JP2016529319A - イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン系化合物、それを含む組成物、及びそれらを使用する方法 - Google Patents

Abstract

式（式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は本明細書中で規定されるとおりである）のイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン系化合物を開示する。該化合物を含む組成物、並びにアダプター関連キナーゼ１活性によって媒介される疾患及び障害を治療、管理及び／又は予防するそれらの使用方法も開示する。【選択図】図１

Description

１． 発明の分野
本発明は、アダプター関連キナーゼ１（ＡＡＫ１）の阻害剤として有用なイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン系化合物と、それを含む組成物と、それらを使用する方法とに関する。

２． 発明の背景
アダプター関連キナーゼ１（ＡＡＫ１）は、セリン／スレオニンキナーゼのＡｒｋ１／Ｐｒｋ１ファミリーの成員である。ＡＡＫ１ ｍＲＮＡはショート及びロングと呼ばれる２種のスプライシング型で存在する。ロング型は脳及び心臓において優勢であり、強く発現する（非特許文献１）。ＡＡＫ１はシナプトソーム調製物に豊富に含まれ、培養細胞においてエンドサイトーシス構造と共局在化する。ＡＡＫ１は、シナプス小胞の再利用及び受容体媒介性のエンドサイトーシスに重要なプロセスであるクラスリン被覆エンドサイトーシスを調節する。ＡＡＫ１が、受容体のカーゴとクラスリン被覆とを連結するヘテロ四量体であるＡＰ２複合体に結び付く。クラスリンとＡＡＫ１との結合がＡＡＫ１キナーゼ活性を刺激する（非特許文献２、非特許文献３）。ＡＡＫ１は、ＡＰ−２のｍｕ−２サブユニットをリン酸化し、それによりｍｕ−２とカーゴ受容体上のチロシンを含むソーティングモチーフとの結合を促す（非特許文献４、非特許文献５）。Ｍｕ２のリン酸化は受容体の取込みに必要ではないが、リン酸化は内在化の効率を高める（非特許文献６）。

ＡＡＫ１はＰＣ１２細胞におけるニューレグリン−１／ＥｒｂＢ４シグナル伝達の阻害剤として特定されている。ＲＮＡ干渉媒介性の遺伝子サイレンシング又はキナーゼ阻害剤Ｋ２５２ａ（ＡＡＫ１キナーゼ活性を阻害する）での処理によるＡＡＫ１発現の喪失がニューレグリン−１誘導性の神経突起伸長の増強をもたらす。これらの処理により、細胞膜又はその付近でのＥｒｂＢ４の発現の増大及びＥｒｂＢ４の集積が起こる（非特許文献７）。ＮＲＧ１及びＥｒｂＢ４は推定統合失調症感受性遺伝子である（非特許文献８）。両遺伝子のＳＮＰが複合的な統合失調症の中間形質に関連している（非特許文献９）。ニューレグリン１及びＥｒｂＢ４ ＫＯマウスモデルは統合失調症関連の形態変化及び行動的表現型を示した（非特許文献１０、非特許文献１１）。加えて、ＡＡＫ１遺伝子のイントロンでの一塩基多型はパーキンソン病の発症年齢に関連していた（非特許文献１２）。これらの結果から、ＡＡＫ１活性の阻害が統合失調症、統合失調症における認知障害、パーキンソン病、双極性障害及びアルツハイマー病の治療に有用であり得ることが示唆される。

Henderson and Conner, Mol. Biol. Cell. 2007, 18, 2698-2706 Conner et. al., Traffic 2003, 4, 885-890 Jackson et. al., J. Cell. Biol. 2003, 163, 231-236 Ricotta et. al., J. Cell Bio. 2002, 156, 791-795 Conner and Schmid, J. Cell Bio. 2002, 156, 921-929 Motely et. al., Mol. Biol. Cell. 2006, 17, 5298-5308 Kuai et. al., Chemistry and Biology 2011, 18, 891-906 Buonanno, Brain Res. Bull. 2010, 83, 122-131 Greenwood et. al., Am. J. Psychiatry 2011, 168, 930-946 Jaaro-Peled et. al., Schizophrenia Bulletin 2010, 36, 301-313 Wen et. al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2010, 107, 1211-1216 Latourelle et. al., BMC Med. Genet. 2009, 10, 98

３． 発明の概要
本発明は、一つには下記式のＡＡＫ１阻害剤：

（式中、
Ｒ_１はＲ_１Ａ又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ_１Ａによるものであり、
各Ｒ_１Ａは独立して、−ＯＲ_１Ｃ、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ_１Ｂによるものであり、
各Ｒ_１Ｂは独立して、−ＯＲ_１Ｃ、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、シアノ又はハロであり、
各Ｒ_１Ｃは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ又はヒドロキシルによるものであり、
Ｒ_２は、炭素原子の１つがＣ５に結合した、任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル又は２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ_２Ｃによるものであり、
各Ｒ_２Ｃは独立して、−ＯＲ_２Ｄ、−Ｎ（Ｒ_２Ｄ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_２Ｄ）_２、−Ｎ（Ｒ_２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ、シアノ、ハロ、オキソ、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシル又はＲ_２Ｄによるものであり、
各Ｒ_２Ｄは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、又はヒドロキシルによるものであり、
Ｒ_３は水素、又は１つ若しくは複数のシアノ、ハロ若しくはヒドロキシルで任意に置換されたＣ_１〜６アルキルである）及びその薬学的に許容可能な塩に関する。

本発明の１つの実施の形態は、本明細書に開示の化合物（すなわち本発明の化合物）を含む医薬組成物及び剤形を包含する。

本発明の別の実施の形態は、ＡＡＫ１を本発明の化合物と接触させることを含む、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏの両方でアダプター関連キナーゼ１（ＡＡＫ１）を阻害する方法を包含する。

別の実施の形態は、ＡＡＫ１活性によって媒介される疾患及び障害を治療及び管理する方法を包含する。このような疾患及び障害の例としては、アルツハイマー病、双極性障害、疼痛、パーキンソン病及び統合失調症（統合失調症における認知障害を含む）が挙げられると考えられる。

４． 図面の簡単な説明

本発明の態様を説明するものであり、ＡＡＫ１ホモ接合型（−／−）ノックアウトマウスとその野生型（＋／＋）同腹子とを用いたホルマリン疼痛モデルから得られた結果を示す図である。ＡＡＫ１ホモ接合型（−／−）ノックアウトマウスは、その野生型（＋／＋）同腹子と比較して急性及び持続性の（tonic）疼痛応答の両方において明らかな低減を示している。

５． 発明の詳細な説明
本発明は、ＡＡＫ１ノックアウトマウスが疼痛に高い耐性を示すという発見に一部基づくものである。この発見が研究を促し、最終的にＡＡＫ１阻害剤、それを含む組成物及びそれらを使用する方法の発見へと至った。

５．１． 定義
特に明示のない限り、「本発明の化合物」、「本開示の化合物」等の語句は、本明細書中で開示される化合物を指す。

特に明示のない限り、「ヒドロカルビル」という用語は、全炭素骨格（all-carbon backbone）を有し、炭素原子と水素原子とからなる脂肪族部分又は脂環式部分を意味する。ヒドロカルビル基の例としては、炭素数１〜２０、１〜１２、１〜６及び１〜４のもの（それぞれＣ_１〜２０ヒドロカルビル、Ｃ_１〜１２ヒドロカルビル、Ｃ_１〜６ヒドロカルビル及びＣ_１〜４ヒドロカルビルと称される）が挙げられる。具体例としては、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ベンジル、シクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキルアルキル、シクロアルケニルアルキル、ナフチル、フェニル及びフェニルエチルが挙げられる。

アルキル部分の例としては、炭素数１〜２０、１〜１２、１〜６、１〜４及び１〜３の直鎖部分及び分岐部分（それぞれＣ_１〜２０アルキル、Ｃ_１〜１２アルキル、Ｃ_１〜６アルキル、Ｃ_１〜４アルキル及びＣ_１〜３アルキルと称される）が挙げられる。具体例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ペンチル、ヘキシル、イソへキシル、ヘプチル、４，４−ジメチルペンチル、オクチル、２，２，４−トリメチルペンチル、ノニル、デシル、ウンデシル及びドデシルが挙げられる。

アルケニル部分の例としては、直鎖及び分岐Ｃ_２〜２０、Ｃ_２〜１２及びＣ_２〜６アルケニルが挙げられる。具体例としては、ビニル、アリル、１−ブテニル、２−ブテニル、イソブチレニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、１−ヘプテニル、２−ヘプテニル、３−ヘプテニル、１−オクテニル、２−オクテニル、３−オクテニル、１−ノネニル、２−ノネニル、３−ノネニル、１−デセニル、２−デセニル及び３−デセニルが挙げられる。

アルキニル部分の例としては、直鎖及び分岐Ｃ_２〜２０、Ｃ_２〜１２及びＣ_２〜６アルキニルが挙げられる。具体例としては、エチニル及び２−プロピニル（プロパルギル）が挙げられる。

アリール部分の例としては、アントラセニル、アズレニル、フルオレニル、インダン、インデニル、ナフチル、フェニル及びフェナントレニルが挙げられる。

シクロアルキル部分の例としては、Ｃ_３〜１２、Ｃ_３〜７、Ｃ_４〜６及びＣ_６シクロアルキルが挙げられる。具体例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びアダマンチルが挙げられる。

特に明示のない限り、「ハロ」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードを包含する。

特に明示のない限り、「ヘテロカルビル」という用語は、１つ又は複数の炭素原子と１つ又は複数のヘテロ原子とから構成される骨格を有する部分を指す。具体的なヘテロ原子は窒素、酸素及び硫黄である。ヘテロカルビル部分は、少なくとも１つの炭素原子、ＣＨ基、ＣＨ_２基又はＣＨ_３基が、１つ又は複数のヘテロ原子と原子価を満たすのに必要な数の水素原子とで置き換えられたヒドロカルビル部分と考えることができる。ヘテロカルビルの例としては、２員〜２０員、２員〜１２員、２員〜８員、２員〜６員及び２員〜４員のヘテロカルビル部分が挙げられ、この数の範囲はこの部分の炭素原子、窒素原子、酸素原子及び／又は硫黄原子の合計を指す。したがって、「２員〜１２員のヘテロカルビル」という用語は、合計で２個〜１２個の炭素原子、窒素原子、酸素原子及び／又は硫黄原子を有するヘテロカルビル部分を指す。具体的なヘテロカルビル部分としては、直鎖及び分岐ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル及びヘテロアルキニル、並びに複素環及びヘテロアリールが挙げられる。

ヘテロアルキル部分の例としては、２員〜８員、２員〜６員及び２員〜４員のヘテロアルキル部分が挙げられる。具体例としては、アルコキシル、アシル（例えばホルミル、アセチル、ベンゾイル）、アルキルアミノ（例えばジ−（Ｃ_１〜３−アルキル）アミノ）、アリールアミノ、アリールオキシム、カルバメート、カルバミド、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アルキルスルファニル、アリールスルファニル、アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルホニルアミノ及びアリールスルホニルアミノが挙げられる。

特に明示のない限り、「複素環」という用語は、芳香族、部分芳香族又は非芳香族であり得る環式（単環式又は多環式）のヘテロカルビル部分を指す。複素環はヘテロアリールを含む。例としては、４員〜１０員、４員〜７員、６員及び５員の複素環が挙げられる。具体例としては、ベンゾ［１，３］ジオキソリル、２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシニル、シンノリニル、フラニル、ヒダントイニル、モルホリニル、オキセタニル、オキシラニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジノニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニル及びバレロラクタミルが挙げられる。「複素環」という用語は環を指すため、単独ではオキサゾリジノン及びイミダゾリジノン等の部分を包含しない。かかる部分は、置換された複素環、すなわちオキソで置換された複素環とみなされる。

ヘテロアリール部分の例としては、アクリジニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾキナゾリニル、ベンゾチアゾリル、ベンズオキサゾリル、フリル、イミダゾリル、インドリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、フタラジニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピリミジル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、テトラゾリル、チアゾリル及びトリアジニルが挙げられる。

特に明示のない限り、「挙げられる（含む）（include）」という用語は、「挙げられる（含む）が、これらに限定されない」と同じ意味を有し、「挙げられる（含む）（includes）」という用語は、「挙げられる（含む）が、これらに限定されない」と同じ意味を有する。同様に、「等の（のような）（such as）」という用語は、「等の（のような）（ただし、これらに限定されない）」という用語と同じ意味を有する。

特に明示のない限り、「管理する（manage）」、「管理すること（managing）」及び「管理（management）」という用語は、特定の疾患若しくは障害に既に罹患した患者において疾患若しくは障害の再発を予防すること、及び／又は疾患若しくは障害に罹患している患者が寛解期にある時間を延長させることを包含する。この用語は、疾患若しくは障害の閾値、発症及び／又は継続期間を調節すること、又は患者の疾患若しくは障害に対する応答の仕方を変えることを包含する。

特に明示のない限り、化合物の「治療的に有効な量」は、疾患若しくは病態の治療若しくは管理において治療的利点をもたらすのに、又は疾患若しくは病態に関連した１つ若しくは複数の症状を遅延させる若しくは最小限に抑えるのに十分な量である。化合物の「治療的に有効な量」は、疾患又は病態の治療又は管理に治療的利点をもたらす、単独の又は他の療法と組み合わせた治療剤の量を意味する。「治療的に有効な量」という用語は、療法を全体的に改善するか、疾患若しくは病態の症状若しくは原因を低減させる若しくは回避するか、又は別の治療剤の治療的な有効性を高める量を包含し得る。

特に明示のない限り、「治療する（treat）」、「治療すること（treating）」及び「治療（treatment）」という用語は、疾患若しくは障害の重症度を低減させるか、又は疾患若しくは障害の進行を遅延若しくは減速させる、患者が特定の疾患又は障害に罹患している間に行う処置を意図する。

特に明示のない限り、一連の名詞の直前にくる１つ又は複数の形容詞は、それぞれの名詞を修飾するものとして解釈される。例えば、「任意に置換されるアルキル、アリール又はヘテロアリール」という語句は、「任意に置換されるアルキル、任意に置換されるアリール、又は任意に置換されるヘテロアリール」と同じ意味を有する。

５．２． 化合物
本発明は、下記式の化合物：

（式中、
Ｒ_１はＲ_１Ａ又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ_１Ａによるものであり、
各Ｒ_１Ａは独立して、−ＯＲ_１Ｃ、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ_１Ｂによるものであり、
各Ｒ_１Ｂは独立して、−ＯＲ_１Ｃ、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、シアノ又はハロであり、
各Ｒ_１Ｃは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ又はヒドロキシルによるものであり、
Ｒ_２は、炭素原子の１つがＣ５に結合した、任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル又は２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ_２Ｃによるものであり、
各Ｒ_２Ｃは独立して、−ＯＲ_２Ｄ、−Ｎ（Ｒ_２Ｄ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_２Ｄ）_２、−Ｎ（Ｒ_２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ、シアノ、ハロ、オキソ、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシル又はＲ_２Ｄによるものであり、
各Ｒ_２Ｄは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、又はヒドロキシルによるものであり、
Ｒ_３は水素、又は１つ若しくは複数のシアノ、ハロ若しくはヒドロキシルで任意に置換されたＣ_１〜６アルキルである）及びその薬学的に許容可能な塩を包含する。「Ｃ５」という用語は、上記のコア構造に「５」と標識された炭素原子を指す。

本発明のいくつかの化合物は下記式の化合物：

（式中、Ａは環状Ｃ_１〜１２ヒドロカルビル又は４員〜７員の複素環であり、Ｄは炭素原子の１つがＣ５に結合した、環状Ｃ_１〜１２ヒドロカルビル又は４員〜７員の複素環であり、ｎは１〜３であり、ｍは０〜３である）である。

いくつかの化合物は下記式の化合物：

（式中、ＸはＣＨ又はＮである）である。

いくつかの化合物は下記式の化合物：

である。

いくつかの化合物は下記式の化合物：

である。

いくつかの化合物は下記式の化合物：

（式中、Ｒ_２Ｃは−Ｃ（Ｏ）Ｒ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシル又はＲ_２Ｄによるものである）である。

いくつかの化合物は下記式の化合物：

（式中、Ｒ_２Ｃは−Ｃ（Ｏ）Ｒ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシル又はＲ_２Ｄによるものである）である。

いくつかの化合物は下記式の化合物：

（Ｒ_２Ｃは−Ｃ（Ｏ）Ｒ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシル又はＲ_２Ｄによるものである）である。

いくつかの化合物は下記式の化合物：

である。

いくつかの化合物は下記式の化合物：

である。

いくつかの化合物は下記式の化合物：

である。

本開示の種々の式を参照し、本発明の実施形態は、以下の１つ又は複数を満たす化合物を包含する。
Ｄはピペラジン又はピロリジンである
ｎは２である
ｍは１である
Ａはピリジニル、チオフェン、又はイミダゾールである
Ｒ_１はＲ_１Ａである
Ｒ_１は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビルである
Ｒ_１は任意に置換されたフェニルである
Ｒ_１は任意に置換された２員〜１２員のヘテロカルビル（例えば、２員〜８員のヘテロカルビル、２員〜６員のヘテロカルビル、２員〜６員のヘテロカルビル）である
Ｒ_１は任意に置換されたピリジニル、チオフェン、又はイミダゾールである
Ｒ_１Ａはハロである
Ｒ_１Ａは−ＯＲ_１Ｃ、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、又は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２である
Ｒ_１Ａは−ＯＲ_１Ｃである
Ｒ_１Ｂは−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−ＯＲ_１Ｃ、ハロである
Ｒ_１Ｃは水素である
Ｒ_１ＣはＣ_１〜１２ヒドロカルビル（例えば、Ｃ_１〜６ヒドロカルビル、Ｃ_１〜４ヒドロカルビル、例えばメチル、エチル、プロピル）である
Ｒ_２は６員の複素環である
Ｒ_２はＣ_１〜６ヒドロカルビルである
Ｒ_２ＣはＣ_１〜１２ヒドロカルビルである
Ｒ_２Ｄはハロである
Ｒ_２Ｄは任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシルによるものである
Ｒ_２Ｄは少なくとも１つの窒素原子を含む２員〜１２員のヘテロカルビルである
Ｒ_３は水素である

