MX2014010584A - Compuestos a base de imidazo[1,2,b]piridazina, composiciones que los comprenden, y metodos para su uso. - Google Patents

Compuestos a base de imidazo[1,2,b]piridazina, composiciones que los comprenden, y metodos para su uso.

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Abstract

Se describen compuestos a base de imidazo[1,2-b]piridazina de la fórmula: (ver fórmula) en donde R1, R2 y R3 se definen en la presente. También se describen composiciones que comprenden los compuestos y sus métodos de uso para tratar, manejar y/o prevenir enfermedades y trastornos mediados por la actividad de cinasa 1 asociada al adaptador.

Description

- - COMPUESTOS A BASE DE IMIDAZO [1 , 2-b] PIRIDAZINA, COMPOSICIONES QUE LOS COMPRENDEN, Y MÉTODOS PARA SU USO Esta solicitud reivindica prioridad para la solicitud provisional de patente no. 61/608,758, presentada el 9 de marzo de 2012, cuya totalidad se incorpora en la presente mediante la referencia. 1. CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se dirige a compuestos a base de imidazo [ 1 , 2-b] piridazina útiles como inhibidores de la cinasa 1 asociada al adaptador (AAK1), a las composiciones que los comprenden, y métodos de uso. 2. ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La cinasa 1 asociada al adaptador (AAKl) es un miembro de la familia Arkl/Prkl de las serina/treonina cinasas. El ARNm de AAKl existe en dos formas empalmadas denominadas corta y larga. La forma larga predomina y está altamente expresada en el cerebro y el corazón (Henderson y Conner, Mol. Biol. Cell. 2007, 18,2698-2706). La AAKl se enriquece en preparaciones sinaptosómicas y se co-localiza con estructuras endociticas en células cultivadas. La 7???1 modula la endocitosis recubierta de clatrina, un proceso importante en el reciclaje de la vesícula sináptica y la endocitosis mediada por el receptor. La AAKl se asocia con el complejo AP2, un hetero-tetrámero que une la carga del receptor con el recubrimiento de clatrina. El enlace de - - clatrina a AAK1 estimula la actividad de AAK1 cinasa (Conner et. al., Traffic (Tráfico) 2003, 4, 885-890; Jackson et. al., J. Cell Biol. 2003, 163, 231-236). La AAK1 fosforila a la subunidad mu-2 de AP-2, lo cual promueve el enlace de mu-2 a los motivos de selección que contienen tirosina en los receptores de carga (Ricotta et . al., J. Cell. Bio. 2002, 156, 791-795; Conner y Schmid, J. Cell. Bio. 2002, 156, 921-929) . La fosforilación de mu-2 no se requiere para la absorción del receptor, pero la fosforilación mejora la eficiencia de internalización (Motely et . al., Mol. Biol. Cell. 2006, 17, 5298-530.
La AAKl se ha identificado como un inhibidor de la señalización de Neuregulin-l/ErbB4 en células PC12. La pérdida de expresión de la AAKl a través del silenciado del gen mediado por la interferencia de ARN o el tratamiento con el inhibidor de cinasa K252a (el cual inhibe la actividad de la cinasa AAKl) da como resultado el potenciamiento del brote de neurita inducido por Neuregulin-1. Estos tratamientos dan como resultado un aumento en la expresión de ErbB4 y la acumulación de ErbB4 en o cerca de la membrana de plasma (Kuai et. al., Chemistry and Biology (Química y Biología) 2001, 18, 891-906) . Los genes NRG1 y ErbB4 son genes putativos de susceptibilidad a la esquizofrenia (Buonanno, Brain Res. Bull. 2010, 83, 122-131). Los SNPs en ambos genes se han asociado con múltiples endofenotipos de la - - esquizofrenia (Greenwood et. al., Am. J. Psychiatry 2011, 168, 930-946) . Los modelos de ratón KO de Neuregulin 1 y ErbB4 han mostrado cambios morfológicos y fenotipos de comportamiento relevantes en la esquizofrenia ( Jaaro-Peleted et. al., Schizophrenia Bulletin (Boletín de Esquizofrenia) 2010, 36, 301-313; Wen et . al., Proc. Nati. Acad. Sci. USA 2010, 107, 1211-1216). Además, un polimorfismo de nucleotido único en un intrón del gen AAK1 ha sido asociado con la edad de comienzo de la enfermedad de Parkinson (Latourelle et . al., BMC Med. Genet . 2009, 10, 98). Estos resultados sugieren que la inhibición de la actividad de AAK1 puede tener utilidad en el tratamiento de la esquizofrenia, el déficit cognitivo de la esquizofrenia, la enfermedad de Parkinson, el trastorno bipolar, y la enfermedad de Alzheimer. 3. SUMARIO DE LA INVENCIÓN Esta invención se dirige, en parte, a inhibidores de AAK1 de la fórmula: y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde: Ri es RiA o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más RiA; cada RÍA es independientemente - - ORic, -N(R1C)2, -C(0)Ric, C(0)ORiC, -C (O) N (Ríe) 2 , N (Rlc) C (O) ORlc, ciano, halo, o hidrocarbilo Ci_i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más RiB; cada RiB es independientemente ORic, -N(R1C)2, -C(0)Ric, -C(0)ORlc, -C (0) N (Rlc) 2, -N (Rlc) C (O) 0R1C/ ciano o halo; cada Rlc es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo Ci_12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; R2 es -NR2AR2B, en donde R2A es hidrógeno y R2B es hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más R20" o R2A y R2B se toman juntos para formar un heterociclo de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido con uno o más R2C; cada R2c es independientemente -0R2D, -N(R2D)2, -C(0)R2D, -C(0)0R2D, -C (0) N (R2D) 2, -N (R2D) C (0) 0R2D, ciano, halo o hidrocarbilo Ci_i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más R2D; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo Ci-i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; y R3 es hidrógeno o alquilo C1-6 opcionalmente sustituido con uno o más de ciano, halo o hidroxilo.
Una modalidad de la invención abarca composiciones farmacéuticas y formas de dosis que comprenden un compuesto - - descrito en la presente (i.e., un compuesto de la invención).
Otra modalidad de esta invención abarca métodos para inhibir la cinasa 1 asociada al adaptador (AAK1) , tanto in vitro como in vivo, que comprende poner en contacto la AAK1 con un compuesto de la invención.
Otra modalidad abarca métodos para tratar y manejar enfermedades y trastornos mediados por la actividad de la AAK1. Se considera que los ejemplos de tales enfermedades y trastornos incluyen enfermedad de Alzheimer, trastorno bipolar, dolor, enfermedad de Parkinson y esquizofrenia (incluyendo el déficit cognitivo de la esquizofrenia) . 4. BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS Los aspectos de la invención se ilustran en la Figura 1, que muestra los resultados obtenidos de un modelo de dolor en formalina utilizando ratones knockout AAK1 homóziguos (-/-) y su tipo silvestre (+/+) de la misma carnada. Los ratones knockout AAKl homóziguos (-/-) muestran una clara reducción en la respuesta al dolor tanto agudo como tónico en comparación con su tipo silvestre (+/+) de la misma carnada. 5. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Esta invención se basa, en parte, en el descubrimiento de que los ratones knockout AAKl exhiben una alta resistencia al dolor. Ese descubrimiento motivó la investigación que condujo finalmente al descubrimiento de los - - inhibidores de AAK1, las composiciones que los comprenden, y sus métodos de uso. 5.1 DEFINICIONES A menos que se indique de otra manera, las frases "compuestos de la invención", "compuestos de la presente descripción" y lo similar, se refieren a los compuestos descritos en la presente.
A menos que se indique de otra manera, el término "hidrocarbilo" significa un residuo alifático o aliciclico que tiene una estructura todo-carbono y que consiste de átomos de carbono e hidrógeno. Ejemplos de grupos hidrocarbilo incluyen aquellos que tienen de 1 a 20, de 1 a 12, de 1 a 6 y de 1 a 4 átomos de carbono (referidos como hidrocarbilo Ci_2o, hidrocarbilo Ci_i2, hidrocarbilo Ci_6 e hidrocarbilo Ci_4, respectivamente) . Los ejemplos particulares incluyen alquilo, alquenilo, arilo, bencilo, cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquilalquilo, cicloalquenilaquilo, naftilo, fenilo y feniletilo.
Ejemplos de residuos de alquilo incluyen residuos de cadena recta y ramificada que tienen de 1 a 20, de 1 a 12, de 1 a 6, de 1 a 4 y de 1 a 3 átomos de carbono (referidos como alquilo Ci-20f alquilo C1-12, alquilo C1-6, alquilo C1-4 y alquilo C1-3, respectivamente) . Ejemplos particulares incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, t-butilo, isobutilo, pentilo, hexilo, isohexilo, heptilo, 4,4- - - dimetilopentilo, octilo, 2, 2, 4-trimetilpentilo, nonilo, decilo, undecilo y dodecilo.
Ejemplos de residuos de alquenilo incluyen alquenilo C2_20, C2-12, Y C2-6 de cadena recta y ramificada. Ejemplos particulares incluyen vinilo, alilo, 1-butenilo, 2-butenilo, isobutilenilo, 1-pentenilo, 2-pentenilo, 3-metil-l-butenilo, 2-metil-2-butenilo, 2 , 3-dimetil-2-butenilo, 1-hexenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 1-heptenilo, 2-heptenilo, 3-heptenilo, 1-octenilo, 2-octenilo, 3-octenilo, 1-nonenilo, 2-nonenilo, 3-nonenilo, 1-decenilo, 2-decenilo y 3-decenilo.
Ejemplos de residuos de alquinilo incluyen alquinilo C2-2o, C2-i2, y C2-6 de cadena recta y ramificada. Ejemplos particulares incluyen etinilo y 2-propinilo (propargilo) .
Ejemplos de residuos de arilo incluyen antracenilo, azulenilo, fluorenilo, indano, indenilo, naftilo, fenilo y fenantrenilo .
Ejemplos de residuos de cicloalquilo incluyen cicloalquilo C3-i2, C3-7, C4_6 y C6. Ejemplos particulares incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y adamantilo.
A menos que se indique de otra manera, el término "halo" abarca flúor, cloro, bromo y yodo.
A menos que se indique de otra manera, el término "heterocarbilo" se refiere a un residuo que tiene una - - estructura constituida por uno o más átomos de carbono y uno o más heteroátomos . Los heteroátomos particulares son nitrógeno, oxigeno y azufre. Un residuo de heterocarbilo puede considerarse como un residuo de hidrocarbilo en donde al menos un átomo de carbono, un grupo CH, CH2 o CH3 se remplaza con uno o más heteroátomos y el número de átomos de hidrógeno requerido para satisfacer las valencias. Ejemplos de heterocarbilo incluyen residuos de heterocarbilo de 2 a 20, de 2 a 12, de 2 a 6 de 2 a 4 miembros, en donde el rango numérico se refiere a la suma total de átomos de carbono, nitrógeno, oxigeno y/o azufre en el residuo. El término "heterocarbilo de 2 a 12 miembros" se refiere por tanto a un residuo de heterocarbilo que tiene un total de 2 a 12 átomos de carbono, nitrógeno, oxigeno y/o azufre. Los residuos de heterocarbilo particulares incluyen heteroalquilo, heteroalquenilo y heteroalquinilo, asi como heterociclo y heteroarilo de cadena recta y ramificada.
Ejemplos de residuos de heteroalquilo incluyen residuos de heteroalquilo de 2 a 8 miembros, de 2 a 6 miembros y de 2 a 4 miembros. Los ejemplos particulares incluyen alcoxilo, acilo (e.g., formilo, acetilo, benzoilo) , alquilamino (e.g., di- (alquil Ci_3) amino) , arilamino, ariloxima, carbamatos, carbamidas, alquilcarbonilo, arilcarbonilo, aminocarbonilo, alquilaminocarbonilo, alquilsulfañilo, arilsulfañilo, alquilsulfinilo, - - arilsulfinilo, alquilsulfonilo, arilsulfonilo, alquilsulfonilamino, y arilsulfonilamino . ? menos que se indique de otra manera, el término "heterociclo" se refiere a un residuo de heterocarbilo cíclico (monocíclico o policíclico) que puede ser aromático, parcialmente aromático, o no aromático. Los heterociclos incluyen heteroarilos . Los ejemplos incluyen heterociclos de 4 a 10 miembros, 4 a 7 miembros, 6 miembros, y 5 miembros. Ejemplos particulares incluyen benzo [1, 3] dioxolilo, 2,3-dihidro-benzo [1, 4] dioxinilo, cinolinilo, furanilo, hidantoinilo, morfolinilo, oxetanilo, oxiranilo, piperazinilo, piperidinilo, pirrolidinonilo, pirrolidinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidropiridinilo, tetrahidropirimidinilo, tetrahidrotiofenilo, tetrahidrotiopiranilo y valerolactamilo . Debido a que el término "heterociclo" se refiere a un anillo, por sí solo no abarca residuos tales como oxazolidinona e imidazolidinona : tales residuos se consideran heterociclos sustituidos, viz. heterociclos sustituidos con oxo.
Ejemplos de residuos de heteroarilo incluyen acridinilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzoisotiazolilo, benzoisoxazolilo, benzoquinazolinilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, furilo, imidazolilo, indolilo, isotiazolilo, isoxazolilo, oxadiazolilo, oxazolilo, ftalazinilo, pirazinilo, pirazolilo, piridazinilo, piridilo, - - pirimidinilo, pirimidilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolinilo, tetrazolilo, tiazolilo, y triazinilo.
A menos que se indique de otra manera, el término "incluyen" tiene el mismo siqnificado que "incluyen, pero no se limitan a" y el término "incluye" tiene el mismo significado que "incluye, pero no se limita a". De manera similar, el término "tal como" tiene el mismo significado que el término "tal como, pero sin limitarse a".
A menos que se indique de otra manera, los términos "manejar", "manejando" y "manejo" abarcan prevenir la recurrencia de la enfermedad o trastorno especificado en un paciente que ya ha sufrido de la enfermedad o trastorno y/o alargar el tiempo en que permanece en remisión un paciente que ha sufrido de la enfermedad o trastorno. Los términos abarcan modular el umbral, el desarrollo y/o la duración de la enfermedad o trastorno o cambiar la manera en que responde un paciente a la enfermedad o trastorno.
A menos que se indique de otra manera, una "cantidad terapéuticamente efectiva" de un compuesto es una cantidad suficiente para proporcionar un beneficio terapéutico en el tratamiento o manejo de una enfermedad o condición, o para retrasar o minimizar uno o más síntomas asociados con la enfermedad o condición. Una "cantidad terapéuticamente efectiva" de un compuesto significa una cantidad del agente terapéutico, solo o en combinación con - - otras terapias, que proporciona un beneficio terapéutico en el tratamiento o el manejo de la enfermedad o condición. El término "cantidad terapéuticamente efectiva" puede abarcar una cantidad que mejora la terapia en general, reduce o evita los síntomas o causas de una enfermedad o condición, o aumenta la eficacia terapéutica de otro agente terapéutico.
A menos que se indique de otra manera, los términos "tratar", "tratando" y "tratamiento" contemplan una acción que se presenta mientras un paciente sufre de la enfermedad o trastorno especificado, que reduce la severidad de la enfermedad o trastorno o retrasa o retarda el progreso de la enfermedad o trastorno.
A menos que se indique de otra manera, debe considerarse que uno o más adjetivos que preceden inmediatamente una serie de sustantivos se aplican a cada uno de los sustantivos. Por ejemplo, la frase "alquilo, arilo o heteroarilo opcionalmente sustituido" tiene el mismo significado que "alquilo opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido o heteroarilo opcionalmente sustituido" . 5.2 COMPUESTOS Esta invención abarca los compuestos de la fórmula: - - y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde: Ri es RiA o hidrocarbilo C1-12 o eterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más R1A; cada RIA es independientemente ORic, -N(Ric)2, -C(0)R1C, C(0)ORlc, -C (0) N (Ric) 2, N (Ríe) C (0) 0R1C, ciano, halo, o hidrocarbilo Ci_12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más RiB; cada R1B es independientemente 0RiC, -N(Ric)2, -C(0)Ric, -C(0)0Ric, -C (0) N (Rlc) 2, -N (Rlc) C (0) 0RiC, ciano o halo; cada RiC es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; R2 es -NR2AR2B, en donde R2A es hidrógeno y R2B es hidrocarbilo Ci_i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más R2c o R2A y R2B se toman juntos para formar un heterociclo de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido con uno o más R2C; cada R2c es independientemente -0R2D, -N (R2D)2, -C(0)R2D, -C(0)0R2D, -C (0) N (R2D) 2, -N (R2D) C (0) 0R2D, ciano, halo o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, hidroxilo, o R2D; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo Ci_i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional - - es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; y R3 es hidrógeno o alquilo Ci-6 opcionalmente sustituido con uno o más de ciano, halo o hidroxilo.
En compuestos particulares, Ri es RiA. En compuestos particulares, Ri es hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido. En compuestos particulares, Ri es fenilo opcionalmente sustituido. En compuestos particulares, Ri es heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido (e.g., de 2 a 8 miembros heterocarbilo, heterocarbilo de 2 a 6 miembros, heterocarbilo de 2 a 6 miembros) . En compuestos particulares, Ri es piridinilo, tiofeno, o imidazol opcionalmente sustituido.
En compuestos particulares, Ri¾ es halo. En algunos, RiA es -ORlc, -N(RiC)2, -C(0)Ric, -C(0)0RiC, o -C(0)N(Ric)2- En algunos, R1A es -ORlc- En algunos, RiB es - N(Ric)2, -ORic, halo.
En compuestos particulares, R2A y 2B se toman juntos para formar un heterociclo de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido con uno o más R2C.
En compuestos particulares, Rlc es hidrógeno. En algunos, RiC es hidrocarbilo C1-12 (e.g., hidrocarbilo C1-6, hidrocarbilo C1- tal como metilo, etilo, propilo) .
En compuestos particulares, R2c es -C(0)OR2D, C(0)N(R2D)2, o -N (R2D) C (0)OR2D.
En compuestos particulares, R2D es hidrógeno. En - - algunos, R2D es hidrocarbilo C1-12 (e.g., hidrocarbilo C hidrocarbilo C1- tal como metilo, etilo, propilo) .
En compuestos particulares, R3 es hidrógeno.
Una modalidad de la invención abarca compuestos la fórmula: una sal farmacéuticamente aceptable mismos, en donde: A es hidrocarbilo cíclico C1-12 o heterociclo de 4 a 7 miembros; D es heterociclo de 4 a 7 miembros; cada RiA es independientemente -ORiC, - (Rlc ) 2 f C(0)Ric, -C(0)ORic, -C(0)N(Rlc)2, ~ (Ríe) C (0) ORiC, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más RiB; cada RiB es independientemente -ORiC, -N(R1C)2, -C(0)Ric, -C(0)ORic, -C(0)N(Ric)2/ -N (Ríe) C (0) 0R1C, ciano o halo; cada Ríe es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; cada R2C es independientemente -0R2D, -N(R2D)2 C(0)R2D, -C(0)OR2D, -C(0)N(R2 D) 2 , -N (R2D) C (0) OR2D, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de amino, ciano, halo, hidroxilo, o R2D; cada R2D es - - independientemente hidrógeno o hidrocarbilo Ci_i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, o hidroxilo; n es de 1 a 3; y m es de 0 a 3.
En compuestos particulares, R2c no es hidroxilo o fenilo o piridinilo opcionalmente sustituido.
En compuestos particulares, cuando D es diazepina y A es piridinilo, R2c no es -C (0) O-ter-butilo .
En compuestos particulares, cuando D es piperazina, A es fenilo y RiA es cloro, R2c no es -C (0) O-ter-butilo .
En compuestos particulares, cuando D es piperidinilo, A es piridinilo y Ri¾ es cloro, R2C no es --NHC (0) O-ter-butilo .
En compuestos particulares, cuando D es piperidinilo, A es piridinilo y RiA es -NHCH2CH2CH (CH3) 2, R2c no es NH2.
Una modalidad de la invención abarca compuestos de la fórmula: y una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en donde: A es hidrocarbilo cíclico C1-12 o heterociclo de 4 a 7 miembros; D es heterociclo de 4 a 7 miembros; cada RiA es independientemente -ORic, -N(RiC)2, - - C(0) ic, -C(0)ORic, -C(0)N(Ric)2, -N (Ríe) C (O) 0RiC, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más RiB; cada RiB es independientemente -0Ric, -N(RiC)2, ~ C(0)Rlc, -C(0)0Ric, -C(0)N(Rlc)2, -N (Rlc) C (0) 0RiC, ciano o halo; cada Ríe es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; cada R2C es independientemente -OR2D/ _ (R2D)2/ C(0)R2D, -C(0)0R2D, -C(0)N(R2D)2f -N ( R2D) C (0) 0R2D, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, hidroxilo, o R2D; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de amino, ciano, halo, o hidroxilo; n es de 1 a 3; y m es de 0 a 3.
En compuestos particulares abarcados por esta modalidad: 1) R2C no es hidroxilo o fenilo o piridinilo opcionalmente sustituido; 2) cuando D es diazepina y A es piridinilo, R2C no es —C (0) O-ter-butilo; 3) cuando D es piperazina, A es fenilo y RiA es cloro, R2C no es -C(0) 0-ter-butilo; 4) cuando D es piperidinilo, A es piridinilo y Ri¾ es cloro, R2c no es -NHC (0) O-ter-butilo; y 5) cuando D es piperidinilo, A es piridinilo y R1A es -NHCH2CH2CH (CH3) 2, R2C no es NH2.
En compuestos particulares, D es piperazina pirrolidina .
En compuestos particulares, n es 1.
En compuestos particulares, m es 1 o 2.
En compuestos particulares, A es piridinilo, tiofeno, o imidazol.
Los compuestos particulares de la invención son de la fórmula: en donde X es CH o N. En una modalidad, X es N y m es 1 o 2.
Una modalidad de la invención abarca compuestos de la fórmula: una sal farmacéuticamente aceptable mismos, en donde: X es CH o N; cada R1A es independientemente -ORic, -N(R1C)2, -C(0)Ric, -C(0)ORiC, -C (0) N (Ríe) 2/ N (Ríe) C (0) ORic, ciano, halo, o hidrocarbilo Ci_i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más RIB; cada RiB es - - independientemente -ORiC, - (Ric)2 -C(0)RiC, -C(0)ORic, C(0)N(Ric)2, -N (Ríe) C (O) ORic, ciano o halo; cada RiC es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo Ci_i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; cada R2c es independientemente -OR2D, _N(R2D)2, C(0)R2D, -C(0)OR2D, -C(0)N(R2D)2, -N (R2D) C (0) OR2D, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, hidroxilo, o R2D; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo Ci_i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, o hidroxilo; y m es de 0 a 3.
En algunos compuestos de esta modalidad, 2c no es fenilo o piridinilo opcionalmente sustituido.
Los compuestos particulares de la invención son de la fórmula: Los compuestos particulares de la invención son de la fórmula: Los compuestos particulares de la invención son de la fórmula: Los compuestos particulares de la invención son de la fórmula: Una modalidad de la invención abarca compuestos fórmula : y una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en donde: X es CH o N; cada RiA es independientemente -O ic, -N(R1C)2, -C(0)Ric, -C(0)ORlc, -C (0) N ( Rlc) 2, N (Ríe) C (0) ORic, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o eterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, - - cuya sustitución opcional es con uno o más RiB; cada RiB es independientemente -ORiC, -N(RiC)2, -C(0)RiC, -C(0)ORiC, C(0)N(Ric)2, - (Ríe) C (O) ORic, ciano o halo; cada Rxc es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; cada R2C es independientemente -OR2D, _N(R2D)2/ C(0)R2D, -C(0)OR2D, -C(0)N(R2d)2, -N(R2D)C(0)OR2d, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, hidroxilo, o R2D; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, o hidroxilo; y n es de 0 a 3.
En algunos compuestos de esta modalidad, cuando X es CH, m es 1 y Ri¾ es cloro, R2D no es t-butilo.
En algunos compuestos de esta modalidad, R2C no es fenilo o piridinilo opcionalmente sustituido.
Los compuestos particulares de la invención son de la fórmula: - - En algunos, m es 1 o 2.
Los compuestos particulares de la invención son de la fórmula: Otros son En compuestos particulares, RiA es -0Ric.
En compuestos particulares, RiC es hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido (e.g., hidrocarbilo Ci_6, hidrocarbilo Ci-4) .
En compuestos particulares, R2C es -C(0)0R2D, C(0)N(R2D)2, o -N (R2D) C (0) OR2D. En otros, R2C es -C(0)R2D.
En compuestos particulares, cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo Ci_i2 (e.g., hidrocarbilo Ci-6, hidrocarbilo Ci-4) . En otros, R2D es heterocarbilo de 2 a 12 miembros que comprende al menos un átomo de nitrógeno.
Los compuestos de la invención pueden tener uno o más centros asimétricos. A menos que se indique de otra manera, esta invención abarca todos los estereoisómeros de - - los compuestos, así como mezclas de los mismos. Los estereoisómeros individuales de los compuestos pueden prepararse sintéticamente a partir de materiales de inicio comercialmente disponibles que contienen centros quirales o mediante la preparación de mezclas de productos enantioméricos seguida por separación tal como la conversión en una mezcla de diastereómeros seguida por separación o recristalización, técnicas cromatográficas , o separación directa de enantiómeros en columnas cromatográficas quirales. Los compuestos de inicio de la estereoquímica particular se encuentran ya sea comercialmente disponibles o pueden producirse y disolverse mediante técnicas conocidas en la técnica .
Ciertos compuestos de la presente descripción pueden existir también en diferentes formas conformacionales estables que pueden separarse. La asimetría torsional debida a la restringida rotación alrededor de un enlace asimétrico único, por ejemplo, debido a la obstrucción esférica o a la tensión del anillo, puede permitir la separación de diferentes conformadores. La presente descripción incluye cada isómero conformacional de estos compuestos y mezclas de los mismos.
La presente descripción pretende incluir todos los isótopos de átomos que se presentan en los presentes compuestos. Los isótopos incluyen aquellos átomos que tienen - - el mismo número atómico pero diferentes números de masas. A modo de ejemplo general y sin limitación, los isótopos de hidrógeno incluyen deuterio y tritio. Los isótopos de carbono incluyen 13C y 14C. Los compuestos isotópicamente etiquetados de la invención pueden prepararse generalmente mediante técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica o mediante procesos análogos a los descritos en la presente, utilizando un reactivo isotópicamente etiquetado en lugar del reactivo no etiquetado de otra manera empleado. Tales compuestos pueden tener una variedad de usos potenciales, por ejemplo, como estándares y reactivos para determinar la actividad biológica. En el caso de isótopos estables, tales compuestos pueden tener el potencial para modificar favorablemente las propiedades biológicas, farmacológicas o farmacocinéticas .
Los compuestos de la presente descripción pueden existir como sales farmacéuticamente aceptables. El término "sal farmacéuticamente aceptable" como se utiliza en la presente, representa sales o formas zwitteriónicas de los compuestos de la presente descripción que son solubles o dispersables en agua o en aceite, que son, dentro del alcance del juicio médico, adecuadas para su uso en contacto con los tejidos de los pacientes sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica u otros problemas o complicaciones proporcionales a una proporción razonable de riesgo/beneficio - - y que son efectivas para el uso pretendido. Las sales pueden prepararse durante el aislamiento y la purificación final de los compuestos o por separado haciendo reaccionar un átomo de nitrógeno adecuado con un ácido adecuado. Las sales de adición de ácido representativas incluyen acetato, adipato, alginato, citrato, aspartato, benzoato, bencenosulfonato, bisulfato, butirato, canforato, canforsulfonato; digluconato, dihidrobromuro, dihidrocloruro, dihidroyoduro, glicerofosfato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, formato, fumarato, hidrocloruro, hidrobromuro, hidroyoduro, 2-hidroxietanosulfonato, lactato, maleato, mesitilenosulfonato, metanosulfonato, naftilenosulfonato, nicotinato, 2-naftalenosulfonato, oxalato, palmoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, tartrato, tricloroacetato, trifluoroacetato, fosfato, glutamato, bicarbonato, para-toluenosulfonato, y undecanoato. Ejemplos de ácidos que pueden emplearse para formar sales de adición farmacéuticamente aceptables incluyen ácidos orgánicos tales como clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico y fosfónico y ácidos orgánicos tales como oxálico, maleico, succínico y cítrico.
Las sales de adición básicas pueden prepararse durante el aislamiento y la purificación final de los compuestos haciendo reaccionar un grupo carboxi con una base adecuada tal como el hidróxido, carbonato o bicarbonato de un - - catión de metal o con amoniaco o una amina orgánica primaria, secundaria o terciaria. Los cationes de sales farmacéuticamente aceptables incluyen litio, sodio, potasio, calcio, magnesio, y aluminio, asi como cationes de amina cuaternaria no tóxicos tales como amonio, tetrametilamonio, tetraetilamonio, metilamina, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina, detilamina, etilamina, tributilamina, piridina, N, -dimetilanilina, N-metilpiperidina, N-metilmorfolina, diciclohexilamina, procaina, dibencilamina, N,N-dibencilfenetilamina y N, N' -dibenciletilenodiamina . Otras aminas orgánicas representativas útiles para la formación de sales de adición de base incluyen etilenodiamina, etanolamina, dietanolamina, piperidina y piperazina.
Los compuestos particulares de la invención inhiben la AAK1 con una IC50 menor que 0.1, 0.01 o 0.001 µ? medida en el análisis de placa de filtro P81 descrito más adelante en los Ejemplos. Los compuestos particulares de la invención inhiben la AAK1 con una IC50 menor que 0. lm 0.01 o 0.001 µ medida en el análisis a base de células HEK281 descrito más adelante en los Ejemplos. 5.3. MÉTODOS DE SÍNTESIS Los compuestos de la invención pueden prepararse utilizando métodos conocidos por los expertos en la técnica. Los compuestos particulares son de la fórmula general: - - en donde Ri, R2 y R3 se definen en la presente. Estos compuestos pueden prepararse mediante los métodos descritos más adelante.
En el Esquema 1, el cloro o el flúor de un compuesto de la fórmula 1 se desplaza con una amina para producir 2. Para algunos ejemplos, el halógeno en 1 puede hidrolizarse para proporcionar 3, y después hacerse reaccionar con amina para proporcionar 2. El acoplamiento Suzuki de 2 con un ácido borónico o éster apropiado [ 3B(OR)2 proporciona compuestos de la fórmula 4. El compuesto 2 también puede convertirse en su ácido borónico correspondiente 5, que puede acoplarse con el bromuro apropiado para proporcionar 4. Alternativamente, el acoplamiento Suzuki de 1 con un ácido borónico o éster apropiado [R3B(OR)2] proporciona compuestos de la fórmula 6, cuyo halógeno puede desplazarse para producir 4.
- - Esquema 1 El esquema 2 representa un procedimiento útil en la preparación de los compuestos de 3-bromo-6-fluoroimidazo [ 1 , 2-b]piridazina de la fórmula la. La 3 , 6-dicloropiridazina 7 se convierte en 3, 6-difluoropiridazina 8 haciendo reaccionar 7 con KF secado por aspersión en DMSO a 135°C. El desplazamiento de uno de los flúors de 8 mediante NH4OH en un tubo sellado caliente genera 9. El ciclado de 9 con cloroacetaldehido proporciona el intermediario 10. La bromación de 10 proporciona la.
Esquema 2 - - El esquema 3 muestra un método para preparar los compuestos de 3-bromo-6-cloroimidazo [1, 2-b] piridazina 4- o 5-sustituidos de la fórmula Ib. El desplazamiento de uno de los cloros de 11 por medio de 2, 4-dimetoxibencilamina genera una mezcla de regio-isómeros de 12, los cuales se separan. El retiro del grupo 2 , 4-dimetoxibencil produce 13. El ciclado de 13 con cloroacetaldehido proporciona el intermediario 14. La bromación de 14 proporciona Ib.
El esquema 4 muestra un procedimiento útil en la preparación de los compuestos de la invención en donde R2 es arilo. Aqui, el acoplamiento Suzuki del compuesto 15 con un ácido borónico o éster apropiado [R3B(OR)2] proporciona 16. La bromación de 16 proporciona el intermediario 17. El segundo acoplamiento Suzuki proporciona el compuesto 18.
- - Esquema 4 El esquema 5 describes la preparación de los compuestos de la fórmula 20. El cloro o el flúor de un compuesto de la fórmula 1 se desplaza con un tiol para producir 19. El acoplamiento Suzuki de 19 con un ácido borónico o éster apropiado [RIB(OR)2] proporciona compuestos de la fórmula 20.
Esquema 5 Los compuestos de la fórmula 21, 22 y 23 pueden prepararse mediante los métodos descritos en el Esquema 6. El bromo de un compuesto de la fórmula 2 se desplaza con un grupo ciano para producir 21. La hidrólisis del grupo ciano en 21 proporciona el ácido 22. El acoplamiento regular de amida del ácido 22 proporciona la amida 23.
- - Esquema 6 El esquema 7 describe un método para preparar los compuestos 26, 27 y 30. En este procedimiento, el grupo amina de un compuesto de la fórmula 24 se hace reaccionar con cloruro de acetilo en condiciones básicas para proporcionar 25. El desplazamiento de amina del cloro en 25 proporciona los compuestos con la fórmula 26 y 27. El grupo amina en 24 también puede hacerse reaccionar con un cloruro de acilo portador de un grupo terminal de partida, tal como bromo, para proporcionar 28. El ciclado intra-molecular de 28 bajo fuertes condiciones básicas proporciona el intermediario 29. El desplazamiento de amina del cloro en 29 proporciona compuestos de la fórmula 30.
Esquema 7 Descritos en el Esquema 8 se encuentran procedimientos útiles para preparar los compuestos de las fórmulas 33 y 35. Aquí, la reducción de la función del aldehido en el compuesto 31 proporciona el alcohol 32. El desplazamiento del cloro en 32 proporciona compuestos de la fórmula 33. La conversión del carbonilo de 31 en difluorometilo proporciona 34. El desplazamiento del cloro en 34 proporciona los compuestos con la fórmula 35.
- - Los compuestos macrocíclicos pueden prepararse de acuerdo con el Esquema 9. El desplazamiento del flúor en la con una amina cuidadosamente ensamblada que posee un aril bromuro terminal proporciona el compuesto 36. El acoplamiento tipo Suzuki intra-molecular de 36 proporciona el compuesto macrociclico 37.
Esquema 9 - - 5.4. MÉTODOS DE USO Una modalidad de esta invención abarca métodos para inhibir la cinasa 1 asociada al adaptador (AAK1), tanto in vitro como in vivo, que comprenden poner en contacto la AAK1 con un compuesto de la invención.
Otra modalidad abarca métodos para tratar y manejar enfermedades y trastornos mediados por la actividad de AAK1. Las enfermedades y trastornos mediados por la actividad de la AAK1 son enfermedades y trastornos que tienen al menos un síntoma, cuya severidad o manifestación se afecta por la actividad de AAK1. Se considera que los ejemplos de tales enfermedades y trastornos incluyen enfermedad de Alzheimer, trastorno bipolar, dolor, enfermedad de Parkinson, y esquizofrenia (incluyendo déficits cognitivos en la esquizofrenia) . Los métodos particulares comprenden administrar a un paciente (un humano u otro mamífero) que lo necesita una cantidad terapéutica o profilácticamente efectiva de un inhibidor de AAK1 (e.g., un compuesto descrito en la presente) .
Otra modalidad de esta invención abarca un método para tratar o manejar una enfermedad o trastorno, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad terapéutica o profilácticamente efectiva de un inhibidor de AAK1, en donde la enfermedad o trastorno es enfermedad de Alzheimer, trastorno bipolar, dolor, enfermedad - - de Parkinson, y esquizofrenia (incluyendo déficits cognitivos en la esquizofrenia) . Los tipos de dolor particulares incluyen dolor crónico, dolor agudo, y dolor neuropático. Los tipos de dolor neuropático particulares incluyen fibromialgia y neuropatía periférica (e.g., neuropatía diabética) .
Cuando se utilizan para tratar o manejar una enfermedad o trastorno, los compuestos de la invención se administran preferentemente como parte de una composición farmacéutica que comprende uno o más vehículos, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.
Las composiciones o formulaciones farmacéuticas pueden presentarse en formas de dosis unitaria conteniendo una cantidad predeterminada del ingrediente activo por dosis unitaria. Los niveles de dosis de entre aproximadamente 0.01 y aproximadamente 250 miligramos por kilogramo ("mg/kg") de peso corporal por día, preferentemente entre aproximadamente 0.05 y aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal por día de los compuestos de la presente descripción son típicos en la monoterapia para la prevención y el tratamiento de enfermedades. Típicamente, las composiciones farmacéuticas de esta descripción se administrarán de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 veces por día o alternativamente, como una infusión continua. Tal administración puede utilizarse como terapia crónica o aguda. La cantidad del ingrediente activo - - que puede combinarse con los materiales vehículo para producir una forma de dosis única variarán dependiendo de la condición que se trata, de la severidad de la condición, del tiempo de administración, la vía de administración, la tasa de excreción del compuesto empleado, la duración del tratamiento y de la edad, el género, el peso y la condición del paciente. Las formulaciones de dosis unitaria preferidas son aquellas que contienen una dosis o sub-dosis diaria, como se citó anteriormente en la presente, o una fracción apropiada de la misma, de un ingrediente activo. El tratamiento puede iniciarse con pequeñas dosis sustancialmente menores que la dosis óptima del compuesto. Después, la dosis se incrementa en pequeños incrementos hasta lograr el efecto óptimo bajo las circunstancias. En general, el compuesto se administra de manera más deseable a un nivel de concentración que proporcionará generalmente resultados efectivos sin ocasionar ningún efecto secundario dañino o perj udicial .
Los compuestos de la invención pueden administrarse en combinación con uno o más agentes terapéuticos o profilácticos. Por ejemplo, cuando se utilizan para el tratamiento del dolor, los agentes adicionales posibles incluyen agentes inmunosupresores y anti-inflamatorios .
Los inmunosupresores adecuados para su uso en los métodos y composiciones de esta invención incluyen los - - conocidos en la técnica. Los ejemplos incluyen aminopterina, azatioprina, ciclosporina A, D-penicilamina, sales de oro, hidroxicloroquinona, leflunomida, metotrexato, nimociclina, rapamicina, sulfasalazina, tacrolimus (FK506) y sus sales farmacéuticamente aceptables. Un inmunosupresor particular es metotrexato.
Ejemplos adicionales incluyen anticuerpos anti-TNF, tales como adalimumab, certolizumab pegol, etanercept e infliximab. Otros incluyen bloqueadores de interleucina 1, tales como anakinra. Otros incluyen anticuerpos anti célula B (CD20) , tales como rituximab. Otros incluyen bloqueadores de activación de célula T, tales como abatacept.
Ejemplos adicionales incluyen inhibidores de inosina monofosfato deshidrogenasa, tales como mofetil micofenolato (CellCept®) y ácido micofenólico (Myfortic®) .
Los fármacos anti-inflamatorios adecuados para su uso en los métodos y composiciones de esta invención incluyen aquellos conocidos en la técnica. Los ejemplos incluyen glucocorticoides y NSAIDs.
Ejemplos de glucocorticoides incluyen aldosterona, beclometasona, betametasona, cortisona, desoxicorticosterona, dexametasona, fludrocortisonas, hidrocortisona, metilprednisolona, prednisolona, prednisona, triamcinolona, y sus sales farmacéuticamente aceptables.
Ejemplos de NSAID incluyen salicilatos (e.g., - - aspirina, amoxiprina, benorilato, salicilato de colina magnesio, diflunisal, faislamina, metil salicilato, salicilato de magnesio, salicil salicilato, y sus sales farmacéuticamente aceptables), ácidos arilalcanoicos (e.g., diclofenaco, aceclofenaco, acemetacina, bromfenaco, etodolaco, indometacina, nabumetona, sulindaco, tolmetina, y sus sales farmacéuticamente aceptables) , ácidos arilpropiónicos (e.g., ibuprofeno, carprofeno, fenbufeno, fenoprofeno, flurbiprofeno, cetoprofeno, cetorolaco, loxoprofeno, naproxeno, oxaprozina, ácido tiaprofénico, suprofeno, y sus sales farmacéuticamente aceptables) , ácidos arilantranilicos (e.g., ácido meclofenámico, ácido mefenámico, y sus sales farmacéuticamente aceptables) , derivados de pirazolidina (e.g., azapropazona, metamizol, oxifenbutazona, fenilbutazona, sulfinprazona, y sus sales farmacéuticamente aceptables), oxicamos (e.g., lornoxicam, meloxicam, piroxicam, tenoxicam, y sus sales farmacéuticamente aceptables), inhibidores de COX-2 (e.g., celecoxib, etoricoxib, lumiracoxib, parecoxib, rofecoxib, valdecoxib, y sus sales farmacéuticamente aceptables), y sulfonanilidas (e.g., nimesulida y sus sales farmacéuticamente aceptables) .
Otros agentes utilizados en el tratamiento del dolor (incluyendo pero sin limitarse a dolor neuropático e inflamatorio) incluyen agentes tales como pregabalina, - - lidocaina, duloxetina, gabapentina, carbamazepina, capsaicina, y otros inhibidores de reabsorción de serotonina/norepinefrina/dopamina, y opiatos (tales como oxicontina, morfina, y codeina) .
En el tratamiento del dolor ocasionado por una enfermedad o condición conocida, tal como diabetes, infección (e.g., herpes zoster o infección por VIH) o cáncer, los compuestos de la invención pueden administrarse en combinación con uno o más agentes terapéuticos o profilácticos adicionales dirigidos a la enfermedad o condición subyacente. Por ejemplo, cuando se utilizan para tratar neuropatía diabética, los compuestos de la invención pueden administrarse en combinación con uno o más agentes antidiabéticos, agentes anti-hiperglucémicos , agentes hipolipidémicos/de disminución de lípidos, agentes antiobesidad, agentes anti-hipertensivos y supresores del apetito. Ejemplos de tales agentes anti-diabéticos incluyen biguanidas (e.g., metformina, fenformina) , inhibidores de glucosidasa (e.g., acarbosa, miglitol), insulinas (incluyendo secretagoguos de insulina y sensibilizadores de insulina) , meglitinidas (e.g., repaglinida) , sulfonilureas (e.g., glimepirida, gliburida, gliclazida, clorpropamida, y glipizida) , combinaciones de biguanida/gliburida (e.g., Glucovance), tiazolidinadionas (e.g., troglitazona, rosiglitazona, y pioglitazona) , agonistas de PPAR-alfa, - - agonistas de PPAR-gamma, agonistas dobles de PPAR alfa/gamma, inhibidores de glicogén fosforilasa, inhibidores de proteina de enlace de ácido graso (aP2), péptido 1 tipo glucagón (GLP-1) u otros agonistas del receptor de GLP-1, inhibidores de dipeptidil peptidasa IV (DPP4), e inhibidores del co-ransportador 2 de sodio-glucosa (SGLT2) (e.g., dapagliflozina, canagliflozina, y LX-4211) . 5.5 COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS Las formulaciones farmacéuticas pueden adaptarse para su administración mediante cualquier vía apropiada, por ejemplo, por medio de via oral (incluyendo bucal o sublingual) , rectal, nasal, tópica (incluyendo bucal, sublingual, o transdérmica) , vaginal o parenteral (incluyendo inyecciones o infusiones subcutáneas, intracutáneas, intramusculares, intra-articulares, intra-sinoviales, intra-esternales, intratecales, intra-lesionales, intravenosas o intradérmicas) . Tales formulaciones pueden prepararse mediante cualquier método conocido en la técnica farmacéutica, por ejemplo, poniendo el ingrediente activo en asociación con el (los) vehículo (s) o excipiente (s) . Se prefiere la administración oral o la administración por inyección.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración oral pueden presentarse como unidades separadas tales como cápsulas o tabletas; polvos o gránulos; - - soluciones o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; espumas o batidos comestibles o emulsiones líquidas de aceite en agua o emulsiones de agua en aceite.
Por ejemplo, para administración oral en forma de una tableta o cápsula, el componente de fármaco activo puede combinarse con un vehículo inerte, oral, no tóxico, farmacéuticamente aceptable tal como etanol, glicerol, agua y lo similar. Los polvos se preparan triturando el compuesto hasta un tamaño fino adecuado y mezclando con un vehículo farmacéutico similarmente triturado tal como un carbohidrato comestible como, por ejemplo, almidón o manitol. También puede estar presente un agente saborizante, conservador, dispersante y colorante.
Las cápsulas se producen preparando una mezcla de polvo, como se describió anteriormente, y llenando las cubiertas de gelatina formadas. Pueden agregarse deslizantes y lubricantes tales como sílice coloidal, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio, o polietilenglicol sólido a la mezcla en polvo antes de la operación de llenado. También puede agregarse un agente desintegrador o de solubilidad tal como agar-agar, carbonato de calcio, o carbonato de sodio para mejorar la disponibilidad del medicamento cuando se ingiere la cápsula.
Además, cuando se desea o se necesita, también pueden incorporarse en la mezcla aglutinantes, lubricantes, - - agentes de desintegración y agentes colorantes adecuados. Los aglutinantes adecuados incluyen almidón, gelatina, azúcares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas tales como acacia, tragacanto, o alginato de sodio, carboximetilcelulosa, polietilenglicol, y lo similar. Los lubricantes utilizados en estas formas de dosis incluyen oleato de sodio, cloruro de sodio y lo similar. Los desintegradores incluyen, sin limitación, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, goma de xantano, y lo similar. Las tabletas se formulan, por ejemplo, preparando una mezcla de polvo, granulando o triturando, agregando un lubricante y un desintegrador y prensando en tabletas. Se prepara una mezcla de polvo mezclando el compuesto, adecuadamente triturado, con un diluyente o base como se describió anteriormente, y opcionalmente, con un aglutinante tal como carboximetilcelulosa, un alginato, gelatina o polivinil pirrolidona, una solución retardadora tal como parafina, un acelerador de reabsorción tal como una sal cuaternario y/o un agente de absorción tal como bentonita, caolín o fosfato dicálcico. La mezcla de polvos puede granularse humedeciendo con un aglutinante tal como un jarabe, pasta de almidón, mucílago de acadia o soluciones de celulosa o materiales poliméricos y presionarse a través de un tamiz. Como una alternativa a la granulación, la mezcla - - de polvos puede correrse a través de la máquina para tabletas y el resultado es trozos imperfectamente formados rotos en gránulos. Los gránulos pueden lubricarse para evitar la adhesión de la tableta a los troqueles de formación por medio de la adición de ácido esteárico, sal de estearato, talco, o aceite mineral. La mezcla lubricada se comprime entonces en tabletas. Los compuestos de la presente descripción también pueden combinarse con un vehículo de flujo libre y comprimirse en tabletas directamente sin pasar por las etapas de granulación o trituración. Puede proporcionarse un recubrimiento protector transparente u opaco que consiste de un revestimiento sellador de laca, un revestimiento de azúcar o material polimérico, y un revestimiento pulidor de cera. Pueden agregarse tintes a estos revestimientos para distinguir diferentes dosis unitarias.
Los fluidos orales tales como soluciones, jarabes y elíxires pueden prepararse en forma de dosis unitaria de manera que una cantidad dada contenga una cantidad predeterminada del compuesto. Los jarabes pueden prepararse disolviendo el compuesto en una solución acuosa adecuadamente saborizada, mientras los elíxires se preparan mediante el uso de un vehículo no tóxico. También pueden agregarse solubilizantes y emulsionantes tales como alcoholes de isostearilo etoxilados y éteres de polioxietileno sorbitol, conservadores, aditivos de sabor tales como aceite de menta o - - edulcorantes naturales, o sacarina u otros edulcorantes artificiales, y lo similar.
Cuando sea apropiado, las formulaciones en dosis unitaria para administración oral pueden micro-encapsularse . La formulación también puede prepararse para prolongar o sostener la liberación como, por ejemplo, recubriendo o embebiendo el material particulado en polímeros, cera, o lo similar .
Los compuestos de la Fórmula (I), y sus sales farmacéuticamente aceptables, también pueden administrarse en forma de sistemas de suministro de liposomas, tales como pequeñas vesículas unilaminales, grandes vesículas unilaminales y vesículas multilaminales . Los liposomas pueden formarse a partir de una variedad de fosfolípidos, tales como colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas .
Los compuestos de la Fórmula (I) y sus sales farmacéuticamente aceptables también pueden suministrarse mediante el uso de anticuerpos monoclonales como vehículos individuales a los cuales se acoplan las moléculas del compuesto. Los compuestos también pueden acoplarse con polímeros solubles como vehículos de fármaco direccionables . Tales polímeros pueden incluir polivinilpirrolidona, copolímero de pirano, polihidroxipropilmetacrilamidafenol, polihidroxietilaspartamidafenol, o polietilenooxidopolilisina sustituida con residuos de palitoilo. Además, los compuestos - - pueden acoplarse a una clase de polímero biodegradable útil para lograr la liberación controlada de un fármaco, por ejemplo, ácido poliláctico, polepsilon caprolactona, ácido polihidroxi butírico, poliortoésteres, poliacetales, polidihidropiranos , policianoacrilatos, y copolímeros de bloque de hidrogeles reticulados o anfifáticos.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración transdérmica pueden presentarse como parches separados destinados a permanecer en íntimo contacto con la epidermis del receptor durante un prolongado período de tiempo. Por ejemplo, el ingrediente activo puede suministrarse desde el parche mediante iontoforesis como se describe generalmente en Pharmaceutical Research (Investigación Farmacéutica) 1986, 3(6), 318.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración tópica pueden formularse como ungüentos, cremas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, rocíos, aerosoles o aceites.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración rectal pueden presentarse como supositorios o como enemas .
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración nasal en donde el vehículo es un sólido incluyen un polvo grueso que tiene un tamaño de partícula, por ejemplo, en el rango de 20 a 500 mieras que se administra - - de la manera en que se inhala el tabaco en polvo, i.e., mediante inhalación rápida a través del pasaje nasal desde el contenedor del polvo manteniéndolo cerca de la nariz. Las formulaciones adecuadas en donde el vehículo es un líquido, para administración como un rocío nasal o gotas nasales, incluyen soluciones acuosas u oleosas del ingrediente activo.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración mediante inhalación incluyen polvos o rocíos en partículas finas, que pueden generarse por medio de varios tipos de aerosoles, nebulizadores o insufladores presurizados de dosis medida.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración vaginal pueden presentarse como formulaciones en pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o espray.
Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración parenteral incluyen soluciones para inyección estériles acuosas y no acuosas que pueden contener antioxidantes, amortiguadores, bacteriostatos y solutos que hacen la formulación isotónica con la sangre del receptor destinado, y suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes. Las formulaciones pueden presentarse en contenedores de dosis unitaria o de dosis múltiple, por ejemplo, ámpulas y viales sellados, y pueden almacenarse en una condición secada por - - congelación (liofilizada) que solamente requiere la adición del vehículo líquido estéril, por ejemplo, agua para inyecciones, inmediatamente antes de su uso. Pueden prepararse soluciones y suspensiones para inyección extemporánea a partir de polvos, gránulos y tabletas estériles .
Debe entenderse que además de los ingredientes particularmente mencionados anteriormente, las formulaciones pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica teniendo en cuenta el tipo de formulación en cuestión, por ejemplo, aquellas adecuadas para administración oral pueden incluir agentes saborizantes . 5.6. EJEMPLOS Ciertos aspectos de la invención pueden entenderse a partir de los siguientes ejemplos. 5.6.1. Ratones Knockout AAK1 Se prepararon ratones homóziguos (-/-) para el rompimiento del gen de AAK1 mediante dos métodos; atrapamiento de gen y recombinación homologa.
El atrapamiento de gen es un método de mutagénesis de inserción aleatoria que utiliza un fragmento de codificación del ADN para un gen marcador informante o seleccionable como un mutágeno. Los vectores de atrapamiento de gen se han diseñado para integrarse en intrones o genes de manera que permiten que la maquinaria de empalme celular - - empalme los exones codificados por el vector a ARNms. Comúnmente, los vectores de atrapamiento de gen contienen secuencias de marcador selecciónateles precedidas por fuertes secuencias aceptor de empalme y no precedidas por un promotor. Por tanto, cuando tales vectores se integran en un gen, la maquinaria de empalme celular empalma los exones provenientes del gen atrapado sobre el extremo 5' de la secuencia de marcador seleccionable . Típicamente, tales genes de marcador seleccionable solamente pueden ser expresados si el vector que codifica para el gen se ha integrado en un intrón. Los eventos de atrapamiento de gen resultantes se identifican subsecuentemente seleccionando células que pueden sobrevivir al cultivo selectivo.
Células madre embrionarias (células Lex.l provenientes de la cepa murina derivada A129) , se mutaron mediante un proceso que implica la inserción de al menos una porción de la secuencia del vector genéticamente fabricada en el gen de interés, las células madre embrionarias mutadas se micro-inyectaron en blastocitos que subsecuentemente se introdujeron en huéspedes hembra pseudo-preñadas y se llevaron a término utilizando métodos establecidos. Ver, e.g., " ouse utagenesis" (Mutagénesis de Ratón) 1998, Zambrowicz et al., eds., Lexicón Press, The Woodlands, TX. Los animales quiméricos resultantes se criaron subsecuentemente para producir progenie con la capacidad de - - transmitir la linea germinal de un alelo conteniendo la mutación fabricada en un gen de interés.
