ES2548141T3 - Compuestos químicos - Google Patents

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Abstract

Un compuesto de Fórmula (III):**Fórmula** en la que: R41 se selecciona entre el grupo que consiste en: hidrógeno, metilo, trifluorometilo, etilo, propilo, isopropilo, terc-butilo, sec-butilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, metoxi, etoxi, isopropoxi, tiometilo, tioetilo, -N(R55)(R56), donde R55 es H y R56 se seleccionan entre: fenilo, etilo, propilo, isopropilo, terc-butilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, alquilo C1-C6, y alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido con fenilo o ciclohexilo, amino, fenilo, fenilo sustituido con uno a tres R47, tiazolilo, tienilo, furanilo, piridilo, azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piranilo, hexahidro-1H-azepina, heterocicloalquilo sustituido con uno a tres R48, donde el heterocicloalquilo se selecciona entre: azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piranilo y hexahidro-1H-azepina; R42 se selecciona entre el grupo que consiste en: hidrógeno, halo, furanilo, -NH-(CH2)n-R61, donde R61 se selecciona entre: hidrógeno, trifluorometilo, fenilo, fenilo sustituido con uno a tres R47, fenoxi, fenoxi sustituido con uno a tres R47, heteroarilo y heteroarilo sustituido con uno a tres R47, y n es 1, 2 ó 3, y -O-(CH2)n-R61, donde R61 se selecciona entre: hidrógeno, trifluorometilo, fenilo, fenilo sustituido con uno a tres R47, fenoxi, fenoxi sustituido con uno a tres R47, heteroarilo y heteroarilo sustituido con uno a tres R47, y n es 1, 2 ó 3, R43 se selecciona entre: hidrógeno, -NH2 y alquilo C1-C3; y R44 se selecciona entre: hidrógeno, NH2 y NH-alquilo C1-C3; donde, cada R48 se selecciona independientemente entre: hidroxi, ciano, oxo, flúor, cloro, trifluorometilo, alquilo C1-C4, cicloalquilo C3-C7 pirazolilo, imidazolilo, azabenzoimidazolilo, benzoimidazolilo, benzoimidazolilo sustituido con uno a tres R47, 1H-benzoimidazol-2-ilo, 4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol-2-ilo, 5-cloro-1H-benzoimidazol-2-ilo, 5-fluoro-1H-benzoimidazol-2-ilo, 5-metil-1H-benzoimidazol-2-ilo, 5-metoxi-1H-benzoimidazol-2-ilo, 1H-imidazo[4,5-c]piridin-2-ilo, 1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilo, 4-(1,1-dimetiletil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-fenil-1H-imidazol-2-ilo, 4-metil-5-fenil-1H-imidazol-2-ilo, 4-(2-clorofenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(3-clorofenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(4-clorofenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(3-metoxifenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(4-metoxifenil)-1H-imidazol-2-ilo, hidroxialquilo C1-C4, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2.

Description

Compuestos químicos
Campo de la invención
La presente invención se refiere a derivados de 6-(4-pirimidinil)-1H-indazol que son inhibidores de la actividad de la serina/treonina quinasa, PDK1. La presente invención también se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos y a dichos compuestos para uso en el tratamiento del cáncer, enfermedades metabólicas e inmunes.
Antecedentes de la invención
La ruta de la fosfoinositida-3 quinasa (PI3K) regula funciones celulares críticas tales como la progresión del ciclo celular, el crecimiento, la supervivencia y la diferenciación, así como las acciones metabólicas de la insulina (Hennessy et al. Nature Rev. Drug Dis. 4: 988-1004 (2005)). La modulación de la actividad de las quinasas aguas abajo de PI3K está mediada por la quinasa dependiente de 3-fosfoinositida 1 (PDK1), una serina/treonina quinasa de 63 kD que se expresa de forma ubicua en tejidos humanos (Storz y Toker, Front. Biosci. 7: 886-902 (2002). La PDK1 contiene un dominio quinasa amino-terminal, una región enlazadora y un dominio de homología con pleckstrina (PH) en el extremo carboxilo-terminal. El dominio PH se une a los productos lipídicos de PI3K (fostadinilinositol 3,4,5-trifosfato, PIP3) con gran afinidad y facilita la colocalización de la quinasa con sus sustratos que contienen dominio PH. Los sustratos de PDK1 incluyen muchos de la familia de proteínas quinasas AGC (dependientes de AMPc, dependientes de GMPc y proteína quinasa C), incluyendo AKT/PKB, p70S6K, proteína quinasa dependiente de AMP cíclico (PKA), proteína quinasa C (PCK), quinasa inducible por suero y glucocorticoides (SGK), proteína quinasa ribosomal p90 (RSK), quinasa activada por p21 1 (PAK1), PRK1/2 y otras (Wick y Liu, Curr. Drug Targets Immune Endocr. Metabol. Disord. 1: 209-221 (2001); Mora et al., Semin. Cell Dev. Biol. 15: 161-170 (2004)). Estudios recientes in vivo con ratones PDK1(-/-) y PDK1(-/+) mostraban que AKT, p70S6K, RSK y proteína quinasa C son mediadores clave de la función de PDK1, regulando diversas funciones celulares (Lawlor et al EMBO J. 21: 3728-3738 (2002); Williams et al., Curr. Biol. 10: 439-448 (2000); Storz y Toker, Front. Biosci. 7: 886-902 (2002)). La activación de estos sustratos por PDK1 conduce a un aumento en la captación de glucosa, la síntesis de proteínas y la inhibición de proteínas proapoptóticas.
Se observa una desregulación de la ruta de la quinasa PI-3 en una diversidad de cánceres. Un número significativo de cánceres poseen mutaciones en genes que dan como resultado una elevación de los niveles de PIP3. Los niveles aumentados de PIP3 conducen a la activación de las quinasas AKT y p70S6K, que promueven la proliferación y la supervivencia aumentada de estas células tumorales. Por ejemplo, se han observado alteraciones genéticas del gen de PI3K que incluyen amplificaciones y mutaciones activantes en diversos cánceres (Hennessey et al., Nature Rev. Cancer 4, 988-1004 (2005)). Una de las mutaciones más comunes que da origen a niveles elevados de PIP3 está en gen de la PIP3 3-fosfatasa PTEN (Leslie y Downes, Cell Signal. 14: 285-295 (2002); Cantley, Science 296: 1655-1657 (2002)). Las mutaciones de PTEN en la línea germinal son responsables de síndromes de cánceres humanos tales como la enfermedad de Cowden (Liaw et al., Nature Genetics 16: 64-67 (1997)). PTEN está delecionada en un gran porcentaje de tumores humanos y líneas celulares tumorales sin PTEN funcional muestran niveles elevados de AKT activada (Li et al. anteriormente, Guldberg et al., Cancer Research 57: 3660-3663 (1997), Risinger et al., Cancer Research 57: 4736-4738 (1997)).
La AKT/PKB (que consiste en 3 miembros de familia, AKT1, AKT2, AKT3) es un sustrato para PDK1 y es un mediador importante de los efectos fisiológicos de la insulina y varios factores de crecimiento incluyendo EGF, PDGF e IGF-1 (Manning y Cantley, Cell 129: 1261-1274 (2007)). La AKT se activa por acontecimientos de fosforilación que suceden en respuesta a la señalización de PI3K. La PI3K fosforila los fosfolípidos de inositol de membrana, generando los segundos mensajeros PIP3 y fosfatidilinositol 3,4-difosfato, que se ha demostrado que se unen al dominio PH de AKT. El modelo actual de activación de AKT propone el reclutamiento de la enzima hacia la membrana por PIP3 a través del dominio PH de PDK1. La colocalización de AKT y PDK1 en la membrana permite la modificación de AKT y la activación por PDK1 y posiblemente otras quinasas (Hemmings, Science 275: 628-630 (1997); Hemmings, Science 276: 534 (1997); Downward, Science 279: 673-674 (1998)). La fosforilación de AKT1 sucede en dos sitios reguladores, Thr308 por PDK1 en el bucle de activación del dominio catalítico y Ser473 (muy probablemente por el complejo TORC2 mTOR) cerca del extremo carboxi terminal (Alessi et al., EMBO J. 15: 65416551 (1996); Meier et al., J. Biol. Chem. 272: 30491-30497 (1997)). El análisis de los niveles de AKT en tumores humanos reveló que AKT se sobreexpresa en un número significativo de cánceres ováricos (Cheung et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89: 9267-9271 (1992)) y pancreáticos (Cheung et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 93: 36363641 (1996)). También se descubrió que la AKT se sobreexpresaba en líneas celulares de cáncer de mama y próstata (Nakatani et al. J. Biol. Chem. 274: 21528-21532 (1999)). Más recientemente, se detectó una mutación transformante en el dominio PH de AKT1 en cánceres de mama, colorrectal y ovárico humanos (Carpten et al., Nature 448: 439-444 (2007)). Los inhibidores específicos de PI3K o mutantes de AKT negativos dominantes suprimen las actividades promotoras de la supervivencia de factores de crecimiento o citocinas. Se ha descrito anteriormente que los inhibidores de PI3K (LY294002 o wortmannina) bloqueaban la activación de AKT. Además, la introducción de mutantes de PI3K o AKT constitutivamente activos promueve la supervivencia celular en condiciones en las que las células normalmente experimentan muerte celular apoptótica (Kulik et al., Mol. Cell Biol. 17 (3): 1595
1606 (1997); Dudek et al, Science 275(5300): 661-665 (1997)).
Los moduladores de PDK1 afectan a la actividad de una diversidad de sustratos aparte de AKT. Estos sustratos carecen del dominio PH que se observa en AKT y, por lo tanto, no dependen de la colocalización con PDK1 en membranas celulares. Son sustratos de PDK1 independientes de dominio PH importantes PKC, RSK y p70 S6K. Las RSK se han implicado recientemente en promover la transformación hematopoyética mediada por FGFR3 (Kang et al., Cancer Cell 12: 201-214 (2007)). La PDK1 activa la RSK por fosforilación de su dominio quinasa amino terminal de una forma dependiente de ERK (Cohen et al., Nature Chem. Biol. 3 (3): 156-160 (2007)). Además, estudios recientes pusieron de manifiesto papeles adicionales de la PDK1 que podían ser importantes durante la oncogénesis y la metástasis, tales como motilidad y migración celular (Primo et al., J. Cell Biol. 176 (7): 1035-1047 (2007); Pinner y Sahai, Nature Cell Biol. 10 (2): 127-137 (2008)).
En su conjunto, estas observaciones sugieren un papel beneficioso para un inhibidor de PDK1 en el tratamiento de células cancerosas. De acuerdo con esto, una mutación hipomórfica de PDK1 suprime la oncogénesis en ratones PTEN+/-(Bayascas et al., Curr. Biol. 15, 1839-1846 (2005)). Además, la reducción basada en moléculas antisentido de los niveles de PDK1 en células tumorales conduce a una proliferación de células tumorales disminuida y a una apoptosis aumentada (Flynn et al. Curr. Biol. 10: 1439-1442 (2000)) y los inhibidores de quinasa de molécula pequeña de PDK1 inhiben el crecimiento de células tumorales in vitro e in vivo (Feldman et al., J. Biol. Chem. 280: 19867-19874 (2005); Gopalsamy et al. (J. Med. Chem. 50, 5547-5549 (2007); Tamguney et al. Exp. Cell Res. 314: 2299-2312 (2008)). Por último, puesto que se demostró que el knockdown de PDK1 por ARNsi sensibiliza células cancerosas de mama a tamoxifeno (Irons et al., Biochem. J. 417: 361-370 (2009)), la inhibición de PDK1 puede tener un beneficio terapéutico en combinación con otros tratamientos anticáncer.
Se describe que la PDK1 es un mediador de la activación de células T a través de la activación de NF-kB (Lee et al. Science 308: 114-118 (2005)) y también un regulador del desarrollo de células T (Hinton et. al. Nat. Immunol. 5 (5), 539-545 (2004)). Los datos de bibliografía también sugieren que un inhibidor de PDK1 puede ser útil para el tratamiento de enfermedades autoinmunes y rechazo de trasplantes (por ejemplo, Park et al. Nat. Immunol. 10 (2), 158-666 (2009)).
Dada la estrecha asociación de PDK1 con las rutas de AKT y PI3K, un inhibidor de PDK1 puede tener un uso beneficioso en el tratamiento de enfermedades relacionadas con el metabolismo y el envejecimiento, por ejemplo, a través de la inhibición aguas abajo de la señalización de S6K1 (Selman et al. Science 326: 140-144 (2009)).
WO 2005/123688 A2 describe 3-aminoindazoles como inhibidores de SGK y su uso para el tratamiento de enfermedades relacionadas con SGK y enfermedades como la diabetes, la obesidad, el síndrome metabólico (dislipidemia), hipertonía sistémica y pulmonar, enfermedades cardiovasculares y enfermedades renales, y en general cualquier tipo de fibrosis y procesos inflamatorios.
Un objeto de la presente invención es proporcionar nuevos compuestos que sean inhibidores de PDK1.
También es un objeto de la presente invención proporcionar composiciones farmacéuticas que comprendan dichos compuestos y un vehículo farmacéutico.
También es un objeto de la presente invención proporcionar tales inhibidores de actividad de PDK1 para uso en el tratamiento de cáncer, enfermedades inmunes y metabólicas.
Sumario de la invención
La invención se refiere a derivados de 6-(4-pirimidinil)-1H-indazol. En concreto, la invención se refiere a compuestos de acuerdo con la Fórmula I:
donde R41-R44 se definen a continuación.
Los compuestos de la invención son inhibidores de PDK1 y pueden ser útiles en el tratamiento de trastornos caracterizados por quinasas ACG constitutivamente activadas tales como enfermedades metabólicas, inmunes y cáncer y, convenientemente, cánceres de mama, colon y pulmón. Por consiguiente, la invención se refiere además a
composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de la invención. La invención se refiere además a métodos de inhibición de la actividad de PDK1 y a un compuesto de la invención o una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención para uso en el tratamiento de trastornos asociados con la misma. También se describen nuevos procesos y nuevos intermedios útiles en la preparación de los compuestos inhibidores de Akt/PKB de la presente invención. La invención se refiere además a una combinación de los compuestos inhibidores de PDK1 de la presente invención con ingredientes activos adicionales.
Descripción detallada de la invención
Se describen aquí compuestos novedosos de Fórmula (I):
R2 R3
N
R1 N H
N
N
R4
(I) en la que: R1 se selecciona entre: hidrógeno, alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C7, cicloalquilo C3-C7 sustituido con uno a tres R8,
alcoxi C1-C6, mercapto C1-C6, -N(R5)(R6), arilo, arilo sustituido con uno a tres R8, heteroarilo, heteroarilo sustituido con uno a tres R8, heterocicloalquilo y heterocicloalquilo sustituido con uno a tres R8, donde,
R5 es hidrógeno o alquilo C1-C3, R6 se selecciona entre: hidrógeno, arilo, arilo sustituido con uno a tres R7, cicloalquilo C3-C7, cicloalquilo C3-C7 sustituido con uno a tres R8, alquilo C1-C6 y alquilo C1-C6 sustituido con un R9,
donde,
R9 se selecciona entre: fenilo, fenilo sustituido con uno a tres R7, heteroarilo, heteroarilo sustituido con uno a tres R7, cicloalquilo C3-C7, cicloalquilo C3-C7 sustituido con uno a tres R8; R2 se selecciona entre: hidrógeno, halo, -N(R10)-(CH2)n-R11, -O-(CH2)n-R11, -S-(CH2)n-R11; arilo, arilo sustituido con
uno a tres R7, heteroarilo, heteroarilo sustituido con uno a tres R7, cicloalquilo C3-C7, cicloalquilo C3-C7 sustituido con uno a tres R7, heterocicloalquilo, y heterocicloalquilo sustituido con uno a tres R7, donde, R10 es hidrógeno o alquilo C1-C3, R11
se selecciona entre: hidrógeno, alquilo C1-C3, alquilo C1-C3 sustituido con uno a tres R7, cicloalquilo C3-C7, cicloalquilo C3-C7 sustituido con uno a tres R7, arilo, arilo sustituido con uno a tres R7, heteroarilo, heteroarilo sustituido con uno a tres R7, -O-cicloalquilo C3-C7, -O-cicloalquilo C3-C7 sustituido con uno a tres R7, -O-arilo, -O-arilo sustituido con uno a tres R7, -O-heteroarilo y -O-heteroarilo sustituido con uno a tres R7, y
n es 0, 1, 2 ó 3 con la condición de que cuando R11 es -O-cicloalquilo C3-C7, -O-arilo o -O-heteroarilo, n no sea 0; R3 se selecciona entre: hidrógeno, -NH2, alquilo C1-C3, y cicloalquilo C3-C7; y R4 se selecciona entre: hidrógeno, NH2 y NH-alquilo C1-C3; donde, cada R8 se selecciona independientemente entre: hidroxi, alquilo C1-C6, alquilo C1-C6 sustituido con uno a tres R7,
C(O)alquilo C1-C6, cicloalquilo C3-C7, alcoxi C1-C6, amino, alquilamino C1-C4, dialquilamino C1-C4, -alquil C1-C4
NR200R201, arilo, arilo sustituido con uno a tres R7, -alquilarilo C1-C4, -alquilarilo C1-C4 sustituido con uno a tres R7, fenilheteroarilo, fenilheteroarilo sustituido con uno a tres R7, heterocicloalquilo, heterocicloalquilo sustituido con uno a tres R7, heteroarilo, heteroarilo sustituido con uno a tres R7, nitro, ciano, oxo, halo, -CO2R120, -C(O)NR200R201, -alquil C1-C4-OC(O)NR200R201, -OC(O)NR200R201, -OC(O)R200, -NR200C(O)OR301, -alquil C1-C4-NR200C(O)OR301, -NR200C(O)R302, -NR200S(O)2R302, -alquil C1-C4-NR200C(O)R302 y -alquil C1-C4-NR200S(O)2R302,
donde, R120 se selecciona entre: hidrógeno, alquilo C1-C4 y cicloalquilo C3-C7, R200 es hidrógeno o alquilo C1-C3,
R201
se selecciona entre: hidrógeno, alquilo C1-C6, alquilo C1-C6 sustituido con uno a tres R7, cicloalquilo C3-C7, cicloalquilo C3-C7 sustituido con uno a tres R7, -alquil C1-C4-cicloalquilo C3-C7, -alquil C1-C4-cicloalquilo C3-C7 sustituido con uno a tres R7, arilo, arilo sustituido con uno a tres R7, -alquilarilo C1-C4, -alquilarilo C1-C4 sustituido con uno a tres R7, heteroarilo, heteroarilo sustituido con uno a tres R7, -alquilheteroarilo C1-C4, -alquilheteroarilo C1-C4 sustituido con uno a tres R7, heterocicloalquilo, heterocicloalquilo sustituido con uno a tres R7, -alquil C1-C4heterocicloalquilo, -alquil C1-C4-heterocicloalquilo sustituido con uno a tres R7,
R301 se selecciona entre: alquilo C1-C6, alquilo C1-C6 sustituido con uno a tres R7, cicloalquilo C3-C7, cicloalquilo C3-C7 sustituido con uno a tres R7, -alquilarilo C1-C4, -alquilarilo C1-C4 sustituido con uno a tres R7, -alquil C1-C4cicloalquilo C3-C7, -alquil C1-C4-cicloalquilo C3-C7 sustituido con uno a tres R7, y
R302
se selecciona entre: hidrógeno, alquilo C1-C6, alquilo C1-C6 sustituido con uno a tres R7, cicloalquilo C3-C7, cicloalquilo C3-C7 sustituido con uno a tres R7, -alquil C1-C4-cicloalquilo C3-C7, -alquil C1-C4-cicloalquilo C3-C7 sustituido con uno a tres R7, arilo, arilo sustituido con uno a tres R7, -alquilarilo C1-C4, -alquilarilo C1-C4 sustituido con uno a tres R7, heteroarilo, heteroarilo sustituido con uno a tres R7, -alquilheteroarilo C1-C4, -alquilheteroarilo C1-C4 sustituido con uno a tres R7, heterocicloalquilo, heterocicloalquilo sustituido con uno a tres R7, -alquil C1-C4heterocicloalquilo, -alquil C1-C4-heterocicloalquilo sustituido con uno a tres R7; y
cada R7 se selecciona independientemente entre: halo, ciano, hidroxi, amino, alquilamino C1-C4, dialquilamino C1-C4, alquilo C1-C3 y alcoxi C1-C3;
o una sal de los mismos. Adecuadamente, R1 es alquilo C1-C6. Adecuadamente, R1 es metilo, etilo, propilo, isopropilo, terc-butilo o sec-butilo. Adecuadamente, R1 es cicloalquilo C3-C7. Adecuadamente, R1 es ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo. Adecuadamente, R1 es alcoxi C1-C6. Adecuadamente, R1 es metoxi, etoxi e isopropoxi. Adecuadamente, R1 es mercapto C1-C6. Adecuadamente, R1 es tiometilo. Adecuadamente, R1 es -N(R5)(R6) donde R5 es H y R6 es como se ha definido en la Fórmula (I) anterior.
Adecuadamente, R6 es fenilo, etilo, propilo, isopropilo, terc-butilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo o alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido con fenilo o ciclohexilo. Adecuadamente, R1 es NH2. Adecuadamente, R1 es fenilo opcionalmente sustituido con uno a tres R7. Adecuadamente, R1 es fenilo sin sustituir.
Adecuadamente, R1 es heteroarilo. Adecuadamente, R1 es tiazolilo, tienilo, furanilo y piridilo. Adecuadamente, R1 es heterocicloalquilo opcionalmente sustituido con uno a tres R8. Adecuadamente, R1 es azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piranilo o hexahidro-1H-azepina, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno a tres R8.
Adecuadamente, R2 es H, -NH-(CH2)n-R11 o -O-(CH2)n-R11; donde: R11 es H, CF3, fenilo opcionalmente sustituido con uno a tres R7, fenoxi opcionalmente sustituido con uno a tres R7, o
heteroarilo opcionalmente sustituido con uno a tres R7; y n es 1, 2 ó 3. Adecuadamente, R2 es -NH-(CH2)n-R11 donde: R11 es H, CF3, fenilo opcionalmente sustituido con uno a tres R7,
fenoxi sin sustituir o heteroarilo opcionalmente sustituido con uno a tres R7; y n es 1, 2 ó 3. Adecuadamente, R11 es fenilo opcionalmente sustituido con uno a tres R7, fenoxi sin sustituir, pirazolilo opcionalmente sustituido con uno a tres R7 o piridinilo opcionalmente sustituido con uno a tres R7; y n es 1, 2 ó 3.
Adecuadamente, R2 es -O-(CH2)n-R11 donde R11 es H, CF3, fenilo opcionalmente sustituido con uno a tres R7 o fenoxi opcionalmente sustituido con uno a tres R7; y n es 1, 2 ó 3.
Adecuadamente, R2 es metoxi, etoxi, metilamino o etilamino.
Adecuadamente, R2 es heteroarilo. Adecuadamente, R2 es furanilo.
Adecuadamente, R8 es hidroxi, ciano, oxo, flúor o trifluorometilo.
Adecuadamente, R8 es trifluorometilo.
Adecuadamente, R8 es alquilo C1-C4. Adecuadamente, R8 es metilo, etilo o isopropilo.
Adecuadamente, R8 es cicloalquilo C3-C8. Adecuadamente, R8 es ciclopropilo.
Adecuadamente, R8 es heteroarilo. Adecuadamente, R8 es pirazolilo, imidazolilo, azabenzoimidazolilo y benzoimidazolilo opcionalmente sustituido hasta con tres grupos R7 como se ha definido en la Fórmula (I) anterior. Adecuadamente, R8 es 1H-benzoimidazol-2-ilo, 4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol-2-ilo, 5-cloro-1H-benzoimidazol2-ilo, 5-fluoro-1H-benzoimidazol-2-ilo, 5-metil-1H-benzoimidazol-2-ilo, 5-metoxi-1H-benzoimidazol-2-ilo, 1Himidazo[4,5-c]piridin-2-ilo, 1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilo, 4-(1,1-dimetiletil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-fenil-1H-imidazol-2-ilo, 4-metil-5-fenil-1H-imidazol-2-ilo, 4-(2-clorofenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(3-clorofenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(4-clorofenil)1H-imidazol-2-ilo, 4-(3-metoxifenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(4-metoxifenil)-1H-imidazol-2-ilo.
Adecuadamente, R8 es hidroxialquilo C1-C4. Adecuadamente, R8 es hidroxilmetilo o hidroxietilo.
Adecuadamente, R8 es -C(O)NR200R201. Adecuadamente, R8 es -C(O)NH2, -C(O)NHCH3 o -C(O)N(CH3)2.
Adecuadamente, R8 es -C(O)NR200R201 donde R200 es hidrógeno, y R201 es como se ha definido en la Fórmula (I)
R201
anterior. Adecuadamente, es metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, isopentilo, ciclopentilo, ciclohexilo, 2-metilciclohexilo, 3-metilciclohexilo, 4-metilciclohexilo, 4-etilciclohexilo, 4-hidroxiciclohexilo, (1R)-1ciclohexiletilo, fenilo, 4-fluorofenilo, 2-metilfenilo, 3-metilfenilo, 4-metilfenilo, 2-fluorofenilo, 3-fluorofenilo, 3,4difluorofenilo, 4-clorofenilo, 3-clorofenilo, 3-metoxifenilo, 4-metoxifenilo, piranilo, feniletilo, bencilo, (1S)-1-feniletilo, (1R)-1-feniletilo, 1-metil-1-feniletilo, 2-metoxibencilo, 3-metoxibencilo, 4-metoxilbencilo, 2-fluorobencilo, 3fluorobencilo, 4-metilbencilo, 4-fluorobencilo, 4-piridinilmetilo, 1-metil-1H-pirazol-5-ilo, 1,3-dimetil-1H-pirazol-5-ilo.
R8 R200
Adecuadamente, es -OC(O)NHR200 donde es como se ha definido en la Fórmula (I) anterior. Adecuadamente, R200 es como se ha definido en la Fórmula (I) anterior. Adecuadamente, R200 es isopropilo, ciclobutilo, terc-butilo, ciclopentilo, ciclohexilo, fenilo y bencilo.
R8 R301
Adecuadamente, es -NHC(O)OR301 donde es como se ha definido en la Fórmula (I) anterior. Adecuadamente, R301 es isopropilo, ciclobutilo, terc-butilo, ciclopentilo o ciclohexil bencilo.
Esta invención se refiere a compuestos de Fórmula (III):
en la que: R41 se selecciona entre el grupo que consiste en: hidrógeno, metilo, trifluorometilo, etilo, propilo,
isopropilo, terc-butilo, sec-butilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, metoxi, etoxi, isopropoxi, tiometilo, tioetilo, -N(R55)(R56), donde R55 es H y R56 se selecciona entre: fenilo, etilo, propilo, isopropilo, terc-butilo, ciclopropilo,
ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, alquilo C1-C6 y alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido con fenilo o ciclohexilo, amino, fenilo, fenilo sustituido con uno a tres R47, tiazolilo, tienilo, furanilo, piridilo, azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piranilo, hexahidro-1H-azepina,
R48
heterocicloalquilo sustituido con uno a tres , donde el heterocicloalquilo se selecciona entre: azetidinilo,
pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piranilo y hexahidro-1H-azepina;
R42 se selecciona entre el grupo que consiste en:
hidrógeno,
halo,
furanilo, -NH-(CH2)n-R61, donde R61 se selecciona entre: hidrógeno, trifluorometilo, fenilo, fenilo sustituido con uno a tres R47, fenoxi, fenoxi sustituido con uno a tres R47, heteroarilo y heteroarilo sustituido con uno a tres R47, y n es 1, 2 ó 3, y
-O-(CH2)n-R61, donde R61 se selecciona entre: hidrógeno, trifluorometilo, fenilo, fenilo sustituido con uno a tres R47, fenoxi, fenoxi sustituido con uno a tres R47, heteroarilo y heteroarilo sustituido con uno a tres R47, y n es 1, 2 ó 3.
R43 se selecciona entre: hidrógeno, -NH2 y alquilo C1-C3; y R44 se selecciona entre: hidrógeno, NH2 y NH-alquilo C1-C3; donde,
5 cada R48 se selecciona independientemente entre: hidroxi, ciano, oxo, flúor,
10 cloro, trifluorometilo, alquilo C1-C4, cicloalquilo C3-C7 pirazolilo,
15 imidazolilo, azabenzoimidazolilo, benzoimidazolilo, benzoimidazolilo sustituido con uno a tres R47, 1H-benzoimidazol-2-ilo,
20 4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol-2-ilo, 5-cloro-1H-benzoimidazol-2-ilo, 5-fluoro-1H-benzoimidazol-2-ilo, 5-metil-1H-benzoimidazol-2-ilo, 5-metoxi-1H-benzoimidazol-2-ilo,
25 1H-imidazo[4,5-c]piridin-2-ilo, 1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilo, 4-(1,1-dimetiletil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-fenil-1H-imidazol-2-ilo, 4-metil-5-fenil-1H-imidazol-2-ilo,
30 4-(2-clorofenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(3-clorofenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(4-clorofenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(3-metoxifenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(4-metoxifenil)-1H-imidazol-2-ilo,
35 hidroxialquilo C1-C4, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3,
-
C(O)N(CH3)2.
-
C(O)NR800R801, donde R800 es hidrógeno y R801 se selecciona entre: etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec-butilo, isopentilo, ciclopentilo, ciclohexilo, 2-metilciclohexilo, 3-metilciclohexilo, 4-metilciclohexilo, 4-etilciclohexilo, 4hidroxiciclohexilo, (1R)-1-ciclohexiletilo, fenilo, 4-fluorofenilo, 2-metilfenilo, 3-metilfenilo, 4-metilfenilo, 2-fluorofenilo, 3-fluorofenilo, 3,4-difluorofenilo, 4-clorofenilo, 3-clorofenilo, 3-metoxifenilo, 4-metoxifenilo, piranilo, feniletilo, bencilo, (1S)-1-feniletilo, (1R)-1-feniletilo, 1-metil-1-feniletilo, 2-metoxibencilo, 3-metoxibencilo, 4-metoxilbencilo, 2fluorobencilo, 3-fluorobencilo, 4-metilbencilo, 4-fluorobencilo, 4-piridinilmetilo, 1-metil-1H-pirazol-5-ilo y 1,3-dimetil1H-pirazol-5-ilo,
R810
-
OC(O)NHR810, donde se selecciona entre: metilo, etilo, isopropilo, ciclobutilo, terc-butilo, ciclopentilo,
ciclohexilo, fenilo y bencilo, y -NHC(O)OR901, donde R901 se selecciona entre: metilo, etilo, isopropilo, ciclobutilo, terc-butilo, ciclopentilo, ciclohexilo y bencilo; y
cada R47 se selecciona independientemente entre: halo, ciano, hidroxi, amino, alquilamino C1-C4, dialquilamino C1-C4, alquilo C1-C3 y
alcoxi C1-C3;
o una sal de los mismos. Esta invención también se refiere a sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de Fórmula (III). Adecuadamente, el compuesto de Fórmula (III) no es (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4
pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida.
Adecuadamente, el compuesto de Fórmula (III) no es (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida. Son compuestos incluidos en la presente invención: 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-fenil-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(fenilmetil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-[2-Amino-6-(metiltio)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(4-tiomorfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2,4-pirimidinadiamina; 6-[2-Amino-6-(4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-etil-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(1-metiletil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-[2-Amino-6-(1-piperidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-ciclopentil-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-ciclohexil-2,4-pirimidinadiamina; 6-[2-Amino-6-(1-azetidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-[2-(Metilamino)-6-(1-piperidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina;
6-(2-Amino-6-metil-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-6-fenil-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-(2-feniletil)-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-(3-fenilpropil)-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[2-(feniloxi)etil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(5-metil-1H-pirazol-4-il)propil]-1H-indazol-3,4-diamina; 2-(3-{[3-Amino-6-(2-amino-4-pirimidinil)-1H-indazol-4-il]amino}propil)fenol; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(2-fluorofenil)propil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(4-fluorofenil)propil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(4-piridinil)propil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)propil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(feniloxi)propil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(3-fluorofenil)propil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-[(3-fenilpropil)oxi]-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-{[3-(feniloxi)propil]oxi}-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-[(2,2,2-trifluoroetil)oxi]-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(4-morfolinil)-4-pirimidinil]-N4-(2-feniletil)-1H-indazol-3,4-diamina; 6-[2-Amino-6-(4-morfolinil)-4-pirimidinil]-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(dimetilamino)-4-pirimidinil]-N4-(2-feniletil)-1H-indazol-3,4-diamina; 6-[3-Amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-N4-etil-2,4-pirimidinadiamina; 6-(2-Amino-6-metil-4-pirimidinil)-N4-(3-fenilpropil)-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-amino-6-metil-4-pirimidinil)-N4-(2-feniletil)-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(ciclohexilmetil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-{2-Amino-6-[2-(metiloxi)fenil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[2-(fenilmetil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[2-(1-metiletil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(2-metil-1-pirrolidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(2-feniletil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-[2-Amino-6-(hexahidro-1H-azepin-1-il)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(metiloxi)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(2-ciclopropil-1-pirrolidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; Cis-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida; Cis-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[(2-clorofenil)metil]-2,4-pirimidinadiamina;
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-ciclopropil-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(3-fenilpropil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(2-fluorofenil)etil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-{2-[2-(metiloxi)fenil]etil}-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(3-clorofenil)etil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-metil-N4-(2-feniletil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(3-fluorofenil)etil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(2-clorofenil)etil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(2-metilfenil)etil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(3-metilfenil)etil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[1-(fenilmetil)ciclopropil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(1,1-dimetil-2-feniletil)-2,4-pirimidinadiamina; 1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-pirrolidinacarboxamida; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-metil-N4-[(1R)-1-metil-2-feniletil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(2,3-dihidro-1H-inden-1-il)-2,4-pirimidinadiamina; 4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]benzamida; (2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida; {1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo; N-{1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}benzamida; 6-{2-Amino-6-[2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(1,1-dimetiletil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(2-metilpropil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-propil-2,4-pirimidinadiamina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-2-morfolinacarboxamida; (3S,6R)-1-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-N-Ciclohexil-1-[6-(1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[6-(1H-Indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-6-Metil-1-[2-(metilamino)-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-N-Ciclohexil-6-metil-1-[2-(metilamino)-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-6-Metil-1-[2-(metilamino)-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3
piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3
piperidinacarboxamida; cis-1-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-3-pirrolidinacarboxamida; 4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-morfolinacarboxamida; N-({(2R,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)benzamida; N-({(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)bencenosulfonamida; N-({(2R,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)-2,2-dimetilpropanamida; ({(2R,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)carbamato de metilo; N-({(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)metanosulfonamida; N-({(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)ciclohexanosulfonamida; 6-(2-Amino-6-{2-[4-(4-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[2-(4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[2-(4-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-6-{2-[4-(3-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(2-{4-[4-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-3-piperidinacarboxamida; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-metil-N4-fenil-2,4-pirimidinadiamina; 6-{2-Amino-6-[2-(1H-imidazo[4,5-c]piridin-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(2-{4-[3-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-6-{2-[5-(metiloxi)-1H-benzoimidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina; Fenilcarbamato de {(2S,5R)-4-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metilo; 6-{2-Amino-6-[2-(4-metil-5-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[2-(5-cloro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[2-(5-fluoro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida; {(1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de cis-1,1-dimetiletilo; {(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de fenilmetilo; N-{(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}benzamida; N-{(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}-2-fenilacetamida; cis-1-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclopentil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida; Cis-1-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-6-(trifluorometil)-3
piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida; (3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida; {1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de cis-ciclopentilo; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida;
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-fluorofenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(3-metilfenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(3,4-difluorofenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-metilfenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(2-fluorofenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(3-fluorofenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(2-metilfenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-clorofenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[4-(metiloxi)fenil]-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[3-(metiloxi)fenil]-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(3-clorofenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-piridinilmetil)-3-piperidinacarboxamida;
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(ciclohexilmetil)-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-{[4-(metiloxi)fenil]metil}-3
piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclopentil-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[(1R)-1-ciclohexiletil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[(3-fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-[(4-metilfenil)metil]-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[(4-fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(3-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(2-feniletil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(4-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida; 6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 4-(Etiloxi)-6-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina; {(3R,6S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo; {(3R,6S)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo; 6-{2-Amino-6-[(2R,5R)-2-(aminometil)-5-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-((2R,5R)-5-metil-2-{[(fenilmetil)amino]metil}-4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina;
{(2S,5R)-4-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metanol; (2S,5R)-4-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida; (2S,5R)-4-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-metil-2-morfolinacarboxamida; (2S,5R)-4-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida; 6-[6-{(2R,5R)-2-[(Dimetilamino)metil]-5-metil-4-morfolinil}-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-6-{2-[4-(2-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina; 4-Fluoro-6-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina; N4-Metil-6-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3,4-diamina; 4-(2-Furanil)-6-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-[(1-metiletil)oxi]-1H-indazol-3-amina; (2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-etil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida; (2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida; (2S,5R)-4-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-etil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida; (2S,5R)-4-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida; (2S,5R)-4-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-etil-N-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-fluoro-1H-indazol-3-amina; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina; N4-Ciclopentil-6-[6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N4-metil-1H-indazol-3,4-diamina; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(1-pirrolidinil)-1H-indazol-3-amina; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-(Metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina; 4-(Etiloxi)-6-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-[(1S)-1-feniletil]-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-{[2-(metiloxi)fenil]metil}-3
piperidinacarboxamida;
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-{[3-(metiloxi)fenil]metil}-3piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[(2-fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-[(1R)-1-feniletil]-3-piperidinacarboxamida;
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(1-metil-1-feniletil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-etilciclohexil)-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(2-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida; 6-[6-[(2R,5R)-2,5-Dimetil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; {(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo; {(3R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo; {(3R)-1-[6-[3-Amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1
dimetiletilo; 6-{2-(Metilamino)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-(Metilamino)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; N-{(3R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}benzamida; {(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de fenilmetilo; {(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclopentilo; {(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclobutilo; {(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclohexilo; 3-{(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}-1,3-oxazolidin-2-ona; {(3R,5R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo; 3-{(3R,5R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}-1,3-oxazolidin-2-ona; ((3R,5R)-1-{2-Amino-6-[3-amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-4-pirimidinil}-5-metil-3-piperidinil)carbamato de 1,1
dimetiletilo;
{(3R,5R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1dimetiletilo; {(3R,5R)-1-[6-[3-Amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de
1,1-dimetiletilo; {(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1-metiletilo; 6-[6-[(2R)-2-Etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-[6-[(2R)-2-Etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina; 4-(Etiloxi)-6-[6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; {(3R,5R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo;
y 1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-L-prolinamida;
o una sal de los mismos, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. Entre los compuestos de la presente invención están incluidos: 6-(2-Amino-6-metil-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina;
o una sal de los mismos, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. Entre los compuestos de la presente invención están incluidos: (2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-N-Ciclohexil-6-metil-1-[2-(metilamino)-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxamida;
(3S,6R)-1-[6-(3-Amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3piperidinacarboxamida; {(1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de cis-1,1-dimetiletilo; {1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de cis-ciclopentilo; (3S,6R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclopentil-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(2-feniletil)-3-piperidinacarboxamida; {(3R,6S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo; (2S,5R)-4-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida; (2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; N4-Ciclopentil-6-[6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; {(3R)-1-[6-[3-Amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1dimetiletilo; {(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclobutilo; 3-{(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}-1,3-oxazolidin-2-ona; {(3R,5R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo; ((3R,5R)-1-{2-Amino-6-[3-amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-4-pirimidinil}-5-metil-3-piperidinil)carbamato de 1,1
dimetiletilo; {(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1-metiletilo; y {(3R,5R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo;
o una sal de los mismos, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
El experto en la técnica apreciará que pueden prepararse sales, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables, de los compuestos de acuerdo con la Fórmula (III). De hecho, en ciertas realizaciones de la invención, pueden preferirse sales que incluyen las que son farmacéuticamente aceptables de los compuestos de acuerdo con la Fórmula (III) sobre la base libre respectiva. Por consiguiente, la invención se refiere además a sales, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables, de los compuestos de acuerdo con la Fórmula (III).
Las sales de los compuestos de la invención se preparan fácilmente por los especialistas en la técnica.
Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la invención se preparan fácilmente por los especialistas en la técnica.
Los compuestos de acuerdo con la Fórmula (III) pueden contener uno o más centros asimétricos (también denominados como un centro quiral) y, por lo tanto, pueden existir como enantiómeros o diastereómeros individuales, u otras formas estereoisoméricas, o como mezclas de los mismos. Algunos centros, tales como átomos de carbono quirales, también pueden estar presentes en un sustituyente tal como un grupo alquilo. Cuando no se especifica la estereoquímica de un centro quiral presente en la Fórmula (III), o en cualquier estructura química ilustrada en la presente memoria, la estructura pretende incluir todos los estereoisómeros individuales y todas las mezclas de los mismos. Por lo tanto, los compuestos de acuerdo con la Fórmula (III) que contienen uno o más centros quirales pueden usarse como mezclas racémicas, mezclas enantioméricamente enriquecidas o como estereoisómeros individuales enantioméricamente puros.
Los compuestos de acuerdo con la Fórmula (III) también pueden contener dobles enlaces u otros centros de asimetría geométrica. Cuando no se especifica la estereoquímica de un centro de asimetría geométrica presente en la Fórmula (III), o en cualquier estructura química ilustrada en la presente memoria, la estructura pretende incluir el isómero geométrico trans (E), el isómero geométrico cis (Z) y todas las mezclas de los mismos. De forma análoga, todas las formas tautoméricas también se incluyen en la Fórmula (III) si dichos tautómeros existen en equilibrio o principalmente en una forma.
Los compuestos de Fórmula (III) o sales, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables, de los mismos, pueden existir en forma sólida o líquida. En el estado sólido, los compuestos de la invención pueden existir en forma cristalina o no cristalina, o en forma de una mezcla de las mismas. Para los compuestos de la invención que están en forma cristalina, el especialista en la técnica apreciará que pueden formarse solvatos farmacéuticamente aceptables en los que las moléculas de disolvente se incorporan en la estructura cristalina durante la cristalización. Los solvatos pueden implicar disolventes no acuosos tales como etanol, isopropanol, DMSO, ácido acético, etanolamina y acetato de etilo, o pueden implicar agua como disolvente que se incorpora en la estructura cristalina. Los solvatos en los que el agua es el disolvente que se incorpora en la estructura cristalina se denominan típicamente "hidratos". Los hidratos incluyen hidratos estequiométricos así como composiciones que contienen cantidades variables de agua. La invención incluye todos estos solvatos.
El especialista en la técnica apreciará además que ciertos compuestos de Fórmula (III) o sales, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables, de los mismos, que existen en forma cristalina, incluyendo los diversos solvatos de los mismos, pueden mostrar polimorfismo (es decir, la capacidad de aparecer en diferentes estructuras cristalinas). Estas diferentes formas cristalinas se conocen típicamente como "polimorfos". La invención incluye todos estos polimorfos. Los polimorfos tienen la misma composición química pero se diferencian en el empaquetamiento, disposición geométrica y otras propiedades descriptivas del estado sólido cristalino. Los polimorfos, por lo tanto, pueden tener diferentes propiedades físicas tales como forma, densidad, dureza, deformabilidad, estabilidad y propiedades de disolución. Típicamente, los polimorfos muestran diferentes puntos de fusión, espectros de IR y patrones de difracción de polvo de rayos X, que pueden usarse para su identificación. El especialista apreciará que pueden producirse diferentes polimorfos, por ejemplo, cambiando o ajustando las condiciones de reacción o reactivos, usados para preparar el compuesto. Por ejemplo, los cambios en la temperatura, presión o disolvente pueden dar como resultado polimorfos. Además, un polimorfo puede convertirse espontáneamente en otro polimorfo en ciertas condiciones.
Otra realización de la presente invención es un compuesto de acuerdo con la Fórmula (IIIA)
R42 NH2
N
R41
N H
N
N R44
(IIIA) en la que R41, R42, y R44 son como se han definido en la Fórmula (III) anterior.
Otra realización de la presente invención es un compuesto de acuerdo con la Fórmula (IIIB) NH2
N
R41
N H
N
N
R44
(IIIB)
en la que R41 y R44 son como se han definido en la Fórmula (III) anterior.
Otra realización de la presente invención es un compuesto de acuerdo con la Fórmula (IIIC)
R42
NH2
N
N H
N
N
R44 5 (IIIC) en la que R42 y R44 son como se han definido en la Fórmula (III) anterior. Otra realización de la presente invención es un compuesto de acuerdo con la Fórmula (IIID) R42
N
R41 N H N
N
R44 (IIID) en la que R41, R42 y R44 son como se han definido en la Fórmula (III) anterior. 10 Otra realización de la presente invención es un compuesto de acuerdo con la Fórmula (IIIE) R42 CH3
N
R41 N H N
N
R44 (IIIE)
en la que R41, R42 y R44 son como se han definido en la Fórmula (III) anterior.
Otra realización de la presente invención es un compuesto de acuerdo con la Fórmula (IIIF) R42
R43
N
R41
N H
N
N
NH2
(IIIF)
en la que R41, R42, y R43 son como se han definido en la Fórmula III anterior.
Otra realización de la presente invención es un compuesto de acuerdo con la Fórmula (IIIG)
R41
en la que R41, R42, y R43 son como se han definido en la Fórmula III anterior.
Definiciones
“Alquilo” se refiere a una cadena de hidrocarburo que tiene el número especificado de átomos miembro. Por ejemplo, alquilo C1-C6 se refiere a un grupo alquilo que tiene de 1 a 6 átomos miembro. Los grupos alquilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes como se ha definido en esta memoria. Los grupos alquilo pueden ser saturados, insaturados, lineales o ramificados. Los grupos alquilo ramificados representativos tienen una, dos, o tres ramificaciones. Alquilo incluye metilo, etilo, etileno, propilo (n-propilo e isopropilo), buteno, butilo (n-butilo, isobutilo, y t-butilo), pentilo (n-pentilo, isopentilo, y neopentilo), y hexilo.
“Alcoxi” se refiere a un grupo -O-alquilo en el que alquilo es una cadena de hidrocarburo saturado que tiene el número especificado de átomos miembro. Por ejemplo, alcoxi C1-C6 se refiere a un grupo alcoxi que tiene de 1 a 6 átomos miembro. Los grupos alcoxi pueden ser lineales o ramificados. Los grupos alcoxi ramificados representativos tienen una, dos, o tres ramificaciones. Los ejemplos de tales grupos incluyen metoxi, etoxi, propoxi, butoxi, pentoxi y hexoxi.
“Arilo y Ar” se refiere a un anillo de hidrocarburo aromático. Los grupos arilo son sistemas de anillo monocíclico o sistemas de anillo bicíclico. Anillo de arilo monocíclico se refiere a fenilo. Los anillos de arilo bicíclicos se refieren a naftilo y anillos en los que el fenilo está condensado a un anillo de cicloalquilo o cicloalquenilo que tiene 5, 6, ó 7 átomos miembro. Los grupos arilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes como se ha definido en esta memoria.
“Cicloalquilo" se refiere a un anillo de hidrocarburo no aromático saturado o insaturado que tiene el número especificado de átomos miembro. Los grupos cicloalquilo son sistemas de anillo monocíclico o un anillo monocíclico condensado con un anillo de arilo. Por ejemplo, cicloalquilo C3-C7 se refiere a un grupo cicloalquilo que tiene de 3 a 7 átomos miembro. Por ejemplo, 2,3-dihidro-1H-indeno sería un anillo de cicloalquilo C5 condensado con un anillo de arilo. Los grupos cicloalquilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes como se ha definido en esta memoria. Los ejemplos de cicloalquilo como se usa en esta memoria incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, 2,3-dihidro-1H-indeno, ciclobutenilo, ciclopentenilo y ciclohexenilo.
“Halo” se refiere a los radicales de halógeno flúor, cloro, bromo, y yodo.
"Heteroarilo" se refiere a un anillo aromático que contiene de 1 a 4 heteroátomos como átomos miembro en el
anillo. Los grupos heteroarilo que contienen más de un heteroátomo pueden contener diferentes heteroátomos. Los grupos heteroarilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes como se ha definido en esta memoria. Los grupos heteroarilo son sistemas de anillo monocíclico o son sistemas de anillo bicíclico condensado, espiro, o enlazado. Los anillos de heteroarilo monocíclico tienen 5 ó 6 átomos miembro. Los anillos de heteroarilo bicíclico tienen de 8 a 11 átomos miembro. Los anillos de heteroarilo bicíclico incluyen aquellos anillos en los que un anillo de heteroarilo monocíclico y un fenilo, o un cicloalquilo monocíclico, heterocicloalquilo, o anillo de heteroarilo están unidos formando un sistema de anillo bicíclico condensado, espiro, o enlazado. Heteroarilo incluye pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, furanilo, furazanilo, tienilo, triazolilo, piridinilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirazinilo, triazinilo, tetrazinilo, indolilo, isoindolilo, indolizinilo, indazolilo, purinilo, quinolinilo, isoquinolinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, pteridinilo, cinnolinilo, azabenzoimidazolilo, tetrahidrobenzoimidazolilo, benzoimidazolilo, benopiranilo, benzoxazolilo, benzofuranilo, isobenzofuranilo, benzotiazolilo, benzotienilo, imidazo[4,5-c]piridina, imidazo[4,5-b]piridina, furopiridinilo y naftiridinilo.
“Heteroátomo” se refiere a un átomo de nitrógeno, azufre u oxígeno.
“Heterocicloalquilo" se refiere a un anillo saturado o insaturado que contiene de 1 a 4 heteroátomos como átomos miembro en el anillo. Sin embargo, los anillos de heterocicloalquilo no son aromáticos. Los grupos heterocicloalquilo que contienen más de un heteroátomo pueden contener diferentes heteroátomos. Los grupos heterocicloalquilo pueden estar opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes como se ha definido en esta memoria. Los grupos heterocicloalquilo son sistemas de anillo monocíclico o un anillo monocíclico condensado con un anillo arilo o heteroarilo que tiene de 4 a 11 átomos miembro. En ciertas realizaciones, el heterocicloalquilo está saturado. En otras realizaciones, el heterocicloalquilo está insaturado pero no es aromático. Heterocicloalquilo incluye pirrolidinilo, tetrahidrofuranoílo, dihidrofuranilo, piranilo, tetrahidropiranilo, dihidropiranilo, tetrahidrotienilo, pirazolidinilo, oxazolidinilo, tiazolidinilo, piperidinilo, homopiperidinilo, piperazinilo, morfolinilo, tiamorfolinilo, 1,3-dioxolanilo, 1,3dioxanilo, 1,4-dioxanilo, 1,3-oxatiolanilo, 1,3-oxatianilo, 1,3-ditianilo, 1,3-oxazolidin-2-ona, hexahidro-1H-azepin, 4,5,6,7,tetrahidro-1H-benzoimidazol y azetidinilo.
“Mercapto” se refiere al grupo -S-alquilo en el que alquilo es una cadena de hidrocarburo saturado que tiene el número especificado de átomos miembro. Por ejemplo, mercapto C1-C6 se refiere a un grupo mercapto que tiene de 1 a 6 átomos miembro. Los grupos mercapto pueden ser lineales o ramificados. Los grupos alcoxi ramificados representativos tienen una, dos, o tres ramificaciones. Los ejemplos de grupos mercapto incluyen tiometilo, tioetilo, metiltio y etiltio.
"Farmacéuticamente aceptable" se refiere a aquellos compuestos, materiales, composiciones, y formas de dosificación que son, dentro del alcance del juicio médico razonable, adecuados para usar en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin excesiva toxicidad, irritación, u otro problema o complicación, que corresponde a una proporción beneficio/riesgo razonable.
Como se usa en la presente memoria los símbolos y convenciones usados en estos procesos, esquemas y ejemplos son consistentes con los usados en la bibliografía científica contemporánea, por ejemplo, el Journal of the American Chemical Society o el Journal of Biological Chemistry. Generalmente se usan abreviaturas convencionales de una sola letra o de tres letras para designar restos aminoacídicos, que se supone que están en la configuración L a menos que se indique otra cosa. A menos que se indique otra cosa, todos los materiales de partida se obtuvieron de proveedores comerciales y se usaron sin purificación adicional. Específicamente, pueden usarse las siguientes abreviaturas en los ejemplos y en toda la memoria descriptiva:
Ac (acetilo);
Ac2O (anhídrido acético);
ACN (acetonitrilo);
AIBN (azobis(isobutironitrilo));
BINAP (2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftilo);
BMS (complejo de borano -dimetil sulfuro);
Bn (bencilo);
Boc (terc-butoxicarbonilo);
Boc2O (dicarbonato de di-terc-butilo);
BOP (hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxi-tris-(dimetilamino)-fosfonio);
CAN (nitrato amónico cérico);
Cbz (benciloxicarbonilo);
CSI (isocianato de clorosulfonilo); DABCO (1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano); DAST (Trifluoruro de (dietilamino)azufre); DBU (1,8-Diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno);
5 DCC (Diciclohexil Carbodiimida); DDQ (2,3-Dicloro-5,6-diciano-1,4-benzoquinona); ATP (adenosina trifosfato); Bis-pinacolatodiboro (4,4,4',4',5,5,5',5'-Octametil-2,2'-bi-1,3,2-dioxaborolano); BSA (albúmina de suero bovino);
10 C18 (se refiere a grupos alquilo de 18 carbonos sobre silicio en HPLC en fase estacionaria) CH3CN (acetonitrilo); Ci (ciclohexilo); DCM (diclorometano); DIPEA (base de Hünig, N-etil-N-(1-metiletil)-2-propanamina);
15 DMAP (4-dimetilaminopiridina); DME (1,2-dimetoxietano); DMF (N,N-dimetilformamida); DMSO (dimetilsulfóxido); DPPA (difenil fosforil azida);
20 EDC (N-(3-dimetilaminopropil)-N’etilcarbodiimida); EDTA (ácido etilendiaminatetraacético); EtOAc (acetato de etilo); EtOH (etanol); Et2O (éter dietílico);
25 HEPES (ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazina etano sulfónico); HATU (hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio); HOAt (1-hidroxi-7-azabenzotriazol); HOBt (1-hidroxibenzotriazol); HOAc (ácido acético);
30 HPLC (cromatografía líquida de alta presión); HMDS (hexametildisilazida); Base de Hunig (N,N-Diisopropiletilamina); IPA (alcohol isopropílico); KHMDS (hexametildisilazida potásica);
35 LAH (hidruro de litio y aluminio); LDA (diisopropilamiduro de litio); LHMDS (hexametildisilazida de litio)
MeOH (metanol); MTBE (metil terc-butil éter); mCPBA (ácido m-cloroperbezoico); NaHMDS (hexametildisilazida sódica); NBS (N-bromosuccinimida); PE (éter de petróleo); Pd2(dba)3 (Tris(dibencilidenacetona)dipaladio (0)); Pd(dppf)Cl2 ([1,1′-Bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio (II)); PyBOP (hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxitripirrolidinofosfonio); PyBrOP (hexafluorofosfato de bromotripirrolidinofosfonio); RPHPLC (cromatografía líquida de alta presión en fase inversa); SFC (cromatografía con fluido supercrítico); SGC (cromatografía sobre gel de sílice); TEA (trietilamina); TEMPO (2,2,6,6-Tetrametilpiperidina 1-oxilo, radical libre); TFA (ácido trifluoroacético); y THF (tetrahidrofurano). Todas las referencias a éter son a éter dietílico y salmuera se refiere a una solución acuosa saturada de NaCl.
Preparación de Compuestos
Los compuestos de acuerdo con la Fórmula I se preparan usando síntesis orgánicas convencionales. Una ruta sintética adecuada se representa a continuación en los siguientes esquemas de reacción generales.
El especialista apreciará que si un sustituyente descrito en esta memoria no es compatible con los métodos sintéticos descritos en esta memoria, el sustituyente puede protegerse con un grupo protector adecuado que sea estable en las condiciones de reacción. El grupo protector puede retirarse en un punto adecuado en la secuencia de reacción para proporcionar un intermedio o compuesto diana deseados. Los grupos protectores adecuados y los métodos para proteger y desproteger diferentes sustituyentes usando dichos grupos protectores adecuado los conocen bien los especialistas en la técnica. En algunos casos, un sustituyente puede seleccionarse específicamente para que sea reactivo en las condiciones de reacción usadas. En estas circunstancias, las condiciones de reacción convierten el sustituyente seleccionado en otro sustituyente que también es útil como un compuesto intermedio o es un sustituyente deseado en un compuesto diana. Todos los materiales de partida están disponibles en el mercado o los especialistas en la técnica los preparan fácilmente a partir de materiales de partida disponibles en el mercado a menos que se indique otra cosa en la sección experimental.
Esquema 1
Las dicloropirimidinas 2 están disponibles en el mercado o pueden sintetizarse usando técnicas bien conocidas en la técnica. Por ejemplo, la reacción de la sulfona 1 disponible en el mercado con una amina adecuada tal como 5 metilamina en un disolvente adecuado tal como EtOAc y THF de aproximadamente 0ºC a la temperatura ambiente proporciona el intermedio 2. Las cloropirimidinas 3 están disponibles en el mercado o pueden sintetizarse usando técnicas bien conocidas en la técnica. La reacción de las dicloropirimidinas 2 con un nucleófilo adecuado tal como una amina primaria o secundaria en presencia de una base adecuada (tal como K2CO3 o DIPEA) a una temperatura adecuada (típicamente de aproximadamente la temperatura ambiente a aproximadamente 120ºC) proporciona el 10 intermedio 3. Como alternativa, la reacción puede realizarse en condiciones de microondas a temperaturas tan altas como 200ºC. Esta reacción puede realizarse en una gran diversidad de disolventes tales como DMF, THF, EtOH, CH3OH, 1,4-dioxano, etc. En el caso de aminas poco nucleófilas tales como 2-trifluorometilaminas, su reactividad puede no ser suficiente para desplazar el grupo cloro sobre la dicloropirimidina 2 y podría ser necesario un procedimiento alternativo a la síntesis de cloropirimidinas 3. Un procedimiento alternativo para la síntesis del 15 intermedio 3 se ilustra también en el Esquema 1. La formación de un anión de amina mediante la reacción de la amina respectiva con una base fuerte tal como LiHMDS en un disolvente adecuado tal como THF seguido de la adición de 2-tiometil-4,6-dicloropirimidina 4 disponible en el mercado proporciona el intermedio 5. La oxidación del grupo tiometilo con un agente de oxidación adecuado tal como mCPBA u oxona en un disolvente adecuado tal como CH2Cl2 o CH3OH respectivamente proporciona el intermedio 6. El desplazamiento selectivo de la funcionalidad 20 sulfona con un nucleófilo adecuado tal como metilamina en presencia de una base adecuada tal como base de
Hunig en un disolvente tal como THF puede proporcionar el intermedio cloropirimidina 3.
Esquema 2
El reactivo de boro 7 que está disponible en el mercado o que puede sintetizarse usando técnicas bien conocidas en la técnica, puede hacerse reaccionar con el intermedio de cloropirimidina 3 en condiciones de acoplamiento de 5 Suzuki para producir el intermedio 8, usando un catalizador de paladio tal como Pd(PPh3)4, una base tal como NaHCO3 acuoso saturado, y un disolvente adecuado tal como dioxano. Esta reacción de acoplamiento se realiza ventajosamente a temperaturas elevadas (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 100ºC, o en condiciones de microondas). La reacción del intermedio 8 con hidrazina en un disolvente adecuado tal como dioxano
o etanol a una temperatura elevada (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 120ºC) proporciona el
10 producto final 10. Como alternativa, las reacciones pueden realizarse en condiciones de microondas. Cuando R = H en el compuesto 8 y el producto final deseado 10 requiere R = Me, puede buscarse una ruta sintética alternativa a partir del intermedio 8. La reacción del intermedio 8 con anhídrido acético como disolvente en condiciones de reflujo proporciona el intermedio 9. Si se observan productos que contienen dos grupos acetilo sobre la amina, puede realizarse una retirada selectiva de uno de los grupos acetilo usando técnicas bien conocidas en la técnica. Como
15 alternativa, una separación del intermedio deseado 9 de los subproductos puede conseguirse por métodos de purificación convencionales en la técnica. La metilación del intermedio 9 seguida de reacción con hidrazina en un disolvente adecuado tal como dioxano o etanol a una temperatura elevada (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 120ºC, o con calentamiento con microondas hasta 200ºC) proporciona el producto final 10.
Esquema 3
Un método alternativo para preparar el producto final 10 se ilustra en el Esquema 3. Los 6-bromoindazoles 12 están disponibles en el mercado o pueden sintetizarse usando técnicas bien conocidas en la técnica. Por ejemplo, el 4fluoro-6-bromoindazol puede prepararse a partir de la reacción de difluoronitrilo 11 disponible en el mercado con hidrazina a altas temperaturas o en condiciones de microondas (aproximadamente 150ºC) en un disolvente adecuado tal como etanol. El bromoindazol 12 puede acetilarse usando anhídrido acético como disolvente en condiciones de reflujo para proporcionar el intermedio 13. Como alternativa, el bromoindazol 12 puede protegerse con el grupo Boc en lugar del grupo acetilo usando técnicas bien conocidas en la técnica tal como usando Boc2O en un disolvente adecuado tal como CH3CN y un catalizador adecuado tal como DMAP a una temperatura elevada (aproximadamente 80ºC). El acoplamiento de bispinacolatodiboro para formar el intermedio boronato éster seguido de acoplamiento de Suzuki in situ con cloropirimidina 3 proporciona una versión acetilada o una versión Boc del producto final 10. Un proceso final de desacetilación o desprotección con Boc usando técnicas bien conocidas en la técnica tales como calentar a reflujo el intermedio en HCl metanólico proporciona el producto final 10. El acoplamiento con bispinacolatodiboro puede realizarse ventajosamente a temperaturas elevadas (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 100ºC, o en condiciones de microondas) en presencia de una base adecuada tal como acetato potásico usando un catalizador de paladio tal como Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 en un disolvente adecuado tal como dioxano. El intermedio boronato puede estar aislado o usarse directamente en el acoplamiento de Suzuki por adición posterior a la mezcla de reacción de la correspondiente cloropirimidina 3 y una base adecuada tal como NaHCO3 acuoso saturado.
Esquema 4
NH2 NH2
N N
1) TFA/H2O2
S R1R2NN
N H H
N
NN 2) R1R2NH N
NH
NH R
14 R
Como alternativa, los productos finales de Fórmula 15 pueden prepararse a partir del intermedio 14, un compuesto que puede prepararse de una forma similar por los métodos descritos en el Esquema 2. La reacción del intermedio 14 con peróxido de hidrógeno en TFA como disolvente proporciona los intermedios sulfóxido y/o sulfona respectivos. Los nucleófilos adecuados tales como aminas primarias y secundarias pueden hacerse reaccionar después con los intermedios sulfóxido y/o sulfona a temperaturas elevadas (~100ºC o mayor) en un disolvente adecuado tal como dioxano para proporcionar el producto final 15.
Esquema 5
R1 Cl
N
N FO FO
NH 1) H2NOH
R 3 R1
FHO
2) Ac2OB F N
N OH
17 16
NH R
F
N Nu
NH2 R1
F 1) Nu NR1 N
N
N 2) H2NNH2
H 18 N
NO
N
R
NH R
El compuesto 16 disponible en el mercado y la cloropirimidina 3 puede hacerse reaccionar ventajosamente en condiciones de acoplamiento de Suzuki para producir el intermedio 17, usando un catalizador de paladio tal como Pd(PPh3)4, una base tal como NaHCO3 acuoso saturado, y un disolvente adecuado tal como dioxano. Esta reacción de acoplamiento se realiza ventajosamente a temperaturas elevadas (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 100ºC). La reacción del intermedio 17 con hidroxilamina genera la oxima respectiva que, tras exposición a anhídrido acético como disolvente en condiciones de reflujo, proporciona el intermedio de nitrilo 18. El
desplazamiento de un fluoruro con un nucleófilo adecuado (Nu) seguido de reacción con hidrazina en un disolvente adecuado tal como dioxano o etanol a una temperatura elevada (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 120ºC, o en condiciones de microondas) proporciona el producto final 19.
Esquema 6
Como alternativa, como se muestra en el Esquema 6, el producto final 19 puede prepararse a partir del compuesto 11 que está disponible en el mercado o puede sintetizarse usando técnicas bien conocidas en la técnica. El acoplamiento con bispinacolatodiboro para formar el intermedio boronato éster seguido de acoplamiento de Suzuki con la cloropirimidina 3 proporciona el intermedio 20. El acoplamiento con bispinacolatodiboro puede realizarse 10 ventajosamente a temperaturas elevadas (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 100ºC, o en condiciones de microondas) en presencia de una base adecuada tal como acetato potásico usando un catalizador de paladio tal como Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 en un disolvente adecuado tal como dioxano. El acoplamiento de Suzuki puede realizarse usando un catalizador de paladio tal como Pd(PPh3)4, una base tal como NaHCO3 acuoso saturado, y un disolvente adecuado tal como dioxano a una temperatura elevada (típicamente de aproximadamente 15 80 a aproximadamente 130ºC, o en condiciones de microondas). El desplazamiento de un fluoruro con un nucleófilo (Nu) adecuado seguido de reacción con hidrazina en un disolvente adecuado tal como dioxano o etanol a una temperatura elevada (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 120ºC) proporciona el producto final
19.
Esquema 7
ClCl
N
N
N N
2 NHR
Cl
Ar M
F
O
N
NR B
F O
NHR 21R
N NH2
NAr
H2NNH2 Ar
NF
HN
NN
N
22 23
NHR NHR
De acuerdo con el Esquema 7, el compuesto 7 y la dicloropirimidina 2 pueden hacerse reaccionar ventajosamente en condiciones de acoplamiento de Suzuki para producir el intermedio 21, usando un catalizador de paladio tal como Pd(PPh3)4, una base tal como NaHCO3 acuoso saturado, y un disolvente adecuado tal como dioxano. Esta reacción de acoplamiento se realiza ventajosamente a temperaturas elevadas (típicamente de aproximadamente 80 a 25 aproximadamente 100ºC, o en condiciones de microondas). Las reacciones de acoplamiento cruzado catalizadas con metal con el intermedio 21 pueden usarse para generar compuestos de Fórmula 22 que, tras la reacción con hidrazina en un disolvente adecuado tal como dioxano o etanol a una temperatura elevada (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 120ºC, o en condiciones de microondas), proporcionan el producto final
23.
Esquema 8
El compuesto 24 disponible en el mercado y la cloropirimidina 3 pueden hacerse reaccionar ventajosamente en condiciones de acoplamiento de Suzuki para producir el intermedio 25, usando un catalizador de paladio tal como 5 Pd(PPh3)4, una base tal como NaHCO3 acuoso saturado, y un disolvente adecuado tal como dioxano como se muestra en el Esquema 8. Esta reacción de acoplamiento se realiza ventajosamente a temperaturas elevadas (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 100ºC, o en condiciones de microondas). La reacción del intermedio 25 con hidrazina en un disolvente adecuado tal como dimetoxietano a una temperatura elevada (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 120ºC) proporciona el producto final 26. Como alternativa,
10 el intermedio 25 puede hacerse reaccionar con metoxilamina para dar el intermedio de oxima respectivo que, tras el tratamiento con hidrazina en un disolvente adecuado tal como dimetoxietano a una temperatura elevada (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 120ºC), proporciona el producto final 26.
Esquema 9
R1
Cl
N
N NHR N
3 R1
N NO N HB
H N
NO
NH R
15 Como alternativa, el producto final 26 puede prepararse a partir del acoplamiento de Suzuki del compuesto 27 disponible en el mercado con el intermedio 3. El acoplamiento de Suzuki puede realizarse usando un catalizador de paladio tal como Pd2(dba)3, un ligando tal como triciclohexilfosfina, una base tal como K3PO4, y un sistema disolvente adecuado tal como dioxano/agua a temperaturas elevadas (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 160ºC) o condiciones de microondas.
20 Esquema 10
R1 Cl O
CH3N
N O
3
NNHR R1
R1 NF
HRO B
NN
N N
F OR
30
NHR NHR
El reactivo de boro 28 está disponible en el mercado o puede sintetizarse usando técnicas bien conocidas en la técnica. El acoplamiento de Suzuki con el intermedio 3, usando un catalizador de paladio tal como Pd(PPh3)4, una base tal como NaHCO3 acuoso saturado, y un disolvente adecuado tal como dioxano a temperaturas elevadas
25 (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 100ºC) proporciona el intermedio 29. La reacción de 29 con hidrazina en un disolvente adecuado tal como etanol a una temperatura elevada (típicamente de aproximadamente 120 a aproximadamente 180ºC) proporciona el producto final 30.
Esquema 11
O CH3 H2NNH2 N N
BrF Br H
31 32
R1
Cl CH3N
N CH3
N
3 NHR R1
NN
H OB N
N
N H O
33 NHR 30
Como alternativa, como se muestra en el Esquema 11, el producto final 30 puede prepararse a partir del acoplamiento de Suzuki del intermedio de cloropirimidina 3 con el intermedio boronato éster 33, un compuesto que puede prepararse a partir del compuesto 31 disponible en el mercado. La reacción de 31 con hidrazina a una temperatura elevada (típicamente de aproximadamente 120 a aproximadamente 180ºC) proporciona el compuesto
32. El acoplamiento con bispinacolatodiboro para formar el intermedio boronato éster 33 seguido de acoplamiento de Suzuki con cloropirimidina 3 proporciona el producto final 30. El acoplamiento con bispinacolatodiboro puede realizarse ventajosamente a temperaturas elevadas (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 100ºC) en presencia de una base adecuada tal como acetato potásico usando un catalizador de paladio tal como Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 en un disolvente adecuado tal como dioxano. El acoplamiento de Suzuki puede realizarse usando un catalizador de paladio tal como Pd2(dba)3, un ligando tal como triciclohexilfosfina, una base tal como K3PO4, y un sistema disolvente adecuado tal como dioxano/agua a temperaturas elevadas (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 120ºC, o en condiciones de microondas).
Esquema 12
OH
SO2CF3OCN
CN R1 F
FN
N N
N NHR 34
NHR 35
Ar Ar
NH2 CN N
R1
R1 NF
H N
N NN
NHR 36 NHR 37
Como se muestra en el Esquema 12, el intermedio 34 puede prepararse de una manera similar a la descrita en el Esquema 6. La reacción de 34 con anhídrido tríflico en un disolvente adecuado tal como CH2Cl2 y una base adecuada tal como piridina proporciona el intermedio 35. El acoplamiento catalizado por metal tal como el acoplamiento de Suzuki con un ácido arilborónico adecuado, usando un catalizador de paladio tal como PdCl2(dppf)·CH2Cl2, una base tal como K3PO4, y un disolvente adecuado tal como dioxano a temperaturas elevadas (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 100ºC) proporciona el intermedio 36. La reacción de 36 con hidrazina en un disolvente adecuado tal como etanol a una temperatura elevada (típicamente de aproximadamente 80 a aproximadamente 150ºC, o realizada en condiciones de microondas) proporciona el producto final 37.
El especialista apreciará que si es necesaria una manipulación adicional de la funcionalidad presente en el sustituyente R1, puede realizarse en diferentes fases durante la síntesis del indazol. En los siguientes esquemas se resaltan las síntesis de las aminas seleccionadas usadas en los ejemplos.
El Esquema 13 ilustra la síntesis de piperidinas disustituidas a partir de piridinas. Las piridinas 2,5-bis-sustituidas 38 están disponibles en el mercado o pueden sintetizarse usando técnicas bien conocidas en la técnica. La hidrogenación en un disolvente adecuado tal como CH3OH en presencia de un ácido adecuado tal como HCl y un catalizador adecuado tal como PtO2 proporciona el intermedio 39. Este intermedio se obtiene normalmente como una mezcla de diastereómeros, siendo cis el predominante. El intermedio 39 puede usarse directamente o derivatizarse y purificarse por cromatografía para dar diastereómeros puros. Además, el intermedio racémico 39 puede resolverse en sus enantiómeros puros usando técnicas bien conocidas en la técnica tales como HPLC quiral
o recristalización con ácidos ópticamente puros.
Esquema 13
El intermedio 41, que puede prepararse como se describe en el Esquema 13 puede convertirse en el intermedio protegido con Cbz 42 como se muestra en el Esquema 14 usando técnicas bien conocidas en la técnica. Por ejemplo, el intermedio 41 puede protegerse con Cbz por reacción con CbzCl en un disolvente adecuado tal como CH2Cl2, y una base adecuada tal como trietilamina y un catalizador adecuado tal como DMAP. La funcionalidad éster puede hidrolizarse usando una fuente de hidróxido adecuada tal como LiOH·H2O en una mezcla de disolventes adecuada tal como THF/H2O/CH3OH para dar 42. El intermedio 42 puede convertirse en 43 usando técnicas bien conocidas en la técnica tales como una transposición de Curtius usando DPPA en t-BuOH en presencia de una base adecuada tal como trietilamina a una temperatura elevada (aproximadamente 100ºC). El grupo Cbz puede retirarse usando técnicas bien conocidas en la técnica para generar la amina no protegida deseada.
Esquema 14
41 42 43
Los compuestos de acuerdo con la Fórmula I que contienen morfolinas con sustituyentes imidazol o benzoimidazol pueden prepararse de acuerdo con los métodos del Esquema 15. El reactivo ácido morfolina 44 está disponible en el mercado o puede sintetizarse usando técnicas bien conocidas en la técnica. El acoplamiento de amida con un derivado de aminocetona adecuado usando técnicas bien conocidas en la técnica proporciona el intermedio 46. El especialista apreciará que si una aminocetona adecuada no está disponible y/o accesible, entonces el aminoalcohol respectivo puede usarse en la reacción de acoplamiento con amina para proporcionar el intermedio 45. La funcionalidad alcohol en el intermedio 45 puede oxidarse después a la cetona usando técnicas bien conocidas en la técnica para proporcionar el intermedio 46. La ciclación de 46 al intermedio imidazol 47 puede realizarse usando técnicas bien conocidas en la técnica tales como calentar a temperatura elevada (aproximadamente 150ºC) en presencia de trifluoroacetato de amonio. Además, el intermedio 44 puede hacerse reaccionar con sistemas de 1,2diaminoarilo o heteroarilo en condiciones ácidas tales como calentamiento a reflujo en ácido polifosfórico para proporcionar el intermedio 48. Ambos intermedios 47 y 48 pueden desprotegerse por retirada de la funcionalidad bencilo usando técnicas bien conocidas en la técnica para proporcionar la amina secundaria requerida.
Esquema 15
Las morfolinas 2,5-bis-sustituidas 49 ilustradas en el Esquema 16 se obtuvieron de acuerdo con el método indicado (Breuning et al, Eur. J. Org. Chem 2007, 2100-2106). El compuesto 49 puede elaborarse adicionalmente en diversas 5 morfolinas disustituidas usando transformaciones habituales en el grupo funcional para dar el intermedio 50. Las morfolinas monosustituidas en la posición 2 estaban disponibles en el mercado o se sintetizaron usando técnicas bien conocidas en la técnica. Por ejemplo, el intermedio 48 puede hacerse reaccionar con cloruro de cloroacetilo usando técnicas bien conocidas en la técnica para proporcionar el intermedio 51. La reducción de la funcionalidad lactama a la amina usando agentes reductores bien conocidos en la técnica tales como Red-Al en tolueno, borano o
10 LiAlH4 en THF proporciona el intermedio 52. La desbencilación final proporciona la amina secundaria deseada. El especialista apreciará que esta secuencia sintética podría realizarse sin la presencia del grupo bencilo. En dicho caso, la versión no bencilada del aminoalcohol de 48 puede usarse para la reacción con cloruro de cloroacetilo.
Esquema 16
15 El compuesto 53 se preparó de acuerdo con la síntesis indicada de su enantiómero respectivo (Lee et. al PCT Int. Appl. (2009), WO 2009023473 A2 20090219). El compuesto 53 puede desbencilarse usando técnicas bien conocidas en la técnica para proporcionar la amina secundaria deseada, o puede funcionalizarse antes de la etapa de desprotección del grupo bencilo. Por ejemplo, el compuesto 53 puede metilarse usando una base adecuada tal como NaH y un agente de metilación adecuado tal como yoduro de metilo en un disolvente adecuado tal como DMF
20 para proporcionar el intermedio 54.
Esquema 17
Métodos de Uso
Los compuestos de acuerdo con la Fórmula (III) y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos son inhibidores de PDK1. Estos compuestos son potencialmente útiles en el tratamiento de afecciones en las que la patología subyacente puede atribuirse a (pero no se limita a) quinasas ACG constitutivamente activadas, por ejemplo, enfermedades metabólicas e inmunes, cáncer y, más específicamente, cánceres de mama, colon y pulmón. Las quinasas ACG constitutivamente activadas se refieren a que una o más quinasas ACG se están produciendo a un ritmo constante independientemente de la demanda o de la concentración fisiológica. Por consiguiente, otro aspecto de la invención se refiere a tales compuestos para uso en el tratamiento de dichas afecciones.
Convenientemente, la presente invención se refiere a tales compuestos para uso en el tratamiento de o disminución de la gravedad del cáncer de mama, incluyendo cáncer inflamatorio de mama, carcinoma ductal y carcinoma lobular.
Convenientemente, la presente invención se refiere a tales compuestos para uso en el tratamiento de o disminución de la gravedad del cáncer de colon.
Convenientemente, la presente invención se refiere a tales compuestos para uso en el tratamiento de o disminución de la gravedad del cáncer de pulmón incluyendo cáncer de pulmón microcítico, cáncer de pulmón no microcítico, carcinoma de células escamosas, adenocarcinoma y carcinoma macrocítico.
Convenientemente, la presente invención se refiere a tales compuestos para uso en el tratamiento de o disminución de la gravedad de cánceres seleccionados del grupo que consiste en cáncer cerebral (gliomas), glioblastomas, tumor de Wilm, sarcoma de Ewing, rabdomiosarcoma, ependimoma, meduloblastoma, de cabeza y cuello, de riñón, de hígado, melanoma, ovárico, pancreático, de próstata, sarcoma, osteosarcoma, tumor óseo de células gigantes, de tiroides, leucemia linfoblástica de células T, leucemia mielógena crónica, leucemia linfocítica crónica, tricoleucemia, leucemia linfoblástica aguda, leucemia mielógena aguda, leucemia neutrófila crónica, leucemia linfoblástica aguda de células T, plasmocitoma, leucemia de células grandes inmunoblástica, leucemia de células del manto, mieloma múltiple, leucemia megacarioblástica, mieloma múltiple, leucemia megacariocítica aguda, leucemia promielocítica, eritroleucemia, linfoma maligno, linfoma de Hodking, linfoma no Hodking, linfoma linfoblástico de células T, linfoma de Burkitt, linfoma folicular, neuroblastoma, cáncer de vejiga, cáncer urotelial, cáncer vulvar, cáncer cervical, cáncer endometrial, cáncer renal, mesotelioma, cáncer esofágico, cáncer de glándulas salivares, cáncer hepatocelular, cáncer gástrico, cáncer nasofaríngeo, cáncer bucal, cáncer de boca, GIST (tumor estromal gastrointestinal) y cáncer testicular.
Convenientemente la presente invención se refiere a tales compuestos para uso en el tratamiento de o disminución de la gravedad de enfermedades metabólicas e inmunes incluyendo: diabetes, rechazo de trasplante/injerto, psoriasis y colitis.
La invención también proporciona un compuesto de acuerdo con la Fórmula (III) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en terapia médica y particularmente en la terapia del cáncer. Por lo tanto, en un aspecto adicional, la invención se refiere al uso de un compuesto de acuerdo con la Fórmula (III) o a una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la preparación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno caracterizado por quinasas ACG constitutivamente activadas, tal como cáncer.
Como se usa en este documento, el término “tratar” y derivados del mismo, en referencia a una afección se refiere a:
(1)
mejorar o prevenir la afección o una o más de las manifestaciones biológicas de la afección, (2) a interferir con
(a)
uno o más puntos en la cascada biológica que conduce a o es responsable de la afección o (b) una o más de las manifestaciones biológicas de la afección, (3) aliviar uno o más de los síntomas o efectos asociados con la afección
o (4) ralentizar la progresión de la afección o una o más de las manifestaciones biológicas de la afección.
Como se ha indicado anteriormente, el término “tratamiento” y derivados del mismo, de una afección incluye la prevención de la afección. El especialista apreciará que el término “prevención” no es un término absoluto. En medicina se entiende que la “prevención” se refiere a la administración profiláctica de un fármaco para disminuir sustancialmente la probabilidad o la gravedad de una afección o de una manifestación biológica de la misma o retrasar la aparición de dicha afección o manifestación biológica de la misma.
Como se usan en este documento, los términos “paciente” o “sujeto” se refieren a un ser humano u otro animal. Convenientemente, el paciente o el sujeto es un ser humano.
Los compuestos de Fórmula (III) o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos pueden administrarse por cualquier vía de administración adecuada, incluyendo administración sistémica. La administración sistémica incluye administración oral y administración parenteral. La administración parenteral se refiere a vías de administración distintas de la enteral, transdérmica o por inhalación, y típicamente es por inyección o infusión. La administración parenteral incluye la inyección o infusión intravenosa, intramuscular y subcutánea.
Los compuestos de Fórmula (III) o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos pueden administrarse una vez o de acuerdo con un régimen de dosificación en el que se administran varias dosis a intervalos de tiempo variables durante un periodo de tiempo dado. Por ejemplo, las dosis pueden administrarse una, dos, tres o cuatro veces al día. Pueden administrarse dosis hasta que se consiga el efecto terapéutico deseado o indefinidamente para mantener el efecto terapéutico deseado. Los regímenes de dosificación adecuados para un compuesto de la invención dependen de las propiedades farmacocinéticas de ese compuesto, tales como absorción, distribución y semivida, que pueden determinarse por el especialista. Además, los regímenes de dosificación adecuados, incluyendo el tiempo durante el que se administran dichos regímenes, para un compuesto de la invención depende de la afección que se trate, la gravedad de la afección que se trate, la edad y el estado físico del paciente que se trate, la historia médica del paciente que se trate, la naturaleza de la terapia concurrente, el efecto terapéutico deseado y factores similares dentro del conocimiento y la experiencia del especialista. Dichos especialistas entenderán además que los regímenes de dosificación adecuados pueden requerir un ajuste dada la respuesta de un paciente individual al régimen de dosificación o con el tiempo a medida que el paciente individual necesite un cambio.
Además, los compuestos de Fórmula I o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos pueden administrarse como profármacos. Como se usa en este documento, un “profármaco” de un compuesto de la invención es un derivado funcional del compuesto que, tras la administración a un paciente, libera finalmente el compuesto de la invención in vivo. La administración de un compuesto de Fórmula I como profármaco puede permitir al especialista hacer uno o más de lo siguiente: (a) modificar la aparición del compuesto in vivo; (b) modificar la duración de la acción del compuesto in vivo; (c) modificar el transporte o la distribución del compuesto in vivo; (d) modificar la solubilidad del compuesto in vivo; y (e) superar o superar un efecto secundario u otra dificultad que se encuentre con el compuesto. Los derivados funcionales típicos usados para preparar profármacos incluyen modificaciones del compuesto que se escinden químicamente o enzimáticamente in vivo. Dichas modificaciones, que incluyen la preparación de fosfatos, amidas, ésteres, tioésteres, carbonatos y carbamatos son bien conocidas por los especialistas en la técnica.
Los compuestos de Fórmula I y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos pueden coadministrarse con al menos otro ingrediente activo que se sepa que es útil en el tratamiento del cáncer.
Por el término “coadministración”, como se usa en este documento, se entiende la administración simultánea o cualquier forma de administración secuencial separada de un compuesto inhibidor de PDK1, como se describe en este documento, y un ingrediente o ingredientes activos adicionales, que se sabe que son útiles en el tratamiento del cáncer, incluyendo quimioterapia y tratamiento con radiación. El término ingrediente o ingredientes activos adicionales, como se usa en este documento, incluye cualquier compuesto o agente terapéutico que se sepa que o que demuestre propiedades ventajosas cuando se administra a un paciente que necesita tratamiento para el cáncer. Preferiblemente, si la administración no es simultánea, los compuestos se administran en estrecha proximidad temporal entre sí. Además, no importa si los compuestos se administran en la misma forma de dosificación, por ejemplo, un compuesto puede administrarse por inyección y otro compuesto puede administrarse por vía oral.
Típicamente, cualquier agente antineoplásico que tenga actividad frente a un tumor susceptible de tratarse puede coadministrarse en el tratamiento del cáncer en la presente invención. Pueden encontrarse ejemplos de dichos agentes en Cancer Principles and Practice of Oncology por V. T. Devita y S. Hellman (editores), 6ª edición (15 de febrero de 2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishers. Un especialista en la técnica será capaz de discernir qué combinaciones de agentes serían útiles basándose en las características particulares de los fármacos y del cáncer implicado. Los agentes antineoplásicos típicos útiles en la presente invención incluyen, pero sin limitación, agentes antimicrotúbulos, tales como diterpenoides y alcaloides de la vinca; complejos de coordinación con platino; agentes alquilantes tales como mostazas nitrogenadas, oxazafosforinas, alquilsulfonatos, nitrosoureas y triazenos; agentes antibióticos tales como antraciclinas, actinomicinas y bleomicinas; inhibidores de la topoisomerasa II tales como epipodofilotoxinas; antimetabolitos tales como análogos de purina y pirimidina y compuestos antifolato; inhibidores de la topoisomerasa I tales como camptotecinas; hormonas y análogos hormonales; inhibidores de la ruta de transducción de señales; inhibidores de la angiogénesis de tirosina quinasa no receptora; agentes inmunoterápicos; agentes proapoptóticos; e inhibidores de la señalización del ciclo celular.
Son ejemplos de un ingrediente o ingredientes activos adicionales (agente antineoplásico) para uso en combinación
o coadministrados con los compuestos inhibidores de PDK1 de la presente invención los agentes quimioterápicos.
Los agentes antimicrotúbulos o antimitóticos son agentes específicos de fase activos frente a los microtúbulos de células tumorales durante la fase M o de mitosis del ciclo celular. Los ejemplos de agentes antimicrotúbulos incluyen, pero sin limitación, diterpenoides y alcaloides de la vinca.
Los diterpenoides, que proceden de fuentes naturales, son agentes anticancerosos específicos de fase que funcionan en las fases G2/M del ciclo celular. Se piensa que los diterpenoides estabilizan la subunidad de -tubulina de los microtúbulos por unión con su proteína. El desensamblaje de la proteína parece inhibirse después, deteniéndose la mitosis y siguiendo la muerte celular. Los ejemplos de diterpenoides incluyen, pero sin limitación, paclitaxel y su análogo docetaxel.
El paclitaxel, 13-éster de 4,10-diacetato-2-benzoato de 5,20-epoxi-1,2,4,7,10,13-hexa-hidroxitax-11-en-9-ona con (2R,3S)-N-benzoil-3-fenilisoreina; es un producto de diterpeno natural aislado del tejo del Pacífico Taxus brevifolia y está disponible en el mercado como una solución inyectable TAXOL. Es un miembro de la familia de los taxanos de terpenos. Se aisló por primera vez en 1971 por Wani et al. J. Am. Chem, Soc., 93: 2325, 1971, que caracterizó su estructura por métodos químicos y cristalográficos de rayos X. Un mecanismo para su actividad se refiere a la capacidad del paclitaxel para unirse a tubulina, inhibiendo de este modo el crecimiento de células cancerosas. Schiff et al., Proc. Natl, Acad, Sci. USA, 77: 1561-1565 (1980); Schiff et al., Nature, 277: 665-667 (1979); Kumar, J. Biol, Chem, 256: 10435-10441 (1981). Para una revisión de la síntesis y la actividad anticancerosa de algunos derivados del paclitaxel véase: D. G. I. Kingston et al., Studies in Organic Chemistry vol. 26, titulado “New trends in Natural Products Chemistry 1986”, Attaur-Rahman, P. W. Le Quesne, Eds. (Elsevier, Amsterdam, 1986) págs. 219-235.
El paclitaxel se ha autorizado para uso clínico en el tratamiento del cáncer ovárico resistente a tratamiento en los Estados Unidos (Markman et al., Yale Journal of Biology and Medicine, 64: 583, 1991; McGuire et al., Ann. lntem, Med., 111: 273,1989) y para el tratamiento del cáncer de mama (Holmes et al., J. Nat. Cancer Inst., 83: 1797,1991). Es un candidato potencial para el tratamiento de neoplasias en la piel (Einzig et. al., Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 20: 46) y carcinomas de cabeza de cuello (Forastire et. al., Sem. Oncol., 20: 56, 1990). El compuesto también muestra potencial para el tratamiento de la enfermedad renal poliquística (Woo et al., Nature, 368: 750. 1994), cáncer de pulmón y malaria. El tratamiento de pacientes con paclitaxel da como resultado supresión de la médula ósea (linajes celulares múltiples, Ignoff, R. J. et. al, Cancer Chemotherapy Pocket Guide, 1998) relacionada con la duración de la dosificación por encima de una concentración umbral (50 nM) (Kearns, C.M. et. al., Seminars in Oncology, 3 (6) págs. 16-23, 1995).
El docetaxel, 13-éster del éster-N-terc-butílico de (2R,3S)-N-carboxi-3-fenilisoserina con 4-acetato-2-benzoato de 5,20-epoxi-1,2,4,7,10,13-hexahidroxitax-11-en-9-ona trihidrato; está disponible en el mercado como una solución inyectable como TAXOTERE. El docetaxel está indicado para el tratamiento del cáncer de mama. El docetaxel es un derivado semisintético del paclitaxel, véase, preparado usando un precursor natural, 10-desacetilbacatina III, extraído de la acícula del tejo Europeo. La toxicidad limitante de dosis del docetaxel es la neutropenia.
Los alcaloides de la vinca son agentes antineoplásicos específicos de fase derivados de la vinca perivinca. Los alcaloides de la vinca actúan en la fase M (mitosis) del ciclo celular uniéndose específicamente a tubulina. Por consiguiente, la molécula de tubulina unida es incapaz de polimerizarse en microtúbulos. Se piensa que la mitosis se detiene en la metafase siguiendo la muerte celular. Los ejemplos de alcaloides de la vinca incluyen, pero sin limitación, vinblastina, vincristina y vinorelbina.
La vinblastina, sulfato de vincaleucoblastina, está disponible en el mercado como VELBAN como solución inyectable. Aunque tiene una indicación posible como terapia de segunda línea de diversos tumores sólidos, principalmente está indicada en el tratamiento del cáncer testicular y diversos linfomas incluyendo Enfermedad de Hodgkin; y linfomas linfocíticos e histiocíticos. La mielosupresión es el efecto secundario limitante de dosis de la vinblastina.
La vincristina, 22-oxo-sulfato de vincaleucoblastina, está disponible en el mercado como ONCOVIN como solución inyectable. La vincristina está indicada para el tratamiento de leucemias agudas y también se ha encontrado uso en regímenes de tratamiento de linfomas malignos de Hodgkin y no Hodgkin. La alopecia y los efectos neurológicos son los efectos secundarios más comunes de la vincristina y en menor grado se produce mielosupresión y efectos de mucositis gastrointestinal.
La vinorelbina, 3’,4’-dideshidro-4’-desoxi-C’-norvincaleucoblastina [R-(R*,R*)-2,3-dihidroxibutanodioato (1:2) (sal)], disponible en el mercado como una solución inyectable de tartrato de vinorelbina (NAVELBINE) es un alcaloide de la vinca semisintético. La vinorelbina está indicada como agente en solitario o en combinación con otros agentes quimioterápicos, tales como cisplatino, en el tratamiento de diversos tumores sólidos, particularmente cánceres de pulmón no microcítico, de mama avanzado y de próstata resistente a hormonas. La mielosupresión es el efecto secundario limitante de dosis más común de la vinorelbina.
Los complejos de coordinación con platino son agentes anticancerosos inespecíficos de fase que interaccionan con el ADN. Los complejos de platino se introducen en células tumorales, experimentan acuación y forman entrecruzamientos intra-e intercatenarios con el ADN causando efectos biológicos adversos para el tumor. Los ejemplos de complejos de coordinación con platino incluyen, pero sin limitación, cisplatino y carboplatino.
El cisplatino, cis-diaminodicloroplatino, está disponible en el mercado como PLATINOL, como solución inyectable. El cisplatino está principalmente indicado en el tratamiento del cáncer testicular y ovárico metastásico y del cáncer
de vejiga avanzado. Los efectos secundarios limitantes de dosis principales del cisplatino son neurotoxicidad, que puede controlarse mediante hidratación y diuresis, y ototoxicidad.
El carboplatino, diamina [1,1-ciclobutano-dicarboxilato(2-)-O,O’] de platino está disponible en el mercado como PARAPLATIN como una solución inyectable. El carboplatino está principalmente indicado en el tratamiento de primera y segunda línea del carcinoma ovárico avanzado. La supresión de la médula ósea es la toxicidad limitante de dosis del carboplatino.
Los agentes alquilantes son agentes anticancerosos inespecíficos de fase y electrófilos fuertes. Típicamente, los agentes aquilantes forman enlaces covalentes por alquilación con el ADN a través de restos nucleófilos de la molécula de ADN tales como grupos fosfato, amino, sulfhidrilo, hidroxilo, carboxilo e imidazol. Dicha alquilación altera la función del ácido nucleico conduciendo a muerte celular. Los ejemplos de agentes alquilantes incluyen, pero sin limitación, mostazas nitrogenadas tales como ciclofosfamida, melfalán y clorambucilo; sulfonatos de alquilo tales como busulfán; nitrosoureas tales como carmustina; y triazenos tales como dacarbazina.
La ciclofosfamida, 2-óxido de 2-[bis(2-cloroetil)amino]tetrahidro-2H-1,3,2-oxazafosforina monohidrato está disponible en el mercado como solución inyectable o comprimidos como CYTOXAN. La ciclofosfamida está indicada como agente en solitario o en combinación con otros agentes quimioterápicos en el tratamiento de linfomas malignos, mieloma múltiple y leucemias. La alopecia, náuseas, vómitos y leucopenia son los efectos secundarios limitantes de dosis más comunes de la ciclofosfamida.
El melfalán, 4-[bis(2-cloroetil)amino]-L-fenilalanina, está disponible en el mercado como solución inyectable o comprimidos como ALKERAN. El melfalán está indicado para el tratamiento paliativo del mieloma múltiple y del carcinoma epitelial no resecable del ovario. La supresión de la médula ósea es el efecto secundario limitante de dosis más común del melfalán.
El clorambucilo, ácido 4-[bis(2-cloroetil)amino]bencenobutanoico está disponible en el mercado como comprimidos LEUKERAN. El clorambucilo está indicado para el tratamiento paliativo de la leucemia linfática crónica y linfomas malignos tales como linfosarcoma, linfoma folicular gigante y enfermedad de Hodgkin. La supresión de la médula ósea es el efecto secundario limitante de dosis más común del clorambucilo.
El busulfán, dimetanosulfonato de 1-4-butanadiol, está disponible en el mercado como COMPRIMIDOS MYLERAN. El busulfán está indicado para el tratamiento paliativo de la leucemia mielógena crónica. La supresión de la médula ósea es el efecto secundario limitante de dosis más común del busulfán.
La carmustina, 1,3-[bis(2-cloroetil)-1-nitrosourea, está disponible en el mercado como viales individuales de material liofilizado como BiCNU. La carmustina está indicada para el tratamiento paliativo como un agente en solitario o en combinación con otros agentes para tumores cerebrales, mieloma múltiple, enfermedad de Hodgkin y linfomas no Hodgkin. La mielosupresión retardada es el efecto secundario limitante de dosis más común de la carmustina.
La dacarbazina, 5-(3,3-dimetil-1-triazeno)-imidazol-4-carboxamida, está disponible en el mercado como viales individuales de material como DTIC-Dome. La dacarbazina está indicada para el tratamiento del melanoma maligno metastásico y en combinación con otros agentes para el tratamiento de segunda línea de la enfermedad de Hodgkin. Las náuseas, vómitos y anorexia son los efectos limitantes de dosis más comunes de la dacarbazina.
Los antineoplásicos antibióticos son agentes inespecíficos de fase que se unen o se intercalan con el ADN. Típicamente, dicha acción da como resultado complejos de ADN estables o rotura de cadena, que altera la función normal de los ácidos nucleicos conduciendo a muerte celular. Los ejemplos de agentes antineoplásicos antibióticos incluyen, pero sin limitación, actinomicinas tales como dactinomicina, antraciclinas tales como daunorrubicina y doxorrubicina y bleomicinas.
La dactinomicina, también conocida como Actinomicina D, está disponible en el mercado en forma inyectable como COSMEGEN. La dactinomicina está indicada para el tratamiento del tumor de Wilm y del rabdomiosarcoma. Las náuseas, vómitos y anorexia son los efectos limitantes de dosis más comunes de la dactinomicina.
La daunorrubicina, clorhidrato de (8S-cis)-8-acetil-10-[(3-amino-2,3,6-tridesoxi--L-lixo-hexopiranosil)oxi]-7,8,9,10tetrahidro-6,8,11-trihidroxi-1-metoxi-5,12-naftacenodiona, está disponible en el mercado como forma inyectable liposomal como DAUNOXOME o como un inyectable como CERUBIDINA. La daunorrubicina está indicada para la inducción de la remisión en el tratamiento de la leucemia no linfocítica aguda y del sarcoma de Kaposi asociado con VIH avanzado. La mielosupresión es el efecto secundario limitante de dosis más común de la daunorrubicina.
La doxorrubicina, clorhidrato de (8S,10S)-10-[(3-amino-2,3,6-tridesoxi--L-lixo-hexopiranosil)oxi]-8-glicoloil-7,8,9,10tetrahidro-6,8,11-trihidroxi-1-metoxi-5,12 naftacenodiona, está disponible en el mercado como una forma inyectable como RUBEX o ADRIAMYCIN RDF. La doxorrubicina está indicada principalmente para el tratamiento de la leucemia linfoblástica aguda y la leucemia mieloblástica aguda, pero también es un componente útil en el tratamiento de algunos tumores sólidos y linfomas. La mielosupresión es el efecto secundario limitante de dosis más común de la doxorrubicina.
La bleomicina, una mezcla de antibióticos glicopeptídicos citotóxicos aislados de una cepa de Streptomyces verticillos, está disponible en el mercado como BLENXANE. La bleomicina está indicada como un tratamiento paliativo, como un agente en solitario o en combinación con otros agentes, del carcinoma de células escamosas, linfomas y carcinomas testiculares. Las toxicidades pulmonar y cutánea son los efectos secundarios limitantes de dosis más comunes de la bleomicina.
Los inhibidores de la topoisomerasa II incluyen, pero sin limitación, epipodofilotoxinas.
Las epipodofilotoxinas son agentes antineoplásicos específicos de fase procedentes de la planta mandrágora. Las epipodofilotoxinas afectan típicamente a células en las fases S y G2 del ciclo celular formando un complejo ternario con la topoisomerasa II y el ADN, causando roturas de la cadena de ADN. Las roturas de cadena se acumulan y sigue la muerte celular. Los ejemplos de epipodofilotoxinas incluyen, pero sin limitación, etopósido y tenipósido.
El etopósido, 4’-demetil-epipodofilotoxin-9[4,6-0-(R)-etiliden--D-glucopiranósido], está disponible en el mercado como solución inyectable o cápsulas como VePESID y se conoce comúnmente como VP-16. El etopósido está indicado como agente individual o en combinación con otros agentes quimioterápicos en el tratamiento de cánceres testicular y pulmonar no microcítico. La mielosupresión es el efecto secundario más común del etopósido. La incidencia de leucopenia tiende a ser más grave que la de trombocitopenia.
El tenipósido 4’-demetil-epipodofilotoxin-9[4,6-0-(R)-teniliden--D-glucopiranósido], está disponible en el mercado como solución inyectable como VUMON y se conoce comúnmente como VM-26. El tenipósido está indicado como agente, en solitario o en combinación con otros agentes quimioterápicos, en el tratamiento de la leucemia aguda en niños. La mielosupresión es el efecto secundario limitante de dosis más común del tenipósido. El tenipósido puede inducir tanto leucopenia como trombocitopenia.
Los agentes neoplásicos antimetabolitos son agentes antineoplásicos específicos de fase que actúan en la fase S (síntesis de ADN) del ciclo celular inhibiendo la síntesis de ADN o inhibiendo la síntesis de bases de purina o pirimidina y limitando por lo tanto la síntesis de ADN. Por consiguiente, la fase S no avanza y sigue la muerte celular. Los ejemplos de agentes antineoplásicos antimetabolitos incluyen, pero sin limitación, fluorouracilo, metotrexato, citarabina, mecaptopurina, tioguanina y gemcitabina.
El 5-fluorouracilo, 5-fluoro-2,4-(1H,3H)-pirimidinodiona, está disponible en mercado como fluoruracilo. La administración de 5-fluorouracilo conduce a la inhibición de la síntesis de timidilato y también se incorpora tanto en el ARN como en el ADN. El resultado típicamente es la muerte celular. El 5-fluorouracilo está indicado como agente en solitario o en combinación con otros agentes quimioterápicos en el tratamiento de carcinomas de mama, colon, recto, estómago y páncreas. La mielosupresión y la mucositis son efectos secundarios limitantes de dosis del 5fluorouracilo. Otros análogos de fluoropirimidina incluyen 5-fluorodesoxiuridina (floxuridina) y 5-fluorodesoxiuridina monofosfato.
La citarabina, 4-amino-1--D-arabinofuranosil-2(1H)-pirimidinona, está disponible en el mercado como CYTOSARU y se conoce comúnmente como Ara-C. Se piensa que la citarabina presenta especificidad de fase celular en la fase S inhibiendo la elongación de la cadena de ADN por incorporación terminal de citarabina en la cadena de ADN en crecimiento. La citarabina está indicada como agente en solitario o en combinación con otros agentes quimioterápicos en el tratamiento de la leucemia aguda. Otros análogos de citidina incluyen 5-azacitidina y 2’,2’difluorodesoxicitidina (gemcitabina). La citarabina induce leucopenia, trombocitopenia y mucositis.
La mercaptopurina, 1,7-dihidro-6H-purina-6-tiona monohidrato, está disponible en el mercado como PURINETHOL. La mercaptopurina presenta especificidad de fase celular en la fase S inhibiendo la síntesis de ADN mediante un mecanismo no especificado todavía. La mercaptopurina está indicada como agente en solitario o en combinación con otros agentes quimioterápicos en el tratamiento de la leucemia aguda. La mielosupresión y la mucositis gastrointestinal son efectos secundarios esperados de la mercaptopurina a dosis altas. Un análogo de mercaptopurina útil es la azatioprina.
La tioguanina, 2-amino-1,7-dihidro-6H-purina-6-tiona, está disponible en el mercado como TABLOID. La tioguanina presenta especificidad de fase celular en la fase S inhibiendo la síntesis de ADN mediante un mecanismo no especificado todavía. La tioguanina está indicada como agente en solitario o en combinación con otros agentes quimioterápicos en el tratamiento de la leucemia aguda. La mielosupresión, incluyendo leucopenia, trombocitopenia y anemia, es el efecto secundario limitante de dosis más común de la administración de tioguanina. Sin embargo, los efectos secundarios gastrointestinales aparecen y pueden ser limitantes de dosis. Otros análogos de purina incluyen pentostatina, eritrohidroxinoniladenina, fosfato de fludarabina y cladribina.
La gemcitabina, monoclorhidrato de 2’-desoxi-2’,2’-difluorocitidina (isómero ), está disponible en el mercado como GEMZAR. La gemcitabina presenta especificidad de fase celular en la fase S y bloquea la progresión de las células a través del límite G1/S. La gemcitabina está indicada en combinación con cisplatino en el tratamiento del cáncer pulmonar de células microcíticas localmente avanzado y en solitario en el tratamiento del cáncer pancreático localmente avanzado. La mielosupresión, incluyendo leucopenia, trombocitopenia y anemia, es el efecto secundario limitante de dosis más común de la administración de gemcitabina.
El metotrexato, ácido N-[4[[(2,4-diamino-6-pteridinil)metil]metilamino]benzoil]-L-glutámico, está disponible en el mercado como metotrexato sódico. El metotrexato presenta efectos de fase celular específicamente en la fase S inhibiendo la síntesis, reparación y replicación del ADN a través de la inhibición de la ácido dihidrofólico reductasa, que es necesaria para la síntesis de nucleótidos de purina y timidilato. El metotrexato está indicado como agente en solitario o en combinación con otros agentes quimioterápicos en el tratamiento del coriocarcinoma, leucemia meníngea, linfoma no Hodgkin y carcinomas de mama, cabeza, cuello, ovario y vejiga. La mielosupresión (leucopenia, trombocitopenia y anemia) y la mucositis son un efecto secundario esperado de la administración de metotrexato.
Las camptotecinas, incluyendo, camptotecina y derivados de la camptotecina, están disponibles o en desarrollo como inhibidores de la Topoisomerasa I. Se piensa que la actividad citotóxica de las campotecinas está relacionada con su actividad inhibidora de la Topoisomerasa I. Los ejemplos de campotecinas incluyen, pero sin limitación, irinotecán, topotecán y las diversas formas ópticas de 7-(4-metilpiperazin-metilen)-10,11-etilendioxi-20-camptotecina descritas a continuación.