本明細書に示される構造において、実線及び破線により示された結合は、単／二重結合のどちらでもある。したがって、その部分：

は以下：

及び

の両方を包含する。

本発明の化合物は１つ又は複数の不斉中心を有することができる。特に指示のない限り、本発明はこの化合物のあらゆる立体異性体とそれらの混合物とを包含する。化合物の個々の立体異性体を、キラル中心を含有する市販の出発材料から、又は鏡像異性生成物の混合物を調製した後、ジアステレオマー混合物への変換後の分離若しくは再結晶化、クロマトグラフ法、又はキラルクロマトグラフカラム上での鏡像異性体の直接分離等の分離によって合成的に調製することができる。特定の立体化学の出発化合物は市販されているか、又は当該技術分野で既知の技法によって作製及び分割することができる。

本開示のいくつかの化合物は、分離可能な異なる安定した立体配座型でも存在し得る。非対称の単結合についての束縛回転に起因する、例えば立体障害又は環の変形（ring strain）による捻れ非対称（Torsional asymmetry）によって、異なる配座異性体の分離が可能となり得る。本開示はこれらの化合物の各立体配座異性体とそれらの混合物とを含む。

本開示は本発明の化合物で生じる原子の全ての同位体を含むことが意図される。同位体には、原子数が同じであるが、質量数が異なる複数の原子が含まれる。一般例であり限定するものではないが、水素の同位体にはデューテリウムとトリチウムとが含まれる。炭素の同位体には^１３Ｃと^１４Ｃとが含まれる。本発明の同位体的に標識された化合物は一般的に、当業者に既知の従来技法によって、又は他で用いられている非標識試薬の代わりに適切な同位体的に標識された試薬を用いる本明細書に記載のものに類似するプロセスによって、調製することができる。かかる化合物には多様な潜在用途、例えば生物活性を特定する際の標準及び試薬としての用途があり得る。安定した同位体の場合、かかる化合物には生物学的、薬理学的又は薬物動態的な特性を有利に変更する可能性があり得る。

本開示の化合物は薬学的に許容可能な塩として存在することができる。本明細書で使用される「薬学的に許容可能な塩」という用語は、正しい医学的判断の範囲内において過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又は妥当なベネフィット／リスク比に相応する他の問題若しくは合併症を伴わずに、患者の組織に接触させて使用するのに適しており、その使用目的に対して効果的である、水又は油に可溶性又は分散性の本開示の化合物の塩又は両性イオン体を指す。塩は化合物の最終単離及び精製中に、又は好適な窒素原子と好適な酸とを反応させることにより別々に調製することができる。代表的な酸付加塩としては、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩（camphorate）、カンファースルホン酸塩；ジグルコン酸塩、二臭化水素酸塩、二塩酸塩）、二ヨウ化水素酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メシチレンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフチレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩（pectinate）、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、パラ−トルエンスルホン酸塩、及びウンデカン酸塩が挙げられる。薬学的に許容可能な付加塩を形成するのに用いることができる酸の例としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸及びリン酸等の無機酸とシュウ酸、マレイン酸、コハク酸及びクエン酸等の有機酸とが挙げられる。

塩基付加塩は、カルボキシ基を、金属陽イオンの水酸化物、炭酸塩若しくは重炭酸塩等の好適な塩基、又はアンモニア若しくは有機の第一級アミン、第二級アミン若しくは第三級アミンと反応させることにより、化合物の最終単離及び精製中に調製することができる。薬学的に許容可能な塩の陽イオンとしては、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム及びアルミニウムと、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジエチルアミン、エチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアニリン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン、ジシクロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルフェネチルアミン及びＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン等の非毒性の第四級アミンの陽イオンとが挙げられる。塩基付加塩の形成に有用な他の代表的な有機アミンとしては、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペリジン及びピペラジンが挙げられる。

本発明の特定の化合物は、下記の実施例に記載されるＰ８１フィルタープレートアッセイにおいて測定されるように０．１μＭ、０．０１μＭ又は０．００１μＭ未満のＩＣ_５０でＡＡＫ１を阻害する。本発明の特定の化合物は、下記の実施例に記載されるＨＥＫ２８１細胞ベースアッセイにおいて測定されるように０．１μＭ、０．０１μＭ又は０．００１μＭ未満のＩＣ_５０でＡＡＫ１を阻害する。

５．３． 合成方法
本発明の化合物は、当業者に既知の方法を用いて調製することができる。特定の化合物は下記一般式の化合物：

（式中、Ｒ_１、Ｒ_２及びＲ_３は本明細書で規定されている）である。これらの化合物は下記に概説される方法によって調製することができる。

スキーム１は、Ｒ_２が本明細書で規定されているものである、本発明の化合物を調製するのに有用なアプローチを示す。ここで、化合物１と適切なボロン酸又はエステル［Ｒ_３Ｂ（ＯＲ）_２］との鈴木カップリングにより２が得られる。２の臭素化より中間体３が得られる。２回目の鈴木カップリングにより化合物４が得られる。

スキーム１

スキーム２は、Ｒ_２がヒドロカルビルであり、Ｒ’がＲ_２Ｃ、Ｒ_２Ｄ、又はそれらの前駆体である、本発明の化合物を調製するのに有用なアプローチを示す。ここで、化合物１０と適切なボロン酸、エステル［Ｒ_３Ｂ（ＯＲ）_２］との鈴木カップリングにより１１が得られる。１１の園頭カップリング又は他のカップリング反応によりアルキン類似体１２が得られる。１２のアルキンの還元により化合物１３が得られる。

スキーム２

市販されていない出発材料１及び１０をスキーム３に概説した方法により調製することができる。２，４−ジメトキシベンジルアミンによって７から塩素の１つを置換することにより８の位置異性体の混合物が生じ、これを分離する。２，４−ジメトキシベンジル基の除去により９が得られる。９とクロロアセトアルデヒドとの環化により１’が得られる。１’の臭素化により１０が得られる。

スキーム３

５．４． 使用方法
本発明の一実施形態は、ＡＡＫ１を本発明の化合物と接触させることを含む、アダプター関連キナーゼ１（ＡＡＫ１）をｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏの両方で阻害する方法を包含する。

別の実施形態は、ＡＡＫ１活性によって媒介される疾患及び障害を治療及び管理する方法を包含する。ＡＡＫ１活性によって媒介される疾患及び障害は、ＡＡＫ１活性によって影響を受ける、少なくとも１つの症状、重症度又は徴候を有する疾患及び障害である。かかる疾患及び障害の例としては、アルツハイマー病、双極性障害、疼痛、パーキンソン病及び統合失調症（統合失調症における認知障害を含む）が挙げられると考えられる。特定の方法は、それを必要とする患者（ヒト又は他の哺乳動物）に、治療又は予防に有効な量のＡＡＫ１阻害剤（例えば本明細書で開示される化合物）を投与することを含む。

本発明の別の実施形態は、疾患又は障害を治療又は管理する方法であって、該方法はそれを必要とする患者に治療又は予防に有効な量のＡＡＫ１阻害剤を投与することを含み、上記疾患又は障害がアルツハイマー病、双極性障害、疼痛、パーキンソン病又は統合失調症（統合失調症における認知障害を含む）である、方法を包含する。特定のタイプの疼痛としては、慢性疼痛、急性疼痛及び神経因性疼痛が挙げられる。特定のタイプの神経因性疼痛としては線維筋痛症及び末梢神経障害（例えば糖尿病性神経障害）が挙げられる。

疾患又は障害を治療又は管理するのに使用する場合、本発明の化合物を、１つ又は複数の薬学的に許容可能な担体、希釈剤又は賦形剤を含む医薬組成物の一部として投与するのが好ましい。

医薬組成物又は配合物を単位用量当たり所定量の有効成分を含有する単位用量形態で与えることができる。１日に付き体重１キログラム当たり約０．０１ミリグラム〜約２５０ミリグラム（「ｍｇ／ｋｇ」）、好ましくは１日に付き体重１ｋｇ当たり約０．０５ｍｇ〜約１００ｍｇの投与量レベルの本開示の化合物は、疾患の予防及び治療のための単剤療法において典型的なものである。典型的に、本開示の医薬組成物は１日に付き約１回〜約５回、又は代替的には持続注入として投与される。かかる投与は長期療法又は救急療法として使用することができる。単一剤形を作製するのに担体材料と組み合わせることができる有効成分の量は治療する病態、病態の重症度、投与時間、投与経路、用いる化合物の排出率、治療期間、並びに患者の年齢、性別、体重及び状態によって変わる。好ましい単位投与量配合物は、本明細書の上記で述べられているように有効成分の１日量若しくは１日未満量（sub-dose）又はその適切な分量を含有するものである。治療は実質的に適量に満たない少量の化合物から開始してもよい。その後、その環境下で最適な効果が達成されるまで投与量を少しずつ増大させる。概して、化合物は一般的に悪い又は有害な副作用を引き起こすことなく効果的な結果が得られる濃度レベルで投与されるのが最も望ましい。

本発明の化合物は１つ又は複数の追加の治療剤又は予防剤と組み合わせて投与することができる。例えば、疼痛の治療に使用される場合、可能な追加の作用剤としては免疫抑制剤及び抗炎症剤が挙げられる。

本発明の方法及び組成物における使用に適した免疫抑制剤には当該技術分野で既知のものが含まれる。例としては、アミノプテリン、アザチオプリン、シクロスポリンＡ、Ｄ−ペニシラミン、金塩、ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、メトトレキサート、ミノサイクリン、ラパマイシン、スルファサラジン、タクロリムス（ＦＫ５０６）及びそれらの薬学的に許容可能な塩が挙げられる。特定の免疫抑制剤はメトトレキサートである。

更なる例としては、アダリムマブ、セルトリズマブペゴール、エタネルセプト及びインフリキシマブ等の抗ＴＮＦ抗体が挙げられる。他には、アナキンラ等のインターロイキン−１遮断剤が挙げられる。他には、リツキシマブ等の抗Ｂ細胞（ＣＤ２０）抗体が挙げられる。他には、アバタセプト等のＴ細胞活性化遮断剤が挙げられる。

更なる例としては、ミコフェノール酸モフェチル（ＣｅｌｌＣｅｐｔ（商標））及びミコフェノール酸（Ｍｙｆｏｒｔｉｃ（商標））等のイノシン一リン酸脱水素酵素阻害剤が挙げられる。

本発明の方法及び組成物における使用に適した抗炎症薬には当該技術分野で既知のものが含まれる。例としてはグルココルチコイド及びＮＳＡＩＤが挙げられる。

グルココルチコイドの例としては、アルドステロン、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、コルチゾン、デオキシコルチコステロン、デキサメタゾン、フルドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロン及びそれらの薬学的に許容可能な塩が挙げられる。

ＮＳＡＩＤの例としては、サリチル酸塩（例えばアスピリン、アモキシプリン、ベノリレート、サリチル酸コリンマグネシウム、ジフルニサル、ファイスラミン、サリチル酸メチル、サリチル酸マグネシウム、サリチルサリチル酸及びそれらの薬学的に許容可能な塩）、アリールアルカン酸（例えばジクロフェナク、アセクロフェナク、アセメタシン、ブロムフェナク、エトドラク、インドメタシン、ナブメトン、スリンダク、トルメチン及びそれらの薬学的に許容可能な塩）、アリールプロピオン酸（例えばイブプロフェン、カルプロフェン、フェンブフェン、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、ケトロラック、ロキソプロフェン、ナプロキセン、オキサプロジン、チアプロフェン酸、スプロフェン及びそれらの薬学的に許容可能な塩）、アリールアントラニル酸（例えばメクロフェナム酸、メフェナム酸及びそれらの薬学的に許容可能な塩）、ピラゾリジン誘導体（例えばアザプロパゾン、メタミゾール、オキシフェンブタゾン、フェニルブタゾン、スルフィンピラゾン及びそれらの薬学的に許容可能な塩）、オキシカム（例えばロルノキシカム、メロキシカム、ピロキシカム、テノキシカム及びそれらの薬学的に許容可能な塩）、ＣＯＸ−２阻害剤（例えばセレコキシブ、エトリコキシブ、ルミラコキシブ、パレコキシブ、ロフェコキシブ、バルデコキシブ及びそれらの薬学的に許容可能な塩）及びスルホンアニリド（例えばニメスリド及びその薬学的に許容可能な塩）が挙げられる。

疼痛（神経因性疼痛及び炎症性疼痛を含むが、それらに限定されない）の治療に使用される他の作用剤としては、プレガバリン、リドカイン、デュロキセチン、ガバペンチン、カルバマゼピン、カプサイシン及び他のセロトニン／ノルエピネフリン／ドーパミン再取込み阻害剤、並びに鎮静剤（オキシコンチン、モルヒネ及びコデイン等）のような作用剤が挙げられる。

糖尿病、感染症（例えば帯状疱疹又はＨＩＶ感染症）又は癌等の既知の疾患又は病態によって引き起こされる疼痛の治療において、本発明の化合物を、根本的な疾患又は病態に向けた１つ又は複数の追加の治療剤又は予防剤と併せて投与することができる。例えば、糖尿病性神経障害の治療に使用する場合、本発明の化合物を、１つ又は複数の抗糖尿病剤、抗高血糖剤、抗高脂血症／脂質低下剤、抗肥満剤、抗高血圧剤及び食欲抑制剤と併せて投与することができる。抗糖尿病剤の例としては、ビグアニド（例えば、メトホルミン、フェンホルミン）、グルコシダーゼ阻害剤（例えば、アカルボース、ミグリトール）、インスリン（インスリン分泌促進物質及びインスリン増感剤を含む）、メグリチニド（例えば、レパグリニド）、スルホニル尿素（例えば、グリメピリド、グリブリド、グリクラジド、クロルプロパミド及びグリピジド）、ビグアニド／グリブリド複合薬（例えば、グルコバンス）、チアゾリジンジオン（例えば、トログリタゾン、ロシグリタゾン及びピオグリタゾン）、ＰＰＡＲ−αアゴニスト、ＰＰＡＲ−γアゴニスト、ＰＰＡＲ α／γデュアルアゴニスト、グリコーゲンホスホリラーゼ阻害剤、脂肪酸結合タンパク質（ａＰ２）の阻害剤、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）、又はＧＬＰ−１受容体の他のアゴニスト、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ４）阻害剤及びナトリウム−グルコース共輸送体２（ＳＧＬＴ２）阻害剤（例えば、ダパグリフロジン、カナグリフロジン及びＬＸ−４２１１）が挙げられる。

５．５． 医薬組成物
医薬配合物は、任意の適切な経路による、例えば経口（口腔又は舌下を含む）、直腸、鼻腔、局所（口腔、舌下又は経皮を含む）、膣内、又は非経口（皮下、皮内（intracutaneous）、筋内、関節内、滑液嚢内、胸骨内、髄腔内、病変内、静脈内又は皮内（intradermal）の注射又は注入を含む）の経路による投与に適合させることができる。かかる配合物は、薬学分野において知られる任意の方法によって、例えば有効成分を担体（複数の場合もあり）又は賦形剤（複数の場合もあり）と混ぜ合わせることによって調製することができる。経口投与又は注射による投与が好ましい。

経口投与に適合させた医薬配合物を、カプセル若しくは錠剤、粉末若しくは顆粒、水性液体若しくは非水性液体中の溶液若しくは懸濁液、食用のフォーム（foams）若しくはホイップ、又は水中油型液体エマルション若しくは油中水型エマルション等の不連続単位として与えることができる。

例えば、錠剤又はカプセルの形態での経口投与については、有効薬物成分をエタノール、グリセロール、水等の経口用の非毒性の薬学的に許容可能な不活性担体と組み合わせることができる。粉末は化合物を好適な微細サイズに粉砕して、食用の炭水化物、例えばデンプン又はマンニトール等の同様に粉砕した医薬担体と混合することによって調製される。香味剤、防腐剤、分散剤及び着色剤が存在していてもよい。

カプセルは、上記のように粉末混合物を調製して、形成されたゼラチンシースに充填することによって作製される。コロイドシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム又は固体のポリエチレングリコール等の滑剤及び滑沢剤を充填操作前に粉末混合物に添加することができる。カプセルが消化される際の薬剤のアベイラビリティを改善するのに、寒天（agar-agar）、炭酸カルシウム又は炭酸ナトリウム等の崩壊剤又は可溶化剤も添加することができる。