También se produjeron ratones de gen AKK1 roto mediante recombinación homologa. En este caso, el segundo exón de codificación del gen AAKl murino (ver número de acceso del GenBank NM_177762) se retiró mediante métodos conocidos en la técnica. Ver, e.g., Patentes de E.ü. Nos. 5,487,992, 5,627,059 y 5,789,215.
Se estudiaron ratones homóziguos (-/-) para el rompimiento del gen AAKl en conjunción con ratones heteróziguos (+/-) para el rompimiento del gen AAKl y de tipo silvestre (+/+) de la misma carnada. Durante este análisis, los ratones fueron sometidos a una revisión médica utilizando un conjunto integrado de procedimientos de diagnóstico médico diseñados para evaluar la función de los sistemas de órganos mayores en un sujeto mamífero. Se estudiaron ratones "knockout" homóziguos (-/-) en conjunción con los heteróziguos (+/-) y de tipo silvestre (+/+) de la misma carnada. El rompimiento del gen AAKl se confirmó mediante análisis Southern. La expresión del homólogo murino de AAKl se detectó mediante RT-PCR en cerebro murino; médula espinal; ojo; timo; bazo; pulmón; riñon; hígado; músculo esquelético; hueso; estómago; intestino delgado y colon; corazón; adiposo; pulmón asmático; hígado LPS; sangre; corazón encintado; árbol aórtico; próstata; y glándula mamaria (virgen de 5 semanas, - - virgen maduro, DPC 12, 3 dias post-parto (lactante), 3 días después del destete (involución temprana) y 7 dias después del destete (involución tardía) ) .
Los homóziguos de AAKl (-/-) y los tipos silvestres (+/+) de la misma carnada se probaron utilizando la prueba de formalina en pata a fin de evaluar sus respuestas nociceptivas agudas y tónicas. Para estas pruebas, se utilizaron Automatic Nociception Analyzers (adquiridos del Okazi lab en la Universidad de California, San Diego) . Una banda metálica se colocó alrededor de la pata trasera izquierda de cada ratón 30 minutos antes de la prueba. Después del período de aclimatación de 30 minutos, se inyectaron 20 µ? de formalina al 5% de manera subcutánea en la superficie dorsal de la pata trasera izquierda. Se alojó a los ratones individualmente en cámaras cilindricas durante 45 minutos. Una computadora registró los reflejos de dolor por minuto, el total de los reflejos de dolor para la fase I (fase aguda = primeros 8 minutos) y el total de los reflejos de dolor para la fase II (fase tónica = tiempo entre los minutos 20 y 40) a través de un campo electromagnético. Ver Yaksh TL, Ozaki G . , cCumber D, Rathbun , Svensson C, Malkmus S., Yaksh MC. An automated flinch detecting system for use in the formalin nociceptive bioassay (Un sistema automatizado de detección del reflejo del dolor para uso en el bioanálisis nociceptivo de formalina) J. Appl. Physiol. 2001, 90:2386-402.
Como se muestra en la Figura 1, los datos de la fase 1 y la fase 2 se obtuvieron utilizando ratones homóziguos (-/-) hembra (n = 16), hembras de tipo silvestre (n = 15) , ratones homóziguos (-/-) macho (n = 9) y machos tipo silvestre (n = 18) . En todos los grupos y en ambas fases, los ratones homóziguos (-/-) AAK1 exhibieron un reflejo de dolor en pata registrado significativamente menor que los de tipo silvestre (+/+) de la misma carnada. 5.6.2. Síntesis de 1- [5- ( 6-butilamino-imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) -tiofen-2-il] -etanona Parte A. 6-fluoro-imidazo [1, 2-b] piridazina Se combinó 6-fluoro-piridazin-3-ilamina [108784-42- 5] (10 g, 89 mmol) con solución acuosa de cloroacetaldehído al 5% (peso/peso) [107-20-0] (23 mi, 177 mmol) en n-butanol (150 mi) y se agitó a reflujo durante 1 hora. La solución de reacción enfriada se redujo en volumen y se diluyó con dietil éter para precipitar un sólido café, que se recolectó mediante filtración, para producir 12.0 g. LRMS (ESI) m/z - - 138.0 [(M+H)]\ calculado para C6H4FN3: 137.12.
Parte B. 3-bromo-6-fluoro-imidazo [ 1 , 2-b] piridazina A una solución agitada a temperatura ambiente de 6-fluoro-imidazo [ 1 , 2-b] piridazina (2.1 g, 15.3 mmol) en ácido acético glacial (20 mi) se agregó lentamente bromo (2.5 g, 15.3 mmol). Al completar esta adición la solución de reacción se vació en agua y se extrajo con etil acetato. El extracto se secó ( gS04) y se sometió a cromatografía instantánea (ge de sílice, eluido con 30% (v/v) de etil acetato/hexanos ) para proporcionar 0.9 g de 3-bromo-6-fluoro-imidazo [ 1 , 2-b] piridazina . LRMS (ESI) m/z 215.9/217.9 [( +H)]+, calculado para C6H3BrFN3: 216.01.
Parte C. 1- [5- ( 6-fluoro-imidazo [1 , 2-b] piridazin-3-il) -tiofen-2-il] -etanona Una mezcla de 3-bromo-6-fluoro-imidazo [1, 2-b]piridazina (620 mg, 2.9 mmol), ácido 5-acetil-2-tiofenoborónico [206551-43-1] (634 mg, 3.7 mmol), carbonato de potasio [584-08-7] (792 mg, 5.7 mmol), y dicloruro de bis (trifenilfosfina) paladio (II) [13965-03-2] (100 mg, 0.1 - - mmol) se suspendió en una vial de reacción de microondas con una solución al 25% (v/v) de agua en acetonitrilo (4-5 mi), después se agitó y se irradió a una temperatura interna de 145°C durante 15 minutos. La mezcla de reacción enfriada se diluyó con etil acetato. El extracto orgánico se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice, eluido con 20% (v/v) de etil acetato/hexanos ) para proporcionar l-[5-(6-fluoro-imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) -tiofen-2-il] -etanona como 300 mg de un sólido amarillo. 1H NMR (400 MHz, CLOROFOR O-d) d ppm 2.63 (s, 3 H) 7.00 (d, J = 9.35 Hz, 1H) 7.75 (d, J = 4.04 Hz, 1 H) 7.83 (d, J = 4.04 Hz, 1 H) 8.13 (dd, J = 9.60, 7.07 Hz, 1 H) 8.21 (s, 1H) . LRMS (ESI) m/z 262.1 [(M+H)]+, calculado para Ci2H8FN3OS: 261.28.
Parte D. 1- [ 5- ( 6-butilamino-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il) -tiofen-2-il] -etanona 1- [5- (6-fluoro-imidazo [1, 2-b]piridazin-3-il) -tiofen-2-il] -etanona (60 mg, 0.2 mmol) y butilamina [109-73-9] (0.1 mi, 10.2 mmol) se irradió por microondas a una temperatura interna de 120°C durante 10 minutos. El producto 1- [5- ( 6-butilamino-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il ) -tiofen-2-il] -etanona se purificó mediante RP-HPLC de preparación para - - proporcionar 10.1 mg. 2H NMR (400 MHz, ETANOL-d4) d ppm 1.03 (t, J=7.33 Hz, 3 H) 1.50 - 1.59 (m, 2 H) 1.72 - 1.79 (m, 2 H) 2.59 (s, 3 H) 3.47 (t, J=7.33 Hz, 2 H) 6.73 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.63 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.70 (d, J=4.04 Hz, 1 H) 7.85 (d, J=4.29 Hz, 1 H) 7.95 (s, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 315.2 [(M+H)]+, calculado para Ci6H18N4OS: 314.41. 5.6.3. Síntesis de 1- { 5- [ 6- (2-hidroxi-etilamino) -imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il] -tiofen-2-il } -etanona Se agregó carbonato de cesio [534-17-8] (150 mg, 0.5 mmol) a una solución de 1- [ 5- ( 6-fluoro-imidazo [ 1 , 2-b] iridazin-3-il) -tiofen-2-il] -etanona (60 mg, 0.2 mmol) y etanolamina [141-43-5] (29 mg, 0.5 mmol) en N,N-dimetilformamida (3 mi) . Se agitó la mezcla a 40°C durante una hora y después se dividió entre etil acetato y agua. El análisis del extracto orgánico reveló que la proporción del producto de arilamina deseado al éter fue de aproximadamente 2:1. La RP-HPLC de preparación aisló 22 mg de l-{5-[6-(2-hidroxi-etilamino) -imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il] -tiofen-2-il}-etanona como un sólido amarillo. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.83 (s, 3 H) 2.57 (s, 2 H) 3.04 (t, J=5.68 Hz, 1 H) 4.43 (t, <J=5.68 Hz, 1 H) 7.04 (d, 7=9.60 Hz, 1 H) 7.91 (d, - - J=4.04 Hz, 1 H) 8.03 (d, J=4.04 Hz, 1 H) 8.16 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 8.36 (s, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 303.1 [(M+H)]+ calculado para C14Hi4N02S: 302.36. 5.6.4. Síntesis de 3- (4- (aminometil) fenil) -N- (2-metoxietil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina Parte A. 3-bromo-N- (2-metoxietil) imidazo [1, 2 b] piridazin-6-amina Se calentó una solución de 3-bromo-6-cloroimidazo [ 1 , 2-b] piridazina (844 mg, 3.77 mmol) y 2-metoxietanamina (1.44 mi) a 170°C (microondas) durante 30 minutos. La mezcla resultante se enfrió a temperatura ambiente mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar 3-bromo-N- (2-metoxietil ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina (630 mg, rendimiento al 62%) como un sólido blanquecino: XH NMR (METANOL-d4 ) d: 7.56 (d, J = 9.9 Hz, 1H) , 7.41 (s, 1H) , 6.74 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 3.62 - 3.76 (m, 2H) , 3.50 - 3.62 (m, 2H) , 3.42 (s, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 271.1 [(M+H)+, calculado para C9H12BrN40 271.
- - Parte B. 3- (4- (aminometil) fenil) -N- (2-metoxietil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina A una mezcla de 3-bromo-N- (2-metoxietil ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina (229 mg, 0.85 mmol) , ácido (4- (aminometil) fenil) borónico (395 mg, 2.11 mmol) , [1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II) (62 mg, 0.085 mmol) y fosfato de potasio (540 mg, 2.54 mmol) se agregó 1:1 de dimetoxietano/agua (3 mi). La mezcla resultante se calentó a 160°C (microondas) durante 6 minutos. Después la reacción se filtró y diluyó con una mezcla de 1:1:1 de metanol/agua/acetonitrilo, y después se filtró de nuevo. Finalmente la filtración se purificó mediante HPLC de preparación (acidica) para proporcionar sal de ácido 3- (4-(aminometil) fenil) -N- (2-metoxietil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina mono acético como un sólido blanco: 1H NMR (METAN0L-d4) d: 8.18 - 8.33 (m, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.82 (s, 1H) , 7.67 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 7.53 - 7.58 (m, J = 8.3 Hz, 2H) , 6.78 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.14 (s, 2H) , 3.68 (t, J = 5.7 Hz, 2H) , 3.58 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.42 (s, 3H) , 1.93 (s, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 298.2 [(M+H)+, calculado para Ci6H2oN50 298.2] - - 5.6.5. Síntesis de 4-(6- Metoxietil) amino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) benzamida A una mezcla de 3-bromo-N- (2-metoxietil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina (57.6 mg, 0.21 mmol) , ácido ( 4-carbamoilfenil ) borónico (87.4 mg, 0.53 mmol) , [ 1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II) (7.7 mg, 0.011 mmol) y fosfato de potasio (134 mg, 0.63 mmol) se agregó 1:1 de dimetoxietano/agua (0.75 mi). La mezcla resultante se calentó a 160°C (microondas) durante 6 minutos. Después la reacción se filtró y diluyó con una mezcla de 1:1:1 de metanol/agua/acetonitrilo, y después se filtró de nuevo. Finalmente la filtración se purificó mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar 3- (4- (aminometil) fenil) -N- (2-metoxietil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina (9 mg, rendimiento 14%) como un sólido blanco: XH N R (METANOL-d4) d: 8.29 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.98 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.89 (s, 1H) , 7.66 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 6.79 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 3.69 (t, J = 5.6 Hz, 2H) , 3.59 (t, J = 5.4 Hz, 2H) , 3.42 (s, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 312.2 [(M+H)+, calculado para Ci6Hi8N502 312.2]. - 5.6.6. Síntesis de 3- (4- (aminometil ) fenil) -N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina Parte A. 3-bromo-N-butilimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6- Se calentó una solución de 3-bromo-6-cloroimidazo [ 1 , 2-b] piridazina (1.2 g, 5.2 mmol) y N-butilamina (2 mi) a 170°C (microondas) durante 30 minutos. La mezcla resultante se enfrió a temperatura ambiente y se purificó mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar 3-bromo-N-butilimidazo [1,2-b] piridazin-6-amina (887 mg, rendimiento 63%) como un sólido blanco: 1H NMR ( ETANOL-d4) d: 7.53 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 7.39 (s, 1H) , 6.69 (d, J = 9.9 Hz, 1H) , 3.38 (t, J = 7.1 Hz, 2H) , 1.59 - 1.73 (m, 2H) , 1.41 - 1.53 (m, 2H) , 1.01 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 269.1 [( +H)+, calculado para Ci0H14BrN4 269.0].
Parte B. 3- (4- (aminometil) fenil) -N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina - - A una mezcla de 3-bromo-N-butilimidazo [ 1, 2-¿] piridazin-6-amina (190 mg, 0.71 mmol) , ácido (4- (aminometil) fenil) borónico (331 mg, 1.76 mmol), [1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) (26 mg, 0.036 mmol) y fosfato de tripotasio (452 mg, 2.13 mmol) se agregó 1:1 dimetoxietano/agua (10 mi) . La mezcla resultante se calentó a 160°C (microondas) durante 6 minutos. Después la reacción se filtró y diluyó con una mezcla de 1:1:1 de metanol/agua/acetonitrilo, y después se filtró de nuevo. Finalmente la filtración se purificó mediante HPLC de preparación (acidica) para proporcionar sal de ácido mono acético 3- (4- (aminometil) fenil) -N-butilimidazo [1,2- £>] piridazin-6-amina (21 mg, rendimiento 10%) como un sólido blanco: XH NMR (METANOL-d4) d: 8.25 - 8.29 (m, 2H) , 7.80 (s, 1H) , 7.63 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 7.54 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 6.74 (s, 1H) , 6.72 (s, 1H) , 4.11 (s, 2H) , 3.39 (t, J = 7.1 Hz, 2H) , 1.93 (s, 3H), 1.68 - 1.76 (m, 2H) , 1.46 - 1.55 (m, 2H) , 1.02 (t, J = 7.5 Hz, 3H) ; LR S(ESI) m/e 296.4 [(M+H)+, calculado para Ci7H22N5 296.2]. 5.6.7. Síntesis de ter-butil éster de ácido {3- [3- - - (5-acetil-tiofen-2-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilami propil } -metil-carbámico Se agregó carbonato de cesio [534-17-8] (125 mg, 0.4 mmol) a una solución de 1- [ 5- ( 6-fluoro-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il) -tiofen-2-il] -etanona (50 mg, 0.2 mmol) y ter-butil éster de ácido N- ( 3-aminopropil) -N-metilcarbámico [150349-36-3] (72 mg, 0.4 mmol) en N, -dimetilformamida (1.5 mi) y se agitó durante la noche a temperatura ambiente y después se separó entre etil acetato y agua. El extracto orgánico se evaporó y el producto se aisló mediante RP-HPLC de preparación para proporcionar ter-butil éster de ácido {3- [3- (5-acetil-tiofen-2-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -propil } -metil-carbámico como un aceite amarillo. 1H NMR (400 MHz , ETANOL-d4) d ppm 1.33 - 1.49 (m, 9 H) 2.04 (d, J=11.87 Hz, 2 H) 2.59 (s, 3 H) 2.91 (s, 3 H) 3.35 - 3.53 (m, 4 H) 4.62 (s, 1 H) 6.75 (d, J"=9.60 Hz, 1 H) 7.64 - 7.75 (m, 2 H) 7.87 (d, J=4.04 Hz, 1 H) 7.98 (s, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 430.2 [ ( +H) ]+, calculado para C2iH27N503S : 429.55. 5.6.8. Síntesis de 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il) -N-metilbenzamida - - A una mezcla de 3-bromo-N-butilimidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-amina (100 mg, 0.37 mmol) , ácido (4- (metilcarbamoil) fenil) borónico (166 mg, 0.93 mmol), [1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) (15 mg, 0.02 mmol) y fosfato de potasio (236 mg, 1.11 mmol) se agregó 1:1 de dimetoxietano/agua (5 mi) . La mezcla resultante se calentó a 160°C (microondas) durante 6 minutos. Después la reacción se filtró y diluyó con una mezcla de 1:1:1 de metanol/agua/acetonitrilo, y después se filtró de nuevo. Finalmente la filtración se purificó mediante HPLC de preparación (acidica) para proporcionar 4- (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) -N-metilbenzamida (32.1 mg, rendimiento 27%) como un sólido blanco: 1ti NMR (METAN0L-d4) d: 8.21 - 8.41 (m, 2H) , 7.86 - 7.94 (m, 3H) , 7.64 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 6.74 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 3.35 -3.44 (m, 5H) , 2.97 (s, 3H) , 1.68 - 1.77 (m, 2H) , 1.46 - 1.56 (m, 2H) , 1.03 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ; LR S(ESI) m/e 324.4 [(M+H)+, calculado para Ci8H22N50 324.2]. 5.6.9. Síntesis de [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il] - (tetrahidro-piran-4-il) -amina - - Parte A. Tetrahidro-2H-piran-4-amina Se trató una mezcla de dihidro-2H-piran-4 ( 3H) -ona (2.3 mi, 25 mmol) y metanol (54 mi) con formato de amonio (15.8 g, 250 mmol) y H20 (6 mi). La mezcla resultante se mantuvo a temperatura ambiente con agitación vigorosa hasta que se homogeneizó. Después la mezcla se trató con paladio sobre carbono (2.5 g) , y se mantuvo a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se filtró y concentró para retirar los orgánicos volátiles, después el acuoso se extrajo después exhaustivamente con etil acetato. Los orgánicos combinados se secaron (MgS04) , se filtraron y concentraron para proporcionar tetrahidro-2H-piran-4-amina (2.2 g, 88%) como un aceite: ¾ NMR (400 MHz, MeOD-d4) d 3.89 - 3.99 (m, 2 H) , 3.35 - 3.51 (m, 2 H) , 2.81 - 2.95 (m, 1 H) , 1.75 - 1.90 (m, 2 H) , 1.31 - 1.48 (m, 2 H) ; Parte B. 3-bromo-N- (tetrahidro-piran-4-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina - - Una mezcla de 3-bromo-6-fluoroimidazo [ 1, 2-b] piridazina (1.4 g, 6.6 mmol) , tetrahidro-2H-piran-4-amina (1.0 g, 9.9 mmol), carbonato de cesio (4.3 g, 13 mmol), y DMF (10 mi) se mantuvo a 40°C durante 16 horas, después se enfrió a temperatura ambiente y se separó entre etil acetato (100 mi) y H20 (100 mi) . Las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo con etil acetato (4 x 40 mi) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con H20 (100 mi) y salmuera (MgS04) , se filtraron y se concentraron para proporcionar un residuo que se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02) para proporcionar 3-bromo-N- (tetrahidro-piran-4-il) imidazo [1,2-b] piridazin-6-amina (1.6 g, 80%) como un sólido amarillo claro: XH NMR (400 MHz, MeOD-d4) d 7.58 (d, J=9.9 Hz, 1 H) , 7.42 (s, 2 H), 6.71 (d, J=9.9 Hz, 1 H) , 3.95 - 4.08 (m, 3 H) , 3.60 (td, J=11.5, 2.3 Hz, 2 H) , 2.16 (d, J=11.5 Hz, 2 H) , 1.53 - 1.69 (m, 2 H) ; LCMS (ESI) m/e 297.1 [(M+H)+, calculado para CnHi3BrN40 297.0].
Parte C. [3- ( 4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] - (tetrahidro-piran-4-il) -amina - - Se calentó una mezcla de 3-bromo-N- (tetrahidro-piran-4-il ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina (100 mg, 0.34 mmol) , hidrocloruro de ácido 4- (aminometil ) fenilborónico (160 mg, 0.84 mmol), aducto de dicloro [1, 1' -bis (difenilfosfino) ferroceno] paladio (II) diclorometano (25 mg, 0.034 mmol), fosfato de potasio (360 mg, 1.7 mmol), DME (1.5 mi) y H20 (0.5 mi) en un recipiente cónico sellado a 160°C durante 360 segundos mediante irradiación de microondas. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con etil acetato (2 mi) . Las capas orgánicas combinadas se concentraron bajo presión reducida para proporcionar un aceite que se purificó mediante HPLC en fase inversa para proporcionar [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il] - (tetrahidro-piran-4-il ) -amina (20.5 mg, 20%) como un sólido amarillo: H NMR (400 MHz, MeOD) d 8.24 (d, J=8.4 Hz, 2 H) , 7.82 (s, 1 H) , 7.55 (d, J=8.4 Hz, 1 H) , 6.74 (d, J=10 Hz, 1 H) , 4.13 (s, 2 H) , 4.06-3.92 (m, 3 H), 3.61 (t, J=11.2 Hz, 2 H) , 2.15 (d, J=12.8 Hz, 2 H) , 1.65 (qd, J=11.2, 4.4 Hz, 2 H) ; LCMS (ESI) m/e 324.2 [(M+H)+, calculado para Ci8H22 50 324.2]. 5.6.10 Síntesis de [3- (4-aminometil-fenil) - - - imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ] -ciclohexilamina Parte iV-ciclohexilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina Una mezcla de 3-bromo-6-fluoroimidazo [1,2-j ] piridazina (1.1 g, 5.0 mmol) , ciclohexilamina (0.86 mi, 7.5 mmol) , carbonato de cesio (3.3 g, 10 mmol), DMF (10 mi) se mantuvo a 40°C durante 6 horas, después se enfrió a temperatura ambiente y se separó entre etil acetato (100 mi) y H20 (100 mi) . Las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo con etil acetato (4 x 40 mi) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con H20 (100 mi) y salmuera (100 mi), después se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron para proporcionar un residuo que se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02) para proporcionar 3-bromo-N-(tetrahidro-piran-4-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina (1.1 g, 73%) como un sólido amarillo claro: ¾ NMR (400 Hz, MeOD) d 7.53 (d, J=9.6 Hz, 1 H) , 7.39 (s, 1 H) , 6.68 (d, J=9.9 Hz, 1 H) , 3.68 - 3.87 (m, 1 H) , 2.14 (dd, J-=12.6, 3.3 Hz, 2 H) , - - 1.82 (dt, J=13.3, 3.7 Hz, 2 H) , 1.70 (dt, J=12.8, 3.7 Hz, 1 H), 1.38 - 1.52 (m, 2 H) , 1.23 - 1.38 (m, 3 H) ; LCMS (ESI) m/e 295.2 [(M+H)+, calculado para Ci2Hi5BrN4 295.1].
Parte B. [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -ciclohexilamina Se calentó una mezcla de 3-bromo-N-ciclohexilimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina (100 mg, 0.34 mmol) , hidrocloruro de ácido 4- (aminometil) fenilborónico (160 mg, 0.84 mmol), aducto de dicloro [1, 1' -bis (difenilfosfino) ferroceno] paladio (II) diclorometano (25 mg, 0.034 mmol), fosfato de potasio (360 mg, 1.7 mmol), D E (1.5 mi) y H20 (0.5 mi) en un recipiente cónico sellado a 160°C durante 360 segundos mediante irradiación de microondas. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con etil acetato (2 mi) . Las capas orgánicas combinadas se concentraron bajo presión reducida para proporcionar un aceite que se purificó mediante HPLC en fase inversa para proporcionar [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -ciclohexilamina (48 mg, 44%) como un sólido blanco: ¾ NMR (400 MHz, MeOD-d4) d ppm 8.29 (d, J=8.6 Hz, 2 H) , 7.82 (s, 1 H) , 7.63 (d, J=9.6 Hz, 1 H) , 7.54 (d, J=8.6 Hz, 2 H) , 6.72 (d, J=9.6 Hz, 1 H) , 4.13 (s, 2 H) , 3.70 - 3.78 (m, 1 H) , 2.19 (d, J=9.1 Hz, 2 H) , 1.83 -1.93 (m, 2 H), 1.70 - 1.76 (m, 1 H) , 1.42 - 1.54 (m, 2 H) , 1.29 - 1.40 (m, 3 H) ; LCMS (ESI) m/e 322.2 [(M+H)+, calculado para C19H24N5 322.2]. 5.6.11 Síntesis de 1- { 5- [ 6- ( 3-Metilamino-propilamino) -imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il] -tiofen-2-il } -etanona Se preparó como en el Ejemplo 5.6.3 a partir de 1- [5- ( 6-fluoro-imidazo [1, 2-b] piridazina-3-il ) -tiofen-2-il] -etanona (50 mg, 0.2 mmol) y ter-butil éster de ácido N-(3-aminopropil) -N-metil carbámico [150349-36-3] (72 mg, 0.4 mmol) y se desprotegió con HCI anhidro en metanol. La purificación mediante RP-HPLC proporcionó diacetato de l-{5-[6- (3-metilamino-propilamino) -imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il] -tiofen-2-il } -etanona como un sólido amarillo. 1H N R (400 MHz , METANOL-d4 ) d ppm 1.92 - 1.96 (m, 5 H) 2.24 (t, J=7.45 Hz, 1 H) 2.62 (s, 2 H) 2.80 (s, 2 H) 3.23 - 3.31 (m, 2 H) 3.61 (t, J=1.33 Hz, 1 H) 6.79 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.70 - 7.74 (m, 1 H) 7.92 (d, <J=4.04 Hz, 1 H) 8.06 (br. s., 1 H) . LRMS (ESI) m/z 330.1 [ (M+H) ] +, calculado para Ci6Hi9N5OS: 329.43. - - 5.6.12 Síntesis de 3- (3- (aminometil) fenil) -N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina A una mezcla de 3-bromo-N-butilimidazo [ 1, 2-j ] piridazin-6-amina (62 mg, 0.23 mmol) , ácido (3- ( aminometil) fenil) borónico (108 mg, 0.58 mmol), [1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) (8.4 mg, 0.01 mmol) y fosfato de potasio (146 mg, 0.69 mmol) se agregó 1:1 de dimetoxietano/agua (3 mi). La mezcla resultante se calentó a 160°C (microondas) durante 6 minutos. Después la reacción se filtró y se diluyó con una mezcla de 1:1:1 de metanol/agua/acetonitrilo, y después se filtró de nuevo. Finalmente la filtración se purificó mediante HPLC de preparación (acídica) para proporcionar sal de ácido 3- (3- (aminometil ) fenil ) -N-butilimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina mono trifluoroacético (24.1 mg, rendimiento 25%) como un sólido blanco: *H NMR (METANOL-d4) d: 7.53 (d, J = 8.1 Hz, 1H) , 7.34 (s, 1H) , 7.00 (s, 1H) , 6.83 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 6.73 (t, J = 7.8 Hz, 1H) , 6.61 (d, J = 7.6 Hz, 1H) , 5.93 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 3.33 (s, 2H) , 2.59 (t, J = 7.1 Hz, 2H) , 1.12 (s, 3H) , 0.87 - 0.96 (m, 2H) , 0.64 - 0.74 (m, 2H) , 0.20 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 296.4 [(M+H)+, calculado para - - Ci7H22N5 296.2] . 5.6.13 Síntesis de N-butil-3- ( 4- ( ( (2-metoxietil) amino) metil ) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina Parte A. 3-il) benzaldehido A una mezcla de 3-bromo-N-butilimidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-amina (100 mg, 0.37 mmol) , ácido (4-formilfenil) borónico (139 mg, 0.93 mmol), [1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) (13.5 mg, 0.02 mmol) y fosfato de potasio (236 mg, 1.11 mmol) se agregó 3:1 de dimetoxietano/agua (2 mi) . La mezcla resultante se calentó a 160°C (microondas) durante 6 minutos. Después de enfriar la reacción y separarla en dos capas, la capa oscura superior se filtró y se diluyó con una mezcla de 1:1:1 de metanol/agua/acetonitrilo, y después se filtró de nuevo. Finalmente la filtración se purificó mediante HPLC de - - preparación (neutra) para proporcionar 4- (6- (butilamino) imidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il ) benzaldehido (78 mg, rendimiento 72%) como un sólido amarillo: 1H N R (METANOL-d4) d: 10.01 (s, 1H) , 8.47 (d, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.98 - 8.03 (m, 2H) , 7.97 (s, 1H) , 7.66 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 6.77 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 3.42 (t, J = 7.1 Hz, 2H) , 1.74 (t, J = 7.2 Hz, 2H) , 1.52 (d, J = 7.8 Hz, 2H) , 1.03 (t, J = 7.5 Hz, 4H) ; LR S(ESI) m/e 295.2 [(M+H)+, calculado para Ci7H19N40 295.2].
Parte B. N-butil-3- ( 4- ( ( (2-metoxietil) amino) metil) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina A la solución de 4- ( 6- (butilamino) imidazo [1, 2-j ] piridazin-3-il) benzaldehido (74 mg, 0.25 mmol) en 2 mi de dicloroetano se agregó 2-metoxietanamina (21 mg, 0.28 mmol) y se dejó agitar a temperatura ambiente durante 5 minutos. Se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (106 mg, 0.5 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. Después la reacción se templó con una solución de bicarbonato de sodio saturado y se extrajo con diclorometano tres veces. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron. Finalmente el - - producto crudo se purificó mediante HPLC de preparación (acidice) para proporcionar sal de ácido N-butil-3- (4- ( ( (2-metoxietil ) amino) metil ) fenil ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina mono trifluoroacético (55.8 mg, rendimiento 48%) como un sólido blanco: H NMR (METANOL-d) d: 8.23 - 8.28 (m, 3H) , 7.96 (d, J = 9.9 Hz, 1H) , 7.71 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.24 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 4.35 (s, 2H) , 3.68 - 3.73 (m, 2H) , 3.35 -3.47 (m, 5H) , 3.26 - 3.31 (m, 2H) , 1.67 - 1.76 (m, 2H) , 1.44 - 1.54 (m, 2H) , 1.01 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 354.5 [(M+H)+, calculado para C20H28N5 354.2]. 5.6.14 Síntesis de 1- { 5- [ 6- (2-metil-butilamino) -imidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il ] -tiofen-2-il } -etanona Se preparó como en el ejemplo 5.6.3. a partir de 1-[5- ( 6-fluoro-imidazo [1, 2-b] piridazina-3-il ) -tiofen-2-il] -etanona (50 mg, 0.2 mmol) y 2-metilbutilamina racémica [96-15-1] (42 mg, 0.5 mmol). La purificación mediante RP-HPLC de preparación proporcionó 1- { 5- [ 6- (2-metil-butilamino) -imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ] -tiofen-2-il } -etanona como un sólido amarillo: XH NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 0.88 -1.01 (m, 5 H) 1.19 - 1.30 (m, 1 H) 1.50 - 1.61 (m, 4 H) 1.89 (dq, J=13.29, 6.74 Hz, 1 H) 2.54 (s, 2 H) 3.26 - 3.33 (m, 1 - H) 3.40 - 3.49 (m, 1 H) 4.57 (t, J=5.73 Hz, 1 H) 6.43 - 6.47 (m, 1 H) 7.21 (s, 1 H) 7.56 - 7.58 (m, 1 H) 7.61 - 7.67 (m, 2 H) 7.90 (s, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 329.1 [ (M+H) ] +, calculado para Ci7H2oN4OS: 328.44. 5.6.15. Síntesis de 1- { 5- [ 6- ( 3-fluoro-propilamino) -imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il ] -tiofen-2-il } -etanona Se preparó como en el ejemplo 5.6.3. a partir de 1-[5- ( 6-fluoro-imidazo [1, 2-b] piridazina-3-il ) -tiofen-2-il] -etanona (50 mg, 0.2 mmol) e hidrocloruro de 3-fluoroproplamina [64068-31-1] (43 mg, 0.4 mmol). XH NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.52 (s, 6 H) 2.12 - 2.25 (m, 1 H) 2.54 (s, 1 H) 3.66 - 3.72 (m, 1 H) 4.72 (t, J=5.51 Hz, 1 H) 7.21 (s, 2 H) 7.63 - 7.67 (m, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 319.1 [ (M+H) ] +, calculado para C15Hi5FN4OS: 318.38. 5.6.16. Síntesis de N-butil-3- (4- (pirrolidin-1-ilmetil) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina - - A la solución de 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il) benzaldehido (58 mg, 0.20 mmol) en 1.5 mi de dicloroeteno se agregó pirrolidina (15.4 mg, 0.22 mmol) y se dejó agitar a temperatura ambiente durante 5 minutos. Se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (83.5 mg, 0.4 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. Después la reacción se templó con solución saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo con diclorometano tres veces. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron. El producto crudo se purificó finalmente mediante HPLC de preparación (acidica) para proporcionar sal de ácido N-butil-3- (4- (pirrolidin-l-ilmetil) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina mono trifluoroacético (32.2.8 mg, rendimiento 35%) como un sólido blanco: *H NMR (METANOL-d4) d: 8.22 - 8.33 (m, 3H) , 7.97 (d, J = 9.9 Hz, 1H) , 7.73 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.25 (d, J = 9.9 Hz, 1H) , 4.49 (s, 2H) , 3.57 (br. s., 2H) , 3.41 (t, J = 7.1 Hz, 2H) , 3.26 (br. s., 2H) , 2.22 (br. s., 2H) , 2.07 (br. s., 2H) , 1.65 - 1.82 (m, 2H) , 1.39 - 1.59 (m, 2H) , 1.00 (t, J = 7.5 Hz, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 350.5 [(M+H)+, calculado para C21H28N5 350.2] . 5.6.17. Síntesis de ter-butil éster de ácido {3- [3-(4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -propil } -metil-carbámico Parte A. 3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ona A una b]piridazina [13526-66-4] (425.7 mg, 1.8 mmol) en 1,2-dimetoxietano (9 mi) se agregó una solución de hidróxido de potasio [1310-58-3] (185.4 mg, 2.8 mmol) en agua (9.0 mi) y la solución agitada resultante se calentó a reflujo bajo N2 durante 3 días, se enfrió y se separó entre etil acetato y agua. La fase acuosa se evaporó hasta secar, absorbida en metanol, se filtró, y se evaporó para producir 3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ona como 340 mg de sólido amarillo. LRMS (ESI) m/z 214.0/216.0 [(M+H)]+, calculado para C6H4BrN303: 214.02.
Parte B. ter-butil éster de ácido [3- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -propil] -metil-carbámico Se agregó acetonitrilo (16.0 mi) a una mezcla de bromo-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-ona (344.3 mg, 1.6 mmol) - - hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi) tris (dimetilamino) fosfonio (Reactivo BOP) [56602-33-6], la mezcla se dejó agitar para efectuar la disolución. Se agregó una solución de ter-butil éster de ácido (3-amino-propil) -metil-carbámico [150349-36-3] (0.8 g, 3.98 mmol) y 1, 8-diazabiciclo [5. .0] undec-7-eno (DBU) [6674-22-2] (2.4 mi, 2.4 mmol) en DMF (4.0 mi) y la reacción se dejó agitar a temperatura ambiente durante 3 dias. La solución de reacción se dividió entre salmuera y etil acetato, se secó (MgS04) , y se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice, eluido con 10% (v/v) de 2-propanol/etil acetato) para proporcionar ter-butil éster de ácido [3- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -propil] -metil-carbámico como 0.4 g de un aceite amarillo claro. LRMS (ESI ) m/z 384.1/386.1 [( +H)]+, calculado para Ci5H22BrN502 : 384.28.
Parte C. ter-butil éster de ácido {3- [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -propil}-metil-carbámico . A una mezcla de ter-butil éster de ácido [3- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -propil] -metil-carbámico (381.0 mg, 1.0 mmol), hidrocloruro de ácido 4-aminometilfenilborónico [75705-21-4] (222.8 mg, 1.2 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (632.4 mg, 3.0 mmol), y [1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (164.8 mg, 0.2 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo - - de 50 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (25 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitó rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta con 2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85°C durante 17 horas después se enfrió y se filtró a través de un auxiliar de filtro herméticamente empaquetado y el filtrado se transfirió a un embudo de separación y se dividió entre salmuera y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgS0 ) y se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice, eluido con NH40H concentrado al 1% en 10% (v/v) de metanol/etil acetato) para proporcionar 81.2 mg de un aceite café. Este producto se purificó adicionalmente mediante RP-HPLC de preparación para aislar el ter-butil éster de ácido { 3- [3- (4-aminometil-fenil ) -imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -propil } -metil-carbámico como 4.6 mg de un sólido blanco. 1H NMR (400 MHz, METAN0L-d4) d ppm 1.89 - 2.00 (m, 10 H) 2.87 (br. s., 3 H) 3.41 (q, J=7.16 Hz, 5 H) 4.14 (s, 2 H) 6.74 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.56 (m, J=8.34 Hz, 2 H) 7.66 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.81' (s, 1 H) 8.25 (m, J=8.34 Hz, 2 H) . LRMS (ESI) m/z 411.1 [ (M+H) ] +, calculado para C22H30 6O2: 410.52. 5.6.18. Síntesis de [3- (4-aminometil-fenil) - - - imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] - (3-fenil-propil) -amina Parte A. ( 3-bromo-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-fenil-propil ) -amina Una mezcla de 3-bromo-6-cloro-imidazo [ 1 , 2-b]piridazina (232 mg, 1 mmol) y fenilpropil amina (1 mi, 7 mmol) en n-PrOH (1 mi) se calentó en un microondas a 150°C durante 20 minutos. Se agregó fenilpropil amina adicional (0.5 mi) y la mezcla de reacción se calentó durante 20 minutos adicionales. Después 30 minutos en un microondas. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se sometió a ISCO (columna 40 g, DCM 3 minutos, después 0-10% de eOH en DCM durante 30 minutos) para proporcionar el producto (380 mg ~90% puro y se utilizó directamente para la siguiente etapa) .
Parte B. [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] - ( 3-fenil-propil ) -amina. Una mezcla de (3-bromo-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) - ( 3-fenil-propil) -amina (100 mg, 0.3 mmol), hidrocloruro de ácido (4- - - aminometilfenil ) borónico (67 mg, 0.36 mmol) , K2CO3 (124 mg, 0.9 mmol) y diclorobis (trifenilfosfina) paladio (II) (11 mg, 0.015 mmol) en MeCN/agua (3.6 ml/0.9 mi) se calentó en un microondas a 150°C durante 20 minutos. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (2 mi) y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC de preparación para proporcionar el compuesto del titulo como sal de AcOH (29.9 mg) . *H NMR (400 Hz, METANOL-d4 ) d ppm 1.93 (s, 3 H) 1.99 - 2.09 (m, 2 H) 2.70 - 2.80 (m, 2 H) 3.41 (t, J=6.95 Hz, 2 H) 4.14 (s, 2 H) 6.74 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.15 - 7.29 (m, 5 H) 7.53 (d, J=8.34 Hz, 2 H) 7.64 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.80 (s, 1 H) 8.24 (d, J=8.59 Hz, 2 H) . 5.6.19. Síntesis de pentil- [3- (4-pirrolidin-2-il- fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -amina (pentilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) fenil) irrolidina- 1-carboxilato - - A 150 mg (0.530 mmol) de la 3-bromo-N-pentilimidazo [1, 2-b] iridazin-6-amina se agregó el ter-butil 2- (4- (4,4,5, 5-tetrametil-l, 3 , 2-dioxaborolan-2-il ) fenil ) pirrolidina-l-carboxilato (237 mg, 0.636 mmol), K3PO4 (225 mg, 1.060 mmol), PdCi2(PPh3)3 (37 mg, 0.053 mmol), 3 mi de DME y 1 mi de agua. Esta mezcla se sometió a microondas durante 0.5 horas a 140°C. Después de enfriar se diluyó con 25 mi de EtOAC, y se lavó con aproximadamente 20 mi de salmuera. La capa orgánica se secó sobre MgS04, y se concentró. La mezcla cruda se purificó en una columna de gel de sílice de 12 g (ISCO), eluyendo con 15-100% EtOAc/hexanos para proporcionar 159 mg (67%) del producto deseado.
Parte B. pentil- [ 3- ( 4-pirrolidin-2-il-fenil ) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -amina. A 45 mg de este compuesto, disueltos en 10 mi de eOH a 0°C se agregó 1.0 mi (exceso) de AcCl (lentamente) y la mezcla resultante se agitó a 0°C durante 4 horas. Después se concentró hasta secar para obtener 32 mg (rendimiento 100%) de una sal de HC1 del compuesto deseado. xti NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 0.91 -0.99 (m, 3 H) 1.37 - 1.52 (m, 4 H) 1.74 (quin, J=7.01 Hz, 2 - - H) 2.22 - 2.40 (m, 3 H) 2.50 - 2.66 (m, 1 H) 3.36 - 3.42 (m, 2 H) 3.47 - 3.59 (m, 2 H) 4.75 - 4.81 (m, 1 H) 7.30 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.75 (d, J=8.08 Hz, 2 H) 8.00 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 8.22 - 8.35 (m, 3 H) ; LRMS (ESI) m/e 350.0 [ (M + H)+, calculado para C2iH2N5 349.0]. 5.6.20. Síntesis de butil- [3- (lH-pirazol-4-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -amina Una mezcla de 3-bromo-N-butilimidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-amina (100 mg, 0.37 mmol) , ácido (lH-pirazol-4-il)borónico (90 mg, 0.45 mmol), dicloro-bis (trifenilfosfino) paladio (II) (15 mg, 0.021 mmol), fosfato de potasio (80 mg, 0.56 mmol), acetonitrilo (1.5 mi) y H20 (0.5 mi) se calentó en un recipiente cónico sellado a 160 °C durante 1000 segundos mediante irradiación de microondas. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con etil acetato (2 mi) . Las capas orgánicas combinadas se concentraron bajo presión reducida para proporcionar un aceite que se purificó mediante HPLC en fase inversa para proporcionar butil- [ 3- ( lH-pirazol-4-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -amina (60 mg, 62%) como un sólido blanco: XH NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 7.67 (s, 1 H) , 7.59 (d, J=9.6 Hz, 1 H) , 6.67 (d, J=9.6 Hz, 1 H) , 3.44 - - (t, J=7.1 Hz, 1 H) , 1.70 - 1.80 (m, 1 H) , 1.46 - 1.59 (m, 1 H) , 1.03 (t, J=7.3 Hz, 1 H) ; LCMS (ESI) m/e 257.3 [(M+H)+, calculado para C13H17N6 257.1]. 5.6.21. Síntesis de butil- { 3- [4- (ter-butilamino-metil ) -3-fluoro-fenil ] -imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il } -amina Parte A. 4- ( 6-butilamino-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il) -2-fluorobenzaldehído Una mezcla de 3-bromo-N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina (300 mg, 1.1 mmol), ácido 3-fluoro-4-formilfenilborónico (230 mg, 1.3 mmol), dicloro-bis (trifenilfosfino) paladio (II) (40 mg, 0.055 mmol), carbonato de potasio (230 mg, 1.7 mmol), acetonitrilo (1.5 mi) y H20 (0.5 mi) se calentó en un recipiente cónico sellado a 160°C durante 1000 segundos mediante irradiación de microondas. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con etil acetato (2 mi) . Las capas orgánicas - - combinadas se concentraron bajo presión reducida para proporcionar un aceite que se purificó mediante HPLC inversa para proporcionar 4- ( 6-butilamino-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il ) -2-fluorobenzaldehido (240 mg, 68%) como un sólido amarillo: 2H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 10.39 (s, 1 H) , 8.28 (dd, J=12.9, 1.5 Hz, 1 H) , 7.91 - 8.01 (m, 3 H) , 7.73 (d, J=9.6 Hz, 1 H) , 6.54 (d, J=9.6 Hz, 1 H) , 3.48 (td, J=7.2, 5.8 Hz, 2 H) , 1.69 - 1.80 (m, 2 H) , 1.46 - 1.57 (m, 2 H) , 1.03 (t, J=7.5 Hz, 3 H) ; LCMS (ESI) m/e 313.2 [(M+H)+, calculado para Ci7Hi8FN40 313.1].
Parte B. butil- { 3- [4- (ter-butilamino-metil) -3-fluoro-fenil] -imidazo [ 1 , 2-b] pirid zin-6-il } -amina . Una mezcla de 4- (6-butilamino-imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) -2-fluoro-benzaldehido (30 mg, 0.10 mmol) y dicloroetano (DCE, 1 mi) se trató con ter-butil amina (0.011 mi, 0.11 mmol) y la mezcla de reacción resultante se mantuvo a temperatura ambiente durante 20 minutos. La reacción se trató entonces con triacetoxiborohidruro de sodio (23 mg, 0.11 mmol) y la mezcla resultante se mantuvo hasta que la LCMS indicó el consumo completo del aldehido. La reacción se templó con bicarbonato de sodio saturado acuoso, las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 10 mi) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (20 mi) y salmuera (20 mi) , después se secaron ( gSC^) , se filtraron y se concentraron para proporcionar un residuo que se purificó - - mediante HPLC inversa para proporcionar butil- { 3- [ 4- (ter-butilamino-metil ) -3-fluoro-fenil ] -imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il}-amina (32 mg, 86%) como un sólido blanco: 1H N R (400 MHz, METAN0L-d4) d ppm 8.21 (dd, J=12.3, 1.5 Hz, 1 H) , 7.93 (dd, J=8.0, 1.7 Hz, 1 H) , 7.82 (s, 1 H) , 7.58 (d, J=9.7 Hz, 1 H) , 7.50 (t, J=8.0 Hz, 1 H) , 6.68 (d, J=9.7 Hz, 1 H) , 4.02 (s, 2 H) , 3.34 (t, J=7.2 Hz, 2 H) , 1.60 - 1.73 (m, 2 H) , 1.39 - 1.51 (m, 2 H) , 1.24 - 1.35 (m, 10 H) , 0.91 - 1.00 (m, 3 H) ; LCMS (ESI) m/e 370.2 [(M+H)+, calculado para C21H29F 5 370.2]. 5.6.22. Síntesis de N- (3- ( (3- ( 5-acetiltiofen-2-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) propil) -N-isopropilacetamida Parte A. NI- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) propano-1 , 3-diamina Se agregó propileno diamina [109-76-2] (7.5 mi, 90.3 mmol) a una suspensión agitada de 3-bromo-6-cloro-imidazo[l, 2-b] piridazina [13526-66-4] (2.1 g, 9.0 mmol) en tolueno (18.1 mi) y se calentó a reflujo, bajo un manto de - - N2, durante 7 días después se dividió entre 1N de hidróxido de sodio acuoso y etil acetato. El extracto se lavó con agua después se evaporó para obtener 1.1 g de un semisólido amarillo. LRMS (ESI ) m/z 270.0/272.0 [(M+H)]+, calculado para C9Hi2BrN5: 270.13.
Parte B. NI- ( 3-bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) -N3-isopropilpropano-l, 3-diamina Se agregó acetona [67-64-1] (2.0 mi, 43.5 mmol) , en polvo, activada, en un tamiz molecular de 4 Angstrom a una solución de NI- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) propano-1, 3-diamina (367.2 mg, 1.4 mmol) en metanol (4.8 mi). El recipiente de reacción se cerró y la mezcla se dejó agitar rápidamente, a temperatura ambiente, durante 17 horas después su contenido se transfirió rápidamente a una suspensión en agitación de borohidruro de sodio [16940-66-2] (0.3 g, 6.9 mmol) en metanol (50 mi) . Después de 1 hora la mezcla se filtró por gravedad y el filtrado se evaporó. El producto crudo se absorbió entonces en etil acetato, se lavó con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó para proporcionar 196.9 mg de un sólido amarillo. LRMS (ESI) m/z 312.0/314.0 [(M+H)]+, calculado para Ci2H18BrN5: 312.21.
Parte C. N- (3- ( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6- - - il) amino) propil) -N-isopropilacetamida Se agregó cloruro de acetilo [75-36-5] (1.0 mi, 14.1 mmol) , en porciones, a una solución a temperatura ambiente de NI- ( 3-bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) -N3-isopropilpropano-1,3-diamina (196.9 mg, 0.6 mmol) en piridina (6.5 mi), y se agitó bajo un manto de N2 durante 17 horas. La piridina se evaporó de la mezcla de reacción y el residuo se dividió entre bicarbonato de sodio acuoso al 5% (peso/volumen) y etil acetato. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó para proporcionar 219.2 mg de un aceite oscuro. LRMS (ESI) m/z 354.1/356.1 [(M+H)]+, calculado para Ci4H2oBr 50: 354.25.
Parte D. N- (3- ( (3- (5-acetiltiofen-2-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) propil) -N-isopropilacetamida. A una mezcla de N- ( 3- (( 3-bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) amino) propil) -N-isopropilacetamida (219.2 mg, 0.6 mmol), ácido (5-acetiltiofen-2-il)borónico [206551-43-1] (128.4 mg, 0.8 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (266.5 mg, 1.3 mmol), y [1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloro- paladio(II), complejado con diclorometano [95464-05-4] (53.6 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 25 mi se agregó - - una solución de 30% (v/v) de agua en 1, 2-dimetoxietano (13 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta con N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85°C durante 17 horas después se enfrió y se dividió entre salmuera y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgS04) y se evaporó para producir un sólido café oscuro. El producto se purificó mediante RP-HPLC de preparación. Las fracciones de cromatografía purificadas se combinaron y se dividieron entre bicarbonato de sodio saturado acuoso y etil acetato. El extracto orgánico se secó (CaS0 ) y se evaporó para proporcionar N-(3-((3-(5-acetiltiofen-2-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) propil) -N-isopropilacetamida como 45.7 mg de un sólido amarillo. 1H N R (400 Hz, DMSO-d6) d ppm 1.05 - 1.20 (m, 4 H) 1.24 (br. s., 1 H) 1.86 - 2.03 (m, 4 H) 2.49 - 2.56 (m, 6 H) 3.24 -3.48 (m, 5 H) 6.76 (dd, J=9.73, 1.14 Hz, 1 H) 7.33 - 7.43 (m, 1 H) 7.79 - 7.84 (m, 1 H) 7.97 (d, J=4.04 Hz, 1 H) 8.14 (d, J=5.05 Hz, 1 H) . LR S (ESI) m/z 400.2 [(M+H)]+, calculado para C20H25N5O2S : 399.52. 5.6.23. Síntesis de 6- ( 6-butilamino-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il) -3, 4-dihidro-2H-isoquinolin-l-ona - - Una mezcla de 3-bromo-N-butilimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina (160 mg, 0.61 mmol) , ácido (1-oxo-1, 2, 3, 4-tetrahidroisoquinolin-6-il) borónico (200 mg, 0.73 mmol), aducto de dicloro [1, 1' -bis (difenilfosfino) ferroceno] aladio (II) diclorometano (50 mg, 0.06 mmol), fosfato de potasio (250 mg, 1.2 mmol), DME (1.5 mi) y H20 (0.5 mi) se calentó en un recipiente cónico sellado a 160°C durante 360 segundos mediante irradiación de microondas. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con etil acetato (2 mi) . Las capas orgánicas combinadas se concentraron bajo presión reducida para proporcionar un aceite que se purificó mediante HPLC inversa para proporcionar 6- ( 6-butilamino-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il) -3, 4-dihidro-2H-isoquinolin-l-ona (90 mg, 44%) como un sólido blanco: XH NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.11 - 8.20 (m, 2 H), 7.94 (d, J=8.2 Hz, 1 H) , 7.84 (s, 1 H) , 7.57 (d, J=9.7 Hz, 1 H), 6.67 (d, J=9.7 Hz, 1 H) , 3.50 (t, J=6.7 Hz, 2 H) , 3.34 (t, J=7.2 Hz, 2 H) , 3.00 (t, J=6.6 Hz, 2 H) , 1.60 -1.75 (m, 2 H) , 1.36 - 1.50 (m, 2 H) , 0.95 (t, J=7.4 Hz, 3 H) ; LCMS (ESI) m/e 336.2 [( +H)+, calculado para C19H22N5O 336.2]. - - 5.6.24. Síntesis de 3- ( 6-aminopiridin-3-il ) -N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina A una mezcla de 3-bromo-N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina (75 mg, 0.28 mmol) , ter-butil (5- (4,4,5, 5-tetrametil-l , 3 , 2-dioxaborolan-2-il ) piridin-2-il) carbamato (107 mg, 0.33 mmol), [l,lr-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) (10 mg, 0.014 mmol) y fosfato de potasio (58 mg, 0.42 mmol) se agregó 3:1 de acetonitrilo/agua (2 mi). La mezcla resultante se calentó a 145°C (microondas) durante 1000 segundos. La reacción se filtró entonces y se concentró. El residuo se purificó finalmente mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar 3- (6-aminopiridin-3-il) -N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina (50.3 mg, rendimiento 47%) como un sólido amarillo: 2H NMR (METANOL-d4) d: 8.72 (d, J = 1.8 Hz, 1H) , 8.08 (dd, J = 8.7, 2.3 Hz, 1H) , 7.58 (s, 1H) , 7.52 (d, J = 9.7 Hz, 1H) , 6.58 - 6.66 (m, 2H) , 4.78 - 4.88 (m, 11H) , 3.27 - 3.33 (m, 3H) , 1.62 (d, J = 7.1 Hz, 2H) , 1.42 (d, J = 7.9 Hz, 2H) , 0.91 - 0.97 (m, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 283.4 [(M+H)+, calculado para CisHig g 283.2]. 5.6.25. Síntesis de butil- { 3- [4- (ter-butilamino- - - metil) -2-fluoro-fenil] -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il } -amina Parte A. 4- ( 6-butilamino-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il) -3-fluoro-benzaldehido Una mezcla de 3-bromo-N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina (810 mg, 3.0 mmol), ácido 2-fluoro-4-formilfenilborónico (1.2 g, 7.5 mmol), aducto de dicloro [1,1' -bis (difenilfosfino) ferroceno] paladio (II) diclorometano (200 mg, 0.30 mmol), fosfato de potasio (1.9 g, 9.0 mmol), D E (9 mi) y H20 (3 mi) se mantuvo en un recipiente sellado a 80 °C durante 12 horas. La capa orgánica se separó y se concentró bajo presión reducida para proporcionar un sólido amarillo que se purificó mediante HPLC inversa para proporcionar 4- ( 6-butilamino-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il) -3-fluoro-benzaldehido (600 mg, 64%) como un sólido blanco: ½ NMR (400 MHz, CDC13) d ppm 10.02 (d, J=l .8 Hz, 1 H) , 8.84 - 8.93 (m, 1 H) , 8.12 (d, J=4.3 Hz, 1 H) , 7.79 - - (dd, J=8.1, 1.5 Hz, 1 H) , 7.68 - 7.76 (m, 2 H) , 6.55 (d, J=9.6 Hz, 1 H) , 3.43 (td, J=7.1, 5.6 Hz, 2 H) , 1.67 - 1.78 (m, 2 H) , 1.49 (dq, J=15.0, 7.4 Hz, 2 H) , 1.01 (t, J=7.3 Hz, 3 H) ; LC S (ESI) m/e 313.1 [(M+H)+, calculado para C17Hi8FN40 313.1] .
