ES2449072T3

ES2449072T3 - Borocarbonos de dipirrometenos de boro insaturados

Info

Publication number: ES2449072T3
Application number: ES06709313.8T
Authority: ES
Inventors: Gilles Ulrich; Raymond Ziessel; Christine Goze
Original assignee: Centre National de la Recherche Scientifique CNRS; Universite Louis Pasteur Strasbourg I
Current assignee: Centre National de la Recherche Scientifique CNRS; Universite Louis Pasteur Strasbourg I
Priority date: 2005-02-15
Filing date: 2006-02-14
Publication date: 2014-03-18
Anticipated expiration: 2026-02-14
Also published as: US20080102534A1; WO2006087459A2; EP1848725A2; EP1848725B1; FR2882056A1; US7897786B2; FR2882056B1; WO2006087459A3; JP2008530063A; JP5171267B2

Abstract

Compuestos que responden a la fórmula general (I)**Fórmula** en la que: - cada uno de los sustituyentes R1, R2, R3, R4, R5, R6 y R7 se selecciona independientemente de los otros deentre el grupo constituido por H, los grupos -L-H, los grupos -G y los grupos -L-G, - o bien los dos sustituyentes R3 y R4 forman juntos un grupo divalente Z34 y/o los dos sustituyentes R6 y R7forman juntos un grupo divalente Z67, siendo dichos grupos divalentes tales que forman con los átomos decarbono a los que están unidos, una estructura seleccionada de entre el grupo constituido por un anillo o dosanillos condensados, teniendo cada anillo 5 o 6 átomos y comprendiendo unos átomos de carbono y comomáximo dos heteroátomos seleccionados de entre N, O y S; - L es un grupo de unión constituido por un enlace simple, o por uno o varios segmentos seleccionados deentre los grupos alquileno y los grupos alquenileno lineales o ramificados que comprenden eventualmente ensu cadena uno o varios átomos de oxígeno que forman unos grupos éter, los alquinilenos, y los arilenos quecomprenden un solo núcleo o que comprenden varios núcleos condensados o no condensados; - G es un grupo funcional seleccionado de entre: - los grupos polares seleccionados de entre los grupos amida, sulfonato, sulfato, fosfato, amoniocuaternario, hidroxilo, fosfonato, y los segmentos de polietilenóxido, - los grupos donantes de electrones o electroatractores seleccionados de entre los grupos ciano, nitro,fluoroalquilo, perfluoroalquilo, amida, nitrofenilo, triazino sustituido, sulfonamida, alquenilo y alquinilo, ysiendo el grupo de unión L seleccionado entonces de entre los segmentos alquenileno o alquinileno, quetienen de 2 a 4 átomos de carbono, - los grupos funcionales reactivos que permiten el injerto de dicho compuesto sobre una molécula biológica,y los grupos capaces de reaccionar con un compuesto orgánico formando un enlace fuerte o débil condicho compuesto, y - seleccionados de entre H, los grupos trialquil-sililo y una función reticulable cuando el compuesto esun polímero, - seleccionados de entre el éster succinimidilo, el éster sulfosuccinimidilo, el isotiocianato, el isocianato,la yodoacetamida, la maleimida, los halosulfonilos, las fosforamiditas, los alquilimidatos, losarilimidatos, los halogenoácidos, las hidrazinas sustituidas, las hidroxilaminas sustituidas, lascarbodiimidas cuando el compuesto es una molécula biológica, o - seleccionados de entre los grupos amino, ureido, hidroxilo, sulfhidrilo, carboxilo, carbonilo y étercorona, cuando el compuesto es un compuesto orgánico, - los grupos capaces de reaccionar con un compuesto inorgánico formando un enlace fuerte o débil condicho compuesto y seleccionados de entre grupos carboxilato cuando el compuesto inorgánico es unóxido de titanio, una zeolita o la alúmina, un tiol o un tioéter cuando el compuesto inorgánico es un metalo un siloxano cuando el compuesto inorgánico es la sílice o una superficie oxidada de silicio.

Description

Borocarbonos de dipirrometenos de boro insaturados.

La presente invencion se refiere a borocarbonos de dipirrometenos de boro insaturados, y a su utilizacion para el analisis por fluorescencia o para la electroluminiscencia.

Los marcadores fluorescentes son actualmente muy utilizados para las dosificaciones cualitativas y cuantitativas en los ambitos de la inmunologia, de la biologia molecular, del diagnostico medico o para los chips ADN.

Una de las propiedades requeridas para que un compuesto quimico pueda ser utilizado como marcador fluorescente es un desplazamiento de Stokes elevado, siendo el desplazamiento de Stokes la diferencia de energia entre la excitacion y la emision del compuesto. La utilizacion de marcadores de bajo desplazamiento de Stokes necesita el empleo de filtros especificos para eliminar la luz de excitacion residual, lo que reduce la sensibilidad de la medicion.

Entre los numerosos compuestos de la tecnica anterior utilizables como marcadores fluorescentes, se pueden citar en particular los difluoruros de dipirrometenboro (designados a continuacion por DFMB). El documento USno4.774.339 describe unos compuestos DFMB que tienen unas propiedades de colorante y que contienen unos grupos funcionales capaces de formar un producto fluorescente estable con los grupos funcionales de moleculas biologicas o de polimeros, siendo dichas moleculas detectadas por sus propiedades de absorcion y de fluorescencia. El documento US no 5.187.288 describe unos compuestos DFMB que tienen una absorcion maxima a longitudes de onda superiores a aproximadamente 525 nm, que son neutros electricamente, fotoestables y en general altamente fluorescentes. El documento US no 5.248.782 describe unos compuestos DFMB que tienen unas propiedades de colorante y que comprenden unos sustituyentes heteroarilo. El documento US no 5.274.113 describe unos compuestos DFMB que son unos colorantes fluorescentes que tienen una absorcion maxima a longitudes de onda superiores a aproximadamente 525 nm, y que presentan una reactividad quimica frente a unos acidos nucleicos, unas proteinas, unos hidratos de carbono y otros compuestos biologicos. El documento US no 5.338.854 describe unos compuestos que son unos analogos fluorescentes de acidos grasos derivados de difluoruro de dipirrometenboro, y que tienen una absorcion maxima a longitudes de onda superiores a aproximadamente 480 nm. El documento US no 5.451.663 describe unos compuestos que son unos colorantes fluorescentes que tienen una absorcion maxima a longitudes de onda superiores a aproximadamente 525 nm, y que presentan una reactividad quimica frente a unos acidos nucleicos, unas proteinas, unos hidratos de carbono, y otros compuestos biologicos. El documento US no 4.916.711 describe un procedimiento de produccion de luz laser con la ayuda de compuestos DFMB. El documento US no 5.189.029 describe un metodo de tratamiento de tumores cancerosos con la ayuda de tres compuestos particulares DFMB. El documento US no 5.446.157 menciona una familia de compuestos DFMB. El documento US no 5.852.191 describe unos dihalugenuros de dipirrometenboro presentes como unos colorantes altamente fluorescentes y absorbentes de la luz que emiten en la region del azul, y que pueden ser utilizados en diferentes aplicaciones biologicas y no biologicas. El documento US no 5.446.157 menciona otra familia de compuestos DFMB.

Entre los compuestos evocados anteriormente, la mayoria tienen unas propiedades de fluorescencia. Sin embargo,

-: 1

presentan todos un desplazamiento de Stokes relativamente bajo (Δν ≈ 500 a 600 cm), lo que hace que, cuando son utilizados como marcadores, su sensibilidad no es optima debido a la utilizacion de un filtro.

Los presentes inventores han encontrado que la sustitucion de por lo menos uno de los atomos de fluor presentes en el boro de los compuestos de tipo difluoruro de dipirrometenboro por un sustituyente apropiado, permite obtener unos compuestos que presentan un desplazamiento de Stokes aumentado de manera sustancial con respecto a los compuestos equivalentes bifluorados, teniendo dichos compuestos por lo tanto una sensibilidad claramente mejorada cuando son utilizados como marcadores para el analisis por fluorescencia o para la electroluminiscencia.

El objetivo de la presente invencion es proporcionar unos compuestos que tienen un desplazamiento de Stokes mejorado, un alto rendimiento cuantico de fluorescencia y unos coeficientes muy altos de extincion molar, y en los que la longitud de onda de excitacion y la longitud de onda de emision pueden ser controladas. Dichos compuestos estan particularmente adaptados para una utilizacion como marcador fluorescente o para la electroluminiscencia.

Los compuestos segun la presente invencion responden a la formula general (I)

en la que:

• cada uno de los sustituyentes R1, R2, R3, R4, R5, R6 y R7 se selecciona, independientemente de los otros, de

entre el grupo constituido por H, los grupos -L-H, los grupos -G y los grupos -L-G, 5

•: bien los dos sustituyentes R3 y R4 forman juntos un grupo divalente Z34 y/o los dos sustituyentes R6 y R7 forman juntos un grupo divalente Z67, siendo dichos grupos divalentes tales que forman con los átomos de carbono a los que están unidos, una estructura seleccionada de entre el grupo constituido por un anillo o dos anillos condensados, teniendo cada anillo 5 o 6 átomos y comprendiendo unos átomos de carbono y como máximo dos heteroátomos seleccionados de entre N, O y S;

•: L es un grupo de unión constituido por un enlace simple, o por uno o varios segmentos seleccionados de entre los alquilenos y los alquenilenos lineales o ramificados que comprenden eventualmente en su cadena uno o varios átomos de oxígeno que forman unos grupos éter, los alquilenos, y los arilenos que comprenden

15 un solo núcleo o que comprenden varios núcleos condensados o no condensados;

• G es un grupo funcional seleccionado de entre:

-: los grupos polares seleccionados de entre los grupos amida, sulfonato, sulfato, fosfato, amonio cuaternario, hidroxilo, fosfonato, y los segmentos de polietilenóxido,

-: los grupos donantes de electrones o electroatractores seleccionados de entre los grupos ciano, nitro, fluoroalquilo, perfluoroalquilo, amida, nitrofenilo, triazino sustituido, sulfonamida, alquenilo y alquinilo, y siendo el grupo de unión L seleccionado entonces de entre los segmentos alquenileno o alquinileno que

25 tienen de 2 a 4 átomos de carbono,

-: los grupos funcionales reactivos que permiten el injerto de dicho compuesto sobre una molécula biológica, y los grupos capaces de reaccionar con un compuesto orgánico formando un enlace fuerte o débil con dicho compuesto, y

-: seleccionados de entre H, los grupos trialquil-sililo y una función reticulable cuando el compuesto es un polímero,

-: seleccionados de entre el éster succinimidilo, el éster sulfosuccinimidilo, el isotiocianato, el isocianato,

35 la yodoacetamida, la maleimida, los halosulfonilos, las fosforamiditas, los alquilimidatos, los arilimidatos, los halogenoácidos, las hidrazinas sustituidas, las hidroxilaminas sustituidas, las carbodiimidas cuando el compuesto es una molécula biológica, o

-: seleccionados de entre los grupos amino, ureido, hidroxilo, sulfhidrilo, carboxilo, carbonilo y éter corona cuando el compuesto es un compuesto orgánico,

-: los grupos capaces de reaccionar con un compuesto inorgánico formando un enlace fuerte o débil con dicho compuesto y seleccionados de entre grupos carboxilato cuando el compuesto inorgánico es un óxido de titanio, una zeolita o la alúmina, un tiol o un tioéter cuando el compuesto inorgánico es un metal,

45 o un siloxano cuando el compuesto inorgánico es la sílice o una superficie oxidada de silicio,

• Los sustituyentes S1 y S2 representan independientemente el uno del otro un grupo seleccionado de entre el

grupo definido para los sustituyentes R1 a R7; o un grupo que responde a la fórmula -C≡C-L'-A en la que L' es un enlace simple o un grupo seleccionado de entre el grupo definido para L, y A es

-: un grupo cromóforo seleccionado de entre:

-: los grupos arilo que tienen un núcleo aromático que lleva eventualmente unos sustituyentes;

55 - los grupos arilo que tienen por lo menos dos núcleos condensados, y que llevan eventualmente por lo menos un sustituyente;

-: los grupos que tienen unas propiedades de colorante,

-: un grupo funcional capaz de fijarse sobre una molécula biológica seleccionada de entre el grupo constituido por el éster succinimidilo, el éster sulfosuccinimidilo, el isotiocianato, el isocianato, la yodoacetamida, la maleimida, los halosulfonilos, las fosforamiditas, los alquilimidatos, los arilimidatos, los halogenoácidos, las hidrazinas sustituidas, las hidroxilaminas sustituidas y las carbodiimidas,

-: un grupo funcional capaz de fijarse sobre un compuesto inorgánico seleccionado de entre una función carboxilato, tiol, tioéter y siloxano,

-: un grupo funcional capaz de fijarse sobre un compuesto polímero, siendo dicho grupo funcional seleccionado de entre H, los trialquil-sililos, una función reticulable, o

5 -un grupo funcional capaz de fijarse sobre un compuesto orgánico o una sal orgánica, siendo dicho grupo funcional seleccionado de entre amino, ureido, hidroxilo, sulfhidrilo, carboxilo, carbonilo o éter corona;

caracterizado porque por lo menos uno de los sustituyentes S1 y S2 es un grupo -C≡C-L'-A, en el que A es un grupo cromóforo.

