ES2676826T3 - Compuestos basados en imidazo[1,2-b]piridazina, composiciones que los comprenden y usos de los mismos - Google Patents

Compuestos basados en imidazo[1,2-b]piridazina, composiciones que los comprenden y usos de los mismos Download PDF

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Abstract

Un compuesto de la fórmula:**Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde: X es CH o N; cada R1A es independientemente -OR1C, -N(R1C)2, -10 C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, -N(R1C)C(O)OR1C, ciano, halo o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más R1B; cada R1B es independientemente -OR1C, -N(R1C)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, -N(R1C)C(O)OR1C, ciano o halo; cada R1C es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; R2C es -C(O)R2D; R2D es heterocarbilo de 2-12 miembros que comprende al menos un átomo de nitrógeno; y m es 0-3; con la condición de que cuando X es CH, m es 1 y R1A es cloro, R2D no es t-butilo.

Description

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DESCRIPCION
Compuestos basados en ¡midazo[1,2-6]p¡ndaz¡na, composiciones que los comprenden y usos de los mismos
Esta solicitud reivindica la prioridad de la solicitud de patente provisional de Estados Unidos n.° 61/608.758, presentada el 9 de marzo de 2012, cuya totalidad se incorpora en el presente documento por referencia.
1. Campo de la invención
Esta invención se refiere a compuestos basados en imidazo^^-bpridazina, útiles como inhibidores de la cinasa 1 asociada a adaptador (AAK1), a composiciones que los comprenden y a métodos de su uso.
2. Antecedentes de la invención
La cinasa 1 asociada a adaptador (AAK1) es un miembro de la familia Ark1/Prk1 de las serina/treonina cinasas. El ARNm de AAK1 existe en dos formas de corte y empalme denominadas corta y larga. La forma larga predomina y se expresa a alto nivel en cerebro y corazón (Henderson y Conner, Mol. Biol. Cell. 2007, 18, 2698-2706). La AAK1 es rica en preparaciones sinaptosomales y se co-localiza con estructuras endocíticas en células cultivadas. La AAK1 modula la endocitosis recubierta de clatrina, un proceso que es importante en el reciclaje de vesículas sinápticas y en la endocitosis mediada por receptores. La AAK1 se asocia con el complejo AP2, un heterotetrámero que conecta la carga del receptor con la capa de clatrina. La unión de la clatrina con AAK1 estimula la actividad de la cinasa AAK1 (Conner et al., Traffic 2003, 4, 885-890; Jackson et. al., J. Cell. Biol. 2003, 163, 231-236). La AAK1 fosforila la subunidad mu-2 de AP-2, que promueve la unión de mu-2 con motivos de clasificación que contienen tirosina en los receptores de carga (Ricotta y col., J. Cell Bio. 2002, 156, 791-795; Conner y Schmid, J. Cell Bio. 2002, 156, 921929). La fosforilación de Mu2 no es necesaria para la captación del receptor, aunque la fosforilación mejora la eficacia de la internalización (Motely et. al., Mol. Biol. Cell. 2006, 17, 5298-5308).
La AAK1 se ha identificado como un inhibidor de la señalización de Neuregulina-1/ErbB4 en células PC12. La pérdida de la expresión de AAK1 a través del silenciamiento génico mediado por la interferencia de ARN o el tratamiento con el inhibidor de cinasa K252a (que inhibe la actividad de la cinasa AAK1) da como resultado la potenciación del crecimiento neurítico inducido por la Neuregulina-1. Estos tratamientos dan como resultado la expresión aumentada de ErbB4 y la acumulación de ErbB4 en de la membrana plasmática o cerca de ella (Kuai et al., Chemistry and Biology 2011, 18, 891-906). NRG1 y ErbB4 son supuestos genes de susceptibilidad a la esquizofrenia (Buonanno, Brain Res. Bull. 2010, 83, 122-131). En ambos genes, los SNP (siglas de single nucleotide polymorphism, polimorfismo mononucleotídico), se han asociado con múltiples endofenotipos de esquizofrenia (Greenwood et al., Am. J. Psychiatry 2011, 168, 930-946). Modelos de ratón KO (knockout, genosuprimidos) de Neuregulina 1 y ErbB4, han mostrado cambios morfológicos y fenotipos conductuales relevantes en la esquizofrenia (Jaaro-Peled et al., Schizophrenia Bulletin 2010, 36, 301-313; Wen et. al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2010, 107, 1211-1216). Además, un polimorfismo mononucleotídico en un intrón del gen AAK1 se ha asociado con la edad de aparición de la enfermedad de Parkinson (Latourelle et. al., BMC Med. Genet. 2009, 10, 98). Estos resultados sugieren que la inhibición de la actividad de AAK1 puede ser útil en el tratamiento de la esquizofrenia, déficits cognitivos en la esquizofrenia, enfermedad de Parkinson, trastorno bipolar y enfermedad de Alzheimer. El documento WO 2008/030579 desvela diversos compuestos que modulan la cinasa asociada al receptor de interleucina 1 (IRAK, Interleukin-1 receptor-associated kinase) y propone su uso en el tratamiento de afecciones asociadas con IRAK. El documento wO 2008/052734 desvela compuestos heterocíclicos propuestos para su uso como agentes antiinflamatorios. El documento WO 2010/033941 desvela compuestos de imidazo[1,2b] piridazina sustituidos para su uso como inhibidores de trk cinasa y el documento WO 2007/025090 desvela inhibidores heterobicíclicos y tricíclicos de Mapk/erk cinasa.
3. Sumario de la invención
Esta invención se refiere, en parte, a inhibidores AAK1 de la fórmula:
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y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde: R1 es Ría o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más Ría; cada Ría es independientemente -ORíc, -N(Ríc)2, -C(0)Ríc, -C(0)ORíc, -C(0)N(Ríc)2, -N(Ríc)C(0)ORíc, ciano, halo o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más R-b; cada Ríb es independientemente -ORíc, -N(Ríc)2, -C(O)Ric, -C(O)ORic, -C(O)N(Ric)2, -N(Ric)C(O)ORic,
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ciano o halo; cada Ríe es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1.12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; R2 es - NR2AR2B, en donde R2A es hidrógeno y R2B es hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más R2C; o R2A y R2B se toman juntos para formar un heterociclo de 4-7 miembros opcionalmente sustituido con uno o más R2C; cada R2C es independientemente -OR2D, -N(R2d)2, - C(O)R2d, -C(O)OR2d, -C(O)N(R2d)2, -N(R2d)C(O)OR2d, ciano, halo o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más R2D; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; y R3 es hidrógeno o alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con uno o más de ciano, halo o hidroxilo.
Una realización de la invención abarca composiciones farmacéuticas y formas de dosificación que comprenden un compuesto divulgado en el presente documento (es decir, un compuesto de la invención).
Otra realización de esta invención abarca métodos de inhibición de la quinasa 1 asociada a adaptador (AAK1), tanto in vitro como in vivo, que comprende poner en contacto AAK1 con un compuesto de la invención.
Otra realización abarca métodos para tratar y controlar enfermedades y trastornos mediados por la actividad de AAK1. Se cree que los ejemplos de tales enfermedades y trastornos incluyen la enfermedad de Alzheimer, trastorno bipolar, dolor, enfermedad de Parkinson y la esquizofrenia (incluidos los déficits cognitivos en la esquizofrenia).
4. Breve descripción de las figuras
En la Figura 1 se ilustran aspectos de la invención, que muestra los resultados obtenidos de un modelo de dolor con formalina utilizando ratones genosuprimidos AAK1 homocigotos (-/-) y sus compañeros de camada de tipo silvestre (+/+). En comparación con sus compañeros de camada de tipo silvestre (+/+), los ratones genosuprimidos AAK1 homocigotos (-/-), muestran una clara reducción en la respuesta al dolor tanto agudo como tónico.
5. Descripción detallada de la invención
Esta invención se basa, en parte, en el descubrimiento de que los ratones genosuprimidos AAK1 presentan una gran resistencia al dolor. Ese descubrimiento incentivó la investigación que finalmente condujo al descubrimiento de inhibidores de AAK1, a composiciones que los comprenden y a métodos de su uso.
5.1. Definiciones
A menos que se indique otra cosa, las frases "compuestos de la invención", "compuestos de la presente divulgación", y similares, se refieren a los compuestos divulgados en el presente documento.
A menos que se indique otra cosa, el término "hidrocarbilo" significa un resto alifático o alicíclico que tiene una cadena principal totalmente de carbono y que consiste en átomos de carbono e hidrógeno. Ejemplos de grupos de hidrocarbilo incluyen los que tienen 1-20, 1-12, 1-6 y 1-4 átomos de carbono (denominado como hidrocarbilo C1-20, hidrocarbilo C1-12, hidrocarbilo C1-6 y hidrocarbilo C1.4, respectivamente). Ejemplos particulares incluyen alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, bencilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilalquilo, naftilo, fenilo y feniletilo.
Ejemplos de restos alquilo incluyen restos de cadena lineal y ramificada que tienen 1-20, 1-12, 1-6, 1-4 y 1-3 átomos de carbono (denominados como alquilo C1-20, alquilo C1-12, alquilo C1-6, alquilo C1-4 y alquilo C1-3, respectivamente). Ejemplos particulares incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, t-butilo, isobutilo, pentilo, hexilo, isohexilo, heptilo, 4,4-dimetilpentilo, octilo, 2,2,4-trimetilpentilo, nonilo, decilo, undecilo y dodecilo.
Ejemplos de restos alquenilo incluyen alquenilo C2-20, C2-12 y C2-6 de cadena lineal y ramificada. Ejemplos particulares incluyen vinilo, alilo, 1 -butenilo, 2-butenilo, isobutilenilo, 1-pentenilo, 2-pentenilo, 3-metil-1-butenilo, 2- metil-2-butenilo, 2,3-dimetil-2-butenilo, 1-hexenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 1-heptenilo, 2-heptenilo, 3-heptenilo, 1- octenilo, 2-octenilo, 3-octenilo, 1-nonenilo, 2-nonenilo, 3-nonenilo, 1-decenilo, 2-decenilo y 3-decenilo.
Ejemplos de restos alquinilo incluyen alquinilo C2-20, C2-12 y C2-6 de cadena lineal y ramificada. Ejemplos particulares incluyen etinilo y 2-propinilo (propargilo).
Ejemplos de restos arilo incluyen antracenilo, azulenilo, fluorenilo, indano, indenilo, naftilo, fenilo y fenantrenilo.
Ejemplos de restos cicloalquilo incluyen cicloalquilo C3-12, C3-7, C4-6 y C6. Ejemplos particulares incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y adamantilo.
A menos que se indique otra cosa, el término "halo" abarca flúor, cloro, bromo y yodo.
A menos que se indique otra cosa, el término "heterocarbilo" se refiere a un resto que tiene una cadena principal
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constituida por uno o más átomos de carbono y uno o más heteroátomos. Son heteroátomos particulares, nitrógeno, oxígeno y azufre. Se puede considerar que un resto heterocarbilo es un resto hidrocarbilo en donde al menos un átomo de carbono, el grupo CH, CH2 o CH3 se reemplaza con uno o más heteroátomos y el número requerido de átomos de hidrógeno para satisfacer valencias. Ejemplos de heterocarbilo incluyen restos de heterocarbilo de 2-20,
2-12, 2-8, 2-6 y 2-4 miembros, en donde el intervalo numérico se refiere a la suma total de átomos de carbono, nitrógeno, oxígeno y/o azufre en el resto. La expresión "heterocarbilo de 2-12 miembros" se refiere por lo tanto a un resto heterocarbilo que tiene un total de 2-12 átomos de carbono, nitrógeno, oxígeno y/o azufre. Restos de heterocarbilo particulares incluyen heteroalquilo, heteroalquenilo y heteroalquinilo de cadena lineal y ramificada, así como heterociclo y heteroarilo.
Ejemplos de restos heteroalquilo incluyen restos heteroalquilo de 2-8 miembros, 2-6 miembros y 2-4 miembros. Ejemplos particulares incluyen alcoxilo, acilo (por ejemplo, formilo, acetilo, benzoilo), alquilamino (por ejemplo, di- (alquil C1-3)amino), arilamino, ariloxima, carbamatos, carbamidas, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, alquilsulfanilo, arilsulfanilo, alquilsulfinilo, arilsulfinilo, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, alquilsulfonilamino y arilsulfonilamino.
A menos que se indique otra cosa, el término "heterociclo" se refiere a un resto heterocarbilo cíclico (monocíclico o policíclico) que puede ser aromático, parcialmente aromático o no aromático. Los heterociclos incluyen heteroarilos. Los ejemplos incluyen heterociclos de 4-10 miembros, 4-7 miembros, 6 miembros y 5 miembros. Ejemplos particulares incluyen benzo[1,3]dioxolilo, 2,3-dihidro-benzo[1,4]dioxinilo, cinolinilo, furanilo, hidantoinilo, morfolinilo, oxetanilo, oxiranilo, piperazinilo, piperidinilo, pirrolidinonilo, pirrolidinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidropiridinilo, tetrahidropirimidinilo, tetrahidrotiofenilo, tetrahidrotiopiranilo y valerolactamailo. Debido a que el término "heterociclo" se refiere a un anillo, por sí solo no incluye moléculas, tales como oxazolidinona e imidazolidinona: tales restos se consideran heterociclos sustituidos, a saber heterociclos sustituidos con oxo.
Ejemplos de restos heteroarilo incluyen acridinilo, benzoimidazolilo, benzofuranilo, benzoisotiazolilo,
benzoisoxazolilo, benzoquinazolinilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, furilo, imidazolilo, indolilo, isotiazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, oxazolilo, ftalazinilo, pirazinilo, pirazolilo, piridazinilo, piridilo, pirimidinilo, pirimidilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolinilo, tetrazolilo, tiazolilo y triazinilo.
A menos que se indique otra cosa, el término "incluye" tiene el mismo significado que "incluye, pero sin limitación", y el término "incluyen" tiene el mismo significado que "incluyen, pero sin limitación". De manera similar, la expresión "tal como" tiene el mismo significado que la expresión "tal como, pero sin limitación".
A menos que se indique otra cosa, los términos "gestionar", "gestionando" y "gestión" abarcan la prevención de la recurrencia de la enfermedad o trastorno especificado en un paciente que ya ha sufrido la enfermedad o trastorno, y/o alargar el tiempo que un paciente que ha sufrido la enfermedad o trastorno permanece en remisión. Los términos abarcan la modulación del umbral, el desarrollo y/o la duración de la enfermedad o trastorno, o cambiar la forma en que un paciente responde a la enfermedad o trastorno.
A menos que se indique otra cosa, una "cantidad terapéuticamente eficaz" de un compuesto es una cantidad suficiente para proporcionar un beneficio terapéutico en el tratamiento o gestión de una enfermedad o una afección o para retrasar o minimizar uno o más síntomas asociados con la enfermedad o la afección. Una "cantidad terapéuticamente eficaz" de un compuesto se refiere a una cantidad de agente terapéutico, solo o en combinación con otras terapias, que proporciona un beneficio terapéutico en el tratamiento o tratamiento de la enfermedad o condición. La expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" puede incluir una cantidad que mejora la terapia global, reduce o evita síntomas o causas de una enfermedad o afección, o mejora la eficacia terapéutica de otro agente terapéutico.
A menos que se indique otra cosa, los términos "tratar", "tratando" y "tratamiento" contemplan una acción que ocurre mientras un paciente sufre de la enfermedad o trastorno especificado, que reduce la gravedad de la enfermedad o trastorno, o retarda o ralentiza la progresión de la enfermedad o trastorno.
A menos que se indique otra cosa, uno o más adjetivos que preceden inmediatamente a una serie de sustantivos deben interpretarse como aplicables a cada uno de los sustantivos. Por ejemplo, la frase "alquilo, arilo o heteroarilo opcionalmente sustituido" tiene el mismo significado que "alquilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido o heteroarilo opcionalmente sustituido".
5.2. Compuestos
Esta invención abarca compuestos de la fórmula:
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y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde: Ri es Ría o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más Ría; cada Ría es independientemente -ORic, -N(Ríc)2, -C(O)Ric, -C(O)ORic, -C(O)N(Ric)2, -N(Ric)C(O)ORic, ciano, halo o hidrocarbilo ci-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más Ríb; cada Ríb es independientemente -ORic, -N(Ric)2, -c(O)Ric, -c(O)ORic, -c(O)N(Ric)2, -N(Ric)c(O)ORic, ciano o halo; cada Ric es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo ci-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; R2 es - NR2AR2B, en donde R2A es hidrógeno y R2B es hidrocarbilo ci-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más R2c; o R2A y R2B se toman juntos para formar un heterociclo de 4-7 miembros opcionalmente sustituido con uno o más R2c; cada R2c es independientemente -OR2D, -N(R2d)2, - c(O)R2D, -c(O)OR2D, -c(O)N(R2D)2, -N(R2d)c(0)OR2d, ciano, halo o hidrocarbilo ci-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, hidroxilo o R2d; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo ci-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo o hidroxilo; y R3 es hidrógeno o alquilo ci-6 opcionalmente sustituido con uno o más de ciano, halo o hidroxilo.
En compuestos particulares, Ri es Ría. En compuestos particulares, Ri es hidrocarbilo ci-12 opcionalmente sustituido. En compuestos particulares, Ri es fenilo opcionalmente sustituido. En compuestos particulares, Ri es heterocarbilo de 2-Í2 miembros opcionalmente sustituido (por ejemplo, heterocarbilo de 2-8 miembros, heterocarbilo de 2-6 miembros, heterocarbilo de 2-6 miembros). En compuestos particulares, Ri es piridinilo, tiofeno o imidazol opcionalmente sustituidos.
En compuestos particulares, Ría es halo. En algunos, Ría es -ORic, -N(Ric)2, -c(O)Ric, -c(O)ORic, o -c(O)N(Ric)2. En algunos, Ría es -ORic. En algunos, Ríb es -N(Ric)2, -ORic, halo.
En compuestos particulares, R2A y R2B se toman juntos para formar un heterociclo de 4-7 miembros opcionalmente sustituido con uno o más R2c.
En compuestos particulares, Ric es hidrógeno. En algunos, Ric es hidrocarbilo ci-12 (por ejemplo, hidrocarbilo ci-6, hidrocarbilo ci-4, tal como metilo, etilo, propilo).
En compuestos particulares, R2c es -c(O)OR2D, -c(O)N(R2d)2, o -N(R2d)c(O)OR2d.
En compuestos particulares, R2D es hidrógeno. En algunos, R2D es hidrocarbilo ci-12 (por ejemplo, hidrocarbilo ci-6, hidrocarbilo ci-4, tal como metilo, etilo, propilo).
En compuestos particulares, R3 es hidrógeno.
Una realización de la invención abarca compuestos de la fórmula:
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y una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en donde: A es hidrocarbilo ci-12 cíclico o heterociclo de 4-7 miembros; D es un heterociclo de 4-7; cada Ría es independientemente -ORic, -N(Ric)2, -c(O)Ric,-c(O)ORic, - c(O)N(Ric)2, -N(Ric)c(O)ORic, ciano, halo o hidrocarbilo ci-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más Ríb; cada Ríb es independientemente -ORic, -N(Ric)2, - c(O)Ric, -c(O)ORic, -c(O)N(Ric)2, -N(Ric)c(O)ORic, ciano o halo; cada Ric es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo ci-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; cada R2c es independientemente -OR2D, -N(R2d)2, -c(O)R2d, -c(O)OR2d, - c(O)N(R2d)2, -N(R2d)c(O)OR2d, ciano, halo o hidrocarbilo ci-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más con uno o más amino, ciano, halo, hidroxilo o R2d; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo ci-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo o hidroxilo; n es 1-3; y m es 0-3.
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En compuestos particulares, R2C no es hidroxilo o fenilo o piridinilo opcionalmente sustituidos.
En compuestos particulares, cuando D es diazapina y A es piridinilo, R2C no es -C(O)O-ferc-butilo.
En compuestos particulares, cuando D es piperazina, A es fenilo y Ría es cloro, R2C no es -C(O)O-ferc-butilo.
En compuestos particulares, cuando D es piperidinilo, A es piridinilo y Ría es cloro, R2C no es --NHC(O)O-ferc-butilo.
En compuestos particulares, cuando D es piperidinilo, A es piridinilo y Ría es -NHCH2CH2CH(CH3)2, R2C no es NH2.
Una realización de la invención abarca compuestos de la fórmula:
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y una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en donde: A es hidrocarbilo C1-12 cíclico o heterociclo de 4-7 miembros; D es un heterociclo de 4-7; cada Ría es independientemente -ORíc, -N(Ríc)2, -C(0)Ríc, -C(0)ORíc, - C(0)N(Ríc)2, -N(Ríc)C(0)ORíc, ciano, halo o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más Ríb; cada Ríb es independientemente -ORíc, -N(Ríc)2, - C(O)Ric, -C(0)ORíc, -C(O)N(Ric)2, -N(Ric)C(0)ORíc, ciano o halo; cada Ríe es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; cada R2C es independientemente -OR2D, -N(R2d)2, -C(O)R2D, -C(O)OR2D, - C(O)N(R2D)2, -N(R2d)C(0)OR2d, ciano, halo o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más con uno o más amino, ciano, halo, hidroxilo o R2D; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más de amino, ciano, halo o hidroxilo; n es 1-3; y m es 0-3.
En compuestos particulares abarcados por esta realización: 1) R2C no es hidroxilo o fenilo o piridinilo opcionalmente sustituido; 2) cuando D es diazapina y A es piridinilo, R2C no es --C(O)O-ferc-butilo; 3) cuando D es piperazina, A es fenilo y Ría es cloro, R2C no es -C(O)O-ferc-but¡lo; 4) cuando D es piperidinilo, A es piridinilo y Ría es cloro, R2C no es -NHC(O)O-ferc-butilo; y 5) cuando D es piperidinilo, A es piridinilo y Ría es -NHCH2CH2CH(Ch3)2, R2C no es NH2.
En compuestos particulares, D es piperazina o pirrolidina.
En compuestos particulares, n es 1.
En compuestos particulares, m es 1 o 2.
En compuestos particulares, A es piridinilo, tiofeno o imidazol.
Los compuestos particulares de la invención son de la fórmula:
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en donde X es CH o N. En una realización, X es N y me es 1 o 2. Una realización de la invención abarca compuestos de la fórmula:
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y una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en donde: X es CH o N; cada Ría es independientemente -
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ORic, -N(Ric)2, -C(O)Ric, -C(O)ORic, -C(O)N(Ric)2, -N(Ric)C(O)ORic, ciano, halo o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más Rib; cada Rib es independientemente -OR1C, -N(R1c)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1c)2, -N(R1c)C(O)OR1c, ciano o halo; cada R1C es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; cada R2C es independientemente - OR2D, -N(R2d)2, -C(O)R2d, -C(O)OR2d, -C(O)N(R2d)2, -N(R2d)C(O)OR2d, ciano, halo o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más con uno o más amino, ciano, halo, hidroxilo o R2d; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo o hidroxilo; y m es 0-3.
En algunos compuestos de esta realización, R2C no es fenilo o piridinilo opcionalmente sustituido.
Los compuestos particulares de la invención son de la fórmula:
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Los compuestos particulares de la invención son de la fórmula:
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Una realización de la invención abarca compuestos de la fórmula:
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y una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en donde: X es CH o N; cada R1A es independientemente - OR1C, -N(R1c)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1c)2, -N(R1c)C(O)OR1c, ciano, halo o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más R1B; cada
Rib es independientemente -ORic, -N(Ric)2, -C(O)Ric, -C(O)ORic, -C(O)N(Ric)2, -N(Ric)C(O)ORic, ciano o halo; cada Ríe es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1.12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; cada R2C es independientemente - OR2D, -N(R2d)2, -C(O)R2D, -C(O)OR2D, -C(O)N(R2D)2, -N(R2d)C(0)OR2d, ciano, halo o hidrocarbilo C1-12 5 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más con uno o
más amino, ciano, halo, hidroxilo o R2D; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12
opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo o hidroxilo; y n es 0-3.
10 En algunos compuestos de esta realización, cuando X es CH, m es 1 y R1A es cloro, R2D no es t-butilo.
En algunos compuestos de esta realización, R2C no es fenilo o piridinilo opcionalmente sustituido.
Los compuestos particulares de la invención son de la fórmula:
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En algunos, m es 1 o 2.
20 Los compuestos particulares de la invención son de la fórmula:
Otros son de la fórmula: 25
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En compuestos particulares, R1A es -OR1C.
30 En compuestos particulares, R1C es hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido (por ejemplo, hidrocarbilo C1-6, hidrocarbilo C1-4).
En compuestos particulares, R2C es -C(O)OR2D, -C(0)N(R2d)2, o -N(R2d)C(0)OR2d. En otros, R2C es -C(O)R2D.
35 En compuestos particulares, cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 (por ejemplo, hidrocarbilo C1-6, hidrocarbilo C1-4). En otros, R2D es heterocarbilo de 2-12 miembros que comprende al menos un átomo de nitrógeno.
Los compuestos de la invención pueden tener uno o más centros asimétricos. A menos que se indique otra cosa, 40 esta invención abarca todos los estereoisómeros de los compuestos, así como mezclas de los mismos. Los estereoisómeros individuales de los compuestos pueden prepararse sintéticamente a partir de materiales de partida disponibles comercialmente que contienen centros quirales o mediante la preparación de mezclas de productos enantioméricos, seguido de separación, tal como conversión a una mezcla de diastereómeros, seguido de separación o recristalización, técnicas cromatográficas o separación directa de enantiómeros en columnas 45 cromatográficas quirales. Los compuestos de partida de estereoquímica particular están disponibles o se pueden producir y separar por técnicas conocidas en la técnica.
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Determinados compuestos de la presente divulgación pueden existir también en diferentes formas conformacionales estables que pueden ser separables. La asimetría de torsión debida a una restricción en las rotaciones alrededor de un enlace simple asimétrico, por ejemplo las debidas al impedimento estérico o tensiones en el anillo, pueden permitir la separación de los diferentes confórmeros. La presente divulgación incluye cada isómero conformacional de estos compuestos y mezclas de los mismos.
Se pretende que la presente divulgación incluya todos los isótopos de los átomos que se encuentran en los presentes compuestos. Los isótopos incluyen aquellos átomos que tienen el mismo número atómico pero números másicos diferentes. A modo de ejemplo general y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen deuterio y tritio. Los isótopos de carbono incluyen 13C y 14C. Los compuestos de la invención marcados isotópicamente pueden prepararse generalmente por técnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia o mediante procesos análogos a aquellos descritos en el presente documento, usando un reactivo adecuado marcado isotópicamente en lugar del reactivo no marcado que de otro modo se emplea. Tales compuestos pueden tener una diversidad de usos potenciales, por ejemplo como patrones y reactivos en la determinación de la actividad biológica. En el caso de isótopos estables, tales compuestos pueden tener el potencial de modificar favorablemente propiedades biológicas, farmacológicas o farmacocinéticas.
Los compuestos de la presente divulgación pueden existir como sales farmacéuticamente aceptables. La expresión "sal farmacéuticamente aceptable", como se usa en el presente documento, representa sales o formas de iones híbridos de los compuestos de la presente divulgación que son solubles en agua o aceite o dispersables, que están, dentro del alcance del buen juicio médico, y son adecuadas para el uso en contacto con los tejidos de los pacientes sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica, u otro problema o complicación acorde con una relación beneficio/riesgo razonables, y son eficaces para su uso previsto. Las sales pueden prepararse durante el aislamiento y la purificación finales de los compuestos o haciendo reaccionar un átomo de nitrógeno con un ácido adecuado. Las sales de adición de ácido representativas incluyen acetato, adipato, alginato, citrato, aspartato, benzoato, bencenosulfonato, bisulfato, butirato, alcanforato, alcanforsulfonato; digluconato, dibromhidrato, diclorhidrato, diyodhidrato, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, formiato, fumarato, clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, 2-hidroxietanosulfonato, lactato, maleato, mesitilensulfonato, metanosulfonato, naftilensulfonato, nicotinato, 2-naftalenosulfonato, oxalato, pamoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, tartrato, tricloroacetato, trifluoroacetato, fosfato, glutamato, bicarbonato, paratoluensulfonato y undecanoato. Los ejemplos de ácidos que se pueden formar para formar sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables incluyen ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico y fosfórico, y ácidos orgánicos tales como ácido oxálico, maleico, succínico y cítrico.
Pueden prepararse sales de adición básicas durante el aislamiento y purificación final de los compuestos haciendo reaccionar un grupo carboxi con una base adecuada, tal como el hidróxido, carbonato o bicarbonato de un catión metálico o con amonio o una amina orgánica primaria, secundaria o terciaria. Los cationes de las sales farmacéuticamente aceptables incluyen litio, sodio, potasio, calcio, magnesio y aluminio, así como cationes de aminas cuaternarias tales como amonio, tetrametilamonio, tetraetilamonio, metilamaina, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina, dietilamina, etilamina, tributilamina, piridina, N,W-dimetilanilina, W-metilpiperidina, W-metilmorfolina, diciclohexilamina, procaína, dibencilamina, N,W-dibencilfenetilamina y N,N'-dibenciletilendiamina. Otras aminas orgánicas representativas útiles para la formación de sales de adición de base incluyen etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperidina y piperazina.
Compuestos particulares de la invención inhiben AAK1 con un CI50 de menos de 0,1, 0,01 o 0,001 pM como se midió en el ensayo de la placa de filtro P81 descrito a continuación en los Ejemplos. Compuestos particulares de la invención inhiben AAK1 con un CI50 de menos de 0,1, 0,01 o 0,001 pM como se midió en el ensayo basado en células HEK281 descrito a continuación en los Ejemplos.
5.3. Métodos de síntesis
Los compuestos de la invención pueden prepararse usando métodos conocidos por los expertos en la materia. Los compuestos particulares son de la fórmula general:
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en donde R1, R2 y R3 se definen en el presente documento. Estos compuestos pueden prepararse mediante los métodos mostrados a continuación.
En el Esquema 1, el cloro o flúor de un compuesto de fórmula 1 se desplaza con una amina para producir 2. Para
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algunos ejemplos, el halógeno en 1 puede hidrolizarse para dar 3, y después hacerse reaccionar con la amina para proporcionar 2. El acoplamiento de Suzuki de 2 con un éster o ácido borónico apropiado [R3B(OR)2] proporciona los compuestos de fórmula 4. El compuesto 2 también puede convertirse a su ácido borónico 5 correspondiente, que puede acoplarse con un bromuro apropiado para proporcionar 4. Como alternativa, el acoplamiento de Suzuki de 1 con un éster o ácido borónico apropiado [RgB(OR)2] proporciona compuestos de fórmula 6, el halógeno al que puede desplazarse para producir 4.
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El Esquema 2 representa un enfoque útil en la preparación del compuesto 3-bromo-6-fluoroimidazo[1,2-b]piridazina de fórmula 1a. La 3,6-dicloropiridazina 7 se convierte a 3,6-difluoropiridazina 8 haciendo reaccionar 7 con KF secado en aerosol en DMSO a 135 °C. El desplazamiento de uno de los flúor de 8 por NH4OH en un tuno cerrado herméticamente, calentado, generó 9. La ciclación de 9 con cloroacetaldehído da el intermedio 10. La bromación de 10 proporciona 1a.
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El Esquema 3 muestra un método para preparar compuestos 3-bromo-6-cloroimidazo[1,2-b]piridazina 4 o 5 sustituidos de fórmula 1b. El desplazamiento de uno de los cloro de 11 por 2,4-dimetoxibencilamina genera una mezcla de regioisómeros de 12, que se separan. La retirada del grupo 2,4-dimetoxibencilo produce 13. La ciclación de 13 con cloroacetaldehído da el intermedio 14. La bromación de 14 proporciona 1b.
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El Esquema 4 muestra un enfoque útil en la preparación de compuestos de la invención en donde R2 es arilo. En el 5 presente caso, el acoplamiento de Suzuki del compuesto 15 con un éster o ácido borónico apropiado [R3B(OR)2] proporciona 16. La bromación de 16 proporciona el intermedio 17. El segundo acoplamiento de Suzuki da el compuesto 18.
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El Esquema 5 describe la preparación de compuestos de fórmula 20. El cloro o flúor de un compuesto de fórmula 1 se desplaza con un tiol para producir 19. El acoplamiento de Suzuki de 19 con un éster o ácido borónico apropiado [R-iB(OR)2] proporciona compuestos de fórmula 2o.
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Los compuestos de fórmula 21, 22 y 23 pueden prepararse mediante los métodos mostrados en el Esquema 6. El 20 bromo de un compuesto de fórmula 2 se desplaza con un grupo ciano para producir 21. La hidrólisis del grupo ciano en 21 proporciona el ácido 22. El acoplamiento de amida regular del ácido 22 da la amida 23.
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El Esquema 7 describe un método para preparar los compuestos 26, 27 y 30. Con este enfoque, el grupo amina de 5 un compuesto de fórmula 24 se hace reaccionar con cloruro de acetilo en condiciones básicas para proporcionar 25. El desplazamiento de amina del cloro en 25 proporciona compuestos con formula 26 y 27. El grupo amina en 24 también puede hacerse reaccionar con un cloruro de acilo que aporta un grupo saliente terminal, tal como bromo, para dar 28. La ciclación intramolecular de 28 en condiciones básicas fuertes proporciona el intermedio 29. El desplazamiento de amina del cloro en 29 proporciona compuestos de fórmula 30.
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Se muestran en el Esquema 8, enfoques útiles en la preparación de compuestos de las fórmulas 33 y 35. En el 15 presente caso, reducción de la función aldehído en el compuesto 31 da el alcohol 32. El desplazamiento del cloro en 32 proporciona compuestos de fórmula 33. La conversión del carbonilo del 31 en difluorometilo da 34. El desplazamiento del cloro en 34 proporciona compuestos con fórmula 35.
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Pueden prepararse compuestos macrocíclicos de acuerdo con el Esquema 9. El desplazamiento del flúor en 1a con una amina cuidadosamente ensamblada que posee un bromuro de arilo terminal proporciona el compuesto 36. El acoplamiento tipo Suzuki intramolecular de 36 proporciona el compuesto macrocíclico 37.
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5.4. Métodos de uso
Una realización de esta invención incluye métodos de inhibición de la cinasa 1 asociada a adaptador (AAK1), tanto in vitro como in vivo, que comprenden poner en contacto la AAK1 con un compuesto de la invención.
Otra realización incluye métodos de tratamiento y gestión de enfermedades y trastornos mediados por la actividad de la AAK1. Las enfermedades y los trastornos mediados por la actividad de la AAK1 son enfermedades y trastornos que tienen al menos un síntoma, cuya gravedad o manifestación se ve afectada por la actividad de la AAK1. Se cree que los ejemplos de dichas enfermedades y trastornos incluyen enfermedad de Alzheimer, trastorno bipolar, dolor, enfermedad de Parkinson y esquizofrenia (incluidos déficits cognitivos en la esquizofrenia). Los métodos particulares comprenden administrar a un paciente (un ser humano u otro mamífero) que lo necesite, una cantidad terapéutica o profilácticamente eficaz de un inhibidor de AAK1 (por ejemplo, un compuesto desvelado en este documento).
Otra realización de esta invención incluye un método de tratamiento o gestión de una enfermedad o trastorno, que comprende administrar a un paciente que lo necesite una cantidad terapéutica o profilácticamente eficaz de un
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inhibidor de AAK1, en el que la enfermedad o trastorno es enfermedad de Alzheimer, trastorno bipolar, dolor, enfermedad de Parkinson o esquizofrenia (incluidos déficits cognitivos en la esquizofrenia). Tipos particulares de dolor incluyen dolor crónico, dolor agudo y dolor neuropático. Tipos particulares de dolor neuropático incluyen fibromialgia y neuropatía periférica (por ejemplo, neuropatía diabética).
Cuando se utilizan para tratar o gestionar una enfermedad o trastorno, los compuestos de la invención se administran preferentemente como parte de una composición farmacéutica que comprende uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.
Las composiciones, o formulaciones, farmacéuticas, se pueden presentar en formas de dosis unitaria que contienen una cantidad predeterminada de ingrediente activo por dosis unitaria. En una monoterapia para la prevención y el tratamiento de enfermedades son típicos niveles de dosificación de entre aproximadamente 0,01 y aproximadamente 250 miligramos por kilogramo ("mg/kg") de peso corporal al día, preferentemente entre aproximadamente 0,05 y aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal al día de los compuestos de la presente divulgación. Típicamente, las composiciones farmacéuticas de esta divulgación se administrarán de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 veces al día o, de manera alternativa, como una infusión continua. Dicha administración puede utilizarse como tratamiento crónico o agudo. La cantidad de principio activo que puede combinarse con los materiales transportadores para producir una forma farmacéutica individual variará dependiendo de la afección que se esté tratando, de la gravedad de la afección, del tiempo de administración, de la vía de administración, de la tasa de excreción del compuesto empleado, de la duración del tratamiento y de la edad, del sexo, del peso y de la afección del paciente. Las formulaciones farmacéuticas unitarias preferidas son las que contienen una dosis o subdosis diaria, como se indicó anteriormente en el presente documento, o una fracción apropiada de las mismas, de un principio activo. El tratamiento puede iniciarse con dosificaciones pequeñas sustancialmente por debajo de la dosis óptima del compuesto. Posteriormente, la dosificación se aumenta en pequeñas cantidades hasta que se alcanza el efecto óptimo en las circunstancias dadas. En general, el compuesto se administra de forma más deseable a un nivel de concentración que generalmente proporcionará resultados eficaces sin producir efectos secundarios perjudiciales o nocivos.
Los compuestos de la invención pueden administrarse en combinación con uno o más agentes terapéuticos o profilácticos adicionales. Por ejemplo, cuando se utilizan para el tratamiento del dolor, como posibles agentes adicionales se incluyen agentes inmunosupresores y antiinflamatorios.
Los inmunosupresores adecuados para su uso en los métodos y composiciones de esta invención incluyen los conocidos en la técnica. Como ejemplos se incluyen aminopterina, azatioprina, ciclosporina A, D-penicilamina, sales de oro, hidroxicloroquina, leflunomida, metotrexato, minociclina, rapamicina, sulfasalazina, tracolimus (FK506) y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. El metotrexato es un inmunosupresor particular.
Como ejemplos adicionales se incluyen anticuerpos contra TNF, tales como adalimumab, certolizumab pegol, etanercept e infliximab. Otros ejemplos incluyen bloqueadores de interleucina 1, tales como anakinra. Otros ejemplos incluyen anticuerpos contra linfocitos B (CD20), tales como rituximab. Otros ejemplos incluyen bloqueadores de la activación de linfocitos T, tales como abatacept.
Como ejemplos adicionales se incluyen inhibidores de la inosina monofosfato deshidrogenasa, tales como micofenolato de mofetilo (CellCept®) y ácido micofenólico (Myfortic®).
Los fármacos antiinflamatorios adecuados para su uso en los métodos y composiciones de esta invención incluyen los conocidos en la técnica. Como ejemplos se incluyen glucocorticoides y AINE (antiinflamatorios no esteroideos).
Como ejemplos de glucocorticoides se incluyen aldosterona, beclometasona, betametasona, cortisona, desoxicorticosterona, dexametasona, fludrocortisonas, hidrocortisona, metilprednisolona, prednisolona, prednisona, triamcinolona y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
Como ejemplos de AINE se incluyen salicilatos (por ejemplo, aspirina, amoxiprin, benorilato, salicilato de colina y magnesio, diflunisal, faislamina, salicilato de metilo, salicilato de magnesio, salicilato de salicilo y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos), ácidos arilalcanoicos (por ejemplo, diclofenaco, aceclofenaco, acemetacina, bromfenaco, etodolaco, indometacina, nabumetona, sulindaco, tolmetina y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos), ácidos arilpropiónicos (por ejemplo, ibuprofeno, carprofeno, fenbufeno, fenoprofeno, flurbiprofeno, ketoprofeno, ketorolaco, loxoprofeno, naproxeno, oxaprozina, ácido tiaprofénico, suprofeno y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos), ácidos arilantranílicos (por ejemplo, ácido meclofenámico, ácido mefenámico y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos), derivados de pirazolidina (por ejemplo, azapropazona, metamizol, oxifenbutazona, fenilbutazona, sulprinfazona y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos), oxicams (por ejemplo, lornoxicam, meloxicam, piroxicam, tenoxicam y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos), inhibidores de COX-2 (por ejemplo, celecoxib, etoricoxib, lumiracoxib, parecoxib, rofecoxib, valdecoxib y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos) y sulfonanilidas (por ejemplo, nimesulida y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas).
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Otros agentes utilizados en el tratamiento del dolor (que incluyen pero no se limitan a dolor neuropático e inflamatorio) incluyen agentes tales como pregabalina, lidocaína, duloxetina, gabapentina, carbamazepina, capsaicina y otros inhibidores de la recaptación de serotonina/norepinefrina/dopamina y opiáceos (tales como oxicontina, morfina y codeína).
En el tratamiento del dolor causado por una enfermedad o afección conocida, tal como diabetes, infección (por ejemplo, infección por herpes zóster o VIH) o cáncer, los compuestos de la invención pueden administrarse en combinación con uno o más agentes terapéuticos o profilácticos adicionales dirigidos a la enfermedad o afección subyacente. Por ejemplo, cuando se utilizan para tratar la neuropatía diabética, los compuestos de la invención pueden administrarse en combinación con uno o más agentes antidiabéticos, agentes antihiperglucémicos, agentes hipolipidémicos/hipolipemiantes, agentes antiobesidad, agentes antihipertensivos y supresores del apetito. Como ejemplos de agentes antidiabéticos se incluyen biguanidas (por ejemplo, metformina, fenformina), inhibidores de glucosidasa (por ejemplo, acarbosa, miglitol), insulinas (incluyendo secretagogos de insulina o sensibilizantes de insulina), meglitinidas (por ejemplo, repaglinida), sulfonilureas (por ejemplo, glimepirida, gliburida, gliclazida, clorpropamida y glipizida), combinaciones de biguanida/gliburida (por ejemplo, Glucovance), tiazolidinodionas (por ejemplo, troglitazona, rosiglitazona y pioglitazona), agonistas de PPAR alfa, agonistas de PPAR gamma, agonistas dobles de PPAR alfa/gamma, inhibidores de la glucógeno fosforilasa, inhibidores de la proteína de unión a ácidos grasos (aP2), péptido 1 similar al glucagón (GLP-1) u otros agonistas del receptor de GLP-1, inhibidores de dipeptidil peptidasa IV (DPP4) e inhibidores del co-transportador de sodio-glucosa 2 (SGLT2) (por ejemplo, dapagliflozina, canagliflozina y LX-4211).
5.5. Composiciones farmacéuticas
Las formulaciones farmacéuticas pueden adaptarse para su administración por cualquier vía apropiada, por ejemplo, por vía oral (incluyendo bucal o sublingual), rectal, nasal, tópica (incluyendo bucal, sublingual o transdérmica), vaginal o parenteral (incluyendo inyecciones o infusiones subcutáneas, intracutáneas, intramusculares, intraarticulares, intrasinoviales, intraesternales, intratecales, intralesionales, intravenosas o intradérmicas). Dichas formulaciones pueden prepararse mediante cualquier método conocido en la técnica de farmacia, por ejemplo, asociando el principio activo con el(los) transportador(es) o excipiente(s). Se prefiere la administración oral o la administración por inyección.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración oral pueden presentarse como unidades individuales tales como cápsulas o comprimidos; polvos o gránulos; soluciones o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; espumas o batidos comestibles; o emulsiones líquidas de aceite en agua o emulsiones de agua en aceite.
Por ejemplo, para la administración oral en forma de un comprimido o una cápsula, el componente farmacológico activo puede combinarse con un transportador inerte, oral, no tóxico, farmacéuticamente aceptable, tal como etanol, glicerol, agua y similares. Los polvos se preparan desmenuzando el compuesto hasta un tamaño fino adecuado y mezclándolo con un transportador farmacéutico desmenuzado de forma similar, tal como un hidrato de carbono comestible, como, por ejemplo, almidón o manitol. También puede haber agentes aromatizantes, conservantes, dispersantes y colorantes.
Las cápsulas se fabrican preparando una mezcla en polvo, como se ha descrito anteriormente, y rellenando vainas formadas de gelatina. Antes de la operación de relleno, a la mezcla en polvo se pueden añadir deslizantes y lubricantes, tales como sílice coloidal, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio, o polietilenglicol sólido. Para mejorar la disponibilidad del medicamento cuando se ingiere la cápsula, también se puede añadir un agente disgregante o solubilizante, tal como agar-agar, carbonato de calcio o carbonato de sodio.
Por otra parte, cuando se desee o sea necesario, también pueden incorporarse a la mezcla agentes aglutinantes, lubricantes, disgregantes y colorantes adecuados. Como aglutinantes adecuados se incluyen almidón, gelatina, azúcares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas tales como acacia, tragacanto o alginato de sodio, carboximetilcelulosa, polietilenglicol y similares. Los lubricantes utilizados en estas formas farmacéuticas incluyen oleato de sodio, cloruro de sodio y similares. Los disgregantes incluyen, sin limitación, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, goma xantana y similares. Los comprimidos se formulan, por ejemplo, preparando una mezcla en polvo, granulando o precomprimiendo, añadiendo un lubricante y disgregante, y presionando en comprimidos. Una mezcla en polvo se prepara mezclando el compuesto, desmenuzado de forma adecuada, con un diluyente o una base, como se ha descrito anteriormente, y opcionalmente, con un aglutinante, tal como carboximetilcelulosa, un alginato, gelatina o polivinil pirrolidona, una solución retardante tal como parafina, un acelerador de la reabsorción tal como una sal cuaternaria y/o un agente de absorción tal como bentonita, caolín o fosfato dicálcico. La mezcla en polvo puede granularse humedeciendo con un aglutinante tal como jarabe, pasta de almidón, mucílago de acacia, o soluciones de materiales celulósicos o poliméricos y obligándola a pasar a través de un tamiz. Como una alternativa a la granulación, la mezcla en polvo se puede procesar a través de la compresora y el resultado son lingotes imperfectamente formados fraccionados en gránulos. Para impedir que se adhieran a las matrices que forman el comprimido, los gránulos pueden lubricarse añadiendo ácido esteárico, una sal de estearato, talco o aceite mineral. Después, la mezcla lubricada se comprime
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en comprimidos. Los compuestos de la presente divulgación también pueden combinarse con un transportador inerte fluido y comprimirse en forma de comprimidos directamente sin pasar por las etapas de granulación o precompresión. Se puede proporcionar un revestimiento protector transparente u opaco que consiste de un revestimiento sellador de goma laca, un revestimiento de azúcar o material polimérico, y un revestimiento de cera pulida. Para distinguir diferentes dosificaciones unitarias se pueden añadir colorantes a estos revestimientos.
Se pueden preparar líquidos bucales, tales como soluciones, jarabes y elixires en formas farmacéuticas unitarias, de tal manera que una cantidad dada contenga una cantidad predeterminada del compuesto. Los jarabes se pueden preparar disolviendo el compuesto en una solución acuosa con sabor adecuado, mientras que los elixires se preparan utilizando un vehículo no tóxico. También pueden añadirse solubilizantes y emulsionantes tales como alcoholes isoestearílicos etoxilados y éteres de sorbitol polioxietileno, conservantes, aditivos del sabor tales como aceite de menta o edulcorantes naturales, o sacarina u otros edulcorantes artificiales, y similares.
Cuando sea apropiado, las formulaciones farmacéuticas unitarias para la administración oral pueden microencapsularse. La formulación también puede prepararse para prolongar o sostener la liberación, como por ejemplo, revistiendo o incluyendo el material particulado en polímeros, cera o similares.
Los compuestos de Fórmula (I) y sus sales farmacéuticamente aceptables, pueden administrarse también en forma de sistemas de suministro liposómico, tales como vesículas unilaminares pequeñas, vesículas unilaminares grandes y vesículas multilaminares. Los liposomas pueden formarse a partir de una variedad de fosfolípidos, tales como colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas.
Los compuestos de Fórmula (I) y sus sales farmacéuticamente aceptables, pueden suministrarse también utilizando anticuerpos monoclonales como transportadores individuales a los cuales se acoplan las moléculas del compuesto. Los compuestos pueden también acoplarse con polímeros solubles como transportadores de fármacos
direccionables. Dichos polímeros pueden incluir polivinilpirrolidona, copolímero de pirano,
polihidroxipropilmetacrilamidafenol, polihidroxietilaspartamidafenol o polietilenoxidopolilisina sustituidos con restos de palitoílo. Asimismo, los compuestos pueden acoplarse a una clase de polímeros biodegradables útiles para conseguir la liberación controlada de un fármaco, por ejemplo, ácido poliláctico, poliépsilon caprolactona, ácido polihidroxibutírico, poliortoésteres, poliacetales, polihidropiranos, policianoacrilatos y copolímeros de bloques reticulados o anfipáticos de hidrogeles.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración transdérmica pueden presentarse como parches individuales destinados a permanecer en contacto íntimo con la epidermis del receptor durante un periodo de tiempo prolongado. Por ejemplo, el principio activo puede suministrarse desde el parche por iontoforesis como se describe en líneas generales en Pharmaceutical Research 1986, 3 (6), 318.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración tópica pueden formularse como pomadas, cremas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, pulverizaciones, aerosoles o aceites.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración rectal pueden presentarse como supositorios o como enemas.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración nasal en las que el transportador es un sólido, incluyen un polvo grueso que tiene un tamaño de partícula por ejemplo en el intervalo de 20 a 500 micrómetros que se administra de la manera en la que se toma el rapé, es decir, por inhalación rápida a través de las fosas nasales desde un envase con el polvo que se mantiene cerca de la nariz. Las formulaciones adecuadas en las que el transportador es un líquido, para la administración como un aerosol nasal o gotas nasales, incluyen soluciones acuosas u oleaginosas del principio activo.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para la administración por inhalación incluyen polvos o nebulizaciones de partículas finas, que pueden generarse por medio de diversos tipos aerosoles, nebulizadores o insufladores presurizados de dosis medida.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración vaginal pueden presentarse como pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o formulaciones en aerosol.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración parenteral incluyen soluciones para inyección estériles, acuosas y no acuosas, que pueden contener antioxidantes, tampones, bacteriostáticos y solutos que hacen que la formulación sea isotónica con la sangre del receptor deseado; y suspensiones estériles, acuosas y no acuosas, que pueden incluir agentes de suspensión y espesantes. Las formulaciones pueden presentarse en envases monodosis o multidosis, por ejemplo, ampollas y viales herméticos, y pueden conservarse en un estado criodesecado (liofilizado) que requiere únicamente la adición del transportador líquido estéril, por ejemplo, agua para inyecciones, inmediatamente antes de su uso. A partir de polvos estériles, gránulos y comprimidos, pueden prepararse suspensiones y soluciones para inyección improvisada.
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Debe entenderse que, además de los principios particularmente mencionados con anterioridad, las formulaciones pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica teniendo en cuenta el tipo de formulación en cuestión, por ejemplo, los adecuados para administración oral pueden incluir agentes saborizantes.
5.6. Ejemplos
Ciertos aspectos de la invención pueden entenderse a partir de los siguientes ejemplos.
5.6.1. Ratones genosuprimidos AAK1
A través de dos métodos, atrapamiento de genes y recombinación homóloga, se prepararon ratones homocigotos (-/ -) en lo que respecta a la alteración del gen AAK1.
El atrapamiento de genes es un método de mutagénesis de inserción aleatoria que como mutágeno utiliza un fragmento de ADN que codifica un gen indicador o marcador seleccionable. Los vectores atrapan genes se han diseñado para integrarse en intrones o genes de una manera que permite a la maquinaria de corte y empalme celular cortar y empalmar exones codificados por vector en los ARNm celulares. Habitualmente, los vectores atrapan genes contienen secuencias marcadoras seleccionables que están precedidas por fuertes secuencias aceptoras de corte y empalme y no están precedidas por un promotor. Por lo tanto, cuando dichos vectores se integran en un gen, la maquinaria de corte y empalme celular corta y empalma los exones del gen atrapado en el extremo 5' de la secuencia marcadora seleccionable. Típicamente, dichos genes marcadores seleccionables solo pueden expresarse si el vector que codifica el gen se ha integrado en un intrón. Los acontecimientos de atrapa genes resultantes se identifican posteriormente seleccionando células que puedan sobrevivir al cultivo selectivo.
Se mutaron células madre embrionarias (células Lex-1 de la cepa murina A129 derivada) mediante un proceso que implicaba la inserción de al menos una parte de una secuencia de vector modificada genéticamente en el gen de interés, las células madre embrionarias mutadas se microinyectaron en blastocistos que posteriormente se introdujeron en hembras hospedadoras pseudopreñadas y se llevaron a término utilizando métodos establecidos. Véase, por ejemplo, "Mouse Mutagenesis", 1998, Zambrowicz et al., eds., Lexicon Press, The Woodlands, TX. Los animales quiméricos resultantes se reprodujeron posteriormente para producir descendientes capaces de transmitir en la línea germinal un alelo que contenía la mutación modificada genéticamente en el gen de interés.
Por recombinación homóloga también se crearon ratones con el gen AAK1 alterado. En este caso, el segundo exón codificante del gen murino AAK1 (véase el número de registro NM_177762 del GenBank) se eliminó mediante métodos conocidos en la técnica. Véanse, por ejemplo, las patentes de Estados Unidos N°. 5.487.992, 5.627.059 y 5.789.215.
Para la alteración del gen AAK1 se estudiaron ratones homocigotos (-/-) junto con ratones heterocigotos (+/-) para la alteración del gen AAK1 y compañeros de camada de tipo silvestre (+/+). Durante este análisis, los ratones se sometieron a un estudio médico utilizando un conjunto integrado de procedimientos de diagnóstico médico diseñado para evaluar la función de los principales sistemas de órganos en un sujeto mamífero. Se estudiaron ratones "genosuprimidos" homocigotos (-/-) junto con sus compañeros de camada heterocigotos (+/-) y de tipo silvestre(+/+). La alteración del gen AAK1 se confirmó mediante análisis Southern. La expresión del homólogo murino de AAK1 se detectó mediante RT-PCR en cerebro murino; médula espinal; ojo; timo; bazo; pulmón; riñón; hígado; músculo esquelético; hueso; estómago, intestino delgado y colon; corazón; tejido adiposo; pulmón asmático; LPS hepático; sangre; corazón con banda; árbol aórtico; próstata; y glándula mamaria (virgen de 5 semanas, virgen madura, 12 DPC, 3 días después del parto (lactante), 3 días después del destete (involución temprana) y 7 días después del destete (involución tardía)).
Utilizando la prueba del formol en la pata para evaluar sus respuestas nociceptivas agudas y tónicas, se analizaron homocigotos (-/-) AAK1 y sus compañeros de camada de tipo silvestre (+/+). Para estas pruebas, Se utilizaron Analizadores de Nocicepción Automáticos (adquiridos en el laboratorio Ozaki de la Universidad de California, San Diego). Se colocó una banda de metal alrededor de la pata trasera izquierda de cada ratón 30 minutos antes de la prueba. Después de un periodo de aclimatación de 3o minutos, se inyectaron 20 pl de formol al 5 % por vía subcutánea en la superficie dorsal de la pata trasera izquierda. Los ratones se instalaron individualmente en cámaras cilíndricas durante 45 minutos. Un ordenador registró las sacudidas por minuto, total de sacudidas para la fase I (fase aguda = primeros 8 minutos) y total de sacudidas para la fase II (fase tónica = tiempo entre los minutos 20 - 40) a través de un campo electromagnético. Véase Yaksh TL, Ozaki G, McCumber D, Rathbun M, Svensson C, Malkmus S, Yaksh MC. Un sistema automático de detección de sacudidas para su uso en el bioensayo nociceptivo con formol. J Appl Physiol., 2001; 90:2386-402.
Como se muestra en la Figura 1, los datos de la fase 1 y de la fase 2 se obtuvieron utilizando ratones hembra homocigotos (-/-) (n = 16), ratones hembra de tipo silvestre (n=15), ratones macho homocigotos (-/-) (n = 9) y ratones macho de tipo silvestre (n = 18). En todos los grupos y en ambas fases, los ratones AAK1 homocigotos (-/-) presentaron significativamente menos sacudidas de pata registradas que sus compañeros de camada de tipo silvestre(+/+).
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Parte A. 6-Fluoro-im¡dazoH.2-¿)lp¡r¡daz¡na
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Se combinó 6-fluoro-piridaz¡n-3-¡lam¡na [108784-42-5] (10 g. 89 mmol) con una solución acuosa al 50% (p/v) de cloroacetaldehído [107-20-0] (23 ml. 177 mmol) en n-butanol (150 ml) y se agitó a reflujo durante 1 h. La solución de reacción enfriada se redujo en volumen y se diluyó con éter dietílico para precipitar un sólido de color pardo. que se recogió por filtración. para producir 12.0 g. LRMS (IEN) m/z 138.0 [(M+H)]+. calculado para C6H4FN3: 137.12.
Parte B. 3-Bromo-6-fluoro-im¡dazo[1.2-blp¡r¡daz¡na
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Br
A una solución agitada de 6-fluoro-¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡na (2.1 g. 15.3 mmol) en ácido acético glacial (20 ml). a temperatura ambiente. se le añadió lentamente bromo (2.5 g. 15.3 mmol). Tras la finalización de esta adición. la solución de reacción se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. El extracto se secó (MgSO4) y se sometió a cromatografía ultrarrápida (gel de sílice. eluyendo con 30 % (v/v) de acetato de etilo/hexanos) para proporcionar 0.9 g de 3-bromo-6-fluoro-¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡na. LRMS (IEN) m/z 215.9/217.9 [(M+H)]+. calculado para C6H3BrFN3:
216.01.
Parte C. 1-[5-(6-Fluoro-¡m¡dazo[1.2-blp¡r¡daz¡n-3-¡l)-t¡ofen-2-¡ll-etanona
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Una mezcla de 3-bromo-6-fluoro-¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡na (620 mg. 2.9 mmol). ácido 5-acetil-2-tiofenoborón¡co [206551-43-1] (634 mg. 3.7 mmol). carbonato potásico [584-08-7] (792 mg. 5.7 mmol) y dicloruro de bis(trifen¡lfosf¡na)palad¡o (II) [13965-03-2] (100 mg. 0.1 mmol) se suspendió en un vial de reacción de microondas con una solución al 25 % (v/v) de agua en acetonitrilo (4.5 ml). después se agitó y se irradió a una temperatura interna de 145 °C durante 15 minutos. La mezcla de reacción enfriada se diluyó con acetato de etilo. se filtró y se repartió entre hidróxido sódico acuoso 1 N y acetato de etilo adicional. El extracto orgánico se sometió a cromatografía ultrarrápida (gel de sílice. eluyendo con 20 % (v/v) de acetato de etilo/hexanos) para proporcionar 1- [5-(6-fluoro-¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡n-3-¡l)-t¡ofen-2-¡l]-etanona como 300 mg de un sólido de color amarillo. RMN 1H (400 MHz. CLOROFORMO-d) 6 ppm 2.63 (s. 3 H) 7.00 (d. J = 9.35 Hz. 1 H) 7.75 (d. J = 4.04 Hz. 1 H) 7.83 (d. J =
4.04 Hz. 1 H) 8.13 (dd. J = 9.60. 7.07 Hz. 1 H) 8.21 (s. 1 H). LRMS (IEN) m/z 262.1[(M+H)]+. calculado para C^HaFNaOS: 261.28.
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1-[5-(6-Fluoro-¡m¡dazo[1,2-6]p¡ndaz¡n-3-N)-t¡ofen-2-¡l]-etanona (60 mg, 0.2 mmol) y but¡lam¡na [109-73-9] (0.1 ml, 10.2 mmol) se ¡rrad¡ó con m¡croondas a una temperatura ¡nterna de 120 °C durante 10 m¡nutos. El producto 1-[5-(6- but¡lam¡no-¡m¡dazo[1,2-6]p¡ndaz¡n-3-¡l)-t¡ofen-2-¡l]-etanona se pur¡f¡có por RP-HPLC preparat¡va para proporc¡onar 10,1 mg. RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) 8 ppm 1,03 (t. J = 7.33 Hz. 3 H) 1,50 - 1.59 (m. 2 H) 1.72 - 1.79 (m. 2 H) 2.59 (s. 3 H) 3,47 (t. J = 7,33 Hz. 2 H) 6,73 (d. J = 9,60 Hz. 1 H) 7,63 (d. J = 9,60 Hz. 1 H) 7,70 (d. J = 4,04 Hz. 1 H) 7.85 (d. J = 4,29 Hz. 1 H) 7,95 (s. 1 H). LRMS (IEN) m/z 315,2[(M+H)]+, calculado para C16H18N4OS: 314.41.
5.6.3. Síntesis de 1-{5-[6-(2-H¡drox¡-etMammo)-¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-3-M]-t¡ofen-2-¡l}-etanona
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Se añad¡ó carbonato de ces¡o [534-17-8] (150 mg. 0.5 mmol) a una soluc¡ón de 1-[5-(6-fluoro-¡m¡dazo[1.2-8]p¡r¡daz¡n-
3-¡l)-t¡ofen-2-¡l]-etanona (60 mg. 0.2 mmol) y etanolam¡na [141-43-5] (29 mg. 0.5 mmol) en N,A/-d¡met¡lformam¡da (3 ml). La mezcla se ag¡tó a 40 °C durante 1 h, después se repart¡ó entre acetato de et¡lo y agua. El anál¡s¡s del extracto orgán¡co reveló la relac¡ón de preparac¡ón del producto de ar¡lam¡na deseado al éter era aprox¡madamente 2: 1. La RP-HPLC preparat¡va a¡sló 22 mg de 1-{5-[6-(2-h¡drox¡-et¡lam¡no)-¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡n-3-¡l]-t¡ofen-2-¡l)-etanona en forma de un sól¡do de color amar¡llo. RMN 1H (400 MHz. DMSO-cfe) 8 ppm 1 83 (s. 3 H) 2,57 (s. 2 H) 3,04 (t. J = 5,68 Hz. 1 H) 4,43 (t. J = 5,68 Hz. 1 H) 7,04 (d. J = 9,60 Hz. 1 H) 7,91 (d. J = 4,04 Hz. 1 H) 8,03 (d. J = 4,04 Hz. 1 H) 8,16 (d. J = 9,60 Hz. 1 H) 8,36 (s. 1 H). LRMS (IEN) m/z 303,1[(M+H)]+, calculado para C14H14N4O2S: 302.36.