Parte B. butil- { 3- [4- (ter-butilamino-metil) -2-fluoro-fenil] -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il } -amina . Una mezcla de 4- (6-butilamino-imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) -3-fluoro-benzaldehido (120 mg, 0.40 mmol) y dicloroetano (DCE, 4 mi) se trató con ter-butil amina (0.050 mi, 0.50 mmol) y la mezcla de reacción resultante se mantuvo a temperatura ambiente durante 20 minutos. La reacción se trató entonces con triacetoxiborohidruro de sodio (170 mg, 0.80 mmol) y la mezcla resultante se mantuvo hasta que la LCMS indicó el consumo completo del aldehido. La reacción se templó con bicarbonato de sodio saturado acuoso, las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 20 mi) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (20 mi) y salmuera (20 mi), después se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron para proporcionar un residuo que se purificó mediante HPLC inversa para proporcionar butil- { 3- [ 4- (ter-butilamino-metil) -2-fluoro-fenil] -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il} -amina (98 mg, 67%) como un sólido blanco: 1H NMR (400 MHz , METANOL-d4) d ppm 8.21 (dd, J=12.3, 1.5 Hz, 1 H) , 7.93 (dd, J=8.0, 1.7 Hz, 1 H) , 7.82 (s, 1 H) , 7.58 (d, J=9.7 Hz, 1 - - H), 7.50 (t, J=8.0 Hz, 1 H) , 6.68 (d, J=9.7 Hz, 1 H) , 4.02 (s, 2 H), 3.34 (t, J=7.2 Hz, 2 H) , 1.84 (s, 1 H) , 1.61 - 1.71 (m, 2 H), 1.39 - 1.50 (m, 2 H) , 1.32 (s, 9 H) , 1.25 - 1.30 (m, 1 H) , 0.91 - 0.99 (m, 3 H) ; LCMS (ESI) m/e 370.2 [(M+H)+, calculado para C21H29FN5 370.2]. 5.6.26. Síntesis de butil- [3- ( lH-indazol-5-il ) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -amina Una mezcla de 3-bromo-N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina (140 mg, 0.50 mmol) , pinacol éster de ácido ( lH-indazol-5-borónico (150 mg, 0.60 mmol), dicloro-bis (trifenilfosfino) paladio (II) (20 mg, 0.025 mmol), carbonato de potasio (110 mg, 0.75 mmol), acetonitrilo (1.5 mi) y H20 (0.5 mi) se calentó en un recipiente cónico sellado a 160 °C durante 1000 segundos mediante irradiación de microondas. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con etil acetato (2 mi) . Las capas orgánicas combinadas se concentraron bajo presión reducida para proporcionar un aceite que se purificó mediante HPLC inversa para proporcionar butil- [3- (lH-indazol-5-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -amina (100 mg, 65%) como un sólido blanco: XH NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.62 - 8.68 (m, 1 H) , 8.13 - - - 8.20 (m, 2 H) , 8.02 (dd, J=8.8, 1.5 Hz, 1 H) , 7.94 (d, J=9.9 Hz, 1 H) , 7.72 (d, J=8.8 Hz, 1 H) , 7.21 (d, J=9.9 Hz, 1 H) , 3.43 (t, J=7.2 Hz, 2 H) , 1.66 - 1.79 (m, 2 H) , 1.49 (dq, J=15.1, 7.4 Hz, 2 H) , 0.99 (t, J=7.5 Hz, 3 H) ; LCMS (ESI) m/e 307.2 [(M+H)+, calculado para C17Hi9N6 307.2]. 5.6.27. Síntesis de ter-butil éster de ácido (3-{ [3- ( 5-acetil-tiofen-2-il ) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -metil-amino } -propil ) -carbámico Parte A. N- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) N 1 -metil-propano-1 , 3-diamina y N*l*- (3-bromo-imidazo [1, 2 b] piridazin-6-il) -N*l*-metil-propano-l, 3-diamina 3-bromo-6-cloro-imidazo [1, 2-b] piridazina [13526-66-4] (1.0 g, 4.5 mmol) se disolvió en N-metil-propano-1, 3-diamina [6291-84-5] (8.0 mi, 77.3 mmol) y la solución se agitó a 65°C bajo un manto de N2 durante 4 horas, después se dividió entre bicarbonato de sodio saturado acuoso y etil acetato. El extracto orgánico se secó (MgS04) , se filtró, y se evaporó para obtener 1.31 g de un aceite amarillo como una - - mezcla de los compuestos del título. LRMS (ESI) m/z 284.0/286.0 [(M+H)]+, calculado para C10Hi4BrN5: 284.16. LRMS (ESI) m/z 284.0/286.0 [(M+H)]+, calculado para C10Hi4BrN5: 284.16.
Parte B. N- { 3- [ (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -metil-amino] -propil } -2, 2 , 2-trifluoro-acetamida Una mezcla de N- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) - ' -metil-propano-1, 3-diamina y N*l*- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -N*l*-metil-propano-l, 3-diamina (1.31 g, 4.6 mmol) se disolvió, con agitación, en etil acetato (46 mi) . Se agregó lentamente anhídrido trifluoroacético [407-25-0] (6.4 mi, 46.1 mmol) a la solución agitada a temperatura ambiente y la reacción se calentó a 50 °C durante 8 horas para asegurar una trifluoroacetilación completa. La reacción se lavó con salmuera, se secó (MgS04) , se evaporó y se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice, eluido con 50% (v/v) de acetona/hexanos) para aislar dos productos bien disueltos: Rf = 0.35 (el producto mono-trifluoroacetilado deseado) y Rf = 0.53 (el producto di-trifluoroacetilado) . Las fracciones de cromatografía del componente de Rf = 0.53 se combinaron y se evaporaron para obtener 0.87 g de un sólido amarillo. Las fracciones de cromatografía del - - componente de Rf = 0.35 (el producto deseado) se combinaron y se evaporaron para obtener 0.54 g de un aceite amarillo claro. LRMS (ESI) m/z 380.0/382.0 [(M+H)]+, calculado para Ci2H13Br 3 50: 380.17.
Parte C. ter-butil éster de ácido { 3- [ ( 3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -metil-amino] -propil } -carbámico Se agregó agua (10 mi) a una mezcla de N-{3-[(3-bromo-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il) -metil-amino] -propil } -2, 2, 2-trifluoro-acetamida (0.5 g, 1.4 mmol) y carbonato de potasio [584-08-7] (1.1 g, 8.0 mmol) en metanol (10 mi) y se dejó agitar a temperatura ambiente durante 3 dias . La mezcla se evaporó hasta secar y el residuo se trituró en etil acetato. La suspensión de etil acetato se filtró de sus sólidos insolubles, a ésta se agregó di-ter-butil dicarbonato [24424-99-5] (0.3 g, 1.5 mmol) y N-metilmorfolina [109-02-4] (0.5 mi, 4.3 mmol), la reacción se agitó durante la noche, se lavó con salmuera, se secó (MgS04), y se evaporó para producir 0.5 g de un aceite amarillo claro. LRMS (ESI) m/z 384.1/386.1 [(M+H)]+, calculado para Ci5H22BrN502 : 384.28.
Parte D. ter-butil éster de ácido (3-{ [3- (5-acetil-tiofen-2-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -metil-amino } -propil) -carbámico. Se preparó ter-butil éster de ácido (3- - - { [3- (5-acetil-tiofen-2-il) -imidazo [1, 2-b]piridazin-6-il] -metil-amino } -propil ) -carbámico y se aisló de manera similar al procedimiento detallado en el ejemplo 5.6.17 a partir de una mezcla de ter-butil éster de ácido { 3- [ ( 3-bromo-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) -metil-amino] -propil } -carbámico (0.5 g, 1.3 mmol) , ácido 5-acetil-2-tiofenoborónico [206551-43-1] (0.3 g, 1.5 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (0.5 g, 2.5 mmol), y [1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (0.1 g, 0.1 mmol) en una solución de 30% (v/v) de agua en 1, 2-dimetoxietano (30 mi) para proporcionar 0.16 g de un polvo amarillo, mp. 148-149°C. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.37 (s, 9 H) 1.78 (quin, J=6.95 Hz, 2 H) 2.54 (s, 3 H) 3.05 (q, J=6.57 Hz, 2 H) 3.17 (s, 3 H) 3.61 (t, J=7.20 Hz, 2 H) 6.88 (br. s., 1 H) 7.12 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.82 (d, J=4.29 Hz, 1 H) 7.92 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.97 (d, J=4.04 Hz, 1 H) 8.20 (s, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 430.1 [(M+H)]+, calculado para C21H27B 5O3S : 429.55. 5.6.28. Síntesis de N- [ 3- ( 5-aminometil-tiofen-2-il) -imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il] -N ' -metil- ' -fenil-etano-1, 2-diamina - - Parte A. Ni- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -N3-metil-N3-fenilpropano-1, 3-diamina A 300 mg (1.389 mmol) de la 3-bromo-6-fluoroimidazo [1, 2-b] piridazina, se agregó Nl-metil-Nl-fenilpropano-1, 3-diamina (456 mg, 2.778 mmol) Cs2C03 (903 mg, 2.778 mmol) y 10 mi de DMF. Esta mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Ésta se diluyó con 30 mi de EtOAc, y 15 mi de agua. La capa orgánica se lavó con salmuera y se secó sobre MgS0 . Ésta se concentró y se purificó utilizando cromatografía de gel de sílice (ISCO) eluyendo con 0 - 10% de MeOH/DCM para obtener 301 mg (60%) del producto.
Parte B. N- [3- (5-aminometil-tiofen-2-il) -imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il] -N 1 -metil- 1 -fenil-etano-1, 2-diamina. El producto aislado obtenido de la parte A se acopló al ácido (4- (aminometil) fenil) borónico mediante la reacción Suzuki descrita en el ejemplo 5.6.19 para obtener el compuesto del título en un rendimiento de 56%. 1H N R (400 Hz, METANOL-d4 ) µ ppm 2.14 (t, J=7.06 Hz, 2 H) 3.08 (s, 3 H) 3.53 - 3.69 (m, 4 H) 4.27 (s, 2 H) 6.75 (t, J=7.28 Hz, 1 H) 6.85 - 6.93 (m, 3 H) 7.26 (t, J=8.05 Hz, 2 H) 7.65 (d, J=8.38 Hz, 2 H) 7.80 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 7.95 (s, 1 H) 8.38 (d, - - J=8.38 Hz, 2 H); LRMS (ESI) m/e 387.0 [ (M + H)+, calculado para C23H26 S 386.0] . 5.6.29. Síntesis de butil- [3- (lH-imidazol-4-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -amina Parte A butilamino) imidazo [1,2-b] piridazin-3-il) bor Una solución pre-enfriada (-78 °C) de 3-bromo-N-butilimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina (200 mg, 0.74 mmol) y tetrahidrofurano (4 mi) se trató por goteo con n-butilitio (1.2 mi, 1.6 M, 1.9 mmol). La mezcla de reacción resultante se mantuvo a -78 °C durante 5 minutos, después se trató por goteo con tris (isopropil) borato (0.21 mi, 0.89 mmol) y se mantuvo a -78 °C durante 2.5 horas. La reacción se templó con ¾0 (1 mi) y se dejó calentar a temperatura ambiente. Los volátiles orgánicos se retiraron bajo presión reducida, y la capa acuosa se acidificó con 1 N de HCl hasta que se formó un precipitado blanco. El sólido se recolectó mediante filtración para proporcionar ácido (6- - - (butilamino) imidazo [1, 2-b]piridazin-3-il) borónico (100 mg, 58%) como un sólido blanco: 1H NMR (400 MHz, ETANOL-d4) d ppm 7.56 (d, J=9.9 Hz, 1 H) , 7.39 (s, 1 H) , 6.66 (d, J=9.9 Hz, 1 H), 3.25 - 3.35 (m, 2 H) , 1.60 - 1.75 (m, 1 H) , 1.37 - 1.58 (m, 1 H) , 0.94 - 1.08 (m, 1 H) ; LCMS (ESI) m/e 235.2 [(M+H)+, calculado para C10H15BN4O2 235.1].
Parte B. butil- [3- (lH-imidazol-4-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -amina . Una mezcla de ácido (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) borónico (120 mg, 0.5 mmol) , 4-bromo-lH-imidazol (75 mg, 0.5 mmol) , aducto de dicloro [1, 1' -bis (difenilfosfino) ferroceno] paladio (II) diclorometano (40 mg, 0.050 mmol), fosfato de potasio (210 mg, 1.0 mmol), D E (1.5 mi) y H20 (0.5 mi) se calentó en un recipiente cónico sellado a 140 °C durante 600 segundos mediante irradiación de microondas. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con etil acetato (2 mi) . Las capas orgánicas combinadas se concentraron bajo presión reducida para proporcionar un aceite que se purificó mediante HPLC en fase inversa para proporcionar butil- [3- ( lH-imidazol-4-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -amina (95 mg, 72%) como un sólido blanco: ¾ NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 7.99 (br. s., 1 H), 7.82 (d, J=1.0 Hz, 2 H) , 7.60 (d, J=9.6 Hz, 1 H) , 6.68 (d, J=9.6 Hz, 1 H) , 3.44 (t, J=7.1 Hz, 2 H) , 1.69 - 1.82 (m, 2 H), 1.46 - 1.60 (m, 2 H) , 1.03 (t, J=7.3 Hz, 3 H) ; LCMS (ESI) m/e 257.2 [(M+H)+, calculado para Ci3Hi7N6 257.1]. - - 5.6.30. Síntesis de 3- (4- (aminometil) -3-fluorofenil) -N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina Parte A. ter-butil 4-bromo-2-fluorobencilcarbamato A la solución de sal de mono HC1 de •(4-bromo-2-fluorofenil)metanamina (336 mg, 1.4 mmol) en 1:1 de 1,4-dioxano/agua (8 mi) se agregó trietil amina (312 mg, 3.08 mmol) y di-ter-butil dicarbonato (366 mg, 1.68 mmol). La reacción se mantuvo a temperatura ambiente durante 2 días, y después se templó con solución saturada de bicarbonato de sodio (8 mi) y se extrajo con etil acetato (8 mi) tres veces. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (8 mi) y se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida para proporcionar ter-butil 4-bromo-2-fluorobencilcarbamato (419 mg rendimiento 96%) como un sólido blanco: XH NMR (CLOROFORMO-d) d: 7.05 -7.29 (m, 3H) , 3.65 (s, 2H) , 1.39 (s, 9H) ; LRMS(ESI) m/e 304.0 - - [(M+H)+, calculado para Ci2Hi6BrFN02 304.0].
Parte B. ter-butil 2-fluoro-4- ( 4 , 4 , 5, 5-tetrametil-1,3, 2-dioxaborolan-2-il ) bencilcarbamato La mezcla de ter-butil 4-bromo-2-fluorobencilcarbamato (419 mg, 1.38 mmol) , bis (pinacolato) diboro (385 mg, 1.52 mmol), [1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II) (101 mg, 0.138 mmol), acetato de potasio (406 mg, 4.13 mmol) y 1,4-dioxano (10 mi) se agitó a 80°C durante 18 horas. La reacción se filtró después y se concentró para proporcionar un residuo que se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice (0-30% de etil acetato en hexano) para proporcionar ter-butil 2-fluoro-4- (4, 4, 5, 5-tetrametil-l, 3, 2-dioxaborolan-2-il) bencilcarbamato (293 mg, rendimiento 61%) como un aceite transparente: 1H NMR (CLOROFORMO-d) d: 7.51 -7.62 (m, 1H) , 7.47 (d, J = 10.4 Hz, 1H) , 7.35 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 5.3 Hz, 2H) , 1.46 (s, 9H) , 1.33 - 1.38 (m, 12H) .
Parte C. ter-butil 4- (6- (butilamino) imidazo [1, 2- - - b] piridazin-3-il) -2-fluorobencilcarbamato A una mezcla de 3-bromo-N-butilimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina (187 mg, 0.7 mmol), ter-butil 2-fluoro-4- (4,4,5, 5-tetrametil-l, 3 , 2-dioxaborolan-2-il ) bencilcarbamato (293 mg, 1.2 mmol), [ 1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) (24 mg, 0.034 mmol) y trifosfato de potasio (144 mg, 1.04 mmol) se agregó 3:1 de acetonitrilo/agua (3 mi) . La mezcla resultante se calentó a 145°C (microondas) durante 800 segundos. La reacción se filtró después y se concentró. El residuo se disolvió en metanol, y después se filtró de nuevo. La filtración se purificó finalmente mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar ter-butil 4- (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) -2-fluorobencilcarbamato (110 mg, rendimiento 38%) como un sólido blanco: XH N R (CLORO ORMO-d) d: 8.02 (dd, J = 11.9, 1.3 Hz, 1H) , 7.78 - 7.89 (m, 2H) , 7.74 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 7.43 (t, J = 8.0 Hz, 1H) , 7.28 (s, 2H) , 6.52 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 4.95 (br. s., 1H) , 4.31 - 4.57 (m, 3H) , 3.45 (td, J = 7.1, 5.6 Hz, 2H) , 1.68 - 1.80 (m, 2H) , 1.02 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ; LR S(ESI) m/e 414.3 [(M+H)+, - - calculado para C22H29 N5O2 414.2].
Parte D. 3- (4- (aminometil) -3-fluorofenil ) -N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina . La solución de ter-butil 4- (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) -2-fluorobencilcarbamato (91 mg, 0.22 mmol) se enfrió a 0°C y se trató con acetil cloruro (518 mg, 6.6 mmol). La reacción se mantuvo a temperatura ambiente durante la noche. La solución resultante se concentró bajo presión reducida para proporcionar sal de HC1 de 3- (4- (aminometil) -3-fluorofenil) -N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina (75 mg, rendimiento 88%) como un sólido blanco: XH NMR (METANOL-d4) d: 8.38 (s, 1H), 8.23 (d, J = 11.4 Hz, 1H) , 8.05 (d, J = 7.8 Hz, 1H) , 8.00 (d, J = 9.9 Hz, 1H) , 7.74 (t, J = 7.8 Hz, 1H) , 7.30 (d, J = 9.9 Hz, 1H) , 4.31 (s, 2H) , 3.43 (t, J = 7.1 Hz, 2H) , 1.65 - 1.84 (m, 2H) , 1.42 - 1.59 (m, 2H) , 1.01 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 314.4 [(M+H)+, calculado para Ci7H2iFN5 314.2] . 5.6.31. Síntesis de [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -butil-metil-amina Parte A. ( 3-bromo-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il ) - butil-metil-amina Una solución pura de 3-bromo-6-cloro-imidazo [ 1, 2-b]piridazina [13526-66-4] (522.9 mg, 2.3 mmol) en N-metil butilamina [110-68-9] (3.0 mi, 24.3 mmol) y Base de Hunig [7087-68-5] (0.6 mi, 3.5 mmol) se agitó bajo un manto de N2 a 65 °C durante la noche después se evaporó para proporcionar 0.9 g de un sólido amarillo, utilizado en la siguiente etapa sin purificación adicional. LRMS (ESI ) m/z 283.1/285.1 [(M+H)]+, calculado para CuHi5BrN4: 283.17.
Parte B. [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -butil-metil-amina . A una mezcla de (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -butil-metil-amina (377.7 mg, 1.3 mmol), hidrocloruro de ácido 4-aminometilfenilborónico [75705-21-4] (302.4 mg, 1.6 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (612.7 mg, 2.7 mmol), y [1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (110.4 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 25 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (15 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de - - N2 mientras se agitó rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta con N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85°C durante 17 horas, después se enfrió y se dividió entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (CaS04) , se evaporó y se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice, eluido con 1% de NH40H en 10% (v/v) de metanol/etil acetato) para aislar un sólido café que se trituró en heptano para precipitar un sólido café. El solvente de trituración se evaporó después para proporcionar [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -butil-metil-amina como 41.8 mg de un sólido blanco, mp. 99-101°C. XH NMR (400 Hz, DMSO-d6) d ppm 0.94 (t, J=7.33 Hz, 3 H) 1.30 - 1.42 (m, 2 H) 1.47 - 1.70 (m, 2 H) 1.90 (br. s., 1 H) 3.10 (s, 3 H) 3.51 - 3.57 (m, 2 H) 3.75 (s, 2 H) 7.05 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.42 (d, J=8.34 Hz, 2 H) 7.85 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 7.92 (s, 1 H) 8.14 (d, J=8.34 Hz, 2 H) . LRMS (ESI) m/z 310.3 [(M+H)]+, calculado para C18H23 5: 309.42. 5.6.32. Síntesis de N-butil-3- (isoindolin-5-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina - - Parte A. ter-butil 5- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il ) isoindolina-2-carboxilato A una mezcla de ácido (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) borónico (47 mg, 0.2 mmol), ter-butil 5-bromoisoindolina-2-carboxilato (47 mg, 0.16 mmol), [1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II) (7 mg, 0.01 mmol) y fosfato tripotásico (41 mg, 0.3 mmol) se agregó 3:1 de acetonitrilo/agua (3 mi) . La mezcla resultante se calentó a 145°C (microondas) durante 800 segundos. La reacción se filtró después y se concentró. El residuo se disolvió en metanol, y después se filtró de nuevo. La filtración se purificó finalmente mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar ter-butil 5- (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) isoindolina-2-carboxilato (43 mg, rendimiento 66%) como un sólido blanco: 1H NMR (METAN0L-d4) d: 8.15 (d, J = 10.9 Hz, 1H) , 8.00 - 8.08 (m, 1H) , 7.75 (s, 1H) , 7.59 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 7.35 (t, J = 9.1 Hz, 1H) , 6.68 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 4.69 (br. s., 4H) , 3.37 (d, J = 7.3 Hz, 2H) , 1.65 - 1.78 (m, 2H) , 1.56 (s, 9H) , 1.45-1.53 (m, 2H) , 1.02 (td, J = 7.3, 2.3 Hz, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 408.3 [(M+H)+, - - calculado para C23H30 5O2 408.2].
Parte B. N-butil-3- (isoindolin-5-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina . La solución de ter-butil 5- (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) isoindolina-2-carboxilato (38 mg, 0.09 mmol) se enfrió a 0°C y se trató con acetil cloruro (220 mg, 2.8 mmol). La reacción se mantuvo a temperatura ambiente durante la noche. La solución resultante se concentró bajo presión reducida para proporcionar hidrocloruro de N-butil-3- ( isoindolin-5-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina (12 mg, rendimiento 35%) como un sólido blanco: ?? NMR (METANOL-d ) d: 8.26 (s, 1H) , 8.17 - 8.21 (m, 2H) , 7.98 (d, J = 10.1 Hz, 1H) , 7.65 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 9.9 Hz, 1H) , 4.76 (s, 4H) , 3.36 -3.45 (m, 2H), 1.63 - 1.81 (m, 2H) , 1.40 - 1.56 (m, 2H) , 1.00 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ; LR S(ESI) m/e 308.4 [(M+H)+, calculado para C18H22 5 308.2] . 5.6.33. Síntesis de 1- { 3- [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -propil } -pirrolidin-2-ona Parte A. 1- ( 3- ( ( 3-bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) amino) propil) pirrolidin-2-ona - - La 3-bromo-6-fluoroimidazo [ 1 , 2-b] piridazina se alquiló con 1- (3-aminopropil) pirrolidin-2-ona, bajo la misma condición de reacción utilizada en la síntesis de Ni- (3-bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) -N3-metil-N3-fenilpropano-1,3-diamina del ejemplo 5.6.29 para obtener 68% del producto.
Parte B. l-{3- [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -propil } -pirrolidin-2-ona . La l-(3-((3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) amino) propil) pirrolidin-2-ona también se acopló a ácido (4- (aminometil) fenil) borónico utilizando las condiciones de acoplamiento Suzuki descritas en el ejemplo 5.6.19 para obtener el producto del título en un rendimiento de 64%. XH N R (400 Hz, METANOL-d4) d ppm 1.94 - 2.09 (m, 4 H) 2.33 - 2.43 (m, 2 H) 3.36 - 3.53 (m, 6 H) 4.16 (s, 2 H) 6.74 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.57 (m, J=8.34 Hz, 2 H) 7.65 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.81 (s, 1 H) 8.25 (m, J=8.34 Hz, 2 H); LRMS (ESI) m/e 365.0 [ ( + H)+, calculado para C2oH24N60 364.0] . 5.6.34. Síntesis de 5- ( 6- ( (3- (2-oxopirrolidin-l-il) propil) amino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) tiofeno-2-carboxamida - - Parte A. ácido 5- (6- ( (3- (2-oxopirrolidin-l-il) propil) amino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) tiofeno-2-carboxilico El acoplamiento Suzuki del ácido 5-boronotiofeno-2-carboxilico y 1- (3- ( ( 3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) propil) pirrolidin-2-ona utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.19 produjo 64% del compuesto del titulo.
Parte B. N- (2 , 4-dimetoxibencil) -5- ( 6- ( (3- (2-oxopirrolidin-l-il) propil) amino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) tiofeno-2-carboxamida La reacción de acoplamiento de amida del ácido carboxilico con 2 , 4-dimetoxi-bencilamina proporcionó 83% del - - producto.
Parte C. 5- ( 6- (( 3- (2-oxopirrolidin-l-il ) propil ) amino) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il ) tiofeno-2-carboxamida. A 50 mg (0.094 mmol) de N- (2, 4-dimetoxibencil) -5- ( 6- ( ( 3- (2-oxopirrolidin-l-il) propil) amino) imidazo [1,2-b] piridazin-3-il) tiofeno-2-carboxamida disueltos en 1 mi de DC se agregaron 5 mi de TFA. El solvente resultante se agitó a temperatura ambiente durante 0.5 horas y después se concentró. Éste se purificó en la HPLC de preparación para obtener 26 mg (72%) del producto deseado. XH NMR (400 MHz, METAN0L-d4) d ppm 2.04 (quin, J=7.39 Hz, 4 H) 2.33 - 2.41 (m, 2 H) 3.45 - 3.60 (m, 6 H) 6.76 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.64 -7.72 (m, 2 H) 7.75 (d, J=4.04 Hz, 1 H) 7.94 (s, 1 H) ; LRMS (ESI) m/e 385.0 [ (M + H)+, calculado para Cis^o eC S 384.0]. 5.6.35. Síntesis de N- (2-aminoetil) -4- (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) benzamida Parte A. metil 4- (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) benzoato - - A una mezcla de 3-bromo-N-butilimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina (386 mg, 1.43 mmol), ácido (4- (metoxicarbonil) fenil) borónico (310 mg, 1.72 mmol), [1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) (50 mg, 0.07 mmol) y carbonato de potasio (296 mg, 2.15 mmol) se agregó 3:1 de acetonitrilo/agua (5 mi). La mezcla resultante se calentó a 145°C (microondas) durante 800 segundos. La reacción se filtró después y se concentró. El residuo se disolvió en metanol, y después se filtró de nuevo. La filtración se purificó finalmente mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice (50% de etil acetato en hexano) para proporcionar metil 4- (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) benzoato (312 mg, 67% rendimiento) como un sólido amarillo: XH N R (CLOROFORMO-d) d: 8.22 - 8.34 (m, 2H), 8.09 - 8.20 (m, 2H) , 7.93 (s, 1H) , 7.71 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 6.51 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 3.97 (s, 3H) , 3.41 - 3.53 (m, 2H), 1.72 (t, J = 7.2 Hz, 2H) , 1.50 (dd, J = 15.0, 7.5 Hz, 2H) , 1.02 (t, J = 7.5 Hz, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 325.2 [(M+H)+, calculado para C 8H2iN402 325.2].
Parte B. N- (2-aminoetil) -4- (6-(butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) benzamida . La - - solución de metil aluminio (2.0 M en hexano, 0.31 mi, 0.62 mmol) en tolueno (2 mi) se enfrió a 0°C. Después a la solución en agitación se agregó por goteo respectivamente etano-1, 2-diamina (37.4 mg, 0.62 mmol), y la solución de metil 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il) benzoato (126 mg, 0.39 mmol) en tolueno (1 mi). La reacción resultante se sometió a reflujo a 110°C durante la noche, y después se enfrió a 0°C. A la solución se agregó por goteo agua (0.05 mi), metanol (0.2 mi) y cloroformo (0.2 mi). La mezcla resultante se sometió a reflujo en un baño de vapor durante 15 minutos, y después se filtró sobre sulfato de sodio y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC de preparación para proporcionar sal de ácido N-(2-aminoetil) -4- (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il)benzamida acético (5.7 mg, rendimiento 4%) como un sólido amarillo: XH NMR (METAN0L-d4) d: 8.27 - 8.43 (m, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.95 - 8.04 (m, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.89 (s, 1H) , 7.65 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 9.9 Hz, 1H) , 3.68 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 3.41 (t, J = 7.2 Hz, 2H) , 3.16 (br. s., 2H) , 1.95 (br. s., 5H) , 1.73 (t, J = 7.1 Hz, 2H) , 1.42 - 1.61 (m, 2H) , 1.02 (t, J = 7.3 Hz, 3H); LR S(ESI) m/e 353.4 [(M+H)+, calculado para C19H25N6O 353.2]. 5.6.36. Síntesis de N-butil-3- (4- (4, 5-dihidro-lH-imidazol-2-il) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina - - La solución de metil aluminio (2.0 M en hexano, 0.31 mi, 0.62 mmol) en tolueno (2 mi) se enfrió a 0°C. Después a la solución en agitación se agregó por goteo respectivamente etano-1, 2-diamina (37.4 mg, 0.62 mmol), y la solución de metil 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il)benzoato (126 mg, 0.39 mmol) en tolueno (1 mi). La reacción resultante se sometió a reflujo a 110°C durante la noche, y después se enfrió a 0°C. A la solución se agregó por goteo agua (0.05 mi), metanol (0.2 mi) y cloroformo (0.2 mi) . La mezcla resultante se sometió a reflujo en un baño de vapor durante 15 minutos, y después se filtró sobre sulfato de sodio y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC de preparación para proporcionar sal de ácido N-butil-3-(4- (4, 5-dihidro-lH-imidazol-2-il) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina acético (3.9 mg, rendimiento 3%) como un sólido amarillo: XH NMR (METANOL-d4) d: 8.46 - 8.59 (m, J = 8.8 Hz, 2H), 8.01 (s, 1H) , 7.93 - 7.98 (m, J = 8.8 Hz, 2H) , 7.67 (d, J = 9.9 Hz, 1H) , 6.80 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 4.13 (s, 4H) , 3.42 (t, J = 7.1 Hz, 2H) , 1.86 - 2.05 (m, 6H) , 1.74 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.39 - 1.61 (m, 2H) , 1.03 (t, J = 7.3 Hz, - - 3H) ; LRMS(ESI) m/e 335.4 [(M+H)+, calculado para Ci9H23Ns 335.2] . 5.6.37. Síntesis de 3- (6- (aminometil) piridin-3-il) -N-butilimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina A una mezcla de ácido (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) borónico (36 mg, 0.15 mmol) , (5-bromopiridin-2-il) metanamina (35 mg, 0.18 mmol), [1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II) (5 mg, 0.01 mmol) y carbonato de potasio (31 mg, 0.23 mmol) se agregó 3:1 de acetonitrilo/agua (3 mi) . La mezcla resultante se calentó a 145°C (microondas) durante 800 segundos. La reacción se filtró después y se concentró. El residuo se disolvió en metanol, y después se filtró de nuevo. La filtración se purificó finalmente mediante HPLC de preparación para proporcionar sal de ácido 3- ( 6- (aminometil) piridin-3-il) -N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina acético (13 mg, rendimiento 29%) como un sólido blanco: ?? N R (METANOL-d4) d: 8.64 (d, J = 8.3 Hz, 1H) , 7.91 (s, 1H) , 7.66 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 9.9 Hz, 1H) , 3.39 (t, J = 7.1 Hz, 2H) , 1.94 (s, 4H) , 1.71 (t, J = 7.3 Hz, 2H) , 1.41 - 1.58 (m, 2H) , 1.01 (t, J = 7.5 Hz, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 297.4 [ (M+H) +, calculado - - para C16H2iN6, 297.2] . 5.6.38. Síntesis de isopropil éster de ácido {3- [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -propil } -metil-carbámico Parte A. 2 , 2 , 2-trifluoro-N- ( 3-metilamino-propi acetamida Trifluoroacetato de etilo [383-63-1] (7.5 mi, 62.9 mmol) se agregó lentamente a una solución a temperatura ambiente de Nl-metilpropano-1, 3-diamina [6291-84-5] (6.5 mi, 62.8 mmol) en THF anhidro (100 mi) después se dejó agitar, bajo un manto de N2 durante 17 horas. La solución de reacción se evaporó entonces para proporcionar 12.3 g de un líquido transparente incoloro. LRMS (ESI) m/z 185.1 [(M+H)]+, calculado para C6HuF3N20: 184.16.
Parte B. isopropil éster de ácido metil- [3- (2, 2, 2-trifluoro-acetilamino) -propil] -carbámico - - A una solución rápidamente agitada, a 0°C, cubierta por N2 de 2, 2, 2-trifluoro-N- ( 3-metilamino-propil ) -acetamida (6.0 g, 32.4 mmol) y N-metilmorfolina [109-02-4] (7.1 mi, 64.6 mmol) en etil acetato (65 mi) se agregó continuamente una solución de 1.0 M de cloroformato de isopropilo en tolueno (32.4 mi) durante el cuerpo de 10 minutos. La reacción se dejó agitar y se calentó a temperatura ambiente durante la noche momento en el cual se lavó con salmuera, se secó (MgS04) y se evaporó para proporcionar 9.0 g de un aceite amarillo claro. LRMS (ESI) m/z 271.1 [(M+H)]+, calculado para CioHi7F3N203 : 270.25.
Parte C. isopropil éster de ácido ( 3-amino-propil ) -metil-carbámico Una suspensión de isopropil éster de ácido metil-[3- (2, 2, 2-trifluoro-acetilamino) -propil] -carbámico (9.0 g, 33.15 mmol), y carbonato de potasio [584-08-7] en 50% (v/v) de metanol/agua (200 mi) se agitó a temperatura ambiente, bajo un manto de N2 durante 17 horas, se filtró, el filtrado se evaporó para reducir su volumen. La solución del producto acuoso resultante se colocó en un extractor continuo y se extrajo con etil acetato durante 2 días. El extracto de etil acetato se secó (CaS04) y se evaporó para proporcionar 6.3 g de un aceite amarillo claro. LRMS (ESI) m/z 175.1 [(M+H)]+, - - calculado para C8H18N202: 174.24.
Parte D. isopropil éster de ácido [ 3- ( 3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -propil] -metil-carbámico Una mezcla agitada de isopropil éster de ácido (3-amino-propil) -metil-carbámico (3.0 g, 17.0 mmol) , 3-bromo-6-cloro-imidazo [1, 2-b] piridazina [13526-66-4] (723.7 mg, 3.1 mmol), y base de Hunig [7087-68-5] (0.6 mi, 3.2 mmol) se calentó a 85°C, bajo un manto de N2, durante 3 dias después se pre-absorbió sobre gel de sílice y se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice eluido con 10% (v/v) de metanol/etil acetato) para obtener 1.0 g de un aceite amarillo claro. LRMS (ESI ) m/z 370.2/372.2 [(M+H)]+, calculado para Ci4H2oBrN502 : 370.25.
Parte E. isopropil éster de ácido {3- [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -propil } -metil-carbámico. A una mezcla de isopropil éster de ácido [3- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -propil] -metil-carbámico (601.4 mg, 1.6 mmol), hidrocloruro de ácido (4-(aminometil) fenil) borónico [75705-21-4] (366.3 mg, 2.0 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (1.1 g, 4.9 mmol), y [ 1 , 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloro-paladio(II), complejado con diclorometano [95464-05-4] (138.7 - - mg, 0.2 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 50 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (12 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción de adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85°C durante 17 horas después se enfrió y se separó entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgS04) se purificó mediante RP-HPLC de preparación. Las fracciones de cromatografía purificadas se combinaron y se dividieron entre bicarbonato de sodio saturado acuoso y etil acetato. El extracto orgánico se secó (CaS04) y se evaporó para proporcionar isopropil éster de ácido { 3- [3- ( 4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -propil } -metil-carbámico como 19.4 mg de un aceite amarillo claro. XH NMR (400 MHz, METAN0L-d4) d ppm 1.12 (br. s., 2 H) 1.17 - 1.28 (m, 4 H) 1.84 - 1.98 (m, 2 H) 2.90 (s, 2 H) 3.10 - 3.21 (m, 1 H) 3.32 - 3.43 (m, 3 H) 3.88 (s, 2 H) 4.78 - 4.87 (m, 4 H) 6.69 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.45 (d, J=8.34 Hz, 2 H) 7.61 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.69 - 7.75 (m, 1 H) 8.12 (dd, J=8.21, 2.65 Hz, 2 H) . 13C NMR (100 MHz, METANOL-d4) d ppm 22.58, 37.39, 40.24, 46.39, 70.29, 110.81, 114.20, - - 125.95, 126.19, 127.75, 127.85, 128.87, 129.41, 129.65, 129.73, 130.34, 138.67, 141.99, 155.32. LRMS (ESI) m/z 397.3 [(M+H)]+, calculado para C2iH28N602: 396.50. 5.6.39. Síntesis de 5- (6-butilamino-imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) -indan-l-ona Parte 2-il) -2, 3-dihidro-lH-inden-l-ona Una mezcla de 5-bromo-2 , 3-dihidro-lH-inden-l-ona (1.1 g, 5.0 mmol) , bis (pinacolato) diboro (1.9 g, 7.5 mmol) , acetato de potasio (2.5 g, 25 mmol), aducto de dicloro [1, 1' -bis (difenilfosfino) ferroceno] aladio (II) diclorometano (400 mg, 0.5 mmol), y DMF (25 mi) se mantuvo a 80°C durante 12 horas. La mezcla resultante se dejó enfriar a temperatura ambiente, después se dividió entre etil acetato (200 mi) y H20 (240 mi) . Las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo con etil acetato (2 x 50 mi) . Las capas orgánicas - - combinadas se lavaron con H20 y salmuera, después se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron para proporcionar un residuo oscuro que se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02) para proporcionar 5- ( 4 , 4 , 5, 5-tetrametil-1, 3, 2-dioxaborolan-2-il) -2, 3-dihidro-lH-inden-l-ona . XH NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 7.96 (s, 1 H) , 7.80 - 7.84 (m, 1 H) , 7.74 - 7.79 (m, 1 H) , 3.13 - 3.20 (m, 2 H) , 2.69 - 2.75 (m, 2 H) , 1.39 (s, 12 H) .
Parte B. 5- ( 6-butilamino-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il ) -indan-l-ona . Una mezcla de 3-bromo-N-butilimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina (400 mg, 1.5 mmol), 5-(4, ,5,5-tetrametil-1, 3, 2-dioxaborolan-2-il ) -2, 3-dihidro-lH-inden-l-ona (770 mg, 3.0 mmol), aducto de dicloro [1, 1' -bis (difenilfosfino) ferroceno] paladio (II) diclorometano (240 mg, 0.30 mmol), fosfato de potasio (1.0 g, 4.5 mmol), DME (6 mi) y H20 (2 mi) se calentó en un recipiente sellado a 80°C durante 12 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, después la capa orgánica se separó y se concentró bajo presión reducida para proporcionar un aceite que se purificó mediante cromatografía instantánea (Si02) para proporcionar 5- (6-butilamino-imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) -indan-l-ona (410 mg, 85%) como un sólido color rosa: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 8.52 (s, 1 H) , 8.22 (d, J=8.1 Hz, 1 H) , 8.07 (s, 1 H), 7.78 (s, 1 H) , 7.65 (d, J=8.1 Hz, 1 H) , 7.17 (t, J=5.4 Hz, 1 H) , 6.75 (d, J=9.6 Hz, 1 H) , 3.22 - 3.42 - - (m, 3 H), 3.05 - 3.18 (m, 2 H) , 2.58 - 2.71 (m, 2 H) , 1.58 -1.73 (m, 2 H) , 1.34 - 1.51 (m, 2 H) , 0.89 - 1.00 (m, 3 H) ; LCMS (ESI) m/e 321.2 [(M+H)+, calculado para C19H2iN40 321.2] . 5.6.40. Síntesis de [3- (l-amino-indan-5-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -butil-amina Una mezcla de 5- ( 6-butilamino-imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) -indan-l-ona (50 mg, 0.16 mmol), acetato de amonio (500 mg) , y metanol (5 mi) se mantuvo a temperatura ambiente durante 5 minutos, después se trató con cianoborohidruro de sodio (500 mg) . La mezcla resultante se calentó a 50°C y se mantuvo durante 16 horas, después se enfrió a temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida. El residuo se dividió entre etil acetato y bicarbonato de sodio saturado acuoso. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con etil acetato (2 x) . Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, después se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron para proporcionar un residuo que se purificó mediante HPLC en fase inversa para proporcionar [ 3- (l-amino-indan-5-il ) -imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ] -butil-amina (26 mg, 52%) como - - un sólido blanco: XH NMR (400 MHz, ETANOL-d4) d ppm 8.22 (s, 1 H) , 8.12 (d, J=8.1 Hz, 1 H) , 7.78 (s, 1 H) , 7.54 - 7.66 (m, 2 H), 6.72 (d, J=9.6 Hz, 1 H) , 4.77 - 4.83 (m, 1 H) , 3.38 (t, J=7.2 Hz, 2 H) , 3.18 - 3.30 (m, 1 H) , 3.01 - 3.13 (m, 1 H) , 2.59 - 2.73 (m, 1 H) , 2.06 - 2.22 (m, 1 H) , 1.72 (quin, J=7.4 Hz, 2 H) , 1.43 - 1.57 (m, 2 H) , 1.02 (t, J=7.3 Hz, 3 H) ; LCMS (ESI) m/e 322.3 [ ( +H) +, calculado para C19H24 5 322.2]. 5.6.41. Síntesis de N-butil-3- (4- (1, 4, 5, 6-tetrahidropirimidin-2-il ) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina La solución de metil aluminio (2.0 M en hexano, 0.32 mi, 0.64 mmol) en tolueno (2 mi) se enfrió a 0°C. Después, a la solución en agitación se agregó respectivamente por goteo propano-1, 3-diamina (48 mg, 0.64 mmol), y la solución de metil 4- (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il)benzoato (130 mg, 0.4 mmol) en tolueno (1 mi). La reacción resultante se sometió a reflujo a 110°C durante la noche, y después se enfrió a 0°C. A la solución se agregó por goteo agua (0.05 mi), metanol (0.2 mi) y cloroformo (0.2 mi) . La mezcla resultante se sometió a reflujo en un baño de - - vapor durante 15 minutos, y después se filtró sobre sulfato de sodio y se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC de preparación para proporcionar sal de ácido N-butil-3- (4- (1, 4, 5, 6-tetrahidropirimidin-2-il) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina acético (23.3 mg, rendimiento 17%) como un sólido blanco: XH NMR (METANOL-d4) d: 8.42 - 8.56 (m, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.96 (s, 1H) , 7.75 - 7.86 (m, J = 8.6 Hz, 2H) , 7.66 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 6.78 (d, J = 9.9 Hz, 1H) , 3.64 (t, J = 5.8 Hz, 4H) , 3.41 (t, J = 7.1 Hz, 2H) , 2.16 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 1.94 (s, 5H), 1.73 (t, J = 7.2 Hz, 2H) , 1.42 - 1.58 (m, 2H) , 1.02 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 349.5 [(M+H)+, calculado para C2oH24 6 349.2].
Síntesis de 1- (5-{ 6- [3- (2-metil-piperidin 1-il) -propilamino] -imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il } -tiofen-2-il)-etanona Parte A. 3-bromo-N- (3- (2-metilpiperidin-l-il ) propil ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina A 400 mg (1.852 mmol) del fluoruro de arilo se - - agregó 1- (3-aminopropil) pirrolidin-2-ona (347 mg, 2.222 mmol), 2 mi de isopropanol, y trietilamina (0.52 mi, 3.704 mmol) . Esta mezcla se sometió a microondas a 140°C durante 0.5 horas. Ésta se diluyó con EtOAc, se lavó con salmuera y se secó sobre gS04. Ésta se purificó con gel de sílice (ISCO) eluyendo con 0-10 MeOH/DCM para obtener 486 mg (74%) de la aril amina.
Parte B. 1- (5-{ 6- [3- (2-metil-piperidin-l-il) -propilamino] -imidazo [l,2-b]piridazin-3-il} -tiofen-2-il ) -etanona. La reacción de 3-bromo-N- ( 3- (2-metilpiperidin-l-il ) propil ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina con ácido (5-acetiltiofen-2-il) borónico, bajo la condición de acoplamiento Suzuki descrita en el ejemplo 5.6.19, proporcionó el compuesto deseado en un rendimiento de 71%. 1H N R (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.34 (d, J=6.57 Hz, 3 H) 1.45 - 1.59 (m, 1 H) 1.67 - 1.96 (m, 5 H) 2.13 - 2.31 (m, 2 H) 2.60 (s, 3 H) 2.74 (dd, J=10.86, 4.80 Hz, 1 H) 2.83 - 2.95 (m, 1 H) 3.11 (br. s., 1 H) 3.17 - 3.31 (m, 1 H) 3.34 - 3.46 (m, 1 H) 3.53 - 3.72 (m, 2 H) 6.72 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.56 (d, J=4.04 Hz, 1 H) 7.64 - 7.73 (m, 2 H) 7.94 (s, 1 H) ; LR S (ESI) m/e 398.0 [ (M + H)+, calculado para C2iH27N5OS 397.0]. 5.6.43. Síntesis de ( 4-aminopiperidin-l-il ) ( 4- ( 6-(butilamino) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il ) fenil ) metanona - - A la mezcla de 3-bromo-N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina (340 mg, 1.26 mmol) , ácido 4-boronobenzoico (210 mg, 1.26 mmol), [ 1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II ) (44 mg, 0.063 mmol) y carbonato de potasio (261 mg, 1.89 mmol) se agregó 3:1 de acetonitrilo/agua (3 mi) . La mezcla resultante se calentó a 145°C (microondas) durante 800 segundos. La reacción se filtró después y se concentró para proporcionar ácido 4- (6-(butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) benzoico (886 mg, rendimiento >100%) como un sólido blanquecino crudo: LRMS (ESI) m/e 311.2 [(M+H)+, calculado para Ci7Hi9N02 311.2].
Parte B. ter-butil (l-(4-(6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) benzoil ) piperidin-4-il ) carbamato - - La reacción del ácido 4- (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) benzoico (93 rag, 0.3 mmol) , ter-butil piperidin-4-ilcarbamato (66 mg, 0.33 mmol), l-etil-3- (3-dimetilaminopropil ) carbodiimida (63 mg, 0.33 mmol) y diclorometano (3 mi) se mantuvo a temperatura ambiente durante la noche. La solución resultante se purificó mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar ter-butil ( 1- ( 4- ( 6- (butilamino) imidazo [1 , 2-b] piridazin-3-il ) benzoil ) piperidin-4-il ) carbamato (76 mg, rendimiento 52%) como un sólido amarillo: ?? NMR (METANOL-d4) d: 8.23 - 8.43 (m, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.85 (s, 1H) , 7.63 (d, J = 9.9 Hz, 1H) , 7.45 - 7.56 (m, 2H) , 6.68 - 6.87 (m, 1H) , 4.55 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.82 (br. s., 1H) , 3.59 - 3.72 (m, 1H) , 3.35 - 3.48 (m, 4H) , 3.19 (d, J = 15.2 Hz, 2H) , 1.92 - 2.17 (m, 1H) , 1.90 (br. s., 1H) , 1.72 (m, 2H) , 1.35 - 1.59 (m, 13H) , 1.01 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 493.3 [( +H)+, calculado para C27H37N603 493.3] .
Parte C. (4-aminopiperidin-l-il) (4- ( 6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) fenil) metanona. La solución de ter-butil ( 1- ( 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2- - - b] piridazin-3-il) enzoil) piperidin-4-il) carbamato (47 mg, 0.1 mmol) se enfrió a 0°C y se trató con cloruro de acetilo (225 mg, 2.86 mmol). La reacción se mantuvo a temperatura ambiente durante la noche. La solución resultante se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar sal de ácido (4-aminopiperidin-l-il ) ( 4- ( 6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) fenil) metanona acético (34 mg, rendimiento 79%) como un sólido blanco: 1ti NMR ( ETAN0L-d ) d: 8.17 - 8.42 (m, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.86 (s, 1H), 7.63 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 7.48 - 7.57 (m, J = 8.6 Hz, 2H), 5.74 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 3.36 - 3.49 (m, 3H) , 1.90 -1.99 (m, 9H), 1.72 (quin, J = 7.3 Hz, 2H) , 1.63 (br. s., 2H) , 1.44 - 1.55 (m, 2H) , 1.01 (t, J = 7.5 Hz, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 393.2 [(M+H)+, calculado para C22H29N60 393.2]. 5.6.44. Síntesis de (4- ( 6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) fenil) (piperazin-l-il ) metanona Parte A. ter-butil 4- ( 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il) benzoil) piperazina-l-carboxilato - - La reacción del ácido 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il ) benzoico (124 mg, 0.4 mmol) , ter-butil piperazina-l-carboxilato (82 mg, 0.44 mmol), l-etil-3- (3-dimetilaminopropil) carbodiimida (84 mg, 0.44 mmol) y diclorometano (3 mi) se mantuvo a temperatura ambiente durante la noche. La solución resultante se purificó mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar ter-butil 4- (4- ( 6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) benzoil ) piperazina-l-carboxilato (89 mg, rendimiento 47%) como un sólido amarillo: XH NMR (METANOL-d4) d: 8.20 - 8.39 (m, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.85 (s, 1H) , 7.63 (d, J = 9.9 Hz, ??) , 7.48 - 7.56 (m, 2H) , 6.66 - 6.79 (m, 1H) , 4.55 (d, J = 12.1 Hz, 1H) , 3.82 (br. s., 1H) , 3.58 - 3.73 (m, 1H) , 3.35 - 3.45 (m, 4H), 3.26 (br. s., 1H) , 3.17 (d, J = 15.2 Hz, 1H) , 3.10 (br. s., 1H) , 1.92 - 2.15 (m, 1H) , 1.90 (br. s., 1H) , 1.72 (quin, J = 7.4 Hz, 2H) , 1.34 - 1.57 (m, 14H) , 1.01 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 479.3 [(M+H)+, calculado para C26H35 6O3 479.3] .
