejemplo y sin desear quedar ligado a la teoría, el tratamiento con un anticuerpo antineoplásico o un anticuerpo antineoplásico conjugado con una toxina puede conducir a la muerte de células cancerosas (por ejemplo, células tumorales) que potenciarían una respuesta inmunitaria mediada por CTLA-4 o PD-L1. En una realización ilustrativa, un tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa (por ejemplo, un tumor canceroso) puede incluir un anticuerpo antineoplásico en combinación con un péptido macrocíclico y agentes anti-CTLA-4, simultánea o secuencialmente o cualquier combinación de los mismos, que puede potenciar una respuesta inmunitaria antitumoral por parte del hospedador.

Los tumores evaden la vigilancia inmunitaria del hospedador por una gran diversidad de mecanismos. Muchos de estos mecanismos pueden ser superados por la inactivación de proteínas, que son expresadas por los tumores y que son inmunosupresoras. Estos incluyen, entre otros, TGF-.beta. (Kehrl, J. y col., J. Exp. Med., 163:1037-1050 (1986)), IL-10 (Howard, M. y col., Immunology Today, 13:198-200 (1992)) y ligando Fas (Hahne, M. y col., Science, 274:1363-1365 (1996)). En otro ejemplo, los anticuerpos para cada una de estas entidades pueden combinarse adicionalmente con una combinación de péptido macrocíclico y anti-CTLA-4 para contrarrestar los efectos de los agentes inmunosupresores y favorecer las respuestas inmunitarias antitumorales por parte del hospedador.

Otros agentes que pueden usarse para activar la respuesta inmunitaria del hospedador pueden usarse adicionalmente en combinación con un péptido macrocíclico de la presente divulgación. Estos incluyen moléculas en la superficie de células dendríticas que activan la función de CD y presentación de antígenos. Los péptidos macrocíclicos anti-CD40 pueden sustituir eficazmente la actividad auxiliar de linfocitos T (Ridge, J. y col., Nature, 393: 474-478 (1998)) y pueden usarse junto con los péptidos macrocíclicos de la presente divulgación, ya sea solos o en combinación con una combinación anti-CTLA-4 (Ito, N. y col., Immunobiology, 201(5):527-540 (2000)). La activación de péptidos macrocíclicos para moléculas coestimulantes de linfocitos T, tales como OX-40 (Weinberg, A. y col., Immunol., 164:2160-2169 (2000)), 4-1BB (Melero, I. y col., Nat. Med., 3:682-685 (1997) e ICOS (Hutloff, A. y col., Nature, 397:262-266 (1999)) también pueden proporcionar niveles aumentados de activación de linfocitos T. El trasplante de médula ósea se utiliza actualmente para tratar diversos tumores de origen hematopoyético. Mientras que la enfermedad de injerto contra hospedador es una consecuencia de este tratamiento, puede obtenerse beneficio terapéutico a partir de respuestas de injerto contra tumor. Un péptido macrocíclico de la presente divulgación, ya sea solo o en combinación con el bloqueo de CTLA-4, puede usarse para aumentar la eficacia de los linfocitos T específicos de tumor injertados donantes.

También hay varios protocolos de tratamiento experimental que implican activación y expansión ex vivo de linfocitos T específicos de antígenos y transferencia adoptiva de estas células a receptores para linfocitos T específicos de antígenos contra tumor (Greenberg, R. y col., Science, 285:546-551 (1999)). Estos métodos también se pueden usar para activar respuestas de linfocitos T a agentes infecciosos tales como CMV. Se puede esperar que la activación ex vivo en presencia de un péptido macrocíclico de la presente divulgación, ya sea solo o en combinación con un antagonista anti-CTLA-4, aumente la frecuencia y la actividad de las células T transferidas adoptivamente.

En determinadas realizaciones, la presente divulgación proporciona un método para alterar un evento adverso asociado con el tratamiento de una enfermedad hiperproliferativa con un agente inmunoestimulador, que comprende administrar un péptido macrocíclico de la presente divulgación en combinación con una dosis subterapéutica de anticuerpo anti-CTLA-4 a un sujeto. Por ejemplo, los métodos de la presente divulgación proporcionan un método para reducir la incidencia de colitis o diarrea inducida por anticuerpos terapéuticos inmunoestimuladores administrando un esteroide no absorbible al paciente. Debido a que cualquier paciente que reciba un anticuerpo terapéutico inmunoestimulante está en riesgo de desarrollar colitis o diarrea inducida por dicho tratamiento, toda esta población de pacientes es adecuada para terapia según los métodos de la presente divulgación. Aunque se han administrado esteroides para tratar la enfermedad inflamatoria del intestino (EII) y prevenir agravamientos de la EII, no se han usado para prevenir (reducir la incidencia de) EII en pacientes que no han sido diagnosticados con EII. Los efectos secundarios significativos asociados con esteroides, incluso esteroides no absorbibles, han desalentado su uso profiláctico.

En realizaciones adicionales, un péptido macrocíclico de la presente divulgación, ya sea solo o en combinación con el bloqueo de CTLA-4, se puede combinar adicionalmente con el uso de cualquier esteroide no absorbible. Como se usa en el presente documento, un "esteroide no absorbible" es un glucocorticoide que presenta metabolismo extenso de primer paso de modo que, después del metabolismo en el hígado, la biodisponibilidad del esteroide es baja, es decir, menos de aproximadamente 20 %. En una realización de la divulgación, el esteroide no absorbible es budesonida. La budesonida es un glucocorticoesteroide de acción local, que se metaboliza ampliamente, principalmente por el hígado, después de la administración oral. ENTOCORT® EC (Astra-Zeneca) es una formulación oral de budesonida dependiente del pH y el tiempo desarrollada para optimizar el suministro de fármacos al íleon y a todo el colon. ENTOCORT® EC está aprobado en los ^eE. UU. para el tratamiento de la enfermedad de Crohn de leve a moderada que afecta al íleon y/o al colon ascendente. La dosificación oral habitual de ENTOCORT® EC para el tratamiento de la enfermedad de Crohn es de 6 a 9 mg/día. ENTOCORT® EC se libera en los intestinos antes de ser absorbido y retenido en la mucosa intestinal. Una vez que pasa a través del tejido diana de la mucosa intestinal, ENTOCORT® EC es metabolizado ampliamente por el sistema del citocromo P450 en el hígado a metabolitos con actividad glucocorticoide insignificante. Por lo tanto, la biodisponibilidad es baja (aproximadamente 10%). La baja biodisponibilidad de budesonida da como resultado una relación terapéutica mejorada en comparación con otros glucocorticoides con metabolismo de primer paso menos extenso. La budesonida produce menos efectos adversos, incluyendo menos supresión hipotalámica-hipofisaria, que los corticoesteroides de acción sistémica. Sin embargo, la administración crónica de ENTOCORT® EC puede dar como resultado efectos sistémicos de glucocorticoides, tales como hipercorticismo y supresión suprarrenal. Véase Physicians' Desk Reference Supplement, 58a edición, 608-610 (2004).

En más realizaciones adicionales, una combinación de bloqueo de PD-L1 y CTLA-4 (es decir, péptidos macrocíclicos terapéuticos inmunoestimulantes anti-PD-LI y anti-CTLA-4) junto con un esteroide no absorbible pueden combinarse adicionalmente con un salicilato. Los salicilatos incluyen agentes 5-ASA tales como, por ejemplo: sulfasalazina (AZULFIDINE®, Pharmacia & Upjohn); olsalazina (DIpENTUM®, Pharmacia & Upjohn); balsalazida (COLAZAL®, Salix Pharmaceuticals, Inc.); y mesalamina (ASACOL®, Procter & Gamble Pharmaceuticals; PENTASA®, Shire US; CANASA®, Axcan Scandipharm, Inc.; ROw AsA®, Solvay).

Dosificación y formulación

Un péptido adecuado de Fórmula I, o más específicamente un péptido macrocíclico descrito en el presente documento, puede administrarse a pacientes para tratar la diabetes y otras enfermedades relacionadas como el compuesto solo o mezclado con un vehículo aceptable en forma de formulaciones farmacéuticas. Los expertos en la materia del tratamiento de la diabetes pueden determinar fácilmente la dosificación y la vía de administración del compuesto a mamíferos, incluyendo seres humanos, que necesiten dicho tratamiento. La ruta de administración puede incluir pero sin limitación, administración oral, intraoral, rectal, transdérmica, bucales, intranasal, pulmonar, subcutánea, intramuscular, intradérmica, sublingual, intracolónica, intraocular, intravenosa o intestinal. El compuesto se formula según la ruta de administración basándose en la práctica farmacéutica aceptable (Fingl y col., en The Pharmacological Basis of Therapeutics, Capítulo 1, pág. 1 (1975); Remington's Pharmaceutical Sciences, 18a edición, Mack Publishing Co., Easton, PA (1990)).

Las composiciones peptídicas farmacéuticamente aceptables descritas en el presente documento pueden administrarse en múltiples formas de dosificación tales como comprimidos, cápsulas (cada una de las cuales incluye formulaciones de liberación sostenida o liberación programada), píldoras, polvos, gránulos, elixires, geles in situ, microesferas, complejos cristalinos, liposomas, microemulsiones, tinturas, suspensiones, jarabes, pulverizaciones de aerosol y emulsiones. Las composiciones descritas en el presente documento también pueden administrarse en forma oral, intravenosa (bolo o infusión), intraperitoneal, subcutánea, transdérmica o intramuscular, usando todas formas farmacéuticas bien conocidas por los expertos habituales en la técnica farmacéutica. Las composiciones pueden administrarse solas, pero en general se administrarán con un vehículo farmacéutico seleccionado basándose en la vía de administración elegida y la práctica farmacéutica convencional.

El régimen de dosificación para las composiciones descritas en el presente documento variará, por supuesto, dependiendo de factores conocidos, tales como las características farmacodinámicas del agente particular y su modo y vía de administración; la especie, la edad, el sexo, la salud, el estado médico y peso del receptor; la naturaleza y el alcance de los síntomas; la clase de tratamiento simultáneo; la frecuencia del tratamiento; la vía de administración, la función renal y hepática del paciente y el efecto deseado. Un médico o un veterinario pueden determinar y recetar la cantidad eficaz del fármaco necesaria para prevenir, contrarrestar o detener el progreso de la patología.

A modo de guía general, la dosificación oral diaria del principio activo, cuando se usa para los efectos indicados, variará entre aproximadamente 0,001 y 1000 mg/kg de peso corporal, preferentemente entre aproximadamente 0,01 y 100 mg/kg de peso corporal al día y los más preferentemente de aproximadamente 0,6 a 20 mg/kg/día. Por vía intravenosa, la dosificación diaria del principio activo cuando se usa para los efectos indicados variará entre 0,001 ng y 100,0 ng por min/por kg de peso corporal durante una infusión a velocidad constante. Dicha infusión intravenosa constante se puede administrar preferentemente a una velocidad de 0,01 ng a 50 ng por minuto por kg de peso corporal y lo más preferentemente de 0,01 ng a 10,0 mg por minuto por kg de peso corporal. Las composiciones descritas en el presente documento dosis pueden administrarse en una única dosis diaria o la dosificación diaria total puede administrarse en dosis divididas de dos, tres o cuatro veces al día. Las composiciones descritas en el presente documento también pueden administrarse mediante una formulación de depósito que permitirá la liberación sostenida del fármaco durante un periodo de días/semanas/meses, según se desee.

Las composiciones descritas en el presente documento pueden administrarse de forma intranasal a través del uso tópico de vehículos intranasales adecuados o a través de vías transdérmicas, usando parches cutáneos transdérmicos. Cuando se administra en forma de un sistema de suministro transdérmico, la administración de la dosis será, por supuesto, continua en lugar de intermitente para todo el régimen de dosificación.

Los compuestos se administran normalmente en una mezcla con diluyentes, excipientes o portadores farmacéuticamente adecuados (denominados colectivamente en el presente documento como portadores farmacéuticos) seleccionados adecuadamente con respecto a la forma de administración prevista, es decir, comprimidos orales, cápsulas, elixires, pulverizaciones de aerosol generados con o sin propulsor y jarabes y de forma coherente con prácticas farmacéuticas convencionales.

Por ejemplo, para administración oral en forma de un comprimido o una cápsula, el componente activo del fármaco puede combinarse con un portador inerte oral, no tóxico, farmacéuticamente aceptable, tal como, pero sin limitación a, lactosa, almidón, sacarosa, glucosa, metilcelulosa, estearato de magnesio, fosfato dicálcico, sulfato de calcio, manitol y sorbitol; para administración oral en forma líquida, los componentes del fármaco oral pueden combinarse con cualquier portador inerte farmacéuticamente aceptable, oral, no tóxico, tales como, pero sin limitación, etanol, glicerol y agua. Por otra parte, cuando se desee o sea necesario, se pueden incorporar también aglutinantes, lubricantes, agentes disgregantes y agentes colorantes adecuados en la mezcla. Los aglutinantes adecuados incluyen, pero sin limitación, almidón, gelatina, azúcares naturales tales como, pero sin limitación, glucosa o betalactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas tales como goma arábiga, tragacanto o alginato de sodio, carboximetilcelulosa, polietilenglicol y ceras. Los lubricantes usados en estas formas de dosificación incluyen oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio y cloruro de sodio. Los disgregantes incluyen, pero sin limitación, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita y goma de xantano.

Las composiciones descritas en el presente documento también pueden administrarse en forma de sistemas mixtos de suministro por micelas o liposomas, tales como vesículas unilamelares pequeñas, vesículas unilamelares grandes y vesículas multilamelares. Los liposomas pueden formarse a partir de diversos fosfolípidos, tales como colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas. Se pueden añadir potenciadores de la permeación para potenciar la absorción de fármacos.

Ya que se sabe que los profármacos potencian numerosas cualidades deseables de los compuestos farmacéuticos (es decir, solubilidad, biodisponibilidad, fabricación, etc.) los compuestos descritos en el presente documento pueden suministrarse en forma de profármaco. Por tanto, se pretende que la materia objeto descrita en el presente documento abarque profármacos de los compuestos reivindicados por la presente, métodos para suministrarlos y composiciones que los contienen.

Las composiciones desveladas en el presente documento también pueden acoplarse con polímeros solubles como vehículos farmacológicos direccionables. Tales polímeros pueden incluir polivinilpirrolidona, copolímero de pirano, polihidroxipropilmetacrilamida-fenol, polihidroxietilaspartamidafenol u óxido de polietileno-polilisina sustituido con restos de palmitoílo. Asimismo, las composiciones descritas en el presente documento pueden combinarse con una clase de polímeros biodegradables útiles para lograr liberación controlada de un fármaco, por ejemplo, ácido poliláctico, ácido poliglicólico, copolímeros de ácido poliláctico y poliglicólico, poliépsilon caprolactona, ácido polihidroxibutírico, poliortoésteres, poliacetales, polihidropiranos, policianoacilatos y copolímeros en bloque de hidrogeles reticulados o anfipáticos.

Las formas de dosificación (composiciones farmacéuticas) adecuadas para administración pueden contener de aproximadamente 0,01 miligramos a aproximadamente 500 miligramos de principio activo por unidad de dosificación. En estas composiciones farmacéuticas el principio activo estará habitualmente presente en una cantidad de aproximadamente 0,5-95 % en peso basándose en el peso total de la composición.

Las cápsulas de gelatina pueden contener el principio activo y vehículos en polvo, tales como lactosa, almidón, derivados de celulosa, estearato de magnesio y ácido esteárico. Para preparar comprimidos preparados por compresión pueden usarse diluyentes similares. Tanto los comprimidos como las cápsulas pueden fabricarse como productos de liberación sostenida para proporcionar liberación continua de la medicación durante un periodo de horas. Los comprimidos pueden estar recubiertos de azúcar o recubiertos de una película para enmascarar cualquier sabor desagradable y proteger al comprimido de la atmósfera o pueden tener cubierta entérica para la desintegración selectiva en el tracto intestinal.

Las formas de dosificación líquidas para administración oral pueden contener colorantes y saborizantes para aumentar la aceptación del paciente.

En general, agua, un aceite adecuado, solución salina, dextrosa acuosa (glucosa) y soluciones de azúcares relacionadas y glicoles tales como propilenglicol o polietilenglicoles son vehículos adecuados para soluciones parenterales. La solución para administración parenteral contiene preferentemente una sal soluble en agua del principio activo, agentes estabilizantes adecuados y, si es necesario, sustancias tamponantes. Los agentes antioxidantes tales como bisulfito de sodio, sulfito de sodio o ácido ascórbico, solos o combinados, son agentes estabilizantes adecuados. También se usan ácido cítrico y sus sales y EDTA de sodio. Además, las soluciones parenterales pueden contener conservantes, tales como cloruro de benzalconio, metil o propilparabeno y clorobutanol.

Se describen vehículos farmacéuticos adecuados en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, decimonovena edición, Mack Publishing Company (1995), un texto de referencia convencional en este campo. Las formas de dosificación farmacéuticas útiles representativas para administración de los compuestos descritos en el presente documento pueden ilustrarse de la siguiente manera:

Cápsulas

Se puede preparar una gran cantidad de cápsulas unitarias llenando cápsulas de gelatina dura de dos piezas convencionales con 100 miligramos de principio activo en polvo, 150 miligramos de lactosa, 50 miligramos de celulosa y 6 miligramos de estearato de magnesio.

Cápsulas de gelatina blanda

Una mezcla de principio activo en un aceite digerible tal como aceite de soja, aceite de semilla de algodón o aceite de oliva se pueden preparar e inyectar por medio de una bomba de desplazamiento positivo en gelatina para formar cápsulas de gelatina blanda que contienen 100 miligramos del principio activo. Las cápsulas deben lavarse y secarse.

Comprimidos

Los comprimidos pueden prepararse mediante procedimientos convencionales de modo que la unidad de dosificación, por ejemplo, es de 100 miligramos de principio activo, 0,2 miligramos de dióxido de silicio coloidal, 5 miligramos de estearato de magnesio, 275 miligramos de celulosa microcristalina, 11 miligramos de almidón y 98,8 miligramos de lactosa. Se pueden aplicar recubrimientos adecuados para aumentar la palatabilidad o retardar la absorción.

Inyectables

Una formulación inyectable de una composición peptídica descrita en el presente documento puede requerir o no el uso de excipientes tales como los que han sido aprobados por organismos reguladores. Estos excipientes incluyen, pero sin limitación, disolventes y codisolventes, agentes solubilizantes, emulsionantes o espesantes, agentes quelantes, antioxidantes y agentes reductores, conservantes antimicrobianos, tampones y agentes de ajuste del pH, agentes de carga, protectores y ajustadores de la tonicidad y aditivos especiales. Una formulación inyectable tiene que ser estéril, exenta de pirógenos y, en el caso de soluciones, exenta de materia en partículas.

Una composición parenteral adecuada para administración por inyección puede prepararse agitando, por ejemplo, 1,5% en peso de principio activo en un tampón farmacéuticamente aceptable que puede contener o no un codisolvente u otro excipiente. La solución se debe hacer isotónica con cloruro sódico y esterilizarse.

Suspensión

Se puede preparar una suspensión acuosa para administración oral y/o parenteral para que, por ejemplo, cada 5 ml contiene 100 mg de principio activo finamente dividido, 20 mg de carboximetil celulosa sódica, 5 mg de benzoato sódico, 1,0 g de solución de sorbitol, U.S.P. y 0,025 ml de vainillina u otro saborizante sabroso.

Micropartículas biodegradables

Se puede preparar una composición parenteral de liberación sostenida adecuada para la administración por inyección, por ejemplo, disolviendo un polímero biodegradable adecuado en un disolvente, añadiendo a la solución de polímero el agente activo a incorporar y retirando el disolvente de la matriz, formando así la matriz del polímero con el agente activo distribuido por toda la matriz.

Síntesis de péptidos

Los péptidos macrocíclicos de la presente divulgación pueden producirse mediante métodos conocidos en la técnica, tales como pueden sintetizarse químicamente, recombinantemente en un sistema libre de células, recombinantemente dentro de una célula o pueden aislarse de una fuente biológica. La síntesis química de un péptido macrocíclico de la presente divulgación se puede llevar a cabo usando varios métodos reconocidos en la técnica, incluyendo síntesis en fase sólida por etapas, semisíntesis a través de la re-ligadura asistida conformacionalmente de fragmentos peptídicos, ligadura enzimática de péptido clonado o segmentos de péptidos sintéticos y ligadura química. Un método preferido para sintetizar los péptidos macrocíclicos y los análogos de los mismos descritos en este documento es la síntesis química usando diversas técnicas en fase sólida, tales como las descritas en Chan, W.C. y col., eds., Fmoc Solid Phase Synthesis, Oxford University Press, Oxford (2000); Barany, G. y col., The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, Vol. 2: "Special Methods in Peptide Synthesis, Part A", págs. 3 284, Gross, E. y col., eds., Academic Press, Nueva York (1980); y en Stewart, J.M. y col., Solid-Phase Peptide Synthesis, 2a Edición, Pierce Chemical Co., Rockford, IL (1984). La estrategia preferida se basa en el grupo Fmoc (9-fluorenilmetilmetoxicarbonilo) para la protección temporal del grupo a-amino, en combinación con el grupo terc-butilo para la protección temporal de las cadenas laterales de aminoácido (véase por ejemplo Atherton, E. et al, "The Fluorenylmethoxycarbonyl Amino Protecting Group", en The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, Vol. 9: "Special Methods in Peptide Synthesis, Part C", págs. 1-38, Undenfriend, S. y col., eds., Academic Press, San Diego (1987). Los péptidos se pueden sintetizar de manera gradual en un soporte de polímero insoluble (también denominado "resina") a partir del extremo C del péptido. Se comienza una síntesis añadiendo el aminoácido C-terminal del péptido a la resina mediante la formación de un enlace amida o éster. Esto permite la eventual liberación del péptido resultante como una amida C-terminal o ácido carboxílico, respectivamente.

Se requiere que el aminoácido C-terminal y todos los demás aminoácidos usados en la síntesis tengan sus grupos a-amino y funcionalidades de cadena lateral (si están presentes) protegidos diferencialmente de manera que el grupo protector a-amino pueda eliminarse selectivamente durante la síntesis. El acoplamiento de un aminoácido se realiza mediante la activación de su grupo carboxilo como un éster activo y la reacción del mismo con el grupo aamino no bloqueado del aminoácido N-terminal unido a la resina. La secuencia de desprotección y acoplamiento del grupo a-amino se repite hasta que se ensambla la secuencia peptídica completa. Después, el péptido se libera de la resina con la desprotección concomitante de las funcionalidades de la cadena lateral, generalmente en presencia de eliminadores apropiados para limitar las reacciones secundarias. El péptido resultante finalmente se purifica por HPLC de fase inversa.

La síntesis de las resinas de peptidilo requeridas como precursores de los péptidos finales utiliza resinas poliméricas de poliestireno reticuladas disponibles comercialmente (Novabiochem, San Diego, CA; Applied Biosystems, Foster City, CA). Los soportes sólidos preferidos son: resina 4-(2',4'-dimetoxifenil-Fmoc-aminometil)-fenoxiacetil-p-metil benzhidrilamina (resina de Rink amida MBHA); resina 9-Fmoc-amino-xanten-3-iloxi-Merrifield (resina Sieber amida); resina 4-(9-Fmoc)aminometil-3,5-dimetoxifenoxi)valerilaminometil-Merrifield (resina PAL), para carboxamidas C terminales. El acoplamiento del primer y los siguientes aminoácidos se puede lograr usando los ésteres activos HOBt, 6-Cl-HOBt o HOAt producidos a partir de DIC/HOBt, HBTU/HOBt, BOP, PyBOP o de DIC/6-Cl-HOBt, HCTU, DIC/HOAt o HATU, respectivamente. Los soportes sólidos preferidos son: resina de cloruro de 2-clorotritilo y resina de 9-Fmoc-amino-xanten-3-iloxi-Merrifield (resina de amida Sieber) para fragmentos de péptidos protegidos. La carga del primer aminoácido en la resina de cloruro de 2-clorotritilo se logra mejor haciendo reaccionar el aminoácido protegido con Fmoc con la resina en diclorometano y DIEA. Si es necesario, puede añadirse una pequeña cantidad de DMF para facilitar la disolución del aminoácido.

Las síntesis de los análogos de péptidos descritos en este documento pueden llevarse a cabo usando un sintetizador de péptidos de uno o múltiples canales, tales como un sintetizador de microondas CEM Liberty o un sintetizador Prelude de Protein Technologies, Inc. (6 canales) o Symphony (12 canales).

Los derivados de aminoácidos Fmoc útiles se muestran a continuación.

Ejemplos de aminoácidos ortogonalmente protegidos utilizados en síntesis en fase sólida

Los precursores de resina de peptidilo para sus péptidos respectivos pueden escindirse y desprotegerse usando cualquier procedimiento estándar (véase, por ejemplo, King, D.S. y col., Int. J. Peptide Protein Res., 36:255-266 (1990)). Un método deseado es el uso de TFA en presencia de agua y TIS como neutralizantes. Normalmente, la resina de peptidilo se agita en TFA/agua/TIS (94:3:3, v:v:v; 1 ml/100mg de resina de peptidilo) durante 2-6 h a temperatura ambiente. La resina gastada se filtra y la solución de TFA se concentra o se seca a presión reducida. El péptido bruto resultante se precipita y se lava con Et2O o se vuelven a disolver directamente en DMSO o ácido acético acuoso al 50 % para la purificación por HPLC preparativa.

Los péptidos con la pureza deseada pueden obtenerse mediante purificación usando HPLC preparativa, por ejemplo, en un cromatógrafo de líquidos Waters Modelo 4000 o Shimadzu Modelo LC-8A. La solución de péptido en bruto se inyecta en una columna YMC S5 ODS (20 x 100 mm) y se eluye con un gradiente lineal de MeCN en agua, ambos tamponados con TFA al 0,1 %, usando un caudal de 14-20 ml/min con efluente, controlado por absorbancia UV a 220 nm. Las estructuras de los péptidos purificados se pueden confirmar mediante análisis EM MS por electronebulización.

A continuación se proporciona una lista de aminoácidos no naturales a los que se hace referencia en el presente documento.

Las siguientes abreviaturas se emplean en los ejemplos y en otras partes del presente documento:

Ph = fenilo

Bn = bencilo

i-Bu = iso-butilo

i-Pr = iso-propilo

Me = metilo

Et = etilo

Pr = n-propilo

Bu = n-butilo

t-Bu = tere-butilo

Trt = tritilo

TMS = trimetilsililo

TIS =triisopropilsilano

Et2O = éter dietílico

HOAc o AcOH = ácido acético

MeCN o AcCN = acetonitrilo

DMF = N,N-dimetilformamida

EtOAc = acetato de etilo

THF = tetrahidrofurano

TFA = ácido trifluoroacético

TFE = a,a,a-trifluoroetanol

Et2NH = dietilamina

NMM = N-metilmorfolina

NMP = N-metilpirrolidona

DCM = diclorometano

TEA = trietilamina

min. = minuto(s)

h o hr = hora(s)

l= litro

ml o ml = mililitro

|jl= microlitro

g = gramo(s)

mg = miligramo(s)

mol = mol(es)

mmol = milimol(es)

mequiv. = miliequivalente

ta o TA = temperatura ambiente

sat. o sat'd. = saturado

ac. = acuoso

pf= punto de fusión

reactivo BOP = hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi-tris-dimetilamino-fosfonio (reactivo de Castro) reactivo de PyBOP = hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi-tripirrolidinfosfonio

HBTU = hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio

HATU = hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio

HCTU = Hexafluorofosfato de 2-(6-cloro-1-H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio

T3P = 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosforinano-2,4,6-trióxido

DMAP = 4-(dimetilamino)piridina

DIEA = diisopropiletilamina

Fmoc o FMOC = fluorenilmetiloxicarbonilo

Boc o BOC = terc-butiloxicarbonilo

HOBT o HOBT»H2O = hidrato de 1-hidroxibenzotriazol

Cl-HOBt = 6-Cloro-benzotriazol

HOAT = 1-hidroxi-7-azabenzotriazol

HPLC = cromatografía líquida de alto rendimiento

CL/EM = cromatografía líquida de alto rendimiento/espectrometría de masas

EM o Espec. Masas = espectrometría de masas

RMN = resonancia magnética nuclear

Sc o SC = subcutaneo

IP o ip = intraperitoneal

Ejemplos

Preparación del Ejemplo 1240 (no de acuerdo con la invención)

El Ejemplo 1240 se preparó en resina Rink siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Procedimiento de acoplamiento manual A", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z 955,0 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,39 min; IEN-EM(+) m/z 954,7 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:Calculado: 954,4849(M+2H; Encontrado: 954,4816 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 1241 (no de acuerdo con la invención)

El Ejemplo 1241 se preparó en resina Rink siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Procedimiento de acoplamiento manual A", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 92 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,37 min; IEN-EM(+) m/z 947,8 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,30 min; IEN-EM(+) m/z 948,0 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z; Calculado; 947,4771(M+2H); Encontrado: 947,4755 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1244

El Ejemplo 1244 se preparó en resina Rink siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Procedimiento de acoplamiento manual A", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga. El rendimiento del producto fue 21,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,49 min; IEN-EM(+) m/z 942,0 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,56 min; IEN-EM(+) m/z 942,0 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 941,4771(M+2H); Encontrado: 941,4757 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 1245

El Ejemplo 1245 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio C: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio C: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio C: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio C: Procedimiento de lavado final", Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético B "Método de desprotección global C"y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 1,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 90 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 907,3 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,42 min; IEN-EM(+) m/z 907,3 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1246

El Ejemplo 1246 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio C: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio C: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio C: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio C: Procedimiento de lavado final", Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético B "Método de desprotección global C" y "Método de ciclación D". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-65 % durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,57 min; IEN-EM(+) m/z 941,9 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z 942,2 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 941,4771(M+2H); Encontrado: 941,4755(M+2H)

Preparación del Ejemplo 1247

El Ejemplo 1247 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio C: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio C: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio C: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio C: Procedimiento de lavado final", Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético B "Método de desprotección global C" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 1,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,49 min; IEN-EM(+) m/z 921,1 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,42 min; IEN-EM(+) m/z 921,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 920,9456(M+2H); Encontrado: 920,9436(M+2H)

Preparación del Ejemplo 1248

El Ejemplo 1248 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio C: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio C: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio C: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio C: Procedimiento de lavado final", Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético B "Método de desprotección global C" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z 914,3 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,40 min; IEN-EM(+) m/z 914,1 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 913,9378(M+2H); Encontrado: 913,9372(M+2H)

Preparación del Ejemplo 1250

El Ejemplo 1250 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm;

Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,46 min; IEN-EM(+) m/z 962,7 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,10 min; IEN-EM(+) m/z 962,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 962,4460(M+2H); Encontrado: 962,4459(M+2H)

Preparación del Ejemplo 1251

El Ejemplo 1251 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global D" y "Método de ciclación D".

Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(+) m/z 926,4 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 3,10 min; IEN-EM(+) m/z 926,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 925,9560(M+2H); Encontrado: 925,9548(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1252

El Ejemplo 1252 se preparó en resina Rink siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0002, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método CEM A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento doble", "Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x mm, partículas de 5 pm;

Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 963,1 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,08 min; IEN-EM(+) m/z 963,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 962,9380(M+2H); Encontrado: 962,9370(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1255

El Ejemplo 1255 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global D" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(+) m/z 933,6 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,25 min; IEN-EM(+) m/z 933,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 933,4419(M+2H); Encontrado: 933,4432(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1256

El Ejemplo 1256 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global D" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,37 min; IEN-EM(+) m/z 963,6 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 1,98 min; IEN-EM(+) m/z 963,6 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 963,4300(M+2H); Encontrado: 963,4295(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1257

El Ejemplo 1257 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global D" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm;

Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(+) m/z 908,6 (M+2H). Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 3,12 min; IEN-EM(+) m/z 908,6 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 908,4298(M+2H); Encontrado: 908,4283(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1258

El Ejemplo 1258 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales:

"Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria",

"Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global D" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm;

Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes:

Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol:

agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 909,0 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,66 min; IEN-EM(+) m/z 909,6 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 908,9218(M+2H); Encontrado: 908,9206(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1259

El Ejemplo 1259 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales:

Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,49 min; IEN-EM(+) m/z 976,7 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,15 min; IEN-EM(+) m/z 976,7 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 976,4798(M+2H); Encontrado: 976,4781(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1260

El Ejemplo 1260 se preparó en resina Rink siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0002, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método CEM A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método CEM A:

Procedimiento de acoplamiento único", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento doble",

"Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación C".

Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 35,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z 963,2 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,05 min; IEN-EM(+) m/z 962,9 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 962,9380(M+2H); Encontrado: 962,9367(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1261

El Ejemplo 1261 se preparó en resina Rink siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0002, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método CEM A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento doble", "Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación C".

Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,55 min; IEN-EM(+) m/z 934,1 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 3,02 min; IEN-EM(+) m/z 934,1 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 933,9352(M+2H); Encontrado: 933,9344(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1262

El Ejemplo 1262 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global D" y "Método de ciclación D".

Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,65 min; IEN-EM(+) m/z 944,8 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,59 min; IEN-EM(+) m/z 945,0 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 944,4404(M+2H); Encontrado: 944,4388(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1272

El Ejemplo 1272 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio C: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio C: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio C: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio C: Procedimiento de lavado final", Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético B "Método de desprotección global F" y "Método de delación D"

Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,65 min; IEN-EM(+) m/z 930,4 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 3,08 min; IEN-EM(+) m/z 930,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 929,9453(M+2H); Encontrado: 929,9429(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1273

El Ejemplo 1273 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio C: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio C: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio C: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio C: Procedimiento de lavado final", Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético B "Método de desprotección global F y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,66 min; IEN-EM(+) m/z 954,8 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 3,14 min; IEN-EM(+) m/z 954,8 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 954,4667(M+2H); Encontrado: 954,4644(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1275

El Ejemplo 1275 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 0,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 934,4 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,97 min; IEN-EM(+) m/z 934,4 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1276

El Ejemplo 1276 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,54 min; IEN-EM(+) m/z 933,7 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 3,02 min; IEN-EM(+) m/z 933,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 932,9512(M+2H); Encontrado: 932,9524(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1277

El Ejemplo 1277 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 933,9 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 3,07 min; IEN-EM(+) m/z 933,9 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 933,4432(M+2H); Encontrado: 933,4416(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1278

El Ejemplo 1278 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z 920,3 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,97 min; IEN-EM(+) m/z 920,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 919,9434(M+2H); Encontrado: 919,9422(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1279

El Ejemplo 1279 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga. El rendimiento del producto fue 9,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,55 min; IEN-EM(+) m/z 921,0 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,99 min; IEN-EM(+) m/z 920,9 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 920,4354(M+2H); Encontrado: 920,4340(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1280

El Ejemplo 1280 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 929,0 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z 928,9 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 928,4329(M+2H); Encontrado: 928,4324(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1281

El Ejemplo 1281 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,81 min; IEN-EM(+) m/z 923,7 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,63 min; IEN-EM(+) m/z 924,1 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 922,9431 (M+2H); Encontrado: 922,9422 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1282

El Ejemplo 1282 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z 964,3 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,27 min; IEN-EM(+) m/z 964,7 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 963,4356 (M+2H); Encontrado: 963,4356 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1283

El Ejemplo 1283 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 8 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,32 min; IEN-EM(+) m/z 963,7 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,67 min; IEN-EM(+) m/z 963,8 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 963,9276 (M+2H); Encontrado: 963,9270 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1285

El Ejemplo1285 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Procedimiento de acoplamiento manual A", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,86 min; IEN-EM(+) m/z 928,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 927,4432(M+2H); Encontrado: 927,4426 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1289

El Ejemplo 1289 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,74 min; IEN-EM(+) m/z 926,4 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 3,32 min; IEN-EM(+) m/z 926,2 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 925,9378(M+2H); Encontrado: 925,9350(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1290

El Ejemplo 1290 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 acetonitrilo:agua con ácido trifluoroacético al 0,1 %; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,24 min; IEN-EM(+) m/z 967,3 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,66 min; IEN-EM(+) m/z 967,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 966,9273(M+2H); Encontrado: 966,9273(M+2H)

Preparación del Ejemplo 1291

El Ejemplo 1291 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-100% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 93 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,39 min; IEN-EM(+) m/z 944,1 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,99 min; IEN-EM(+) m/z 943,8 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,4745(M+2H); Encontrado: 943,4714(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1292

El Ejemplo 1292 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 1,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,20 min; IEN-EM(+) m/z 963,3 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,52 min; IEN-EM(+) m/z 963,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 962,9380(M+2H); Encontrado: 962,9357(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1293

El Ejemplo 1293 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 983,9 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,12 min; IEN-EM(+) m/z 984,1 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1294

El Ejemplo 1294 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,22 min; IEN-EM(+) m/z 978,8 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,56 min; IEN-EM(+) m/z 979,0 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 977,9433(M+2H); Encontrado: 977,9417(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1295

El Ejemplo 1295 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,38 min; IEN-EM(+) m/z 951,6 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,96 min; IEN-EM(+) m/z 952,0 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 951,4538(M+2H); Encontrado: 951,4508(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1296

El Ejemplo 1296 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 1,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,35 min; IEN-EM(+) m/z 1005,2 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,75 min; IEN-EM(+) m/z 1005,3 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 1004,5111(M+2H); Encontrado: 1004,5078(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1297

El Ejemplo 1297 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(+) m/z 957,5 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 3,18 min; IEN-EM(+) m/z 957,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 956,9826(M+2H); Encontrado: 956,9896(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1298

El Ejemplo 1298 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,33 min; IEN-EM(+) m/z 977,3 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,71 min; IEN-EM(+) m/z 977,3 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 976,4672(M+2H); Encontrado: 976,4644(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1299

El Ejemplo 1299 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 92 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,40 min; IEN-EM(+) m/z 965,7 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,79 min; IEN-EM(+) m/z 965,3 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 964,9718(M+2H); Encontrado: 964,9680(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1300

El Ejemplo 1300 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,65 min; IEN-EM(+) m/z 944,8 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1301

El Ejemplo 1301 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 976,4672(M+2H); Encontrado: 976,4645(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1302

El Ejemplo 1302 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 1,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,20 min; IEN-EM(+) m/z 1006,3 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,47 min; IEN-EM(+) m/z 1006,3 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 1005,4826(M+2H); Encontrado: 1005,4786 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1303

El Ejemplo 1303 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 93 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,25 min; IEN-EM(+) m/z 1012,9 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,52 min; IEN-EM(+) m/z 1013,3 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 1011,9984(M+2H); Encontrado: 1011,9941 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1304

El Ejemplo 1304 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 1,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,34 min; IEN-EM(+) m/z 959,0 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 959,0 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 958,4560(M+2H); Encontrado: 958,4542 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1305

El Ejemplo 1305 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 0,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,25 min; IEN-EM(+) m/z 966,4 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 2,91 min; IEN-EM(+) m/z 965,7 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 965,4638(M+2H); Encontrado: 965,4619 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1306

El Ejemplo 1306 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga. El rendimiento del producto fue 2,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 92 %.

Condición de análisis LCMS H: tiempo de retención = 1,57 min; IEN-EM(+) m/z 951,9 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: tiempo de retención = 3,07 min; IEN-EM(+) m/z 951,9 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 951,4664(M+2H); Encontrado: 951,4633 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1309

El Ejemplo 1309 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10mM; Gradiente: B al 0-50% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 15-55% durante 25minutos, después una parada de 5 minutos a B al 55 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación.

