ES2566011T3 - Péptido de epítopo HIG2 y URLC10 y vacunas que contienen el mismo - Google Patents
Péptido de epítopo HIG2 y URLC10 y vacunas que contienen el mismo Download PDFInfo
- Publication number
- ES2566011T3 ES2566011T3 ES09808048.4T ES09808048T ES2566011T3 ES 2566011 T3 ES2566011 T3 ES 2566011T3 ES 09808048 T ES09808048 T ES 09808048T ES 2566011 T3 ES2566011 T3 ES 2566011T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- hla
- present
- peptides
- peptide
- ctl
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title abstract description 99
- 101000839066 Homo sapiens Hypoxia-inducible lipid droplet-associated protein Proteins 0.000 title description 22
- 102100028891 Hypoxia-inducible lipid droplet-associated protein Human genes 0.000 title description 22
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title description 11
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 59
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 24
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 abstract description 24
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 21
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 21
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 20
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 abstract description 18
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 16
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract description 15
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 10
- 108010075704 HLA-A Antigens Proteins 0.000 abstract description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 8
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 abstract description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 abstract description 2
- 102000011786 HLA-A Antigens Human genes 0.000 abstract 2
- 101710098119 Chaperonin GroEL 2 Proteins 0.000 abstract 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 42
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 38
- 238000000034 method Methods 0.000 description 33
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 29
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 29
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 29
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 15
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 15
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 12
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 11
- 210000001808 exosome Anatomy 0.000 description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 10
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 10
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 9
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 9
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 8
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 7
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 7
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 102100028972 HLA class I histocompatibility antigen, A alpha chain Human genes 0.000 description 6
- 101100221606 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) COS7 gene Proteins 0.000 description 6
- 206010068771 Soft tissue neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 5
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 5
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 5
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 4
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 4
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 4
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 201000008968 osteosarcoma Diseases 0.000 description 4
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 241001467552 Mycobacterium bovis BCG Species 0.000 description 3
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 229960000190 bacillus calmette–guérin vaccine Drugs 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 3
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 3
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 239000008196 pharmacological composition Substances 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 201000010174 renal carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 3
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 description 3
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 2
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 2
- -1 cationic lipid Chemical class 0.000 description 2
- 208000006990 cholangiocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 2
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 2
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- LEBVLXFERQHONN-UHFFFAOYSA-N 1-butyl-N-(2,6-dimethylphenyl)piperidine-2-carboxamide Chemical compound CCCCN1CCCCC1C(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C LEBVLXFERQHONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 101001092910 Homo sapiens Serum amyloid P-component Proteins 0.000 description 1
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 1
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 108091061960 Naked DNA Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241000282577 Pan troglodytes Species 0.000 description 1
- 241001504519 Papio ursinus Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000293871 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhi Species 0.000 description 1
- 102100036202 Serum amyloid P-component Human genes 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 108010008038 Synthetic Vaccines Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 238000001815 biotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229960003150 bupivacaine Drugs 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 210000001821 langerhans cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000002433 mononuclear leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 229940023041 peptide vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 239000002985 plastic film Substances 0.000 description 1
- 229920006255 plastic film Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 229940124551 recombinant vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/177—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- A61K38/1774—Immunoglobulin superfamily (e.g. CD2, CD4, CD8, ICAM molecules, B7 molecules, Fc-receptors, MHC-molecules)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
- C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Un agente farmacéutico, en donde el agente comprende uno o más péptidos que tienen capacidad de inducción de linfocitos T citotóxicos (CTL), en donde el péptido es un nonapéptido o decapéptido y comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO: 2 y 1, o uno o más polinucelótidos que codifican un péptido de este tipo, en combinación con un soporte farmacológicamente aceptable para uso en un propósito seleccionado del grupo que consiste en: (i) tratamiento de cáncer en un sujeto cuyo antígeno HLA-A es HLA-A0206, (ii) profilaxis de cáncer en un sujeto cuyo antígeno HLA-A es HLA-A0206, (iii) prevenir la recurrencia postoperatoria de cáncer en un sujeto cuyo antígeno HLA-A es HLA-A0206 y (iv) combinaciones de los mismos.
Description
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
Curtiss, Methods in Enzymology (comps. Wu et al.) 1983, 101: 347-62). Por ejemplo, primero, un vector adecuado que alberga un polinucleótido que codifica el péptido objetivo en una forma expresable (p. ej., aguas abajo de una secuencia reguladora que corresponde a una secuencia de promotor) se prepara y se transforma en una célula huésped adecuada. La célula huésped se cultiva después para producir el péptido de interés. El péptido también se puede producir in vitro adoptando un sistema de traducción in vitro.
IV. Polinucleótidos
La presente invención también proporciona un polinucleótido que codifica los péptidos de la presente invención mencionados anteriormente. Estos incluyen polinucleótidos derivados del gen HIG2 o URLC10 que se produce de forma natural (SEQ ID NO: 3 o 5, GenBank Nº de Acceso NM-_013332 o NM_017527), así como los que tienen una secuencia de nucleótidos modificada de forma conservadora de los mismos. En esta memoria, la frase "secuencia de nucleótidos modificada de forma conservadora" se refiere a secuencias que codifican secuencias de aminoácidos idénticas o esencialmente idénticas. Debido a la degeneración del código genético, un gran número de ácidos nucleicos funcionalmente idénticos codifican cualquier proteína dada. Por ejemplo, los codones GCA, GCC, GCG y GCU codifican todo el aminoácido alanina. Por lo tanto, en cada posición en la que una alanina es especificada por un codón, el codón puede ser alterado a cualesquiera codones correspondientes descritos sin alterar el polipéptido codificado. Variaciones de ácido nucleico de este tipo son "variaciones silenciosas", que son una especie de variaciones modificadas de manera conservadora. Cada una de las secuencias de ácidos nucleicos en esta memoria que codifica un péptido también describe cada posible variación silenciosa del ácido nucleico. Un experto ordinario reconocerá que cada uno de los codones en un ácido nucleico (excepto AUG, que es habitualmente el único codón para metionina, y TGG, que es habitualmente el único codón para triptófano) puede ser modificado para proporcionar una molécula funcionalmente idéntica. Por consiguiente, cada una de las variaciones silenciosas de un ácido nucleico que codifica un péptido se describe implícitamente en cada una de las secuencias descritas.