5.6.4. Síntes¡s de 3-(4-(ammomet¡l)feml)-W-(2-metox¡et¡l)¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡dazm-6-amma
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Parte A. 3-bromo-N-í2-metox¡et¡l)¡m¡dazor1.2-blp¡r¡daz¡n-6-am¡na
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Una soluc¡ón de 3-bromo-6-cloro¡m¡dazo[1.2-8]p¡r¡daz¡na (844 mg. 3,77 mmol) y 2-metox¡etanam¡na (1,44 ml) se calentó a 170 °C (m¡croondas) durante 30 m¡n. La mezcla resultante se enfr¡ó a temperatura amb¡ente y se pur¡f¡có por HPLC preparativa (neutral) para proporc¡onar 3-bromo-W-(2-metox¡et¡l)¡m¡dazo [1,2-6]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (630 mg. rend¡m¡ento del 62 %) en forma de un sól¡do de color blanquec¡no: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 7,56 (d. J = 9.9 Hz. 1H). 7,41 (s. 1H). 6,74 (d. J = 9.6 Hz. 1H). 3,62 - 3,76 (m. 2H). 3,50 - 3,62 (m. 2H). 3,42 (s. 3H); LRMS(IEN) m/e 271,1 [(M+H)+, calculado para CgH12BrN4O 271,0]
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Parte B. 3-(4-(am¡nomet¡l)fen¡l)-M-(2-metox¡et¡l)¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-am¡na
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A una mezcla de 3-bromo-A/-(2-metox¡et¡l)¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (229 mg, 0.85 mmol). ác¡do (4- (am¡nomet¡l)fen¡l)borón¡co (395 mg. 2,11 mmol). [1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno]d¡cloropalad¡o (II) (62 mg. 0,085 mmol) y fosfato potás¡co (540 mg. 2,54 mmol) se le añad¡ó d¡metox¡etano/agua 1:1 (3 ml). La mezcla resultante se calentó a 160 °C (m¡croondas) durante 6 m¡n. Después. la reacc¡ón se f¡ltró y se d¡luyó con una mezcla de 1:1:1 de metanol/agua/aceton¡tr¡lo y después se f¡ltró de nuevo. La f¡ltrac¡ón f¡nalmente se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va (ác¡da) para proporc¡onar sal del ác¡do monoacét¡co de 3-(4-(am¡nomet¡l)fen¡l)-A/-(2-metox¡et¡l)¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡n- 6-am¡na en forma de un sól¡do de color blanco: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 8.18 - 8.33 (m. J = 8.3 Hz. 2H). 7.82 (s. 1H). 7.67 (d. J = 9.6 Hz. 1H). 7.53 - 7.58 (m. J = 8.3 Hz. 2H). 6.78 (d. J = 9.6 Hz. 1H). 4,14 (s. 2H). 3,68 (t. J = 5.7 Hz. 2H). 3,58 (t. J = 5.4 Hz. 2H). 3,42 (s. 3H). 1,93 (s. 3H); LRMS(IEN) m/e 298,2 [(M+H)+, calculado para C16H20N5O 298.2]
5.6.5. Síntesis de 4-(6-((2-Metox¡et¡l)ammo)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-3-¡l)benzam¡da
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A una mezcla de 3-bromo-A/-(2-metox¡et¡l)¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (57,6 mg. 0,21 mmol). ác¡do (4- carbamo¡lfen¡l)borón¡co (87,4 mg. 0,53 mmol). [1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno]d¡cloropalad¡o (II) (7.7 mg. 0,011 mmol) y fosfato potás¡co (134 mg. 0,63 mmol) se le añad¡ó d¡metox¡etano/agua 1:1 (0,75 ml). La mezcla resultante se calentó a 160 °C (m¡croondas) durante 6 m¡n. Después. la reacc¡ón se f¡ltró y se d¡luyó con una mezcla de 1:1:1 de metanol/agua/aceton¡tr¡lo y después se f¡ltró de nuevo. La f¡ltrac¡ón Analmente se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va (neutral) para proporc¡onar 3-(4-(am¡nomet¡l)fen¡l)-W-(2-metox¡et¡l)¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (9 mg. rend¡m¡ento del 14 %) en forma de un sól¡do de color blanco: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 8,29 (d. J = 8.6 Hz. 2H). 7,98 (d. J = 8.6 Hz. 2H). 7,89 (s. 1H). 7,66 (d. J = 9.6 Hz. 1H). 6,79 (d. J = 9.9 Hz. 1H). 3,69 (t. J = 5.6 Hz. 2H). 3,59 (t. J = 5.4 Hz. 2H). 3,42 (s. 3H); LRMS(IEN) m/e 312,2 [(M+H)+. calculado para C16H18N5O2 312,2].
5.6.6. Síntes¡s de 3-(4-(Ammomet¡l)feml)-W-butM¡m¡dazo[1,2-d]pmdazm-6-amma
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Parte A. 3-bromo-N-but¡l¡m¡dazor1.2-dlp¡r¡daz¡n-6-am¡na
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Una soluc¡ón de 3-bromo-6-cloro¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡na (1.2 g. 5.2 mmol) y W-but¡lam¡na (2 ml) se calentó a 170 °C
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(microondas) durante 30 min. La mezcla resultante se enfrió a temperatura ambiente y se purificó por HPLC preparativa (neutral) para proporcionar 3-bromo-A/-butilimidazo[1,2-d]piridazin-6-amina (887 mg, rendimiento del 63 %) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 7,53 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,39 (s, 1H), 6,69 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,38 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,59 - 1,73 (m, 2H), 1,41 - 1,53 (m, 2H), 1,01 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(IEN) m/e 269,1 [(M+H)+, calculado para C10H14BrN4 269,0].
Parte B. 3-(4-(am¡nomet¡l)fen¡l)-M-but¡l¡m¡dazo[1,2-81p¡r¡daz¡n-6-am¡na
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A una mezcla de 3-bromo-W-butilimidazo[1,2-8]piridazin-6-amina (190 mg, 0,71 mmol), ácido (4- (aminometil)fenil)borónico (331 mg, 1,76 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) (26 mg, 0,036 mmol) y fosfato tripotásico (452 mg, 2,13 mmol) se le añadió 1:1 de dimetoxietano/agua (10 ml). La mezcla resultante se calentó a 160 °C (microondas) durante 6 min. Después, la reacción se filtró y se diluyó con una mezcla de 1:1:1 de metanol/agua/acetonitrilo y después se filtró de nuevo. La filtración finalmente se purificó por HPLC preparativa (ácida) para proporcionar la sal del ácido monoacético de 3-(4-(aminometil)fenil)-W-butilimidazo[1,2- 8]piridazin-6-amina (21 mg, rendimiento del 10 %) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 8,25 -8,29 (m, 2H), 7,80 (s, 1H), 7,63 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,74 (s, 1H), 6,72 (s, 1H), 4,11 (s, 2H), 3,39 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,93 (s, 3H), 1,68 - 1,76 (m, 2H), 1,46 - 1,55 (m, 2H), 1,02 (t, J = 7,5 Hz, 3H); LRMS(IEN) m/e 296,4 [(M+H)+, calculado para C17H22N5 296,2].
5.6.7. Síntesis de éster ferc-butílico del ácido {3-[3-(5-AcetM-tiofen-2-M)-imidazo[1,2-b]piridazm-6-ilammo]- propil}-metil-carbámico
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Se añadió carbonato de cesio [534-17-8] (125 mg, 0,4 mmol) a una solución de 1-[5-(6-fluoro-imidazo[1,2-b]piridazin- 3-il)-tiofen-2-il]-etanona (50 mg, 0,2 mmol) y éster ferc-butílico del ácido Af-(3-aminopropil)-A/-metilcarbámico [150349-36-3] (72 mg, 0,4 mmol) en N,A/-dimet¡lformamida (1,5 ml) y se agitó durante una noche a temperatura ambiente, después se repartió entre acetato de etilo y agua. El extracto orgánico se evaporó y el producto se aisló por RP-HPLC preparativa para proporcionar éster ferc-butílico del ácido {3-[3-(5-acetil-tiofen-2-il)-imidazo[1,2- d]p¡r¡daz¡n-6-ilam¡no]-prop¡l}-met¡l-carbám¡co en forma de un aceite de color amarillo. RMN 1H (400 MHz, METANOL- d4) 8 ppm 1 33 - 1,49 (m, 9 H) 2,04 (d, J = 11,87 Hz, 2 H) 2,59 (s, 3 H) 2,91 (s, 3 H) 3,35 - 3,53 (m, 4 H) 4,62 (s, 1 H) 6,75 (d, J = 9,60 Hz, 1 H) 7,64 - 7,75 (m, 2 H) 7,87 (d, J = 4,04 Hz, 1 H) 7,98 (s, 1 H). LRMS (IEN) m/z 430,2[(M+H)]+, calculado para C21H27N5O3S: 429.55.
5.6.8. Síntesis de 4-(6-(Butilammo)imidazo[1,2-¿]pirídazm-3-N)-N-metilbenzamida
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A una mezcla de 3-bromo-W-butilimidazo[1,2-d]piridazin-6-amina (100 mg, 0,37 mmol), ácido (4-
(metilcarbamoil)fenil)borónico (166 mg, 0,93 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) (15 mg, 0,02
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mmol) y fosfato potásico (236 mg, 1,11 mmol) se le añadió 1:1 de dimetoxietano/agua (5 ml). La mezcla resultante se calentó a 160 °C (microondas) durante 6 min. Después, la reacción se filtró y se diluyó con una mezcla de 1:1:1 de metanol/agua/acetonitrilo y después se filtró de nuevo. La filtración finalmente se purificó por HPLC preparativa (ácido) para proporcionar 4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-3-¡l)-W-met¡lbenzam¡da (32,1 mg, rendimiento del 27 %) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 8,21 - 8,41 (m, 2H), 7,86 - 7,94 (m, 3H), 7,64 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,35 - 3,44 (m, 5H), 2,97 (s, 3H), 1,68 - 1,77 (m, 2H), 1,46 - 1,56 (m, 2H), 1,03 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(IEN) m/e 324,4 [(M+H)+, calculado para C18H22N5O 324,2].
5.6.9. Síntesis de [3-(4-Ammomet¡l-feml)-¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-¡l]-(tetrah¡drop¡ran-4-M)-amma
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Parte A. Tetrahidro-2H-p¡ran-4-amina
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Una mezcla de dihidro-2H-piran-4(3H)-ona (2,3 ml, 25 mmol) y metanol (54 ml) se trató con formiato amónico (15,8 g, 250 mmol) y H2O (6 ml). La mezcla resultante se mantuvo a TA con agitación vigorosa hasta que se volvió homogénea. Después, la mezcla se trató con paladio sobre carbono (2,5 g), y se mantuvo a TA durante una noche. La mezcla se filtró y se concentró para retirar los orgánicos volátiles, después la capa acuosa se extrajo de forma exhaustiva con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron para proporcionar tetrahidro-2H-piran-4-amina (2,2 g, 88 %) en forma de un aceite: RMN 1H (400 MHz, MeOD-d4) 8 3,89 - 3,99 (m, 2 H), 3,35 -3,51 (m, 2 H), 2,81 -2,95 (m, 1 H), 1,75 - 1,90 (m, 2 H), 1,31 - 1,48 (m, 2 H);
Parte B. 3-bromo-N-ítetrah¡dro-p¡ran-4-¡l)¡m¡dazoH.2-d1p¡r¡daz¡n-6-am¡na
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Una mezcla de 3-bromo-6-fluoroimidazo[1,2-d]piridazina (1,4 g, 6,6 mmol), tetrahidro-2H-piran-4-amina (1,0 g, 9,9 mmol), carbonato de cesio (4,3 g, 13 mmol) y DMF (10 ml) se mantuvo a 40 °C durante 16 h, después se enfrió a TA y se repartió entre acetato de etilo (100 ml) y H2O (100 ml). Las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (4 x 40 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con H2O (100 ml) y salmuera (100 ml), después se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron para proporcionar un residuo que se purificó por cromatografía ultrarrápida (SO2) para proporcionar 3-bromo-W-(tetrahidro-piran-4-il)imidazo[1,2-d]piridazin-6-amina (1,6 g, 80 %) en forma de un sólido de color amarillo claro: RMN 1H (400 MHz, MeOD-d4) 8 7,58 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 7,42 (s, 2 H), 6,71 (d, J = 9,9 Hz, 1 H), 3,95 -4,08 (m, 3 H), 3,60 (td, J = 11,5, 2,3 Hz, 2 H), 2,16 (d, J = 11,5 Hz, 2 H), 1,53 - 1,69 (m, 2 H); CLEM (IEN) m/e 297,1 [(M+H)+, calculado para CnH13BrN4O 297,0].
Parte C. [3-(4-Aminometil-fenil)-imidazo[1,2-d1piridazin-6-il1-(tetrahidro-piran-4-il)-amina
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Una mezcla de 3-bromo-W-(tetrahidro-piran-4-il)imidazo[1,2-d]piridazin-6-amina (100 mg, 0,34 mmol), clorhidrato del
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ácido 4-(aminometil)fenilborónico (160 mg, 0,84 mmol), aducto didoro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) diclorometano (25 mg, 0,034 mmol), fosfato potásico (360 mg, 1,7 mmol), DME (1,5 ml) y H2O (0,5 ml) se calentó en un recipiente cónico cerrado herméticamente a 160 °C durante 360 s por irradiación con microondas. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 ml). Las capas orgánicas combinadas se concentraron a presión reducida para proporcionar un aceite que se purificó por HPLC de fase inversa para proporcionar [3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-8]piridazin-6-il]-(tetrahidro-piran-4-il)-amina (20,5 mg, 20%) en forma de un sólido de color amarillo: RMN 1H (400 MHz, MeOD) 8 8,24 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 7,82 (s, 1 H), 7,55 (d, J =
8,4 Hz, 1 H), 6,74 (d, J = 10 Hz, 1 H), 4,13 (s, 2 H), 4,06-3,92 (m, 3 H), 3,61 (t, J = 11,2 Hz, 2 H), 2,15 (d, J = 12,8 Hz, 2 H), 1,65 (cd, J = 11,2, 4,4 Hz, 2 H); CLEM (IEN) m/e 324,2 [(M+H)+, calculado para C18H22N5O 324,2].
5.6.10. Síntesis de [3-(4-Ammomet¡l-feml)-¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-M]-c¡clohex¡lamma
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Parte A. 3-bromo-N-ciclohexilimidazo[1,2-¿)]piridazin-6-amina
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Una mezcla de 3-bromo-6-fluoroimidazo[1,2-8]piridazina (1,1 g, 5,0 mmol), ciclohexilamina (0,86 ml, 7,5 mmol), carbonato de cesio (3,3 g, 10 mmol) y DMF (10 ml) se mantuvo a 40 °C durante 6 h, después se enfrió a TA y se repartió entre acetato de etilo (100 ml) y H2O (100 ml). Las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (4 x 40 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con H2O (100 ml) y salmuera (100 ml), después se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron para proporcionar un residuo que se purificó por cromatografía ultrarrápida (SO2) para proporcionar 3-bromo-W-(tetrahidro-piran-4-il)imidazo[1,2-8]piridazin-6-amina (1,1 g, 73%) en forma de un sólido de color amarillo claro: RMN 1H (400 MHz, MeOD) 8 7,53 (d, J = 9,6 Hz, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 6,68 (d, J = 9,9 Hz, 1 H), 3,68 - 3,87 (m, 1 H), 2,14 (dd, J = 12,6, 3,3 Hz, 2 H), 1,82 (dt, J = 13,3, 3,7 Hz, 2 H), 1,70 (dt, J = 12,8, 3,7 Hz, 1 H), 1,38 - 1,52 (m, 2 H), 1,23 - 1,38 (m, 3 H); CLEM (IEN) m/e 295,2 [(M+H)+, calculado para C12H15BrN4 295,1].
Parte B. [3-(4-Aminometil-fenil)-imidazo[1,2-8]piridazin-6-il]-ciclohexilamina
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Una mezcla de 3-bromo-W-ciclohexilimidazo[1,2-8]piridazin-6-amina (100 mg, 0,34 mmol), clorhidrato del ácido 4- (aminometil)fenilborónico (160 mg, 0,84 mmol), aducto dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) diclorometano (25 mg, 0,034 mmol), fosfato potásico (360 mg, 1,7 mmol), DME (1,5 ml) y H2O (0,5 ml) se calentó en un recipiente cónico cerrado herméticamente a 160 °C durante 360 s por irradiación con microondas. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 ml). Las capas orgánicas combinadas se concentraron a presión reducida para proporcionar un aceite que se purificó por HPLC de fase inversa para proporcionar [3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-8]piridazin-6-il]-ciclohexilamina (48 mg, 44%) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (400 MHz, MeOD-d4) 8 ppm 8,29 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 7,82 (s, 1 H), 7,63 (d, J = 9,6 Hz, 1 H), 7,54 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 6,72 (d, J = 9,6 Hz, 1 H), 4,13 (s, 2 H), 3,70 - 3,78 (m, 1 H), 2,19 (d, J = 9,1 Hz, 2 H), 1,83-1,93 (m, 2 H), 1,70 - 1,76 (m, 1 H), 1,42 - 1,54 (m, 2 H), 1,29 - 1,40 (m, 3 H); CLEM (IEN) m/e 322,2 [(M+H)+, calculado para C19H24N5 322,2].
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Preparada como en el ejemplo 5.6.3 de 1-[5-(6-fluoro-¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-3-¡l)-t¡ofen-2-¡l]-etanona (50 mg, 0,2 mmol) y éster terc-butíl¡co del ác¡do W-(3-am¡noprop¡l)-W-met¡lcarbám¡co [150349-36-3] (72 mg, 0,4 mmol) y se desproteg¡ó con HCl anh¡dro en metanol. La pur¡f¡cac¡ón med¡ante RP-HPLC preparat¡va proporc¡onó d¡acetato de 1- {5-[6-(3-met¡lam¡no- prop¡lam¡no)-¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-3-¡l]-t¡ofen-2-¡l)-etanona en forma de un sól¡do de color amar¡llo. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 1,92 - 1,96 (m, 5 H) 2,24 (t, J = 7,45 Hz, 1 H) 2,62 (s, 2 H) 2,80 (s, 2 H) 3,23 - 3,31 (m, 2 H) 3,61 (t, J = 7,33 Hz, 1 H) 6,79 (d, J = 9,60 Hz, 1 H) 7,70 - 7,74 (m, 1 H) 7,92 (d, J = 4,04 Hz, 1 H) 8,06 (s a, 1 H). LRMS (IEN) m/z 330,1[(M+H)]+, calculado para C16H19N5OS: 329.43.
5.6.12. Síntes¡s de 3-(3-(Ammomet¡l)feml)-W-butM¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-amma
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A una mezcla de 3-bromo-W-but¡l¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (62 mg, 0,23 mmol), ác¡do (3- (am¡nomet¡l)fen¡l)borón¡co (108 mg, 0,58 mmol), [1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno]d¡cloropalad¡o (II) (8,4 mg, 0,01 mmol) y fosfato potás¡co (146 mg, 0,69 mmol) se le añad¡ó 1:1 de d¡metox¡etano/agua (3 ml). La mezcla resultante se calentó a 160 °C (m¡croondas) durante 6 m¡n. Después, la reacc¡ón se f¡ltró y se d¡luyó con una mezcla de 1:1:1 de metanol/agua/aceton¡tr¡lo y después se f¡ltró de nuevo. La f¡ltrac¡ón Analmente se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va (ác¡da) para proporc¡onar sal del ác¡do mono tr¡fluoroacét¡co de 3-(3-(am¡nomet¡l)fen¡l)-A/-but¡l¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n- 6-am¡na (24,1 mg, rend¡m¡ento del 25 %) en forma de un sól¡do de color blanco: RmN 1H (METANOL-d4) 8: 7,53 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 6,83 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,73 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,93 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,33 (s, 2H), 2,59 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,12 (s, 3H), 0,87 - 0,96 (m, 2H), 0,64 - 0,74 (m, 2H), 0,20 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(IEN) m/e 296,4 [(M+H)+, calculado para C17H22N5 296,2].
5.6.13. Síntes¡s de W-But¡l-3-(4-(((2-metox¡etM)ammo)met¡l)feml)¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡dazm-6-amma
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Parte A. 4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzaldehído
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A una mezcla de 3-bromo-W-but¡l¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (100 mg, 0,37 mmol), ác¡do (4-form¡lfen¡l)borón¡co (139 mg, 0,93 mmol), [1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno]d¡cloropalad¡o (II) (13,5 mg, 0,02 mmol) y fosfato potás¡co (236
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mg, 1,11 mmol) se le añadió 3:1 de dimetoxietano/agua (2 ml). La mezcla resultante se calentó a 160 °C (microondas) durante 6 min. Después de la reacción se enfrió y se separó en dos capas, después, la capa superior de color oscuro se filtró y se diluyó con una mezcla de 1:1:1 de metanol/agua/acetonitrilo, y después se filtró de nuevo. La filtración finalmente se purificó por HPLC preparativa (neutral) para proporcionar 4-(6- (butilamino)imidazo[1,2-6]piridazin-3-il)benzaldehído (78 mg, rendimiento del 72%) en forma de un sólido de color amarillo: RMN 1H (METANOL-c/4) 8: 10,01 (s, 1H), 8,47 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,98 - 8,03 (m, 2H), 7,97 (s, 1H), 7,66 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,42 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,74 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,52 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 1,03 (t, J = 7,5 Hz, 4H); LRMS(IEN) m/e 295,2 [(M+H)+, calculado para C17H19N4O 295,2].
Parte B. M-but¡l-3-(4-(((2-metox¡et¡l)am¡no)met¡l)fen¡l)¡m¡dazo[1,2-81p¡r¡daz¡n-6-am¡na
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A la solución de 4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzaldehído (74 mg, 0,25 mmol) en 2 ml de dicloroeteno se le añadió 2-metoxietanamina (21 mg, 0,28 mmol) y se dejó agitar a temperatura ambiente durante 5 m. Se añadió triacetoxiborohidruro sódico (106 mg, 0,5 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente 18 h. Después, la reacción se detuvo con una solución saturada de bicarbonato sódico y se extrajo con diclorometano tres veces. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró. El producto en bruto finalmente se purificó por HPLC preparativa (ácida) para proporcionar sal del ácido mono trifluoroacético de W-butil-3-(4-(((2-metoxietil)amino)metil)fenil)imidazo[1,2-8]piridazin-6-amina (55,8 mg, rendimiento del 48%) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (METANOL- d4) 8: 8,23 - 8,28 (m, 3H), 7,96 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 4,35 (s, 2H), 3,68 - 3,73 (m, 2H), 3,35 - 3,47 (m, 5H), 3,26 - 3,31 (m, 2H),
1,67 - 1,76 (m, 2H), 1,44 - 1,54 (m, 2H), 1,01 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(IEN) m/e 354,5 [(M+H)+, calculado para C20H28N5 354,2].
5.6.14. Síntesis de 1-{5-[6-(2-MetM-but¡lammo)-¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-3-M]-t¡ofen-2-¡l}-etanona
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Preparada como en el ejemplo 5.6.3 de 1-[5-(6-fluoro-¡m¡dazo[1,2-6]pir¡daz¡n-3-¡l)-t¡ofen-2-¡l]-etanona (50 mg, 0,2 mmol) y 2-metilbutilamina racémica [96-15-1] (42 mg, 0,5 mmol). La purificación mediante RP-HPLC preparativa proporcionó 1-{5-[6-(2-met¡l-but¡lam¡no)-¡m¡dazo[1,2-6]p¡ridaz¡n-3-¡l]-t¡ofen-2-¡l}-etanona en forma de un sólido de color amarillo. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 0,88 - 1,01 (m, 5 H) 1,19 -1,30 (m, 1 H) 1,50 -1,61 (m, 4 H) 1 89 (dc, J = 13,29, 6,74 Hz, 1 H) 2,54 (s, 2 H) 3,26 - 3,33 (m, 1 H) 3,40 - 3,49 (m, 1 H) 4,57 (t, J = 5,73 Hz, 1 H) 6,43 - 6,47 (m, 1 H) 7,21 (s, 1 H) 7,56 - 7,58 (m, 1 H) 7,61 - 7,67 (m, 2 H) 7,90 (s, 1 H). LRMS (IEN) m/z 329,1[(M+H)]+, calculado para C17H20N4OS: 328.44.
5.6.15. Síntes¡s de 1-{5-[6-(3-Fluoro-propMammo)-¡m¡dazo[1,2-b]pmdazm-3-¡l]-t¡ofen-2-M}-etanona
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Preparada como en el ejemplo 5.6.3 de 1-[5-(6-fluoro-¡m¡dazo[1,2-6]pir¡daz¡n-3-¡l)-t¡ofen-2-¡l]-etanona (50 mg, 0,2 mmol) y clorhidrato de 3-fluoropropilamina [64068-31-1] (43 mg, 0,4 mmol). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8
ppm 1,52 (s, 6 H) 2,12 - 2,25 (m, 1 H) 2,54 (s, 1 H) 3,66 - 3,72 (m, 1 H) 4,72 (t, J = 5,51 Hz, 1 H) 7,21 (s, 2 H) 7,63 -
7,67 (m, 1 H). LRMS (IEN) m/z 319,1[(M+H)]+, calculado para C15H15FN4OS: 318.38.
5.6.16. Síntesis de W-But¡l-3-(4-(p¡rrol¡dm-1-Mmet¡l)feml)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-amma
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A la solución de 4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1,2-8]p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzaldehído (58 mg, 0,20 mmol) en 1,5 ml dicloroeteno se le añad¡ó p¡rrol¡d¡na (15,4 mg, 0,22 mmol) y se dejó ag¡tar a temperatura amb¡ente durante 5 m. Se añad¡ó 10 tr¡acetox¡boroh¡druro sód¡co (83,5 mg, 0,4 mmol) y la reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente 18 h. Después, la reacc¡ón se detuvo con una soluc¡ón saturada de b¡carbonato sód¡co y se extrajo con d¡clorometano tres veces. Las capas orgán¡cas comb¡nadas se secaron sobre sulfato de magnes¡o, se f¡ltró y se concentró. El producto en bruto Analmente se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va (ác¡da) para proporc¡onar sal del ác¡do monotr¡fluoroacét¡co de W-but¡l-3- (4-(p¡rrol¡d¡n-1-¡lmet¡l)fen¡l)¡m¡dazo[1,2-8]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (32,2.8 mg, rend¡m¡ento del 35%) en forma de un sól¡do 15 de color blanco: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 8,22 - 8,33 (m, 3H), 7,97 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,25 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 4,49 (s, 2H), 3,57 (s a, 2H), 3,41 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 3,26 (s a, 2H), 2,22 (s a, 2H), 2,07 (s a, 2H), 1,65 - 1,82 (m, 2H), 1,39 - 1,59 (m, 2H), 1,00 (t, J = 7,5 Hz, 3H); LRMS(IEN) m/e 350,5 [(M+H)+, calculado para C21H28N5 350,2].
20 5.6.17. Síntes¡s de éster íerc-butíNco del ác¡do {3-[3-(4-ammomet¡l-feml)-¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡dazm-6-¡lammo]-
prop¡l}-met¡l-carbám¡co
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25 Parte A. 3-Bromo-¡m¡dazo[1,2-b1p¡r¡daz¡n-6-ona
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A una soluc¡ón de 3-bromo-6-cloro-¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡na [13526-66-4] (425,7 mg, 1,8 mmol) en 1,2-d¡metox¡etano 30 (9 ml) se le añad¡ó una soluc¡ón de h¡dróx¡do potás¡co [1310-58-3] (185,4 mg, 2,8 mmol) en agua (9,0 ml) y la
soluc¡ón resultante ag¡tada se calentó a reflujo en atmósfera de N2 durante 3 días, se enfr¡ó y se repart¡ó entre acetato de et¡lo y agua. La fase acuosa se evaporó a sequedad, se recog¡ó en metanol, se f¡ltró y se evaporó para produc¡r 3-bromo-¡m¡dazo[1,2- b]p¡r¡daz¡n-6-ona as 340 mg de sól¡do de color amar¡llo. LRMS (IEN) m/z 214,0/216,0 [(M+H)]+, calculado para C6H4BrNaO3: 214.02.
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Parte B. Éster terc-butíl¡co del ác¡do [3-(3-bromo-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-prop¡l1-met¡l-carbám¡co
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40 Se añad¡ó aceton¡tr¡lo (16,0 ml) a una mezcla de 3-bromo-¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡n-6-ona (344,3 mg, 1,6 mmol) y hexafluorofosfato de (benzotr¡azol-1-¡lox¡)tr¡s(d¡met¡lam¡no)fosfon¡o (react¡vo BOP) [56602-33-6], la mezcla se dejó ag¡tar para efectuar la d¡soluc¡ón. Se añad¡ó una soluc¡ón de éster terc-butíl¡co del ác¡do (3-am¡no-prop¡l)-met¡l-
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carbámico [150349-36-3] (0,8 g, 3,98 mmol) y 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU) [6674-22-2] (2,4 ml, 2,4 mmol) en DMF (4,0 ml) y la reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 3 días. La solución de reacción se repartió entre salmuera y acetato de etilo, se secó (MgSO4) y se sometió a cromatografía ultrarrápida (gel de sílice, eluyendo con 2-propanol al 10% (v/v)/acetato de etilo) para proporcionar éster ferc-butílico del ácido [3-(3- bromo-imidazo[1,2-£)]piridazin-6-ilamino)-propil]-metil-carbámico como 0,4 g de aceite de color amarillo transparente. LRMS (IEN) m/z 384,1/386,1 [(M+H)]+, calculado para C-,5H22BrN5O2: 384.28.
Parte C. Éster ferc-butílico del ácido {3-[3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-¿)]piridazin-6-ilamino]-propil}-
metilcarbámico.
A una mezcla de éster ferc-butílico del ácido [3-(3-bromo-imidazo[1,2-£)]piridazin-6-ilamino)-propil]-metil-carbámico (381,0 mg, 1,0 mmol), clorhidrato del ácido 4-aminometilfenilborónico [75705-21-4] (222,8 mg, 1,2 mmol), monohidrato tribásico de fosfato potásico [27176-10-9] (632,4 mg, 3,0 mmol) y complejo [1,1'- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II), con diclorometano [95464-05-4] (164,8 mg, 0,2 mmol) contenido en un matraz de fondo redondo de 50 ml se le añadió una solución de agua al 30 % (v/v) en 1,2-dimetoxietano (25 ml) y una barra agitadora magnética. El recipiente de reacción se equipó con un condensador de reflujo, se introdujo en un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se sometió a 10 ciclos de evacuación/atmósfera de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, en atmósfera de N2, se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85 °C durante 17 h, después se enfrió y se y se filtró a través de un filtro de ayuda apretado y el filtrado se transfirió a un embudo de decantación y se repartió entre salmuera y acetato de etilo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4) y se sometió a cromatografía ultrarrápida (gel de sílice, eluyendo con NH4OH conc. al 1 % en metanol al 10 % (v/v)/acetato de etilo) para proporcionar 81,2 mg de aceite de color pardo. Este producto se purificó adicionalmente mediante RP-HPLC preparativa para aislar éster ferc-butílico del ácido {3-[3-(4-aminometil- fenil)-imidazo[1,2-6]piridazin-6-ilamino]-propil}-metil-carbámico como 4,6 mg de sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 1,89 - 2,00 (m, 10 H) 2,87 (s a, 3 H) 3,41 (c, J = 7,16 Hz, 5 H) 4,14 (s, 2 H) 6,74 (d, J = 9,60 Hz, 1 H) 7,56 (m, J = 8,34 Hz, 2 H) 7,66 (d, J = 9,60 Hz, 1 H) 7,81 (s, 1 H) 8,25 (m, J = 8,34 Hz, 2 H). LRMS (IEN) m/z 411,1[(M+H)]+, calculado para C22H30N6O2: 410.52.
5.6.18. Síntesis de [3-(4-Ammometil-feml)-¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-M]-(3-femlpropM)-amma
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Parte A. (3-Bromo-imidazo[1,2-¿)]piridazin-6-il)-(3-fenil-propil)-amina
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Una mezcla de 3-bromo-6-cloro-imidazo[1,2-d]piridazina (232 mg, 1 mmol) y fenilpropil amina (1 ml, 7 mmol) en n- PrOH (1 ml) se calentó en un microondas a 150 °C durante 20 min. Se añadió fenilpropil amina adicional (0,5 ml) y la mezcla de reacción se calentó durante 20 min adicionales, después 30 min en un microondas. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se sometió a ISCO (columna de 40 gramos, DCM 3 min, después MeOH al 010 % en DCM durante 30 min) para dar el producto (380 mg ~90 % puro y se usó directamente para la siguiente etapa).
Parte B. [3-(4-Aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-(3-fenil-propil)-amina. Una mezcla de (3-bromo- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-(3-fenil-propil)-amina (100 mg, 0,3 mmol), clorhidrato del ácido (4-
aminometilfenil)borónico (67 mg, 0,36 mmol), K2CO3 (124 mg, 0,9 mmol) y diclorobis(trifenilfosfina)paladio (II) (11 mg, 0,015 mmol) en MeCN/agua (3,6 ml/0,9 ml) se calentó en un microondas a 150 °C durante 20 min. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (2 ml) y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC preparativa para dar el compuesto del título como sal AcOH (29,9 mg). RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 1,93 (s, 3 H) 1,99 - 2,09 (m, 2 H) 2,70 - 2,80 (m, 2 H) 3,41 (t, J = 6,95 Hz, 2 H) 4,14 (s, 2 H) 6,74 (d, J = 9,60 Hz, 1 H) 7,15 - 7,29 (m, 5 H) 7,53 (d, J = 8,34 Hz, 2 H) 7,64 (d, J = 9,60 Hz, 1 H) 7,80 (s, 1 H) 8,24 (d, J = 8,59 Hz, 2 H).
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Parte A. 2-(4-(6-(pent¡lam¡no)¡m¡dazof1.2-b1p¡r¡daz¡n-3-¡l)fenil)p¡rrol¡d¡n-1-carbox¡lato de terc-butilo
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A 150 mg (0.530 mmol) de la 3-bromo-W-pent¡l¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-6-am¡na se les añad¡eron 2-(4-(4,4,5,5- tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)fen¡l)p¡rrol¡d¡n-1-carbox¡lato de terc-but¡lo (237 mg, 0,636 mmol), K3PO4 (225 mg, 1,060 mmol), PdCl2(PPh3)3 (37 mg, 0,053 mmol), 3 ml de DME y 1 ml de agua. Esta mezcla se somet¡ó a m¡croondas durante 0,5 h a 140 °C. Después de enfr¡arse se d¡luyó con 25 ml de EtOAC, y se lavó con aprox¡madamente 20 ml de salmuera. La capa orgán¡ca se secó sobre MgSO4 y se concentró. La mezcla en bruto se pur¡f¡có en una columna de gel de síl¡ce de 12 g (ISCO), eluyendo con EtoAc al 15-100 %/Hex para dar 159 mg (67 %) del producto deseado.
Parte B. Pent¡l-r3-(4-p¡rrol¡d¡n-2-¡l-fen¡l)-¡m¡dazor1,2-;blp¡ndaz¡n-6-¡ll-aiTi¡na. A 45 mg de este compuesto, d¡suelto en 10 ml de MeOH a 0 °C se le añad¡ó 1,0 ml (exceso) de AcCI (lentamente) y la mezcla resultante se ag¡tó a 0 °C durante 4 h. Después, se concentró a sequedad para obtener 32 mg (rend¡m¡ento del 100%) de una sal HCl del compuesto deseado. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 6 ppm 0,91 - 0,99 (m, 3 H) 1,37 - 1,52 (m, 4 H) 1,74 (qu¡n, J = 7,01 Hz, 2 H) 2,22 - 2,40 (m, 3 H) 2,50 - 2,66 (m, 1 H) 3,36 - 3,42 (m, 2 H) 3,47 - 3,59 (m, 2 H) 4,75 - 4,81 (m, 1 H) 7,30 (d, J = 9,85 Hz, 1 H) 7,75 (d, J = 8,08 Hz, 2 H) 8,00 (d, J = 9,85 Hz, 1 H) 8,22 - 8,35 (m, 3 H); LRMS (IEN) m/e 350,0 [(M + H)+, calculado para C21H27N5 349,0].
5.6.20. Síntes¡s de But¡l-[3-(1H-p¡razol-4-¡l)-¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡dazm-6-M]-amma
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Una mezcla de 3-bromo-W-but¡l¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (100 mg, 0,37 mmol), ác¡do (1H-p¡razol-4-¡l)borón¡co (90 mg, 0,45 mmol), d¡cloro-b¡s(tr¡fen¡lfosf¡no)palad¡o (II) (15 mg, 0,021 mmol), fosfato potás¡co (80 mg, 0,56 mmol), aceton¡tr¡lo (1,5 ml) y H2O (0,5 ml) se calentó en un rec¡p¡ente cón¡co cerrado hermét¡camente a 160 °C durante 1000 s por ¡rrad¡ac¡ón con m¡croondas. La capa orgán¡ca se separó y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 ml). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se concentraron a pres¡ón reduc¡da para proporc¡onar un ace¡te que se pur¡f¡có por HPLC de fase ¡nversa para proporc¡onar but¡l-[3-(1H-p¡razol-4-¡l)-¡m¡dazo[1,2-djp¡r¡daz¡n-6-¡l]-am¡na (60 mg, 62 %) en forma de un sól¡do de color blanco: RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 6 ppm 7,67 (s, 1 H), 7,59 (d, J = 9,6 Hz, 1 H),
6,67 (d, J = 9,6 Hz, 1 H), 3,44 (t, J = 7,1 Hz, 1 H), 1,70- 1,80 (m, 1 H), 1,46- 1,59 (m, 1 H), 1,03 (t, J = 7,3 Hz, 1 H); CLEM (IEN) m/e 257,3 [(M+H)+, calculado para C13H17N6 257,1].
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Parte A. 4-(6-But¡lam¡no-¡m¡dazo[1.2-¿)lp¡r¡daz¡n-3-¡l)-2-fluorobenzaldehído
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Una mezcla de 3-bromo-A/-but¡l¡m¡dazo[1.2-£)lp¡r¡daz¡n-6-am¡na (300 mg. 1.1 mmol). ác¡do 3-fluoro-4- form¡lfen¡lborón¡co (230 mg. 1.3 mmol). d¡cloro-b¡s(tr¡fen¡lfosf¡no)palad¡o (II) (40 mg. 0.055 mmol). carbonato potás¡co (230 mg. 1.7 mmol). aceton¡tr¡lo (1.5 ml) y H2O (0.5 ml) se calentó en un rec¡p¡ente cón¡co cerrado hermét¡camente a 160 °C durante 1000 s por ¡rrad¡ac¡ón con m¡croondas. La capa orgán¡ca se separó y la capa acuosa se extrajo con acetato de et¡lo (2 ml). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se concentraron a pres¡ón reduc¡da para proporc¡onar un ace¡te que se pur¡f¡có por HPLC de fase ¡nversa para proporc¡onar 4-(6-but¡lam¡no-¡m¡dazo[1.2-6lp¡r¡daz¡n-3-¡l)-2- fluorobenzaldehído (240 mg. 68 %) en forma de un sól¡do de color amar¡llo: RMN 1H (400 MHz. CLoRoFORMO-d) 6 ppm 10.39 (s. 1 H). 8.28 (dd. J = 12.9. 1.5 Hz. 1 H). 7.91 - 8.01 (m. 3 H). 7.73 (d. J = 9.6 Hz. 1 H). 6.54 (d. J = 9.6 Hz. 1 H). 3.48 (td. J = 7.2. 5.8 Hz. 2 H). 1.69 - 1.80 (m. 2 H). 1.46 - 1.57 (m. 2 H). 1.03 (t. J = 7.5 Hz. 3 H); CLEM (IEN) m/e 313.2 [(M+H)+. calculado para C17H18FN4O 313.1].
Parte B. But¡l-(3-[4-(ferc-but¡lam¡no-met¡l)-3-fluoro-fen¡ll-¡m¡dazo[1.2-¿lp¡r¡daz¡n-6-¡l}-am¡na. Una mezcla de 4-(6- but¡lam¡no-¡m¡dazo[1.2-6lp¡r¡daz¡n-3-¡l)-2-fluoro-benzaldehído (30 mg. 0.10 mmol) y d¡cloroetano (DCE. 1 ml) se trató con terc-but¡l am¡na (0.011 ml. 0.11 mmol) y la mezcla de reacc¡ón resultante se mantuvo a TA durante 20 m¡n. Después. la reacc¡ón se trató con tr¡acetox¡boroh¡druro sód¡co (23 mg. 0.11 mmol) y la mezcla resultante se mantuvo hasta que la CLEM ¡nd¡có el consumo completo del aldehido. La reacc¡ón se ¡nterrump¡ó con b¡carbonato sód¡co acuoso saturado. las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con d¡clorometano (3 x 10 ml). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con agua (20 ml) y salmuera (20 ml). después se secaron (MgSO4). se f¡ltraron y se concentraron para proporc¡onar un res¡duo que se pur¡f¡có por HPLC de fase ¡nversa para proporc¡onar but¡l-{3-[4- (terc-but¡lam¡no- met¡l)-3-fluoro-fen¡ll-¡m¡dazo[1.2-6lp¡r¡daz¡n-6-¡l}-am¡na (32 mg. 86 %) en forma de un sól¡do de color blanco: RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) 6 ppm 8.21 (dd. J = 12.3. 1.5 Hz. 1 H). 7.93 (dd. J = 8.0. 1.7 Hz. 1 H). 7.82 (s. 1 H). 7.58 (d. J = 9.7 Hz. 1 H). 7.50 (t. J = 8.0 Hz. 1 H). 6.68 (d. J = 9.7 Hz. 1 H). 4.02 (s. 2 H). 3.34 (t. J = 7.2 Hz. 2 H). 1.60 - 1.73 (m. 2 H). 1.39 -1.51 (m. 2 H). 1.24 - 1.35 (m. 10 H). 0.91 - 1.00 (m. 3 H); CLEM (IEN) m/e 370.2 [(M+H)+. calculado para C21H29FN5 370.2l.
5.6.22. Síntesis de ^-^-(^-(S-acetMtiofen^-M^midazo^^-^pmdazm^-i^ammo^ropi^-W-isopropMacetamida
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Parte A. N1-(3-Bromo¡m¡dazo[1.2-¿)lp¡r¡daz¡n-6-¡l)propano-1.3-d¡am¡na
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Se añad¡ó prop¡len d¡am¡na [109-76-2] (7.5 ml. 90.3 mmol) a una suspens¡ón ag¡tada de 3-bromo-6-cloro- ¡m¡dazo[1.2-¿lp¡r¡daz¡na [13526-66-4] (2.1 g. 9.0 mmol) en tolueno (18.1 ml) y se calentó a reflujo. en atmósfera de N2. durante 7 días. después se repart¡ó entre h¡dróx¡do sód¡co acuoso 1 N y acetato de et¡lo. El extracto se lavó con agua. después se evaporó para obtener 1.1 g de un sem¡sól¡do de color amar¡llo. LRMS (IEN) m/z 270.0/272.0 [(M+H)l+. calculado para CgH^BrNs: 270.13.
Parte B. N1-(3-Bromo¡m¡dazo[1.2-¿)lp¡r¡daz¡n-6-¡l)-N3-¡soprop¡lpropano-1.3-d¡am¡na
N ^ N H H
Se añad¡eron acetona [67-64-1] (2.0 ml. 43.5 mmol). después tam¡ces moleculares de 4 angstrom. act¡vados en polvo a una soluc¡ón de N1-(3-bromo¡m¡dazo[1.2-£)lp¡r¡daz¡n-6-¡l)propano-1.3-d¡am¡na (367.2 mg. 1.4 mmol) en metanol (4.8 ml). El rec¡p¡ente de reacc¡ón se cerró y la mezcla se dejó ag¡tar ráp¡damente. a temperatura amb¡ente. durante 17 h. después su conten¡do se transf¡r¡ó ráp¡damente a una suspens¡ón con ag¡tac¡ón de boroh¡druro de sod¡o [16940-66-2l (0.3 g. 6.9 mmol) en metanol (50 ml). Después de 1 h. la mezcla se f¡ltró por gravedad y el f¡ltrado se evaporó. Después. el producto en bruto se recog¡ó en acetato de et¡lo. se lavó con salmuera. se secó (MgSO4) y se evaporó para proporc¡onar 196.9 mg de sól¡do de color amar¡llo. LRMS (IEN) m/z 312.0/314.0 [(M+H)^ calculado para C12H1sBrN5: 312.21.
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Parte C. N-(3-((3-Bromo¡m¡dazo[1.2-blp¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)prop¡l)-N-¡soprop¡lacetam¡da
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Se añad¡ó en porc¡ones cloruro de acet¡lo [75-36-5l (1.0 ml. 14.1 mmol). a temperatura amb¡ente. a una soluc¡ón de N1-(3-bromo¡m¡dazo[1.2-6lp¡r¡daz¡n-6-¡l)-N3-¡soprop¡lpropano-1.3-d¡am¡na (196.9 mg. 0.6 mmol) en p¡r¡d¡na (6.5 ml). y se ag¡tó en atmósfera de N2 durante 17 h. Se evaporó p¡r¡d¡na de la mezcla de reacc¡ón y el res¡duo se repart¡ó entre b¡carbonato sód¡co acuoso al 5 % (p/v) y acetato de et¡lo. La fase orgán¡ca se lavó con salmuera. se secó (MgSO4) y se evaporó para proporc¡onar 219.2 mg de ace¡te de color oscuro. LRMS (IEN) m/z 354.1/356.1 [(M+H)^ calculado para C^^gBrNsO: 354.25.
Parte D. A/-(3-((3-(5-acet¡lt¡ofen-2-¡l)¡m¡dazo[1.2-¿)lp¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)prop¡l)-N-¡soprop¡lacetam¡da. A una mezcla de W-(3-((3-bromo¡m¡dazo[1.2-6lp¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)prop¡l)-W-¡soprop¡lacetam¡da (219.2 mg. 0.6 mmol). ác¡do (5- acet¡lt¡ofen-2-¡l)borón¡co [206551-43-1l (128.4 mg. 0.8 mmol). monoh¡drato tr¡bás¡co de fosfato potás¡co [27176-10-9l (266.5 mg. 1.3 mmol) y complejo [1.1'b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferrocenold¡cloropalad¡o (II). con d¡clorometano [95464-05-4l (53.6 mg. 0.1 mmol) conten¡do en un matraz de fondo redondo de 25 ml se le añad¡ó una soluc¡ón de 30 % (v/v) de agua en 1.2-d¡metox¡etano (13 ml) y una barra ag¡tadora magnét¡ca. El rec¡p¡ente de reacc¡ón se equ¡pó con un condensador de reflujo. se ¡ntrodujo en un baño de ace¡te a temperatura amb¡ente. y el s¡stema se somet¡ó a 10 c¡clos de evacuac¡ón/atmósfera de N2 m¡entras se ag¡taba ráp¡damente. La reacc¡ón ráp¡damente ag¡tada. en atmósfera de N2. se calentó a una temperatura de baño de ace¡te de 85 °C durante 17 h. después se enfr¡ó y se repart¡ó entre salmuera y acetato de et¡lo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4) y se evaporó para produc¡r un sól¡do de color pardo oscuro. El producto se pur¡f¡có por RP-HPLC preparat¡va. Las fracc¡ones de cromatografía pur¡f¡cada se comb¡naron y se repart¡eron entre b¡carbonato de sod¡o acuoso saturado y acetato de et¡lo. El extracto orgán¡co se secó (CaSO4) y se evaporó para proporc¡onar A/-(3-((3-(5-acet¡lt¡ofen-2-¡l)¡m¡dazo[1.2-d]p¡r¡daz¡n-6- ¡l)am¡no)prop¡l)-W- ¡soprop¡lacetam¡da como 45.7 mg de sól¡do de color amar¡llo. RMN 1H (400 MHz. DMSO-cfe) 6 ppm 1.05 - 1.20 (m. 4 H) 1.24 (s a. 1 H) 1.86 - 2.03 (m. 4 H) 2.49 - 2.56 (m. 6 H) 3.24 - 3.48 (m. 5 H) 6.76 (dd. J = 9.73. 1.14 Hz. 1 H) 7.33 - 7.43 (m. 1 H) 7.79 - 7.84 (m. 1 H) 7.97 (d. J = 4.04 Hz. 1 H) 8.14 (d. J = 5.05 Hz. 1 H). LRMS (IEN) m/z 400.2[(M+H)]+. calculado para C20H25N5O2S: 399.52.
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Una mezcla de 3-bromo-W-but¡l¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (160 mg, 0,61 mmol), ácido (1-oxo-1,2,3,4- tetrahidroisoquinolin-6-il)borónico (200 mg, 0,73 mmol), aducto d¡cloro[1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno]palad¡o (II) diclorometano (50 mg, 0,06 mmol), fosfato potás¡co (250 mg, 1,2 mmol), DME (1,5 ml) y H2O (0,5 ml) se calentó en un rec¡p¡ente cón¡co cerrado hermét¡camente a 160 °C durante 360 s por ¡rrad¡ac¡ón con m¡croondas. La capa orgán¡ca se separó y la capa acuosa se extrajo con acetato de et¡lo (2 ml). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se concentraron a pres¡ón reduc¡da para proporc¡onar un ace¡te que se pur¡f¡có por HPLC de fase ¡nversa para proporc¡onar 6-(6-but¡lam¡no-¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-3- ¡l)-3,4-d¡h¡dro-2H-¡soqu¡nol¡n-1-ona (90 mg, 44 %) en forma de un sól¡do de color blanco: RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 6 ppm 8,11 - 8,20 (m, 2 H), 7,94 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,84 (s, 1 H), 7,57 (d, J = 9,7 Hz, 1 H), 6,67 (d, J = 9,7 Hz, 1 H), 3,50 (t, J = 6,7 Hz, 2 H), 3,34 (t, J = 7,2 Hz, 2 H), 3,00 (t, J = 6,6 Hz, 2 H), 1,60 - 1,75 (m, 2 H), 1,36-1,50 (m, 2 H), 0,95 (t, J = 7,4 Hz, 3 H); CLEM (IEN) m/e 336,2 [(M+H)+, calculado para C19H22N5O 336,2].
5.6.24. Síntes¡s de 3-(6-ammop¡r¡dm-3-¡l)-W-but¡l¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡dazm-6-amma
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A una mezcla de 3-bromo-W-but¡l¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (75 mg, 0,28 mmol), (5-(4,4,5,5- tetramet¡l-1,3,2- d¡oxaborolan-2-¡l)p¡r¡d¡n-2-¡l)carbamato de ferc-but¡lo (107 mg, 0,33 mmol), [1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno] d¡cloropalad¡o (II) (10 mg, 0,014 mmol) y fosfato potás¡co (58 mg, 0,42 mmol) se añad¡ó 3:1 de aceton¡tr¡lo/agua (2 ml). La mezcla resultante se calentó a 145 °C (m¡croondas) durante 1000 s. Después, la reacc¡ón se f¡ltró y se concentró. El res¡duo f¡nalmente se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va (neutral) para proporc¡onar 3-(6-am¡nop¡r¡d¡n-3-¡l)- W-but¡l¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (50,3 mg, rend¡m¡ento del 47 %) en forma de un sól¡do de color amar¡llo: RMN 1H (METANOL-d4) 6: 8,72 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,08 (dd, J = 8,7, 2,3 Hz, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,52 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,58 -6,66 (m, 2H), 4,78 -4,88 (m, 11H), 3,27 - 3,33 (m, 3H), 1,62 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 1,42 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 0,91 - 0,97 (m, 3H); LRMS(IEN) m/e 283,4 [(M+H)+, calculado para C15H19N6 283,2].
5.6.25. Síntes¡s de ButM-{3-[4-(ferc-but¡lammo-metM)-2-fluoro-feml]-¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡dazm-6-¡l}-amma
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Parte A. 4-(6-But¡lam¡no-¡m¡dazo[1.2-¿)lp¡r¡daz¡n-3-¡l)-3-fluoro-benzaldehído
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Una mezcla de 3-bromo-A/-but¡l¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (810 mg. 3.0 mmol). ác¡do 2-fluoro-4- form¡lfen¡lborón¡co (1.2 g. 7.5 mmol). aducto d¡cloro[1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno]palad¡o (II) d¡clorometano (200 mg. 0.30 mmol). fosfato potás¡co (1.9 g. 9.0 mmol). DME (9 ml) y H2O (3 ml) se mantuvo en un rec¡p¡ente cerrado hermét¡camente a 80 °C durante 12 h. La capa orgán¡ca se separó y se concentró a pres¡ón reduc¡da para proporc¡onar un sól¡do de color amar¡llo que se pur¡f¡có por HPLC de fase ¡nversa para proporc¡onar 4-(6-but¡lam¡no- ¡m¡dazo[1.2-8]p¡r¡daz¡n-3-¡l)-3-fluoro-benzaldehído (600 mg. 64%) en forma de un sól¡do de color blanco: RMN 1H (400 MHz. CDCla) 8 ppm 10.02 (d. J = 1.8 Hz. 1 H). 8.84 - 8.93 (m. 1 H). 8.12 (d. J = 4.3 Hz. 1 H). 7.79 (dd. J = 8.1.
1.5 Hz. 1 H). 7.68 - 7.76 (m. 2 H). 6.55 (d. J = 9.6 Hz. 1 H). 3.43 (td. J = 7.1.5.6 Hz. 2 H). 1.67 - 1.78 (m. 2 H). 1.49 (dc. J = 15.0. 7.4 Hz. 2 H). 1.01 (t. J = 7.3 Hz. 3 H); CLEM (IEN) m/e 313.1 [(M+H)+. calculado para C17H18FN4O 313.1].
Parte B. But¡l-(3-[4-(ferc-but¡lam¡no-met¡l)-2-fluoro-fen¡ll-¡m¡dazo[1.2-8lp¡r¡daz¡n-6-¡l}-am¡na. Una mezcla de 4-(6- but¡lam¡no-¡m¡dazo[1.2-8]p¡r¡daz¡n-3-¡l)-3-fluoro-benzaldehído (120 mg. 0.40 mmol) y d¡cloroetano (DCE. 4 ml) se trató con terc-but¡l am¡na (0.050 ml. 0.50 mmol) y la mezcla de reacc¡ón resultante se mantuvo a TA durante 20 m¡n. Después la reacc¡ón se trató con tr¡acetox¡boroh¡druro sód¡co (170 mg. 0.80 mmol) y la mezcla resultante se mantuvo hasta que la CLEM ¡nd¡có el consumo completo del aldehído. La reacc¡ón se ¡nterrump¡ó con b¡carbonato sód¡co acuoso saturado. las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con d¡clorometano (3 x 20 ml). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con agua (20 ml) y salmuera (20 ml). después se secaron (MgSO4). se f¡ltraron y se concentraron para proporc¡onar un res¡duo que se pur¡f¡có por HPLC de fase ¡nversa para proporc¡onar but¡l-{3-[4-(terc- but¡lam¡no-met¡l)-2-fluoro-fen¡l]-¡m¡dazo[1.2-8]p¡r¡daz¡n-6-¡l}-am¡na (98 mg. 67%) en forma de un sól¡do de color blanco: RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) 8 ppm 8.21 (dd. J = 12.3. 1.5 Hz. 1 H). 7.93 (dd. J = 8.0. 1.7 Hz. 1 H). 7.82 (s. 1 H). 7.58 (d. J = 9.7 Hz. 1 H). 7.50 (t. J = 8.0 Hz. 1 H). 6.68 (d. J = 9.7 Hz. 1 H). 4.02 (s. 2 H). 3.34 (t. J = 7.2 Hz. 2 H). 1.84 (s. 1 H). 1.61 - 1.71 (m. 2 H). 1.39 - 1.50 (m. 2 H). 1.32 (s. 9 H). 1.25 - 1.30 (m. 1 H). 0.91 - 0.99 (m. 3 H); CLEM (IEN) m/e 370.2 [(M+H)+. calculado para C21H29FN5 370.2].
5.6.26. Síntesis de Butil-[3-(1H-mdazol-5-M)-¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-M]-amma
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Una mezcla de 3-bromo-W-but¡l¡m¡dazo[1.2-d]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (140 mg. 0.50 mmol). p¡nacol éster del ác¡do (1H- ¡ndazol-5-borón¡co (150 mg. 0.60 mmol). d¡cloro-b¡s(tr¡fen¡lfosf¡no) palad¡o (II) (20 mg. 0.025 mmol). carbonato potás¡co (110 mg. 0.75 mmol). aceton¡tr¡lo (1.5 ml) y H2O (0.5 ml) se calentó en un rec¡p¡ente cón¡co cerrado hermét¡camente a 160 °C durante 1000 s por ¡rrad¡ac¡ón con m¡croondas. La capa orgán¡ca se separó y la capa acuosa se extrajo con acetato de et¡lo (2 ml). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se concentraron a pres¡ón reduc¡da para proporc¡onar un ace¡te que se pur¡f¡có por HPLc de fase ¡nversa para proporc¡onar but¡l-[3-(1H-¡ndazol-5-¡l)- ¡m¡dazo[1.2-8]p¡r¡daz¡n-6-¡l]-am¡na (100 mg. 65%) en forma de un sól¡do de color blanco: RMN 1H (400 MHz. METANOL-c/4) 8 ppm 8.62 - 8.68 (m. 1 H). 8.13 - 8.20 (m. 2 H). 8.02 (dd. J = 8.8. 1.5 Hz. 1 H). 7.94 (d. J = 9.9 Hz. 1 H). 7.72 (d. J = 8.8 Hz. 1 H). 7.21 (d. J = 9.9 Hz. 1 H). 3.43 (t. J = 7.2 Hz. 2 H). 1.66 - 1.79 (m. 2 H). 1.49 (dc. J = 15.1.7.4 Hz. 2 H). 0.99 (t. J = 7.5 Hz. 3 H); CLEM (IEN) m/e 307.2 [(M+H)+. calculado para C17H19N6 307.2].
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5.6.27. Síntesis de éster íerc-butílico del ácido (3-{[3-(5-acetN-tiofen-2-N)-imidazo[1,2-¿]pirídazm-6-M]- metilamino}-propil)-carbámico
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Parte A. M-(3-Bromo-¡m¡dazof1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-N'-met¡l-propano-1,3-d¡am¡na y N*1*-(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-
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Se d¡solv¡ó 3-bromo-6-cloro-¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡na [13526-66-4] (1.0 g. 4.5 mmol) en A/-met¡l-propano-1,3-d¡am¡na [6291-84-5] (8.0 ml. 77,3 mmol) y la soluc¡ón se ag¡tó a 65 °C en atmósfera de N2 durante 4 h, después se repart¡ó entre b¡carbonato sód¡co acuoso saturado y acetato de et¡lo. El extracto orgán¡co se secó (MgSO4). se f¡ltró y se evaporó para obtener 1,31 g de ace¡te de color amar¡llo como una mezcla de los compuestos del título. LRMS (IEN) m/z 284,0/286,0 [(M+H)]+, calculado para C^H^Br^: 284,16. LRMS (IEN) m/z 284,0/286,0 [(M+H)]+, calculado para C1üH14BrN5: 284.16.
Parte B. M-{3-[(3-Bromo-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-met¡l-am¡nol-prop¡l>-2,2.2-tr¡fluoroacetam¡da
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Se d¡solv¡ó una mezcla de W-(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-N'-met¡l-propano-1,3-d¡am¡na y N*1*-(3-bromo- ¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-N*1*-met¡l-propano-1,3-d¡am¡na (1,31 g. 4.6 mmol). con ag¡tac¡ón, en acetato de et¡lo (46 ml). Se añad¡ó lentamente tr¡fluoroanhídr¡do acét¡co [407-25-0] (6.4 ml. 46,1 mmol) a la soluc¡ón ag¡tada a temperatura amb¡ente y la reacc¡ón se calentó a 50 °C durante 8 h para asegurarse la completa tr¡fluoroacet¡lac¡ón. La reacc¡ón se lavó con salmuera. se secó (MgSO4), se evaporó y se somet¡ó a cromatografía ultrarráp¡da (gel de síl¡ce, eluyendo con acetona al 50 % (v/v)/hexanos) para a¡slar dos productos b¡en resueltos: Rf = 0,35 (producto mono-tr¡fluoroacet¡lado deseado) y Rf = 0,53 (producto d¡-tr¡fluoroacet¡lado). Las fracc¡ones cromatográf¡cas del componente de Rf = 0,53 se comb¡naron y evaporaron para obtener 0,87 g de un sól¡do amar¡llo. Las fracc¡ones cromatográf¡cas del componente de Rf = 0,35 (producto deseado) se comb¡naron y se evaporaron para obtener 0,54 g de ace¡te amar¡llo transparente. LRMS (IEN) m/z 380,0/382,0 [(M+H)]+, calculado para C-i2H-i3BrF3N5O: 380,17
Parte C. Éster terc-butíl¡co del ác¡do {3-[(3-bromo-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-met¡l-am¡nol-prop¡l}-carbám¡co
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Se añad¡ó agua (10 ml) a una mezcla de W-{3-[(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-met¡lam¡no]-prop¡l}- 2,2,2- tr¡fluoro-acetam¡da (0.5 g. 1.4 mmol) y carbonato potás¡co [584-08-7] (1.1 g. 8.0 mmol) en metanol (10 ml) y se dejó ag¡tar a temperatura amb¡ente durante 3 días. La mezcla se evaporó a sequedad y el res¡duo se tr¡turó en acetato de et¡lo. La suspens¡ón de acetato de et¡lo se f¡ltró de sus sól¡dos ¡nsolubles, a lo que se añad¡ó d¡carbonato de d¡-terc- but¡lo [24424-99-5] (0.3 g. 1.5 mmol) y A/-met¡lmorfol¡na [109-02-4] (0.5 ml. 4.3 mmol). la reacc¡ón se ag¡tó durante una noche. se lavó con salmuera. se secó (MgSO4), y se evaporó para produc¡r 0.5 g de un ace¡te de color amar¡llo transparente. LRMS (IEN) m/z 384,1/386,1 [(M+H)]+, calculado para C-,5H22BrN5O2: 384.28.
Parte D. Éster terc-butíl¡co del ác¡do (3-{[3-(5-acet¡l-t¡ofen-2-¡l)-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l1-met¡l-am¡no}-prop¡l)- carbám¡co. Se preparó éster terc-butíl¡co del ác¡do (3-{[3-(5-acet¡l-t¡ofen-2-¡l)-¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡n-6-¡l]-met¡lam¡no}- prop¡l)-carbám¡co y se a¡sló de manera s¡m¡lar al proced¡m¡ento detallado en el ejemplo 5.6.17 a part¡r de una mezcla
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de éster ferc-butíl¡co del ácido {3-[(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-met¡lam¡no]-prop¡l}-carbám¡co (0,5 g, 1,3 mmol), ác¡do 5-acet¡l-2-t¡ofenoborón¡co [206551-43-1] (0,3 g, 1,5 mmol), monoh¡drato tr¡bás¡co de fosfato potás¡co [27176-10-9] (0,5 g, 2,5 mmol) y complejo [1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no) ferroceno] d¡cloropalad¡o (II), con d¡clorometano [95464-05-4] (0,1 g, 0,1 mmol) en una soluc¡ón de agua al 30 % (v/v) en 1,2-d¡metox¡etano (30 ml) para proporc¡onar 0,16 g de polvo de color amar¡llo, pf. 148-149 °C. RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1,37 (s, 9 H) 1,78 (qu¡n, J = 6,95 Hz, 2 H) 2,54 (s, 3 H) 3,05 (c, J = 6,57 Hz, 2 H) 3,17 (s, 3 H) 3,61 (t, J = 7,20 Hz, 2 H) 6,88 (s a, 1 H) 7,12 (d, J = 9,85 Hz, 1 H) 7,82 (d, J = 4,29 Hz, 1 H) 7,92 (d, J = 9,85 Hz, 1 H) 7,97 (d, J = 4,04 Hz, 1 H) 8,20 (s, 1 H). LRMS (IEN) m/z 430,1[(M+H)]+, calculado para C21H27BN5O3S: 429.55.
5.6.28. Síntesis de W-[3-(5-Ammometil-tiofen-2-M)-imidazo[1,2-6]pmdazm-6-N]-N'-metM-N'-feml-etano-1,2-
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Parte A. N1-(3-bromo¡m¡dazo[1,2-8]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-N3-met¡l-N3-fen¡lpropano-1,3-d¡am¡na
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A 300 mg (1,389 mmol) de la 3-bromo-6-fluoro¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡na, se les añad¡eron N1-met¡l-N1-fen¡l-propano- 1,3-d¡am¡na (456 mg, 2,778 mmol), Cs2CO3 (903 mg, 2,778 mmol) y 10 ml de DMF. Esta mezcla se ag¡ta durante una noche a ta. Se d¡luyó con 30 ml de EtOAc y 15 ml de agua. La capa orgán¡ca se lavó con salmuera y se secó sobre MgSO4. Se concentró y se pur¡f¡có usando cromatografía sobre gel de síl¡ce (ISCO) eluyendo con MeOH al 0 - 10 %/DCM para obtener 301 mg (60 %) de producto.
Parte B. N-[3-(5-Am¡nomet¡l-t¡ofen-2-¡l)-¡m¡dazo[1,2-¿)]p¡r¡daz¡n-6-¡l]-N'-met¡l-N'-fen¡letano-1,2-d¡-am¡na. El producto a¡slado obten¡do a par¡r de la parte A se acopló a ác¡do (4-(am¡nomet¡l)fen¡l)borón¡co med¡ante la reacc¡ón de Suzuk¡ descr¡ta en el ejemplo 5.6.19 para obtener el compuesto del título con un rend¡m¡ento del 56 %. RMN 1H (400 MHz, METANOL-c/4) 8 ppm 2,14 (t, J = 7,06 Hz, 2 H) 3,08 (s, 3 H) 3,53 - 3,69 (m, 4 H) 4,27 (s, 2 H) 6,75 (t, J = 7,28 Hz, 1 H) 6,85 - 6,93 (m, 3 H) 7,26 (t, J = 8,05 Hz, 2 H) 7,65 (d, J = 8,38 Hz, 2 H) 7,80 (d, J = 9,70 Hz, 1 H) 7,95 (s, 1 H) 8,38 (d, J = 8,38 Hz, 2 H); LRMS (IEN) m/e 387,0 [(M + H)+, calculado para C23H26N6 386,0].