その上、所望又は必要とされる場合、好適な結合剤、滑沢剤、崩壊剤及び着色剤も混合物に組み込むことができる。好適な結合剤としては、デンプン、ゼラチン、グルコース又はβ−ラクトース等の天然糖、トウモロコシ甘味料、アカシア、トラガカント又はアルギン酸ナトリウム等の天然ガム及び合成ガム、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール等が挙げられる。これらの剤形に用いられる滑沢剤としては、オレイン酸ナトリウム、塩化ナトリウム等が挙げられる。崩壊剤としては、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガム等が挙げられるが、これらに限定されない。錠剤は、例えば粉末混合物を調製し、造粒又はスラッギング（slugging）を行い、滑沢剤及び崩壊剤を添加して、錠剤へと圧縮することによって配合される。粉末混合物は、好適に粉砕した化合物を、上記のような希釈剤又は基剤と、更に任意でカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン又はポリビニルピロリドン等の結合剤、パラフィン等の溶解遅延剤、第４級塩等の再吸収促進剤、及び／又はベントナイト、カオリン若しくはリン酸二カルシウム等の吸収剤と混合することによって調製される。粉末混合物は、シロップ剤、デンプン糊、アカディア粘液（acadia mucilage）等の結合剤、又はセルロース材料若しくはポリマー材料の溶液で湿潤させ、篩にかけることによって造粒することができる。造粒の代わりとして、粉末混合物を錠剤機に通し、その結果として不完全に形成されたスラッグ（slugs）が顆粒へと粉砕される。顆粒は、錠剤成形ダイへの貼り付きを抑えるために、ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク又は鉱油の添加によって潤滑化することができる。次いで潤滑化した混合物を錠剤へと圧縮成形する。本開示の化合物を自由流動不活性担体と組み合わせて、造粒工程又はスラッギング工程を通すことなく直接、錠剤へと圧縮成形することもできる。シェラックのシーリングコート（sealing coat）からなる透明な又は不透明な保護コーティング、糖又はポリマー材料のコーティング、及びワックスの研磨コーティングを提供することができる。染料をこれらのコーティングに添加して、異なる単位投与量を識別させることができる。

溶液、シロップ剤及びエリキシル剤等の経口流体を、所与の分量に所定量の化合物が含まれるように投与量単位形態で調製することができる。シロップ剤は好適に風味付けされた水溶液中に化合物を溶解することによって調製することができるが、エリキシル剤は非毒性ビヒクルの使用によって調製される。エトキシル化イソステアリルアルコール及びポリオキシエチレンソルビトールエーテル等の可溶化剤及び乳化剤、防腐剤、ペパーミントオイル若しくは天然甘味料等の香味用添加物、又はサッカリン若しくは他の人工甘味料等も添加することができる。

必要に応じて、経口投与用の単位投与量配合物をマイクロカプセル化することができる。配合物は、例えば粒子状材料をポリマー、ワックス等でコーティングするか又はそれらに包埋することによって放出を延長又は持続させるように調製することもできる。

式（Ｉ）の化合物及びその薬学的に許容可能な塩を、小型単ラメラ小胞、大型単ラメラ小胞及び多重ラメラ小胞等のリポソーム送達系の形態で投与することもできる。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミン又はホスファチジルコリン等の多様なリン脂質から形成することができる。

式（Ｉ）の化合物及びその薬学的に許容可能な塩を、化合物分子が連結する個々の担体としてのモノクローナル抗体の使用によって送達することもできる。この化合物は標的化可能な薬物担体である可溶性ポリマーと連結することもできる。かかるポリマーには、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノール、又はパリトイル（palitoyl）残基で置換されたポリエチレンオキシドポリリジンが含まれ得る。さらに、この化合物は、薬物の制御放出を達成するのに有用な生分解性ポリマー群、例えばポリ乳酸、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、及びヒドロゲルの架橋又は両親媒性ブロックコポリマーに連結することができる。

経皮投与に適合させた医薬配合物を、長期間、レシピエントの表皮への密接な接触を維持することを目的とした個別のパッチとして与えることができる。例えば、有効成分をPharmaceutical Research 1986, 3（6）, 318に概説されるようにイオントフォレーシスによってパッチから送達させることができる。

局所投与に適合させた医薬配合物を、軟膏、クリーム、懸濁液、ローション、粉末、溶液、ペースト、ジェル、噴霧剤、エアロゾル又はオイルとして配合することができる。

直腸投与に適合させた医薬配合物を坐剤又は浣腸剤として与えることができる。

担体が固体の鼻腔投与に適合させた医薬配合物には、嗅ぎタバコ（snuff）を摂取するように、すなわち鼻に近付けた粉末容器からの鼻腔を通した急速吸入によって投与される、粒径が例えば２０ミクロン〜５００ミクロンの範囲の粗粉末が含まれる。鼻噴霧剤又は点鼻剤として投与される担体が液体の好適な配合物には有効成分の水溶液又は油溶液が含まれる。

吸入による投与に適合させた医薬配合物には、様々なタイプの加圧式定量噴霧器、ネブライザ又は吸入器を用いて発生させることができる微細粒子の粉塵又は煙霧が含まれる。

膣内投与に適合させた医薬配合物を、ペッサリー、タンポン、クリーム、ジェル、ペースト、フォーム、又は噴霧配合物として与えることができる。

非経口投与に適合させた医薬配合物には、抗酸化剤、バッファー、静菌薬及び配合物を目的のレシピエントの血液と等張にする溶質を含有し得る水性及び非水性の滅菌注射溶液、並びに懸濁化剤及び増粘剤を含み得る水性及び非水性の滅菌懸濁液が含まれる。この配合物は単用量又は多用量の容器、例えば封止されたアンプル及びバイアル内に与えることができ、使用の直前に滅菌液体担体、例えば注射用水を添加するだけでよいフリーズドライ（凍結乾燥）条件で保存することができる。即席の注射溶液及び懸濁液を滅菌粉末、顆粒及び錠剤から調製することができる。

この配合物は、上記で特に言及される成分に加えて、対象となる配合物のタイプを考慮して当該技術分野において従来的な他の作用剤を含むことができる、例えば経口投与に適したものには香味剤が含まれ得ることを理解されたい。

５．６． 実施例
本発明のいくつかの態様は下記実施例から理解することができる。

５．６．１． ＡＡＫ１ノックアウトマウス
ＡＡＫ１遺伝子の破壊に関するホモ接合型（−／−）マウスを遺伝子トラップ法及び相同組換えという２つの方法によって準備した。

遺伝子トラップ法は、突然変異原としてレポーター又は選択可能なマーカー遺伝子をコードするＤＮＡのフラグメントを使用するランダム挿入突然変異の方法である。遺伝子トラップベクターは、細胞スプライシング機構によって、ベクターでコードされたエクソンが細胞ｍＲＮＡへとスプライシングするようにイントロン又は遺伝子に組み込まれるように設計されている。一般的に遺伝子トラップベクターは、強いスプライスアクセプター配列が先行しプロモーターは先行していない、選択可能なマーカー配列を含有する。このため、かかるベクターが遺伝子に組み込まれると、細胞スプライシング機構によって、エクソンはトラップされた遺伝子から選択可能なマーカー配列の５’末端上へとスプライシングする。典型的に、かかる選択可能なマーカー遺伝子は、遺伝子をコードするベクターがイントロンに組み込まれている場合にのみ発現することができる。次いで得られる遺伝子トラップ事象は選択的培養物を生存させることができる細胞を選択することによって特定される。

胚性幹細胞（マウス派生株Ａ１２９由来のＬｅｘ−１細胞）は、遺伝子操作されたベクター配列の少なくとも一部を対象の遺伝子に挿入させることを含むプロセスによって突然変異させて、突然変異された胚性幹細胞を胚盤胞に微量注入して、次いでそれを偽妊娠雌性宿主に導入して、確立された方法を用いて出産させた。例えば、"Mouse Mutagenesis", 1998, Zambrowicz et al., eds., Lexicon Press, The Woodlands, TXを参照されたい。その後、得られるキメラ動物を繁殖させ、対象の遺伝子に遺伝子操作による突然変異を含有する対立遺伝子の生殖細胞系伝達が可能な子孫を産生した。

ＡＡＫ１遺伝子が破壊されたマウスは相同組換えによっても作製された。この場合、マウスＡＡＫ１遺伝子の第２のコーディングエクソン（ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＮＭ＿１７７７６２を参照されたい）を当該技術分野で既知の方法によって除去した。例えば、米国特許第５，４８７，９９２号、同第５，６２７，０５９号及び同第５，７８９，２１５号を参照されたい。

ＡＡＫ１遺伝子の破壊に関するホモ接合型（−／−）マウスを、ＡＡＫ１遺伝子の破壊に関するヘテロ接合型（＋／−）マウス及び野生型（＋／＋）同腹子とともに研究した。この分析の間、マウスに対して、哺乳動物の被験体において主な器官系の機能を評価するように設計された一連の統合医療診断法を用いる医学的精密検査を行った。ホモ接合型（−／−）「ノックアウト」マウスをそのヘテロ接合型（＋／−）及び野生型（＋／＋）の同腹子とともに研究した。ＡＡＫ１遺伝子の破壊をサザン分析によって確認した。ＡＡＫ１のマウスホモログの発現をマウスの脳、脊髄、眼、胸腺、脾臓、肺、腎臓、肝臓、骨格筋、骨、胃、小腸及び結腸、心臓、脂肪、喘息肺、ＬＰＳ肝臓、血液、輪状化した心臓、大動脈（aortic tree）、前立腺及び乳腺（５週齢の未交尾（virgin）、成体の未交尾、１２ＤＰＣ、産後３日目（授乳）、離乳後３日目（初期乳腺退縮）、及び離乳後７日目（後期乳腺退縮））においてＲＴ−ＰＣＲによって検出した。

ＡＡＫ１ホモ接合型（−／−）及びその野生型（＋／＋）同腹子を、急性及び持続性の侵害受容反応を評価するためにホルマリン脚試験を用いて試験した。これらの試験には、Ａｕｔｏｍａｔｉｃ Ｎｏｃｉｃｅｐｔｉｏｎ Ａｎａｌｙｚｅｒ（カリフォルニア大学サンディエゴ校のOzaki labから購入）を使用した。試験の３０分前に金属バンドを各マウスの左後肢に巻いた。３０分の馴化期間の後、２０μｌの５％ホルマリンを左後肢の背面に皮下注射する。マウスを個々に４５分間、円筒型のチャンバに収容した。コンピューターによって、電磁場による１分当たりのフリンチ回数（flinches）、第１相（最初の８分である急性期）の総フリンチ回数、及び第２相（２０分〜４０分の間の期間である持続期）の総フリンチ回数を記録した。Yaksh TL, Ozaki G, McCumber D, Rathbun M, Svensson C, Malkmus S, Yaksh MC. An automated flinch detecting system for use in the formalin nociceptive bioassay. J Appl Physiol., 2001; 90:2386-402を参照されたい。

図１に示されるように、第１相及び第２相のデータは、ホモ接合型（−／−）雌性マウス（ｎ＝１６）、野生型雌性マウス（ｎ＝１５）、ホモ接合型（−／−）雄性マウス（ｎ＝９）、及び野生型雄性マウス（ｎ＝１８）を用いて入手した。全ての群及び両相において、ＡＡＫ１ホモ接合型（−／−）マウスは、その野生型（＋／＋）同腹子よりも記録された脚フリンチが大幅に少なかった。

５．６．２． ４−［３−（５−アセチル−チオフェン−２−イル）−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル］−ベンゾニトリルの合成

パートＡ． ４−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル−ベンゾニトリル

１２５ｍＬ容の丸底フラスコに入った、６−クロロ−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン［６７７５−７８−６］（１．２３ｇ、８．０ｍｍｏｌ）、（４−シアノフェニル）ボロン酸［１２６７４７−１４−６］（１．４ｇ、９．７ｍｍｏｌ）、三塩基性リン酸カリウム一水和物［２７１７６−１０−９］（３．４ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）のジクロロメタン錯体［９５４６４−０５−４］（０．７ｇ、０．８ｍｍｏｌ）の混合物に、３０％（ｖ／ｖ）の１，２−ジメトキシエタン（８０ｍＬ）水溶液及び磁気撹拌子を加えた。反応ポットを還流冷却器に取り付け、常温油浴に入れ、システムを急速撹拌させながら、１０回の排気／Ｎ_２ブランケットサイクルに供した。急速撹拌したＮ_２ブランケット反応物を８５℃の油浴温度に１７時間加熱した後、冷却し、ブラインと酢酸エチルとで分配した。相分離した抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、１０％（ｖ／ｖ）の２−プロパノール／酢酸エチルを用いて溶出）に供し、酢酸エチル／ヘプタンから再結晶化させ、１．０ｇの灰色粉末を単離した（ｍｐ．１９３℃〜１９４℃）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） ｐｐｍ ７．８９（ｄ，Ｊ＝９．７０Ｈｚ，２Ｈ） ８．０４（ｄ，Ｊ＝８．６０Ｈｚ，２Ｈ） ８．２４〜８．３３（ｍ，３Ｈ） ８．４２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） ｐｐｍ １１２．４３、１１６．１７、１１７．５９、１１８．４５、１２６．１８、１２７．６９、１３２．９１、１３４．７２、１３９．２６、１４９．５１。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２２１．１［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、Ｃ_１３Ｈ_８Ｎ_４についての算出値：２２０．２４。

パートＢ． ４−（３−ブロモ−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−ベンゾニトリル

臭素［７７２６−４５−６］（０．３ｍＬ、５．３ｍｍｏｌ）を、撹拌された常温の４−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル−ベンゾニトリル（９５５．９ｍｇ、４．３ｍｍｏｌ）及び酢酸ナトリウム［１２７−０９−３］（７８４．６ｍｇ、９．６ｍｍｏｌ）の氷酢酸（４４ｍＬ）溶液にゆっくり添加した。１０分間にわたって、固体の析出物が形成され、十分に撹拌された懸濁液を生じ、次いでこの混合物を３００ｍＬの撹拌されている氷及び水に注いだ。混合物を、氷が融解するまで撹拌した後、生成物を濾過によって単離し、水を用いて洗浄し、乾燥させ、１．７ｇの黄色粉末を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２９９．０／３０１．０（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１３Ｈ_７ＢｒＮ_４についての算出値：２９９．１３。

パートＣ． ４−［３−（５−アセチル−チオフェン−２−イル）−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル］−ベンゾニトリル

５０ｍＬ容の丸底フラスコに入った、４−（３−ブロモ−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−ベンゾニトリル（５０４．２ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）、５−アセチル−２−チエニルボロン酸［２０６５５１−４３−１］（３４５．２ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）、三塩基性リン酸カリウム一水和物［２７１７６−１０−９］（７８０．１ｇ、３．４ｍｍｏｌ）及び［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）のジクロロメタン錯体［９５４６４−０５−４］（１４１．７ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の混合物に、３０％（ｖ／ｖ）の１，２−ジメトキシエタン（１７ｍＬ）水溶液及び磁気撹拌子を加えた。反応ポットを還流冷却器に取り付け、常温油浴に入れ、システムを急速撹拌させながら、１０回の排気／Ｎ_２ブランケットサイクルに供した。急速撹拌したＮ_２ブランケット反応物を８５℃の油浴温度に１７時間加熱した後、冷却し、ブラインと酢酸エチルとで分配した。相分離した抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、蒸発させ、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、１００％酢酸エチルを用いて溶出）に供し、酢酸エチル／ヘプタンから再結晶化させ、１２３．９ｍｇの４−［３−（５−アセチル−チオフェン−２−イル）−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル］−ベンゾニトリルを黄色粉末として単離した（ｍｐ．２２４℃〜２２５℃）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） ｐｐｍ ２．５６（ｓ，３Ｈ） ７．９１（ｄ，Ｊ＝４．０４Ｈｚ，１Ｈ） ７．９４〜８．００（ｍ，２Ｈ） ８．０６（ｄ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，２Ｈ） ８．３１（ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ，２Ｈ） ８．３４（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ８．５２（ｓ，１Ｈ）。^１３Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） ｐｐｍ ２６．５１、１１２．８２、１１６．２５、１１８．３７、１２３．１６、１２５．１０、１２６．５２、１２７．６５、１３３．０１、１３３．９２、１３４．６９、１３６．３５、１３８．７６、１３９．３９、１４２．０４、１４９．９６、１９０．６５。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３４５．０（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１９Ｈ_１２Ｎ_４ＯＳについての算出値：３４４．４０。

５．６．３． １−（５−（６−（ペンタ−１−イン−１−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）チオフェン−２−イル）エタノンの合成

パートＡ． １−（５−（６−クロロイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）チオフェン−２−イル）エタノン

３−ブロモ−６−クロロ−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン（１．０ｇ、４．３ｍｍｏｌ）、５−アセチル−２−チエニルボロン酸（０．９５ｇ、５．６ｍｍｏｌ）、Ｋ_２ＣＯ_３（１．４８ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）及びジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（１８０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ／水（１６ｍｌ／４ｍｌ）混合液をマイクロ波において１４０℃にて３０分間加熱した。反応混合物を濾過し、ＭｅＣＮを除去した。水層を、水を用いて希釈し、ＤＣＭを用いて抽出した。ＤＣＭ混合物をＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させた。残渣をＩＳＣＯ（ＤＣＭ中の０％−５％のＭｅＯＨ）に供し、表題の化合物（３３０ｍｇ）を得た。

パートＢ． １−（５−（６−（ペンタ−１−イン−１−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）チオフェン−２−イル）エタノン

２５ｍｌ容のフラスコに１−（５−（６−クロロイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）チオフェン−２−イル）エタノン（１６０ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（２４ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（１２ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（５ｍＬ）、ＤＭＦ（５ｍＬ）及び１−ペンチン（０．１７ｍＬ、１．７４ｍｍｏｌ）を注入した。フラスコを、Ｎ_２を用いて３回フラッシュし、混合物を１００℃にて２４時間加熱した。反応混合物を濾過し、濃縮した。残渣を、水を用いて希釈し、ＤＣＭを用いて抽出した。ＤＣＭ混合物をＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮した。残渣をＩＳＣＯ（ヘキサン中の１０％−６０％のＥｔＯＡｃ）に供し、表題の化合物（８０ｍｇ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ １．１５（ｔ，Ｊ＝７．４５Ｈｚ，３Ｈ） １．７１〜１．８０（ｍ，２Ｈ） ２．５６〜２．６２（ｍ，２Ｈ） ２．６３（ｓ，３Ｈ） ７．４６（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ７．９２〜７．９６（ｍ，２Ｈ） ８．１３（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ８．４３（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３１０．１（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１７Ｈ_１５Ｎ_３ＯＳについての算出値：３０９．３９。