10 Las propiedades de fluorescencia son conferidas a las moléculas de la invención esencialmente por el anillo central de 6 átomos que comprende la secuencia -N-B-N-.

La elección de los sustituyentes R1 a R7 (designados colectivamente, llegado el caso, a continuación por R1) permite

15 modificar las propiedades del compuesto, tales como, por ejemplo, la longitud de onda de emisión de fluorescencia, el rendimiento cuántico de fluorescencia, la solubilidad y el momento dipolar, por la elección del grupo de unión L y/o del grupo terminal H o G.

El grupo de unión L está constituido preferentemente por un enlace simple, o por un segmento alquileno que tiene

20 de 1 a 10 átomos de carbono, más particularmente de 1 a 6 átomos de carbono, y/o por un segmento fenileno, y/o por un segmento alquinileno que tiene de 2 a 4 átomos de carbono, y/o por un segmento alquenileno que tiene de 2 a 4 átomos de carbono, y/o por un segmento poliéter [por ejemplo un segmento poli(óxido de etileno)] que tiene de 1 a 12 átomos de oxígeno.

25 El grupo funcional terminal G está destinado a conferir al compuesto las propiedades requeridas. Se puede seleccionar de entre:

• Los grupos polares que aumentan la solubilidad del compuesto en agua (por ejemplo los grupos amida,

sulfonato, sulfato, fosfato, amonio cuaternario, hidroxilo, fosfonato, polioxietileno); 30

• Los grupos donantes de electrones y los grupos electroatractores que mueven las longitudes de onda de absorción y de emisión de la molécula fluorescente (por ejemplo los grupos ciano, nitro, fluoroalquilo, perfluoroalquilo, amida, nitrofenilo, triazino sustituido, sulfonamida, alquenilo y alquinilo), entendiéndose que en este caso, el grupo de unión L se selecciona de entre los segmentos alquileno o alquinileno que tienen de

35 2 a 4 átomos de carbono.

• Los grupos funcionales reactivos que permiten el injerto del compuesto de la invención sobre una molécula biológica, formando un compuesto marcado que permitirá detectar y cuantificar un compuesto dado presente en un medio (por ejemplo, el compuesto obtenido por injerto de un compuesto según la invención sobre un

40 anticuerpo permitirá detectar el antígeno correspondiente);

• Los grupos funcionales capaces de reaccionar con un compuesto orgánico o un compuesto inorgánico a detectar en un medio, formando un enlace fuerte (covalente o iónico) o débil (enlace hidrógeno) con dicho compuesto a detectar.

45 Los sustituyentes S1 y S2 son designados a continuación colectivamente por Si, llegado el caso.

Un sustituyente Si en el que el grupo terminal A es un grupo cromóforo tiene por efecto permitir la excitación de la molécula en las longitudes de onda próximas al sustituyente cromóforo A, que se selecciona preferentemente de

50 entre los sustituyentes cromóforos que tienen una longitud de onda próxima a la ultravioleta, lo que aumenta altamente el desplazamiento de Stokes. Este efecto estará acentuado si los dos sustituyentes Si llevan un grupo terminal cromóforo.

En un modo de realización, uno por lo menos de los sustituyentes Si es un grupo -C≡C-L'-A, en el que L' es un

55 enlace simple o un segmento alquileno que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, o un segmento poliéter que tiene de 1 a 12 átomos de carbono, y A representa un grupo cromóforo seleccionado de entre:

• los grupos arilo que tienen un núcleo aromático que lleva eventualmente unos sustituyentes (por ejemplo el p

toluilo, el estirenilo, el piridinilo, los oligopiridinilos (en particular el bipiridinilo y el terpiridinilo), el tienilo, o el 60 pirrolilo),

• los grupos arilo que tienen por lo menos dos núcleos condensados (tales como, por ejemplo, el naftilo, le pirenilo, el antracenilo; el fenantrenilo, el quinolilo, el fenantronilo, el perilenilo, el fluorenilo, el carbazolilo y el acridinilo), llevando dichos grupos eventualmente por lo menos un sustituyente (seleccionado por ejemplo de

65 entre el grupo constituido por los grupos sulfonato, amino, nitro, hidroxi, éter y halógeno);

• los grupos que tienen unas propiedades de colorante, tal como por ejemplo, los grupos cumarinilo, hidroxicumarinilo, alcoxicumarinilo, trisulfonatopirenilo, cianinas, estirilpiridinio, naftalimidinilo o fenilfenantridio.

Cuando un compuesto según la invención está destinado a ser fijado sobre otro compuesto, uno por lo menos de los sustituyentes Si es un grupo -C≡C-L'-A, o uno por lo menos de los sustituyentes Ri es un grupo -L-G, en los que A o G es un grupo que permite fijar el compuesto de la invención sobre dicho otro compuesto. En un modo de realización preferido, L' o L es un enlace simple o un alquileno que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, o un

10 segmento poliéter que tiene de 1 a 12 átomos de carbono.

Si un solo grupo Si es del tipo -C≡C-L'-A, el segundo grupo Si se selecciona ventajosamente de entre los grupos arilo mononucleares que llevan eventualmente un sustituyente, y los grupos arilo que comprenden por lo menos dos núcleos condensados.

15 Cuando el compuesto de la invención está destinado a ser fijado sobre un compuesto polímero, el grupo A o el grupo G se selecciona preferentemente de entre H, los trialquil-sililos, o una función reticulable tal como por ejemplo un grupo metacrilato, vinilo, estirilo, anilino, pirrolilo, tiofenilo, furilo, isocianato, o epóxido. El polímero puede ser por ejemplo un poliestireno, un poliacrilato, un polimetacrilato, una poliamida, un poliuretano, un poliepóxido, un

20 poli(óxido de etileno), un poli(cloruro de vinilo), o un polímero natural tal como una celulosa, un látex o una fibra textil natural.

Cuando un compuesto de la invención está destinado a ser fijado sobre una molécula biológica, el grupo A o el grupo G se selecciona preferentemente de entre el grupo constituido por el éster succinimidilo, el éster

25 sulfosuccinimidilo, el isotiocianato, el isocianato, la yodoacetamida, la maleimida, los halosulfonilos, las fosforamiditas, los alquilimidatos, los arilimidatos, los halogenoácidos, las hidrazinas sustituidas, las hidroxilaminas sustituidas, las carbodiimidas. La molécula biológica puede ser, por ejemplo, una proteína, un nucleótido o un anticuerpo.

30 Un grupo funcional A o G capaz de interactuar con un compuesto orgánico o una sal metálica, de los cuales se desea detectar la presencia y determinar la cantidad en un medio, es un grupo funcional capaz de formar un enlace fuerte (enlace covalente o iónico) o débil (enlace hidrógeno) con dicho compuesto a detectar. Como ejemplo de tales grupos, se pueden citar los grupos amino, ureido, hidroxilo, sulfhidrilo, carboxilo, carbonilo o éter corona. Un grupo éter corona permite en particular detectar unos iones alcalinos.

35 Un compuesto de la invención puede ser destinado a ser fijado sobre un compuesto inorgánico, en particular para la realización de dispositivos ópticos u optoelectrónico (por ejemplo unos diodos electroluminiscentes o unos dispositivos fotovoltaicos). El compuesto inorgánico puede ser por ejemplo una sílice, una alúmina, una zeolita, un metal, el silicio o un óxido de titanio. El grupo A o el grupo G es, en este caso, seleccionado de entre los grupos

40 funcionales capaces de formar unos enlaces fuertes con unos materiales inorgánicos. Por ejemplo, una función carboxilato permite el injerto sobre unos óxidos de titanio, unas zeolitas o la alúmina); un grupo tiol o un grupo tioéter permite la fijación del compuesto de la invención sobre un metal (por ejemplo Au o Ag); un grupo siloxano permite la fijación sobre la sílice y sobre la superficie oxidada de silicio.

45 Cuando un compuesto según la invención está destinado a una utilización que se basa en sus propiedades de fluorescencia o de luminiscencia, se prefieren muy particularmente los compuestos que comprenden por lo menos un sustituyente Si que lleva un grupo terminal A cromóforo, y por lo menos un sustituyente Si que lleva una función de injerto, o por lo menos un sustituyente Ri que lleva una función de injerto.

50 Una familia particular de compuestos según la invención comprende los compuestos que responden a la fórmula (I) que son simétricos, es decir R2 y R5 son idénticos, R3 y R6 son idénticos, R4 y R7 son idénticos, S1 y S2 son idénticos.

55 Otra familia particular de compuestos responde a la fórmula general (I) en la que los dos sustituyentes de cada pentaciclo forman juntos un birradical. Estos compuestos pueden estar representados por la fórmula (III) siguiente:

en la que los sustituyentes R8i y R9j se seleccionan, independientemente el uno del otro, de entre el grupo definido para los sustituyentes R1 a R7.

5 Tales compuestos pueden ser obtenidos a partir de los numerosos indoles conocidos por el experto en la materia del campo y disponibles en el comercio.

De manera general, un compuesto (I) según la presente invención se obtiene a partir del difluoruro de

10 dipirrometenboro correspondiente, que responde a una fórmula (I') idéntica a la fórmula (I), representando S1 y S2 cada uno F. Si los sustituyentes R1 a R8 deseados no pueden ser obtenidos directamente a partir del dipirrometenboro (I'), el compuesto (I) está modificado por unas reacciones apropiadas, que están al alcance del experto en la materia.

15 Un compuesto (I) disimétrico se obtiene también a partir de difluoruro de dipirrometenboro (I') correspondiente. En este caso, (I') puede ser obtenido por reacción de un ceto-pirrol con un pirrol en presencia de un ácido (por ejemplo HBr o el ácido trifluoroacético (TFA) según el esquema de reacción siguiente, para el cual se describe, en particular en el documento US-4,774,339 citado anteriormente, un modo de realización detallado.

20 se somete (I') después a la acción de un reactivo apropiado para sustituir los átomos F por los sustituyentes deseados. El reactivo se puede seleccionar de entre los compuestos organometálicos (por ejemplo un compuesto organomagnesiano u organolítico), en un disolvente anhidro (por ejemplo THF), a una temperatura apropiada, entre -20°C y 40°C. X es un átomo de halógeno. Para la preparación de un compuesto (I) que tiene dos Si idénticos, se utilizan dos equivalentes de compuesto organometálico de S, Si-MX. Para la preparación de un compuesto (I) que

25 tiene dos Si diferentes, se utiliza una mezcla 1/1 de dos compuestos organometálicos S1-MX y S2-MX, y el producto deseado se separa mediante cromatografía.

Un compuesto (II) simétrico se puede obtener a partir del difluoruro de dipirrometenboro (II') correspondiente, obtenido él mismo a partir del pirrol apropiado según el esquema de reacción siguiente:

30 Un procedimiento análogo se describe en el documento US no 5.189.029 y en el documento US no 5.446.157. Consiste en hacer reaccionar el pirrol con R1COCl en un disolvente apropiado (por ejemplo el dicloroetano o el tolueno), y después en hacer reaccionar el hidrocloruro de pirrometeno obtenido en el mismo disolvente con un eterato de trifluoroboro en presencia de una base para obtener el difluoruro de dipirrometenboro (II'). Se somete

5 después (II') a la acción de un reactivo apropiado para sustituir los átomos F por los sustituyentes deseados. El reactivo es de la misma naturaleza que el utilizado en la etapa correspondiente del procedimiento de preparación de los compuestos (I) simétricos y las condiciones de reacción son similares.

