ES2348975T3 - Composicion de péptido inmunógeno para la prevencion y tratamiento de la enfermedad de alzehimer. - Google Patents
Composicion de péptido inmunógeno para la prevencion y tratamiento de la enfermedad de alzehimer. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2348975T3 ES2348975T3 ES02731223T ES02731223T ES2348975T3 ES 2348975 T3 ES2348975 T3 ES 2348975T3 ES 02731223 T ES02731223 T ES 02731223T ES 02731223 T ES02731223 T ES 02731223T ES 2348975 T3 ES2348975 T3 ES 2348975T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- baselineskip
- peptide
- hskip1cm
- prt
- fragment
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 164
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 title claims abstract description 84
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 50
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 13
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title description 13
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title description 13
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 28
- 210000004898 n-terminal fragment Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims abstract description 3
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims description 51
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 46
- 108010091748 peptide A Proteins 0.000 claims description 39
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 35
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 claims description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 4
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 1
- 108010064539 amyloid beta-protein (1-42) Proteins 0.000 abstract description 16
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 abstract 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 42
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 41
- 241000712079 Measles morbillivirus Species 0.000 description 38
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 34
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 33
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 28
- 208000037259 Amyloid Plaque Diseases 0.000 description 27
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 description 27
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 25
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 23
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 22
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 18
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 18
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 17
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 15
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 14
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 14
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 14
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 12
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 12
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 12
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 10
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 10
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 9
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 7
- 238000013461 design Methods 0.000 description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 7
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 7
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 7
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 7
- 108010041872 Islet Amyloid Polypeptide Proteins 0.000 description 6
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 6
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 6
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 6
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 241000193449 Clostridium tetani Species 0.000 description 5
- 102000036770 Islet Amyloid Polypeptide Human genes 0.000 description 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 5
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 5
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 5
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 4
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 4
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 4
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 4
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 4
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 4
- 108010048112 Amyloidogenic Proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000009091 Amyloidogenic Proteins Human genes 0.000 description 3
- 201000010374 Down Syndrome Diseases 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 3
- DZHSAHHDTRWUTF-SIQRNXPUSA-N amyloid-beta polypeptide 42 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)[C@@H](C)CC)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C(C)C)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DZHSAHHDTRWUTF-SIQRNXPUSA-N 0.000 description 3
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 3
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 3
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 3
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 3
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 229940126577 synthetic vaccine Drugs 0.000 description 3
- 102000013498 tau Proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010026424 tau Proteins Proteins 0.000 description 3
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710137189 Amyloid-beta A4 protein Proteins 0.000 description 2
- 101710151993 Amyloid-beta precursor protein Proteins 0.000 description 2
- 102100022704 Amyloid-beta precursor protein Human genes 0.000 description 2
- 108010060159 Apolipoprotein E4 Proteins 0.000 description 2
- 241000588832 Bordetella pertussis Species 0.000 description 2
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 2
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 2
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 108010008038 Synthetic Vaccines Proteins 0.000 description 2
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003942 amyloidogenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000002788 anti-peptide Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 2
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 2
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ADEBPBSSDYVVLD-UHFFFAOYSA-N donepezil Chemical compound O=C1C=2C=C(OC)C(OC)=CC=2CC1CC(CC1)CCN1CC1=CC=CC=C1 ADEBPBSSDYVVLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000000521 hyperimmunizing effect Effects 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 2
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 2
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 230000002025 microglial effect Effects 0.000 description 2
- 210000002241 neurite Anatomy 0.000 description 2
- 229940023041 peptide vaccine Drugs 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 2
- 210000000063 presynaptic terminal Anatomy 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 2
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 2
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 2
- 239000007762 w/o emulsion Substances 0.000 description 2
- -1 βPPA Proteins 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010068327 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase Proteins 0.000 description 1
- 208000023769 AA amyloidosis Diseases 0.000 description 1