El rendimiento del producto fue de 3,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,1 min; IEN-EM(+) m/z 925,3 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,25 min; IEN-EM(+) m/z 925,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 924,8985(M+2H); Encontrado: 950,8961(M+2H).

Preparación del Ejemplo 1500

El Ejemplo 1500 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 0,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(+) m/z 957,00 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,06 min; IEN-EM(+) m/z 957,00 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1501

El Ejemplo 1501 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(+) m/z 928,15 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,20 min; IEN-EM(+) m/z 928,20 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1502

El Ejemplo 1502 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de delación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,796 min; IEN-EM(+) m/z 941,20 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 2,389 min; IEN-EM(+) m/z 940,95 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1503

El Ejemplo 1503 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,870 min; IEN-EM(+) m/z 948,75 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,358 min; IEN-EM(+) m/z 948,60 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1504

El Ejemplo 1504 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,447 min; IEN-EM(+) m/z 970,80 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 2,838 min; IEN-EM(+) m/z 970,20 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1505

El Ejemplo 1505 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,624 min; IEN-EM(+) m/z 970,95 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,075 min; IEN-EM(+) m/z 970,65 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1506

El Ejemplo 1506 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,566 min; IEN-EM(+) m/z 947,20 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,069 min; IEN-EM(+) m/z 946,90 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1507

El Ejemplo 1507 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,761 min; IEN-EM(+) m/z 917,60 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,321 min; IEN-EM(+) m/z 917,40 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1508

El Ejemplo 1508 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,702 min; IEN-EM(+) m/z 942,90 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,245 min; IEN-EM(+) m/z 942,95 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1509

El Ejemplo 1509 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Preparación del Ejemplo 1510

El Ejemplo 1510 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,706 min; IEN-EM(+) m/z 917,55 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,271 min; IEN-EM(+) m/z 917,90 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1511

El Ejemplo 1511 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,819 min; IEN-EM(+) m/z 963,45 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,377 min; IEN-EM(+) m/z 963,45 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1512

El Ejemplo 1512 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 ^m; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 ^m; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,479 min; IEN-EM(+) m/z 972,25 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,000 min; IEN-EM(+) m/z 972,40 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1513

El Ejemplo 1513 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,539 min; IEN-EM(+) m/z 971,90 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,071 min; IEN-EM(+) m/z 971,85 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1514

El Ejemplo 1514 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,66 min; IEN-EM(+) m/z 935,5 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 2,53 min; IEN-EM(+) m/z 935,7 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1515

El Ejemplo 1515 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,455 min; IEN-EM(+) m/z 964,65 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 2,809 min; IEN-EM(+) m/z 964,75 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1519

El Ejemplo 1519 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,551 min; IEN-EM(+) m/z 922,85 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,012 min; IEN-EM(+) m/z 922,90 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1520

El Ejemplo 1520 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional', "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis ^cL^eM D: Tiempo de retención = 1,30 min; IEN-EM(+) m/z 939,6 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,40 min; IEN-EM(+) m/z 939,4 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1521

El Ejemplo 1521 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,525 min; IEN-EM(+) m/z 938,15 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 2,936 min; IEN-EM(+) m/z 938,05 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1522

El Ejemplo 1522 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,637 min; IEN-EM(+) m/z 901,95 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,038 min; IEN-EM(+) m/z 901,75 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1523

El Ejemplo 1523 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 92 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,683 min; IEN-EM(+) m/z 900,80 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,098 min; IEN-EM(+) m/z 900,60 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1525

El Ejemplo 1525 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,643 min; IEN-EM(+) m/z 927,20 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 2,250 min; IEN-EM(+) m/z 926,85 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1526

El Ejemplo 1526 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 ^m; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,39 min; IEN-EM(+) m/z 944,3 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,44 min; IEN-EM(+) m/z 944,2 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1528

El Ejemplo 1528 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-60% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 15-60% durante 25minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,43 min; IEN-EM(+) m/z 937,1 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,41 min; IEN-EM(+) m/z 937,5 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1529

El Ejemplo 1529 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-60% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 91 %.

Condición de análisis ClEm D: Tiempo de retención = 1,44 min; IEN-EM(+) m/z 927,0 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,35 min; IEN-EM(+) m/z 926,8 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1530

El Ejemplo 1530 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,57 min; IEN-EM(+) m/z 931,9 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 2,70 min; IEN-EM(+) m/z 931,2 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1531

El Ejemplo 1531 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acopiamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-60% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 1,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,34 min; IEN-EM(+) m/z 963,0 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,35 min; IEN-EM(+) m/z 962,6 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1532

El Ejemplo 1532 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis Lc Ms H: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 949,4 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 2,57 min; IEN-EM(+) m/z 949,0 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1533

El Ejemplo 1533 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis lCm S H: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(+) m/z 971,6 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 2,87 min; IEN-EM(+) m/z 971,9 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1534 (no de acuerdo con la invención)

El Ejemplo 1534 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10mM; Gradiente: B al 0-50% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 0-45% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 1,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 0,94 min; IEN-EM(+) m/z 922,1 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 0,97 min; IEN-EM(+) m/z 921,5 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1535

El Ejemplo 1535 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-60% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 5-50% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,32 min; IEN-EM(+) m/z 948,5 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,21 min; IEN-EM(+) m/z 948,7 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1536

El Ejemplo 1536 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-60% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 15-60% durante 25minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 1,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,32 min; IEN-EM(+) m/z 956,7 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,43 min; IEN-EM(+) m/z 956,7 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1537

El Ejemplo 1537 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-60% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-55% durante 25minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 1,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,42 min; IEN-EM(+) m/z 969,7 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,40 min; IEN-EM(+) m/z 969,7 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1538

El Ejemplo 1538 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-60% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,38 min; IEN-EM(+) m/z 977,6 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,31 min; IEN-EM(+) m/z 976,7 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 1541

El Ejemplo 1541 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F "y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 2,87 min; IEN-EM(+) m/z 960,7 (M+2H).

Preparación delEjemplo 1542

El Ejemplo 1542 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico B: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final", "Método de desprotección global F" y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis LCMS H: Tiempo de retención = 1,769 min; IEN-EM(+) m/z 929,30 (M+2H).

Condición de análisis LCMS I: Tiempo de retención = 3,313 min; IEN-EM(+) m/z 929,30 (M+2H).

Datos analíticos:

Espectrometría de Masas: "IEN-EM(+)" significa espectrometría de masas por ionización por electropulverización realizada en modo de ion positivo; "IEN-EM(+)" significa espectrometría de masas por ionización por electropulverización realizada en modo de ion negativo; "IEN-HRMS(+)" significa espectrometría de masas de ionización por electropulverización de alta resolución realizada en modo de iones positivos; "IEN-HRMS(-)" significa espectrometría de masas de ionización por electropulverización de alta resolución realizada en modo de iones negativos. Las masas detectadas se informan siguiendo la designación de la unidad "m/z". Los compuestos con masas exactas superiores a 1000, a menudo se detectaron como iones de doble o triple carga.

Condición de análisis CLEM A:

Columna: Waters BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 pm; Fase móvil A: agua con TFA al 0,05 %; Fase móvil B:Acetonitrilo con TFA al 0,05 %; Temperatura: 50 °C; Gradiente: B al 2 % a B al 98 % durante 2 min, después una parada de 0,5 min a B al 98 %; Flujo: 0,8 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Condición de análisis CLEM C:

Columna: Waters BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 pm; Fase móvil A: agua con ácido fórmico al 0,2 % y TFA al 0,01 %; Fase móvil B: Acetonitrilo con ácido fórmico al 0,2 % y TFA al 0,01 %; Temperatura: 50 °C; Gradiente: B al 2 % a B al 80 % durante 2 min, B al 80 % a B al 98 % durante 0,1 minutos, después una parada de 0,5 min a B al 98 %; Flujo: 0,8 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Condición de análisis CLEM D:

Columna: Waters BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Temperatura: 50 °C; Gradiente: B al 0-100% durante 3 min, después una parada de 0,75 minutos a B al 100%; Flujo: 1,0 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Condición de análisis CLEM E:

Columna: Waters BEH C18, 2,1 x 50 mm, partículas de 1,7 pm; Fase móvil A: 5:95 acetonitrilo:agua con ácido trifluoroacético al 0,1 %; Fase móvil B: 95:5 acetonitrilo:agua con ácido trifluoroacético al 0,1 %; temperatura: 50 °C; Gradiente: B al 0-100% durante 3 min, después una parada de 0,75 minutos a B al 100%; Flujo: 1,11 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Condición de análisis CLEM F:

Columna: Waters XBridge C18, 2,1 x 50 mm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Temperatura: 35 °C; Gradiente: B al 0-100 % durante 4 min, después una parada de 1 minutos a B al 100 %; Flujo: 4 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Condición de análisis CLEM G:

Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partículas de 1,7 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol:agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol:agua con acetato de amonio 10 mM; Temperatura: 50 °C; Gradiente: B al 0-100 % durante 3 min, después una parada de 0,5 minutos a B al 100 %; Flujo: 0,5 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Condición de análisis HPLC B:

Columna: YMC Pack ODS-AQ 3um 150x4,6 mm; Fase móvil A: agua con TFA al 0,1 %; Fase móvil B: Acetonitrilo con TFA al 0,1 %; Temperatura: 40 °C; Gradiente: de B al 10 % a B al 100 % durante 10 a 40 min; Caudal: 1 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Procedimientos generales:

Método de preludio A:

Todas las manipulaciones se realizaron bajo automatización en un sintetizador de péptidos Prelude (Protein Technologies). Todos los procedimientos, a menos que se indique lo contrario, se realizaron en un tubo de polipropileno de 10 o 45 ml equipado con una frita inferior. El tubo se conecta al sintetizador de péptidos Prelude a través de la parte inferior y la parte superior del tubo. Se pueden añadir DMF y DCM a través de la parte superior del tubo, que bajan los lados del tubo por igual. Los reactivos restantes se agregan a través del fondo del tubo y pasan a través de la frita para contactar con la resina. Todas las soluciones se eliminan a través del fondo del tubo. La "agitación periódica" describe un breve pulso de gas N2 a través de la frita inferior; el pulso dura aproximadamente 5 segundos y ocurre cada 30 segundos. Las soluciones de aminoácidos generalmente no se usaron más de tres semanas después de la preparación. La solución HATU se usó dentro de los 5 días de preparación. DMF = dimetilformamida; HCTU = 2-(6-Cloro-1- H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio; HATU = 3-Óxido hexafluorofosfato de 1-[bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio; NMM = N-metilmorfolina; Sieber = Fmoc-amino-xanten-3-iloxi, en donde "3-iloxi" describe la posición y el tipo de conectividad con la resina de poliestireno. La resina utilizada es el polímero Merrifield (poliestireno) con un enlazador Sieber (protegido con Fmoc en nitrógeno); malla 100-200, DVB al 1 %, 0,71 mmol/g de carga. Los aminoácidos comunes usados se enumeran a continuación con grupos protectores de cadena lateral indicados dentro del paréntesis.

Fmoc-Ala-OH; Fmoc-Arg(Pbf)-OH; Fmoc-Asn(Trt)-OH; Fmoc-Asp(OtBu)-OH; Fmoc-Bzt-OH; Fmoc-Cys(Trt)-OH; Fmoc-Dab(Boc)-OH; Fmoc-Dap(Boc)-OH; Fmoc-Gln(Trt)-OH; Fmoc-Gly-OH; Fmoc-His(Trt)-OH; Fmoc-Ile-OH; Fmoc-Leu-OH; Fmoc-Lys(Boc)-OH; Fmoc-Nle-OH; Fmoc-[N-Me]Ala-OH; Fmoc-[N-Me]Nle-OH; Fmoc-Phe-OH; Fmoc-Pro-OH; Fmoc-(D)-cis-Pro(4-OtBu)-OH; Fmoc-(D)-trans-Pro(4-OtBu)-OH; Fmoc-Sar-OH; Fmoc-Ser(tBu)-OH; Fmoc-Thr(tBu)-OH; Fmoc-Trp(Boc)-OH; Fmoc-Tyr(tBu)-OH; Fmoc-Val-OH.

El procedimiento del "Método de preludio A" describe un experimento realizado en una escala de 0,100 mmol, en donde la escala está determinada por la cantidad de enlazador Sieber unido a la resina. Esta escala corresponde a aproximadamente 140 mg de la resina Sieber-Merrifield descrita anteriormente. Todos los procedimientos se pueden escalar más allá de la escala de 0,100 mmol ajustando los volúmenes descritos por el múltiplo de la escala. Antes del acoplamiento de aminoácidos, todas las secuencias de síntesis de péptidos comenzaron con un procedimiento de hinchamiento de resina, descrito a continuación como "procedimiento de hinchamiento de resina". El acoplamiento de aminoácidos a un extremo N de amina primaria usó el "Procedimiento de acoplamiento único" que se describe a continuación. El acoplamiento de aminoácidos a un terminal N de amina secundaria usó el "Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria" que se describe a continuación. El acoplamiento del grupo cloroacetilo al extremo N del péptido se describe mediante el "Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo" o el "Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético" que se detalla a continuación.

Procedimiento de hinchamiento de resina:

A un recipiente de reacción en fase sólida de 40 ml de polipropileno se le añadió resina Merrifield:Sieber (140 mg, 0,100 mmol). La resina se lavó (se hinchó) tres veces como sigue a continuación: al recipiente de reacción se le añadió DMF (5,0 ml) y DCM (5,0 ml), después de lo cual la mezcla se agitó periódicamente con burbujeo de N2 desde el fondo del recipiente de reacción durante 10 min antes de drenar el disolvente a través de la frita.

Procedimiento de acoplamiento único:

Al recipiente de reacción que contiene resina de la etapa anterior se le añadió piperidina: DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 o 5 min y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 o 5 min y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cinco veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (4,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 60 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 5,0 ml, 10 equiv.), después HATU o HCTU (0,2 M en DMF, 5,0 ml, 10 equiv.) y finalmente NMM (0,8 M en DMF, 2,5 ml, 20 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 60 min, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (4,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió una solución de anhídrido acético:DIEA:DMF (10:1:89 v/v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 10 min, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (4,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina resultante se usó directamente en la siguiente etapa. Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria:

Al recipiente de reacción que contiene resina de la etapa anterior se le añadió piperidina: DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 o 5 min y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 o 5 min y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cinco veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (4,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 2,5 ml, 5 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 2,5 ml, 5 equiv.) y finalmente NMM (0,8 M en DMF, 1,5 ml, 12 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 300 min, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó dos veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (4,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió una solución de anhídrido acético:DIEA:DMF (10:1:89 v/v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 10min, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (4,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina resultante se usó directamente en la siguiente etapa.

Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado:

Al recipiente de reacción que contiene resina de la etapa anterior se le añadió piperidina: DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 o 5 min y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 o 5 min y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cinco veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (4,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 0,5 a 2,5 ml, 1 a 5 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 0,5 a 2,5 ml, 1 a 5 equiv.) y finalmente DIPEA (0,8 M en DMF, 0,5 a 1,5 ml, 4 a 12 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 60 min a 600 min, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó dos veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió una solución de anhídrido acético:DIEA:DMF (10:1:89 v/v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 10 min, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (4,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina resultante se usó directamente en la siguiente etapa.

Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A:

Al recipiente de reacción que contenía la resina de la etapa previa se la añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 min y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 min y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cinco veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (4,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadieron 3,0 ml de una solución de DIPEA (4,0 mmol, 0,699 ml, 40 equiv.) y cloruro de cloroacetilo (2,0 mmol, 0,160 ml, 20 equiv.) en DMF. La mezcla se agitó periódicamente durante 12 a 18 horas, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (4,0 ml) a la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió CH2Cl2 (2,0 ml) a la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita.

Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético A:

Al recipiente de reacción que contenía la resina de la etapa previa se la añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 min y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 min y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cinco veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (4,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadieron DMF (2,0 ml), ácido cloroacético (1,2 mmol, 113 mg, 12 equiv.) y N,N'-diisopropilcarbodiimida (1,2 mmol, 0,187 ml, 12 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 12 a 18 horas, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (4,0 ml) a la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió CH2Cl2 (2,0 ml) a la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita.

Método CEM A:

Todas las manipulaciones se realizaron bajo automatización en un sintetizador de péptidos de microondas CEM Liberty (CEM Corporation). Todos los procedimientos, a menos que se indique lo contrario, se realizaron en un tubo de polipropileno de 30 o 125 ml equipado con una frita inferior en una unidad de microondas CEM Discovery. El tubo se conecta al sintetizador CEM Liberty a través de la parte inferior y la parte superior del tubo. Se pueden añadir DMF y DCM a través de la parte superior e inferior del tubo, que bajan los lados del tubo por igual. Todas las soluciones se retiran a través del fondo del tubo, excepto mientras se transfiere resina desde la parte superior. El "burbujeo periódico" describe un breve burbujeo de gas N2 a través de la frita inferior. Las soluciones de aminoácidos generalmente no se usaron más de tres semanas después de la preparación. La solución HATU se usó dentro de los 5 días de preparación. DMF = dimetilformamida; HCTU = 2-(6-Cloro-1-H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio; HATU = 3-Óxido hexafluorofosfato de 1-[bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio; DIPEA = diisopropiletilamina; Sieber = Fmoc-amino-xanten-3-iloxi, en donde "3-iloxi" describe la posición y el tipo de conectividad con la resina de poliestireno. La resina utilizada es el polímero Merrifield (poliestireno) con un enlazador Sieber (protegido con Fmoc en nitrógeno); malla 100-200, DVB al 1 %, 0,71 mmol/g de carga. Los aminoácidos comunes usados se enumeran a continuación con grupos protectores de cadena lateral indicados dentro del paréntesis.

Fmoc-Ala-OH; Fmoc-Arg(Pbf)-OH; Fmoc-Asn(Trt)-OH; Fmoc-Asp(OtBu)-OH; Fmoc-Bzt-OH; Fmoc-Cys(Trt)-OH; Fmoc-Dab(Boc)-OH; Fmoc-Dap(Boc)-OH; Fmoc-Gln(Trt)-OH; Fmoc-Gly-OH; Fmoc-His(Trt)-OH; Fmoc-Hyp(tBu)-OH; Fmoc-Ile-OH; Fmoc-Leu-OH; Fmoc-Lys(Boc)-OH; Fmoc-Nle-OH; Fmoc-Met-OH; Fmoc-[N-Me]Ala-OH; Fmoc-[N-Me]Nle-OH; Fmoc-Phe-OH; Fmoc-Pro-OH; Fmoc-Sar-OH; Fmoc-Ser(tBu)-OH; Fmoc-Thr(tBu)-OH; Fmoc-Trp(Boc)-OH; Fmoc-Tyr(tBu)-OH; Fmoc-Val-OH

El procedimiento del "Método CEM A" describe un experimento realizado en una escala de 0,100 mmol, en donde la escala está determinada por la cantidad de enlazador Sieber unido a la resina. Esta escala corresponde a aproximadamente 140 mg de la resina Sieber-Merrifield descrita anteriormente. Todos los procedimientos se pueden escalar más allá de la escala de 0,100 mmol ajustando los volúmenes descritos por el múltiplo de la escala. Antes del acoplamiento de aminoácidos, todas las secuencias de síntesis de péptidos comenzaron con un procedimiento de hinchamiento de resina, descrito a continuación como "procedimiento de hinchamiento de resina". El acoplamiento de aminoácidos a un extremo N de amina primaria usó el "Procedimiento de acoplamiento único" que se describe a continuación. El acoplamiento de aminoácidos a un terminal N de amina secundaria usó el "Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria" que se describe a continuación. El acoplamiento del grupo cloroacetilo al extremo N del péptido se describe mediante el "Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo" o el "Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético" detallado anteriormente.

Procedimiento de hinchamiento de resina:

A un tubo cónico de polipropileno de 50 ml se le añadió resina Merrifield Sieber (140 mg, 0,100 mmol). Después se añadió DMF (7 ml) al tubo seguido de DCM (7 ml). Después, la resina se transfirió al recipiente de reacción desde la parte superior del recipiente. El procedimiento se repitió adicionalmente dos veces. Se añadió DMF (7 ml) seguido de DCM (7 ml). La resina se dejó hinchar con burbujeo de N2 desde el fondo del recipiente de reacción durante 15 min antes de drenar el disolvente a través de la frita.

Procedimiento de acoplamiento convencional:

Al recipiente de reacción que contenía resina de la etapa previa se le añadió una solución de piperidina:DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 min y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió una solución de piperidina:DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 min y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: se lavó con DMF (7 ml) desde arriba, seguido de lavado con DMF (7 ml) desde abajo y finalmente con lavado con DMF (7 ml) desde arriba. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 2,5 ml, 5 equiv.), HATU (0,5 M en DMF, 1,0 ml, 5 equiv.) y DIPEA (2 M en NMP, 0,5 ml, 10 equiv.). La mezcla se mezcló burbujeando con N2 durante 5 min a 75 °C para todos los aminoácidos, excepto Fmoc-Cys(Trt)-OH y Fmoc-His(Trt)-OH que se acoplaron a 50 °C, la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: se lavó con DMF (7 ml) desde arriba, seguido de lavado con DMF (7 ml) desde abajo y finalmente con lavado con DMF (7 ml) desde arriba. Al recipiente de reacción se le añadió una solución de anhídrido acético:DIEA:DMF (10:1:89 v/v/v, 5,0 ml). La mezcla se burbujeó periódicamente durante 2 min a 65 °C, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: se lavó con DMF (7 ml) desde arriba, seguido de lavado con DMF (7 ml) desde abajo y finalmente con lavado con DMF (7 ml) desde arriba. La resina resultante se usó directamente en la siguiente etapa.

Procedimiento de acoplamiento de pareja doble:

Al recipiente de reacción que contenía resina de la etapa previa se le añadió una solución de piperidina:DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 min y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió una solución de piperidina:DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 min y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: se lavó con DMF (7 ml) desde arriba, seguido de lavado con DMF (7 ml) desde abajo y finalmente con lavado con DMF (7 ml) desde arriba. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 2,5 ml, 5 equiv.), HATU (0,5 M en DMF, 1,0 ml, 5 equiv.) y DIPEA (2 M en NMP, 0,5 ml, 10 equiv.). La mezcla se mezcló burbujeando con N2 durante 5 min a 75 °C para todos los aminoácidos, excepto Fmoc-Cys(Trt)-OH y Fmoc-His(Trt)-OH que se acoplaron a 50 °C, la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: se lavó con DMF (7 ml) desde arriba, seguido de lavado con DMF (7 ml) desde abajo y finalmente con lavado con DMF (7 ml) desde arriba. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 2,5 ml, 5 equiv.), HATU (0,5 M en DMF, 1,0 ml, 5 equiv.) y DIPEA (2 M en NMP, 0,5 ml, 10 equiv.). La mezcla se mezcló burbujeando con N2 durante 5 min a 75 °C para todos los aminoácidos, excepto Fmoc-Cys(Trt)-OH y Fmoc-His(Trt)-OH que se acoplaron a 50 °C, la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: se lavó con DMF (7 ml) desde arriba, seguido de lavado con DMF (7 ml) desde abajo y finalmente con lavado con DMF (7 ml) desde arriba. Al recipiente de reacción se le añadió una solución de anhídrido acético:DIEA:DMF (10:1:89 v/v/v, 5,0 ml). La mezcla se burbujeó periódicamente durante 2 min a 65 °C, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: se lavó con DMF (7 ml) desde arriba, seguido de lavado con DMF (7 ml) desde abajo y finalmente con lavado con DMF (7 ml) desde arriba. La resina resultante se usó directamente en la siguiente etapa.

Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado:

Al recipiente de reacción que contenía resina de la etapa previa se le añadió una solución de piperidina:DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 min y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió una solución de piperidina:DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 min y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: se lavó con DMF (7 ml) desde arriba, seguido de lavado con DMF (7 ml) desde abajo y finalmente con lavado con DMF (7 ml) desde arriba. Al recipiente de reacción se le añadió la solución de aminoácidos (1,25 ml a 5 ml, 2,5 equiv. a 10 equiv.) que contenía HATU (2,5 equiv. a 10 equiv.) y finalmente DIPEA (2 M en NMP, 0,5 ml a 1 ml, 20 equiv.). La mezcla se mezcló burbujeando N2 durante 5 min a 2 horas a 25 °C a 75 °C, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: se lavó con DMF (7 ml) desde arriba, seguido de lavado con DMF (7 ml) desde abajo y finalmente con lavado con DMF (7 ml) desde arriba. Al recipiente de reacción se le añadió una solución de anhídrido acético:DIEA:DMF (10:1:89 v/v/v, 5,0 ml). La mezcla se burbujeó periódicamente durante 2 min a 65 °C, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: se lavó con DMF (7 ml) desde arriba, seguido de lavado con DMF (7 ml) desde abajo y finalmente con lavado con DMF (7 ml) desde arriba. La resina resultante se usó directamente en la siguiente etapa.

Método sinfónico A:

Todas las manipulaciones se realizaron bajo automatización en un sintetizador de péptidos Symphony (Protein Technologies). Todos los procedimientos, a menos que se indique lo contrario, se realizaron en un tubo de polipropileno Symphony equipado con una frita inferior. El tubo se conecta al sintetizador de péptidos Symphony a través de la parte inferior y la parte superior del tubo. Todos los disolventes, DMF, DCM, aminoácidos y reactivos se añadieron a través del fondo del tubo y pasan a través de la frita para contactar con la resina. Todas las soluciones se eliminan a través del fondo del tubo. La "agitación periódica" describe un breve pulso de gas N2 a través de la frita inferior; el pulso dura aproximadamente 5 segundos y ocurre cada 15 segundos. Las soluciones de aminoácidos generalmente no se usaron más de tres semanas después de la preparación. La solución HATU se usó dentro de los 5 días de preparación. DMF = dimetilformamida; HCTU = 2-(6-Cloro-1-H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio; HATU = 3-Óxido hexafluorofosfato de 1-[bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio; NMM= n-Metil morfolina; DIPEA = diisopropiletilamina; Sieber = Fmoc-amino-xanten-3-iloxi, en donde "3-iloxi" describe la posición y el tipo de conectividad con la resina de poliestireno. La resina utilizada es el polímero Merrifield (poliestireno) con un enlazador Sieber (protegido con Fmoc en nitrógeno); malla 100-200, DVB al 1 %, 0,71 mmol/g de carga. Otras resinas sensibles a ácidos comunes también se pueden usar en la síntesis, tal como resina Rink o Clorotritilo funcionalizada. Los aminoácidos comunes usados se enumeran a continuación con grupos protectores de cadena lateral indicados dentro del paréntesis. Fmoc-Ala-OH; Fmoc-Arg(Pbf)-OH; Fmoc-Asn(Trt)-OH; Fmoc-Asp(Ot-Bu)-OH; Fmoc-Bzt-OH; Fmoc-Cys(Trt)-OH; Fmoc-Dab(Boc)-OH; Fmoc-Dap(Boc)-OH; Fmoc-Gln(Trt)-OH; Fmoc-Gly-OH; Fmoc-His(Trt)-OH; Fmoc-Hyp(tBu)-OH; Fmoc-Ile-OH; Fmoc-Leu-OH; Fmoc-Lys(Boc)-OH; Fmoc-Nle-OH; Fmoc-Met-OH; Fmoc-[N-Me]Ala-OH; Fmoc-[N-Me]Nle-OH; Fmoc-Phe-OH; Fmoc-Pro-OH; Fmoc-Sar-OH; Fmoc-Ser(tBu)-OH; Fmoc-Thr(tBu)-oH; Fmoc-Trp(Boc)-OH; Fmoc-Tyr(tBu)-OH; Fmoc-Val-OH

Los procedimientos del "Método sinfónico A" describen un experimento realizado en una escala de 0,050 0,100 mmol, en donde la escala se determina por la cantidad de enlazador Sieber unido a la resina. Esta escala corresponde a aproximadamente 70-140 mg de la resina Sieber-Merrifield descrita anteriormente. Todos los procedimientos se pueden escalar más allá de la escala de 0,050-0,100 mmol ajustando los volúmenes descritos por el múltiplo de la escala. Antes del acoplamiento de aminoácidos, todas las secuencias de síntesis de péptidos comenzaron con un procedimiento de hinchamiento de resina, descrito a continuación como "Procedimiento de hinchamiento". El acoplamiento de aminoácidos a un extremo N de amina primaria usó el "Procedimiento de acoplamiento convencional" que se describe a continuación. El acoplamiento de aminoácidos a un terminal N de amina secundaria usó el "acoplamiento doble", los aminoácidos personalizados se acoplan mediante una adición en blanco manual del aminoácido "acoplamiento en blanco" que se describe a continuación.

Procedimiento de hinchamiento:

A un recipiente de reacción en fase sólida de polipropileno Symphony se le añadió resina Merrifield:Sieber (70 mg, 0,050 mmol o 140 mg, 0,100 mmol). La resina se lavó (se hinchó) tres veces como sigue a continuación: al recipiente de reacción se le añadió DMF (2,5 ml) después de lo cual la mezcla se agitó periódicamente con burbujeo de N2 desde el fondo del recipiente de reacción durante 10 minutos antes de drenar el disolvente a través de la frita. Procedimiento de acoplamiento convencional:

La resina se lavó tres veces como sigue a continuación: al recipiente de reacción se le añadió DMF (2,5 ml) después de lo cual la mezcla se agitó periódicamente con burbujeo de N2 desde el fondo del recipiente de reacción durante 30 segundos antes de drenar el disolvente a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 2,5 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 5 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. El procedimiento se repitió una vez más. La resina se lavó 6 veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,5 ml) a través de la parte inferior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 1,25 ml, 5 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 1,25 ml, 5 equiv.) y finalmente NMM (0,8 M en DMF, 1,25 ml, 10 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 10 minutos, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó con DMF (6,25 ml), se añadió a través del fondo del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de drenar la solución a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 1.25 ml, 5 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 1,25 ml, 5 equiv.) y finalmente NMM (0,8 M en DMF, 1,25 ml, 10 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 10 minutos, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,5 ml) a través de la parte inferior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina resultante se usó directamente en la siguiente etapa.

Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria:

La resina se lavó tres veces como sigue a continuación: al recipiente de reacción se le añadió DMF (2,5 ml) después de lo cual la mezcla se agitó periódicamente con burbujeo de N2 desde el fondo del recipiente de reacción durante 30 segundos antes de drenar el disolvente a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 2,5 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 5 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. El procedimiento se repitió una vez más. La resina se lavó 6 veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,5 ml) a través de la parte inferior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 1,25 ml, 5 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 1,25 ml, 5 equiv.) y finalmente NMM (0,8 M en DMF, 1,25 ml, 10 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 300 minutos, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó con DMF (6,25 ml), se añadió a través del fondo del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de drenar la solución a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 1.25 ml, 5 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 1,25 ml, 5 equiv.) y finalmente NMM (0,8 M en DMF, 1,25 ml, 10 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 300 minutos, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,5 ml) a través de la parte inferior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina resultante se usó directamente en la siguiente etapa.

Método sinfónico B

Procedimiento de acoplamiento final:

La resina se lavó tres veces como sigue a continuación: al recipiente de reacción se le añadió DMF (2,5 ml) después de lo cual la mezcla se agitó periódicamente con burbujeo de N2 desde el fondo del recipiente de reacción durante 30 segundos antes de drenar el disolvente a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 2,5 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 2,5 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó 6 veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,5 ml) a través de la parte inferior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió NMM (0,8 M en DMF, 1,25 ml, 10 equiv.) seguido de la adición del anhídrido cloroacético (0,4 M en DMF, 1,25 ml, 10 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 15 minutos, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó con DMF (6,25 ml), se añadió a través del fondo del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de drenar la solución a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió NMM (0,8 M en DMF, 1,25 ml, 10 equiv.) seguido de la adición del anhídrido cloroacético (0,4 M en DMF, 1,25 ml, 10 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 15 minutos, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó 6 veces como sigue a continuación: se añadió DMF (2,5 ml) a través de la parte inferior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió Ac2O/DIPEA/DMF (v/v/v 1:1:32,5 ml), la mezcla se agitó periódicamente durante 10 minutos, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente seis veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,5 ml) a través de la parte inferior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DCM (2,5 ml) a través de la parte inferior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Después, la resina resultante se secó con una corriente de nitrógeno durante 10 min.

N-methylation on-resin (Turner, R. A.; Hauksson, N. E.; Gipe, J. H.; Lokey, R. S. Org. Lett. 2013, 15(19), 5012-5015): Todas las manipulaciones se realizaron manualmente a menos que se indique lo contrario. El procedimiento del "N-metilación en resina" describe un experimento realizado en una escala de 0,100 mmol, en donde la escala se determina por la cantidad de enlazador Sieber unido a la resina que se usó para generar el péptido. Esta escala no se basa en una determinación directa de la cantidad de péptido usada en el procedimiento. El procedimiento se puede escalar más allá de la escala de 0,100 mmol ajustando los volúmenes descritos por el múltiplo de la escala.

La resina se transfirió en una jeringa de 25 ml equipada con una frita. A la resina se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 5,0 ml). La mezcla se agitó durante 3 min y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó 3 veces con DMF (4,0 ml). Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 4,0 ml). La mezcla se agitó durante 3 min y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente seis veces como sigue a continuación: se añadió 3 veces DMF (4,0 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 3 segundos antes de drenar la solución a través de la frita, seguido de 3 adiciones de DCM (4,0 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 3 segundos antes de drenar la solución. a través de la frita.

La resina se suspendió en DMF (2,0 ml) y TRIFLUOROACETATO DE ETILO (0,119 ml, 1,00 mmol), 1,8-DIAZABICICLO[5.4.0]UNDEC-7-ENO (0,181 ml, 1,20 mmol). La mezcla se puso en un agitador durante 60 min. La solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente seis veces como sigue a continuación: se añadió 3 veces DMF (4,0 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 3 segundos antes de drenar la solución a través de la frita, seguido de 3 adiciones de DCM (4,0 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 3 segundos antes de drenar la solución. a través de la frita. La resina se lavó 3 veces con THF seco (2,0 ml) para retirar cualquier agua residual. En un vial de 4,0 ml secado al horno, se añadieron THF (1,0 ml), TRIFe NiLFOSFINA (131 mg, 0,500 mmol) en tamices moleculares de 4 A secos (20 mg). La solución turbia se transfirió a la resina y se añadió lentamente azodicarboxilato de isopropilo (0,097 ml, 0,5 mmol). La resina se agita durante 15 min. La solución se drenó a través de la frita y la resina se lavó 3 veces con THF seco (2,0 ml) para retirar cualquier agua residual. En un vial de 4,0 ml secado al horno, se añadieron THF (1,0 ml), TRIFENILFOSFINA (131 mg, 0,500 mmol) en tamices moleculares de 4 A secos (20 mg). La solución turbia se transfirió a la resina y se añadió lentamente azodicarboxilato de diisopropilo (0,097 ml, 0,5 mmol). La resina se agita durante 15 min. La solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente seis veces como sigue a continuación: se añadió 3 veces DMF (4,0 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 3 segundos antes de drenar la solución a través de la frita, seguido de 3 adiciones de DCM (4,0 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 3 segundos antes de drenar la solución. a través de la frita.

La resina se suspendió en Etanol (1,0 ml) y THF (1,0 ml) y se añadió BOROHIDRURO SÓDICO (37,8 mg, 1,000 mmol). La mezcla se mezcló en un agitador durante 30 min. La solución se drenó a través de la frita y la resina se lavó sucesivamente seis veces como sigue a continuación: se añadió 3 veces DMF (4,0 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 3 segundos antes de drenar la solución a través de la frita, seguido de 3 adiciones de DCM (4,0 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 3 segundos antes de drenar la solución. a través de la frita.

Método de desprotección global B:

Todas las manipulaciones se realizaron manualmente a menos que se indique lo contrario. El procedimiento del "Método de desprotección global B" describe un experimento realizado en una escala 0,100 mmol, en donde la escala está determinada por la cantidad de enlazador Sieber unido a la resina. El procedimiento se puede escalar más allá de la escala de 0,100 mmol ajustando los volúmenes descritos por el múltiplo de la escala. Se preparó una "solución de desprotección" usando ácido trifluoroacético:triisopropilsilano:ditiotreitol (94:3:3 v:v:p). La resina se retiró del recipiente de reacción y se transfirió a una jeringa de 25 ml equipado con una frita. A la jeringa se le añadió la "solución de desprotección" (5,0 ml). La mezcla se mezcló en un agitador durante 5 min. La solución se filtró a través de y se diluyó en éter dietílico (30 ml). El sólido precipitado se centrifugó durante 3 min. La solución sobrenadante se decantó y el sólido se volvió a suspender en éter dietílico (25 ml). La suspensión se centrifugó durante 3 min. El sobrenadante se decantó y el sólido restante se suspendió éter dietílico (25 ml). La suspensión se centrifugó durante 3 min. El sobrenadante se decantó y el sólido restante se secó a alto vacío. El péptido en bruto se obtuvo en forma de un sólido de color blanco a color blanquecino.

Método de desprotección global G

Todas las manipulaciones se realizaron manualmente a menos que se indique lo contrario. El procedimiento del "Método de desprotección global G" describe un experimento realizado en una escala 0,50 o 0,100 mmol, en donde la escala está determinada por la cantidad de enlazador Sieber unido a la resina. El procedimiento se puede escalar más allá de la escala de 0,100 mmol ajustando los volúmenes descritos por el múltiplo de la escala. Se preparó una "solución de desprotección" usando ácido trifluoroacético:triisopropilsilano:agua (95:2,5:2,5 v:v:v). A la resina se le añadió la "solución de desprotección" (2,5 ml). La mezcla se agitó durante 5 min. La solución se filtró y el filtrado se añadió un éter dietílico frío (40 ml). La resina se trató con un adicional de 2,5 ml de "solución de desprotección" durante 2 min y el filtrado se añadió a éter frío del tratamiento previo. El sólido precipitado se recogió por centrifugado, se lavó dos veces con éter (40 ml) y se secó a alto vacío para dar un sólido de color blanco a blanquecino.

Método de ciclación C:

Todas las manipulaciones se realizaron manualmente a menos que se indique lo contrario. El procedimiento del "Método de ciclación C" describe un experimento realizado en una escala de 0,100 mmol, en donde la escala está determinada por la cantidad de enlazador Sieber unido a la resina que se usó para generar el péptido. Esta escala no se basa en una determinación directa de la cantidad de péptido usada en el procedimiento. El procedimiento se puede escalar más allá de la escala de 0,100 mmol ajustando los volúmenes descritos por el múltiplo de la escala. Los sólidos peptídicos en bruto se disolvieron en una solución de acetonitrilo: tampón de bicarbonato de amonio 0,1 M acuoso (11 ml:24 ml), y después, la solución se ajustó cuidadosamente a pH = 8,5-9,0 usando NaOH acuoso (1,0 M). Después, la solución se mezcló usando un agitador durante 12 a 18 horas. La solución de reacción se concentró y después el residuo se disolvió en acetonitrilo:agua. Esta solución se sometió a purificación HPLC de fase inversa para proporcionar el péptido cíclico deseado.