Según sea simétrico o disimétrico, un compuesto (III) se obtiene a partir del pirrol o de los dos pirroles apropiados, 10 en los que los sustituyentes R3 y R4 por un lado, R6 y R7 por otro lado, forman juntos un birradical respectivamente

Z34

y Z67 apropiados. Los átomos F son después sustituidos según unos procedimientos análogos a los que se utilizan para los compuestos de tipo (II).

Los sustituyentes Ri que existen en los pirroles disponibles en el comercio y que son utilizables como productos de 15 partida son muy variados. A título de ejemplo, se pueden citar los sustituyentes de tipo alquilo, fenilo o éster. Pueden ser modificados para obtener los sustituyentes Ri deseados. Por ejemplo:

-: unas funciones éster terminales pueden ser hidrolizadas para dar el ácido correspondiente, que puede ser

después activado en forma de succinimida, por ejemplo para el injerto sobre proteína; 20

-: una función nitrofenilo puede ser reducida (por ejemplo por el hidrógeno en presencia de un catalizador apropiado), para dar la amina aromática correspondiente, que será activada después con un tiofosgeno para obtener un isotiocianato, permitiendo tal grupo el injerto de compuestos que llevan un grupo OH;

25 - unas funciones activas terminales que fueron protegidas previamente mediante métodos conocidos, pueden ser desprotegidas. Por ejemplo, una amina protegida por un Boc sobre el pirrol, estará desprotegida sobre el compuesto (I) buscado.

La presente invención se ilustra mediante los ejemplos siguientes, a los que no está sin embargo limitada.

30 En los ejemplos 1 a 20, los compuestos preparados corresponden a la fórmula general I, R1, R2, R4, R5 y R7 representan cada uno un metilo, R3 y R6 representan cada uno un etilo (ejemplos 1 a 17 y 20) o un hidrógeno (ejemplos 18 y 19). Los compuestos difluorados utilizados son unos compuestos que responden a una de las fórmulas I' o II' y que están descritos en la bibliografía. Las selecciones específicas de los sustituyentes S1, S2 y R1

35 para los 19 compuestos preparados se reúnen en la tabla I siguiente. Estos compuestos son unos análogos, para la longitud de onda de emisión de la fluorescencia, respectivamente de la Rhodamine 6G (compuestos de los ejemplos 1 a 17 y 20) y de la Fluoresceine (compuestos de los ejemplos 18 y 19).

TABLA 1 40

N°: S1 S2 R1

1: toluil-1-etinilo p-CH3C6H4-C=C- CH3-

2: Me3Si-C=C-trimetilsilil-1-etinilo Me3Si-C=C CH3-

3: H-C=C-etinilo H-C=C- CH3-

4: pirenil-1-etinilo pirenil-1-etinilo CH3-

5: pirenil-1-etinilo pirenil-1-etinilo prenil-etinil-fenilo

6: pirenil-1-etinilo pirenil-1-etinilo yodo-fenilo

7: pirenil-1-etinilo pirenil-1-etinilo ácido etinil-fenil pentanoico

8: pirenil-1-etinilo pirenil-1-etinilo pentanoato-etinil-fenil de succinimidilo

9: pirenil-1-etinilo pirenil-1-etinilo pentanamida-etinil-fenil propilo

10: TMS-C=C-trimetilsilil-1-etinilo pirenil-C=C CH3-

11: H-C=C-etinilo pirenil-C=C CH3-

12: 9,9-di-(n-butil)-fluorenil-2-etinilo 9,9-di-(n-butil)-fluorenil-2-etinilo CH3-

13: CH3-

N°: S1 S2 R1

perilenil-etinilo: perinil-etinilo

14: naftil-2-etinilo naftil-2-etinilo CH3-

15: Pirenil-1-etinilo pirenil-1-etinilo 4'-(2,2':6',2-terpiridina)

16: p-CH3C6H4-C=C-toluil-1-etinilo 6-oxazolin-hex-1-inilo metilo

17: pirenil-C=C 4-oxazolin-fenil-1-etinilo p-yodo-fenilo

18: pirenil-1-etinilo pirenil-1-etinilo yodo-fenilo

19: pirenil-1-etinilo pirenil-1-etinilo ácido etinil-fenil pentanoico

20: Antracenil-9-etinilo Antracenil-9-etinilo metilo

Ejemplo 1

Preparacion del compuesto 1 El compuesto 1 se preparo segun el esquema de reaccion siguiente:

El 4,4-difluoro-1,3,5,7,8-pentametil-2,6-dietil-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno, utilizado como difluorobora

10 dipirrometeno de partida, se ha preparado según el modo de realización siguiente. Se introdujo 1 g (12,7 mmoles) de cloruro de acetilo y 0,67 g de 3-etil-2,4-dimetil-pirrol en diclorometano anhidro, y se agitó a temperatura ambiente durante 1 día. Después, se añadió el éter de petróleo anhidro, y el precipitado obtenido después de una noche de agitación se filtró, y después se disolvió en tolueno. Se añadieron después 1,6 ml de trietilamina (1,6 ml), y después 2 ml de BF3Et2O (2ml) y la solución se calentó a 80°C durante 15 minutos. Después de lavar la fase orgánica (agua

15 3x20 ml), y de la cromatografía sobre gel de sílice (Hexano/diclorometano, 6:4), se obtuvieron 0,5 g de compuesto 1'.

A una solución de p-etiniltolueno (80 ml, 0,63 mmoles) en THF anhidro, a -78°C, se añadió bajo argón n-Butillitio (1,55 M en hexano, 0,44 ml). La mezcla se agitó durante 1h a -78°C, y después durante 30 minutos a temperatura ambiente. La solución amarillo pálido así obtenida se transfirió mediante una cánula en una solución de

20 difluoroboradipirrometeno 1' (100 mg, 0,31 mmoles) en THF anhidro. La solución se agitó durante 5 minutos a temperatura ambiente, y después se añadió agua. Esta solución se extrajo con diclorometano. Después de la evaporación, el residuo orgánico se purificó mediante cromatografía sobre columna de alúmina (CH2Cl2/ciclohexano, 20:80), y se obtuvo el compuesto 1 en forma de un polvo naranja (110 mg, 69%).

25 Caracterización del compuesto 1

RMN 1H (CDCl3 400 MHz): δ = 7,28 (d, 4H, 3J = 8,0 Hz), 7,0 (d, 4H, 3J = 8,85 Hz), 2,84 (s, 6H), 2,63 (s, 3H), 2,45 (q, 4H, 3J = 7,5 Hz), 2,37 (s, 6H), 2,30 (s, 6H), 1,1 (t, 6H, 3J = 7,5 Hz);

30 RMN 13C (CDCl3, 75 MHz): 151,9, 139,6, 136,6, 134,2, 132,4, 131,8, 131,4, 130,1, 128,6, 122,6, 21,3, 17,5, 17,2, 15,1, 14,7, 13,9,

RMN 11B (CDCl3, 128 MHz); -9,69 (s); UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1 cm-1) = 515 (68000), 371 (6600), 264 (45600), 252 (47100);

35 IR (KBr): ν = 2963 (s), 2173 (m), 1555 (s), 1186 (s), 977 (s), 816 (s);

FAB+ m/z: 511,2 ([M+H]+, 100);

40 Análisis elemental calculado para C36H39BN2: C, 84,70; H, 7,70; N, 5,49. Encontrado: C, 84,64; H, 7,62; N, 5,32.

La figura 1 representa la estructura del compuesto 1, obtenida por difracción de los rayos X sobre monocristal.

La figura 2 representa los espectros de absorción (en línea continua, nota A) y de emisión (en línea discontinua, nota 45 E) (λexc = 515 nm) del compuesto de partida 4,4-difluoro-1,3,5,7,8-pentametil-2,6-dietil-4-bora-3a,4a-diaza-sindaceno, dado en la patente US no 5.446.157.

Ejemplo 2

Preparación del compuesto 2 El compuesto 2 se preparó según el esquema de reacción siguiente:

10 El difluoroboradipirrometeno 1' utilizado como producto de partida es idéntico al del ejemplo 1.

A un trimetilsililacetileno (0,174 ml, 1,26 mmoles) en THF anhidro (10 ml) bajo argón, se añadió n-Butil-litio (1,34 M en n-hexano, 0,94 ml) a -78°C. Se agitó después la mezcla a -78°C durante 1h, y después a temperatura ambiente 15 durante 30 minutos. La solución amarillo pálido se transfirió después mediante una cánula sobre una solución de difluoroboradipirrometeno (0,2 g, 0,33 mmoles) en THF anhidro (40 ml). La solución se agitó después a temperatura ambiente durante 15 min, hasta el consumo completo del producto de partida (seguido por CCM). Se añadió agua (10 ml), y la solución se extrajo con CH2Cl2 (50 ml). Después de la evaporación, el residuo orgánico se purificó mediante cromatografía sobre columna de alúmina (CH2Cl2/ciclohexano, 20:80), seguida de una recristalización en

20 una mezcla CH2Cl2/Hexano, para obtener el compuesto 3 puro (0,21 g, 70%).

Caracterización del compuesto 2

RMN 1H (CDCl3 300 MHz): δ = 2, 67 (s, 6H), 2,58 (s, 3H), 2,43 (q, 4H, 3J = 7,5 Hz), 2,34 (s, 6H), 1,05 (t, 6H, 3J = 25 7,5 Hz), 0,09 (s, 6H);

RMN 13C{1H} (CDCl3, 75 MHz): δ =152,0, 139,5, 134,1, 132,4, 130,1, 17,6, 17,3, 15,2, 14,8, 13,9, 0,5;

RMN 11B (CDCl3, 128 MHz); -11, 10 (s); 30 UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1 cm-1) = 516 (42700), 366 (3500), 278 (24000).

Ejemplo 3

35 Preparación del compuesto 3 El compuesto 3 se preparó según el esquema de reacción siguiente, a partir del compuesto 3.

40 A una solución de compuesto 2 (210 mg, 0,43 mmoles) en 5 ml de CH2Cl2, se añadió una solución de sosa (345 mg, 20 equiv. en 5 ml de metanol). La mezcla se agitó durante dos días a temperatura ambiente, hasta la desaparición completa del producto de partida. Se añadió después agua (10 ml), y la solución se extrajo con CH2Cl2 (50 ml). Después de la evaporación, la parte orgánica se purificó mediante cromatografía sobre columna de sílice

45 (CH2Cl2/ciclohexano, 30:70), seguida por una recristalización en CH2Cl2/Hexano. El compuesto 4 puro se obtuvo en forma de cristales naranjas (92 mg, 60%);

RMN 1H (CDCl3 300 MHz): δ = 2,72 (s, 6H), 2,61 (s, 3H), 2,43 (q, 4H, 3J = 7,5 Hz), 2,34 (s, 6H), 2,17 (s, 2H), 1,06 (t, 6H, 3J = 7,5 Hz); RMN 13C {1H} (CDCl3, 75 MHz): δ =151, 9, 139,8, 134,8, 132,7, 130,2, 17,5, 17,4, 15,1, 14,8, 50 14,0;

RMN 11B (CDCl3, 128 MHz); -11,05 (s); UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1 cm-1) = 514 (80000), 367 (5100), 280 (10100), 245 (15600).

La figura 3 representa la estructura del compuesto 4, obtenida por difracción de los rayos X sobre monocristal.

Ejemplo 4

Preparación del compuesto 4 El compuesto 4 se preparó según el esquema de reacción siguiente:

ambiente. La solución así obtenida se transfirió mediante una cánula en una solución de 4,4-difluoro-1,3,5,7,8-pentametil-2,6-dietil-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno 1' (100 mg, 0,31 mmoles) en THF anhidro (20 ml). La solución se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente, hasta la desaparición del producto de partida (seguida por CCM), y después se añadió agua. Esta solución se extrajo con diclorometano. Después de la evaporación, el residuo

15 orgánico se purificó mediante cromatografía sobre columna de alúmina (CH2Cl2/ciclohexano, 20:80), seguida de una recristalización en una mezcla CH2CL2/ciclohexano, para obtener el compuesto 5 en forma de cristales naranjas (76 mg, 30%).