El irinotecán HCl, clorhidrato de (4S)-4,11-dietil-4-hidroxi-9-[(4-piperidinpiperidin)carboniloxi]-1Hpirano[3’,4’,6,7]indolizin[1,2-b]quinolin-3,14(4H,12H)-diona, está disponible en el mercado como la solución inyectable CAMPTOSAR.
El irinotecán es un derivado de la camptotecina que se une, junto con su metabolito activo SN-38, al complejo de la topoisomerasa I-ADN. Se piensa que la citotoxicidad se produce como resultado de roturas de la doble cadena irreparables causadas por la interacción del complejo ternario topoisomerasa I:ADN:irinotecán o SN-38 con enzimas de replicación. El irinotecán está indicado para el tratamiento del cáncer metastásico del colon o del recto. Los efectos secundarios limitantes de dosis del irinotecán HCL son mielosupresión, incluyendo neutropenia y efectos GI incluyendo diarrea.
El topotecán HCI, monoclorhidrato de (S)-10-[(dimetilamino)metil]-4-etil-4,9-dihidroxi-1H-pirano[3’,4’,6,7]indolizin[1,2b]quinolin-3,14-(4H,12H)-diona, está disponible en el mercado como la solución inyectable HYCAMTIN. El topotecán es un derivado de la camptotecina que se une al complejo de la topoisomerasa I-ADN y evita la religación de roturas de cadenas sencillas causadas por la Topoisomerasa I en respuesta a presión torsional de la molécula de ADN. El topotecán está indicado para el tratamiento de segunda línea del carcinoma metastásico del cáncer de ovario y de pulmón microcítico. El efecto secundario limitante de dosis del topotecán HCl es la mielosupresión, principalmente neutropenia.
También es de interés el derivado de campotecina de Fórmula A siguiente, actualmente en desarrollo, incluyendo la forma de mezcla racémica (R,S) así como los enantiómeros R y S:
conocida por el nombre químico “7-(4-metilpiperazin-metilen)-10,11-etilenedioxi-20(R,S)-camptotecina (mezcla racémica) o “7-(4-metilpiperazin-metilen)-10,11-etilenedioxi-20(R)-camptotecina (enantiómero de R) o “7-(4metilpiperazin-metilen)-10,11-etilenedioxi-20(S)-camptotecina (enantiómero de S). Dicho compuesto, así como compuestos relacionados, se describen incluyendo métodos de preparación en las Patentes de Estados Unidos Nº 6.063.923; 5.342.947; 5.559.235; 5.491.237 y la Solicitud de Patente de los Estados Unidos en trámite Nº 08/977.217 presentada el 24 de noviembre de 1997.
Las hormonas y análogos hormonales son compuestos útiles para tratar cánceres en los que existe una relación entre la hormona u hormonas y el crecimiento y/o ausencia de crecimiento del cáncer. Los ejemplos de hormonas y análogos hormonales útiles en el tratamiento del cáncer, incluyen, pero sin limitación, adrenocorticosteroides tales como prednisona y prednisolona que son útiles en el tratamiento del linfoma maligno y de la leucemia aguda en niños; aminoglutetimida y otros inhibidores de la aromatasa tales como anastrozol, letrazol, vorazol y exemestano, útiles en el tratamiento del carcinoma adrenocortical y del carcinoma de mama dependiente de hormonas que contiene receptores de estrógenos; progestrinas tales como acetato de megestrol útiles en el tratamiento del cáncer de mama dependiente de hormonas y del carcinoma endometrial; estrógenos, andrógenos y antiandrógenos tales como flutamida, nilutamida, bicalutamida, acetato de ciproterona y 5-reductasas tales como finasterida y
dutasterida, útiles en el tratamiento del carcinoma prostático y de la hipertrofia prostática benigna; antiestrógenos tales como tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno, iodoxifeno, así como modulares selectivos de receptores de estrógenos (SERMS) tales como los descritos en las Patentes de Estados Unidos Nº 5.681.835, 5.877.219, y 6.207.716, útiles en el tratamiento del carcinoma de mama dependiente de hormonas y otros cánceres susceptibles; y hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH) y análogos de la misma que estimulan la liberación de hormona luteinizante (LH) y/o hormona folículoestimulante (FSH) para el tratamiento del carcinoma prostático, por ejemplo, agonistas y antagonistas de LHRH tales como acetato de goserelina y luprolida.
Los inhibidores de la ruta de transducción de señales son aquellos inhibidores que bloquean o inhiben el proceso químico que provoca un cambio intracelular. Como se usa en este documento, este cambio es la proliferación o diferenciación celular. Los inhibidores de la transducción de señales útiles en la presente invención incluyen inhibidores de tirosina quinasas receptoras, tirosina quinasas no receptoras, bloqueantes de dominio SH2/SH3, serina/treonina quinasas, fosfotidilinositol-3 quinasas, señalización de mioinositol y oncogenes Ras.
Varias proteínas tirosina quinasas catalizan la fosforilación de restos tirosilo específicos en diversas proteínas implicadas en la regulación del crecimiento regular. Dichas proteínas tirosina quinasas pueden clasificarse ampliamente como quinasas receptoras o no receptoras.
Las tirosina quinasas receptoras son proteínas transmembrana que tienen un dominio de unión a ligando extracelular, un dominio transmembrana y un dominio tirosina quinasa. Las tirosina quinasas receptoras están implicadas en la regulación del crecimiento celular y generalmente se denominan receptores de factores de crecimiento. Se ha demostrado que una activación inapropiada o incontrolada de muchas de estas quinasas, es decir, actividad receptora de factores de crecimiento de quinasas aberrante, por ejemplo, por sobreexpresión o mutación, da como resultado un crecimiento celular descontrolado. Por consiguiente, la actividad aberrante de dichas quinasas se ha ligado al crecimiento de tejido maligno. Por consiguiente, los inhibidores de dichas quinasas podrían proporcionar métodos de tratamiento del cáncer. Los receptores de factores de crecimiento incluyen, por ejemplo, receptor de factor de crecimiento epidérmico (EGFr), receptor de factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGFr), erbB2, erbB4, receptor de factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFr), tirosina quinasa con dominios similares a inmunoglobulina y de homología con el factor de crecimiento epidérmico (TIE-2), receptor de factor de crecimiento de insulina I (IGFI), factor estimulante de colonias de macrófagos (cfms), BTK, ckit, cmet, receptores del factor de crecimiento de fibroblastos (FGF), receptores Trk (TrkA, TrkB y TrkC), receptores de efrina (eph) y protooncogén RET. Varios inhibidores de receptores de crecimiento están en desarrollo e incluyen antagonistas de ligando, anticuerpos, inhibidores de tirosina quinasa y oligonucleótidos antisentido. Los receptores de factores de crecimiento y agentes que inhiben la función del receptor de factor de crecimiento se describen, por ejemplo, en Kath, John C., Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10 (6): 803-818; Shawver et al DDT Vol 2, Nº 2 Febrero 1997; y Lofts, F. J. et al, “Growth factor receptors as targets”, New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy, ed. Workman, Paul y Kerr, David, CRC press 1994, Londres.
Las tirosina quinasas, que no son quinasas de receptores de factores de crecimiento se denominan tirosina quinasas no receptoras. Las tirosina quinasas no receptoras para uso en la presente invención, que son dianas o dianas potenciales de fármacos anticancerosos incluyen cSrc, Lck, Fyn, Yes, Jak, cAbl, FAK (quinasa de adhesión focal), tirosina quinasa de Brutons y Bcr-Abl. Dichas quinasas no receptoras y agentes que inhiben la función tirosina quinasa no receptora se describen en Sinh, S. y Corey, S. J., (1999) Journal of Hematotherapy and Stem Cell Research 8 (5): 465-80; y Bolen, J. B., Brugge, J. S., (1997) Annual review of Immunology. 15: 371-404.
Los bloqueantes de dominio SH2/SH3 son agentes que alteran la unión del dominio SH2 o SH3 en una diversidad de enzimas o proteínas adaptadoras, incluyendo la subunidad p85 de PI3-K, quinasas de la familia Src, moléculas adaptadoras (Shc, Crk, Nck, Grb2) y Ras-GAP. Los dominios SH2/SH3 como dianas para fármacos anticancerosos se analizan en Smithgall, T. E. (1995), Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 34 (3) 125-32.
Los inhibidores de Serina/Treonina Quinasas incluyendo bloqueantes de la cascada de MAP quinasas que incluyen bloqueantes de Raf quinasas (rafk), quinasas reguladas por mitógenos o señales extracelulares (MEK) y quinasas reguladas por señales extracelulares (ERK); y bloqueantes de miembros de la familia de Proteína quinasa C incluyendo bloqueantes de PKC (alfa, beta, gamma, epsilon, mu, lambda, iota, zeta). La familia de quinasas IkB (IKKa, IKKb), quinasas de la familia PKB, miembros de la familia de la quinasa akt y quinasas receptoras de TGF beta. Dichas Serina/Treonina quinasas e inhibidores de las mismas se describen en Yamamoto, T., Taya, S., Kaibuchi, K., (1999), Journal of Biochemistry. 126 (5) 799-803; Brodt, P, Samani, A., y Navab, R. (2000), Biochemical Pharmacology, 60. 1101-1107; Massague, J., Weis-Garcia, F. (1996) Cancer Surveys. 27: 1-64; Philip, P. A., y Harris, A. L. (1995), Cancer Treatment and Research. 78: 3-27, Lackey, K. et al Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, (10), 2000, 223-226; Patente de Estados Unidos Nº 6.268.391; y Martinez-Iacaci, L., et al, Int. J. Cancer (2000), 88(1), 44-52.
Convenientemente, los compuestos farmacéuticamente activos de la invención se usan en combinación con un inhibidor de MEK. Convenientemente, la N-{3-[3-ciclopropil-5-(2-fluoro-4-yodo-fenilamino)-6,8-dimeti-2,4,7-trioxo3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirido[4,3-d]pirimidin-1-il]fenil}acetamida o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable, convenientemente el solvato de dimetilsulfóxido, de la misma, que se describe y se reivindica en la Solicitud Internacional Nº PCT/JP2005/011082, que tiene una fecha de presentación internacional del 10 de junio de 2005;
Número de Publicación Internacional WO 2005/121142 y una fecha de Publicación Internacional del 22 de diciembre de 2005, cuya descripción completa se incorpora en este documento como referencia. La N-{3-[3-ciclopropil-5-(2fluoro-4-yodo-fenilamino)-6,8-dimeti-2,4,7-trioxo-3,4,6,7-tetrahidro-2H-pirido[4,3-d]pirimidin-1-il]fenil}acetamida puede prepararse como se describe en la Publicación de Patente de Estados Unidos Nº 2006/0014768, publicada el 19 de enero de 2006, cuya descripción completa se incorpora en este documento como referencia.
Convenientemente, los compuestos farmacéuticamente activos de la invención se usan en combinación con un inhibidor de B-Raf. Convenientemente, N-{3-[5-(2-amino-4-pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}2,6-difluorobencenosulfonamida o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma que se describe y se reivindica en la Solicitud Internacional Nº PCT/US2009/042682, que tiene una fecha de presentación internacional del 4 de mayo de 2009, cuya descripción completa se incorpora en este documento como referencia. La N-{3-[5-(2-amino-4pirimidinil)-2-(1,1-dimetiletil)-1,3-tiazol-4-il]-2-fluorofenil}-2,6-difluorobencenosulfonamida puede prepararse como se describe en la Solicitud Internacional Nº PCT/US2009/042682.
Los inhibidores de los miembros de la familia de la Fosfatidilinositol-3 Quinasa incluyendo bloqueantes de PI3quinasa, ATM, DNA-PK y Ku también pueden ser útiles en la presente invención. Dichas quinasas se analizan en Abraham, R. T. (1996), Current Opinion in Immunology. 8 (3) 412-8; Canman, C. E., Lim, D. S. (1998), Oncogene 17
(25)
3301-3308; Jackson, S. P. (1997), International Journal of Biochemistry and Cell Biology. 29 (7): 935-8; y Zhong,
H.
et al, Cancer res, (2000) 60(6), 1541-1545.
También son de interés en la presente invención inhibidores de la señalización de mioinositol tales como bloqueantes de la fosfolipasa C y análogos de mioinositol. Dichos inhibidores de señal se describen en Powis G., y Kozikowski A., (1994) New Molecular Targets for Cancer Chemotherapy ed., Paul Workman y David Kerr, CRC press 1994, Londres.
Otro grupo de inhibidores de la ruta de transducción de señales son los inhibidores del Oncogén Ras. Dichos inhibidores incluyen inhibidores de la farnesiltransferasa, geranil-geranil transferasa y CAAX proteasas así como oligonucleótidos antisentido, ribozimas e inmunoterapia. Se ha demostrado que dichos inhibidores bloquean la activación de ras en células que contienen ras mutante de tipo silvestre, actuando por lo tanto como agentes antiproliferación. La inhibición del oncogén Ras se analiza en Scharovsky, O. G., Rozados, V. R., Gervasoni, S. I. Matar, P. (2000), Journal of Biomedical Science. 7(4) 292-8; Ashby, M. N. (1998), Current Opinion in Lipidology. 9 (2) 99-102; y BioChim. Biophys. Acta, (19899) 1423(3): 19-30.
Como se ha mencionado anteriormente, los antagonistas de anticuerpos para la unión de ligandos de quinasas receptoras también pueden servir como inhibidores de la transducción de señales. Este grupo de inhibidores de la ruta de transducción de señales incluyen el uso de anticuerpos humanizados para el dominio de unión a ligando extracelular de tirosina quinasas receptoras. Por ejemplo, anticuerpo específico de EGFR Imclone C225 (véase Green, M. C. et al, Monoclonal Antibody Therapy for Solid Tumors, Cancer Treat. Rev., (2000), 26 (4), 269-286); anticuerpo de erbB2 Herceptin (véase Tyrosine Kinase Signalling en Breast cancer: erbB Family Receptor Tyrosine Kniases, Breast cancer Res., 2000, 2 (3), 176-183); y anticuerpo específico de VEGFR2 2CB (véase Brekken, R. A. et al, Selective Inhibition of VEGFR2 Activity by a monoclonal Anti-VEGF antibody blocks tumor growth in mice, Cancer Res. (2000) 60, 5117-5124).
Los inhibidores de la angiogénesis de quinasas no receptoras también pueden ser útiles en la presente invención. Los inhibidores de la angiogénesis relacionados con VEGFR y TIE2 se han analizado anteriormente en relación con los inhibidores de la transducción de señales (ambos receptores son tirosina quinasas receptoras). La angiogénesis en general está vinculada a la señalización de erbB2/EGFR puesto que se ha demostrado que los inhibidores de erbB2 y EGFR inhiben la angiogénesis, principalmente la expresión de VEGF. Por consiguiente, los inhibidores de tirosina quinasa no receptora pueden usarse en combinación con los compuestos de la presente invención. Por ejemplo, los anticuerpos anti-VEGF que no reconocen VEGFR (la tirosina quinasa receptora), pero que se unen al ligando; inhibidores de molécula pequeña de integrina (alfav, beta3) que inhibirán la angiogénsis; endostatina y angiostatina (no RTK) también pueden demostrar ser útiles en combinación con los compuestos descritos. (Véase Bruns CJ et al (2000), Cancer Res., 60: 2926-2935; Schreiber AB, Winkler ME, y Derynck R. (1986), Science, 232: 1250-1253; Yen L et al. (2000), Oncogene 19: 3460-3469).
Los agentes usados en regímenes inmunoterapéuticos también pueden ser útiles en combinación con los compuestos de Fórmula (I). Existen varias estrategias inmunológicas para generar una respuesta inmune. Estas estrategias están generalmente en el campo de las vacunaciones contra tumores. La eficacia de las estrategias inmunológicas puede aumentarse enormemente mediante la inhibición combinada de rutas de señalización usando un inhibidor de molécula pequeña. El análisis de la estrategia de vacuna inmunológica/tumoral contra erbB2/EGFR se encuentran en Reilly RT et al. (2000), Cancer Res. 60: 3569-3576; y Chen Y, Hu D, Eling DJ, Robbins J, y Kipps TJ. (1998), Cancer Res. 58: 1965-1971.
Los agentes usados en regímenes proapoptóticos (por ejemplo, oligonucleótidos antisentido de bcl-2) también pueden usarse en la combinación de la presente invención. Los miembros de la familia Bcl-2 de proteínas bloquean la apoptosis. Por lo tanto, la sobrerregulación de bcl-2 se ha relacionado con quimiorresistencia. Los estudios han demostrado que el factor de crecimiento epidérmico (EGF) estimula miembros antiapoptóticos de la familia de bcl-2
(es decir, mcl-1). Por lo tanto, las estrategias diseñadas para regular negativamente la expresión de bcl-2 en tumores han demostrado beneficio clínico y están ahora en ensayos de Fase II/III, en concreto el oligonucleótido antisentido de bcl-2 G3139 de Genta. Dichas estrategias proapoptóticas usando la estrategia oligonucleótidos antisentido para bcl-2 se analizan en Water JS et al. (2000), J. Clin. Oncol. 18: 1812-1823; y Kitada S et al. (1994), Antisense Res. Dev. 4: 71-79.
Los inhibidores de la señalización del ciclo celular inhiben moléculas implicadas en el control del ciclo celular. Una familia de proteínas quinasas denominadas quinasas dependientes de ciclina (CDK) y su interacción con una familia de proteínas denominadas ciclinas controla la progresión a través del ciclo celular eucariota. La activación e inactivación coordinada de diferentes complejos de ciclina/CDK es necesaria para la progresión normal a través del ciclo celular. Están en desarrollo varios inhibidores de la señalización de ciclo celular. Por ejemplo, los ejemplos de quinasas dependientes de ciclina, incluyendo CDK2, CDK4 y CDK6 e inhibidores de las mismas se describen, por ejemplo, en Rosania et al, Exp. Opin. Ther. Patents (2000) 10 (2):2 15-230.
Composiciones
Los compuestos farmacéuticamente activos dentro del alcance de esta invención son útiles como inhibidores de PDK1 en mamíferos, particularmente en seres humanos, que lo necesiten.
Los compuestos de Fórmula (III) o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos normalmente, pero no necesariamente, se formularán en composiciones farmacéuticas antes de la administración a un paciente. Por consiguiente, en otro aspecto la invención se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden compuestos de Fórmula (III) o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.
Las dosis de los compuestos farmacéuticamente activos de la presente invención en una unidad de dosificación farmacéutica como se ha descrito anteriormente serán una cantidad eficaz no tóxica convenientemente seleccionada en el intervalo de 0,001-100 mg/kg de compuesto activo, convenientemente de 0,01-50 mg/kg, convenientemente de 0,1-20 mg/kg. Cuando se trata a un paciente humano que necesita un inhibidor de PDK1, la dosis seleccionada se administra preferiblemente de 1-6 veces al día, por vía oral o parenteral. Las formas preferidas de administración parenteral incluyen por vía tópica, rectal, transdérmica, por inyección y de forma continua por infusión. Las unidades de dosificación oral para administración humana contienen convenientemente de aproximadamente 0,05 a 3500 mg de compuesto activo, convenientemente de 0,5 a 350 mg, convenientemente de 5 a 200 mg. Se prefiere la administración oral, que usa dosificaciones menores. Sin embargo, también puede usarse la administración parenteral, a dosificaciones elevadas, cuando sea segura y conveniente para el paciente.
Las composiciones farmacéuticas de la invención contienen típicamente un compuesto de Fórmula (III) o sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Sin embargo, en ciertas realizaciones, las composiciones farmacéuticas de la invención contienen más de un compuesto de Fórmula (III). Por ejemplo, en ciertas realizaciones las composiciones farmacéuticas de la invención contienen dos compuestos de Fórmula (III). Además, las composiciones farmacéuticas de la invención pueden comprender opcionalmente además uno o más compuestos farmacéuticamente activos adicionales.
El compuesto de Fórmula (III) o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo y el excipiente o excipientes farmacéuticamente aceptables se formularán típicamente en una forma de dosificación adaptada para la administración al paciente por la vía de administración deseada. Por ejemplo, las formas de dosificación incluyen las adaptadas para (1) administración oral, tales como comprimidos, cápsulas, comprimidos encapsulados, píldoras, trociscos, polvos, jarabes, elixires, suspensiones, soluciones, emulsiones, sobrecitos y obleas; y (2) administración parenteral, tales como soluciones, suspensiones y polvos estériles para reconstitución.
Los excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados variarán dependiendo de la forma de dosificación particular seleccionada. Además, los excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados pueden seleccionarse por una función particular para la que pueden servir en la composición. Por ejemplo, ciertos excipientes farmacéuticamente aceptables pueden seleccionarse por su capacidad para facilitar la producción de formas de dosificación uniforme. Pueden seleccionarse ciertos excipientes farmacéuticamente aceptables por su capacidad para facilitar la producción de formas de dosificación estables. Ciertos excipientes farmacéuticamente aceptables pueden seleccionarse por su capacidad para facilitar que se lleve o trasporte el compuesto o compuestos de la invención una vez que se administra al paciente desde un órgano o una parte del cuerpo a otro órgano o parte del cuerpo. Ciertos excipientes farmacéuticamente aceptables pueden seleccionarse por su capacidad para aumentar la conformidad del paciente.
Los excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados incluyen los siguientes tipos de excipientes: diluyentes, cargas, aglutinantes, disgregantes, lubricantes, emolientes, agentes de granulación, agentes de recubrimiento, agentes humectantes, disolventes, codisolventes, agentes de suspensión, emulsionantes, edulcorantes, agentes saporíferos, agentes enmascaradores del sabor, agentes colorantes, agentes antiapelmazantes, humectantes, agentes quelantes, plastificantes, agentes de aumento de la viscosidad, antioxidantes, conservantes, estabilizantes, tensioactivos y agentes tamponantes. El especialista apreciará que determinados excipientes farmacéuticamente
aceptables pueden servir para más de una función y pueden servir para funciones alternativas dependiendo de cuánto del excipiente esté presente en la formulación y de qué otros ingredientes estén presentes en la formulación.
El especialista posee conocimientos y especialidad en la técnica para permitirle seleccionar excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados en cantidades apropiadas para el uso en la invención. Además, existen varios recursos que están disponibles para el especialista, que describen excipientes farmacéuticamente aceptables y pueden ser útiles en la selección de excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados. Los ejemplos incluyen Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company), The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited) y The Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press).
Las composiciones farmacéuticas de la invención se preparan usando técnicas y métodos conocidos por los especialistas en la técnica. Algunos de los métodos usados comúnmente en la técnica se describen en Remington’s Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company).
En un aspecto, la invención se refiere a una forma de dosificación oral sólida tal como un comprimido o cápsula que comprende una cantidad segura y eficaz de un compuesto de Fórmula (III) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un diluyente o carga. Los diluyentes y cargas adecuados incluyen lactosa, sacarosa, dextrosa, manitol, sorbitol, almidón (por ejemplo, almidón de maíz, almidón de patata y almidón pregelatinizado), celulosa y sus derivados (por ejemplo, celulosa microcristalina), sulfato de calcio y fosfato de calcio dibásico. La forma de dosificación sólida oral puede comprender además un aglutinante. Los aglutinantes adecuados incluyen almidón (por ejemplo, almidón de maíz, almidón de patata y almidón pregelatinizado), gelatina, goma arábiga, alginato de sodio, ácido algínico, tragacanto, goma guar, povidona y celulosa y sus derivados (por ejemplo celulosa microcristalina). La forma de dosificación sólida oral puede comprender además un disgregante. Los disgregantes adecuados incluyen crospovidona, almidón glicolato sódico, croscarmelosa, ácido algínico y carboximetilcelulosa sódica. La forma de dosificación sólida oral puede comprender además un lubricante. Los lubricantes adecuados incluyen ácido esteárico, estearato de magnesio, esterato de calcio y talco.
Cuando sea apropiado, las formulaciones de unidad de dosificación para administración oral pueden microencapsularse. La composición también puede prepararse para prolongar o mantener la liberación, como por ejemplo, por recubrimiento o embebimiento de material particular en polímeros, cera o similares.
Los compuestos de la invención también pueden acoplarse con polímeros solubles como vehículos de fármacos dirigibles. Dichos polímeros pueden incluir polivinilpirrolidona, copolímero de pirano, polihidroxipropilmetacrilamidafenol, polihidroxietilaspartamidefenol o polietileneoxidopolilisina sustituida con restos palmitoílo. Además, los compuestos de la invención pueden acoplarse a una clase de polímeros biodegradables útiles para conseguir una liberación controlada del fármaco, por ejemplo, ácido poliláctico, caprolactona poliépsilon, ácido polihidroxibutírico, poliortoésteres, poliacetales, polidihidropiranos, policianoacrilatos y copolímeros de bloque reticulados o anfipáticos de hidrogeles.
En otro aspecto, la invención se refiere a una forma de dosificación oral líquida. Pueden prepararse líquidos orales tales como una solución, jarabes y elixires en forma unitaria de dosificación de modo que una cantidad dada contiene una cantidad predeterminada de un compuesto de la invención. Pueden prepararse jarabes disolviendo el compuesto de la invención en una solución acuosa convenientemente aromatizada, mientras que los elixires se preparan mediante el uso de un vehículo alcohólico no tóxico. Pueden formularse suspensiones por dispersión del compuesto de la invención en un vehículo no tóxico. También pueden añadirse solubilizantes y emulsionantes tales como alcoholes isostearílicos etoxilados y ésteres de polioxietilensorbitol, conservantes, aditivos de sabor tales como aceite de menta o edulcorantes naturales o sacarina u otros edulcorantes artificiales y similares.
Pueden añadirse otros excipientes farmacéuticamente aceptables a la suspensión o solución. El compuesto de la invención puede estabilizarse mediante la adición de un ácido inorgánico, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido nítrico, ácido sulfúrico y/o ácido fosfórico; un ácido orgánico, por ejemplo, ácido ascórbico, ácido cítrico, ácido acético y ácido tartárico, etc.; un agente formador de complejos tal como EDTA o ácido cítrico y sales del mismo; o un antioxidante tal como un antioxidante tal como vitamina E o ácido ascórbico. Pueden usarse en solitario o en conjunto para estabilizar el compuesto de la invención. Pueden añadirse conservantes tales como cloruro de benzalconio o ácido benzoico y sales de los mismos. Puede añadirse un tensioactivo particularmente para mejorar la estabilidad física de las suspensiones. Éstas incluyen lecitina, dioctilsulfosuccinato disódico, ácido oleico y ésteres de sorbitán.
Otro aspecto de la invención se refiere a una composición farmacéutica adaptada para administración parenteral que comprende un compuesto de Fórmula (III) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Las composiciones farmacéuticas adaptadas para administración parenteral incluyen soluciones para inyección estériles acuosas y no acuosas que pueden contener antioxidantes, tampones, bacteriostáticos y solutos que hacen a la formulación isotónica con la sangre del destinatario deseado; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas que pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes. Las composiciones pueden presentarse en recipientes de dosis unitaria o multidosis, por ejemplo ampollas y viales sellados y pueden almacenarse en un estado secado por congelación (liofilizado) que requiere sólo la adición del vehículo líquido estéril, por ejemplo agua para inyección,
inmediatamente antes del uso. Las soluciones y suspensiones para inyección extemporánea pueden prepararse a partir de polvos, gránulos y comprimidos estériles.
Las dosificaciones óptimas a administrar pueden determinarse fácilmente por los especialistas en la técnica y variarán con el inhibidor de PDK1 particular en uso, la potencia de la preparación, el modo de administración y el progreso del estado patológico. Los factores adicionales que dependen del paciente particular que se trate darán como resultado la necesidad de ajustar dosificaciones, incluyendo la edad, peso, dieta del paciente y momento de administración.
El método de inducir actividad inhibidora de PDK1 en mamíferos, incluyendo seres humanos, comprende administrar a un sujeto que necesite dicha actividad una cantidad inhibidora de PDK1 eficaz de un compuesto farmacéuticamente activo de la presente invención.
La invención también proporciona el uso de un compuesto de Fórmula (III) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de o la disminución de la gravedad del cáncer.
La invención también proporciona una composición farmacéutica para el uso como inhibidor de PDK1, que comprende un compuesto de Fórmula (III) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
La invención también proporciona una composición farmacéutica para el uso en el tratamiento del cáncer que comprende un compuesto de Fórmula (III) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
Además, los compuestos farmacéuticamente activos de la presente invención pueden coadministrarse con ingredientes activos adicionales, tales como otros compuestos conocidos para tratar cáncer o compuestos que se sabe que tienen utilidad cuando se usan en combinación con un inhibidor de PDK1.
Sin una elaboración adicional, se piensa que un especialista la técnica puede, usando la descripción anterior, utilizar la presente invención en su alcance más completo. Los siguientes Ejemplos, por lo tanto, deben interpretarse como meramente ilustrativos y no como una limitación del alcance de la presente invención de ningún modo.
Ejemplos
Los siguientes ejemplos ilustran la invención. Estos ejemplos no pretenden limitar el alcance de la presente invención, si no preferiblemente proporcionar orientación al especialista en la técnica para preparar y usar los compuestos, composiciones y métodos de la presente invención. Aunque se describen realizaciones particulares de la presente invención, el especialista en la técnica apreciará que se pueden efectuar diversos cambios y modificaciones sin salirse del espíritu y del alcance de la invención.
Intermedio 1
6-Cloro-N4-fenil-2,4-pirimidindiamina
NH2
A 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (0,50 g, 3,05 mmol) en etanol (EtOH) (10 ml) se le añadió anilina (0,3 ml, 3,3 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla se vertió en acetato de etilo (EtOAc) y NaHCO3 acuoso saturado. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título en bruto (620 mg) en forma de un sólido de color amarillo. El producto contiene ~25% del producto de adición bis. LC-MS (ES) m/z = 221 [M+H]+.
Intermedio 2 4-[2-Amino-6-(fenilamino)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo
NH2
A ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (197 mg, 1,20 mmol) y 6-cloro-N4-fenil-2,4-pirimidindiamina (330 mg, 1,50
5 mmol) en un matraz que puede cerrarse herméticamente se le añadieron 1,4-dioxano (6 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (3 ml). La mezcla se desgasificó con gas nitrógeno durante 10 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (86 mg, 0,075 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla se vertió en EtOAc y agua. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. El residuo producido se cromatografió
10 sobre SiO2 (gradiente: de 99:1:0,1 de CHCl3/CH3OH/NH4OH a 90:10:1 de CHCl3/CH3OH/NH4OH) para producir el compuesto del título (366 mg). LC-MS (ES) m/z = 306 [M+H]+.
Ejemplo 1
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-fenil-2,4-pirimidindiamina
NH2
15 A 4-[2-amino-6-(fenilamino)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo (366 mg, 1,2 mmol) en EtOH (10 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (1,0 ml, 32 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla se vertió en agua y EtOAc. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron para producir el producto en bruto (230 mg). Este material se disolvió en EtOH. Se añadió hexano hasta que empezó a formarse un
20 precipitado (se usó una espátula para rascar las paredes). La mezcla se decantó y el sólido se secó al vacío para producir el compuesto del título (100 mg, 26%) en forma de un sólido de color castaño. LC-MS (ES) m/z = 302, 304 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  6,51 (s, 1H), 7,04 (m, 1H), 7,32 (m, 2H), 7,46 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H), 7,66 (m, 2H), 7,75 (dd, J = 8,3, 0,8 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H).
Intermedio 3
25 6-Cloro-N4-(fenilmetil)-2,4-pirimidindiamina
NH2
A 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (0,5 g, 3,1 mmol) en EtOH (10 ml) se le añadió base de Hunig (1,1 ml, 6,1 mmol) seguido de bencilamina (0,37 ml, 3,35 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla de reacción se vertió en agua y EtOAc. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo 30 adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se
filtraron y se concentraron para producir el compuesto del título en bruto (670 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 235 [M+H]+. Intermedio 4 4-{2-Amino-6-[(fenilmetil)amino]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
5 A ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (190 mg, 1,15 mmol) y 6-cloro-N4-(fenilmetil)-2,4-pirimidindiamina (300 mg, 1,28 mmol) en un matraz que puede cerrarse herméticamente se les añadieron 1,4-dioxano (6 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (3 ml). La mezcla se desgasificó con gas nitrógeno durante 10 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (74 mg, 0,064 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla se vertió en EtOAc y agua. La capa
10 orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se filtraron, después se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. El residuo producido se cromatografió sobre SiO2 (gradiente: de 99:1:0,1 de CHCl3/CH3OH/NH4OH a 90:10:1 de CHCl3/CH3OH/NH4OH). El material (367 mg) se llevó como tal a la siguiente reacción.
Ejemplo 2
15 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(fenilmetil)-2,4-pirimidindiamina
NH2
A 4-{2-amino-6-[(fenilmetil)amino]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (367 mg, 1,15 mmol) en EtOH (10 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (1,0 ml, 20,4 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla se vertió en agua y EtOAc. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. 20 Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron para producir el producto en bruto (280 mg). Este material se disolvió en EtOH. Se añadió hexano hasta que empezó a formarse un precipitado (se usó una espátula para rascar las paredes). La mezcla se decantó y el sólido se secó al vacío para producir el compuesto del título (150 mg, 39%) en forma de un sólido de color castaño. LC-MS (ES) m/z = 332 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  4,59 (s, 2H), 6,29 (s, 1H), 7,23 (m, 1H), 7,28 -7,38 (m, 4H), 7,41 (d, J =
25 8,3 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,75 (s, 1H).
Intermedio 5
4-Cloro-6-(metiltio)-2-pirimidinamina
NH2
A 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (1,0 g, 6,1 mmol) en EtOH (15 ml) se le añadió tiometóxido sódico (0,43 g, 6,10 mmol)
30 y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. La mezcla se vertió en agua y EtOAc. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron para producir el compuesto del título en
bruto (910 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 176 [M+H]+. Ejemplo 3 6-[2-Amino-6-(metiltio)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH2
A 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (16,5 g, 66,6 mmol) y 4-cloro-6-(metiltio)-2pirimidinamina (11,7 g, 66,6 mmol) se les añadieron 1,4-dioxano (300 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (150 ml) y la mezcla se desgasificó con gas nitrógeno durante 15 minutos en un tubo que puede cerrarse herméticamente. Se añadió Pd(Ph3P)4 (2,3 g, 2,0 mmol), el tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se vertió en agua, donde se formó un precipitado. La mezcla se filtró y el sólido se transfirió a un tubo que puede cerrarse herméticamente. Se añadió dioxano (300 ml) seguido de hidrazina monohidrato (32,7 ml, 666 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC en el tubo sellado. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se filtró. El filtrado se vertió en agua y se filtró de nuevo. El filtrado acuoso se vertió en un embudo de decantación y se extrajo tres veces con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. Al residuo producido se le añadió 1,4-dioxano (100 ml) y la mezcla se sonicó durante 30 minutos. Los sólidos se filtraron, produciendo el compuesto del título en bruto (11,5 g) en forma de un sólido de color amarillo. El filtrado se concentró y el residuo producido se disolvió en dioxano y se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de 99:1:0,1 de CHCl3/CH3OH/NH4OH a 90:10:1 de CHCl3/CH3OH/NH4OH) para producir el compuesto del título (4,5 g) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 273 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,53 (s, 3H), 5,41 (s, 2H), 6,70 (s, 2H), 7,06 (s, 1H), 7,58 (dd, J = 8,5, 1,1 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H), 11,60 (s, 1H).
Ejemplo 4
6-[2-Amino-6-(4-tiomorfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH2
A 6-[2-amino-6-(metiltio)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (0,43 g, 1,58 mmol) en ácido trifluoroacético (TFA) (15 ml) a 0ºC se le añadió gota a gota H2O2 acuoso (0,97 ml, 9,47 mmol, al 30% (p/p)). Después de 10 minutos, la mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó a esta temperatura durante 30 minutos. El análisis por LCMS mostró una mezcla de sulfóxido y sulfona. La mezcla de reacción se enfrió a 0ºC y se interrumpió con sulfuro de dimetilo (1,0 ml, 13,5 mmol, adición gota a gota) para asegurarse de que no quedaba peróxido de hidrógeno. La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se diluyó con éter dietílico (Et2O). Cuando la oxidación convierte todo el material de partida en la sulfona, este material precipita al añadir Et2O. Sin embargo, en esta ocasión la especie sulfóxido fue la dominante (~80%) como se muestra en el análisis por LCMS. Por lo tanto, se añadió hexano para asegurar la precipitación completa de la mezcla de sulfóxido y sulfona. El material se filtró y el sólido se trató con 1,4-dioxano (10 ml) y tiomorfolina (1,21 ml, 12,6 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se vertió en agua y EtOAc. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. La mezcla en bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de 99:1:0,1 de CHCl3/CH3OH/NH4OH a 90:10:1 de CHCl3/CH3OH/NH4OH). Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron. La trituración con Et2O produjo el compuesto del título (205 mg, 40%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 328 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,61 (m, 4H), 3,99 (m, 4H), 5,37 (s, 2H), 6,12 (s, 2H), 6,61 (s, 1H), 7,58 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,95 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 6 N-Acetil-N-(1-acetil-6-bromo-1H-indazol-3-il)acetamida
O O
En un matraz de 100 ml en una atmósfera de argón se combinaron 6-bromo-1H-indazol-3-amina (2,47 g, 11,7
5 mmol), anhídrido acético (22,0 ml, 233 mmol) y DMAP (0,07 g, 0,58 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 120ºC durante 5 horas, después de lo cual se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante una noche. El análisis por LCMS muestra una mezcla de 2 productos, bis-y tris-acetilados. La mezcla de reacción se concentró a sequedad. El residuo producido se cargó en seco en acetona sobre SiO2 y se cromatografió sobre 90 g de SiO2 (Analogix) usando un gradiente de EtOAc/Hexanos. El primer compuesto en eluir es el compuesto tris-acetilado
10 deseado. Las fracciones se combinaron y se concentraron para producir el compuesto del título (2,84 g, 68%) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,31 (s, 6H), 2,70 (s, 3H), 7,67 (dd, J = 8,6, 1,8 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,53 (d, J = 1,5 Hz, 1H).
Intermedio 7
N-[6-(2,6-Diamino-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-il]acetamida
O
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de argón se combinaron N-acetil-N-(1acetil-6-bromo-1H-indazol-3-il)acetamida (0,25 g, 0,74 mmol), bis(pinacolato)diboro (0,197 g, 0,776 mmol), acetato potásico (0,145 g, 1,48 mmol) y 1,4-dioxano (4,9 ml). La mezcla se desgasificó con argón durante 5 minutos. Se añadió PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,024 g, 0,03 mmol), el tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó 20 durante una noche a 100ºC. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, el tubo se abrió y se añadieron 4-cloro-2,6diaminopirimidina (0,12 g, 0,81 mmol), NaHCO3 (0,248 g, 2,96 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,024 g, 0,03 mmol) y agua (1,64 ml). El tubo se volvió a cerrar herméticamente en una atmósfera de argón y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC y después durante el fin de semana a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con CH3CN (15 ml) y se filtró a través de una capa de Celite503. El filtrado se concentró y el sólido de color pardo
25 oscuro producido se sonicó en 20 ml de una mezcla 3:1 de agua y CH3CN que contenían respectivamente TFA (1 ml). La solución producida que contenía la mayor parte del material se filtró a través de un lecho C18 de 300 mg. El filtrado se concentró hasta alcanzar 50% de su volumen y después se purificó en una RPHPLC Varian (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%) para producir una sal TFA del compuesto del título (83 mg) en forma de un sólido de color castaño claro. LC-MS (ES) m/z = 284 [M+H]+.
Ejemplo 5 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2,4-pirimidindiamina NH2
N
H2N
N
H
N
N
NH2
En un matraz de 100 ml en una atmósfera de argón se combinaron N-[6-(2,6-diamino-4-pirimidinil)-1H-indazol-3
5 il]acetamida (0,083 g, 0,29 mmol) y HCl (0,28 ml, 9,4 mmol, 12 M) en CH3OH (20 ml). La mezcla de reacción se agitó a 60ºC durante 8 horas y después se enfrió a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se concentró y el sólido de color amarillo producido se disolvió en agua (3 ml). A la solución se le añadió NaOH (1 M) hasta que el valor del pH fue 12. El sólido precipitado se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío a 40ºC. El sólido (18 mg) se disolvió en DMSO caliente (0,5 ml) y se sonicó. El precipitado producido se filtró. Como la HPLC mostró que el
10 material era puro sólo al 90%, se combinó todo (sólidos y filtrado) y se purificó por RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con NH4OH al 0,1%) para producir el compuesto del título (7 mg, 10%) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 242 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  5,37 (s, 2H), 5,93 (s, 2H), 6,25 (s, 1H), 6,31 (s, 2H), 7,40 (dd, J = 8,3, 1,3 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 11,51 (s, 1H).
Intermedio 8
15 N-{6-[2-Amino-6-(4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-il}acetamida
O
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de argón se combinaron N-acetil-N-(1acetil-6-bromo-1H-indazol-3-il)acetamida (0,25 g, 0,74 mmol), bis(pinacolato)diboro (0,197 g, 0,776 mmol) y acetato potásico (0,145 g, 1,48 mmol) en 1,4-dioxano (4,9 ml). La mezcla se desgasificó con argón durante 5 minutos. Se 20 añadió PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,024 g, 0,03 mmol), el tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante 5 horas a 100ºC. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, el tubo se abrió y se añadieron 4-cloro-6-(4morfolinil)-2-pirimidinamina (0,175 g, 0,813 mmol), NaHCO3 (0,25 g, 2,96 mmol), agua (1,64 ml) y PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,024 g, 0,03 mmol). El tubo se volvió a cerrar herméticamente en una atmósfera de argón y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con CH3CN (10
25 ml), se filtró a través de una capa de Celite503 y se concentró. El sólido de color pardo producido se disolvió 10 ml de disolvente (30/70 de CH3CN/H2O con 0,25 ml de TFA) y la solución se filtró a través de un filtro de disco de 0,45 m. La purificación en una RPHPLC Varian (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%) produjo una sal TFA del compuesto del título (151 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 354 [M+H]+.
Ejemplo 6
30 6-[2-Amino-6-(4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH2
En un matraz de 100 ml en una atmósfera de argón se disolvió N-{6-[2-amino-6-(4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1Hindazol-3-il}acetamida (0,15 g, 0,26 mmol) en CH3OH (10 ml). Se añadió HCl (0,69 ml, 8,3 mmol, 12 M) y la mezcla de reacción se agitó a 60ºC durante 4 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. El sólido se lavó con hexanos para producir una sal HCl del compuesto del título (75 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 312 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  3,73 (m, 4H), 3,89 (m, 4H), 6,98 (s, 1H), 7,66 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,08 (m, 2H).
Intermedio 9
6-Cloro-N4-etil-2,4-pirimidindiamina
NH2
En un matraz de 50 ml argón se combinaron 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (0,50 g, 3,05 mmol) y etilamina (2,0 M en CH3OH) (15,24 ml, 30,5 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 50ºC durante 3 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El sólido de color amarillo producido se disolvió en EtOAc y la solución se lavó con agua. La capa orgánica se secó (MgSO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (368 mg, 69%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 173 [M+H]+.
Intermedio 10
4-[2-Amino-6-(etilamino)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo
NH2
En un tubo cerrado herméticamente de 25 ml en una atmósfera de nitrógeno se añadieron ácido (4-ciano-3fluorofenil)borónico (0,29 g, 1,74 mmol) y 6-cloro-N4-etil-2,4-pirimidindiamina (0,30 g, 1,74 mmol) seguido de 1,4dioxano (11,1 ml) y una solución saturada acuosa de NaHCO3 (2,8 ml). La mezcla se desgasificó con nitrógeno durante 10 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,10 g, 0,087 mmol), el vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 95ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se filtró y se concentró. El residuo producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. El sólido de color amarillo producido se disolvió en CH3CN (5 ml con 5 gotas TFA). Se añadieron DMSO (3 gotas) y agua (0,5 ml) y la solución se purificó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron hasta que la mayor parte del CH3CN se retiró (~la mitad del volumen original). El precipitado producido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío para producir una sal TFA del compuesto del título (164 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 258 [M+H]+.
Ejemplo 7
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-etil-2,4-pirimidindiamina
NH2
En un matraz de 25 ml en una atmósfera de argón se añadió 4-[2-amino-6-(etilamino)-4-pirimidinil]-25
fluorobenzonitrilo (0,164 g, 0,442 mmol) seguido de EtOH (3,5 ml). Se añadió hidrazina monohidrato (0,87 ml, 17,7 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 6 horas a 80ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró casi a sequedad. Se añadió agua (3 ml) (se formó un sólido de color naranja) seguido de CH3CN (8 gotas) y la mezcla se sonicó. Se formó un precipitado de color amarillo claro. La suspensión se enfrió en un baño de hielo y el sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío a 40ºC para producir el compuesto del título (82 mg, al 68%) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 270 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,13 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 3,20 -3,40 (m, 2H), 5,36 (s, 2H), 5,97 (s, 2H), 6,25 (s, 1H), 6,82 (s a, 1H), 7,41 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 11,50 (s, 1 H).
Intermedio 11
6-Cloro-N4-(1-metiletil)-2,4-pirimidindiamina
NH2
En un tubo cerrado herméticamente de 25 ml en una atmósfera de argón se combinaron 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (0,50 g, 3,05 mmol) e isopropilamina (0,78 ml, 9,15 mmol) en CH3OH (15 ml). El vial se cerró herméticamente y la mezcla producida se agitó durante una noche a 50ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante el fin de semana. La mezcla de reacción se concentró y el aceite de color naranja producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (453 mg, al 71%) en forma de una espuma de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 187 [M+H]+.
Intermedio 12
4-{2-Amino-6-[(1-metiletil)amino]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de argón se añadieron ácido (4-ciano-3fluorofenil)borónico (0,40 g, 2,43 mmol) y 6-cloro-N4-(1-metiletil)-2,4-pirimidindiamina (0,45 g, 2,43 mmol) seguido de 1,4-dioxano (9,7 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (2,4 ml). La mezcla se desgasificó con argón durante 5 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,14 g, 0,12 mmol), el vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se decantó y se concentró. El aceite de color naranja producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. Al aceite de color naranja producido se le añadieron agua (1 ml), CH3CN (3 ml), DMSO (2 ml) y TFA (10 gotas). La mezcla se filtró a través de una frita de 0,2 m se purificó por RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron hasta que la mayor parte del CH3CN se retiró. Precipitó un sólido de color blanco en el agua restante. La mezcla se filtró y el sólido se lavó con agua y se secó al vacío a 40ºC para producir una sal TFA del compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (208 mg). LC-MS (ES) m/z = 272 [M+H]+.
Ejemplo 8 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(1-metiletil)-2,4-pirimidindiamina
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente se combinaron 4-{2-amino-6-[(1-metiletil)amino]-4pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (0,21 g, 0,54 mmol), hidrazina monohidrato (1,06 ml, 21,6 mmol) y EtOH (10 ml). El tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. La mezcla se concentró y al sólido producido se le añadió EtOH (2 ml) seguido de hexanos (15 ml). La mezcla se sonicó y se filtró. El sólido se lavó con hexanos para producir el compuesto del título (167 mg, 99%) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 284 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,15 (d, J = 6,6 Hz, 6H), 4,12 (s a, 1H), 5,36 (s, 2H), 5,94 (s, 2H), 6,24 (s, 1H), 6,71 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 11,50 (s a, 1H).
Intermedio 13
4-Cloro-6-(1-piperidinil)-2-pirimidinamina
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de argón se combinaron 4,6-dicloro-2pirimidinamina (0,50 g, 3,05 mmol), piperidina (0,75 ml, 7,62 mmol) y CH3OH (10 ml). El vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante 4 horas a 50ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El sólido producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (565 mg, 83%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 213 [M+H]+.
Intermedio 14
4-[2-Amino-6-(1-piperidinil)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de argón se combinaron 4-cloro-6-(1piperidinil)-2-pirimidinamina (0,57 g, 2,66 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (0,44 g, 2,66 mmol) seguido de 1,4-dioxano (10,6 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (2,7 ml). La mezcla se desgasificó durante 5 minutos con argón. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,15 g, 0,13 mmol), el vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante 15 horas a 95ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y la solución se decantó y se concentró. El residuo de color naranja producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. El aceite de color naranja producido se disolvió en 90/10 de CHCl3/EtOAc y se cromatografió en una columna de 90 g de SiO2, usando 90/10/1 de CHCl3/CH3OH/NH4OH como sistema disolvente. El análisis HPLC mostró una mezcla de 2 productos. La purificación en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%) produjo una sal TFA del compuesto del título (286 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 298 [M+H]+.
Ejemplo 9 6-[2-Amino-6-(1-piperidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina NH2
N
N
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de argón se combinaron 4-[2-amino-6
5 (1-piperidinil)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo (0,106 g, 0,258 mmol), hidrazina monohidrato (0,51 ml, 10,3 mmol) y EtOH (5 ml). El vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El sólido producido se sonicó en una mezcla de EtOH (1 ml) y agua (9 ml). La mezcla se filtró y el sólido se lavó con agua y se secó al vacío a 40ºC para producir el compuesto del título (66 mg, 80%) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 310 [M+H]+. 1H RMN
10 (400 MHz, DMSO-d6):  1,53 (m, 4H), 1,64 (m, 2H), 3,47 -3,79 (m, 4H), 5,37 (s, 2H), 6,03 (s, 2H), 6,58 (s, 1H), 7,57 (dd, J = 8,3, 1,3 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,94 (s, 1H), 11,49 (s, 1H).
Intermedio 15
6-Cloro-N4-ciclopentil-2,4-pirimidindiamina
N
N
NH2
15 En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de argón se combinaron 4,6-dicloro-2pirimidinamina (0,50 g, 3,05 mmol), ciclopentilamina (0,75 ml, 7,62 mmol) y CH3OH (10 ml). El vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 50ºC. La reacción se concentró y el aceite producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (605 mg, 93%) en forma de un aceite de color naranja. LC-MS (ES) m/z = 213
20 [M+H]+.
Intermedio 16
4-[2-Amino-6-(ciclopentilamino)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo
N
N
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de nitrógeno se combinaron 6-cloro-N4
25 ciclopentil-2,4-pirimidindiamina (0,60 g, 2,82 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (0,51 g, 3,10 mmol) seguido de 1,4-dioxano (11,3 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (2,8 ml). La mezcla se desgasificó con nitrógeno durante 5 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,16 g, 0,14 mmol), el tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. La solución se decantó y se concentró y el residuo producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. La purificación
30 en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%) produjo una sal TFA del compuesto del título (476 mg, 39%) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 298 [M+H]+.
Ejemplo 10 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-ciclopentil-2,4-pirimidindiamina
N
N
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente se disolvió 4-[2-amino-6-(ciclopentilamino)-4-pirimidinil]-2
5 fluorobenzonitrilo (0,476 g, 1,16 mmol) en EtOH (10 ml). Se añadió hidrazina monohidrato (1,14 ml, 23,1 mmol), el vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 95ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El sólido de color amarillo producido se disolvió en EtOH (2 ml). Se añadió agua (8 ml) y la mezcla producida se sonicó durante 10 minutos. El precipitado blanco producido se filtró y se secó para producir el compuesto del título (177 mg, 47%) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 310
10 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,38 -1,61 (m, 4H), 1,61 -1,78 (m, 2H), 1,92 (m, 2H), 4,22 (s a, 1H), 5,37 (s, 2H), 5,97 (s a, 2H), 6,26 (s, 1H), 6,87 (s a, 1H), 7,40 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 11,51 (s, 1H).
Intermedio 17
6-Cloro-N4-ciclohexil-2,4-pirimidindiamina
N
N
NH2
15 En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de argón se combinaron 4,6-dicloro-2pirimidinamina (0,50 g, 3,05 mmol) y ciclohexilamina (0,87 ml, 7,62 mmol) y CH3OH (10 ml). El vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante 2 días a 50ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El aceite producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se lavó
20 con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (750 mg, 99%) en forma de un aceite de color naranja. LC-MS (ES) m/z = 227 [M+H]+.
Intermedio 18
4-[2-Amino-6-(ciclohexilamino)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo
N
N
NH2
25 En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de nitrógeno se combinaron 6-cloro-N4ciclohexil-2,4-pirimidindiamina (0,75 g, 3,31 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (0,546 g, 3,31 mmol) seguido de 1,4-dioxano (13,2 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (3,3 ml). La mezcla producida se desgasificó con nitrógeno durante 5 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,19 g, 0,165 mmol), el vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 95ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se decantó y se
30 concentró. El aceite de color naranja producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se lavó
con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. Al sólido amarillo producido se le añadió CH3CN (5 ml) y la mezcla se sonicó. La filtración del sólido y el lavado con la mínima cantidad de CH3CN produjo el compuesto del título (387 mg, 36%) en forma de un sólido de color castaño claro. LC-MS (ES) m/z = 312 [M+H]+.
Ejemplo 11
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-ciclohexil-2,4-pirimidindiamina
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente se combinaron 4-[2-amino-6-(ciclohexilamino)-4-pirimidinil]2-fluorobenzonitrilo (0,39 g, 1,24 mmol), hidrazina monohidrato (1,2 ml, 24,9 mmol) y EtOH (10 ml). El vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de una capa de Celite503. El filtrado se concentró a sequedad. El sólido de color amarillo producido se diluyó con EtOH (2 ml) seguido de agua (8 ml). La mezcla se sonicó durante 10 minutos y después se filtró. Al sólido producido se le añadieron 5 ml de una mezcla 90/10 de CH3CN y agua respectivamente. Se añadió TFA (0,5 ml) y después de 2 minutos, se observó una masa sólida. La mezcla se diluyó con CH3CN (15 ml) y se filtró para producir una sal TFA del compuesto del título (100 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 324 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,30 (m, 6H), 1,62 (m, 1H), 1,70 -1,81 (m, 2H), 1,91 (m, 2H), 3,96 (s a, 1H), 6,36 (s, 1H), 7,17 (dd, J = 8,5, 1,4 Hz, 1H), 7,57 (s, 1H), 7,89 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,66 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 11,87 (s, 1H), 11,94 (s a, 1H).
Intermedio 19
4-(1-Azetidinil)-6-cloro-2-pirimidinamina
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente se combinaron 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (0,50 g, 3,05 mmol), azetidina (0,21 ml, 3,05 mmol) y trietilamina (1,06 ml, 7,62 mmol) en CH3OH (10 ml). El vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 50ºC. La reacción se concentró y el sólido producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (314 mg, 53%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 185 [M+H]+.
Intermedio 20
4-[2-Amino-6-(1-azetidinil)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de nitrógeno se combinaron ácido (4ciano-3-fluorofenil)borónico (0,28 g, 1,70 mmol) y 4-(1-azetidinil)-6-cloro-2-pirimidinamina (0,314 g, 1,70 mmol) en 1,4-dioxano (6,8 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (1,7 ml). La mezcla producida se desgasificó con nitrógeno durante 5 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,098 g, 0,085 mmol), el vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se
agitó durante una noche a 95ºC. La reacción se concentró y el sólido producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. Al sólido amarillo producido se le añadió CH3CN (3 ml), agua (1 ml) y TFA (0,5 ml) y la mezcla se sonicó durante 2 minutos y después se concentró. El sólido se diluyó con CH3CN (2 ml), se filtró y se lavó con CH3CN (1 ml) y Et2O (2 ml) para producir una sal TFA del compuesto del título (212 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 270 [M+H]+.
Ejemplo 12
6-[2-Amino-6-(1-azetidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente se combinaron 4-[2-amino-6-(1-azetidinil)-4-pirimidinil]-2
10 fluorobenzonitrilo (0,21 g, 0,79 mmol), hidrazina monohidrato (0,77 ml, 15,8 mmol) y CH3OH (10 ml). El vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. La reacción se concentró y el sólido de color amarillo producido se diluyó con EtOH (2 ml) y agua (5 ml). La mezcla se sonicó y el sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío para producir el compuesto del título (99 mg, 43%) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 282 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,33 (m, 2H), 4,02 (m, 4H), 5,38 (s, 2H), 6,13
15 (s a, 2H), 6,14 (s, 1H), 7,51 (dd, J = 8,3, 1,3 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,91 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 21
N-[4-(4-Ciano-3-fluorofenil)-6-(1-piperidinil)-2-pirimidinil]acetamida
O
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de argón se combinaron 4-[2-amino-6
20 (1-piperidinil)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo (0,18 g, 0,44 mmol) y anhídrido acético (5 ml). El vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó a 95ºC. Después de 16 horas, el análisis por LCMS indicó una mezcla 2:1 de productos bis:mono acetilados. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. A la mezcla en bruto producida (192 mg) se le añadió CH3OH (10 ml) seguido de DMAP (0,046 g, 0,38 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 30ºC. Se añadió más cantidad de DMAP (30 mg) y la
25 mezcla de reacción se agitó durante 24 horas más. La reacción se concentró y el aceite producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (150 mg, algo de DMAP está presente) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 340
[M+H]+. Intermedio 22 N-[4-(4-Ciano-3-fluorofenil)-6-(1-piperidinil)-2-pirimidinil]-N-metilacetamida
O
5A N-[4-(4-ciano-3-fluorofenil)-6-(1-piperidinil)-2-pirimidinil]acetamida (0,15 g, 0,44 mmol) en DMF (4,4 ml) se le añadió carbonato de cesio (0,16 g, 0,49 mmol) seguido de yoduro de metilo (0,03 ml, 0,49 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente. Se añadieron más carbonato de cesio (300 mg) y yoduro de metilo (0,03 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante el fin de semana. La mezcla se filtró a través de una frita 0,2 m y se purificó por RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las
10 fracciones que contenían el compuesto del título y el compuesto del título acetilado se combinaron y se concentraron, proporcionando una sal TFA de los dos compuestos en forma de un sólido de color blanco (39 mg). LC-MS (ES) m/z = 354 [M+H]+.
Ejemplo 13
6-[2-(Metilamino)-6-(1-piperidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
N
N
HN 15 En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente se combinaron N-[4-(4-ciano-3-fluorofenil)-6-(1-piperidinil)2-pirimidinil]-N-metilacetamida (0,04 g, 0,11 mmol) e hidrazina monohidrato (0,11 ml, 2,21 mmol) en EtOH (10 ml). El tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El aceite producido se disolvió en EtOH (3 ml) seguido de la adición de agua
20 (6 ml). Ya que no se observó ningún sólido (se formó un aceite de color amarillo), la mezcla se concentró a sequedad. El aceite producido se diluyó con CH3CN (2 ml) y se sonicó. El sólido de color amarillo producido se filtró, se lavó con CH3CN (1 ml) y se secó para producir el compuesto del título (18 mg, 48%). LC-MS (ES) m/z = 324 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,60 (m, 4H), 1,68 (m, 2H), 2,92 (d, J = 4,3 Hz, 3H), 3,84 (s a, 4H), 5,54 (s a, 2H), 6,81 (s a, 1H), 7,21 (s a, 1H), 7,40 (s a, 1H), 7,76 (s a, 1H), 7,85 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 11,83 (s a, 1H).
25 Intermedio 23
N-[6-(2-Amino-6-metil-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-il]acetamida
O
HN
N
N
NH2
En de un matraz de 25 ml en una atmósfera de argón se combinaron N-acetil-N-(1-acetil-6-bromo-1H-indazol-35
il)acetamida (0,25 g, 0,74 mmol), bis(pinacolato)diboro (0,197 g, 0,78 mmol) y acetato potásico (0,145 g, 1,48 mmol) en 1,4-dioxano (4,9 ml). La mezcla se desgasificó con argón durante 5 minutos. Se añadió PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (0,024 g, 0,03 mmol), el tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y el tubo se abrió. Se añadieron 4-cloro-6-metil-2-pirimidinamina (0,117 g, 0,813 mmol), bicarbonato sódico (0,25 g, 2,96 mmol), PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (0,024 g, 0,03 mmol) y agua (1,64 ml), el tubo se volvió a cerrar herméticamente en una atmósfera de argón y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con CH3CN (15 ml), se filtró a través de una capa de Celite503 y se concentró. Al sólido de color pardo resultante se le añadieron una mezcla 70/30 de agua/CH3CN (12 ml) y TFA (0,5 ml). La mezcla producida se filtró a través de un disco de filtro de 0,45 m y se inyectaron en una RPHPLC Varian (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron (el material se cargó en el rotavapor y se perdió una cantidad significativa del material) para producir una sal TFA del compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo (21 mg). LC-MS (ES) m/z = 283 [M+H]+.
Ejemplo 14
6-(2-Amino-6-metil-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina
N
N
NH2
En un matraz de 100 ml en una atmósfera de argón se disolvió N-[6-(2-amino-6-metil-4-pirimidinil)-1H-indazol-3il]acetamida (0,021 g, 0,074 mmol) en CH3OH (5 ml). Se añadió HCl (2,26 l, 0,074 mmol) y la solución se agitó durante 8 horas a 60ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente. El precipitado producido se filtró y se lavó con la cantidad mínima de CH3OH para producir una sal HCl del compuesto del título (6 mg, 26%) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 241 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,51 (s, 3H {se asume que está escondido debajo del pico de DMSO}), 7,59 (s, 1H), 7,81 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,21 (s, 1H), 12,72 (s a, 1H).
Intermedio 24
4-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de argón se combinaron ácido (4-ciano3-fluorofenil)borónico (0,50 g, 3,03 mmol), 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (0,497 g, 3,03 mmol), NaHCO3 acuoso saturado (4,04 ml) y 1,4-dioxano (16,2 ml) y la mezcla se desgasificó con argón durante 5 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,175 g, 0,152 mmol), el vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a 95ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se filtró a través de un lecho de celite503 y se concentró. La brea de color naranja producida se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. El sólido de color naranja producido se sonicó en CHCl3 (50 ml) durante 2 minutos. La mezcla se filtró, el sólido se lavó con CHCl3 y el filtrado se concentró. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (40 g) del residuo producido (gradiente: de CHCl3 al 100% a EtOAc al 5%/CHCl3) produjo el compuesto del título (267 mg, 32%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 249 [M+H]+.
Intermedio 25 4-(2-Amino-6-fenil-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de argón se combinaron 4-(2-amino-6
5 cloro-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo (0,196 g, 0,788 mmol) y ácido fenilborónico (0,096 g, 0,79 mmol) en 1,4dioxano (5,0 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (1,3 ml) y la mezcla se desgasificó con argón durante 5 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,046 g, 0,04 mmol), el vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró y el filtrado se concentró a sequedad. El sólido producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó
10 (MgSO4), se filtró y se concentró. La purificación de los sólidos resultantes en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%) produjo una sal TFA del compuesto del título (52 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 291 [M+H]+.
Ejemplo 15
6-(2-Amino-6-fenil-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina
NH2
15 En un tubo cerrado herméticamente de 25 ml en una atmósfera de argón se añadieron 4-(2-amino-6-fenil-4pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo (0,052 g, 0,18 mmol) y EtOH (5 ml). Se añadió hidrazina monohidrato (0,35 ml, 7,17 mmol), el vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El sólido producido se sonicó en una mezcla de EtOH (1 ml) y agua
20 (10 ml), se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío a 40ºC para producir el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo (44 mg, 77%). LC-MS (ES) m/z = 303 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  5,43 (s, 2H), 6,74 (s, 2H), 7,46 -7,59 (m, 3H), 7,69 -7,84 (m, 3H), 8,12 (s, 1H), 8,23 (m, 2H), 11,63 (s, 1 H).
Procedimiento General A:
Una solución de ácido (3,5-difluoro-4-formilfenil)borónico y la cloro-pirimidina (1 equiv.) en una mezcla de 1,4
25 dioxano/NaHCO3 acuoso saturado (4:1 ratio) se desgasificó con nitrógeno durante ~20 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,05 equiv.) y la solución resultante de color amarillo se agitó a 100ºC hasta que se consumieron los materiales de partida tal como se determinó mediante análisis por LCMS o HPLC. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y agua. La fase orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se concentraron para dar un sólido. El tratamiento a partir de aquí varía de acuerdo con el
30 compuesto.
Intermedio 26 4-(2-Amino-4-pirimidinil)-2,6-difluorobenzaldehído
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General A usando: ácido (3,5-difluoro-4formilfenil)borónico (4,93 g, 26,5 mmol) y 4-cloro-2-pirimidinamina (3,44 g, 26,5 mmol). La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de CHCl3 al 100% a THF al 10%/CHCl3 al 90%) produjo el compuesto del título (5,69 g, 75%) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 236 [M+H]+.
Intermedio 27
N-[4-(4-Ciano-3,5-difluorofenil)-2-pirimidinil]acetamida
CN
F
F
N N NH
O
A una suspensión de 4-(2-amino-4-pirimidinil)-2,6-difluorobenzaldehído (5,69 g, 24,2 mmol) en EtOH (50 ml) y agua (150 ml) se le añadieron carbonato sódico (2,82, 26,6 mmol) y hidrocloruro de hidroxilamina (1,85 g, 26,6 mmol) y la mezcla producida se agitó a 100ºC hasta que se consumió el material de partida tal como se determinó por LCMS (~2 horas). La mezcla de reacción se concentró y el sólido de color castaño producido se lavó con agua y se filtró. 15 Los lavados acuosos se extrajeron con EtOAc y las capas orgánicas combinadas se concentraron. El extracto orgánico concentrado y la torta de filtro se combinaron y se suspendieron en anhídrido acético (usado como disolvente, ~150 ml) y la mezcla de reacción se agitó a 100ºC hasta que el intermedio de oxima se convirtió completamente en el nitrilo (~5 días). La mezcla de reacción se concentró y se co-evaporó con EtOH y el sólido producido se trituró en CH3OH para producir el compuesto del título (2,4 g, 36%) en forma de un sólido arenoso de
20 color castaño. El filtrado se trató con NaHCO3 acuoso saturado y K2CO3 y la solución básica se agitó durante una noche a temperatura ambiente, convirtiendo el subproducto de bis-acetilo en el compuesto del título. La solución básica se filtró y el filtrado se concentró. El sólido producido se trituró en CH3OH y se lavó con agua para producir el compuesto del título (1,05 g, 16%) en forma de un sólido arenoso de color castaño. LC-MS (ES) m/z = 275 [M+H]+.
Procedimiento General B:
25 A una suspensión del difluoro-nitrilo apropiado en tetrahidrofurano (THF) o 1,4-dioxanos se le añadieron la amina apropiada (1,1 equiv.) y base de Hunig (1,1 equiv.) La mezcla producida se agitó a 85-90ºC hasta que se consumió el material de partida tal como se determinó por HPLC o LCMS (~12 horas). Se añadió hidrazina monohidrato (50 equiv.) y la mezcla de reacción se agitó a 85-90ºC hasta que el intermedio se consumió tal como se determinó por análisis por LCMS o HPLC (~12 horas). La mezcla de reacción se vertió en EtOAc y agua, la capa orgánica se
30 separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se concentraron. El tratamiento a partir de aquí varía de acuerdo con el compuesto.
Ejemplo 16 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-(2-feniletil)-1H-indazol-3,4-diamina H2N
N
H
NH
N
N N NH2
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General B usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6
5 metil-2-pirimidinil]acetamida (0,10 g, 0,37 mmol), (2-feniletil)amina (0,059 ml, 0,47 mmol) y tetrahidrofurano (THF) (3 ml). El residuo se secó y se cargó en una columna de 12 g de SiO2 eluyendo con CHCl3 al 100% a 90:10:1 de CHCl3:CH3OH:NH4OH. Las fracciones transparentes se concentraron para producir el compuesto del título (43 mg, 29%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 346 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  3,04 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 3,56 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 6,74 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 7,11 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,24 (m, 2H), 7,33 (m, 2H),
10 7,34 (s, 2H), 8,27 (d, J = 5,3 Hz, 1H).
Ejemplo 17
6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-(3-fenilpropil)-1H-indazol-3,4-diamina
NH2N
H
HN
N
N N NH2
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General B usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6
15 metil-2-pirimidinil]acetamida (0,30 g, 1,09 mmol), 3-fenil-1-propanamina (0,17 ml, 1,20 mmol) y 1,4-dioxano (5 ml). El residuo se disolvió en EtOH caliente y se precipitó con hexanos. El precipitado se recogió por filtración al vacío para producir el compuesto del título (0,14 g, 36%) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 360 [M+H]+.1H RMN (400 MHz, CD3OD):  2,07 -2,13 (m, 2H), 2,82 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 6,58 (s, 1H), 7,03 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,18 (m, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,25 -7,30 (m, 4H), 8,26 (d, J = 5,6 Hz, 1H). NOTA: Se supone que los protones de
20 NHCH2 están escondidos bajo el pico residual del disolvente.
Ejemplo 18
6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[2-(feniloxi)etil]-1H-indazol-3,4-diamina
H2N NH
NH
NO
N N NH2
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General B usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-2
25 pirimidinil]acetamida (0,10 g, 0,365 mmol), 2-(feniloxi)etanamina (0,053 ml, 0,40 mmol) y 1,4-dioxano (3 ml). El sólido se disolvió en EtOH caliente y se precipitó con hexanos (los hexanos suficientes para que la solución empezara a volverse turbia). El precipitado se recogió por filtración al vacío para producir el compuesto del título (57 mg, 43%) en
forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 362 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  3,72 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 4,31 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 6,79 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 6,93 (m, 1H), 7,00 (m, 2H), 7,10 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,24 7,32 (m, 3H), 8,25 (d, J = 5,6 Hz, 1H).
Ejemplo 19
5 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(5-metil-1H-pirazol-4-il)propil]-1H-indazol-3,4-diamina
NH2 H NN
H
NHN
N
N
N NH2
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General B usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6metil-2-pirimidinil]acetamida (0,10 g, 0,365 mmol), 3-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-1-propanamina (0,056 g, 0,40 mmol) y 1,4-dioxano (3 ml). El residuo se disolvió en EtOH caliente y se precipitó con hexanos (los hexanos suficientes para
10 que la solución empezara a volverse turbia). El precipitado se recogió por filtración al vacío para producir el compuesto del título (47 mg, 36%) en forma de un sólido oscuro de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 364 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, THF):  1,92 -2,00 (m, 2H), 2,18 (s, 3H), 2,57 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,24-3,35 (m, 3H), 4,37 (s a, 2H), 5,28 (s a, 1H), 6,06 (s a, 2H), 6,71 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 7,33 (s, 1H), 8,17 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 10,79 (s a, 1H).
15 Ejemplo 20
2-(3-{[3-Amino-6-(2-amino-4-pirimidinil)-1H-indazol-4-il]amino}propil)fenol
NH2N
H
HN
N
OH
N
N NH2
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General B usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6
metil-2-pirimidinil]acetamida (0,10 g, 0,365 mmol), 2-(3-aminopropil)fenol (0,061 g, 0,40 mmol) y 1,4-dioxano (3 ml). 20 El residuo se disolvió en 2:1 de CHCl3:acetona (3 ml) y se inyectó en una columna de 12 g de SiO2 eluyendo con
CHCl3 al 100% a 80:20:2 de CHCl3:CH3OH:NH4OH. Las fracciones que contenían el producto deseado se
concentraron. El sólido de color amarillo producido se disolvió en CH3OH (1 ml) y se inyectó en un cromatógrafo
Gilson RPHPLC (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones apropiadas se concentraron para producir una sal
TFA del compuesto del título (28 mg, 13%) en forma de un sólido de color naranja. LC-MS (ES) m/z = 376 [M+H]+. 25 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  2,03 -2,10 (m, 2H), 2,78 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 3,37 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 6,74 -6,81 (m,
3H), 7,00 -7,07 (m, 1H), 7,12 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,38 (s, 1H), 8,29 (d, J = 6,8 Hz, 1H).
Ejemplo 21 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(2-fluorofenil)propil]-1H-indazol-3,4-diamina NH2N
H
HN
N F
N
N NH2
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General B usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6metil-2-pirimidinil]acetamida (0,150 g, 0,547 mmol), 3-(2-fluorofenil)-1-propanamina (0,114 g, 0,602 mmol) y 1,4dioxano (3 ml). El sólido se disolvió en EtOH caliente y se precipitó con hexanos. El precipitado se recogió por filtración al vacío para producir el compuesto del título (86 mg, 42%) en forma de un sólido de color castaño. LC-MS (ES) m/z = 378 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,98 (m, 2H), 2,78 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 3,21 -3,28 (m, 2H), 5,11 (s, 2H), 5,63 (m, 1H), 6,45 (s, 1H), 6,56 (s, 2H), 6,97 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,13 -7,20 (m, 3H,) 7,24 -7,30 (m, 1H), 7,37 (m, 1H), 8,25 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 11,49 (s, 1H).
Ejemplo 22
6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(4-fluorofenil)propil]-1H-indazol-3,4-diamina
NH2
FN HHN N
N
N NH2
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General B usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6metil-2-pirimidinil]acetamida (0,150 g, 0,547 mmol), 3-(4-fluorofenil)-1-propanamina (0,092 g, 0,602 mmol) y 1,4dioxano (3 ml). El sólido se disolvió en EtOH caliente y se precipitó con hexanos. El precipitado se recogió por filtración al vacío para producir el compuesto del título (109 mg, 53%) en forma de un sólido de color castaño. LC-MS (ES) m/z = 378 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,95 -2,01 (m, 2H), 2,74 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 3,18 -3,25 (m, 2H), 5,12 (s, 2H), 5,60 (m, 1H), 6,44 (s, 1H), 6,57 (s, 2H), 6,97 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,09 -7,16 (m, 2H), 7,18 (s, 1H), 7,28 -7,34 (m, 2H), 8,25 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 11,49 (s, 1H).
Ejemplo 23
6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(4-piridinil)propil]-1H-indazol-3,4-diamina
NH2N
N
H
HN
N
N
N NH2
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General B usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6metil-2-pirimidinil]acetamida (0,10 g, 0,365 mmol), 3-(4-piridinil)-1-propanamina (0,138 g, 0,802 mmol) y 1,4-dioxano (3 ml). El residuo se disolvió en 2:1 de CHCl3:acetona y se inyectó en una columna de 12 g de SiO2 eluyendo con CHCl3 al 100% a 90:10:1 de CHCl3:MeOH:NH4OH. Las fracciones que contenían el producto deseado se
concentraron y el sólido producido se disolvió en CH3OH y se inyectó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones apropiadas se concentraron para producir una sal TFA del compuesto del título (15 mg, 6%) en forma de un sólido de color rojo. LC-MS (ES) m/z = 361 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  2,23 -2,30 (m, 2H), 3,15 -3,21 (m, 2H), 3,52 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 6,92 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,53 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 8,34 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 8,68 (d, J = 6,6 Hz, 2H).
Intermedio 28
4-(2-Amino-4-pirimidinil)-2-{[3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)propil]amino}-6-fluorobenzonitrilo
A N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-2-pirimidinil]acetamida (0,10 g, 0,365 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml) se le añadieron
10 base de Hunig (0,07 ml, 0,40 mmol) y 3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)-1-propanamina (0,061 g, 0,40 mmol). La mezcla producida se agitó a 90ºC hasta que se consumió el material de partida tal como se determinó por LCMS (~12 horas). La mezcla de reacción se vertió en EtOAc y agua. La fase orgánica se separó, la fase acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc y los extractos orgánicos combinados se concentraron. El residuo de color amarillo producido se disolvió en DMSO (1 ml) y se inyectó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las
15 fracciones apropiadas se concentraron para producir una sal TFA del compuesto del título (38 mg, 18%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 366 [M+H]+.
Ejemplo 24
6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)propil]-1H-indazol-3,4-diamina
NH2 H
NN
H
NHN
N
N
NH2
N
20 A una solución de 4-(2-amino-4-pirimidinil)-2-{[3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)propil]amino}-6-fluorobenzonitrilo (22 mg, 0,037 mmol) en EtOH (2 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (1 ml). La solución producida se agitó a 90ºC hasta que se consumió el material de partida tal como se determinó por LCMS (~12 horas). La mezcla de reacción se concentró y el sólido de color amarillo producido se disolvió en EtOH y se precipitó con hexanos. El filtrado se decantó para producir el compuesto del título (5 mg, 32%) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES)
25 m/z = 378 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): 1,91 -1,98 (m, 2H), 2,16 -2,23 (s, 6H), 2,59 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,24 -3,31 (m, 2H), 6,60 (s, 1H), 7,04 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 8,27 (d, J = 5,30 Hz, 1H).
Ejemplo 25 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(feniloxi)propil]-1H-indazol-3,4-diamina NH2
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General B usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6
5 metil-2-pirimidinil]acetamida (0,150 g, 0,547 mmol), fenoxipropilamina (0,113 g, 0,602 mmol) y 1,4-dioxano (3 ml). El residuo se disolvió en una solución de CH3OH:DMSO y se inyectó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones apropiadas se concentraron para producir una sal TFA del compuesto del título (52 mg, 14%) en forma de un sólido de color rojo. LC-MS (ES) m/z = 376 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  2,23 (m, 2H), 3,61 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 4,15 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 6,88 -6,95 (m, 3H), 7,21 -7,28 (m, 2H), 7,39 (s, 1H), 7,41 (d, J = 6,8 Hz,
10 1H), 8,26 (d, J = 6,6 Hz, 1H). Debe apreciarse que el protón de la "enamina" es intercambiable y no está presente en la RMN.
Ejemplo 26
6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(3-fluorofenil)propil]-1H-indazol-3,4-diamina
F H2N
N
H
NH
N
N
N NH2
15 El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General B usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6metil-2-pirimidinil]acetamida (0,10 g, 0,365 mmol), 3-(3-fluorofenil)-1-propanamina (0,069 g, 0,365 mmol) y 1,4dioxano (3 ml). El sólido se disolvió en EtOH caliente y se precipitó con hexanos. El precipitado se recogió por filtración al vacío para producir el compuesto del título (44 mg, 29%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 378 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,00 (m, 2H), 2,78 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 3,18 -3,26 (m, 2H),
20 5,12 (s, 2H), 5,61 (m, 1H), 6,45 (s, 1H), 6,57 (s, 2H), 6,98 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 6,99 -7,06 (m, 1H), 7,12 (m, 2H), 7,18 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 7,31 -7,38 (m, 1H), 8,25 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 29
4-(2-Amino-4-pirimidinil)-2-fluoro-6-(metiloxi)benzonitrilo
CN
25 A una suspensión de 4-(2-amino-4-pirimidinil)-2,6-difluorobenzaldehído (5,37 g, 22,8 mmol) en una mezcla de EtOH y agua se le añadieron carbonato sódico (2,66 g, 25,1 mmol) y hidrocloruro de hidroxilamina (1,75 g, 25,1 mmol). La mezcla producida se calentó a reflujo hasta que se consumió el material de partida (~2 horas). La reacción se dejó
enfriar a temperatura ambiente y la oxima insoluble se filtró. El filtrado se extrajo con EtOAc y la capa orgánica se concentró. El sólido de color gris producido se combinó con el precipitado de oxima y se trató con exceso de anhídrido acético (disolvente). La mezcla de reacción se agitó a 100ºC hasta que se confirmo por LCMS la conversión completa en el nitrilo deseado (~5 días). La mezcla se concentró y el sólido de color pardo oscuro producido se co-evaporó con EtOH para retirar el exceso de anhídrido acético. El sólido de color pardo oscuro se trituró en CH3OH para producir N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-2-pirimidinil]acetamida (2,44 g 39%) en forma de un sólido de color castaño. El filtrado se trató con bicarbonato sódico acuoso y K2CO3 en CH3OH y la mezcla producida se agitó durante una noche a temperatura ambiente. El CH3OH se evaporó y el sólido de color castaño producido se disolvió en EtOAc y agua. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se concentraron y el sólido de color castaño producido se trituró en CH3OH para producir el compuesto del título (0,60 g, 11%). LC-MS (ES) m/z = 245 [M+H]+.
Ejemplo 27
6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina
NH2N
HN
O
N
N NH2
A una suspensión de 4-(2-amino-4-pirimidinil)-2-fluoro-6-(metiloxi)benzonitrilo (0,20 g, 0,82 mmol) en THF (2 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (1,3 ml) y la mezcla producida se agitó a 90ºC hasta que se consumió el material de partida tal como se determinó por LCMS (~12 horas). La mezcla de reacción se concentró para producir el compuesto del título (102 mg, 49%) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 257 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  3,94 (s, 3H), 5,06 (s, 2H), 6,65 (s, 2H), 6,97 (s, 1H), 7,16 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 8,30 (d, J = 5,3 Hz, 1H), 11,67 (s a, 1H).
Procedimiento General C:
A una solución de N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6-metil-2-pirimidinil]acetamida en DMF (3 ml) se le añadió hidruro sódico (1,5 equiv.). A la solución básica se le añadió gota a gota una solución del alcohol apropiado (1 equiv.) e hidruro sódico (1 equiv.) en DMF (3 ml). El vial que contenía la solución de alcóxido se aclaró con más DMF (1 ml). Cuando se consideró que la reacción había terminado (HPLC, ~1 hora), la mezcla de reacción se vertió en cloruro de amonio acuoso saturado. Después de un periodo de reposo de ~10-15 minutos, el precipitado formado se recogió por filtración al vacío. Al sólido producido en EtOH se le añadió hidrazina monohidrato (50 equiv.) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 90ºC. La reacción se vertió en EtOAc y agua. La fase orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se concentraron. El tratamiento a partir de aquí varía de acuerdo con el compuesto.
Ejemplo 28
6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-[(3-fenilpropil)oxi]-1H-indazol-3-amina
NH2N
HN
O
N
NH2
N
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General C usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6metil-2-pirimidinil]acetamida (0,10 g, 0,37 mmol) y 3-fenil-propan-1-ol (0,044 ml, 0,33 mmol). El residuo se disolvió en una mezcla 2:1 de CHCl3:acetona (3 ml) y se inyectó en una columna de 12 g de SiO2 eluyendo con CHCl3 al 100% a 90:10:1 de CHCl3:CH3OH:NH4OH. Las fracciones que contenían el producto deseado se concentraron y el residuo producido se disolvió en una mezcla de CH3OH y DMSO (volumen total ~0,7 ml). La solución se inyectó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones apropiadas se concentraron para producir una sal TFA del compuesto del título (15 mg, 7%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 361 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  2,23 -2,31 (m, 2H), 2,89 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 4,28 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 7,15 -7,21 (m, 1H), 7,22 -7,30 (m, 5H), 7,52 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H), 8,31 (d, J = 6,8 Hz, 1H).
Ejemplo 29
6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-{[3-(feniloxi)propil]oxi}-1H-indazol-3-amina
NH2
N HN
O
O
N
N NH2
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General C usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6
metil-2-pirimidinil]acetamida (0,15 g, 0,55 mmol) y 3-(feniloxi)-1-propanol (0,070 ml, 0,49 mmol). El residuo de color 10 castaño se disolvió en EtOH caliente y se precipitó con hexanos. El precipitado se recogió por filtración al vacío. El
sólido producido se disolvió en DMSO y se inyectó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las
fracciones apropiadas se concentraron para producir una sal TFA del compuesto del título (36 mg, 10%) en forma de
un sólido de color dorado. LC-MS (ES) m/z = 377 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,33 (m, 2H), 4,22 (t, J =
6,1 Hz, 2H), 4,36 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 6,93 -6,99 (m, 3H), 7,10 (s, 1H), 7,26 -7,33 (m, 2H), 7,43 (m, 1H), 7,67 (s, 1H), 15 8,37 (d, J = 5,8 Hz, 1H). NOTA: los dos grupos de protones amino son probablemente demasiado anchos para
verse.
Ejemplo 30
6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina
H2N
N
NH
O N
N NH2
20 El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General C usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6metil-2-pirimidinil]acetamida (0,15 g, 0,55 mmol) y EtOH (0,032 ml, 0,55 mmol). El sólido de color castaño claro se disolvió en DMSO (1 ml) y se inyectó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones apropiadas se concentraron para producir una sal TFA del compuesto del título (14 mg, 5%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 271 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,58 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 4,38 (c, J =
25 6,9 Hz, 2H), 7,32 (s, 1H), 7,58 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,35 (d, J = 6,6 Hz, 1H).
Ejemplo 31 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-[(2,2,2-trifluoroetil)oxi]-1H-indazol-3-amina F
F
H2N
N NH
F
O
N
N NH2
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General C usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6
5 metil-2-pirimidinil]acetamida (0,15 g, 0,55 mmol) y 2,2,2-trifluoroetanol (0,04 ml, 0,55 mmol). El sólido de color amarillo se disolvió en DMSO (1 ml) y se inyectó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones apropiadas se concentraron para producir una sal TFA del compuesto del título (38 mg, 13%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 325 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  7,35 (s, 1H), 7,61 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 8,35 (d, J = 6,6 Hz, 1H). NOTA: Se supone que los protones -OCH2CF3 están
10 escondidos bajo el pico de agua.
Intermedio 30
4-[2-Amino-6-(4-morfolinil)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzaldehído
F
NH2
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General A usando: ácido (3,5-difluoro-4
15 formilfenil)borónico (2,17 g, 11,7 mmol) y 4-cloro-6-(4-morfolinil)-2-pirimidinamina (2,50 g, 11,7 mmol). El sólido se cargó en seco en 10 g de SiO2. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 eluyendo con CHCl3 al 100% a 90:10 de CHCl3:CH3OH produjo el compuesto del título (2,55 g, 51%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 321 [M+H]+.
Intermedio 31
20 (A) N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6-(4-morfolinil)-2-pirimidinil]acetamida
(B) N-acetil-N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6-(4-morfolinil)-2-pirimidinil]acetamida CN
CN F
F FF
N
N N N NH
O
N NN O
OO
O
A B
A una suspensión de 4-[2-amino-6-(4-morfolinil)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzaldehído (2,55 g, 7,96 mmol) en 5
THF/EtOH/agua se le añadieron carbonato sódico (0,93 g, 8,8 mmol) y hidrocloruro de hidroxilamina (0,61 g, 8,8 mmol) y la mezcla producida se agitó a 100ºC hasta que se consumió el material de partida (~2 horas). La mezcla de reacción se concentró y el sólido de color amarillo producido se disolvió en una mezcla de EtOAc y agua. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se concentraron para producir un residuo. El precipitado que se formó en la capa acuosa también se recogió por filtración al vacío. Los residuos combinados se trataron con anhídrido acético (usado como disolvente) y la mezcla de reacción se agitó a 100ºC hasta que la oxima se convirtió completamente en el nitrilo según se determinó mediante análisis por LCMS (~5 días). La mezcla de reacción se diluyó con EtOH, se concentró y se co-evaporó con EtOH (tres veces) para producir un sólido de color castaño anaranjado. El sólido se trituró en CH3OH y se filtró para producir una mezcla de los compuestos del título (2,4 g). (A) LC-MS (ES) m/z = 360 [M+H]+. (B) LC-MS (ES) m/z = 402 [M+H]+.
Ejemplo 32
6-[2-Amino-6-(4-morfolinil)-4-pirimidinil]-N4-(2-feniletil)-1H-indazol-3,4-diamina
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General B usando: Intermedio 31 (0,15 g) y (2feniletil)amina (0,066 ml, 0,52 mmol) en 1,4-dioxanos (3 ml). El residuo se disolvió en EtOH (1,1 ml). Parte de la solución (0,6 ml) se inyectó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%) y las fracciones apropiadas se concentraron para producir el producto impuro. El sólido de color amarillo se recristalizó en EtOH para producir una sal TFA del compuesto del título (42 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 431 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  3,07 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 3,58 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 3,73-3,85 (m, 4H), 3,93 (s a, 4H), 6,30 (s, 1H), 6,67 (s, 1H), 6,94 (s, 1H) 7,15-7,51 (m, 5H).
Ejemplo 33
6-[2-Amino-6-(4-morfolinil)-4-pirimidinil]-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina
H2N
N NH
O
N
NN
NH2 O
A una solución del Intermedio 31 (0,15 g) en DMF (3 ml) se le añadió hidruro sódico (0,22 g, 0,56 mmol, dispersión al 60% en de aceite), seguido de la adición gota a gota de una solución de metóxido sódico (0,085 ml, 0,374 mmol, al 25% en peso en CH3OH) en DMF (3 ml). El vial que contenía la solución de metóxido sódico se aclaró con DMF (1 ml) y la mezcla producida se añadió a la mezcla de reacción. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente hasta que se consumió el material de partida (~ 1 hora). La mezcla se vertió en NH4Cl acuoso saturado y el sólido producido se filtró. Al sólido se le añadió EtOH seguido de hidrazina monohidrato (0,59 ml) y la mezcla producida se agitó durante una noche a 90ºC. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. El filtrado se concentró hasta obtener un sólido de color amarillo. El sólido se disolvió en DMSO y se inyectó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones apropiadas se concentraron para producir una sal TFA del compuesto del título (14 mg, 6%) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 342 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  3,81 (m, 6H), 4,05 (s a, 2H), 4,11 (s, 3H), 6,79 (s, 1H), 6,85 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 1,3 Hz, 1H).
Intermedio 32
6-Cloro-N4,N4-dimetil-2,4-pirimidindiamina
NH2
A una solución de 4,6-dicloropirimidinamina (2,0 g, 12,2 mmol) en acetonitrilo se le añadieron base de Hunig (2,34 ml, 13,4 mmol) y dimetilamina (6,7 ml, 13,4 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1,5 horas a 50ºC. La mezcla se vertió en CH2Cl2 y agua. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera y se concentró para producir el compuesto del título (2,2 g, 94%) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 173, 175 [M+H]+.
Intermedio 33
4-[2-Amino-6-(dimetilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzaldehído
F
NH2
10 El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General A usando: ácido (3,5-difluoro-4formilfenil)borónico (2,37 g, 12,8 mmol) y 6-cloro-N4,N4-dimetil-2,4-pirimidindiamina (2,2 g, 12,8 mmol). El sólido se disolvió en EtOAc y se precipitó con hexanos. El sólido producido se recogió por filtración al vacío para producir el compuesto del título (2,82 g, 80%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 279 [M+H]+. 15 Intermedio 34 N-acetil-N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6-(dimetilamino)-2-pirimidinil]acetamida N
FF N
N NN
O
O
A una solución de 4-[2-amino-6-(dimetilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzaldehído (2,86 g, 10,3 mmol) en una
mezcla de EtOH y agua se le añadieron carbonato sódico (1,2 g, 11,3 mmol) y hidrocloruro de hidroxilamina (0,79 g, 20 11,3 mmol). La mezcla producida se calentó a reflujo hasta que se consumió el material de partida (~2 horas). La
mezcla se concentró y el sólido de color gris producido se lavó con agua. El filtrado se extrajo con EtOAc y la capa
orgánica se combinó con el sólido de color gris y se concentró. El residuo producido se trató con exceso de
anhídrido acético (disolvente) y la mezcla de reacción se agitó a 100ºC hasta que el análisis por LCMS confirmó la
conversión completa en el nitrilo deseado (~5 días). La mezcla de reacción se concentró y el sólido de color castaño 25 oscuro producido se trituró en CH3OH para producir el compuesto del título (0,624 g, 17%) en forma de un sólido de
color gris. LC-MS (ES) m/z = 360 [M+H]+. LCMS (M+1) = 360 m/z.
Ejemplo 34
6-[2-Amino-6-(dimetilamino)-4-pirimidinil]-N4-(2-feniletil)-1H-indazol-3,4-diamina
H2N
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General B usando: N-acetil-N-[4-(4-ciano-3,5
5 difluorofenil)-6-(dimetilamino)-2-pirimidinil]acetamida (0,145 g, 0,404 mmol), (2-feniletil)amina (0,056 ml, 0,44 mmol) y 1,4-dioxano (3 ml). NOTA: El tratamiento con EtOAc/agua no fue necesario para este proceso. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se formó un precipitado. El precipitado se filtró y se lavó con agua para producir el compuesto del título (70 mg, 40%) en forma de un sólido de color castaño. LC-MS (ES) m/z = 389 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,99 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 3,06 (s, 6H), 3,38 -3,46 (m, 2H), 5,03 (s, 2H), 5,63 (t, J =
10 5,3 Hz, 1H), 5,96 (s, 2H), 6,32 (s, 1H), 6,55 (s, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,19 -7,26 (m, 1H), 7,34 (m, 4H), 11,38 (s, 1H).
Intermedio 35
4-[2-Amino-6-(etilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzaldehído
O
F
F
N
N N NH2H
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General A usando: ácido (3,5-difluoro-4
15 formilfenil)borónico (2,54 g, 13,7 mmol) y 6-cloro-N4-etil-2,4-pirimidindiamina (2,36 g, 13,7 mmol). El sólido se trituró en EtOAc y se filtró para producir el compuesto del título (1,63 g, 43%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 279 [M+H]+.
Intermedio 36
N-Acetil-N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6-(etilamino)-2-pirimidinil]acetamida
CN F
F
N
N NN
O H
O
A una solución de 4-[2-amino-6-(etilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzaldehído (1,57 g, 5,64 mmol) en EtOH/agua se le añadieron carbonato sódico (0,66 g, 6,21 mmol) y hidrocloruro de hidroxilamina (0,431 g, 6,21 mmol). La mezcla producida se calentó a reflujo hasta que se consumió el material de partida. La mezcla de reacción se concentró hasta obtener un sólido oscuro. El sólido se lavó con agua y los lavados acuosos se extrajeron con 25 EtOAc. El sólido y las extracciones con EtOAc se combinaron para producir un sólido oscuro. El sólido se trató con
anhídrido acético (exceso) y se agitó a 100ºC hasta que la oxima se convirtió en el nitrilo (~5 días). La mezcla de reacción se concentró y se co-evaporó con EtOH. El sólido oscuro producido se trituró en CH3OH para producir el compuesto del título (0,2 g, 10%) en forma de un sólido de color pardo oscuro. LC-MS (ES) m/z = 360 [M+H]+.
Ejemplo 35
6-[3-Amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-N4-etil-2,4-pirimidindiamina
H2N
N NH O
N
N N
NH2H
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General C usando: N-acetil-N-[4-(4-ciano-3,5difluorofenil)-6-(etilamino)-2-pirimidinil]acetamida (0,10 g, 0,28 mmol) y metóxido sódico (0,064 ml, 0,28 mmol, al 25% en peso en CH3OH). NOTA: El tratamiento con EtOAc/agua se omitió para este proceso. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró hasta obtener un residuo. El residuo se disolvió en DMSO y se inyectó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones apropiadas se concentraron para producir una sal TFA del compuesto del título (8 mg, 5%) en forma de un sólido de color castaño. LC-MS (ES) m/z = 300 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,28 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 3,57 (c, J = 7,33 Hz, 2H), 4,09 (s, 3H), 6,37 (s, 1H), 6,76 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 1,3 Hz, 1H).
Intermedio 37
4-(2-Amino-6-metil-4-pirimidinil)-2,6-difluorobenzaldehído
FO
N
N
NH2
A ácido (3,5-difluoro-4-formilfenil)borónico (5,0 g, 26,9 mmol) y 4-cloro-6-metil-2-pirimidinamina (3,86 g, 26,9 mmol) se les añadieron 1,4-dioxano (100 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (40 ml). La mezcla se desgasificó con nitrógeno durante 10 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (1,0 g, 0,87 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se vertió en agua y se filtró. El sólido se lavó con agua y EtOAc para proporcionar un sólido de color amarillo pálido (2,4 g). Los filtrados combinados se vertieron en un embudo de decantación. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. El residuo producido se cromatografió sobre una columna de SiO2 (gradiente: de CHCl3 al 100% a 90:10:1 de CHCl3/CH3OH/NH4OH). La carga del material en la columna fue complicada debido a las pobres propiedades de solubilidad del residuo. Se usó dioxano caliente para ayudar a disolver el residuo. Parte del material co-eluyó con la primera parte del disolvente. Todas las fracciones que contenían el producto (incluyendo las que coeluyeron con el frente de disolvente) se combinaron, se concentraron y se trituraron en una mezcla ~1:1 de EtOAc y hexanos para proporcionar el producto deseado en forma de un sólido de color amarillo (1,6 g). Este material se combinó con el sólido de color amarillo pálido obtenido a partir de la filtración inicial y se usó sin purificación adicional. LC-MS (ES) m/z = 250 [M+H]+.
Intermedio 38
N-[4-(4-Ciano-3,5-difluorofenil)-6-metil-2-pirimidinil]acetamida F
NH
O
A 4-(2-amino-6-metil-4-pirimidinil)-2,6-difluorobenzaldehído (4,0 g, 16,1 mmol) en agua (150 ml) y EtOH (50 ml) se le
5 añadieron hidrocloruro de hidroxilamina (1,23 g, 17,7 mmol) y carbonato sódico (1,87 g, 17,7 mmol). La mezcla se agitó durante 3 horas a 100ºC. La mezcla de reacción se filtró y el sólido se lavó con agua. El filtrado combinado se extrajo con EtOAc y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. El sólido producido se combinó con el sólido obtenido después de la filtración de la mezcla de reacción y se trató con anhídrido acético (usado como disolvente) en un tubo que puede cerrarse herméticamente. El tubo se cerró
10 herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante 5 días a 100ºC. Los análisis por LCMS mostraron una mezcla de producto deseado mono y bis-acetilado junto con sus respectivas oximas acetiladas. La mezcla de reacción se calentó durante 2 días más a 110ºC. La mezcla se concentró y el residuo producido se trató con CH3OH. La mezcla se filtró y el sólido se lavó con más CH3OH para proporcionar el compuesto del título (1,3 g) en forma de un sólido de color castaño. A la solución del filtrado (150 ml) que contenía principalmente el producto deseado bis
15 acetilado se le añadió K2CO3 (~1 g) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente. Se añadió más cantidad de K2CO3 (~1 g) seguido de agua (~50 ml) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente. Los análisis por LCMS mostraron una conversión completa en el producto mono-acetilado. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se filtró. El sólido producido se lavó con CH3OH para proporcionar el compuesto del título (1,03 g) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 289 [M+H]+.
20 Ejemplo 36
6-(2-Amino-6-metil-4-pirimidinil)-N4-(3-fenilpropil)-1H-indazol-3,4-diamina
NH2N
H
HN
N
N
NH2
N
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General B usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6metil-2-pirimidinil]acetamida (0,15 g, 0,52 mmol), 3-fenil-1-propanamina (0,081 ml, 0,57 mmol) y 1,4-dioxanos (3 ml).
25 El residuo se disolvió en CH3OH (1,2 ml) y se inyectó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones apropiadas se concentraron para producir una sal TFA del compuesto del título (60 mg, 19%) en forma de un sólido de color rojo. LC-MS (ES) m/z = 374 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  2,06 -2,13 (m, 2H), 2,57 (s, 3H), 2,80 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 3,37 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 7,14 -7,19 (m, 1H), 7,22 -7,29 (m, 5H), 7,32 (s, 1H), 7,36 (s, 1H).
Ejemplo 37 6-(2-amino-6-metil-4-pirimidinil)-N4-(2-feniletil)-1H-indazol-3,4-diamina NH2
N
H
HN
N
N
NH2
N
El compuesto del título se preparó siguiendo el Procedimiento General B usando: N-[4-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-6
5 metil-2-pirimidinil]acetamida (0,15 g, 0,52 mmol), (2-feniletil)amina (0,072 ml, 0,57 mmol) y 1,4-dioxano (3 ml). El residuo se disolvió en DMSO (1 ml) y se inyectó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones apropiadas se concentraron para producir una sal TFA del compuesto del título (40 mg, 13%) en forma de un sólido de color rojo. LC-MS (ES) m/z = 360 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  2,55 (s, 3H), 3,01 -3,08 (m, 2H), 3,52 -3,60 (m, 2H), 7,19 -7,26 (m, 2H), 7,27 -7,34 (m, 5H), 7,37 (s, 1H).
10 Intermedio 39
6-Cloro-N4-(ciclohexilmetil)-2,4-pirimidindiamina
NH2
A 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (1,64 g, 10 mmol) en CH3OH (20 ml) se le añadieron trietilamina (2,02 g, 20 mmol) y ciclohexilmetanamina (1,36 g, 12 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a 60ºC. La mezcla se
15 evaporó al vacío y el residuo producido se sometió a cromatografía en SiO2 (gradiente: de 1:4 a 1:2 de EtOAc/éter de petróleo) para producir el compuesto del título (1,6 g, 66%) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 241, 243 [M+H]+.
Intermedio 40
4-{2-Amino-6-[(ciclohexilmetil)amino]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
20 A 6-cloro-N4-(ciclohexilmetil)-2,4-pirimidindiamina (1,2 g, 5 mmol), 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2il)benzonitrilo (1,48 g, 6 mmol) y Pd(PPh3)4 (289 mg, 0,25 mmol) en 1,4-dioxano (40 ml) se les añadió una solución de Na2CO3 (636 mg, 6 mmol) en agua (10 ml) y la mezcla producida se desgasificó y después se recargó con nitrógeno (tres veces). La mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La reacción se enfrió a
25 temperatura ambiente y la capa orgánica se separó y se concentró. El residuo producido se purificó por cromatografía sobre SiO2 (eluyente: 1/2 de EtOAc/éter de petróleo) para producir el compuesto del título (0,7 g, 43%) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 326 [M+H]+.
Ejemplo 38 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(ciclohexilmetil)-2,4-pirimidindiamina
NH2
A una solución de 4-{2-amino-6-[(ciclohexilmetil)amino]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (300 mg, 0,92 mmol) en EtOH (2 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (3,0 ml, 61,2 mmol) y la suspensión producida se agitó a 120ºC durante 1 hora en condiciones de microondas. La mezcla de reacción transparente se concentró y el residuo producido se purificó por RPHPLC (CH3CN/H2O con THF al 0,1%) para producir el compuesto del título (160 mg, 48%) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 338 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,92 (m, 2H), 1,19 (m, 3H), 1,51 (m, 1H), 1,68 (m, 5H), 3,14 (s, 2H), 5,37 (s, 2H), 5,95 (s, 2H), 6,29 (s, 1H), 6,85 (s a, 1H), 7,40 (s a, 1H), 7,69 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,83 (s, 1H), 11,5 (s, 1H).
Intermedio 41
4-{2-Amino-6-[2-(metiloxi)fenil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
Una mezcla de 4-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo (298 mg, 1,2 mmol), ácido [2(metiloxi)fenil]borónico (273 mg, 1,8 mmol) y Na2CO3 (318 mg en 2 ml de agua) en 1,4-dioxano (8 ml), se desgasificó con N2. Se añadió Pd(PPh3)4 (69 mg, 0,06 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. La reacción se vertió en agua y EtOAc. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc (dos veces). Las capas orgánicas combinadas se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron para producir el compuesto del título en bruto (306 mg). LC-MS (ES) m/z = 321 [M+H]+.
Ejemplo 39
6-{2-Amino-6-[2-(metiloxi)fenil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
NH2
A la mezcla de 4-{2-Amino-6-[2-(metiloxi)fenil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (306 mg) en 1,4-dioxano (30 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (2,5 ml) y la mezcla se agitó durante una noche a 95ºC. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró para retirar una pequeña cantidad de sólido de color negro (que parecía ser partículas de Pd). Se añadió más cantidad de hidrazina monohidrato (1 ml) y la mezcla producida se agitó durante 24 horas más a 95ºC. El disolvente se evaporó y el residuo producido se purificó por RPHPLC (CH3CN/H2O con NH4HCO3 al 0,1%) para producir el compuesto del título (43 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 333 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  3,88 (s, 3H), 5,42 (s, 2H), 6,66 (s, 2H), 7,08 (m, 1H), 7,18 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,46 (m, 1H), 7,58 (m, 2H), 7,78 (m, 2H), 7,98 (s, 1H), 11,60 (s, 1H).
Intermedio 42
6-[2-Amino-6-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH2
A 6-[2-amino-6-(metiltio)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (1,0 g, 3,7 mmol) en TFA (30 ml) a 0ºC se le añadió gota a
5 gota H2O2 acuoso (1,5 ml, 14,7 mmol, al 30% (p/p)) durante 3 minutos. La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. Después de 2 horas, el análisis por LCMS mostró la oxidación completa en la sulfona. La mezcla de reacción se enfrió a 0ºC y se interrumpió con sulfuro de dimetilo (1,36 ml, 18,4 mmol, adición gota a gota). Después de que se completara la adición, la reacción se calentó a temperatura ambiente. Después de 10 minutos, la mezcla se enfrió de nuevo a 0ºC y se trató con Et2O (20 ml) y hexano (40 ml). El sólido producido se filtró y se lavó con
10 hexano para producir una sal TFA del compuesto del título (1,01 g) en forma de un sólido de color naranja. LC-MS (ES) m/z = 305 [M+H]+.
Ejemplo 40
6-{2-Amino-6-[2-(fenilmetil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
NH2
N
N H
N
N
NH2
15 En un tubo de 10 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de nitrógeno se combinaron 6-[2-amino6-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (0,20 g, 0,376 mmol), 1,4-dioxano (5 ml), 2-(fenilmetil)pirrolidina (0,151 g, 0,939 mmol) y trietilamina (0,16 ml, 1,13 mmol). El vial se cerró herméticamente y la mezcla se agitó durante una noche a 95ºC. La mezcla de reacción se concentró y el residuo producido se purificó parcialmente por cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (90/10/1 de CHCl3/CH3OH/NH4OH). Las fracciones que contenían el producto
20 deseado se combinaron y se concentraron. El material producido se purificó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%) para producir una sal TFA del compuesto del título (9 mg) en forma de un sólido de color amarillo como una mezcla de rotámeros. LC-MS (ES) m/z = 386 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  [1,86 -2,11 (m) y 2,73 -2,79 (m)] (5H), [2,89 -3,01 (m) y 3,25 -3,26 (m)] (1H), 3,60 -3,81 (m, 2H), [4,50 -4,55 (m) y 4,67 -4,72 (m)] (1H), [6,11 (s) y 6,53 (s)] (1H), [7,13 -7,33 (m) y 7,49 -7,51 (m)] (6H), [7,62 (s) y 7,85 (s)] (1H), 7,97 -8,03 (m, 1H).