El polinucleótido de la presente invención puede estar compuesto por ADN, ARN y derivados de los mismos. Un ADN está adecuadamente compuesto de bases tales como A, T, C y G, y T es reemplazada por U en un ARN.
El polinucleótido de la presente invención puede codificar múltiples péptidos de la presente invención, con o sin intervenir en secuencias de aminoácidos entremedias. Por ejemplo, la secuencia de aminoácidos intermedia puede proporcionar un sitio de escisión (p. ej., secuencia de reconocimiento de enzimas) del polinucleótido o los péptidos traducidos. Además de ello, el polinucleótido puede incluir cualesquiera secuencias adicionales a la secuencia codificadora que codifica el péptido de la presente invención. Por ejemplo, el polinucleótido puede ser un polinucleótido recombinante que incluye secuencias reguladoras requeridas para la expresión del péptido o puede ser un vector de expresión (plásmido) con genes marcadores y similares. En general, dichos polinucleótidos recombinantes se pueden preparar mediante la manipulación de polinucleótidos mediante técnicas recombinantes convencionales utilizando, por ejemplo, polimerasas y endonucleasas.
Se pueden utilizar tanto las técnicas de síntesis recombinantes como químicas para producir los polinucleótidos de la presente invención. Por ejemplo, un polinucleótido puede ser producido mediante inserción en un vector apropiado, que puede expresarse cuando es transfectado en una célula competente. Alternativamente, un polinucleótido puede ser amplificado utilizando técnicas de PCR o la expresión en huéspedes adecuados (véase, p. ej., Sambrook et al, Molecular Cloning:. A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Nueva York, 1989). Alternativamente, un polinucleótido puede ser sintetizado utilizando las técnicas en fase sólida tal como se describe en Beaucage SL e Iyer RP, Tetrahedron 1992, 48: 2223-311; Matthes et al, EMBO J 1984, 3: 801-5.
Los vectores que contienen el polinucleótido de la presente invención y células huéspedes que albergan los vectores también se incluyen en la presente invención.
V. Exosomas
La presente descripción proporciona, además, vesículas intracelulares denominadas exosomas, que presentan complejos formados entre los péptidos de esta invención y antígenos HLA en su superficie. Los exosomas se pueden preparar, por ejemplo, utilizando los métodos detallados en la Publicación de la Solicitud de Patente japonesa Kohyo Nº Hei 11-510507 y el documento WO99/03499, y se pueden preparar utilizando APCs obtenidos de pacientes que son sometidos a tratamiento y/o prevención. Los exosomas de esta invención pueden ser inoculados como vacunas, de una manera similar a los péptidos de esta invención.
En el contexto de la presente invención, el tipo de antígenos HLA incluidos en los complejos debería ser HLA-A0206, y el sujeto al que se inoculan los exosomas debe poseer el antígeno HLA-A0206. Típicamente, en la clínica, el tipo de antígeno HLA del paciente que requiere tratamiento es investigado por adelantado, lo que permite la selección adecuada de los pacientes que se espera se beneficien del tratamiento con los exosomas de la presente descripción.
VI. Células presentadoras de antígenos (APCs
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
La presente invención también proporciona APCs aisladas que presentan complejos formados entre antígenos HLA-A0206 y los péptidos de esta invención en su superficie. Las APCs, que se obtienen poniendo en contacto los péptidos de esta invención, o introduciendo los nucleótidos que codifican los péptidos de esta invención en una forma expresable se pueden derivar de pacientes que son sometidos a un tratamiento y/o prevención, y se pueden administrar como vacunas por sí mismas o en combinación con otros fármacos, incluyendo los péptidos de esta invención, los exosomas, o células T citotóxicas.
Las APCs no se limitan a un tipo particular de células e incluyen células dendríticas (DCs), células de Langerhans, macrófagos, células B y células T activadas, que son conocidos por presentar antígenos proteicos en su superficie celular con el fin de ser reconocidos por linfocitos. Dado que la DC es una APC representativa que tiene la más fuerte acción inductora de CTL entre las APCs, APCs preferibles de la presente invención son DCs.
Por ejemplo, una APC se puede obtener induciendo DCs procedentes de monocitos de la sangre periférica y después poniéndolas en contacto (estimulándolas) con los péptidos de esta invención in vitro, ex vivo o in vivo. Cuando los péptidos de esta invención se administran a los sujetos cuyo antígeno HLA-A es HLA-A0206, las APCs que presentan los péptidos de esta invención son inducidas en el cuerpo del sujeto. La frase "inducción de la APC" incluye poner en contacto (estimular) una célula con los péptidos de esta invención, o los nucleótidos que codifican los péptidos de la presente invención para presentar complejos formados entre antígenos HLA-A0206 y los péptidos de esta invención en la superficie de la célula. Alternativamente, después de introducir los péptidos de esta invención en las APCs para permitir que las APCs presenten los péptidos, las APCs se pueden administrar al sujeto como una vacuna. Por ejemplo, la administración ex vivo puede incluir las etapas de:
a: recoger APCs de un primer sujeto cuyo antígeno HLA-A es HLA-A0206,
b: poner en contacto las APCs de la etapa a con el péptido y
c: administrar las APCs cargadas con péptido a un segundo sujeto cuyo antígeno HLA-A es HLA-A0206.
El primer sujeto y el segundo sujeto pueden ser el mismo individuo, o pueden ser individuos diferentes. Alternativamente, de acuerdo con la presente descripción, se proporciona el uso de péptidos de esta invención para fabricar una composición farmacéutica que induce células presentadoras de antígenos. Además, la presente descripción proporciona un método o procedimiento para la fabricación de una composición farmacéutica que induce células presentadoras de antígenos, en donde el método incluye la etapa de mezclar o formular el péptido de la presente invención con un soporte farmacéuticamente aceptable. Además, la presente invención también proporciona los péptidos de la presente invención para inducir células presentadoras de antígenos. Las APCs obtenidos mediante la etapa b se pueden administrar al sujeto como una vacuna.