5.6.29. Síntesis de ButM-[3-(1H-imidazol-4-M)-imidazo[1,2-6]pindazm-6-M]-amma
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Parte A. Ác¡do (6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1,2-¿)]p¡r¡daz¡n-3-¡l)borón¡co
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Una soluc¡ón preenfr¡ada (-78 °C) de 3-bromo-W-but¡l¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (200 mg, 0,74 mmol) y tetrah¡drofurano (4 ml) se trató gota a gota con n-but¡ll¡t¡o (1,2 ml, 1,6 M, 1,9 mmol). La mezcla de reacc¡ón resultante se mantuvo a -78 °C durante 5 m¡n, después se trató gota a gota con tr¡s(¡soprop¡l)borato (0,21 ml, 0,89 mmol) y se mantuvo a -78 °C durante 2,5 h. La reacc¡ón se ¡nterrump¡ó con H2O (1 ml) y se dejó calentar a TA. Los volát¡les
orgánicos se retiraron a presión reducida y la capa acuosa se acidificó con HCI 1 N hasta que se formó un precipitado de color blanco. El sólido se recogió por filtración para proporcionar ácido (6-(butilamino)imidazo[1,2- d]piridazin-3-il)borónico (100 mg, 58 %) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (400 MHz, MeTaNOL-¿4) 8 ppm 7,56 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 6,66 (d, J = 9,9 Hz, 1 H), 3,25 - 3,35 (m, 2 H), 1,60 - 1,75 (m, 1 H), 1,37 - 5 1,58 (m, 1 H), 0,94 - 1,08 (m, 1 H); CLEM (IEN) m/e 235,2 [(M+H)+, calculado para C10H15BN402 235,1].
Parte B. Butil-[3-(1H-imidazol-4-il)-imidazo[1,2-d]piridazin-6-il]-amina. Una mezcla de ácido (6-
(butilamino)imidazo[1,2-£)]piridazin-3-il)borónico (120 mg, 0,5 mmol), 4-bromo-1H-imidazol (75 mg, 0,5 mmol), aducto dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) diclorometano (40 mg, 0,050 mmol), fosfato potásico (210 mg, 1,0 10 mmol), DME (1,5 ml) y H2O (0,5 ml) se calentó en un recipiente cónico cerrado herméticamente a 140 °C durante 600 s por irradiación con microondas. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 ml). Las capas orgánicas combinadas se concentraron a presión reducida para proporcionar un aceite que se purificó por HPLC de fase inversa para proporcionar butil-[3-(1H-imidazol-4-il)-imidazo[1,2-£)]piridazin-6-il]-amina (95 mg, 72 %) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 7,99 (s a, 1 H), 7,82 (d, J 15 = 1,0 Hz, 2 H), 7,60 (d, J = 9,6 Hz, 1 H), 6,68 (d, J = 9,6 Hz, 1 H), 3,44 (t, J = 7,1 Hz, 2 H), 1,69 - 1,82 (m, 2 H), 1,46 -
1,60 (m, 2 H), 1,03 (t, J = 7,3 Hz, 3 H); CLEM (IEN) m/e 257,2 [(M+H)+, calculado para C13H17N6 257,1].
5.6.30. Síntesis de 3-(4-(ammometM)-3-fluorofeml)-W-but¡Mm¡dazo[1,2-d]p¡r¡dazm-6-amma
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Parte A. 4-Bromo-2-fluorobencilcarbamato de tere-butilo
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A la solución de sal mono HCl (4-bromo-2-fluorofenil)metanamina (336 mg, 1,4 mmol) en 1:1 1,4-dioxano/agua (8 ml) se le añadieron trietil amina (312 mg, 3,08 mmol) y dicarbonato de di-tere-butilo (366 mg, 1,68 mmol). La reacción se mantuvo a temperatura ambiente durante 2 días, y después se inactivó con una solución saturada de bicarbonato sódico (8 ml) y se extrajo con acetato de etilo (8 ml) tres veces. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con 30 salmuera (8 ml) y se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y se concentraron a presión reducida para proporcionar 4-bromo-2-fluorobencilcarbamato de tere-butilo (419 mg, rendimiento del 96%) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (CLOROFORMO-d) 8: 7,05 - 7,29 (m, 3H), 3,65 (s, 2H), 1,39 (s, 9H); LRMS(IEN) m/e 304,0 [(M+H)+, calculado para C-i2H-i6BrFNO2 304,0].
35 Parte B. 2-Fluoro-4-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)benc¡lcarbamato de tere-butilo
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La mezcla de 4-bromo-2-fluorobencilcarbamato de tere-butilo (419 mg, 1,38 mmol), bis(pinacolato)diboro (385 mg,
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1,52 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) (101 mg, 0,138 mmol), acetato potásico (406 mg, 4,13 mmol) y 1,4-dioxano (10 ml) se agitó a 80 °C durante 18 h. Después, la reacción se filtró y se concentró para proporcionar un residuo que se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (acetato de etilo al 0-30 % en hexano) para proporcionar 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)bencilcarbamato de ferc-butilo (293 mg, rendimiento del 61 %) en forma de un aceite transparente: RMN 1H (CLoRoFORMO-d) 8: 7,51 - 7,62 (m, 1H), 7,47 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 7,35 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 1,46 (s, 9H), 1,33 - 1,38 (m, 12H).
Parte C. 4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡ridaz¡n-3-¡l)-2-fluorobenc¡lcarbamato de ferc-butilo
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A una mezcla de 3-bromo-A/-but¡l¡m¡dazo[1,2-6]p¡ridaz¡n-6-am¡na (187 mg, 0,7 mmol), 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)bencilcarbamato de ferc-butilo (293 mg, 1,2 mmol), [1,1'-
bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) (24 mg, 0,034 mmol) y fosfato tripotásico (144 mg, 1,04 mmol) se le añadió 3:1 de acetonitrilo/agua (3 ml). La mezcla resultante se calentó a 145 °C (microondas) durante 800 s. Después, la reacción se filtró y se concentró. El residuo se disolvió en metanol y después, se filtró de nuevo. La filtración finalmente se purificó por HPLC preparativa (neutral) para proporcionar 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2- 8]piridazin-3-il)-2-fluorobencilcarbamato de ferc-butilo (110 mg, rendimiento del 38 %) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (CLOROFORMO-d) 8: 8,02 (dd, J = 11,9, 1,3 Hz, 1H), 7,78 - 7,89 (m, 2H), 7,74 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,43 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,28 (s, 2H), 6,52 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,95 (s a, 1H), 4,314,57 (m, 3H), 3,45 (td, J = 7,1, 5,6 Hz, 2H), 1,68 - 1,80 (m, 2H), 1,02 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(IEN) m/e 414,3 [(M+H)+, calculado para C22H29FN5O2 414,2].
Parte D. 3-(4-(am¡nomet¡l)-3-fluorofen¡l)-M-but¡l¡m¡dazo[1,2-81p¡r¡daz¡n-6-am¡na. La solución de 4-(6-
(butilamino)imidazo[1,2-8]piridazin-3-il)-2-fluorobencilcarbamato de ferc-butilo (91 mg, 0,22 mmol) se enfrió a 0 °C y se trató con cloruro de acetilo (518 mg, 6,6 mmol). La reacción se mantuvo a temperatura ambiente durante una noche. La solución resultante se concentró a presión reducida para proporcionar sal HCl 3-(4-(aminometil)-3- fluorofenil)-W-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (75 mg, rendimiento del 88%) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 8,38 (s, 1H), 8,23 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,74 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 4,31 (s, 2H), 3,43 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,65 - 1,84 (m, 2H), 1,42 - 1,59 (m, 2H), 1,01 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(IEN) m/e 314,4 [(M+H)+, calculado para C17H21FN5 314,2].
5.6.31. Síntesis de [3-(4-Ammomet¡l-feml)-¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-M]-but¡l-met¡l-amma
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Parte A. (3-Bromo-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-6-¡l)-but¡l-met¡l-am¡na
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Una solución pura de 3-bromo-6-cloro-imidazo[1,2-d]piridazina [13526-66-4] (522,9 mg, 2,3 mmol) en W-metil butilamina [110-68-9] (3,0 ml, 24,3 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (0,6 ml, 3,5 mmol) se agitó en atmósfera de N2 a 65 °C durante una noche, después se evaporó para proporcionar 0,9 g de un sólido de color amarillo, usado en
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la siguiente etapa sin purificación adicional. LRMS (IEN) m/z 283,1/285,1 [(M+H)]+, calculado para C-nH-isBrN^
283.17.
Parte B. [3-(4-Am¡nomet¡l-fen¡l)-¡m¡dazo[1.2-¿1p¡ridaz¡n-6-¡l1-but¡l-met¡l-am¡na. A una mezcla de (3-bromo- ¡m¡dazo[1,2-£)]pmdaz¡n-6-¡l)-but¡l-met¡l-am¡na (377.7 mg. 1.3 mmol). clorhidrato del ácido 4-aminometilfenilborónico [75705-21-4] (302.4 mg. 1.6 mmol). monohidrato tribásico de fosfato potásico [27176-10-9] (612.7 mg. 2.7 mmol) y complejo [1.1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II). con diclorometano [95464-05-4] (110.4 mg. 0.1 mmol) contenido en un matraz de fondo redondo de 25 ml se le añadió una solución de agua al 30% (v/v) en 1.2- dimetoxietano (15 ml) y una barra agitadora magnética. El recipiente de reacción se equipó con un condensador de reflujo. se introdujo en un baño de aceite a temperatura ambiente. y el sistema se sometió a 10 ciclos de evacuación/atmósfera de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada. en atmósfera de N2. se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85 °C durante 17 h. después se enfrió y se repartió entre salmuera (pH ajustado a 10 con hidróxido sódico acuoso 3 N) y acetato de etilo. El extracto de fase separada se secó (CaSO4). se evaporó y se sometió a cromatografía ultrarrápida (gel de sílice. eluyendo con NH4OH al 1 % en metanol al 10 % (v/v)/acetato de etilo) para aislar un sólido de color pardo que se trituró en heptano para precipitar un sólido de color pardo. Después. el disolvente de trituración se evaporó para proporcionar [3-(4-aminometilfenil)- imidazo[1.2-6]piridazin-6-il]-butil-metil-amina como 41.8 mg de sólido de color blanco. pf. 99-101 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-cfe) 8 ppm 0.94 (t. J = 7.33 Hz. 3 H) 1.30 - 1.42 (m. 2 H) 1.47 - 1.70 (m. 2 H) 1.90 (s a. 1 H) 3.10 (s. 3 H) 3.51 - 3.57 (m. 2 H) 3.75 (s. 2 H) 7.05 (d. J = 9.85 Hz. 1 H) 7.42 (d. J = 8.34 Hz. 2 H) 7.85 (d. J = 10.11 Hz. 1 H) 7.92 (s. 1 H) 8.14 (d. J = 8.34 Hz. 2 H). LRMS (IEN) m/z 310.3 [(M+H)]+. calculado para ^,8^8^:309.42.
5.6.32. Síntesis de W-butM-3-(¡somdolm-5-M)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-amma
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Parte A. 5-í6-ÍBut¡lam¡no)¡m¡dazor1.2-8lp¡r¡daz¡n-3-¡l)¡so¡ndol¡n-2-carboxilato de tere-butilo
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A una mezcla de ácido (6-(butilamino)imidazo[1.2-8]piridazin-3-il)borónico (47 mg. 0.2 mmol). 5-bromoisoindolin-2- carboxilato de tere-butilo (47 mg. 0.16 mmol). [1.1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II) (7 mg. 0.01 mmol) y fosfato tripotásico (41 mg. 0.3 mmol) se le añadió 3:1 de acetonitrilo /agua (3 ml). La mezcla resultante se calentó a 145 °C (microondas) durante 800 s. Después. la reacción se filtró y se concentró. El residuo se disolvió en metanol y después. se filtró de nuevo. La filtración finalmente se purificó por HPLC preparativa (neutral) para proporcionar 5-(6- (butilamino)imidazo[1.2-8]piridazin-3-il)isoindolin-2-carboxilato de tere-butilo (43 mg. rendimiento del 66 %) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 8.15 (d. J = 10.9 Hz. 1H). 8.00 - 8.08 (m. 1H). 7.75 (s. 1H). 7.59 (d. J = 9.6 Hz. 1H). 7.35 (t. J = 9.1 Hz. 1H). 6.68 (d. J = 9.9 Hz. 1H). 4.69 (s a. 4H). 3.37 (d. J = 7.3 Hz. 2H). 1.65 - 1.78 (m. 2H). 1.56 (s. 9H). 1.45-1.53 (m. 2H). 1.02 (td. J = 7.3. 2.3 Hz. 3H); LRMS(IEN) m/e 408.3 [(M+H)+. calculado para C23H30N5O2 408.2].
Parte B. N-butil-3-(isoindolin-5-il)imidazo[1.2-81piridazin-6-amina. Se enfrió la solución de 5-(6-
(butilamino)imidazo[1.2-8]piridazin-3-il)isoindolin-2-carboxilato de tere-butilo (38 mg. 0.09 mmol) a 0 °C y se trató con cloruro de acetilo (220 mg. 2.8 mmol). La reacción se mantuvo a temperatura ambiente durante una noche. La solución resultante se concentró a presión reducida para proporcionar clorhidrato de W-butil-3-(isoindolin-5- il)imidazo[1.2-8]piridazin-6-amina (12 mg. rendimiento del 35%) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 8.26 (s. 1H). 8.17 - 8.21 (m. 2H). 7.98 (d. J = 10.1 Hz. 1H). 7.65 (d. J = 8.6 Hz. 1H). 7.27 (d. J = 9.9 Hz. 1H). 4.76 (s. 4H). 3.36 - 3.45 (m. 2H). 1.63 - 1.81 (m. 2H). 1.40 - 1.56 (m. 2H). 1.00 (t. J = 7.3 Hz. 3H); LRMS(IEN) m/e 308.4 [(M+H)+. calculado para C18H22N5 308.2].
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5.6.33. Síntesis de 1-{3-[3-(4-Ammomet¡l-feml)-¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-Mammo]-propM}-p¡rroMdm-2-ona
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Parte A. 1-(3-((3-bromo¡m¡dazof1.2-¿1p¡r¡daz¡n-6-¡l)amino)prop¡l)p¡rrol¡d¡n-2-ona
O
b
La 3-bromo-6-fluoro¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡na se alqu¡ló con 1-(3-am¡noprop¡l)p¡rrol¡d¡n-2-ona. en las misma cond¡c¡ones de reacc¡ón como las usadas en la síntes¡s de N1-(3-bromo¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-N3-met¡l-N3- fen¡lpropano-1,3-d¡am¡na. en el ejemplo 5.6.29 para obtener el 68 % del producto.
Parte B. 1-(3-[3-(4-Am¡nomet¡l-fen¡l)-¡m¡dazo[1.2-¿1p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no1-prop¡l}-p¡rrol¡d¡n-2-ona. La 1-(3-((3-
bromo¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)prop¡l)p¡rrol¡d¡n-2-ona tamb¡én se acopló a ác¡do (4-
(am¡nomet¡l)fen¡l)borón¡co usando las cond¡c¡ones de acoplam¡ento de Suzuk¡ descr¡tas en el ejemplo 5.6.19 para obtener el producto del título con un rend¡m¡ento del 64 %. RMN 1H (400 MHz, METANOL-cL) 6 ppm 1,94 - 2,09 (m, 4 H) 2,33 - 2,43 (m, 2 H) 3,36 - 3,53 (m, 6 H) 4,16 (s, 2 H) 6,74 (d, J = 9,60 Hz, 1 H) 7,57 (m, J = 8,34 Hz, 2 H) 7,65 (d, J = 9,60 Hz, 1 H) 7,81 (s, 1 H) 8,25 (m, J = 8,34 Hz, 2 H); LRMS (IEN) m/e 365,0 [(M + H)+, calculado para C20H24N6O 364,0].
5.6.34. Síntesis de 5-(6-((3-(2-oxop¡rrol¡dm-1-M)prop¡l)ammo)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-3-¡l)t¡ofeno-2-
carboxamida
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Parte A. Ác¡do 5-(6-((3-(2-oxop¡rrol¡d¡n-1-¡l)prop¡l)am¡no)¡m¡dazo[1.2-¿1p¡r¡daz¡n-3-¡l)t¡ofeno-2-carboxíl¡co
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El acoplam¡ento de Suzuk¡ del ác¡do 5-boronot¡ofeno-2-carboxíl¡co y 1-(3-((3-bromo¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡n-6- ¡l)am¡no)prop¡l)p¡rrol¡d¡n-2-ona usando el proced¡m¡ento descr¡to en ejemplo 5.6.19 produjo el 64% del compuesto del título.
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Parte B. N-(2.4-d¡metox¡benc¡l)-5-(6-((3-(2-oxop¡rrol¡d¡n-1-¡l)prop¡l)am¡no)¡m¡dazo[1.2-¿)lp¡r¡daz¡n-3-¡l)t¡ofeno-2-
carboxamida
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La reacc¡ón de acoplam¡ento de am¡da del ác¡do carboxíl¡co con 2.4-d¡metox¡-benc¡lam¡na proporc¡onó el 83 % del producto.
Parte C. 5-(6-((3-(2-oxop¡rrol¡d¡n-1-¡l)prop¡l)am¡no)¡m¡dazo[1.2-8lp¡r¡daz¡n-3-¡l)t¡ofeno-2-carboxam¡da. A 50 mg (0.094 mmol) de W-(2.4-d¡metox¡benc¡l)-5-(6-((3-(2-oxop¡rrol¡d¡n-1-¡l)prop¡l)am¡no)¡m¡dazo[1.2-8lp¡r¡daz¡n-3- ¡l)t¡ofeno-2-
carboxam¡da d¡suelta en 1 ml de DCM se le añad¡eron 5 ml de TFA. El d¡solvente resultante se ag¡tó a ta durante 0.5 h y después se concentró. Se pur¡f¡có en el HPLC PREP para obtener 26 mg (72 %) del producto deseado. RMN 1H (400 MHz. METANOL-c^) 8 ppm 2.04 (qu¡n. J = 7.39 Hz. 4 H) 2.33 - 2.41 (m. 2 H) 3.45 - 3.60 (m. 6 H) 6.76 (d. J = 9.85 Hz. 1 H) 7.64 - 7.72 (m. 2 H) 7.75 (d. J = 4.04 Hz. 1 H) 7.94 (s. 1 H); LRMS (IEN) m/e 385.0 [(M + H)+. calculado para C18H20N6O2S 384.0].
5.6.35. Síntesis de W-(2-ammoetM)-4-(6-(but¡lammo)¡m¡dazo[1,2-b]pmdazm-3-¡l)benzam¡da
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Parte A. 4-(6-(But¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-8lp¡r¡daz¡n-3-¡l)benzoato de met¡lo
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A una mezcla de 3-bromo-A/-but¡l¡m¡dazo[1.2-8lp¡r¡daz¡n-6-am¡na (386 mg. 1.43 mmol). ác¡do (4- (metox¡carbon¡l)fen¡l)borón¡co (310 mg. 1.72 mmol). [1.1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferrocenold¡cloropalad¡o (II) (50 mg. 0.07 mmol) y carbonato potás¡co (296 mg. 2.15 mmol) se le añad¡ó 3:1 de aceton¡tr¡lo/agua (5 ml). La mezcla resultante se calentó a 145 °C (m¡croondas) durante 800 s. Después. la reacc¡ón se f¡ltró y se concentró. El res¡duo se d¡solv¡ó en metanol y después. se f¡ltró de nuevo. La f¡ltrac¡ón f¡nalmente se pur¡f¡có por cromatografía en columna sobre gel de síl¡ce (acetato de et¡lo al 50 % en hexano) para proporc¡onar 4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-8lp¡r¡daz¡n-3-¡l)benzoato de met¡lo (312 mg. rend¡m¡ento del 67 %) en forma de un sól¡do de color amar¡llo: RMN 1H (CLOROFoRMO-d) 8: 8.22 - 8.34 (m. 2H). 8.09 - 8.20 (m. 2H). 7.93 (s. 1H). 7.71 (d. J = 9.6 Hz. 1H). 6.51 (d. J = 9.6 Hz. 1H). 3.97 (s. 3H). 3.41 - 3.53 (m. 2H). 1.72 (t. J = 7.2 Hz. 2H). 1.50 (dd. J = 15.0. 7.5 Hz. 2H). 1.02 (t. J = 7.5 Hz. 3H); LRMS(IEN) m/e 325.2 [(M+H)+. calculado para C18H21N4O2 325.2l.
Parte B. M-(2-am¡noet¡l)-4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-8lp¡r¡daz¡n-3-¡l)benzam¡da. La soluc¡ón de met¡l alum¡n¡o (2.0 M en hexano. 0.31 ml. 0.62 mmol) en tolueno (2 ml) se enfr¡ó a 0 °C. Después. a la soluc¡ón ag¡tada. se le añad¡ó respect¡vamente. gota a gota etano-1.2-d¡am¡na (37.4 mg. 0.62 mmol). y la soluc¡ón de 4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-
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6]pindaz¡n-3-il)benzoato de metilo (126 mg, 0,39 mmol) en tolueno (1 ml). La reacción resultante se calentó a reflujo a 110 °C durante una noche y después se enfrió a 0 °C. A la solución se le añadió gota a gota agua (0,05 ml), metanol (0,2 ml) y cloroformo (0,2 ml). La mezcla resultante se calentó a reflujo en un baño de vapor durante 15 m, y después se filtró sobre sulfato sódico y se concentró. El residuo se purificó por HPLC preparativa para proporcionar sal del ácido acético W-^-aminoetil^-^^butilamino^midazo^^-^piridazin^-iObenzamida (5,7 mg, rendimiento del 4 %) en forma de un sólido de color amarillo: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 8,27 - 8,43 (m, J = 8,6 Hz, 2H), 7,95 - 8,04 (m, J = 8,3 Hz, 2H), 7,89 (s, 1H), 7,65 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,68 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 3,41 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,16 (s a, 2H), 1,95 (s a, 5H), 1,73 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,42 - 1,61 (m, 2H), 1,02 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(IEN) m/e 353,4 [(M+H)+, calculado para C19H25N6O 353,2].
5.6.36. Síntesis de W-but¡l-3-(4-(4,5-d¡h¡dro-1H-¡m¡dazol-2-¡l)feml)¡m¡dazo[1,2-8]p¡r¡dazm-6-amma
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La solución de metil aluminio (2,0 M en hexano, 0,31 ml, 0,62 mmol) en tolueno (2 ml) se enfrió a 0 °C. Después, a la solución agitada, se le añadió respectivamente, gota a gota etano-1,2-diamina (37,4 mg, 0,62 mmol), y la solución de
4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1,2-8]p¡^daz¡n-3-¡l)benzoato de metilo (126 mg, 0,39 mmol) en tolueno (1 ml). La reacción resultante se calentó a reflujo a 110 °C durante una noche y después se enfrió a 0 °C. A la solución se le añadió gota a gota agua (0,05 ml), metanol (0,2 ml) y cloroformo (0,2 ml). La mezcla resultante se calentó a reflujo en un baño de vapor durante 15 m, y después se filtró sobre sulfato sódico y se concentró. El residuo se purificó por HPLC preparativa para proporcionar sal del ácido W-butil-3-(4-(4,5- d¡h¡dro-1H-¡m¡dazol-2-¡l)fen¡l)¡m¡dazo[1,2-8]p¡r¡daz¡n-6- amina (3,9 mg, rendimiento del 3 %) en forma de un sólido de color amarillo: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 8,46 - 8,59 (m, J = 8,8 Hz, 2H), 8,01 (s, 1H), 7,93 - 7,98 (m, J = 8,8 Hz, 2H), 7,67 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,13 (s, 4H), 3,42 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,86 - 2,05 (m, 6H), 1,74 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,39 -1,61 (m, 2H), 1,03 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(IEN) m/e 335,4 [(M+H)+, calculado para C19H23N6 335,2].
5.6.37. Síntesis de 3-(6-(ammomet¡l)p¡r¡dm-3-M)-W-but¡Mm¡dazo[1,2-d]p¡r¡dazm-6-amma
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A una mezcla de ácido ^-(butilammo^midazon^-^piridazin^-iOborónico (36 mg, 0,15 mmol), (5-bromopiridin-2- il)metanamina (35 mg, 0,18 mmol), [1,1'-B¡s(d¡fen¡lfosf¡no) ferroceno]dicloropaladio (II) (5 mg, 0,01 mmol) y carbonato potásico (31 mg, 0,23 mmol) se le añadió 3:1 de acetonitrilo/agua (3 ml). La mezcla resultante se calentó a 145 °C (microondas) durante 800 s. Después, la reacción se filtró y se concentró. El residuo se disolvió en metanol y después, se filtró de nuevo. La filtración finalmente se purificó por HPLC preparativa para proporcionar sal del ácido acético 3-(6-(am¡nomet¡l)pmd¡n-3-¡l)-A/- butilimidazo^^-í^piridazin^-amina (13 mg, rendimiento del 29 %) en forma de un sólido de color blanco: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 8,64 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,66 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,39 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,94 (s, 4H), 1,71 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 1,41 - 1 58 (m, 2H), 1,01 (t, J = 7,5 Hz, 3H); LRMS(IEN) m/e 297,4 [(M+H)+, calculado para C16H21N6, 297,2].
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5.6.38. Síntesis de éster isopropílico del ácido {3-[3-(4-ammometil-feml)-imidazo[1,2-b]pirídazm-6-ilammo]- propil}-metil-carbámico
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Parte A. 2.2.2-Tr¡fluoro-A/-í3-met¡lam¡no-prop¡l)-acetamida
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Se añadió lentamente trifluoroacetato de etilo [383-63-1] (7.5 ml. 62.9 mmol) a temperatura ambiente. a una solución de N1-metilpropano-1.3-diamina [6291-84-5] (6.5 ml. 62.8 mmol) en THF anhidro (100 ml). después se dejó agitar. en atmósfera de N2 durante 17 h. Después. la solución de reacción se evaporó para proporcionar 12.3 g de líquido incoloro transparente. LRMS (IEN) m/z 185.1 [(M+H)]+. calculado para C6H11F3N2O: 184.16.
Parte B. Éster isopropílico del ácido metil-^-^^^-tnfluoro-acetilaminoVpropill-carbámico
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A una solución en atmósfera de N2. a 0 °C. agitada rápidamente de 2.2.2-tr¡fluoro-W-(3-met¡lam¡no-prop¡l)-acetam¡da (6.0 g. 32.4 mmol) y W-metilmorfolina [109-02-4] (7.1 ml. 64.6 mmol) en acetato de etilo (65 ml) se le añadió constantemente una solución 1.0 M de cloroformiato de isopropilo en tolueno (32.4 ml) en el transcurso de 10 minutos. La reacción se dejó en agitación y se calentó a temperatura ambiente durante una noche. momento en el cual se lavó con salmuera. se secó (MgSO4) y se evaporó para proporcionar 9.0 g de aceite de color amarillo. LRMS (IEN) m/z 271.1[(M+H)]+. calculado para C10H17F3N2O3: 270.25.
Parte C. Éster isopropílico del ácido P-amino-propiD-metil-carbámico
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Una suspensión de éster isopropílico del ácido metil-^-^^^-trifluoro-acetilamino^propil^carbámico (9.0 g. 33.15 mmol) y carbonato potásico [584-08-7] en metanol al 50 % (v/v)/agua (200 ml) se agitó a temperatura ambiente. en atmósfera de N2. durante 17 h. se filtró y el filtrado se evaporó para reducir su volumen. La solución del producto acuoso resultante se colocó en un extractor continuo y se extrajo con acetato de etilo hasta 2 días. El extracto de acetato de etilo se secó (CaSO4) y se evaporó para proporcionar 6.3 g de aceite de color amarillo transparente. LRMS (IEN) m/z 175.1[(M+H)]+. calculado para C8H18N2O2: 174.24.
Parte D. Éster isopropílico del ácido re-P-bromo-imidazoH^-btoindazm^-ilaminoVpropin-metil-carbámico
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Una mezcla agitada de éster isopropílico del ácido ^-amino-propi^-metil-carbámico (3.0 g. 17.0 mmol). 3-bromo-6- cloro- imidazon^-í^piridazina [13526-66-4] (723.7 mg. 3.1 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (0.6 ml. 3.2 mmol) se calentó a 85 °C. en atmósfera de N2. durante 3 días. después se preabsorbió sobre gel de sílice y se sometió a cromatografía ultrarrápida (gel de sílice eluyendo con metanol al 10 % (v/v)/acetato de etilo) para obtener 1.0 g de
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aceite de color amarillo transparente. LRMS (IEN) m/z 370,2/372,2 [(M+H)]+, calculado para Ci4H20BrN5O2: 370,25.
Parte E. Éster isopropílico del ácido {3-[3-(4-am¡nomet¡l-fen¡l)-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no1-prop¡l}-met¡l- carbámico. A una mezcla de éster isopropílico del ácido [3-(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-£)]p¡ndaz¡n-6-¡lam¡no)-prop¡l]-met¡l- carbámico (601,4 mg, 1,6 mmol), clorhidrato del ácido (4-(aminometil)fenil)borónico [75705-21-4] (366,3 mg, 2,0 mmol), monohidrato tribásico de fosfato potásico [27176-10-9] (1,1 g, 4,9 mmol) y complejo [1,1'- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II), con diclorometano [95464-05-4] (138,7 mg, 0,2 mmol) contenido en un matraz de fondo redondo de 50 ml se le añadió una solución de agua al 30 % (v/v) en 1,2-dimetoxietano (12 ml) y una barra agitadora magnética. El recipiente de reacción se equipó con un condensador de reflujo, se introdujo en un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se sometió a 10 ciclos de evacuación/atmósfera de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, en atmósfera de N2, se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85 °C durante 17 h, después se enfrió y se repartió entre salmuera (pH ajustado a 10 con hidróxido sódico acuoso 3 N) y acetato de etilo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4), se purificó por RP- HPLC preparativa. Las fracciones de cromatografía purificada se combinaron y se repartieron entre bicarbonato de sodio acuoso saturado y acetato de etilo. El extracto orgánico se secó (CaSO4) y se evaporó para proporcionar éster isopropílico del ácido [3-[3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-6]piridazin-6-ilamino]-propil}-metil-carbámico como 19,4 mg de aceite de color amarillo transparente. RMN 1H (400 mHz, METANOL-d4) 8 ppm 1,12 (s a, 2 H) 1,17 -1,28 (m, 4 H) 1,84 -1,98 (m, 2 H) 2,90 (s, 2 H) 3,10 - 3,21 (m, 1 H) 3,32 - 3,43 (m, 3 H) 3,88 (s, 2 H) 4,78 - 4,87 (m, 4 H) 6,69 (d, J = 9,60 Hz, 1 H) 7,45 (d, J = 8,34 Hz, 2 H) 7,61 (d, J = 9,60 Hz, 1 H) 7,69 - 7,75 (m, 1 H) 8,12 (dd, J = 8,21, 2,65 Hz, 2 H). RMN 13C (100 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 22,58, 37,39, 40,24, 46,39, 70,29, 110,81, 114,20, 125,95,
126,19, 127,75, 127,85, 128,87, 129,41, 129,65, 129,73, 130,34, 138,67, 141,99, 155,32. LRMS (IEN) m/z 397,3[(M+H)]+, calculado para C21H28N6O2: 396,50.
5.6.39. Síntesis de 5-(6-ButMammo-im¡dazo[1,2-d]pmdazm-3-M)-mdan-1-ona
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Parte A. 5-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-2.3-d¡h¡dro-1H-¡nden-1-ona
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Una mezcla de 5-bromo-2,3-dihidro-1H-inden-1-ona (1,1 g, 5,0 mmol), bis(pinacolata)diboro (1,9 g, 7,5 mmol), acetato potásico (2,5 g, 25 mmol), aducto dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) diclorometano (400 mg, 0,5 mmol) y DMF (25 ml) se mantuvo a 80 °C durante 12 h. La mezcla resultante se dejó enfriar a TA, después se repartió entre acetato de etilo (200 ml) y H2O (240 ml). Las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con H2O y salmuera, después se secó (MgSO4), se filtró y se concentró para proporcionar un residuo de color oscuro que se purificó por cromatografía ultrarrápida (SO2) para proporcionar 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2,3-dihidro-1H-inden-1-ona RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO- d) 8 ppm 7,96 (s, 1 H), 7,80 - 7,84 (m, 1 H), 7,74 - 7,79 (m, 1 H), 3,13 - 3,20 (m, 2 H), 2,69 -2,75 (m, 2 H), 1,39 (s, 12 H).
Parte B. 5-(6-But¡lam¡no-¡m¡dazo[1,2-blp¡r¡daz¡n-3-¡l)-¡ndan-1-ona. Una mezcla de 3-bromo-A/-butilimidazo[1,2- b]piridazin-6-amina (400 mg, 1,5 mmol), 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2,3-dihidro-1H-inden-1-ona (770 mg, 3,0 mmol), aducto dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio (II) diclorometano (240 mg, 0,30 mmol), fosfato (1,0 g, 4,5 mmol), DME (6 ml) y H2O (2 ml) se calentó en un recipiente cerrado herméticamente a 80 °C durante 12 h. La reacción se enfrió a TA, después la capa orgánica se separó y se concentró a presión reducida para proporcionar un aceite que se purificó por cromatografía ultrarrápida (SiO2) para proporcionar 5-(6-butilamino- imidazo[1,2-b]piridazin-3- il)-indan-1-ona (410 mg, 85%) en forma de un sólido de color rosa: RMN 1H (400 MHz,
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DMSO-da) 8 ppm 8,52 (s, 1 H), 8,22 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,65 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,17 (t, J = 5,4 Hz, 1 H), 6,75 (d, J = 9,6 Hz, 1 H), 3,22 - 3,42 (m, 3 H), 3,05 - 3,18 (m, 2 H), 2,58 - 2,71 (m, 2 H), 1,58 - 1,73 (m, 2 H), 1,34 -1,51 (m, 2 H), 0,89 - 1,00 (m, 3 H); CLEM (IEN) m/e 321,2 [(M+H)+, calculado para C19H21N4O 321,2].
5.6.40. Síntesis de [3-(1-Ammo-mdan-5-¡l)-¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-M]-but¡l-amma
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Una mezcla de 5-(6-but¡lam¡no-¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡n-3-¡l)-¡ndan-1-ona (50 mg, 0,16 mmol), acetato amónico (500 mg) y metanol (5 ml) se mantuvo a TA durante 5 m¡n, después se trató con c¡anoboroh¡druro sód¡co (500 mg). La mezcla resultante se calentó a 50 °C y se mantuvo 16 h, después se enfr¡ó a TA y se concentró a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo se repart¡ó entre acetato de et¡lo y b¡carbonato sód¡co acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de et¡lo (2 x). Las capas orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con salmuera, después se secaron (MgSO4), se f¡ltraron y se concentraron para proporc¡onar un res¡duo que se pur¡f¡có por HPLC de fase ¡nversa para proporc¡onar [3-(1-am¡no-¡ndan-5-¡l)-¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡n-6-¡l]-but¡l-am¡na (26 mg, 52%) en forma de un sól¡do de color blanco: RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,22 (s, 1 H), 8,12 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,54 - 7,66 (m, 2 H), 6,72 (d, J = 9,6 Hz, 1 H), 4,77 - 4,83 (m, 1 H), 3,38 (t, J = 7,2 Hz, 2 H), 3,18 - 3,30 (m, 1 H), 3,01 - 3,13 (m, 1 H), 2,59 -2,73 (m, 1 H), 2,06 -2,22 (m, 1 H), 1,72 (qu¡n, J = 7,4 Hz, 2 H), 1,43 - 1,57 (m, 2 H), 1,02 (t, J = 7,3 Hz, 3 H); CLEM (IEN) m/e 322,3 [(M+H)+, calculado para C19H24N5 322,2].
5.6.41. Síntesis de W-but¡l-3-(4-(1,4,5,6-tetrah¡drop¡r¡m¡dm-2-M)feml)¡m¡dazo[1,2-d]pmdazm-6-amma
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La soluc¡ón de met¡l alum¡n¡o (2,0 M en hexano, 0,32 ml, 0,64 mmol) en tolueno (2 ml) se enfr¡ó a 0 °C. Después, a la soluc¡ón ag¡tada, se le añad¡ó respectivamente, gota a gota propano-1,3-d¡am¡na (48 mg, 0,64 mmol) y la soluc¡ón de 4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzoato de met¡lo (130 mg, 0,4 mmol) en tolueno (1 ml). La reacc¡ón resultante se calentó a reflujo a 110 °C durante una noche y después se enfr¡ó a 0 °C. A la soluc¡ón se le añad¡ó gota a gota agua (0,05 ml), metanol (0,2 ml) y cloroformo (0,2 ml). La mezcla resultante se calentó a reflujo en un baño de vapor durante 15 m, y después se f¡ltró sobre sulfato sód¡co y se concentró. El res¡duo se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va para proporc¡onar sal del ác¡do acét¡co W-but¡l-3-(4-(1,4,5,6-tetrah¡drop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)fen¡l)¡m¡dazo[1,2- b]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (23,3 mg, rend¡m¡ento del 17 %) en forma de un sól¡do de color blanco: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 8,42 - 8,56 (m, J = 8,6 Hz, 2H), 7,96 (s, 1H), 7,75 - 7,86 (m, J = 8,6 Hz, 2H), 7,66 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,64 (t, J = 5,8 Hz, 4H), 3,41 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,16 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 1,94 (s, 5H), 1,73 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,42 - 1,58 (m, 2H), 1,02 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(IEN) m/e 349,5 [(M+H)+, calculado para C20H24N6 349,2].
5 6 42. Síntes¡s de 1-(5-{6-[3-(2-MetM-p¡per¡dm-1-M)-prop¡lammo]-¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡dazm-3-M}-t¡ofen-2-¡l)- etanona
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Parte A. 3-bromo-N-(3-(2-met¡lp¡per¡d¡n-1-¡l)prop¡l)¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-am¡na
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A 400 mg (1.852 mmol) del fluoruro de ar¡lo se les añad¡eron 1-(3-am¡noprop¡l)p¡rrol¡d¡n-2-ona (347 mg, 2.222 mmol). 2 ml de ¡sopropanol y tr¡et¡lam¡na (0,52 ml, 3.704 mmol). Esta mezcla se somet¡ó a m¡croondas a 140 °C durante 0.5 h. Se d¡luyó con EtOAc. se lavó con salmuera y se secó sobre MgSO4. Se pur¡f¡có con gel de síl¡ce (ISCO) eluyendo con 0-10 de MeOH/DCM para obtener 486 mg (74 %) de la ar¡l am¡na.
Parte B. 1-(5-16-[3-(2-Met¡l-p¡per¡d¡n-1-¡l)-prop¡lam¡no1-¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-3-¡l}-t¡ofen-2-¡l)-etanona. La reacc¡ón de 3-bromo-A/-(3-(2-met¡lp¡per¡d¡n-1-¡l)prop¡l)¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-am¡na con ác¡do (5-acet¡lt¡ofen-2-¡l)borón¡co. en la cond¡c¡ón de acoplam¡ento de Suzuk¡ descr¡to en el ejemplo 5.6.19. proporc¡onó el compuesto deseado con un rend¡m¡ento del 71 %. RMN 1H (400 MHz. CLOROFORMO-d) 6 ppm 1.34 (d. J = 6.57 Hz. 3 H) 1.45 - 1.59 (m. 1 H)
1.67 - 1.96 (m. 5 H) 2.13 -2.31 (m. 2 H) 2.60 (s. 3 H) 2.74 (dd. J = 10.86. 4.80 Hz. 1 H) 2.83 -2.95 (m. 1 H) 3.11 (s a.
1 H) 3.17 - 3.31 (m. 1 H) 3.34 - 3.46 (m. 1 H) 3.53 - 3.72 (m. 2 H) 6.72 (d. J = 9.85 Hz. 1 H) 7.56 (d. J = 4.04 Hz. 1 H)
7.64 - 7.73 (m. 2 H) 7.94 (s. 1 H); LRMS (IEN) m/e 398.0 [(M + H)+. calculado para C21H27N5OS 397.0].
5.6.43. Síntesis de (4-ammop¡per¡dm-1-M)(4-(6-(but¡lammo)¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-3-¡l)feml)metanona
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Parte A. Ác¡do 4-(6-(but¡am¡no)¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzo¡co
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A la mezcla de 3-bromo-W-but¡l¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-am¡na (340 mg. 1.26 mmol). ác¡do 4-boronobenzo¡co (210 mg. 1.26 mmol). [1.1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno1d¡cloropalad¡o (ll) (44 mg. 0.063 mmol) y carbonato potás¡co (261 mg. 1.89 mmol) se le añad¡ó 3:1 de aceton¡tr¡lo/agua (3 ml). La mezcla resultante se calentó a 145 °C (m¡croondas) durante 800 s. Después. la reacc¡ón se f¡ltró y se concentró para proporc¡onar ác¡do 4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2- ¿1p¡r¡daz¡n- 3-¡l)benzo¡co (886 mg. rend¡m¡ento >100% ) en forma de un sól¡do de color blanquec¡no en bruto: LRMS(IEN) m/e 311.2 [(M+H)+. calculado para C17H19N4O2 311.21.
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Parte B. (1-(4-(6-(But¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzo¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)carbamato de tere-butilo
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La reacc¡ón del ác¡do 4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-£)1p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzo¡co (93 mg, 0.3 mmol). p¡per¡d¡n-4- ¡lcarbamato de fere-but¡lo (66 mg. 0,33 mmol). 1-et¡l-3-(3-d¡met¡lam¡noprop¡l)carbod¡¡m¡da (63 mg. 0,33 mmol) y d¡clorometano (3 ml) se mantuvo a temperatura amb¡ente durante una noche. La soluc¡ón resultante se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va (neutral) para proporc¡onar (1-(4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-61p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzo¡l)p¡per¡d¡n-4- ¡l)carbamato de fere-but¡lo (76 mg. rend¡m¡ento del 52%) en forma de un sól¡do de color amar¡llo: RMN 1H (METANOL-d4) 8: 8.23 - 8.43 (m. J = 8.3 Hz. 2H). 7.85 (s. 1H). 7.63 (d. J = 9.9 Hz. 1H). 7.45 - 7.56 (m. 2H). 6.68 - 6.87 (m. 1H). 4.55 (d. J = 12.1 Hz. 1H). 3.82 (s a. 1H). 3.59 - 3.72 (m. 1H). 3.35 - 3.48 (m. 4H). 3.19 (d. J = 15.2 Hz. 2H). 1.92 -2.17 (m. 1H). 1.90 (s a. 1H). 1.72 (m. 2H). 1.35 - 1.59 (m. 13H). 1.01 (t. J = 7.3 Hz. 3H); LRMS(IEN) m/e 493.3 [(M+H)+. calculado para C27H37N6O3 493.3].
Parte C. (4-am¡nop¡per¡d¡n-1-¡l)(4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-3-¡l)fen¡l)metanona. La soluc¡ón de (1-(4-(6- (but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzo¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)carbamato de fere-but¡lo (47 mg. 0.1 mmol) se enfr¡ó a 0 °C y se trató con cloruro de acet¡lo (225 mg. 2.86 mmol). La reacc¡ón se mantuvo a temperatura amb¡ente durante una noche. La soluc¡ón resultante se concentró a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo se pur¡f¡có por HPLC preparativa (neutral) para proporc¡onar sal del ác¡do acét¡co (4-am¡nop¡per¡d¡n-1-¡l)(4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-3- ¡l)fen¡l)metanona (34 mg. rend¡m¡ento del 79 %) en forma de un sól¡do de color blanco: RMN 1H (METANOL-cfo) 8: 8.17 - 8.42 (m. J = 8.3 Hz. 2H). 7.86 (s. 1H). 7.63 (d. J = 9.6 Hz. 1H). 7.48 - 7.57 (m. J = 8.6 Hz. 2H). 6.74 (d. J = 9.6 Hz. 1H). 3.36 - 3.49 (m. 3H). 1.90 - 1.99 (m. 9H). 1.72 (qu¡n. J = 7.3 Hz. 2H). 1.63 (s a. 2H). 1.44 - 1.55 (m. 2H). 1.01 (t. J = 7.5 Hz. 3H); LRMS(IEN) m/e 393.2 [(M+H)+. calculado para C22H29N6O 393.21.
5.6.44. Síntes¡s de (4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-3-¡l)fen¡l)(p¡peraz¡n-1-¡l)metanona
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Parte A. 4-(4-(6-(But¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzo¡l)p¡peraz¡n-1-carbox¡lato de terc-but¡lo
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La reacc¡ón del ác¡do 4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzo¡co (124 mg. 0.4 mmol). p¡peraz¡n-1- carbox¡lato de fere-but¡lo (82 mg. 0.44 mmol). 1-et¡l-3-(3-d¡met¡lam¡noprop¡l)carbod¡¡m¡da (84 mg. 0.44 mmol) y d¡clorometano (3 ml) se mantuvo a temperatura amb¡ente durante una noche. La soluc¡ón resultante se pur¡f¡có por HPLC preparativa (neutral) para proporc¡onar 4-(4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzo¡l)p¡peraz¡n-1- carbox¡lato de fere-but¡lo (89 mg. rend¡m¡ento del 47%) en forma de un sól¡do de color amar¡llo: RMN 1H
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(METANOL-d4) 8: 8,20 - 8,39 (m, J = 8,3 Hz, 2H), 7,85 (s, 1H), 7,63 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,48 - 7,56 (m, 2H), 6,66 - 6,79 (m, 1H), 4,55 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 3,82 (s a, 1H), 3,58 - 3,73 (m, 1H), 3,35 - 3,45 (m, 4H), 3,26 (s a, 1H), 3,17 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 3,10 (s a, 1H), 1,92 - 2,15 (m, 1H), 1,90 (s a, 1H), 1,72 (quin, J = 7,4 Hz, 2H), 1,34 - 1,57 (m, 14H), 1,01 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(IEN) m/e 479,3 [(M+H)+, calculado para C26H35N6O3 479 3].
Parte B. (4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡dazin-3-¡l)fen¡l)(p¡peraz¡n-1-¡l)metanona. La solución de 4-(4-(6- (but¡lam¡no)¡m¡dazo[1,2-£)]pmdazm-3-¡l)benzo¡l)p¡peraz¡n-1-carbox¡lato de ferc-but¡lo (65 mg, 0,14 mmol) se enfr¡ó a 0 °C y se trató con cloruro de acet¡lo (320 mg, 4,07 mmol). La reacc¡ón se mantuvo a temperatura amb¡ente durante una noche. La soluc¡ón resultante se concentró a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo se pur¡f¡có por HPLC preparat¡va (neutral) para proporc¡onar sal del ác¡do acét¡co (4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡n-3-¡l)fen¡l)(p¡peraz¡n-1- ¡l)metanona (52 mg, rend¡m¡ento del 76 %) en forma de un sól¡do de color blanco: RmN 1H (METaNoL-^) 8: 8,34 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,87 (s, 1H), 7,64 (d, J =9,6 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,75 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,40 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,04 (s a, 3H), 1 92 - 2,02 (m, 7H), 1,73 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,41 - 1 59 (m, 2H), 1,02 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(IEN) m/e 379,2 [(M+H)+, calculado para C21H27O 379,2].
5.6.45. Síntesis de ButM-{3-[4-(1H-tetrazol-5-M)-feml]-¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-M}-amma
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A una mezcla de (3-bromo-¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-but¡l-am¡na (327,5 mg, 1,2 mmol), ác¡do [[4-(2H-tetrazol-5- ¡l)fen¡l]borón¡co [179942-55-3] (287,2 mg, 1,5 mmol), monoh¡drato tr¡bás¡co de fosfato potás¡co [27176-10-9] (564,7 mg, 2,5 mmol) y complejo [1,1'b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno]d¡cloropalad¡o (II), con d¡clorometano [95464-05-4] (103,7 mg, 0,1 mmol) conten¡do en un matraz de fondo redondo de 50 ml se le añad¡ó una soluc¡ón de 30 % (v/v) de agua en 1,2-d¡metox¡etano (20 ml) y una barra ag¡tadora magnét¡ca. El rec¡p¡ente de reacc¡ón se equ¡pó con un condensador de reflujo, se ¡ntrodujo en un baño de ace¡te a temperatura amb¡ente, y el s¡stema se somet¡ó a 10 c¡clos de evacuac¡ón/atmósfera de N2 m¡entras se ag¡taba ráp¡damente. La reacc¡ón en atmósfera de N2, ag¡tada ráp¡damente, se calentó a una temperatura de baño de ace¡te de 85 °C durante 17 h, después se enfr¡ó, se d¡luyó con metanol, se f¡ltró y se somet¡ó a cromatografía ultrarráp¡da (gel de síl¡ce, eluyendo con ác¡do acét¡co al 1 % en metanol al 10 % (v/v)/acetato de et¡lo) para a¡slar un sól¡do de color castaño que se recr¡stal¡zó en 2-propanol en ebull¡c¡ón para produc¡r 101,7 mg de but¡l-{3-[4-( 1H- tetrazol-5-¡l)-fen¡l1-¡m¡dazo[1,2-81p¡r¡daz¡n-6-¡l}-am¡na en forma de un polvo blanquec¡no, pf. 270-271 °C. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 0,98 (t, J = 7,06 Hz, 3 H) 1,38 - 1,53 (m, 2 H) 1,59 - 1,73 (m, 2 H) 3,34 (d, J = 5,51 Hz, 2 H) 6,75 (d, J = 9,48 Hz, 1 H) 7,17 (s a, 1 H) 7,79 (d, J = 9,04 Hz, 1 H) 8,06 (s a, 1 H) 8,12 (m, J = 7,72 Hz, 2 H) 8,47 (m, J = 7,72 Hz, 2 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 13,63, 19,77, 30,02, 40,66, 112,49, 122,39, 125,43, 125,65, 126,80, 130,59, 131,70, 153,44. LRMS (IEN) m/z 335,1 [(M+H)]+, calculado para C^H-iaNa: 334,39.
5.6.46. Síntesis de [3-(4-Ammomet¡l-feml)-im¡dazo[1,2-d]pmdazm-6-M]-[2-(2-metox¡-fenox¡)-etM]-amma
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Parte A. (3-Bromo-¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-[2-(2-metox¡-fenox¡)-et¡l1-am¡na
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Una mezcla de 3-bromo-6-cloro-imidazo[1,2-b1piridazina (232 mg, 1 mmol) y 2-(2-metoxi-fenoxi)-etilamina (2 g, 12 mmol) se calentó en un microondas a 160 °C durante 30 min. La mezcla de reacción se sometió a ISCO (columna de 40 gramos, DCM 3 min, después MEOH al 0-10 % en DCM durante 30 min) para dar el producto (160 mg). LRMS (IEN) m/z 363 y 365,1[(M+H)]+, calculado para C^H^rN^: 363,22.
Parte B. [3-(4-Am¡nomet¡l-fen¡l)-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l1-[2-(2-metoxi-fenox¡)-et¡l1-am¡na
Una mezcla de ((3-bromo-imidazo[1,2-b1piridazin-6-il)-[2-(2-metoxi-fenoxi)-etil1-amina (75 mg, 0,21 mmol), clorhidrato del ácido (4-aminometilfenil)borónico (51 mg, 0,27 mmol), K2CO3 (87 mg, 0,63 mmol) y
diclorobis(trifenilfosfina)paladio (II) (7,4 mg, 0,011 mmol) en MeCN/agua (3,2 ml/0,8 ml) se calentó en un microondas a 150 °C durante 15 min. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (3 ml) y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC preparativa para dar el compuesto del título como sal AcOH (59,6 mg). rMn 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 1,93 (s, 3 H) 3,76 - 3,83 (m, 5 H) 4,13 (s, 2 H) 4,26 (t, J = 5,56 Hz, 2 H) 6,77 (d, J = 9,60 Hz, 1 H) 6,85 -6,99 (m, 4 H) 7,51 (d, J = 8,34 Hz, 2 H) 7,65 (d, J = 9,60 Hz, 1 H) 7,79 (s, 1 H) 8,21 (d, J = 8,34 Hz, 2 H). LRMS (IEN) m/z 390,2 [(M+H)1+, calculado para C22H28N5O2: 389,46.
5.6.47. Síntesis de éster metílico del ácido 3-[3-(5-acetil-tiofen-2-M)-imidazo[1,2-b]pmdazm-6-Nammo]- propiónico
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Parte A. 3-((3-Bromo¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)propanoato de metilo
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H Br
La alquilación del fluoruro de arilo con 3-aminopropanoato de metilo se realizó siguiendo el procedimiento del desplazamiento de amina descrito en el ejemplo 5.6.42.
Parte B. Éster metílico del ácido 3-[3-(5-acet¡l-t¡ofen-2-¡l)-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no1-prop¡ón¡co. Después, el 3- ((3-bromoimidazo[1,2-b1piridazin-6-il)amino)propanoato de metilo se sometió a reacción de acoplamiento de Suzuki con ácido (5-acetil-tiofen-2-il)borónico como se describe en el ejemplo 5,6,19. Sin embargo, para esta reacción, se usó trietilamina como la base en lugar de la base regular (K2CO3). El producto deseado se obtuvo con un rendimiento del 79 %. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 2,62 - 2,65 (m, 3 H) 2,88 (t, J = 5,94 Hz, 2 H) 3,77 (s, 3 H) 3,88 (t, J = 5,68 Hz, 2 H) 7,06 (d, J = 9,85 Hz, 1 H) 7,70 (d, J = 4,04 Hz, 1 H) 7,77 (d, J = 4,04 Hz, 1 H) 8,15 (s, 1 H) 8,33 (d, J = 9,85 Hz, 1 H); LRMS (IEN) m/e 345,0 [(M + H)+, calculado para C16H16N4O8S 344,01.
5.6.48. Síntesis de N-butil-3-(1H-pirazol-3-M)imidazo[1,2-b]pirídazm-6-amma:
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Una mezcla de 3-bromo-6-(butilamino)imidazo[1,2-b1piridazina (100 mg, 0,38 mmol), ácido (1H-pirazol-4-il)borónico (45 mg, 0,38 mmol), PdCl2(PPh3)2 (10 mg, 0,014 mmol) y carbonato potásico (98 mg, 0,71 mmol) se disolvió en CH3CN (3 ml) y agua (1,5 ml). La reacción se calentó a 140 °C durante 30 min en el microondas. El catalizador se retiró por filtración en celite, después el filtrado se concentró y se purificó por HPLC Prep (neutral) para dar sal acetato de W-butil-3-(1H-pirazol- 3-il)imidazo[1,2-b1piridazin-6-amina en forma de un sólido de color amarillo (1,7 mg, rendimiento del 2 %): RMN 1H (400 MHz, METANOL- d4) 8 ppm 8,12 (s, 1 H), 7,86 - 7,92 (m, 2 H), 7,30 (d, J = 2,53 Hz, 1 H), 7,17 (d, J = 9,85 Hz, 1 H), 3,47 (t, J = 7,20 Hz, 2 H), 1,75 (quin, J = 7,26 Hz, 2 H), 1,52 (sext, J = 7,43 Hz, 2 H), 1,02 (t, J = 7,33 Hz, 3 H); LRMS (IEN) m/e 257,2 [(M + H)+, calculado para C13H17N6 257,31.
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5.6.49. Síntesis de 3-[4-(6-But¡lammo-¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-3-M)-feml]-4H-[1,2,4]oxad¡azol-5-ona
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A una mezcla de 3-(4-bromofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona [16672-19-8] (502,7 mg, 2,1 mmol), acetato potásico [127-08-2] (615,4 mg, 6,3 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5' -octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) [73183-34-3] (582,6 mg, 2,3 mmol) y complejo [1,1'-bis(difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II), con diclorometano [95464-05-4] (53,4 mg, 0,1 mmol) se le añadió dimetilsulfóxido anhidro. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 17 h, después se vertió en agua agitada para precipitar el producto. Se aisló 3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-
1.2.4- oxadiazol-5(4H)-ona en bruto por filtración, se lavó con agua, se dejó secar y se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. LRMS (IEN) m/z 287,3 [(M-H)]-, calculado para C14H17BN2O4: 288,11.
Siguiendo las condiciones de acoplamiento de Suzuki descritas en el ejemplo 5.6.45 a partir de (3-bromo- imidazo[1,2-d]piridazin- 6-il)-butil-amina (213,1 mg, 0,8 mmol) y 3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil)-
1.2.4- oxadiazol- 5(4H)-ona (308,2 mg, 1,1 mmol) para proporcionar 70,9 mg de 3-[4-(6-butilamino-imidazo[1,2- b]piridazin-3-il)-fenil]-4H-[1,2,4]oxadiazol-5-ona en forma de un polvo cristalino de color blanco, pf. 253-254 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 0,96 (t, J = 7,33 Hz, 3 H) 1,44 (sext, J = 7,38 Hz, 2 H) 1,65 (quin, J = 7,26 Hz, 2 H) 3,26 - 3,35 (m, 2 H) 6,75 (d, J = 9,85 Hz, 1 H) 7,15 (t, J = 5,31 Hz, 1 H) 7,77 (d, J = 9,60 Hz, 1 H) 7,88 (m, J = 8,84 Hz, 2 H) 8,05 (s, 1 H) 8,44 (m, J = 8,59 Hz, 2 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 13,73, 19,89, 30,15, 40,81, 112,82, 120,91, 125,38, 125,50, 126,11, 131,05, 133,01, 137,80, 153,62, 157,06, 159,94. LRMS (IEN) m/z 351,2 [(M+H)]+, calculado para Ci8Hi8N6O2: 350,38.
5.6.50. Síntesis de W-but¡l-3-(2,4-d¡met¡lt¡azol-5-¡l)¡midazo[1,2-d]pmdazm-6-amma:
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Usando las condiciones de acoplamiento de Suzuki descritas en el ejemplo 5.6.48, se proporcionó el compuesto del título con un rendimiento del 16 % en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 6 ppm 7,59 - 7,69 (m, 2 H), 6,70 -6,74 (m, 1 H), 3,39 (t, J = 7,20 Hz, 2 H), 2,70 (s, 3 H), 2,57 (s, 3 H), 1,67 - 1,75 (m, 2 H), 1,45 - 1,54 (m, 2 H), 1,01 (t, J = 7,45 Hz, 3 H); LRMS (IEN) m/e 302,2 [(M + H)+, calculado para C15H20N5S 302,4].
5.6.51. Síntes¡s de ác¡do 4-[3-(5-acet¡l-t¡ofen-2-M)-¡m¡dazo[1,2-d]pmdazm-6-¡lammo]-butír¡co
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Parte A. 4-((3-Bromo¡m¡dazo[1.2-¿)lp¡ndaz¡n-6-¡l)am¡no)butanoato de etilo
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La alqu¡lac¡ón del fluoruro de ar¡lo con 4-am¡nobutanoato de et¡lo se proced¡ó en las cond¡c¡ones descr¡tas en el ejemplo 5.6.46 para proporc¡onar el compuesto del título.
Parte B. 4-((3-(5-Acet¡lt¡ofen-2-¡l)¡m¡dazo[1.2-¿)lp¡ndaz¡n-6-¡l)am¡no)butanoato de et¡lo
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El 4-((3-bromo¡m¡dazo[1,2-£)]p¡ndaz¡n-6-¡l)am¡no)butanoato de et¡lo se somet¡ó a acoplam¡ento de Suzuk¡ con ác¡do (5- acet¡lt¡ofen-2-¡l)borón¡co, usando tr¡et¡lam¡na como la base y el proced¡m¡ento descr¡to en ejemplo 5.6.19 para dar un rend¡m¡ento del 74 % del producto.
Parte C. Ác¡do 4-[3-(5-acet¡l-t¡ofen-2-¡l)-¡m¡dazo[1.2-8lp¡r¡daz¡n-6-¡lam¡nol-butír¡co
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A 200 mg (0,566 mmol) de este éster se le añad¡eron LOH.H2O (71.4 mg. 1.700 mmol), 10 ml de THF y 3 ml de agua y después se ag¡tó a ta durante 4 h. La mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có a pH de aprox¡madamente 3. y el producto se extrajo con EtOAc. Los d¡solventes orgán¡cos se lavaron con salmuera y se secaron sobre MgSO4. Se concentraron para obtener 148 mg (76%) del producto deseado. No se requ¡r¡ó pur¡f¡cac¡ón. RMN 1H (400 MHz, METANOL-c/4) 8 ppm 2,60 (s. 3 H) 2,73 (t. J = 6,73 Hz. 2 H) 3.68 (t. J = 6,73 Hz. 2 H) 4,23 (s. 2 H) 7,26 (d. J = 9.92 Hz. 1 H) 7,67 (d. J = 8.16 Hz. 2 H) 7.99 (d. J = 9.70 Hz. 1 H) 8.27 (s. 1 H); LRMS (IEN) m/e 345,0 [(M + H)+. calculado para C16H16N4O8S 344,0].
5.6.52. Síntesis de ButM-(3-¡soqumolm-6-M-¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-M)-amma
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Parte A. 6-(4.4.5.5-Tetramet¡l-[1.3.2]d¡oxaborolan-2-¡l)-¡soqu¡nol¡na
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Una mezcla de 6-bromo¡soqu¡nol¡na (208 mg, 1 mmol). b¡s(p¡nacolato)d¡boro (279 mg, 1.1 mmol). KOAc (323 mg, 3.3 mmol) y Pd(dppf)2Cl2 (73 mg. 0.1 mmol) en DMSO (3 ml) se calentó en un m¡croondas durante 10 m¡n a 160 °C. La mezcla se d¡luyó con agua (20 ml) y se extrajo con EtOAc (4 x 20 ml). El EtOAc comb¡nado se lavó con agua (15 ml) y salmuera (15 ml) después se secó (Na2SO4). El d¡solvente se ret¡ró para dar el compuesto del título que se usó d¡rectamente para la s¡gu¡ente etapa.
Parte B. But¡l-(3-¡soqu¡nol¡n-6-¡l-¡m¡dazo[1.2-¿1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-am¡na. Una mezcla de (3-bromo-¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n- 6-¡l)-but¡l-am¡na (100 mg. 0.37 mmol). 6-(4,4,5,5-tetramet¡l-[1,3,2]d¡oxaborolan-2-¡l)-¡soqu¡nol¡na (de la parte A. ~1 mmol). K2CO3 (153 mg. 1,11 mmol) y d¡clorob¡s(tr¡fen¡lfosf¡na)palad¡o (II) (13 mg. 0,019 mmol) en MeCN/agua (4 ml/1 ml) se calentó en un m¡croondas a 150 °C durante 15 m¡n. La capa de agua se ret¡ró y la mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con MeCN (3 ml) y se f¡ltró. El f¡ltrado se somet¡ó a HPLC preparat¡va para dar el compuesto del título (80.8 mg). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,03 (t. J = 7.33 Hz. 3 H) 1,53 (dc. J = 14.97. 7.39 Hz. 2 H) 1.74 - 1.81 (m. 2 H) 3.48 - 3,54 (m. 2 H) 4.58 (t. J = 5,05 Hz. 1 H) 6,54 (d. J = 9,60 Hz. 1 H) 7.68 (d. J = 5,56 Hz. 1 H) 7,75 (d. J = 9,60 Hz. 1 H) 8,01 - 8,05 (m. 2 H) 8,25 (dd. J = 8,72, 1,64 Hz. 1 H) 8,55 (d. J = 5,81 Hz. 1 H) 8,86 (s. 1 H) 9,25 (s. 1 H). LRMS (IEN) m/z 318,2 [(M+H)]+, calculado para C19H19N5: 317,40.