Preparación de ácido 2-((((9H-fluoren-9-il)metoxi)carbonil)amino)-3-(1-(terc-butoxicarbonil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)propanoico racémico

(Robison, M. M y Robison, B. L. J. Am. Chem. Soc., 1955, 77, 457-459).

Esquema:

Etapa 1:

Una mezcla de 7-azagramina (3,5 g, 19,97 mmol), acetamidomalonato de dietilo (4,34 g, 19,97 mmol) y xilenos (35 ml) se trató con hidróxido sódico en polvo (0,080 g, 1,997 mmol) y se agitó a reflujo durante 15 h en una atmósfera de nitrógeno. La solución caliente se filtró para dar un filtrado de color amarillo. Un sólido de color amarillo precipitó del filtrado cuando se enfrió a temperatura ambiente. La masa sólida se suspendió en benceno (40 ml) y se filtró. El sólido recogido se lavó con ciclohexano (2 x 100 ml) para dar 2-((1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)metil)-2acetamidomalonato de dietilo (3,5 g, 50,4 %) en forma de un sólido de color blanco.

Condición de análisis CLEM A: Tiempo de retención = 0,79 min; IEN-EM(+) m/z 348,3 (M+H).

Etapa 2:

Una mezcla de 2-((1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)metil)-2-acetamidomalonato de dietilo (3,5 g, 10,08 mmol) y ácido clorhídrico, 37 % (30 ml) se calentó a reflujo durante 15 h y después se concentró hasta 10 ml. El producto se trató con acetonitrilo (5 ml) y se liofilizó para dar un sólido de color blanquecino. Este se volvió a disolver en NH4OH al 15 % a pH 7 y la solución después se diluyó con agua (20 ml). El sólido precipitado de color blanco se recogió por filtración, se lavó con agua y EtOH y se secó para producir ácido 2-amino-3-(1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)propanoico (1,5 g, 72,5 %) en forma de un sólido de color blanco.

Condición de análisis CLEM A: Tiempo de retención = 0,29 min; IEN-EM(+) m/z 206,0 (M+H).

Etapa 3:

Una solución de ácido 2-amino-3-(1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)propanoico (1,3 g, 6,33 mmol) y trietilamina (1,766 ml, 12,67 mmol) en acetonitrilo (20 ml) y agua (15 ml) se trató con FMOC-OSu (2,137 g, 6,33 mmol) y la solución resultante se agitó a ta durante 30 min. La mezcla se concentró a sequedad para dar un sólido espumoso de color blanco que se trituró con éter (50 ml). El sólido se trató HCl 1 M (100 ml) y el sólido gomoso que se formó se trituró con agua, MeOH y éter y se secó al vacío. El producto resultante se suspendió en MeOH anhidro (50 ml) y HCl 4 M/dioxano (10 ml) y la solución se calentó a reflujo durante 1 h. La mezcla se concentró a presión reducida y el residuo se repartió entre EtOAc y NaHCO3 saturado y se filtró. La fase de EtOAc se lavó dos veces con salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se concentró a presión reducida para dar 2-((((9H-fluoren-9-il)metoxi)carbonil)amino)-3-(1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)propanoato de metilo (1,0 g, rendimiento del 28 %) en forma de una sólido espumoso de color amarillo.

Condición de análisis CLEM A: Tiempo de retención = 0,81 min; IEN-EM(+) m/z 442,5 (M+H).

Etapa 4:

Una solución de 2-((((9H-fluoren-9-il)metoxi)carbonil)amino)-3-(1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)propanoato de metilo (1,0 g, 2,265 mmol) en Th F anhidro (10 ml) se trató con DMAP (0,028 g, 0,227 mmol), se colocó en nitrógeno y se enfrió en un baño de hielo. Una solución de Boc2O (0,789 ml, 3,40 mmol) en THF (5 ml) se añadió a la mezcla durante 3 min y la mezcla se agitó y se dejó calentar durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (150 ml), se lavó con NH4Cl saturado (3 x 50 ml) y salmuera (50 ml), se secó sobre sulfato sódico y se concentró a presión reducida. El producto en bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida usando un cartucho de gel de sílice ISCO de 40 g eluyendo con EtOAc al 0-60 %/hexanos para dar 3-(2-((((9H-fluoren-9-il)metoxi)carbonil)amino)-3-metoxi-3-oxopropil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-1-carboxilato de tere-butilo (0,85 g, rendimiento del 69 %) en forma de un sólido de color blanco.

Condición de análisis CLEM A: Tiempo de retención = 1,01 min; IEN-EM(+) m/z 542,5 (M+H).

Etapa 5:

Una solución de 3-(2-((((9H-fluoren-9-il)metoxi)carbonil)amino)-3-metoxi-3-oxopropil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-1-carboxilato de tere-butilo (200 mg, 0,369 mmol) en 1,2-dicloroetano anhidro (5 ml) se trató con hidróxido de trimetilestaño (200 mg, 1,108 mmol) y la mezcla se agitó a 65 °C durante 1 h. La mezcla se concentró a presión reducida y el residuo se disolvió en EtOAc (50 ml), se lavó con HCl 1 M y salmuera, se secó sobre sulfato sódico y se concentró a presión reducida para producir ácido 2-((((9H-fluoren-9-il)metoxi)carbonil)amino)-3-(1-(tere-butoxicarbonil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-il)propanoico en forma de un sólido espumosos de color blanco. Este se usó sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 88,40 - 8,37 (m, 1H), 8,12 - 8,05 (m, 1H), 7,90-7,75 (m, 2H), 7,70 - 7,55 (m, 2H), 7,43 -7,35 (m, 2H), 7,30-7,18 (m, 4H), 4,37-4,29 (m, 1H), 4,16 -4,12 (m, 3H), 3,23-3,15 (m, 1H), 3,07-2,98 (m, 1H), 1,60 (s, 9H).

Condición de análisis c Le M A: Tiempo de retención = 0,93 min; IEN-EM(+) m/z 528,4 (M+H).

Preparaeión del Ejemplo 3210 (no de aeuerdo eon la inveneión)

Ejemplo 3210

A un tubo de polipropileno de 50 ml se le añadió resina Sieber (140 mg, 0,100 mmol), y el tubo se colocó en el sintetizador de péptidos de microondas CEM Liberty. Después, los siguientes procedimientos se realizaron secuencialmente:

se siguió el "Método CEM A: Procedimiento de hinchamiento de resina";

se siguió el "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional" con Fmoc-Gly-OH;

se siguió el "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional" con Fmoc-Cys(Trt)-OH;

se siguió el "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional" con Fmoc-Leu-OH;

se siguió el "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional" con Fmoc-Tyr(tBu)-OH;

se siguió el "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional" con Fmoc-Trp(Boc)-OH; Fmoc-D-Pro(5,5-di-Me) se acopló manualmente como sigue a continuación: a la resina de peptidilo se le añadió una solución de 5 ml de Fmoc-D-Pro(5,5-di-Me)-OH (1,2equiv.), HATU (1,2equiv.) y DIEA (2,5 equiv.). La suspensión de resina se agitó durante 16 h. La resina se lavó con DMF (3 x 5 ml), DCM (3 x 5 ml) y una vez más con DMF (5 ml). Después, la síntesis se continuó en el sintetizador CEM.

se siguió el "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional" con Fmoc-[N-Me]Phe-OH;

se siguió el "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado" con Fmoc-Val-OH usando 10 equiv. durante 10 min a 75 °C, seguido de 2 horas a temperatura ambiente;

se siguió el "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional" con Fmoc-Asp(OtBu)-OH;

se siguió el "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional" con Fmoc-Sar-OH;

se siguió el "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado" con Fmoc-[N-Me]Nle-OH usando 5 equiv. durante 10 min;

se siguió el "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado" con Fmoc-[N-Me]Phe-OH usando 5 equiv. durante 10 min;

se siguió el "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado" con Fmoc-Phe-OH usando 5 equiv. durante 10 min; "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A" se siguió;

se siguió el "Método de desprotección global B";

se siguió el "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Phenomenex Luna 20x250 partículas de 5 p; Fase móvil A: agua con TFA al 0,1 %; Fase móvil B: Acetonitrilo con TFA al 0,1 %; Gradiente: B al 30-80% durante 50 min, después una parada de 5 minutos a B al 80%; Flujo: 15 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 1,1 mg y su pureza estimada fue del 99 % "Condición de análisis HPLC B" usando un gradiente de tampón B del 35 % al 85 % durante 30 min.

Condición de análisis CLEM A: Tiempo de retención = 1,55 min; IEN-EM(+) m/z 925,8 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 925,4547 (M+2H)

Encontrado: 925,4551 (M+2H)

P re p a ra c ió n d e l E je m p lo 3211

El Ejemplo 3211 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3210, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método CEM A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 15-65 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue 3,4 mg, y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 % mediante las "Condiciones de análisis D y E".

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(+) m/z 905,9 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,82 min; IEN-EM(+) m/z 906,0 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3212

A un recipiente de reacción en fase sólida de polipropileno de 40 ml se le añadió resina Sieber (140 mg, 0,100 mmol) y el recipiente de reacción se colocó en el sintetizador de péptidos Prelude. Después, los siguientes procedimientos se realizaron secuencialmente:

se siguió el "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina";

"Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único" se siguió con Fmoc-Gly-OH;

"Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único" se siguió con Fmoc-Cys(Trt)-OH;

"Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único" se siguió con Fmoc-Leu-OH;

se siguió el "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único" con Fmoc-Phe(CH2NH2)-OH; "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único" se siguió con Fmoc-Trp(Boc)-OH;

se siguió el "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único" con Fmoc-Sar-OH;

se siguió el "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único" con Fmoc-Asp(OtBu)-OH; se siguió el "Método

de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único" con Fmoc-[N-Me]Phe-OH; se siguió el "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria" con Fmoc-Val-OH; "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único" se siguió con Fmoc-Asn(Trt)-OH;

se siguió el "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria" con Fmoc-Sar-OH; se siguió el "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria" con Fmoc-[N-Me]Nle-OH;

se siguió el "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria" con Fmoc-[N-Me]Phe-OH;

se siguió el "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria" con Fmoc-Phe-OH;

"Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A" se siguió;

se siguió el "Método de desprotección global B";

se siguió el "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-60 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue 6,8 mg, y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 % mediante las "Condiciones de análisis D y E".

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,62 min; IEN-EM(+) m/z 880,7 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 880,7 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3213

El Ejemplo 3213 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 15-65 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue 9,5 mg, y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 % mediante las "Condiciones de análisis D y E".

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(+) m/z 887,9 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(+) m/z 887,7 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3216

Ejemplo 3216

El Ejemplo 3216 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-65 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 25-70 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue 1,3 mg, y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 % mediante las "Condiciones de análisis D y E".

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,69 min; IEN-EM(+) m/z 949,2 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(+) m/z 949,2 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3217

Ejemplo 3217

El Ejemplo 3217 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 35-85 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue 5,2 mg, y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 % mediante las "Condiciones de análisis D y E".

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 2,43 min; IEN-EM(+) m/z 956,8 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 2,43 min; IEN-EM(+) m/z 957,0 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 956,4613 (M+2H).

Encontrado: 956,4604 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3218

Ejemplo 3218

El Ejemplo 3218 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 20-70 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue 7,6 mg, y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 % mediante las "Condiciones de análisis D y E".

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 2,12 min; IEN-EM(+) m/z 957,2 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,83 min; IEN-EM(+) m/z 957,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 956,9590 (M+2H)

Encontrado: 956,9582 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3219

El Ejemplo 3219 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 30-80 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue 7,9 mg, y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 % mediante las "Condiciones de análisis D y E".

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 2,26 min; IEN-EM(+) m/z 957,9 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 2,26 min; IEN-EM(+) m/z 958,0 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 956,4510 (M+2H)

Encontrado: 956,4493 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3220

El Ejemplo 3220 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 25-75 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue 8,4 mg, y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 92 % mediante las "Condiciones de análisis D y E".

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,71 min; IEN-EM(+) m/z 932,0 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,94 min; IEN-EM(+) m/z 932,0 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 931,4547 (M+2H)

Encontrado: 931,4536 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3221

El Ejemplo 3221 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 30-80 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue 7,2 mg, y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 % mediante las "Condiciones de análisis D y E".

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 2,22 min; IEN-EM(+) m/z 942,1 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 2,20 min; IEN-EM(+) m/z 943,2 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 942,4457 (M+2H)

Encontrado: 942,4445 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3222

Ejemplo 3222

El Ejemplo 3222 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Phenomenex Luna 20x250 partículas de 5 u; Fase móvil A: agua con TFA al 0,1 %; Fase móvil B: Acetonitrilo con TFA al 0,1 %; Gradiente: B al 35-95% durante 50 min, después una parada de 5 minutos a B al 95%; Flujo: 15 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,9 mg y su pureza estimada fue del 99 % "Condición de análisis HPLC B" usando un gradiente de tampón B del 35 % al 85 % durante 30 min.

Condición de análisis CLEM A: Tiempo de retención = 1,65 min; IEN-EM(+) m/z 966,1 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 965,4484 (M+2H)

Encontrado: 965,4473 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3223

Ejemplo 3223

El Ejemplo 3223 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Phenomenex Luna 20x250 partículas de 5 u; Fase móvil A: agua con TFA al 0,1 %; Fase móvil B: Acetonitrilo con TFA al 0,1 %; Gradiente: B al 35-95% durante 50 min, después una parada de 5 minutos a B al 95%; Flujo: 15 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,1 mg y su pureza estimada fue del 98 % "Condición de análisis HPLC B" usando un gradiente de tampón B del 35 % al 85 % durante 30 min.

Condición de análisis CLEM A: Tiempo de retención = 1,65 min; IEN-EM(+) m/z 966,8 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 966,4381 (M+2H)

Encontrado: 966,4375 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3224

El Ejemplo 3224 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante c L/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65% durante 30 min, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 % mediante la "Condición de análisis CLEM E".

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,93 min; IEN-EM(+) m/z 939,31 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 939,4328 (M+2H)

Encontrado: 939,4322 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3225

Ejemplo 3225

El Ejemplo 3225 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 20-60% durante 30 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue 10,2 mg, y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 % mediante las "Condiciones de análisis E y G".

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,59 min; IEN-EM(-) m/z 898,5 (M-2H).

Condición de análisis CLEM G: Tiempo de retención = 3,18 min; IEN-EM(+) m/z 899,5 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3226 (no de acuerdo con la invención)

Ejemplo 3226

El Ejemplo 3226 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 25-65% durante 30 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 % mediante la "Condición de análisis CLEM E".

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,84 min; IEN-EM(-) m/z 928,9 (M-2H).

Preparación del Ejemplo 3227

El Ejemplo 3227 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 % mediante la "Condición de análisis CLEM E y G".

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,74 min; IEN-EM(+) m/z 947,7 (M+2H).

Condición de análisis CLEM G: Tiempo de retención = 3,37 min; IEN-EM(+) m/z 948,00 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 947,9461 (M+2H)

Encontrado: 949,9449 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3228

El Ejemplo 3228 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 % mediante las "Condiciones de análisis CLEM E y G". Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,80 min; IEN-EM(-) m/z 947,7 (M-2H).

Condición de análisis CLEM G: Tiempo de retención = 3,41 min; IEN-EM(+) m/z 949,10 (M+2h ).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 948,9357 (M+2H)

Encontrado: 948,9354 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3229

Ejemplo 3229

El Ejemplo 3229 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 % mediante las "Condiciones de análisis CLEM E y G". Condición de análisis CLEM G: Tiempo de retención = 3,443 min; IEN-EM(+) m/z 965,55 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3230 (no de acuerdo con la invención)

Ejemplo 3230

El Ejemplo 3230 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material en bruto se purificó a través de HPLC preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Phenomenex Luna 20x250 partículas de 5 u; Fase móvil A: agua con TFA al 0,1 %; Fase móvil B: Acetonitrilo con TFA al 0,1 %; Gradiente: B al 45-95% durante 55 min, después una parada de 5 minutos a B al 95%; Flujo: 15 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. Se obtuvieron cuatro isómeros (Isómeros 3230-A, 3230-B, 3230-C y 3230-D). Los rendimientos de los productos isómero 3230-A, 3230-B, 3230-C y 3060-D fueron de 7,5 mg, 9,3 mg, 0,66 mg y 0,72 mg, respectivamente, y sus purezas estimadas fueron del 97 %, 97,5 %, 99 % y 84 %, respectivamente, mediante "Condición de análisis HPLC B" usando un gradiente de tampón B del 35 % al 90 % durante 30 min a 60 °C.

Condición de análisis CLEM A: isómero 3230-A: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z 930,1 (M+2H). Condición de análisis CLEM A: isómero 3230-B: Tiempo de retención = 1,55 min; IEN-EM(+) m/z 930,0 (m 2h ). Condición de análisis CLEM A: isómero 3230-C: Tiempo de retención = 1,55 min; IEN-EM(+) m/z 929,8 (^m+2H). Condición de análisis CLEM A: isómero 3230-D: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z 930,2 (^m+2^h). 3230-A:

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 929,4391 (M+2H)

Encontrado: 929,4371 (M+2H)

3230-B:

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 929,4391 (M+2H)

Encontrado: 929,4372 (M+2H)

3230-C:

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 929,4391 (M+2H)

Encontrado: 929,4380 (M+2H)

3230-D:

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 929,4391 (M+2H)

Encontrado: 929,4379 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3231

El Ejemplo 3231 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-70% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,652 min; IEN-EM(+) m/z 910,40 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,801 min; IEN-EM(+) m/z 910,75 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3232 (no de acuerdo con la invención)

Ejemplo 3232

El Ejemplo 3232 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,499 min; IEN-EM(+) m/z 911,70 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,633 min; IEN-EM(+) m/z 911,40 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3233 (no de acuerdo con la invención)

El Ejemplo 3233 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-70% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,662 min; IEN-EM(+) m/z 923,70 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,823 min; IEN-EM(+) m/z 923,75 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3234 (no de acuerdo con la invención)

El Ejemplo 3234 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,585 min; IEN-EM(+) m/z 922,60 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,724 min; IEN-EM(+) m/z 924,45 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3235 (no de acuerdo con la invención)

El Ejemplo 3235 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-70% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,77 min; IEN-EM(+) m/z 923,8 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,99 min; IEN-EM(+) m/z 924,0 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3236

Ejemplo 3236

El Ejemplo 3236 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,69 min; IEN-EM(+) m/z 916,3 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,89 min; IEN-EM(+) m/z 916,3 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3237

El Ejemplo 3237 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,78 min; IEN-EM(+) m/z 898,4 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,78 min; IEN-EM(+) m/z 898,5 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3238

Ejemplo 3238

El Ejemplo 3238 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 91 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,78 min; IEN-EM(+) m/z 902,3 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,98 min; IEN-EM(+) m/z 902,1 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3239

El Ejemplo 3239 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C". El residuo 7-aza-Trp protegido con Fmoc se acopló como el racemato.

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,4 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 98 % como una mezcla diastereomérica.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z 899,8 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 899,3 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3240

El Ejemplo 3240 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C". El residuo 7-aza-Trp protegido con Fmoc se acopló como el racemato.

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,5 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 97 % como una mezcla diastereomérica.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z 902,5 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,77 min; IEN-EM(+) m/z 902,5 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3241

El Ejemplo 3241 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C". El residuo 7-aza-Trp protegido con Fmoc se acopló como el racemato.

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,0 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 98 % como una mezcla distereomérica.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,66 min; IEN-EM(+) m/z 898,6 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,57 min; IEN-EM(+) m/z 899,2 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3242

El Ejemplo 3242 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,43 min; IEN-EM(+) m/z 899,5 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,54 min; IEN-EM(+) m/z 899,6 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3243

Ejemplo 3243

El Ejemplo 3243 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,44 min; IEN-EM(+) m/z 899,5 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,54 min; IEN-EM(+) m/z 899,9 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3244

El Ejemplo 3244 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-70% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(+) m/z 921,3 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,81 min; IEN-EM(+) m/z 922,0 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3245

El Ejemplo 3245 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-75% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,73 min; IEN-EM(+) m/z 927,1 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,93 min; IEN-EM(+) m/z 927,4 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3246

El Ejemplo 3246 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global G" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18 300, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-65% durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,78 min; IEN-EM(+) m/z 932,9 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,97 min; IEN-EM(+) m/z 932,9 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 3614

El Ejemplo 3614 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3210, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método CEM A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Procedimiento de N-metilación sobre resina" para la N-metilación del Fmoc-3-PyAla-OH, "Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C". Se acopló Fmoc-3-PyAla-OH (2,5 equiv.) manualmente usando HATU (2,5 equiv.) y NMM (2,5 equiv.) como método de acoplamiento, seguido de una segunda etapa de acoplamiento manual de Fmoc-Phe-OH (5 equiv.) usando HATU (5 equiv.) y NMM (5 equiv.) como método de acoplamiento.

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 30-70 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,53 min; IEN-EM(+) m/z 899,6 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z 899,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 898,9345 (M+2H)

Encontrado: 898,9345 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3616

Ejemplo 3616

El Ejemplo 3616 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3210, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método CEM A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Procedimiento de N-metilación sobre resina" para la N-metilación del Fmoc-4-tiazolala-OH, "Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C". Se acopló Fmoc-3-(tiazol-4il)-Ala-OH (2,5 equiv.) manualmente usando HATU (2,5equiv.) y NMM (2,5 equiv.) como método de acoplamiento, seguido de una segunda etapa de acoplamiento manual de Fmoc-Phe-OH (5 equiv.) usando HATU (5 equiv.) y NMM (5 equiv.) como método de acoplamiento. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 25o mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-60% durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,53 min; IEN-EM(+) m/z 902,1 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z 902,1 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 901,9127 (M+2H)

Encontrado: 901,9130 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3617

El Ejemplo 3617 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3210, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método CEM A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético A ", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material en bruto se purificó a través de HPLC preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Phenomenex Luna 5u C18(2) 250 x 21,2 AXIA, 100A Ser.#520221-1; Fase móvil A: TFA al 0,1 % en agua; Fase móvil B: TFA al 0,1 % en acetonitrilo; Gradiente: B al 35-75 % durante 40 min, después un gradiente de 5 minutos hasta B al 85 %; Flujo: 15 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El producto se disolvió en un mínimo de acetonitrilo y agua, se congeló y se liofilizó para dar un sólido amorfo de color blanco. El rendimiento del producto fue de 1,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 90 %.

Condición de análisis CLEM A: Tiempo de retención = 1,42 min; IEN-EM(+) m/z 817,2 (M+2H).

Condición de análisis CLEM C: Tiempo de retención = 1,65 min; IEN-EM(+) m/z 1632,8 (M+H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 816,8996 (M+2H)

Encontrado: 816,8968 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3618

Ejemplo 3618

El Ejemplo 3618 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3210, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método CEM A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético A ", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material en bruto se purificó a través de HPLC preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Phenom Luna 5u C18(2) 250 x 21,2 AXIA, 100A Ser.#520221-1; Fase móvil A: TFA al 0,1 % en agua; Fase móvil B: TFA al 0,1 % en acetonitrilo; Gradiente: B al 35-75 % durante 40 min, después un gradiente de 5 minutos hasta B al 85 %; Flujo: 15ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El producto se disolvió en un mínimo de acetonitrilo y agua, se congeló y se liofilizó para dar un sólido amorfo de color blanco. El rendimiento del producto fue de 3,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis CLEM A: Tiempo de retención = 1,49 min; IEN-EM(+) m/z 781,7 (M+2H).

Condición de análisis CLEM C: Tiempo de retención = 1,74 min; IEN-EM(+) m/z 1561,8 (M+H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 781,3810 (M+2H)

Encontrado: 781,3778 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3628

Ejemplo 3628

El Ejemplo 3628 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3210, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método CEM A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético A ", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-60 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,97 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z 849,2 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,66 min; IEN-EM(+) m/z 849,3 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 848,8971 (M+2H)

Encontrado: 848,8962 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3637

El Ejemplo 3637 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3210, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método CEM A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Procedimiento de N-metilación sobre resina" para la N-metilación del Fmoc-4-Py-ala-OH, "Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C". Se acopló Fmoc-4-PyAla-OH (10equiv.) manualmente usando HATU (10equiv.) y NMM (20equiv.) como método de acoplamiento, seguido de una segunda etapa de acoplamiento manual de Fmoc-Phe-OH (5 equiv.) usando HATU (5 equiv.) y NMM (10 equiv.) como método de acoplamiento.

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-60 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,78 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,74 min; IEN-EM(+) m/z 932,5 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 932,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 931,9580 (M+2H)

Encontrado: 931,9557 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3638 (no de acuerdo con la invención)

El Ejemplo 3638 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3210, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método CEM A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Procedimiento de N-metilación sobre resina" para la N-metilación del Fmoc-4-Py-ala-OH, "Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético A ", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C". Se acopló Fmoc-4-PyAla-OH (10equiv.) manualmente usando HATU (10equiv.) y NMM (20equiv.) como método de acoplamiento, seguido de una segunda etapa de acoplamiento manual de Fmoc-Phe-OH (5 equiv.) usando HATU (5 equiv.) y NMM (10 equiv.) como método de acoplamiento.

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-60 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. La separación condujo a dos isómeros. El rendimiento del primer isómero, 3638-A, fue de 1,66 mg, y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 91 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,07 min; IEN-EM(+) m/z 899,5 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,08 min; IEN-EM(+) m/z 899,4 (M+2H). El rendimiento del segundo isómero, 3638-B, fue de 7,56 mg, y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 92 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z 899,2 (M+2H).

Condición de análisis CLEM E: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z 899,5 (M+2H). 3638-B:

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 898,9345 (M+2H)

Encontrado: 898,9331 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3639

El Ejemplo 3639 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3210, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método CEM A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método CEM A: Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético A ", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-60 % durante 25 min, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado como una mezcla diastereomérica se combinaron y se secaron a través de evaporación centrífuga. El rendimiento del producto fue de 6,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,65 min; IEN-EM(+) m/z 903,45 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: 905,4391 (M+2H)

Encontrado: 905,4376 (M+2H)

Preparación del Ejemplo 3640

Los dos diastereoisómeros del Ejemplo 3639 se separaron por cromatografía de fluido supercrítico (SFC) en un sistema Berger SFC MGII usando las siguientes condiciones: Columna: ES DEAP 25 X 2,1 cm partículas de 5 |jm; Fase móvil 44/55 de CÜ2/95:5 MeOH: H2O con NH4OAc 10 mM.

El rendimiento del primer isómero, 3640-A, fue de 2,39 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis CLEM A: Tiempo de retención = 1,43 min; IEN-EM(+) m/z 1812,1 (M+H).

Condición de análisis CLEM C: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z 1810,2 (M+H). El rendimiento del segundo isómero, 3640-B, fue de 2,15 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis CLEM A: Tiempo de retención = 1,42 min; IEN-EM(+) m/z 1812,1 (M+H).

Condición de análisis CLEM C: Tiempo de retención = 1,66 min; IEN-EM(+) m/z 1811,1 (m H).

Preparación del Ejemplo 3641

El Ejemplo 3641 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C". El acoplamiento de Fmoc-Val-OH a la resina de peptidilo se realizó usando 10equiv. de aminoácidos, 10 equiv. de HATU y 20 equiv. de NMM y se extendió hasta 10 horas. El acoplamiento final de Fmoc-Phe(3,4,5-tri-F)-OH se realizó manualmente usando 1,5 equiv. de aminoácidos, 1,65 equiv. de 7-aza-benzotriazol (HOAt) y 1,58 equiv. de N,N-diisopropilcarbodiimida (DIC) en DMF, y se le permitió proceder durante 60 horas.

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 % mediante las "Condiciones de análisis CLEM D y G".

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(-) m/z 948,7 (M-2H).

Condición de análisis CLEM G: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 950,7 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: (M+2H) 949,9253

Encontrado: (M+2H) 949,9230

Preparación del Ejemplo 3642

El Ejemplo 3642 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C". El acoplamiento de Fmoc-Val-OH a la resina de peptidilo se realizó usando 10equiv. de aminoácidos, 10equiv. de HATU y 20 equiv. de NMM y se extendió hasta 10 horas. El acoplamiento final de Fmoc-Phe(3,4,5-tri-F)-OH se realizó manualmente usando 1,5 equiv. de aminoácidos, 1,65 equiv. de 7-aza-benzotriazol (HOAt) y 1,58 equiv. de N,N-diisopropilcarbodiimida (DIC) en DMF, y se le permitió proceder durante 60 horas.

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 % mediante las "Condiciones de análisis CLEM D y G". Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(+) m/z 950,8 (M-2H).

Condición de análisis CLEM G: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 950,8 (m 2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: (M+2H) 949,9253

Encontrado: (M+2H) 949,9229

Preparación del Ejemplo 3643

El Ejemplo 3643 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C". El acoplamiento de Fmoc-Val-OH a la resina de peptidilo se realizó usando 10equiv. de aminoácidos, 10equiv. de HATU y 20 equiv. de NMM y se extendió hasta 10 horas. El acoplamiento final de Fmoc-Phe(3,4,5-tri-F)-OH se realizó manualmente usando 1,5 equiv. de aminoácidos, 1,65 equiv. de 7-aza-benzotriazol (HOAt) y 1,58 equiv. de N,N-diisopropilcarbodiimida (DIC) en DMF, y se le permitió proceder durante 60 horas.

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 31,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 % mediante las "Condiciones de análisis CLEM D y G". Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z 936,9 (M+2H).

Condición de análisis CLEM G: Tiempo de retención = 2,90 min; IEN-EM(+) m/z 936,8 (m 2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: (M+2H) 935,9097

Encontrado: (M+2H) 935,9073

Preparación del Ejemplo 3644

El Ejemplo 3644 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C". El acoplamiento de Fmoc-Val-OH a la resina de peptidilo se realizó usando 10equiv. de aminoácidos, 10equiv. de HATU y 20 equiv. de NMM y se extendió hasta 10 horas. El acoplamiento final de Fmoc-Phe(3,4,5-tri-F)-OH se realizó manualmente usando 1,5 equiv. de aminoácidos, 1,65 equiv. de 7-aza-benzotriazol (HOAt) y 1,58 equiv. de N,N-diisopropilcarbodiimida (DIC) en DMF, y se le permitió proceder durante 60 horas.

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 35,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 % mediante las "Condiciones de análisis CLEM D y G". Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,57 min; IEN-EM(+) m/z 936,5 (M+2H).

Condición de análisis CLEM G: Tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z 936,5 (^m+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: (M+2H) 935,9097

Encontrado: (M+2H) 935,9069

Preparación del Ejemplo 3645

El Ejemplo 3645 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C". El acoplamiento de Fmoc-Val-OH a la resina de peptidilo se realizó usando 10equiv. de aminoácidos, 10equiv. de HATU y 20 equiv. de NMM y se extendió hasta 10 horas. El acoplamiento final de Fmoc-Phe(3,4,5-tri-F)-OH se realizó manualmente usando 1,5 equiv. de aminoácidos, 1,65 equiv. de 7-aza-benzotriazol (HOAt) y 1,58 equiv. de N,N-diisopropilcarbodiimida (DIC) en DMF, y se le permitió proceder durante 60 horas.

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-100% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 46,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 % mediante las "Condiciones de análisis CLEM D y G". Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,82 min; IEN-EM(-) m/z 941,05 (M-2H).

Condición de análisis CLEM G: Tiempo de retención = 3,06 min; IEN-EM(+) m/z 943,8 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: (M+2H) 942,9175

Encontrado: (M+2H) 942,9159

Preparación del Ejemplo 3646

El Ejemplo 3646 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3212, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo A", "Método de desprotección global B" y "Método de ciclación C". El acoplamiento de Fmoc-Val-OH a la resina de peptidilo se realizó usando 10equiv. de aminoácidos, 10equiv. de HATU y 20 equiv. de NMM y se extendió hasta 10 horas. El acoplamiento final de Fmoc-Phe(3,4,5-tri-F)-OH se realizó manualmente usando 1,5 equiv. de aminoácidos, 1,65 equiv. de 7-aza-benzotriazol (HOAt) y 1,58 equiv. de N,N-diisopropilcarbodiimida (DIC) en DMF, y se le permitió proceder durante 60 horas.

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 % mediante las "Condiciones de análisis CLEM D y G". Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,57 min; IEN-EM(+) m/z 943,4 (M+2H).

Condición de análisis CLEM G: Tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z 943,6 (^m+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: (M+2H) 942,9175

Encontrado: (M+2H) 942,9152

Preparación del Ejemplo 3647

A un recipiente de reacción en fase sólida de polipropileno Symphony se le añadió resina Sieber (140 mg, 0,100 mmol) y el recipiente de reacción se colocó en el sintetizador de péptidos Symphony. Después, los siguientes procedimientos se realizaron secuencialmente:

;

carboxílico;

se siguió el "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria" con Fmoc-Glu(OtBu)-OH; se siguió el "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento convencional" con Fmoc-[N-Me]Phe-OH; se siguió el "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria" con Fmoc-Val-OH; se siguió el "Método sinfónico A: Single Procedimiento de acoplamiento convencional" con Fmoc-Asp(OtBu)-OH; se siguió el "Método sinfónico A: Single Procedimiento de acoplamiento convencional" con Fmoc-(D)-cis-Pro(4-OH)-OH;

se siguió el "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria" con Fmoc-[N-Me]Nle-OH;

se siguió el "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria" con Fmoc-Phe(3-Cl)-OH;

se siguió el "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final";

se siguió el "Método de desprotección global B";

se siguió el "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,73 min; IEN-EM(-) m/z 939,8 (M-2H).

Condición de análisis CLEM G: Tiempo de retención = 2,9 min; IEN-EM(+) m/z 941,8 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: (M+2H) 940,9096

Encontrado: (M+2H) 940,9063

Preparación del Ejemplo 3648

El Ejemplo 3648 se preparó en resina Rink siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 3647, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria", "Método sinfónico B: Procedimiento de acoplamiento final" "Método de desprotección global B "y "Método de ciclación C".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis CLEM D: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(-) m/z 931,1 (M-2H).

Condición de análisis CLEM G: Tiempo de retención = 2,84 min; IEN-EM(+) m/z 933,3 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z:

Calculado: (M+2H) 932,9244

Encontrado: (M+2H) 932,9200

Datos analíticos:

Espectrometría de Masas: "IEN-EM(+)" significa espectrometría de masas por ionización por electropulverización realizada en modo de ion positivo; "IEN-EM(+)" significa espectrometría de masas por ionización por electropulverización realizada en modo de ion negativo; "IEN-HRMS(+)" significa espectrometría de masas de ionización por electropulverización de alta resolución realizada en modo de iones positivos; "IEN-HRMS(-)" significa espectrometría de masas de ionización por electropulverización de alta resolución realizada en modo de iones negativos. Las masas detectadas se informan siguiendo la designación de la unidad "m/z". Los compuestos con masas exactas superiores a 1000, a menudo se detectaron como iones de doble o triple carga.

Condición de análisis A:

Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partículas de 1,7 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Temperatura: 50 °C; Gradiente: B al 0%, B al 0-100% durante 3 minutos, después una parada de 0,5 minutos a B al 100%; Flujo: 1 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Condición de análisis B:

Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partículas de 1,7 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol:agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol:agua con acetato de amonio 10 mM; Temperatura: 50 °C; Gradiente: B al 0%, B al 0-100% durante 3 minutos, después una parada de 0,5 minutos a B al 100%; Flujo: 0,5 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Condición de análisis C:

Columna: Waters Aquity BEH C182,1 X 50 mm partículas de 1,7 |jm; Fase móvil A: agua con TFA al 0,05 %; Fase móvil B: acetonitrilo con TFA al 0,05 %; Temperatura: 40 °C; Gradiente: B al 0 %, B al 0-100 % durante 3 minutos, después una parada de 0,5 minutos a B al 100 %; Flujo: 0,8 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Condición de análisis D:

Columna: Waters Aquity BEH C182,1 X 50 mm partículas de 1,7 jm; Fase móvil A: agua con TFA al 0,05 %; Fase móvil B: metanol con TfA al 0,05%; Temperatura: 40 °C; Gradiente: B al 0%, B al 0-100% durante 3 minutos, después una parada de 0,5 minutos a B al 100 %; Flujo: 0,8 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Procedimientos generales:

Método de preludio A:

Todas las manipulaciones se realizaron bajo automatización en un sintetizador de péptidos Prelude (Protein Technologies). Todos los procedimientos, a menos que se indique lo contrario, se realizaron en un tubo de polipropileno de 10 ml equipado con una frita inferior; en donde la escala de la reacción excedió 0,100 mmol, se usó un tubo de polipropileno de 40 ml equipado con una frita inferior. El tubo se conecta al sintetizador de péptidos Prelude a través de la parte inferior y la parte superior del tubo. Se pueden añadir DMF y DCM a través de la parte superior del tubo, que bajan los lados del tubo por igual. Los reactivos restantes se agregan a través del fondo del tubo y pasan a través de la frita para contactar con la resina. Todas las soluciones se eliminan a través del fondo del tubo. La "agitación periódica" describe un breve pulso de gas N2 a través de la frita inferior; el pulso dura aproximadamente 5 segundos y ocurre cada 30 segundos. Se usaron soluciones de cloruro de cloroacetilo en DMF dentro de las 24 h de preparación. Las soluciones de aminoácidos generalmente no se usaron más de tres semanas después de la preparación. Se usaron soluciones de HATU dentro de los 5 días de preparación. DMF = dimetilformamida; HATU = 3-Óxido hexafluorofosfato de 1-[bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio; DIPEA = diisopropiletilamina; Rink = (2,4-dimetoxifenil)(4-alcoxifenil)metanamina, en donde "4-alcoxi" describe la posición y el tipo de conectividad con la resina de poliestireno. La resina usada es el polímero Merrifield (poliestireno) con un enlazador Rink (protegido con Fmoc en nitrógeno); malla 100-200, DVB al 1 %, 0,56 mmol/g de carga. Los aminoácidos comunes usados se enumeran a continuación con grupos protectores de cadena lateral indicados dentro del paréntesis.

Fmoc-Ala-OH; Fmoc-Arg(Pbf)-OH; Fmoc-Asn(Trt)-OH; Fmoc-Asp(OtBu)-OH; Fmoc-Bzt-OH; Fmoc-Cys(Trt)-OH; Fmoc-Dab(Boc)-OH; Fmoc-Dap(Boc)-OH; Fmoc-Gln(Trt)-OH; Fmoc-Gly-OH; Fmoc-His(Trt)-OH; Fmoc-Hyp(tBu)-OH; Fmoc-Ile-OH; Fmoc-Leu-OH; Fmoc-Lys(Boc)-OH; Fmoc-Nle-OH; Fmoc-Met-OH; Fmoc-[N-Me]Ala-OH; Fmoc-[N-Me]Nle-OH; Fmoc-Phe-OH; Fmoc-Pro-OH; Fmoc-Sar-OH; Fmoc-Ser(tBu)-OH; Fmoc-Thr(tBu)-OH; Fmoc-Trp(Boc)-OH; Fmoc-Tyr(tBu)-OH; Fmoc-Val-OH.