Parte B. ( 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il) fenil) (piperazin-l-il)metanona. La solución de ter- - - butil 4- (4- ( 6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) benzoil)piperazina-l-carboxilato (65 mg, 0.14 mmol) se enfrió a 0°C y se trató con cloruro de acetilo (320 mg, 4.07 mmol) . La reacción se mantuvo a temperatura ambiente durante la noche. La solución resultante se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar sal de ácido (4-(6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) fenil) (piperazin-1-il)metanona acético (52 mg, rendimiento 76%) como un sólido blanco: XH NMR (METANOL-d4) d: 8.34 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 7.87 (s, 1H) , 7.64 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 7.55 (d, J = 8.3 Hz, 2H) , 6.75 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 3.40 (t, J = 7.2 Hz, 2H) , 3.04 (br. s., 3H), 1.92 - 2.02 (m, 7H) , 1.73 (t, J = 7.2 Hz, 2H) , 1.41 - 1.59 (m, 2H) , 1.02 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ; LRMS(ESI) m/e 379.2 [(M+H)+, calculado para C2iH270 379.2]. 5.6.45. Síntesis de butil- { 3- [ - ( lH-tetrazol-5-il ) -fenil] -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il } -amina A una mezcla de ( 3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -butil-amina (327.5 mg, 1.2 mmol), ácido [ [4- (2H-tetrazol-5-il) fenil]borónico [179942-55-3] (287.2 mg, 1.5 mmol), - - monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (564.7 mg, 2.5 mmol), y [1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (103.7 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 50 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (20 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85°C durante 17 horas, después se enfrió, se diluyó con metanol, se filtró, y se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice, eluido con ácido acético al 1% en 10% (v/v) de metanol/etil acetato) para aislar un sólido bronce que se re-cristalizó a partir de la ebullición de 2-propanol a un rendimiento de 101.7 mg de butil-{ 3- [4- (1H-tetrazol-5-il) -fenil] -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il } -amina como un polvo blanquecino, mp. 270-271°C. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 0.98 (t, J=7.06 Hz, 3 H) 1.38 - 1.53 (m, 2 H) 1.59 - 1.73 (m, 2 H) 3.34 (d, J=5.51 Hz, 2 H) 6.75 (d, J=9.48 Hz, 1 H) 7.17 (br. s., 1 H) 7.79 (d, J=9.04 Hz, 1 H) 8.06 (br. s., 1 H) 8.12 (m, J=7.72 Hz, 2 H) 8.47 (m, J=7.72 Hz, 2 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 13.63, 19.77, 30.02, 40.66, 112.49, 122.39, 125.43, 125.65, 126.80, 130.59, - - 131.70, 153.44. LRMS (ESI) m/z 335.1 [(M+H)]+, calculado para Ci7Hi8N8: 334.39. 5.6.46. Síntesis de [3- ( 4-aminometil-fenil ) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ] - [2- (2-metoxi-fenoxi) -etil] -amina Parte A. ( 3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) - [2- (2-metoxi-fenoxi) -etil] -amina Una mezcla de 3-bromo-6-cloro-imidazo [1, 2-b]piridazina (232 mg, 1 mmol) y 2- (2-metoxi-fenoxi) -etilamina (2 g, 12 mmol) se calentó en un microondas a 160°C durante 30 minutos. La mezcla de reacción se sometió a ISCO (columna de 40 g, DCM 3 minutos, después 0-10% de MeOH en DCM durante 30 minutos) para proporcionar el producto (160 mg) . LRMS (ESI) m/z 363 y 365.1 [(M+H)]+, calculado para Ci5Hi5BrN402 : 363.22.
Parte B. [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] - [2- (2-metoxi-fenoxi) -etil] -amina Una mezcla de ( ( 3-bromo-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) - [2- (2-metoxi-fenoxi) -etil] -amina (75 mg, 0.21 mmol), - - hidrocloruro de ácido (4-aminometilfenil)borónico (51 mg, 0.27 mmol), K2C03 (87 mg, 0.63 mmol) y diclorobis (trifenilfosfina) paladio ( II ) (7.4 mg, 0.011 mmol) en MeCN/agua (3.2 ml/0.8 mi) se calentó en un microondas a 150°C durante 15 minutos. La mezcla de reacción se diluyó con MeOH (3 mi) y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC de preparación para proporcionar el compuesto del titulo como sal de AcOH (59.6 mg) . XH NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 1.93 (s, 3 H) 3.76 - 3.83 (m, 5 H) 4.13 (s, 2 H) 4.26 (t, J=5.56 Hz, 2 H) 6.77 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 6.85 - 6.99 (m, 4 H) 7.51 (d, J=8.34 Hz, 2 H) 7.65 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.79 (s, 1 H) 8.21 (d, J=8.34 Hz, 2 H) . LRMS (ESI) m/z 390.2 [(M+H)]+, calculado para C22H23 5O2: 389.46. 5.6.47. Síntesis de metil éster de ácido 3-[3-(5-acetil-tiofen-2-il) -imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-ilamino] -propiónico Parte A. metil 3- ( ( 3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) propanoato - - La alquilación del fluoruro de arilo con metil 3-aminopropanoato se llevó a cabo siguiendo el procedimiento de desplazamiento de amina descrito en el ejemplo 5.6.42.
Parte B. metil éster de ácido 3- [ 3- ( 5-acetil-tiofen-2-il ) -imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -propiónico . El metil 3- ( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) amino) propanoato se sometió entonces a reacción de acoplamiento Suzuki con ácido ( 5-acetil-tiofen-2-il ) borónico como se describe en el ejemplo 5.6.19. Sin embargo para esta reacción, se utilizó trietilamina como la base en lugar de la base regular (K2CO3) . El producto deseado se obtuvo en un rendimiento de 79%. ½ NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 2.62 - 2.65 (m, 3 H) 2.88 (t, J-5.94 Hz, 2 H) 3.77 (s, 3 H) 3.88 (t, J=5.68 Hz, 2 H) 7.06 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.70 (d, J=4.04 Hz, 1 H) 7.77 (d, J=4.04 Hz, 1 H) 8.15 (s, 1 H) 8.33 (d, J=9.85 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/e 345.0 [ (M + H)+, calculado para Ci6Hi6N403S 344.0]. 5.6.48. Síntesis de N-butil-3- ( lH-pirazol-3-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina Una mezcla de 3-bromo-6- (butilamino) imidazo [1, 2-b]piridazina (100 mg, 0.38 mmol) , ácido ( lH-pirazol-4-il) borónico (45 mg, 0.38 mmol), PdCi2 ( PPh3) 2 (10 mg, 0.014 - - mmol) y carbonato de potasio (98 mg, 0.71 mmol) se disolvió en CH3CN (3 mi) y agua (1.5 mi). La reacción se calentó a 140°C durante 30 minutos en microondas. El catalizador se filtró en celita, después el filtrado se concentró y se purificó mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar sal de N-butil-3- (lH-pirazol-3-il) imidazo [1, 2- b] piridazin-6-amina acetato como un sólido amarillo (1.7 mg, rendimiento 2%): XH NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.12 (s, 1 H) , 7.86 - 7.92 (m, 2 H) , 7.30 (d, J=2.53 Hz, 1 H) , 7.17 (d, J=9.85 Hz, 1 H), 3.47 (t, J=7.20 Hz, 2 H) , 1.75 (quin, J=7.26 Hz, 2 H), 1.52 (sxt, J=7.43 Hz, 2 H) , 1.02 (t, J=7.33 Hz, 3 H) ; LRMS (ESI) m/e 257.2 [ (M + H)+, calculado para Ci3Hi7N6 257.3] . 5.6.49. Síntesis de 3- [4- (6-butilamino-imidazo [1, 2- b] piridazin-3-il) -fenil] - H- [1, 2, 4] oxadiazol-5-ona A una mezcla de 3- (4-bromofenil) -1, 2, 4-oxadiazol- 5(4H)-ona [16672-19-8] (502.7 mg, 2.1 mmol), acetato de potasio [127-08-2] (615.4 mg, 6.3 mmol), 4, 4 , 41 , 4 ' , 5, 5, 5 ' , 5 ' -octametil-2,2 ' -bi (1, 3, 2-dioxaborolano) [73183-34-3] (582.6 mg, 2.3 mmol), y [1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] - - dicloropaladio ( II ) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (53.4 mg, 0.1 mmol) se agregó dimetilsulfóxido anhidro. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 17 horas después se vació en agua agitada para precipitar el producto. La 3- (4- (4, 4, 5, 5-tetrametil-l, 3, 2-dioxaborolan-2-il) fenil) -1 , 2 , 4-oxadiazol-5 ( 4H) -ona cruda se aisló mediante filtración, se lavó con agua, se dejó secar y se utilizó en la siguiente etapa sin purificación adicional. LRMS (ESI) m/z 287.3 [ (M-H) ] -, calculado para C14Hi7B 204: 288.11.
Se siguieron las condiciones de acoplamiento Suzuki descritas en el ejemplo 5.6.45 a partir de (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -butil-amina (213.1 mg, 0.8 mmol), y 3- (4- (4, 4, 5, 5-tetrametil-l, 3, 2-dioxaborolan-2-il) fenil) -1, 2, 4-oxadiazol-5 (4H) -ona (308.2 mg, l.lmmol) para proporcionar 70.9 mg de 3- [4- ( 6-butilamino-imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) -fenil] -4H- [1, 2, 4 ] oxadiazol-5-ona como un polvo blanco cristalino, mp. 253-254°C (dec.) . XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 0.96 (t, J=7.33 Hz, 3 H) 1.44 (sxt, J=7.38 Hz, 2 H) 1.65 (quin, J=7.26 Hz, 2 H) 3.26 - 3.35 (m, 2 H) 6.75 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.15 (t, J=5.31 Hz, 1 H) 7.77 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.88 (m, J=8.84 Hz, 2 H) 8.05 (s, 1 H) 8.44 (m, J=8.59 Hz, 2 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 13.73, 19.89, 30.15, 40.81, 112.82, 120.91, 125.38, 125.50, 126.11, 131.05, 133.01, 137.80, 153.62, 157.06, 159.94. LRMS (ESI) m/z 351.2 [(M+H)]+, calculado para CieHisNeC^ : 350.38. - - 5.6.50. Síntesis de N-butil-3- (2 , 4-dimetiltiazol-5-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina El uso de las condiciones de acoplamiento Suzuki descritas en el ejemplo 5.6.48 proporcionó el compuesto del título en un rendimiento de 16% como un sólido blanco. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 7.59 - 7.69 (m, 2 H) , 6.70 -6.74 (m, 1 H), 3.39 (t, J=7.20 Hz, 2 H) , 2.70 (s, 3 H) , 2.57 (s, 3 H), 1.67 - 1.75 (m, 2 H) , 1.45 - 1.54 (m, 2 H) , 1.01 (t, J=7.45 Hz, 3 H) ; LRMS (ESI) m/e 302.2 [ (M + H)+, calculado para C15H20N5S 302.4]. 5.6.51. Síntesis de ácido 4- [ 3- ( 5-acetil-tiofen-2-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -butírico Parte A. etil 4- ( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) amino) butanoato La alquilación del fluoruro de arilo con etil 4- - - aminobutanoate procedió bajo las condiciones descritas en el ejemplo 5.6.46 para proporcionar el compuesto del titulo.
Parte B. etil 4- ( (3- (5-acetiltiofen-2-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) butanoato El etil 4- ( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) butanoato se sometió a acoplamiento Suzuki con ácido (5-acetiltiofen-2-il) borónico, utilizando trietilamina como la base y el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.19 para proporcionar un rendimiento de 74% del producto.
Parte C. ácido 4- [3- (5-acetil-tiofen-2-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -butírico A 200 mg (0.566 mmol) de este éster se agregó LiOH.H20 (71.4 mg, 1.700 mmol), 10 mi de THF y 3 mi de agua y después se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla de reacción se acidificó a un pH de aproximadamente 3, y el producto se extrajo con EtOAc. El solvente orgánico se lavó con salmuera y se secó sobre MgS04. Éste se concentró - - para obtener 148 mg (76%) del producto deseado. No se requirió purificación. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 2.60 (s, 3 H) 2.73 (t, J=6.73 Hz, 2 H) 3.68 (t, J=6.73 Hz, 2 H) 4.23 (s, 2 H) 7.26 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 7.67 (d, J=8.16 Hz, 2 H) 7.99 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 8.27 (s, 1 H) ; LRMS (ESI) m/e 345.0 [ (M + H)+, calculado para Ci6H16N403S 344.0]. 5.6.52. Síntesis de butil- ( 3-isoquinolin-6-il-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -amina Parte A. 6- (4, 4, 5, 5-tetrametil- [1, 3, 2] dioxaborolan-2-il) -isoquinolina Una mezcla de 6-bromoisoquinolina (208 mg, 1 mmol) , bis (pinacolato) diboro (279 mg, 1.1 mmol), KOAc (323 mg, 3.3 mmol) y Pd(dppf)2Ci2 (73 mg, 0.1 mmol) en D SO (3 mi) se calentó en un microondas durante 10 minutos a 160°C. La mezcla se diluyó con agua (20 mi) y se extrajo con EtOAc (4 x 20 mi) . El EtOAc combinado se lavó con agua (15 mi) y salmuera (15 mi) después se secó (Na2S04) . El solvente se - - retiró para proporcionar el compuesto del titulo que se utilizó directamente para la siguiente etapa.
Parte B. butil- (3-isoquinolin-6-il-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -amina. Una mezcla de (3-bromo-imidazo [1, 2-b]piridazin-6-il) -butil-amina (100 mg, 0.37 mmol) , 6-(4,4,5, 5-tetrametil- [1,3,2] dioxaborolan-2-il ) -isoquinolina (de la parte A, ~1 mmol), K2C03 (153 mg, 1.11 mmol) y diclorobis (trifenilfosfina) paladio ( II ) (13 mg, 0.019 mmol) en MeCN/agua (4 ml/1 mi) se calentó en un microondas a 150°C durante 15 minutos. La capa acuosa se retiró y la mezcla de reacción se diluyó con MeCN (3 mi) y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC de preparación para proporcionar el compuesto del titulo (80.8 mg) . XH NMR (400 Hz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.03 (t, J=7.33 Hz, 3 H) 1.53 (dq, J=14.97, 7.39 Hz, 2 H) 1.74 - 1.81 (m, 2 H) 3.48 - 3.54 (m, 2 H) 4.58 (t, J=5.05 Hz, 1 H) 6.54 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.68 (d, J=5.56 Hz, 1 H) 7.75 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 8.01 - 8.05 (m, 2 H) 8.25 (dd, J=8.72, 1.64 Hz, 1 H) 8.55 (d, J=5.81 Hz, 1 H) 8.86 (s, 1 H) 9.25 (s, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 318.2 [(M+H)]+, calculado para C19H19N5: 317.40. 5.6.53. Síntesis de 4- [3- ( 4-aminometil-fenil ) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -N, N-dimetil-butiramida - - Parte A. ácido 4-( (3-(4-( ( (ter-butoxicarbonil ) amino) metil) fenil) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) amino) butanoico El il) amino) butanoato se sometió a acoplamiento Suzuki con ácido N-Boc-bencil amina borónico, utilizando 4.0 equivalentes de K2CO3 como la base y el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.19 para proporcionar el compuesto del titulo.
Parte B. ter-butil 4- ( 6- ( ( 4- (dimetilamino) -4-oxobutil) amino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) bencilcarbamato El ácido carboxilico se hizo reaccionar con - - dimetilamina, bajo las condiciones normales de acoplamiento de amida para proporcionar 59% del producto.
Parte C. 4- [3- ( 4-aminometil-fenil ) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -N, N-dimetil-butiramida . La amida purificada (20.4 mg, 0.045 mmol) se disolvió en 2 mi de DCM y 3 mi de TFA se agregó y se agitó durante 2 horas. Ésta se concentró para proporcionar un rendimiento de 100% (21 mg) de sal de TFA del producto del titulo. lR NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 2.01 (quin, J=7.06 Hz, 2 H) 2.52 (t, J=7.39 Hz, 2 H) 2.93 (s, 3 H) 3.05 (s, 3 H) 3.46 (t, J=6.84 Hz, 2 H) 4.24 (s, 2 H) 7.26 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 7.68 (d, J=8.16 Hz, 2 H) 7.99 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 8.22 (d, J=8.38 Hz, 2 H) 8.26 (s, 1 H) ; LRMS (ESI) m/e 353.0 [ ( + H)+, calculado para Ci9H24N60 352.0] . 5.6.54. Síntesis de N- (4- (aminometil) fenil) -6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazina-3-carboxamida Parte A. 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2-b] piridazina-3-carbonitrilo - - Una solución de 6- (butilamino) imidazo [1, 2- b] piridazina-3-bromuro (820 mg, 2.34 mmol) , NaCN (137 mg, 2.8 mmol), Cul (45 mg, 0.23 mmol), KI (78 mg, 0.47 mmol) y N1,N2- dimetiletano-1 , 2-diamina (0.25 mi, 2.34 mmol) en tolueno (3 mi) se agitó a 110°C durante 12 horas. La reacción se enfrió, se concentró, se absorbió con EtOAc y agua, se extrajo y la capa orgánica se secó con gS04. La capa orgánica se concentró y se purificó mediante ISCO (0-5% de MeOH/DCM) para proporcionar 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2- b] piridazina-3-carbonitrilo como un sólido amarillo claro (460 mg, rendimiento 92%). LR S (ESI) m/e 216.1 [ (M + H)+, calculado para CnHi4 5 216.3].
Parte B. ácido 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2- b] piridazina-3-carboxílico Una solución de 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2- b] piridazina-3-carbonitrilo (250 mg, 1.16 mmol) en solución acuosa al 10% de NaOH (15 mi) se sometió a reflujo durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se neutralizó a un pH = 5-7 utilizando 1N de HC1, se extrajo con DCM, se secó y se concentró para proporcionar ácido 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2-b] piridazina-3-carboxílico como un sólido blanco (150 mg, 60%). LRMS (ESI) m/e 235.1 - - [ (M + H)+, calculado para CiiHi5N402 235.3].
Parte C. ter-butil 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2-b] piridazina-3-carboxamido) bencilcarbamato A una solución de ácido 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2-b] piridazina-3-carboxílico (150 mg, 0.64 mmol) en CH3CN (1 mi) se agregó reactivo BOP (567 mg, 1.28 mmol), trietil amina (0.26 mi, 1.92 mmol) y ter-butil 4-aminobencilcarbamato (143 mg, 0.64 mmol) . La reacción se agitó durante la noche. Después la reacción se purificó mediante Cromatografía de columna ISCO sobre gel de sílice (10% de eOH/DCM) para proporcionar ter-butil 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2-b] piridazina-3-carboxamido) bencilcarbamato como un sólido blanco (280 mg, rendimiento 100%) . Se purificaron 20 mg adicionalmente mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar ter-butil 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2-b] piridazina-3-carboxamido) bencilcarbamato (5 mg) como un sólido blanco. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.10 (s, 1 H), 7.76 (d, J=9.70 Hz, 1 H) , 7.67 (d, J=8.38 Hz, 2 H) , 7.32 (d, J=8.38 Hz, 2 H) , 6.90 (d, J=9.70 Hz, 1 H) , 4.62 (s, 1 H) , 4.24 (s, 2 H), 3.47 (t, J=7.28 Hz, 2 H) , 1.79 (t, J=7.39 Hz, 2 H) , 1.46 - 1.57 (m, 10 H) , 1.02 (t, J=7.39 Hz, 3 H) ; LRMS - - (ESI) m/e 439.9 [ (M + H) +, calculado para C23H31 6O3 439.5].
Parte D. N- (4- (aminometil ) fenil) -6- (butilamino) imidazo [ 1, 2-b] piridazina-3-carboxamida . A una solución de ter-butil 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1, 2-b] piridazina-3-carboxamido) bencilcarbamato (230 mg, 0.53 mmol) en metanol (15 mi) se agregó cloruro de acetilo (0.37 mi, 5.25 mmol) por goteo. La mezcla de reacción se agitó durante la noche, se concentró y se purificó mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar N-(4- (aminometil) fenil) -6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazina-3-carboxamida (25 mg, 20% rendimiento) . XH NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.54 (s, 1 H) , 8.11 (s, 1 H) , 7.80 (d, J=8.38 Hz, 2 H), 7.77 (d, J=9.92 Hz, 1 H) , 7.50 (d, J=8.38 Hz, 2 H), 6.92 (d, J=9.70 Hz, 1 H) , 4.12 (s, 2 H) , 3.48 (t, J=7.17 Hz, 2 H) , 1.79 (quin, J=7.33 Hz, 2 H) , 1.55 (dq, J=15.02, 7.41 Hz, 2 H) , 1.02 (t, J=7.39 Hz, 3 H) ; LRMS (ESI) m/e 339.2 [ (M + H)+, calculado para Ci8H23N60 339.4]. 5.6.55. Síntesis de [3- (4-aminometil-fenil) -7-metil-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -butil-amina Parte A. 6-cloro-5-metil-piridazin-3-ilamina - - Una mezcla de 3 , 6-dicloro-4-metilpiridazina (1.35 g, 8.28 mmol) y 2 , 4-dimetoxibencilamina (11.1 g, 66.3 mmol) en i-PrOH (5 mi) se calentó en un microondas a 100 °C durante 50 minutos. (30 + 20 min.) . La mezcla se concentró y el residuo se sometió a ISCO (columna de 120 g, hexano 5 minutos, 0-55% de EtOAc en hexano durante 90 minutos para proporcionar ( 6-cloro-5-metil-piridazin-3-il ) - (2, 4-dimetoxi-bencil) -amina (680 mg) más el análogo 6-metilo (320 mg) .
A una solución de (6-cloro-5-metil-piridazin-3-il) -(2, 4-dimetoxi-bencil) -amina anterior (680 mg) en DCM (8 mi) se agregó TFA (8 mi) . La solución resultante se dejó reposar durante la noche. La mezcla se concentró para proporcionar el compuesto del titulo que se utilizó directamente para la siguiente etapa.
Parte B. 3-bromo-6-cloro-7-metil-imidazo [1, 2-b] piridazina Una mezcla de 6-cloro-5-metil-piridazin-3-ilamina de la Parte A (~ 2.3 mmol) y solución acuosa de cloroacetaldehido (50% agua, 880 ul, ~7 mmol) en n-BuOH se sometió a reflujo durante la noche. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con MeOH (15 mi) y - - se filtró. El filtrado se concentró y se trató con Et20 (15 mi) . El producto sólido se recolectó mediante filtración.
A una suspensión del producto anterior en AcOH (6 mi) se agregó Br2 (358 ul, 6.96 mmol) lentamente a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se suspendió in Et20 (80 mi) y se agitó durante la noche. El producto sólido (~800 mg) se recolectó mediante filtración y se utilizó directamente para la siguiente etapa.
Parte C. ( 3-bromo-7-metil-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) -butil-amina A la 3-bromo-6-cloro-7-metil-imidazo [ 1, 2-b]piridazina de la Parte B se agregó n-BuNH2 (10 mi) . La mezcla se calentó en un microondas a 160°C durante 60 minutos (30 + 30 min. ) . La mezcla se concentró y el residuo se sometió a ISCO (columna de 40 g, hexano 3 minutos, 0-100% de EtOAc en hexano durante 25 minutos, el EtOAc 10 minutos) para proporcionar el compuesto del titulo (348 mg) . XH N R (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 0.97 (t, J=7.39 Hz, 3 H) 1.29 - 1.50 (m, 2 H) 1.61 - 1.71 (m, 2 H) 2.14 (s, 3 H) 3.44 (q, J=6.62 Hz, 2 H) 4.39 (br. s., 1 H) 7.34 (s, 1 H) 7.37 (s, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 283 y 285 [(M+H)]+, calculado para CnHi5BrN : 283.17.
- - Parte D. [3- (4-aminometil-fenil) -7-metil-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -butil-amina. Una mezcla de (3-bromo-7-metil-imidazo [l,2-b]piridazin-6-il) -butil-amina (115 mg, 0.41 mmol) , hidrocloruro de ácido (4-aminometilfenil ) borónico (99.9 mg, 0.53 mmol), K2C03 (170 mg, 1.23 mmol) y diclorobis (trifenilfosfina) paladio (II) (14.4 mg, 0.021 mmol) en eCN/agua (3.2 ml/0.8 mi) se calentó en un microondas a 150 °C durante 15 minutos. La mezcla de reacción se diluyó con MeCN y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC de preparación para proporcionar el compuesto del titulo como sal de AcOH (66.5 mg) . XH N R (400 MHz, ETANOL-d4) d ppm 1.01 (t, J=7.39 Hz, 3 H) 1.42 - 1.52 (m, 2 H) 1.73 (t, J=7.28 Hz, 2 H) 2.23 (s, 3 H) 3.41 (t, J=7.28 Hz, 2 H) 4.16 (s, 2 H) 7.44 (s, 1 H) 7.52 (d, J=8.38 Hz, 2 H) 7.75 (s, 1 H) 8.25 (d, J=8.38 Hz, 2 H) 8.54 (s, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 310.2 [(M+H)]+, calculado para C18H23N5: 309.42. 5.6.56. Síntesis de ter-butil éster de ácido [2- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -metil-carbámico Una solución de 3-bromo-6-fluoro-imidazo [1, 2-b]piridazina (1.4 g, 6.3 mmol), ter-butil éster de ácido N-(2-aminoetil) -n-metil carbámico [121492-06-6] (961 mg, 5.5 - - mmol) , y base de Hunig [7087-68-5] (1.1 mi, 6.4 mmol) en 2- propanol (28 mi) se calentó a reflujo durante 4 días, se enfrió, se pre-cargó sobre gel de sílice y se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice eluido con 10% (v/v) de metanol/etil acetato) . El producto sólido amarillo claro aislado se re-cristalizó (etil acetato/heptano) para producir 1.2 g de ter-butil éster de ácido [2- (3-bromo-imidazo [1, 2- b] piridazin-6-ilamino) -etil] -metil-carbámico como un polvo blanco, mp. 128-129oC. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm (rotámeros presentes) 1.16 (s, 6 H) 1.33 (br. s., 3 H) 2.84 (s, 2 H) 2.90 (br. s., 1 H) 3.34 - 3.44 (m, 3 H) 3.45 - 3.52 (m, 1 H) 6.68 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.31 (br. s., 1 H) 7.49 (s, 1 H) 7.72 (d, J=9.35 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 28.22, 28.45, 34.02, 35.07, 39.02, 39.97, 46.23, 47.06, 78.52, 78.87, 99.57, 113.35, 125.92, 130.80, 137.01, 154.37, 155.39. LRMS (ESI) m/z 370.1/372.1 [(M+H)]+, calculado para Ci4H2oBrN502: 370.25. 5.6.57. Síntesis de ácido isopropil carbámico de 4- (6-butilamino-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il) -bencil éster Parte A. ácido isopropil carbámico de 4- (4, 4,5,5- tetrametil- [1, 3, 2] dioxaborolan-2-il) -bencil éster - - A una solución de [ 4- ( 4 , 4 , 5 , 5-tetrametil- [1, 3, 2] dioxaborolan-2-il) -fenil] -metanol (2.34 g, 10 mmol) y piridina (890 ul, 11 mmol) en THF (50 mi) a temperatura ambiente se agregó por goteo una solución de 4-nitrofenil cloroformato (2.22 g, 11 mmol) en THF (10 mi). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El precipitado se retiró mediante filtración. El filtrado se concentró para proporcionar el compuesto deseado (4.2 g, puede contener algo de sal de HCl piridina) .
A una solución del producto anterior (400 mg, 1 mmol) en THF (3 mi) se agregó isopropil amina (1.5 mi). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas después se concentró para proporcionar el compuesto del titulo. LRMS (ESI) m/z 320.2 [(M+H)]+, calculado para Ci7H26BN04: 319.21 Parte B. ácido isopropil carbámico de 4-(6-butilamino-imidazo[l,2-b]piridazin-3-il) -bencil éster. Una mezcla de (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -butil-amina (50 mg, 0.19 mmol), ácido isopropil carbámico de 4- (4, 4,5,5-tetrametil- [1, 3, 2] dioxaborolan-2-il) -bencil éster (de la - 14 - parte A, -0.5 mmol), K2C03 (77 mg, 0.56 mmol) y diclorobis (trifenilfosfina) paladio ( II ) (6.5 mg, 0.01 mmol) en MeCN/agua (2 ml/0.5 mi) se calentó en un microondas a 140°C durante 10 minutos. La reacción se repitió con la otra mitad del éster borónico de la parte A. Las dos reacciones se combinaron para purificación. La capa acuosa se retiró y la mezcla de reacción se diluyó con MeCN (3 mi) y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC de preparación para proporcionar el compuesto del título (100 mg) . XH NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.00 (t, J=7.39 Hz, 3 H) 1.19 (d, J=6.62 Hz, 6 H) 1.43 - 1.52 (m, 2 H) 1.66 - 1.73 (m, 2 H) 3.41 (td, J=7.06, 5.73 Hz, 2 H) 3.87 (d, J=6.84 Hz, 1 H) 4.49 (t, J=5.29 Hz, 1 H) 5.14 (m, 1 H) 6.45 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 7.46 (d, J=8.16 Hz, 2 H) 7.66 (d, J=9.48 Hz, 1 H) 7.81 (s, 1 H) 8.14 (d, J=8.38 Hz, 2 H) . LRMS (ESI) m/z 382.2 [(M+H)]+, calculado para C21H27 5O2: 381.48. 5.6.58. Síntesis de 2- [4- (6-butilamino-imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) -fenoxi ] -acetamida Parte A. ácido 2- (4- (4, 4, 5, 5-tetrametil-l, 3, 2-dioxaborolan-2-il ) fenoxi) acético - - A 135 mg (0.441 mmol) del éster comercialmente disponible, se agregaron 99 mg (1.765 mmol) de KOH, y 8 mi de solución a 3:1 de eOH/H20, y se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. El pH se ajustó a 4 utilizando 2 de solución de HC1. Se realizaron tres extracciones utilizando EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera y se secó sobre MgS04. Ésta se filtró y los solventes se evaporaron para obtener 72 mg (59%) del ácido carboxilico deseado.
Parte B. 2- ( 4- ( 4 , 4 , 5, 5-tetrametil-l , 3 , 2-dioxaborolan-2-il) fenoxi) acetamida los 72 mg de ácido carboxilico se agregó (exceso) de S0C12 y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas, y después se concentró hasta secar. Al intermediario de cloruro de ácido sólido obtenido se agregaron lentamente 2.6 mi de 0.5 de solución de NH3/dioxano y se agitó durante - - otras 2 horas. La mezcla de reacción se concentró para obtener la amida primaria deseada.
Parte C. 2- [4- ( 6-butilamino-imidazo [1,2-bj piridazin-3-il) -fenoxi] -acetamida. El acoplamiento Suzuki del éster borónico y el bromuro de arilo bajo las mismas condiciones descritas para el ejemplo 5.6.19 proporcionó el compuesto del titulo en un rendimiento de 78%. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 1.01 (t, J=7.45 Hz, 3 H) 1.44 - 1.55 (m, 2 H) 1.65 - 1.76 (m, 2 H) 3.40 (t, J-7.20 Hz, 2 H) 4.62 (s, 2 H) 7.15 - 7.25 (m, 3 H) 7.93 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 8.04 -8.16 (m, 3 H); LRMS (ESI) m/e 340.0 [ (M + H)+, calculado para Ci8H2iN505 339.0. 5.6.59. Síntesis de 3- (2-aminopirimidin-5-il) -N-butilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina Utilizando las condiciones de acoplamiento Suzuki descritas en el ejemplo 5.6.48 se proporcionó el compuesto del titulo en un rendimiento de 63% como un sólido blanco. XH NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 9.03 (s, 2 H) , 7.73 (s, 1 H) , 7.61 (d, J=9.85 Hz, 1 H) , 6.71 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 4.64 (s, 1 H), 3.36 (t, J=7.07 Hz, 2 H) , 1.66 - 1.73 (m, 2 H) , 1.45 - 1.54 (m, 2 H) , 1.00 (t, J=7.33 Hz, 3 H) ; LRMS (ESI) - - m/e 284.2 [ (M + H)+, calculado para Ci4Hi8N7 284.3]. 5.6.60. Síntesis de ter-butil éster de ácido {2- ( 5-acetil-tiofen-2-il ) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -etil } -metil-carbámico A una mezcla de ter-butil éster de ácido [2- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -metil-carbámico (285.5 mg, 0.8 mmol), ácido ( 5-acetiltiofen-2-il)borónico [206551-43-1] (157.3 mg, 0.9 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (354.8 mg, 1.5 mmol) , y [1,1' bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) , complej ado con diclorometano [95464-05-4] (63.4 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 25 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1, 2-dimetoxietano (12.5 mi) y a una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitó rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85°C durante 17 horas después se enfrió y se dividió entre - - salmuera y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgS04) , se evaporó, se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice eluido con 100% etil acetato) y se cristalizó (etil acetato/heptano) para proporcionar ter-butil éster de ácido { 2- [ 3- ( 5-acetil-tiofen-2-il) -imidazo [ 1, 2 -b] piridazin-6-ilamino] -etil } -metil-carbámico como 121.3 mg de un polvo amarillo, mp. 174-175°C. 2H NMR (400 MHz, DMS0-d6) d ppm (rotámeros presentes) 1.11 (br. s., 6 H) 1.39 (br. s., 3 H) 2.54 (s, 3 H) 2.87 (br. s., 2 H) 2.92 (br. s., 1 H) 3.32 (s, 1 H) 3.52 (br. s., 3 H) 3.62 (br. s., 1 H) 7.78 - 7.85 (m, 2 H) 7.96 (d, J=4.29 Hz, 1 H) 8.14 (s, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 26.95, 28.16, 28.50, 34.07, 46.09, 78.50, 113.14, 123.02, 124.18, 126.13, 130.89, 134.37, 137.71, 138.38, 141.77, 154.32, 155.43, 191.11. LRMS (ESI) m/z 416.2 [(M+H)]+, calculado para Ci4H2oBrN502 : 415.52. 5.6.61. Síntesis de 2- [4- (6-butilamino-imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) -fenoxi] -N-metil-acetamida Parte A. etil 2- (4- (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) fenoxi) acetato - - El etil 2- (4- (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) fenoxi) acetato, se sintetizó mediante la reacción de acoplamiento Suzuki del éster borónico y el bromuro de arilo bajo las mismas condiciones descritas para el ejemplo 5.6.19.
Parte B. ácido 2- (4- (6- (butilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) fenoxi) acético A 368 mg (1.00 mmol) del éster disuelto en 15 mi de THF se agregó LiOH.H20 (82 mg, 2.00 mmol) y 5 mi de agua. Esto se agitó durante la noche a 50°C. Se enfrió a temperatura ambiente, se concentró hasta secar, y después se suspendió en agua. El pH se ajustó a aproximadamente 3 utilizando 1N de HC1. Se utilizó EtOAc para la extracción. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre gS04, y se concentró a ácido carboxilico en un rendimiento de 100% (340 mg) .
Parte C. 2- [4- ( 6-butilamino-imidazo [1, 2- - - b] piridazin-3-il ) -fenoxi] -N-metil-acetamida . A 50 mg (0.147 mmol) de ácido carboxilico se agregaron 20 ing (0.294 mmol) de metil amina (sal de HC1) , seguido por HOBt (30 mg, 0.221 mmol), EDC (42 mg, 0.221 mmol), trietilamina (0.30 mg, 0.294 mmol) y 5 mi de DMF. La mezcla resultante se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Ésta se diluyó con EtOAc, y después se lavó con salmuera y se secó sobre MgS04. Se concentró y se purificó en la HPLC de preparación para obtener 27 mg (52%) del compuesto del titulo. 1ñ NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 0.97 - 1.05 (m, 3 H) 1.44 - 1.56 (m, 2 H) 1.67 - 1.79 (m, 2 H) 2.83 - 2.89 (m, 3 H) 3.40 (t, J=7.20 Hz, 2 H) 4.62 (s, 2 H) 7.17 - 7.27 (m, 3 H) 7.93 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 8.06 - 8.18 (m, 3 H) ; LRMS (ESI) m/e 354.0 (M + H)+, calculado para C19H23 5O2 353.0. 5.6.62. Síntesis de ácido (R) -2-amino-4-metil-pentanoico de 4- (6-butilamino-imidazo[l,2-b]piridazin-3-il) -bencilamida Parte A. (R) -ter-butil (l-((4-(6- (butilamino) imidazo [1, 2-b]piridazin-3-il)bencil) amino) -4-metil-l-oxopentan-2-il ) carbamato - - La (4- (4,4,5, 5-tetrametil-l , 3, 2-dioxaborolan-2-il) fenil)metanamina y el ácido (R) -2- ( (ter-butoxi-carbonil) amino) -4-metilpentanoico fueron ambos comercialmente disponibles, y se sometieron a la reacción normal de acoplamiento de amida, y produjeron 94% del producto (No fue necesaria la purificación) . Este producto se acopla mediante reacción Suzuki con el bromuro de arilo bajo las condiciones descritas en el ejemplo 5.6.19. La mezcla cruda se purificó en la ISCO (gel de sílice) eluyendo con 2-10% de MeOH/DCM.
Parte B. ácido (R) -2-amino-4-metil-pentanoico de 4- ( 6-butilamino-imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) -bencilamida. A 100 mg (0.197 mmol) de (R) -ter-butil (l-((4-(6-(butilamino) imidazo [1, 2-b]piridazin-3-il)bencil) -amino) -4-metil-l-oxopentan-2-il) carbamato se agregaron 10 mi de 4 M de HCl/dioxano, y se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas y después se concentró hasta secar a 102 mg (100%) de la sal de TFA del producto deseado. X N R (400 Hz, METANOL-d4) d ppm 0.97 - 1.03 (m, 9 H) 1.48 (dq, J=15.02, 7.41 Hz, 2 H) 1.69 - 1.79 (m, 5 H) 3.40 (t, J=7.06 Hz, 2 H) - - 3.92 (t, J=6.95 Hz, 1 H) 4.49 (dd, J=15.10, 4.08 Hz, 1 H) 4.56 - 4.63 (m, 1 H) 7.23 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 7.52 (m, J=8.38 Hz, 2 H) 7.95 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 8.12 (m, J=8.38 Hz, 2 H) 8.20 (s, 1 H); LRMS (ESI) m/e 409.0 (M + H)+, calculado para C23H32 6O 408.0. 5.6.63. Síntesis de ter-butil éster de ácido {2- [3- ( 4-carbamoil-fenil ) -imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -etil } -metil-carbámico El ter-butil éster de ácido { 2- [3- (4-carbamoil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -etil } -metil-carbámico se preparó de manera similar al procedimiento para el ejemplo 5.6.61 a partir de ter-butil éster de ácido [2- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -metil-carbámico (367.4 mg, 1.0 mmol), ácido (4-carbamoilfenil)borónico [123088-59-5] (196.7 mg, 1.2 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (418.4 mg, 1.8 mmol), y [1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (82.1 mg, 0.1 mmol) en 30% (v/v) de agua en 1, 2-dimetoxietano (25 mi) a 85°C durante 17 - - horas. Polvo blanco de etil acetato/heptano, mp. 190-191°C (dec.) . 1H NMR (400 MHz , DMSO-d6) d ppm (rotámeros presentes) 1.15 (br. s., 5 H) 1.28 (br. s., 1 H) 1.38 (br. s., 3 H) 2.85 (br. s., 3 H) 3.32 (br. s., 1 H) 3.54 (br. s., 1 H) 6.73 (d, J=9.35 Hz, 1 H) 7.27 (br. s., 1 H) 7.34 (br. s., 1 H) 7.79 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.94 - 8.03 (m, 4 H) 8.28 (d, J=8.08 Hz, 2 H) . LRMS (ESI) m/z 411.2 [(M+H)]+, calculado para C2iH26 603: 410.48. 5.6.64. Síntesis de [ 3- ( 4-aminometil-ciclohex-l-enil ) -imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ] -butil-amina Parte A. metil 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il) ciclohex-3-enocarboxilato El acoplamiento Suzuki del bromuro de arilo y éster borónico comercialmente disponible bajo las mismas condiciones descritas en el ejemplo 5.6.19 proporcionó el compuesto del título en un rendimiento de 97%.
- - Parte B. ( 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il) ciclohex-3-en-l-il) metanol A 200 mg (0.610 mmol) del producto aislado disuelto en 15 mi de THF a 0°C se agregaron 2.44 mi (2.439 mmol) de 1M de solución de hidruro de litio aluminio THF. Después de 15 minutos de agitación, la reacción se completó. Ésta se diluyó con 40 mi de THF, y se agregaron lentamente 2.0 g de Na2SO4.10H2O y se agitó durante otra hora. Después se filtró y el filtrado se concentró para obtener 182 mg (99%) del alcohol deseado.
Parte C. 2- (( 4- ( 6- (butilamino) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il) ciclohex-3-en-l-il ) metil) isoindolina-1 , 3-diona A 150 mg (0.500 mmol) del alcohol disuelto en 15 mi de THF a 0°C, se agregó ftalimida (80.9 mg, 0.55 mmol), DIAD (121 mg, 0.599 mmol) y trifenilfosfina (157 mg, 0.599 mmol).
- - Después de 0.5 horas de agitación a 0°C, se retiró el baño de hielo, y continuó la agitación a temperatura ambiente durante aproximadamente 16 horas. Después se diluyó con 20 mi de EtOAc, y se templó con 10 mi agua. La capa orgánica se separó y se lavó con salmuera, se secó sobre MgS04, y se purificó en la ISCO (gel de sílice) eluyendo con 0-10% de MeOH/DCM para proporcionar 163 mg (76%) del producto.
Parte D. [3- (4-aminometil-ciclohex-l-enil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -butil-amina. A 130 mg (0.303 mmol) de la amina protegida por ftalimida, disuelta en 10 mi de EtOH se agregaron 45.5 mg (0.909 mmol) de monohidrato de hidrazina. La mezcla resultante se sometió a reflujo durante 4 horas, se enfrió a temperatura ambiente, se filtró para retirar los sólidos, y el filtrado se concentró para obtener 88 mg (97%) del compuesto deseado. ?? NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 1.01 (t, J=7.45 Hz, 3 H) 1.44 - 1.61 (m, 3 H) 1.66 - 1.76 (m, 2 H) 2.03 - 2.20 (m, 3 H) 2.50 - 2.76 (m, 3 H) 3.00 (d, J=6.57 Hz, 2 H) 3.39 (t, J=7.07 Hz, 2 H) 7.19 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.24 - 7.31 (m, 1 H) 7.82 - 7.86 (m, 1 H) 7.88 - 7.93 (m, 1 H) ; LRMS (ESI) m/e 300.0 (M + H)+, calculado para Ci7H25 5 299.0. 5.6.65. Síntesis de ter-butil éster de ácido metil-[2- (3-fenil-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -carbámico - - El ter-butil éster de ácido metil- [2- (3-fenil-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -carbámico se preparó de manera similar al procedimiento para el ejemplo 5.6.61 a partir de ter-butil éster de ácido [2- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -metil-carbámico (370.3 mg, 1.0 mmol) , ácido fenilborónico [98-80-6] (146.4 mg, 1.2 mmol) , monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (460.2 mg, 2.0 mmol), y [ 1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (81.9 mg, 0.1 mmol) en 30% (v/v) de agua en 1, 2-dimetoxietano (12.5 mi) a 85°C durante 17 horas. Polvo blanquecino de etil acetato/heptano, mp. 150-151°C. XH NMR (400 MHz, D SO-d6) d ppm (rotámeros presentes) 1.16 (br. s., 5 H) 1.20 - 1.33 (m, 1 H) 1.37 (br. s., 3 H) 2.49 - 2.54 (m, 1 H) 2.83 (br. s., 3 H) 3.43 (br. s., 2 H) 3.51 (br. s., 1 H) 6.69 (d, J=8.84 Hz, 1 H) 7.22 (br. s., 1 H) 7.29 - 7.38 (m, 1 H) 7.43 - 7.54 (m, 2 H) 7.76 (d, J=8.84 Hz, 1 H) 7.89 (br. s., 1 H) 8.16 (d, J=6.82 Hz, 2 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 14.39, 22.55, 28.24, 28.49, 31.71, 34.17, 35.10, 46.33, 47.00, 78.60, 112.58, 126.28, 127.46, 128.93, 130.40, 134.52, 153.69, 155.40. LRMS (ESI) m/z 368.1 [(M+H)]+, calculado para C20H25N5O2: 367.45. - - 5.6.66. Síntesis de 4- { 6- [2- ( 3-ter-butil-l-metil-ureido) -etilamino] -imidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il } -benzamida Parte A. dihidrocloruro de 4- [ 6- (2-metilamino-etilamino) -imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ] -benzamida Se agregó ácido clorhídrico concentrado a una solución a temperatura ambiente de ter-butil éster de ácido 2- [3- (4-carbamoil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -etil } -metil-carbámico (784.1 mg, 1.9 mmol) en metanol (130 mi) y se dejó agitar bajo un manto de N2 durante 2 días. La mezcla de reacción se enfrió y se filtró para proporcionar di-hidrocloruro de 4- [6- (2-metilamino-etilamino) -imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il] -benzamida como un polvo blanquecino, mp. 322-323°C (dec). ?? NMR (400 MHz , ÓXIDO DE DEUTERIO) d ppm 2.68 (s, 3 H) 3.34 (t, J=5.81 Hz, 2 H) 3.74 (t, J=5.68 Hz, 2 H) 7.24 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.88 (d, J=8.59 Hz, 2 H) 7.96 -8.02 (m, 3 H) 8.08 (s, 1H) . LRMS (ESI) m/z 311.1 [(M+H)]+, - - calculado para ??e?^?d?: 310.36.
Parte B. 4-{ 6- [2- (3-ter-butil-l-metil-ureido) -etilamino] -imidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il } -benzamida . Se agregó lentamente 2-isocianato-2-metilpropano a una suspensión agitada a 0°C de dihidrocloruro de 4- [6- (2-metilamino-etilamino) -imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ] -benzamida (177.3 mg, 0.5 mmol) , y Base de Hunig [7087-68-5] (0.3 mi, 1.8 mmol) en diclorometano (4.6 mi) y la mezcla se dejó agitar y se calentó a temperatura ambiente durante 17 horas. La mezcla de reacción se dividió entonces entre salmuera y etil acetato, se secó (MgS04) , se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice eluido con 10% (v/v) de metanol/etil acetato) , y se cristalizó a partir de 2-propanol/agua a 50.2 mg de un polvo blanco, mp. 154-155°C. 1ñ NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.18 (s, 8 H) 2.49 - 2.52 (m, 1 H) 2.86 (s, 2 H) 3.32 (s, 1 H) 3.40 - 3.49 (m, 3 H) 5.26 (s, 1 H) 6.72 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.79 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.95 - 8.02 (m, 3 H) 8.29 (d, J=8.59 Hz, 2 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 29.06, 34.55, 39.42, 46.40, 49.75, 112.42, 124.98, 125.83, 126.03, 127.73, 130.82, 132.01, 132.19, 137.58, 153.61, 157.25, 167.43. LRMS (ESI) m/z 410.2 [(M+H)]+, calculado para C21H27 7O2: 409.50. 5.6.67. Síntesis de 6- (butilamino) -N- ( lH-pirazol-3-il) imidazo [1, 2-b] piridazina-3-carboxamida: - - Utilizando de reacción de acoplamiento de amida descritas en el ejemplo 5.6.55 se proporcionó el compuesto del titulo como un sólido de color en un rendimiento de 43%. H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.01 - 8.07 (m, 2 H) , 7.70 (d, J=9.92 Hz, 1 H) , 7.63 (br. s., 1 H) , 6.84 (d, J=9.92 Hz, 1 H) , 4.56 (s, 1 H) , 3.41 (t, J=7.06 Hz, 2 H), 1.69 - 1.76 (m, 2 H) , 1.48 (dq, J=15.05, 7.48 Hz, 2 H), 0.96 (t, J=7.39 Hz, 3 H) ; LRMS (ESI) m/e 300.0 [ (M + H)+, calculado para Ci4Hi8 70 300.3]. 5.6.68. Síntesis de 3- (4- (aminometil) fenil) -N- (2-(ter-butoxi) etil) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina Parte A. 3-bromo-N- (2- (ter-butoxi) etil) imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-amina - - Una solución de 3-bromo-6-fluoroimidazo [ 1, 2-b]piridazina (216 mg, 1.0 mmol), trietil amina (0.35 mi, 2.5 mmol) y 2- (ter-butoxi) etanamina (180 mg, 1.5 mmol) en isopropanol (2 mi) se calentó a 65°C durante la noche. La mezcla se enfrió, se diluyó con etil acetato y se lavó con agua. La capa orgánica se secó sobre MgS04 y se concentró para proporcionar un sólido café como el crudo en un rendimiento cuantitativo para síntesis posterior. Se purificaron adicionalmente 20 mg mediante HPLC de preparación para proporcionar 3-bromo-N- (2- (ter-butoxi) etil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina pura como un sólido blanco (8 mg) . """H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 7.57 (d, J=9.85 Hz, 1 H) , 7.42 (s, 1 H), 6.76 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 4.56 (s, 1 H) , 3.67 (t, J=5.94 Hz, 2 H) , 3.53 (t, J=5.94 Hz, 2 H) , 1.24 (s, 9 H) LRMS (ESI) m/e 315.0 [ (M + H)+, calculado para C12Hi8BrN40 314.2] .
Parte B. 3- (4- (aminometil) fenil) -N- (2- (ter-butoxi) etil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina . Utilizando las condiciones de acoplamiento Suzuki descritas en el ejemplo 5.6.48 se proporcionó el compuesto del título como un sólido blanco en un rendimiento de 40%. *H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.53 (s, 1 H) , 8.24 - 8.28 (m, 2 H) , 7.82 (s, 1 H) , 7.66 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 7.57 (d, J=8.59 Hz, 2 H) , 6.79 (d, J=9.85 Hz, 1 H), 4.18 (s, 2 H) , 3.67 (t, J=5.81 Hz, 2 H) , 3.53 (t, J=5.94 Hz, 2 H) , 1.23 (s, 9 H) ; LRMS (ESI) m/e 340.1 - - [ (M + H)+, calculado para C19H26N5O 340.4]. 5.6.69. Síntesis de 4-((3-(4- (aminometil ) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) -2-metilbutan-2-ol Parte A. 4- ( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin- 1) amino) -2-metilbutan-2-ol La 3-bromo-6-fluoroimidazo [1, 2-b] piridazina se hizo reaccionar con 4-amino-2-metilbutan-2-ol utilizando las mismas condiciones de reacción descritas en el ejemplo 5.6.42, Parte A para obtener 82% del producto.
Parte B. 4- ( (3- (4- (aminometil) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) -2-metilbutan-2-ol . El 4-((3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) -2-metilbutan-2-ol se acopló con el ácido ( - (aminometil ) fenil ) borónico como se describe en el ejemplo 5.6.19 para proporcionar el compuesto del título en un rendimiento de 78%. *H NMR (400 MHz, ETANOL-d4) d ppm 1.29 (s, 6 H) 1.84 - 1.94 (m, 2 H) 3.49 -3.58 (m, 2 H) 4.24 (s, 2 H) 7.25 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.67 (d, - - J=8.59 Hz, 2 H) 7.97 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 8.22 - 8.29 (m, 3 H) ; LRMS (ESI) m/e 326.0 [ ( + H)+, calculado para Ci8H23N50 325.0] . 5.6.70. Síntesis de N-alil-4-(6- (alilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) benzamida Parte A. N-alil-3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6- Una solución de 3-bromo-6-cloroimidazo [ 1 , 2-b]piridazina (1000 mg, 4.32 mmol) y alilamina (6.0 mi, 80 mmol) se calentó a 80°C (tubo sellado) durante 6 horas. La mezcla resultante se enfrió a temperatura ambiente y se purificó sobre gel de sílice (eluyendo con etil acetato) para proporcionar N-alil-3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina (550 mg, rendimiento 51%) como un sólido amarillo: LRMS (ESI) m/z 253.0, 255.0 [(M+H)+, calculado para C9H9BrN4 252.0] Parte B. N-alil-4- (6- (alilamino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) benzamida. A una mezcla de N-alil-3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina (365 mg, 1.44 mmol), - - ácido (4- (alilcarbamoil) fenil) borónico (615 mg, 3.0 mmol) , [1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) (62 mg, 0.085 mmol) se agregó n-butanol (3 mi) y 2 M de carbonato de sodio acuoso (2 mi) . La mezcla resultante se calentó a 100 °C durante 5 horas. La reacción se diluyó entonces ' con agua, se extrajo con etil acetato, y se purificó mediante columna de gel de sílice (10% de metanol en etil acetato) seguido por HPLC de preparación (acetonitrilo/formato de sodio acuoso, columna Sunfire) para proporcionar N-alil-4-(6- (alilamino) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il ) benzamida como un sólido blanco: XH NMR (METANOL-d4) d: 8.30 - 8.33 (d, J = 8.4 Hz, 2H) , 7.94 (d, , J = 8.4 Hz, 2H) , 7.67 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 6.78 (d, J = 9.6 Hz, 1H) , 5.9-6.2 (m, 2H) , 5.1-5.4 (m, 4H), 4.00 (m, 4H); LRMS(ESI) m/z 334.2 [(M+H)+, calculado para C19H19 5O 333.4]. 5.6.71. Síntesis de 3- (4- (aminometil) fenil) -N- (3- (ter-butoxi) propil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina Utilizando un proceso similar al descrito en el ejemplo 5.6.69 se proporcionó el compuesto del título. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.51 (s, 2 H) , 8.30 (d, - - J=8.38 Hz, 2 H), 7.83 (s, 1 H) , 7.65 (d, J=9.48 Hz, 1 H) , 7.56 (d, J=8.38 Hz, 2 H) , 6.76 (s, 1 H) , 6.73 (s, 1 H) , 4.17 (s, 2 H) , 3.56 (t, J=6.17 Hz, 2 H) , 3.47 (t, J=6.73 Hz, 2 H) , 1.93 (t, J=6.50 Hz, 2 H) , 1.22 (s, 9 H) ; LRMS (ESI) m/e 354.1 [ (M + H) +, calculado para C20H28 5O 354.4]. 5.6.72. Síntesis de ter butil éster de ácido [2- (3- bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -isopropil- carbámico Parte A. NI- ( 3-bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6- il) etano-1, 2-diamina Una suspensión agitada de 3-bromo-6-cloro- imidazo [1, 2-b] piridazina [13526-66-4] (5.0 g, 21.5 mmol) en etilenodiamina [ 107-15-3] (25.0 mi, 373.1 mmol) se calentó a 65 °C bajo un manto de nitrógeno. Una vez a temperatura, la mezcla se convirtió en una solución amarillo claro. Estas condiciones se mantuvieron durante 17 horas, momento en el cual, la solución de reacción caliente se vació en agua, y el volumen se extrajo exhaustivamente con etil acetato. Los extractos combinados se combinaron, se secaron (CaS04) , y se evaporaron para obtener 1.79 g de un sólido amarillo. Este - - sólido se re-cristalizó a partir de etil acetato/heptano para proporcionar 1.4 g de NI- ( 3-bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) etano-1, 2-diamina como un polvo blanco, mp. 158-159°C. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.49 (br. s., 1 H) 2.79 (t, J=6.19 Hz, 2 H) 3.27 (q, J=5.89 Hz, 2 H) 6.73 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.10 (t, J=5.05 Hz, 1 H) 7.47 (s, 1 H) 7.68 (d, J=9.60 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 40.97, 45.13, 99.48, 113.51, 125.73, 130.72, 137.04, 154.81. LRMS (ESI) m/z 255.9/257.9 [(M+H)]+, calculado para C8Hi0BrN5: 256.11.