5.6.53. Síntesis de 4-[3-(4-Ammomet¡l-feml)-¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-¡lammo]-N,W-d¡met¡l-but¡ram¡da
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Parte A. Ác¡do 4-((3-(4-(((ferc-butox¡carbon¡l)am¡no)met¡l)fen¡l)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)butano¡co
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El 4-((3-bromo¡m¡dazo[1.2-6]p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)butanoato de et¡lo se somet¡ó a acoplam¡ento de Suzuk¡ con ác¡do W-Boc-benc¡l am¡na borón¡co, usando 4.0 equ¡valentes de K2CO3 como la base y el proced¡m¡ento descr¡to en ejemplo 5.6.19 para dar el compuesto del título.
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Parte B. 4-(6-((4-(d¡met¡lam¡no)-4-oxobut¡l)am¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-3-¡l)benc¡lcarbamato de tere-butilo
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El ác¡do carboxíl¡co se h¡zo reacc¡onar con d¡met¡lam¡na. en las cond¡c¡ones de acoplam¡ento de am¡da regular para proporc¡onar el producto al 59 %.
Parte C. 4-[3-(4-Am¡nomet¡l-fen¡l)-¡m¡dazo[1.2-¿)1p¡ndaz¡n-6-¡lam¡nol-N.N-d¡met¡l-but¡ram¡da. La am¡da pur¡f¡cada (20.4 mg. 0.045 mmol) se d¡solv¡ó en 2 ml de DCM y se añad¡eron 3 ml de TFA y se ag¡tó durante 2 h. Se concentró para dar un rend¡m¡ento del 100 % (21 mg) de sal TFA del producto del título. RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) 8 ppm 2.01 (qu¡n. J = 7.06 Hz. 2 H) 2.52 (t. J = 7.39 Hz. 2 H) 2.93 (s. 3 H) 3.05 (s. 3 H) 3.46 (t. J = 6.84 Hz. 2 H) 4.24 (s. 2 H) 7.26 (d. J = 9.70 Hz. 1 H) 7.68 (d. J = 8.16 Hz. 2 H) 7.99 (d. J = 9.92 Hz. 1 H) 8.22 (d. J = 8.38 Hz. 2 H) 8.26 (s. 1 H); LRMS (IEN) m/e 353.0 [(M + H)+. calculado para C19H24N6O 352.0].
5.6.54. Síntesis de W-(4-(ammometil)feml)-6-(butMammo)¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-3-carboxam¡da:
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Parte A. 6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-3-carbon¡tr¡lo:
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Una soluc¡ón de 6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-3-bromuro (820 mg. 2.34 mmol). NaCN (137 mg. 2.8 mmol). Cul (45 mg. 0.23 mmol). KI (78 mg. 0.47 mmol) y W7,W2-d¡met¡letano-1.2-d¡am¡na (0.25 ml. 2.34 mmol) en tolueno (3 ml) se ag¡tó a 110 °C durante 12 h. La reacc¡ón se enfr¡ó. se concentró. se recog¡ó con EtOAc y agua. se extrajo y se secó la capa orgán¡ca con MgSO4. La capa orgán¡ca se concentró y se pur¡f¡có por ISCO (MeOH al 0-5 %/DCM) para dar 6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-3-carbon¡tr¡lo en forma de un sól¡do de color amar¡llo claro (460 mg. rend¡m¡ento del 92 %). LRMS (IEN) m/e 216.1 [(M + H)+. calculado para C11H14N5 216.3].
Parte B. Ác¡do 6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-3-carboxíl¡co:
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Una soluc¡ón de 6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-3-carbon¡tr¡lo (250 mg. 1.16 mmol) en soluc¡ón acuosa al 10 % de NaOH (15 ml) se calentó a reflujo durante una noche. La mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó a temperatura amb¡ente. se neutral¡zó a pH = 5-7 usando HCl 1 N. se extrajo con DCM. se secó y se concentró para dar ác¡do 6- (but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-3-carboxíl¡co en forma de un sól¡do de color blanco (150 mg. 60 %). LRMS (IEN) m/e 235.1 [(M + H)+. calculado para C11H15N4O2 235.31.
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Parte C. 4-(6-(But¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-¿i]p¡r¡daz¡n-3-carboxam¡do)benc¡lcarbamato de ferc-but¡lo:
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A una soluc¡ón de ác¡do 6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-¿>]p¡r¡daz¡n-3-carboxíl¡co (150 mg. 0.64 mmol) en CH3CN (1 ml) se le añad¡eron react¡vo de BOP (567 mg. 1.28 mmol). tr¡et¡l am¡na (0.26 ml. 1.92 mmol) y 4-am¡nobenc¡l-carbamato de ferc-but¡lo (143 mg. 0.64 mmol). La reacc¡ón se ag¡tó durante una noche. Después. la reacc¡ón se pur¡f¡có por cromatografía en columna ISCO sobre gel de síl¡ce (MeOH al 10%/DCM) para dar 4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2- ¿>]p¡r¡daz¡n-3-carboxam¡do)benc¡lcarbamato de ferc-but¡lo en forma de un sól¡do de color blanco (280 mg. rend¡m¡ento del 100%). Además. se pur¡f¡caron 20 mg med¡ante HPLC prep. (neutral) para proporc¡onar 4-(6- (but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-¿>]p¡r¡daz¡n-3-carboxam¡do)benc¡lcarbamato de ferc-but¡lo (5 mg) en forma de un sól¡do de color blanco. RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) 5 ppm 8.10 (s. 1 H). 7.76 (d. J = 9.70 Hz. 1 H). 7.67 (d. J = 8.38 Hz. 2 H). 7.32 (d. J = 8.38 Hz. 2 H). 6.90 (d. J = 9.70 Hz. 1 H). 4.62 (s. 1 H). 4.24 (s. 2 H). 3.47 (t. J = 7.28 Hz. 2 H). 1.79 (t. J = 7.39 Hz. 2 H). 1.46 - 1.57 (m. 10 H). 1.02 (t. J = 7.39 Hz. 3 H); LRMS (IEN) m/e 439.9 [(M + H)+. calculado para C23H31N6O3 439.5].
Parte D. A/-(4-(am¡nomet¡l)fen¡l)-6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-¿i]p¡r¡daz¡n-3-carboxam¡da. A una soluc¡ón de 4-(6- (but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-¿>]p¡r¡daz¡n-3-carboxam¡do)benc¡lcarbamato de ferc-but¡lo (230 mg. 0.53 mmol) en metanol (15 ml) se le añad¡ó gota a gota cloruro de acet¡lo (0.37 ml. 5.25 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó durante una noche. se concentró y se pur¡f¡có por HPLC Prep (neutral) para dar A/-(4-(am¡nomet¡l)fen¡l)-6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2- ¿>]p¡r¡daz¡n-3-carboxam¡da (25 mg. rend¡m¡ento del 20%). RMN 1H (400 MHz. METANOL-CÍ4) 5 ppm 8.54 (s. 1 H). 8.11 (s. 1 H). 7.80 (d. J = 8.38 Hz. 2 H). 7.77 (d. J = 9.92 Hz. 1 H). 7.50 (d. J = 8.38 Hz. 2 H). 6.92 (d. J = 9.70 Hz. 1 H). 4.12 (s. 2 H). 3.48 (t. J = 7.17 Hz. 2 H). 1.79 (qu¡n. J = 7.33 Hz. 2 H). 1.55 (dc. J = 15.02. 7.41 Hz. 2 H). 1.02 (t. J = 7.39 Hz. 3 H); LRMS (IEN) m/e 339.2 [(M + H)+. calculado para C18H23N6O 339.4].
5.6.55. Síntesis de [3-(4-Aminometil-fenil)-7-metil-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-butil-amina
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Parte A. 6-Cloro-5-metil-p¡r¡daz¡n-3-¡lam¡na
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Una mezcla de 3.6-d¡cloro-4-met¡lp¡r¡daz¡na (1.35 g. 8.28 mmol) y 2.4-d¡metox¡benc¡lam¡na (11.1 g. 66.3 mmol) en i- PrOH (5 ml) se calentó en un m¡croondas a 100 °C durante 50 m¡n. (30 +20 m¡n). La mezcla se concentró y el res¡duo se somet¡ó a ISCO (columna de 120 g. hexano 5 m¡n. EtOAc al 0-55 % en hexano durante 90 m¡n para dar (6-cloro-5-met¡l-p¡r¡daz¡n-3-¡l)-(2.4-d¡metox¡-benc¡l)-am¡na (680 mg) más el análogo de 6-met¡lo (320 mg).
A una soluc¡ón de (6-cloro-5-met¡l-p¡r¡daz¡n-3-¡l)-(2.4-d¡metox¡-benc¡l)-am¡na de lo anter¡or (680 mg) en DCM (8 ml) se le añad¡ó TFA (8 ml). La soluc¡ón resultante se dejó en reposo durante una noche. La mezcla se concentró para dar el compuesto del título que se usó d¡rectamente para la s¡gu¡ente etapa.
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Parte B. 3-Bromo-6-cloro-7-met¡l-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡na
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Una mezcla de 6-cloro-5-met¡l-p¡r¡daz¡n-3-¡lam¡na de la Parte A (~ 2.3 mmol) y una soluc¡ón acuosa de cloroacetaldehído (agua al 50 %, 880 ul. ~7 mmol) en n-BuOH se calentó a reflujo durante una noche. Después de enfr¡ar a ta. la mezcla se d¡luyó con MeOH (15 ml) y se f¡ltró. El f¡ltrado se concentró y se trató con Et2O (15 ml). El producto sól¡do se recog¡ó por f¡ltrac¡ón.
A una suspens¡ón del producto anter¡or en AcOH (6 ml) se le añad¡ó lentamente Br2 (358 ul. 6.96 mmol) a ta. La mezcla resultante se ag¡tó a ta durante 3 h. La mezcla de reacc¡ón se concentró y el res¡duo se suspend¡ó en Et2O (80 ml) y se ag¡tó durante una noche. El producto sól¡do (~800 mg) se recog¡ó por f¡ltrac¡ón y se usó d¡rectamente para la s¡gu¡ente etapa.
Parte C. (3-Bromo-7-met¡l-¡m¡dazo[1.2-81p¡ndaz¡n-6-¡l)-but¡l-am¡na
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A la 3-bromo-6-cloro-7-met¡l-¡m¡dazo[1.2-61p¡r¡daz¡na de la Parte B se le añad¡ó n-BuNH2 (10 ml). La mezcla se calentó en un m¡croondas a 160 °C durante 60 m¡n (30 +30 m¡n). La mezcla se concentró y el res¡duo se somet¡ó a ISCO (columna de 40 g. hexano 3 m¡n. EtOAc al 0-100 % en hexano durante 25 m¡n el EtOAc 10 m¡n.) para dar el compuesto del título (348 mg). RMN 1H (400 MHz. CLOROFORMO-d) 8 ppm 0.97 (t. J=7.39 Hz. 3 H) 1.29 - 1.50 (m. 2 H) 1.61 - 1.71 (m. 2 H) 2.14 (s. 3 H) 3.44 (c. J=6.62 Hz. 2 H) 4.39 (s a. 1 H) 7.34 (s. 1 H) 7.37 (s. 1 H). LRMS (IEN) m/z 283 y 285[(M+H)]+. calculado para C^H^Br^: 283.17.
Parte D. [3-(4-Am¡nomet¡l-fen¡l)-7-met¡l-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-6-¡l1-but¡l-am¡na. Una mezcla de (3-bromo-7-met¡l- ¡m¡dazo[1.2-8]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-but¡l-am¡na (115 mg. 0.41 mmol). clorh¡drato del ác¡do (4-am¡nomet¡lfen¡l)borón¡co (99.9 mg. 0.53 mmol). K2CO3 (170 mg. 1.23 mmol) y d¡clorob¡s(tr¡fen¡lfosf¡na)palad¡o (II) (14.4 mg. 0.021 mmol) en MeCN/agua (3.2 ml/0.8 ml) se calentó en un m¡croondas a 150 °C durante 15 m¡n. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con MeCN y se f¡ltró. El f¡ltrado se somet¡ó a HPLC preparat¡va para dar el compuesto del título como sal AcOH (66.5 mg). RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) 8 ppm 1.01 (t. J=7.39 Hz. 3 H) 1.42 - 1.52 (m. 2 H) 1.73 (t. J=7.28 Hz. 2 H) 2.23 (s. 3 H) 3.41 (t. J=7.28 Hz. 2 H) 4.16 (s. 2 H) 7.44 (s. 1 H) 7.52 (d. J=8.38 Hz. 2 H) 7.75 (s. 1 H) 8.25 (d. J=8.38 Hz. 2 H) 8.54 (s. 1 H). LRMS (IEN) m/z 310.2 [(M+H)1+. calculado para C18H23N5: 309.42.
5.6.56. Síntesis de éster íerc-butílico del ácido [2-(3-bromo-imidazo[1,2-b]pmdazm-6-ilammo)-etM]-metil- carbámico
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Una soluc¡ón de 3-bromo-6-fluoro-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡na (1.4 g. 6.3 mmol). éster ferc-butíl¡co del ác¡do N-(2- am¡noet¡l)-n-met¡lcarbám¡co [121492-06-61 (961 mg. 5.5 mmol) y base de Hun¡g [7087-68-51 (1.1 ml. 6.4 mmol) en 2- propanol (28 ml) se calentó a reflujo durante 4 días. se dejó enfr¡ar. se precargó sobre gel de síl¡ce y se somet¡ó a cromatografía ultrarráp¡da (gel de síl¡ce eluyendo con 10 % (v/v) de metanol/acetato de et¡lo). El producto sól¡do. de color amar¡llo claro. a¡slado. se recr¡stal¡zó (acetato de et¡lo/heptano) para produc¡r 1.2 g de éster ferc-butíl¡co del ác¡do [2-(3-bromo-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-et¡l1-met¡l-carbám¡co en forma de un polvo de color blanco. pf. 128-129 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-cfe) 8 ppm (rotámeros presentes) 1.16 (s. 6 H) 1.33 (s a. 3 H) 2.84 (s. 2 H) 2.90 (s a. 1 H) 3.34 - 3.44 (m. 3 H) 3.45 - 3.52 (m. 1 H) 6.68 (d. J=9.60 Hz. 1 H) 7.31 (s a. 1 H) 7.49 (s. 1 H) 7.72 (d. J=9.35 Hz. 1 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-cfe) 8 ppm 28.22. 28.45. 34.02. 35.07. 39.02. 39.97. 46.23. 47.06. 78.52. 78.87. 99.57. 113.35. 125.92. 130.80. 137.01. 154.37. 155.39. LRMS (IEN) m/z 370.1/372.1 [(M+H)1+. calculado para C14H20BrN5O2: 370.25.
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5.6.57. Síntesis de 4-(6-butMammo-¡m¡dazo[1,2-6]p¡ridazm-3-M)-benc¡l éster del ácido isopropil-carbámico
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Parte A. 4-(4.4.5.5-Tetramet¡l-[1.3.21d¡oxaborolan-2-¡l)-benc¡l éster del ácido isopropil-carbámico
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A una solución de ^-^^^^-tetrametil-fl^^ldioxaborolan^-iO-fenill-irietanol (2.34 g. 10 mmol) y piridina (890 ul. 11 mmol) en THF (50 ml) a ta se le añadió gota a gota una solución de cloroformiato de 4-nitrofenilo (2.22 g. 11 mmol) en THF (10 ml). La mezcla de reacción se agitó a ta durante una noche. El precipitado se retiró mediante filtración. El filtrado se concentró para dar el compuesto deseado (4.2 g. puede contener algo de sal HCl piridina).
A una solución del producto anterior (400 mg. 1 mmol) en THF (3 ml) se le añadió isopropil amina (1.5 ml). La mezcla se agitó a ta durante 3 h. después se concentró para dar el compuesto del título. LRMS (IEN) m/z 320.2 [(M+H)1+. calculado para C17H26BNO4: 319.21
Parte B. 4-(6-But¡lam¡no-¡m¡dazo^1.2-¿1p¡r¡daz¡n-3-¡l)-benc¡l éster del ácido isopropil-carbámico. Una mezcla de (3- bromo-imidazon^-íilpindazin^-iO-butil-amma (50 mg. 0.19 mmol). 4-(4.4.5.5-tetrametil-[1.3.21dioxaborolan-2-il)- bencil éster del ácido isopropil-carbámico (de la parte A. ~0.5 mmol). K2CO3 (77 mg. 0.56 mmol) y diclorobis^rifenilfosfina^aladio (II) (6.5 mg. 0.01 mmol) en MeCN/agua (2 ml/0.5 ml) se calentó en un microondas a 140 °C durante 10 min. La reacción se repitió con la otra mitad del éster borónico de la Parte A. Las dos reacciones se combinaron para la purificación. La capa de agua se retiró y la mezcla de reacción se diluyó con MeCN (3 ml) y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC preparativa para dar el compuesto del título (100 mg). RMN 1H (400 MHz. CLOROFORMO-d) 6 ppm 1.00 (t. J=7.39 Hz. 3 H) 1.19 (d. J=6.62 Hz. 6 H) 1.43 - 1.52 (m. 2 H) 1.66 - 1.73 (m. 2 H) 3.41 (td. J=7.06. 5.73 Hz. 2 H) 3.87 (d. J=6.84 Hz. 1 H) 4.49 (t. J=5.29 Hz. 1 H) 5.14 (m. 1 H) 6.45 (d. J=9.70 Hz. 1 H) 7.46 (d. J=8.16 Hz. 2 H) 7.66 (d. J=9.48 Hz. 1 H) 7.81 (s. 1 H) 8.14 (d. J=8.38 Hz. 2 H). LRMS (IEN) m/z 382.2 [(M+H)1+. calculado para C21H27N5O2: 381.48.
5.6.58. Síntesis de 2-[4-(6-Butilammo-imidazo[1,2-b]piridazm-3-M)-fenoxi]-acetamida
imagen144
Parte A. Ácido 2-í4-í4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-il)fenox¡)acét¡co
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5 A 135 mg (0.441 mmol) del éster disponible en el mercado. se le añadieron 99 mg (1.765 mmol) de KOH y 8 ml de una solución 3:1 de MeOH/H2O y se agitó durante 2 h a ta. El pH se ajustó a 4 usando una solución 2 M de HCl. Se realizaron tres extracciones usando EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera y se secó sobre MgSO4. Se filtró y los disolventes se evaporaron para obtener 72 mg (59 %) del ácido carboxílico deseado.
10 Parte B. 2-(4-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)fenox¡)acetam¡da
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A los 72 mg de ácido carboxílico se le añadieron 8 ml (exceso) de SOCl2 y se agitó a ta durante 2 h y después se 15 concentró a sequedad. Al intermedio de cloruro de ácido sólido obtenido. se le añadieron lentamente 2.6 ml de una solución 0.5 M de N^/dioxano y se agitó durante otras 2 h. La mezcla de reacción se concentró para obtener la amida primaria deseada.
Parte C. 2-[4-(6-But¡lam¡no-¡m¡dazo[1.2-¿)]p¡r¡daz¡n-3-¡l)-fenox¡-acetam¡da. El acoplamiento de Suzuki del éster 20 borónico y el bromuro de arilo en las mismas condiciones como se describen para el ejemplo 5.6.19 proporcionó el compuesto del título con un rendimiento del 78 %. RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) 8 ppm 1.01 (t. J=7.45 Hz. 3 H) 1.44 - 1.55 (m. 2 H) 1.65 - 1.76 (m. 2 H) 3.40 (t. J=7.20 Hz. 2 H) 4.62 (s. 2 H) 7.15 - 7.25 (m. 3 H) 7.93 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 8.04 - 8.16 (m. 3 H); LRMS (IEN) m/e 340.0 [(M + H)+. calculado para C18H21N5O5 339.0.
25 5.6.59. Síntesis de 3-(2-ammopmm¡dm-5-¡l)-W-butM¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-amma:
imagen147
Usando las condiciones de acoplamiento de Suzuki descritas en el ejemplo 5.6.48. proporcionó el compuesto del 30 título con un rendimiento del 63 % en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) 8 ppm 9.03 (s. 2 H). 7.73 (s. 1 H). 7.61 (d. J = 9.85 Hz. 1 H). 6.71 (d. J = 9.60 Hz. 1 H). 4.64 (s. 1 H). 3.36 (t. J = 7.07 Hz. 2 H). 1.66 - 1.73 (m. 2 H). 1.45 - 1.54 (m. 2 H). 1.00 (t. J=7.33 Hz. 3 H); LRMS (IEN) m/e 284.2 [(M + H)+. calculado para C14H18N7 284.3].
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5.6.60. Síntesis de éster íerc-butílico del ácido {2-[3-(5-acetil-tiofen-2-il)-imidazo[1,2-b]piridazm-6-ilammo]- etil}-metil-carbámico
imagen148
A una mezcla de éster íerc-butílico del ácido [2-(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-et¡l]-met¡l-carbám¡co (285,5 mg, 0,8 mmol), ác¡do (5-acet¡lt¡ofen-2-¡l)borón¡co [206551-43-1] (157,3 mg, 0,9 mmol), monoh¡drato tr¡bás¡co de fosfato potás¡co [27176-10-9] (354,8 mg, 1,5 mmol) y complejo [1,1'b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno]d¡cloropalad¡o (II), con d¡clorometano [95464-05-4] (63,4 mg, 0,1 mmol) conten¡do en un matraz de fondo redondo de 25 ml se le añad¡ó una soluc¡ón de 30 % (v/v) de agua en 1,2-d¡metox¡etano (12,5 ml) y una barra ag¡tadora magnét¡ca. El rec¡p¡ente de reacc¡ón se equ¡pó con un condensador de reflujo, se ¡ntrodujo en un baño de ace¡te a temperatura amb¡ente, y el s¡stema se somet¡ó a 10 c¡clos de evacuac¡ón/atmósfera de N2 m¡entras se ag¡taba ráp¡damente. La reacc¡ón ráp¡damente ag¡tada, en atmósfera de N2, se calentó a una temperatura de baño de ace¡te de 85 °C durante 17 h, después se enfr¡ó y se repart¡ó entre salmuera y acetato de et¡lo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4), se evaporó, se somet¡ó a cromatografía ultrarráp¡da (gel de síl¡ce eluído con acetato de et¡lo al 100%) y se cr¡stal¡zó (acetato de et¡lo/heptano) para proporc¡onar éster íerc-butíl¡co del ác¡do [2-[3-(5-acet¡l-t¡ofen-2-¡l)-¡m¡dazo[1,2- ¿]p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no]-et¡l}-met¡l-carbám¡co como 121,3 mg de polvo de color amar¡llo, pf. 174-175 °C. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm (rotámeros presentes) 1,11 (s a, 6 H) 1,39 (s a, 3 H) 2,54 (s, 3 H) 2,87 (s a, 2 H) 2,92 (s a, 1 H) 3,32 (s, 1 H) 3,52 (s a, 3 H) 3,62 (s a, 1 H) 7,78 - 7,85 (m, 2 H) 7,96 (d, J=4,29 Hz, 1 H) 8,14 (s, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-cfe) 6 ppm 26,95, 28,16, 28,50, 34,07, 46,09, 78,50, 113,14, 123,02, 124,18, 126,13, 130,89, 134,37, 137,71, 138,38, 141,77, 154,32, 155,43, 191,11. LRMS (IEN) m/z 416,2 [(M+H)]+, calculado para C14H20BrN5O2: 415,52.
5.6.61. Síntesis de 2-[4-(6-Butilammo-imidazo[1,2-b]pmdazm-3-M)-fenoxi]-N-metil-acetamida
imagen149
Parte A. 2-(4-(6-(But¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-d]p¡r¡daz¡n-3-¡l)fenox¡)acetato de et¡lo
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El 2-(4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡n-3-¡l)fenox¡)acetato de et¡lo, se s¡ntet¡zó med¡ante la reacc¡ón de acoplam¡ento de Suzuk¡ del éster borón¡co y el bromuro de ar¡lo en las m¡smas cond¡c¡ones como se descr¡be para el ejemplo 5.6.19.
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Parte B. Ácido 2-(4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-¿)lp¡r¡daz¡n-3-¡l)fenox¡)acét¡co
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A 368 mg (1.00 mmol) del éster d¡suelto en 15 ml de THF se les añad¡eron, LOH.H2O (82 mg. 2.00 mmol) y 5 ml de agua. Esto se ag¡tó durante una noche a 50 °C. Se enfr¡ó a ta. se concentró a sequedad y después se suspend¡ó en agua. El pH se ajustó a aprox¡madamente 3 usando HCl 1 N. Se usó EtOAc para la extracc¡ón. La capa orgán¡ca se lavó con salmuera. se secó sobre MgSO4. y se concentró a ác¡do carboxíl¡co con un rend¡m¡ento del 100% (340 mg).
Parte C. 2-[4-(6-But¡lam¡no-¡m¡dazo[1.2-8lp¡r¡daz¡n-3-¡l)-fenox¡l-A/-met¡l-acetam¡da. A 50 mg (0.147 mmol) de ác¡do carboxíl¡co se les añad¡eron 20 mg (0.294 mmol) met¡l amina (sal HCl). segu¡do de HOBt (30 mg. 0.221 mmol). EDC (42 mg. 0.221 mmol). tr¡et¡lam¡na (0.30 mg. 0.294 mmol) y 5 ml de DMF. La mezcla resultante se ag¡tó durante una noche a ta. Se d¡luyó con EtOAc. y después se lavó con salmuera y se secó sobre MgSO4. Se concentró y se pur¡f¡có en el HPLC PREP para obtener 27 mg (52 %) del compuesto del título. RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) 8 ppm 0.97 - 1.05 (m. 3 H) 1.44 - 1.56 (m. 2 H) 1.67 - 1.79 (m. 2 H) 2.83 - 2.89 (m. 3 H) 3.40 (t. J=7.20 Hz. 2 H) 4.62 (s. 2 H) 7.17 - 7.27 (m. 3 H) 7.93 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 8.06 - 8.18 (m. 3 H); LRMS (IEN) m/e 354.0 (M + H)+. calculado para C19H23N5O2 353.0.
5.6.62. Síntesis de 4-(6-but¡lammo-¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-3-M)-benc¡lam¡da del ácido (R)-2-ammo-4-metil- pentanoico
imagen152
Parte A. (1-((4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-dlp¡r¡daz¡n-3-¡l)benc¡l)am¡no)-4-met¡l-1-oxopentan-2-¡l)carbamato de (R)- terc-but¡lo
imagen153
La (4-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)fen¡l)metanam¡na y el ác¡do (R)-2-((terc-butox¡-carbon¡l)am¡no)-4- met¡lpentano¡co estaban ambos d¡spon¡bles en el mercado. y se somet¡eron a la reacc¡ón de acoplam¡ento de am¡da regular y produjeron un producto al 94 % (No se neces¡tó pur¡f¡cac¡ón). Este producto se acopló med¡ante reacc¡ón de Suzuk¡ con el bromuro de ar¡lo en las cond¡c¡ones descr¡tas en ejemplo 5.6.19. La mezcla en bruto se pur¡f¡có en el ISCO (gel de síl¡ce) eluyendo con MeOH al 2-10 %/DCM.
Parte B. 4-(6-But¡lam¡no-¡m¡dazo[1.2-¿)lp¡r¡daz¡n-3-¡l)-benc¡lam¡da del ác¡do (R)-2-am¡no-4-met¡l-pentano¡co. A 100 mg (0.197 mmol) de (1-((4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-dlp¡r¡daz¡n-3-¡l)benc¡l)-am¡no)-4-met¡l-1-oxopentan-2-¡l)carbamato de (R)-terc-but¡lo se les añad¡eron 10 ml de HCl 4 M/d¡oxano. y se ag¡tó a ta durante 4 h y después se concentró a
sequedad hasta 102 mg (100 %) de la sal de TFA del producto deseado. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 0,97 - 1,03 (m, 9 H) 1,48 (dc, J=15,02, 7,41 Hz, 2 H) 1,69 - 1,79 (m, 5 H) 3,40 (t, J=7,06 Hz, 2 H) 3,92 (t, J=6,95 Hz, 1 H) 4,49 (dd, J=15,10, 4,08 Hz, 1 H) 4,56 - 4,63 (m, 1 H) 7,23 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,52 (m, J=8,38 Hz, 2 H) 7,95 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 8,12 (m, J=8,38 Hz, 2 H) 8,20 (s, 1 H); LRMS (IEN) m/e 409,0 (M + H)+, calculado para C23H32N6O 5 408,0.
5.6.63. Síntesis de éster íerc-butílico del ácido {2-[3-(4-carbamoN-feml)-imidazo[1,2-b]piridazm-6-Nammo]- etil)-metil-carbámico
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imagen154
Se preparó éster íerc-butílico del ácido [2-[3-(4-carbamoil-fenil)-imidazo[1,2-d]piridazin-6-ilamino]-etil}-metil- carbámico de manera similar al procedimiento para el 5.6.60 del éster íerc-butílico del ácido [2-(3-bromo-imidazo[1,2- d]piridazin-6-ilamino)-etil]-metil-carbámico (367,4 mg, 1,0 mmol), ácido (4-carbamoilfenil)borónico [123088-59-5] 15 (196,7 mg, 1,2 mmol), monohidrato tribásico de fosfato potásico [27176-10-9] (418,4 mg, 1,8 mmol) y complejo [1,1'-
bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II), con diclorometano [95464-05-4] (82,1 mg, 0,1 mmol) en 30% (v/v) agua en 1,2-dimetoxietano (25 ml) a 85 °C durante 17 h. Polvo de color blanco a partir de acetato de etilo/heptano, pf. 190-191 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm (rotámeros presentes) 1,15 (s a, 5 H) 1,28 (s a, 1 H) 1,38 (s a, 3 H) 2,85 (s a, 3 H) 3,32 (s a, 1 H) 3,54 (s a, 1 H) 6,73 (d, J=9,35 Hz, 1 H) 7,27 (s a, 1 H) 7,34 (s a, 1 H) 20 7,79 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,94 - 8,03 (m, 4 H) 8,28 (d, J=8,08 Hz, 2 H). LRMS (IEN) m/z 411,2 [(M+H)]+, calculado
para C21H26N6O3: 410,48.
5.6.64. Síntesis de [3-(4-Ammometil-ciclohex-1-eml)-imidazo[1,2-b]pmdazm-6-M]-butil-amma
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imagen155
Parte A. 4-(6-(Butilamino)imidazo[1,2-d]piridazin-3-il)ciclohex-3-enecarboxilato de metilo
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El acoplamiento de Suzuki del bromuro de arilo y el éster borónico disponible en el mercado en las mismas condiciones que se han descrito en ejemplo 5.6.19 proporcionaron el compuesto del título con un rendimiento del 97 %.
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Parte B. (4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-3-¡l)c¡clohex-3-en-1-¡l)metanol
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A 200 mg (0.610 mmol) del producto a¡slado d¡suelto en 15 ml de THF a 0 °C. se les añad¡eron 2.44 ml (2.439 mmol) de una soluc¡ón THF h¡druro de l¡t¡o y alum¡n¡o 1 M. Después de 15 m¡nutos de ag¡tac¡ón. la reacc¡ón se completó. Se d¡luyó con 40 ml de THF y se añad¡eron lentamente 2.0 g de Na2SO4.10 H2O y se ag¡tó durante otra hora. Después se f¡ltró y el f¡ltrado se concentró para obtener 182 mg (99 %) del alcohol deseado.
Parte C. 2-((4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-3-¡l)c¡clohex-3-en-1-¡l)met¡l)¡so¡ndol¡n-1.3-d¡ona
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A 150 mg (0.500 mmol) del alcohol d¡suelto en 15 ml de THF a 0 °C. se les añad¡eron ftal¡m¡da (80.9 mg. 0.55 mmol). DIAD (121 mg. 0.599 mmol) y tr¡fen¡lfosf¡na (157 mg. 0.599 mmol). Después de 0.5 h de ag¡tac¡ón a 0 °C. el baño de h¡elo se ret¡ró y se cont¡nuó ag¡tando a ta durante aprox¡madamente 16 h. Después se d¡luyó con 20 ml de EtOAc y se ¡nact¡vó con 10 ml de agua. La capa orgán¡ca se separó y se lavó con salmuera. se secó sobre MgSO4. y se pur¡f¡có en el ISCO (gel de síl¡ce) eluyendo con MeOH al 0-10 %/DCM para dar 163 mg (76 %) del producto.
Parte D. [3-(4-Am¡nomet¡l-c¡clohex-1-en¡l)-¡m¡dazo[1.2-¿)1p¡ndaz¡n-6-¡l1-but¡l-am¡na. A 130 mg (0.303 mmol) de la am¡na proteg¡da con ftal¡m¡da. d¡suelta en 10 ml de EtOH. se les añad¡eron 45.5 mg (0.909 mmol) de monoh¡drato de h¡draz¡na. La mezcla resultante se calentó a reflujo durante 4 h. se enfr¡ó a ta. se f¡ltró para ret¡rar los sól¡dos. y el f¡ltrado se concentró para obtener 88 mg (97 %) del compuesto deseado. RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) 8 ppm 1.01 (t. J=7.45 Hz. 3 H) 1.44 - 1.61 (m. 3 H) 1.66 - 1.76 (m. 2 H) 2.03 - 2.20 (m. 3 H) 2.50 - 2.76 (m. 3 H) 3.00 (d. J=6.57 Hz. 2 H) 3.39 (t. J=7.07 Hz. 2 H) 7.19 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 7.24 - 7.31 (m. 1 H) 7.82 - 7.86 (m. 1 H) 7.88 - 7.93 (m. 1 H); LRMS (IEN) m/e 300.0 (M + H)+. calculado para C17H25N5 299.0.
5.6.65. Síntesis de éster íerc-butílico del ácido metM-[2-(3-femMmidazo[1,2-b]piridazm-6-Mammo)-etM]- carbámico
imagen159
Se preparó éter ferc-butíl¡co del ác¡do met¡l-[2-(3-fen¡l-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-et¡l1-carbám¡co de manera s¡m¡lar al proced¡m¡ento para el ejemplo 5.6.60 a part¡r de éster ferc-butíl¡co del ác¡do [2-(3-bromo-¡m¡dazo[1.2- 81p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-et¡l1-met¡l-carbám¡co (370.3 mg. 1.0 mmol). ác¡do fen¡lborón¡co [98-80-6] (146.4 mg. 1.2 mmol). monoh¡drato tr¡bás¡co de fosfato potás¡co [27176-10-91 (460.2 mg. 2.0 mmol) y complejo [1.1'-
b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno1 d¡cloropalad¡o (II). con d¡clorometano [95464-05-41 (81.9 mg. 0.1 mmol) en 30% (v/v) agua en 1.2-d¡metox¡etano (12.5 ml) a 85 °C durante 17 h. Polvo de color blanquec¡no a part¡r de acetato de et¡lo/heptano. pf. 150-151 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 8 ppm (rotámeros presentes) 1.16 (s a. 5 H) 1.20 - 1.33 (m. 1 H) 1.37 (s a. 3 H) 2.49 - 2.54 (m. 1 H) 2.83 (s a. 3 H) 3.43 (s a. 2 H) 3.51 (s a. 1 H) 6.69 (d. J=8.84 Hz. 1 H) 7.22 (s a. 1 H) 7.29 - 7.38 (m. 1 H) 7.43 - 7.54 (m. 2 H) 7.76 (d. J=8.84 Hz. 1 H) 7.89 (s a. 1 H) 8.16 (d. J=6.82 Hz. 2 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 14.39. 22.55. 28.24. 28.49. 31.71.34.17. 35.10. 46.33. 47.00. 78.60.
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112,58, 126,28, 127,46, 128,93, 130,40, 134,52, 153,69, 155,40. LRMS (IEN) m/z 368,1 [(M+H)1+, calculado para C20H25N5O2: 367,45.
5.6.66. Síntesis de 4-{6-[2-(3-ferc-ButM-1-met¡l-ure¡do)-et¡lammo]-¡m¡dazo[1,2-b]p¡rídazm-3-¡l}-benzam¡da
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Parte A. Diclorhidrato de 4-[6-(2-met¡lam¡no-et¡lam¡no)-¡m¡dazo[1,2-¿)1p¡r¡daz¡n-3-¡l1-benzam¡da
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Se añad¡ó ác¡do clorhídr¡co concentrado a una soluc¡ón a temperatura amb¡ente de éster ferc-butíl¡co del ác¡do 2-[3- (4-carbamo¡l-fen¡l)-¡m¡dazo[1,2-£)1p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no1-et¡l}-met¡l-carbám¡co (784,1 mg, 1,9 mmol) en metanol (130 ml) y se dejó ag¡tar en atmósfera de N2 durante 2 días. La mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó y se f¡ltró para proporc¡onar d¡clorh¡drato de 4-[6-(2-met¡l am¡no-et¡lam¡no)-¡m¡dazo[1,2-£)1p¡ndaz¡n-3-¡l1-benzam¡da en forma de un polvo de color blanquec¡no, pf. 322-323 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz, ÓXIDO DE DEUTERIO) 8 ppm 2,68 (s, 3 H) 3,34 (t, J=5,81 Hz, 2 H) 3,74 (t, J=5,68 Hz, 2 H) 7,24 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,88 (d, J=8,59 Hz, 2 H) 7,96 - 8,02 (m, 3 H) 8,08 (s, 1 H). LRMS (IEN) m/z 311,1[(M+H)1+, calculado para C^H-is^O: 310,36.
Parte B. 4-(6-[2-(3-terc-But¡l-1-met¡l-ure¡do)-et¡lam¡no1-¡m¡dazo[1,2-81p¡r¡daz¡n-3-¡l}-benzam¡da. Se añad¡ó lentamente 2-¡soc¡anato-2-met¡lpropano a 0 °C una suspens¡ón en ag¡tac¡ón de d¡clorh¡drato de 4-[6-(2-met¡lam¡no-et¡lam¡no)- ¡m¡dazo[1,2-b1p¡r¡daz¡n-3-¡l1-benzam¡da (177,3 mg, 0,5 mmol) y base de Hun¡g base [7087-68-51 (0,3 ml, 1,8 mmol) en d¡clorometano (4,6 ml) y la mezcla se dejó ag¡tar y calentar a temperatura amb¡ente durante 17 h. Después, la mezcla de reacc¡ón se repart¡ó entre salmuera y acetato de et¡lo, se secó (MgSO4), se somet¡ó a cromatografía ultrarráp¡da (gel de síl¡ce eluyendo con 10 % (v/v) de metanol/acetato de et¡lo), y se cr¡stal¡zó a part¡r de 2- propanol/agua hasta 50,2 mg de polvo de color blanco, pf. 154-155 °C. RMN 1H (400 Mhz, DMSO-d6) 8 ppm 1,18 (s, 8 H) 2,49 - 2,52 (m, 1 H) 2,86 (s, 2 H) 3,32 (s, 1 H) 3,40 - 3,49 (m, 3 H) 5,26 (s, 1 H) 6,72 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,79 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,95 - 8,02 (m, 3 H) 8,29 (d, J=8,59 Hz, 2 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 29,06, 34,55, 39,42, 46,40, 49,75, 112,42, 124,98, 125,83, 126,03, 127,73, 130,82, 132,01,132,19, 137,58, 153,61,157,25, 167,43. LRMS (IEN) m/z 410,2[(M+H)1+, calculado para C21H27N7O2: 409,50.
5.6.67. Síntes¡s de 6-(butilammo)-W-(1H-p¡razol-3-¡l)¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡dazm-3-carboxam¡da:
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Usando las cond¡c¡ones de reacc¡ón de acoplam¡ento de am¡da descr¡tas para el ejemplo 5.6.54 proporc¡onó el compuesto del título en forma de un sól¡do de color con un rend¡m¡ento del 43 %. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,01- 8,07 (m, 2 H), 7,70 (d, J = 9,92 Hz, 1 H), 7,63 (s a, 1 H), 6,84 (d, J = 9,92 Hz, 1 H), 4,56 (s, 1 H), 3,41 (t, J = 7,06 Hz, 2 H), 1,69 - 1,76 (m, 2 H), 1,48 (dc, J = 15,05, 7,48 Hz, 2 H), 0,96 (t, J=7,39 Hz, 3 H); LRMS (IEN) m/e 300,0 [(M + H)+, calculado para C14H18N7O 300,31.
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Parte A. 3-bromo-N-(2-(terc-butox¡)et¡l)¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-am¡na:
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Una soluc¡ón de 3-bromo-6-fluoro¡m¡dazo[1.2-d1p¡ndaz¡na (216 mg, 1.0 mmol). tr¡et¡l am¡na (0.35 ml, 2.5 mmol) y 2- (terc-butox¡)etanam¡na (180 mg. 1.5 mmol) en ¡sopropanol (2 ml) se calentó a 65 °C durante una noche. La mezcla se enfr¡ó. se d¡luyó con acetato de et¡lo y se lavó con agua. La capa orgán¡ca se secó sobre MgSO4 y se concentró para dar un sól¡do de color pardo en bruto con rend¡m¡ento cuant¡tat¡vo durante síntes¡s ad¡c¡onales. Se pur¡f¡caron ad¡c¡onalmente 20 mg med¡ante HPLC Prep para dar 3-bromo-A/-(2-(ferc-butox¡)et¡l)¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-am¡na pura en forma de un sól¡do de color blanco (8 mg). RMN 1H (400 Mhz. METAnOl-^) 6 ppm 7.57 (d. J=9.85 Hz. 1 H). 7.42 (s. 1 H). 6.76 (d. J = 9.60 Hz. 1 H). 4.56 (s. 1 H). 3.67 (t. J = 5.94 Hz. 2 H). 3.53 (t. J = 5.94 Hz. 2 H). 1.24 (s. 9 H) LRMS (IEN) m/e 315.0 [(M + H)+. calculado para C-^H-ieBr^O 314.2].
Parte B. 3-(4-(am¡nomet¡l)fen¡l)-N-(2-(ferc-butox¡)et¡l)¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-am¡na.
Usando las cond¡c¡ones de acoplam¡ento de Suzuk¡ descr¡tas en el 5.6.48 se proporc¡onó el compuesto del título en forma de un sól¡do de color blanco con un rend¡m¡ento del 40 %. RMN 1H (400 MHz. METANOL-cfo) 6 ppm 8.53 (s. 1 H). 8.24 - 8.28 (m. 2 H). 7.82 (s. 1 H). 7.66 (d. J = 9.60 Hz. 1 H). 7.57 (d. J = 8.59 Hz. 2 H). 6.79 (d. J = 9.85 Hz. 1 H). 4.18 (s. 2 H). 3.67 (t. J = 5.81 Hz. 2 H). 3.53 (t. J = 5.94 Hz. 2 H). 1.23 (s. 9 H); LRMS (IEN) m/e 340.1 [(M + H)+. calculado para C19H26N5O 340.4].
5.6.69. Síntes¡s de 4-((3-(4-(ammomet¡l)feml)¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡dazm-6-¡l)ammo)-2-met¡lbutan-2-ol
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Parte A. 4-((3-bromo¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)-2-met¡lbutan-2-ol
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Se h¡zo reacc¡onar la 3-bromo-6-fluoro¡m¡dazo[1.2-¿1p¡r¡daz¡na con 4-am¡no-2-met¡lbutan-2-ol usando las m¡smas cond¡c¡ones de reacc¡ón como se descr¡ben en el ejemplo 5.6.42. Parte A para obtener producto al 82 %.
Parte B. 4-((3-(4-(am¡nomet¡l)fen¡l)¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)-2-met¡lbutan-2-ol.
Se acopló el 4-((3-bromo¡m¡dazo[1.2-¿1p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)-2-met¡lbutan-2-ol con ác¡do (4-(am¡nomet¡l)fen¡l)borón¡co como se descr¡be en el ejemplo 5.6.19 para proporc¡onar el compuesto del título con un rend¡m¡ento del 78 %. RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) 6 ppm 1.29 (s. 6 H) 1.84 - 1.94 (m. 2 H) 3.49 - 3.58 (m. 2 H) 4.24 (s. 2 H) 7.25 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 7.67 (d. J=8.59 Hz. 2 H) 7.97 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 8.22 - 8.29 (m. 3 H); LRMS (IEN) m/e 326.0 [(M + H)+. calculado para C18H23N5O 325.01.
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Parte A. N-al¡l-3-bromo¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-am¡na
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Una soluc¡ón de 3-bromo-6-cloro¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡na (1000 mg. 4.32 mmol) y al¡lam¡na (6.0 ml. 80 mmol) se calentó a 80 °C (tubo cerrado hermét¡camente) durante 6 h. La mezcla resultante se enfr¡ó a temperatura amb¡ente y se pur¡f¡có sobre gel de síl¡ce (eluyendo con acetato de et¡lo) para proporc¡onar W-al¡l-3-bromo¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n- 6-am¡na (550 mg. rend¡m¡ento del 51 %) en forma de un sól¡do de color amar¡llo: LRMS (IEN) m/z 253.0. 255.0 [(M+H)+. calculado para CgHgBrN 252.0]
Parte B. N-al¡l-4-(6-(al¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzam¡da. A una mezcla de W-al¡l-3-bromo¡m¡dazo[1.2- b1p¡r¡daz¡n-6-am¡na (365 mg. 1.44 mmol). ác¡do (4-(al¡lcarbamo¡l)fen¡l)borón¡co (615 mg. 3.0 mmol). [1.1'- b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno1d¡cloropalad¡o (Il) (62 mg. 0.085 mmol) se le añad¡eron añad¡ó n-butanol (3 ml) y carbonato sód¡co acuoso 2 M (2 ml). La mezcla resultante se calentó a 100 °C durante 5 h. La reacc¡ón después se d¡luyó con agua. se extrajo con acetato de et¡lo. y se pur¡f¡có med¡ante columna sobre gel de síl¡ce (metanol al 10 % en acetato de et¡lo) segu¡do por HPLC preparat¡va (aceton¡tr¡lo/form¡ato amón¡co acuoso. columna Sunf¡re) para proporc¡onar W-al¡l-4-(6-(al¡lam¡no)¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzam¡da en forma de un sól¡do de color blanco: RMN 1H (METANOL-d4) 6: 8.30 - 8.33 (d. J = 8.4 Hz. 2H). 7.94 (d. . J = 8.4 Hz. 2H). 7.67 (d. J = 9.6 Hz. 1H). 6.78 (d. J =
9.6 Hz. 1H). 5.9-6.2 (m. 2H). 5.1-5.4 (m. 4H). 4.00 (m. 4H); LRMS (IEN) m/z 334.2 [(M+H)+. calculado para C19H19N5O 333.41
5.6.71. Síntes¡s de 3-(4-(ammomet¡l)feml)-N-(3-(ferc-butox¡)propM)¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡dazm-6-amma:
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Usando un proceso s¡m¡lar al que se descr¡be en el ejemplo 5.6.68. se proporc¡onó el compuesto del título. RMN 1H (400 MHz. metanol-d4) 6 ppm 8.51 (s. 2 H). 8.30 (d. J = 8.38 Hz. 2 H). 7.83 (s. 1 H). 7.65 (d. J = 9.48 Hz. 1 H). 7.56 (d. J = 8.38 Hz. 2 H). 6.76 (s. 1 H). 6.73 (s. 1 H). 4.17 (s. 2 H). 3.56 (t. J = 6.17 Hz. 2 H). 3.47 (t. J = 6.73 Hz. 2 H). 1.93 (t. J = 6.50 Hz. 2 H). 1.22 (s. 9 H); LRMS (IEN) m/e 354.1 [(M + H)+. calculado para C26H28N5O 354.41.
5.6.72. Síntes¡s de éster íerc-butíl¡co del ác¡do [2-(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-¡lammo)-et¡l]-¡soprop¡l- carbám¡co
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Parte A. N1-(3-bromo¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)etano-1.2-d¡am¡na
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Una suspens¡ón ag¡tada de 3-bromo-6-cloro-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡na [13526-66-4] (5.0 g. 21.5 mmol) en et¡lend¡am¡na [107-15-3] (25.0 ml. 373.1 mmol) se calentó a 65 °C en atmósfera de n¡trógeno. Una vez a la temperatura. la mezcla se conv¡rt¡ó en una soluc¡ón de color amar¡llo transparente. Estas cond¡c¡ones se mantuv¡eron durante 17 h. t¡empo en el cual. la soluc¡ón de reacc¡ón cal¡ente se vert¡ó en agua. y la masa se extrajo exhaustivamente con acetato de et¡lo. Los extractos comb¡nados se comb¡naron. se secaron (CaSO4) y se evaporaron para obtener 1.79 g de sól¡do de color amar¡llo. Este sól¡do se recr¡stal¡zó en acetato de et¡lo/heptano para proporc¡onar 1.4 g de N1-(3-bromo¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)etano-1.2-d¡am¡na en forma de un polvo de color blanco. pf. 158-159 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 1.49 (s a. 1 H) 2.79 (t. J=6.19 Hz. 2 H) 3.27 (c. J=5.89 Hz. 2 H) 6.73 (d. J=9.60 Hz. 1 H) 7.10 (t. J=5.05 Hz. 1 H) 7.47 (s. 1 H) 7.68 (d. J=9.60 Hz. 1 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-cfe) 8 ppm 40.97. 45.13. 99.48. 113.51. 125.73. 130.72. 137.04. 154.81. LRMS (IEN) m/z 255.9/257.9 [(M+H)1+. calculado para CaH^r^: 256.11.
Parte B. N1-(3-bromo¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-N2-¡soprop¡letano-1.2-d¡am¡na
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Se añad¡ó ác¡do acét¡co glac¡al [64-19-71 (1.6 ml. 28.0 mmol) a una suspens¡ón ag¡tada de N1-(3-bromo¡m¡dazo[1.2- b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)etano-1.2-d¡am¡na (7.0 g. 27.2 mmol). acetona [67-64-11 (2.4 ml. 32.6 mmol). c¡anoboroh¡druro sód¡co [25895-80-71 (1.8 g. 27.2 mmol) y tam¡ces moleculares de 4 angstrom act¡vados. en polco (4 g). El matraz se somet¡ó a atmósfera de N2. se cerró con un tab¡que y la mezcla se dejó ag¡tar a temperatura amb¡ente durante 3 días. después se f¡ltró. El f¡ltrado se evaporó. y el res¡duo se repart¡ó entre NaHCO3 acuoso al 10 % y acetato de et¡lo (p/v). El extracto se secó (CaSO4). y se evaporó para proporc¡onar un ace¡te de color naranja transparente. Este ace¡te se tr¡turó en heptano para prec¡p¡tar N1-(3-bromo¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-N2-¡soprop¡letano-1.2-d¡am¡na como 2.3 g de polvo de color amadlo. pf 87-88 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 0.99 (d. J=6.32 Hz. 5 H) 1.60 (s a. 1 H) 2.71 - 2.81 (m. 3 H) 3.34 (c. J=6.32 Hz. 2 H) 6.73 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 7.07 (t. J=5.31 Hz. 1 H) 7.47 (s. 1 H) 7.68 (d. J=9.60 Hz. 1 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 22.92. 41.48. 45.29. 47.81.98.98. 112.99. 125.26. 130.24. 136.53. 154.24. LRMS (IEN) m/z 297.9/299.9 [(M+H)1+. calculado para CnH^BrNa: 289.19.
Parte C. Éster terc-butíl¡co del ác¡do [2-(3-bromo-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-et¡l1-¡soprop¡l-carbám¡co. A una soluc¡ón en atmósfera de N2. a temperatura amb¡ente. ag¡tada ráp¡damente de N1-(3-bromo¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6- ¡l)-N2-¡soprop¡l-etano-1.2-d¡am¡na (633.3 mg. 2.1 mmol) y base de Hun¡g [7087-68-51 (0.5 ml. 2.9 mmol) en acetato de et¡lo (30 ml) se le añad¡ó d¡carbonato de d¡-terc-but¡lo sól¡do [24424-99-51 (556.6 mg. 2.6 mmol). Una vez completada. la reacc¡ón se lavó con salmuera. se secó (MgSO4) y se evaporó para proporc¡onar 894.5 mg de sól¡do de color amar¡llo. Este sól¡do se recr¡stal¡zó en acetato de et¡lo heptano para proporc¡onar éster terc-butíl¡co del ác¡do [2-(3-bromo-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-et¡l1-¡soprop¡l-carbám¡co como 559.5 mg de un polvo cr¡stal¡no de color blanco. pf. 154-155 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 1.16 (d. J=6.82 Hz. 6 H) 1.40 (s. 9 H) 2.49 -2.52 (m. 1 H) 3.26 - 3.35 (m. 2 H) 3.35 - 3.42 (m. 2 H) 6.68 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 7.32 (s. 1 H) 7.49 (s. 1 H) 7.71 (d. J=9.60 Hz. 1 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 20.55. 28.08. 78.46. 98.93. 112.85. 125.52. 130.41. 136.57. 154.10. LRMS (IEN) m/z 297.9/299.9 [(M+H)1+. calculado para C^H24BrNaO2: 398.31.
5.6.73. Síntesis de éster etílico del ácido {2-[3-(4-carbamoil-feml)-imidazo[1,2-b]piridazm-6-ilammo]-etM}-feml- arbámico
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Parte A. 2.2.2-Tr¡fluoro-A/-í2-fen¡lam¡no-etil)-acetam¡da
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Se añadió trifluoroacetato de etilo [383-63-1] (5.5 ml. 46.1 mmol) a una solución a 0 °C. agitada de N1-feniletano-1.2- diamina [1664-40-0] (5.0 ml. 38.4 mmol) en THF (125 ml) y se dejó en agitación y se calentó a temperatura ambiente en atmósfera de N2 durante 17 h. después se repartió entre salmuera y acetato de etilo. El extracto se secó (MgSO4) y se evaporó para proporcionar 10.2 g de un líquido de color amarillo oscuro transparente. LRMS (IEN) m/z 232.9 [(M+H)]+. calculado para C10H11F3N2O: 232.21.
Parte B. Éster etílico del ácido fenil-^^^^-trifluoro-acetilaminoVetill-carbámico
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Se añadió cloroformiato de etilo [541-41-3] (1.4 ml. 14.7 mmol) a una solución a temperatura ambiente de 2.2.2- trifluoro-N-p-fenilamino-eti^-acetamida (3.4 g. 14.6 mmol) y N-metil morfolina [109-02-4] (2.0 ml. 17.7 mmol) en acetato de etilo (145 ml) y se agitó en atmósfera de N2 durante 17 h. Después. la suspensión de reacción se lavó con ácido clorhídrico acuoso diluido. salmuera. se secó (MgSO4). se evaporó y se llevó a la siguiente etapa sintética sin aislamiento adicional.
Parte C. Éster etílico de ácido re-^-bromo-imidazoH^-btoindazin^-ilaminoVetin-fenil-carbámico
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Se combinó éster etílico del ácido fenil-^-p^^-trifluoro-acetilamino^etil^carbámico (2.2 g. 7.3 mmol} con 3-bromo- 6-fluoro-¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡na (892.5 mg. 4.1 mmol) y carbonato potásico [584-08-7] (2.9 g. 20.6 mmol) en una solución al 20 % (v/v) de agua en 1.2-dimetoxietano (25 ml) y se calentó a 85 °C durante 5 días. Después. la mezcla de reacción se repartió entre agua y acetato de etilo y el extracto se sometió a cromatografía ultrarrápida (gel de sílice eluyendo con acetato de etilo al 100%) para producir 863.1 mg de polvo cristalino de color blanco. pf. 160161 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 1.08 (t. J=7.06 Hz. 2 H) 2.51 (dt. J=3.58. 1.85 Hz. 1 H) 3.35 (s. 1 H) 3.46 (c. J=6.39 Hz. 2 H) 3.90 (t. J=6.50 Hz. 2 H) 4.04 (c. J=7.06 Hz. 2 H) 6.65 (d. J=9.70 Hz. 1 H) 7.19 - 7.25 (m. 1 H) 7.31- 7.39 (m. 4 H) 7.48 (s. 1 H) 7.69 (d. J=9.70 Hz. 1 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 14.16. 38.85. 47.84.
60.82. 98.79. 112.62. 125.31. 125.99. 126.79. 128.63. 130.18. 136.35. 141.81. 153.79. 154.64. LRMS (IEN) m/z 403.9/405.9[(M+H)]+. calculado para C17H1sBrN5O2: 404.27.
Parte D. Éster etílico del ácido ^-re-^-carbamoil-fenin-imidazoH^-btomdazin^-ilamino^etilHenil-arbámico. A una mezcla de éster etílico del ácido ^-^-bromo-imidazo^^-bpridazin^-ilamino^etil^fenil-carbámico (354.7 mg. 0.9 mmol). ácido ^-carbamoilfeni^borónico [123088-59-5] (174.2 mg. 1.1 mmol). monohidrato tribásico de fosfato potásico [27176-10-9] (368.8 mg. 1.6 mmol) y complejo [1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno]d¡cloropalad¡o (II). con diclorometano [95464-05-4] (74.4 mg. 0.1 mmol) contenido en un matraz de fondo redondo de 25 ml se le añadió una solución de agua al 30 % (v/v) en 1.2-dimetoxietano (13 ml) y una barra agitadora magnética. El recipiente de reacción se equipó con un condensador de reflujo. se introdujo en un baño de aceite a temperatura ambiente. y el sistema se sometió a 10 ciclos de evacuación/atmósfera de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada. en atmósfera de N2. se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85 °C durante 17 h. después se enfrió y se repartió entre salmuera y acetato de etilo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4). se evaporó. se sometiño a cromatografía ultrarrápida (gel de sílice eluyendo con metanol al 10 %/acetato de etilo (v/v)) y se purificó adicionalmente mediante RP-HPLC preparativa para proporcionar éster etílico del ácido {2-[3-(4- carbamoil-feniO-imidazon^-^piridazin^-ilamino^eti^-fenil-arbámico en forma de un polvo de color blanco. pf. 227228 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 1.03 (t. J=7.07 Hz. 2 H) 2.51 (dt. J=3.73. 1.80 Hz. 2 H) 3.31 (s. 1 H) 3.48 (c. J=6.23 Hz. 2 H) 3.91- 4.04 (m. 3 H) 6.69 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 7.18 - 7.35 (m. 5 H) 7.76 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 7.91- 8.01 (m. 3 H) 8.21 (d. J=8.59 Hz. 2 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 14.25. 48.18. 60.95. 112.37. 124.91.125.75. 126.00. 126.35. 127.18. 127.79. 128.77. 130.81. 131.93. 132.15. 137.57. 141.78. 153.40. 154.85.
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167,49. LRMS (IEN) m/z 445,1 [(M+H)]+, calculado para C24H24N6O3: 444,50.
5.6.74. Síntesis de 4-(6-But¡lammo-¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡dazm-3-M)-W-(2,2-d¡met¡l-[1,3]d¡oxolan-4-¡lmet¡l}-
benzamida
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Parte A. Ácido 4-(6-(but¡lam¡no)¡m¡dazo[1,2-¿1p¡r¡daz¡n-3-¡l)benzo¡co
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Se acoplaron el bromuro de ar¡lo y el éster borón¡co usando las m¡sma cond¡c¡ones de Suzuk¡ como en el ejemplo 5.6.19 para obtener el producto de ác¡do carboxíl¡co.
Parte B. 4-(6-But¡lam¡no-¡m¡dazo[1.2-¿1p¡r¡daz¡n-3-¡l)-M-(2.2-d¡met¡l-[1,31d¡oxolan-4-¡lmet¡l)-benzam¡da. El
acoplam¡ento de am¡da regular del ác¡do carboxíl¡co con (2,2-d¡met¡l-1,3-d¡oxolan-4-¡l)metanam¡na proporc¡onó producto al 71 %. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 1,02 (t, J=7,33 Hz, 3 H) 1,36 (s, 3 H) 1,45 (s, 3 H) 1,49 - 1,57 (m, 2 H) 1,67 - 1,76 (m, 2 H) 3,40 (t, J=7,20 Hz, 2 H) 3,58 (d, J=5,31 Hz, 2 H) 3,80 (dd, J=8,46, 6,19 Hz, 1 H) 4,12 (dd, J=8,34, 6,32 Hz, 1 H) 4,36 (t, J=5,81 Hz, 1 H) 6,73 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,63 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,87 (s, 1 H) 7,90 - 7,97 (m, 2 H) 8,29 - 8,36 (m, 2 H); LRMS (IEN) m/e 424,0 [(M + H)+, calculado para C23H29N5O3 423,0].
5.6.75. Síntes¡s de 4-(6-But¡lammo-¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-3-¡l)-W-(2,3-d¡h¡drox¡-prop¡l)-benzam¡da
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A 150 mg (0,355 mmol) de 4-(6-but¡lam¡no-¡m¡dazo[1,2-£)]p¡ndaz¡n-3-¡l)-W-(2,2-d¡met¡l-[1,3]d¡oxolan-4-¡l-met¡l)- benzam¡da se les añad¡eron 15 ml de AcOH y 5 ml de agua y se calentaron a 60 °C durante 1,5 h. Se concentró y el producto en bruto se pur¡f¡có en el HPLC PREP acét¡co para produc¡r 107 mg (79 %) del compuesto del título. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 1,00 (t, J=7,39 Hz, 3 H) 1,42 - 1,55 (m, 2 H) 1,66 - 1,76 (m, 2 H) 3,40 (t, J=7,17 Hz, 2 H) 3,43 - 3,52 (m, 1 H) 3,56 - 3,65 (m, 3 H) 3,84 - 3,93 (m, 1 H) 7,24 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,96 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 8,00 - 8,05 (m, 2 H) 8,23 - 8,28 (m, 2 H) 8,30 (s, 1 H); LRMS (IEN) m/e 384,0 [(M + H)+, calculado para C20H25N5O3 383,0]
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Parte A. 7-í4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)quinazol¡n-4-ol
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A 87.2 mg (0.356 mmol) de la 4-bromo-2-nitrobenzamida disuelta en 5 ml de formaldehído se les añadió polvo de hierro (50 mg. 0.89 mmol). La mezcla resultante se agita durante 2 h a 80 °C. Se diluyó con 20 ml de EtoAc y una solución de 10 ml de DCM/IPA 2:1. Después. la mezcla resultante se concentró a través de un lecho de arena y después se concentró. Al residuo obtenido se le añadieron 99 mg (0.391 mmol) de bis(pinacolato)diboro. seguido de KoAc (105 mg. 1.07 mmol). PdCh(dppf).DCM (29 mg. 0.04 mmol) y 18 ml de dioxano. La mezcla resultante se calentó a 80 °C durante una noche. Después de un periodo de refrigeración. se diluyó con EtOAc. se lavó con salmuera y se secó sobre MgSO4. Se concentró y se purificó en el ISCO (gel de sílice) y eluyendo con MeOH al 110 %/DCM. para obtener 78 mg (81 %) del éster borónico.
Parte B. 7-(6-But¡lam¡no-¡m¡dazo[1.2-¿)]p¡^daz¡n-3-¡l)-qu¡nazol¡n-4-ol. Para (60 mg. 0.223 mmol) de bromuro de arilo. en un vial apto para microondas se le añadió (73 mg. 0.268 mmol) del éster borónico. K3PO4 (142 mg. 0.669 mmol). PdCl2(PPh3)3 (16 mg. 0.022 mmol). 3 ml de DME y 1 ml de agua. La mezcla resultante se sometió a microondas durante 30 minutos a 140 °C. Se diluyó con 15 ml de EtOAC. y se lavó con aproximadamente 10 ml de salmuera. La capa orgánica se secó sobre MgSO4 y se concentró. La mezcla en bruto se disolvió de nuevo en una solución de 3 ml 2:1 de MeOH/H2O. Se filtró y se purificó en el HPLC PREP para dar 41 mg (55%) del producto deseado. [El procedimiento se usa para todas las reacciones de acoplamiento de Suzuki a menos que se indique otra cosa. Los ácidos borónicos funcionan igual que los ésteres borónicos.] RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) 6 ppm 0.99 (t. J=7.39 Hz. 3 H) 1.45 -1.56 (m. 2 H) 1.68 - 1.77 (m. 2 H) 3.46 (t. J=7.06 Hz. 2 H) 7.28 (d. J=9.92 Hz. 1 H) 7.99 (d. J=9.70 Hz. 1 H) 8.22 - 8.28 (m. 2 H) 8.37 (d. J=8.38 Hz. 1 H) 8.45 (s. 1 H) 8.63 (d. J=1.54 Hz. 1 H); LRMS (IEN) m/e 335.0 [(M + H)+. calculado para C-iaH^O 334.0].
