BR112014022271B1 - Compostos com base em imidazo[1,2-b]piridazina, composições compreendendo-os, e usos dos mesmos - Google Patents

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Abstract

compostos com base em imidazo[1,2-b] piridazina, composições compreendendo-os, e usos dos mesmos. a presente invenção refere-se a compostos com base em imidazo[1,2-b]piridazina da fórmula: em que r1, r2 e r3 são definidos aqui. composições compreendendo os compostos e métodos de seu uso para tratar, controlar e/ou prevenir doenças e distúrbios mediados por atividade de cinase 1 associada a adaptador são também descritos.

Description

[001] Este pedido reivindica prioridade para o pedido de patente provisional dos Estados Unidos no. 61/608.758, depositado em 09 de março de 2012, a íntegra do qual é incorporada aqui por referência.
1. CAMPO DA INVENÇÃO
[002] Esta invenção é direcionada a compostos com base em imida- zo[1,2-b]piridazina úteis como inibidores de cinase 1 associada a adaptador (AAK1), composições compreendendo-os, e métodos de seu uso.
2. ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
[003] A cinase 1 associada ao adaptador (AAK1) é um membro da família Ark1/Prk1 de serina/treonina cinases. MRNA de AAK1 existe em duas formas de união denominadas curta e longa. A forma longa predomina e é altamente expressa em cérebro e coração (Henderson e Conner, Mol. Biol. Cell. 2007, 18, 2698-2706). A AAK1 é enriquecida em preparações sinaptossômicas e é colocalizada com estruturas endocíticas em células cultivadas. AAK1 modula a endocitose revestida por claterina, um processo que é importante em reciclo de vesícula sináptica e endoci- tose mediada por receptor. AAK1 associa-se com o complexo de AP2, um heterotetrâmero que liga o receptor cargo ao revestimento de clateri- na. A ligação de claterina à AAK1 estimula a atividade de AAK1 cinase (Conner et. al., Traffic 2003, 4, 885-890; Jackson et. al., J. Cell. Biol. 2003, 163, 231-236). A AAK1 fosforila a subunidade mu-2 de AP-2, que promove a ligação de mu-2 à tirosina contendo motives de classificação sobre os receptores cargo (Ricotta et. al., J. Cell Bio. 2002, 156, 791-795; Conner e Schmid, J. Cell Bio. 2002, 156, 921-929). A fosforilação de Mu2 não é requerida para captação de receptor, porém a fosforilação realça a eficiência de internalização (Motely et. al., Mol. Biol. Cell. 2006, 17, 52985308).
[004] A AAK1 foi identificada como uminibidor de sinalização de Neuregulina-1/ErbB4 em células PC12. Perda de expressão de AAK1 por meio do silenciamento de gene mediado por interferência de RNA ou tratamento com o inibidor de cinase K252a (que inibe a atividade de AAK1 cinase) resulta na potenciação de crescimento de neurito induzido por Neuregulina-1. Estes tratamentos resultam em expressão aumentada de ErbB4 e acúmuro de ErbB4 em ou próximo da membrana plasmática (Kuai et. al., Chemistry e Biology 2011, 18, 891-906). NRG1 e ErbB4 são genes de suscetibilidade à esquizofrenia são putativa (Buonanno, Brain Res. Bull. 2010, 83, 122-131). SNPs em ambos os genes foram associados com múltiplos endofenótipos de esquizofrenia (Greenwood et. al., Am. J. Psychiatry 2011, 168, 930-946). Modelos de camundongo KO de Neuregulina 1 e ErbB4 mostraram mudanças morfológicas relevantes de esquizofrenia e fenótipos comportamentais (Jaaro-Peled et. al., Schizophrenia Bulletin 2010, 36, 301-313; Wen et. al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2010, 107, 1211-1216). Além disso, um único polimorfismo de nucleotí- deo em um íntrom do gene AAK1 foi associado com a idade de início de doença de Parkinson (Latourelle et. al., BMC Med. Genet. 2009, 10, 98). Estes resultados sugerem que a inibição de atividade de AAK1 pode ter utilidade no tratamento de esquizofrenia, déficits cognitivos em esquizofrenia, doença de Parkinson, distúrbio bipolar, e doença de Alzheimer.
3. SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[005] Esta invenção é direcionada, em parte, a inibidores de AAK1 da fórmula:
Figure img0001
[006] e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que: R1 é R1A ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituído de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais R1A; cada R1A é independentemente -OR1C, -N(R1C)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, -N(R1C)C(O)OR1C, ciano, halo, ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais R1B; cada R1B é independentemente - OR1C, -N(R1C)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, -N(R1C)C(O)OR1C, ciano ou halo; cada R1C é independentemente hidrogênio ou C1-12 hidro- carbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais de ciano, halo ou hidroxila; R2 é -NR2AR2B, caracterizado pelo fato de que R2A é hidrogênio e R2B é C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais R2C; ou R2A e R2B são empregados juntos para formar um heterociclo de 4 a 7 membros opcionalmente substituído com um ou mais R2C; cada R2C é independentemente -OR2D, -N(R2D)2, -C(O)R2D, -C(O)OR2D, -C(O)N(R2D)2, -N(R2D)C(O)OR2D, ciano, halo, ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais R2D; cada R2D é independentemente hidrogênio ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais de ciano, halo ou hidroxila; e R3 é hi-drogênio ou C1-6 alquila opcionalmente substituído com um ou mais de ciano, halo ou hidroxila.
[007] Uma modalidade da invenção abrange composições farma- cêuticas e formas de dosagem compreendendo um composto descrito aqui (isto é, um composto da invenção).
[008] Outra modalidade desta invenção abrange métodos de inibição de cinase 1 associada a adaptador (AAK1), tanto in vitro quanto in vivo, que compreende contatar AAK1 com um composto da invenção.
[009] Outra modalidade abrange métodos de tratar e controlar doenças e distúrbios mediados por atividade de AAK1. Exemplos de tais doenças e distúrbios são acreditados incluir doença de Alzheimer, distúrbio bipolar, dor, doença de Parkinson, e esquizofrenia (incluindo déficits cognitivos em esquizofrenia).
4. BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[010] Aspectos da invenção são ilustrados na Figura 1, que mostra resultados obtidos de um modelo de dor de formalina usando camundongos de nocaute homozigoto AAK1 (-/-) e seus filhotes do tipo selvagem (+/+). Os camundongos de nocaute homozigoto AAK1 (-/-) mostra uma clara redução em resposta de dor tanto aguda quanto tonica quando comparado a seus filhotes do tipo selvagem (+/+).
5. DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
[011] Esta invenção é com base, em parte, na descoberta de que os camundongos de nocaute de AAK1 exibem uma alta resistência à dor. Essa descoberta levou a uma pesquisa que finalmente levou à descoberta de inibidores de AAK1, composições compreendendo-os, e métodos de seu uso. 5.1. DEFINIÇÕES
[012] A menos que de outro modo indicado, as frases "compostos da invenção," "compostos da presente invenção," e similares referem-se aos compostos descritos aqui.
[013] A menos que de outro modo indicado, o termo "hidrocarbila" significa uma porção alifática ou alicíclica tendo um esqueleto totalment carbono e consistindo em átomos de carbono e hidrogênio. Exemplos de grupos hidrocarbila incluem aqueles tendo 1-20, 1-12, 1-6, e 1-4 átomos de carbono (referidos como C1-20 hidrocarbila, C1-12 hidrocarbila, C1-6 hi- drocarbila, e C1-4 hidrocarbila, respectivamente). Exemplos particulares incluem alquila, alquenila, alquinila, arila, benzila, cicloalquila, cicloalque- nila, cicloalquilalquila, cicloalquenilalquila, naftila, fenila, e feniletila.
[014] Exemplos de porções alquila incluem porções de cadeia linear e ramificadas tendo 1-20, 1-12, 1-6, 1-4 e 1-3 átomos de carbono (referidos como C1-20 alquila, C1-12 alquila, C1-6 alquila, C1-4 alquila e C1-3 alquila, respectivamente). Exemplos particulares incluem metila, etila, propila, i- sopropila, n-butila, t-butila, isobutila, pentila, hexila, iso-hexila, heptila, 4,4-dimetilpentila, octila, 2,2,4-trimetilpentila, nonila, decila, undecila e dodecila.
[015] Exemplos de porções alquenila incluem de cadeia linear e ramificada C2-20, C2-12 e C2-6 alquenila. Exemplos particulares incluem vinila, alila, 1-butenila, 2-butenila, isobutilenila, 1-pentenila, 2-pentenila, 3-metil- 1-butenila, 2-metil-2-butenila, 2,3-dimetil-2-butenila, 1-hexenila, 2- hexenila, 3-hexenila, 1-heptenila, 2-heptenila, 3-heptenila, 1-octenila, 2- octenila, 3-octenila, 1-nonenila, 2-nonenila, 3-nonenila, 1-decenila, 2- decenila e 3-decenila.
[016] Exemplos de porções alquinila incluem de cadeia linear e ramificada C2-20, C2-12 e C2-6 alquinila. Exemplos particulares incluem etinila e 2-propinila (propargila).
[017] Exemplos de porções arila incluem antracenila, azulenila, fluo- renila, indano, indenila, naftila, fenila e fenantrenila.
[018] Exemplos de porções cicloalquila incluem C3-12, C3-7, C4-6 e C6 cicloalquila. Exemplos particulares incluem ciclopropila, ciclobutila, ciclo- pentila, ciclo-hexila e adamantila.
[019] A menos que de outro modo indicado, o termo "halo" abrange flúor, cloro, bromo, e iodo.
[020] A menos que de outro modo indicado, o termo "heterocarbila" refere-se a uma porção tendo um esqueleto formado de um ou mais átomos de carbono e um ou mais heteroátomos. Heteroátomos particulares são nitrogênio, oxigênio e enxofre. Porções heterocarbila podem ser podem ser pensadas como uma porção hidrocarbila em que pelo menos um átomo de carbono, grupo CH, CH2, ou CH3 é substituído com um ou mais heteroátomos e o número de requisito de átomos de hidrogênio para satisfazer valências. Exemplos de heterocarbila incluem porções heterocar- bila de 2-20, 2-12, 2-8, 2-6 e 2-4 membros, em que a variação do número refere-se à soma total de átomos de carbono, nitrogênio, oxigênio, e/ou enxofre na porção. O termo "heterocarbila de 2 a12 membros" desse modo refere-se a uma porção heterocarbila tendo um total de 2 a 12 átomos de carbono, nitrogênio, oxigênio, e/ou enxofre. Porções heterocarbila particulares incluem heteroalquila, heteroalquenila, e heteroalquinila de cadeia linear e ramificada, bem como heterociclo e heteroarila.
[021] Exemplos de porções heteroalquila incluem porções heteroal- quila de 2 a 8 membros, 2 a 6 membros e 2 a 4 membros. Exemplos particulares incluem alcoxila, acila (por exemplo, formila, acetila, benzoíla), alquilamino (por exemplo, di-(C1-3-alquil)amino), arilamino, ariloxima, car- bamatos, carbamidas, alquilcarbonila, arilcarbonila, aminocarbonila, alqui- laminocarbonila, alquilsulfanila, arilsulfanila, alquilsulfinila, arilsulfinila, al- quilsulfonila, arilsulfonila, alquilsulfonilamino, e arilsulfonilamino.
[022] A menos que de outro modo indicado, o termo "heterociclo" refere-se a uma porção heterocarbila cíclica (monocíclica ou policíclica) que pode ser aromática, parcialmente aromática ou não aromática. Hete- rociclos incluem heteroarilas. Exemplos incluem 4 a 10 membros, hetero- ciclos de 4 a 7 membros, 6 membros, e 5 membros. Exemplos particulares incluem benzo[1,3]dioxolila, 2,3-di-hidro-benzo[1,4]dioxinila, cinnolini- la, furanila, hidantoinila, morfolinila, oxetanila, oxiranila, piperazinila, pipe- ridinila, pirrolidinonila, pirrolidinila, tetra-hidrofuranila, tetra-hidropiranila, tetra-hidropiridinila, tetra-hidropirimidinila, tetra-hidrotiofenila, tetra- hidrotiopiranila e valerolactamila. Por que o termo "heterociclo" refere-se a um anel, sozinho ele não abrange porções tais como oxazolidinona e imidazolidinona: tais porções são consideradas heterociclos substituídos, viz. heterociclos substituídos com oxo.
[023] Exemplos de porções heteroarila incluem acridinila, benzimi- dazolila, benzofuranila, benzoisotiazolila, benzoisoxazolila, benzoquinazo- linila, benzotiazolila, benzoxazolila, furila, imidazolila, indolila, isotiazolila, isoxazolila, oxadiazolila, oxazolila, ftalazinila, pirazinila, pirazolila, piridazi- nila, piridila, pirimidinila, pirimidila, pirrolila, quinazolinila, quinolinila, tetrazolila, tiazolila, e triazinila.
[024] A menos que de outro modo indicado, o termo "inclui" tem o mesmo significado de "inclui, porém não está limitado a," e o termo "inclui" tem o mesmo significado de "inclui, porém não está limitado a". Similarmente, o termo "tal como" tem o mesmo significado do termo "tal como, porém não limitado a".
[025] A menos que de outro modo indicado, os termos "controlar," "controlando" e "controle" abrange prevenir a recorrência da doença ou distúrbio especificado em um paciente que já sofreu da doença ou distúrbio, e/ou aumentando o tempo durante o qual um paciente que sofreu da doença ou distúrbio permanece em remissão. Os termos abrangem modular o limiar, desenvolvimento e/ou duração da doença ou distúrbio, ou mudando o modo como um paciente responde à a doença ou distúrbio.
[026] A menos que de outro modo indicado, uma "quantidade tera- peuticamente efetiva" de um composto é uma quantidade suficiente para fornecer um benefício terapêutico no tratamento ou controle de uma doença ou condição, ou para retardar ou minimizar um ou mais sintomas associados com a doença ou condição. Uma "quantidade terapeutica- mente efetiva" de um composto significa uma quantidade de agente terapêutico, sozinho ou em combinação com outras terapias, que fornece um benefício terapêutico no tratamento ou controle de uma doença ou condição. O termo "quantidade terapeuticamente efetiva" pode abranger uma quantidade que melhora a terapia geral, reduz ou evita os sintomas ou causas de uma doença ou condição, ou realça a eficácia terapêutica de outro agente terapêutico.
[027] A menos que de outro modo indicado, os termos "tratar," "tratando" e "tratamento" contemplam uma ação que ocorre enquanto um paciente está sofrendo da doença ou distúrbio especificado, que reduz a severidade de uma doença ou distúrbio, ou retarda ou reduz a progressão de uma doença ou distúrbio.
[028] A menos que de outro modo indicado, um ou mais adjetivos imediatamente anteriores a uma série de substantivos devem ser construídos quando aplicando a cada um dos substantivos. Por exemplo, a frase "alquila, arila ouheteroarila opcionalmente substituído" tem o mesmo significado de "alquila opcionalmente substituído, arila opcionalmente substituído, ou heteroarila opcionalmente substituído". 5.2. COMPOSTOS
[029] Esta invenção abrange compostos da fórmula:
Figure img0002
[030] e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, em que: R1 é R1A ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais R1A; cada R1A é independentemente -OR1C, -N(R1C)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, - C(O)N(R1C)2, -N(R1C)C(O)OR1C, ciano, halo, ou C1-12 hidrocarbila ou he- terocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais R1B; cada R1B é independentemente - OR1C, -N(R1C)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, -N(R1C)C(O)OR1C, ciano ou halo; cada R1C é independentemente hidrogênio ou C1-12 hidro- carbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais de ciano, halo ou hidroxila; R2 é -NR2AR2B, caracterizado pelo fato de que R2A é hidrogênio e R2B é C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais R2C; ou R2A e R2B são empregados juntos para formar um heterociclo de 4 a 7 membros opcionalmente substituído com um ou mais R2C; cada R2C é independentemente -OR2D, -N(R2D)2, -C(O)R2D, -C(O)OR2D, -C(O)N(R2D)2, - N(R2D)C(O)OR2D, ciano, halo, ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila op-cionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais amino, ciano, halo, hidroxila, ou R2D; cada R2D é independentemente hidrogênio ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais amino, ciano, halo, ou hidroxila; e R3 é hidrogênio ou C16 alquila opcionalmente substituído com um ou mais de ciano, halo ou hi- droxila.
[031] Em compostos particulares, R1 é R1A. Em compostos particulares, R1 é opcionalmente substituído C1-12 hidrocarbila. Em compostos particulares, R1 é fenila opcionalmente substituída. Em compostos particula- res, R1 é heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros (por exemplo, heterocarbila de 2 a 6 membros, heterocarbila de 2 a 6 membros). Em compostos particulares, R1 é opcionalmente substituído piridini- la, tiofeno, ou imidazol.
[032] Em compostos particulares, R1A é halo. Em alguns, R1A é - OR1C, -N(R1C)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, ou -C(O)N(R1C)2. Em alguns, R1A é -OR1C. Em alguns, R1B é -N(R1C)2, -OR1C, halo.
[033] Em compostos particulares, R2A e R2B são empregados juntos para formar um heterociclo de 4 a 7 membros opcionalmente substituído com um ou mais R2C.
[034] Em compostos particulares, R1C é hidrogênio. Em alguns, R1C é C1-12 hidrocarbila (por exemplo, C1-6 hidrocarbila, C1-4 hidrocarbila tal como metila, etila, propila).
[035] Em compostos particulares, R2C é -C(O)OR2D, -C(O)N(R2D)2, ou -N(R2D)C(O)OR2D.
[036] Em compostos particulares, R2D é hidrogênio. Em alguns, R2D é C1-12 hidrocarbila (por exemplo, C1-6 hidrocarbila, C1-4 hidrocarbila tal como metila, etila, propila).
[037] Em compostos particulares, R3 é hidrogênio.
[038] Uma modalidade da invenção abrange compostos da fórmula:
Figure img0003
[039] e sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: A é C112 hidrocarbila cíclica ou heterociclo de 4 a 7 membros; D é heterociclo de 4 a 7 membros; cada R1A é independentemente -OR1C, -N(R1C)2, - C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, -N(R1C)C(O)OR1C, ciano, halo, ou C112 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais R1B; cada R1B é inde- pendentemente -OR1C, -N(R1C)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, - N(R1C)C(O)OR1C, ciano ou halo; cada R1C é independentemente hidrogênio ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais de ciano, halo ou hidroxila; cada R2C é independentemente -OR2D, -N(R2D)2, - C(O)R2D, -C(O)OR2D, -C(O)N(R2D)2, -N(R2D)C(O)OR2D, ciano, halo, ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais amino, ciano, halo, hidroxila, ou R2D; cada R2D é independentemente hidrogênio ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais amino, ciano, halo, ou hidroxila; n é 1-3; e m é 0 a 3.
[040] Em compostos particulares, R2C não é hidroxila ou fenila ou piridinila opcionalmente substituída.
[041] Em compostos particulares, quando D é diazapina e A é piridi- nila, R2C não é -C(O)O-terc-butila.
[042] Em compostos particulares, quando D é piperazina, A é fenila e R1A é cloro, R2C não é -C(O)O-terc-butila.
[043] Em compostos particulares, quando D é piperidinila, A é piridi- nila e R1A é cloro, R2C não é -NHC(O)O-terc-butila.
[044] Em compostos particulares, quando D é piperidinila, A é piridi- nila e R1A é -NHCH2CH2CH(CH3)2, R2C não é NH2.
[045] Uma modalidade da invenção abrange compostos da fórmula:
Figure img0004
[046] e sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: A é C1-12 hidrocarbila cíclica ou heterociclo de 4 a 7 membros; D é hetero- ciclo de 4 a 7 membros; cada R1A é independentemente -OR1C, - N(R1C)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, -N(R1C)C(O)OR1C, ciano, halo, ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais R1B; cada R1B é independentemente -OR1C, -N(R1C)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, - N(R1C)C(O)OR1C, ciano ou halo; cada R1C é independentemente hidrogênio ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais de ciano, halo ou hidroxila; cada R2C é independentemente -OR2D, -N(R2D)2, - C(O)R2D, -C(O)OR2D, -C(O)N(R2D)2, -N(R2D)C(O)OR2D, ciano, halo, ou C112 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais amino, ciano, halo, hidroxila, ou R2D; cada R2D é independentemente hidrogênio ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais de amino, ciano, halo, ou hidroxila; n é 1-3; e m é 0 a 3.
[047] Em compostos particulares abrangidos por esta modalidade: 1) R2C não é hidroxila ou fenila ou piridinila opcionalmente substituída; 2) quando D é diazapina e A é piridinila, R2C não é --C(O)O-terc-butila; 3) quando D é piperazina, A é fenila e R1A é cloro, R2C não é -C(O)O-terc- butila; 4) quando D é piperidinila, A é piridinila e R1A é cloro, R2C não é - NHC(O)O-terc-butila; e 5) quando D é piperidinila, A é piridinila e R1A é - NHCH2CH2CH(CH3)2, R2C não é NH2.
[048] Em compostos particulares, D é piperazina ou pirrolidina.
[049] Em compostos particulares, n é 1.
[050] Em compostos particulares, m é 1 ou 2.
[051] Em compostos particulares, A é piridinila, tiofeno, ou imidazol.
[052] Compostos particulares da invenção são da fórmula:
Figure img0005
[053] em que X é CH ou N. Em uma modalidade, X é N e m é 1 ou 2.
[054] Uma modalidade da invenção abrange compostos da fórmula:
Figure img0006
[055] e sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é CH ou N; cada R1A é independentemente -OR1C, -N(R1C)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, -N(R1C)C(O)OR1C, ciano, halo, ou C1-12 hidrocarbila ou hetero- carbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais R1B; cada R1B é independentemente -OR1C, - N(R1C)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, -N(R1C)C(O)OR1C, ciano ou halo; cada R1C é independentemente hidrogênio ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais de ciano, halo ou hidroxila; cada R2C é independentemente -OR2D, -N(R2D)2, -C(O)R2D, -C(O)OR2D, -C(O)N(R2D)2, -N(R2D)C(O)OR2D, ciano, halo, ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais amino, ciano, halo, hidroxila, ou R2D; cada R2D é independentemente hidrogênio ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais amino, ciano, halo, ou hidroxila; e m é 0 a 3.
[056] Em alguns compostos desta modalidade, R2C não é fenila ou piridinila opcionalmente substituída.
[057] Compostos particulares da invenção são da fórmula:
Figure img0007
[058] Compostos particulares da invenção são da fórmula:
Figure img0008
[059] Compostos particulares da invenção são da fórmula:
Figure img0009
[060] Compostos particulares da invenção são da fórmula:
Figure img0010
[061] Uma modalidade da invenção abrange compostos da fórmula:
Figure img0011
[062] e sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é CH ou N; cada R1A é independentemente -OR1C, -N(R1C)2, -C(O)R1C, - C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, -N(R1C)C(O)OR1C, ciano, halo, ou C1-12 hidro- carbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais R1B; cada R1B é independentemente -OR1C, -N(R1C)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, -N(R1C)C(O)OR1C, ci- ano ou halo; cada R1C é independentemente hidrogênio ou C1-12 hidro- carbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais de ciano, halo ou hidroxila; cada R2C é independentemente -OR2D, -N(R2D)2, -C(O)R2D, -C(O)OR2D, -C(O)N(R2D)2, -N(R2D)C(O)OR2D, ciano, halo, ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais amino, ciano, halo, hidroxila, ou R2D; cada R2D é independentemente hidrogênio ou C1-12 hidrocarbila ou hete- rocarbila opcionalmente substituída de 2 a 12 membros, cuja substituição opcional é com um ou mais amino, ciano, halo, ou hidroxila; e n é 0 a 3.
[063] Em alguns compostos desta modalidade, quando X é CH, m é 1 e R1A é cloro, R2D não é t-butila.
[064] Em alguns compostos desta modalidade, R2C não seja fenila ou piridinila opcionalmente substituída.
[065] Compostos particulares da invenção são da fórmula: r^VN\
Figure img0012
[066] Em alguns, m é 1 ou 2.
[067] Compostos particulares da invenção são da fórmula:
Figure img0013
[068] Outros são da fórmula:
Figure img0014
[069] Em compostos particulares, R1A é -OR1C.
[070] Em compostos particulares, R1C é opcionalmente substituído C1-12 hidrocarbila (por exemplo, C1-6 hidrocarbila, C1-4 hidrocarbila).
[071] Em compostos particulares, R2C é -C(O)OR2D, -C(O)N(R2D)2, ou -N(R2D)C(O)OR2D. Em outros, R2C é -C(O)R2D.
[072] Em compostos particulares, cada R2D é independentemente hidrogênio ou C1-12 hidrocarbila (por exemplo, C1-6 hidrocarbila, C1-4 hidro- carbila). Em outros, R2D é heterocarbila de 2 a 12 membros compreendendo pelo menos um átomo de nitrogênio.
[073] Compostos da invenção podem ter um ou mais centros assimétricos. A menos que de outro modo indicado, esta invenção abrange todos os estereoisômeros dos compostos, bem como misturas dos mesmos. Estereoisômeros individuais de compostos podem ser preparados sinteticamente de materiais de partida comecialmente disponíveis que contêm centros quirais ou por preparação de misturas de produtos enan- tioméricos seguida por separação, tal como conversão em uma mistura de diastereômeros seguida por separação, ou recristalização, técnicas cromatográficas, ou separação direta de enantiômeros nas colunas cro- matográficas quirais. Compostos de partida de estereoquímica particular são ou comercialmente disponíveis ou podem ser preparados e resolvi-dos por técnicas conhecidas na técnica.
[074] Certos compostos da presente invenção podem também existir em diferentes formas conformacionais estáveis que podem ser separáveis. Assimetria torsional devido à rotação restrita em torno de uma ligação simples assimétrica, por exemplo, por causa de impedimento estérico ou linhagem de anel, pode permitir a separação de diferentes conforma- dores. A presente invenção inclui cada isômero conformacional destes compostos e misturas dos mesmos.
[075] A presente invenção destina-se a incluir todos os isótopos de átomos de ocorrência nos presentes compostos. Isótopos incluem aqueles átomos tendo o mesmo número atômico, porém diferentes números de massa. A título de exemplo geral e sem limitação, isótopos de hidrogênio incluem deutério e trítio. Isótopos de carbono incluem 13C e 14C. Compostos isotopicamente rotulados da invenção podem geralmente ser preparados por técnicas convencionais conhecidas por aqueles versados na técnica ou por processos análogos àqueles descritos aqui, usando um reagente isotopicamente rotulado apropriado em lugar do reagente não rotulado de outro modo empregado. Tais compostos podem ter uma variedade de usos potenciais, por exemplo, como padrões e reagentes na determinação de atividade biológica. No caso de isótopos estáveis, tais compostos podem ter o potencial de favoravelmente modificar propriedades biológicas, farmacológicas, ou farmacocinéticas.
[076] Os compostos da presente invenção podem existir como sais farmaceuticamente aceitáveis. O termo "sal farmaceuticamente aceitável," como usado aqui, representa sais ou formas zwiteriônicas dos compostos da presente invenção que são solúveis em água ou óleo ou dis- persíveis, que se incluem no escopo de diagnóstico médico seguro, adequados para uso em contato com os tecidos de pacientes sem toxicidade excessiva, irritação, resposta alérgica, ou outro problema ou complicação comensurada com uma relação benefício/risco razoável, e são efetivos para seu uso pretendido. Os sais podem ser preparados durante a isola- ção final e purificação dos compostos ou separadamente reagindo um átomo de nitrogênio adequado com um ácido adequado. Sais de adição de ácido representativo incluem acetato, adipato, alginato, citrato, aspar- tato, benzoato, benzenossulfonato, bissulfato, butirato, canforato, canfor- sulfonato; digluconato, dibromidrato, dicloridrato, di-hidroiodeto, glicero- fosfato, hemissulfato, heptanoato, hexanoato, formato, fumarato, cloridra- to, bromidrato, hidroiodeto, 2-hidroxietanossulfonato, lactato, maleato, mesitilenossulfonato, metanossulfonato, naftilenossulfonato, nicotinato, 2- naftalenossulfonato, oxalato, palmoato, pectinato, persulfato, 3- fenilproprionato, picrato, pivalato, propionato, succinato, tartarato, triclo- roacetato, trifluoroacetato, fosfato, glutamato, bicarbonato, para- toluenossulfonato, e undecanoato. Exemplos de ácidos que podem ser empregados para formar sais de adição farmaceuticamente aceitáveis incluem inorgânicos, tais como clorídrico, bromídrico, sulfúrico, e fosfórico, e ácidos orgânicos tais como oxálico, maleico, succínico, e cítrico.
[077] Sais de adição básicos podem ser preparados durante a isola- ção final e purificação dos compostos reagindo um grupo carbóxi com uma base adequada, tal como o hidróxido, carbonato, ou bicarbonato de um cátion de metal ou com amônia ou uma amina primária, secundária, ou terciária orgânica. Os cátions de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem lítio, sódio, potássio, cálcio, magnésio, e alumínio, bem como cá- tions de amina quaternária não tóxica, tais como amônio, tetrametilamô- nio, tetraetilamônio, metilamina, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina, dietilamina, etilamina, tributilamina, piridina, N,N-dimetilanilina, N- metilpiperidina, N-metilmorfolina, diciclo-hexilamina, procaína, dibenzila- mina, N,N-dibenzilfenetilamina, e N,N’-dibenziletilenodiamina. Outras aminas orgânicas representativas úteis na formação de sais de adição de base incluem etilenodiamina, etanolamina, dietanolamina, piperidina, e piperazina.
[078] Compostos particulares da invenção inibem AAK1 com uma IC50 menor do que 0,1,0,01 ou 0,001 μM como medido no ensaio de placa filtrante P81 descrito abaixo nos exemplos. Compostos particulares da invenção inibem AAK1 com uma IC50 menor do que 0,1, 0,01 ou 0,001 μM como medido no ensaio com base em célula HEK281 descrito abaixo nos exemplos. 5.3. MÉTODOS DE SÍNTESE
[079] Compostos da invenção podem ser preparados usando métodos conhecidos por aqueles versados na técnica. Compostos particulares são da fórmula geral:
Figure img0015
[080] em que R1, R2 e R3 são definidos aqui. Estes compostos podem ser preparados pelos métodos delineados abaixo.
[081] No esquema 1, o cloro ou flúor de um composto de fórmula 1 é removido com uma amina para produzir 2. Para alguns exemplos, o ha- logênio em 1 pode ser hidrolizado para fornecer 3, e em seguidareagido com amina para fornecer 2. Acoplamento Suzuki de 2 com um ácido bo- rônico apropriado ou éster [R3B(OR)2] fornece compostos de fórmula 4. O composto 2 pode também ser convertido em seu correspondente ácido borônico 5, que pode ser acoplado com brometo apropriado para fornecer 4. Alternativamente, acoplamento Suzuki de 1 com um ácido borônico apropriado ou éster [R3B(OR)2] fornece compostos de fórmula 6, o halo- gênio do qual pode ser removido para produzir 4. Esquema 1
Figure img0016
[082] O esquema 2 representa um método útil na preparação de compostos de 3-bromo-6-fluoroimidazo[1,2-b]piridazina de fórmula 1a. A 3,6-dicloropiridazina 7 é convertida em 3,6-difluoropiridazina 8 reagindo 7 com KF secado por spray em DMSO a 135°C. A remoção de um dos fluo- ros de 8 por NH4OH em um tubo selado aquecido gera 9. A ciclização de 9 com cloroacetaldeído fornece o intermediário 10. Bromação de 10 fornece 1a. Esquema 2
Figure img0017
[083] O esquema 3 mostra um método de preparação de compostos de 3-bromo-6-cloroimidazo[1,2-b]piridazina 4- ou 5- substituídos de fórmula 1b. Remoção de um dos cloros de 11 por 2,4-dimetoxibenzilamina gera uma mistura de regioisômeros de 12, que são separados. Remoção do grupo 2,4-dimetoxibenzila produz 13. Ciclização de 13 com cloroace- taldeído fornece o intermediário 14. Bromação de 14 fornece 1b. Esquema 3
Figure img0018
[084] O esquema 4 mostra um método útil na preparação de compostos da invenção em que R2 é arila. Aqui, o acoplamento Suzuki de composto 15 com um ácido borônico apropriado ou éster [R3B(OR)2] fornece 16. Bromação de 16 fornece o intermediário 17. Segundo acoplamento Suzuki fornece o composto 18. Esquema 4
Figure img0019
[085] O esquema 5 descreve a preparação de compostos de fórmula 20. O cloro ou flúor de um composto de fórmula 1 é removido com um tiol para produzir 19. O acoplamento Suzuki de 19 com um ácido borônico apropriado ou éster [R1B(OR)2] fornece compostos de fórmula 20. Esquema 5
Figure img0020
[086] Os compostos de fórmula 21, 22 e 23 podem ser preparados pelos métodos delineados no esquema 6. O bromo de um composto de fórmula 2 é removido com um grupo ciano para produzir 21. Hidrólise do grupo ciano em 21 fornece o ácido 22. Acoplamento de amida regular do ácido 22 fornece amida 23. Esquema 6
Figure img0021
[087] O esquema 7 descreve um método de preparação dos compostos 26, 27 e 30. Neste método, o grupo amina de um composto de fórmula 24 é reagido com cloreto de acetila em condições básicas para fornecer 25. Remoção de amina do cloro em 25 fornece compostos com fórmula 26 e 27. O grupo amina em 24 podem também ser reagidos com um cloreto de acila transportando um grupo de saída terminal, tal como bromo, para fornecer 28. Ciclização intramolecular de 28 sob fortes condições básicas fornece o intermediário 29. Remoção de amina do cloro em 29 fornece compostos de fórmula 30. Esquema 7
Figure img0022
[088] São delineados no esquema 8 métodos úteis na preparação de compostos de fórmulas 33 e 35. Aqui, redução da função de aldeído no composto 31 fornece o álcool 32. Remoção do cloro em 32 fornece compostos de fórmula 33. Conversão da carbonila de 31 em difluorometi- la fornece 34. Remoção do cloro em 34 fornece os compostos com a fórmula 35. Esquema 8
Figure img0023
[089] Os compostos macrocíclicos podem ser preparados de acordo com o esquema 9. Remoção do flúor em 1a com uma amina cuidadosamente agrupada que possui um brometo de arila terminal fornece o composto 36. Acoplamento tipo Suzuki intramolecular de 36 fornece o composto macrocíclico 37. Esquema 9
Figure img0024
5.4. MÉTODOS DE USO
[090] Uma modalidade desta invenção abrange métodos de inibição de cinase 1 associada a adaptador (AAK1), tanto in vitro quanto in vivo, que compreende contatar AAK1 com um composto da invenção.
[091] Outra modalidade abrange métodos de tratamento e controle de doenças e distúrbios mediados por atividade de AAK1. Doenças e distúrbios mediados por atividade de AAK1 são doenças e distúrbios que têm pelo menos um sintoma, a severidade ou manifestação dos quais é afetada pela atividade de AAK1. Exemplos de tais doenças e distúrbios são acreditados incluírem doença de Alzheimer, distúrbio bipolar, dor, doença de Parkinson, e esquizofrenia (incluindo déficits cognitivos em esquizofrenia). Métodos particulares compreendem administrar a um paciente (um ser humano ou outro mamífero) em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente ou profilaticamente efetiva de um inibidor de AAK1 (por exemplo, um composto descrito aqui).
[092] Outra modalidade desta invenção abrange um método de tratar ou controlar uma doença ou distúrbio, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um paciente em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente ou profilaticamente efetiva de um inibidor de AAK1, caracterizado pelo fato de que a doença ou distúrbio é doença de Alzheimer, distúrbio bipolar, dor, doença de Parkinson, ou esquizofrenia (incluindo déficits cognitivos em esquizofrenia). Tipos particulares de dor incluem dor crônica, acute dor, e dor neuropática. Tipos particulares de dor neuropática incluem fibromialgia e neuropatia periférica (por exemplo, neuropatia diabética).
[093] Quando usados para tratar ou controlar uma doença ou distúrbio, compostos da invenção são preferivelmente administrados como parte de uma composição farmacêutica compreendendo um ou mais veículos, diluentes ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis.
[094] Composições ou formulações farmacêuticas, podem ser apresentadas em formas de dose unitária contendo uma quantidade predeterminada de ingrediente ativo por dose unitária. Níveis de dosagem entre cerca de 0,01 e cerca de 250 miligramas por kilograma ("mg/kg") de peso corporal por dia, preferivelmente entre cerca de 0,05 e cerca de 100 mg/kg peso corporal por dia dos compostos da presente invenção são típicos em uma monoterapia para a prevenção e tratamento de doença. Tipicamente, as composições farmacêuticas desta invenção serão administradas de cerca de 1 a cerca de 5 vezes por dia ou alternativamente, como uma infusão contínua. Tal administração pode ser usada como uma terapia crônica ou aguda. A quantidade de ingrediente ativo que pode ser combinada com os materiais veículos para produzir uma forma de dosage simples variará dependendo da condição que está sendo tratada, a severidade da condição, o tempo de administração, a rotina de administração, a taxa de excreção do composto empregado, a duração de tratamento, e a idade, o sexo, o peso, e a condição do paciente. Formulações de dosa- gem unitária preferidas são aquelas contendo uma dose diária ou subdose, como aqui acima mencionado, ou uma fração apropriada da mesma, de um ingrediente ativo. O tratamento pode ser iniciado com pequenas dosagens substancialmente menores doque a dose ideal do composto. A seguir, a dosagem é aumentada por pequenos incrementos até o efeito ideal sob as circunstâncias ser atingido. Em geral, o composto é mais desejavelmente administrado em um nível de concentração que geralmente fornecerá resultados efetivos sem causar quaisquer efeitos colaterais nocivos ou deletérios.
[095] Compostos da invenção podem ser administrados em combinação com um ou mais agentes terapêuticos ou profiláticos adicionais. Por exemplo, quando usados para o tratamento de dor, agentes adicionais possíveis incluem agentes imunossupressores e anti-inflamatórios.
[096] Imunossupressores adequados para uso nos métodos e composições desta invenção incluem aqueles conhecidos na técnica. Exemplos incluem aminopterina, azatioprina, ciclosporina A, D-penicilamina, sais de ouro, hidroxicloroquina, leflunomida, metotrexato, minociclina, ra- pamicina, sulfasalazina, tacrolimus (FK506), e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. Um imunossupressor particular é o metotrexato.
[097] Exemplos adicionais incluem anticorpos anti-TNF, tais como adalimumabe, certolizumabe pegol, etanercepte, e infliximabe. Outros incluem bloqueadores de interleucina-1, tal como anakinra. Outros incluem anticorpos de célula anti-B (CD20), tal como rituximabe. Outros incluem bloqueadores de ativação de célula T, tal como abatacepte.
[098] Exemplos adicionais incluem inibidores de monofosfato de inosina desidrogenase, tal como micofenolato de mofetila (CellCept®) e ácido micofenólico (Myfortic®).
[099] Fármacos anti-inflamatórios adequados para uso nos metodos e composições desta invenção incluem aqueles conhecidos na técnica. Exemplos incluem glucocorticoides e NSAIDs.
[0100] Exemplos de glicocorticoides incluem aldosterona, beclometa- sona, betametasona, cortisona, deoxicorticosterona, dexametasona, flu- drocortisonas, hidrocortisona, metilprednisolone, prednisolona, predniso- na, triancinolona, e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
[0101] Exemplos de NSAID incluem salicilatos (por exemplo, aspirina, amoxiprina, benorilato, salicilato de colina magnésio, diflunisal, faislami- na, salicilato de metila, salicilato de magnésio, salicilato de salicila, e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos), ácidos arilalcanoicos (por exemplo, diclofenaco, aceclofenaco, acemetacina, bromfenaco, etodolac, indometacina, nabumetona, sulindac, tolmetina, e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos), ácidos arilpropiônicos (por exemplo, ibuprofeno, carprofeno, fenbufeno, fenoprofeno, flurbiprofeno, cetoprofeno, cetorolac, loxoprofeno, naproxeno, oxaprozina, ácido tiaprofênico, suprofeno, e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos), ácidos arilantranílicos (por exemplo, ácido meclofenâmico, ácido mefenâmico, e sais farmaceutica- mente aceitáveis dos mesmos), derivados de pirazolidina (por exemplo, azapropazona, metamizol, oxifenbutazona, fenilbutazona, sulfinprazona, e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos), oxicams (por exemplo, lornoxicam, meloxicam, piroxicam, tenoxicam, e sais farmaceutica- mente aceitáveis dos mesmos), inibidores de COX-2 (por exemplo, cele- coxibe, etoricoxibe, lumiracoxibe, parecoxibe, rofecoxibe, valdecoxibe, e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos), e sulfonanilidas (por exemplo, nimesulida e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos).
[0102] Outros agentes usados no tratamento de dor (incluindo, porém não limitada à dor neuropática e inflamatória) incluem agentes tais como pregabalina, lidocaína, duloxetina, gabapentina, carbamazepina, capsai- cina, e outros inibidores de recaptação de serotonina/norepinefrina/do- pamina, e opiatos (tais como oxicontina, morfina, e codeína).
[0103] No tratamento de dor causada por uma doença ou condição conhecida, tal como diabetes, infecção (por exemplo, herpes zóster ou infecção de HIV), ou câncer, compostos da invenção podem ser adminis-trados em combinação com um ou mais agentes terapêuticos ou profiláticos adicionais voltados para a doença ou condição subjacente. Por exemplo, quando usados para tartar neuropatia diabética, compostos da invenção podem ser administrados em combinação com um ou mais agentes antidiabéticos, agentes anti-hiperglicêmicos, agentes hipolipidêmi- cos/redutores de lipídeo, agentes antiobesidade, agentes anti-hiper- tensivos e supressores de apetite. Exemplos de agentes anti-diabéticos incluem biguanidas (por exemplo, metformina, fenformina), inibidores de glucosidase (por exemplo, acarbose, miglitol), insulinas (incluindo secre- tagogo de insulina e sensibilizantes de insulina), meglitinidas (por exemplo, repaglinida), sulfonilureias (por exemplo, glimepirida, gliburida, glicla- zida, clorpropamida, e glipizida), combinações de biguanida/gliburida (por exemplo, Glucovance), tiazolidinadionas (por exemplo, troglitazona, rosi- glitazona, e pioglitazona), agonistas de PPAR-alfa, agonistas de PPAR- gama, agonistas duais de PPAR alfa/gama, inibidores de glicogênio fosfo- rilase, inibidores de agonistas de proteína de ligação a ácido graxo (aP2), peptídeo-1 semelhante a glicagon (GLP-1) ou outros agonistas do receptor de GLP-1, inibidores de dipeptidil peptidase IV (DPP4), e inibidores de cotransportador 2 de sódio-glicose (SGLT2) (por exemplo, dapagliflozina, canagliflozina, e LX-4211). 5.5. COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS
[0104] Formulações farmacêuticas podem ser adaptadas para administração por qualquer rotina apropriada, por exemplo, pela rotina oral (incluindo bucal ou sublingual), retal, nasal, tópica (incluindo buccal, sub-lingual, ou transdérmica), vaginal, ou parenteral (incluindo infusões ou injeções subcutânea, intracutânea, intramuscular, intra-articular, intrasi- novial, intrasternal, intratecal, intralesional, intravenosa, ou intradérmica). Tais formulações podem ser preparadas por qualquer métodos conhecido na técnica de farmácia, por exemplo, trazendo em associação o ingrediente ativo com o(s) veículo(s) ou excipiente(s). Administração oral ou administração por injeção são preferidas.
[0105] Formulações farmacêuticas adaptadas para administração oral podem ser apresentadas como unidades discretas, tal como cápsulas ou comprimidos; pós ou grânulos; soluções ou suspensões em líquidos aquosos ou não aquosos; espumas comestíveis ou whips; ou emulsões líquidas de óleo em água ou emulsões de água em óleo.
[0106] Por exemplo, para administração oral na forma de um comprimido ou cápsula, o componente de fármaco ativo pode ser combinado com um veículo inerte farmaceuticamente aceitável não tóxico, oral, tal como etanol, glicerol, água, e similares. Pós são preparados por fragmentação do composto para um tamanho fino adequado e mistura com um veículo farmacêutico fragmentado similarmente, tal como um carboidrato comestível, como, por exemplo, amido ou manitol. Agente aromatizante, preservativo, dispersante e colorante pode também estar presente.
[0107] Cápsulas são feitas por preparação de uma mistura em pó, como descrito acima, e carregando os estojos de gelatina formadas. Deslizantes e lubrificantes, tais como silica coloidal, talco, estearato de magnésio, estearato de cálcio, ou polietileno glicol sólido, podem ser adicionados à mistura em pó, antes da operação de carregamento. Um agente desintegrante ou solubilizante, tal como agar-agar, carbonato de cálcio, ou carbonato de sódio pode também ser adicionado para melhorar a dis- ponibilidade do medicamente quando a cápsula é ingerida.
[0108] Além disso, quando desejado ou necessário, aglutinantes adequados, lubrificantes, agentes desintegrantes, e agentes colorantes, podem também ser incorporados na mistura. Aglutinantes adequados incluem amido, gelatina, açúcares naturais, tal como glicose ou betalactose, adoçantes de milho, gomas naturais e sintéticas, tal como acácia, tragacanto ou alginato de sódio, carboximetilcelulose, polietileno glicol, e similares. Lubricantes usados nestas formas de dosage incluem oleato de sódio, cloreto de sódio, e similares. Desintegrantes incluem, sem limitação, amido, metil celulose, ágar, betonita, goma xantana, e similares. Comprimidos são formulados, por exemplo, preparando-se uma mistura em pó, granulando ou formando balas, adicionando um lubrificante e de- sintegrante, e prensando em comprimidos. Uma mistura em pó é preparada misturando-se o composto, fragmentado adequado, com um diluente ou base como descrito acima, e, opcionalmente, com um aglutinante, tal como carboximetilcelulose, um alginato, gelatina, ou polivinil pirrolidona, um retardante de solução, tal como parafina, um acelerador de reabsorção, tal como um sal quaternário e/ou e agente de absorção, tal como betonita, caulim, ou fosfato de dicálcio. A mistura em pó pode ser granulada por umectação com um aglutinante, tal como xarope, pasta de amido, mucilagem de acádia, ou soluções de materiais celulósicos ou polimé- ricos e forçando através de uma peneira. Como uma alternativa para granulação, a mistura em pó pode ser passada através da máquina de formação de comprimido e o resultado é balas imperfeitamente formadas quebradas em grânulos. Os grânulos podem ser lubrificados para prevenir aderência às matrizes de formação de comprimido por meio da adição de ácido esteárico, um sal de estearato, talco, ou óleo mineral. A mistura lubrificada é em seguida prensada em comprimidos. Os compostos da presente invenção podem também ser combinados com um veículo inerte de fluxo livre e prensados em comprimidos diretamente sem passar pelas etapas de granulação ou formação de balas. Um revestimento protetor claro e opaco consistindo em um revestimento de selagem de goma-laca, um revestimento de açúcar ou material polimérico, e um revestimento de polimento de cera pode ser fornecido. Matérias corantes podem ser adicionadas a estes revestimentos para distinguir diferentes dosagens unitárias.
[0109] Fluidos orais tal como solução, xaropes, e elixires podem ser preparados em forma de unidade de dosagem, de modo que uma deter-minada quantidade contenha uma quantidade predeterminada do composto. Xaropes podem ser preparados dissolvendo-se o composto em uma solução aquosa adequadamente aromatizada, enquanto elixires são preparados por meio do uso de um veículo não tóxico. Solubilizantes e emulsificantes, tais como álcoois isoestearílicos etoxilados e éteres de sorbitol de polioxietileno, preservativos, aditivo de sabor, tal como óleo de hortelã-pimenta ou adoçantes naturais, ou sacarina ou outros adoçantes artificiais, e similares, podem também ser adicionados.
[0110] Onde apropriado, formulações de unidade de dosagem para administração oral podem ser microencapsuladas. A formulação pode também ser preparada para prolongar ou sustentar a liberação como, por exemplo, por revestimento ou embutimento de material particulado em polímeros, cera, ou similar.
[0111] Os compostos de fórmula (I), e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, podem também ser administrados na forma de sistemas de liberação de lipossoma, tal como vesículas unilamelares pequenas, vesículas unilamelares grandes, e vesículas multilamelares. As lipossomas podem ser formadas de uma variedade de fosfolipídeos, tal como colesterol, estearilamina, ou fosfatidilcolinas.
[0112] Os compostos de fórmula (I) e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos podem também ser liberados pelo uso de anticorpos monoclonais como veículos individuais aos quais as moléculas de composto são acopladas. Os compostos podem também ser acoplados com polímeros solúveis como veículos de fármaco alvejáveis. Tais polímeros podem incluir polivinilpirrolidona, copolímero de pirano, poli-hidro- xipropilmetacrilamidafenol, poli-hidroxietilaspartamidafenol, ou polietile- nooxidepolilisina substituído por resíduos de palitoíla. Além disso, os compostos podem ser acoplados a uma classe de polímeros biodegradáveis úteis na obtenção de liberação controlada de um fármaco, por exemplo, ácido polilático, caprolactona de polépsilon, ácido poli-hidroxi butírico, poliortoésteres, poliacetais, polidi-hidropiranos, policianoacrilatos, e copo- límeros de bloco de hidrogéis reticulados ou anfipáticos.
[0113] [0106] Formulações farmacêuticas adaptadas para adminis tração transdérmica podem ser apresentadas como emplastros discretos destinados a permanecer em contato íntimo com a epiderme do receptor durante um período de tempo prolongado. Por exemplo, o ingrediente ativo pode ser liberado do emplastro por iontoforese como de um modo geral descrito em Pharmaceutical Research 1986, 3(6), 318.
[0114] Formulações farmacêuticas adaptadas para administração tópica podem ser formulada como unguentos, cremes, suspensões, loções, põs, soluções, pastas, géis, sprays, aerossóis, ou óleos.
[0115] Formulações farmacêuticas adaptadas para administração retal podem ser apresentadas como supositórios ou como enemas.
[0116] Formulações farmacêuticas adaptadas para administração nasal em que o veículo é um sólido incluem um pó grosso tendo um tamanho de partícula, por exemplo, na faixa de 20 a 500 mícrons que é admi- nistrado da maneira em que a fungada é feita, isto é, por rápida inalação através da passagem nasal a partir do recipiente do pó mantido próximo ao nariz. Formulações adequadas em que o veículo é um líquido, para administração como um spray nasal ou gotas nasais, incluem soluções aquosas ou oleosas do ingrediente ativo.
[0117] Formulações farmacêuticas adaptadas para administração por inalação incluem pós de partículas finas ou névoas, que podem ser gerados por meio de vários tipos de aerossóis pressurizados de dose, dosifi- cados, nebulizadores, ou insufladores.
[0118] Formulações farmacêuticas adaptadas para administração vaginal podem ser apresentadas como pessários, tampões, cremes, géis, pastas, espumas, ou formulações spray.