Parte B. NI- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -N2-isopropiletano-l , 2-diamina Ácido acético glacial [64-19-7] (1.6 mi, 28.0 mmol) se agregó a una suspensión agitada de NI- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) etano-1, 2-diamina (7.0 g, 27.2 mmol), acetona [67-64-1] (2.4 mi, 32.6 mmol), cianoborohidruro de sodio [25895-80-7] (1.8 g, 27.2 mmol) y se trituró en un tamiz molecular activado de 4 Angstrom (4 g) . El matraz se cubrió con 2, se cerró con un septum, y la mezcla se dejó agitar a temperatura ambiente durante 3 días, después se filtró. El filtrado se evaporó, y el residuo se dividió entre 10% (peso/volumen) de aHC03 acuoso y etil acetato. El extracto se secó (CaS04) , y se evaporó para proporcionar un - - aceite naranja claro. Este aceite se trituró en heptano para precipitar NI- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -N2-isopropiletano-1, 2-diamina como 2.3 g de un polvo amarillo, mp.87-88°C. *H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 0.99 (d, J=6.32 Hz, 5 H) 1.60 (br. s., 1 H) 2.71 - 2.81 (m, 3 H) 3.34 (q, J=6.32 Hz, 2 H) 6.73 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.07 (t, J=5.31 Hz, 1 H) 7.47 (s, 1 H) 7.68 (d, J=9.60 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 22.92, 41.48, 45.29, 47.81, 98.98, 112.99, 125.26, 130.24, 136.53, 154.24. LRMS (ESI) m/z 297.9/299.9 [(M+H)]+, calculado para CuHi6BrN5: 289.19.
Parte C. ter butil éster de ácido [2- (3-bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -isopropil-carbámico . A una solución rápidamente agitada, a temperatura ambiente, cubierta con N2 de NI- ( 3-bromoimidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il ) -N2-isopropiletano-l , 2-diamina (633.3 mg, 2.1 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (0.5 mi, 2.9 mmol) en etil acetato (30 mi) se agregó di-ter-butil dicarbonato sólido [24424-99-5] (556.6 mg, 2.6 mmol). Una vez completa, la reacción se lavó con salmuera, se secó (MgS0 ) , y se evaporó para proporcionar 894.5 mg de un sólido amarillo. Este sólido se re-cristalizó a partir de etil acetato heptano para proporcionar ter butil éster de ácido [2- ( 3-bromo-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -isopropil-carbámico como 559.5 mg de un polvo blanco cristalino, mp. 154-155°C. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.16 (d, J=6.82 Hz, 6 H) 1.40 (s, 9 H) 2.49 - 2.52 (m, 1 - - H) 3.26 - 3.35 (m, 2 H) 3.35 - 3.42 (m, 2 H) 6.68 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.32 (s, 1 H) 7.49 (s, 1 H) 7.71 (d, J=9.60 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz , DMSO-d6) d ppm 20.55, 28.08, 78.46, 98.93, 112.85, 125.52, 130.41, 136.57, 154.10. LRMS (ESI) m/z 297.9/299.9 [(M+H)]+, calculado para Ci6H24Br 502 : 398.31. 5.6.73. Síntesis de etil éster de ácido {2-[3-(4-carbamoil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -etil } -fenil-carbámico Parte A. 2, 2, 2-trifluoro-N- (2-fenilamino-etil) -acetamida Se agregó trifluoroacetato de etilo [383-63-1] (5.5 mi, 46.1 mmol) a una solución agitada a 0°C de Nl-feniletano-1,2-diamina [1664-40-0] (5.0 mi, 38.4 mmol) en THF (125 mi) y se dejó agitar y calentar a temperatura ambiente bajo un manto de N2 durante 17 horas después se dividió entre salmuera y etil acetato. El extracto se secó (MgS04) y se evaporó para proporcionar 10.2 g de un líquido amarillo - - oscuro transparente. LRMS (ESI ) m/z 232.9 [(M+H)]+, calculado para C10H11 F3N2O : 232.21.
Parte B. etil éster de ácido fenil- [2- (2, 2, 2-trifluoro-acetilamino) -etil] -carbámico Se agregó cloroformato de etilo [541-41-3] (1.4 mi, 14.7 mmol) a una solución a temperatura ambiente de 2,2,2-trifluoro-N- (2-fenilamino-etil ) -acetamida (3.4 g, 14.6 mmol) y N-metil morfolina [109-02-4] (2.0 mi, 17.7 mmol) en etil acetato (145 mi) y se agitó bajo un manto de N2 durante 17 horas. La suspensión de reacción se lavó después con ácido clorhídrico acuoso diluido, salmuera, se secó (MgS04) , se evaporó y se llevó a la siguiente etapa sintética sin aislamiento adicional.
Parte C. etil éster de ácido [2-(3-bromo-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -fenil-carbámico El etil éster de ácido fenil- [2- (2, 2, 2-trifluoro-acetilamino) -etil] -carbámico crudo (2.2 g, 7.3 mmol) se combinó con 3-bromo-6-fluoro-imidazo [1, 2-b] piridazina (892.5 mg, 4.1 mmol) y carbonato de potasio [584-08-7] (2.9 g, 20.6 - - ramol) en una solución al 20% (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (25 mi) y se calentó a 85°C durante 5 dias. La mezcla de reacción se dividió después entre agua y etil acetato y el extracto se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice eluido con 100% de etil acetato) para producir 863.1 mg de un polvo blanco cristalino, mp. 160-161°C. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.08 (t, J=7.06 Hz, 2 H) 2.51 (dt, J=3.58, 1.85 Hz, 1 H) 3.35 (s, 1 H) 3.46 (q, J=6.39 Hz, 2 H) 3.90 (t, J=6.50 Hz, 2 H) 4.04 (q, J=7.06 Hz, 2 H) 6.65 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 7.19 - 7.25 (m, 1 H) 7.31 - 7.39 (m, 4 H) 7.48 (s, 1 H) 7.69 (d, J=9.70 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 14.16, 38.85, 47.84, 60.82, 98.79, 112.62, 125.31, 125.99, 126.79, 128.63, 130.18, 136.35, 141.81, 153.79, 154.64. LRMS (ESI) m/z 403.9/405.9 [ (M+H) ] +, calculado para Ci7H18Br 502 : 404.27.
Parte D. etil éster de ácido { 2- [ 3- ( 4-carbamoil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -etil } -fenil-carbámic. A una mezcla de etil éster de ácido [2-(3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -fenil-carbámico (354.7 mg, 0.9 mmol), ácido (4-carbamoilfenil) borónico [123088-59-5] (174.2 mg, 1.1 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (368.8 mg, 1.6 mmol), y [1,1' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (74.4 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 25 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1, 2-dimetoxietano (13 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitó rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta con N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85 °C durante 17 horas después se dividió entre salmuera y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgSC>4) , se evaporó, se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice, eluido con 10% (v/v) de metanol/etil acetato) y se purificó adicionalmente mediante RP-HPLC de preparación para proporcionar etil éster de ácido { 2- [ 3- ( 4-carbamoil-fenil ) -imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-ilamino] -etil } -fenil-carbámico como un polvo blanco, mp. 227-228 °C. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.03 (t, J=7.07 Hz, 2 H) 2.51 (dt, J=3.73, 1.80 Hz, 2 H) 3.31 (s, 1 H) 3.48 (q, J=6.23 Hz, 2 H) 3.91 - 4.04 (m, 3 H) 6.69 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.18 - 7.35 (m, 5 H) 7.76 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.91 - 8.01 (m, 3 H) 8.21 (d, J=8.59 Hz, 2 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 14.25, 48.18, 60.95, 112.37, 124.91, 125.75, 126.00, 126.35, 127.18, 127.79, 128.77, 130.81, 131.93, 132.15, 137.57, 141.78, 153.40, 154.85, 167.49. LRMS (ESI) m/z 445.1 [(M+H)]+, calculado para C24H24 6O3: 444.50. 5.6.74. Síntesis de 4- ( 6-butilamino-imidazo [ 1, 2- - - b] piridazin-3-il) -N- (2, 2-dimetil- [1,3] dioxolan-4-ilmetil) - benzaraida b]piridazin-3-il) benzoico El bromuro de arilo y el éster borónico se acoplaron utilizando las mismas condiciones de reacción Suzuki que en el ejemplo 5.6.19 para obtener el producto de ácido carboxilico.
Parte B. 4- ( 6-butilamino-imidazo [1, 2-b] piridazin-3- il) -N- (2, 2-dimetil- [1, 3] dioxolan-4-ilmetil) -benzamida. El acoplamiento normal de la amida del ácido carboxilico con (2, 2-dimetil-l, 3-dioxolan-4-il ) metanamina proporcionó 71% del producto. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d ) d ppm 1.02 (t, J=7.33 Hz, 3 H) 1.36 (s, 3 H) 1.45 (s, 3 H) 1.49 - 1.57 (m, 2 H) 1.67 - 1.76 (m, 2 H) 3.40 (t, J=7.20 Hz, 2 H) 3.58 (d, J=5.31 - - Hz, 2 H) 3.80 (dd, J=8.46, 6.19 Hz, 1 H) 4.12 (dd, J=8.34, 6.32 Hz, 1 H) 4.36 (t, J=5.81 Hz, 1 H) 6.73 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.63 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.87 (s, 1 H) 7.90 - 7.97 (m, 2 H) 8.29 - 8.36 (m, 2 H) ; LRMS (ESI) m/e 424.0 [ (M + H)+, calculado para C23H29N5O3 423.0]. 5.6.75. Síntesis de 4- ( 6-butilamino-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il) -N- (2, 3-dihidroxi-propil) -benzamida A 150 mg (0.355 mmol) de 4- ( 6-butilamino-imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) -N- (2, 2-dimetil- [1, 3] dioxolan-4-ilmetil) -benzamida se agregaron 15 mi de AcOH y 5 mi de agua y se calentó a 60°C durante 1.5 horas. Esto se concentró y el crudo se purificó en la HPLC de preparación del acético para producir 107 mg (79%) del compuesto del título. 1H N R (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 1.00 (t, J=7.39 Hz, 3 H) 1.42 -1.55 (m, 2 H) 1.66 - 1.76 (m, 2 H) 3.40 (t, J=7.17 Hz, 2 H) 3.43 - 3.52 (m, 1 H) 3.56 - 3.65 (m, 3 H) 3.84 - 3.93 (m, 1 H) 7.24 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 7.96 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 8.00 -8.05 (m, 2 H) 8.23 - 8.28 (m, 2 H) 8.30 (s, 1 H) ; LRMS (ESI) m/e 384.0 [ (M + H)+, calculado para C20H25N5O3 383.0]. 5.6.76. Síntesis de 7- ( 6-butilamino-imidazo [ 1, 2- b] piridazin-3-il ) -quinazolin Parte A. 7- (4, 4, 5, 5-tetrametil-1, 3, 2-dioxaborolan 1) quinazolin-4-ol A 87.2 mg (0.356 mmol) de la 4-bromo-2-nitrobenzamida disuelta en 5 mi de formaldehído se agregó polvo de hierro (50 mg, 0.89 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 2 horas a 80°C. Ésta se diluyó con 20 mi de EtOAc, y 10 mi de solución de 2:1 de DCM/IPA. La mezcla resultante se filtró después a través de una almohadilla de arena, y después se concentró. Al residuo obtenido se agregaron 99 mg (0.391 mmol) de bis (pinacolato) diboro, seguido por KOAc (105 mg, 1.07 mmol), PdCl2 (dppf) . DCM (29 mg, 0.04 mmol) y 18 mi de dioxano. La mezcla resultante se calentó a 80 °C durante la noche. Después de enfriar, ésta se diluyó con EtOAc, se lavó con salmuera, y se secó sobre MgS04. Esta se concentró y se purificó sobre la ISCO (gel de - - sílice) y se eluyó con 1-10% de MeOH/DCM, para obtener 78 mg (81%) del éster borónico.
Parte B. 7- ( 6-butilamino-imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) -quinazolin-4-ol . A (60 mg, 0.223 mmol) del bromuro de arilo, en un vial para microondas se agregó (73 mg, 0.268 mmol) del éster borónico, K3P04 (142 mg, 0.669 mmol), PdCl2(PPh3)3 (16 mg, 0.022 mmol), 3 ml de DME y 1 ml de agua. La mezcla resultante se sometió a microondas durante 30 minutos a 140°C. Se diluyó con 15 ml de EtOAC, y se lavó con aproximadamente 10 ml de salmuera. La capa orgánica se secó sobre MgS04, y se concentró. La mezcla en crudo se redisolvió en 3 ml de la solución de 2:1 de MeOH/H20. Ésta se filtró y se purificó en la HPLC de preparación para proporcionar 41 mg (55%) del producto deseado. [El procedimiento se utiliza para todas las reacciones de acoplamiento Suzuki a menos que se defina de otra manera. Los ácidos borónicos funcionan justo como los ésteres borónicos] . XH NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 0.99 (t, J=7.39 Hz, 3 H) 1.45 - 1.56 (m, 2 H) 1.68 - 1.77 (m, 2 H) 3.46 (t, J=7.06 Hz, 2 H) 7.28 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 7.99 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 8.22 - 8.28 (m, 2 H) 8.37 (d, J=8.38 Hz, 1 H) 8.45 (s, 1 H) 8.63 (d, J=1.54 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/e 335.0 [ (M + H)+, calculado para Ci8Hi8N60 334.0]. 5.6.77. Síntesis de Iso-propil metil (2- ( (3- (4-(pirrolidin-2-il) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6- - - il) amino) etil) carbamato El compuesto del titulo se obtuvo utilizando un proceso similar al descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.56 (s, 1 H) , 8.28 (br. s., 2 H) , 7.83 (s, 1 H) , 7.68 (d, J=9.35 Hz, 1 H) , 7.60 (d, J=8.34 Hz, 2 H), 6.73 (d, J=9.85 Hz, 1 H) , 4.66 (dd, J=9.60, 6.82 Hz, 1 H), 3.66 (br. s., 1 H) , 3.59 (br. s., 3 H) , 3.41 - 3.55 (m, 2 H), 2.94 (s, 3 H) , 2.48 - 2.56 (m, 1 H) , 2.19 - 2.34 (m, 3 H) , 1.00-1.23 (d, J=5.05 Hz, 6 H) ; LRMS (ESI) m/e 423.1 [ (M + H)+, calculado para C23H31N602. 423.5]. 5.6.78. Síntesis de ter-butil (2-((3-(2-metoxifenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6 il) amino) etil) (metil) carbamato El compuesto del título se obtuvo utilizando un proceso similar al descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.04 (s, 1 H) , 7.97 (br. s., 1 H) , 7.90 (br. s., 1 H) , 7.52 - 7.57 (m, 1 H) , 7.13 - 7.24 (m, - 1 - 3 H) , 3.90 (s, 3 H) , 3.42 - 3.49 (m, 4 H) , 2.74 (s, 3 H) , 1.30-1.38 (br. s., 9 H) ; LRMS (ESI) m/e 398.1 [ (M + H)+, calculado para C21H28 5O3 398.5]. 5.6.79. Síntesis de isopropil metil (2- ( (3- (tiazol-4-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) amino) etil) carbamato El compuesto del título se obtuvo utilizando un proceso similar al descrito en el ejemplo 5.6.69. 1R NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 9.19 (s, 1 H) , 8.65-8.85 (bs, 1 H),8.31 (s, 1 H) , 7.97 (d, J=9.85 Hz, 1 H) , 7.18 (d, J=9.35 Hz, 1 H), 4.78 (m, 1 H) , 3.64 - 3.75 (m, 4 H) , 2.98 (s, 3 H) , 1.06-1.25 (m, 6 H) ; LRMS (ESI) m/e 361.1 [ (M + H)+, calculado para Ci6H2o 602S 361.4]. 5.6.80. Síntesis de 4- (6- ( (2- (2-ciano-N-metilacetamido) etil) amino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) benzamida Parte A. N- (2- ( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) etil) -2-ciano-N-metilacetamida - - El ter-butil (2- ( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) etil) (metil ) carbamato se agitó en solución de TFA/DCM (2:1) durante 0.5 horas y después se concentró. la sal de amina-TFA resultante se amidó bajo las condiciones descritas en el ejemplo 5.6.62, parte C con ácido 2-cianoacético para obtener la amida en un rendimiento de 63%.
Parte B. 4- (6- ( (2- (2-ciano-N-metilacetamido) etil) amino) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il) benzamida. La reacción de la amida con ácido (4-carbamoilfenil) borónico bajo condiciones de acoplamiento Suzuki como se describe en el ejemplo 5.6.19 proporcionó el producto deseado en un rendimiento de 28%. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 2.87 (s, 1 H) 2.95 (s, 2 H) 3.56 - 3.67 (m, 4 H) 3.73 (s, 2 H) 7.16 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 7.94 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 8.00 - 8.06 (m, 2 H) 8.17 (d, J=8.38 Hz, 2 H) 8.21 -8.28 (m, 1 H); LRMS (ESI) m/e 378.0 [ (M + H)+, calculado para Ci9Hi9N702 377.0] . 5.6.81. Síntesis de 2- ( ( 3- ( 3-metoxipiridin-4-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) etil ter-butil (metil) carbamato - - Parte A. N- (ter-butil ) -N-metil-lH-imidazol-1-carboxamida A una suspensión de N, N' -carbonildiimidazol (CDI, 1.76 g, 11 mmol) en THF (18 mi) se agregó t-butilmetilamina (1.2 mi, 10 mmol). La reacción se sometió a reflujo durante la noche, después se enfrió, se concentró, se absorbió con DCM y agua, y se extrajo. La capa orgánica (DCM) se secó con sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró para proporcionar N- (ter-butil) -N-metil-lH-imidazol-l-carboxamida como un aceite pegajoso (0.27 g, rendimiento 15%). LRMS (ESI) m/e 182.1 [ (M + H)+, calculado para C9Hi6N30 182.2].
Parte B. 1- (ter-butil (metil) carbamoil) -3-metil-lH-imidazol-3-io A una solución de N- (ter-butil) -N-metil-lH-imidazol-l-carboxamida (0.27 g, 1.5 mmol) en acetonitrilo (3 mi) se agregó yoduro de metilo (0.4 mi, 6.0 mmol). La reacción se concentró in vacuo después de agitar a - - temperatura ambiente durante 24 horas para proporcionar 1- (ter-butil (metil) carbamoil) -3-metil-lH-imidazol-3-io (0.28 g, 100%) .
Parte C. 2- ( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) etil ter-butil (metil ) carbamato A una solución de 2- (( 3-bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) amino) etanol (0.35 g, 1.5 mmol) y l-(ter-butil (metil) carbamoil) -3-metil-lH-imidazol-3-io (0.30 g, 1.5 mmol) en THF/DMF (6.0 ml/3.0 mi) se agregó NaH (0.15 g, 60% en aceite mineral, 2.5 mmol). La reacción se agitó durante 24 horas y después se templó con agua, se extrajo con éter, se concentró y se purificó mediante Cromatografía de columna ISCO para proporcionar 2- ( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) etil ter-butil (metil) carbamato como el producto (0.17 g, rendimiento 31%). LRMS (ESI) m/e 372.0 [ (M + H)+, calculado para Ci4H2iBrN502 371.2].
Parte D. 2- ( (3- (3-metoxipiridin-4-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) etil ter-butil (metil ) carbamato . El compuesto del título se obtuvo utilizando Acoplamiento Suzuki como se describe en el ejemplo 5.6.69. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.70 (d, J=5.31 Hz, 1 H) , 8.43 (s, 1 H) , 8.13 (s, 1 H), 7.73 (s, 1 H) , 7.71 (s, 1 H) , 6.84 (s, 1 H) , - - 6.82 (s, 1 H), 4.31 (t, J=5.68 Hz, 2 H) , 4.10 (s, 3 H) , 3.70 (t, J=5.68 Hz, 2 H), 2.89 (s, 3 H) , 1.35 (s, 9 H) ; LRMS (ESI) m/e 399.3 [ (M + H)+, calculado para C20H27N6O3 399.5]. 5.6.82. Síntesis de N- (2-isopropoxietil) -3- (3-metoxipiridin-4-il ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina El compuesto del título se obtuvo como se describe en el ejemplo 5.6.69. XH NMR (400 Hz, METANOL-d4) d ppm 8.66 (d, J=5.29 Hz, 1 H) , 8.36 (br. s., 1 H) , 8.21 (d, J=4.41 Hz, 1 H) , 8.06 (br. s., 1 H) , 7.63 (d, J=9.70 Hz, 1 H) , 6.79 (d, J=9.70 Hz, 1 H), 4.57 (br. s., 1 H) , 4.03 (s, 3 H) , 3.58 -3.67 (m, 3 H), 3.47 - 3.52 (m, 2 H) , 1.11 (d, J=6.17 Hz, 6 H) ; LRMS (ESI) m/e 328.1 [ (M + H)+, calculado para Ci7H22 502 328.4] . 5.6.83. Síntesis de isopropil éster de ácido [2- (3-Ciclopropil-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -isopropil-carbámico Parte A. isopropil éster de ácido [2-(3-bromo imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -isopropil-carbámico - - 7A una solución rápidamente agitada, a temperatura ambiente, cubierta por N2 de NI- ( 3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -N2-isopropiletano-l, 2-diamina (945.0 mg, 3.2 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (0.7 mi, 3.8 mmol) en etil acetato (32 mi) se agregó una solución de 1.0 M de cloroforraato de isopropilo en tolueno (3.2 mi). Una vez completa, la reacción se lavó con salmuera, se secó (MgS04) , y se evaporó para proporcionar 1.2 g de un sólido bronce. Este sólido se re-cristalizó a partir de etil acetato heptano para proporcionar isopropil éster de ácido [2- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -isopropil-carbámico como 750 mg de un polvo blanco cristalino, mp. 146-147°C. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.17 (d, J=6.82 Hz, 12 H) 3.31 -3.35 (m, 2 H) 3.38 - 3.44 (m, 2 H) 4.80 (dt, J=12.06, 5.97 Hz, 1 H) 6.67 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.34 (t, J=5.68 Hz, 1 H) 7.49 (s, 1 H) 7.71 (d, J=9.60 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 20.44, 21.95, 47.01, 67.46, 98.94, 112.84, 125.54, 130.42, 136.57, 154.10. LRMS (ESI) m/z 297.9/299.9 [(M+H)]+, calculado para Ci5H22Br 502 : 384.28.
Parte B. isopropil éster de ácido [2- (3-ciclopropil-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -isopropil-carbámico. Una solución de 10% (v/v) de agua en - - THF (25 mi) se agregó a una mezcla de isopropil éster de ácido [2- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -isopropil-carbámico (515.1 mg, 1.34 mmol), ciclopropiltrifluoroborato de potasio [1065010-87-1] (396.8 mg, 2.7 mmol), carbonato de cesio [534-17-8] (1.3 g, 4.0 mmol), y [1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (110.4 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 50 mi. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitó rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta con N2 se calentó a reflujo durante 4 dias después se enfrió y se filtró. El filtrado se dividió entre salmuera y etil acetato y el extracto orgánico separado en fases se secó (MgS04) y se evaporó para proporcionar un aceite negro que se purificó mediante RP-HPLC de preparación para proporcionar 41.6 mg de isopropil éster de ácido [2- ( 3-ciclopropil-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -isopropil-carbámico como un sólido blanco. 1ti NMR (400 MHz, ETAN0L-d4) d ppm 0.77 - 0.84 (m, 2 H) 0.98 - 1.06 (m, 2 H) 1.20 - 1.32 (m, 14 H) 2.08 -2.19 (m, 1 H) 3.43 - 3.50 (m, 2 H) 3.50 - 3.59 (m, 2 H) 6.61 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 7.08 (s, 1 H) 7.52 (d, J=9.70 Hz, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 346.2 [(M+H)]+, calculado para C18H27 5O2: 345.45. - - 5.6.84. Síntesis de ( S ) -ter-butil 2-(((3-(4-carbamoilfenil ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidina-l-carboxilato El compuesto del título se obtuvo utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.24 - 8.34 (m, 2 H) , 7.97 - 8.01 (m, 2 H) , 7.87 (s, 1 H) , 7.66 (d, J=8.84 Hz, 1 H) , 6.77 (br. s., 1 H) , 4.17 (br. s., 1 H) , 3.68 (br. s., 1 H) , 3.44 - 3.55 (m, 1 H) , 3.35 - 3.44 (m, 3 H) , 1.91 - 2.05 (m, 3 H) , 1.87 (br. s., 1 H), 1.38 - 1.48 (m, 5 H) , 1.34 (br. s., 4 H) ; LRMS (ESI) m/e 437.2 [ (M + H)+, calculado para C23H29 6O3 437.5]. 5.6.85. Síntesis de ( S ) -ter-butil 2- (((3- (4-(aminometil) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidina-l-carboxilato - - El compuesto del titulo se obtuvo utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. XH NMR (400 MHz, METANOL-d ) d ppm 8.27 (br. s., 2 H) , 7.82 (br. s., 1 H) , 7.66 (d, J=9.35 Hz, 1 H) , 7.58 (d, J=8.34 Hz, 2 H) , 6.77 (d, J-9.09 Hz, 1 H) , 4.18 (s, 3 H) , 3.36-3.50 (m, 4 H) , 1.85 - 2.04 (m, 4 H), 1.33 - 1.48 (m, 9 H) ; LRMS (ESI) m/e 437.2 [ (M + H)+, calculado para C23H29N603 437.5]. 5.6.86. Síntesis de (R) -ter-butil 2-(((3-(4- (aminometil) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) amino) metil ) pirrolidina-l-carboxilato El compuesto del título se obtuvo utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.27 (br. s., 2 H) , 7.82 (br. s., 1 H), 7.66 (d, J=9.35 Hz, 1 H) , 7.58 (d, J=8.34 Hz, 2 H) , 6.77 (d, J=9.09 Hz, 1 H) , 4.18 (s, 3 H) , 3.36-3.50 (m, 4 H) , 1.85 - 2.04 (m, 4 H), 1.33 - 1.48 (m, 9 H) ; LRMS (ESI) m/e 437.2 [ (M + H)+, calculado para C23H29N603 437.5]. 5.6.87. Síntesis de N- (2-isopropoxietil ) -3-(isotiazol-5-il) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina - - El compuesto del titulo se obtuvo utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H N R (400 MHz , METANOL-d4) d ppm 8.60 (d, J=2.02 Hz, 1 H) , 8.45 (s, 1 H) , 8.01 (d, J=1.77 Hz, 1 H) , 7.95 (d, J=9.85 Hz, 1 H) , 7.25 (d, J=9.85 Hz, 1 H) , 3.80 - 3.85 (m, 2 H) , 3.69 - 3.77 (m, 3 H) , 1.21 (d, J=6.32 Hz, 6 H) ; LRMS (ESI ) m/e 304.1 [ (M + H)+, calculado para C14Hi8N5OS 304.4]. 5.6.88. Síntesis de ter-butil 2-(2-((3-(4- (aminometil ) fenil ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) amino) etil) pirrolidina-l-carboxilato El compuesto del título se obtuvo utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.53 (s, 1 H) , 8.27 (d, J=8.34 Hz, 2 H) , 7.81 (s, 1 H) , 7.64 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 7.57 (d, J=8.34 Hz, 2 H), 6.73 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 4.18 (s, 2 H) , 3.92 -3.98 (m, 1 H) , 3.52 (br. s., 1 H) , 3.35 - 3.46 (m, 3 H) , - - 1.67-2.22 (m, 6 H) , 1.48 (br. s., 4 H) , 1.28 (br. s., 5 H) ; LR S (ESI) m/e 437.3 [ (M + H)+, calculado para C24H33N602 437.5] . 5.6.89. Síntesis de 3- (4- (aminometil) fenil) -N- (2-(ciclopentiloxi) etil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina Parte 3-bromo-N- (2- (ciclopentiloxi ) etil ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-amina La 2- (ciclopentiloxi) etanamina se hizo reaccionar con 3-bromo-6-fluoroimidazo [1, 2-b] piridazina, utilizando las condiciones de desplazamiento de amina descritas en el ejemplo 5.6.42, parte A para proporcionar 69% del producto.
Parte B. ter-butil 4-(6-((2- (ciclopentiloxi) etil) amino) imidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) bencilcarbamato - - La 3-bromo-N- (2- (ciclopentiloxi) etil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina se acopló con ácido (4-(((ter-butoxicarbonil ) amino)metil) fenil) borónico bajo las condiciones de acoplamiento Suzuki como se describe en el ejemplo 5.6.77, Parte B para obtener 70% del producto.
Parte C. 3- (4- (aminometil) fenil) -N- (2- (ciclopentiloxi) etil ) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina . La protección de ter-butoxicarbonilo se retiró utilizando 10 equivalentes de AcCl en eOH a 0°C durante 4 horas para obtener un rendimiento del 100% del compuesto deseado. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 1.55 (d, J=3.54 Hz, 2 H) 1.63 - 1.81 (m, 6 H) 3.57 (t, J=5.31 Hz, 2 H) 3.67 (q, J=5.05 Hz, 2 H) 3.93 - 4.05 (m, 1 H) 4.21 - 4.31 (m, 2 H) 7.29 - 7.41 (m, 1 H) 7.70 (d, J=8.08 Hz, 2 H) 7.96 - 8.05 (m, 1 H) 8.18 -8.25 (m, 2 H) 8.25 - 8.31 (m, 1 H) ; 13C NMR (101 MHz, METANOL-d4) d ppm 24.59 (s, 1 C) 33.34 (s, 1 C) 43.09 (s, 1 C) 44.12 (s, 1 C) 67.41 (s, 1 C) 83.26 (s, 1 C) 120.08 (s, 1 C) 121.33 (s, 1 C) 121.60 (s, 1 C) 128.35 (s, 1 C) 129.81 (s, 1 C) 130.45 (s, 1 C) 130.65 (s, 1 C) 134.28 (s, 1 C) 135.94 (s, 1 C) 146.70 - 146.90 (m, 1 C) 157.40 (s, 1 C) ; LRMS (ESI) m/e 352.0 [ (M + H)+, calculado para C20H25 5O 351.0]. 5.6.90. Síntesis de (S) -isopropil 2-(((3-vinilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidina-1-carboxilato - - El compuesto del titulo se obtuvo utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H NMR (400 MHz, ETAN0L-d4) d ppm 7.52 - 7.59 (m, 2 H) , 6.95 - 7.00 (m, 1 H) , 6.68 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 6.20 (d, J=1.52 Hz, 1 H) , 6.16 (d, J=1.52 Hz, 1 H) , 5.37 (d, J=l .52 Hz, 1 H) , 5.34 (d, J=1.77 Hz, 1 H) , 4.88 (quin, J=6.25 Hz, 1 H) , 4.22 (Rs, 1 H) , 3.40 - 3.64 (m, 4 H) , 1.87 - 2.05 (m, 4 H) , 1.18 - 1.25 (m, 6 H) ; LRMS (ESI) m/e 330.3 [ (M + H)+, calculado para Ci7H24N502 330.4] 5.6.91. Síntesis de (S) -isopropil 2- ( ( (3- (prop-1-en-2-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidina-1-carboxilato El compuesto del titulo se obtuvo utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d ) d ppm 7.60 (d, J=9.85 Hz, 1 H) , 7.47 (s, 1 H), 6.70 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 6.43 (s, 1 H) , 5.27 (s, 1 H) , 4.86 (dt, J=12.44, 6.28 Hz, 1 H) , 4.21 (br. s., 1 H) , 3.54 -3.61 (m, 1 H) , 3.35 - 3.50 (m, 3 H) , 2.23 (s, 3 H) , 1.86 - - - 2.05 (m, 4 H) , 1.21 (dd, J=12.13, 6.06 Hz, 6 H) ; LRMS (ESI) m/e 344.2 [ (M + H)+, calculado para C18H26 502 344.4]. 5.6.92. Síntesis de (S) -isopropil 2-(((3-ciclopropilimidazo [l,2-b]piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidina-l-carboxilato El compuesto del titulo se obtuvo utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H N R (400 MHz, METAN0L-d4) d ppm 7.85 (m, J=9.85 Hz, 1 H) , 7.52 (s, 1 H) , 7.17 - 7.21 (m, 1 H) , 4.84 - 4.90 (m, 1 H) , 4.25 (d, J=6.57 Hz, 1 H) , 3.63 - 3.69 (m, 1 H) , 3.42 - 3.57 (m, 3 H) , 2.24 - 2.31 (m, 1 H) , 1.90 - 2.08 (m, 4 H) , 1.16 - 1.25 (m, 8 H), 0.90 - 0.94 (m, 2 H) ; LRMS (ESI) m/e 344.2 [ (M + H)+, calculado para Ci8H26 502 344.4]. 5.6.93. Síntesis de N- (2- (ciclopentiloxi) etil) -3- (2-metoxipiridin-3-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina El compuesto del título se obtuvo utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H NMR (400 MHz, METAN0L-d4) d ppm 8.76 (dd, J=7.58, 1.77 Hz, 1 H) , 8.13 - - (dd, J=4.80, 1.77 Hz, 1 H) , 7.89 (s, 1 H) , 7.64 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 7.08 (dd, J=7.45, 4.93 Hz, 1 H) , 6.76 (d, J=9.60 Hz, 1 H), 4.05 (s, 3 H) , 3.97 (dd, J=5.18, 3.41 Hz, 1 H) , 3.64 (t, J=5.94 Hz, 2 H) , 3.51 (t, J=5.94 Hz, 2 H) , 1.62 -1.76 (m, 6 H) , 1.50 - 1.58 (m, 2 H) ; LRMS (ESI) m/e 354.2 [ (M + H)+, calculado para Ci9H24 502 354.4]. 5.6.94. Síntesis de (S) -ter-butil 3-(((3-(3-metoxipiridin-4-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino)metil) irrolidina-l-carboxilato El compuesto del titulo se obtuvo utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.64 (d, J=5.05 Hz, 1 H) , 8.43 (s, 1 H) , 8.29 (d, J=5.05 Hz, 1 H) , 8.10 (s, 1 H) , 7.69 (d, J=9.60 Hz, 1 H), 6.80 (d, J=9.85 Hz, 1 H) , 4.08 (s, 3 H) , 3.2 - 3.56 (m, 5 H), 3.36 (br. s., 1 H) , 2.69 (m, 1 H) , 2.08 (m, 1 H) , 1.78 (m, 1 H) , 1.44 (s, 9 H) ; LRMS (ESI) m/e 425.3 [ (M + H)+, calculado para C22H29 6O3 425.5]. 5.6.95. Síntesis de (S) -ter-butil 2-(((3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) amino) metil) pirrolidina-l-carboxilato - - El compuesto del título se obtuvo utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H NMR (400 MHz, METAN0L-d4) d ppm 7.57 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 7.41 (s, 1 H) , 6.73 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 3.55 - 3.61 (m, 1 H) , 3.39 -3.52 (m, 3 H) , 3.37 (s, 1 H) , 2.08 (br. s., 1 H) , 1.87 - 2.03 (m, 3 H) , 1.43 (s, 9 H) ; LRMS (ESI) m/e 398.1 [ (M + H)+, calculado para Ci6H22Br 502 397.3]. 5.6.96. Síntesis de (S) -isopropil 2-(((3-cianoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino)metil)pirrolidina-l-carboxilato Una solución de (S) -iso-propil 2-(((3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino)metil)pirrolidina-l-carboxilato (300 mg, 0.79 mmol), NaCN (46 mg, 0.94 mmol), Cul (15 mg, 0.08 mmol), KI (27 mg, 0.16 mmol) y N1,N2-dimetiletano-1, 2-diamina (0.085 mi, 0.79 mmol) en tolueno (0.8 mi) se agitó a 110°C durante 12 horas. La reacción se enfrió, se concentró, se absorbió con EtOAc y agua, se extrajo y se secó la capa orgánica con MgS04. La capa - - orgánica se concentró y se purificó mediante ISCO (0-5% de MeOH/DCM) , después siguió la HPLC de preparación (neutra) para proporcionar (S) -isopropil 2- (( (3-cianoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidina-l-carboxilato (63 mg, rendimiento 25%). XH NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.00 (s, 1 H) , 7.72 (d, J=9.85 Hz, 1 H) , 6.91 (d, J=9.85 Hz, 1H) , 4.20 (m, 1 H) , 3.38 - 3.61 (m, 4 H) , 1.97 - 2.05 (m, 4 H) , 1.16 - 1.25 (m, 6 H) ; LRMS (ESI) m/e 329.2 [ (M + H)+, calculado para Ci6H2iN602 329.4]. 5.6.97. Síntesis de ( 3-ciclopent-l-enil-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) - [2- (2-etoxi-fenil) -etil] -amina Parte A. ( 3-bromo-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il )- [2- (2-etoxi-fenil) -etil] -amina Una mezcla de 3-bromo-6-fluoro-imidazo [ 1, 2-b]piridazina (648 mg, 3 mmol) , 2-etoxi-fenetilamina (1 g, 6 mmol) y trietilamina (1 mi) en alcohol isopropílico (2 mi) se calentó en un microondas a 140 °C durante 20 minutos. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se sometió a - - ISCO (columna de 40 g) , para proporcionar el compuesto del titulo (980 mg) . XH NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.47 (t, J=6.95 Hz, 3 H) 3.04 (t, J=6.69 Hz, 2 H) 3.64 - 3.72 (m, 2 H) 4.06 - 4.17 (m, 2 H) 4.97 (br. s., 1 H) 6.40 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 6.87 - 7.02 (m, 2 H) 7.17 - 7.32 (m, 2 H) 7.47 (s, 1 H) 7.54 (d, J=9.60 Hz, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 361 y 363.1 [( +H)]+, calculado para Ci6H17BrN40: 361.24.
Parte B. ( 3-ciclopent-l-enil-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) - [2- (2-etoxi-fenil) -etil] -amina . Una mezcla de (3-bromo-imidazo [1, 2-b]piridazin-6-il) - [2- (2-etoxi-fenil) -etil] -amina (90 mg, 0.25 mmol) , 2-ciclopent-l-enil- , , 5, 5-tetrametil- [1, 3, 2] dioxaborolano (97 mg, 0.5 mmol), K2C03 (104 mg, 0.75 mmol) y diclorobis (trifenilfosfina) paladio ( II ) (8.8 mg, 0.013 mmol) en eCN/agua (2.8 ml/0.7 mi) se calentó en un microondas a 150 °C durante 15 minutos. La capa acuosa se retiró y la capa orgánica se concentró. El residuo se sometió a ISCO. El producto se purificó adicionalmente mediante preparación para proporcionar el compuesto del titulo (60 mg) . XH NMR (400 MHz, CL0R0FORMO-d) d ppm 1.46 (t, J=6.95 Hz, 3 H) 1.99 - 2.07 (m, 2 H) 2.64 - 2.70 (m, 2 H) 2.82 - 2.88 (m, 2 H) 3.06 (t, J=6.62 Hz, 2 H) 3.66 - 3.72 (m, 2 H) 4.11 (q, J=7.06 Hz, 2 H) 4.77 - 4.84 (m, 1 H) 6.37 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 6.88 - 6.95 (m, 2 H) 7.02 (t, J=1.98 Hz, 1 H) 7.18 - 7.27 (m, 2 H) 7.46 (s, 1 H) 7.62 (d, J=9.48 Hz, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 349.2 [(M+H)]+, calculado para C2iH24N40: - - 348.45. 5.6.98. Síntesis de (S) -ter-butil-2- ( ( (3- (2-oxopirrolidin-l-il ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) amino) metil ) irrolidina-l-carboxilato Parte A. 4-bromo-N- ( 6-cloroimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-3-il ) butanamida A 1.0 g (5.930 mmol) de 6-cloroimidazo [1, 2-b] piridazin-3-amina disuelta en 15 mi de THF se agregó 4-cloruro de bromobutanoilo (1.21 g, 6.52 mmol) y piridina (0.96 mi, 11.86 mmol). Esta mezcla se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente, y después se diluyó con 30 mi de EtOAc y se templó con NaHC03 acuoso. La capa orgánica se separó y se lavó con salmuera, se secó sobre MgS04, y se concentró. El sólido ob.tenido (1.39 g, rendimiento 74%) fue suficientemente puro para utilizarse para la siguiente etapa sin purificación adicional.
Parte B. 1- ( 6-cloroimidazo [1 , 2-b] piridazin-3-il) pirrolidin-2-ona - - A 1.0 g de 4-bromo-N- ( 6-cloroimidazo [ 1, 2-b] piridazin-3-il ) butanamida (3.15 mmol) disuelta en 39 mi de DMF se agregó NaH (189 mg, 4.72 mmol), y se agitó a temperatura ambiente durante 0.5 horas. Se diluyó con 50 mi de EtOAc y se separó la capa orgánica. Se lavó dos veces con agua, una vez con salmuera y se secó sobre MgS04. Se concentró para obtener 0.49 g del producto (66%). No fue necesaria la purificación.
Parte C. (S) -ter-butil 2- ( ( ( 3- (2-oxopirrolidin-l-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidina-1-carboxilato. La 1- (6-cloroimidazo [1, 2-b] piridazin-3-il ) pirrolidin-2-ona se hizo reaccionar con (S) -ter-butil 2-(aminometil) pirrolidina-l-carboxilato utilizando las condiciones de desplazamiento de amina descritas en el ejemplo 5.6.42, Parte A para proporcionar el producto deseado en un rendimiento de 73%. H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.38 - 1.46 (m, 10 H) 1.71 (br. s., 1 H) 1.80 - 1.91 (m, 2 H) 1.95 - 2.08 (m, 1 H) 2.22 (quin, J=7.55 Hz, 2 H) 2.50 -2.58 (m, 2 H) 3.22 - 3.41 (m, 4 H) 3.90 (q, J=6.69 Hz, 2 H) 4.16 (br. s., 1 H) 6.40 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 7.44 (s, 1 H) 7.54 (d, J=9.70 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/401.0 [ (M + H) +, calculado para C2oH28 603 400.0]. - - 5.6.99. Síntesis de l-{2- [3- ( 4-aminometil-fenil ) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -etil } -3-ter-butil-imidazolidin-2-ona Parte A. 1- [2- ( 3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -3-ter-butil-imidazolidin-2-ona Una mezcla de l-ter-butil-imidazolidin-2-ona (1.42 g, 10 mmol) y NaH (600 mg, 60% dispersión en aceite, 15 mmol) en THF (50 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas después se enfrió a 0°C. Una solución de bromoacetonitrilo (1.4 mi, 20 mmol) en THF (30 mi) se agregó lentamente a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se trató con una pequeña cantidad de agua y después la mezcla se pasó a través de una almohadilla de sílice. El filtrado se concentró y el residuo se sometió a una columna corta para proporcionar el producto crudo que se purificó adicionalmente mediante otra columna corta para proporcionar el producto.
A una solución del producto anterior (1.6 g, 8.8 - - itimol) en THF (20 mi) a 0°C se agregó una solución de BH3THF en THF (1 M, 100 mi). La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 30 minutos, después a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla se enfrió después a 0°C de nuevo y se trató con HC1 frió (6 N, 20 mi) a un fuerte pH acidice El solvente orgánico se retiró bajo presión reducida. El residuo se trató con NaOH (4 N, -30 mi) a un pH>10, después se extrajo con EtOAc (5 x 75 mi) . Los extractos combinados se secaron (Na2SC>4) y se concentraron para proporcionar el producto deseado.
Una mezcla del producto anterior (350 mg, 1.89 mmol), 3-bromo-6-fluoro-imidazo [ 1, 2-b] piridazina (216 mg, 1 mmol) , y trietilamina (0.5 mi) en alcohol isopropilico (1.5 mi) se calentó en un microondas a 140°C durante 20 minutos. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se sometió a ISCO (columna de 40 g) , para proporcionar el compuesto del titulo (180 mg) . LRMS (ESI) m/z 381 y 383.2 [( +H)]+, calculado para Ci5H2iBrN60: 381.28.
Parte B. l-{2- [3- ( 4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -etil } -3-ter-butil-imidazolidin-2-ona . Una mezcla de 1- [2- ( 3-bromo-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -3-ter-butil-imidazolidin-2-ona (75 mg, 0.2 mmol), hidrocloruro de ácido (4-aminometilfenil) borónico (49 mg, 0.26 mmol), K2C03 (83 mg, 0.6 mmol) y diclorobis (trifenilfosfina) paladio (II) (7 mg, 0.01 mmol) en - - MeCN/agua (2.8 ml/0.7 mi) se calentó en un microondas a 150°C durante 15 minutos. La mezcla de reacción se diluyó con MeCN y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC de preparación para proporcionar el compuesto del titulo (64.8 mg) . 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 1.26 (s, 9 H) 3.24 - 3.31 (m, 4 H) 3.40 (t, J=5.95 Hz, 2 H) 3.52 (t, J=5.95 Hz, 2 H) 4.17 (s, 2 H) 6.70 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 7.54 - 7.63 (m, 3 H) 7.77 (s, 1 H) 8.19 - 8.23 (m, 2 H) 8.56 (s, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 408.4 [(M+H)]+, calculado para C22H29N7O: 407.52. 5.6.100. Síntesis de (S) -ter-butil 2-(((3-(4- (aminometil) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino)metil) piperidina-l-carboxilato Parte A. (S) -ter-butil 2- ( ( ( 3-bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) amino)metil) piperidina-l-carboxilato La reacción de 3-bromo-6-fluoroimidazo [1, 2-b]piridazina y (S) -ter-butil 2- (aminometil) piperidina-l-carboxilato bajo las condiciones de desplazamiento de amina descritas en el ejemplo 5.6.42, Parte A, proporcionó la amina - - de arilo en un rendimiento de 38%.
Parte B. (S) -ter-butil 2-(((3-(4- (aminometil ) fenil ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) amino) metil ) -piperidina-l-carboxilato. El (S) -ter-butil 2-(((3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil ) piperidina-l-carboxilato se sometió a la reacción de acoplamiento Suzuki descrita en el ejemplo 5.6.19, Parte B con los ácidos borónicos respectivos para proporcionar los productos esperados (S) -ter-butil 2- (((3- (4- (aminometil) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino)metil) piperidina-l-carboxilato. 1H NMR (400 Hz, METAN0L-d4) d ppm 1.14 (br. s., 9 H) 1.59 - 1.73 (m, 5 H) 1.78 (br. s., 1 H) 3.00 (t, J=12.63 Hz, 1 H) 3.50 (dd, J=14.15, 4.55 Hz, 1 H) 3.67 - 3.80 (m, 1 H) 4.00 (d, J=12.38 Hz, 1 H) 4.19 (s, 2 H) 4.87 (br. s., 1 H) 6.72 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.57 (m, J=8.34 Hz, 2 H) 7.67 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.82 (s, 1 H) 8.27 (m, J=8.34 Hz, 2 H) ; LRMS (ESI) m/437.0 [ (M + H)+, calculado para C24H32 6O2 436.0]. 5.6.101. Síntesis de 3- (4- (aminometil) fenil) -N- ( (2-metiltetrahidrofuran-2-il)metil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina - - compuesto del título se obtuvo utilizando procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. """H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.55 (s, 1 H) , 8.25 (d, J=7.83 Hz, 2 H) , 7.80 (s, 1 H) , 7.66 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 7.57 (d, J=8.08 Hz, 2 H), 6.83 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 4.17 (s, 2 H) , 3.91 (t, J=6.19 Hz, 2 H) , 3.56 (d, J=13.64 Hz, 1 H) , 3.46 (d, J=13.64 Hz, 1 H) , 1.97 - 2.06 (m, 3 H) , 1.70 - 1.80 (m, 1 H) , 1.31 (s, 3 H) ; LRMS (ESI) m/e 338.2 [ (M + H)+, calculado para C19H24N5O 338.4] . 5.6.102. Síntesis de isopropil éster de ácido 4- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -piperazina-l-carboxílico Parte A. ter-butil éster de ácido 4-(3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -piperazina-l-carboxílico 3-bromo-6-cloro-imidazo [1, 2-b] piridazina [13526-66- 4] (1.1 g, 4.5 mmol) y piperazina [110-85-0] (3.6 g, 41.8 mmol) se trituraron juntos en un mortero hasta una mezcla íntima y se transfirió a un matraz de fondo redondo de 15 mi conteniendo una barra de agitación magnética. El matraz se - - adaptó a un condensador de reflujo, se cubrió por N2, y el recipiente de reacción se sumergió en un baño de aceite a temperatura ambiente. Mientras se agitaba la mezcla sólida pura, el baño se calentó a 120°C durante 0.5 horas y se mantuvo a la temperatura nominal durante un total de 17 horas. El baño se retiró y la reacción fundida se dejó enfriar y solidificar. La masa sólida se disolvió en metanol, se transfirió a un embudo de separación y se dividió entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgS04) y se evaporó para proporcionar 0.9 g de 3-bromo-6-piperazin-l-il-imidazo [ 1, 2-b] piridazina como un sólido amarillo claro que se utilizó sin purificación adicional. LRMS (ESI) m/z 282.1/284.1 [(M+H)]+, calculado para Ci0Hi2BrN5: 282.14.
Una solución de 3-bromo-6-piperazin-l-il-imidazo [1, 2-b] piridazina (4.3 g, 15.3 mmol) , di-t-butil dicarbonato [24424-99-5] (3.7 g, 16.9 mmol), y base de Hunig [7087-68-5] (3.0 mi, 17.2 mmol) en etil acetato (160 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 17 horas después se lavó con salmuera, se secó (CaS04) , y se evaporó para producir 5.5 g de un sólido amarillo que se re-cristalizó a partir de etil acetato/heptano para proporcionar 2.9 g de ter-butil éster de ácido 4- ( 3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -piperazina-1-carboxilico como un polvo blanco, 178-180°C. lH NMR (400 - - Hz, DMSO-de) d ppm 1.43 (s, 9 H) 3.27 - 3.31 (m, 3 H) 3.45 -3.56 (m, 8 H) 7.24 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 7.61 (s, 1 H) 7.90 (d, J=9.92 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz , DMSO-d6) d ppm 27.88, 45.00, 78.96, 99.17, 110.57, 125.97, 131.45, 136.41, 153.72, 154.90. LR S (ESI) m/z 382.1/384.1 [(M+H) ]+, calculado para Ci5H2oBrN502: 382.26.
Parte B. dihidrocloruro de 3-bromo-6-piperazin-l-il-imidazo [1, 2-b] piridazina Se agregó ácido clorhídrico concentrado (6.4 mi) a una solución de ter-butil éster de ácido 4- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -piperazina-l-carboxílico 2.9 g, 7.6 mmol) en metanol (150 mi), se dejó agitar a temperatura ambiente durante la noche, después se evaporó hasta secar. El sólido amarillo resultante se disolvió en metanol y la solución agitada se diluyó con dietil éter para precipitar dihidrocloruro de 3-bromo-6-piperazin-l-il-imidazo [ 1, 2-b]piridazina como 2.6 g de un polvo blanco, mp. 275-276°C (dec). XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 3.24 (br. s., 4 H) 3.82 - 3.92 (m, 4 H) 7.57 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 8.05 (s, 1 H) 8.12 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 9.70 (br. s., 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 41.86, 42.37, 101.30, 114.15, 124.22, 127.20, 134.76, 155.43. LRMS (ESI) m/z 282.1/284.1 [(M+H)]+, - - calculado para Ci0Hi2BrN5: 282.14.