Caracterización del compuesto 4

20 RMN 1H (CDCl3, 400 MHz): δ = 8, 75 (d, 2H, 3J = 9, 0 Hz), 8,16-7,96 (m, 16H), 3,11 (s, 6H), 2,74 (s, 3H), 2,56 (q, 4H, 3J = 7,5 Hz), 2,45 (s, 6H), 1,17 (t, 6H, 3J = 7,5 Hz);

RMN 13C (CDCl3, 100 MHz): 152,1, 140,0, 134,7, 132,8, 132,1, 131,4, 131,3, 130,5, 130,4, 129,7, 127,8, 127,43, 25 127,38, 126,4, 126,0, 125,3, 125,11, 125,08, 124,61, 124,57, 124,4, 94,4, 17,6, 17,4, 15,2, 14,8, 14,5;

RMN 11B (CDCl3, 128 MHz): -16,8 (s); UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1 cm-1) = 516 (73000), 371 (95000), 350 (69000), 286 (93000), 275 (53000), 248 (86000), 241 (80500);

30 IR (KBr): ν = 2960 (s), 2293 (m), 1599 (s), 1430 (s), 1184 (s), 978 (s);

FAB+ m/z: 731,2 ([M+H]+, 100), 505,2 ([M-pir-≡-]+, 25);

Análisis elemental calculado para C54H43BN2: C, 88,76; H, 5,93; N, 3,83. Encontrado: C, 88,57; H, 5,77; N, 3,65. 35 La figura 4 representa la estructura del compuesto 4, obtenida por difracción de los rayos X sobre monocristal.

La figura 5 representa los espectros de absorción (en línea continua, nota A) y de emisión (en línea discontinua, nota E) (λexc = 515 nm) del compuesto 4. 40 La figura 6 represente el espectro de emisión del compuesto 4 con λexc a 370 nm, y un rendimiento cuántico del 94%.

Ejemplo 5

45 Se preparó el 4,4-difluoro-8-((1-pireniletinil)-4-fenil)-1,3,5,7-tetrametil-2,6-dietil-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno mediante acoplamiento de Sonogashira entre el 1-'etinil-pireno y el 4,4-difluoro-1,3,5,7-tetrametil-8-(p-yodofenil)-2,6dietil-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno 2', según el modo de realización siguiente. Se agitaron 2 g (7,5 mmoles) de cloruro de p-yodo-benzoílo y 2,24 ml (16,5 mmoles) de 3-etil-2,4-dimetil-pirrol durante un día a 40°C. Después, se

5 añadieron 6,9 ml de trietilamina y 7,6 ml de BF3Et2O. La mezcla se agitó durante una noche, y después se lavó la fase orgánica con agua. Se obtuvieron 1,2 g de compuesto 2' por cromatografía sobre alúmina (hexano/diclorometano, 7:3) y recristalización en una mezcla hexano/diclorometano.

A una solución de 1-etinilpireno (37 mg, 0,17 mmoles) en THF anhidro (10 ml) bajo argón, se añadió a

10 n-butillitio -78°C (1,55 M en n-hexano, 0,11 ml), la mezcla se agitó a -78°C durante 1h, y después a temperatura ambiente durante 30 minutos. La solución verde oscuro se transfirió entonces mediante cánula en una solución de 4,4-difluoro-8-((1-pireniletinil)-4-fenil)-1,3,5,7-tetrametil-2,6-dietil-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno (50 mg, 0,085 mmoles) en THF anhidro (20 ml). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 30 min, hasta desaparición completa del producto de partida (seguida por CCM). Se añadió entonces agua (5 ml), y la solución se extrajo con

15 CH2Cl2 (20 ml). Después de la evaporación, el residuo orgánico se purificó mediante cromatografía sobre columna de alúmina (CH2Cl2/ciclohexano, 30:70), seguida por una recristalización en una mezcla CH2Cl2/Hexano, para obtener el compuesto 5 (43 mg, 20%).

Caracterización del compuesto 5

20 RMN 1H (CDCl3 400 MHz): δ = 8,84 (d, 2H, 3J = 8,9 Hz), 8,76 (d, 1H, 3J = 8,9 Hz), 8,30-8,00 (m, 25H), 7,94 (d, 2H, 3J = 8,0 Hz), 3,21 (s, 6H), 2,52 (q, 4H, 3J = 7,5 Hz), 1,56 (s, 6H), 1,67 (t, 6H, 3J = 7,5 Hz;

RMN 13C (CDCl3, 100 MHz): 154,2, 139,6, 136,7, 136,5, 133,3, 132,3, 132,1, 132,0, 131,5, 131,4, 131,3, 131,2,

25 131,1, 130,4, 129,71, 129,67, 129,2, 129,0, 128,5, 128,3, 127,8, 127,5, 127,35, 127,27, 126,33, 126,28, 126,0, 125,77, 125,72, 125,5, 125,1, 124,60, 124,56, 124,5, 124,42, 124,36, 124,0, 120,5, 117,4, 94,7, 89,8, 17,5, 14,9, 14,6, 12,3;

RMN 11B (CDCl3, 128 MHz); -8,91 (s);

30 UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1 cm-1) = 523 (72600), 370 (138400), 351 (99000), 285 (133000), 275 (97000), 248 (118300;

IR (KBr): ν = 2926 (s), 2169 (m), 1542 (s), 1402 (s), 1179 (s), 843 (s); IR (KBr): ν = 3118 (m), 2926 (s), 2169 (m), 35 1542 (s), 1402 (s), 1179 (s), 978 (s), 843 (s), 757 (s);

FAB+ m/z: 1017.2 ([M+H]+ 90), 791,1 ([M-pir-≡-]+, 20;

Análisis elemental calculado para C77H53BN2: C, 90,9; H, 5,2; N, 2,75. Encontrado: C, 90,6; H, 4,9; N, 2,48. 40

Ejemplo 6

Preparación del compuesto 6

45 El compuesto 6 se preparó según el esquema de reacción siguiente

El 4,4-difluoro-1,3,5,7-tetrametil-8-(p-yodofenil)-2,6-dietil-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno 2' se preparó según el modo de realización descrito anteriormente.

50 Se añadió n-Butillitio (1,55 M en hexano, 0,26 ml) a una solución de 1-etinilpireno (89 mg, 0,39 mmoles) en THF anhidro (10 ml), a -78°C, bajo argón. La mezcla se agitó durante 1h a -78°C, y después durante 30 minutos a temperatura ambiente. La solución verde oscuro así obtenida se transfirió mediante una cánula en una solución de 4,4-difluoro-1,3,5,7-tetrametil-8-(p-yodofenil)-2,6-dietil-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno 2' (100 mg, 0,19 mmoles) en THF anhidro (20 ml). La solución se agitó durante 15 minutos a temperatura ambiente, hasta la desaparición del producto de partida (seguida por CCM), y después se añadió agua (10 ml). Esta solución se extrajo con diclorometano (20 ml). Después de la evaporación, el residuo orgánico se purificó mediante cromatografía sobre columna de alúmina (CH2Cl2/ciclohexano, gradiente de 90:10 a 70:30), seguida de una recristalización en una mezcla CH2Cl2/ciclohexano, para obtener el compuesto 6 en forma de cristales naranjas (132 mg, 76%)

5 Caracterización del compuesto 6

RMN 1H (CDCl3 400 MHz): δ = 8,78 (d, 2H, 3J = 9,0 Hz), 8,17-7,97 (m, 16H), 7,88 (d, 2H, 3J = 8,5 Hz), 7,22 (d, 2H, 3J = 8,5 Hz), 3, 16 (s, 6H), 2,47 (q, 4H, 3J = 7,5 Hz), 1,44 (s, 6H), 1,11 (t, 6H, 3J = 7,5 Hz);

10 RMN 13C (CDCl3, 75 MHz): 154,3, 138,8, 138,2, 136,3, 136,1, 133,4, 132,1, 131,3, 131,2, 130,7, 130,4, 129,6, 129,1, 127,8, 127,5, 127,3, 126,2, 126,0, 125,1, 124,6, 124,5, 124,4, 120,4, 94,5, 17,7, 15,1, 14,8, 12,5;

RMN 11B (CDCl3, 128 MHz); -8,92 (s);

15 UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1 cm-1) = 523 (70300), 370 (95000), 350 (72100), 285 (94000), 274 (56000), 247 (89700);

FAB+ m/z: 919,1 ([M+H]+, 100), 693,2 ([M-pir-≡-]+, 32);

20 Análisis elemental calculado para C59H44BIN2: C, 77,13; H, 4,83; N, 3,05. Encontrado: C, 76,81; H, 4,51: N, 2,75.

Ejemplo 8

25 Preparación del compuesto 7 El compuesto 7 se preparó según el esquema de reacción siguiente:

30 Una solución del compuesto 6 (0,1 g, 0,110 mmoles) y de éster heptinoico (0,025 g, 0,165 mmoles) se desgasificó durante 30 minutos en una mezcla THF/iPr2NH (10/1,5 ml). Se añadieron después Pd(II)Cl2(PF3)2 (4 mg, 6% moles) y CuI (2 mg, 10% moles), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Al final de la reacción, se añadieron 50 ml de agua y se extrajeron las fases orgánicas con CH2Cl2 (30 ml), después se secaron con MgSO4. El

35 éster se obtuvo después de la purificación sobre una columna de cromatografía sobre alúmina (eluyente: ciclohexano/CH2Cl2 80/30), y después recristalización en CH2Cl2/Hexano (masa obtenida: 0,09 g, 91%). El éster se calentó después durante 12 horas a 60°C, en una solución de EtOH/THF (10/10 ml), en presencia de un exceso de una solución a 1M de NaOH (9,7 ml, 1 mmoles). Se añadió una solución de HCl diluida para llevar el pH a 4, lo que conlleva la precipitación del ácido deseado. El producto se extrajo después con CH2Cl2 (50 ml), se lavó dos veces

40 con agua (50 ml), y después se secó mediante MgSO4. El ácido puro se obtuvo después de una recristalización en CH2Cl2/Hexano (79 mg, rendimiento del 87%).

Caracterización del compuesto 7

45 RMN 1H (CDCl3, 300 MHz): 8,77 (d, 2H, 3J = 9,0 Hz), 8,17-7,96 (m, 16H), 7,56 (d, 2H,3J = 8,3 Hz), 7,38 (d, 2H, 3J = 8,3 Hz), 3,14 (s, 6H), 2,53-2,41 (m, 8H), 1,96-1,83 (m, 2H), 1,77-1,63 (m, 2H), 1,42 (s, 6H), 1,07 (t, 6H, 3J = 7,6 Hz); RMN 13C (CDCl3, 75 MHz): 154,2, 139,9, 136,7, 136,0, 134,8, 133,3, 132,3, 132,2, 131,5, 131,3, 130,5, 129,8, 129,3, 128,8, 127,9, 127,6, 127,5, 126,4, 124,7, 124,6, 124,5, 124,4, 120,6, 33,3, 28,1, 19,4, 17,6, 15,0, 14,7, 12,3;

50 RMN 11B (CDCl3, 128 MHz); -8,92 (s);

UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1 cm-1) = 523 (58100), 370 (75000), 350 (66400), 285 (67200), 274 (56300), 251 (67600);

IR (KBr): ν = 2962 (s), 2164 (m), 1633 (s), 1544 (s), 1180 (s), 977 (s), 846 (s); FAB+ m/z (naturaleza del pico, intensidad relativa): 917,2 ([M-OH]+, 25); 5 Análisis elemental calculado para C67H57BN2O2, HCl: C, 83,01; H, 6,03; N, 2,89. Encontrado: C, 83,08; H, 5, 95; N, 2,88.

Ejemplo 8

10 El compuesto 9 posee una función ácida activada que permite el injerto sobre una proteína u otra biomolécula que posee unos residuos aminas.