De acuerdo con un aspecto de la presente invención, las APCs tienen un alto nivel de capacidad de inducción de CTL. En la expresión "alto nivel de capacidad de inducción de CTL", el alto nivel es con relación al nivel contactado por APC en con ningún péptido o péptidos que no puede inducir el CTL. APCs de este tipo que tienen un alto nivel de capacidad de inducción de CTL se pueden preparar por un método que incluye la etapa de transferir genes que contienen polinucleótidos que codifican los péptidos de esta invención a APCs in vitro. Los genes introducidos pueden estar en forma de ADNs o ARNs. Ejemplos de métodos de introducción incluyen, sin limitaciones particulares, diversos métodos convencionalmente realizados en este campo tales como la lipofección, electroporación y el método de fosfato de calcio. Más específicamente, se puede llevar a cabo tal como se describe en Cancer Res 1996, 56: 5672-7; J Immunol 1998, 161: 5607-13; J Exp Med 1996, 184: 465-72; Traducción Japonesa Publicada de la Publicación Internacional Nº 2000-509281. Mediante la transferencia del gen en APCs, el gen se somete a transcripción, traducción y similares en la célula, y luego la proteína obtenida es procesada por MHC de Clase I o Clase II, y prosigue a través de una ruta de presentación para presentar péptidos.
VII. Células T citotóxicas (CTLs)
Una célula T citotóxica inducida contra cualquiera de los péptidos de la presente invención refuerza la respuesta inmune que fija como objetivo endotelios asociados a tumores in vivo y, por lo tanto, se puede utilizar como vacunas, de una manera similar a los péptidos en sí. Por lo tanto, la presente invención también proporciona células T citotóxicas aisladas que son inducidas o activadas específicamente por cualquiera de los presentes péptidos.
Células T citotóxicas de este tipo se pueden obtener (1) administrando los péptidos de la presente invención a un sujeto y después recogiendo las células T citotóxicas del sujeto o (2) poniendo de contacto (estimulando) APCs derivadas de sujetos, y células CD8-positivas, o leucocitos mononucleares de la sangre periférica, in vitro con los péptidos de la presente invención.
Las células T citotóxicas, que han sido inducidas por la estimulación de las APCs que presentan los péptidos de esta invención, pueden derivarse de pacientes que son sometidos a un tratamiento y/o prevención y poseen antígeno HLA-A0206, y se pueden administrar por sí mismas o en combinación con otros fármacos, incluyendo los péptidos de esta invención o exosomas con el propósito de regular efectos. Las células T citotóxicas obtenidas actúan
uso como agentes o composiciones farmacéuticos. Además, las células T citotóxicas antes mencionadas que fijan como objetivo a cualquiera de los péptidos de la presente invención también se pueden utilizar como el ingrediente activo de los presentes agentes o composiciones farmacéuticos. En el contexto de la presente invención, la frase "fijar como objetivo un péptido" se refiere a reconocer (es decir, unirse a) un complejo formado entre un antígeno HLA-A0206 y un péptido en una superficie de la célula diana con el receptor de células T, y luego atacar la célula diana para inducir la muerte de la célula diana.
La presente descripción también proporciona el uso de un ingrediente activo seleccionado de entre:
- (a)
- un péptido de la presente invención,
- (b)
- un ácido nucleico que codifica un péptido de este tipo tal como se describe en esta memoria en una forma expresable,
- (c)
- una APC de la presente invención, y
- (d)
- células T citotóxicas de la presente invención
en la fabricación de una composición farmacéutica o agente para el tratamiento de cáncer. La presente descripción proporciona, además, un ingrediente activo seleccionado de entre:
- (a)
- un péptido de la presente invención,
- (b)
- un ácido nucleico que codifica un péptido de este tipo tal como se describe en esta memoria en una forma expresable,
- (c)
- una APC de la presente invención, y
- (d)
- células T citotóxicas de la presente invención
para uso en el tratamiento de cáncer.
Alternativamente, la presente descripción proporciona, además, un método o procedimiento para la fabricación de una composición farmacéutica o un agente para tratar el cáncer, en donde el método o procedimiento incluye la etapa de formular un soporte farmacéutica o fisiológicamente aceptable con un ingrediente activo seleccionado de entre:
- (a)
- un péptido de la presente invención,
- (b)
- un ácido nucleico que codifica un péptido de este tipo tal como se describe en esta memoria en una forma expresable,
- (c)
- una APC de la presente invención, y
- (d)
- células T citotóxicas de la presente invención
como ingredientes activos.
En otra realización, la presente descripción también proporciona un método o procedimiento para la fabricación de una composición o agente farmacéutico para tratar el cáncer, en donde el método o procedimiento incluye la etapa de mezclar un ingrediente activo con un soporte farmacéutica o fisiológicamente aceptable, en el que el ingrediente activo se seleccionado entre:
- (a)
- un péptido de la presente invención,
- (b)
- un ácido nucleico que codifica un péptido de este tipo tal como se describe en esta memoria en una forma expresable,
- (c)
- una APC de la presente invención, y
- (d)
- células T citotóxicas de la presente invención.
Alternativamente, la composición o el agente farmacéutico de la presente invención pueden utilizarse para una o ambas de la profilaxis del cáncer y la prevención de la recurrencia postoperatoria del mismo.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
Los presentes agentes o composiciones farmacéuticos encuentran uso como una vacuna. En el contexto de la presente invención, el término "vacuna" (al que también se alude como una "composición inmunogénica") se refiere a una sustancia que tiene la función de inducir inmunidad antitumoral tras la inoculación en animales.
Los agentes o composiciones farmacéuticos de la presente invención se pueden utilizar para tratar y/o prevenir cánceres, y/o para la prevención de la recurrencia postoperatoria de los mismos en sujetos o pacientes, incluyendo seres humanos y cualquier otro mamífero incluyendo, pero no limitado a, ratón, rata, cobaya, conejo, gato, perro, oveja, cabra, cerdo, ganado, caballo, mono, babuino y chimpancé, particularmente un animal de importancia comercial o un animal domesticado.