Los procedimientos del "Método de preludio A" describen un experimento realizado en una escala de 0,100 mmol, en donde la escala se determina por la cantidad de enlace Rink unido a la resina. Esta escala corresponde a aproximadamente 178 mg de la resina Rink-Merrifield descrita anteriormente. Todos los procedimientos se pueden escalar más allá de la escala de 0,100 mmol ajustando los volúmenes descritos por el múltiplo de la escala. Antes del acoplamiento de aminoácidos, todas las secuencias de síntesis de péptidos comenzaron con un procedimiento de hinchamiento de resina, descrito a continuación como "procedimiento de hinchamiento de resina". El acoplamiento de aminoácidos a un extremo N de amina primaria usó el "Procedimiento de acoplamiento único" que se describe a continuación. El acoplamiento de aminoácidos a un terminal N de amina secundaria usó el "Procedimiento de acoplamiento doble" que se describe a continuación. El acoplamiento del cloruro de cloroacetilo al extremo N del péptido se describe mediante el "Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo" detallado a continuación.

Procedimiento de hinchamiento de resina:

A un recipiente de reacción de polipropileno en fase sólida de 10 ml se le añadió resina Merrifield:Rink (178 mg, 0,100 mmol). La resina se lavó (se hinchó) tres veces como sigue a continuación: se añadió DMF (2,0 ml) al recipiente de reacción, sobre el cual la mezcla se agitó periódicamente durante 10 minutos antes de que el disolvente se drene a través de la frita.

Procedimiento de acoplamiento único:

Al recipiente de reacción que contiene resina de la etapa anterior se le añadió piperidina: DMF (20:80 v/v, 2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente seis veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 1,0 ml, 2 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 1.0 ml, 2 equiv.) y finalmente DIPEA (0,8 M en DMF, 0,5 ml, 4 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 15 minutos, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió anhídrido acético (2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 10 minutos, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina resultante se usó directamente en la siguiente etapa.

Procedimiento de acoplamiento doble:

Al recipiente de reacción que contiene resina de la etapa anterior se le añadió piperidina: DMF (20:80 v/v, 2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente seis veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 1,0 ml, 2 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 1.0 ml, 2 equiv.) y finalmente DIPEA (0,8 M en DMF, 0,5 ml, 4 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 15 minutos, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó dos veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 1,0 ml, 2 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 1.0 ml, 2 equiv.) y finalmente DIPEA (0,8 M en DMF, 0,5 ml, 4 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 15 minutos, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó dos veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió anhídrido acético (2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 10 minutos, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina resultante se usó directamente en la siguiente etapa.

Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo:

Al recipiente de reacción que contenía la resina de la etapa previa se la añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente seis veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió DIPEA (0,8 M en DMF, 3,0 ml, 24 equiv.), después cloruro de cloroacetilo (0,8 M en DMF, 1,65 ml, 13,2 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 30 minutos, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió CH2Cl2 (2,0 ml) a la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina resultante se puso en una corriente de N2 durante 15 minutos.

Método sinfónico A:

Esta colección de procedimientos es idéntica a la del "Método de Preludio A", excepto como se indica. Para todos los procedimientos se usó un sintetizador de péptidos Symphony X (Protein Technologies) en lugar de un sintetizador de péptidos Prelude y todos los reactivos se añadieron a través de la parte superior del recipiente de reacción.

Procedimiento de hinchamiento de resina:

Este procedimiento es idéntico al "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina".

Procedimiento de acoplamiento único:

Este procedimiento es idéntico al "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único" excepto que la concentración de la solución de DIPEA fue de 0,4 M y se administraron 1,0 ml de esta solución a la reacción.

Procedimiento de acoplamiento doble:

Este procedimiento es idéntico al "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento doble" excepto que la concentración de la solución de DIPEA fue de 0,4 M y se administró 1,0 ml de esta solución a la reacción.

Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo:

Este procedimiento es idéntico al "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo". Método de desprotección global A:

Todas las manipulaciones se realizaron manualmente a menos que se indique lo contrario. El procedimiento del "Método de desprotección global A" describe un experimento realizado en una escala de 0,100 mmol, en donde la escala se determina por la cantidad de enlace Rink unido a la resina. El procedimiento se puede escalar más allá de la escala de 0,100 mmol ajustando los volúmenes descritos por el múltiplo de la escala. Se preparó una "solución de desprotección" combinando en un vial de vidrio de 40 ml de ácido trifluoroacético (22 ml), fenol (1,325 g), agua (1,25 ml) y triisopropilsilano (0,5 ml). La resina se retiró del recipiente de reacción y se transfirió a un vial de vidrio de 4 ml. Al vial se le añadió la "solución de desprotección" (2,0 ml). La mezcla se mezcló vigorosamente en un agitador (1000 rpm durante 1 minuto, después 500 rpm durante 1-2 h). La mezcla se filtró a través de un filtro de jeringa de 0,2 micrómetros y los sólidos se extrajeron con la "solución de desprotección" (1,0 ml) o TFA (1,0 ml). A un tubo de ensayo de 24 ml cargado con los filtrados combinados se le añadió Et2O (15 ml). La mezcla se mezcló vigorosamente sobre la cual precipitó una cantidad significativa de un sólido de color blanco. La mezcla se centrifugó durante 5 minutos, después la solución se decantó de los sólidos y se desechó. Los sólidos se suspendieron en Et2O (20 ml); después la mezcla se centrifugó durante 5 minutos; y la solución se decantó de los sólidos y se desechó. Por última vez, los sólidos se suspendieron en Et2O (20 ml); la mezcla se centrifugó durante 5 minutos; y la solución se decantó de los sólidos y se desechó para proporcionar el péptido en bruto en forma de un sólido de color blanco a color blanquecino.

Método de ciclación A:

Todas las manipulaciones se realizaron manualmente a menos que se indique lo contrario. El procedimiento del "Método de ciclación A" describe un experimento realizado en una escala de 0,100 mmol, en donde la escala está determinada por la cantidad de enlazador Rink unido a la resina que se usó para generar el péptido. Esta escala no se basa en una determinación directa de la cantidad de péptido usada en el procedimiento. El procedimiento se puede escalar más allá de la escala de 0,100 mmol ajustando los volúmenes descritos por el múltiplo de la escala. Los sólidos peptídicos en bruto se disolvieron en MeCN:NH4OAc 0,1 M ac. (1:1) hasta un volumen total de 18-22 ml, y después, la solución se ajustó cuidadosamente a pH = 8,5-9,0 usando NaOH ac. (1,0 M). Después, se dejó reposar la solución sin agitar durante 12-18 h. La solución de reacción se concentró y el residuo se disolvió después en DMSO:MeOH. Esta solución se sometió a purificación HPLC de fase inversa para proporcionar el péptido cíclico deseado.

Secuencia sintética general A:

La "Secuencia sintética general A" describe una secuencia general de procedimientos que se usaron para proporcionar los péptidos cíclicos descritos en el presente documento. Para los dines de este procedimiento general, los procedimientos del "Método sinfónico A" son intercambiables con los del "Método de preludio A". A un recipiente de reacción en fase sólida de polipropileno de 10 ml se le añadió resina Rink-Merrifield (178 mg, 0,100 mmol) y el recipiente de reacción se colocó en el sintetizador de péptidos Prelude. Se siguió el "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina". Después, se realizó una serie de acoplamientos de aminoácidos secuencialmente en el Preludio siguiendo el "Método del Preludio A: Procedimiento de acoplamiento único" si el extremo N del péptido unido a la resina era una amina primaria o "Método de Preludio A: Procedimiento de acoplamiento doble" si el extremo N del péptido unido a la resina era una amina secundaria. Se siguió el "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo"; después se siguió el "Método de desprotección global A"; después se siguió el "Método de ciclación A".

Secuencia sintética general B:

La "Secuencia sintética general B" describe una secuencia general de procedimientos que se usaron para proporcionar los péptidos cíclicos descritos en el presente documento. Para los dines de este procedimiento general, los procedimientos del "Método sinfónico A" son intercambiables con los del "Método de preludio A". A un recipiente de reacción de fase sólida de polipropileno de 10 ml se le añadió resina de 2-clorotritilcloruro (100 mg, 1,42 mmol/g de carga). El recipiente de reacción se puso en un sintetizador peptídico Prelude. Manualmente, al recipiente de reacción se le añadió una solución del aminoácido C-terminal protegido con Fmoc (0,10 mmol) y diisopropiletilamina (0,65 mmol) en DCM (2,5 ml). En automatización, la mezcla se agitó por burbujeo periódico de nitrógeno durante 60 minutos. Al recipiente de reacción se le añadió metanol (0,20 ml). La mezcla se agitó por burbujeo periódico de nitrógeno durante 15 minutos, después el recipiente de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DCM (2,0 ml) a la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente dos veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DCM (2,0 ml) a la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente tres veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Después, se realizó una serie de acoplamientos de aminoácidos secuencialmente en el Preludio siguiendo el "Método del Preludio A: Procedimiento de acoplamiento único" si el extremo N del péptido unido a la resina era una amina primaria o "Método de Preludio A: Procedimiento de acoplamiento doble" si el extremo N del péptido unido a la resina era una amina secundaria. Se siguió el "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo"; después se siguió el "Método de desprotección global A"; después se siguió el "Método de ciclación A".

Preparación de ácido (S)-2-((((9H-fluoren-9-il)metoxi)carbonil)amino)-3-(1-(2-(terc-butoxi)-2-oxoetil)-1H-indol-3-il)propanoico

Etapa 1:

A una solución a 0°C de 2-(((benciloxi)carbonil)amino)-3-(1H-indol-3-il)propanoato de (S)-bencilo (25,0 g, 58,3 mmol) y carbonato de cesio (20,9 g, 64,2 mmol) en DMF (200 ml) se le añadió 2-bromoacetato de tere-butilo (9,36 ml, 64,2 mmol). La solución se dejó calentar lentamente hasta TA con agitación durante 18 h. La mezcla de reacción se vertió en agua enfriada con hielo:HCl 1 N ac. (1:1) y después se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con salmuera, se recogió, se secó sobre MgSO4, se filtró y después se concentró al vacío. El sólido resultante se sometió a cromatografía sobre SiO2 (columna de 330 g, EtOAc al 0-50 %:Hex sobre 20 volúmenes de columna) para proporcionar 2-(((benciloxi)carbonil)amino)-3-(1-(2-(tere-butoxi)-2-oxoetil)-1H-indol-3-il)propanoato de (S)-bencilo en forma de un sólido de color blanco, 29,6 g (93 %).

Etapa 2:

Se burbujeó lentamente H2 a través de una mezcla de 2-(((benciloxi)carbonil)amino)-3-(1-(2-(tere-butoxi)-2-oxoetil)-1H-indol-3-il)propanoato de (S)-bencilo (29,6 g, 54,5 mmol) y Pd-C (1,45 g, 1,36 mmol) en MeOH (200 ml) a TA durante 10 min. Después, la mezcla se agitó a presión positiva de H2 mientras que la conversión se controló por CLEM. Después de 48 h, la conversión se consideró completa y la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se evaporó para proporcionar ácido (S)-2-amino-3-(1-(2-(tere-butoxi)-2-oxoetil)-1H-indol-3-il)propanoico (17,0 g) en bruto, que se llevó a la etapa tres sin purificación adicional.

Etapa 3:

A una solución de ácido (S)-2-amino-3-(1-(2-(tere-butoxi)-2-oxoetil)-1H-indol-3-il)propanoico (5,17 g, 16,2 mmol) y bicarbonato sódico (6,8 g, 81 mmol) en acetona:agua (50,0 ml:100 ml) se le añadió (2,5-dioxopirrolidin-1-il)carbonato de (9H-fluoren-9-il)metilo (5,48 g, 16,2 mmol). La mezcla se agitó durante una noche, después de la cual el análisis CLEM indicó la conversión completa. La mezcla agitada vigorosamente se acidificó a través de la adición lenta de HCl 1 N ac. Una vez acidificada, la mezcla se diluyó con DCM (150 ml), y después, la fase orgánica aislada se lavó con agua, seguido de salmuera. La capa orgánica se recogió, se secó sobre sulfato sódico, y se concentró al vacío para proporcionar el producto en bruto. El material en bruto se purificó a través de cromatografía sobre gel de sílice (columna de 330 g, EtOAc al 20-80 %:Hex sobre 20 volúmenes de columna) para proporcionar ácido (S)-2-((((9H-fluoren-9-il)metoxi)carbonil)amino)-3-(1-(2-(tere-butoxi)-2-oxoetil)-1H-indol-3- il)propanoico en forma de una espuma de color blanco, 7,26 g (83 %). RMN 1H (500 MHz, metanol^) d 7,80 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,67 - 7,60 (m, 2H), 7,39 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,32 - 7,22 (m, 3H), 7,18 (td, J = 7,6, 0,9 Hz, 1H), 7,08 (td, J = 7,5, 0,9 Hz, 1H), 7,04 (s, 1H), 4,54 (dd, J = 8,4, 4,9 Hz, 1H), 4,36 - 4,23 (m, 2H), 4,23 - 4,14 (m, 1H), 3,43 - 3,35 (m, 2H), 3,25 - 3,09 (m, 1H), 1,55 - 1,38 (m, 9H). IEN-EM(+) m/z = 541,3 (M H).

Preparaeión del Ejemplo 5148

El Ejemplo 5148 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,57 min; IEN-EM(+) m/z 972,2 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,76 min; IEN-EM(+) m/z 972,3 (m 2h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 971,4662 Encontrado: 971,4619.

Preparación del Ejemplo 5150

El Ejemplo 5150 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con ácido difluoroacético al 0,1 %; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,36 min; IEN-EM(-) m/z 948,7 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,46 min; IEN-EM(-) m/z 948,3 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 949,9302 Encontrado: 949,9312.

Preparación del Ejemplo 5151

El Ejemplo 5151 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A”. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 1,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,41 min; IEN-EM(+) m/z 1833,3 (M+H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,55 min; IEN-EM(-) m/z 915,7 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 916,9374 Encontrado: 916,9376.

Preparación del Ejemplo 5152

El Ejemplo 5152 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 32,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,13 min; IEN-EM(+) m/z 943,6 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,23 min; IEN-EM(+) m/z 943,6 (m 2h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 942,9279 Encontrado: 942,9257.

Preparación del Ejemplo 5153

El Ejemplo 5153 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A”, en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 49,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,458 min; IEN-EM(+) m/z 953,15 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,883 min; IEN-EM(-) m/z 950,30 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 951,964 Encontrado: 951,9617.

Preparación del Ejemplo 5154

El Ejemplo 5154 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,523 min; IEN-EM(+) m/z 946,40 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,738 min; IEN-EM(+) m/z 946,10 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 945,922 Encontrado: 945,9222.

Preparación del Ejemplo 5155

El Ejemplo 5155 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,42 min; IEN-EM(+) m/z 978,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,61 min; IEN-EM(+) m/z 977,7 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 977,4694 Encontrado: 977,4682.

Preparación del Ejemplo 5156

El Ejemplo 5156 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo:

20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,23 min; IEN-EM(+) m/z 97,6 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,35 min; IEN-EM(-) m/z 969,5 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 970,9354 Encontrado: 970,9336.

Preparación del Ejemplo 5157

El Ejemplo 5157 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,35 min; IEN-EM(+) m/z 929,7 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,50 min; IEN-EM(+) m/z 930,3 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 929,5135 Encontrado: 929,5102.

Preparación del Ejemplo 5158

El Ejemplo 5158 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con ácido difluoroacético al 0,1 %; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,25 min; IEN-EM(+) m/z 972,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,39 min; IEN-EM(+) m/z 971,6 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 970,9354 Encontrado: 970,9359.

Preparación del Ejemplo 5159

El Ejemplo 5159 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 936,5 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z 936,3 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 935,9238 Encontrado: 935,9214.

Preparación del Ejemplo 5160

El Ejemplo 5160 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-40 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,36 min; IEN-EM(+) m/z 972,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,46 min; IEN-EM(+) m/z 971,8 (m 2h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 971,4463 Encontrado: 971,444.

Preparación del Ejemplo 5161

El Ejemplo 5161 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,44 min; IEN-EM(+) m/z 923,2 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,60 min; IEN-EM(-) m/z 921,6 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 922,9613 Encontrado: 922,9568

Preparación del Ejemplo 5162

El Ejemplo 5162 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,47 min; IEN-EM(+) m/z 923,8 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,63 min; IEN-EM(+) m/z 923,8 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 923,4533 Encontrado: 923,449.

Preparación del Ejemplo 5163

El Ejemplo 5163 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 25-45% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-35 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 49,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,28 min; IEN-EM(+) m/z 958,7 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,41 min; IEN-EM(+) m/z 957,8 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 957,4356 Encontrado: 957,4321.

Preparación del Ejemplo 5164

El Ejemplo 5164 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CL^eM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,36 min; IEN-EM(-) m/z 915,3 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,54 min; IEN-EM(+) m/z 917,6 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 916,9374 Encontrado: 916,9374.

Preparación del Ejemplo 5165

El Ejemplo 5165 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(-) m/z 914,8 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,58 min; IEN-EM(+) m/z 917,0 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 916,4454 Encontrado: 916,4459.

Preparación del Ejemplo 5166

El Ejemplo 5166 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A”, en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,41 min; IEN-EM(+) m/z 923,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,58 min; IEN-EM(+) m/z 923,1 (m 2H).

Preparación del Ejemplo 5167

El Ejemplo 5167 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 37,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,38 min; IEN-EM(+) m/z 931,8 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,54 min; IEN-EM(+) m/z 931,3 (m 2h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 931,4325 Encontrado: 931,4285.

Preparación del Ejemplo 5168

El Ejemplo 5168 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,374 min; IEN-EM(+) m/z 931,4 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,892 min; IEN-EM(+) m/z 931,4 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 930,9405 Encontrado: 930,9383.

Preparación del Ejemplo 5169

El Ejemplo 5169 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,538 min; IEN-EM(+) m/z 940,60 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,832 min; IEN-EM(-) m/z 940,65 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 942,434 Encontrado: 942,4326.

Preparación del Ejemplo 5170

El Ejemplo 5170 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,36 min; IEN-EM(+) m/z 1849,6 (M+H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,49 min; IEN-Em (-) m/z 923,6 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 924,9167 Encontrado: 924,9175.

Preparación del Ejemplo 5171

El Ejemplo 5171 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 31,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,551 min; IEN-EM(+) m/z 944,95 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,165 min; IEN-EM(+) m/z 943,2 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 944,4767 Encontrado: 944,4745.

Preparación del Ejemplo 5174

El Ejemplo 5174 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A”. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(+) m/z 935,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,70 min; IEN-EM(-) m/z 933,2 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 934,4511 Encontrado: 934,4518.

Preparación del Ejemplo 5175

El Ejemplo 5175 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 92 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,408 min; IEN-EM(+) m/z 873,65 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,63 min; IEN-EM(+) m/z 873,7 (M+2H)

Condición de análisis C: Tiempo de retención = 1,408 min; IEN-EM(+) m/z 873,65 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 873,4089 Encontrado: 873,4089.

Preparación del Ejemplo 5176

El Ejemplo 5176 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 27,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,35 min; IEN-EM(+) m/z 939,5 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,49 min; IEN-EM(+) m/z 939,7 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 938,938 Encontrado: 938,9345.

Preparación del Ejemplo 5177

El Ejemplo 5177 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A”. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 27,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,393 min; IEN-EM(+) m/z 946,20 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,41 min; IEN-EM(+) m/z 946,2 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 945,922 Encontrado: 945,9222.

Preparación del Ejemplo 5178

El Ejemplo 5178 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 949,7 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,59 min; IEN-EM(-) m/z 947,8 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 949,462 Encontrado: 949,4626.

Preparación del Ejemplo 5179

El Ejemplo 5179 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CL^eM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,39 min; IEN-EM(+) m/z 1847,5 (M+H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,54 min; IEN-EM(+) m/z 924,6 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 923,9453 Encontrado: 923,944.

Preparación del Ejemplo 5180

El Ejemplo 5180 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-50% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,471 min; IEN-EM(-) m/z 950,95 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,060 min; IEN-EM(-) m/z 951,15 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 952,456 Encontrado: 952,4533.

Preparación del Ejemplo 5181

El Ejemplo 5181 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,238 min; IEN-EM(+) m/z 978,95 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,659 min; IEN-EM(-) m/z 977,00 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 978,4409 Encontrado: 978,4382.

Preparación del Ejemplo 5182

El Ejemplo 5182 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A”, en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 114,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(+) m/z 912,6 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,65 min; IEN-EM(+) m/z 912,9 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 912,4561 Encontrado: 912,4545.

Preparación del Ejemplo 5183

El Ejemplo 5183 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 1772,2 (M+H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(+) m/z 887,0 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 886,9388 Encontrado: 886,9384.

Preparación del Ejemplo 5184

El Ejemplo 5184 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A”. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,34 min; IEN-EM(-) m/z 915,5 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,48 min; IEN-EM(+) m/z 918,0 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 917,4295 Encontrado: 917,4291.

Preparación del Ejemplo 5186

El Ejemplo 5186 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,21 min; IEN-EM(+) m/z 1940,3 (M+H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,33 min; IEN-EM(+) m/z 970,5 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 970,4434 Encontrado: 970,4435.

Preparación del Ejemplo 5187

El Ejemplo 5187 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,305 min; IEN-EM(-) m/z 955,20 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,639 min; IEN-EM(+) m/z 957,85 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 956,9436 Encontrado: 956,9401.

Preparación del Ejemplo 5189

El Ejemplo 5189 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CL^eM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 951,4 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,91 min; IEN-EM(-) m/z 949,5 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 950,9473 Encontrado: 950,9449.

Preparación del Ejemplo 5190

El Ejemplo 5190 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,36 min; IEN-EM(+) m/z 957,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,52 min; IEN-Em (-) m/z 954,8 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 956,446 Encontrado: 956,4415.

Preparación del Ejemplo 5191

El Ejemplo 5191 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,599 min; IEN-EM(+) m/z 944,40 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,917 min; IEN-EM(+) m/z 945,20 (m 2h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 944,938 Encontrado: 944,9383.

Preparación del Ejemplo 5192

El Ejemplo 5192 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 19 x 150 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol:agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CL^eM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,354 min; IEN-EM(+) m/z 938,25 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,876 min; IEN-EM(+) m/z 938,90 (m 2h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 938,446 Encontrado: 938,4432.

Preparación del Ejemplo 5196

El Ejemplo 5196 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,417 min; IEN-EM(+) m/z 947,15 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,469 min; IEN-EM(+) m/z 946,25 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 945,922 Encontrado: 945,9222.

Preparación del Ejemplo 5198

El Ejemplo 5198 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,44 min; IEN-EM(+) m/z 898,7 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,56 min; IEN-EM(+) m/z 899,0 (m 2h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 898,4223 Encontrado: 898,4223.

Preparación del Ejemplo 5199

El Ejemplo 5199 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general B". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CL^eM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,484 min; IEN-EM(-) m/z 921,40 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,064 min; IEN-EM(+) m/z 923,45 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 922,9738 Encontrado: 922,9705.

Preparación del Ejemplo 5200

El Ejemplo 5200 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,47 min; IEN-EM(+) m/z 931,3 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,62 min; IEN-EM(+) m/z 931,3 (m 2h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 930,9405 Encontrado: 930,9383.

Preparación del Ejemplo 5201

El Ejemplo 5201 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A”. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,33 min; IEN-EM(+) m/z 956,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,51 min; IEN-EM(+) m/z 955,8 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 955,0189 Encontrado: 955,015.

Preparación del Ejemplo 5202

El Ejemplo 5202 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,54 min; IEN-EM(+) m/z 984,3 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,70 min; IEN-EM(+) m/z 984,2 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 983,5058 Encontrado: 983,5018.

Preparación del Ejemplo 5203

El Ejemplo 5203 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A”, en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,225 min; IEN-EM(-) m/z 956,15 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,460 min; IEN-EM(-) m/z 955,15 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 957,9276 Encontrado: 957,9241.

Preparación del Ejemplo 5204

El Ejemplo 5204 se preparo siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purifico a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo:

20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,39 min; IEN-EM(+) m/z 1848,3 (M+H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,51 min; IEN-Em (-) m/z 922,7 (M-2H).

Preparación del Ejemplo 5205

El Ejemplo 5205 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A”. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-50 % durante 5 minutos, después una parada de 30 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,36 min; IEN-EM(-) m/z 923,9 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,45 min; IEN-EM(+) m/z 925,1 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 924,9167 Encontrado: 924,9173.

Preparación del Ejemplo 5207

El Ejemplo 5207 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,39 min; IEN-EM(+) m/z 931,6 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,58 min; IEN-EM(+) m/z 931,5 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 930,9405 Encontrado: 930,9359.

Preparación del Ejemplo 5208

El Ejemplo 5208 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,35 min; IEN-EM(+) m/z 925,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,51 min; IEN-EM(+) m/z 924,7 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 923,9327 Encontrado: 923,9336.

Preparación del Ejemplo 5209

El Ejemplo 5209 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-40 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 35,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,297 min; IEN-EM(+) m/z 971,45 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,45 min; IEN-EM(+) m/z 971,8 (M+2H)

Condición de análisis C: Tiempo de retención = 1,297 min; IEN-EM(+) m/z 971,45 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 971,4463 Encontrado: 971,4443.

Preparación del Ejemplo 5211

El Ejemplo 5211 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A”. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-100 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,74 min; IEN-EM(+) m/z 957,6 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 957,6 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 956,9473 Encontrado: 956,9451.

Preparación del Ejemplo 5213

El Ejemplo 5213 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A”, en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,30 min; IEN-EM(+) m/z 938,2 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,46 min; IEN-EM(+) m/z 938,6 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 937,954 Encontrado: 937,9511.

Preparación del Ejemplo 5214

El Ejemplo 5214 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,39 min; IEN-EM(+) m/z 925,5 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,49 min; IEN-EM(+) m/z 925,5 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 924,9167 Encontrado: 924,9166.

Preparación del Ejemplo 5215

El Ejemplo 5215 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,44 min; IEN-EM(+) m/z 958,7 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,62 min; IEN-EM(+) m/z 959,2 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 958,4107 Encontrado: 958,4078.

Preparación del Ejemplo 5216

El Ejemplo 5216 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CL^eM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,38 min; IEN-EM(+) m/z 938,7 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,49 min; IEN-EM(+) m/z 938,6 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 937,9427 Encontrado: 937,9436.

Preparación del Ejemplo 5218

El Ejemplo 5218 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A”. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,38 min; IEN-EM(+) m/z 357,2 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,52 min; IEN-EM(+) m/z 956,8 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 956,446 Encontrado: 956,4413.

Preparación del Ejemplo 5219

El Ejemplo 5219 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z 858,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,55 min; IEN-EM(+) m/z 858,7 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 858,4036 Encontrado: 858,4032.

Preparación del Ejemplo 5220

El Ejemplo 5220 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 40,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,342 min; IEN-EM(-) m/z 962,60 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,856 min; IEN-EM(+) m/z 965,00 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 964,4434 Encontrado: 964,4399.

Preparación del Ejemplo 5221

El Ejemplo 5221 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,40 min; IEN-EM(+) m/z 932,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,55 min; IEN-EM(+) m/z 932,1 (m 2h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 931,4325 Encontrado: 931,429.

Preparación del Ejemplo 5222

El Ejemplo 5222 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,31 min; IEN-EM(+) m/z 964,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,48 min; IEN-EM(+) m/z 963,6 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 963,4594 Encontrado: 963,4567.

Preparación del Ejemplo 5223

El Ejemplo 5223 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A”. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,42 min; IEN-EM(+) m/z 956,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,59 min; IEN-EM(+) m/z 956,6 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 955,954 Encontrado: 955,9503.

Preparación del Ejemplo 5224

El Ejemplo 5224 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,37 min; IEN-EM(+) m/z 932,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,53 min; IEN-EM(+) m/z 931,8 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 931,4325 Encontrado: 931,4303.

Preparación del Ejemplo 5225

El Ejemplo 5225 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,69 min; IEN-EM(+) m/z 944,7 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,90 min; IEN-EM(+) m/z 944,3 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,9395 Encontrado: 943,9396.

Preparación del Ejemplo 5226

El Ejemplo 5226 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,375 min; IEN-EM(-) m/z 930,30 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,988 min; IEN-EM(+) m/z 932,35 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 931,9302 Encontrado: 931,9273.

Preparación del Ejemplo 5227

El Ejemplo 5227 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,429 min; IEN-EM(-) m/z 922,45 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,914 min; IEN-EM(+) m/z 924,45 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 924,4429 Encontrado: 924,4396.

Preparación del Ejemplo 5228

El Ejemplo 5228 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(+) m/z 969,8 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,72 min; IEN-Em (-) m/z 267,1 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 968,9982 Encontrado: 968,9941.

Preparación del Ejemplo 5229

El Ejemplo 5229 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-40 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,41 min; IEN-EM(+) m/z 971,8 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,53 min; IEN-EM(+) m/z 972,1 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 971,4463 Encontrado: 971,4448.

Preparación del Ejemplo 5230

El Ejemplo 5230 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,32 min; IEN-EM(+) m/z 950,8 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,40 min; IEN-EM(+) m/z 951,1 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 950,4222 Encontrado: 950,4232.

Preparación del Ejemplo 5231

El Ejemplo 5231 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,31 min; IEN-EM(+) m/z 932,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,44 min; IEN-EM(+) m/z 932,4 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 931,9302 Encontrado: 931,9273.

Preparación del Ejemplo 5232

El Ejemplo 5232 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,34 min; IEN-EM(+) m/z 937,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,47 min; IEN-Em (-) m/z 936,2 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 937,4507 Encontrado: 937,4509.

Preparación del Ejemplo 5233

El Ejemplo 5233 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,29 min; IEN-EM(+) m/z 925,8 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,40 min; IEN-E^m(-) m/z 924,1 (M-2H).

Preparación del Ejemplo 5234

El Ejemplo 5234 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 935,6 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,71 min; IEN-E^m(-) m/z 933,7 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 935,4589 Encontrado: 935,4591.

Preparación del Ejemplo 5236

El Ejemplo 5236 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,21 min; IEN-EM(+) m/z 972,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,31 min; IEN-EM(+) m/z 972,0 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 971,4274 Encontrado: 971,4247.

Preparación del Ejemplo 5237

El Ejemplo 5237 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 150 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,43 min; IEN-EM(+) m/z 931,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,58 min; IEN-EM(+) m/z 931,0 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 930,4485 Encontrado: 930,4441.

Preparación del Ejemplo 5238

El Ejemplo 5238 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 25-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 93 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,29 min; IEN-EM(+) m/z 964,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,46 min; IEN-EM(+) m/z 964,2 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 963,9484 Encontrado: 963,9514.

Preparación del Ejemplo 5240

El Ejemplo 5240 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,30 min; IEN-EM(+) m/z 946,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,44 min; IEN-EM(+) m/z 946,2 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 945,43 Encontrado: 945,4304.

Preparación del Ejemplo 5241

El Ejemplo 5241 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z 978,5 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-E^m(-) m/z 975,3 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 976,9774 Encontrado: 976,9757.

Preparación del Ejemplo 5242

El Ejemplo 5242 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,34 min; IEN-EM(+) m/z 1849,3 (M+H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,47 min; IEN-E^m(-) m/z 923,1 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 924,4247 Encontrado: 924,4248.

Preparación del Ejemplo 5243

El Ejemplo 5243 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 40-100 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,22 min; IEN-EM(+) m/z 946,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,31 min; IEN-E^m(-) m/z 944,1 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 945,43 Encontrado: 945,4302.

Preparación del Ejemplo 5245

El Ejemplo 5245 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,576 min; IEN-EM(+) m/z 946,60 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,171 min; IEN-EM(+) m/z 945,55 (^m+2^h)

Condición de análisis C: Tiempo de retención = 1,576 min; IEN-EM(+) m/z 946,60 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 945,43 Encontrado: 945,4308.

Preparación del Ejemplo 5246

El Ejemplo 5246 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,42 min; IEN-EM(-) m/z 923,0 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,54 min; IEN-EM(+) m/z 925,1 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 924,4247 Encontrado: 924,4249.

Preparación del Ejemplo 5247

El Ejemplo 5247 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,49 min; IEN-EM(+) m/z 924,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,64 min; IEN-Em (-) m/z 922,1 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 923,4533 Encontrado: 923,449.

Preparación del Ejemplo 5248

El Ejemplo 5248 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 60-100 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,65 min; IEN-EM(+) m/z 1847,4 (M+H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z 924,5 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 5249

El Ejemplo 5249 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 37,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,06 min; IEN-EM(+) m/z 943,5 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,16 min; IEN-E^m(-) m/z 941,4 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 942,9279 Encontrado: 942,9254.

Preparación del Ejemplo 5251

El Ejemplo 5251 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,49 min; IEN-EM(+) m/z 931,5 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,61 min; IEN-E^m(-) m/z 929,2 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 930,9405 Encontrado: 930,936.

Preparación del Ejemplo 5252

El Ejemplo 5252 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,30 min; IEN-EM(+) m/z 932,3 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,45 min; IEN-Em (-) m/z 930,6 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 931,9245 Encontrado: 931,9205.

Preparación del Ejemplo 5253

El Ejemplo 5253 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,378 min; IEN-EM(+) m/z 931,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,862 min; IEN-Em (-) m/z 929,9 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 931,4381 Encontrado: 931,435.

Preparación del Ejemplo 5254

El Ejemplo 5254 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,655 min; IEN-EM(+) m/z 938,60 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,40 min; IEN-EM(+) m/z 939,2 (M+2H)

Condición de análisis C: Tiempo de retención = 1,655 min; IEN-EM(+) m/z 938,60 (M+2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 938,4347 Encontrado: 938,4348.

Preparación del Ejemplo 5255

El Ejemplo 5255 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,32 min; IEN-EM(+) m/z 971,2 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,44 min; IEN-EM(+) m/z 971,6 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 970,9536 Encontrado: 970,9501.

Preparación del Ejemplo 5256

El Ejemplo 5256 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,54 min; IEN-EM(+) m/z 993,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,73 min; IEN-EM(+) m/z 992,8 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 992,4897 Encontrado: 992,4871.

Preparación del Ejemplo 5257

El Ejemplo 5257 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,34 min; IEN-EM(+) m/z 1876,4 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,45 min; IEN-E^m(-) m/z 936,3 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 937,9427 Encontrado: 937,9431.

Preparación del Ejemplo 5259

El Ejemplo 5259 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método de preludio A" se modificaron para usar anhídrido acético en DMF (1,0 M, 2 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 31,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 951,3 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,69 min; IEN-Em (-) m/z 950,0 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 951,472 Encontrado: 951,4698.

Preparación del Ejemplo 5260

El Ejemplo 5260 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 928,2 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,72 min; IEN-EM(+) m/z 928,6 (m 2h )

Condición de análisis C: Tiempo de retención = 1,432 min; IEN-EM(+) m/z 946,70 (M+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 946,414 Encontrado: 946,4138.

Preparación del Ejemplo 5261

El Ejemplo 5261 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,432 min; IEN-EM(+) m/z 946,70 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,462 min; IEN-E^m(-) m/z 944,80 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 946,414 Encontrado: 946,4138.

Preparación del Ejemplo 5262

El Ejemplo 5262 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,62 min; IEN-EM(+) m/z 908,8 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,75 min; IEN-Em (-) m/z 907,1 (M- 2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 908,4480 Encontrado: 908,4463.

Preparación del Ejemplo 5263 (no de acuerdo con la invención)

El Ejemplo 5263 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,43 min; IEN-EM(+) m/z 920,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,59 min; IEN-Em (-) m/z 919,2 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 920,4354 Encontrado: 920,4356.

Preparación del Ejemplo 5264 (no de acuerdo con la invención)

El Ejemplo 5264 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,82 min; IEN-EM(=) m/z 964,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,94 min; IEN-EM(+) m/z 964,6 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 963,9551 Encontrado: 963,9530.

Preparación del Ejemplo 5265

El Ejemplo 5265 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,631 min; IEN-EM(-) m/z 920,30 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,126 min; IEN-EM(+) m/z 922,35 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 6118

El Ejemplo 6118 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z 965,3 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,16 min; IEN-EM(+) m/z 965,65 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 965,4694 Encontrado: 965,4676.

Preparación del Ejemplo 6119

El Ejemplo 6119 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,27 min; IEN-EM(+) m/z 938,75 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,79 min; IEN-EM(+) m/z 939 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 938,446 Encontrado: 938,444.

Preparación del Ejemplo 6128

El Ejemplo 6128 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,43 min; IEN-EM(+) m/z 956,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,89 min; IEN-EM(+) m/z 956,0 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 955,4563 Encontrado: 955,4553.

Preparación del Ejemplo 6134

Ejemplo 6134

El Ejemplo 6134 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,22 min; IEN-EM(-) m/z 984,4 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,30 min; IEN-E^m(-) m/z 984,6 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 985,4487 Encontrado: 985,4464.

Preparación del Ejemplo 6135

El Ejemplo 6135 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con ácido difluoroacético al 0,1 %; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,18 min; IEN-EM(+) m/z 954,2 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,27 min; IEN-EM(+) m/z 953,5 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 952,948 Encontrado: 952,9465.

Preparación del Ejemplo 6136

El Ejemplo 6136 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEm fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,30 min; IEN-EM(+) m/z 952,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,90 min; IEN-EM(+) m/z 952,7 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 952,456 Encontrado: 952,4533.

Preparación del Ejemplo 6137

El Ejemplo 6137 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,31 min; IEN-EM(+) m/z 945,95 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 945,4482 Encontrado: 945,4472.

Preparación del Ejemplo 6140

El Ejemplo 6140 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,36 min; IEN-EM(+) m/z 896,4 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,56 min; IEN-EM(+) m/z 896,4 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 895,4402 Encontrado: 895,4393.

Preparación del Ejemplo 6141

El Ejemplo 6141 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEm fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,44 min; IEN-EM(+) m/z 978,5 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,94 min; IEN-EM(+) m/z 978,4 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 977,9615 Encontrado: 977,9603.

Preparación del Ejemplo 6146

El Ejemplo 6146 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z 952,4 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,07 min; IEN-EM(+) m/z 952,4 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 951,964 Encontrado: 951,9612.

Preparación del Ejemplo 6156

El Ejemplo 6156 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEm fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,46 min; IEN-EM(+) m/z 992,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 992,0 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 991,5033 Encontrado: 991,5002.

Preparación del Ejemplo 6158

Ejemplo 6158

El Ejemplo 6158 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,30 min; IEN-EM(+) m/z 957,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,43 min; IEN-EM(+) m/z 956,9 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 956,446 Encontrado: 956,4428.

Preparación del Ejemplo 6162

El Ejemplo 6162 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,21 min; IEN-EM(+) m/z 999,7 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,68 min; IEN-EM(+) m/z 999,6 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 999,4826 Encontrado: 999,4816.

Preparación del Ejemplo 6168

El Ejemplo 6168 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 150 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z 920,65 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z 920,65 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 920,4536 Encontrado: 920,4506.

Preparación del Ejemplo 6170

El Ejemplo 6170 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,55 min; IEN-EM(+) m/z 924,3 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,87 min; IEN-EM(+) m/z 924,3 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 922,9794 Encontrado: 922,9764.

Preparación del Ejemplo 6172

El Ejemplo 6172 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEm fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,21 min; IEN-EM(+) m/z 960,7 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,79 min; IEN-EM(+) m/z 960,9 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 960,4353 Encontrado: 960,4323.