Preparación del compuesto 8

El ácido 7 (30 mg g, 0,033 mmoles) en 10 ml de CH2Cl2 se añadió en dimetilaminopiridina (8,4 mg, 0,066 mmoles), EDCI (12 mg, 0,066 mmoles) y N-hidroxisuccinimida (7,2 mg, 0,066 mmoles). La mezcla se agitó a temperatura ambiente, y la reacción se siguió por placa CCM. Después de la desaparición total del compuesto 8 (1 hora), la

20 mezcla se lavó con agua (10 ml), y después se secó sobre MgSO4. El producto puro se obtuvo después de la purificación por una columna de cromatografía sobre sílice (eluyente: CH2Cl2), y después recristalización en CH2Cl2/Hexano (masa obtenida: 0,018 g, 54%).

Caracterización del compuesto 8

25 RMN 1H (CDCl3, 300 MHz): 8,78 (d, 2H, 3J = 9,1 Hz), 8,17-7,96 (m, 16H), 7,56 (d, 2H,3J = 8,3 Hz), 7,39 (d, 2H, 3J = 8,3 Hz), 3,14 (s, 6H), 2,9 (s, 4H), 2,73 (t, 2H, 3J = 7,1 Hz), 2,53 (q, 4H, 3J = 7,5 Hz), 2,04-1,94 (m, 2H), 1,821,73 (m, 2H), 1,43 (s, 6H), 1,10 (t, 6H, 3J = 7,5 Hz);

30 RMN 13C (CDCl3, 75 MHz): 169,2, 168,2, 154,2, 136,7, 136,0, 133,3, 132,35, 132,34, 132,28, 131,8, 131,5, 130,5, 129,8, 129,4, 128,9, 127,9, 127,6, 127,5, 126,4, 126,1, 125,2, 124,8, 124,7, 124,5, 124,3, 120,7, 90,5, 30,7, 27,8; 25,8, 24,0, 19,2, 17,6, 15,0, 14,7, 12,3;

RMN 11B (CDCl3, 128 MHz); -8,97 (s);

35 UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1cm-1) = 523 (55000), 370 (70000), 350 (56000), 285 (81000), 274 (57000), 248 (88000);

IR (KBr): ν = 3435 (m), 2960 (s), 2927 (s), 2230 (m), 2169 (m), 1741 (s), 1543 (s), 1431 (s), 1180 (s), 978 (s), 848 40 (s);

Análisis elemental calculado para C70H56BN3O4.CH2Cl2: C, 77,60; H, 5,32; N, 3,82. Encontrado: C, 77,54; H, 5,28; N, 3, 72.

45 La figura 7 representa los espectros de absorción (línea continua, nota A) y de emisión (línea discontinua, nota E) (λexc = 515 nm) del compuesto 9.

La figura 8 representa el espectro de emisión del compuesto 8 con λexc a 372 nm, y un rendimiento cuántico del 98%. 50

Ejemplo 9

Preparación del compuesto 9

55 El procedimiento de preparación del compuesto 9 ilustra la reacción de un grupo funcional G particular de un compuesto según la invención, con un grupo amina que podría ser el de una proteína (por ejemplo una lisina) o de un oligonucleótido modificado que estaría marcado con la ayuda de un compuesto según la presente invención. Por ejemplo, la asociación de una proteína específica con el compuesto según la presente invención permitirá detectar los receptores biológicos específicos de esta proteína.

El compuesto 9 se preparó según el esquema de reacción siguiente:

El compuesto 8 (10 mg, 0,0099 mmoles) se agitó durante una hora en 10 ml de n-propilamina; el disolvente se evaporó después y se extrajo el sólido resultante con CH2Cl2 (20 ml), y después se lavó dos veces con agua (20 ml). El producto puro se obtuvo después de la purificación por una columna de cromatografía sobre sílice (gradiente de

10 eluyente: CH2Cl2/MeOH 100/0 hasta 95/5) (7 mg, 74%).

Caracterización del compuesto 9

RMN 1H (CDCl3, 300 MHz): 8,78 (d, 2H, 3J = 9,0 Hz), 8,17-7,96 (m, 16H), 7,56 (d, 2H,3J = 8,3 Hz), 7,38 (d, 2H, 3J 15 = 8,3 Hz), 3,27 (m, 2H), 3,14 (s, 6H), 2,52-2,42 (m, 6H), 2,25 (t, 2H, 3J = 7,2 Hz), 1,98-1,85 (m, 2H), 1,74-1,66 (m, 2H), 1,53 (q, 2H, 3J = 7,2 Hz), 1,42 (s, 6H), 1, 10 (t, 6H, 3J = 7,4 Hz), 0,93 (t, 3H,3J = 7,4 Hz);

RMN 13C (CDCl3, 75 MHz): 172,7, 154,2, 139,9, 136,6, 136,0, 133,3, 132,29, 132,27, 131,5, 131,3, 130,5, 129,8, 129,3, 128,8, 127,9, 127,6, 127,5, 126,4, 126,1, 125,3, 124,7, 124,6, 124,5, 124,4, 120,6, 91,1, 41,4, 36,5, 28,4, 20 25,2, 23,2, 19,4, 17,6, 15,0, 14,7, 12,3, 11,5;

RMN 11B (CDCl3, 128 MHz); -8,97 (s).

UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1cm-1) = 523 (60700), 370 (88000), 350 (70000), 285 (91000), 274 (57000), 248 25 (103000);

= 2962 (s), 2317 (m), 2172 (s), 1711 (m), 1648 (s), 1543 (s), 1180 (s), 847 (s);

FAB+ m/z (naturaleza del pico, intensidad relativa): 958.2 ([M]+, 100);

30 Análisis elemental calculado para C69H60BN3O.CH2Cl2: C, 80,61; H, 5,99; N, 4,03. Encontrado: C, 80,44; H, 5,87; N, 3,85.

Ejemplo 10

35 Preparación del compuesto 10

40 Se colocaron 1-etinilpireno (71 mg, 0,31 mmol, 1 eq.) y trimetilsililacetileno (87 μl, 0,32 mmoles, 1 eq.) en dos tubos de Schlenck diferentes, cada uno en 5 ml de THF anhidro, y después se añadió n-Butillitio (1,34 M, 0,23 ml) a -78°C en cada uno de los tubos. Las dos soluciones se mantuvieron entonces a -78°C durante 1h y a temperatura ambiente durante 30 minutos. Las dos soluciones se transfirieron al mismo tiempo mediante cánula en una solución

45 de 4,4-difluoro-1,3,5,7,8-pentametil-2,6-dietil-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno 1' (100 mg, 0,31 mmoles) en THF anhidro (20 ml). La solución se agitó entonces a temperatura ambiente durante 10 minutos, hasta la desaparición completa del producto de partida. Se añadió entonces agua (5 ml), y la solución se extrajo con CH2Cl2 (20 ml). Después de la evaporación del disolvente, el residuo orgánico se purificó mediante cromatografía sobre columna de sílice (CH2Cl2/ciclohexano, 20:80). Una recristalización en CH2Cl2/Hexano permitió obtener el compuesto 10 (47 mg, 25%).

Caracterización del compuesto 10

5 RMN 1H (CDCl3, 400 MHz): δ = 8,62 (d, 1H,3J = 9, 1 Hz), 8,17-8,13 (m, 2H), 8,09-7,95 (m, 6H), 2,90 (s, 6H), 2,65 (s, 3H), 2,49 (q, 4H, 3J = 7,5 Hz), 2,38 (s, 6H), 1,12 (t, 6H, 3J = 7,5 Hz), 0,18 (s, 9H);

RMN 13C (CDCl3, 100 MHz): 152,1, 139,8, 134,5, 132,7, 132,3, 131,5, 131,3, 130,4, 130,3, 129,6, 127,7, 127,5, 10 126,4, 126,1, 125,1, 124,6, 124,4, 120,8, 17,6, 17,4, 15,2, 14,8, 14,3, 0,6;

RMN 11B (CDCl3, 128 MHz): -10,2 (s);

UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1cm-1) = 515 (44200), 368 (30300), 349 (22600), 333 (11200), 285 (31400), 274 15 (18200), 248 (29000), 242 (28200).

Ejemplo 11

El compuesto 11 es un compuesto que posee una función Si acetilénica verdadera, esta función puede estar 20 acoplada sobre un halogenuro aromático mediante un acoplamiento con paladio, de tipo Sonogashira.

Preparación del compuesto 11

A una solución del compuesto 10 (85 mg, 0,14 mmoles) en 10 ml de CH2Cl2, se añadió NaOH (28 mg, 5 eq.) en 5 ml de MeOH. La solución se agitó a temperatura ambiente durante 4 días, hasta la desaparición completa del producto de partida (control por CCM). Se añadió entonces agua (10 ml) y la solución se extrajo con diclorometano (50 ml).

30 Después de la evaporación, el residuo orgánico se purificó mediante cromatografía sobre columna de sílice (CH2Cl2/ciclohexano, 30:70), seguida de una recristalización en una mezcla CH2Cl2/Hexano, para dar el compuesto 11 (49 mg, 67%).

Caracterización del compuesto 11

35 RMN 1H (CDCl3, 400 MHz): δ = 8,55 (d, 1H, 3J = 9,2 Hz), 8,17-8,13 (m, 2H), 8,07-7,95 (m, 6H), 2,93 (s, 6H), 2,68 (s, 3H), 2,50 (q, 4H, 3J = 7,5 Hz), 2,40 (s, 6H), 2,67 (s, 1H), 1,12 (t, 6H, 3J = 7,5 Hz), 0,18 (s, 9H);

RMN 13C (CDCl3, 100 MHz): 152,0,139,9, 134,8, 132,9, 132,1, 131,5, 131,3, 130,4, 130,3, 129,8, 127,8, 127,53, 40 127,46, 126,4, 126,1, 125,2, 124,6, 124,4, 120,5, 17,6, 17,5, 15,2, 14,8, 14,3;

RMN 11B (CDCl3, 128 MHz): -10, 1 (s);

UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1 cm-1) = 516 (60700), 367 (42000), 349 (31500), 285 (46000), 274 (27600), 248 45 (42000), 241 (39500).

Ejemplo 12

Preparación del compuesto 12 50 El compuesto 12 se preparó según el esquema de reacción siguiente.

A una solución de 2-etinilfluoreno (95 mg, 0,31 mmoles) en THF anhidro (10 ml) bajo argón, se añadió n-Butillitio (1,74 M, 0,18 ml) a -78°C y la mezcla se agitó a -78°C durante 1h, y después a temperatura ambiente durante media 5 hora. La solución se transfirió entonces mediante una cánula en una solución de 4,4-difluoro-1,3,5,7,8-pentametil2,6-dietil-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno 1' (50 mg, 0,16 mmoles) en THF anhidro (10 ml). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, hasta la desaparición del producto de partida (seguida por CCM). Se añadió entonces agua (5 ml) y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (20 ml). Después de la evaporación, la parte orgánica se purificó mediante cromatografía sobre columna de sílice (CH2Cl2/ciclohexano, 20:80). Una recristalización en una

10 mezcla CH2Cl2/Hexano, dio el compuesto 12 (50 mg, 38%).

Caracterización del compuesto 12

RMN 1H (CDCl3, 400 MHz): δ = 7, 65-7, 62 (m, 2H), 7,55. (d, 2H, 3J = 7,7 Hz), 7,39-7,26 (m, 10H), 2,96 (s, 6H), 15 2,67 (s, 3H), 2,52 (q, 4H, 3J = 7,5 Hz), 2,40 (s, 6H), 1,92 (t, 8H, 3J = 8,3 Hz), 1,14 (t, 6H, 3J = 7,5 Hz), 1,05 (q, 8H, 3J = 7,2 Hz), 0,6 (t, 12 H, 3J = 7,2 Hz), 0,58-0,50 (m, 8H);

RMN 13C (CDCl3, 100 MHz): 152,1, 151,0, 150,4, 141,0, 140,2, 139,8, 134,6, 132,7, 130,8, 130,3, 127,1, 126,8, 125,9, 124,1, 122,9, 119,8, 119,3, 55,0, 40,4, 26,0, 23,2, 17,7, 17,5, 15,2, 14,9, 14,3, 13,9; 20 RMN 11B (CDCl3, 128 MHz): -9,6 (s);

UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1cm-1) =517 (70000), 323 (80000), 297 (62100), 228 (38500).