Parte C. isopropil éster de ácido 4-(3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -piperazina-l-carboxílico . A una solución rápidamente agitada, a temperatura ambiente, cubierta por N2, de 3-bromo-6-piperazin-l-il-imidazo [ 1 , 2-b]piridazina (0.9 g, 3.1 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (0.8 mi, 4.6 mmol) en etil acetato (60 mi) se agregó una solución de 1.0 M de cloroformato de isopropilo en tolueno (3.3 mi). Una vez completa, la reacción se lavó con salmuera, se secó (MgS04) , se cargó sobre gel de sílice, se sometió a cromatografía (gel de sílice, eluido con 100% de etil acetato) y se cristalizó a partir de heptano para proporcionar 717.7 mg de un polvo blanco cristalino, mp. 123-124°C. LH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.22 (d, J=6.32 Hz, 6 H) 3.44 - 3.54 (m, 4 H) 3.67 - 3.79 (m, 4 H) 4.82 (spt, J=6.23 Hz, 1 H) 6.77 (d, J=7.83 Hz, 1 H) 7.97 (s, 1 H) 8.69 (d, J=7.83 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMS0-d6) d ppm 21.94, 42.80, 43.87, 68.17, 77.32, 97.66, 136.47, 143.87, 144.40, 154.29, 155.64. LRMS (ESI) m/z 368.0/370.0 [(M+H)]+, calculado para Ci4Hi8BrN502 : 368.24. 5.6.103. Síntesis de isopropil éster de ácido 4- [3-(3-metoxi-piridin-4-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -piperazina-l-carboxílico - - Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.112 a partir de isopropil éster de ácido 4- ( 3-bromo-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il ) -piperazina-l-carboxilico (281.1 mg, 0.8 mmol) e hidrato de ácido 3-metoxipiridina-4-borónico [1072952-50-1] (217.4 mg, 1.2 mmol) para proporcionar 209.4 mg de di-hidrocloruro de isopropil éster de ácido 4- [3- (3-metoxi-piridin-4-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -piperazina-l-carboxilico como un polvo blanco, mp. 217-218°C (dec.) . XH NMR (400 MHz, DMS0-d6) d ppm 1.23 (d, J=6.32 Hz, 5 H) 2.51 (dt, J=3.73, 1.80 Hz, 3 H) 3.54 - 3.60 (m, 4 H) 3.61 - 3.67 (m, 4 H) 4.18 (s, 3 H) 4.83 (quin, J=6.25 Hz, 1 H) 7.66 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 8.21 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 8.64 - 8.67 (m, 2 H) 8.77 (s, 1 H) 9.08 (d, J=5.81 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 21.96, 42.58, 45.26, 57.69, 68.22, 115.12, 119.36, 121.73, 124.86, 126.61, 135.30, 136.82, 152.56, 154.26, 155.31. LRMS (ESI) m/z 397.2 [(M+H)]+, calculado para C20H24N6O3: 396.45. 5.6.104. Síntesis de (S) -ter-butil 2-(((3-etilimidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil ) pirrolidina-1-carboxilato - - A una solución de PdCl2dppf (25 mg, 0.03 mmol) y (S) -ter-butil 2- ( ( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidina-l-carboxilato (100 mg, 0.2 mmol) en dioxano (2 mi) se agregó dietilzinc (0.24 mi, 1 M en hexano) , DiBAL-H (0.008 mi, 1M en tolueno) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a 100°C y se agitó durante 2 horas. Se filtró sobre celita, y se concentró el filtrado, se purificó mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar (S) -ter-butil 2-(((3-eti1imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidina-1-carboxilato como un aceite. XH NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 7.55 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 7.22 (s, 1 H) , 6.66 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 4.18 (br. s., 1 H) , 3.55 (br. s., 1 H) , 3.37 - 3.49 (m, 3 H), 2.91 (q, J=7.49 Hz, 2 H) , 1.87 - 2.07 (m, 4 H) , 1.44 (br. s., 9 H) , 1.36 (t, J=7.45 Hz, 3 H) ; LRMS (ESI) m/e 346.3 [ (M + H)+, calculado para Ci^eNsC^ 346.4. 5.6.105. Síntesis de ter-butil éster de ácido (S)-2- (imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilaminometil) -pirrolidina-1-carboxílico - - 1.6 M de n-butil litio en hexanos (5.8 mi, 9.3 mmol) se introdujo rápidamente por jeringa a una solución agitada, incolora, cubierta por 2 de ter-butil éster de ácido (S) -2- [ (3-bromo-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-ilamino) -metil] -pirrolidina-l-carboxilico (1.8 g, 4.6 mmol) en THF anhidro (100 mi) mantenido a -73°C. La solución de reacción inmediatamente se volvió de color café y se dejó agitar durante 5 minutos. El aril litio generado se templó mediante la cuidadosa adición de NH4CI saturado acuoso (2 mi) . La solución de reacción se dividió entre salmuera y etil acetato, el extracto se secó (CaS04) , y el producto crudo se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice, eluido con 10% (v/v de metanol/etil acetato) y se cristalizó a partir de etil acetato/heptano para proporcionar ter-butil éster de ácido S) -2- (imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilaminometil) -pirrolidina-l-carboxílico como 1.5 g de un polvo blanquecino, mp. 161-162°C. XH NMR (400 MHz , DMSO-d6) d ppm 1.40 (s, 9 H) 1.72 - 1.95 (m, 4 H) 3.10 - 3.22 (m, 1 H) 3.28 (br. s., 2 H) 3.41 - 3.53 (m, 1 H) 3.92 - 4.05 (m, 1 H) 6.65 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 6.96 (br. s., 1 H) 7.36 (d, J=0.76 Hz, 1 H) 7.66 (d, J=9.60 Hz, 2 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 23.15, 28.13, 43.14, 45.96, 46.36, 55.57, 56.15, 78.30, 112.50, 116.01, 125.26, 130.32, 135.78, 153.75. LRMS (ESI) m/z 318.3 [( +H)]+, calculado para C16H23 5O2: 317.36. 5.6.106. Síntesis de [3- (2 , 3-dihidro-benzofuran-7- - - il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ] - (4, 4, -trifluoro-butil) Parte A. (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) - (4,4, 4-trifluoro-butil) -amina Una solución agitada de 3-bromo-6-fluoro-imidazo [ 1 , 2-b] piridazina (1.7 g, 7.6 mmol) , hidrocloruro de 4, 4, 4-trifluoro-butilamina [84153-82-2] (1.3 g, 7.6 mmol), y base de Hunig [7087-68-5] (4.0 mi, 23.0 mmol) en 2-propanol (40 mi) se calentó a 65°C, bajo un manto de N2 durante 3 días, se enfrió, y se dividió entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgS04) y se evaporó para proporcionar 2.3 g de un sólido amarillo. LRMS (ESI) m/z 323.1/325.1 [(M+H)]+, calculado para Ci0Hi0BrF3N4: 323.12.
Parte B. [3- (2, 3-dihidro-benzofuran-7-il ) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -(4,4, 4-trifluoro-butil) -amina. A una mezcla de (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -(4, 4, 4-trifluoro-butil) -amina (442.4 mg, 1.4 mmol), 7-(4,4,5, 5-tetrametil- [1, 3, 2] dioxaborolan-2-il) -2, 3-dihidro- - - benzofurano [934586-50-2] (404.4 mg, 1.6 mmol) , monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (632.1 mg, 2.7 mmol), y [ 1 , 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (116.7 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 50 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (25 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por 2, se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85°C durante 17 horas después se enfrió y se dividió entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgS04) y se evaporó para proporcionar un sólido café que se purificó mediante RP-HPLC de preparación. El producto aislado se disolvió en metanol, se diluyó con ácido clorhídrico concentrado, se evaporó hasta secar, se re-disolvió en metanol y se precipitó mediante la adición de dietil éter. La filtración del precipitado produjo 162.0 mg de sal de monohidrocloruro de [3- (2, 3-dihidro-benzofuran-7-il) -imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il] -( 4 , 4 , 4-trifluoro-butil) -amina como un polvo blanco, mp. 299-300°C. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.88 (quin, J=7.52 Hz, - - 2 H) 2.32 - 2.46 (m, 2 H) 3.31 (t, J=8.84 Hz, 2 H) 3.34 -3.41 (m, 2 H) 4.69 (t, J=8.72 Hz, 2 H) 7.00 (t, J=7.71 Hz, 1 H) 7.28 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.36 (dd, J=7.33, 1.01 Hz, 1 H) 8.06 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 8.09 (br. s., 1 H) 8.22 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 8.26 (s, 1 H).19 F NMR (376 MHz , DMSO-d6) d ppm -64.62. 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 20.40, 20.43, 29.04, 30.01, 30.29, 30.57, 30.84, 71.69, 108.63, 110.72, 118.75, 120.16, 121.07, 121.12, 123.71, 125.72, 125.99, 126.24, 128.07, 128.99, 132.10, 155.03, 156.77. LRMS (ESI) m/z 363.2 [(M+H)]+, calculado para Ci8H17F3 40: 362.36. 5.6.107. Síntesis de ter-butil éster de ácido (S)-2- [ ( 3-Yodo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -metil] -pirrolidina-l-carboxílico Se agregó N-yodosuccinimida [516-12-1] (1.1 g, 4.7 mmol) a una solución a temperatura ambiente de ter-butil éster de ácido (S) -3- (imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilaminometil) -pirrolidina-l-carboxílico (1.4 g, 4.3 mmol) en DMF (43 mi) y se dejó agitar bajo un manto de N2 durante la noche después se vació en una solución acuosa agitada de 5% (peso/volumen) del producto precipitado de meta bisulfito de sodio y la mezcla en dos fases se extrajo con etil acetato. El extracto se secó (CaS04) , se evaporó, y se re-cristalizó a - - partir de etil acetato frío para producir 0.6 g de ter-butil éster de ácido (S) -2- [ (3-yodo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -metil] -pirrolidina-l-carboxilico como un polvo blanco, mp. 138-139°C. XH NMR (400 Hz, DMSO-d6) d ppm 1.37 (br. s., 8 H) 1.79 (dd, J=9.98, 5.18 Hz, 1 H) 1.84 - 1.92 (m, 2 H) 1.97 (br. s., 1 H) 3.23 - 3.40 (m, 4 H) 3.42 - 3.53 (m, 1 H) 4.01 (br. s., 1 H) 6.69 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.09 (t, J=5.94 Hz, 1 H) 7.47 (s, 1 H) 7.64 (d, J=9.60 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 22.35, 23.20, 28.11, 28.54, 43.21, 45.99, 46.35, 56.25, 70.08, 78.32, 112.67, 125.09, 136.22, 137.90, 154.42. 5.6.108. Síntesis de isopropil éster de ácido 4- (3-piridin-4-il-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -piperazina-1-carboxílico Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.112 a partir de isopropil éster de ácido 4- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -piperazina-l-carboxílico (101.1 mg, 0.3 mmol) y ácido piridina-4-borónico [1692-15-5] (39.9 mg, 0.3 mmol) para proporcionar 51.3 mg de di-hidrocloruro de isopropil éster de ácido 4- (3-piridin-4-il-imidazo [l,2-b]piridazin-6-il) -piperazina-l-carboxílico como un polvo amarillo, mp. 195- - - 196°C (dec). ?? NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.23 (d, J=6.32 Hz, 6 H) 2.50 (br. s., 2 H) 3.52 - 3.62 (m, 4 H) 3.62 - 3.70 (m, 3 H) 4.79 - 4.88 (m, 1 H) 7.58 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 8.16 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 8.73 - 8.84 (m, 3 H) 8.90 (d, J=6.06 Hz, 2 H) . 13C NMR (100 Hz, DMSO-d6) d ppm 21.97, 30.40, 42.61, 45.32, 68.22, 114.29, 120.46, 122.56, 125.88, 135.61, 139.37, 141.63, 143.40, 154.26, 155.42. LRMS (ESI) m/z 367.3 [( +H)]+, calculado para C19H22 6O2: 366.43. 5.6.109. Síntesis de (S ) -ter-butil 2-(((3- (hidroximetil ) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino)metil) pirrolidina-l-carboxilato Parte idazo [1, 2-b] piridazin-3-il) metanol A una solución de 6-cloroimidazo [1, 2-b] piridazina-3-carbaldehido (0.55 g, 3 mmol) en metanol (20 mi) se agregó borohidruro de sodio (0.15 g, 4 mmol) en pequeñas porciones a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la reacción se templó con agua, y se extrajo con DCM para proporcionar el producto crudo - - (0.55 g, rendimiento 100%). 40 mg del producto crudo se purificaron mediante HPLC de preparación para proporcionar ( 6-cloroimidazo [1 , 2-b] iridazin-3-il) metanol como un sólido blanco. 1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 7.95 (d, J=9.35 Hz, 1 H), 7.79 (s, 1 H) , 7.11 (d, J=9.35 Hz, 1 H) , 5.07 (s, 2 H) ; LRMS (ESI) m/e 184.0 [ (M + H)+, calculado para C7H7C1N30 184.6] .
Parte B. (S) -ter-butil 2-(((3- (hidroximetil ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) amino)metil) pirrolidina-l-carboxilato . El compuesto del titulo se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. *H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 7.58 (d, J=9.60 Hz, 1 H), 7.40 (s, 1 H) , 6.70 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 4.85 - 4.94 (m, 2 H) , 4.54 (br. s., 1 H) , 4.14 - 4.20 (m, 1 H) , 3.35 - 3.74 (m, 5 H) , 1.99 - 2.08 (m, 1 H) , 1.87 - 1.99 (m, 3 H) , 1.47 (br. s., 9 H) ; LRMS (ESI) m/e 348.3 [ (M + H)+, calculado para Ci7H26 503 348.4]. 5.6.110. Síntesis de (R) -3- { 2- [ 3- ( 4-aminometil-fenil ) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -etil } -4-isopropil-oxazolidin-2-ona - - Parte A. (R) -3- [2- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -4-isopropil-oxazolidin-2-ona Una mezcla de (R) -4-isopropil-oxazolidin-2-ona (1.3 g, 10 mmol) y NaH (480 mg, 60% dispersión en aceite, 12 mmol) en THF (50 mi) se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas después se enfrió a 0°C. Una solución de bromoacetonitrilo (1.4 mi, 20 mmol) en THF (30 mi) se agregó lentamente a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se trató con una pequeña cantidad de agua y después la mezcla se pasó a través de una almohadilla de sílice. El filtrado se concentró y el residuo se sometió a una columna corta para proporcionar el producto crudo. El proceso se repitió y ambos productos crudos se combinaron y se purificaron adicionalmente mediante otra columna corta para proporcionar el producto (3.3 g) .
A una solución del producto anterior (3.3 g, 19 mmol) en THF (40 mi) a 0°C se agregó una solución de BH3THF en THF (1 , 200 mi) . La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 30 minutos, después a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla se enfrió después a 0°C de nuevo y se trató con HC1 frío (6 N, 20 mi) a un fuerte pH acidice El - - solvente orgánico se retiró bajo presión reducida. El residuo se trató con NaOH (4 N, ~40 mi) a un pH>10, después se extrajo con EtOAc (5 x 80 mi) y DCM (5 x 80 mi) . Los extractos combinados de ambos solventes se secaron (Na2S04) y se concentraron. El concentrado de EtOAc proporcionó 1.9 g del producto deseado (no limpio) y se obtuvieron 650 mg del producto limpiador del concentrado de DCM.
Una mezcla del producto anterior (1.9 g, 11 mmol) , 3-bromo-6-fluoro-imidazo [ 1, 2-b] piridazina (650 mg, 3 mmol), y trietilamina (1.5 mi) en alcohol isopropilico (8 mi) se calentó en un microondas a 140°C durante 20 minutos dos veces. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se sometió a ISCO (columna de 40 g) , para proporcionar el compuesto del titulo (345 mg) . LRMS (ESI) m/z 368 y 370.2 [(M+H)]+, calculado para Ci4Hi8BrN502 : 368.24.
Parte B. (R) -3-{2- [3- (4-aminometil-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino] -etil } -4-isopropil-oxazolidin-2-ona . Una mezcla de (R) -3- [2- ( 3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] -4-isopropil-oxazolidin-2-ona (95 mg, 0.26 mmol), hidrocloruro de ácido (4-aminometilfenil) borónico (63.7 mg, 0.34 mmol), K2C03 (108 mg, 0.78 mmol) y diclorobis (trifenilfosfina) paladio (II) (9.1 mg, 0.013 mmol) en MeCN/agua (3.2 ml/0.8 mi) se calentó en un microondas a 150 °C durante 15 minutos. La mezcla de reacción se diluyó con MeCN y se filtró. El filtrado se sometió a - - HPLC de preparación para proporcionar el compuesto del título como sal de HCOOH (86.3 mg) . XH N R (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 0.84 (dd, J=6.95, 0.88 Hz, 6 H) 2.09 (td, J=6.95, 3.54 Hz, 1 H) 3.26 - 3.31 (m, 1 H) 3.59 - 3.71 (m, 2 H) 3.85 (dt, J=13.96, 6.79 Hz, 1 H) 3.95 (ddd, J=8.65, 5.24, 3.54 Hz, 1 H) 4.11 - 4.19 (m, 4 H) 6.74 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.58 (d, J=8.34 Hz, 2 H) 7.68 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.81 (s, 1 H) 8.21 - 8.26 (m, 2 H) 8.52 (s, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 395.3 [(M+H)]+, calculado para 02??26 6?2: 394.48. 5.6.111. Síntesis de isopropil éster de ácido 4- (3-fenil-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) -piperazina-l-carboxílico A una mezcla de isopropil éster de ácido 4- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -piperazina-l-carboxílico (330.0 mg, 0.9 mmol) , ácido fenil borónico [98-80-8] (131.4 mg, 1.1 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (416.4 mg, 1.8 mmol), y [1,1'-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (77.1 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 50 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1 , 2-dimetoxietano (25 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó - - a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85 °C durante 17 horas después se enfrió y se dividió entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgS04) y se evaporó para proporcionar un aceite naranja que se purificó mediante RP-HPLC de preparación. El producto aislado se disolvió en metanol, se diluyó con ácido clorhídrico concentrado, se evaporó hasta secar, se re-disolvió en metanol y se precipitó mediante la adición de dietil éter. La filtración del precipitado produjo 154.6 mg de sal de monohidrocloruro de isopropil éster de ácido 4- (3-fenil-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -piperazina-l-carboxílico como un polvo blanco cristalino, mp. 232-233°C (dec) . 1H N R (400 MHz, DMS0-d6) d ppm 1.22 (d, J=6.32 Hz, 6 H) 3.50 - 3.60 (m, 4 H) 3.60 - 3.70 (m, 4 H) 4.77 - 4.87 (m, 1 H) 7.50 (d, J=7.58 Hz, 1 H) 7.55 - 7.71 (m, 2 H) 7.77 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 8.05 - 8.17 (m, 2 H) 8.25 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 8.54 (s, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 21.95, 42.49, 44.98, 68.23, 116.22, 120.94, 122.22, 126.28, 127.18, 128.09, 128.83, 129.05, 132.74, 154.26, 155.80. LRMS (ESI) m/z 366.2 [(M+H)]+, calculado para C2oH23 502: 395.44. 5.6.112. Síntesis de ter-butil éster de ácido 4- [3- (3-metoxi-piridin-4-il) -imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il] -piperazina-l-carboxilico A una mezcla de ter-butil éster de ácido 4- (3-bromo-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) -piperazina-l-carboxilico (524.4 mg, 1.4 mmol), hidrato de ácido 3-metoxipiridina-4-borónico [1072952-50-1] (253.1 mg, 1.7 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (632.2 mg, 2.8 mmol), y [1, 1 '-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (117.6 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 50 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (25 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85°C durante 17 horas después se enfrió y se dividió entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en - - fases se secó (CaS04) y se evaporó para proporcionar un aceite café que se purificó mediante RP-HPLC de preparación para obtener un polvo blanco, mp. 205-206oC (dec.) . 1H N R (400 MHz, D SO-d6) d ppm 1.43 (s, 9 H) 3.46 - 3.55 (m, 8 H) 4.02 (s, 3 H) 7.30 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 8.00 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 8.13 (s, 1 H) 8.35 (d, J=5.05 Hz, 1 H) 8.41 (d, J=5.05 Hz, 1 H) 8.51 (s, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 28.04, 45.53, 56.33, 79.10, 111.13, 120.39, 120.75, 124.25, 126.24, 134.48, 135.69, 137.20, 142.26, 151.08, 153.85, 154.60. LRMS (ESI) m/z 411.3 [(M+H)]+, calculado para C21H26 6O3: 410.48. 5.6.113. Síntesis de 1- (4- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperazin-l-il) -3, 3-dimetilbutan-l-ona A una suspensión rápidamente agitada, a temperatura ambiente, cubierta por N2 de dihidrocloruro de 3-bromo-6-piperazin-l-il-imidazo [1, 2-b] piridazina (400.5 mg, 1.1 mmol) y cloruro de 3 , 3-dimetilbutanoilo [7065-46-5] (0.2 mi, 1.4 mmol) en etil acetato (50 mi) se agregó base de Hunig [7087-68-5] (0.8 mi, 4.6 mmol) y la reacción se dejó agitar durante la noche. Una vez completada, la reacción se lavó con salmuera, se secó (MgS04) , y se cristalizó a partir de etil acetato/heptano frío para proporcionar 392.5 mg de polvo blanco cristalino, mp. 170-171°C. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d - - ppm 1.02 (s, 9 H) 2.30 (s, 2 H) 3.57 (d, J=7.06 Hz, 4 H) 3.63 - 3.72 (m, 4 H) 7.26 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 7.63 (s, 1 H) 7.91 (d, J=9.92 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 29.57, 30.81, 40.12, 43.50, 45.26, 45.34, 99.17, 110.56, 125.96, 131.44, 136.42, 154.89, 169.49. LRMS (ESI) m/z 380.1/382.1 [(M+H)]+, calculado para Ci6H22BrN50: 380.28. 5.6.114. Síntesis de 1- (4- (3- (3-metoxipiridin-4-il ) imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il) piperazin-l-il) -3,3-dimetilbutan-l-ona A una mezcla de 1- (4- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperazin-l-il) -3, 3-dimetilbutan-l-ona (168.9 mg, 0.4 mmol) , hidrato de ácido 3-metoxipiridina-4-borónico [1072952-50-1] (82.3 mg, 0.5 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (210. mg, 0.9 mmol), y [1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (33.8 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 25 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (13 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de - - N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85°C durante 17 horas, después se enfrió y se dividió entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgSO,}) y se evaporó para proporcionar un aceite café que se purificó mediante RP-HPLC de preparación. El producto aislado se disolvió en metanol, se diluyó con ácido clorhídrico concentrado, se evaporó hasta secar, se re-disolvió en metanol y se precipitó mediante la adición de dietil éter. La filtración del precipitado produjo 59.7 mg de sal de di-hidrocloruro 1- ( 4- ( 3- ( 3-metoxipiridin-4-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperazin-l-il) -3,3-dimetilbutan-l-ona como un polvo amarillo claro, mp. 211-212°C (dec) . XH NMR (400 MHz , DMSO-d6) d ppm 1.00 - 1.04 (m, 9 H) 2.26 - 2.35 (m, 2 H) 3.57 - 3.66 (m, 4 H) 3.70 (br. s., 4 H) 4.14 - 4.21 (m, 3 H) 7.68 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 8.20 (dd, J=10.10, 2.02 Hz, 1 H) 8.65 (d, J=2.53 Hz, 2 H) 8.75 - 8.80 (m, 1 H) 9.04 - 9.10 <m, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 29.70, 30.94, 43.69, 45.00, 45.43, 45.70, 57.70, 115.22, 119.35, 121.79, 124.70, 126.64, 130.45, 134.42, 135.21, 136.68, 152.58, 155.32, 169.63. LRMS (ESI) m/z 409.2 [ (M+H) ] +, calculado para C22H28 60^: 408.50. 5.6.115. Síntesis de isopropil éster de ácido 4-[3-(2-metoxi-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -piperazina-1- - - carboxilico Se preparó de manera similar al ejemplo 5.6.112 a partir de isopropil éster de ácido 4- (3-bromo-imidazo [1, 2- b] piridazin-6-il) -piperazina-l-carboxilico (310.0 mg, 0.8 mmol) y ácido 2-metoxifenilborónico [5720-06-9] (153.6 mg, 1.0 mmol) para proporcionar 172.7 mg de monohidrocloruro de isopropil éster de ácido 4- [3- (2-metoxi-fenil) -imidazo [1, 2- b] piridazin-6-il] -piperazina-l-carboxilico como un polvo blanco, mp. 243-244°C (dec. ) . ñ NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.09 - 1.24 (m, 7 H) 3.54 - 3.61 (m, 5 H) 3.82 - 3.87 (m, 4 H) 4.76 - 4.84 (m, 1 H) 7.15 (t, J=7.33 Hz, 1 H) 7.24 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 7.49 - 7.56 (m, 1 H) 7.78 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 7.90 (d, J=7.58 Hz, 1 H) 8.22 - 8.31 (m, 2 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 21.92, 42.46, 44.82, 55.70, 68.21, 111.70, 114.19, 116.39, 120.27, 121.81, 122.20, 125.03, 130.44, 131.14, 131.75, 154.24, 155.62, 156.93. LRMS (ESI) m/z 396.2 [(M+H)]+, calculado para C21H25 5O3: 395.47. 5.6.116. Síntesis de (S) -ter-butil 2- ( ( ( 3- (prop-1- en-l-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino)metil) piperidina- 1-carboxilato - - El acoplamiento Suzuki siguiendo el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.19 proporcionó una mezcla de los isómeros E y Z . 1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.35 (br. s., 6 H) 1.42 (br. s., 3 H) 1.61 - 1.74 (m, 3 H) 1.78 (br. s., 3 H) 1.98 - 2.08 (m, 3 H) 2.40 (br. s., 1 H) 3.11 (t, J=12.76 Hz, 1 H) 3.27 - 3.40 (m, 1 H) 4.13 (d, J=13.89 Hz, 1 H) 4.50 (br. s., 1 H) 5.87 - 6.00 (m, 1 H) 6.75 - 6.94 (m, 2 H) 7.59 - 7.72 (m, 2 H) ; LRMS (ESI) m/372.0 [ (M + H)+, calculado para C20H29N5O2 371.0]. 5.6.117. Síntesis de (S) -ter-butil 2-(((3-propilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) piperidina-1-carboxilato La reducción del enlace doble se llevó a cabo mediante la agitación vigorosa de 0.135 mmol en 25 mi de MeOH con 0.2 eguivalentes de paladio sobre carbono (10% Pd/C) sobre hidrógeno bajo presión atmosférica durante 8 horas. Ésta se filtró después, se concentró y se purificó en la HPLC de preparación para obtener el producto deseado en un rendimiento de 58%. 1H NMR (400 MHz, CL0ROFORM0-d) d ppm - - 1.04 (m, 3 H) 1.28 - 1.49 (m, 9 H) 1.63 (d, J=12.38 Hz, 1 H) 1.67 - 1.91 (m, 7 H) 2.82 - 2.95 (m, 4 H) 3.35 (br. s., 1 H) 4.01 (d, J=11.87 Hz, 1 H) 4.62 (d, J=7.33 Hz, 1 H) 6.40 (dd, J=9.60, 2.27 Hz, 1 H) 7.28 (d, J=2.78 Hz, 1 H) 7.70 (dd, J=9.47, 2.15 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/374.0 [ ( + H)+, calculado para C20H31 5O2 373.0]. 5.6.118. Síntesis de (S) -2- [3- (2-metoxi-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -hexahidro-pirrolo [1,2-c] imidazol-3-ona Parte A. (S) -3-bromo-N- (pirrolidin lmetil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina A una solución de (S) -ter-butil 2-(((3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidina-1-carboxilato (13.4 g, 33.8 mmol) en MeOH (100 mi) se enfrió a 0°C y se agregó cloruro de acetilo (24 mi, 338 mi) por goteo. La reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche, y se concentró para proporcionar (S)-3-bromo-N- (pirrolidin-2-ilmetil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina como sal de HC1 (11 g, rendimiento 100%). LRMS (ESI) m/e - - 298.0 [ (M + H)+, calculado para CuHi5BrN5 298.2].
Parte B. vinil éster de ácido (S) -2- [ (3-bromo- imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -metil] -pirrolidina-1- carboxilico A una solución de ter- butil éster de ácido (S)-2- [ ( 3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -metil] - pirrolidina-l-carboxilico (450 mg, 1.14 mmol) en DCM (10 mi) se agregó TFA (4 mi) . La mezcla resultante reposó durante 0.5 horas. La mezcla se concentró y el residuo se secó bajo vacio durante la noche.
El producto anterior se disolvió en DCM (10 mi) y se agregó DIEA (993 ul, 5.7 mmol). La mezcla se enfrió a 0°C y se agregó por goteo cloroformato de vinilo (145 ul, 1.17 mmol) . La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 2 horas, después a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentró y el residuo se sometió a ISCO (columna de 40 g) para proporcionar el compuesto del titulo (251 mg) . LRMS (ESI) m/z 366.1 y 368.1 [(M+H)]+, calculado para Ci4Hi6BrN502 : 366.22.
Parte C. (S) -2- [3- (2-metoxi-fenil ) -imidazo [1, 2- b] piridazin-6-il] -hexahidro-pirrolo [1, 2-c] imidazol-3-ona . Una mezcla de vinil éster de ácido (S) -2- [ (3-bromo-imidazo [1, 2- - - b] piridazin-6-ilamino) -metil] -pirrolidina-1-carboxílico (125 mg, 0.34 mmol) , ácido (2-metoxifenil ) borónico (67.2 mg, 0.44 mmol) , K2C03 (141 mg, 1.02 mmol) y diclorobis (trifenilfosfina) paladio (II) (12 mg, 0.017 mmol) en MeCN/agua (3.2 ml/0.8 mi) se calentó en un microondas a 150°C durante 15 minutos. La reacción se repitió a 140°C. Después del retiro del agua la mezcla de reacciones se combinó y se diluyó con MeCN y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC de preparación para proporcionar el compuesto del titulo (S)-2- [3- (2-metoxi-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ] -hexahidro-pirrolo [1, 2-c] imidazol-3-ona (76.5 mg) . 1ti NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.39 - 1.51 (m, 1 H) 1.89 -2.02 (m, 1 H) 2.05 - 2.18 (m, 2 H) 3.18 - 3.26 (m, 1 H) 3.72 - 3.96 (m, 6 H) 4.09 - 4.16 (m, 1 H) 7.04 - 7.13 (m, 2 H) 7.35 - 7.42 (m, 1 H) 7.90 - 7.96 (m, 1 H) 8.03 - 8.10 (m, 2 H) 8.40 (dd, J=9.85, 2.78 Hz, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 350.2 [(M+H)]+, calculado para C19H19N5O2: 349.4. 5.6.119. Síntesis de 3- (4- (aminometil) fenil) -N- ( (1-(2, 2, 2-trifluoroetil)pirrolidin-2-il)metil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina - - El compuesto del título se obtuvo utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.47 (s, 1 H) , 8.15 - 8.19 (m, 2 H) , 7.73 (s, 1 H), 7.59 (m, J=9.70 Hz, 1 H) , 7.49 (d, J=8.60 Hz, 2 H) , 6.70 - 6.73 (m, 1 H) , 4.09 (s, 2 H) , 3.55 (dd, J=13.45, 3.97 Hz, 1 H), 3.35 - 3.44 (m, 1 H) , 3.14 - 3.24 (m, 2 H) , 2.96 - 3.10 (m, 2 H) , 2.46 - 2.53 (m, 1 H) , 1.91 - 2.00 (m, 1 H) , 1.74 - 1.85 (m, 2 H) , 1.62 - 1.70 (m, 1 H) ; LRMS (ESI) m/e 405.2 [ (M + H)+, calculado para C2oH24F3N5 405.4]. 5.6.120. Síntesis de ter-butil éster de ácido 4- (3-fenil-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) -piperazina-l-carboxílico Parte A. ter-butil éster de ácido 4-imidazo [ 1, 2 -b] piridazin-6-il-piperazina-l-carboxílico Una íntima mezcla de 6-cloro-imidazo [ 1, 2-b]piridazina [6775-88-6] (4.1 g, 26.5 mmol) y piperazina [110-85-0] (11.4 g, 132.8 mmol) se calentó a 120°C y se agitó como una fusión bajo un manto de N2 durante 2 horas. La reacción enfriada se dividió entre agua y etil acetato, el - - extracto se secó (MgS04) , y se evaporó para producir 5.6 g de 6-piperazin-l-il-imidazo [1, 2-b] piridazina la cual, sin purificación, se suspendió en etil acetato (250 mi) . A esta mezcla agitada se agregó base de Hunig [7087-68-5] (9.6 mi, 55.1 mmol) y di-ter-butil pirocarbonato [24424-99-5] (7.2 g, 33.2 mmol) . La mezcla cubierta por N2 se agitó durante la noche a temperatura ambiente después se dividió entre salmuera y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (CaSO,}) , se evaporó, y se cristalizó a partir de etil acetato/heptano para proporcionar un polvo blanco cristalino, mp. 122-123°C. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.43 (s, 9 H) 3.46 (s, 8 H) 7.16 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 7.50 (s, 1 H) 7.81 -7.94 (m, 2 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 28.03, 42.66, 45.42, 79.07, 110.58, 116.43, 125.91, 131.62, 135.77, 153.88, 154.71. LRMS (ESI) m/z 304.2 [(M+H)]+, calculado para C15H21 5O2: 303.37.
Parte B. ter-butil éster de ácido 4-(3-yodo-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) -piperazina-l-carboxilico Una solución de ter-butil éster de ácido 4-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il-piperazina-l-carboxilico (3.6 g, 11.8 mmol) y N-yodosuccinimida [516-12-1] (3.1 g, 13.1 mmol) en DMF (120 mi) se agitó bajo un manto de N2 a temperatura - - ambiente durante 2 horas después se dividió entre 5% (peso/volumen) de metabisulfito de sodio acuoso y etil acetato. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó (CaS04) , se evaporó, y se cristalizó a partir de etil acetato/heptano para proporcionar un polvo blanco cristalino, mp. 203-204°C (dec). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.43 (s, 9 H) 3.45 - 3.51 (m, 4 H) 3.51 - 3.58 (m, 4 H) 7.19 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 7.61 (s, 1 H) 7.85 (d, J=9.92 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 27.89, 45.06, 70.52, 78.95, 110.55, 125.66, 137.28, 137.71, 153.73, 154.88. LRMS (ESI) m/z 430.0 (M+H)]+, calculado para C15H2oIN502: 429.26.
Parte C. ter-butil éster de ácido 4-(3-fenil-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -piperazina-l-carboxilico. Se preparó ter-butil éster de ácido 4- (3-fenil-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -piperazina-l-carboxilico utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.113 a partir de ter-butil éster de ácido 4- (3-yodo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -piperazina-l-carboxilico (513.4 mg, 1.2 mmol) y ácido fenil borónico [98-80-6] (178.3 mg, 1.5 mmol) para obtener 220.2 mg de un polvo blanco, mp. 101-103°C (dec). XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.44 (s, 9 H) 3.52 (br. s., 8 H) 7.22 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.31 - 7.37 (m, 1 H) 7.46 - 7.54 (m, 2 H) 7.95 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 8.00 (s, 1 H) 8.11 - 8.18 (m, 2 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 28.03, 42.73, 45.56, 79.08, 110.13, 125.75, 126.24, 126.93, 127.14, 128.61, 129.03, - - 131.07, 137.15, 153.85, 154.63. LRMS (ESI) m/z 411.3 [(M+H)]+, calculado para C21H25 5O2: 379.47. 5.6.121. Síntesis de ter-butil éster de ácido 4-[3- (3-metoxi-piridin-4-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ] - [1, 4 ] diazepano-l-carboxílico Parte A. ter-butil 4- (3-bromoimidazo [1, 2-b]piridazin-6-il) -1, 4-diazepano-l-carboxilato Una solución agitada de 3-bromo-6-fluoroimidazo[l,2-b]piridazina (1.6 g, 7.6 mmol) , ter-butil 1, 4-diazepano-l-carboxilato [112275-50-0] (4.4 mi, 22.6 mmol), y base de Hunig [7087-68-5] (5.3 mi, 30.4 mmol) en 2-propanol (25 mi) se calentó a 65°C durante 3 días, después se dividió entre salmuera y etil acetato. El extracto se secó (CaS04) y se evaporó para proporcionar 5.9 g de un líquido color naranja claro que se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice eluido con 10% (v/v) de metanol/etil acetato) y se cristalizó a partir de etil acetato/heptano para proporcionar 2.0 g de un polvo blanco, - - mp. 101-102°C. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm (rotámeros presentes) 1.03 (s, 5 H) 1.17 (s, 4 H) 1.73 (br. s., 1 H) 1.85 (br. s., 1 H) 2.43 - 2.47 (m, 1 H) 3.20 - 3.29 (m, 3 H) 3.49 (d, J=5.51 Hz, 1 H) 3.55 - 3.66 (m, 3 H) 3.70 - 3.79 (m, 2 H) 7.05 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 7.49 (d, J=7.28 Hz, 1 H) 7.78 (d, J=9.70 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm (rotámeros presentes) 24.50, 24.83, 27.45, 27.61, 44.10, 44.78, 44.83, 45.33, 47.58, 47.74, 48.01, 48.09, 78.11, 78.27, 98.80, 109.23, 109.61, 125.65, 125.77, 130.81, 130.89, 136.07, 153.01, 153.18, 153.90, 154.19. LRMS (ESI) m/z 396.1/398.1 [(M+H) ]+, calculado para Ci6H22Br 502 : 396.29.
Parte B. ter-butil éster de ácido 4- [ 3- ( 3-metoxi-piridin-4-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -[1,4] diazepano-1-carboxílico. A una mezcla de ter-butil 4- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -1, 4-diazepano-l-carboxilato (329.9 mg, 0.8 mmol), monohidrato de ácido (3-metoxi piridin-4-il) borónico [1072952-50-1] (153.6 mg, 1.0 mmol) , monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (384.1 mg, 1.7 mmol), y [1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (69.2 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 50 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1, 2-dimetoxietano (25 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a - - temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85 °C durante 6 horas, después se enfrió y se dividió entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgSC ) y se evaporó para proporcionar un sólido café que se purificó mediante RP-HPLC de preparación para proporcionar ter-butil éster de ácido 4- [ 3- ( 3-metoxi-piridin-4-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -[1,4] diazepano-1-carboxilico como 79.5 mg de un polvo blanquecino, mp. 115-116°C. XH NMR (400 MHz, DMS0-d6) d ppm (rotámeros presentes) 1.01 (s, 4 H) 1.20 (s, 4 H) 1.91 (s, 2 H) 2.51 (dt, J=3.60, 1.86 Hz, 2 H) 3.27 - 3.35 (m, 4 H) 3.57 (br. s., 1 H) 3.64 (s, 1 H) 3.70 (br. s., 2 H) 3.81 (d, J=16.67 Hz, 2 H) 4.02 (s, 3 H) 7.19 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.93 (s, 1 H) 8.11 (d, J=8.59 Hz, 1 H) 8.32 (d, J=5.05 Hz, 1 H) 8.49 - 8.54 (m, 2 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm (rotámeros presentes) 13.89, 22.03, 24.66, 24.75, 27.49, 27.74, 31.20, 44.27, 44.96, 45.60, 47.99, 48.26, 48.39, 56.31, 78.25, 78.41, 109.66, 109.87, 119.88, 120.03, 120.27, 124.50, 126.00, 126.08, 134.46, 135.39, 135.52, 136.92, 141.96, 150.98, 152.56, 152.65, 154.01, 154.34. LRMS (ESI) m/z 425.2 [(M+H)]+, calculado para C22H28 6O3: 424.51. - - 5.6.122. Síntesis de ter-butil éster de ácido [1- ( 3-bromo-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il) -pirrolidin-3-il] -metil-carbámico Una mezcla de ter-butil éster de ácido metil-pirrolidin-3-il-carbámico (1.2 g, 6 mmol) , 3-bromo-6-fluoro-imidazo [ 1 , 2-b] piridazina (648 mg, 3 mmol), y trietilamina (1.67 mi, 12 mmol) en alcohol isopropílico (3 mi) se calentó en un microondas a 140 °C durante 20 minutos. La mezcla de reacción se dejó reposar durante la noche y el sólido blanco se recolectó mediante filtración y se lavó con eOH para proporcionar el compuesto del título (750 mg) . El filtrado se concentró y el residuo se sometió a ISCO (columna de 40 g) , para proporcionar el compuesto del título (360 mg) . 1H NMR (400 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 1.45 - 1.52 (m, 9 H) 2.03 -2.27 (m, 2 H) 2.83 (s, 3 H) 3.39 - 3.54 (m, 2 H) 3.69 - 3.77 (m, 2 H) 6.58 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 7.49 (s, 1 H) 7.65 (d, J=9.70 Hz, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 396.1 y 398 [(M+H)]+, calculado para Ci6H22BrN502 : 396.29. 5.6.123. Síntesis de ( S ) -5- ( ( ( 3-bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidin-2-ona - - Parte - ( (5-oxopirrolidin-2-il) metil) isoindolina- A (S) -5- (hidroximetil ) pirrolidin-2-ona (2.00 g, 17.39 mmol) disuelta en 25 mi de THF se agregó ftalimida (2.81 g, 19.13 mmol), trifenilfosfina (5.01 g, 19.13 mmol) y diisopropilazodi-carboxilato (3.33 g, 19.13 mmol). Esta mezcla se agitó durante aproximadamente 16 horas, y después se diluyó con 200 mi de hexanos y 2 mi de DCM, y después se enfrió a -30°C. el producto precipitado se filtró y se secó (4.11g, 96%, sólido blanco) .
Parte B. (S) -5- (aminometil) pirrolidin-2-ona A 244 mg (1 mmol) de la ( S ) -2- ( ( 5-oxopirrolidin-2-il) metil) isoindolina-1, 3-diona disuelta en 25 mi de EtOH se agregó hidrazina (500 mg, 10 mmol) , y esta mezcla se sometió a reflujo durante 4 horas. Ésta se enfrió a temperatura ambiente y el compuesto del titulo se cristalizó, y se filtró y se secó (114 mg, rendimiento 100%) .
- - Parte C. (S) -5- (( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino)metil)pirrolidin-2-ona. La (S)-5- (aminometil) pirrolidin-2-ona se hizo reaccionar con 3-bromo-6-fluoroimidazo [1, 2-b] piridazina bajo las condiciones de desplazamiento de amina descritas en el ejemplo 5.6.42, Parte A, para obtener el compuesto del titulo en un rendimiento de 62%. XU N R (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 1.90 - 2.04 (m, 1 H) 2.24 - 2.50 (m, 3 H) 3.46 - 3.56 (m, 2 H) 4.09 (quin, J=5.84 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 7.43 (s, 1 H) 7.60 (d, J=9.70 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/310.0 doble [ (M + H)+, calculado para C Hi2BrN50 309.0 ] . 5.6.124. Síntesis de (S) -5- (( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) -l-isopentilpirrolidin-2-ona Parte A. ( S ) -2- ( ( l-isopentil-5-oxopirrolidin-2-il) metil) isoindolina-1, 3-diona A 244 mg (1.000 mmol) de ( S ) -2- ( ( 5-oxopirrolidin-2-il)metil) isoindolina-1, 3-diona disuelta en 4 mi de DMSO se - - agregó (227 mg, 1.500 mmol) l-bromo-3-metilbutano, y NaH al 60% (42 mg, 1.050 mmol). Después de 1 hora de agitación a 70°C, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, y se diluyó con EtOAc y se templó con agua. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera y se secó sobre MgS04. Ésta se concentró y se purificó sobre gel de sílice eluyendo con 15-100% de EtOAc/hexanos para obtener 48% del producto deseado .
Parte B. (S) -5- (aminometil) -1-isopentilpirrolidin-2-ona La (S) -2- ( ( l-isopentil-5-oxopirrolidin-2-il)metil) isoindolina-1, 3-diona se sometió al procedimiento de desprotección de ftalimida descrito en el ejemplo 5.6.124, Parte B, para obtener un rendimiento de 100% del producto deseado .
Parte C. (S) -5- ( ( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino)metil) -l-isopentilpirrolidin-2-ona. La 3-bromo-6-fluoroimidazo [ 1 , 2-b] piridazina se hizo reaccionar con (S)-5-(aminometil) -l-isopentil-pirrolidin-2-ona bajo las condiciones de desplazamiento de amina descritas en el ejemplo 5.6.42, Parte A para proporcionar 60% del compuesto del título. ¾ NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 0.95 (d, - - J=6.32 Hz, 6 H) 1.39 - 1.66 (m, 3 H) 1.95 - 2.08 (m, 1 H) 2.13 - 2.26 (m, 1 H) 2.31 - 2.53 (m, 2 H) 3.02 (ddd, J=13.89, 9.22, 4.93 Hz, 1 H) 3.48 (dt, J=14.15, 5.18 Hz, 1 H) 3.79 (ddd, J=13.77, 9.35, 6.95 Hz, 1 H) 3.91 (ddd, J=14.08, 7.01, 2.91 Hz, 1 H) 4.00 - 4.11 (m, 1 H) 5.42 (t, J=5.31 Hz, 1 H) 6.67 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.52 (s, 1 H) 7.66 (d, J=9.85 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/380.0 doble [ (M + H)+, calculado para Ci6H22BrN50 379.0] . 5.6.125. Síntesis de 2 , 2-dimetil-l- [ - ( 3-fenil-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -piperazin-l-il] -propan-l-ona Parte A. -piperazin-l-il] -2, 2-dimetil-propan-l-ona Se agregó (1.8 mi, 10.3 mmol) a una suspensión agitada a temperatura ambiente de dihidrocloruro de 3-bromo-6-piperazin-l-il-imidazo [1, 2-b]piridazina (907.1 mg, 2.6 mmol) en etil acetato (50 mi). Después de 30 minutos, se agregó cloruro de pivaloilo [3282-30-2] (0.3 mi, 2.5 mmol) y la suspensión se agitó bajo un manto de N2 durante 17 horas, después se lavó con salmuera, - - se secó (MgS04), y se diluyó con heptano. La solución agitada fria cristalizó un polvo blanco que se aisló mediante filtración, 618.5 mg. LRMS (ESI) m/z 366.0/368.0 [(M+H)]+, calculado para Ci5H2oBr 50: 366.26.