Preparación del Ejemplo 6176

El Ejemplo 6176 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,47 min; IEN-EM(+) m/z 971,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,91 min; IEN-EM(+) m/z 970,9 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 6180

El Ejemplo 6180 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,50 min; IEN-EM(-) m/z 907,7 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,71 min; IEN-EM(+) m/z 910,3 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 908,9582 Encontrado: 908,9577.

Preparación del Ejemplo 6183

El Ejemplo 6183 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con ácido difluoroacético al 0,1 %; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 50 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,24 min; IEN-EM(+) m/z 957,8 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,36 min; IEN-EM(+) m/z 957,6 (m 2H).

Preparación del Ejemplo 6184

El Ejemplo 6184 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,25 min; IEN-EM(-) m/z 958,8 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,62 min; IEN-EM(+) m/z 960,5 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 959,4694 Encontrado: 959,4692.

Preparación del Ejemplo 6185

El Ejemplo 6185 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 92 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,38 min; IEN-EM(-) m/z 976,9 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,09 min; IEN-EM(+) m/z 977,6 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 977,4694 Encontrado: 977,4692.

Preparación del Ejemplo 6189

El Ejemplo 6189 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 37,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,18 min; IEN-EM(+) m/z 960,5 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,33 min; IEN-EM(+) m/z 960,7 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 959,9433 Encontrado: 959,9404.

Preparación del Ejemplo 6201

El Ejemplo 6201 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,49 min; IEN-EM(+) m/z 951,6 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,06 min; IEN-EM(+) m/z 951,6 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 6202

El Ejemplo 6202 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,27 min; IEN-EM(+) m/z 972,3 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,44 min; IEN-EM(+) m/z 972,1 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 971,4569 Encontrado: 971,4558.

Preparación del Ejemplo 6203

El Ejemplo 6203 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,39 min; IEN-EM(-) m/z 929,0 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,51 min; IEN-EM(+) m/z 931,1 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 929,9635 Encontrado: 929,9623.

Preparación del Ejemplo 6204

El Ejemplo 6204 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-50% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,43 min; IEN-EM(+) m/z 991,5 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 991,5 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 991,0113 Encontrado: 991,0095.

Preparación del Ejemplo 6207

El Ejemplo 6207 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 908,9582 Encontrado: 908,9577.

Preparación del Ejemplo 6209

El Ejemplo 6209 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEm fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,28 min; IEN-EM(+) m/z 992,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,69 min; IEN-EM(+) m/z 993,0 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 992,4747 Encontrado: 992,4713.

Preparación del Ejemplo 6213

El Ejemplo 6213 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,32 min; IEN-EM(-) m/z 959,5 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,51 min; IEN-E^m(-) m/z 959,8 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 960,4591 Encontrado: 960,4585.

Preparación del Ejemplo 6216

El Ejemplo 6216 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z 945,4 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z 945,6 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 945,4482 Encontrado: 945,4472.

Preparación del Ejemplo 6224

El Ejemplo 6224 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con ácido difluoroacético al 0,1 %; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,29 min; IEN-EM(+) m/z 1013,45 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 0,42 min; IEN-EM(+) m/z 1013,7 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 6228

El Ejemplo 6228 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45% durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,34 min; IEN-EM(+) m/z 992,6 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,85 min; IEN-EM(+) m/z 992,7 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 992,4622 Encontrado: 992,4599.

Preparación del Ejemplo 6236

El Ejemplo 6236 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,42 min; IEN-EM(+) m/z 962,4 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,92 min; IEN-EM(+) m/z 964,5 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 963,964 Encontrado: 963,9611.

Preparación del Ejemplo 6244

El Ejemplo 6244 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLE^mfue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,35 min; IEN-EM(+) m/z 957,6 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,82 min; IEN-EM(+) m/z 957,8 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 957,4356 Encontrado: 957,4328.

Preparación del Ejemplo 6247

El Ejemplo 6247 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,34 min; IEN-EM(+) m/z 943,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,89 min; IEN-EM(+) m/z 942,9 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 942,9461 Encontrado: 942,9426.

Preparación del Ejemplo 6249

Ejemplo 6249

El Ejemplo 6249 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,36 min; IEN-EM(+) m/z 943,4 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,82 min; IEN-EM(+) m/z 943,4 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 942,9405 Encontrado: 942,9378.

Preparación del Ejemplo 6250

El Ejemplo 6250 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEm fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,24 min; IEN-EM(+) m/z 946,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,61 min; IEN-EM(+) m/z 946,1 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 945,9402 Encontrado: 945,9386.

Preparación del Ejemplo 6258

El Ejemplo 6258 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 93 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,44 min; IEN-EM(+) m/z 922,8 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z 923,1 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 922,9556 Encontrado: 922,9537.

Preparación del Ejemplo 6262

Ejemplo 6262

El Ejemplo 6262 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,47 min; IEN-EM(+) m/z 928,7 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(+) m/z 928,7 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 928,4511 Encontrado: 928,4479.

Preparación del Ejemplo 6266

El Ejemplo 6266 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,49 min; IEN-EM(+) m/z 952,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,09 min; IEN-EM(+) m/z 952,7 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 952,456 Encontrado: 952,4541.

Preparación del Ejemplo 6267

El Ejemplo 6267 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40% durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEm fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,26 min; IEN-EM(+) m/z 992,7 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,75 min; IEN-EM(+) m/z 992,7 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 6269

El Ejemplo 6269 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,19 min; IEN-EM(+) m/z 972,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,32 min; IEN-EM(+) m/z 972,7 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 971,9433 Encontrado: 971,9421.

Preparación del Ejemplo 6272

El Ejemplo 6272 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,47 min; IEN-EM(+) m/z 896,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,63 min; IEN-EM(+) m/z 896,1 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 895,4765 Encontrado: 895,4740.

Preparación del Ejemplo 6274

El Ejemplo 6274 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,29 min; IEN-EM(+) m/z 925,5 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,68 min; IEN-EM(+) m/z 925,9 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 925,4269 Encontrado: 925,4266.

Preparación del Ejemplo 6276

El Ejemplo 6276 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLE^mfue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,29 min; IEN-EM(-) m/z 970,9 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,55 min; IEN-EM(+) m/z 972,5 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 971,4456 Encontrado: 971,4445.

Preparación del Ejemplo 6283

El Ejemplo 6283 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,22 min; IEN-EM(+) m/z 936,1 (M+2H)

Condición de análisis C: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(+) m/z 935,9 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 935,9873 Encontrado: 935,9857.

Preparación del Ejemplo 6284

El Ejemplo 6284 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-100 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLE^mfue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,55 min; IEN-EM(+) m/z 958,3 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,22 min; IEN-EM(+) m/z 958,2 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 957,9822 Encontrado: 957,9801.

Preparación del Ejemplo 6288

El Ejemplo 6288 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100%.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,24 min; IEN-EM(+) m/z 985,2 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,80 min; IEN-EM(+) m/z 985,1 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 984,9567 Encontrado: 984,9557.

Preparación del Ejemplo 6289

El Ejemplo 6289 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLE^mfue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,24 min; IEN-EM(+) m/z 953,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,57 min; IEN-EM(+) m/z 953,9 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 953,4274 Encontrado: 953,4251.

Preparación del Ejemplo 6293

El Ejemplo 6293 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,30 min; IEN-EM(+) m/z 971,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(+) m/z 971,0 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 970,4672 Encontrado: 970,4643.

Preparación del Ejemplo 6296

El Ejemplo 6296 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,46 min; IEN-EM(+) m/z 958,5 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,01 min; IEN-EM(+) m/z 958,5 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 958,0004 Encontrado: 957,9994.

Preparación del Ejemplo 6297

El Ejemplo 6297 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEm fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,32 min; IEN-EM(+) m/z 978,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z 978,9 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 978,4591 Encontrado: 978,4570.

Preparación del Ejemplo 6301

Ejemplo 6301

El Ejemplo 6301 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,34 min; IEN-EM(+) m/z 938,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,84 min; IEN-EM(+) m/z 938,8 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 938,446 Encontrado: 938,4450.

Preparación del Ejemplo 6303

Ejemplo 6303

El Ejemplo 6303 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,34 min; IEN-EM(+) m/z 930,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,85 min; IEN-EM(+) m/z 930,9 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 930,4667 Encontrado: 930,4644.

Preparación del Ejemplo 6309

Ejemplo 6309

El Ejemplo 6309 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,39 min; IEN-EM(+) m/z 924,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,91 min; IEN-EM(+) m/z 924,1 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 923,9509 Encontrado: 923,9473.

Preparación del Ejemplo 6310

Ejemplo 6310

El Ejemplo 6310 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,54 min; IEN-EM(+) m/z 916,7 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,82 min; IEN-EM(+) m/z 916,5 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 915,474 Encontrado: 915,4721.

Preparación del Ejemplo 6324

El Ejemplo 6324 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,24 min; IEN-EM(+) m/z 1000,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,69 min; IEN-EM(+) m/z 999,2 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 6331

El Ejemplo 6331 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,89 min; IEN-EM(+) m/z 971,2 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 970,9592 Encontrado: 970,9561.

Preparación del Ejemplo 6334

El Ejemplo 6334 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,32 min; IEN-EM(+) m/z 910,2 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z 910,3 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 909,9296 Encontrado: 909,9284.

Preparación del Ejemplo 6335

El Ejemplo 6335 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-45% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEm fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,19 min; IEN-EM(+) m/z 979,4 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,50 min; IEN-EM(+) m/z 979,4 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 6338

El Ejemplo 6338 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,33 min; IEN-EM(+) m/z 992,5 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z 992,5 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 991,9883 Encontrado: 991,9861.

Preparación del Ejemplo 6344

El Ejemplo 6344 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,47 min; IEN-EM(+) m/z 952,7 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,37 min; IEN-EM(+) m/z 952,6 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 951,964 Encontrado: 951,9612.

Preparación del Ejemplo 6347

Ejemplo 6347

El Ejemplo 6347 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLE^mfue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,29 min; IEN-EM(+) m/z 950,4 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,66 min; IEN-EM(+) m/z 950,4 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 949,9302 Encontrado: 949,9288.

Preparación del Ejemplo 6350

El Ejemplo 6350 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z 965,4 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z 965,4 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 964,9956 Encontrado: 964,9953.

Preparación del Ejemplo 6361

El Ejemplo 6361 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLE^mfue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,33 min; IEN-EM(+) m/z 985,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z 985,9 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 985,4725 Encontrado: 985,4694.

Preparación del Ejemplo 6363

El Ejemplo 6363 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,36 min; IEN-EM(+) m/z 916,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,88 min; IEN-EM(+) m/z 916,9 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 916,4454 Encontrado: 916,4428.

Preparación del Ejemplo 6365

El Ejemplo 6365 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,20 min; IEN-EM(-) m/z 963,8 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,32 min; IEN-EM(+) m/z 966,6 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 965,9354 Encontrado: 965,9352.

Preparación del Ejemplo 6369

El Ejemplo 6369 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,34 min; IEN-EM(+) m/z 963,4 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,79 min; IEN-EM(+) m/z 963,4 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 962,98 Encontrado: 962,9762.

Preparación del Ejemplo 6370

El Ejemplo 6370 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45% durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,35 min; IEN-EM(+) m/z 984,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,85 min; IEN-EM(+) m/z 984,0 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 6372

El ejemplo 6372 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z 923,8 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z 923,7 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 922,4818 Encontrado: 922,4799.

Preparación del Ejemplo 6380

El Ejemplo 6380 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/Em preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLE^mfue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,33 min; IEN-EM(+) m/z 957,3 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,86 min; IEN-EM(+) m/z 957,3 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 956,446 Encontrado: 956,4431.

Preparación del Ejemplo 6383

El Ejemplo 6383 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,34 min; IEN-EM(+) m/z 903,2 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,55 min; IEN-EM(+) m/z 903,4 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 901,956 Encontrado: 901,9538.

Preparación del Ejemplo 6384

El Ejemplo 6384 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A". El material bruto se purificó a través de CL/E^mpreparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 27,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,23 min; IEN-EM(+) m/z 954,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 954,0 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 952,456 Encontrado: 952,4545.

Preparación del Ejemplo 6389

El Ejemplo 6389 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,49 min; IEN-EM(+) m/z 936,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,84 min; IEN-E^m(-) m/z 934,9 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 936,9769 Encontrado: 936,9742.

Preparación del Ejemplo 6390

El Ejemplo 6390 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 969,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,84 min; IEN-EM(+) m/z 969,2 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 968,9744 Encontrado: 968,9721.

Preparación del Ejemplo 6391

El Ejemplo 6391 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,30 min; IEN-EM(+) m/z 1005,4 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,54 min; IEN-E^m(-) m/z 1003,5 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 1005,4882 Encontrado: 1005,4868.

Preparación del Ejemplo 6392

Ejemplo 6392

El Ejemplo 6392 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,481 min; IEN-EM(+) m/z 969,25 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,004 min; IEN-EM(+) m/z 969,80 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 968,9744 Encontrado: 968,9728.

Preparación del Ejemplo 6393

El Ejemplo 6393 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,270 min; IEN-EM(+) m/z 953,40 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,685 min; IEN-E^m(-) m/z 951,55 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 953,4274 Encontrado: 953,425.

Preparación del Ejemplo 6394

El Ejemplo 6394 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 33,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,227 min; IEN-EM(-) m/z 976,85 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 0,366 min; IEN-E^m(-) m/z 976,75 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 978,9329 Encontrado: 978,9314.

Preparación del Ejemplo 6395

El Ejemplo 6395 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 93 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z 978,3 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,09 min; IEN-EM(+) m/z 978,2 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 977,4896 Encontrado: 977,4877.

Preparación del Ejemplo 6396

Ejemplo 6396

El Ejemplo 6396 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,54 min; IEN-EM(+) m/z 960,9 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,96 min; IEN-EM(+) m/z 961,7 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 960,9769 Encontrado: 960,9741.

Preparación del Ejemplo 6397

El Ejemplo 6397 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,47 min; IEN-EM(+) m/z 972,2 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,80 min; IEN-EM(+) m/z 972,2 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 972,0035 Encontrado: 972,0013.

Preparación del Ejemplo 6398

El Ejemplo 6398 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,16 min; IEN-EM(-) m/z 943,4 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,43 min; IEN-EM(+) m/z 945,6 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 945,4482 Encontrado: 945,4459.

Preparación del Ejemplo 6399

El Ejemplo 6399 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z 961,3 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,92 min; IEN-EM(+) m/z 961,6 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 960,9769 Encontrado: 960,9745.

Preparación del Ejemplo 6400

El Ejemplo 6400 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,34 min; IEN-EM(+) m/z 931,6 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,72 min; IEN-Em (-) m/z 928,9 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 930,9587 Encontrado: 930,9564.

Preparación del Ejemplo 6401

El Ejemplo 6401 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,26 min; IEN-EM(-) m/z 993,9 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,51 min; IEN-EM(+) m/z 996,5 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 6402

El Ejemplo 6402 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z 962,3 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(-) m/z 960,7 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 962,4824 Encontrado: 962,4792.

Preparación del Ejemplo 6403

El Ejemplo 6403 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,92 min; IEN-EM(+) m/z 965,0 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 965,0138 Encontrado: 965,0104.

Preparación del Ejemplo 6404

El Ejemplo 6404 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 979,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,87 min; IEN-E^m(-) m/z 977,3 (M-2H).

Preparación del Ejemplo 6405

El Ejemplo 6405 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,47 min; IEN-EM(+) m/z 966,2 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,87 min; IEN-EM(+) m/z 965,4 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 965,4933 Encontrado: 965,4899.

Preparación del Ejemplo 6406

El Ejemplo 6406 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,32 min; IEN-EM(+) m/z 965,6 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,70 min; IEN-EM(+) m/z 965,6 (^m+2^h)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 965,4933 Encontrado: 965,4894.

Preparación del Ejemplo 6407

El Ejemplo 6407 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,16 min; IEN-EM(+) m/z 953,1 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,46 min; IEN-E^m(-) m/z 951,1 (M-2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 952,9354 Encontrado: 952,9326.

Preparación del Ejemplo 6408

Ejemplo 6408

El Ejemplo 6408 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,22 min; IEN-EM(+) m/z 952,8 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,53 min; IEN-EM(+) m/z 953,1 (m 2H).

Preparación del Ejemplo 6409

El Ejemplo 6409 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,23 min; IEN-EM(+) m/z 945,7 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,57 min; IEN-EM(+) m/z 945,2 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 944,9562 Encontrado: 944,9537.

Preparación del Ejemplo 6410

El Ejemplo 6410 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,16 min; IEN-EM(+) m/z 953,0 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,41 min; IEN-EM(+) m/z 953,2 (m 2h )

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 952,9354 Encontrado: 952,9332.

Preparación del Ejemplo 6411

El Ejemplo 6411 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,15 min; IEN-EM(-) m/z 977,0 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,36 min; IEN-EM(+) m/z 978,7 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 978,4409 Encontrado: 978,4388.

Preparación del Ejemplo 6412

El Ejemplo 6412 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,17 min; IEN-EM(-) m/z 976,5 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,42 min; IEN-EM(+) m/z 978,3 (M+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 977,9489 Encontrado: 977,9467.

Preparación del Ejemplo 6415

El Ejemplo 6415 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z 975,8 (M+2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(+) m/z 977,9 (^m+2H)

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 976,9774 Encontrado: 976,9735.

Preparación del Ejemplo 6416

El Ejemplo 6416 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A", en donde el "Procedimiento de acoplamiento único" y el "Procedimiento de acoplamiento doble" del "Método sinfónico A" se modificaron para usar anhídrido acético (1,0 ml) DIPEA en DMF (0,4 M, 1,0 ml) en lugar de anhídrido acético puro (2,0 ml). El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLe M fue del 94 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(-) m/z 977,9 (M-2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z 977,9 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 7067

El Ejemplo 7013 (3,0 mg, 1,631 umol) se disolvió en metanol (3 ml). La mezcla se trató con Pd/C (1 mg), se roció en una atmósfera de hidrógeno (1 atm, globo) y después se agitó durante 24 h. La CLEM mostró que se consumió el material de partida insaturado. La mezcla se filtró para retirar Pd/C. El disolvente se retiró para dar el Ejemplo 7067 (1,4 mg).

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,92 min; IEN-EM(+) m/z = 921,5 (M 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 920,9965, Encontrado 920,9965 (M 2H).

Los Ejemplos 7068 al 7154 se prepararon siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 5001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método de preludio A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento único", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento doble", "Método de preludio A: Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo". El "Método de desprotección global A" y el "Método de ciclación A" usado para la preparación de los Ejemplos 7068 a 7154 se modificaron como se describe a continuación. Método de desprotección global A: El procedimiento del "Método de desprotección global A" describe un experimento realizado en una escala de 0,100 mmol, en donde la escala se determina mediante la cantidad de enlazador Rink unido a la resina. Se preparó una "solución de desprotección" combinando en un frasco de vidrio de 40 ml de ácido trifluoroacético (22 ml), fenol (1,325 g), agua (1,25 ml) y triisopropilsilano (0,5 ml). La resina se retiró del recipiente de reacción y se transfirió a un vial de vidrio de 4 ml. Al vial se le añadió la "solución de desprotección" (2,0 ml). La mezcla se mezcló en un agitador orbital (175 rpm durante 2 h). La mezcla se filtró a través de un embudo, los sólidos se lavaron con una "solución de desprotección" adicional (1,0 ml) y se recogieron en un vial con tapa de rosca de 40 ml. A los filtrados combinados se les añadió Et2O (15 ml). La mezcla se mezcló vigorosamente sobre la cual precipitó una cantidad significativa de un sólido de color blanco. La mezcla se centrifugó durante 3 minutos a 2000 rpm, la solución se decantó de los sólidos y se desechó. El proceso se repitió x3, después, se dejaron reposar los sólidos en el banco y se secaron al aire durante 1-2 h antes de continuar proporcionando el péptido en bruto en forma de un sólido de color blanquecino. Método de ciclación A: El procedimiento del "Método de ciclación A" describe un experimento realizado en una escala de 0,100 mmol. Los sólidos peptídicos en bruto se disolvieron en MeCN:NH4OAc 0,1 M ac. (15 ml:15 ml) y después, la solución se ajustó cuidadosamente a pH = 9,0 usando NaOH ac. (1,0 M). Los viales se taparon y después la solución se mezcló a 175 rpm en un agitador orbital durante la noche (~18 h). La solución de reacción se concentró y después el residuo se disolvió en MeOH. Esta solución se sometió a purificación HPLC de fase inversa para proporcionar el péptido cíclico deseado.

Dos de las cuatro condiciones analíticas de CL/EM se usaron para determinar la pureza final.

Condición de análisis A: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partículas de 1,7 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Temperatura: 50 °C; Gradiente: B al 0%, B al 0-100% durante 3 minutos, después una parada de 0,5 minutos a B al 100 %; Flujo: 1 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Condición de análisis B: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partículas de 1,7 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol:agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol:agua con acetato de amonio 10 mM; Temperatura: 50 °C; Gradiente: B al 0 %, B al 0-100 % durante 3 minutos, después una parada de 0,5 minutos a B al 100 %; Flujo: 0,5 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Condición de análisis C1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partículas de 1,7 pm; Fase móvil A: acetonitrilo:agua 5:95 con TFA al 0,05 %; Fase móvil B: acetonitrilo:agua 95:5 con TFA al 0,05 %; Temperatura: 50 °C; Gradiente: B al 0%, B al 0-100% durante 3 minutos, después, una parada de 0,5 minutos a B al 100%; Flujo: 0,5 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Condición de análisis D1: Columna: Waters BEH C18, 2,0 x 50 mm, partículas de 1,7 pm; Fase móvil A: 5:95 metanol:agua con TFA al 0,05 %; Fase móvil B: 95:5 metanol:agua con TFA al 0,05 %; Temperatura: 50 °C; Gradiente: B al 0%, B al 0-100% durante 3 minutos, después, una parada de 0,5 minutos a B al 100%; Flujo: 0,5 ml/min; Detección: UV a 220 nm.

Preparación del Ejemplo 7068

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 5 |jm, 19 x 200 mm, Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 1,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,84 min; IEN-EM(+) m/z = 940,6 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,06 min; IEN-EM(+) m/z = 940,5 (^m+ 2H).

Preparación del Ejemplo 7069

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,85 min; IEN-EM(+) m/z = 957,5 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,07 min; IEN-EM(+) m/z = 957,5 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 955,9383, Encontrado 955,9382 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7070

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,86 min; IEN-EM(+) m/z = 929,9 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,06 min; IEN-EM(+) m/z = 929,7 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 928,9851, Encontrado 928,9842 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7071

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,91 min; IEN-EM(+) m/z = 955,4 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,02 min; IEN-EM(+) m/z = 955,2 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 954,4905, Encontrado 954,4909 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7072

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,66 min; IEN-EM(+) m/z = 978,2 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,80 min; IEN-EM(+) m/z = 978,3 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 977,4933, Encontrado 9774928 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7073

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,50 min; IEN-EM(+) m/z = 937,4 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,59 min; IEN-EM(+) m/z = 937,7 (m 2H).

Preparación del Ejemplo 7075

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,50 min; IEN-EM(+) m/z = 963,2 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,59 min; IEN-EM(+) m/z = 963,6 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 962,4880, Encontrado 962,4865 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7077

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,43 min; IEN-EM(+) m/z = 975,2 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,58 min; IEN-EM(+) m/z = 975,1 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 974,4754, Encontrado 974,4743 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7078

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(+) m/z = 968,6 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z = 968,6 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 967,9596, Encontrado 967,9601 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7079

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,65 min; IEN-EM(+) m/z = 979,6 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,89 min; IEN-EM(+) m/z = 979,4 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 978,9583, Encontrado 978,9560 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7080

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,86 min; IEN-EM(+) m/z = 973,1 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,03 min; IEN-EM(+) m/z = 973,6 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 972,4425, Encontrado 972,4426 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7081

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,59 min; IEN-EM(+) m/z = 971,8 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,82 min; IEN-EM(+) m/z = 971,6 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 970,9731, Encontrado 970,9718 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7082

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,75 min; IEN-EM(+) m/z = 965,2 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z = 965,5 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 964,4572, Encontrado 964,4570 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7083

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,89 min; IEN-EM(+) m/z = 951,5 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,00 min; IEN-EM(+) m/z = 951,3 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 950,9826, Encontrado 950,9820 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7084

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 5 |jm, 19 x 200 mm, Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,79 min; IEN-EM(+) m/z = 923,6 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,92 min; IEN-EM(+) m/z = 923,6 (^m+ 2^h)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 922,9695, Encontrado 922,9695 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7085

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(+) m/z = 977,6 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z = 977,8 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 976,9831, Encontrado 976,9844 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7086

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,74 min; IEN-EM(+) m/z = 971,0 (M 2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,89 min; IEN-EM(+) m/z = 971,1 (^m+ 2H).

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 970,4672, Encontrado 970,4671 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7087

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,64 min; IEN-EM(+) m/z = 957,6 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z = 957,0 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 955,9722, Encontrado 955,9700 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7088

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 33,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(+) m/z = 931,3 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,01 min; IEN-EM(+) m/z = 931,8 (^m+ 2H).

Preparación del Ejemplo 7089

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 44,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,50 min; IEN-EM(+) m/z = 930,7 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z = 930,6 (^m+ 2^h)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 929,9929, Encontrado 929,9914 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7090

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(+) m/z = 949,9 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,81 min; IEN-EM(+) m/z = 949,6 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 948,9825, Encontrado 948,9801 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7091

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 41,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,59 min; IEN-EM(+) m/z = 931,1 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,81 min; IEN-EM(+) m/z = 931,4 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 930,4667, Encontrado 930,4647 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7092

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 49,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,47 min; IEN-EM(+) m/z = 924,1 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z = 924,2 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 923,4771, Encontrado 923,4752 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7093

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,55 min; IEN-EM(+) m/z = 956,6 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,91 min; IEN-EM(+) m/z = 956,2 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 955,4983, Encontrado 955,4978 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7094

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z = 956,6 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z = 956,7(M 2H).

Preparación del Ejemplo 7095

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 35,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis C1: Tiempo de retención = 1,31 min; IEN-EM(+) m/z = 948,7 (M 2H)

Condición de análisis D1: Tiempo de retención = 3,48 min; IEN-EM(+) m/z = 948,8 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 948,5087, Encontrado 948,5072 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7096

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,59 min; IEN-EM(+) m/z = 931,5 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,03 min; IEN-EM(+) m/z = 931,1 (^m+ 2H).

Preparación del Ejemplo 7097

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-100% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,64 min; IEN-EM(+) m/z = 964,3 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,96 min; IEN-EM(+) m/z = 964,2 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 963,4538, Encontrado 963,4514 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7098

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 31,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z = 957,6 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,79 min; IEN-EM(+) m/z = 957,0 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 956,4642, Encontrado 956,4646 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7099

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 60-100% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,65 min; IEN-EM(+) m/z = 964,5 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z = 964,5 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 963,9458, Encontrado 963,9441 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7100

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 31,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(+) m/z = 938,7 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,99 min; IEN-EM(+) m/z = 938,9 (^m+ 2^h)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 937,9483, Encontrado 937,9466 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7101

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 32,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,66 min; IEN-EM(+) m/z = 939,1 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z = 939,1 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 938,4404, Encontrado 938,4387 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7102

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(+) m/z = 938,9 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,84 min; IEN-EM(+) m/z = 938,6 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 937,9483, Encontrado 937,9471 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7103

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis C1: Tiempo de retención = 1,28 min; IEN-EM(+) m/z = 923,4 (M 2H)

Condición de análisis D1: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z = 923,3 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 923,0033, Encontrado 923,0011 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7104

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-100% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 40,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(+) m/z = 957,0 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,91 min; IEN-EM(+) m/z = 957,1 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 956,4642, Encontrado 956,4623 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7105

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,55 min; IEN-EM(+) m/z = 931,6 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,87 min; IEN-EM(+) m/z = 931,8 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 930,9587, Encontrado 930,9573 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7106

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 33,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(+) m/z = 964,0 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,99 min; IEN-EM(+) m/z = 964,2 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 963,4720, Encontrado 963,4704 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7107

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 36,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z = 956,5 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(+) m/z = 956,6 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 955,9903, Encontrado 955,9890 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7108

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 41,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,64 min; IEN-EM(+) m/z = 938,2 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,94 min; IEN-EM(+) m/z = 938,5 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 937,4745, Encontrado 937,4723 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7109

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 36,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,59 min; IEN-EM(+) m/z = 964,0 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,83 min; IEN-EM(+) m/z = 964,1 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 963,4538, Encontrado 963,4521 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7110

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 41,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z = 964,6 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(+) m/z = 964,6 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 963,9458, Encontrado 963,9432 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7111

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se volvieron a purificar mediante CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z = 957,3 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,80 min; IEN-EM(+) m/z = 957,0 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 956,4642, Encontrado 956,4619 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7112

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 43,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,47 min; IEN-EM(+) m/z = 931,6 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,80 min; IEN-EM(+) m/z = 931,5 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 930,9587, Encontrado 930,9565 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7113

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 34,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(+) m/z = 939,0 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,91 min; IEN-EM(+) m/z = 939,1 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 938,4404, Encontrado 938,4382 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7114

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z = 939,7 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,48 min; IEN-EM(+) m/z = 939,7 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 938,4404, Encontrado 938,4375 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7115

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,53 min; IEN-EM(+) m/z = 971,1 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,57 min; IEN-EM(+) m/z = 971,0 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 970,4616, Encontrado 970,4587 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7116 (no de acuerdo con la invención)

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,55 min; IEN-EM(+) m/z = 938,8 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,54 min; IEN-EM(+) m/z = 938,5 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 937,9665, Encontrado 937,9649 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7117

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,41 min; IEN-EM(+) m/z = 945,7 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,66 min; IEN-EM(+) m/z = 945,8 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 945,4300, Encontrado 945,4282 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7118

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 35,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,69 min; IEN-EM(+) m/z = 963,4 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,25 min; IEN-EM(+) m/z = 963,4 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 962,9800, Encontrado 962,9780 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7119

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 52,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z = 963,9 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,31 min; IEN-EM(+) m/z = 964,0 (M 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 963,4720, Encontrado 963,4699 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7120

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 48,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z = 956,4 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,03 min; IEN-EM(+) m/z = 956,3 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 955,9903, Encontrado 955,9896 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7121

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,66 min; IEN-EM(+) m/z = 937,9 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,26 min; IEN-EM(+) m/z = 937,9 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 937,4745, Encontrado 937,4724 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7122

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 46,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,71 min; IEN-EM(+) m/z = 938,4 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,35 min; IEN-EM(+) m/z = 938,4 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 937,4745, Encontrado 937,4724 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7123

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,44 min; IEN-EM(+) m/z = 930,9 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,01 min; IEN-EM(+) m/z = 931,0 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 930,4849, Encontrado 930,4835 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7124

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z = 971,4 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z = 971,4 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 970,9354, Encontrado 970,9357 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7125

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z = 971,9 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z = 971,9 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 971,4274, Encontrado 971,4269 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7126 (no de acuerdo con la invención)

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,35 min; IEN-EM(+) m/z = 964,7 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,85 min; IEN-EM(+) m/z = 964,9 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 963,4720, Encontrado 963,4704 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7127

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 37,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z = 945,4 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z = 945,4 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 944,9562, Encontrado 944,9556 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7128

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-100% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,74 min; IEN-EM(+) m/z = 963,4 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,29 min; IEN-EM(+) m/z = 963,4 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 962,9800, Encontrado 962,9778 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7129

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 37,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,65 min; IEN-EM(+) m/z = 938,5 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z = 938,4 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 937,9665, Encontrado 937,9647 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7130

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 44,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,42 min; IEN-EM(+) m/z = 946,1 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,64 min; IEN-EM(+) m/z = 946,0 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 945,4482, Encontrado 945,4475 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7131

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,40 min; IEN-EM(+) m/z = 971,3 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,69 min; IEN-EM(+) m/z = 971,2 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 970,9536, Encontrado 970,9536 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7132

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 32,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,28 min; IEN-EM(+) m/z = 964,3 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,58 min; IEN-EM(+) m/z = 964,2 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 963,9458, Encontrado 963,9452 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7133

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z = 946,2 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,72 min; IEN-EM(+) m/z = 946,2 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 945,9220, Encontrado 945,9208 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7134

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 99,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,59 min; IEN-EM(+) m/z = 931,8 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,59 min; IEN-EM(+) m/z = 931,2 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 930,4849, Encontrado 930,4832 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7135

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 32,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,94 min; IEN-EM(+) m/z = 948,8 (M 2H), 957,5 (M H NH4) Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,90 min; IEN-EM(+) m/z = 949,8 (M 2^h), 957,5 (M H NH4) IEN-HRMS(+) m/z Calculado 948,4667, Encontrado 948,4650 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7136

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 41,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,84 min; IEN-EM(+) m/z = 924,0 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,39 min; IEN-EM(+) m/z = 924,0 (M 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 923,4533, Encontrado 923,4520 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7137

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,84 min; IEN-EM(+) m/z = 936,0 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,36 min; IEN-EM(+) m/z = 936,0 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 935,4407, Encontrado 935,4402 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7138

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,89 min; IEN-EM(+) m/z = 911,0 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,40 min; IEN-EM(+) m/z = 911,0 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 910,4272, Encontrado 910,4266 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7139

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 33,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(+) m/z = 943,0 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,90 min; IEN-EM(+) m/z = 943,7 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 942,4485, Encontrado 942,4482 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7140

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,33 min; IEN-EM(+) m/z = 968,0 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,70 min; IEN-EM(+) m/z = 968,0 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 967,4431, Encontrado 967,4406 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7141

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(+) m/z = 978,7 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,27 min; IEN-EM(+) m/z = 978,6 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 977,4694, Encontrado 977,4683 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7142

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,71 min; IEN-EM(+) m/z = 952,8 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,31 min; IEN-EM(+) m/z = 952,9 (m 2H).

Preparación del Ejemplo 7143

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,47 min; IEN-EM(+) m/z = 965,2 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z = 965,8 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 964,4434, Encontrado 964,4420 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7144

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z = 940,8 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,22 min; IEN-EM(+) m/z = 940,7 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 939,4300, Encontrado 939,4296 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7145

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(+) m/z = 971,4 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,22 min; IEN-EM(+) m/z = 971,8 (m 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 971,4513, Encontrado 971,4496 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7146

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,43 min; IEN-EM(+) m/z = 967,7 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(+) m/z = 967,6 (^m+ 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 966,4773, Encontrado 966,4745 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7147

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 36,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,44 min; IEN-EM(+) m/z = 993,7 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,08 min; IEN-EM(+) m/z = 993,6 (M 2H)

IEN-HRMS(+) m/z Calculado 992,4747, Encontrado 992,4711 (M 2H).

Preparación del Ejemplo 7148

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,47 min; IEN-EM(+) m/z = 967,4 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,15 min; IEN-EM(+) m/z = 967,4 (^m+ 2H).

Preparación del Ejemplo 7151

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,69 min; IEN-EM(+) m/z = 951,7 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z = 951,2 (m 2H).

Preparación del Ejemplo 7152

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z = 946,6 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,49 min; IEN-EM(+) m/z = 946,9 (^m+ 2H).

Preparación del Ejemplo 7153

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación.

El rendimiento del producto fue de 6,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,55 min; IEN-EM(+) m/z = 999,5 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,87 min; IEN-EM(+) m/z = 999,8 (m 2H).

Preparación del Ejemplo 7154

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación.

El rendimiento del producto fue de 1,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z = 999,7 (M 2H)

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,03 min; IEN-EM(+) m/z = 999,8 (^m+ 2H).

Procedimientos generales para Método D sinfónico X

Datos analíticos:

Condición de análisis A:

Condición de análisis B:

Procedimientos de acoplamiento general D:

Todas las manipulaciones se realizaron bajo automatización en un sintetizador de péptidos Symphony-X (Protein Technologies). Todos los procedimientos, a menos que se indique lo contrario, se realizaron en un tubo de polipropileno de 10 ml equipado con una frita inferior; en donde la escala de la reacción excedió 0,100 mmol, se usó un tubo de polipropileno de 40 ml equipado con una frita inferior. El tubo se conecta al sintetizador de péptidos Symphony X a través de la parte inferior y la parte superior del tubo. Se pueden añadir DMF y DCM a través de la parte superior del tubo, que bajan los lados del tubo por igual. Los reactivos restantes se añaden a través de la parte superior del tubo y pasan a través de la frita para contactar con la resina. Todas las soluciones se eliminan a través del fondo del tubo. La "agitación periódica" describe un breve pulso de gas N2 a través de la frita inferior; el pulso dura aproximadamente 5 segundos y ocurre cada 30 segundos. Se usaron soluciones de cloruro de cloroacetilo en DMF dentro de las 24 h de preparación. Las soluciones de aminoácidos generalmente no se usaron más de tres semanas después de la preparación. Se usaron soluciones de HATU dentro de los 5 días de preparación. DMF = dimetilformamida; HATU = 3-Óxido hexafluorofosfato de 1-[bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio; DIPEA = diisopropiletilamina; resina Rink: 4-((2,4-dimetoxifenil)(Fmocamino)metil)fenoximetilpoliestireno. resina de Sieber amida: 9-Fmoc-amino-xanten-3-iloxi-metilo, unido al polímero.

Los procedimientos del "Método D Sinfónico X" describen un experimento realizado en una escala de 0,100 mmol. Todos los procedimientos se pueden escalar más allá de la escala de 0,100 mmol ajustando los volúmenes descritos por el múltiplo de la escala. Antes del acoplamiento de aminoácidos, todas las secuencias de síntesis de péptidos comenzaron con un procedimiento de hinchamiento de resina, descrito a continuación como "procedimiento de hinchamiento de resina". El acoplamiento de aminoácidos a un extremo N de amina primaria usó el "Procedimiento de acoplamiento único" que se describe a continuación. El acoplamiento de aminoácidos a un terminal N de amina secundaria usó el "Procedimiento de acoplamiento doble" que se describe a continuación. El acoplamiento del cloruro de cloroacetilo al extremo N del péptido se describe mediante el "Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo" detallado a continuación.

Procedimiento de hinchamiento de resina:

A un recipiente de reacción de polipropileno en fase sólida de 10 ml se le añadió resina (0,100 mmol). La resina se lavó (se hinchó) tres veces como sigue a continuación: se añadió DMF (2,0 ml) al recipiente de reacción, sobre el cual la mezcla se agitó periódicamente durante 10 minutos antes de que el disolvente se drene a través de la frita. Procedimiento de acoplamiento único:

Al recipiente de reacción que contiene resina de la etapa anterior se le añadió piperidina: DMF (20:80 v/v, 2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente seis veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 1,0 ml, 2 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 1,0 ml, 2 equiv.) y finalmente DIPEA (0,4 M en DMF, 1,0 ml, 4 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 15 minutos, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió anhídrido acético (2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 10 minutos, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina resultante se usó directamente en la siguiente etapa.

Procedimiento de acoplamiento único 1h:

Al recipiente de reacción que contiene resina de la etapa anterior se le añadió piperidina: DMF (20:80 v/v, 2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente seis veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 1,0 ml, 2 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 1.0 ml, 2 equiv.) y finalmente DIPEA (0,4 M en DMF, 1,0 ml, 4 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 60 minutos, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió anhídrido acético (2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 10 minutos, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina resultante se usó directamente en la siguiente etapa.