25 Ejemplo 13

Preparación del compuesto 13

A una solución de 1-etinilperileno (45 mg, 0,16 mmoles) en THF anhidro (5 ml) bajo argón, se añadió n-Butillitio (1,74 M, 93 μl) a -78°C y la mezcla se agitó a -78°C durante 1h, y después a temperatura ambiente durante media hora. La solución se transfirió entonces mediante una cánula en una solución de 4,4-difluoro-1,3,5,7,8-pentametil-2,6

35 dietil-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno (100 mg, 0,082 mmoles) en THF anhidro (10 ml). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, hasta la desaparición del producto de partida (seguido por CCM). Se añadió entonces agua (5 ml) y la mezcla se extrajo con CH2Cl2 (20 ml). Después de la evaporación, la parte orgánica se purificó mediante cromatografía sobre columna de sílice (CH2Cl2/ciclohexano, 20:80). Una recristalización en una mezcla CH2Cl2/Hexano, dio el producto deseado (20 mg, 15%).

40 Caracterización del compuesto 13

RMN 1H (CDCl3, 400 MHz): δ = 8,37 (d, 2H, 3J = 8,1 Hz), 8,21-8,13 (m, 6H), 8,08. (d, 2H,3J = 8, 1 Hz), 7,67-7,65 (m, 4H), 7,61 (d, 2H, 3J = 7,9 Hz), 7,51-7,43 (m, 6H), 3,00 (s, 6H), 2,71 (s, 3H), 2,52 (q, 4H, 3J = 7,5 Hz), 2,43 (s, 6H), 1,13 (t, 6H, 3J = 7, 5 Hz);

RMN 13C (CDCl3, 100 MHz): 152,1, 135,4, 134,8, 134,7, 132,9, 131,5, 131,4, 131,3, 130,6, 130,5, 128,7, 127,9, 5 127,1, 127,0, 126,7, 123,0, 120,63, 120,57, 120,4, 119,9, 17,6, 17,5, 15,3, 14,9, 14,5;

RMN 11B (CDCl3, 128 MHz): -9,4 (s);

UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1cm-1) = 517 (53500), 462 (93000), 435 (64500), 410 (30500), 259 (83000), 228 10 (83000).

La figura 9 representa los espectros de absorción (en línea continua, nota A) y de emisión (en línea discontinua, nota E) (λexc = 526 nm) del compuesto 13.

15 La figura 10 representa el espectro de emisión del compuesto 13 con λexc a 462 nm, y un rendimiento cuántico del 94%.

Ejemplo 14

20 Preparación del compuesto 14 El compuesto 14 se preparó según el esquema de reacción siguiente.

25 A un 2-etinilnaftaleno (96 mg, 0,62 mmoles) en THF anhidro (10 ml) bajo argón se añadió n-Butillitio (1,55 M, 0,44 ml) a -78°C y la mezcla se agitó a -78°C durante 1h, y después a temperatura ambiente durante 30 minutos. Esta solución se transfirió después mediante una cánula en una solución de 4,4-difluoro-1,3,5,7,8-pentametil-2,6-dietil-4bora-3a,4a-diaza-s-indaceno 1' (100 mg, 0,31 mmoles) en THF anhidro (20 ml). La solución se agitó durante 5

30 minutos a 20°C. Se añadió agua (10 ml), y la solución se extrajo con CH2Cl2 (50 ml). Después de la evaporación, el residuo orgánico se purificó mediante cromatografía sobre una columna de alúmina (CH2Cl2/ciclohexano, 10:90), seguida por una recristalización en una mezcla CH2Cl2/Hexano, para dar el compuesto 15 puro (130 mg, 72%).

Caracterización del compuesto 14

35 RMN 1H (CDCl3 300 MHz): δ = 7,89 (s, 2H), 7, 77-7, 68 (m, 6H), 2,93 (s, 6H), 2,67 (s, 3H), 2,50 (q, 4H, 3J = 7,5 Hz), 2,39 (s, 6H), 1,12 (t, 6H, 3J = 7,5 Hz);

RMN 13C (CDCl3, 75 MHz): 152,1, 139,8, 134,6, 133,2, 132,7, 132,4, 130,9, 130,3, 129,2, 127,7, 127,6, 127,5, 40 126,2, 125,9, 123,1, 17,6, 17,4, 15,2, 14,8, 14, 2;

RMN 11B (CDCl3, 128 MHz); -9,63 (s);

UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1cm-1): 517 (77700), 303 (29900), 292 (34500), 284 (27300), 255 (110000), 246 45 (97500)

IR (KBr): ν = 3413 (s), 2961 (s), 2172 (s), 1554 (s), 1184 (s), 1184 (s), 978 (s);

FAB+ m/z (naturaleza del pico, intensidad relativa): 583,1 ([M+H]+, 100), 431,2 ([M-nafta-≡-]+, 15); 50 Análisis elemental calculado para C42H39BN2: C, 86, 59 H, 6,75; N, 4,81. Encontrado: C, 86,32; H, 6,52; N, 4,62.

Ejemplo 15

55 Preparación del compuesto 15 El compuesto 15 se preparó según el esquema de reacción siguiente.

Se preparó el 4,4-difluoro-8-(2,2':6',2"-terpiridin-4'-il)-1,3,5,7-tetrametil-2,6-dietil-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno según el modo de realización siguiente. Se agitaron 0,5 g (1,91 mmoles) de 4'-(formil-2,2':6,2"-terpiridina), 0,57 ml (4,2

5 mmoles) de 3-etil-2,4-dimetil-pirrol en el ácido trifluoroacético durante una semana a temperatura ambiente, y después se añadieron 0,42 g (1,9 mmoles) de diciano-dicloroquinona y se agitó la mezcla durante 4 horas más. Después, se añadieron 0,5 ml de trietilamina y 0,35 ml de BF3.Et2O y se agitó la solución durante 1 día más. La mezcla se lavó finalmente con una solución saturada de NaHCO3, la fase orgánica se secó, y después se cromatografió sobre alúmina (hexano/diclorometano, 7:3), para dar 0,73 g de compuesto 3'.

10 A un 1-etinilpireno (41 mg, 0,179 mmoles) en THF anhidro (5 ml) bajo argón se añadió n-Butillitio (1,55 M, 0,15 ml) a -78°C y la mezcla se agitó a -78°C durante 1h, y después a temperatura ambiente durante 30 minutos. La solución verde oscuro se transfirió entonces mediante una cánula en una solución de 4,4-difluoro-8-(2,2':6',2"-terpiridin-4'-il)1,3,5,7-tetrametil-2,6-dietil-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno 3' (48 mg, 0,089 mmoles) en THF anhidro (10 ml). La

15 solución se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos, hasta la desaparición completa del producto de partida (control por CCM). Se añadió entonces agua (5 ml), y la solución se extrajo con diclorometano CH2Cl2 (20 ml). Después de la evaporación, la fracción orgánica se purificó mediante cromatografía sobre columna de alúmina (CH2Cl2/ciclohexano, 20:80), seguida por una recristalización en CH2Cl2/Hexano, para dar el producto deseado 15 (25 mg, 30%).

20 Caracterización del compuesto 15

RMN 1H (CDCl3 400 MHz): δ = 8,82 (d, 2H, 3J = 9,0 Hz), 8,75-8,69 (m, 6H), 8,22-7,98 (m, 16H), 7,91 (dt, 2H, 3J = 8,0 Hz, 4J = 2,0 Hz), 7,37 (m, 2H), 3,15 (s, 6H), 2,45 (q, 4H,3J = 7,6 Hz), 1,57 (s, 6H), 1,09 (t, 6H, 3J = 7,5 Hz);

25 RMN 13C (CDCl3, 75 MHz): 156,4, 155,7, 154,6, 149,5, 147,1, 137,0, 136,3, 133,6, 132,3, 131,5, 131,4, 130,5, 129,9, 128,6, 128,0, 127,6, 127,5, 126,5, 126,1, 125,3, 125,2, 124,75, 124,70, 124,6, 124,3, 121,5, 121,3, 120,8, 17,2, 15,0, 14,7, 12,9;

30 RMN 11B (CDCl3, 128 MHz); -8,92 (s);

UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1cm-1) = 526 (70000), 370 (103000), 358 (78000), 285 (111400), 275 (74400), 248 (106000);

35 IR (KBr): ν = 2961 (s), 2164 (m), 1582 (s), 1402 (s), 1178 (s), 978 (s), 845 (s);

FAB+ m/z (naturaleza del pico, intensidad relativa): 948,2 ([M+H]+, 100), 722,2 ([M-pir-≡-]+, 20);

Análisis elemental calculado para C68H50BN5: C, 86, 16; H, 5,32; N, 7,39, Encontrado: C, 85,95; H, 5,12; N, 7,27. 40

Ejemplo 16

Este compuesto presenta una función ácida que está protegida en forma de oxazolina, y que puede ser desprotegida mediante los procedimientos al alcance del experto en la materia.

45 Preparación del compuesto 16

Se disolvieron 6-oxazolin-hex-1-ina (47 mg, 0,31 mmoles) y p-etiniltolueno (40 μl, 0,31 mmoles) en dos tubos de Schlenck diferentes, en THF anhidro (5 ml) bajo argón. Se añadió entonces n-Butillitio (1,34 M en el n-hexano, 0,23 ml) a -78°C en cada Schlenck y se agitaron las dos soluciones durante una hora a -78 °C, y después a 5 temperatura ambiente durante 30 minutos. Las dos soluciones se transfirieron después simultáneamente mediante cánula en una solución de 4,4-difluoro-1,3,5,7,8-pentametil-2,4-dietil-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno 1' (100 mg, 0,31 mmoles) en THF anhidro (20 ml), a temperatura ambiente. La solución se agitó a temperatura ambiente durante 20 min, hasta la desaparición completa del producto de partida (control por CCM). Se añadió entonces agua (5 ml), y la solución se extrajo con CH2Cl2 (20 ml). Después de la evaporación, la parte orgánica se purificó mediante

10 cromatografía sobre columna de sílice (CH2Cl2/ciclohexano, 20:80), seguida de una recristalización en una mezcla CH2Cl2/ Hexano, para obtener el compuesto 16 puro (22 mg, 13%).

Caracterización del compuesto 16

15 RMN 1H (C6D6, 300 MHz): δ = 7,43 (d, 2H, 3J = 8,1 Hz), 6, 76 (s, 2H, 3J = 8,1.Hz), 3,59 (t, 2H, 3J = 8,8 Hz), 3,43 (t, 2H,3J = 8,8 Hz), 3,11 (s, 6H), 2,26 (q, 4H 3J = 7,5 Hz), 2,17-2,11 (m, 4H), 2,01 (s, 3H), 1,99 (s, 6H), 1,95 (s, 3H), 1,80-1,70 (m, 2H), 1,50-1,42 (m, 2H), 0,94 (t, 6H, 3J = 7,5 Hz);

RMN 13C{1H} (C6D6, 75 MHz): 167,3, 151,9, 190,0, 136,6, 133,9, 132,4, 131,9, 130,8, 129,1, 66,7, 54,9, 30,5, 20 29,2, 27,8, 25,7, 21,2, 20,0, 17,7, 16,9, 15,2, 14,5;

RMN 11B{1H} (C6D6, 128 MHz): -9,40 (s);

UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1cm-1) = 515 (54700), 370 (4350), 262 (24000), 251 (24500). 25

Ejemplo 17

Este compuesto presenta una función ácida protegida en forma de oxazolina, que puede ser desprotegida utilizando los métodos conocidos por el experto en la materia. 30 Preparación del compuesto 17

35 Se disolvieron 1-etinil-4-oxazolin-fenilo (35 mg, 0,20 mmoles) y 1-etinilpireno (45 mg, 0,2 mmoles) en dos tubos diferentes de Schlenk en THF anhidro THF (5 ml) bajo argón. Se añadió bromuro de etilmagnesio (1,0 M en THF, 0,2 ml) en cada tubo de Schlenk a -78°C y las dos soluciones se agitaron a temperatura ambiente durante tres horas. Las dos soluciones aniónicas se transfirieron simultáneamente mediante cánulas en una solución de 4,4-difluoro-8

40 (4-yodofenil)-1,3,5,7-tetrametil-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno 2' (100 mg, 0,2 mmoles) en THF anhidro (20 ml). La solución se calentó a reflujo durante una noche, hasta el consumo completo del producto difluorado de partida (control mediante CCM). Se añadió después agua (5 ml), y se extrajo la solución con CH2Cl2 (20 ml). Después de la evaporación, la parte orgánica se purificó mediante cromatografía sobre columna de sílice (CH2Cl2/ciclohexano, 20:80), seguida de una recristalización en una mezcla CH2Cl2/Hexano, para dar el compuesto 17 (35 mg, 26%).