5.6.77. Síntesis de met¡l(2-((3-(4-(p¡rroMdm-2-M)feml)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-¡l)ammo}et¡l)carbamato de iso- propilo:
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El compuesto del título se obtuvo usando un proceso similar al que se describió en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz. METANOL-c/4) 6 ppm 8.56 (s. 1 H). 8.28 (s a. 2 H). 7.83 (s. 1 H). 7.68 (d. J = 9.35 Hz. 1 H). 7.60 (d. J = 8.34 Hz. 2 H). 6.73 (d. J = 9.85 Hz. 1 H). 4.66 (dd J = 9.60. 6.82 Hz. 1 H). 3.66 (s a. 1 H). 3.59 (s a. 3 H). 3.41- 3.55 (m. 2 H). 2.94 (s. 3 H). 2.48 - 2.56 (m. 1 H). 2.19 - 2.34 (m. 3 H). 1.00-1.23 (d. J=5.05 Hz. 6 H); LRMS (IEN) m/e 423.1 [(M
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+ H)+, calculado para C23H31N6O2. 423,5].
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El compuesto del título se obtuvo usando un proceso similar al que se describió en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL-c/4) 6 ppm 8,04 (s, 1 H), 7,97 (s a, 1 H), 7,90 (s a, 1 H), 7,52 - 7,57 (m, 1 H), 7,13 - 7,24 (m, 3 H), 3,90 (s, 3 H), 3,42 - 3,49 (m, 4 H), 2,74 (s, 3 H), 1,30-1,38 (s a, 9 H); LRMS (IEN) m/e 398,1 [(M + H)+, calculado para C21H28N5O3 398,5].
5.6.79. Síntesis de metil^p^tiazoM-il^midazo^^-^pindazm^-i^ammo^ti^carbamato de isopropilo:
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El compuesto del título se obtuvo usando un proceso similar al que se describió en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL-c/4) 6 ppm 9,19 (s, 1 H), 8,65-8,85 (s a, 1 H), 8,31 (s, 1 H), 7,97 (d, J = 9,85 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 9,35 Hz, 1 H), 4,78 (m, 1 H), 3,64 - 3,75 (m, 4 H), 2,98 (s, 3 H), 1,06-1,25 (m, 6 H); LRMS (IEN) m/e 361,1 [(M + H)+, calculado para C16H20N6O2S 361,4].
5.6.80. Síntesis de 4-(6-((2-(2-ciano-N-metilacetamido)etM)ammo)imidazo[1,2-b]piridazm-3-il)benzamida
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Parte A. A/-(2-((3-bromoimidazo[1,2-¿)]piridazin-6-il)amino)etil)-2-ciano-N-metilacetamida
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El (2-((3-bromoimidazo[1,2-6]piridazin-6-il)amino)etil)(metil)carbamato de ferc-butilo se agitó en una solución de TFA/DCM (2:1) durante 0,5 h y después se concentró. La sal de amina-TFA resultante se aminó en las condiciones descritas en el ejemplo 5.6.61, parte C con ácido 2-cianoacético para obtener la amida con un rendimiento del 63 %.
Parte B. 4-(6-((2-(2-ciano-N-metilacetamido)etil)amino)imidazo[1,2-;b]piridazin-3-il)benzamida. La reacción de la amida con ácido (4-carbamoilfenil)borónico en condiciones de acoplamiento de Suzuki como se describe en el ejemplo 5.6.19 proporcionó el producto deseado con un rendimiento del 28%. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 6 ppm 2,87 (s, 1 H) 2,95 (s, 2 H) 3,56 - 3,67 (m, 4 H) 3,73 (s, 2 H) 7,16 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,94 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 8,00 - 8,06 (m, 2 H) 8,17 (d, J=8,38 Hz, 2 H) 8,21 - 8,28 (m, 1 H); LRMS (IEN) m/e 378,0 [(M + H)+, calculado para C19H19N7O2 377,0].
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Parte A. N-(terc-but¡l)-A/-met¡l-1H-¡m¡dazol-1-carboxam¡da:
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A una suspens¡ón de N, N'-carbon¡ld¡¡m¡dazol (CDI, 1,76 g, 11 mmol) en THF (18 ml) se le añad¡ó t-but¡lmet¡lam¡na (1,2 ml, 10 mmol). La reacc¡ón se calentó a reflujo durante una noche, después se enfr¡ó, se concentró, se recog¡ó con DCM y agua y se extrajo. La capa orgán¡ca (DCM) se secó con sulfato sód¡co anh¡dro, se f¡ltró y se concentró para dar Ñ-(ferc-but¡l)-W-met¡l-1H-¡m¡dazol-1-carboxam¡da en forma de un ace¡te pegajoso (0,27 g, rend¡m¡ento del 15 %). LRMS (IEN) m/e 182,1 [(M + H)+, calculado para C9H16N3O 182,2].
Parte B. 1-(terc-but¡l(met¡l)carbamo¡l)-3-met¡l-1H-¡m¡dazol-3-¡o:
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A una soluc¡ón de W-(ferc-but¡l)-W-met¡l-1H-¡m¡dazol-1-carboxam¡da (0,27 g, 1,5 mmol) en aceton¡tr¡lo (3 ml) se le añad¡ó yoduro de met¡lo (0,4 ml, 6,0 mmol). La reacc¡ón se concentró al vacío después de ag¡tarse a ta durante 24 h para dar 1-(ferc-but¡l(met¡l)carbamo¡l)-3-met¡l-1H-¡m¡dazol-3-¡o (0,28 g, 100 %).
Parte C. ferc-but¡l(met¡l)carbamato de 2-((3-bromo¡m¡dazo[1,2-8]p¡ndaz¡n-6-¡l)am¡no)et¡lo:
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A una soluc¡ón de 2-((3-bromo¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)etanol (0,35 g, 1,5 mmol) y 1-(ferc- but¡l(met¡l)carbamo¡l)-3-met¡l-1H-¡m¡dazol-3-¡o (0,30 g, 1,5 mmol) en THF/DMF (6,0 ml/3,0 ml) se le añad¡ó NaH (0,15 g, 60 % en ace¡te m¡neral, 2,5 mmol). La reacc¡ón se ag¡tó durante 24 h y después se detuvo con agua, se extrajo con éter, se concentró y se pur¡f¡có por cromatografía en columna ISCO para dar ferc-but¡l(met¡l)carbamato de 2-((3- bromo¡m¡dazo[1,2-6]p¡ndaz¡n-6-¡l)am¡no)et¡lo como producto (0,17 g, rend¡m¡ento del 31 %). LRMS (IEN) m/e 372,0 [(M + H)+, calculado para C-i4H2-iBrN5O2 371,2].
Parte D. ferc-but¡l(met¡l)carbamato de 2-((3-(3-metox¡p¡r¡d¡n-4-¡l)¡m¡dazo[1.2-¿]p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)et¡lo. El compuesto del título se obtuvo usando acoplam¡ento de Suzuk¡ como se descr¡be en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4; 8 ppm 8,70 (d, J=5,31 Hz, 1 H), 8,43 (s, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 7,73 (s, 1 H), 7,71 (s, 1 H), 6,84 (s, 1 H), 6,82 (s, 1 H), 4,31 (t, J = 5,68 Hz, 2 H), 4,10 (s, 3 H), 3,70 (t, J = 5,68 Hz, 2 H), 2,89 (s, 3 H), 1,35 (s, 9 H); LRMS (IEN) m/e 399,3 [(M + H)+, calculado para C20H27N6O3 399,5].
5.6.82. Síntesis de W-(2-¡sopropox¡et¡l)-3-(3-metox¡pmdm-4-M)¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-amma:
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El compuesto del título se obtuvo como se describe en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 6 ppm 8,66 (d, J=5,29 Hz, 1 H), 8,36 (s a, 1 H), 8,21 (d, J = 4,41 Hz, 1 H), 8,06 (s a, 1 H), 7,63 (d, J = 9,70 Hz, 1 H), 6,79 (d, J = 9,70 Hz, 1 H), 4,57 (s a, 1 H), 4,03 (s, 3 H), 3,58 - 3,67 (m, 3 H), 3,47 - 3,52 (m, 2 H), 1,11 (d, J = 6,17 Hz, 6 H); LRMS (IEN) m/e 328,1 [(M + H)+, calculado para C17H22N5O2 328,4].
5.6.83. Síntesis de éster isopropílico del ácido [2-(3-ciclopropil-imidazo[1,2-b]piridazm-6-ilammo)-etil]- isopropil-carbámico
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Parte A. Éster isopropílico del ácido [2-(3-bromo-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-etil1-¡soprop¡l-carbám¡co
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A una solución en atmósfera de N2, a temperatura ambiente, agitada rápidamente de N1-(3-bromoimidazo[1,2- d1piridazin-6-il)-N2-isopropiletano-1,2-diamina (945,0 mg, 3,2 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (0,7 ml, 3,8 mmol) en acetato de etilo (32 ml) se le añadió una solución 1,0 M de cloroformiato de isopropilo en tolueno (3,2 ml). Una vez completada, la reacción se lavó con salmuera, se secó (MgSO4) y se evaporó para proporcionar 1,2 g de sólido de color castaño. Este sólido se recristalizó en acetato de etilo heptano para proporcionar éster isopropílico del ácido [2-(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-et¡l]-¡soprop¡l-carbám¡co como 750 mg de polvo cristalino de color blanco, pf. 146-147 °C. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 1,17 (d, J=6,82 Hz, 12 H) 3,31- 3,35 (m, 2 H) 3,38 - 3,44 (m, 2 H) 4,80 (dt, J=12,06, 5,97 Hz, 1 H) 6,67 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,34 (t, J=5,68 Hz, 1 H) 7,49 (s, 1 H) 7,71 (d, J=9,60 Hz, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 20,44, 21,95, 47,01,67,46, 98,94, 112,84, 125,54, 130,42, 136,57, 154,10. LRMS (IEN) m/z 297,9/299,9 [(M+H)]+, calculado para C1sH22BrNsO2: 384,28.
Parte B. Éster isopropílico del ácido [2-(3-c¡cloprop¡l-¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-et¡l1-¡soprop¡l-carbám¡co. Una solución de agua al 10 % (v/v) en THF (25 ml) se añadió a una mezcla de éster isopropílico del ácido [2-(3-bromo- ¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-et¡l]-¡soprop¡l-carbámico (515,1 mg, 1,34 mmol), ciclopropiltrifluoroborato potásico [1065010-87-1] (396,8 mg, 2,7 mmol), carbonato de cesio [534-17-8] (1,3 g, 4,0 mmol) y complejo [1,1'- bis(difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II), con diclorometano [95464-05-4] (110,4 mg, 0,1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 50 ml. El recipiente de reacción se equipó con un condensador de reflujo y el sistema se recogió a través de 10 ciclos de evacuación/atmósfera de N2 mientras que se agitaba rápidamente. La reacción en atmósfera de N2, agitada rápidamente, se calentó a reflujo durante 4 días, después se enfrió y se filtró. El filtrado se repartió entre salmuera y acetato de etilo y el extracto orgánico de fase separada se secó (MgSO4) y se evaporó para dar un aceite de color negro que se purificó por RP-HPLC preparatoria para proporcionar 41,6 mg de éster isopropílico del éster [2-(3-c¡cloprop¡l-¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-6-¡lamino)-et¡l]-¡soprop¡l-carbám¡co en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 6 ppm 0,77 - 0,84 (m, 2 H) 0,98 -1,06 (m, 2 H) 1,20 - 1,32 (m, 14 H) 2,08 - 2,19 (m, 1 H) 3,43 - 3,50 (m, 2 H) 3,50 - 3,59 (m, 2 H) 6,61 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,08 (s, 1 H) 7,52 (d, J=9,70 Hz, 1 H). LRMS (IEN) m/z 346,2[(M+H)]+, calculado para C18H27N5O2: 345,45.
5.6.84. Síntesis de 2-(((3-(4-carbamoilfeml)imidazo[1,2-b]piridazm-6-il)ammo)metil)pirrolidm-1-carboxilato de (S)-íerc-butilo:
imagen193
El compuesto del título se obtuvo usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL-
d4) 8 ppm 8,24 - 8,34 (m, 2 H), 7,97 - 8,01 (m, 2 H), 7,87 (s, 1 H), 7,66 (d, J = 8,84 Hz, 1 H), 6,77 (s a, 1 H), 4,17 (s a, 1 H), 3,68 (s a, 1 H), 3,44 - 3,55 (m, 1 H), 3,35 - 3,44 (m, 3 H), 1,91-2,05 (m, 3 H), 1,87 (s a, 1 H), 1,38 - 1,48 (m, 5 H), 1,34 (s a, 4 H); LRMS (IEN) m/e 437,2 [(M + H)+, calculado para C23H29N6O3 437,5].
5 5.6.85. Síntesis de 2-(((3-(4-(ammomet¡l)feml)¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-M)ammo)metM)p¡rroMdm-1-carbox¡lato
de (S)-íerc-butNo:
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10 El compuesto del título se obtuvo usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL- d4) 8 ppm 8,27 (s a, 2 H), 7,82 (s a, 1 H), 7,66 (d, J = 9,35 Hz, 1 H), 7,58 (d, J = 8,34 Hz, 2 H), 6,77 (d, J = 9,09 Hz, 1 H), 4,18 (s, 3 H), 3,36-3,50 (m, 4 H), 1,85 - 2,04 (m, 4 H), 1,33 - 1,48 (m, 9 H); LRMS (IEN) m/e 437,2 [(M + H)+, calculado para C23H29N6O3 437,5].
15 5.6.86. Síntes¡s de 2-(((3-(4-(ammomet¡l)feml)¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡dazm-6-M)ammo)metM)p¡rrol¡dm-1-carbox¡lato
de (R)-íerc-butNo:
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20 El compuesto del título se obtuvo usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL- d4) 8 ppm 8,27 (s a, 2 H), 7,82 (s a, 1 H), 7,66 (d, J = 9,35 Hz, 1 H), 7,58 (d, J = 8,34 Hz, 2 H), 6,77 (d, J = 9,09 Hz, 1 H), 4,18 (s, 3 H), 3,36-3,50 (m, 4 H), 1,85 - 2,04 (m, 4 H), 1,33 - 1,48 (m, 9 H); LRMS (IEN) m/e 437,2 [(M + H)+, calculado para C23H29N6O3 437,5].
25 5.6.87. Síntes¡s de N-(2-¡sopropox¡et¡l)-3-(¡sot¡azol-5-¡l)¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡dazm-6-amma:
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El compuesto del título se obtuvo usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL- 30 d4) 8 ppm 8,60 (d, J=2,02 Hz, 1 H), 8,45 (s, 1 H), 8,01 (d, J = 1,77 Hz, 1 H), 7,95 (d, J = 9,85 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 9,85 Hz, 1 H), 3,80 - 3,85 (m, 2 H), 3,69 - 3,77 (m, 3 H), 1,21 (d, J = 6,32 Hz, 6 H); LRMS (IEN) m/e 304,1 [(M + H)+, calculado para C14H18N5OS 304,4].
5.6.88. Síntesis de 2-(2-((3-(4-(ammomet¡l)feml)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-¡l)ammo)et¡l)p¡rrol¡dm-1-carbox¡lato de ferc-but¡lo:
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5
El compuesto del título se obtuvo usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL- dA) 8 ppm 8,53 (s, 1 H), 8,27 (d, J = 8,34 Hz, 2 H), 7,81 (s, 1 H), 7,64 (d, J = 9,60 Hz, 1 H), 7,57 (d, J = 8,34 Hz, 2 H), 6,73 (d, J = 9,60 Hz, 1 H), 4,18 (s, 2 H), 3,92 - 3,98 (m, 1 H), 3,52 (s a, 1 H), 3,35 - 3,46 (m, 3 H), 1,67-2,22 (m, 6 H), 1,48 (s a, 4 H), 1,28 (s a, 5 H); LRMS (IEN) m/e 437,3 [(M + H)+, calculado para C24H33N6O2 437,5].
10
5.6.89. Síntes¡s de 3-(4-(ammomet¡l)feml)-W-(2-(c¡clopent¡lox¡)etM)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-amma
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15 Parte A. 3-bromo-N-(2-(c¡clopent¡lox¡)et¡l)¡m¡dazo[1,2-81p¡r¡daz¡n-6-am¡na
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La 2-(c¡clopent¡lox¡)etanam¡na se h¡zo reacc¡onar con 3-bromo-6-fluoro¡m¡dazo[1,2-£)]p¡ndaz¡na, usando las 20 cond¡c¡ones de desplazamiento de am¡na descr¡tas en el ejemplo 5.6.42, parte A para proporc¡onar un producto al 69 %.
Parte B. 4-(6-((2-(c¡clopent¡lox¡)et¡l)am¡no)¡m¡dazo[1,2-81p¡r¡daz¡n-3-¡l)benc¡lcarbamato de terc-but¡lo
25
La 3-bromo-W-(2-(c¡clopent¡lox¡)et¡l)¡m¡dazo[1,2-6]pmdaz¡n-6-am¡na se acopló con ác¡do (4-(((terc-butox¡-
carbon¡l)am¡no)met¡l)fen¡l)borón¡co en las cond¡c¡ones de acoplam¡ento de Suzuk¡ como se descr¡be en el ejemplo
5.6.76, Parte B para obtener el 70 % del producto.
30
Parte C. 3-(4-(am¡nomet¡l)fen¡l)-N-(2-(c¡clopent¡lox¡)et¡l)¡m¡dazo[1,2-81p¡r¡daz¡n-6-am¡na. La protecc¡ón de terc- butox¡carbon¡lo se ret¡ró usando 10 equ¡valentes de AcCl en MeOH a 0 °C durante 4 h para obtener un rend¡m¡ento del 100 % del compuesto deseado. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 1,55 (d, J=3,54 Hz, 2 H) 1,63 -1,81 (m, 6 H) 3,57 (t, J=5,31 Hz, 2 H) 3,67 (c, J=5,05 Hz, 2 H) 3,93 - 4,05 (m, 1 H) 4,21- 4,31 (m, 2 H) 7,29 - 7,41 (m, 1 H)
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7,70 (d, J=8,08 Hz, 2 H) 7,96 - 8,05 (m, 1 H) 8,18 - 8,25 (m, 2 H) 8,25 - 8,31 (m, 1 H); RMN 13C (101 MHz, METANOL-c/4) 8 ppm 24,59 (s, 1 C) 33,34 (s, 1 C) 43,09 (s, 1 C) 44,12 (s, 1 C) 67,41 (s, 1 C) 83,26 (s, 1 C) 120,08 (s, 1 C) 121,33 (s, 1 C) 121,60 (s, 1 C) 128,35 (s, 1 C) 129,81 (s, 1 C) 130,45 (s, 1 C) 130,65 (s, 1 C) 134,28 (s, 1 C)
135,94 (s, 1 C) 146,70 - 146,90 (m, 1 C) 157,40 (s, 1 C); LRMS (IEN) m/e 352,0 [(M + H)+, calculado para C26H25N5O 5 351,0].
5.6.90. Síntesis de 2-(((3-v¡ml¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-¡l)ammo)met¡l)p¡rrol¡dm-1-carbox¡lato de (S)- isopropilo:
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El compuesto del título se obtuvo usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL- d4) d ppm 7,52 - 7,59 (m, 2 H), 6,95 - 7,00 (m, 1 H), 6,68 (d, J = 9,60 Hz, 1 H), 6,20 (d, J = 1,52 Hz, 1 H), 6,16 (d, J = 1,52 Hz, 1 H), 5,37 (d, J = 1,52 Hz, 1 H), 5,34 (d, J = 1,77 Hz, 1 H), 4,88 (quin, J = 6,25 Hz, 1 H), 4,22 (Rs, 1 H), 3,40 15 - 3,64 (m, 4 H), 1,87 - 2,05 (m, 4 H), 1,18 - 1,25 (m, 6 H); LRMS (IEN) m/e 330,3 [(M + H)+, calculado para
C17H24N5O2 330,4].
5.6.91. Síntesis de 2-(((3-(prop-1-en-2-¡l)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-¡l)ammo)met¡l)p¡rrol¡dm-1-carboxilato de (S)- ¡soprop¡lo:
20
imagen202
El compuesto del título se obtuvo usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL- d4) 8 ppm 7,60 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 7,47 (s, 1 H), 6,70 (d, J = 9,60 Hz, 1 H), 6,43 (s, 1 H), 5,27 (s, 1 H), 4,86 (dt, J = 25 12,44, 6,28 Hz, 1 H), 4,21 (s a, 1 H), 3,54 - 3,61 (m, 1 H), 3,35 - 3,50 (m, 3 H), 2,23 (s, 3 H), 1,86 - 2,05 (m, 4 H),
1,21 (dd, J = 12,13, 6,06 Hz, 6 H); LRMS (IEN) m/e 344,2 [(M + H)+, calculado para C18H26N5O2 344,4].
5.6.92. Síntesis de 2-(((3-ciclopropMimidazo[1,2-b]piridazm-6-M)ammo)metM)pirrolidm-1-carboxilato de (S)- ¡soprop¡lo:
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El compuesto del título se obtuvo usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL- d4) 8 ppm 7,85 (m, J=9,85 Hz, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,17 - 7,21 (m, 1 H), 4,84 - 4,90 (m, 1 H), 4,25 (d, J = 6,57 Hz, 1 35 H), 3,63 - 3,69 (m, 1 H), 3,42 - 3,57 (m, 3 H), 2,24 - 2,31 (m, 1 H), 1,90 - 2,08 (m, 4 H), 1,16 - 1,25 (m, 8 H), 0,90 -
0,94 (m, 2 H); LRMS (IEN) m/e 344,2 [(M + H)+, calculado para C18H26N5O2 344,4].
5.6.93. Síntesis de N-(2-(ciclopentMoxi)etM)-3-(2-metoxipiridm-3-il)imidazo[1,2-b]piridazm-6-amma:
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El compuesto del título se obtuvo usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL-
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d4) 8 ppm 8,76 (dd, J=7,58, 1 77 Hz, 1 H), 8,13 (dd J = 4,80, 1,77 Hz, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,64 (d, J = 9,60 Hz, 1 H), 7,08 (dd J = 7,45, 4,93 Hz, 1 H), 6,76 (d, J = 9,60 Hz, 1 H), 4,05 (s, 3 H), 3,97 (dd J = 5,18, 3,41 Hz, 1 H), 3,64 (t, J =
5,94 Hz, 2 H), 3,51 (t, J = 5,94 Hz, 2 H), 1,62 - 1,76 (m, 6 H), 1,50 - 1,58 (m, 2 H); LRMS (IEN) m/e 354,2 [(M + H)+, calculado para C19H24N5O2 354,4].
5.6.94. Síntesis de 3-(((3-(3-metox¡p¡r¡dm-4-¡l)¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡dazm-6-¡l)ammo)met¡l)p¡rrol¡dm-1-carbox¡lato de (S)-terc-but¡lo:
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El compuesto del título se obtuvo usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL- d4) 8 ppm 8,64 (d, J=5,05 Hz, 1 H), 8,43 (s, 1 H), 8,29 (d, J = 5,05 Hz, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 7,69 (d, J = 9,60 Hz, 1 H), 6,80 (d, J = 9,85 Hz, 1 H), 4,08 (s, 3 H), 3,2 - 3,56 (m, 5 H), 3,36 (s a, 1 H), 2,69 (m, 1 H), 2,08 (m, 1 H), 1,78 (m, 1 H), 1,44 (s, 9 H); LRMS (IEN) m/e 425,3 [(M + H)+, calculado para C22H29N6O3 425,5].
5.6.95. Síntes¡s de 2-(((3-bromo¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡dazm-6-¡l)ammo)met¡l)p¡rrol¡dm-1-carbox¡lato de (S)-terc- but¡lo:
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El compuesto del título se obtuvo usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL- d4) 8 ppm 7,57 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 6,73 (d, J = 9,60 Hz, 1 H), 3,55 - 3,61 (m, 1 H), 3,39 - 3,52 (m, 3 H), 3,37 (s, 1 H), 2,08 (s a, 1 H), 1,87 - 2,03 (m, 3 H), 1,43 (s, 9 H); LRMS (IEN) m/e 398,1 [(M + H)+, calculado para C-i6H22BrN5O2 397,3].
5.6.96. Síntes¡s de 2-(((3-c¡ano¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡dazm-6-¡l)ammo)met¡l)p¡rrol¡dm-1-carbox¡lato de (S)- ¡soprop¡lo:
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Una solución de 2-(((3-bromoimidazo[1,2-d]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-Zso-propilo (300 mg, 0,79 mmol), NaCN (46 mg, 0,94 mmol), Cul (15 mg, 0,08 mmol), Kl (27 mg, 0,16 mmol) y N1,N2-dimetiletano- 1,2-diamina (0,085 ml, 0,79 mmol) en tolueno (0,8 ml) se agitó a 110 °C durante 12 h. La reacción se enfrió, se concentró, se recogió con EtOAc y agua, se extrajo y se secó la capa orgánica con MgSO4. La capa orgánica se concentró y se purificó por ISCO (MeOH al 0-5%/DCM), después siguiendo HPLC PREP (neutral) para dar 2-(((3- cianoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-isopropilo (63 mg, rendimiento del 25%). RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,00 (s, 1 H), 7,72 (d, J = 9,85 Hz, 1 H), 6,91 (d, J = 9,85 Hz, 1 H), 4,20 (m, 1 H), 3,38 - 3,61 (m, 4 H), 1,97 - 2,05 (m, 4 H), 1,16 -1,25 (m, 6 H); LRMS (IEN) m/e 329,2 [(M + H)+, calculado para C16H21N6O2 329,4].
5.6.97. Síntes¡s de (3-C¡clopent-1-eml-¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡dazm-6-¡l)-[2-(2-etox¡-feml)-et¡l]-amma
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Parte A. (3-Bromo-¡m¡dazo[1.2-¿1p¡r¡dazin-6-¡l)-[2-(2-etox¡-fen¡l)-et¡l1-am¡na
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Una mezcla de 3-bromo-6-fluoro-¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡na (648 mg, 3 mmol). 2-etox¡-fenet¡lam¡na (1 g. 6 mmol) y tr¡et¡lam¡na (1 ml) en alcohol ¡sopropíl¡co (2 ml) se calentó en un m¡croondas a 140 °C durante 20 m¡n. La mezcla de reacc¡ón se concentró y el res¡duo se somet¡ó a ISCO (columna de 40 g). para dar el compuesto del título (980 mg). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1.47 (t. J=6,95 Hz. 3 H) 3.04 (t. J=6,69 Hz. 2 H) 3.64 - 3.72 (m. 2 H)
4.06 - 4.17 (m. 2 H) 4.97 (s a. 1 H) 6,40 (d. J=9,60 Hz. 1 H) 6.87 - 7.02 (m. 2 H) 7.17 - 7.32 (m. 2 H) 7.47 (s. 1 H) 7.54 (d. J=9,60 Hz. 1 H). LRMS (IEN) m/z 361 y 363,1 [(M+H)]+, calculado para C^H^Br^O: 361,24.
Parte B. (3-C¡clopent-1-en¡l-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-6-¡l)-[2-(2-etox¡-fen¡l)-et¡l1-am¡na. Una mezcla de (3-bromo- ¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-[2-(2-etox¡-fen¡l)-et¡l]-am¡na (90 mg. 0.25 mmol). 2-c¡clopent-1-en¡l-4,4.5.5-tetramet¡l- [1,3,2]d¡oxaborolano (97 mg. 0.5 mmol). K2CO3 (104 mg. 0.75 mmol) y d¡clorob¡s(tr¡fen¡lfosf¡na)palad¡o (II) (8.8 mg. 0,013 mmol) en MeCN/agua (2.8 ml/0,7 ml) se calentó en un m¡croondas a 150 °C durante 15 m¡n. La capa de agua se ret¡ró y la capa orgán¡ca se concentró. El res¡duo se somet¡ó a ISCO. El producto se pur¡f¡có ad¡c¡onalmente med¡ante preparat¡va para dar el compuesto del título (60 mg).
RMN 1H (400 MHz. CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,46 (t. J=6,95 Hz. 3 H) 1,99 - 2,07 (m. 2 H) 2,64 - 2,70 (m. 2 H) 2,82 - 2,88 (m. 2 H) 3,06 (t. J=6,62 Hz. 2 H) 3,66 - 3,72 (m. 2 H) 4,11 (c. J=7,06 Hz. 2 H) 4,77 - 4,84 (m. 1 H) 6,37 (d. J=9,70 Hz. 1 H) 6,88 - 6,95 (m. 2 H) 7,02 (t. J=1,98 Hz. 1 H) 7,18 - 7,27 (m. 2 H) 7,46 (s. 1 H) 7,62 (d. J=9,48 Hz. 1 H). LRMS (IEN) m/z 349,2 [(M+H)]+, calculado para C21H24N4O: 348,45.
5.6.98. Síntesis de (S)-ferc-but¡l-2-(((3-(2-oxop¡rrol¡dm-1-M)¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-¡l)ammo)met¡l)p¡rrol¡dm-1- carboxilato
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Parte A. 4-bromo-N-(6-cloro¡m¡dazor1.2-¿)lp¡r¡daz¡n-3-¡l)butanam¡da
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A 1.0 g (5,930 mmol) de 6-cloro¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡n-3-am¡na d¡suelta en 15 ml de THF se le añad¡ó cloruro de 4- bromobutanoílo (1,21 g. 6,52 mmol) y p¡r¡d¡na (0,96 ml. 11,86 mmol). Esta mezcla se ag¡tó durante 1 h a ta y después se d¡luyó con 30 ml de EtOAc y se ¡nact¡vó con NaHCO3 ac. La capa orgán¡ca se separó y se lavó con salmuera. se secó sobre MgSO4 y se concentró. El sól¡do obten¡do (1,39 g. rend¡m¡ento del 74%) fue lo suf¡c¡entemente puro como para usarse en la s¡gu¡ente etapa s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal.
Parte B. 1-(6-cloro¡m¡dazor1.2-8lp¡r¡daz¡n-3-¡l)p¡rrol¡d¡n-2-ona
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A 1.0 g de 4-bromo-W-(6-cloro¡m¡dazo[1.2-8]p¡r¡daz¡n-3-¡l)butanam¡da (3,15 mmol) d¡suelta en 39 ml de DMF se le
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añadió NaH (189 mg, 4,72 mmol) y se agitó a ta durante 0,5 h. Se diluyó con 50 ml de EtOAc y se separó la capa orgánica. Se lavó dos veces con agua, una vez con salmuera y se secó sobre MgSO4. Se concentró para obtener el producto 0,49 g (66 %). No se necesitó purificación.
Parte C. 2-(((3-(2-oxop¡rrol¡d¡n-1-¡l)¡m¡dazo[1.2-¿)lp¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)met¡l)p¡rrol¡d¡n-1-carbox¡lato de (S)-terc-butilo. La 1-(6-cloro¡m¡dazo[1,2-£)]p¡ndaz¡n-3-¡l)p¡rrol¡d¡n-2-ona se hizo reaccionar con 2-(aminometil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-terc-butilo usando las condiciones de desplazamiento de amina descritas en el ejemplo 5.6.42, Parte A para proporcionar el producto deseado con un rendimiento del 73 %. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,38 - 1,46 (m, 10 H) 1,71 (s a, 1 H) 1,80 -1,91 (m, 2 H) 1,95 -2,08 (m, 1 H) 2,22 (quin, J=7,55 Hz, 2 H) 2,50 - 2,58 (m, 2 H)
3,22 - 3,41 (m, 4 H) 3,90 (c, J=6,69 Hz, 2 H) 4,16 (s a, 1 H) 6,40 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,44 (s, 1 H) 7,54 (d, J=9,70 Hz, 1 H); LRMS (IEN) m/401,0 [(M + H)+, calculado para C20H28N6O3 400,0].
5.6.99. Síntesis de 1-{2-[3-(4-AmmometN-feml)-imidazo[1,2-6]pindazm-6-Nammo]-etN}-3-ferc-butM-
imidazolidin-2-ona
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Parte A. 1-r2-(3-Bromo-¡m¡dazor1,2-¿)lp¡ndaz¡n-6-¡laiTi¡no)-et¡n-3-ferc-but¡l-¡iTi¡dazol¡d¡n-2-ona
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Una mezcla de 1-ferc-butil-imidazolidin-2-ona (1,42 g, 10 mmol) y NaH (600 mg, dispersión oleosa al 60 %, 15 mmol) en THF (50 ml) se agitó a ta durante 2 h. Después se enfrió a 0 °C. Se añadió lentamente una solución de bromoacetonitrilo (1,4 ml, 20 mmol) en THF (30 ml) a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó a ta durante una noche. La mezcla se trató con una cantidad pequeña de agua y después la mezcla se pasó a través de un lecho de sílice. El filtrado se concentró y el residuo se sometió a una columna corta para dar el producto en bruto que se purificó adicionalmente por otra columna corta para dar el producto.
A una solución del producto anterior (1,6 g, 8,8 mmol) en THF (20 ml) a 0 °C se le añadió una solución de BH3THF en THF (1 M, 100 ml). La mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 30 min. Después a ta durante 4 h. Después, la mezcla se enfrió a 0 °C de nuevo y se trató con HCl frío (6 N, 20 ml) a pH ácido fuerte. El disolvente orgánico se retiró a presión reducida. El residuo se trató con NaOH (4 N, ~30 ml) a pH>10, después se extrajo con EtOAc (5 x75 ml). Los extractos combinados se secaron (Na2SO4) y se concentraron para dar el producto deseado.
Una mezcla del producto anterior (350 mg, 1,89 mmol), 3-bromo-6-fluoro-imidazo[1,2-6]piridazina (216 mg, 1 mmol) y trietilamina (0,5 ml) en alcohol isopropílico (1,5 ml) se calentó en un microondas a 140 °C durante 20 min. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se sometió a ISCO (columna de 40 g), para dar el compuesto del título (180 mg). LRMS (IEN) m/z 381 y 383,2[(M+H)]+, calculado para C-^-iBr^O: 381,28.
Parte B. 1-{2-r3-(4-Am¡nomet¡l-fen¡l)-¡m¡dazor1,2-¿)lp¡r¡daz¡n-6-¡laiTi¡nol-et¡l}-3-ferc-but¡l-¡iTi¡dazol¡d¡n-2-ona. Una
mezcla de 1-[2-(3-bromo-im¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-et¡l]-3-ferc-but¡l-¡m¡dazol¡d¡n-2-ona (75 mg, 0,2 mmol), clorhidrato del ácido (4-aminometilfenil)borónico (49 mg, 0,26 mmol), K2CO3 (83 mg, 0,6 mmol) y dicloro- bis(trifenilfosfina)paladio (II) (7 mg, 0,01 mmol) en MeCN/agua (2,8 ml/0,7 ml) se calentó en un microondas a 150 °C durante 15 min. La mezcla de reacción se diluyó con MeCN y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC preparativa para dar el compuesto del título (64,8 mg). RMN 1H (400 MHz, METANOL-c/4) 8 ppm 1,26 (s, 9 H) 3,24 - 3,31 (m, 4 H) 3,40 (t, J=5,95 Hz, 2 H) 3,52 (t, J=5,95 Hz, 2 H) 4,17 (s, 2 H) 6,70 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,54 - 7,63 (m, 3 H) 7,77 (s, 1 H) 8,19 - 8,23 (m, 2 H) 8,56 (s, 1 H). LRMS (IEN) m/z 408,4 [(M+H)]+, calculado para C22H29N7O: 407,52.
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5.6.100. Síntesis de 2-(((3-(4-(ammomet¡l)feml)¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡dazm-6-M)ammo)metM)p¡per¡dm-1-carbox¡lato de (S)-íerc-butMo
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Parte A. 2-(((3-bromo¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)met¡l)p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato de (S)-terc-but¡lo
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La reacc¡ón de 3-bromo-6-fluoro¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡na y 2-(am¡nomet¡l)p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato de (S)-terc-but¡lo en las cond¡c¡ones de desplazam¡ento de am¡na descr¡tas en el ejemplo 5.6.42. La Parte A. d¡o la ar¡l am¡na con un rend¡m¡ento del 38 %.
Parte B. 2-(((3-(4-(am¡nomet¡l)fen¡l)¡m¡dazo[1.2-¿1p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)met¡l)-p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato de (S)-terc-but¡lo. El 2-(((3-bromo¡m¡dazo[1.2-61p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)met¡l)p¡per¡d¡n-1-carbox¡lato de (S)-terc-but¡lo se somet¡ó a la reacc¡ón de acoplam¡ento de Suzuk¡ descr¡ta en el ejemplo 5.6.19. La Parte B con los respect¡vos ác¡dos borón¡cos para proporc¡onar los productos 2-(((3-(4-(am¡nomet¡l)fen¡l)¡m¡dazo[1.2-£)1p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)met¡l)p¡per¡d¡n-1- carbox¡lato de (S)-terc-but¡lo esperados. RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) 6 ppm 1.14 (s a. 9 H) 1.59 - 1.73 (m. 5 H) 1.78 (s a. 1 H) 3.00 (t. J=12.63 Hz. 1 H) 3.50 (dd. J=14.15. 4.55 Hz. 1 H) 3.67 - 3.80 (m. 1 H) 4.00 (d. J=12.38 Hz. 1 H) 4.19 (s. 2 H) 4.87 (s a. 1 H) 6.72 (d. J=9.60 Hz. 1 H) 7.57 (m. J=8.34 Hz. 2 H) 7.67 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 7.82 (s. 1 H) 8.27 (m. J=8.34 Hz. 2 H); LRMS (IEN) m/437.0 [(M + H)+. calculado para C24H32N6O2 436.01
5.6.101. Síntes¡s de 3-(4-(ammometM)feml)-W-((2-met¡ltetrah¡drofurano-2-¡l)met¡l)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6- am¡na:
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El compuesto del título se obtuvo usando el enfoque descr¡to en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz. METANOL- d4) 6 ppm 8.55 (s. 1 H). 8.25 (d. J = 7.83 Hz. 2 H). 7.80 (s. 1 H). 7.66 (d. J = 9.60 Hz. 1 H). 7.57 (d. J = 8.08 Hz. 2 H). 6.83 (d. J = 9.60 Hz. 1 H). 4.17 (s. 2 H). 3.91 (t. J = 6.19 Hz. 2 H). 3.56 (d. J = 13.64 Hz. 1 H). 3.46 (d. J = 13.64 Hz. 1 H). 1.97 - 2.06 (m. 3 H). 1.70 - 1.80 (m. 1 H). 1.31 (s. 3 H); LRMS (IEN) m/e 338.2 [(M + H)+. calculado para C19H24N5O 338.41.
5.6.102. Síntes¡s de éster ¡sopropíl¡co del ác¡do 4-(3-cromo-¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-¡l)-p¡perazm-1- carboxíl¡co
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Parte A. Éster terc-butíl¡co del ácido 4-í3-bromo-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1-carboxíl¡co
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Se mol¡eron juntos 3-bromo-6-cloro-¡m¡dazo[1,2-b)]p¡r¡daz¡na [13526-66-4] (1.1 g. 4.5 mmol) y p¡peraz¡na [110-85-0] (3.6 g. 41.8 mmol) en un mortero a una mezcla ínt¡ma y se transf¡r¡eron a un matraz de fondo redondo de 15 ml que contenía una barra ag¡tadora magnét¡ca. El matraz se equ¡pó con un condensador de reflujo. se somet¡ó a atmósfera de N2 y el rec¡p¡ente de reacc¡ón se sumerg¡ó en un baño de ace¡te a temperatura amb¡ente. M¡entras la mezcla sól¡da pura se ag¡taba. el baño se calentó a 120 °C durante 0.5 h y se mantuvo a la temperatura nom¡nal durante un total de 17 h. El baño se ret¡ró y la reacc¡ón fund¡da se dejó enfr¡ar y sol¡d¡f¡car. La masa sól¡da se d¡solv¡ó en metanol. se transf¡r¡ó a un embudo de decantac¡ón y se repart¡ó entre salmuera (pH se ajustó a 10 con h¡dróx¡do sód¡co acuoso 3 N) y acetato de et¡lo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4) y se evaporó para proporc¡onar 0.9 g de 3-bromo-6-p¡peraz¡n-1-¡l-¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡na en forma de un sól¡do de color amar¡llo claro que se usó s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. LRMS (IEN) m/z 282.1/284.1 [(M+H)]+. calculado para C1üH12BrN5: 282.14.
Una soluc¡ón de 3-bromo-6-p¡peraz¡n-1-¡l-¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡na (4.3 g. 15.3 mmol). d¡carbonato de d¡-t-but¡lo [24424-99-5] (3.7 g. 16.9 mmol) y base de Hun¡g [7087-68-5] (3.0 ml. 17.2 mmol) en acetato de et¡lo (160 ml) se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 17 h. después se lavó con salmuera. se secó (CaSO4). y se evaporó para produc¡r 5.5 g de sól¡do de color amar¡llo que se recr¡stal¡zó a part¡r de acetato de et¡lo/heptano para proporc¡onar 2.9 g de éster terc-butíl¡co del ác¡do 4-(3-bromo-¡m¡dazo [1.2-b]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1-carboxíl¡co en forma de un polvo de color blanco. 178-180 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 6 ppm 1.43 (s. 9 H) 3.27 - 3.31 (m. 3 H) 3.45 - 3.56 (m. 8 H) 7.24 (d. J=9.92 Hz. 1 H) 7.61 (s. 1 H) 7.90 (d. J=9.92 Hz. 1 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-d6) 6 ppm 27.88. 45.00. 78.96. 99.17. 110.57. 125.97. 131.45. 136.41. 153.72. 154.90. LRMS (IEN) m/z 382.1/384.1 [(M+H)]+. calculado para C-i5H20BrN5O2: 382.26.
Parte B. D¡clorh¡drato de 3-bromo-6-p¡peraz¡n-1-¡l-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡na
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Se añad¡ó ác¡do clorhídr¡co concentrado (6.4 ml) a una soluc¡ón de éster terc-butíl¡co del ác¡do 4-(3-bromo- ¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1-carboxíl¡co 2.9 g. 7.6 mmol) en metanol (150 ml). se dejó ag¡tar a temperatura amb¡ente durante una noche. después se evaporaron a sequedad. El sól¡do de color amar¡llo resultante se d¡solv¡ó en metanol y la soluc¡ón ag¡tada se d¡luyó con éter d¡etíl¡co para prec¡p¡tar d¡clorh¡drato de 3-bromo-6- p¡peraz¡n-1-¡l-¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡na como 2.6 g de polvo de color blanco. pf. 275-276 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 6 ppm 3.24 (s a. 4 H) 3.82 - 3.92 (m. 4 H) 7.57 (d. J=10.11 Hz. 1 H) 8.05 (s. 1 H) 8.12 (d. J=10.10 Hz. 1 H) 9.70 (s a. 1 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-d6) 6 ppm 41.86. 42.37. 101.30. 114.15. 124.22. 127.20. 134.76. 155.43. LRMS (IEN) m/z 282.1/284.1 [(M+H)]+. calculado para C^H^Br^: 282.14.
Parte C. Éster ¡sopropíl¡co del ác¡do 4-(3-bromo-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1-carboxíl¡co.
A una soluc¡ón en atmósfera de N2. a temperatura amb¡ente. ag¡tada ráp¡damente de 3-bromo-6-p¡peraz¡n-1-¡l- ¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡na (0.9 g. 3.1 mmol) y base de Hun¡g [7087-68-5] (0.8 ml. 4.6 mmol) en acetato de et¡lo (60 ml) se le añad¡ó una soluc¡ón 1.0 M de cloroform¡ato de ¡soprop¡lo en tolueno (3.3 ml). Una vez completada. la reacc¡ón se lavó con salmuera. se secó (MgSO4). se precargó sobre gel de síl¡ce. se somet¡ó a cromatografía (Gel de Síl¡ce. eluyendo con acetato de et¡lo al 100%) y se cr¡stal¡zó a part¡r de heptano para proporc¡onar 717.7 mg de polvo cr¡stal¡no de color blanco. pf. 123-124 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 6 ppm 1.22 (d. J=6.32 Hz. 6 H) 3.44 - 3.54 (m. 4 H) 3.67 - 3.79 (m. 4 H) 4.82 (sept. J=6.23 Hz. 1 H) 6.77 (d. J=7.83 Hz. 1 H) 7.97 (s. 1 H) 8.69 (d. J=7.83 Hz. 1 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-d6) 6 ppm 21.94. 42.80. 43.87. 68.17. 77.32. 97.66. 136.47. 143.87. 144.40. 154.29. 155.64. LRMS (IEN) m/z 368.0/370.0 [(M+H)]+. calculado para C14H1sBrN5O2: 368.24.
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Este compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.111 a partir de éster isopropílico del ácido 4-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-piperazin-1-carboxílico (281,1 mg, 0,8 mmol) e hidrato del ácido 3- metoxipiridin-4-borónico [1072952-50-1] (217,4 mg, 1,2 mmol) para proporcionar 209,4 mg de diclorhidrato del éster isopropílico del ácido 4-[3-(3-metoxi-piridin-4-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazin-1-carboxílico en forma de un polvo de color blanco, pf. 217-218 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz, DIVISOR) 6 ppm 1,23 (d, J=6,32 Hz, 5 H) 2,51 (dt, J=3,73, 1,80 Hz, 3 H) 3,54 - 3,60 (m, 4 H) 3,61- 3,67 (m, 4 H) 4,18 (s, 3 H) 4,83 (quin, J=6,25 Hz, 1 H) 7,66 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,21 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,64 - 8,67 (m, 2 H) 8,77 (s, 1 H) 9,08 (d, J=5,81 Hz, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-cfe) 6 ppm 21,96, 42,58, 45,26, 57,69, 68,22, 115,12,119,36, 121,73, 124,86, 126,61,135,30, 136,82, 152,56, 154,26, 155,31. LRMS (IEN) m/z 397,2 [(M+H)]+, calculado para C26H24N6O3: 396,45.
5.6.104. Síntesis de 2-(((3-etilimidazo[1,2-b]piridazm-6-il)ammo)metil)pirrolidm-1-carboxilato de (S)-terc- butilo:
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A una solución de PdC^dppf (25 mg, 0,03 mmol) y 2-(((3-bromoimidazo[1,2-d]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1- carboxilato de (S)-terc-butilo (100 mg, 0,2 mmol) en dioxano (2 ml) se le añadieron dietilcinc (0,24 ml, 1 M en hexano), DiBAL-H (0,008 ml, 1 M en tolueno) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a 100 °C y se agitó durante 2 h. Separado por filtración en celite y se concentró el filtrado, se purificó por HPLC Prep (neutral) para dar 2-(((3-etilimidazo[1,2-d]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-terc-butilo en forma de un aceite. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 6 ppm 7,55 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 7,22 (s, 1 H), 6,66 (d, J = 9,60 Hz, 1 H), 4,18 (s a, 1 H), 3,55 (s a, 1 H), 3,37 - 3,49 (m, 3 H), 2,91 (c, J = 7,49 Hz, 2 H), 1,87 - 2,07 (m, 4 H), 1,44 (s a, 9 H), 1,36 (t, J=7,45 Hz, 3 H); LRMS (IEN) m/e 346,3 [(M + H)+, calculado para C18H28N5O2 346,4.
5.6.105. Síntesis de éster terc-butílico del ácido (S)-2-(imidazo[1,2-b]piridazm-6-ilammometil)-pirrolidm-1- carboxílico
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n-Butillitio 1,6 M en hexanos (5,8 ml, 9,3 mmol) se introdujo por jeringa en una solución en atmósfera de N2, incolora, agitada de éster terc-butílico del ácido (S)-2-[(3-bromo-imidazo[1,2-d]piridazin-6-ilamino)-metil]-pirrolidin-1-carboxílico (1,8 g, 4,6 mmol) en THF anhidro (100 ml) se mantuvo a -73 °C. La solución de reacción se volvió inmediatamente de color pardo y se dejó en agitación durante 5 minutos. El aril litio generado se inactivó mediante la adición cuidadosa de NH4Cl acuoso saturado (2 ml). La solución de reacción se repartió entre salmuera y acetato de etilo, el extracto se secó (CaSO4) y el producto en bruto se sometió a cromatografía ultrarrápida (gel de sílice, eluyendo con 10 % (v/v metanol/acetato de etilo) y se cristalizó a partir de acetato de etilo/heptano para proporcionar éster terc- butílico del ácido S)-2-(imidazo[1,2-d]piridazin-6-ilaminometil)-pirroMdin-1-carboxílico como 1,5 g de polvo de color blanquecino, pf. 161-162 °C. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 1,40 (s, 9 H) 1,72 -1,95 (m, 4 H) 3,10 - 3,22 (m, 1 H) 3,28 (s a, 2 H) 3,41- 3,53 (m, 1 H) 3,92 - 4,05 (m, 1 H) 6,65 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 6,96 (s a, 1 H) 7,36 (d, J=0,76 Hz, 1 H) 7,66 (d, J=9,60 Hz, 2 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 23,15, 28,13, 43,14, 45,96, 46,36, 55,57, 56,15, 78,30, 112,50, 116,01, 125,26, 130,32, 135,78, 153,75. LRMS (IEN) m/z 318,3[(M+H)]+, calculado para C16H23N5O2: 317,36.
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5.6.106. Síntesis de [3-(2,3-D¡h¡dro-benzofuran-7-M)-¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-il]-(4,4,4-tr¡fluoro-butM)-amma
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Parte A. í3-Bromo-¡m¡dazori.2-¿)lp¡r¡daz¡n-6-¡lW4.4.4-tr¡fluoro-but¡l)-am¡na
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Una soluc¡ón ag¡tada de 3-bromo-6-fluoro-¡m¡dazo[1.2-d]p¡r¡daz¡na (1.7 g. 7.6 mmol). clorh¡drato de 4.4.4-tr¡fluoro- but¡lam¡na [84153-82-2] (1.3 g. 7.6 mmol) y base de Hun¡g [7087-68-5] (4.0 ml. 23.0 mmol) en 2-propanol (40 ml) se calentó a 65 °C. en atmósfera de N2 durante 3 días. se enfr¡ó y se repart¡ó entre salmuera (el pH se ajustó a 10 con h¡dróx¡do sód¡co acuoso 3 N) y acetato de et¡lo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4) y se evaporó para proporc¡onar 2.3 g de sól¡do de color amar¡llo. LRMS (IEN) m/z 323.1/325.1 [(M+H)]+. calculado para C10H10BrF3N4: 323.12.
Parte B. [3-(2.3-D¡h¡dro-benzofuran-7-¡l)-¡m¡dazo[1.2-¿lp¡r¡daz¡n-6-¡ll-(4.4.4-tr¡fluoro-but¡l)-am¡na. A una mezcla de (3- bromo-¡m¡dazo[1.2-6]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-(4.4.4-tr¡fluoro-but¡l)-am¡na (442.4 mg. 1.4 mmol). 7-(4.4.5.5-tetramet¡l-
[1.3.2]d¡oxaboroIan-2-¡l)-2.3-d¡h¡dro-benzofurano [934586-50-2] (404.4 mg. 1.6 mmol). monoh¡drato tr¡bás¡co de fosfato potás¡co [27176-10-9] (632.1 mg. 2.7 mmol) y complejo [1.1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno]d¡cloropalad¡o (II). con d¡clorometano [95464-05-4] (116.7 mg. 0.1 mmol) conten¡do en un matraz de fondo redondo de 50 ml se le añad¡ó una soluc¡ón de agua al 30% (v/v) en 1.2-d¡metox¡etano (25 ml) y una barra ag¡tadora magnét¡ca. El rec¡p¡ente de reacc¡ón se equ¡pó con un condensador de reflujo. se ¡ntrodujo en un baño de ace¡te a temperatura amb¡ente. y el s¡stema se somet¡ó a 10 c¡clos de evacuac¡ón/atmósfera de N2 m¡entras se ag¡taba ráp¡damente. La reacc¡ón ráp¡damente ag¡tada. en atmósfera de N2. se calentó a una temperatura de baño de ace¡te de 85 °C durante 17 h. después se enfr¡ó y se repart¡ó entre salmuera (pH ajustado a 10 con h¡dróx¡do sód¡co acuoso 3 N) y acetato de et¡lo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4) y se evaporó para proporc¡onar un sól¡do de color pardo que se pur¡f¡có por RP-HPLC preparat¡va. El producto a¡slado se d¡solv¡ó en metanol. se d¡luyó con ác¡do clorhídr¡co concentrado. se evaporó a sequedad. se volv¡ó a d¡solver en metanol y se prec¡p¡tó med¡ante la ad¡c¡ón de éter d¡etíl¡co. La f¡ltrac¡ón del prec¡p¡tado produjo 162.0 mg de [sal monoclorh¡drato de 3-(2.3-d¡h¡dro-benzofuran-7-¡l)- ¡m¡dazo[1.2-6lp¡r¡daz¡n-6-¡ll-(4.4.4-tr¡fluoro-but¡l)-am¡na en forma de un polvo de color blanco. pf. 299-300 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 6 ppm 1.88 (qu¡n. J=7.52 Hz. 2 H) 2.32 - 2.46 (m. 2 H) 3.31 (t. J=8.84 Hz. 2 H) 3.34 - 3.41 (m. 2 H) 4.69 (t. J=8.72 Hz. 2 H) 7.00 (t. J=7.71 Hz. 1 H) 7.28 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 7.36 (dd. J=7.33. 1.01 Hz. 1 H) 8.06 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 8.09 (s a. 1 H) 8.22 (d. J=8.08 Hz. 1 H) 8.26 (s. 1 H). RMN 19 F (376 MHz. DMSO-d6) 6 ppm -64.62. RMN 13C (100 MHz. DMSO-d6) 6 ppm 20.40. 20.43. 29.04. 30.01. 30.29. 30.57. 30.84. 71.69. 108.63. 110.72. 118.75. 120.16. 121.07. 121.12. 123.71. 125.72. 125.99. 126.24. 128.07. 128.99. 132.10. 155.03. 156.77. LRMS (IEN) m/z 363.2 [(M+H)]+. calculado para C18H17F3N4O: 362.36.
5.6.107. Síntes¡s de éster íerc-butíNco del ác¡do (S)-2-[(3-yodo-¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡dazm-6-¡lammo)-metM]- p¡rrol¡d¡n-1-carboxíl¡co
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Se añad¡ó W-yodosucc¡n¡m¡da [516-12-1] (1.1 g. 4.7 mmol) a una soluc¡ón a temperatura amb¡ente de éster terc- butíl¡co del ác¡do (S)-3-(¡m¡dazo[1.2-d]p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡nomet¡l)-p¡rrol¡d¡n-1-carboxíl¡co (1.4 g. 4.3 mmol) en DMF (43 ml) y se dejó ag¡tar en atmósfera de N2 durante una noche. después se vert¡ó en una soluc¡ón acuosa ag¡tada de producto prec¡p¡tado de metab¡sulf¡to de sod¡o al 5 % (p/v) y la mezcla de dos fases se extrajo con acetato de et¡lo. El extracto se secó (CaSO4). se evaporó. y se recr¡stal¡zó en acetato de et¡lo enfr¡ado para produc¡r 0.6 g de éster terc- butíl¡co del ác¡do (S)-2-[(3-yodo-¡m¡dazo[1.2-d]p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-met¡l]-p¡rrol¡d¡n-1-carboxíl¡co en forma de un polvo de color blanco. pf. 138-139 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 6 ppm 1.37 (s a. 8 H) 1.79 (dd. J=9.98. 5.18 Hz. 1 H) 1.84 -1.92 (m. 2 H) 1.97 (s a. 1 H) 3.23 - 3.40 (m. 4 H) 3.42 - 3.53 (m. 1 H) 4.01 (s a. 1 H) 6.69 (d. J=9.60 Hz. 1 H) 7.09 (t. J=5.94 Hz. 1 H) 7.47 (s. 1 H) 7.64 (d. J=9.60 Hz. 1 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-d6) 6 ppm 22.35. 23.20. 28.11. 28.54. 43.21. 45.99. 46.35. 56.25. 70.08. 78.32. 112.67. 125.09. 136.22. 137.90. 154.42.
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Este compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.111 a partir del éster isopropílico del ácido 4-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-piperazin-1-carboxílico (101,1 mg, 0,3 mmol) y ácido piridin-4-borónico [1692-15-5] (39,9 mg, 0,3 mmol) para proporcionar 51,3 mg de diclorhidrato del éster isopropílico del ácido 4-(3- piridin-4-il-imidazo[1,2-£>]piridazin-6-il)-piperazin-1-carboxflico en forma de un polvo de color amarillo, pf. 195-196 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz, DMSO-^6) 5 ppm 1,23 (d, J=6,32 Hz, 6 H) 2,50 (s a, 2 H) 3,52 - 3,62 (m, 4 H) 3,62 - 3,70 (m, 3 H) 4,79 - 4,88 (m, 1 H) 7,58 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,16 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 8,73 - 8,84 (m, 3 H) 8,90 (d, J=6,06 Hz, 2 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 21,97, 30,40, 42,61,45,32, 68,22, 114,29, 120,46, 122,56, 125,88, 135,61, 139,37, 141,63, 143,40, 154,26, 155,42. LRMS (IEN) m/z 367,3 [(M+H)]+, calculado para C19H22N6O2: 366,43.
5.6.109. Síntesis de 2-(((3-(hidroximetil)imidazo[1,2-b]piridazm-6-il)ammo)metil)pirrolidm-1-carboxilato de (S)- ferc-butilo
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Parte A. (6-cloroimidazoí1,2-¿)1piridazin-3-il)metanol:
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A una solución de 6-cloroimidazo[1,2-£>]piridazin-3-carbaldehído (0,55 g, 3 mmol) en metanol (20 ml) se le añadió borohidruro sódico (0,15 g, 4 mmol) en unas porciones pequeñas a ta. Después de agitar a ta durante 30 min, la reacción se interrumpió con agua, y se extrajo con DCM para dar el producto en bruto (0,55 g, rendimiento del 100%). Se purificaron 40 mg de producto en bruto por HPLC Prep para dar (6-cloroimidazo[1,2-£>]piridazin-3- il)metanol en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORM0-d) 5 ppm 7,95 (d, J=9,35 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,11 (d, J = 9,35 Hz, 1 H), 5,07 (s, 2 H); LRMS (IEN) m/e 184,0 [(M + H)+, calculado para C7H7ClN3O 184,6].
Parte B. 2-(((3-(hidroximetil)imidazoí1.2-¿)1piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-ferc-butilo. El compuesto del título se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL-^) 5 ppm 7,58 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 6,70 (d, J = 9,60 Hz, 1 H), 4,85 - 4,94 (m, 2 H), 4,54 (s a, 1 H), 4,14 -
4,20 (m, 1 H), 3,35 - 3,74 (m, 5 H), 1,99 - 2,08 (m, 1 H), 1,87-1,99 (m, 3 H), 1,47 (s a, 9 H); LRMS (IEN) m/e 348,3 [(M + H)+, calculado para C17H26N5O3 348,4].
5.6.110. Síntesis de (R)-3-{2-[3-(4-Ammometil-feml)-imidazo[1,2-b]piridazm-6-ilammo]-etil}-4-isopropil-
oxazolidin-2-ona
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Parte A. (R)-3-[2-(3-Bromo-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-et¡l1-4-¡soprop¡l-oxazol¡d¡n-2-ona
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Una mezcla de (R)-4-¡soprop¡l-oxazol¡d¡n-2-ona (1.3 g. 10 mmol) y NaH (480 mg, d¡spers¡ón oleosa al 60%. 12 mmol) en THF (50 ml) se ag¡tó a ta durante 2 h. Después se enfr¡ó a 0 °C. Una soluc¡ón de bromoaceton¡tr¡lo (1.4 ml, 20 mmol) en THF (30 ml) se añad¡ó lentamente a la mezcla de reacc¡ón. La mezcla resultante se ag¡tó a ta durante una noche. La mezcla se trató con una cant¡dad pequeña de agua y después la mezcla se pasó a través de un lecho de síl¡ce. El f¡ltrado se concentró y el res¡duo se somet¡ó a una columna corta para dar el producto en bruto. El proceso se rep¡t¡ó y ambos productos en bruto se comb¡naron y se pur¡f¡caron ad¡c¡onalmente med¡ante otra columna corta para dar el producto (3.3 g).
A una soluc¡ón del producto anter¡or (3.3 g. 19 mmol) en THF (40 ml) a 0 °C se le añad¡ó una soluc¡ón de BH3THF en THF (1 M. 200 ml). La mezcla resultante se ag¡tó a 0 °C durante 30 m¡n. Después a ta durante 4 h. Después. la mezcla se enfr¡ó a 0 °C de nuevo y se trató con HCl frío (6 N. 20 ml) a pH ác¡do fuerte. El d¡solvente orgán¡co se ret¡ró a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo se trató con NaOH (4 N. ~40 ml) a pH>10. después se extrajo con EtOAc (5 x 80 ml) y DCM (5 x 80 ml). Los extractos comb¡nados de ambos d¡solventes se secaron (Na2SO4) y se concentraron. El EtOAc concentrado proporc¡onó 1.9 g del producto deseado (no puro) y 650 mg de producto puro se obtuv¡eron a part¡r del DCM concentrado.
Una mezcla del producto anter¡or (1.9 g. 11 mmol). 3-bromo-6-fluoro-¡m¡dazo[1.2-£)1p¡r¡daz¡na (650 mg. 3 mmol) y tr¡et¡lam¡na (1.5 ml) en alcohol ¡sopropíl¡co (8 ml) se calentó en un m¡croondas a 140 °C durante 20 m¡n dos veces. La mezcla de reacc¡ón se concentró y el res¡duo se somet¡ó a ISCO (columna de 40 g). para dar el compuesto del título (345 mg). LRMS (IEN) m/z 368 and 370.2 [(M+H)]+. calculado para C14H1sBrN5O2: 368.24.
Parte B. (R)-3-(2-[3-(4-Am¡nomet¡l-fen¡l)-¡m¡dazo[1.2-¿)1p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no1-et¡lM-¡soprop¡l-oxazol¡d¡n-2-ona. Una mezcla de (R)-3-[2-(3-bromo-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-et¡l1-4-¡soprop¡l-oxazol¡d¡n-2-ona (95 mg. 0.26 mmol). clorh¡drato del ác¡do (4-am¡nomet¡lfen¡l)borón¡co (63.7 mg. 0.34 mmol). K2CO3 (108 mg. 0.78 mmol) y d¡clorob¡s(tr¡fen¡lfosf¡na)palad¡o (II) (9.1 mg. 0.013 mmol) en MeCN/agua (3.2 ml/0.8 ml) se calentó en un m¡croondas a 150 °C durante 15 m¡n. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con MeCN y se f¡ltró. El f¡ltrado se somet¡ó a HPLC preparat¡va para dar el compuesto del título como sal HCOOH (86.3 mg). RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) ppm 0.84 (dd. J=6.95. 0.88 Hz. 6 H) 2.09 (td. J=6.95. 3.54 Hz. 1 H) 3.26 - 3.31 (m. 1 H) 3.59 - 3.71 (m. 2 H) 3.85 (dt. J=13.96. 6.79 Hz. 1 H) 3.95 (ddd. J=8.65. 5.24. 3.54 Hz. 1 H) 4.11- 4.19 (m. 4 H) 6.74 (d. J=9.60 Hz. 1 H) 7.58 (d. J=8.34 Hz. 2 H) 7.68 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 7.81 (s. 1 H) 8.21 - 8.26 (m. 2 H) 8.52 (s. 1 H). LRMS (IEN) m/z 395.3 [(M+H)1+. calculado para C21H26N6O2: 394.48.