Procedimiento de acoplamiento doble:

Al recipiente de reacción que contiene resina de la etapa anterior se le añadió piperidina: DMF (20:80 v/v, 2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente seis veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 1,0 ml, 2 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 1.0 ml, 2 equiv.) y finalmente DIPEA (0,4 M en DMF, 1,0 ml, 4 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 15 minutos, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó dos veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 1,0 ml, 2 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 1.0 ml, 2 equiv.) y finalmente DIPEA (0,4 M en DMF, 1,0 ml, 4 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 15 minutos, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó dos veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió anhídrido acético (2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 10 minutos, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina resultante se usó directamente en la siguiente etapa.

Procedimiento de acoplamiento doble 6 h:

Al recipiente de reacción que contiene resina de la etapa anterior se le añadió piperidina: DMF (20:80 v/v, 2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió piperidina:DMF (20:80 v/v, 2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 3 minutos y después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente seis veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 1,0 ml, 2 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 1.0 ml, 2 equiv.) y finalmente DIPEA (0,4 M en DMF, 1,0 ml, 4 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 6 h, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó dos veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió el aminoácido (0,2 M en DMF, 1,0 ml, 2 equiv.), después HATU (0,2 M en DMF, 1.0 ml, 2 equiv.) y finalmente DIPEA (0,4 M en DMF, 1,0 ml, 4 equiv.). La mezcla se agitó periódicamente durante 6 h, después la solución de reacción se drenó a través de la frita. La resina se lavó dos veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 30 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. Al recipiente de reacción se le añadió anhídrido acético (2,0 ml). La mezcla se agitó periódicamente durante 10 minutos, después la solución se drenó a través de la frita. La resina se lavó sucesivamente cuatro veces como sigue a continuación: para cada lavado, se añadió DMF (2,0 ml) a través de la parte superior del recipiente y la mezcla resultante se agitó periódicamente durante 90 segundos antes de que la solución se drenara a través de la frita. La resina resultante se usó directamente en la siguiente etapa.

Procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo:

Método de desprotección D:

Todas las manipulaciones se realizaron manualmente a menos que se indique lo contrario. El procedimiento del "Método de desprotección D" describe un experimento realizado en una escala 0,100 mmol. El procedimiento se puede escalar más allá de la escala de 0,100 mmol ajustando los volúmenes descritos por el múltiplo de la escala. Se preparó una "solución de desprotección" combinando en un vial de vidrio de 40 ml ácido trifluoroacético (38 ml), DTT (1 g) y triisopropilsilano (1 ml). La resina se retiró del recipiente de reacción y se transfirió a un vial de vidrio de 4 ml. Al vial se le añadió la "solución de desprotección" (2,0 ml). La mezcla se mezcló vigorosamente en un agitador (1000 rpm durante 15-30 minutos). La mezcla se filtró a través de un filtro de jeringa de 0,2 micrómetros y los sólidos se extrajeron con la "solución de desprotección" (1,0 ml). A un tubo de ensayo de 24 ml cargado con los filtrados combinados se le añadió Et2O (15 ml). La mezcla se mezcló vigorosamente sobre la cual precipitó una cantidad significativa de un sólido de color blanco. La mezcla se centrifugó durante 3 minutos, después la solución se decantó de los sólidos y se desechó. Los sólidos se suspendieron en Et2O (20 ml); después la mezcla se centrifugó durante 3 minutos; y la solución se decantó de los sólidos y se desechó. Por última vez, los sólidos se suspendieron en Et2O (20 ml); la mezcla se centrifugó durante 3 minutos; y la solución se decantó de los sólidos y se desechó para proporcionar el péptido en bruto en forma de un sólido de color blanco a color blanquecino.

Método de ciclación D:

Todas las manipulaciones se realizaron manualmente a menos que se indique lo contrario. El procedimiento del "Método de ciclación D" describe un experimento realizado en una escala de 0,100 mmol. El procedimiento se puede escalar más allá de la escala de 0,100 mmol ajustando los volúmenes descritos por el múltiplo de la escala. Los sólidos peptídicos en bruto se disolvieron en MeCN:NH4OAc 0,1 M ac. (1:1) hasta un volumen total de 18-22 ml, y después, la solución se ajustó cuidadosamente a pH = 8,5-9,0 usando NaOH ac. (1,0 M). Después, se dejó reposar la solución sin agitar durante 12-18 h. La solución de reacción se concentró y el residuo se disolvió después en DMSO:MeOH (1:1). Esta solución se sometió a purificación HPLC de fase inversa para proporcionar el péptido cíclico deseado.

Secuencia sintética general D:

La "Secuencia sintética general D" describe una secuencia general de procedimientos que se usaron para proporcionar los péptidos cíclicos descritos en el presente documento. A un recipiente de reacción de polipropileno en fase sólida de 10 ml se le añadió resina Rink o Sieber, y el recipiente de reacción se colocó en el sintetizador de péptidos Symphony X. "Procedimientos de acoplamiento general D": Se siguió el procedimiento de hinchamiento de resina. Después, se realizó una serie de acoplamientos de aminoácidos secuencialmente en el sintetizador de péptidos Symphony X siguiendo el "Procedimiento de acoplamiento único" si el extremo N del péptido unido a la resina era una amina primaria o el "Procedimiento de acoplamiento doble" si el extremo N del péptido unido a resina era una amina secundaria. El procedimiento de "acoplamiento único 1h" se usó con el aminoácido, ácido (S)-2-((((9H-fluoren-9-il)metoxi)carbonil)amino)-3-(3,4,5-trifluorofenil)propanoico acoplado a la resina. Se usó el "procedimiento de acoplamiento doble 6h" cuando la valina se acopló sobre la resina. Se siguió el procedimiento de acoplamiento de cloruro de cloroacetilo; después se siguió el Método de desprotección D; después se siguió el Método de ciclación D.

Serie 9000

Se prepararon los Ejemplos 9115-9187 siguiendo la "Secuencia sintética general A". Se prepararon los Ejemplos 9188-9196, Ejemplo 9213-9224, Ejemplos 9241-9288 y Ejemplos 9318-9374 siguiendo la "Secuencia sintética general D".

Preparación del Ejemplo 9115

El material en bruto del Ejemplo 9115 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 91 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,37 min; IEN-EM(+) m/z 910,1 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,42 min; IEN-EM(+) m/z 910,1 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9116

El material en bruto del Ejemplo 9116 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,54 min; IEN-EM(+) m/z 918,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,64 min; IEN-EM(+) m/z 918,6 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9117

El material en bruto del Ejemplo 9117 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,33 min; IEN-EM(+) m/z 913,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,36 min; IEN-EM(+) m/z 914,1 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 9118

El material en bruto del Ejemplo 9118 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,43 min; IEN-EM(+) m/z 922,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,58 min; IEN-EM(+) m/z 922,6 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9119

El material en bruto del Ejemplo 9119 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,28 min; IEN-EM(+) m/z 922,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,34 min; IEN-EM(+) m/z 922,2 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9120

El material en bruto del Ejemplo 9120 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z 930,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,56 min; IEN-EM(+) m/z 930,7 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9121

El material en bruto del Ejemplo 9121 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,39 min; IEN-EM(+) m/z 916,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,45 min; IEN-EM(+) m/z 917,1 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9122

El material en bruto del Ejemplo 9122 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z 925,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,65 min; IEN-EM(+) m/z 925,5 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9123

El material en bruto del Ejemplo 9123 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,38 min; IEN-EM(+) m/z 925,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,40 min; IEN-EM(+) m/z 925,3 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9124

El material en bruto del Ejemplo 9124 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 93 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 933,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,62 min; IEN-EM(+) m/z 933,7 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9125

El material en bruto del Ejemplo 9125 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,47 min; IEN-EM(+) m/z 942,1 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,59 min; IEN-EM(+) m/z 942,2 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9126

El material en bruto del Ejemplo 9126 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,59 min; IEN-EM(+) m/z 950,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,75 min; IEN-EM(+) m/z 950,7 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9127

El material en bruto del Ejemplo 9127 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,53 min; IEN-EM(+) m/z 938,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,65 min; IEN-EM(+) m/z 938,6 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9128

El material en bruto del Ejemplo 9128 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 93 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,50 min; IEN-EM(+) m/z 941,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,59 min; IEN-EM(+) m/z 941,8 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 9129

El material en bruto del Ejemplo 9129 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(-) m/z 949,9 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,79 min; IEN-EM(+) m/z 952,1 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9130

El material en bruto del Ejemplo 9130 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,50 min; IEN-EM(+) m/z 951,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,56 min; IEN-EM(+) m/z 951,6 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 9131

El material en bruto del Ejemplo 9131 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(+) m/z 960,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,79 min; IEN-EM(+) m/z 960,2 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9132

El material en bruto del Ejemplo 9132 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(-) m/z 892,1 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,67 min; IEN-EM(+) m/z 894,1 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9133

El material en bruto del Ejemplo 9133 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(+) m/z 902,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,88 min; IEN-EM(+) m/z 902,6 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9134

El material en bruto del Ejemplo 9134 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z 902,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,65 min; IEN-EM(+) m/z 902,0 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9135

El material bruto del Ejemplo 9135 se sometió al equipo de Purificación de Compuesto Único para su purificación y análisis. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-60% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,73 min; IEN-EM(+) m/z 910,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,90 min; IEN-EM(+) m/z 910,6 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9136

El material en bruto del Ejemplo 9136 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 92 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,35 min; IEN-EM(+) m/z 915,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,42 min; IEN-EM(+) m/z 915,6 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9137

El material en bruto del Ejemplo 9137 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-50% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,53 min; IEN-EM(+) m/z 924,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,65 min; IEN-EM(+) m/z 924,3 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9138

El material en bruto del Ejemplo 9138 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,32 min; IEN-EM(+) m/z 924,1 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,35 min; IEN-EM(+) m/z 924,0 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 9139

El material en bruto del Ejemplo 9139 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z 932,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,63 min; IEN-EM(+) m/z 932,2 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9140

El material en bruto del Ejemplo 9140 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(+) m/z 902,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,60 min; IEN-EM(+) m/z 902,0 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9141

El material en bruto del Ejemplo 9141 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(+) m/z 910,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,86 min; IEN-EM(+) m/z 910,6 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9142

El material en bruto del Ejemplo 9142 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,57 min; IEN-EM(+) m/z 910,1 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,63min; IEN-EM(+) m/z 910,0 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9143

El material en bruto del Ejemplo 9143 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(+) m/z 918,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,84 min; IEN-EM(+) m/z 918,5 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9144

El material en bruto del Ejemplo 9144 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,54 min; IEN-EM(+) m/z 948,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,60 min; IEN-EM(+) m/z 948,2 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 9145

El material en bruto del Ejemplo 9145 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,66 min; IEN-EM(+) m/z 956,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,83 min; IEN-EM(+) m/z 956,6 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9146

El material en bruto del Ejemplo 9146 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 956,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,57 min; IEN-EM(+) m/z 956,1 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9147

El material en bruto del Ejemplo 9147 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 965,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z 964,7 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9148 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9148 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,31 min; IEN-EM(+) m/z 931,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,50 min; IEN-EM(+) m/z 931,0 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9149 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9149 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,37 min; IEN-EM(+) m/z 939,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,62 min; IEN-EM(+) m/z 939,1 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9150

El material en bruto del Ejemplo 9150 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(+) m/z 946,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,80 min; IEN-EM(+) m/z 946,6 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9155

El material en bruto del Ejemplo 9155 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,54 min; IEN-EM(+) m/z 915,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,63 min; IEN-EM(+) m/z 916,1 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9156

El material en bruto del Ejemplo 9156 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(-) m/z 922,1 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,83 min; IEN-EM(+) m/z 924,0 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9157

El material en bruto del Ejemplo 9157 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,53 min; IEN-EM(+) m/z 923,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,60 min; IEN-EM(+) m/z 923,6 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9158

El material bruto del Ejemplo 9158 se sometió al equipo de Purificación de Compuesto Único para su purificación y análisis. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,64 min; IEN-EM(+) m/z 932,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,80 min; IEN-EM(+) m/z 932,0 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9159

El material en bruto del Ejemplo 9159 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,74 min; IEN-EM(+) m/z 913,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,80 min; IEN-EM(+) m/z 915,1 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9160

El material en bruto del Ejemplo 9160 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,89 min; IEN-EM(+) m/z 923,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,04 min; IEN-EM(+) m/z 923,7 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9161

El material en bruto del Ejemplo 9161 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 93 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(+) m/z 923,1 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,75 min; IEN-EM(+) m/z 923,1 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9162

El material en bruto del Ejemplo 9162 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,53 min; IEN-EM(+) m/z 908,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,63 min; IEN-EM(+) m/z 908,8 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9163

El material en bruto del Ejemplo 9163 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,66 min; IEN-EM(+) m/z 917,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,84 min; IEN-EM(+) m/z 917,3 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9164

El material en bruto del Ejemplo 9164 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min.

Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación.

El rendimiento del producto fue de 21,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 93 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 916,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,60 min; IEN-EM(+) m/z 916,6 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9165

El material en bruto del Ejemplo 9165 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 34,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %. Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,66 min; IEN-EM(+) m/z 925,1 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,81 min; IEN-EM(+) m/z 925,1 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9166 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9166 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(+) m/z 950,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,72 min; IEN-EM(+) m/z 949,9 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9167 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9167 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,44 min; IEN-EM(+) m/z 949,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,61 min; IEN-EM(+) m/z 950,0 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9168

El material en bruto del Ejemplo 9168 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(+) m/z 922,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,47 min; IEN-EM(+) m/z 923,1 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9169

El material en bruto del Ejemplo 9169 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z 930,90 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,88 min; IEN-EM(+) m/z 930,95 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9170

El material en bruto del Ejemplo 9170 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,40 min; IEN-EM(+) m/z 934,65 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,83 min; IEN-EM(+) m/z 934,80 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9171

El material en bruto del Ejemplo 9171 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,36 min; IEN-EM(+) m/z 942,85 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z 942,95 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9172

El material en bruto del Ejemplo 9172 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,35 min; IEN-EM(+) m/z 936,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,93 min; IEN-EM(+) m/z 936,80 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9173

El material en bruto del Ejemplo 9173 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,28 min; IEN-EM(+) m/z 944,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,87 min; IEN-EM(+) m/z 944,60 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9174

El material en bruto del Ejemplo 9174 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 92 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,26 min; IEN-EM(+) m/z 948,55 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,63 min; IEN-EM(+) m/z 948,30 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9175

El material en bruto del Ejemplo 9175 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 0-40% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,22 min; IEN-EM(+) m/z 956,80 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(+) m/z 956,70 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9176

El material en bruto del Ejemplo 9176 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 92 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,31 min; IEN-EM(+) m/z 922,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z 922,40 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9177

El material en bruto del Ejemplo 9177 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,44 min; IEN-EM(+) m/z 930,05 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,69 min; IEN-EM(+) m/z 930,05 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9178

El material en bruto del Ejemplo 9178 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,41 min; IEN-EM(+) m/z 934,15 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,89 min; IEN-EM(+) m/z 934,20 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 9179

El material en bruto del Ejemplo 9179 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,37 min; IEN-EM(+) m/z 942,20 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,70 min; IEN-EM(+) m/z 942,05 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9180

El material en bruto del Ejemplo 9180 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z 929,20 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,99 min; IEN-EM(+) m/z 929,25 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9181

El material en bruto del Ejemplo 9181 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,49 min; IEN-EM(+) m/z 937,20 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,99 min; IEN-EM(+) m/z 937,40 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9182

El material en bruto del Ejemplo 9182 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,53 min; IEN-EM(+) m/z 941,45 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,99 min; IEN-EM(+) m/z 941,40 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9183

El material en bruto del Ejemplo 9183 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,49 min; IEN-EM(+) m/z 949,35 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,91 min; IEN-EM(+) m/z 949,45 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9184

El material en bruto del Ejemplo 9184 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z 929,90 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,92 min; IEN-EM(+) m/z 929,95 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9185

El material en bruto del Ejemplo 9185 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,42 min; IEN-EM(+) m/z 937,85 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,88 min; IEN-EM(+) m/z 937,90 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9186

El material en bruto del Ejemplo 9186 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,28 min; IEN-EM(+) m/z 941,65 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,53 min; IEN-EM(+) m/z 941,65 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9187

El material en bruto del Ejemplo 9187 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,24 min; IEN-EM(+) m/z 949,65 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,49 min; IEN-EM(+) m/z 949,65 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9188

El material en bruto del Ejemplo 9188 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 1,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,10 min; IEN-EM(+) m/z 919,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(+) m/z 919,2 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 9189

El material en bruto del Ejemplo 9189 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 93 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,07 min; IEN-EM(+) m/z 925,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,73 min; IEN-EM(+) m/z 926,0 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9190

El material en bruto del Ejemplo 9190 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 10

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,13 min; IEN-EM(+) m/z 918,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,85 min; IEN-EM(+) m/z 918,5 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 9191

El material en bruto del Ejemplo 9191 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 60-100 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 27,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,02 min; IEN-EM(+) m/z 923,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,83 min; IEN-EM(+) m/z 923,6 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9192

El material en bruto del Ejemplo 9192 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,92 min; IEN-EM(+) m/z 911,70 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,53 min; IEN-EM(+) m/z 911,45 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9193

El material en bruto del Ejemplo 9193 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 60-100 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,82 min; IEN-EM(+) m/z 919,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,76 min; IEN-EM(+) m/z 919,7 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9194

El material en bruto del Ejemplo 9194 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,81 min; IEN-EM(+) m/z 926,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,73 min; IEN-EM(+) m/z 926,7 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9195

El material en bruto del Ejemplo 9195 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1. 919,2 min; IEN-EM(+) m/z 919,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,76 min; IEN-EM(+) m/z 919,1 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9196

El material en bruto del Ejemplo 9196 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,04 min; IEN-EM(+) m/z 926,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,72 min; IEN-EM(+) m/z 926,5 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9213

El material en bruto del Ejemplo 9213 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 34,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,80 min; IEN-EM(+) m/z 916,55 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,40 min; IEN-EM(+) m/z 916,60 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9214

El material en bruto del Ejemplo 9214 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,87 min; IEN-EM(+) m/z 923,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,55 min; IEN-EM(+) m/z 923,55 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9215

El material en bruto del Ejemplo 9215 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(+) m/z 899,15 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,44 min; IEN-EM(+) m/z 899,05 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 9216

El material en bruto del Ejemplo 9216 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 54,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,81 min; IEN-EM(+) m/z 906,20 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,42 min; IEN-EM(+) m/z 906,10 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9217

El material en bruto del Ejemplo 9217 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 60,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,73 min; IEN-EM(+) m/z 899,55 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,41 min; IEN-EM(+) m/z 899,65 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9218

El material en bruto del Ejemplo 9218 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 44,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,59 min; IEN-EM(+) m/z 906,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,43 min; IEN-EM(+) m/z 906,70 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9219

El material en bruto del Ejemplo 9219 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(+) m/z 917,95 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención =3,27 min; IEN-EM(+) m/z 917,95 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9220

El material en bruto del Ejemplo 9220 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 36,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,73 min; IEN-EM(+) m/z 924,95 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,25 min; IEN-EM(+) m/z 924,90 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9221

El material en bruto del Ejemplo 9221 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 43,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(+) m/z 918,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,27 min; IEN-EM(+) m/z 918,40 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9222

El material en bruto del Ejemplo 9222 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 33,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,66 min; IEN-EM(+) m/z 925,50 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,35 min; IEN-EM(+) m/z 925,40 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9223

El material en bruto del Ejemplo 9223 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 36,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 900,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,18 min; IEN-EM(+) m/z 900,40 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9224

El material en bruto del Ejemplo 9224 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(+) m/z 907,25 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,28 min; IEN-EM(+) m/z 907,40 (m 2h ).

Preparación de los Ejemplos 9225 y 9226

Los Ejemplos 9225 y 9226 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/^eM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9225 fue de 27,4 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 96 %. El rendimiento de los Ejemplos 9226 fue de 24,9 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 96 %.

Ejemplos 9225

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,77 min; IEN-EM(+) m/z 966,45 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,34 min; IEN-EM(+) m/z 966,45 (m 2h ).

Ejemplos 9226

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,93 min; IEN-EM(+) m/z 966,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,50 min; IEN-EM(+) m/z 966,85 (m 2h ).

Preparación de los Ejemplos 9227 y 9228

Los Ejemplos 9227 y 9228 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/^eM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9227 fue de 39,1 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 98 %. El rendimiento de los Ejemplos 9228 fue de 21,6 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 95 %.

Ejemplos 9227

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(+) m/z 958,90 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,27 min; IEN-EM(+) m/z 958,90 (^m+2^h).

Ejemplos 9228

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,79 min; IEN-EM(+) m/z 958,90 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,36 min; IEN-EM(+) m/z 958,95 (^m+2^h).

Preparación de los Ejemplos 9229 y 9230

Los Ejemplos 9229 y 930 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9229 fue de 25,1 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 98 %. El rendimiento de los Ejemplos 9230 fue de 12,7 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 98 %.

Ejemplos 9229

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(+) m/z 965,95 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,35 min; IEN-EM(+) m/z 965,95 (m 2h ).

Ejemplos 9230

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,98 min; IEN-EM(+) m/z 965,85 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,47 min; IEN-EM(+) m/z 965,55 (m 2h ).

Preparación de los Ejemplos 9231 y 9232

Los Ejemplos 9231 y 9232 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/e M preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9231 fue de 24,9 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %. El rendimiento de los Ejemplos 9232 fue de 16,0 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 96 %.

Ejemplos 9231

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z 959,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,25 min; IEN-EM(+) m/z 959,40 (^m+2^h).

Ejemplos 9232

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,78 min; IEN-EM(+) m/z 959,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,32 min; IEN-EM(+) m/z 959,35 (m 2h ).

Preparación de los Ejemplos 9233 y 9234

Los Ejemplos 9233 y 9234 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/e M preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9233 fue de 13,3 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 93 %. El rendimiento de los Ejemplos 9234 fue de 11,1 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 94 %.

Ejemplos 9233

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,54 min; IEN-EM(+) m/z 960,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,70 min; IEN-EM(+) m/z 960,0 (m 2h ).

Ejemplos 9234

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,59 min; IEN-EM(+) m/z 960,1 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z 960,4 (m 2h ).

Preparación de los Ejemplos 9235 y 9236

Los Ejemplos 9235 y 9236 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/^eM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9235 fue de 13,0 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 90 %. El rendimiento de los Ejemplos 9236 fue de 10,3 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 92 %.

Ejemplos 9235

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,62 min; IEN-EM(+) m/z 966,95 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,16 min; IEN-EM(+) m/z 966,90 (^m+2^h).

Ejemplos 9236

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,79 min; IEN-EM(+) m/z 966,75 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,37 min; IEN-EM(+) m/z 966,95 (m 2H).

Preparación de los Ejemplos 9237 y 9238

Los Ejemplos 9237 y 9238 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9237 fue de 20,4 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 96 %. El rendimiento de los Ejemplos 9238 fue de 20,5 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 97 %.

Ejemplos 9237

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z 960,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,05 min; IEN-EM(+) m/z 960,40 (^m+2^h).

Ejemplos 9238

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,62 min; IEN-EM(+) m/z 960,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,13 min; IEN-EM(+) m/z 960,40 (^m+2H).

Preparación de los Ejemplos 9239 y 9240

Los Ejemplos 9239 y 9240 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/e M preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9239 fue de 22,7 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 97 %. El rendimiento de los Ejemplos 9240 fue de 16,0 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 97 %.

Ejemplos 9239

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,59 min; IEN-EM(+) m/z 967,45 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,13 min; IEN-EM(+) m/z 967,45 (m 2h ).

Ejemplos 9240

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,75 min; IEN-EM(+) m/z 967,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,29 min; IEN-EM(+) m/z 967,40 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9241 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9241 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,65 min; IEN-EM(-) m/z 908,5 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,86 min; IEN-EM(+) m/z 908,1 (M-2H).

Preparación del Ejemplo 9242 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9242 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,82 min; IEN-EM(+) m/z 916,20 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,47 min; IEN-EM(+) m/z 916,45 (M-2H).

Preparación del Ejemplo 9243 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9243 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,66 min; IEN-EM(-) m/z 909,0 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,30 min; IEN-EM(+) m/z 910,10 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9244 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9244 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,69 min; IEN-EM(-) m/z 916,0 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,43 min; IEN-EM(+) m/z 917,05 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9245 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9245 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(-) m/z 891,4 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,04 min; IEN-EM(+) m/z 892,55 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9246 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9246 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,14 min; IEN-EM(+) m/z 899,55 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9247

El material en bruto del Ejemplo 9247 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,12 min; IEN-EM(+) m/z 893,00 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9248 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9248 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, l9 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,26 min; IEN-EM(+) m/z 900,0 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9249

El material en bruto del Ejemplo 9249 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,38 min; IEN-EM(+) m/z 916,55 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9250 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9250 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 41,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,85 min; IEN-EM(-) m/z 922,5 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,48 min; IEN-EM(+) m/z 923,45 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9251

El material en bruto del Ejemplo 9251 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94%. Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1 min; IEN-EM(+) m/z (M+2H).

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,71 min; IEN-EM(-) m/z 916,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,39 min; IEN-EM(+) m/z 917,05 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9252

El material en bruto del Ejemplo 9252 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 33,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(-) m/z 923,0 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,06 min; IEN-EM(+) m/z 925,7 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9253 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9253 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 47,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(-) m/z 898,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,19 min; IEN-EM(+) m/z 899,50 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9254 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9254 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 48,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,64 min; IEN-EM(-) m/z 905,8 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2 min; IEN-EM(+) m/z 906,55 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9255 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9255 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 52,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(+) m/z 899,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,23 min; IEN-EM(+) m/z 900,05 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9256 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9256 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 53,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,69 min; IEN-EM(+) m/z 906,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,40 min; IEN-EM(+) m/z 907,00 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9257 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9257 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,88 min; IEN-EM(+) m/z 915,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,28 min; IEN-EM(+) m/z 916,55 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9258 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9258 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,77 min; IEN-EM(+) m/z 922,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,76 min; IEN-EM(+) m/z 923,60 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9259 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9259 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,75 min; IEN-EM(-) m/z 923,0 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,47 min; IEN-EM(+) m/z 924,05 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9260 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9260 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,08 min; IEN-EM(-) m/z 899,55 (M-2H).

Preparación del Ejemplo 9261 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9261 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z 905,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,19 min; IEN-EM(+) m/z 906,55 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9262 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9262 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,18 min; IEN-EM(+) m/z 899,9 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9263 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 9263 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 33,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(+) m/z 905,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,31 min; IEN-EM(+) m/z 907,10 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9264

El material en bruto del Ejemplo 9264 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 60-100 % durante 25 minutos, después una parada de 10 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %. Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,74 min; IEN-EM(+) m/z 968,25 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,38 min; IEN-EM(+) m/z 968,45 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9265

El material en bruto del Ejemplo 9265 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 60-100 % durante 25 minutos, después una parada de 10 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-65 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(+) m/z 969,15 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,32 min; IEN-EM(+) m/z 969,05 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9266

El material en bruto del Ejemplo 9266 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 60-100 % durante 25 minutos, después una parada de 10 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(-) m/z 950,2 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,85 min; IEN-EM(+) m/z 951,8 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9267

El material en bruto del Ejemplo 9267 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z 951,50 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,26 min; IEN-EM(+) m/z 951,55 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9268

El material en bruto del Ejemplo 9268 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 951,85 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,18 min; IEN-EM(+) m/z 951,95 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9269

El material en bruto del Ejemplo 9269 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,40 min; IEN-EM(+) m/z 945,35 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(+) m/z 945,35 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9270

El material en bruto del Ejemplo 9270 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,32 min; IEN-EM(+) m/z 980,35 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(+) m/z 980,45 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9271

El material en bruto del Ejemplo 9271 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(+) m/z 973,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,12 min; IEN-EM(+) m/z 973,35 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9272

El material en bruto del Ejemplo 9272 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,82 min; IEN-EM(+) m/z 973,50 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,08 min; IEN-EM(+) m/z 973,45 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9273

El material en bruto del Ejemplo 9273 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 48,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(+) m/z 967,70 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,99 min; IEN-EM(+) m/z 967,70 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9274

El material en bruto del Ejemplo 9274 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 46,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(+) m/z 968,80 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,04 min; IEN-E^m(+) m/z 968,20 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9275

El material en bruto del Ejemplo 9275 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 50,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,55 min; IEN-EM(+) m/z 950,70 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,87 min; IEN-EM(+) m/z 950,70 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9276

El material en bruto del Ejemplo 9276 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1 min; IEN-EM(+) m/z 951,20 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,96 min; IEN-EM(+) m/z 951,15 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9277

El material en bruto del Ejemplo 9277 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 43,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,50 min; IEN-EM(+) m/z 941,70 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,75 min; IEN-EM(+) m/z 941,70 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9278

El material en bruto del Ejemplo 9278 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,50 min; IEN-EM(+) m/z 942,20 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,91 min; IEN-EM(+) m/z 942,20 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9279

El material en bruto del Ejemplo 9279 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 52,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(+) m/z 942,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,86 min; IEN-EM(+) m/z 942,8 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9280

El material en bruto del Ejemplo 9280 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 42,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(+) m/z 951,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,76 min; IEN-EM(+) m/z 951,6 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9281

El material en bruto del Ejemplo 9281 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 56,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z 942,25 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z 942,25 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9282

El material en bruto del Ejemplo 9282 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 150 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(+) m/z 951,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z 951,4 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9283

El material en bruto del Ejemplo 9283 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 52,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,84 min; IEN-EM(+) m/z 967,65 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,42 min; IEN-EM(+) m/z 967,90 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9284

El material en bruto del Ejemplo 9284 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,72 min; IEN-EM(+) m/z 967,90 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,16 min; IEN-EM(+) m/z 968,25 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9285

El material en bruto del Ejemplo 9285 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 50,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(+) m/z 942,75 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,89 min; IEN-EM(+) m/z 942,75 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9286

El material en bruto del Ejemplo 9286 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 59,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,75 min; IEN-EM(-) m/z 941,10 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,33 min; IEN-EM(+) m/z 943,35 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9287

El material en bruto del Ejemplo 9287 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 47,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,85 min; IEN-EM(+) m/z 960,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,50 min; IEN-EM(+) m/z 959,50 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 9288

El material en bruto del Ejemplo 9288 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 33,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,81 min; IEN-EM(-) m/z 958,10 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,48 min; IEN-EM(+) m/z 960,15 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9289

El Ejemplo 9289 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,72 min; IEN-EM(-) m/z 931,75 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,33 min; IEN-EM(+) m/z 933,60 (M+2H).

Preparación de los Ejemplos 9290 y 9291

Los Ejemplos 9290 y 9291 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/^eM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9290 fue de 4,8 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %. El rendimiento de los Ejemplos 9291 fue de 9,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Ejemplos 9290

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(-) m/z 938,90 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,36 min; IEN-EM(+) m/z 941,10 (M+2H).

Ejemplos 9291

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,79 min; IEN-EM(+) m/z 938,10 (M-2H).

Preparación de los Ejemplos 9292 y 9293

Los Ejemplos 9292 y 9293 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9292 fue de 3,1 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %. El rendimiento de los Ejemplos 9293 fue de 2,9 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %. Ejemplos 9292

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,39 min; IEN-EM(+) m/z 934,25 (M+2H).

Ejemplos 9293

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,39 min; IEN-EM(+) m/z 934,15 (M+2H).

Preparación de los Ejemplos 9294 y 9295

Los Ejemplos 9294 y 9295 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/^eM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: waters xbridge c-18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9294 fue de 5,2 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %. El rendimiento de los Ejemplos 9295 fue de 3,1 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %.

Ejemplos 9294

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,82 min; IEN-EM(+) m/z 940,95 (M+2H).

Ejemplos 9295

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,89 min; IEN-EM(+) m/z 940,90 (M+2H).

Preparación de los Ejemplos 9296 y 9297

Los Ejemplos 9296 y 9297 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/e M preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-100 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9296 fue de 11,6 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %. El rendimiento de los Ejemplos 9297 fue de 10,1 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 97 %.

Ejemplos 9296

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,89 min; IEN-EM(+) m/z 933,25 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,56 min; IEN-EM(+) m/z 933,15 (^m+2^h).

Ejemplos 9297

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,93 min; IEN-EM(+) m/z 933,05 (M+2H).

Preparación de los Ejemplos 9298 y 9299

Los Ejemplos 9298 y 9299 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/^eM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9298 fue de 4,1 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %. El rendimiento de los Ejemplos 9299 fue de 4,6 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %.

Ejemplos 9298

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,81 min; IEN-EM(+) m/z 927,30 (M+2H).

Ejemplos 9299

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,83 min; IEN-EM(+) m/z 926,85 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,13 min; IEN-EM(+) m/z 927,7 (M+2H).

Preparación de los Ejemplos 9300 y 9301

Los Ejemplos 9300 y 9301 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/^eM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9300 fue de 8,4 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 93 %. El rendimiento de los Ejemplos 9301 fue de 2,1 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 98 %.

Ejemplos 9300

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(+) m/z 935,10 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,24 min; IEN-EM(+) m/z 934,85 (m 2h ).

Ejemplos 9301

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,79 min; IEN-EM(+) m/z 935,55 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,35 min; IEN-EM(+) m/z 935,05 (m 2h ).

Preparación de los Ejemplos 9302 y 9303

Los Ejemplos 9302 y 9303 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 15-55% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9302 fue de 14,2 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %. El rendimiento de los Ejemplos 9303 fue de 9,1 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %.

Ejemplos 9302

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,71 min; IEN-EM(-) m/z 939,55 (M-2H).

Ejemplos 9303

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(-) m/z 939,25 (M-2H).

Preparación de los Ejemplos 9304 y 9305

Los Ejemplos 9304 y 9305 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/^eM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 15-55% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9304 fue de 8,9 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %. El rendimiento de los Ejemplos 9305 fue de 10,8 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %.

Ejemplos 9304

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,76min; IEN-EM(+) m/z 934,75 (M+2H).

Ejemplos 9305

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,78 min; IEN-EM(+) m/z (M+2H).

Preparación de los Ejemplos 9306 y 9307

Los Ejemplos 9306 y 9307 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/e M preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 15-55% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9306 fue de 1,3 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %. El rendimiento de los Ejemplos 9307 fue de 2,1 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 96 %.

Ejemplos 9306

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,78 min; IEN-EM(+) m/z 940,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,27 min; IEN-EM(+) m/z 941,0 (^m+2H).

Ejemplos 9307

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,82 min; IEN-EM(+) m/z 941,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,30 min; IEN-EM(+) m/z 940,9 (m 2h ).

Preparación de los Ejemplos 9308 y 9309

Los Ejemplos 9308 y 9309 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/^eM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-50% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 150 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 40 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9308 fue de 2,2 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 97 %. El rendimiento de los Ejemplos 9309 fue de 4,0 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 96 %.

Ejemplos 9308

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,79 min; IEN-EM(+) m/z 934,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,25 min; IEN-EM(+) m/z 934,3 (^m+2^h).

Ejemplos 9309

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,81 min; IEN-EM(+) m/z 934,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,28 min; IEN-EM(+) m/z 934,2 (m 2h ).

Preparación de los Ejemplos 9310 y 9311

Los Ejemplos 9310 y 9311 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-50% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 40 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9310 fue de 3,1 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 96 %. El rendimiento de los Ejemplos 9311 fue de 1,4 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 96 %.

Ejemplos 9310

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,79 min; IEN-EM(+) m/z 926,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,25 min; IEN-EM(+) m/z 926,8 (^m+2^h).

Ejemplos 9311

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,83 min; IEN-EM(+) m/z 927,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,29 min; IEN-EM(+) m/z 926,8 (^m+2^h).

Preparación de los Ejemplos 9312 y 9313

Los Ejemplos 9312 y 9313 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/^eM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 15-55% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían los productos deseados se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9312 fue de 3,3 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %. El rendimiento de los Ejemplos 9313 fue de 1,0 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %.

Ejemplos 9312

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,29 min; IEN-EM(+) m/z 949,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,60 min; IEN-EM(+) m/z 949,9 (^m+2^h).

Ejemplos 9313

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,33 min; IEN-EM(+) m/z 949,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,63 min; IEN-EM(+) m/z 950,0 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9314

El Ejemplo 9314 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 15-55% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Ejemplos 9314

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,35 min; IEN-EM(+) m/z 942,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,61 min; IEN-EM(+) m/z 942,9 (m 2h ).

Preparación de los Ejemplos 9315 y 9316

Los Ejemplos 9315 y 9316 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/^eM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 15-55% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento de los Ejemplos 9315 fue de 2,1 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 100 %. El rendimiento de los Ejemplos 9316 fue de 1,3 mg, y su pureza estimada por análisis CLEM fue del 96 %.

Ejemplos 9315

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,41 min; IEN-EM(+) m/z 948,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,76 min; IEN-EM(+) m/z 948,8 (m 2h ).

Ejemplos 9316

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,46 min; IEN-EM(+) m/z 948,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,81 min; IEN-EM(+) m/z 948,9 (^m+2^h).

Preparación de los Ejemplos 9317

El Ejemplo 9317 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 10-50% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,78 min; IEN-EM(+) m/z 942,30 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,21 min; IEN-EM(+) m/z 942,05 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9318

El material en bruto del Ejemplo 9318 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,11 min; IEN-EM(+) m/z 941,45 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9319

El material en bruto del Ejemplo 9319 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,49 min; IEN-EM(+) m/z 944,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z 944,2 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9320

El material en bruto del Ejemplo 9320 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 950,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,96 min; IEN-EM(+) m/z 950,6 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9321

El material en bruto del Ejemplo 9321 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10,1-90% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(+) m/z 951,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,00 min; IEN-EM(+) m/z 951,8 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 9322

El material en bruto del Ejemplo 9322 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,69 min; IEN-EM(+) m/z 975,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,09 min; IEN-EM(+) m/z 975,1 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9323

El material en bruto del Ejemplo 9323 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(+) m/z 968,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,09 min; IEN-EM(+) m/z 968,4 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9324

El material en bruto del Ejemplo 9324 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z 961,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,08 min; IEN-EM(+) m/z 961,5 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 9325

El material en bruto del Ejemplo 9325 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,64 min; IEN-EM(-) m/z 952,2 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,02 min; IEN-EM(+) m/z 954,3 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9326

El material en bruto del Ejemplo 9326 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 35,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 976,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,82 min; IEN-EM(+) m/z 976,2 (m 2H).