25 Ejemplo 41
6-{2-Amino-6-[2-(1-metiletil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
NH2
A 6-[2-amino-6-(metiltio)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (0,25 g, 0,92 mmol) en TFA (8,74 ml) a 0ºC se le añadió gota a gota H2O2 acuoso (0,375 ml, 3,67 mmol, al 30% (p/p)) durante 2 minutos. Después de que se completara la 30 adición, la reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. Después de 2 horas, la mezcla de reacción se enfrió de nuevo a 0ºC y se interrumpió con sulfuro de dimetilo (0,54 ml, 7,34 mmol, adición gota a gota). La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 1 hora. La mezcla se enfrió a 0ºC y se diluyó con Et2O (5 ml) Et2O y hexano (15 ml). El sólido de color naranja resultante se filtró y se transfirió a un tubo cerrado herméticamente de 25 ml en una atmósfera de nitrógeno. Se añadieron 1,4-dioxano (5,83 ml), hidrocloruro de 2-(15 metiletil)pirrolidina (0,275 g, 1,84 mmol) y trietilamina (0,51 ml, 3,67 mmol), el tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. Como el análisis por LCMS mostró una cantidad mínima de producto, se añadió más trietilamina (1 ml) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se decantó. La solución se concentró y el aceite producido se disolvió en una mezcla de 50/50 de CH3CN/H2O con 0,1 ml de TFA. La mezcla producida se filtró a través de una frita de 0,45 m y
10 se purificó por RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%) para producir una sal TFA del compuesto del título (12 mg) en forma de un sólido de color amarillo en forma de una mezcla de rotámeros. LC-MS (ES) m/z = 338 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,75 -0,99 (m, 6H), 1,79 -2,04 (m, 4H), 3,58 -3,88 (m, 3H), 4,26 (m, 1H), 4 -5 (s a), [6,59 (s) y 6,65 (s)] (1H), [7,33 (d, J = 8,6 Hz) y 7,37 (d, J = 8,6 Hz)] (1H), [7,69 (s) y 7,73 (s)] (1H), 7,91 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 12,04 (s a, 1H).
15 Ejemplo 42
6-[2-Amino-6-(2-metil-1-pirrolidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH2
A 6-[2-amino-6-(metiltio)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (0,250 g, 0,918 mmol) en TFA (8,7 ml) a 0ºC se le añadió gota a gota H2O2 acuoso (0,375 ml, 3,67 mmol, al 30% (p/p)) durante 3 minutos. Después de que se completara la 20 adición, la reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. Después de 2 horas, el análisis por LCMS mostró una conversión completa en la sulfona. La reacción se enfrió a 0ºC y se interrumpió con sulfuro de dimetilo (0,54 ml, 7,34 mmol). La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante 10 minutos. La mezcla se enfrió a 0ºC y se diluyó con Et2O (10 ml) y hexano (5 ml). El sólido de color naranja resultante se filtró, se lavó con hexano y se puso en un tubo cerrado herméticamente de 25 ml. Se añadieron 1,4-dioxano (5,83 ml) y trietilamina (0,51 ml, 25 3,67 mmol) seguido de 2-metilpirrolidina (0,12 ml, 1,19 mmol). El tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. El análisis por LCMS de la mezcla de reacción mostró 60% del producto deseado y 30% de sulfona sin reaccionar. Se añadió más cantidad de 2-metilpirrolidina (0,1 ml) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas más a 95ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se decantó. La solución se concentró y el residuo producido se disolvió en 3 ml de 50/50 de CH3CN/H2O con TFA al 0,1%. La
30 purificación en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%) produjo una sal TFA del compuesto del título (105 mg, 20%) en forma de un sólido de color amarillo en forma de una mezcla de rotámeros. LC-MS (ES) m/z = 310 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,22 -1,26 (m, 3H), 1,65 -1,87 (m, 1H), 1,93 -2,16 (m, 3H), 3,47 -3,64 (m, 1H), 3,65 -3,87 (m, 1H), 4,31 -4,54 (m, 1H), [6,54 (s) y 6,63 (s)] (1H), 7,36 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,91 (m, 1H), 11,99 (s a, 2H).
35 Intermedio 43
6-Cloro-N4-(2-feniletil)-2,4-pirimidindiamina
NH2
Una mezcla de 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (815 mg, 5,0 mmol), (2-feniletil)amina (665 mg, 5,5 mmol) y trietilamina (1,0 g, 10 mmol) en CH3OH (20 ml) se agitó a 60ºC durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró y el
40 residuo producido se sometió a cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (eluyente: 1/1 de EtOAc/éter de petróleo) para producir el compuesto del título (1,0 g, 81%) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 249 [M+H]+.
Intermedio 44
4-{2-Amino-6-[(2-feniletil)amino]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
A una mezcla de 6-cloro-N4-(2-feniletil)-2,4-pirimidindiamina (0,9 g, 3,6 mmol), 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2
5 dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (1,06 g, 4,3 mmol) y Pd(PPh3)4 (289 mg, 0,25 mmol) en 1,4-dioxano (200 ml) se le añadió una solución de Na2CO3 (320 mg, 3 mmol) en agua (20 ml) y la mezcla producida se desgasificó y se recargó con N2 (tres veces). La mezcla de reacción producida se agitó durante una noche a 95ºC y después se dejó enfriar hasta temperatura ambiente. La capa orgánica se separó y se concentró y el producto en bruto producido se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de 1:5 a 2:1 de EtOAc/éter de petróleo) para producir el
10 compuesto del título (0,8 g, 66%) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 334 [M+H]+.
Ejemplo 43
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(2-feniletil)-2,4-pirimidindiamina
NH2
A una solución de 4-{2-amino-6-[(2-feniletil)amino]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (800 mg, 2,4 mmol) en EtOH (20
15 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (7 ml) y la suspensión producida se agitó durante una noche a 95ºC. La mezcla transparente de reacción se concentró y el residuo producido se purificó por RPHPLC (CH3CN/H2O con THF al 0,1%) para producir el compuesto del título (500 mg, 42%) en forma de un polvo amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 346 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 2,85 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,53 (m, 2H), 5,37 (s, 2H), 6,02 (s, 2H), 6,28 (s, 1H), 6,94 (s, 1H), 7,18 -7,23 (m, 1H),7,28 -7,33 (m, 4H), 7,42 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,85 (s,
20 1H), 11,5 (s, 1H).
Intermedio 45
4-Cloro-6-(hexahidro-1H-azepin-1-il)-2-pirimidinamina
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de nitrógeno se combinaron 4,6-dicloro
25 2-pirimidinamina (0,50 g, 3,05 mmol) y hexahidro-1H-azepina (0,34 ml, 3,05 mmol) en CH3OH (10 ml). Se añadió trietilamina (0,47 ml, 3,35 mmol), el vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante 5 horas a 50ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El sólido de color amarillo producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (600 mg, 82%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 227 [M+H]+.
30 Intermedio 46
4-[2-Amino-6-(hexahidro-1H-azepin-1-il)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de nitrógeno se combinaron 4-cloro-6
5 (hexahidro-1H-azepin-1-il)-2-pirimidinamina (600 mg, 2,65 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (0,437 g, 2,65 mmol) en 1,4-dioxano (10,6 ml). Se añadió NaHCO3 acuoso saturado (2,65 ml) y la mezcla producida se desgasificó con nitrógeno durante 5 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,153 g, 0,13 mmol), el recipiente se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y la capa orgánica se separó y se concentró. El sólido producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa
10 orgánica se separó, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (eluyente: 90/10/1 de CHCl3/CH3OH/NH4OH) produjo el compuesto del título (547 mg, 62%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 312 [M+H]+.
Ejemplo 44
6-[2-Amino-6-(hexahidro-1H-azepin-1-il)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH2
15 En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de nitrógeno se combinaron 4-[2-amino6-(hexahidro-1H-azepin-1-il)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo (0,547 g, 1,76 mmol) e hidrazina monohidrato (1,72 ml) en EtOH (8,8 ml). El vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante 6 horas a 95ºC. La reacción se filtró a través de una frita de 0,2 m para retirar una pequeña cantidad de precipitado y el filtrado se
20 concentró. El aceite producido se diluyó con EtOH (5 ml) y la mezcla se concentró. El sólido producido se disolvió en una mezcla de CH3CN/H2O/TFA y se purificó por RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%) para producir una sal TFA del compuesto del título (90 mg, 9%) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 324 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,52 -1,56 (m, 4H), 1,68 -1,86 (m, 4H), 3,73 -3,92 (m, 4H), 6,75 (s, 1H), 7,37 (dd, J = 8,4, 1,6 Hz, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,91 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 12,00 (s, 1H).
25 Intermedio 47
N-{6-[2-amino-6-(metiloxi)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-il}acetamida
O
NH
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de argón se combinaron N-acetil-N-(1acetil-6-bromo-1H-indazol-3-il)acetamida (0,25 g, 0,74 mmol), bis(pinacolato)diboro (0,197 g, 0,776 mmol), acetato 30 potásico (0,145 g, 1,48 mmol) y 1,4-dioxano (4,9 ml). La mezcla se desgasificó con argón durante 5 minutos. Se añadió PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,024 g, 0,03 mmol), el tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, el tubo se abrió y se añadieron 4-cloro-6(metiloxi)-2-pirimidinamina (0,130 g, 0,813 mmol), NaHCO3 (0,248 g, 2,96 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,024 g, 0,03 mmol) y agua (1,64 ml). El tubo se volvió a cerrar herméticamente en una atmósfera de argón y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, se diluyó con 5 CH3CN (20 ml) y se filtró a través de una capa de Celite 503. El filtrado se concentró y el sólido de color pardo producido se disolvió en una mezcla de CH3CN (5 ml), agua (10 ml) y TFA (0,5 ml). La mezcla producida se filtró a través de un lecho C18 de 300 mg y se lavó con una mezcla de CH3CN al 20%/H2O al 80%. El filtrado se concentró y la espuma de color amarillo producida se purificó en una RPHPLC Varian (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%) para producir una sal TFA del compuesto del título (115 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z =
10 299 [M+H]+.
Ejemplo 45
6-[2-Amino-6-(metiloxi)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH2
A N-{6-[2-amino-6-(metiloxi)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-il}acetamida (115 mg, 0,218 mmol) en CH3OH (20 ml) se le
15 añadió HCl (0,21 ml, 2,5 mmol, 12 M) y la mezcla de reacción se agitó durante 12 horas a 60ºC. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante el fin de semana. La mezcla se concentró y el sólido de color amarillo producido se purificó en una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron. El sólido de color amarillo producido se disolvió en agua y se trató con NaOH (1 M). El sólido de color rosa producido se filtró para producir el compuesto del título (15 mg, 25%).
20 LC-MS (ES) m/z = 257 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  3,86 (s, 3H), 5,40 (s, 2H), 6,58 (s, 1H), 6,64 (s, 2H), 7,54 (dd, J = 8,6, 1,0 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,95 (s, 1H), 11,57 (s, 1H).
Intermedio 48
(2S)-2-({[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}metil)-1-pirrolidinacarboxilato] de fenilmetilo
25 A (2S)-2-(hidroximetil)-1-pirrolidinacarboxilato de fenilmetilo (0,78 g, 3,32 mmol) en CH2Cl2 (10 ml) se le añadió Et3N (0,92 ml, 6,63 mmol) seguido de TsCl (0,664 g, 3,48 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se vertió en agua y éter dietílico (Et2O). La capa acuosa se separó y la capa orgánica se lavó con NaHCO3 acuoso saturado seguido de salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de hexanos al 100% a EtOAc al 20%/hexanos) produjo el
30 compuesto del título (0,85 g, 66%) en forma de un aceite incoloro. LC-MS (ES) m/z = 390 [M+H]+.
Intermedio 49
(2R)-2-etil-1-pirrolidinacarboxilato de fenilmetilo
N
O
A yoduro de cobre (I) (1,25 g, 6,55 mmol) en Et2O (25 ml) se le añadió metillitio (8,2 ml, 13,1 mmol) a 0ºC. Después,
5 se añadió una solución de (2S)-2-({[(4-metilfenil)sulfonil]oxi}metil)-1-pirrolidincarboxilato de fenilmetilo (0,85 g, 2,182 mmol) en CH2Cl2 (4 ml) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a 0ºC. La reacción se interrumpió con NH4Cl acuoso saturado y se extrajo con CH2Cl2 (tres veces). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de hexanos al 100% a EtOAc al 20%/hexanos) produjo el compuesto del título (230 mg, 45%) en forma de un aceite
10 incoloro. LC-MS (ES) m/z = 234 [M+H]+.
Intermedio 50
(2R)-2-Etilpirrolidina
En un tubo que puede cerrarse herméticamente se disolvió (2R)-2-etil-1-pirrolidinacarboxilato de fenilmetilo (230 mg,
15 0,99 mmol) en una mezcla de 1,4-dioxano (6 ml) y HCl concentrado (4 ml). El tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante 5 horas a 90ºC. La solución se concentró evaporando el residuo producido en tolueno (~20 ml). Se añadió Et2O y la mezcla producida se sonicó y se decantó. El sólido producido se disolvió en acetonitrilo (CH3CN) y se trató con Et2O hasta que se formó un precipitado. La mezcla se sonicó y se decantó y el sólido se trituró en Et2O para producir la sal HCl del compuesto del título (80 mg, 60%) en forma de un sólido de
20 color blanquecino. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,07 (t, J = 7,5, 3H), 1,60 -1,84 (m, 3H), 1,96 -2,17 (m, 2H), 2,19 2,31 (m, 1H), 3,30 (m, 2H), 3,38 -3,52 (m, 1H).
Intermedio 51
4-Cloro-6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-2-pirimidinamina
NH2
25 Una mezcla de (2R)-2-etilpirrolidina (80 mg, 0,59 mmol), 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (119 mg, 0,726 mmol) y Et3N (0,25 ml, 1,77 mmol) en CH3CN (6 ml) se agitó durante una noche a 80ºC. La mezcla se vertió en agua (~150 ml), se sonicó y se filtró para producir el compuesto del título (94 mg, 70%) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 227, 229 [M+H]+.
Intermedio 52 4-{2-Amino-6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
A 4-cloro-6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-2-pirimidinamina (40 mg, 0,176 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (29,1 mg, 0,176 mmol) se les añadió 1,4-dioxano (3 ml) seguido de NaHCO3 ac. sat. (0,5 ml) y la mezcla se purgó con N2 durante 10 minutos en un tubo que puede cerrarse herméticamente. Se añadió Pd(Ph3P)4 (20,4 mg, 0,018 mmol), el tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla se vertió en agua y EtOAc. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de CHCl3 al 100% a 95:5:0,5 de CHCl3:CH3OH:NH4OH) produjo el compuesto del título (52 mg) en forma de un sólido. LC-MS (ES) m/z = 312 [M+H]+.
Ejemplo 46
6-{2-Amino-6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
N
N
NH2
A 4-{2-amino-6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (50 mg, 0,161 mmol) en etanol (4 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (1 ml, 20,40 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente. La reacción se vertió en agua y EtOAc y la capa orgánica se separó, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. El sólido producido se disolvió en etanol (~2 ml) y se trató con hexanos hasta que la solución se volvió turbia. La mezcla se sometió a evaporador rotatorio (~1/2 volumen original) hasta que se observó un precipitado voluminoso. La solución se decantó y el sólido se secó al vacío a 40ºC para producir el compuesto del título (30 mg, 58%) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 324 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,89 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 1,37 (m, 1H), 1,7 -2,0 (m, 5H), 3,40 (m, 1H), 3,50 (m, 1H), 4,00 (m, 1H), 5,38 (s a, 2H), 5,97 (s a, 2H), 6,23 (s, 1H), 7,51 (dd, J = 8,6, 1,0 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,89 (s, 1H), 11,49 (s, 1H).
Intermedio 53
1-(Fenilmetil)-2,5-pirrolidindiona
A 2,5-pirrolidindiona (2,5 g, 25,2 mmol) en DMF (50 ml) se le añadió K2CO3 (4,18 g, 30,3 mmol) seguido de bromuro de bencilo (3,00 ml, 25,2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 55ºC. A la mezcla de reacción se le añadió agua (~200 ml) y se observó inmediatamente un precipitado. El precipitado se filtró y el sólido de color blanco se lavó con agua y se secó para producir el compuesto del título (2,7 g, 57%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3): 2,73 (s, 4H), 4,68 (s, 2H), 7,28 -7,37 (m, 3H), 7,39 -7,44 (m, 2H).
Intermedio 54
5-Ciclopropil-5-hidroxi-1-(fenilmetil)-2-pirrolidinona
A 1-(fenilmetil)-2,5-pirrolidindiona (1 g, 5,29 mmol) en THF (50 ml) a -78ºC se le añadió gota a gota bromuro de
5 ciclopropilmagnesio (42,3 ml, 21,1 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar a 0ºC y se agitó durante 2 horas más. La reacción se interrumpió con una solución saturada acuosa de cloruro de amonio y se transfirió a un embudo de decantación. Se añadió EtOAc y la fase orgánica se separó. La capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de hexanos al 100% a EtOAc al 80%/hexanos)
10 produjo el compuesto del título (400 mg, 33%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 232 [M+H]+.
Intermedio 55
5-Ciclopropil-1-(fenilmetil)-2-pirrolidinona
15 A 5-ciclopropil-5-hidroxi-1-(fenilmetil)-2-pirrolidinona (400 mg, 1,73 mmol) en CH2Cl2 (10 ml) a -78ºC se le añadió gota a gota una mezcla de trietilsilano (2,76 ml, 17,3 mmol) y BF3·OEt2 (0,88 ml, 6,92 mmol). La mezcla de reacción producida se agitó durante 2 horas a -78ºC, después se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante una noche. La reacción se interrumpió añadiendo una solución acuosa saturada de NaHCO3 y la capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (dos veces). Las capas orgánicas combinadas se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. La
20 cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de hexanos al 100% a EtOAc al 100%) produjo el compuesto del título (240 mg, 65%) en forma de un aceite incoloro. LC-MS (ES) m/z = 216 [M+H]+.
Intermedio 56
2-Ciclopropil-1-(fenilmetil)pirrolidina
25 A 5-ciclopropil-1-(fenilmetil)-2-pirrolidinona (240 mg, 1,12 mmol) en THF (5 ml) se le añadió BH3·SMe2 2 M en THF (5,6 ml, 11,2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante el fin de semana a temperatura ambiente. La reacción se interrumpió con la adición gota a gota de CH3OH (~2 ml, precaución: se produce un desprendimiento vigoroso de H2). La solución se vertió en agua (~50 ml) y EtOAc (~50 ml) y la mezcla se agitó a 60ºC durante 3 horas. Se añadieron una solución saturada acuosa de NaHCO3 (~25 ml) y EtOAc (~50 ml) y la capa orgánica se separó, se
30 lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de hexanos al 100% a EtOAc al 75%/hexanos) produjo el compuesto del título (100 mg, 45%) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 202 [M+H]+.
Intermedio 57 2-Ciclopropilpirrolidina
A una solución de 2-ciclopropil-1-(fenilmetil)pirrolidina (100 mg, 0,50 mmol) en etanol (5 ml) se le añadió HCl(ac.) 1 N (0,50 ml, 0,50 mmol) y la mezcla producida se purgó con N2 durante 10 minutos. Se añadió Pd/C (10 mg, 10 % en peso) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente en una atmósfera de H2 (sistema de globo). Los análisis por LCMS indicaron ~20% del producto deseado y ~70% de material de partida. Se añadió más cantidad de Pd/C (30 mg) y la mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de H2 durante 24 horas más. Se añadió más cantidad de HCl(ac.) 1 N (0,50 ml, 0,50 mmol) y la mezcla se filtró a través de un Acrodisc lavando con etanol. La solución se evaporó y el residuo producido se trituró en éter dietílico para producir la sal HCl del compuesto del título (74 mg) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  0,37 -0,54 (m, 2H), 0,67 -0,80 (m, 2H), 0,98 -1,15 (m, 1H), 1,77 -1,93 (m, 1H), 1,96 -2,18 (m, 2H), 2,18 -2,30 (m, 1H), 2,84 -2,98 (m, 1H), 3,20 -3,30 (m, 1H), 3,30 -3,43 (m, 1H).
Intermedio 58
4-Cloro-6-(2-ciclopropil-1-pirrolidinil)-2-pirimidinamina
NH2
A 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (95 mg, 0,576 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadió Et3N (0,25 ml, 1,75 mmol) seguido de 2-ciclopropilpirrolidina (74 mg, 0,50 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 4 horas a 80ºC. La reacción se vertió en agua (se formó un precipitado) y se filtró. La cromatografía ultrarrápida SiO2 (gradiente: EtOAc/hexanos) produjo el compuesto del título (70 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 239, 241 [M+H]+.
Ejemplo 47
6-[2-Amino-6-(2-ciclopropil-1-pirrolidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
N
N
NH2
A 4-cloro-6-(2-ciclopropil-1-pirrolidinil)-2-pirimidinamina (26 mg, 0,11 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (17,96 mg, 0,11 mmol) se le añadieron 1,4-dioxano (3 ml) y solución saturada acuosa de NaHCO3 (0,5 ml) y la mezcla producida se purgó ("desgasificó") con N2 en un tubo que puede cerrarse herméticamente. Se añadió Pd(Ph3P)4 (12,6 mg, 10,9 mol), el tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla se vertió en agua y se filtró. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 del sólido filtrado (gradiente: de CHCl3 al 100% a 90:10:1 de CHCl3:CH3OH:NH4OH) produjo el producto de Suzuki deseado. LC-MS (ES) m/z = 324 [M+H]+. Este material se disolvió en etanol (4 ml), se trató con hidrazina monohidrato (1 ml, 20,4 mmol) y la mezcla producida se agitó durante una noche a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente. La mezcla se vertió en agua y EtOAc. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. El residuo producido se disolvió en etanol (~2 ml) y se trató con hexanos hasta que la solución se volvió turbia. La mezcla se concentró al vacío hasta que se observó un precipitado. El precipitado se filtró para producir el producto deseado (22 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 336 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz,
CD3OD): 0,29 (m, 1H), 0,47 (m, 1H), 0,60 (m, 1H), 0,71 (m, 1H), 1,05 (m, 1H), 1,92 -2,10 (m, 3H), 2,19 (m, 1H), 3,47 -3,59 (m, 1H), 3,65 (m, 1H), 4,00 (m, 1H), 6,36 (s, 1H), 7,46 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H), 7,76 -7,81 (m, 2H). Intermedio 59 N-Ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piridinacarboxamida
O
N
H
N CF3
5 A ácido 6-(trifluorometil)-3-piridinacarboxílico (2,0 g, 10,5 mmol) en DMF (10 ml) se le añadió HATU (4,18 g, 11,0 mmol) seguido de base de Hunig (1,83 ml, 10,5 mmol). Después de 15 minutos, se añadió ciclohexilamina (2,40 ml, 20,9 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 45 minutos a temperatura ambiente. La reacción se vertió en agua (~300 ml). Después de 5 minutos, la mezcla acuosa producida se filtró y el sólido de color blanco se secó al
10 aire durante ~15 minutos para producir el compuesto del título (2,57 g). LC-MS (ES) m/z = 273 [M+H]+.
Intermedio 60
Cis-N-Ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
H
A una solución de N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piridinacarboxamida (2,57 g, 9,44 mmol) en CH3OH (100 ml) se le
15 añadió óxido de platino (IV) (0,11 g, 0,47 mmol) seguido de HCl concentrado (1 ml, 12,00 mmol) en un agitador Parr. La mezcla se desgasificó (tres veces) con nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó durante una noche en una atmósfera de H2 (379,211 kPa (55 psi)). La mezcla de reacción se desgasificó (tres veces) con N2, se filtró a través de un Acrodisc y se concentró. El residuo producido se co-evaporó en tolueno (100 ml), seguido de CH3CN (100 ml) y se secó al vacío para producir la sal HCl del compuesto del título (2,91 g) en forma de un sólido de color blanco
20 que contenía una pequeña cantidad del isómero trans. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): 1,14 -1,44 (m, 5H), 1,67 (m, 1H), 1,73 -2,2 (m, 8H), 2,86 (m, 1H), 3,27 (dd, J = 12,9, 3,3 Hz, 1H), 3,68 (m, 2H), 4,24 (m, 1H).
Intermedio 61
Cis-1-[6-Cloro-2-(metiltio)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
25 A cis-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida (1,0 g, 3,2 mmol) en THF (15 ml) se le añadió LiHMDS 1 M en THF (11 ml, 11,00 mmol) a temperatura ambiente. Después de 5 minutos, se añadió 4,6-dicloro-2(metiltio)pirimidina (0,620 g, 3,18 mmol). Después de 10 minutos, el análisis por LCMS de la mezcla de reacción indicó la presencia de ~85% del producto deseado + 13% del material de partida de dicloropirimidina. La mezcla de reacción se vertió en NH4Cl saturado y EtOAc. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgSO4),
30 se filtró y se concentró. Se preparó un cartucho sólido añadiendo EtOAc (~200 ml) al material en bruto y SiO2 (3 g). La mezcla se concentró. La cromatografía ultrarrápida (de hexanos al 100% a EtOAc al 50% en hexanos, después EtOAc al 100%) produjo el compuesto del título (690 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 437, 439 [M+H]+.
Intermedio 62
Cis-1-[6-Cloro-2-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida CF3 O
N Cl
NH N
N
O
S O
A cis-1-[6-cloro-2-(metiltio)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida (590 mg, 1,350 mmol)
5 en CH2Cl2 (12 ml) se le añadió mCPBA (757 mg, 3,38 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Se añadió una solución saturada de Na2SO3 y la mezcla producida se agitó durante 30 minutos. La mezcla se vertió en NaHCO3 acuoso saturado y EtOAc. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (640 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 469, 471 [M+H]+.
10 Intermedio 63
cis-1-[2-({[2,4-Bis(metiloxi)fenil]metil}amino)-6-cloro-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3
piperidinacarboxamida
CF3
O N Cl
NH N
N NH O
O
A cis-1-[6-cloro-2-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida (300 mg, 0,640
15 mmol) en 1,4-dioxano (8 ml) se le añadió base de Hunig (0,22 ml, 1,28 mmol) seguido de {[2,4bis(metiloxi)fenil]metil}amina (0,19 ml, 1,28 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 60ºC en un tubo cerrado herméticamente. Esta mezcla de reacción se combinó con otra mezcla de reacción similar (~1/3 la escala) antes del tratamiento. Las mezclas de reacción combinadas se vertieron en agua y EtOAc. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con
20 salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de hexanos al 100% a EtOAc al 50% en hexanos) produjo el compuesto del título (322 mg) en forma de una espuma de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 556 [M+H]+.
Intermedio 64
Cis-1-[2-({[2,4-Bis(metiloxi)fenil]metil}amino)-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3piperidinacarboxamida
NCF3
O
N
F NH N N
NH
O
O
5 A cis-1-[2-({[2,4-bis(metiloxi)fenil]metil}amino)-6-cloro-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3piperidinacarboxamida (322 mg, 0,58 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (124 mg, 0,75 mmol) se les añadieron 1,4-dioxano (6 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (3 ml) y la mezcla producida se purgó ("desgasificó") con N2 en un tubo que puede cerrarse herméticamente durante 5 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (33,5 mg, 0,029 mmol) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 5 minutos más. El tubo se cerró herméticamente y la mezcla de
10 reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla de reacción se vertió en agua y EtOAc. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de hexanos al 100% a EtOAc al 50%/Hexanos) produjo el compuesto del título (305 mg) en forma de una espuma de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 641 [M+H]+.
Intermedio 65
15 Cis-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-({[2,4-bis(metiloxi)fenil]metil}amino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3piperidinacarboxamida
NH2 CF3 N
O
N
N H
NH N
N NH O
O
A cis-1-[2-({[2,4-bis(metiloxi)fenil]metil}amino)-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3piperidinacarboxamida (304 mg, 0,48 mmol) en etanol (6 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (0,47 ml, 9,5 mmol)
20 y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se vertió en agua (~200 ml). Se formó un precipitado de color blanco. La mezcla se filtró y el sólido se secó al aire durante 2 horas para producir el compuesto del título (270 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 653 [M+H]+.
Ejemplo 48 Cis-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida NH2
NH N
N
NH2
A cis-1-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-({[2,4-bis(metiloxi)fenil]metil}amino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)3-piperidinacarboxamida (250 mg, 0,38 mmol) se le añadió ácido trifluoroacético (TFA) (6 ml). Después de 3 horas, el análisis por LCMS indicó que la reacción había finalizado. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo producido se co-evaporó en tolueno (2 x 50 ml), después en CH3CN (50 ml). Al sólido de color rosa producido se le añadió una solución saturada acuosa de NaHCO3 y EtOAc. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. Este material se purificó por cromatografía ultrarrápida (gradiente: de CH2Cl2 al 100% a 90:10:1 de CH2Cl2:CH3OH:NH4OH). Las fracciones más transparentes se combinaron y se concentraron al vacío para producir un sólido de color amarillo. Este material se disolvió en EtOAc (~2 ml) y la solución producida se transfirió un vial de microondas. El vial se tapó y se calentó a 70ºC. Se añadió gota a gota hexano hasta que la solución se volvió turbia y después la mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. Se usó una espátula para rascar el sólido y la mezcla se filtró. El sólido de color rosa recogido se lavó con hexanos y en el filtrado precipitó un sólido de color blanco. Este sólido de color blanco se recogió por filtración para producir el producto deseado (35 mg). LC-MS (ES) m/z = 503 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,05 -1,34 (m, 5H), 1,56 (m, 1H), 1,63 -1,85 (m, 7H), 2,07 (m, 1H), 2,33, (m, 1H), 3,06 (s a, 1H), 3,53 (m, 1H), 5,39 (s, 2H), 6,29 (s, 2H), 6,78 (s, 1H), 7,63 (dd, J = 8,5, 1,1 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,84 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,99 (s, 1H), 11,54 (s, 1H).
Intermedio 66
Cis-1-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
NH N
N
NH A cis-1-[6-cloro-2-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida (390 mg, 0,832 mmol) en 1,4-dioxano (8 ml) se le añadió base de Hunig (0,29 ml, 1,66 mmol) seguido de metilamina 2 M en THF (1 ml, 2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 60ºC en un tubo cerrado herméticamente. La mezcla se vertió en agua y EtOAc. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de hexanos al 100% a EtOAc al 50% en hexanos) produjo el compuesto del título (204 mg) en forma de una espuma de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 420, 422 [M+H]+.
Intermedio 67
Cis-1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
A cis-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida (204 mg, 0,486 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (104 mg, 0,632 mmol) se les añadieron 1,4-dioxano (6 ml) y NaHCO3
acuoso saturado (3 ml) y la mezcla producida se purgó ("desgasificó") con N2 en un tubo que puede cerrarse herméticamente durante 5 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (28 mg, 0,024 mmol) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 5 minutos más. El tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla de reacción se vertió en agua. El precipitado formado se filtró. Al sólido se le añadió EtOAc en el
5 filtro y la mezcla se agitó suavemente con una espátula hasta que se disolvió el sólido. La solución producida se filtró y el filtrado se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de hexanos al 100% a EtOAc al 50%/Hexanos) produjo el compuesto del título (152 mg) en forma de una espuma de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 505 [M+H]+.
Ejemplo 49
10 Cis-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
NH2 CF3 N
O
N
N H
NH N
N
NH A cis-1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
(152 mg, 0,301 mmol) en etanol (6 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (0,4 ml, 8,16 mmol) y la mezcla de
reacción se agitó durante una noche a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente. La reacción se dejó enfriar a 15 temperatura ambiente y se vertió en agua y EtOAc. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo
adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se
filtraron y se concentraron. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de CH2Cl2 al 100% a 90:10:1 de
CH2Cl2:CH3OH:NH4OH) produjo el compuesto del título (116 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS
(ES) m/z = 517 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,05 -1,34 (m, 5H), 1,56 (m, 1H), 1,62 -1,85 (m, 7H), 2,08, 20 (m, 1H), 2,34 (m, 1H), 2,84 (s, 3H), 3,07 (s a, 1H), 3,53 (m, 1H), 5,39 (s, 2H), 6,73 (s a, 1H), 6,78 (s, 1H), 7,63 -7,69
(m, 1H), 7,70 -7,75 (m, 1H), 7,84 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,02 (s a, 1H), 11,52 (s, 1H).
Intermedio 68
2-Fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo
N
O
B
F
O
25 Una mezcla de 4-bromo-2-fluorobenzonitrilo (30 g, 150 mmol), bis(pinacolato)diboro (49,5 g, 195 mmol), acetato potásico (29,4 g, 300 mmol) y Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (12,2 g, 15,0 mmol) en DMSO y 1,4-dioxano (65 ml) se calentó durante una noche a 110ºC en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se filtró a través de Kieselgur y se concentró. El residuo producido se purificó por cromatografía sobre SiO2 (100:1 de éter de petróleo:EtOAc) para producir el compuesto del título (35 g) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS
30 (ES) m/z = 247 [M+H]+.
Intermedio 69
6-Cloro-N4-[(2-clorofenil)metil]-2,4-pirimidindiamina
NH2
Una mezcla de 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (1 g, 6,1 mmol), [(2-clorofenil)metil]amina (2,23 g, 15,8 mmol) y 5
trietilamina (1,86 g, 18,4 mmol) en CH3OH (40 ml) se agitó durante 4 horas a 50ºC. La mezcla de reacción se evaporó para proporcionar un residuo de color amarillo, que se purificó por cromatografía sobre SiO2 (1:1 de éter de petróleo:EtOAc) para producir el compuesto del título (1,2 g) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 328 [M+H]+.
Intermedio 70
4-(2-Amino-6-{[(2-clorofenil)metil]amino}-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo
NH2
Una mezcla de 6-cloro-N4-[(2-clorofenil)metil]-2,4-pirimidindiamina (1,2 g, 4,46 mmol) y 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (1,32 g, 5,35 mmol) en 1,4-dioxano (14,6 ml) y una solución de NaHCO3 (3,12 mmol) en agua (20 ml) se protegió con N2. Se añadió Pd(Ph3P)4 (100 mg, 0,087 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 100ºC durante 16 horas. La mezcla se decantó para retirar los sólidos y la solución producida se concentró a sequedad. El material en bruto se purificó por cromatografía sobre SiO2 (1:2 de THF:éter de petróleo) para producir el compuesto del título (800 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 354 [M+H]+.
Ejemplo 50
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[(2-clorofenil)metil]-2,4-pirimidindiamina
NH2
A 4-(2-amino-6-{[(2-clorofenil)metil]amino}-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo (800 mg, 2,27 mmol) en etanol (2 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (3 ml, 74 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 100ºC durante 1 hora en un sintetizador de microondas BiotageInitiator®. Después de la refrigeración, la mezcla de reacción se concentró al vacío y se purificó por RPHPLC (BiotageSP1) (gradiente: de CH3CN al 30%/H2O a CH3CN al 60%/H2O) para producir el compuesto del título (151 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 366 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  4,61 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 5,37 (s, 2H), 6,07 (s, 2H), 6,40 (s, 1H), 7,34 -7,27 (m, 2H), 7,46 -7,41 (m, 4H), 7,70 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 11,52 (s, 1H).
Ejemplo 51
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-ciclopropil-2,4-pirimidindiamina
NH2
Una mezcla de 6-[2-amino-6-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (650 mg, 2,14 mmol), ciclopropilamina (650 mg, 11,4 mmol) y base de Hunig (2 ml, 11,4 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) se calentó durante 2 horas a 120ºC en un sintetizador de microondas BiotageInitiator®. Después de la refrigeración, la mezcla se decantó para retirar los sólidos y la solución producida se concentró a sequedad. El material en bruto se purificó por RPHPLC (gradiente: de CH3CN al 15%/H2O a CH3CN al 45%/H2O) para producir el compuesto del título (32 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 282 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,46 -0,49 (m, 2H), 0,73 (t, J = 6,8
Hz, 2H), 2,62 -2,67 (m, 1H), 5,37 (s, 2H), 6,0 (s, 2H), 6,38 (s, 1H), 7,02 (s, 1H), 7,45 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H), 11,50 (s, 1H). Ejemplo 52 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(3-fenilpropil)-2,4-pirimidindiamina NH2
H
N
N
N
H
N
N
NH2
Una mezcla de 6-[2-amino-6-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (500 mg, 1,64 mmol), (3fenilpropil)amina (500 mg, 3,70 mmol) y base de Hunig (2 ml) en 1-1-metil-2-pirrolidinona (NMP) (3 ml) se calentó durante 4 horas a 140ºC en un sintetizador de microondas BiotageInitiator®. Después de la refrigeración, la mezcla se decantó para retirar los sólidos y la solución producida se concentró a sequedad. El material en bruto se purificó por RPHPLC (gradiente: de CH3CN al 10%/H2O a CH3CN al 30%/H2O) para producir el compuesto del título (90 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 360 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,80 -1,87 (m, 2H), 2,64 -2,68 (m, 2H), 3,28 -3,30 (m, 2H), 5,37 (s, 2H), 5,97 (s, 2H), 6,27 (s, 1H), 6,93 (s, 1H), 7,17 -7,31 (m, 5H), 7,40 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 11,51 (s, 1H).
Ejemplo 53
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(2-fluorofenil)etil]-2,4-pirimidindiamina
NH2
F
H
NN N
H
N
N
NH2
Una mezcla de 6-[2-amino-6-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (500 mg, 1,64 mmol), 2-(2fluorofenil)etanamina (500 mg, 2,19 mmol) y base de Hunig (2 ml) en NMP (3 ml) se calentó durante 4 horas a 140ºC en un sintetizador de microondas BiotageInitiator®. Después de la refrigeración, la mezcla se decantó para retirar los sólidos y la solución producida se concentró a sequedad. El material en bruto se purificó por RPHPLC (gradiente: de CH3CN al 20%/H2O a CH3CN al 40%/H2O) para producir el compuesto del título (166 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 364 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,86 -2,90 (m, 2H), 3,49 -3,51 (m, 2H), 5,35 (s, 2H), 5,98 (s, 2H), 6,25 (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 7,12 -7,17 (m, 2H), 7,23 -7,29 (m, 1H), 7,33 -7,41 (m, 2H), 7,68 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Ejemplo 54
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-{2-[2-(metiloxi)fenil]etil}-2,4-pirimidindiamina
NH2
O
H
NN N
H
N
N
NH2
Una mezcla de 6-[2-amino-6-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (500 mg, 1,64 mmol), 2-[2(metiloxi)fenil]etanamina (500 mg, 3,31 mmol) y base de Hunig (2 ml) en NMP (3 ml) se calentó durante 4 horas a 140ºC en un sintetizador de microondas BiotageInitiator®. Después de la refrigeración, la mezcla se decantó para retirar los sólidos y la solución producida se concentró a sequedad. El material en bruto se purificó por RPHPLC (gradiente: de CH3CN al 10%/H2O a CH3CN al 30%/H2O) para producir el compuesto del título (100 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 376 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,81 -2,84 (m, 2H), 3,52 (m, 2H), 3,74 (s, 3H), 5,37 (s, 2H), 6,01 (s, 2H), 6,28 (s, 1H), 6,76 -6,86 (m, 4H), 7,22 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 11,51 (s, 1H).
Ejemplo 55
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(3-clorofenil)etil]-2,4-pirimidindiamina
NH2
Una mezcla de 6-[2-amino-6-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (300 mg, 0,99 mmol), 2-(2clorofenil)etanamina (300 mg, 1,94 mmol) y base de Hunig (2 ml) en NMP (3 ml) se calentó durante 2 horas a 160ºC en un sintetizador de microondas BiotageInitiator®. Después de la refrigeración, la mezcla se decantó para retirar los
10 sólidos y la solución producida se concentró a sequedad. El material en bruto se purificó por RPHPLC para producir el compuesto del título (120 mg) en forma de un sólido de color amarillo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,87 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,52 -3,54 (m, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,05 (s, 2H), 6,29 (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 7,25 -7,44 (m, 5H), 7,71 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H), 11,54 (s, 1H).
Ejemplo 56
15 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-metil-N4-(2-feniletil)-2,4-pirimidindiamina
NH2
Una mezcla de 6-[2-amino-6-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (300 mg, 0,99 mmol), N-metil-2feniletanamina (300 mg, 2,22 mmol) y base de Hunig (2 ml) en NMP (3 ml) se calentó durante 2 horas a 160ºC en un sintetizador de microondas BiotageInitiator®. Después de la refrigeración, la mezcla se decantó para retirar los
20 sólidos y la solución producida se concentró a sequedad. El material en bruto se purificó por RPHPLC para producir el compuesto del título (50 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 360 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,85 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 3,0 (s, 3H), 3,76 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 5,37 (s, 2H), 6,04 (s, 2H), 6,39 (s, 1H), 7,19 -7,23 (m, 1H), 7,30 -7,32 (m, 4H), 7,53 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,91 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
25 Ejemplo 57
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(3-fluorofenil)etil]-2,4-pirimidindiamina
NH2
Una mezcla de 6-[2-amino-6-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (300 mg, 0,99 mmol), 2-(3fluorofenil)etanamina (300 mg, 2,16 mmol) y base de Hunig (2 ml) en NMP (3 ml) se calentó durante 2 horas a 160ºC 30 en un sintetizador de microondas BiotageInitiator®. Después de la refrigeración, la mezcla se decantó para retirar los sólidos y la solución producida se concentró a sequedad. El material en bruto se purificó por RPHPLC para producir el compuesto del título (160 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 364 [M+H]+. 1H RMN
(400 MHz, DMSO-d6):  2,86 -2,90 (m, 2H), 3,51 -3,56 (m, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,04 (s, 2H), 6,29 (s, 1H), 6,97 -7,43 (m, 6H), 7,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,85 (s, 1H), 11,53 (s, 1H). Ejemplo 58 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(2-clorofenil)etil]-2,4-pirimidindiamina
NH2
Una mezcla de 6-[2-amino-6-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (300 mg, 0,99 mmol), 2-(2clorofenil)etanamina (300 mg, 1,94 mmol) y base de Hunig (2 ml) en NMP (3 ml) se calentó durante 2 horas a 160ºC en un sintetizador de microondas BiotageInitiator®. Después de la refrigeración, la mezcla se decantó para retirar los sólidos y la solución producida se concentró a sequedad. El material en bruto se purificó por RPHPLC para producir el compuesto del título (150 mg) en forma de un sólido de color amarillo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,99 (t, J = 8 Hz, 2H), 3,52 -3,53 (m, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,03 (s, 2H), 6,29 (s, 1H), 7,03 (s, 1H), 7,24 -7,46 (m, 5H), 7,71 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,85 (s, 1H), 11,53 (s, 1H).
Ejemplo 59
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(2-metilfenil)etil]-2,4-pirimidindiamina
NH2
Una mezcla de 6-[2-amino-6-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (300 mg, 0,99 mmol), 2-(2metilfenil)etanamina (300 mg, 2,22 mmol) y base de Hunig (2 ml) en NMP (3 ml) se calentó durante 2 horas a 160ºC en un sintetizador de microondas BiotageInitiator®. Después de la refrigeración, la mezcla se decantó para retirar los sólidos y la solución producida se concentró a sequedad. El material en bruto se purificó por RPHPLC para producir el compuesto del título (150 mg) en forma de un sólido de color amarillo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,33 (s, 3H), 2,82 -2,86 (m, 2H), 3,50 -3,45 (m, 2H), 5,36 (s, 2H), 5,98 (s, 2H), 6,29 (s, 1H), 6,97 (s, 1H), 7,09 -7,22 (m, 4H), 7,43 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,85 (s, 1H), 11,51 (s, 1H).
Ejemplo 60
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(3-metilfenil)etil]-2,4-pirimidindiamina
NH2
Una mezcla de 6-[2-amino-6-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (300 mg, 0,99 mmol), 2-(3metilfenil)etanamina (300 mg, 2,22 mmol) y base de Hunig (2 ml) en NMP (3 ml) se calentó durante 2 horas a 160ºC en un sintetizador de microondas BiotageInitiator®. Después de la refrigeración, la mezcla se decantó para retirar los sólidos y la solución producida se concentró a sequedad. El material en bruto se purificó por RPHPLC para producir el compuesto del título (125 mg) en forma de un sólido de color amarillo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,03 (s, 3H), 2,79 -2,82 (m, 2H), 3,49 -3,51 (m, 2H), 5,35 (s, 2H), 5,99 (s, 2H), 6,28 (s, 1H), 6,92 -7,10 (m, 4H), 7,41 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,84 (s, 1H), 11,49 (s, 1H).
Intermedio 71 1-(Fenilmetil)ciclopropanamina
A una solución de fenilacetonitrilo (3 g, 25,6 mmol) y ortotitanato de tetraisopropilo (8 ml, 27,2 mmol) en Et2O/THF (1/1,100 ml) se le añadió gota a gota bromuro de etilmagnesio (7,85 g,58,9 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla exotérmica se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después, se añadió gota a gota BF3·Et2O (7,27 g, 51,2 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se vertió en un solución acuosa fría de hidróxido sódico (10%) y se diluyó con EtOAc. La mezcla se filtró y la capa orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. Los sólidos producidos se purificaron por cromatografía de fase inversa usando CH3CN en agua (hidrogenocarbonato amónico al 0,08%) (gradiente: del 37% al 47% en 7 min; caudal:40 ml/min). El pH de la solución se ajustó a 2 con HCl concentrado y se concentró al vacío para producir la sal HCl del compuesto del título (700 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 148 [M+H]+.
Intermedio 72
6-Cloro-N4-[1-(fenilmetil)ciclopropil]-2,4-pirimidindiamina
NH2
Una mezcla de hidrocloruro de 1-(fenilmetil)ciclopropanamina (530 mg, 2,88 mmol), 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (295 mg, 1,80 mmol), Et3N (911 mg, 9 mmol) y K2CO3 (249 mg,1,80 mmol) en etanol (6 ml) se agitó y se calentó a 140ºC durante 4 horas en un sintetizador de microondas Biotage Initiator. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró a sequedad. Los sólidos producidos se repartieron entre EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, se secó (Na2SO4), se concentró a sequedad y se purificó por cromatografía de fase inversa usando CH3CN en agua del 32% al 42% (ácido trifluoroacético al 0,05% en agua) en 8 min para producir el compuesto del título (204 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 275 [M+H]+.
Intermedio 73
4-(2-Amino-6-{[1-(fenilmetil)ciclopropil]amino}-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo
NH2
Una mezcla de 6-cloro-N4-[1-(fenilmetil)ciclopropil]-2,4-pirimidindiamina (185 mg, 0,67 mmol), 2-fluoro-4-(4,4,5,5tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (247 mg, 1 mmol), Pd(PPh3)4 (81 mg, 0,07 mmol) y Na2CO3 (178 mg, 1,68 mmol) en 1,4-dioxano (30 ml) y agua (10 ml) se agitó y se calentó a 110ºC durante 3,5 horas en una atmósfera de nitrógeno. Después la mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El residuo producido se repartió entre EtOAc y agua. Los productos acuosos se extrajeron con EtOAc (2 x 50 ml) y los orgánicos se secaron (MgSO4), se filtraron, se concentraron a sequedad y se purificaron por SGC usando éter de petróleo a 4:1 de éter de petróleo/EtOAc a 1:1 de éter de petróleo/EtOAc como eluyente para producir el compuesto del título (124 mg) en forma de un sólido oleoso de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 360 [M+H]+.
Ejemplo 61 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[1-(fenilmetil)ciclopropil]-2,4-pirimidindiamina
NH2
Una mezcla de 4-(2-amino-6-{[1-(fenilmetil)ciclopropil]amino}-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo (124 mg, 0,34 mmol) e
5 hidrazina hidrato (al 99%, 2 ml) en etanol (10 ml) se agitó y se calentó a 120ºC durante 1 hora en un sintetizador de microondas Biotage Initiator. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se filtró y se concentró al vacío. Los sólidos producidos se purificaron por cromatografía de fase inversa con CH3CN en agua (hidrogenocarbonato amónico al 0,08%) (gradiente: del 35% al 45% en 6 min: caudal: 30 ml/min), para producir el compuesto del título (30 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 372 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,78 (d,
10 4H), 2,93 (s, 2H), 5,37 (s, 2H), 5,97 (s, 2H), 6,32 (s, 1H), 6,90 (s, 1H), 7,18 (d, 3H), 7,27 (t, 2H), 7,40 (s, 1H), 7,69 (d, 1H), 7,81 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 74
Ácido 2,2-dimetil-3-fenilpropanoico
O
15 A una solución de diisopropilamina (48,91 g, 483 mmol) en THF (100 ml) en una atmósfera de nitrógeno a 0ºC se le añadió una solución de n-butil litio 2,5 M en hexano (179 ml, 447,5 mmol.) seguido de la adición gota a gota de ácido isobutírico (15,77 gramos, 179 mmoles). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 horas y después se enfrió a -15ºC. Se añadió gota a gota cloruro de bencilo (22,66 g, 179 mmol) mientras se mantenía la temperatura por debajo de -5ºC y la mezcla producida se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La
20 mezcla de reacción se repartió entre Et2O y agua. La capa acuosa se acidificó mediante la adición de HCl concentrado (al 36%, 50 ml) y se extrajo con Et2O (4 x 150 ml) La capa orgánica se secó sobre MgSO4 y se concentró para producir el compuesto del título (21,36 g) en forma de un líquido incoloro. LC-MS (ES) m/z = 177 [M-H]-.
Intermedio 75
25 2-Metil-1-fenil-2-propanamina
Se añadió DPPA (16,87 g, 61,31 mmol) con refrigeración externa a una solución agitada de ácido 2,2-dimetil-3fenilpropanoico (10,21 g, 57,30 mmol) y trietilamina (6,20 g, 61,3 mmol) en tolueno seco (100 ml). Se produjo una reacción ligeramente exotérmica que finalizó después de aproximadamente 1 hora. La mezcla de reacción se agitó 30 durante 1 hora más a temperatura ambiente, seguido de calentamiento a reflujo durante 3 horas. La solución se enfrió y se lavó con agua (3 x 100 ml) y la fase de tolueno se separó, se secó sobre Na2SO4 y se evaporó al vacío. Se añadió una mezcla de ácido clorhídrico al 15% (20 ml) y ácido acético (20 ml) y la mezcla producida se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla se repartió entre EtOAc y agua. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (4 x 50 ml) y los productos acuosos se concentraron al vacío para producir la sal HCl del compuesto del título
35 (5,21 g) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 150 [M+H]+.
Intermedio 76
6-Cloro-N4-(1,1-dimetil-2-feniletil)-2,4-pirimidindiamina
NH2
Una mezcla de hidrocloruro de 2-metil-1-fenil-2-propanamina (742 mg, 4 mmol), 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (438
5 mg, 2,67 mmol) y base de Hunig (1,55 g, 12 mmol) en CH3CN (8 ml) se agitó y se calentó durante 6 horas a 160ºC en un sintetizador de microondas Biotage Initiator. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró a sequedad. Los sólidos producidos se repartieron entre EtOAc y agua y la capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a sequedad. La purificación por cromatografía de fase inversa usando CH3CN en agua de 45% al 65% (hidrogenocarbonato amónico al 0,08%) en 18 min, produjo el compuesto del título (373 mg) en forma de un
10 sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 277,0 [M+H]+.
Intermedio 77
4-{2-Amino-6-[(1,1-dimetil-2-feniletil)amino]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
Una mezcla de 6-cloro-N4-(1,1-dimetil-2-feniletil)-2,4-pirimidindiamina (338 mg, 1,22 mmol), 2-fluoro-4-(4,4,5,5
15 tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (452 mg, 1,83 mmol), Pd(PPh3)4 (139 mg, 0,12 mmol) y Na2CO3 (323 mg, 3,05 mmol) en 1,4-dioxano (6 ml) y agua (2 ml) se agitó y se calentó a 140ºC durante 30 min en un sintetizador de microondas Biotage Initiator. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró a sequedad y el residuo producido se repartió entre EtOAc y agua. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a sequedad. La purificación por
20 RPHPLC con CH3CN en agua (hidrogenocarbonato amónico al 0,01%) (gradiente: del 70% al 80% en 7,5 min, caudal: 30 ml/min), produjo el compuesto del título (210 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 362 [M+H]+.
Ejemplo 62
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(1,1-dimetil-2-feniletil)-2,4-pirimidindiamina
NH2
25 Una mezcla de 4-{2-amino-6-[(1,1-dimetil-2-feniletil)amino]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (210 mg, 0,58 mmol) e hidrazina hidrato (al 99%, 2 ml) en etanol (3 ml) se agitó y se calentó a 120ºC durante 1 h en un sintetizador de microondas Biotage Initiator. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró al vacío. Se añadió agua (100 ml) y la mezcla producida se filtró. Los sólidos se secaron al vacío para producir el compuesto del título (90 mg)
30 en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 374 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,34 (s, 6H), 3,26 (s, 2H), 5,37 (s, 2H), 6,05 (s, 2H), 6,34 (s, 1H),6,40 (s, 1H), 7,10 -7,25 (m, 5H),7,39 (d, 1H),7,70 (d, 1H), 7,84 (s, 1H).
Intermedio 78
3-[(fenilamino)carbonil]-1-pirrolidincarboxilato de 1,1-dimetiletilo
Una mezcla de ácido 1-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-3-pirrolidincarboxílico (1,0 g, 4,7 mmol), CDI (1,3 g, 7,0 mmol) y
5 HOBT (0,5 g) en CH2Cl2 (20 ml) y base de Hunig (2,0 ml) se enfrió a 0ºC y se agitó durante 15 minutos. Después, se añadió anilina (520 mg, 5,6 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas. La mezcla se concentró y se purificó por cromatografía sobre SiO2 (eluyente: 1:1 de EtOAc:éter de petróleo) para producir el compuesto del título (1,3 g) en forma de un aceite. 1H RMN (400 MHz, CDCl3):  1,40 (s, 9H), 2,10 (m, 2H), 3,0 (m, 1H), 3,7 -4 (m, 4H), 4,2 (m, 1H), 7,21 (m, 1H), 7,40 (m, 2H), 7,51 (m, 1H).
10 Intermedio 79
N-Fenil-3-pirrolidinacarboxamida
Una mezcla de 3-[(fenilamino)carbonil]-1-pirrolidinacarboxilato de 1,1-dimetiletilo (1,3 g, 4,5 mmol) en HCl 3 M/EtOAc (30 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se concentró y se lavó con Et2O para producir la 15 sal HCl del compuesto del título (900 mg) en forma de un sólido de color blanco. Ejemplo 63 1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-pirrolidinacarboxamida NH2 O
N N
NN HH
N NH2 N
Una mezcla de hidrocloruro de N-fenil-3-pirrolidinacarboxamida (500 mg, 2,21 mmol), 6-[2-amino-6-(metilsulfonil)-4
20 pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (500 mg, 1,6 mmol) en NMP (3 ml) y base de Hunig (1,5 ml) se calentó a 160ºC durante 1 hora en condiciones de microondas. La mezcla de reacción se concentró y se purificó por cromatografía sobre SiO2 (eluyente: 4,5:4,5:1 de EtOAc:THF:NH4OH) para producir el compuesto del título (50 mg) en forma de un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,05 (m, 2H), 3,30 (m, 1H), 3,4-3,7 (m, 4H), 5,36 (s, 2H), 6,03 (s, 2H), 6,31 (s, 1H), 25 7,03 (m, 1H), 7,31 (m, 2H), 7,57-7,74 (m, 4H), 7,94 (s, 1H), 10,10 (s, 1H), 11,49 (s,1H).
Intermedio 80
[(1R)-1-Metil-2-feniletil]carbamato de 1,1-dimetiletilo A una solución en agitación de ácido (2R)-1-fenil-2-propanamina D-(-)-tartárico (1,8 g, 6,31 mmol) en CH2Cl2 (150 ml) se le añadieron trietilamina (1,4 g, 1,9 ml, 13,9 mmol) y dicarbonato de di-terc-butilo (1,38 g, 6,31 mmol) a 0ºC y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La reacción se interrumpió mediante la adición de agua (50 ml) y el producto acuoso se extrajo con CH2Cl2 (2 x 100 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron para producir el compuesto del título (3,0 g) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 180 [M+H]+.
Intermedio 81
(2R)-N-metil-1-fenil-2-propanamina
10 A una suspensión en agitación de LiAlH4 (0,77 g, 20,4 mmol) en THF (120 ml) se le añadió gota a gota una solución de [(1R)-1-metil-2-feniletil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (2,4 g, 10,2 mmol) en THF (30,0 ml) a 0ºC y después la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 2 horas. La mezcla se enfrió a 0ºC y se inactivó mediante la adición de hielo (1,0 g) y después hidróxido sódico acuoso al 15% (1,0 ml) seguido de agua (0,5 ml). Las sales de litio se recogieron por filtración y se lavaron con Et2O (200 ml). El filtrado se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró. El
15 residuo resultante se destiló a presión reducida, produciendo el compuesto del título (1,6 g) en forma de un aceite de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 150 [M+H]+.
Intermedio 82
6-Cloro-N4-metil-N4-[(1R)-1-metil-2-feniletil]-2,4-pirimidinadiamina
NH2
20 A una suspensión de 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (1,0 g, 6,10 mmol) y K2CO3 (1,69 g, 12,2 mmol) en CH3CN (6,0 ml) se le añadió (2R)-N-metil-1-fenil-2-propanamina (1,09 g, 7,32 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 140ºC en condiciones de microondas con agitación durante 2 horas. La mezcla se filtró y se lavó por EtOAc (50 ml). La solución se concentró y el residuo resultante se purificó por cromatografía de fase inversa usando CH3CN en agua de 45% a 55% (hidrogenocarbonato de amonio al 0,5% en agua) para producir el compuesto del título (910 mg) en
25 forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 277 [M+H]+.
Intermedio 83
4-(2-Amino-6-{metil[(1R)-1-metil-2-feniletil]amino}-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo
NH2
A una mezcla de 6-cloro-N4-metil-N4-[(1R)-1-metil-2-feniletil]-2,4-pirimidinadiamina (0,4 g, 1,45 mmol), 2-fluoro-4
30 (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (0,46 g, 1,88 mmol) y Na2CO3 (0,38 g, 3,63 mmol) en 1,4dioxano (6 ml) y agua (3 ml) se le añadió Pd(PPh3)4 (16 mg, 0,015 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 140ºC en condiciones de microondas con agitación durante 40 minutos. La mezcla se filtró y se concentró y el residuo resultante se purificó por cromatografía de fase inversa usando CH3CN en agua de 45% al 55% (hidrogenocarbonato de amonio al 0,5% en agua) para producir el compuesto del título (0,42 g) en forma de un sólido de color amarillo.
35 LC-MS (ES) m/z = 362 [M+H]+.
Ejemplo 64 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-metil-N4-[(1R)-1-metil-2-feniletil]-2,4-pirimidinadiamina
NH2
A una suspensión de 4-(2-amino-6-{metil[(1R)-1-metil-2-feniletil]amino}-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo (200 mg,
5 0,55 mmol) en etanol (2 ml) se le añadió hidrazina hidrato (2,0 ml, 99%) y la mezcla de reacción se calentó a 120ºC en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El residuo resultante se lavó con Et2O (30 ml) y se secó al vacío para producir el compuesto del título (156 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 374 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,12 (d, J = 6,0 Hz, 3H), 2,77-2,89 (m, 6H), 5,36 (s, 2H), 5,99 (s, 2H), 6,35 (s, 1H), 7,12-7,16 (m, 1H), 7,23-7,27 (m,
10 4H), 7,49-7,52 (m, 1H), 7,68-7,70 (m, 1H), 7,88 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 84
6-Cloro-N4-(2,3-dihidro-1H-inden-1-il)-2,4-pirimidinadiamina
NH2
Una mezcla de 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (500 mg, 3,09 mmol), 2,3-dihidro-1H-inden-1-amina (500 mg, 3,78 mmol)
15 y trietilamina (2 ml) en NMP (3 ml) se calentó a 160ºC durante 2 horas en un sintetizador de microondas BiotageInitiator®. La mezcla de reacción se evaporó y se purificó por cromatografía sobre SiO2 eluyendo con 1:3 de éter de petróleo/THF para producir el compuesto del título (700 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 261 [M+H]+.
Intermedio 85
20 4-[2-Amino-6-(2,3-dihidro-1H-inden-1-ilamino)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo
NH2
Se protegieron con nitrógeno una mezcla de 6-cloro-N4-(2,3-dihidro-1H-inden-1-il)-2,4-pirimidinadiamina (700 mg, 2,69 mmol) y 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (797 mg, 3,23 mmol) en 1,4-dioxano (150 ml) y una solución de NaHCO3 (903 mg, 10,76 mmol) en agua (50 ml). Se añadió Pd(Ph3P)4 (31 mg, 0,0269
25 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 120ºC durante 16 horas. La mezcla se decantó para retirar los sólidos y la solución se concentró a sequedad. El material en bruto se purificó por cromatografía sobre SiO2 eluyendo con 1:1 de THF:éter de petróleo para producir el compuesto del título (500 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 246 [M+H]+.
Ejemplo 65 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(2,3-dihidro-1H-inden-1-il)-2,4-pirimidinadiamina
NH2
A 4-[2-amino-6-(2,3-dihidro-1H-inden-1-ilamino)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo (500 mg, 1,45 mmol) en etanol (2
5 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (3 ml, 74,0 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 100ºC durante 1 hora en un sintetizador de microondas BiotageInitiator®. Después de la refrigeración, la mezcla de reacción se concentró al vacío y se purificó por HPLC para producir el compuesto del título (100 mg) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 358 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,81 (s, 1H), 1,90-1,92 (m, 1H), 2,84-3,051 (m, 2H), 5,43 (s, 2H), 5,71 (s, 1H), 6,12 (s, 2H), 6,40 (s, 1H), 7,23-7,48 (m, 6H), 7,75 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,90 (s,1H), 11,58 (s,
10 1H).
Intermedio 86
4-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]benzamida
O
NH2
Una mezcla de 4-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo (400 mg, 1,61 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2
15 dioxaborolan-2-il)benzamida (397,0 mg, 2,41 mmol), Pd(PPh3)4 (185 mg, 0,16 mmol) y Na2CO3 (427 mg, 4,02 mmol) en 1,4-dioxano (60 ml) y agua (20,0 ml) se agitó y se calentó a 110ºC durante 1 hora en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró y el residuo resultante se repartió entre EtOAc (100 ml) y agua (100 ml). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml) y las capas orgánicas combinadas se secaron Na2CO3, se filtraron y se concentraron a sequedad. La purificación por cromatografía sobre SiO2 usando 4:1 de éter
20 de petróleo/THF como eluyente produjo el compuesto del título (190 mg) en forma de un sólido de color blanco . LC-MS (ES) m/z = 334 [M+H]+.
Ejemplo 66
4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]benzamida
NH2
25 A una suspensión de 4-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]benzamida (200 mg, 0,6 mmol) en etanol (2,0 ml) se le añadió hidrazina hidrato (2,0 ml, al 99%) y la mezcla de reacción se calentó a 120ºC en condiciones de microondas con agitación durante 40 minutos. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se filtró, se lavó por EtOAc (100 ml) y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía sobre SiO2 usando 1:3 de éter de petróleo/THF como eluyente para producir el compuesto del título (25 mg) en forma de un sólido de color amarillo.
30 LC-MS (ES) m/z = 346,0 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  5,45 (s, 2H), 6,81 (s, 2H), 7,48 (s, 1H), 7,79-7,82 (m, 3H), 8,01-8,03 (m, 2H), 8,11 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,30-8,31 (m, 2H), 11,66 (s, 1H).
Intermedio 87
[(2S,5R)-5-Metil-4-(fenilmetil)-2-morfolinil]metanol
O HO
N
Se preparó de acuerdo con compuestos similares indicados por Breuning et al., Eur. J. Org. Chem 2007, 2100-2106.
A una solución en agitación de (2R)-2-[(fenilmetil)amino]-1-propanol (1,65 g, 9,99 mmol) en tolueno (50 ml) se le añadió (R)-(-)-epiclorohidrina (1,02 ml, 12,98 mmol) seguido de perclorato de litio (1,062 g, 9,99 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. Después de agitar durante 2 días, el análisis por TLC (metanol al 5%-diclorometano) mostró que sólo quedaba una cantidad residual de material de partida y un producto principal. Después, se añadió una solución de metóxido sódico (al 25% en peso en CH3OH) (5,71 ml, 24,96 mmol) y la mezcla se agitó durante 3 días. Se añadió NH4Cl ac. saturado (75 ml) y el producto se extrajo con EtOAc (3 x 75 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se evaporaron para dar el producto en bruto, que se purificó por cromatografía (cartucho de sílice Analogix RS-120) eluyendo con EtOAc al 20-50%hexanos para producir el compuesto del título (1,11 g) en forma de un aceite incoloro. LC-MS (ES) m/z = 222 [M+H]+. []D = -5,2 (c = 1,55, CH3OH, 23,5ºC)
Intermedio 88
[(2S,5R)-5-Metil-2-morfolinil]metanol
O HO
NH
A una solución en agitación de [(2S,5R)-5-metil-4-(fenilmetil)-2-morfolinil]metanol (1,05 g, 4,74 mmol) en etanol (15 ml) se le añadió ácido clorhídrico (concentrado, 12 M) (0,435 ml, 5,22 mmol). La mezcla se purgó con nitrógeno para desgasificarla, después se añadió paladio al 10% sobre carbono (Degussa Type E101 NE/W, húmedo al 50%) (150 mg, 0,070 mmol) y la mezcla se purgó con hidrógeno y después se agitó en el globo. Después de agitar durante 4 h, el análisis por TLC (EtOAc al 50%-hexanos) no mostró material de partida pero sí el producto inicial. La mezcla se desgasificó con nitrógeno, se filtró a través de Celite y se evaporó a sequedad para producir el compuesto del título (880 mg) en forma de la sal hidrocloruro. 1H RMN (400 MHz, D2O):  3,72-3,92 (m, 3H), 3,48-3,69 (m, 3H), 3,13-3,24 (m, 1H), 3,04-3,13 (m, 1H), 1,34 (d, J = 7,1 Hz, 3H).
Intermedio 89
[(2S,5R)-4-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-2-morfolinil]metanol
O HO
N Cl
NN
NH2
En un recipiente para microondas de 2-5 ml se añadió base de Hunig (0,59 ml, 3,35 mmol) a hidrocloruro de [(2S,5R)-5-metil-2-morfolinil]metanol (208 mg, 1,12 mmol) en CH3CN (3 ml) y después se añadió 2-amino-4,6dicloropirimidina (174 mg, 1,06 mmol). La mezcla se calentó con agitación en un reactor de microondas a 160ºC durante 1 hora. El análisis por HPLC indicó una conversión completa. La mezcla se filtró a través de un filtro de disco de 0,45 m, se evaporó y el producto se purificó adicionalmente por cromatografía (columna de sílice Analogix SF25 de 40 g) eluyendo con CH3OH al 2-5%-CHCl3 para producir el compuesto del título (258 mg) en forma de una espuma de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 260 [M+H]+.
Intermedio 90
4-{2-Amino-6-[(2S,5R)-2-(hidroximetil)-5-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
En un recipiente que puede cerrarse herméticamente de 10-20 ml se añadieron ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico
5 (163 mg, 0,986 mmol), [(2S,5R)-4-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-2-morfolinil]metanol (232 mg, 0,897 mmol), 1,4-dioxano (5 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (2,5 ml). La mezcla se purgó con nitrógeno para desgasificarla, después se añadió Pd(PPh3)4 (104 mg, 0,090 mmol) y el recipiente se cerró herméticamente y se calentó a 100ºC durante una noche. Los análisis por HPLC y CLEM indicaron un producto formado con una pequeña cantidad de material de partida de pirmidina restante. Se añadieron 50 mg más de ácido borónico y la reacción se sometió a
10 microondas a 120ºC durante 30 minutos. Aún quedaba 10% de material de partida pero la reacción se trató por dilución con tolueno y agua. La capa acuosa se extrajo con tolueno (2 x 5 ml) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se evaporaron. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (Analogix SF25-40 g) eluyendo con CH3OH al 2-10%-CHCl3. El compuesto del título (193 mg) se obtuvo en forma de una espuma de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 344 [M+H]+.
15 Intermedio 91
Ácido (2S,5R)-4-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinacarboxílico
NH2
Se preparó una solución madre de oxidante de acuerdo con Zhao et al. (Tetrahedron Letters 1998, 39, 5323) disolviendo H5IO6 (11,4 g, 50 mmol) y CrO3 (23 mg, al 1,15% en mol) en CH3CN húmedo (agua al 0,75%) hasta un
20 volumen de 114 ml (se emplearon aproximadamente 2 h para la disolución). Esta solución madre es 0,439 M en H5IO6 y 0,00202 M en CrO3.
En un matraz de fondo redondo de 100 ml se colocaron 4-{2-amino-6-[(2S,5R)-2-(hidroximetil)-5-metil-4-morfolinil]-4pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (188 mg, 0,548 mmol) y CH3CN húmedo (agua al 0,75%, 4,5 ml), la solución en agitación se enfrió en un baño de hielo y se añadieron muy lentamente gota a gota 4,37 ml de la solución madre 25 anterior (durante 10 minutos). Después de 2 horas, se observó una pequeña cantidad de material de partida mediante análisis por TLC (se añadió NaHCO3 a un alícuota, CH3OH al 5%-CHCl3) así que la reacción se puso en el frigorífico durante una noche. En ese momento no quedaba más material de partida según se determinó mediante análisis por TLC. La reacción se interrumpió mediante la adición de Na2HPO4 (0,5 g) en 5 ml de agua. Después de agitar durante unos minutos, la mezcla se volvió turbia y el pH = 5. El producto se extrajo con EtOAc (5 x 10 ml) y los
30 extractos orgánicos combinados se lavaron con NaHSO3 al 5% y salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se evaporaron para producir el compuesto del título en bruto (102 mg) en forma de un producto de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 358 [M+H]+.
Intermedio 92
(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida
NH2
Un vial 5 ml se cargó con ácido (2S,5R)-4-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-2morfolinacarboxílico (72 mg, 0,201 mmol), HOBT (29,9 mg, 0,222 mmol) y DMF (1 ml) en una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se agitó, se enfrió en un baño de hielo y después se añadió EDC (42,5 mg, 0,222 mmol). Después de agitar durante 10 minutos, se añadió anilina (0,020 ml, 0,222 mmol) y la mezcla se dejó calentar a
5 temperatura ambiente y en agitación. A las 2 y 4 horas, no hubo ningún cambio en el progreso. La mezcla se diluyó con EtOAc, se lavó con agua, NaHCO3 saturado y salmuera y se secó (MgSO4). Después de la filtración, el filtrado se concentró y el producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (Analogix SF-4 g) eluyendo con EtOAc al 20-50%-CHCl3 para producir el compuesto del título (59 mg) en forma de un aceite de color naranja claro. LC-MS (ES) m/z = 433 [M+H]+.
10 Ejemplo 67
(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida
NH2
OH N
N
N
N
H ON
N
NH2
Se disolvió (2S,5R)-4-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida (57 mg, 0,132 mmol) en etanol (3 ml) con agitación en un recipiente para microondas de 5 ml. Se añadió hidrazina 15 monohidrato (150 l, 3,09 mmol) y la mezcla se tapó y se calentó a 100ºC en un baño de aceite durante 24 horas. La mezcla se repartió entre EtOAc y agua y la capa acuosa se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4) se filtraron y se evaporaron. La purificación por cromatografía sobre gel de sílice (Analogix RS-4 g) eluyendo con 90:10:1 de CHCl3:CH3OH:NH4OH ac. conc. produjo el compuesto del título (19 mg, 0,041 mmol, rendimiento de 30,8%) en forma de una película/espuma incolora. El análisis por RMN
20 mostró un pico de disolvente residual con singletes a 1,9 y 3,36, por lo que el material se destiló azeotrópicamente con CH3CN y después se trituró para dar un polvo de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,24 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 3,04 (s a, 1H), 3,82 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 3,93 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 4,07-4,23 (m, 1H), 4,53 (s a, 2H), 5,39 (s a, 2H), 6,22 (s a, 2H), 6,61 (s, 1H), 7,10 (t, J = 7,1 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 7,60 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,697,78 (m, 3H), 7,96 (s, 1H), 9,87 (s a, 1H), 11,52 (s, 1H).
25 Intermedio 93
[1-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo
NH2
Se añadió 2-amino-4,6-dicloropirimidina (3,33 g, 20,30 mmol) a una mezcla en agitación de 3-N-Boc-aminopiperidina (4,28 g, 21,4 mmol) y K2CO3 (2,95 g, 21,4 mmol) en etanol (50 ml). La reacción se calentó a reflujo durante 1 hora.
30 El análisis por HPLC indicó la conversión completa. A la mezcla caliente se le añadió lentamente agua (50 ml), y después se dejó enfriar a temperatura ambiente con agitación. El producto precipitado se recogió por filtración, se lavó con 1:1 de etanol:agua (50 ml) y se secó para producir el compuesto del título (5,98 g) en forma de un polvo de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 328 [M+H]+.
Intermedio 94
{1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
NH2
Se añadieron carbonato potásico (0,843 g, 6,10 mmol) y agua (5 ml) a una mezcla en agitación de [1-(2-amino-6cloro-4-pirimidinil)-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (1 g, 3,05 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (0,654 g, 3,97 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml). Después de la desgasificación, se añadió Pd(PPh3)4 (0,176 g, 0,153 mmol) y el recipiente se cerró herméticamente y se calentó a 100ºC en un baño de aceite durante una noche. El análisis por HPLC mostró que la conversión se había completado. La mezcla enfriada se vertió en agua (50 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se evaporaron para dar el residuo en bruto, que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (Analogix SF25-40 g) eluyendo con EtOAc al 15-50%-CHCl3 para producir el compuesto del título (1,22 g) en forma de una espuma de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 413 [M+H]+.
Ejemplo 68
{1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
NH2
Se añadieron {1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (1,2 g, 2,91 mmol), 1,4-dioxano (5 ml) y etanol (5 ml) a un recipiente para microondas de 10-20 ml y se añadió hidrazina monohidrato (1,41 ml, 29,1 mmol). El recipiente se tapó y se calentó en un reactor de microondas durante 45 minutos a 120ºC. El análisis por HPLC mostró ~25% de material de partida restante, por lo que se añadieron 5 equivalentes más de hidrazina (0,71 ml) y el calentamiento en microondas se continuó durante 45 minutos. El análisis por HPLC indicó la conversión completa. La mezcla se filtró a través de un disco de nylon de 0,45 m, lavando con una cantidad mínima de etanol. El filtrado se calentó con agitación y se añadió gota a gota agua hasta que la solución quedó ligeramente turbia (~25 ml de agua). Después de dejar enfriar a temperatura ambiente con agitación, el sólido se recogió por filtración, se lavó con 2:1 de agua:etanol y se secó al aire para producir el compuesto del título (875 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 425 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,38 (s, 9H), 1,43 (s a, 2H), 1,74 (s a, 1H), 1,86 (s a, 1H), 2,86 (s a, 1H), 3,02 (s a, 1H), 3,35 (s, 1H), 4,11 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 4,26 (s a, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,08 (s, 2H), 6,57 (s, 1H), 6,93 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 11,51 (s, 1H).
Intermedio 95
6-[2-Amino-6-(3-amino-1-piperidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH2
Se añadió en porciones {1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1dimetietilo (865 mg, 2,04 mmol) a ácido clorhídrico enfriado con hielo (acuoso concentrado) (8 ml, 96 mmol) con agitación. Se formó una masa sólida de color amarillo. El baño de hielo se retiró y la reacción se dejó calentar a
temperatura ambiente con agitación. El análisis por HPLC indicó la conversión completa. La mezcla se diluyó con agua enfriada con hielo (20 ml) y la solución se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en etanol (15 ml) y se evaporó, seguido de suspensión en CH3CN (15 ml) y evaporación. Después, el residuo se trituró con isopropanol (10 ml), se filtró, se lavó con isopropanol seguido de hexanos y se secó al vacío para producir una sal 5 HCl del compuesto del título (761 mg) en forma de un polvo de color amarillo. Se suspendió una porción de 140 mg en CH3OH (2 ml) y agua (1 ml) y se neutralizó a pH 10 con NaOH 1 N. La solución se filtró y se purificó por HPLC de fase inversa automatizada Gilson (Gemini Phenomenex C18 5 , 100 x 300 mm), eluyendo con CH3CN al 5-90%agua + NH4OH al 0,1%). Las fracciones puras se combinaron, se evaporaron y se secaron para producir el compuesto del título (72 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 325 [M+H]+. 1H RMN (400
10 MHz, DMSO-d6): 1,15-1,29 (m, 1H), 1,31-1,46 (m, 1H), 1,51 (s a, 2H), 1,62-1,75 (m, 1H), 1,87 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 2,53-2,68 (m, 2H), 2,83 (t, J = 12,1 Hz, 1H), 4,30 (m, 2H), 5,38 (s, 2H), 6,03 (s a, 2H), 6,58 (s, 1H), 7,56 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,94 (s, 1H), 11,52 (s, 1H).
Ejemplo 69
N-{1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}benzamida
NH2
O
N
N
N
N
H
H
N
N
NH2
Se añadió bicarbonato sódico (145 mg, 1,73 mmol) a una solución de trihidrocloruro de 6-[2-amino-6-(3-amino-1piperidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (150 mg, 0,346 mmol) en agua (1,5 ml) con agitación. Se añadió tetrahidrofurano (THF) (1,5 ml), la mezcla se enfrió en un baño de hielo y se añadió gota a gota cloruro de benzoílo (0,044 ml, 0,380 mmol) con agitación. Después, la mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 2 20 horas. El análisis por LCMS mostró el material de partida restante, el producto y la bis-benzoilación. Se añadieron 40 l más de cloruro de benzoílo y 145 mg de NaHCO3 y la mezcla se agitó durante 1 hora. El análisis por HPLC mostró que se había completado la conversión en el producto multi-benzotiolado. La reacción se diluyó con EtOAc, se lavó con agua, se secó (Na2SO4), se filtró y se evaporó. El producto en bruto se suspendió en CH3OH (8 ml), se añadió 1 ml de HCl acuoso concentrado y la mezcla se agitó durante 3 días a 65ºC. El análisis por HPLC mostró la conversión 25 en el producto deseado. La mezcla se concentró hasta alcanzar un volumen de ~2 ml, después se diluyó con CH3CN (~8 ml) y se calentó. A la solución caliente se le añadió más cantidad de CH3CN hasta que se volvió turbia. La mezcla se dejó enfriar lentamente a temperatura ambiente con agitación durante 2 horas. El precipitado se recogió por filtración y se lavó con CH3CN, después con Et2O y finalmente con hexanos. El secado produjo el dihidrocloruro del compuesto del título (156 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. Una porción de 100 mg se purificó 30 adicionalmente por HPLC de fase inversa automatizada Gilson (Gemini Phenomenex C18 5 , 100 x 300 mm), eluyendo con CH3CN al 5-90%-agua + NH4OH al 0,1%) para dar el compuesto del título (55 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 429 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,43-1,60 (m, 1H), 1,60-1,74 (m, 1H), 1,76-1,86 (m, 1H), 1,92-2,03 (m, 1H), 2,87-3,00 (m, 2H), 3,83-3,95 (m, 1H), 4,27-4,39 (m, 1H), 4,49 (s a, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,12 (s, 2H), 6,64 (s, 1H), 7,46 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 7,50-7,54 (m, 1H), 7,54-7,61 (m, 1H), 7,71 (d, J =
35 8,6 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 7,94 (s, 1H), 8,39 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 11,52 (s, 1H).
Intermedio 96
4-Cloro-6-[2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-2-pirimidinamina
N
N
NH2
Se añadió 2-amino-4,6-dicloropirimidina (143 mg, 0,870 mmol) a una mezcla en agitación de 2-trifluorometil
40 pirrolidina (121 mg, 0,870 mmol) y base de Hunig (0,23 ml, 1,31 mmol) en CH3CN (2,5 ml) en un recipiente para microondas. La reacción se tapó y se calentó en un reactor de microondas durante 1 hora. La cromatografía sobre gel de sílice (cartucho Analogix RS-12 g) eluyendo con EtOAc al 5-10%-CHCl3 dio el compuesto del título (85 mg) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCl3, * representa un rotámero secundario):  1,96-2,15 (m,
2H), 2,15-2,32 (m, 2H), 3,37-3,52 (m, 1H), 3,54-3,65 (m, 1H), 4,82,5,60* (s a, 1H), 5,00 (s a, 2H), 5,94,6,72* (s, 1H).
Intermedio 97
4-{2-Amino-6-[2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
F
F CN F
N
F N
N
NH2
Se añadieron carbonato potásico (129 mg, 0,934 mmol) y agua (1,5 ml) a una mezcla en agitación de 4-cloro-6-[2(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-2-pirimidinamina (83 mg, 0,311 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (61,6 mg, 0,374 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml). Después de la desgasificación, se añadió Pd(PPh3)4 (29 mg, 0,025 mmol) y el recipiente se cerró herméticamente y se calentó a 100ºC en un baño de aceite durante una noche. El análisis por LCMS mostró que la conversión se había completado. La mezcla se diluyó con EtOAc y se lavó con agua. La capa acuosa se extrajo de nuevo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se evaporaron. La purificación por cromatografía sobre gel de sílice (Analogix RS-4 g) eluyendo con EtOAc al 5-20%-CHCl3 produjo el compuesto del título (65 mg) en forma de una espuma de color blanco. La muestra contenía una pequeña cantidad de PH3P/Ph3PO por RMN, pero era adecuada para reacciones posteriores. LC-MS (ES) m/z = 352 [M+H]+.
Ejemplo 70
6-{2-Amino-6-[2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
F
F NH2
F N N
N H N
N
NH2
Se disolvió 4-{2-amino-6-[2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (60 mg, 0,17 mmol) en etanol (1,5 ml) con agitación en un recipiente para microondas de 5 ml. Se añadió hidrazina monohidrato (0,207 ml, 4,27 mmol) y la mezcla se tapó y se calentó a 100ºC en un baño de aceite durante una noche. El análisis por HPLC mostró que la conversión se había completado. La mezcla caliente se filtró a través de un disco de filtro de 0,2 m, aclarando con etanol (1 ml). Se añadió agua (~3 ml) para el filtrado con agitación y la mezcla se calentó para evaporar la mayor parte del etanol hasta un volumen de ~4 ml. La mezcla se dejó enfriar con agitación a temperatura ambiente, en el momento en el que un poco de producto precipitaba en forma de una goma. La agitación se continuó durante aproximadamente una hora y el precipitado se volvió un sólido de color blanco fluido, que se filtró, se lavó con agua y se secó para producir el compuesto del título (42 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 364 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,98-2,08 (m, 2H), 2,08-2,23 (m, 2H), 3,49-3,60 (m, 1H), 3,60-3,72 (m, 1H), 5,06-5,17 (m, 1H), 5,39 (s, 2H), 6,22 (s, 2H), 6,52 (s, 1H), 7,57 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,94 (s, 1H), 11,54 (s, 1H).
Intermedio 98
(5R)-5-Etil-3-morfolinona
O NH
O
Se enfrió NaH (1,51 g, 37,9 mmol) en tolueno seco (10 ml) a 0ºC en una atmósfera de nitrógeno y se añadió gota a gota (2R)-2-amino-1-butanol (1,5 g, 16,8 mmol) en tolueno (5 ml). La mezcla se agitó durante 20 minutos, calentándola a temperatura ambiente, y se añadió gota a gota cloruro de cloroacetilo (1,5 ml, 18,9 mmol) en tolueno (5 ml). Se observó una exotermia, así que la mezcla se enfrió en un baño de hielo durante la adición. Después de que se completara la adición, la mezcla de reacción se calentó a 110ºC durante una noche. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se añadieron en porciones 5 g de cloruro de amonio. La mezcla se agitó durante 20 minutos y se filtró. La torta de filtro se lavó con tolueno y se desechó. El filtrado se concentró para dar un aceite de color
5 naranja que se disolvió en CH2Cl2 y se purificó por cromatografía sobre SiO2 (gradiente: CH2Cl2 al 100% a 90:10:1 de CH2Cl2/CH3OH/NH4OH) para producir el compuesto del título (1,2 g) en forma de un sólido de color amarillo. 1H RMN (400 MHz, CDCl3):  0,96 (t, J = 7,6 Hz, 3H), 1,52-1,63 (m, 2H), 3,40-3,51 (m, 2H), 3,85-3,94 (m, 1H), 4,07-4,20 (m, 2H), 7,55 (s a, 1H).
Intermedio 99
10 (3R)-3-Etilmorfolina
Una solución de LiAlH4 1 M en THF (7,7 ml, 7,7 mmol) se enfrió en un baño de hielo en una atmósfera de nitrógeno.
Se añadió gota a gota una solución de (5R)-5-etil-3-morfolinona (500 mg, 3,87 mmol) en THF (10 ml) y la solución se
calentó a 70ºC durante 16 horas. Después de aproximadamente 2 horas, se formó un precipitado espeso de color 15 blanco. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se inactivó cuidadosamente con agua (1 ml),
NaOH 2 M (1 ml) y agua (4 ml). La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y después
se filtró a través de celite. La torta de filtro se lavó con EtOAc y se desechó. El filtrado se lavó con salmuera, se secó
(MgSO4) y se filtró. Se añadió HCl en éter (3,87 ml, 3,87 mmol) produciendo una solución turbia y el disolvente se
evaporó para producir la sal HCl del compuesto del título (251 mg) en forma de un sólido de color naranja. 1H RMN 20 (400 MHz, DMSO-d6):  0,88-0,97 (m, 3H), 1,46-1,72 (m, 2H), 2,91-3,18 (m, 3H), 3,46 (dd, J = 12,3, 10,2 Hz, 1H),
3,71 (td, J = 11,8, 2,7 Hz, 1H), 3,82-3,97 (m, 2H), 9,68 (s a, 2H).
Intermedio 100
4-Cloro-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-pirimidinamina
NH2
25 A 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (240 mg, 1,46 mmol) en CH3CN (8 ml) se le añadieron (3R)-3-etilmorfolina (244 mg, 1,61 mmol) y base de Hunig (1,02 ml, 5,85 mmol) y la mezcla de reacción se calentó en un microondas a 150ºC durante un total de 3 horas, comprobando el progreso de la reacción a intervalos regulares. La mezcla se evaporó al vacío y el residuo resultante se repartió entre EtOAc y agua. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x) y CH2Cl2 (2 x). Los extractos orgánicos se lavaron con agua y salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se evaporaron. El
30 material resultante se trituró con Et2O y se secó al vacío para producir el compuesto del título (307 mg). LC-MS (ES) m/z = 243, 245 [M+H]+.
Ejemplo 71
6-{2-Amino-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
NH2
35 En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de nitrógeno se combinaron 4-cloro-6[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-pirimidinamina (140 mg, 0,58 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (0,114 g, 0,69 mmol) en 1,4-dioxano (9 ml). Se añadió NaHCO3 acuoso saturado (3 ml) y la mezcla resultante se desgasificó con nitrógeno durante 10 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,76 g, 0,066 mmol), el recipiente se cerró herméticamente y la
mezcla de reacción se agitó a 100ºC durante 3 horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, los sólidos y otras impurezas insolubles formadas durante la reacción se filtraron y el filtrado se concentró. El sólido resultante se repartió entre EtOAc y agua y se extrajo con EtOAc (2 x) y CH2Cl2 (2 x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de CHCl3 al 100% a 90/10/1 de CHCl3/CH3OH/NH4OH) produjo una mezcla del producto de Suzuki deseado con óxido de trifenilfosfina. LC-MS (ES) m/z = 328 [M+H]+. En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de nitrógeno se combinaron el producto en bruto que contenía el producto de Suzuki 4-{2-amino-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo e hidrazina monohidrato (0,42 ml) en EtOH (6 ml). El vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó a 100ºC durante 2 días. La reacción se filtró para retirar algunas impurezas y el filtrado se concentró. El sólido resultante se disolvió en una mezcla de CH3CN/H2O/DMSO y se purificó por una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). El CH3CN se evaporó y se añadió NaHCO3 acuoso saturado al agua restante, donde se formó un precipitado. El precipitado se filtró, se trituró en Et2O y se secó al vacío para producir el compuesto del título (47 mg) en forma de un sólido de color castaño. LC-MS (ES) m/z = 340 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,88 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,63-1,80 (m, 2H), 3,09 (td, J = 12,8, 3,2 Hz, 1H), 3,37-3,46 (m, 2H), 3,51 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz, 1H), 3,80-3,91 (m, 2H), 4,30 (s a, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,09 (s a, 2H), 6,56 (s, 1H), 7,56 (dd, J = 8,6, 1,0 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,94 (s, 1H), 11,52 (s, 1H).
Intermedio 101
6-Cloro-N4-(1,1-dimetiletil)-2,4-pirimidinadiamina
NH2
A 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (400 mg, 2,44 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron (1,1-dimetiletil)amina (0,34 ml, 3,17 mmol) y trietilamina (1,36 ml, 9,76 mmol) y la mezcla de reacción se calentó en un microondas a 170ºC durante un total de 2,25 horas, comprobando el progreso de la reacción a intervalos regulares. La mezcla se enfrió y se evaporó. El residuo resultante se repartió entre EtOAc y agua y se extrajo con EtOAc (2 x) y CH2Cl2 (2 x). Los extractos orgánicos se lavaron con agua y salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se evaporaron. El sólido resultante se trituró con Et2O y se secó al vacío para producir el compuesto del título (440 mg). LC-MS (ES) m/z = 201, 203 [M+H]+.
Intermedio 102
4-{2-Amino-6-[(1,1-dimetiletil)amino]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
N HN
F N
N
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de nitrógeno se combinaron 6-cloro-N4(1,1-dimetiletil)-2,4-pirimidinadiamina (440 mg, 2,19 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (0,416 g, 2,52 mmol) en 1,4-dioxano (8 ml). Se añadió NaHCO3 acuoso saturado (4 ml) y la mezcla resultante se desgasificó con nitrógeno durante 10 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,127 g, 0,11 mmol), el recipiente se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó a 95ºC durante una noche. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, los sólidos y otras impurezas insolubles formadas durante la reacción se filtraron y el filtrado de color naranja se concentró. El sólido resultante se repartió entre EtOAc y agua y se extrajo con EtOAc (2 x) y CH2Cl2 (2 x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. El sólido resultante se disolvió en DMSO y se purificó por RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones se evaporaron y los sólidos se trituraron en Et2O y se filtraron para producir el compuesto del título (553 mg). LC-MS (ES) m/z = 286 [M+H]+.
NHN
N H N
N
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de nitrógeno se combinaron 4-{2-amino6-[(1,1-dimetiletil)amino]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (500 mg, 1,25 mmol) e hidrazina monohidrato (1,22 ml) en EtOH (8 ml). El vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó a 95ºC durante 22 horas. La solución se concentró, se repartió entre EtOAc y agua y se extrajo con EtOAc (2 x) y CH2Cl2. La capa orgánica se separó, se lavó con NaHCO3 y salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. El sólido resultante se disolvió en una mezcla de CH3CN/agua/CH3OH/DMSO y se purificó por RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones se evaporaron, se añadió carbonato potásico acuoso al residuo y la solución se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla acuosa se extrajo con EtOAc (x 2) y DCM (x 2). La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró, se concentró y se destiló azeotrópicamente con CH3CN para dar un sólido de color pardo. A los sólidos se les añadió una cantidad mínima de acetonitrilo y la mezcla resultante se sonicó. Se formó un precipitado de color blanco que se filtró y se lavó con hexanos y Et2O para producir el compuesto del título (102 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 298 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,42 (s, 9H), 5,36 (s, 2H), 5,90 (s, 2H), 6,31 (s, 1H), 6,53 (s, 1H), 7,36 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,80 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Ejemplo 73
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(2-metilpropil)-2,4-pirimidinadiamina
NH2
NHN N
H
N
N
NH2
A 6-[2-amino-6-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (300 mg, 0,56 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) se le añadió trietilamina (0,39 ml, 2,82 mmol) y la mezcla resultante se desgasificó con nitrógeno durante 5 minutos. Se añadió (2-metilpropil)amina (57,7 mg, 0,79 mmol) y la solución resultante se calentó a 95ºC durante una noche. Se añadieron 0,5 equiv. más de (2-metilpropil)amina y 0,5 equiv. de trietilamina y la mezcla de reacción se calentó a 95ºC durante una noche. La solución de color pardo se enfrió y se concentró. El sólido resultante se disolvió en una mezcla de CH3CN/H2O/TFA al 0,1% y se purificó por RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones se evaporaron y el material resultante se trituró con Et2O, se filtró y se secó al vacío para producir una sal TFA del compuesto del título (19 mg). LC-MS (ES) m/z = 298 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,01 (d, J = 6,8 Hz, 6H), 1,99 (m, 1H), 3,36-3,40 (m, 2H), 6,41 (s, 1H), 7,36 (dd, J = 8,6, 1,5 Hz, 1H), 7,73 (s, 1 H), 7,95-7,99 (m, 1H).
Ejemplo 74
6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-propil-2,4-pirimidinadiamina
NH2
NHN N
H
N
N
Ejemplo 72 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(1,1-dimetiletil)-2,4-pirimidinadiamina
NH2
NH2
A 6-[2-amino-6-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (300 mg, 0,56 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) se le añadió trietilamina (0,39 ml, 2,82 mmol) y la mezcla resultante se desgasificó con nitrógeno durante 5 minutos. Se añadió propilamina (50 mg, 0,84 mmol) y la solución resultante se calentó en un microondas a 160ºC durante 2 horas y a 180ºC durante 1 hora. La solución de color pardo se enfrió y se concentró. El sólido resultante se disolvió
5 en una mezcla de CH3CN/H2O/TFA al 0,1% y se purificó por una RPHPLC Gilson (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones se evaporaron y el material resultante se trituró con Et2O, se filtró y se secó al vacío para producir una sal TFA del compuesto del título (40 mg) en forma de un sólido de color pardo claro brillante. LC-MS (ES) m/z = 284 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): 1,02 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 1,65-1,75 (m, 2H), 3,5 (m, 2H), 6,39 (s, 1H), 7,39 (dd, J = 8,6, 1,5 Hz, 1H), 7,76 (s, 1H), 8,00 (d, J = 8,6 Hz, 1H).
10 Intermedio 103
(2R)-2-[(Fenilmetil)amino]-1-propanol
A (2R)-2-amino-1-propanol (4,5 g, 60 mmol) en tolueno (120 ml) se le añadió benzaldehído (636 ml). Se puso un
purgador Dean-Stark en el matraz y la mezcla de reacción se calentó a reflujo hasta que no se desprendió más 15 agua. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró. El residuo resultante se disolvió en etanol (120
ml) y se trató con NaBH4 (5,67 g, 150 mmol) a 0ºC seguido de suficiente cantidad de HCl 4 N en dioxano para ajustar
el pH a 2. La mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente y después se concentró al
vacío. El residuo resultante se disolvió en HCl ac. 1 N (200 ml) y se lavó con CH2Cl2 (2 x 100 ml). Después, la fase
acuosa se ajustó a pH >13 con NaOH acuoso 6 N y se extrajo con CH2Cl2 (2 x 150 ml). La fase orgánica combinada 20 se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (9,44 g, 95%) en forma
de un aceite incoloro que solidificó a alto vacío. LC-MS (ES) m/z = 166,2 [M+H]+
Intermedio 104
(5R)-5-Metil-4-(fenilmetil)-3-morfolinona
O
25 A (2R)-2-[(fenilmetil)amino]-1-propanol (8,43 g, 51 mmol) en THF (50 ml) se le añadió una solución de K2CO3 (21,15 g, 153 mmol) en agua (50 ml). A la mezcla resultante a 0ºC se le añadió lentamente mediante una jeringa cloruro de cloroacetilo cloruro (5,7 ml, 71,4 mmol) con agitación vigorosa y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a 0ºC. Se añadió una solución acuosa al 50% de NaOH para ajustar el pH >13 y la mezcla resultante se calentó durante una noche a temperatura ambiente. La solución se extrajo con CH2Cl2 (2 x 200 ml) y la capa orgánica se secó
30 (Na2SO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (rendimiento de 100% en bruto) en forma de un aceite incoloro. LC-MS (ES) m/z = 206 [M+H]+
Intermedio 105
(3R)-3-Metil-4-(fenilmetil)morfolina
35 A una solución de (5R)-5-metil-4-(fenilmetil)-3-morfolinona (11,7 g, 57 mmol) en tolueno (140 ml) a 0ºC se le añadió lentamente hidruro de bis(2-metoxietoxi)aluminio y sodio (Red-Al) (35 ml, 3 ml/g de morfolinona) mediante un embudo de adición y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 60ºC. La reacción se enfrió a 0ºC y se interrumpió mediante la adición gota a gota de NaOH acuoso 1 N (15 ml). La mezcla resultante se repartió entre Et2O (100 ml) y NaOH acuoso 1 N (100 ml). La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente
40 con Et2O (50 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. El residuo resultante se destiló azeotrópicamente con CH3OH (50 ml) para producir el compuesto del título (10,69 g) en forma de un aceite incoloro. LC-MS (ES) m/z = 192 [M+H]+
Intermedio 106 (3R)-3-Metilmorfolina
A (3R)-3-metil-4-(fenilmetil)morfolina (10,7 g, 56 mmol) en CH3OH (110 ml) se le añadieron HCl acuoso 6 N (9,3 ml)
5 y Pd/C (1,07 g, al 10% en peso) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente en una atmósfera de H2 (sistema de globo). La mezcla se filtró a través de un filtro de fibra de vidrio y la torta de filtro se lavó con CH3OH. El filtrado combinado se concentró y se destiló azeotrópicamente con CH3OH (4 x 100 ml) para producir la sal HCl del compuesto del título en forma de un aceite de color amarillo que se solidificó a alto vacío (7,91 g). 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  3,95-4,05 (m, 2H), 3,77 (m, 1H), 3,47-3,54 (m, 1H), 3,38-3,47 (m, 1H), 3,30-3,34 (m, 1H),
10 3,18-3,28 (m, 1H), 1,29 (d, J = 6,3 Hz, 3H).
Intermedio 107
4-Cloro-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-2-pirimidinamina
NH2
A 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (500 mg, 3,05 mmol) en CH3OH (10 ml) se le añadieron hidrocloruro de (3R)-3
15 metilmorfolina (441 mg, 3,2 mmol) y trietilamina (1,28 ml, 9,2 mmol) y la mezcla de reacción se calentó en un microondas a 120ºC durante 35 minutos. Comenzó a formarse un subproducto. Se añadieron 0,5 equiv. de hidrocloruro de (3R)-3-metilmorfolina y 0,2 ml de trietilamina y la mezcla se calentó en un baño de aceite a 50ºC durante 3 días y en un microondas a 100ºC durante 3 horas. La mezcla se enfrió, se evaporó al vacío y el residuo resultante se repartió entre EtOAc y agua y se extrajo con EtOAc (2 x) y CH2Cl2 (2 x). Los extractos orgánicos
20 combinados se lavaron con agua y salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se evaporaron. El material resultante se trituró con Et2O y se secó al vacío para producir el compuesto del título (524 mg). LC-MS (ES) m/z = 229, 231 [M+H]+.
Intermedio 108
4-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
25 En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de nitrógeno se combinaron 4-cloro-6
[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-2-pirimidinamina (500 mg, 2,19 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (0,397 g, 2,4
mmol) en 1,4-dioxano (10 ml). Se añadió NaHCO3 acuoso saturado (5 ml), y la mezcla resultante se desgasificó con
nitrógeno durante 10 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,126 g, 0,11 mmol), el recipiente se cerró herméticamente y la 30 mezcla de reacción se agitó a 95ºC durante una noche. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, los sólidos y
otras impurezas insolubles formados durante la reacción se filtraron y el filtrado de color naranja se concentró. El
sólido resultante se repartió entre EtOAc y agua y se extrajo con EtOAc (2 x) y CH2Cl2 (2 x). La capa orgánica se
separó, se lavó con agua y salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. El sólido resultante se disolvió en
CH2Cl2 y se purificó por cromatografía ultrarrápida en SiO2 (gradiente: CH2Cl2 de 100% a 15% de 90/10/1 de 35 CH2Cl2/CH3OH/NH4OH). Las fracciones se evaporaron y los sólidos se trituraron con Et2O y se filtraron para producir
el compuesto del título (403 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 314 [M+H]+.
Ejemplo 75 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
NH2
A una solución de 4-{2-amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (400 mg, 1,28 mmol) en EtOH (12 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (1,25 ml, 25,5 mmol) y la suspensión resultante se agitó a 95ºC durante 18 horas. La mezcla de reacción se concentró y el residuo resultante se repartió entre EtOAc y agua y se extrajo con EtOAc (2 x) y CH2Cl2 (1 x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaHCO3 acuoso saturado y salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se evaporaron. El residuo resultante se disolvió en una mezcla de CH3CN/agua/DMSO y se purificó por RPHPLC (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%) para producir un sal TFA del compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo pálido. Una porción de este material (180 mg) se trató con carbonato potásico en agua. La mezcla acuosa se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas y se extrajo con EtOAc (2 x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se evaporaron para producir el compuesto del título (69 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 326 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,19 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 3,11 (m, 1H), 3,44 (m, 1H), 3,563,63 (m, 1H), 3,68-3,74 (m, 1H), 3,92 (dd, J = 11,1, 3,0 Hz, 1H), 4,05-4,14 (m, 1H), 4,49 (s a, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,11 (s, 2H), 6,55 (s, 1H), 7,57 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,95 (s, 1 H), 11,52 (s, 1H).
Intermedio 109
N-Fenil-2-morfolinacarboxamida
A una solución en agitación de ácido 4-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-2-morfolinacarboxílico (500 mg, 2,16 mmol) en DMF seca (2 ml) a 0ºC se le añadieron EDCI (456 mg, 2,38 mmol), HOBT (331 mg, 2,16 mmol) y anilina (0,22 ml, 2,38 mmol). La solución se agitó a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evaporó y el residuo resultante se vertió en agua y se extrajo con EtOAc (2 x) y CH2Cl2 (2 x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se evaporaron. A este material en bruto disuelto en CH2Cl2/CH3OH (3 ml/0,3 ml) se le añadió TFA (1,5 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla se concentró y se secó al vacío para producir un aceite de color pardo claro. Se añadieron Et2O y hexanos y se formó un precipitado. La mezcla se sonicó y se filtró para producir el compuesto del título (604 mg). LC-MS (ES) m/z = 207 [M+H]+.
Intermedio 110
4-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-N-fenil-2-morfolinacarboxamida
A 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (160 mg, 0,98 mmol) en CH3CN (5 ml) se le añadieron N-fenil-2-morfolinacarboxamida (400 mg, 1,25 mmol) y trietilamina (0,68 ml, 4,88 mmol) y la mezcla de reacción se calentó en un microondas a 140ºC durante 25 minutos. La reacción se enfrió y se formó un precipitado. La mezcla se filtró y el filtrado se evaporó. El residuo resultante se repartió entre EtOAc y agua y se extrajo con EtOAc (2 x) y CH2Cl2 (2 x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se evaporaron. El residuo resultante se combinó con los sólidos filtrados con anterioridad y el material combinado se trituró con Et2O y se secó al vacío para producir el compuesto del título (306 mg). LC-MS (ES) m/z = 334, 336 [M+H]+.
Ejemplo 76 4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-2-morfolinacarboxamida NH2 O
NO
N
N H
NH N
N
NH2
En un tubo de 25 ml que puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de nitrógeno se combinaron 4-(2-amino
6-cloro-4-pirimidinil)-N-fenil-2-morfolinacarboxamida (290 mg, 0,87 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico
(0,172 g, 1,04 mmol) en 1,4-dioxano (8 ml). Se añadió NaHCO3 acuoso saturado (4 ml) y la mezcla resultante se 10 desgasificó con nitrógeno durante 10 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,050 g, 0,043 mmol), el recipiente se cerró
herméticamente y la mezcla de reacción se agitó a 95ºC durante una noche. La reacción se enfrió a temperatura
ambiente, los sólidos y otras impurezas insolubles formados durante la reacción se filtraron y el filtrado se concentró.
El sólido resultante se repartió entre EtOAc y agua y se extrajo con EtOAc (2 x) y CH2Cl2 (2 x). Las capas orgánicas
combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. El producto de 15 Suzuki en bruto resultante contenía óxido de trifenilfosfina. LC-MS (ES) m/z = 419 [M+H]+. En un tubo de 25 ml que
puede cerrarse herméticamente en una atmósfera de nitrógeno se combinaron el producto de Suzuki en bruto 4-[2
amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-fenil-2-morfolinacarboxamida e hidrazina monohidrato (0,64 ml) en
EtOH (8 ml). El vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó a 80ºC durante 14 h y a 90ºC durante
8 h. El precipitado de color verde que se formó durante la reacción y que contenía impurezas se filtró y el filtrado se 20 concentró. La trituración en EtOAc/Hexano y después con EtOH/Et2O dio un sólido de color gris que contenía
impurezas que se filtraron y el filtrado se evaporó. Se añadió CH3OH y se formó un precipitado de color blanco. Se
añadieron algunos hexanos y agua y la mezcla se sonicó. Los sólidos se filtraron y se secaron al vacío durante una
noche para producir el compuesto del título (85 mg, 21%) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z =
431 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,99-3,16 (m, 2H), 3,70 (td, J = 11,4, 2,5 Hz, 1H), 4,09 (d, J = 11,4 Hz, 25 1H), 4,15-4,29 (m, 2H), 4,65 (s a, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,23 (s a, 2H), 6,68 (s, 1H), 7,09 (t, J = 7,45 Hz, 1H), 7,33 (t, J =
8,0 Hz, 2H), 7,60 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H), 7,69-7,74 (m, 3H), 7,97 (s, 1H), 9,84 (s, 1H), 11,53 (s, 1H).