Parte B. 2, 2-dimetil-l- [4- (3-fenil-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -piperazin-l-il] -propan-l-ona. A una mezcla de 1- [4- ( 3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -piperazin-l-il] -2, 2-dimetil-propan-l-ona (526.7 mg, 1.4 mmol) , ácido fenil borónico [98-80-8] (211.3 mg, 1.7 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (664.4 mg, 2.9 mmol), y [1, 1 '-bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (123.2 mg, 0.2 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 50 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (25 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85°C durante 17 horas después se enfrió y se dividió entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgS04) y se evaporó para proporcionar un aceite color naranja claro que se purificó mediante HPLC de - 4 - preparación. El producto aislado se disolvió en metanol, se diluyó con ácido clorhídrico concentrado, se evaporó hasta secar, se re-disolvió en metanol y se precipitó mediante la adición de dietil éter. La filtración del precipitado produjo 85.8 mg de sal de monohidrocloruro de 2, 2-dimetil-l- [4- ( 3-fenil-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) -piperazin-l-il] -propan-l-ona como un polvo amarillo claro, mp. 277-278 °C (dec) . XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.24 (s, 9 H) 3.59 -3.67 (m, 4 H) 3.71 - 3.79 (m, 4 H) 7.55 - 7.64 (m, 2 H) 8.06 - 8.15 (m, 2 H) 8.57 (br. s., 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 28.00, 38.08, 43.85, 45.30, 116.00, 121.14, 122.29, 126.29, 127.20, 128.85, 129.04, 155.84, 175.34. LRMS (ESI) m/z 364.2 [(M+H)]+, calculado para C21H25N5O: 363.47. 5.6.126. Síntesis de ( S ) -5- ( ( ( 3- ( -(aminometil) fenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) -l-isopentilpirrolidin-2-ona El acoplamiento Suzuki siguiendo el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.19 proporcionó el compuesto del título en un rendimiento de 71%. XH NMR (400 MHz, METANOL-d ) d ppm 0.78 - 0.90 (m, 6 H) 1.31 - 1.50 (m, 3 H) 1.93 - 2.06 - - (m, 1 H) 2.12 - 2.36 (ra, 2 H) 2.39 - 2.52 (m, 1 H) 3.09 (ddd, J=13.83, 8.15, 5.56 Hz, 1 H) 3.56 - 3.75 (m, 3 H) 3.99 - 4.08 (m, 1 H) 4.19 (s, 2 H) 6.78 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.58 (m, J=8.34 Hz, 2 H) 7.70 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.80 (s, 1 H) 8.20 (m, J=8.34 Hz, 2 H) ; LRMS (ESI) m/407.0 [ (M + H) +, calculado para C23H30 6O 406.0] . 5.6.127. Síntesis de 4- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -N- (tert-butil) piperazina-l-carboxamida A una suspensión rápidamente agitada a 0°C, cubierta por N2 de dihidrocloruro de 3-bromo-6-piperazin-l-il-imidazo [ 1 , 2-b] piridazina (934.9 mg, 2.6 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (1.8 mi, 10.6 mmol) en diclorometano (26 mi) se agregó 2-isocianato-2-metilpropano [1609-86-5] (340 mi, 2.9 mmol). La suspensión se dejó agitar y calentar a temperatura ambiente durante 17 horas y después se dividió entre salmuera y etil acetato. La fase orgánica se redujo en volumen para precipitar el producto como 442.1 mg de un sólido amarillo. Un alícuota de 129.3 mg se purificó mediante HPLC de preparación para proporcionar 61.8 mg de 4-(3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -N- (ter-butil) piperazina-l-carboxamida como un polvo blanco, mp. 199- - - 200°C. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.28 (s, 8 H) 2.51 (s, 1 H) 3.30 (s, 1 H) 3.39 - 3.46 (m, 4 H) 3.48 - 3.54 (m, 4 H) 7.26 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 7.61 (s, 1 H) 7.88 (d, J=10.11 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 29.15, 43.05, 45.27, 49.94, 99.27, 110.77, 126.00, 131.50, 136.54, 155.16, 156.93. LR S (ESI ) m/z 381.1/383.1 [(M+H)]+, calculado para Ci5H2iBrN60: 381.28. 5.6.128. Síntesis de ( S ) -2- ( ( ( 3-bromoimidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) -N- (ter-butil) pirrolidina-1-carboxamida A una solución de (S) -3-bromo-N- (pirrolidin-2-ilmetil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-amina (400 mg, 1.2 mmol) y tírietilamina (0.5 mi, 3.5 mmol) en DCM (10 mi) se agregó t-butil isocianato (0.2 mi, 1.75 mmol) por goteo. Después de agitar a temperatura ambiente durante 2 horas, la mezcla de reacción se concentró y se purificó mediante cromatografía de columna ISCO (10% de eOH/DCM) para proporcionar (S)-2-(((3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) amino)metil) -N- (ter-butil ) pirrolidina-l-carboxamida (360 mg, rendimiento 76%). ¾ NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 7.58 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 7.42 (s, 1 H), 6.72 (d, J=9.85 Hz, 1 H) , 5.07 (s, 1 H) , 4.26 (dd, J=6.57, 1.77 Hz, 1 H) , 3.35 - 3.48 (m, 4 H) , 2.09 - 2.20 - - (m, 1 H), 1.90 - 2.05 (m, 3 H) , 1.26 (s, 9 H) ; LR S (ESI) m/e 395.2 [ (M + H)+, calculado para Ci6H24BrN60 396.3]. 5.6.129. Síntesis de (S) -1- (2- ( ( (3-bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) (metil) amino)metil) pirrolidin-l-il) -3-metilbutan-l-ona A una solución de (S) -1- (2- (( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidin-l-il) -3-metilbutan-l-ona (380 mg, 1.0 mmol) en THF (10 mi) se agregó hidruro de sodio (120 mg, 3.0 mmol) a temperatura ambiente. Después de agitar durante 15 minutos, se agregó por goteo yoduro de metilo. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche y se elaboró con solución de cloruro de amonio, se extrajo con etil acetato, se concentró y se purificó mediante cromatografía de columna ISCO (10% de eOH/DC ) para proporcionar un producto no puro. Ésta se purificó adicionalmente mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar (S) -1- (2- (( (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) (metil ) amino) metil) pirrolidin-l-il ) -3-metilbutan-l-ona como un aceite. 1H NMR (400 MHz , METANOL-d4) d ppm 7.65 -7.75 (m, 1 H) , 7.44 - 7.52 (m, 1 H) , 7.04-7.22 (m, 1 H) , 4.45-4.61 (m, 1 H) , 3.45-3.92 (m, 4 H) , 3.19 - 3.23 (m, 3 H) , 1.90-2.32 (m, 7 H) , 0.78 - 0.92 (m, 6 H) ; LRMS (ESI) m/e - - 394.1 [ (M + H)+, calculado para Ci7H25BrN50 395.3]. 5.6.130. Síntesis de (S) -3-metil-l- (2- ( (metil (3-(piridin-4-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidin-l-il) butan-l-ona (con rotámeros menores) Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.50 - 8.73 (m, 2 H) , 8.16 - 8.31 (m, 2 H) , 7.93 - 8.16 (m, 1 H) , 7.65 - 7.93 (m, 1 H) , 7.38 (d, J=10.11 Hz, 1 H) , 4.49 (q, J=5.81 Hz, 1 H) , 3.96 (dd, J=14.78, 5.94 Hz, 1 H) , 3.37 - 3.66 (m, 3 H) , 3.25 (m, 3 H) , 2.07 - 2.20 (m, 3 H) , 1.88 - 2.06 (m, 4 H) , 0.72 - 0.96 (m, 6 H) ; LR S (ESI) m/e 393.2 [ (M + H)+, calculado para C22H29 60 393.5] . 5.6.131. Síntesis de N- (ter-butil) -4- (3-fenilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperazina-l-carboxamida A una mezcla de 4- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin- - - 6-il ) -N- (ter-butil ) piperazina-l-carboxamida (301.0 mg, 0.8 mmol) , ácido fenil borónico [98-80-8] (117.8 mg, 1.0 mmol) , monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (366.4 mg, 1.6 mmol), y [1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (68.7 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 50 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (25 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85 °C durante 17 horas después se enfrió y se dividió entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgS04) y se evaporó para proporcionar un aceite café que se purificó mediante HPLC de preparación. El producto aislado se disolvió en metanol, se diluyó con ácido clorhídrico concentrado, se evaporó hasta secar, se re-disolvió en metanol y se precipitó mediante la adición de dietil éter. La filtración del precipitado produjo 39.3 mg de sal de monohidrocloruro de N- (ter-butil) -4- (3-fenilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperazina-l-carboxamida como un polvo blanco, mp. 210-211°C (dec) . ¾ NMR (400 Hz, - - DMSO-d6) d ppm 1.28 (s, 8 H) 2.51 (br. s., 2 H) 3.47 (br. s., 4 H) 3.57 - 3.63 (m, 4 H) 7.49 (s, 1 H) 7.55 - 7.60 (m, 2 H) 7.76 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 8.11 (d, J=7.58 Hz, 2 H) 8.21 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 8.48 (s, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 29.15, 42.92, 45.19, 49.98, 116.08, 121.27, 122.26, 126.43, 127.18, 128.08, 128.78, 129.02, 132.90, 155.89, 156.83. LRMS (ESI) m/z 379.2 [(M+H)]+, calculado para C2iH26N60: 378.48. 5.6.132. Síntesis de ter-butil ( 1- (3- (piridin-4-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperidin-3-il) carbamato Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.42. 1H NMR (400 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 1.48 (s, 9 H) 1.57 - 1.64 (m, 1 H) 1.78 (ddt, J=13.34, 8.88, 4.44, 4.44 Hz, 1 H) 1.91 (ddd, J=13.56, 6.62, 3.20 Hz, 1 H) 1.96 - 2.06 (m, 1 H) 3.27 (dd, J=12.90, 7.61 Hz, 1 H) 3.43 (t, J=9.15 Hz, 1 H) 3.70 - 3.79 (m, 1 H) 3.99 (d, J=12.79 Hz, 1 H) 4.70 (br. s., 1 H) 6.98 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 7.80 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 8.03 - 8.08 (m, 3 H) 8.66 - 8.73 (m, 2 H) ; LRMS (ESI) m/395.0 [ (M + H)+, calculado para C21H26N6O2 394.0]. 5.6.133. Síntesis de ( 3aR, 6aS ) -ter-butil 5-(3- - - bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) hexahidropirrolo [3,4-c]pirrol-2 (1H) -carboxilato Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.42, Parte A. 1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.49 (s, 9 H) 1.57 (s, 2 H) 3.06 (br. s., 2 H) 3.39 (br. s., 2 H) 3.50 (d, J=9.35 Hz, 2 H) 3.69 (br. s., 2 H) 3.76 - 3.89 (m, 2 H) 6.60 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.53 (s, 1 H) 7.68 (d, J=9.85 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/408.0 [ (M + H)+ doble, calculado para Ci7H22BrN502 407.0]. 5.6.134. Síntesis de 3-bromo-6- (3-fenilpirrolidin-1-il) imidazo [1, 2-b] piridazina Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.42, Parte A. 1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 2.15 - 2.29 (m, 1 H) 2.44 -2.55 (m, 1 H) 3.51 - 3.73 (m, 3 H) 3.80 - 3.89 (m, 1 H) 4.01 - 4.11 (m, 1 H) 6.65 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.29 - 7.42 (m, 5 H) 7.52 (s, 1 H) 7.68 (d, J=9.60 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/343.0 [(M + H)+ doble, calculado para Ci6Hi5BrN4 342.0]. - - 5.6.135. Síntesis de ter-butil 2-(l-(3-bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) pirrolidin-2-il ) acetato Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.42, Parte A. 1H NMR (400 Hz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.46 - 1.51 (m, 10 H) 1.96 -2.24 (m, 4 H) 2.31 (dd, J=14.99, 9.92 Hz, 1 H) 2.97 (dd, J=14.77, 3.09 Hz, 1 H) 3.42 - 3.53 (m, 1 H) 3.59 - 3.70 (m, 1 H) 4.48 (ddt, J=10.01, 7.25, 2.73, 2.73 Hz, 1 H) 6.66 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 7.51 (s, 1 H) 7.67 (d, J=9.70 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/381.0 [ (M + H)+ doble, calculado para C16H2iBrN402 380.0] . 5.6.136. Síntesis de S-isopropil 4-(3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperazina-l-carbotioato Se agregó base de Hunig [7087-68-5] (0.4 mi, 2.4 mmol) , después S-isopropil carbonocloridotioato [13889-93-5] (0.2 mi, 1.6 mmol) a una solución agitada a temperatura ambiente de 3-bromo-6-piperazin-l-il-imidazo [ 1 , 2-b] piridazina (450.0 mg, 1.6 mmol) en etil acetato (30 mi). Después la - - suspensión rápidamente formada se agitó durante la noche, bajo un manto de 2, después se lavó con salmuera, se secó (MgSO,}) , se evaporó, y se cristalizó a partir de etil acetato/heptano para proporcionar 482.9 mg de un polvo blanco, mp. 186-187°C. XH NMR (400 MHz, DMS0-d6) d ppm 1.30 (d, J=6.82 Hz, 6 H) 2.51 (dt, J=3.60, 1.86 Hz, 1 H) 3.49 -3.59 (m, 1 H) 3.59 - 3.71 (m, 7 H) 7.58 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 8.09 - 8.13 (m, 2 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 23.22, 35.48, 44.71, 101.63, 110.84, 113.71, 114.69, 116.58, 119.46, 123.56, 126.04, 134.22, 155.61, 157.77, 158.15, 158.53, 158.90, 166.18. LRMS (ESI) m/z 384.0/386.0 [(M+H)]+, calculado para Ci4Hi8BrN5OS : 384.30. 5.6.137. Síntesis de 3-bromo-6- ( 4- (pirazin-2-il) piperazin-l-il) imidazo [1, 2-b] piridazina Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.42, Parte A. 1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 3.70 - 3.87 (m, 8 H) 6.90 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 7.58 (s, 1 H) 7.75 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.94 (d, J=2.53 Hz, 1 H) 8.13 (dd, J=2.53, 1.52 Hz, 1 H) 8.23 (d, J=1.52 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/360.0 [ (M + H) + doble, calculado para Ci4Hi4BrN7 359.0]. - - 5.6.138. Síntesis de ter-butil (2-(l-(3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) piperidin-4-il) etil) carbamato Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.42, Parte A. 1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.19 - 1.40 (m, 2 H) 1.41 -1.53 (m, 11 H) 1.60 (dtd, J=10.71, 7.15, 7.15, 3.79 Hz, 1 H) 1.85 (d, J=12.38 Hz, 2 H) 2.88 - 3.01 (m, 2 H) 3.21 (q, J=6.57 Hz, 2 H) 4.21 (d, J=13.14 Hz, 2 H) 6.84 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.52 (s, 1 H) 7.64 (d, J=9.85 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/424.0 [ (M + H)+ doble, calculado para Ci8H26Br 502 423.0]. 5.6.139. Síntesis de ter-butil éster de ácido metil- [1- ( 3-piridin-4-il-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -pirrolidin-3-il] -carbámico Una mezcla de ter-butil éster de ácido [l-(3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -pirrolidin-3-il] -metil-carbámico (100 mg, 0.25 mmol) , ácido 4-piridinilborónico (40 mg, 0.33 mmol), K2C03 (104 mg, 0.75 mmol) y diclorobis (trifenilfosfina) paladio (II) (8.8 mg, 0.013 mmol) - - en MeCN/agua (3.2 ml/0.8 mi) se calentó en un microondas a 150°C durante 15 minutos. La capa acuosa se retiró y la capa orgánica se diluyó con MeCN y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC de preparación para proporcionar el compuesto del titulo (25.3 mg) . XH NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 1.50 - 1.55 (m, 9 H) 2.22 - 2.32 (m, 2 H) 2.89 (s, 3 H) 3.46 -3.57 (m, 2 H) 3.72 - 3.80 (m, 2 H) 4.91 (t, J=7.61 Hz, 1 H) 6.95 (d, J=9.92 Hz, 1 H) 7.77 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 8.11 (s, 1 H) 8.23 - 8.27 (m, 2 H) 8.53 - 8.58 (m, 2 H) . LRMS (ESI) m/z 395.2 [(M+H)]+, calculado para C2iH26N602: 394.48. 5.6.140. Síntesis de S-isopropil 4- (3-fenilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) piperazina-l-carbotioato A una mezcla de S-isopropil 4- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperazina-l-carbotioato (360.9 mg, 0.9 mmol) , ácido fenil borónico [98-80-8] (137.5 mg, 1.1 mmol) , monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (438.1 mg, 1.9 mmol), y [ 1 , 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio (II) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (78.4 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 50 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (25 mi) y una barra de agitación magnética. El - - recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85°C durante 17 horas, después se enfrió y se dividió entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgS04) y se evaporó para proporcionar un aceite café oscuro que se purificó mediante RP-HPLC de preparación. El producto aislado se disolvió en metanol, se diluyó con ácido clorhídrico concentrado, se evaporó hasta secar, se re-disolvió en metanol y se precipitó mediante la adición de dietil éter. La filtración del precipitado produjo 226.9 mg de sal de monohidrocloruro de S-isopropil 4-( 3-fenilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperazina-l-carbotioato como un polvo blanco, mp. 276-277°C (dec) . ?? NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.30 (d, J=6.82 Hz, 6 H) 2.49 - 2.52 (m, 2 H) 3.52 (dt, J=13.64, 6.82 Hz, 1 H) 3.60 - 3.71 (m, 7 H) 7.46 -7.51 (m, 1 H) 7.55 - 7.60 (m, 2 H) 7.77 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 8.09 - 8.13 (m, 2 H) 8.25 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 8.54 (s, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMS0-d6) d ppm 23.27, 35.50, 44.94, 116.00, 121.27, 122.33, 126.38, 127.14, 128.02, 128.82, 128.97, 132.91. LRMS (ESI) m/z 384.0/386.0 [ (M+H) ] +, calculado para C20H23N5OS: 381.50. - - 5.6.141. Síntesis de N-isopropil-4- ( 3-fenilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperazina-l-carboxamida Parte A. 4- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -N-isopropilpiperazina-l-carboxamida Se agregó 2-isocianatopropano [1795-48-8] (120 mi, 1.2 mmol) , mediante jeringa, a una solución incolora, transparente, agitada, a temperatura ambiente de 3-bromo-6-piperazin-l-il-imidazo [1, 2-b] piridazina (334.6 mg, 1.2 mmol) en diclorometano (20 mi) . La solución se dejó proceder durante 17 horas después se evaporó hasta secar para proporcionar 481.5 mg de una espuma sólida amarillo claro. LRMS (ESI) m/z 367.0/369.0 [(M+H)]+, calculado para Ci4Hi9BrN60: 367.25.
Parte B. N-isopropil-4- ( 3-fenilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperazina-l-carboxamida. A una mezcla de 4- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -N-isopropilpiperazina-l-carboxamida (481.5 mg, 1.3 mmol), ácido fenil borónico [98-80-8] (191.8 mg, 1.6 mmol), monohidrato - - tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (608.4 mg, 2.6 mmol), y [ 1 , 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (111.4 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 50 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1,2-dimetoxietano (25 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85°C durante 17 horas después se enfrió y se dividió entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgS04) y se evaporó para proporcionar un aceite café que se purificó mediante RP-HPLC de preparación. El producto aislado se disolvió en metanol, se diluyó con ácido clorhídrico concentrado, se evaporó hasta secar, se re-disolvió en metanol y se precipitó mediante la adición de dietil éter. La filtración del precipitado produjo 219.4 mg de sal de monohidrocloruro de N-isopropil-4- ( 3-fenilimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperazina-l-carboxamida como un polvo blanco, mp. 217-218°C (dec) . XH NMR (400 MHz, D SO-d6) d ppm 1.08 (d, J=6.57 Hz, 6 H) 2.51 (d, J=1.52 Hz, 2 H) 3.50 (d, J=5.05 Hz, 4 H) 3.56 - 3.63 (m, 4 H) 3.73 - 3.82 - - (m, 1 H) 7.49 (d, J=7.33 Hz, 1 H) 7.54 - 7.60 (m, 2 H) 7.80 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 8.08 - 8.13 (m, 2 H) 8.22 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 8.53 (s, 1 H) . 13C NMR (100 MHz , DMSO-d6) d ppm 22.88, 41.82, 42.69, 45.13, 116.22, 120.96, 122.08, 126.38, 127.20, 128.03, 128.76, 129.02, 132.77, 155.89, 156.69. LRMS (ESI) m/z 365.1 [(M+H)]+, calculado para C2oH24N60: 364.45. mw =364.45. 5.6.142. Síntesis de (S) -ter-butil 2-(((3-aminoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) amino) metil ) pirrolidina-1-carboxilato y (S) -ter-butil 2- ( ( (3-acetamidoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidina-l-carboxilato Parte A. N- ( 6-cloroimidazo [ 1, 2-b] piridazin- 1) acetamida A una solución de 6-cloroimidazo [1, 2-b] piridazin-3-amina y trietilamina (0.8 mi, 6.0 mmol) en DCM (25 mi) se agregó cloruro de acetilo por goteo y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentró y se purificó mediante Cromatografía de columna ISCO (10% de MeOH/DCM) para proporcionar N- ( 6-cloroimidazo [1, 2- - - b] piridazin-3-il) acetamida no muy pura (500 mg, rendimiento 95%). 60 mg del material no puro se purificaron adicionalmente mediante HPLC de preparación (neutra) para proporcionar N- ( 6-cloroimidazo [1, 2-b] piridazin-3-il) acetamida pura. XH NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.01 (d, J=9.35 Hz, 1 H) , 7.94 (s, 1 H) , 7.26 (d, J=9.35 Hz, 1 H) , 2.29 (s, 3 H) ; LRMS (ESI) m/e 210.9 [ (M + H)+, calculado para C8H8C1N40 211.6] .
Parte B. (S) -ter-butil 2- (( (3-aminoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidina-l-carboxilato y (S)-ter-butil 2- ( ( (3-acetamidoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirrolidina-l-carboxilato Los compuestos del titulo se prepararon utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. (S)-ter-butil 2- ((( 3-aminoimidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il) amino)metil) pirrolidina-l-carboxilato: 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 7.43-7.46 (m, 1 H) , 6.80 - 6.87 (m, 1 H) , 6.48-6.51 (m, 1 H) , 4.19 (br. s., 1 H) , 3.40-3.79 (m, 4 H) , 1.96 - 2.04 (m, 4 H) , 1.41 - 1.50 (m, 9 H) ; LRMS (ESI) m/e 333.1 [ (M + H)+, calculado para Ci6H25 602 333.4].
(S) -ter-butil 2- ( ( (3-acetamidoimidazo [1,2-b] piridazin-6-il) amino)metil) pirrolidina-l-carboxilato: 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 7.51 - 7.67 (m, 2 H) , 6.61 -6.91 (m, 1 H), 2.89-4.30 (m, 6 H) , 1.80-2.37 (m, 7 H) , 1.45-1.49 (m, 9 H); LRMS (ESI) m/e 375.2 [ (M + H)+, calculado para - - Ci8H27 603 375.5] . 5.6.143. Síntesis de isopropil éster de ácido 4- [3- (2-metoxi-piridin-4-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ] -piperazina-l-carboxílico Este utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.112 a partir de isopropil éster de ácido 4- ( 3-bromo-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il) -piperazina-l-carboxílico (452.7 mg, 1.2 mmol) y ácido 2-metoxipiridina-4-borónico [762262-09-9] (225.6 mg, 1.5 mmol) para proporcionar 229.7 mg de di-hidrocloruro de isopropil éster de ácido 4- [3- (2-metoxi-piridin-4-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -piperazina-l-carboxílico como un polvo blanco, mp. 215-216oC (dec.) . XH NMR (400 MHz , DMS0-d6) d ppm 1.22 (d, J=6.06 Hz, 6 H) 2.51 (s, 2 H) 3.53 -3.60 (m, 4 H) 3.62 - 3.72 (m, 4 H) 3.94 (s, 2 H) 4.82 (spt, J=6.19 Hz, 1 H) 7.65 (s, 1 H) 7.75 - 7.83 (m, 2 H) 8.25 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 8.33 (d, J=5.56 Hz, 1 H) 8.81 (s, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 21.95, 42.48, 45.02, 53.67, 68.26, 106.68, 114.00, 116.54, 122.59, 124.17, 125.11, 134.06, 137.16, 147.16, 154.28, 155.83, 163.92. LRMS (ESI) m/z 397.1 [(M+H)]+, calculado para C20H24 6O3: 396.45. 5.6.144. Síntesis de (S) -1- (3, 3-dimetilbutil) -5- - - ( ( ( 3- (2-metoxipiridin-3-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-ß-il ) amino) metil ) pirrolidin-2-ona Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.127. 1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 0.91 (s, 9 H) 1.35 (td, J=12.25, 5.56 Hz, 1 H) 1.48 (td, J=12.38, 4.55 Hz, 1 H) 1.90 - 2.05 (m, 1 H) 2.11 - 2.25 (m, 1 H) 2.30 - 2.53 (m, 2 H) 2.88 -3.01 (m, 1 H) 3.49 (dt, J=14.21, 4.01 Hz, 1 H) 3.67 - 3.81 (m, 2 H) 3.95 - 4.04 (m, 1 H) 4.07 (s, 3 H) 5.10 (br. s., 1 H) 6.66 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.04 (dd, J=7.45, 4.93 Hz, 1 H) 7.84 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 8.06 (s, 1 H) 8.19 (dd, J=5.05, 1.77 Hz, 1 H) 8.61 (dd, J=7.58, 1.77 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/423.0 [ ( + H)+, calculado para C23H3oN602 422.0]. 5.6.145. Síntesis de isopropil éster de ácido 4- [3-(2-isopropoxi-fenil) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -piperazina-l-carboxílico Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.112 a partir de - - isopropil éster de ácido 4- ( 3-bromo-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) -piperazina-l-carboxilico (370.2 mg, 1.0 mmol) y ácido 2-isopropoxifenilborónico [138008-97-6] (217.4 mg, 1.2 mmol) para proporcionar 250.7 mg de monohidrocloruro de isopropil éster de ácido 4- [3- (2-isopropoxi-fenil) -imidazo [1,2-b] piridazin-6-il ] -piperazina-l-carboxilico como un polvo blanco, mp. 216-217oC (dec). XH N R (400 MHz, DMS0-d6) d ppm 1.22 (dd, J=18.95, 6.06 Hz, 11 H) 2.51 (dt, J=3.54, 1.77 Hz, 3 H) 3.47 - 3.53 (m, 4 H) 3.54 - 3.60 (m, 4 H) 4.69 - 4.83 (m, 2 H) 7.08 - 7.13 (m, 1 H) 7.22 (d, J=8.34 Hz, 1 H) 7.47 (td, J=7.89, 1.64 Hz, 1 H) 7.78 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 7.95 (dd, J=7.71, 1.64 Hz, 1 H) 8.25 (t, J=5.05 Hz, 2 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 21.70, 21.92, 42.50, 44.87, 68.20, 70.05, 113.38, 115.03, 116.05, 119.86, 121.98, 122.68, 124.87, 130.37, 130.78, 131.87, 154.25, 154.99, 155.54. LRMS (ESI ) m/z 424.1 [(M+H)]+, calculado para C23H29N5O3: 423.52. 5.6.146. Síntesis de isopropil 4-(3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -3-metilpiperazina-l-carboxilato Parte A. ter-butil 4- ( 3-bromoimidazo [1,2-b] iridazin-6-il) -3-metilpiperazina-l-carboxilato - - Una suspensión agitada de ter-butil 3-metilpiperazina-l-carboxilato [120737-59-9] (987.7 mg, 4.9 mmol), 3-bromo-6-fluoro-imidazo [1, 2-b] piridazina (361.7 mg, 4.9 mmol), y base de Hunig [7087-68-5] (0.9 mi, 5.2 mmol) en 2-propanol (40 mi) se calentó a 65°C, bajo un manto de N2, durante 21 días. La suspensión de reacción enfriada se dividió entre salmuera y etil acetato y el extracto se secó (MgS04) y se evaporó para obtener 1.2 g de un aceite café claro. LRMS (ESI) m/z 215.9/217.9 [(M+H)]+, calculado para Ci6H22Br 502: 396.29.
Parte B. dihidrocloruro de 3-bromo-6- (2-metilpiperazin-l-il) imidazo [1, 2-b] piridazina Se agregó ácido clorhídrico concentrado (3.0 mi) a una solución de ter-butil 4- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -3-metilpiperazina-l-carboxilato (1.2 g, 3.1 mmol) en metanol (60 mi) y se dejó agitar a temperatura ambiente bajo un manto de N2 durante 3 días. La solución se evaporó entonces hasta secar para proporcionar 1.1 g de un sólido - - café claro. LRMS (ESI) ra/z 295.9/297.9 [(M+H)]+, calculado para CnHi4BrN5: 296.17.
Parte C. isopropil 4- ( 3-bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) -3-metilpiperazina-l-carboxilato . Se agregó base de Hunig [7087-68-5] (2.1 mi, 12.1 mmol) a una suspensión agitada a temperatura ambiente de dihidrocloruro de 3-bromo-6- (2-metilpiperazin-l-il) imidazo [1, 2-b] piridazina (1.1 g, 3.0 mmol) en etil acetato (150 mi). La suspensión se agitó durante 1.5 horas después se agregó lentamente una solución de 1.0 M de cloroformato de isopropilo en tolueno (3.0 mi) y la reacción se dejó proceder durante 17 horas después se lavó con salmuera. La fase de etil acetato se secó (MgS04) y se evaporó. El producto se purificó mediante RP-HPLC de preparación para proporcionar 52.1 mg de isopropil 4- ( 3-bromoimidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il ) -3-metilpiperazina-l-carboxilato racémico como un sólido amarillo claro, mp. 52-54°C. XH NMR (400 Hz, D SO-d6) d ppm 1.11 (d, J=6.57 Hz, 3 H) 1.15 - 1.25 (m, 6 H) 2.51 (dt, J=3.73, 1.80 Hz, 2 H) 3.15 (dd, J=12.88, 2.78 Hz, 2 H) 3.86 (d, J=13.39 Hz, 1 H) 3.98 (d, J=13.39 Hz, 2 H) 4.47 (br. s., 1 H) 4.78 - 4.87 (m, 1 H) 7.23 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 7.64 (s, 1 H) 7.91 (d, J=10.11 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 13.53, 21.90, 42.71, 48.04, 68.05, 99.42, 110.59, 126.00, 131.15, 136.33, 154.41, 154.71. LRMS (ESI) m/z 382.0/384.0 [(M+H)]+, calculado para Ci5H2oBr 502 : 382.26. - - 5.6.147. Síntesis de isopropil 4-(3- bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -2-metilpiperazina-l- carboxilato Parte A. 4-ter-butil 1-isopropil 2-metilpiperazina- 1, 4-dicarboxilato A una solución agitada a 0°C de ter-butil 3- metilpiperazina-l-carboxilato [120737-59-9] (3.0 g, 148.4 mmol) y base de Hunig [7087-65-5] (31.0 mi, 178.0 mmol) en etil acetato (300 mi) se agregó una solución de 1.0 de cloroformato de isopropilo en tolueno (150 mi) . La reacción se dejó agitar y se calentó a temperatura ambiente durante la noche bajo un manto de N2. La mezcla de reacción se lavó después con salmuera, se secó (CaS04) , y se evaporó para proporcionar 4.2 g de un aceite amarillo claro. LRMS (ESI) m/z 193.1 [(M+H)]+, calculado para C14H26 2O4: 286.37.
Parte B. hidrocloruro de isopropil 2- metilpiperazina-l-carboxilato - - Se agregó ácido clorhídrico concentrado (6.0 mi) a una solución de 4-ter-butil 1-isopropil 2-metilpiperazina-1 , 4-dicarboxilato (4.2 g, 14.6 mmol) en metanol (250 mi) y se dejó agitar a temperatura ambiente bajo un manto de N2 durante 3 días. La solución se evaporó entonces hasta secar y el aceite viscoso amarillo resultante se trituró en acetona para precipitar un polvo blanco fino que se aisló mediante filtración, bajo un manto de N2, para proporcionar 2.0 g. LRMS (ESI ) m/z 187.0 [(M+H)]+, calculado para C9H18N202: 186.26.
Parte C. isopropil 4- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -2-metilpiperazina-l-carboxilato . Una suspensión agitada de hidrocloruro de isopropil 2-metilpiperazina-l-carboxilato (1.8 g, 8.0 mmol), 3-bromo-6-fluoro-imidazo [ 1, 2-b] piridazina (1.5 g, 6.6 mmol), y base de Hunig [7087-68-5] (5.5 mi, 31.6 mmol) en 2-propanol (40 mi) se calentó a reflujo, bajo un manto de N2, durante 2 días. La suspensión de reacción enfriada se dividió entre salmuera y etil acetato y el extracto se secó (MgS04) y se evaporó para obtener 3.0 g de un sólido café claro. Un alícuota de 217 mg de esta muestra se purificó mediante RP-HPLC de preparación para proporcionar 76.4 mg de isopropil 4- (3- - - bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -2-metilpiperazina-l-carboxilato racémico como un polvo amarillo claro, mp. 144-145°C. XH N R (400 MHz , DMSO-d6) d ppm 1.13 - 1.24 (m, 10 H) 2.49 - 2.52 (m, 2 H) 3.19 - 3.32 (m, 2 H) 3.87 (d, J=13.39 Hz, 1 H) 4.02 (d, J=13.39 Hz, 1 H) 4.78 - 4.86 (m, 1 H) 7.22 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 7.60 (s, 1 H) 7.89 (d, J=10.11 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 15.57, 21.93, 37.98, 44.82, 46.94, 48.94, 68.01, 99.25, 110.49, 126.08, 131.50, 136.47, 154.20, 155.35. LRMS (ESI ) m/z 382.0/384.0 [(M+H)]+, calculado para Ci5H2oBr s02 : 382.26. 5.6.148. Síntesis de isopropil éster de ácido 4- [3- (2-hidroxi-piridin-3-il ) -imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il ] -piperazina-l-carboxílico Se preparó a partir de isopropil éster de ácido 4-[3- (2-metoxi-piridin-3-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -piperazina-l-carboxílico mediante hidrólisis de ácido clorhídrico en metanol para proporcionar di-hidrocloruro de isopropil éster de ácido 4- [3- (2-metoxi-piridin-3-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -piperazina-l-carboxílico como un polvo blanco, mp. 275-276°C. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.15 (d, J=6.06 Hz, 5 H) 3.51 (br. s., 7 H) 4.37 (s, 4 H) 4.67 - 4.79 (m, 1 H) 6.51 (t, J=6.82 Hz, 1 H) 7.45 - 7.57 (m, - - 2 H) 7.97 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 8.41 (s, 1 H) 8.65 (dd, J=7.33, 1.77 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 21.58, 42.23, 44.60, 69.30, 106.47, 115.89, 116.31, 121.12, 122.00, 122.89, 131.50, 135.26, 139.85, 155.11, 155.49, 159.85. LR S (ESI) m/z 383.1 [(M+H)]+, calculado para Ci9H22 603: 382.43. 5.6.149. Síntesis de (S ) -ter-butil 2-(((3- (difluorometil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino)metil) pirrolidina-l-carboxilato Parte uorometil) imidazo [1, 2-b] piridazina A una solución de 6-cloroimidazo [ 1, 2-b] piridazina-3-carbaldehído (0.36 g, 2 mmol) en DCM (1 mi) se agregó una solución de Deoxo-Fluor (0.67 mi, 3.6 mmol) en DCM (2 mi) y EtOH (0.023 mi, 0.5 mmol) a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante la noche, la solución se vació en NaHC03 saturado y se extrajo con DCM (2 x 20 mi) , se secó sobre Na2S04, se filtró y se evaporó in vacuo. El crudo se purificó mediante cromatografía de columna ISCO (50% de EtOAC/hexano) para proporcionar 6-cloro-3- - - (difluorometil) imidazo [ 1, 2-b] piridazina como un sólido blanco (180 mg, rendimiento 50%) . XH NMR (400 MHz, ETANOL-d4) d ppm 8.15 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 8.03 - 8.06 (m, 1 H) , 7.18 - 7.49 (m, 2 H) ; LRMS (ESI) m/e 203.9 [ (M + H)+, calculado para C7H5C1F2N3 204.6] .
Parte B. ( S ) -ter-butil 2-(((3- (difluorometil) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il) amino)metil) pirrolidina-l-carboxilato. Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. ?? NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 7.62 - 7.67 (m, 2 H) , 7.10-7.40 (m, 1 H) , 6.81 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 4.15 (bs, 1 H) , 3.37-3.41 (m, 4 H) , 1.87 - 2.06 (m, 4 H) , 1.44 (br. s., 9 H) ; LRMS (ESI) m/e 368.0 [ (M + H)+, calculado para C17H24 F2N5O2 368.4]. 5.6.150. Síntesis de ( S ) -N- (tert-butil ) -2- ( ( ( 3-cianoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) amino) metil ) pirrolidina-1-carboxamida Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. XH NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 8.02 (s, 1 H) , 7.73 (d, J=9.85 Hz, 1 H) , 6.91 (d, J=9.85 Hz, 1 H) , 5.15 (s, 1 H) , 4.25 (m, 1 H) , 3.35 - 3.50 (m, 3 H) , 3.30 (m, 1 H) , 1.92-2.17 (m, 4 H) , 1.30 - - (s, 9 H) ; LRMS (ESI) m/e 342.3 [ (M + H)+, calculado para C17H24N70 342.4] . 5.6.151. Síntesis de isopropil éster de ácido 4- [3- (2-metoxi-piridin-3-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -piperazina-l-carboxilico Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.112 a partir de isopropil éster de ácido 4- ( 3-bromo-imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) -piperazina-l-carboxilico (309.2 mg, 0.8 mmol) y ácido 2-metoxipiridina-3-borónico [163105-90-6] (154.8 mg, 1.0 mmol) para proporcionar 94.0 mg de di-hidrocloruro de isopropil éster de ácido 4- [3- (2-metoxi-piridin-3-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ] -piperazina-l-carboxilico como un polvo amarillo, mp. 179-181°C (dec). XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.20 - 1.24 (m, 6 H) 2.51 (dt, J=3.54, 1.77 Hz, 2 H) 3.50 - 3.61 (m, 7 H) 3.62 - 3.68 (m, 1 H) 3.98 (s, 2 H) 4.78 - 4.86 (m, 1 H) 7.24 (dd, J=7.58, 5.05 Hz, 1 H) 7.69 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 8.18 - 8.25 (m, 1 H) 8.28 - 8.35 (m, 2 H) 8.56 (dd, J=7.58, 1.77 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 21.93, 42.50, 45.01, 53.64, 68.20, 109.84, 115.44, 116.90, 122.75, 122.83, 125.22, 133.07, 138.18, 146.97, 154.26, 155.45, 159.81. LRMS (ESI) m/z 397.0 [(M+H)]+, - - calculado para C20H24 6O3: 396.45. 5.6.152. Síntesis de ter-butil 4-(3- bromoimidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) hexaphidropirrolo [3,2- b]pirrol-l (2H) -carboxilato Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. 1H NMR (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 7.73 (d, J=9.85 Hz, 1 H) , 7.44 - 7.50 (m, 1 H) , 6.96 - 6.99 (m, 1 H) , 4.49 - 4.66 (m, 2 H) , 3.52 - 3.85 (m, 3 H) , 3.21 - 3.39 (m, 2 H) , 2.14 - 2.32 (m, 3 H) , 1.46 - 1.57 (m, 9 H) ; LRMS (ESI) m/e 409.9 [ (M + H)+, calculado para Ci7H23BrN50 409.3]. 5.6.153. Síntesis de (S) -ter-butil 2-(((3- (metilcarbamoil ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6- il) amino) metil) pirrolidina-l-carboxilato Parte A. ácido 6-cloroimidazo [ 1, 2-b] piridazina carboxílico - - A una solución de 6-cloroimidazo [1, 2-b] piridazina-3-carbaldehido (1.82 g, 10 mol), en t-BuOH (90 mi) y 2-metil-2-buteno en THF (30 mi, 2.0 M) se agregó una solución de clorito de sodio (80%, 9.0 g, 100 mmol) y NaH2P04 (1 g, 8 mmol) en agua (45 mi) . La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche, se concentró, se diluyó con agua, se acidificó a un pH = 4, se precipitó a un sólido blanco, se filtró para proporcionar ácido 6-cloroimidazo [1, 2-b] piridazina-3-carboxílico como un sólido blanco (1.2 g, 67% rendimiento). XH NMR (400 MHz , DMSO-d6) d ppm 8.29 (d, J=9.60 Hz, 1 H), 8.22 (s, 1 H) , 7.50 (d, J=9.60 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/e 198.1 [ (M + H)+, calculado para C7H5C1N302 198.6].
Parte B. 6-cloro-N-metilimidazo [1, 2-b] piridazina-3-carboxamida Una reacción normal de acoplamiento de amida proporcionó el compuesto del titulo. XH NMR (400 MHz, METHANOL-d4) d ppm 8.37 (d, J=1.77 Hz, 1 H) , 8.24 (dd, J=9.60, 2.02 Hz, 1 H) , 7.56 (dd, J=9.47, 2.15 Hz, 1 H) , 3.08 (d, J=2.02 Hz, 3 H) ; LRMS (ESI) m/e 211.0 [ (M + H)+, - - calculado para C8H8C1N40 211.6].
Parte C. (S) -ter-butil 2-( ( (3- (metilcarbamoil ) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) amino)metil) pirrolidina-l-carboxilato. Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.69. *H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 8.66 (br. s., 1 H) , 8.19 (s, 1 H) , 7.82 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 7.28 (s, 1 H) , 7.22 (br. s., 1 H) , 6.72 (d, J=9.60 Hz, 1 H) , 4.29 (br. s., 1 H) , 3.32 - 3.51 (m, 5 H) , 3.07 - 3.11 (m, 3 H) , 2.11 - 2.21 (m, 1 H), 1.91 - 2.02 (m, 2 H) , 1.77 - 1.85 (m, 1 H) , 1.46 -1.52 (m, 9 H); LRMS (ESI) m/e 375.2 [ (M + H)+, calculado para C18H27N603 375.4] . 5.6.154. Síntesis de isopropil 5- (3- (2-metoxifenil) imidazo [1, 2-b]piridazin-6-il) diazabiciclo [2.2.1] heptano-2-carboxilato Parte A. (1S, 4S) -2-ter-butil 5-isopropil diazabiciclo [2.2.1] heptano-2, 5-dicarboxilato - - A una solución agitada a temperatura ambiente de (1S, 4S) -ter-butil 2 , 5-diazabiciclo [2.2.1] heptano-2-carboxilato [113451-59-5] (1.0 g, 5.0 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (1.4 mi, 8.0 mmol) en etil acetato (120 mi) se agregó lentamente una solución de 1.0 M de cloroformato de isopropilo en tolueno (5.1 mi) durante el curso de 10 minutos. La reacción se dejó agitar durante la noche después se lavó con salmuera, se secó (MgS04) , y se evaporó para obtener 1.3 g de un aceite amarillo. LRMS (ESI) m/z 285.1 [(M+H)]+, calculado para Ci4H24 204: 284.35.
Parte B. (1S, 4S) -isopropil 2,5-diazabiciclo[2.2.1] heptano-2-carboxilato El (1S, 4S) -2-ter-butil 5-isopropil 2,5-diazabiciclo [2.2.1] heptano-2 , 5-dicarboxilato (1.3 g, 4.6 mmol) se disolvió en metanol (200 mi) . Se agregó ácido clorhídrico concentrado (6 mi, 72 mmol) y la solución se agitó a 50°C durante 2 horas, después se evaporó hasta secar para proporcionar hidrocloruro de ( 1S, 4S) -isopropil 2,5-diazabiciclo [2.2.1] heptano-2-carboxilato como 0.9 g de un sólido blanco. LRMS (ESI) m/z 185.1 [(M+H)]+, calculado para C9Hi6N202: 184.24.
Parte C. isopropil 5- (3-bromoimidazo [1, 2- - - b] piridazin-6-il) -2, 5-diazabiciclo [2.2.1] heptano-2-carboxilato Una solución de hidrocloruro de (1S, 4S) -isopropil 2, 5-diazabiciclo [2.2.1] heptano-2-carboxilato (0.9 g, 4.2 mmol) , 3-bromo-6-fluoroimidazo [ 1 , 2-b] piridazina (1.0 g, 4.6 ramol), y base de Hunig [7087-68-5] (3.0 mi, 17.2 mmol) en 2-propanol (21 mi) se agitó a reflujo bajo un manto de N2 durante 3 días después se dividió entre salmuera y etil acetato. El extracto se secó (MgS04) y se evaporó para obtener 1.6 g de un sólido amarillo. LRMS (ESI) m/z 380.0/382.0 [(M+H)]+, calculado para Ci5Hi8Br 502 : 380.24.
Parte D. isopropil 5- (3- (2-metoxifenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -2 , 5-diazabiciclo [2.2.1] heptano-2-carboxilato. A una mezcla de isopropil 5- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -2, 5-diazabiciclo [2.2.1] heptano-2-carboxilato (429.1 mg, 1.1 mmol), ácido 2-metoxifenilborónico [5720-06-9] (206.7 mg, 1.4 mmol) , monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (520.7 mg, 2.3 mmol), y [1, 1 ' -bis (difenilfosfino) -ferroceno] dicloropaladio ( II) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (93.4 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 50 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de - - agua en 1 , 2-dimetoxietano (25 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85 °C durante 17 horas después se enfrió y se dividió entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en fases se secó ( gS04) , se evaporó y se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice eluido con 10% (v/v) de metanol/etil acetato para proporcionar un aceite café que se purificó adicionalmente mediante RP-HPLC de preparación. El producto aislado se disolvió en metanol, se diluyó con ácido clorhídrico concentrado, se evaporó hasta secar, se re-disolvió en metanol y se precipitó mediante la adición de dietil éter. La filtración del precipitado produjo 207.1 mg del producto sal de monohidrocloruro como un polvo amarillo, mp. 173-174°C. ?? NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.06 - 1.31 (m, 7 H) 1.91 - 2.06 (m, 2 H) 3.30 (br. s., 1 H) 3.40 (br. s., 2 H) 3.58 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 3.84 (s, 3 H) 4.54 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 4.67 - 4.79 (m, 1 H) 4.84 (br. s., 1 H) 7.13 (br. s., 1 H) 7.24 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 7.51 (t, J=7.20 Hz, 2 H) 7.95 (br. s., 1 H) 8.20 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 8.27 (s, 1 - - H) . iJC NMR (100 Hz, DMSO-d6) d ppm 13.88, 21.94, 22.00, 28.29, 31.19, 36.44, 36.92, 52.49, 55.67, 56.08, 56.44, 56.95, 57.43, 67.74, 111.65, 114.33, 116.61, 120.16, 121.59, 121.87, 124.72, 130.33, 131.05, 131.70, 153.57, 153.74, 156.91. LR S (ESI) m/z 408.3 [(M+H)]+, calculado para C22H25 503: 407.47. 5.6.155. Síntesis de [4- ( 3-piridin-2-il-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il ) -piperazin-l-il] -pirrolidin-1-il-metanona Parte A. [4- ( 3-bromo-pirazolo [1, 5-a] pirimidin-5-il) -piperazin-l-il] -pirrolidin-l-il-metanona A una magnéticamente, a temperatura ambiente, cubierta por N2 de dihidrocloruro de 3-bromo-6-piperazin-l-il-imidazo [1, 2-b] piridazina (3.1 g, 8.8 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (6.2 mi, 35.6 mmol) en etil acetato (200 mi) se agregó cloruro de pirrolidina-l-carbonilo [1192-63-8] (1.2 mi, 10.9 mmol). La reacción se dejó proceder durante la noche para dar como resultado una - - suspensión bien agitada. Una vez completa, la reacción se lavó con salmuera, se secó (MgS04) , y se diluyó con heptano para proporcionar el precipitado como un polvo amarillo claro fino, 2.6 g en dos cultivos. LRMS (ESI) m/z 379.0/381.0 [( +H)]+, calculado para Ci5Hi9BrN60: 379.26.
Parte B. [4- ( 3-piridin-2-il-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -piperazin-l-il] -pirrolidin-l-il-metanona . A una mezcla de [ 4- ( 3-bromo-pirazolo [ 1 , 5-a] pirimidin-5-il ) -piperazin-l-il ] -pirrolidin-l-il-metanona (381.0 mg, 01.0 mmol) , 2- (4, 4, 5, 5-tetrametil-l, 3, 2-dioxaborolan-2-il) piridina [874186-98-8] (512.7 mg, 2.5 mmol), cloruro de cobre [7758-89-6] (99.4 mg, l.Ommol), carbonato de cesio [534-17-8] (651.8 mg, 2.0 mmol) y [1, 1 ' -bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaladio ( II ) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (82.1 mg, 0.1 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 25 mi se agregó DMF anhidro y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por N2 se calentó a una temperatura de baño de aceite de 100 °C durante 17 horas después se enfrió y se dividió entre salmuera y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (MgS04) y se evaporó para proporcionar un aceite café - - que se purificó mediante RP-HPLC de preparación. El producto aislado se disolvió en metanol, se diluyó con ácido clorhídrico concentrado, se evaporó hasta secar, se re-disolvió en metanol y se precipitó mediante la adición de dietil éter. La filtración del precipitado produjo 83.2 mg de sal de dihidrocloruro de [4- ( 3-piridin-2-il-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -piperazin-l-il ] -pirrolidin-l-il-metanona como un polvo amarillo claro, mp. 202-203°C. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.73 - 1.84 (m, 4 H) 3.33 (t, J=6.44 Hz, 4 H) 3.36 - 3.43 (m, 4 H) 3.62 - 3.72 (m, 4 H) 7.45 - 7.52 (m, 1 H) 7.66 (d, J=10.11 Hz, 1 H) 8.08 (td, J=7.83, 1.77 Hz, 1 H) 8.18 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 8.54 (s, 1 H) 8.60 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 8.72 (d, J=4.55 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 25.04, 45.05, 45.27, 47.84, 114.83, 121.12, 123.43, 123.55, 126.59, 127.01, 134.87, 138.20, 145.21, 149.07, 155.74, 161.49. LRMS (ESI) m/z 378.2 [{M+H)]+, calculado para C20H23N7O: 377.45. 5.6.156. Síntesis de isopropil éster de ácido {(S)-1- [3- (2-metoxi-piridin-3-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -pirrolidin-3-il } -metil-carbámico Parte A. ter-butil éster de ácido [ (S) -1- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -pirrolidin-3-il ] -metil- - - carbáraico Una mezcla de ter-butil éster de ácido (S)-pirrolidin-3-il-carbámico (2.8 g, 15 mmol), 3-bromo-6-fluoro-imidazo [ 1 , 2-b] piridazina (2.16 g, 10 mmol), y trietilamina (5.58 mi, 40 mmol) en alcohol isopropílico (10 mi) se calentó en un microondas a 140 °C durante 30 minutos. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se pasó a través de una columna corta para proporcionar el producto deseado (3.8 g) . A una solución del producto anterior (3.8 g) en DMF (40 mi) a 0°C se agregó Mel (1.13 mi). La mezcla se agitó a 0°C durante 5 minutos, y se agregó NaH (800 mg, 60% dispersión en aceite, 20 mmol) en porciones. La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 5 minutos y a temperatura ambiente durante 30 minutos, después se trató con agua y se diluyó con EtOAc (250 mi) . La mezcla se lavó con agua (100 mi) y salmuera (100 mi) . La capa acuosa se extrajo de nuevo con EtOAc (2 x 50 mi) . El EtOAc combinado se secó (Na2S04) y se concentró. El residuo se sometió a ISCO (columna de 120 g) para proporcionar el compuesto del título (3.1 g) . 1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.43 (s, 9 H) 2.04 - 2.22 (m, 2 H) 2.78 (s, 3 H) 3.37 (dd, J=10.80, 7.28 Hz, 1 H) 3.46 (dt, J=10.36, 8.05 Hz, 1 H) 3.65 - 3.72 (m, 2 H) 4.87 (br. s., 1 - - H) 6.53 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 7.44 (s, 1 H) 7.64 (d, J=9.70 Hz 1 H) . LRMS (ESI) m/z 396 y 398.1 [(M+H)]+, calculado para Ci6H22BrN502: 396.29.
Parte B. isopropil éster de ácido [ (S) -1- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -pirrolidin-3-il ] -metil-carbámico. A una solución de ter-butil éster de ácido [(S)-1- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -pirrolidin-3-il] -metil-carbámico (1.35 g, 3.4 mmol) en eOH (80 mi) a 0°C se agregó AcCl (2.5 mi, 35 mmol) . La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentró para proporcionar un sólido blanco como el producto (1.25 g) .
El producto anterior (610 mg, 1.65 mmol) y DIEA (1.44 mi, 8.25 mmol)) se suspendieron en THF (15 mi). A la suspensión se agregó una solución de cloroformato de isopropilo en tolueno (1M, 2 mi, 2 mmol) . La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 5 horas. La mezcla se concentró y el residuo se sometió a ISCO (columna de 12 g) para proporcionar el compuesto del título (350 mg) . XH NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.27 (d, J=6.32 Hz, 6 H) 2.09 - 2.28 (m, 2 H) 2.87 (s, 3 H) 3.39 -3.56 (m, 2 H) 3.68 - 3.79 (m, 2 H) 4.96 (m, 2 H) 6.57 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.49 (s, 1 H) 7.64 (d, J=9.85 Hz, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 382.1 y 384.1 [(M+H)]+, calculado para CisHzoBrNsOz : 382.26.
- - Parte C. isopropil éster de ácido { (S ) -1- [ 3— (metoxi-piridin-3-il ) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ] -pirrolidin-3-il } -metil-carbámico . Una mezcla de isopropil éster de ácido [ (S) -1- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -pirrolidin-3-il] -metil-carbámico (88 mg, 0.23 mmol), ácido 2-metoxipiridina-3-borónico (46 mg, 0.3 mmol), K2CO3 (95 mg, 0.69 mmol) y diclorobis (trifenilfosfina) paladio (II) (8.4 mg, 0.012 mmol) en MeCN/agua (3.2 ml/0.8 mi) se calentó en un microondas a 150 °C durante 15 minutos. La capa acuosa se retiró y la capa orgánica se diluyó con MeCN y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC de preparación para proporcionar el compuesto del titulo (82.5 mg) . XH NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.29 (d, J=6.06 Hz, 6 H) 2.13 - 2.32 (m, 2 H) 2.89 (s, 3 H) 3.43 (dd, J=10.48, 6.95 Hz, 1 H) 3.48 -3.56 (m, 1 H) 3.69 - 3.76 (m, 2 H) 4.09 (s, 3 H) 4.99 (dt, J=12.38, 6.19 Hz, 2 H) 6.62 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.04 (dd, J=7.45, 4.93 Hz, 1 H) 7.79 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 8.13 - 8.19 (m, 2 H) 8.86 (dd, J=7.71, 1.64 Hz, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 411.2 [(M+H)]+, calculado para C21H26 6O3: 410.48. 5.6.157. Síntesis de ácido ciclopentanocarboxílico de { (S ) -1- [3- (2-hidroxi-piridin-3-il) -imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il] -pirrolidin-3-il } -metil-amida - - Parte A. ter-butil éster de ácido { (S) -1- [3- (2-metoxi-piridin-3-il ) -imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il] -pirrolidin-3-il } -metil-carbámico Una mezcla de ter-butil éster de ácido [(S)-l-(3-bromo-imidazo [ 1, 2-b] piridazin-6-il ) -pirrolidin-3-il] -metil-carbámico (83 mg, 0.21 mmol) , ácido 2-metoxipiridina-3-borónico (43 mg, 0.28 mmol), K2CO3 (87 mg, 0.63 mmol) y diclorobis (trifenilfosfina) paladio ( II ) (7.4 mg, 0.011 mmol) en MeCN/agua (3.2 ml/0.8 mi) se calentó en un microondas a 150°C durante 15 minutos. La capa acuosa se retiró y la capa orgánica se diluyó con eCN y se filtró. El filtrado se sometió a HPLC de preparación para proporcionar el compuesto del titulo (69.3 mg) . 1ti NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.50 (s, 9 H) 2.11 - 2.29 (m, 2 H) 2.84 (s, 3 H) 3.40 (dd, J=10.48, 6.95 Hz, 1 H) 3.46 - 3.53 (m, 1 H) 3.67 - 3.74 (m, 2 H) 4.08 (s, 3 H) 4.94 (br. s., 1 H) 6.61 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.03 (dd, J=7.58, 4.80 Hz, 1 H) 7.77 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 8.12 - 8.18 (m, 2 H) 8.86 (dd, J=7.58, 1.77 Hz, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 425.3 [(M+H)]+, calculado para C22H28 6O3: 424.51.
Parte B. ácido ciclopentanocarboxilico {(S)-l-[3-(2-hidroxi-piridin-3-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] - - - pirrolidin-3-il } -metil-amida . A una solución de ter-butil éster de ácido { (S) -1- [3-.(2-metoxi-piridin-3-il) -imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -pirrolidin-3-il } -metil-carbámico (540 mg, 1.27 mmol) en MeOH (40 mi) a 0°C se agregó AcCl (1.2 mi), 16.8 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentró para proporcionar el producto.