De acuerdo con la presente invención, se ha encontrado que los polipéptidos que tienen una secuencia de aminoácidos seleccionada de entre SEQ ID NOs: 1 y 2 son péptidos de epítopos restringidos por HLA-A0206 que pueden inducir una respuesta inmune potente y específica contra células diana que expresan HIG2 o URLC10, y HLA-A0206. Por lo tanto, los presentes agentes o composiciones farmacéuticos que incluyen cualquiera de estos polipéptidos con la secuencia de aminoácidos seleccionada de entre SEQ ID NOs: 1 y 2 son particularmente adecuados para la administración a sujetos, cuyo antígeno HLA es HLA-A0206. Lo mismo se aplica a agentes o composiciones farmacéuticos que incluyen polinucleótidos que codifican cualquiera de estos polipéptidos.
Los cánceres a ser tratados por los agentes o composiciones farmacéuticos de la presente invención no están limitados, e incluyen todos los tipos de cánceres en los que está implicado HIG2 o URLC10, incluyendo, por ejemplo, cáncer de vejiga, cáncer de cuello uterino, carcinoma colangiocelular, cáncer de esófago, cáncer gástrico, NSCLC, osteosarcoma, cáncer de páncreas, carcinoma renal y tumores de tejidos blandos. En particular, los agentes o composiciones farmacéuticos que fijan como objetivo HIG2 son preferiblemente aplicables a carcinoma renal y tumores de tejidos blandos, y los agentes o composiciones farmacéuticos que fijan como objetivo URLC10 son preferiblemente aplicables a cáncer de vejiga, cáncer de cuello uterino, carcinoma colangiocelular, cáncer de esófago, cáncer gástrico, NSCLC, osteosarcoma, cáncer de páncreas y tumores de tejidos blandos.
Los presentes agentes o composiciones farmacéuticos pueden contener, además de los ingredientes activos antes mencionados, otros péptidos que tienen la capacidad de inducir CTLs contra células cancerígenas, otros polinucleótidos que codifican los otros péptidos, otras células que presentan los otros péptidos, o similares. En esta memoria, los otros péptidos que tienen la capacidad de inducir CTLs contra células cancerigenas se ejemplifican por antígenos específicos para cáncer (p. ej., TAAs identificados), pero no se limitan a los mismos.
Si es necesario, los agentes o composiciones farmacéuticos de la presente invención pueden incluir opcionalmente otras sustancias terapéuticas como ingrediente activo, siempre y cuando la sustancia no inhiba el efecto antitumoral del ingrediente activo, p. ej., cualquiera de los presentes péptidos. Por ejemplo, las formulaciones pueden incluir agentes o composiciones anti-inflamatorios, analgésicos, agentes quimioterapéuticos, y similares. Además de incluir otras sustancias terapéuticas en el propio medicamento, los medicamentos de la presente invención también se pueden administrar secuencial o simultáneamente con uno o más de otros agentes o composiciones farmacológicos. Las cantidades de medicamento y agente o composición farmacológico dependen, por ejemplo, de qué tipo de agente o agentes o composición o composiciones farmacológicos se utilicen, de la enfermedad que esté siendo tratada y la programación y vías de administración.
Se debe entender que, además de los ingredientes particularmente mencionados en esta memoria, los agentes o composiciones farmacéuticos de esta invención pueden incluir otros agentes o composiciones convencionales en la técnica teniendo en cuenta el tipo de formulación en cuestión.
Los presentes agentes o composiciones farmacéuticos pueden ser incluidos en artículos de manufactura y kits que contienen materiales útiles para el tratamiento de las condiciones patológicas de la enfermedad a tratar, p. ej., cáncer. El artículo de manufactura puede incluir un recipiente de cualquiera de los presentes agentes o composiciones farmacéuticos con una etiqueta. Recipientes adecuados incluyen botellas, viales y tubos de ensayo. Los recipientes pueden formarse a partir de una diversidad de materiales tales como vidrio o plástico. La etiqueta en el recipiente debe indicar el agente o composiciones que se utilizan para el tratamiento o la prevención de uno o más estados de la enfermedad. La etiqueta también puede indicar instrucciones para la administración, etcétera.
Además del recipiente descrito anteriormente, un kit que incluye un agente farmacéutico o composiciones de la presente invención opcionalmente puede incluir, además, un segundo recipiente que aloja un diluyente farmacéuticamente aceptable. Puede incluir, además, otros materiales deseables desde un punto de vista comercial y del usuario, incluyendo otros tampones, diluyentes, filtros, agujas, jeringas y prospectos con instrucciones para su uso.
Las composiciones farmacéuticas pueden, si se desea, presentarse en un envase o dispositivo dispensador que puede contener una o más formas de dosificación unitaria que contienen el ingrediente activo. El envase puede, por ejemplo, incluir una película metálica o de plástico, tal como un envase blíster. El envase o dispositivo dispensador puede acompañarse de instrucciones para la administración.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Nºs. 5.580.859; 5.589.466; 5.804.566; 5.739.118; 5.736.524; 5.679.647; y documento WO 98/04720. Ejemplos de tecnologías de suministro basadas en ADN incluyen "ADN desnudo", suministro facilitado (bupivacaína, polímeros, mediado por péptidos), complejos de lípidos catiónicos, y suministro mediado por partículas ("pistola de genes") o mediado por presión (véase, p. ej., la Patente de EE.UU. Nº 5.922.687).
Los péptidos de la presente invención también pueden ser expresadas por vectores virales o bacterianos. Ejemplos de vectores de expresión incluyen huéspedes virales atenuados tales como vacuna o de la viruela aviar. Este enfoque implica el uso de virus vacuna, p. ej., como un vector para expresar secuencias de nucleótidos que codifican el péptido. Tras la introducción en un huésped, el virus vacuna recombinante expresa el péptido inmunogénico y, con ello, provoca una respuesta inmune. Vectores vacuna y métodos útiles en protocolos de inmunización se describen, p. ej., en la patente de EE.UU. Nº 4.722.848. Ejemplos de otro vector incluyen BCG (Bacilo Calmette Guerin). Vectores de BCG se describen en Stover et al., Nature 1991, 351: 456-60. Resultará evidente una amplia diversidad de otros vectores útiles para la administración terapéutica o la inmunización, p. ej., vectores de adenovirus y virus adeno-asociados, vectores retrovirales, vectores de Salmonella typhi, vectores de toxina destoxificada ántrax, y similares. Véase, p. ej., Shata et al., Mol Med Today 2000, 6: 66-71; Shedlock et al, J Leukoc Biol 2000, 68:. 793-806; Hipp et al., In Vivo 2000, 14: 571-85.