5.6.111. Síntesis de éster isopropílico del ácido 4-(3-femMmidazo[1,2-b]pirídazm-6-M)-piperazm-1-carboxíNco
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A una mezcla de éster ¡sopropíl¡co del ác¡do 4-(3-bromo-¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1-carboxíl¡co (330.0 mg. 0.9 mmol). ác¡do fen¡lborón¡co [98-80-81 (131.4 mg. 1.1 mmol). monoh¡drato tr¡bás¡co de fosfato potás¡co [2717610-91 (416.4 mg. 1.8 mmol) y complejo [1.1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno1 d¡cloropalad¡o (II). con d¡clorometano [95464
05-41 (77.1 mg. 0.1 mmol) conten¡do en un matraz de fondo redondo de 50 ml se le añad¡ó una soluc¡ón de 30 % (v/v) de agua en 1.2-d¡metox¡etano (25 ml) y una barra ag¡tadora magnét¡ca. El rec¡p¡ente de reacc¡ón se equ¡pó con un condensador de reflujo. se ¡ntrodujo en un baño de ace¡te a temperatura amb¡ente. y el s¡stema se somet¡ó a 10 c¡clos de evacuac¡ón/atmósfera de N2 m¡entras se ag¡taba ráp¡damente. La reacc¡ón ráp¡damente ag¡tada. en atmósfera de N2. se calentó a una temperatura de baño de ace¡te de 85 °C durante 17 h. después se enfr¡ó y se repart¡ó entre salmuera (pH ajustado a 10 con h¡dróx¡do sód¡co acuoso 3 N) y acetato de et¡lo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4) y se evaporó para proporc¡onar un ace¡te de color naranja que se pur¡f¡có por RP-HPLC preparat¡va. El producto a¡slado se d¡solv¡ó en metanol. se d¡luyó con ác¡do clorhídr¡co concentrado. se evaporó a sequedad. se volv¡ó a d¡solver en metanol y se prec¡p¡tó med¡ante la ad¡c¡ón de éter d¡etíl¡co. La f¡ltrac¡ón del prec¡p¡tado produjo 154.6 mg de la sal monoclorh¡drato del ác¡do 4-(3-fen¡l-¡m¡dazo[1.2-¿1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1- carboxíl¡co en forma de un polvo cr¡stal¡no de color blanco. pf. 232-233 °C (desc.). RmN 1H (400 MHz. DMsO-cfe) 8 ppm 1.22 (d. J=6.32 Hz. 6 H) 3.50 - 3.60 (m. 4 H) 3.60 - 3.70 (m. 4 H) 4.77 - 4.87 (m. 1 H) 7.50 (d. J=7.58 Hz. 1 H)
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7,55 -7,71 (m, 2 H) 7,77 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,05 -8,17 (m, 2 H) 8,25 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,54 (s, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-da) 5 ppm 21,95, 42,49, 44,98, 68,23, 116,22, 120,94, 122,22, 126,28, 127,18, 128,09, 128,83,
129,05, 132,74, 154,26, 155,80. LRMS (IEN) m/z 366,2 [(M+H)]+, calculado para C26H23N5O2: 395,44.
5.6.112. Síntesis de éster íerc-butílico del ácido 4-[3-(3-metoxi-piridm-4-il)-imidazo[1,2-£>]piridazm-6-il]- piperazin-1-carboxílico
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A una mezcla de éster ferc-butíl¡co del ácido 4-(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-¿>]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1-carboxíl¡co (524,4 mg, 1,4 mmol), h¡drato del ác¡do 3-metox¡p¡r¡d¡n-4-borón¡co [1072952-50-1] (253,1 mg, 1,7 mmol), monoh¡drato tr¡bás¡co de fosfato potás¡co [27176-10-9] (632,2 mg, 2,8 mmol) y complejo [1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no) ferroceno] d¡cloropalad¡o (II), con d¡clorometano [95464-05-4] (117,6 mg, 0,1 mmol) conten¡do en un matraz de fondo redondo de 50 ml se le añad¡ó una soluc¡ón de 30% (v/v) de agua en 1,2-d¡metox¡etano (25 ml) y una barra ag¡tadora magnét¡ca. El rec¡p¡ente de reacc¡ón se equ¡pó con un condensador de reflujo, se ¡ntrodujo en un baño de ace¡te a temperatura amb¡ente, y el s¡stema se somet¡ó a 10 c¡clos de evacuac¡ón/atmósfera de N2 m¡entras se ag¡taba ráp¡damente. La reacc¡ón ráp¡damente ag¡tada, en atmósfera de N2, se calentó a una temperatura de baño de ace¡te de 85 °C durante 17 h, después se enfr¡ó y se repart¡ó entre salmuera (pH ajustado a 10 con h¡dróx¡do sód¡co acuoso 3 N) y acetato de et¡lo. El extracto de fase separada se secó (CaSO4) y se evaporó para proporc¡onar un ace¡te de color pardo que se pur¡f¡có por RP-HPLC preparat¡va para obtener un polvo de color blanco, pf. 205-206 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 1,43 (s, 9 H) 3,46 - 3,55 (m, 8 H) 4,02 (s, 3 H) 7,30 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 8,00 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,13 (s, 1 H) 8,35 (d, J=5,05 Hz, 1 H) 8,41 (d, J=5,05 Hz, 1 H) 8,51 (s, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-da) 5 ppm 28,04, 45,53, 56,33, 79,10, 111,13, 120,39, 120,75, 124,25, 126,24, 134,48, 135,69,
137,20, 142,26, 151,08, 153,85, 154,60. LRMS (IEN) m/z 411,3 [(M+H)]+, calculado para C21H26N6O3: 410,48.
5.6.113. Síntesis de 1-(4-(3-Bromoimidazo[1,2-£>]pindazm-6-il)piperazm-1-N)-3,3-dimetilbutan-1-ona
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A una suspens¡ón en atmósfera de N2, a temperatura amb¡ente, ag¡tada ráp¡damente de 3-bromo-6-p¡peraz¡n-1-¡l- ¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡na (d¡clorh¡drato (400,5 mg, 1,1 mmol) y cloruro de 3,3-d¡met¡lbutanoílo [7065-46-5] (0,2 ml, 1,4 mmol) en acetato de et¡lo (50 ml) se le añad¡ó base de Hun¡g [7087-68-5] (0,8 ml, 4,6 mmol) y la reacc¡ón se dejó ag¡tar durante una noche. Una vez completada, la reacc¡ón se lavó con salmuera, se secó (MgSO4) y se cr¡stal¡zó a part¡r de acetato de et¡lo enfr¡ado/heptano para proporc¡onar 392,5 mg de polvo cr¡stal¡no de color blanco, pf. 170171 °C. RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 1,02 (s, 9 H) 2,30 (s, 2 H) 3,57 (d, J=7,06 Hz, 4 H) 3,63 - 3,72 (m, 4 H) 7,26 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,63 (s, 1 H) 7,91 (d, J=9,92 Hz, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-da) 5 ppm 29,57, 30,81,40,12, 43,50, 45,26, 45,34, 99,17, 110,56, 125,96, 131,44, 136,42, 154,89, 169,49. LRMS (IEN) m/z 380,1/382,1[(M+H)]+, calculado para C^Br^O: 380,28.
5.6.114. Síntesis de 1-(4-(3-(3-Metoxipiridm-4-il)imidazo[1,2-ü]piridazm-6-il)piperazm-1-il)-3,3-dimetilbutan-1- ona
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A una mezcla de 1-(4-(3-bromo¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-6-¡l)p¡peraz¡n-1-¡l)-3,3-d¡met¡lbutan-1-ona (168,9 mg, 0,4 mmol), h¡drato del ác¡do 3-metox¡p¡r¡d¡n-4-borón¡co [1072952-50-1] (82,3 mg, 0,5 mmol), monoh¡drato tr¡bás¡co de fosfato potás¡co [27176-10-9] (210,4 mg, 0,9 mmol) y complejo [1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no) ferroceno] d¡cloropalad¡o (II), con d¡clorometano [95464-05-4] (33,8 mg, 0,1 mmol) conten¡do en un matraz de fondo redondo de 25 ml se le añad¡ó
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una solución de 30 % (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (13 ml) y una barra agitadora magnética. El recipiente de reacción se equipó con un condensador de reflujo, se introdujo en un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se sometió a 10 ciclos de evacuación/atmósfera de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, en atmósfera de N2, se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85 °C durante 17 h, después se enfrió y se repartió entre salmuera (pH ajustado a 10 con hidróxido sódico acuoso 3 N) y acetato de etilo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4) y se evaporó para proporcionar un aceite de color pardo que se purificó por RP-HPLC preparativa. El producto aislado se disolvió en metanol, se diluyó con ácido clorhídrico concentrado, se evaporó a sequedad, se volvió a disolver en metanol y se precipitó mediante la adición de éter dietílico. La filtración del precipitado produjo 59,7 mg de sal diclorhidrato de 1-(4-(3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2- d]piridazin-6-il)piperazin-1-il)-3,3-dimetilbutan-1-ona en forma de un polvo amarillo claro, pf. 211-212 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1,00 - 1,04 (m, 9 H) 2,26 - 2,35 (m, 2 H) 3,57 - 3,66 (m, 4 H) 3,70 (s a, 4 H) 4,14 - 4,21 (m, 3 H) 7,68 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,20 (dd, J=10,10, 2,02 Hz, 1 H) 8,65 (d, J=2,53 Hz, 2 H) 8,75 - 8,80 (m, 1 H) 9,04 - 9,10 (m, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 29,70, 30,94, 43,69, 45,00, 45,43, 45,70, 57,70,
115,22, 119,35, 121,79, 124,70, 126,64, 130,45, 134,42, 135,21, 136,68, 152,58, 155,32, 169,63. LRMS (IEN) m/z 409,2[(M+H)]+, calculado para C22H28N6O2: 408,50.
5.6.115. Síntesis de éster isopropílico del ácido 4-[3-(2-metoxi-feml)-imidazo[1,2-b]pirídazm-6-il]-piperazm-1- carboxílico
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Preparado de manera similar al ejemplo 5.6.111 a partir de éster isopropílico del ácido 4-(3-bromo-imidazo[1,2- d]piridazin-6-il)-piperazin-1-carboxílico (310,0 mg, 0,8 mmol) y ácido 2-metoxifenilborónico [5720-06-9] (153,6 mg, 1,0 mmol) para proporcionar 172,7 mg de monoclorhidrato del éster isopropílico del ácido 4-[3-(2-metoxi-fenil)- imidazo[1,2-d]piridazin-6-il]-piperazin-1-carboxílico en forma de un polvo de color blanco, pf. 243-244 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,09 - 1,24 (m, 7 H) 3,54 - 3,61 (m, 5 H) 3,82 - 3,87 (m, 4 H) 4,76 - 4,84 (m, 1 H) 7,15 (t, J=7,33 Hz, 1 H) 7,24 (d, J=8,08 Hz, 1 H) 7,49 -7,56 (m, 1 H) 7,78 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 7,90 (d, J=7,58 Hz, 1 H) 8,22 - 8,31 (m, 2 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 21,92, 42,46, 44,82, 55,70, 68,21, 111,70, 114,19, 116,39, 120,27, 121,81, 122,20, 125,03, 130,44, 131,14, 131,75, 154,24, 155,62, 156,93. LRMS (IEN) m/z 396,2 [(M+H)]+, calculado para C21H25N5O3: 395,47.
5.6.116. Síntesis de 2-(((3-(prop-1-en-1-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)piperidin-1-carboxilato de (S)-terc-butilo
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El acoplamiento de Suzuki siguiendo el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.19 proporcionó una mezcla de isómeros E y Z. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,35 (s a, 6 H) 1,42 (s a, 3 H) 1,61 - 1,74 (m, 3 H) 1,78 (s a, 3 H) 1,98 -2,08 (m, 3 H) 2,40 (s a, 1 H) 3,11 (t, J=12,76 Hz, 1 H) 3,27 - 3,40 (m, 1 H) 4,13 (d, J=13,89 Hz, 1 H) 4,50 (s a, 1 H) 5,87 - 6,00 (m, 1 H) 6,75 - 6,94 (m, 2 H) 7,59 - 7,72 (m, 2 H); LRMS (IEN) m/372,0 [(M + H)+, calculado para C20H29N5O2 371,0]
5.6.117. Síntesis de 2-(((3-propMimidazo[1,2-b]pmdazm-6-M)ammo)metil)piperídm-1-carboxilato de (S)-terc- butilo
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La reducción del doble enlace se realizó mediante agitación vigorosa de 0,135 mmol en 25 ml de MeOH con 0,2
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equivalentes de paladio sobre carbono (Pd al 10 %/C) sobre hidrógeno a presión atmosférica durante 8 h. Después, se filtró, se concentró y se purificó en la HPLC PREP para obtener el producto deseado con un rendimiento del 58 %. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,04 (m, 3 H) 1,28 - 1,49 (m, 9 H) 1,63 (d, J=12,38 Hz, 1 H) 1,67 - 1,91 (m, 7 H) 2,82 - 2,95 (m, 4 H) 3,35 (s a, 1 H) 4,01 (d, J=11,87 Hz, 1 H) 4,62 (d, J=7,33 Hz, 1 H) 6,40 (dd, J=9,60, 2,27 Hz, 1 H) 7,28 (d, J=2,78 Hz, 1 H) 7,70 (dd, J=9,47, 2,15 Hz, 1 H); LRMS (IEN) m/374,0 [(M + H)+, calculado para C20H31N5O2 373,0].
5.6.118. Síntesis de (S)-2-[3-(2-metox¡-feml)-¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-il]-hexah¡dro-p¡rrolo[1,2-c]¡m¡dazol-3- ona
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Parte A. (S)-3-bromo-M-(p¡rrol¡d¡n-2-¡lmet¡l)¡m¡dazo[1,2-81p¡r¡daz¡n-6-am¡na:
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A una solución de 2-(((3-bromo¡m¡dazo[1,2-6]pmdaz¡n-6-¡l)am¡no)met¡l)p¡rrol¡d¡n-1-carbox¡lato de (S)-terc-butilo (13,4 g, 33,8 mmol) en MeOH (100 ml) se enfrió a 0 °C y se le añadió gota a gota cloruro de acetilo (24 ml, 338 ml). La reacción se calentó a ta y se agitó durante una noche y se concentró para dar (S)-3-bromo-W-(pirrolidin-2- ilmetil)imidazo[1,2-6]piridazin-6-amina como sal de HCl (11 g, rendimiento del 100%). lRmS (IEN) m/e 298,0 [(M + H)+, calculado para C^H^Br^ 298,2].
Parte B. Éster vinílico del ácido (S)-2-[(3-bromo-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-metil1-p¡rrol¡d¡n-1-carboxíl¡co
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A una solución de éster terc-butílico del ácido (S)-2-[(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡n-6-¡lamino)-met¡l]-p¡rrol¡d¡n-1- carboxílico (450 mg, 1,14 mmol) en DCM (10 ml) se le añadió TFA (4 ml). La mezcla resultante se mantuvo durante 0,5 h. La mezcla se concentró y el residuo se secó al vacío durante una noche.
El producto de lo anterior se disolvió en DCM (10 ml) y se añadió DIEA (993 ul, 5,7 mmol). La mezcla se enfrió a 0 °C y se añadió gota a gota cloroformiato de vinilo (145 ul, 1,17 mmol). La mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 2 h, después a ta durante una noche. La mezcla se concentró y el residuo se sometió a ISCO (columna de 40 g) para dar el compuesto del título (251 mg). LRMS (IEN) m/z 366,1 y 368,1 [(M+H)]+, calculado para C-MH-i6BrN5O2:
366,22.
Parte C. (S)-2-[3-(2-Metox¡-fen¡l)-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-6-¡l1-hexah¡dro-p¡rrolo[1.2-c1¡m¡dazol-3-ona. Una mezcla de éster vinílico del ácido (S)-2-[(3-bromo-imidazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-6-¡lam¡no)-met¡l]-p¡rrol¡d¡n-1-carboxíl¡co (125 mg, 0,34 mmol), ácido (2-metoxifenil)borónico (67,2 mg, 0,44 mmol), K2CO3 (141 mg, 1,02 mmol) y
diclorobis(trifenilfosfina)paladio (II) (12 mg, 0,017 mmol) en MeCN/agua (3,2 ml/0,8 ml) se calentó en un microondas a 150 °C durante 15 min. La reacción se repitió a 140 °C. Después de la retirada del agua, las mezclas de reacción se combinaron y se diluyeron con MeCN y se filtraron. El filtrado se sometió a HPLC preparativa para dar el compuesto del título (S)-2-[3-(2-metox¡fen¡l)-¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazin-6-¡l]-hexah¡dro-p¡rrolo[1,2-c]¡m¡dazol-3-ona (76,5 mg). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,39 -1,51 (m, 1 H) 1,89 -2,02 (m, 1 H) 2,05 -2,18 (m, 2 H) 3,18 - 3,26 (m, 1 H) 3,72 - 3,96 (m, 6 H) 4,09 - 4,16 (m, 1 H) 7,04 - 7,13 (m, 2 H) 7,35 - 7,42 (m, 1 H) 7,90 - 7,96 (m, 1 H) 8,03 - 8,10 (m, 2 H) 8,40 (dd, J=9,85, 2,78 Hz, 1 H). LRMS (IEN) m/z 350,2 [(M+H)]+, calculado para C19H19N5O2: 349,4.
5.6.119. Síntes¡s de 3-(4-(ammometM)feml)-W-((1-(2,2,2-tr¡fluoroet¡l)p¡rrol¡dm-2-M)metM)¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡dazm-
6-am¡na:
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El compuesto del título se obtuvo usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL- d4) 8 ppm 8,47 (s, 1 H), 8,15 - 8,19 (m, 2 H), 7,73 (s, 1 H), 7,59 (m, J=9,70 Hz, 1 H), 7,49 (d, J = 8,60 Hz, 2 H), 6,70 - 6,73 (m, 1 H), 4,09 (s, 2 H), 3,55 (dd J = 13,45, 3,97 Hz, 1 H), 3,35 - 3,44 (m, 1 H), 3,14 - 3,24 (m, 2 H), 2,96 - 3,10 (m, 2 H), 2,46 -2,53 (m, 1 H), 1,91 -2,00 (m, 1 H), 1,74 - 1,85 (m, 2 H), 1,62 - 1,70 (m, 1 H); LRMS (IEN) m/e 405,2 [(M + h)+, calculado para C20H24F3N6 405,4].
5.6.120. Síntesis de éster íerc-butílico del ácido 4-(3-femMmidazo[1,2-b]pirídazm-6-N)-piperazm-1-carboxílico
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Parte A. Éster terc-butílico del ácido 4-¡m¡dazo[1.2-81pir¡daz¡n-6-¡l-p¡peraz¡n-1-carboxíl¡co
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Una mezcla íntima de 6-cloro-imidazo[1,2-6]piridazina [6775-88-6] (4,1 g, 26,5 mmol y piperazina [110-85-0] (11,4 g, 132,8 mmol) se calentó a 120 °C y se agitó como una masa fundida en atmósfera de N2 durante 2 h. La reacción enfriada se repartió entre agua y acetato de etilo, el extracto se secó (MgSO4) y se evaporó para producir 5,6 g de 6- piperazin-1-il-imidazo[1,2-b]piridazina que, sin purificación, se suspendió en acetato de etilo (250 ml). A esta mezcla de agua se le añadió base de Hunig [7087-68-5] (9,6 ml, 55,1 mmol) y pirocarbonato de di-ferc-butilo [24424-99-5] (7,2 g, 33,2 mmol). La mezcla en atmósfera de N2 se agitó durante una noche a temperatura ambiente, después se repartió entre salmuera y acetato de etilo. El extracto de fase separada se secó (CaSO4), se evaporó y se cristalizó a partir de acetato de etilo/heptano para proporcionar un polvo cristalino de color blanco, pf. 122-123 °C. RMN 1H (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 1,43 (s, 9 H) 3,46 (s, 8 H) 7,16 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 7,50 (s, 1 H) 7,81 - 7,94 (m, 2 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 28,03, 42,66, 45,42, 79,07, 110,58, 116,43, 125,91,131,62, 135,77, 153,88, 154,71. LRMS (IEN) m/z 304,2 [(M+H)]+, calculado para C15H21N5O2: 303,37.
Parte B. Éster terc-butílico del ácido 4-(3-yodo-¡m¡dazor1,2-¿)lp¡ndaz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1-carboxíl¡co
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Una solución de éster ferc-butílico del ácido 4-imidazo[1,2-8]piridazin-6-il-piperazin-1-carboxílico (3,6 g, 11,8 mmol) y W-yodosuccinimida [516-12-1] (3,1 g, 13,1 mmol) en DMF (120 ml) se agitó en atmósfera de N2 a temperatura ambiente durante 2 h, después se repartió entre metabisulfito sódico acuoso al 5 % (p/v) y acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó (CaSO4), se evaporó y se cristalizó a partir de acetato de etilo/heptano para proporcionar un polvo cristalino de color blanco, pf. 203-204 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 1,43 (s, 9 H) 3,45 - 3,51 (m, 4 H) 3,51 - 3,58 (m, 4 H) 7,19 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,61 (s, 1 H) 7,85 (d, J=9,92 Hz, 1 H). RMN 13C
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(100 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 27,89, 45,06, 70,52, 78,95, 110,55, 125,66, 137,28, 137,71, 153,73, 154,88. LRMS (IEN) m/z 430,0 (M+H)]+, calculado para C15H20IN5O2: 429,26.
Parte C. Éster ferc-butílico del ácido 4-í3-fen¡l-im¡dazoH.2-¿)1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1-carboxíl¡co. Se preparó éster ferc-butílico del ác¡do 4-(3-fen¡l-¡m¡dazo[1,2-81p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1-carboxíl¡co usando el enfoque descr¡to en el ejemplo 5.6.112 a partir de éster ferc-butílico del ácido 4-(3-yodo-¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1-carboxíl¡co (513,4 mg, 1,2 mmol) y ácido fenilborónico [98-80-6] (178,3 mg, 1,5 mmol) para obtener 220,2 mg de un polvo de color blanco, pf. 101-103 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,44 (s, 9 H) 3,52 (s a, 8 H) 7,22 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,31 - 7,37 (m, 1 H) 7,46 - 7,54 (m, 2 H) 7,95 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,00 (s, 1 H) 8,11 - 8,18 (m, 2 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 28,03, 42,73, 45,56, 79,08, 110,13, 125,75, 126,24, 126,93, 127,14, 128,61, 129,03, 131,07, 137,15, 153,85, 154,63. LRMS (IEN) m/z 411,3 [(M+H)]+, calculado para C21H25N5O2: 379,47.
5.6.121. Síntesis de éster terc-butílico del ácido 4-[3-(3-metoxi-pirídm-4-M)-imidazo[1,2-b]pirídazm-6-N]- [1,4]diazepano-1-carboxílico
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Parte A. 4-(3-Bromo¡m¡dazo[1,2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-1,4-d¡azepano-1-carbox¡lato de ferc-butilo
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Una solución agitada de 3-bromo-6-fluoroim¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡na (1,6 g, 7,6 mmol), 1,4-diazepano-1-carboxilato de ferc-butilo [112275-50-0] (4,4 ml, 22,6 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (5,3 ml, 30,4 mmol) en 2-propanol (25 ml) se calentó a 65 °C durante 3 días, después se repartió entre salmuera y acetato de etilo. El extracto se secó (CaSO4) y se evaporó para proporcionar 5,9 g de líquido de color naranja transparente que se sometió a cromatografía ultrarrápida (gel de sílice eluyendo con metanol al 10 % (v/v)/acetato de etilo) y se cristalizó a partir de acetato de etilo/heptano para proporcionar 2,0 g de polvo de color blanco, pf. 101-102 °C. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm (rotámeros presentes) 1,03 (s, 5 H) 1,17 (s, 4 H) 1,73 (s a, 1 H) 1,85 (s a, 1 H) 2,43 -2,47 (m, 1 H)
3,20 - 3,29 (m, 3 H) 3,49 (d, J=5,51 Hz, 1 H) 3,55 - 3,66 (m, 3 H) 3,70 - 3,79 (m, 2 H) 7,05 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,49 (d, J=7,28 Hz, 1 H) 7,78 (d, J=9,70 Hz, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 8 ppm (rotámeros presentes) 24,50, 24,83, 27,45, 27,61,44,10, 44,78, 44,83, 45,33, 47,58, 47,74, 48,01,48,09, 78,11,78,27, 98,80, 109,23, 109,61, 125,65, 125,77, 130,81, 130,89, 136,07, 153,01, 153,18, 153,90, 154,19. LRMS (IEN) m/z 396,1/398,1[(M+H)]+, calculado para C-|6H22BrN5O2: 396,29.
Parte__B^_Éster__ferc:bu;tíj^o__d^_ác¡d^_4-[3-í^:m^^K¡zg¡r^¡n:4^):¡m¡d^zo£1^^t|p¡r^az¡nz6z¡r|z[1,4Jd^zepanoz1^ carboxílico. A una mezcla de 4-(3-bromo¡m¡dazo[1,2-b]p¡ridaz¡n-6-¡l)-1,4-d¡azepano-1-carbox¡lato de ferc-butilo (329,9 mg, 0,8 mmol), monohidrato del ácido (3-metoxip¡r¡d¡n-4-¡l)borónico [1072952-50-1] (153,6 mg, 1,0 mmol), monohidrato tribásico de fosfato potásico [27176-10-9] (384,1 mg, 1,7 mmol) y complejo
[1,1'bis(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno]dicloropalad¡o (II), con diclorometano [95464-05-4] (69,2 mg, 0,1 mmol) contenido en un matraz de fondo redondo de 50 ml se le añadió una solución de 30 % (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (25 ml) y una barra ag¡tadora magnét¡ca. El rec¡p¡ente de reacc¡ón se equ¡pó con un condensador de reflujo, se ¡ntrodujo en un baño de ace¡te a temperatura amb¡ente, y el s¡stema se somet¡ó a 10 c¡clos de evacuac¡ón/atmósfera de N2 m¡entras se ag¡taba ráp¡damente. La reacc¡ón ráp¡damente ag¡tada, en atmósfera de N2, se calentó a una temperatura de baño de ace¡te de 85 °C durante 6 h, después se enfr¡ó y se repart¡ó entre salmuera (pH ajustado a 10 con hidróxido sódico acuoso 3 N) y acetato de etilo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4) y se evaporó para proporcionar un sólido de color pardo que se purificó por RP-HPLC preparativa para proporcionar éster ferc- butílico del ácido 4-[3-(3-metox¡-p¡r¡d¡n-4-¡l)-¡m¡dazo[1,2-b]p¡ridaz¡n-6-¡l]-[1,4]d¡azepano-1-carboxíl¡co como 79,5 mg de polvo de color blanquecino, pf. 115-116 °C. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm (rotámeros presentes) 1,01 (s, 4 H) 1,20 (s, 4 H) 1,91 (s, 2 H) 2,51 (dt, J=3,60, 1,86 Hz, 2 H) 3,27 - 3,35 (m, 4 H) 3,57 (s a, 1 H) 3,64 (s, 1 H) 3,70 (s a, 2 H) 3,81 (d, J=16,67 Hz, 2 H) 4,02 (s, 3 H) 7,19 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,93 (s, 1 H) 8,11 (d, J=8,59 Hz, 1 H) 8,32 (d, J=5,05 Hz, 1 H) 8,49 - 8,54 (m, 2 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 8 ppm (rotámeros presentes) 13,89, 22,03, 24,66, 24,75, 27,49, 27,74, 31,20, 44,27, 44,96, 45,60, 47,99, 48,26, 48,39, 56,31,78,25, 78,41, 109,66, 109,87, 119,88, 120,03, 120,27, 124,50, 126,00, 126,08, 134,46, 135,39, 135,52, 136,92, 141,96, 150,98, 152,56, 152,65,
154,01, 154,34. LRMS (IEN) m/z 425,2[(M+H)]+, calculado para C22H28N6O3: 424,51.
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Una mezcla de éster íerc-butílico del ácido metil-pirrolidin-3-il-carbámico (1,2 g, 6 mmol), 3-bromo-6-fluoro- imidazo[1,2-b]piridazina (648 mg, 3 mmol) y trietilamina (1,67 ml, 12 mmol) en alcohol isopropílico (3 ml) se calentó en un microondas a 140 °C durante 20 min. La mezcla de reacción se dejó en reposo durante una noche y el sólido de color blanco se recogió por filtración y se lavó con MeOH para dar el compuesto del título (750 mg). El filtrado se concentró y el residuo se sometió a ISCO (columna de 40 g), para dar compuesto del título adicional (360 mg). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,45 - 1,52 (m, 9 H) 2,03 - 2,27 (m, 2 H) 2,83 (s, 3 H) 3,39 - 3,54 (m, 2 H) 3,69 - 3,77 (m, 2 H) 6,58 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,49 (s, 1 H) 7,65 (d, J=9,70 Hz, 1 H). LRMS (IEN) m/z 396,1 y 398 [(M+H)]+, calculado para C16H22BrNsO2: 396,29.
5.6.123. Síntesis de (S)-5-(((3-bromoimidazo[1,2-¿]piridazm-6-N)ammo)metN)pirrolidm-2-ona
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Parte A. (S)-2-((5-oxop¡rrol¡d¡n-2-¡l)met¡l)¡so¡ndol¡n-1,3-d¡ona
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A (S)-5-(hidroximetil)pirrolidin-2-ona (2,00 g, 17,39 mmol) disuelta en 25 ml de THF se le añadió ftalimida (2,81 g, 19,13 mmol), trifenilfosfina (5,01 g, 19,13 mmol) y diisopropilazodi-carboxilato (3,33 g, 19,13 mmol). Esta mezcla se agitó durante aproximadamente 16 h y después se diluyó con 200 ml de hexanos y 2 ml de DCM y después se enfrió a -30 °C. El producto precipitó y se filtró y se secó (4,11 g, 96 %, sólido de color blanco).
Parte B. (S)-5-(aminomet¡l)p¡rrol¡d¡n-2-ona
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A 244 mg (1 mmol) de la (S)-2-((5-oxopirrolidin-2-il)metil)isoindolin-1,3-diona disuelta en 25 ml de EtOH se le añadió hidrazina (500 mg, 10 mmol) y esta mezcla se calentó a reflujo durante 4 h. Se enfrió a ta y el compuesto del título se retiró por cristalización y se filtró y se secó (114 mg, rendimiento del 100 %).
Parte C. (S)-5-(((3-bromoimidazo[1,2-¿)1piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-2-ona. La (S)-5-(aminometil)pirrolidin-2- ona se hizo reaccionar con 3-bromo-6-fluoroim¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡na en las condiciones de desplazamiento de amina descritas en el ejemplo 5.6.42, Parte A, para obtener el compuesto del título con un rendimiento del 62 %. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 1,90 - 2,04 (m, 1 H) 2,24 - 2,50 (m, 3 H) 3,46 - 3,56 (m, 2 H) 4,09 (quin, J=5,84 Hz, 1 H) 6,74 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,43 (s, 1 H) 7,60 (d, J=9,70 Hz, 1 H); LRMS (IEN) m/310,0 doblete [(M + H)+, calculado para C-nH-^BrNsO 309,0].
5.6.124. Síntesis de (S)-5-(((3-Bromoimidazo[1,2-¿]piridazm-6-il)ammo)metil)-1-isopentilpirroNdm-2-ona
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Parte A. (S)-2-((1-¡sopent¡l-5-oxop¡rrol¡d¡n-2-¡l)met¡l)¡so¡ndol¡n-1,3-d¡ona
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A 244 mg (1,000 mmol) de (S)-2-((5-oxop¡rrol¡d¡n-2-¡l)met¡l)¡so¡ndol¡n-1,3-d¡ona d¡suelta en 4 ml de DMSO se le añad¡eron (227 mg, 1,500 mmol) de 1-bromo-3-met¡lbutano y NaH al 60 % (42 mg, 1,050 mmol). Después de 1 h de ag¡tac¡ón a 70 °C, la mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó a ta y se d¡luyó con EtOAc y se ¡nact¡vó con agua. La capa orgán¡ca se separó, se lavó con salmuera y se secó sobre MgSO4. Se concentró y se pur¡f¡có sobre gel de síl¡ce eluyendo con EtOAc al 15-100 %/hexanos para obtener el 48 % del producto deseado.
Parte B. (S)-5-(am¡nomet¡l)-1-¡sopent¡lp¡rrol¡d¡n-2-ona
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La (S)-2-((1-¡sopent¡l-5-oxop¡rrol¡d¡n-2-¡l)met¡l)¡so¡ndol¡n-1,3-d¡ona se somet¡ó al proced¡m¡ento de desprotecc¡ón de ftal¡m¡da descr¡to en el ejemplo 5.6.123, Parte B, para obtener un rend¡m¡ento del 100 % del producto deseado.
Parte C. (S)-5-(((3-bromo¡m¡dazof1.2-¿1p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)met¡l)-1-¡sopent¡lp¡rrol¡d¡n-2-ona. La 3-bromo-6-
fluoro¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡na se h¡zo reacc¡onar con (S)-5-(am¡nomet¡l)-1-¡sopent¡l-p¡rrol¡d¡n-2-ona en las cond¡c¡ones de desplazam¡ento de am¡na descr¡tas en el ejemplo 5.6.42, Parte A para proporc¡onar el 60 % del compuesto del título. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 0,95 (d, J=6,32 Hz, 6 H) 1,39 - 1,66 (m, 3 H) 1,95 - 2,08 (m, 1 H) 2,13 - 2,26 (m, 1 H) 2,31 - 2,53 (m, 2 H) 3,02 (ddd, J=13,89, 9,22, 4,93 Hz, 1 H) 3,48 (dt, J=14,15, 5,18 Hz, 1 H) 3,79 (ddd, J=13,77, 9,35, 6,95 Hz, 1 H) 3,91 (ddd, J=14,08, 7,01,2,91 Hz, 1 H) 4,00 -4,11 (m, 1 H) 5,42 (t, J=5,31 Hz, 1 H) 6,67 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,52 (s, 1 H) 7,66 (d, J=9,85 Hz, 1 H); LRMS (IEN) m/380,0 doblete [(M + H)+, calculado para C16H22BrNsO 379,0].
5.6.125. Síntesis de 2,2-D¡metM-1-[4-(3-feml-¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-M)-piperazm-1-¡l]-propan-1-ona
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Parte A. 1-[4-(3-Bromo-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1-¡l1-2.2-d¡met¡l-propan-1-ona
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base de Hun¡g [7087-99-5] (1,8 ml, 10,3 mmol) se añad¡ó a una suspens¡ón ag¡tada a temperatura amb¡ente de d¡clorh¡drato de 3-bromo-6-p¡peraz¡n-1-¡l-¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡na (907,1 mg, 2,6 mmol) en acetato de et¡lo (50 ml). Después de 30 m¡nutos, se añad¡ó cloruro de p¡valoílo [3282-30-2] (0,3 ml, 2,5 mmol) y la suspens¡ón se ag¡tó en atmósfera de N2 durante 17 h, después se lavó con salmuera, se secó (MgSO4) y se d¡luyó con heptano. El enfr¡am¡ento de la soluc¡ón ag¡tada cr¡stal¡zó un polvo blanco que se a¡sló por f¡ltrac¡ón, 618,5 mg. LRMS (IEN) m/z 366,0/368,0 [(M+H)]+, calculado para C15H20BrN5O: 366,26.
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Parte B. 2.2-D¡met¡l-1-[4-(3-fen¡l-¡m¡dazo[1.2-¿1p¡r¡daz¡n-6-il)-p¡peraz¡n-1-¡l1-propan-1-ona.
A una mezcla de 1-[4-(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1-¡l]-2,2-d¡met¡l-propan-1-ona (526.7 mg, 1.4 mmol). ác¡do fen¡lborón¡co [98-80-8] (211,3 mg. 1.7 mmol), monoh¡drato tr¡bás¡co de fosfato potás¡co [27176-10-9] (664,4 mg. 2.9 mmol) y complejo [1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno] d¡cloropalad¡o (II). con d¡clorometano [95464-05-4] (123,2 mg. 0.2 mmol) conten¡do en un matraz de fondo redondo de 50 ml se le añad¡ó una soluc¡ón de 30 % (v/v) de agua en 1,2-d¡metox¡etano (25 ml) y una barra ag¡tadora magnét¡ca. El rec¡p¡ente de reacc¡ón se equ¡pó con un condensador de reflujo. se ¡ntrodujo en un baño de ace¡te a temperatura amb¡ente, y el s¡stema se somet¡ó a 10 c¡clos de evacuac¡ón/atmósfera de N2 m¡entras se ag¡taba ráp¡damente. La reacc¡ón ráp¡damente ag¡tada, en atmósfera de N2, se calentó a una temperatura de baño de ace¡te de 85 °C durante 17 h, después se enfr¡ó y se repart¡ó entre salmuera (pH ajustado a 10 con h¡dróx¡do sód¡co acuoso 3 N) y acetato de et¡lo. El extracto de fase separada se secó (MgSÜ4) y se evaporó para proporc¡onar un ace¡te de color naranja transparente que se pur¡f¡có por RP-HPLC preparat¡va. El producto a¡slado se d¡solv¡ó en metanol, se d¡luyó con ác¡do clorhídr¡co concentrado. se evaporó a sequedad. se volv¡ó a d¡solver en metanol y se prec¡p¡tó med¡ante la ad¡c¡ón de éter d¡etíl¡co. La f¡ltrac¡ón del prec¡p¡tado produjo 85,8 mg de sal monoclorh¡drato 2.2-d¡met¡l-1-[4-(3-fen¡l-¡m¡dazo[1.2-6]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n- 1-¡l]-propan-1-ona en forma de un polvo amar¡llo claro. pf. 277-278 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,24 (s. 9 H) 3,59 - 3,67 (m. 4 H) 3,71 - 3,79 (m. 4 H) 7,55 - 7,64 (m. 2 H) 8,06 - 8,15 (m. 2 H) 8,57 (s a. 1 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-cfe) 8 ppm 28,00, 38,08, 43,85, 45,30, 116,00, 121,14, 122,29, 126,29, 127,20, 128,85, 129,04, 155,84, 175,34. LRMS (IEN) m/z 364,2[(M+H)]+, calculado para C21H25N5O: 363,47.
5.6.126. Síntesis de (S)-5-(((3-(4-(ammometM)feml)imidazo[1,2-b]pindazm-6-N)ammo)metN)-1-
isopentilpirrolidin-2-ona
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El acoplam¡ento de Suzuk¡ s¡gu¡endo el proced¡m¡ento descr¡to en ejemplo 5.6.19 proporc¡onó el compuesto del título con un rend¡m¡ento del 71 %. RMN 1H (400 MHz. METANOL-d4) 8 ppm 0,78 - 0,90 (m. 6 H) 1,31 -1,50 (m. 3 H) 1,93 - 2,06 (m. 1 H) 2,12 - 2,36 (m. 2 H) 2,39 - 2,52 (m. 1 H) 3,09 (ddd, J=13,83, 8,15, 5,56 Hz. 1 H) 3,56 - 3,75 (m. 3 H) 3,99 - 4,08 (m. 1 H) 4,19 (s. 2 H) 6,78 (d. J=9,85 Hz. 1 H) 7,58 (m. J=8,34 Hz. 2 H) 7,70 (d. J=9,85 Hz. 1 H) 7,80 (s. 1 H) 8,20 (m. J=8,34 Hz. 2 H); LRMS (IEN) m/407,0 [(M + H)+. calculado para C23H30N6O 406,0].
5.6.127. Síntesis de 4-(3-Bromo¡m¡dazo[1,2-6]p¡Ndazm-6-¡l)-W-(ferc-but¡l)p¡perazm-1-carboxam¡da
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A una suspens¡ón en atmósfera de N2. a 0 °C. ag¡tada ráp¡damente de d¡clorh¡drato de 3-bromo-6-p¡peraz¡n-1-¡l- ¡m¡dazo[1.2-8]p¡r¡daz¡na (934,9 mg. 2.6 mmol) y base de Hun¡g [7087-68-5] (1.8 ml. 10,6 mmol) en d¡clorometano (26 ml) se le añad¡ó 2-¡soc¡anato-2-met¡lpropano [1609-86-5] (340 pl. 2.9 mmol). Se perm¡t¡ó que la suspens¡ón se ag¡tará y se calentará a temperatura amb¡ente durante 17 h y después se repart¡ó entre salmuera y acetato de et¡lo. La fase orgán¡ca se redujo en volumen para prec¡p¡tar el producto como 442,1 mg de sól¡do de color amar¡llo. Una alícuota de 129,3 mg se pur¡f¡có por RP-HPLC preparat¡va para produc¡r 61,8 mg de 4-(3-bromo¡m¡dazo[1,2- 6]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-W-(ferc-but¡l)p¡peraz¡n-1-carboxam¡da en forma de un polvo de color blanco. pf. 199-200 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 1,28 (s. 8 H) 2,51 (s. 1 H) 3,30 (s. 1 H) 3,39 - 3,46 (m. 4 H) 3,48 - 3,54 (m. 4 H) 7,26 (d. J=10,11 Hz. 1 H) 7,61 (s. 1 H) 7,88 (d. J=10,11 Hz. 1 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-d6) 5 ppm 29,15,43.05. 45,27, 49,94, 99,27, 110,77, 126,00, 131,50, 136,54, 155,16, 156,93. LRMS (IEN) m/z 381,1/383,1 [(M+H)]+, calculado para C-i5H21BrN6O: 381,28.
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A una solución de (S)-3-bromo-A/-(p¡rrol¡d¡n-2-¡lmet¡l)¡midazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-6-am¡na (400 mg, 1,2 mmol) y trietilamina (0,5 ml, 3,5 mmol) en DCM (10 ml) se le añad¡ó gota a gota t-but¡l ¡soc¡anato (0,2 ml, 1,75 mmol). Después de agitar a ta durante 2 h, la mezcla de reacción se concentró y se purificó por cromatografía en columna ISCO (MeOH al 10%/DCM) para dar (S)-2-(((3-bromo¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-6-¡l)amino)met¡l)-W-(ferc-but¡l)p¡rrol¡d¡n- 1-carboxamida (360 mg, rendimiento del 76 %). RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 7,58 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 6,72 (d, J = 9,85 Hz, 1 H), 5,07 (s, 1 H), 4,26 (dd, J = 6,57, 1,77 Hz, 1 H), 3,35 - 3,48 (m, 4 H), 2,09 -
2,20 (m, 1 H), 1,90 - 2,05 (m, 3 H), 1,26 (s, 9 H); LRMS (IEN) m/e 395,2 [(M + H)+, calculado para C-,6H24BrN6O 396,3].
5.6.129. Síntesis de (S)-1-(2-(((3-bromo¡m¡dazo[1,2-b]pmdazm-6-M)(met¡l)ammo)met¡l)p¡rrol¡dm-1-¡l)-3-
metilbutan-1-ona:
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A una solución de (S)-1-(2-(((3-bromo¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)met¡l)pirrol¡d¡n-1-¡l)-3-met¡lbutan-1-ona (380 mg, 1,0 mmol) en THF (10 ml) se le añadió hidruro sódico (120 mg, 3,0 mmol) a ta. Después de agitar durante 15 m¡n, se añad¡ó gota a gota yoduro de met¡lo. La reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante la noche y se trató con solución de cloruro de amonio, se extrajo con acetato de etilo, se concentró y se purificó por cromatografía en columna ISCO (MeOH al 10%/DCM) para dar un producto no puro. Se purificó adicionalmente por HPLC Prep (neutral) para dar (S)-1-(2-(((3-bromo¡m¡dazo[1,2-8]p¡r¡daz¡n-6-il)(met¡l)am¡no)met¡l)p¡rrol¡d¡n-1-¡l)-3-met¡lbutan-1-ona en forma de un aceite. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 7,65 - 7,75 (m, 1 H), 7,44 - 7,52 (m, 1 H), 7,04-7,22 (m, 1 H), 4,45-4,61 (m, 1 H), 3,45-3,92 (m, 4 H), 3,19 - 3,23 (m, 3 H), 1,90-2,32 (m, 7 H), 0,78 - 0,92 (m, 6 H); LRMS (IEN) m/e 394,1 [(M + H)+, calculado para C-i/^sBrNsO 395,3].
5.6.130. Síntesis de (S)-3-metiM-(2-((metM(3-(pmdm-4-M)imidazo[1,2-b]pmdazm-6-N)ammo)metN)pirrolidm-1- il)butan-1-ona (con rotámeros menores):
imagen261
Este compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,50 - 8,73 (m, 2 H), 8,16 - 8,31 (m, 2 H), 7,93 - 8,16 (m, 1 H), 7,65 - 7,93 (m, 1 H), 7,38 (d, J = 10,11 Hz, 1 H), 4,49 (c, J = 5,81 Hz, 1 H), 3,96 (dd, J = 14,78, 5,94 Hz, 1 H), 3,37 - 3,66 (m, 3 H), 3,25 (m, 3 H), 2,07 - 2,20 (m, 3 H), 1,88 - 2,06 (m, 4 H), 0,72 - 0,96 (m, 6 H); LRMS (IEN) m/e 393,2 [(M + H)+, calculado para C22H29N6O 393,5].
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A una mezcla de 4-(3-bromo¡m¡dazo[1,2-¿>]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-A/-(ferc-but¡l)p¡peraz¡n-1-carboxam¡da (301,0 mg, 0,8 mmol), ácido fen¡lborón¡co [98-80-8] (117,8 mg, 1,0 mmol), monoh¡drato tr¡bás¡co de fosfato potás¡co [27176-10-9] (366,4 mg, 1,6 mmol) y complejo [1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno] d¡cloropalad¡o (II), con d¡clorometano [95464-05-4] (68,7 mg, 0,1 mmol) conten¡do en un matraz de fondo redondo de 50 ml se le añad¡ó una soluc¡ón de 30 % (v/v) de agua en 1,2-d¡metox¡etano (25 ml) y una barra ag¡tadora magnét¡ca. El rec¡p¡ente de reacc¡ón se equ¡pó con un condensador de reflujo, se ¡ntrodujo en un baño de ace¡te a temperatura amb¡ente, y el s¡stema se somet¡ó a 10 c¡clos de evacuac¡ón/atmósfera de N2 m¡entras se ag¡taba ráp¡damente. La reacc¡ón ráp¡damente ag¡tada, en atmósfera de N2, se calentó a una temperatura de baño de ace¡te de 85 °C durante 17 h, después se enfr¡ó y se repart¡ó entre salmuera (pH ajustado a 10 con h¡dróx¡do sód¡co acuoso 3 N) y acetato de et¡lo. El extracto de fase separada se secó (MgSÜ4) y se evaporó para proporc¡onar un ace¡te de color pardo que se pur¡f¡có por RP-HPLC preparat¡va. El producto a¡slado se d¡solv¡ó en metanol, se d¡luyó con ác¡do clorhídr¡co concentrado, se evaporó a sequedad, se volv¡ó a d¡solver en metanol y se prec¡p¡tó med¡ante la ad¡c¡ón de éter d¡etíl¡co. la f¡ltrac¡ón del prec¡p¡tado produjo 39,3 mg de sal monoclorh¡drato W-(ferc-but¡l)-4-(3-fen¡l¡m¡dazo[1,2-¿>]p¡r¡daz¡n-6-¡l)p¡peraz¡n-1- carboxam¡da en forma de un polvo de color blanco, pf. 210-211 °C (desc.). RMN 1H (400 Mhz, DMSO-da) 5 ppm 1 28 (s, 8 H) 2,51 (s a, 2 H) 3,47 (s a, 4 H) 3,57 - 3,63 (m, 4 H) 7,49 (s, 1 H) 7,55 - 7,60 (m, 2 H) 7,76 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,11 (d, J=7,58 Hz, 2 H) 8,21 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 8,48 (s, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-da) 5 ppm 29,15, 42,92, 45,19, 49,98, 116,08, 121,27, 122,26, 126,43, 127,18, 128,08, 128,78, 129,02, 132,90, 155,89, 156,83. LRMS (IEN) m/z 379,2[(M+H)]+, calculado para C21H26N6O: 378,48.
5.6.132. Síntesis de (1-(3-(pmdm-4-N)imidazo[1,2-£>]pÍNdazm-6-il)pipeNdm-3-il)carbamato de tere-butilo
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Este compuesto se preparó usando el enfoque descr¡to en el ejemplo 5.6.42. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 1,48 (s, 9 H) 1,57 - 1,64 (m, 1 H) 1,78 (ddt, J=13,34, 8,88, 4,44, 4,44 Hz, 1 H) 1,91 (ddd, J=13,56, 6,62, 3,20 Hz, 1 H) 1,96 - 2,06 (m, 1 H) 3,27 (dd, J=12,90, 7,61 Hz, 1 H) 3,43 (t, J=9,15 Hz, 1 H) 3,70 - 3,79 (m, 1 H) 3,99 (d, J=12,79 Hz, 1 H) 4,70 (s a, 1 H) 6,98 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,80 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 8,03 - 8,08 (m, 3 H) 8,66 - 8,73 (m, 2 H); LRMS (IEN) m/395,0 [(M + H)+, calculado para C21H26N6O2 394,0].
5.6.133. Síntesis de 5-(3-bromoimidazo[1,2-b]pmdazm-6-il)hexahidropirrolo[3,4-c]pirrol-2(1H)-carboxilato de (3aR,6aS)-tere-butilo
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Este compuesto se preparó usando el enfoque descr¡to en el ejemplo 5.6.42, Parte A. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 1,49 (s, 9 H) 1,57 (s, 2 H) 3,06 (s a, 2 H) 3,39 (s a, 2 H) 3,50 (d, J=9,35 Hz, 2 H) 3,69 (s a, 2 H) 3,76 - 3,89 (m, 2 H) 6,60 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,53 (s, 1 H) 7,68 (d, J=9,85 Hz, 1 H); LRMS (IEN) m/408,0 [(M + H)+ doblete, calculado para C^H22BrN5O2 407,0].
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Este compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.42, Parte A. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 2,15 - 2,29 (m, 1 H) 2,44 - 2,55 (m, 1 H) 3,51 - 3,73 (m, 3 H) 3,80 - 3,89 (m, 1 H) 4,01 - 5 4,11 (m, 1 H) 6,65 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,29 - 7,42 (m, 5 H) 7,52 (s, 1 H) 7,68 (d, J=9,60 Hz, 1 H); LRMS (IEN)
m/343,0 [(M + H)+ doblete, calculado para C16H15BrN4 342,0].
5.6.135. Síntesis de 2-(1-(3-bromo¡m¡dazo[1,2-6]pmdazm-6-M)p¡rrol¡dm-2-il)acetato de tere-butilo
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Este compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.42, Parte A.
RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,46 - 1,51 (m, 10 H) 1,96 - 2,24 (m, 4 H) 2,31 (dd, J=14,99, 9,92 Hz, 15 1 H) 2,97 (dd, J=14,77, 3,09 Hz, 1 H) 3,42 - 3,53 (m, 1 H) 3,59 - 3,70 (m, 1 H) 4,48 (ddt, J=10,01,7,25, 2,73, 2,73 Hz,
1 H) 6,66 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,51 (s, 1 H) 7,67 (d, J=9,70 Hz, 1 H); LRMS (IEN) m/381,0 [(M + H)+ doblete, calculado para C-i6H2-iBrN4O2 380,0].
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5.6.136. Síntesis de 4-(3-bromo¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡dazm-6-¡l)p¡perazm-1-carbot¡oato de S-isopropilo
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Se añadieron base de Hunig [7087-68-5] (0,4 ml, 2,4 mmol), después carbonocloridotioato de S-isopropilo [1388993-5] (0,2 ml, 1,6 mmol) a una solución agitada a temperatura ambiente de 3-bromo-6-piperazin-1-il-imidazo[1,2- 25 b]piridazina (450,0 mg, 1,6 mmol) en acetato de etilo (30 ml). Después, la suspensión formada rápidamente se agitó durante una noche, en atmósfera de N2, después se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se evaporó y se cristalizó a partir de acetato de etilo/heptano para proporcionar 482,9 mg de polvo de color blanco, pf. 186-187 °C. RMN 1H (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 1,30 (d, J=6,82 Hz, 6 H) 2,51 (dt, J=3,60, 1,86 Hz, 1 H) 3,49 - 3,59 (m, 1 H) 3,59 - 3,71 (m, 7 H) 7,58 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,09 - 8,13 (m, 2 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 23,22, 35,48, 30 44,71,101,63, 110,84, 113,71,114,69, 116,58, 119,46, 123,56, 126,04, 134,22, 155,61,157,77, 158,15, 158,53,
158,90, 166,18. LRMS (IEN) m/z 384,0/386,0 [(M+H)]+, calculado para C^H-ieBr^OS: 384,30.
5.6.137. Síntesis de 3-Bromo-6-(4-(pirazm-2-il)piperazm-1-M)imidazo[1,2-b]pirídazma
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Este compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.42, Parte A. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 3,70 - 3,87 (m, 8 H) 6,90 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 7,58 (s, 1 H) 7,75 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,94 (d, J=2,53 Hz, 1 H) 8,13 (dd, J=2,53, 1,52 Hz, 1 H) 8,23 (d, J=1,52 Hz, 1 H); LRMS (IEN) m/360,0 [(M + H)+ doblete, 40 calculado para C14H14BrN7 359,0].
5.6.138. Síntesis de (2-(1-(3-bromoimidazo[1,2-b]pirídazm-6-il)piperídm-4-N)etil)carbamato de tere-butilo
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Este compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.42, Parte A. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,19 -1,40 (m, 2 H) 1,41-1,53 (m, 11 H) 1,60 (dtd, J=10,71, 7,15, 7,15, 3,79 Hz, 1 H) 1,85 (d, J=12,38 Hz, 2 H) 2,88 - 3,01 (m, 2 H) 3,21 (c, J=6,57 Hz, 2 H) 4,21 (d, J=13,14 Hz, 2 H) 6,84 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,52 (s, 1 H) 7,64 (d, J=9,85 Hz, 1 H); LRMS (IEN) m/424,0 [(M + H)+ doblete, calculado para C1sH26BrN5O2 423,0].
5.6.139. Síntesis de éster íerc-butílico del ácido metil-[1-(3-piridm-4-il-imidazo[1,2-b]piridazm-6-M)-pirrolidm-3- il]-carbámico
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Una mezcla de éster íerc-butílico del ácido [1-(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-£)]p¡ndaz¡n-6-¡l)-p¡rrol¡dm-3-¡l]-met¡l-carbám¡co (100 mg, 0,25 mmol), ác¡do 4-p¡r¡d¡mlborómco (40 mg, 0,33 mmol), K2CO3 (104 mg, 0,75 mmol) y d¡clorob¡s(tr¡femlfosf¡na)palad¡o (II) (8,8 mg, 0,013 mmol) en MeCN/agua (3,2 ml/0,8 ml) se calentó en un m¡croondas a 150 °C durante 15 m¡n. La capa de agua se ret¡ró y la capa orgán¡ca se d¡luyó con MeCN y se f¡ltró. El f¡ltrado se somet¡ó a HPLC preparat¡va para dar el compuesto del título (25,3 mg). RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 1,50 - 1,55 (m, 9 H) 2,22 -2,32 (m, 2 H) 2,89 (s, 3 H) 3,46 - 3,57 (m, 2 H) 3,72 - 3,80 (m, 2 H) 4,91 (t, J=7,61 Hz, 1 H)
6,95 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,77 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 8,11 (s, 1 H) 8,23 - 8,27 (m, 2 H) 8,53 - 8,58 (m, 2 H). LRMS (IEN) m/z 395,2 [(M+H)]+, calculado para C2-|H26N6O2: 394,48.
5.6.140. Síntesis de 4-(3-femlimidazo[1,2-b]piridazm-6-il)piperazm-1-carbotioato de S-isopropilo
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A una mezcla de 4-(3-bromo¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡n-6-¡l)p¡peraz¡n-1-carbot¡oato de S-¡soprop¡lo (360,9 mg, 0,9 mmol), ác¡do fen¡lborón¡co [98-80-8] (137,5 mg, 1,1 mmol), monoh¡drato tr¡bás¡co de fosfato potás¡co [27176-10-9] (438,1 mg, 1,9 mmol) y complejo [1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno] d¡cloropalad¡o (II), con d¡clorometano [95464-05-4] (78,4 mg, 0,1 mmol) conten¡do en un matraz de fondo redondo de 50 ml se le añad¡ó una soluc¡ón de 30 % (v/v) de agua en 1,2-d¡metox¡etano (25 ml) y una barra ag¡tadora magnét¡ca. El rec¡p¡ente de reacc¡ón se equ¡pó con un condensador de reflujo, se ¡ntrodujo en un baño de ace¡te a temperatura amb¡ente, y el s¡stema se somet¡ó a 10 c¡clos de evacuac¡ón/atmósfera de N2 m¡entras se ag¡taba ráp¡damente. La reacc¡ón ráp¡damente ag¡tada, en atmósfera de N2, se calentó a una temperatura de baño de ace¡te de 85 °C durante 17 h, después se enfr¡ó y se repart¡ó entre salmuera (pH ajustado a 10 con h¡dróx¡do sód¡co acuoso 3 N) y acetato de et¡lo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4) y se evaporó para proporc¡onar un ace¡te de color pardo oscuro que se pur¡f¡có por RP- HPLC preparat¡va. El producto a¡slado se d¡solv¡ó en metanol, se d¡luyó con ác¡do clorhídr¡co concentrado, se evaporó a sequedad, se volv¡ó a d¡solver en metanol y se prec¡p¡tó med¡ante la ad¡c¡ón de éter d¡etíl¡co. La f¡ltrac¡ón del prec¡p¡tado produjo 226,9 mg de sal monoclorh¡drato 4-(3-fen¡l¡m¡dazo[1,2-6]p¡ndaz¡n-6-¡l)p¡peraz¡n-1-carbot¡oato de S-¡soprop¡lo en forma de un polvo de color blanco, pf. 276-277 °C (desc.). rMn 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1,30 (d, J=6,82 Hz, 6 H) 2,49 - 2,52 (m, 2 H) 3,52 (dt, J=13,64, 6,82 Hz, 1 H) 3,60 - 3,71 (m, 7 H) 7,46 - 7,51 (m, 1 H) 7,55 - 7,60 (m, 2 H) 7,77 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,09 - 8,13 (m, 2 H) 8,25 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 8,54 (s, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 23,27, 35,50, 44,94, 116,00, 121,27, 122,33, 126,38, 127,14, 128,02, 128,82, 128,97, 132,91. LRMS (IEN) m/z 384,0/386,0[(M+H)]+, calculado para C26H23N5OS: 381,50.
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Parte A. 4-(3-Bromo¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-N-¡soprop¡lp¡peraz¡n-1-carboxam¡da
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Se añad¡ó 2-¡soc¡anatopropano [1795-48-8] (120 pl. 1.2 mmol). med¡ante una jer¡nga, a una soluc¡ón ag¡tada, temperatura amb¡ente, transparente. ¡ncolora de 3-bromo-6-p¡peraz¡n-1-¡l-¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡na (334,6 mg. 1.2 mmol) en d¡clorometano (20 ml). La soluc¡ón se dejó proceder durante 17 h, después se evaporó a sequedad para proporc¡onar 481,5 mg de una espuma sól¡da de color amar¡llo claro. LRmS (IEN) m/z 367,0/369.0[(M+H)]+. calculado para C^H^Br^O: 367,25.
Parte B. M-Isoprop¡l-4-(3-fen¡l¡m¡dazo[1.2-blp¡r¡daz¡n-6-¡l)p¡peraz¡n-1-carboxam¡da. A una mezcla de 4-(3- bromo¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-A/-¡soprop¡lp¡peraz¡n-1-carboxam¡da (481,5 mg. 1.3 mmol). ác¡do fen¡lborón¡co [9880-8] (191,8 mg. 1.6 mmol). monoh¡drato tr¡bás¡co de fosfato potás¡co [27176-10-9] (608,4 mg. 2.6 mmol) y complejo [1,1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno] d¡cloropalad¡o (II). con d¡clorometano [95464-05-4] (111,4 mg. 0.1 mmol) conten¡do en un matraz de fondo redondo de 50 ml se le añad¡ó una soluc¡ón de 30 % (v/v) de agua en 1,2-d¡metox¡etano (25 ml) y una barra ag¡tadora magnét¡ca. El rec¡p¡ente de reacc¡ón se equ¡pó con un condensador de reflujo. se ¡ntrodujo en un baño de ace¡te a temperatura amb¡ente, y el s¡stema se somet¡ó a 10 c¡clos de evacuac¡ón/atmósfera de N2 m¡entras se ag¡taba ráp¡damente. La reacc¡ón ráp¡damente ag¡tada, en atmósfera de N2. se calentó a una temperatura de baño de ace¡te de 85 °C durante 17 h, después se enfr¡ó y se repart¡ó entre salmuera (pH ajustado a 10 con h¡dróx¡do sód¡co acuoso 3 N) y acetato de et¡lo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4) y se evaporó para proporc¡onar un ace¡te de color pardo que se pur¡f¡có por RP-HPLC preparat¡va. El producto a¡slado se d¡solv¡ó en metanol, se d¡luyó con ác¡do clorhídr¡co concentrado. se evaporó a sequedad. se volv¡ó a d¡solver en metanol y se prec¡p¡tó med¡ante la ad¡c¡ón de éter d¡etíl¡co. La f¡ltrac¡ón del prec¡p¡tado produjo 219,4 mg de sal monoclorh¡drato W-¡soprop¡l-4-(3-fen¡l¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡n-6-¡l)p¡peraz¡n-1-carboxam¡da en forma de un polvo de color blanco. pf. 217-218 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 1,08 (d. J=6,57 Hz. 6 H) 2,51 (d. J=1,52 Hz. 2 H) 3,50 (d. J=5,05 Hz. 4 H) 3,56 - 3,63 (m. 4 H) 3,73 - 3,82 (m. 1 H) 7.49 (d. J=7,33 Hz. 1 H) 7,54 - 7,60 (m. 2 H) 7,80 (d. J=10,10 Hz. 1 H) 8,08 - 8,13 (m. 2 H) 8,22 (d. J=10,11 Hz. 1 H) 8,53 (s. 1 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 22,88, 41,82, 42,69, 45,13, 116,22, 120,96, 122,08, 126,38, 127,20, 128,03, 128,76, 129,02, 132,77, 155,89, 156,69. LRMS (IEN) m/z 365,1[(M+H)]+, calculado para C20H24N6O: 364,45. pm = 364,45.
5.6.142. Síntesis de 2-(((3-ammo¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡dazm-6-¡l)ammo)met¡l)p¡rrol¡dm-1-carbox¡lato de (S)-terc- butilo y 2-(((3-acetam¡do¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡dazm-6-¡l)ammo)met¡l)p¡rrol¡dm-1-carbox¡lato de (S)-terc-but¡lo
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Parte A. A/-(6-cloro¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡n-3-¡l)acetam¡da:
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A una soluc¡ón de 6-cloro¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡n-3-am¡na y tr¡et¡lam¡na (0.8 ml. 6.0 mmol) en DCM (25 ml) se le añad¡ó gota a gota cloruro de acet¡lo y se ag¡tó a ta durante una noche. La mezcla se concentró y se pur¡f¡có por
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cromatografía de columna ISCO (MeOH al 10%/DCM) para dar A/-(6-cloro¡m¡dazo[1,2-¿>]p¡r¡daz¡n-3-¡l)acetam¡da no muy pura (500 mg, rend¡m¡ento del 95 %). 60 mg de mater¡al no puro se purificaron ad¡c¡onalmente por HPLC Prep (neutral) para dar W-(6-cloro¡m¡dazo[1,2-¿>]p¡r¡daz¡n-3-¡l)acetam¡da puro. RmN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm
8,01 (d, J=9,35 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,26 (d, J = 9,35 Hz, 1 H), 2,29 (s, 3 H); LRMS (IEN) m/e 210,9 [(M + H)+, calculado para C8H8ClN4O 211,6].
Parte B. (2-(((3-am¡no¡m¡dazo[1,2-¿i]p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)met¡l)p¡rrol¡d¡n-1-carbox¡lato de S)-ferc-but¡lo y 2-(((3- acetam¡do¡m¡dazo[1,2-¿i]p¡ridaz¡n-6-¡l)am¡no)met¡l)p¡rrol¡d¡n-1-carbox¡lato de (S)-terc-but¡lo
Los compuestos del título se prepararon usando el enfoque descr¡to en el ejemplo 5.6.68.
2-(((3-am¡no¡m¡dazo[1,2-¿>]p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)met¡l)p¡rrol¡d¡n-1-carbox¡lato de (S)-ferc-but¡lo: RMN 1H (400 MHz, METANOL-cC,) 5 ppm 7,43-7,46 (m, 1 H), 6,80 - 6,87 (m, 1 H), 6,48-6,51 (m, 1 H), 4,19 (s a, 1 H), 3,40-3,79 (m, 4 H),
1,96 - 2,04 (m, 4 H), 1,41 -1,50 (m, 9 H); LRMS (IEN) m/e 333,1 [(M + H)+, calculado para C16H25N6O2 333,4].