[0119] [0112] Formulações farmacêuticas adaptadas para adminis tração parenteral incluem soluções de injeção estéreis aquosas e não aquosas que podemconter antioxidantes, tampões, bacteriostatos, e sou- tes que tornam a formulação isotônica com o sangue do receptor pretendido; e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes de suspensão e agentes de espessamento. As formulações podem ser apresentadas em recipients de dose única e múltiplas doses, por exemplo, ampolas e frasconetes selados, e podem ser armazenados em uma condição secada por congelamento (liofilizada) requerendo apenas a adição do veículo líquido estéril, por exemplo, água para injeções, imediatamente antes do uso. Soluções e suspensões de injeção extemporâneas podem ser preparadas de pós estéreis, grânulos, e comprimidos.
[0120] [0113] Deve ser entendido que além dos ingredientes particu larmente mencionados acima, as formulações podem incluir outros agentes convencionais na técnica, levando em consideração o tipo de formulação em questão, por exemplo, aqueles adequados para administração oral podem incluir agentes aromatizantes.
[0121] 5.6. EXEMPLOS
[0122] Certos aspectos da invenção podem ser entendidos a partir dos exemplos a seguir.
[0123] 5.6.1. Camundongos com nocaute de AAK1
[0124] [0115] Camundongos homozigotos (-/-) para o rompimento do gene AAK1 foram preparados por dois métodos; aprisionamento de gene e recombinação homóloga.
[0125] Aprisionamento de gene é um método de mutagênese inser- cional aleatória que usa um fragmento de codificação de DNA para um gene marcador reporter ou selecionável como um mutágeno. Vetores de aprisionamento de gene foram designados para integrar em íntrons ou genes de uma maneira que permite o mecanismo de união celular para unir os éxons codificados por vetor a mRNAs celulares. Comumente, vetores de aprisionamento de gene contêm sequências marcadoras selecionáveis que são precedidas por sequências aceptoras de forte união e não são precedidas por um promotor. Desse modo, quando tais vetores integram-se em um gene, o mecanismo de união celular une éxons a partir do gene aprisionado sobre a extremidade 5' da sequência marcadora selecionável. Tipicamente, tais genes marcadores selecionáveis podem apenas ser expressos se o vetor codificando o gene estiver integrado dentro de um íntron. Os eventos de aprisionamento de gene resultante são subsequentemente identificados por seleção para células que podem sobreviver à cultura seletiva.
[0126] Células tronco embriônicas (células Lex-1 de linhagem murina derivada A129), foram mutados por um processo envolvendo a inserção de pelo menos uma porção de uma sequência de vetor geneticamente construída no gene de interesse, as células tronco embriônicas mutadas foram microinjetadas em blastocistos que foram subsequentemente intro-duzidos em hospedeiros fêmeas pseudográvidas e levadas a termo usando métodos estabelecidos. Veja, por exemplo, "Mouse Mutagenesis", 1998, Zambrowicz et al., eds., Lexicon Press, The Woodlands, TX. Os animais quiméricos resultantes foram subsequentemente criados para produzir filhores capazes de transmitssão de linha germinativa de um ale- lo contendo a mutação construída no gene de interesse.
[0127] Camundongos de gene AAK1 rompido foram também feitos por recombinação homóloga. Neste caso, o segundo éxon de codificação do gene AAK1 de murino (veja o Número de Acessão GenBank NM_177762) foi removido por métodos conhecidos na técnica. Veja, por exemplo, as Patentes dos Estados Unidos Nos. 5.487.992, 5.627.059, e 5.789.215.
[0128] Camundongos homozigotos (-/-) para o rompimento do gene AAK1 foram estudados em conjunto com camundongos heterozigotos (+/-) para o rompimento do gene AAK1, e filhotes tipo selvagem (+/+). Durante esta análise, os camundongos foram submetidos a uma preparação médica usando um conjunto integrado de procedimentos diagnósticos médicos designados para avaliar a função dos maiores sistemas de órgão em um indivíduo mamífero. Camundongos "nocaute" (-/-) homozigotos foram estudados em conjunto com seus filhotes heterozigotos (+/-) e tipo selvagem (+/+). Rompimento do gene AAK1 foi confirmado por análise do Sul. Expressão do homólogo murino de AAK1 foi detectada por RT-PCR em cérebro murino; medula espinhal; olho; timo; baço; pulmão; rim; fígado; músculo esqueletal; osso; estômago, intestine delgado e cólon; coração; adipose; pulmão asmático; fígado LPS; sangue; coração em faixas; árvore aórtica; próstata; e glândula mamária (virgem de 5 semanas, virgem madura, 12 DPC, 3 dias pós-parto (lactação), 3 dias após desmame (in- volução precoce), e 7 dias após desmame (involução tardia)).
[0129] Filhotes homozigotos AAK1 (-/-) e seu tipo selvagem (+/+) foram testados usando o teste de pata de formalina a fim de avaliar suas respostas nociceptivas agudas e tônicas. Para estes testes, Analisadores de Nociceptção Automáticos (adquiridos da Ozaki lab at University of California, San Diego) foram usados. Uma faixa de metal foi colocada em torno da pata traseira esquerda de cada camundongo 30 minutos antes do teste. Após o período de aclimação de 30 minutos, 20 μl de formalina a 5% são subcutaneamente injetados na superfície dorsal da pata traseira esquerda. Os camundongos foram individualmente alojados em câmaras cilíndricas durante 45 minutos. Um computador registrou os recuos por minuto, recuos totais para a fase I (fase aguda = primeiros 8 minutos), e recuos totais para a fase II (fase tônica = tempo entre 20 a 40 minutos) através de um campo eletromagnético. Veja Yaksh TL, Ozaki G, McCum- ber D, Rathbun M, Svensson C, Malkmus S, Yaksh MC. An automated flinch detecting system for use in the formalin nociceptive bioassay. J Appl Physiol., 2001; 90:2386-402.
[0130] Como mostrados na Figura 1, os dados da fase 1 e fase 2 foram obtidos usando fêmeas de camundongos homozigotos (-/-)(n = 16), fêmeas do tipo selvagem (n = 15), machos de camundongos homozigotos (-/-) (n = 9), e machos tipo selvagem (n = 18). Em todos os grupos e em ambas as fases, os camundongos (-/-) homozigotos AAK1 exibiram signi- ficantemente menos registros de recuo da pata do que seus filhotes do tipo selvagem (+/+). 5.6.2. Síntese de 1-[5-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)- tiofen-2-il]-etanona
Figure img0025
Parte A. 6-Flúor-imidazo[1,2-b]piridazina
Figure img0026
[0122] 6-Flúor-piridazin-3-ilamina [108784-42-5] (10 g, 89 mmol) foi combinado com uma solução aquosa a 50% (peso/v) de cloroacetaldeído [107-20-0] (23 mL, 177 mmol) em n-butanol (150 mL) e agitado ao refluxo durante 1 h. A solução de reação resfriada foi reduzida em volume e diluída com dietil éter para precipitar um sólido marrom, que foi coletado por filtração, para produzir 12,0 g. LRMS (ESI) m/z 138,0 [(M+H)]+, calculado para C6H4FN3: 137,12. Parte B. 3-Bromo-6-flúor-imidazo[1,2-b]piridazina
Figure img0027
[0131] Em uma temperatura ambiente, solução agitada de 6-flúor- imidazo[1,2-b]piridazina (2,1 g, 15,3 mmol) em ácido acético glacial (20 mL) foi lentamente adicionado bromo (2,5 g, 15,3 mmol). Após conclusão desta adição, a solução de reação foi vertida em água e extraída com acetato de etila. O extrato foi secado (MgSO4) e cromatografado flash (sílica-gel, eluída com 30% de (v/v) acetato de etila/hexanos) para fornecer 0,9 g de 3-bromo-6-flúor-imidazo[1,2-b]piridazina. LRMS (ESI) m/z 215,9/217,9 [(M+H)]+, calculado para C6H3BrFN3: 216,01. Parte C. 1-[5-(6-Flúor-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-tiofen-2-il]-etanona
Figure img0028
[0132] Uma mistura de 3-bromo-6-flúor-imidazo[1,2-b]piridazina (620 mg, 2,9 mmol), ácido 5-acetil-2-tiofenoborônico [206551-43-1] (634 mg, 3,7 mmol), carbonato de potássio [584-08-7] (792 mg, 5,7 mmol), e diclo- reto de bis(trifenilfosfina)paládio (II) [13965-03-2] (100 mg, 0,1 mmol) foi suspensa em um frasconete de reação de micro-ondas com uma solução a 25% (v/v) de água em acetonitrila (4,5 mL), em seguida agitada e irradiada para uma temperatura interna de 145°C durante 15 minutos. A mistura de reação resfriada foi diluída com acetato de etila, filtrada, e dividida entre hidróxido de sódio aquoso a 1 N e mais acetato de etila. O extrato orgânico foi cromatografado flash (sílica-gel, eluída com 20% de (v/v) acetato de etila/hexanos) para fornecer 1-[5-(6-flúor-imidazo[1,2- b]piridazin-3-il)-tiofen-2-il]-etanona como 300 mg de sólido amarelo. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 2,63 (s, 3 H) 7,00 (d, J=9,35 Hz, 1 H) 7,75 (d, J=4,04 Hz, 1 H) 7,83 (d, J=4,04 Hz, 1 H) 8,13 (dd, J=9,60, 7,07 Hz, 1 H) 8,21 (s, 1 H). LRMS (ESI) m/z 262,1[(M+H)]+, calculado para C12H8FN3OS: 261,28. Parte D. 1-[5-(6-Butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-tiofen-2-il]-eta- nona
Figure img0029
[0133] 1-[5-(6-Flúor-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-tiofen-2-il]-etanona (60 mg, 0,2 mmol) e butilamina [109-73-9] (0,1 mL, 10,2 mmol) foi irradiada por micro-ondas para uma temperatura interna de 120°C durante 10 minutos. Produto 1-[5-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-tiofen-2- il]-etanona foi purificado por RP-HPLC preparativa para fornecer 10,1 mg. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,03 (t, J=7,33 Hz, 3 H) 1,50 - 1,59 (m, 2 H) 1,72 - 1,79 (m, 2 H) 2,59 (s, 3 H) 3,47 (t, J=7,33 Hz, 2 H) 6,73 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,63 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,70 (d, J=4,04 Hz, 1 H) 7,85 (d, J=4,29 Hz, 1 H) 7,95 (s, 1 H). LRMS (ESI) m/z 315,2[(M+H)]+, calculado para C16H18N4OS: 314,41. 5.6.3. Síntese de 1-{5-[6-(2-hidróxi-etilamino)-imidazo[1,2-b] piridazin- 3-il]-tiofen-2-il}-etanona
Figure img0030
[0134] Carbonato de césio [534-17-8] (150 mg, 0,5 mmol) foi adicionado a uma solução de 1-[5-(6-flúor-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-tiofen-2- il]-etanona (60 mg, 0,2 mmol) e etanolamina [141-43-5] (29 mg, 0,5 mmol) em N,N-dimetilformamida (3 mL). A mistura foi agitada a 40°C durante 1 h em seguida dividida entre acetato de etila e água. Análise do extrato orgânico revelou relação de preparação do produto de arilamina desejado para o éter ser aproximadamente 2:1. RP-HPLC preparativa isolou 22 mg de 1-{5-[6-(2-hidróxi-etilamino)-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il]-tiofen-2-il}- etanona como um sólido amarelo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,83 (s, 3 H) 2,57 (s, 2 H) 3,04 (t, J=5,68 Hz, 1 H) 4,43 (t, J=5,68 Hz, 1 H) 7,04 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,91 (d, J=4,04 Hz, 1 H) 8,03 (d, J=4,04 Hz, 1 H) 8,16 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 8,36 (s, 1 H). LRMS (ESI) m/z 303,1[(M+H)]+, calculado para C14H14N4O2S: 302,36. 5.6.4. Síntese de 3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-metoxietil) imidazo[1,2- b] piridazin-6-amina
Figure img0031
Parte A. 3-bromo-N-(2-metoxietil)imidazo[1,2-b ]piridazin-6-amina
Figure img0032
[0135] Uma solução de 3-bromo-6-cloroimidazo[1,2-b]piridazina (844 mg, 3,77 mmol) e 2-metoxietanamina (1,44 mL) foi aquecida a 170°C (micro-ondas) durante 30 min. A mistura resultante foi resfriada para temperatura ambiente e purificada por HPLC preparativa (neutra) para fornecer 3-bromo-N-(2-metoxietil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (630 mg, 62% de produção) como um sólido não totalmente branco: 1H RMN (METANOL- d4) δ: 7,56 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,41 (s, 1H), 6,74 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,62 - 3,76 (m, 2H), 3,50 - 3,62 (m, 2H), 3,42 (s, 3H); LRMS(ESI) m/e 271,1 [(M+H)+, calculado para C9H12BrN4O 271,0] Parte B. 3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-metoxietil)imidazo[1,2-b]piridazin-6- amina
Figure img0033
[0136] A uma mistura de 3-bromo-N-(2-metoxietil)imidazo[1,2-b] piri- dazin-6-amina (229 mg, 0,85 mmol), ácido (4-(aminometil)fenil)borônico (395 mg, 2,11 mmol), [1,1‘-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) (62 mg, 0,085 mmol) e fosfato de potássio (540 mg, 2,54 mmol) foi adi- cionado 1:1 de dimetoxietano/água (3 mL). A mistura resultante foi aquecida a 160°C (micro-ondas) durante 6 min. A reação foi em seguida filtrada e diluída com uma mistura de 1:1:1 de metanol/água/acetonitrila, e em seguida filtrada novamente. A filtração foi finalmente purificada por HPLC preparativa (acídica) para fornecer sal de ácido mono acético de 3-(4- (aminometil)fenil)-N-(2-metoxietil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina como um sólido branco: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,18 - 8,33 (m, J = 8,3 Hz, 2H), 7,82 (s, 1H), 7,67 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,53 - 7,58 (m, J = 8,3 Hz, 2H), 6,78 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,14 (s, 2H), 3,68 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 3,58 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 3,42 (s, 3H), 1,93 (s, 3H); LRMS(ESI) m/e 298,2 [(M+H)+, calculado para C16H20N5O 298,2] 5.6.5. Síntese de 4-(6-((2-metoxietil)amino)imidazo[1,2-b] piridazin- 3- il)benzamida
Figure img0034
[0137] A uma mistura de 3-bromo-N-(2-metoxietil)imidazo[1,2-b]pi- ridazin-6-amina (57,6 mg, 0,21 mmol), ácido (4-carbamoilfenil) borônico (87,4 mg, 0,53 mmol), [1,1-bis(difenilfosfino) ferroceno] dicloropaládio (II) (7,7 mg, 0,011 mmol) e fosfato de potássio (134 mg, 0,63 mmol) foi adicionado 1:1 de dimetoxietano/água (0,75 mL). A mistura resultante foi aquecida a 160°C (micro-ondas) durante 6 min. A rea ção foi em seguida filtrada e diluída com uma mistura de 1:1:1 de metanol/água/acetonitrila, e em seguida filtrada novamente. A filtração foi finalmente purificada por HPLC preparativa (neutra) para fornecer 3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2- metoxietil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (9 mg, 14% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,29 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,98 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,89 (s, 1H), 7,66 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,79 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,69 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,59 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 3,42 (s, 3H); LRMS(ESI) m/e 312,2 [(M+H)+, calculado para C16H18N5O2 312,2]. 5.6.6. Síntese de 3-(4-(aminometil)fenil)-N-butilimidazo[1,2-b] piridazin-6-amina
Figure img0035
Parte A. 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b ]piridazin-6-amina
Figure img0036
[0138] Uma solução de 3-bromo-6-cloroimidazo[1,2-b]piridazina (1,2 g, 5,2 mmol) e N-butilamina (2 mL) foi aquecida a 170°C (micro-ondas) durante 30 min. A mistura resultante foi resfriada para temperatura ambiente e purificada por HPLC preparativa (neutra) para fornecer 3-bromo-N- butilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (887 mg, 63% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 7,53 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,39 (s, 1H), 6,69 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,38 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,59 - 1,73 (m, 2H), 1,41 - 1,53 (m, 2H), 1,01 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 269,1 [(M+H)+, calculado para C10H14BrN4 269,0]. Parte B. 3-(4-(aminometil)fenil)-N-butilimidazo[1,2-b ]piridazin-6-amina
Figure img0037
[0139] A uma mistura de 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6- amina (190 mg, 0,71 mmol), ácido (4-(aminometil)fenil)borônico (331 mg, 1,76 mmol), [1,1‘-bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaládio (II) (26 mg, 0,036 mmol) e fosfato de tripotássio (452 mg, 2,13 mmol) foi adicionado 1:1 de dimetoxietano/água (10 mL). A mistura resultante foi aquecida a 160°C (micro-ondas) durante 6 min. A reação foi em seguida filtrada e diluída com uma mistura de 1:1:1 de metanol/água/acetonitrila, e em seguida filtrada novamente. A filtração foi finalmente purificada por HPLC preparativa (acídica) para fornecer sal de ácido mono acético de 3-(4- (aminometil)fenil)-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (21 mg, 10% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,25 - 8,29 (m, 2H), 7,80 (s, 1H), 7,63 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,74 (s, 1H), 6,72 (s, 1H), 4,11 (s, 2H), 3,39 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,93 (s, 3H), 1,68 - 1,76 (m, 2H), 1,46 - 1,55 (m, 2H), 1,02 (t, J = 7,5 Hz, 3H); L- RMS(ESI) m/e 296,4 [(M+H)+, calculado para C17H22N5 296,2]. 5.6.7. Síntese de terc-butil éster de ácido {3-[3-(5-acetil-tiofen-2-il)- imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]-propil}-metil-carbâmico
Figure img0038
[0140] [0132] Carbonato de césio [534-17-8] (125 mg, 0,4 mmol) foi adicionado a uma solução de 1-[5-(6-flúor-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)- tiofen-2-il]-etanona (50 mg, 0,2 mmol) e terc-butil éster de ácido N-(3- aminopropil)-N-metilcarbâmico [150349-36-3] (72 mg, 0,4 mmol) em N,N- dimetilformamida (1,5 mL) e agitado durante a noite em temperatura ambiente em seguida dividido entre acetato de etila e água. O extrato orgânico foi evaporado e produto isolado por RP-HPLC preparativa para fornecer terc-butil éster de ácido {3-[3-(5-acetil-tiofen-2-il)-imidazo[1,2- b]piridazin-6-ilamino]-propil}-metil-carbâmico como um óleo amarelo. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,33 - 1,49 (m, 9 H) 2,04 (d, J=11,87 Hz, 2 H) 2,59 (s, 3 H) 2,91 (s, 3 H) 3,35 - 3,53 (m, 4 H) 4,62 (s, 1 H) 6,75 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,64 - 7,75 (m, 2 H) 7,87 (d, J=4,04 Hz, 1 H) 7,98 (s, 1 H). LRMS (ESI) m/z 430,2[(M+H)]+, calculado para C21H27N5O3S: 429,55. 5.6.8. Síntese de 4-(6-(Butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-N- metilbenzamida
Figure img0039
[0141] A uma mistura de 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6- amina (100 mg, 0,37 mmol), ácido (4-(metilcarbamoil)fenil)borônico (166 mg, 0,93 mmol), [1,1-bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaládio (II) (15 mg, 0,02 mmol) e fosfato de potássio (236 mg, 1,11 mmol) foi adicionado 1:1 de dimetoxietano/água (5 mL). A mistura resultante foi aquecida a 160°C (micro-ondas) durante 6 min. A reação foi em seguida filtrada e diluída com uma mistura de 1:1:1 de metanol/água/acetonitrila, e em seguida filtrada novamente. A filtração foi finalmente purificada por HPLC preparativa (acídica) para fornecer 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2- b]piridazin-3-il)-N-metilbenzamida (32,1 mg, 27% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,21 - 8,41 (m, 2H), 7,86 - 7,94 (m, 3H), 7,64 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,35 - 3,44 (m, 5H), 2,97 (s, 3H), 1,68 - 1,77 (m, 2H), 1,46 - 1,56 (m, 2H), 1,03 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 324,4 [(M+H)+, calculado para C18H22N5O 324,2]. 5.6.9. Síntese de [3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]- (tetra-hidro-piran-4-il)-amina
Figure img0040
Parte A. Tetra-hidro-2H-piran-4-amina
Figure img0041
[0142] Uma mistura de di-hidro-2H-piran-4(3H)-ona (2,3 mL, 25 mmol) e metanol (54 mL) foi tratada com formiato de amônio (15,8 g, 250 mmol) e H2O (6 mL). A mistura resultante foi mantida em temperatura ambiente com vigorosa agitação até tornar-se homogênea. A mistura foi em seguida tratada com paládio sobre carbono (2,5 g), e mantida em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi filtrada e concentrada para remover os orgânicos voláteis, em seguida a camada aquosa foi exaustivamente extraída com acetato de etila. Os orgânicos combinados foram secados (MgSO4), filtrados e concentrados para fornecer tetra- hidro-2H-piran-4-amina (2,2 g, 88%) como um óleo: 1H RMN (400 MHz, MeOD-d4) δ 3,89 - 3,99 (m, 2 H), 3,35 - 3,51 (m, 2 H), 2,81 - 2,95 (m, 1 H), 1,75 - 1,90 (m, 2 H), 1,31 - 1,48 (m, 2 H);
[0143] Parte B. 3-bromo-N-(tetra-hidro-piran-4-il)imidazo[1,2-b]piri- azin-6-amina
Figure img0042
[0144] Uma mistura de 3-bromo-6-fluoroimidazo[1,2-b]piridazina (1,4 g, 6,6 mmol), tetra-hidro-2H-piran-4-amina (1,0 g, 9,9 mmol), carbonato de césio (4,3 g, 13 mmol), e DMF (10 mL) foi mantida a 40°C durante 16 h, em seguida resfriada para RT e dividida entre acetato de etila (100 mL) e H2O (100 mL). As camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (4 x 40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H2O (100 mL) e salmoura (100 mL), em seguida secadas (MgSO4), filtradas e concentradas para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia flash (SiO2) para fornecer 3-bromo-N- (tetra-hidro-piran-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (1,6 g, 80%) como um sólido amarelo claro: 1H RMN (400 MHz, MeOD-d4) δ 7,58 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 7,42 (s, 2 H), 6,71 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 3,95 - 4,08 (m, 3 H), 3,60 (td, J=11,5, 2,3 Hz, 2 H), 2,16 (d, J=11,5 Hz, 2 H), 1,53 - 1,69 (m, 2 H); LCMS (ESI) m/e 297,1 [(M+H)+, calculado para C11H13BrN4O 297,0]. Parte C. [3-(4-Aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-(tetra-hidro- piran-4-il)-amina
Figure img0043
[0145] Uma mistura de 3-bromo-N-(tetra-hidro-piran-4-il)imidazo[1,2- b]piridazin-6-amina (100 mg, 0,34 mmol), cloridrato de ácido 4- (aminometil) fenilborônico (160 mg, 0,84 mmol), aduto de diclorometano de dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (25 mg, 0,034 mmol), fosfato de potássio (360 mg, 1,7 mmol), DME (1,5 mL) e H2O (0,5 mL) foi aquecida em um vaso cônico selado a 160°C d urante 360 s por irradiação por micro-ondas. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para fornecer um óleo que foi purificado por HPLC de fase reversa para fornecer [3-(4- aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-(tetra-hidro-piran-4-il)-amina (20,5 mg, 20%) como um sólido amarelo: 1H RMN (400 MHz, MeOD) δ 8,24 (d, J=8,4 Hz, 2 H), 7,82 (s, 1 H), 7,55 (d, J=8,4 Hz, 1 H), 6,74 (d, J=10 Hz, 1 H), 4,13 (s, 2 H), 4,06-3,92 (m, 3 H), 3,61 (t, J=11,2 Hz, 2 H), 2,15 (d, J=12,8 Hz, 2 H), 1,65 (qd, J=11,2, 4,4 Hz, 2 H); LCMS (ESI) m/e 324,2 [(M+H)+, calculado para C18H22N5O 324,2]. 5.6.10. Síntese de [3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b] piridazin-6- il]-cicloeilamina
Figure img0044
Parte A. 3-bromo-N-ciclo-hexilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
Figure img0045
[0146] Uma mistura de 3-bromo-6-fluoroimidazo[1,2-b]piridazina (1,1 g, 5,0 mmol), ciclo-hexilamina (0,86 mL, 7,5 mmol), carbonato de césio (3,3 g, 10 mmol), e DMF (10 mL) foi mantida a 40°C durante 6 h, em seguida resfriada para RT e dividida entre acetato de etila (100 mL) e H2O (100 mL). As camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (4 x 40 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H2O (100 mL) e salmoura (100 mL), em seguida secadas (MgSO4), filtradas e concentradas para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia flash (SiO2) para fornecer 3-bromo-N-(tetra- hidro-piran-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (1,1 g, 73%) como um sólido amarelo claro: 1H RMN (400 MHz, MeOD) δ 7,53 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 6,68 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 3,68 - 3,87 (m, 1 H), 2,14 (dd, J=12,6, 3,3 Hz, 2 H), 1,82 (dt, J=13,3, 3,7 Hz, 2 H), 1,70 (dt, J=12,8, 3,7 Hz, 1 H), 1,38 - 1,52 (m, 2 H), 1,23 - 1,38 (m, 3 H); LCMS (ESI) m/e 295,2 [(M+H)+, calculado para C12H15BrN4 295,1].
[0147] Parte B. [3-(4-Aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]- ciclo-hexilamina
Figure img0046
[0148] Uma mistura de 3-bromo-N-ciclo-hexilimidazo[1,2-b]piridazin- 6-amina (100 mg, 0,34 mmol), cloridrato de ácido 4-(aminometil) fenilbo- rônico (160 mg, 0,84 mmol), aduto de diclorometano de dicloro[1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (25 mg, 0,034 mmol), fosfato de potássio (360 mg, 1,7 mmol), DME (1,5 mL) e H2O (0,5 mL) foi aquecida em um vaso cônico selado a 160°C durante 360 s por irradiação por micro-ondas. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para fornecer um óleo que foi purificado por HPLC de fase reversa para fornecer [3-(4-aminometil-fenil)- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-ciclo-hexilamina (48 mg, 44%) como um sólido branco: 1H RMN (400 MHz, MeOD-d4) δ ppm 8,29 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 7,82 (s, 1 H), 7,63 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 7,54 (d, J=8,6 Hz, 2 H), 6,72 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,13 (s, 2 H), 3,70 - 3,78 (m, 1 H), 2,19 (d, J=9,1 Hz, 2 H), 1,83 - 1,93 (m, 2 H), 1,70 - 1,76 (m, 1 H), 1,42 - 1,54 (m, 2 H), 1,29 - 1,40 (m, 3 H); LCMS (ESI) m/e 322,2 [(M+H)+, calculado para C19H24N5 322,2]. 5.6.11. Síntese de 1-{5-[6-(3-metilamino-propilamino)-imidazo [1,2- b]piridazin-3-il]-tiofen-2-il}-etanona
Figure img0047
[0149] Preparado como no exemplo 5,6,3 de 1-[5-(6-flúor-imi- dazo[1,2-b]piridazina-3-il)-tiofen-2-il]-etanona (50 mg, 0,2 mmol) e terc- butil éster de ácido N-(3-aminopropil)-N-metilcarbâmico [150349-36-3] (72 mg, 0,4 mmol) e desprotegido com HCl anidroso em metanol. Purificação por RP-HPLC preparativa forneceu diacetato de 1-{5-[6-(3-metilamino- propilamino)-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il]-tiofen-2-il}-etanona como um sólido amarelo. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,92 - 1,96 (m, 5 H) 2,24 (t, J=7,45 Hz, 1 H) 2,62 (s, 2 H) 2,80 (s, 2 H) 3,23 - 3,31 (m, 2 H) 3,61 (t, J=7,33 Hz, 1 H) 6,79 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,70 - 7,74 (m, 1 H) 7,92 (d, J=4,04 Hz, 1 H) 8,06 (br. s., 1 H). LRMS (ESI) m/z 330,1[(M+H)]+, calculado para C16H19N5OS: 329,43. 5.6.12. Síntese de 3-(3-(aminometil)fenil)-N-butilimidazo[1,2-b] piridazin-6-amina
Figure img0048
[0150] A uma mistura de 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6- amina (62 mg, 0,23 mmol), ácido (3-(aminometil)fenil)borônico (108 mg, 0,58 mmol), [1,1‘-bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaládio (II) (8,4 mg, 0,01 mmol) e fosfato de potássio (146 mg, 0,69 mmol) foi adicionado 1:1 de dimetoxietano/água (3 mL). A mistura resultante foi aquecida a 160°C (micro-ondas) durante 6 min. A reação foi em seguida filtrada e diluída com uma mistura de 1:1:1 de metanol/água/acetonitrila, e em seguida filtrada novamente. A filtração foi finalmente purificada por HPLC preparati- va (acídica) para fornecer sal de ácido mono trifluoroacético de 3-(3- (aminometil)fenil)-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (24,1 mg, 25% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 7,53 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 6,83 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,73 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,93 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,33 (s, 2H), 2,59 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,12 (s, 3H), 0,87 - 0,96 (m, 2H), 0,64 - 0,74 (m, 2H), 0,20 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 296,4 [(M+H)+, calculado para C17H22N5 296,2]. 5.6.13. Síntese de N-butil-3-(4-(((2-metoxietil)amino)metil)fenil) imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
Figure img0049
Parte A. 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b ]piridazin-3-il)benzaldeído
Figure img0050
[0151] A uma mistura de 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6- amina (100 mg, 0,37 mmol), ácido (4-formilfenil) borônico (139 mg, 0,93 mmol), [1,1-bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaládio (II) (13,5 mg, 0,02 mmol) e fosfato de potássio (236 mg, 1,11 mmol) foi adicionado 3:1 de dimetoxietano/água (2 mL). A mistura resultante foi aquecida a 160°C (micro-ondas) durante 6 min. Após a reação ser resfriada e separada em duas camadas, a camada superior escura foi em seguida filtrada e diluída com uma mistura de 1:1:1 de metanol/água/acetonitrila, e em seguida filtrada novamente. A filtração foi finalmente purificada por HPLC preparativa (neutra) para fornecer 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il) en- zaldeído (78 mg, 72% de produção) como um sólido amarelo: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 10,01 (s, 1H), 8,47 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,98 - 8,03 (m, 2H), 7,97 (s, 1H), 7,66 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,42 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,74 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,52 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 1,03 (t, J = 7,5 Hz, 4H); LRMS(ESI) m/e 295,2 [(M+H)+, calculado para C17H19N4O 295,2]. Parte B. N-butil-3-(4-(((2-metoxietil)amino)metil)fenil)imidazo[1,2-b ]piri- dazin-6-amina
Figure img0051
[0152] À solução de 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il) ben- zaldeído (74 mg, 0,25 mmol) em 2 mL de dicloroeteno foi adicionado 2- metoxietanamina (21 mg, 0,28 mmol) e deixado agitar em temperatura ambiente durante 5 m. Triacetoxiboroidreto de sódio (106 mg, 0,5 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada em temperatura ambiente 18 h. Em seguida a reação foi saciada com solução de bicarbonato de sódio saturada e extraída com diclorometano três vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas. O produto bruto foi finalmente purificado por HPLC preparativa (acídica) para fornecer sal de ácido mono trifluoroacético de N-butil-3-(4- (((2-metoxietil)amino)metil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (55,8 mg, 48% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,23 - 8,28 (m, 3H), 7,96 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,24 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 4,35 (s, 2H), 3,68 - 3,73 (m, 2H), 3,35 - 3,47 (m, 5H), 3,26 - 3,31 (m, 2H), 1,67 - 1,76 (m, 2H), 1,44 - 1,54 (m, 2H), 1,01 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 354,5 [(M+H)+, calculado para C20H28N5 354,2]. 5.6.14. Síntese de 1-{5-[6-(2-metil-butilamino)-imidazo[1,2-b]piridazin- 3-il]-tiofen-2-il}-etanona
Figure img0052
[0153] Preparado como no exemplo 5,6,3 de 1-[5-(6-flúor-imi- dazo[1,2-b]piridazina-3-il)-tiofen-2-il]-etanona (50 mg, 0,2 mmol) e 2- metilbutilamina racêmico [96-15-1] (42 mg, 0,5 mmol). Purificação por RP-HPLC preparativa forneceu 1-{5-[6-(2-metil-butilamino)-imidazo[1,2- b]piridazin-3-il]-tiofen-2-il}-etanona como um sólido amarelo. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 0,88 - 1,01 (m, 5 H) 1,19 - 1,30 (m, 1 H) 1,50 - 1,61 (m, 4 H) 1,89 (dq, J=13,29, 6,74 Hz, 1 H) 2,54 (s, 2 H) 3,26 - 3,33 (m, 1 H) 3,40 - 3,49 (m, 1 H) 4,57 (t, J=5,73 Hz, 1 H) 6,43 - 6,47 (m, 1 H) 7,21 (s, 1 H) 7,56 - 7,58 (m, 1 H) 7,61 - 7,67 (m, 2 H) 7,90 (s, 1 H). LRMS (ESI) m/z 329,1[(M+H)]+, calculado para C17H20N4OS: 328,44. 5.6.15. Síntese de 1-{5-[6-(3-flúor-propilamino)-imidazo[1,2-b] piridazin-3-il]-tiofen-2-il}-etanona
Figure img0053
[0154] Preparado como no exemplo 5,6,3 de 1-[5-(6-flúor-imidazo [1,2-b]piridazina-3-il)-tiofen-2-il]-etanona (50 mg, 0,2 mmol) e cloridrato de 3-fluoropropilamina [64068-31-1] (43 mg, 0,4 mmol). 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,52 (s, 6 H) 2,12 - 2,25 (m, 1 H) 2,54 (s, 1 H) 3,66 - 3,72 (m, 1 H) 4,72 (t, J=5,51 Hz, 1 H) 7,21 (s, 2 H) 7,63 - 7,67 (m, 1 H). LRMS (ESI) m/z 319,1[(M+H)]+, calculado para C15H15FN4OS: 318,38. 5.6.16. Síntese de N-butil-3-(4-(pirrolidin-1-ilmetil)fenil)imidazo[1,2- b]piridazin-6-amina
Figure img0054
[0155] À solução de 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3- il)benzaldeído (58 mg, 0,20 mmol) em 1,5 mL de dicloroeteno foi adicionado pirrolidina (15,4 mg, 0,22 mmol) e deixado agitar em temperatura ambiente durante 5 m. Triacetoxiboroidreto de sódio (83,5 mg, 0,4 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada em temperatura ambiente 18 h. Em seguida a reação foi saciada com solução de bicarbonato de sódio saturada e extraída com diclorometano três vezes. As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas e concentradas. O produto bruto foi finalmente purificado por HPLC preparativa (acídica) para fornecer sal de ácido mono trifluoroacético de N-butil-3-(4- (pirrolidin-1-ilmetil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (32,2,8 mg, 35% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,22 - 8,33 (m, 3H), 7,97 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,25 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 4,49 (s, 2H), 3,57 (br. s., 2H), 3,41 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 3,26 (br. s., 2H), 2,22 (br. s., 2H), 2,07 (br. s., 2H), 1,65 - 1,82 (m, 2H), 1,39 - 1,59 (m, 2H), 1,00 (t, J = 7,5 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 350,5 [(M+H)+, calculado para C21H28N5 350,2]. 5.6.17. Síntese de terc- butil éster de ácido {3-[3-(4-aminometil-fenil)- imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]-propil}-metil-carbâmico
Figure img0055
Parte A. 3-Bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ona
Figure img0056
[0156] A uma solução de 3-bromo-6-cloro-imidazo[1,2-b]piridazina [13526-66-4] (425,7 mg, 1,8 mmol) em 1,2-dimetoxietano (9 mL) foi adicionada uma solução de hidróxido de potássio [1310-58-3] (185,4 mg, 2,8 mmol) em água (9,0 mL) e a solução resultante agitada aquecida ao refluxo sob N2 durante 3 dias, resfriada e dividida entre acetato de etila e água. A fase de água foi evaporada até a secura, apreendida em metanol, filtrada, e evaporada para produzir 3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6- ona como 340 mg de sólido amarelo. LRMS (ESI) m/z 214,0/216,0 [(M+H)]+, calculado para C6H4BrN3O3: 214,02. Parte B. terc-butil éster de ácido [3-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6- ilamino)-propil]-metil-carbâmico
Figure img0057
[0157] Acetonitrila (16,0 mL) foi adicionado a uma mistura de 3- bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ona (344,3 mg, 1,6 mmol) e hexafluoro- fosfato de (benzotriazol-1-ilóxi)tris(dimetilamino)fosfônio (reagente BOP) [56602-33-6], a mistura deixada agitar para efetuar a dissolução. Uma solução de terc-butil éster de ácido (3-amino-propil)-metil-carbâmico [150349-36-3] (0,8 g, 3,98 mmol) e 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (DBU) [6674-22-2] (2,4 mL, 2,4 mmol) em DMF (4,0 mL) foi adicionada e a reação deixada agitar em temperatura ambiente durante 3 dias. A solução de reação foi dividida entre salmoura e acetato de etila, secada (Mg- SO4), e cromatografada flash (sílica-gel, eluída com 10% de (v/v) 2- propanol/acetato de etila) para fornecer terc-butil éster de ácido [3-(3- bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-propil]-metil-carbâmico como 0,4 g de óleo amarelo claro. LRMS (ESI) m/z 384,1/386,1 [(M+H)]+, calculado para C15H22BrN5O2: 384,28. Parte C. terc-butil éster de ácido {3-[3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2- b]piridazin-6-ilamino]-propil}-metil-carbâmico.
[0158] A uma mistura de terc-butil éster de ácido [3-(3-bromo-imidazo [1,2-b]piridazin-6-ilamino)-propil]-metil-carbâmico (381,0 mg, 1,0 mmol), cloridrato de ácido 4-aminometilfenilborônico [75705-21-4] (222,8 mg, 1,2 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (632,4 mg, 3,0 mmol), e complexo de [1,1-bis(difenilfosfino) ferroceno] dicloropa- ládio (II), com diclorometano [95464-05-4] (164,8 mg, 0,2 mmol) contida em um frasco de base redonda de 50 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2-dimetoxietano (25 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85°C durante 17 h em seguida resfriada e filtrada através de auxiliar de filtragem firmemente empacotado e o filtrado transferido para um funil separatório e dividido entre salmoura e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4) e cromatografado flash (sílica-gel, eluída com 1% de NH4OH concentrado em 10% de (v/v) metanol/acetato de etila) para fornecer 81,2 mg de óleo marrom. Este produto foi também purificado por RP-HPLC preparativa para isolar terc-butil éster de ácido {3-[3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]-propil}-metil- carbâmico como 4,6 mg de sólido branco. 1H RMN (400 MHz, METANOL- d4) δ ppm 1,89 - 2,00 (m, 10 H) 2,87 (br. s., 3 H) 3,41 (q, J=7,16 Hz, 5 H) 4,14 (s, 2 H) 6,74 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,56 (m, J=8,34 Hz, 2 H) 7,66 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,81 (s, 1 H) 8,25 (m, J=8,34 Hz, 2 H). LRMS (ESI) m/z 411,1[(M+H)]+, calculado para C22H30N6O2: 410,52. 5.6.18. Síntese de [3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]- (3-fenil-propil)-amina
Figure img0058
Parte A. (3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-(3-fenil-propil)-amina
Figure img0059
[0159] Uma mistura de 3-bromo-6-cloro-imidazo[1,2-b]piridazina (232 mg, 1 mmol) e fenilpropil amina (1 ml, 7 mmol) em n-PrOH (1 mL) foi aquecida em um micro-ondas a 150°C durante 20 min. M ais fenilpropil amina (0,5 ml) foi adicionado e a mistura de reação aquecida durante mais 20 min., em seguida 30 min., em um micro-ondas. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi submetido a ISCO (coluna de 40 g, DCM 3 min., em seguida 0 - 10% de MeOH em DCM durante 30 min.) para fornecer o produto (380 mg ~90% puro e foi usado diretamente para a etapa seguinte). Parte B. [3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-(3-fenil-propil)- amina.
[0160] Uma mistura de (3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-(3-fenilpropil)-amina (100 mg, 0,3 mmol), cloridrato de ácido (4-aminometilfenil) borônico (67 mg, 0,36 mmol), K2CO3 (124 mg, 0,9 mmol) e diclorobis(trifenilfosfina)paládio (II) (11 mg, 0,015 mmol) em MeCN/água (3,6ml/0,9 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 150°C durante 20 min. A mistura de reação foi diluída com MeOH (2 ml) e filtrada. O filtrado foi submetido à HPLC preparativa para fornecer o composto título como sal de AcOH (29,9 mg). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,93 (s, 3 H) 1,99 - 2,09 (m, 2 H) 2,70 - 2,80 (m, 2 H) 3,41 (t, J=6,95 Hz, 2 H) 4,14 (s, 2 H) 6,74 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,15 - 7,29 (m, 5 H) 7,53 (d, J=8,34 Hz, 2 H) 7,64 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,80 (s, 1 H) 8,24 (d, J=8,59 Hz, 2 H).
[0161] 5.6.19 Síntese de pentil-[3-(4-pirrolidin-2-il-fenil)- imidazo[1,2-b] piridazin-6-il]-amina
Figure img0060
Parte A. 2-(4-(6-(pentilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)fenil) pirrolidina- 1-carboxilato de terc-butila
Figure img0061
[0162] A 150 mg (0,530 mmol) do 3-bromo-N-pentilimidazo[1,2- b]piridazin-6-amina foram adicionados o 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)fenil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila (237 mg, 0,636 mmol), K3PO4 (225 mg, 1,060 mmol), PdCl2(PPh3)3 (37 mg, 0,053 mmol), 3 mL de DME e 1 mL de água. Esta mistura foi tratada por microondas durante 0,5 hr a 140°C. Após resfriar, ela fo i diluída com 25 mL de EtOAC, e lavada com cerca de 20 mL de salmoura. A camada orgânica foi secada sobre MgSO4, e concentrada. A mistura bruta foi purificada sobre uma coluna de sílica-gel de 12 g (ISCO), eluindo com 15-100% de EtOAc/Hex para fornecer 159 mg (67%) do produto desejado. Parte B. Pentil-[3-(4-pirrolidin-2-il-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-amina.
[0163] A 45 mg deste composto, dissolvidos em 10 mL de MeOH a 0°C foi adicionado 1,0 ml (excesso) de AcCl (lentam ente) e a mistura resultante agitada a 0°C durante 4 hr. Ela foi em seg uida concentrada até a secura para obter 32 mg (100% de produção) de um sal de HCl do composto desejado. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 0,91 - 0,99 (m, 3 H) 1,37 - 1,52 (m, 4 H) 1,74 (quin, J=7,01 Hz, 2 H) 2,22 - 2,40 (m, 3 H) 2,50 - 2,66 (m, 1 H) 3,36 - 3,42 (m, 2 H) 3,47 - 3,59 (m, 2 H) 4,75 - 4,81 (m, 1 H) 7,30 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,75 (d, J=8,08 Hz, 2 H) 8,00 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,22 - 8,35 (m, 3 H); LRMS (ESI) m/e 350,0 [(M + H)+, calculado para C21H27N5 349,0]. 5.6.20. Síntese de butil-[3-(1 H-pirazol-4-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6- il]-amina
Figure img0062
[0164] Uma mistura de 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6- amina (100 mg, 0,37 mmol), ácido (1H-pirazol-4-il)borônico (90 mg, 0,45 mmol), dicloro-bis(trifenilfosfino)paládio (II) (15 mg, 0,021 mmol), fosfato de potássio (80 mg, 0,56 mmol), acetonitrila (1,5 mL) e H2O (0,5 mL) foi aquecida em um vaso cônico selado a 160°C durante 1 000 s por irradia- ção por micro-ondas. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para fornecer um óleo que foi purificado por HPLC de fase reversa para fornecer butil-[3-(1H- pirazol-4-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-amina (60 mg, 62%) como um sólido branco: 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,67 (s, 1 H), 7,59 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 6,67 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 3,44 (t, J=7,1 Hz, 1 H), 1,70 - 1,80 (m, 1 H), 1,46 - 1,59 (m, 1 H), 1,03 (t, J=7,3 Hz, 1 H); LCMS (ESI) m/e 257,3 [(M+H)+, calculado para C13H17N6 257,1]. 5.6.21. Síntese de butil-{3-[4-(terc-butilamino-metil)-3-flúor-fenil]- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il}-amina
Figure img0063
Parte A. 4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b ]piridazin-3-il)-2-fluorobenzaldeído
Figure img0064
[0165] Uma mistura de 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6- amina (300 mg, 1,1 mmol), ácido 3-flúor-4-formilfenilborônico (230 mg, 1,3 mmol), dicloro-bis(trifenilfosfino)paládio (II) (40 mg, 0,055 mmol), carbonato de potássio (230 mg, 1,7 mmol), acetonitrila (1,5 mL) e H2O (0,5 mL) foi aquecida em um vaso cônico selado a 160°C d urante 1000 s por irradiação por micro-ondas. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para fornecer um óleo que foi purificado por HPLC de fase reversa para fornecer 4-(6- butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-2-fluorobenzaldeído (240 mg, 68%) como um sólido amarelo: 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 10,39 (s, 1 H), 8,28 (dd, J=12,9, 1,5 Hz, 1 H), 7,91 - 8,01 (m, 3 H), 7,73 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 6,54 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 3,48 (td, J=7,2, 5,8 Hz, 2 H), 1,69 - 1,80 (m, 2 H), 1,46 - 1,57 (m, 2 H), 1,03 (t, J=7,5 Hz, 3 H); LCMS (ESI) m/e 313,2 [(M+H)+, calculado para C17H18FN4O 313,1]. Parte B. Butil-{3-[4-(terc-butilamino-metil)-3-flúor-fenil]-imidazo[1,2-b] piri- dazin-6-il}-amina.
[0166] Uma mistura de 4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-2- flúor-benzaldeído (30 mg, 0,10 mmol) e dicloroetano (DCE, 1 mL) foi tratada com terc-butil amina (0,011 mL, 0,11 mmol) e a mistura de reação resultante foi mantida em temperatura ambiente durante 20 min. A reação foi em seguida tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (23 mg, 0,11 mmol) e a mistura resultante foi mantida até LCMS indicar completo consumo do aldeído. A reação foi saciada com bicarbonato de sódio aquoso saturado, as camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com diclorometano (3 x 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (20 mL) e salmoura (20 mL), em seguida secadas (MgSO4), filtradas e concentradas para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC de fase reversa para fornecer butil-{3-[4-(terc-butilamino- metil)-3-flúor-fenil]-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il}-amina (32 mg, 86%) como um sólido branco: 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,21 (dd, J=12,3, 1,5 Hz, 1 H), 7,93 (dd, J=8,0, 1,7 Hz, 1 H), 7,82 (s, 1 H), 7,58 (d, J=9,7 Hz, 1 H), 7,50 (t, J=8,0 Hz, 1 H), 6,68 (d, J=9,7 Hz, 1 H), 4,02 (s, 2 H), 3,34 (t, J=7,2 Hz, 2 H), 1,60 - 1,73 (m, 2 H), 1,39 - 1,51 (m, 2 H), 1,24 - 1,35 (m, 10 H), 0,91 - 1,00 (m, 3 H); LCMS (ESI) m/e 370,2 [(M+H)+, calculado para C21H29FN5 370,2]. 5.6.22. Síntese de N-(3-((3-(5-acetiltiofen-2-il)imidazo[1,2-b] piridazin- 6-il)amino)propil)-N-isopropilacetamida
Figure img0065
Parte A. N1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)propano-1,3-diamina
Figure img0066
[0167] Propileno diamina [109-76-2] (7,5 mL, 90,3 mmol) foi adicionado a uma suspensão agitada de 3-bromo-6-cloro-imidazo[1,2-b]piridazina [13526-66-4] (2,1 g, 9,0 mmol) em tolueno (18,1mL) e foi aquecido ao refluxo, sob camisa de N2, durante 7 dias, em seguida dividido entre hidróxido de sódio a 1 N aquoso e acetato de etila. O extrato foi lavado com água, em seguida evaporado para obter 1,1 g de semissólido amarelo. LRMS (ESI) m/z 270,0/272,0 [(M+H)]+, calculado para C9H12BrN5: 270,13. Parte B. N1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N3-isopropilpropano- 1,3-diamina
Figure img0067
[0168] Acetona [67-64-1] (2,0 mL, 43,5 mmol), em seguida, peneira molecular Angstrom 4, ativada, em pó foram adicionadas a uma solução de N1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)propano-1,3-diamina (367,2 mg, 1,4 mmol) em metanol (4,8 mL). O vaso de reação foi fechado e a mistura deixada rapidamente agitar, em temperatura ambiente, durante 17 h em seguida seu conteúdo rapidamente transferido em uma suspensão em agitação de boroidreto de sódio [16940-66-2] (0,3 g, 6,9 mmol) em metanol (50 mL). Após 1 h, a mistura foi filtrada por gravidade e o filtrado evaporado. O produto bruto foi em seguida apreendido em acetato de etila, lavado com salmoura, secado (MgSO4) e evaporado para fornecer 196,9 mg de sólido amarelo. LRMS (ESI) m/z 312,0/314,0 [(M+H)]+, calculado para C12H18BrN5: 312,21. Parte C. N-(3-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)propil)-N-isopro- pilacetamida
Figure img0068
[0169] Cloreto de acetila [75-36-5] (1,0 mL, 14,1 mmol) foi adicionado, em porções, em uma solução em temperatura ambiente de N1-(3- bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N3-isopropilpropano-1,3-diamina (196,9 mg, 0,6 mmol) em piridina (6,5 mL), e agitado sob camisa de N2 durante 17 h. Piridina foi evaporada da mistura de reação e o resíduo dividido entre bicarbonato de sódio (peso/v) a 5% aquoso e acetato de etila. A fase orgânica foi lavada com salmoura, secada (MgSO4) e evaporada para fornecer 219,2 mg de óleo escuro. LRMS (ESI) m/z 354,1/356,1 [(M+H)]+, calculado para C14H20BrN5O: 354,25. Parte D. N-(3-((3-(5-acetiltiofen-2-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) propil)-N-isopropilacetamida.