El suministro de un polinucleótido a un sujeto puede ser directa, en cuyo caso el sujeto es expuesto directamente a un vector portador de polinucleótidos, o indirecta, en cuyo caso las células se transforman primero con el polinucleótido de interés in vitro, a continuación las células son trasplantado en el sujeto. Estos dos enfoques se conocen, respectivamente, como terapias génicas in vivo y ex vivo.
Para revisiones generales de los métodos de terapia génica, véase Goldspiel et al., Clinical Pharmacy 1993, 12: 488-505; Wu y Wu, Biotherapy 1991, 3: 87-95; Tolstoshev, Ann Rev Pharmacol Toxicol 1993, 33: 573-96; Mulligan, Science 1993, 260: 926-32; Morgan y Anderson, Ann Rev Biochem 1993, 62: 191-217; Trends in Biotechnology 1993, 11(5): 155-215). Métodos comúnmente conocidos en la técnica de la tecnología de ADN recombinante que se pueden utilizar también para la presente invención se describen en comps. Ausubel et al, Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, NY., 1993; y Krieger, Gene Transfer and Expression, A Laboratory Manual, Stockton Press, NY, 1990.
El método de administración puede ser oral, inyección intradérmica, subcutánea, intravenosa, o similar, y encuentra uso la administración sistémica o la administración local en la vecindad de los sitios fijados como objetivo. La administración se puede realizar por administración única o impulsada por múltiples administraciones. La dosis del polinucleótido en el soporte adecuado o células transformadas con el polinucleótido que codifica los péptidos de esta invención se puede ajustar apropiadamente de acuerdo con la enfermedad a tratar, la edad del paciente, el peso, la forma de administración, y similares, y es ordinariamente de 0,001 mg a 1000 mg, por ejemplo, de 0,001 mg a 1000 mg, por ejemplo, de 0,1 mg a 10 mg, y puede administrarse una vez cada pocos días a una vez cada pocos meses. Un experto en la técnica puede seleccionar adecuadamente la dosis adecuada.
X. Métodos que utilizan los péptidos, exosomas, APCS y CTLs
Los péptidos de la presente invención y polinucleótidos que codifican estos péptidos pueden utilizarse para la inducción de APCs y CTLs. Los exosomas y APCs de la presente invención también se pueden utilizar para la inducción de CTLs. Los péptidos, polinucleótidos, exosomas y APCs se pueden utilizar en combinación con cualquier otro compuesto con tal que los compuestos no inhiban su capacidad de inducción de CTL. Por lo tanto, cualquiera de los agentes o composiciones farmacéuticos mencionados anteriormente de la presente invención se pueden utilizar para la inducción de CTLs y, además de ello, los que incluyen los péptidos y polinucleótidos también se pueden utilizar para la inducción de APC como se comenta más adelante.
(1) Método de inducr células presentadoras de antígenos (APCs)
La presente invención proporciona métodos de inducir APCs utilizando los péptidos de esta invención o polinucleótidos que codifican los péptidos. La inducción de APCs se puede realizar tal como se describe anteriormente en la sección "VI. Células presentadoras de antígenos". Esta invención también proporciona un método para inducir APCs que tienen un alto nivel de capacidad de inducción de CTL, cuya inducción ha sido también mencionada en el apartado de "VI. Células presentadoras de antígenos", supra.
Preferiblemente, los métodos para inducir APCs incluyen al menos una etapa seleccionada entre:
a: poner en contacto APCs cuyo antígeno HLA-A es HLA-A0206 con los péptidos de la presente invención, y
b: introducir los polipéptidos de la presente invención en una forma expresable en APCs, cuyo antígeno HLA-A es HLA A0206.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Después de 2 días de la transfección, las células transfectadas fueron tratadas con solución de disociación celular y se utilizaron como las células diana para el ensayo de actividad de CTL.
Resultados
Expresión mejorada de HIG2 y URLC10 en los cánceres
Los datos del perfil de expresión génica globales, obtenidos a partir de diversos cánceres utilizando la micro-matriz de ADNc revelaron que la expresión de HIG2 (GenBank Nº de acceso NM_013332; SEQ ID NO: 3) y URLC10 (GenBank Nº de acceso NM_017527; SEQ ID NO: 5) fue elevada. La expresión de HIG2 fue elevada válidamente en 19 de 20 cánceres renales y 7 de 9 tumores de tejidos blandos en comparación con tejidos normales correspondientes. La expresión de URLC10 fue elevada válidamente en 29 de 29 cánceres de vejiga, 15 de 16 cánceres de cuello uterino, 7 de 7 carcinomas colangiocelulares, 7 de 19 cánceres de esófago, 3 de 3 cáncer gástricos, 24 de 27 NSCLC, 15 de 19 osteosarcomas, 4 de 5 cánceres de páncreas y 33 de 43 tumores de tejidos blandos en comparación con los tejidos normales correspondientes.
Inducción de CTL con el péptido de HIG2 restringido con HLA-A0206 y establecimiento de líneas CTL estimuladas con péptidos derivados de HIG2
CTLs para el péptido derivados de HIG2 fueron generados de acuerdo con los protocolos tal como se describen en "Materiales y Métodos". La actividad de CTL específica para péptidos se determinó mediante el ensayo ELISPOT para IFN-gamma (Figura 1). Los resultados en esta memoria muestran que HIG2-A0206-9-4 (SEQ ID NO: 1) demuestra una potente producción de IFN-gamma en comparación con los pocillos de control. Además de ello, las células en los números de pocillos positivos 1, 2, 5, 7, 8, 10, 13 y 14 estimuladas con SEQ ID NO: 1 se expandieron para establecer líneas de CTL. Las actividades de CTL de esas líneas de CTL se determinaron el ensayo ELISA para IFN-gamma (Figura 2). Los resultados en esta memoria muestran que todas las líneas de CTL demuestran una potente producción de IFN-gamma contra las células diana pulsadas con el péptido correspondiente en comparación con las células diana sin el pulso de péptidos. Por lo tanto, HIG2-A0206-9-4 puede inducir potentes líneas de CTL contra las células diana que expresan HLA-A0206.