2-(((3-acetam¡do¡m¡dazo[1,2-¿>]p¡r¡daz¡n-6-¡l)am¡no)met¡l)p¡rrol¡d¡n-1-carbox¡lato de (S)-ferc-but¡lo: RMN 1H (400 MHz, METANOL-C,) 5 ppm 7,51 - 7,67 (m, 2 H), 6,61 - 6,91 (m, 1 H), 2,89-4,30 (m, 6 H), 1,80-2,37 (m, 7 H), 1,45-1,49 (m, 9 H); LRMS (IEN) m/e 375,2 [(M + H)+, calculado para C18H27N6O3 375,5].
5.6.143. Síntesis de éster isopropílico del ácido 4-[3-(2-metoxi-piridm-4-il)-imidazo[1,2-£>]piridazm-6-il]- piperazin-1-carboxílico
imagen276
Este compuesto se preparó usando el enfoque descr¡to en el ejemplo 5.6.111 a part¡r del éster ¡sopropíl¡co del ác¡do 4-(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1-carboxíl¡co (452,7 mg, 1,2 mmol) y ác¡do 2-metox¡p¡r¡d¡n-4- borón¡co [762262-09-9] (225,6 mg, 1,5 mmol) para proporc¡onar 229,7 mg de d¡clorh¡drato del éster ¡sopropíl¡co del ác¡do 4-[3-(2-metox¡-p¡r¡d¡n-4-¡l)-¡m¡dazo[1,2-¿>]p¡r¡daz¡n-6-¡l]-p¡peraz¡n-1-carboxíl¡co en forma de un polvo blanco, pf. 215-216 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 1,22 (d, J=6,06 Hz, 6 H) 2,51 (s, 2 H) 3,53 - 3,60 (m, 4 H) 3,62 - 3,72 (m, 4 H) 3,94 (s, 2 H) 4,82 (sept, J=6,19 Hz, 1 H) 7,65 (s, 1 H) 7,75 - 7,83 (m, 2 H) 8,25 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,33 (d, J=5,56 Hz, 1 H) 8,81 (s, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-da) 5 ppm 21,95, 42,48, 45,02, 53,67, 68,26,
106,68, 114,00, 116,54, 122,59, 124,17, 125,11, 134,06, 137,16, 147,16, 154,28, 155,83, 163,92. LRMS (IEN) m/z
397,1 [(M+H)]+, calculado para C20H24N6O3: 396,45.
5.6.144. Síntesis de (S)-1-(3,3-dimetilbutil)-5-(((3-(2-metoxipiridm-3-N)imidazo[1,2-£>]piridazm-6-
il)amino)metil)pirrolidin-2-ona
imagen277
Este compuesto se preparó usando el enfoque descr¡to en el ejemplo 5.6.126. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO- d) 5 ppm 0,91 (s, 9 H) 1,35 (td, J=12,25, 5,56 Hz, 1 H) 1,48 (td, J=12,38, 4,55 Hz, 1 H) 1,90 - 2,05 (m, 1 H) 2,11 -
2,25 (m, 1 H) 2,30 - 2,53 (m, 2 H) 2,88 - 3,01 (m, 1 H) 3,49 (dt, J=14,21,4,01 Hz, 1 H) 3,67 - 3,81 (m, 2 H) 3,95 - 4,04 (m, 1 H) 4,07 (s, 3 H) 5,10 (s a, 1 H) 6,66 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,04 (dd, J=7,45, 4,93 Hz, 1 H) 7,84 (d, J=9,60 Hz, 1 H)
8,06 (s, 1 H) 8,19 (dd, J=5,05, 1,77 Hz, 1 H) 8,61 (dd, J=7,58, 1,77 Hz, 1 H); LRMS (IEN) m/423,0 [(M + H)+, calculado para C23H30N6O2 422,0].
5.6.145. Síntesis de éster isopropílico del ácido 4-[3-(2-isopropoxi-feml)-imidazo[1,2-£>]piridazm-6-il]- piperazin-1-carboxílico
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Este compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.111 a partir del éster isopropílico del ácido 4-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-piperazin-1-carboxílico (370,2 mg, 1,0 mmol) y ácido 2- isopropoxifenilborónico [138008-97-6] (217,4 mg, 1,2 mmol) para proporcionar 250,7 mg de monoclorhidrato del éster isopropílico del ácido 4-[3-(2-isopropoxi-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazin-1-carboxílico en forma de un polvo de color blanco, pf. 216-217 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1,22 (dd, J=18,95, 6,06 Hz, 11 H) 2,51 (dt, J=3,54, 1,77 Hz, 3 H) 3,47 - 3,53 (m, 4 H) 3,54 - 3,60 (m, 4 H) 4,69 - 4,83 (m, 2 H) 7,08 - 7,13 (m, 1 H)
7,22 (d, J=8,34 Hz, 1 H) 7,47 (td, J=7,89, 1,64 Hz, 1 H) 7,78 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 7,95 (dd, J=7,71, 1,64 Hz, 1 H)
8,25 (t, J=5,05 Hz, 2 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 21,70, 21,92, 42,50, 44,87, 68,20, 70,05, 113,38, 115,03, 116,05, 119,86, 121,98, 122,68, 124,87, 130,37, 130,78, 131,87, 154,25, 154,99, 155,54. LRMS (IEN) m/z
424,1 [(M+H)]+, calculado para C23H29N5O3: 423,52.
5.6.146. Síntesis de 4-(3-bromo¡m¡dazo[1,2-d]pmdazm-6-il)-3-metMp¡perazm-1-carboxMato de isopropilo
imagen279
Parte A. 4-(3-bromo¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-il)-3-met¡lp¡peraz¡n-1-carbox¡lato de tere-butilo
imagen280
Una suspensión agitada de 3-metilpiperazin-1-carboxilato de tere-butilo [120737-59-9] (987,7 mg, 4,9 mmol), 3- bromo-6-fluoro-¡midazo[1,2-b]p¡r¡daz¡na (361,7 mg, 4,9 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (0,9 ml, 5,2 mmol) en 2- propanol (40 ml) se calentó a 65 °C, en atmósfera de N2, durante 21 días. La suspensión de reacción enfriada se repartió entre salmuera y acetato de etilo y el extracto se secó (MgSO4) y se evaporó para obtener 1,2 g de aceite de color pardo transparente. LRMS (IEN) m/z 215,9/217,9[(M+H)]+, calculado para C-i6H22BrN5O2: 396,29.
Parte B. Diclorhidrato de 3-bromo-6-(2-met¡lp¡peraz¡n-1-¡l)¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡na
imagen281
Se añadió ácido clorhídrico concentrado (3,0 ml) a una solución de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-3- metilpiperazin-1-carboxilato de tere-butilo (1,2 g, 3,1 mmol) en metanol (60 ml) y se dejó agitar a temperatura ambiente en atmósfera de N2 durante 3 días. Después, la solución se evaporó a sequedad para proporcionar 1,1 g de un sólido de color pardo claro. LRMS (IEN) m/z 295,9/297,9 [(M+H)]+, calculado para CnH14BrNs: 296,17.
Parte C. 4-(3-Bromo¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-3-met¡lp¡peraz¡n-1-carbox¡lato de isopropilo.
Se añadió base de Hunig [7087-68-5] (2,1 ml, 12,1 mmol) a temperatura ambiente, a una suspensión agitada de diclorhidrato de 3-bromo-6-(2-metilpiperazin-1-il)imidazo[1,2-b]piridazina (1,1 g, 3,0 mmol) en acetato de etilo (150 ml). La suspensión se agitó durante 1,5 h, después se añadió lentamente una solución 1,0 M de cloroformiato de isopropilo en tolueno (3,0 ml) y se dejó proceder la reacción durante 17 h, después se lavó con salmuera. La fase de acetato de etilo se secó (MgSO4) y se evaporó. El producto se purificó por RP-HPLC preparativa para proporcionar
52,1 mg de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-3-metilpiperazin-1-carboxilato de isopropilo racémico en forma de
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un sólido de color amarillo claro, pf. 52-54 °C. RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 1,11 (d, J=6,57 Hz, 3 H) 1,15 -
1,25 (m, 6 H) 2,51 (dt, J=3,73, 1,80 Hz, 2 H) 3,15 (dd, J=12,88, 2,78 Hz, 2 H) 3,86 (d, J=13,39 Hz, 1 H) 3,98 (d, J=13,39 Hz, 2 H) 4,47 (s a, 1 H) 4,78 - 4,87 (m, 1 H) 7,23 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 7,64 (s, 1 H) 7,91 (d, J=10,11 Hz, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 13,53, 21,90, 42,71,48,04, 68,05, 99,42, 110,59, 126,00, 131,15, 136,33,
154,41, 154,71. LRMS (IEN) m/z 382,0/384,0[(M+H)]+, calculado para C-i5H20BrN5O2: 382,26.
5.6.147. Síntesis de 4-(3-bromo¡m¡dazo[1,2-d]p¡r¡dazm-6-¡l)-2-met¡lp¡perazm-1-carboxMato de isopropilo
imagen282
Parte A. 1-Isopropil 2-met¡lp¡peraz¡n-1,4-d¡carbox¡lato de 4-terc-butilo
imagen283
A una solución a 0 °C, agitada de 3-metilpiperazin-1-carboxilato de ferc-butilo [120737-59-9] (3,0 g, 148,4 mmol) y base de Hunig [7087-65-5] (31,0 ml, 178,0 mmol) en acetato de etilo (300 ml) se le añadió una solución 1,0 M de cloroformiato de isopropilo en tolueno (150 ml). La reacción se dejó en agitación y se calentó a temperatura ambiente durante una noche en atmósfera de N2. Después, la mezcla de reacción se lavó con salmuera, se secó (CaSO4) y se evaporó para proporcionar 4,2 g de aceite de color amarillo transparente. LRMS (IEN) m/z 193,1[(M+H)]+, calculado para C14H26N2O4: 286,37.
Parte B. Clorhidrato de 2-metilp¡peraz¡n-1-carbox¡lato de isopropilo
imagen284
Se añadió ácido clorhídrico concentrado (6,0 ml) a una solución de 1 -isopropil 2-metilpiperazin-1,4-dicarboxilato de 4-ferc-butilo (4,2 g, 14,6 mmol) en metanol (250 ml) y se dejó agitar a temperatura ambiente en atmósfera de N2 durante 3 días. Después, la solución se evaporó a sequedad y el aceite viscoso de color amarillo resultante se trituró en acetona para precipitar un polvo fino de color blanco que se aisló por filtración, en atmósfera de N2, par proporcionar 2,0 g. LRMS (IEN) m/z 187,0[(M+H)]+, calculado para C9H18N2O2: 186,26.
Parte C. 4-(3-Bromo¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-il)-2-met¡lp¡peraz¡n-1-carbox¡lato de isopropilo. Una suspensión agitada de clorhidrato de 2-metilpiperazin-1-carboxilato de isopropilo (1,8 g, 8,0 mmol), 3-bromo-6-fluoro-imidazo[1,2- b]piridazina (1,5 g, 6,6 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (5,5 ml, 31,6 mmol) en 2-propanol (40 ml) se calentó a reflujo, en atmósfera de N2, durante 2 días. La suspensión de reacción enfriada se repartió entre salmuera y acetato de etilo y el extracto se secó (MgSO4) y se evaporó para obtener 3,0 g de un sólido de color pardo claro. Una alícuota de 217 mg de esta muestra se purificó por RP-HPLC preparativas para proporcionar 76,4 mg de 4-(3- bromoimidazo [1,2-b]p¡r¡dazin-6-¡l)-2-met¡lp¡peraz¡n-1-carbox¡lato de isopropilo racémico en forma de un polvo amarillo claro, pf. 144-145 °C. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 1,13 - 1,24 (m, 10 H) 2,49 -2,52 (m, 2 H) 3,19 - 3,32 (m, 2 H) 3,87 (d, J=13,39 Hz, 1 H) 4,02 (d, J=13,39 Hz, 1 H) 4,78 - 4,86 (m, 1 H) 7,22 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 7,60 (s, 1 H) 7,89 (d, J=10,11 Hz, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 15,57, 21,93, 37,98, 44,82, 46,94, 48,94,
68,01, 99,25, 110,49, 126,08, 131,50, 136,47, 154,20, 155,35. LRMS (IEN) m/z 382,0/384,0[(M+H)]+, calculado para C15H20BrN5O2: 382,26.
5.6.148. Síntesis de éster ¡sopropílico del ácido 4-[3-(2-hidroxi-pirídm-3-M)-imidazo[1,2-b]pirídazm-6-il]- p¡peraz¡n-1-carboxíl¡co
imagen285
Se preparó a partir de éster isopropílico del ácido 4-[3-(2-metoxi-pindin-3-il)-imidazo[1,2-d]piridazin-6-il]-piperazin-1- carboxílico mediante hidrólisis del ácido clorhídrico en metanol para proporcionar diclorhidrato del éster isopropílico 5 del ácido 4-[3-(2-metoxi-piridin-3-il)-imidazo[1,2-d]pindazin-6-il]-piperazin-1-carboxílico en forma de un polvo de color blanco, pf. 275-276 °C. RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1,15 (d, J=6,06 Hz, 5 H) 3,51 (s a, 7 H) 4,37 (s, 4 H) 4,67 - 4,79 (m, 1 H) 6,51 (t, J=6,82 Hz, 1 H) 7,45 - 7,57 (m, 2 H) 7,97 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 8,41 (s, 1 H) 8,65 (dd, J=7,33, 1,77 Hz, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 21,58, 42,23, 44,60, 69,30, 106,47, 115,89, 116,31, 121,12, 122,00, 122,89, 131,50, 135,26, 139,85, 155,11, 155,49, 159,85. LRMS (IEN) m/z 383,1 [(M+H)]+, calculado 10 para C19H22N6O3: 382,43.
5.6.149. Síntesis de 2-(((3-(d¡fluoromet¡l)¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡dazm-6-¡l)ammo)met¡l)p¡rrol¡dm-1-carbox¡lato de (S)-terc-butilo
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Parte A. 6-cloro-3-(d¡fluoromet¡l)¡m¡dazo[1,2-d1p¡r¡daz¡na:
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A una solución de 6-cloroimidazo[1,2-d]pindazin-3-carbaldehído (0,36 g, 2 mmol) en DCM (1 ml) se le añadió una solución de Deoxo-Fluor (0,67 ml, 3,6 mmol) en DCM (2 ml) y EtOH (0,023 ml, 0,5 mmol) a ta. Después de agitar a ta durante una noche, la solución se vertió en NaHCO3 saturado y se extrajo con DCM (2x 20 ml), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se evaporó al vacío. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna ISCO (EtOAC 25 al 50 %/hexano) para dar 6-cloro-3-(difluorometil)imidazo[1,2-d]piridazina en forma de un sólido de color blanco (180 mg, rendimiento del 50 %). RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,15 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 8,03 - 8,06 (m, 1 H), 7,18 - 7,49 (m, 2 H); LRMS (IEN) m/e 203,9 [(M + H)+, calculado para C7H5CF2N3 204,6].
Parte B. 2-(((3-(difluorometil)imidazo[1,2-¿)]pindazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-terc-butilo. Este 30 compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 7,62 -7,67 (m, 2 H), 7,10-7,40 (m, 1 H), 6,81 (d, J = 9,60 Hz, 1 H), 4,15 (s a, 1 H), 3,37-3,41 (m, 4 H), 1,87 -2,06 (m, 4 H), 1,44 (s a, 9 H); LRMS (IEN) m/e 368,0 [(M + H)+, calculado para C17H24F2N5O2 368,4].
5.6.150. Síntes¡s de (S)-W-(ferc-but¡l)-2-(((3-c¡ano¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡dazm-6-¡l)ammo)met¡l)p¡rrol¡dm-1-
35 carboxam¡da:
imagen287
imagen288
Este compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 40 ppm 8,02 (s, 1 H), 7,73 (d, J = 9,85 Hz, 1 H), 6,91 (d, J = 9,85 Hz, 1 H), 5,15 (s, 1 H), 4,25 (m, 1 H), 3,35 - 3,50 (m, 3 H), 3,30 (m, 1 H), 1,92-2,17 (m, 4 H), 1,30 (s, 9 H); LRMS (IEN) m/e 342,3 [(M + H)+, calculado para C17H24N7O 342,4].
5.6.151. Síntesis de éster isopropílico del ácido 4-[3-(2-metoxi-piridm-3-il)-imidazo[1,2-b]piridazm-6-il]- piperazin-1-carboxílico
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Este compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.111 a partir del éster isopropílico del ácido 4-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-piperazin-1-carboxílico (309,2 mg, 0,8 mmol) y ácido 2-metoxipiridin-3- borónico [163105-90-6] (154,8 mg, 1,0 mmol) para proporcionar 94,0 mg de diclorhidrato del éster isopropílico del ácido 4-[3-(2-metoxi-piridin-3-il)-imidazo[1,2-d]piridazin-6-il]-piperazin-1-carboxílico en forma de un polvo amarillo, pf. 10 179-181 °C (desc.). RMN 1H (400 MHz, DIVISOR) 6 ppm 1,20 - 1,24 (m, 6 H) 2,51 (dt, J=3,54, 1,77 Hz, 2 H) 3,50 -
3,61 (m, 7 H) 3,62 - 3,68 (m, 1 H) 3,98 (s, 2 H) 4,78 - 4,86 (m, 1 H) 7,24 (dd, J=7,58, 5,05 Hz, 1 H) 7,69 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 8,18 - 8,25 (m, 1 H) 8,28 - 8,35 (m, 2 H) 8,56 (dd, J=7,58, 1,77 Hz, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 21,93, 42,50, 45,01,53,64, 68,20, 109,84, 115,44, 116,90, 122,75, 122,83, 125,22, 133,07, 138,18, 146,97, 154,26, 155,45, 159,81. LRMS (IEN) m/z 397,0 [(M+H)]+, calculado para C26H24N6O3: 396,45.
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5.6.152. Síntesis de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazm-6-il)hexahidropirrolo[3,2-b]pirroM(2H)-carboxilato de íerc-butilo:
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Este compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 6 ppm 7,73 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 7,44 - 7,50 (m, 1 H), 6,96 - 6,99 (m, 1 H), 4,49 - 4,66 (m, 2 H), 3,52 - 3,85 (m, 3 H),
3,21 - 3,39 (m, 2 H), 2,14 - 2,32 (m, 3 H), 1,46 - 1,57 (m, 9 H); LRMS (IEN) m/e 409,9 [(M + H)+, calculado para C-i/^aBrNsO 409,3].
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5.6.153. Síntesis de 2-(((3-(metilcarbamoil)imidazo[1,2-b]piridazm-6-il)ammo)metil)pirrolidm-1-carboxilato de (S)-íerc-butilo
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Parte A. Ácido 6-cloroimidazo[1,2-¿)]piridazin-3-carboxílico:
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35 A una solución de 6-cloroimidazo[1,2-d]piridazin-3-carbaldehído (1,82 g, 10 mmol), en t-BuOH (90 ml) y 2-metil-2- buteno en THF (30 ml, 2,0 M) se le añadió una solución de clorito sódico (80 %, 9,0 g, 100 mmol) y NaH2PO4 (1 g, 8 mmol) en agua (45 ml). La mezcla se agitó a ta durante una noche, se concentró, se diluyó con agua, se acidificó a pH = 4, precipitó a sólido de color blanco, se filtró para dar ácido 6-cloroimidazo[1,2-d]piridazin-3-carboxílico en
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forma de un sólido de color blanco (1,2 g, rendimiento del 67 %)). RMN 1H (400 MHz, DMSO-cfe) 6 ppm 8,29 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 8,22 (s, 1 H), 7,50 (d, J = 9,60 Hz, 1 H); LRMS (IEN) m/e 198,1 [(M + H)+, calculado para CyHsClN3O2 198,6].
Parte B. 6-cloro-N-metilimidazo[1,2-¿)]piridazin-3-carboxamida:
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La reacción de acoplamiento de amida regular proporcionó el compuesto del título. RMN 1H (400 MHz, METANOL- d4) 6 ppm 8,37 (d, J=1,77 Hz, 1 H), 8,24 (dd J = 9,60, 2,02 Hz, 1 H), 7,56 (dd J = 9,47, 2,15 Hz, 1 H), 3,08 (d, J = 2,02 Hz, 3 H); LRMS (IEN) m/e 211,0 [(M + H)+, calculado para CaHaCl^O 211,6].
Parte C. 2-(((3-(Metilcarbamoil)imidazo[1,2-¿)]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-terc-butilo. Este compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.68. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 8,66 (s a, 1 H), 8,19 (s, 1 H), 7,82 (d, J = 9,60 Hz, 1 H), 7,28 (s, 1 H), 7,22 (s a, 1 H), 6,72 (d, J = 9,60 Hz, 1 H), 4,29 (s a, 1 H), 3,32 - 3,51 (m, 5 H), 3,07 - 3,11 (m, 3 H), 2,11 - 2,21 (m, 1 H), 1,91- 2,02 (m, 2 H), 1,77 - 1,85 (m, 1 H), 1,46 - 1,52 (m, 9 H); LRMS (IEN) m/e 375,2 [(M + H)+, calculado para C^y^Os 375,4].
5.6.154. Síntesis de 5-(3-(2-metox¡feml)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-M)-2,5-d¡azab¡c¡clo[2.2.1]heptano-2-
carboxilato de ¡soprp¡lo
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Parte A. 5-Isopropil 2.5-d¡azab¡c¡clo[2.2.11heptano-2.5-d¡carbox¡lato de (1S,4S)-2-terc-but¡lo
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A una solución a temperatura ambiente, agitada de 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptano-2-carboxilato de (1S,4S)-ferc- butilo [113451-59-5] (1,0 g, 5,0 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (1,4 ml, 8,0 mmol) en acetato de etilo (120 ml) se le añadió lentamente una solución 1,0 M de cloroformiato de isopropilo en tolueno (5,1 ml) durante el transcurso de 10 minutos. La reacción se dejó en agitación durante una noche, después se lavó con salmuera, se secó (MgSO4) y se evaporó para obtener 1,3 g de aceite de color amarillo. LRMS (IEN) m/z 285,1 [(M+H)]+, calculado para C14H24N2O4: 284,35.
Parte B. 2.5-D¡azab¡c¡clo[2.2.11heptano-2-carbox¡lato de (1S,4S)-¡soprop¡lo
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Se disolvió 5-isopropil 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptano-2,5-dicarboxilato de (1S,4S)-2-terc-butilo (1,3 g, 4,6 mmol) se disolvió en metanol (200 ml). Se añadió ácido clorhídrico concentrado (6 ml, 72 mmol) y la solución se agitó at 50 °C durante 2 h, después se evaporó a sequedad para proporcionar clorhidrato de 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptano-2- carboxilato de (1S,4S)-isopropilo como 0,9 g de sólido de color blanco. LRMS (IEN) m/z 185,1 [(M+H)]+, calculado para C9H16N2O2: 184,24.
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Parte C. 5-(3-Bromo¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-2.5-d¡azab¡c¡clo[2.2.11heptano-2-carbox¡lato de isopropilo
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Una soluc¡ón de clorh¡drato de 2,5-d¡azab¡c¡clo[2.2.1]heptano-2-carbox¡lato de (1S.4S)-¡soprop¡lo (0.9 g. 4.2 mmol). 3-bromo-6-fluoro¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡na (1.0 g. 4.6 mmol) y base de Hun¡g [7087-68-5] (3.0 ml. 17.2 mmol) en 2- propanol (21 ml) se ag¡tó a la temperatura de reflujo en atmósfera de N2 durante 3 días. después se repart¡ó entre salmuera y acetato de et¡lo. El extracto se secó (MgSO4) y se evaporó para obtener 1.6 g de sól¡do de color amar¡llo. LRMS (IEN) m/z 380.0/382.0 [(M+H)1+. calculado para C15H1sBrN5O2: 380.24.
Parte D. 5-(3-(2-Metox¡fen¡l)¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-2.5-d¡azab¡c¡clo[2.2.11heptano-2-carbox¡lato de ¡soprop¡lo. A una mezcla de 5-(3-bromo¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-2.5-d¡azab¡c¡clo[2.2.11heptano-2-carbox¡lato de ¡soprop¡lo (429.1 mg. 1.1 mmol). ác¡do 2-metox¡fen¡lborón¡co [5720-06-91 (206.7 mg. 1.4 mmol). monoh¡drato tr¡bás¡co de fosfato potás¡co [27176-10-91 (520.7 mg. 2.3 mmol) y complejo [1.1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno1d¡cloropalad¡o (II). con d¡clorometano [95464-05-41 (93.4 mg. 0.1 mmol) conten¡do en un matraz de fondo redondo de 50 ml se le añad¡ó una soluc¡ón de agua al 30 % (v/v) en 1.2-d¡metox¡etano (25 ml) y una barra ag¡tadora magnét¡ca. El rec¡p¡ente de reacc¡ón se equ¡pó con un condensador de reflujo. se ¡ntrodujo en un baño de ace¡te a temperatura amb¡ente. y el s¡stema se somet¡ó a 10 c¡clos de evacuac¡ón/atmósfera de N2 m¡entras se ag¡taba ráp¡damente. La reacc¡ón ráp¡damente ag¡tada. en atmósfera de N2. se calentó a una temperatura de baño de ace¡te de 85 °C durante 17 h. después se enfr¡ó y se repart¡ó entre salmuera (pH ajustado a 10 con h¡dróx¡do sód¡co acuoso 3 N) y acetato de et¡lo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4). se evaporó y se somet¡ó a cromatografía ultrarráp¡da (gel de síl¡ce eluído con metanol al 10% (v/v)/acetato de et¡lo para proporc¡onar un ace¡te de color pardo que se pur¡f¡có ad¡c¡onalmente med¡ante RP-HPLC preparat¡va. El producto a¡slado se d¡solv¡ó en metanol. se d¡luyó con ác¡do clorhídr¡co concentrado. se evaporó a sequedad. se volv¡ó a d¡solver en metanol y se prec¡p¡tó med¡ante la ad¡c¡ón de éter d¡etíl¡co. La f¡ltrac¡ón del prec¡p¡tado el prec¡p¡tado produjo 207.1 mg del producto de sal monoclorh¡drato en forma de un polvo de color amar¡llo. pf. 173-174 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 1.06 -1.31 (m. 7 H) 1.91 -
2.06 (m. 2 H) 3.30 (s a. 1 H) 3.40 (s a. 2 H) 3.58 (d. J=9.60 Hz. 1 H) 3.84 (s. 3 H) 4.54 (d. J=9.60 Hz. 1 H) 4.67 - 4.79 (m. 1 H) 4.84 (s a. 1 H) 7.13 (s a. 1 H) 7.24 (d. J=8.08 Hz. 1 H) 7.51 (t. J=7.20 Hz. 2 H) 7.95 (s a. 1 H) 8.20 (d. J=10.11 Hz. 1 H) 8.27 (s. 1 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-cfe) 8 ppm 13.88. 21.94. 22.00. 28.29. 31.19. 36.44. 36.92. 52.49. 55.67. 56.08. 56.44. 56.95. 57.43. 67.74. 111.65. 114.33. 116.61. 120.16. 121.59. 121.87. 124.72. 130.33. 131.05. 131.70. 153.57. 153.74. 156.91. LRMS (IEN) m/z 408.3 [(M+H)1+. calculado para C22H25N5O3: 407.47
5.6.155. Síntesis de [4-(3-P¡Ndm-2-¡l-¡m¡dazo[1,2-6]p¡Ndazm-6-¡l)-p¡perazm-1-M]-p¡rrol¡dm-1-¡l-metanona
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Parte A. [4-(3-Bromo-p¡razolo[1.5-a1p¡r¡m¡d¡n-5-¡l)-p¡peraz¡n-1-¡l1-p¡rrol¡d¡n-1-¡l-metanona
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A una soluc¡ón en atmósfera de N2. a temperatura amb¡ente. ag¡tada magnét¡camente de d¡clorh¡drato de 3-bromo-6- p¡peraz¡n-1-¡l-¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡na (3.1 g. 8.8 mmol) y base de Hun¡g [7087-68-51 (6.2 ml. 35.6 mmol) en acetato de et¡lo (200 ml) se le añad¡ó cloruro de p¡rrol¡d¡n-1-carbon¡lo [1192-63-81 (1.2 ml. 10.9 mmol). Se dejó proceder la reacc¡ón durante una noche para dar como resultado una suspens¡ón b¡en ag¡tada. Una vez completada. la reacc¡ón se lavó con salmuera. se secó (MgSO4) y se d¡luyó con heptano para proporc¡onar un prec¡p¡tado como un polvo f¡no de color amar¡llo clave. 2.6 g en dos cult¡vos. LRMS (IEN) m/z 379.0/381.0 [(M+H)1+. calculado para C^H^Br^O: 379.26.
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Parte B. r4-(3-P¡r¡d¡n-2-¡l-¡m¡dazori.2-¿1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡perazin-1-¡l1-p¡rrol¡d¡n-1-¡l-metanona. A una mezcla de [4-(3- bromo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)-piperazin-1-il]-pirrolidin-1-il-metanona (381.0 mg, 01.0 mmol). 2-(4.4.5.5- tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)p¡r¡d¡na [874186-98-8] (512.7 mg. 2.5 mmol). cloruro de cobre [7758-89-6] (99.4 mg. 1.0 mmol). carbonato de ces¡o [534-17-8] (651.8 mg. 2.0 mmol) y complejo [1.1'-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)ferroceno] d¡cloropalad¡o (II). con d¡clorometano [95464-05-4] (82.1 mg. 0.1 mmol) conten¡da en un matraz de fondo redondo de 25 ml se le añad¡ó DMF anh¡dra y una barra ag¡tadora magnét¡ca. El rec¡p¡ente de reacc¡ón se equ¡pó con un condensador de reflujo. se ¡ntrodujo en un baño de ace¡te a temperatura amb¡ente. y el s¡stema se somet¡ó a 10 c¡clos de evacuac¡ón/atmósfera de N2 m¡entras se ag¡taba ráp¡damente. La reacc¡ón ráp¡damente ag¡tada. en atmósfera de N2. se calentó a una temperatura de baño de ace¡te de 100 °C durante 17 h. después se enfr¡ó y se repart¡ó entre salmuera y acetato de et¡lo. El extracto de fase separada se secó (MgSO4) y se evaporó para proporc¡onar un ace¡te de color pardo que se pur¡f¡có por RP-HPLC preparat¡va. El producto a¡slado se d¡solv¡ó en metanol. se d¡luyó con ác¡do clorhídr¡co concentrado. se evaporó a sequedad. se volv¡ó a d¡solver en metanol y se prec¡p¡tó med¡ante la ad¡c¡ón de éter d¡etíl¡co. La f¡ltrac¡ón del prec¡p¡tado produjo 83.2 mg de sal d¡clorh¡drato de [4- (3-p¡r¡d¡n-2-¡l-¡m¡dazo[1.2-61p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡peraz¡n-1-¡l1-p¡rrol¡d¡n-1-¡l-metanona en forma de un polvo amar¡llo claro. pf. 202-203 °C. RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 1.73 - 1.84 (m. 4 H) 3.33 (t. J=6.44 Hz. 4 H) 3.36 - 3.43 (m. 4 H) 3.62 -3.72 (m. 4 H) 7.45 -7.52 (m. 1 H) 7.66 (d. J=10.11 Hz. 1 H) 8.08 (td. J=7.83. 1.77 Hz. 1 H) 8.18 (d. J=10.10 Hz. 1 H) 8.54 (s. 1 H) 8.60 (d. J=8.08 Hz. 1 H) 8.72 (d. J=4.55 Hz. 1 H). RMN 13C (100 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 25.04.
45.05. 45.27. 47.84. 114.83. 121.12. 123.43. 123.55. 126.59. 127.01.134.87. 138.20. 145.21.149.07. 155.74. 161.49. LRMS (IEN) m/z 378.2 [(M+H)]+. calculado para C20H23N7O: 377.45.
5.6.156. Síntesis de éster isopropílico del ácido {(S)-1-[3-(2-metoxi-piridm-3-M)-imidazo[1,2-b]piridazm-6-M]- pirrolidin-3-il}-metil-carbámico
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Parte A. Éster terc-butíl¡co del ác¡do ríS)-1-í3-bromo-¡m¡dazor1.2-dlp¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡rrol¡d¡n-3-¡ll-met¡l-carbám¡co
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Una mezcla de éster terc-butíl¡co del ác¡do (S)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l-carbám¡co (2.8 g. 15 mmol). 3-bromo-6-fluoro- ¡m¡dazo[1.2-b]p¡r¡daz¡na (2.16 g. 10 mmol) y tr¡et¡lam¡na (5.58 ml. 40 mmol) en alcohol ¡sopropíl¡co (10 ml) se calentó en un m¡croondas a 140 °C durante 30 m¡n. La mezcla de reacc¡ón se concentró y el res¡duo se pasó a través de una columna corta para proporc¡onar el producto deseado (3.8 g). A una soluc¡ón del producto anter¡or (3.8 g) en DMF (40 ml) a 0 °C se le añad¡ó Mel (1.13 ml). La mezcla se ag¡tó a 0 °C durante 5 m¡n. se añad¡ó en porc¡ones NaH (800 mg. d¡spers¡ón oleosa al 60 %. 20 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a 0 °C durante 5 m¡n y a ta durante 30 m¡n. después se trató con agua y se d¡luyó con EtOAc (250 ml). La mezcla se lavó con agua (100 ml) y salmuera (100 ml). La capa acuosa se volv¡ó a extraer con EtOAc (2 x 50 ml). El EtOAc comb¡nado se secó (Na2SO4) y se concentró. El res¡duo se somet¡ó a ISCO (columna de 120 g) para proporc¡onar el compuesto del título (3.1 g). RMN 1H (400 MHz. CLOROFORMO-d) 8 ppm 1.43 (s. 9 H) 2.04 -2.22 (m. 2 H) 2.78 (s. 3 H) 3.37 (dd. J=10.80. 7.28 Hz. 1 H) 3.46 (dt. J=10.36. 8.05 Hz. 1 H) 3.65 - 3.72 (m. 2 H) 4.87 (s a. 1 H) 6.53 (d. J=9.70 Hz. 1 H) 7.44 (s. 1 H) 7.64 (d. J=9.70 Hz 1 H). LRMS (IEN) m/z 396 y 398.1 [(M+H)]+. calculado para C^H22BrN5O2: 396.29.
Parte B. Éster ¡sopropíl¡co del ác¡do [íS)-1-í3-bromo-¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l1-met¡l-carbám¡co. A una soluc¡ón de éster terc-butíl¡co del ác¡do [(S)-1-(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l]-met¡l-carbám¡co (1.35 g. 3.4 mmol) en MeOH (80 ml) a 0 °C se le añad¡ó AcCl (2.5 ml. 35 mmol). La mezcla resultante se ag¡tó a ta durante una noche. La mezcla se concentró para proporc¡onar un sól¡do de color blanco como el producto (1.25 g).
El producto anter¡or (610 mg. 1.65 mmol) y DIEA (1.44 ml. 8.25 mmol)) se suspend¡eron en THF (15 ml). A la suspens¡ón se le añad¡ó una soluc¡ón de cloroform¡ato de ¡soprop¡lo en tolueno (1 M. 2 ml. 2 mmol). La mezcla resultante se ag¡tó a ta durante 5 h. La mezcla se concentró y el res¡duo se somet¡ó a ISCO (columna de 12 g) para dar el compuesto del título (350 mg). RMN 1H (400 MHz. CLOROFORMO-d) 8 ppm 1.27 (d. J=6.32 Hz. 6 H) 2.09 - 2.28 (m. 2 H) 2.87 (s. 3 H) 3.39 - 3.56 (m. 2 H) 3.68 - 3.79 (m. 2 H) 4.96 (m. 2 H) 6.57 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 7.49 (s. 1 H) 7.64 (d. J=9.85 Hz. 1 H). LRMS (IEN) m/z 382.1 y 384.1 [(M+H)]+. calculado para C15H20BrN5O2: 382.26.
Parte C. Éster ¡sopropíl¡co del ác¡do (íS)-1-[3-í2-metox¡-p¡r¡d¡n-3-¡l)-¡m¡dazo[1.2-d1p¡r¡daz¡n-6-¡l1-p¡rrol¡d¡n-3-¡l}-met¡l- carbám¡co. Una mezcla de éster ¡sopropíl¡co del ác¡do [(S)-1-(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l]-
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metil-carbámico (88 mg, 0,23 mmol), ácido 2-metoxipiridin-3-borónico (46 mg, 0,3 mmol), K2CO3 (95 mg, 0,69 mmol) y didorobis(trifenilfosfina)paladio (II) (8,4 mg, 0,012 mmol) en MeCN/agua (3,2 ml/0,8 ml) se calentó en un microondas a 150 °C durante 15 min. La capa de agua se retiró y la capa orgánica se diluyó con MeCN y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC preparativa para dar el compuesto del título (82,5 mg). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,29 (d, J=6,06 Hz, 6 H) 2,13 -2,32 (m, 2 H) 2,89 (s, 3 H) 3,43 (dd, J=10,48, 6,95 Hz, 1 H) 3,48 - 3,56 (m, 1 H) 3,69 - 3,76 (m, 2 H) 4,09 (s, 3 H) 4,99 (dt, J=12,38, 6,19 Hz, 2 H) 6,62 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,04 (dd, J=7,45, 4,93 Hz, 1 H) 7,79 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,13 - 8,19 (m, 2 H) 8,86 (dd, J=7,71, 1,64 Hz, 1 H). LRMS (IEN) m/z 411,2 [(M+H)]+, calculado para C21H26N6O3: 410,48.
5.6.157. Síntesis de {(S)-1-[3-(2-h¡drox¡-p¡r¡dm-3-M)-¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-¡l]-p¡rrol¡dm-3-M}-metM-am¡da del ácido c¡clopentanocarboxíl¡co
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Parte A. Éster terc-butílico del ácido ((S)-1-[3-(2-metox¡-p¡r¡d¡n-3-¡l)-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡dazin-6-¡l1-p¡rrol¡d¡n-3-¡l)-met¡l- carbámico
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Una mezcla de éster terc-butílico del ácido [(S)-1-(3-bromo-im¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l]-met¡l-carbám¡co (83 mg, 0,21 mmol), ácido 2-metoxipiridin-3-borónico (43 mg, 0,28 mmol), K2CO3 (87 mg, 0,63 mmol) y dicloro- bis(trlfenilfosfina)paladio (II) (7,4 mg, 0,011 mmol) en MeCN/agua (3,2 ml/0,8 ml) se calentó en un microondas a 150 °C durante 15 min. La capa de agua se retiró y la capa orgánica se diluyó con MeCN y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC preparativa para dar el compuesto del título (69,3 mg). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,50 (s, 9 H) 2,11 - 2,29 (m, 2 H) 2,84 (s, 3 H) 3,40 (dd, J=10,48, 6,95 Hz, 1 H) 3,46 - 3,53 (m, 1 H) 3,67 - 3,74 (m, 2 H) 4,08 (s, 3 H) 4,94 (s a, 1 H) 6,61 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,03 (dd, J=7,58, 4,80 Hz, 1 H) 7,77 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,12 - 8,18 (m, 2 H) 8,86 (dd, J=7,58, 1,77 Hz, 1 H). LRMS (IEN) m/z 425,3 [(M+H)]+, calculado para C22H28N6O3: 424,51.
Parte B. {(S)-1-[3-(2-Hidroxi-piridin-3-il)-imidazo[1,2-¿)1piridazin-6-il1-pirroIidin-3-il}-metil-amida del ácido
ciclopentanocarboxílico. A una solución de éster terc-butílico del ácido {(S)-1-[3-(2-metoxi-piridin-3-il)-imidazo[1,2- 6]p¡r¡daz¡n-6-¡I]-pirroI¡d¡n-3-¡l}-met¡l-carbám¡co (540 mg, 1,27 mmol) en MeOH (40 ml) a 0 °C se le añadió AcCl (1,2 ml), 16,8 mmol). La mezcla resultante se agitó a ta durante una noche. La mezcla se concentró para proporcionar el producto.
A una mezcla del producto anterior (80 mg, 0,2 mmol) y TEA (112 ul, 0,8 mmol) en DCM (2 ml) se le añadió cloruro de ciclopentanocarbonilo a ta. La mezcla resultante se agitó a ta durante una noche. La mezcla se concentró y el residuo se sometió a HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título (49,9 mg). RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,57 - 1,67 (m, 2 H) 1,74 - 1,93 (m, 6 H) 2,12 - 2,22 (m, 1 H) 2,27 - 2,35 (m, 1 H) 2,95 (t, J=7,28 Hz, 2 H) 3,04 (s, 2 H) 3,42 (dd, J=10,14, 6,62 Hz, 1 H) 3,52 - 3,62 (m, 1 H) 3,78 (t, J=9,04 Hz, 2 H) 5,50 (t, J=7,28 Hz, 1 H) 6,47 - 6,51 (m, 1 H) 6,63 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,40 (d, J=5,95 Hz, 1 H) 7,83 (d, J=9,48 Hz, 1 H) 8,77 (s, 1 H) 9,12 (d, J=6,62 Hz, 1 H). LRMS (IEN) m/z 407,2 [(M+H)]+, calculado para C22H26N6O2: 406,49.
5.6.158. Síntes¡s de (S)-W-(1-(3-(2-metox¡feml)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-¡l)p¡rrol¡dm-3-M)-W-met¡lp¡rrol¡dm-1- carboxam¡da
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Este compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.42. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,78 - 1,92 (m, 4 H) 2,13 (dc, J=12,63, 8,76 Hz, 1 H) 2,21 - 2,32 (m, 1 H) 2,81 (s, 3 H) 3,31 - 3,50 (m, 6 H) 3,67 - 3,82 (m, 2 H) 3,89 (s, 3 H) 4,64 (quin, J=7,83 Hz, 1 H) 6,59 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,04 (d, J=8,34 Hz, 1 H) 7,09 (td, J=7,58, 1,01 Hz, 1 H) 7,33 (ddd, J=8,21,7,45, 1,77 Hz, 1 H) 7,74 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,99 (s, 1 H) 8,30 (dd, J=7,71, 1,64 Hz, 1 H); LRMS (IEN) m/421,0 [(M + H)+, calculado para C23H28N6O2 420,0].
5.6.159. Síntesis de (S)-W-(1 -(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-8]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)-W-metil-
pirrolidin-1-carboxamida
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Este compuesto se preparó usando el enfoque descrito en el ejemplo 5.6.42. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,82 -1,93 (m, 4 H) 2,12 -2,25 (m, 1 H) 2,27 -2,38 (m, 1 H) 2,85 (s, 3 H) 3,35 - 3,46 (m, 5 H) 3,47 -3,56 (m, 1 H) 3,70 - 3,78 (m, 1 H) 3,83 (dd, J=10,36, 8,08 Hz, 1 H) 4,09 (s, 3 H) 4,61 - 4,74 (m, 1 H) 6,70 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,05 (dd, J=7,58, 5,05 Hz, 1 H) 7,92 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,12 - 8,20 (m, 2 H) 8,85 (dd, J=7,58, 1,77 Hz, 1 H); LRMS (IEN) m/422,0 [(M + H)+, calculado para C22H27N7O2 421,0].
5.6.160. Síntesis de (1-(3-(5-fluoro-2-metox¡feml)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-M)p¡rroMdm-3-il)(met¡l)carbamato de (S)-isopropilo
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Parte A. [(S)-1-(3-(2-Metox¡-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-6-¡l1-p¡rrolid¡n-3-¡l1-met¡l-am¡na
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Éster ferc-butílico del ácido [(S)-1-(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-6]p¡ndaz¡n-6-¡l)-pirrol¡d¡n-3-¡l]-carbám¡co (1,2 g, 3,1 mmol) recogido en 15 ml de DMF y enfriado a 0 °C en un baño de hielo. Se añadió yodometano (342 ul, 5,42 mmol) y se agitó 5 minutos. Después, se añadió lentamente hidruro sódico al 60 % en aceite (251 mg, 6,2 mmol). La reacción se agitó 5 minutos a 0 °C, después se retiró el baño de hielo y se agitó 30 minutos a temperatura ambiente. La reacción se detuvo con hielo, después se extrajo con acetato de etilo 2x. Las fracciones combinadas de acetato de etilo se secaron sobre sulfato de magnesio filtrado se reducen al vacío. Después, esta se recogió en 26 ml de DCM y se añadieron 4 ml TFA. Se agitó 1 hora hasta completarse mediante CL/EM. La reacción se lavó con NaOH 1 N, la capa de DCM se retiró seca sobre sulfato de magnesio filtrado, se redujo al vacío para conseguir 951 mg de producto en bruto llevada como tal a la parte B. LRMS (IEN) m/z 296/298 [(M+H)]+, calculado para CnH14BrNs:
296,17.
Parte B. Éster isopropílico del ácido [(S)-1-(3-bromo-¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l1-met¡l-carbám¡co
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Se recogió [(S)-1-(3-bromo-imidazo[1,2-8]piridazin-6-il)-pirrolidin-3-il]-metil-amina (951 mg, 3,2 mmol) en DCM y se añadieron cloroformiato de etilo (459 ul, 4,8 mmol) y trietilamina (895 ul, 6,4 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno durante 1 hora. Después, la mezcla de reacción se lavó con
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agua, después HCl 1 N. La capa de DCM se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se redujo al vacío para dar el producto en bruto (1,1 g) que se usó como tal en la parte C. LRMS (IEN) m/z 382/384 [(M+H)]+, calculado para C-i5H26BrN5O2: 382,26.
Parte C. (1-(3-(5-Fluoro-2-metox¡fen¡l)¡m¡dazo[1.2-¿1p¡r¡dazin-6-¡l)p¡rrol¡d¡n-3-¡l)(met¡l)carbamato de (S)-isopropilo. Se recogieron éster isopropílico del ácido [(S)-1-(3-bromo-¡m¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l]-met¡l-carbám¡co (120 mg, 0,3 mmol), ácido 5-fluoro-2-metoxifenilborón¡co (107 mg, 0,6 mmol), carbonato potásico (65 mg, 0,45 mmol) y Pd(dppf)Cl2 d¡clorometano (26 mg, 0,03 mmol) en 2 ml de aceton¡tr¡lo y 1 ml de agua y se somet¡eron a microondas en un tubo cerrado herméticamente a 140 °C durante 15 minutos. Después la reacción se filtró a través de celite con acetonitrilo reducido al vacío, después se purificó en la prep. de fase neutral de Shimadzu y las fracciones del producto se liofilizaron para conseguir 52 mg de (1-(3-(5-fluoro-2-metox¡fen¡l)¡midazo[1,2-b]p¡r¡daz¡n-6- ¡l)pirrol¡d¡n-3-¡l)(met¡l)carbamato de (S)-isopropilo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-cfe) d 8,33 - 8,38 (m, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,91 (d, J = 9,85 Hz, 1H), 7,13 - 7,18 (m, 2H), 6,92 (d, J = 9,85 Hz, 1H), 4,76 -4,86 (m, 2H), 3,87 (s, 3H), 3,63 - 3,70 (m, 2H), 3,36 - 3,50 (m, 2H), 2,80 (s, 3H), 2,10 - 2,22 (m, 2H), 1,21 (d, J = 6,32 Hz, 6H). (IEN) m/z 428 [(M+H)]+, calculado para C22H26FN5O3: 427,4.
5.6.161. Síntesis de (1-(3-(2-metox¡-5-metMp¡r¡dm-3-¡l)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-¡l)p¡rrol¡dm-3-
il)(metil)carbamato de (S)-¡soprop¡lo
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Se recogieron éster isopropílico del ácido [(S)-1-(3-bromo-im¡dazo[1,2-£)]p¡r¡daz¡n-6-¡l)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l]-met¡l-carbám¡co (120 mg, 0,3 mmol), ácido 2-metox¡-5-met¡lp¡r¡d¡n-3-borón¡co (105 mg, 0,6 mmol), carbonato potásico (65 mg, 0,45 mmol) y Pd(dppf)Cl2 d¡clorometano (26 mg, 0,03 mmol) en 2 ml de aceton¡tr¡lo y 1 ml de agua y se somet¡eron a microondas en un tubo cerrado herméticamente a 140 °C durante 15 minutos. Después la reacción se filtró a través de celite con acetonitrilo reducido al vacío, después se purificó en la prep, de fase neutral de Shimadzu y las fracciones del producto se liofilizaron para proporcionar 65 mg de (1-(3-(2-metoxi-5-met¡lp¡r¡d¡n-3-¡l)¡midazo[1,2- 6]p¡r¡daz¡n-6-¡l)pirrol¡d¡n-3-¡l)(met¡l)carbamato de (S)-isopropilo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-cfe) 6 8,75 (d, J = 2,02 Hz, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,94 - 7,97 (m, 1H), 7,91 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 9,85 Hz, 1H), 4,75 - 4,85 (m, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,64 - 3,70 (m, 2H), 3,38 - 3,51 (m, 2H), 2,81 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,11 - 2,23 (m, 2H), 1,21 (d, J = 6,32 Hz, 6H). (IEN) m/z 425 [(M+H)]+, calculado para C22H28N6O3: 424,5.
5.6.162. Síntes¡s de éster ¡sopropíl¡co del ác¡do {(S)-1-[3-(1,6-d¡met¡l-2-oxo-1,2-d¡h¡dro-p¡r¡d¡n-3-¡l)- ¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-M]-p¡rrol¡dm-3-M}-metM-carbám¡co
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Parte A. 3-Bromo-1,6-d¡met¡l-1H-p¡r¡d¡n-2-ona
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Se recogió 3-bromo-6-metilpir¡d¡n-2-ol (2 g, 10,6 mmol) en THF y se agitó. Se añadió en porciones hidruro sódico (al 60 % en aceite 510 mg, 12,7 mmol), después se agitó 30 minutos. Se añadió bromuro de litio (1,85 g, 21,2 mmol) y se agitó durante 1 hora. Después, se añadió yodometano (1,32 ml, 21,2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con DCM y se lavó con NaOH 1 N. La capa de DCM se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se secó al vacío para proporcionar 1,19 g del producto llevados a las siguientes
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etapas como tal. LRMS (IEN) m/z 202/204 [(M+H)1+. calculado para Cy^BrNO: 202,05. Parte B. Ácido 1.6-dimet¡l-1H-p¡r¡d¡n-2-ona-3-borón¡co
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3-Bromo-1,6-dimetil-1H-piridin-2-ona (1.19 g. 5.9 mmol) recog¡do en 10 ml de DMF en una atmósfera de n¡trógeno. Se añad¡eron b¡s(p¡nacalato)d¡borano (2.24 g. 8.8 mmol). acetato potás¡co (1.73 g. 17.7 mmol) y PD(dppf)Cl2 d¡clorometano (481 mg. 0.59 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se calentó a 85 °C y se ag¡tó durante una noche. La mezcla de reacc¡ón se enfr¡ó a temperatura amb¡ente y se f¡ltró a través de cel¡te con aceton¡tr¡lo. Este se redujo al vacío y se recog¡ó en NaOH 1 N y se lavó con DCM. Después. la capa acuosa se h¡zo ác¡da con HCl 1 N y se extrajo con DCM. La capa de DCM se secó sobre sulfato de magnes¡o f¡ltrado y se redujo al vacío para produc¡r 929 mg >90 % para su uso en la Parte C. LRMS (IEN) m/z 167 [(M+H)1+. calculado para C7H10BNO3: 166.97.
Parte C. Éster ¡sopropíl¡co del ác¡do {(S)-1-[3-(2-d¡met¡l-2oxo-1.2-d¡h¡dro-p¡r¡d¡n-3-¡l)-¡m¡dazo[1.2-¿)1p¡r¡daz¡n-6-¡l1- p¡rrol¡d¡n-3-¡l}-met¡l-carbám¡co. Se recog¡eron éster ¡sopropíl¡co del ác¡do [(S)-1-(3-bromo-¡m¡dazo[1.2-£)1p¡r¡daz¡n-6-¡l)- p¡rrol¡d¡n-3-¡l]-met¡l-carbám¡co (120 mg. 0.3 mmol). ác¡do 1.6-d¡met¡l-1H-p¡r¡d¡n-2-oan-3-borón¡co (105 mg. 0.6 mmol). carbonato potás¡co (65 mg. 0.45 mmol) y Pd(dppf)Cl2 d¡clorometano (26 mg. 0.3 mmol) en 2 ml de aceton¡tr¡lo y 1 ml de agua y se somet¡eron a m¡croondas en un tubo cerrado hermét¡camente a 140 °C durante 15 m¡nutos. Después. la mezcla de reacc¡ón se f¡ltró a través de cel¡te con aceton¡tr¡lo. se redujo al vacío. se pur¡f¡có en la prep. de fase neutral de Sh¡madzu y las fracc¡ones del producto se l¡of¡l¡zaron para consegu¡r 43 mg éster ¡sopropíl¡co del ác¡do {(S)-1-[3-(1.6-d¡met¡l-2-oxo-1.2-d¡h¡dro-p¡r¡d¡n-3-¡l)-¡m¡dazo[1.2-61p¡r¡daz¡n-6-¡l]-p¡rrol¡d¡n-3-¡l}-met¡l-carbám¡co. RMN 1H (400 MHz. DMSO-d6) 8 8.91 (d. J = 7.58 Hz. 1H). 8.45 (s. 1H). 7.88 (d. J = 9.60 Hz. 1H). 6.87 (d. J = 9.85 Hz. 1H). 6.36 (d. J = 8.08 Hz. 1H). 4.77 - 4.88 (m. 2H). 3.67 (dd. J = 7.58. 10.61 Hz. 2H). 3.39 - 3.51 (m. 2H). 3.31 (s. 2H). 2.82 (s. 3H). 2.42 (s. 3H). 2.10 - 2.22 (m. 2H). 1.22 (dd. J = 1.89. 6.19 Hz. 6H). (IEN) m/z 425 [(M+H)]+. calculado para C22H28N6O3: 424.51.
5.6.163. Síntesis de (1-(3-(2-metox¡-6-metMp¡r¡dm-3-¡l)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-¡l)p¡rrol¡dm-3-
il)(metil)carbamato de (S)-¡soprop¡lo
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A 80 mg (0.217 mmol) de (1-(3-bromo¡m¡dazo[1.2-81p¡r¡daz¡n-6-¡l)p¡rrol¡d¡n-3-¡l)(met¡l)carbamato de (S)-¡soprop¡lo en un v¡al de m¡croondas. se le añad¡eron 54 mg (0.326 mmol) de ác¡do (2-metox¡-6-met¡lp¡r¡d¡n-3-¡l)borón¡co. 92 mg (0.435 mmol) de K3PO4. 18 mg (0.022 mmol) PdCh(dppf)2. 3 ml de DmE y después 1 ml de agua. La mezcla resultante se somet¡ó a m¡croondas a 140 °C durante 0.5 h. Se d¡luyó con EtOAc. se lavó con salmuera y la capa orgán¡ca se secó sobre MgSO4. Se concentró y se pur¡f¡có en la HPLC PREP neutral para obtener 50.6 mg del producto deseado. RMN 1H (400 MHz. CLOROFORMO-d) 8 ppm 1.30 (d. J=6.32 Hz. 6 H) 2.13 - 2.31 (m. 2 H) 2.53 (s. 3 H) 2.89 (s. 3 H) 3.43 (dd. J=10.61.7.07 Hz. 1 H) 3.49 - 3.56 (m. 1 H) 3.70 - 3.76 (m. 2 H) 4.06 (s. 3 H) 4.99 (m. 2 H) 6.61 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 6.89 (d. J=7.83 Hz. 1 H) 7.79 (d. J=9.85 Hz. 1 H) 8.12 (s. 1 H) 8.69 (d. J=7.83 Hz. 1 H). LRMS (IEN) m/e 425 [(M + H)+. calculado para C22H28N6O3 4241.
5.6.164. Síntes¡s de (S)-2-ammo-1-(4-(3-(2-metox¡pmdm-3-¡l)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-¡l)p¡perazm-1-¡l)-4- met¡lpentan-1-ona
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Parte A. (4-Metil-1-oxo-1-(p¡peraz¡n-1-¡l)pentan-2-¡l)carbamato de (S)-ferc-butilo
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A 1,00 g (4,33 mmol) de ácido (S^-^ferc-butoxicarboni^aminoH-metilpentanoico se le añadieron 750 mg (8,66 mmol) de piperazina, 20 ml de DCM, 1,34 g (6,5 mmol) de DCC y 17,9 ml (12,99 mmol) de TEA. Esto se dejó en agitación durante una noche a temperatura ambiente. A la siguiente mañana, se diluyó con más DCM y se filtró. El 10 filtrado se concentró y se purificó en la ISCO usando una columna de 40 gramos y eluyendo con MeOH al 010 %/DCM para obtener el producto deseado con un rendimiento del en 79 %.
Parte B. (1-(4-(Im¡dazof1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)p¡peraz¡n-1-¡l)-4-met¡l-1-oxopentan-2-¡l)carbamato de (S)-ferc-butilo
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A 305 mg (2,23 mmol) de 6-fluoro¡m¡dazo[1,2-¿>]p¡^daz¡na, se le añadieron 1,00 g (3,34 mmol) de (4-metil-1-oxo-1- (p¡peraz¡n-1-¡l)pentan-2-¡l)carbamato de (S)-ferc-butilo, 10 ml de alcohol isopropílico y 0,93 ml (6,68 mmol) de TEA. Este se sometió a microondas a 150 °C durante 0,5 h. Se diluyó con EtoAc, se lavó con salmuera, y la capa 20 orgánica se secó sobre MgSO4 y después se concentró. Se purificó en la ISCO con una columna de 40 gramos eluyendo con MeOH al 0-10 %/dCm para obtener el producto deseado con un rendimiento del 78 %.
Parte C. (1-(4-(3-Bromo¡m¡dazof1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)p¡peraz¡n-1-¡l)-4-met¡l-1-oxopentan-2¡l)carbamato de (S)-ferc-butilo
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A 104 mg (0,25 mmol) de (1-(4-(¡m¡dazo[1,2-¿>]p¡^daz¡n-6-¡l)p¡peraz¡n-1-¡l)-4-met¡l-1-oxopentan-2-¡l)carbamato de (S)- ferc-butilo disueltos en 5 ml de AcOH se les añadió bromo (48 mg, 0,3 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente. Después de 0,25 h, la reacción se realizó y se concentró mediante rotovap y después 30 mediante una bomba de alto vacío para obtener 139 mg (rendimiento del 100 %) de sal del ácido mono-acético del producto deseado.
Parte D. (S)-2-Am¡no-1-[4-(3-bromo-p¡razolo[1.5-a1p¡r¡m¡d¡n-5-¡l)-p¡peraz¡n-1-¡l1-4-met¡l-pentan-1-ona
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A 139 mg (0,25 mmol) la sal del ácido mono-acético de (1-(4-(3-bromoim¡dazo[1,2-6]pmdaz¡n-6-¡l)p¡peraz¡n-1-¡l)-4- metil-1-oxopentan-2-il)carbamato de (S)-terc-but¡lo en 5 ml de DCM se les añad¡eron 2 ml de TFA, y la mezcla 5 resultante se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 1 h. Esta se concentró para obtener el 100% del producto deseado (como sal d¡-TFA).
Parte E. (S)-2-am¡no-1-(4-(3-(2-metox¡p¡r¡d¡n-3-¡l)¡m¡dazo[1.2-¿1p¡r¡daz¡n-6-¡l)p¡peraz¡n-1-¡l)-4-met¡lpentan-1-ona. A 124 mg (0.20 mmol) de (S)-2-am¡no-1-(4-(3-bromo¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡n-6-¡l)p¡peraz¡n-1-¡l)-4-met¡l-pentan-1-ona (sal 10 ác¡do d¡-TFA ) en un v¡al apto para m¡croondas se les añad¡eron 51 mg (0,33 mmol) del ác¡do (2-metox¡p¡r¡d¡n-3- ¡l)borón¡co, 110 mg (0.80 mmol) de K2CO3, 31 mg de PdCh(dppf)2 3 ml de MeCN y 1.5 ml de agua. Esto se somet¡ó a m¡croondas durante 0,5 h a 140 °C. Después se d¡luyó con EtOAc, se lavó con salmuera y la capa orgán¡ca se secó sobre MgSO4 y se concentró. Se pur¡f¡có med¡ante HPLC PREP neutral para obtener 51,6 mg (61 %) del producto deseado. RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 0,98 - 1,10 (m, 6 H) 1,60 - 1,84 (m, 3 H) 3,48 - 3,60 (m, 15 2 H) 3,62 - 3,81 (m, 5 H) 3,94 - 4,02 (m, 1 H) 4,05 (s, 3 H) 4,48 (dd, J=9,47, 4,17 Hz, 1 H) 7,13 (dd, J=7,45, 4,93 Hz,
1 H) 7,27 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,88 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,01 (s, 1 H) 8,17 (dd, J=5,05, 1,77 Hz, 1 H) 8,51 (s, 2 H) 8,66 (dd, J=7,58, 1,77 Hz, 1 H).
5.6.165. Síntesis de 1-(3-(2-metox¡pmdm-3-¡l)¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡dazm-6-M)-1H-p¡razol-4-carbox¡lato de metilo
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Parte A. 3-Bromo-6-h¡draz¡n¡l¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡na
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Una suspens¡ón de 3-bromo-6-fluoro¡m¡dazo[1,2-8]p¡r¡daz¡na (2,16 g, 10 mmol) en monoh¡drato de h¡draz¡na (10 ml) se calentó a 70 °C durante 30 m¡nutos. La mezcla se enfr¡ó a temperatura amb¡ente y el compuesto del título (1,78 g) se recog¡ó por f¡ltrac¡ón. RMN 1H (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 4,27 (s a, 2 H) 6,78 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,51 (s, 1 H) 7,73 (dd, J=9,60, 1,52 Hz, 1 H) 8,20 (s a, 1 H).
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Parte B. 1-(3-Bromo¡m¡dazor1,2-¿)lp¡r¡daz¡n-6-¡l)-1H-p¡razol-4-carbox¡lato de met¡lo
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35 Una mezcla de 3-bromo-6-h¡draz¡n¡l¡m¡dazo[1,2-6]p¡r¡daz¡na (866 mg, 3,8 mmol) y 2-form¡l-3-oxopropanoato de met¡lo (500 mg, 3,8 mmol) en EtOH (20 ml) se calentó a 70 °C durante una noche. La mezcla se concentró y se trató con MeOH. El compuesto del título (410 mg) se recog¡ó por f¡ltrac¡ón. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 3,94 (s, 3 H) 7,84 (s, 1 H) 8,01 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 8,11 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 8,19 (s, 1 H) 9,09 (s, 1 H).
40 Parte C. 1-(3-(2-Metox¡p¡r¡d¡n-3-¡l)¡m¡dazo[1.2-b1p¡r¡daz¡n-6-¡l)-1H-p¡razol-4-carbox¡lato de met¡lo. El compuesto del título se obtuvo usando cond¡c¡ones típ¡cas de acoplam¡ento de Suzuk¡ con 1-(3-bromo¡m¡dazo[1,2-b]p¡r¡daz¡n-6-¡l)- 1H-p¡razol-4-carbox¡lato de met¡lo y un ác¡do borón¡co aprop¡ado. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 3,92
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(s, 3 H) 4,08 (s, 3 H) 7,15 (dd, J=7,58, 5,05 Hz, 1 H) 7,98 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 8,14 - 8,21 (m, 2 H) 8,26 - 8,33 (m, 2 H) 8,46 (dd, J=7,58, 2,02 Hz, 1 H) 8,83 (s, 1 H). LRMS (IEN) m/z 351,0 [(M+H)]+, calculado para C22H29N7O2: 350,33.
5.6.166. Síntesis de macrociclo
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Parte A. 2-(3-Bromo-fenoxi)-etanol
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Se añadió 2-bromoetanol [540-51-2] (5,8 ml, 78,9 mmol) a una suspensión agitada a temperatura ambiente de 3- bromofenol [591-20-8] (9,0 g, 52,3 mmol) y carbonato potásico [584-08-7] (36,2 g, 262,1 mmol) en acetona (260 ml) contenida en un matraz de fondo redondo de 500 ml. El matraz de reacción se equipó con un condensador de reflujo y se calentó a reflujo durante una noche, se enfrió, se filtró y se evaporó para obtener 11,7 g de un aceite de color pardo claro transparente. La cromatografía ultrarrápida (gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo al 50 % (v/v)/heptano) proporcionó 4,5 g de 2-(3-bromo-fenoxi)-etanol en forma de un aceite de color amarillo transparente. LRMS (IEN) m/z 217,0/219,0 [(M+H)]+, calculado para C8H9O2Br: 217,06.