５．６．４． １−（５−（６−ペンチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）チオフェン−２−イル）エタノンの合成

１−（５−（６−（ペンタ−１−イン−１−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）チオフェン−２−イル）エタノン（８０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）及びＰｄ／Ｃ（５％、５０ｍｇ）のＥｔＯＨ混合液をＨ_２下において室温にて一晩撹拌させた。混合物を濾過し、濾液を濃縮させた。残渣を分取ＨＰＬＣに供し、表題の化合物（４８．７ｍｇ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ ０．９３〜０．９９（ｍ，３Ｈ） １．４７（ｄｑ，Ｊ＝７．２０、３．５８Ｈｚ，４Ｈ） １．８９〜１．９７（ｍ，２Ｈ） ２．６１（ｓ，３Ｈ） ３．００（ｔ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，２Ｈ） ７．２８（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ７．８３〜７．９０（ｍ，２Ｈ） ７．９９（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ８．２４（ｓ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３１４．１（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１７Ｈ_１９Ｎ_３ＯＳについての算出値：３１３．４２。

５．６．５． ４−（６−（ペンタ−１−イン−１−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルの合成

パートＡ． ４−（６−クロロイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

３−ブロモ−６−クロロ−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン（１．０ｇ、４．３ｍｍｏｌ）、（４−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）メチル）フェニル）ボロン酸（１．０８ｇ、４．３ｍｍｏｌ）、Ｋ_２ＣＯ_３（１．４８ｇ、１０．７ｍｍｏｌ）及びジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（１５０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ／水（１６ｍｌ／４ｍｌ）混合液をマイクロ波において１４０℃にて３５分間加熱した。更なる（４−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−メチル）フェニル）ボロン酸（０．５４ｇ）及びジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（５０ｍｇ）を添加し、再度マイクロ波において１４０℃にて３０分間加熱した。反応混合物を濾過し、ＭｅＣＮを除去した。水層を、水を用いて希釈し、ＤＣＭを用いて抽出した。ＤＣＭ混合物をＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させた。残渣をＩＳＣＯ（ヘキサン中の０％−８０％のＥｔＯＡｃ）に供し、表題の化合物（２５０ｍｇ）を得た。

パートＢ． ４−（６−（ペンタ−１−イン−１−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

２５ｍｌ容のフラスコに４−（６−クロロイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２５０ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（３０ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（１４ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）、ＴＥＡ（６ｍＬ）、ＤＭＦ（６ｍＬ）及び１−ペンチン（０．２ｍＬ、２．１ｍｍｏｌ）を注入した。フラスコを、Ｎ_２を用いて３回フラッシュし、混合物を１００℃にて２４時間加熱した。反応混合物を濾過し、濃縮させた。残渣を、ＤＣＭを用いて希釈し、ＮａＨＣＯ_３を用いて洗浄した。ＥｔＯＡｃをＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させた。残渣をＩＳＣＯ（ヘキサン中の５％−６０％のＥｔＯＡｃ）に供し、表題の化合物（２５０ｍｇ）を得た。分析用サンプル（１０．２ｍｇ）を分取ＨＰＬＣにより得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ １．１２（ｔ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ，３Ｈ） １．４９（ｓ，９Ｈ） １．６８〜１．７７（ｍ，２Ｈ） ２．５３（ｔ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，２Ｈ） ４．３２（ｓ，２Ｈ） ７．２８（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ７．４４（ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ，２Ｈ） ８．００（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ８．０５〜８．１３（ｍ，３Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３９１．１（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_２３Ｈ_２６Ｎ_４Ｏ_２についての算出値：３９０．４９。

５．６．６． （４−（６−（ペンタ−１−イン−１−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）フェニル）メタンアミンの合成

４−（６−（ペンタ−１−イン−１−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（７０ｍｇ）のＤＣＭ（２ｍＬ）溶液にＴＦＡ（０．５ｍＬ）を添加した。混合物を室温にて１時間撹拌した後、濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣに供し、表題の化合物をＡｃＯＨ塩（１０ｍｇ）として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ １．０６（ｔ，Ｊ＝７．３９Ｈｚ，３Ｈ） １．６１〜１．７０（ｍ，２Ｈ） １．８６（ｓ，３Ｈ） ２．４７（ｔ，Ｊ＝７．０６Ｈｚ，２Ｈ） ４．０８（ｓ，２Ｈ） ７．２６（ｄ，Ｊ＝９．４８Ｈｚ，１Ｈ） ７．５４（ｄ，Ｊ＝８．１６Ｈｚ，２Ｈ） ７．９８（ｄ，Ｊ＝９．２６Ｈｚ，１Ｈ） ８．１０〜８．１７（ｍ，３Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２９１．１（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１８Ｈ_１８Ｎ_４についての算出値：２９０．３７。

５．６．７． （４−（６−ペンチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）フェニル）メタンアミンの合成

（４−（６−（ペンタ−１−イン−１−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）フェニル）メタンアミンＨＯＡｃ塩（２００ｍｇ）及びＰｄ／Ｃ（５％、５０ｍｇ）のＭｅＯＨ混合液と数滴のＴＦＡとをＨ_２下において室温にて２時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を濃縮させた。残渣を分取ＨＰＬＣに供し、表題の化合物をＡｃＯＨ塩（８ｍｇ）として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ ０．９１〜０．９９（ｍ，３Ｈ） １．３９〜１．４７（ｍ，４Ｈ） １．８５（ｍ，２Ｈ） １．９４（ｓ，３Ｈ） ２．９４（ｔ，Ｊ＝７．５８Ｈｚ，２Ｈ） ４．１８（ｓ，２Ｈ） ７．２４（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ７．６０（ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ，２Ｈ） ７．９８（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ８．０９（ｓ，１Ｈ） ８．２６（ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ，２Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２９５．１［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、Ｃ_１８Ｈ_１８Ｎ_４についての算出値：２９４．４。

５．６．８． １−（３−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）エタノンの合成

パートＡ． １−（３−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）エタノン

５ｍＬ容のマイクロ波処理が可能なバイアルに、１５０ｍｇ（０．７９ｍｍｏｌ）の６−クロロイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン、１５５ｍｇ（０．９５ｍｍｏｌ）の（３−アセチルフェニル）ボロン酸、３２７ｍｇ（２．３７ｍｍｏｌ）のＫ_２ＣＯ_３、５５ｍｇ（０．０８ｍｍｏｌ）のＰｄＣｌ_２（ＰＰｈ_３）_２、続いて、３ｍＬのＤＭＥ及び１ｍＬの水を添加した。空気を窒素に置き換えた後、１４０℃にて、０．２５時間マイクロ波処理した。これを、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて洗浄し、ＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させ、３５％−１００％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いて溶出する１２グラムのカラムのＩＳＣＯにより精製し、１８０．４ｍｇ（９６％）の所望の生成物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ ２．７２（ｓ，３Ｈ） ７．５６（ｄ，Ｊ＝９．４８Ｈｚ，１Ｈ） ７．６３〜７．７０（ｍ，１Ｈ） ７．８４（ｄ，Ｊ＝１．３２Ｈｚ，１Ｈ） ８．０５〜８．１５（ｍ，３Ｈ） ８．１８〜８．２５（ｍ，１Ｈ） ８．５８（ｔ，Ｊ＝１．６５Ｈｚ，１Ｈ）。

パートＢ． １−（３−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）エタノン

１０ｍＬのＡｃＯＨに溶解させた１４０ｍｇ（０．５９１ｍｍｏｌ）の１−（３−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）エタノンに、臭素（１４２ｍｇ、０．８９０ｍｍｏｌ）を添加し、室温にて０．３３時間撹拌した。反応フラスコ全体をロータリーエバポレーターにより濃縮し、固体の残渣をエーテルに懸濁させ、上清を濾去し、所望の生成物のＡｃＯＨ塩（２０７ｍｇ、黄色固体）を９３％の収率において得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ ２．７３（ｓ，３Ｈ） ７．６３〜７．７０（ｍ，２Ｈ） ７．８４（ｓ，１Ｈ） ８．０７（ｄ，Ｊ＝９．４８Ｈｚ，１Ｈ） ８．１２（ｄｔ，Ｊ＝７．７２、１．３２Ｈｚ，１Ｈ） ８．２９〜８．３５（ｍ，１Ｈ） ８．６２（ｔ，Ｊ＝１．７６Ｈｚ，１Ｈ）；ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３１６（Ｍ＋Ｈ）^＋、（３１８でのダブレット）、Ｃ_１４Ｈ_１０ＢｒＮ_３Ｏについての算出値：３１５。

５．６．９． １−（３−（３−（４−（アミノメチル）フェニル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）エタノンの合成

マイクロ波処理が可能なバイアルに入った、５０ｍｇ（０．１６ｍｍｏｌ）の１−（３−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）エタノンに、３５ｍｇ（０．１９ｍｍｏｌ）の（４−（アミノメチル）フェニル）ボロン酸、６６ｍｇ（０．４６ｍｍｏｌ）のＫ_２ＣＯ_３、１１ｍｇ（０．０１６ｍｍｏｌ）のＰｄＣｌ_２（ＰＰｈ_３）_２、３ｍＬのＤＭＥ及び１ｍＬの水を添加した。空気を窒素に置き換え、１４０℃にて、０．５時間マイクロ波処理した。これを、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて洗浄し、ＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させ、中性条件下において分取ＨＰＬＣにおいて精製し、所望の生成物のギ酸一アンモニウム塩（５９％の収率）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ ２．７３（ｓ，３Ｈ） ４．２１（ｓ，２Ｈ） ７．６５（ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ，２Ｈ） ７．７２（ｔ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ） ７．９３（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ８．１６〜８．２４（ｍ，３Ｈ） ８．３１〜８．３６（ｍ，３Ｈ） ８．５５（ｓ，１Ｈ）；ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｅ ３４３．０（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_２１Ｈ_１８Ｎ_４Ｏについての算出値３４２．０。

５．６．１０． ４−（６−（３−アセチルフェニル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル）ベンズアミドの合成

実施例５．６．９に記載の鈴木カップリングの手法を使用し、所望の生成物を５７％の収率において得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） ｐｐｍ ２．７３（ｓ，３Ｈ） ７．７８（ｔ，Ｊ＝７．７１Ｈｚ，１Ｈ） ８．０２〜８．０９（ｍ，４Ｈ） ８．１５（ｄｔ，Ｊ＝７．９６、１．３３Ｈｚ，１Ｈ） ８．３７〜８．４４（ｍ，５Ｈ） ８．４５（ｓ，１Ｈ） ８．６９（ｔ，Ｊ＝１．５２Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３５７（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_２１Ｈ_１６Ｎ_４Ｏ_２についての算出値：３５６。

５．６．１１． １−（３−（３−（４−（アミノメチル）フェニル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）−４−メチルペンタン−１−オンの合成

パートＡ． １−（３−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）−４−メチルペンタン−１−オン

２３７ｍｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）の１−（３−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）エタノンに、２−メチルプロパン−１−オール（３７０ｍｇ、５．０ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（３１４ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）、ＫＯＨ（８４ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）、ビス（１，５−シクロオクタジエン）ジイリジウム（Ｉ）ジクロリド（６７ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）及び１５ｍＬのジオキサンを添加した。この混合物を室温にて一晩撹拌した。これを冷却し、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて洗浄した。次いでこれを濃縮し、２０％−１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いて溶出するシリカゲルにおいて精製し、１９７ｍｇ（６７％）の生成物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．００（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ） １．６３〜１．７８（ｍ，３Ｈ） ３．０１〜３．１３（ｍ，２Ｈ） ７．５６（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ７．６５（ｔ，Ｊ＝７．７１Ｈｚ，１Ｈ） ７．８４（ｄ，Ｊ＝１．２６Ｈｚ，１Ｈ） ８．０４〜８．１３（ｍ，３Ｈ） ８．１７〜８．２２（ｍ，１Ｈ） ８．５７（ｔ，Ｊ＝１．６４Ｈｚ，１Ｈ）。

パートＢ． １−（３−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）−４−メチルペンタン−１−オン

１２ｍＬのＡｃＯＨに溶解させた１９０ｍｇの１−（３−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）−４−メチルペンタン−１−オン（０．６４８ｍｍｏｌ）に、３１１ｍｇ（０．１ｍＬ）の臭素を添加し、得られた混合物を室温にて撹拌した。０．３３時間後、ＬＣＭＳは、反応が完了したことを示した。これをロータリーエバポレーターにおいて濃縮乾固し、１２グラムのシリカゲルカラムに充填し、１５％−１００％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを使用するＩＳＣＯにおいて精製し、２０７ｍｇ（８６％の収率）の所望の生成物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．０１（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ） １．６６〜１．７８（ｍ，３Ｈ） ３．０３〜３．１３（ｍ，２Ｈ） ７．６４（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ７．６８（ｔ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ） ７．８４（ｓ，１Ｈ） ８．０６（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ８．１２（ｄｔ，Ｊ＝７．７７、１．２９Ｈｚ，１Ｈ） ８．２６〜８．３３（ｍ，１Ｈ） ８．６２（ｔ，Ｊ＝１．７７Ｈｚ，１Ｈ）。

パートＣ． １−（３−（３−（４−（アミノメチル）フェニル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）−４−メチルペンタン−１−オン

マイクロ波処理が可能なバイアルに入れた、５５ｍｇ（０．１５ｍｍｏｌ）の１−（３−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）−４−メチルペンタン−１−オンに、３３ｍｇ（０．１８ｍｍｏｌ）の（４−（アミノメチル）フェニル）ボロン酸、６１ｍｇ（０．４４ｍｍｏｌ）のＫ_２ＣＯ_３、１０ｍｇ（０．０１５ｍｍｏｌ）のＰｄＣｌ_２（ＰＰｈ_３）_２、３ｍＬのＤＭＥ及び１ｍＬの水を添加した。空気を窒素に置き換え、１３５℃にて０．２５時間マイクロ波処理した。これを、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて洗浄し、ＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させ、分取ＨＰＬＣにおいて精製し、所望の生成物をＴＦＡ塩（５８％の収率）として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ １．００（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ） １．６３〜１．７５（ｍ，３Ｈ） ３．１０〜３．２０（ｍ，２Ｈ） ４．２５（ｓ，２Ｈ） ７．７０（ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ，２Ｈ） ７．７５（ｔ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ） ８．１３（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ８．２２（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ） ８．３０〜８．４０（ｍ，５Ｈ） ８．６９〜８．７７（ｍ，１Ｈ）；ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｅ ３９９．０（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_２５Ｈ_２６Ｎ_４Ｏについての算出値３９８．０。

５．６．１２． ３−（３−（４−（アミノメチル）フェニル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−Ｎ−イソブチルベンズアミドの合成

パートＡ． Ｎ−イソブチル−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミド

５００ｍｇ（２．０２ｍｍｏｌ）の３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）安息香酸に、２９５ｍｇ（４．０４ｍｍｏｌ）の２−メチルプロパン−１−アミン、続いて９８２ｍｇ（２．２２ｍｍｏｌ）のベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−（ジメチルアミノ）−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＣＡＳ番号５６６０２−３３−６）、０．７ｍＬ（５．０５ｍｍｏｌ）のトリエチルアミン及び２５ｍＬのＤＭＦを添加した。得られた混合物を一晩撹拌し、翌朝に、これを、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて２回洗浄し、ＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させた。得られた材料（４８６ｍｇ）は、更に精製することなく次の工程に使用するのに十分に純粋なものであった。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３０４［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、Ｃ_１７Ｈ_２６ＢＮＯ_３についての算出値：３０３。

パートＢ． ３−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−Ｎ−イソブチルベンズアミド

マイクロ波処理が可能なバイアルに入った、４８０ｍｇ（１．５８ｍｍｏｌ）のＮ−イソブチル−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ベンズアミドに、２９２ｍｇ（１．９０ｍｍｏｌ）の６−クロロイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン、６５４ｍｇ（４．７４ｍｍｏｌ）のＫ_２ＣＯ_３、１１１ｍｇ（０．１６ｍｍｏｌ）のＰｄＣｌ_２（ＰＰｈ_３）_２、１２ｍＬのＤＭＥ及び４ｍＬの水を添加した。空気を窒素に置き換え、１３５℃にて０．２５時間マイクロ波処理した。これを、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて洗浄し、ＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させ、３５％−１００％のＥｔＯＡｃ／ｈｅｘを用いて溶出する４０グラムのカラムを使用するＩＳＣＯにより精製し、３２１ｍｇの生成物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．０４（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，６Ｈ） １．９７（ｄｑｕｉｎ，Ｊ＝１３．４７、６．７４、６．７４、６．７４、６．７４Ｈｚ，１Ｈ） ３．３７（ｔ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，２Ｈ） ７．５２〜７．５８（ｍ，１Ｈ） ７．６２（ｔ，Ｊ＝７．７１Ｈｚ，１Ｈ） ７．８４（ｓ，１Ｈ） ７．８９（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ） ８．０６（ｔ，Ｊ＝４．６７Ｈｚ，２Ｈ） ８．１２（ｄｄ，Ｊ＝７．８３、１．０１Ｈｚ，１Ｈ） ８．３８〜８．４５（ｍ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２９５（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１７Ｈ_１８Ｎ_４Ｏについての算出値：２９４。