Intermedio 111
1-(Fenilmetil)-6-metil-1,3-piperidinadicarboxilato de cis-3-metilo
O
O
N
O
O
30 Se añadió una solución de 6-metilnicotinato de metilo (50 g, 331 mmol, 1 equiv.) en CH3OH (400 ml) y HCl conc. (26 ml) a una suspensión de óxido de platino (IV) (2,0 g) en 50 ml de CH3OH/agua (4/1) en una Botella Parr. La mezcla se hidrogenó a temperatura ambiente en una atmósfera de 413,68 kPa (60 psi) de gas hidrógeno durante 4,5 horas. Después, la mezcla se filtró a través de celite. El filtrado se concentró al vacío y después se extrajo con 500 ml de tolueno, en aproximadamente 77 g de jarabe. Este residuo se disolvió en CH2Cl2 (500 ml) y se enfrió en un baño de
35 hielo. A esta solución en agitación se le añadió DMAP (0,4 g, 3,31 mmol) seguido de la adición en porciones de TEA (101 ml, 728 mmol, 2,2 equiv.). Se formó una suspensión cuando se añadió el TEA. Esta mezcla se enfrió a 15ºC. A la suspensión resultante se le añadió gota a gota cloroformiato de bencilo (52 ml, 364 mmol, 1,1 equiv.) durante un periodo de 25 minutos de modo que la temp. de la mezcla se mantuvo a 15-20ºC. Después de que se completara la adición de cloroformiato de bencilo, la mezcla se enfrió en agitación con un baño de hielo durante 30 minutos más y
40 después a temperatura ambiente durante 1 hora. Esta mezcla se lavó con 300 ml de HCl 1 N frío. El extracto orgánico se concentró al vacío. El residuo se repartió entre tolueno (400 ml), MTBE (200 ml) y agua (250 ml). El extracto orgánico se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío para dar un aceite (97 g) en forma del producto en bruto. La cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc en hexano dio 64,4 g (rendimiento de 65%) del compuesto del título. LC-MS (ES) m/z = 292 [M+H]+.
Resolución del Intermedio 111:
El Intermedio 111 puede resolverse por HPLC quiral de fase estacionaria, SFC o cristalización de una sal tartrato. Para el análisis por HPLC y la resolución preparativa se usaron las siguientes condiciones:
Método de Separación:
Se usó HPLC para la analítica y la SFC era separación quiral preparativa.
Método de separación analítica:
Instrumento: HPLC analítica Shimadzu 20-AB Columna: ChiralPak AD-3, 150 x 4,6 mm de D.I. Fase móvil: A para Hex (DEA al 0,1%) y B para etanol Gradiente: B al 15% Caudal: 1 ml/min Longitud de onda: 220 nm
Método de separación preparativa:
Instrumento: SFC preparativa Berger SFCⅢ Columna: ChiralPak IC-H, 250 x 30 mm de D.I. Fase móvil: A para SFC de CO2 y B para 2-Propanol Gradiente: 75:25 de A:B Caudal: 90 ml/min Preparación de muestra: disuelta en 2-Propanol, 200 mg/ml Inyección: 1 ml por inyección. La resolución por cristalización de la sal tartrato se describe en el siguiente ejemplo para producir el intermedio 113. Intermedio 112 6-metil-3-piperidinacarboxilato de cis-metilo
O O
N H
Se añadió una solución de 1-(fenilmetil)-6-metil-1,3-piperidinadicarboxilato de cis-3-metilo (69 g, 237 mol) en EtOH (50 ml) y EtOAc (300 ml) a una suspensión de Pd al 10%/C (3,7 g) en EtOAc (30 ml) y EtOH (10 ml) en una atmósfera de nitrógeno en un agitador de botella Parr. La mezcla se hidrogenó en una atmósfera de 448,16 kPa (65 psi) a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla se filtró a través de celite y se lavó con EtOAc. El filtrado se concentró al vacío para dar 37 g del compuesto del título en forma de un líquido. LC-MS (ES) m/z = 158 [M+H]+.
Intermedio 113
Sal del ácido L-(+)-tartárico de (3S,6R)-6-metil-3-piperidinacarboxilato de metilo
Una suspensión de ácido L-(+)-tartárico (39 g, 260 mmol, 1,05 equiv.) en IPA (200 ml) y agua (13 ml) se calentó en
5 un baño de agua a 60ºC hasta que se disolvió por completo. A esta solución en agitación caliente se le añadió (3S,6R)-6-metil-3-piperidinacarboxilato de metilo racémico puro (39 g, 248 mmol) seguido de la adición de 25 ml de aclarado de IPA. La mezcla resultante se calentó a 60ºC, dando como resultado una solución transparente que después se enfrió a temperatura ambiente, mientras se retiraba el baño de agua caliente. Esta solución caliente se pipeteó con una muestra de sal del ácido L-(+)-tartárico de (3S,6R)-6-metil-3-piperidinacarboxilato de metilo que
10 tenía una pureza quiral de 98% de ee y se maduró a temperatura ambiente (con el baño de agua retirado) durante 20 minutos. La mezcla se convirtió en una textura oleosa con cristales seminales aún presentes. A la mezcla se le añadieron 5 ml de agua y se calentó en el baño de agua caliente a 43ºC. La mezcla se volvió transparente con los cristales seminales aún presentes. El calentamiento se interrumpió y la mezcla se agitó en el baño de agua caliente. Después de 20 minutos, la mezcla se convirtió gradualmente en una pasta. Después de 10 min más, el baño de
15 agua se retiró y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora más. La pasta se filtró. La torta se lavó con 50 ml de IPA, dando 62 g de sólidos húmedos. Esta torta se recogió en 150 ml de IPA y 8 ml de agua y se agitó en forma de una suspensión mientras se calentaba en un baño de agua a 60ºC (temperatura interna a 55ºC) durante 5 minutos. El calentamiento se interrumpió mientras la mezcla aún se agitaba en el baño de agua caliente. Después de 30 min, la mezcla se filtró. La torta se lavó con 100 ml de IPA. El secado al vacío a temperatura ambiente durante
20 48 horas dio 46,7 g de sólidos. Una muestra analítica se derivatizó para dar el derivado de N-Cbz correspondiente (como en la preparación de intermedio 111), que se determinó por HPLC quiral (métodos usados para analizar la resolución del intermedio 111 anterior) que tenía 85% de ee. Este material se recogió en IPA (420 ml) y agua (38 ml) en forma de una suspensión. La mezcla se calentó en un baño de agua a 65ºC, momento en el que la mezcla se volvió una solución transparente. El baño de calentamiento se retiró. La mezcla se pipeteó y se dejó madurar a
25 temp. ambiente durante 20 horas. Los sólidos formados se filtraron y se lavaron con 100 ml de IPA. Los sólidos recogidos se secaron al vacío a temperatura ambiente durante 24 h y después al vacío a temperatura ambiente durante 24 horas más para dar 28,5 g del compuesto del título. Una muestra analítica se convirtió en el derivado de N-Cbz. Se determinó que el ee era de 97,7%. LC-MS (ES) m/z = 158 [M+H]+.
Intermedio 114
30 4,6-Dicloro-N-metil-2-pirimidinamina
NH
Se cargó metilamina (solución 2 M, 113 ml, 217 mmol, 2,05 equiv.) en un matraz de 3 bocas de 1 l equipado con un agitador magnético y un termómetro. La mezcla se enfrió en un baño de hielo. A esta solución en agitación se le añadió en porciones mediante un embudo de adición una solución de 4,6-dicloro-2-(metilsulfonil)pirimidina (25 g, 110 35 mmol) en EtOAc (250 ml) durante un periodo de 25 minutos. La temp. estaba entre 5-10ºC. Después de que se completara la adición, el baño de hielo se retiró y la mezcla se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. El análisis por LCMS mostró que la conversión se había completado. La suspensión se filtró y se lavó con EtOAc. El filtrado se concentró al vacío. El residuo se repartió entre agua (100 ml) y EtOAc (450 ml). El extracto orgánico se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío para dar sólidos de color blanco, que se
40 trituraron en 150 ml de CH2Cl2. Estos sólidos se recogieron por filtración y se lavaron con CH2Cl2 frío (50 ml). El secado al vacío a temperatura ambiente durante 20 horas y después a alto vacío a temperatura ambiente durante 3 horas dio 9,31 g del compuesto del título en forma de un sólido. LC-MS (ES) m/z = 179 [M+H]+.
Intermedio 115
Ácido (3S,6R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico
OH N
N
NH
Se disolvió sal del ácido L-tartárico de (3S,6R)-6-metil-3-piperidinacarboxilato de metilo (4,0 g, 13,02 mmol) en agua
5 (25 ml) y se añadió LiOH·H2O (1,80 g, 43,0 mmol, 3,3 equiv.). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró que la hidrólisis de éster se había completado. A esta mezcla se le añadieron NaHCO3 (4,81 mg, 57,3 mmol, 4,4 equiv.), 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina (2,32 g, 13,02 mmol, 1 equiv.) y 1,4dioxano (25 ml). La mezcla de reacción se calentó a reflujo a 100ºC durante 24 horas. La mezcla se concentró al vacío. El residuo resultante se suspendió en 40 ml de agua y se añadió HCl 2 N frío hasta alcanzar pH = 3. La
10 mezcla resultante se filtró y los sólidos se lavaron con agua, se secaron al vacío a temperatura ambiente durante 18 horas y después al vacío sobre P2O5 a temperatura ambiente durante 24 horas para dar el compuesto del título (3,23 g) en forma de un sólido. LC-MS (ES) m/z = 285 [M+H]+.
Intermedio 116
(3S,6R)-1-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida
NH N
N
NH 15 A ácido (3S,6R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (880 mg, 3,09 mmol) en CH2Cl2 (15 ml) a temperatura ambiente se le añadieron base de Hunig (1,62 ml, 9,27 mmol, 3 equiv.) y anilina (0,56 ml, 6,18 mmol, 2 equiv.) y la mezcla resultante se enfrió en un baño de hielo. A esta solución en agitación se le añadió en una porción HATU (1,29 g, 3,40 mmol, 1,1 equiv.). La suspensión resultante se agitó en el baño de hielo
20 durante 45 minutos. El análisis por LCMS mostró que la conversión se había completado. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró al vacío. La cromatografía en columna sobre gel de sílice con un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 35% en CHCl3 dio 700 mg del compuesto del título. LC-MS (ES) m/z = 360 [M+H]+.
Intermedio 117
3-(bis{[(1,1-Dimetiletil)oxi]carbonil}amino)-6-bromo-1H-indazol-1-carboxilato de 1,1-dimetiletilo
O
O
O N
O
N N
Br O O
A una suspensión en agitación de 6-bromo-1H-indazol-3-amina (25 g, 118 mmol) y DMAP (0,72 g, al 5% en mol) en CH3CN (400 ml) se le añadió en una porción (Boc)2O (129 g, 589 mmol, 5 equiv.) seguido de calentamiento a 80ºC durante 1 hora y después refrigeración a 45ºC. A la mezcla se le añadieron 30 g más de (Boc)2O. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 minutos y se concentró al vacío. El residuo resultante se repartió entre CH2Cl2 30 (500 ml) y agua (250 ml). El extracto orgánico se lavó con salmuera, se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró al vacío para dar un aceite (95 g), que después la maduración a ta durante 48 horas se convirtió en una suspensión. A esta mezcla se le añadió una pequeña cantidad de hexano y se enfrió en el frigorífico. Los sólidos formados se
recogieron por filtración y se lavaron con hexano frío (100 ml). El secado al vacío a temperatura ambiente dio 37,58 g del compuesto del título en forma de un sólido de color beige. LC-MS (ES) m/z = 512, 514 [M+H]+.
Intermedio 118
3-(bis{[(1,1-Dimetiletil)oxi]carbonil}amino)-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indazol-1-carboxilato de 1,1-dimetiletilo
O
O
O N
O
N OB
N OO O
Una mezcla de 3-(bis{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}amino)-6-bromo-1H-indazol-1-carboxilato de 1,1-dimetiletilo (17,64 g, 34,4 mmol), bis(pinacolato)diboro (10,49 g, 41,3 mmol, 1,2 equiv.), KOAc (8,45 g, 86 mmol, 2,5 equiv.) y aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (1,97 g, 2,41 mmol, 0,07 equiv.) en 1,4-dioxano (270 ml) se desgasificó 4 veces con nitrógeno y 10 se calentó a 100ºC durante 18 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se filtró y se lavó con EtOAc (200 ml). El filtrado se concentró al vacío para dar una espuma de color parduzco oscuro. Este residuo se recogió entre EtOAc (500 ml) y agua (200 ml). La mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se repartió. El extracto orgánico se lavó con salmuera, se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró al vacío. El residuo espumoso de color parduzco oscuro se disolvió en EtOAc (25 ml). A esta solución se le añadieron 800 ml de hexano para precipitar sólidos de
15 color parduzco. La solución turbia se filtró. De nuevo, se desarrollaron partículas en el filtrado, que se filtraron de nuevo. El filtrado resultante de color naranja oscuro se trató con Darco y se filtró a través de celite. El filtrado se volvió una solución de color amarillo claro y se concentró al vacío para dar una espuma. El secado al vacío a temperatura ambiente durante una noche produjo el compuesto del título (17,2 g) en forma de un sólido de color beige. LC-MS (ES) m/z = 560 [M+H]+.
20 Intermedio 119
(3-(bis{[(1,1-Dimetiletil)oxi]carbonil}amino)-1-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-1H-indazol-6-il)(trifluoro)borato potásico (1)
O
O
O N
O
N
+F
NBKF
OF O
Se preparó una solución saturada de KHF2 acuoso recogiendo KHF2 (3,69 g, 14,3 mmol, 3,3 equiv.) en agua (12 ml)
25 y sonicando durante 10 min, dando como resultado una solución ligeramente turbia. La mayor parte de los sólidos entraron en solución. A una solución del 3-(bis{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}amino)-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan-2-il)-1H-indazol-1-carboxilato de 1,1-dimetiletilo (8 g, 3,69 mmol) en CH3OH (30 ml) se le añadió la solución acuosa de KHF2. La mezcla resultante se concentró al vacío y se extrajo con CH3OH (3 x 80 ml). El residuo resultante se secó al vacío a temperatura ambiente durante 18 horas. Este material se recogió en acetona (100 ml) y
30 la suspensión resultante se sonicó y se filtró. El filtrado se concentró al vacío y el residuo se recogió en MTBE (200 ml). La suspensión resultante se sonicó, se filtró y los sólidos se secaron al vacío a temperatura ambiente durante 5 horas para producir el compuesto del título (5,70 g). El análisis por LC-MS mostró la masa del ácido borónico correspondiente. LC-MS (ES) m/z = 478 [M+H]+
Intermedio 120
[6-(2-(Metilamino)-6-{(2R,5S)-2-metil-5-[(fenilamino)carbonil]-1-piperidinil}-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-il]carbamato de 1,1-dimetiletilo
NH
NH N
N
NH
5 Se cargaron (3S,6R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida (570 mg, 1,58 mmol), (3-(bis{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil} amino)-1-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-1H-indazol-6-il)(trifluoro)borato potásico (1-) (1,45 g, 2,69 mmol, 1,7 equiv.), Pd2(dba)3 (109 mg, 0,12 mmol, 0,075 equiv.), triciclohexilfosfina (67 mg, 0,24 mmol, 0,15 equiv.) y K3PO4 (572 mg, 2,69 mmol, 1,7 equiv.) en un vial para microondas de 20 ml seguido de la adición de 1,4-dioxano (12 ml) y agua (4 ml). La mezcla resultante se burbujeó con argón a temperatura ambiente
10 durante 10 minutos seguido de calentamiento a 100ºC durante 18 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la capa orgánica superior se retiró por pipeteo y se filtró a través de celite. El filtrado se concentró al vacío. La purificación del residuo resultante por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de A al 1% en CHCl3 a A al 100% (A era una mezcla de 200/800/3 de CH3OH/CHCl3/NH3 7 N en CH3OH) produjo el compuesto del título (567 mg). LC-MS (ES) m/z = 557 [M+H]+.
15 Ejemplo 77
(3S,6R)-1-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida
NH N
N
NH
Una mezcla de [6-(2-(metilamino)-6-{(2R,5S)-2-metil-5-[(fenilamino)carbonil]-1-piperidinil}-4-pirimidinil)-1H-indazol-3il]carbamato de 1,1-dimetiletilo (530 mg, 0,95 mmol) en CH3OH (15 ml) y HCl conc. (0,5 ml) se calentó a 50ºC 20 durante un total de 6 horas. El residuo se recogió en 5 ml de agua, al que se le añadieron 5 ml de NaHCO3 sat. La suspensión resultante se sonicó y se filtró. Los sólidos de color amarillo recogidos se sometieron a purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando elución de gradiente de A al 1% en CHCl3 a A al 60% en CHCl3 (A era 200/800/20 de CH3OH/ CHCl3/NH4OH). La trituración del residuo obtenida a partir de la cromatografía en MTBE (6 ml) seguido del secado al vacío a 50ºC durante 20 horas produjo el compuesto del título (221 mg) en forma
25 de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 457 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,33 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,82-1,97 (m, 3H), 2,06-2,16 (m, 1H), 2,57-2,65 (m, 1H), 2,98 (s, 3H), 3,15-3,25 (m, 1H), 6,51 (s, 1H), 7,12 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 7,54 (dd, J = 8,5, 1,1 Hz, 1H), 7,60 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 2H), 7,76 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,87 (s, 1H).
Intermedio 121
30 (3S,6R)-1-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida
NH N N NH
A una suspensión de ácido (3S,6R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (3,05 g, 10,71 mmol) en CH2Cl2 (50 ml) a temperatura ambiente se le añadieron base de Hunig (2,70 ml, 15,43 mmol, 1,3 equiv.) y ciclohexilamina (1,60 ml, 14,2 mmol, 1,2 equiv.) y la mezcla resultante se enfrió en un baño de hielo. A esta solución en agitación se le añadió en una porción HATU (4,96 g, 13,1 mmol, 1,1 equiv.) y la suspensión resultante se
5 agitó en el baño de hielo durante 30 minutos. El análisis por LCMS mostró que la conversión se había completado. La mezcla se diluyó con CH2Cl2 (50 ml) y se filtró a través de celite. El filtrado se lavó agua (2 x 25 ml) y después con salmuera. El extracto orgánico se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. La cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 50% en CHCl3 produjo el compuesto del título (4,26 g) en forma de una espuma. LC-MS (ES) m/z = 366 [M+H]+.
10 Intermedio 122
(3S,6R)-1-[6-(4-Ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida
Se cargaron (3S,6R)-1-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida (300 mg,
0,82 mmol), ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (176 mg, 1,07 mmol, 1,3 equiv.), Pd2(dba)3 (56 mg, 0,061 mmol, 15 0,075 equiv.), triciclohexilfosfina (34,5 mg, 0,123 mmol, 0,15 equiv.) y K3PO4 (296 mg, 1,39 mmol, 1,7 equiv.) en un
vial para microondas de 30 ml seguido de la adición de 1,4-dioxano (6 ml) y agua (2 ml). La mezcla se burbujeó con
argón durante 10 minutos y se calentó a 100ºC durante 20 horas. La mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se
concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc (75 ml) y salmuera (20 ml). El extracto orgánico se secó
(Na2SO4), se filtró y se concentró al vacío para dar un residuo. Este material en bruto se purificó por cromatografía 20 en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 100% para
producir el compuesto del título (258 mg). LC-MS (ES) m/z = 451 [M+H]+.
Ejemplo 78
(3S,6R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida
25 A (3S,6R)-1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida (260 mg, 0,58 mmol) en EtOH (10 ml) en forma una suspensión a temperatura ambiente en un vial para microondas se le añadió en una porción hidrazina monohidrato (807 l, 16,7 mmol, 30 equiv.). La mezcla se tapó y se calentó a 100ºC durante 48 horas. Se realizó un proceso duplicado. Las reacciones en bruto de ambos procesos se combinaron y se concentraron al vacío. El residuo se recogió en 10 ml de agua. La suspensión resultante se sonicó brevemente y se
30 filtró. Los sólidos recogidos se secaron al vacío a temperatura ambiente sobre P2O5 durante 18 horas y después a 65ºC al vacío durante 18 horas más para producir el compuesto del título (410 mg) en forma de un sólido de color crema. LC-MS (ES) m/z = 463 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,16-1,32 (m, 3H), 1,29 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,34-1,45 (m, 2H), 1,65-1,68 (m, 1H), 1,76-1,81 (m, 5H), 1,85-1,92 (m, 2H), 1,97-2,05 (m, 1H), 2,35-2,42 (m, 1H), 2,97 (s, 3H), 3,11-3,15 (m, 1H), 3,64-3,70 (m, 1H), 4,45-4,65 (s a, 1H), 4,72-4,92 (s a, 1H), 6,45 (s, 1H), 7,52 (dd, J =
35 8,5, 1,14 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,85 (s, 1H).
Ejemplo 79 (3S,6R)-N-Ciclohexil-1-[6-(1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida
Se cargaron (3S,6R)-1-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida (700 mg,
5 1,91 mmol), 6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indazol (607 mg, 2,50 mmol, 1,3 equiv.), Pd2(dba)3 (131 mg, 0,14 mmol, 0,075 equiv.), triciclohexilfosfina (80 mg, 0,287 mmol, 0,15 equiv.) y K3PO4 (690 mg, 3,25 mmol, 1,7 equiv.) en un vial para microondas de 30 ml seguido de la adición de 1,4-dioxano (12 ml) y agua (4 ml). La mezcla se burbujeó con argón durante 10 minutos y se calentó a 100ºC durante 20 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se concentró al vacío. El residuo resultante se repartió
10 entre EtOAc (50 ml) y salmuera (15 ml). El extracto orgánico se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. La purificación se realizó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de A al 1% en CHCl3 a A al 75% en CHCl3 (A era una mezcla 200/80/800 de CH3OH/NH4OH/CHCl3). La trituración del residuo obtenido a partir de la cromatografía en una mezcla de MTBE (3 ml) y hexano (3 ml) seguido del secado al vacío a 65ºC durante 24 horas produjo el compuesto del título (496 mg) en forma de sólidos. LC-MS (ES) m/z = 448
15 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,20-1,30 (m, 3H), 1,30 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,35-1,48 (m, 2H), 1,64-1,74 (m, 1H), 1,75-1,84 (m, 5H), 1,86-1,94 (m, 2H), 1,96-2,08 (m, 1H), 2,34-2,45 (m, 1H), 2,98 (s, 3H), 3,08-3,18 (m, 1H), 3,64-3,71 (m, 1H), 4,50-4,70 (s a, 1H), 4,75-4,95 (s a, 1H), 6,50 (s, 1H), 7,69 (dd, J = 8,5, 1,1 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,11 (s, 1H).
Intermedio 123
20 (3S,6R)-1-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida
NH
A una suspensión de ácido (3S,6R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (2,2 g, 7,73 mmol) en CH2Cl2 (30 ml) a temperatura ambiente se le añadieron base de Hunig (1,75 ml, 10,04 mmol, 1,3 equiv.) y bencilamina (1,01 ml, 9,27 mmol, 1,2 equiv.) y la mezcla resultante se enfrió en un baño de hielo. A esta solución en
25 agitación se le añadió en una porción HATU (3,23 g, 8,50 mmol, 1,1 equiv.) y la suspensión resultante se agitó en el baño de hielo durante 30 minutos. El análisis por LCMS mostró que la conversión se había completado. La mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se concentró al vacío. La cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 40% en CHCl3 produjo el compuesto del título (3,05 g) en forma de una goma. LC-MS (ES) m/z = 374 [M+H]+.
30 Intermedio 124
(3S,6R)-1-[6-(4-Ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida
NH
Se cargaron (3S,6R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida (300 mg, 0,80 mmol), ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (176 mg, 1,07 mmol, 1,3 equiv.), Pd2(dba)3 (56 mg, 0,061 mmol, 35 0,075 equiv.), triciclohexilfosfina (34,5 mg, 0,123 mmol, 0,15 equiv.) y K3PO4 (296 mg, 1,39 mmol, 1,7 equiv.) en un
vial para microondas de 30 ml seguido de la adición de 1,4-dioxano (6 ml) y agua (2 ml). La mezcla se burbujeó con argón durante 10 minutos y se calentó a 100ºC durante 20 horas. Se realizó un proceso duplicado. La mezcla en bruto de ambos procesos se combinó y se filtró a través de celite y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc (50 ml) y salmuera (15 ml). El extracto orgánico se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. La purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 100% dio el compuesto del título (636 mg) en forma de una espuma. LC-MS (ES) m/z = 459 [M+H]+.
Ejemplo 80
(3S,6R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida
NH 10
Se extrajo (3S,6R)-1-[6-(4-Ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3piperidinacarboxamida (630 mg, 1,37 mmol) con EtOH para retirar cantidades residuales de EtOAc y el residuo se recogió en forma de una suspensión en 25 ml de EtOH. A la mezcla se le añadió hidrazina monohidrato (2,0 ml) a temperatura ambiente en una porción y la mezcla de reacción se calentó a 100ºC a suave reflujo durante 20 horas. 15 Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se suspendió en agua (10 ml) y se filtró. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de A al 1% a A al 70% en CHCl3 (A era una mezcla 200/80/800 de CH3OH/NH4OH/CHCl3). El residuo recogido de la cromatografía se trituró en una mezcla de CHCl3 (1 ml), MTBE (3 ml) y hexano (4 ml). El lavado con hexano y el secado al vacío a 65ºC durante 20 horas produjeron el compuesto del
20 título (457 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 471 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,30 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,77-1,88 (m, 3H), 2,00-2,09 (m, 1H), 2,44-2,52 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 3,14-3,19 (m, 1H), 4,42 (s, 2H), 4,56-4,73 (s a, 1H), 4,76-4,93 (s a, 1H), 6,46 (s, 1H), 7,24-7,38 (m, 5H), 7,51 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,85 (s, 1H).
Ejemplo 81
25 (3S,6R)-1-[6-(1H-Indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida
NH
Se cargaron (3S,6R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida (600 mg, 1,61 mmol), 6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indazol (509 mg, 2,09 mmol, 1,3 equiv.), Pd2(dba)3 (110 mg, 0,12 mmol, 0,075 equiv.), triciclohexilfosfina (68 mg, 0,24 mmol, 0,15 equiv.) y K3PO4 (579 mg, 2,73 mmol, 1,7 30 equiv.) en un vial para microondas de 30 ml seguido de la adición de 1,4-dioxano (12 ml) y agua (4 ml). La mezcla se burbujeó con argón durante 10 minutos y se calentó a 100ºC durante 20 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc (50 ml) y salmuera (15 ml). El extracto orgánico se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. La purificación se realizó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de A al 1% a 35 A al 70% en CHCl3 (A era una mezcla 200/80/800 de CH3OH/NH4OH/CHCl3). La trituración del residuo recogido de la cromatografía en una mezcla de CHCl3 (2 ml), MTBE (3 ml) y hexano (6 ml) seguido del secado al vacío a 65ºC durante 20 horas dio el compuesto del título (526 mg) en forma de un sólido de color amarillento pálido. LC-MS (ES) m/z = 456 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,31 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,75-1,90 (m, 3H), 1,99-2,10 (m, 1H), 2,45-2,55 (m, 1H), 2,97 (s, 3H), 3,10-3,19 (m, 1H), 4,42 (s, 2H), 4,50-4,60 (s a, 1H), 4,75-4,85 (s a, 1H), 6,50 (s, 1H),
40 7,24-7,38 (m, 5H), 7,69 (dd, J = 8,5, 1,1 Hz, 1H), 7,84 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,10 (s, 1H).
Intermedio 125
6-Bromo-3-metil-1H-indazol
H
Una suspensión de 1-(4-bromo-2-fluorofenil)etanona (8,33 g, 38,4 mmol) en 15 ml de hidrazina monohidrato (309
5 mmol, 8 equiv.) se calentó a 120ºC en un condensador de reflujo durante 23 horas. La suspensión resultante (después del enfriado a temperatura ambiente) se filtró. Los sólidos de color blanco se lavaron con agua (2 x 15 ml), se aspiraron al vacío a temperatura ambiente durante 24 horas y después se secaron al vacío a temperatura ambiente sobre P2O5 durante 24 horas para producir el compuesto del título (7,59 g) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 211, 213 [M+H]+.
10 Intermedio 126
3-Metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indazol
N OB
N H O
Una mezcla de 6-bromo-3-metil-1H-indazol (8,32 g, 39,4 mmol), bis(pinacolato)diboro (11,01 g, 43,4 mmol, 1,1 equiv.), acetato potásico (11,61 g, 118 mmol, 3 equiv.) y aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (1,61 g, 1,97 mmol, 0,05 15 equiv.) en 1,4-dioxano (80 ml) se desgasificó y se lavó abundantemente de nuevo con argón. Esta acción se repitió cinco veces. La mezcla se calentó a 100ºC durante 20 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró a través de celite y se aclaró con EtOAc (200 ml). El filtrado se concentró al vacío y el residuo resultante se recogió en EtOAc (200 ml) y salmuera (50 ml) seguido de filtración a través de celite. El filtrado se repartió entre fases y la fase orgánica se trató con Darco y Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se trituró en 30 ml
20 de hexano, la suspensión resultante se filtró y la torta se lavó con hexano (2 x 10 ml). El secado al vacío a temperatura ambiente durante 20 horas produjo el compuesto del título (9,91 g) en forma de un sólido de color rosáceo claro. LC-MS (ES) m/z = 259 [M+H]+.
Ejemplo 82
(3S,6R)-6-Metil-1-[2-(metilamino)-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida
Se cargaron (3S,6R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida (420 mg, 1,17 mmol), 3-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indazol (452 mg, 1,75 mmol, 1,5 equiv.), triciclohexilfosfina (49 mg, 0,175 mmol, 0,15 equiv.), Pd2(dba)3 (80 mg, 0,088 mmol, 0,075 equiv.) y K3PO4 (412 mg, 1,98 mmol, 1,7 equiv.) en un vial para microondas de 30 ml seguido de la adición de 1,4-dioxano (6 ml) y agua (2 30 ml). La mezcla se burbujeó con argón durante 10 minutos seguido de calentamiento a 100ºC durante 20 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró a través de celite y se aclaró con EtOAc (30 ml). El filtrado se concentró al vacío y el residuo resultante se repartió entre EtOAc (30 ml) y salmuera (10 ml). El extracto orgánico se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de A al 1% en CHCl3 a A al 70% en CHCl3 (A era una mezcla 35 800/80/3200 de CH3OH/NH4OH/CHCl3). La trituración del material purificado en una mezcla de CHCl3 (1 ml), MTBE (2 ml) y hexano (6 ml) y el secado al vacío a 65ºC durante 20 horas produjeron el compuesto del título (208 mg) en forma de un sólido de color castaño. LC-MS (ES) m/z = 456 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,33 (d, J = 6,8
Hz, 3H), 1,78-1,96 (m, 3H), 2,05-2,16 (m, 1H), 2,58-2,16 (m, 1H), 2,59 (s, 3H), 2,99 (s, 3H), 3,18-3,27 (m, 1H), 6,53 (s, 1H), 7,12 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 7,60 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,68 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,04 (s, 1H).
Ejemplo 83
(3S,6R)-N-Ciclohexil-6-metil-1-[2-(metilamino)-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxamida
NO
N H
NH N
N
NH Se cargaron (3S,6R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida (440 mg, 1,20 mmol), 3-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indazol (466 mg, 1,80 mmol, 1,5 equiv.), triciclohexilfosfina (50 mg, 0,18 mmol, 0,15 equiv.), Pd2(dba)3 (83 mg, 0,09 mmol, 0,075 equiv.) y K3PO4 (434 mg, 2,04 mmol, 1,7 equiv.) en un vial para microondas de 30 ml seguido de la adición de 1,4-dioxano (4,5 ml) y agua (1,5 ml). La mezcla se burbujeó con argón durante 10 minutos seguido de tapado y calentamiento a 100ºC durante 20 horas. La mezcla se filtró a través de celite y se aclaró con EtOAc (50 ml). El filtrado se concentró al vacío y el residuo se repartió entre EtOAc (50 ml) y salmuera (20 ml). El extracto orgánico se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 100%. Este material purificado se combinó con el producto purificado de un proceso duplicado. El residuo combinado se trituró en una mezcla de CHCl3 (1 ml) y hexano (6 ml). El secado al vacío a 65ºC durante 20 horas produjo el compuesto del título (194 mg) en forma de un sólido de color beige. LC-MS (ES) m/z = 462 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,20-1,34 (m, 3H), 1,30 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,35-1,45 (m, 2H), 1,64-1,71 (m, 1H), 1,73-1,83 (m, 5H), 1,85-1,95 (m, 2H), 1,95-2,07 (m, 1H), 2,35-2,45 (m, 1H), 2,59 (s, 3H), 2,98 (s, 3H), 3,07-3,17 (m, 1H), 3,63-3,73 (m, 1H), 4,45-4,65 (s a, 1H), 6,48 (s, 1H), 7,66 (dd, J = 8,5, 1,1 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,02 (s, 1H).
Ejemplo 84
(3S,6R)-6-Metil-1-[2-(metilamino)-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida
NO
N
N H NH N
N
NH
Se cargaron (3S,6R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida (370 mg, 0,99 mmol), 3-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indazol (383 mg, 1,48 mmol, 1,5 equiv.), triciclohexilfosfina (42 mg, 0,5 mmol, 0,15 equiv.), Pd2(dba)3 (68 mg, 0,07 mmol, 0,075 equiv.) y K3PO4 (357 mg, 1,68 mmol, 1,7 equiv.) en un vial para microondas de 30 ml seguido de la adición de 1,4-dioxano (4 ml) y agua (1,33 ml). La mezcla se burbujeó con argón durante 10 minutos, seguido de tapado y calentamiento a 100ºC durante 20 horas. Esta mezcla se combinó con otra realización partiendo de 200 mg de (3S,6R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida. La mezcla combinada se filtró a través de celite y se aclaró con EtOAc (50 ml). El filtrado se concentró al vacío y el residuo resultante se repartió entre EtOAc (75 ml) y salmuera (20 ml). El extracto orgánico se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de A al 1% en CHCl3 a A al 50% en CHCl3 (donde A era una mezcla 800/80/3200 de CH3OH/NH4OH/CHCl3). La trituración del material purificado en una mezcla de CHCl3 (1 ml) y hexano (6 ml) y el secado al vacío a 65ºC produjeron el compuesto del título (312 mg) en forma de un sólido de color castaño. LC-MS (ES) m/z = 470 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,30 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,75-1,90 (m, 3H), 1,97-2,10 (m, 1H), 2,42-2,54 (m, 1H), 2,59 (s, 3H), 2,97 (s, 3H), 3,10-3,20 (m, 1H), 4,42 (s, 2H), 4,60-4,70 (s a, 1H), 4,75-4,85 (s a, 1H), 6,49 (s, 1H), 7,25-7,37 (m, 5H), 7,65 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,02 (s, 1H).
Intermedio 127
Ácido 4-bromo-2,6-difluorobenzoico
Br
Se añadió gota a gota n-BuLi (220 ml, 550 mmol, 2,5 M) a una solución de diisopropilamina (61 g) en THF (500 ml)
5 con agitación a -50ºC en una atmósfera de N2. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó a -50ºC durante 15 minutos y después se calentó a 0ºC durante 1 hora. La reacción se enfrió a -50ºC y después se añadió gota a gota una solución de 3,5-difluorobromobenceno (96 g, 0,5 mol) en THF (500 ml). Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó a -50ºC durante 2 horas y después se añadió en porciones hielo seco (aproximadamente 200 g). La mezcla resultante se calentó gradualmente a temperatura ambiente y se agitó durante
10 una noche. La mezcla se concentró a presión reducida y el residuo resultante se repartió entre CH2Cl2 (1 l) y agua (1 l). Se añadió una solución acuosa de NaOH para ajustar el pH de la mezcla a 10. La capa orgánica se desechó y la fase de agua se ajustó a pH 2 con una solución de HCl. La mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3 x 400 ml) y los extractos se combinaron, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se evaporaron al vacío para proporcionar el compuesto del título (45 g) en forma de un sólido de color blanco.
15 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 7,61 (m, 2H), 14,1(s a, 1H).
Intermedio 128
4-Bromo-2,6-difluorobenzamida
Br
A una mezcla de ácido 4-bromo-2,6-difluorobenzoico (110 g) y trietilamina (65 g) en THF (1,5 l) a -50ºC se le añadió
20 gota a gota cloroformiato de etilo (60 g). Después de la adición, la mezcla de reacción se calentó a 0ºC y se agitó a esta temperatura durante 1 hora. Se añadió gota a gota amoniaco (2 l, 0,5 M en 1,4-dioxano) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se concentró y el residuo resultante se repartió entre una solución acuosa de HCl 1 N (2 l) y CH2Cl2 (1 l). El sólido resultante se filtró y se lavó con CH2Cl2 para producir el compuesto del título (60 g). La capa orgánica del filtrado se separó, se secó sobre MgSO4, se filtró y
25 se evaporó al vacío para producir otra porción del compuesto del título (50 g). 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6):  7,56 (m, 2H), 7,91 (s, 1H), 8,15 (s, 1H).
Intermedio 129
4-Bromo-2,6-difluorobenzonitrilo
N
30 A una solución en agitación de 4-bromo-2,6-difluorobenzamida (9 5 g) en DMF (1 l) a 0ºC se le añadió lentamente cloruro cianúrico (82 g) y la mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 4 horas. A la reacción se le añadió lentamente agua (5 l) y se extrajo con EtOAc (2 l). La capa orgánica se separó, se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó al vacío para producir el producto en bruto, que se purificó por cromatografía (SiO2, malla de 300-400, éter de petróleo:EtOAc = 200:1) para proporcionar 47 g del compuesto del título puro y 17 g del compuesto del título
35 impuro. 1H RMN (300 MHz, DMSO-d6): 7,90 (m, 2H).
Intermedio 130
2,6-Difluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo
F O B
N O F
Una mezcla de 4-bromo-2,6-difluorobenzonitrilo (40 g), acetato potásico (36 g), bis[(pinacolato)]diboro (51 g, 1,1 equiv.) y Pd(dppf)Cl2 (3,0 g, 0,02 equiv.) en 1,4-dioxano (500 ml) y DMSO (10 ml) se desgasificó, después se cargó de nuevo con nitrógeno 3 veces y después la mezcla se calentó a 100ºC durante una noche en una atmósfera de N2. La mezcla de reacción se evaporó al vacío y el residuo resultante se enfrió con hielo. Se añadió una solución de hidróxido sódico 2 N (1 l) a 0ºC y la mezcla resultante se agitó a esta temperatura durante 20 minutos. La mezcla se filtró y el filtrado se lavó con éter dietílico (1 l). La capa acuosa se ajustó a pH 5 con ácido clorhídrico 5 N a 0ºC y el sólido resultante se recogió y se disolvió en EtOAc (1 l). La solución orgánica resultante se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó al vacío para proporcionar 35 g del producto en bruto. El filtrado se extrajo con EtOAc y la capa de EtOAc se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó al vacío para proporcionar 3 g más del producto en bruto. Los 38 g combinados del producto en bruto se purificaron adicionalmente por destilación a presión reducida (130ºC/2 mmHg)) para producir el compuesto del título (25 g) en forma de un sólido de color blanco.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,31 (s, 12H), 7,49 (m, 2H).
Intermedio 131
Ácido (4-ciano-3,5-difluorofenil)borónico
F HO B
N HO F
Se disolvió 2,6-difluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (55 g) en acetona (1 l) y agua (1 l). A esta mezcla en agitación se le añadieron NaIO4 (160 g) y NH4OAc (5 0 g). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche y después se filtró. El filtrado se evaporó al vacío a 40ºC hasta que se retiró la mayor parte de la acetona. El residuo se enfrió a 0ºC y se añadió una solución 2 N de NaOH (1 l) con agitación durante 30 minutos. La mezcla se filtró y el filtrado se lavó con CH2Cl2 (1 l). A la capa acuosa se añadió ácido clorhídrico 5 N a 0ºC hasta pH = 2. El sólido resultante se filtró y después se disolvió en EtOAc (1,5 l), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se evaporó al vacío para proporcionar 30 g del compuesto del título en forma de un sólido de color blanco.
Intermedio 132
(3S,6R)-1-[6-(4-Ciano-3,5-difluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida
F
Se cargaron (3S,6R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida (600 mg, 1,64 mmol) y ácido (4-ciano-3,5-difluorofenil)borónico (390 mg, 2,13 mmol, 1,3 equiv.), Pd2(dba)3 (113 mg, 0,12 mmol, 0,075 equiv.), triciclohexilfosfina (69 mg, 0,246 mmol, 0,15 equiv.) y K3PO4 (592 mg, 2,79 mmol, 1,7 equiv.) en un tubo cerrado herméticamente seguido de la adición de 1,4-dioxano (12 ml) y agua (4 ml). La mezcla se burbujeó con argón durante 10 minutos, se cerró y se calentó a 100ºC durante 20 horas. La mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se concentró al vacío. El residuo resultante se repartió entre EtOAc (50 ml) y salmuera (15 ml) y la capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. La purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 100% produjo el compuesto del
título (490 mg). LC-MS (ES) m/z = 469 [M+H]+. Ejemplo 85 (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3
piperidinacarboxamida F
NH2
NO
N H
NH N
N
NH 5
Se extrajo (3S,6R)-1-[6-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3piperidinacarboxamida (480 mg, 1,02 mmol) con EtOH para retirar las cantidades residuales de EtOAc y se recogió en forma de una suspensión en 25 ml de EtOH. A la mezcla se le añadió en una porción hidrazina monohidrato (1,5 ml) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se calentó a 100ºC durante 20 horas. Después de enfriar a 10 temperatura ambiente, la mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se concentró al vacío. El residuo resultante se suspendió en agua (10 ml) y se filtró. Los sólidos se secaron al vacío a temperatura ambiente durante 24 horas seguido de lavado con hexano. El secado al vacío a 65ºC durante 20 horas produjo el compuesto del título (438 mg) en forma de un polvo de color crema. LC-MS (ES) m/z = 481 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,16-1,34 (m, 3H), 1,29 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,34-1,50 (m, 2H), 1,62-1,71 (m, 1H), 1,72-1,84 (m, 5H), 1,84-1,95 (m, 2H), 1,96-2,06
15 (m, 1H), 2,32-3,43 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 3,05-3,17 (m, 1H), 3,60-3,72 (m, 1H), 4,47-4,65 (s a, 1H), 4,75-4,90 (s a, 1H), 6,45 (s, 1H), 7,20 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 7,67 (s, 1H).
Intermedio 133
(3S,6R)-1-[6-(4-Ciano-3,5-difluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida
F
NH
20 Se cargaron (3S,6R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida (500 mg, 1,34 mmol) y ácido (4-ciano-3,5-difluorofenil)borónico (318 mg, 1,74 mmol, 1,3 equiv.), Pd2(dba)3 (92 mg, 0,10 mmol, 0,075 equiv.), triciclohexilfosfina (56 mg, 0,20 mmol, 0,15 equiv.) y K3PO4 (483 mg, 2,27 mmol, 1,7 equiv.) en un vial para microondas de 30 ml seguido de la adición de 1,4-dioxano (10 ml) y agua (3,3 ml). La mezcla se burbujeó con argón durante 10 minutos y se calentó a 100ºC durante 20 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la
25 mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se concentró al vacío. El residuo resultante se repartió entre EtOAc (50 ml) y salmuera (15 ml) y la capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. La purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 100% produjo el compuesto del título (470 mg) en forma de una goma de color amarillo/verdoso . LC-MS (ES) m/z = 477 [M+H]+.
30 Ejemplo 86 (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3piperidinacarboxamida
F
NH
5 Se extrajo (3S,6R)-1-[6-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3piperidinacarboxamida (460 mg, 0,97 mmol) con EtOH para retirar las cantidades residuales de EtOAc y el residuo resultante se recogió en forma de una suspensión en 20 ml de EtOH. A la mezcla se le añadió en una porción hidrazina monohidrato (2,0 ml) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se calentó a 100ºC a suave reflujo durante 20 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla se filtró y el filtrado se concentró al vacío.
10 El residuo resultante se suspendió en agua (10 ml) y se filtró. La purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de A al 1% en CHCl3 a A al 70% en CHCl3 (donde A era una mezcla 200/80/800 de CH3OH/NH4OH/CHCl3) y la trituración del residuo recogido a partir de la cromatografía en una mezcla de CHCl3 (2 ml), MTBE (2 ml) y hexano (4 ml) produjeron el compuesto del título (318 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 489 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,30 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,74-1,88 (m, 3H),
15 1,98-2,10 (m, 1H), 2,42-2,52 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 3,10-3,19 (m, 1H), 4,42 (s, 2H), 4,55-4,70 (s a, 1H), 4,75-4,90 (s a, 1H), 6,46 (s, 1H), 7,18-7,37 (m, 6H), 7,67 (s, 1H).
Intermedio 134
3-Etil 2-cloro-5-metil-1H-pirrol-1,3-dicarboxilato de 1-(1,1-dimetiletilo)
O
20 A una solución en agitación de 2-cloro-5-metil-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo (11 g, 58,6 mmol) y DMAP (358 mg, 2,93 mmol, 0,05 equiv.) en CH3CN (77 ml) a temperatura ambiente se le añadió en una porción (Boc)2O (14,07 g, 64,5 mmol). La mezcla se convirtió gradualmente de una suspensión a una solución transparente de color rosáceo. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. El análisis por LCMS mostró que la conversión se había completado. La mezcla se concentró al vacío para dar un aceite. Este material se combinó con el producto en bruto
25 de otra realización partiendo de 1 g de 2-cloro-5-metil-1H-pirrol-3-carboxilato de etilo. La mezcla combinada se concentró al vacío y el residuo resultante se repartió entre CH2Cl2 (150 ml) y agua (30 ml). El extracto orgánico se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío para dar un aceite (20 g). Este producto en bruto se pasó a través de una columna de gel de sílice, eluyendo con EtOAc al 10%, para producir, después de la concentración al vacío, 18 g del compuesto del título en forma de un aceite transparente. LC-MS (ES) m/z = 288 [M+H]+.
30 Intermedio 135
3-Etil 5-metil-1,3-pirrolidinadicarboxilato de 1-(1,1-dimetiletilo)
Se añadió 3-etil 2-cloro-5-metil-1H-pirrol-1,3-dicarboxilato de 1-(1,1-dimetiletilo) (3 g, 10,4 mmol) en 30 ml de EtOH a una suspensión de Pt al 5%/C (tipo Degussa, 0,5 g) en 10 ml de EtOH en una atmósfera de nitrógeno en una Botella 5
Parr pequeña. La mezcla se hidrogenó en una atmósfera de hidrógeno a una presión de 413,68 kPa (60 psi) a temperatura ambiente. Las muestras de LCMS se tomaron a 1,5 h y a 5,5 h. No se completó. La hidrogenación a temperatura ambiente en una atmósfera de 413,68 kPa (60 psi) se continuó durante 18 h más. El análisis por LCMS mostró que aún quedaba 21% de material de partida y el producto era en su mayor parte el análogo descloro a M+H+ a 254 (el anillo pirrol estaba intacto). La mezcla se lavó abundantemente 3 veces con N2 y se filtró a través de filtros de microdiscos. El filtrado se trató con 1 g de Darco, se agitó en un baño de agua caliente (60ºC) durante unos minutos y se filtró. El filtrado se combinó con el material que se indica a continuación para otra realización de hidrogenación.
Se disolvió 3-etil 2-cloro-5-metil-1H-pirrol-1,3-dicarboxilato de 1-(1,1-dimetiletilo) (15 g) en 100 ml de EtOH, se trató con 3 g de Darco y se calentó en un baño de agua (60ºC) durante 5 min. La mezcla se filtró. El filtrado se combinó con el material anterior y se concentró al vacío hasta alcanzar un volumen de aproximadamente 100 ml. Esta mezcla se añadió a una suspensión de 4,5 g de Pt al 5%/C en 10 ml de EtOH en una Botella Parr en una atmósfera de N2. La mezcla se hidrogenó en una atmósfera de 413,68 kPa (60 psi) a ta durante 18 h. El análisis por LCMS mostró aún la presencia del derivado descloro. La mezcla se filtró a través de celite. El filtrado se trató con 4 g de Darco y se filtró de nuevo. El filtrado se concentró al vacío para dar un aceite transparente (17 g). La RMN confirmó la presencia del producto descloro ya que se detectaron 2 señales aromáticas. La proporción del producto completamente reducido deseado frente a descloro era 4/1 por RMN. El aceite cogió un color amarillento pálido después de un periodo de reposo a temperatura ambiente durante 30 min. Este material se recogió en 200 ml de EtOH y se sometió a hidrogenación de nuevo en presencia de 5 g de Pt al 5%/C a 413,68 kPa (60 psi) a temperatura ambiente durante 24 h más. El gas hidrógeno se retiró y la mezcla se almacenó en nitrógeno a ta durante 2 días.
El análisis por LCMS mostró que no quedaba descloropirrol. La mezcla se filtró a través de celite y se concentró al vacío para dar el producto (15,4 g). El análisis por RMN mostró que había algunas impurezas, mientras que el análisis por LCMS no pudo determinarlo. El análisis por TLC mostró 2 manchas (gel de sílice, hexano/EtOAc (4/1)). Una muestra de 1,5 g se cromatografió sobre sílice. La mancha más polar era el material deseado (una mezcla de los isómeros cis y trans, 0,75 g). Se realizaron dos realizaciones de cromatografía de 9 g usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en hexano a EtOAc al 30% en hexano para dar 9,54 g del compuesto del título en forma de un aceite. El resultado de una realización a pequeña escala previo sugirió que era una mezcla 3:1 de los isómeros cis/trans. LC-MS (ES) m/z = 280 [M+Na]+.
Intermedio 136
Ácido 1-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-5-metil-3-pirrolidinacarboxílico
O
Se agitó 3-etil 5-metil-1,3-pirrolidinadicarboxilato de 1-(1,1-dimetiletilo) (1,0 g, 3,89 mmol, una mezcla estimada de
3:1 de isómeros cis/trans) y LiOH·H2O (228 mg, 5,44 mmol, 1,4 equiv.) en THF (5 ml) y agua (2 ml) como una mezcla de dos fases a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se concentró al vacío y el residuo resultante se recogió en 15 ml de agua, se acidificó con HCl 2 N frío y se extrajo con 2 x 50 ml de EtOAc. El extracto orgánico se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío para producir el compuesto del título (1,03 g) en forma de un aceite. LC-MS (ES) m/z = 230 [M+H]+.
Intermedio 137
2-Metil-4-{[(fenilmetil)amino]carbonil}-1-pirrolidinacarboxilato de 1,1-dimetiletilo
A una solución de ácido 1-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-5-metil-3-pirrolidinacarboxílico (0,9 g, 3,93 mmol) en CH2Cl2 (15 ml) a temperatura ambiente se le añadieron en una porción base de Hunig (0,89 ml, 5,10 mmol, 1,3 equiv.) y 10
bencilamina (0,56 ml, 5,10 mmol, 1,3 equiv.). La mezcla resultante se enfrió en un baño de hielo seguido de la adición en una porción de HATU (1,64 g, 4,32 mmol, 1,1 equiv.) y la mezcla de reacción se agitó en el baño de hielo durante 30 minutos. La mezcla se filtró a través de celite y se aclaró con CH2Cl2. El filtrado se lavó con agua y se secó sobre Na2SO4 seguido de filtración y concentración al vacío. El residuo resultante se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice dando como resultado 1,70 g del compuesto del título en forma de un aceite. La proporción de los isómeros cis/trans no pudo determinarse. LC-MS (ES) m/z = 319 [M+H]+.
Intermedio 138
Cis-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-3-pirrolidinacarboxamida
O
N Cl N H
N
N
NH A una solución en agitación de 2-metil-4-{[(fenilmetil)amino]carbonil}-1-pirrolidinacarboxilato de 1,1-dimetiletilo (3,93 mmol, teórico, 1,70 g del anterior) en CH2Cl2 (6 ml) a temperatura ambiente se le añadió en una porción TFA (2 ml, 26 mmol, 6,6 equiv.) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. El análisis por LCMS mostró que la escisión de Boc se había completado. La mezcla se concentró al vacío para dar un aceite en forma de la sal TFA. A este aceite, disuelto en 1,4-dioxano (10 ml), se le añadió agua (8 ml) seguido de NaHCO3 (1,65 g, 19,65 mmol, 5 equiv.). Después de que disminuyera la formación de espuma, se añadió en una porción 4,6-dicloroN-metil-2-pirimidinamina (0,80 g, 4,49 mmol, 1,14 equiv.) y la mezcla resultante se calentó en un baño de aceite a 100ºC a suave reflujo durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró sólo una pequeña cantidad del producto formado. La comprobación del pH mostró que era sólo de 3 (usando papel de pH). A la mezcla se le añadieron 5 ml de NaHCO3 acuoso saturado y la mezcla se calentó a 100ºC durante 20 horas más, dando como resultado una suspensión. Después de enfriar a temperatura ambiente, la suspensión se filtró. Los sólidos recogidos se lavaron con EtOAc y se secaron al vacío para dar 644 mg del compuesto del título en forma del isómero cis puro. LC-MS (ES) m/z = 360 [M+H]+.
Intermedio 139
Cis-1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-3-pirrolidinacarboxamida
N O N
FN
H
N
N
NH Se cargaron (3S,5R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-3-pirrolidinacarboxamida racémica (100 mg, 0,28 mmol), ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (60 mg, 0,36 mmol, 1,3 equiv.), triciclohexilfosfina (12 mg, 0,043 mmol, 0,15 equiv.), Pd2(dba)3 (20 mg, 0,022 mmol, 0,075 equiv.) y K3PO4 (101 mg, 0,48 mmol, 1,7 equiv.) en un vial para microondas de 20 ml seguido de la adición de 1,4-dioxano (3 ml) y agua (1 ml). La mezcla se burbujeó con argón durante 15 minutos seguido del tapado y el calentamiento a 100ºC durante 21 horas. Esta mezcla en bruto se combinó con otra realización partiendo de 300 mg de (3S,5R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metilN-(fenilmetil)-3-pirrolidinacarboxamida racémica. La mezcla combinada se filtró a través de celite y la torta se aclaró con EtOAc (100 ml). El filtrado se concentró al vacío y el residuo resultante se recogió en 25 ml de agua, se sonicó brevemente y se filtró. Los sólidos de color oscuro se lavaron con agua y se secaron al vacío durante 1 hora. Se realizó un intento para disolver estos sólidos en CHCl3, EtOAc y CH3OH, pero siempre quedaba una pequeña cantidad de residuo. El residuo se comprobó por LCMS para determinar si era el producto puro deseado. Este residuo de color oscuro se recogió por filtración y se disolvió en CHCl3 con una pequeña cantidad de MeOH (al 2% en volumen, aproximadamente 100 ml de disolvente usado en total) para dar una solución oscura, que se filtró a través de celite. El filtrado se concentró al vacío y el residuo de color amarillento resultante se secó al vacío para dar 142 mg del compuesto del título. El filtrado orgánico anterior (lavados de CHCl3, EtOAc y CH3OH combinados) se concentró al vacío. La trituración de EtOAc (6 ml) y el secado al vacío dieron 220 mg más del compuesto del título.
El filtrado de la trituración se sometió a cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de A al 1% en CHCl3 a A al 50% en CHCl3 (A era una mezcla 800/80/3200 de CH3OH/NH4OH/CHCl3), dando como
resultado 192 mg más del compuesto del título en forma de un residuo de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 445 [M+H]+. Ejemplo 87 cis-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-3-pirrolidinacarboxamida
A una suspensión de (3S,5R)-1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-3pirrolidinacarboxamida racémica (360 mg total, 0,81 mmol) en EtOH (50 ml) a temperatura ambiente se le añadió en una porción hidrazina monohidrato (2 ml). La suspensión se calentó en un baño de aceite a 100ºC durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró que aún quedaba 40% de material de partida. A la mezcla se le añadieron 2 ml de hidrazina monohidrato seguido de calentamiento a 100ºC durante 24 h más. El análisis por LCMS mostró que la conversión se había completado. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de celite. El filtrado se concentró al vacío y el residuo resultante se recogió en 8 ml de agua para formar una suspensión, que se sonicó brevemente. La mezcla se filtró. Los sólidos recogidos se combinaron con otra realización partiendo de 190 mg de (3S,5R)-1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-3-pirrolidinacarboxamida racémica. Los productos en bruto combinados se purificaron por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de A al 1% en CHCl3 a A al 75% en CHCl3. A era una mezcla 800/80/3200 de CH3OH/NH4OH/ CHCl3. La trituración del material purificado en una mezcla de CHCl3 (2 ml) y hexano (8 ml) seguido del secado al vacío a 65ºC durante 14 horas produjo el compuesto del título (228 mg) en forma de un polvo de color beige. LC-MS (ES) m/z = 457 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,42 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 2,00-2,06 (m, 1H), 2,52-2,58 (m, 1H), 2,99 (s, 3H), 3,00-3,10 (m, 1H), 3,68-3,73 (m, 1H), 3,95-4,10 (s a, 1H), 4,21-4,33 (s a, 1H), 4,394,47 (m, 2H), 6,23 (s, 1H), 7,25-7,37 (m, 5H), 7,52 (dd, J = 8,5, 1,1 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,85 (s, 1H).
Intermedio 140
3-Morfolinacarboxamida
Una mezcla de ácido 4-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-3-morfolinacarboxílico (2,86 g, 12,4 mmol), EDC (2,83 g, 14,7 mmol) y HOBt (1,25 g, 7,36 mmol) en DMF (50 ml) se agitó durante aproximadamente 5 minutos. Después, se añadieron cloruro de amonio (2,09 g, 39,1 mmol) y trietilamina (8,5 ml, 61,0 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno durante 18 horas. Después, la mezcla se vertió en agua (100 ml) y se extrajo con Et2O (3 x 50 ml). Los extractos se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío. Las capas acuosas combinadas se extrajeron adicionalmente con CH2Cl2 (3 x 75 ml) y los extractos se secaron (Na2SO4), se filtraron, se combinaron con los extractos de Et2O y se concentraron al vacío. El residuo se agitó en CH2Cl2 (50 ml) y TFA (10 ml) a temperatura ambiente durante una hora y después se concentró al vacío. Se añadió Et2O y la mezcla se agitó vigorosamente durante 3 días. El precipitado se recogió por filtración al vacío para dar una sal de TFA del compuesto del título (2,31 g, aprox. puro al 90%) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 131 [M+H]+.
Intermedio 141
4-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-3-morfolinacarboxamida
NH2
Una mezcla de 3-morfolinacarboxamida (830 mg, 3,40 mmol), 2-amino-4,6-dicloropirimidina (502 mg, 3,06 mmol) y
5 base de Hunig (1,6 ml, 9,16 mmol) en CH3CN (12 ml) se agitó a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 40 horas. La mezcla se diluyó con EtOAc (100 ml) y se lavó con NaHCO3 acuoso saturado (2 x 50 ml) y salmuera (50 ml). Las fases acuosas combinadas se extrajeron adicionalmente con CH2Cl2 (3 x 50 ml) y EtOAc (3 x 50 ml). Todas las fases orgánicas se combinaron, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (34 g de SiO2, gradiente de CH2Cl2 a 90/10/1 de
10 CH2Cl2/CH3OH/NH4OH) para dar el compuesto del título (394 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 258, 260 [M+H]+.
Intermedio 142
4-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-morfolinacarboxamida
NH2
NH2
15 Una mezcla de 4-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-3-morfolinacarboxamida (390 mg, 1,51 mmol), Pd(PPh3)4 (91 mg, 0,08 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (285 mg, 1,73 mmol) en 1,4-dioxano (6 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (2 ml) se agitó a 95ºC en una atmósfera de argón en un tubo cerrado herméticamente durante 18 horas. La mezcla se enfrió, se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado (25 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml). Los extractos se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó
20 por cromatografía sobre gel de sílice (34 g, SiO2, gradiente de CH2Cl2 a 90/10/1 de CH2Cl2/CH3OH/NH4OH) para dar el compuesto del título (360 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 343 [M+H]+.
Ejemplo 88
4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-morfolinacarboxamida
NH2
NH2
O
O
NN
N H
N
N
NH2
25 Una mezcla de 4-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-morfolinacarboxamida (360 mg, 1,05 mmol) e hidrazina monohidrato (2,58 ml, 52,6 mmol) en etanol (10 ml) se agitó a 90ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 16 horas. La mezcla se enfrió y se diluyó con agua. Los intentos de extraer el producto del agua usando 90/10 de CH2Cl2/IPA no tuvieron éxito, por lo que la fase acuosa se combinó con el residuo de las extracciones concentradas de CH2Cl2/IPA y la mezcla se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de
30 sílice (68 g SiO2, gradiente de CHCl3 a 80/20/2 de CHCl3/CH3OH/NH4OH con un mantenimiento de 10 minutos a 90/10/1 de CHCl3/CH3OH/NH4OH) para dar el compuesto del título (40 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 355 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  3,29-3,41 (m, 1H), 3,41-3,50 (m, 1H), 3,61 (dd, J = 11,6, 3,5 Hz, 1H), 3,85-3,93 (m, 1H), 3,99-4,18 (s a, 1H), 4,35 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,82-5,08 (s a, 1H), 5,39 (s, 2H), 6,12 (s, 2H), 6,55 (s, 1H), 7,19 (s, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,57 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,95 (s, 1H), 11,54 (s, 1H).
Intermedio 143
Metanosulfonato de [(2S,5R)-4-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-2-morfolinil]metilo
O N Cl
ON
N
S
O O NH2
Se añadieron gota a gota trietilamina (0,65 ml, 4,69 mmol) y cloruro de metanosulfonilo (0,34 ml, 4,36 mmol) a una solución de [(2S,5R)-4-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-2-morfolinil]metanol (1,00 g, 3,88 mmol) en CH2Cl2 (35 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno. Después de 75 minutos, se añadió
10 gota a gota una porción más de cada uno de trietilamina (0,16 ml, 1,16 mmol) y cloruro de metanosulfonilo (0,076 ml, 0,97 mmol) y la agitación se continuó durante 30 minutos más. Después, la mezcla de reacción se vertió en NaHCO3 acuoso saturado (100 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 75 ml). Los extractos se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para dar el compuesto del título (1,53 g, pureza de aproximadamente 85%) en forma de una espuma de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 337, 339 [M+H]+.
15 Intermedio 144
4-[(2S,5R)-2-(Azidometil)-5-metil-4-morfolinil]-6-cloro-2-pirimidinamina
NH2
Una mezcla de metanosulfonato de [(2S,5R)-4-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-2-morfolinil]metilo en bruto (1,53 g, aproximadamente puro al 85%, 3,88 mmol) y azida sódica (0,382 g, 5,88 mmol) en DMF (75 ml) se agitó a 20 80ºC en una atmósfera de nitrógeno durante 20,5 horas. Después, se añadió una porción más de azida sódica (0,094 g, 1,45 mmol) y la agitación se continuó a 80ºC durante 6,5 horas más. Después, la mezcla se enfrió, se diluyó con EtOAc (200 ml), se lavó con agua (2 x 150 ml) y salmuera (1 x 150 ml), se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (60 g de SiO2, gradiente de 1:1 de hexanos/CH2Cl2 a 45:45:10 de hexanos/CH2Cl2/CH3CN) para dar el compuesto del título (890 mg) en forma de un
25 aceite espeso incoloro. LC-MS (ES) m/z = 284, 286 [M+H]+.
Intermedio 145
4-[(2R,5R)-2-(Aminometil)-5-metil-4-morfolinil]-6-cloro-2-pirimidinamina
NH2
Una suspensión de 4-[(2S,5R)-2-(azidometil)-5-metil-4-morfolinil]-6-cloro-2-pirimidinamina (890 mg, 3,14 mmol) y Pd
30 al 10%/C (95 mg, 0,09 mmol) en etanol (35 ml) se agitó en una atmósfera de hidrógeno durante 1,5 horas y después se filtró a través de una capa de celite. El filtrado se concentró al vacío para dar el compuesto del título (778 mg, pureza de aproximadamente 85%) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 258, 260 [M+H]+.
Intermedio 146
4-{2-Amino-6-[(2R,5R)-2-(aminometil)-5-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
Una mezcla de 4-[(2R,5R)-2-(aminometil)-5-metil-4-morfolinil]-6-cloro-2-pirimidinamina (0,809 g, 3,14 mmol) y ácido
5 (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (1,038 g, 6,29 mmol) en 1,4-dioxano (30 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (10 ml) se desgasificó con nitrógeno durante 10 minutos. Después, se añadió Pd(PPh3)4 (0,185 g, 0,16 mmol) y la mezcla se agitó a la temperatura de reflujo en una atmósfera de nitrógeno durante 16 horas. Después, la mezcla se enfrió, se inactivó lentamente con HCl 1 M (75 ml) y después se lavó con EtOAc (2 x 75 ml). Después, la fase acuosa se neutralizó con NaHCO3 acuoso saturado, se llevó a aproximadamente pH 10 con Na2CO3 acuoso saturado y
10 después se extrajo con 90/10 de CH2Cl2/IPA (3 x 100 ml). Los extractos se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (40 g de SiO2, gradiente de CH2Cl2 a 90/10/1 de CH2Cl2/CH3OH/NH4OH). Las fracciones de producto se concentraron y se destilaron azeotrópicamente unas veces con CH3CN para dar el compuesto del título (642 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 343 [M+H]+.
15 Intermedio 147
N-({(2R,5R)-4-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)benzamida
Se añadieron trietilamina (48 l, 0,34 mmol) y cloruro de benzoílo (31 l, 0,27 mmol) a una solución de 4-{2-amino-6[(2R,5R)-2-(aminometil)-5-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (77 mg, 0,23 mmol) en THF (5 ml) y la
20 mezcla se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno durante 30 minutos. La mezcla se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado (15 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). Los extractos se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para dar el compuesto del título (115 mg) en forma de un cristal de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 447 [M+H]+.
Ejemplo 89
25 N-({(2R,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)benzamida
O NH2
Una mezcla de N-({(2R,5R)-4-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)benzamida en bruto (0,23 mmol, valor teórico) e hidrazina monohidrato (0,25 ml, 5,14 mmol) en etanol (3 ml) se agitó a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 15 horas. La mezcla se enfrió, se vertió en NaHCO3 acuoso saturado (15 30 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). Los extractos se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por HPLC Gilson de fase inversa (CH3CN/agua con TFA al
0,1%). Las fracciones de producto se concentraron al vacío, se recogieron en una pequeña cantidad de CH3OH y se añadió a NaHCO3 acuoso saturado (25 ml). Esta mezcla se extrajo con 90/10 de CH2Cl2/IPA (3 x 25 ml) y los extractos se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para producir el compuesto del título (47 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 459 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,19
5 (d, J = 6,8 Hz, 3 H), 2,73-2,91 (m, 1H), 3,39-3,55 (m, 2H), 3,57-3,71 (m, 2H), 3,73-3,83 (m, 1H), 4,08-4,74 (s a, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,14 (s, 2H), 6,57 (s, 1H), 7,45-7,51 (m, 2H), 7,51-7,60 (m, 2H), 7,72 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,95 (s, 1H), 8,68 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 11,53 (s, 1H).
Intermedio 148
N-({(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)bencenosulfonamida
N O N
FO
NH N
N
S
O NH2
10 Se añadieron trietilamina (0,05 ml, 0,36 mmol) y cloruro de bencenosulfonilo (0,04 ml, 0,31 mmol) a una solución de 4-{2-amino-6-[(2R,5R)-2-(aminometil)-5-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (99 mg, 0,29 mmol) en THF (3 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno durante 45 minutos. La mezcla se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado (10 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). Los extractos se
15 lavaron con salmuera (15 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para dar el compuesto del título en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 483 [M+H]+.
Ejemplo 90
N-({(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)bencenosulfonamida
NH2
O N
N
N O
H
NH N
N
S
O NH2
20 Una mezcla de N-({(2S,5R)-4-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-2morfolinil}metil)bencenosulfonamida en bruto (0,29 mmol, valor teórico) e hidrazina monohidrato (0,28 ml, 5,78 mmol) en etanol (3 ml) se agitó a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 17 horas. La mezcla se concentró al vacío y el residuo se purificó por HPLC Gilson de fase inversa (CH3CN/agua con TFA al 0,1%). Las fracciones de producto se combinaron y se concentraron al vacío, se recogieron en EtOAc (15 ml) y un poco de
25 CH3OH, se lavaron con NaHCO3 acuoso saturado (2 x 10 ml) y salmuera (10 ml), después se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para producir el compuesto del título (59 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 495 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,12 (d, J = 6,3 Hz, 3 H), 2,65-2,80 (m, 1H), 2,86-3,04 (m, 2H), 3,34-3,43 (m, 1H), 3,47-3,59 (m, 1H), 3,65-3,75 (m, 1H), 3,85-4,75 (s a, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,13 (s, 2H), 6,52 (s, 1H), 7,56 (dd, J = 8,6, 1,0 Hz, 1H), 7,58-7,68 (m, 3H), 7,69-7,74 (m, 1H), 7,85 (dd, J = 7,6, 1,7
30 Hz, 2H), 7,88-7,97 (m, 2H), 11,53 (s, 1H).
Intermedio 149
N-({(2R,5R)-4-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)-2,2-dimetilpropanamida
N O N
F O NH N
N NH2
Se añadieron trietilamina (0,05 ml, 0,36 mmol) y cloruro de pivaloílo (0,04 ml, 0,33 mmol) a una solución de 4-{2amino-6-[(2R,5R)-2-(aminometil)-5-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (99 mg, 0,29 mmol) en THF (5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno durante 45 minutos. La mezcla se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado (10 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). Los extractos se lavaron con salmuera (15 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para dar el compuesto del título en forma de una espuma de color amarillo (154 mg, aproximadamente puro al 75%). LC-MS (ES) m/z = 427 [M+H]+.
Ejemplo 91
N-({(2R,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)-2,2-dimetilpropanamida
NH2
O
N
N
N
H
O
NH N
N
NH2
Una mezcla de N-({(2R,5R)-4-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)-2,2dimetilpropanamida en bruto (0,29 mmol, valor teórico) e hidrazina monohidrato (0,28 ml, 5,78 mmol) en etanol (3 ml) se agitó a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 17 horas. La mezcla se concentró al vacío y el residuo se purificó por HPLC Gilson de fase inversa (CH3CN/agua con TFA al 0,1%). Las fracciones de producto se combinaron y se concentraron al vacío, se recogieron en EtOAc (15 ml), se lavaron con NaHCO3 acuoso saturado (2 x 10 ml) y salmuera (10 ml), después se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para producir el compuesto del título (81 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 439 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,13 (s, 9H), 1,17 (d, J = 6,6 Hz, 3 H), 2,64-2,84 (m, 1H), 3,20-3,30 (m, 2H), 3,42-3,52 (m, 1H), 3,63 (dd, J = 11,4, 2,5 Hz, 1H), 3,77 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 3,98-4,79 (s a, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,12 (s, 2H), 6,50 (s, 1H), 7,53 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,63 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 11,53 (s, 1H).
Ejemplo 92
({(2R,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)carbamato de metilo
NH2
O
NN
N
H
O
NH N
N
O NH2
Se añadió gota a gota cloroformiato de metilo (16 l, 0,21 mmol) a una mezcla de 4-{2-amino-6-[(2R,5R)-2(aminometil)-5-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (65 mg, 0,19 mmol) y trietilamina (40 l, 0,29 mmol) en THF (2 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno. Después de 1,5 horas, se añadió gota a gota una porción más de cloroformiato de metilo (10 l, 0,13 mmol) y la agitación se continuó durante 30 more minutos. Después, la mezcla se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado (10 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). Los extractos se lavaron con salmuera (15 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para dar el carbamato de metilo. El carbamato en bruto se disolvió en CH3OH (2 ml), se añadió hidrazina monohidrato (185 l, 3,81 mmol) y la mezcla se agitó a 80ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 16 horas. La mezcla se concentró al vacío y el residuo se purificó por HPLC Gilson de fase inversa (CH3CN/agua con TFA al 0,1%). Las fracciones de producto se combinaron y se concentraron al vacío, se recogieron en EtOAc (15 ml), se lavaron con NaHCO3 acuoso saturado (2 x 10 ml) y salmuera (10 ml), después se
5 secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para producir el compuesto del título (35 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 413 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,16 (d, J = 6,6 Hz, 3 H), 2,65-2,83 (m, 1H), 3,13-3,24 (m, 2H), 3,39-3,48 (m, 1H), 3,55 (s, 3H), 3,58-3,68 (m, 1H), 3,76 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 4,01-4,71 (s a, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,14 (s, 2H), 6,56 (s, 1H), 7,34 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 7,57 (dd, J = 8,4, 1,1 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,95 (s, 1H), 11,53 (s, 1H).
10 Intermedio 150
N-({(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)metanosulfonamida
N O N
FO
NH N
N
S
O NH2
Se añadieron trietilamina (41 L, 0,30 mmol) y cloruro de metanosulfonilo (21 l, 0,27 mmol) a una solución de 4-{2amino-6-[(2R,5R)-2-(aminometil)-5-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (85 mg, 0,25 mmol) en THF (3
15 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno durante 30 minutos. La mezcla se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado (10 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). Los extractos se lavaron con salmuera (15 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para dar el compuesto del título (108 mg, aproximadamente puro al 90%) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 421 [M+H]+.
Ejemplo 93
20 N-({(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)metanosulfonamida
NH2
O
N N O
H
NH N
N
S
O NH2
Una mezcla de N-({(2S,5R)-4-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-2morfolinil}metil)metanosulfonamida en bruto (0,25 mmol, valor teórico) e hidrazina monohidrato (0,24 ml, 4,95 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml) se agitó a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 17 horas. La mezcla se 25 concentró al vacío y el residuo se purificó por HPLC Gilson de fase inversa (CH3CN/agua con TFA al 0,1%). Las fracciones de producto se concentraron al vacío, se recogieron en EtOAc (25 ml), se lavaron con NaHCO3 acuoso saturado (2 x 15 ml) y salmuera (15 ml), después se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para producir el compuesto del título (29 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 433 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,18 (d, J = 6,6 Hz, 3 H), 2,72-2,88 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 3,09-3,22 (m, 2H),
30 3,45-3,55 (m, 1H), 3,67 (dd, J = 11,4, 2,5 Hz, 1H), 3,79 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 4,04-4,75 (s a, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,14 (s, 2H), 6,56 (s, 1H), 7,23 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 7,57 (dd, J = 8,6, 1,0 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,94 (s, 1H), 11,53 (s, 1H).
Intermedio 151
N-({(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)ciclohexanosulfonamida N O
N
FO
NH N
N
S
O NH2
Se añadieron trietilamina (41 l, 0,30 mmol) y cloruro de ciclohexanosulfonilo (44 l, 0,27 mmol) a una solución de 4
5 {2-amino-6-[(2R,5R)-2-(aminometil)-5-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (85 mg, 0,25 mmol) en THF (3 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno durante 22 horas. El análisis por LC-MS indicó sólo una conversión de aproximadamente 25%, por lo que se añadió más cantidad de trietilamina (0,15 ml, 1,08 mmol) y cloruro de ciclohexanosulfonilo (0,15 ml, 1,03 mmol) y la agitación se continuó a temperatura ambiente durante 26 horas más. Después, la mezcla se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado (25 ml) y se extrajo
10 con EtOAc (3 x 15 ml). Los extractos se lavaron con salmuera (15 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para dar el compuesto del título en bruto (180 mg, aproximadamente puro al 45% de acuerdo con LC-MS) en forma de una espuma de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 489 [M+H]+.
Ejemplo 94
N-({(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)ciclohexanosulfonamida
NH2
O N
N
N O
H
NH N
N
S
O NH2
Una mezcla de N-({(2S,5R)-4-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-2morfolinil}metil)ciclohexanosulfonamida en bruto (0,2 mmol, valor teórico) e hidrazina monohidrato (0,30 ml, 6,20 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml) se agitó a 120ºC en el microondas durante 2 horas. La mezcla se concentró al vacío y el residuo se purificó por HPLC Agilent de fase inversa (CH3CN/agua con TFA al 0,1%) para dar una sal TFA del 20 compuesto del título (17 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 501 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6, se añadieron varios miligramos de Na2CO3 para formar la base libre):  1,06-1,43 (m, 5H), 1,17 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,58-1,69 (m, 1H), 1,73-1,85 (m, 2H), 2,00-2,12 (m, 2H), 2,72-2,88 (m, 1H), 2,94-3,05 (m, 1H), 3,07-3,22 (m, 2H), 3,40-3,51 (m, 1H), 3,65 (dd, J = 11,2, 2,4 Hz, 1H), 3,79 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 3,98-4,73 (s a, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,13 (s, 2H), 6,55 (s, 1H), 7,19-7,31 (m, 1H), 7,56 (dd, J = 8,4, 0,9 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,3 Hz, 1H),
25 7,94 (s, 1H), 11,53 (s, 1H).
Intermedio 152
4-(Fenilmetil)-2-morfolinacarbonitrilo
Un reactor de 500 ml en una atmósfera de nitrógeno se cargó sucesivamente con tolueno (50 ml) y 2-cloro-2
30 propenonitrilo (14,26 ml, 179 mmol) a 25ºC y después se añadió 2-[(fenilmetil)amino]etanol (25,4 ml, 179 mmol) durante 15 minutos. La mezcla de reacción se agitó posteriormente a 25ºC durante 16 horas. La mezcla se diluyó con tolueno (100 ml), se enfrió a -5ºC y se añadió lentamente terc-butóxido potásico (20,04 g, 179 mmol) en THF (90 ml) durante 30 minutos, manteniendo la temperatura de -5ºC a 0ºC. La mezcla se agitó posteriormente de aproximadamente -5ºC a 0ºC durante 1 hora, después se inactivó mediante la adición de agua (150 ml) y la mezcla se dejó calentar a 25ºC. El producto acuoso se extrajo con EtOAc (4 x 150 ml), se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (36 g) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 203 [M+H]+.
Intermedio 153
Ácido 4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxílico O
Se disolvió 4-(fenilmetil)-2-morfolinacarbonitrilo (36 g, 178 mmol) en tolueno (150 ml) y se extrajo con una solución al 18% de ácido clorhídrico (240 ml, 1424 mmol). La fase acuosa se calentó a reflujo durante 1,5 horas y después la mezcla se dejó en agitación a 25ºC durante 4 horas. La mezcla se filtró y el sólido se aclaró con ácido clorhídrico 6 N
10 (60 ml) y se secó al vacío para producir una sal HCl del compuesto del título (29 g) en forma de un sólido de color gris. LC-MS (ES) m/z = 222 [M+H]+.
Intermedio 154
N-[2-(4-Clorofenil)-2-oxoetil]-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida
15 A una mezcla de ácido 4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxílico (1,61 g, 7,28 mmol) y DMF (0,1 ml) en CH2Cl2 (70 ml) se le añadió cloruro de oxalilo (0,956 ml, 10,92 mmol) a 25ºC. La mezcla se agitó a esta temperatura durante 1 hora y la mezcla se volvió transparente. El disolvente y el exceso de cloruro de oxalilo se retiraron al vacío y el residuo resultante se disolvió en CH2Cl2 (70 ml). Se añadieron 2-amino-1-(4-clorofenil)etanona (1,5 g, 7,28 mmol) y trietilamina (4,06 ml, 29,1 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante una noche. Se añadió agua (80 ml) para
20 interrumpir la reacción. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (2 x 80 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaHCO3 ac. sat. (80 ml) y después con salmuera (2 x 80 ml), se secaron (MgSO4) y se evaporaron para conseguir 3,4 g de un residuo de color amarillo, que se cromatografió (EtOAc-éter de petróleo, 1:1) para producir el compuesto del título (2,5 g). LC-MS (ES) m/z = 373 [M+H]+.
Intermedio 155
25 2-[4-(4-Clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(fenilmetil)morfolina
Cl
Una mezcla de N-[2-(4-clorofenil)-2-oxoetil]-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida (3,3 g, 8,85 mmol) y trifluoroacetato de amonio (5,27 g, 44,3 mmol) se calentó a 150ºC durante 20 minutos. Después de un periodo de refrigeración, a la mezcla resultante se le añadieron agua (50 ml) y CH2Cl2 (50 ml). La capa orgánica se separó y se
30 lavó con salmuera, se secó (MgSO4) y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (2,8 g). LC-MS (ES) m/z = 354 [M+H]+.
Intermedio 156
2-[4-(4-Clorofenil)-1H-imidazol-2-il]morfolina
Se hidrogenó 2-[4-(4-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(fenilmetil)morfolina (2,8 g, 7,91 mmol) en etanol (30 ml) sobre
5 Pd/C (al 10% en peso, 0,842 g, 0,791 mmol). A la mezcla se le añadieron 0,2 ml de ácido clorhídrico concentrado. Después de la agitación a temperatura ambiente durante una noche, el catalizador se retiró por filtración. El filtrado se concentró para conseguir 2,9 g del residuo, que se purificó por HPLC preparativa para producir el compuesto del título (200 mg) en forma de un sólido pálido. LC-MS (ES) m/z = 264 [M+H]+.
Intermedio 157
10 4-Cloro-6-{2-[4-(4-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-2-pirimidinamina
Una solución de 2-[4-(4-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]morfolina (322 mg, 1,22 mmol), 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (200 mg, 1,220 mmol) y base de Hunig (531 l, 3,05 mmol) en etanol (6,1 ml) se calentó a 85ºC durante una noche. La mezcla se evaporó y se cromatografió (PE-EtOAc, 2:3) para producir el compuesto del título (220 mg). LC-MS (ES)
15 m/z = 391 [M+H]+.
Intermedio 158
4-(2-Amino-6-{2-[4-(4-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo
NH2
Una mezcla de 4-cloro-6-{2-[4-(4-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-2-pirimidinamina (300 mg, 0,767 mmol), 2
20 fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (246 mg, 0,997 mmol), Na2CO3 (203 mg, 1,917 mmol) y Pd(PPh3)4 (89 mg, 0,077 mmol) en 1,4-dioxano (6 ml) y agua (2 ml) se calentó a 140ºC en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. La mezcla se filtró, se lavó con EtOAc (150 ml), se evaporó y después se cromatografió para producir el compuesto del título (305 mg). LC-MS (ES) m/z = 476 [M+H]+.
Ejemplo 95 6-(2-Amino-6-{2-[4-(4-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina NH2 O
N N
H
N
N H NN
Cl
N
NH2
Una mezcla de 4-(2-amino-6-{2-[4-(4-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo (155
5 mg, 0,326 mmol) e hidrazina (1,033 ml, 32,6 mmol) en etanol (4 ml) se calentó a 120ºC en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. El disolvente se evaporó para conseguir 200 mg del residuo, que se purificó por HPLC preparativa para producir el compuesto del título (19 mg) en forma de un polvo de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 488 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  3,32-3,08 (m, 2H), 3,72 (t, J = 11,2 Hz, 1H), 4,064,01 (m, 1H), 4,31-4,34 (m, 1H), 4,61 (d, J = 14,0 Hz, 1H), 4,72 (s a, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,20 (s, 2H), 6,75 (s, 1H), 7,39
10 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,76-7,46 (m, 3H), 7,81 (d, J = 8,4 Hz 2H), 7,99 (s,1H), 11,53 (s, 1H), 12,41 (s, 1H).
Intermedio 159
N-[(1R,2R)-2-Hidroxiciclohexil]-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida
O
A una mezcla de ácido 4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxílico (5 g, 22,60 mmol) y DMF (0,1 ml) en CH2Cl2 (113 ml) se
15 le añadió cloruro de oxalilo (2,97 ml, 33,9 mmol) a 25ºC. La mezcla se agitó a esta temperatura durante 1 hora y la mezcla se volvió transparente. El disolvente y el exceso de cloruro de oxalilo se retiraron al vacío y el residuo resultante se disolvió en CH2Cl2 (113 ml). Se añadieron (1R,2R)-2-aminociclohexanol (2,60 g, 22,60 mmol) y trietilamina (12,60 ml, 90 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante una noche. Se añadió agua (80 ml) para interrumpir la reacción. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (2 x 80 ml). Los
20 extractos orgánicos combinados se lavaron con NaHCO3 (ac.) sat. (80 ml), después con salmuera (2 x 80 ml), se secaron (MgSO4) y se evaporaron para producir el compuesto del título (5,3 g). LC-MS (ES) m/z = 319 [M+H]+.
Intermedio 160
N-[(1R)-2-Oxociclohexil]-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida
O
25 Una suspensión de N-[(1R,2R)-2-hidroxiciclohexil]-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida (5,0 g, 15,7 mmol) y clorocromato de piridinio (PCC) (4,06 g, 18,84 mmol) en CH2Cl2 (79 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de una capa de gel de sílice y se lavó con EtOAc para conseguir el producto en bruto (4,0 g). La purificación se realizó por cromatografía en columna (EtOAc-PE, de 2:1 a 2:0) para producir el compuesto del título (0,7 g). LC-MS (ES) m/z = 317 [M+H]+.
30 Intermedio 161
2-[4-(Fenilmetil)-2-morfolinil]-4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol
N
Una mezcla de N-[(1R)-2-oxociclohexil]-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida (1,1 g, 3,48 mmol) y trifluoroacetato de amonio (2,069 g, 17,38 mmol) se calentó a 150ºC durante 20 minutos. Después de un periodo de refrigeración, a la mezcla se le añadieron agua (30 ml) y CH2Cl2 (50 ml). La capa orgánica se separó y se lavó con salmuera, se secó (MgSO4) y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (0,78 g). LC-MS (ES) m/z = 298 [M+H]+.
Intermedio 162
2-(2-Morfolinil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol
H
10 Se hidrogenó 2-[4-(fenilmetil)-2-morfolinil]-4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol (0,78 g, 2,62 mmol) en etanol (30 ml) en presencia de Pd/C (al 10% en peso, 0,279 g, 0,262 mmol). A la mezcla de reacción se le añadieron 0,2 ml de ácido clorhídrico concentrado. Después de agitar a temperatura ambiente durante una noche, el catalizador se retiró por filtración. El filtrado se concentró para producir el compuesto del título (0,8 g) en forma de un aceite de color
15 amarillo. LC-MS (ES) m/z = 208 [M+H]+.
Intermedio 163
4-Cloro-6-[2-(4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina
NH2
Una solución de 2-(2-morfolinil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol (0,8 g, 3,86 mmol), 4,6-dicloro-2-pirimidinamina
20 (0,633 g, 3,86 mmol) y base de Hunig (1,681 ml, 9,65 mmol) en etanol (19,3 ml) se calentó a 85ºC durante una noche. La mezcla se concentró y se cromatografió (eluyente EtOAc + NH4OH) para producir el compuesto del título (200 mg). LC-MS (ES) m/z = 335 [M+H]+.
Intermedio 164
4-{2-Amino-6-[2-(4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
Una mezcla de 4-cloro-6-[2-(4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina (208 mg, 0,623
5 mmol), 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (200 mg, 0,809 mmol), Na2CO3 (165 mg, 1,557 mmol) y Pd(PPh3)4 (72 mg, 0,062 mmol) en 1,4-dioxano (6 ml) y agua (2 ml) se calentó a 140ºC en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. La mezcla se filtró, se lavó con EtOAc (150 ml), se evaporó y se cromatografió (PE-EtOAc, 3:1) para producir el compuesto del título (150 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 420 [M+H]+ .
10 Ejemplo 96
6-{2-Amino-6-[2-(4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
NH2
O
N N
H
N
N H NN
N
NH2
Una mezcla de 4-{2-amino-6-[2-(4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2fluorobenzonitrilo (150 mg, 0,358 mmol) e hidrazina (1,13 ml, 35,8 mmol) en etanol (4 ml) se calentó a 120ºC en 15 condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. El disolvente se evaporó para conseguir 200 mg del residuo, que se purificó por HPLC preparativa para producir el compuesto del título (42 mg) en forma de un polvo de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 432 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,71 (s, 4H), 2,42 (s, 2H), 3,12-2,99 (m, 2H), 3,66 (dt, J = 11,6 Hz, 2,4 Hz, 1H), 4,00 (dd, J = 11,6 Hz, 2,0 Hz, 1H), 4,33-4,30 (m, 1H), 4,44 (dd, J = 10,8 Hz, 2,4 Hz, 1H), 4,62 (s a, 1H), 5,28 (s, 2H), 6,18 (s, 2H), 6,66 (s, 1H), 7,61 (dd, J = 8,4 Hz, 0,8 Hz, 1H), 7,71 (d, J =
20 8,4 Hz, 1H), 7,97 (s, 1H), 11,51 (s, 1H), 11,68 (s, 1H).
Intermedio 165
Bromuro de 1-(2-oxo-2-feniletil)-3,5,7-triaza-1-azoniatriciclo[3,3,1,13,7]decano
Se añadió 2-bromo-1-feniletanona (2,0 g, 10,05 mmol) a una solución de hexametilenotetramina (1,409 g, 10,05
25 mmol) en CHCl3 (60 ml) y la mezcla resultante se calentó a 50ºC durante 1 hora. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y el precipitado blanco se recogió por filtración, se lavó con CHCI3 y se secó al vacío para producir el compuesto del título (3,3 g) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 259 [M+H]+.
Intermedio 166
2-Amino-1-feniletanona
O
Se suspendió bromuro de 1-(2-oxo-2-feniletil)-3,5,7-triaza-1-azoniatriciclo[3,3,1,13,7]decano (3,3 g, 9,73 mmol) en
5 una mezcla de etanol (50 ml) y ácido clorhídrico (4,93 ml, 58,4 mmol) y se calentó a reflujo en etanol (50 ml) durante 1,5 horas. La mezcla se enfrió a 0ºC, se filtró y se lavó con etanol (30 ml). La fase orgánica se evaporó para producir una sal HCl del compuesto del título (1,7 g) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 136 [M+H]+.
Intermedio 167
10 N-(2-Oxo-2-feniletil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida
Se añadió cloruro de oxalilo (1,187 ml, 13,56 mmol) a una suspensión de ácido 4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxílico (2,0 g, 9,04 mmol) en CH2Cl2 (70 ml) a 0ºC en 10 minutos y la mezcla resultante se agitó a 25ºC durante 2 horas. La mezcla se concentró, y el residuo resultante se trató con CH2Cl2 (70 ml), trietilamina (2,77 ml, 19,89 mmol) y 2
15 amino-1-feniletanona (1,551 g, 9,04 mmol) a 0ºC. La mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 3 horas. Se añadió agua (150 ml) y la mezcla acuosa resultante se extrajo con EtOAc (3 x 80 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. El residuo resultante se purificó por cromatografía sobre gel de sílice para producir el compuesto del título (1,0 g) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 339 [M+H]+.
20 Intermedio 168
2-(4-Fenil-1H-imidazol-2-il)-4-(fenilmetil)morfolina
Una mezcla de N-(2-oxo-2-feniletil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida (850 mg, 2,51 mmol) y trifluoroacetato de amonio (1317 mg, 10,05 mmol) se calentó a 150ºC en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. Al
25 residuo se le añadió agua (150 ml) y se extrajo con EtOAc (200 ml). La capa orgánica se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (1,3 g) en forma de un aceite de color pardo. Este material se combinó con un extracto más del compuesto del título en bruto (250 mg) y se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando como eluyente EtOAc (1600 ml) en hexanos (400 ml) para producir el compuesto del título (900 mg, 2,82 mmol) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 320 [M+H]+.
30 Intermedio 169
2-(4-Fenil-1H-imidazol-2-il)morfolina
Se añadió paladio sobre carbono (al 10% en peso, 300 mg, 0,282 mmol) a una solución de 2-(4-fenil-1H-imidazol-2
il)-4-(fenilmetil)morfolina (900 mg, 2,82 mmol) y HCl acuoso al 36% (0,713 ml, 8,45 mmol) en CH3OH (50 ml) en una atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno a 25ºC durante 1,5 horas. La mezcla se filtró, se lavó con metanol (150 ml) y se concentró para producir una sal HCl del compuesto del título (600 mg) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 230 [M+H]+.
Intermedio 170
4-Cloro-6-[2-(4-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina
NH2
Una solución de 2-(4-fenil-1H-imidazol-2-il)morfolina (550 mg, 2,07 mmol), 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (339 mg, 2,07 mmol) y base de Hunig (0,901 ml, 5,17 mmol) en etanol (80 ml) se calentó a 85ºC durante 5 horas. La mezcla se
10 concentró para producir el compuesto del título en bruto (850 mg) en forma de un aceite de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 357 [M+H]+.
Intermedio 171
4-{2-Amino-6-[2-(4-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
N O
H
N
N
F NN
N
NH2
15 Una mezcla de 4-cloro-6-[2-(4-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina, 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo en bruto (765 mg, 3,10 mmol), Na2CO3 (631 mg, 5,96 mmol) y Pd(PPh3)4 (275 mg, 0,238 mmol) en 1,4-dioxano (6 ml) y agua (2 ml) se calentó a 140ºC en condiciones de microondas con agitación durante 1,0 hora. La mezcla se filtró, se lavó con EtOAc (150 ml) y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (1,3 g) en forma de un sólido de color amarillo. Este material se combinó con un
20 extracto más del compuesto del título en bruto (100 mg). El material combinado se lavó con EtOAc (150 ml) y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando EtOAc en éter de petróleo de 50% a 70% para producir el compuesto del título (400 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 442 [M+H]+.
Ejemplo 97
25 6-{2-Amino-6-[2-(4-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
NH2
O
N N
H
N
N H NN
N
NH2
Una mezcla de 4-{2-amino-6-[2-(4-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (310 mg, 0,702 mmol) e hidrazina (2,5 ml, 79 mmol) en etanol (4 ml) se calentó en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. La mezcla se concentró para producir el compuesto del título en bruto (400 mg) en forma de un sólido de 30 color amarillo. Este material se combinó con un extracto más del compuesto del título en bruto (100 mg). El material combinado se lavó con CH2Cl2 (2 x 8 ml) y se secó al vacío. El residuo resultante se purificó por HPLC Prep. usando CH3CN en agua (hidrogenocarbonato de amonio al 0,5% en agua) de 25% a 30% para producir el compuesto del título (220 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 454 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSOd6): 3,08-3,14 (m, 1H), 3,18-3,24 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 4,04-4,07 (m, 1H), 4,30-4,34 (m, 1H), 4,59-4,64 (m, 1H),
4,73-4,75 (m, 1H), 5,39 (s, 2H), 6,21 (s, 2H), 6,71 (s, 1H), 7,16-7,20 (m, 1H), 7,31-7,36 (m, 2H), 7,61-7,63 (m, 2H), 7,71 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,99 (s, 1H), 11,53 (s, 1H), 12,33-12,62 (m, 1H).
Intermedio 172
2-Amino-1-(3-clorofenil)etanona
O Cl
Se añadió 2-bromo-1-(3-clorofenil)etanona (2,0 g, 8,57 mmol) a una solución de hexametilenotetramina (1,201 g, 8,57 mmol) en CHCl3 (60 ml) y la mezcla resultante se calentó a 55ºC durante 1 hora. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y el precipitado de color blanco se recogió por filtración, se lavó con CHCI3 y se secó al vacío para producir 3,1 g. Este sólido de color blanco se suspendió en una mezcla de etanol (50 ml) y ácido clorhídrico
10 (0,25 ml, 8,30 mmol) y se calentó a 105ºC durante 1,5 horas. La mezcla se enfrió a 0ºC, se filtró y se lavó con etanol (30 ml). La fase orgánica se concentró para producir una sal HCl del compuesto del título (1,74 g) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 170 [M+H]+.
Intermedio 173
N-[2-(3-Clorofenil)-2-oxoetil]-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida
Cl
Se añadió cloruro de oxalilo (1,32 ml, 15,03 mmol) a la suspensión de ácido 4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxílico (2,218 g, 10,02 mmol) y DMF (0,155 ml, 2,005 mmol) en CH2Cl2 (100 ml) a 0ºC en 10 minutos y la mezcla resultante se agitó a 25ºC durante 2 horas. La mezcla se concentró y el residuo resultante se disolvió en CH2Cl2 (100 ml) y trietilamina (3,07 ml, 22,05 mmol). A la solución de color pardo se le añadió 2-amino-1-(3-clorofenil)etanona (1,7 g,
20 10,02 mmol) a 0ºC y la mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 3 horas. A la mezcla de reacción se le añadió agua (150 ml) y la mezcla acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), se filtraron y se evaporaron. El residuo resultante se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando como eluyente EtOAc al 50% en éter de petróleo para producir el compuesto del título (800 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 373 [M+H]+.
25 Intermedio 174
2-[4-(3-Clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(fenilmetil)morfolina
Cl
Una mezcla de N-[2-(3-clorofenil)-2-oxoetil]-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida (350 mg, 0,939 mmol) y trifluoroacetato de amonio (615 mg, 4,69 mmol) se agitó durante 2,5 horas a 150ºC. Al residuo se le añadió agua
30 (150 ml) y la mezcla acuosa se extrajo con EtOAc (200 ml). La fase orgánica se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (320 mg) en forma de un aceite de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 354 [M+H]+.
Intermedio 175
2-[4-(3-Clorofenil)-1H-imidazol-2-il]morfolina
Se añadió paladio sobre carbono (al 10% en peso, 208 mg, 0,195 mmol) a una solución de 2-[4-(3-clorofenil)-1H
5 imidazol-2-il]-4-(fenilmetil)morfolina (690 mg, 1,950 mmol) y ácido clorhídrico (0,823 ml, 9,75 mmol) en CH3OH (50 ml) en una atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno a 25ºC durante 1,5 horas. La mezcla se filtró lavando con CH3OH (150 ml) y se concentró para producir la sal HCl en bruto del compuesto del título (600 mg) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 264 [M+H]+.
Intermedio 176
10 4-Cloro-6-{2-[4-(3-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-2-pirimidinamina
NH2
Una solución de 2-[4-(3-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]morfolina (600 mg, 2,0 mmol), 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (328 mg, 2,0 mmol) y base de Hunig (0,870 ml, 5,00 mmol) en etanol (80 ml) se calentó durante una noche a 85ºC. La mezcla de reacción se filtró y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (1,1 g) en forma de un
15 aceite de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 391 [M+H]+.
Intermedio 177
4-(2-Amino-6-{2-[4-(3-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo
N Cl
O
H N N
F NN
N
NH2
Una mezcla de 4-cloro-6-{2-[4-(3-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-2-pirimidinamina (1,1 g, 2,81 mmol), 2
20 fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (0,903 g, 3,65 mmol), Na2CO3 (0,745 g, 7,03 mmol) y Pd(PPh3)4 (0,325 g, 0,281 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) y agua (1 ml) se calentó a 140ºC en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. La mezcla de reacción se filtró, se lavó con acetato de etilo (100 ml) y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (310 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 476 [M+H]+.
25 Ejemplo 98
6-(2-Amino-6-{2-[4-(3-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina
NH2 Cl
O
H
N
N
N N
H NN
N
NH2
Una mezcla de 4-(2-amino-6-{2-[4-(3-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo (310 mg, 0,651 mmol) e hidrazina (1,03 ml, 32,6 mmol) en etanol (4 ml) se calentó en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. La mezcla se concentró y el residuo resultante se purificó por HPLC Prep. usando CH3CN en agua (10 mmol de hidrogenocarbonato de amonio en agua) de 40% a 60% en 9 minutos para producir el
5 compuesto del título (96 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 488 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 3,07-3,15 (m, 1H), 3,17-3,23 (m, 1H), 3,69-3,75 (m, 1H), 4,04-4,06 (m, 1H), 4,30-4,34 (m, 1H), 4,60-4,64 (m, 1H), 4,72-4,75 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,20 (s, 2H), 6,71 (s, 1H), 7,21-7,30 (m, 1H), 7,34-7,47(m, 1H), 7,60-7,63 (m, 1H), 7,69-7,72 (m, 1H), 7,74-7,76 (m, 2H), 7,83-7,85 (m, 1H), 7,99 (s, 1H), 11,52 (s, 1H), 12,43-12,70 (m, 1H).
10 Intermedio 178
2-Azido-1-[4-(metiloxi)fenil]etanona
O
Una mezcla de 2-bromo-1-[4-(metiloxi)fenil]etanona (3,5 g, 15,28 mmol) y azida sódica (1,490 g, 22,92 mmol) en THF (40 ml) y agua (13,33 ml) se agitó a 25ºC durante 2 horas. La mezcla se diluyó con agua (150 ml), se extrajo
15 con Et2O (3 x 100 ml), se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (3,0 g) en forma de un sólido de color rosa. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  3,87 (s, 3H), 4,83 (s, 2H), 7,07 (d, 2H), 7,93 (d, 2H).
Intermedio 179
2-Amino-1-[4-(metiloxi)fenil]etanona
O
20 Se añadió paladio sobre carbono (al 10% en peso, 1,67 g, 1,57 mmol) a una solución de 2-azido-1-[4(metiloxi)fenil]etanona (3,0 g, 15,69 mmol) y ácido clorhídrico (6,62 ml, 78 mmol) en CH3OH (90 ml) en una atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno durante una noche a 25ºC. La mezcla se filtró, se lavó con EtOAc (150 ml) y se concentró para producir una sal HCl del compuesto del título
25 (3,0 g) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 166 [M+H]+.
Intermedio 180
N-{2-[4-(Metiloxi)fenil]-2-oxoetil}-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida
Se añadió cloruro de oxalilo (2,385 ml, 27,2 mmol) a una suspensión de ácido 4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxílico
30 (4,02 g, 18,16 mmol) y DMF (0,703 ml, 9,08 mmol) en CH2Cl2 (100 ml) a 0ºC en 10 minutos y la mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 2 horas. La mezcla se concentró y el residuo resultante se disolvió en CH2Cl2 (100 ml) y trietilamina (5,57 ml, 40,0 mmol). A la solución de color pardo se le añadió 2-amino-1-[4-(metiloxi)fenil]etanona (3,0 g, 18,16 mmol) a 0ºC y la mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 3 horas. A la mezcla de reacción se le añadió agua (150 ml) y la mezcla acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron
35 (Na2SO4), se filtraron y se evaporaron para producir el compuesto del título (3,4 g) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 369 [M+H]+.
Intermedio 181
2-{4-[4-(Metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-(fenilmetil)morfolina
Una mezcla de N-{2-[4-(metiloxi)fenil]-2-oxoetil}-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida (2,5 g, 6,79 mmol) y
5 trifluoroacetato de amonio (4,45 g, 33,9 mmol) se agitó durante 2,5 horas a 150ºC. Al residuo se le añadió agua (150 ml) y la mezcla acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 80 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron para producir el compuesto del título (2,3 g) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 350 [M+H]+.
Intermedio 182
10 2-{4-[4-(Metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}morfolina
Se añadió paladio sobre carbono (al 10% en peso, 0,700 g, 0,658 mmol) a una solución de 2-{4-[4-(metiloxi)fenil]1H-imidazol-2-il}-4-(fenilmetil)morfolina (2,3 g, 6,58 mmol) y ácido clorhídrico (2,78 ml, 32,9 mmol) en CH3OH (80 ml) en una atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno a 25ºC durante 1,5
15 horas. La mezcla de reacción se filtró, se lavó con CH3OH (150 ml) y se concentró para producir una sal HCl del compuesto del título (1,9 g) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 260 [M+H]+.
Intermedio 183
4-Cloro-6-(2-{4-[4-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-morfolinil)-2-pirimidinamina
NH2
20 Una solución de 2-{4-[4-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}morfolina (1,9 g, 6,42 mmol), 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (1,053 g, 6,42 mmol) y base de Hunig (2,8 ml, 16,1 mmol) en etanol (80 ml) se calentó durante una noche a 85ºC. La mezcla de reacción se concentró y el residuo resultante se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando como eluyente EtOAc al 40% en CH2Cl2 para producir el compuesto del título (1,8 g) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 387 [M+H]+.
25 Intermedio 184
4-[2-Amino-6-(2-{4-[4-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-morfolinil)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo
N O
H N NO
F NN
N
NH2
Una mezcla de 4-cloro-6-(2-{4-[4-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-morfolinil)-2-pirimidinamina (1,0 g, 2,59 mmol), 2fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (0,83 g, 3,36 mmol), Na2CO3 (0,685 g, 6,46 mmol) y 30 Pd(PPh3)4 (0,30 g, 0,26 mmol) en 1,4-dioxano (8 ml) y agua (2 ml) se calentó a 140ºC en condiciones de microondas
con agitación durante 1 hora. La mezcla de reacción se filtró, se lavó con acetato de etilo (100 ml) y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando EtOAc/éter de petróleo (3:1) para producir el compuesto del título (675 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 472 [M+H]+.