Establecimiento de clones de CTL estimulados con péptidos derivados de HIG2
La dilución limitante de estas líneas de CTL se realizó de acuerdo con los protocolos recogidos en la sección de "Materiales y Métodos" anterior. El establecimiento de un clon de CTL de la línea de CTL HIG2-A0206-9-4 (SEQ ID NO: 1) se muestra en la Figura 3. Estos clones de CTL tenían actividades de CTL potentes y específicas contra la diana pulsada por péptidos, en comparación con las actividades contra la diana sin pulso de péptidos.
Actividad específica de CTL contra las células diana que expresan HIG2 y HLA-A0206
Los clones de CTL establecidos generados contra HIG2-A0206-9-4 (SEQ ID NO: 1) se examinaron en cuanto a su capacidad para reconocer las células diana que expresan HIG2 y HLA-A0206. La actividad específica de CTL contra COS7 transfectadas tanto con el gen HLA-A0206 como con la molécula HIG2 de longitud completa, que sirve como un modelo específico para las células diana que expresan endógenamente HIG2 y HLA-A0206, se sometió a ensayo utilizando como células efectoras el clon CTL producido por HIG2-A0206-9-4 (SEQ ID NO: 1). COS7 transfectadas con HLA-A0206 pero no HIG2 de longitud completa y pulsadas con otro péptido (HIG2-9-8: YLLGVVLTL) y COS7 transfectadas con HIG2 de longitud completa pero no HLA-A0206 se prepararon como controles. Los clones de CTL que demuestran la actividad de CTL específica más alta contra COS7 eran los transfectados tanto con HIG2 como con HLA-A0206 (Figura 4).
Los resultados en esta memoria demuestran claramente que HIG2-A0206-9-4 (SEQ ID NO: 1) es procesado de forma natural y es presentado en la superficie de la célula diana con la molécula HLA-A0206 y reconoce CTL. Por lo tanto, HIG2-A0206-9-4 puede servir como una vacuna contra el cáncer que fija como objetivo células cancerígenas expresadas con HIG2 en un sujeto cuyo antígeno HLA es HLA-A0206.
Inducción de CTL con el péptido de URLC10 restringido con HLA-A0206 y establecimiento de líneas CTL estimuladas con péptidos derivados de URLC10
CTLs para los péptidos derivados de URLC10 fueron generados de acuerdo con los protocolos tal como se describen en "Materiales y Métodos". La actividad de CTL específica para péptidos se determinó mediante el ensayo ELISPOT para IFN-gamma (Figura 5). Los resultados en esta memoria muestran que URLC10-A0206-10-211 (SEQ ID NO: 2) muestra una potente producción de IFN-gamma en comparación con los pocillos de control. Además de ello, las células en el pocillo positivo número 7 estimuladas con SEQ ID NO: 2 se expandieron y se estableció la línea CTL. La actividad de CTL de la línea de CTL se determinó mediante el ensayo ELISA para IFN-gamma (Figura 6). El resultado en esta memoria muestra que la línea CTL demuestra una potente producción de IFN-gamma contra las células diana pulsadas con el péptido correspondiente en comparación con células diana sin pulso de péptidos. Por lo tanto, URLC10-A0206-10-211 puede inducir una potente línea de CTL.
Establecimiento del clon de CTL estimulado con el péptido derivado de URLC10
La dilución limitante de estas líneas de CTL se realizó de acuerdo con los protocolos recogidos en la sección de "Materiales y Métodos" anterior. El establecimiento del clon de CTL de la línea de CTL URLC10-A0206-10-211 (SEQ ID NO: 2) se muestra en la Figura 7. Este clon de CTL tiene una actividad de CTL potente y específica contra la
5 diana pulsada por el péptido en comparación con las actividades contra la diana sin pulso de péptidos.
Actividad específica de CTL contra las células diana que expresan URLC10 y HLA-A0206
Los clones de CTL establecidos producidos contra URLC10-A0206-10-211 (SEQ ID NO: 2) fueron examinados en cuanto a su capacidad para reconocer las células diana que expresan URLC10 y HLA-A0206. La actividad de CTL específica contra COS7 transfectadas tanto con el gen URLC10 de longitud completa como con la molécula HLA10 A0206, que sirve como un modelo específico para las células diana que expresan endógenamente URLC10 y HLA-A0206, se sometió a ensayo utilizando como células efectoras el clon CTL producido por URLC10-A0206-10-211 (SEQ ID NO: 2). COS 7 transfectadas con URLC10 de longitud completa, pero no HLA-A0206 y COS 7 transfectadas con HLA-A0206 pero no URLC10 de longitud completa se prepararon como controles. El clon de CTL que demuestra la actividad de CTL específica más alta contra COS7 era el transfectado tanto con URLC10 como
15 con HLA-A0206 (Figura 8).
Los resultados en esta memoria demuestran claramente que URLC10-A0206-10-211 SEQ ID NO: 2) es procesado de forma natural y es presentado en la superficie de la célula diana con la molécula HLA-A0206 y reconoce CTL. Además de ello, URLC10-A0206-10-211 puede servir como una vacuna contra el cáncer que fija como objetivo células cancerígenas que expresan URLC10 en un sujeto cuyo antígeno HLA es HLA-A0206.
20 En conclusión, se identificaron nuevos péptidos HIG2-A0206-9-4 (SEQ ID NO: 1) y URLC10-A0206-10-211 (SEQ ID NO: 2) del epítopo HLA-A0206 y demostraron ser aplicables para la inmunoterapia del cáncer en un sujeto cuyo antígeno HLA-A es HLA-A0206.