パートＣ． ３−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−Ｎ−イソブチルベンズアミド

１−（３−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）−４−メチルペンタン−１−オン（実施例５．６．１１、パートＢ）に使用される臭素化の手法を使用し、８８％の所望の生成物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．０５（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，６Ｈ） １．９８（ｄｑｕｉｎ，Ｊ＝１３．５５、６．７２、６．７２、６．７２、６．７２Ｈｚ，１Ｈ） ３．３７（ｄｄ，Ｊ＝６．６９、６．１９Ｈｚ，２Ｈ） ６．３１（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ） ７．６０〜７．６８（ｍ，２Ｈ） ７．８３（ｓ，１Ｈ） ７．８９（ｄｔ，Ｊ＝７．８３、１．３９Ｈｚ，１Ｈ） ８．０４（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ８．２１〜８．２７（ｍ，１Ｈ） ８．４７（ｔ，Ｊ＝１．６４Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３７３［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、（３７５でのダブレット）、Ｃ_１７Ｈ_１７ＢｒＮ_４Ｏについての算出値：３７２。

パートＤ． ３−（３−（４−（アミノメチル）フェニル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−Ｎ−イソブチルベンズアミド

実施例５．６．１１に記載の手法を使用し、表題の化合物をギ酸塩として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ １．０３（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，６Ｈ） ２．００（ｄｔ，Ｊ＝１３．４５、６．７９Ｈｚ，１Ｈ） ３．２８（ｄ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，２Ｈ） ４．２２（ｓ，２Ｈ） ７．６４〜７．７２（ｍ，３Ｈ） ７．９３（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ７．９８〜８．０２（ｍ，１Ｈ） ８．１９〜８．２３（ｍ，２Ｈ） ８．２７（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ） ８．３４（ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ，２Ｈ） ８．５９（ｔ，Ｊ＝１．７７Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ４００［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、Ｃ_２４Ｈ_２５Ｎ_５Ｏについての算出値：３９９。

５．６．１３． ５−（３−（４−（アミノメチル）フェニル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−Ｎ−イソブチルニコチンアミドの合成

パートＡ． ５−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ニコチン酸

５００ｍｇ（１．８１ｍｍｏｌ）の５−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ニコチン酸エチルから開始し、３−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−Ｎ−イソブチルベンズアミドの合成に使用される上記の鈴木カップリングの条件に従い、４２８ｍｇの所望の化合物を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２４１（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１２Ｈ_８ＢＮ_４Ｏ_２についての算出値：２４０。

パートＢ． ５−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−Ｎ−イソブチルニコチンアミド

実施例５．６．１２、パートＡに記載の手法を使用し、所望の生成物を７６％の収率において得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．０５（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，６Ｈ） １．９９（ｄｑｕｉｎ，Ｊ＝１３．４８、６．８０、６．８０、６．８０、６．８０Ｈｚ，１Ｈ） ３．３９（ｔ，Ｊ＝６．４４Ｈｚ，２Ｈ） ６．３７（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ） ７．５５（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ７．８８（ｄ，Ｊ＝１．０１Ｈｚ，１Ｈ） ８．０６〜８．１５（ｍ，２Ｈ） ８．７２（ｔ，Ｊ＝２．１５Ｈｚ，１Ｈ） ９．０８（ｄ，Ｊ＝２．０２Ｈｚ，１Ｈ） ９．３４（ｄ，Ｊ＝２．０２Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２９６［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、Ｃ_１６Ｈ_１７Ｎ_５Ｏについての算出値：２９５。

パートＣ． ５−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−Ｎ−イソブチルニコチンアミド

実施例５．６．１１、パートＢに記載の手法を使用し、所望の生成物を９１％の収率において得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．０５（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，６Ｈ） １．９９（ｄｔ，Ｊ＝１３．５８、６．７３Ｈｚ，１Ｈ） ３．４０（ｄｄ，Ｊ＝６．８２、６．０６Ｈｚ，２Ｈ） ６．３５（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ） ７．６２（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ７．８７（ｓ，１Ｈ） ８．１０（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ８．７７（ｔ，Ｊ＝２．１５Ｈｚ，１Ｈ） ９．０９（ｄ，Ｊ＝２．２７Ｈｚ，１Ｈ） ９．４２（ｄ，Ｊ＝２．２７Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３７４（Ｍ＋Ｈ）^＋、（３７６でのダブレット）、Ｃ_１６Ｈ_１６ＢｒＮ_５Ｏについての算出値：３７３

パートＤ． ５−（３−（４−（アミノメチル）フェニル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−Ｎ−イソブチルニコチンアミド

実施例５．６．１１に記載の手法を使用し、所望の生成物をギ酸塩（７１％）として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ １．０４（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，６Ｈ） ２．０１（ｄｔ，Ｊ＝１３．６４、６．８２Ｈｚ，１Ｈ） ３．２０〜３．３１（ｍ，２Ｈ） ４．２３（ｓ，２Ｈ） ７．６７（ｄ，Ｊ＝８．３４Ｈｚ，２Ｈ） ７．９８（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ８．２２〜８．３５（ｍ，４Ｈ） ８．９１（ｔ，Ｊ＝２．１５Ｈｚ，１Ｈ） ９．１３（ｄ，Ｊ＝２．０２Ｈｚ，１Ｈ） ９．４１（ｄ，Ｊ＝２．０２Ｈｚ，１Ｈ）；ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｅ ４０１．０（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_２３Ｈ_２４Ｎ_６Ｏについての算出値４００．０。

５．６．１４． Ｎ−イソブチル−３−（３−（ピリジン−４−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ベンズアミドの合成

実施例５．６．１１に記載の手法を使用し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ １．０３（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，６Ｈ） ２．０１（ｄｑｕｉｎ，Ｊ＝１３．５６、６．７８、６．７８、６．７８、６．７８Ｈｚ，１Ｈ） ３．２９（ｄ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，２Ｈ） ７．７４（ｔ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ） ８．００〜８．０９（ｍ，１Ｈ） ８．１６（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ８．３０〜８．４３（ｍ，２Ｈ） ８．６２（ｓ，１Ｈ） ８．８３〜８．９３（ｍ，３Ｈ） ９．０２（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，２Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３７２（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_２２Ｈ_２１Ｎ_５Ｏについての算出値：３７１。

５．６．１５． Ｎ−イソブチル−３−（３−（３−メトキシピリジン−４−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ベンズアミドの合成

実施例５．６．１１に記載の手法を使用し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ １．０３（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，６Ｈ） ２．０１（ｄｑｕｉｎ，Ｊ＝１３．６４、６．８２、６．８２、６．８２、６．８２Ｈｚ，１Ｈ） ３．２９（ｄ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，２Ｈ） ４．２９（ｓ，３Ｈ） ７．７３（ｔ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ） ８．０２〜８．０７（ｍ，１Ｈ） ８．１９（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ８．３２（ｄ，Ｊ＝８．０８Ｈｚ，１Ｈ） ８．３９（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ８．６１（ｔ，Ｊ＝１．５２Ｈｚ，１Ｈ） ８．６６（ｄ，Ｊ＝６．０６Ｈｚ，１Ｈ） ８．７４（ｓ，１Ｈ） ８．８８（ｓ，１Ｈ） ９．４９（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ４０２（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_２３Ｈ_２３Ｎ_５Ｏ_２についての算出値：４０１。

５．６．１６． Ｎ−イソブチル−３−（３−（４−（メチルカルバモイル）フェニル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ベンズアミドの合成

実施例５．６．１１に記載の手法を使用し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ １．０３（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，６Ｈ） ２．００（ｄｑｕｉｎ，Ｊ＝１３．４７、６．７４、６．７４、６．７４、６．７４Ｈｚ，１Ｈ） ２．９９（ｓ，３Ｈ） ３．２８（ｄ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，２Ｈ） ７．７２（ｔ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ） ８．０４（ｄ，Ｊ＝８．５９Ｈｚ，３Ｈ） ８．２１（ｄ，Ｊ＝９．８５Ｈｚ，１Ｈ） ８．３０〜８．３５（ｍ，３Ｈ） ８．３９（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ８．４４（ｓ，１Ｈ） ８．６０（ｓ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ４２８（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_２５Ｈ_２５Ｎ_５Ｏ_２についての算出値：４２７。

５．６．１７． １−（３−（３−（３−メトキシピリジン−４−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）−４−メチルペンタン−１−オンの合成

マイクロ波処理が可能なバイアルに入った、６０ｍｇ（０．１６１ｍｍｏｌ）の１−（３−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）フェニル）−４−メチルペンタン−１−オンに、２７ｍｇ（０．１９４ｍｍｏｌ）、１０３ｍｇ（０．４８４ｍｍｏｌ）のＫ_３ＰＯ_４、１５ｍｇ（０．０１６ｍｍｏｌ）のＰｄ（ｄｂａ）_２、３ｍＬのＭｅＣＮ及び１ｍＬの水を添加した。空気を窒素に置き換え、１４０℃にて０．５時間マイクロ波処理した。これを、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて洗浄し、ＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させ、分取ＨＰＬＣにて精製し、所望の生成物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ １．００（ｄ，Ｊ＝５．８１Ｈｚ，６Ｈ） １．６２〜１．７５（ｍ，３Ｈ） ３．１３（ｔ，Ｊ＝７．２０Ｈｚ，２Ｈ） ４．１２（ｓ，３Ｈ） ７．７２（ｔ，Ｊ＝７．７１Ｈｚ，１Ｈ） ７．９８（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ８．１６（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ） ８．２３（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ８．３２（ｄ，Ｊ＝７．８３Ｈｚ，１Ｈ） ８．３６〜８．３９（ｍ，１Ｈ） ８．４１（ｓ，１Ｈ） ８．５２（ｓ，１Ｈ） ８．５７（ｄ，Ｊ＝４．５５Ｈｚ，１Ｈ） ８．７０（ｓ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ４０１（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_２４Ｈ_２４Ｎ_４Ｏ_２についての算出値：４００。

５．６．１８． ４−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−１−イソペンチルピリジン−２（１Ｈ）−オンの合成

パートＡ． ４−ブロモ−１−イソペンチルピリジン−２（１Ｈ）−オン

４−ブロモ−２−ヒドロキシピリジン（６００ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ）を窒素下において乾燥ＤＭＦに取った。６０％油中水素化ナトリウム（１６５ｍｇ、４．１ｍｍｏｌ）を添加し、３０分間撹拌した。臭化リチウム（５９８ｍｇ、６．８ｍｍｏｌ）を添加し、１時間撹拌した。１−ブロモ−３−メチルブタン（８７０μＬ、６．８ｍｍｏｌ）を添加し、一晩撹拌した。反応物を真空下において減じ、ＤＣＭに取った。これを水、１Ｎ ＮａＯＨを用いて洗浄した後、硫酸マグネシウムにて乾燥させ、濾過し、真空下において減じ、次の工程にそのまま使用される粗生成物を８４０ｍｇ得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２４５（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１０Ｈ_１４ＢｒＮＯについての算出値：２４４．１３。

パートＢ． （１−イソペンチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−４−イル）ボロン酸

４−ブロモ−１−イソペンチルピリジン−２（１Ｈ）−オン（８４０ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ）を窒素下において１０ｍＬの乾燥ＤＭＦに取った。ビス（ピナコラト）ジボラン（１．３ｇ、５．１ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（１．０１ｇ、１０．２ｍｍｏｌ）、及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２ジクロロメタン（２８１ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を８５℃に加熱し、一晩撹拌した。反応物を室温に冷却し、ＤＣＭを用いてセライトに通して濾過した。これを真空下において減じ、１Ｎ ＮａＯＨに取り、ＤＣＭを用いて洗浄した。次いで水性層を１Ｎ ＨＣｌを用いて酸性化し、ＤＣＭを用いて抽出した。ＤＣＭ層を硫酸マグネシウムにて乾燥させ、濾過し、真空下において減じ、次の工程に使用される粗製物を６００ｍｇ得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２１０［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、Ｃ_１０Ｈ_１６ＢＮＯ_３についての算出値：２０９．０５。

パートＣ． ４−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−１−イソペンチルピリジン−２（１Ｈ）−オン

６−クロロ−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン（３７０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのアセトニトリル及び１０ｍＬの水に取った。（１−イソペンチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−４−イル）ボロン酸（６００ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（６６５ｍｇ、４．８ｍｍｏｌ）、及びＰＤ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２ジクロロメタン（１９７ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を８５℃にて２時間撹拌した。次いで、混合物を室温に冷却し、ＤＣＭを用いてセライトプラグに通して濾過し、真空下において減じた。次いでこれを、ＤＣＭを用いてシリカプラグに通し、真空下において乾燥させ、酢酸メチルから再結晶させ、次の工程にそのまま用いる粗生成物を６８０ｍｇ得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２８３（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１６Ｈ_１８Ｎ_４Ｏについての算出値：２８２．３。

パートＤ． ４−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−１−イソペンチルピリジン−２（１Ｈ）−オン

４−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−１−イソペンチルピリジン−２（１Ｈ）−オン（６８０ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）をアセトニトリルに取った。Ｎ−ブロモスクシンイミド（４２９ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を４時間撹拌した。次いで、反応混合物を真空下においてストリッピングし、酢酸エチルに取り、水、１Ｎ ＮａＯＨ、ブライン、及び水を用いて洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムにて乾燥させ、濾過し、真空下において減じ、更なる反応に使用される粗生成物を６５３ｍｇ得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６） ：８．２９（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、８．０２（ｓ，１Ｈ）、７．８７〜７．９７（ｍ，２Ｈ）、７．１７（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）、６．９４（ｄｄ，Ｊ＝７．２、２．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．９１〜４．０２（ｍ，２Ｈ）、１．５１〜１．６４（ｍ，３Ｈ）、０．９４（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，６Ｈ） ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３６１／３６３［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、Ｃ_１６Ｈ_１７ＢｒＮ_４Ｏについての算出値：３６１．２４。

５．６．１９． １−イソペンチル−４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンの合成

４−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−１−イソペンチルピリジン−２（１Ｈ）−オン（２００ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、２−メトキシピリジン−３−ボロン酸（１６９ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２２９ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（２．５ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）、及びｘ−Ｐｈｏｓ（１０．５ｍｇ、．０２２ｍｍｏｌ）を、密封管に入った２ｍＬのジオキサン及び１ｍＬの水に取り、８５℃にて２時間加熱した。次いで、反応物を室温に冷却し、アセトニトリル及びＤＣＭを用いてセライトプラグに通して濾過し、真空下において減じた。株式会社島津製作所の中性相分取にて精製し、凍結乾燥させ、２９ｍｇの生成物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６） ：８．５７（ｄｄ，Ｊ＝７．５、１．９Ｈｚ，１Ｈ）、８．３３（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、８．２６〜８．２８（ｍ，１Ｈ）、８．２６（ｓ，１Ｈ）、７．９２（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．８６（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．２２（ｄｄ，Ｊ＝７．５、４．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１１（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．８４（ｄｄ，Ｊ＝７．２、２．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．９８（ｓ，３Ｈ）、３．９０〜３．９６（ｍ，２Ｈ）、１．５０〜１．６１（ｍ，３Ｈ）、０．９３（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，６Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３９０（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_２２Ｈ_２３Ｎ_５Ｏ_２についての算出値：３８９．４。

５．６．２０． ４−（３−（５−フルオロ−２−メトキシピリジン−３−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−１−イソペンチルピリジン−２（１Ｈ）−オンの合成

実施例５．６．１９に記載の手法を使用し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６） ：８．７２（ｄｄ，Ｊ＝９．９、３．０Ｈｚ，１Ｈ）、８．４０（ｓ，１Ｈ）、８．３８（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，１Ｈ）、８．２６（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．９７（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．９３（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．１４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．８６（ｄｄ，Ｊ＝７．１、２．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．０１（ｓ，３Ｈ）、３．９１〜３．９９（ｍ，２Ｈ）、１．４８〜１．６５（ｍ，３Ｈ）、０．９４（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，６Ｈ） ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ４０８（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_２２Ｈ_２２ＦＮ_５Ｏ_２についての算出値：４０７．４。

５．６．２１． １−イソペンチル−４−（３−（２−メトキシ−６−メチルピリジン−３−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンの合成

実施例５．６．１９に記載の手法を使用し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６） ：８．４２（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）、８．３３（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、８．２１（ｓ，１Ｈ）、７．９１（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．８８（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．１２（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．０９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ）、６．８５（ｄｄ，Ｊ＝７．１、２．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．８９〜４．０１（ｍ，５Ｈ）、１．５６（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）、０．９４（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，６Ｈ） ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ４０４（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_２３Ｈ_２５Ｎ_５Ｏ_２についての算出値：４０３．４９。

５．６．２２． ４−（３−（２−エトキシピリジン−３−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−１−イソペンチルピリジン−２（１Ｈ）−オンの合成

実施例５．６．１９に記載の手法を使用し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６） ：８．５９（ｄｄ，Ｊ＝７．５、１．９Ｈｚ，１Ｈ）、８．３５（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、８．２９（ｓ，１Ｈ）、８．２６（ｄｄ，Ｊ＝４．９、１．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．９５（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．８８（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．２２（ｄｄ，Ｊ＝７．５、４．９Ｈｚ，１Ｈ）、７．１４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．８７（ｄｄ，Ｊ＝７．１、２．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．４５（ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ）、３．９６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）、１．５７（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）、１．３３（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）、０．９４（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，６Ｈ） ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ４０４（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_２３Ｈ_２５Ｎ_５Ｏ_２についての算出値：４０３．４９。