Ejemplo 99
5 6-[2-Amino-6-(2-{4-[4-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH2
O
H
NNN NO
H NN
N
NH2
Una mezcla de 4-[2-amino-6-(2-{4-[4-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-morfolinil)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo (350 mg, 0,742 mmol) e hidrazina (1,18 ml, 37,1 mmol) en etanol (4 ml) se calentó en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. La mezcla se concentró. Se añadió etanol (15 ml) al residuo resultante y la mezcla
10 resultante se calentó a 85ºC durante 20 minutos, después se filtró mientras estaba caliente y se secó al vacío para producir el compuesto del título (115 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 484 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  3,09-3,15 (m, 1H), 3,19-3,25 (m, 1H), 3,69-3,77 (m, 4H), 4,02-4,05 (m, 1H), 4,29-4,36 (m, 1H), 4,56-4,62 (m, 1H), 4,72 (s, 1H), 5,39 (s, 2H), 6,21 (s, 2H), 6,71 (s, 1H), 6,89-6,98 (m, 2H), 7,217,68 (m, 1H), 7,60-7,65 (m, 1H), 7,68-7,72 (m, 3H), 7,99 (s, 1H), 11,52 (s, 1H), 12,22-12,48 (m, 1H).
15 Intermedio 185
6-Bromo-4-fluoro-1H-indazol-3-amina
F
H
Se realizaron cinco extracciones de la siguiente reacción en secuencia en un reactor de microondas: A un vial para microondas de 5 ml se le añadieron 4-bromo-2,6-difluorobenzonitrilo (3 g, 13,76 mmol), hidrazina (0,864 ml, 27,5 20 mmol), base de Hunig (4,81 ml, 27,5 mmol) y etanol (10 ml). El vial se tapó y se agitó durante 10 minutos a 150ºC en un microondas reactor. La mezcla de reacción se enfrió (baño de agua enfriado con hielo) y se formó un precipitado de color amarillo. Los precipitados de color amarillo se recogieron, se combinaron y los sólidos se lavaron con etanol frío para producir vástagos de color amarillo pálido del compuesto del título (13,0 g). LC-MS (ES) m/z = 230 y 232
(1:1 de intensidad) [M+H]+.
25 Intermedio 186
N-Acetil-N-(1-acetil-6-bromo-4-fluoro-1H-indazol-3-il)acetamida
O
A un matraz de fondo redondo de 100 ml se le añadieron 6-bromo-1H-indazol-3-amina (8 g, 34,8 mmol) y anhídrido acético (49,2 ml, 522 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 120ºC durante el fin de semana. El análisis por
30 LCMS después de este tiempo indicó una mezcla estimada 2:1 de productos de tris-acilados a bis-acilados. El anhídrido acético se retiró al vacío y el residuo se disolvió en acetona y se cargó en seco sobre sílice. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (EtOAc al 0-40%/hexanos, columna de 80 g) para producir el compuesto del título (8,7 g) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 356 y 358 (1:1 de intensidad) [M+H]+.
Intermedio 187
N-Acetil-N-[1-acetil-4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indazol-3-il]acetamida O
O F N
N O N
B O
O
Un matraz de fondo redondo de 500 ml se cargó con N-acetil-N-(1-acetil-6-bromo-4-fluoro-1H-indazol-3-il)acetamida
5 (10,7 g, 30,0 mmol), bis(pinacolato)diboro (7,63 g, 30,0 mmol), acetato potásico (7,37 g, 75 mmol), aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (2,453 g, 3,00 mmol) y 1,4-dioxano (100 ml) y se colocó en una atmósfera de nitrógeno. La reacción se agitó a 100ºC en una placa caliente agitadora durante una noche. El dioxano se retiró al vacío y el residuo se repartió entre CH2Cl2 (300 ml) y agua (100 ml). El producto acuoso se extrajo con CH2Cl2 (2 x 100 ml) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4. Los extractos orgánicos secos se filtraron a través de
10 celite y se concentraron. El residuo se disolvió en CH2Cl2 (50 ml), después se añadió hexanos (250 ml) para provocar la precipitación y el precipitado se filtró. Se añadió más cantidad de hexanos (500 ml) y la mezcla se dejó en reposo. Se formó un precipitado cristalino durante aprox. 1 hora, que se recogió en forma de un subproducto. El filtrado se concentró, se disolvió de nuevo en CH2Cl2 y se precipitó con hexanos. Este procedimiento se repitió 3 veces. Los residuos cristalinos combinados se recogieron para proporcionar el compuesto del título (8,7 g) en forma
15 de un sólido de color pardo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,34 (s, 12H), 2,35 (s, 6H), 2,73 (s, 3H), 7,36 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 8,51 (s, 1H).
Intermedio 188
Ácido (3S)-1-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-3-piperidinacarboxílico
O
20 En un sistema de disolvente premezclado de CH2Cl2 (20 ml) y DMF (2 ml) se añadieron ácido (3S)-3piperidinacarboxílico (2 g, 15,49 mmol) y (Boc)2O (4,31 ml, 18,58 mmol). Los sólidos no eran muy solubles pero la reacción se dejó en agitación durante una noche a temperatura ambiente. La reacción se concentró para producir el compuesto del título en bruto. LC-MS (ES) m/z = 230 [M+H]+.
Intermedio 189
25 (3S)-N-Fenil-3-piperidinacarboxamida
A una mezcla de ácido (3S)-1-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-3-piperidinacarboxílico (500 mg, 2,181 mmol), HOBT (668 mg, 4,36 mmol) y EDC (502 mg, 2,62 mmol) en DMF (5 ml) se le añadió N-metilmorfolina (1,20 ml, 10,90 mmol) y la solución se agitó durante 10 minutos. Se añadió anilina (223 mg, 2,399 mmol) y la mezcla de reacción se agitó 30 durante una noche a temperatura ambiente. La reacción se diluyó con EtOAc (50 ml) y después se lavó con agua y salmuera. Después, el extracto orgánico se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró para dar un aceite de color amarillo claro. El aceite se purificó en una columna Biotage SP1 de 25 m con un gradiente de EtOAc de 0 a 40% en hexano en 14 volúmenes de columna. Después, se añadieron 5 ml de una solución premezclada 2:1 de CH2Cl2:TFA,
la mezcla resultante se agitó durante 15 minutos y después se concentró para aislar la sal TFA en bruto del compuesto del título. LC-MS (ES) m/z = 205 [M+H]+. Intermedio 190 (3S)-1-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-N-fenil-3-piperidinacarboxamida
Cl
N
O
N
NH N
NH2 A (3S)-N-fenil-3-piperidinacarboxamida (327 mg, 1,6 mmol) en CH3CN (10 ml) se le añadieron 4,6-dicloro-2pirimidinamina (289 mg, 1,760 mmol) y trietilamina (0,446 ml, 3,20 mmol) y la solución se dejó en agitación durante una noche a 50ºC. Después, la reacción se interrumpió con agua (2 ml) y se extrajo 3 veces con EtOAc. Los extractos orgánicos se combinaron, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron para producir el compuesto del título en bruto (350 mg) en forma de un sólido. LC-MS (ES) m/z = 332 [M+H]+.
Ejemplo 100
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida
F NH2
NO
N H
NH N
N
NH2
A un vial para microondas de 20 ml se le añadieron (3S)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-N-fenil-3piperidinacarboxamida (82 mg, 0,248 mmol), N-acetil-N-[1-acetil-4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2il)-1H-indazol-3-il]acetamida (200 mg, 0,496 mmol), K2CO3 (0,372 ml, 0,744 mmol), aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (10,13 mg, 0,012 mmol) y 1,4-dioxano (3 ml). El vial se tapó y se agitó durante 10 minutos a 150ºC en un reactor de microondas, después la mezcla de reacción se vertió en CH2Cl2 (50 ml) y se repartió con agua (10 ml). El producto acuoso se extrajo con CH2Cl2 (2 x 50 ml) y la capa orgánica se concentró. El residuo se disolvió en CH3OH, se trató con HCl 0,1 ml (6 N) y se calentó a reflujo durante una noche. El CH3OH se retiró al vacío y el residuo se disolvió en DMSO y se purificó por RPHPLC para producir una sal TFA del compuesto del título (26,3 mg). LC-MS (ES) m/z = 447 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,38-1,62 (m, 1H), 1,67-1,95 (m, 2H), 1,97-2,17 (m, 1H), 2,54-2,69 (m, 1H), 4,33-4,63 (m, 2H), 4,65-4,86 (m, 1H), 4,89-5,11 (m, 1H), 6,89-7,13 (m, 3H), 7,15-7,39 (m, 3H), 7,51-7,72 (m, 3H), 10,08 (s, 1H), 11,99-12,24 (m, 1H), 12,22-12,45 (m, 1H).
Intermedio 191
(3S)-N-Ciclohexil-3-piperidinacarboxamida
O
N H
N H
Una mezcla de ácido (3S)-1-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-3-piperidinacarboxílico (500 mg, 2,181 mmol), HOBT (668 mg, 4,36 mmol), EDC (502 mg, 2,62 mmol) y N-metilmorfolina (1,199 ml, 10,90 mmol) en DMF (5 ml) se agitó durante 5 minutos. Después, se añadió ciclohexanamina (260 mg, 2,62 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La reacción se interrumpió con 30 ml de agua y se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, se concentraron y después se cargaron en un lecho de gel de sílice (4 gramos) eluyendo con EtOAc:Hexano (1:1, 150 ml). El extracto orgánico concentró y se recristalizó con hexano caliente. Después, el sólido se añadió a una solución premezclada de TFA (1
ml, 12,98 mmol) y CH2Cl2 (2 ml), la mezcla resultante se agitó durante 0,5 horas y después se concentró para producir la sal TFA en bruto del compuesto del título. LC-MS (ES) m/z = 211 [M+H]+. Intermedio 192 (3S)-1-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-N-ciclohexil-3-piperidinacarboxamida
A (3S)-N-ciclohexil-3-piperidinacarboxamida (446 mg, 2,12 mmol) en CH3CN (10 ml) se le añadieron 4,6-dicloro-2pirimidinamina (382 mg, 2,332 mmol) y trietilamina (0,591 ml, 4,24 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 50ºC. El análisis por LCMS no mostró material de partida después de 3 horas. La reacción se concentró y se añadieron 3 ml de EtOAc hasta que el sólido se disolvió. Después, se añadieron 15 ml de hexano y se formó un sólido a partir de la solución. El sólido se aisló por filtración para producir el compuesto del título (430 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 338 [M+H]+.
Ejemplo 101
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-3-piperidinacarboxamida
A un vial para microondas de 20 ml se le añadieron (3S)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-N-ciclohexil-3piperidinacarboxamida (84 mg, 0,248 mmol), N-acetil-N-[1-acetil-4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2il)-1H-indazol-3-il]acetamida (200 mg, 0,496 mmol), K2CO3 (0,372 ml, 0,744 mmol), aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (10,13 mg, 0,012 mmol) y 1,4-dioxano (3 ml). El vial se tapó y se agitó durante 10 minutos a 150ºC en un reactor de microondas. La mezcla de reacción se vertió en CH2Cl2 (50 ml) y se repartió con agua (10 ml). El producto acuoso se extrajo con CH2Cl2 (2 x 50 ml) y la capa orgánica se concentró. El residuo se disolvió en CH3OH, se trató con 0,1 ml de HCl (6 N) y se calentó a reflujo durante una noche. El CH3OH se retiró al vacío y el residuo se disolvió en DMSO y se purificó por RP-HPLC (CH3CN al 15-30% en H2O; TFA al 0,1%) para producir una sal TFA del compuesto del título (42,6 mg). LC-MS (ES) m/z = 453 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,93-1,98 (m, 12H), 2,21-2,43 (m, 2H), 3,03-3,28 (m, 2H), 4,23-4,47 (m, 2H), 4,52-4,69 (m, 1H), 4,76-4,92 (m, 1H), 6,89-7,03 (m, 1H), 7,13-7,29 (m, 1H), 7,55-7,64 (m, 1H), 7,71-7,94 (m, 1H), 11,94-12,18 (m, 1H), 12,22-12,51 (m, 1H).
Intermedio 193
6-Cloro-N4-metil-N4-fenil-2,4-pirimidinadiamina
NH2
Un vial tapado a rosca de 20 ml se cargó con N-metilanilina (0,653 g, 6,1 mmol), 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (1 g, 6,1 mmol), 1,4-dioxano (5 ml) y HCl (0,152 ml, 0,61 mmol, 4 M en 1,4-dioxano). El vial se tapó y se agitó a reflujo durante una noche. Al mismo tiempo, el análisis por LCMS indicó una buena conversión en el producto deseado, por lo que la mezcla de reacción se vertió en 1:1 de NaHCO3 (sat.) y agua (20 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na2SO4) y se concentraron. El residuo sólido se trituró con CH2Cl2 para producir el compuesto del título (644 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 235
[M+H]+. Ejemplo 102 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-metil-N4-fenil-2,4-pirimidinadiamina
NH2
A un vial para microondas de 5 ml se le añadieron 6-cloro-N4-metil-N4-fenil-2,4-pirimidinadiamina (61 mg, 0,260 mmol), 3-(bis{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}amino)-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indazol-1carboxilato de 1,1-dimetiletilo (218 mg, 0,390 mmol), K2CO3 (0,130 ml, 0,260 mmol), aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (212 mg, 0,260 mmol) y 1,4-dioxano (3 ml). El vial se tapó y se agitó durante 10 minutos a 150ºC en un reactor de microondas. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo se disolvió en EtOAc (50 ml) y agua (20 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml) y los extractos orgánicos combinados se secaron con Na2SO4 y después se filtraron. El filtrado se concentró, se disolvió en dioxano (10 ml) y CH3OH (1 ml) y se añadió HCl (0,5 ml, 2 mmol) en dioxano. La reacción se agitó durante una noche a 40ºC. Al mismo tiempo, el análisis por LCMS indicó que se había completado la conversión en el producto deseado. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se disolvió en DMSO y se purificó por RP-HPLC (CH3CN al 15-35% en H2O; TFA al 0,1%). Las fracciones que contenían el producto se combinaron, se concentraron para retirar el CH3CN, se basificaron (NaHCO3, papel de pH) y se extrajeron en EtOAc. La capa orgánica se secó y se concentró para producir el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo (19 mg). LC-MS (ES) m/z = 332 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  3,46 (s, 3H), 5,38-5,52 (m, 2H), 5,94-6,15 (m, 1H), 6,25-7,00 (s a, 1H), 7,12-7,27 (m, 1H), 7,34-7,46 (m, 4H), 7,47-7,57 (m, 2H), 7,58-7,66 (m, 1H), 7,67-7,78 (m, 1H), 11,40-11,77 (m, 1H).
Intermedio 194
2-[4-(Fenilmetil)-2-morfolinil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina
Una mezcla de 3,4-piridinadiamina (1,7 g, 15,58 mmol), hidrocloruro del ácido 4-bencilmorfolina-2-carboxílico (4,82 g, 18,69 mmol) y ácido polifosfórico (40 ml, 15,58 mmol) se calentó a reflujo durante 12 horas. Después, se añadieron agua (70 ml) y NH4OH y la mezcla resultante se extrajo con CH2Cl2 (CH3OH al 10%) (3 x 80 ml). La solución orgánica combinada se lavó con salmuera (2 x 100 ml), se secó y se evaporó al vacío para producir el compuesto del título (1,0 g). LC-MS (ES) m/z = 295 [M+H]+.
Intermedio 195
2-(2-Morfolinil)-1H-imidazo[4,5-c]piridina
Se hidrogenó 2-[4-(fenilmetil)-2-morfolinil]-1H-imidazo[4,5-c]piridina (1,0 g, 3,40 mmol) en etanol (30 ml) en presencia de Pd/C (al 10% en peso, 0,362 g, 0,340 mmol) y 0,2 ml de ácido clorhídrico concentrado. Después de agitar a temperatura ambiente durante una noche, el catalizador se retiró por filtración. El filtrado se concentró para producir una sal HCl del compuesto del título (0,8 g) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 205 [M+H]+.
Intermedio 196
4-Cloro-6-[2-(1H-imidazo[4,5-c]piridin-2-il)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina
NH2
Una solución de 2-(2-morfolinil)-1H-imidazo[4,5-c]piridina (0,996 g, 4,88 mmol), 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (0,8 g,
5 4,88 mmol) y base de Hunig (2,12 ml, 12,2 mmol) en etanol (24,39 ml) se calentó a 85ºC durante una noche. La mezcla se concentró y se cromatografió (PE-EtOAc, 1:5) para producir el compuesto del título (0,9 g). LC-MS (ES) m/z = 332 [M+H]+.
Intermedio 197
4-{2-Amino-6-[2-(1H-imidazo[4,5-c]piridin-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
N O
H
N
N
N N
N
N NH2
10 Una mezcla de 4-cloro-6-[2-(1H-imidazo[4,5-c]piridin-2-il)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina (403 mg, 1,21 mmol), 2fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (390 mg, 1,58 mmol), Na2CO3 (322 mg, 3,04 mmol) y Pd(PPh3)4 (140 mg, 0,121 mmol) en 1,4-dioxano (6 ml) y agua (2 ml) se calentó a 140ºC en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. La mezcla se filtró, se lavó con EtOAc (150 ml) y se evaporó para dar un
15 sólido de color amarillo que se cromatografió para producir el compuesto del título (430 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 417 [M+H]+.
Ejemplo 103
6-{2-Amino-6-[2-(1H-imidazo[4,5-c]piridin-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
NH2
OH
NN
N
N H
NN
N
N NH2
20 Una mezcla de 4-{2-amino-6-[2-(1H-imidazo[4,5-c]piridin-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (380 mg, 0,913 mmol) e hidrazina (1,432 ml, 45,6 mmol) en etanol (3 ml) se calentó en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. La mezcla se concentró. Se añadió agua (20 ml) y la mezcla resultante se filtró para producir el compuesto del título en bruto (135 mg) en forma de un sólido de color pardo. Este material se combinó con otra muestra del compuesto del título (25 mg) y el material combinado se purificó por HPLC preparativa usando
25 CH3CN en agua (10 mmol de hidrogenocarbonato de amonio en agua) de 40% a 60% en 9 min para producir el compuesto del título (21 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 429 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 3,13-3,22 (m, 2H), 3,81-3,91 (m, 1H), 4,14 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,91 (dd, J = 10,0 Hz, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,25 (s, 2H), 6,72 (s, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,62 (m, 1H), 7,72 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,97 (s, 1H), 8,31 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,91 (s, 1H), 11,54 (s, 1H), 13,01 (s, 1H).
30 Intermedio 198
2-Azido-1-[3-(metiloxi)fenil]etanona
O
A una solución de 2-bromo-1-[3-(metiloxi)fenil]etanona (2,4 g, 10,5 mmol) en THF (80 ml) y agua (20 ml) se le añadió
5 azida sódica (1,703 g, 26,2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 60 horas. Se añadió agua (40 ml) y la mezcla acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 80 ml). Los extractos orgánicos se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron a presión reducida para producir el compuesto del título (1,87 g) en forma de un aceite de color pardo. 1H RMN (400 MHz, CDCl3): 3,87 (s, 3H), 4,55 (s, 2H), 7,15-7,18 (m, 1H), 7,38-7,42 (m, 1H), 7,44-7,47 (m, 2H).
10 Intermedio 199
2-Amino-1-[3-(metiloxi)fenil]etanona
O
O
Se añadió paladio sobre carbono (al 10% en peso, 10,41 g, 9,78 mmol) a una solución de 2-azido-1-[3(metiloxi)fenil]etanona (1,87 g, 9,78 mmol) y ácido clorhídrico (8,14 ml, 98 mmol) en CH3OH (50 ml) en una
15 atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno durante una noche a 25ºC. La mezcla se filtró, lavando con CH2Cl2 (50 ml) y CH3OH (100 ml) y después se concentró. Se añadió agua (150 ml) y la mezcla se liofilizó para producir una sal HCl del compuesto del título (2,0 g) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 166 [M+H]+.
Intermedio 200
20 N-{2-[3-(Metiloxi)fenil]-2-oxoetil}-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida
O
Se añadió cloruro de oxalilo (1,139 ml, 13,02 mmol) a una suspensión de ácido 4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxílico (2,237 g, 8,68 mmol) y DMF (0,034 ml, 0,434 mmol) en CH2Cl2 (80 ml) a 0ºC y la mezcla resultante se agitó a 25ºC durante 2 horas. La mezcla se concentró y el residuo resultante se disolvió en CH2Cl2 (80 ml). La solución resultante 25 de color pardo se añadió a una suspensión de trietilamina (3,63 ml, 26,0 mmol) y 2-amino-1-[3-(metiloxi)fenil]etanona (1,75 g, 8,68 mmol) en CH2Cl2 a 0ºC y la mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 3 horas. A la mezcla de reacción se le añadió agua (150 ml) y la mezcla resultante se extrajo con CH2Cl2 (3 x 100 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron. La purificación por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc en EP de 0% a 50% produjo el compuesto del título (1,6 g) en forma de un aceite de color
30 naranja. LC-MS (ES) m/z = 369 [M+H]+.
Intermedio 201
2-{4-[3-(Metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-(fenilmetil)morfolina
Una mezcla de N-{2-[3-(metiloxi)fenil]-2-oxoetil}-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida (1,6 g, 4,34 mmol) y
5 trifluoroacetato de amonio (2,85 g, 21,71 mmol) se agitó durante 0,75 horas a 150ºC. El análisis por LCMS indicó que el material de partida se había consumido. El producto deseado se contenía en el residuo. Se añadió agua (50 ml) al residuo y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Los extractos orgánicos se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron para producir el compuesto del título (1,56 g) en forma de un aceite de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 350 [M+H]+.
10 Intermedio 202
2-{4-[3-(Metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}morfolina
Se añadió paladio sobre carbono (al 10% en peso, 0,609 g, 0,572 mmol) a una solución de 2-{4-[3-(metiloxi)fenil]1H-imidazol-2-il}-4-(fenilmetil)morfolina (2,0 g, 5,72 mmol) y ácido clorhídrico (4,76 ml, 57,2 mmol) en CH3OH (80 ml)
15 en una atmósfera de nitrógeno y la mezcla resultante se agitó en una atmósfera de hidrógeno durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla se filtró, lavando con CH2Cl2 (50 ml) y CH3OH (3 x 50 ml) y después se concentró. Se añadió agua (80 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir una sal HCl del compuesto del título (2,5 g) en forma de un aceite de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 260 [M+H]+.
Intermedio 203
20 4-Cloro-6-(2-{4-[3-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-morfolinil)-2-pirimidinamina
NH2
A una solución en agitación de 2-{4-[3-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}morfolina (1,5 g, 5,07 mmol) y 4,6-dicloro-2pirimidinamina (0,832 g, 5,07 mmol) en etanol (100 ml) se le añadió base de Hunig (4,5 ml, 25,4 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a reflujo. Se añadió agua (150 ml) y la mezcla resultante se extrajo con
25 EtOAc (3 x 100 ml). El extracto orgánico se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró. La purificación por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con EtOAc en EP de 50% a 80% produjo el compuesto del título (830 mg) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 387 [M+H]+.
Intermedio 204
4-[2-Amino-6-(2-{4-[3-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-morfolinil)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo
N O
H
NN
F NN
N
O NH2
30 Una mezcla de 4-cloro-6-(2-{4-[3-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-morfolinil)-2-pirimidinamina (770 mg, 1,991 mmol), 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (590 mg, 2,389 mmol), Na2CO3 (464 mg, 4,38 mmol) y Pd(PPh3)4 (138 mg, 0,119 mmol) en 1,4-dioxano (8 ml) y agua (2 ml) se calentó a 140ºC en condición de microondas con agitación durante 1 hora. La mezcla se filtró, lavando con EtOAc (100 ml), y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (1,0 g) en forma de un aceite de color gris. Este material se combinó con otra muestra del compuesto del título (100 mg). El material combinado se purificó por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con EtOAc en EP de 50% a 80% para producir el compuesto del título (760 mg) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 472 [M+H]+.
Ejemplo 104
6-[2-Amino-6-(2-{4-[3-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH2
O
N N
H
N
N H NN
N
O NH2
Una mezcla de 4-[2-amino-6-(2-{4-[3-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-morfolinil)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo (700 mg, 1,485 mmol) e hidrazina (2,35 ml, 74,2 mmol) en etanol (8,0 ml) se calentó en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. La mezcla se concentró y se añadió agua (20 ml). La mezcla resultante se filtró para producir el compuesto del título en bruto (725 mg) en forma de un sólido de color amarillo. Este material se combinó 15 con otra muestra del compuesto del título (25 mg). El material combinado se lavó con CH2Cl2 (2 x 25 ml) y EtOAc (2 x 20 ml) y se secó a alto vacío para producir el compuesto del título (216 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 484 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 3,08-3,15 (m, 1H), 3,23 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 3,693,76 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 4,05 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 4,33 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,62 (dd, J = 10,0 Hz, 2,4 Hz, 1H), 4,73 (s, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,21 (s, 2H), 6,71 (s, 1H), 6,76 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,25 (t, J = 8,0 Hz,1H), 7,35-7,37 (m, 2H),
20 7,54-7,63 (m, 2H), 7,71 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,97 (s, 1H), 11,52 (s, 1H), 12,34 (s, 1H).
Intermedio 205
5-(Metiloxi)-2-[4-(fenilmetil)-2-morfolinil]-1H-benzoimidazol
Una solución de 4-metoxibenceno-1,2-diamina (0,5 g, 2,369 mmol) y ácido 4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxílico
25 (1,221 g, 4,74 mmol) en HCl 6 N (10 ml) se agitó a 105ºC durante una noche. La mezcla de reacción se neutralizó con NaOH acuoso y se repartió entre EtOAc (50 ml) y agua (50 ml). La fase orgánica se lavó con agua (50 ml), se secó (MgSO4) y se evaporó al vacío para dar el producto en bruto en forma de un aceite de color negro. El producto en bruto se añadió a una columna sobre gel de sílice y se eluyó con 90:10 de CH2Cl2/CH3OH para producir el compuesto del título (0,6 g). LC-MS (ES) m/z = 324 [M+H]+.
30 Intermedio 206
5-(Metiloxi)-2-(2-morfolinil)-1H-benzoimidazol
H
H
A una solución de 5-(metiloxi)-2-[4-(fenilmetil)-2-morfolinil]-1H-benzoimidazol (2,0 g, 6,18 mmol) y cloruro de hidrógeno (0,451 g, 12,37 mmol) en CH3OH (50 ml) en agitación en una atmósfera de nitrógeno a temperatura
35 ambiente se le añadió paladio sobre carbono (0,066 g, 0,618 mmol). La mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno a 25ºC durante 3 horas. Se añadió CH2Cl2 y la mezcla se filtró. El filtrado se concentró al vacío. El producto en bruto se añadió a una columna sobre gel de sílice y se eluyó con 90:10 de CH2Cl2/CH3OH para producir el compuesto del título (500 mg). LC-MS (ES) m/z = 234 [M+H]+.
Intermedio 207
4-Cloro-6-{2-[5-(metiloxi)-1H-benzoimidazol-2-il]-4-morfolinil}-2-pirimidinamina
O
A una suspensión de 5-(metiloxi)-2-(2-morfolinil)-1H-benzoimidazol (500 mg, 2,143 mmol) y DIPEA (693 mg, 5,36
5 mmol) en etanol (10 ml) en agitación a temperatura ambiente se le añadió 4,6-dicloro-2-pirimidinamina sólida (352 mg, 2,143 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 85ºC durante una noche. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se repartió entre EtOAc (25 ml) y agua (25 ml). El disolvente se evaporó al vacío para dar el producto en bruto. El producto en bruto se añadió a una columna sobre gel de sílice y se eluyó con CH2Cl2/CH3OH para producir el compuesto del título (300 mg). LC-MS (ES) m/z = 361 [M+H]+.
10 Intermedio 208
4-(2-Amino-6-{2-[5-(metiloxi)-1H-benzoimidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo
O
A una solución de 4-cloro-6-{2-[5-(metiloxi)-1H-benzoimidazol-2-il]-4-morfolinil}-2-pirimidinamina (150 mg, 0,416 mmol), 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (134 mg, 0,540 mmol) y Na2CO3 (110 mg, 15 1,039 mmol) en 1,4-dioxano (1,8 ml) y agua (0,6 ml) en agitación en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se le añadió Pd(PPh3)4 sólido (48,0 mg, 0,042 mmol) en una carga. El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó en un Biotage Initiator usando una temperatura inicial alta de 140ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se repartió entre 25/25 ml de EtOAc/THF y agua 50 ml. La fase orgánica se lavó con agua (50 ml), se secó (Na2SO4) y se concentró al vacío. El producto en bruto se añadió a una columna sobre gel de sílice y se
20 eluyó con Hexanos/EtOAc para producir el compuesto del título (180 mg). LC-MS (ES) m/z = 446 [M+H]+.
Ejemplo 105
6-(2-Amino-6-{2-[5-(metiloxi)-1H-benzoimidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina
NH2
O NH
N
NN
H NN
N
NH2O
A una suspensión de 4-(2-amino-6-{2-[5-(metiloxi)-1H-benzoimidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-2
25 fluorobenzonitrilo (340 mg, 0,763 mmol) en etanol (8 ml) a temperatura ambiente se le añadió hidrazina hidrato (764 mg, 15,27 mmol). El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó en un CEM Discover usando una temperatura inicial alta de 120ºC durante 1 hora. Después de un periodo de refrigeración, la reacción se vertió en agua. El precipitado resultante se filtró y se secó al vacío para producir el compuesto del título (148 mg). LC-MS (ES) m/z = 458 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 3,21-3,10 (m, 2H), 3,82-3,78 (m, 4H), 4,11 (d, 1H), 4,34 (d, 1H),
30 4,86-4,77 (m, 2H), 5,39 (s a, 2H), 6,23 (s a, 2H), 6,71 (s, 1H), 6,85-6,78 (m, 1H), 7,14-6,95 (m, 1H), 7,50-7,34 (m, 1H), 7,61 (d, 1H), 7,71 (d, 1H), 7,99 (s, 1H), 11,53 (s, 1H), 12,43 (s, 1H).
Intermedio 209
Fenilcarbamato de [(2S,5R)-4-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-2-morfolinil]metilo
NH2
A un vial tapado a rosca de 20 ml se le añadieron [(2S,5R)-4-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-2
5 morfolinil]metanol (100 mg, 0,387 mmol), base de Hunig (0,135 ml, 0,773 mmol) y CHCl3 (10 ml). La reacción se enfrió a 0ºC y después se añadieron gota a gota isocianato de fenilo (0,046 ml, 0,425 mmol) en CHCl3 (2 ml) mediante una jeringa. La solución se dejó calentar a temperatura ambiente y después se agitó durante una noche. Se añadió una porción más de base de Hunig (0,135 ml, 0,773 mmol) e isocianato de fenilo (0,046 ml, 0,425 mmol) y la reacción se agitó a 60ºC durante una noche. Los disolventes se retiraron al vacío y el residuo se purificó por
10 cromatografía ultrarrápida para producir el compuesto del título (123 mg). LC-MS (ES) m/z = 378 [M+H]+.
Intermedio 210
Fenilcarbamato de {(2S,5R)-4-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metilo
N O HN
O
N
F ON
N
NH2
Una suspensión bifásica de fenilcarbamato de [(2S,5R)-4-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-2-morfolinil]metilo
15 (123 mg, 0,326 mmol), ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (107 mg, 0,651 mmol), aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (13,3 mg, 0,016 mmol), K2CO3 acuoso 2 N (0,488 ml, 0,977 mmol) y 1,4-dioxano (3 ml) se calentó en un reactor de microondas durante 10 minutos a 140ºC. La reacción se vertió en HCl 0,1 N (30 ml) y CH2Cl2 (50 ml) y el producto acuoso se extrajo con CH2Cl2 (2 x 50 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para producir el compuesto del título (151 mg) en forma de un aceite de color pardo oscuro. LC-MS
20 (ES) m/z = 463 [M+H]+.
Ejemplo 106
Fenilcarbamato de {(2S,5R)-4-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metilo
NH2
O NHN
O
N
N H
ON
N
NH2
A una solución de fenilcarbamato de {(2S,5R)-4-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-2
25 morfolinil}metilo (151 mg, 0,326 mmol) en etanol (3 ml) se le añadieron base de Hunig (0,455 ml, 2,61 mmol) e hidrazina (0,041 ml, 1,304 mmol). La solución resultante se calentó a 150ºC en un reactor de microondas durante 30 minutos. El análisis por LCMS indicó una conversión parcial, por lo que la reacción se calentó durante 30 minutos más en el reactor de microondas. El análisis por LCMS indicó una conversión mejor. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó por RPHPLC (Gilson, columna de 30 mm, CH3CN al 25-55% en agua, TFA al
30 0,1%) para producir una sal TFA del compuesto del título (40 mg) en forma de un sólido de color pardo. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,28-1,36 (m, 3H) 3,03-3,17 (m, 0,5H), 3,25-3,39 (m, 0,5H), 3,65-3,90 (m, 3H), 4,13-4,38 (m, 2,5H), 4,50-4,62 (m, 0,5H), 4,63-4,75 (m, 0,5H), 4,88-5,00 (m, 0,5H), 5,10-6,20 (s a, 3 H), 6,85-6,95 (m, 1H), 6,967,06 (m, 1H), 7,25-7,35 (m, 2H), 7,37-7,43 (m, 1H), 7,45-7,55 (m, 2H), 7,72-7,77 (m, 1H), 7,90-7,95 (m, 1H), 9,5810,04 (m, 1H), 11,63-12,67 (m, 2H). Nota: duplicación evidente de algunos picos en esta muestra probablemente debido a los rotámeros. LC-MS (ES) m/z = 475 [M+H]+.
Intermedio 211
2-Bromo-1-fenil-1-propanona
O
A una solución en CH2Cl2 (5 ml) de propiofenona (4,93 g, 36,82 mmol) se le añadió gradualmente una solución en
10 CH2Cl2 (5 ml) de bromo (6,49 g, 40 mmol) a 15ºC seguido de 1 hora de agitación. A la solución resultante se le añadieron 30 ml de una solución saturada de NaHCO3 y 40 ml de EtOAc para realizar la extracción. La capa orgánica se lavó con 20 ml de una solución acuosa de tiosulfato sódico al 20% en peso y después con 20 ml de salmuera saturada, se secó (MgSO4) y se sometió a destilación a presión reducida para retirar el disolvente. El compuesto del título (7,7 g) se obtuvo en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 214 [M+H]+.
15 Intermedio 212
2-Azido-1-fenil-1-propanona
O
A una solución de 2-bromo-1-fenil-1-propanona (2,29 g, 10,75 mmol) en THF (80 ml) y agua (20 ml) se le añadió azida sódica (1,75 g, 26,9 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. El
20 análisis por TLC mostró que la reacción se había completado. Se añadió agua (40 ml) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 80 ml). Los extractos orgánicos se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida para producir el compuesto del título (1,76) en forma de un aceite de color pardo. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3)  7,94-7,96 (m, 2H), 7,60-7,64 (m, 1H), 7,49-7,52 (m, 2H), 4,71 (c, J = 6,8 Hz, 1H), 1,58(d, J = 6,8 Hz, 3H).
25 Intermedio 213
2-Amino-1-fenil-1-propanona
O
Se añadió paladio sobre carbono (1,069 g, 1,005 mmol) a la solución de 2-azido-1-fenil-1-propanona (1,76 g, 10,05 mmol) y ácido clorhídrico (6,69 ml, 80 mmol) en CH3OH (50 ml) en una atmósfera de nitrógeno y la mezcla de
30 reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno durante una noche a 25ºC. La mezcla se filtró, lavando con CH2Cl2 (50 ml) y CH3OH (100 ml) y se concentró. Se añadió agua (100 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir una sal HCl del compuesto del título (1,9 g) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 150 [M+H]+.
Intermedio 214
N-(1-Metil-2-oxo-2-feniletil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida O
O
N
O
NH
5 durante 2 horas y después se evaporó. Al residuo resultante se le añadió CH2Cl2 (60 ml) y la solución de color pardo resultante se añadió a una suspensión de trietilamina (4,34 ml, 31,1 mmol) y 2-amino-1-fenil-1-propanona (1,65 g, 8,89 mmol) en CH2Cl2 (60 ml) a 0ºC. La mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante una noche. Se añadió agua (150 ml) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 80 ml). Los extractos orgánicos se secaron (Na2SO4), se
10 filtraron y se evaporaron. El residuo resultante se purificó por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con EtOAc en EP de 20% a 50% para producir el compuesto del título (1,3 g) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 353 [M+H]+.
Intermedio 215
2-(4-Metil-5-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-(fenilmetil)morfolina
Una mezcla de N-(1-metil-2-oxo-2-feniletil)-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida (1,3 g, 3,69 mmol) y trifluoroacetato de amonio (2,417 g, 18,44 mmol) se agitó durante 0,75 horas a 150ºC. El análisis por LCMS indicó que el material de partida se había consumido. El producto deseado se contenía en el residuo. Al residuo se le añadió agua (150 ml) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Los extractos orgánicos se secaron (Na2SO4), se
20 filtraron y se evaporaron para producir el compuesto del título (1,2 g) en forma de un aceite de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 334 [M+H]+.
Intermedio 216
2-(4-Metil-5-fenil-1H-imidazol-2-il)morfolina
25 Se añadió paladio sobre carbono (0,527 g, 0,495 mmol) a una solución de 2-(4-metil-5-fenil-1H-imidazol-2-il)-4(fenilmetil)morfolina (1,65 g, 4,95 mmol) y ácido clorhídrico (4,12 ml, 49,5 mmol) en CH3OH (80 ml) en una atmósfera de nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno durante 2 horas a 25ºC. El análisis por TLC indicó que el material de partida se había consumido. La mezcla se filtró, lavando con EtOAc (50 ml) y CH3OH (50 ml) y se concentró. Se añadió agua (80 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título
30 (980 mg) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 244 [M+H]+.
Intermedio 217 4-Cloro-6-[2-(4-metil-5-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina
O
N NH N
N
NH2
Una suspensión de DIPEA (2,39 g, 18,50 mmol), 2-(4-metil-5-fenil-1H-imidazol-2-il)morfolina (1,5 g, 6,17 mmol) y
5 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (1,011 g, 6,17 mmol) en etanol (200 ml) se agitó a 100ºC durante una noche. El disolvente se retiró a presión reducida y el producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice, eluyendo con CH2Cl2/EtOAc (10:1) para producir el compuesto del título (1,2 g) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 371, 373 [M+H]+.
Intermedio 218
10 4-{2-Amino-6-[2-(4-metil-5-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
Una mezcla de 4-cloro-6-[2-(4-metil-5-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina (1,2 g, 3,24 mmol), 2fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (1,199 g, 4,85 mmol), Na2CO3 (0,857 g, 8,09 mmol) y Pd(PPh3)4 (0,374 g, 0,324 mmol) se puso en un vial para microondas y se calentó en un Biotage Initiator usando una
15 potencia inicial de 150 W a 140ºC durante 1 hora. Después de enfriar la reacción, el disolvente se retiró a presión reducida y el producto en bruto se añadió a una columna sobre gel de sílice y eluyendo con Hex/EtOAc (1:3) para producir el compuesto del título (1,2 g) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 456 [M+H]+.
Ejemplo 107
6-{2-Amino-6-[2-(4-metil-5-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
NH2
O N
N
N N
H
NH N
N
NH2
20 Una mezcla de 4-{2-amino-6-[2-(4-metil-5-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (100 mg, 0,220 mmol) e hidrazina (0,348 ml, 10,98 mmol) en etanol (2 ml) se calentó en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. La mezcla se concentró y el producto en bruto se purificó por RPHPLC para producir el compuesto del título (90 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 468 [M+H]+. 1H RMN
25 (400 MHz, DMSO-d6):  2,35 (s, 3H), 3,04-3,22 (m, 2H), 3,66-3,75 (m, 1H), 4,04 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 4,32 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 4,52-4,58 (m, 1H), 4,70 (s, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,20 (s, 2H), 6,70 (s, 1H), 7,17-7,28 (m, 1H), 7,34-7,46 (m, 2H), 7,52-7,66 (m, 3H), 7,71 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,96 (s, 1H), 11,52 (s, 1H), 12,20 (s, 1H).
Intermedio 219
5-Cloro-2-[4-(fenilmetil)-2-morfolinil]-1H-benzoimidazol
Una mezcla de 4-clorobenceno-1,2-diamina (2,0 g, 14,03 mmol) y ácido 4-bencilmorfolina-2-carboxílico (4,66 g,
5 21,04 mmol) en ácido polifosfórico (20 ml) se agitó a 140ºC durante una noche. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se trató con 100 ml de agua. La fase acuosa se hizo débilmente básica con hidróxido sódico acuoso 2 N y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se secó sobre MgSO4 y se concentró al vacío para dar el producto en bruto en forma de un sólido de color blanquecino. El residuo se trituró con hex/EtOAc (1 x 25 ml). El sólido resultante se filtró, se aclaró con n-hexano y se recogió. El disolvente se evaporó al vacío para producir el
10 compuesto del título (2,1 g). LC-MS (ES) m/z = 328 [M+H]+.
Intermedio 220
5-Cloro-2-(2-morfolinil)-1H-benzoimidazol
A una solución de 4-bencil-2-(5-cloro-1H-benzo[d]imidazol-2-il)morfolina (2,1 g, 6,41 mmol) y cloruro de hidrógeno
15 (0,234 g, 6,41 mmol) en CH3OH (50 ml) en agitación en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se le añadió paladio sobre carbono (0,068 g, 0,641 mmol). La mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno a 25ºC durante 3 horas. Se añadió CH2Cl2 y la mezcla se filtró. El filtrado se evaporó al vacío y el residuo se disolvió en agua (10 ml). El producto en bruto se purificó por cromatografía de fase inversa, eluyendo con 5~50% de CH3OH en agua para producir el compuesto del título (400 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 238
20 [M+H]+.
Intermedio 221
4-Cloro-6-[2-(5-cloro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina
A una solución de 5-cloro-2-(2-morfolinil)-1H-benzoimidazol (200 mg, 0,841 mmol) y base de Hunig (109 mg, 0,841
25 mmol) en etanol (10 ml) en agitación a temperatura ambiente se le añadió 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (138 mg, 0,841 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 85ºC. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se repartió entre EtOAc (25 ml) y agua (25 ml). El disolvente se evaporó al vacío para dar el producto en bruto. El residuo se trituró con EtOAc (1 x 5 ml). El sólido resultante se filtró y se recogió para producir el compuesto del título (300 mg). LC-MS (ES) m/z = 365, 367 [M+H]+.
30 Intermedio 222
4-{2-Amino-6-[2-(5-cloro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
A una suspensión de 4-cloro-6-(2-(5-cloro-1H-benzo[d]imidazol-2-il)morfolino)pirimidin-2-amina (200 mg, 0,548
5 mmol), 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (176 mg, 0,712 mmol) y Na2CO3 (145 mg, 1,369 mmol) en 1,4-dioxano (2,4 ml) y agua (0,8 ml) en una atmósfera de nitrógeno se le añadió Pd(PPh3)4 (63,3 mg, 0,055 mmol). El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó en un Biotage Initiator usando una temperatura inicial alta de 140ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc/THF (25/25 ml) y agua (50 ml). La fase orgánica se lavó con agua (50 ml), se secó (Na2SO4) y se evaporó al vacío. El residuo se
10 trituró con EtOAc (1 x 10 ml). El sólido resultante se filtró a través de un embudo de vidrio poroso grueso y se recogió para producir el compuesto del título (140 mg). LC-MS (ES) m/z = 450 [M+H]+.
Ejemplo 108
6-{2-Amino-6-[2-(5-cloro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
NH2
OH
N
N
N N
H NN
N
NH2Cl
15 A una solución de 4-{2-amino-6-[2-(5-cloro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (140 mg, 0,311 mmol) en etanol (5 ml) en agitación a temperatura ambiente se le añadió hidrazina hidrato (156 mg, 3,11 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 85ºC. El disolvente se evaporó al vacío para dar el producto en bruto. El producto en bruto se añadió a una columna sobre gel de sílice y se eluyó con CH2Cl2/MeOH para producir el compuesto del título (41 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 462 [M+H]+.
20 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  3,13-3,17 (m, 2H), 3,81 (t, J = 13,2 Hz, 1H), 4,12 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,35 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 4,84-4,89 (m, 2H), 5,40 (s, 2H), 6,30 (s, 2H), 6,72 (s, 1H), 7,22 (t, J = 9,6 Hz, 1H), 7,48-7,50 (m, 1H), 7,607,73 (m, 3H), 7,97 (s, 1H), 11,55 (s, 1H), 12,80 (m, 1H).
Intermedio 223
5-Fluoro-2-[4-(fenilmetil)-2-morfolinil]-1H-benzoimidazol
F
25 Una mezcla de 4-fluorobenceno-1,2-diamina (2,0 g, 15,86 mmol) y ácido 4-bencilmorfolina-2-carboxílico (5,26 g, 23,78 mmol) en ácido polifosfórico (20 ml) se agitó a 140ºC durante una noche. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se trató con 100 ml de agua. La fase acuosa se hizo débilmente básica con hidróxido sódico acuoso 2 N y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se secó sobre MgSO4 y se evaporó al vacío para dar el
30 producto en bruto en forma de un sólido de color rojo. El residuo se trituró con Hexanos/EtOAc (1 x 25 ml). El sólido resultante se filtró, se aclaró con n-hexano y se recogió. El disolvente se evaporó al vacío para producir el compuesto del título (3,0 g). LC-MS (ES) m/z = 312 [M+H]+.
Intermedio 224
5-Fluoro-2-(2-morfolinil)-1H-benzoimidazol
F
A una solución de 5-fluoro-2-[4-(fenilmetil)-2-morfolinil]-1H-benzoimidazol (3,0 g, 9,64 mmol) y cloruro de hidrógeno
5 (0,703 g, 19,27 mmol) en CH3OH (50 ml) en agitación en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se le añadió paladio sobre carbono (0,103 g, 0,964 mmol) y la mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de hidrógeno a 25ºC durante una noche. Se añadió CH2Cl2 y la mezcla se filtró. El filtrado se concentró al vacío y el residuo se trituró con EtOAc, se filtró y se secó para producir una sal hidrocloruro del compuesto del título en forma de un sólido de color blanquecino (2,0 g). LC-MS (ES) m/z = 222 [M+H]+.
10 Intermedio 225
4-Cloro-6-[2-(5-fluoro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina
A una suspensión de 5-fluoro-2-(2-morfolinil)-1H-benzoimidazol (200 mg, 0,904 mmol) y base de Hunig (409 mg, 3,16 mmol) en etanol (10 ml) en agitación a temperatura ambiente se le añadió 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (148 mg,
15 0,904 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 85ºC. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se repartió entre EtOAc (25 ml) y agua (25 ml). El disolvente orgánico se evaporó al vacío para dar el producto en bruto. El residuo se trituró con EtOAc (1 x 5 ml). El sólido resultante se filtró y se recogió para producir el compuesto del título (250 mg). LC-MS (ES) m/z = 349 [M+H]+.
Intermedio 226
20 4-{2-Amino-6-[2-(5-fluoro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
N O
H
N
N
NN
N
NH2F
A una suspensión de 4-fluoro-6-(2-(5-cloro-1H-benzo[d]imidazol-2-il)morfolino)pirimidin-2-amina (250 mg, 0,717 mmol), 2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (230 mg, 0,932 mmol) y Na2CO3 (190 mg, 1,792 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml) y agua (1,0 ml) en una atmósfera de nitrógeno se le añadió Pd(PPh3)4 (83 mg,
25 0,072 mmol). El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó en un Biotage Initiator usando una temperatura inicial alta de 140ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc/THF (25/25 ml) y agua (50 ml). La fase orgánica se lavó con agua (50 ml), se secó sobre Na2SO4 y se evaporó al vacío. El residuo se trituró con EtOAc (1 x 10 ml). El sólido resultante se filtró a través de un embudo de vidrio poroso grueso y se recogió para producir el compuesto del título (130 mg). LC-MS (ES) m/z = 434 [M+H]+.
30 Ejemplo 109
6-{2-Amino-6-[2-(5-fluoro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
NH2 O
H
N
N
N N
H NN
N
NH2F
A una solución de 4-{2-amino-6-[2-(5-fluoro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (120
5 mg, 0,277 mmol) en etanol (3,0 ml) a temperatura ambiente se le añadió hidrazina hidrato (139 mg, 2,77 mmol). El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó en un Biotage Initiator usando una temperatura inicial alta de 120ºC durante 1 hora. Después de enfriar la reacción, el disolvente se evaporó al vacío para dar el producto en bruto que se trituró con EtOAc (1 x 5 ml). El sólido resultante se filtró a través de un embudo de vidrio poroso mediano y se recogió para producir el compuesto del título (37 mg). LC-MS (ES) m/z = 446 [M+H]+. 1H RMN (400
10 MHz, DMSO-d6):  3,10-3,17 (m, 2H), 3,81 (t, J = 9,6 Hz, 1H), 4,12 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 4,34 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 4,82-4,84 (m, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,23 (s, 2H), 6,71 (s, 1H), 7,02-7,09 (m, 1H), 7,25 (d, J = 8,8 Hz, 0,5H), 7,41-7,49 (m, 1H), 7,61 (d, J = 9,6 Hz, 1,5H), 7,71 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H), 11,53 (s, 1H), 12,7 (s a, 1H).
Intermedio 227
Ácido (3S,6R)-6-metil-1-{[(fenilmetil)oxi]carbonil}-3-piperidinacarboxílico
O
HO
A una solución de 1-(fenilmetil) (3S,6R)-6-metil-1,3-piperidinadicarboxilato de 3-metilo (15 g, 51,5 mmol) en THF/agua/CH3OH (10/5/1, 480 ml) se le añadió LiOH·H2O (2,59 g, 61,8 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 hora. La mezcla se acidificó con HCl 1 N hasta que el pH fue de ~5 y después se concentró al vacío. El residuo resultante se extrajo con EtOAc (2 x 300 ml) y CHCl3 (2 x 300 ml) y
20 las capas orgánicas combinadas se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron al vacío para producir el compuesto del título en bruto (17 g). LC-MS (ES) m/z = 278 [M+H]+.
Intermedio 228
(2R,5S)-2-Metil-5-[(fenilamino)carbonil]-1-piperidinacarboxilato de fenilmetilo
25 A una solución de ácido (3S,6R)-6-metil-1-{[(fenilmetil)oxi]carbonil}-3-piperidinacarboxílico (17 g, 61,3 mmol) en DMF (400 ml) se le añadieron anilina (8,56 g, 92 mmol), base de Hunig (32,1 ml, 184 mmol), HOBt (14,08 g, 92 mmol) y EDC (17,63 g, 92 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente, después se diluyó con H2O (~100 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 250 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con HCl 1 N (100 ml), H2O (3 x 100 ml) y salmuera (100 ml), se secaron (MgSO4), se filtraron
30 y se concentraron al vacío para producir el compuesto del título en bruto (21 g). LC-MS (ES) m/z = 353 [M+H]+.
Intermedio 229
(3S,6R)-6-Metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida
Una solución de (2R,5S)-2-metil-5-[(fenilamino)carbonil]-1-piperidinacarboxilato de fenilmetilo (21 g, 59,6 mmol) en
5 EtOAc (250 ml) y EtOH (250 ml) se desgasificó. Se añadió Pd/C (al 10%, 6,34 g, 5,96 mmol) y después se burbujeó H2 a través de la mezcla. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente en una atmósfera de globo de H2 durante una noche. La mezcla se filtró a través de una capa de celite y se concentró al vacío para producir el compuesto del título en bruto (12 g). LC-MS (ES) m/z = 219 [M+H]+.
Intermedio 230
10 (3S,6R)-1-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-6-metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida
A una solución de (3S,6R)-6-metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida (12 g, 55 mmol) en 1,4-dioxano (250 ml) se le añadieron 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (8,11 g, 49,5 mmol) y NaHCO3 acuoso sat. (125 ml) y después la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante una noche. La reacción no se completó. La mezcla de reacción se enfrió, se
15 añadió 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (0,9 g, 5,5 mmol) y se calentó a reflujo durante una noche. Cuando la reacción se completó, la mezcla se enfrió. A la mezcla se le añadieron aproximadamente 500 ml de H2O para formar un precipitado y después se filtró para obtener un sólido gomoso. Después, el sólido gomoso se disolvió en EtOAc (~800 ml). La solución orgánica se lavó con agua (2 x 200 ml) y salmuera (200 ml), se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró al vacío para producir el compuesto del título en bruto (20 g). LC-MS (ES) m/z = 346 [M+H]+.
20 Intermedio 231
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida
A una solución de (3S,6R)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-6-metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida (8 g, 23,1 mmol) en 1,4-dioxano (250 ml) se le añadieron ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (5,72 g, 34,7 mmol), Pd(PPh3)4 (2,67 g, 25 2,3 mmol) y NaHCO3 acuoso sat. (125 ml). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante una noche, se enfrió y se diluyó con H2O (~400 ml) para formar un precipitado. La mezcla se filtró y el sólido gomoso se disolvió en EtOAc (~800 ml) y se concentró al vacío hasta que quedaron aproximadamente 50 ml de disolvente. La solución en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (columna de 400 g) eluyendo con EtOAc al 20%/hexanos a EtOAc al 70%/hexanos. Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron al vacío para
30 producir el compuesto del título (10 g). LC-MS (ES) m/z = 431 [M+H]+.
Ejemplo 110 (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida NH2
NO
N H
NH N
N
NH2
A una solución de (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida (10 g, 23,2 mmol) en EtOH (400 ml) se le añadió hidrazina (22,8 ml, 465 mmol). La mezcla resultante se calentó en un tubo cerrado herméticamente a 100ºC durante una noche, se enfrió y se concentró al vacío. La solución en bruto se purificó por la cromatografía sobre gel de sílice (columna de 200 g) eluyendo con CHCl3 al 100% a CHCl3/CH3OH/NH4OH (9:1:0,1). Las fracciones puras que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron al vacío para producir el compuesto del título (3 g). LC-MS (ES) m/z = 443 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,18 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,75 (s, 2H), 1,83 (m, 1H), 1,92 (m, 1H), 5,37 (s, 2H), 6,10 (s, 2H), 6,64 (s, 1H), 7,03 (s, 1H), 7,32 (s, 2H), 7,29-7,34 (m, 2H), 7,64 (d, J = 7,3 Hz, 4H), 7,96 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 10,06 (s, 1H), 11,49 (s, 1H). El resto de fracciones que contenían el producto deseado y una pequeña cantidad de impurezas se combinaron, se concentraron al vacío y se cristalizaron en CH3OH (~10 ml). Se obtuvo el material cristalino (3,6 g).
Intermedio 232
5-({[(1,1-Dimetiletil)oxi]carbonil}amino)-2-metil-1-piperidinacarboxilato de cis-fenilmetilo
H
O
N
O
N
O
O
Se disolvió ácido cis-6-metil-1-{[(fenilmetil)oxi]carbonil}-3-piperidinacarboxílico (2,62 g, 9,45 mmol) en alcohol tbutílico (20 ml, 212 mmol) (anhidro) en un vial de 40 ml. Se añadió trietilamina (1,975 ml, 14,17 mmol) seguido de la adición lenta de azidofosfato de difenilo (dppa) (1,87 ml, 8,65 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y después se calentó a 100ºC durante una noche. La mezcla de reacción se concentró y después se disolvió de nuevo con 150 ml de EtOAc. La mezcla orgánica resultante se lavó con agua (50 ml) y salmuera, se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró. El aceite transparente resultante se purificó en una columna de 50 g Biotage SNAP con un gradiente de EtOAc de 0 a 50% en hexano durante 40 minutos para producir el compuesto del título (1,06 g) en forma de un aceite transparente. LC-MS (ES) m/z = 349 [M+H]+.
Intermedio 233
[(6-Metil-3-piperidinil]carbamato de cis-1,1-dimetiletilo
H
O
N
O
N
H
En un matraz de fondo redondo de 50 ml se añadió el Pd/C de tipo Degussa (1,240 g, 0,583 mmol) seguido de 5({[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}amino)-2-metil-1-piperidinacarboxilato de cis-fenilmetilo (2,03 g, 5,83 mmol) en etanol (3 ml). La mezcla se evacuó, después se cargó de nuevo con hidrógeno (0,012 g, 5,83 mmol) en globo y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La reacción se filtró a través de un filtro de jeringa, se lavó con etanol y se concentró para producir el compuesto del título (1,21 g) en forma de un aceite transparente. LC-MS (ES) m/z = 215 [M+H]+.
Intermedio 234 [(1-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-6-metil-3-piperidinil]carbamato de cis-1,1-dimetiletilo
NH2
Una mezcla de [6-metil-3-piperidinil]carbamato de cis-1,1-dimetiletilo (1,21 g, 5,65 mmol) y 4,6-dicloro-2pirimidinamina (1,852 g, 11,29 mmol) se disolvió en etanol (10 ml) en un vial para microondas de 5 ml. Se añadió trietilamina (1,57 ml, 11,3 mmol) y la solución se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró y se purificó en una columna de 10 g Biotage SNAP con un gradiente de EtOAc de 0 a 50% en hexano. Se aislaron dos manchas. La mancha que eluyó más tarde era el compuesto del título (1,70 g) en forma de un aceite transparente. LC-MS (ES) m/z = 341 [M+H]+.
Intermedio 235
{(1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de cis-1,1-dimetiletilo
NH2
En un vial de 20 ml que puede cerrarse herméticamente se añadieron [1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-6-metil-3piperidinil]carbamato de cis-1,1-dimetiletilo (1,07 g, 3,13 mmol), ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (0,774 g, 4,70 mmol), 1,4-dioxano (10 ml) y NaHCO3 acuoso sat. (5 ml) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla resultante durante 10 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,543 g, 0,470 mmol) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 5 minutos más. El vial se tapó y se calentó a 100ºC durante una noche. El análisis por LCMS muestra una finalización de aproximadamente 30%. Se añadieron 200 mg más del ácido borónico y 150 mg de catalizador y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 110ºC. La reacción se diluyó con 100 ml de EtOAc y se lavó con 30 ml de agua y salmuera. Después, el extracto orgánico se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. La purificación en una columna de 40 g de Biotage SNAP con un gradiente de EtOAc de 0 a 60% en hexano durante 40 minutos produjo el compuesto del título (984 mg) en forma de un aceite transparente. LC-MS (ES) m/z = 427 [M+H]+.
Ejemplo 111
{(1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de cis-1,1-dimetiletilo
NH2
O N
N
O N N
H H
N
N
NH2
Se disolvió {(1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de cis-1,1-dimetiletilo (77 mg, 0,181 mmol) en etanol (3 ml) en un vial de 5 ml que puede cerrarse herméticamente. Se añadió hidrazina monohidrato (0,266 ml, 5,42 mmol), el vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se calentó durante una noche a 100ºC. Después, la reacción se concentró, se disolvió de nuevo en 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condición de HPLC: Gilson de acceso ilimitado usando el software Unipoint con una realización Varian Polaris 5  C18(2) 100A, 50 x 30,00 mm y 5 micrómetros de 10 minutos (30 ml/min, CH3CN al 20%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 45%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones con el producto deseado se combinaron y el volumen se redujo hasta que se retiró la mayor parte del CH3CN. A la mezcla acuosa resultante se le añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 y después se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron para producir el compuesto del título. LC-MS (ES) m/z = 439 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,11 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,24 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 1,42 (s, 9H), 1,65 (m, 4H), 2,56-2,68 (m, 1H), 4,41 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 4,69 (s a, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,09 (s a, 2H), 6,56 (s, 1H), 6,94 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 236
4-{2-Amino-6-[(2R,5S)-5-amino-2-metil-1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
A una solución de {(3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1dimetiletilo (985 mg, 2,310 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) se le añadió HCl 4 M en 1,4-dioxano (10 ml, 40,0 mmol) en
10 un vial de 40 ml. Se formó un sólido y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y después se concentró para producir una sal HCl del compuesto del título (1,15 g) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 327 [M+H]+.
Intermedio 237
{(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de fenilmetilo
NH2
15 A una solución de 4-{2-amino-6-[(2R,5S)-5-amino-2-metil-1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (170 mg, 0,426 mmol) en THF (4 ml) se le añadió NaHCO3 acuoso saturado (2 ml) seguido de cloridocarbonato de fenilmetilo (0,07 ml, 0,47 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla se diluyó con 3 ml de agua y después se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Después, el extracto orgánico se lavó con salmuera,
20 se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El aceite resultante de color amarillo se purificó en una columna Biotage SNAP de 10 g con un gradiente de EtOAc de 0 a 50% en hexano durante 30 minutos para producir el compuesto del título (57 mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 327 [M+H]+.
Ejemplo 112
{(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de fenilmetilo
NH2
O N O
N N
H HN
N
NH2
A {(3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de fenilmetilo (57 mg, 0,124 mmol) en etanol (3 ml) se le añadió hidrazina (0,182 ml, 3,71 mmol) en un vial de 5 ml que puede cerrarse herméticamente. Después, la solución de tapó y se calentó a 100ºC durante una noche. Después, la reacción se concentró, se disolvió de nuevo 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condición de HPLC: Gilson de acceso 30 ilimitado usando el software Unipoint con una realización Varian Polaris 5  C18(2) 100A, 50 x 30,00 mm y 5 micrómetros de 10 minutos (30 ml/min, CH3CN al 33%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 58%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones de producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar el CH3CN. A la mezcla acuosa resultante se le añadieron 5 ml de NaHCO3 acuoso saturado y después se extrajo 3 veces con
EtOAc. Después, los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron para producir el compuesto del título (37 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 473 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,12 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,66 (m, 4H), 2,67 (dt, J = 3,7, 1,8 Hz, 1H), 3,38 (s a, 1H), 4,50 (s a, 1H), 4,73 (s a, 1H), 5,06 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,04-6,20 (s a, 2H), 6,58 (s a, 1H), 7,30-7,46 (m, 6H), 7,55 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 11,52 (s a, 1H).
Intermedio 238
N-{(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}benzamida
NH2
A {(3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (100 mg, 0,234 mmol) en un vial de 20 ml se le añadieron 2 ml de HCl 4 M en 1,4-dioxano y la solución se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después, la reacción se concentró. Al sólido blanquecino resultante se le añadió una solución premezclada de ácido benzoico (34,4 mg, 0,281 mmol), EDC (67,4 mg, 0,352 mmol), HOBT (71,8 mg, 0,469 mmol) y N-metilmorfolina (0,129 ml, 1,172 mmol) en DMF (2 ml) y la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se diluyó con agua (10 ml), después se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, después se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron para producir el compuesto del título en bruto (30 mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 431 [M+H]+.
Ejemplo 113
N-{(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}benzamida
NH2
O N
N
N N
H H
N
N
NH2
A N-{(3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}benzamida (101 mg, 0,234 mmol) en etanol (2 ml) en un vial de 5 ml que puede cerrarse herméticamente se le añadió hidrazina monohidrato (0,22 ml, 7,02 mmol) y la reacción se tapó y se calentó durante una noche a 100ºC. La reacción se concentró, se disolvió de nuevo en 1 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condición de HPLC: Gilson de acceso ilimitado usando el software Unipoint con una realización Varian Polaris 5  C18(2) 100A, 50 x 30,00 mm y 5 micrómetros de 10 minutos (30 ml/min, CH3CN al 15%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 40%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones de producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. A la mezcla acuosa resultante se le añadió NaHCO3 acuoso sat. y después se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). El extracto orgánico lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (20 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 443 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,19 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,24 (s, 1H), 1,66-1,93 (m, 5H), 2,54 (s, 1H), 3,89 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 5,39 (s, 2H), 6,13 (s a, 1H), 6,62 (s, 1H), 7,47-7,59 (m, 5H), 7,71 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 7,94 (s, 1H), 8,43 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 11,51 (s a, 1H).
Intermedio 239
N-{(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}-2-fenilacetamida
N
N
NH2
Se añadió una solución premezclada de ácido fenilacético (45,0 mg, 0,331 mmol), EDC (79 mg, 0,413 mmol), HOBT
5 (84 mg, 0,551 mmol) y N-metilmorfolina (0,152 ml, 1,378 mmol) en DMF (2 ml) a 4-{2-amino-6-[(2R,5S)-5-amino-2metil-1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (100 mg, 0,276 mmol) en DMF (2 ml). La solución se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se diluyó con agua (10 ml) y después se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El aceite resultante se purificó con una columna Biotage SNAP de 10 g con un gradiente de EtOAc
10 de 0 a 85% en hexano durante 25 minutos para producir el compuesto del título (105 mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 445 [M+H]+.
Ejemplo 114
N-{(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}-2-fenilacetamida
N
N
NH2
15 A N-{(3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}-2-fenilacetamida (105 mg, 0,236 mmol) en etanol (2 ml) en un vial de 5 ml que puede cerrarse se le añadió hidrazina (0,22 ml, 7,1 mmol) y después la reacción se tapó y se calentó en una placa caliente a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró, después se disolvió de nuevo en 1 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condición de HPLC: Gilson de acceso ilimitado usando el software Unipoint con una realización Varian Polaris 5  C18(2) 100A, 50 x 30,00 mm y 5 micrómetros de
20 10 minutos (30 ml/min, CH3CN al 15%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 45%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones de producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. A la mezcla acuosa resultante se le añadió NaHCO3 acuoso sat. y después se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). El extracto orgánico lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se transfirió a un vial Haystack. Se añadió agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (44 mg) en forma de un
25 sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 457 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,15 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,61-1,76 (m, 4H), 2,57-2,68 (m, 1H), 3,44 (s, 2H), 3,59 (dd, J = 7,7, 3,4 Hz, 1H), 4,38-4,84 (m, 2H), 5,38 (s, 2H), 6,11 (s a, 2H), 6,56 (s, 1H), 7,21-7,36 (m, 5H), 7,54 (dd, J = 8,6, 1,0 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 8,16 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 11,51 (s, 1H).
Intermedio 240
30 6-(Trifluorometil)-3-piperidinacarboxilato de cis-metilo
O
A una solución de 6-(trifluorometil)-3-piridinacarboxilato de metilo (10 g, 48,7 mmol) en CH3OH (100 ml) se le añadió óxido de platino (IV) (0,332 g, 1,462 mmol) seguido de HCl concentrado (4,47 ml, 53,6 mmol) en un agitador Parr. La mezcla se desgasificó (3 x) con nitrógeno y la mezcla de reacción se agitó durante una noche en una atmósfera de 35 379,211 kPa (55 psi) de H2 (durante la primera hora fueron necesarias ~3 recargas con gas H2 para reestablecer la presión a 379,211 kPa (55 psi)). La mezcla de reacción se desgasificó (3 x) con nitrógeno, se filtró, se trató con 1 ml
de HCl 12 N y se concentró. El residuo resultante se co-evaporó en tolueno (100 ml) seguido de CH3CN (100 ml) y se secó al vacío para producir la sal HCl del compuesto del título (10,8 g) en forma de un sólido de color blanco que era el isómero cis al 90%. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): 1,84 (m, 1H), 2,00 (m, 1H), 2,15 (dc, J = 14,2, 3,5 Hz, 1H), 2,30-2,39 (m, 1H), 3,09-3,16 (m, 1H), 3,42 (dd, J = 13,4, 4,3, 1H), 3,80 (s, 3H), 4,17-4,35 (m, 1H).
Intermedio 241
Ácido cis-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxílico
O
En un tubo que puede cerrarse herméticamente se añadió 6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxilato de cis-metilo (7,8 g, 31,5 mmol) seguido de 1,4-dioxano (30 ml) y HCl concentrado (30 ml). El tubo se cerró herméticamente y la mezcla resultante se agitó durante 6 horas a 100ºC. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se diluyó con tolueno (~100 ml). La mezcla se concentró y el residuo resultante se destiló azeotrópicamente con más tolueno (~100 ml) seguido de evaporación del CH3CN (~50 ml). El sólido resultante se trituró con CH3CN y se filtró para producir la sal HCl del producto deseado (5,9 g) en forma de un sólido de color blanco. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,78-1,92 (m, 1H), 2,00 (m, 1H), 2,16 (m, 1H), 2,33 (m, 1H), 3,07 (m, 1H), 3,37 (dd, J = 13,4, 4,3 Hz, 1H), 3,79 (d, J = 13,1 Hz, 1H), 4,25 (m, 1H).
Intermedio 242
Ácido cis-1-[6-cloro-2-(metiltio)-4-pirimidinil]-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxílico
F
S
A ácido cis-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxílico (3,393 g, 14,52 mmol) en THF (1,5 ml) se le añadieron tamices moleculares y la mezcla resultante se agitó durante 5 minutos en un matraz de fondo redondo de 250 ml. La mezcla se enfrió en un baño de hielo y después se añadió lentamente LiHMDS (43,6 ml, 43,6 mmol). Después de que se completara la adición, se añadió 4,6-dicloro-2-(metiltio)pirimidina (3,40 g, 17,43 mmol). Después de 0,5 horas, la reacción se interrumpió con 30 ml de agua y con la adición gota a gota de HCl 6 N hasta que el pH se volvió ácido. La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron para producir el compuesto del título en bruto en forma de un aceite. LC-MS (ES) m/z = 356 [M+H]+.
Intermedio 243
Ácido cis-1-[6-cloro-2-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxílico
F
Una suspensión de ácido cis-1-[6-cloro-2-(metiltio)-4-pirimidinil]-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxílico (180 mg, 0,506 mmol) en CH3OH (8 ml) y agua (2,5 ml) se enfrió en un baño de hielo y se trató lentamente con una solución premezclada de oxone (778 mg, 1,27 mmol) en agua (3 ml). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. El pH se ajustó a pH ácido con HCl 1 N y después se añadieron 5 ml de agua. La mezcla resultante se filtró sobre un embudo de vidrio poroso para aislar el compuesto del título (79 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 388, 390 [M+H]+.
Intermedio 244
Cis-1-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclopentil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
F
En un vial de 20 ml se disolvió ácido cis-1-[6-cloro-2-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-6-(trifluorometil)-3piperidinacarboxílico (77 mg, 0,199 mmol) en 1,4-dioxano (1 ml) y se añadió base de Hunig (0,14 ml, 0,794 mmol) seguido de metilamina (0,199 ml, 0,397 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Se añadieron 100 l más de metilamina 2 M en THF y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente 10 hasta que el análisis por LCMS indicó que se había completado en >95%. La reacción se concentró, después se disolvió de nuevo con DMF (2 ml) y se añadieron HOBT (60,8 mg, 0,397 mmol), EDC (57,1 mg, 0,298 mmol), Nmetilmorfolina (0,109 ml, 0,993 mmol) y ciclopentilamina (0,029 ml, 0,298 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Se añadió agua (15 ml) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. El
15 material resultante se disolvió en 1 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condición de HPLC: Gilson de acceso ilimitado usando el software Unipoint con una realización Varian Polaris 5  C18(2) 100A, 50 x 30,00 mm y 5 micrómetros de 10 minutos (30 ml/min, CH3CN al 40%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 60%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones de producto se combinaron, se concentraron y se liofilizaron para producir el compuesto del título (40 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 406 [M+H]+.
20 Intermedio 245
Cis-1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclopentil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
F
A una mezcla de cis-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclopentil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
(46 mg, 0,113 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (28,0 mg, 0,170 mmol) en 1,4-dioxano (1 ml) se le 25 añadió NaHCO3 acuoso saturado (0,5 ml) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla resultante durante 10 minutos
en un vial de 5 ml que puede cerrarse herméticamente. Se añadió Pd(Ph3P)4 (19,7 mg, 0,017 mmol) y se burbujeó
N2 durante 5 minutos más. El vial se tapó y la mezcla de reacción se calentó a 100ºC durante una noche. La
reacción se diluyó con agua (5 ml) y después se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos se secaron
sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. Después, el aceite resultante de color amarillo se purificó en una 30 columna Biotage SNAP de 10 g con un gradiente de EtOAc de 0 a 40% en hexano para producir el compuesto del
título (37 mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 491 [M+H]+.
Ejemplo 115
cis-1-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclopentil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida F NH2
F
F
N O
N
N H
NH N
N
NH A cis-1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclopentil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
5 (37 mg, 0,075 mmol) en etanol (2 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (0,11 ml, 2,26 mmol) en un vial de 5 ml que puede cerrarse herméticamente y la reacción se tapó y se calentó durante una noche a 100ºC. La reacción se concentró, después se disolvió de nuevo en 1 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condición de HPLC: Gilson de acceso ilimitado usando el software Unipoint con una realización Varian Polaris 5  C18(2) 100A, 50 x 30,00 mm y 5 micrómetros de 10 minutos (35 ml/min, CH3CN al 25%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 50%/H2O, TFA al 0,1%) con
10 detección UV a 254 nm). Las fracciones de producto se combinaron y el volumen se redujo a presión reducida hasta que la mayor parte del CH3CN se retiró. A la mezcla acuosa resultante se le añadió una solución acuosa saturada de NaHCO3 (10 ml). Después, la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El material resultante se transfirió a un vial y se añadió agua para la liofilización durante una noche y producir el compuesto del título (20 mg) en forma
15 de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 503 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,30-1,45 (m, 3H), 1,47-1,58 (m, 2H), 1,64 (dd, J = 8,3, 4,3 Hz, 2H), 1,73-1,87 (m, 5H), 2,08 (s a, 1H), 2,33 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 2,84 (s a, 3H), 3,94-4,07 (m, 1H), 5,39 (s, 2H), 6,78 (s a, 2H), 7,62-7,74 (m, 2H), 7,94 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 8,02 (s a, 1H), 11,52 (s, 1H).
Intermedio 246
20 Cis-1-[6-cloro-2-(metiltio)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
F
S
A ácido cis-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxílico (50 mg, 0,254 mmol) en THF (1,5 ml) en un vial de 5 ml que puede cerrarse herméticamente se le añadieron tamices moleculares y la mezcla resultante se agitó durante 5 minutos. Se añadió gota a gota LiHMDS (0,888 ml, 0,888 mmol), la mezcla resultante se agitó a temperatura 25 ambiente durante 2 minutos y después se añadió 4,6-dicloro-2-(metiltio)pirimidina (59,4 mg, 0,304 mmol). La reacción se comprobó por LCMS después de 5 minutos y se observó una conversión muy pura. Después, la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas más. Se añadió agua (5 ml) seguido de la adición gota a gota de HCl 1 N hasta que la mezcla se volvió ligeramente ácida. Después, la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml) y los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se 30 concentraron. El aceite en bruto se disolvió en DMF (1,5 ml) y después se añadieron HOBT (78 mg, 0,507 mmol), EDC (58,3 mg, 0,304 mmol) y N-metilmorfolina (0,139 ml, 1,268 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 10 minutos. Se añadió bencilamina (0,033 ml, 0,304 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente. El análisis por LCMS de la reacción indicó una conversión pura. A la reacción se le añadió agua (10 ml) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Después, los extractos orgánicos se
35 combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. Después, el aceite de color amarillo se purificó en una columna Biotage SNAP de 10 g con un gradiente de EtOAc de 0 a 35% en hexanos durante 30 minutos para producir el compuesto del título (49 mg) en forma de un aceite transparente. LC-MS (ES) m/z = 445 [M+H]+.
Intermedio 247
1-[6-Cloro-2-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
F F
F N Cl
O
NH NN OS
O
Una suspensión de cis-1-[6-cloro-2-(metiltio)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
5 (550 mg, 1,236 mmol) en CH3OH (5 ml) y agua (1,5 ml) se enfrió en un baño de hielo y se trató lentamente con una solución premezclada de oxone (2280 mg, 3,71 mmol) en agua (0,5 ml). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante el fin de semana. Se añadió agua (10 ml) y la mezcla resultante se filtró. El sólido se secó en una estufa de vacío a 35ºC durante una noche para producir el compuesto del título en bruto (834 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 477 [M+H]+.
10 Intermedio 248
Cis-1-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
F
NH
En un matraz de fondo redondo de 100 ml se disolvió cis-1-[6-cloro-2-(metilsulfonil)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-6(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida (400 mg, 0,839 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml), después se añadió base de
15 Hunig (0,730 ml, 4,19 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 5 minutos. Se añadió metilamina (1,677 ml, 3,35 mmol, 2 M en THF) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La reacción se concentró y después se añadió CH3OH (15 ml). Se observó un sólido insoluble y la mezcla se filtró. El filtrado se concentró para producir el compuesto del título (301 mg) en forma de un aceite transparente. LC-MS (ES) m/z = 428 [M+H]+.
20 Intermedio 249
Cis-1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
F F N
F O
N
F
NH NN
NH
A una mezcla de cis-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida (100 mg, 0,234 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (57,8 mg, 0,351 mmol) en 1,4-dioxano (2 ml) se le 25 añadió NaHCO3 acuoso saturado y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 10 minutos en un vial para microondas de 5 ml. Se añadió Pd(Ph3P)4 (40,5 mg, 0,035 mmol) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 5 minutos más. El vial se tapó y la mezcla de reacción se calentó durante una noche sobre una placa caliente a 100ºC. La reacción se diluyó con agua (5 ml) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El aceite de color amarillo resultante 30 se purificó en una columna Biotage SNAP de 10 g con un gradiente de EtOAc de 0 a 40% en hexano durante 30 minutos para producir el compuesto del título (66 mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 513
[M+H]+.
Ejemplo 116
Cis-1-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
F NH2
F
F
N O
N
N H
NH NN
NH
A una solución de 1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-6-(trifluorometil)-3piperidinacarboxamida (66 mg, 0,129 mmol) en etanol (2 ml) en un vial para microondas de 5 ml se le añadió hidrazina monohidrato (0,121 ml, 3,86 mmol). La reacción se tapó y se calentó durante una noche. Puesto que la reacción no se había completado, se añadieron 50 l más de hidrazina monohidrato y se calentó durante una noche. Después, la reacción se concentró, se disolvió de nuevo en 1 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condición de HPLC: Gilson de acceso ilimitado usando el software Unipoint con una realización Varian Polaris 5  C18(2) 100A, 50 x 30,00 mm y 5 micrómetros de 10 minutos (35 ml/min, CH3CN al 25%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 50%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones de producto se combinaron y el volumen se redujo al vacío hasta que se retiró la mayor parte del CH3CN. Se añadió NaHCO3 acuoso saturado (10 ml) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El material resultante se transfirió en un vial, se añadió agua y se liofilizó durante una noche para producir el compuesto del título (27 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 525 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,81-1,88 (m, 3H), 2,06-2,14 (m, 1H), 2,432,49 (m, 1H), 2,84 (s a, 3H), 3,14 (s a, 1H), 4,20-4,43 (m, 2H), 5,40 (s, 2H), 6,80 (s a, 1H), 7,22-7,31 (m, 3H), 7,317,38 (m, 2H), 7,62-7,69 (m, 1H), 7,71-7,75 (m, 1H), 8,02 (s a, 1H), 8,54 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 11,53 (s, 1H).
Ejemplo 117
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-3-piperidinacarboxamida
NH2
NO
N H
NH N
N
NH2
Un vial para microondas de 5 ml se cargó con (3S)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-N-ciclohexil-3piperidinacarboxamida (50 mg, 0,148 mmol), N-acetil-N-[1-acetil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1Hindazol-3-il]acetamida (68,4 mg, 0,178 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (121 mg, 0,148 mmol). Se añadieron 1,4-dioxano (1,5 ml) y K2CO3 2 M (0,75 ml), el vial se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se calentó en un microondas durante 10 minutos a 150ºC. La capa orgánica superior se separó y se concentró. El material resultante se disolvió en 1 ml de DMSO, después se purificó por HPLC (condición de HPLC: Gilson de acceso ilimitado usando el software Trilution con una realización phenomenex Luna 5 C18(2) 100A, AXIA. 50 x 30,00 mm y 5 micrómetros, de 7,3 minutos (47 ml/min, CH3CN al 10%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 40%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones de producto se combinaron, se concentraron y se liofilizaron para aislar 19 mg del intermedio de producto de Suzuki en forma de una sal TFA. Después, el sólido se disolvió en CH3OH (4 ml) y HCl 6 N (ac.) (100 l, 0,600 mmol) y la mezcla resultante se calentó a 95ºC durante 2 horas. Después, la reacción se concentró y se disolvió de nuevo en 2 ml de agua y 1 ml de CH3CN. La mezcla resultante se liofilizó para producir una sal HCl del compuesto del título (30 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 435 [M+H]+. El espectro de RMN observó un gran pico de agua. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,08-1,30 (m, 4H), 1,36-1,59 (m, 2H), 1,59-1,77 (m, 4H), 1,91 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 3,09 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 3,20 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 4,38 (s a, 1H), 4,57-4,91 (m, 1H), 6,99 (d, J = 14,2 Hz, 1H), 7,57 (dd, J = 8,0, 4,7 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,94-8,01 (m, 2H), 12,62 (d, J = 1,0 Hz, 1H).
Intermedio 250 (3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida
Un vial para microondas de 5 ml se cargó con (3S)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-N-fenil-3-piperidinacarboxamida (100 mg, 0,301 mmol), ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (59,6 mg, 0,362 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (24,61 mg, 0,030 mmol). Se añadieron 1,4-dioxano (4 ml) y K2CO3 2 M (2 ml) y el vial se cerró herméticamente y se calentó en un microondas durante 10 minutos a 150ºC. La capa orgánica superior se separó y se concentró. El aceite resultante se disolvió en 1 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condición de HPLC: Gilson de acceso ilimitado usando el software Trilution con una realización phenomenex Luna 5 C18(2) 100A, AXIA. 50 x 30,00 mm y 5 micrómetros, de 7,3 minutos (47 ml/min, CH3CN al 23%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 53%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones de producto se combinaron, se concentraron y se liofilizaron para producir una sal TFA del compuesto del título (59 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 417 [M+H]+.
Ejemplo 118
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida
NH N
N
NH2
A una solución de (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida (55 mg, 0,132 mmol) en etanol (3 ml) en un vial de 5 ml que puede cerrarse herméticamente se le añadió hidrazina monohidrato (0,149 ml, 3,04 mmol). El vial se tapó y se calentó a 100ºC durante una noche. El análisis por HPLC mostró una conversión limpia completa de 70%. Se añadieron 100 l más de hidrazina monohidrato y el calentamiento continuó. La reacción se concentró y el material resultante se disolvió en 1 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condición de HPLC: Gilson de acceso ilimitado usando el software Trilution con una realización phenomenex Luna 5 C18(2) 100A, AXIA. 50 x 30,00 mm y 5 micrómetros, de 7,3 minutos (47 ml/min, CH3CN al 10%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 40%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones de producto se combinaron, se concentraron y se liofilizaron para producir una sal TFA del compuesto del título (42 mg) en forma de un producto de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 429 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,43-1,59 (m, 1H), 1,75-1,94 (m, 2H), 2,03-2,16 (m, 1H), 2,57-2,69 (m, 1H), 3,12-3,31 (m, 2H), 3,43-3,54 (m, 2H), 4,40-4,58 (m, 1H), 4,72-5,07 (m, 1H), 6,94-7,11 (m, 2H), 7,30 (m, 2H), 7,37-7,43 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,75 (s a, 1H), 7,90 (d, 1H), 10,08 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 12,10 (s a, 2H).
Intermedio 251
(3R)-N-Fenil-3-piperidinacarboxamida
Una solución de ácido (3R)-1-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-3-piperidinacarboxílico (1 g, 4,36 mmol), HOBT (1,336 g, 8,72 mmol), EDC (1,003 g, 5,23 mmol) y N-metilmorfolina (2,40 ml, 21,81 mmol) en DMF (5 ml) se agitó durante 5 5
minutos. Después, se añadió anilina (0,48 ml, 5,23 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 72 horas. Después, la reacción se interrumpió con 30 ml de agua y se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El aceite resultante se purificó con una columna de gel de sílice con un gradiente de EtOAc de 0 a 35% en hexano para aislar 1,01 g del producto N-Boc protegido en forma de un sólido. Después, al sólido se le añadió una solución premezclada de TFA (2 ml, 13 mmol) y CH2Cl2 (4 ml). La mezcla resultante se agitó durante 0,5 horas y después se concentró para obtener una sal TFA del compuesto del título en bruto en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 205 [M+H]+.
Intermedio 252
(3R)-1-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-N-fenil-3-piperidinacarboxamida
NH N
N
NH2
A una solución de (3R)-N-fenil-3-piperidinacarboxamida (339 mg, 1,66 mmol) en CH3CN (3 ml) en un vial para microondas de 5 ml se le añadieron base de Hunig (0,87 ml, 4,98 mmol) y 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (299 mg, 1,83 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 160ºC en condiciones de microondas durante 0,5 horas. Después de la refrigeración, se formó un sólido a partir de la mezcla de reacción. Después, el sólido se aisló por filtración, lavando con CH3CN para producir el compuesto del título en bruto (239 mg) en forma de un sólido de color pardo claro. LC-MS (ES) m/z = 332 [M+H]+.
Intermedio 253
(3R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida
Un vial para microondas de 5 ml se cargó con (3R)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-N-fenil-3-piperidinacarboxamida (100 mg, 0,301 mmol), ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (59,6 mg, 0,362 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (24,6 mg, 0,030 mmol). Se añadieron 1,4-dioxano (4 ml) y K2CO3 2 M (2 ml) y el vial se cerró herméticamente y se calentó a 150ºC en condiciones de microondas durante 10 minutos. La capa orgánica superior se separó y se concentró. El aceite resultante se disolvió en 1 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condición de HPLC: Gilson de acceso ilimitado usando el software Trilution con una realización phenomenex Luna 5  C18(2) 100A, AXIA. 50 x 30,00 mm y 5 micrómetros, de 7,3 minutos (47 ml/min, CH3CN al 23%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 53%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones de producto se combinaron, se concentraron y se liofilizaron para producir una sal TFA del compuesto del título (93 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 417 [M+H]+.
Ejemplo 119
(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida
NH N
N
NH2
A una solución de (3R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida (90 mg, 0,216 mmol) en Etanol (4 ml) en un vial para microondas de 5 ml se le añadió hidrazina monohidrato (0,24 ml, 4,97 mmol). El vial se tapó y se calentó durante una noche a 100ºC. La reacción se completó sólo en 50% según se determinó mediante análisis por HPLC. Se añadió más cantidad de hidrazina monohidrato (0,244 ml, 4,97 mmol) y la 5 mezcla de reacción se continuó para calentar durante una noche. La reacción se concentró y el material resultante se disolvió en 1 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condición de HPLC: Gilson de acceso ilimitado usando el software Trilution con una realización phenomenex Luna 5  C18(2) 100A, AXIA. 50 x 30,00 mm y 5 micrómetros, de 7,3 minutos (47 ml/min, CH3CN al 12%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 42%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones de producto se combinaron, se concentraron y se liofilizaron para producir una sal TFA del
10 compuesto del título (66 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 429 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,43-1,62 (m, 1H), 1,75-1,94 (m, 2H), 2,02-2,14 (m, 1H), 2,55-2,69 (m, 1H), 3,11-3,31 (m, 2H), 3,43-3,53 (m, 1H), 4,41-4,58 (m, 1H), 4,72-5,06 (m, 1H), 6,96-7,10 (m, 2H), 7,31 (m, 2H), 7,37-7,43 (m, 1H), 7,61 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,75 (s a, 1H), 7,89 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 10,08 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 12,10 (s a, 2H).
Intermedio 254
15 5-{[(Ciclopentiloxi)carbonil]amino}-2-metil-1-piperidinacarboxilato de cis-fenilmetilo
O
A una mezcla de ácido cis-6-metil-1-{[(fenilmetil)oxi]carbonil}-3-piperidinacarboxílico (200 mg, 0,721 mmol), alcohol ciclopentilo (1,5 ml, 16,51 mmol) y trietilamina (0,151 ml, 1,082 mmol) se le añadió lentamente azidofosfato de difenilo (dppa) (0,171 ml, 0,793 mmol), la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos y
20 después a 125ºC. Después de 4 h, la reacción se diluyó con EtOAc (40 ml) y se lavó con agua. Después, el extracto orgánico se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se purificó con una columna Biotage SNAP de 10 g con un gradiente de EtOAc de 0 a 50% en hexano durante 35 minutos para producir el compuesto del título (160 mg) en forma de un aceite transparente. LC-MS (ES) m/z = 361 [M+H]+.
Intermedio 255
25 [6-Metil-3-piperidinil]carbamato de cis-ciclopentilo
H
Se disolvió 5-{[(ciclopentiloxi)carbonil]amino}-2-metil-1-piperidinacarboxilato de cis-fenilmetilo (160 mg, 0,444 mmol) en etanol (3 ml) en un matraz de fondo redondo de 25 ml. Se añadió Pd/C (94 mg, 0,044 mmol) de tipo degussa y la mezcla resultante se desgasificó al vacío y se cargó con H2 en un globo. La reacción se agitó durante 4 horas y
30 después se filtró a través de un filtró de jeringa. El filtrado se concentró para producir el compuesto del título en bruto (107 mg) en forma de un aceite transparente. LC-MS (ES) m/z = 227 [M+H]+.
Intermedio 256
[1-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-6-metil-3-piperidinil]carbamato de cis-ciclopentilo
NH2
35 A una solución de [6-metil-3-piperidinil]carbamato de cis-ciclopentilo (107 mg, 0,473 mmol) en etanol (3 ml) se le añadieron 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (116 mg, 0,709 mmol) y K2CO3 (98 mg, 0,709 mmol) en un vial de 5 ml que puede cerrarse herméticamente. La solución se tapó y se calentó a 100ºC durante una noche. Después, la reacción se comprobó mediante análisis por LCMS y se determinó que no se había completado. Se añadieron más cantidad de 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (30 mg) y K2CO3 (50 mg) y la mezcla resultante se calentó durante una noche. La
40 reacción se concentró y después se añadieron 5 ml de DMF. Algunos sólidos no eran solubles. Se añadió agua (10 ml) y la mezcla resultante se extrajo 3 veces con EtOAc. Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. Después, el aceite transparente se purificó con una columna Biotage SNAP de 10 g con un gradiente de EtOAc de 0 a 50% en hexano durante 30 minutos para producir el compuesto del título (135 mg) en forma de un aceite transparente. LC-MS (ES) m/z = 354 [M+H]+.
Intermedio 257
{1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de cis-ciclopentilo
NH2
Se disolvieron [1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-6-metil-3-piperidinil]carbamato de cis-ciclopentilo (135 mg, 0,382 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (94 mg, 0,572 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml) en un vial de 20 ml que puede cerrarse herméticamente. Se añadió NaHCO3 acuoso saturado (1,5 ml) y la mezcla resultante se burbujeó 10 con gas N2 durante 10 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (66 mg, 0,057 mmol) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 5 minutos más. El vial se tapó y se calentó durante una noche a 100ºC. La reacción se filtró a través de un filtro de jeringa y se lavó con 1,4-dioxano. El filtrado se concentró, después se disolvió de nuevo en 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condición de HPLC: Gilson de acceso ilimitado usando el software Unipoint con una realización Varian Polaris 5  C18(2) 100A, 50 x 30,00 mm y 5 micrómetros de 10 minutos (30 ml/min, CH3CN al
15 33%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 58%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones de producto se combinaron y se liofilizaron para producir una sal TFA del compuesto del título (98 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 439 [M+H]+.
Ejemplo 120
{1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de cis-ciclopentilo
NH2
O
N N
O N HH N
N
NH2
Se disolvió {1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de cis-ciclopentilo (98 mg, 0,223 mmol) en etanol (3 ml) en un vial de 5 ml que puede cerrarse herméticamente. Se añadió hidrazina monohidrato (0,329 ml, 6,70 mmol), el vial se tapó y la mezcla de reacción se calentó durante una noche a 100ºC. Después, la reacción se concentró, se disolvió de nuevo en 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condición de 25 HPLC: Gilson de acceso ilimitado usando el software Unipoint con una realización Varian Polaris 5  C18(2) 100A, 50 x 30,00 mm y 5 micrómetros de 10 minutos (30 ml/min, CH3CN al 20%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 45%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones de producto se combinaron, se concentraron y se liofilizaron para obtener una sal TFA del compuesto del título (57 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 450 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,21 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 1,52-1,74 (m, 8H), 1,76
30 1,85 (m, 2H), 2,66-3,08 (m, 1H), 3,40 (s a, 2H), 4,18-4,76 (m, 1H), 4,85-5,35 (m, 1H), 4,99 (s a, 1H), 6,83-6,95 (m, 1H), 7,24 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 8,34 Hz, 1H), 7,70-7,77 (m, 1H), 7,91 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 11,93-12,27 (m, 2H).
Intermedio 258
Ácido (3S,6R)-6-metil-3-piperidinacarboxílico
OH
En un tubo de 75 ml que puede cerrarse herméticamente se añadieron (3S,6R)-6-metil-1,3-piperidinadicarboxilato de 5
1-(fenilmetil) 3-metilo (10 g, 34,3 mmol), 1,4-dioxano (20 ml) y HCl concentrado (20 ml) y la mezcla se agitó a 100ºC durante 3 horas. Después, la mezcla se enfrió a temperatura ambiente. El análisis por HPLC no mostró material de partida y el análisis por RMN mostró que el material principal era el producto deseado. La solución se transfirió a un matraz de fondo redondo de 500 ml y se concentró a sequedad. La trituración con Et2O y CH3CN produjo la sal HCl del compuesto del título (6,17 g) en forma de un aceite incoloro que se convirtió en un sólido de color blanco después de reposar durante una noche. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  6,51 (s, 1H), 7,04 (m, 1H), 7,32 (m, 2H), 7,46 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H), 7,66 (m, 2H), 7,75 (dd, J = 8,3, 0,8 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H).
Intermedio 259
Ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico
NH2
Una mezcla de 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (3 g, 18,3 mmol), ácido (3S,6R)-6-metil-3-piperidinacarboxílico (3,98 g, 20,12 mmol) y NaHCO3 (7,68 g, 91 mmol) en 1,4-dioxano (100 ml) y agua (50 ml) se agitó durante una noche a 117ºC en un tubo cerrado herméticamente. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. El análisis por LCMS mostró que el material de partida 4,6-dicloro-2-pirimidinamina se había consumido. Después, se añadieron ácido 4ciano-3-fluorobencenoborónico (3,32 g, 20,12 mmol) y Pd(Ph3P)4 (0,423 g, 0,366 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 24 horas a 117ºC. La mezcla se vertió en agua (300 ml) y EtOAc (200 ml). En este momento, el pH de la solución era de 9. El compuesto permaneció en la capa de agua. La capa de agua se separó de la capa orgánica. Había una pequeña cantidad de suspensión de color blanco y de color amarillo en la capa de agua, que se retiró por filtración (no era el producto). A la capa acuosa se le añadió gota a gota HCl 6 N para preparar el pH = 4. Se formó un precipitado. El precipitado se filtró, se lavó con agua y se secó para producir el compuesto del título (3,6 g) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 356 [M+H]+.
Intermedio 260
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (415 mg, 1,128 mmol) y HATU (533 mg, 1,401 mmol) en DMF (3 ml) en un matraz de fondo redondo de 10 ml se le añadió base de Hunig (0,408 ml, 2,34 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió ciclohexilamina (0,16 ml, 1,401 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución de la capa orgánica se concentró y el sólido formado se recristalizó en CH3CN para producir el compuesto del título (245 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 437 [M+H]+.
Ejemplo 121 (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida
NH N
N
NH2
En un tubo para microondas, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6
5 metil-3-piperidinacarboxamida (235 mg, 0,538 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,376 ml, 2,153 mmol) e hidrazina anhidra (0,101 ml, 3,23 mmol) y la mezcla de suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. Cuando la temperatura de la reacción alcanzó 100ºC con calentamiento, todo el sólido de la mezcla se disolvió. Después de una noche, se había formado una suspensión de color amarillo al igual que una pequeña cantidad de sólido de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. El sólido de
10 color negro y el sólido de color amarillo se separaron cuidadosamente ya que el sólido de color negro era más pesado que el sólido de color amarillo en el disolvente de CH3OH. El sólido de color amarillo en CH3OH se filtró y se lavó con CH3OH para retirar el color y producir el compuesto del título (157 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 449 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,05-1,35 (m, 8H), 1,50-1,88 (m, 9H), 2,24 (s, 1H), 2,90 (s, 1H), 3,46-3,60 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,07 (s, 2H), 6,57 (s, 1H), 7,57 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,70 (d, J =
15 8,3 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1H), 11,49 (s, 1H).
Intermedio 261
Ácido (3S)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-3-piperidinacarboxílico
OH N
N
NH2
Una mezcla de 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (1,397 g, 8,52 mmol), ácido (3S)-3-piperidinacarboxílico (1 g, 7,74 mmol)
20 y base de Hunig (2,70 ml, 15,49 mmol) en NMP (10 ml) se calentó en el microondas a 140ºC durante 90 minutos. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto deseado. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se vertió en agua (160 ml). El sólido formado se filtró y el sólido filtrado se identificó como el material de partida 4,6dicloro-2-pirimidinamina. El producto permaneció en la solución acuosa. Se añadió HCl 1 N para ajustar a pH = 7. Después, la solución acuosa se extrajo 3 veces con una mezcla de CHCl3 e isopropanol (200:10 ml). Las capas
25 orgánicas se combinaron y se evaporaron para producir el compuesto del título (1,99 g) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 257 [M+H]+.
Intermedio 262
Ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico
OH N
N
NH2
30 Una mezcla de ácido (3S)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-3-piperidinacarboxílico (1,9 g, 7,40 mmol), ácido (4-ciano3-fluorofenil)borónico (1,465 g, 8,88 mmol) y NaHCO3 (0,622 g, 7,40 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) y agua (2,5 ml) se agitó durante 10 minutos en una atmósfera de nitrógeno. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,171 g, 0,148 mmol) y el tubo para microondas se calentó a 140ºC durante 50 minutos en un microondas. El análisis por LCMS mostró 50% del producto deseado. Después, la reacción se calentó a 100ºC durante una noche. La mezcla de color amarillo se filtró y se secó. El sólido se lavó con Et2O (3 x) y se secó. El filtrado se vertió en agua. El sólido formado se filtró y se secó. Los sólidos se combinaron para producir el compuesto del título (1,8 g) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 342 [M+H]+.
Intermedio 263
5 (3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(4-fluorofenil)-3-piperidinacarboxamida
A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (150 mg, 0,439 mmol), EDC (118 mg, 0,615 mmol) y HOBT (83 mg, 0,615 mmol) en DMF (8 ml) se le añadió 4-fluoroanilina (68,4 mg, 0,615 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis por LCMS
10 mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (90 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 435 [M+H]+.
Ejemplo 122
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-fluorofenil)-3-piperidinacarboxamida
En un tubo para microondas se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(4-fluorofenil)-3piperidinacarboxamida (90 mg, 0,207 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,11 ml, 0,621 mmol) e hidrazina anhidra (0,026 ml, 0,829 mmol) y la mezcla de color amarillo se calentó a 150ºC durante 150 minutos en un microondas. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente producto con 10% de material de 20 partida restante. Los sólidos de color negro se filtraron y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo de color amarillo resultante se disolvió en CH3OH y se purificó por HPLC (CH3CN/H2O con HCO2H al 0,1%) para producir una sal de ácido fórmico del compuesto del título (20 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 447 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,50 (m, 1H), 1,85 (m, 2H), 2,07 (m, 1H), 3,17 (m, 2H), 4,52 (m, 1H), 4,74 (m, 1H), 4,98 (m, 1H), 6,94-7,08 (m, 1H), 7,16 (m, 2H), 7,39 (s, 1H), 7,56-7,69 (m, 2H), 7,73 (s, 1H), 7,82-8,04
25 (m, 1H), 10,13 (m, 1H), 11,86-12,16 (m, 2H).
Intermedio 264
(3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(3-metilfenil)-3-piperidinacarboxamida
N
O
NH N
N
NH2
A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (146 mg, 0,428 30 mmol), EDC (115, 0,599 mmol) y HOBT (81 mg, 0,599 mmol) en DMF (8 ml) en un matraz de fondo redondo de 100 ml se le añadió m-toluidina (45,8 mg, 0,428 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante
4 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (90 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 431 [M+H]+.
Ejemplo 123
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(3-metilfenil)-3-piperidinacarboxamida
NH2
NO
N
H
NH N
N
NH2
En un tubo para microondas se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(3-metilfenil)-3piperidinacarboxamida (90 mg, 0,209 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,11 ml, 0,627 mmol) e hidrazina anhidra 10 (0,026 ml, 0,836 mmol) y la mezcla de color amarillo se calentó a 150ºC durante 150 minutos en un microondas. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente producto con un 10% de material de partida restante. Los sólidos de color negro se filtraron y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo de color amarillo resultante se disolvió en CH3OH y se purificó por HPLC (CH3CN/H2O con HCO2H al 0,1%) para producir una sal de ácido fórmico del compuesto del título (77 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z
15 = 443 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,52 (m, 1H), 1,84 (m, 2H), 2,07 (m, 1H), 2,27 (s, 3H), 3,50 (m, 1H), 4,48 (m, 2H), 4,75 (m, 1H), 4,90-5,13 (m, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,94-7,08 (m, 1H), 7,13-7,26 (m, 1H), 7,41 (m, 6 H), 7,75 (s, 1H), 7,83-8,00 (m, 1H), 10,00 (s, 1H), 12,07 (s, 2H).
Intermedio 265
(3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(3,4-difluorofenil)-3-piperidinacarboxamida
F
20 A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (146 mg, 0,428 mmol), EDC (115 mg, 0,599 mmol) y HOBT (81 mg, 0,599 mmol) en DMF (8 ml) se le añadió 3,4-difluoroanilina (77 mg, 0,599 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el
25 producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (95 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 453 [M+H]+.
Ejemplo 124 (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(3,4-difluorofenil)-3-piperidinacarboxamida NH2
N
O
N
H
NH N
N
NH2
F F
En un tubo para microondas se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(3,4-difluorofenil)3-piperidinacarboxamida (90 mg, 0,199 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,104 ml, 0,597 mmol) e hidrazina anhidra (0,025 ml, 0,796 mmol) y la mezcla de color amarillo se calentó a 150ºC durante 150 minutos en condiciones de microondas. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente producto. Los sólidos de color negro se filtraron y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo de color amarillo resultante se disolvió en CH3OH y se purificó por HPLC (CH3CN/H2O con HCO2H al 0,1%) para producir el compuesto del título (65 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 465 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,50 (m, 1H), 1,69-1,96 (m, 2H), 2,06 (m, 1H), 3,19 (m, 1H), 3,40-3,55 (m, 1H), 4,36-4,56 (m, 2H), 4,73-4,97 (m, 1H), 6,91-7,09 (m, 1H), 7,25-7,52 (m, 4H), 7,66-8,03 (m, 4H), 10,25-10,42 (m, 1H), 10,33 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 12,09 (s, 2H).
Intermedio 266
(3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(4-metilfenil)-3-piperidinacarboxamida
N
O NH N N NH2
A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (146 mg, 0,428 mmol), EDC (115 mg, 0,599 mmol) y HOBT (81 mg, 0,599 mmol) en DMF (8 ml) se le añadió p-toluidina (46 mg, 0,43 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (94 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 431 [M+H]+.
Ejemplo 125
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-metilfenil)-3-piperidinacarboxamida
NH2
NO N
H
NH N
N
NH2
En un tubo para microondas se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(4-metilfenil)-3piperidinacarboxamida (90 mg, 0,209 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,11 ml, 0,627 mmol) e hidrazina anhidra (0,026 ml, 0,836 mmol) y la mezcla de color amarillo resultante se calentó a 150ºC durante 150 minutos en condiciones de microondas. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente producto con un 10% de material de partida restante. Los sólidos de color negro se filtraron y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo de color amarillo resultante se disolvió en CH3OH y se purificó por HPLC (CH3CN/H2O con HCO2H al 0,1%) para producir una sal de ácido fórmico del compuesto del título (31 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 443 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,49 (m, 1H), 1,70-1,95 (m, 2H), 1,98-2,12 (m, 1H), 2,25 (s, 3H), 3,16 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 4,49 (m, 2H), 4,74-4,99 (m, 1H), 7,11 (t, J = 8,3 Hz, 2H), 7,39 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,74 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 9,97 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 12,03 (m, 2H).
Intermedio 267
(3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(2-fluorofenil)-3-piperidinacarboxamida
NH N
N
NH2F
A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (150 mg, 0,439
10 mmol), EDC (118 mg, 0,615 mmol) y HOBT (83 mg, 0,615 mmol) en DMF (8 ml) se le añadió 2-fluoroanilina (68,4 mg, 0,615 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (191 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 435 [M+H]+.
15 Ejemplo 126
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(2-fluorofenil)-3-piperidinacarboxamida
NH N
N
NH2F
En un tubo para microondas se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(2-fluorofenil)-3piperidinacarboxamida (191 mg, 0,440 mmol) 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,077 ml, 0,440 mmol) e hidrazina 20 anhidra (0,055 ml, 1,759 mmol) y la mezcla de color amarillo resultante se calentó a 150ºC durante 150 minutos en condiciones de microondas. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente producto. Los sólidos de color negro se filtraron y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo amarillo se disolvió en CH3OH y se purificó por HPLC (CH3CN/H2O con HCO2H al 0,1%) para producir una sal de ácido fórmico del compuesto del título (20 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 447 [M+H]+. 1H
25 RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,51 (m, 1H), 1,84 (m, 2H), 2,01-2,20 (m, 1H), 3,21-3,24 (m, 2H), 3,44-3,61 (m, 1H), 4,36-4,53 (m, 1H), 4,61-5,09 (m, 1H), 6,97 (m, 1H), 7,17 (m, 3H), 7,39 (s, 1H), 7,67-8,01 (m, 3H), 9,84 (m, 1H), 11,87-12,17 (m, 2H).