45 Caracterización del compuesto 17

RMN 1H (CDCl3, 200 MHz): δ = 8,62 (d, 1H, 3J = 9,1 Hz), 8,18-7,83 (m, 12H), 7,51 (d, 2H, 3J = 8,6 Hz), 7,19-7,13 (m, 2H), 4,47 (t, 2H,3J = 9,1 Hz), 4,08 (t, 2H,3J = 9,1 Hz), 2,99 (s, 6H), 2,42 (q, 4H, 3J = 7,5 Hz), 1,39 (s, 6H), 1,08

50 (t, 6H, 3J = 7,5 Hz);

RMN 13C {1H} (C6D6, 75 MHz): 167,6, 154,6, 138,3, 136,6, 136,3, 132,0, 130,8, 130,7, 130,1, 129,7, 129,1, 128,7,

126,6, 126,3, 125,6, 125,5, 125,2, 124,9, 67,2, 55,3, 17,6, 14,7, 14,9, 12,1; RMN 11B {1H} (C6D6, 128 MHz): -8,56 (s);

5 UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1cm-1) = 525 (58200), 380 (50700), 350 (38100), 286 (90500), 276 (78100), 249 (64300).

La figura 11 representa los espectros de absorción (en línea continua, nota A) y de emisión (en línea discontinua, nota E) (λexc = 516 nm) del compuesto 17. 10 La figura 12 representa el espectro de emisión del compuesto 17 con λexc a 380 nm, y un rendimiento cuántico del 53%.

Ejemplo 18

Preparación del compuesto 18 El compuesto 18 se preparó según el esquema de reacción siguiente

Se preparó el 4,4-difluoro-1,3,5,7-tetrametil-8-(p-yodofenil)-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno 4' según el modo de realización siguiente. Se agitaron 1,17 g de cloruro de p-yodo-benzíilo y 1 ml de 2,4-dimetil-pirrolo durante un día a temperatura ambiente. Después, se añadieron 3,7 ml de trietilamina y 4,5 ml de BF3Et2O. La mezcla se agitó durante 25 una noche, y después se lavó la fase orgánica con agua. Una cromatografía sobre columna de alúmina (hexano/diclorometano, 7: 3), y una recristalización en una mezcla hexano/diclorometano dio 0,9 g del compuesto 4'.

Una solución de n-Butillitio 1,27 M en hexano (0,304 ml) se añadió a una solución de 1-etinilpireno (100 mg, 0,44 mmoles) en THF anhidro (10 ml), a -78°C, bajo argón. La mezcla se agitó durante 1h a -78°C, y después durante 30 30 minutos a temperatura ambiente. La solución así obtenida se transfirió mediante una cánula en una solución de 4,4difluoro-1,3,5,7-tetrametil-8-(p-yodofenil)-4-bora-3a,4a-diaza-s-indaceno (80 mg, 0,176 mmoles) en THF anhidro (10 ml). La solución se agitó durante 15 minutos a temperatura ambiente, hasta la desaparición del producto de partida (seguida por CCM), y después se añadió agua (10 ml). Esta solución se extrajo con diclorometano (20 ml). Después de la evaporación, el residuo orgánico se purificó mediante cromatografía sobre columna de alúmina

35 (CH2Cl2/ciclohexano, gradiente de 90:10 a 70:30), seguida de una recristalización en una mezcla CH2Cl2/ciclohexano, para obtener el compuesto 7 en forma de cristales naranjas (76 mg, 50%).

Caracterización del compuesto 20

40 RMN 1H (CDCl3 400 MHz): δ = 8,79 (d, 2H, 3J = 9,3 Hz), 8,18-7,99 (m, 16H), 7,89 (d, 2H, 3J = 8,5 Hz), 7,21 (d, 2H, 3J = 8, 2 Hz), 6.20 (s, 2H), 3,17 (s, 6H), 1,53 (s, 6H)

RMN 13C (CDCl3, 100 MHz): 156,3, 141,6, 140,7, 138,6, 135,6, 132,5, 131,7, 131,6, 130,9, 130,7, 130,1, 128,3, 127,9, 127,7, 126,6, 126,4, 125,5, 125,0, 124,9, 124,8, 122,4, 120,7, 95,4, 94,9, 17,0, 15,4; 45 RMN 11B (CDCl3, 128 MHz); -8, 87 (s);

UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1cm-1) = 501 (70000), 471sh (16200), 369 (89000), 349 (69700), 285 (94000)

Ejemplo 19

Preparación del compuesto 19 El compuesto 19 se preparó según el esquema de reacción siguiente

Una solución del compuesto 18 (0,07 g, 0,081 mmoles) y de éster heptinoico (0,025 g, 0,162 mmoles) se desgasificó durante 30 minutos en una mezcla THF/iPr2NH (10/1,5 ml). Se añadieron después Pd(II)Cl2(PF3)2 (4 mg, 6% mol) y

10 CuI (2 mg, 10% mol), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Al final de la reacción, se añadieron 50 ml de agua y se extrajeron las fases orgánicas con CH2Cl2 (30 ml), después se secaron con MgSO4. El éster se obtuvo después de la purificación sobre una columna de cromatografía sobre alúmina (eluyente: ciclohexano/CH2Cl2 80/30), y después de la recristalización en CH2Cl2/Hexano (masa obtenida: 0,06 g, 83%).

15 Caracterización del compuesto 19

RMN 1H NMR (CDCl3 300 MHz): δ = 8,80 (d, 2H, 3J = 9,2 Hz), 8,18-7,96 (m, 16H), 7,48 (ABsys, 4H, JAB = 8,3, voδ = 58,5Hz), 6.20 (s, 2H), 4,16 (q, 2H, 3J = 6Hz), 3,17 (s, 6H), 2,49-2,37 (m, 4H), 1,90-1,69 (m, 4H), 1,53 (s, 6H), 1,28 (t, 3H, 3J = 6Hz).

20 RMN 13C (CDCl3, 100 MHz): 173,4, 1555,7, 141,4, 141,3, 134,9, 132,2 (CH), 132,1, 131,3, 131,2, 130,4, 129,8, 129,7 (CH), 128,4 (CH), 127,9 (CH), 127,5 (CH), 127,3(CH), 126,2 (CH), 126,0 (CH), 125,2 (CH), 125,1 (CH), 124,6, 124,5, 124,4 (CH), 121,9 (CH), 120,4, 94,9, 91,0, 82,6, 80,5, 60,3 (CH2), 33,9 (CH2), 30,9 (CH3), 28,1 (CH2), 24,3 (CH2), 19,2 (CH2), 16,6 (CH3), 14,9 (CH3)

25 UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1cm-1) = 501 (65900), 471sh (15900), 369 (87000), 349 (69500), 285 (94000).

La figura 13 representa los espectros de absorción (en línea continua, nota A) y de emisión (en línea discontinua, nota E) (λexc = 501 nm) del compuesto 19.

30 La figura 10 representa el espectro de emisión del compuesto 19 con λexc a 369 nm, y un rendimiento cuántico del 40%.

Ejemplo 20

35 Preparación del compuesto 20

El compuesto 20 se preparó según el esquema de reacción siguiente, a partir del compuesto 3 y de un halogenuro de arilo. Esta reacción es un ejemplo de acoplamiento de tipo Sonogashira sobre el compuesto 3, destinado a

40 modificar los sustituyentes S1 y S2.

En un recipiente Schlenk, se desgasificó durante 20 minutos una solución de benceno/iPr2NH (50:50) que contenía 57 mg (0,18 mmoles) del compuesto 3 y 92 mg (0,36 mmoles) de 9-bromoantraceno. Se añadieron después 12,5 mg

5 (6% mol) de [Pd(PF3)4] y la mezcla se calentó bajo agitación a 60°C, bajo argón, durante 16h. Después de la evaporación del disolvente, una cromatografía sobre soporte (CH2Cl2/ciclohexano, 10:90), seguida de una recristalización en CH2Cl2/Hexano permitió obtener el compuesto 20 puro (31 mg, 25%).

Caracterización del compuesto 20

10 RMN 1H (CDCl3, 400 MHz): δ = 8,60-8,56 (m, 4H), 8,24 (s, 2H), 7,90-7,85 (m, 6H), 7,38-7,32 (m, 6H), 2,70 (s, 3H), 2,42 (q, 4H, 3J = 7,5 Hz), 2,43 (s, 6H), 1,04 (t, 6H, 3J = 7,5 Hz);

RMN 13C {1H} (CDCl3, 100 MHz): 132,9, 131,4, 128,5, 127,7, 126,1, 126,0, 125,7, 125,5, 123,0, 120,63, 120,57, 15 120,4, 119,9, 17,6, 17,5, 15,3, 14,93, 14,92;

RMN 11B {1H} (CDCl3, 128 MHz): -9,4 (s);

UV-Vis (CH2Cl2) λ nm (ε, M-1cm-1) = 517 (81300), 411 (40000), 390 (38000), 262 (173000);

20 IR (KBr): ν = 2960 (m), 2926 (m), 2146 (m), 1594(m), 1554 (s), 1439 (s), 1185 (s), 1122 (m), 977 (m), 878 (m), 736 (m);

FAB+ m/z (naturaleza del pico, intensidad relativa): 683,2 ([M+H]+, 100); Anal. Calc. para C50H43BN2.: C, 87, 96: 25 H, 6,35; N, 4,10. Encontrado: C, 87,63; H, 5,97; N, 3,81.

Se determinaron las propiedades de fluorescencia de los compuestos 1 a 20. La tabla siguiente da la longitud de onda de absorción λabs, la longitud de onda de emisión λem, el desplazamiento de Stokes ΔS calculado según la fórmula ΔS = (1/λabs) - (1/λem), el coeficiente de extinción molar ε, y el rendimiento cuántico relativo Φ, medido en 30 diclorometano a 20°C. El rendimiento cuántico Φ relativo se midió utilizando como referencia la Rhodamine 6G en agua (Φ=76%, λexc = 488 nm) cuya determinación exacta por calorimetría del rendimiento cuántico está descrita en

J. Fys. Chem., 83, 1979, 2581). Con la excepción de los compuestos 1, 2, 3 y 16 que no poseen los grupos cromóforos en la región próxima ultravioleta/azul, todos los compuestos descritos en los ejemplos presentan unos desplazamientos de Stokes de entre 3000 y 12300 cm-1 cuando están excitados entre 320 y 460 nm, y para unos

35 rendimientos cuánticos de fluorescencia muy elevados.

El ΔS de los compuestos 1', 2' y 3' se da a título comparativo.

• El compuesto 1' designa el compuesto 4,4-difluoro-1,3,5,7,8-pentametil-2,6-dietil-4-bora-3a,4a-diaza-s40 indaceno que se debe comparar con los compuestos obtenidos en los ejemplos 1, 4, 10-13.

• el compuesto 2' designa el compuesto 4,4-difluoro-1,3,5,7-tetrametil-8-(p-yodofenil)-2,6-dietil-4-bora-3a,4adiaza-s-indaceno, que se debe de comparar con los compuestos obtenidos en los ejemplos 7, 8, 17.

45 • el compuesto 3' designa el compuesto 4,4-difluoro-1,3,5,7-tetrametil-8-(2,2':6',2"-terpiridin-4'-il))-2,6-dietil-4bora-3a,4a-diaza-s-indaceno que se debe de comparar con el compuesto del ejemplo 14.