- 229940100578 Acetylcholinesterase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 208000000044 Amnesia Diseases 0.000 description 1
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 241000606161 Chlamydia Species 0.000 description 1
- 241000606153 Chlamydia trachomatis Species 0.000 description 1
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 1
- 241000238586 Cirripedia Species 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 208000028698 Cognitive impairment Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N D-thyroxine Chemical compound IC1=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000724791 Filamentous phage Species 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 101000904173 Homo sapiens Progonadoliberin-1 Proteins 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 206010062016 Immunosuppression Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000026139 Memory disease Diseases 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008763 Neurofilament Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010088373 Neurofilament Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101710138657 Neurotoxin Proteins 0.000 description 1
- 108020004485 Nonsense Codon Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 241000502301 Pertusaria trachythallina Species 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 241000223960 Plasmodium falciparum Species 0.000 description 1
- 102000010780 Platelet-Derived Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108010038512 Platelet-Derived Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 101800001357 Potential peptide Proteins 0.000 description 1
- 102400000745 Potential peptide Human genes 0.000 description 1
- 102000012419 Presenilin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010036908 Presenilin-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000015499 Presenilins Human genes 0.000 description 1
- 108010050254 Presenilins Proteins 0.000 description 1
- 102100024028 Progonadoliberin-1 Human genes 0.000 description 1
- 244000088415 Raphanus sativus Species 0.000 description 1
- 235000006140 Raphanus sativus var sativus Nutrition 0.000 description 1
- 241000242680 Schistosoma mansoni Species 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- 101000996723 Sus scrofa Gonadotropin-releasing hormone receptor Proteins 0.000 description 1
- 108700005078 Synthetic Genes Proteins 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 230000002744 anti-aggregatory effect Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 1
- 229940039856 aricept Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000003376 axonal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229940000635 beta-alanine Drugs 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000004094 calcium homeostasis Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 108091006116 chimeric peptides Proteins 0.000 description 1
- 229940038705 chlamydia trachomatis Drugs 0.000 description 1
- 239000000544 cholinesterase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 1
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- 230000003930 cognitive ability Effects 0.000 description 1
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 239000012050 conventional carrier Substances 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003436 cytoskeletal effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000011257 definitive treatment Methods 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005016 dendritic process Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000003619 fibrillary effect Effects 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 1
- XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N gonadorelin Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011597 hartley guinea pig Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 201000010235 heart cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000024348 heart neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 239000012729 immediate-release (IR) formulation Substances 0.000 description 1
- 230000008086 immune related sensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000004201 immune sera Anatomy 0.000 description 1
- 229940042743 immune sera Drugs 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000003125 immunofluorescent labeling Methods 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical compound O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 1
- 210000001699 lower leg Anatomy 0.000 description 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000006984 memory degeneration Effects 0.000 description 1
- 208000023060 memory loss Diseases 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002682 neurofibrillary tangle Anatomy 0.000 description 1
- 210000005044 neurofilament Anatomy 0.000 description 1
- 230000009251 neurologic dysfunction Effects 0.000 description 1
- 208000015015 neurological dysfunction Diseases 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 230000004693 neuron damage Effects 0.000 description 1
- 230000002981 neuropathic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007171 neuropathology Effects 0.000 description 1
- 230000002887 neurotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002581 neurotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000618 neurotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000037434 nonsense mutation Effects 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000006919 peptide aggregation Effects 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007084 physiological dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000007505 plaque formation Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 108010005636 polypeptide C Proteins 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000007342 reactive astrogliosis Effects 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008521 reorganization Effects 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012898 sample dilution Substances 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 238000009589 serological test Methods 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229940034208 thyroxine Drugs 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N thyroxine-binding globulin Natural products IC1=CC(CC([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4711—Alzheimer's disease; Amyloid plaque core protein
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/806—Antigenic peptides or proteins
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Un péptido inmunógeno representado por una de las siguientes fórmulas: en donde cada A es independientemente un aminoácido; (A)n-(fragmento N-terminal del péptido Aß1-42)-(B)o-(Th)m-X ó (A)n-(Th)m-(B)o-(fragmento N-terminal del péptido Aß1-42)-X; Th es el epítope de la célula T de SEC ID NO: 1; el fragmento N-terminal del péptido Aß1-42 es el péptido de SEC ID NO: 67; cada B es un grupo de enlace seleccionado del grupo que consiste de gly-gly, (alfa, épsilon-N)Lys, Pro-Pro-Xaa-Pro-Xaa- Pro; X es un alfa-COOH o alfa-CONH2 de un aminoácido; n es desde 0 a aproximadamente 10; m es desde 1 a aproximadamente 4 y o es desde 0 a aproximadamente 10.
Description
Composición de péptido inmunógeno para la
prevención y tratamiento de la Enfermedad de Alzheimer.