Intermedio 268
(3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(3-fluorofenil)-3-piperidinacarboxamida
NH N N NH2
F
A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (150 mg, 0,439 mmol), EDC (118 mg, 0,615 mmol) y HOBT (83 mg, 0,615 mmol) en DMF (8 ml) se le añadió 3-fluoroanilina (68,4 mg, 0,615 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (97 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 434 [M+H]+.
Ejemplo 127
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(3-fluorofenil)-3-piperidinacarboxamida
F
En un tubo para microondas se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(3-fluorofenil)-3piperidinacarboxamida (90 mg, 0,207 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,109 ml, 0,621 mmol) e hidrazina anhidra (0,026 ml, 0,829 mmol) y la mezcla de color amarillo se calentó a 150ºC durante 150 minutos en condiciones de microondas. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente producto. Los sólidos de color negro se filtraron y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo de color amarillo resultante se disolvió en CH3OH y se purificó por HPLC (CH3CN/H2O con HCO2H al 0,1%) para producir una sal de ácido fórmico del compuesto del título (65 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 447 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): 1,35-1,44 (m, 1H), 1,69 (m, 1H), 1,91-2,11 (m, 2H), 2,12-2,27 (m, 1H), 2,61-2,78 (m, 1H), 3,39-3,80 (m, 1H), 4,24-4,41 (m, 1H), 4,68-5,17 (m, 1H), 6,85 (m, 2H), 7,22-7,47 (m, 3H), 7,51-7,60 (m, 1H), 7,79 (m, 1H), 7,89-8,01 (m, 1H).
Intermedio 269
(3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(2-metilfenil)-3-piperidinacarboxamida
A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (146 mg, 0,428 mmol), EDC (115, 0,599 mmol) y HOBT (81 mg, 0,599 mmol) en DMF (8 ml) se le añadió o-toluidina (64 mg, 0,60 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc se añadió para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (92 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 431 [M+H]+.
Ejemplo 128
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(2-metilfenil)-3-piperidinacarboxamida
En un tubo de microondas se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(2-metilfenil)-3piperidinacarboxamida (90 mg, 0,209 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,11 ml, 0,627 mmol) e hidrazina anhidra (0,026 ml, 0,836 mmol) y la mezcla de color amarillo se calentó a 150ºC durante 150 minutos en condiciones de microondas. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente producto con 10% del 5 material de partida restante. Los sólidos de color negro se filtraron y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo de color amarillo resultante se disolvió en CH3OH y se purificó por HPLC (CH3CN/H2O con HCO2H al 0,1%) para producir una sal de ácido fórmico del compuesto del título (50 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 443 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): 1,73 (m, 1H), 1,91-2,15 (m, 2H), 2,26 (m, 4H), 2,702,92 (m, 1H), 3,44 (m, 1H), 3,50-3,84 (m, 1H), 4,30 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 4,67-5,11 (m, 1H), 6,79 -6,95 (m, 1H), 7,09
10 7,33 (m, 4H), 7,47 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,83 (s, 1H) 7,99 (m, 1H).
Intermedio 270
(3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(4-clorofenil)-3-piperidinacarboxamida
A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (150 mg, 0,439
15 mmol), EDC (118 mg, 0,615 mmol) y HOBT (83 mg, 0,615 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió 4-cloroanilina (56 mg, 0,44 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 451 [M+H]+.
20 Ejemplo 129
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-clorofenil)-3-piperidinacarboxamida
En un tubo de microondas, se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(4-clorofenil)-3piperidinacarboxamida (190 mg, 0,421 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,22 ml, 1,26 mmol) e hidrazina anhidra 25 (0,053 ml, 1,69 mmol) y la mezcla de color amarillo se calentó a 150ºC durante 180 minutos en condiciones de microondas. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. Los sólidos de color negro se filtraron y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo de color amarillo resultante se disolvió en CH3OH a 50ºC y se usó EtOAc para la trituración. Cuando la solución se volvió ligeramente turbia, se enfrió a temperatura ambiente para dar el compuesto del título puro cristalizado de color amarillo claro (59 mg). LC
30 MS (ES) m/z = 463 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,45 (m, 1H), 1,64 -1,85 (m, 2H), 1,99 (m, 1H), 2,55 (m, 1H), 2,78 -3,07 (m, 2H), 4,38 -4,82 (m, 2H), 5,37 (s, 2H), 6,10 (s, 2H), 6,64 -6,74 (m, 1H), 7,31 -7,40 (m, 2H), 7,53 -7,76 (m, 4H), 7,97 (s, 1H), 10,18 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 271
(3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-[4-(metiloxi)fenil]-3-piperidinacarboxamida
A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (150 mg, 0,439
5 mmol), EDC (118 mg, 0,615 mmol) y HOBT (83 mg, 0,615 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió p-anisidina (54 mg, 0,44 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (191 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 447 [M+H]+.
10 Ejemplo 130
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[4-(metiloxi)fenil]-3-piperidinacarboxamida
NH2
NO N
H
NH N
N
NH2O
En un tubo de microondas, se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-[4-(metiloxi)fenil]-3piperidinacarboxamida (190 mg, 0,426 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,223 ml, 1,28 mmol) e hidrazina 15 anhidra (0,053 ml, 1,702 mmol) y la mezcla de color amarillo se calentó a 150ºC durante 180 minutos en el microondas. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. Los sólidos de color negro se filtraron y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo de color amarillo resultante se disolvió en CH3OH a 50ºC y se usó EtOAc para la trituración. Cuando la solución se volvió ligeramente turbia, se enfrió a temperatura ambiente para dar el compuesto del título puro cristalizado de color amarillo claro (22 mg). LC
20 MS (ES) m/z = 459 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,46 (m, 1H), 1,65 -1,84 (m, 2H), 1,98 (m, 1H), 2,79 3,06 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 4,49 (m, 1H), 4,68 (m, 1H), 5,37 (s, 2H), 6,10 (s, 2H), 6,68 (s, 1H), 6,88 (d, J = 9,1 Hz, 2H), 7,53 (d, J = 9,1 Hz, 2H), 7,58 -7,65 (m, 1H), 7,66 -7,78 (m, 1H), 7,97 (s, 1H), 9,87 (s, 1H), 11,49 (s, 1H).
Intermedio 272
(3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-[3-(metiloxi)fenil]-3-piperidinacarboxamida
O 25
A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (150 mg, 0,439 mmol), EDC (118 mg, 0,615 mmol) y HOBT (83 mg, 0,615 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió m-anisidina (54 mg, 0,44 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El
30 producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (194 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 447 [M+H]+.
Ejemplo 131
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[3-(metiloxi)fenil]-3-piperidinacarboxamida
NH N
N
NH2 O En un tubo de microondas, se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-[3-(metiloxi)fenil]-3
5 piperidinacarboxamida (190 mg, 0,426 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,223 l, 1,277 mmol) e hidrazina anhidra (0,053 ml, 1,702 mmol) y la mezcla de color amarillo se calentó a 150ºC durante 180 minutos en condiciones de microondas. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. Los sólidos de color negro se retiraron por filtración y el filtrado de color amarillo se evaporó. Al líquido de color pardo resultante se le añadió EtOAc (1 ml) y la mezcla se calentó a 50ºC. Se formaron dos capas. La capa superior es una
10 solución en EtOAc y se pipeteó en un vial diferente. La capa del fondo es el producto comparativamente puro. Este compuesto se trató con agua a 50ºC y se formó un sólido. Este material se filtró y se secó para dar el compuesto del título (90 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 459 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,45 (m, 1H), 1,61 -1,85 (m, 2H), 2,01 (m, 1H), 2,79 -3,06 (m, 2H), 3,74 (s, 3H), 4,36 -4,79 (m, 2H), 5,37 (s, 2H), 6,02 -6,15 (s, 2H), 6,55 -6,74 (m, 2H), 7,09 -7,26 (m, 2H), 7,32 -7,41 (m, 1H), 7,51 -7,78 (m, 2H),
15 7,91 -8,00 (m, 1H), 10,01 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 273
(3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(3-clorofenil)-3-piperidinacarboxamida
NH N
N
NH2 Cl
A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (150 mg, 0,439
20 mmol), EDC (118 mg, 0,615 mmol) y HOBT (83 mg, 0,615 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió 3-cloroanilina (56 mg, 0,44 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (193 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 451 [M+H]+.
25 Ejemplo 132
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(3-clorofenil)-3-piperidinacarboxamida
NH N
N NH2 Cl
En un tubo de microondas, se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(3-clorofenil)-3piperidinacarboxamida (190 mg, 0,421 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,22 ml, 1,26 mmol) e hidrazina anhidra (0,053 ml, 1,69 mmol) y la mezcla de color amarillo se calentó a 150ºC durante 180 minutos en condiciones de microondas. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. Los 5 sólidos de color negro se retiraron por filtración y el filtrado de color amarillo se evaporó. Al líquido de color pardo resultante se le añadió EtOAc (1 ml) y la mezcla se calentó a 50ºC. Se formaron dos capas. La capa superior es una solución en EtOAc y se pipeteó en un vial diferente. La capa del fondo es el producto comparativamente puro. Este compuesto se trató con agua a 50ºC y se formó un sólido. Este material se filtró y se secó para dar el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo claro (150 mg). LC-MS (ES) m/z = 463 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz,
10 DMSO-d6): 1,45 (m, 1H), 1,63 -1,85 (m, 2H), 2,01 (m, 1H), 2,79 -3,06 (m, 2H), 4,62 -4,76 (m, 1H), 5,37 (s, 2H), 6,11 (s, 2H), 6,69 (s, 1H), 7,10 (m, 1H), 7,28 (m, 1H), 7,52 (m, 1H), 7,55 (m, 1H), 7,79 (m, 1H), 7,82 (s, 1H), 8,03 (s, 1H), 10,22 (s, 1H), 11,45 -11,57 (s, 1H).
Intermedio 274
(3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida
NH2
15 A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (150 mg, 0,439 mmol), EDC (118 mg, 0,615 mmol) y HOBT (83 mg, 0,615 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió 1-fenilmetanamina (47 mg, 0,44 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El
20 producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (190 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 431 [M+H]+.
Ejemplo 133
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida
NH2
25 En un tubo de microondas, se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-3piperidinacarboxamida (190 mg, 0,441 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,308 ml, 1,761 mmol) e hidrazina anhidra (0,083 ml, 2,64 mmol) y la mezcla de color amarillo se calentó a 150ºC durante 180 minutos en condiciones de microondas. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. Los sólidos de color negro se filtraron y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo de color amarillo resultante se
30 disolvió en CH3OH y se usó EtOAc para la trituración, produciendo el compuesto del título (29 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 443 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,31 -1,52 (m, 1H), 1,61 -1,81 (m, 2H), 1,86 -2,04 (m, 1H), 2,29 -2,45 (m, 1H), 2,77 -3,05 (m, 2H), 4,17 -4,25 (m, 1H), 4,31 -4,69 (m, 3H), 5,38 (s, 2H), 6,09 (s, 2H), 6,58 -6,70 (m, 1H), 7,17 -7,39 (m, 5H), 7,58 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,96 (s, 1H), 8,46 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 275 (3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(4-piridinilmetil)-3-piperidinacarboxamida
NH2
A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (150 mg, 0,439 mmol), EDC (118 mg, 0,615 mmol) y HOBT (83 mg, 0,615 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió 4-(aminometil)piridina (47,5 mg, 0,439 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (190 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 432 [M+H]+.
Ejemplo 134
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-piridinilmetil)-3-piperidinacarboxamida
NH2
NO
N
NN
H NH N
N
NH2
En un tubo de microondas, se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-3piperidinacarboxamida (190 mg, 0,440 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,31 ml, 1,76 mmol) e hidrazina anhidra (0,083 ml, 2,64 mmol) y la mezcla de color amarillo se calentó a 150ºC durante 180 minutos en condiciones de microondas. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. Los sólidos de color negro se filtraron y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo amarillo se sonicó en EtOAc a 50ºC y el sólido se filtró. Después, este material se sonicó en agua a 50ºC y el sólido se filtró y se lavó con agua para producir el compuesto del título (92 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 444 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,37 -1,55 (m, 1H), 1,62 -1,80 (m, 2H), 1,96 (m, 1H), 2,35 -2,45 (m, 1H), 2,81 -3,05 (m, 2H), 4,18 -4,46 (m, 3H), 4,56 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,10 (s, 2H), 6,65 (s, 1H), 7,25 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 7,59 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H), 7,67 -7,78 (m, 1H), 7,96 (s, 1H), 8,45 -8,65 (m, 3H), 11,51 (s, 1H).
Intermedio 276
(3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(4-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida
A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (150 mg, 0,439 mmol), EDC (118 mg, 0,615 mmol) y HOBT (83 mg, 0,615 mmol) en DMF (3 ml) en un matraz de fondo redondo de 100 ml se le añadió 4-metilciclohexanamina (50 mg, 0,44 mmol) y La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (190 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 437 [M+H]+.
Ejemplo 135
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida NH2 N
O
N
N
H
NH N
N
NH2
En un tubo de microondas, se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(4-metilciclohexil)3-piperidinacarboxamida (190 mg, 0,435 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,30 ml, 1,74 mmol) e hidrazina anhidra (0,082 ml, 2,61 mmol) y la mezcla de color amarillo se calentó a 150ºC durante 180 minutos en condiciones de microondas. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. Los sólidos de color negro se filtraron y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo amarillo se sonicó en EtOAc a 50ºC y el sólido se filtró. Después, este material se sonicó en agua a 50ºC y el sólido se filtró y se lavó con agua para producir el compuesto del título (125 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 449 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 0,87 (m, 3H), 0,89 -1,94 (m, 13H), 2,18 -2,44 (m, 1H), 2,78 -3,05 (m, 2H), 3,76 (m, 1H), 4,39 (m, 2H), 5,38 (s, 2H), 6,12 (s, 2H), 6,62 (s, 1H), 7,54 -7,79 (m, 3H), 7,90 -7,99 (m, 1H), 11,51 (s, 1H).
Intermedio 277
(3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-3-piperidinacarboxamida
N
O NH N N N NH2N
A una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (150 mg, 0,439 mmol) y HATU (201 mg, 0,527 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,15 ml, 0,88 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió 1-metil-1H-pirazol-5-amina (51 mg, 0,53 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (180 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 421 [M+H]+.
Ejemplo 136
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-3-piperidinacarboxamida
NH2
NO N
H
NH N
N
N NH2N
En un tubo de microondas, se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(1-metil-1H-pirazol5-il)-3-piperidinacarboxamida (180 mg, 0,428 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,30 ml, 1,71 mmol) e hidrazina anhidra (0,081 ml, 2,57 mmol) y la mezcla de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. Los sólidos de color negro se filtraron y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo de color amarillo resultante se trató con EtOAc (3 ml) a 50ºC con agitación y la capa libre de solución de EtOAc se extrajo por vertido. Después, la capa
sólida se trató con agua (3 ml) a 50ºC con agitación y la suspensión se filtró. El sólido de color amarillo claro se lavó con agua y se secó para dar el compuesto del título (82 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 433 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,39 -1,57 (m, 1H), 1,62 -1,84 (m, 2H), 2,04 (m, 1H), 2,55 2,71 (m, 1H), 2,81 -2,94 (m, 1H), 2,97 -3,11 (m, 1H), 3,67 (s, 3H), 4,39 -4,73 (m, 2H), 5,38 (s, 2H), 6,11 (s, 2H), 6,21 (s, 1H), 6,69 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,56 -7,77 (m, 2H), 7,97(s, 1H), 10,00 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 278
(3S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)-3-piperidinacarboxamida
En un matraz de fondo redondo de 100 ml, a una solución de ácido (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4pirimidinil]-3-piperidinacarboxílico (150 mg, 0,439 mmol) y HATU (201 mg, 0,527 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,15 ml, 0,88 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió 1,3dimetil-1H-pirazol-5-amina (59 mg, 0,53 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (190 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 435 [M+H]+.
Ejemplo 137
(3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)-3-piperidinacarboxamida
NH2
NO N
H
NH N
N
N NH2N
En un tubo de microondas, se añadieron (3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(1-metil-1H-pirazol5-il)-3-piperidinacarboxamida (190 mg, 0,437 mmol), 3 ml de EtOH, base de Hunig (0,31 ml, 1,75 mmol) e hidrazina anhidra (0,082 ml, 2,62 mmol) y la mezcla de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. Los sólidos de color negro se retiraron por filtración y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo de color amarillo resultante se trató con EtOAc (3 ml) a 50ºC con agitación y la capa libre de solución de EtOAc se extrajo por vertido. Después, la capa sólida se trató con agua (3 ml) agua a 50ºC con agitación y la suspensión se filtró. El sólido de color amarillo claro se lavó con agua y se secó para dar el compuesto del título (3,3 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 447 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,47 (s, 1H), 1,74 (s, 2H), 2,08 (s, 4H), 2,33 (m, 1H), 2,67 (m, 1H), 2,82 -3,09 (m, 2H), 3,57 (s, 3H), 5,38 (s, 2H), 6,00 (s, 1H), 6,07 -6,27 (m, 2H), 6,69 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,71 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,96 (s, 1H), 9,92 (s, 1H), 11,51 (s, 1H).
El filtrado se secó, y en MeOH y se purificó por HPLC, 30 ml/min, partiendo con CH3CN al 14%/Agua, con 0,1% de HCO2H, terminando con 17% de CH3CN/Agua, con 0,1% de HCO2H. 10 minutos de realización. El producto es un sólido de color amarillo claro, en forma de su sal del ácido fórmico. LC-MS (ES) m/z = 447 [M+H]+.
Intermedio 279 Ácido (3S,6R)-1-[6-(4-acetil-3-fluorofenil)-2-amino-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico
NH2
Una mezcla de 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (1,69 g, 10,31 mmol), ácido (3S,6R)-6-metil-3-piperidinacarboxílico (2,037 g, 10,31 mmol) y NaHCO3 (3,90 g, 46,4 mmol) en 1,4-dioxano (100 ml) y agua (50 ml) se agitó durante una noche a 117ºC en un tubo que puede cerrarse herméticamente. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. El análisis por LCMS mostró que la mayor parte del material de partida 4,6-dicloro-2-pirimidinamina se había consumido. Después, se añadieron ácido (4-acetil-3-fluorofenil)borónico (2,81 g, 15,5 mmol) y Pd(Ph3P)4 (0,238 g, 0,206 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 24 horas a 117ºC. La mezcla se vertió en agua (300 ml) y EtOAc (200 ml). En este momento, el pH de la solución era de 9. El compuesto permaneció en la capa de agua. La capa de agua se separó de la capa orgánica. Había una pequeña cantidad de suspensión de color negro y de color rojo en la capa de agua, que se retiró por filtración. (No había producto). A la capa acuosa se le añadió gota a gota HCl 6 N hasta que se alcanzó el pH = 4. Se formó un precipitado. El precipitado se filtró, se lavó con agua y se secó para producir el compuesto del título (1,87 g) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 373 [M+H]+.
Intermedio 280
(3S,6R)-1-[6-(4-Acetil-3-fluorofenil)-2-amino-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida
O
NH2
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[6-(4-acetil-3-fluorofenil)-2-amino-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (308 mg, 0,827 mmol) y HATU (377 mg, 0,992 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,289 ml, 1,654 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Después, se añadió bencilamina (0,11 ml, 0,99 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución orgánica se concentró a sequedad para dar el compuesto del título (339 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 462 [M+H]+.
Ejemplo 138
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida
NH2
En un tubo que puede cerrarse herméticamente, se agitaron juntos (3S,6R)-1-[6-(4-acetil-3-fluorofenil)-2-amino-4pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida (90 mg, 0,195 mmol), hidrocloruro de O-metilhidroxilamina (16,3 mg, 0,20 mmol) y K2CO3 (32,3 mg, 0,234 mmol) en DME (3 ml) durante 4 horas a 57ºC. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado que contenía el intermedio de oxima se concentró al vacío hasta alcanzar un volumen de 2 ml.
Después, se añadieron EtOH (3 ml), base de Hunig (0,05 ml, 0,27 mmol) e hidrazina anhidra (0,013 ml, 0,410 mmol) y la mezcla de color amarillo resultante se calentó durante una noche a 120ºC en un baño de aceite. La solución se volvió de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. El sólido de color negro se filtró y el filtrado de color amarillo se evaporó. El residuo de color amarillo resultante se disolvió en CH3OH y se purificó por HPLC (CH3CN/H2O con HCO2H al 0,1%) para producir una sal del ácido fórmico del compuesto del título (9 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 456 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): 1,32 (m, 4H), 1,75 -1,91 (m, 3H), 1,97 -2,12 (m, 1H), 2,41 -2,53 (m, 1H), 2,60 (s, 3H), 3,11 -3,27 (m, 1H), 4,33 -4,50 (m, 2H), 4,56 -4,74 (m, 1H), 6,59 (s, 1H), 7,23 -7,41 (m, 5H), 7,54 -7,63 (m, 1H), 7,96 (m, 1H), 7,94 (s, 1H).
Intermedio 281
Ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico
NH2
Una mezcla de 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (0,2 g, 1,22 mmol), ácido (3S,6R)-6-metil-3-piperidinacarboxílico (0,265 g, 1,342 mmol) y NaHCO3 (V, 6,10 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) y agua (5 ml) se agitó durante una noche a 117ºC en un tubo que puede cerrarse herméticamente. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. El análisis por LCMS mostró que la mayor parte del material de partida 4,6-dicloro-2-pirimidinamina se había consumido. Después, se añadieron pinacol éster del ácido 1H-indazol-6-borónico (0,327 g, 1,342 mmol) y Pd(Ph3P)4 (0,028 g, 0,024 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 24 horas a 117ºC. La mezcla se vertió en agua (200 ml). El sólido formado se filtró. A la capa acuosa se le añadió gota a gota HCl 6 N hasta que se alcanzó el pH = 4. Se formó un precipitado y la solución parecía turbia. Se usó una solución de isopropanol al 10% en EtOAc (200 ml) para extraer el compuesto, pero la mayor parte del compuesto permaneció en agua. Esta capa orgánica se desechó. Después, se usó una solución de isopropanol al 10% en CH2Cl2 (100 ml) para la extracción. La mezcla se volvió turbia después de asentarse durante 30 minutos y se formó una cantidad significativa de sólido. El sólido de color blanco se filtró, se lavó con agua y se secó para producir el compuesto del título (95 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 353 [M+H]+.
Ejemplo 139
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (95 mg, 0,270 mmol) y HATU (123 mg, 0,324 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,094 ml, 0,54 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Después, se añadió ciclohexilamina (0,037 ml, 0,324 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La capa orgánica se concentró a sequedad y el sólido de tipo vidrio resultante se disolvió en CH3OH. Se vertió agua en la solución y se formó un sólido de color blanco, que se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío para dar el compuesto del título (100 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 434 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): 1,29 (m, 9H), 1,62 -2,09 (m, 9H), 2,32 -2,45 (m, 1H), 3,06 -3,18 (m, 1H), 3,61 -3,73 (m, 1H), 4,44 -4,84 (m, 1H), 6,53 (s, 1H), 7,65 (dd, J = 8,5, 1,4 Hz, 1H), 7,85 (dd, J = 8,5, 1,4 Hz, 1H), 8,06 (s, 1H), 8,09 (s, 1H).
Intermedio 282
(3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(ciclohexilmetil)-6-metil-3-piperidinacarboxamida
NH2
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170
5 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,17 ml, 0,96 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Después, se añadió ciclohexilmetilamina (0,07 ml, 0,53 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y el sólido formado se filtró, se lavó con agua y se secó para producir el compuesto del título (187 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 451
10 [M+H]+.
Ejemplo 140
(3S,6R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(ciclohexilmetil)-6-metil-3-piperidinacarboxamida
NH2
En un tubo de microondas, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(ciclohexilmetil)
15 6-metil-3-piperidinacarboxamida (187 mg, 0,415 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,290 ml, 1,66 mmol) e hidrazina anhidra (0,078 ml, 2,49 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro y la solución de color amarillo se separaron cuidadosamente ya que el sólido de color negro era más pesado que la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua
20 (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró y se lavó con agua, se secó al vacío y después se trató con EtOAc y CH3OH. El sólido en el disolvente se filtró, se lavó con EtOAc y se secó al vacío para producir el compuesto del título (115 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 463 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSOd6): 0,88 (m, 2H), 1,05 -1,26 (m, 6H), 1,32 -1,46 (m, 1H), 1,54 -1,74 (m, 8H), 1,75 -1,88 (m, 1H), 2,21 -2,38 (m, 1H), 2,76 -3,08 (m, 3H), 5,38 (s, 2H), 6,07 (s, 2H), 6,57 (s, 1H), 7,54 -7,59 (m, 1H), 7,66-7,72 (m, 1H), 7,87 -7,92
25 (m, 1H), 7,94 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 283
(3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-{[4-(metiloxi)fenil]metil}-3-piperidinacarboxamida
NH2
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170
30 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Después, se añadió 1-[4-(metiloxi)fenil]metanamina (65,6 mg, 0,478 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y el sólido formado se filtró, se lavó con agua y se secó para dar el compuesto del título (203 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS
(ES) m/z = 475 [M+H]+.
Ejemplo 141
(3S,6R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-{[4-(metiloxi)fenil]metil}-3piperidinacarboxamida
NH2 NOO
N
N
H
NH NN
NH2
En un tubo de microondas, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-{[4(metiloxi)fenil]metil}-3-piperidinacarboxamida (203 mg, 0,43 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,30 ml, 1,71 mmol) e hidrazina anhidra (0,080 ml, 2,56 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro y la solución de color amarillo se separaron cuidadosamente ya que el sólido de color negro es más pesado que la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró y se lavó con agua, se secó al vacío y después se trató con EtOAc y CH3OH. El sólido en el disolvente se filtró, se lavó con EtOAc y se secó al vacío para producir el compuesto del título (101 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 487 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,07 -1,22 (m, 3H), 1,56 -1,94 (m, 4H), 2,33 (m, 1H), 2,94 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 4,10 -4,22 (m, 1H), 4,23 -4,37 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,08 (s, 2H), 6,58 (s, 1H), 6,83 -6,97 (m, 2H), 7,20 (d, J = 8,6 Hz, 2 H), 7,57 (dd, J = 8,6, 1,26 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H) 8,36 -8,48 (m, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 284
(3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-ciclopentil-6-metil-3-piperidinacarboxamida
N O
F NH N N NH2
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Después, se añadió ciclopentilamina (44,8 mg, 0,526 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y el sólido formado se filtró, se lavó con agua y se secó para producir el compuesto del título (174 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 423 [M+H]+.
Ejemplo 142
(3S,6R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclopentil-6-metil-3-piperidinacarboxamida
NH2
NO N
H
NH N
N
NH2
En un tubo de microondas, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-ciclopentil-6metil-3-piperidinacarboxamida (174 mg, 0,412 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,288 ml, 1,647 mmol) e hidrazina anhidra (0,078 ml, 2,471 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro y la solución de color amarillo se separaron cuidadosamente ya que el sólido de color negro es más pesado que la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró y se lavó con agua, se secó al vacío y después se trató con EtOAc y
5 CH3OH. El sólido en el disolvente se filtró, se lavó con EtOAc y se secó al vacío para producir el compuesto del título (82 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 435 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,14 (m, 3H), 1,65 (m, 12H), 2,14 -2,33 (m, 1H), 2,76 -3,08 (m, 1H), 3,93 -4,12 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,07 (s, 2H), 6,57 (s, 1H), 7,57 (m, 1H), 7,69 (m, 1H), 7,87 (m, 1H), 7,94 (s, 1H), 11,49 (s, 1H).
Intermedio 285
10 (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-[(1R)-1-ciclohexiletil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Después, se añadió (1R)-1-ciclohexiletanamina (60,9
15 mg, 0,478 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y el sólido formado se filtró, se lavó con agua y se secó para dar el compuesto del título (196 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 465 [M+H]+.
Ejemplo 143
20 (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[(1R)-1-ciclohexiletil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida
En un tubo de microondas, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-[(1R)-1ciclohexiletil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida (195,6 mg, 0,421 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,294 ml, 1,684 mmol) e hidrazina anhidra (0,079 ml, 2,53 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó 25 durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro y la solución de color amarillo se separaron cuidadosamente ya que el sólido de color negro es más pesado que la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó usando CH3CN y el sólido del disolvente se filtró, se lavó con EtOAc y CH3CN y se secó al
30 vacío para producir el compuesto del título (102 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 477 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 0,83 -1,36 (m, 12H), 1,55 -1,85 (m, 9H), 2,20 -2,37 (m, 1H), 2,92 (m, 1H), 3,56 -3,71 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,07 (s, 2H), 6,57 (s, 1H), 7,54 -7,61 (m, 1H), 7,66 -7,78 (m, 2H), 7,94 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 286
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-[(3-fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida
NH2
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170
5 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Después, se añadió 1-(3-fluorofenil)metanamina (60 mg, 0,48 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y el sólido formado se filtró, se lavó con agua y se secó para dar el compuesto del título (201 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z =
10 463 [M+H]+.
Ejemplo 144
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[(3-fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida
NH2
En un tubo de microondas, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-[(3
15 fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida (201 mg, 0,435 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,304 ml, 1,738 mmol) e hidrazina anhidra (0,082 ml, 2,61 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro y la solución de color amarillo se separaron cuidadosamente ya que el sólido de color negro es más pesado que la solución de color amarillo. A la solución de
20 color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó usando CH3CN y el sólido del disolvente se filtró, se lavó con EtOAc y CH3CN y se secó al vacío para producir el compuesto del título (94 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 475 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,16 (m, 3H), 1,60 -1,92 (m, 4H), 2,29 -2,44 (m, 1H), 2,84 -3,07 (m, 1H), 4,20 -4,45 (m, 2H), 5,36 (s, 2H), 6,08 (s, 2H), 6,60 (s, 1H), 7,10 (m, 3H), 7,32 -7,50 (m, 1H), 7,54 -7,63 (m,
25 1H), 7,70 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 8,49 -8,59 (m, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 287
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida
NH2
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170
30 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Después, se añadió bencilamina (56,4 mg, 0,526 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y el sólido formado se filtró, se lavó con agua y se secó para producir el compuesto del título (210 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 445
[M+H]+. Ejemplo 145 (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida
NH2
En un tubo de microondas, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida (201 mg, 0,472 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,330 ml, 1,890 mmol) e hidrazina anhidra (0,089 ml, 2,83 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro y la solución de color amarillo se separaron cuidadosamente ya que el sólido de color negro es más pesado que la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó usando CH3CN y el sólido del disolvente se filtró, se lavó con EtOAc y CH3CN y se secó al vacío para producir el compuesto del título (81 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 457 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,12 -1,21 (m, 3H), 1,59 -1,92 (m, 5H), 2,27 -2,44 (m, 1H), 2,96 (m, 1H), 4,16 -4,45 (m, 2H), 5,38 (s, 2H), 6,00 -6,16 (m, 2H), 6,59 (s, 1H), 7,18 -7,42 (m, 5H), 7,58 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,90 -8,00 (m, 1H), 8,43 -8,55 (m, 1H), 11,50 (s, 1 H).
Intermedio 288
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-[(4-metilfenil)metil]-3-piperidinacarboxamida
NH2
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Después, se añadió 1-(4-metilfenil)metanamina (63,8 mg, 0,526 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y el sólido formado se filtró, se lavó con agua y se secó para dar el compuesto del título de color amarillo (190 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 459 [M+H]+.
Ejemplo 146
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-[(4-metilfenil)metil]-3-piperidinacarboxamida
NH2
En un tubo de microondas, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-[(4metilfenil)metil]-3-piperidinacarboxamida (189,5 mg, 0,413 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,289 ml, 1,653 mmol) e hidrazina anhidra (0,078 ml, 2,480 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la solución se le
añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro y la solución de color amarillo se separaron cuidadosamente ya que el sólido de color negro es más pesado que la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó usando CH3CN y el sólido del disolvente se filtró, se lavó con EtOAc y CH3CN y se secó al vacío para producir el compuesto del título de color amarillo claro (82 mg). LC-MS (ES) m/z = 471 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,15 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,57 -1,94 (m, 5H), 2,23 -2,42 (m, 5H), 2,94 (m, 1H), 4,13 -4,43 (m, 2H), 5,38 (s, 2H), 6,08 (s, 2H), 6,58 (s, 1H), 7,16 (m, 4H), 7,50 -7,62 (m, 1H), 7,63 -7,77 (m, 1H), 7,94 (s, 1H), 8,33 -8,53 (m, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 289
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-[(4-fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida
NH2
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Después, se añadió 1-(4-fluorofenil)metanamina (60 mg, 0,48 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y el sólido formado se filtró, se lavó con agua y se secó para dar el compuesto del título de color amarillo (193 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 463 [M+H]+.
Ejemplo 147
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[(4-fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida
NH2
En un tubo para microondas, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-[(4fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida (192,5 mg, 0,416 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,291 ml, 1,665 mmol) e hidrazina anhidra (0,078 ml, 2,497 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro y la solución de color amarillo se separaron cuidadosamente ya que el sólido de color negro es más pesado que la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó usando CH3CN y el sólido del disolvente se filtró, se lavó con EtOAc y CH3CN y se secó al vacío para producir el compuesto del título de color amarillo claro (84 mg). LC-MS (ES) m/z = 475 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,08 -1,24 (m, 3H), 1,58 -2,01 (m, 4H), 2,22 -2,42 (m, 1H), 2,94 (m, 1H), 4,16 -4,42 (m, 2H), 5,38 (s, 2H), 6,08 (s, 2H), 6,55 -6,65 (m, 1H), 7,12 -7,24 (m, 2H), 7,27 -7,39 (m, 2H), 7,58 (dd, J = 8,5, 1,1 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,95 (s, 1H), 8,50 (m, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 290
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(3-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida N
O
F NH N
N NH2
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170
5 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Después, se añadió 3-metilciclohexanamina (54,2 mg, 0,478 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y el sólido formado se filtró, se lavó con agua y se secó para dar el compuesto del título de color amarillo (186 mg). LC-MS (ES) m/z = 451 [M+H]+.
10 Ejemplo 148
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(3-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida
NH2
NO
N H
NH N
N
NH2
En un tubo de microondas, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(3metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida (186,2 mg, 0,413 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,289 ml, 1,653 15 mmol) e hidrazina anhidra (0,078 ml, 2,480 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro y la solución de color amarillo se separaron cuidadosamente ya que el sólido de color negro es más pesado que la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó
20 usando CH3CN y el sólido del disolvente se filtró, se lavó con EtOAc y CH3CN y se secó al vacío para producir el compuesto del título de color amarillo claro (34 mg). LC-MS (ES) m/z = 463 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 0,67 -0,94 (m, 6H), 0,97 -1,33 (m, 6H), 1,36 -1,87 (m, 7H), 2,13 -2,42 (m, 1H), 2,90 (m, 1H), 3,45 -3,63 (m, 1H), 4,67 (m, 2H), 5,38 (s, 2H), 6,07 (s, 2H), 6,57 (s, 1H), 7,57 (dd, J = 8,6, 1,0 Hz, 1H), 7,70 (m, 2H), 7,94 (s, 1H), 11,49 (s, 1H).
25 Intermedio 291
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(2-feniletil)-3-piperidinacarboxamida
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y 30 la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Después, se añadió 2-feniletanamina (58,0 mg, 0,478
mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y el sólido formado se filtró, se lavó con agua y se secó para dar el compuesto del título de color amarillo (198 mg). LC-MS (ES) m/z = 459 [M+H]+.
Ejemplo 149 (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(2-feniletil)-3-piperidinacarboxamida NH2
NO
N H
NH N
N
NH2
En un tubo de microondas, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(2feniletil)-3-piperidinacarboxamida (197,7 mg, 0,431 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,289 ml, 1,653 mmol) e hidrazina anhidra (0,078 ml, 2,480 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. Cuando la temperatura de la reacción alcanzó 100ºC, se disolvió todo el sólido de la mezcla. Después de una noche, había una suspensión de color amarillo y también se formó una pequeña cantidad de sólido de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro y la solución de color amarillo se separaron cuidadosamente ya que el sólido de color negro es más pesado que la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó usando CH3CN y el sólido del disolvente se filtró, se lavó con EtOAc y CH3CN y se secó al vacío. El residuo amarillo se disolvió en CH3OH y se purificó por HPLC para producir el compuesto del título de color amarillo claro (31 mg). LC-MS (ES) m/z = 517 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,08 -1,18 (m, 4H), 1,56 -1,70 (m, 4H), 1,71 -1,86 (m, 1H), 2,17 2,31 (m, 1H), 2,68 -2,78 (m, 3H), 2,82 -2,99 (m, 1H), 5,24 -5,57 (m, 2H), 6,03 -6,13 (m, 2H), 6,50 -6,58 (m, 1H), 7,16 -7,37 (m, 5H), 7,50 -7,61 (m, 1H), 7,66 -7,76 (m, 1H), 7,90 -7,97 (m, 1H), 8,01 -8,12 (m, 1H), 8,19 (s, 1H).
Intermedio 292
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(4-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida
N O
F NH N N NH2
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. Después, se añadió 4-metilciclohexanamina (54,2 mg, 0,478 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y el sólido formado se filtró, se lavó con agua y se secó para dar el compuesto del título de color amarillo (192 mg). LC-MS (ES) m/z = 451 [M+H]+.
Ejemplo 150
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(4-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida
NH2
NO N
H
NH N N NH2
En un tubo de microondas, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(4metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida (192,2 mg, 0,427 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,298 ml, 1,706 mmol) e hidrazina anhidra (0,080 ml, 2,56 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. Cuando la temperatura de la reacción alcanzó 100ºC, se disolvió todo el sólido de la mezcla. Después de una noche, había una suspensión de color amarillo y también se formó una pequeña cantidad de sólido de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro y la solución de color amarillo se separaron cuidadosamente ya que el sólido de color negro es más pesado que la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó usando CH3CN y el sólido del disolvente se filtró, se lavó con EtOAc y CH3CN y se secó al vacío. El residuo amarillo se disolvió en CH3OH y se purificó por HPLC para producir el compuesto del título de color amarillo claro (95 mg). LC-MS (ES) m/z = 509 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 0,81 -1,04 (m, 4H), 1,08 -1,37 (m, 6H), 1,40 -1,86 (m, 10H), 2,16 -2,44 (m, 1H), 2,92 (m, 1H), 3,78 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,08 (s, 2H), 6,56 (s, 1H), 7,57 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,67 -7,82 (m, 2H), 7,88 -7,99 (m, 1H), 8,16 (s, 1H).
Intermedio 293
(5R)-5-(1-Metiletil)-3-morfolinona
Se cargó NaH (6,24 g, al 60% en peso en aceite mineral, 156 mmol, 2,3 equiv.) en un matraz de fondo redondo de 1 l, seguido de la adición de 100 ml de tolueno. La suspensión se agitó en un baño de hielo. Se añadió en porciones (2R)-2-amino-3-metil-1-butanol (7,0 g, 67,9 mmol) en 50 ml de tolueno. La adición duró 10 minutos, seguido de retirada del baño de refrigeración. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos y se enfrió en un baño de hielo. A la mezcla enfriada se le añadió en porciones una solución de cloruro de cloroacetilo (6,25 ml, 78 mmol, 1,15 equiv.) en 50 ml de tolueno. La mezcla comenzó a espumear. Cuando la adición casi se había completado, la formación de espuma disminuyó. La mezcla resultante se calentó en un condensador de reflujo a 90ºC (temp. del baño de aceite) durante 20 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, seguido de la adición de 22 g de NH4Cl y después de agua (50 ml). Las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 150 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se trituró en 30 ml de hexano. Los sólidos formados se recogieron por filtración, lavando con hexano (2 x 10 ml). El secado al vacío a temperatura ambiente durante 5 horas dio el compuesto del título (6,53 g) en forma de un sólido de color crema. LC-MS (ES) m/z = 144
Intermedio 294
Sal hidrocloruro de (3R)-3-(1-metiletil)morfolina
Una solución de (5R)-5-(1-metiletil)-3-morfolinona (6,38 g, 44,6 mmol) en THF (80 ml) se añadió a temperatura ambiente mediante un embudo de adición en una solución agitada de LiAlH4 (85 ml, 85 mmol, 1,9 equiv.) en un matraz de 3 bocas de 1 l en una atmósfera de nitrógeno gota a gota durante un periodo de 15 minutos. La mezcla resultante se calentó en un baño de aceite a 70ºC (a suave reflujo) durante 4 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y después en un baño de hielo. A la mezcla se le añadieron gota a gota 3,2 ml de agua en THF (20 ml), seguido de 3,2 ml de una solución ac. al 15% de NaOH y 9,6 ml de agua. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, seguido de filtración a través de celite, lavando con EtOAc (250 ml). Al filtrado se le añadieron 50 ml de una solución de HCl 2 N/Et2O, dando como resultado una suspensión. Los sólidos se recogieron por filtración. El lavado con EtOAc (10 ml) y el secado al vacío a temperatura ambiente durante 18 horas produjeron el compuesto del título (4,33 g) en forma de un sólido de color blanco. El filtrado se concentró al vacío y se destiló azeotrópicamente con etanol (3 x 70 ml). El residuo de color pardo resultante se secó al vacío a temperatura ambiente durante 18 horas para dar otra extracción (2,51 g) del compuesto del título. LC-MS (ES) m/z = 130 [M+H]+.
Intermedio 295
4-Cloro-N-metil-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina
NH
Se cargaron sal hidrocloruro de (3R)-3-(1-Metiletil)morfolina (3,0 g, 18,11 mmol) y 4,6-dicloro-N-metil-2
5 pirimidinamina (3,22 g, 18,11 mmol, 1 equiv.) en un tubo de 60 ml que puede cerrarse herméticamente, seguido de la adición de propionitrilo (25 ml) y base de Hunig (9,49 ml, 54,3 mmol, 3 equiv.). El recipiente se cerró herméticamente y se calentó a 110ºC en un baño de aceite durante 96 horas. La mezcla se concentró al vacío. El residuo se repartió entre HCl 2 N frío (100 ml) y EtOAc (2 x 100 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. La fase acuosa ácida se basificó con NaOH 6 N a pH = 10, seguido de la extracción
10 con EtOAc (2 x 100 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío para dar un aceite de color parduzco oscuro. Las dos muestras se purificaron por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 40% en CHCl3. Las fracciones combinadas se concentraron al vacío. El residuo se secó al vacío a temperatura ambiente durante 7 horas para dar el compuesto del título (2,17 g). LC-MS (ES) m/z = 271 [M+H]+.
15 Intermedio 296
2,6-Difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo
NH
Se cargaron 4-cloro-N-metil-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina (1,70 g, 6,28 mmol), ácido (4-ciano3,5-difluorofenil)borónico (1,72 g, 9,42 mmol, 1,5 equiv.), triciclohexilfosfina (0,264 g, 0,94 mmol, 0,15 equiv.), 20 Pd2(dba)3 (0,431 g, 0,47 mmol, 0,075 equiv.) y K3PO4 (2,27 g, 10,67 mmol, 1,7 equiv.) en un matraz de fondo redondo de 250 ml, seguido de la adición de 1,4-dioxano (30 ml) y agua (10 ml). La mezcla se desgasificó y se lavó abundantemente de nuevo con argón (5 x). La mezcla se calentó en un baño de aceite a 100ºC durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se filtró a través de celite y se aclaró con EtOAc (150 ml). El filtrado se concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc (150 ml) y salmuera (40 ml). La capa
25 orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 100%, para producir el compuesto del título (1,64 g) en forma de una espuma de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 374 [M+H]+.
Intermedio 297
2-Fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-6-(metiloxi)benzonitrilo
NH
Se destiló azeotrópicamente 2,6-difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (360 mg, 0,96 mmol) con tolueno (2 x 12 ml). El residuo resultante se recogió en 7,5 ml de CH3OH en forma de una suspensión. A una solución enfriada (baño de hielo) de CH3OH (12,5 ml) se le añadió en porciones NaH (260 mg, al 60% en peso en aceite mineral, 6,5 mmol) en una atmósfera de nitrógeno. Después de que se completara la adición, el baño de hielo se retiró. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos (se supuso que la concentración de CH3ONa era de 0,52 mmol/ml). A la suspensión anterior se le añadió una porción de 2,25 ml (1,17 mmol, 1,2 equiv.) de esta mezcla a temperatura ambiente en una porción. La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. El análisis por LCMS no mostró ninguna conversión. Después de 1 h más, a la mezcla se le añadieron 5 ml de DMF, y ésta se volvió lechosa. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas más, tiempo después del cual se convirtió en una solución transparente. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se concentró al vacío. El residuo se recogió en agua (20 ml) en forma de una suspensión, que se sonicó brevemente y después se filtró. Los sólidos recogidos se secaron al vacío a temperatura ambiente durante 1 hora. La purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 100% dio el compuesto del título (350 mg) en forma de una espuma. LC-MS (ES) m/z = 386 [M+H]+.
Ejemplo 151
6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina
O NH2
O NN
N H
N
N
NH
A una solución de 2-fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-6-(metiloxi)benzonitrilo (350 mg, 0,91 mmol) en etanol (10 ml) se le añadió en una porción hidrazina monohidrato (2,5 ml). La mezcla se calentó a 100ºC durante 20 horas, se enfrió a temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se recogió en agua (10 ml) en forma de una suspensión. Los sólidos se recogieron por filtración, se lavaron con agua (2 x 2 ml) y se secaron al vacío a temperatura ambiente sobre P2O5 durante 20 horas. Los sólidos se lavaron con hexano (2 x 3 ml). El secado al vacío a 65ºC durante 20 horas produjo el compuesto del título (302 mg) en forma de un sólido de color crema. LC-MS (ES) m/z = 398 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): 0,89 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,11 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 2,45 -2,55 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 3,25 -3,35 (m, 1H), 3,53 -3,61 (m, 2H), 3,94 (dd, J = 11,1, 3,5 Hz, 1H), 4,04 (s, 3H), 4,11 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 6,38 (s, 1H), 6,89 (s, 1H), 7,35 (s, 1H).
Intermedio 298
2-(Etiloxi)-6-fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo
Se destiló azeotrópicamente 2,6-difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (377 mg, 1,01 mmol) con tolueno (2 x 15 ml). El residuo se disolvió en 5 ml de DMF en forma de una solución transparente de color amarillo. Se pesó NaH (260 mg, al 60% en peso en aceite mineral, 6,5 mmol) en un matraz de fondo redondo de 5 bocas y de 50 ml, al que en una atmósfera de nitrógeno se le añadió en porciones etanol (7,5 ml). La solución transparente resultante se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. A la solución de color amarillento anterior se le añadió una porción de esta solución (1,40 ml, 1,21 mmol de NaOEt, 1,2 equiv.) mediante una jeringa a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno en una porción. La solución transparente de color naranja resultante se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se concentró al vacío y después se bombeó al vacío para dar un residuo, que se
recogió en 20 ml de agua en forma de una suspensión. Esta suspensión se sonicó brevemente y se filtró. Los sólidos recogidos se disolvieron en EtOAc (50 ml) y la solución orgánica resultante se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. La purificación del residuo resultante por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 100% dio el compuesto del título (315 mg) en forma de un residuo de color amarillento. LC-MS (ES) m/z = 400 [M+H]+.
Ejemplo 152
4-(Etiloxi)-6-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
A una solución de 2-(etiloxi)-6-fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (315 mg, 0,79 mmol) en etanol (10 ml) se le añadió en una porción hidrazina monohidrato (2,5 ml). La mezcla se calentó a 100ºC durante 20 horas, se enfrió a temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo se recogió en agua (10 ml) en forma de una suspensión. Los sólidos se recogieron por filtración y se lavaron con agua (3 x 2 ml). La purificación adicional se realizó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de 1% de A en CHCl3 a 75% de A en CHCl3 (donde A era una mezcla 800/80/3200 de CH3OH/NH4OH/CHCl3). Las fracciones que contenían el producto deseado se combinaron y se concentraron. El residuo resultante se disolvió en una solución de CH3OH al 5% en CHCl3 (15 ml) y se filtró. El filtrado se concentró al vacío y se destiló azeotrópicamente con 10 ml de etanol. El residuo resultante se recogió en 10 ml de agua y se sonicó. Se formó una suspensión y se filtró. Los sólidos recogidos se secaron al vacío a temperatura ambiente sobre P2O5 durante 18 horas y después se lavaron con hexano (3 x 2 ml). El secado adicional al vacío a 65ºC durante 20 horas dio el compuesto del título (231 mg) en forma de un sólido de color crema. LC-MS (ES) m/z = 412 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD): 0,89 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,11 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,55 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 2,45 -2,55 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 3,25 -3,35 (m, 1H), 3,53 -3,61 (m, 2H), 3,94 (dd, J = 11,1, 3,5 Hz, 1H), 4,11 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,30 (c, J = 7,0 Hz, 2H), 6,37 (s, 1H), 6,86 (s, 1H), 7,33 (s, 1H).
Intermedio 299
2-Fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-6-(metiltio)benzonitrilo
NH
Se destiló azeotrópicamente 2,6-difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (348 mg, 0,93 mmol) con tolueno (2 x 10 ml). El residuo se disolvió en DMF (5 ml), a lo que se le añadieron en una porción 479 mg de una solución acuosa de NaSMe (al 15% en peso, 479 mg, 1,03 mmol, 1,1 equiv.) a temperatura ambiente (junto con 1 ml de aclarado de DMF). La mezcla de color pardo pero transparente resultante se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. El análisis por LCMS mostró que aún quedaba 22% de material de partida. A la mezcla se le añadieron 100 mg más de la solución acuosa de NaSMe. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas más. El análisis por LCMS mostró que aún quedaba presente 6% de material de partida. A la mezcla se le añadieron 40 mg de la solución acuosa de NaSMe. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas más. El análisis por LCMS mostró que ya no quedaba material de partida. La mezcla se concentró al vacío. El residuo de tipo gomoso se recogió en 30 ml de agua, se sonicó brevemente para dar una suspensión y se filtró. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 80% en CHCl3, para producir el compuesto del título (350 mg) en forma de una espuma de color amarillento. LC-MS (ES) m/z = 402 [M+H]+.
Ejemplo 153 6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina
S
NH2 O N
N
N H
N
N
NH
A una suspensión de 2-fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-6-(metiltio)benzonitrilo
5 (350 mg, 0,87 mmol) en etanol (10 ml) se le añadió en una porción hidrazina monohidrato (2,5 ml). La suspensión resultante se calentó en un baño de aceite a 100ºC en un condensador de reflujo durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se recogió en agua (30 ml) y se sonicó brevemente. La suspensión resultante se filtró. Los sólidos recogidos experimentaron una purificación por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de
10 1% de A en CHCl3 a 100% de A (donde A era una mezcla 800/80/3200 de CH3OH/NH4OH/CHCl3). Después de la retirada de los disolventes de elución, el residuo se disolvió de nuevo en CHCl3, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se recogió en agua (15 ml) en forma de una suspensión. Los sólidos formados se recogieron por filtración y se secaron al vacío a temperatura ambiente sobre P2O5 durante 20 horas. Estos sólidos se lavaron con hexano (3 x 3 ml). El secado adicional al vacío a 65ºC durante 20 horas dio el compuesto del título (282 mg) en forma de un
15 sólido de color crema. LC-MS (ES) m/z = 414 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  0,89 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,11 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 2,45 -2,55 (m, 1H), 2,65 (s, 3H), 2,96 (s, 3H), 3,25 -3,35 (m, 1H), 3,53 -3,61 (m, 2H), 3,94 (dd, J = 11,2, 3,4 Hz, 1H), 4,11 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 6,40 (s, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,62 (s, 1H).
Intermedio 300
Ácido (3R,6S)-6-metil-1-{[(fenilmetil)oxi]carbonil}-3-piperidinacarboxílico
O
HO
N
O
O
A una solución agitada de 1-(fenilmetil) (3R,6S)-6-metil-1,3-piperidinadicarboxilato de 3-metilo (58,9 g, 202 mmol) en THF (350 ml) a temperatura ambiente se le añadió LiOH·H2O (10,18 g, 243 mmol, 1,2 equiv.), seguido de agua (175 ml) y CH3OH (85 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró la hidrólisis completa. La mezcla se concentró al vacío. El residuo se recogió en EtOAc (500 ml), se acidificó con 120
25 ml de HCl 2 N frío y se diluyó con 200 ml de salmuera. Las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 300 ml). La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío para dar el compuesto del título (57 g) en forma de un aceite. LC-MS (ES) m/z = 278 [M+H]+.
Intermedio 301
(2S,5R)-5-({[(1,1-Dimetiletil)oxi]carbonil}amino)-2-metil-1-piperidinacarboxilato de fenilmetilo
Se destiló azeotrópicamente ácido (3R,6S)-6-metil-1-{[(fenilmetil)oxi]carbonil}-3-piperidinacarboxílico (85 g, 307
mmol) en un matraz de fondo redondo de 2 l con tolueno (3 x 200 ml). El residuo (un aceite) se disolvió en 500 ml de t-butanol (calidad anhidra). A esta solución se le añadió en una porción trietilamina (64,1 ml, 460 mmol, 1,5 equiv.) a temperatura ambiente. A esta mezcla agitada se le añadió en porciones azidofosfato de difenilo (110 g, 398 mmol, 1,3 equiv.) mediante un embudo de adición a temperatura ambiente. La adición duró 20 minutos. La mezcla 5 resultante (una solución transparente de color amarillo claro) se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, seguido de calentamiento en un baño de aceite a 100ºC a la temperatura de reflujo durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se concentró al vacío para retirar tanto t-butanol como fuera posible. El residuo se diluyó con EtOAc (1 l), que se lavó con 200 ml de HCl 2 N frío, seguido de 200 ml de NaOH 2,5 N. La porción de NaOH se saló con NaCl y se extrajo de nuevo con EtOAc (400 ml). Todas las porciones 10 orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se recogió en hexano (500 ml) y EtOAc (20 ml). Se desarrolló una pasta cerosa. La mezcla se enfrió en el frigorífico durante 20 horas, dando como resultado una mezcla de 2 fases. La capa superior se retiró por decantación y dio 42 g en forma de un aceite después de la concentración al vacío, que experimentaría una purificación adicional en columna de gel de sílice. El componente ceroso del fondo se recogió en CHCl3 (300 ml) y 15 EtOAc (30 ml). La mezcla se agitó durante 5 minutos y se filtró. El filtrado se concentró al vacío para dar un aceite (150 g), que experimentaría una purificación adicional en columna de gel de sílice. Los sólidos cerosos (30 g) recogidos se identificaron como (PhO)2POOH y se desecharon. La cromatografía en columna de gel de sílice de las dos muestras anteriores en múltiples realizaciones usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 50% en CHCl3 dio el compuesto del título (88,28 g) en forma de un jarabe espeso transparente. LC-MS
20 (ES) m/z = 349 [M+H]+.
Intermedio 302
[(3R,6S)-6-Metil-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo
Se añadió Pd/C (6,30 g) en una botella Parr de 2 l, seguido de la adición de EtOAc (50 ml) en una atmósfera de
25 nitrógeno. La mezcla se agitó en forma de una suspensión, seguido de la adición de una solución de (2S,5R)-5({[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}amino)-2-metil-1-piperidinacarboxilato de fenilmetilo (58 g, 166 mmol) en EtOAc (330 ml). La mezcla se hidrogenó a una presión de 344,74 kPa (50 psi) a temperatura ambiente durante 4 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se filtró a través de celite y se aclaró con EtOAc. El filtrado se concentró al vacío para dar el compuesto del título (35,47 g) en forma de un aceite. LC-MS (ES) m/z = 215
30 [M+H]+.
Intermedio 303
[(3R,6S)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-6-metil-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo
Cl
N
HN N
NO
O NH2
Una mezcla de [(3R,6S)-6-metil-3-piperidinil]carbamato (6,0 g, 28 mmol), 4,6-dicloro-2-pirimidinamina de 1,1
35 dimetiletilo (5,05 g, 30,8 mmol, 1,1 equiv.) y base de Hunig (12,2 ml, 70,0 mmol, 2,5 equiv.) en propionitrilo (50 ml) se calentó en un baño de aceite a 100ºC a la temperatura de reflujo durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc (100 ml) y salmuera (30 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío para dar una espuma. Esta espuma se trituró en CHCl3 y EtOAc. La suspensión resultante se filtró. Los sólidos (0,93 g) recuperados se identificaron como
40 la 4,6-dicloro-2-pirimidinamina de partida. El filtrado se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 100% para dar el compuesto del título (8,20 g) en forma de una espuma de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 342 [M+H]+.
Intermedio 304
{(3R,6S)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
NH2
Una mezcla de [(3R,6S)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-6-metil-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (7,0 g, 24,0 mmol, este material se destiló azeotrópicamente con 2 x 40 ml de tolueno antes del mezclado), ácido (4-ciano3-fluorofenil)borónico (5,14 g, 31,2 mmol, 1,3 equiv.), triciclohexilfosfina (1,0 g, 3,6 mmol, 0,15 equiv.), Pd2(dba)3 (1,64 g, 1,80 mmol, 0,075 equiv.) y K3PO4 (8,66 g, 40,8 mmol, 1,7 equiv.) en 1,4-dioxano (100 ml) y agua (33 ml) se desgasificó y se lavó abundantemente de nuevo con nitrógeno (5 x) y después se calentó en un baño de aceite a 100ºC en un condensador de reflujo durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se filtró a través de celite. El filtrado se concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc (350 ml) y salmuera (80 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 100% para dar el compuesto del título (9,24 g) en forma de una espuma de color amarillo pálida. LC-MS (ES) m/z = 427 [M+H]+.
Ejemplo 154
{(3R,6S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
NH2
N
N NHN
H N
NO
O NH2
Se destiló azeotrópicamente {(3R,6S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3piperidinil}carbamato 1,1-dimetiletilo (2,5 g, 5,86 mmol) con etanol (2 x 25 ml). El residuo se disolvió en etanol (25 ml), a lo que se le añadieron en una porción 5 ml de hidrazina monohidrato a temperatura ambiente. La mezcla resultante se calentó a 100ºC en un baño de aceite a reflujo durante 4 horas. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. A esta mezcla enfriada se le añadieron 1,2 g más de {(3R,6S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (2,81 mmol) en etanol (12 ml). La mezcla resultante se calentó a 100ºC durante 24 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se recogió en agua (20 ml). La suspensión resultante se sonicó brevemente y se filtró. Los sólidos se lavaron con agua y se secaron al vacío a temperatura ambiente durante 48 horas y después al vacío a temperatura ambiente sobre P2O5 durante 20 horas para dar el compuesto del título (3,42 g) en forma de un sólido de color beige. LC-MS (ES) m/z = 439 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,25 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,48 (s, 9H), 1,64 -1,77 (m, 2H), 1,78 -1,87 (m, 2H), 2,73 (t, J = 12,1 Hz, 1H), 3,41 -3,48 (m, 1H), 4,50 -4,60 (s a, 1H), 4,75 -4,85 (s a, 1H), 6,52 (s, 1H), 7,48 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,80 (s, 1H).
Intermedio 305
{(3R,6S)-1-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
Una mezcla de [(3R,6S)-6-metil-3-piperidinil]carbamato (13,7 g, 63,9 mmol), 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina de 1,1-dimetiletilo (12,52 g, 70,3 mmol, 1,1 equiv.) y base de Hunig (24,5 ml, 141 mmol, 2,2 equiv.) en propionitrilo (100
ml) se calentó en un baño de aceite a 100ºC a la temperatura de reflujo durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc (250 ml) y salmuera (50 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío para dar una suspensión. Esta suspensión (en aprox. 35 ml de EtOAc) se diluyó con CHCl3. La suspensión resultante se filtró. Los sólidos
5 recogidos se identificaron por LCMS como la 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina de partida. El filtrado se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 100% para dar el compuesto del título (15,23 g) en forma de una espuma vítrea de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 356 [M+H]+.
Intermedio 306
10 {(3R,6S)-1-[6-(4-Ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
HN
Una mezcla de {(3R,6S)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (8,0 g, 22,48 mmol, este material se destiló azeotrópicamente con 2 x 40 ml de tolueno antes del mezclado), ácido (4ciano-3-fluorofenil)borónico (4,82 g, 29,2 mmol, 1,3 equiv.), triciclohexilfosfina (0,95 g, 3,37 mmol, 0,15 equiv.), 15 Pd2(dba)3 (1,54 g, 1,69 mmol, 0,075 equiv.) y K3PO4 (8,11 g, 38,2 mmol, 1,7 equiv.) en 1,4-dioxano (100 ml) y agua (33 ml) se desgasificó con nitrógeno y se lavó abundantemente de nuevo (5 x) y después se calentó en un baño de aceite a 100ºC en un condensador de reflujo durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se filtró a través de celite. El residuo se repartió entre EtOAc (300 ml) y salmuera (80 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna
20 sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 80% para dar el compuesto del título (8,89 g) en forma de una espuma de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 441 [M+H]+.
Ejemplo 155
{(3R,6S)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
NH
25 A una solución de {(3R,6S)-1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (2,5 g, 5,68 mmol, este material se destiló azeotrópicamente con 2 x 30 ml de etanol antes del mezclado) en etanol (25 ml) se le añadió en una porción hidrazina monohidrato (5 ml). La mezcla resultante se calentó en un baño de aceite a 100ºC durante 24 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se concentró al vacío. El residuo se recogió en agua (25 ml). La suspensión resultante se sonicó
30 brevemente, seguido de filtración. Los sólidos recogidos se lavaron con agua. El secado al vacío a temperatura ambiente sobre P2O5 durante 20 horas dio el compuesto del título (1,76 g) en forma de un sólido de color beige. LC-MS (ES) m/z = 453 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,25 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,49 (s, 9H), 1,63 -1,79 (m, 2H), 1,80 -1,93 (m, 2H), 2,74 (t, J = 12,0 Hz, 1H), 2,98 (s, 3H), 3,40 -3,54 (s a, 1H), 4,50 -4,63 (s a, 1H), 4,80 -4,90 (s a, 1H), 6,47 (s, 1H), 7,52 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,85 (s, 1H).
Ejemplo 156
6-{2-Amino-6-[(2R,5R)-2-(aminometil)-5-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
NH2
Una mezcla de 4-{2-amino-6-[(2R,5R)-2-(aminometil)-5-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (55 mg, 0,16 mmol) e hidrazina monohidrato (0,16 ml, 3,29 mmol) en EtOH (2 ml) se agitó a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 20 horas. Después, la mezcla se concentró y el residuo se purificó sobre una HPLC Gilson de fase inversa (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%). Las fracciones del producto se concentraron al vacío, se trituraron con Et2O y se secaron en un horno de vacío durante una noche para dar una sal TFA del compuesto del título (36 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 355 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD, se añadieron varios miligramos de Na2CO3 para formar la base libre, * representa el rotámero secundario):  1,29 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 2,77-2,85 (m, 1H), 2,85-3,01 (m, 1H), 3,22-3,37 (m, 1H), 3,45-3,60 (m, 1H), 3,73-3,84 (m, 1H), 3,843,94 (m, 1H), 4,08-4,38 (s a, 1H), 4,38-4,73 (s a, 1H), 6,48* y 6,50 (s, 1H), 7,50 (dd, J = 8,4, 1,4 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H).
Ejemplo 157
6-[2-Amino-6-((2R,5R)-5-metil-2-{[(fenilmetil)amino]metil}-4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH2
O
N
N
N
H
NH N
N
NH2
Se añadió triacetoxiborohidruro sódico (62 mg, 0,29 mmol) a una mezcla de 4-{2-amino-6-[(2R,5R)-2-(aminometil)-5metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (80 mg, 0,23 mmol) y benzaldehído (26 l, 0,26 mmol) en THF (2,5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Después, se añadió otra porción de triacetoxiborohidruro sódico (62 mg, 0,29 mmol) y la agitación se continuó durante 27 horas más, después de lo cual se añadió otra porción de cada uno del benzaldehído (26 l, 0,26 mmol) y triacetoxiborohidruro sódico (62 mg, 0,29 mmol). Después de 4 horas, la mezcla se inactivó con NaHCO3 acuoso saturado (15 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 15 ml). Los extractos se lavaron con salmuera (15 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para dar una mezcla que contenía la amina mono-y dibencilada en forma de un aceite de color amarillo (149 mg). Ese residuo se disolvió en EtOH (3,5 ml), se añadió hidrazina monohidrato (0,50 ml, 10,29 mmol) y la mezcla se agitó a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 15 horas. Después, la mezcla de reacción se enfrió y se concentró al vacío y el residuo se purificó sobre una HPLC Gilson de fase inversa (CH3CN/H2O con TFA al 0,1%) para dar una sal TFA del compuesto del título (28 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 445 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6, se añadieron 3 mg de Na2CO3 para formar la base libre, * representa el rotámero secundario):  1,15 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 2,59-2,72 (m, 2H), 2,72-2,89 (m, 1H), 3,46-3,57 (m, 1H), 3,59-3,69 (m, 1H), 3,70-3,81 (m, 3H), 3,90-4,83 (s a, 2H), 5,38 (s, 2H), 6,11 (s, 2H), 6,51* y 6,55 (s, 1H), 6,606,77 (s a, 1H), 7,20-7,29 (m, 1H), 7,29-7,39 (m, 4H), 7,56 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,94 (s, 1H), 11,52 (s, 1H).
Intermedio 307 {(2S,5R)-4-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metanol
OH N
N
NH
Una mezcla de [(2S,5R)-5-metil-2-morfolinil]metanol (11,50 g, 65,2 mmol), 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina (11,38 g, 63,9 mmol) y K2CO3 (19,87 g, 144 mmol) en EtOH (250 ml) se agitó a la temperatura de reflujo en una atmósfera de nitrógeno durante 23 horas. La mezcla se enfrió, se vertió en agua (500 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 400 ml). Los extractos se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para dar un sólido de color crema. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (400 g de SiO2, gradiente de EtOAc al 10-60% en hexanos). El producto se recogió y se concentró al vacío para dar una espuma muy pegajosa. El residuo se recogió en Et2O (250 ml) y se añadió gota a gota HCl (4,0 M en 1,4-dioxano, 10 ml) mientras la mezcla se removía. El sólido que se formó se recogió por filtración al vacío y se secó en la estufa de vacío durante una noche para dar una sal hidrocloruro del compuesto del título (9,75 g) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 273, 275 [M+H]+.
Intermedio 308
2-Fluoro-4-[6-[(2S,5R)-2-(hidroximetil)-5-metil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]benzonitrilo
Una mezcla de {(2S,5R)-4-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metanol (2,24 g, 7,24 mmol), ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (2,64 g, 16,01 mmol) y Pd(PPh3)4 (0,43 g, 0,37 mmol) en 1,4-dioxano (50 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (25 ml) se desgasificó con nitrógeno durante 10 minutos. Después, se agitó a 100ºC en una atmósfera de nitrógeno durante 17 horas, se enfrió, se diluyó con agua (25 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (100 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Los extractos se lavaron con salmuera (150 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (90 g de SiO2, gradiente de EtOAc al 20-100% en hexanos) para dar el compuesto del título (2,36 g) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 358 [M+H]+.
Ejemplo 158
{(2S,5R)-4-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metanol
OH N
N
NH
Una mezcla de 2-fluoro-4-[6-[(2S,5R)-2-(hidroximetil)-5-metil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]benzonitrilo (151 mg, 0,42 mmol) e hidrazina monohidrato (0,41 ml, 8,44 mmol) en EtOH (4 ml) se agitó a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 42 horas. Después, se enfrió, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (24 g de SiO2, gradiente de CH2Cl2 a 90/10/1 de CH2Cl2/CH3OH/NH4OH) para dar el compuesto del título (113 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 370 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,17 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 2,72-2,93 (m, 4H), 3,37-3,59 (m, 3H), 3,66 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,77 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 3,94-4,74 (s a, 2H), 4,38 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,54 (m, 2H), 7,59 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,72
(d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H), 11,50 (s, 1H). Intermedio 309 Ácido (2S,5R)-4-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinacarboxílico
Se añadieron TEMPO (0,18 g, 1,17 mmol) y yodobenceno diacetato (3,88 g, 12,05 mmol) a una mezcla de 2-fluoro4-[6-[(2S,5R)-2-(hidroximetil)-5-metil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]benzonitrilo (2,09 g, 5,85 mmol) en CH2Cl2 (20 ml) y agua (10 ml) a 0ºC y la mezcla se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente y se agitó vigorosamente durante 42 horas. La mezcla se inactivó con CH3OH (10 ml), se vertió en NaHCO3 acuoso saturado (100 ml), se diluyó con agua (15 ml) y se lavó con CH2Cl2 (2 x 50 ml). Después, la fase acuosa se llevó a pH 5 mediante la adición muy lenta de ácido cítrico sólido (monohidrato, aproximadamente 9,5 g). Mientras se acidificaba, la mezcla formó una emulsión muy mala. Después de intentar varios trucos que fracasaron (salado, usando cloroformo, filtración, etc), la emulsión finalmente se rompió en su mayor parte por dilución a aproximadamente 1,5 l de solución acuosa y aproximadamente 1 l de CH2Cl2 y CHCl3. La capa orgánica se recogió y la fase acuosa se extrajo adicionalmente con 90/10 de CH2Cl2/IPA (5 x 500 ml). Los extractos se combinaron, se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para dar el compuesto del título (1,63 g, aproximadamente 90% de pureza) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 372 [M+H]+.
Intermedio 310
(2S,5R)-4-[6-(4-Ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida
Una mezcla de ácido (2S,5R)-4-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinacarboxílico (300 mg, 0,81 mmol), HATU (340 mg, 0,89 mmol) y base de Hünig (0,21 ml, 1,20 mmol) en DMF (5 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Después, se añadió anilina (0,085 ml, 0,93 mmol) y la agitación se continuó a temperatura ambiente durante 17 horas. El análisis por LC-MS indicó una conversión de aproximadamente 50%, así que se añadió otra porción de cada uno de base de Hünig (0,21 ml, 1,20 mmol) y HATU (340 mg, 0,89 mmol). Después de aproximadamente 10 minutos, se añadió más cantidad de anilina (0,085 ml, 0,93 mmol) y la mezcla se agitó durante 1,5 horas más. después se diluyó con EtOAc (25 ml) y se lavó sucesivamente con agua, NaHCO3 acuoso saturado y salmuera (25 ml de cada). Después, la fase orgánica se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (40 g de SiO2, gradiente de EtOAc al 10-35% en hexanos) para dar el compuesto del título (340 mg, aproximadamente 80% de pureza) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 447 [M+H]+.
Ejemplo 159
(2S,5R)-4-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida
NH2
O NO
N H
NH N
N NH
Una mezcla de (2S,5R)-4-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-fenil-2morfolinacarboxamida (340 mg, 0,61 mmol) e hidrazina monohidrato (0,39 ml, 12,54 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) se agitó a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió y se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (60 g de SiO2, gradiente de CH2Cl2 a 90/10/1 de
5 CH2Cl2/CH3OH/NH4OH) para dar el compuesto del título (243 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 459 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,24 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 2,86 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 2,973,15 (m, 1H), 3,83 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 3,94 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 4,16 (dd, J = 11,2, 2,9 Hz, 1H), 4,33-4,88 (s a, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,56-6,73 (m, 2H), 7,10 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 7,34 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 7,63 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,3 Hz, 3H), 8,01 (s, 1H), 9,88 (s, 1H), 11,51 (s, 1H).
10 Intermedio 311
(2S,5R)-4-[6-(4-Ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-metil-2-morfolinacarboxamida
Una mezcla de ácido (2S,5R)-4-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinacarboxílico (302 mg, 0,81 mmol), HATU (343 mg, 0,90 mmol) y base de Hünig (0,21 ml, 1,20 mmol) en DMF (5 ml) se agitó a 15 temperatura ambiente durante 10 minutos. Después, se añadió ciclohexilamina (0,105 ml, 0,92 mmol) y la agitación se continuó a temperatura ambiente durante 17 horas. El análisis por LC-MS indicó una conversión de aproximadamente 50% así que se añadió otra porción de cada uno de base de Hünig (0,21 ml, 1,20 mmol) y HATU (343 mg, 0,90 mmol). Después de aproximadamente 10 minutos, se añadió más cantidad de ciclohexilamina (0,105 ml, 0,92 mmol) y la mezcla se agitó durante 1,5 horas más, después se diluyó con EtOAc (25 ml) y se lavó
20 sucesivamente con agua, NaHCO3 acuoso saturado y salmuera (25 ml de cada). Después, la fase orgánica se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (40 g de SiO2, gradiente de EtOAc al 10-40% en hexanos) para dar el compuesto del título (328 mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 453 [M+H]+.
Ejemplo 160
25 (2S,5R)-4-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-metil-2-morfolinacarboxamida
NH2
O NO
N H
NH N
N
NH
Una mezcla de (2S,5R)-4-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-metil-2morfolinacarboxamida (328 mg, 0,65 mmol) e hidrazina monohidrato (0,41 ml, 13,18 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) se agitó a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 18 horas. La mezcla se enfrió y se concentró al vacío y el 30 residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (60 g de SiO2, gradiente de CH2Cl2 a 90/10/1 de CH2Cl2/CH3OH/NH4OH) para dar el compuesto del título (244 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 465 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,04-1,16 (m, 1H), 1,19 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,23-1,37 (m, 4H), 1,52-1,63 (m, 1H), 1,63-1,79 (m, 4H), 2,76-2,99 (m, 4H), 3,55-3,68 (m, 1H), 3,74 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz, 1H), 3,86 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 3,91 (dd, J = 11,4, 2,8 Hz, 1H), 4,20-4,83 (s a, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,50-6,71 (m, 2H), 7,56
35 7,69 (m, 2H), 7,72 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,99 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 312 (2S,5R)-4-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida
NH
Una mezcla de ácido (2S,5R)-4-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinacarboxílico (302 mg, 0,81 mmol), HATU (340 mg, 0,89 mmol) y base de Hünig (0,21 ml, 1,20 mmol) en DMF (5 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Después, se añadió bencilamina (0,100 ml, 0,92 mmol) y la agitación se continuó a temperatura ambiente durante 17 horas. El análisis por LC-MS indicó una conversión de aproximadamente 50% así que se añadió otra porción de cada uno de base de Hünig (0,21 ml, 1,20 mmol) y HATU (340 mg, 0,89 mmol). Después de aproximadamente 10 minutos, se añadió más cantidad de bencilamina (0,100 ml, 0,92 mmol) y la mezcla se agitó durante 1,5 horas más, después se diluyó con EtOAc (25 ml) y se lavó sucesivamente con agua, NaHCO3 acuoso saturado y salmuera (25 ml de cada). Después, la fase orgánica se secó (Na2SO4), se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (40 g de SiO2, gradiente de EtOAc al 15-50 en hexanos) para dar el compuesto del título (302 mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 461 [M+H]+.
Ejemplo 161
(2S,5R)-4-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida
Una mezcla de (2S,5R)-4-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-2morfolinacarboxamida (302 mg, 0,66 mmol) e hidrazina monohidrato (0,41 ml, 13,18 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) se agitó a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 18 horas. La mezcla de reacción se enfrió y se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (60 g de SiO2, gradiente de CH2Cl2 a 90/10/1 de CH2Cl2/CH3OH/NH4OH) para dar el compuesto del título (239 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 473 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,21 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 2,77-3,02 (m, 4H), 3,78 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,88 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 4,02 (dd, J = 11,2, 2,9 Hz, 1H), 4,27-4,41 (m, 2H), 4,41-4,85 (s a, 2H), 5,39 (s, 2H), 6,51-6,72 (m, 2H), 7,19-7,38 (m, 5H), 7,62 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,99 (s, 1H), 8,54 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 313
Metanosulfonato de {(2S,5R)-4-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metilo
Se añadieron gota a gota trietilamina (1,95 ml, 14,07 mmol) y cloruro de metanosulfonilo (0,52 ml, 6,67 mmol) a una solución de {(2S,5R)-4-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metanol (1,52 g, 5,57 mmol) en CH2Cl2 (50 ml) a 0ºC y la mezcla se agitó a 0ºC en una atmósfera de nitrógeno durante 45 minutos. Después, se vertió en NaHCO3 acuoso saturado (100 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 100 ml). Los extractos se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío para dar el compuesto del título (1,88 g) en forma de una espuma
que se prensó en un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 351, 353 [M+H]+. Intermedio 314 4-Cloro-6-{(2R,5R)-2-[(dimetilamino)metil]-5-metil-4-morfolinil}-N-metil-2-pirimidinamina
NH
Una mezcla de metanosulfonato de {(2S,5R)-4-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metilo (161 mg, 0,46 mmol) y dimetilamina (2,0 M en THF, 5,0 ml, 10,0 mmol) se agitó a 120ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 32 horas. La mezcla se enfrió, se vertió en NaHCO3 acuoso saturado (15 ml), se diluyó con agua (5 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). Los extractos se lavaron con salmuera (15 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (24 g de SiO2, gradiente de CH2Cl2 a 95/5/0,5 de CH2Cl2/CH3OH/NH4OH) para dar el compuesto del título (62 mg, aproximadamente 85% de pureza) en forma de una espuma de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 300, 302 [M+H]+.
Intermedio 315
4-[6-{(2R,5R)-2-[(Dimetilamino)metil]-5-metil-4-morfolinil}-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo
Una mezcla de 4-cloro-6-{(2R,5R)-2-[(dimetilamino)metil]-5-metil-4-morfolinil}-N-metil-2-pirimidinamina (60 mg, 0,20 mmol), ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (73 mg, 0,44 mmol) y Pd(PPh3)4 (12 mg, 0,010 mmol) en 1,4-dioxano (2 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (1 ml) se desgasificó con nitrógeno durante 10 minutos. Después, el vial se tapó y se agitó a 100ºC durante 15 horas. La mezcla se enfrió, se diluyó con NaHCO3 acuoso saturado (5 ml) y agua (5 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). Los extractos se lavaron con salmuera (10 ml), se secaron (Na2SO4), se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (10 g de SiO2, gradiente de CH2Cl2 a 95/5/0,5 de CH2Cl2/CH3OH/NH4OH) para dar el compuesto del título (58 mg, aproximadamente 85% de pureza) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 385 [M+H]+.
Ejemplo 162
6-[6-{(2R,5R)-2-[(Dimetilamino)metil]-5-metil-4-morfolinil}-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH
Una mezcla de 4-[6-{(2R,5R)-2-[(dimetilamino)metil]-5-metil-4-morfolinil}-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2fluorobenzonitrilo (58 mg, 0,15 mmol) e hidrazina monohidrato (0,10 ml, 3,21 mmol) en 1,4-dioxano (2 ml) se agitó a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente durante 15 horas. Después, la mezcla de reacción se enfrió y se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (24 g de SiO2, gradiente de CH2Cl2 a 90/10/1 de CH2Cl2/CH3OH/NH4OH) para dar el compuesto del título (44 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 397 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,17 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 2,22 (s, 6H), 2,35-2,45 (m, 2H), 2,66-2,80 (m, 1H), 2,84 (d, J = 4,3 Hz, 3H), 3,49-3,60 (m, 1H), 3,66 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,75 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 4,02-4,79 (s a, 2H), 5,38 (s, 2H), 6,48-6,65 (m, 2H), 7,60 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,3 Hz, 1H),
7,98 (s, 1H), 11,50 (s, 1H). Intermedio 316 N-[2-(2-Clorofenil)-2-oxoetil]-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida
5 Se añadió cloruro de oxalilo (0,765 ml, 8,73 mmol) a una suspensión de ácido 4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxílico (1,288 g, 5,82 mmol) y DMF (0,090 ml, 1,165 mmol) en CH2Cl2 (80 ml) a 0ºC durante 10 minutos. La mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 2 h y después se concentró. El residuo se disolvió en CH2Cl2 (80 ml) y después a la solución de color pardo se le añadieron trietilamina (2,029 ml, 14,56 mmol) y 2-amino-1-(2-clorofenil)etanona (1,2 g, 5,82 mmol) a 0ºC. La mezcla se agitó a 25ºC durante 3 horas, y en este momento, se añadió agua (150 ml). La
10 mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml) y los extractos orgánicos combinados se secaron con Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo resultante se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando EtOAc al 50% en éter de petróleo para producir el compuesto del título (350 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 373 [M+H]+.
Intermedio 317
15 2-[4-(2-Clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-(fenilmetil)morfolina
Una mezcla de N-[2-(2-clorofenil)-2-oxoetil]-4-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida (350 mg, 0,939 mmol) y trifluoroacetato de amonio (615 mg, 4,69 mmol) se calentó a 150ºC durante 1,5 horas. Al residuo se le añadió agua (150 ml) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron con Na2SO4
20 anhidro, se filtraron y se concentraron para producir el compuesto del título (320 mg) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 354 [M+H]+.
Intermedio 318
2-[4-(2-Clorofenil)-1H-imidazol-2-il]morfolina
Cl
25 Se añadió paladio sobre carbono (al 10% en peso, 96 mg, 0,090 mmol) a una solución de 2-[4-(2-clorofenil)-1Himidazol-2-il]-4-(fenilmetil)morfolina (320 mg, 0,904 mmol) y ácido clorhídrico (al 36%, 0,382 ml, 4,52 mmol) en CH3OH (80 ml) en una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó en una atmósfera de hidrógeno a 25ºC durante 1,5 horas. La mezcla de reacción se filtró, se lavó con CH3OH (150 ml) y se concentró para producir el compuesto del título (250 mg) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 264 [M+H]+.
30 Intermedio 319
4-Cloro-6-{2-[4-(2-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-2-pirimidinamina
NH2
Una solución de 2-[4-(2-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]morfolina (250 mg, 0,833 mmol), 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (137 mg, 0,833 mmol) y base de Hunig (0,36 ml, 2,08 mmol) en etanol (80 ml) se calentó a 85ºC durante 3 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando EtOAc al 50% en éter de petróleo para producir el compuesto del título (100 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 391, 393 [M+H]+.
Intermedio 320
4-(2-Amino-6-{2-[4-(2-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo
N Cl OH
N
N
F NN
N
NH2
Una mezcla de 4-cloro-6-{2-[4-(2-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-2-pirimidinamina (100 mg, 0,256 mmol), 2fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (82 mg, 0,332 mmol), Na2CO3 (67,7 mg, 0,639 mmol) y Pd(PPh3)4 (29,5 mg, 0,026 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) y agua (1 ml) se calentó a 140ºC en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. La mezcla de reacción se filtró, se lavó con EtOAc (100 ml) y se concentró. El residuo resultante se purificó por HPLC prep. usando CH3CN en agua (NH4HCO3 10 mmol en agua) de 60% a 70% en 7 minutos para producir el compuesto del título (50 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 476 [M+H]+.
Ejemplo 163
6-(2-Amino-6-{2-[4-(2-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina
NH2
Cl O
N N
H
N
N H NN
N
NH2
Una mezcla de 4-(2-amino-6-{2-[4-(2-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-2-fluorobenzonitrilo (50 mg, 0,105 mmol) e hidrazina (0,167 ml, 5,25 mmol) en etanol (2 ml) se calentó a 120ºC en condiciones de microondas con agitación durante 1 hora. La mezcla de reacción se filtró y se concentró y el residuo resultante se secó al vacío para producir el compuesto del título (40 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 488 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  3,10-3,16 (m, 1H), 3,22-3,28 (m, 1H), 3,71-3,76 (m, 1H), 4,04-4,07 (m, 1H), 4,30-4,34 (m, 1H), 4,65-4,68 (m, 1H), 4,73 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,20 (s, 2H), 6,71 (s, 1H), 7,21-7,25 (m, 1H), 7,33-7,37 (m, 1H), 7,46-7,48 (m, 1H), 7,60-7,63 (m, 1H), 7,69-7,73 (m, 2H), 7,99 (s, 1H), 8,11-8,13 (m, 1H), 11,52 (s, 1H), 12,53 (s, 1H).
Intermedio 321
4-Cloro-N-metil-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-2-pirimidinamina
A una solución de 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina (2 g, 11,23 mmol) en etanol (50 ml) en un matraz de fondo redondo de 200 ml se le añadieron base de Hunig (5,89 ml, 33,7 mmol) y (3R)-3-metilmorfolina (1,546 g, 11,23 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 100ºC en un tubo cerrado herméticamente en un agitador de placa caliente durante 2 días. La reacción se concentró al vacío y el residuo se disolvió en EtOAc (200 ml) y se lavó con agua (50
ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y después se concentró para producir el compuesto del título (1,873 g) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 243 [M+H]+.
Intermedio 322
2,6-Difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo
A un vial para microondas de 20 ml se le añadieron 4-cloro-N-metil-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-2-pirimidinamina (500 mg, 2,060 mmol), ácido (4-ciano-3,5-difluorofenil)borónico (754 mg, 4,12 mmol), aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (84 mg, 0,103 mmol), K2CO3 (2 M, 3,09 ml, 6,18 mmol) y 1,4-dioxano (9 ml). La mezcla de reacción se calentó a 140ºC durante 10 min en un reactor de microondas. El 1,4-dioxano se retiró y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo resultante se purificó por cromatografía ultrarrápida (EtOAc al 0-50% en hexanos, columna de 12 g) para producir el compuesto del título (312 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 346 [M+H]+.
Ejemplo 164
4-Fluoro-6-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
HN
Un vial para microondas de 2 ml se cargó con 2,6-difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4pirimidinil}benzonitrilo (75 mg, 0,217 mmol), hidrazina (0,027 ml, 0,869 mmol), base de Hunig (0,152 ml, 0,869 mmol) y etanol (1 ml). La mezcla de reacción se calentó a 150ºC durante 15 minutos en un reactor de microondas. La mezcla de reacción se dejó enfriar y después se vertió en EtOAc (50 ml) y agua (25 ml). La capa acuosa se extrajo con dos porciones adicionales de EtOAc (2 x 50 ml) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4. La solución seca se filtró y se concentró y el residuo resultante se purificó por RP-HPLC (CH3CN al 0-30% en H2O, TFA al 0,1%) para producir el compuesto del título (53,2 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 358 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,19 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 2,83 (s a, 3H), 3,06 -3,20 (m, 1H), 3,40 -3,52 (m, 1H), 3,55 -3,66 (m, 1H), 3,69 -3,78 (m, 1H), 3,88 -4,00 (m, 1H), 4,06 -4,24 (m, 1H), 4,43 -4,62 (m, 1H), 5,27 (s a, 2H), 6,45 -6,71 (m, 2H), 7,26 -7,49 (m, 1H), 7,76 -7,96 (m, 1H), 11,71 -12,13 (m, 1H).
Intermedio 323
2-Fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo
NH
A un vial para microondas de 5 ml se le añadieron 4-cloro-N-metil-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-2-pirimidinamina (200 mg, 0,824 mmol), ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (177 mg, 1,071 mmol), aducto PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (33,6 mg, 0,041 mmol), K2CO3 (1,236 ml, 2,472 mmol) y 1,4-dioxano (3 ml). La mezcla de reacción se calentó a 140ºC durante
10 minutos en un reactor de microondas. El 1,4-dioxano se retiró y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo resultante se purificó por cromatografía ultrarrápida (EtOAc al 0-50% en hexanos, columna de 12 g) para producir el compuesto del título (294 mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 328 [M+H]+.
Ejemplo 165
6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
N
N
NH
A un vial para microondas de 5 ml se le añadieron 2-fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4pirimidinil}benzonitrilo (270 mg, 0,824 mmol), hidrazina (0,31 ml, 9,9 mmol), base de Hunig (0,576 ml, 3,30 mmol) y etanol (3 ml). La mezcla de reacción se calentó a 150ºC durante 70 minutos en un reactor de microondas. El análisis por LCMS indicó una buena conversión, así que la mezcla de reacción se concentró, se disolvió en DMSO y se purificó por RP-HPLC (CH3CN al 8-32% en agua, TFA al 0,1%). Las fracciones del producto se combinaron, después se basificaron con NaHCO3 y se extrajeron con EtOAc. La capa orgánica se secó y se concentró para producir el compuesto del título (117 mg). LC-MS (ES) m/z = 340 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,17 -1,23 (m, 3H), 2,84 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 3,02 -3,20 (m, 1H), 3,38 -3,51 (m, 1H), 3,56 -3,66 (m, 1H), 3,67 -3,78 (m, 1H), 3,87 -3,98 (m, 1H), 4,07 -4,19 (m, 1H), 4,45 -4,57 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,55 (s a, 2H), 7,61 (s, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,98 (s a, 1H), 11,51 (s, 1H).
Ejemplo 166
6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina
Un matraz de fondo redondo de 100 ml se cargó con hidruro sódico (73,1 mg, 2,90 mmol), se puso en una atmósfera de nitrógeno y se enfrió a 0ºC. Después, se añadió CH3OH (10 ml) gota a gota mediante una jeringa y la mezcla resultante se agitó a esta temperatura durante 10 minutos. Después, la mezcla se calentó a temperatura ambiente durante 10 minutos para dar una solución turbia de metóxido sódico en CH3OH. A un vial de 4 ml se le añadieron 2,6-difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (100 mg, 0,290 mmol), DMF (1 ml) y 1,2 ml de la solución de metóxido sódico en CH3OH (1,2 equiv.). La reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente y después se vertió en EtOAc (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y después se concentraron. El residuo se transfirió a un vial para microondas de 2 ml y se añadieron etanol (1,5 ml), base de Hunig (0,152 ml, 0,869 mmol) e hidrazina hidrato (0,101 ml, 1,74 mmol). La mezcla resultante se calentó a 150ºC durante 30 minutos en un reactor de microondas. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó por RP-HPLC (CH3CN al 0-30% en H2O, TFA al 0,1%). Las fracciones del producto se combinaron, se basificaron con Na2CO3 y se extrajeron en EtOAc. La capa orgánica se concentró y el residuo se liofilizó para producir el compuesto del título (41,7 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 370 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,19 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 2,83 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 3,05 -3,22 (m, 1H), 3,46 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 3,62 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 3,67 -3,79 (m, 1H), 3,85 -4,01 (m, 4H), 4,04 -4,22 (m, 1H), 4,41 -4,62 (m, 1H), 5,03 (s, 2H), 6,37 -6,68 (m, 2H), 6,95 (s, 1H), 7,53 (s a, 1H), 11,53 (s, 1H).
Intermedio 324 2-Fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-6-(metiltio)benzonitrilo
A un vial de 4 ml se le añadieron 2,6-difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (100 mg, 0,290 mmol), DMF (1 ml) y NaSMe acuoso al 15% (162 mg, 0,347 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 h a temperatura ambiente. La mezcla se vertió en EtOAc (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y después se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (EtOAc al 0-40% en hexanos, columna de 12 g) para producir el compuesto del título (40 mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 374 [M+H]+.
Ejemplo 167
6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina
S NH2
O NN N
H
N
N
NH
Un vial para microondas de 2 ml se cargó con 2-fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-6(metiltio)benzonitrilo (40 mg, 0,107 mmol), hidrazina (0,037 ml, 0,643 mmol), base de Hunig (0,056 ml, 0,321 mmol) y etanol (1,5 ml). La mezcla se calentó a 150ºC durante 90 minutos en un reactor de microondas. La mezcla de reacción se dejó enfriar y después se concentró. El residuo resultante se disolvió en DMSO y se purificó por RP-HPLC (CH3CN al 0-30% en H2O, TFA al 0,1%). Las fracciones del producto se combinaron, se basificaron con NaHCO3 y después se extrajeron en EtOAc. La capa orgánica se secó y después se concentró para producir el compuesto del título (28 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 386 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,19 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,61 (s, 3H), 2,83 (d, J = 4,3 Hz, 3H), 3,04 -3,22 (m, 1H), 3,40 3,52 (m, 1H), 3,55 -3,66 (m, 1H), 3,67 -3,79 (m, 1H), 3,85 -3,99 (m, 1H), 4,05 -4,23 (m, 1H), 4,44 -4,59 (m, 1H), 5,10 (s, 2H), 6,38 -6,71 (m, 2H), 7,26 -7,49 (m, 1H), 7,66 -7,88 (m, 1H), 11,62 -11,92 (m, 1H).
Ejemplo 168
N4-Metil-6-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3,4-diamina
NH
A un vial de 20 ml se le añadieron 2,6-difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (100 mg, 0,290 mmol), DMF (1 ml) y metilamina (2 M en THF, 0,174 ml, 0,347 mmol). La reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente. Se añadieron 0,6 equiv. más de una solución de metilamina (2 M en THF) y la reacción se agitó a temperatura ambiente 3 días durante el fin de semana. La mezcla de reacción se concentró al vacío, el residuo se disolvió en etanol (1,5 ml) y se añadieron hidrazina (0,101 ml, 1,737 mmol) y base de Hunig (0,152 ml, 0,869 mmol). La reacción se calentó a 150ºC durante 60 minutos en un reactor de microondas. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se disolvió en DMSO y se purificó por RPHPLC. Las fracciones del producto se combinaron, se basificaron con NaHCO3 y se extrajeron con EtOAc. Los extractos orgánicos se combinaron, se
5 secaron y se concentraron para producir el compuesto del título (40,5 mg) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS(ES) m/z = 369 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,18 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,73 -2,91 (m, 6H), 3,03 -3,15 (m, 1H), 3,39 -3,52 (m, 1H), 3,62 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 3,67 -3,78 (m, 1H), 3,87 -3,98 (m, 1H), 4,01 -4,15 (m, 1H), 4,41 -4,55 (m, 1H), 5,07 (s, 2H), 5,59 -5,74 (m, 1H), 6,26 -6,62 (m, 3H), 7,14 (s a, 1H), 11,35 (s, 1H).
Intermedio 325
10 4-Bromo-2-fluoro-6-[(fenilmetil)oxi]benzonitrilo
Br
A un matraz de fondo redondo de 500 ml se le añadieron NaH (0,660 g, 27,5 mmol) y THF (100 ml). A esta solución se le añadió alcohol bencílico (2,385 ml, 22,94 mmol) en THF lentamente mediante una jeringa, con refrigeración externa (baño de hielo) cuando fue necesario. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora 15 a temperatura ambiente. En este momento, la mezcla se transfirió lentamente mediante una jeringa a una solución de 4-bromo-2,6-difluorobenzonitrilo (5 g, 22,94 mmol) en THF at 0ºC. La solución se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante el fin de semana. La reacción se vertió en agua (50 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Las capas orgánicas se combinaron y se secaron sobre Na2SO4. La solución seca se filtró y el filtrado se concentró al vacío para producir un sólido de color amarillo pálido que se purificó por cromatografía ultrarrápida
20 (gradiente de elución EtOAc al 0-30% en hexanos) para producir el compuesto del título (3,911 g) en forma de un sólido esponjoso de color blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  5,35 (s, 2H), 7,27 -7,66 (m, 7H).
Intermedio 326
4-Bromo-2-fluoro-6-hidroxibenzonitrilo
CN HO
F
Br
25 A un matraz de fondo redondo de 500 ml se le añadieron 4-bromo-2-fluoro-6-[(fenilmetil)oxi]benzonitrilo (5 g, 16,33 mmol) y CH2Cl2 (100 ml). El matraz se enfrió en un baño de hielo-agua y se añadió gota a gota BBr3 (49,0 ml, 49,0 mmol) (solución en CH2Cl2) mediante una jeringa. La solución de color rojo se dejó calentar a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se vertió en agua (200 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 200 ml). Los extractos orgánicos combinados se concentraron para dar un residuo de color amarillo. El residuo se trató con CH2Cl2 y se formó un
30 precipitado que se recogió para producir el compuesto del título (2,830 g) en forma de un sólido de color amarillo fino. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  7,03 (t, J = 1,4 Hz, 1H), 7,29 (dd, J = 9,0, 1,6 Hz, 1H), 12,23 (s, 1H).
Intermedio 327
2-Fluoro-6-hidroxi-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo
NH
A un vial con tapón a rosca de 20 ml se le añadieron 4-bromo-2-fluoro-6-hidroxibenzonitrilo (500 mg, 2,315 mmol),
5 bis-pinacolato diboro (705 mg, 2,78 mmol), acetato potásico (568 mg, 5,79 mmol), aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (95 mg, 0,116 mmol) y 1,4-dioxano (8 ml). El vial se tapó y se agitó durante 4 h a 100ºC en un agitador de placa caliente. La mezcla de reacción se dejó enfriar, después se diluyó con acetato de etilo (50 ml) y se lavó con agua (20 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró. El residuo se añadió a un vial para microondas de 20 ml y se añadieron 4-cloro-N-metil-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-2-pirimidinamina (0,279 g, 1,15 mmol), aducto de
10 PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (0,047 g, 0,058 mmol), K2CO3 (2 M, 1,725 ml, 3,45 mmol) y 1,4-dioxano (6 ml). La mezcla resultante se calentó a 140ºC durante 10 minutos en un reactor de microondas. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se diluyó con agua (10 ml), se neutralizó con HCl 0,1 N (papel de pH) y después se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Los extractos orgánicos se combinaron y después se secaron sobre Na2SO4. La solución seca se concentró y después se purificó por cromatografía ultrarrápida con CH3OH al 0-10% en CH2Cl2 (columna de 24 g,
15 carga seca) para producir el compuesto del título (0,37 g) en forma de un sólido de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 344 [M+H]+.
Intermedio 328
Trifluorometanosulfonato de 2-ciano-3-fluoro-5-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}fenilo
CF3
S
O
O
O CN
O N
F N
N
HN
20 A una solución de 2-fluoro-6-hidroxi-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (270 mg, 0,786 mmol) y piridina (0,382 ml, 4,72 mmol) en CH2Cl2 (9 ml) a 0ºC se le añadió una solución de anhídrido tríflico (0,199 ml, 1,180 mmol) en CH2Cl2 (9 ml). La reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente, después se vertió en cloruro de amonio (20 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (3 x 50 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para producir el compuesto del título en bruto (374 mg). LC-MS (ES) m/z =
25 476 [M+H]+.
Intermedio 329
2-Fluoro-6-(2-furanil)-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo
HN
Una solución de trifluorometanosulfonato de 2-ciano-3-fluoro-5-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4
5 pirimidinil}fenilo (374 mg, 0,786 mmol), ácido 2-furanilborónico (176 mg, 1,572 mmol), aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (32,1 mg, 0,039 mmol) y K3PO4 (500 mg, 2,358 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) se calentó durante una noche a 100ºC en un tubo que puede cerrarse herméticamente. La mezcla de reacción se dejó enfriar y después se repartió entre EtOAc (50 ml) y agua (50 ml). La capa acuosa se neutralizó con HCl 0,1 M (papel de pH) y se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se purificó por
10 RP-HPLC (CH3CN al 15-50% en agua, TFA al 0,1%). Las fracciones del producto se combinaron, se basificaron con NaHCO3, se extrajeron con EtOAc, se secaron y se concentraron para producir el compuesto del título (74 mg) en forma de un sólido de color pardo LC-MS (ES) m/z = 394 [M+H]+.
Ejemplo 169
4-(2-Furanil)-6-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
O NH2
O
N
N N H
N
N
NH 15 A un vial para microondas de 2 ml se le añadieron 2-fluoro-6-(2-furanil)-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]4-pirimidinil}benzonitrilo (50 mg, 0,127 mmol), hidrazina (0,044 ml, 0,763 mmol), base de Hunig (0,067 ml, 0,381 mmol) y etanol (1 ml). La reacción se calentó a 150ºC durante 90 minutos en un reactor de microondas. La mezcla de reacción se dejó enfriar, después se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida
20 (CH3OH al 0-10% en CH2Cl2) para producir el compuesto del título (35 mg, 0,086 mmol) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 406 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,20 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 2,75 -2,94 (m, 3H), 3,05 -3,21 (m, 1H), 3,41 -3,52 (m, 1H), 3,57 -3,67 (m, 1H), 3,68 -3,80 (m, 1H), 3,87 -4,00 (m, 1H), 4,06 4,21 (m, 1H), 4,45 -4,62 (m, 1H), 5,11 (s, 2H), 6,46 -6,68 (m, 2H), 6,68 -6,74 (m, 1H), 6,97 -7,16 (m, 1H), 7,74 7,82 (m, 1H), 7,89 -7,95 (m, 1H), 7,97 -8,07 (m, 1H), 11,95 (s, 1H).
25 Ejemplo 170
6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina
NH2
Se generó una solución madre de etóxido sódico en etanol mediante la adición de etanol (20 ml) a NaH (254 mg, 10,56 mmol), seguido de agitación a temperatura ambiente durante 30 minutos. A un vial para microondas de 20 ml se le añadieron 4-{2-amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2,6-difluorobenzonitrilo (700 mg, 2,11 mmol), DMF (2 ml) y etanol (3 ml). La reacción se enfrió a 0ºC y se añadió una solución de etóxido sódico en etanol (4,40 5 ml, 2,324 mmol). La reacción se agitó durante una noche, se añadió una porción adicional de DMF y la reacción se dejó en agitación durante una noche a temperatura ambiente. Se añadieron 0,25 equiv. más de etóxido sódico en etanol (1 ml) y la reacción se agitó durante 8 horas. La mezcla de reacción se vertió en NH4Cl (sat.) y agua (1:1, 30 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El residuo se disolvió en etanol (10 ml) y se añadieron hidrazina hidrato (0,73 ml, 12,7 mmol) y base 10 de Hunig (1,11 ml, 6,34 mmol). La reacción se calentó en un reactor de microondas durante 90 minutos a 150ºC. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, se concentró y el precipitado resultante se recogió por filtración, se lavó con etanol y se secó al vacío para producir el compuesto del título (400 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 370 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,18 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,45 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 3,05 -3,15 (m, 1H), 3,38 -3,49 (m, 1H), 3,54 -3,65 (m, 1H), 3,66 -3,78 (m, 1H), 3,88 -3,96 (m, 1H), 4,08 (d, J = 15 12,6 Hz, 1H), 4,21 (c, J = 6,8 Hz, 2H), 4,50 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 5,00 (s, 2H), 6,10 (s, 2H), 6,49 (s, 1H), 6,91 (s, 1H),
7,49 (s, 1H), 11,53 (s, 1H).
Ejemplo 171
6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-[(1-metiletil)oxi]-1H-indazol-3-amina
O
NH2
O
N
N
N
H
N
N
NH2
20 Se generó una solución madre de isopropóxido sódico en isopropanol mediante la adición de isopropanol (40 ml) a NaH (254 mg, 10,56 mmol) a 0ºC, seguido de agitación a temperatura ambiente durante 30 minutos y después a 40ºC durante 30 minutos. La solución incolora transparente se dejó enfriar a temperatura ambiente. A un vial para microondas de 20 ml se le añadieron 4-{2-amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2,6-difluorobenzonitrilo (700 mg, 2,11 mmol), DMF (2 ml) e isopropanol (3 ml). La reacción se enfrió a 0ºC y se añadió gota a gota una
25 solución de isopropóxido sódico en isopropanol (8,80 ml, 2,324 mmol). La reacción se agitó durante una noche. Después, se añadió una porción adicional de DMF (2 ml) y la reacción se dejó en agitación durante una noche a temperatura ambiente. En este momento, se añadieron 0,4 equiv. más de isopropóxido sódico en isopropanol (3,2 ml) y la reacción se agitó 3 días durante el fin de semana. La mezcla de reacción se concentró y el residuo resultante se disolvió en etanol (10 ml). Se añadieron hidrazina hidrato (0,73 ml, 12,7 mmol) y base de Hunig (1,11
30 ml, 6,34 mmol) y la mezcla de reacción se calentó en un reactor de microondas durante 90 minutos a 150ºC. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, después de lo cual se formó un precipitado. El precipitado se recogió por filtración, se lavó con etanol y se secó al vacío para producir el compuesto del título (600 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 384 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,18 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,38 (d, J = 5,8, 3H), 1,37 (d, J = 5,8, 3H), 3,03 -3,19 (m, 1H), 3,40 -3,50 (m, 1H), 3,53 -3,65 (m, 1H), 3,66
35 3,79 (m, 1H), 3,92 (dd, J = 11,1, 3,0 Hz, 1H), 4,08 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 4,45 -4,55 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 4,78 -4,94 (m, 1H), 4,99 (s, 2H), 6,09 (s, 2H), 6,47 (s, 1H), 6,94 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 330
(2R)-2-[(Fenilmetil)amino]-1-butanol
NH
40 A (R)-(-)-2-amino-1-butanol (5 g, 56,1 mmol) en CH3OH (120 ml) se le añadió benzaldehído (6,24 ml, 61,7 mmol) y la mezcla de reacción se agitó en una atmósfera de nitrógeno durante 15 minutos. Después, la mezcla se enfrió en un baño de hielo y se añadió en porciones borohidruro sódico (2,33 g, 61,7 mmol). La mezcla se agitó en el baño de hielo durante 1,5 horas. Se añadió NaOH (6 N, 25 ml) y la mezcla se concentró. El residuo resultante se recogió en 100 ml de H2O y se extrajo con Et2O (2 x). Los extractos orgánicos se combinaron, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para producir el compuesto del título (10,92 g) en forma de un sólido mullido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 180 [M+H]+.
Intermedio 331
[(2S,5R)-5-Etil-4-(fenilmetil)-2-morfolinil]metanol
A una solución de (2R)-2-[(fenilmetil)amino]-1-butanol (10,06 g, 56,1 mmol) en 1,2-dicloroetano (DCE) (250 ml) se le añadió (R)-(-)-epiclorohidrina (6,75 g, 72,9 mmol) seguido de perclorato de litio (5,97 g, 56,1 mmol) en una atmósfera
10 de nitrógeno. La reacción se agitó durante 2 días a temperatura ambiente, después se añadió etóxido sódico (52,4 ml, 140 mmol) y la reacción continuó en agitación durante 3 días. Se añadió NH4Cl saturado y el producto se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para producir el compuesto del título (16,2 g) en forma de un aceite incoloro. LC-MS (ES) m/z = 236 [M+H]+.