Aplicabilidad Industrial
La presente invención describe nuevos TAAs, en particular los derivados de HIG2 o URLC10 que inducen
25 respuestas inmunes anti-tumorales potentes y específicos y tienen aplicabilidad a una amplia gama de tipos de cáncer. TAAs de este tipo justifican su posterior desarrollo como vacunas de péptidos contra enfermedades asociadas con HIG2 o URLC10, p. ej., cánceres tales como cáncer de vejiga, cáncer de cuello uterino, carcinoma colangiocelular, cáncer de esófago, cáncer gástrico, el cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), osteosarcoma, cáncer de páncreas , carcinoma renal y tumores de tejidos blandos.
30
Claims (1)
-
imagen1 imagen2
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US8997208P | 2008-08-19 | 2008-08-19 | |
| US89972P | 2008-08-19 | ||
| PCT/JP2009/003897 WO2010021112A1 (en) | 2008-08-19 | 2009-08-14 | Hig2 and urlc10 epitope peptide and vaccines containing the same |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2566011T3 true ES2566011T3 (es) | 2016-04-08 |
Family
ID=41707003
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES09808048.4T Active ES2566011T3 (es) | 2008-08-19 | 2009-08-14 | Péptido de epítopo HIG2 y URLC10 y vacunas que contienen el mismo |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9119800B2 (es) |
| EP (1) | EP2328600B9 (es) |
| JP (1) | JP5633025B2 (es) |
| KR (1) | KR101713581B1 (es) |
| CN (2) | CN104958753B (es) |
| AU (1) | AU2009283763B2 (es) |
| BR (1) | BRPI0917391A2 (es) |
| CA (1) | CA2734467C (es) |
| DK (1) | DK2328600T3 (es) |
| ES (1) | ES2566011T3 (es) |
| HK (1) | HK1157204A1 (es) |
| IL (1) | IL211117A (es) |
| MX (2) | MX337756B (es) |
| RU (1) | RU2529373C2 (es) |
| SG (2) | SG10201610206VA (es) |
| TW (2) | TWI580431B (es) |
| WO (1) | WO2010021112A1 (es) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TWI438207B (zh) * | 2007-02-21 | 2014-05-21 | Oncotherapy Science Inc | 表現腫瘤相關抗原之癌症的胜肽疫苗 |
| TW201008574A (en) | 2008-08-19 | 2010-03-01 | Oncotherapy Science Inc | INHBB epitope peptides and vaccines containing the same |
| CN103415620B (zh) * | 2010-11-17 | 2016-10-12 | 艾杜罗生物科技公司 | 诱导针对EGFRvIII的免疫应答的方法和组合物 |
| JP6255594B2 (ja) | 2012-07-10 | 2018-01-10 | オンコセラピー・サイエンス株式会社 | Ｔｈ１細胞のＬＹ６Ｋエピトープペプチドおよびこれを含有するワクチン |
| RU2700881C2 (ru) | 2014-08-04 | 2019-09-23 | Онкотерапи Сайенс, Инк. | Пептид, полученный из urlc10, и содержащая его вакцина |
| JP7181676B2 (ja) | 2015-08-10 | 2022-12-01 | 東レ株式会社 | 免疫誘導剤 |
| RU2022100330A (ru) | 2015-08-12 | 2022-01-19 | Онкотерапи Сайенс, Инк. | Пептид, полученный из depdc1, и содержащая его вакцина |
| CN110741016A (zh) | 2017-04-26 | 2020-01-31 | 优瑞科生物技术公司 | 嵌合抗体/t-细胞受体构筑体及其用途 |
| PL3538645T3 (pl) | 2017-06-20 | 2021-11-08 | Institut Curie | Komórki odpornościowe z defektem suv39h1 |
| CN115300609A (zh) * | 2021-05-08 | 2022-11-08 | 西湖大学 | 缺氧诱导脂滴相关蛋白(hilpda)在预防或治疗高血脂相关疾病中的应用 |
Family Cites Families (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20070014787A1 (en) | 1998-07-15 | 2007-01-18 | Human Genome Sciences, Inc. | 71 human secreted proteins |
| AU6318300A (en) * | 1999-08-05 | 2001-03-05 | Kyogo Itoh | Tumor antigen |
| WO2001023426A2 (en) | 1999-09-30 | 2001-04-05 | Varian Associates, Inc. | Hypoxia-related human genes, proteins, and uses thereof |
| MXPA03003151A (es) | 2000-10-13 | 2003-08-19 | Eos Biotechnology Inc | Metodos de diagnostico de cancer de prostata, composiciones y metodos para seleccionar moduladores de cancer de prostata. |
| US20030232350A1 (en) | 2001-11-13 | 2003-12-18 | Eos Biotechnology, Inc. | Methods of diagnosis of cancer, compositions and methods of screening for modulators of cancer |
| US20070015271A1 (en) | 2002-04-04 | 2007-01-18 | Rosen Craig A | Human secreted proteins |
| US20060024692A1 (en) | 2002-09-30 | 2006-02-02 | Oncotherapy Science, Inc. | Method for diagnosing non-small cell lung cancers |
| TW200413725A (en) | 2002-09-30 | 2004-08-01 | Oncotherapy Science Inc | Method for diagnosing non-small cell lung cancers |
| WO2005019258A2 (en) | 2003-08-11 | 2005-03-03 | Genentech, Inc. | Compositions and methods for the treatment of immune related diseases |
| JP4614952B2 (ja) | 2003-08-20 | 2011-01-19 | オンコセラピー・サイエンス株式会社 | 腎細胞癌（ｒｃｃ）の潜在的な新規治療標的としての低酸素誘導タンパク質２（ｈｉｇ２） |
| WO2005123122A1 (ja) * | 2004-06-21 | 2005-12-29 | Green Peptide Co., Ltd. | 癌治療ペプチドワクチン |
| EP2295601A1 (en) | 2005-02-10 | 2011-03-16 | Oncotherapy Science, Inc. | Method of diagnosing bladder cancer |
| PT2325305E (pt) | 2005-02-25 | 2014-04-29 | Oncotherapy Science Inc | Vacinas peptídicas para cancros do pulmão que expressam polipéptidos ttk, urlc10 ou koc1 |