La presente invención se refiere a una
composición que comprende un péptido inmunógeno útil para la
prevención y tratamiento de la Enfermedad de Alzheimer. Más
particularmente, el péptido inmunógeno comprende un sitio de
regulación/funcional, un fragmento N-terminal del
péptido Amiloide \beta (A\beta) unido a un epítope de la célula
T del auxiliar (Th) teniendo múltiples sitios de enlace MHC de clase
II. El péptido inmunógeno produce una respuesta inmune en sitio
dirigida en contra del sitio regulador/funcional principal del
péptido A\beta y genera anticuerpos, que son altamente reactivos
en forma cruzada para el péptido A\beta_{1-42}
soluble y las placas amiloides formadas en el cerebro de los
pacientes con Enfermedad de Alzheimer. Los anticuerpos producidos
siendo reactivos en forma cruzada al péptido
A\beta_{1-42} soluble, promueven la disgregación
fibril e inhiben la agregación fibrilar que conduce a la
inmunoneutralización de las toxinas derivadas del A\beta
soluble'' y siendo reactivos en forma cruzada a las placas
amiloides, aceleran el despeje de estas placas del cerebro. Además,
la composición de la invención que comprende el péptido inmunógeno
es útil para la prevención y el tratamiento de la Enfermedad de
Alzheimer.
La enfermedad de Alzheimer (EA) es una
enfermedad neurodegenerativa crónica caracterizada por una pérdida
de la habilidad cognoscitiva y severas anormalidades del
comportamiento en un paciente que conduce a la muerte eventual del
paciente. Existen actualmente 2.5 a 4.0 millones de pacientes con EA
en los Estados Unidos y 17 a 25 millones en todo el mundo. Es la
cuarta causa que conduce a la muerte en las culturas occidentales,
precedida solamente por enfermedades coronarias, cáncer y apoplejía.
El ARICEPT®, in inhibidor de la acetilcolinestereasa se ha aprobado
por la FDA para la desacelerar la proporción del decline en
pacientes con Alzheimer. Sin embargo, es solamente efectivo por un
periodo de tiempo limitado y en algunos pacientes. Hasta la fecha no
es un tratamiento definitivo o cura para esta enfermedad
devastadora.
Dos depósitos microscópicos, es decir ovillos
neurofibrilares (ONF) y placas amiloides seniles, se identificaron
por Alois Alzheimer como sellos distintivos de la enfermedad. Los
ovillos neurofibrilares consisten de dos filamentos de 10 nm de
ancho entrelazados alrededor uno del otro, referidos como filamentos
helicoidales en par (FHP), un componente principal de loas cuales
es el tau fosforilado. La fosforilación de serina en el aminoácido
262 de la proteína tau representa una etapa crucial que conduce a la
disfunción fisiológica de tau. Los FHP son intracelulares y se
encuentran en la mayoría de los procesos axonales y dendríticos
anormales o neuritas que componen la periferia de las placas
amiloides seniles. Las placas amiloides seniles consisten de
filamentos neurofílicos desorganizados en un área de más de 150
\mum en la sección transversal con un centro
extra-celular del depósito amiloide. Las placas
amiloides son ultraestructuralmente distintas de los FHPs y
consisten de filamentos de 4-8 nm de ancho que no se
encuentran torcidas juntas en pares. El centro de la placa consiste
de agregados de un péptido, inicialmente referido como A4, con una
masa molecular relativa (M) de aproximadamente 4,000 (Masters et
al., Proc Natl Acad Sci EUA, 1985,
82:4245-4249).
Una secuencia de aminoácidos parcial de A4,
ahora renombrada péptido \beta amiloide (o
A\beta_{1-42}), muestra que es similar a la
proteína \beta amiloide aislada de los vasos sanguíneos cerebrales
de los pacientes con enfermedad de Alzheimer o el síndrome de Down
(Glenner y Wong, Biochem Biophys Res Comm, 1984;
120:885-890; 122:1131-1135).
El A\beta_{1-42} se ha
hipotetizado para relacionarse a la EA por un número de razones.
Primeramente, en la amiloidosis periférica, es decir la enfermedad
de cadena primaria ligera o la amiloidosis secundaria AA, las
cargas amiloides largas se correlacionan fuertemente con el tejido y
la disfunción orgánica. Secundariamente, la densidad de la placa
amiloide positivamente se correlaciona con las señales de demencia
post-mortem en EA. Tercero, la deposición
A\beta_{1-42} es el marcador neuropatológico más
temprano en la EA y las enfermedades relacionadas tales como el
síndrome de Down, en donde puede proceder la formación ONF por
2-3 décadas. Cuarto, la
\beta-amiloidosis es relativamente específica para
la EA y las enfermedades relacionadas. Quinto, el
A\beta_{1-42} es tóxico para las neuronas
(Yankner et al., Science, 1990; 250:279-282).