[0170] A uma mistura de N-(3-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)propil)-N-isopropilacetamida (219,2 mg, 0,6 mmol), ácido (5- acetiltiofen-2-il)borônico [206551-43-1] (128,4 mg, 0,8 mmol), monohidra- to tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (266,5 mg, 1,3 mmol), e complexo de [1,1-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloro-paládio (II), com di- clorometano [95464-05-4] (53,6 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 25 mL foi adicionada uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2-dimetoxietano (13 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85°C durante 17 h em seguida resfriada e dividida entre salmoura e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4) e evaporado para produzir um sólido marrom escuro. Produto foi purificado por RP-HPLC preparativa. Frações de cromatografia purificadas foram combinadas e divididas entre bicarbonato de sódio saturado aquoso e acetato de etila. O extrato orgânico secado (CaSO4) e evaporado para fornecer N-(3-((3- (5-acetiltiofen-2-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)propil)-N- isopropilacetamida como 45,7 mg de sólido amarelo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,05 - 1,20 (m, 4 H) 1,24 (br. s., 1 H) 1,86 - 2,03 (m, 4 H) 2,49 - 2,56 (m, 6 H) 3,24 - 3,48 (m, 5 H) 6,76 (dd, J=9,73, 1,14 Hz, 1 H) 7,33 - 7,43 (m, 1 H) 7,79 - 7,84 (m, 1 H) 7,97 (d, J=4,04 Hz, 1 H) 8,14 (d, J=5,05 Hz, 1 H). LRMS (ESI) m/z 400,2[(M+H)]+, calculado para C20H25N5O2S: 399,52. 5.6.23. Síntese de 6-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-3,4-di- hidro-2H-isoquinolin-1 -ona
Figure img0069
[0171] Uma mistura de 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6-ami- na (160 mg, 0,61 mmol), ácido (1-oxo-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-6-il) borônico (200 mg, 0,73 mmol), aduto de diclorometano de dicloro[1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (50 mg, 0,06 mmol), fosfato de potássio (250 mg, 1,2 mmol), DME (1,5 mL) e H2O (0,5 mL) foi aquecida em um vaso cônico selado a 160°C durante 360 s por irradiação por microondas. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para fornecer um óleo que foi purificado por HPLC de fase reversa para fornecer 6-(6-butilamino- imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-3,4-di-hidro-2H-isoquinolin-1-ona (90 mg, 44%) como um sólido branco: 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,11 - 8,20 (m, 2 H), 7,94 (d, J=8,2 Hz, 1 H), 7,84 (s, 1 H), 7,57 (d, J=9,7 Hz, 1 H), 6,67 (d, J=9,7 Hz, 1 H), 3,50 (t, J=6,7 Hz, 2 H), 3,34 (t, J=7,2 Hz, 2 H), 3,00 (t, J=6,6 Hz, 2 H), 1,60 - 1,75 (m, 2 H), 1,36 - 1,50 (m, 2 H), 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3 H); LCMS (ESI) m/e 336,2 [(M+H)+, calculado para C19H22N5O 336,2]. 5.6.24. Síntese de 3-(6-aminopiridin-3-il)-N-butilimidazo[1,2-b] piridazin-6-amina
Figure img0070
[0172] A uma mistura de 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6- amina (75 mg, 0,28 mmol), (5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)piridin-2-il)carbamato de terc-butila (107 mg, 0,33 mmol), [1,1‘-bis (difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) (10 mg, 0,014 mmol) e fosfato de potássio (58 mg, 0,42 mmol) foi adicionado 3:1 de acetonitrila/água (2 mL). A mistura resultante foi aquecida a 145°C (mic ro-ondas) durante 1000 s. A reação foi em seguida filtrada e concentrada. O resíduo foi finalmente purificado por HPLC preparativa (neutra) para fornecer 3-(6- aminopiridin-3-il)-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (50,3 mg, 47% de produção) como um sólido amarelo: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,72 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,08 (dd, J = 8,7, 2,3 Hz, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,52 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 6,58 - 6,66 (m, 2H), 4,78 - 4,88 (m, 11H), 3,27 - 3,33 (m, 3H), 1,62 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 1,42 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 0,91 - 0,97 (m, 3H); LRMS(ESI) m/e 283,4 [(M+H)+, calculado para C15H19N6 283,2]. 5.6.25. Síntese de butil-{3-[4-(terc-butilamino-metil)-2-flúor-fenil]- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il}-amina
Figure img0071
Parte A. 4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-3-flúor-benzaldeído
Figure img0072
[0173] Uma mistura de 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6- amina (810 mg, 3,0 mmol), ácido 2-flúor-4-formilfenilborônico (1,2 g, 7,5 mmol), aduto de diclorometano de dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino) ferroce- no]paládio (II) (200 mg, 0,30 mmol), fosfato de potássio (1,9 g, 9,0 mmol), DME (9 mL) e H2O (3 mL) foi mantida em um vaso selado a 80°C duran te 12 h. A camada orgânica foi separada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um sólido amarelo que foi purificado por HPLC de fase reversa para fornecer 4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-3-flúor- benzaldeído (600 mg, 64%) como um sólido branco: 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ ppm 10,02 (d, J=1,8 Hz, 1 H), 8,84 - 8,93 (m, 1 H), 8,12 (d, J=4,3 Hz, 1 H), 7,79 (dd, J=8,1, 1,5 Hz, 1 H), 7,68 - 7,76 (m, 2 H), 6,55 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 3,43 (td, J=7,1, 5,6 Hz, 2 H), 1,67 - 1,78 (m, 2 H), 1,49 (dq, J=15,0, 7,4 Hz, 2 H), 1,01 (t, J=7,3 Hz, 3 H); LCMS (ESI) m/e 313,1 [(M+H)+, calculado para C17H18FN4O 313,1]. Parte B. Butil-{3-[4-(terc-butilamino-metil)-2-flúor-fenil]-imidazo[1,2-b] piri- dazin-6-il}-amina.
[0174] Uma mistura de 4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-3- flúor-benzaldeído (120 mg, 0,40 mmol) e dicloroetano (DCE, 4 mL) foi tratada com terc-butil amina (0,050 mL, 0,50 mmol) e a mistura de reação resultante foi mantida em temperatura ambiente durante 20 min. A reação foi em seguida tratada com triacetoxiboroidreto de sódio (170 mg, 0,80 mmol) e a mistura resultante foi mantida até LCMS indicar completo consumo do aldeído. A reação foi saciada com bicarbonato de sódio aquoso saturado, as camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com diclorometano (3 x 20 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (20 mL) e salmoura (20 mL), em seguida secadas (MgSO4), filtradas e concentradas para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC de fase reversa para fornecer butil-{3-[4-(terc-butilamino- metil)-2-flúor-fenil]-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il}-amina (98 mg, 67%) como um sólido branco: 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,21 (dd, J=12,3, 1,5 Hz, 1 H), 7,93 (dd, J=8,0, 1,7 Hz, 1 H), 7,82 (s, 1 H), 7,58 (d, J=9,7 Hz, 1 H), 7,50 (t, J=8,0 Hz, 1 H), 6,68 (d, J=9,7 Hz, 1 H), 4,02 (s, 2 H), 3,34 (t, J=7,2 Hz, 2 H), 1,84 (s, 1 H), 1,61 - 1,71 (m, 2 H), 1,39 - 1,50 (m, 2 H), 1,32 (s, 9 H), 1,25 - 1,30 (m, 1 H), 0,91 - 0,99 (m, 3 H); LCMS (ESI) m/e 370,2 [(M+H)+, calculado para C21H29FN5 370,2]. 5.6.26. Síntese de Butil-[3-(1H-indazol-5-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6- il]-amina
Figure img0073
[0175] Uma mistura de 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6-ami- na (140 mg, 0,50 mmol), pinacol éster de ácido (1H-indazol-5-borônico (150 mg, 0,60 mmol), dicloro-bis(trifenilfosfino)paládio (II) (20 mg, 0,025 mmol), carbonato de potássio (110 mg, 0,75 mmol), acetonitrila (1,5 mL) e H2O (0,5 mL) foi aquecida em um vaso cônico selado a 160°C durante 1000 s por irradiação por micro-ondas. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para fornecer um óleo que foi purificado por HPLC de fase reversa para fornecer butil-[3-(1H-indazol-5-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-amina (100 mg, 65%) como um sólido branco: 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,62 - 8,68 (m, 1 H), 8,13 - 8,20 (m, 2 H), 8,02 (dd, J=8,8, 1,5 Hz, 1 H), 7,94 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 7,72 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,21 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 3,43 (t, J=7,2 Hz, 2 H), 1,66 - 1,79 (m, 2 H), 1,49 (dq, J=15,1, 7,4 Hz, 2 H), 0,99 (t, J=7,5 Hz, 3 H); LCMS (ESI) m/e 307,2 [(M+H)+, calculado para C17H19N6 307,2]. 5.6.27. Síntese de terc-butil éster de ácido (3-{[3-(5-acetil-tiofen-2-il)- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-metil-amino}-propil)-carbâmico
Figure img0074
Parte A. N-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N'-metil-propano-1,3- diamina e N*1 *-(3-bromo-imidazo[ 1,2-b]piridazin-6-il)-N*1*-metil-propano- 1,3-diamina
Figure img0075
[0176] 3-Bromo-6-cloro-imidazo[1,2-b]piridazina [13526-66-4] (1,0 g, 4,5 mmol) foi dissolvido em N-metil-propano-1,3-diamina [6291-84-5] (8,0 mL, 77,3 mmol) e a solução agitada a 65°C sob camis a de N2 durante 4 h, em seguida dividida entre bicarbonato de sódio aquoso saturado e acetato de etila. O extrato orgânico foi secado (MgSO4), filtrado, e evaporado para obter 1,31 g de óleo amarelo como uma mistura dos compostos títulos. LRMS (ESI) m/z 284,0/286,0 [(M+H)]+, calculado para C10H14BrN5: 284,16. LRMS (ESI) m/z 284,0/286,0 [(M+H)]+, calculado para C10H14BrN5: 284,16. Parte B. N-{3-[(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-metil-amino]-propil}- 2,2,2-trifluoro-acetamida
Figure img0076
[0177] Uma mistura de N-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N'- metil-propano-1,3-diamina e N*1*-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)- N*1*-metil-propano-1,3-diamina (1,31 g, 4,6 mmol) foi dissolvida, com agitação, em acetato de etila (46 mL). Anidrido trifluoroacético [407-25-0] (6,4 mL, 46,1 mmol) foi lentamente adicionado à solução agitada em temperatura ambiente e a reação aquecida a 50°C durante 8h para assegurar completa trifluoroacetilação. A reação foi lavada com salmoura, secada (MgSO4), evaporada e cromatografada flash (sílica-gel, eluída com 50% de (v/v) acetona/hexanos) para isolar dois produtos bem resolvidos: Rf = 0,35 (produto monotrifluoroacetilado desejado) e Rf = 0,53 (produto di-triflouroacetilado). Frações de cromatografia de componente de Rf = 0,53 foram combinadas e evaporadas para obter 0,87 g de sólido amarelo. Frações de cromatografia de componente de Rf = 0,35 (produto desejado) foram combinadas e evaporadas para obter 0,54 g de óleo amarelo claro. LRMS (ESI) m/z 380,0/382,0 [(M+H)]+, calculado para C12H13BrF3N5O: 380,17 Parte C. terc-butil éster de ácido {3-[(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)- metil-amino]-propil}-carbâmico
Figure img0077
[0178] Água (10 mL) foi adicionada a uma mistura de N-{3-[(3-bromo- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-metil-amino]-propil}-2,2,2-trifluoro-acetamida (0,5 g, 1,4 mmol) e carbonato de potássio [584-08-7] (1,1 g, 8,0 mmol) em metanol (10 mL) e deixada agitar em temperatura ambiente durante 3 dias. A mistura foi evaporada até a secura e o resíduo triturado em acetato de etila. A suspensão de acetato de etila foi filtrada de seus sólidos insolúveis, à ela foram adicionados dicarbonato de di-terc-butila [24424-99-5] (0,3 g, 1,5 mmol) e N-metilmorfolina [109-02-4] (0,5 mL, 4,3 mmol), a reação foi agitada durante a noite, lavada com salmoura, secada (MgSO4), e evaporada para produzir 0,5 g de óleo amarelo claro. LRMS (ESI) m/z 384,1/386,1 [(M+H)]+, calculado para C15H22BrN5O2: 384,28. Parte D. terc-butil éster de ácido (3-{[3-(5-acetil-tiofen-2-il)-imidazo[1,2- b]piridazin-6-il]-metil-amino}-propil)-carbâmico.
[0179] terc-Butil éster de ácido (3-{[3-(5-acetil-tiofen-2-il)-imidazo[1,2- b]piridazin-6-il]-metil-amino}-propil)-carbâmico foi preparado e isolado si-milarmente ao procedimento detalhado no exemplo 5.6.17 de uma mistu- ra de terc-butil éster de ácido {3-[(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)- metil-amino]-propil}-carbâmico (0,5 g, 1,3 mmol), ácido 5-acetil-2- tiofenoborônico [206551-43-1] (0,3 g, 1,5 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (0,5 g, 2,5 mmol), e complexo de [1,1‘- bis(difenilfosfino) ferroceno]dicloropaládio (II), com diclorometano [9546405-4] (0,1 g, 0,1 mmol) em uma solução de 30% de (v/v) água em 1,2- dimetoxietano (30 mL) para fornecer 0,16 g de pó amarelo, ponto de fusão 148-149 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,37 (s, 9 H) 1,78 (quin, J=6,95 Hz, 2 H) 2,54 (s, 3 H) 3,05 (q, J=6,57 Hz, 2 H) 3,17 (s, 3 H) 3,61 (t, J=7,20 Hz, 2 H) 6,88 (br. s., 1 H) 7,12 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,82 (d, J=4,29 Hz, 1 H) 7,92 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,97 (d, J=4,04 Hz, 1 H) 8,20 (s, 1 H). LRMS (ESI) m/z 430,1[(M+H)]+, calculado para C21H27BN5O3S: 429,55. 5.6.28. Síntese de N-[3-(5-aminometil-tiofen-2-il)-imidazo[1,2-b] piridazin-6-il]-N'-metil-N'-fenil-etano-1,2-diamina
Figure img0078
Parte A. N1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N3-metil-N3-fenilpro- pano-1,3-diamina
Figure img0079
[0180] A 300 mg (1,389 mmol) do 3-bromo-6-fluoroimidazo[1,2-b] pi- ridazina, foram adicionados N1-metil-N1-fenilpropano-1,3-diamina (456 mg, 2,778 mmol), Cs2CO3 (903 mg, 2,778 mmol) e 10 mL de DMF. Esta mistura é agitada durante a noite em temperatura ambiente. Ela foi diluída com 30 mL de EtOAc, e 15 mL de água. A camada orgânica foi lavada com salmoura e secada sobre MgSO4. Ela foi concentrada e purificada usando cromatografia de sílica-gel (ISCO) eluindo com 0 - 10% de Me- OH/DCM para obter 301 mg (60%) de produto. Parte B. N-[3-(5-aminometil-tiofen-2-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-N'- metil-N'-fenil-etano-1,2-diamina.
[0181] O produto isolado obtido de Parte A foi acoplado ao ácido (4- (aminometil)fenil)borônico pela reação Suzuki descrita no exemplo 5.6.19 para obter o composto título em 56% de produção. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 2,14 (t, J=7,06 Hz, 2 H) 3,08 (s, 3 H) 3,53 - 3,69 (m, 4 H) 4,27 (s, 2 H) 6,75 (t, J=7,28 Hz, 1 H) 6,85 - 6,93 (m, 3 H) 7,26 (t, J=8,05 Hz, 2 H) 7,65 (d, J=8,38 Hz, 2 H) 7,80 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,95 (s, 1 H) 8,38 (d, J=8,38 Hz, 2 H); LRMS (ESI) m/e 387,0 [(M + H)+, calculado para C23H26N6 386,0]. 5.6.29. Síntese de butil-[3-(1H-imidazol-4-il)-imidazo[1,2-b] piridazin- 6-il]-amina
Figure img0080
Parte A. Ácido (6-(butilamino)imidazo[1,2-b ]piridazin-3-il)borônico
Figure img0081
[0182] Uma solução pré-resfriada (-78°C) de 3-bromo-N-butilimidazo [1,2-b]piridazin-6-amina (200 mg, 0,74 mmol) e tetra-hidrofurano (4 mL) foi tratada gota a gota com n-butillítio (1,2 mL, 1,6 M, 1,9 mmol). A mistura de reação resultante foi mantida a -78°C durante 5 min, em seguida tratada gota a gota com tris(isopropil)borato (0,21 mL, 0,89 mmol) e mantida a -78°C durante 2,5 h. A reação foi saciada co m H2O (1 mL) e deixa- da aquecer para RT. Os voláteis orgânicos foram removidos sob pressão reduzida, e a camada aquosa foi acidificada com HCl a 1 N até um precipitado branco formar-se. O sólido foi coletado por filtração para fornecer ácido (6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)borônico (100 mg, 58%) como um sólido branco: 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,56 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 6,66 (d, J=9,9 Hz, 1 H), 3,25 - 3,35 (m, 2 H), 1,60 - 1,75 (m, 1 H), 1,37 - 1,58 (m, 1 H), 0,94 - 1,08 (m, 1 H); LCMS (E- SI) m/e 235,2 [(M+H)+, calculado para C10H15BN4O2 235,1]. Parte B. Butil-[3-(1 H-imidazol-4-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-amina.
[0183] Uma mistura de ácido (6-(butilamino)imidazo[1,2-b] piridazin-3- il)borônico (120 mg, 0,5 mmol), 4-bromo-1H-imidazol (75 mg, 0,5 mmol), aduto de diclorometano de dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino) ferroceno]paládio (II) (40 mg, 0,050 mmol), fosfato de potássio (210 mg, 1,0 mmol), DME (1,5 mL) e H2O (0,5 mL) foi aquecida em um vaso cônico selado a 140°C durante 600 s por irradiação por micro-ondas. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 mL). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas sob pressão reduzida para fornecer um óleo que foi purificado por HPLC de fase reversa para fornecer butil-[3-(1H-imidazol-4-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-amina (95 mg, 72%) como um sólido branco: 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,99 (br. s., 1 H), 7,82 (d, J=1,0 Hz, 2 H), 7,60 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 6,68 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 3,44 (t, J=7,1 Hz, 2 H), 1,69 - 1,82 (m, 2 H), 1,46 - 1,60 (m, 2 H), 1,03 (t, J=7,3 Hz, 3 H); LCMS (ESI) m/e 257,2 [(M+H)+, calculado para C13H17N6 257,1]. 5.6.30. Síntese de 3-(4-(aminometil)-3-fluorofenil)-N-butilimidazo [1,2- b]piridazin-6-amina
Figure img0082
Parte A. 4-bromo-2-fluorobenzilcarbamato de terc- butila
Figure img0083
[0184] À solução de sal de mono HCl de (4-bromo-2-fluoro- fenil)metanamina (336 mg, 1,4 mmol) em 1:1 de 1,4-dioxano/água (8 mL) foram adicionados trietil amina (312 mg, 3,08 mmol) e dicarbonato de di- terc-butila (366 mg, 1,68 mmol). A reação foi mantida em temperatura ambiente durante 2 dias, e em seguida saciada com solução de bicarbonato de sódio saturada (8 mL) e extraída com acetato de etila (8 mL) três vezes. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (8 mL) e secadas sobre sulfato de sódio, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer 4-bromo-2-fluorobenzilcarbamato de terc- butila (419 mg, 96% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (CLOROFÓRMIO-d) δ: 7,05 - 7,29 (m, 3H), 3,65 (s, 2H), 1,39 (s, 9H); LRMS(ESI) m/e 304,0 [(M+H)+, calculado para C12H16BrFNO2 304,0]. Parte B. 2-flúor-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) benzilcarba- mato de terc-butila
Figure img0084
[0185] Uma mistura de 4-bromo-2-fluorobenzilcarbamato de terc- butila (419 mg, 1,38 mmol), bis(pinacolato)dibóro (385 mg, 1,52 mmol), [1,1‘-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) (101 mg, 0,138 mmol), acetato de potássio (406 mg, 4,13 mmol) e 1,4-dioxano (10 mL) foi agitada a 80°C durante 18 h. A reação foi em seguid a filtrada e concentrada para fornecer um resíduo que foi purificado por cromatografia de coluna sobre sílica-gel (0-30% de acetato de etila em hexano) para fornecer 2-flúor-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzilcarbamato de terc-butila (293 mg, 61% de produção) como um óleo claro: 1H RMN (CLOROFÓRMIO-d) δ: 7,51 - 7,62 (m, 1H), 7,47 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 7,35 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 4,39 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 1,46 (s, 9H), 1,33 - 1,38 (m, 12H). Parte C. 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b ]piridazin-3-il)-2-fluorobenzilcar- bamato de terc- butila
Figure img0085
[0186] A uma mistura de 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6- amina (187 mg, 0,7 mmol), 2-flúor-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaboro- lan-2-il)benzilcarbamato de terc-butila (293 mg, 1,2 mmol), [1,1- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) (24 mg, 0,034 mmol) e fosfato de tripotássio (144 mg, 1,04 mmol) foi adicionado 3:1 de acetoni- trila/água (3 mL). A mistura resultante foi aquecida a 145°C (micro-ondas) durante 800 s. A reação foi em seguida filtrada e concentrada. O resíduo foi dissolvido em metanol, e em seguida filtrado novamente. A filtração foi finalmente purificada por HPLC preparativa (neutra) para fornecer 4-(6- (butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-2-fluorobenzilcarbamato de terc- butila (110 mg, 38% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (CLOROFÓRMIO-d) δ: 8,02 (dd, J = 11,9, 1,3 Hz, 1H), 7,78 - 7,89 (m, 2H), 7,74 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,43 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,28 (s, 2H), 6,52 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,95 (br. s., 1H), 4,31 - 4,57 (m, 3H), 3,45 (td, J = 7,1, 5,6 Hz, 2H), 1,68 - 1,80 (m, 2H), 1,02 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 414,3 [(M+H)+, calculado para C22H29FN5O2 414,2]. Parte D. 3-(4-(aminometil)-3-fluorofenil)-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6- amina.
[0187] Uma solução de 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)- 2-fluorobenzilcarbamato de terc-butila (91 mg, 0,22 mmol) foi resfriada para 0°C e tratada com cloreto de acetila (518 mg, 6,6 mmol). A reação foi mantida em temperatura ambiente durante a noite. A solução resultante foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer sal de HCl de 3-(4- (aminometil)-3-fluorofenil)-N-butilimidazo[1,2-b] piridazin-6-amina (75 mg, 88% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,38 (s, 1H), 8,23 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,74 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 4,31 (s, 2H), 3,43 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,65 - 1,84 (m, 2H), 1,42 - 1,59 (m, 2H), 1,01 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 314,4 [(M+H)+, calculado para C17H21FN5 314,2]. 5.6.31. Síntese de [3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]- butil-metil-amina
Figure img0086
Parte A. (3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-butil-metil-amina
Figure img0087
[0188] Uma solução pura de 3-bromo-6-cloro-imidazo[1,2-b]piridazina [13526-66-4] (522,9 mg, 2,3 mmol) em N-metil butilamina [110-68-9] (3,0 mL, 24,3 mmol) e base de Hunig [7087-68-5] (0,6 mL, 3,5 mmol) foi agitada sob camisa de N2 a 65°C durante a noite em seguida evaporada para fornecer 0,9 g de sólido amarelo, usado na etapa seguinte sem outra purificação. LRMS (ESI) m/z 283,1/285,1 [(M+H)]+, calculado para C11H15BrN4: 283,17. Parte B. [3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-butil-metil-ami- na.
[0189] A uma mistura de (3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-butil- metil-amina (377,7 mg, 1,3 mmol), cloridrato de ácido 4-aminome- tilfenilborônico [75705-21-4] (302,4 mg, 1,6 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (612,7 mg, 2,7 mmol), e complexo de [1,1-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) com diclorometano [95464-05-4] (110,4 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 25 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2-dimetoxietano (15 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85°C durante 17 h, em seguida resfriada e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (CaSO4), evaporado e cromatografado flash (síli- ca-gel, eluída com 1% de NH4OH em 10% (v/v) de metanol/acetato de etila) para isolar um sólido marrom que foi triturado em heptano para precipitar um sólido marrom. Solvente de trituração foi em seguida evaporado para fornecer [3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-butil- metil-amina como 41,8 mg de sólido branco, ponto de fusão 99-101 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,94 (t, J=7,33 Hz, 3 H) 1,30 - 1,42 (m, 2 H) 1,47 - 1,70 (m, 2 H) 1,90 (br. s., 1 H) 3,10 (s, 3 H) 3,51 - 3,57 (m, 2 H) 3,75 (s, 2 H) 7,05 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,42 (d, J=8,34 Hz, 2 H) 7,85 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 7,92 (s, 1 H) 8,14 (d, J=8,34 Hz, 2 H). LRMS (ESI) m/z 310,3 [(M+H)]+, calculado para C18H23N5:309,42. 5.6.32. Síntese de N-butil-3-(isoindolin-5-il)imidazo[1,2-b] piridazin-6- amina
Figure img0088
Parte A. 5-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)isoindolina-2-carbo- xilato de terc-butila
Figure img0089
[0190] A uma mistura de ácido (6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin- 3-il)borônico (47 mg, 0,2 mmol), 5-bromoisoindolina-2-carboxilato de terc- butila (47 mg, 0,16 mmol), [1,1‘-bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaládio (II) (7 mg, 0,01 mmol) e fosfato de tripotássio (41 mg, 0,3 mmol) foi adicionado 3:1 de acetonitrila /água (3 mL). A mistura resultante foi aquecida a 145°C (micro-ondas) durante 800 s. A reação foi em seguida filtrada e concentrada. O resíduo foi dissolvido em metanol, e em seguida filtrado novamente. A filtração foi finalmente purificada por HPLC preparati- va (neutra) para fornecer 5-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il) ni- soindolina-2-carboxilato de terc-butila (43 mg, 66% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,15 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 8,00 - 8,08 (m, 1H), 7,75 (s, 1H), 7,59 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,35 (t, J = 9,1 Hz, 1H), 6,68 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 4,69 (br. s., 4H), 3,37 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 1,65 - 1,78 (m, 2H), 1,56 (s, 9H), 1,45-1,53 (m, 2H), 1,02 (td, J = 7,3, 2,3 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 408,3 [(M+H)+, calculado para C23H30N5O2 408,2]. Parte B. N-butil-3-(isoindolin-5-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina.
[0191] Uma solução de 5-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il) visoindolina-2-carboxilato de terc-butila (38 mg, 0,09 mmol) foi resfriada para 0°C e tratada com cloreto de acetila (220 mg, 2,8 mmol). A reação foi mantida em temperatura ambiente durante a noite. A solução resultante foi concentrada sob pressão reduzida para fornecer cloridrato de N- butil-3-(isoindolin-5-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (12 mg, 35% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,26 (s, 1H), 8,17 - 8,21 (m, 2H), 7,98 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 4,76 (s, 4H), 3,36 - 3,45 (m, 2H), 1,63 - 1,81 (m, 2H), 1,40 - 1,56 (m, 2H), 1,00 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 308,4 [(M+H)+, calculado para C18H22N5 308,2]. 5.6.33. Síntese de 1-{3-[3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b] piri- dazin-6-ilamino]-propil}-pirrolidin-2-ona
Figure img0090
Parte A. 1-(3-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) propil)pirrolidin- 2-ona
Figure img0091
[0192] O 3-bromo-6-fluoroimidazo[1,2-b]piridazina foi alquilado com 1-(3-aminopropil)pirrolidin-2-ona, sob a mesma condição de reação como usado na síntese de N1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N3-metil- N3-fenilpropano-1,3-diamina exemplo 5.6.29 para obter 68% de produto. Parte B. 1-{3-[3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]- propil}-pirrolidin-2-ona.
[0193] O 1-(3-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) propil) pir- rolidin-2-ona foi também acoplado ao ácido (4-(aminometil)fenil)borônico usando as condições de acoplamento Suzuki descritas no exemplo 5.6.19 para obter o produto título em 64% de produção. 1H RMN (400 MHz, ME- TANOL-d4) δ ppm 1,94 - 2,09 (m, 4 H) 2,33 - 2,43 (m, 2 H) 3,36 - 3,53 (m, 6 H) 4,16 (s, 2 H) 6,74 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,57 (m, J=8,34 Hz, 2 H) 7,65 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,81 (s, 1 H) 8,25 (m, J=8,34 Hz, 2 H); LRMS (ESI) m/e 365,0 [(M + H)+, calculado para C20H24N6O 364,0]. 5.6.34. Síntese de 5-(6-((3-(2-oxopirrolidin-1-il)propil)amino) imi- dazo[1,2-b]piridazin-3-il)tiofeno-2-carboxamida
Figure img0092
Parte A. ácido 5-(6-((3-(2-oxopirrolidin-1-il)propil)amino)imidazo[1,2-b] pi- ridazin-3-il)tiofeno-2-carboxílico
Figure img0093
[0194] O acoplamento Suzuki de ácido 5-boronotiofeno-2-carboxílico e 1-(3-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) propil)pirrolidin-2-ona usando o procedimento descrito no exemplo 5.6.19 produziu 64% do composto título. Parte B. N-(2,4-dimetoxibenzil)-5-(6-((3-(2-oxopirrolidin-1-il)propil) ami- no)imidazo[ 1,2-b]piridazin-3-il)tiofeno-2-carboxamida
Figure img0094
[0195] A reação de acoplamento de amida do ácido carboxílico com 2,4-dimetóxi-benzilamina forneceu 83% de produto. Parte C. 5-(6-((3-(2-oxopirrolidin-1-il)propil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin- 3-il)tiofeno-2-carboxamida.
[0196] A 50 mg (0,094 mmol) de N-(2,4-dimetoxibenzil)-5-(6-((3-(2- oxopirrolidin-1-il)propil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)tiofeno-2- carboxamida dissolvidos em 1 mL de DCM foram adicionados 5 mL de TFA. O solvente resultante foi agitado em temperatura ambiente durante 0,5 hr e em seguida concentrado. Ele foi purificado na HPLC PREP para obter 26 mg (72%) do produto desejado. 1H RMN (400 MHz, METANOL- d4) δ ppm 2,04 (quin, J=7,39 Hz, 4 H) 2,33 - 2,41 (m, 2 H) 3,45 - 3,60 (m, 6 H) 6,76 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,64 - 7,72 (m, 2 H) 7,75 (d, J=4,04 Hz, 1 H) 7,94 (s, 1 H); LRMS (ESI) m/e 385,0 [(M + H)+, calculado para C18H20N6O2S 384,0]. 5.6.35. Síntese de N-(2-aminoetil)-4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b] piridazin-3-il)benzamida
Figure img0095
Parte A. 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b ]piridazin-3-il)benzoato de metila
Figure img0096
[0197] A uma mistura de 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6- amina (386 mg, 1,43 mmol), ácido (4-(metoxicarbonil)fenil)borônico (310 mg, 1,72 mmol), [1,1-bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaládio (II) (50 mg, 0,07 mmol) e carbonato de potássio (296 mg, 2,15 mmol) foi adicionado 3:1 de acetonitrila/água (5 mL). A mistura resultante foi aquecida a 145°C (micro-ondas) durante 800 s. A reação foi em seguida filtrada e concentrada. O resíduo foi dissolvido em metanol, e em seguida filtrado novamente. A filtração foi finalmente purificada por cromatografia de coluna sobre sílica-gel (50% de acetato de etila em hexano) para fornecer 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzoato de metila (312 mg, 67% de produção) como um sólido amarelo: 1H RMN (CLOROFÓRMIO- d) δ: 8,22 - 8,34 (m, 2H), 8,09 - 8,20 (m, 2H), 7,93 (s, 1H), 7,71 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,51 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,41 - 3,53 (m, 2H), 1,72 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,50 (dd, J = 15,0, 7,5 Hz, 2H), 1,02 (t, J = 7,5 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 325,2 [(M+H)+, calculado para C18H21N4O2 325,2]. Parte B. N-(2-aminoetil)-4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)ben- zamida.
[0198] Uma solução de metil alumínio (2,0 M em hexano, 0,31 mL, 0,62 mmol) em tolueno (2 mL) foi resfriada para 0°C . Em seguida, à solução em agitação foi respectivamente adicionados gota a gota etano-1,2- diamina (37,4 mg, 0,62 mmol), e a solução de 4-(6-(butilamino) imida- zo[1,2-b]piridazin-3-il)benzoato de metila (126 mg, 0,39 mmol) em tolueno ( 1 mL). A reação resultante foi refluxada a 110°C durante a noite, e em seguida resfriada para 0°C. À solução foram adicion ados gota a gota água (0,05 mL), metanol (0,2 mL) e clorofórmio (0,2 mL). A mistura resultante foi refluxada sobre um banho de vapor durante 15 m, e em seguida filtrada sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa para fornecer sal de ácido acético de N-(2-aminoetil)-4- (6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzamida (5,7 mg, 4% de produção) como um sólido amarelo: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,27 - 8,43 (m, J = 8,6 Hz, 2H), 7,95 - 8,04 (m, J = 8,3 Hz, 2H), 7,89 (s, 1H), 7,65 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,68 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 3,41 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,16 (br. s., 2H), 1,95 (br. s., 5H), 1,73 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,42 - 1,61 (m, 2H), 1,02 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 353,4 [(M+H)+, calculado para C19H25N6O 353,2]. 5.6.36. Síntese de N-butil-3-(4-(4,5-di-hidro-1H-imidazol-2-il)fenil) imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
Figure img0097
[0199] Uma solução de metil alumínio (2,0 M em hexano, 0,31 mL, 0,62 mmol) em tolueno (2 mL) foi resfriada para 0°C . Em seguida, à solução em agitação foram respectivamente adicionados gota a gota etano- 1,2-diamina (37,4 mg, 0,62 mmol), e a solução de 4-(6-(butilamino) imida- zo[1,2-b]piridazin-3-il)benzoato de metila (126 mg, 0,39 mmol) em tolueno (1 mL). A reação resultante foi refluxada a 110°C d urante a noite, e em seguida resfriada para 0°C. À solução foram adicion ados gota a gota água (0,05 mL), metanol (0,2 mL) e clorofórmio (0,2 mL). A mistura resultante foi refluxada sobre um banho de vapor durante 15 m, e em seguida filtrada sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa para fornecer sal de ácido acético de N-butil-3-(4-(4,5- di-hidro-1H-imidazol-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (3,9 mg, 3% de produção) como um sólido amarelo: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,46 - 8,59 (m, J = 8,8 Hz, 2H), 8,01 (s, 1H), 7,93 - 7,98 (m, J = 8,8 Hz, 2H), 7,67 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,13 (s, 4H), 3,42 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,86 - 2,05 (m, 6H), 1,74 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,39 - 1,61 (m, 2H), 1,03 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 335,4 [(M+H)+, calculado para C19H23N6 335,2]. 5.6.37. Síntese de 3-(6-(aminometil)piridin-3-il)-N-butilimidazo[1,2- blpiπdazm-6-amina
Figure img0098
[0200] A uma mistura de ácido (6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin- 3-il)borônico (36 mg, 0,15 mmol), (5-bromopiridin-2-il)metanamina (35 mg, 0,18 mmol), [1,1-bis(difenilfosfino)ferroceno] dicloropaládio (II) (5 mg, 0,01 mmol) e carbonato de potássio (31 mg, 0,23 mmol) foi adicionado 3:1 de acetonitrila /água (3 mL). A mistura resultante foi aquecida a 145°C (micro-ondas) durante 800 s. A reação foi em seguida filtrada e concentrada. O resíduo foi dissolvido em metanol, e em seguida filtrado novamente. A filtração foi finalmente purificada por HPLC preparativa para fornecer sal de ácido acético de 3-(6-(aminometil)piridin-3-il)-N-butilimidazo [1,2-b]piridazin-6-amina (13 mg, 29% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,64 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,66 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,39 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,94 (s, 4H), 1,71 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 1,41 - 1,58 (m, 2H), 1,01 (t, J = 7,5 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 297,4 [(M+H)+, calculado para C16H21N6, 297,2]. 5.6.38. Síntese de isopropil éster de ácido {3-[3-(4-aminometil-fenil)- imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]-propil}-metil-carbâmico
Figure img0099
Parte A. 2,2,2-Trifluoro-N-(3-metilamino-propil)-acetamida
Figure img0100
[0201] Trifluoroacetato de etila [383-63-1] (7,5 mL, 62,9 mmol) foi lentamente adicionado em uma solução em temperatura ambiente de N1- metilpropano-1,3-diamina [6291-84-5] (6,5 mL, 62,8 mmol) em THF ani- droso (100 mL), em seguida deixado agitar, sob camisa de N2 durante 17 h. A solução de reação foi em seguida evaporada para fornecer 12,3 g de líquido incolor claro. LRMS (ESI) m/z 185,1 [(M+H)]+, calculado para C6H11F3N2O: 184,16. Parte B. isopropil éster de ácido metil-[3-(2,2,2-trifluoro-acetilamino)- propil]-carbâmico
Figure img0101
[0202] A uma solução, com camisa de N2, a 0°C, rapidamente agitada de 2,2,2-trifluoro-N-(3-metilamino-propil)-acetamida (6,0 g, 32,4 mmol) e N-metilmorfolina [109-02-4] (7,1 mL, 64,6 mmol) em acetato de etila (65 mL) foi firmemente adicionada uma solução a 1,0 M de cloroformiato de isopropila em tolueno (32,4 mL) durante o curso de 10 minutos. A reação foi deixada agitar e aquecer para temperatura ambiente durante a noite tempo no qual ela foi lavada com salmoura, secada (MgSO4) e evaporada para fornecer 9,0 g de óleo amarelo claro. LRMS (ESI) m/z 271,1 [(M+H)]+, calculado para C10H17F3N2O3: 270,25. Parte C. isopropil éster de ácido (3-amino-propil)-metil-carbâmico
Figure img0102
[0203] Uma suspensão de isopropil éster de ácido metil-[3-(2,2,2- trifluoro-acetilamino)-propil]-carbâmico (9,0 g, 33,15 mmol), e carbonato de potássio [584-08-7] em 50% (v/v) de metanol/água (200 mL) foi agitada em temperatura ambiente, sob camisa de N2 durante 17 h, filtrada, e o filtrado evaporado para reduzir seu volume. A solução de produto aquosa resultante foi colocada em um extrator contínuo e extraída com acetato de etila em 2 dias. O extrato de acetato de etila foi secado (CaSO4) e evaporado para fornecer 6,3 g de óleo amarelo claro. LRMS (ESI) m/z 175,1[(M+H)]+, calculado para C8H18N2O2: 174,24. Parte D. isopropil éster de ácido [3-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6- ilamino)-propil]-metil-carbâmico
Figure img0103
[0204] Uma mistura agitada de isopropil éster de ácido (3-amino- propil)-metil-carbâmico (3,0 g, 17,0 mmol), 3-bromo-6-cloro-imidazo[1,2- b]piridazina [13526-66-4] (723,7 mg, 3,1 mmol), e base de Hunig [708768-5] (0,6 mL, 3,2 mmol) foi aquecida para 85°C, so b camisa de N2, durante 3 dias em seguida pré-absorvida sobre sílica-gel e cromatografada flash (sílica-gel eluída com 10% (v/v) de metanol/acetato de etila) para obter 1,0 g de óleo amarelo claro. LRMS (ESI) m/z 370,2/372,2 [(M+H)]+, calculado para C14H20BrN5O2: 370,25. Parte E. isopropil éster de ácido {3-[3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b] piridazin-6-ilamino]-propil}-metil-carbâmico.
[0208] A uma mistura de isopropil éster de ácido [3-(3-bromo- imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-propil]-metil-carbâmico (601,4 mg, 1,6 mmol), cloridrato de ácido (4-(aminometil)fenil)borônico [75705-21-4] (366,3 mg, 2,0 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (1,1 g, 4,9 mmol), e complexo de [1,1-bis(difenilfosfino) fer- roceno]dicloro-paládio (II) com diclorometano [95464-05-4] (138,7 mg, 0,2 mmol) contida em um frasco de base redonda de 50 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2-dimetoxietano (12 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85°C durante 17 h e m seguida resfriada e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4), purificado por RP-HPLC preparativa. Frações de cromatografia purificadas foram combinadas e divididas entre bicarbonato de sódio saturado aquoso e acetato de etila. O extrato orgânico secado (CaSO4) e evaporado para fornecer isopropil éster de ácido {3-[3-(4-aminometil- fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]-propil}-metil-carbâmico como 19,4 mg de óleo amarelo claro. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,12 (br. s., 2 H) 1,17 - 1,28 (m, 4 H) 1,84 - 1,98 (m, 2 H) 2,90 (s, 2 H) 3,10 - 3,21 (m, 1 H) 3,32 - 3,43 (m, 3 H) 3,88 (s, 2 H) 4,78 - 4,87 (m, 4 H) 6,69 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,45 (d, J=8,34 Hz, 2 H) 7,61 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,69 - 7,75 (m, 1 H) 8,12 (dd, J=8,21, 2,65 Hz, 2 H),13C RMN (100 MHz, ME- TANOL-d4) δ ppm 22,58, 37,39, 40,24, 46,39, 70,29, 110,81, 114,20, 125,95, 126,19, 127,75, 127,85, 128,87, 129,41, 129,65, 129,73, 130,34, 138,67, 141,99, 155,32. LRMS (ESI) m/z 397,3[(M+H)]+, calculado para C21H28N6O2: 396,50. 5.6.39. Síntese de 5-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-indan- 1-ona
Figure img0104
Parte A. 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2,3-di-hidro-1 H- inden-1-ona
Figure img0105
[0205] Uma mistura de 5-bromo-2,3-di-hidro-1H-inden-1-ona (1,1 g, 5,0 mmol), bis(pinacolata)dibóro (1,9 g, 7,5 mmol), acetato de potássio (2,5 g, 25 mmol), aduto de diclorometano de dicloro[1,1’-bis(dife- nilfosfino)ferroceno]paládio (II) (400 mg, 0,5 mmol), e DMF (25 mL) foi mantida a 80°C durante 12 h. A mistura resultante foi deixada resfriar para RT, em seguida dividida entre acetato de etila (200 mL) e H2O (240 mL). As camadas foram separadas, e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 50 mL). Camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H2O e salmoura, em seguida secadas (MgSO4), filtradas e concentradas para fornecer um resíduo escuro que foi purificado por croma- tografia flash (SiO2) para fornecer 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)-2,3-di-hidro-1H-inden-1-ona 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,96 (s, 1 H), 7,80 - 7,84 (m, 1 H), 7,74 - 7,79 (m, 1 H), 3,13 - 3,20 (m, 2 H), 2,69 - 2,75 (m, 2 H), 1,39 (s, 12 H). Parte B. 5-(6-butilamino-imidazo[ 1,2-b]piridazin-3-il)-indan-1 -ona.
[0206] Uma mistura de 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6- amina (400 mg, 1,5 mmol), 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)- 2,3-di-hidro-1H-inden-1-ona (770 mg, 3,0 mmol), aduto de diclorometano de dicloro[1,1’-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (240 mg, 0,30 mmol), fosfato de potássio (1,0 g, 4,5 mmol), DME (6 mL) e H2O (2 mL) foi aquecida em um vaso selado a 80°C durante 12 h. A reação foi resfriada para RT, em seguida a camada orgânica foi separada e concentrada sob pressão reduzida para fornecer um óleo que foi purificado por croma- tografia flash (SiO2) para fornecer 5-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin- 3-il)-indan-1-ona (410 mg, 85%) como um sólido rosa: 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,52 (s, 1 H), 8,22 (d, J=8,1 Hz, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,65 (d, J=8,1 Hz, 1 H), 7,17 (t, J=5,4 Hz, 1 H), 6,75 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 3,22 - 3,42 (m, 3 H), 3,05 - 3,18 (m, 2 H), 2,58 - 2,71 (m, 2 H), 1,58 - 1,73 (m, 2 H), 1,34 - 1,51 (m, 2 H), 0,89 - 1,00 (m, 3 H); LCMS (ESI) m/e 321,2 [(M+H)+, calculado para C19H21N4O 321,2]. 5.6.40. Síntese de [3-(1-amino-indan-5-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]- butil-amina
Figure img0106
[0207] Uma mistura de 5-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)- indan-1-ona (50 mg, 0,16 mmol), acetato de amônio (500 mg), e metanol (5 mL) foi mantida em temperatura ambiente durante 5 min, em seguida tratada com cianoboroidreto de sódio (500 mg). A mistura resultante foi aquecida para 50°C e mantida 16 h, em seguida resfriada para RT e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dividido entre acetato de etila e bicarbonato de sódio aquoso saturado. As camadas foram separa- das e a camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, em seguida secadas (MgSO4), filtradas e concentradas para fornecer um resíduo que foi purificado por HPLC de fase reversa para fornecer [3-(1-amino-indan-5- il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-butil-amina (26 mg, 52%) como um sólido branco: 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,22 (s, 1 H), 8,12 (d, J=8,1 Hz, 1 H), 7,78 (s, 1 H), 7,54 - 7,66 (m, 2 H), 6,72 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,77 - 4,83 (m, 1 H), 3,38 (t, J=7,2 Hz, 2 H), 3,18 - 3,30 (m, 1 H), 3,01 - 3,13 (m, 1 H), 2,59 - 2,73 (m, 1 H), 2,06 - 2,22 (m, 1 H), 1,72 (quin, J=7,4 Hz, 2 H), 1,43 - 1,57 (m, 2 H), 1,02 (t, J=7,3 Hz, 3 H); LCMS (ESI) m/e 322,3 [(M+H)+, calculado para C19H24N5 322,2]. 5.6.41. Síntese de N-butil-3-(4-(1,4,5,6-tetra-hidropirimidin-2-il) fe- nil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
Figure img0107
[0208] Uma solução de metil alumínio (2,0 M em hexano, 0,32 mL, 0,64 mmol) em tolueno (2 mL) foi resfriada para 0°C . Em seguida, à solução em agitação foram respectivamente adicionados gota a gota propa- no-1,3-diamina (48 mg, 0,64 mmol), e a solução de 4-(6-(butilamino) imi- dazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzoato de metila (130 mg, 0,4 mmol) em tolue- no (1 mL). A reação resultante foi refluxada a 110°C durante a noite, e em seguida resfriada para 0°C. À solução foram adicion ados gota a gota água (0,05 mL), metanol (0,2 mL) e clorofórmio (0,2 mL). A mistura resultante foi refluxada sobre um banho de vapor durante 15 m, e em seguida filtrada sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa para fornecer sal de ácido acético de N-butil-3-(4- (1,4,5,6-tetra-hidropirimidin-2-il)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (23,3 mg, 17% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,42 - 8,56 (m, J = 8,6 Hz, 2H), 7,96 (s, 1H), 7,75 - 7,86 (m, J = 8,6 Hz, 2H), 7,66 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,64 (t, J = 5,8 Hz, 4H), 3,41 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,16 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 1,94 (s, 5H), 1,73 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,42 - 1,58 (m, 2H), 1,02 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 349,5 [(M+H)+, calculado para C20H24N6 349,2]. 5.6.42. Síntese de 1-(5-{6-[3-(2-metil-piperidin-1-il)-propilamino]- imidazo[1,2-b]piridazin-3-il}-tiofen-2-il)-etanona
Figure img0108
Parte A. 3-bromo-N-(3-(2-metilpiperidin-1-il)propil)imidazo[1,2-b] piridazin- 6-amina
Figure img0109
[0209] A 400 mg (1,852 mmol) do fluoreto de arila foram adicionados 1-(3-aminopropil)pirrolidin-2-ona (347 mg, 2,222 mmol), 2 mL de isopropanol, e trietilamina (0,52 ml, 3,704 mmol). Esta mistura foi tratada por micro-ondas a 140°C durante 0,5 hr. Ela foi diluída com EtOAc, lavada com salmoura e secada sobre MgSO4. Ela foi purificada com sílica-gel (ISCO) eluindo com 0 - 10 de MeOH/DCM para obter 486 mg (74%) do aril amina. Parte B. 1-(5-{6-[3-(2-Metil-piperidin-1-il)-propilamino]-imidazo[1,2-b] piri- dazin-3-il}-tiofen-2-il)-etanona.
[0210] A reação de 3-bromo-N-(3-(2-metilpiperidin-1-il)propil) imida- zo[1,2-b]piridazin-6-amina com ácido (5-acetiltiofen-2-il)borônico, sob a condição de acoplamento Suzuki descrita no exemplo 5.6.19, forneceu o composto desejado em 71% de produção. 1H RMN (400 MHz, CLORO- FÓRMIO-d) δ ppm 1,34 (d, J=6,57 Hz, 3 H) 1,45 - 1,59 (m, 1 H) 1,67 - 1,96 (m, 5 H) 2,13 - 2,31 (m, 2 H) 2,60 (s, 3 H) 2,74 (dd, J=10,86, 4,80 Hz, 1 H) 2,83 - 2,95 (m, 1 H) 3,11 (br. s., 1 H) 3,17 - 3,31 (m, 1 H) 3,34 - 3,46 (m, 1 H) 3,53 - 3,72 (m, 2 H) 6,72 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,56 (d, J=4,04 Hz, 1 H) 7,64 - 7,73 (m, 2 H) 7,94 (s, 1 H); LRMS (ESI) m/e 398,0 [(M + H)+, calculado para C21H27N5OS 397,0]. 5.6.43. Síntese de (4-aminopiperidin-1-il)(4-(6-(butilamino) imidazo [1,2-b]piridazin-3-il)fenil)metanona
Figure img0110
Parte A. ácido 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzoico
Figure img0111
[0211] A uma mistura de 3-bromo-N-butilimidazo[1,2-b]piridazin-6- amina (340 mg, 1,26 mmol), ácido 4-boronobenzoico (210 mg, 1,26 mmol), [1,1‘-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) (44 mg, 0,063 mmol) e carbonato de potássio (261 mg, 1,89 mmol) foi adicionado 3:1 de acetonitrila /água (3 mL). A mistura resultante foi aquecida a 145°C (micro-ondas) durante 800 s. A reação foi em seguida filtrada e concentrada para fornecer ácido 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzoico (886 mg, >100% de produção) como um sólido não totalmente branco bruto: LRMS(ESI) m/e 311,2 [(M+H)+, calculado para C17H19N4O2311,2]. Parte B. (1-(4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b ]piridazin-3-il)benzoil)piperidin- 4-il)carbamato de terc-butila
Figure img0112
[0212] A reação do ácido 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3- il)benzoico (93 mg, 0,3 mmol), piperidin-4-ilcarbamato de terc-butila (66 mg, 0,33 mmol), 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodi-imida (63 mg, 0,33 mmol) e diclorometano (3 mL) foi mantida em temperatura ambiente durante a noite. A solução resultante foi purificada por HPLC preparativa (neutra) para fornecer (1-(4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3- il)benzoil)piperidin-4-il)carbamato de terc-butila (76 mg, 52% de produção) como um sólido amarelo: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,23 - 8,43 (m, J = 8,3 Hz, 2H), 7,85 (s, 1H), 7,63 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,45 - 7,56 (m, 2H), 6,68 - 6,87 (m, 1H), 4,55 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 3,82 (br. s., 1H), 3,59 - 3,72 (m, 1H), 3,35 - 3,48 (m, 4H), 3,19 (d, J = 15,2 Hz, 2H), 1,92 - 2,17 (m, 1H), 1,90 (br. s., 1H), 1,72 (m, 2H), 1,35 - 1,59 (m, 13H), 1,01 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 493,3 [(M+H)+, calculado para C27H37N6O3 493,3]. Parte C. (4-aminopiperidin-1-il)(4-(6-(butilamino)imidazo [1,2-b ]piridazin-3- il)fenil)metanona.