Intermedio 332
15 [(2S,5R)-5-Etil-2-morfolinil]metanol
HO
HN O
Se disolvió [(2S,5R)-5-Etil-4-(fenilmetil)-2-morfolinil]metanol (0,5 g, 2,125 mmol) en CH3OH (20 ml) y se puso en una atmósfera de nitrógeno. Se añadió paladio sobre carbono (al 10% en peso, 0,023 g, 0,212 mmol) y el matraz se lavó abundantemente con nitrógeno y se evacuó (3 x). Después, la reacción se puso en una atmósfera de hidrógeno
20 (globo) y se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reacción se filtró a través de celite y se concentró para producir el compuesto del título (0,309 g) en forma de un aceite incoloro. LC-MS (ES) m/z = 146 [M+H]+.
Intermedio 333
(2S,5R)-5-Etil-2-(hidroximetil)-4-morfolinacarboxilato de 1,1-dimetiletilo
A [(2S,5R)-5-etil-2-morfolinil]metanol (0,309 g, 2,125 mmol) en THF (10 ml) se le añadieron Boc2O (0,493 ml, 2,125 mmol) y base de Hunig (0,371 ml, 2,125 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 40ºC y se agitó durante una noche. Después, la reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró para producir el compuesto del título (0,488 g). LC-MS (ES) m/z = 246 [M+H]+.
30 Intermedio 334
Ácido (2S,5R)-4-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-5-etil-2-morfolinacarboxílico
A una solución agitada vigorosamente de (2S,5R)-5-etil-2-(hidroximetil)-4-morfolinacarboxilato de 1,1-dimetiletilo
5 (2,52 g, 10,27 mmol) en CH2Cl2 (50 ml) enfriada a 0ºC se le añadieron TEMPO (0,321 g, 2,054 mmol) y (diacetoxiyodo)benceno (7,28 g, 22,60 mmol). El baño de hielo se retiró y la reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó durante una noche. La reacción se interrumpió con CH3OH y después se concentró para producir el compuesto del título (0,711 g) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 260 [M+H]+.
Intermedio 335
10 (2S,5R)-5-Etil-2-[(fenilamino)carbonil]-4-morfolinacarboxilato de 1,1-dimetiletilo
A ácido (2S,5R)-4-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-5-etil-2-morfolinacarboxílico (0,250 g, 0,964 mmol) en CH2Cl2 (10 ml) se le añadieron anilina (0,088 ml, 0,964 mmol), HOAt (0,131 g, 0,964 mmol) y EDC (0,222 g, 1,157 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reacción se lavó con agua (2
15 x) y los extractos orgánicos se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para producir el compuesto del título (0,247 g) en forma de un aceite de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 240 [M+H]+.
Intermedio 336
(2S,5R)-5-Etil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida
HN
HN O
20 Se recogió (2S,5R)-5-etil-2-[(fenilamino)carbonil]-4-morfolinacarboxilato de 1,1-dimetiletilo (0,269 g, 0,804 mmol) en HCl en 1,4-dioxano (4 M, 0,024 ml, 0,804 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se concentró para producir una sal HCl del compuesto del título (0,198 g) en forma de un aceite de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 235 [M+H]+.
Intermedio 337
(2S,5R)-4-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-etil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida
Se añadieron (2S,5R)-5-etil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida (0,3118 g, 1,331 mmol) y 2,6-dicloropirimidina (0,218 g,
5 1,331 mmol) a un recipiente para microondas de 20 ml y la mezcla se disolvió en CH3CN (5 ml). Se añadió base de Hunig (1,162 ml, 6,65 mmol) y la reacción se tapó y se irradió a 150ºC durante 2 horas. Después, la mezcla de reacción se diluyó con H2O y se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas se combinaron y se secaron para producir el compuesto del título (0,419 g). LC-MS (ES) m/z = 362 [M+H]+.
Ejemplo 172
10 (2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-etil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida
NH2
O O
N
N
N
HNH
N N
NH2
Se añadieron (2S,5R)-4-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-etil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida (0,4185 g, 1,157 mmol), ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (0,572 g, 3,47 mmol) y Pd(PPh3)4 (0,067 g, 0,058 mmol) a un recipiente para microondas de 20 ml seguido de 1,4-dioxano (5 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (2,5 ml). La reacción se irradió a 15 130ºC durante 30 minutos. Se añadió SiliaBond® Tiol (4,45 g, 5,78 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. Después, la reacción se filtró y el filtrado se diluyó con H2O y se lavó con EtOAc (2 x). Los extractos orgánicos se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para producir un aceite de color pardo que se recogió en CH3CN (5 ml) en un recipiente para microondas de 20 ml. Se añadieron hidrazina (0,17 ml, 5,5 mmol) y base de Hunig (1,92 ml, 11,0 mmol) y la reacción se irradió a 150ºC durante 10 minutos. La mezcla de reacción se
20 concentró y después se purificó por HPLC de fase inversa (CH3CN al 25-55%/H2O, TFA al 0,1%). Las fracciones del producto se combinaron y se concentraron para producir un sólido de color amarillo que se recogió en 1 ml de H2O y se liofilizó para producir una sal TFA del compuesto del título (12,7 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 459 [M+H]+.
Intermedio 338
25 (2S,5R)-2-[(Ciclohexilamino)carbonil]-5-etil-4-morfolinacarboxilato de 1,1-dimetiletilo
A ácido (2S,5R)-4-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-5-etil-2-morfolinacarboxílico (0,250 g, 0,964 mmol) en CH2Cl2 (10 ml) se le añadieron ciclohexilamina (0,096 g, 0,964 mmol), HOAt (0,131 g, 0,964 mmol) y EDC (0,222 g, 1,157 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reacción se lavó con H2O (2 x) y los
30 extractos orgánicos se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para producir el compuesto del título (0,296 g) en forma de un aceite de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 241 [M+H-Boc]+.
Intermedio 339
(2S,5R)-N-Ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida
HN
HN O
Se recogió (2S,5R)-2-[(ciclohexilamino)carbonil]-5-etil-4-morfolinacarboxilato de 1,1-dimetiletilo (0,2963 g, 0,870
5 mmol) en HCl en 1,4-dioxano (4 M, 5 ml, 165 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se concentró para producir una sal HCl del compuesto del título (0,256 g). LC-MS (ES) m/z = 241 [M+H]+.
Intermedio 340
(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida
NH210
Se recogió (2S,5R)-N-ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida (0,256 g, 1,07 mmol) en CH3CN (5 ml) en un recipiente para microondas de 20 ml, seguido de la adición de base de Hunig (0,93 ml, 5,33 mmol) y 2,6dicloropirimidina (0,175 g, 1,07 mmol). La reacción se irradió a 150ºC durante 2 horas. Después, la mezcla de reacción se diluyó con H2O y se extrajo con EtOAc (2 x). Los extractos orgánicos se secaron y se concentraron para 15 producir un aceite de color pardo que se añadió a un recipiente para microondas de 20 ml con Pd(PPh3)4 (0,054 g, 0,047 mmol) seguido de 1,4-dioxano (5 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (2,5 ml). La reacción se irradió a 130ºC durante 30 minutos. A la mezcla de reacción se le añadió SiliaBond® Tiol (4,45 g, 5,78 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. Después, la reacción se filtró y el filtrado se diluyó con H2O y se lavó con EtOAc (2 x). Los extractos orgánicos se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para producir el compuesto del
20 título en bruto (0,583 g) en forma de un aceite de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 453 [M+H]+.
Ejemplo 173
(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida
NH2
O O
N
N
N NH
H NN
NH2
Se recogió (2S,5R)-4-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida
25 (0,583 g, 1,288 mmol) en CH3CN (5 ml) seguido de la adición de hidrazina (0,162 ml, 5,15 mmol) y base de Hunig (1,800 ml, 10,31 mmol) en un recipiente para microondas de 20 ml. La reacción se irradió a 150ºC durante 10 minutos. La mezcla de reacción se purificó por HPLC de fase inversa (CH3CN al 25-55%/H2O, TFA al 0,1%). Las fracciones del producto se combinaron y se concentraron para producir una sal TFA del compuesto del título (29 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 465 [M+H]+.
Intermedio 341 (2S,5R)-4-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-etil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida
Se añadió 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina (0,150 g, 0,845 mmol) a un vial para microondas de 20 ml seguido de la adición de (2S,5R)-5-etil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida (0,198 g, 0,845 mmol) en CH3CN (5 ml) y base de Hunig (0,738 ml, 4,23 mmol). La reacción se irradió a 150ºC durante 10 minutos. La reacción se dejó en el recipiente para microondas cerrado herméticamente de 20 ml y se calentó a 100ºC durante el fin de semana. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (2 x). Las capas orgánicas se combinaron y se secaron para producir el compuesto del título en bruto (0,410 g). LC-MS (ES) m/z = 376 [M+H]+.
Intermedio 342
(2S,5R)-4-[6-(4-Ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-etil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida
Se añadió ácido 4-ciano-3-fluorofenil)borónico (0,279 g, 1,690 mmol) a un recipiente para microondas de 20 ml seguido de la adición de Pd(PPh3)4 (0,049 g, 0,042 mmol) y (2S,5R)-4-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-etil-Nfenil-2-morfolinacarboxamida (0,318 g, 0,845 mmol) disuelta en 1,4-dioxano (5 ml). Se añadió NaHCO3 acuoso saturado (2,5 ml) y la reacción se irradió a 130ºC durante 30 minutos. A la mezcla de reacción se le añadió SiliaBond® Tiol (3,25 g, 4,23 mmol), se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas y después se filtró. Después, el filtrado se diluyó con H2O y se extrajo con EtOAc (2 x). Los extractos orgánicos se secaron y se concentraron para producir el compuesto del título en bruto (0,412 g) en forma de un aceite de color pardo oscuro. LC-MS (ES) m/z = 461 [M+H]+.
Ejemplo 174
(2S,5R)-4-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-etil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida
Se recogió (2S,5R)-4-[6-(4-Ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-etil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida (389 mg, 0,845 mmol) en CH3CN (5 ml) y después se añadió a un recipiente para microondas de 20 ml seguido de la adición de hidrazina (0,106 ml, 3,38 mmol) y base de Hunig (1,181 ml, 6,76 mmol). La reacción se irradió a 150ºC durante 15 minutos. La reacción se concentró y se purificó por HPLC de fase inversa (CH3CN al 15-45%/H2O, TFA al 0,1%). Las fracciones se combinaron y se concentraron para producir una sal TFA del compuesto del título (48,5 mg). LC-MS (ES) m/z = 473 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,92 (t, 3H), 1,74 -1,86 (m, 2H), 3,34 (s, 3H), 3,71 -3,74 (m, 1H), 3,74 -3,77 (m, 1H), 4,03 (s a, 1H), 4,06 (s a, 1H), 4,10 -4,16 (m, 1H), 4,64 -4,85 (m, 1H), 5,39 (s a, 2H), 6,60 -6,67 (m, 2H), 7,07 -7,13 (m, 1H), 7,31 -7,36 (m, 2H), 7,60 -7,64 (m, 1H), 7,70 -7,74 (m, 3H), 8,00 (s, 1H), 9,87 (s a, 1H), 11,50 (s a, 1H).
Intermedio 343 (2S,5R)-4-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida
NH N
N
NH Se añadió 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina (0,141 g, 0,791 mmol) a un vial para microondas de 20 ml seguido de la adición de (2S,5R)-N-ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida (0,190 g, 0,791 mmol) en CH3CN (5 ml) y base de Hunig (0,690 ml, 3,95 mmol). La reacción se irradió a 150ºC durante 10 minutos. La reacción se dejó en el recipiente de microondas cerrado herméticamente de 20 ml y se calentó a 100ºC durante el fin de semana. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (2 x). Las capas orgánicas se combinaron y se secaron para producir el compuesto del título (0,302 g). LC-MS (ES) m/z = 382 [M+H]+.
Intermedio 344
(2S,5R)-4-[6-(4-Ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida
NH N
N
NH
Se añadió ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (0,261 g, 1,582 mmol) a un recipiente para microondas de 20 ml seguido de la adición de Pd(PPh3)4 (0,046 g, 0,040 mmol) y (2S,5R)-4-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-Nciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida (0,302 g, 0,791 mmol) disuelta en 1,4-dioxano (5 ml). Se añadió NaHCO3 acuoso saturado (2,5 ml) y la reacción se irradió a 130ºC durante 30 minutos. A la reacción se le añadió SiliaBond® Tiol (3,04 g, 3,96 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas y después se filtró. Después, el filtrado se diluyó con H2O y se extrajo con EtOAc (2 x). Los extractos orgánicos se secaron y se concentraron para producir el compuesto del título en bruto (0,387 g) en forma de un aceite de color pardo oscuro. LC-MS (ES) m/z = 467 [M+H]+.
Ejemplo 175
(2S,5R)-4-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida
Se recogió (2S,5R)-4-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida (369 mg, 0,791 mmol) en CH3CN (5 ml) y después se añadió a un recipiente para microondas de 20 ml seguido de la adición de hidrazina (0,099 ml, 3,16 mmol) y base de Hunig (1,105 ml, 6,33 mmol). La reacción se irradió a 150ºC durante 15 minutos. El disolvente se retiró de la mezcla de reacción a través de un evaporador de N2 y el residuo resultante se recogió en 5 ml de DMSO para la purificación en fase inversa (CH3CN al 15-45%/H2O, TFA al 0,1%). Las fracciones se combinaron y se concentraron para producir una sal TFA del compuesto del título (30,7 mg). LC-MS (ES) m/z = 479 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,85 -0,92 (m, 3H), 1,07 -1,15 (m, 2H), 1,20 -1,35 (m, 4H), 1,52 -1,61 (m, 2H), 1,65 -1,80 (m, 4H), 2,81 -2,88 (m, 5H), 3,56 -3,63 (m, 1H), 3,63 -3,69 (m, 1H), 3,86 -3,92 (m, 1H), 3,93 -3,99 (m, 1H), 4,57 -4,83 (m, 2H), 5,38 (s a, 1H), 6,53 -6,64 (m, 2H), 7,58 -7,67 (m, 2H), 7,70 -7,74 (m, 1H), 7,97 (s a, 1H), 11,49 (s a, 1H).
Intermedio 345
(2S,5R)-5-Etil-2-{[(fenilmetil)amino]carbonil}-4-morfolinacarboxilato de 1,1-dimetiletilo
A ácido (2S,5R)-4-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-5-etil-2-morfolinacarboxílico (0,390 g, 1,504 mmol) en CH2Cl2 (10 ml)
5 se le añadieron bencilamina (0,164 ml, 1,504 mmol), HOAt (0,205 g, 1,504 mmol) y EDC (0,346 g, 1,805 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reacción se lavó con H2O (3 x) y después los extractos orgánicos se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para producir el compuesto del título (0,551 g). LC-MS (ES) m/z = 249 [M+H-Boc]+.
Intermedio 346
10 (2S,5R)-5-Etil-N-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida
HN
HN O
Se recogió (2S,5R)-5-etil-2-{[(fenilmetil)amino]carbonil}-4-morfolinacarboxilato de 1,1-dimetiletilo (0,551 g, 1,581 mmol) en HCl en 1,4-dioxano (4 M, 5 ml, 165 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se concentró para producir una sal HCl del compuesto del título (0,400 g) en forma de un aceite de color
15 pardo. LC-MS (ES) m/z = 249 [M+H]+.
Intermedio 347
(2S,5R)-4-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-etil-N-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida
Se añadió 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina (0,143 g, 0,805 mmol) a un vial para microondas de 20 ml seguido de
20 la adición de (2S,5R)-5-etil-N-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida (0,200 g, 0,805 mmol) en CH3CN (5 ml) y base de Hunig (0,703 ml, 4,03 mmol). La reacción se irradió a 150ºC durante 10 minutos. La reacción se dejó en el recipiente de microondas cerrado herméticamente de 20 ml y se calentó a 100ºC durante el fin de semana. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (2 x). Las capas orgánicas se combinaron y se secaron para producir el compuesto del título (0,805 g) en forma de un aceite. LC-MS (ES) m/z = 376 [M+H]+.
25 Intermedio 348
(2S,5R)-4-[6-(4-Ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-etil-N-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida
Se añadió ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (0,266 g, 1,61 mmol) a un recipiente para microondas de 20 ml
5 seguido de la adición de Pd(PPh3)4 (0,047 g, 0,040 mmol) y (2S,5R)-4-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-etil-N(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida (0,314 g, 0,805 mmol) disuelta en 1,4-dioxano (5 ml). Se añadió NaHCO3 acuoso saturado (2,5 ml) y la reacción se irradió a 130ºC durante 30 minutos. A la reacción se le añadió SiliaBond® Tiol (3,10 g, 4,03 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas y después se filtró. Después, el filtrado se diluyó con H2O y se extrajo con EtOAc (x 2). Los extractos orgánicos se secaron y se concentraron para producir el
10 compuesto del título (0,365 g) en forma de un aceite de color pardo oscuro. LC-MS (ES) m/z = 475 [M+H]+.
Ejemplo 176
(2S,5R)-4-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-etil-N-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida
NH2
O
N
O N
N H
NH N N NH
Se recogió (2S,5R)-4-[6-(4-Ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-etil-N-(fenilmetil)-2
15 morfolinacarboxamida (382 mg, 0,805 mmol) en CH3CN (5 ml) y después se añadió a un recipiente para microondas de 20 ml seguido de la adición de hidrazina (0,101 ml, 3,22 mmol) y base de Hunig (1,125 ml, 6,44 mmol). La reacción se irradió a 150ºC durante 15 minutos. La reacción se concentró y se purificó por HPLC de fase inversa (CH3CN al 15-45%/H2O, TFA al 0,1%). Las fracciones se combinaron y se concentraron para producir una sal TFA el compuesto del título (36,9 mg). LC-MS (ES) m/z = 487 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,86 -0,93 (m, 3H),
20 1,63 -1,83 (m, 2H), 2,76 -2,79 (m, 1H), 2,81 -2,87 (m, 3H), 3,67 -3,73 (m, 1H), 3,95 -4,03 (m, 2H), 4,30 -4,39 (m, 2H), 4,66 (s, 2H), 5,37 -5,41 (m, 2H), 5,77 (s, 2H), 6,60 (s a, 2H), 7,22 -7,36 (m, 5H), 7,59 -7,63 (m, 1H), 7,70 -7,74 (m, 1H), 7,98 (s a, 1H), 8,48 -8,56 (m, 1H), 11,49 (s a, 1H).
Intermedio 349
4-Cloro-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-N-metil-2-pirimidinamina
NH 25 Se recogió (3R)-3-etilmorfolina (5 g, 43,4 mmol) en CH3CN (100 ml) y base de Hunig (15,2 ml, 87 mmol), seguido de la adición de 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina (6,96 g, 39,1 mmol) y la reacción se calentó a 130ºC durante una noche en un tubo que puede cerrarse herméticamente. La mezcla de reacción se concentró y después se purificó por cromatografía ultrarrápida (EtOAc al 0-15%/CHCl3, 400 g). Las fracciones se combinaron y se concentraron para
30 producir el compuesto del título (1,6 g) en forma de un aceite incoloro. LC-MS (ES) m/z = 257 [M+H]+.
Intermedio 350
4-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo
NH
Se añadió 4-cloro-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-N-metil-2-pirimidinamina (250 mg, 0,974 mmol) a un vial para microondas de 20 ml, seguido de ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (209 mg, 1,266 mmol), aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (39,8 mg, 0,049 mmol), K2CO3 2 M (1,461 ml, 2,92 mmol) y 1,4-dioxano (4 ml). La mezcla se calentó a 140ºC durante 10 minutos. La mezcla de reacción se filtró a través de un lecho de sílice y se lavó con EtOAc (3 x). Después, el filtrado se lavó con H2O (2 x) y la capa orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró para producir el compuesto del título (464 mg) en forma de un aceite de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 342 [M+H]+.
Ejemplo 177
6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH
Se recogió 4-[6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo (0,464 g, 1,359 mmol) en CH3CN (5 ml) seguido de la adición de hidrazina (0,171 ml, 5,44 mmol) y base de Hunig (1,899 ml, 10,87 mmol) en un vial para microondas de 20 ml. La reacción se irradió a 150ºC durante 1 hora. Después, la mezcla de reacción se concentró y el residuo resultante se purificó usando HPLC de fase inversa (CH3CN al 5-30%/H2O, TFA al 0,1%). Las fracciones se combinaron y se diluyeron con EtOAc. Los extractos orgánicos se lavaron con una solución saturada de NaHCO3 (2 x) que se extrajo de nuevo con EtOAc (x 1). Los extractos orgánicos se combinaron y se secaron sobre Na2SO4. El producto se recogió en 2 ml de H2O y se liofilizó para producir el compuesto del título (137 mg) en forma de un polvo mullido de color blanco. LC-MS(ES) m/z = 354 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,89 (t, 3H), 1,60 -1,82 (m, 2H), 2,83 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 3,10 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 3,43 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 3,52 (dd, J = 11,5, 2,9 Hz, 1H), 3,84 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,89 (dd, J = 11,2, 3,2 Hz, 1H), 4,03 (c, J = 7,1 Hz, 1H), 4,14 -4,26 (m, 1H), 4,29 -4,38 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,55 (s a, 2H), 7,59 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,97 (s a, 1H), 11,50 (s a, 1H).
Intermedio 351
4-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzonitrilo
F
Se añadió 4-cloro-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-N-metil-2-pirimidinamina (250 mg, 0,974 mmol) a un vial para microondas de 20 ml, seguido de ácido (4-ciano-3,5-difluorofenil)borónico (356 mg, 1,948 mmol), aducto de PdCl2(dppf)·CH2Cl2 (39,8 mg, 0,049 mmol), K2CO3 2 M (1,461 ml, 2,92 mmol) y 1,4-dioxano (4 ml). La mezcla se calentó a 140ºC durante 10 minutos. La mezcla de reacción se filtró a través de un lecho de sílice y se lavó con EtOAc (3 x). Después, el filtrado se lavó con H2O (2 x) y la capa orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró para
producir el compuesto del título (453 mg) en forma de un aceite de color pardo. LC-MS (ES) m/z = 360 [M+H]+.
Ejemplo 178
6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-fluoro-1H-indazol-3-amina
Se recogió 4-[6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo (0,453 g, 1,261 mmol) en CH3CN (5 ml) seguido de la adición de hidrazina (0,158 ml, 5,04 mmol) y base de Hunig (1,76 ml, 10,1 mmol) en un vial para microondas de 20 ml. La reacción se irradió a 150ºC durante 1 hora. La mezcla de reacción se concentró y se purificó por HPLC de fase inversa (CH3CN al 8-28%/H2O, TFA al 0,1%). Las fracciones se combinaron y se diluyeron con EtOAc. Los extractos orgánicos se lavaron con una solución saturada de NaHCO3 (2 x) que se extrajo de nuevo con EtOAc. Los extractos orgánicos se combinaron y se secaron sobre Na2SO4. El producto se recogió en 2 ml de H2O y se liofilizó para producir el compuesto del título (137 mg) en forma de un polvo mullido de color blanco. LC-MS(ES) m/z = 372 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,88 (t, 3H), 1,60 -1,81 (m, 2H), 2,82 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 3,05 -3,16 (m, 1H), 3,43 (d, J = 2,53 Hz, 1H), 3,51 (dd, J = 11,5, 2,9 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 3,89 (dd, J = 11,1, 3,0 Hz, 1H), 4,03 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 4,16 -4,28 (m, 1H), 4,30 -4,43 (m, 1H), 5,26 (s, 2H), 6,58 (s a, 2H), 7,36 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 7,84 (s a, 1H), 11,89 (s, 1H).
Ejemplo 179
6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina
NH
Se añadió gota a gota CH3OH (10 ml) a un matraz de fondo redondo de 100 ml a 0ºC cargado con hidruro sódico (66,8 mg, 2,78 mmol). La mezcla se agitó durante 10 minutos y después se dejó calentar a temperatura ambiente durante 10 minutos. A un vial de 4 ml se le añadieron 4-[6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2,6difluorobenzonitrilo (100 mg, 0,278 mmol), DMF (1 ml) y 1,2 ml de una solución de metóxido sódico (1,2 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. A la reacción se le añadieron 0,5 equiv. más de metóxido sódico y se calentó a 40ºC durante 3 horas. Después, la mezcla de reacción se vertió en EtOAc (10 ml). Los extractos orgánicos se lavaron con H2O (2 x) y después se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para producir 4-[6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2-fluoro-6-(metiloxi)benzonitrilo. Este material se recogió en CH3CN (1 ml) y se añadió a un vial para microondas de 5 ml seguido de la adición de hidrazina (0,035 ml, 1,113 mmol) y base de Hunig (0,39 ml, 2,23 mmol). La reacción se irradió a 150ºC durante 90 minutos. Después, la mezcla de reacción se concentró y se purificó por HPLC de fase inversa (CH3CN al 10-30%/H2O, TFA al 0,1%). Las fracciones se combinaron y se diluyeron con EtOAc. Los extractos orgánicos se lavaron con una solución saturada de NaHCO3 que se extrajo de nuevo con EtOAc (x 1). Los extractos orgánicos se combinaron y se secaron sobre Na2SO4. El producto se recogió en 2 ml de H2O y se liofilizó para producir el compuesto del título (34,8 mg) en forma de un polvo mullido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 384 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,88 (t, 3H), 1,59 -1,82 (m, 2H), 2,82 (d, J = 3,8 Hz, 3H), 3,07 -3,18 (m, 1H), 3,39 -3,49 (m, 1H), 3,50 -3,56 (m, 1H), 3,82 -3,87 (m, 1H), 3,87 -3,92 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 4,10 -4,23 (m, 1H), 4,27 -4,39 (m, 1H), 5,02 (s, 2H), 6,45 -6,57 (m, 1H), 6,94 (s a, 1H), 7,52 (s a, 1H), 8,30 -8,34 (s a, 1H), 11,53 (s a, 1H).
Ejemplo 180 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina
N
N
NH
A un vial de 4 ml se le añadieron 4-[6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzonitrilo (100 mg, 0,278 mmol), DMF (1 ml) y NaSMe (al 15% en peso, 117 mg, 0,250 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La reacción se vertió en EtOAc (10 ml) seguido de H2O (10 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x). Después, los extractos orgánicos se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para producir un aceite de color amarillo que después se recogió en CH3CN (1,5 ml) y se añadió a un vial para microondas de 5 ml seguido de la adición de hidrazina (0,035 ml, 1,113 mmol) y base de Hunig (0,39 ml, 2,23 mmol). La reacción se irradió a 150ºC durante 90 minutos. Después, la mezcla de reacción se concentró y se purificó por HPLC de fase inversa (CH3CN al 10-30%/H2O, TFA al 0,1%). Las fracciones se combinaron y se diluyeron con EtOAc. Los extractos orgánicos se lavaron con una solución saturada de NaHCO3 que se extrajo de nuevo con EtOAc. Los extractos orgánicos se combinaron y se secaron sobre Na2SO4. El producto se recogió en 2 ml de H2O y se liofilizó para producir el compuesto del título (28,8 mg) en forma de un polvo mullido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 400 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,89 (t, 3H), 1,60 -1,81 (m, 2H), 2,82 (d, J = 3,3 Hz, 3H), 3,05 3,15 (m, 1H), 3,16 -3,19 (m, 3H), 3,40 -3,48 (m, 1H), 3,49 -3,56 (m, 1H), 3,81 -3,87 (m, 1H), 3,87 -3,93 (m, 1H), 4,18 (s a, 1H), 4,33 (s a, 1H), 5,09 (s, 2H), 6,47 -6,57 (m, 1H), 7,39 -7,45 (m, 1H), 7,72 -7,80 (m, 1H), 8,60 -8,68 (m, 1H), 11,84 (s a, 1H).
Ejemplo 181
N4-Ciclopentil-6-[6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3,4-diamina
A un vial de 4 ml se le añadieron 4-[6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzonitrilo (100 mg, 0,278 mmol), DMF (1 ml) y ciclopentil amina (23,7 mg, 0,28 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La reacción se vertió en EtOAc (10 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x). Después, los extractos orgánicos se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para producir un aceite de color amarillo que se recogió en CH3CN (1,5 ml) y se añadió a un vial para microondas de 5 ml seguido de la adición de hidrazina (0,035 ml, 1,113 mmol) y base de Hunig (0,39 ml, 2,23 mmol). La reacción se irradió a 150ºC durante 90 minutos. Después, la mezcla de reacción se concentró y se purificó por HPLC de fase inversa (CH3CN al 2040%/H2O, TFA al 0,1%). Las fracciones se combinaron y se diluyeron con EtOAc. Los extractos orgánicos se lavaron con una solución saturada de NaHCO3 que se extrajo de nuevo con EtOAc. Los extractos orgánicos se combinaron y se secaron sobre Na2SO4. El producto se recogió en 2 ml de H2O y se liofilizó para producir el compuesto del título (23 mg). LC-MS (ES) m/z = 437 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,89 (s, 3H), 1,53 -1,82 (m, 8H), 2,00 2,09 (m, 2H), 2,79 -2,85 (m, 3H), 3,03 -3,13 (m, 1H), 3,39 -3,48 (m, 1H), 3,49 -3,55 (m, 1H), 3,82 -3,86 (m, 1H), 3,87 -3,92 (m, 1H), 4,11 -4,19 (m, 1H), 4,20 -4,28 (m, 1H), 5,03 (s, 2H), 5,32 -5,37 (m, 1H), 6,35 (s a, 1H), 6,46 (s a, 1H), 6,55 (s a, 1H), 7,11 (s a, 1H), 11,38 (s a, 1H).
Ejemplo 182 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N4-metil-1H-indazol-3,4-diamina
N
N
NH
A un vial de 4 ml se le añadieron 4-[6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzonitrilo (100 mg, 0,278 mmol), DMF (1 ml) y metilamina en THF (2 M, 0,14 ml, 0,28 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después, la reacción se vertió en EtOAc (10 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x). Después, los extractos orgánicos se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para producir un aceite de color amarillo que se recogió en CH3CN (1,5 ml) y se añadió a un vial para microondas de 5 ml seguido de la adición de hidrazina (0,035 ml, 1,113 mmol) y base de Hunig (0,39 ml, 2,23 mmol). La reacción se irradió a 150ºC durante 90 minutos. Después, la mezcla de reacción se concentró y se purificó por HPLC de fase inversa (CH3CN al 10-30%/H2O, TFA al 0,1%). Las fracciones se combinaron y se diluyeron con EtOAc. Los extractos orgánicos se lavaron con una solución saturada de NaHCO3 que se extrajo de nuevo con EtOAc. Los extractos orgánicos se combinaron y se secaron sobre Na2SO4. El producto se recogió en 2 ml de H2O y se liofilizó para producir el compuesto del título (7 mg). LC-MS (ES) m/z = 383 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,85 -0,91 (m, 3H), 1,58 -1,82 (m, 2H), 2,79 -2,84 (m, 3H), 3,05 -3,14 (m, 1H), 3,22 -3,28 (m, 3H), 3,39 -3,48 (m, 1H), 3,49 -3,55 (m, 1H), 3,81 -3,86 (m, 1H), 3,87 -3,92 (m, 1H), 4,12 -4,20 (m, 1H), 4,31 (s a, 1H), 4,85 (s, 2H), 6,43 (s a, 1H), 6,51 (s a, 1H), 6,96 (s a, 1H), 7,48 (s a, 1H), 11,58 (s a, 1H).
Ejemplo 183
6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(1-pirrolidinil)-1H-indazol-3-amina
A un vial de 4 ml se le añadieron 4-[6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzonitrilo (100 mg, 0,278 mmol), DMF (1 ml) y pirrolidina (19,8 mg, 0,28 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La reacción se vertió en EtOAc (10 ml) y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x). Después, los extractos orgánicos se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para producir un aceite de color amarillo que se recogió en CH3CN (1,5 ml) y se añadió a un vial para microondas de 5 ml seguido de la adición de hidrazina (0,035 ml, 1,113 mmol) y base de Hunig (0,39 ml, 2,23 mmol). La reacción se irradió a 150ºC durante 90 minutos. Después, la mezcla de reacción se concentró y se purificó por HPLC de fase inversa (CH3CN al 15-35%/H2O, TFA al 0,1%). Las fracciones se combinaron y se diluyeron con EtOAc. Los extractos orgánicos se lavaron con una solución saturada de bicarbonato sódico que se extrajo de nuevo con EtOAc. Los extractos orgánicos se combinaron y se secaron sobre Na2SO4. El producto se recogió en 2 ml de H2O y se liofilizó para producir el compuesto del título (17,1 mg). LC-MS (ES) m/z = 423 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,88 (t, 3H), 1,57 -1,82 (m, 4H), 2,81 (d, J = 4,6 Hz, 3H), 2,84 (d, J = 4,8 Hz, 4H), 3,04 -3,14 (m, 1H), 3,40 -3,48 (m, 1H), 3,49 -3,55 (m, 1H), 3,81 -3,86 (m, 1H), 3,86 -3,92 (m, 1H), 4,11 -4,20 (m, 1H), 4,29 (s a, 1H), 5,07 (s, 2H), 5,65 -5,71 (m, 1H), 6,40 (s a, 2H), 6,44 (s a, 2H), 7,14 (s a, 1H), 11,34 (s a, 1H).
Ejemplo 184
6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina
O
NH2
O
N
N
N
H
N
N
NH
Se recogió 4-[6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzonitrilo (690 mg, 1,92 mmol) en
5 DMF (6 ml) seguido de la adición de etóxido sódico (1,1 M, 1,75 ml, 1,92 mmol). Después, la reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente. La reacción se diluyó con EtOAc (20 ml) y se lavó con H2O (25 ml). Después, el H2O se extrajo de nuevo con EtOAc (20 ml). Los extractos orgánicos se secaron y se concentraron para producir un aceite de color amarillo que después se disolvió en CH3CN (5 ml) y se transfirió a un vial para microondas de 20 ml, seguido de la adición de hidrazina (0,241 ml, 7,68 mmol) y base de Hunig (2,68 ml, 15,36 mmol). La reacción se
10 irradió a 140ºC durante 2 horas. A la reacción se le añadió otro equivalente de hidrazina (0,120 ml, 3,84 mmol) y se irradió a 140ºC durante 30 minutos. La reacción se concentró y se purificó por cromatografía ultrarrápida (al 0-50%,
80:20:2 de CH2Cl2:CH3OH:NH4OH, 60 g). Las fracciones se combinaron y se concentraron para producir el compuesto del título (398,8 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 398 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,88 (t, J = 7,5 Hz, 3H), 1,45 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,60 -1,80 (m, 2H), 2,79 -2,85 (m, 3H), 3,06
15 -3,15 (m, 1H), 3,40 -3,48 (m, 1H), 3,49 -3,55 (m, 1H), 3,81 -3,87 (m, 1H), 3,87 -3,92 (m, 1H), 4,17 -4,25 (m, 3H), 4,34 (s a, 1H), 4,99 (s, 2H), 6,50 (s a, 2H), 6,93 (s a, 1H), 7,52 (s a, 1H), 11,52 (s a, 1H).
Intermedio 352
2,6-Difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo
F
N
N
HN
20 Una mezcla de 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina (1,2 g, 6,74 mmol), (2R)-2-metilpirrolidina (0,631 g, 7,41 mmol) y NaHCO3 (2,83 g, 33,7 mmol) en dioxano (40 ml) y agua (20 ml) se agitó durante una noche a 117ºC en un tubo que puede cerrarse herméticamente. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. El análisis por LCMS mostró que la mayor parte del material de partida 4,6-dicloro-2-pirimidinamina se había consumido. Después, se añadieron ácido (4-ciano-3,5-difluorofenil)borónico (1,233 g, 6,74 mmol) y Pd(Ph3P)4 (0,156 g, 0,135 mmol) y la mezcla de
25 reacción se agitó durante 24 horas a 117ºC. La mezcla se vertió en agua (30 ml) y EtOAc (100 ml). El compuesto permaneció en la capa de EtOAc. La capa orgánica se separó de la capa acuosa. Había una pequeña cantidad de suspensión de color negro en la capa orgánica, que se retiró por filtración. (no había producto). La capa orgánica se sometió a evaporación rotatoria a sequedad para producir el compuesto del título (0,8 g) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 330 [M+H]+.
Intermedio 353 2-Fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-6-(metiloxi)benzonitrilo
HN
Se preparó una solución 1 M de metóxido sódico en CH3OH mediante la adición de sodio recién cortado (50 mg, 2,17 mmol) a CH3OH enfriado con hielo (2,17 ml). Se añadió una porción de esta solución (0,45 ml) a una solución de 2,6-difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (134 mg, 0,407 mmol) en CH3OH (1 ml). La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante una noche en un vial tapado de 10 ml. La mezcla se vertió en agua (15 ml). Se formó un sólido que se filtró, se lavó con agua y se secó para producir el compuesto del título (100 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 342 [M+H]+.
Ejemplo 185
6-{2-(Metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina
HN
En un tubo que puede cerrarse herméticamente se añadieron 2-fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]4-pirimidinil}-6-(metiloxi)benzonitrilo (100 mg, 0,293 mmol), EtOH (5 ml), base de Hunig (0,05 ml, 0,29 mmol) e hidrazina anhidra (0,055 ml, 1,76 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. Después de una noche, había una suspensión de color amarillo y también se formó un sólido de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. La reacción se enfrió a temperatura ambiente. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se purificó adicionalmente por cromatografía en columna ultrarrápida. Las fracciones con producto se combinaron y el disolvente se retiró a presión reducida para producir el compuesto del título (23,7 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 354 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCl3):  1,30 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 1,75 -2,18 (m, 4H), 3,02 (s, 3H), 3,50 -3,63 (m, 2H), 4,02 (s, 3H), 4,34 (m, 1H), 4,50 (m, 2H), 6,07 (s, 1H), 6,93 (s, 1H), 7,44 (s, 1H).
Intermedio 354
2-Fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-6-(metiltio)benzonitrilo
A una solución de 2,6-difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (162 mg, 0,492 mmol) en DMF (4 ml) se le añadió sal sódica de metil mercaptano (aprox. al 15% en agua, 319 mg, 0,683 mmol). La solución se agitó a temperatura ambiente durante una noche en un vial tapado de 10 ml. La mezcla se vertió en agua (15 ml). El sólido formado se filtró, se lavó con agua y se secó para producir el compuesto del título (86 mg) en
forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 358 [M+H]+. Ejemplo 186 6-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina
HN
5 En un tubo que puede cerrarse herméticamente, se añadieron 2-fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1pirrolidinil]-4-pirimidinil}-6-(metiltio)benzonitrilo (86 mg, 0,241 mmol), EtOH (5 ml), base de Hunig (0,042 ml, 1,44 mmol) e hidrazina anhidra (0,045 ml, 0,241 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 100ºC en un baño de aceite. Después de una noche, había una solución de color amarillo y también se formó una pequeña cantidad de sólido de color blanco. El análisis por LCMS no mostró más cantidad de material de
10 partida. La reacción se enfrió a temperatura ambiente. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se purificó adicionalmente por cromatografía en columna ultrarrápida. Las fracciones que contenían el producto se combinaron y el disolvente se retiró a presión reducida para producir el compuesto del título (20,5 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 370 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,21 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,67 (m, 1H), 1,84 -2,10 (m,
15 3H), 2,61 (s, 3H), 2,79 -2,91 (m, 3H), 3,41 -3,66 (m, 2H), 4,27 (m, 1H), 5,09 (s, 2H), 6,23 (s, 1H), 6,44 (s, 1H), 7,34 7,46 (m, 1H), 7,72 (s, 1H), 11,75 (s, 1H).
Intermedio 355
2-(Etiloxi)-6-fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo
O
HN
20 Se preparó una solución 1 M de etóxido sódico en EtOH mediante la adición de sodio recién cortado (55 mg, 2,4 mmol) a EtOH enfriado con hielo (2,4 ml). Una porción de esta solución (0,54 ml) se añadió a una solución de 2,6difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (161 mg, 0,489 mmol) en etanol (6 ml). La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante una noche en un vial tapado de 10 ml. La mezcla se vertió en agua (15 ml) y se formó un sólido que se filtró, se lavó con agua y se secó para producir el compuesto del
25 título (87 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 356 [M+H]+.
Ejemplo 187 4-(Etiloxi)-6-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
O
HN
En un tubo que puede cerrarse herméticamente, se añadieron 2-(etiloxi)-6-fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1
5 pirrolidinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (87 mg, 0,245 mmol), EtOH (5 ml), base de Hunig (0,046 ml, 1,469 mmol) e hidrazina anhidra (0,043 ml, 0,245 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó a 100ºC durante una noche en un baño de aceite. Después de una noche, había una solución de color amarillo y también se formó una pequeña cantidad de sólido de color blanco. El análisis por LCMS no mostró más cantidad de material de partida. La reacción se enfrió a temperatura ambiente. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se
10 formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida. Las fracciones que contenían el producto se combinaron y el disolvente se retiró a presión reducida para producir el compuesto del título (48 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 368 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,21 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,44 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,66 (m, 1H), 2,02 (m, 3H), 2,82 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 3,56 (m, 1H), 4,12 -4,24 (c, J = 7,1 Hz, 2H), 4,99 (s, 2H), 6,19 (s, 1H), 6,32 -6,51 (m, 1H),
15 6,87 -6,98 (m, H), 7,41 -7,56 (m, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 356
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-[(1S)-1-feniletil]-3-piperidinacarboxamida
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170
20 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió (1S)-1-feniletanamina (58 mg, 0,478 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución de la capa orgánica se concentró y el sólido
25 formado se recristalizó en CH3CN para producir el compuesto del título (186 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 459 [M+H]+.
Ejemplo 188 (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-[(1S)-1-feniletil]-3-piperidinacarboxamida
En un tubo que puede cerrarse herméticamente, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4
5 pirimidinil]-6-metil-N-[(1S)-1-feniletil]-3-piperidinacarboxamida (186 mg, 0,406 mmol), EtOH (5 ml), base de Hunig (0,071 ml, 0,406 mmol) e hidrazina anhidra (0,076 ml, 2,434 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. Cuando la temperatura de la reacción alcanzó 100ºC, se disolvió todo el sólido de la mezcla. Después de una noche, había una solución de color amarillo y también se formó una pequeña cantidad de sólido de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la
10 solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro se filtró de la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó en CH3CN y el sólido se filtró, se lavó con CH3CN y se secó al vacío para producir el compuesto del título (120 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 471 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,14 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,36 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,66 (m, 1H), 1,68 (m, 1H), 1,77 (m, 2H),
15 2,34 (m, 1H), 4,94 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,07 (s, 2H), 6,56 (s, 1H), 7,19 -7,30 (m, 1H), 7,36 (m, 4H), 7,56 (dd, J = 8,6, 1,5 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,34 Hz, 1H), 7,94 (s, 1H), 8,39 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 357
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-{[2-(metiloxi)fenil]metil}-3-piperidinacarboxamida
20 A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió 1-[2-(metiloxi)fenil]metanamina (65,6 mg, 0,478 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el
25 producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución de la capa orgánica se concentró y el sólido formado se recristalizó en CH3CN para producir el compuesto del título (200 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 475 [M+H]+.
Ejemplo 189
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-{[2-(metiloxi)fenil]metil}-3piperidinacarboxamida
5 En un tubo que puede cerrarse herméticamente, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4pirimidinil]-6-metil-N-{[2-(metiloxi)fenil]metil}-3-piperidinacarboxamida (200 mg, 0,421 mmol), EtOH (5 ml), base de Hunig (0,074 ml, 0,421 mmol) e hidrazina anhidra (0,08 ml, 2,5 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. Cuando la temperatura de la reacción alcanzó 100ºC, se disolvió todo el sólido de la mezcla. Después de una noche, había una solución de color amarillo y también se formó
10 una pequeña cantidad de sólido de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro se filtró de la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó en CH3CN y el sólido se filtró, se lavó con CH3CN y se secó al vacío para producir el compuesto del título (65 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 487 [M+H]+. 1H RMN
15 (400 MHz, DMSO-d6):  1,16 (d, J = 6,82 Hz, 3H), 1,66 (m, 2H), 1,71 -1,95 (m, 2H), 2,31 -2,45 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 3,82 (s, 3H), 4,12 -4,41 (m, 2H), 5,38 (s, 2H), 6,08 (s, 2H), 6,59 (s, 1H), 6,87 -7,08 (m, 2H), 7,14 -7,30 (m, 2H), 7,52 -7,62 (m, 1H), 7,70 (m, 1H), 7,94 (s, 1H), 8,24 -8,38 (m, 1), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 358
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-{[3-(metiloxi)fenil]metil}-3-piperidinacarboxamida
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió 1-[3-(metiloxi)fenil]metanamina (65,6 mg, 0,478 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por
25 LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución de la capa orgánica se concentró y el sólido formado se recristalizó en CH3CN para producir el compuesto del título (186 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 475 [M+H]+.
Ejemplo 190
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-{[3-(metiloxi)fenil]metil}-3piperidinacarboxamida
NH2
NO
N H
NH2
O
5 En un tubo que puede cerrarse herméticamente, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4pirimidinil]-6-metil-N-{[3-(metiloxi)fenil]metil}-3-piperidinacarboxamida (186 mg, 0,392 mmol), EtOH (5 ml), base de Hunig (0,068 ml, 0,392 mmol) e hidrazina anhidra (0,074 ml, 2,35 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. Cuando la temperatura de la reacción alcanzó 100ºC, se disolvió todo el sólido de la mezcla. Después de una noche, había una solución de color amarillo y también se
10 formó una pequeña cantidad de sólido de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro se filtró de la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó en CH3CN y el sólido se filtró, se lavó con CH3CN y se secó al vacío para producir el compuesto del título (31 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 487 [M+H]+. 1H RMN
15 (400 MHz, DMSO-d6):  1,16 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,58 -1,71 (m, 2H), 1,76 (m, 1H), 1,86 (m, 1H), 2,36 (m, 1H), 3,75 (s, 3H), 4,19 (m, 1H), 4,23 (m, 1H), 4,33 (m, 1H), 4,37 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,08 (s, 2H), 6,59 (s, 1H), 6,81 -6,91 (m, 3H), 7,26 (m, 1H), 7,52 -7,63 (m, 1H), 7,70 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,94 (s, 1H), 8,48 (m, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 359
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-[(2-fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida
NH N
N
F
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,17 ml, 0,96 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió 1-(2-fluorofenil)metanamina (60 mg, 0,48 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS
25 mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución de la capa orgánica se concentró y el sólido formado se recristalizó en CH3CN para producir el compuesto del título (189 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 463 [M+H]+.
Ejemplo 191 (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[(2-fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida
En un vial que puede cerrarse herméticamente, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4
5 pirimidinil]-N-[(2-fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida (189 mg, 0,409 mmol), EtOH (5 ml), base de Hunig (0,071 ml, 0,409 mmol) e hidrazina anhidra (0,077 ml, 2,452 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. Cuando la temperatura de la reacción alcanzó 100ºC, se disolvió todo el sólido de la mezcla. Después de una noche, había una solución de color amarillo y también se formó una pequeña cantidad de sólido de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la
10 solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro se filtró de la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó en CH3CN y el sólido se filtró, se lavó con CH3CN y se secó al vacío para producir el compuesto del título (80 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 475 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,15 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,66 (m, 2H), 1,76 (m, 1H), 1,84 (m, 1H), 2,35 (m, 1H), 2,85 (m,
15 1H), 4,22 -4,47 (m, 3H), 5,38 (s, 2H), 6,08 (s, 2H), 6,59 (s, 1H), 7,14 -7,25 (m, 2H), 7,28 -7,41 (m, 2H), 7,57 (m, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,94 (s, 1H), 8,45 -8,54 (m, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 360
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-[(1R)-1-feniletil]-3-piperidinacarboxamida
20 A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió (1R)-1-feniletanamina (58 mg, 0,478 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el
25 producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución de la capa orgánica se concentró y el sólido formado se recristalizó en CH3CN para producir el compuesto del título (188 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 459 [M+H]+.
Ejemplo 192 (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-[(1R)-1-feniletil]-3-piperidinacarboxamida
En un tubo que puede cerrarse herméticamente, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4
5 pirimidinil]-6-metil-N-[(1R)-1-feniletil]-3-piperidinacarboxamida (188 mg, 0,41 mmol), EtOH (5 ml), base de Hunig (0,072 ml, 0,41 mmol) e hidrazina anhidra (0,077 ml, 2,46 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. Cuando la temperatura de la reacción alcanzó 100ºC, se disolvió todo el sólido de la mezcla. Después de una noche, había una solución de color amarillo y también se formó una pequeña cantidad de sólido de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la
10 solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro se filtró de la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó en CH3CN y el sólido se filtró, se lavó con CH3CN y se secó al vacío para producir el compuesto del título (78 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 471 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,06 -1,21 (m, 4H), 1,38 (m, 3H), 1,71 (m, 4H), 2,25 -2,41 (m, 1H), 2,92 (m, 1H), 4,84 -5,01
15 (m, 1H), 5,38 (s, H), 6,09 (s, 2H), 6,59 (s, 1H), 7,12 -7,40 (m, 6H), 7,53 -7,62 (m, 1H), 7,71 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,95 (s, 1H), 8,41 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 361
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(1-metil-1-feniletil)-3-piperidinacarboxamida
20 A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió 2-fenil-2-propanamina (71 mg, 0,53 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El
25 producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución de la capa orgánica se concentró y el sólido formado se recristalizó en CH3CN para producir el compuesto del título (222 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 473 [M+H]+.
Ejemplo 193 (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(1-metil-1-feniletil)-3-piperidinacarboxamida
En un tubo que puede cerrarse herméticamente, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4
5 pirimidinil]-6-metil-N-(1-metil-1-feniletil)-3-piperidinacarboxamida (222 mg, 0,47 mmol), EtOH (5 ml), base de Hunig (0,082 ml, 0,47 mmol) e hidrazina anhidra (0,089 ml, 2,82 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. Cuando la temperatura de la reacción alcanzó 100ºC, se disolvió todo el sólido de la mezcla. Después de una noche, había una solución de color amarillo y también se formó una pequeña cantidad de sólido de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la
10 solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro se filtró de la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó en CH3CN y el sólido se filtró, se lavó con CH3CN y se secó al vacío para producir el compuesto del título (101 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 485 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,11 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,53 (s, 3H), 1,62 (s, 3H), 1,71 (m, 4H), 2,32 -2,44 (m, 2H), 2,84
15 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,09 (s, 2H), 6,57 (s, 1H), 7,11 -7,22 (m, 1H), 7,30 -7,42 (m, 4H), 7,52 -7,60 (m, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1H), 8,16 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 362
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-N-(4-etilciclohexil)-6-metil-3-piperidinacarboxamida
N
O
F
NH N
N
NH2
20 A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió 4-etilciclohexanamina (61 mg, 0,48 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El
25 producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución de la capa orgánica se concentró y el sólido formado se recristalizó en CH3CN para producir el compuesto del título (187 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 465 [M+H]+.
Ejemplo 194 (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-etilciclohexil)-6-metil-3-piperidinacarboxamida NH2
NO
N H
NH N
N
NH2
En un tubo que puede cerrarse herméticamente, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4
5 pirimidinil]-N-(4-etilciclohexil)-6-metil-3-piperidinacarboxamida (187 mg, 0,403 mmol), EtOH (5 ml), base de Hunig (0,070 ml, 0,403 mmol) e hidrazina anhidra (0,076 ml, 2,415 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. Cuando la temperatura de la reacción alcanzó 100ºC, se disolvió todo el sólido de la mezcla. Después de una noche, había una solución de color amarillo y también se formó una pequeña cantidad de sólido de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la
10 solución se le añadió CH3OH (5 ml). El sólido de color negro se filtró de la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó en CH3CN y el sólido se filtró, se lavó con CH3CN y se secó al vacío para producir el compuesto del título (50 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 477 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,79 -1,25 (m, 14H), 1,64 (m, 3H), 1,68 -1,88 (m, 5H), 2,22 (m, 1H), 2,90 (m, 1H), 3,41
15 3,58 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,07 (s, 2H), 6,57 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,65 -7,84 (m, 2H), 7,94 (s, 1H), 11,49 (s, 1H).
Intermedio 363
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(2-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida
A una solución de ácido (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxílico (170
20 mg, 0,478 mmol) y HATU (218 mg, 0,574 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió base de Hunig (0,167 ml, 0,957 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se añadió 2-metilciclohexanamina (54,2 mg, 0,478 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 horas. El análisis por LCMS mostró que la reacción se había completado. La reacción se vertió en agua y se añadió EtOAc para extraer el producto. El producto permaneció en la capa de EtOAc. La solución de la capa orgánica se concentró y el sólido
25 formado se recristalizó en CH3CN para producir el compuesto del título (192 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 451 [M+H]+.
Ejemplo 195
(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(2-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida
30 En un tubo de microondas, se añadieron (3S,6R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(2metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida (192 mg, 0,426 mmol), EtOH (5 ml), base de Hunig (0,074 ml, 0,426 mmol)
e hidrazina anhidra (0,08 ml, 2,56 mmol) y la mezcla en suspensión de color amarillo se calentó durante una noche a 110ºC en un baño de aceite. Cuando la temperatura de la reacción alcanzó 100ºC, se disolvió todo el sólido de la mezcla. Después de una noche, había una solución de color amarillo y también se formó una pequeña cantidad de sólido de color negro. El análisis por LCMS mostró principalmente el producto. A la solución se le añadió CH3OH (5 5 ml). El sólido de color negro se filtró de la solución de color amarillo. A la solución de color amarillo se le añadió agua (20 ml) y se formó un sólido. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío. El sólido se recristalizó en CH3CN y el sólido se filtró, se lavó con CH3CN y se secó al vacío para producir el compuesto del título (122 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 463 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,68 0,98 (m, 4H), 1,14 (m, 8H), 1,66 (m, 8H), 2,25 (m, 1H), 3,30 (m, 1H), 3,36 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,07 (s, 2H), 6,56 (d,
10 J = 3,5 Hz, 1H), 7,51 -7,65 (m, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,73 (s, H), 7,94 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 11,50 (s, 1H).
Intermedio 364
[(2S,5R)-5-Metil-4-(fenilmetil)-2-morfolinil]metil metanosulfonato
A una solución de [(2S,5R)-5-metil-4-(fenilmetil)-2-morfolinil]metanol (5 g, 22,59 mmol) y trietilamina (9,45 ml, 67,8
15 mmol) en CH2Cl2 (50 ml) agitada en una atmósfera de nitrógeno a 0ºC se añadió gota a gota una solución de cloruro de metanosulfonilo (4,37 ml, 56,5 mmol) en CH2Cl2 (15 ml) durante 5 minutos. La mezcla de reacción se agitó a 25ºC durante 2,5 horas. Después, la mezcla de reacción se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO3 (2 x 25 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida para producir el compuesto del título (8,0 g) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 300 [M+H]+.
20 Intermedio 365
(2S,5R)-2-(Yodometil)-5-metil-4-(fenilmetil)morfolina
A una solución de [(2S,5R)-5-metil-4-(fenilmetil)-2-morfolinil]metil metanosulfonato (8,0 g, 26,7 mmol) en acetona (80
ml) agitada en una atmósfera de nitrógeno a temp. ambiente se le añadió yoduro sódico (20,03 g, 134 mmol) y la 25 mezcla de reacción se agitó a la temperatura de reflujo durante una noche. La reacción se enfrió y se concentró a
presión reducida. Después, al residuo se le añadieron agua (50 ml) y CH2Cl2 (60 ml). Las capas se separaron y la
capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (60 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con Na2S2O3 1 M (2 x 30
ml) y después con agua (20 ml), se secaron (Na2SO4) y se concentraron para producir el producto en bruto. La
purificación por cromatografía sobre gel de sílice (malla 300-400), eluyendo con Hex/EtOAc (de 2:1 a 3:2) y 30 controlando en yodo produjo el compuesto del título (5,9 g) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z
= 332 [M+H]+.
Intermedio 366
(2R,5R)-2,5-Dimetil-4-(fenilmetil)morfolina
A una solución de (2S,5R)-2-(yodometil)-5-metil-4-(fenilmetil)morfolina (5,0 g, 15,10 mmol) en etanol (120 ml) agitada en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se le añadió Pd/C (1,607 g, 1,510 mmol) en etanol (120 ml). La mezcla de reacción se purgó con hidrógeno y se agitó en una atmósfera de hidrógeno a 25ºC durante 2 horas. Después de que se completara (por LCMS), la mezcla se filtró a través de una capa de celite y el filtrado se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (malla 300-400), eluyendo con petróleo/EtOAc (1:1) para producir el compuesto del título deseado (2,5 g) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 206 [M+H]+. 1H RMN (CDCl3):  7,96-7,93 (m, 2H), 7,49-7,46 (m, 3H), 4,69-4,61 (m, 2H), 4,41-4,37 (m, 1H), 4,03-3,97 (m, 1 H), 3,73-3,70 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,48-3,46 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 3,27-3,24 (d, J = 12,4 Hz, 2 H), 2,78-2,69 (m, 1 H), 1,39-1,37 (d, J = 6,4 Hz, 3 H), 1,24-1,23 (d, J = 12,4 Hz, 3H).
Intermedio 367
(2R,5R)-2,5-dimetilmorfolina
A una solución de ((2R,5R)-2,5-dimetil-4-(fenilmetil)morfolina (2,5 g, 12,18 mmol) y ácido clorhídrico (0,740 ml, 24,36 mmol) en etanol (80 ml) agitada en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se le añadió Pd/C (0,648 g, 6,09 mmol). Después, la mezcla de reacción se purgó con hidrógeno y después se agitó en una atmósfera de hidrógeno a 25ºC durante una noche. La mezcla se filtró a través de una capa de gel de sílice y el filtrado se concentró a presión reducida para producir el compuesto del título (1,0 g) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 116 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,14 -1,14 (d, J = 5,6 Hz, 3H), 1,32 -1,33 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 2,81 -2,84 (m, 1H), 2,96 -2,99 (m, 1H), 3,60 -3,63 (m, 2H), 3,82 -3,85 (m, 2H), 9,42 (s a, 1H), 9,96 (s a, 1H).
Intermedio 368
4-Cloro-6-[(2R,5R)-2,5-dimetil-4-morfolinil]-N-metil-2-pirimidinamina
HN
A una solución de (2R,5R)-2,5-dimetilmorfolina (400 mg, 3,47 mmol) y 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina (742 mg, 4,17 mmol) en CH3CN (5 ml) agitada a temperatura ambiente se le añadió base de Hunig (1,213 ml, 6,95 mmol). El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó en un Biotage Initiator usando un valor inicial normal a 120ºC durante 1 hora. Después de enfriar la reacción, la mezcla se concentró a presión reducida y el residuo se añadió a una columna de gel de sílice y se eluyó con Hex/EtOAc (de 10:1 a 3:1). Fracciones recogidas: la primera fracción era el material de partida 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina (300 mg) y la segunda fracción era el compuesto del título (460 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 257 [M+H]+.
Intermedio 369
4-[6-[(2R,5R)-2,5-Dimetil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo
A una solución de 4-cloro-6-[(2R,5R)-2,5-dimetil-4-morfolinil]-N-metil-2-pirimidinamina (430 mg, 1,675 mmol) y 2fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzonitrilo (621 mg, 2,51 mmol) en 1,4-dioxano (2 ml) y agua (1,00 ml) en un recipiente de reacción para microondas agitada en una atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente se le añadieron Na2CO3 (355 mg, 3,35 mmol) y Pd(Ph3P)4 (194 mg, 0,167 mmol). El recipiente de reacción
se cerró herméticamente y se calentó en un Biotage Initiator usando un valor inicial normal a 120ºC durante 1 hora. Después de enfriar la reacción a temperatura ambiente, la mezcla se filtró a través de una capa de celite y la torta de filtro se lavó con THF (3 x 30 ml) y CH3OH (3 x 30 ml). El filtrado se purificó con una columna de gel de sílice (300400) y se eluyó con Hex/EtOAc (de 2:1 a 1:2) para producir el compuesto del título (315 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 342 [M+H]+.
Ejemplo 196
6-[6-[(2R,5R)-2,5-Dimetil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
Realización 1: A una solución de 4-[6-[(2R,5R)-2,5-dimetil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2fluorobenzonitrilo (315 mg, 0,923 mmol) en etanol (2,5 ml) a temperatura ambiente se le añadió hidrazina monohidrato (0,647 ml, 18,45 mmol). El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó en un Biotage Initiator usando un valor inicial por debajo de 120ºC durante 1 hora. Después de enfriar la reacción, la mezcla se concentró a presión reducida y después el producto en bruto (300 mg, 0,740 mmol, 80% de rendimiento) se purificó con otra extracción en un experimento posterior. LC-MS (ES) m/z = 354 [M+H]+.
Realización 2: A una solución de 4-[6-[(2R,5R)-2,5-dimetil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2fluorobenzonitrilo (300 mg, 0,879 mmol) en etanol (2,5 ml) a temperatura ambiente se le añadió hidrazina monohidrato (0,616 ml, 17,58 mmol). El recipiente de reacción se cerró herméticamente y se calentó en un Biotage Initiator usando una temperatura inicial inferior a 120ºC durante 1 hora. Después de enfriar la reacción, la mezcla se concentró a presión reducida y después el producto en bruto (250 mg, 0,626 mmol, 71,3% de rendimiento) se purificó con el producto en bruto de la Realización 1 por cromatografía sobre gel de sílice. LC-MS (ES) m/z = 354 [M+H]+.
Purificación: Los productos en bruto de la Realización 1 (300 mg, 0,849 mmol) y la Realización 2 (250 mg, 0,707 mmol) se añadieron a una columna de gel de sílice eluyendo con Hex/EtOAc (de 2:1 a 1:1) para producir el compuesto del título (285 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 354 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,17 -1,21 (m, 6H), 2,68 -2,75 (t, J = 10,0 Hz, 1H), 2,84 -2,85 (d, J = 4,8 Hz, 3H), 3,49 -3,54 (m, 1H), 3,64 -3,68 (dd, J = 11,6 Hz, J = 2,8 Hz, 1H), 3,72 -3,75 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,17 (s a, 1H), 4,50 (s a, 1H), 5,37 (s, 2H), 6,53 (s a, 1H), 6,56 (s, 1H), 7,60 -7,62 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,71 -7,73(d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,97 (s, 1H), 11,49 (s, 1H).
Intermedio 370
4-Cloro-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina
N
N
NH2
Se cargaron sal HCl de (3R)-3-(1-metiletil)morfolina (3,50 g, 21,1 mmol) y 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (3,81 g, 23,2 mmol, 1,1 equiv.) en un tubo de 60 ml que puede cerrarse herméticamente, seguido de la adición de 20 ml de propionitrilo y base de Hunig (11,1 ml, 63,4 mmol, 3 equiv.). El recipiente se cerró herméticamente y se calentó a 110ºC en un baño de aceite durante 68 horas. La mezcla se concentró al vacío y el residuo se repartió entre agua (50 ml) y EtOAc (150 ml). La capa acuosa se extrajo con 100 ml más de EtOAc. La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo espumoso se recogió en CHCl3 con una pequeña cantidad de EtOAc para dar una suspensión que se filtró. Los sólidos recogidos eran principalmente la 4,6-dicloro-2pirimidinamina de partida. El filtrado se sometió a cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 80% en CHCl3 para producir el compuesto del título (4,36 g) en forma de una espuma vítrea. LC-MS (ES) m/z = 257 [M+H]+.
Intermedio 371 4-{2-Amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
Se cargaron 4-cloro-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina (350 mg, 1,36 mmol), ácido (4-ciano-3fluorofenil)borónico (337 mg, 2,05 mmol, 1,5 equiv.), triciclohexilfosfina (57,3 mg, 0,20 mmol, 0,15 equiv.), Pd2(dba)3 (94 mg, 0,10 mmol, 0,075 equiv.) y K3PO4 (492 mg, 2,32 mmol, 1,7 equiv.) en un vial para microondas de 30 ml, seguido de la adición de 5 ml de 1,4-dioxano y 1,6 ml de agua. La mezcla se burbujeó con argón durante 10 minutos, seguido de tapado y calentamiento en un baño de aceite a 100ºC durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se filtró a través de celite y se aclaró con EtOAc (40 ml). El filtrado se concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc (50 ml) y salmuera (10 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 80% en CHCl3 para producir el compuesto del título (359 mg) en forma de una espuma de color blanquecino con un tinte amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 342 [M+H]+.
Ejemplo 197
6-{2-Amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
N
N
NH2
A una solución de 4-{2-amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (355 mg, 1,04 mmol) en EtOH (10 ml) se le añadió en una porción hidrazina monohidrato (2 ml) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó en un baño de aceite a 100ºC con calentamiento suave a reflujo durante 18 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente, se filtró a través de celite y se aclaró con EtOH (20 ml). El filtrado se concentró al vacío. El residuo se suspendió en agua (10 ml). La suspensión se sonicó brevemente y se filtró. Los sólidos se lavaron con agua y se secaron al vacío a temperatura ambiente durante 2 horas y después al vacío a temperatura ambiente sobre P2O5 durante 20 horas. Estos sólidos se lavaron con hexano (2 x 3 ml), seguido de secado al vacío a 65ºC durante 24 horas para dar el compuesto del título (256 mg) en forma de un sólido de color beige. LC-MS (ES) m/z = 354 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  0,88 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,10 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 2,47 -2,54 (m, 1H), 3,21 -3,30 (m., 1H), 3,51 -3,58 (m, 2H), 3,93 (dd, J = 11,2, 3,41 Hz, 1H), 4,10 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 6,46 (s, 1H), 7,47 (dd, J = 8,5, 1,4 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H).
Intermedio 372
4-{2-Amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2,6-difluorobenzonitrilo
N
N
NH2
252 5
Se cargaron 4-cloro-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-2-pirimidinamina (2,36 g, 9,19 mmol), ácido (4-ciano-3,5difluorofenil)borónico (2,52 g, 13,19 mmol, 1,5 equiv.), triciclohexilfosfina (0,39 g, 1,38 mmol, 0,15 equiv.), Pd2(dba)3 (0,63 g, 0,69 mmol, 0,075 equiv.), y K3PO4 (3,32 g, 15,63 mmol, 1,7 equiv.) en un matraz de fondo redondo de 250 ml, seguido de la adición de 1,4-dioxano (30 ml) y agua (10 ml). La mezcla se desgasificó y se lavó abundantemente de nuevo con nitrógeno, que se repitió cinco veces. La mezcla se calentó en un baño de aceite a 100ºC durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se filtró a través de celite y se aclaró con EtOAc (100 ml). El filtrado se concentró al vacío. El residuo se repartió entre EtOAc (200 ml) y salmuera (50 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 100%, proporcionando el compuesto del título (2,92 g) en forma de una espuma de color amarillento. LC-MS (ES) m/z = 360 [M+H]+.
Intermedio 373
4-{2-Amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluoro-6-(metiloxi)benzonitrilo
NH2
Se destiló azeotrópicamente 4-{2-amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2,6-difluorobenzonitrilo (380 mg, 1,06 mmol) con tolueno (2 x 12 ml). El residuo se disolvió en 5 ml de DMF en forma de una solución transparente de color amarillo, a lo que se le añadió en una porción NaOMe (2,30 ml de una solución madre con una concentración de 0,52 mmol/ml, 1,19 mmol, 1,12 equiv.) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 100%, proporcionando el compuesto del título (276 mg) en forma de un residuo oleoso de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 372 [M+H]+.
Ejemplo 198
6-{2-Amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina
N
N
NH2
A una solución de 4-{2-amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-fluoro-6-(metiloxi)benzonitrilo (276 mg, 0,74 mmol) en etanol (10 ml) se le añadió en una porción hidrazina monohidrato (2 ml). La mezcla se calentó a 100ºC durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo sólido se repartió entre EtOAc (2 x 40 ml) y agua (15 ml). La capa orgánica se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de 1% de A en CHCl3 a 75% de A en CHCl3, donde A era una mezcla 800/80/3200 (v/v/v) de CH3OH/NH4OH/CHCl3. Las fracciones recogidas se concentraron al vacío. El residuo se disolvió de nuevo en CHCl3 y EtOAc, seguido de filtración. El filtrado se concentró al vacío y se destiló azeotrópicamente con EtOH. El residuo se recogió en agua (8 ml) en forma de una suspensión. Los sólidos se recogieron por filtración y se lavaron con agua (2 x 2 ml), seguido de secado al vacío a temperatura ambiente durante 1 hora y después al vacío a temperatura ambiente sobre P2O5 durante 20 horas. Los sólidos se lavaron con hexano (2 x 3 ml) y se secaron al vacío a 65ºC durante 20 horas para dar el compuesto del título (125 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 384 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  0,88 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,10 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 2,45 -2,55 (m, 1H), 3,20 -3,30 (m, 1H), 3,48 -3,60 (m, 2H), 3,93 (dd, J = 11,4, 3,3 Hz, 1H), 4,04 (s, 3H), 4,10 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 6,43 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 7,31 (s, 1H).
Intermedio 374 4-{2-Amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-(etiloxi)-6-fluorobenzonitrilo
NH2
Se destiló azeotrópicamente 4-{2-amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2,6-difluorobenzonitrilo (405 mg, 1,12 mmol) con tolueno (2 x 15 ml). El residuo se disolvió en 5 ml de DMF en forma de una solución transparente de color amarillo, a lo que se le añadió en una porción NaOEt (1,45 ml de una solución madre con una concentración de 0,87 mmol/ml, 1,25 mmol, 1,12 equiv.) a temperatura ambiente. La solución transparente de color naranja claro resultante se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de EtOAc al 1% en CHCl3 a EtOAc al 100%, proporcionando el compuesto del título (310 mg) en forma de un residuo sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 386 [M+H]+.
Ejemplo 199
6-{2-Amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina
O NH2
O NN
N H
N
N
NH2
A una solución de 4-{2-amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2-(etiloxi)-6-fluorobenzonitrilo (370 mg, 0,96 mmol) en etanol (10 ml) se le añadió en una porción hidrazina monohidrato (2,0 ml). La mezcla se calentó a 100ºC durante 20 horas. El análisis por LCMS mostró la conversión completa. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo sólido se repartió entre EtOAc (2 x 40 ml) y agua (15 ml). La capa orgánica se concentró al vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice usando un gradiente de elución de 1% de A en CHCl3 a 75% de A en CHCl3, donde A era una mezcla 800/80/3200 (v/v/v) de CH3OH/NH4OH/CHCl3. Las fracciones recogidas se concentraron al vacío. El residuo se disolvió de nuevo en CHCl3 y EtOAc, seguido de filtración. El filtrado se concentró al vacío y se destiló azeotrópicamente con EtOH. El residuo se recogió en agua (8 ml) en forma de una suspensión. Los sólidos se recogieron por filtración y se lavaron con agua (2 x 2 ml), secando al vacío a temperatura ambiente durante 1 hora y después secando al vacío a temperatura ambiente sobre P2O5 durante 20 horas. Estos sólidos se lavaron con hexano (2 x 3 ml) y se secaron al vacío a 65ºC durante 20 horas para producir el compuesto del título (273 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 398 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  0,87 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,10 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,54 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 2,44 -2,54 (m, 1H), 3,21 -3,30 (m, 1H), 3,50 -3,59 (m, 2H), 3,92 (dd, J = 11,2, 3,4 Hz, 1H), 4,09 (d, J = 11,9 Hz, 1H), 4,30 (c, J = 6,9 Hz, 2H), 6,41 (s, 1H), 6,83 (s, 1H), 7,30 (d, J = 1,0 Hz, 1H).
Ejemplo 200 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina
O
NH2 O N
N N
H
N
N
NH2
Se suspendió 4-{2-amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2,6-difluorobenzonitrilo (500 mg, 1,509 mmol) en CH3OH (7 ml) con agitación en un matraz de fondo redondo de 50 ml en una atmósfera de nitrógeno y se añadió una solución de metóxido sódico en metanol (recién preparado a partir de sodio (41,6 mg, 1,811 mmol) y se añadió metanol (3 ml)). La mezcla se agitó a temperatura ambiente controlándola por HPLC. Después de 4 horas, la reacción no cambió y parecía haber finalizado. Como era una suspensión y la solubilidad era deficiente, se añadió DMF (3 ml) para dar una solución transparente de color amarillo. Después de una hora más (5 horas en total), el análisis por HPLC mostró una pequeña progresión, así que la reacción se dejó en agitación durante una noche. El análisis por HPLC indicó la conversión completa. Se añadió ácido acético (5 gotas) para inactivar cualquier metóxido restante y la mezcla se evaporó a sequedad. El residuo se suspendió en etanol (8 ml) y se añadió hidrazina monohidrato (1,464 ml, 30,2 mmol). La mezcla se calentó a reflujo en una atmósfera de nitrógeno en un baño de aceite a 100ºC durante una noche. El análisis por HPLC mostró la conversión completa en el producto. Después de la concentración a sequedad, la purificación por cromatografía sobre gel de sílice (cartucho Analogix SF25-40 g) eluyendo con un gradiente de CHCl3 a 90:10:1 de CHCl3:CH3OH:NH4OH dio el compuesto del título (491 mg) en forma de un sólido de color amarillo pálido. LC-MS (ES) m/z = 356 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,18 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 3,11 (td, J = 12,8, 3,7 Hz, 1H), 3,44 (td, J = 11,8, 2,9 Hz, 1H), 3,53 -3,66 (m, 1H), 3,66 -3,79 (m, 1H), 3,84 -4,01 (m, 4H), 4,08 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 4,42-4,55 (m, 1H), 5,03 (s, 2H), 6,11 (s, 2H), 6,50 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 11,54 (s, 1H).
Intermedio 375
[(3R)-1-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo
H
O
N
O
N
N
H2N N Cl
A una mezcla en agitación de (3R)-3-piperidinilcarbamato de 1,1-dimetiletilo (10 g, 49,9 mmol) y K2CO3 (6,90 g, 49,9 mmol) en etanol (100 ml) se le añadió 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (7,78 g, 47,4 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1 hora. El análisis por LCMS indicó la conversión completa. A la mezcla caliente se le añadió lentamente agua (150 ml), que después se dejó enfriar a temperatura ambiente con agitación. El producto precipitado se recogió por filtración, se lavó con 1:2 de etanol:agua y se secó al vacío a 45ºC para producir el compuesto del título (14,98 g) en forma de un sólido de color castaño. LC-MS (ES) m/z = 328 [M+H]+.
Intermedio 376
{(3R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
CN
O N
F H
NO
N
N NH2
Se disolvieron [(3R)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (154 mg, 0,470 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (116 mg, 0,705 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml) en un vial que puede cerrarse herméticamente de 20 ml. Se añadió NaHCO3 acuoso saturado (1,5 ml) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 10 minutos. Después, se añadió Pd(Ph3P)4 (81 mg, 0,070 mmol) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 5 minutos más. Después, la reacción se tapó y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se diluyó con agua (5 ml) y después se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. Después, el aceite de color amarillo se purificó sobre una columna Biotage SNAP (25 g) con un gradiente de EtOAc de 0 a 45% en hexano durante 30 minutos para producir el compuesto del título (140 mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 413 [M+H]+.
Ejemplo 201
{(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
NH2
O
N
N
NNO HH
N
N
NH2
Se disolvió {(3R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (140 mg, 0,339 mmol) en etanol (3 ml) en un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml. Después, se añadió hidrazina monohidrato (0,499 ml, 10,18 mmol), el vial se cerró herméticamente y la reacción se calentó a 100ºC durante una noche. Después, la reacción se concentró y se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó sobre HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando software Trilution con un Varian Polaris 5u C18(2) 100A. 50 x 30,00 mm 5 micrómetros. Realización de 7,3 minutos (47 ml/min, CH3CN al 20%/H2O, de TFA al 0,1% a CH3CN al 45%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. Después, al agua que quedó se le añadió NaHCO3 saturado y después se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica se combinó y se lavó con NaCl saturado, se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se transfirió a un vial Haystack. Se añadió agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (49 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 425 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,38 (s, 9H), 1,44 (s a, 2H), 1,73 (d, J = 4,3 Hz, 1H), 1,86 (s a, 1H), 2,86 (s a, 1H), 3,02 (s a, 1H), 4,09 (s a, 1H), 4,26 (s a, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,10 (s a, 2H), 6,57 (s, 1H), 6,94 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 11,51 (s, 1H).
Intermedio 377
{(3R)-1-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
A una mezcla en agitación de (3R)-3-piperidinilcarbamato de 1,1-dimetiletilo (4,8 g, 24,0 mmol) y K2CO3 (3,31 g, 24,0 mmol) en etanol (50 ml) se le añadió 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina (4,05 g, 22,8 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1 hora. El análisis por LCMS indicó la conversión completa. A la mezcla caliente se le añadió lentamente agua (50 ml), que después se dejó enfriar a temperatura ambiente con agitación. El producto precipitado se recogió por filtración, se lavó con 1:1 de etanol:agua y se secó al vacío a 45ºC para producir el compuesto del título (7,07 g) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 342 [M+H]+.
Intermedio 378 {(3R)-1-[6-(4-Ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
NH
A {(3R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (3,0 g, 8,8 mmol) y ácido (4ciano-3-fluorofenil)borónico (1,8 g, 10,9 mmol) se les añadieron 1,4-dioxano (50 ml) y NaHCO3 ac. sat. (25 ml) y la mezcla resultante se purgó ("desgasificó") con N2 en un tubo que puede cerrarse herméticamente. Se añadió Pd(Ph3P)4 (0,507 g, 0,439 mmol), el tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 95ºC. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se vertió en agua. Precipitó inmediatamente un sólido. La mezcla se sonicó y se filtró para producir un sólido de color amarillo. Este sólido material se recogió en EtOAc (500 ml) y la solución orgánica resultante se secó (MgSO4), se filtró y se concentró hasta que quedaron ~10 ml de disolvente. Este líquido se inyectó en una columna de 400 g de SiO2 y se purificó por cromatografía ultrarrápida (gradiente: de Hexanos al 100% a EtOAc al 75%/Hexanos) para producir el compuesto del título (3,18 g) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 427 [M+H]+.
Ejemplo 202
{(3R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
NH
Se disolvió {(3R)-1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (162 mg, 0,380 mmol) en etanol (3 ml) en un vial para microondas de 5 ml. Después, se añadió hidrazina monohidrato (0,559 ml, 11,40 mmol) y el vial se tapó y se calentó a 100ºC durante una noche. Después, la reacción se concentró y se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó sobre HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando software Trilution con un Varian Polaris 5u C18(2) 100A. 50 x 30,00 mm 5 micrómetros. realización de 7,3-minutos (47 ml/min, de CH3CN al 13%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 38%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. Después, al agua que quedó se le añadió NaHCO3 saturado y después se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica se combinó y se lavó con NaCl saturado, se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se transfirió a un vial Haystack. Se añadió agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (110 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 439 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  11,43 (s, 1H), 7,89 (s a, 1H), 7,61-7,67 (m, 1H), 7,50 (d, J = 8,34 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 7,58 Hz, 1H), 6,49 (s a, 2H), 5,23-5,39 (m, 2H), 4,17 (s a, 1H), 3,99-4,09 (m, 1H), 2,94-3,10 (m, 1H), 2,85 (s a, 1H), 2,77 (d, J = 4,39 Hz, 3H), 1,73-1,89 (m, 1H), 1,16-1,73 (m, 1H), 1,34-1,50 (m, 2H), 1,31 (s, 9H).
Intermedio 379
{(3R)-1-[6-(4-Ciano-3,5-difluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
F
NH
Se disolvieron {(3R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (150 mg, 0,439 mmol) y ácido (4-ciano-3,5-difluorofenil)borónico (120 mg, 0,658 mmol) en 1,4-dioxano (3 ml) en un vial que puede cerrarse herméticamente de 20 ml. Se añadió NaHCO3 saturado (1,5 ml) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 10 minutos. Después, se añadió Pd(Ph3P)4 (76 mg, 0,066 mmol) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 5 minutos más. El vial se tapó y la reacción se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se diluyó con agua (5 ml) y después se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. Después, el aceite de color amarillo se purificó sobre una columna Biotage SNAP 25 g con un gradiente de EtOAc de 0 a 55% en hexano durante 35 minutos para producir el compuesto del título (130 mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 445 [M+H]+.
Intermedio 380
{(3R)-1-[6-[4-Ciano-3-fluoro-5-(metiloxi)fenil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
Se preparó una solución de metóxido sódico a partir de 65 mg de sodio disuelto en 2,8 ml de CH3OH. De esa solución, se añadieron 0,35 ml a una solución pre-disuelta de {(3R)-1-[6-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-2-(metilamino)-4pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (130 mg, 0,292 mmol) en CH3OH (3 ml). La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se concentró, se diluyó con agua (10 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). La capa orgánica se combinó, se lavó con una solución saturada de NaCl, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (118 mg). LC-MS (ES) m/z = 457 [M+H]+.
Ejemplo 203
{(3R)-1-[6-[3-Amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1dimetiletilo
O NH2
O
N
N
NNO HH
N
N
NH
Se disolvió {(3S)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (180 mg, 0,436 mmol) en etanol (3 ml) en un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml. Después, se añadió hidrazina monohidrato (0,642 ml, 13,09 mmol), el vial se tapó y la reacción se calentó a 100ºC durante una noche. Después, la reacción se concentró y se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando software Trilution con un Varian Polaris 5u C18(2) 100A. 50 x 30,00 mm 5 micrómetros. realización de 7,3-minutos (47 ml/min, de CH3CN al 13%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 38%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. Después, al agua que quedó se le añadió NaHCO3 saturado y después se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica se lavó con NaCl saturado, se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se transfirió a un vial Haystack. Se añadió agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (63 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 469 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,31 (s, 9H), 1,34-1,46 (m, 2H), 1,61-1,71 (m, 1H), 1,74-1,84 (m, 1H), 2,68-2,88 (m, 4H), 2,89-3,07 (m, 1H), 3,88 (s, 3H), 4,05-4,30 (m, 2H), 4,96 (s a, 2H), 6,49 (s a, 2H), 6,81 -6,90 (m, 2H), 7,45 (s a, 1H), 11,47 (s, 1H).
Intermedio 381 4-Cloro-2-(metiltio)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]pirimidina CF3
S
Se disolvió (2S)-2-(trifluorometil)pirrolidina (858 mg, 6,17 mmol) en THF (10 ml) en un matraz de fondo redondo de 250 ml. La mezcla se enfrió en un baño de hielo. Después, se añadieron tamices moleculares y se dejó en agitación durante 5 minutos. Se añadió lentamente LiHMDS (6,78 ml, 6,78 mmol) seguido de la adición de 4,6-dicloro-2(metiltio)pirimidina (1,444 g, 7,40 mmol) y la reacción se agitó a 0ºC durante 10 minutos más. Después, se añadió agua (10 ml) seguido de la adición gota a gota de HCl 6 N hasta que el pH fue ácido. Después, la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml) y la capa orgánica se combinó, se lavó con NaCl saturado, se filtró y se concentró. El aceite en bruto se purificó sobre una columna Biotage 25 g SNAP con un gradiente de EtOAc de 0 a 35% en hexano durante 25 minutos para producir el compuesto del título (1,42 g) en forma de un aceite transparente. LC-MS (ES) m/z = 298 [M+H]+.
Intermedio 382
4-Cloro-2-(metilsulfonil)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]pirimidina
CF3
Una suspensión de 4-cloro-2-(metiltio)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]pirimidina (1,45 g, 4,87 mmol) en CH3OH (15 ml) se enfrió en un baño de hielo y se trató lentamente con una solución premezclada de oxone (3,89 g, 6,33 mmol) en agua (5 ml). La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se diluyó con agua (20 ml) seguido de NaHCO3 saturado (30 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). La capa orgánica se combinó, se lavó con una solución saturada de NaCl, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (1,55 g) en forma de un aceite amarillento. LC-MS (ES) m/z = 330 [M+H]+.
Intermedio 383
4-Cloro-N-metil-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-2-pirimidinamina
CF3
NH
La 4-cloro-2-(metilsulfonil)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]pirimidina en bruto (1,09 g, 3,31 mmol) se disolvió en 1,4-dioxano (30 ml), se añadieron base de Hunig (2,88 ml, 16,53 mmol) y metilamina (6,61 ml, 13,22 mmol) y la solución se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Se añadió más cantidad de metilamina (2 ml). La reacción se concentró, después se diluyó con 30 ml de EtOAc y se lavó con HCl 0,1 N (30 ml). La capa acuosa se extrajo de nuevo con EtOAc y los extractos orgánicos se combinaron y se lavaron con NaCl saturado, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. La purificación en una columna Biotage 25 g SNAP con un gradiente de EtOAc de 0 a 50% en hexano durante 35 minutos produjo el compuesto del título (760 mg) en forma de un aceite transparente. LC-MS (ES) m/z = 281 [M+H]+.
Intermedio 384
2,6-Difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo
NH
Se disolvieron 4-cloro-N-metil-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-2-pirimidinamina (600 mg, 2,138 mmol) y ácido
5 (4-ciano-3,5-difluorofenil)borónico (587 mg, 3,21 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) en un vial que puede cerrarse herméticamente de 20 ml. Se añadió una solución saturada de NaHCO3 (5 ml) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 10 minutos. Después, se añadió Pd(Ph3P)4 (371 mg, 0,321 mmol) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 5 minutos más. Después, el vial de reacción se tapó y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se diluyó con agua (10 ml) y después se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Después, los extractos orgánicos se
10 combinaron, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. Después, el aceite de color amarillo se purificó en una columna Biotage SNAP 50 g con un gradiente de EtOAc de 0 a 35% en hexano durante 30 minutos para aislar el compuesto del título (452 mg). LC-MS (ES) m/z = 384 [M+H]+.
Intermedio 385
2-Fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-6-(metiloxi)benzonitrilo
O
NH 15 Se preparó una solución de metóxido sódico a partir de 65 mg de sodio disuelto en 2,8 ml de CH3OH. De esta solución, se añadieron 0,4 ml a una solución predisuelta de 2,6-difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1pirrolidinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (127 mg, 0,331 mmol) en CH3OH (3 ml). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se concentró, después se diluyó con agua (15 ml) y se extrajo con EtOAc
20 (3 x 15 ml). La capa orgánica se combinó, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (131 mg). LC-MS (ES) m/z = 396 [M+H]+.
Ejemplo 204
6-{2-(Metilamino)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina
O NH2CF3 N N
N
H
N
N
NH
25 Se disolvió 2-fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-6-(metiloxi)benzonitrilo (131 mg, 0,331 mmol) en etanol (3 ml) en un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml. Se añadió hidrazina monohidrato (0,487 ml, 9,94 mmol), el vial se tapó y la reacción se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró, se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó en HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando software Trilution con un Sunfire 5u C18(2) 100A. 50 x 30,00 mm 5 micrómetros. realización de 7,3-minutos
(47 ml/min, de CH3CN al 18%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 43%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. Al agua que quedó se le añadió NaHCO3 saturado y después se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se transfirió a un vial Haystack. Se añadió agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (74 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 408 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,95 -2,03 (m, 2H), 2,05 (s a, 2H), 2,77 (d, J = 3,3 Hz, 3H) 3,47 (d, J = 8,8 Hz, 1H) 3,62 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 3,87 (s, 3H), 4,98 (s a, 2H), 5,08 (s a, 1H), 6,39 (s a, 1H), 6,64 (s a, 1H), 6,88 (s a, 1H), 7,43 (s a, 1H), 11,50 (s a, 1H).
Intermedio 386
2-Fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo
NH
Se disolvieron 4-cloro-N-metil-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-2-pirimidinamina (110 mg, 0,392 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (97 mg, 0,588 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) en un vial que puede cerrarse herméticamente de 20 ml. Se añadió una solución saturada de NaHCO3 (5 ml) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 10 minutos. Después, se añadió Pd(Ph3P)4 (371 mg, 0,321 mmol) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 5 minutos más. Después, el vial de reacción se tapó y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se diluyó con agua (10 ml) y después se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Después, los extractos orgánicos se combinaron, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. Después, el aceite de color amarillo se purificó sobre una columna Biotage SNAP 10 g con un gradiente de EtOAc de 0 a 35% en hexano durante 30 minutos para producir el compuesto del título (167 mg). LC-MS (ES) m/z = 366 [M+H]+.
Ejemplo 205
6-{2-(Metilamino)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
NH2
NH
Se disolvió 2-fluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (166 mg, 0,454 mmol) en etanol (3 ml) en un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml. Se añadió hidrazina monohidrato (0,668 ml, 13,63 mmol), el vial se tapó y la reacción se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró, se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó en HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando software Trilution con a Sunfire 5u C18(2) 100A. 50 x 30,00 mm 5 micrómetros. realización de 7,3-minutos (47 ml/min, de CH3CN al 1%/H2O, TFA al 0,1% a CH3CN al 42%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. Al agua que quedó se le añadió NaHCO3 saturado y después se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se transfirió a un vial Haystack. Se añadió agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (91 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 377 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  2,01 -2,22 (m, 4H), 2,85 (d, J = 4,3 Hz, 3H), 3,48 -3,61 (m, 1H), 3,68 (dt, J = 10,1, 5,1 Hz, 1H), 5,14 (t, 1H), 5,40 (s a, 2H), 6,50 (s a, 1H), 6,68 (s a, 1H), 7,59 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,97 (s a, 1H), 11,54 (s, 1H).
Intermedio 387
4-[6-[(3R)-3-Amino-1-piperidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo
NH
A {(3R)-1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (0,544 g,
5 1,28 mmol) se le añadió HCl en dioxano (4 ml, 16,00 mmol) a temperatura ambiente con agitación. Se formó inmediatamente un precipitado. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche y después se concentró a sequedad para producir una sal HCl del compuesto del título (0,539 g) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 327 [M+H]+.
Intermedio 388
10 N-{(3R)-1-[6-(4-Ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}benzamida
NH
A ácido benzoico (30,6 mg, 0,250 mmol) en DMF (2 ml) se le añadió HATU (105 mg, 0,275 mmol) seguido de base de Hunig (0,18 ml, 1,00 mmol). Después de 15 minutos, se añadió 4-[6-[(3R)-3-amino-1-piperidinil]-2-(metilamino)-4pirimidinil]-2-fluorobenzonitrilo (100 mg, 0,250 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente
15 durante 30 minutos. Se añadió agua (~10 ml) y precipitó un sólido. La mezcla se filtró y el sólido se lavó con agua y se secó al aire para producir el compuesto del título en bruto (83 mg) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 431 [M+H]+.
Ejemplo 206
N-{(3R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}benzamida
NH2 O
N
N
NN HH N
N
NH 20 A N-{(3R)-1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}benzamida (83 mg, 0,19 mmol) en etanol (2 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (0,5 ml, 10,2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC en un tubo que puede cerrarse herméticamente. La solución se vertió en agua (~50 ml) y se formó un precipitado. La mezcla acuosa se filtró y el sólido se lavó adicionalmente con agua. El material se secó al vacío
25 durante una noche a 45ºC para producir el compuesto del título (52 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 443 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,43 -1,60 (m, 1H), 1,61 -1,75 (m, 1H), 1,76 -1,89 (m, 1H), 1,92 -2,05 (m, 1H), 2,83 (d, J = 4,0 Hz, 3H), 2,91 -3,10 (m, 2H), 3,83 -3,98 (m, 1H), 4,24 -4,57 (m, 2H), 5,38 (s, 2H), 6,45 -6,58 (m, 1H), 6,64 (s, 1H), 7,41 -7,49 (m, 2H), 7,50 -7,56 (m, 1H), 7,59 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,34 Hz, 1H), 7,82 -7,90 (m, 2H), 7,98 (s a, 1H), 8,37 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 11,50 (s, 1H).
30 Intermedio 389
4-{2-Amino-6-[(3R)-3-amino-1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
A {(3R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (1,02 g, 2,473 mmol) se le añadió HCl 4 M en 1,4-dioxano (6,18 ml, 24,73 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 horas. Después, la reacción se concentró para producir una sal HCl del compuesto del título (1,03 g) en forma de un sólido de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 313 [M+H]+.
Intermedio 390
{(3R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de fenilmetilo
NH210
A 4-{2-amino-6-[(3R)-3-amino-1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (125 mg, 0,324 mmol) en THF (4 ml) y NaHCO3 saturado (2 ml) se le añadió cloridocarbonato de fenilmetilo (0,055 ml, 0,389 mmol) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se diluyó con agua (10 ml), después se extrajo con EtOAc (3 x 1 0 ml). La capa orgánica se combinó, se lavó con una solución saturada de NaCl, se secó sobre MgSO4,
15 se filtró y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (155 mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 447 [M+H]+.
Ejemplo 207
{(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de fenilmetilo
NH2
O
N N
NNO HH
NN NH2
20 En un tubo que puede cerrarse herméticamente de 5 ml se añadieron {(3R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de fenilmetilo (155 mg, 0,347 mmol) y etanol (3 ml) seguido de hidrazina monohidrato (0,511 ml, 10,41 mmol). La mezcla se tapó después y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró, después se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando el programa Trilution con una columna Sunfire 5u C18(2) 100A. de 50 X 30,00 mm 5
25 micrómetros. 7,3 minutos de ejecución (47 ml/min, CH3CN al 10%/H2O, TFA al 0,1% hasta CH3CN al 35%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. Al agua que quedaba se le añadió NaHCO3 saturado, después se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se transifirió a un vial Haystack. Se añadió agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (32 mg) en
30 forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 459 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  1,47 (s a, 2H), 1,71 -1,78 (m, 1H), 1,87 -1,94 (m, 1H), 2,92 (s a, 1H), 3,06 (s a, 1H), 3,40 -3,48 (m, 1H), 4,12 (s a, 1H), 4,31 (s a, 1H), 4,96 -5,08 (m, 2H), 5,40 (s a, 2H), 6,19 (s a, 2H), 6,61 (s, 1H), 7,29 -7,37 (m, 5H), 7,43 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), 11,55 (s a, 1H).
Intermedio 391 {(3R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclopentilo
NH2
Una solución premezclada de ciclopentanol (33,5 mg, 0,389 mmol) y base de Hunig (57 l) en CH2Cl2 (1 ml) se añadió lentamente a una solución de trifosgeno (38,5 mg, 0,130 mmol) en CH2Cl2 (1 ml), y la solución resultante se agitó durante 1 hora. Una solución premezclada de 4-{2-amino-6-[(3R)-3-amino-1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2fluorobenzonitrilo (125 mg, 0,324 mmol) y base de Hunig (226 l) en CH2Cl2 (5 ml) se añadió y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se concentró, después se cargó en una columna Biotage SNAP de 10 g y se purificó con un gradiente de EtOAc al 0 a 55% en hexano durante 25 min. LC-MS (ES) m/z = 425 [M+H]+.
Ejemplo 208
{(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclopentilo
NH2
En un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml se añadieron {(3R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclopentilo (58 mg, 0,137 mmol) y etanol (3 ml) seguido de hidrazina monohidrato (0,201 ml, 4,10 mmol) y la mezcla resultante se tapó después y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró, después se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando el programa Trilution con una columna Sunfire 5u C18(2) 100A. de 50 X 30,00 mm 5 micrómetros. 7,3 minutos de ejecución (47 ml/min, CH3CN al 10%/H2O, TFA al 0,1% hasta CH3CN al 35%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. Al agua que quedaba se le añadió NaHCO3 saturado, después se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se transifirió a un vial Haystack. Se añadió agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (39 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 437 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,40 -1,63 (m, 8H), 1,70 -1,82 (m, 3H), 1,85 -1,92 (m, 1H), 2,83 -2,93 (m, 1H), 3,05 (s a, 1H), 4,10 (m, 1H), 4,25 (s a, 1H), 4,94 -5,01 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,09 (s a, 2H), 6,56 (s, 1H), 7,15 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 11,51 (s, 1H).
Intermedio 392
{(3R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclobutilo
NH2
Una solución premezclada de ciclobutanol (30,5 l, 0,389 mmol) y base de Hunig (57 l) en CH2Cl2 (1 ml) se añadió lentamente a una solución de trifosgeno (38,5 mg, 0,130 mmol) en CH2Cl2 (1 ml), y la solución resultante se agitó durante 1 hora. Una solución premezclada de 4-{2-amino-6-[(3R)-3-amino-1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2fluorobenzonitrilo (125 mg, 0,324 mmol) y base de Hunig (226 l) en CH2Cl2 (5 ml) se añadió y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se concentró, después se cargó en una columna Biotage SNAP de 10 g y se purificó con un gradiente de EtOAc al 0 a 55% en hexano durante 25 min. LC-MS (ES) m/z = 411 [M+H]+.
Ejemplo 209
5 {(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclobutilo
NH2
O
N N N
NO HH
NN NH2
En un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml se añadieron {(3R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclobutilo (49 mg, 0,119 mmol) y etanol (3 ml) seguido de hidrazina monohidrato (0,176 ml, 3,58 mmol) y la mezcla resultante se tapó después y se calentó a 100ºC durante una noche. 10 La reacción se concentró, y después se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando el programa Trilution con una columna Sunfire 5u C18(2) 100A. de 50 X 30,00 mm 5 micrómetros. 7,3 minutos de ejecución (47 ml/min, CH3CN al 10%/H2O, TFA al 0,1% hasta CH3CN al 35%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. Al agua que quedaba se le añadió NaHCO3 saturado, y la mezcla acuosa 15 resultante se extrajo después con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se transifirió a un vial Haystack. Se añadió agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (26 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 423 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,41 -1,56 (m, 3H), 1,63 -1,77 (m, 2H), 1,83 -2,00 (m, 3H), 2,12 -2,26 (m, 2H), 2,87 (s a, 1H), 3,03 (s a, 1H), 4,08 -4,16 (m, 1H), 4,26 (s a, 1H), 4,83 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,06 -6,13 (m,
20 2H), 6,56 (s, 1H), 7,25 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 11,52 (s, 1H).
Intermedio 393
{(3R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclohexilo
NH2
25 Una solución premezclada de ciclohexanol (40,7 l, 0,389 mmol) y base de Hunig (57 l) en CH2Cl2 (1 ml) se añadió lentamente a una solución de trifosgeno (38,5 mg, 0,130 mmol) en CH2Cl2 (1 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. Se añadió una solución premezclada de 4-{2-amino-6-[(3R)-3-amino-1piperidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (125 mg, 0,324 mmol) y base de Hunig (226 l) en CH2Cl2 (5 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se concentró, y después se
30 cargó en una columna Biotage SNAP de 10 g y se purificó con un gradiente de EtOAc al 0 a 55% en hexano durante 25 minutos para producir el compuesto del título (45 mg) en forma de un aceite de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 439 [M+H]+.
Ejemplo 210 {(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclohexilo
NH2
En un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml se añadieron {(3R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4
5 pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclohexilo (45 mg, 0,103 mmol) y etanol (3 ml) seguido de hidrazina monohidrato (0,151 ml, 3,08 mmol) y la mezcla resultante se tapó después y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró, después se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando el programa Trilution con una columna Sunfire 5u C18(2) 100A. de 50 X 30,00 mm 5 micrómetros. 7,3 minutos de ejecución (47 ml/min, CH3CN al 10%/H2O, TFA al 0,1% hasta CH3CN al 35%/H2O,
10 TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron, y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. Al agua que quedaba se le añadió NaHCO3 saturado y después se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se transifirió a un vial Haystack. Se añadió agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (22 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 451 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz,
15 DMSO-d6): 1,09 -1,18 (m, 1H), 1,18 -1,33 (m, 5H), 1,46 (s a, 3H), 1,53 -1,92 (m, 7H), 2,95 (s a, 1H), 3,13 (s a, 1H), 4,00 -4,08 (m, 1H), 4,48 (s a, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,09 (s a, 2H), 6,55 (s, 1H), 7,17 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,91 (s, 1H), 11,52 (s, 1H).
Intermedio 394
4-{2-amino-6-[(3R)-3-(2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH220
En un vial de 40 ml se añadió 4-{2-amino-6-[(3R)-3-amino-1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (100 mg, 0,260 mmol) seguido de THF (3 ml) y NaHCO3 saturado (1,5 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 5 minutos. Después, se añadió cloridocarbonato de 2-cloroetilo (0,032 ml, 0,311 mmol) y la mezcla de reacción se tapó y se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción después se diluyó con 5 ml de agua y se extrajo con 25 EtOAc (3 x 10 ml). La capa orgánica se combinó y se lavó con NaCl saturado, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El sólido de color amarillo claro resultante (114 mg) se disolvió en DMF (3,00 ml), y después se añadió Cs2CO3 (127 mg, 0,389 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción no se completó. Se añadieron 0,5 equiv. más de Cs2CO3 y la mezcla de reacción continuó en agitación a temperatura ambiente. Después de 5 horas, la reacción se completó y después se diluyó con 10 ml de agua y se extrajo con
30 EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con NaCl saturado, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron para producir el compuesto del título en bruto (83 mg). LC-MS (ES) m/z = 383 [M+H]+.
Ejemplo 211
3-{(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}-1,3-oxazolidin-2-ona
NH2
N
N
NN
H N
N O
NH2 O
En un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml se añadieron 4-{2-amino-6-[(3R)-3-(2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il)1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (83 mg, 0,217 mmol) y etanol (3 ml) seguido de hidrazina monohidrato (0,319 ml, 6,51 mmol). El vial de reacción se tapó y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró, después se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso 5 abierto usando el programa Trilution con una columna Sunfire 5u C18(2) 100A. de 50 X 30,00 mm 5 micrómetros. 7,3 minutos de ejecución (47 ml/min, CH3CN al 10%/H2O, TFA al 0,1% hasta CH3CN al 25%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. Al agua que quedaba se le añadió NaHCO3 saturado y después se extrajo con EtOAc (5 x 100 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se transifirió a un vial
10 Haystack. Se añadió agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (37 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 395 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,45 1,58 (m, 1H), 1,68 -1,89 (m, 3H), 2,82 (t, J = 11,6 Hz, 1H), 2,99 (t, J = 11,8 Hz, 1H), 3,54 (ddd, J = 11,1, 7,0, 4,2 Hz, 1H), 3,60 (dd, J = 9,6, 8,6 Hz, 2H), 4,29 (td, J = 8,0, 2,2 Hz, 2H), 4,40 (dd, 2 H), 5,38 (s, 2H), 6,14 (s a, 2H), 6,63 (s, 1H), 7,57 (dd, J = 8,3, 1,3 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,95 (s, 1H), 11,52 (s, 1H).
15 Intermedio 395
N-{[(1,1-Dimetiletil)oxi]carbonil}-D-glutamato de dimetilo
OO
En un matraz RB de 20 ml se disolvió D-glutamato de dimetilo (25 g, 118 mmol) con CH3OH (150 ml). Se añadió trietilamina (36,2 ml, 260 mmol) seguido de Boc2O (33,5 g, 154 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 20 temperatura ambiente durante 18 horas. La reacción se concentró y después se disolvió en 200 ml de CH2Cl2. La solución orgánica resultante se lavó con HCl 1 N (2 x 50 ml), NaCl saturado, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. La purificación se realizó en una columna Biotage SNAP de 350 g con un gradiente de EtOAc al 0 a 35% y Hexano durante 35 minutos para aislar el compuesto del título (30,7 g) en forma de un aceite transparente. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,38 (s, 9H), 1,79 (ddd, J = 14,5, 8,8, 6,1 Hz, 1H), 1,94 (t, J = 13,4 Hz, 1H), 2,33 -2,43
25 (m, 2H), 3,59 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 4,00 (dd, J = 9,4, 7,6 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 7,8 Hz, 1H).
Intermedio 396
(4R)-N-{[(1,1-Dimetiletil)oxi]carbonil}-4-metil-D-glutamato de dimetilo
OO
En un matraz de fondo redondo de 250 ml se añadió N-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-D-glutamato de dimetilo (4 g,
30 14,53 mmol) y se enfrió en un baño de hielo seco/acetona a -78ºC. Por canulación, se añadió gota a gota LiHMDS 1 M en THF (30,5 ml, 30,5 mmol. Después de la adición la mezcla se dejó agitar a -78ºC durante 0,5 horas. Después, se añadió yoduro de metilo (1,817 ml, 29,1 mmol) tan rápido como fue posible, y la solución se agitó a -78ºC durante 4,5 horas. La reacción se interrumpió después con una solución 1 N de HCl (40 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Los extractos orgánicos se combinaron y se lavaron con NaHCO3 saturado y salmuera, después se secaron
35 sobre Na2SO4 y se concentraron para dar un aceite de color rojo ambarino. El aceite después se purificó en una columna Biotage SNAP de 50 g con un gradiente de EtOAc al 0 a 35% en hexano durante 35 minutos. Las fracciones con producto se combinaron para aislar el compuesto del título (1,37 g) en forma de un aceite transparente. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,08 (d, J = 7,1 Hz, 3H), 1,38 (s, 9H), 1,71 (ddd, J = 13,6, 8,3, 5,1 Hz, 1H), 1,94 (ddd, J = 13,9, 10,1, 6,1 Hz, 1H), 2,43 -2,49 (m, 1H), 3,60 (s, 3H), 3,62 (s, 3H), 4,01 (ddd, J = 9,9, 8,4, 5,2
40 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 8,3 Hz, 1H).