| EP1854473A1 (en) | 2005-03-03 | 2007-11-14 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Preventive/therapeutic agent for cancer |
| EP1907580A2 (en) | 2005-07-28 | 2008-04-09 | Oncotherapy Science, Inc. | Method for diagnosing and treating renal cell carcinoma |
| US20080306243A1 (en) | 2005-09-07 | 2008-12-11 | Nec Corporation | Hla-Binding Peptide, and Dna Fragment and Recombinant Vector Coding for Said Hla-Binding Peptide |
| JP4840858B2 (ja) * | 2006-03-16 | 2011-12-21 | 学校法人慶應義塾 | 癌ワクチン |
| MX2008015939A (es) | 2006-06-16 | 2009-02-11 | Univ Kumamoto | Peptidos antigeneticos de rechazo de tumor derivados de sparc y medicamentos que comprenden los mismos. |
| TWI438207B (zh) * | 2007-02-21 | 2014-05-21 | Oncotherapy Science Inc | 表現腫瘤相關抗原之癌症的胜肽疫苗 |
| US20100291091A1 (en) | 2007-07-30 | 2010-11-18 | ONCOTHERAPY SCIENCE ,inc. | Cancer associated gene ly6k |
| TW201000115A (en) | 2008-06-11 | 2010-01-01 | Oncotherapy Science Inc | IQGAP3 epitope peptides and vaccines containing the same |
| TW201008574A (en) | 2008-08-19 | 2010-03-01 | Oncotherapy Science Inc | INHBB epitope peptides and vaccines containing the same |
-
2009
- 2009-08-13 TW TW103132024A patent/TWI580431B/zh active
- 2009-08-13 TW TW098127226A patent/TWI543767B/zh active
- 2009-08-14 MX MX2011001883A patent/MX337756B/es active IP Right Grant
- 2009-08-14 ES ES09808048.4T patent/ES2566011T3/es active Active
- 2009-08-14 CN CN201510236002.5A patent/CN104958753B/zh active Active
- 2009-08-14 EP EP09808048.4A patent/EP2328600B9/en active Active
- 2009-08-14 KR KR1020117005809A patent/KR101713581B1/ko active IP Right Grant
- 2009-08-14 CN CN200980141320.6A patent/CN102186491B/zh active Active
- 2009-08-14 SG SG10201610206VA patent/SG10201610206VA/en unknown
- 2009-08-14 CA CA2734467A patent/CA2734467C/en active Active
- 2009-08-14 SG SG2013062690A patent/SG193806A1/en unknown
- 2009-08-14 US US13/059,618 patent/US9119800B2/en active Active
- 2009-08-14 MX MX2013010331A patent/MX355054B/es unknown
- 2009-08-14 AU AU2009283763A patent/AU2009283763B2/en not_active Ceased
- 2009-08-14 RU RU2011110376/10A patent/RU2529373C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2009-08-14 BR BRPI0917391A patent/BRPI0917391A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2009-08-14 JP JP2011507735A patent/JP5633025B2/ja active Active
- 2009-08-14 DK DK09808048.4T patent/DK2328600T3/en active
- 2009-08-14 WO PCT/JP2009/003897 patent/WO2010021112A1/en active Application Filing
-
2011
- 2011-02-08 IL IL211117A patent/IL211117A/en not_active IP Right Cessation
- 2011-10-26 HK HK11111564.0A patent/HK1157204A1/zh not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2566011T3 (es) | Péptido de epítopo HIG2 y URLC10 y vacunas que contienen el mismo | |
| TWI781928B (zh) | 新抗原及其使用方法 | |
| ES2415958T3 (es) | Vacunas de péptidos para cánceres que expresan los polipéptidos MPHOSPH1 ó DEPDC1 | |
| ES2459492T3 (es) | Vacunas de péptidos para cánceres de pulmón que expresan polipéptidos TTK, URLC10 o KOC1 | |
| ES2413079T3 (es) | Métodos y composiciones para desencadenar respuestas inmunitarias multivalentes contra epítopos dominantes y subdominantes expresados en células cancerosas y estroma tumoral | |
| JP5435938B2 (ja) | ワクチン接種のための天然ペプチド及びそれらの最適化された誘導体の使用 | |
| TW201008574A (en) | INHBB epitope peptides and vaccines containing the same | |
| ES2618896T3 (es) | Péptidos de FOXM1 y vacunas que contienen los mismos | |
| TW200906850A (en) | TEM8 peptides and vaccines comprising the same | |
| JP5789820B2 (ja) | 血管内皮増殖因子受容体１に由来するエピトープ・ペプチドおよびこれらのペプチドを含むワクチン | |
| TW201000120A (en) | CDCA1 epitope peptides and vaccines containing the same | |
| KR20170002563A (ko) | 돌연변이 ras 펩타이드를 포함하는 펩타이드 백신 및 화학 요법제 | |
| Fang et al. | The potential of phage display virions expressing malignant tumor specific antigen MAGE-A1 epitope in murine model | |
| TWI441648B (zh) | Ｆｏｘｐ３胜肽疫苗 | |
| TW201000119A (en) | MYBL2 epitope peptides and vaccines containing the same | |
| MX2010013680A (es) | Peptidos del epitope iqgap3 y vacunas que los contienen. | |
| ES2541325T3 (es) | Péptido de epítopo RAB6KIFL/KIF20A y vacunas que contienen el mismo | |
| ES2631952T3 (es) | Péptidos CDC45L y vacunas que incluyen los mismos | |
| ES2655437T3 (es) | Péptidos de ECT2 y vacunas que incluyen los mismos | |
| ES2913148T3 (es) | Péptidos con epítopos WDRPUH y vacunas que los contienen | |
| EP1696950A2 (en) | Vaccine comprising an angiomotin or a polynucleotide encoding an angiomotin and its use for the treatment of angiogenic-related disorders | |
| RU2773273C2 (ru) | Неоантигены и способы их использования | |
| TWI837869B (zh) | 新抗原及其使用方法 |