５．６．２３． １−イソペンチル−４−（３−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンの合成

６−クロロ−３−メチル−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン（９８ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）、１−（３−メチル−ブチル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−４−ボロン酸（１４５ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）、Ｋ_２ＣＯ_３（２４０ｍｇ、１．７４ｍｍｏｌ）及びジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（２０ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ／水（３．２ｍｌ／０．８ｍｌ）混合液を１５０℃にて１５分間マイクロ波において加熱した。反応混合物を、ＭｅＯＨ（２ｍｌ）を用いて希釈し、濾過した。濾液を分取ＨＰＬＣに供し、表題の化合物（８１．５ｍｇ）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ ０．９９（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ） １．６３〜１．７３（ｍ，３Ｈ） ２．６１（ｓ，３Ｈ） ３．９６〜４．０４（ｍ，２Ｈ） ６．９４（ｄｄ，Ｊ＝７．０７、２．０２Ｈｚ，１Ｈ） ７．１２（ｄ，Ｊ＝２．０２Ｈｚ，１Ｈ） ７．３６〜７．４２（ｍ，２Ｈ） ７．６３（ｓ，１Ｈ） ７．９９（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２９７．１（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１７Ｈ_２０Ｎ_４Ｏについての算出値：２９６．４。

５．６．２４． ４−（３−アセチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−１−イソペンチルピリジン−２（１Ｈ）−オンの合成

１−（６−クロロ−イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−３−イル−エタノン（１１３ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）、１−（３−メチル−ブチル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−ピリジン−４−ボロン酸（１４５ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）、Ｋ_２ＣＯ_３（２４０ｍｇ、１．７４ｍｍｏｌ）及びジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）（２０ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ／水（３．２ｍｌ／０．８ｍｌ）混合液を１５０℃にて１５分間マイクロ波において加熱した。反応混合物を、ＭｅＯＨ（２ｍｌ）を用いて希釈し、濾過した。濾液を分取ＨＰＬＣに供し、表題の化合物（９３ｍｇ）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．０１（ｄ，Ｊ＝６．０６Ｈｚ，６Ｈ） １．６５〜１．７７（ｍ，３Ｈ） ２．８３（ｓ，３Ｈ） ４．００〜４．０６（ｍ，２Ｈ） ７．０３（ｄｄ，Ｊ＝７．０７、２．０２Ｈｚ，１Ｈ） ７．１３（ｄ，Ｊ＝１．７７Ｈｚ，１Ｈ） ７．４５（ｄ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，１Ｈ） ７．６９（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ８．１９（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ８．４９（ｓ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３２５．０（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１８Ｈ_２０Ｎ_４Ｏ_２についての算出値：３２４．４。

５．６．２５． ４−（３−クロロイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−１−イソペンチルピリジン−２（１Ｈ）−オンの合成

４−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−１−イソペンチルピリジン−２（１Ｈ）−オン（２００ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）をアセトニトリルに取った。Ｎ−クロロスクシンイミド（９５ｍｇ、０．７１ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を７５℃にて一晩撹拌した。次いで、反応物を真空下においてストリッピングし、ＤＣＭに取り、水、１Ｎ ＮａＯＨ、ブライン、及び水を用いて洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムにて乾燥させ、濾過し、真空下において減じ、株式会社島津製作所の中性相分取にて精製し、凍結乾燥させ、２８ｍｇの生成物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６） ：８．３２（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、８．０３（ｄ，Ｊ＝０．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．９５（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．９１（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．１７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．９４（ｄｄ，Ｊ＝７．１、１．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．８８〜４．０３（ｍ，２Ｈ）、１．４８〜１．６６（ｍ，３Ｈ）、０．９５（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，６Ｈ） ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３１７（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１６Ｈ_１７ＣｌＮ_４Ｏについての算出値：３１６．８。

５．６．２６． ６−（１−イソペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−３−（２−メトキシピリジン−３−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジンの合成

パートＡ． ６−（１−イソペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン

実施例５．６．１１に記載の手法を使用し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ ０．９９（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，６Ｈ） １．６４（ｄｑｕｉｎ，Ｊ＝１３．３９、６．６９、６．６９、６．６９、６．６９Ｈｚ，１Ｈ） １．８１〜１．８８（ｍ，２Ｈ） ４．２０〜４．２６（ｍ，２Ｈ） ７．２４〜７．２７（ｍ，１Ｈ） ７．７２〜７．７６（ｍ，１Ｈ） ７．９２〜７．９６（ｍ，２Ｈ） ７．９７（ｓ，１Ｈ） ７．９９〜８．０１（ｍ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２５６（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１４Ｈ_１７Ｎ_５についての算出値：２５５。

パートＢ． ３−ブロモ−６−（１−イソペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン

実施例５．６．１１、パートＢに記載の臭素化の手法を使用し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．００（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，６Ｈ） １．６０〜１．７１（ｍ，１Ｈ） １．８２〜１．９０（ｍ，２Ｈ） ４．２０〜４．２８（ｍ，２Ｈ） ７．３１（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ７．７４（ｓ，１Ｈ） ７．９１（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ８．０３〜８．０８（ｍ，２Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３３４（Ｍ＋Ｈ）^＋、（３３６でのダブレット）、Ｃ_１４Ｈ_１６ＢｒＮ_５についての算出値：３３３。

パートＣ． ６−（１−イソペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−３−（２−メトキシピリジン−３−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン

実施例５．６．１１に記載の鈴木カップリングの手法を使用し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．００（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，６Ｈ） １．６５（ｄｑｕｉｎ，Ｊ＝１３．３９、６．６９、６．６９、６．６９、６．６９Ｈｚ，１Ｈ） １．８０〜１．８８（ｍ，２Ｈ） ４．０９（ｓ，３Ｈ） ４．１９〜４．２８（ｍ，２Ｈ） ７．１１（ｄｄ，Ｊ＝７．５８、５．０５Ｈｚ，１Ｈ） ７．３０（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ７．９２（ｓ，１Ｈ） ７．９８〜８．０４（ｍ，２Ｈ） ８．２３（ｄｄ，Ｊ＝４．９３、１．８９Ｈｚ，１Ｈ） ８．２９（ｓ，１Ｈ） ８．７４（ｄｄ，Ｊ＝７．５８、１．７７Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３６３（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_２０Ｈ_２２Ｎ_６Ｏについての算出値：３６２。

５．６．２７． ４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボン酸イソプロピルの合成

パートＡ． ６−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン

３０８ｍｇ（２．００ｍｍｏｌ）の６−クロロイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジンに８８２ｍｇ（３．００ｍｍｏｌ）の（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）ボロン酸、続いて１４０ｍｇ（０．２０ｍｍｏｌ）のＰｄＣｌ_２（ＰＰｈ_３）_２、４００ｍｇ（４．００ｍｍｏｌ）のＮａ_２ＣＯ_３、１０ｍＬのＭｅＣＮ、及び４ｍＬのＨ_２Ｏを添加した。空気を窒素に置き換え、１４０℃にて０．５時間マイクロ波処理した。Ｂｏｃ保護基が鈴木カップリングの間に失われたことが観察された。バイアルの内容物を、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて洗浄し、ＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮し、０％−１０％のＭｅＯＨ／ＤＣＭを用いて溶出するＩＳＣＯにて精製し、２０９ｍｇの所望の化合物を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ １８６（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_９Ｈ_７Ｎ_５についての算出値：１８５。

パートＢ． ４−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボン酸イソプロピル

１０ｍＬのＥｔＯＡｃに溶解させた１３７ｍｇ（０．７４１ｍｍｏｌ）の６−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジンに、１．４８ｍＬ（１．４８ｍｍｏｌ）のクロロギ酸イソプロピル（１Ｍのトルエン溶液）、及び０．３１ｍＬ（２．２２ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを添加した。得られた混合物を室温にて２時間撹拌した。これを、２０ｍＬのＥｔＯＡｃを用いて希釈し、５ｍＬの水を用いてクエンチした。これを、ブラインを用いて洗浄し、ＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させ、１０％−１００％のＥｔＯＡｃ／ｈｅｘを用いて溶出するＩＳＣＯにて精製し、１４６ｍｇの所望の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．５３（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ） ５．３１〜５．４２（ｍ，１Ｈ） ７．３１（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ７．８１（ｄ，Ｊ＝１．２６Ｈｚ，１Ｈ） ７．９９〜８．０４（ｍ，２Ｈ） ８．３１（ｄ，Ｊ＝０．７６Ｈｚ，１Ｈ） ８．６７（ｄ，Ｊ＝０．７６Ｈｚ，１Ｈ）。

パートＣ． ４−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボン酸イソプロピル

実施例５．６．１１、パートＢに記載の臭素化の手法を使用し、８４％の所望の生成物を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３５０［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、（３５２でのダブレット） Ｃ_１３Ｈ_１２ＢｒＮ_５Ｏ_２についての算出値：３４９

パートＤ． ４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボン酸イソプロピル

実施例５．６．１１に記載の鈴木カップリングの手法を使用し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．５３（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，６Ｈ） ４．１０（ｓ，３Ｈ） ５．３７（ｑｕｉｎ，Ｊ＝６．２５Ｈｚ，１Ｈ） ７．１２（ｄｄ，Ｊ＝７．４５、４．９３Ｈｚ，１Ｈ） ７．３５（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ８．０８（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ８．２３〜８．２８（ｍ，２Ｈ） ８．３３（ｓ，１Ｈ） ８．６５（ｄ，Ｊ＝０．５１Ｈｚ，１Ｈ） ８．６７（ｄｄ，Ｊ＝７．５８、２．０２Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３７９（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１９Ｈ_１８Ｎ_６Ｏ_３についての算出値：３７８。

５．６．２８． （Ｓ）−１−（２−アミノ−４−メチルペンチル）−４−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンの合成

パートＡ． （Ｓ）−２−（１−ヒドロキシ−４−メチルペンタン−２−イル）イソインドリン−１，３−ジオン

マイクロ波処理が可能なバイアルに入った、２．２０ｇ（１４．８６ｍｍｏｌ）の無水フタル酸に、２．０９ｇ（１７．８４ｍｍｏｌ）の（ｓ）−（＋）ロイシノール、３．１ｍＬ（２２．３０ｍｍｏｌ）のトリエチルアミン及び１２ｍＬのトルエンを添加した。これを１６０℃にて０．５時間マイクロ波処理した。これをロータリーエバポレーターにて濃縮し、８０グラムのシリカゲルカラムに充填し、５％−１００％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いて溶出するＩＳＣＯにて精製し、３．６１ｇ（９８％）の所望の生成物を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２４８（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１４Ｈ_１７ＮＯ_３についての算出値：２４７。

パートＢ． （Ｓ）−２−（１−（４−ブロモ−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）−４−メチルペンタン−２−イル）イソインドリン−１，３−ジオン

６０ｍｌのＴＨＦに溶解させた１．１４ｇ（６．５５ｍｍｏｌ）の４−ブロモピリジン−２−オールに、１．７０ｇ（６．８８ｍｍｏｌ）の（Ｓ）−２−（１−ヒドロキシ−４−メチルペンタン−２−イル）イソインドリン−１，３−ジオン、続いて１．８０ｇ（６．８８ｍｍｏｌ）のトリフェニルホスフィン及び１．２５ｇ（７．２１ｍｍｏｌ）のアゾジカルボン酸ジエチルを添加した。この混合物を室温にて一晩撹拌した。翌朝、ＬＣＭＳは同一の質量の２つの大きなピークを示した。これを、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて洗浄し、ＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させた。これを、１０％−１００％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いて溶出する４０グラムのカラムを使用するＩＳＣＯにて精製した。１つ目の大きなピークは位置異性体（副生成物）、及び２つ目の大きなピークが所望の生成物であった。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ ０．９５（ｄｄ，Ｊ＝６．１９、３．１６Ｈｚ，６Ｈ） １．４８〜１．６３（ｍ，２Ｈ） ２．１６（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．２６、１０．３６、４．４２Ｈｚ，１Ｈ） ４．２６（ｄｄ，Ｊ＝１３．３９、１０．３６Ｈｚ，１Ｈ） ４．４１（ｄｄ，Ｊ＝１３．３９、４．０４Ｈｚ，１Ｈ） ４．７８〜４．９１（ｍ，１Ｈ） ６．０８〜６．１４（ｍ，１Ｈ） ６．７６（ｄ，Ｊ＝２．２７Ｈｚ，１Ｈ） ６．９２（ｄ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ，１Ｈ） ７．７２〜７．７８（ｍ，２Ｈ） ７．７９〜７．８５（ｍ，２Ｈ）。

パートＣ． （Ｓ）−２−（４−メチル−１−（２−オキソ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピリジン−１（２Ｈ）−イル）ペンタン−２−イル）イソインドリン−１，３−ジオン

マイクロ波処理が可能なバイアルに入った、１．００ｇ（２．４８ｍｍｏｌ）の（Ｓ）−２−（１−（４−ブロモ−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）−４−メチルペンタン−２−イル）イソインドリン−１，３−ジオンに、１．２６ｇ（４．９６ｍｍｏｌ）のビス（ピナコラト）−ジボロン、０．９７ｇ（９．９３ｍｍｏｌ）のＫＯＡｃ、続いて０．３０ｇ（０．１５ｍｍｏｌ）のＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）_２．ＤＣＭを添加した。これを１３０℃にて０．５時間マイクロ波処理した。ＬＣＭＳは、得られた生成物が主に所望の生成物のボロン酸のようであることを示している。ボロン酸／エステルの両方が次の工程において十分に作用するため、収率は理論量であることを前提し、材料を任意の抽出を行うことなく、精製することなく次の工程に進めた。

パートＤ． （Ｓ）−２−（１−（４−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）−４−メチルペンタン−２−イル）イソインドリン−１，３−ジオン

２．４８ｍｍｏｌのボロン酸エステル（又は酸）、十分なＫＯＡｃ、及び十分なＤＭＥを含有することが推定されたこれまでの工程からのマイクロ波バイアルに、０．３８１ｇ（２．４８ｍｍｏｌ）の６−クロロイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン、５ｍＬの水、及び更なる１００ｍｇ（０．１２３ｍｍｏｌ）のＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）_２．ＤＣＭを添加した。混合物を１３５℃にて０．５時間マイクロ波処理した。これを、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて洗浄し、セライトのパッドに通して濾過し、有機層と水性層とに分離した。有機層をＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させ、８０グラムのシリカゲルカラムに充填し、０％−１０％のＭｅＯＨ／ＤＣＭを用いて溶出するＩＳＣＯにて精製し、６４４ｍｇの所望の生成物（２工程にわたり５９％の収率）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ ０．９８（ｄｄ，Ｊ＝６．３２、２．７８Ｈｚ，６Ｈ） １．４９〜１．７４（ｍ，２Ｈ） ２．１６〜２．２９（ｍ，１Ｈ） ４．３５（ｄｄ，Ｊ＝１３．２６、１０．４８Ｈｚ，１Ｈ） ４．５３（ｄｄ，Ｊ＝１３．３９、４．０４Ｈｚ，１Ｈ） ４．８８〜５．００（ｍ，１Ｈ） ６．７４（ｄｄ，Ｊ＝７．０７、２．０２Ｈｚ，１Ｈ） ７．０５（ｄ，Ｊ＝１．７７Ｈｚ，１Ｈ） ７．２０（ｄ，Ｊ＝７．３３Ｈｚ，１Ｈ） ７．４１（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ７．７０〜７．７５（ｍ，２Ｈ） ７．８２（ｄ，Ｊ＝１．０１Ｈｚ，３Ｈ） ７．９８（ｓ，１Ｈ） ８．０３（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ）。

パートＥ． （Ｓ）−１−（２−アミノ−４−メチルペンチル）−４−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン

３０ｍＬのＥｔＯＨに溶解させた２５０ｍｇ（０．６０４ｍｍｏｌ）の出発材料に、３０２ｍｇ（６．０４０ｍｍｏｌ）のヒドラジン一水和物を添加し、得られた混合物を３時間撹拌しながら加熱した。これを室温に冷却し、固体を濾去した。濾液を濃縮させ、所望の生成物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ １．０１（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，３Ｈ） １．０５（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，３Ｈ） １．５１〜１．５９（ｍ，２Ｈ） １．８５（ｄｔ，Ｊ＝１３．４５、６．７９Ｈｚ，１Ｈ） ３．６５〜３．７５（ｍ，１Ｈ） ４．１７（ｄｄ，Ｊ＝１４．１５、７．８３Ｈｚ，１Ｈ） ４．３２（ｄｄ，Ｊ＝１４．１５、３．７９Ｈｚ，１Ｈ） ７．１８（ｄｄ，Ｊ＝７．２０、１．８９Ｈｚ，１Ｈ） ７．２７（ｄ，Ｊ＝１．７７Ｈｚ，１Ｈ） ７．７７〜７．８４（ｍ，２Ｈ） ７．８７（ｄ，Ｊ＝１．２６Ｈｚ，１Ｈ） ８．１６（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ８．２７（ｓ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３１２（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１７Ｈ_２１Ｎ_５Ｏについての算出値：３１１。

５．６．２９． （Ｓ）−１−（２−アミノ−４−メチルペンチル）−４−（３−クロロイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンの合成

１０ｍＬのＤＭＦに溶解させた６０ｍｇ（０．１３６ｍｍｏｌ）の（Ｓ）−２−（１−（４−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）−４−メチルペンタン−２−イル）イソインドリン−１，３−ジオンに、６３ｍｇ（０．２７２ｍｍｏｌ）のＮＣＳを添加し、得られた混合物を撹拌しながら５０℃にて１６時間加熱した。これを室温に冷却し、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて洗浄し、ＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させ、５０％−１００％のＥｔＯＡｃ／ｈｅｘを用いて溶出する１２グラムのカラムを用いたＩＳＣＯにて精製し、４３ｍｇの所望の生成物を得た。この生成物を実施例５．６．２８に記載のフタルイミド脱保護の手法を供し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ ０．９９〜１．０７（ｍ，６Ｈ） １．４９〜１．５８（ｍ，２Ｈ） １．８０〜１．９０（ｍ，１Ｈ） ３．６２〜３．７４（ｍ，１Ｈ） ４．１７（ｄｄ，Ｊ＝１４．０２、７．９６Ｈｚ，１Ｈ） ４．３３（ｄｄ，Ｊ＝１４．１５、４．０４Ｈｚ，１Ｈ） ７．２３（ｄｄ，Ｊ＝７．０７、２．０２Ｈｚ，１Ｈ） ７．３２（ｄ，Ｊ＝１．７７Ｈｚ，１Ｈ） ７．７９〜７．８５（ｍ，１Ｈ） ７．８６〜７．９２（ｍ，２Ｈ） ８．２０（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３４６（Ｍ＋Ｈ）^＋、（３４８でのダブレット）、Ｃ_１７Ｈ_２０ＣｌＮ_５Ｏについての算出値：３４５。