Preparación del Ejemplo 9327

El material en bruto del Ejemplo 9327 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,46 min; IEN-EM(+) m/z 968,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,86 min; IEN-EM(+) m/z 968,9 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9328

El material en bruto del Ejemplo 9328 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 60-90 % durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 34,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,56 min; IEN-EM(+) m/z 975,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,96 min; IEN-EM(+) m/z 975,6 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9329

El material en bruto del Ejemplo 9329 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 60-90 % durante 25 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(+) m/z 968,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 968,2 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9330

El material en bruto del Ejemplo 9330 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,53 min; IEN-EM(+) m/z 951,1 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z 950,7 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9331

El material en bruto del Ejemplo 9331 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,53 min; IEN-EM(+) m/z 958,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,91 min; IEN-EM(+) m/z 958,3 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9332

El material en bruto del Ejemplo 9332 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,57 min; IEN-EM(+) m/z 951,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,92 min; IEN-EM(+) m/z 951,0 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9333

El material en bruto del Ejemplo 9333 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,54 min; IEN-EM(+) m/z 944,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,91 min; IEN-EM(+) m/z 944,3 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9334

El material en bruto del Ejemplo 9334 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 27,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,50 min; IEN-EM(+) m/z 937,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,83 min; IEN-EM(+) m/z 937,4 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9335

El material en bruto del Ejemplo 9335 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 34,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,32 min; IEN-EM(+) m/z 959,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,58 min; IEN-EM(+) m/z 959,0 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9336

El material en bruto del Ejemplo 9336 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,34 min; IEN-EM(+) m/z 952,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,64 min; IEN-EM(+) m/z 951,7 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9337

El material en bruto del Ejemplo 9337 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 32,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,46 min; IEN-EM(+) m/z 959,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(+) m/z 958,8 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9338

El material en bruto del Ejemplo 9338 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,47 min; IEN-EM(+) m/z 951,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,75 min; IEN-EM(+) m/z 951,7 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9345

El material en bruto del Ejemplo 9345 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 43,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,35 min; IEN-EM(+) m/z 951,35 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9346

El material en bruto del Ejemplo 9346 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,26 min; IEN-EM(+) m/z 944,35 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9347

El material en bruto del Ejemplo 9347 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 45,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,26 min; IEN-EM(+) m/z 937,30 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9348

El material en bruto del Ejemplo 9348 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,17 min; IEN-EM(+) m/z 930,35 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9349

El material en bruto del Ejemplo 9349 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,46 min; IEN-EM(+) m/z 951,70 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z 951,65 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9350

El material en bruto del Ejemplo 9350 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 37,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,46 min; IEN-EM(-) m/z 942,8 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,69 min; IEN-EM(+) m/z 944,8 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9351

El material en bruto del Ejemplo 9351 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 45,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(-) m/z 950,0 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,70 min; IEN-EM(+) m/ 951,3 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9352

El material en bruto del Ejemplo 9352 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 40,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(-) m/z 942,8 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,73 min; IEN-EM(+) m/z 944,6 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9353

El material en bruto del Ejemplo 9353 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 34,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(-) m/z 955,8 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,94 min; IEN-EM(+) m/z 957,8 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9354

El material en bruto del Ejemplo 9354 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 37,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(+) m/z 951,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z 950,6 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9355

El material en bruto del Ejemplo 9355 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 32,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,71 min; IEN-EM(+) m/z 941,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-E^m(-) m/z 941,6 (M-2H).

Preparación del Ejemplo 9356

El material en bruto del Ejemplo 9356 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(-) m/z 934,7 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,82 min; IEN-EM(+) m/z 936,8 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9357

El material en bruto del Ejemplo 9357 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 49,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,50 min; IEN-EM(-) m/z 956,3 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,73 min; IEN-EM(+) m/z 958,4 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9358

El material en bruto del Ejemplo 9358 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 48,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,50 min; IEN-EM(-) m/z 949,9 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,76 min; IEN-EM(+) m/z 951,3 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9359

El material en bruto del Ejemplo 9359 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,59 min; IEN-EM(-) m/z 955,7 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,86 min; IEN-EM(+) m/z 957,8 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9360

El material en bruto del Ejemplo 9360 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 34,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,65 min; IEN-EM(-) m/z 948,9 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,89 min; IEN-EM(+) m/z 950,8 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9361

El material en bruto del Ejemplo 9361 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,73 min; IEN-EM(-) m/z 941,2 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,97 min; IEN-EM(+) m/z 943,4 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9362

El material en bruto del Ejemplo 9362 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 37,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,72 min; IEN-EM(+) m/z 948,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 950,9 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9363

El material en bruto del Ejemplo 9363 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(-) m/z 941,5 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 943,4 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9364

El material en bruto del Ejemplo 9364 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 42,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,71 min; IEN-EM(+) m/z 934,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,97 min; IEN-EM(+) m/z 936,8 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 9365

El material en bruto del Ejemplo 9365 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 48-88 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(-) m/z 927,8 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z 929,6 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9366

El material en bruto del Ejemplo 9366 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,56 min; IEN-EM(-) m/z 949,2 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z 951,2 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9367

El material en bruto del Ejemplo 9367 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,77 min; IEN-EM(-) m/z 965,8 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 967,5 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9368

El material en bruto del Ejemplo 9368 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,65 min; IEN-EM(+) m/z 968,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,90 min; IEN-EM(+) m/z 968,4 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 9369

El material en bruto del Ejemplo 9369 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,62 min; IEN-EM(+) m/z 948,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z 950,8 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9370

El material en bruto del Ejemplo 9370 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 47,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(+) m/z 952,1 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,83 min; IEN-EM(+) m/z 951,2 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 9371

El material en bruto del Ejemplo 9371 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,69 min; IEN-EM(-) m/z 966,0 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,85 min; IEN-EM(+) m/z 968,2 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9372

El material en bruto del Ejemplo 9372 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,77 min; IEN-EM(-) m/z 966,1 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z 968,3 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 9373

El material en bruto del Ejemplo 9373 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,56 min; IEN-EM(+) m/z 950,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,68 min; IEN-EM(+) m/z 950,5 (^m+2H).

Preparación del Ejemplo 9374

El material en bruto del Ejemplo 9374 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(-) m/z 949,3 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,82 min; IEN-EM(+) m/z 951,2 (M+2H).

Serie 10000

Los Ejemplos 10012-10043, Ejemplos 10045-10052, Ejemplos 10122-10147 y Ejemplo s10196-10219 se prepararon siguiendo la "Secuencia sintética general A".

El Ejemplo 10044, Ejemplos 10053-10121 y Ejemplos 10148-10195 se prepararon siguiendo la "Secuencia sintética general D".

Preparación del Ejemplo 10012

El material en bruto del Ejemplo 10012 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,54 min; IEN-EM(+) m/z 954,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,72 min; IEN-EM(+) m/z 953,5 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 949,9269 (M+2H); Encontrado: 949,9263 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10013

El material en bruto del Ejemplo 10013 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,46 min; IEN-EM(+) m/z 936,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,58 min; IEN-EM(+) m/z 937,5 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 936,4541 (M+2H); Encontrado: 936,4540 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10014

El material en bruto del Ejemplo 10014 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,44 min; IEN-EM(+) m/z 945,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,56 min; IEN-EM(+) m/z 945,1 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 944,4516 (M+2H); Encontrado: 944,4522 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10015

El material en bruto del Ejemplo 10015 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 918,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,79 min; IEN-EM(+) m/z 918,5 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 917,9238 (M+2H); Encontrado: 917,9246 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10016

El material en bruto del Ejemplo 10016 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(-) m/z 924,4 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z 926,6 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 925,9213 (M+2H); Encontrado: 925,9217 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10017

El material en bruto del Ejemplo 10017 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,53 min; IEN-EM(+) m/z 910,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,64 min; IEN-EM(+) m/z 910,0 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 909,4432 (M+2H); Encontrado: 909,4430 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10018

El material en bruto del Ejemplo 10018 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,45 min; IEN-EM(+) m/z 918,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,61 min; IEN-EM(+) m/z 918,0 (m 2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 917,4407 (M+2H); Encontrado: 917,4411 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10019

El material en bruto del Ejemplo 10019 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,64 min; IEN-EM(+) m/z 1864,6 (M+H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,79 min; IEN-EM(+) m/z 933,0 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 931,9395 (M+2H); Encontrado: 931,9389 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10020

El material en bruto del Ejemplo 10020 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(+) m/z 940,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,81 min; IEN-EM(+) m/z 940,6 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 939,9369 (M+2H); Encontrado: 939,9374 (M+2H).

Preparación de los Ejemplos 10021 y 10022

El material en bruto del Ejemplo 10021 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 90 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,52 min; IEN-EM(-) m/z 922,0 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,64 min; IEN-EM(+) m/z 924,1 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 923,4589 (M+2H); Encontrado: 923,4589 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10022

El material en bruto del Ejemplo 10022 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(-) m/z 924,0 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z 925,9 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 924,9316 (M+2H); Encontrado: 924,9323 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10023

El material en bruto del Ejemplo 10023 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(-) m/z 932,1 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,76 min; IEN-EM(+) m/z 934,1 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 932,9291 (M+2H); Encontrado: 932,9300 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10024

El material en bruto del Ejemplo 10024 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,46 min; IEN-EM(+) m/z 925,1 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,60 min; IEN-EM(+) m/z 925,4 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 924,4485 (M+2H); Encontrado: 924,4496 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10025

El material en bruto del Ejemplo 10025 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,66 min; IEN-EM(-) m/z 923,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,82 min; IEN-EM(+) m/z 925,6 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 924,9316 (M+2H); Encontrado: 924,9320 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10034

El material en bruto del Ejemplo 10034 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 90 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(+) m/z 916,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,19 min; IEN-EM(+) m/z 916,55 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 916,4511 (M+2H); Encontrado: 916,4492 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10035

El material en bruto del Ejemplo 10035 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(-) m/z 931,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,10 min; IEN-EM(+) m/z 934,10 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 932,9291 (M+2H); Encontrado: 932,9265 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10036

El material en bruto del Ejemplo 10036 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 91 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,78 min; IEN-EM(+) m/z 916,80 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,61 min; IEN-EM(+) m/z 916,80 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 916,4511 (M+2H); Encontrado: 916,4490 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10037

El material en bruto del Ejemplo 10037 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(+) m/z 924,55 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z 924,65 (^m+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 924,4485 (M+2H); Encontrado: 924,4468 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10042

El material en bruto del Ejemplo 10042 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(+) m/z 945,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,13 min; IEN-EM(+) m/z 945,40 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 944,9347 (M+2H); Encontrado: 944,9326 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10043

El material en bruto del Ejemplo 10043 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,78 min; IEN-EM(+) m/z 931,80 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,57 min; IEN-EM(+) m/z 932,00 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 931,4563 (M+2H); Encontrado: 931,4546 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10044

El material en bruto del Ejemplo 10044 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(+) m/z 897,95 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,31 min; IEN-EM(+) m/z 897,85 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 10045

El material en bruto del Ejemplo 10045 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(+) m/z 956,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,18 min; IEN-EM(+) m/z 956,3 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 955,9633 (M+2H); Encontrado: 955,9613(M+2H).

Preparación del Ejemplo 10047

El material en bruto del Ejemplo 10047 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,71 min; IEN-EM(+) m/z 957,35 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,17 min; IEN-EM(+) m/z 957,30 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 956,4672 (M+2H); Encontrado: 956,4629 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10049

El material en bruto del Ejemplo 10049 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 36,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,69 min; IEN-EM(+) m/z 932,45 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,14 min; IEN-EM(+) m/z 932,45 (^m+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 931,9395 (M+2H); Encontrado: 931,9380 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10050

El material en bruto del Ejemplo 10050 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(+) m/z 940,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,14 min; IEN-EM(+) m/z 940,40 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 939,9369 (M+2H); Encontrado: 939,9354 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10051

El material en bruto del Ejemplo 10051 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,57 min; IEN-EM(+) m/z 923,90 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z 923,90 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 923,4589 (M+2H); Encontrado: 923,4565(M+2H).

Preparación del Ejemplo 10052

El material en bruto del Ejemplo 10052 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,54 min; IEN-EM(+) m/z 931,90 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,94 min; IEN-EM(+) m/z 931,90 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 931,4563 (M+2H); Encontrado: 931,4547 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10053

El material en bruto del Ejemplo 10053 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 36,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,79 min; IEN-EM(+) m/z 924,90 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,37 min; IEN-EM(+) m/z 925,00 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 10054

El material en bruto del Ejemplo 10054 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 32,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,89 min; IEN-EM(+) m/z 883,95 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,38 min; IEN-EM(+) m/z 883,85 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 10055

El material en bruto del Ejemplo 10055 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,96 min; IEN-EM(+) m/z 892,15 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,09 min; IEN-EM(+) m/z 892,20 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 10056

El material en bruto del Ejemplo 10056 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 41,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,91 min; IEN-EM(+) m/z 903,50 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,40 min; IEN-EM(+) m/z 903,65 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 903,4416 (M+2H); Encontrado: 903,4412 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10057

El material en bruto del Ejemplo 10057 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,79 min; IEN-EM(+) m/z 890,70 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,26 min; IEN-EM(+) m/z 891,05 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 10058

El material en bruto del Ejemplo 10058 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,92 min; IEN-EM(+) m/z 890,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,43 min; IEN-EM(+) m/z 890,65 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10059

El material en bruto del Ejemplo 10059 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,03 min; IEN-EM(+) m/z 899,00 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,15 min; IEN-EM(+) m/z 899,10 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 898,9144 (M+2H); Encontrado: 898,9140 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10060

El material en bruto del Ejemplo 10060 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 27,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,97 min; IEN-EM(+) m/z 910,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,46 min; IEN-EM(+) m/z 910,60 (^m+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 910,4495 (M+2H); Encontrado: 910,4492 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10061

El material en bruto del Ejemplo 10061 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,84 min; IEN-EM(+) m/z 897,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,33 min; IEN-EM(+) m/z 897,60 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10062

El material en bruto del Ejemplo 10062 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,95 min; IEN-EM(+) m/z 897,30 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,49 min; IEN-EM(+) m/z 897,75 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10063

El material en bruto del Ejemplo 10063 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,07 min; IEN-EM(+) m/z 906,05 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,16 min; IEN-EM(+) m/z 906,20 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 905,9222 (M+2H); Encontrado: 905,9215 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10064

El material en bruto del Ejemplo 10064 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,01 min; IEN-EM(+) m/z 917,85 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,05 min; IEN-EM(+) m/z 917,70 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 917,4573 (M+2H); Encontrado: 917,4568 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10065

El material en bruto del Ejemplo 10065 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,89 min; IEN-EM(+) m/z 904,75 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,36 min; IEN-EM(+) m/z 904,45 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 904,4495 (M+2H); Encontrado: 904,4494 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10066

El material en bruto del Ejemplo 10066 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,02 min; IEN-EM(+) m/z 937,65 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,07 min; IEN-EM(+) m/z 937,65 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 10067

El material en bruto del Ejemplo 10067 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,95 min; IEN-EM(+) m/z 910,55 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,43 min; IEN-EM(+) m/z 910,60 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10068

El material en bruto del Ejemplo 10068 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,83 min; IEN-EM(+) m/z 933,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,53 min; IEN-EM(+) m/z 933,60 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 933,4251 (M+2H); Encontrado: 933,4239 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10069

El material en bruto del Ejemplo 10069 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,02 min; IEN-EM(+) m/z 933,20 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 932,9331 (M+2H); Encontrado: 932,9326 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10070

El material en bruto del Ejemplo 10070 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,05 min; IEN-EM(+) m/z 920,00 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,79 min; IEN-EM(+) m/z 919,60 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 919,4277 (M+2H); Encontrado: 919,4267 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10071

El material en bruto del Ejemplo 10071 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,94 min; IEN-EM(+) m/z 918,75 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,46 min; IEN-EM(+) m/z 919,75 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 918,9357 (M+2H); Encontrado: 918,9330 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10072

El material en bruto del Ejemplo 10072 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,80 min; IEN-EM(+) m/z 933,55 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,48 min; IEN-E^m(+) m/z 933,00 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 933,4251 (M+2H); Encontrado: 933,4245 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10073

El material en bruto del Ejemplo 10073 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,97 min; IEN-EM(+) m/z 933,45 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,67 min; IEN-EM(+) m/z 932,90 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 932,9331 (M+2H); Encontrado: 932,9324 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10074

El material en bruto del Ejemplo 10074 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,01 min; IEN-EM(+) m/z 919,60 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 919,4277 (M+2H); Encontrado: 919,4265 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10075

El material en bruto del Ejemplo 10075 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,90 min; IEN-EM(+) m/z 919,10 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,62 min; IEN-EM(+) m/z 919,00 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 918,9357 (M+2H); Encontrado: 918,9337 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10076

El material en bruto del Ejemplo 10076 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,75 min; IEN-EM(+) m/z 910,85 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,36 min; IEN-EM(+) m/z 910,60 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 910,4313 (M+2H); Encontrado: 910,4301 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10077

El material en bruto del Ejemplo 10077 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =2,44 min; IEN-EM(+) m/z 924,65 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,37 min; IEN-EM(+) m/z 924,70 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 924,4469 (M+2H); Encontrado: 924,4455 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10078

El material en bruto del Ejemplo 10078 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,84 min; IEN-EM(+) m/z 929,05 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,46 min; IEN-EM(+) m/z 929,20 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 928,3877 (M+2H); Encontrado: 928,3871 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10079

El material en bruto del Ejemplo 10079 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,65 min; IEN-EM(+) m/z 926,55 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,18 min; IEN-EM(+) m/z 926,60 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 926,4262 (M+2H); Encontrado: 926,4252 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10080

El material en bruto del Ejemplo 10080 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 0,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,59 min; IEN-EM(+) m/z 897,70 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,14 min; IEN-EM(+) m/z 897,70 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 897,4234 (M+2H); Encontrado: 897,4224 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10081

El material en bruto del Ejemplo 10081 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,72 min; IEN-EM(+) m/z 904,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,32 min; IEN-EM(+) m/z 904,55 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 904,4313 (M+2H); Encontrado: 904,4304 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10082

El material en bruto del Ejemplo 10082 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,73 min; IEN-EM(+) m/z 906,70 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,29 min; IEN-EM(+) m/z 906,65 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 906,4017 (M+2H); Encontrado: 906,4014 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10083

El material en bruto del Ejemplo 10083 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,48 min; IEN-EM(+) m/z 905,80 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,90 min; IEN-EM(+) m/z 905,70 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 905,4209 (M+2H); Encontrado: 905,4196 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10084

El material en bruto del Ejemplo 10084 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,81 min; IEN-EM(+) m/z 904,45 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,36 min; IEN-EM(+) m/z 904,60 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 904,4313 (M+2H); Encontrado: 904,4304 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10085

El material en bruto del Ejemplo 10085 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,77 min; IEN-EM(+) m/z 907,35 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,38 min; IEN-EM(+) m/z 906,50 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 906,4017 (M+2H); Encontrado: 906,4011 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10086

El material en bruto del Ejemplo 10086 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,63 min; IEN-EM(+) m/z 905,65 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 905,65 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 905,4209 (M+2H); Encontrado: 905,4198 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10087

El material en bruto del Ejemplo 10087 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,80 min; IEN-EM(+) m/z 917,45 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,40 min; IEN-EM(+) m/z 917,70 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 917,4391 (M+2H); Encontrado: 917,4378 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10088

El material en bruto del Ejemplo 10088 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,72 min; IEN-EM(+) m/z 919,90 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,33 min; IEN-EM(+) m/z 919,95 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 919,4095 (M+2H); Encontrado: 919,4090 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10089

El material en bruto del Ejemplo 10089 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =2,14 min; IEN-EM(-) m/z 945,30 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,19 min; IEN-EM(+) m/z 947,10 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 946,4135 (M+2H); Encontrado: 946,4148 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10090

El material en bruto del Ejemplo 10090 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %. Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 944,20 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,4006 (M+2H); Encontrado: 943,4012 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10091

El material en bruto del Ejemplo 10091 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,75 min; IEN-EM(-) m/z 935,2 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,01 min; IEN-EM(+) m/z 936,7 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 936,3928 (M+2H); Encontrado: 936,3937 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10092

El material en bruto del Ejemplo 10092 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %. Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,14 min; IEN-EM(+) m/z 961,2 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 960,4110 (M+2H); Encontrado: 960,4109 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10093

El material en bruto del Ejemplo 10093 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,82 min; IEN-EM(-) m/z 959,0 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,09 min; IEN-EM(+) m/z 960,9 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 944,4110 (M+2H); Encontrado: 960,4109 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10094

El material en bruto del Ejemplo 10094 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,93 min; IEN-EM(+) m/z 938,70 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,09 min; IEN-EM(+) m/z 939,30 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 938,4068 (M+2H); Encontrado: 938,4065 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10095

El material en bruto del Ejemplo 10095 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,75 min; IEN-EM(+) m/z 946,30 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,08 min; IEN-EM(+) m/z 946,60 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 945,4146 (M+2H); Encontrado: 945,4132 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10096

El material en bruto del Ejemplo 10096 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 32,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,82 min; IEN-EM(+) m/z 959,10 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,13 min; IEN-EM(+) m/z 959,30 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 958,9382 (M+2H); Encontrado: 958,9363 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10097

El material en bruto del Ejemplo 10097 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 44,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,60 min; IEN-EM(+) m/z 959,70 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,11 min; IEN-EM(+) m/z 959,70 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 959,4121 (M+2H); Encontrado: 959,4115 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10098

El material en bruto del Ejemplo 10098 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 36,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,91 min; IEN-EM(+) m/z 952,10 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,30 min; IEN-EM(+) m/z 952,20 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 951,9304 (M+2H); Encontrado: 951,9286 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10099

El material en bruto del Ejemplo 10099 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 36,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,65 min; IEN-EM(+) m/z 952,80 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 953,20 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 952,4042 (M+2H); Encontrado: 952,4045 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10100

El material en bruto del Ejemplo 10100 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,83 min; IEN-EM(+) m/z 959,20 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,34 min; IEN-EM(+) m/z 959,25 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 958,9382 (M+2H); Encontrado: 958,9368 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10102

El material en bruto del Ejemplo 10102 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 36,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,90 min; IEN-EM(+) m/z 909,05 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 908,9502 (M+2H); Encontrado: 908,9476 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10103

El material en bruto del Ejemplo 10103 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 27,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,88 min; IEN-EM(+) m/z 900,35 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,57 min; IEN-EM(+) m/z 900,10 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 899,9549 (M+2H); Encontrado: 899,9521 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10104

El material en bruto del Ejemplo 10104 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 40,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,94 min; IEN-EM(+) m/z 927,45 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,44 min; IEN-EM(+) m/z 927,40 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 926,9408 (M+2H); Encontrado: 926,9375 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10105

El material en bruto del Ejemplo 10105 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,88 min; IEN-EM(+) m/z 901,95 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,44 min; IEN-EM(+) m/z 902,15 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 901,9424 (M+2H); Encontrado: 901,9385 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10106

El material en bruto del Ejemplo 10106 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 40,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,61 min; IEN-EM(+) m/z 910,20 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 909,4240 (M+2H); Encontrado: 909,4215 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10107

El material en bruto del Ejemplo 10107 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 42,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,68 min; IEN-EM(+) m/z 917,50 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,75 min; IEN-EM(+) m/z 917,10 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 916,4318 (M+2H); Encontrado: 916,4293 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10108

El material en bruto del Ejemplo 10108 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 31,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,84 min; IEN-EM(+) m/z 918,90 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,06 min; IEN-EM(+) m/z 918,40 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 917,9455 (M+2H); Encontrado: 917,9416 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10109

El material en bruto del Ejemplo 10109 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 45,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,86 min; IEN-EM(+) m/z 912,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,07 min; IEN-EM(+) m/z 911,50 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 910,9377 (M+2H); Encontrado: 910,9345 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10110

El material en bruto del Ejemplo 10110 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,58 min; IEN-EM(+) m/z 919,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,73 min; IEN-EM(+) m/z 919,50 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 918,4193 (M+2H); Encontrado: 918,4171 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10111

El material en bruto del Ejemplo 10111 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,68 min; IEN-EM(+) m/z 925,95 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,21 min; IEN-EM(+) m/z 926,00 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 925,4271 (M+2H); Encontrado: 925,4250 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10112

El material en bruto del Ejemplo 10112 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 41,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,89 min; IEN-EM(+) m/z 916,50 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,11 min; IEN-EM(+) m/z 916,50 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 915,9580 (M+2H); Encontrado: 915,9549 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10113

El material en bruto del Ejemplo 10113 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 31,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,96 min; IEN-EM(+) m/z 909,40 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 908,9502 (M+2H); Encontrado: 908,9469 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10114

El material en bruto del Ejemplo 10114 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,63 min; IEN-EM(+) m/z 916,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z 917,0 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 916,4318 (M+2H); Encontrado: 916,4293 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10115

El material en bruto del Ejemplo 10115 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 31,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,72 min; IEN-EM(+) m/z 923,95 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,26 min; IEN-EM(+) m/z 923,95 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 923,4397 (M+2H); Encontrado: 923,4369 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10116

El material en bruto del Ejemplo 10116 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 35,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,67 min; IEN-EM(+) m/z 951,90 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,18 min; IEN-EM(+) m/z 951,90 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 951,4152 (M+2H); Encontrado: 951,4133 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10117

El material en bruto del Ejemplo 10117 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 32,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,62 min; IEN-EM(+) m/z 950,70 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,80 min; IEN-EM(+) m/z 950,10 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 949,4277 (M+2H); Encontrado: 949,4250 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10118

El material en bruto del Ejemplo 10118 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,84 min; IEN-EM(+) m/z 944,45 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,34 min; IEN-EM(+) m/z 944,35 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,9335 (M+2H); Encontrado: 943,9302 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10119

El material en bruto del Ejemplo 10119 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 32,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,89 min; IEN-EM(+) m/z 942,45 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,41 min; IEN-EM(+) m/z 942,35 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 941,9461 (M+2H); Encontrado: 941,9436 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10120

El material en bruto del Ejemplo 10120 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 47,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,72 min; IEN-EM(+) m/z 944,90 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,41 min; IEN-EM(+) m/z 944,85 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 944,4311 (M+2H); Encontrado: 944,4283 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10121

El material en bruto del Ejemplo 10121 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 48,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,79 min; IEN-EM(+) m/z 942,65 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,47 min; IEN-EM(+) m/z 942,80 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 942,4437 (M+2H); Encontrado: 942,4407 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10122 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10122 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,67 min; IEN-EM(+) m/z 949,80 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,73 min; IEN-EM(+) m/z 949,60 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 948,9555 (M+2H); Encontrado: 948,9532 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10123

El material en bruto del Ejemplo 10123 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,61 min; IEN-EM(+) m/z 957,15 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,27 min; IEN-EM(+) m/z 957,30 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10126 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10126 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,46 min; IEN-EM(+) m/z 956,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,50 min; IEN-EM(+) m/z 956,60 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10127 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10127 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,45 min; IEN-EM(+) m/z 942,95 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,89 min; IEN-EM(+) m/z 942,80 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 942,4303 (M+2H); Encontrado: 942,4284 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10128 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10128 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,45 min; IEN-EM(+) m/z 943,45 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,84 min; IEN-EM(+) m/z 943,10 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 942,9223 (M+2H); Encontrado: 942,9201 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10129 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10129 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 92 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,51 min; IEN-EM(+) m/z 935,65 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,04 min; IEN-EM(+) m/z 935,60 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 935,4407 (M+2H); Encontrado: 935,4384 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10130 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10130 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,49 min; IEN-EM(+) m/z 935,80 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,96 min; IEN-EM(+) m/z 936,15 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 935,9327 (M+2H); Encontrado: 935,9300 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10131 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10131 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,53 min; IEN-EM(+) m/z 935,10 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,94 min; IEN-EM(+) m/z 936,20 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 934,9431 (M+2H); Encontrado: 934,9411 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10132

El material en bruto del Ejemplo 10132 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,49 min; IEN-EM(+) m/z 935,55 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,88 min; IEN-EM(+) m/z 935,65 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 935,4341 (M+2H); Encontrado: 935,4325 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10136

El material en bruto del Ejemplo 10136 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,27 min; IEN-EM(+) m/z 951,00 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,64 min; IEN-EM(+) m/z 951,20 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 950,9198 (M+2H); Encontrado: 950,9178 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10137

El material en bruto del Ejemplo 10137 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,42 min; IEN-EM(+) m/z 928,30 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,52 min; IEN-EM(+) m/z 928,00 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 927,4432 (M+2H); Encontrado: 927,4417 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10138

El material en bruto del Ejemplo 10138 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,39 min; IEN-EM(+) m/z 929,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,83 min; IEN-EM(+) m/z 929,75 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10139

El material en bruto del Ejemplo 10139 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,37 min; IEN-EM(+) m/z 929,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,96 min; IEN-EM(+) m/z 929,70 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10140

El material en bruto del Ejemplo 10140 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,48 min; IEN-EM(+) m/z 936,20 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,13 min; IEN-EM(+) m/z 936,20 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 935,9509 (M+2H); Encontrado: 935,9480 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10141

El material en bruto del Ejemplo 10141 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 27,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,36 min; IEN-EM(+) m/z 950,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,79 min; IEN-EM(+) m/z 950,60 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 950,4278 (M+2H); Encontrado: 950,4262 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10142

El material en bruto del Ejemplo 10142 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z 951,90 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 950,9198 (M+2H); Encontrado: 950,9182 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10143

El material en bruto del Ejemplo 10143 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,45 min; IEN-EM(+) m/z 928,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,54 min; IEN-EM(+) m/z 928,30 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 927,4432 (M+2H); Encontrado: 927,4418 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10144

El material en bruto del Ejemplo 10144 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,36 min; IEN-EM(+) m/z 929,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,41 min; IEN-EM(+) m/z 930,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 929,4225 (M+2H); Encontrado: 929,4217 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10145

El material en bruto del Ejemplo 10145 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,41 min; IEN-EM(+) m/z 929,55 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,99 min; IEN-EM(+) m/z 930,65 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 929,4225 (M+2H); Encontrado: 929,4194 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10146

El material en bruto del Ejemplo 10146 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,42 min; IEN-EM(+) m/z 936,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,53 min; IEN-EM(+) m/z 936,7 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 935,9509 (M+2H); Encontrado: 935,9490 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10147

El material en bruto del Ejemplo 10147 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,23 min; IEN-EM(+) m/z 951,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,33 min; IEN-EM(+) m/z 951,6 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 950,4278 (M+2H); Encontrado: 950,4256 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10148

El material en bruto del Ejemplo 10148 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,71 min; IEN-EM(-) m/z 950,9 (M-2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 951,3981 (M+2H); Encontrado: 951,3967 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10149

El material en bruto del Ejemplo 10149 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,73 min; IEN-EM(-) m/z 943,5 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,89 min; IEN-EM(+) m/z 945,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 944,3903 (M+2H); Encontrado: 944,3894 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10150

El material en bruto del Ejemplo 10150 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,61 min; IEN-EM(-) m/z 944,2 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,84 min; IEN-EM(+) m/z 946,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 945,3799 (M+2H); Encontrado: 945,3791 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10151

El material en bruto del Ejemplo 10151 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,59 min; IEN-EM(-) m/z 937,3 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,83 min; IEN-EM(+) m/z 939,8 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 938,3721 (M+2H); Encontrado: 938,3719 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10152

El material en bruto del Ejemplo 10152 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,72 min; IEN-EM(-) m/z 928,1 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,06 min; IEN-EM(+) m/z 930,0 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 928,9200 (M+2H); Encontrado: 928,9183 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10153

El material en bruto del Ejemplo 10153 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,68 min; IEN-EM(-) m/z 952,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z 954,8 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 953,4121 (M+2H); Encontrado: 953,4107 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10154

El material en bruto del Ejemplo 10154 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 36,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,48 min; IEN-EM(+) m/z 936,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(+) m/z 937,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 936,4017 (M+2H); Encontrado: 936,4008 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10155

El material en bruto del Ejemplo 10155 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 31,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,54 min; IEN-EM(-) m/z 928,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,69 min; IEN-EM(+) m/z 930,3 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 929,3939 (M+2H); Encontrado: 929,3927 (M+2H).

Preparación de ácido (R)-4-(((9H-fluoren-9-il)metoxi)carbonil)morfolin-3-carboxílico

A una solución de ácido (R)-morfolin-3-carboxílico (2 g, 15,25 mmol) en THF (50,8 ml) y agua (25,4 ml) se le añadieron bicarbonato sódico (1,922 g, 22,88 mmol) y FMOC-OSU (5,14 g, 15,25 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 28 h. Después de la retirada de THF, la suspensión de color blanco se diluyó con NaHCO3 sat./agua y éter. Se filtró a través de celite. Se lavó con agua y éter. Se separó la capa de éter y la acuosa. La capa acuosa se acidificó con HCl 1 N, se extrajo con acetato de etilo, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se concentró para dar 3,19 g de ácido (R)-4-(((9H-fluoren-9- il)metoxi)carbonil)morfolin-3-carboxílico en forma de un sólido de color blanco.

Preparación del Ejemplo 10156

El material en bruto del Ejemplo 10156 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,60 min; IEN-EM(-) m/z 943,3 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,83 min; IEN-EM(+) m/z 945,8 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 944,3991 (M+2H); Encontrado: 944,3984 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10157

El material en bruto del Ejemplo 10157 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,59 min; IEN-EM(-) m/z 936,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,81 min; IEN-EM(+) m/z 938,7 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 937,3913 (M+2H); Encontrado: 937,3905 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10158

El material en bruto del Ejemplo 10158 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,77 min; IEN-EM(+) m/z 937,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,99 min; IEN-EM(+) m/z 937,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 936,9175 (M+2H); Encontrado: 936,9158 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10159

El material en bruto del Ejemplo 10159 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,73 min; IEN-EM(+) m/z 960,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,01 min; IEN-EM(+) m/z 962,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 961,4095 (M+2H); Encontrado: 961,4093 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10160

El material en bruto del Ejemplo 10161 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,80 min; IEN-EM(+) m/z 968,80 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,44 min; IEN-EM(+) m/z 968,80 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 968,4173 (M+2H); Encontrado: 968,4154 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10161

El material en bruto del Ejemplo 10161 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,65 min; IEN-EM(+) m/z 944,65 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,20 min; IEN-EM(+) m/z 944,80 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 944,3991 (M+2H); Encontrado: 944,3977 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10162

El material en bruto del Ejemplo 10162 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 33,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,85 min; IEN-EM(+) m/z 944,45 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,9253 (M+2H); Encontrado: 943,9225 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10163

El material en bruto del Ejemplo 10163 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,59 min; IEN-EM(+) m/z 950,30 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,90 min; IEN-EM(+) m/z 950,70 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 949,9253 (M+2H); Encontrado: 949,9239 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10164

El material en bruto del Ejemplo 10164 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,75 min; IEN-EM(+) m/z 958,10 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 958,00 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 957,4308 (M+2H); Encontrado: 957,4300 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10165

El material en bruto del Ejemplo 10165 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,63 min; IEN-EM(+) m/z 945,40 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,85 min; IEN-EM(+) m/z 944,70 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,9071 (M+2H); Encontrado: 943,9067 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10166

El material en bruto del Ejemplo 10166 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,73 min; IEN-EM(+) m/z 951,50 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 951,00 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10167

El material en bruto del Ejemplo 10167 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 48,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,61 min; IEN-EM(+) m/z 949,50 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z 949,50 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10168

El material en bruto del Ejemplo 10168 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,74 min; IEN-EM(+) m/z 967,80 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,10 min; IEN-EM(+) m/z 968,10 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 966,9357 (M+2H); Encontrado: 966,9339 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10169

El material en bruto del Ejemplo 10169 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,75 min; IEN-EM(+) m/z 937,10 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,17 min; IEN-EM(+) m/z 937,30 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 936,4255 (M+2H); Encontrado: 936,4226 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10170

El material en bruto del Ejemplo 10170 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,70 min; IEN-EM(+) m/z 919,20 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,39 min; IEN-EM(+) m/z 920,05 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 921,3964 (M+2H); Encontrado: 921,3936 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10171

El material en bruto del Ejemplo 10171 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 35,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,59 min; IEN-EM(+) m/z 935,50 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z 935,50 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 934,9200 (M+2H);Encontrado: 934,9167 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10172

El material en bruto del Ejemplo 10172 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 32,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,69 min; IEN-EM(-) m/z 927,65 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,35 min; IEN-EM(+) m/z 929,65 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 929,3939 (M+2H); Encontrado: 929,3927 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10173

El material en bruto del Ejemplo 10173 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,45 min; IEN-EM(+) m/z 938,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,70 min; IEN-EM(+) m/z 938,3 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 937,3913 (M+2H); Encontrado: 937,3897 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10174

El material en bruto del Ejemplo 10174 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,58 min; IEN-EM(+) m/z 944,1 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z 943,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 942,9175 (M+2H); Encontrado: 942,9151 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10175

El material en bruto del Ejemplo 10175 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,89 min; IEN-EM(-) m/z 918,8 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,34 min; IEN-EM(+) m/z 921,15 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 920,9226 (M+2H); Encontrado: 920,9186 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10176

El material en bruto del Ejemplo 10176 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,37 min; IEN-EM(-) m/z 973,9 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,57 min; IEN-EM(+) m/z 976,1 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 975,4070 (M+2H); Encontrado: 975,4049 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10177

El material en bruto del Ejemplo 10177 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,55 min; IEN-EM(+) m/z 959,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z 959,2 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 958,4148 (M+2H); Encontrado: 958,4130 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10178

El material en bruto del Ejemplo 10178 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 46,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,49 min; IEN-EM(+) m/z 952,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,81 min; IEN-EM(+) m/z 952,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 951,4070 (M+2H); Encontrado: 951,4050 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10179

El material en bruto del Ejemplo 10179 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,74 min; IEN-EM(+) m/z 976,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,12 min; IEN-EM(+) m/z 976,1 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 975,4252 (M+2H); Encontrado: 975,4227 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10180

El material en bruto del Ejemplo 10180 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,79 min; IEN-EM(+) m/z 975,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,37 min; IEN-EM(+) m/z 975,8 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 975,4252 (M+2H); Encontrado: 975,4225 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10181

El material en bruto del Ejemplo 10181 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,77 min; IEN-EM(+) m/z 960,70 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,37 min; IEN-EM(+) m/z 960,75 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 960,4199 (M+2H); Encontrado: 960,4173 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10182

El material en bruto del Ejemplo 10182 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,80 min; IEN-EM(+) m/z 936,25 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,47 min; IEN-EM(+) m/z 936,20 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 935,9279 (M+2H); Encontrado: 935,9249 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10183

El material en bruto del Ejemplo 10183 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,72 min; IEN-EM(+) m/z 960,75 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,29 min; IEN-EM(+) m/z 960,75 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 968,4173 (M+2H); Encontrado: 968,4135 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10184

El material en bruto del Ejemplo 10184 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,74 min; IEN-EM(+) m/z 944,20 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,37 min; IEN-EM(+) m/z 944,20 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,9253 (M+2H); Encontrado: 943,9220 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10185

El material en bruto del Ejemplo 10185 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,71 min; IEN-EM(+) m/z 960,65 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,23 min; IEN-EM(+) m/z 960,70 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 960,4199 (M+2H); Encontrado: 960,4174 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10186

El material en bruto del Ejemplo 10186 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 31,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,72 min; IEN-EM(+) m/z 960,70 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,30 min; IEN-EM(+) m/z 960,70 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 960,4199 (M+2H); Encontrado: 960,4169 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10187

El material en bruto del Ejemplo 10187 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 50,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,82 min; IEN-EM(+) m/z 960,70 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,42 min; IEN-EM(+) m/z 960,75 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 960,4199 (M+2H); Encontrado: 960,4168 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10188

El material en bruto del Ejemplo 10188 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,67 min; IEN-EM(+) m/z 943,65 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,18 min; IEN-EM(+) m/z 943,65 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,4095 (M+2H); Encontrado: 943,4072 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10189