Parte B. N1-(2-(3-bromofenox¡)et¡l)etano-1,2-d¡am¡na
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A una solución a temperatura ambiente, agitada magnéticamente de 2-(3-bromo-fenoxi)-etanol (3,6 g, 16,7 mmol) y W-metilmorfolina [109-02-4] (2,2 ml, 20,0 mmol) en acetato de etilo (200 ml) se le añadió cloruro de metanosulfonilo [124-63-0] (1,3 ml, 16,8 mmol). La reacción se agitó durante una noche, después se lavó con salmuera y el extracto de acetato de etilo de fase separada se secó (MgSO4) y se añadió a una solución agitada a temperatura ambiente de etilendiamina [107-15-3] (33,3 ml, 497,0 mmol) en acetato de etilo (300 ml) de un embudo de adición ecualizador de presión en el transcurso de 15 minutos. El embudo de adición se reemplazó por un condensador y la reacción se calentó a reflujo durante 4 h, después se enfrió y se lavó con salmuera. La fase de acetato de etilo se secó (CaSO4) y se evaporó para obtener N1-(2-(3-bromofenoxi)etil)etano-1,2-diamina como 4,7 g de líquido de color amarillo transparente. LRMS (IEN) m/z 259,1/261,1 [(M+H)]+, calculado para C^H^Br^O: 259,15.
Parte C. N-{2-[2-(3-Bromo-fenoxi)-etilamino]-etil}-2,2,2-trifluoro-acetamida
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A una solución a 0 °C, agitada de N1-(2-(3-bromofenoxi)etil)etano-1,2-diamina (4,7 g, 17,9 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (180 ml) se le añadió trifluoroacetato de etilo [383-63-1] (2,1 ml, 17,9 mmol). La solución resultante se dejó 5 en agitación en atmósfera de N2 durante 15 minutos, después se evaporó a sequedad para obtener N-{2-[2-(3- Bromo-fenoxi)-etilamino]-etil}-2,2,2-trifluoroacetamida como 6,3 g de sólido de color amarillo. LRMS (IEN) m/z 355,1/357,1 [(M+H)]+, calculado para C12H14BrFaN2O2: 355,16.
Parte D. Éster ferc-butílico del ácido [2-(3-bromo-fenox¡)-et¡l1-[2-(2.2.2-tr¡fluoro-acetilam¡no)-et¡l1-carbám¡co
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Se añadió pirocarbonato de di-t-butilo [24424-99-5] (4,7 g, 21,44 mmol) a una solución a temperatura ambiente de N- {2-[2-(3-Bromo-fenox¡)-et¡lamino]-et¡l}-2,2,2-tr¡fluoro-acetam¡da (6,3 g, 17,6 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (3,1 15 ml, 17,8 mmol) en acetato de etilo (150 ml) y se dejó agitar en atmósfera de N2 durante 1 h después se lavó con salmuera, se secó (CaSO4), se evaporó y se sometió a cromatografía ultrarrápida (gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo al 30 % (v/v)/heptano) para proporcionar 5,5 g de éster ferc-butílico del ácido [2-(3-bromo-fenoxi)- et¡lH2-(2,2,2-trifluoro-acet¡lam¡no)-et¡l]-carbám¡co en forma de un aceite incoloro transparente. LRMS (IEN) m/z 399,1/401,1 [(M -ferc-bu +H)]+, calculado para C1/H22BrFaN2O4: 455,28.
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Parte E. Éster ferc-butílico del ácido (2-am¡no-et¡l)-[2-(3-bromo-fenox¡)-et¡l1-carbám¡co
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25 Se añadió carbonato potásico [584-08-7] (35,8 g, 259,2 mmol) a una solución de éster ferc-butílico del ácido [2-(3- bromo-fenox¡)-et¡lH2-(2,2,2-trifluoro-acet¡lam¡no)-et¡l]-carbám¡co (4,7 g, 10,3 mmol) en metanol acuoso al 10% (v/v) (200 ml) y se agitó a 50 °C durante 5 h. La mezcla de reacción se filtró, el filtrado se evaporó a sequedad, se disolvió en acetato de etilo, se lavó con salmuera, se secó (CaSO4) y se evaporó para producir 3,8 g de éster ferc-butílico del ácido (2-amino-etil)-[2-(3-bromo-fenoxi)-etil]-carbámico en forma de un aceite de color amarillo transparente. LRMS 30 (IEN) m/z 359,1/361,1 [(M+H)]+, calculado para C-^aBr^Oa: 359,27.
Parte F. Éster ferc-butílico del ácido r2-(3-bromo-¡m¡dazor1,2-¿)lp¡r¡daz¡n-6-¡laiTi¡no)-et¡ll-r2-(3-broiTio-fenox¡)-et¡ll- carbámico
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Una mezcla agitada de 3-bromo-6-fluoro-imidazo[1,2-£)]piridazina (1,9 g, 9,0 mmol), éster ferc-butílico del ácido (2- aminoetil)-[2-(3-bromo-fenoxi)-etil]-carbámico (3,8 g, 10,6 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (3,1 ml, 17,8 mmol) en 2-propanol (45 ml) se calentó a 65 °C, en atmósfera de N2, durante 17 h. La solución de reacción enfriada se repartió entre salmuera y acetato de etilo. El extracto se secó (CaSO4) y se evaporó para proporcionar 5,1 g de un aceite de color pardo. Este aceite se sometió a cromatografía ultrarrápida (gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo al 100%), después, el producto cristalizó (acetato de etilo/heptano) para proporcionar éster ferc-butílico del ácido [2-(3-bromo-imidazo[1,2-£)]piridazin-6-ilamino)-etil]-[2-(3-bromo-fenoxi)-etil]-carbámico como 2,7 g de polvo cristalino fino de color blanco, pf. 134-135 °C. RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) ppm 1,27 (s a, 5 H) 1,33 (s a, 4 H) 2,51 (s, 1 H) 3,41 - 3,52 (m, 3 H) 3,55 (s a, 1 H) 3,63 (s a, 2 H) 4,14 (s a, 2 H) 6,69 (d, J=9,35 Hz, 1 H) 6,94 (dd, J=8,21,2,15 Hz, 1 H) 7,08 - 7,29 (m, 4 H) 7,48 (s, 1 H) 7,70 (d, J=9,60 Hz, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 27,85, 45,46, 45,77, 46,28, 66,04, 78,72, 99,00, 112,79, 113,89, 117,34, 122,05, 123,50, 125,47, 130,35,
131,10, 136,55, 153,98, 154,76, 159,27. LRMS (IEN) m/z 554,1/556,1/558,1[(M+H)]+, calculado para
C21H25Br2N5Oa: 555,27.
Parte G. Macrociclo. A una mezcla de éster ferc-butílico del ácido [2-(3-bromo-imidazo[1,2-d]piridazin-6-ilamino)-etil]- [2-(3-bromo-fenoxi)-etil]-carbámico (818,1 mg, 1,47 mmol), bis(pinacolato)diboro [73183-34-3] (1,9 g, 7,4 mmol), monohidrato tribásico de fosfato potásico [27176-10-9] (1,7 g, 7,3 mmol) y complejo [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaladio (II), con diclorometano [95464-05-4] (241,2 mg, 0,3 mmol) contenido en un matraz de fondo redondo de 250 ml se le añadió una solución de 30% (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (125 ml) y una barra agitadora magnética. El recipiente de reacción se equipó con un condensador de reflujo, se introdujo en un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se sometió a 10 ciclos de evacuación/atmósfera de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, en atmósfera de N2, se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85 °C durante 17 h, después se enfrió y se repartió entre salmuera (pH ajustado a 10 con hidróxido sódico acuoso 3 N) y acetato de etilo. El extracto de fase separada se secó (CaSO4) y se evaporó para proporcionar un aceite de color pardo que se purificó por RP-HPLC preparativa. Las fracciones cromatográficas se combinaron, se extrajeron con acetato de etilo, se secaron (CaSO4) y se diluyeron con heptano para precipitar el producto de macrociclo como 39,4 mg de polvo de color blanco, pf. 244-245 °C (desc.) RmN 1H (400 mHz, DMSO-cfe) 6 ppm 1,45 (s, 8 H) 3,37 (s a, 2 H) 3,49 - 3,67 (m, 4 H) 4,22 - 4,35 (m, 2 H) 6,68 (dd, J=9,60, 6,82 Hz, 1 H) 6,79 - 6,85 (m, 1 H) 7,30 - 7,48 (m, 3 H) 7,78 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,92 (d, J=3,03 Hz, 1 H) 8,45 - 8,61 (m, 1 H). RMN 13C (100 MHz, DMSO-cfe) 6 ppm 27,96, 27,99, 38,49, 61,97, 79,22, 79,26, 108,11, 108,21, 111,93, 115,57, 117,89, 118,03, 126,01, 126,32, 129,84, 130,08, 130,51, 137,29, 152,90, 154,53, 156,75. LRMS (IEN) m/z 396,0 [(M +H)]+, calculado para C21H25N5O3: 395,47. HRMS (EM/EM) m/z 396,2021 [(M +H)]+, calculado para C21H26N5O3 396,2036.
5.6.167. Ensayo de Placa en Filtro P81
Los compuestos se diluyeron en serie en una placa de Labcyte LDV (Labcyte, cat n.° LP-0200) utilizando un Mutiprobe (PerkinElmer) y Biomek FX (Beckman Coulter) de modo que la mayor concentración de compuesto era de 96 |jM. Después, los compuestos se llevaron (75 nl por pocillo) a una placa de reacción de Greiner de 384 pocillos (Greiner, n.° 781076) utilizando un manipulador de líquidos ECHO 550 (Labcyte). Después, a cada pocillo de las columnas 1 y 13 se añadió un total de 12 jl de tampón de reacción (tampón IMAP que contenía Tween y DTT, de Molecular Devices) para los controles negativos y a los pocillos restantes se añadieron 12 jl de 2X AAK1 (proteína humana de longitud completa 0,2 nM, número de registro NP_055726.2 del NCBI). La enzima se preincubó después con el compuesto durante 10 minutos a TA. Las reacciones se iniciaron después de la adición de 12 jl de mezcla de sustrato Minitrak (PerkinElmer) que contenía 2X Mu2 (0,2 jM, proteína humana de longitud completa), 2x ATP frío (2 jM) y 1,3 jCi de 33P-ATP caliente. Las reacciones continuaron durante una hora a TA. Mientras tanto, en un lavaplacas (Zoom ZW, de Titertek) se colocaron placas de filtro P81 Millipore de 384 pocillos (Millipore, catálogo n°. MZPHN0W10) y se humedecieron previamente con 50 jl de ácido fosfórico al 1 %. Las reacciones de cinasa se detuvieron después de la adición, a cada pocillo, de 24 jl de ácido fosfórico al 2 % y después se utilizó el Minitrak para transferir 40 jl de cada pocillo a las placas de filtro P81 Millipore de 384 pocillos previamente humedecidas. Las mezclas de reacción se incubaron durante 10 minutos a TA en las placas P81, seguido de un lavado de cinco veces con 100 jl/pocillo de ácido fosfórico al 1 % utilizando el lavafiltros Zoom. La parte inferior de cada placa de filtro se selló, seguido de la adición de Microscint 40, 20 jl en cada pocillo, sellando la parte superior de las placas con la tapa de Flashplate, y después esperando una hora hasta efectuar la lectura en un TopCount (PerkinElmer).
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Se cultivaron células HEK293F en medios que contenían DMEM (Gibco, cat. n°. 11965), FBS al 10% (SAFC Biosciences, cat. n° 12103C), 1X GPS (glutamina, penicilina y estreptomicina). El primer día, las células se sembraron en una placa de 10 cm, de modo que en el momento de la transfección su confluencia era de ~ 80 %. Aproximadamente, en el momento de la transfección, había 12 millones de células en una placa de 10 cm. El segundo día, cada placa se transfectó con 48 ug de ADN y 144 ul de Lipofectamine 2000 (Invitrogen, cat. n.° 11668019). El ADN estaba compuesto por una mezcla (por placa de 10 cm) que contenía 3 |jg de AAK1/HA/pIRES (ser humano de longitud completa, número de registro NP_055726.2 del NcBI), 45 jg de Flag/AP2MI/pcADN (ser humano de longitud completa) y 1,5 ml de OPTI-MEM. La Lipofectamine 2000 se compone de una mezcla (por placa de 10 cm) que contiene 144 jl de Lipofectamine 2000 y 1,5 ml de OPTI-MEM. Cada mezcla se transfirió a tubos individuales de 15 ml y se incubó a tA durante 5 minutos, y después las dos mezclas se combinaron y se incubaron a TA durante 20 minutos. Después, el medio de crecimiento de cada placa de 10 cm se aspiró y se reemplazó con 10 ml de DMEM + FBS al 10 % (sin GPS). Finalmente, A cada placa de 10 cm se añadieron 3 ml de mezcla de ADN/Lipofectamina y se mezcló con cuidado seguido de incubación de la placa durante una noche a 37 °C y con CO2 al 5 %.
El tercer día, los compuestos se diluyeron en DMSO al 100% a una concentración final de 1000X, seguido de diluciones en serie de factor 3 para un total de 5 concentraciones examinadas. Se examinaron cuatro compuestos por placa de 10 cm. Después, 1 ul de cada dilución de compuesto se transfirió con pipeta a una placa de 96 pocillos, de pocillos profundos, seguido de la adición de 500 jl de DMEM + FBS al 0,5 % en cada pocillo para una concentración final 2X de cada compuesto. Las células se resuspendieron en una placa de 10 cm mediante transferencia simple con pipeta (las células HEK293 salen de la placa fácilmente en este momento) y después se transfirieron a un tubo cónico de 50 ml y se sedimentaron por centrifugación a 1000 rpm durante 5 minutos. Los sedimentos celulares se resuspendieron después en DMEM 2,75 ml + FBS al 0,5 % por placa de 10 cm y 100 jl de suspensión celular se transfirieron a cada pocillo de la placa TC de 96 pocillos. Finalmente, después se añadieron 100 jl de compuesto 2X diluido en DMEM + FBS al 0,5 % en los pocillos que contenían la suspensión celular para una concentración final de 1X. Después, las placas se incubaron a 37 °C y con CO2 al 5 % durante 3 horas, seguido de la transferencia de suspensiones celulares de cada pocillo a tiras de PCR de 12 tubos. Las tiras de PCR se hicieron girar en una rejilla de punta a 1000 rpm durante 5 minutos para sedimentar las células y los medios se eliminaron después con una pipeta sin perturbar el sedimento celular.
Para preparar el análisis de transferencia Western, los sedimentos celulares se resuspendieron en tampón de muestra 40 ul 1X LDS-PAGE (Invitrogen, cat. n.° NP0008) + 2X cóctel inhibidor de fosfatasa Halt y proteasa (Thermo Scientific, cat. n.° 1861284), seguido de homogeneización con ultrasonidos cada uno de ellos con un homogeneizador por ultrasonidos de micropunta configurado a 5°C durante 8-10 segundos. Cinco jl de agente reductor de muestra NuPage 10X (con DTT 50 mM) se aplicaron a cada muestra seguido de desnaturalización térmica a 70 °C durante 10 minutos en una máquina de PCR. Para la transferencia de fosfo-mu2, se cargó un total de 10 jl por muestra en cada carril de un gel Criterion Tris-Glicina al 4-20% (Biorad, cat. n.° 345-0034) en 26 pocillos y para la transferencia de mu2, 10 jl por carril, en un gel NuPAGE Bis-Tris al 4-12% (+tampón MES) (Invitrogen, cat. n.°WG1403BX10) en 26 pocillos. Para los controles, en el último pocillo de cada gel, se cargaron 2 ng de fosfo-mu2 o 20 ng de proteínas mu2/Flag. Después de la SDS-PAGE, las muestras en cada gel se transfirieron a la membrana de PVDF utilizando una inmunotransferencia (iBIot) y las membranas se bloquearon durante una hora en TBST + leche al 5 %, seguido de lavado 3X durante 5-10 minutos con TBST. Los geles Criterion se exploraron con anti-fosfo-mu2 de conejo (1: 5000; un anticuerpo policlonal de conejo producido por New England Peptide y purificado por afinidad en Lexicon) en TBST + BSA al 5 %, mientras que, los geles NuPAGE se exploraron con anti-Flag de ratón (1: 500; Sigma, cat. n.° F1804) en TBST + leche al 5%, y estos anticuerpos primarios se incubaron durante una noche a 4 °C en un oscilador.
El cuarto día, las transferencias Western se lavaron 3X durante 5-10 minutos con TBST, se exploraron con anti- conejo-HRP (1: 2000; BioRad, cat. n.° 170-6515) o anti-ratón-HRP (1:2000; Biorad, cat. n.° 170-6516) en TBST + leche al 5 % durante 1 hora a TA, se lavaron 3 veces durante 10 minutos con TBST, y se revelaron con el reactivo ECL (GE Healthcare, cat. n.° RPN2132) en un Versadoc. Finalmente, la cámara se configuró para tomar una foto cada 30 segundos durante 10 minutos y se guardó la mejor imagen de cada transferencia sin señal saturada (cuando la señal está saturada, las bandas se resaltarán en rojo). Se realizó un análisis de volumen en cada banda para obtener valores de densidad. Se calculó el porcentaje de inhibición de cada muestra normalizando primero a niveles de expresión de Mu2 totales y después comparando con controles de 0 % y 100 %. Después los valores de CI50 se calcularon con el programa informático de ajuste de Excel.
5.6.169. Datos In Vitro
Los datos obtenidos in vitro de los diversos compuestos de la invención se proporcionan a continuación en la Tabla 1, en la que "PM" significa peso molecular, "Ensayo P81" se refiere al ensayo de placa en filtro P81 descrito anteriormente, "CBA" se refiere al ensayo basado en células (cell-based assay) HEK281 descrito anteriormente, "-" significa que para el ensayo dado no se obtuvieron resultados, "*" significa inferior o igual a 1,0 pM, "**" significa un valor inferior o igual a 0,1 jM y "***" significa inferior o igual a 0,01 jM.
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
2-(((3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (2S)-etilo
434,5 ** --
2-(((3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (2S)-metilo
420,5 ** --
2-(((3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (2S)-tetrahidrofurano-3-ilo
408,5 -- ***
2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-carboxilato de (2S)-tetrahidrofurano-3-ilo
410,3 -- ***
(4-(3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b] piridazin-6-il)piperazin-1-il)(pirrolidin-1- il)metanona
406,5 ** ***
(4-(3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)(piperidin-1- il)metanona
420,5 ** ***
(4-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)(pirrolidin-1- il)metanona
407,5 ** ***
(4-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)(piperidin-1- il)metanona
421,5 ** ***
(4-(3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)(pirrolidin-1- il)metanona
407,5 ** ***
(4-(3-(piridin-2-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)(pirrolidin-1- il)metanona
377,4 ** ***
(4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)(piperidin-1-il)metanona
390,5 ** ***
(4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)(pirrolidin-1-il)metanona
376,5 * ***
(4-(6-((2-(ciclopentiloxi)etil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)fenil)metanol
352,4 -- ***
(4-aminopiperidin-1-il)(4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3- il)fenil)metanona
392,5 * --
metil(2-((3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) etil)carbamato de (R)-isopropilo
422,5 ** --
(R)-N-butil-3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
335,4 * --
(S)-1-(2-(((3-(2,4-dimetiltiazol-5-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-il)-3-metilbutan-1-ona
412,6 *** ***
(S)-1-(2-(((3-(2-clorofenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-il)- 3-metilbutan-1-ona
411,9 -- --
(S)-1-(2-(((3-(2-fluoropiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)metil)pirrolidin-1-il)-3-metilbutan-1-ona
396,5 -- ***
(S)-1-(2-(((3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1- il)-3-metilbutan-1-ona
407,5 *** --
(S)-1-(2-(((3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1- il)etanona
365,4 ** --
(S)-1-(2-(((3-(3-clorofenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-il)- 3-metilbutan-1-ona
411,9 *** ***
(S)-1-(2-(((3-(3-fluorofenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-il)- 3-metilbutan-1-ona
395,5 *** ***
(S)-1-(2-(((3-(3-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1- il)-3-metilbutan-1-ona
407,5 ** ***
(S)-1-(2-(((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-il)etanona
366,4 ** --
(S)-1-(2-(((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-il)-3-metilbutan-1-ona
408,5 *** --
(S)-1-(2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-il)-3-metilbutan-1-ona
406,5 *** --
(S)-1-(2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-il)-2,2-dimetilpropan-1-ona
406,5 ** ***
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
(S)-1-(2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-il)butan-1-ona
392,5 *** ***
(S)-1-(2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-il)-3,3-dimetilbutan-1-ona
420,6 ** ***
(S)-1-(2-(((3-(4-fluorofeml)imidazo[1,2-b]pindazin-6-il)aiTiino)iTietil)pirrolidin-1-il)- 3-metilbutan-1-ona
395,5 ** ***
(S)-1-(2-(((3-(4-metoxifenil)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-il)aiTimo)iTietil)pirrolidin-1- il)-3-metiibutan-1-ona
407,5 * ***
(S)-1-(2-(((3-(ddopent-1-en-1-il)iiriidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)metil)pirrolidin-1-il)-3-metilbutan-1-ona
367,5 -- ***
(S)-1-(2-(((3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-il) butan-1-ona
364,4 -- ***
(S)-1-(2-(((3-bromoiiriidazo[1,2-b]pindazin-6-il)aiTimo)iTietil)pirrolidin-1-il)-3- metilbutan-1-ona
380,3 ** --
(S)-1-(3,3-dimetilbutil)-5-(((3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) metil)pirrolidin-2-ona
421,5 * ***
(S)-1-(3,3-dimetilbutil)-5-(((3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il) amino)metil)pirrolidin-2-ona
422,5 *** ***
(S)-1-(3,3-dimetilbutil)-5-(((3-(piridin-4-il)iiriidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)metil) pirrolidin-2-ona
392,5 -- ***
(S)-1-(3,3-dimetilbutil)-5-(((3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-2-ona
391,5 * ***
2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-carboxilato de (S)-l-metilciclopentilo
422,3 * ***
(S)-2-(((3-bromoiiriidazo[1,2-b]pindazin-6-il)aiTimo)iTietil)-N-(terc-butil)pirrolidin- 1-carboxamida
395,3 ** ***
(1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il) pirrolidin-3- il)(metil)carbamato de (S)-2,2,2-trifluoroetilo
450,4 ** ***
(S)-2-amino-N-(4-(6-(butilairimo)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-3-il)bendl)-4- metilpentanamida
408,5 ** --
(S)-2-ddopropil-N-(1-(3-(2-hidroxipiridin-3-il)iiTiidazo[1,2-b]piridazin-6- il)pirrolidin-3-il)-N-metilacetamida
392,5 -- ***
(1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-il)pirrolidin-3- il)(metil)carbamato de (S)-2-metoxietilo
426,5 -- **
(S)-3-(4-(aminometil)fenil)-N-((tetrahidrofurano-2-il)metil)imidazo[1,2- b]piridazin-6-amina
323,4 ** --
(S)-3-(6-(((1-(3-metilbutanoil)pirrolidin-2-il)metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin- 3-il)benzonitrilo
402,5 ** ***
(S)-3,3,3-tnfluoro-1-(2-(((3-femliiriidazo[1,2-b]pindazin-6- il)amino)metil)pirrolidin-1-il)propan-1-ona
403,4 *** ***
(S)-3,3,3-tnfluoro-N-(1-(3-(2-hidroxipindin-3-il)iiriidazo[1,2-b]pindazin-6- il)pirrolidin-3-il)-N-metilpropanamida
420,4 -- ***
(S)-3,3-dimetil-1-(2-(((3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-il)butan-1-ona
392,5 ** ***
(S)-3-metil-1-(2-(((3-(2-metilpiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-il)butan-1-ona
392,5 ** ***
(S)-3-metil-1-(2-(((3-(m-tolil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1- il) butan-1-ona
391,5 * ***
(S)-3-metil-1-(2-(((3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)metil)pirrolidin-1-il)butan-1-ona
378,5 ** --
(S)-3-metil-1-(2-(((3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-il) butan-1-ona
377,5 ** ***
(S)-4-(6-(((1-(3-metilbutanoil)pirrolidin-2-il)metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin- 3-il)benzonitrilo
402,5 *** ***
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
(S)-5-(((3-(4-(aminoirietil)feml)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-il)aiTiino)iTietil)-1- isopentilpirrolidin-2-ona
406,5 ** ***
(S)-5-(((3-(4-(aminoirietil)feml)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-il)aiTiino)iTietil)-1-(3,3- dimetilbutil)pirrolidin-2-ona
420,6 ** ***
(S)-5-(((3-bromoiiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-il)aiTimo)iTietil)-1-(3,3- dimetilbutil)pirrolidin-2-ona
394,3 ** ***
2-(((3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-ciclobutilo
421,5 ** ***
2-(((3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-ciclobutilo
392,5 *** ***
2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-ciclobutilo
394,3 ** ***
2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) metil)pirrolidin-1- carboxilato de (S)-ciclopentilo
434,5 *** ***
2-(((3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-ciclopentilo
406,5 *** ***
2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-ciclopentilo
408,3 *** ***
2-(((3-cianoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-ciclopentilo
354,4 -- ***
2-(((3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-ciclopentilo
405,5 ** ***
2-(((3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-ciclopropilmetilo
392,5 -- ***
metil 2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-ciclopropilo
394,3 -- ***
(1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)iiriidazo[1,2-b]pindazin-6-il)pirrolidin-3- il)(metil)carbamato de (S)-etilo
396,4 ** ***
2-(((3-(2-metoxifeml)iiriidazo[1,2-b]pindazin-6-il)aiTimo)iTietil)pirrolidin-1- carboxilato de (S)-etilo
395,5 ** --
2-(((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-etilo
396,4 ** --
2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato (S)-etilo
394,5 *** --
2-(((3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-etilo
366,4 ** --
2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-etilo
368,2 ** --
(1-(3-(2-(difluorometoxi)piridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il) pirrolidin-3- il)(metil)carbamato de (S)-isopropilo
446,5 -- ***
(1-(3-(2-metoxi-6-metilpiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il) pirrolidin-3- il)(metil)carbamato de (S)-isopropilo
424,5 *** ***
(1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il) (metil)carbamato de (S)-isopropilo
410,5 *** ***
(1-(3-(3,6-dimetoxipiridazin-4-il)iiriidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3- il)(metil)carbamato de (S)-isopropilo
441,5 ** ***
(1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)(metil)carbamato de (S)- isopropilo
382,3 -- ***
2-(((3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-isopropilo
409,5 *** --
2-(((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-(S)-isopropilo
410,5 *** --
2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-isopropilo
408,5 *** --
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
2-(((3-(prop-1-en-2-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-isopropilo
343,4 ** --
2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-isopropilo
382,3 * --
2-(((3-cianoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-isopropilo
328,4 * ***
2-(((3-ciclopropilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-isopropilo
343,4 * --
2-(((3-vinilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)- isopropilo
329,4 *** --
metil(1-(3-(piridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il) carbamato de (S)-isopropilo
380,4 ** ***
metil(1-(3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il) carbamato de (S)-isopropilo
380,4 -- **
metil (2-((3-(4-(pirrol id in-2-il)feml)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)etil)carbamato de (S)-isopropilo
422,5 ** --
2-(((3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-metilo
381,4 ** --
2-(((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-metilo
382,4 ** --
2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-metilo
380,4 ** --
2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-metilo
354,2 * --
(S)-N-(1-(3-(2-hidroxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)-N- metilciclopentanocarboxamida
406,5 -- **
(S)-N-(1-(3-(2-hidroxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)-2- metoxi-N-metilacetamida
382,4 -- *
(S)-N-(1-(3-(2-hidroxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)-N,3- dimetilbutanamida
394,5 -- **
(S)-N-(1-(3-(2-hidroxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)-N,3,3- trimetilbutanamida
408,5 * **
(S)-N-(1-(3-(2-hidroxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)-N- metilbutiramida
380,4 -- **
(S)-N-(1-(3-(2-metoxifeml)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)-N- metilpirrolidin-1-carboxamida
420,5 ** ***
(S)-N-(1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)-N- metilpirrolidin-1-carboxamida
421,5 ** ***
(S)-N-(1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)-N- metilbutiramida
394,5 -- **
(S)-N-(1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)-N-metilbutiramida
366,3 -- *
(S)-N-(1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)-N-metilpirrolidin-1- carboxamida
393,3 -- **
(S)-N-(terc-butil)-2-(((3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-carboxamida
422,5 ** ***
(S)-N-(terc-butil)-2-(((3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-carboxamida
393,5 ** ***
(S)-N-(terc-butil)-2-(((3-femlimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)ammo)metil)pirrolidin-1- carboxamida
392,5 ** ***
(S)-N-butil-3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
335,4 ** --
(S)-N-ciclopentil-2-(((3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-carboxamida
434,5 * ***
2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-neopentilo
436,5 *** ***
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
2-(((3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-neopentilo
408,5 ** ***
2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-neopentilo
410,3 ** --
(S)-N-metil-N-(1-(3-(piridin-2-il)iiriidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3- il)pirrolidin-1-carboxamida
391,5 -- **
(S)-N-metil-N-(1-(3-(piridin-3-il)iiriidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3- il)butiramida
364,4 -- *
(S)-N-metil-N-(1-(3-(piridin-4-il)iiriidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3- il)pirrolidin-1-carboxamida
391,5 -- **
(S)-N-metil-N-(1-(3-(piridin-4-il)iiriidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3- il)butiramida
364,4 -- **
(S)-N-neopentil-2-(((3-femliiTiidazo[1,2-b]piridazin-6-il)aiTiino)iTietil)pirrolidin-1- carboxamida
406,5 ** ***
2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-propilo
382,3 -- ***
(1-(3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)(metil)carbamato de (S)-terc-butilo
423,5 ** ***
(1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il) (metil)carbamato de (S)-terc-butilo
424,5 ** ***
(1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)(metil)carbamato de (S)- terc-butilo
396,3 * ***
2-(((3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-terc-butilo
423,5 *** --
2-(((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) piperidin-1- carboxilato de (S)-terc-butilo
438,5 ** --
2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-terc-butilo
422,5 *** ***
2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) piperidin-1- carboxilato de (S)-terc-butilo
436,5 *** --
2-(((3-(4-carbamoilfenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-terc-butilo
436,5 *** ***
2-(((3-(difluorometil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-terc-butilo
367,4 * ***
2-(((3-(metilcarbamoil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-terc-butilo
374,4 ** ***
2-(((3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)piperidin-1-carboxilato de (S)-terc-butilo
408,5 ** --
2-(((3-(trifluorometil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-terc-butilo
385,4 ** --
2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-terc-(S)-terc-butilo
396,3 ** --
2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)azetidin-1-carboxilato de (S)-terc-butilo
382,3 ** ***
2-(((3-cloroimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-terc-butilo
351,8 ** --
2-(((3-etilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)- terc-butilo
345,4 ** --
2-(((3-yodoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-terc-butilo
443,3 *** --
2-(((3-metilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-terc-butilo
331,4 ** ***
2-(((3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-terc-butilo
393,5 *** ***
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
2-(2-((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-terc-butilo
436,5 ** --
3-(((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-terc-butilo
424,5 * --
3-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-terc-butilo
422,5 ** --
3-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-terc-(S)-terc-butilo
396,3 * --
metil(1-(3-(piridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il) carbamato de (S)-terc-butilo
394,5 -- ***
metil(1-(3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il) carbamato de (S)-terc-butilo
394,5 * ***
2-(((3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1- carboxilato de (S)-vinilo
393,4 ** ***
1-(2-((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)-3-(terc-butil) imidazolidin-2-ona
407,5 ** --
1-(4-(3-(3-metoxipiridin-4-il)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-N)piperazin-1-N)-3,3- dimetilbutan-1-ona
408,5 ** --
1-(5-(6-((2-(metil(fenil)amino)etil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)tiofen-2-il) etanona
391,5 ** --
1-(5-(6-((3-(metilamino)propil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)tiofen-2-il) etanona
329,4 * --
1-(5-(6-((3-metoxipropil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)tiofen-2-il)etanona
330,4 * --
1-(5-(6-(butil(metil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)tiofen-2-il)etanona
328,4 ** --
1-(5-(6-(isobutilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)tiofen-2-il)etanona
314,4 * --
1-(5-(6-(propilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)tiofen-2-il)etanona
300,4 * --
1-(terc-butil)-3-(2-((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) imidazolidin-2-ona
409,5 ** --
2,2-dimetil-1-(4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)propan-1-ona
363,5 -- **
isopropil(2-((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) etil)carbamato de 2-fluoroetilo
416,4 * --
3-(2,4-dimetiltiazol-5-il)-N-(2-isobutoxietil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
345,5 * --
3-(2-aminopiridin-4-il)-N-(3-(terc-butoxi)propil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
340,4 * --
3-(2-aminopiridin-4-il)-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
282,3 * --
3-(2-metoxipiridin-3-N)-N-((tetrahidrofurano-3-N)metil)imidazo[1,2-b]piridazin-6- amina
325,4 * --
3-(3-metoxipiridin-4-il)-N-(4,4,4-trifluorobutil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
351,3 *** --
3-(4-(((2-metoxietil)amino)metil)fenil)-N-pentilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
367,5 * --
3-(4-((2-(dimetilamino)etoxi)metil)fenil)-N-(3,3-dimetilbutil)imidazo[1,2- b]piridazin-6-amina
395,5 ** --
3-(4-((2-aminoetoxi)metN)fenN)-N-(3,3-dimetNbutN)imidazo[1,2-b]pindazin-6- amina
367,5 ** --
3-(4-(1H-tetrazol-5-il)fenil)-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
334,4 * --
3-(4-(2-aminoetoxi)fenil)-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
325,4 ** --
3-(4-(3-aminopropoxi)fenil)-N-(3,3-dimetilbutil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
367,5 ** --
3-(4-(3-aminopropoxi)fenil)-N-(3-fenilpropil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
401,5 ** --
3-(4-(aminometil)-3-fluorofenil)-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
313,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-((1-(2,2,2-trifluoroetil)pirrolidin-2-il)metil)imidazo[1,2- b]piridazin-6-amina
404,4 ** ***
3-(4-(aminometil)fenil)-N-((tetrahidrofurano-3-il)metil)imidazo[1,2-b]piridazin-6- amina
323,4 * --
3-(4-(aminometN)fenN)-N-(1-oxaspiro[4,4]nonan-3-N)imidazo[1,2-b]piridazin-6- amina
363,5 ** --
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-(cidopentiloxi)etil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
351,4 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-(neopentiloxi)etil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
353,5 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-(terc-butoxi)etil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
339,4 ** --
3-(4-(aminometN)fenN)-N-(2-(trifluorometoxi)fenetil)imidazo[1,2-b]pindazin-6- amina
427,4 *** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-cidohexiletil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
349,5 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-cidopropiletil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
307,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-etoxifenetil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
387,5 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-fluorofenetil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
361,4 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-isobutoxietil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
339,4 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-isopropoxietil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
325,4 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-metoxifenetil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
373,5 *** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-metilbutil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
309,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-fenoxietil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
359,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(3-(2-fluorofenil)propil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
375,4 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(3-(3-fluorofenil)propil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
375,4 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(3-(4-fluorofenil)propil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
375,4 ** --
3-(4-(aminometN)fenN)-N-(3-(cidopentiloxi)propN)imidazo[1,2-b]piridazin-6- amina
365,5 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(3-(terc-butoxi)propil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
353,5 ** --
3-(4-(aminometN)fenN)-N-(3-(trifluorometil)fenetN)imidazo[1,2-b]piridazin-6- amina
411,4 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(3,3-dimetilbutil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
323,4 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(3-fluorofenetil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
361,4 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(3-fluoropropil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
299,3 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(3-metoxifenetil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
373,5 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(3-fenilpropil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
357,5 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(4-fluorobutil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
313,4 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(4-fluorofenetil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
361,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(4-metoxifenetil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
373,5 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(4-fenilbutil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
371,5 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(5-fluoropentil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
327,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(ciclobutilmetil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
307,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(ciclohexilmetil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
335,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(ciclopentilmetil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
321,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(ciclopropilmetil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
293,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-butil-7-metilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
309,4 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
295,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-butil-N-metilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
309,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-ciclohexilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
321,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-isobutilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
295,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-isopentilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
309,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-neopentilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
309,4 ** --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-pentilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
309,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-fenetilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
343,4 * --
3-(4-(aminometil)fenil)-N-propilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
281,4 * --
3-(6-((2-(ciclopentiloxi)etil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)fenol
338,4 * ***
3-(benzo[d][1,3]dioxol-5-N)-N-(2-(cidopentNoxi)etN)imidazo[1,2-b]piridazin-6- amina
366,4 * **
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
3,3-dimetil-1-(4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)butan-1-ona
377,5 ** ***
4-((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-2-metilbutan-2-ol
325,4 ** --
4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N-(terc-butil)piperazin-1-carboxamida
381,3 ** ***
4-(6-((2-(N,3,3-tnmetilbutanairiido)etil)aiTiino)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-3- il)benzamida
408,5 ** --
4-(6-((2-(terc-butoxi)etil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzamida
353,4 ** --
4-(6-((2-(terc-butoxi)etil)amino)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-3-il)-N-(2- (dietilamino)etil)benzamida
452,6 ** --
4-(6-((2-(terc-butoxi)etil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-N-metilbenzamida
367,4 ** --
4-(6-((2-(trifluorometoxi)fenetil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzamida
441,4 *** --
4-(6-((2-etoxifenetil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-N-metilbenzamida
415,5 *** --
4-(6-((2-isobutoxietil)ammo)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-3-il)-N-(2-(pin'olidin-1- il)etil)benzamida
450,6 ** --
4-(6-((2-isopropoxietil)ammo)iiTiidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-N-(2-(pin'olidin-1- il)etil)benzamida
436,5 ** --
4-(6-((2-metoxifenetil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzamida
387,4 *** --
4-(6-((3-(trifluorometil)fenetil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzamida
425,4 ** --
4-(6-((3-metoxifenetil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzamida
387,4 ** --
4-(6-(butilamino)iiriidazo[1,2-b]pindazin-3-il)-2-fluoro-N-(2- (metilamino)etil)benzamida
384,5 ** --
4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzamida
309,4 ** --
4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-N-(2-(dietilamino)etil)benzamida
408,5 *** --
4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-N-(2-(dimetilamino)etil)benzamida
380,5 ** --
4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-N-(2-(metilamino)etil)benzamida
366,5 ** --
4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-N-(2-(pirrolidin-1-il)etil)benzamida
406,5 ** --
5-(6-((2-(ciclopentiloxi)etil)aiTiino)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-3-il)tiofeno-2- carbonitrilo
353,4 ** ***
5-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)tiofeno-2-carboxamida
315,4 * --
5-(6-(propilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)tiofeno-2-carbaldehído
286,4 * --
6-(butilamino)-N-(1H-pirazol-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida
299,3 * --
6-(butilamino)-N-(4-((2-(dimetilamino)etil)carbamoil)fenil)imidazo[1,2-b] piridazin-3-carboxamida
423,5 ** --
(2-((3-(4-carbamoilfenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) (isopropil)carbamato de ciclopentilo
450,5 ** --
(2-((3-(3-metoxipiridin-4-il)iiriidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)etil)(metil)carbamato de etilo
370,4 *** --
(2-((3-(4-(isopentilcarbamoil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) (metil)carbamato de etilo
452,5 ** --
(2-((3-(4-(terc-butilcarbamoil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) (metil)carbamato de etilo
438,5 ** --
(2-((3-(4-carbamoilfenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil)carbamato de etilo
382,4 ** --
(2-((3-(4-carbamoilfeml)iiriidazo[1,2-b]pindazin-6- il)amino)etil)(isopropil)carbamato de etilo
410,5 ** --
(3-((3-(5-acetiltiofen-2-il)iiriidazo[1,2-b]pindazin-6- il)amino)propil)(metil)carbamato de etilo
401,5 * --
4-((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)butanoato de etilo
353,4 ** --
4-((3-(5-acetiltiofen-2-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)butanoato de etilo
372,4 ** --
4-(3-(metilcarbamoil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de etilo
332,4 -- **
4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de etilo
351,4 ** ***
isopropil(2-((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) carbamato de etilo
398,5 *** --
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
metil(2-((3-(4-(metilcarbamoil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) carbamato de etilo
396,4 ** --
metil(2-((3-(5-(metilcarbamoil)tiofen-2-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) etil)carbamato de etilo
402,5 ** --
(2-((3-(4-carbamoilfenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil)carbamato de isobutilo
410,5 ** --
isopropil(2-((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) carbamato de isobutilo
426,5 ** --
metil(2-((3-(4-(metilcarbamoil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) etil)carbamato de isobutilo
424,5 ** --
(2-((3-(1H-pirazol-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil)carbamato de isopropilo
343,4 ** --
(2-((3-(2,4-dimetiltiazol-5-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) (metil)carbamato de isopropilo
388,5 ** --
(2-((3-(2-aminopiridin-4-il)iiriidazo[1,2-b]pindazin-6- il)amino)etil)(metil)carbamato de isopropilo
369,4 ** --
(2-((3-(2-fluorofenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil) carbamato de isopropilo
371,4 ** --
(2-((3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil) carbamato de isopropilo
383,4 ** --
(2-((3-(3-metoxipiridin-4-il)iiriidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)etil)(metil)carbamato de isopropilo
384,4 ** --
(2-((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) carbamato de isopropilo
370,4 ** --
(2-((3-(4,5-difluoro-2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) (isopropil)carbamato de isopropilo
447,5 ** --
(2-((3-(4-carbamoilfenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)etil)(isopropil)carbamato de isopropilo
424,5 ** --
(2-((3-(4-carbamoilfenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil)carbamato de isopropilo
396,4 *** --
(2-((3-(4-fluoro-2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) (metil)carbamato de isopropilo
401,4 ** --
(2-((3-(5-fluoro-2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) (metil)carbamato de isopropilo
401,4 *** --
(2-((3-(5-fluoro-2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) (isopropil)carbamato de isopropilo
429,5 ** --
(3-((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)propil) (metil)carbamato de isopropilo
396,5 ** --
(3-((3-(5-acetiltiofen-2-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)propil)(metil)carbamato de isopropilo
415,5 ** --
4-(3-(2-(difluorometoxi)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
431,4 ** ***
4-(3-(2-(difluorometoxi)piridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1- carboxilato de isopropilo
432,4 ** ***
4-(3-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioxol-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il) piperazin- 1-carboxilato de isopropilo
445,4 * ***
4-(3-(2,3-dihidrobenzofuran-7-il)iiriidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1- carboxilato de isopropilo
407,5 ** --
4-(3-(2,3-dimetoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
425,5 ** ***
4-(3-(2,5-dimetoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
425,5 ** ***
4-(3-(2-etoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
409,5 ** ***
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
4-(3-(2-fluoro-3-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
413,4 ** ***
4-(3-(2-fluorofenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
383,4 ** ***
4-(3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
395,5 *** ***
4-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
396,4 *** ***
4-(3-(2-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
396,4 ** ***
4-(3-(2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1- carboxilato de isopropilo
382,4 ** ***
4-(3-(3-clorofenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
399,9 * ***
4-(3-(3-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
395,5 ** ***
4-(3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
396,4 *** --
4-(3-(benzo[d][1,3]dioxol-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
409,4 ** --
4-(3-(metilcarbamoil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
346,4 -- **
4-(3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
366,4 ** --
4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
365,4 ** --
etil(2-((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) carbamato de isopropilo
398,5 ** --
etil(2-((3-(4-(metilcarbamoil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) etil)carbamato de isopropilo
424,5 ** --
isopropil(2-((3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) carbamato de isopropilo
411,5 ** --
isopropil(2-((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) etil)carbamato de isopropilo
412,5 *** --
isopropil(2-((3-(4-(metilcarbamoil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il) amino)etil)carbamato de isopropilo
438,5 ** --
isopropil(2-((3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) carbamato de isopropilo
382,5 ** --
isopropil(2-((3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)carbamato de isopropilo
381,5 ** --
metil(2-((3-(4-(metilcarbamoil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) etil)carbamato de isopropilo
410,5 ** --
metil(2-((3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) carbamato de isopropilo
422,5 *** --
metil(2-((3-(tiazol-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)carbamato de isopropilo
360,4 ** --
isopropil(2-((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) carbamato de metilo
384,4 *** --
N-((1R,2S)-2-aminociclohexil)-4-(6-(butilammo)imidazo[1,2-b]piridazin-3- il)benzamida
406,5 ** --
N-(2-((3-(4-cianofeml)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)ammo)etil)-N,3,3- trimetilbutanamida
390,5 ** --
N-(2-((3-(4-cianofenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)-N-metilpivalamida
376,5 ** --
N-(2-(ciclopentiloxi)etil)-3-(1H-pirazol-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
312,4 * **
N-(2-(ciclopentiloxi)etil)-3-(2-fluoropiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
341,4 * ***
N-(2-(ciclopentiloxi)etil)-3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
353,4 ** --
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
N-(2-(cidopentiloxi)etil)-3-(3-fluoropiridin-4-il}imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
341,4 ** --
N-(2-(cidopentiloxi)etil)-3-(3-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
352,4 -- **
N-(2-(cidopentiloxi)etil)-3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
353,4 * --
N-(2-(cidopentiloxi)etil)-3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
391,5 ** --
N-(2-(cidopentiloxi)etil)-3-(4-metiltiofen-2-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
342,5 -- **
N-(2-(cidopentiloxi)etil)-3-(5-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
353,4 ** ***
N-(2-(cidopentiloxi)etil)-3-(5-metiltiofen-2-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
342,5 -- **
N-(2-(cidopentiloxi)etil)-3-(piridin-2-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
323,4 ** ***
N-(2-(cidopentiloxi)etil)-3-(tiofen-2-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
328,4 -- ***
N-(2-(cidopentiloxi)etil)-3-(tiofen-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
328,4 -- **
N-(2-(dietilamino)etil)-4-(6-((2-isobutoxietil)airiino)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-3- il)benzamida
452,6 ** --
N-(2-(dietilamino)etil)-4-(6-((2-isopropoxietil)airimo)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-3- il)benzamida
438,6 ** --
N-(2-(metilamino)etil)-4-(6-((3-(N-metilpivalamido)propil)amino)imidazo[1,2-b] piridazin-3-il)benzamida
465,6 * --
N-(2-(terc-butoxi)etil)-3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
341,4 ** --
N-(2-(terc-butoxi)etil)-3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
379,5 ** --
N-(2-ammoetil)-4-(6-((3-(terc-butoxi)propil)airiino)iiTiidazo[1,2-b]piridazin-3- il)benzamida
410,5 * --
N-(2-amrnoetil)-4-(6-((3,3-diirietilbutil)aiTiino)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-3- il)benzamida
380,5 * --
N-(2-aminoetil)-4-(6-((3-fenilpropil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzamida
414,5 * --
N-(2-ammoetil)-4-(6-(butilairimo)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-3-il)-2- metoxibenzamida
382,5 * --
N-(2-aminoetil)-4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-2-fluorobenzamida
370,4 ** --
N-(2-aminoetil)-4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-3-fluorobenzamida
370,4 * --
N-(2-aminoetil)-4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzamida
352,4 * --
N-(2-aminopropil)-4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzamida
366,5 * --
N-(2-etoxifenetil)-3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
389,5 ** --
N-(2-isobutoxietil)-3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
340,4 * --
N-(2-isobutoxietil)-3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
341,4 ** --
N-(2-isobutoxietil)-3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
311,4 * --
N-(2-isopropoxietil)-3-(1H-pirazol-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
286,3 * --
N-(2-isopropoxietil)-3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
327,4 *** --
N-(2-isopropoxietil)-3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
365,5 ** --
N-(2-isopropoxietil)-3-(isotiazol-5-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
303,4 ** --
N-(2-isopropoxietil)-3-(tiazol-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
303,4 * --
N-(3-((3-(4-(aminometil)feml)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-il)aiTimo)propil)-N- metilpivalamida
394,5 * --
N-(3-(6-((2-(ciclopentiloxi)etil)amino}imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)fenil)acetamida
379,5 ** **
N-(3-(terc-butoxi)propil)-3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
355,4 * --
N-(3,3-dimetilbutil)-3-(4-((2-(metilamino)etoxi)metil)fenil)imidazo[1,2-b] piridazin-6-amina
381,5 ** --
N-(3,3-dimetilbutil)-3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
363,5 * --
N-(3-aminopropil)-4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzamida
366,5 * --
N-(3-fluoropropil)-3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
339,4 ** --
N-(3-fenilpropil)-3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
397,5 * --
N-(4-(2-aminoetoxi)fenil)-6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida
368,4 * --
N-(4-(aminometil)fenil)-6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-carboxamida
338,4 * --
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
N-(cidopentilmetil)-3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
323,4 ** --
N-(terc-butil)-4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxamida
378,5 ** ***
N,N-dimetil-3-(6-(4-(pirrolidin-1-carboml)piperazin-1-N)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-3- il)benzamida
447,5 ** ***
N1-(3-(4-(aminometN)feml)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-N)-N2-iTietN-N2-femletano- 1,2-diamina
372,5 ** --
N1-(3-(4-(aminometN)feml)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-N)-N3-iTietN-N3- fenilpropano-1,3-diamina
386,5 ** --
N1-(3-(5-(aminometN)tiofen-2-N)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-N)-N3-iTietN-N3- fenilpropano-1,3-diamina
392,5 * --
N1-(4-(6-((3,3-dimetilbutN)airiino)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-3-N)bencN)etano-1,2- diamina
366,5 * --
N1-(4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)bencil)etano-1,2-diamina
338,4 * --
N1-(4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)bencil)propano-1,3-diamina
352,5 * --
N-butil-3-(1H-pirazol-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
256,3 ** --
N-butil-3-(2,4-dimetiltiazol-5-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
301,4 ** --
N-butil-3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
297,4 ** --
N-butil-3-(4-((((tetrahidrofurano-2-il)iTietN)aiTimo)iTietN)feml)iiTiidazo[1,2- b]piridazin-6-amina
379,5 * --
N-butil-3-(4-(((2-metoxietil)amino)metil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
353,5 * --
N-butil-3-(4-(((ciclopropilmetil)amino)metil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
349,5 * --
N-butil-3-(4-((isopropilamino)metil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
337,5 * --
N-butil-3-(4-((propilamino)metil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
337,5 * --
N-butil-3-(4-((terc-butilamino)metil)-2-fiuorofenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
369,5 * --
N-butil-3-(4-((terc-butilamino)metil)-3-fluorofenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
369,5 ** --
N-butil-3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
335,4 * --
N-butil-3-(isoindolin-5-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
307,4 * --
N-butil-3-(isoquinolin-6-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
317,4 ** --
N-ciclohexil-3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
323,4 ***
N-isopentil-3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
311,4 ** --
N-isopropil-4-(3-(2-irietoxifeml)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-N)-N-iTietNpiperazin-1- carboxamida
408,5 ** ***
N-isopropil-4-(3-(2-irietoxifeml)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-N)piperazin-1- carboxamida
394,5 * ***
N-isopropil-4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxamida
364,4 ** ***
N-metil-4-(6-((2-(trifluoroiTietoxi)fenetN)aiTiino)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-3- il)benzamida
455,4 *** --
N-pentil-3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
349,5 * --
piperidin-1-il(4-(3-(piridin-2-il)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-N)piperazin-1- il)metanona
391,5 ** ***
isopropil(2-((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) carbamato de propilo
412,5 * --
4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carbotioato de S-isopropilo
381,5 * ***
(1-(3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)(metil)carbamato de terc-butilo
423,5 * ***
(1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il) (metil)carbamato de terc-butilo
424,5 ** ***
(1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-N)azetidin-3- il)(metil)carbamato de terc-butilo
410,5 - *
(2-((3-(2-aminopiridin-4-N)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6- il)amino)etil)(metil)carbamato de terc-butilo
383,4 *** --
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
(2-((3-(2-fluorofenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil)carbamato de terc-butilo
385,4 ** --
(2-((3-(2-fluoropiridin-4-il)iiTiidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)etil)(metil)carbamato de terc-butilo
386,4 ** --
(2-((3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil)carbamato de terc-butilo
397,5 ** --
(2-((3-(3-carbamoilfenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil)carbamato de terc-terc-butilo
410,5 ** --
(2-((3-(3-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil)carbamato de terc-butilo
397,5 ** --
(2-((3-(3-metoxipiridin-4-il)iiriidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)etil)(metil)carbamato de terc-butilo
398,5 * --
(2-((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) carbamato de terc-butilo
382,5 ** --
(2-((3-(4-(cianometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) (metil)carbamato de terc-butilo
406,5 ** --
(2-((3-(4-carbamoilfenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil)carbamato de terc-butilo
410,5 ** ***
(2-((3-(4-carbamoilfeml)iiriidazo[1,2-b]pindazin-6- il)amino)etil)(isopropil)carbamato de terc-butilo
438,5 *** --
(2-((3-(4-cianofenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil)carbamato de terc-butilo
392,5 ** --
(2-((3-(5-acetiltiofen-2-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil)carbamato de terc-butilo
415,5 *** --
(3-((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)propil) (metil)carbamato de terc-butilo
410,5 ** --
(3-((3-(5-acetiltiofen-2-il)iiTiidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)propil)(metil)carbamato de terc-butilo
429,5 ** --
2-(2-((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) pirrolidin-1- carboxilato de terc-butilo
436,5 *** --
2-(2-((3-(4-carbamoilfenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) pirrolidin-1- carboxilato de terc-butilo
450,5 ** --
4-(3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo
410,5 *** --
4-(3-cloroimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo
337,8 ** --
4-(3-yodoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo
429,3 ** ***
4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de terc-butilo
379,5 ** ***
isopropil(2-((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) carbamato de terc-butilo
426,5 ** --
metil(1-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)carbamato de terc-butilo
393,5 ** **
metil(2-((3-(4-(metilcarbamoil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)etil)carbamato de terc-butilo
424,5 ** --
metil(2-((3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)etil)carbamato de terc-butilo
436,5 *** --
metil(2-((3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)carbamato de terc- butilo
368,4 ** --
metil(2-((3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)carbamato de terc-butilo
367,4 ** --
4-(3-(5-fluoro-2-metoxi-4-metilfenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il) piperazin-1- carboxilato de isopropilo
427,5 *** ***
2-(((3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-isopropilo
410,5 *** ***
2-(((3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)(metil)amino) metil)pirrolidin-1 -carboxilato de (S)-isopropilo
424,5 *** ***
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
2-(((3-(2-hidroxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)oxi)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-isopropilo
397,4 -- **
2-(((3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)oxi)metil) pirrolidin-1- carboxilato de (S)-isopropilo
411,5 -- **
(S)-6-(3-(2-metoxietoxi)pirrolidin-1-N)-3-(2-iTietoxipiridin-3-N)iiTiidazo[1,2- b]piridazina
369,4 -- *
(S)-3-(2-metoxi-6-metilpiridin-3-il)-6-(3-(2-metoxietoxi)pirrolidin-1-il)imidazo[1,2- b]piridazina
383,4 -- **
(S)-3-(2-metoxi-5-metilpiridin-3-il)-6-(3-(2-metoxietoxi)pirrolidin-1-il)imidazo[1,2- b]piridazina
383,4 -- *
(S)-1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-ol
311,3 -- *
(1-(3-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-N)pin'oNdin-3- il)(metil)carbamato de (S)-etilo
414,4 ** ***
(1-(3-(2-metoxi-6-metilpiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3- il)(metil)carbamato de (S)-etilo
410,5 ** -
(1-(3-(5-fluoro-2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il) (metil)carbamato de (S)-etilo
413,4 ** ***
(1-(3-(2,6-dimetoxipindin-3-il)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-N)pirroNdin-3- il)(metil)carbamato de (S)-etilo
426,5 -- -
(1-(3-(2-metoxi-5-metilpiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3- il)(metil)carbamato de (S)-etilo
410,5 ** ***
(1-(3-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-il)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-N)pin'oNdin-3- il)(metil)carbamato de (S)-isopropilo
428,5 ** ***
(1-(3-(2,6-dimetoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il) (metil)carbamato de (S)-isopropilo
440,5 ** ***
(1-(3-(5-fluoro-2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il) (metil)carbamato de (S)-isopropilo
427,5 *** ***
(1-(3-(2-metoxi-5-metilpiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3- il)(metil)carbamato de (S)-isopropilo
424,5 ** ***
4-(3-acetilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
331,4 -- **
(1-(3-(1,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropindin-3-il)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6- il)pirrolidin-3-il)(metil)carbamato de (S)-isopropilo
424,5 -- **
(1-(3-(2-(tri-deuterometoxi)piridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il) pirrolidin-3- il)(metil)carbamato de (S)-isopropilo
413,4 *** ***
(1-(3-(2-(trideuteroiTietoxi)pindin-3-N)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-N)pirroNdin-3- il)(metil)carbamato de (S)-etilo
399,4 ** ***
4-(3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
394,5 *** ***
(S)-2-amino-1-(4-(imidazo[1,2-b]pindazin-6-il)piperazin-1-N)-4-metilpentan-1- ona
316,4 -- *
(S)-2-amino-1-(4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)-4- metilpentan-1-ona
395,3 -- ***
(S)-2-amino-1-(4-(3-(2-irietoxipiridin-3-N)iiTiidazo[1,2-b]piridazin-6-N)piperazin-1- il)-4-metilpentan-1-ona
423,5 *** ***
(S)-2-amino-1-(4-(3-doroiiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-N)piperazin-1-N)-4- metilpentan-1-ona
350,8 -- **
(S)-2-amino-3-metil-1-(4-(3-metilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1- il)butan-1-ona
316,4 -- ***
(S)-2-amino-4-metil-1-(4-(3-metilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1- il)pentan-1-ona
330,4 -- **
(1-(3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il) (metil)carbamato de (S)-isopropilo
408,5 *** ***
4-(3-(5-fluoro-2-metoxipiridin-3-N)iiTiidazo[1,2-b]pindazin-6-N)piperazin-1- carboxilato de isopropilo
414,4 *** ***
5
10
15
20
25
Compuesto
PM CBA CI50 CI50 de P81
4-(3-(2-metoxi-6-metilpiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1- carboxilato de isopropilo
410,5 *** ***
4-(3-(5-fluoro-2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
413,4 *** ***
(S)-1-(4-(3-acetilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)-2-amino-3- metilbutan-1-ona
344,4 ** ***
1-(6-(4-(1-aminociclopentanocarbonil)piperazin-1-il)imidazo[1,2-b]piridazin-3- il)etanona
356,4 -- **
4-(3-(2-etoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1 -carboxilato de isopropilo
410,5 *** ***
1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-1H-pirazol-4-carboxilato de metilo
322,1 -- **
1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-1H-pirazol-4-carboxilato de metilo
350,3 -- ***
4-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de 2-metoxietilo
412,4 ** ***
5.6.170. Efectos farmacológicos
Los estudios de ratones knock-out AAK1 mostraron que la alteración del gen AAK1 afecta la respuesta al dolor medida usando la prueba de la pata de formol. Véase el ejemplo 5.6.1, anterior. La misma prueba se usó para confirmar que la administración de un inhibidor de AAK1 también puede afectar la respuesta al dolor.
Los ratones se evaluaron para nocicepción con analizadores de nocicepción automáticos (comprados en el laboratorio Ozaki de la Universidad de California, San Diego). Se colocó una banda de metal alrededor de la pata trasera izquierda de cada ratón con superpegamento 30 minutos antes de la prueba. Después del minuto 30 del periodo de aclimatación, se inyectaron por vía subcutánea 20 pl de formalina al 5 % en la superficie dorsal de la pata trasera izquierda. Los ratones se alojaron individualmente en cámaras cilindricas durante 45 minutos. Se preparó una solución de formalina al 5 % fresca diluyendo formaldehído (Formalde-fresco al 20 %, Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) con agua destilada. Los compuestos de investigación se administraron 30 minutos antes de la inyección de formalina.
Un software informático registró retrocesos por minuto, estrecheces totales para la Fase I (fase aguda = primeros 8 minutos) y estrecheces totales para la Fase II (fase tónica entre 20 y 40 minutos) a través de un campo electromagnético. Véase Yaks tL, Ozaki G, McCumber D, Rathbun M, Svensson C, Malkmus S, Yaks MC. Un sistema automático de detección de estremecimiento para usar en el bioensayo nociceptivo con formalina. J Appl Physiol., 2001; 90:2386-402.
Se probaron diversos compuestos de la invención a diferentes dosis. Gabapentina y pregabalina se usaron como controles positivos. Los resultados se muestran a continuación en la Tabla 2, en donde "*" significa un efecto igual o mayor al 50 por ciento del de la gabapentina a 200 mpk, "**" significa un efecto igual o mayor al 100 por ciento del de la gabapentina a 200 mpk, "sc" significa administración subcutánea, "ip" significa administración intraperitoneal y "po" significa administración oral.
Tabla 2
Compuesto
Dosis (mpk) Efecto
Gabapentina
50 sc *
Gabapentina
200 sc **
Pregabalina
50 sc *
(1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)(metil)carbamato de (S)- isopropilo
10 po *
(1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)(metil)carbamato de (S)- isopropilo
30 po **
(1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)(metil) carbamato de (S)- isopropilo
60 po **
2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirrolidin-1-carboxilato de (S)-terc-butilo
60 sc **
Compuesto
Dosis (mpk) Efecto
2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-terc- butilo
30 sc **
2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1-carboxilato de (S)-terc-(S)- terc-butilo
60 sc **
3-(4-(1H-tetrazol-5-il)fenil)-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
60 ip **
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-(ciclopentiloxi)etil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
60 sc **
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-(ciclopentiloxi)etil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
100 sc **
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-(terc-butoxi)etil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
60 sc **
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(3-(terc-butoxi)propil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
60 sc **
3-(4-(aminometil)fenil)-N-(3-fenilpropil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
30 ip **
4-(3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
30 sc **
4-(3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-carboxilato de isopropilo
60 sc **
N-(2-aminoetil)-4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzamida
30 ip **
(2-((3-(4-carbamoilfenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil)carbamato de terc- butilo
100 po **
(2-((3-(4-carbamoilfenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)(metil)carbamato de terc- butilo
60 sc **
Estos resultados demuestran que los inhibidores de AAK1 pueden usarse para tratar el dolor.
Todas las publicaciones (por ejemplo, patentes y solicitudes de patente) citadas anteriormente se incorporan aquí 5 como referencia en su totalidad.

Claims (8)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    1. Un compuesto de la fórmula:
    imagen1
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:
    X es CH o N;
    cada R-ia es independientemente -ORíe, -N(Ric)2, -C(O)Ríe, -C(O)OR1c, -C(O)N(R1c)2, -N(R1c)C(O)OR1c, ciano, halo o hidrocarbilo C1.12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más Rib;
    cada Rib es independientemente -ORic, -N(Ric)2, -C(O)Ric, -C(O)ORic, -C(0)N(Ric)2, -N(Ric)C(O)ORic, ciano o halo;
    cada Ríe es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido o heterocarbilo de 2-12 miembros, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo;
    R2C es -C(0)R2d;
    R2D es heterocarbilo de 2-12 miembros que comprende al menos un átomo de nitrógeno; y m es 0-3;
    con la condición de que cuando X es CH, m es 1 y Ría es cloro, R2D no es t-butilo.
  2. 2. El compuesto de la reivindicación 1, que es de la fórmula:
  3. 3. El compuesto de la reivindicación 2,
    imagen2
  4. 4. El compuesto de la reivindicación
    imagen3
    imagen4
  5. 5. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde al menos un Ría es halo.
  6. 6. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde al menos un Ría es -ORic.
  7. 7. El compuesto de la reivindicación 6, en donde Ríe es hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido (por ejemplo, hidrocarbilo C1-6, hidrocarbilo C1-4).
  8. 8. El compuesto de la reivindicación 7, en donde Ríe es metilo.
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