[0213] Uma solução de (1-(4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b] piridazin-3- il)benzoil)piperidin-4-il)carbamato de terc-butila (47 mg, 0,1 mmol) foi resfriada para 0°C e tratada com cloreto de acetila (2 25 mg, 2,86 mmol). A reação foi mantida em temperatura ambiente durante a noite. A solução resultante foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por HPLC preparativa (neutra) para fornecer sal de ácido acético de (4- aminopiperidin-1-il)(4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)fenil)meta- nona (34 mg, 79% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (ME- TANOL-d4) δ: 8,17 - 8,42 (m, J = 8,3 Hz, 2H), 7,86 (s, 1H), 7,63 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,48 - 7,57 (m, J = 8,6 Hz, 2H), 6,74 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,36 - 3,49 (m, 3H), 1,90 - 1,99 (m, 9H), 1,72 (quin, J = 7,3 Hz, 2H), 1,63 (br. s., 2H), 1,44 - 1,55 (m, 2H), 1,01 (t, J = 7,5 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 393,2 [(M+H)+, calculado para C22H29N6O 393,2]. 5.6.44. Síntese de (4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il) fenil)(piperazin-1 -il)metanona
Figure img0113
Parte A. 4-(4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b ]piridazin-3-il)benzoil) piperazi- na-1-carboxilato de terc-butila
Figure img0114
[0214] A reação do ácido 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3- il)benzoico (124 mg, 0,4 mmol), piperazina-1-carboxilato de terc-butila (82 mg, 0,44 mmol), 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodi-imida (84 mg, 0,44 mmol) e diclorometano (3 mL) foi mantida em temperatura ambiente durante a noite. A solução resultante foi purificada por HPLC preparativa (neutra) para fornecer 4-(4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3- il)benzoil)piperazina-1-carboxilato de terc-butila (89 mg, 47% de produção) como um sólido amarelo: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,20 - 8,39 (m, J = 8,3 Hz, 2H), 7,85 (s, 1H), 7,63 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 7,48 - 7,56 (m, 2H), 6,66 - 6,79 (m, 1H), 4,55 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 3,82 (br. s., 1H), 3,58 - 3,73 (m, 1H), 3,35 - 3,45 (m, 4H), 3,26 (br. s., 1H), 3,17 (d, J = 15,2 Hz, 1H), 3,10 (br. s., 1H), 1,92 - 2,15 (m, 1H), 1,90 (br. s., 1H), 1,72 (quin, J = 7,4 Hz, 2H), 1,34 - 1,57 (m, 14H), 1,01 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 479,3 [(M+H)+, calculado para C26H35N6O3 479,3]. Parte B. (4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)fenil) (piperazin-1- il)metanona.
[0215] Uma solução de 4-(4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3- il)benzoil)piperazina-1-carboxilato de terc-butila (65 mg, 0,14 mmol) foi resfriada para 0°C e tratada com cloreto de acetila (320 mg, 4,07 mmol). A reação foi mantida em temperatura ambiente durante a noite. A solução resultante foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por HPLC preparativa (neutra) para fornecer sal de ácido acético de (4-(6- (butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)fenil)(piperazin-1-il)metanona (52 mg, 76% de produção) como um sólido branco: 1H RMN (METANOL-d4) δ: 8,34 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,87 (s, 1H), 7,64 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,75 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 3,40 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,04 (br. s., 3H), 1,92 - 2,02 (m, 7H), 1,73 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,41 - 1,59 (m, 2H), 1,02 (t, J = 7,3 Hz, 3H); LRMS(ESI) m/e 379,2 [(M+H)+, calculado para C21H27O 379,2]. 5.6.45. Síntese de butil-{3-[4-(1H-tetrazol-5-il)-fenil]-imidazo[1,2-b] piridazin-6-il}-amina
Figure img0115
[0216] A uma mistura de (3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-butil- amina (327,5 mg, 1,2 mmol), ácido [4-(2H-tetrazol-5-il)fenil]borônico [179942-55-3] (287,2 mg, 1,5 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (564,7 mg, 2,5 mmol), e complexo de [1,1‘- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) com diclorometano [9546405-4] (103,7 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 50 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2- dimetoxietano (20 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85oC durante 17 h em seguida resfriada, diluída com metanol, filtrada, e cromatografada flash (sílica-gel, eluída com 1% de ácido acético em 10% (v/v) de meta- nol/acetato de etila) para isolar um sólido castanho que foi recristalizado de 2-propanol em ebulição para produzir 101,7 mg de butil-{3-[4-(1H- tetrazol-5-il)-fenil]-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il}-amina como um pó não totalmente branco, ponto de fusão 270-271oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO- d6) δ ppm 0,98 (t, J=7,06 Hz, 3 H) 1,38 - 1,53 (m, 2 H) 1,59 - 1,73 (m, 2 H) 3,34 (d, J=5,51 Hz, 2 H) 6,75 (d, J=9,48 Hz, 1 H) 7,17 (br. s., 1 H) 7,79 (d, J=9,04 Hz, 1 H) 8,06 (br. s., 1 H) 8,12 (m, J=7,72 Hz, 2 H) 8,47 (m, J=7,72 Hz, 2 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13,63, 19,77, 30,02, 40,66, 112,49, 122,39, 125,43, 125,65, 126,80, 130,59, 131,70, 153,44. LRMS (ESI) m/z 335,1 [(M+H)]+, calculado para C17H18N8:334,39. 5.6.46. Síntese de [3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b] piridazin-6- il]-[2-(2-metóxi-fenóxi)-etil]-amina
Figure img0116
Parte A. (3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-[2-(2-metóxi-fenóxi)-etil]- amina
Figure img0117
[0217] Uma mistura de 3-bromo-6-cloro-imidazo[1,2-b]piridazina (232 mg, 1 mmol) e 2-(2-metóxi-fenóxi)-etilamina (2 g, 12 mmol) foi aquecida em um micro-ondas a 160°C durante 30 min. A mistura de reação foi submetida a ISCO (coluna de 40 g, DCM 3 min., em seguida 0 - 10% de MeOH em DCM durante 30 min.) para fornecer o produto (160 mg). L- RMS (ESI) m/z 363 e 365,1[(M+H)]+, calculado para C15H15BrN4O2: 363,22. Parte B. [3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-[2-(2-metóxi- fenóxi)-etil]-amina
[0218] Uma mistura de ((3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-[2-(2- metóxi-fenóxi)-etil]-amina (75 mg, 0,21 mmol), cloridrato de ácido (4- aminometilfenil)borônico (51 mg, 0,27 mmol), K2CO3 (87 mg, 0,63 mmol) e diclorobis(trifenilfosfina)paládio (II) (7,4 mg, 0,011 mmol) em MeCN/ água (3,2ml/0,8 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 150°C durante 15 min. A mistura de reação foi diluída com MeOH (3 ml) e filtrada. O filtrado foi submetido à HPLC preparativa para fornecer o composto título como sal de AcOH (59,6 mg). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,93 (s, 3 H) 3,76 - 3,83 (m, 5 H) 4,13 (s, 2 H) 4,26 (t, J=5,56 Hz, 2 H) 6,77 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 6,85 - 6,99 (m, 4 H) 7,51 (d, J=8,34 Hz, 2 H) 7,65 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,79 (s, 1 H) 8,21 (d, J=8,34 Hz, 2 H). LRMS (ESI) m/z 390,2 [(M+H)]+, calculado para C22H23N5O2:389,46. 5.6.47. Síntese de metil éster de ácido 3-[3-(5-acetil-tiofen-2-il)- imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]-propiônico
Figure img0118
Parte A. 3-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)propanoato de me- tila
Figure img0119
[0219] A alquilação do fluoreto de arila com 3-aminopropanoato de metila foi realizada seguindo o procedimento de deslocamento de amina descrito no exemplo 5.6.42. Parte B. metil éster de ácido 3-[3-(5-acetil-tiofen-2-il)-imidazo[1,2-b] piri- dazin-6-ilamino]-propiônico.
[0220] O 3-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)propanoato de metila foi em seguida submetido à reação de acoplamento Suzuki com ácido (5-acetil-tiofen-2-il)borônico como descrito no exemplo 5.6.19. Contudo, para esta reação, trietilamina foi usada como a base em lugar da base regular (K2CO3). O produto desejado foi obtido em 79% de produção. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 2,62 - 2,65 (m, 3 H) 2,88 (t, J=5,94 Hz, 2 H) 3,77 (s, 3 H) 3,88 (t, J=5,68 Hz, 2 H) 7,06 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,70 (d, J=4,04 Hz, 1 H) 7,77 (d, J=4,04 Hz, 1 H) 8,15 (s, 1 H) 8,33 (d, J=9,85 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/e 345,0 [(M + H)+, calculado para C16H16N4O3S 344,0]. 5.6.48. Síntese de N-butil-3-(1H-pirazol-3-il)imidazo[1,2-b] piridazin-6- amina:
Figure img0120
[0221] Uma mistura de 3-bromo-6-(butilamino)imidazo[1,2-b] piridazi- na (100 mg, 0,38 mmol), ácido (1H-pirazol-4-il)borônico (45 mg, 0,38 mmol), PdCl2(PPh3)2 (10 mg, 0,014 mmol) e carbonato de potássio (98 mg, 0,71 mmol) foi dissovida em CH3CN (3 mL) e água (1,5 mL). A reação foi aquecida a 140°C durante 30 min no micro-on das. O catalisador foi filtrado de celita, em seguida o filtrado foi concentrado e purificado por HPLC preparativa (neutra) para fornecer sal de acetato de N-butil-3-(1H- pirazol-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina como sólido amarelo (1,7 mg, 2% de produção): 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,12 (s, 1 H), 7,86 - 7,92 (m, 2 H), 7,30 (d, J=2,53 Hz, 1 H), 7,17 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 3,47 (t, J=7,20 Hz, 2 H), 1,75 (quin, J=7,26 Hz, 2 H), 1,52 (sxt, J=7,43 Hz, 2 H), 1,02 (t, J=7,33 Hz, 3 H); LRMS (ESI) m/e 257,2 [(M + H)+, calculado para C13H17N6 257,3]. 5.6.49. Síntese de 3-[4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il) - fenil]-4H-[1,2,4]oxadiazol-5-ona
Figure img0121
[0222] A uma mistura de 3-(4-bromofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona [16672-19-8] (502,7 mg, 2,1 mmol), acetato de potássio [127-08-2] (615,4 mg, 6,3 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) [73183-34-3] (582,6 mg, 2,3 mmol), e complexo de [1,1‘-bis (difenilfos- fino)ferroceno]dicloropaládio (II) com diclorometano [95464-05-4] (53,4 mg, 0,1 mmol) foi adicionado dimetilsulfóxido anidroso. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 17 h em seguida vertida em água agitada para precipitar o produto. 3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxabo- rolan-2-il)fenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona bruto foi isolado por filtração, lavado com água, deixado secar e usado na etapa seguinte sem outra purificação. LRMS (ESI) m/z 287,3 [(M-H)]-, calculado para C14H17BN2O4: 288,11.
[0223] Seguindo as condições de acoplamento Suzuki descritas no exemplo 5.6.45 de (3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-butil-amina (213,1 mg, 0,8 mmol), e 3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)fenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona (308,2 mg, 1,1mmol) para fornecer 70,9 mg de 3-[4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-fenil]-4H-[1,2,4] oxa- diazol-5-ona como pó cristalino branco, ponto de fusão 253-254°C (dec.). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,96 (t, J=7,33 Hz, 3 H) 1,44 (sxt, J=7,38 Hz, 2 H) 1,65 (quin, J=7,26 Hz, 2 H) 3,26 - 3,35 (m, 2 H) 6,75 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,15 (t, J=5,31 Hz, 1 H) 7,77 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,88 (m, J=8,84 Hz, 2 H) 8,05 (s, 1 H) 8,44 (m, J=8,59 Hz, 2 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13,73, 19,89, 30,15, 40,81, 112,82, 120,91, 125,38, 125,50, 126,11, 131,05, 133,01, 137,80, 153,62, 157,06, 159,94. LRMS (ESI) m/z 351,2 [(M+H)]+, calculado para C18H18N6O2:350,38. 5.6.50. Síntese de N-butil-3-(2,4-dimetilthiazol-5-il)imidazo[1,2-b] piridazin-6-amina:
Figure img0122
[0224] Usando as condições de acoplamento Suzuki descritas no exemplo 5.6.48 forneceu o composto título em 16% de produção como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,59 - 7,69 (m, 2 H), 6,70 - 6,74 (m, 1 H), 3,39 (t, J=7,20 Hz, 2 H), 2,70 (s, 3 H), 2,57 (s, 3 H), 1,67 - 1,75 (m, 2 H), 1,45 - 1,54 (m, 2 H), 1,01 (t, J=7,45 Hz, 3 H); LRMS (ESI) m/e 302,2 [(M + H)+, calculado para C15H20N5S 302,4]. 5.6.51. Síntese de ácido 4-[3-(5-acetil-tiofen-2-il)-imidazo[1,2-b] piridazin-6-ilamino]-butírico
Figure img0123
Parte A. 4-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)butanoato de etila
Figure img0124
[0225] A alquilação do fluoreto de arila com 4-aminobutanoato de eti- la procedeu sob as condições descritas no exemplo 5.6.46 para fornecer o composto título. Parte B. 4-((3-(5-acetiltiofen-2-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il) amino) buta- noato de etila
Figure img0125
[0210] O 4-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)butanoato de etila foi submetido ao acoplamento Suzuki com ácido (5-acetiltiofen-2- il)borônico, usando trietilamina como a base e o procedimento descrito no exemplo 5.6.19 para fornecer 74% de produção do produto. Parte C. ácido 4-[3-(5-acetil-tiofen-2-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]- butírico
Figure img0126
[0226] A 200 mg (0,566 mmol) deste éster foram adicionados Li- OH.H2O (71,4 mg, 1,700 mmol), 10 mL de THF e 3 mL de água e em seguida agitados em temperatura ambiente durante 4 hr. A mistura de reação foi acidificada para pH de cerca de 3, e o produto extraído com EtO- Ac. Os solventes orgânicos foram lavados com salmoura e secados sobre MgSO4. Isto foi concentrado para obter 148 mg (76%) do produto desejado. Nenhuma purificação foi requerida. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 2,60 (s, 3 H) 2,73 (t, J=6,73 Hz, 2 H) 3,68 (t, J=6,73 Hz, 2 H) 4,23 (s, 2 H) 7,26 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,67 (d, J=8,16 Hz, 2 H) 7,99 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 8,27 (s, 1 H); LRMS (ESI) m/e 345,0 [(M + H)+, calculado para C16H16N4O3S 344,0]. 5.6.52. Síntese de butil-(3-isoquinolin-6-il-imidazo[1,2-b] piridazin-6- il)-amina
Figure img0127
Parte A. 6-(4,4,5,5-Tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-isoquinolina
Figure img0128
[0227] Uma mistura de 6-bromoisoquinolina (208 mg, 1 mmol), bis (pinacolato)dibóro (279 mg, 1,1 mmol), KOAc (323 mg, 3,3 mmol) e Pd(dppf)2Cl2 (73 mg, 0,1 mmol) em DMSO (3 ml) foi aquecida em um micro-ondas durante 10 min a 160°C. A mistura foi dil uída com água (20 ml) e extraída com EtOAc (4 x 20 ml). O EtOAc combinado foi lavado com água (15 ml) e salmoura (15 ml) em seguida secado (Na2SO4). O solvente foi removido para fornecer o composto título que foi usado diretamente para a etapa seguinte. Parte B. Butil-(3-isoquinolin-6-il-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-amina.
[0228] Uma mistura de (3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-butil- amina (100 mg, 0,37 mmol), 6-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)- isoquinolina (de Parte A, ~1 mmol), K2CO3 (153 mg, 1,11 mmol) e diclo- robis(trifenilfosfina)paládio (II) (13 mg, 0,019 mmol) em MeCN/água (4 ml/1 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 150°C durante 15 min. A camada de água foi removida e a mistura de reação foi diluída com MeCN (3 ml) e filtrada. O filtrado foi submetido à HPLC preparativa para fornecer o composto título (80,8 mg). 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,03 (t, J=7,33 Hz, 3 H) 1,53 (dq, J=14,97, 7,39 Hz, 2 H) 1,74 - 1,81 (m, 2 H) 3,48 - 3,54 (m, 2 H) 4,58 (t, J=5,05 Hz, 1 H) 6,54 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,68 (d, J=5,56 Hz, 1 H) 7,75 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 8,01 - 8,05 (m, 2 H) 8,25 (dd, J=8,72, 1,64 Hz, 1 H) 8,55 (d, J=5,81 Hz, 1 H) 8,86 (s, 1 H) 9,25 (s, 1 H). LRMS (ESI) m/z 318,2 [(M+H)]+, calculado para C19H19N5: 317,40. 5.6.53. Síntese de 4-[3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6- ilamino]-N,N-dimetil-butiramida
Figure img0129
Parte A. ácido 4-((3-(4-(((terc-butoxicarbonil)amino)metil)fenil)imidazo[1,2- b]piridazin-6-il)amino)butanoico
Figure img0130
[0229] O 4-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)butanoato de etila foi submetido a acoplamento Suzuki com ácido N-Boc-benzil amina borônico, usando 4,0 equivalentes de K2CO3 como a base e procedimento descrito no exemplo 5.6.19 para fornecer o composto título. Parte B. 4-(6-((4-(dimetilamino)-4-oxobutil)amino)imidazo[1,2-b] piridazin- 3-il)benzilcarbamato de terc- butila
Figure img0131
[0230] O ácido carboxílico foi reagido com dimetilamina, sob as condições de acoplamento de amida regular para fornecer 59% de produto. Parte C. 4-[3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]-N,N- dimetil-butiramida.
[0231] [0216] A amida purificada (20,4 mg, 0,045 mmol) foi dissovida em 2 mL de DCM e 3 mL de TFA foram adicionados e agitados durante 2 hr. Isto foi concentrado para fornecer 100% (21 mg) de produção de sal de TFA do produto título. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 2,01 (quin, J=7,06 Hz, 2 H) 2,52 (t, J=7,39 Hz, 2 H) 2,93 (s, 3 H) 3,05 (s, 3 H) 3,46 (t, J=6,84 Hz, 2 H) 4,24 (s, 2 H) 7,26 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,68 (d, J=8,16 Hz, 2 H) 7,99 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 8,22 (d, J=8,38 Hz, 2 H) 8,26 (s, 1 H); LRMS (ESI) m/e 353,0 [(M + H)+, calculado para C19H24N6O 352,0]. 5.6.54. Síntese de N-(4-(aminometil)fenil)-6-(butilamino)imidazo [1,2- b]piridazina-3-carboxamida:
Figure img0132
Parte A. 6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazina-3-carbonitrila:
Figure img0133
[0232] Uma solução de 6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazina-3- brometo (820 mg, 2,34 mmol), NaCN (137 mg, 2,8 mmol), CuI (45 mg, 0,23 mmol), KI (78 mg, 0,47 mmol) e N1,N2-dimetiletano-1,2-diamina (0,25 mL, 2,34 mmol) em tolueno (3 mL) foi agitada a 110°C durante 12 h. A reação foi resfriada, concentrada, apreendida com EtOAc e água, extraída e camada orgânica secada com MgSO4. A camada orgânica foi concentrada e purificada por ISCO (0-5% de MeOH/DCM) para fornecer 6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazina-3-carbonitrila como um sólido amarelo claro (460 mg, 92% de produção). LRMS (ESI) m/e 216,1 [(M + H)+, calculado para C11H14N5 216,3]. Parte B. ácido 6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazina-3-carboxílico:
Figure img0134
[0233] Uma solução de 6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazina-3- carbonitrila (250 mg, 1,16 mmol) em 10% de solução aquosa de NaOH (15 mL) foi refluxada durante a noite. A mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente, neutralizada para pH = 5-7 usando HCl a 1 N, extraída com DCM, secada e concentrada para fornecer ácido 6- (butilamino)imidazo[1,2-b]piridazina-3-carboxílico como sólido branco (150 mg, 60%). LRMS (ESI) m/e 235,1 [(M + H)+, calculado para C11H15N4O2 235,3]. Parte C. 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazina-3-carboxamido) benzil- carbamato de terc- butila:
Figure img0135
[0234] A uma solução de ácido 6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazina- 3-carboxílico (150 mg, 0,64 mmol) em CH3CN (1 mL) foram adicionados reagente de BOP (567 mg, 1,28 mmol), trietil amina (0,26 mL, 1,92 mmol) e 4-aminobenzilcarbamato de terc-butila (143 mg, 0,64 mmol). A reação foi agitada durante a noite. Em seguida, a reação foi purificada por cro- matografia de coluna ISCO sobre sílica-gel (10% de MeOH/DCM) para fornecer 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazina-3-carboxamido) benzil- carbamato de terc-butila como sólido branco (280 mg, 100% de produção). 20 mg foram também purificados por HPLC preparativa (neutra) para fornecer 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazina-3-carboxamido) ben- zilcarbamato de terc-butila (5 mg) como sólido branco. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,10 (s, 1 H), 7,76 (d, J=9,70 Hz, 1 H), 7,67 (d, J=8,38 Hz, 2 H), 7,32 (d, J=8,38 Hz, 2 H), 6,90 (d, J=9,70 Hz, 1 H), 4,62 (s, 1 H), 4,24 (s, 2 H), 3,47 (t, J=7,28 Hz, 2 H), 1,79 (t, J=7,39 Hz, 2 H), 1,46 - 1,57 (m, 10 H), 1,02 (t, J=7,39 Hz, 3 H); LRMS (ESI) m/e 439,9 [(M + H)+, calculado para C23H31N6O3 439,5]. Parte D. N-(4-(aminometil)fenil)-6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazina-3- carboxamida.
[0235] A uma solução de 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazina-3- carboxamido)benzilcarbamato de terc-butila (230 mg, 0,53 mmol) em metanol (15 mL) foi adicionado cloreto de acetila (0,37 mL, 5,25 mmol) gota a gota. A mistura de reação foi agitada durante a noite, concentrada e purificada por HPLC preparativa (neutra) para fornecer N-(4- (aminometil)fenil)-6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazina-3-carboxamida (25 mg, 20% de produção). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,54 (s, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 7,80 (d, J=8,38 Hz, 2 H), 7,77 (d, J=9,92 Hz, 1 H), 7,50 (d, J=8,38 Hz, 2 H), 6,92 (d, J=9,70 Hz, 1 H), 4,12 (s, 2 H), 3,48 (t, J=7,17 Hz, 2 H), 1,79 (quin, J=7,33 Hz, 2 H), 1,55 (dq, J=15,02, 7,41 Hz, 2 H), 1,02 (t, J=7,39 Hz, 3 H); LRMS (ESI) m/e 339,2 [(M + H)+, calcu- lado para C18H23N6O 339,4]. 5.6.55. Síntese de [3-(4-aminometil-fenil)-7-metil-imidazo[1,2-b] piridazin-6-il]-butil-amina
Figure img0136
Parte A. 6-Cloro-5-metil-piridazin-3-ilamina
Figure img0137
[0236] Uma mistura de 3,6-dicloro-4-metilpiridazina (1,35 g, 8,28 mmol) e 2,4-dimetoxibenzilamina (11,1 g, 66,3 mmol) em i-PrOH (5 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 100°C durante 50 min. (30 + 20 min.). A mistura foi concentrada e o resíduo foi submetido a ISCO (coluna de 120 g, hexano 5 min., 0-55% de EtOAc em hexano durante 90 min.) para fornecer (6-cloro-5-metil-piridazin-3-il)-(2,4-dimetóxi-benzil)-amina (680 mg) mais o análogo de 6-metila (320 mg).
[0237] [0222] A uma solução de (6-cloro-5-metil-piridazin-3-il)-(2,4- dimetóxi-benzil)-amina do acima (680 mg) em DCM (8 ml) foi adicionado TFA (8 ml). A solução resultante foi deixada descansar durante a noite. A mistura foi concentrada para fornecer o composto título que foi usado diretamente para a etapa seguinte. Parte B. 3-bromo-6-cloro-7-metil-imidazo[1,2-b]piridazina
Figure img0138
[0238] Uma mistura de 6-cloro-5-metil-piridazin-3-ilamina de parte A (~ 2,3 mmol) e solução de água em cloroacetaldeído (50% de água, 880 ul, ~7 mmol) em n-buOH foi refluxada durante a noite. Após resfriada pa- ra rt, a mistura foi diluída com MeOH (15 ml) e filtrada. O filtrado foi con-centrado e tratado com Et2O (15 ml). O produto sólido foi coletado por filtração.
[0239] A uma suspensão de produto acima em AcOH (6 ml) foi adicionado Br2 (358 ul, 6,96 mmol) lentamente em temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 3 h. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi suspenso em Et2O (80 ml) e agitado durante a noite. O produto sólido (~800 mg) foi coletado por filtração e usado diretamente para a etapa seguinte. Parte C. (3-bromo-7-metil-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-butil-amina
Figure img0139
[0240] A 3-bromo-6-cloro-7-metil-imidazo[1,2-b]piridazina de Parte B foi adicionado n-buNH2 (10 ml). A mistura foi aquecida em um microondas a 160°C durante 60 min (30 + 30 min.). A mist ura foi concentrada e o resíduo foi submetido a ISCO (coluna de 40 g, hexano 3 min., 0-100% de EtOAc em hexano durante 25 min., o EtOAc 10 min.) para fornecer o composto título (348 mg). 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 0,97 (t, J=7,39 Hz, 3 H) 1,29 - 1,50 (m, 2 H) 1,61 - 1,71 (m, 2 H) 2,14 (s, 3 H) 3,44 (q, J=6,62 Hz, 2 H) 4,39 (br. s., 1 H) 7,34 (s, 1 H) 7,37 (s, 1 H). LRMS (ESI) m/z 283 e 285[(M+H)]+, calculado para C11H15BrN4:283,17. Parte D. [3-(4-aminometil-fenil)-7-metil-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-butil- amina.
[0241] Uma mistura de (3-bromo-7-metil-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)- butil-amina (115 mg, 0,41 mmol), cloridrato de ácido (4-aminome- tilfenil)borônico (99,9 mg, 0,53 mmol), K2CO3 (170 mg, 1,23 mmol) e di- clorobis(trifenilfosfina)paládio (II) (14,4 mg, 0,021 mmol) em MeCN/água (3,2 ml/0,8 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 150°C durante 15 min. A mistura de reação foi diluída com MeCN e filtrada. O filtrado foi submetido à HPLC preparativa para fornecer o composto título como sal de A- cOH (66,5 mg). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,01 (t, J=7,39 Hz, 3 H) 1,42 - 1,52 (m, 2 H) 1,73 (t, J=7,28 Hz, 2 H) 2,23 (s, 3 H) 3,41 (t, J=7,28 Hz, 2 H) 4,16 (s, 2 H) 7,44 (s, 1 H) 7,52 (d, J=8,38 Hz, 2 H) 7,75 (s, 1 H) 8,25 (d, J=8,38 Hz, 2 H) 8,54 (s, 1 H). LRMS (ESI) m/z 310,2 [(M+H)]+, calculado para C18H23N5:309,42. 5.6.56. Síntese de terc-butil éster de ácido [2-(3-bromo-imidazo[1,2- b]piridazin-6-ilamino)-etil]-metil-carbâmico
Figure img0140
[0242] Uma solução de 3-bromo-6-flúor-imidazo[1,2-b]piridazina (1,4 g, 6,3 mmol), terc-butil éster de ácido N-(2-aminoetil)-n-metil carbâmico [121492-06-6] (961 mg, 5,5 mmol), e base de Hunig [7087-68-5] (1,1 mL, 6,4 mmol) em 2-propanol (28 mL) foi aquecida ao refluxo durante 4 dias, resfriada, pré-carregada sobre sílica-gel e cromatografada flash (sílica-gel eluída com 10% (v/v) de metanol /acetato de etila). O produto de sólido amarelo claro isolado foi recristalizado (acetato de etila/heptano) para produzir 1,2 g de terc-butil éster de ácido [2-(3-bromo-imidazo[1,2- b]piridazin-6-ilamino)-etil]-metil-carbâmico como um pó branco, ponto de fusão 128-129 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm (rotâmeros presentes) 1,16 (s, 6 H) 1,33 (br. s., 3 H) 2,84 (s, 2 H) 2,90 (br. s., 1 H) 3,34 - 3,44 (m, 3 H) 3,45 - 3,52 (m, 1 H) 6,68 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,31 (br. s., 1 H) 7,49 (s, 1 H) 7,72 (d, J=9,35 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 28,22, 28,45, 34,02, 35,07, 39,02, 39,97, 46,23, 47,06, 78,52, 78,87, 99,57, 113,35, 125,92, 130,80, 137,01, 154,37, 155,39. LRMS (E- SI) m/z 370,1/372,1 [(M+H)]+, calculado para C14H20BrN5O2:370,25. 5.6.57. Síntese de 4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-benzil éster de ácido isopropil-carbâmico
Figure img0141
Parte A. 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-benzil éster de ácido isopropil-carbâmico
Figure img0142
[0243] A uma solução de [4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2- il)-fenil]-metanol (2,34 g, 10 mmol) e piridina (890 ul, 11 mmol) em THF (50 ml) em temperatura ambiente foi adicionada gota a gota uma solução de cloroformiato de 4-nitrofenila (2,22 g, 11 mmol) em THF (10 ml). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. O precipitado foi removido por filtração. O filtrado foi concentrado para fornecer o composto desejado (4,2 g, pode conter algum sal de HCl de piri- dina).
[0244] A uma solução de produto acima (400 mg, 1 mmol) em THF (3 ml) foi adicionado isopropil amina (1,5 ml). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 3 h, em seguida concentrada para fornecer o composto título. LRMS (ESI) m/z 320,2 [(M+H)]+, calculado para C17H26BNO4: 319,21
Figure img0143
Parte B. 4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-benzil éster de ácido isopropil-carbâmico.
[0245] Uma mistura de (3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-butil- amina (50 mg, 0,19 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)- benzil éster de ácido isopropil-carbâmico (de Parte A, ~0,5 mmol), K2CO3 (77 mg, 0,56 mmol) e diclorobis(trifenilfosfina)paládio (II) (6,5 mg, 0,01 mmol) em MeCN/água (2 ml/0,5 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 140°C durante 10 min. A reação foi repetida com out ra metade do éster borônico de Parte A. As duas reações foram combinadas para purificação. A camada de água foi removida e a mistura de reação foi diluída com MeCN (3 ml) e filtrada. O filtrado foi submetido à HPLC preparativa para fornecer o composto título (100 mg). 1H RMN (400 MHz, CLORO- FÓRMIO-d) δ ppm 1,00 (t, J=7,39 Hz, 3 H) 1,19 (d, J=6,62 Hz, 6 H) 1,43 - 1,52 (m, 2 H) 1,66 - 1,73 (m, 2 H) 3,41 (td, J=7,06, 5,73 Hz, 2 H) 3,87 (d, J=6,84 Hz, 1 H) 4,49 (t, J=5,29 Hz, 1 H) 5,14 (m, 1 H) 6,45 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,46 (d, J=8,16 Hz, 2 H) 7,66 (d, J=9,48 Hz, 1 H) 7,81 (s, 1 H) 8,14 (d, J=8,38 Hz, 2 H). LRMS (ESI) m/z 382,2 [(M+H)]+, calculado para C21H27N5O2: 381,48. 5.6.58. Síntese de 2-[4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)- fenóxi]-acetamida
Figure img0144
Parte A. ácido 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) fenóxi) acé tico
Figure img0145
[0246] A 135 mg (0,441 mmol) do éster comercialmente disponível, foram adicionados 99 mg (1,765 mmol) de KOH, e 8 mL de 3:1 de solução de MeOH/H2O, e agitados durante 2 hr em temperatura ambiente. O pH foi ajustado para 4 usando solução de HCl a 2 M. Três extrações foram feitas usando EtOAc. A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura e secada sobre MgSO4. Ela foi filtrada e os solventes foram e-vaporados para obter 72 mg (59%) do ácido carboxílico desejado. Parte B. 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) fenóxi)acetamida
Figure img0146
[0247] A 72 mg de ácido carboxílico foram adicionados 8 mL (excesso) de SOCl2 e agitados em temperatura ambiente durante 2 hr, e em seguida concentrados até a secura. Ao intermediário de cloreto de ácido sólido obtido foram lentamente adicionados 2,6 mL de solução de NH3/dioxano a 0,5 M e agitados durante mais 2 hr. A mistura de reação foi concentrada para obter a amida primária desejada. Parte C. 2-[4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-fenóxi]-acetamida.
[0248] O acoplamento Suzuki do éster borônico e o brometo de arila sob as mesmas condições como descrito para o exemplo 5.6.19 forneceram o composto título em 78% de produção. 1H RMN (400 MHz, META- NOL-d4) δ ppm 1,01 (t, J=7,45 Hz, 3 H) 1,44 - 1,55 (m, 2 H) 1,65 - 1,76 (m, 2 H) 3,40 (t, J=7,20 Hz, 2 H) 4,62 (s, 2 H) 7,15 - 7,25 (m, 3 H) 7,93 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,04 - 8,16 (m, 3 H); LRMS (ESI) m/e 340,0 [(M + H)+, calculado para C18H21N5O5 339,0. 5.6.59. Síntese de 3-(2-aminopirimidin-5-il)-N-butilimidazo[1,2-b] piridazin-6-amina:
Figure img0147
[0249] Usando as condições de acoplamento Suzuki descritas no exemplo 5.6.48 forneceu o composto título em 63% de produção como só- lido branco. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 9,03 (s, 2 H), 7,73 (s, 1 H), 7,61 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 6,71 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 4,64 (s, 1 H), 3,36 (t, J=7,07 Hz, 2 H), 1,66 - 1,73 (m, 2 H), 1,45 - 1,54 (m, 2 H), 1,00 (t, J=7,33 Hz, 3 H); LRMS (ESI) m/e 284,2 [(M + H)+, calculado para C14H18N7 284,3]. 5.6.60. Síntese de terc- butil éster de ácido {2-[3-(5-acetil-tiofen-2-il)- imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]-etil}-metil-carbâmico
Figure img0148
[0250] A uma mistura de terc-butil éster de ácido [2-(3-bromo- imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-etil]-metil-carbâmico (285,5 mg, 0,8 mmol), ácido (5-acetiltiofen-2-il)borônico [206551-43-1] (157,3 mg, 0,9 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (354,8 mg, 1,5 mmol), e complex de [1,1‘ bis(difenilfosfino) ferroceno] dicloropa- ládio (II), com diclorometano [95464-05-4] (63,4 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 25 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2-dimetoxietano (12,5 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85oC durante 17 h em seguida resfriada e dividida entre salmoura e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4), evaporado, cromatografado flash (sílica-gel eluída com 100% de acetato de etila) e cristalizado (acetato de etila/heptano) para fornecer terc-butil éster de ácido {2-[3-(5-acetil-tiofen-2-il)-imidazo[1,2-b]piridazin- 6-ilamino]-etil}-metil-carbâmico como 121,3 mg de pó amarelo, ponto de fusão 174-175 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm (rotâmeros presentes) 1,11 (br. s., 6 H) 1,39 (br. s., 3 H) 2,54 (s, 3 H) 2,87 (br. s., 2 H) 2,92 (br. s., 1 H) 3,32 (s, 1 H) 3,52 (br. s., 3 H) 3,62 (br. s., 1 H) 7,78 - 7,85 (m, 2 H) 7,96 (d, J=4,29 Hz, 1 H) 8,14 (s, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 26,95, 28,16, 28,50, 34,07, 46,09, 78,50, 113,14, 123,02, 124,18, 126,13, 130,89, 134,37, 137,71, 138,38, 141,77, 154,32, 155,43, 191,11. LRMS (ESI) m/z 416,2 [(M+H)]+, calculado para C14H20BrN5O2: 415,52. 5.6.61. Síntese de 2-[4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)- fenóxi]-N-metil-acetamida
Figure img0149
Parte A. 2-(4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)fenóxi)acetato de
Figure img0150
[0251] O 2-(4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il) fenóxi) acetato de etila, foi sintetizado pela reação de acoplamento Suzuki do éster borônico e o brometo de arila sob as mesmas condições como descrito para o exemplo 5.6.19. Parte B. ácido 2-(4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)fenóxi) acético
Figure img0151
[0252] A 368 mg (1,00 mmol) do éster dissolvidos em 15 mL de THF foram adicionados, LiOH.H2O (82 mg, 2,00 mmol) e 5 mL de água. Isto foi agitado durante a noite a 50°C. Isto foi resfriado para rt, concentrado até a secura, e em seguida suspenso em água. O pH foi ajustado para cerca de 3 usando HCl a 1 N. EtOAc foi usado para a extração. A camada orgânica foi lavada com salmoura, secada sobre MgSO4, e concentrada para ácido carboxílico em 100% de produção (340 mg). Parte C. 2-[4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-fenóxi]-N-metil- acetamida.
[0253] A 50 mg (0,147 mmol) de ácido carboxílico foram adicionados 20 mg (0,294 mmol) metil amina (sal de HCl), seguidos por HOBt (30 mg, 0,221 mmol), EDC (42 mg, 0,221 mmol), trietilamina (0,30 mg, 0,294 mmol) e 5 mL de DMF. A mistura resultante foi agitada durante a noite em temperatura ambiente. Ela foi diluída com EtOAc, e em seguida lavada com salmoura e secada sobre MgSO4. Ela foi concentrada e purificada sobre a HPLC PREP para obter 27 mg (52%) do composto título. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 0,97 - 1,05 (m, 3 H) 1,44 - 1,56 (m, 2 H) 1,67 - 1,79 (m, 2 H) 2,83 - 2,89 (m, 3 H) 3,40 (t, J=7,20 Hz, 2 H) 4,62 (s, 2 H) 7,17 - 7,27 (m, 3 H) 7,93 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,06 - 8,18 (m, 3 H); L- RMS (ESI) m/e 354,0 (M + H)+, calculado para C19H23N5O2 353,0. 5.6.62. Síntese de 4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-ben- zilamida de ácido (R)-2-amino-4-metil-pentanoico
Figure img0152
Parte A. (1-((4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzil)amino)-4- metil-1-oxopentan-2-il)carbamato de (R)-terc-butila
Figure img0153
[0254] O (4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil) metana- mina e o ácido (R)-2-((terc-butóxi-carbonil)amino)-4-metilpentanoico foram ambos comercialmente disponíveis, e eles foram submetidos à reação de acoplamento de amida regular, e produziram 94% de produto (Nenhuma purificação foi necessária). Este produto é acoplado por reação Suzuki com o brometo de arila sob as condições descritas no exemplo 5.6.19. A mistura bruta foi purificada sobre o ISCO (sílica-gel) eluindo com 2-10% de MeOH/DCM. Parte B. 4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-benzilamida de ácido (R)-2-amino-4-metil-pentanoico.
[0255] A 100 mg (0,197 mmol) de (1-((4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b] piridazin-3-il)benzil)-amino)-4-metil-1-oxopentan-2-il)carbamato de (R)- terc-butila foram adicionados 10 mL de HCl a 4 M /dioxano, e agitados em temperatura ambiente durante 4 hr e em seguida concentrados até a secura para 102 mg (100%) do sal de TFA do produto desejado. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 0,97 - 1,03 (m, 9 H) 1,48 (dq, J=15,02, 7,41 Hz, 2 H) 1,69 - 1,79 (m, 5 H) 3,40 (t, J=7,06 Hz, 2 H) 3,92 (t, J=6,95 Hz, 1 H) 4,49 (dd, J=15,10, 4,08 Hz, 1 H) 4,56 - 4,63 (m, 1 H) 7,23 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,52 (m, J=8,38 Hz, 2 H) 7,95 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 8,12 (m, J=8,38 Hz, 2 H) 8,20 (s, 1 H); LRMS (ESI) m/e 409,0 (M + H)+, calculado para C23H32N6O 408,0. 5.6.63. Síntese de terc- butil éster de ácido {2-[3-(4-carbamoil-fenil)- imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]-etil}-metil-carbâmico
Figure img0154
[0256] terc-Butil éster de ácido {2-[3-(4-carbamoil-fenil)-imidazo[1,2- b]piridazin-6-ilamino]-etil}-metil-carbâmico foi preparado similarmente ao procedimento para exemplo 5.6.61 de terc-butil éster de ácido [2-(3- bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-etil]-metil-carbâmico (367,4 mg, 1,0 mmol), ácido (4-carbamoilfenil)borônico [123088-59-5] (196,7 mg, 1,2 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (418,4 mg, 1,8 mmol), e complex de [1,1-bis(difenilfosfino) ferroceno] dicloropa- ládio (II), com diclorometano [95464-05-4] (82,1 mg, 0,1 mmol) em 30% (v/v) de água em 1,2-dimetoxietano (25 mL) a 85°C d urante 17 h. Pó branco de acetato de etila/heptano, ponto de fusão 190-191°C (dec.). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm (rotâmeros presentes) 1,15 (br. s., 5 H) 1,28 (br. s., 1 H) 1,38 (br. s., 3 H) 2,85 (br. s., 3 H) 3,32 (br. s., 1 H) 3,54 (br. s., 1 H) 6,73 (d, J=9,35 Hz, 1 H) 7,27 (br. s., 1 H) 7,34 (br. s., 1 H) 7,79 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,94 - 8,03 (m, 4 H) 8,28 (d, J=8,08 Hz, 2 H). LRMS (ESI) m/z 411,2 [(M+H)]+, calculado para C21H26N6O3:410,48. 5.6.64. Síntese de [3-(4-aminometil-ciclo-hex-1-enil)-imidazo[1,2- b]piridazin-6-il]-butil-amina
Figure img0155
Parte A. 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)ciclo-hex-3-enocar- boxilato de metila
Figure img0156
[0257] O acoplamento Suzuki de brometo de arila e éster borônico comercialmente disponível sob as mesmas condições como descrito no exemplo 5.6.19 forneceu o composto título em 97% de produção. Parte B. (4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)ciclo-hex-3-en-1- il)metanol
Figure img0157
[0258] A 200 mg (0,610 mmol) do produto isolado dissolvidos em 15 mL de THF a 0°C foram adicionados 2,44 mL (2,439 mm ol) de solução de THF de hidreto de alumínio de lítio a 1 M. Após 15 minutos de agitação, a reação foi concluída. Ela foi diluída com 40 mL de THF, e 2,0 g de Na2SO4.10H2O foram lentamente adicionados e agitados durante mais 1 hr. Isto foi em seguida filtrado e o filtrado concentrado para obter 182 mg (99%) do álcool desejado. Parte C. 2-((4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)ciclo-hex-3-en-1- il)metil)isoindolina-1,3-diona
Figure img0158
[0259] A 150 mg (0,500 mmol) do álcool dissolvidos em 15 mL de THF a 0°C, foram adicionados ftalimida (80,9 mg, 0, 55 mmol), DIAD (121 mg, 0,599 mmol) e trifenilfosfina (157 mg, 0,599 mmol). Após 0,5 hr de agitação a 0°C, o banho de gelo foi removido, e agi tação foi continuada em temperatura ambiente durante cerca de 16 hr. Ela foi em seguida diluída com 20 mL de EtOAc, e saciada com 10 mL de água. A camada orgânica foi separada e lavada com salmoura, secada sobre MgSO4, e purificada sobre o ISCO (sílica-gel) eluindo com 0 - 10% de MeOH/DCM para fornecer 163 mg (76%) de produto. Parte D. [3-(4-aminometil-ciclo-hex-1-enil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]- butil-amina.
[0260] A 130 mg (0,303 mmol) da amina protegida por ftalimida, dissolvidos em 10 mL de EtOH foram adicionados 45,5 mg (0,909 mmol) de monohidrato de hidrazina. A mistura resultante foi refluxada durante 4 hr, resfriada para rt, filtrada para remover os sólidos, e o filtrado foi concentrado para obter 88 mg (97%) do composto desejado. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,01 (t, J=7,45 Hz, 3 H) 1,44 - 1,61 (m, 3 H) 1,66 - 1,76 (m, 2 H) 2,03 - 2,20 (m, 3 H) 2,50 - 2,76 (m, 3 H) 3,00 (d, J=6,57 Hz, 2 H) 3,39 (t, J=7,07 Hz, 2 H) 7,19 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,24 - 7,31 (m, 1 H) 7,82 - 7,86 (m, 1 H) 7,88 - 7,93 (m, 1 H); LRMS (ESI) m/e 300,0 (M + H)+, calculado para C17H25N5 299,0. 5.6.65. Síntese de terc-butil éster de ácido metil-[2-(3-fenil- imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-etil]-carbâmico
Figure img0159
[0261] terc-Butil éster de ácido metil-[2-(3-fenil-imidazo[1,2-b] pirida- zin-6-ilamino)-etil]-carbâmico foi preparado similarmente ao procedimento para exemplo 5.6.61 de terc-butil éster de ácido [2-(3-bromo-imidazo[1,2- b] piridazin-6-ilamino)-etil]-metil-carbâmico (370,3 mg, 1,0 mmol), ácido fenilborônico [98-80-6] (146,4 mg, 1,2 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (460,2 mg, 2,0 mmol), e complexo de [1,1-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) com diclorometano [95464-05-4] (81,9 mg, 0,1 mmol) em 30% (v/v) de água em 1,2-di- metoxietano (12,5 mL) a 85oC durante 17 h. Pó não totalmente branco de acetato de etila/heptano, ponto de fusão 150-151 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm (rotâmeros presentes) 1,16 (br. s., 5 H) 1,20 - 1,33 (m, 1 H) 1,37 (br. s., 3 H) 2,49 - 2,54 (m, 1 H) 2,83 (br. s., 3 H) 3,43 (br. s., 2 H) 3,51 (br. s., 1 H) 6,69 (d, J=8,84 Hz, 1 H) 7,22 (br. s., 1 H) 7,29 - 7,38 (m, 1 H) 7,43 - 7,54 (m, 2 H) 7,76 (d, J=8,84 Hz, 1 H) 7,89 (br. s., 1 H) 8,16 (d, J=6,82 Hz, 2 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 14,39, 22,55, 28,24, 28,49, 31,71, 34,17, 35,10, 46,33, 47,00, 78,60, 112,58, 126,28, 127,46, 128,93, 130,40, 134,52, 153,69, 155,40. LRMS (ESI) m/z 368,1 [(M+H)]+, calculado para C20H25N5O2:367,45. 5.6.66. Síntese de 4-{6-[2-(3-terc-butil-1-metil-ureido)-etilamino]- imidazo[1,2-b]piridazin-3-il}-benzamida
Figure img0160
Parte A. dicloridrato de 4-[6-(2-metilamino-etilamino)-imidazo[1,2-b] piri- dazin-3-il]-benzamida
Figure img0161
[0262] Ácido clorídrico concentrado foi adicionado em uma solução em temperatura ambiente de terc-butil éster de ácido 2-[3-(4-carbamoil- fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]-etil}-metil-carbâmico (784,1 mg, 1,9 mmol) em metanol (130 mL) e deixado agitar sob camisa de N2 durante 2 dias. A mistura de reação foi resfriada e filtrada para fornecer diclori- drato de 4-[6-(2-metilamino-etilamino)-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il]-benza- mida como um pó não totalmente branco, ponto de fusão 322-323 oC (dec.). 1H RMN (400 MHz, ÓXIDO DE DEUTÉRIO) δ ppm 2,68 (s, 3 H) 3,34 (t, J=5,81 Hz, 2 H) 3,74 (t, J=5,68 Hz, 2 H) 7,24 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,88 (d, J=8,59 Hz, 2 H) 7,96 - 8,02 (m, 3 H) 8,08 (s, 1 H). LRMS (ESI) m/z 311,1[(M+H)]+, calculado para C16H18N6O: 310,36. Parte B. 4-{6-[2-(3-terc-butil-1-metil-ureido)-etilamino]-imidazo[1,2-b]piri- dazin-3-il}-benzamida.
[0263] 2-Isocianato-2-metilpropano foi lentamente adicionado a uma suspensão a 0°C agitada de dicloridrato de 4-[6-(2- metilamino-etilamino)- imidazo[1,2-b]piridazin-3-il]-benzamida (177,3 mg, 0,5 mmol), e base de Hunig [7087-68-5] (0,3 mL, 1,8 mmol) em diclorometano (4,6 mL) e a mistura deixada agitar e aquecer para temperatura ambiente durante 17 h. A mistura de reação foi em seguida dividida entre salmoura e acetato de etila, secada (MgSO4), cromatografada flash (sílica-gel eluída com 10% (v/v) de metanol/acetato de etila), e cristalizada de 2-propanol/água para 50,2 mg de pó branco, ponto de fusão 154-155°C. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,18 (s, 8 H) 2,49 - 2,52 (m, 1 H) 2,86 (s, 2 H) 3,32 (s, 1 H) 3,40 - 3,49 (m, 3 H) 5,26 (s, 1 H) 6,72 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,79 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,95 - 8,02 (m, 3 H) 8,29 (d, J=8,59 Hz, 2 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 29,06, 34,55, 39,42, 46,40, 49,75, 112,42, 124,98, 125,83, 126,03, 127,73, 130,82, 132,01, 132,19, 137,58, 153,61, 157,25, 167,43. LRMS (ESI) m/z 410,2[(M+H)]+, calculado para C21H27N7O2: 409,50. 5.6.67. Síntese de 6-(butilamino)-N-(1H-pirazol-3-il)imidazo[1,2-b] piridazina-3-carboxamida:
Figure img0162
[0264] Usando as condições de reação de acoplamento de amida descritas no exemplo 5.6.55 forneceu o composto título como sólido colorido em 43% de produção. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,01 - 8,07 (m, 2 H), 7,70 (d, J=9,92 Hz, 1 H), 7,63 (br. s., 1 H), 6,84 (d, J=9,92 Hz, 1 H), 4,56 (s, 1 H), 3,41 (t, J=7,06 Hz, 2 H), 1,69 - 1,76 (m, 2 H), 1,48 (dq, J=15,05, 7,48 Hz, 2 H), 0,96 (t, J=7,39 Hz, 3 H); LRMS (ESI) m/e 300,0 [(M + H)+, calculado para C14H18N7O 300,3]. 5.6.68. Síntese de 3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-(terc-butóxi)etil) imi- dazo[1,2-b]piridazin-6-amina
Figure img0163
Parte A. 3-bromo-N-(2-(terc-butóxi)etil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina:
Figure img0164
[0265] Uma solução de 3-bromo-6-fluoroimidazo[1,2-b]piridazina (216 mg, 1,0 mmol), trietil amina (0,35 mL, 2,5 mmol) e 2-(terc-butóxi) etana- mina (180 mg, 1,5 mmol) em isopropanol (2 mL) foi aquecida a 65 oC durante a noite. A mistura foi resfriada, diluída com acetato de etila e lavada com água. A camada orgânica foi secada sobre MgSO4 e concentrada para fornecer sólido marrom como bruto em produção quantitativa para outra síntese. 20 mg foi também purificados por HPLC preparativa para fornecer 3-bromo-N-(2-(terc-butóxi)etil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina puro como sólido branco (8 mg). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,57 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 6,76 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 4,56 (s, 1 H), 3,67 (t, J=5,94 Hz, 2 H), 3,53 (t, J=5,94 Hz, 2 H), 1,24 (s, 9 H)LRMS (ESI) m/e 315,0 [(M + H)+, calculado para C12H18BrN4O 314,2]. Parte B. 3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-(terc-butóxi)etil)imidazo[1,2-b] pirida- zin-6-amina.