El material en bruto del Ejemplo 10189 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,50 min; IEN-EM(+) m/z 952,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(+) m/z 952,0 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 951,4070 (M+2H); Encontrado: 951,4054 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10190

El material en bruto del Ejemplo 10190 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,77 min; IEN-EM(-) m/z 935,2 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,97 min; IEN-EM(-) m/z 934,3 (M-2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 935,9279 (M+2H); Encontrado: 935,9238 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10191

El material en bruto del Ejemplo 10191 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,79 min; IEN-EM(-) m/z 934,1 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,99 min; IEN-EM(+) m/z 936,1 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 935,9279 (M+2H); Encontrado: 935,9237 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10192

El material en bruto del Ejemplo 10192 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,58 min; IEN-EM(-) m/z 942,1 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,66 min; IEN-EM(+) m/z 943,7 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,4095 (M+2H); Encontrado: 943,4064 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10193

El material en bruto del Ejemplo 10193 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 51,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,62 min; IEN-EM(-) m/z 941,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,68 min; IEN-EM(+) m/z 943,7 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,4095 (M+2H); Encontrado: 943,4070 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10194

El material en bruto del Ejemplo 10194 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,82 min; IEN-EM(-) m/z 942,3 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,97 min; IEN-EM(+) m/z 943,9 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,4277 (M+2H); Encontrado: 943,4248 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10195

El material en bruto del Ejemplo 10195 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,88 min; IEN-EM(-) m/z 967,4 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,01 min; IEN-EM(+) m/z 968,8 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 968,4255 (M+2H); Encontrado: 968,4234 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10196 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10196 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 5,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,61 min; IEN-EM(+) m/z 895,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,28 min; IEN-EM(+) m/z 895,2 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 894,9356 (M+2H); Encontrado: 894,9339 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10197 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10197 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,24 min; IEN-EM(+) m/z 902,15 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,83 min; IEN-EM(+) m/z 902,10 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 901,9434 (M+2H); Encontrado: 901,9418 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10198 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10198 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,24 min; IEN-EM(+) m/z 909,05 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,58 min; IEN-EM(+) m/z 909,05 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 908,9512 (M+2H); Encontrado: 908,9496 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10199 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10199 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 35,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,61 min; IEN-EM(+) m/z 903,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,22 min; IEN-EM(+) m/z 903,2 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 902,9330 (M+2H); Encontrado: 902,9322 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10200 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10200 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,47 min; IEN-EM(+) m/z 910,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,15 min; IEN-EM(+) m/z 910,3 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 909,9409 (M+2H); Encontrado: 909,9391 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10201 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10201 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 45,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,54 min; IEN-EM(+) m/z 917,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,22 min; IEN-EM(+) m/z 917,7 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 916,9457 (M+2H); Encontrado: 916,9488 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10202 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10202 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,45 min; IEN-EM(+) m/z 888,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,18 min; IEN-EM(+) m/z 888,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 887,9277 (M+2H); Encontrado: 887,9263 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10203 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10203 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,48 min; IEN-EM(+) m/z 895,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,12 min; IEN-EM(+) m/z 895,3 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 894,9356 (M+2H); Encontrado: 894,9343 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10204 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10204 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,46 min; IEN-EM(+) m/z 902,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,11 min; IEN-EM(+) m/z 902,3 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 901,9434 (M+2H); Encontrado: 901,9419 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10205 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10205 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,51 min; IEN-EM(+) m/z 896,1 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,12 min; IEN-EM(+) m/z 896,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 895,9252 (M+2H); Encontrado: 895,9240 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10206 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10206 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,42 min; IEN-EM(+) m/z 903,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,07 min; IEN-EM(+) m/z 903,7 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 902,9330 (M+2H); Encontrado: 902,9324 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10207 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10207 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,46 min; IEN-EM(+) m/z 910,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,05 min; IEN-EM(+) m/z 910,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 909,9409 (M+2H); Encontrado: 909,9397 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10208 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10208 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 9,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,51 min; IEN-EM(+) m/z 881,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,29 min; IEN-EM(+) m/z 882,1 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 881,4245 (M+2H); Encontrado: 881,4237 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10209 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10209 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,52 min; IEN-EM(+) m/z 882,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,25 min; IEN-EM(+) m/z 882,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 881,8983 (M+2H); Encontrado: 881,8978 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10210 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10210 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,34 min; IEN-EM(+) m/z 874,50 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,95 min; IEN-EM(+) m/z 874,50 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 874,4167 (M+2H); Encontrado: 874,4162 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10211 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10211 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,57 min; IEN-EM(+) m/z 890,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,29 min; IEN-EM(+) m/z 889,8 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 889,4220 (M+2H); Encontrado: 889,4208 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10212 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10212 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,56 min; IEN-EM(+) m/z 890,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,60 min; IEN-EM(+) m/z 890,35 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 889,8958 (M+2H); Encontrado: 889,8954 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10213 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10213 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,48 min; IEN-EM(+) m/z 882,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,26 min; IEN-EM(+) m/z 882,8 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 882,4141 (M+2H); Encontrado: 882,4134 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10214 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10214 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,31 min; IEN-EM(+) m/z 888,80 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,72 min; IEN-EM(+) m/z 888,85 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 888,4323 (M+2H); Encontrado: 888,4312 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10215 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10215 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,46 min; IEN-EM(+) m/z 889,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,24 min; IEN-EM(+) m/z 889,6 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 889,9061 (M+2H); Encontrado: 889,9052 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10216 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10216 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,31 min; IEN-EM(+) m/z 881,45 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,72 min; IEN-EM(+) m/z 881,70 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 881,4245 (M+2H); Encontrado: 881,4238 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10217 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10217 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,29 min; IEN-EM(+) m/z 896,60 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,65 min; IEN-EM(+) m/z 896,55 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10218 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10218 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,46 min; IEN-EM(-) m/z 895,30 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,20 min; IEN-EM(-) m/z 895,60 (M-2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 896,9036 (M+2H); Encontrado: 896,9030 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10219 (no de acuerdo con la invención)

El material en bruto del Ejemplo 10219 se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención =1,29 min; IEN-EM(-) m/z 889,45 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 1,90 min; IEN-EM(-) m/z 890,35 (M-2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 889,4220 (M+2H); Encontrado: 889,4208 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10530

El Ejemplo 10530 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A" pero usando el "Método de ciclación B" en lugar del "Método de ciclación A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación.

El rendimiento del producto fue de 1,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,01 min; IEN-EM(+) m/z 915,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,94 min; IEN-EM(+) m/z 915,8 (^m+2H.)

Preparación del Ejemplo 10531

El Ejemplo 10531 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A" pero usando el "Método de ciclación B" en lugar del "Método de ciclación A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,56 min; IEN-EM(+) m/z 922,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,94 min; IEN-EM(+) m/z 922,5 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 922,4692 (M+2H); Encontrado: 922,4669 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10532

El Ejemplo 10532 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A" pero usando el "Método de ciclación B" en lugar del "Método de ciclación A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,77 min; IEN-EM(+) m/z 887,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,16 min; IEN-EM(+) m/z 887,2 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 866,9633 (M+2H); Encontrado: 866,9610 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10533

El ejemplo 10533 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A" con los siguientes cambios: "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento único" se modificó mediante el incremento del tiempo de agitación de acoplamiento de 15 minutos a 3 horas para la etapa de acoplamiento Fmoc-Val-OH. "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento único" se usó para la etapa de acoplamiento Fmoc-Phe-OH, pero el tiempo de agitación durante la etapa de acoplamiento se incrementó de 15 min a 1 h. "Desprotección global A "se modificó cambiando la" solución de desprotección "de una solución de [ácido trifluoroacético (22 ml), fenol (1,325 g), agua (1,25 ml) y triisopropilsilano (0,5 ml)] a una solución de [ácido trifluoroacético (23,75 ml), 1,4-Ditio-DL-treitol (625 mg), triisopropilsilano (0,625 ml)]. Se usó el "Método de ciclación B" en lugar del "Método de ciclación A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(+) m/z 905,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,27 min; IEN-EM(+) m/z 905,9 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 10534

El Ejemplo 10534 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A" pero usando el "Método de ciclación B" en lugar del "Método de ciclación A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,56 min; IEN-EM(+) m/z 951,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,94 min; IEN-EM(+) m/z 951,4 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 950,9800 (M+2H); Encontrado: 950,9786 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10535

El Ejemplo 10535 se preparó de acuerdo al método usado para el Ejemplo 10533. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(+) m/z 932,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,34 min; IEN-EM(+) m/z 931,9 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 931,4547 (M+2H); Encontrado: 931,4535 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10536 (no de acuerdo con la invención)

El Ejemplo 10536 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A" pero usando el "Método de ciclación B" en lugar del "Método de ciclación A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65 % durante 30 minutos, después una parada de 3 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 2,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,35 min; IEN-EM(+) m/z 927,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,62 min; IEN-EM(+) m/z 927,6 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10539 (no de acuerdo con la invención)

El Ejemplo 10539 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A" pero usando el "Método de ciclación B" en lugar del "Método de ciclación A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con 0,1 % de ácido trifluoroacético; Gradiente: B al 25-65% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,19 min; IEN-EM(+) m/z 906,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,32 min; IEN-EM(+) m/z 906,6 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 906,9118 (M+2H); Encontrado: 906,9105 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10540 (no de acuerdo con la invención)

El Ejemplo 10540 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A" pero usando el "Método de ciclación B" en lugar del "Método de ciclación A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 3 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,71 min; IEN-EM(+) m/z 934,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,52 min; IEN-EM(+) m/z 934,3 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 934,4511 (M+2H); Encontrado: 934,4494 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10542

El Ejemplo 10542 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 150 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato amónico 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,92 min; IEN-EM(+) m/z 946,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,91 min; IEN-EM(+) m/z 946,4 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 946,4124 (M+2H) Encontrado: 946,4113 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10543

El Ejemplo 10543 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 93 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z 919,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,26 min; IEN-EM(+) m/z 919,9 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 919,4266 (M+2H); Encontrado: 919,4253 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10544 (no de acuerdo con la invención)

El Ejemplo 10544 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A" pero usando el "Método de ciclación B" en lugar del "Método de ciclación A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLE^mfue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,36 min; IEN-EM(+) m/z 936,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,14 min; IEN-EM(+) m/z 936,4 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 935,9145 (M+2H); Encontrado: 935,9138 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10551 y el Ejemplo 10640

El Ejemplo 10551 y el Ejemplo 10640 se prepararon de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10541 excepto que se usó el fragmento dipéptido Fmoc-L-Val-L-mPhe-OH en lugar del fragmento dipéptido Fmoc-L-CiclopentilGly-L-mPhe-OH. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50 90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Los diastereómeros se separaron y se secaron por evaporación centrífuga para dar 7,3 mg del Ejemplo 10551 (primer pico de elución) con una pureza estimada por análisis CLEM del 95 % y 10,3 mg del Ejemplo 10640 (segundo pico de elución) con una pureza estimada por análisis CLEM del 98 %.

Ejemplo 10551:

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z 966,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,28 min; IEN-EM(+) m/z 966,9 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 966,4381 (M+2H); Encontrado: 966,4368 (M+2H).

Ejemplo 10640:

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,78 min; IEN-EM(+) m/z 967,0 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 966,4381 (M+2H); Encontrado: 966,4368 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10552

El Ejemplo 10552 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A" pero usando el "Método de ciclación B" en lugar del "Método de ciclación A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEm fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(+) m/z 956,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,47 min; IEN-EM(+) m/z 956,9 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 956,9380 (M+2H); Encontrado: 956,9363 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10553

El Ejemplo 10553 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A" pero usando el "Método de ciclación B" en lugar del "Método de ciclación A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,55 min; IEN-EM(+) m/z 928,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,21 min; IEN-EM(+) m/z 928,1 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 927,9352 (M+2H); Encontrado: 927,9321 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10554

El Ejemplo 10554 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A" pero usando el "Método de ciclación B" en lugar del "Método de ciclación A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 25-65 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,87 min; IEN-EM(+) m/z 948,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,72 min; IEN-EM(+) m/z 948,3 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 948,4667 (M+2H); Encontrado: 948,4634 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10555

El Ejemplo 10555 se preparó siguiendo la "Secuencia sintética general A" pero usando el "Método de ciclación B" en lugar del "Método de ciclación A". El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85% durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100%; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEm fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,89 min; IEN-EM(+) m/z 955,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,75 min; IEN-EM(+) m/z 955,6 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 955,4745 (M+2H); Encontrado: 955,4722 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10556

El Ejemplo 10556 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 60-100 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,94 min; IEN-EM(+) m/z 958,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(+) m/z 958,8 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10557

El Ejemplo 10557 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 60-100 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,94 min; IEN-EM(+) m/z 946,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z 946,0 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10558

El Ejemplo 10558 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 7,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,93 min; IEN-EM(+) m/z 958,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,75 min; IEN-EM(+) m/z 958,9 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10559

El Ejemplo 10559 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,92 min; IEN-EM(+) m/z 965,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z 966,1 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10560

El Ejemplo 10560 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 60-100 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 35,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,08 min; IEN-EM(+) m/z 966,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,87 min; IEN-EM(+) m/z 966,1 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 10561

El Ejemplo 10561 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 2,14 min; IEN-EM(+) m/z 951,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,85 min; IEN-EM(+) m/z 950,6 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10562

El Ejemplo 10562 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,80 min; IEN-EM(+) m/z 951,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,32 min; IEN-EM(+) m/z 950,3 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 10563

El Ejemplo 10563 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 32,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,77 min; IEN-EM(+) m/z 958,1 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,33 min; IEN-EM(+) m/z 958,4 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10564

El Ejemplo 10564 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,88 min; IEN-EM(+) m/z 957,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,52 min; IEN-EM(+) m/z 957,9 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10565

El Ejemplo 10565 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,84 min; IEN-EM(+) m/z 937,6 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,38 min; IEN-EM(+) m/z 937,6 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10566

El Ejemplo 10566 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(+) m/z 952,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,36 min; IEN-EM(+) m/z 952,5 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 951,9128 (M+2H); Encontrado: 951,9113 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10567

El Ejemplo 10567 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 15,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(+) m/z 945,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,35 min; IEN-EM(+) m/z 945,4 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 944,9050 (M+2H); Encontrado: 944,9027 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10568

El Ejemplo 10568 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,81 min; IEN-EM(+) m/z 944,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,45 min; IEN-EM(+) m/z 944,5 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,9153 (M+2H); Encontrado: 943,9124 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10569

El Ejemplo 10569 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,79 min; IEN-EM(+) m/z 937,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,39 min; IEN-EM(+) m/z 937,6 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 936,9075 (M+2H); Encontrado: 936,9049 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10570

El Ejemplo 10570 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,77 min; IEN-EM(+) m/z 944,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,39 min; IEN-EM(+) m/z 943,9 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,4177 (M+2H); Encontrado: 943,4163 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10571

El Ejemplo 10571 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,83 min; IEN-EM(+) m/z 937,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,44 min; IEN-EM(+) m/z 937,4 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 936,9075 (M+2H); Encontrado: 936,9053 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10572

El Ejemplo 10572 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(+) m/z 930,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,31 min; IEN-EM(+) m/z 930,4 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 929,8997 (M+2H); Encontrado: 929,8971 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10573

El Ejemplo 10573 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,72 min; IEN-EM(+) m/z 930,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,25 min; IEN-EM(+) m/z 930,9 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 930,3917 (M+2H); Encontrado: 930,3903 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10574

El Ejemplo 10574 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,71 min; IEN-EM(+) m/z 944,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,24 min; IEN-EM(+) m/z 944,3 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,8971 (M+2H); Encontrado: 943,8959 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10575

El Ejemplo 10575 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z 951,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,22 min; IEN-EM(+) m/z 951,4 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 950,9050 (M+2H); Encontrado: 950,9041 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10576

El Ejemplo 10576 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 31,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,77 min; IEN-EM(+) m/z 957,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,30 min; IEN-EM(+) m/z 957,9 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 957,4334 (M+2H); Encontrado: 957,4322 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10577

El Ejemplo 10577 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,94 min; IEN-EM(+) m/z 943,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 942,9439 (M+2H) Encontrado: 942,9416 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10578

El Ejemplo 10578 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,95 min; IEN-EM(+) m/z 936,3 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 935,9361 (M+2H); Encontrado: 935,9335 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10579

El Ejemplo 10579 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,94 min; IEN-EM(+) m/z 950,1 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,46 min; IEN-EM(+) m/z 950,1 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 949,9335 (M+2H); Encontrado: 949,9317 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10580

El Ejemplo 10580 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,81 min; IEN-EM(+) m/z 951,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,34 min; IEN-EM(+) m/z 950,1 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 950,4255 (M+2H); Encontrado: 950,4237 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10581

El Ejemplo 10581 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,94 min; IEN-EM(+) m/z 936,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,46 min; IEN-EM(+) m/z 936,4 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 935,9361 (M+2H); Encontrado: 935,9339 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10582

El Ejemplo 10582 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 27,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,95 min; IEN-EM(+) m/z 929,3 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 928,9282 (M+2H); Encontrado: 928,9258 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10583

El Ejemplo 10583 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,95 min; IEN-EM(+) m/z 929,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,46 min; IEN-EM(+) m/z 929,9 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10584

El Ejemplo 10584 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,91 min; IEN-EM(+) m/z 943,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,43 min; IEN-EM(+) m/z 943,4 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 10585

El Ejemplo 10585 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,48 min; IEN-EM(+) m/z 972,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,12 min; IEN-EM(+) m/z 972,5 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 971,9202 (M+2H); Encontrado: 971,9183 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10586

El Ejemplo 10586 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 28,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,41 min; IEN-EM(+) m/z 978,7 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z 978,7 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 978,4304 (M+2H); Encontrado: 978,4291 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10587

El Ejemplo 10587 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,98 min; IEN-EM(+) m/z 936,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,46 min; IEN-EM(+) m/z 936,4 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 936,4281 (M+2H) Encontrado: 936,4261 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10588

El Ejemplo 10588 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,98 min; IEN-EM(-) m/z 949,9 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z 951,9 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10589

El Ejemplo 10589 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(+) m/z 944,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,88 min; IEN-EM(+) m/z 944,9 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 10590

El Ejemplo 10590 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,71 min; IEN-EM(+) m/z 959,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,90 min; IEN-EM(+) m/z 958,7 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10591

El Ejemplo 10591 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 8,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,71 min; IEN-EM(-) m/z 957,5 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,90 min; IEN-E^m(-) m/z 957,5 (M-2H).

Preparación del Ejemplo 10592

El Ejemplo 10592 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 13,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(+) m/z 966,3 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,91 min; IEN-EM(+) m/z 966,2 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10593

El Ejemplo 10593 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(-) m/z 949,5 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,87 min; IEN-EM(+) m/z 952,0 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10594

El Ejemplo 10594 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 35-75 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm ; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-65 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,73 min; IEN-EM(+) m/z 958,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,3 min; IEN-EM(+) m/z 958,9 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10595

El Ejemplo 10595 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 6,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,59 min; IEN-EM(+) m/z 966,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,77 min; IEN-EM(+) m/z 966,0 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 10596

El Ejemplo 10596 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,80 min; IEN-EM(-) m/z 951,0 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,97 min; IEN-EM(+) m/z 952,4 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10597

El Ejemplo 10597 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 19,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,73 min; IEN-EM(-) m/z 950,5 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,93 min; IEN-EM(+) m/z 952,2 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10598

El Ejemplo 10598 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-100 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 24,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,75 min; IEN-EM(+) m/z 959,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,97 min; IEN-EM(+) m/z 959,7 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 10599

El Ejemplo 10599 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 34,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,77 min; IEN-EM(-) m/z 948,0 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,82 min; IEN-EM(+) m/z 949,6 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10600

El Ejemplo 10600 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,75 min; IEN-EM(-) m/z 942,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 943,5 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10601

El Ejemplo 10601 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,67 min; IEN-EM(+) m/z 950,8 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 950,6 (m 2h ).

Preparación del Ejemplo 10602

El Ejemplo 10602 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,18 min; IEN-EM(-) m/z 955,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,84 min; IEN-EM(+) m/z 956,9 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10603

El Ejemplo 10603 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 31,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,75 min; IEN-EM(+) m/z 950,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,96 min; IEN-EM(+) m/z 949,9 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10604

El Ejemplo 10604 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 94 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,74 min; IEN-EM(-) m/z 934,5 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,95 min; IEN-EM(+) m/z 936,7 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10605

El Ejemplo 10605 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 55-95 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 15 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,80 min; IEN-EM(-) m/z 943,0 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,06 min; IEN-EM(+) m/z 945,5 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10606

El Ejemplo 10606 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 30-70 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,73 min; IEN-EM(+) m/z 938,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,94 min; IEN-EM(+) m/z 938,5 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10607

El Ejemplo 10607 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 3,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,62 min; IEN-EM(+) m/z 959,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,97 min; IEN-EM(+) m/z 959,3 (^m+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 958,9024 (M+2H); Encontrado: 958,9002 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10608 (no de acuerdo con la invención)

El Ejemplo 10608 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,57 min; IEN-EM(-) m/z 920,5 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,10 min; IEN-EM(+) m/z 922,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 922,4048 (M+2H); Encontrado: 922,4025 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10609

El Ejemplo 10609 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,60 min; IEN-EM(+) m/z 908,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,06 min; IEN-EM(+) m/z 908,4 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 907,9153 (M+2H); Encontrado: 907,9127 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10610

El Ejemplo 10610 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 5-45 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 26,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(-) m/z 937,4 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,25 min; IEN-E^m(-) m/z 936,5 (M-2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 939,4152 (M+2H); Encontrado: 939,4132 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10611

El Ejemplo 10611 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 17,7 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,40 min; IEN-EM(-) m/z 973,4 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,64 min; IEN-EM(+) m/z 975,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 975,4152 (M+2H); Encontrado: 975,4136 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10612

El Ejemplo 10612 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 11,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,58 min; IEN-EM(-) m/z 958,1 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,92 min; IEN-EM(+) m/z 960,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 959,9102 (M+2H); Encontrado: 959,9085 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10613

El Ejemplo 10613 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 12,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,76 min; IEN-EM(+) m/z 945,4 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,20 min; IEN-EM(+) m/z 945,7 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 945,4208 (M+2H); Encontrado: 945,4181 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10614

El Ejemplo 10614 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El material se purificó adicionalmente mediante CL/EM preparativa con las condiciones siguientes: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 16,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,59 min; IEN-EM(-) m/z 965,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,90 min; IEN-EM(+) m/z 967,4 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 967,4177 (M+2H); Encontrado: 967,4156 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10615

El Ejemplo 10615 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 21,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,72 min; IEN-EM(-) m/z 948,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,88 min; IEN-E^m(-) m/z 948,0 (M-2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 950,4173 (M+2H); Encontrado: 950,4165 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10616

El Ejemplo 10616 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,74 min; IEN-EM(-) m/z 942,0 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,99 min; IEN-E^m(-) m/z 942,0 (M-2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,9071 (M+2H); Encontrado: 943,9057 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10617

El Ejemplo 10617 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 18,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,78 min; IEN-EM(-) m/z 934,4 (M-2H).

Preparación del Ejemplo 10618

El Ejemplo 10618 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 37,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,73 min; IEN-EM(+) m/z 951,2 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,98 min; IEN-EM(+) m/z 950,4 (^m+2^h).

Preparación del Ejemplo 10619

El Ejemplo 10619 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,65 min; IEN-EM(-) m/z 955,5 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,84 min; IEN-EM(+) m/z 957,6 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 957,9046 (M+2H); Encontrado: 957,9030 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10620

El Ejemplo 10620 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,68 min; IEN-EM(-) m/z 656,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,73 min; IEN-E^m(-) m/z 955,9 (M-2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 958,4148 (M+2H); Encontrado: 958,4128 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10621

El Ejemplo 10621 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 27,5 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,62 min; IEN-EM(-) m/z 957,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,82 min; IEN-EM(+) m/z 958,7 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 958,9124 (M+2H); Encontrado: 958,9115 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10622

El Ejemplo 10622 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 35,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,92 min; IEN-EM(+) m/z 936,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,11 min; IEN-Em (-) m/z 933,5 (M-2H).

Preparación del Ejemplo 10623

El Ejemplo 10623 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 39,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,90 min; IEN-EM(+) m/z 930,0 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,11 min; IEN-E^m(-) m/z 927,0 (M-2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 929,4177 (M+2H); Encontrado: 929,4155 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10624

El Ejemplo 10624 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 27,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 943,9071 (M+2H) Encontrado: 943,9056 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10625

El Ejemplo 10625 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 30,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,89 min; IEN-EM(+) m/z 936,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,11 min; IEN-EM(+) m/z 935,9 (m 2h ).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 936,4255 (M+2H); Encontrado: 936,4238 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10626

El Ejemplo 10626 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 20-60 % durante 20 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 4,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,82 min; IEN-EM(-) m/z 942,5 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,08 min; IEN-EM(+) m/z 943,6 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10627

El Ejemplo 10627 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,9 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 97 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,79 min; IEN-EM(+) m/z 944,9 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 3,04 min; IEN-EM(+) m/z 944,1 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 944,4230 (M+2H); Encontrado: 944,4208 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10628

El Ejemplo 10628 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 32,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,70 min; IEN-EM(-) m/z 950,8 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,91 min; IEN-EM(+) m/z 951,6 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 951,9046 (M+2H); Encontrado: 951,9030 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10629

El Ejemplo 10629 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 14,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,85 min; IEN-EM(+) m/z 950,0 (M+2H).

Condición de análisis C: Tiempo de retención = 1,86 min; IEN-EM(+) m/z 950,7 (^m+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 950,4173 (M+2H); Encontrado: 950,4166 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10630

El Ejemplo 10630 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 36,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,64 min; IEN-EM(-) m/z 949,0 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,79 min; IEN-EM(+) m/z 950,6 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 950,8968 (M+2H); Encontrado: 950,8961 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10631

El Ejemplo 10631 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 23,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,57 min; IEN-EM(-) m/z 955,9 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,79 min; IEN-E^m(-) m/z 956,1 (M-2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 957,9046 (M+2H); Encontrado: 957,9032 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10632

El Ejemplo 10632 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 15-55 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 20,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,64 min; IEN-EM(-) m/z 949,2 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,89 min; IEN-Em (-) m/z 948,4 (M-2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 950,9157 (M+2H); Encontrado: 950,9138 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10633

El Ejemplo 10633 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 40-80 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 27,8 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,56 min; IEN-EM(-) m/z 957,4 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,67 min; IEN-Em (-) m/z 956,0 (M-2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 958,3966 (M+2H); Encontrado: 958,3953 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10634

El Ejemplo 10634 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 32,1 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 100 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,61 min; IEN-EM(-) m/z 956,7 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,74 min; IEN-EM(+) m/z 958,2 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 958,4148 (M+2H); Encontrado: 958,4144 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10635

El Ejemplo 10635 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 10-50 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 25,3 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,53 min; IEN-EM(-) m/z 956,6 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,69 min; IEN-EM(+) m/z 959,5 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 958,8942 (M+2H); Encontrado: 958,8936 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10636

El Ejemplo 10636 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 22,0 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(-) m/z 964,5 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,69 min; IEN-EM(+) m/z 965,6 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 965,9020 (M+2H); Encontrado: 965,9010 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10637

El Ejemplo 10637 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 45-85 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 35,4 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,51 min; IEN-EM(+) m/z 966,5 (M+2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,57 min; IEN-EM(+) m/z 966,6 (^m+2^h).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 966,3941 (M+2H); Encontrado: 966,3934 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 10638

El Ejemplo 10638 se preparó de acuerdo con el método mostrado en el Ejemplo 10537. El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: XBridge C18, 19 x 200 mm, partículas de 5 |jm; Fase móvil A: 5:95 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de metanol: agua con acetato de amonio 10 mM; Gradiente: B al 50-90 % durante 30 minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 20 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 29,6 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 99 %.

Condición de análisis A: Tiempo de retención = 1,63 min; IEN-EM(-) m/z 956,9 (M-2H).

Condición de análisis B: Tiempo de retención = 2,81 min; IEN-Em (-) m/z 956,5 (M-2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 958,9124 (M+2H); Encontrado: 958,9121 (M+2H).

Condición de análisis CLEM XX;

Columna: Waters Xbridge C18, 2,1 x 50 mm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo:agua con acetato de amonio 10 mM; Temperatura: 35 °C; Gradiente: B al 0-100 % durante 8 minutos, después una parada de 1 minutos a B al 100 %; Flujo: 0,8 ml/min; Detección: UV a 220 nm. Preparación del Ejemplo 11001

El Ejemplo 11001 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria B", "Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético B", "Método de desprotección global C y "Método de ciclación D". Se usó ácido (S)-2-((((9H-fluoren-9-il)metoxi)carbonil)amino)-3,3-dimetilbutanoico en el "procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10mM; Gradiente: B al 15-55% durante 25minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 30 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 10,2 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 98,2 %.

Condición de análisis CLEM XX; Tiempo de retención = 4,66 min; IEN-EM(+) m/z 949,52 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 11002

El Ejemplo 11002 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria B", "Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético B", ""Método de desprotección global C y ""Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10mM; Gradiente: B al 15-55% durante 25minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 30 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 38 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 93,6 %.

Condición de análisis CLEM XX; Tiempo de retención = 3,64 min; IEN-EM(+) m/z 941,70 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 941,9691 (M+2H) Encontrado: 941,9683 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 11003

El Ejemplo 11003 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria B", "Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético B", "Método de desprotección global C y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10mM; Gradiente: B al 15-55% durante 25minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 30 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 50 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 95,6 %.

Condición de análisis CLEM XX; Tiempo de retención = 3,55 min; IEN-EM(+) m/z 976,30 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 976,5036 (M+2H) Encontrado: 976,5027 (M+2H).

Preparación del Ejemplo 11004

El Ejemplo 11004 se preparó siguiendo la secuencia sintética general descrita para la preparación del Ejemplo 0001, compuesta de los siguientes procedimientos generales: "Método sinfónico A: Procedimiento de hinchamiento de resina", "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento convencional", "Método sinfónico A: Procedimiento de acoplamiento de amina secundaria B", "Procedimiento de acoplamiento de aminoácidos personalizado", "Procedimiento de acoplamiento de ácido cloroacético B", "Método de desprotección global C y "Método de ciclación D".

El material bruto se purificó a través de CL/EM preparativa con las siguientes condiciones: Columna: Waters XBridge C18, 30 x 100 mm, partículas de 5 pm; Fase móvil A: 5:95 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10 mM; Fase móvil B: 95:5 de acetonitrilo: agua con acetato de amonio 10mM; Gradiente: B al 15-55% durante 25minutos, después una parada de 5 minutos a B al 100 %; Flujo: 30 ml/min. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se secaron a través de evaporación por centrifugación. El rendimiento del producto fue de 70 mg y su pureza estimada mediante análisis CLEM fue del 96,5 %.

Condición de análisis CLEM XX; Tiempo de retención = 3,78 min; IEN-EM(+) m/z 942,30 (M+2H).

IEN-HRMS(+) m/z: Calculado: 942,4541 (M+2H) Encontrado: 942,4525 (M+2H).

MÉTODOS PARA PROBAR LA CAPACIDAD DE LOS PÉPTIDOS MACROCÍCLICOS PARA COMPETIR POR LA UNIÓN DE PD-1 A PD-L1 USANDO ENSAYOS DE UNIÓN DE FLUORESCENCIA CON RESOLUCIÓN TEMPORAL HOMOGÉNEA (HTRF)

La capacidad de los péptidos macrocíclicos de la presente divulgación para unirse a PD-L1 se investigó usando un ensayo de unión de fluorescencia con resolución temporal homogénea (HTRF) de PD-1/PD-L1.

Métodos

Ensayos de fluorescencia con resolución temporal homogénea (HTRF) de unión de PD-1 soluble a PD-L1 soluble. PD-1 soluble y PD-L1 soluble se refieren a proteínas con truncamientos del extremo carboxilo que eliminan las regiones transmembrana y se fusionan con secuencias heterólogas, específicamente la parte Fc de la secuencia de inmunoglobulina G (Ig) humana o el marcador del epítopo de hexahistidina (His). Todos los estudios de unión se realizaron en un tampón de ensayo de HTRF que consistía en dPBS complementado con albúmina de suero bovino al 0,1 % (p/v) y Tween-20 al 0,05% (v/v). Para el ensayo de unión PD-1-Ig/PD-L1-His, los inhibidores se preincubaron con PD-L1-His (10 nM final) durante 15 min en 4 pl de tampón de ensayo, seguido de la adición de PD-1-Ig (20 nM final) en 1 pl de tampón de ensayo e incubación adicional durante 15 min. Se usaron proteínas de fusión PD-L1 de seres humanos, macacos cinomólogos o de ratón. La detección de HTRF se realizó usando anticuerpo monoclonal anti-Ig marcado con cripato de europio (1 nM final) y anticuerpo monoclonal anti-His marcado con aloficocianina (APC) (20 nM final). Los anticuerpos se diluyeron en tampón de detección de HTRF y se distribuyeron 5 pl sobre la reacción de unión. Se dejó que la reacción se equilibrara durante 30 minutos y se obtuvo una señal (relación 665 nm/620 nm) usando un fluorímetro EnVision. Se establecieron ensayos de unión adicionales entre PD-1-Ig/PD-L2-His (20 y 5 nM, respectivamente), CD80-His/PD-L1-Ig (100 y 10 nM, respectivamente) CD80-His/CTLA4-Ig (10 y 5 nM, respectivamente). Se realizaron estudios de competición entre el compuesto n.° 71 biotinilado y la PD-L1-His humana de la siguiente manera. Se preincubaron inhibidores de péptidos macrocíclicos con PD-L1-His (10nM final) durante 60m en 4 pl de tampón de ensayo seguido de la adición de compuesto n.° 71 biotinilado (0,5 nM final) en 1 pl de tampón de ensayo. Se dejó que la unión se equilibrara durante 30 m seguido de la adición de estreptavidina marcada con criptato de europio (2,5 pM final) y anti-His marcado con APC (20 nM final) en 5 pl de tampón HTRF. Se dejó que la reacción se equilibrara durante 30 m y se obtuvo una señal (relación 665 nm/620 nm) usando un fluorímetro EnVision.

Proteínas recombinantes. PD-1 humana truncada en carboxilo (aminoácidos 25-167) con un marcador de epítopo de Ig humana C-terminal [hPD-1 (25-167)-3S-IG] y PD-L1 humana (aminoácidos 18-239) con un marcador de epítopo His C-terminal [hPD-L1(19-239)-sitio de escisión de proteasa de virus de moteado de las venas del tabaco (^tV^mV)-His] se expresó en células HEK293T y se purificó secuencialmente mediante cromatografía de afinidad de rProteinA y cromatografía de exclusión por tamaño. PD-L2-His humana (Sino Biologicals), CD80-His (Sino Biologicals), CTLA4-Ig (RnD Systems) se obtuvieron todos a través de fuentes comerciales.

Secuencia de PD-1-Ig humano recombinante

hPD1(25-167)-3S-IG

X LDSPDEFíífEP PTESPALLVV TEGSRATFTC FFSSÍTFESFV

S I QTDKLS&PPE 0RSQFGQDCE FEVTQAPRGE m m s w s & R RNDSOTTLOCÍ

101 AISLAPK&QX KSSLRAELRV TIR8AEVFTA R PS P S PE PAG QPQGSPGGGG

151 GESPKSSDKT k t s p p s e a p h i l l g g e s v e l f EPXPKDTLPJI SRTPEVTCVV

101 VDVSHHDPEV BQYííSTYRW SVI,1VLHCW

251 LMGKEYKCKV s ^ k a l p a p ie ktis k a k c s o p REFQYYTLPP BRDELTKMGV' 301 SLTCLYKGP'Í PSDIAVEWBS SKXJPfflffllYKT TPPVLDSDGS FF1YSKLTVS 251 KSR^QQÍJRVP 8 CSVFÍH EALH BH1TQKSES1 SFSK

(SEQ ID NO'.l)

Secuencia de PD-L1-TVMV His (PD-L1-His) humano recombinante

hPDL1(19-239)-TVMV-His

i -FTVTVPKDiíY W EYG SBFilI EGKFFvEKQL DI^íAALIVYWE MEDKN1IQFV

101 GGADYKEITV Q E IEW D PvT SEHELTCQAE GYPKAEYIWT

151 SSEíHQVGSGK TTTTHSKRES KDFNV7BTLR ISTTTH EIFY CTFESEDPSS

GGl 1H T á S L vTPS LPLARPPNBR "TtíSSETYEFQ GKHÉBHH

(SEQ ID NO\2)

Los resultados se muestran en la tabla 1. Como se ha mostrado, los péptidos macrocíclicos de la presente divulgación demostraron potente inhibición de la actividad de unión de PD-1-Ig a PD-L1-TVMV-His (PD-L1-His). A = 0,001-0,0099 ^|JM; B = 0,01-0,0999 pM; C = 0,10-0,99 pM; D=1-10 pM.

Tabla 1

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Numerosas modificaciones y variaciones de la materia objeto descrita y reivindicada en el presente documento son posibles a la luz de las enseñanzas anteriores. Por lo tanto, se entiende que dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas, la materia objeto enumerada en las reivindicaciones puede practicarse de una forma distinta a la descrita específicamente en el presente documento.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto seleccionado entre:

o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

2. Un compuesto seleccionado entre

o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

3. Un compuesto seleccionado entre

y

4. Al menos un péptido macrocíclico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso en la mejora, la estimulación y/o el aumento de la respuesta inmunitaria en un sujeto que lo necesite.

5. Al menos un péptido macrocíclico para uso de acuerdo con la reivindicación 4 con un agente adicional antes de, después o simultáneamente con el péptido o péptidos macrocíclicos descritos en el presente documento.

6. Al menos un péptido macrocíclico para uso de acuerdo con la reivindicación 5, en donde el agente adicional es un agente antimicrobiano, un agente antivírico, un agente citotóxico y/o un modificador de la respuesta inmunitaria.

7. Al menos un péptido macrocíclico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso en la inhibición del crecimiento, de la proliferación o de la metástasis de células cancerosas en un sujeto que lo necesite.

8. Al menos un péptido macrocíclico para su uso de acuerdo con la reivindicación 7 en donde el cáncer se selecciona de melanoma, carcinoma de células renales, cáncer de pulmón no microcítico (CPNM) escamoso, CPNM no escamoso, cáncer colorrectal, cáncer de próstata resistente a la castración, cáncer de ovario, cáncer gástrico, carcinoma hepatocelular, carcinoma de páncreas, carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello, carcinomas de esófago, del tracto gastrointestinal y de mama y una neoplasia maligna hematológica.

9. Al menos un péptido macrocíclico de acuerdo con uno cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para usar en el tratamiento de una enfermedad infecciosa en un sujeto que lo necesite.

10. Al menos un péptido macrocíclico para usar de acuerdo con la reivindicación 9 en donde la enfermedad infecciosa es causada por un virus.

11. Al menos un péptido macrocíclico para uso de acuerdo con la reivindicación 10 en el que el virus se selecciona entre VIH, hepatitis A, hepatitis B, hepatitis C, virus del herpes y gripe.

12. Al menos un péptido macrocíclico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso en el tratamiento del choque séptico en un sujeto que lo necesite.

13. Al menos un péptido macrocíclico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso en el bloqueo de la interacción de PD-L1 con PD-1 y/o CD80 en un sujeto.