A una mezcla del producto anterior (80 mg, 0.2 mmol) y TEA (112 ul, 0.8 mmol) en DCM (2 mi) se agregó cloruro de ciclopentanocarbonilo a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se concentró y el residuo se sometió a HPLC de preparación para proporcionar el compuesto del titulo (49.9 mg) . XH NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.57 - 1.67 (m, 2 H) 1.74 - 1.93 (m, 6 H) 2.12 - 2.22 (m, 1 H) 2.27 -2.35 (m, 1 H) 2.95 (t, J=7.28 Hz, 2 H) 3.04 (s, 2 H) 3.42 (dd, J=10.14, 6.62 Hz, 1 H) 3.52 - 3.62 (m, 1 H) 3.78 (t, J=9.04 Hz, 2 H) 5.50 (t, J=7.28 Hz, 1 H) 6.47 - 6.51 (m, 1 H) 6.63 (d, J=9.70 Hz, 1 H) 7.40 (d, J=5.95 Hz, 1 H) 7.83 (d, J=9.48 Hz, 1 H) 8.77 (s, 1 H) 9.12 (d, J=6.62 Hz, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 407.2 [(M+H)]+, calculado para C22H26 602: 406.49. 5.6.158. Síntesis de (S) -N- (1- ( 3- (2-metoxifenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) pirrolidin-3-il) -N-metilpirrolidina-l-carboxamida - - Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.42. ½ NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.78 - 1.92 (m, 4 H) 2.13 (dq, J=12.63, 8.76 Hz, 1 H) 2.21 - 2.32 (m, 1 H) 2.81 (s, 3 H) 3.31 - 3.50 (m, 6 H) 3.67 - 3.82 (m, 2 H) 3.89 (s, 3 H) 4.64 (quin, J=7.83 Hz, 1 H) 6.59 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.04 (d, J=8.34 Hz, 1 H) 7.09 (td, J=7.58, 1.01 Hz, 1 H) 7.33 (ddd, J=8.21, 7.45, 1.77 Hz, 1 H) 7.74 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.99 (s, 1 H) 8.30 (dd, J=7.71, 1.64 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/421.0 [ (M + H)+, calculado para C23H28 6O2 420.0] . 5.6.159. Síntesis de (S) -N- (1- (3- (2-metoxipiridin-3-il) imidazo [l,2-b]piridazin-6-il) pirrolidin-3-il ) -N-metilpirrolidina-l-carboxamida Este compuesto se preparó utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 5.6.42. 1H NMR (400 MHz , CLOROFORMO-d) d ppm 1.82 - 1.93 (m, 4 H) 2.12 - 2.25 (m, 1 H) 2.27 - 2.38 (m, 1 H) 2.85 (s, 3 H) 3.35 - 3.46 (m, 5 H) - - 3.47 - 3.56 (m, 1 H) 3.70 - 3.78 (m, 1 H) 3.83 (dd, J=10.36, 8.08 Hz, 1 H) 4.09 (s, 3 H) 4.61 - 4.74 (m, 1 H) 6.70 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.05 (dd, J=7.58, 5.05 Hz, 1 H) 7.92 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 8.12 - 8.20 (m, 2 H) 8.85 (dd, J=7.58, 1.77 Hz, 1 H) ; LRMS (ESI) m/422.0 [ ( + H)+, calculado para C22H27 7O2 421.0] . 5.6.160. Síntesis de (S) -isopropil ( 1- ( 3- ( 5-fluoro-2-metoxifenil ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) pirrolidin-3-il) (metil) carbamato Parte A. [ (S) -1- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -pirrolidin-3-il] -metil-amina El ter-butil éster de ácido [ (S) -1- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -pirrolidin-3-il] -carbámico (1.2 g, 3.1 mmol) se absorbió en 15 mi de DMF y se enfrió a 0°C en un baño de hielo. Se agregó yodometano (342 ul, 5.42 mmol) y se agitó 5 minutos. Después se agregó lentamente hidruro de sodio al 60% en aceite (251 mg, 6.2 mmol). La reacción se agitó 5 minutos a 0°C después se retiró del baño de hielo y - - se agitó 30 minutos a temperatura ambiente. La reacción se templó con hielo después se extrajo con etil acetato 2x. Las fracciones de etil acetato combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio y se filtraron y se redujeron in vacuo. Después se absorbieron en 26 mi de DCM y se agregaron 4 mi de TFA. Se agitó durante 1 hora hasta completar mediante LC/MS. La reacción se lavó con 1N de NaOH, la capa de DCM se retiró, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y se redujo in vacuo para obtener 951 mg del producto crudo llevado a cabo como en la parte B. LRMS (ESI) m/z 296/298 [(M+H)]+, calculado para CnH^BrNs: 296.17.
Parte B. isopropil éster de ácido [ (S) -1- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -pirrolidin-3-il] -metil-carbámico La [ (S) -1- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -pirrolidin-3-il] -metil-amina (951 mg, 3.2 mmol) se absorbió en DCM, y se agregó cloroformato de etilo (459 ul, 4.8 mmol) y trietilamina (895 ul, 6.4 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante 1 hora. La mezcla de reacción se lavó después con agua, después con IN de HC1. La capa de DCM se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se redujo in vacuo para proporcionar el producto - - crudo (1.1 g) que se utilizó como en la parte C. LRMS (ESI) m/z 382/384 [(M+H)]+, calculado para Ci5H2oBrN502 : 382.26.
Parte C. (S) -isopropil ( 1- (3- (5-fluoro-2-metoxifenil) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) pirrolidin-3-il) (metil) carbamato. Isopropil éster de ácido [(S)-l-(3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -pirrolidin-3-il] -metil-carbámico (120 mg, 0.3 mmol) , ácido 5-fluoro-2-metoxi fenil borónico (107 mg, 0.6 mmol), carbonato de potasio (65 mg, 0.45 mmol), y Pd(dppf)Cl2 diclorometano (26 mg, 0.03 mmol) se absorbieron en 2 mi de acetonitrilo y 1 mi de agua y se sometieron a microondas en un tubo sellado a 140°C durante 15 minutos. La reacción se filtró después a través de celita con acetonitrilo y se redujo in vacuo, después se purificó en preparación de fase neutra Shimadzu y las fracciones del producto se liofilizaron para obtener 52 mg de ( S ) -isopropil (1- (3- ( 5-fluoro-2-metoxifenil ) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) pirrolidin-3-il) (metil) carbamato . H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 8.33 - 8.38 (m, 1H) , 7.99 (s, 1H) , 7.91 (d, J = 9.85 Hz, 1H) , 7.13 - 7.18 (m, 2H) , 6.92 (d, J = 9.85 Hz, 1H) , 4.76 -4.86 (m, 2H) , 3.87 (s, 3H) , 3.63 - 3.70 (m, 2H) , 3.36 - 3.50 (m, 2H), 2.80 (s, 3H) , 2.10 - 2.22 (m, 2H) , 1.21 (d, J = 6.32 Hz, 6H) . (ESI) m/z 428 [(M+H)]+, calculado para C22H26F 5O3 : 427.4. 5.6.161. Síntesis de (S) -isopropil ( 1- ( 3- (2-metoxi-5-metilpiridin-3-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) pirrolidin- - - 3-il) (metil) carbamato El isopropil éster de ácido [ (S) -1- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -pirrolidin-3-il ] -metil-carbámico (120 mg, 0.3 mmol) , ácido 2-metoxi-5-metilpiridina-3-borónico (105 mg, 0.6 mmol), carbonato de potasio (65 mg, 0.45 mmol), y Pd(dppf)Cl2 diclorometano (26 mg, 0.03 mmol) se absorbieron en 2 mi de acetonitrilo y 1 mi de agua y se sometieron a microondas en un tubo sellado a 140°C durante 15 minutos. La reacción se filtró después a través de celita con acetonitrilo y se redujo in vacuo, se purificó en preparación de fase neutra Shimadzu y las fracciones del producto se liofilizaron para proporcionar 65 mg de (S)-isopropil (1- (3- (2-metoxi-5-metilpiridin-3-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) pirrolidin-3-il) (metil) carbamato. ¾ NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 8.75 (d, J = 2.02 Hz, 1H) , 7.99 (s, 1H) , 7.94 - 7.97 (m, 1H) , 7.91 (d, J = 9.60 Hz, 1H) , 6.92 (d, J = 9.85 Hz, 1H),4.75 - 4.85 (m, 2H) , 3.95 (s, 3H) , 3.64 - 3.70 (m, 2H) , 3.38 - 3.51 (m, 2H) , 2.81 (s, 3H) , 2.29 (s, 3H) , 2.11 - 2.23 (m, 2H) , 1.21 (d, J = 6.32 Hz, 6H) . (ESI) m/z 425 t(M+H)]+, calculado para C22H28 6O3: 424.5. 5.6.162. Síntesis de isopropil éster de ácido {(S)- - - 1- [3- (1, 6-dimetil-2-oxo-l, 2-dihidro-piridin-3-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il] -pirrolidin-3-il } carbámico Parte A. 3-bromo-l, 6-dimetil-lH-piridin-2-ona El 3-bromo-6-metilpiridin-2-ol (2 g, 10.6 mmol) se absorbió en THF y se agitó. Se agregó hidruro de sodio (60% en aceite 510 mg, 12.7 mmol) en porciones después se agitó 30 minutos. Se agregó bromuro de litio (1.85 g, 21.2 mmol) y se agitó durante 1 hora. Después se agregó yodometano (1.32 mi, 21.2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con DCM y se lavó con 1N de NaOH. La capa de DCM se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se secó in vacuo para proporcionar 1.19 g del producto llevado a la siguiente etapa como estaba. LRMS (ESI) m/z 202/204 [(M+H)]+, calculado para C7H8BrNO: 202.05.
Parte B. ácido 1 , 6-dimetil-lH-piridin-2-ona-3-borónico - - La 3-bromo-l , 6-dimetil-lH-piridin-2-ona (1.19 g, 5.9 mmol) se absorbió en 10 mi de DMF bajo nitrógeno. Se agregó bis (pinacolato) diborano (2.24 g, 8.8 mmol), acetato de potasio (1.73 g, 17.7 mmol), y PD(dppf)Cl2 diclorometano (481 mg, 0.59 mmol), y la mezcla de reacción se calentó a 85°C y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de celita con acetonitrilo . Ésta se redujo in vacuo y se absorbió en 1N de NaOH y se lavó con DCM. Después la capa acuosa se volvió acidica con 1N de HC1 y se extrajo con DCM. La capa de DCM se secó sobre sulfato de magnesio se filtró y se redujo in vacuo para producir 929 mg >90% para uso en la Parte C. LRMS (ESI) m/z 167 [(M+H)]+, calculado para C7Hi0BNO3: 166.97.
Parte C. isopropil éster de ácido { (S) -1- [3- (1, 6-dimetil-2-oxo-l , 2-dihidro-piridin-3-il) -imidazo [1,2-b] piridazin-6-il] -pirrolidin-3-il } -metil-carbámico . El isopropil éster de ácido [ (S) -1- ( 3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -pirrolidin-3-il] -metil-carbámico (120 mg, 0.3 mmol), ácido 1, 6-dimetil-lH-piridin-2-ona-3-borónico (105 mg, 0.6 mmol), carbonato de potasio (65 mg, 0.45 mmol), y Pd(dppf)Cl2 diclorometano (26 mg, 0.3 mmol) se absorbieron en 2 mi de acetonitrilo y 1 mi de agua y se sometieron a - - microondas en un tubo sellado a 140 °C durante 15 minutos. La mezcla de reacción se filtró después a través de celita con acetonitrilo, se redujo in vacuo, y se purificó en preparación de fase neutra Shimadzu y las fracciones del producto se liofilizaron para obtener 43 mg de isopropil éster de ácido { (S) -1- [3- (1, 6-dimetil-2-oxo-l , 2-dihidro-piridin-3-il) -imidazo [1,2-b] piridazin-6-il] -pirrolidin-3-il } -metil-carbámico. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 8.91 (d, J = 7.58 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H) , 7.88 (d, J = 9.60 Hz, 1H) , 6.87 (d, J = 9.85 Hz, 1H), 6.36 (d, J = 8.08 ??,??), 4.77 - 4.88 (m, 2H) , 3.67 (dd, J = 7.58, 10.61 Hz, 2H) , 3.39 - 3.51 (m, 2H) , 3.31 (s, 2H) , 2.82 (s, 3H) , 2.42 (s, 3H) , 2.10 - 2.22 (m, 2H), 1.22(dd, J = 1.89, 6.19 Hz, 6H) . (ESI) m/z 425 [(M+H)]+, calculado para C22H28 6O3: 424.51. 5.6.163. Síntesis de ( S ) -isopropil (1- (3- (2-metoxi- 6-metilpiridin-3-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) pirrolidin-3-il) (metil) carbamato A 80 mg (0.217 mmol) de (S) -isopropil (l-(3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) pirrolidin-3-il) (metil) carbamato en un vial de microondas se agregaron 54 mg (0.326 mmol) de ácido (2-metoxi-6-metilpiridin-3-il) orónico, 92 mg - - (0.435 mmol) de K3P04, 18 mg (0.022 mmol) de PdCl2 (dppf) 2, 3 mi de DME y después 1 mi agua. La mezcla resultante se sometió a microondas a 140 °C durante 0.5 horas. Ésta se diluyó con EtOAc, se lavó con salmuera, y la capa orgánica se secó sobre MgS04. Se concentró y se purificó sobre la HPLC de preparación neutra para obtener 50.6 mg del producto deseado. 1H NMR (400 Hz, CLOROFORMO-d) d ppm 1.30 (d, J=6.32 Hz, 6 H) 2.13 - 2.31 (m, 2 H) 2.53 (s, 3 H) 2.89 (s, 3 H) 3.43 (dd, J=10.61, 7.07 Hz, 1 H) 3.49 - 3.56 (m, 1 H) 3.70 - 3.76 (m, 2 H) 4.06 (s, 3 H) 4.99 (m, 2 H) 6.61 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 6.89 (d, J=7.83 Hz, 1 H) 7.79 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 8.12 (s, 1 H) 8.69 (d, J=7.83 Hz, 1 H) . LRMS (ESI) m/e 425 [ (M + H)+, calculado para C22H28N6O3 424]. 5.6.164. Síntesis de (S) -2-amino-l- (4- (3- (2-metoxipiridin-3-il) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) piperazin-il) -4-metilpentan-l-ona Parte A. (S) -ter-butil (4-metil-l-oxo-l- (piperazin- 1-il ) pentan-2-il) carbamato A 1.00 g de ácido (S)-2-( (ter- - - butoxicarbonil) amino) -4-metilpentanoico se agregaron 750 mg (8.66 mmol) de piperazina, 20 mi de DCM, 1.34 g (6.5 mmol) de DCC y 17.9 ml (12.99 mmol) de TEA. Esto se dejó agitar durante la noche a temperatura ambiente. A la mañana siguiente, se diluyó con más DCM, y se filtró. El filtrado se concentró y se purificó en la ISCO utilizando una columna de 40 gramos y eluyendo con 0-10% de MeOH/DCM para obtener el producto deseado en un rendimiento de 79%.
Parte B. ( S) -ter-butil (1- (4- (imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) piperazin-l-il) -4-metil-l-oxopentan-2-il ) carbamato A 305 mg (2.23 mmol) de 6-fluoroimidazo [1, 2-b] piridazina, se agregó 1.00 g (3.34 mmol) de (S) -ter-butil (4-metil-l-oxo-l- (piperazin-l-il ) pentan-2-il) carbamato, 10 ml de alcohol isopropílico, y 0.93 ml (6.68 mmol) de TEA. Esto se sometió a microondas a 150°C durante 0.5 horas. Se diluyó con EtOAc, se lavó con salmuera, y la capa orgánica se secó sobre MgS04, y después se concentró. Se purificó en la ISCO con una columna de 40 gramos eluyendo con 0-10% de MeOH/DCM para obtener el producto deseado en un rendimiento de 78%.
Parte C. (S) -ter-butil (1- (4- (3-bromoimidazo [1, 2- - - b] piridazin-6-il) piperazin-l-il) -4-metil-l-oxopentan il) carbamato A (S) -ter-butil (l-(4- (imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) piperazin-l-il ) -4-metil-l-oxopentan-2-il ) carbamato disuelto en 5 mi de AcOH se agregó bromo (48 mg, 0.3 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente. Después de 0.25 horas, la reacción se efectuó, y se concentró mediante rotavap y después mediante una bomba de alto vacio para obtener 139 mg (rendimiento 100%) de la sal de ácido mono-acético del producto deseado.
Parte D. (S) -2-amino-l- [4- (3-bromo-pirazolo [1, 5-a] pirimidin-5-il) -piperazin-l-il] -4-metil-pentan-l-ona A 139 mg (0.25 mmol) de la sal de ácido mono-acético de (S) -ter-butil (1- (4- ( 3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperazin-l-il) -4-metil-l-oxopentan-2-il) carbamato en 5 mi de DCM se agregaron 2 mi de TFA, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 - - hora. Ésta se concentró para obtener 100% del producto deseado (como sal de di-TFA) .
Parte E. (S ) -2-amino-l- ( 4- ( 3- (2-metoxipiridin-3-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperazin-l-il) -4-metilpentan-l-ona. A 124 mg (0.20 mmol) de (S) -2-amino-l- (4-( 3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) piperazin-l-il) -4-metilpentan-l-ona (sal de ácido di-TFA) en un vial para microondas se agregaron 51 mg (0.33 mmol) del ácido (2-metoxipiridin-3-il ) borónico, 110 mg (0.80 mmol) de K2C03, 31 mg de PdCl2 (dppf) 2, 3 mi de MeCN y 1.5 mi de agua. Esto se sometió a microondas durante 0.5 horas a 140°C. Después se diluyó con EtOAc, se lavó con salmuera, y la capa orgánica se secó sobre MgS04 y se concentró. Se purificó mediante HPLC de preparación neutra para obtener 51.6 mg (61%) del producto deseado. XH N R (400 MHz, METANOL-d4 ) d ppm 0.98 - 1.10 (m, 6 H) 1.60 - 1.84 (m, 3 H) 3.48 - 3.60 (m, 2 H) 3.62 - 3.81 (m, 5 H) 3.94 - 4.02 (m, 1 H) 4.05 (s, 3 H) 4.48 (dd, J=9.47, 4.17 Hz, 1 H) 7.13 (dd, J=7.45, 4.93 Hz, 1 H) 7.27 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 7.88 (d, J=9.85 Hz, 1 H) 8.01 (s, 1 H) 8.17 (dd, J=5.05, 1.77 Hz, 1 H) 8.51 (s, 2 H) 8.66 (dd, J=7.58, 1.77 Hz, 1 H) . 5.6.165. Síntesis de metil 1- (3- (2-metoxipiridin-3-il) imidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -lH-pirazol-4-carboxilato - - Parte -hidrazinilimidazo [1,2-b] piridazina Una suspensión de 3-bromo-6-fluoroimidazo [1, 2-b] piridazina (2.16 g, 10 mmol) en monohidrato de hidrazina (10 mi) se calentó a 70°C durante 30 minutos. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, y el compuesto del titulo (1.78 g) se recolectó mediante filtración. ?? NMR (400 MHz, DMSO-de) d ppm 4.27 (br. s., 2 H) 6.78 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 7.51 (s, 1 H) 7.73 (dd, J=9.60, 1.52 Hz, 1 H) 8.20 (br. s., 1 Parte B. metil 1- (3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il) -lH-pirazol-4-carboxilato Una mezcla de 3-bromo-6-hidrazinilimidazo [1, 2 b] piridazina (866 mg, 3.8 mmol) y metil 2-formil-3 oxopropanoato (500 mg, 3.8 mmol) en EtOH (20 mi) se calentó 70°C durante la noche. La mezcla se concentró y se trató co - - MeOH. El compuesto del título (410 mg) se recolectó mediante filtración. XH NMR (400 Hz, CLOROFORMO-d) d ppm 3.94 (s, 3 H) 7.84 (s, 1 H) 8.01 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 8.11 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 8.19 (s, 1 H) 9.09 (s, 1 H) .
Parte C. metil 1- ( 3- (2-metoxipiridin-3-il ) imidazo [ 1 , 2-b] piridazin-6-il ) -lH-pirazol-4-carboxilato . El compuesto del título se obtuvo utilizando condiciones típicas de acoplamiento Suzuki con metil l-(3-bromoimidazo [1, 2-b] piridazin-6-il ) -lH-pirazol-4-carboxilato y un ácido borónico apropiado. XH NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d) d ppm 3.92 (s, 3 H) 4.08 (s, 3 H) 7.15 (dd, J=7.58, 5.05 Hz, 1 H) 7.98 (d, J=9.60 Hz, 1 H) 8.14 - 8.21 (m, 2 H) 8.26 -8.33 (m, 2 H) 8.46 (dd, J=7.58, 2.02 Hz, 1 H) 8.83 (s, 1 H) . LRMS (ESI) m/z 351.0 [(M+H)]+, calculado para C22H29 7O2: 350.33. 5.6.166. Síntesis de macrociclo Parte A. 2- (3-bromo-fenoxi) -etanol Se agregó 2-bromoetanol [540-51-2] (5.8 mi, 78.9 - - mmol) a una suspensión agitada a temperatura ambiente de 3-bromofenol [591-20-8] (9.0 g, 52.3 mmol) y carbonato de potasio [584-08-7] (36.2 g, 262.1 mmol) en acetona (260 mi) contenido en un matraz de fondo redondo de 500 mi. El matraz de reacción se adaptó con un condensador de reflujo y se calentó a reflujo durante la noche, se enfrió, se filtró y se evaporó para obtener 11.7 g de un aceite café claro. La cromatografía instantánea (gel de sílice, eluido con 50% (v/v) de etil acetato/heptano) proporcionó 4.5 g de 2- (3-bromo-fenoxi ) -etanol como un aceite amarillo claro. LRMS (ESI) m/z 217.0/219.0 [(M+H)]+, calculado para C8H902Br: 217.06.
Parte B. NI- (2- ( 3-bromofenoxi ) etil) etano-1, 2-diamina A una solución magnéticamente agitada a temperatura ambiente de 2- ( 3-bromo-fenoxi) -etanol (3.6 g, 16.7 mmol) y N-metilmorfolina [109-02-4] (2.2 mi, 20.0 mmol) en etil acetato (200 mi) se agregó cloruro de metanosulfonilo [124-63-0] (1.3 mi, 16.8 mmol). La reacción se agitó durante la noche después se lavó con salmuera y el extracto de etil acetato separado en fases se secó (MgS04) y se agregó a una solución - - agitada a temperatura ambiente de etilenodiamina [107-15-3] (33.3 mi, 497.0 mmol) en etil acetato (300 mi) desde un embudo de adición de ecualizacion de presión durante el curso de 15 minutos. El embudo de adición se remplazó con un condensador y la reacción se sometió a reflujo durante 4 horas después se enfrió y se lavó con salmuera. La fase de etil acetato se secó (CaS04) y se evaporó para obtener NI- (2- ( 3-bromofenoxi ) etil ) etano-1 , 2-diamina como 4.7 g de un liquido amarillo claro. LRMS (ESI) m/z 259.1/261.1 [(M+H)]+, calculado para Ci0Hi5BrN2O: 259.15.
Parte C. N- { 2- [2- ( 3-bromo-fenoxi ) -etilamino] -etil } - 2, 2, 2-trifluoro-acetamida A una solución agitada a 0°C de NI- (2- (3- bromofenoxi) etil) etano-1, 2-diamina (4.7 g, 17.9 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (180 mi) se agregó trifluoroacetato de etilo [383-63-1] (2.1 mi, 17.9 mmol). La solución resultante se dejó agitar bajo un manto de N2 durante 15 minutos después se evaporó hasta secar para obtener N-{2-[2- ( 3-bromo-fenoxi) -etilamino] -etil } -2 , 2, 2-trifluoro-acetamida como 6.3 g de un sólido amarillo. LRMS (ESI) m/z 355.1/357.1 - - [( +H)]+, calculado para Ci2Hi4BrF3 202 : 355.16.
Parte D. ter-butil éster de ácido [2- (3-bromo-fenoxi) -etil] - [2- (2,2, 2-trifluoro-acetilamino) -etil] -carbámico Se agregó di-t-butil pirocarbonato [24424-99-5] (4.7 g, 21.44 mmol) a una solución a temperatura ambiente de N-{2- [2- (3-bromo-fenoxi) -etilamino] -etil}-2, 2 , 2-trifluoro-acetamida (6.3 g, 17.6 mmol) y base de Hunig [7087-68-5] (3.1 mi, 17.8 mmol) en etil acetato (150 mi) y se dejó agitar bajo un manto de N2 durante 1 hora después se lavó con salmuera, se secó (CaS04) , se evaporó, y se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice, eluido con 30% (v/v) de etil acetato/heptano) para proporcionar 5.5 g de ter-butil éster de ácido [2- (3-bromo-fenoxi) -etil] - [2- (2, 2, 2-trifluoro-acetilamino) -etil] -carbámico como un aceite transparente incoloro. LRMS (ESI) m/z 399.1/401.1 [ (M -ter-bu +H)]+, calculado para Ci7H22BrF3N204: 455.28.
Parte E. ter-butil éster de ácido (2-amino-etil ) -[2- (3-bromo-fenoxi) -etil] -carbámico - - Se agregó carbonato de potasio [584-08-7] (35.8 g, 259.2 mmol) a una solución de ter-butil éster de ácido [2- (3-bromo-fenoxi ) -etil] - [2- (2, 2, 2-trifluoro-acetilamino) -etil] -carbámico (4.7 g, 10.3 mmol) en 10% (v/v) de metanol acuoso (200 mi) y se agitó a 50°C durante 5 horas. La mezcla de reacción se filtró, el filtrado se evaporó hasta secar, disuelto en etil acetato, se lavó con salmuera, se secó (CaS04) y se evaporó para producir 3.8 g de ter-butil éster de ácido (2-amino-etil) - [2- (3-bromo-fenoxi) -etil] -carbámico como un aceite amarillo claro. LRMS (ESI) m/z 359.1/361.1 [(M+H)]+, calculado para Cis^BrNzC : 359.27.
Parte F. ter-butil éster de ácido [2- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] - [2- (3-bromo-fenoxi) -etil] -carbámico Una mezcla agitada de 3-bromo-6-fluoro-imidazo [1, 2-b]piridazina (1.9 g, 9.0 mmol), ter-butil éster de ácido (2- - - amino-etil) - [2- (3-bromo-fenoxi) -etil] -carbámico (3.8 g, 10.6 itunol), y base de Hunig [7087-68-5] (3.1 mi, 17.8 mmol) en 2-propanol (45 mi) se calentó a 65°C, bajo un manto de N2, durante 17 horas. La solución de reacción enfriada se dividió entre salmuera y etil acetato. El extracto se secó (CaS04) y se evaporó para proporcionar 5.1 g de un aceite café. Este aceite se sometió a cromatografía instantánea (gel de sílice, eluido con 100% etil acetato) , después el producto se cristalizó (etil acetato/heptano) para proporcionar ter-butil éster de ácido [2- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ylamino) -etil] - [2- ( 3-bromo-fenoxi ) -etil] -carbámico como 2.7 g de un polvo fino blanco cristalino, mp. 134-135°C. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.27 (br. s., 5 H) 1.33 (br. s., 4 H) 2.51 (s, 1 H) 3.41 -3.52 (m, 3 H) 3.55 (br. s., 1 H) 3.63 (br. s., 2 H) 4.14 (br. s., 2 H) 6.69 (d, J=9.35 Hz, 1 H) 6.94 (dd, J=8.21, 2.15 Hz, 1 H) 7.08 - 7.29 (m, 4 H) 7.48 (s, 1 H) 7.70 (d, J=9.60 Hz, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6) d ppm 27.85, 45.46, 45.77, 46.28, 66.04, 78.72, 99.00, 112.79, 113.89, 117.34, 122.05, 123.50, 125.47, 130.35, 131.10, 136.55, 153.98, 154.76, 159.27. LRMS (ESI) m/z 554.1/556.1/558.1 [ (M+H) ] +, calculado para C2iH25Br2 503: 555.27.
Parte G. Macrociclo. A una mezcla de ter-butil éster de ácido [2- (3-bromo-imidazo [1, 2-b] piridazin-6-ilamino) -etil] - [2- (3-bromo-fenoxi) -etil] -carbámico (818.1 mg, - - 1.47 mmol), bis (pinacolato) diboro [73183-34-3] (1.9 g, 7.4 mmol) , monohidrato tribásico de fosfato de potasio [27176-10-9] (1.7 g, 7.3 mmol), y [ 1, 1 ' -bis (difenilfosfino) -ferroceno] dicloropaladio (II) , complejado con diclorometano [95464-05-4] (241.2 mg, 0.3 mmol) contenida en un matraz de fondo redondo de 250 mi se agregó una solución de 30% (v/v) de agua en 1 , 2-dimetoxietano (125 mi) y una barra de agitación magnética. El recipiente de reacción se adaptó a un condensador de reflujo, se bajó a un baño de aceite a temperatura ambiente, y el sistema se llevó a través de 10 ciclos de evacuación/manto de N2 mientras se agitaba rápidamente. La reacción rápidamente agitada, cubierta por N2, se calentó a una temperatura de baño de aceite de 85°C durante 17 horas después se enfrió y se dividió entre salmuera (pH ajustado a 10 con 3N de hidróxido de sodio acuoso) y etil acetato. El extracto separado en fases se secó (CaS04) y se evaporó para proporcionar un aceite café que se purificó mediante RP-HPLC de preparación. Las fracciones de cromatografía se combinaron, se extrajeron con etil acetato, se secaron (CaS04) , y se diluyeron con heptano para precipitar el producto de macrociclo como 39.4 mg de un polvo blanco, mp. 244-245°C (dec.) . ?? NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.45 (s, 8 H) 3.37 (br. s., 2 H) 3.49 - 3.67 (m, 4 H) 4.22 - 4.35 (m, 2 H) 6.68 (dd, J=9.60, 6.82 Hz, 1 H) 6.79 -6.85 (m, 1 H) 7.30 - 7.48 (m, 3 H) 7.78 (d, J=9.60 Hz, 1 H) - - 7.92 (d, J=3.03 Hz, 1 H) 8.45 - 8.61 (m, 1 H) . 13C NMR (100 MHz, D SO-d6) d ppm 27.96, 27.99, 38.49, 61.97, 79.22, 79.26, 108.11, 108.21, 111.93, 115.57, 117.89, 118.03, 126.01, 126.32, 129.84, 130.08, 130.51, 137.29, 152.90, 154.53, 156.75. LRMS (ESI) m/z 396.0 [ (M +H)]+, calculado para C21H25 5O3: 395.47. HR S (MS/MS) m/z 396.2021 [ (M + H)]+, calculado para C21H26 5O3: 396.2036. 5.6.167. Análisis de placa de filtro P81 Los compuestos se diluyeron de manera serial en una placa Labcyte LDV (Labcyte, cat# LP-0200) utilizando una Mutiprobe ( PerkinElmer) y Biomek FX (Beckman Coulter) de manera que la más alta concentración el compuesto fue de 96 µ?. Después los compuestos se pusieron en contacto (75 nL por pozo) con una placa de reacción Greiner de 384-pozos (Greiner, # 781076) utilizando un manipulador de líquidos ECHO 550 (Labcyte) . Un total de 12 µ? del amortiguador de reacción (amortiguador IMAP conteniendo Tween y DTT, de Molecular Devices) se agregó después a cada pozo de las columnas 1 y 13 para los controles negativos y se agregaron 12 µ? de 2X AAK1 (0.2 nM de proteína humana de longitud total, no. de acceso NCBI NP_055726.2) a los pozos restantes. Después la enzima se pre-incubó con el compuesto durante 10 minutos a temperatura ambiente. Las reacciones se iniciaron a la adición al Minitrak (PerkinElmer) de 12 µ? de la mezcla del sustrato conteniendo 2 X Mu2 (0.2 µ?, proteína humana de - - longitud total), 2 x ATP frío (2 µ?) , y 1.3 \iCi de 33P-ATP caliente. Las reacciones procedieron durante una hora a temperatura ambiente. Mientras tanto, se colocaron placas de filtro Millipore de 384-pozos P81 ( illipore, catálogo # MZPHN0W10) sobre un lavador de placas (Zoom Z , de Titertek) y se pre-humedecieron con 50 µ? de ácido fosfórico al 1%. Después se detuvieron las reacciones de cinasa a la adición de 24 µ? de ácido fosfórico al 2% a cada pozo y después se utilizó el Minitrak para transferir 40 µ? de cada pozo a las placas de filtro Millipore de 384-pozos P81 pre-humedecidas . Las mezclas de reacción se incubaron durante 10 minutos a temperatura ambiente en las placas P81, seguido por lavado cinco veces con 100 µ?/???? de ácido fosfórico al 1% utilizando el lavador de filtro Zoom. El fondo de cada placa de filtro se selló seguido por la adición de 20 µ? de Microscint 40 a cada pozo, el sellado de la parte superior de las placas con una cubierta Flashplate, y después la espera de una hora hasta la lectura en el TopCount ( PerkinElmer) . 5.6.168. Análisis a base de células HEK281 Se cultivaron células HEK293F en medio conteniendo DMEM (Gibco, cat. #11965), FBS al 10% (SAFC Biosciences, cat . #12103C) , IX GPS (glutamina, penicilina y estreptomicina) . En el día uno, las células se colocaron en placas en un plato de 10 cm de manera que fueran ~80% confluentes al momento de la transfección . Aproximadamente 12 millones de células se - - encontraban en el plato de 10 cm al momento de la transfección. En el día dos, cada plato se transfectó con 48 ug de ADN y 144 ul de lipofectamina 2000 (Invitrogen, cat. # 11668-019) . El ADN se comprendió de una mezcla (por plato de 10 cm) conteniendo 3 ug de AAKl/HA/pIRES (humano de longitud total, no. de acceso NCBI NP_055726.2 ) , 45 g de Flag/AP2MI/pcDNA (humano de longitud total), y 1.5 mi de OPTI-MEM. La lipofectamina 2000 se conforma de una mezcla (por plato de 10 cm) conteniendo 144 µ? de lipofectamina 2000 y 1.5 mi de OPTI-MEM. Cada mezcla se transfirió a tubos individuales de 15 mi y se incubó a temperatura ambiente durante 5 minutos, y después las dos mezclas se combinaron y se incubaron a temperatura ambiente durante 20 minutos. Después se aspiró el medio de crecimiento de cada placa de 10 cm y se remplazó con 10 mi de DMEM+10% FBS (sin GPS) . Finalmente, se agregaron 3 mi de mezcla de ADN/lipofectamina a cada plato de 10 cm y se mezcló suavemente seguido por la incubación de la placa durante la noche a 37 °C y 5% de C02.
En el día tres, los compuestos se diluyeron en 100% de DMSO a una concentración final de 1000 X, seguido por diluciones en serie de 3 veces para un total de 5 concentraciones probadas. Se probaron cuatro compuestos por plato de 10 cm. Un ul de cada dilución de compuesto se pipeteó después en una placa de 96 pozos de pozo profundo seguido por la adición de 500 µ? de DMEM + 0.5% de FBS en - - cada pozo para una concentración final de 2X de cada compuesto. Las células se re-suspendieron en un plato de 10 cm mediante simple pipeteado (las células HEK293 salen de la placa con esa facilidad en este punto) y después se transfirieron a un tubo cónico de 50 mi y se granularon mediante centrifugación a 1000 rpm durante 5 minutos. Los gránulos celulares se re-suspendieron después en 2.75 mi de DMEM + 0.5% de FBS por plato de 10 cm y 100 µ? de la suspensión celular se transfirieron a cada pozo de la placa de TC de 96 pozos. Finalmente, se agregaron después 100 µ? del compuesto 2X diluido en DMEM + 0.5% de FBS a los pozos conteniendo la suspensión celular para una concentración final de IX. Las placas se incubaron después a 37°C y 5% de C02 durante 3 horas seguido por la transferencia de las suspensiones celulares de cada pozo en cintas de PCR de 12 tubos. Las cintas de PCR se hicieron girar en un rack inclinado a 1000 rpm durante 5 minutos para granular las células y después se retiró el medio pipeteando sin perturbar el gránulo celular.
Para preparar para el inmunoanális Western, los gránulos celulares se re-suspendieron en 40 ul IX de amortiguador de muestra LDS-PAGE (Invitrogen, cat.# NP0008) + 2X de cóctel de fosfatasa Halt e inhibidor de proteasa (Thermo Scientific, cat . #1861284), seguido por sonicación de cada uno con el equipo de sonicador de micro-punta a 5 - - durante 8 a 10 segundos. Cinco ul de 10X del agente de reducción de muestra NuPage (con 50 mM de DTT) fueron para cada muestra seguido por la desnaturalización por calor a 70°C durante 10 min en una máquina de PCR. Un total de 10 µ? por muestra se cargaron en cada campo de un gel de 4 a 20% de Tris-Glycine Criterion de 26-pozos (Biorad, cat . # 345-0034) para el inmunoanálisis de fosfo-mu2 y 10 µ? por campo en un gel de 4 a 12% de Bis-Tris (amortiguador +MES) NuPAGE de 26-pozos (Invitrogen, cat. # WG1403BX10) para el inmunoanálisis de mu2. Para los controles, 2 ng de phospho-mu2 o 20 ng de proteínas mu2/Flag se cargaron en el último pozo de cada gel. Después de SDS-PAGE, las muestras en cada gel se transfirieron a una membrana PVDF utilizando un iBlot y las membranas se bloquearon durante una hora en TBST + 5% de leche, seguido por lavado 3X durante 5 a 10 minutos con TBST. Los geles Criterion se sondearon con anti-fosfo-mu2 de conejo (1:5000; un anticuerpo policlonal de conejo producido por New England Peptide y afinidad purificada en Lexicón) en TBST + 5% de BSA, mientras, los geles NuPAGE se sondearon con anti-Flag de ratón (1:500; Sigma, cat. # F1804) en TBST + 5% de leche, y estos anticuerpos primarios se incubaron durante la noche a 4°C en un balancín.
En el día cuatro, los inmunoanálisis Western se lavaron 3X durante 5 a 10 minutos con TBST, se sondearon con anti-conejo-HRP (1:2000; BioRad, cat. # 170-6515) o anti- - - ratón-HRP (1:2000; Biorad, cat. # 170-6516) en TBST + 5% de leche durante 1 hora a temperatura ambiente, se lavaron 3X durante 10 minutos con TBST, y se desarrollaron con reactivo ECL (GE Healthcare, cat. # RPN2132) en un Versadoc. Finalmente, la cámara se ajustó para tomar una fotografía cada 30 segundos durante 10 minutos y se guardó la mejor imagen para cada inmunoanálisis sin señal saturada (cuando la señal se satura, las bandas se destacarán en rojo) . Se llevó a cabo un análisis de volumen en cada banda para obtener los valores de densidad. La inhibición porcentual se calculó para cada muestra normalizando primeramente a los niveles de expresión Mu2 totales y después comparándolos con 0% y 100% de los controles. Los valores IC50 se calcularon después utilizando el software de ajuste Excel. 5.6.169. Datos In Vitro Los datos in vitro obtenidos para los diversos compuestos de la invención se proporcionan más adelante en la Tabla 1, en donde "MW" significa peso molecular, "análisis P81" se refiere al análisis de placa de filtro P81 descrito anteriormente, "CBA" se refiere al análisis a base de células HEK281 descrito anteriormente, significa que no se obtuvieron resultados para el análisis dado, significa menor que o igual a 1.0 µ?, "**" significa un valor de menos de o igual a 0.1 µ , y significa menor que o igual a 0.01 µ .
- - Tabla 1 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 5.6.170. Efectos Farmacológicos Estudios de ratones knockout AA l mostraron que el rompimiento del gen de AAKl afecta la respuesta al dolor medida utilizando la prueba de formalina en para. Ver ejemplo 5.6.1. anterior. La misma prueba se utilizó para confirmar que la administración de un inhibidor de AAKl también puede afectar la respuesta al dolor.
Los ratones fueron probados por nocicepción con - - analizadores de nocicepción automáticos (adquiridos del Ozaki lab en la Universidad de California, San Diego) . Una banda metálica se colocó alrededor de la pata trasera izquierda de cada ratón con superglue 30 minutos antes de la prueba. Después del periodo de aclimatación de 30 minutos, se inyectaron 20 µ? de formalina al 5% de manera subcutánea en la superficie dorsal de la pata trasera izquierda. Se alojó a los ratones individualmente en cámaras cilindricas durante 45 minutos. Se preparó formalina al 5% fresca diluyendo formaldehido ( Formaldehido-fresco 20%, Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) con agua destilada. Se administraron los compuestos de investigación 30 minutos antes de la inyección de formalina.
Un software de computadora registró los reflejos de dolor por minuto, el total de los reflejos de dolor para la fase I (fase aguda = primeros 8 minutos) y el total de los reflejos de dolor para la fase II (fase tónica entre los minutos 20 y 40) a través de un campo electromagnético. Ver Yaksh TL, Ozaki G. , cCumber D, Rathbun M, Svensson C, alkmus S., Yaksh MC. An automated flinch detecting system for use in the formalin nociceptive bioassay (Un sistema automatizado de detección del reflejo del dolor para uso en el bioanálisis nociceptivo de formalina) J. Appl. Physiol. 2001, 90:2386-402.
Varios compuestos de la invención se probaron a - - diferentes dosis. Se utilizó gabapentina y pregabalina como controles positivos. Los resultados se muestran más adelante en la Tabla 2, en donde significa un efecto igual a o mayor que 50 por ciento del de gabapentina a 200 mpk, "**" significa un efecto igual a o mayor que 100 por ciento del de gabapentina a 200 mpk, "se" significa administración subcutánea, "ip" significa administración intraperitoneal, y "po" significa administración oral.
Tabla 2 - - Estos resultados demuestran que los inhibidores de AAKl pueden utilizarse para tratar el dolor.
Todas las publicaciones (e.g., patentes y solicitudes de patente) citadas anteriormente se incorporan en la presente mediante la referencia en su totalidad.

Claims (66)

REIVINDICACIONES
1. Un método para inhibir la actividad de cinasa 1 asociada al adaptador (AAK1) , que comprende poner en contacto la AAK1 con un compuesto de la fórmula: o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde: Ri es RÍA O hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más RiA; cada RÍA es independientemente ORiC, -N(RiC)2/ C(0)Rlc, C(0)0Ric, -C (0) N (RiC) 2, N (RiC) C (0) ORic, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más RiB; cada RIB es independientemente ORic, _N(RiC)2, C(0)Rlc, -C(0)0Ric, -C(0)N(Ric)2, -N (Ríe) C (0) ORic, ciano o halo; cada Ríe es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; R2 es - R2AR2BÍ en donde R2A es hidrógeno y R2B es hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más R2o" o Í A y 2B se toman juntos para formar un heterociclo de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido con uno o más R2C; cada R2C es independientemente -OR2D, -N(R2D)2, C(0)R2D, -C(0)0R2D, -C(0)N(R2D)2, -N (R2D) C (0) 0R2D, ciano, halo o hidrocarbilo i-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, hidroxilo o R2D; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de amino, ciano, halo o hidroxilo; y R3 es hidrógeno o alquilo Ci_6 opcionalmente sustituido con uno o más de ciano, halo o hidroxilo.
2. Un método para tratar o manejar una enfermedad o trastorno mediado por la actividad de AAK1, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula: o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde : Ri es RÍA O hidrocarbilo Ci-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más RiA; cada Ri¾ es independientemente ORic, -N(RiC)2, C(0)R1C, C(0)ORlc, -C(0)N(Ric)2, N (RiC) C (0) 0R1C, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más RIB; cada RIB es independientemente 0Ric, -N(RiC)2, C(0)Ric, -C(0)0Ric, -C(0)N(Ric)2 -N (Ríe) C (0) 0R1C, ciano o halo; cada Ríe es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; R2 es - R2A 2B, en donde R2A es hidrógeno y R2B es hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más R2C; o R2 y R2B se toman juntos para formar un heterociclo de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido con uno o más R2c cada R2C es independientemente -0R2D, _N(R2D)2, C(0)R2D, -C(0)0R2D, -C(0)N(R2D)2, -N (R2D) C (0) 0R2D, ciano, halo o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, hidroxilo o I¾D; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo Ci_i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de amino, ciano, halo o hidroxilo; y R3 es hidrógeno o alguilo Ci_6 opcionalmente sustituido con uno o más de ciano, halo o hidroxilo.
3. El método de la reivindicación 2, en donde la enfermedad o trastorno es enfermedad de Alzheimer, trastorno bipolar, dolor, enfermedad de Parkinson, o esquizofrenia.
4. El método de la reivindicación 3, en donde el dolor es dolor neuropático.
5. El método de la reivindicación 4, en donde el dolor neuropático es fibromialgia o neuropatía periférica (e.g., neuropatía diabética).
6. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde Ri es Ri¾.
7. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde Ri es hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido.
8. El método de la reivindicación 7, en donde Ri es fenilo opcionalmente sustituido.
9. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde Ri es heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido (e.g., heterocarbilo de 2 a 8 miembros, heterocarbilo de 2 a 6 miembros, heterocarbilo de 2 a 6 miembros) .
10. El método de la reivindicación 9 , en donde Ri es piridinilo, tiofeno, o imidazol opcionalmente sustituido.
11. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde RiA es halo.
12. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde RiA es -ORiC, -N(R1C)2, -C(0)Rlc, -C(0)0Rlc, o -C(0)N(Rlc)2.
13. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde RiA es -ORiC-
14. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde RiB es -N(RiC)2, -0RiC, o halo.
15. El método de la reivindicación 1 o 2, en donde 2A y 1¾B se toman juntos para formar un heterociclo de 4 a 7 miembros opcionalmente sustituido con uno o más R20
16. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde RiC es hidrógeno.
17. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde Ric es hidrocarbilo Ci-12 (e.g., hidrocarbilo C1-6, hidrocarbilo C1-4 tal como metilo, etilo, propilo) .
18. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde R2C es -C(0)OR2D, C(0)N (R2D)2, o -N (R2D)C(0)OR2D.
19. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde R2C es -C(0) R2D.
20. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde R2D es hidrógeno.
21. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde R2D es hidrocarbilo Ci_ 12 (e.g., hidrocarbilo Ci_6, hidrocarbilo Ci-4 tal como metilo, etilo, propilo) .
22. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde R2D es heterocarbilo de 2 a 12 miembros que comprende al menos un átomo de nitrógeno.
23. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde al menos un R2D es hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de amino, ciano, halo, o hidroxilo.
24. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde R2D es heterocarbilo de 2 a 12 miembros que comprende al menos un átomo de nitrógeno.
25. El método de cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde R3 es hidrógeno.
26. El método de la reivindicación 1 o 2, en donde el compuesto es de la fórmula: o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en donde: A es hidrocarbilo cíclico C1-12 o heterociclo de 4 a 7 miembros; D es heterociclo de 4 a 7 miembros; cada RÍA es independientemente -ORiC, _ (Ric)2^ C(0)Ric, -C(0)ORlc, -C(0)N(RLC)2, -N (RLC) C (0) 0R1C, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más RiB cada RIB es independientemente -0RiC, - (RiC)2 C(0)Ric, -C(0)0Ric, -C(0)N(Ric)2, -N (Ríe) C (0) 0RiC, ciano o hale- cada Ríe es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo Ci_i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; cada R2C es independientemente -0R2D, - (R2D)2Í C(0)R2D, -C(0)0R2D, -C(0)N(R2D)2, -N(R2D)C(0)OR2D, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de amino, ciano, halo, hidroxilo, o R2D cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo Ci_i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, o hidroxilo; n es de 1 a 3; y m es de 0 a 3.
27. El método de la reivindicación 26, con la salvedad de que R2C no sea hidroxilo o fenilo o piridinilo opcionalmente sustituido.
28. El método de la reivindicación 26, con la salvedad de que cuando D es diazepina y A es piridinilo, R2C no sea -C (0) O-ter-butilo .
29. El método de la reivindicación 26, con la salvedad de que cuando D es piperazina, A es fenilo y Ri¾ es cloro, R2c no sea -C (0) O-ter-butilo .
30. El método de la reivindicación 26, con la salvedad de que cuando D es piperidinilo, A es piridinilo y RÍA es cloro, R2c no sea -NHC (0) O-ter-butilo .
31. El método de la reivindicación 26, con la salvedad de que cuando D es piperidinilo, A es piridinilo y RÍA es -NHCH2CH2CH (CH3) 2, R2C no sea NH2.
32. El método de la reivindicación 26, con la salvedad de que m sea 1.
33. El método de la reivindicación 26, con la salvedad de que m sea 2.
34. Un compuesto de la fórmula: o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde : A es hidrocarbilo cíclico Ci_i2 o heterociclo de 4 a 7 miembros; D es heterociclo de 4 a 7 miembros; cada RÍA es independientemente -ORic, - (RiC)2 C(0)Ric, -C(0)ORic, -C(0)N(Ric)2, -N (Ríe) C (0) 0RiC, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más R1B; cada RIB es independientemente -0RiC, _N(RiC)2f C(0)Ric, -C(0)0Ric, -C(0)N(Rlc)2, -N (Ríe) C (0) ORic, ciano o halo; cada Ríe es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; cada R2c es independientemente -OR2Dr _ (R2D)2Í C(0)R2D, -C(0)0R2D, -C (0)N (R2D) 2, -N (R2D) C (0) 0R2D, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, hidroxilo, o R2D cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de amino, ciano, halo, o hidroxilo; n es de 1 a 3; y m es de 0 a 3. Con la salvedad de que: 1) R2C no sea hidroxilo o fenilo o piridinilo opcionalmente sustituido; 2) cuando D es diazepina y A es piridinilo, R2C no sea -C (0) O-ter-butilo; 3) cuando D es piperazina, A es fenilo y Ri¾ es cloro, R2c no sea -C (0) O-ter-butilo; 4) cuando D es piperidinilo, A es piridinilo y R1A es cloro, R2C no sea -NHC (O) O-ter-butilo; y 5) cuando D es piperidinilo, A es piridinilo y RiA es -NHCH2CH2CH (CH3) 2, R2C no sea NH2.
35. El compuesto de la reivindicación 34, en donde D es piperazina o pirrolidina.
36. El compuesto de la reivindicación 34, en donde n es 1.
37. El compuesto de la reivindicación 34, en donde m es 1.
38. El compuesto de la reivindicación 34, en donde m es 2.
39. El compuesto de la reivindicación 34, en donde A es piridinilo, tiofeno, o imidazol.
40. El compuesto de la reivindicación 34, que es de la fórmula: en donde X es CH o N.
41. El compuesto de la reivindicación 40, en donde X es y m es l o 2.
42. Un compuesto de la fórmula: o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde : X es CH o N; cada RiA es independientemente -ORic, - (RiC)2^ C(0)Ric, -C(0)ORic, -C(0)N(Ric)2, -N (RiC) C (O) ORiC, ciano, halo, o hidrocarbilo Ci_i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más RiB; cada RIB es independientemente -ORiC, -N(RiC)2, C(0)Ric, -C(0)ORic, -C(0)N(Ric)2/ -N (Ríe) C (O) ORiC, ciano o halo; cada Ríe es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; cada R2C es independientemente -OR2D, -N(R2D)2, C(0)R2D, -C(0)OR2D, -C (O)N (R2D) 2, -N (R2D) C (O) OR2D, ciano, halo, o hidrocarbilo Ci-i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, hidroxilo, o R2D; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo Ci-i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, o hidroxilo; y m es de 0 a 3.
43. El compuesto de la reivindicación 42, con la salvedad de que R2C no sea fenilo o piridinilo opcionalmente sustituido.
44. El compuesto de la reivindicación 42, que es de la fórmula:
45. El compuesto de la reivindicación 44, que es de la fórmula:
46. El compuesto de la reivindicación 45, que es de la fórmula:
47. El compuesto de la reivindicación 45, que es de la fórmula: compuesto de la fórmula o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde:
X es CH o N; cada RÍA es independientemente -ORic, ~ (RiC)2/ C(0)Ric, -C(0)ORic, -C(0)N(RLC)2, -N ( Rlc) C (0) 0R1C, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más RiB; cada RIB es independientemente -0RiC, -N(RiC)2 C(0)Ric, -C(0)0Ric, -C(0)N(Ric)2, -N (Ríe) C (0) 0R1C, ciano o halo; cada Ríe es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de ciano, halo o hidroxilo; cada R2C es independientemente -OR2D , ~ ( R2D ) 2 Í C(0)R2D, -C(0)OR2D, -C(0)N( R2D ) 2 , -N (R2D) C (0) 0R2D, ciano, halo, o hidrocarbilo C1-12 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, hidroxilo, o R2D ; cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo Ci_i2 o heterocarbilo de 2 a 12 miembros opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más amino, ciano, halo, o hidroxilo; y m es de 0 a 3; con la salvedad de que cuando X es CH, m es 1 y RiA es cloro, R2D no sea t-butilo.
49. el compuesto de la reivindicación 48, con la salvedad adicional de que R2C no sea fenilo o piridinilo opcionalmente sustituido.
50. El compuesto de la reivindicación 48, que es de la fórmula:
51. El compuesto de la reivindicación 50, que es de la fórmula:
52. El compuesto de la reivindicación 50, que es de la fórmula:
53. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 28 a 52, en donde al menos un Ri¾ es halo.
54. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 28 a 52, en donde al menos un RiA es -ORiC .
55. El compuesto de la reivindicación 54, en donde Ríe es hidrocarbilo C1-12 opcionalmente sustituido (e.g., hidrocarbilo C1-6, hidrocarbilo C1-4) .
56. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 28 a 52, en donde R2C es -C(0)0R2D/ C(0) N ( R2D)2, o -N ( R2D ) C(0) OR2D .
57. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 28 a 52, en donde R2c es -C(0) R2D .
58. El compuesto de la reivindicación 56 o 57, en donde cada R2D es independientemente hidrógeno o hidrocarbilo C1-12 (e.g., hidrocarbilo Ci-6, hidrocarbilo C1-4) ·
59. El compuesto de la reivindicación 56 o 57, en donde al menos un R2D es hidrocarbilo i-i2 opcionalmente sustituido, cuya sustitución opcional es con uno o más de amino, ciano, halo o hidroxilo.
60. El compuesto de la reivindicación 56 o 57, en donde R2D es heterocarbilo de 2 a 12 miembros que comprende al menos un átomo de nitrógeno.
61. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 28 a 60 y un excipiente o diluyente farmacéuticamente aceptable.
62. Un método para inhibir la actividad de AAK1, que comprende poner en contacto la AAK1 con un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 28 a 60.
63. Un método para tratar o manejar una enfermedad o trastorno mediado por la actividad de 7AAK1, que comprende administrar a un paciente que lo necesita una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 28 a 60, o una composición farmacéutica de la reivindicación 61.
64. El método de la reivindicación 63, en donde la enfermedad o trastorno es enfermedad de Alzheimer, trastorno bipolar, dolor, enfermedad de Parkinson, o esquizofrenia.
65. El método de la reivindicación 64, en donde el dolor es dolor neuropático.
66. El método de la reivindicación 65, en donde el dolor neuropático es fibromialgia o neuropatía periférica (e.g., neuropatía diabética).
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