[0266] Usando as condições de acoplamento Suzuki descritas no exemplo 5.6.48 forneceu o composto título como sólido branco em 40% de produção. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,53 (s, 1 H), 8,24 - 8,28 (m, 2 H), 7,82 (s, 1 H), 7,66 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 7,57 (d, J=8,59 Hz, 2 H), 6,79 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 4,18 (s, 2 H), 3,67 (t, J=5,81 Hz, 2 H), 3,53 (t, J=5,94 Hz, 2 H), 1,23 (s, 9 H); LRMS (ESI) m/e 340,1 [(M + H)+, calculado para C19H26N5O 340,4]. 5.6.69. Síntese de 4-((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)-2-metilbutan-2-ol
Figure img0165
Parte A. 4-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-2-metilbutan-2-ol
Figure img0166
[0267] O 3-bromo-6-fluoroimidazo[1,2-b]piridazina foi reagido com 4- amino-2-metilbutan-2-ol usando as mesmas condições de reação como descrito no exemplo 5.6.42, Parte A para obter 82% de produto. Parte B. 4-((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-2- metilbutan-2-ol.
[0268] O 4-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)-2-metilbutan- 2-ol foi acoplado com ácido (4-(aminometil)fenil)borônico como descrito no exemplo 5.6.19 para fornecer o composto título em 78% de produção. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,29 (s, 6 H) 1,84 - 1,94 (m, 2 H) 3,49 - 3,58 (m, 2 H) 4,24 (s, 2 H) 7,25 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,67 (d, J=8,59 Hz, 2 H) 7,97 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,22 - 8,29 (m, 3 H); LRMS (ESI) m/e 326,0 [(M + H)+, calculado para C18H23N5O 325,0]. 5.6.70. Síntese de N-alil-4-(6-(allilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3- il)benzamida
Figure img0167
Parte A. N-alil-3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
Figure img0168
[0269] Uma solução de 3-bromo-6-cloroimidazo[1,2-b]piridazina (1000 mg, 4,32 mmol) e alilamina (6,0 mL, 80 mmol) foi aquecida a 80°C (tubo selado) durante 6 h. A mistura resultante foi resfriada para temperatura ambiente e purificada sobre sílica-gel (eluindo com acetato de etila) para fornecer N-alil-3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-amina (550 mg, 51% de produção) como um sólido amarelo: LRMS(ESI) m/z 253,0, 255,0 [(M+H)+, calculado para C9H9BrN4 252,0] Parte B. N-alil-4-(6-(allilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzamida.
[0270] A uma mistura de N-alil-3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-ami- na (365 mg, 1,44 mmol), ácido (4-(alilcarbamoil)fenil)borônico (615 mg, 3,0 mmol), [1,1‘-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) (62 mg, 0,085 mmol) foram adicionados n-butanol (3 mL) e carbonato de sódio aquoso a 2 M (2 mL). A mistura resultante foi aquecida a 100°C durante 5 h. A reação foi em seguida diluída com água, extraída com acetato de etila, e purificada por coluna de sílica-gel (10% de metanol em acetato de etila) seguida por HPLC preparativa (acetonitrila/formiato de amônio aquoso, coluna Sunfire) para fornecer N-alil-4-(6-(alilamino)imidazo[1,2- b]piridazin-3-il)benzamida como um sólido branco: 1H RMN (METANOL- d4) δ: 8,30 - 8,33 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,94 (d,, J = 8,4 Hz, 2H), 7,67 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 5,9-6,2 (m, 2H), 5,1-5,4 (m, 4H), 4,00 (m, 4H); LRMS(ESI) m/z 334,2 [(M+H)+, calculado para C19H19N5O 333,4] 5.6.71. Síntese de 3-(4-(aminometil)fenil)-N-(3-(terc-butóxi)propil) imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina:
Figure img0169
[0271] Usando um processo similar àquele descrito no exemplo 5.6.69 forneceu o composto título. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,51 (s, 2 H), 8,30 (d, J=8,38 Hz, 2 H), 7,83 (s, 1 H), 7,65 (d, J=9,48 Hz, 1 H), 7,56 (d, J=8,38 Hz, 2 H), 6,76 (s, 1 H), 6,73 (s, 1 H), 4,17 (s, 2 H), 3,56 (t, J=6,17 Hz, 2 H), 3,47 (t, J=6,73 Hz, 2 H), 1,93 (t, J=6,50 Hz, 2 H), 1,22 (s, 9 H); LRMS (ESI) m/e 354,1 [(M + H)+, calculado para C20H28N5O 354,4]. 5.6.72. Síntese de terc-butil éster de ácido [2-(3-bromo-imidazo [1,2- b]piridazin-6-ilamino)-etil]-isopropil-carbâmico
Figure img0170
Parte A. N1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)etano-1,2-diamina
Figure img0171
[0272] Uma suspensão agitada de 3-bromo-6-cloro-imidazo[1,2-b] piridazina [13526-66-4] (5,0 g, 21,5 mmol) em etilenodiamina [ 107-15-3] (25,0 mL, 373,1 mmol) foi aquecida para 65°C sob ca misa de nitrogênio. Uma vez na temperatura, a mistura tornou-se uma solução amarela clara. Estas condições foram mantidas durante 17 h, tempo no qual, a solução de reação quente verteu-se em água, e o volume extraído exaustivamente com acetato de etila. Os extratos combinados foram combinados, secados (CaSO4), e evaporados para obter 1,79 g de sólido amarelo. Este sólido foi recristalizado de acetato de etila/heptano para fornecer 1,4 g de N1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)etano-1,2-diamina como um pó branco, ponto de fusão 158-159°C. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,49 (br. s., 1 H) 2,79 (t, J=6,19 Hz, 2 H) 3,27 (q, J=5,89 Hz, 2 H) 6,73 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,10 (t, J=5,05 Hz, 1 H) 7,47 (s, 1 H) 7,68 (d, J=9,60 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 40,97, 45,13, 99,48, 113,51, 125,73, 130,72, 137,04, 154,81. LRMS (ESI) m/z 255,9/257,9 [(M+H)]+, calculado para C8H10BrN5:256,11. Parte B. N1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N2-isopropiletano-1,2- diamina
Figure img0172
[0273] Ácido acético glacial [64-19-7] (1,6 mL, 28,0 mmol) foi adicionado a uma suspensão agitada de N1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6- il)etano-1,2-diamina (7,0 g, 27,2 mmol), acetona [67-64-1] (2,4 mL, 32,6 mmol), cianoboroidreto de sódio [25895-80-7] (1,8 g, 27,2 mmol) e peneira molecular Angstrom 4 ativada, em pó (4 g). O frasco foi colocado em manta de N2, fechado com um septo, e a mistura deixada agitar em temperatura ambiente durante 3 dias, em seguida filtrada. O filtrado foi evaporado, e o resíduo dividido entre 10% (peso/v) de NaHCO3 aquoso e a- cetato de etila. O extrato foi secado (CaSO4), e evaporado para fornecer um óleo laranja claro. Este óleo foi triturado em heptano para precipitar N1-(3-bromoimidazo[1,2-b] piridazin-6-il)-N2-isopropiletano-1,2-diamina como 2,3 g de pó amarelo, mp,87-88 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0,99 (d, J=6,32 Hz, 5 H) 1,60 (br. s., 1 H) 2,71 - 2,81 (m, 3 H) 3,34 (q, J=6,32 Hz, 2 H) 6,73 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,07 (t, J=5,31 Hz, 1 H) 7,47 (s, 1 H) 7,68 (d, J=9,60 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 22,92, 41,48, 45,29, 47,81, 98,98, 112,99, 125,26, 130,24, 136,53, 154,24. LRMS (ESI) m/z 297,9/299,9 [(M+H)]+, calculado para C11H16BrN5: 289,19. Parte C. terc-butil éster de ácido [2-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6- ilamino)-etil]-isopropil-carbâmico.
[0274] A uma solução, com camisa de N2 em temperatura ambiente, rapidamente agitada de N1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N2- isopropiletano-1,2-diamina (633,3 mg, 2,1 mmol) e base de Hunig [708768-5] (0,5 mL, 2,9 mmol) em acetato de etila (30 mL) foi adicionado dicarbonato de di-terc-butila sólido [24424-99-5] (556,6 mg, 2,6 mmol). Uma vez concluída, a reação foi lavada com salmoura, secada (MgSO4), e evaporada para fornecer 894,5 mg de sólido amarelo. Este sólido foi recris- talizado de acetato de etila/heptano para fornecer terc-butil éster de ácido [2-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-etil]-isopropil-carbâmico como 559,5 mg de pó cristalino branco, ponto de fusão 154-155 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,16 (d, J=6,82 Hz, 6 H) 1,40 (s, 9 H) 2,49 - 2,52 (m, 1 H) 3,26 - 3,35 (m, 2 H) 3,35 - 3,42 (m, 2 H) 6,68 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,32 (s, 1 H) 7,49 (s, 1 H) 7,71 (d, J=9,60 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 20,55, 28,08, 78,46, 98,93, 112,85, 125,52, 130,41, 136,57, 154,10. LRMS (ESI) m/z 297,9/299,9 [(M+H)]+, calculado para C16H24BrN5O2: 398,31. 5.6.73. Síntese de etil éster de ácido {2-[3-(4-carbamoil-fenil)- imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]-etil}-fenil-carbâmico
Figure img0173
Parte A. 2,2,2-Trifluoro-N-(2-fenilamino-etil)-acetamida
Figure img0174
[0275] Trifluoroacetato de etila [383-63-1] (5,5 mL, 46,1 mmol) foi adicionado a uma solução a 0°C agitada de N1-feniletan o-1,2-diamina [1664-40-0] (5,0 mL, 38,4 mmol) em THF (125 mL) e foi deixado agitar e aquecer para temperatura ambiente sob camisa de N2 durante 17 h em seguida foi dividido entre salmoura e acetato de etila. O extrato foi secado (MgSO4) e evaporado para fornecer 10,2 g de líquido amarelo escuro claro. LRMS (ESI) m/z 232,9 [(M+H)]+, calculado para C10H11F3N2O:232,21. Parte B. etil éster de ácido fenil-[2-(2,2,2-trifluoro-acetilamino)-etil]- carbâmico
Figure img0175
[0276] Cloroformiato de etila [541-41-3] (1,4 mL, 14,7 mmol) foi adicionado em uma solução em temperatura ambiente de 2,2,2-trifluoro-N- (2-fenilamino-etil)-acetamida (3,4 g, 14,6 mmol) e N-metil morfolina [10902-4] (2,0 mL, 17,7 mmol) em acetato de etila (145 mL) e agitado sob camisa de N2 durante 17 h. A suspensão de reação foi em seguida lavada com ácido clorídrico aquoso diluído, salmoura, secada (MgSO4), evaporada e levada para a seguinte etapa sintética sem outra isolação.
[0277] Parte C. etil éster de ácido [2-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin- 6-ilamino)-etil]-fenil-carbâmico
Figure img0176
[0278] Etil éster de ácido fenil-[2-(2,2,2-trifluoro-acetilamino)-etil]- carbâmico bruto (2,2 g, 7,3 mmol) foi combinado com 3-bromo-6-flúor- imidazo[1,2-b]piridazina (892,5 mg, 4,1 mmol) e carbonato de potássio [584-08-7] (2,9 g, 20,6 mmol) em uma solução a 20% (v/v) de água em 1,2-dimetoxietano (25 mL) e aquecido para 85 oC durante 5 dias. A mistura de reação foi em seguida dividida entre água e acetato de etila e o extrato cromatografado flash (sílica-gel eluída com 100% de acetato de eti- la) para produzir 863,1 mg de pó cristalino branco, ponto de fusão 160161 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,08 (t, J=7,06 Hz, 2 H) 2,51 (dt, J=3,58, 1,85 Hz, 1 H) 3,35 (s, 1 H) 3,46 (q, J=6,39 Hz, 2 H) 3,90 (t, J=6,50 Hz, 2 H) 4,04 (q, J=7,06 Hz, 2 H) 6,65 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,19 - 7,25 (m, 1 H) 7,31 - 7,39 (m, 4 H) 7,48 (s, 1 H) 7,69 (d, J=9,70 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 14,16, 38,85, 47,84, 60,82, 98,79, 112,62, 125,31, 125,99, 126,79, 128,63, 130,18, 136,35, 141,81, 153,79, 154,64. LRMS (ESI) m/z 403,9/405,9[(M+H)]+, calculado para C17H18BrN5O2: 404,27.
[0279] Parte D. etil éster de ácido {2-[3-(4-carbamoil-fenil)-imidazo [ 1,2-b]piridazin-6-ilamino]-etil}-fenil-carbâmico.
[0280] A uma mistura de etil éster de ácido [2-(3-bromo-imidazo[1,2- b] piridazin-6-ilamino)-etil]-fenil-carbâmico (354,7 mg, 0,9 mmol), ácido (4- carbamoilfenil)borônico [123088-59-5] (174,2mg, 1,1mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (368,8 mg, 1,6 mmol), e complexo de [1,1-bis(difenilfosfino) ferroceno]dicloropaládio (II) com di- clorometano [95464-05-4] (74,4 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 25 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2-dimetoxietano (13 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85 oC durante 17 h em seguida resfriada e dividida entre salmoura e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4), evaporado, cromatografado flash (sílica-gel eluída com 10% (v/v) de meta- nol/acetato de etila) e mais purificado por RP-HPLC preparativa para fornecer etil éster de ácido {2-[3-(4-carbamoil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin- 6-ilamino]-etil}-fenil-carbâmico como um pó branco, ponto de fusão 227- 228oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,03 (t, J=7,07 Hz, 2 H) 2,51 (dt, J=3,73, 1,80 Hz, 2 H) 3,31 (s, 1 H) 3,48 (q, J=6,23 Hz, 2 H) 3,91 - 4,04 (m, 3 H) 6,69 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,18 - 7,35 (m, 5 H) 7,76 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,91 - 8,01 (m, 3 H) 8,21 (d, J=8,59 Hz, 2 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 14,25, 48,18, 60,95, 112,37, 124,91, 125,75, 126,00, 126,35, 127,18, 127,79, 128,77, 130,81, 131,93, 132,15, 137,57, 141,78, 153,40, 154,85, 167,49. LRMS (ESI) m/z 445,1[(M+H)]+, calculado para C24H24N6O3:444,50. 5.6.74. Síntese de 4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-N-(2,2- dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetil)-benzamida
Figure img0177
Parte A. ácido 4-(6-(butilamino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzoico
Figure img0178
[0281] O brometo de arila e o éster borônico foram acoplados usando as mesmas condições de reação Suzuki como exemplo 5.6.19 para obter o produto de ácido carboxílico. Parte B. 4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-N-(2,2-dimetil-[1,3] dioxolan-4-ilmetil)-benzamida.
[0282] O acoplamento de amida regular do ácido carboxílico com (2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metanamina forneceu 71% de produto. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,02 (t, J=7,33 Hz, 3 H) 1,36 (s, 3 H) 1,45 (s, 3 H) 1,49 - 1,57 (m, 2 H) 1,67 - 1,76 (m, 2 H) 3,40 (t, J=7,20 Hz, 2 H) 3,58 (d, J=5,31 Hz, 2 H) 3,80 (dd, J=8,46, 6,19 Hz, 1 H) 4,12 (dd, J=8,34, 6,32 Hz, 1 H) 4,36 (t, J=5,81 Hz, 1 H) 6,73 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,63 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,87 (s, 1 H) 7,90 - 7,97 (m, 2 H) 8,29 - 8,36 (m, 2 H); LRMS (ESI) m/e 424,0 [(M + H)+, calculado para C23H29N5O3 423,0]. 5.6.75. Síntese de 4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-N-(2,3- di-hidróxi-propil)-benzamida
Figure img0179
[0283] A 150 mg (0,355 mmol) de 4-(6-butilamino-imidazo[1,2-b] piri- dazin-3-il)-N-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolan-4-ilmetil)-benzamida foram adicionados 15 ml de AcOH e 5 mL de água e aquecidos para 60°C durante 1,5 hr. Isto foi concentrado e o bruto foi purificado sobre o HPLC PREP acético para produzir 107 mg (79%) do composto título. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,00 (t, J=7,39 Hz, 3 H) 1,42 - 1,55 (m, 2 H) 1,66 - 1,76 (m, 2 H) 3,40 (t, J=7,17 Hz, 2 H) 3,43 - 3,52 (m, 1 H) 3,56 - 3,65 (m, 3 H) 3,84 - 3,93 (m, 1 H) 7,24 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,96 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 8,00 - 8,05 (m, 2 H) 8,23 - 8,28 (m, 2 H) 8,30 (s, 1 H); LRMS (ESI) m/e 384,0 [(M + H)+, calculado para C20H25N5O3 383,0] 5.6.76. Síntese de 7-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-qui- nazolin-4-ol
Figure img0180
Parte A. 7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)quinazolin-4-ol
Figure img0181
[0284] A 87,2 mg (0,356 mmol) do 4-bromo-2-nitrobenzamida dissolvidos em 5 mL de formaldeído foi adicionado pó de ferro (50 mg, 0,89 mmol). A mistura resultante é agitada durante 2 hrs a 80°C. Ela foi diluída com 20 mL de EtOAc, e 10 mL de 2:1 de solução de DCM/IPA. A mistura resultante foi em seguida filtrada através de uma almofada de areia, e em seguida concentrada. Ao resíduo obtido foram adicionados 99 mg (0,391 mmol) de bis(pinacolato)dibóro, seguidos por KOAc (105 mg, 1,07 mmol), PdCl2(dppf).DCM (29 mg, 0,04 mmol) e 18 mL de dioxano. A mistura re-sultante foi aquecida a 80°C durante a noite. Após resfriar, ela foi diluída com EtOAc, lavada com salmoura, e secada sobre MgSO4. Ela foi concentrada e purificada sobre o ISCO (sílica-gel) e eluída com 1-10% de MeOH/DCM, para obter 78 mg (81%) do éster borônico. Parte B. 7-(6-butilamino-imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)-quinazolin-4-ol.
[0285] A (60 mg, 0,223 mmol) do brometo de arila, em um frasconete que pode ir ao micro-ondas foram adicionados éster borônico (73 mg, 0,268 mmol), K3PO4 (142 mg, 0,669 mmol), PdCl2(PPh3)3 (16 mg, 0,022 mmol), 3 mL de DME e 1 mL de água. A mistura resultante foi tratada por micro-ondas durante 30 minutos a 140°C. Diluída com 15 mL de EtOAC, e lavada com cerca de 10 mL de salmoura. A camada orgânica foi secada sobre MgSO4, e concentrada. A mistura bruta foi novamente dissovida em 3 ml de solução de 2:1 de MeOH/H2O. Ela foi filtrada e purificada sobre a HPLC PREP para fornecer 41 mg (55%) do produto desejado. O procedimento é usado para todas as reações de acoplamento Suzuki a menos que estabelecido de outro modo. Ácidos borônicos funcionam como os ésteres borônicos.] 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 0,99 (t, J=7,39 Hz, 3 H) 1,45 - 1,56 (m, 2 H) 1,68 - 1,77 (m, 2 H) 3,46 (t, J=7,06 Hz, 2 H) 7,28 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,99 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 8,22 - 8,28 (m, 2 H) 8,37 (d, J=8,38 Hz, 1 H) 8,45 (s, 1 H) 8,63 (d, J=1,54 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/e 335,0 [(M + H)+, calculado para C18H18N6O 334,0]. 5.6.77. Síntese de metil(2-((3-(4-(pirrolidin-2-il)fenil) imidazo[1,2-b] piridazin-6-il)amino)etil)carbamato de iso-propila:
Figure img0182
[0286] O composto título foi obtido usando um processo similar àquele descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,56 (s, 1 H), 8,28 (br. s., 2 H), 7,83 (s, 1 H), 7,68 (d, J=9,35 Hz, 1 H), 7,60 (d, J=8,34 Hz, 2 H), 6,73 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 4,66 (dd, J=9,60, 6,82 Hz, 1 H), 3,66 (br. s., 1 H), 3,59 (br. s., 3 H), 3,41 - 3,55 (m, 2 H), 2,94 (s, 3 H), 2,48 - 2,56 (m, 1 H), 2,19 - 2,34 (m, 3 H), 1,00-1,23 (d, J=5,05 Hz, 6 H); LRMS (ESI) m/e 423,1 [(M + H)+, calculado para C23H31N6O2. 423,5]. 5.6.78. Síntese de (2-((3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6 il) amino)etil)(metil)carbamato de terc-butila:
Figure img0183
[0287] O composto título foi obtido usando um processo similar àquele descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,04 (s, 1 H), 7,97 (br. s., 1 H), 7,90 (br. s., 1 H), 7,52 - 7,57 (m, 1 H), 7,13 - 7,24 (m, 3 H), 3,90 (s, 3 H), 3,42 - 3,49 (m, 4 H), 2,74 (s, 3 H), 1,30-1,38 (br. s., 9 H); LRMS (ESI) m/e 398,1 [(M + H)+, calculado para C21H28N5O3 398,5]. 5.6.79. Síntese de metil(2-((3-(thiazol-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)etil)carbamato de isopropila:
Figure img0184
[0288] O composto título foi obtido usando um processo similar àquele descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 9,19 (s, 1 H), 8,65-8,85 (bs, 1 H),8,31 (s, 1 H), 7,97 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 7,18 (d, J=9,35 Hz, 1 H), 4,78 (m, 1 H), 3,64 - 3,75 (m, 4 H), 2,98 (s, 3 H), 1,06-1,25 (m, 6 H); LRMS (ESI) m/e 361,1 [(M + H)+, calculado para C16H20N6O2S 361,4]. 5.6.80. Síntese de 4-(6-((2-(2-ciano-N-metilacetamido)etil)amino) imidazo[1,2-b]piridazin-3-il)benzamida
Figure img0185
Parte A. N-(2-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil)-2-ciano-N- metilacetamida
Figure img0186
[0289] O (2-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etil) (metil) carbamato de terc-butila foi agitado em solução de TFA/DCM (2:1) durante 0,5 hr e em seguida concentrado. O sal de amina-TFA resultante foi amidado sob as condições descritas no exemplo 5.6.62, Parte C com ácido 2-cianoacético para obter a amida em 63% de produção. Parte B. 4-(6-((2-(2-ciano-N-metilacetamido)etil)amino)imidazo[1,2-b]piri- dazin-3-il)benzamida.
[0290] A reação da amida com ácido (4-carbamoilfenil)borônico sob condições de acoplamento Suzuki como descrito no exemplo 5.6.19 forneceu o produto desejado em 28% de produção. 1H RMN (400 MHz, ME- TANOL-d4) δ ppm 2,87 (s, 1 H) 2,95 (s, 2 H) 3,56 - 3,67 (m, 4 H) 3,73 (s, 2 H) 7,16 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,94 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 8,00 - 8,06 (m, 2 H) 8,17 (d, J=8,38 Hz, 2 H) 8,21 - 8,28 (m, 1 H); LRMS (ESI) m/e 378,0 [(M + H)+, calculado para C19H19N7O2 377,0]. 5.6.81. Síntese de terc-butil(metil)carbamato de 2-((3-(3-meto- xipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)etila
Figure img0187
Parte A. N-(terc-butil)-N-metil-1H-imidazol-1-carboxamida:
Figure img0188
[0291] A uma suspensão de N, N’-carbonildi-imidazol (CDI, 1,76 g, 11 mmol) em THF (18 mL) foi adicionado t-butilmetilamina (1,2 mL, 10 mmol). A reação foi refluxada durante a noite, em seguida resfriada, concentrada, apreendida com DCM e água, e extraída. A camada orgânica (DCM) foi secada com sulfato de sódio anidroso, filtrada e concentrada para fornecer N-(terc-butil)-N-metil-1H-imidazol-1-carboxamida como óleo pegajoso ( 0,27 g, 15% de produção). LRMS (ESI) m/e 182,1 [(M + H)+, calculado para C9H16N3O 182,2]. Parte B. 1 -(terc- butil(metil)carbamoil)-3-metil-1 H-imidazol-3-ío:
Figure img0189
[0292] A uma solução de N-(terc-butil)-N-metil-1H-imidazol-1-car- boxamida (0,27 g, 1,5 mmol) em acetonitrila (3 mL) foi adicionado iodeto de metila (0,4 mL, 6,0 mmol). A reação foi concentrada em vácuo, após agitar em temperatura ambiente durante 24 h para fornecer 1-(terc- butil(metil)carbamoil)-3-metil-1H-imidazol-3-ío (0,28 g, 100%). Parte C. terc-butil(metil)carbamato de 2-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin- 6-il)amino)etila:
Figure img0190
[0293] A uma solução de 2-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)etanol (0,35 g, 1,5 mmol) e 1-(terc-butil(metil)carbamoil)-3-metil- 1H-imidazol-3-ío (0,30 g, 1,5 mmol) em THF/DMF (6,0 mL/3,0 mL) foi adicionado NaH (0,15 g, 60% em óleo mineral, 2,5 mmol). A reação foi agitada durante 24 h e em seguida saciada com água, extraída com éter, concentrada e purificada por cromatografia de coluna ISCO para fornecer terc-butil(metil)carbamato de 2-((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) ami- no)etila como produto (0,17 g, 31% de produção). LRMS (ESI) m/e 372,0 [(M + H)+, calculado para C14H21BrN5O2 371,2]. Parte D. terc-butil(metil)carbamato de 2-((3-(3-metoxipiridin-4-il) imida- zo[ 1,2-b]piridazin-6-il)amino)etila.
[0294] O composto título foi obtido usando acoplamento Suzuki como descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,70 (d, J=5,31 Hz, 1 H), 8,43 (s, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 7,73 (s, 1 H), 7,71 (s, 1 H), 6,84 (s, 1 H), 6,82 (s, 1 H), 4,31 (t, J=5,68 Hz, 2 H), 4,10 (s, 3 H), 3,70 (t, J=5,68 Hz, 2 H), 2,89 (s, 3 H), 1,35 (s, 9 H); LRMS (ESI) m/e 399,3 [(M + H)+, calculado para C20H27N6O3 399,5]. 5.6.82. Síntese de N-(2-isopropoxietil)-3-(3-metoxipiridin-4-il) imi- dazo[1,2-b]piridazin-6-amina:
Figure img0191
[0295] O composto título foi obtido como descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,66 (d, J=5,29 Hz, 1 H), 8,36 (br. s., 1 H), 8,21 (d, J=4,41 Hz, 1 H), 8,06 (br. s., 1 H), 7,63 (d, J=9,70 Hz, 1 H), 6,79 (d, J=9,70 Hz, 1 H), 4,57 (br. s., 1 H), 4,03 (s, 3 H), 3,58 - 3,67 (m, 3 H), 3,47 - 3,52 (m, 2 H), 1,11 (d, J=6,17 Hz, 6 H); LRMS (ESI) m/e 328,1 [(M + H)+, calculado para C17H22N5O2 328,4]. 5.6.83. Síntese de isopropil éster de ácido [2-(3-ciclopropil-imi- dazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-etil]-isopropil-carbâmico
Figure img0192
Parte A. isopropil éster de ácido [2-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6- ilamino)-etil]-isopropil-carbâmico
Figure img0193
[0296] A uma solução, com camisa de N2 em temperatura ambiente, rapidamente agitada de N1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N2- isopropiletano-1,2-diamina (945,0 mg, 3,2 mmol) e base de Hunig [7087- 68-5] (0,7 mL, 3,8 mmol) em acetato de etila (32 mL) foi adicionada uma solução a 1,0 M de cloroformiato de isopropila em tolueno (3,2 mL). Uma vez concluída, a reação foi lavada com salmoura, secada (MgSO4), e evaporada para fornecer 1,2 g de sólido castanho. Este sólido foi recristali- zado de acetato de etila/heptano para fornecer isopropil éster de ácido [2- (3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-etil]-isopropil-carbâmico como 750 mg de pó cristalino branco, ponto de fusão 146-147°C. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,17 (d, J=6,82 Hz, 12 H) 3,31 - 3,35 (m, 2 H) 3,38 - 3,44 (m, 2 H) 4,80 (dt, J=12,06, 5,97 Hz, 1 H) 6,67 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,34 (t, J=5,68 Hz, 1 H) 7,49 (s, 1 H) 7,71 (d, J=9,60 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 20,44, 21,95, 47,01, 67,46, 98,94, 112,84, 125,54, 130,42, 136,57, 154,10. LRMS (ESI) m/z 297,9/299,9 [(M+H)]+, calculado para C15H22BrN5O2:384,28. Parte B. isopropil éster de ácido [2-(3-ciclopropil-imidazo[1,2-b]piridazin-6- ilamino)-etil]-isopropil-carbâmico.
[0297] Uma solução de 10% (v/v) de água em THF (25 mL) foi adicionada a uma mistura de isopropil éster de ácido [2-(3-bromo- imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-etil]-isopropil-carbâmico (515,1 mg, 1,34 mmol), ciclopropiltrifluoroborato de potássio [1065010-87-1] (396,8 mg, 2,7 mmol), carbonato de césio [534-17-8] (1,3 g, 4,0 mmol), e complexo de [1,1‘-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) com dicloro- metano [95464-05-4] (110,4 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 50 mL. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida ao refluxo durante 4 dias, em seguida resfriada e filtrada. O filtrado foi dividido entre salmoura e acetato de etila e o extrato orgânico separado por fase seca- do (MgSO4) e evaporado para fornecer um óleo preto que foi purificado por RP-HPLC preparatória para fornecer 41,6 mg de isopropil éster de ácido [2-(3-ciclopropil-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-etil]-isopropil-car- bâmico como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 0,77 - 0,84 (m, 2 H) 0,98 - 1,06 (m, 2 H) 1,20 - 1,32 (m, 14 H) 2,08 - 2,19 (m, 1 H) 3,43 - 3,50 (m, 2 H) 3,50 - 3,59 (m, 2 H) 6,61 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,08 (s, 1 H) 7,52 (d, J=9,70 Hz, 1 H). LRMS (ESI) m/z 346,2[(M+H)]+, calculado para C18H27N5O2:345,45. 5.6.84. Síntese de 2-(((3-(4-carbamoilfenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila:
Figure img0194
[0281] O composto título foi obtido usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,24 - 8,34 (m, 2 H), 7,97 - 8,01 (m, 2 H), 7,87 (s, 1 H), 7,66 (d, J=8,84 Hz, 1 H), 6,77 (br. s., 1 H), 4,17 (br. s., 1 H), 3,68 (br. s., 1 H), 3,44 - 3,55 (m, 1 H), 3,35 - 3,44 (m, 3 H), 1,91 - 2,05 (m, 3 H), 1,87 (br. s., 1 H), 1,38 - 1,48 (m, 5 H), 1,34 (br. s., 4 H); LRMS (ESI) m/e 437,2 [(M + H)+, calculado para C23H29N6O3 437,5]. 5.6.85. Síntese de 2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin- 6-il)amino)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila:
Figure img0195
[0298] O composto título foi obtido usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,27 (br. s., 2 H), 7,82 (br. s., 1 H), 7,66 (d, J=9,35 Hz, 1 H), 7,58 (d, J=8,34 Hz, 2 H), 6,77 (d, J=9,09 Hz, 1 H), 4,18 (s, 3 H), 3,36-3,50 (m, 4 H), 1,85 - 2,04 (m, 4 H), 1,33 - 1,48 (m, 9 H); LRMS (ESI) m/e 437,2 [(M + H)+, calculado para C23H29N6O3 437,5]. 5.6.86. Síntese de 2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin- 6-il)amino)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (R)-terc-butila:
Figure img0196
[0299] O composto título foi obtido usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,27 (br. s., 2 H), 7,82 (br. s., 1 H), 7,66 (d, J=9,35 Hz, 1 H), 7,58 (d, J=8,34 Hz, 2 H), 6,77 (d, J=9,09 Hz, 1 H), 4,18 (s, 3 H), 3,36-3,50 (m, 4 H), 1,85 - 2,04 (m, 4 H), 1,33 - 1,48 (m, 9 H); LRMS (ESI) m/e 437,2 [(M + H)+, calculado para C23H29N6O3 437,5]. 5.6.87. Síntese de N-(2-isopropoxietil)-3-(isotiazol-5-il)imidazo [1,2-b] piridazin-6-amina:
Figure img0197
[0300] O composto título foi obtido usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,60 (d, J=2,02 Hz, 1 H), 8,45 (s, 1 H), 8,01 (d, J=1,77 Hz, 1 H), 7,95 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 7,25 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 3,80 - 3,85 (m, 2 H), 3,69 - 3,77 (m, 3 H), 1,21 (d, J=6,32 Hz, 6 H); LRMS (ESI) m/e 304,1 [(M + H)+, calculado para C14H18N5OS 304,4]. 5.6.88. Síntese de 2-(2-((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b] piri- dazin-6-il)amino)etil)pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila:
Figure img0198
[0301] O composto título foi obtido usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,53 (s, 1 H), 8,27 (d, J=8,34 Hz, 2 H), 7,81 (s, 1 H), 7,64 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 7,57 (d, J=8,34 Hz, 2 H), 6,73 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 4,18 (s, 2 H), 3,92 - 3,98 (m, 1 H), 3,52 (br. s., 1 H), 3,35 - 3,46 (m, 3 H), 1,67-2,22 (m, 6 H), 1,48 (br. s., 4 H), 1,28 (br. s., 5 H); LRMS (ESI) m/e 437,3 [(M + H)+, calculado para C24H33N6O2 437,5]. 5.6.89. Síntese de 3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-(ciclopentilóxi) etil) imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
Figure img0199
Parte A. 3-bromo-N-(2-(ciclopentilóxi)etil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina
Figure img0200
[0302] O 2-(ciclopentilóxi)etanamina foi reagido com 3-bromo-6- fluoroimidazo[1,2-b]piridazina, usando as condições de deslocamento de amina descritas no exemplo 5.6.42, Parte A para fornecer 69% de produto. Parte B. 4-(6-((2-(ciclopentilóxi)etil)amino)imidazo[1,2-b]piridazin-3-il) ben- zilcarbamato de terc-butila
Figure img0201
[0303] O 3-bromo-N-(2-(ciclopentilóxi)etil)imidazo[1,2-b]piridazin-6- amina foi acoplado com ácido (4-(((terc-butoxicarbonil) amino) me- til)fenil)borônico sob as condições de acoplamento Suzuki como descrito no exemplo 5.6.77, Parte B para obter 70% de produto. Parte C. 3-(4-(aminometil)fenil)-N-(2-(ciclopentilóxi)etil)imidazo[1,2-b]piri- dazin-6-amina.
[0304] A proteção de terc-butoxicarbonila foi removida usando 10 e-quivalentes de AcCl em MeOH a 0°C durante 4 hr para obter 100% de produção do composto desejado. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,55 (d, J=3,54 Hz, 2 H) 1,63 - 1,81 (m, 6 H) 3,57 (t, J=5,31 Hz, 2 H) 3,67 (q, J=5,05 Hz, 2 H) 3,93 - 4,05 (m, 1 H) 4,21 - 4,31 (m, 2 H) 7,29 - 7,41 (m, 1 H) 7,70 (d, J=8,08 Hz, 2 H) 7,96 - 8,05 (m, 1 H) 8,18 - 8,25 (m, 2 H) 8,25 - 8,31 (m, 1 H); 13C RMN (101 MHz, METANOL-d4) δ ppm 24,59 (s, 1 C) 33,34 (s, 1 C) 43,09 (s, 1 C) 44,12 (s, 1 C) 67,41 (s, 1 C) 83,26 (s, 1 C) 120,08 (s, 1 C) 121,33 (s, 1 C) 121,60 (s, 1 C) 128,35 (s, 1 C) 129,81 (s, 1 C) 130,45 (s, 1 C) 130,65 (s, 1 C) 134,28 (s, 1 C) 135,94 (s, 1 C) 146,70 - 146,90 (m, 1 C) 157,40 (s, 1 C); LRMS (ESI) m/e 352,0 [(M + H)+, calculado para C20H25N5O 351,0]. 5.6.90. Síntese de 2-(((3-vinilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-isopropila:
Figure img0202
[0305] O composto título foi obtido usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) d ppm 7,52 - 7,59 (m, 2 H), 6,95 - 7,00 (m, 1 H), 6,68 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 6,20 (d, J=1,52 Hz, 1 H), 6,16 (d, J=1,52 Hz, 1 H), 5,37 (d, J=1,52 Hz, 1 H), 5,34 (d, J=1,77 Hz, 1 H), 4,88 (quin, J=6,25 Hz, 1 H), 4,22 (Rs, 1 H), 3,40 - 3,64 (m, 4 H), 1,87 - 2,05 (m, 4 H), 1,18 - 1,25 (m, 6 H); LRMS (ESI) m/e 330,3 [(M + H)+, calculado para C17H24N5O2 330,4]. 5.6.91. Síntese de 2-(((3-(prop-1-en-2-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-isopropila:
Figure img0203
[0306] O composto título foi obtido usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,60 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 7,47 (s, 1 H), 6,70 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 6,43 (s, 1 H), 5,27 (s, 1 H), 4,86 (dt, J=12,44, 6,28 Hz, 1 H), 4,21 (br. s., 1 H), 3,54 - 3,61 (m, 1 H), 3,35 - 3,50 (m, 3 H), 2,23 (s, 3 H), 1,86 - 2,05 (m, 4 H), 1,21 (dd, J=12,13, 6,06 Hz, 6 H); LRMS (ESI) m/e 344,2 [(M + H)+, calculado para C18H26N5O2 344,4]. 5.6.92. Síntese de 2-(((3-ciclopropilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) ami- no)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-isopropila:
Figure img0204
[0307] O composto título foi obtido usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,85 (m, J=9,85 Hz, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,17 - 7,21 (m, 1 H), 4,84 - 4,90 (m, 1 H), 4,25 (d, J=6,57 Hz, 1 H), 3,63 - 3,69 (m, 1 H), 3,42 - 3,57 (m, 3 H), 2,24 - 2,31 (m, 1 H), 1,90 - 2,08 (m, 4 H), 1,16 - 1,25 (m, 8 H), 0,90 - 0,94 (m, 2 H); LRMS (ESI) m/e 344,2 [(M + H)+, calculado para C18H26N5O2 344,4]. 5.6.93. Síntese de N -(2-(ciclopentilóxi)etil)-3-(2-metoxipiridin-3-il) imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina:
Figure img0205
[0308] O composto título foi obtido usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,76 (dd, J=7,58, 1,77 Hz, 1 H), 8,13 (dd, J=4,80, 1,77 Hz, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,64 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 7,08 (dd, J=7,45, 4,93 Hz, 1 H), 6,76 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 4,05 (s, 3 H), 3,97 (dd, J=5,18, 3,41 Hz, 1 H), 3,64 (t, J=5,94 Hz, 2 H), 3,51 (t, J=5,94 Hz, 2 H), 1,62 - 1,76 (m, 6 H), 1,50 - 1,58 (m, 2 H); LRMS (ESI) m/e 354,2 [(M + H)+, calculado para C19H24N5O2 354,4]. 5.6.94. Síntese de 3-(((3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b] piridazin- 6-il)amino)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila:
Figure img0206
[0309] O composto título foi obtido usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,64 (d, J=5,05 Hz, 1 H), 8,43 (s, 1 H), 8,29 (d, J=5,05 Hz, 1 H), 8,10 (s, 1 H), 7,69 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 6,80 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 4,08 (s, 3 H), 3,2 - 3,56 (m, 5 H), 3,36 (br. s., 1 H), 2,69 (m, 1 H), 2,08 (m, 1 H), 1,78 (m, 1 H), 1,44 (s, 9 H); LRMS (ESI) m/e 425,3 [(M + H)+, calculado para C22H29N6O3 425,5]. 5.6.95. Síntese de 2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila:
Figure img0207
[0310] O composto título foi obtido usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,57 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 6,73 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 3,55 - 3,61 (m, 1 H), 3,39 - 3,52 (m, 3 H), 3,37 (s, 1 H), 2,08 (br. s., 1 H), 1,87 - 2,03 (m, 3 H), 1,43 (s, 9 H); LRMS (ESI) m/e 398,1 [(M + H)+, calculado para C16H22BrN5O2 397,3]. 5.6.96. Síntese de 2-(((3-cianoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-isopropila:
Figure img0208
[0311] Uma solução de 2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) ami- no)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-iso-propila (300 mg, 0,79 mmol), NaCN (46 mg, 0,94 mmol), CuI (15 mg, 0,08 mmol), KI (27 mg, 0,16 mmol) e N1,N2-dimetiletano-1,2-diamina (0,085 mL, 0,79 mmol) em tolu- eno (0,8 mL) foi agitada a 110°C durante 12 h. A re ação foi resfriada, concentrada, apreendida com EtOAc e água, extraída e camada orgânica secada com MgSO4. A camada orgânica foi concentrada e purificada por ISCO (0-5% de MeOH/DCM), em seguida seguindo HPLC PREP (neutra) para fornecer 2-(((3-cianoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirroli- dina-1-carboxilato de (S)-isopropila (63 mg, 25% de produção). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,00 (s, 1 H), 7,72 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 6,91 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 4,20 (m, 1 H), 3,38 - 3,61 (m, 4 H), 1,97 - 2,05 (m, 4 H), 1,16 - 1,25 (m, 6 H); LRMS (ESI) m/e 329,2 [(M + H)+, calculado para C16H21N6O2 329,4]. 5.6.97. Síntese de (3-ciclopent-1-enil-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-[2- (2-etóxi-fenil)-etil]-amina
Figure img0209
Parte A. (3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-[2-(2-etóxi-fenil)-etil]-amina
Figure img0210
[0312] Uma mistura de 3-bromo-6-flúor-imidazo[1,2-b]piridazina (648 mg, 3 mmol), 2-etóxi-fenetilamina (1 g, 6 mmol) e trietilamina (1 ml) em álcool de isopropila (2 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 140°C durante 20 min. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi submetido a ISCO (coluna de 40 g), para fornecer o composto título (980 mg). 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,47 (t, J=6,95 Hz, 3 H) 3,04 (t, J=6,69 Hz, 2 H) 3,64 - 3,72 (m, 2 H) 4,06 - 4,17 (m, 2 H) 4,97 (br. s., 1 H) 6,40 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 6,87 - 7,02 (m, 2 H) 7,17 - 7,32 (m, 2 H) 7,47 (s, 1 H) 7,54 (d, J=9,60 Hz, 1 H). LRMS (ESI) m/z 361 e 363,1 [(M+H)]+, calculado para C16H17BrN4O:361,24. Parte B. (3-Ciclopent-1-enil-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-[2-(2-etóxi-fenil)- etil]-amina.
[0313] Uma mistura de (3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-[2-(2- etóxi-fenil)-etil]-amina (90 mg, 0,25 mmol), 2-ciclopent-1-enil-4,4,5,5- tetrametil-[1,3,2]dioxaborolano (97 mg, 0,5 mmol), K2CO3 (104 mg, 0,75 mmol) e diclorobis(trifenilfosfina)paládio (II) (8,8 mg, 0,013 mmol) em MeCN/água (2,8 ml/0,7 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 150°C durante 15 min. A camada de água foi removida e a camada orgânica foi concentrada. O resíduo foi submetido a ISCO. O produto foi mais purificado por preparativa para fornecer o composto título (60 mg).
[0314] 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,46 (t, J=6,95 Hz, 3 H) 1,99 - 2,07 (m, 2 H) 2,64 - 2,70 (m, 2 H) 2,82 - 2,88 (m, 2 H) 3,06 (t, J=6,62 Hz, 2 H) 3,66 - 3,72 (m, 2 H) 4,11 (q, J=7,06 Hz, 2 H) 4,77 - 4,84 (m, 1 H) 6,37 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 6,88 - 6,95 (m, 2 H) 7,02 (t, J=1,98 Hz, 1 H) 7,18 - 7,27 (m, 2 H) 7,46 (s, 1 H) 7,62 (d, J=9,48 Hz, 1 H). LRMS (ESI) m/z 349,2 [(M+H)]+, calculado para C21H24N4O:348,45. 5.6.98. Síntese de (S)-terc-butil-2-(((3-(2-oxopirrolidin-1-il) imidazo [1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidina-1 -carboxilato
Figure img0211
Parte A. 4-bromo-N-(6-cloroimidazo[1,2-b]piridazin-3-il) butanamida
Figure img0212
[0315] A 1,0 g (5,930 mmol) de 6-cloroimidazo[1,2-b]piridazin-3-ami- na dissolvido em 15 mL de THF foram adicionados cloreto de 4-bro- mobutanoíla (1,21 g, 6,52 mmol) e piridina (0,96 mL, 11,86 mmol). Esta mistura foi agitada durante 1 hr em temperatura ambiente, e em seguida diluída com 30 mL de EtOAc e saciada com NaHCO3 aq.. A camada orgânica foi separada e lavada com salmoura, secada sobre MgSO4, e concentrada. O sólido obtido (1,39 g, 74% de produção) foi puro o suficiente para ser usado para a etapa seguinte sem outra purificação. Parte B. 1-(6-cloroimidazo[1,2-b]piridazin-3-il)pirrolidin-2-ona
Figure img0213
[0316] A 1,0 g de 4-bromo-N-(6-cloroimidazo[1,2-b]piridazin-3-il) bu- tanamida (3,15 mmol) dissolvido em 39 mL de DMF foi adicionado NaH (189 mg, 4,72 mmol), e agitado em temperatura ambiente durante 0,5 hr. Diluído com 50 mL de EtOAc e separada a camada orgânica. Lavada duas vezes com água, uma vez com salmoura e secada sobre MgSO4. Concentrada para obter o produto 0,49 g (66%). Nenhuma purificação foi necessária. Parte C. 2-(((3-(2-oxopirrolidin-1-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) me- til)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila.
[0317] O 1-(6-cloroimidazo[1,2-b]piridazin-3-il)pirrolidin-2-ona foi reagido com 2-(aminometil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila usando as condições de deslocamento de amina descritas no exemplo 5.6.42, Parte A para fornecer o produto desejado em 73% de produção. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,38 - 1,46 (m, 10 H) 1,71 (br. s., 1 H) 1,80 - 1,91 (m, 2 H) 1,95 - 2,08 (m, 1 H) 2,22 (quin, J=7,55 Hz, 2 H) 2,50 - 2,58 (m, 2 H) 3,22 - 3,41 (m, 4 H) 3,90 (q, J=6,69 Hz, 2 H) 4,16 (br. s., 1 H) 6,40 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,44 (s, 1 H) 7,54 (d, J=9,70 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/401,0 [(M + H)+, calculado para C20H28N6O3 400,0]. 5.6.99. Síntese de 1-{2-[3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b] piridazin-6-ilamino]-etil}-3-terc-butil-imidazolidin-2-ona
Figure img0214
Parte A. 1-[2-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-etil]-3-terc-butil-
Figure img0215
[0318] Uma mistura de 1-terc-butil-imidazolidin-2-ona (1,42g, 10 mmol) e NaH (600 mg, 60% de dispersão em óleo, 15 mmol) em THF (50 ml) foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h., em seguida resfriada para 0°C. Uma solução de bromoacetonitrila (1,4 ml, 20 mmol) em THF (30 ml) foi adicionada lentamente a uma mistura de reação. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi tratada com pequena quantidade de água e em seguida a mistura foi passada através de uma almofada de sílica. O filtrado foi concentrado e o resíduo foi submetido a uma coluna curta para fornecer o produto bruto que foi também purificado por outra coluna curta para fornecer o produto.
[0319] A uma solução de produto acima (1,6 g, 8,8 mmol) em THF (20 ml) a 0°C foi adicionada uma solução de BH 3THF em THF (1 M, 100 ml). A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 30 min., em seguida em temperatura ambiente durante 4 h. A mistura foi em seguida resfriada para 0°C novamente e tratada com HCl frio (6 N, 20 ml) para pH acídico forte. O solvente orgânico foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi tratado com NaOH (4 N, ~30 ml) para pH>10, em seguida extraído com EtOAc (5 x 75 ml). Os extratos combinados foram secados (Na2SO4) e concentrados para fornecer o produto desejado.
[0320] Uma mistura de produto acima (350 mg, 1,89 mmol), 3-bromo- 6-flúor-imidazo[1,2-b]piridazina (216 mg, 1 mmol), e trietilamina (0,5 ml) em álcool de isopropila (1,5 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 140°C durante 20 min. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi submetido a ISCO (coluna de 40 g), para fornecer o composto título (180 mg). LRMS (ESI) m/z 381 e 383,2[(M+H)]+, calculado para C15H21BrN6O: 381,28. Parte B. 1-{2-[3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]- etil}-3-terc-butil-imidazolidin-2-ona.
[0321] Uma mistura de 1-[2-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-etil]-3-terc-butil-imidazolidin-2-ona (75 mg, 0,2 mmol), cloridrato de ácido (4-aminometilfenil)borônico (49 mg, 0,26 mmol), K2CO3 (83 mg, 0,6 mmol) e diclorobis(trifenilfosfina)paládio (II) (7 mg, 0,01 mmol) em MeCN/água (2,8 ml/0,7 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 150°C durante 15 min. A mistura de reação foi diluída com MeCN e filtrada. O filtrado foi submetido à HPLC preparativa para fornecer o composto título (64,8 mg). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,26 (s, 9 H) 3,24 - 3,31 (m, 4 H) 3,40 (t, J=5,95 Hz, 2 H) 3,52 (t, J=5,95 Hz, 2 H) 4,17 (s, 2 H) 6,70 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,54 - 7,63 (m, 3 H) 7,77 (s, 1 H) 8,19 - 8,23 (m, 2 H) 8,56 (s, 1 H). LRMS (ESI) m/z 408,4 [(M+H)]+, calculado para C22H29N7O: 407,52. 5.6.100. Síntese de 2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b] piridazin-6-il)amino)metil)piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila
Figure img0216
Parte A. 2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) piperidina-1- carboxilato de (S)-terc-butila
Figure img0217
[0322] A reação de 3-bromo-6-fluoroimidazo[1,2-b]piridazina e 2- (aminometil)piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila sob as condições de deslocamento de amina descritas no exemplo 5.6.42, Parte A, forneceu a aril amina em 38% de produção. Parte B. 2-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) metil)-piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila.