５．６．３０． （Ｓ）−１−（２−アミノ−４−メチルペンチル）−４−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンの合成

パートＡ． （Ｓ）−２−（１−（４−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）−４−メチルペンタン−２−イル）イソインドリン−１，３−ジオン

１０ｍＬのＡｃＯＨに溶解させた６０ｍｇ（０．１３６ｍｍｏｌ）の（Ｓ）−２−（１−（４−（イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）−４−メチルペンタン−２−イル）イソインドリン−１，３−ジオンに、２４ｍｇ（０．１５０ｍｍｏｌ）の臭素を添加し、０．２５時間撹拌した。反応混合物をロータリーエバポレーターの後に、高真空ポンプにて濃縮し、定量的収率の所望の生成物を得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ５２０［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、（５２２でのダブレット）、Ｃ_２５Ｈ_２２ＢｒＮ_５Ｏ_３についての算出値：５１９。

パートＢ． （Ｓ）−１−（２−アミノ−４−メチルペンチル）−４−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン

（Ｓ）−２−（１−（４−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）−４−メチルペンタン−２−イル）イソインドリン−１，３−ジオンを、実施例５．６．２８に記載のフタルイミド脱保護の手法に供し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ １．０１（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，３Ｈ） １．０５（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，３Ｈ） １．５１〜１．５９（ｍ，２Ｈ） １．８５（ｄｔ，Ｊ＝１３．４５、６．７９Ｈｚ，１Ｈ） ３．６４〜３．７３（ｍ，１Ｈ） ４．１６（ｄｄ，Ｊ＝１４．０２、７．９６Ｈｚ，１Ｈ） ４．３３（ｄｄ，Ｊ＝１４．０２、３．９２Ｈｚ，１Ｈ） ７．２３（ｄｄ，Ｊ＝７．０７、１．７７Ｈｚ，１Ｈ） ７．３２（ｄ，Ｊ＝１．５２Ｈｚ，１Ｈ） ７．８１（ｄ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，１Ｈ） ７．８７〜７．９３（ｍ，２Ｈ） ８．１８（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３９０［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、（３９２でのダブレット）、Ｃ_１７Ｈ_２０ＢｒＮ_５Ｏについての算出値：３８９。

５．６．３１． （Ｓ）−１−（２−アミノ−４−メチルペンチル）−４−（３−（２−メトキシピリジン−３−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンの合成

マイクロ波処理が可能なバイアルに入った、７０ｍｇ（０．１３５ｍｍｏｌ）の（Ｓ）−２−（１−（４−（３−ブロモイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）−４−メチルペンタン−２−イル）イソインドリン−１，３−ジオンに、３１ｍｇ（０．２０２ｍｍｏｌ）の（２−メトキシピリジン−３−イル）ボロン酸、３７ｍｇ（０．２６９ｍｍｏｌ）のＫ_２ＣＯ_３、１１ｍｇ（０．０１４ｍｍｏｌ）のＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）_２．ＤＣＭ、３ｍＬのＭｅＣＮ及び１ｍＬの水を添加した。この混合物を１４０℃にて０．２５時間マイクロ波処理した。これを、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて洗浄し、ＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮し、分取ＨＰＬＣにて精製し、４０ｍｇの所望の生成物を得た。この生成物を実施例５．６．２８に記載のフタルイミド脱保護の手法に供し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ １．０５（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，３Ｈ） １．０２（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，３Ｈ） １．５０〜１．６４（ｍ，２Ｈ） １．７７〜１．９１（ｍ，１Ｈ） ３．７０〜３．８１（ｍ，１Ｈ） ４．２４（ｄｄ，Ｊ＝１４．２７、７．７１Ｈｚ，１Ｈ） ４．３４（ｄｄ，Ｊ＝１４．４０、３．５４Ｈｚ，１Ｈ） ７．１１（ｄｄ，Ｊ＝７．０７、１．７７Ｈｚ，１Ｈ） ７．１７（ｄｄ，Ｊ＝７．５８、５．０５Ｈｚ，１Ｈ） ７．２５〜７．３２（ｍ，１Ｈ） ７．７９（ｄ，Ｊ＝７．０７Ｈｚ，１Ｈ） ７．８８（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ８．２０〜８．３０（ｍ，３Ｈ） ８．５８（ｄｄ，Ｊ＝７．５８、１．７７Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ４１９［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、Ｃ_２３Ｈ_２６Ｎ_６Ｏ_２についての算出値：４１８。

５．６．３２． （Ｓ）−１−（２−アミノ−４−メチルペンチル）−４−（３−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンの合成

マイクロ波処理が可能なバイアルに入った、０．８３５ｍｍｏｌの（Ｓ）−２−（４−メチル−１−（２−オキソ−４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−ピリジン−１（２Ｈ）−イル）ペンタン−２−イル）イソインドリン−１，３−ジオンに、１００ｍｇ（０．５９７ｍｍｏｌ）の６−クロロ−３−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン、９８ｍｇ（０．１１９ｍｍｏｌ）のＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）_２．ＤＣＭ、２ｍＬのＤＭＥ、及び２ｍＬの２Ｍ ＫＯＡｃ水溶液を添加した。これを１３５℃にて０．５時間マイクロ波処理した。これを、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて洗浄し、セライトのパッドに通して、有機層と水性層とに分離した。有機層をＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させ、４０グラムのシリカゲルカラムに充填し、０％−１０％のＭｅＯＨ／ＤＣＭを用いて溶出するＩＳＣＯにて精製し、所望の生成物（the desired）を得た。この生成物を実施例５．６．２８に記載のフタルイミド脱保護の手法に供し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ_４） ｐｐｍ １．０２（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，３Ｈ） １．０６（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，３Ｈ） １．５４〜１．６７（ｍ，２Ｈ） １．８０〜１．９１（ｍ，１Ｈ） ２．６６（ｓ，３Ｈ） ３．７９（ｑｄ，Ｊ＝７．２４、３．７９Ｈｚ，１Ｈ） ４．２６（ｄｄ，Ｊ＝１４．２７、７．７１Ｈｚ，１Ｈ） ４．３６（ｄｄ，Ｊ＝１４．４０、３．７９Ｈｚ，１Ｈ） ７．２３（ｄｄ，Ｊ＝７．２０、１．８９Ｈｚ，１Ｈ） ７．２９（ｄ，Ｊ＝１．７７Ｈｚ，１Ｈ） ７．６８（ｓ，１Ｈ） ７．７５〜７．８３（ｍ，２Ｈ） ８．１１（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３２６［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、Ｃ_１８Ｈ_２３ＮＯ_５についての算出値：３２５。

５．６．３３． ３−ブロモ−６−（１−ネオペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジンの合成

パートＡ． ６−（１−ネオペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン

マイクロ波処理が可能なバイアルに入った、１５３．６ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ）の６−クロロイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジンに、３４３．２ｍｇ（１．３０ｍｍｏｌ）の１−ネオペンチル−３−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピロール、続いて、８１．８ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ）のＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）_２．ＤＣＭ、２ｍＬのＭｅＣＮ及び次いで２ｍＬの２Ｍ ＫＯＡｃ水溶液に添加した。これを、１３５℃にて２０分間マイクロ波処理した。これを、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて洗浄し、ＭｇＳＯ_４にて乾燥させ、濃縮させた。これを、５％−１００％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いて溶出する４０グラムのカラムを使用するＩＳＣＯにて精製し、所望の生成物を７９％の収率において得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．０４（ｓ，９Ｈ） ４．００（ｓ，２Ｈ） ７．２６（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ７．７４（ｄ，Ｊ＝１．０１Ｈｚ，１Ｈ） ７．９０〜７．９５（ｍ，３Ｈ） ８．００（ｓ，１Ｈ）。

パートＢ． ３−ブロモ−６−（１−ネオペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン

実施例５．６．１１、パートＢに記載の臭素化の手法を使用し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．０５（ｓ，９Ｈ） ４．０１（ｓ，２Ｈ） ７．３１（ｄ，Ｊ＝９．６０Ｈｚ，１Ｈ） ７．７３（ｓ，１Ｈ） ７．９１（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ８．０４（ｓ，１Ｈ） ８．００（ｓ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３３４［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、（３３６でのダブレット）、Ｃ_１４Ｈ_１６ＢｒＮ_５についての算出値：３３３。

５．６．３４． ３−（２−メトキシピリジン−３−イル）−６−（１−ネオペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジンの合成

実施例５．６．１１に記載の鈴木カップリングの手法を使用し、表題の化合物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．０４（ｓ，９Ｈ） ４．００（ｓ，２Ｈ） ４．０９（ｓ，３Ｈ） ７．０９（ｄｄ，Ｊ＝７．５８、４．８０Ｈｚ，１Ｈ） ７．３０（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ７．８６（ｓ，１Ｈ） ７．９８〜８．０３（ｍ，２Ｈ） ８．２２（ｄｄ，Ｊ＝５．０５、１．７７Ｈｚ，１Ｈ） ８．２９（ｓ，１Ｈ） ８．７３（ｄｄ，Ｊ＝７．４５、１．８９Ｈｚ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３６３［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、Ｃ_２０Ｈ_２２Ｎ_６Ｏについての算出値：３６２。

５．６．３５． ３−クロロ−６−（１−ネオペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジンの合成

４ｍＬのＤＭＦに溶解させた７２ｍｇ（０．２８２ｍｍｏｌ）の６−（１−ネオペンチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）イミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジンに、５６ｍｇ（０．４２３ｍｍｏｌ）のＮ−クロロスクシンイミドを添加し、得られた混合物を５５℃にて一晩撹拌した。翌朝、ＬＣＭＳは有意な二塩素化の副生成物を示した。これを室温に冷却し、ＥｔＯＡｃを用いて希釈し、ブラインを用いて２回洗浄し、ＭｇＳＯ_４にて乾燥させた。これを分取ＨＰＬＣにて精製し、所望の生成物（１５％の収率）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ） ｐｐｍ １．０４（ｓ，９Ｈ） ４．０１（ｓ，２Ｈ） ７．３１（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ７．６８（ｓ，１Ｈ） ７．９３（ｄ，Ｊ＝９．３５Ｈｚ，１Ｈ） ８．００（ｓ，１Ｈ） ８．０４（ｓ，１Ｈ）。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２９０（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１４Ｈ_１６ＣｌＮ_５についての算出値：２８９。

５．６．３６． １−（３，３−ジメチルブチル）−４−（３−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オンの合成

パートＡ． ４−ブロモ−１−（３，３−ジメチルブチル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン

４−ブロモ−２−ヒドロキシピリジン（６００ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ）を窒素下において乾燥ＤＭＦに取った。６０％油中水素化ナトリウム（１６５ｍｇ、４．１ｍｍｏｌ）を添加し、３０分間撹拌した。臭化リチウム（５９８ｍｇ、６．８ｍｍｏｌ）を添加し、１時間撹拌した。１−ブロモ−３，３−ジメチルブタン（８７０μＬ、６．８ｍｍｏｌ）を添加し、３日間撹拌した。反応物を真空下において減じ、ＤＣＭに取った。これを水、１Ｎ ＮａＯＨを用いて洗浄し、次いで硫酸マグネシウムにて乾燥させ、濾過し、真空下において減じ、次の工程においてそのまま使用される粗生成物を８６０ｍｇ得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２５８／２６０［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、Ｃ_１１Ｈ_１６ＢｒＮＯについての算出値：２５８．１６。

パートＢ． （１−（３，３−ジメチルブチル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−４−イル）ボロン酸

４−ブロモ−１−（３，３−ジメチルブチル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン（８６０ｍｇ、３．３ｍｍｏｌ）を窒素下において１０ｍＬの乾燥ＤＭＦに取った。ビス（ピナコラト）ジボラン（１．２６ｇ、５ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（９８５ｍｇ、１０ｍｍｏｌ）、及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２ジクロロメタン（２７２ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を８５℃に加熱し、一晩撹拌した。反応物を室温に冷却し、ＤＣＭを用いてセライトに通して濾過した。これを真空下において減じ、１Ｎ ＮａＯＨに取り、ＤＣＭを用いて洗浄した。次いで、水性層を、１Ｎ ＨＣｌを用いて酸性化し、ＤＣＭを用いて抽出した。ＤＣＭ層を硫酸マグネシウムにて乾燥させ、濾過し、真空下において減じ、更なる反応に使用する粗製物を７４０ｍｇ得た。ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ２２４［（Ｍ＋Ｈ）］^＋、Ｃ_１１Ｈ_１８ＢＮＯ_３についての算出値：２２３．０８。

パートＣ． １−（３，３−ジメチルブチル）−４−（３−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン−６−イル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン

６−クロロ−３−メチルイミダゾ［１，２−ｂ］ピリダジン（１９４ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）を５ｍＬのアセトニトリル及び１ｍＬの水に取った。（１−（３，３−ジメチルブチル）−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−４−イル）ボロン酸（２６０ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４８０ｍｇ、３．４８ｍｍｏｌ）、及びＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２ジクロロメタン（９５ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を８５℃にて２時間撹拌した。室温に冷却し、ＤＣＭを用いてセライトプラグに通して濾過し、真空下において減じた。残渣を株式会社島津製作所の中性相分取にて精製し、凍結乾燥させ、１８ｍｇの生成物を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ_６） ：８．１８（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．８９（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．７８（ｄ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．７０（ｓ，１Ｈ）、７．１２（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ）、６．９２〜６．９９（ｍ，１Ｈ）、３．９０〜４．０２（ｍ，２Ｈ）、２．５８（ｓ，３Ｈ）、１．４９〜１．６３（ｍ，２Ｈ）、０．９８（ｓ，９Ｈ） ＬＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ３１１（Ｍ＋Ｈ）^＋、Ｃ_１８Ｈ_２２Ｎ_４Ｏについての算出値：３１０．４。

５．６．３７． Ｐ８１フィルタープレートアッセイ
化合物を、最大化合物濃度が９６μＭとなるようにＭｕｔｉｐｒｏｂｅ（PerkinElmer）及びＢｉｏｍｅｋ ＦＸ（Beckman Coulter）を用いてＬａｂｃｙｔｅ ＬＤＶプレート（Labcyte、カタログ番号ＬＰ−０２００）へと段階希釈させた。次いで化合物を、ＥＣＨＯ ５５０ Ｌｉｑｕｉｄ Ｈａｎｄｌｅｒ（Labcyte）を用いてＧｒｅｉｎｅｒ ３８４ウェル反応プレート（Greiner、番号７８１０７６）に分注した（pinged）（１ウェル当たり７５ｎＬ）。その後、合計１２μｌの反応バッファー（Molecular Devices製のＴｗｅｅｎとＤＴＴとを含有するＩＭＡＰバッファー）を陰性対照用のカラム１及びカラム１３の各ウェルに添加して、１２μｌの２×ＡＡＫ１（０．２ｎＭの完全長ヒトタンパク質、ＮＣＢＩアクセッション番号ＮＰ＿０５５７２６．２）を残りのウェルに添加した。次に酵素を化合物と室温で１０分間プレインキュベートした。反応は、２×Ｍｕ２（０．２μＭ、完全長ヒトタンパク質）、２×低温ＡＴＰ（２μＭ）、及び１．３μＣｉの高温^３３Ｐ−ＡＴＰを含有する１２μｌの基質ミックスをＭｉｎｉｔｒａｋ（PerkinElmer）によって添加することで開始した。反応は室温で１時間進行させた。一方で、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ ３８４ウェルＰ８１フィルタープレート（Millipore、カタログ番号ＭＺＰＨＮ０Ｗ１０）をプレートウォッシャー（plate washer）（Ｚｏｏｍ ＺＷ、Titertek製）に載せ、５０μｌの１％リン酸で予め湿潤させた。次いでキナーゼ反応は２４μｌの２％リン酸を各ウェルに添加することで停止した後、Ｍｉｎｉｔｒａｋを使用して、４０μｌを各ウェルから予め湿潤させたＭｉｌｌｉｐｏｒｅ ３８４ウェルＰ８１フィルタープレートに移した。反応混合物をＰ８１プレートにおいて室温で１０分間インキュベートし、その後Ｚｏｏｍフィルターウォッシャー（filter washer）を用いて１００μｌ／ウェルの１％リン酸で５回洗浄した。各フィルタープレートの下部に封をした後、各ウェルに２０μｌのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ ４０を添加して、プレートの上部にＦｌａｓｈｐｌａｔｅカバーで封をした後、ＴｏｐＣｏｕｎｔ（PerkinElmer）による読み取りまで１時間置いた。