Intermedio 397
[(1R,3R)-4-Hidroxi-1-(hidroximetil)-3-metilbutil]carbamato de 1,1-dimetiletilo
A una solución de (4R)-N-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-4-metil-D-glutamato de dimetilo (1,79 g, 6,19 mmol) en etanol
5 (15 ml) y THF (15 ml) enfriada en un baño de hielo, se le añadió borohidruro sódico (1,873 g, 49,5 mmol) en porciones. La mezcla blanca turbia se agitó durante 0,5 horas en un baño de hielo y después se dejó en agitación durante una noche a temperatura ambiente. Se añadió una solución al 10% de Na2CO3 para interrumpir la reacción, pero la solución era demasiado espesa y se añadieron 20 ml más de agua. La suspensión blanca se extrajo con EtOAc (3 x 60 ml). La capa orgánica se combinó y se lavó con una solución saturada de NaCl, se secó sobre
10 Na2SO4, se filtró y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (1,56 g) en forma de un aceite transparente. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,82 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,18 (t, J = 7,1 Hz, 1H), 1,31 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 1,37 (s, 9H), 1,49 -1,60 (m, 1H), 3,09 -3,33 (m, 4H), 3,45 (td, J = 7,0, 5,1 Hz, 2H), 4,37 (dt, J = 9,2, 5,2 Hz, 1H), 4,56 (t, J = 5,7 Hz, 1H).
Intermedio 398
15 Metanosulfonato de (2R,4R)-2-({[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}amino)-4-metil-5-[(metilsulfonil)oxi]pentilo
O
HN
O
O
O
S
SO O OO
Se disolvió [(1R,3R)-4-hidroxi-1-(hidroximetil)-3-metilbutil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (1,56 g, 6,69 mmol) en CH2Cl2 (30 ml) en un matraz de fondo redondo de 250 ml tapado con un tapón de goma. El matraz de reacción se cargó con N2 y se enfrió en un baño de hielo. Se añadió trietilamina (3,73 ml, 26,7 mmol) seguido de la adición gota
20 a gota de cloruro de metanosulfonilo (1,563 ml, 20,06 mmol). Después de la adición, la reacción se dejó en agitación a 0ºC durante 1 hora. La reacción después se diluyó con CH2Cl2 (30 ml) y se lavó con NaHCO3 saturado (30 ml) y después con agua, se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (2,61 g). LC-MS (ES) m/z = 390 [M+H]+.
Intermedio 399
25 [(3R,5R)-5-Metil-1-(fenilmetil)-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo
En un vial que puede cerrarse herméticamente de 10 ml se añadió metanosulfonato de (2R,4R)-2-({[(1,1dimetiletil)oxi]carbonil}amino)-4-metil-5-[(metilsulfonil)oxi]pentilo (1,05 g, 2,70 mmol) seguido de bencilamina (5,88 ml, 53,9 mmol) y la reacción se tapó y se calentó a 70ºC durante 24 horas. La reacción se dejó enfriar, y después se
30 transfirió en una solución de NaOH 1 N (20 ml). La mezcla oleosa resultante se extrajo después con Hexano (3 x 20 ml). Los extractos combinados se lavaron con una solución saturada de NaCl, y después se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. Se realizó la purificación en una columna Biotage SNAP de 20 g con un gradiente de EtOAc al 0 a 20% en hexano durante 20 minutos para producir el compuesto del título (452 mg) en forma de un aceite transparente. LC-MS (ES) m/z = 305 [M+H]+.
35 Intermedio 400
[(3R,5R)-5-Metil-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo
En un frasco agitador Parr se añadió Pd/C (316 mg, 0,148 mmol, tipo Degussa) seguido de una solución
5 premezclada de [(3R,5R)-5-metil-1-(fenilmetil)-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (452 mg, 1,485 mmol) en etanol (20 ml). El frasco agitador Parr se puso después en la instalación de vibración, se lavó abundantemente con N2, y después se presurizó con hidrógeno hasta 0,21 MPa (30 psi). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se filtró sobre un filtro de jeringa y se concentró para aislar el compuesto del título en bruto (310 mg). LC-MS (ES) m/z = 215 [M+H]+.
10 Intermedio 401
[(3R,5R)-1-(2-Amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo
NH2
En un vial que puede cerrarse herméticamente de 20 ml se disolvió [(3R,5R)-5-metil-3-piperidinil]carbamato de 1,1dimetiletilo (517 mg, 2,412 mmol) en etanol (10 ml). Después, se añadieron 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (593 mg,
15 3,62 mmol) y trietilamina (0,672 ml, 4,82 mmol) y la mezcla se tapó después y se calentó a 100ºC durante una noche. Después, la reacción se concentró y se cargó en una columna Biotage SNAP de 25 g y se purificó con un gradiente de EtOAc al 0 a 70% en hexano durante 30 minutos para producir el compuesto del título (720 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 342 [M+H]+.
Intermedio 402
20 {(3R,5R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
NH2
Una mezcla de [(3R,5R)-5-metil-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (100 mg, 0,47 mmol) y 4,6-dicloro-2
pirimidinamina (77 mg, 0,47 mmol) en 1,4-dioxano (6 ml) y NaHCO3 ac. sat. (3 ml) se agitó durante 3 horas a 80ºC
en un tubo que puede cerrarse herméticamente. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. Se añadió 25 ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (115 mg, 0,70 mmol) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla resultante
durante 10 minutos. Se añadió Pd(Ph3P)4 (54 mg, 0,047 mmol), el tubo volvió a cerrarse herméticamente, y la
mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La mezcla se vertió en agua, y se formó un precipitado. La
mezcla se filtró. El sólido resultante se recogió en EtOAc y se filtró. El filtrado orgánico resultante se secó (MgSO4),
se filtró y se concentró hasta que quedaban ~5 ml de disolvente. Este líquido se inyectó en una columna de SiO2 de 30 40 g y se purificó por cromatografía ultrarrápida (gradiente: 100% Hexanos hasta EtOAc al 75%/Hexanos) para
producir el compuesto del título (135 mg) en forma de una espuma de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 427 [M+H]+.
Ejemplo 212 {(3R,5R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo NH2 O
N
N
N
O
N
H
H
N
N
NH2
A {(3R,5R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (135
5 mg, 0,317 mmol) en etanol (5 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (0,5 ml, 10,2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC en un tubo que puede cerrarse herméticamente. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, y se formó un precipitado. Se añadió agua (~5 ml) y la mezcla se filtró. El material sólido blanquecino se lavó con agua (2 x 20 ml). Se añadió EtOAc (~ 25 ml) al filtro y la mezcla se agitó en un intento de disolver todo el material. La mezcla se filtró, y el proceso se repitió 2 veces más. Los filtrados combinados se
10 secaron (MgSO4), se filtraron, se concentraron y se secaron al vacío para producir el compuesto del título (75 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 439 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,88 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,29 (s, 9H), 1,37 -1,52 (m, 2H), 1,68 (m, 1H), 1,93 -2,07 (m, 1H), 2,83 (s a, 1H), 3,38 (s a, 1H), 3,63 (s a, 1H), 3,89 (m, 1H), 5,37 (s, 2H), 6,04 (s a, 2H), 6,49 (s, 1H), 6,82 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,89 (s, 1H), 11,49 (s, 1H).
15 Intermedio 403
4-{2-Amino-6-[(3R,5R)-3-amino-5-metil-1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
NH2
A {(3R,5R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (127 mg, 0,298 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) se le añadió HCl 4 M en 1,4-dioxano (0,074 ml, 0,298 mmol) y la reacción se
20 dejó en agitación a temperatura ambiente durante 3 horas. La reacción se concentró para producir la sal bis HCl del compuesto del título (164 mg) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 327 [M+H]+.
Intermedio 404
4-{2-Amino-6-[(3R,5R)-3-metil-5-(2-oxo-1,3-oxazolidin-3-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo
N
F N
N
NO
O NH2
25 En un vial de 40 ml se añadió 4-{2-amino-6-[(3R,5R)-3-amino-5-metil-1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (164 mg, 0,411 mmol) seguido de THF (5 ml) y NaHCO3 saturado (2,5 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 5 minutos. Después, se añadió cloridocarbonato de 2-cloroetilo (0,051 ml, 0,493 mmol) y la mezcla se tapó después y se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción después se diluyó con 5 ml de agua y se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). La capa orgánica se combinó y se lavó con NaCl saturado, se secó sobre MgSO4, se filtró y
30 se concentró para producir 101 mg de un sólido de color amarillo claro. La purificación en una columna Biotage SNAP de 10 g con un gradiente de EtOAc al 0 a 65% en hexano durante 35 minutos produjo 101 mg del aceite en bruto. El aceite se disolvió en DMF (5,00 ml), y después se añadió Cs2CO3 (268 mg, 0,821 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción no se completó. Se añadieron 0,5 equiv. más de Cs2CO3 y la reacción se continuó agitando a temperatura ambiente. Después de 5 horas, la reacción se completó. La reacción se diluyó con 10 ml de agua, y se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se lavaron con NaCl saturado, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron para aislar el compuesto del
5 título en bruto (96 mg). LC-MS (ES) m/z = 397 [M+H]+.
Ejemplo 213
3-{(3R,5R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}-1,3-oxazolidin-2-ona
NH2
N N
N
H N
NO
O NH2
En un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml se añadieron 4-{2-amino-6-[(3R,5R)-3-metil-5-(2-oxo-1,3
10 oxazolidin-3-il)-1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (96 mg, 0,242 mmol) y etanol (10 ml) seguido de hidrazina monohidrato (0,356 ml, 7,27 mmol). El vial de reacción se tapó y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró, después se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando el programa Trilution con una columna Sunfire 5u C18(2) 100A. de 50 X 30,00 mm 5 micrómetros. 7,3 minutos de ejecución (47 ml/min, CH3CN al 10%/H2O, TFA al 0,1% hasta CH3CN al 25%/H2O, TFA
15 al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. El agua que quedaba se liofilizó, y el sólido obtenido se disolvió después en 2 ml de CH2Cl2:CH3OH 9:1 y después se cargó en una columna Biotage SNAP de 10 g. El producto se eluyó después de la columna con un gradiente de 0 a 100% de CH2Cl2:CH3OH:NH4OH 95:5:1 en CH2Cl2 durante 25 minutos. Las fracciones del producto se combinaron, se concentraron, y después se transfirieron a un vial Haystack. Se añadió
20 agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (55 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 409 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 0,97 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,51 1,59 (m, 1 H), 1,96 (ddd, J = 12,8, 8,1, 4,4 Hz, 1H), 2,00 -2,07 (m, 1H), 3,36 -3,45 (m, 1H), 3,50 -3,72 (m, 4H), 3,80 -3,87 (m, 1H), 3,89 -3,98 (m, 1H), 4,18 -4,26 (m, 2H), 5,38 (s, 2H), 6,11 (s, 2H), 6,64 (s, 1H), 7,58 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,95 (s, 1H), 11,51 (s, 1H).
25 Intermedio 405
{(3R,5R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
F
N O
O N
F H N N
NH2
En un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml se disolvieron [(3R,5R)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5
metil-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (100 mg, 0,293 mmol) y ácido (4-ciano-3,5-difluorofenil)borónico (80 30 mg, 0,439 mmol) con 1,4-dioxano (4 ml). Se añadió NaHCO3 saturado (2 ml) y se burbujeó gas N2 a través de la
mezcla durante 10 minutos. Después, se añadió Pd(Ph3P)4 (33,8 mg, 0,029 mmol) y se burbujeó gas N2 a través de
la mezcla durante 5 minutos más. La reacción se tapó después y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción
se diluyó con agua (10 ml) y después se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml). Los extractos orgánicos combinados se
secaron sobre Mg2SO4, se filtraron y se concentraron. El aceite de color pardo después se purificó en una columna 35 Biotage SNAP de 10 g en un gradiente de EtOAc al 0 a 45% en hexano para producir el compuesto del título (128
mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 445 [M+H]+.
Intermedio 406
((3R,5R)-1-{2-Amino-6-[4-ciano-3-fluoro-5-(metiloxi)fenil]-4-pirimidinil}-5-metil-3-piperidinil)carbamato de 1,1dimetiletilo
O
N O
O N
F H N N
NH2
5 Se preparó una solución de metóxido sódico a partir de 50 mg de sodio metálico disuelto en 2,1 ml de CH3OH anhidro. A partir de esta solución se añadieron 0,32 ml a una solución predisuelta de {(3R,5R)-1-[2-amino-6-(4-ciano3,5-difluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (120 mg, 0,270 mmol) en CH3OH (2 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se concentró, después se diluyó con agua (10 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). La capa orgánica se combinó, se lavó con una
10 solución saturada de NaCl, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (168 mg). LC-MS (ES) m/z = 457 [M+H]+.
Ejemplo 214
((3R,5R)-1-{2-Amino-6-[3-amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-4-pirimidinil}-5-metil-3-piperidinil)carbamato de 1,1dimetiletilo
O
NH2
O
N
N
NO N HH N
N
NH2
En un tubo que puede cerrarse herméticamente se añadieron ((3R,5R)-1-{2-amino-6-[4-ciano-3-fluoro-5(metiloxi)fenil]-4-pirimidinil}-5-metil-3-piperidinil)carbamato de 1,1-dimetiletilo (168 mg, 0,368 mmol) y etanol (3 ml) seguido de hidrazina monohidrato (0,541 ml, 11,04 mmol). Después, la solución se tapó y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró, después se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC 20 (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando el programa Trilution con una columna Sunfire 5u C18(2) 100A. de 50 X 30,00 mm 5 micrómetros. 7,3 minutos de ejecución (47 ml/min, 15%CH3CN/H2O, TFA al 0,1% hasta CH3CN al 40%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron, y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. Al agua que quedaba se le añadió NaHCO3 saturado. Después, se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró,
25 se concentró y se transifirió a un vial Haystack. Se añadió agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (60 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 469 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,88 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,29 (s a, 9H), 1,47 (d, J = 12,88 Hz, 2H), 1,67 (s a, 1H), 1,95 2,03 (m, 1H), 2,92 (s a, 1H), 3,63 (s a, 1H), 3,82 (s a, 1H), 3,93 (s, 3H), 5,02 (s a, 2H), 6,05 (s a, 2H), 6,46 (s, 1H), 6,81 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 6,87 (s, 1H), 7,43 (s, 1H), 11,52 (s, 1H).
Intermedio 407 {(3R,5R)-1-[6-Cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
Una mezcla de [(3R,5R)-5-metil-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (176 mg, 0,821 mmol) y 4,6-dicloro-Nmetil-2-pirimidinamina (146 mg, 0,821 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (2 ml) se agitó durante 3 horas a 80ºC en un tubo que puede cerrarse herméticamente. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se diluyó con agua (~200 ml). Se formó un precipitado blanco que se filtró y se lavó con agua (~50 ml). El sólido de color blanco se disolvió en la cantidad mínima de CH2Cl2 y se inyectó en una columna de SiO2 de 40 g. La cromatografía ultrarrápida (gradiente: 100% Hexanos a EtOAc al 40% en hexanos) produjo el compuesto del título (234 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 356 [M+H]+.
Intermedio 408
{(3R,5R)-1-[6-(4-Ciano-3-fluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
NH
En un tubo que puede cerrarse herméticamente se disolvieron {(3R,5R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (115 mg, 0,323 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (80 mg, 0,485 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml). Se añadió NaHCO3 saturado (2 ml) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 10 minutos. Después, se añadió Pd(Ph3P)4 (56,0 mg, 0,048 mmol) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 5 minutos más. La reacción se tapó después y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se diluyó con agua (10 ml) y después se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml). La capa orgánica se combinó, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El aceite de color pardo después se purificó en una columna Biotage SNAP de 10 g en un gradiente de EtOAc al 0 a 35% en hexano. LC-MS (ES) m/z = 441 [M+H]+.
Ejemplo 215
{(3R,5R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
NH2
O
N N
O N HH
N
N
NH
En un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml se añadieron {(3R,5R)-1-[6-(4-ciano-3-fluorofenil)-2(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (121 mg, 0,275 mmol) y etanol (3 ml) seguido de hidrazina monohidrato (0,404 ml, 8,24 mmol). La reacción se tapó y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró, después se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando el programa Trilution con una columna Sunfire 5u C18(2) 100A. de 50 X 30,00 mm 5 micrómetros. 7,3 minutos de ejecución (47 ml/min, 20%CH3CN/H2O, TFA al 0,1% hasta CH3CN al 45%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. Al agua que quedaba se le añadió NaHCO3 saturado. Después, se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se transifirió a un vial Haystack. Se añadió agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (87 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 453 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,88 (d, J = 6,6 Hz, 3H,) 1,29 (s, 9H), 1,38 -1,50 (m, 2H), 1,66 -1,74 (m, 1H), 1,99 (s, 1H), 2,83 (d, J = 4,6 Hz, 3H). 2,85 -2,92 (m, 1H). 3,63 (s a, 1H), 3,96 -4,08 (m, 1H), 4,07 -4,22 (m, 1H), 5,37 (s, 2H), 6,50 (s a, 2H), 6,79 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,93 (s a, 1H).
Intermedio 409
{(3R,5R)-1-[6-(4-Ciano-3,5-difluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-Dimetiletil
F
N O N
O N
F H N N
NH 10 En un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml se disolvieron {(3R,5R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (115 mg, 0,323 mmol) y ácido (4-ciano-3,5difluorofenil)borónico (89 mg, 0,485 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml). Se añadió NaHCO3 saturado (2 ml) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 10 minutos. Después, se añadió Pd(Ph3P)4 (56,0 mg, 0,048 mmol) y se
15 burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 5 minutos más. La reacción se tapó después y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se diluyó con agua (10 ml) y después se extrajo con EtOAc (3 x 20 ml). La capa orgánica se combinó, se secó sobre Mg2SO4, se filtró y se concentró. El aceite de color pardo después se purificó en una columna Biotage SNAP de 25 g en un gradiente de EtOAc al 0 a 35% en hexano para producir el compuesto del título (128 mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 459 [M+H]+.
20 Intermedio 410
{(3R,5R)-1-[6-[4-Ciano-3-fluoro-5-(metiloxi)fenil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1dimetiletilo
O
N O N
O
F H
N N
N
NH
Se preparó una solución de metóxido sódico a partir de 60 mg de sodio metálico disuelto en 2,6 ml de CH3OH. A
25 partir de esta solución se añadieron 0,36 ml a una solución predisuelta de {(3R,5R)-1-[6-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-2(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (138 mg, 0,301 mmol) en CH3OH (3 ml). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. En la reacción se observó aproximadamente un 5% de adición de bis-OMe pero no material de partida. La reacción se concentró, y después se diluyó con agua (10 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). La capa orgánica se combinó, se lavó con una solución saturada de NaCl, se secó
30 sobre MgSO4, se filtró y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (109 mg). LC-MS (ES) m/z = 471 [M+H]+.
Ejemplo 216
{(3R,5R)-1-[6-[3-Amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo
O
NH2
O
N
N
NO N HH
N
N
NH
En un tubo que puede cerrarse herméticamente se añadieron {(3R,5R)-1-[6-[4-ciano-3-fluoro-5-(metiloxi)fenil]-2(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo (109 mg, 0,232 mmol) y etanol (3 ml) seguido de hidrazina monohidrato (0,341 ml, 6,95 mmol). Después, la solución se tapó y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró, después se disolvió en 3 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando el programa Trilution con una columna Sunfire 5u C18(2) 100A. de 50 X 30,00 mm 5 micrómetros. 7,3 minutos de ejecución (47 ml/min, 20%CH3CN/H2O, TFA al 0,1% hasta CH3CN al 45%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. Al agua que quedaba se le añadió NaHCO3 saturado. Después, se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y se transifirió a un vial Haystack. Se añadió agua (1 ml) y la mezcla resultante se liofilizó para producir el compuesto del título (38 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 483 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 0,88 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,30 (s, 9H), 1,47 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 1,70 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 2,00 (s a, 1H) 2,82 (d, J = 4,3 Hz, 3H), 2,97 (s a, 1H), 3,42 (s a, 1H), 3,62 (s a, 1H), 3,94 (s, 3H), 4,02 (s a, 1H), 5,02 (s, 2H), 6,47 (s a, 2H), 6,80 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 6,90 (s a, 1H), 7,46 (s a, 1H), 11,53 (s, 1H).
Intermedio 411
{(3R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1-metiletilo
NH2
A 4-{2-amino-6-[(3R)-3-amino-1-piperidinil]-4-pirimidinil}-2-fluorobenzonitrilo (125 mg, 0,324 mmol) en THF (4 ml) y NaHCO3 saturado (2 ml) se le añadió cloridocarbonato de 1-metiletilo (0,389 ml, 0,389 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se diluyó con agua (10 ml), después se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). La capa orgánica se combinó, se lavó con una solución saturada de NaCl, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para producir el compuesto del título en bruto (116 mg) en forma de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 399 [M+H]+.
Ejemplo 217
{(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1-metiletilo
NH2
O
N
N
NO N HH
N
N
NH2
En un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml se añadió {(3R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1-metiletilo (116 mg, 0,291 mmol) seguido de etanol (3 ml) e hidrazina (0,428
ml, 8,73 mmol). La mezcla se tapó después y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró, después se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando el programa Trilution con una columna Sunfire 5u C18(2) 100A. de 50 X 30,00 mm 5 micrómetros. 7,3 minutos de ejecución (47 ml/min, CH3CN al 10%/H2O, TFA al 0,1% hasta CH3CN al 35%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del CH3CN. Al agua que quedaba se le añadió NaHCO3 saturado. Después, se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml) y las fracciones orgánicas se combinaron y se lavaron con una solución saturada de NaCl, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto después se transfirió a un vial Haystack, se añadió 1 ml de agua y se liofilizó. LC-MS (ES) m/z = 411 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 1,13 (d, 3H), 1,16 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 1,39 -1,49 (m, 2H), 1,70 -1,77 (m, 1H), 1,85 -1,93 (m, 1H), 2,87 (s a, 1H), 3,03 (s a, 1H), 4,06 -4,16 (m, 1H), 4,28 (s a, 1H), 4,77 (ddd, J = 12,51, 6,19, 6,06 Hz, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,09 (s a, 2H), 6,56 (s, 1H), 7,16 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 11,52 (s, 1H).
Intermedio 412
4-Cloro-6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-N-metil-2-pirimidinamina
NH
Una mezcla de (2R)-2-etilpirrolidina (0,8 g, 5,90 mmol) y 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina (0,997 g, 5,60 mmol) en 1,4-dioxano (40 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (20 ml) se agitó durante una noche a 100ºC en un tubo que puede cerrarse herméticamente. La mezcla de reacción se vertió en agua (~400 ml). Se formó un precipitado blanco. La mezcla acuosa se filtró, y el sólido blanco se lavó con agua (~100 ml). El sólido húmedo se secó durante una noche al vacío a 40ºC para producir el compuesto del título (1,19 g). LC-MS (ES) m/z = 241 [M+H]+.
Intermedio 413
4-[6-[(2R)-2-Etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzonitrilo
F
En un vial de microondas de 150 ml, 4-[6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzonitrilo (1,18 g, 4,90 mmol) y ácido (4-ciano-3,5-difluorofenil)borónico (1,345 g, 7,35 mmol) se disolvieron en 1,4-dioxano (40 ml) con agitación. Se añadió agua (20 ml) seguido de fosfato potásico tribásico monohidrato (3,05 g, 13,23 mmol) y la mezcla se purgó con N2 para desgasificar durante 2 minutos. Se añadieron triciclohexilfosfina tetrafluoroborato (0,271 g, 0,735 mmol) y Pd2(dba)3 (0,337 g, 0,368 mmol) y la mezcla se cerró herméticamente y se calentó a 100ºC durante una noche. El análisis por LCMS indicó una conversión completa. La mezcla se diluyó con EtOAc y se lavó con agua y salmuera, se secó (MgSO4) se filtró y se evaporó. El producto se purificó adicionalmente por cromatografía (columna de sílice Analogix RS-90 g) eluyendo con EtOAc al 0-20%/hexano para dar el compuesto del título (1,4 g) en forma de una espuma de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 374 [M+H]+.
Intermedio 414
4-[6-[(2R)-2-Etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2-fluoro-6-(metiloxi)benzonitrilo O
NH
Una solución 1 M de metóxido sódico en CH3OH se preparó mediante la adición de 50 mg (2,17 mmol) de sodio
5 recién cortado a CH3OH enfriado con hielo (2,17 ml). De esto, 0,489 ml se añadieron a una solución de 4-[6-[(2R)-2etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzonitrilo (140 mg, 0,408 mmol) en CH3OH/DMF (2 ml/0,2 ml). La solución amarilla se agitó a temperatura ambiente durante una noche en un vial de 10 ml tapado. El análisis por LCMS fue muy limpio. La mezcla se vertió en agua (15 ml). El sólido de color amarillo formado se filtró, se lavó con agua y se secó para producir el compuesto del título (129 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC
10 MS (ES) m/z = 356 [M+H]+.
Ejemplo 218
6-[6-[(2R)-2-Etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina
NH
En un tubo para microondas, se añadieron 4-[6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2-fluoro-6
15 (metiloxi)benzonitrilo (129 mg, 0,363 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,063 ml, 0,363 mmol) e hidrazina anhidra (0,068 ml, 2,178 mmol). La mezcla en suspensión de color amarillo se calentó a 100ºC en un baño de aceite durante una noche. Cuando la temperatura de la reacción alcanzó 100ºC, se disolvió todo el sólido de la mezcla. Después de una noche, no había sólido formado de color blanco. El análisis por LCMS mostró que no había más material de partida. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, después el sólido blanco se filtró de la solución de
20 color amarillo, se lavó con CH3CN (2 ml), y se secó a presión reducida para producir el compuesto del título (70 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 368 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,90 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 1,37 (m, 1H), 1,80 (m, 2H), 1,93 (m, 3H), 2,82 (d, J = 4,6 Hz, 3H), 3,39 (m, H), 3,47 -3,63 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 4,05 (m, 1H), 5,02 (s, 2H), 6,19 (s, 1H), 6,41 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 11,51 (s, 1H).
Intermedio 415
25 4-[6-[(2R)-2-Etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2-fluoro-6-(metiltio)benzonitrilo
S
NH
A una solución de 4-[6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzonitrilo (140 mg, 0,408 mmol) en DMF (4 ml), se le añadió sal sódica de metil mercaptano (aprox. 15% en agua) (252 mg, 0,543 mmol). La solución de color naranja se agitó a temperatura ambiente durante una noche en un vial de 10 ml tapado. El análisis por LCMS fue muy limpio. La mezcla se vertió en agua (15 ml). El sólido formado se filtró, se lavó con agua y se secó para producir el compuesto del título (136 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 372 [M+H]+.
Ejemplo 219
6-[6-[(2R)-2-Etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina
NH
En un tubo para microondas, se añadieron 4-[6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2-fluoro-6
(metiltio)benzonitrilo (136 mg, 0,366 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,064 ml, 0,366 mmol) e hidrazina anhidra
(0,069 ml, 2,197 mmol). La mezcla en suspensión de color amarillo se calentó a 100ºC en un baño de aceite durante 10 una noche. Cuando la temperatura de la reacción alcanzó 100ºC, se disolvió todo el sólido de la mezcla. Después de
una noche, no había sólido formado de color blanco. El análisis por LCMS mostró que no había más material de
partida. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, después el sólido blanco se filtró de la solución de color
amarillo, se lavó con CH3CN (2 ml), se secó a presión reducida para producir el compuesto del título (90 mg). LC-MS
(ES) m/z = 370 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,91 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 1,36 (m, 1H), 1,80 (m, 2H), 1,93 (m, 15 3H), 2,59 (s, 3H), 2,83 (d, J = 4,6 Hz, 3H), 3,53 (m, 1H), 4,06 (m, 1H), 5,08 (s, 2H), 6,22 (s, 1H), 6,44 (s, 1H), 7,38 (s,
1H), 7,71 (s, 1H), 11,75 (s, 1H).
Intermedio 416
2-(Etiloxi)-4-[6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-fluorobenzonitrilo
O
NH
20 Se preparó una solución 1 M de etóxido sódico en EtOH mediante la adición de 60 mg (2,61 mmol) de sodio recién cortado a EtOH enfriado con hielo (2,61 ml). De esto, 0,489 ml se añadieron a una solución de 4-[6-[(2R)-2-etil-1pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-2,6-difluorobenzonitrilo (140 mg, 0,408 mmol) en Etanol/DMF (2 ml/0,2 ml). La solución amarilla se agitó a temperatura ambiente durante una noche en un vial de 10 ml tapado. El análisis por LCMS fue muy limpio. La mezcla se vertió en agua (15 ml). El sólido formado se filtró, se lavó con agua y se secó
25 para producir el compuesto del título (137 mg) en forma de un sólido de color amarillo claro. LC-MS (ES) m/z = 370 [M+H]+.
Ejemplo 220 4-(Etiloxi)-6-[6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina
NH
En un tubo para microondas, se añadieron 2-(etiloxi)-4-[6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6
5 fluorobenzonitrilo (137 mg, 0,371 mmol), 5 ml de EtOH, base de Hunig (0,065 ml, 0,371 mmol) e hidrazina anhidra (0,070 ml, 2,225 mmol). La mezcla en suspensión de color amarillo se calentó a 100ºC en un baño de aceite durante una noche. Cuando la temperatura de la reacción alcanzó 100ºC, se disolvió todo el sólido de la mezcla. Después de una noche, no había sólido formado de color blanco. El análisis por LCMS mostró que no había más material de partida. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, después el sólido blanco se filtró de la solución de color
10 amarillo, se lavó con CH3CN (2 ml), y se secó a presión reducida para producir el compuesto del título (120 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 382 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): 0,90 (t, J = 7,3 Hz, 3H), 1,35 (m, 1H), 1,44 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 1,80 (m, 2H), 1,93 (m, 3H), 2,82 (d, J = 4,6 Hz, 3H), 3,39 (m, 1H), 3,40 -3,45 (m, 1H), 3,48 -3,62 (m, 1H), 4,05 (m, 1H), 4,13 -4,25 (c, J = 7,0 Hz, 2 H), 4,99 (s, 2H), 6,17 (s, 1H), 6,40 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
15 Intermedio 416
Metil[(3R,5R)-5-metil-1-(fenilmetil)-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo
O N
O
N
A [(3R,5R)-5-metil-1-(fenilmetil)-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (196 mg, 0,644 mmol) en DMF (3 ml) se le añadió NaH (38,6 mg, 0,966 mmol) y la mezcla resultante se agitó vigorosamente durante 30 minutos. Se añadió
20 CH3I (0,044 ml, 0,708 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 3 horas a temperatura ambiente. Se añadió cuidadosamente NaHCO3 acuoso saturado (~5 ml: burbujeo inicial vigoroso) y la mezcla resultante se vertió en agua y EtOAc. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: 100% Hexano a EtOAc al 30%/Hexano) produjo el compuesto del título (162 mg) en forma de un aceite incoloro. LC-MS (ES) m/z = 319 [M+H]+.
25 Intermedio 417
{(3R,5R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo
NH2
Una solución de metil[(3R,5R)-5-metil-1-(fenilmetil)-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (160 mg, 0,502 mmol) en etanol (6 ml) se desgasificó con N2 durante 10 minutos. Se añadió Pd/C tipo Degussa (53,5 mg, 0,502 mmol) y la 30 mezcla resultante se agitó durante 3 días (probablemente la reacción es mucho más rápida que esto) a temperatura ambiente en una atmósfera de H2 (sistema de balón). La mezcla se desgasificó con N2 y se filtró a través de un Acrodisk, aclarando con etanol (~15 ml). La mezcla se concentró al vacío. El residuo resultante se recogió en 1,4
dioxano (6,00 ml). A la solución resultante se le añadieron 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (79 mg, 0,477 mmol) y NaHCO3 acuoso saturado (3 ml) y la mezcla resultante se agitó durante una noche a 100ºC en un tubo que puede cerrarse herméticamente. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. Se añadió ácido (4-ciano-3fluorofenil)borónico (124 mg, 0,754 mmol) y se burbujeó gas N2 a través de la mezcla durante 10 minutos. Se añadió
5 Pd(Ph3P)4 (29 mg, 0,025 mmol), el recipiente se cerró herméticamente, y la mezcla de reacción se agitó durante 4 horas a 100ºC. La mezcla se vertió en agua y EtOAc. La capa orgánica se separó, y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: 100% Hexano a EtOAc al 70% /Hexano) produjo el compuesto del título (170 mg) en forma de un aceite espeso. LC-MS (ES) m/z = 441 [M+H]+.
10 Ejemplo 221
{(3R,5R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo
NH2
A {(3R,5R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo
(170 mg, 0,386 mmol) en etanol (6 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (0,70 ml, 14,3 mmol) y la mezcla de 15 reacción se agitó durante una noche a 100ºC en un tubo que puede cerrarse herméticamente. La mezcla se vertió
en agua (~150 ml) y se formó un precipitado de color blanco. La mezcla acuosa se filtró, y el sólido se secó al aire
durante 2 horas. El sólido de color blanco resultante se secó al vacío a 45ºC durante 1 hora para producir el
compuesto del título (110 mg). LC-MS (ES) m/z = 453 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6):  0,92 -1,02 (m, 3H),
1,41 (s, 9H), 1,46 -1,55 (m, 1H), 1,85 -1,99 (m, 1H), 2,07 -2,19 (m, 1H), 2,76 (s, 3H), 3,02 -3,14 (m, 1H), 3,12 20 3,23 (m, 1H), 3,90 -4,15 (m, 2H), 4,35 (m, 1H), 5,38 (s, 2H), 6,07 (s, 2H), 6,60 (s, 1H), 7,57 (dd, J = 8,6, 1,3 Hz, 1H),
7,70 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,95 (s, 1H), 11,50 (s, 1H).
Ejemplo 222
1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-L-prolinamida
NH2
25 En un tubo de 5 ml (vol. máx) que puede cerrarse herméticamente, se recogieron (3-(bis{[(1,1dimetiletil)oxi]carbonil}amino)-1-{[(1,1-dimetiletil)oxi]carbonil}-1H-indazol-6-il)(trifluoro)borato (1-) (335 mg, 0,621 mmol), 1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-L-prolinamida (150 mg, 0,621 mmol) y fosfato potásico (224 mg, 1,055 mmol) en 4 ml de dioxano-agua 3:1. Los contenidos se desgasificaron burbujeando nitrógeno a su través durante 10 min. Se añadieron triciclohexilfosfina (17,41 mg, 0,062 mmol) y Pd2(dba)3 (22,73 mg, 0,025 mmol), los contenidos se
30 desgasificaron durante 5 min. más. El recipiente se cerró herméticamente y se calentó a 100ºC durante una noche (16 h). Los contenidos se enfriaron a temperatura ambiente, y la capa de dioxano se separó de la parte acuosa. Los sólidos se retiraron por filtración y la fase de dioxano en bruto se pasó a través de un cartucho de filtrado C18. El cartucho de filtrado se lavó con 5 ml de acetonitrilo, y los lavados se combinaron con la solución de dioxano en bruto. El material en bruto después se purificó por RPHPLC usando un gradiente de 5-75% de TFA al 0,1%/ACN
35 durante 10 min. Las fracciones deseadas se combinaron y se evaporaron a sequedad como el producto acoplado protegido con mono-Boc. Este material se trató después con 10 ml de TFA durante 30 min, se evaporó a sequedad, se recogió en metanol y se purificó por RPHPLC como se ha mencionado anteriormente y se liofilizó para dar un polvo floculento de color amarillo claro como la sal ditrifluoroacetato. LC-MS (ES) m/z = 339 [M+H]+.
Ejemplo 223
6-{2-amino-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina
O
NH2
O
N N
N
N
N
NH2
A un vial de 20 ml se le añadieron 4-{2-amino-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2,6-difluorobenzonitrilo (850
5 mg, 2,461 mmol), N,N-dimetilformamida (DMF) (5 ml) y etóxido sódico 1 M (2,461 ml, 2,461 mmol). La reacción se agitó durante 30 min a temperatura ambiente. Después, la reacción se vertió en EtOAc (10 ml) seguido de H2O (15 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (x 1) y después se secó sobre Na2SO4 y se concentró hasta un sólido de color amarillo que se recogió en acetonitrilo (5 ml) y se añadió a un vial para microondas de 20 ml seguido de hidrazina (0,309 ml, 9,85 mmol) y DIEA (3,44 ml, 19,69 mmol). La reacción se cerró herméticamente y se calentó en
10 un reactor de microondas a 150ºC durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró hasta un aceite de color amarillo y se purificó por cromatografía ultrarrápida (120 g, 50-100%, DCM:MeOH:NH4OH). Las fracciones se combinaron y se concentraron para producir 6-{2-amino-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina (514 mg) en forma de un sólido de color castaño. LC-MS (ES) m/z = 384 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6)  0,87 (t, J = 7,45 Hz, 3H), 1,45 (t, J = 6,95 Hz, 3H), 1,58 -1,80 (m, 2H), 3,01 -3,14 (m, 1H), 3,37 -3,47 (m, 1H), 3,46 -3,56
15 (m, 1H), 3,83 (d, J = 11,4 Hz, 2H), 3,85-3,91 (m, 1H), 4,21 (c, J = 6,99 Hz, 3H), 4,25 -4,39 (m, 1H), 5,00 (s, 2H), 6,07 (s, 2H), 6,49 (s, 1H), 6,90 (s, 1H), 7,47 (s, 1 H), 11,53 (s, 1H).
Ejemplo 224
6-{2-amino-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina
O NH2
O
N N
N
N
N
NH2
20 A un vial de 20 ml se le añadieron 4-{2-amino-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-2,6-difluorobenzonitrilo (850 mg, 2,461 mmol), N,N-dimetilformamida (DMF) (5 ml) y metóxido sódico 1 M (2,461 ml, 2,461 mmol). La reacción se agitó durante 30 min a temperatura ambiente. Después, la reacción se vertió en EtOAc (10 ml) seguido de H2O (15 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (x 1) y después se secó sobre Na2SO4 y se concentró hasta un sólido de color amarillo que se recogió en acetonitrilo (5 ml) y se añadió a un vial para microondas de 20 ml seguido de
25 hidrazina (0,309 ml, 9,85 mmol) y DIEA (3,44 ml, 19,69 mmol). La reacción se irradió a 150ºC durante 3 h. Después, la mezcla de reacción se concentró para la purificación por cromatografía ultrarrápida (120 g, 50-100%, DCM:MeOH:NH4OH). Las fracciones se combinaron y se concentraron para producir 6-{2-amino-6-[(3R)-3-etil-4morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina (421,5 mg, 1,084 mmol, rendimiento del 44%) en forma de un sólido de color castaño. LC-MS (ES) m/z = 370 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6)  0,87 (t, J = 7,45 Hz, 3H),
30 1,58 -1,82 (m, 2H), 3,04 -3,14 (m, 1H), 3,37 -3,46 (m, 1H), 3,48 -3,55 (m, 1H), 3,83 (d, J = 11,62 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 11,6 Hz, 1H) 3,85-3,91 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 4,08 -4,24 (m, 1H), 4,25 -4,39 (m, 1H), 5,02 (s, 2H), 6,07 (s, 2H), 6,50 (s, 1H), 6,91 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 11,54 (s, 1H).
Intermedio 418 N-[(3R,5R)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-3-piperidinil]-N,3,3-trimetilbutanamida
O N Cl
N N
N
NH2
A [(3R,5R)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-3-piperidinil]metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo (75 mg, 0,211 mmol) en CH2Cl2 (2 ml) se le añadió TFA (2 ml) y la reacción se dejó reposar a temperatura ambiente durante 2 horas. Se añadió tolueno (~15 ml) y la mezcla resultante se evaporó al vacío. Al residuo resultante se le añadieron CH2Cl2 (2 ml) y base de Hunig (0,18 ml, 1,05 mmol) seguido de cloruro de 3,3-dimetilbutanoílo (0,03 ml, 0,21 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante una noche a temperatura ambiente. Se añadió NaHCO3 acuoso saturado (~20 ml) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (~50 ml). La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró para producir el compuesto del título (80 mg). LC-MS (ES) m/z = 354 [M+H]+.
Intermedio 419
N-{(3R,5R)-1-[2-Amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}-N,3,3-trimetilbutanamida
NH2
A N-[(3R,5R)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-3-piperidinil]-N,3,3-trimetilbutanamida (80 mg, 0,23 mmol) y ácido (4-ciano-3-fluorofenil)borónico (49 mg, 0,29 mmol) se le añadieron 1,4-dioxano (4 ml) y NaHCO3 ac. sat. (2 ml) y la mezcla resultante se purgó ("desgasificó") con N2 en un tubo que puede cerrarse herméticamente. Se añadió Pd(Ph3P)4 (26 mg, 0,023 mmol), el tubo se cerró herméticamente, y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se vertió en agua y EtOAc. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: 100% Hexanos hasta EtOAc al 75%/Hexanos) produjo el compuesto del título (84 mg) en forma de un sólido. LC-MS (ES) m/z = 439 [M+H]+.
Ejemplo 225
N-{(3R,5R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}-N,3,3-trimetilbutanamida
NH2 O N
N
NN
H N
N
NH2
A N-{(3R,5R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3-fluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}-N,3,3-trimetilbutanamida (82 mg, 0,187 mmol) en etanol (4 ml) se le añadió hidrazina monohidrato (1 ml, 20,4 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 4 horas a 120ºC en un recipiente cerrado herméticamente. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente, y se vertió en agua (~120 ml). La mezcla acuosa resultante se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron para producir el compuesto del título (36 mg) en forma de un sólido de color blanquecino en forma de una mezcla de rotámeros 3:2. LC-MS (ES) m/z = 451 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 + 1 gota de D2O): 0,98 (m, 12H), 1,41 y 1,52 (m, 1H), 1,87 -2,41 (m, 4H), 2,76 y 2,90 (s, 3H), 2,99 -3,25 (m, 2H), 3,84 -3,99 (m, 1H), 4,01 -4,26 (m, 1H), 4,39 -4,66 (m,
1H), 6,57 -6,62 (s, 1H), 7,50 -7,60 (m, 1H), 7,70 (m, 1H), 7,92 (s, 1H). Intermedio 420 N-Ciclohexil-1-(2,6-dicloro-4-pirimidinil)-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida
5 A una mezcla de 2,4,6-tricloropirimidina (0,18 ml, 1,59 mmol) y N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida (0,5 g, 1,588 mmol) en 1,4-dioxano (15 ml) se le añadió base de Hunig (0,56 ml, 3,18 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante el fin de semana (3 días) a 80ºC en un tubo que puede cerrarse herméticamente. Aproximadamente quedaba 35% del material de partida. La temperatura se elevó a 140ºC, y la mezcla de reacción se agitó a esta temperatura durante 3 horas. La reacción se calentó después durante 1 hora a 160ºC. Como aún quedaba material
10 de partida, la reacción se agitó durante una noche a 140ºC. La mezcla de reacción se vertió en agua y EtOAc. La capa orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: 100% Hexanos a EtOAc al 50% en hexanos) produjo el compuesto del título (239 mg) en forma de un sólido de color blanco, y el regioisómero correspondiente (196 mg) en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 425, 427 [M+H]+.
15 Intermedio 421
1-{6-[3-(Acetilamino)-4-fluoro-1H-indazol-6-il]-2-cloro-4-pirimidinil}-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3
piperidinacarboxamida
O H
F
N CF3 N
O
N
N H
NH N
N
Cl
A N-ciclohexil-1-(2,6-dicloro-4-pirimidinil)-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida (150 mg, 0,353 mmol) y N-acetil
20 N-[1-acetil-4-fluoro-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indazol-3-il]acetamida (142 mg, 0,353 mmol) se le añadieron 1,4-dioxano (12 ml) y NaHCO3 acuoso saturado (6 ml) en un tubo que puede cerrarse herméticamente y la mezcla resultante se purgó con N2. Se añadió Pd(Ph3P)4 (41 mg, 0,035 mmol), el tubo se cerró herméticamente y la mezcla de reacción se agitó durante una noche a 100ºC. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y se vertió en agua. El precipitado resultante se filtró. Al sólido se le añadió EtOAc en el filtro y la solución orgánica se
25 filtró. El filtrado se secó (MgSO4), se filtró y se concentró. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: de CHCl3 al 100% a 90:10:1 de CHCl3:CH3OH:NH4OH) produjo el producto (93 mg) en forma de un sólido de color castaño que contenía una mezcla de dos regioisómeros a partir del acoplamiento cruzado en cualquier cloro del material de partida. El análisis por análisis RMN no fue concluyente para determinar la proporción de los dos posibles regioisómeros. LC-MS (ES) m/z = 582 [M+H]+.
Ejemplo 226 1-[2-Amino-6-(3-amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida F
NH2CF3 N
O
N
N H
NH N
N
NH2
Una mezcla de 1-{6-[3-(acetilamino)-4-fluoro-1H-indazol-6-il]-2-cloro-4-pirimidinil}-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3piperidinacarboxamida (mezcla de regioisómeros) (93 mg, 0,16 mmol) y 1-[2,4-bis(metiloxi)fenil]metanamina (0,1 ml, 0,666 mmol) en 1,4-dioxano (6,00 ml) se agitó durante una noche a 120ºC en un tubo que puede cerrarse herméticamente. Como todavía estaba presente el intermedio cloropirimidina, se añadió más 1-[2,4bis(metiloxi)fenil]metanamina (0,1 ml, 0,666 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a 140ºC y durante 2 horas a 160ºC. La mezcla de reacción se concentró al vacío. Al residuo resultante se le añadió CH3OH (6 ml) seguido de HCl conc. (0,3 ml, 3,60 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 1 hora a 80ºC en un tubo que puede cerrarse herméticamente. El análisis por LCMS indicó la retirada completa del grupo acetato. La mezcla se concentró y el residuo resultante se evaporó del tolueno. Al residuo se le añadió TFA (6,00 ml). Después de 1 hora, la solución se vertió en una solución saturada acuosa de NaHCO3. Se añadió EtOAc y la capa orgánica se separó. La capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc, y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4), se filtraron y se concentraron. La cromatografía ultrarrápida sobre SiO2 (gradiente: 100% CH2Cl2 a CH2Cl2:CH3OH:NH4OH 80:20:2) produjo el producto (49 mg) en forma de un sólido tostado oscuro. Este material era una mezcla de regioisómeros ~ 2:1 como resultado de que el material de partida fuera una mezcla regioisomérica de cloropirimidina. Este material se purificó por purificación por HPLC para separar los regioisómeros.
HPLC Prep
Luna C18(2) 5u 21,2 x 250 mm
A = formiato amónico acuoso 300 mM (pH 4)
B = acetonitrilo
A:B -58:42
20 ml/min
uv 254 nm
muestra 45 mg en 0,9 ml B + 0,9 ml A (añadir un par de gotas de HCO2H para dar
pH 4
inyección única de 45 mg
Se recogieron 2 fracciones principales a los 8 y 16 min. Cada fracción se trató por separado de la siguiente manera: Conc. a 45ºC para dar una suspensión tostada (10 ml). El pH de la capa acuosa se ajustó a 8,5 con NH4OH conc. La capa acuosa se extrajo con 3 x EtOAc; se lavó con H2O, NaCl sat.; se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para dar un sólido. Se secó al alto vacío a 40ºC, 1,5 h.
Recuperación: compuesto del título; 25 mg sólido tostado; HPLC 98,4%
regioisómero; 15 mg sólido tostado; HPLC 99,5%
Datos para el compuesto del título: LC-MS (ES) m/z = 521 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CD3OD):  1,14 -1,46 (m, 5H), 1,59 -1,72 (m, 1H), 1,72 -2,11 (m, 7H), 2,14 -2,26 (m, 1H), 2,37 -2,50 (m, 1H), 3,18 -3,30 (m, 1H), 3,58 -3,73 (m, 1H), 6,63 (s, 1H), 7,22 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 7,68 (s, 1H).
Ejemplo 227 4-(etiloxi)-6-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina
O
N
N
NH
Una solución madre de etóxido sódico en etanol se generó mediante la adición de etanol (10 ml) a NaH (204 mg,
5 8,48 mmol), seguido de agitación a temperatura ambiente durante 30 min. A un vial de 20 ml se le añadieron 2,6difluoro-4-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}benzonitrilo (293 mg, 0,848 mmol), N,Ndimetilformamida (DMF) (1 ml) y etanol (1,5 ml). La reacción se enfrió a 0ºC y se añadió gota a gota una solución de etóxido sódico en etanol (de una solución madre 0,848 M) (1,101 ml, 0,933 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 90 min. Se añadieron cloruro de amonio (ac., sat., 2 ml) y agua (2 ml) y la mezcla se
10 extrajo con acetato de etilo (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (EtOAc al 0-50% en hexanos, columna de 10 g) para producir un sólido de color blanco que se añadió a un vial de 5 ml para microondas con hidrazina (0,259 ml, 4,48 mmol), DIEA (0,391 ml, 2,239 mmol) y etanol (3 ml). La suspensión resultante se calentó durante 90 min a 150ºC en un reactor de microondas. La mezcla de reacción se concentró y se cargó en seco sobre sílice y se purificó
15 por cromatografía ultrarrápida (MeOH al 0-10% en DCM, columna de 25 g) para producir el compuesto del título (175,4 mg, 0,457 mmol, rendimiento del 54%) en forma de un sólido de color blanquecino. LC-MS(ES) m/z = 384 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6)  1,19 (d, 3H), 1,45 (t, J = 6,95 Hz, 3H), 2,83 (d, J = 4,04 Hz, 3H), 3,05 -3,18 (m, 1H), 3,45 (td, J = 11,75, 2,53 Hz, 1H), 3,56 -3,66 (m, 1H), 3,67 -3,78 (m, 1H), 3,93 (dd, J = 11,12, 3,03 Hz, 1H), 4,11 (d, J = 12,88 Hz, 1H), 4,22 (c, J = 6,99 Hz, 2H), 4,52 (d, J = 4,80 Hz, 1H), 5,00 (s, 2H), 6,35 -6,64 (m, 2H), 6,95
20 (s, 1H), 7,52 (s a, 1H), 11,52 (s, 1H).
Intermedio 422
(3S,6R)-1-[6-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida
F
Se disolvieron (3S,6R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida (100 mg,
25 0,267 mmol) y ácido (4-ciano-3,5-difluorofenil)borónico (73,4 mg, 0,401 mmol) en 1,4-dioxano (2 ml) en un vial de 5 ml que puede cerrarse herméticamente y después se añadió NaHCO3 saturado (1 ml). Se burbujeó gas nitrógeno a través de la mezcla durante 10 min. Después, se añadió Pd(Ph3P)4 (37,1 mg, 0,032 mmol) y se burbujeó gas nitrógeno durante 5 min. más. El vial se tapó y la reacción se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se diluyó con agua (5 ml) y después se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se
30 secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El aceite de color amarillo después se purificó en una a columna Biotage SNAP de 10 g con un gradiente de EtOAc al 0 a 40% en hexano. LC-MS (ES) m/z = 477 [M+H]+.
Intermedio 423
(3S,6R)-1-[6-[4-ciano-3-fluoro-5-(metiloxi)fenil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3piperidinacarboxamida
O
CN O F
N NH2 NH N
5 Se preparó una solución 1 M de metóxido sódico a partir de 55 mg (2,4 mmol) de sodio recién cortado y 2,4 ml de MeOH enfriado con hielo. De esto, se añadieron 0,176 ml a una solución de (3S,6R)-1-[6-(4-ciano-3,5-difluorofenil)2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida (84 mg, 0,176 mmol) en metanol (1 ml). La solución se dejó en agitación durante una noche a temperatura ambiente. La reacción se concentró, después se diluyó con agua (10 ml) y después se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos orgánicos se combinaron, se
10 lavaron con una solución saturada de NaCl, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. El material no se purificó adicionalmente. LC-MS (ES) m/z = 489 [M+H]+.
Ejemplo 228
(3S,6R)-1-[6-[3-amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3
piperidinacarboxamida
O NH2
N O
N H
N
NH N
NH2
Se disolvió (3S,6R)-1-[6-[4-ciano-3-fluoro-5-(metiloxi)fenil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3piperidinacarboxamida (96 mg, 0,196 mmol) con etanol (2 ml) en un vial de 5 ml que puede cerrarse herméticamente y después se añadió hidrazina (0,185 ml, 5,89 mmol). La reacción se tapó y se calentó durante una noche a 100ºC. La reacción se concentró y después se disolvió en 1 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condiciones de HPLC: 20 Gilson de acceso abierto usando el programa Unipoint con una Varian Polaris 5u C18(2) 100A, de 50 X 30,00 mm 5 micrómetros. 10 minutos de ejecución (35 ml/min, ACN al 28%/H2O, TFA al 0,1% hasta ACN al 53%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo reduciendo la presión hasta que la mayor parte del MeCN se retiró y después se añadió NaHCO3 acuoso saturado (10 ml). Después, la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). La capa orgánica se combinó, se lavó con NaCl saturado, se 25 secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. Después, se transfirió a un vial de 40 ml y después se añadió agua y después se liofilizó para aislar 36 mg del sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 501 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6)  ppm 1,17 (d, J = 7,07 Hz, 3 H) 1,67 (d, J = 3,54 Hz, 2 H) 1,75 (dd, J = 12,88, 3,03 Hz, 1 H) 1,80 1,93 (m, 1 H) 2,31 -2,42 (m, 1 H) 2,83 (d, J = 4,55 Hz, 3 H) 2,98 (s a, 1 H) 3,94 (s, 3 H) 4,31 (dd, J = 9,73, 5,94 Hz, 2 H) 4,78 (s a, 1 H) 5,03 (s a, 2 H) 6,56 (s a, 2 H) 6,94 (s a, 1 H) 7,28 (d, J = 7,07 Hz, 2 H) 7,31 -7,37 (m, 2 H) 7,51 (s
30 a, 1 H) 8,50 (t, J = 5,94 Hz, 1 H)
Intermedio 424
metil[(3R,5R)-5-metil-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo O N
O
N
H
En un frasco agitador Parr se añadió Pd/C tipo Degussa (0,922 g, 0,433 mmol) seguido de una solución de metil[(3R,5R)-5-metil-1-(fenilmetil)-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (1,38 g, 4,33 mmol) en etanol (20 ml). El frasco agitador Parr se puso después sobre la máquina agitadora Parr y el frasco se lavó abundatemente con N2 y después se presurizó el frasco con hidrógeno a 0,21 MPa (30 psi). La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se filtró y se concentró para aislar 860 mg de producto en bruto en forma de un aceite transparente, que se usó sin purificación. LC-MS (ES) m/z = 229 [M+H]+.
Intermedio 425
[(3R,5R)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-3-piperidinil]metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo
Cl N
N
N
N O
O NH2
En un vial de 20 ml que puede cerrarse herméticamente se añadió metil[(3R,5R)-5-metil-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (443 mg, 1,940 mmol), 4,6-dicloro-2-pirimidinamina (477 mg, 2,91 mmol), trietilamina (0,541 ml, 3,88 mmol) y etanol (10 ml) y después se tapó. Después, la mezcla se calentó a 100ºC durante una noche. Después del calentamiento, el sólido se disolvió en solución. La reacción se concentró y después se cargó en una columna Biotage SNAP de 25 g con un gradiente de 0 a 55% con EtOAc en hexano. Las fracciones con el producto deseado se combinaron para aislar 678 mg del producto deseado en forma de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 356 [M+H]+.
Ejemplo 229
{(3R,5R)-1-[2-amino-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo
N N
NN
H N
N O
O NH2
En un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml se añadió [(3R,5R)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-3piperidinil]metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo (105 mg, 0,295 mmol), 3-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2il)-1H-indazol (152 mg, 0,590 mmol), 1,4-Dioxano (2 ml) y NaHCO3 saturado (1 ml). La mezcla se burbujeó después con N2 durante 10 minutos y después se añadió Pd(Ph3P)4 (34,1 mg, 0,030 mmol) y la mezcla se burbujeó durante 5 minutos más. La mezcla se tapó después y se calentó a 100ºC durante una noche. A la reacción se le añadió agua (5 ml) y después se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). La capa orgánica se combinó y después se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y después se disolvió en 2 ml de DMSO y se purificó por HPLC (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando el programa Trilution con una columna Sunfire 5u C18(2) 100A. de 50 X 30,00 mm 5 micrómetros. 7,3 minutos de ejecución (47 ml/min, 25%ACN/H2O, TFA al 0,1% hasta ACN al 50%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del MeCN. Al agua que quedaba se le añadió NaHCO3 saturado. Después, se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica se combinó y se lavó con NaCl saturado, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. Después,
se transfirió la muestra a un vial de 40 ml con MeCN y después se añadió agua y se liofilizó para aislar 92 mg de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 452 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 0,97 (d, J = 7,07 Hz, 3 H) 1,41 (s, 9 H) 1,46 -1,55 (m, 1 H) 1,88 -1,98 (m, 1 H) 2,09 -2,18 (m, 1 H) 2,51 (s, 3 H) 2,76 (s, 3 H) 3,09 (t, J = 11,37 Hz, 1 H) 3,18 (dd, J = 12,88, 2,78 Hz, 1 H) 3,94 -4,13 (m, 2 H) 4,37 (s a, 1 H) 6,14 (s a, 2 H) 6,65 (s, 1 H) 7,67 -7,80 (m, 2 H) 8,15 (s, 1 H) 12,77 (s, 1 H)
Intermedio 426
{(3R,5R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo
N Cl N
NN
OO NH
En un vial de 20 ml que puede cerrarse herméticamente se añadió metil[(3R,5R)-5-metil-3-piperidinil]carbamato de 1,1-dimetiletilo (420 mg, 1,839 mmol), 4,6-dicloro-N-metil-2-pirimidinamina (491 mg, 2,76 mmol), trietilamina (0,513 ml, 3,68 mmol) y etanol (10 ml) y después se tapó. Después, la mezcla se calentó a 100ºC durante una noche. Después del calentamiento, el sólido se disolvió en solución. La reacción se concentró y después se cargó en una columna Biotage SNAP de 25 g con un gradiente de 0 a 45% con EtOAc en hexano. Las fracciones con el producto deseado se combinaron para aislar 604 mg de un sólido de color blanco. LC-MS (ES) m/z = 370 [M+H]+.
Ejemplo 230
metil{(3R,5R)-5-metil-1-[2-(metilamino)-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1dimetiletilo
N N
NN
H NN
OO NH
En un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml se añadió {(3R,5R)-1-[6-cloro-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo (113 mg, 0,305 mmol), 3-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan-2-il)-1H-indazol (158 mg, 0,611 mmol), 1,4-dioxano (2 ml) y NaHCO3 saturado (1 ml). La mezcla se burbujeó después con N2 durante 10 minutos y después se añadió Pd(Ph3P)4 (35,3 mg, 0,031 mmol) y la mezcla se burbujeó durante 5 minutos más. La mezcla se tapó después y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró y después se disolvió en 2 ml de DMSO y después se purificó por HPLC: (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando el programa Trilution con una columna Sunfire 5u C18(2) 100A. de 50 X 30,00 mm 5 micrómetros. 7,3 minutos de ejecución (47 ml/min, ACN al 20%/H2O, TFA al 0,1% hasta ACN al 40%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del MeCN. Al agua que quedaba se le añadió NaHCO3 saturado y después se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). La capa orgánica se combinó, se lavó con una solución saturada de NaCl, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. Después, se transfirió a un vial de 40 ml con MeCN después se añadió agua y se liofilizó para aislar 52 mg de un sólido de color blanco rosáceo. LC-MS (ES) m/z = 466 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6)  ppm 0,97 (d, J = 6,82 Hz, 3 H) 1,40 (s, 9 H) 1,47 -1,57 (m, 1 H) 1,90 -2,01 (m, 1 H) 2,10 -2,18 (m, 1 H) 2,50 (d, J = 2,02 Hz, 3 H) 2,76 (s, 3 H) 2,84 (d, J = 4,29 Hz, 3 H) 3,08 -3,23 (m, 2 H) 3,98 -4,12 (m, 2 H) 4,36 (s a, 1 H) 6,55 (s a, 1 H) 6,65 (s, 1 H) 7,70 -7,75 (m, 1 H) 7,75 -7,81 (m, 1 H) 8,18 (s a, 1 H) 12,76 (s, 1 H)
Intermedio 427
{(3R,5R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo
F CN
N
F
N N
N O
O NH2
En un vial que puede cerrarse herméticamente de 5 ml se añadió [(3R,5R)-1-(2-amino-6-cloro-4-pirimidinil)-5-metil-3piperidinil]metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo (105 mg, 0,295 mmol), ácido (4-ciano-3,5-difluorofenil)borónico (108 mg, 0,590 mmol), 1,4-dioxano (2 ml) y NaHCO3 saturado (1 ml). La mezcla se burbujeó después con N2 durante 10 minutos y después se añadió Pd(Ph3P)4 (34,1 mg, 0,030 mmol) y la mezcla se burbujeó durante 5 minutos más. La mezcla se tapó después y se calentó a 100ºC durante una noche. A la reacción se le añadió agua (5 ml) después se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). La capa orgánica se combinó y después se secó sobre MgSO4, se filtró, se concentró y después se cargó con una columna Biotage SNAP de 10 g con un gradiente del 0 al 50% de EtOAc en hexano durante 30 minutos para aislar 106 mg de un aceite de color amarillo. LC-MS (ES) m/z = 459 [M+H]+.
Ejemplo 231
{(3R,5R)-1-[2-amino-6-(3-amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1dimetiletilo
F NH2
N N
NN
H N
N O
O NH2
Se disolvió {(3R,5R)-1-[2-amino-6-(4-ciano-3,5-difluorofenil)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1dimetiletilo (106 mg, 0,231 mmol) en etanol (3 ml) en un vial de 5 ml que puede cerrarse herméticamente, después se añadió hidrazina monohidrato (0,340 ml, 6,94 mmol). Después, la solución se tapó y se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se concentró y después se disolvió en 2 ml de DMSO y después se purificó por HPLC: (condiciones de HPLC: Gilson de acceso abierto usando el programa Trilution con una columna Sunfire 5u C18(2) 100A. de 50 X 30,00 mm 5 micrómetros. 7,3 minutos de ejecución (47 ml/min, ACN al 20%/H2O, TFA al 0,1% hasta ACN al 40%/H2O, TFA al 0,1%) con detección UV a 254 nm). Las fracciones del producto se combinaron y el volumen se redujo para retirar la mayor parte del MeCN. Al agua que quedaba se le añadió NaHCO3 saturado y después se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). Los extractos orgánicos se combinaron y se lavaron con una solución saturada de NaCl, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. Después, se transfirió a un vial de 40 ml con MeCN y después se añadió agua y se liofilizó para aislar 89 mg de un sólido de color blanquecino. LC-MS (ES) m/z = 471 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6)  ppm 0,96 (d, J = 7,07 Hz, 3 H) 1,41 (s, 9 H) 1,50 (d, J = 12,13 Hz, 1 H) 1,88 -1,97 (m, 1 H) 2,08 -2,17 (m, 1 H) 2,76 (s, 3 H) 3,04 -3,13 (m, 1 H) 3,17 (dd, J = 13,01, 2,91 Hz, 1 H) 3,96 -4,10 (m, 2 H) 4,36 (s a, 1 H) 5,26 (s, 2 H) 6,12 (s a, 2 H) 6,64 (s, 1 H) 7,35 (d, J = 12,38 Hz, 1 H) 7,82 (s, 1 H) 11,90 (s, 1 H).
Ejemplo 232 -Composición de Cápsula
Una forma de dosificación oral para administrar la presente invención se produce llenando una cápsula de gelatina dura convencional de dos piezas con los ingredientes en las proporciones mostradas en la Tabla I, a continuación.
Tabla I
INGREDIENTES CANTIDADES 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-fenil-2,4-pirimidinadiamina 7 mg (Compuesto del Ejemplo 1) Lactosa 53 mg Talco 16 mg Estearato de Magnesio 4 mg
Ejemplo 233 -Composición Parenteral Inyectable Una forma inyectable para administrar la presente invención se produce agitando un 1,5% en peso de 6-[2-Amino-6
5 (4-tiomorfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina (Compuesto del Ejemplo 4) en un 10% en volumen de propilenglicol en agua. Ejemplo 234 -Composición de Comprimido La sacarosa, el sulfato cálcico dihidrato y un inhibidor de PDK1 como se muestra en la Tabla II a continuación, se
mezclan y granulan en las proporciones mostradas con una solución de gelatina al 10%. Los gránulos húmedos se
10 tamizan, se secan, se mezclan con el almidón, el talco y el ácido esteárico; se tamizan y se comprimen en un comprimido. Tabla II
INGREDIENTES CANTIDADES 6-[2-Amino-6-(4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina 12 mg (Compuesto del Ejemplo 6)
sulfato cálcico dihidrato 30 mg sacarosa 4 mg almidón 2 mg talco 1 mg ácido esteárico 0,5 mg
Actividad Biológica
15 Los ensayos de fosforilación de sustrato se realizaron de la forma siguiente:
La fuente de proteína sustrato
hAKT1 biotinilada: La AKT1 humana (que contiene los restos aminoacídicos 136-480, según está anotado en el número de acceso del National Center for Biotechnology Information (NCBI) AAL57732.1, con una adición N-terminal MetLysLysHis6) se purifica hasta >90% a partir del lisado de expresión de baculovirus mediante resina ProBond
20 quelante de níquel (Invitrogen), Q-Sepharose Fast Flow y cromatografía de exclusión por tamaño Superdex 200. La biotinilación se consiguió usando EZ-Link Sulfo-NHS-LC Biotina (Pierce). Las muestras en HEPES 25 mM, pH 7,5, NaCl 200 mM, DTT 2 mM y glicerol a 30% se almacenaron a -80ºC hasta el uso.
La fuente de enzima:
PDK1: La proteína quinasa 1 dependiente de 3-fosfoinositida humana de longitud completa (hPDK1; número de
25 acceso del National Center for Biotechnology Information (NCBI) AAH39158.1; con una adición N-terminal MetGlyHis6) se purifica a partir de la expresión de baculovirus en células Sf9. Se consigue una pureza de aproximadamente 80% mediante el uso de cromatografía de quelación (Ni-NTA Superflow) y columnas de desalinización. Las muestras en HEPES 25 mM, , NaCl 150 mM, DTT 2,5 mM, Triton a 0,05%, glicerol a 30%, pH 8,0 se almacenan a -80ºC hasta el uso.
30 La fuente de péptido sustrato:
PDktide Biotinilado: El péptido PDKtide biotinilado de 39 aminoácidos (Biotina-Ahx-KTFCGTPEYLAPEVRREPRILSEEEQEMFRDFDYIADWC) se sintetizó por encargo por 21st Century Biochemicals. El péptido tenía una pureza de >95% y se disolvió en agua de calidad HPLC para dar una concentración final de 1,1 mM. La concentración se confirmó mediante análisis de aminoácidos cuantitativo.
Ensayo de Quinasa de Centelleo por Proximidad (LEADseeker) de hpDK1 purificada:
Se realizaron ensayos en placas de microtitulación de 384 pocillos (Greiner, Nº de Catálogo 784075). El volumen de reacción (10 l) contiene en concentraciones finales, MOPS 25 mM (pH 7,5), MgCl2 10 mM, KCl 50 mM, BSA 0,1 mg/ml, ATP 1 M, 33PγATP 3 Ci/ml, DTT 5 mM, CHAPS 1 mM o Tween20 a 0,05%, proteína biotinilada AKT1 0,35 M y hPDK1 10 nM.
Los compuestos, valorados en DMSO, se evaluaron a once concentraciones que variaban de 50 M a 2 pM. Las concentraciones de ensayo final de DMSO no superaban 1%. No se observaron efectos sobre la actividad respecto a los controles sin DMSO para hPDK1 a estas cantidades de DMSO. Se preincubó hPDK1 30 minutos a temperatura ambiente con compuestos antes de iniciar la fosforilación de AKT por adición de sustrato a hPDK1/compuesto. Las reacciones se detuvieron después 3 horas a temperatura ambiente por la adición de EDTA 50 mM, perlas LEADseeker 5 mg/ml (GE Healthcare) en PBS (10 l). Se permitió que las perlas se asentaran durante una noche y se formaron imágenes de las muestras en Viewlux (PerkinElmer).
Los datos para respuestas a concentración de compuestos se representaron como % de Inhibición, calculado con la fórmula de reducción de datos 100*(1-[(U1-C2)/(C1-C2)]), frente a la concentración de compuesto, donde
U es el valor desconocido,
C1 es el valor de control medio obtenido para DMSO solamente, y
C2 es el valor de control medio obtenido para reacciones interrumpidas con EDTA a t = 0.
Los datos se ajustan a la curva descrita por:
y = ((Vmáx * x) / (K + x)) donde
Vmáx es la asíntota superior y
K es la CI50.
Los resultados para cada compuesto se registraron como pCI50 calculada de la forma siguiente:
pCI50 = -Log10(K).
Ensayo de quinasa TR-FRET de hPDK1 purificada:
Se realizaron ensayos en placas de microtitulación de 384 pocillos (Greiner, Nº de Catálogo 784076). El volumen de reacción (10 l) contiene en concentraciones finales, MOPS 25 mM (pH 7,5), MgCl2 10 mM, KCl 50 mM, BSA 0,1 mg/ml, ATP 5 M, DTT 5 mM, CHAPS 1 mM, proteína biotinilada AKT1 0,35 M y hPDK1 0,6-0,9 nM.
Como se ha descrito anteriormente para el protocolo de Centelleo por Proximidad, se preincuba hPDK1 (30 minutos a temperatura ambiente) con compuestos antes de iniciar la fosforilación de AKT1 por adición de sustrato a la mezcla de hPDK1 y compuesto. Las reacciones se interrumpen después de 4-6 horas a temperatura ambiente por adición a concentraciones finales de EDTA 0,02 M, Estreptavidina APC 0,0875 M (PerkinElmer), anticuerpo de AKT1 (fosfo T308) 0,03 M (Abcam Inc.), anticuerpo anti-IgG de conejo marcado con Eu Lance 0,00375 M (PerkinElmer). La unión de anticuerpo alcanza el equilibrio en 30 minutos antes de que la señal se lea en un Lector Multimarcador EnVision 2103 (PerkinElmer). Las señales de APC se normalizaron con la señal del Europio. El procesamiento de datos es el mismo que el descrito para el ensayo de Centello por Proximidad con la excepción de la generación del control “C2” por adición de tampón sin hPDK1 a pocillos de control a t = 0 en lugar de EDTA.
Ensayo de Quinasa de Centelleo por Proximidad (LEADseeker) de hPDK1 purificada usando péptido PDKtide biotinilado:
Se realizaron ensayos en placas de micro titulación de 384 pocillos (Greiner, Nº de Catálogo 784075). El volumen de reacción (10 l) contiene en concentraciones finales, MOPS 25 mM (pH 7,5), MgCl2 10 mM, KCl 50 mM, BSA 0,1 mg/ml, ATP 1 M, 33PγATP 3 Ci/ml, DTT 5mM, CHAPS 0,5 mM, péptido PDKtide biotinilado 1 M y hPDK1 0,5 nM.
Los compuestos, valorados en DMSO, se evaluaron a once concentraciones que variaban de 25 M a 0,4 pM. Las concentraciones de ensayo finales de DMSO no superaban 1%. No se observaron efectos sobre la actividad respecto a controles sin DMSO para hPDK1 a estas cantidades de DMSO. La hPDK1 se preincuba 30 minutos a temperatura ambiente con compuestos antes de iniciar la fosforilación del péptido PDKtide biotinilado por adición de sustrato a hPDK1/compuesto. Las reacciones se interrumpen después 4 horas a temperatura ambiente por adición de EDTA 50 mM, perlas LEADseeker 5 mg/ml (GE Healthcare) en PBS (10 l). Se deja que las perlas se asienten durante una noche y se forman imágenes de las muestras en Viewlux (PerkinElmer).
Los datos para respuestas a concentración de compuesto se representaron como % de Inhibición, calculado con la
fórmula de reducción de datos 100*(1-[(U1-C2)/(C1-C2)]), frente a la concentración de compuesto, donde
U es el valor desconocido,
C1 es el valor de control medio obtenido para DMSO solamente, y
C2 es el valor de control medio obtenido para reacciones interrumpidas con EDTA a t = 0.
Los datos se ajustan a la curva descrita por:
y = ((Vmáx * x) / (K + x)) donde
Vmáx es la asíntota superior y
K es la CI50.
Los resultados para cada compuesto se registraron como pCI50 calculada de la forma siguiente:
pCI50 = -Log10(K).
Abreviaturas usadas:
Ahx, ácido aminohexanoico
APC, Aloficocianina
ATP, trifosfato de adenosina
BSA, albúmina de suero bovino
CHAPS, 3-[3-Cloramidopropil)Dimetilammonio]-1-Propanosulfonato
DMSO, dimetilsulfóxido
DTT, Ditiotreitol
EDTA, ácido etilendiaminotetraacético
Eu, Europio
HEPES, ácido N-(2-hidroxietil)piperazin-N’-2-etanosulfónico
HPLC, cromatografía líquida de alto rendimiento/presión
KCl, Cloruro potásico
M, molar
mg, miligramo
MgCl2, cloruro de magnesio
ml, mililitro
mM, milimolar
MOPS, ácido 3-morfolinopropanosulfónico
NaCl, Cloruro sódico
NCBI, National Center for Biotechnology Information
nM, nanomolar
PBS, solución salina tamponada con fosfato PDK1, Proteína Quinasa 1 Dependiente de 3-Fosfoinositida humana
pM, picomolar
Tris-HCl, clorhidrato de tris(hidroximetil)aminometano
M, micromolar
ELISA de Fosfo-AKT (S473, T308, AKT Total) y fosfo-RSK
Se sembraron células PC3 (ATCC, Manassas, VA) en placas de fondo plano de 96 pocillos (Corning, Lowell, MA) a una densidad de 15.000 células/pocillo en medio RPMI 1640 complementado con FBS a 10%. Las células se incubaron a 37ºC, CO2 a 5% durante 18-20 h. Los compuestos (disueltos en DMSO a 100%) se diluyeron en una dilución de 3 veces de 11 puntos en DMSO. Las soluciones madre de dilución del compuesto se diluyeron adicionalmente en RPMI 1640 con FBS a 10% y se añadieron a cada pocillo de células. Se usó DMSO sin compuesto en pocillos de control. La concentración final de DMSO en cada pocillo era de 0,15%. Después de 6 horas a 37ºC las células se lavaron con PBS frío (sin calcio ni magnesio) y se lisaron en tampón de lisis (Meso Scale Discovery, Gaithersburg, MD) complementado con 1 comprimido de inhibidor de proteasas/10 ml (Roche, Indianapolis, IN), NaF 10 mM e inhibidor de fosfatasa Sigma 1 y 2 200 l/10 ml (Sigma Aldrich, St. Louis, MO) durante 30 min a 4ºC. Todos los lavados se realizaron en un lavador de placas Bio Tek ELx405 (Bio Tek Instruments, Winooski, VT).
Se prepararon placas de ELISA (Meso Scale Discovery; AKT Duplex, cat. N41100B-1; fosfo AKT, cat. N411CAB-1; RSK, cat. N41ZB-1) por adición de tampón de bloqueo (Bloqueante A a 3% diluido en tampón de lavado (Meso Scale Discovery) para ensayo de dúplex de AKT y ensayos de fosfo AKT; Bloqueante A a 5%/Bloqueante B a 1% en solución salina tamponada con Tris para RSK) durante 1 hora y se lavaron con tampón de lavado. Los lisados se transfirieron a pocillos de ensayo y se incubaron durante una noche a 4ºC. Después del lavado con tampón de lavado, se añadió tampón de detección (Bloqueante A a 1% en tampón de lavado para dúplex de AKT y fosfo AKT o Bloqueante A a 1% en TBS para RSK) con anticuerpos apropiados. La detección de dúplex de AKT y fosfo AKT se realizó usando anticuerpos de detección sulfo-marcados (Meso Scale Discovery). La detección de fosfo-RSK se realizó secuencialmente con anti-fosfo-RSK1 (S221)/RSK2 (S227) (R&D systems, Minneapolis, MN, cat. AF892) y anticuerpo de cabra anti-conejo sulfo-marcado (cat R32AB-1; Meso Scale Discovery). Las placas se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente y se lavaron con tampón de lavado. Las placas se leyeron en un SECTOR Imager 6000 (Meso Scale Discovery) usando el programa informático Workbench (Meso Scale Discovery) después de la adición de tampón de lectura (Meso Scale Discovery) a cada pocillo. Para el análisis, las señales de fosfo-AKT (S473) se normalizaron para AKT total, mientras que las señales de fosfo-AKT (T308) y fosfo-RSK se analizaron sin normalización. Todos los valores se expresaron como porcentaje de los controles tratados con DMSO. Se determinaron las CI50 a partir de las curvas de inhibición usando el programa informático XLfit4 (IDBS, Guildford, Reino Unido).
Ensayos de Proliferación Celular
Se sembraron células en placas a 5000 células/pocillo en medio de cultivo completo en placas de 96 pocillos capaces de lectura superior blancas (Thermo-Fisher, Waltham, MA) y se dejó que se adhirieran durante una noche en un incubador humidificador a 37ºC complementado con CO2 al 5%. Se usaron placas por duplicado para cada línea celular. Los compuestos se diluyeron en dimetilsulfóxido (DMSO) y se añadieron directamente a cada pocillo para dar un intervalo de concentración de compuesto final de 10 pM a 30 M en una serie de dilución de 3 veces. La concentración final de DMSO era de 0,3% por pocillo. Después las células se devolvieron al incubador durante 72 h. Se añadió reactivo Cell Titer Glo (Promega, Madison, WI) a cada pocillo y las placas se balancearon suavemente durante 2 min. Se dejó que se desarrollara la señal quimioluminiscente a temperatura ambiente durante 10 minutos, después de los cuales se midió la luminiscencia usando un lector de placas Envision (Wallac/Perkin Elmer, Waltham, MA). Se expresó el crecimiento celular como porcentaje de las células en los pocillos de control de DMSO y la CI50 para cada compuesto se determinó a partir de las curvas de inhibición usando el programa informático XLfit4 (IDBS, Guildford, Reino Unido).
Los compuestos de la invención se ensayaron para determinar la actividad frente a PDK1 en uno o más de los ensayos anteriores.
Los compuestos de los Ejemplos 1 a 229 se ensayaron en general de acuerdo con los ensayos enzimáticos de PDK1 anteriores y en al menos un procesamiento experimental presentaban un valor de CI50  1,0 M frente a PDK1 de longitud completa.
Los compuestos de los ejemplos 14, 46, 71, 75, 177, 181, 184, 199 y 200 se ensayaron en general de acuerdo con los ensayos enzimáticos de PDK1 anteriores y en al menos un procesamiento experimental presentaba un valor de CI50 < 150 nM frente a la PDK1 de longitud completa. En al menos un procesamiento experimental el Ejemplo 177 presentaba un valor de CI50 igual a 25 nM frente a la PDK1 de longitud completa usando el ensayo de sustrato PDKtide.
Los compuestos de los ejemplos 2, 10, 38, 51, 61 y 74 se ensayaron en general de acuerdo con los ensayos enzimáticos de PDK1 anteriores y en al menos un procesamiento experimental presentaban una CI50 < 100 nM frente a la PDK1 de longitud completa. En al menos un procesamiento experimental el Ejemplo 61 presentaba un valor de CI50 igual a 10 nM frente a PDK1 de longitud completa usando el ensayo de sustrato PDKtide.
Los compuestos de los ejemplos 111, 120, 154, 203, 209, 211, 212, 214, 217 y 221 se ensayaron en general de acuerdo con los ensayos enzimáticos de PDK1 anteriores y en al menos un procesamiento experimental presentaban una CI50 < 50 nM frente a la PDK1 de longitud completa. En al menos un procesamiento experimental el Ejemplo 214 presentaba un valor de CI50 igual a 2,0 nM frente a la PDK1 de longitud completa usando el ensayo de sustrato PDKtide.
Los compuestos de los ejemplos 67, 78, 80, 83, 85, 142, 149, 161 y 173 se ensayaron en general de acuerdo con los ensayos enzimáticos de PDK1 anteriores y en al menos un procesamiento experimental presentaban una CI50 < 20 nM frente a la PDK1 de longitud completa. En al menos un procesamiento experimental el Ejemplo 173 presentaba un valor de CI50 igual a 7,9 nM frente a la PDK1 de longitud completa usando el ensayo de sustrato PDKtide.
De los Ejemplos 1 a 229, 146 se ensayaron en general en al menos un procesamiento experimental para inhibición de la fosforilación de AKT en T308 en células PC-3 como se ha descrito anteriormente. De los 146 ejemplos ensayados, 86 compuestos presentaban una CI50 < 5 M. En al menos un procesamiento experimental los Ejemplos 49, 67, 77, 78, 81, 83, 86, 121, 150, 161, 176, 212 y 221 presentaban un valor de CI50 < 1,0 M.
Aunque las realizaciones preferidas de la invención se ilustran mediante lo anterior, debe entenderse que la invención no se limita a las instrucciones exactas descritas en este documento y que se reservan los derechos para todas las modificaciones que se incluyen en el alcance de las siguientes reivindicaciones.
Se prepararon placas de ELISA (Meso Scale Discovery; AKT Duplex, cat. N41100B-1; fosfo AKT, cat. N411CAB-1; RSK, cat. N41ZB-1) por adición de tampón de bloqueo (Bloqueante A a 3% diluido en tampón de lavado (Meso Scale Discovery) para ensayo de dúplex de AKT y ensayos de fosfo AKT; Bloqueante A a 5%/Bloqueante B a 1% en solución salina tamponada con Tris para RSK) durante 1 hora y se lavaron con tampón de lavado. Los lisados se transfirieron a pocillos de ensayo y se incubaron durante una noche a 4ºC. Después del lavado con tampón de lavado, se añadió tampón de detección (Bloqueante A a 1% en tampón de lavado para dúplex de AKT y fosfo AKT o Bloqueante A a 1% en TBS para RSK) con anticuerpos apropiados. La detección de dúplex de AKT y fosfo AKT se realizó usando anticuerpos de detección sulfo-marcados (Meso Scale Discovery). La detección de fosfo-RSK se realizó secuencialmente con anti-fosfo-RSK1 (S221)/RSK2 (S227) (R&D systems, Minneapolis, MN, cat. AF892) y anticuerpo de cabra anti-conejo sulfo-marcado (cat R32AB-1; Meso Scale Discovery). Las placas se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente y se lavaron con tampón de lavado. Las placas se leyeron en un SECTOR Imager 6000 (Meso Scale Discovery) usando el programa informático Workbench (Meso Scale Discovery) después de la adición de tampón de lectura (Meso Scale Discovery) a cada pocillo. Para el análisis, las señales de fosfo-AKT (S473) se normalizaron para AKT total, mientras que las señales de fosfo-AKT (T308) y fosfo-RSK se analizaron sin normalización. Todos los valores se expresaron como porcentaje de los controles tratados con DMSO. Se determinaron las CI50 a partir de las curvas de inhibición usando el programa informático XLfit4 (IDBS, Guildford, Reino Unido).
Ensayos de Proliferación Celular
Se sembraron células en placas a 5000 células/pocillo en medio de cultivo completo en placas de 96 pocillos capaces de lectura superior blancas (Thermo-Fisher, Waltham, MA) y se dejó que se adhirieran durante una noche en un incubador humidificador a 37ºC complementado con CO2 al 5%. Se usaron placas por duplicado para cada línea celular. Los compuestos se diluyeron en dimetilsulfóxido (DMSO) y se añadieron directamente a cada pocillo para dar un intervalo de concentración de compuesto final de 10 pM a 30 M en una serie de dilución de 3 veces. La concentración final de DMSO era de 0,3% por pocillo. Después las células se devolvieron al incubador durante 72 h. Se añadió reactivo Cell Titer Glo (Promega, Madison, WI) a cada pocillo y las placas se balancearon suavemente durante 2 min. Se dejó que se desarrollara la señal quimioluminiscente a temperatura ambiente durante 10 minutos, después de los cuales se midió la luminiscencia usando un lector de placas Envision (Wallac/Perkin Elmer, Waltham, MA). Se expresó el crecimiento celular como porcentaje de las células en los pocillos de control de DMSO y la CI50 para cada compuesto se determinó a partir de las curvas de inhibición usando el programa informático XLfit4 (IDBS, Guildford, Reino Unido).
Los compuestos de la invención se ensayaron para determinar la actividad frente a PDK1 en uno o más de los ensayos anteriores.
Los compuestos de los Ejemplos 1 a 229 se ensayaron en general de acuerdo con los ensayos enzimáticos de PDK1 anteriores y en al menos un procesamiento experimental presentaban un valor de CI50  1,0 M frente a PDK1 de longitud completa.
Los compuestos de los ejemplos 14, 46, 71, 75, 177, 181, 184, 199 y 200 se ensayaron en general de acuerdo con los ensayos enzimáticos de PDK1 anteriores y en al menos un procesamiento experimental presentaba un valor de CI50 < 150 nM frente a la PDK1 de longitud completa. En al menos un procesamiento experimental el Ejemplo 177 presentaba un valor de CI50 igual a 25 nM frente a la PDK1 de longitud completa usando el ensayo de sustrato PDKtide.
Los compuestos de los ejemplos 2, 10, 38, 51, 61 y 74 se ensayaron en general de acuerdo con los ensayos enzimáticos de PDK1 anteriores y en al menos un procesamiento experimental presentaban una CI50 < 100 nM frente a la PDK1 de longitud completa. En al menos un procesamiento experimental el Ejemplo 61 presentaba un valor de CI50 igual a 10 nM frente a PDK1 de longitud completa usando el ensayo de sustrato PDKtide.
Los compuestos de los ejemplos 111, 120, 154, 203, 209, 211, 212, 214, 217 y 221 se ensayaron en general de acuerdo con los ensayos enzimáticos de PDK1 anteriores y en al menos un procesamiento experimental presentaban una CI50 < 50 nM frente a la PDK1 de longitud completa. En al menos un procesamiento experimental el Ejemplo 214 presentaba un valor de CI50 igual a 2,0 nM frente a la PDK1 de longitud completa usando el ensayo de sustrato PDKtide.
Los compuestos de los ejemplos 67, 78, 80, 83, 85, 142, 149, 161 y 173 se ensayaron en general de acuerdo con los ensayos enzimáticos de PDK1 anteriores y en al menos un procesamiento experimental presentaban una CI50 < 20 nM frente a la PDK1 de longitud completa. En al menos un procesamiento experimental el Ejemplo 173 presentaba un valor de CI50 igual a 7,9 nM frente a la PDK1 de longitud completa usando el ensayo de sustrato PDKtide.
De los Ejemplos 1 a 229, 146 se ensayaron en general en al menos un procesamiento experimental para inhibición de la fosforilación de AKT en T308 en células PC-3 como se ha descrito anteriormente. De los 146 ejemplos ensayados, 86 compuestos presentaban una CI50 < 5 M. En al menos un procesamiento experimental los Ejemplos 49, 67, 77, 78, 81, 83, 86, 121, 150, 161, 176, 212 y 221 presentaban un valor de CI50 < 1,0 M.
Aunque las realizaciones preferidas de la invención se ilustran mediante lo anterior, debe entenderse que la invención no se limita a las instrucciones exactas descritas en este documento y que se reservan los derechos para todas las modificaciones que se incluyen en el alcance de las siguientes reivindicaciones.

Claims (17)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un compuesto de Fórmula (III):
    R42
    R43
    N
    R41
    N H
    N
    N
    R44
    (III) en la que: R41 se selecciona entre el grupo que consiste en:
    hidrógeno, metilo, trifluorometilo, etilo, propilo, isopropilo, terc-butilo, sec-butilo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, metoxi, etoxi, isopropoxi, tiometilo, tioetilo, -N(R55)(R56), donde R55 es H y R56 se seleccionan entre: fenilo, etilo, propilo, isopropilo, terc-butilo,
    ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, alquilo C1-C6, y alquilo C1-C6 opcionalmente sustituido con fenilo o ciclohexilo, amino, fenilo, fenilo sustituido con uno a tres R47, tiazolilo, tienilo, furanilo,
    piridilo, azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piranilo, hexahidro-1H-azepina, heterocicloalquilo sustituido con uno a tres R48, donde el heterocicloalquilo se selecciona entre: azetidinilo,
    pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piranilo y hexahidro-1H-azepina; R42 se selecciona entre el grupo que consiste en:
    hidrógeno,
    halo,
    furanilo,
    -NH-(CH2)n-R61, donde R61 se selecciona entre: hidrógeno, trifluorometilo, fenilo, fenilo sustituido con uno a
    tres R47, fenoxi, fenoxi sustituido con uno a tres R47, heteroarilo y heteroarilo sustituido con uno a tres R47, y
    n es 1, 2 ó 3, y -O-(CH2)n-R61, donde R61 se selecciona entre: hidrógeno, trifluorometilo, fenilo, fenilo sustituido con uno a tres R47, fenoxi, fenoxi sustituido con uno a tres R47, heteroarilo y heteroarilo sustituido con uno a tres R47, y n es 1, 2 ó 3,
    R43 se selecciona entre: hidrógeno, -NH2 y alquilo C1-C3; y R44 se selecciona entre: hidrógeno, NH2 y NH-alquilo C1-C3; donde, cada R48 se selecciona independientemente entre:
    hidroxi,
    ciano,
    oxo,
    flúor,
    cloro,
    trifluorometilo,
    alquilo C1-C4,
    cicloalquilo C3-C7
    pirazolilo,
    imidazolilo,
    azabenzoimidazolilo,
    benzoimidazolilo,
    benzoimidazolilo sustituido con uno a tres R47,
    1H-benzoimidazol-2-ilo,
    4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol-2-ilo,
    5-cloro-1H-benzoimidazol-2-ilo, 5-fluoro-1H-benzoimidazol-2-ilo, 5-metil-1H-benzoimidazol-2-ilo, 5-metoxi-1H-benzoimidazol-2-ilo, 1H-imidazo[4,5-c]piridin-2-ilo, 1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ilo, 4-(1,1-dimetiletil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-fenil-1H-imidazol-2-ilo, 4-metil-5-fenil-1H-imidazol-2-ilo, 4-(2-clorofenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(3-clorofenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(4-clorofenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(3-metoxifenil)-1H-imidazol-2-ilo, 4-(4-metoxifenil)-1H-imidazol-2-ilo, hidroxialquilo C1-C4, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3, -C(O)N(CH3)2, -C(O)NR800R801, donde R800 es hidrógeno y R801 se selecciona entre: etilo, propilo, isopropilo, butilo, sec
    butilo, isopentilo, ciclopentilo, ciclohexilo, 2-metilciclohexilo, 3-metilciclohexilo, 4-metilciclohexilo, 4
    etilciclohexilo, 4-hidroxiciclohexilo, (1R)-1-ciclohexiletilo, fenilo, 4-fluorofenilo, 2-metilfenilo, 3-metilfenilo, 4
    metilfenilo, 2-fluorofenilo, 3-fluorofenilo, 3,4-difluorofenilo, 4-clorofenilo, 3-clorofenilo, 3-metoxifenilo, 4
    metoxifenilo, piranilo, feniletilo, bencilo, (1S)-1-feniletilo, (1R)-1-feniletilo, 1-metil-1-feniletilo, 2
    metoxibencilo, 3-metoxibencilo, 4-metoxilbencilo, 2-fluorobencilo, 3-fluorobencilo, 4-metilbencilo, 4
    fluorobencilo, 4-piridinilmetilo, 1-metil-1H-pirazol-5-ilo y 1,3-dimetil-1H-pirazol-5-ilo,
    -
    OC(O)NHR810, donde R810 se selecciona entre: metilo, etilo, isopropilo, ciclobutilo, terc-butilo, ciclopentilo,
    ciclohexilo, fenilo y bencilo, y -NHC(O)OR901, donde R901 se selecciona entre: metilo, etilo, isopropilo, ciclobutilo, terc-butilo, ciclopentilo, ciclohexilo y bencilo; y
    cada R47 se selecciona independientemente entre:
    halo,
    ciano,
    hidroxi,
    amino,
    alquilamino C1-C4,
    dialquilamino C1-C4,
    alquilo C1-C3 y
    alcoxi C1-C3;
    o una sal del mismo, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  2. 2. Un compuesto seleccionado entre: 6-{2-Amino-6-[2-(fenilmetil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(2-fluorofenil)etil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-{2-[2-(metiloxi)fenil]etil}-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(3-clorofenil)etil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-metil-N4-(2-feniletil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(3-fluorofenil)etil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(2-clorofenil)etil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(2-metilfenil)etil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[2-(3-metilfenil)etil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[1-(fenilmetil)ciclopropil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-metil-N4-[(1R)-1-metil-2-feniletil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(2,3-dihidro-1H-inden-1-il)-2,4-pirimidinadiamina; 4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]benzamida; N-({(2R,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)benzamida; N-({(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)bencenosulfonamida; N-({(2R,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)-2,2-dimetilpropanamida;
    ({(2R,5R)-4-[2-am!no-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)carbamato de metilo; N-({(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)metanosulfonamida; N-({(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metil)ciclohexanosulfonamida; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-metil-N4-fenil-2,4-pirimidinadiamina; Fenilcarbamato de {(2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metilo; N-{(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}benzamida; N-{(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}-2-fenilacetamida; (3S,6R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(ciclohexilmetil)-6-metil-3-piperidinacarboxamida; 6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(2R,5R)-2-(aminometil)-5-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-((2R,5R)-5-metil-2-{[(fenilmetil)amino]metil}-4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-[6-{(2R,5R)-2-[(Dimetilamino)metil]-5-metil-4-morfolinil}-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina; N4-Ciclopentil-6-[6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(1-pirrolidinil)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina; 3-1(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}-1,3-oxazolidin-2-ona; 3-{(3R,5R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}-1,3-oxazolidin-2-ona; 6-[6-[(2R)-2-Etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(metiltio)-1H-indazol-3-amina; {(3R,5R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo; N-{(3R,5R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}-N-3,3-trimetilbutanamida; {(3R,5R)-1-[2-amino-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo; {(3R,5R)-5-metil-1-[2-(metilamino)-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1
    dimetiletilmetilo; {(3R,5R)-1-[2-amino-6-(3-amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1dimetiletilo;
    o una sal de los mismos, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  3. 3. Un compuesto de Fórmula (III) como se describe en la reivindicación 1, seleccionado de: 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-fenil-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(fenilmetil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-[2-Amino-6-(metiltio)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(4-tiomorfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2,4-pirimidinadiamina; 6-[2-Amino-6-(4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-etil-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(1-metiletil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-[2-Amino-6-(1-piperidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-ciclopentil-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-ciclohexil-2,4-pirimidinadiamina; 6-[2-Amino-6-(1-azetidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-[2-(Metilamino)-6-(1-piperidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-6-metil-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-6-fenil-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-(2-feniletil)-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-(3-fenilpropil)-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[2-(feniloxi)etil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(5-metil-1H-pirazol-4-il)propil]-1H-indazol-3,4-diamina; 2-(3-{[3-Amino-6-(2-amino-4-pirimidinil)-1H-indazol-4-il]amino}propil)fenol; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(2-fluorofenil)propil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(4-fluorofenil)propil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(4-piridinil)propil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(3,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)propil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(feniloxi)propil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-N4-[3-(3-fluorofenil)propil]-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-[(3-fenilpropil)oxi]-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-{[3-(feniloxi)propil]oxi}-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-4-pirimidinil)-4-[(2,2,2-trifluoroetil)oxi]-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(4-morfolinil)-4-pirimidinil]-N4-(2-feniletil)-1H-indazol-3,4-diamina; 6-[2-Amino-6-(4-morfolinil)-4-pirimidinil]-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(dimetilamino)-4-pirimidinil]-N4-(2-feniletil)-1H-indazol-3,4-diamina; 6-[3-Amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-N4-etil-2,4-pirimidinadiamina; 6-(2-Amino-6-metil-4-pirimidinil)-N4-(3-fenilpropil)-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(2-amino-6-metil-4-pirimidinil)-N4-(2-feniletil)-1H-indazol-3,4-diamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(ciclohexilmetil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-{2-Amino-6-[2-(metiloxi)fenil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[2-(1-metiletil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(2-metil-1-pirrolidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(2-feniletil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-[2-Amino-6-(hexahidro-1H-azepin-1-il)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(metiloxi)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(2-ciclopropil-1-pirrolidinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; Cis-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida; Cis-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-[(2-clorofenil)metil]-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-ciclopropil-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(3-fenilpropil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(1,1-dimetil-2-feniletil)-2,4-pirimidinadiamina; 1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-pirrolidinacarboxamida;
    (2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida; {1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo; N-{1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}benzamida; 6-{2-Amino-6-[2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(1,1-dimetiletil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-(2-metilpropil)-2,4-pirimidinadiamina; 6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-N4-propil-2,4-pirimidinadiamina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-2-morfolinacarboxamida; (3S,6R)-1-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-N-Ciclohexil-1-[6-(1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[6-(1H-Indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-6-Metil-1-[2-(metilamino)-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-N-Ciclohexil-6-metil-1-[2-(metilamino)-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-6-Metil-1-[2-(metilamino)-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3
    piperidinacarboxamida;
    (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3piperidinacarboxamida; cis-1-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-3-pirrolidinacarboxamida; 4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-morfolinacarboxamida; 6-(2-Amino-6-{2-[4-(4-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[2-(4,5,6,7-tetrahidro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[2-(4-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-6-{2-[4-(3-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(2-{4-[4-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-3-piperidinacarboxamida; 6-{2-Amino-6-[2-(1H-imidazo[4,5-c]piridin-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-[2-Amino-6-(2-{4-[3-(metiloxi)fenil]-1H-imidazol-2-il}-4-morfolinil)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-(2-Amino-6-{2-[5-(metiloxi)-1H-benzoimidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[2-(4-metil-5-fenil-1H-imidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[2-(5-cloro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[2-(5-fluoro-1H-benzoimidazol-2-il)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-fenil-3-piperidinacarboxamida; {(1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de cis-1,1-dimetiletilo; {(3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de fenilmetilo; Cis-1-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclopentil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida; Cis-1-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-6-(trifluorometil)-3
    piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida; (3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-fenil-3-piperidinacarboxamida; {1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de cis-ciclopentilo; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-fluorofenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(3-metilfenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(3,4-difluorofenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-metilfenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(2-fluorofenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(3-fluorofenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(2-metilfenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-clorofenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[4-(metiloxi)fenil]-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[3-(metiloxi)fenil]-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(3-clorofenil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-piridinilmetil)-3-piperidinacarboxamida;
    (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(1-metil-1H-pirazol-5-il)-3-piperidinacarboxamida; (3S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-metil-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-{[4-(metiloxi)fenil]metil}-3
    piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclopentil-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[(1R)-1-ciclohexiletil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[(3-fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-[(4-metilfenil)metil]-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[(4-fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(3-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(2-feniletil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(4-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida; 6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 4-(Etiloxi)-6-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; {(3R,6S)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo; {(3R,6S)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo; {(2S,5R)-4-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-2-morfolinil}metanol; (2S,5R)-4-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida; (2S,5R)-4-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-metil-2-morfolinacarboxamida; (2S,5R)-4-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida; 6-(2-Amino-6-{2-[4-(2-clorofenil)-1H-imidazol-2-il]-4-morfolinil}-4-pirimidinil)-1H-indazol-3-amina; 4-Fluoro-6-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-(Metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; N4-Metil-6-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3,4-diamina; 4-(2-Furanil)-6-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-[(1-metiletil)oxi]-1H-indazol-3-amina; (2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-etil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida; (2S,5R)-4-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida; (2S,5R)-4-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-etil-N-fenil-2-morfolinacarboxamida; (2S,5R)-4-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-5-etil-2-morfolinacarboxamida; (2S,5R)-4-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-etil-N-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-fluoro-1H-indazol-3-amina; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N4-metil-1H-indazol-3,4-diamina; 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-(Metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 4-(Etiloxi)-6-{2-(metilamino)-6-[(2R)-2-metil-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-[(1S)-1-feniletil]-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-{[2-(metiloxi)fenil]metil}-3
    piperidinacarboxamida;
    (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-{[3-(metiloxi)fenil]metil}-3piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-[(2-fluorofenil)metil]-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-[(1R)-1-feniletil]-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(1-metil-1-feniletil)-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-(4-etilciclohexil)-6-metil-3-piperidinacarboxamida; (3S,6R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(2-metilciclohexil)-3-piperidinacarboxamida; 6-[6-[(2R,5R)-2,5-Dimetil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-(1-metiletil)-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; {(3R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo; {(3R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato 1,1-dimetiletilo; {(3R)-1-[6-[3-Amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1,1
    dimetiletilo; 6-{2-(Metilamino)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina;
    6-{2-(Metilamino)-6-[(2S)-2-(trifluorometil)-1-pirrolidinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; N-{(3R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}benzamida; {(3R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de fenilmetilo; {(3R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclopentilo; {(3R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclobutilo; {(3R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de ciclohexilo; {(3R,5R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo; ((3R,5R)-1-{2-amino-6-[3-amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-4-pirimidinil}-5-metil-3-piperidinil)carbamato de 1,1
    dimetiletilo; {(3R,5R)-1-[6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo; {(3R,5R)-1-[6-[3-amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de
    1,1-dimetiletilo; {(3R)-1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-3-piperidinil}carbamato de 1-metiletilo; 6-[6-[(2R)-2-Etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 4-(Etiloxi)-6-[6-[(2R)-2-etil-1-pirrolidinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-1H-indazol-3-amina; y 1-[2-amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-L-prolinamida;
    o una sal de los mismos, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos. 4.Un compuesto de Fórmula (III) como se describe en la reivindicación 1 seleccionado entre: 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina; 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-etil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-4-(metiloxi)-1H-indazol-3-amina; 1-[2-amino-6-(3-amino-4-fluoro-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-(trifluorometil)-3-piperidinacarboxamida; 4-(etiloxi)-6-{2-(metilamino)-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina; (3S,6R)-1-[6-[3-amino-4-(metiloxi)-1H-indazol-6-il]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-6-metil-N-(fenilmetil)-3
    piperidinacarboxamida;
    o una sal de los mismos, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
  4. 5. Un compuesto de Fórmula (III) como se describe en la reivindicación 1 seleccionado entre: 6-{2-Amino-6-[(3R)-3-metil-4-morfolinil]-4-pirimidinil}-1H-indazol-3-amina;
    o una sal del mismo, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
  5. 6. Un compuesto de Fórmula (III) como se describe en la reivindicación 1 seleccionado entre: (3S,6R)-1-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-N-ciclohexil-6-metil-3-piperidinacarboxamida;
    o una sal del mismo, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
  6. 7. Un compuesto de Fórmula (III) como se describe en la reivindicación 1 seleccionado entre: (2S,5R)-4-[6-(3-Amino-1H-indazol-6-il)-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-5-metil-N-(fenilmetil)-2-morfolinacarboxamida;
    o una sal del mismo, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
  7. 8. Un compuesto de Fórmula (III) como se describe en la reivindicación 1 seleccionado entre: 6-[6-[(3R)-3-Etil-4-morfolinil]-2-(metilamino)-4-pirimidinil]-4-(etiloxi)-1H-indazol-3-amina;
    o una sal del mismo, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
  8. 9. Un compuesto de Fórmula (III) como se describe en la reivindicación 1 seleccionado entre:
    {(3R,5R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}carbamato de 1,1-dimetiletilo;
    o una sal del mismo, incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.
  9. 10. Un compuesto de Fórmula (III) como se describe en la reivindicación 2 seleccionado entre: {(3R,5R)-1-[2-Amino-6-(3-amino-1H-indazol-6-il)-4-pirimidinil]-5-metil-3-piperidinil}metilcarbamato de 1,1-dimetiletilo;
    o una sal del mismo incluyendo una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  10. 11.
    Una composición farmacéutica que comprende un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 y un excipiente farmacéuticamente aceptable.
  11. 12.
    Una combinación farmacéutica que comprende cantidades terapéuticamente eficaces de:
    a) un compuesto o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable como se reivindica en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10; y b) al menos un agente anti-neoplásico.
  12. 13.
    Un compuesto o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, o una combinación como se reivindica en la reivindicación 12, para uso en terapia médica.
  13. 14.
    Un compuesto o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, o una combinación como se reivindica en la reivindicación 12, para uso en el tratamiento de o la disminución de la gravedad de cáncer.
  14. 15.
    Un compuesto o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para uso en el tratamiento de diabetes, rechazo de trasplantes/injertos, psoriasis o colitis.
  15. 16.
    El uso de un compuesto o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, o de una combinación como se reivindica en la reivindicación 12, en la preparación de un medicamento para el tratamiento de o la disminucion de la gravedad de cáncer.
  16. 17.
    El uso de un compuesto o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en la preparación de un medicamento para el tratamiento de diabetes, rechazo de trasplantes/injertos, psoriasis o colitis.
  17. 18.El compuesto para uso según la reivindicación 14 o el uso según la reivindicación 16, donde dicho cáncer se selecciona de: cerebral (gliomas), glioblastomas, síndrome de Bannayan-Zonana, enfermedad de Cowden, enfermedad de Lhermitte-Duclos, cáncer de mama, de colon, de cabeza y cuello, de riñón, de pulmón, de hígado, melanoma, ovárico, pancreático, de próstata, sarcoma y de tiroides.
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