[0323] O 2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) metil)pipe- ridina-1-carboxilato de (S)-terc-butila foi submetido à reação de acoplamento Suzuki descrita no exemplo 5.6.19, Parte B com os respectivos ácidos borônicos para fornecer o produtos esperado 2-(((3-(4-(amino- metil)fenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,14 (br. s., 9 H) 1,59 - 1,73 (m, 5 H) 1,78 (br. s., 1 H) 3,00 (t, J=12,63 Hz, 1 H) 3,50 (dd, J=14,15, 4,55 Hz, 1 H) 3,67 - 3,80 (m, 1 H) 4,00 (d, J=12,38 Hz, 1 H) 4,19 (s, 2 H) 4,87 (br. s., 1 H) 6,72 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,57 (m, J=8,34 Hz, 2 H) 7,67 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,82 (s, 1 H) 8,27 (m, J=8,34 Hz, 2 H); LRMS (ESI) m/437,0 [(M + H)+, calculado para C24H32N6O2 436,0] 5.6.101. Síntese de 3-(4-(aminometil)fenil)-N-((2-metiltetra-hidrofuran- 2-il)metil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina:
Figure img0218
[0324] O composto título foi obtido usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,55 (s, 1 H), 8,25 (d, J=7,83 Hz, 2 H), 7,80 (s, 1 H), 7,66 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 7,57 (d, J=8,08 Hz, 2 H), 6,83 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 4,17 (s, 2 H), 3,91 (t, J=6,19 Hz, 2 H), 3,56 (d, J=13,64 Hz, 1 H), 3,46 (d, J=13,64 Hz, 1 H), 1,97 - 2,06 (m, 3 H), 1,70 - 1,80 (m, 1 H), 1,31 (s, 3 H); LRMS (ESI) m/e 338,2 [(M + H)+, calculado para C19H24N5O 338,4]. 5.6.102. Síntese de isopropil éster de ácido 4-(3-bromo-imidazo [1,2- b]piridazin-6-il)-piperazina-1-carboxílico
Figure img0219
Parte A. terc-butil éster de ácido 4-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)- piperazina-1-carboxílico
Figure img0220
[0325] 3-Bromo-6-cloro-imidazo[1,2-b]piridazina [13526-66-4] (1,1 g, 4,5 mmol) e piperazina [110-85-0] (3,6 g, 41,8 mmol) foram moídos juntos em uma argamassa em uma mistura íntima e transferidos para um frasco de base redonda de 15 mL contendo uma barra agitadora magnética. O frasco foi equipado para um condensador de refluxo, com camisa de N2, e o recipiente de reação imerso em um banho de óleo em temperatura ambiente. Ao mesmo tempo em que a mistura sólida pura agitou-se, o banho foi aquecido para 120°C durante 0,5 h e mantido em temperatura nominal durante um total de 17 h. O banho foi removido e a reação fundida deixada resfriar e solidificar. A massa sólida foi dissovida em metanol, transferida para um funil separatório, e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4) e evaporado para fornecer 0,9 g de 3-bromo-6-piperazin-1-il-imidazo[1,2-b]piridazina como um sólido amarelo claro que foi usado sem outra purificação. LRMS (ESI) m/z 282,1/284,1 [(M+H)]+, calculado para C10H12BrN5:282,14.
[0326] Uma solução de 3-bromo-6-piperazin-1-il-imidazo[1,2-b] piri- dazina (4,3 g, 15,3 mmol), dicarbonato de di-t-butila [24424-99-5] (3,7 g, 16,9 mmol), e base de Hunig [7087-68-5] (3,0 mL, 17,2 mmol) em acetato de etila (160 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 17 h em seguida lavada com salmoura, secada (CaSO4), e evaporada para produzir 5,5 g de sólido amarelo que foi recristalizado de acetato de eti- la/heptano para fornecer 2,9 g de terc-butil éster de ácido 4-(3-bromo- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-piperazina-1-carboxílico como um pó branco, 178-180°C. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,43 (s, 9 H) 3,27 - 3,31 (m, 3 H) 3,45 - 3,56 (m, 8 H) 7,24 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,61 (s, 1 H) 7,90 (d, J=9,92 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 27,88, 45,00, 78,96, 99,17, 110,57, 125,97, 131,45, 136,41, 153,72, 154,90. LRMS (E- SI) m/z 382,1/384,1 [(M+H)]+, calculado para C15H20BrN5O2:382,26. Parte B. dicloridrato de 3-bromo-6-piperazin-1-il-imidazo[1,2-b]piridazina
Figure img0221
[0327] Ácido clorídrico concentrado (6,4 mL) foi adicionado a uma solução de terc-butil éster de ácido 4-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)-piperazina-1-carboxílico (2,9 g, 7,6 mmol) em metanol (150 mL), deixado agitar em temperatura ambiente durante a noite, em seguida evaporado até a secura. O sólido amarelo resultante foi dissolvido em metanol e a solução agitada diluída com dietil éter para precipitar dicloridrato de 3- bromo-6-piperazin-1-il-imidazo[1,2-b]piridazina como 2,6 g de pó branco, ponto de fusão 275-276 oC (dec.). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3,24 (br. s., 4 H) 3,82 - 3,92 (m, 4 H) 7,57 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,05 (s, 1 H) 8,12 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 9,70 (br. s., 1 H). 13C RMN (100 MHz, DM- SO-d6) δ ppm 41,86, 42,37, 101,30, 114,15, 124,22, 127,20, 134,76, 155,43. LRMS (ESI) m/z 282,1/284,1 [(M+H)]+, calculado para C10H12BrN5: 282,14. Parte C. isopropil éster de ácido 4-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)- piperazina-1-carboxílico.
[0328] A uma solução, com camisa de N2 em temperatura ambiente, rapidamente agitada de 3-bromo-6-piperazin-1-il-imidazo[1,2-b]piridazina (0,9 g, 3,1 mmol) e base de Hunig [7087-68-5] (0,8 mL, 4,6 mmol) em acetato de etila (60 mL) foi adicionada uma solução a 1,0 M de clorofor- miato de isopropila em tolueno (3,3 mL). Uma vez concluída, a reação foi lavada com salmoura, secada (MgSO4), pré-carregada sobre sílica-gel, cromatografada (sílica-gel, eluída com 100% de acetato de etila) e cristalizada de heptano para fornecer 717,7 mg de pó cristalino branco, ponto de fusão 123-124 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,22 (d, J=6,32 Hz, 6 H) 3,44 - 3,54 (m, 4 H) 3,67 - 3,79 (m, 4 H) 4,82 (spt, J=6,23 Hz, 1 H) 6,77 (d, J=7,83 Hz, 1 H) 7,97 (s, 1 H) 8,69 (d, J=7,83 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 21,94, 42,80, 43,87, 68,17, 77,32, 97,66, 136,47, 143,87, 144,40, 154,29, 155,64. LRMS (ESI) m/z 368,0/370,0 [(M+H)]+, calculado para C14H18BrN5O2:368,24. 5.6.103. Síntese de isopropil éster de ácido 4-[3-(3-metóxi-piridin-4- il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazina-1-carboxílico
Figure img0222
[0329] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.112 de isopropil éster de ácido 4-(3-bromo-imidazo[1,2- b]piridazin-6-il)-piperazina-1-carboxílico (281,1 mg, 0,8 mmol) e hidrato de ácido 3-metoxipiridina-4-borônico [1072952-50-1] (217,4 mg, 1,2 mmol) para fornecer 209,4 mg de di-cloridrato de isopropil éster de ácido 4-[3-(3- metóxi-piridin-4-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazina-1-carboxílico como pó branco, ponto de fusão 217-218°C (dec.). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,23 (d, J=6,32 Hz, 5 H) 2,51 (dt, J=3,73, 1,80 Hz, 3 H) 3,54 - 3,60 (m, 4 H) 3,61 - 3,67 (m, 4 H) 4,18 (s, 3 H) 4,83 (quin, J=6,25 Hz, 1 H) 7,66 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,21 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,64 - 8,67 (m, 2 H) 8,77 (s, 1 H) 9,08 (d, J=5,81 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO- d6) δ ppm 21,96, 42,58, 45,26, 57,69, 68,22, 115,12, 119,36, 121,73, 124,86, 126,61, 135,30, 136,82, 152,56, 154,26, 155,31. LRMS (ESI) m/z 397,2 [(M+H)]+, calculado para C20H24N6O3:396,45. 5.6.104. Síntese de 2-(((3-etilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) metil) pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila:
Figure img0223
[0330] A uma solução de PdCl2dppf (25 mg, 0,03 mmol) e 2-(((3- bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila (100 mg, 0,2 mmol) em dioxano (2 mL) foram adicionados dietilzinco ( 0,24 ml, 1 M em hexano), DiBAL-H (0,008 mL, 1 M em tolue- no) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi aquecida para 100°C e agitada durante 2 h. Filtrada a celita, e c oncentrado o filtrado, purificado por HPLC preparativa (neutra) para fornecer 2-(((3-etili- midazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)- terc-butila como óleo. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,55 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 7,22 (s, 1 H), 6,66 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 4,18 (br. s., 1 H), 3,55 (br. s., 1 H), 3,37 - 3,49 (m, 3 H), 2,91 (q, J=7,49 Hz, 2 H), 1,87 - 2,07 (m, 4 H), 1,44 (br. s., 9 H), 1,36 (t, J=7,45 Hz, 3 H); LRMS (ESI) m/e 346,3 [(M + H)+, calculado para C18H28N5O2 346,4. 5.6.105. Síntese de terc-butil éster de ácido (S)-2-(imidazo[1,2-b] piridazin-6-ilaminometil)-pirrolidina-1 -carboxílico
Figure img0224
[0314] n-Butil lítio a 1,6 M em hexanos (5,8 mL, 9,3 mmol) foi rapida- mente colocado em seringa em uma solução com camisa de N2, incolor, agitada de terc-butil éster de ácido (S)-2-[(3-bromo-imidazo[1,2-b]piri- dazin-6-ilamino)-metil]-pirrolidina-1-carboxílico (1,8 g, 4,6 mmol) em THF anidroso (100 mL) mantido a -73 oC. A solução de reação imediatamente tornou-se de cor marrom e foi deixada agitar durante 5 minutos. O aril lítio gerado foi saciado pela cuidadosa adição de NH4Cl aquoso saturado (2 mL). A solução de reação foi dividida entre salmoura e acetato de etila, o extrato secado (CaSO4), e o produto bruto cromatografado flash (sílica- gel, eluída com 10% de (v/v metanol/acetato de etila) e cristalizado de acetato de etila/heptano para fornecer terc-butil éster de ácido (S)-2- (imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilaminometil)-pirrolidina-1-carboxílico como 1,5 g de pó não totalmente branco, ponto de fusão 161-162 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,40 (s, 9 H) 1,72 - 1,95 (m, 4 H) 3,10 - 3,22 (m, 1 H) 3,28 (br. s., 2 H) 3,41 - 3,53 (m, 1 H) 3,92 - 4,05 (m, 1 H) 6,65 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 6,96 (br. s., 1 H) 7,36 (d, J=0,76 Hz, 1 H) 7,66 (d, J=9,60 Hz, 2 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 23,15, 28,13, 43,14, 45,96, 46,36, 55,57, 56,15, 78,30, 112,50, 116,01, 125,26, 130,32, 135,78, 153,75. LRMS (ESI) m/z 318,3[(M+H)]+, calculado para C16H23N5O2: 317,36. 5.6.106. Síntese de [3-(2,3-di-hidro-benzofuran-7-il)-imidazo[1,2-b] piridazin-6-il]-(4,4,4-trifluoro-butil)-amina
Figure img0225
Parte A. (3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-(4,4,4-trifluoro-butil)-amina
Figure img0226
[0331] Uma solução agitada de 3-bromo-6-flúor-imidazo[1,2-b] pirida- zina (1,7 g, 7,6 mmol), cloridrato de 4,4,4-trifluoro-butilamina [84153-82-2] (1,3 g, 7,6 mmol), e base de Hunig [7087-68-5] (4,0 mL, 23,0 mmol) em 2- propanol (40 mL) foi aquecida para 65 oC, sob camisa de N2 durante 3 dias, resfriada, e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4) e evaporado para fornecer 2,3 g de sólido amarelo. LRMS (ESI) m/z 323,1/325,1 [(M+H)]+, calculado para C10H10BrF3N4: 323,12. Parte B. [3-(2,3-Di-hidro-benzofuran-7-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]- (4,4,4-trifluoro-butil)-amina.
[0332] A uma mistura de (3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-(4,4,4- trifluoro-butil)-amina (442,4 mg, 1,4 mmol), 7-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2] dioxaborolan-2-il)-2,3-di-hidro-benzofurano [934586-50-2] (404,4 mg, 1,6 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (632,1 mg, 2,7 mmol), e complexo de [1,1-bis(difenilfosfino) ferroceno] dicloropa- ládio (II) com diclorometano [95464-05-4] (116,7 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 50 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2-dimetoxietano (25 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85 oC durante 17 h em seguida resfriada e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4) e evaporado para fornecer sólido marrom que foi purificado por RP-HPLC preparativa. Produto isolado foi dissolvido em metanol, diluído com ácido clorídri- co concentrado, evaporado até a secura, novamente dissolvido em metanol e precipitado pela adição de dietil éter. Filtração do precipitado produziu 162,0 mg de sal de monocloridrato de [3-(2,3-di-hidro-benzofuran-7-il)- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-(4,4,4-trifluoro-butil)-amina como um pó branco, ponto de fusão 299-300°C. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,88 (quin, J=7,52 Hz, 2 H) 2,32 - 2,46 (m, 2 H) 3,31 (t, J=8,84 Hz, 2 H) 3,34 - 3,41 (m, 2 H) 4,69 (t, J=8,72 Hz, 2 H) 7,00 (t, J=7,71 Hz, 1 H) 7,28 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,36 (dd, J=7,33, 1,01 Hz, 1 H) 8,06 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,09 (br. s., 1 H) 8,22 (d, J=8,08 Hz, 1 H) 8,26 (s, 1 H),19 F RMN (376 MHz, DMSO-d6) δ ppm -64,62. 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 20,40, 20,43, 29,04, 30,01, 30,29, 30,57, 30,84, 71,69, 108,63, 110,72, 118,75, 120,16, 121,07, 121,12, 123,71, 125,72, 125,99, 126,24, 128,07, 128,99, 132,10, 155,03, 156,77. LRMS (ESI) m/z 363,2 [(M+H)]+, calculado para C18H17F3N4O:362,36. 5.6.107. Síntese de terc-butil éster de ácido (S)-2-[(3-iodo-imidazo [1,2-b]piridazin-6-ilamino)-metil]-pirrolidina-1 -carboxílico
Figure img0227
[0333] N-iodosuccinimida [516-12-1] (1,1 g, 4,7 mmol) foi adicionado em uma solução em temperatura ambiente de terc-butil éster de ácido (S)-3-(imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilaminometil)-pirrolidina-1-carboxílico (1,4 g, 4,3 mmol) em DMF (43 mL) e deixado agitar sob camisa de N2 durante a noite em seguida vertido em uma solução aquosa agitada de 5% (pe- so/v) de produto precipitado de meta bissulfito de sódio e as duas misturas de fase extraídas com acetato de etila. O extrato foi secado (CaSO4), evaporado, e recristalizado de acetato de etila refrigerado para produzir 0,6 g de terc-butil éster de ácido (S)-2-[(3-iodo-imidazo[1,2-b]piridazin-6- ilamino)-metil]-pirrolidina-1-carboxílico como um pó branco, ponto de fu são 138-139 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,37 (br. s., 8 H) 1,79 (dd, J=9,98, 5,18 Hz, 1 H) 1,84 - 1,92 (m, 2 H) 1,97 (br. s., 1 H) 3,23 - 3,40 (m, 4 H) 3,42 - 3,53 (m, 1 H) 4,01 (br. s., 1 H) 6,69 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,09 (t, J=5,94 Hz, 1 H) 7,47 (s, 1 H) 7,64 (d, J=9,60 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 22,35, 23,20, 28,11, 28,54, 43,21, 45,99, 46,35, 56,25, 70,08, 78,32, 112,67, 125,09, 136,22, 137,90, 154,42. 5.6.108. Síntese de isopropil éster de ácido 4-(3-piridin-4-il-imidazo [1,2-b]piridazin-6-il)-piperazina-1 -carboxílico
Figure img0228
[0334] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.112 de isopropil éster de ácido 4-(3-bromo-imidazo[1,2- b]piridazin-6-il)-piperazina-1-carboxílico (101,1 mg, 0,3 mmol) e ácido pi- ridina-4-borônico [1692-15-5] (39,9 mg, 0,3 mmol) para fornecer 51,3 mg de di-cloridrato de isopropil éster de ácido 4-(3-piridin-4-il-imidazo[1,2- b]piridazin-6-il)-piperazina-1-carboxílico como pó amarelo, ponto de fusão 195-196 oC (dec.). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,23 (d, J=6,32 Hz, 6 H) 2,50 (br. s., 2 H) 3,52 - 3,62 (m, 4 H) 3,62 - 3,70 (m, 3 H) 4,79 - 4,88 (m, 1 H) 7,58 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,16 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 8,73 - 8,84 (m, 3 H) 8,90 (d, J=6,06 Hz, 2 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 21,97, 30,40, 42,61, 45,32, 68,22, 114,29, 120,46, 122,56, 125,88, 135,61, 139,37, 141,63, 143,40, 154,26, 155,42. LRMS (ESI) m/z 367,3 [(M+H)]+, calculado para C19H22N6O2:366,43. 5.6.109. Síntese de 2-(((3-(hidroximetil)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila
Figure img0229
Parte A. (6-cloroimidazo[1,2-b]piridazin-3-il)metanol:
Figure img0230
[0335] A uma solução de 6-cloroimidazo[1,2-b]piridazina-3-carbal- deído (0,55 g, 3 mmol) em metanol (20 mL) foi adicionado boroidreto de sódio (0,15 g, 4 mmol) em pequenas porções em temperatura ambiente. Após agitar em temperatura ambiente durante 30 min, a reação foi saciada com água, e extraída com DCM para fornecer produto bruto (0,55 g, 100% de produção). 40 mg de produto bruto foram purificados por HPLC preparativa para fornecer (6-cloroimidazo[1,2-b]piridazin-3-il)metanol como um sólido branco. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,95 (d, J=9,35 Hz, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 7,11 (d, J=9,35 Hz, 1 H), 5,07 (s, 2 H); LRMS (ESI) m/e 184,0 [(M + H)+, calculado para C7H7ClN3O 184,6]. Parte B. 2-(((3-(hidróximetil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirro- lidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila.
[0336] O composto título foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,58 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 6,70 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 4,85 - 4,94 (m, 2 H), 4,54 (br. s., 1 H), 4,14 - 4,20 (m, 1 H), 3,35 - 3,74 (m, 5 H), 1,99 - 2,08 (m, 1 H), 1,87 - 1,99 (m, 3 H), 1,47 (br. s., 9 H); LRMS (ESI) m/e 348,3 [(M + H)+, calculado para C17H26N5O3 348,4]. 5.6.110. Síntese de (R)-3-{2-[3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b] piridazin-6-ilamino]-etil}-4-isopropil-oxazolidin-2-ona
Figure img0231
Parte A. (R)-3-[2-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-etil]-4-iso- propil-oxazolidin-2-ona
Figure img0232
[0337] Uma mistura de (R)-4-isopropil-oxazolidin-2-ona (1,3 g, 10 mmol) e NaH (480 mg, 60% de dispersão em óleo, 12 mmol) em THF (50 ml) foi agitada em temperatura ambiente durante 2 h., em seguida resfriada para 0°C. Uma solução de bromoacetonitrila (1,4 ml, 20 mmol) em THF (30 ml) foi adicionada lentamente a uma mistura de reação. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi tratada com pequena quantidade de água e em seguida a mistura foi passada através de uma almofada de sílica. O filtrado foi concentrado e o resíduo foi submetido a uma coluna curta para fornecer o produto bruto. O processo foi repetido e ambos os produtos crus foram combinados e também purificados por outra coluna curta para fornecer o produto (3,3 g).
[0338] A uma solução de produto acima (3,3 g, 19 mmol) em THF (40 ml) a 0°C foi adicionada uma solução de BH 3THF em THF (1 M, 200 ml). A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 30 m in., em seguida em temperatura ambiente durante 4 h. A mistura foi em seguida resfriada para 0°C novamente e tratada com HCl frio (6 N, 20 ml ) para pH acídico forte. O solvente orgânico foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi tratado com NaOH (4 N, ~40 ml) para pH>10, em seguida extraído com EtOAc (5 x 80 ml) e DCM (5 x 80 ml). Os extratos combinados de ambos os solventes foram secados (Na2SO4) e concentrados. Concentrado de EtOAc fornece 1,9 g de produto desejado (não limpo) e 650 mg de produto mais limpo foram obtidos do concentrado de DCM.
[0339] Uma mistura de produto acima (1,9 g, 11 mmol), 3-bromo-6- flúor-imidazo[1,2-b]piridazina (650 mg, 3 mmol), e trietilamina (1,5 ml) em álcool de isopropila (8 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 140°C durante 20 min. duas vezes. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi submetido a ISCO (coluna de 40 g), para fornecer o composto título (345 mg). LRMS (ESI) m/z 368 e 370,2 [(M+H)]+, calculado para C14H18BrN5O2: 368,24. Parte B. (R)-3-{2-[3-(4-aminometil-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino]- etil}-4-isopropil-oxazolidin-2-ona.
[0340] Uma mistura de (R)-3-[2-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6- ilamino)-etil]-4-isopropil-oxazolidin-2-ona (95 mg, 0,26 mmol), cloridrato de ácido (4-aminometilfenil)borônico (63,7 mg, 0,34 mmol), K2CO3 (108 mg, 0,78 mmol) e diclorobis(trifenilfosfina)paládio (II) (9,1 mg, 0,013 mmol) em MeCN/água (3,2 ml/0,8 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 150°C durante 15 min. A mistura de reação foi diluída com MeCN e filtrada. O filtrado foi submetido à HPLC preparativa para fornecer o composto título como sal de HCOOH (86,3 mg). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 0,84 (dd, J=6,95, 0,88 Hz, 6 H) 2,09 (td, J=6,95, 3,54 Hz, 1 H) 3,26 - 3,31 (m, 1 H) 3,59 - 3,71 (m, 2 H) 3,85 (dt, J=13,96, 6,79 Hz, 1 H) 3,95 (ddd, J=8,65, 5,24, 3,54 Hz, 1 H) 4,11 - 4,19 (m, 4 H) 6,74 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,58 (d, J=8,34 Hz, 2 H) 7,68 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,81 (s, 1 H) 8,21 - 8,26 (m, 2 H) 8,52 (s, 1 H). LRMS (ESI) m/z 395,3 [(M+H)]+, calculado pa-ra C21H26N6O2: 394,48. 5.6.111. Síntese de isopropil éster de ácido 4-(3-fenil-imidazo[1,2-b] piridazin-6-il)-piperazina-1-carboxílico
Figure img0233
[0341] A uma mistura de isopropil éster de ácido 4-(3-bromo-imi- dazo[1,2-b]piridazin-6-il)-piperazina-1-carboxílico (330,0 mg, 0,9 mmol), ácido fenil borônico [98-80-8] (131,4 mg, 1,1 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (416,4 mg, 1,8 mmol), e complexo de [1,1-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) com diclorometano [95464-05-4] (77,1 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 50 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2- dimetoxietano (25 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85 oC durante 17 h em seguida resfriada e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4) e evaporado para fornecer um óleo laranja que foi purificado por RP-HPLC preparativa. Produto isolado foi dissolvido em metanol, diluído com ácido clorídrico concentrado, evaporado até a secura, novamente dissolvido em metanol e precipitado pela adição de dietil éter. Filtração do precipitado produziu 154,6 mg de sal de mono- cloridrato de isopropil éster de ácido 4-(3-fenil-imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)-piperazina-1-carboxílico como um pó cristalino branco, ponto de fusão 232-233 oC (dec). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,22 (d, J=6,32 Hz, 6 H) 3,50 - 3,60 (m, 4 H) 3,60 - 3,70 (m, 4 H) 4,77 - 4,87 (m, 1 H) 7,50 (d, J=7,58 Hz, 1 H) 7,55 - 7,71 (m, 2 H) 7,77 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,05 - 8,17 (m, 2 H) 8,25 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,54 (s, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 21,95, 42,49, 44,98, 68,23, 116,22, 120,94, 122,22, 126,28, 127,18, 128,09, 128,83, 129,05, 132,74, 154,26, 155,80. LRMS (ESI) m/z 366,2 [(M+H)]+, calculado para C20H23N5O2:395,44. 5.6.112. Síntese de terc-butil éster de ácido 4-[3-(3-metóxi-piridin-4- il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazina-1 -carboxílico
Figure img0234
[0342] A uma mistura de terc-butil éster de ácido 4-(3-bromo- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-piperazina-1-carboxílico (524,4 mg, 1,4 mmol), hidrato de ácido 3-metoxipiridina-4-borônico [1072952-50-1] (253,1 mg, 1,7 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (632,2 mg, 2,8 mmol), e complexo de [1,1‘-bis(difenil- fosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) com diclorometano [95464-05-4] (117,6 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 50 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2-dime- toxietano (25 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapi-damente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85 oC durante 17 h em seguida resfriada e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (CaSO4) e evaporado para fornecer um óleo marrom que foi purificado por RP-HPLC preparativa para obter um pó branco, ponto de fusão 205-206 oC (dec.). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,43 (s, 9 H) 3,46 - 3,55 (m, 8 H) 4,02 (s, 3 H) 7,30 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 8,00 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,13 (s, 1 H) 8,35 (d, J=5,05 Hz, 1 H) 8,41 (d, J=5,05 Hz, 1 H) 8,51 (s, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 28,04, 45,53, 56,33, 79,10, 111,13, 120,39, 120,75, 124,25, 126,24, 134,48, 135,69, 137,20, 142,26, 151,08, 153,85, 154,60. LRMS (ESI) m/z 411,3 [(M+H)]+, calculado para C21H26N6O3:410,48. 5.6.113. Síntese de 1-(4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) piperazin-1 -il)-3,3-dimetilbutan-1 -ona
Figure img0235
[0343] A uma suspensão, com camisa de N2, em temperatura ambiente, rapidamente agitada de dicloridrato de 3-bromo-6-piperazin-1-il- imidazo[1,2-b]piridazina (400,5 mg, 1,1 mmol) e cloreto de 3,3-dime- tilbutanoíla [7065-46-5] (0,2 mL, 1,4 mmol) em acetato de etila (50 mL) foi adicionada base de Hunig [7087-68-5] (0,8 mL, 4,6 mmol) e a reação deixada agitar durante a noite. Uma vez concluída, a reação foi lavada com salmoura, secada (MgSO4), e cristalizada de acetato de etila refrigera- do/heptano para fornecer 392,5 mg de pó cristalino branco, ponto de fusão 170-171 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,02 (s, 9 H) 2,30 (s, 2 H) 3,57 (d, J=7,06 Hz, 4 H) 3,63 - 3,72 (m, 4 H) 7,26 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,63 (s, 1 H) 7,91 (d, J=9,92 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 29,57, 30,81, 40,12, 43,50, 45,26, 45,34, 99,17, 110,56, 125,96, 131,44, 136,42, 154,89, 169,49. LRMS (ESI) m/z 380,1/382,1[(M+H)]+, calculado para C16H22BrN5O:380,28. 5.6.114. Síntese de 1-(4-(3-(3-metoxipiridin-4-il)imidazo[1,2-b]piri- dazin-6-il)piperazin-1 -il)-3,3-dimetilbutan-1 -ona
Figure img0236
[0344] A uma mistura de 1-(4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pi- perazin-1-il)-3,3-dimetilbutan-1-ona (168,9 mg, 0,4 mmol), hidrato de ácido 3-metoxipiridina-4-borônico [1072952-50-1] (82,3 mg, 0,5mmol), mo- nohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (210,4 mg, 0,9 mmol), e complexo de [1,1-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) com diclorometano [95464-05-4] (33,8 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 25 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2-dimetoxietano (13 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85 oC durante 17 h em seguida resfriada e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4) e evaporado para fornecer um óleo marrom que foi purificado por RP-HPLC preparativa. Produto isolado foi dissolvido em metanol, diluído com ácido clorídrico concentrado, evaporado até a secura, novamente dissolvido em metanol e precipitado pela adição de dietil éter. Filtração do precipitado produziu 59,7 mg de sal de di-cloridrato de 1-(4-(3-(3-metoxipiridin-4-il) imi- dazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)-3,3-dimetilbutan-1-ona como um pó amarelo claro, ponto de fusão 211-212 oC (dec). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,00 - 1,04 (m, 9 H) 2,26 - 2,35 (m, 2 H) 3,57 - 3,66 (m, 4 H) 3,70 (br. s., 4 H) 4,14 - 4,21 (m, 3 H) 7,68 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,20 (dd, J=10,10, 2,02 Hz, 1 H) 8,65 (d, J=2,53 Hz, 2 H) 8,75 - 8,80 (m, 1 H) 9,04 - 9,10 (m, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 29,70, 30,94, 43,69, 45,00, 45,43, 45,70, 57,70, 115,22, 119,35, 121,79, 124,70, 126,64, 130,45, 134,42, 135,21, 136,68, 152,58, 155,32, 169,63. LRMS (ESI) m/z 409,2[(M+H)]+, calculado para C22H28N6O2:408,50. 5.6.115. Síntese de isopropil éster de ácido 4-[3-(2-metóxi-fenil)- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazina-1 -carboxílico
Figure img0237
[0345] Preparado similarmente ao exemplo 5.6.112 de isopropil éster de ácido 4-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-piperazina-1-carboxílico (310,0 mg, 0,8 mmol) e ácido 2-metoxifenilborônico [5720-06-9] (153,6 mg, 1,0 mmol) para fornecer 172,7 mg de monocloridrato de isopropil éster de ácido 4-[3-(2-metóxi-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazina-1- carboxílico como pó branco, ponto de fusão 243-244 oC (dec.). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,09 - 1,24 (m, 7 H) 3,54 - 3,61 (m, 5 H) 3,82 - 3,87 (m, 4 H) 4,76 - 4,84 (m, 1 H) 7,15 (t, J=7,33 Hz, 1 H) 7,24 (d, J=8,08 Hz, 1 H) 7,49 - 7,56 (m, 1 H) 7,78 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 7,90 (d, J=7,58 Hz, 1 H) 8,22 - 8,31 (m, 2 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 21,92, 42,46, 44,82, 55,70, 68,21, 111,70, 114,19, 116,39, 120,27, 121,81, 122,20, 125,03, 130,44, 131,14, 131,75, 154,24, 155,62, 156,93. LRMS (ESI) m/z 396,2 [(M+H)]+, calculado para C21H25N5O3:395,47. 5.6.116. Síntese de 2-(((3-(prop-1-en-1-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)metil)piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila
Figure img0238
[0346] O acoplamento Suzuki seguindo o procedimento descrito no exemplo 5.6.19 forneceu uma mistura de isômeros E e Z. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,35 (br. s., 6 H) 1,42 (br. s., 3 H) 1,61 - 1,74 (m, 3 H) 1,78 (br. s., 3 H) 1,98 - 2,08 (m, 3 H) 2,40 (br. s., 1 H) 3,11 (t, J=12,76 Hz, 1 H) 3,27 - 3,40 (m, 1 H) 4,13 (d, J=13,89 Hz, 1 H) 4,50 (br. s., 1 H) 5,87 - 6,00 (m, 1 H) 6,75 - 6,94 (m, 2 H) 7,59 - 7,72 (m, 2 H); LRMS (ESI) m/372,0 [(M + H)+, calculado para C20H29N5O2 371,0] 5.6.117. Síntese de 2-(((3-propilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) metil)piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila
Figure img0239
[0347] A redução da ligação dupla foi realizada por vigorosa agitação de 0,135 mmol em 25 mL de MeOH com 0,2 equivalente de paládio sobre carbono (10% de Pd/C) sobre hidrogênio sob pressão atmosférica durante 8 hr. Ela foi em seguida filtrada, concentrada e purificada sobre a H- PLC PREP para obter o produto desejado em 58% de produção. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,04 (m, 3 H) 1,28 - 1,49 (m, 9 H) 1,63 (d, J=12,38 Hz, 1 H) 1,67 - 1,91 (m, 7 H) 2,82 - 2,95 (m, 4 H) 3,35 (br. s., 1 H) 4,01 (d, J=11,87 Hz, 1 H) 4,62 (d, J=7,33 Hz, 1 H) 6,40 (dd, J=9,60, 2,27 Hz, 1 H) 7,28 (d, J=2,78 Hz, 1 H) 7,70 (dd, J=9,47, 2,15 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/374,0 [(M + H)+, calculado para C20H31N5O2 373,0]. 5.6.118. Síntese de (S)-2-[3-(2-metóxi-fenil)-imidazo[1,2-b] piridazin-6- il]-hexa-hidro-pirrol[1,2-c]imidazol-3-ona
Figure img0240
Parte A. (S )-3-bromo-N-(pirrolidin-2-ilmetil)imidazo[1,2-b] piridazin-6- amina:
Figure img0241
[0348] Uma solução de 2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) ami- no)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila (13,4 g, 33,8 mmol) em MeOH (100 mL) foi resfriada para 0°C e adicionado c loreto de acetila (24 mL, 338 mL) gota a gota. A reação foi aquecida para temperatura ambiente e agitada durante a noite, e concentrada para fornecer (S)-3-bromo- N-(pirrolidin-2-ilmetil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina como sal de HCl (11 g, 100% de produção). LRMS (ESI) m/e 298,0 [(M + H)+, calculado para C11H15BrN5 298,2]. Parte B. vinil éster de ácido (S)-2-[(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6- ilamino)-metil]-pirrolidina-1-carboxílico
Figure img0242
[0349] A uma solução de terc-butil éster de ácido (S)-2-[(3-bromo- imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-metil]-pirrolidina-1-carboxílico (450 mg, 1,14 mmol) em DCM (10 ml) foi adicionado TFA (4 ml). A mistura resultante permaneceu durante 0,5 h. A mistura foi concentrada e o resíduo foi secado sob vácuo durante a noite. lulex
[0350] O produto do acima foi dissolvido em DCM (10 ml) e DIEA (993 ul, 5,7 mmol) foi adicionado. A mistura foi resfriada para 0°C e cloro- formiato de vinila (145 ul, 1,17 mmol) foi adicionado gota a gota. A mistura resultante foi agitada a 0°C durante 2 h, em seg uida em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada e o resíduo foi submetido a ISCO (coluna de 40 g) para fornecer o composto título (251 mg). LRMS (ESI) m/z 366,1 e 368,1 [(M+H)]+, calculado para C14H16BrN5O2: 366,22. Parte C. (S)-2-[3-(2-Metóxi-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-hexa-hidro- pirrol[1,2-c]imidazol-3-ona.
[0351] Uma mistura de vinil éster de ácido (S)-2-[(3-bromo-imidazo [1,2-b]piridazin-6-ilamino)-metil]-pirrolidina-1-carboxílico (125 mg, 0,34 mmol), ácido (2-metoxifenil)borônico (67,2 mg, 0,44 mmol), K2CO3 (141 mg, 1,02 mmol) e diclorobis(trifenilfosfina)paládio (II) (12 mg, 0,017 mmol) em MeCN/água (3,2 ml/0,8 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 150°C durante 15 min. A reação foi repetida a 140°C. Após remoção da água, as misturas de reação foram combinadas e diluídas com MeCN e filtradas. O filtrado foi submetido à HPLC preparativa para fornecer o composto título (S)-2-[3-(2-metóxi-fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-hexa-hidro-pirrol[1,2- c]imidazol-3-ona (76,5 mg). 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,39 - 1,51 (m, 1 H) 1,89 - 2,02 (m, 1 H) 2,05 - 2,18 (m, 2 H) 3,18 - 3,26 (m, 1 H) 3,72 - 3,96 (m, 6 H) 4,09 - 4,16 (m, 1 H) 7,04 - 7,13 (m, 2 H) 7,35 - 7,42 (m, 1 H) 7,90 - 7,96 (m, 1 H) 8,03 - 8,10 (m, 2 H) 8,40 (dd, J=9,85, 2,78 Hz, 1 H). LRMS (ESI) m/z 350,2 [(M+H)]+, calculado para C19H19N5O2: 349,4. 5.6.119. Síntese de 3-(4-(aminometil)fenil)-N-((1-(2,2,2-trifluoroetil) pirrolidin-2-il)metil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-amina:
Figure img0243
[0352] O composto título foi obtido usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,47 (s, 1 H), 8,15 - 8,19 (m, 2 H), 7,73 (s, 1 H), 7,59 (m, J=9,70 Hz, 1 H), 7,49 (d, J=8,60 Hz, 2 H), 6,70 - 6,73 (m, 1 H), 4,09 (s, 2 H), 3,55 (dd, J=13,45, 3,97 Hz, 1 H), 3,35 - 3,44 (m, 1 H), 3,14 - 3,24 (m, 2 H), 2,96 - 3,10 (m, 2 H), 2,46 - 2,53 (m, 1 H), 1,91 - 2,00 (m, 1 H), 1,74 - 1,85 (m, 2 H), 1,62 - 1,70 (m, 1 H); LRMS (ESI) m/e 405,2 [(M + H)+, calculado para C20H24F3N6405,4]. 5.6.120. Síntese de terc-butil éster de ácido 4-(3-fenil-imidazo [1,2- b]piridazin-6-il)-piperazina-1-carboxílico
Figure img0244
Parte A. terc-butil éster de ácido 4-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il-piperazina- 1-carboxílico
Figure img0245
[0353] Uma mistura íntima de 6-cloro-imidazo[1,2-b]piridazina [677588-6] (4,1 g, 26,5 mmol) e piperazina [110-85-0] (11,4 g, 132,8 mmol) foi aquecida para 120°C e agitada como um fundido sob c amisa de N2 durante 2 h. A reação resfriada foi dividida entre água e acetato de etila, o extrato secado (MgSO4), e evaporado para produzir 5,6 g de 6-piperazin- 1-il-imidazo[1,2-b]piridazina que, sem purificação, foram suspensos em acetato de etila (250 mL). A esta mistura agitada foram adicionados base de Hunig [7087-68-5] (9,6 mL, 55,1 mmol) e pirocarbonato de di-terc- butila [24424-99-5] (7,2 g, 33,2 mmol). A mistura com camisa de N2 foi agitada durante a noite em temperatura ambiente, em seguida dividida entre salmoura e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (CaSO4), evaporado, e cristalizado de acetato de etila/heptano para fornecer um pó cristalino branco, ponto de fusão 122-123 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,43 (s, 9 H) 3,46 (s, 8 H) 7,16 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 7,50 (s, 1 H) 7,81 - 7,94 (m, 2 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 28,03, 42,66, 45,42, 79,07, 110,58, 116,43, 125,91, 131,62, 135,77, 153,88, 154,71. LRMS (ESI) m/z 304,2 [(M+H)]+, calculado para C15H21N5O2: 303,37. Parte B. terc-butil éster de ácido 4-(3-iodo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)- piperazina-1-carboxílico
Figure img0246
[0354] Uma solução de terc-butil éster de ácido 4-imidazo[1,2- b]piridazin-6-il-piperazina-1-carboxílico (3,6 g, 11,8 mmol) e N- iodosuccinimida [516-12-1] (3,1 g, 13,1 mmol) em DMF (120 mL) foi agitada sob camisa de N2 em temperatura ambiente durante 2 h em seguida dividida entre 5% (peso/v) de metabissulfito de sódio aquoso e acetato de etila. A fase orgânica foi lavada com salmoura, secada (CaSO4), evaporada, e cristalizada de acetato de etila/heptano para fornecer um pó cristalino branco, ponto de fusão 203-204 oC (dec.). 1H RMN (400 MHz, DM- SO-d6) δ ppm 1,43 (s, 9 H) 3,45 - 3,51 (m, 4 H) 3,51 - 3,58 (m, 4 H) 7,19 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,61 (s, 1 H) 7,85 (d, J=9,92 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 27,89, 45,06, 70,52, 78,95, 110,55, 125,66, 137,28, 137,71, 153,73, 154,88. LRMS (ESI) m/z 430,0 (M+H)]+, calculado para C15H20IN5O2:429,26. Parte C. terc-butil éster de ácido 4-(3-fenil-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)- piperazina-1-carboxílico.
[0355] terc-Butil éster de ácido 4-(3-fenil-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)- piperazina-1-carboxílico foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.113 de terc-butil éster de ácido 4-(3-iodo-imidazo[1,2- b]piridazin-6-il)-piperazina-1-carboxílico (513,4 mg, 1,2 mmol) e ácido fe- nil borônico [98-80-6] (178,3 mg, 1,5 mmol) para obter 220,2 mg de pó branco, ponto de fusão 101-103°C (dec.). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,44 (s, 9 H) 3,52 (br. s., 8 H) 7,22 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,31 - 7,37 (m, 1 H) 7,46 - 7,54 (m, 2 H) 7,95 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,00 (s, 1 H) 8,11 - 8,18 (m, 2 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 28,03, 42,73, 45,56, 79,08, 110,13, 125,75, 126,24, 126,93, 127,14, 128,61, 129,03, 131,07, 137,15, 153,85, 154,63. LRMS (ESI) m/z 411,3 [(M+H)]+, calculado para C21H25N5O2: 379,47. 5.6.121. Síntese de terc- butil éster de ácido 4-[3-(3-metóxi-piridin-4- il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-[1,4]diazepano-1 -carboxílico
Figure img0247
Parte A. 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-1,4-diazepano-1-carboxi- lato de terc-butila
Figure img0248
[0356] Uma solução agitada de 3-bromo-6-fluoroimidazo[1,2-b] piri- dazina (1,6 g, 7,6 mmol), 1,4-diazepano-1-carboxilato de terc-butila [112275-50-0] (4,4 mL, 22,6 mmol), e base de Hunig [7087-68-5] (5,3 mL, 30,4 mmol) em 2-propanol (25 mL) foi aquecida para 65°C durante 3 dias, em seguida dividida entre salmoura e acetato de etila. O extrato foi secado (CaSO4) e evaporado para fornecer 5,9 g de líquido laranja claro que foi cromatografado flash (sílica-gel eluída com 10% (v/v) de meta- nol/acetato de etila) e cristalizado de acetato de etila/heptano para fornecer 2,0 g de pó branco, ponto de fusão 101-102 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm (rotômeros presentes) 1,03 (s, 5 H) 1,17 (s, 4 H) 1,73 (br. s., 1 H) 1,85 (br. s., 1 H) 2,43 - 2,47 (m, 1 H) 3,20 - 3,29 (m, 3 H) 3,49 (d, J=5,51 Hz, 1 H) 3,55 - 3,66 (m, 3 H) 3,70 - 3,79 (m, 2 H) 7,05 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,49 (d, J=7,28 Hz, 1 H) 7,78 (d, J=9,70 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm (rotômeros presentes) 24,50, 24,83, 27,45, 27,61, 44,10, 44,78, 44,83, 45,33, 47,58, 47,74, 48,01, 48,09, 78,11, 78,27, 98,80, 109,23, 109,61, 125,65, 125,77, 130,81, 130,89, 136,07, 153,01, 153,18, 153,90, 154,19. LRMS (ESI) m/z 396,1/ 398,1[(M+H)]+, calculado para C16H22BrN5O2: 396,29. Parte B. terc-butil éster de ácido 4-[3-(3-metóxi-piridin-4-il)-imidazo[1,2-b] piridazin-6-il]-[ 1,4]diazepano-1-carboxílico.
[0357] A uma mistura de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-1,4- diazepano-1-carboxilato de terc-butila (329,9 mg, 0,8 mmol), monohidrato de ácido (3-metoxipiridin-4-il)borônico [1072952-50-1] (153,6 mg, 1,0 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (384,1 mg, 1,7 mmol), e complexo de [1,1-bis(difenilfosfino) ferroceno]dicloropa- ládio (II) com diclorometano [95464-05-4] (69,2 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 50 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2-dimetoxietano (25 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85 oC durante 6 h, em seguida resfriada e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4) e evaporado para fornecer um sólido marrom que foi purificado por RP-HPLC preparativa para fornecer terc-butil éster de ácido 4-[3-(3-metóxi-piridin-4-il)- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-[1,4]diazepano-1-carboxílico como 79,5 mg de pó não totalmente branco, ponto de fusão 115-116 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm (rotômeros presentes) 1,01 (s, 4 H) 1,20 (s, 4 H) 1,91 (s, 2 H) 2,51 (dt, J=3,60, 1,86 Hz, 2 H) 3,27 - 3,35 (m, 4 H) 3,57 (br. s., 1 H) 3,64 (s, 1 H) 3,70 (br. s., 2 H) 3,81 (d, J=16,67 Hz, 2 H) 4,02 (s, 3 H) 7,19 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,93 (s, 1 H) 8,11 (d, J=8,59 Hz, 1 H) 8,32 (d, J=5,05 Hz, 1 H) 8,49 - 8,54 (m, 2 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm (rotômeros presentes) 13,89, 22,03, 24,66, 24,75, 27,49, 27,74, 31,20, 44,27, 44,96, 45,60, 47,99, 48,26, 48,39, 56,31, 78,25, 78,41, 109,66, 109,87, 119,88, 120,03, 120,27, 124,50, 126,00, 126,08, 134,46, 135,39, 135,52, 136,92, 141,96, 150,98, 152,56, 152,65, 154,01, 154,34. LRMS (ESI) m/z 425,2[(M+H)]+, calculado para C22H28N6O3: 424,51. 5.6.122. Síntese de terc-butil éster de ácido [1-(3-bromo-imidazo [1,2- b]piridazin-6-il)-pirrolidin-3-il]-metil-carbâmico
Figure img0249
[0358] Uma mistura de terc-butil éster de ácido metil-pirrolidin-3-il- carbâmico (1,2 g, 6 mmol), 3-bromo-6-flúor-imidazo[1,2-b]piridazina (648 mg, 3 mmol), e trietilamina (1,67 ml, 12 mmol) em álcool de isopropila (3 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 140°C durante 20 min. A mistura de reação foi deixada descansar durante a noite e o sólido branco foi coletado por filtração e lavado com MeOH para fornecer o composto título (750 mg). O filtrado foi concentrado e o resíduo foi submetido a ISCO (coluna de 40 g), para fornecer outro composto título (360 mg). 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,45 - 1,52 (m, 9 H) 2,03 - 2,27 (m, 2 H) 2,83 (s, 3 H) 3,39 - 3,54 (m, 2 H) 3,69 - 3,77 (m, 2 H) 6,58 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,49 (s, 1 H) 7,65 (d, J=9,70 Hz, 1 H). LRMS (ESI) m/z 396,1 e 398 [(M+H)]+, calculado para C16H22BrN5O2:396,29. 5.6.123. Síntese de (S)-5-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) ami- no)metil)pirrolidin-2-ona
Figure img0250
Parte A. (S)-2-((5-oxopirrolidin-2-il)metil)isoindolina-1,3-diona
Figure img0251
[0359] A (S)-5-(hidroximetil)pirrolidin-2-ona (2,00 g, 17,39 mmol) dissolvido em 25 mL de THF foram adicionados ftalimida (2,81 g, 19,13 mmol), trifenilfosfina (5,01 g, 19,13 mmol) e diisopropilazodi-carboxilato (3,33 g, 19,13 mmol). Esta mistura foi agitada durante cerca de 16 hr, e em seguida diluída com 200 mL de hexanos e 2 mL de DCM, e em seguida resfriada a -30°C. O produto precipitado e fo i filtrado e secado (4,11 g, 96%, sólido branco). Parte B. (S)-5-(aminometil)pirrolidin-2-ona
Figure img0252
[0360] A 244 mg (1 mmol) do (S)-2-((5-oxopirrolidin-2-il)metil) isoindo- lina-1,3-diona dissolvidos em 25 mL de EtOH foi adicionado hidrazina (500 mg, 10 mmol), e esta mistura foi refluxada durante 4 hr. Isto foi resfriado para rt e o composto título cristalizado, e isto foi filtrado e secado (114 mg, 100% de produção). Parte C. (S)-5-(((3-bromoimidazo[1,2-b] piridazin-6-il) amino) metil) pirroli- din-2-ona.
[0361] O (S)-5-(aminometil)pirrolidin-2-ona foi reagido com 3-bromo- 6-fluoroimidazo[1,2-b]piridazina sob as condições de deslocamento de amina descritas no exemplo 5.6.42, Parte A, para obter o composto título em 62% de produção. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 1,90 - 2,04 (m, 1 H) 2,24 - 2,50 (m, 3 H) 3,46 - 3,56 (m, 2 H) 4,09 (quin, J=5,84 Hz, 1 H) 6,74 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,43 (s, 1 H) 7,60 (d, J=9,70 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/310,0 dupleto [(M + H)+, calculado para C11H12BrN5O 309,0]. 5.6.124. Síntese de (S)-5-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) ami- no)metil)-1 -isopentilpirrolidin-2-ona
Figure img0253
Parte A. (S)-2-((1-isopentil-5-oxopirrolidin-2-il)metil)isoindolina-1,3-diona
Figure img0254
[0362] A 244 mg (1,000 mmol) de (S)-2-((5-oxopirrolidin-2-il)metil) iso- indolina-1,3-diona dissolvidos em 4 mL de DMSO foi adicionado (227 mg, 1,500 mmol) de 1-bromo-3-metilbutano, e 60% de NaH (42 mg, 1,050 mmol). Após 1 hr de agitação a 70°C, a mistura de reação foi resfriada para rt, e diluída com EtOAc e saciada com água. A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura e secada sobre MgSO4. Ela foi concentrada e purificada sobre sílica-gel eluindo com 15-100% de EtO- Ac/hexanos para obter 48% do produto desejado. Parte B. (S)-5-(aminometil)-1-isopentilpirrolidin-2-ona
Figure img0255
[0363] O (S)-2-((1-isopentil-5-oxopirrolidin-2-il)metil)isoindolina-1,3- diona foi submetido ao procedimento de desproteção de ftalimida descrito no exemplo 5.6.124, Parte B, para obter 100% de produção do produto desejado. Parte C. (S)-5-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)-1-iso- pentilpirrolidin-2-ona.