• el compuesto 4' designa el compuesto 4,4-difluoro-1,3,5,7-tetrametil-8-(p-yodofenil)-4-bora-3a,4a-diaza-s

indaceno que se debe comparar con los compuestos obtenidos en los ejemplos 18 y 19. 50

Tabla 2

N°: Iabs (nm) "em (nm) fS (cm -1) £(M -1 cm -1) c

1: 515 535 725 68000 98%

2: 513 532 696 43000 95%

3: 514 534 728 80000 92%

4: 516 535 688 73000 94%

371: 535 8263 95000 90%

350: 535 9880 69000 92%

5: 523 538 533 73000 98%

370: 538 8440 140000 97%

350: 538 9984 100000 98%

6: 522 538 570 70300 80%

371: 538 8367 95000 78%

352: 538 9822 72500 78%

7: 522 537 535 60000 80%

373: 537 8188 75000 80%

353: 537 9707 66500 79%

8: 522 538 570 55000 98%

372: 538 8294 70000 95%

353: 538 9741 55000 95%

9: 522 538 570 61000 82%

373: 538 8222 88000 51%

352: 538 9822 70200 55%

10: 515 533 655 44200 90%

368: 533 8412 30300 92%

342: 533 10478 23000 95%

11: 516 532 588 60700 80%

367: 532 8451 42000 73%

349: 532 9856 31500 75%

12: 517 535 650 70000 95%

323: 535 12268 80000 90%

297: 535 - 62100 90%

13: 517 536 685 53000 94%

462: 536 2988 93000 93%

435: 536 4332 64500 90%

14: 517 535 650 78000 90%

303: 535 14300 30000 31%

292: 535 15554 34500 32%

15: 526 590 2062 70000 40%

370: 590 10078 103000 50%

358: 590 10984 78000 50%

16: 515 534 690 54700 73%

17: 525 539 495 58200 83%

380: 539 7763 50700 53%

350: 539 10078 38100 53%

18: 501 514 504 70000 40%

369: 514 7645 89000 37%

349: 514 9200 70000 41%

19: 501 514 504 66000 47%

370: 514 7570 87000 40%

350: 514 9120 69500 42%

20: 517 538 755 81300 98%

411: 538 5750 41000 98%

1': 517 538 755 64500 83%

2': 524 537 460 75900 78%

3': 529 548 655 72000 87%

4': 500 510 392 47100 64%

La comparación de las características de los compuestos 1', 2', 3' y 4' con los compuestos correspondientes de la presente invención muestra que la sustitución de un átomo F por un sustituyente -C≡C-L'-A permite en general multiplicar el ΔS como mínimo por 10. Además, si se comparan los compuestos 6 y 18, se constata que con una

excitación única de aproximadamente 370 nm, se observarán dos emisiones diferentes para cada uno de los compuestos. Esta propiedad hace de las moléculas de la invención buenos candidatos para la utilización para el marcado multicolor.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Compuestos que responden a la fórmula general (I)

5 en la que:

• cada uno de los sustituyentes R1, R2, R3, R4, R5, R6 y R7 se selecciona independientemente de los otros de entre el grupo constituido por H, los grupos -L-H, los grupos -G y los grupos -L-G, 10

• o bien los dos sustituyentes R3 y R4 forman juntos un grupo divalente Z34 y/o los dos sustituyentes R6 y R7 forman juntos un grupo divalente Z67, siendo dichos grupos divalentes tales que forman con los átomos de carbono a los que están unidos, una estructura seleccionada de entre el grupo constituido por un anillo o dos anillos condensados, teniendo cada anillo 5 o 6 átomos y comprendiendo unos átomos de carbono y como

15 máximo dos heteroátomos seleccionados de entre N, O y S;

• L es un grupo de unión constituido por un enlace simple, o por uno o varios segmentos seleccionados de entre los grupos alquileno y los grupos alquenileno lineales o ramificados que comprenden eventualmente en su cadena uno o varios átomos de oxígeno que forman unos grupos éter, los alquinilenos, y los arilenos que

20 comprenden un solo núcleo o que comprenden varios núcleos condensados o no condensados;

• G es un grupo funcional seleccionado de entre:

-

los grupos polares seleccionados de entre los grupos amida, sulfonato, sulfato, fosfato, amonio 25 cuaternario, hidroxilo, fosfonato, y los segmentos de polietilenóxido,

-

los grupos donantes de electrones o electroatractores seleccionados de entre los grupos ciano, nitro, fluoroalquilo, perfluoroalquilo, amida, nitrofenilo, triazino sustituido, sulfonamida, alquenilo y alquinilo, y siendo el grupo de unión L seleccionado entonces de entre los segmentos alquenileno o alquinileno, que

30 tienen de 2 a 4 átomos de carbono,

-

los grupos funcionales reactivos que permiten el injerto de dicho compuesto sobre una molécula biológica, y los grupos capaces de reaccionar con un compuesto orgánico formando un enlace fuerte o débil con dicho compuesto, y

-

seleccionados de entre H, los grupos trialquil-sililo y una función reticulable cuando el compuesto es un polímero,

-

seleccionados de entre el éster succinimidilo, el éster sulfosuccinimidilo, el isotiocianato, el isocianato,

40 la yodoacetamida, la maleimida, los halosulfonilos, las fosforamiditas, los alquilimidatos, los arilimidatos, los halogenoácidos, las hidrazinas sustituidas, las hidroxilaminas sustituidas, las carbodiimidas cuando el compuesto es una molécula biológica, o

-

seleccionados de entre los grupos amino, ureido, hidroxilo, sulfhidrilo, carboxilo, carbonilo y éter 45 corona, cuando el compuesto es un compuesto orgánico,

-

los grupos capaces de reaccionar con un compuesto inorgánico formando un enlace fuerte o débil con dicho compuesto y seleccionados de entre grupos carboxilato cuando el compuesto inorgánico es un óxido de titanio, una zeolita o la alúmina, un tiol o un tioéter cuando el compuesto inorgánico es un metal

50 o un siloxano cuando el compuesto inorgánico es la sílice o una superficie oxidada de silicio,

• los sustituyentes S1 y S2 representan, independientemente el uno del otro, un grupo seleccionado de entre el grupo definido para los sustituyentes R1 a R7 o un grupo que responde a la fórmula -C≡C-L'-A en la que:

55 -L' es un enlace simple o un grupo seleccionado de entre el grupo definido para L, y

-

A es:

-

un grupo cromóforo seleccionado de entre:

-

los grupos arilo que tienen un núcleo aromático que lleva eventualmente unos sustituyentes;

-

los grupos arilo que tienen por lo menos dos núcleos condensados, y que llevan eventualmente por lo menos un sustituyente;

-

los grupos que tienen unas propiedades de colorante,

-

un grupo funcional capaz de fijarse sobre una molécula biológica seleccionada de entre el grupo constituido por el éster succinimidilo, el éster sulfosuccinimidilo, el isotiocianato, el isocianato, la yodoacetamida, la maleimida, los halosulfonilos, los fasforamiditas, los alquilimidatos, los arilimidatos, los halogenoácidos, las hidrazinas sustituidas, las hidroxilaminas sustituidas y las carbodiimidas,

-

un grupo funcional capaz de fijarse sobre un compuesto inorgánico seleccionado de entre una función carboxilato, tiol, tioéter y siloxano,

-

un grupo funcional capaz de fijarse sobre un compuesto polímero, siendo dicho grupo funcional seleccionado de entre H, los trialquil-sililos, una función reticulable, o

-

un grupo funcional capaz de fijarse sobre un compuesto orgánico o una sal orgánica, siendo dicho grupo funcional seleccionado de entre amino, ureido, hidroxilo, sulfhidrilo, carboxilo, carbonilo o éter corona;

caracterizado porque por lo menos uno de los sustituyentes S1 y S2 es un grupo -C≡C-L'-A en el que A es un grupo cromóforo.
2.

Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque el grupo de unión L está constituido por lo menos por un segmento seleccionado de entre un enlace simple, un segmento alquileno que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, un segmento fenileno, por un segmento alquinileno que tiene de 2 a 4 átomos de carbono, un segmento alquenileno que tiene de 2 a 4 átomos de carbono y un segmento poliéter que tiene de 1 a 12 átomos de oxígeno.
3.

Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque cada uno de los sustituyentes S1 y S2 es un grupo -C≡C-L'-A en el que A es un grupo cromóforo.
4.

Compuesto según una de las reivindicaciones 1 o 3, caracterizado porque L' es un enlace simple o un segmento alquileno que tiene de 1 a 10 átomos de carbono o un segmento poliéter que tiene de 1 a 12 átomos de carbono y A representa un grupo cromóforo.
5.

Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque el grupo arilo que tiene un núcleo aromático que lleva eventualmente unos sustituyentes se selecciona de entre el p-toluilo, el estirenilo, el piridinilo, los oligopiridinilos, el tienilo, y el pirrolilo.
6.

Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque el grupo arilo que tiene por lo menos dos núcleos condensados se selecciona de entre el naftilo, el pirenilo, el antracenilo, el fenantrenilo, el quinolilo, el fenantronilo, el perilenilo, el fluorenilo, el carbazolilo y el acridinilo, llevando dichos grupos eventualmente por lo menos un sustituyente.
7.

Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque el grupo que tiene propiedades de colorante se selecciona de entre los grupos cumarinilo, hidroxicumarinilo, alcoxicumarinilo, trisulfonatopirenilo, cianina, estirilpiridinio, naftalimidinilo y fenilfenantridio.
8.

Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque uno por lo menos de los sustituyentes S1 y S2 es un

grupo -C≡C-L'-A o uno por lo menos de los sustituyentes R1 a R7 es un grupo -L-G, en los que A o G es un grupo que permite fijar dicho compuesto sobre otro compuesto.
9.

Compuesto según la reivindicación 8, caracterizado porque L' o L es un enlace simple o un alquileno que tiene de 1 a 10 átomos de carbono, o un segmento poliéter que tiene de 1 a 12 átomos de carbono.
10.

Compuesto según la reivindicación 8, que puede ser fijado sobre un polímero, caracterizado porque el grupo A o el grupo G se selecciona de entre H, los grupos trialquil-sililo, o una función reticulable.
11.

Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque la función reticulable se selecciona de entre los grupos metacrilato, vinilo, estirilo, anilino, pirrolilo, tiofenilo, furilo, isocianato, y epóxido.
12.

Compuesto según la reivindicación 8 que puede ser fijado sobre una molécula biológica, caracterizado porque el grupo A o el grupo G se selecciona de entre el grupo constituido por el éster succinimidilo, el éster sulfosuccinimidilo, el isotiocianato, el isocianato, la yodoacetamida, la maleimida, los halosulfonilos, las fosforamiditas, los alquilimidatos, los arilimidatos, los halogenoácidos, las hidrazinas sustituidas, las hidroxilaminas sustituidas, las

5 carbodiimidas.
13. Compuesto según la reivindicación 8 que puede ser fijado sobre un compuesto orgánico, caracterizado porque el grupo funcional A o G es un grupo funcional capaz de formar un enlace fuerte (enlace covalente o iónico) o débil (enlace hidrógeno) con un compuesto a detectar.
14.

Compuesto según la reivindicación 13, caracterizado porque el grupo funcional A o G se selecciona de entre los grupos amino, ureido, hidroxilo, sulfhidrilo, carboxilo, carbonilo o éter corona.
15.

Compuesto según la reivindicación 8, que puede ser fijado sobre un compuesto inorgánico, caracterizado porque

15 el grupo A o el grupo G se selecciona de entre los grupos funcionales capaces de formar unos enlaces fuertes con unos materiales inorgánicos.
16. Compuesto según la reivindicación 15, que puede ser fijado sobre unos óxidos de titanio, unas zeolitas o la

alúmina, caracterizado porque el grupo A o G es una función carboxilato. 20
17. Compuesto según la reivindicación 15, que puede ser fijado sobre un metal, caracterizado porque A o G es un grupo tiol o un grupo tioéter.
18. Compuesto según la reivindicación 19, que puede ser fijado sobre la sílice y sobre la superficie oxidada de silicio, 25 caracterizado porque el grupo A o G es un grupo siloxano.
19. Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque uno de los sustituyentes S1 y S2 es un grupo -C≡C-L'-A, y el otro sustituyente se selecciona de entre los grupos arilo mononucleares que llevan eventualmente un sustituyente, y los grupos arilo que comprenden por lo menos dos núcleos condensados.
20. Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque es simétrico y responde a la fórmula (II)

35 21. Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque los sustituyentes R3 y R4 forman juntos un anillo con el pentaciclo que los lleva, y los sustituyentes R5 y R7 forman juntos un anillo con el pentaciclo que los lleva.

40 en la que los sustituyentes R8i y R9j se seleccionan, independientemente el uno del otro, de entre el grupo definido para los sustituyentes R1 a R7.
23.

Utilización de un compuesto según una de las reivindicaciones 1 a 22 como marcador fluorescente.
24.

Utilización de un compuesto según una de las reivindicaciones 1 a 22 como material electroluminiscente.