５．６．３８． ＨＥＫ２８１細胞ベースアッセイ
ＨＥＫ２９３Ｆ細胞をＤＭＥＭ（Gibco、カタログ番号１１９６５）、１０％ ＦＢＳ（SAFC Biosciences、カタログ番号１２１０３Ｃ）、１×ＧＰＳ（グルタミン、ペニシリン及びストレプトマイシン）を含む培地中で培養した。細胞がトランスフェクション時に約８０％コンフルエントとなるように、１日目に細胞を１０ｃｍ径の皿の上でプレーティングした。およそ１２００万の細胞がトランスフェクション時の１０ｃｍ径の皿に存在していた。２日目、各皿を４８μｇのＤＮＡ及び１４４μｌのＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ２０００（Invitrogen、カタログ番号１１６６８−０１９）でトランスフェクトした。ＤＮＡは、３μｇのＡＡＫ１／ＨＡ／ｐＩＲＥＳ（完全長ヒト、ＮＣＢＩアクセッション番号ＮＰ＿０５５７２６．２）、４５μｇのＦｌａｇ／ＡＰ２ＭＩ／ｐｃＤＮＡ（完全長ヒト）、及び１．５ｍｌのＯＰＴＩ−ＭＥＭを含む混合物（１０ｃｍ径の皿１つ当たり）で構成されていた。Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ２０００は、１４４μｌのＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ ２０００及び１．５ｍｌのＯＰＴＩ−ＭＥＭを含む混合物（１０ｃｍ径の皿１つ当たり）で構成されていた。各混合物を個々の１５ｍｌ容のチューブに移し、室温で５分間インキュベートした後、２つの混合物を組み合わせて、室温で２０分間インキュベートした。次いで成長培地を各１０ｃｍ径のプレートから吸引して、１０ｍｌのＤＭＥＭ＋１０％ ＦＢＳ（ＧＰＳなし）と交換した。最後に、３ｍｌのＤＮＡ／Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅミックスを各１０ｃｍ径の皿に添加し、穏やかに混合した後、プレートを３７℃、５％ ＣＯ_２で一晩、インキュベートした。

３日目、化合物を１０００倍の最終濃度で１００％ ＤＭＳＯで希釈した後、合計５つの試験濃度となるように３倍の段階希釈を行った。１０ｃｍ径の皿１つ当たり４つの化合物を試験した。次いで１μｌの各化合物希釈液をディープウェルの９６ウェルプレートへとピペッティングした後、各化合物が２倍の最終濃度となるように５００μｌのＤＭＥＭ＋０．５％ ＦＢＳを各ウェルに添加した。細胞を１０ｃｍ径の皿において単純なピペッティングによって再懸濁させ（この時点でＨＥＫ２９３細胞がプレートから容易に剥がれ落ちる）、次いで５０ｍｌ容の円錐チューブに移し、１０００ｒｐｍで５分間の遠心分離によってペレット化した。次いで細胞ペレットを１０ｃｍ径の皿１つ当たり２．７５ｍｌのＤＭＥＭ＋０．５％ ＦＢＳで再懸濁させ、１００μｌの細胞懸濁液を９６ウェルＴＣプレートの各ウェルに移した。次いで最後に、ＤＭＥＭ＋０．５％ ＦＢＳで希釈した１００μｌの２×化合物を１倍の最終濃度となるように細胞懸濁液の入ったウェルに添加した。その後プレートを３７℃及び５％ ＣＯ_２で３時間インキュベートした後、細胞懸濁液を各ウェルから１２チューブＰＣＲストリップへと移した。ＰＣＲストリップをチップラック内において１０００ｒｐｍで５分間スピンさせ、細胞をペレット化した後、培地をピペッティングによって細胞ペレットを破壊することなく取り除いた。

ウェスタンブロット分析の準備のために、細胞ペレットを４０μｌの１×ＬＤＳ−ＰＡＧＥサンプルバッファー（Invitrogen、カタログ番号ＮＰ０００８）＋２×Ｈａｌｔホスファターゼ及びプロテアーゼ阻害剤カクテル（Thermo Scientific、カタログ番号１８６１２８４）で再懸濁させた後、それぞれを５に設定されたマイクロチップソニケーターを用いて８秒〜１０秒超音波処理した。５μｌの１０×ＮｕＰａｇｅ Ｓａｍｐｌｅ Ｒｅｄｕｃｉｎｇ Ａｇｅｎｔ（５０ｍＭ ＤＴＴを含む）を各サンプルに添加した後、ＰＣＲ機器において７０℃で１０分間熱変性させた。ホスホ−ｍｕ２ブロットについては、１サンプル当たり合計１０μｌを４％〜２０％ Ｔｒｉｓ−Ｇｌｙｃｉｎｅ Ｃｒｉｔｅｒｉｏｎ ２６ウェルゲル（Biorad、カタログ番号３４５−００３４）の各レーンに、及びｍｕ２ブロットについては１レーン当たり１０μｌを４％〜１２％ Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ（＋ＭＥＳバッファー）ＮｕＰＡＧＥ ２６ウェルゲル（Invitrogen、カタログ番号ＷＧ１４０３ＢＸ１０）に充填した。対照については、２ｎｇのホスホ−ｍｕ２又は２０ｎｇのｍｕ２／Ｆｌａｇタンパク質を各ゲルの最後のウェルに充填した。ＳＤＳ−ＰＡＧＥ後、各ゲル上のサンプルを、ｉＢｌｏｔを用いてＰＶＤＦ膜へと移し、膜はＴＢＳＴ＋５％ミルクで１時間ブロッキングした後、５分間〜１０分間ＴＢＳＴで３回洗浄した。Ｃｒｉｔｅｒｉｏｎゲルを、ＴＢＳＴ＋５％ ＢＳＡ中のウサギ抗ホスホ−ｍｕ２（１：５０００、New England Peptideにより作製され、Lexiconでアフィニティー精製されたウサギポリクローナル抗体）を用いてプローブした一方で、ＮｕＰＡＧＥゲルは、ＴＢＳＴ＋５％ミルク中のマウス抗Ｆｌａｇ（１：５００、Sigma、カタログ番号Ｆ１８０４）を用いてプローブして、これらの一次抗体はロッカーにおいて４℃で一晩インキュベートした。

４日目、ウェスタンブロット膜を５分間〜１０分間ＴＢＳＴで３回洗浄して、ＴＢＳＴ＋５％ミルク中の抗ウサギ−ＨＲＰ（１：２０００、BioRad、カタログ番号１７０−６５１５）又は抗マウス−ＨＲＰ（１：２０００、Biorad、カタログ番号１７０−６５１６）を用いて室温で１時間プローブして、１０分間ＴＢＳＴで３回洗浄して、ＶｅｒｓａｄｏｃにおいてＥＣＬ試薬（GE Healthcare、カタログ番号ＲＰＮ２１３２）を用いて発光させた（developed）。最後に、１０分間３０秒毎に撮影するようにカメラを設定して、各ブロットについて飽和シグナルのない最良の画像を保存した（シグナルが飽和すると、バンドが赤色に強調表示される）。各バンドの容量分析を行い、密度値を得た。各サンプルについてのパーセント阻害を、初めに総Ｍｕ２発現レベルに正規化した後、０％対照及び１００％対照と比較することによって算出した。次いでＩＣ_５０値を、エクセルのフィッティングソフトウェアを用いて算出した。

５．６．３９． ｉｎ ｖｉｔｒｏデータ
様々な本発明の化合物で得られたｉｎ ｖｉｔｒｏデータを下記表１に提示する。表１において、「ＭＷ」は分子量を意味し、「Ｐ８１アッセイ」は上記のＰ８１フィルタープレートアッセイを表し、「ＣＢＡ」は上記のＨＥＫ２８１細胞ベースアッセイを表し、「−−」は所与のアッセイの結果が得られなかったか、又は１．０μＭを超える値であったことを意味し、「^＊」は１．０μＭ以下の値を意味し、「^＊＊」は０．１μＭ以下の値を意味し、「^＊＊＊」は０．０１μＭ以下の値を意味する。

上記に挙げられた全ての公報（例えば特許及び特許出願）はその全体が、引用することにより本明細書の一部をなす。

Claims (53)

1. アダプター関連キナーゼ１（ＡＡＫ１）活性を阻害する方法であって、ＡＡＫ１を下記式の化合物：
   

   

   （式中、
   Ｒ_１はＲ_１Ａ又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ_１Ａによるものであり、
   各Ｒ_１Ａは独立して、−ＯＲ_１Ｃ、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ_１Ｂによるものであり、
   各Ｒ_１Ｂは独立して、−ＯＲ_１Ｃ、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、シアノ又はハロであり、
   各Ｒ_１Ｃは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ又はヒドロキシルによるものであり、
   Ｒ_２は、炭素原子の１つがＣ５に結合した、任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル又は２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ_２Ｃによるものであり、
   各Ｒ_２Ｃは独立して、−ＯＲ_２Ｄ、−Ｎ（Ｒ_２Ｄ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_２Ｄ）_２、−Ｎ（Ｒ_２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシル又はＲ_２Ｄによるものであり、
   各Ｒ_２Ｄは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、又はヒドロキシルによるものであり、
   Ｒ_３は水素、又は１つ若しくは複数のシアノ、ハロ若しくはヒドロキシルで任意に置換されたＣ_１〜６アルキルである）又はその薬学的に許容可能な塩に接触させることを含む、方法。
2. ＡＡＫ１活性によって媒介される疾患又は障害を治療又は管理する方法であって、それを必要とする患者に治療的に有効な量の下記式の化合物：
   

   

   （式中、
   Ｒ_１はＲ_１Ａ又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ_１Ａによるものであり、
   各Ｒ_１Ａは独立して、−ＯＲ_１Ｃ、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ_１Ｂによるものであり、
   各Ｒ_１Ｂは独立して、−ＯＲ_１Ｃ、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、シアノ又はハロであり、
   各Ｒ_１Ｃは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ又はヒドロキシルによるものであり、
   Ｒ_２は、炭素原子の１つがＣ５に結合した、任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル又は２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ_２Ｃによるものであり、
   各Ｒ_２Ｃは独立して、−ＯＲ_２Ｄ、−Ｎ（Ｒ_２Ｄ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_２Ｄ）_２、−Ｎ（Ｒ_２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシル又はＲ_２Ｄによるものであり、
   各Ｒ_２Ｄは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、又はヒドロキシルによるものであり、
   Ｒ_３は水素、又は１つ若しくは複数のシアノ、ハロ若しくはヒドロキシルで任意に置換されたＣ_１〜６アルキルである）又はその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む、方法。
3. 前記疾患又は障害がアルツハイマー病、双極性障害、疼痛、パーキンソン病又は統合失調症である、請求項２に記載の方法。
4. 前記疼痛が神経因性疼痛である、請求項３に記載の方法。
5. 前記神経因性疼痛が線維筋痛症又は末梢神経障害（例えば糖尿病性神経障害）である、請求項４に記載の方法。
6. Ｒ_１がＲ_１Ａである、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
7. Ｒ_１が、任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビルである、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
8. Ｒ_１が、任意に置換されたフェニルである、請求項７に記載の方法。
9. Ｒ_１が、任意に置換された２員〜１２員のヘテロカルビル（例えば２員〜８員のヘテロカルビル、２員〜６員のヘテロカルビル、２員〜６員のヘテロカルビル）である、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
10. Ｒ_１が、任意に置換されたピリジニル、チオフェン又はイミダゾールである、請求項９に記載の方法。
11. Ｒ_１Ａがハロである、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
12. Ｒ_１Ａが−ＯＲ_１Ｃ、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、又は−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２である、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
13. Ｒ_１Ａが−ＯＲ_１Ｃである、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
14. Ｒ_１Ｂが−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−ＯＲ_１Ｃ、ハロである、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
15. Ｒ_１Ｃが水素である、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
16. Ｒ_１ＣがＣ_１〜１２ヒドロカルビル（例えばＣ_１〜６ヒドロカルビル、Ｃ_１〜４ヒドロカルビル、例えばメチル、エチル、プロピル）である、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
17. Ｒ_２がＣ_１〜１２ヒドロカルビルである、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
18. Ｒ_２Ｃが−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_２Ｄ）_２、又は−Ｎ（Ｒ_２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄである、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
19. Ｒ_２Ｃが−Ｃ（Ｏ）Ｒ_２Ｄである、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
20. Ｒ_２Ｄが水素である、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
21. Ｒ_２ＤがＣ_１〜１２ヒドロカルビル（例えばＣ_１〜６ヒドロカルビル、Ｃ_１〜４ヒドロカルビル、例えばメチル、エチル、プロピル）である、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
22. Ｒ_２Ｄが、少なくとも１つの窒素原子を含む２員〜１２員のヘテロカルビルである、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
23. 少なくとも１つのＲ_２Ｄが、任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビルであり、任意の置換が１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシルによるものである、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
24. Ｒ_２Ｄが、少なくとも１つの窒素原子を含む２員〜１２員のヘテロカルビルである、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
25. Ｒ_３が水素である、前記請求項のいずれか一項に記載の方法。
26. 前記化合物が下記式の化合物：
    

    

    （式中、
    Ａは環状Ｃ_１〜１２ヒドロカルビル又は４員〜７員の複素環であり、
    Ｄは炭素原子の１つがＣ５に結合した、環状Ｃ_１〜１２ヒドロカルビル又は４員〜７員の複素環であり、
    ｎは１〜３であり、
    ｍは０〜３である）又はその薬学的に許容可能な塩である、請求項１又は２に記載の方法。
27. 下記式の化合物：
    

    

    （式中、
    Ａは環状Ｃ_１〜１２ヒドロカルビル又は４員〜７員の複素環であり、
    Ｄは炭素原子の１つがＣ５に結合した、環状Ｃ_１〜１２ヒドロカルビル又は４員〜７員の複素環であり、
    各Ｒ_１Ａは独立して、−ＯＲ_１Ｃ、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のＲ_１Ｂによるものであり、
    各Ｒ_１Ｂは独立して、−ＯＲ_１Ｃ、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_１Ｃ）_２、−Ｎ（Ｒ_１Ｃ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_１Ｃ、シアノ又はハロであり、
    各Ｒ_１Ｃは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のシアノ、ハロ又はヒドロキシルによるものであり、
    各Ｒ_２Ｃは独立して、−ＯＲ_２Ｄ、−Ｎ（Ｒ_２Ｄ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ_２Ｄ）_２、−Ｎ（Ｒ_２Ｄ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ、シアノ、ハロ、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシル又はＲ_２Ｄによるものであり、
    各Ｒ_２Ｄは独立して、水素、又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、又はヒドロキシルによるものであり、
    ｎは１〜３であり、
    ｍは０〜３である）又はその薬学的に許容可能な塩。
28. Ｄがピペラジン又はピロリジンである、請求項２７に記載の化合物。
29. ｎが１である、請求項２７に記載の化合物。
30. ｍが１である、請求項２７に記載の化合物。
31. ｍが２である、請求項２７に記載の化合物。
32. Ａがピリジニル、チオフェン又はイミダゾールである、請求項２７に記載の化合物。
33. 下記式の化合物：
    

    

    （式中、ＸはＣＨ又はＮである）である、請求項２７に記載の化合物。
34. ＸがＮであり、ｍが１又は２である、請求項３３に記載の化合物。
35. 下記式の化合物：
    

    

    である、請求項２７に記載の化合物。
36. 下記式の化合物：
    

    

    である、請求項２７に記載の化合物。
37. 下記式の化合物：
    

    

    （式中、
    Ｒ_２Ｃは−Ｃ（Ｏ）Ｒ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシル又はＲ_２Ｄによるものである）である、請求項２７に記載の化合物。
38. 下記式の化合物：
    

    

    （式中、
    Ｒ_２Ｃは−Ｃ（Ｏ）Ｒ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシル又はＲ_２Ｄによるものである）である、請求項２７に記載の化合物。
39. 下記式の化合物：
    

    

    （式中、
    Ｒ_２Ｃは−Ｃ（Ｏ）Ｒ_２Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ又は任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル若しくは２員〜１２員のヘテロカルビルであり、任意の置換は１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシル又はＲ_２Ｄによるものである）である、請求項２７に記載の化合物。
40. 下記式の化合物：
    

    

    である、請求項３９に記載の化合物。
41. 下記式の化合物：
    

    

    である、請求項４０に記載の化合物。
42. 下記式の化合物：
    

    

    である、請求項４１に記載の化合物。
43. 少なくとも１つのＲ_１Ａがハロである、請求項２７〜４２のいずれか一項に記載の化合物。
44. 少なくとも１つのＲ_１Ａが−ＯＲ_１Ｃである、請求項２７〜４２のいずれか一項に記載の化合物。
45. Ｒ_１Ｃが、任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビル（例えばＣ_１〜６ヒドロカルビル、Ｃ_１〜４ヒドロカルビル）である、請求項４４に記載の化合物。
46. Ｒ_２Ｃが−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_２Ｄ又は−Ｃ（Ｏ）Ｒ_２Ｄである、請求項２７〜４２のいずれか一項に記載の化合物。
47. 少なくとも１つのＲ_２Ｄが、任意に置換されたＣ_１〜１２ヒドロカルビルであり、任意の置換が１つ又は複数のアミノ、シアノ、ハロ、ヒドロキシルによるものである、請求項４６に記載の化合物。
48. 請求項２７〜４７のいずれか一項に記載の化合物と薬学的に許容可能な賦形剤又は希釈剤とを含む医薬組成物。
49. ＡＡＫ１を請求項２７〜４７のいずれか一項に記載の化合物と接触させることを含む、ＡＡＫ１活性を阻害する方法。
50. ＡＡＫ１活性によって媒介される疾患又は障害を治療又は管理する方法であって、それを必要とする患者に治療的に有効な量の請求項２７〜４７のいずれか一項に記載の化合物又は請求項４８に記載の医薬組成物を投与することを含む、方法。
51. 前記疾患又は障害が、アルツハイマー病、双極性障害、疼痛、パーキンソン病又は統合失調症である、請求項５０に記載の方法。
52. 前記疼痛が神経因性疼痛である、請求項５１に記載の方法。
53. 前記神経因性疼痛が、線維筋痛症又は末梢神経障害（例えば糖尿病性神経障害）である、請求項５２に記載の方法。

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