[0364] O 3-bromo-6-fluoroimidazo[1,2-b]piridazina foi reagido com (S)-5-(aminometil)-1-isopentil-pirrolidin-2-ona sob as condições de deslocamento de amina descritas no exemplo 5.6.42, Parte A para fornecer 60% de composto título. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 0,95 (d, J=6,32 Hz, 6 H) 1,39 - 1,66 (m, 3 H) 1,95 - 2,08 (m, 1 H) 2,13 - 2,26 (m, 1 H) 2,31 - 2,53 (m, 2 H) 3,02 (ddd, J=13,89, 9,22, 4,93 Hz, 1 H) 3,48 (dt, J=14,15, 5,18 Hz, 1 H) 3,79 (ddd, J=13,77, 9,35, 6,95 Hz, 1 H) 3,91 (ddd, J=14,08, 7,01, 2,91 Hz, 1 H) 4,00 - 4,11 (m, 1 H) 5,42 (t, J=5,31 Hz, 1 H) 6,67 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,52 (s, 1 H) 7,66 (d, J=9,85 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/380,0 dupleto [(M + H)+, calculado para C16H22BrN5O 379,0]. 5.6.125. Síntese de 2,2-dimetil-1-[4-(3-fenil-imidazo[1,2-b] piridazin- 6- il)-piperazin-1 -il]-propan-1 -ona
Figure img0256
Parte A. 1-[4-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-piperazin-1-il]-2,2-di- metil-propan-1-ona
Figure img0257
[0365] Nase de Hunig [7087-99-5] (1,8 mL, 10,3 mmol) foi adicionada em uma suspensão agitada em temperatura ambiente de dicloridrato de 3-bromo-6-piperazin-1-il-imidazo[1,2-b]piridazina (907,1 mg, 2,6 mmol) em acetato de etila (50 mL). Após 30 minutos, cloreto de pivaloíla [328230-2] (0,3 mL, 2,5 mmol) foi adicionado e a suspensão agitada sob camisa de N2 durante 17 h, em seguida lavada com salmoura, secada (Mg- SO4), e diluída com heptano. O resfriamento da solução agitada cristalizada produziu um pó branco que foi isolado por filtração, 618,5 mg. L- RMS (ESI) m/z 366,0/368,0 [(M+H)]+, calculado para C15H20BrN5O: 366,26. Parte B. 2,2-Dimetil-1-[4-(3-fenil-imidazo[ 1,2-b]piridazin-6-il)-piperazin-1- il]-propan-1-ona.
[0366] A uma mistura de 1-[4-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)- piperazin-1-il]-2,2-dimetil-propan-1-ona (526,7 mg, 1,4 mmol), ácido fenil borônico [98-80-8] (211,3 mg, 1,7 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (664,4 mg, 2,9 mmol), e complexo de [1,1‘- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) com diclorometano [9546405-4] (123,2 mg, 0,2 mmol) contida em um frasco de base redonda de 50 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2- dimetoxietano (25 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85 oC durante 17 h em seguida resfriada e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4) e evaporado para fornecer um óleo laranja claro que foi purificado por RP-HPLC preparativa. Produto isolado foi dissolvido em metanol, diluído com ácido clorídrico concentrado, evaporado até a secura, novamente dissolvido em metanol e precipitado pela adição de dietil éter. Filtração do precipitado produziu 85,8 mg de sal de monocloridrato de 2,2-dimetil-1-[4-(3-fenil-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)- piperazin-1-il]-propan-1-ona como um pó amarelo claro, ponto de fusão 277-278 oC (dec). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,24 (s, 9 H) 3,59 - 3,67 (m, 4 H) 3,71 - 3,79 (m, 4 H) 7,55 - 7,64 (m, 2 H) 8,06 - 8,15 (m, 2 H) 8,57 (br. s., 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 28,00, 38,08, 43,85, 45,30, 116,00, 121,14, 122,29, 126,29, 127,20, 128,85, 129,04, 155,84, 175,34. LRMS (ESI) m/z 364,2[(M+H)]+, calculado para C21H25N5O: 363,47. 5.6.126. Síntese de (S)-5-(((3-(4-(aminometil)fenil)imidazo[1,2-b] piridazin-6-il)amino)metil)-1-isopentilpirrolidin-2-ona
Figure img0258
[0367] O acoplamento Suzuki seguindo o procedimento descrito no exemplo 5.6.19 forneceu o composto título em 71% de produção. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 0,78 - 0,90 (m, 6 H) 1,31 - 1,50 (m, 3 H) 1,93 - 2,06 (m, 1 H) 2,12 - 2,36 (m, 2 H) 2,39 - 2,52 (m, 1 H) 3,09 (ddd, J=13,83, 8,15, 5,56 Hz, 1 H) 3,56 - 3,75 (m, 3 H) 3,99 - 4,08 (m, 1 H) 4,19 (s, 2 H) 6,78 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,58 (m, J=8,34 Hz, 2 H) 7,70 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,80 (s, 1 H) 8,20 (m, J=8,34 Hz, 2 H); LRMS (ESI) m/407,0 [(M + H)+, calculado para C23H30N6O 406,0]. 5.6.127. Síntese de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N-(terc- butil)piperazina-1 -carboxamida
Figure img0259
[0368] A uma suspensão, com camisa de N2, rapidamente agitada, a 0°C de dicloridrato de 3-bromo-6-piperazin-1-il-imi dazo[1,2-b]piridazina (934,9 mg, 2,6 mmol) e base de Hunig [7087-68-5] (1,8 mL, 10,6 mmol) em diclorometano (26 mL) foi adicionado 2-isocianato-2-metilpropano [1609-86-5] (340 μL, 2,9 mmol). A suspensão foi permitida agitar e aquecer para temperatura ambiente durante 17 h e foi em seguida dividida en- tre salmoura e acetato de etila. A fase orgânica foi reduzida em volume para precipitar produto como 442,1 mg de sólido amarelo. Uma alíquota de 129,3 mg foi purificada por RP-HPLC preparativa para produzir 61,8 mg de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N-(terc-butil)piperazina-1- carboxamida como um pó branco, ponto de fusão 199-200°C. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,28 (s, 8 H) 2,51 (s, 1 H) 3,30 (s, 1 H) 3,39 - 3,46 (m, 4 H) 3,48 - 3,54 (m, 4 H) 7,26 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 7,61 (s, 1 H) 7,88 (d, J=10,11 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 29,15, 43,05, 45,27, 49,94, 99,27, 110,77, 126,00, 131,50, 136,54, 155,16, 156,93. LRMS (ESI) m/z 381,1/383,1 [(M+H)]+, calculado para C15H21BrN6O: 381,28. 5.6.128. Síntese de (S)-2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) ami- no)metil)- N -(terc-butil)pirrolidina-l -carboxamida
Figure img0260
[0369] A uma solução de (S)-3-bromo-N-(pirrolidin-2-ilmetil) imida- zo[1,2-b]piridazin-6-amina (400 mg, 1,2 mmol) e trietilamina (0,5 mL, 3,5 mmol) em DCM ( 10 mL) foi adicionado isocianato de t-butila (0,2 mL, 1,75 mmol) gota a gota. Após agitar em temperatura ambiente durante 2 h, a mistura de reação foi concentrada e purificado por cromatografia de coluna ISCO (10% de MeOH/DCM) para fornecer (S)-2-(((3-bromo- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)-N-(terc-butil)pirrolidina-1- carboxamida (360 mg, 76% de produção). 1H RMN (400 MHz, META- NOL-d4) δ ppm 7,58 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 6,72 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 5,07 (s, 1 H), 4,26 (dd, J=6,57, 1,77 Hz, 1 H), 3,35 - 3,48 (m, 4 H), 2,09 - 2,20 (m, 1 H), 1,90 - 2,05 (m, 3 H), 1,26 (s, 9 H); LRMS (ESI) m/e 395,2 [(M + H)+, calculado para C16H24BrN6O 396,3]. 5.6.129. Síntese de (S )-1-(2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6- il)(metil)amino)metil)pirrolidin-1 -il)-3-metilbutan-1 -ona:
Figure img0261
[0370] A uma solução de (S)-1-(2-(((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin- 6-il)amino)metil)pirrolidin-1-il)-3-metilbutan-1-ona (380 mg, 1,0 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado hidreto de sódio (120 mg, 3,0 mmol) em temperatura ambiente. Após agitar durante 15 min, iodeto de metila foi adicionado gota a gota. A reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite e preparada com solução de cloreto de amônio, extraída com acetato de etila, concentrada e purificada por cromatografia de coluna ISCO (10% de MeOH/DCM) para fornecer produto não puro. Ela foi também purificada por HPLC preparativa (neutra) para fornecer (S)-1-(2- (((3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)(metil)amino)metil)pirrolidin-1-il)-3- metilbutan-1-ona como óleo. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,65 - 7,75 (m, 1 H), 7,44 - 7,52 (m, 1 H), 7,04-7,22 (m, 1 H), 4,45-4,61 (m, 1 H), 3,45-3,92 (m, 4 H), 3,19 - 3,23 (m, 3 H), 1,90-2,32 (m, 7 H), 0,78 - 0,92 (m, 6 H); LRMS (ESI) m/e 394,1 [(M + H)+, calculado para C17H25BrN5O 395,3]. 5.6.130. Síntese de (S )-3-metil-1-(2-((metil(3-(piridin-4-il)imidazo [1,2- b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-1 -il)butan-1 -ona (com rotâme- ros menores):
Figure img0262
[0371] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,50 - 8,73 (m, 2 H), 8,16 - 8,31 (m, 2 H), 7,93 - 8,16 (m, 1 H), 7,65 - 7,93 (m, 1 H), 7,38 (d, J=10,11 Hz, 1 H), 4,49 (q, J=5,81 Hz, 1 H), 3,96 (dd, J=14,78, 5,94 Hz, 1 H), 3,37 - 3,66 (m, 3 H), 3,25 (m, 3 H), 2,07 - 2,20 (m, 3 H), 1,88 - 2,06 (m, 4 H), 0,72 - 0,96 (m, 6 H); LRMS (ESI) m/e 393,2 [(M + H)+, calculado para C22H29N6O 393,5]. 5.6.131. Síntese de N-(terc-butil)-4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6- il)piperazina-1 -carboxamida
Figure img0263
[0372] A uma mistura de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N- (terc-butil)piperazina-1-carboxamida (301,0 mg, 0,8 mmol), ácido fenil bo- rônico [98-80-8] (117,8 mg, 1,0 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (366,4 mg, 1,6 mmol), e complexo de [1,1‘- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) com diclorometano [9546405-4] (68,7 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 50 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2- dimetoxietano (25 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85 oC durante 17 h em seguida resfriada e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4) e evaporado para fornecer um óleo marrom que foi purificado por RP-HPLC preparativa. Produto isolado foi dissolvido em metanol, diluído com ácido clorídrico concentrado, evaporado até a secura, novamente dissolvido em metanol e precipitado pela adição de dietil éter. Filtração do precipitado produziu 39,3 mg de sal de monocloridrato de N-(terc-butil)-4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) pipe- razina-1-carboxamida como um pó branco, ponto de fusão 210-211oC (dec). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,28 (s, 8 H) 2,51 (br. s., 2 H) 3,47 (br. s., 4 H) 3,57 - 3,63 (m, 4 H) 7,49 (s, 1 H) 7,55 - 7,60 (m, 2 H) 7,76 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,11 (d, J=7,58 Hz, 2 H) 8,21 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 8,48 (s, 1 H),13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 29,15, 42,92, 45,19, 49,98, 116,08, 121,27, 122,26, 126,43, 127,18, 128,08, 128,78, 129,02, 132,90, 155,89, 156,83. LRMS (ESI) m/z 379,2[(M+H)]+, calculado para C21H26N6O:378,48. 5.6.132. Síntese de (1-(3-(piridin-4-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il) piperidin-3-il)carbamato de terc-butila
Figure img0264
[0373] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.42. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,48 (s, 9 H) 1,57 - 1,64 (m, 1 H) 1,78 (ddt, J=13,34, 8,88, 4,44, 4,44 Hz, 1 H) 1,91 (ddd, J=13,56, 6,62, 3,20 Hz, 1 H) 1,96 - 2,06 (m, 1 H) 3,27 (dd, J=12,90, 7,61 Hz, 1 H) 3,43 (t, J=9,15 Hz, 1 H) 3,70 - 3,79 (m, 1 H) 3,99 (d, J=12,79 Hz, 1 H) 4,70 (br. s., 1 H) 6,98 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,80 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 8,03 - 8,08 (m, 3 H) 8,66 - 8,73 (m, 2 H); LRMS (ESI) m/395,0 [(M + H)+, calculado para C21H26N6O2 394,0]. 5.6.133. Síntese de 5-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)hexa- hidropirrol[3,4-c]pirrole-2(1 H)-carboxilato de (3aR,6aS)-terc-butila
Figure img0265
[0374] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.42, Parte A. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,49 (s, 9 H) 1,57 (s, 2 H) 3,06 (br. s., 2 H) 3,39 (br. s., 2 H) 3,50 (d, J=9,35 Hz, 2 H) 3,69 (br. s., 2 H) 3,76 - 3,89 (m, 2 H) 6,60 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,53 (s, 1 H) 7,68 (d, J=9,85 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/408,0 [(M + H)+ dupleto, calculado para C17H22BrN5O2 407,0]. 5.6.134. Síntese de 3-bromo-6-(3-fenilpirrolidin-1-il)imidazo[1,2-b] piridazina
Figure img0266
[0375] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.42, Parte A. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 2,15 - 2,29 (m, 1 H) 2,44 - 2,55 (m, 1 H) 3,51 - 3,73 (m, 3 H) 3,80 - 3,89 (m, 1 H) 4,01 - 4,11 (m, 1 H) 6,65 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,29 - 7,42 (m, 5 H) 7,52 (s, 1 H) 7,68 (d, J=9,60 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/343,0 [(M + H)+ du- pleto, calculado para C16H15BrN4 342,0]. 5.6.135. Síntese de 2-(1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) pir- rolidin-2-il)acetato de terc- butila
Figure img0267
[0376] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.42, Parte A.
[0377] 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,46 - 1,51 (m, 10 H) 1,96 - 2,24 (m, 4 H) 2,31 (dd, J=14,99, 9,92 Hz, 1 H) 2,97 (dd, J=14,77, 3,09 Hz, 1 H) 3,42 - 3,53 (m, 1 H) 3,59 - 3,70 (m, 1 H) 4,48 (ddt, J=10,01, 7,25, 2,73, 2,73 Hz, 1 H) 6,66 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,51 (s, 1 H) 7,67 (d, J=9,70 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/381,0 [(M + H)+ dupleto, calcula- do para C16H21BrN4O2 380,0]. 5.6.136. Síntese de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) piperazina- 1-carbotioato de S-isopropila
Figure img0268
[0378] Base de Hunig [7087-68-5] (0,4 mL, 2,4 mmol), em seguida carbonocloridotioato de S-isopropila [13889-93-5] (0,2 mL, 1,6 mmol) foram adicionados a uma solução agitada em temperatura ambiente de 3- bromo-6-piperazin-1-il-imidazo[1,2-b]piridazina (450,0 mg, 1,6 mmol) em acetato de etila (30 mL). Em seguida, a suspensão rapidamente formada foi agitada durante a noite, sob camisa de N2, em seguida lavada com salmoura, secada (MgSO4), evaporada, e cristalizada de acetato de eti- la/heptano para fornecer 482,9 mg de pó branco, ponto de fusão 186- 187oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,30 (d, J=6,82 Hz, 6 H) 2,51 (dt, J=3,60, 1,86 Hz, 1 H) 3,49 - 3,59 (m, 1 H) 3,59 - 3,71 (m, 7 H) 7,58 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,09 - 8,13 (m, 2 H),13C RMN (100 MHz, DMSO- d6) δ ppm 23,22, 35,48, 44,71, 101,63, 110,84, 113,71, 114,69, 116,58, 119,46, 123,56, 126,04, 134,22, 155,61, 157,77, 158,15, 158,53, 158,90, 166,18. LRMS (ESI) m/z 384,0/386,0 [(M+H)]+, calculado para C14H18BrN5OS: 384,30. 5.6.137. Síntese de 3-bromo-6-(4-(pirazin-2-il)piperazin-1-il)imi- dazo[1,2-b]piridazina
Figure img0269
[0379] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.42, Parte A.
[0380] 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 3,70 - 3,87 (m, 8 H) 6,90 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 7,58 (s, 1 H) 7,75 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,94 (d, J=2,53 Hz, 1 H) 8,13 (dd, J=2,53, 1,52 Hz, 1 H) 8,23 (d, J=1,52 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/360,0 [(M + H)+ dupleto, calculado para C14H14BrN7 359,0]. 5.6.138. Síntese de (2-(1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) pipe- ridin-4-il)etil)carbamato de terc-butila
Figure img0270
[0381] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.42, Parte A.
[0382] 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,19 - 1,40 (m, 2 H) 1,41 - 1,53 (m, 11 H) 1,60 (dtd, J=10,71, 7,15, 7,15, 3,79 Hz, 1 H) 1,85 (d, J=12,38 Hz, 2 H) 2,88 - 3,01 (m, 2 H) 3,21 (q, J=6,57 Hz, 2 H) 4,21 (d, J=13,14 Hz, 2 H) 6,84 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,52 (s, 1 H) 7,64 (d, J=9,85 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/424,0 [(M + H)+ dupleto, calculado para C18H26BrN5O2 423,0]. 5.6.139. Síntese de terc-butil éster de ácido metil-[1-(3-piridin-4-il- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-pirrolidin-3-il]-carbâmico
Figure img0271
[0383] Uma mistura de terc-butil éster de ácido [1-(3-bromo-imi- dazo[1,2-b]piridazin-6-il)-pirrolidin-3-il]-metil-carbâmico (100 mg, 0,25 mmol), ácido 4-piridinilaborônico (40 mg, 0,33 mmol), K2CO3 (104 mg, 0,75 mmol) e diclorobis(trifenilfosfina)paládio (II) (8,8 mg, 0,013 mmol) em MeCN/água (3,2 ml/0,8 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 150°C durante 15 min. A camada de água foi removida e a camada orgânica foi diluída com MeCN e filtrada. O filtrado foi submetido à HPLC preparativa para fornecer o composto título (25,3 mg). 1H RMN (400 MHz, META- NOL-d4) δ ppm 1,50 - 1,55 (m, 9 H) 2,22 - 2,32 (m, 2 H) 2,89 (s, 3 H) 3,46 - 3,57 (m, 2 H) 3,72 - 3,80 (m, 2 H) 4,91 (t, J=7,61 Hz, 1 H) 6,95 (d, J=9,92 Hz, 1 H) 7,77 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 8,11 (s, 1 H) 8,23 - 8,27 (m, 2 H) 8,53 - 8,58 (m, 2 H). LRMS (ESI) m/z 395,2 [(M+H)]+, calculado para C21H26N6O2: 394,48. 5.6.140. Síntese de 4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) piperazina-1- carbotioato de S-isopropila
Figure img0272
[0384] A uma mistura de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) pipe- razina-1-carbotioato de S-isopropila (360,9 mg, 0,9 mmol), ácido fenil bo- rônico [98-80-8] (137,5 mg, 1,1 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (438,1 mg, 1,9 mmol), e complexo de [1,1‘- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) com diclorometano [9546405-4] (78,4 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 50 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2- dimetoxietano (25 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85°C durante 17 h, em seguida resfriada e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4) e evaporado para fornecer um óleo marrom escuro que foi purificado por RP-HPLC preparativa. Produto iso- lado foi dissolvido em metanol, diluído com ácido clorídrico concentrado, evaporado até a secura, novamente dissolvido em metanol e precipitado pela adição de dietil éter. Filtração do precipitado produziu 226,9 mg de sal de monocloridrato de 4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazina- 1-carbotioato de S-isopropila como um pó branco, ponto de fusão 276- 277oC (dec). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,30 (d, J=6,82 Hz, 6 H) 2,49 - 2,52 (m, 2 H) 3,52 (dt, J=13,64, 6,82 Hz, 1 H) 3,60 - 3,71 (m, 7 H) 7,46 - 7,51 (m, 1 H) 7,55 - 7,60 (m, 2 H) 7,77 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,09 - 8,13 (m, 2 H) 8,25 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 8,54 (s, 1 H),13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 23,27, 35,50, 44,94, 116,00, 121,27, 122,33, 126,38, 127,14, 128,02, 128,82, 128,97, 132,91. LRMS (ESI) m/z 384,0/386,0[(M+H)]+, calculado para C20H23N5OS:381,50. 5.6.141. Síntese de N-Isopropil-4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6- il)piperazina-1 -carboxamida
Figure img0273
Parte A. 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N-isopropilpiperazina-1- carboxamida
Figure img0274
[0385] 2-Isocianatopropano [1795-48-8] (120 μL, 1,2 mmol) foi adicionado, por meio de seringa, a uma solução incolor clara, agitada, em temperatura ambiente de 3-bromo-6-piperazin-1-il-imidazo[1,2-b]piridazina (334,6 mg, 1,2 mmol) em diclorometano (20 mL). A solução foi deixada proceder durante 17 h, em seguida evaporada até a secura para fornecer 481,5 mg de espuma de sólido amarelo claro. LRMS (ESI) m/z 367,0/369,0[(M+H)]+, calculado para C14H19BrN6O:367,25. Parte B. N-Isopropil-4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazina-1- carboxamida.
[0386] A uma mistura de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-N- isopropilpiperazina-1-carboxamida (481,5 mg, 1,3 mmol), ácido fenil bo- rônico [98-80-8] (191,8 mg, 1,6 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (608,4 mg, 2,6 mmol), e complexo de [1,1‘- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II) com diclorometano [9546405-4] (111,4 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 50 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2- dimetoxietano (25 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85 oC durante 17 h, em seguida resfriada e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4) e evaporado para fornecer um óleo marrom que foi purificado por RP-HPLC preparativa. Produto isolado foi dissolvido em metanol, diluído com ácido clorídrico concentrado, evaporado até a secura, novamente dissolvido em metanol e precipitado pela adição de dietil éter. Filtração do precipitado produziu 219,4 mg de sal de monocloridrato de N-isopropil-4-(3-fenilimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) pipe- razina-1-carboxamida como um pó branco, ponto de fusão 217-218 oC (dec). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,08 (d, J=6,57 Hz, 6 H) 2,51 (d, J=1,52 Hz, 2 H) 3,50 (d, J=5,05 Hz, 4 H) 3,56 - 3,63 (m, 4 H) 3,73 - 3,82 (m, 1 H) 7,49 (d, J=7,33 Hz, 1 H) 7,54 - 7,60 (m, 2 H) 7,80 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 8,08 - 8,13 (m, 2 H) 8,22 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,53 (s, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 22,88, 41,82, 42,69, 45,13, 116,22, 120,96, 122,08, 126,38, 127,20, 128,03, 128,76, 129,02, 132,77, 155,89, 156,69. LRMS (ESI) m/z 365,1[(M+H)]+, calculado para C20H24N6O:364,45. mw = 364,45. 5.6.142. Síntese de 2-(((3-aminoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) ami- no)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila e 2-(((3-acetami- doimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidina-1 -carboxilato de (S)-terc-butila
Figure img0275
Parte A. N-(6-cloroimidazo[1,2-b]piridazin-3-il)acetamida:
Figure img0276
[0387] A uma solução de 6-cloroimidazo[1,2-b]piridazin-3-amina e trietilamina (0,8 mL, 6,0 mmol) em DCM (25 mL) foi adicionado cloreto de acetila gota a gota e agitado em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada e purificada por cromatografia de coluna ISCO (10% de MeOH/DCM) para fornecer N-(6-cloroimidazo[1,2-b]piridazin-3- il)acetamida não muito puro (500 mg, 95% de produção). 60 mg de material não puro foram também purificados por HPLC preparativa (neutra) para fornecer N-(6-cloroimidazo[1,2-b]piridazin-3-il)acetamida puro. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,01 (d, J=9,35 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,26 (d, J=9,35 Hz, 1 H), 2,29 (s, 3 H); LRMS (ESI) m/e 210,9 [(M + H)+, calculado para C8H8ClN4O 211,6]. Parte B. 2-(((3-aminoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidina-1- carboxilato de (S)-terc- butila e 2-(((3-acetamidoimidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila
[0388] Os compostos títulos foram preparados usando o método descrito no exemplo 5.6.69.
[0389] 2-(((3-aminoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidina- 1-carboxilato de (S)-terc-butila: 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,43-7,46 (m, 1 H), 6,80 - 6,87 (m, 1 H), 6,48-6,51 (m, 1 H), 4,19 (br. s., 1 H), 3,40-3,79 (m, 4 H), 1,96 - 2,04 (m, 4 H), 1,41 - 1,50 (m, 9 H); LRMS (ESI) m/e 333,1 [(M + H)+, calculado para C16H25N6O2333,4].
[0390] 2-(((3-acetamidoimidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila: 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,51 - 7,67 (m, 2 H), 6,61 - 6,91 (m, 1 H), 2,89-4,30 (m, 6 H), 1,80-2,37 (m, 7 H), 1,45-1,49 (m, 9 H); LRMS (ESI) m/e 375,2 [(M + H)+, calculado para C18H27N6O3 375,5]. 5.6.143. Síntese de isopropil éster de ácido 4-[3-(2-metóxi-piridin-4- il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazina-1 -carboxílico
Figure img0277
[0391] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.112 de isopropil éster de ácido 4-(3-bromo-imidazo[1,2- b]piridazin-6-il)-piperazina-1-carboxílico (452,7 mg, 1,2 mmol) e ácido 2- metoxipiridina-4-borônico [762262-09-9] (225,6 mg, 1,5 mmol) para fornecer 229,7 mg de di-cloridrato de isopropil éster de ácido 4-[3-(2-metóxi- piridin-4-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazina-1-carboxílico como pó branco, ponto de fusão 215-216 oC (dec.). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,22 (d, J=6,06 Hz, 6 H) 2,51 (s, 2 H) 3,53 - 3,60 (m, 4 H) 3,62 - 3,72 (m, 4 H) 3,94 (s, 2 H) 4,82 (spt, J=6,19 Hz, 1 H) 7,65 (s, 1 H) 7,75 - 7,83 (m, 2 H) 8,25 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,33 (d, J=5,56 Hz, 1 H) 8,81 (s, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 21,95, 42,48, 45,02, 53,67, 68,26, 106,68, 114,00, 116,54, 122,59, 124,17, 125,11, 134,06, 137,16, 147,16, 154,28, 155,83, 163,92. LRMS (ESI) m/z 397,1 [(M+H)]+, calculado para C20H24N6O3:396,45. 5.6.144. Síntese de (S)-1-(3,3-dimetilbutil)-5-(((3-(2-metoxipiridin-3- il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil)pirrolidin-2-ona
Figure img0278
[0392] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.127. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 0,91 (s, 9 H) 1,35 (td, J=12,25, 5,56 Hz, 1 H) 1,48 (td, J=12,38, 4,55 Hz, 1 H) 1,90 - 2,05 (m, 1 H) 2,11 - 2,25 (m, 1 H) 2,30 - 2,53 (m, 2 H) 2,88 - 3,01 (m, 1 H) 3,49 (dt, J=14,21, 4,01 Hz, 1 H) 3,67 - 3,81 (m, 2 H) 3,95 - 4,04 (m, 1 H) 4,07 (s, 3 H) 5,10 (br. s., 1 H) 6,66 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,04 (dd, J=7,45, 4,93 Hz, 1 H) 7,84 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 8,06 (s, 1 H) 8,19 (dd, J=5,05, 1,77 Hz, 1 H) 8,61 (dd, J=7,58, 1,77 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/423,0 [(M + H)+, calculado para C23H30N6O2 422,0]. 5.6.145. Síntese de isopropil éster de ácido 4-[3-(2-isopropóxi-fenil)- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazina-1 -carboxílico
Figure img0279
[0393] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.112 de isopropil éster de ácido 4-(3-bromo-imidazo[1,2- b]piridazin-6-il)-piperazina-1-carboxílico (370,2 mg, 1,0 mmol) e ácido 2- isopropoxifenilborônico [138008-97-6] (217,4 mg, 1,2 mmol) para fornecer 250,7 mg de monocloridrato de isopropil éster de ácido 4-[3-(2-isopropóxi- fenil)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazina-1-carboxílico como pó bran- co, ponto de fusão 216-217 oC (dec.). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,22 (dd, J=18,95, 6,06 Hz, 11 H) 2,51 (dt, J=3,54, 1,77 Hz, 3 H) 3,47 - 3,53 (m, 4 H) 3,54 - 3,60 (m, 4 H) 4,69 - 4,83 (m, 2 H) 7,08 - 7,13 (m, 1 H) 7,22 (d, J=8,34 Hz, 1 H) 7,47 (td, J=7,89, 1,64 Hz, 1 H) 7,78 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 7,95 (dd, J=7,71, 1,64 Hz, 1 H) 8,25 (t, J=5,05 Hz, 2 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 21,70, 21,92, 42,50, 44,87, 68,20, 70,05, 113,38, 115,03, 116,05, 119,86, 121,98, 122,68, 124,87, 130,37, 130,78, 131,87, 154,25, 154,99, 155,54. LRMS (ESI) m/z 424,1 [(M+H)]+, calculado para C23H29N5O3:423,52. 5.6.146. Síntese de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-3-metil- piperazina-1-carboxilato de isopropila
Figure img0280
Parte A. 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-3-metilpiperazina-1-carbo- xilato de terc-butila
Figure img0281
[0394] Uma suspensão agitada de 3-metilpiperazina-1-carboxilato de terc-butila [120737-59-9] (987,7 mg, 4,9 mmol), 3-bromo-6-flúor-imidazo [1,2-b]piridazina (361,7 mg, 4,9 mmol), e base de Hunig [7087-68-5] (0,9 mL, 5,2 mmol) em 2-propanol (40 mL) foi aquecida para 65°C, sob camisa de N2, durante 21 dias. A suspensão de reação resfriada foi dividida entre salmoura e acetato de etila e o extrato secado (MgSO4) e evaporado para obter 1,2 g de óleo marrom claro. LRMS (ESI) m/z 215,9/ 217,9[(M+H)]+, calculado para C16H22BrN5O2: 396,29. Parte B. dicloridrato de 3-bromo-6-(2-metilpiperazin-1-il)imidazo[1,2-b] piridazina
Figure img0282
[0395] Ácido clorídrico concentrado (3,0 mL) foi adicionado a uma solução de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-3-metilpiperazina-1- carboxilato de terc-butila (1,2 g, 3,1 mmol) em metanol (60 mL) e deixado agitar em temperatura ambiente sob camisa de N2 durante 3 dias. A solução foi em seguida evaporada até a secura para fornecer 1,1 g de sólido marrom claro. LRMS (ESI) m/z 295,9/297,9 [(M+H)]+, calculado para C11H14BrN5: 296,17. Parte C. 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-3-metilpiperazina-1-car- boxilato de isopropila.
[0396] Base de Hunig [7087-68-5] (2,1 mL, 12,1 mmol) foi adicionada em uma suspensão agitada em temperatura ambiente de dicloridrato de 3-bromo-6-(2-metilpiperazin-1-il) imidazo[1,2-b]piridazina (1,1 g, 3,0 mmol) em acetato de etila (150 mL). A suspensão foi agitada durante 1,5 h em seguida uma solução a 1,0 M de cloroformiato de isopropila em to- lueno (3,0 mL) foi lentamente adicionada e a reação deixada proceder durante 17 h, em seguida lavada com salmoura. A fase de acetato de eti- la foi secada (MgSO4) e evaporada. Produto foi purificado por RP-HPLC preparativa para fornecer 52,1 mg de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin- 6-il)-3-metilpiperazina-1-carboxilato de isopropila racêmico como um sólido amarelo claro, ponto de fusão 52-54 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,11 (d, J=6,57 Hz, 3 H) 1,15 - 1,25 (m, 6 H) 2,51 (dt, J=3,73, 1,80 Hz, 2 H) 3,15 (dd, J=12,88, 2,78 Hz, 2 H) 3,86 (d, J=13,39 Hz, 1 H) 3,98 (d, J=13,39 Hz, 2 H) 4,47 (br. s., 1 H) 4,78 - 4,87 (m, 1 H) 7,23 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 7,64 (s, 1 H) 7,91 (d, J=10,11 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13,53, 21,90, 42,71, 48,04, 68,05, 99,42, 110,59, 126,00, 131,15, 136,33, 154,41, 154,71. LRMS (ESI) m/z 382,0/ 384,0[(M+H)]+, calculado para C15H20BrN5O2:382,26. 5.6.147. Síntese de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-2-metilpi- perazina-1-carboxilato de isopropila
Figure img0283
Parte A. 1-isopropil 2-metilpiperazina-1,4-dicarboxilato de 4-terc-butila
Figure img0284
[0397] À solução agitada a 0°C de 3-metilpiperazina-1-carboxilato de terc-butila [120737-59-9] (3,0 g, 148,4 mmol) e base de Hunig [7087-65-5] (31,0 mL, 178,0 mmol) em acetato de etila (300 mL) foi adicionada uma solução a 1,0 M de cloroformiato de isopropila em tolueno (150 mL). A reação foi deixada agitar e aquecer para temperatura ambiente durante a noite sob camisa de N2. A mistura de reação foi em seguida lavada com salmoura, secada (CaSO4), e evaporada para fornecer 4,2 g de óleo amarelo claro. LRMS (ESI) m/z 193,1[(M+H)]+, calculado para C14H26N2O4: 286,37. Parte B. cloridrato de 2-metilpiperazina-1-carboxilato de isopropila
Figure img0285
[0398] Ácido clorídrico concentrado (6,0 mL) foi adicionado a uma solução de 2-metilpiperazina-1,4-dicarboxilato de 1-isopropila de 4-terc- butila (4,2 g, 14,6 mmol) em metanol (250 mL) e deixado agitar em temperatura ambiente sob camisa de N2 durante 3 dias. A solução foi em seguida evaporada até a secura e o óleo amarelo viscose resultante triturado em acetona para precipitar um pó branco fino que foi isolado por filtração, sob camisa de N2, para fornecer 2,0 g. LRMS (ESI) m/z 187,0 [(M+H)]+, calculado para C9H18N2O2: 186,26. Parte C. 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-2-metilpiperazina-1-car- boxilato de isopropila.
[0399] Uma suspensão agitada de cloridrato de 2-metilpiperazina-1- carboxilato de isopropila (1,8 g, 8,0 mmol), 3-bromo-6-flúor-imidazo[1,2- b]piridazina (1,5 g, 6,6 mmol), e base de Hunig [7087-68-5] (5,5 mL, 31,6 mmol) em 2-propanol (40 mL) foi aquecida ao refluxo, sob camisa de N2, durante 2 dias. A suspensão de reação resfriada foi dividida entre salmoura e acetato de etila e o extrato secado (MgSO4) e evaporado para obter 3,0 g de sólido marrom claro. Uma alíquota de 217 mg desta amostra foi purificada por RP-HPLC preparativa para fornecer 76,4 mg de 4-(3- bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-2-metilpiperazina-1-carboxilato de iso- propila racêmico como um pó amarelo claro, ponto de fusão 144-145 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,13 - 1,24 (m, 10 H) 2,49 - 2,52 (m, 2 H) 3,19 - 3,32 (m, 2 H) 3,87 (d, J=13,39 Hz, 1 H) 4,02 (d, J=13,39 Hz, 1 H) 4,78 - 4,86 (m, 1 H) 7,22 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 7,60 (s, 1 H) 7,89 (d, J=10,11 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 15,57, 21,93, 37,98, 44,82, 46,94, 48,94, 68,01, 99,25, 110,49, 126,08, 131,50, 136,47, 154,20, 155,35. LRMS (ESI) m/z 382,0/384,0[(M+H)]+, calculado para C15H20BrN5O2: 382,26. 5.6.148. Síntese de isopropil éster de ácido 4-[3-(2-hidróxi-piridin-3- il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazina-1 -carboxílico
Figure img0286
[0400] Preparado de isopropil éster de ácido 4-[3-(2-metóxi-piridin-3- il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazina-1-carboxílico por hidrólise de ácido clorídrico em metanol para fornecer di-cloridrato de isopropil éster de ácido 4-[3-(2-metóxi-piridin-3-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazina- 1-carboxílico como um pó branco, ponto de fusão 275-276 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,15 (d, J=6,06 Hz, 5 H) 3,51 (br. s., 7 H) 4,37 (s, 4 H) 4,67 - 4,79 (m, 1 H) 6,51 (t, J=6,82 Hz, 1 H) 7,45 - 7,57 (m, 2 H) 7,97 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 8,41 (s, 1 H) 8,65 (dd, J=7,33, 1,77 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 21,58, 42,23, 44,60, 69,30, 106,47, 115,89, 116,31, 121,12, 122,00, 122,89, 131,50, 135,26, 139,85, 155,11, 155,49, 159,85. LRMS (ESI) m/z 383,1 [(M+H)]+, calculado para C19H22N6O3: 382,43. 5.6.149. Síntese de 2-(((3-(difluorometil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il) amino)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila
Figure img0287
Parte A. 6-cloro-3-(difluorometil)imidazo[1,2-b]piridazina:
Figure img0288
[0401] A uma solução de 6-cloroimidazo[1,2-b]piridazina-3-carbal- deído (0,36 g, 2 mmol) em DCM (1 mL) foram adicionados uma solução de Deoxo-fluor (0,67 mL, 3,6 mmol) em DCM ( 2 mL) e EtOH (0,023 mL, 0,5 mmol) em temperatura ambiente. Após agitar em temperatura ambiente durante a noite, a solução foi vertida em NaHCO3 saturado e extraída com DCM (2 x 20 mL), secada sobre Na2SO4, filtrada e evaporada em vácuo. O bruto foi purificado por cromatografia de coluna ISCO (50% de EtOAc/hexano) para fornecer 6-cloro-3-(difluorometil)imidazo [1,2- b]piridazina como sólido branco (180 mg, 50% de produção). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,15 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 8,03 - 8,06 (m, 1 H), 7,18 - 7,49 (m, 2 H); LRMS (ESI) m/e 203,9 [(M + H)+, calculado pa- ra C7H5ClF2N3 204,6]. Parte B. 2-(((3-(difluorometil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino)metil) pirro- lidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila.
[0402] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,62 - 7,67 (m, 2 H), 7,10-7,40 (m, 1 H), 6,81 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 4,15 (bs, 1 H), 3,37-3,41 (m, 4 H), 1,87 - 2,06 (m, 4 H), 1,44 (br. s., 9 H); LRMS (ESI) m/e 368,0 [(M + H)+, calculado para C17H24F2N5O2 368,4]. 5.6.150. Síntese de (S)-N-(terc-butil)-2-(((3-cianoimidazo[1,2-b] pi- ridazin-6-il)amino)metil)pirrolidina-1 -carboxamida:
Figure img0289
[0403] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,02 (s, 1 H), 7,73 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 6,91 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 5,15 (s, 1 H), 4,25 (m, 1 H), 3,35 - 3,50 (m, 3 H), 3,30 (m, 1 H), 1,92-2,17 (m, 4 H), 1,30 (s, 9 H); LRMS (ESI) m/e 342,3 [(M + H)+, calculado para C17H24N7O 342,4]. 5.6.151. Síntese de isopropil éster de ácido 4-[3-(2-metóxi-piridin-3- il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazina-1 -carboxílico
Figure img0290
[0404] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.112 de isopropil éster de ácido 4-(3-bromo-imidazo[1,2- b]piridazin-6-il)-piperazina-1-carboxílico (309,2 mg, 0,8 mmol) e ácido 2- metoxipiridina-3-borônico [163105-90-6] (154,8 mg, 1,0 mmol) para fornecer 94,0 mg de di-cloridrato de isopropil éster de ácido 4-[3-(2-metóxi- piridin-3-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-piperazina-1-carboxílico como pó amarelo, ponto de fusão 179-181oC (dec.). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,20 - 1,24 (m, 6 H) 2,51 (dt, J=3,54, 1,77 Hz, 2 H) 3,50 - 3,61 (m, 7 H) 3,62 - 3,68 (m, 1 H) 3,98 (s, 2 H) 4,78 - 4,86 (m, 1 H) 7,24 (dd, J=7,58, 5,05 Hz, 1 H) 7,69 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 8,18 - 8,25 (m, 1 H) 8,28 - 8,35 (m, 2 H) 8,56 (dd, J=7,58, 1,77 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO- d6) δ ppm 21,93, 42,50, 45,01, 53,64, 68,20, 109,84, 115,44, 116,90, 122,75, 122,83, 125,22, 133,07, 138,18, 146,97, 154,26, 155,45, 159,81. LRMS (ESI) m/z 397,0 [(M+H)]+, calculado para C20H24N6O3:396,45. 5.6.152. Síntese de 4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il) hexa- hidropirrol[3,2-b]pirrol-1(2H)-carboxilato de terc-butila:
Figure img0291
[0405] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7,73 (d, J=9,85 Hz, 1 H), 7,44 - 7,50 (m, 1 H), 6,96 - 6,99 (m, 1 H), 4,49 - 4,66 (m, 2 H), 3,52 - 3,85 (m, 3 H), 3,21 - 3,39 (m, 2 H), 2,14 - 2,32 (m, 3 H), 1,46 - 1,57 (m, 9 H); LRMS (ESI) m/e 409,9 [(M + H)+, calculado para C17H23BrN5O 409,3]. 5.6.153. Síntese de 2-(((3-(metilcarbamoil)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)amino)metil)pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc- butila
Figure img0292
Parte A. ácido 6-cloroimidazo[1,2-b]piridazina-3-carboxílico:
Figure img0293
[0406] A uma solução de 6-cloroimidazo[1,2-b]piridazina-3-carbal- deído (1,82 g, 10 mmol), em t-buOH (90 mL) e 2-metil-2-buteno em THF (30 mL, 2,0 M) foram adicionados uma solução de clorito de sódio (80%, 9,0 g, 100 mmol) e NaH2PO4 (1 g, 8 mmol) em água (45 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, concentrada, diluída com água, acidificada para PH = 4, sólido branco precipitado, filtrado para fornecer ácido 6-cloroimidazo[1,2-b]piridazina-3-carboxílico como sólido branco (1,2 g, 67% de produção). ). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8,29 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 8,22 (s, 1 H), 7,50 (d, J=9,60 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/e 198,1 [(M + H)+, calculado para C7H5ClN3O2 198,6]. Parte B. 6-cloro-N-metilimidazo[1,2-b]piridazina-3-carboxamida:
Figure img0294
[0407] Reação de acoplamento de amida regular forneceu o composto título. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8,37 (d, J=1,77 Hz, 1 H), 8,24 (dd, J=9,60, 2,02 Hz, 1 H), 7,56 (dd, J=9,47, 2,15 Hz, 1 H), 3,08 (d, J=2,02 Hz, 3 H); LRMS (ESI) m/e 211,0 [(M + H)+, calculado para C8H8ClN4O 211,6]. Parte C. 2-(((3-(metilcarbamoil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)amino) metil) pirrolidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila.
[0408] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.69. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 8,66 (br. s., 1 H), 8,19 (s, 1 H), 7,82 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 7,28 (s, 1 H), 7,22 (br. s., 1 H), 6,72 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 4,29 (br. s., 1 H), 3,32 - 3,51 (m, 5 H), 3,07 - 3,11 (m, 3 H), 2,11 - 2,21 (m, 1 H), 1,91 - 2,02 (m, 2 H), 1,77 - 1,85 (m, 1 H), 1,46 - 1,52 (m, 9 H); LRMS (ESI) m/e 375,2 [(M + H)+, calculado para C18H27N6O3 375,4]. 5.6.154. Síntese de 5-(3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)- 2,5-diazabiciclo[2,2,1]heptano-2-carboxilato de isopropila
Figure img0295
Parte A. 2,5-diazabiciclo[2,2,1]heptano-2,5-dicarboxilato de 5-isopropila de (1S,4S)-2-terc-butila
Figure img0296
[0409] A uma solução em temperatura ambiente, agitada de 2,5- diazabiciclo[2,2,1]heptano-2-carboxilato de (1S,4S)-terc-butila [11345159-5] (1,0 g, 5,0 mmol) e base de Hunig [7087-68-5] (1,4 mL, 8,0 mmol) em acetato de etila (120 mL) foi lentamente adicionada uma solução a 1,0 M de cloroformiato de isopropila em tolueno (5,1 mL) durante o curso de 10 minutos. A reação foi deixado agitar durante a noite em seguida foi lavada com salmoura, secada (MgSO4), e evaporada para obter 1,3 g de óleo amarelo. LRMS (ESI) m/z 285,1 [(M+H)]+, calculado para C14H24N2O4: 284,35. Parte B. 2,5-diazabiciclo[2,2,1]heptano-2-carboxilato de (1S,4S)-isopro-
Figure img0297
[0410] 2,5-Diazabiciclo[2,2,1]heptano-2,5-dicarboxilato de 5-isopropila de (1S,4S)-2-terc-butila (1,3 g, 4,6 mmol) foi dissolvido em metanol (200 mL). Ácido clorídrico concentrado (6 mL, 72 mmol) foi adicionado e a solução agitada a 50°C durante 2 h, em seguida evaporada até a secura para fornecer cloridrato de 2,5-diazabiciclo[2,2,1]heptano-2-carboxilato de (1S,4S)-isopropila como 0,9 g de sólido branco. LRMS (ESI) m/z 185,1 [(M+H)]+, calculado para C9H16N2O2: 184,24. Parte C. 5-(3-bromoimidazo[ 1,2-b]piridazin-6-il)-2,5-diazabiciclo[2,2,1 ] heptano-2-carboxilato de isopropila
Figure img0298
[0411] Uma solução de cloridrato de 2,5-diazabiciclo[2,2,1]heptano-2- carboxilato de (1S,4S)-isopropila (0,9 g, 4,2 mmol), 3-bromo-6-fluo- roimidazo[1,2-b]piridazina (1,0 g, 4,6 mmol), e base de Hunig [7087-68-5] (3,0 mL, 17,2 mmol) em 2-propanol (21 mL) foi agitada ao refluxo sob camisa de N2 durante 3 dias, em seguida dividida entre salmoura e acetato de etila. O extrato foi secado (MgSO4) e evaporado para obter 1,6 g de sólido amarelo. LRMS (ESI) m/z 380,0/382,0 [(M+H)]+, calculado para C15H18BrN5O2: 380,24. Parte D. 5-(3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-2,5-diazabiciclo [2,2,1]heptano-2-carboxilato de isopropila.
[0412] A uma mistura de 5-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-2,5- diazabiciclo[2,2,1]heptano-2-carboxilato de isopropila (429,1 mg, 1,1 mmol), ácido 2-metoxifenilborônico [5720-06-9] (206,7 mg, 1,4 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (520,7 mg, 2,3 mmol), e complexo de [1,1-bis(difenilfosfino)-ferroceno]dicloropaládio (II), com diclorometano [95464-05-4] (93,4 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 50 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2-dimetoxietano (25 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85 oC durante 17 h em seguida resfriada e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4), evaporado e cromatografado flash (sílica-gel eluída com 10% (v/v) de meta- nol/acetato de etila) para fornecer um óleo marrom que foi também purificado por RP-HPLC preparativa. Produto isolado foi dissolvido em metanol, diluído com ácido clorídrico concentrado, evaporado até a secura, novamente dissolvido em metanol e precipitado pela adição de dietil éter. Filtração do precipitado produz 207,1 mg do produto sal de monocloridra- to como um pó amarelo, ponto de fusão 173-174 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,06 - 1,31 (m, 7 H) 1,91 - 2,06 (m, 2 H) 3,30 (br. s., 1 H) 3,40 (br. s., 2 H) 3,58 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 3,84 (s, 3 H) 4,54 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 4,67 - 4,79 (m, 1 H) 4,84 (br. s., 1 H) 7,13 (br. s., 1 H) 7,24 (d, J=8,08 Hz, 1 H) 7,51 (t, J=7,20 Hz, 2 H) 7,95 (br. s., 1 H) 8,20 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,27 (s, 1 H),13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13,88, 21,94, 22,00, 28,29, 31,19, 36,44, 36,92, 52,49, 55,67, 56,08, 56,44, 56,95, 57,43, 67,74, 111,65, 114,33, 116,61, 120,16, 121,59, 121,87, 124,72, 130,33, 131,05, 131,70, 153,57, 153,74, 156,91. LRMS (ESI) m/z 408,3 [(M+H)]+, calculado para C22H25N5O3:407,47 5.6.155. Síntese de [4-(3-piridin-2-il-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)- piperazin-1 -il]-pirrolidin-1 -il-metanona
Figure img0299
Parte A. [4-(3-bromo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)-piperazin-1-il]-pirrolidin- 1-il-metanona
Figure img0300
[0413] A uma solução magneticamente agitada em temperatura ambiente, com camisa de N2, de dicloridrato de 3-bromo-6-piperazin-1-il- imidazo[1,2-b]piridazina (3,1 g, 8,8 mmol) e base de Hunig [7087-68-5] (6,2 mL, 35,6 mmol) em acetato de etila (200 mL) foi adicionado cloreto de pirrolidina-1-carbonila [1192-63-8] (1,2 mL, 10,9 mmol). A reação foi deixada proceder durante a noite para resultar em uma suspensão bem agitada. Uma vez concluída, a reação foi lavada com salmoura, secada (MgSO4), e diluída com heptano para fornecer um precipitado em um pó amarelo claro fino, 2,6 g em duas colheitas. LRMS (ESI) m/z 379,0/381,0 [(M+H)]+, calculado para C15H19BrN6O:379,26. Parte B. [4-(3-Piridin-2-il-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-piperazin-1-il]-pir- rolidin-1-il-metanona.
[0414] A uma mistura de [4-(3-bromo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)- piperazin-1-il]-pirrolidin-1-il-metanona (381,0 mg, 01,0 mmol), 2-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridina [874186-98-8] (512,7 mg, 2,5 mmol), cloreto de cobre [7758-89-6] (99,4 mg, 1,0 mmol), carbonato de césio [534-17-8] (651,8 mg, 2,0 mmol) e complexo de [1,1‘-bis (difenilfos- fino)ferroceno]dicloropaládio (II) com diclorometano [95464-05-4] (82,1 mg, 0,1 mmol) contida em um frasco de base redonda de 25 mL foram adicionados DMF anidroso e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 100°C durante 17 h, em seguida resfriada e dividida entre salmoura e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (MgSO4) e evaporado para fornecer um óleo marrom que foi purificado por RP-HPLC preparativa. Produto isolado foi dissolvido em metanol, diluído com ácido clorídrico concentrado, evaporado até a secura, novamente dissolvido em metanol e precipitado pela adição de dietil éter. Filtração do precipitado produziu 83,2 mg de sal de dicloridrato de [4-(3-piridin-2-il-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-piperazin-1- il]-pirrolidin-1-il-metanona como um pó amarelo claro, ponto de fusão 202203 oC. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,73 - 1,84 (m, 4 H) 3,33 (t, J=6,44 Hz, 4 H) 3,36 - 3,43 (m, 4 H) 3,62 - 3,72 (m, 4 H) 7,45 - 7,52 (m, 1 H) 7,66 (d, J=10,11 Hz, 1 H) 8,08 (td, J=7,83, 1,77 Hz, 1 H) 8,18 (d, J=10,10 Hz, 1 H) 8,54 (s, 1 H) 8,60 (d, J=8,08 Hz, 1 H) 8,72 (d, J=4,55 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 25,04, 45,05, 45,27, 47,84, 114,83, 121,12, 123,43, 123,55, 126,59, 127,01, 134,87, 138,20, 145,21, 149,07, 155,74, 161,49. LRMS (ESI) m/z 378,2 [(M+H)]+, calculado para C20H23N7O:377,45. 5.6.156. Síntese de isopropil éster de ácido {(S)-1-[3-(2-metóxi- piridin-3-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-pirrolidin-3-il}-metil- carbâmico
Figure img0301
Parte A. terc-butil éster de ácido [(S)-1-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin- 6-il)-pirrolidin-3-il]-metil-carbâmico
Figure img0302
[0415] Uma mistura de terc-butil éster de ácido (S)-pirrolidin-3-il- carbâmico (2,8 g, 15 mmol), 3-bromo-6-flúor-imidazo[1,2-b]piridazina (2,16 g, 10 mmol), e trietilamina (5,58 ml, 40 mmol) em álcool de isopropi- la (10 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 140°C d urante 30 min. A mistura de reação foi concentrada e o resíduo foi passado através de uma coluna curta para fornecer o produto desejado (3,8 g). A uma solução de produto acima (3,8 g) em DMF (40 ml) a 0°C foi adicionado MeI (1,13 ml). A mistura foi agitada a 0°C durante 5 mi n., NaH (800 mg, 60% de dispersão em óleo, 20 mmol) foi adicionado porção a porção. A mistura de reação foi agitada a 0°C durante 5 min. e em temperatura ambiente durante 30 min., em seguida ela foi tratada com água e diluída com EtO- Ac (250 ml). A mistura foi lavada com água (100 ml) e salmoura (100 ml). A camada aquosa foi novamente extraída com EtOAc (2 x 50 ml). O EtO- Ac combinado foi secado (Na2SO4) e concentrado. O resíduo foi submetido a ISCO (coluna de 120 g) para fornecer o composto título (3,1 g). 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,43 (s, 9 H) 2,04 - 2,22 (m, 2 H) 2,78 (s, 3 H) 3,37 (dd, J=10,80, 7,28 Hz, 1 H) 3,46 (dt, J=10,36, 8,05 Hz, 1 H) 3,65 - 3,72 (m, 2 H) 4,87 (br. s., 1 H) 6,53 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,44 (s, 1 H) 7,64 (d, J=9,70 Hz 1 H). LRMS (ESI) m/z 396 e 398,1 [(M+H)]+, calculado para C16H22BrN5O2:396,29. Parte B. isopropil éster de ácido [(S)-1-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin- 6-il)-pirrolidin-3-il]-metil-carbâmico.
[0416] A uma solução de terc-butil éster de ácido [(S)-1-(3-bromo- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-pirrolidin-3-il]-metil-carbâmico (1,35 g, 3,4 mmol) em MeOH (80 ml) a 0°C foi adicionado AcCl (2, 5 ml, 35 mmol). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada para fornecer um sólido branco como o produto (1,25 g).
[0417] O produto acima (610 mg, 1,65 mmol) e DIEA (1,44 ml, 8,25 mmol)) foram suspensos em THF (15 ml). À suspensão foi adicionada uma solução de cloroformiato de isopropila em tolueno (1 M, 2 ml, 2 mmol). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 5 h. A mistura foi concentrada e o resíduo foi submetido a ISCO (coluna de 12 g) para fornecer o composto título (350 mg). 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,27 (d, J=6,32 Hz, 6 H) 2,09 - 2,28 (m, 2 H) 2,87 (s, 3 H) 3,39 - 3,56 (m, 2 H) 3,68 - 3,79 (m, 2 H) 4,96 (m, 2 H) 6,57 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,49 (s, 1 H) 7,64 (d, J=9,85 Hz, 1 H). LRMS (ESI) m/z 382,1 e 384,1 [(M+H)]+, calculado para C15H20BrN5O2:382,26. Parte C. isopropil éster de ácido {(S)-1-[3-(2-metóxi-piridin-3-il)-imi- dazo[ 1,2-b]piridazin-6-il]-pirrolidin-3-il}-metil-carbâmico.
[0418] Uma mistura de isopropil éster de ácido [(S)-1-(3-bromo- imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-pirrolidin-3-il]-metil-carbâmico (88 mg, 0,23 mmol), ácido 2-metoxipiridina-3-borônico (46 mg, 0,3 mmol), K2CO3 (95 mg, 0,69 mmol) e diclorobis(trifenilfosfina)paládio (II) (8,4 mg, 0,012 mmol) em MeCN/água (3,2 ml/0,8 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 150°C durante 15 min. A camada de água foi removida e a camada orgânica foi diluída com MeCN e filtrada. O filtrado foi submetido à HPLC preparativa para fornecer o composto título (82,5 mg). 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,29 (d, J=6,06 Hz, 6 H) 2,13 - 2,32 (m, 2 H) 2,89 (s, 3 H) 3,43 (dd, J=10,48, 6,95 Hz, 1 H) 3,48 - 3,56 (m, 1 H) 3,69 - 3,76 (m, 2 H) 4,09 (s, 3 H) 4,99 (dt, J=12,38, 6,19 Hz, 2 H) 6,62 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,04 (dd, J=7,45, 4,93 Hz, 1 H) 7,79 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,13 - 8,19 (m, 2 H) 8,86 (dd, J=7,71, 1,64 Hz, 1 H). LRMS (ESI) m/z 411,2 [(M+H)]+, calculado para C21H26N6O3:410,48. 5.6.157. Síntese de {(S)-1-[3-(2-hidróxi-piridin-3-il)-imidazo[1,2- b]piridazin-6-il]-pirrolidin-3-il}-metil-amida de ácido ciclopentano- carboxílico
Figure img0303
Parte A. terc-butil éster de ácido {(S)-1-[3-(2-metóxi-piridin-3-il)-imi- dazo[ 1,2-b]piridazin-6-il]-pirrolidin-3-il}-metil-carbâmico
Figure img0304
[0419] Uma mistura de terc-butil éster de ácido [(S)-1-(3-bromo-imida- zo[1,2-b]piridazin-6-il)-pirrolidin-3-il]-metil-carbâmico (83 mg, 0,21 mmol), ácido 2-metoxipiridina-3-borônico (43 mg, 0,28 mmol), K2CO3 (87 mg, 0,63 mmol) e diclorobis(trifenilfosfina)paládio (II) (7,4 mg, 0,011 mmol) em MeCN/água (3,2 ml/0,8 ml) foi aquecida em um micro-ondas a 150°C durante 15 min. A camada de água foi removida e a camada orgânica foi diluída com MeCN e filtrada. O filtrado foi submetido à HPLC preparativa para fornecer o composto título (69,3 mg). 1H RMN (400 MHz, CLORO- FÓRMIO-d) δ ppm 1,50 (s, 9 H) 2,11 - 2,29 (m, 2 H) 2,84 (s, 3 H) 3,40 (dd, J=10,48, 6,95 Hz, 1 H) 3,46 - 3,53 (m, 1 H) 3,67 - 3,74 (m, 2 H) 4,08 (s, 3 H) 4,94 (br. s., 1 H) 6,61 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,03 (dd, J=7,58, 4,80 Hz, 1 H) 7,77 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,12 - 8,18 (m, 2 H) 8,86 (dd, J=7,58, 1,77 Hz, 1 H). LRMS (ESI) m/z 425,3 [(M+H)]+, calculado para C22H28N6O3: 424,51. Parte B. {(S)-1-[3-(2-hidróxi-piridin-3-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-pirro- lidin-3-il}-metil-amida de ácido ciclopentanocarboxílico.
[0420] A uma solução de terc-butil éster de ácido {(S)-1-[3-(2-metóxi- piridin-3-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-pirrolidin-3-il}-metil-carbâmico (540 mg, 1,27 mmol) em MeOH (40 ml) a 0°C foi adicionado AcCl (1,2 ml, 16,8 mmol). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada para fornecer o produto.
[0421] A uma mistura de produto acima (80 mg, 0,2 mmol) e TEA (112 ul, 0,8 mmol) em DCM (2 ml) foi adicionado cloreto de ciclopentano- carbonila em temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi concentrada e o resíduo foi submetido à HPLC preparativa para fornecer o composto título (49,9 mg). 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,57 - 1,67 (m, 2 H) 1,74 - 1,93 (m, 6 H) 2,12 - 2,22 (m, 1 H) 2,27 - 2,35 (m, 1 H) 2,95 (t, J=7,28 Hz, 2 H) 3,04 (s, 2 H) 3,42 (dd, J=10,14, 6,62 Hz, 1 H) 3,52 - 3,62 (m, 1 H) 3,78 (t, J=9,04 Hz, 2 H) 5,50 (t, J=7,28 Hz, 1 H) 6,47 - 6,51 (m, 1 H) 6,63 (d, J=9,70 Hz, 1 H) 7,40 (d, J=5,95 Hz, 1 H) 7,83 (d, J=9,48 Hz, 1 H) 8,77 (s, 1 H) 9,12 (d, J=6,62 Hz, 1 H). LRMS (ESI) m/z 407,2 [(M+H)]+, calculado para C22H26N6O2:406,49. 5.6.158. Síntese de (S)-N-(1-(3-(2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin- 6-il)pirrolidin-3-il)-N-metilpirrolidina-1 -carboxamida
Figure img0305
[0422] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.42. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,78 - 1,92 (m, 4 H) 2,13 (dq, J=12,63, 8,76 Hz, 1 H) 2,21 - 2,32 (m, 1 H) 2,81 (s, 3 H) 3,31 - 3,50 (m, 6 H) 3,67 - 3,82 (m, 2 H) 3,89 (s, 3 H) 4,64 (quin, J=7,83 Hz, 1 H) 6,59 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,04 (d, J=8,34 Hz, 1 H) 7,09 (td, J=7,58, 1,01 Hz, 1 H) 7,33 (ddd, J=8,21, 7,45, 1,77 Hz, 1 H) 7,74 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,99 (s, 1 H) 8,30 (dd, J=7,71, 1,64 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/421,0 [(M + H)+, calculado para C23H28N6O2 420,0]. 5.6.159. Síntese de (S)-N-(1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b] piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)-N-metilpirrolidina-1-carboxamida
Figure img0306
[0423] Este composto foi preparado usando o método descrito no exemplo 5.6.42. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,82 - 1,93 (m, 4 H) 2,12 - 2,25 (m, 1 H) 2,27 - 2,38 (m, 1 H) 2,85 (s, 3 H) 3,35 - 3,46 (m, 5 H) 3,47 - 3,56 (m, 1 H) 3,70 - 3,78 (m, 1 H) 3,83 (dd, J=10,36, 8,08 Hz, 1 H) 4,09 (s, 3 H) 4,61 - 4,74 (m, 1 H) 6,70 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,05 (dd, J=7,58, 5,05 Hz, 1 H) 7,92 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,12 - 8,20 (m, 2 H) 8,85 (dd, J=7,58, 1,77 Hz, 1 H); LRMS (ESI) m/422,0 [(M + H)+, calculado para C22H27N7O2 421,0]. 5.6.160. Síntese de (1-(3-(5-flúor-2-metoxifenil)imidazo[1,2-b] pirida- zin-6-il)pirrolidin-3-il)(metil)carbamato de (S)-isopropila
Figure img0307
Parte A. [(S)-1-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-pirrolidin-3-il]-metil- amina
Figure img0308
[0424] terc-Butil éster de ácido [(S)-1-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piri- dazin-6-il)-pirrolidin-3-il]-carbâmico (1,2 g, 3,1 mmol) apreendido em 15 mL de DMF e resfriado para 0°C em um banho de gelo. Iodometano (342 uL, 5,42 mmol) adicionado e agitado 5 minutos. Em seguida, hidreto de sódio a 60% em óleo (251 mg, 6,2 mmol) foi lentamente adicionado. Reação agitada 5 minutos a 0°C, em seguida removida do banho de gelo e agitada 30 minutos em temperatura ambiente. Reação foi saciada com gelo, em seguida extraída com acetato de etila 2x. Frações de acetato de etila combinadas, secadas sobre sulfato de magnésio, filtradas, reduzidas em vácuo. Isto foi em seguida apreendido em 26 mL de DCM e 4 mL de TFA adicionados. Agitados 1 hora até completar por LC/MS. Reação la- vada com NaOH a 1 N, camada de DCM removida, secada sobre sulfato de magnésio, filtrada, reduzida em vácuo para obter 951 mg de produto bruto levado no estado em que se encontra para a Parte B. LRMS (ESI) m/z 296/298 [(M+H)]+, calculado para C11H14BrN5: 296,17. Parte B. isopropil éster de ácido [(S)-1-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin- 6-il)-pirrolidin-3-il]-metil-carbâmico
Figure img0309
[0425] [(S)-1-(3-Bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-pirrolidin-3-il]- metil-amina (951 mg, 3,2 mmol) foi apreendido em DCM, e cloroformiato de etila (459 uL, 4,8 mmol) e trietilamina (895 uL, 6,4 mmol) foram adicionados. A reação foi agitada em temperatura ambiente sob nitrogênio durante 1 hora. A mistura de reação foi em seguida lavada com água, em seguida HCl a 1 N. A camada de DCM foi secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e reduzida em vácuo para fornecer produto bruto (1,1 g) que foi usado no estado em que se encontra na Parte C. LRMS (ESI) m/z 382/384 [(M+H)]+, calculado para C15H20BrN5O2:382,26. Parte C. (1-(3-(5-flúor-2-metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il) pirrolidin- 3-il)(metil)carbamato de (S)-isopropila.
[0426] Isopropil éster de ácido [(S)-1-(3-bromo-imidazo[1,2-b]pirida- zin-6-il)-pirrolidin-3-il]-metil-carbâmico (120 mg, 0,3 mmol), ácido 5-flúor- 2-metóxi fenil borônico (107 mg, 0,6 mmol), carbonato de potássio (65 mg, 0,45 mmol), e diclorometano de Pd(dppf)Cl2 (26 mg, 0,03 mmol) foram apreendidos em 2 mL de acetonitrila e 1 mL de água e tratados por micro-ondas em um tubo selado a 140°C durante 15 mi nutos. Reação foi em seguida filtrada através de celita com acetonitrila, reduzida em vácuo, em seguida purificada em uma preparação de fase neutra shimadzu e frações de produto liofilizadas para obter 52 mg de (1-(3-(5-flúor-2- metoxifenil)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il) pirrolidin-3-il)(metil)carbamato de (S)-isopropila. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d 8,33 - 8,38 (m, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,91 (d, J = 9,85 Hz, 1H), 7,13 - 7,18 (m, 2H), 6,92 (d, J = 9,85 Hz, 1H), 4,76 -4,86 (m, 2H), 3,87 (s, 3H), 3,63 - 3,70 (m, 2H), 3,36 - 3,50 (m, 2H), 2,80 (s, 3H), 2,10 - 2,22 (m, 2H), 1,21 (d, J = 6,32 Hz, 6H). (ESI) m/z 428 [(M+H)]+, calculado para C22H26FN5O3: 427,4. 5.6.161. Síntese de (1-(3-(2-metóxi-5-metilpiridin-3-il)imidazo[1,2- b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)(metil)carbamato de (S)-isopropila
Figure img0310
[0427] Isopropil éster de ácido [(S)-1-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piri- dazin-6-il)-pirrolidin-3-il]-metil-carbâmico (120 mg, 0,3 mmol), ácido 2- metóxi-5-metilpiridina-3-borônico (105 mg, 0,6 mmol), carbonato de potássio (65 mg, 0,45 mmol), e diclorometano de Pd(dppf)Cl2 (26 mg, 0,03 mmol) foram apreendidos em 2 mL de acetonitrila e 1 mL de água e tratados por micro-ondas em um tubo selado a 140°C durante 15 minutos. Reação foi em seguida filtrada através de celita com acetonitrila, reduzida em vácuo, purificada em preparação de fase neutra shimadzu e frações de produto liofilizadas para fornecer 65 mg de (1-(3-(2-metóxi-5-me- tilpiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)(metil)carbamato de (S)-isopropila. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,75 (d, J = 2,02 Hz, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,94 - 7,97 (m, 1H), 7,91 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 9,85 Hz, 1H),4,75 - 4,85 (m, 2H), 3,95 (s, 3H), 3,64 - 3,70 (m, 2H), 3,38 - 3,51 (m, 2H), 2,81 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 2,11 - 2,23 (m, 2H), 1,21 (d, J = 6,32 Hz, 6H). (ESI) m/z 425 [(M+H)]+, calculado para C22H28N6O3:424,5. 5.6.162. Síntese de isopropil éster de ácido {(S)-1-[3-(1,6-dimetil-2- oxo-1,2-di-hidro-piridin-3-il)-imidazo[1,2-b] piridazin-6-il]-pirrolidin-3- il}-metil-carbâmico
Figure img0311
Parte A. 3-bromo-1,6-dimetil-1 H-piridin-2-ona
Figure img0312
[0428] 3-Bromo-6-metilpiridina-2-ol (2 g, 10,6 mmol) foi apreendido em THF e agitado. Hidreto de sódio (60% em óleo, 510 mg, 12,7 mmol) foi adicionado porção a porção, em seguida agitado 30 minutos. Brometo de lítio (1,85 g, 21,2 mmol) foi adicionado e agitado durante 1 hora. Em seguida, iodometano (1,32 mL, 21,2 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada durante a noite. A mistura de reação foi diluída com DCM e lavada com NaOH a 1 N. A camada de DCM foi secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e secada em vácuo para fornecer 1,19 g de produto levado para a etapa seguinte no estado em que se encontrada. LRMS (ESI) m/z 202/204 [(M+H)]+, calculado para C7H8BrNO:202,05. Parte B. ácido 1,6-dimetil-1H-piridina-2-ona-3-borônico
Figure img0313
[0429] 3-Bromo-1,6-dimetil-1H-piridin-2-ona (1,19 g, 5,9 mmol) apreendido em 10 mL de DMF sob nitrogênio. Bis(pinacalato)diborano (2,24 g, 8,8 mmol), acetato de potássio (1,73 g, 17,7 mmol), e diclorometano de PD(dppf)Cl2 (481 mg, 0,59 mmol) foram adicionados, e a mistura de reação foi aquecida para 85°C e agitada durante a noit e. A mistura de rea ção foi resfriada para temperatura ambiente e filtrada através de celita com acetonitrila. Isto foi reduzido em vácuo e apreendido em NaOH a 1 N e lavado com DCM. A camada aquosa foi em seguida tornada acídica com HCl a 1 N e extraída com DCM. A camada de DCM foi secada sobre sulfato de magnésio, filtrada e reduzida em vácuo para produzir 929 mg >90% para uso na Parte C. LRMS (ESI) m/z 167 [(M+H)]+, calculado para C7H10BNO3: 166,97. Parte C. isopropil éster de ácido {(S)-1-[3-(1,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro- piridin-3-il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-pirrolidin-3-il}-metil-carbâmico.
[0430] Isopropil éster de ácido [(S)-1-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piri- dazin-6-il)-pirrolidin-3-il]-metil-carbâmico (120 mg, 0,3 mmol), ácido 1,6- dimetil-1H-piridina-2-ona-3-borônico (105 mg, 0,6 mmol), carbonato de potássio (65 mg, 0,45 mmol), e diclorometano de Pd(dppf)Cl2 (26 mg, 0,3 mmol) foram apreendidos em 2 mL de acetonitrila e 1 mL de água e tratados por micro-ondas em um tubo selado a 140°C dur ante 15 minutos. A mistura de reação foi em seguida filtrada através de celita com acetonitri- la, reduzida em vácuo, e purificada em uma preparação de fase neutra Shimadzu e as frações de produto foram liofilizadas para obter 43 mg de isopropil éster de ácido {(S)-1-[3-(1,6-dimetil-2-oxo-1,2-di-hidro-piridin-3- il)-imidazo[1,2-b]piridazin-6-il]-pirrolidin-3-il}-metil-carbâmico. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,91 (d, J = 7,58 Hz, 1H), 8,45 (s, 1H), 7,88 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 6,87 (d, J = 9,85 Hz, 1H), 6,36 (d, J = 8,08 Hz,1H), 4,77 - 4,88 (m, 2H), 3,67 (dd, J = 7,58, 10,61 Hz, 2H), 3,39 - 3,51 (m, 2H), 3,31 (s, 2H), 2,82 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 2,10 - 2,22 (m, 2H), 1,22(dd, J = 1,89, 6,19 Hz, 6H). (ESI) m/z 425 [(M+H)]+, calculado para C22H28N6O3:424,51. 5.6.163. Síntese de (1-(3-(2-metóxi-6-metilpiridin-3-il)imidazo[1,2- b]piridazin-6-il)pirrolidin-3-il)(metil)carbamato de (S)-isopropila
Figure img0314
[0431] A 80 mg (0,217 mmol) de (1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin- 6-il)pirrolidin-3-il)(metil)carbamato de (S)-isopropila em um frasconete de micro-ondas foram adicionados 54 mg (0,326 mmol) de ácido (2-metóxi- 6-metilpiridin-3-il)borônico, 92 mg (0,435 mmol) de K3PO4, 18 mg (0,022 mmol) de PdCl2(dppf)2, 3 mL de DME e em seguida 1 mL de água. A mistura resultante foi tratada por micro-ondas a 140°C durante 0,5 hr. Ela foi diluída com EtOAc, lavada com salmoura, e a camada orgânica foi secada sobre MgSO4. Ela foi concentrada e purificada sobre a HPLC PREP neutra para obter 50,6 mg do produto desejado. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 1,30 (d, J=6,32 Hz, 6 H) 2,13 - 2,31 (m, 2 H) 2,53 (s, 3 H) 2,89 (s, 3 H) 3,43 (dd, J=10,61, 7,07 Hz, 1 H) 3,49 - 3,56 (m, 1 H) 3,70 - 3,76 (m, 2 H) 4,06 (s, 3 H) 4,99 (m, 2 H) 6,61 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 6,89 (d, J=7,83 Hz, 1 H) 7,79 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,12 (s, 1 H) 8,69 (d, J=7,83 Hz, 1 H). LRMS (ESI) m/e 425 [(M + H)+, calculado para C22H28N6O3 424]. 5.6.164. Síntese de (S)-2-amino-1-(4-(3-(2-metoxipiridin-3-il) imi- dazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1 -il)-4-metilpentan-1 -ona
Figure img0315
Parte A. (4-metil-1-oxo-1-(piperazin-1-il)pentan-2-il)carbamato de (S)- terc-butila
Figure img0316
[0432] A 1,00 g (4,33 mmol) de ácido (S)-2-((terc-butoxicarbonil) ami- no)-4-metilpentanoico foram adicionados 750 mg (8,66 mmol) de pipera- zina, 20 mL de DCM, 1,34 g (6,5 mmol) de DCC e 17,9 mL (12,99 mmol) de TEA. Isto foi deixado agitar durante a noite em temperatura ambiente. Na manhã seguinte, isto foi diluído com mais DCM, e filtrado. O filtrado foi concentrado e purificado no ISCO usando uma coluna de 40 grama e elu- indo com 0 - 10% de MeOH/DCM para obter o produto desejado em 79% de produção. Parte B. (1-(4-(imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)-4-metil-1-oxopen- tan-2-il)carbamato de (S)-terc-butila
Figure img0317
[0433] A 305 mg (2,23 mmol) de 6-fluoroimidazo[1,2-b]piridazina, foram adicionados 1,00 g (3,34 mmol) de (4-metil-1-oxo-1-(piperazin-1- il)pentan-2-il)carbamato de (S)-terc-butila, 10 mL de álcool de isopropila, e 0,93 mL (6,68 mmol) de TEA. Isto foi tratado por micro-ondas a 150 oC durante 0,5 hr. Isto foi diluído com EtOAc, lavado com salmoura, e a camada orgânica foi secada sobre MgSO4, e em seguida concentrada. Ela foi purificada sobre o ISCO com uma coluna de 40 gramas eluindo com 0 - 10% de MeOH/DCM para obter o produto desejado em 78% de produção. Parte C. (1-(4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)-4-metil- 1-oxopentan-2il)carbamato de (S)-terc-butila
Figure img0318
[0434] A 104 mg (0,25 mmol) de (1-(4-(imidazo[1,2-b]piridazin-6-il) piperazin-1-il)-4-metil-1-oxopentan-2-il)carbamato de (S)-terc-butila dissolvidos em 5 mL de AcOH foi adicionado bromo (48 mg, 0,3 mmol) e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente. Após 0,25 hr, a reação foi preparada, e concentrada por rotavap e em seguida por bomba de vácuo elevado para obter 139 mg (100% de produção) de sal de ácido mono-acético do produto desejado. Parte D. (S)-2-amino-1-[4-(3-bromo-pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)-piperazin- 1 -il]-4-metil-pentan-1 -ona
Figure img0319
[0435] A 139 mg (0,25 mmol) do sal de ácido mono-acético de (S)- (1-(4-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)-4-metil-1-oxopen- tan-2-il)carbamato de terc-butila em 5 ml de DCM foram adicionados 2 mL de TFA, e a mistura resultante agitada em temperatura ambiente durante 1 hr. Isto foi concentrado para obter 100% de produto desejado (como o sal de di-TFA). Parte E. (S)-2-amino-1-(4-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6- il)piperazin-1-il)-4-metilpentan-1-ona.
[0436] A 124 mg (0,20 mmol) de (S)-2-amino-1-(4-(3-bromoimidazo [1,2-b]piridazin-6-il)piperazin-1-il)-4-metilpentan-1-ona (sal de ácido de di- TFA) em um frasconete de micro-ondas foram adicionados 51 mg (0,33 mmol) do ácido (2-metoxipiridin-3-il)borônico, 110 mg (0,80 mmol) de K2CO3, 31 mg de PdCl2(dppf)2, 3 mL de MeCN e 1,5 mL de água. Isto foi tratado por micro-ondas durante 0,5 hr a 140°C. Isto foi em seguida diluído com EtOAc, lavado com salmoura, e a camada orgânica foi secada sobre MgSO4 e concentrada. Ela foi purificada por HPLC PREP neutra para obter 51,6 mg (61%) do produto desejado. 1H RMN (400 MHz, ME- TANOL-d4) δ ppm 0,98 - 1,10 (m, 6 H) 1,60 - 1,84 (m, 3 H) 3,48 - 3,60 (m, 2 H) 3,62 - 3,81 (m, 5 H) 3,94 - 4,02 (m, 1 H) 4,05 (s, 3 H) 4,48 (dd, J=9,47, 4,17 Hz, 1 H) 7,13 (dd, J=7,45, 4,93 Hz, 1 H) 7,27 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 7,88 (d, J=9,85 Hz, 1 H) 8,01 (s, 1 H) 8,17 (dd, J=5,05, 1,77 Hz, 1 H) 8,51 (s, 2 H) 8,66 (dd, J=7,58, 1,77 Hz, 1 H). 5.6.165. Síntese de 1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b] piridazin- 6-il)-1H-pirazol-4-carboxilato de metila
Figure img0320
Parte A. 3-bromo-6-hidrazinilimidazo[1,2-b]piridazina
Figure img0321
[0437] Uma suspensão de 3-bromo-6-fluoroimidazo[1,2-b]piridazina (2,16 g, 10 mmol) em monohidrato de hidrazina (10 mL) foi aquecida a 70°C durante 30 minutos. A mistura foi resfriada pa ra temperatura ambiente, e o composto título (1,78 g) foi coletado por filtração. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 4,27 (br. s., 2 H) 6,78 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,51 (s, 1 H) 7,73 (dd, J=9,60, 1,52 Hz, 1 H) 8,20 (br. s., 1 H). Parte B. 1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-1 H-pirazol-4-carboxilato de metila
Figure img0322
[0438] Uma mistura de 3-bromo-6-hidrazinilimidazo[1,2-b]piridazina (866 mg, 3,8 mmol) e 2-formil-3-oxopropanoato de metila (500 mg, 3,8 mmol) em EtOH (20 mL) foi aquecida a 70°C durante a noite. A mistura foi concentrada e tratada com MeOH. O composto título (410 mg) foi coletado por filtração. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 3,94 (s, 3 H) 7,84 (s, 1 H) 8,01 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 8,11 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 8,19 (s, 1 H) 9,09 (s, 1 H). Parte C. 1-(3-(2-metoxipiridin-3-il)imidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-1 H-pirazol- 4-carboxilato de metila.
[0439] O composto foi subtitulado obtido usando condições de acoplamento Suzuki típicas com 1-(3-bromoimidazo[1,2-b]piridazin-6-il)-1H- pirazol-4-carboxilato de metila e um apropriado ácido borônico. 1H RMN (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 3,92 (s, 3 H) 4,08 (s, 3 H) 7,15 (dd, J=7,58, 5,05 Hz, 1 H) 7,98 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 8,14 - 8,21 (m, 2 H) 8,26 - 8,33 (m, 2 H) 8,46 (dd, J=7,58, 2,02 Hz, 1 H) 8,83 (s, 1 H). LRMS (ESI) m/z 351,0 [(M+H)]+, calculado para C22H29N7O2: 350,33. 5.6.166. Síntese de Macrociclo
Figure img0323
Parte A. 2-(3-bromo-fenóxi)-etanol
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[0440] 2-Bromoetanol [540-51-2] (5,8 mL, 78,9 mmol) foi adicionado a uma suspensão agitada em temperatura ambiente de 3-bromofenol [59120-8] (9,0 g, 52,3 mmol) e carbonato de potássio [584-08-7] (36,2 g, 262,1 mmol) em acetona (260 mL) contida em um frasco de base redon- da de 500 mL. O frasco de reação foi equipado com um condensador de refluxo e aquecido ao refluxo durante a noite, resfriado, filtrado e evaporado para obter 11,7 g de óleo marrom claro transparente. Cromatografia flash (sílica-gel, eluída com 50% (v/v) de acetato de etila/heptano) forneceu 4,5 g de 2-(3-bromo-fenóxi)-etanol como um óleo amarelo claro. L- RMS (ESI) m/z 217,0/219,0 [(M+H)]+, calculado para C8H9O2Br: 217,06. Parte B. N1-(2-(3-bromofenóxi)etil)etano-1,2-diamina
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[0441] A uma solução magneticamente agitada em temperatura ambiente de 2-(3-bromo-fenóxi)-etanol (3,6 g, 16,7 mmol) e N-metilmorfolina [109-02-4] (2,2 mL, 20,0 mmol) em acetato de etila (200 mL) foi adicionado cloreto de metanossulfonila [124-63-0] (1,3 mL, 16,8 mmol). A reação foi agitada durante a noite, em seguida lavada com salmoura e a fase separada, extrato de acetato de etila secado (MgSO4) e adicionado a uma solução agitada em temperatura ambiente de etilenodiamina [107-15-3] (33,3 mL, 497,0 mmol) em acetato de etila (300 mL) a partir de um funil de adição equalizante da pressão durante o curso de 15 minutos. O funil de adição foi substituído com um condensador e a reação refluxada durante 4 h, em seguida resfriada e lavada com salmoura. A fase de acetato de etila foi secada (CaSO4) e evaporada para obter N1-(2-(3-bromo- fenóxi)etil)etano-1,2-diamina como 4,7 g de líquido amarelo claro. LRMS (ESI) m/z 259,1/261,1 [(M+H)]+, calculado para C10H15BrN2O:259,15. Parte C. N-{2-[2-(3-bromo-fenóxi)-etilamino]-etil}-2,2,2-trifluoro-acetamida
Figure img0326
[0442] A uma solução agitada a 0°C de N 1-(2-(3-bromofenóxi) etil) etano-1,2-diamina (4,7 g, 17,9 mmol) em tetra-hidrofurano anidroso (180 mL) foi adicionado trifluoroacetato de etila [383-63-1] (2,1 mL, 17,9 mmol). A solução resultante foi deixada agitar sob camisa de N2 durante 15 minutos, em seguida evaporada até a secura para obter N-{2-[2-(3- bromo-fenóxi)-etilamino]-etil}-2,2,2-trifluoro-acetamida como 6,3 g de sólido amarelo. LRMS (ESI) m/z 355,1/357,1 [(M+H)]+, calculado para C12H14BrF3N2O2: 355,16. Parte D. terc-butil éster de ácido [2-(3-bromo-fenóxi)-etil]-[2-(2,2,2-tri- fluoro-acetilamino)-etil]-carbâmico
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[0443] Pirocarbonato de di-t-butila [24424-99-5] (4,7 g, 21,44 mmol) foi adicionado em uma solução em temperatura ambiente de N-{2-[2-(3- bromo-fenóxi)-etilamino]-etil}-2,2,2-trifluoro-acetamida (6,3 g, 17,6 mmol) e base de Hunig [7087-68-5] (3,1 mL, 17,8 mmol) em acetato de etila (150 mL) e deixado agitar sob camisa de N2 durante 1 h, em seguida lavado com salmoura, secado (CaSO4), evaporado, e cromatografado flash (sílica-gel, eluída com 30% (v/v) de acetato de etila/heptano) para fornecer 5,5 g de terc-butil éster de ácido [2-(3-bromo-fenóxi)-etil]-[2-(2,2,2- trifluoro-acetilamino)-etil]-carbâmico como um óleo incolor claro. LRMS (ESI) m/z 399,1/401,1 [(M -terc-bu +H)]+, calculado para C17H22BrF3N2O4: 455,28. Parte E. terc-butil éster de ácido (2-amino-etil)-[2-(3-bromo-fenóxi)-etil]- carbâmico
Figure img0328
[0444] Carbonato de potássio [584-08-7] (35,8 g, 259,2 mmol) foi adicionado a uma solução de terc-butil éster de ácido [2-(3-bromo-fenóxi)- etil]-[2-(2,2,2-trifluoro-acetilamino)-etil]-carbâmico (4,7 g, 10,3 mmol) em 10% (v/v) de metanol aquoso (200 mL) e agitado a 50°C durante 5 h. A mistura de reação foi filtrada, o filtrado evaporado até a secura, dissolvido em acetato de etila, lavado com salmoura, secado (CaSO4) e evaporado para produzir 3,8 g de terc-butil éster de ácido (2-amino-etil)-[2-(3-bromo- fenóxi)-etil]-carbâmico como um óleo amarelo claro. LRMS (ESI) m/z 359,1/361,1 [(M+H)]+, calculado para C15H23BrN2O3:359,27. Parte F. terc-butil éster de ácido [2-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6- ilamino)-etil]-[2-(3-bromo-fenóxi)-etil]-carbâmico
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[0445] Uma mistura agitada de 3-bromo-6-flúor-imidazo[1,2-b] pirida- zina (1,9 g, 9,0 mmol), terc-butil éster de ácido (2-amino-etil)-[2-(3-bromo- fenóxi)-etil]-carbâmico (3,8 g, 10,6 mmol), e base de Hunig [7087-68-5] (3,1 mL, 17,8 mmol) em 2-propanol (45 mL) foi aquecida para 65oC, sob camisa de N2, durante 17 h. A solução de reação resfriada foi dividida en- tre salmoura e acetato de etila. O extrato foi secado (CaSO4) e evaporado para fornecer 5,1 g de óleo marrom. Este óleo foi cromatografado flash (sílica-gel, eluída com 100% de acetato de etila), em seguida o produto cristalizado (acetato de etila/heptano) para fornecer terc-butil éster de ácido [2-(3-bromo-imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-etil]-[2-(3-bromo-fe- nóxi)-etil]-carbâmico como 2,7 g de pó cristalino branco fino, ponto de fusão 134-135°C. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,27 (br. s., 5 H) 1,33 (br. s., 4 H) 2,51 (s, 1 H) 3,41 - 3,52 (m, 3 H) 3,55 (br. s., 1 H) 3,63 (br. s., 2 H) 4,14 (br. s., 2 H) 6,69 (d, J=9,35 Hz, 1 H) 6,94 (dd, J=8,21, 2,15 Hz, 1 H) 7,08 - 7,29 (m, 4 H) 7,48 (s, 1 H) 7,70 (d, J=9,60 Hz, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 27,85, 45,46, 45,77, 46,28, 66,04, 78,72, 99,00, 112,79, 113,89, 117,34, 122,05, 123,50, 125,47, 130,35, 131,10, 136,55, 153,98, 154,76, 159,27. LRMS (ESI) m/z 554,1/556,1/558,1[(M+H)]+, calculado para C21H25Br2N5O3: 555,27. Parte G. Macrociclo.
[0446] A uma mistura de terc-butil éster de ácido [2-(3-bromo- imidazo[1,2-b]piridazin-6-ilamino)-etil]-[2-(3-bromo-fenóxi)-etil]-carbâmico (818,1 mg, 1,47 mmol), bis(pinacolato)dibóro [73183-34-3] (1,9 g, 7,4 mmol), monohidrato tribásico de fosfato de potássio [27176-10-9] (1,7 g, 7,3 mmol), e complexo de [1,1‘-bis(difenilfosfino)-ferroceno]dicloropaládio (II), com diclorometano [95464-05-4] (241,2 mg, 0,3 mmol) contida em um frasco de base redonda de 250 mL foram adicionadas uma solução de 30% (v/v) de água em 1,2-dimetoxietano (125 mL) e uma barra agitadora magnética. O recipiente de reação foi equipado para um condensador de refluxo, baixado em um banho de óleo em temperatura ambiente, e o sistema realizado por meio de 10 evacuações/ciclos de manta de N2 ao mesmo tempo em que sendo rapidamente agitado. A reação, com camisa de N2, rapidamente agitada, foi aquecida para uma temperatura de banho de óleo de 85°C durante 17 h, em seguida resfriada e dividida entre salmoura (pH ajustado para 10 com hidróxido de sódio aquoso a 3 N) e acetato de etila. O extrato separado por fase foi secado (CaSO4) e evaporado para fornecer um óleo marrom que foi purificado por RP-HPLC preparativa. Frações de cromatografia foram combinadas, extraídas com acetato de etila, secadas (CaSO4), e diluídas com heptano para precipitar produto de macrociclo como 39,4 mg de pó branco, ponto de fusão 244-245°C (dec.) 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,45 (s, 8 H) 3,37 (br. s., 2 H) 3,49 - 3,67 (m, 4 H) 4,22 - 4,35 (m, 2 H) 6,68 (dd, J=9,60, 6,82 Hz, 1 H) 6,79 - 6,85 (m, 1 H) 7,30 - 7,48 (m, 3 H) 7,78 (d, J=9,60 Hz, 1 H) 7,92 (d, J=3,03 Hz, 1 H) 8,45 - 8,61 (m, 1 H). 13C RMN (100 MHz, DMSO-d6) δ ppm 27,96, 27,99, 38,49, 61,97, 79,22, 79,26, 108,11, 108,21, 111,93, 115,57, 117,89, 118,03, 126,01, 126,32, 129,84, 130,08, 130,51, 137,29, 152,90, 154,53, 156,75. LRMS (ESI) m/z 396,0 [(M +H)]+, calculado para C21H25N5O3: 395,47. HRMS (MS/MS) m/z 396,2021 [(M +H)]+, calculado para C21H26N5O3: 396,2036. 5.6.167. Ensaio de Placa Filtrante P81
[0447] Os compostos foram serialmente diluídos em uma placa Labcyte LDV (Labcyte, catNo. LP-0200) usando uma Mutiprobe (Perki- nElmer) e Biomek FX (Beckman Coulter) de modo que a maior concentração de composto fosse a 96 μM. Os compostos foram em seguida pingados (75 nL por cavidade) em uma placa de reação de 384 cavidades Greiner (Greiner, No. 781076) usando um Manipulador de Líquido ECHO 550 (Labcyte). Um total de 12 μl de tampão de reação (tampão de reação IMAP contendo Tween e DTT, de Molecular Devices) foi em seguida adicionado a cada cavidade de colunas 1 e 13 durante os controles negativos e 12 μl de 2X AAK1 (proteína humana de tamanho natural a 0,2 nM, acessão NCBI no. NP_055726,2) foi adicionado às cavidades restantes. A enzima foi em seguida pré-incubada com composto durante 10 minutos em temperatura ambiente. As reações foram iniciadas em adição de Mini- trak (PerkinElmer) de 12 μl de mistura de substrato contendo 2X Mu2 (0,2 μM, proteína humana de tamanho natural), 2x ATP frio (2 μM), e 1,3 μCi de 33P-ATP quente. As reações prosseguiram durante uma hora em temperatura ambiente. Entretanto, placas filtrantes P81 de 384 cavidades Millipore (Millipore, catálogo No. MZPHN0W10) foram colocadas sobre uma lavadora de placa (Zoom ZW, de Titertek) e pré-umidecidas com 50 μl de ácido fosfórico a 1%. Reações de cinase foram em seguida interrompidas sob a adição de 24 μl de 2% de ácido fosfórico a cada cavidade e Mini- trak foi em seguida usado para transferir 40 μl de cada cavidade para dentro das placas filtrantes P81 de 384 cavidades Millipore pré-umi- decidas. As misturas de reação foram incubadas durante 10 minutos em temperatura ambiente nas placas P81, seguido por lavagem cinco vezes com 100 μl/cavidade de 1% de ácido fosfórico usando a lavadora de filtro Zoom. A base de cada placa filtrante foi seladas, seguido pela adição de 20 μl de Microscint 40 a cada cavidade, selando o topo das placas com revestimento Flashplate, e em seguida esperando uma hora até leitura sobre a TopCount (PerkinElmer). 5.6.168. Ensaio com base em célula HEK281
[0448] Células HEK293F foram cultivadas em meio contendo DMEM (Gibco, cat. No.11965), 10% de FBS (SAFC Biosciences, cat. No.12103C), 1X GPS (glutamina, penicilina e estreptomicina). No dia um, as células foram semeadas sobre um prato de 10 cm, de modo que elas fossem ~80% confluentes no momento da transfecção. Aproximadamente 12 milhões de células estavam em um prato de 10 cm no momento da trans- fecção. No dia dois, cada prato foi transfectado com 48 ug de DNA e 144 ul de Lipofectamina 2000 (Invitrogen, cat.No. 11668-019). O DNA foi compreendido de uma mistura (por prato de 10 cm) contendo 3 ug de AAK1/HA/pIRES (humano de tamanho natural, acessão NCBI no. NP_055726,2), 45 μg de Flag/AP2MI/pcDNA (humano de tamanho natural), e 1,5 ml de OPTI-MEM. A Lipofectamina 2000 é preparada de uma mistura (por prato de 10 cm) contendo 144 μl de Lipofectamina 2000 e 1,5 ml de OPTI-MEM. Cada mistura foi transferida para tubos individuais de 15 ml e incubada em temperatura ambiente durante 5 minutos, e em seguida as duas misturas foram combinadas e incubadas em temperatura ambiente durante 20 minutos. O meio de crescimento foi em seguida aspirado de cada placa de 10 cm e substituído com 10 ml de DMEM+10% de FBS (nenhum GPS). Finalmente, 3 ml de mistura de DNA/Lipo- fectamina foram adicionados a cada prato de 10 cm e misturados suavemente, seguido por incubação de placa durante a noite a 37°C e 5% de CO2.
[0449] No dia três, os compostos foram diluídos em 100% de DMSO a 1000X concentração final, seguido por diluições seriais de 3 vezes durante um total de 5 concentrações testadas. Quatro compostos foram testados por prato de 10 cm. Um ul de cada diluição de composto foi em seguida pipetado em um prato de 96 cavidades, de cavidade profunda, seguido pela adição de 500 μl de DMEM + 0,5% de FBS em cada cavidade para uma concentração final de 2X de cada composto. As células foram ressuspensas em um prato de 10 cm por simples pipetagem (células HEK293 saem da placa tão fácil neste ponto) e em seguida transferidas para um tubo cônico de 50 ml e peletadas por centrifugação a 1000 rpm durante 5 minutos. Péletes celulares foram em seguida ressuspensas em 2,75 ml de DMEM + 0,5% de FBS por prato de 10 cm e 100 μl de suspensão celular transferidos em cada cavidade de placa TC de 96 cavidades. Finalmente, 100 μl de 2X composto diluídos em DMEM + 0,5% de FBS foram em seguida adicionados em cavidades contendo suspensão celular para concentração final de 1X. As placas foram em seguida incubadas a 37°C e 5% de CO 2 durante 3 horas seguido por transferência de suspensões celulares de cada cavidade em faixas de PCR de tubo-12. As faixas de PCR foram centrifugadas em uma prateleira de ponta a 1000 rpm durante 5 minutos para peletar as células e o meio foi em seguida removido por pipetagem sem atrapalhar a pélete celular.
[0450] Para preparar para análise Western Blot, péletes celulares foram ressuspensas em 40 ul 1X tampão de amostra LDS-PAGE (Invitro- gen, cat.No. NP0008) + 2X Halt fosfatase e coquetel de inibidor de protease (Thermo Scientific, cat.No.1861284), seguido por sonicação de cada um com sonicador de microponta estabelecido a 5 durante 8 a 10 segundos. Cinco ul de 10X Agente de Redução de Amostra de NuPage (com DTT a 50 mM) foi para cada amostra seguidos por desnaturação térmica a 70°C durante 10 minutos em máquina de PCR. Um total de 10 μl por amostras foi carregado em cada faixa de 4 a 20% de gel de 26 cavidades Tris-Glycine Criterion (Biorad, cat.No. 345-0034) para a mancha phospho- mu2 e 10 μl por faixa em 4 a 12% de Bis-Tris (tampão +MES) gel de 26 cavidades (Invitrogen, cat.No. WG1403BX10) para a mancha mu2. Para os controles, 2 ng de fosfo-mu2 ou 20 ng de proteínas mu2/Flag foram carregados na última cavidade de cada gel. Após SDS-PAGE, amostras sobre cada gel foram transferidas para membrane PVDF usando um iBlot e as membranas foram bloqueadas durante uma hora em TBST + 5% de leite, seguido por lavagem 3X durante 5 a 10 minutos com TBST. Os géis Criterion foram sondados com anti-fosfo-mu2 de coelho (1:5000; um anticorpo policlonal de coelho produzido por New England Peptide e purificado por afinidade em Lexicon) em TBST + 5% de BSA, ao passo que, géis NuPAGE foram sondados com anti-Flag de camundongo (1:500; Sigma, cat.No. F1804) em TBST + 5% de leite, e estes anticorpos primários foram incubados durante a noite a 4°C em um oscilador .
[0451] No quarto dia, Western blots foram lavadas 3X durante 5 a 10 minutos com TBST, sondadas com HRP anti-coelho (1:2000; BioRad, cat.No. 170-6515) ou HRP anti-camundongo (1:2000; Biorad, cat.No. 170-6516) em TBST + 5% de leite durante 1 hora em temperatura ambiente, lavadas 3X durante 10 minutos com TBST, e desenvolvidas com reagente ECL (GE Healthcare, cat.No. RPN2132) em um Versadoc. Finalmente, a câmara foi estabelecida para ter uma imagem a cada 30 segundos, durante 10 minutos e a melhor imagem salva para cada mancha sem nenhum sinal saturado (quando o sinal é saturado, as faixas serão vermelho realçado). Uma análise de volume em cada faixa foi realizada para obter valores de densidade. Inibição percentual foi calculada para cada amostra, primeiro normalizando para níveis de expressão de Mu2 totais e em seguida comparando a 0% e 100% dos controles. Valores IC50 foram em seguida calculados usando software de ajuste Excel. 5.6.169. Dados em Vitro
[0452] Os dados in vitro obtidos para vários compostos da invenção são fornecidos abaixo na Tabela 1, caracterizados pelo fato de que "MW" significa peso molecular, "Ensaio P81" refere-se ao ensaio de placa filtrante P81 descrito acima, "CBA" refere-se ao ensaio com base em célula HEK281 descrito acima, "--"significa que os resultados para o ensaio referido não foram obtidos, "*"significa menos do que ou igual a 1,0 μM, "**" significa um valor de menos do que ou igual a 0,1 μM, e "***" significa menos do que ou igual a 0,01 μM.
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5.6.170. Efeitos Farmacológicos
[0453] Estudos de camundongos nocaute de AAK1 mostrou que o rompimento do gene AAK1 afeta a resposta de dor quando medido usando o teste da pata de formalina. Veja o exemplo 5.6.1, acima. O mesmo teste foi utilizado para confirmar que a administração de um inibidor de AAK1 pode também afetar a resposta de dor.
[0454] Os camundongos foram testados quanto à nocicepção com Automatic Nociception Analyzers (adquiridos do Ozaki lab at University de California, San Diego). Uma faixa de metal foi colocada em torno da pata traseira esquerda de cada camundongo com supercola 30 minutos antes do teste. Após o período de aclimação de 30 minutos, 20 μl de formalina a 5% foram subcutaneamente injetados na superfície dorsal da pata traseira esquerda. Os camundongos foram individualmente alojados em câmaras cilíndricas durante 45 minutos. Solução de formalina a 5% fresca foi preparada diluindo-se formaldeído (Formaldeído fresco a 20%, Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) com água destilada. Compostos investiga- tórios foram administrados 30 minutos antes da injeção de formalina.
[0455] [0436] Um software computador registrou retiradas por minu to, as retiradas totais durante a Fase I (fase aguda = primeiros 8 minutos), e as retiradas totais durante a Fase II (fase tônica entre 20 a 40 minutos) através de um campo eletromagnético. Veja Yaksh TL, Ozaki G, McCum- ber D, Rathbun M, Svensson C, Malkmus S, Yaksh MC. An automated flinch detecting system for use in the formalin nociceptive bioassay. J Appl Physiol., 2001; 90:2386-402.
[0456] Vários compostos da invenção foram testados em diferentes doses. Gabapentina e pregabalina foram utilizadas como controles positivos. Os resultados são mostrados abaixo na Tabela 2, em que "*" significa um efeito igual a ou maior do que 50 por cento daquele de Gabapenti- na a 200 mpk, "**" significa um efeito igual a ou maior do que 100 por cento daquele de Gabapentina a 200 mpk, "sc" significa administração subcutânea, "ip" significa administração intraperitoneal, e "po" significa administração oral.
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[0457] Estes resultados demonstram que inibidores de AAK1 podem ser usados para tratar a dor.
[0458] Todas as publicações (por exemplo, patentes e pedidos de patente) citadas acima são incorporadas aqui por referência em suas totalidades.

Claims (10)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:
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ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: X é CH ou N; cada R1A é independentemente -OR1C, -N(R1C)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, -N(R1C)C(O)OR1C, ciano, halo, ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila de 2 a 12 membros opcionalmente substituído, cuja substituição opcional é com um ou mais R1B; cada R1B é independentemente -OR1C, -N(R1C)2, -C(O)R1C, -C(O)OR1C, -C(O)N(R1C)2, -N(R1C)C(O)OR1C, ciano ou halo; cada R1C é independentemente hidrogênio ou C1-12 hidrocarbila ou heterocarbila de 2 a 12 membros opcionalmente substituído, cuja substituição opcional é com um ou mais de ciano, halo ou hidroxila; R2C é -C(O)R2D; R2D é heterocarbila de 2 a 12 membros compreendendo pelo menos um átomo de nitrogênio; e m é 0-3; com a condição de que quando X for CH, m for 1 e R1A for cloro, R2D não seja t-butila.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é da fórmula:
Figure img0355
3. Composto de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que é da fórmula:
Figure img0356
4. Composto de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que é da fórmula:
Figure img0357
5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que pelo menos um R1A é halo.
6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que pelo menos um R1A é -OR1C.
7. Composto de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que R1C é C1-12 hidrocarbila opcionalmente substituído, por exemplo, C1-6 hidrocarbila, C1-4 hidrocarbila.
8. Composto de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que R1C é metila.
9. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, e um excipiente ou diluente farmaceuticamente aceitável.
10. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de ser para preparação de uma composição para inibir atividade de cinase 1 associada com adaptador (AAK1); para tratar ou controlar uma doença ou distúrbio mediado pela atividade de AAK1; para inibir atividade de AAK1.
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