Por último, las mutaciones sin sentido en el gen proteína
precursora amiloide estructural (PPA) causa inicios tempranos de EA
familiar (Goate et al., Nature, 1991;
349:704-706; Mullan et al., Nature Genetics,
1992; 1:345-347). Notablemente, dicha mutación
causa sobreproducción de A\beta_{1-42} dramática
(Citron et al., Nature, 1992;
360:672-674).
En 1987, Kang et al. (Nature,
1987; 325:733-737) y otros tres grupos (ver 1987
reportes de estado por Anderton, Nature, 1987;
325:658-659 y Barnes, Science, 1987;
235:846-847) independientemente clonó el gen del
cual A\beta_{1-42} se derivó. Este gen, ahora
conocido como la proteína precursora amiloide (PPA), codifica una
proteína de los residuos de 695 aminoácidos con un MW de
aproximadamente 79,000 que se expresa virtualmente en todos los
tejidos. Existen al menos cinco variantes de unión del PPA, cuatro
de las cuales contienen la secuencia del péptido
\beta-amiloide.
Cuatro genes se han implicado en las formas
familiares de la EA. Tres de los genes, \betaPPA, presenilin
I y presenilin 2, cuando se mutan causan las formas
tempranas dominantes autosomales de la EA. El cuarto gen, la
Apoliproteína E tiene una forma polimórfica de ocurrencia natural,
ApoE4, que representa un factor de riesgo genético principal para
del desarrollo de la enfermedad. El concepto de que las alteraciones
en varios genes distintos puede conducir a un desequilibrio entre
la producción A\beta_{1-42} y su claro, con la
agregación resultante del primer residuo 42 y posteriormente el
péptido del residuo 40 en las placas citotóxicas, se soporta por la
evidencia disponible. La evidencia sugiere fuertemente que los
defectos en cada uno de estos cuatro genes predispone el fenotipo
EA por (1) mejorar la producción y/o la deposición de los péptidos
A\beta_{1-42} o (2) mediante disminuir el claro
del ApoE4 del tejido (Selkoe, J Biol. Chem, 1996;
271:18295-18298).
De los datos disponibles, parece que los
péptidos A\beta_{1-42} agregados pero no
monoméricos pueden inducir la disfunción celular y la muerte in
vitro por un rango de mecanismos presumiblemente
interrelacionados. Estos incluyen el daño oxidativo (Thomas et
al., Nature, 1996; 380:168-171; Bel et al.,
Cell, 1994; 77:817-827), las alteraciones en la
homeostasis de calcio intracelular (Arispe et al., Proc Natl Acad
Sci EUA, 1993; 90:567-571) y la reorganización
citoesqueletal (Busciglio et al., Neuron, 1995;
14:879-888). Ha surgido conocimiento suficiente de
algunas etapas principales en la cascada amiloide inducida, incluso
aunque la hipótesis es vehementemente contestada.
Los avances farmacológicos de identificación de
moléculas pequeñas que podrían inhibir una u otra etapa de la
cascada inducida por amiloides ahora esta en curso. Existen dos
avances de interés particular: intentos de interferir con la
agregación de los péptidos A\beta_{1-42}
mediante la disminución de la secreción de los péptidos
A\beta_{1-42} de las células de la glía y
neuronales o inhibe la toxicidad que estos agregados extracelulares
que se producen en las neuronas y las células de la glía y sus
procesos. Un tercer alcance tentativo para controlar la respuesta
inflamatoria especializada que parece impulsarse por el
A\beta_{1-42} agregado (incluyendo la
estimulación microglial, activación de la cascada del complemento
clásico, liberación de citoquina y astrocitosis reactiva) puede
probar ser benéfico para los pacientes con Alzheimer.
Además de los alcances farmacológicos
anteriormente mencionados para la intervención de la EA, las
intervenciones inmunológicas también se han intentado. Soloman
et al. (Proc Natl Acad Sci. 1996;
93:452-455; Proc Natl Aca Sci. 1997;
94:4109-4112) mostró que tres anticuerpos
monoclonales específicos dirigidos hacia un sitio en la región
N-terminal del péptido
A\beta_{1-42} humano se une en varios grados a
las fibrilas preformadas que conducen a su disgregación e
inhibición de su efecto neurotóxico. También se encontró que los
anticuerpos previenen la formación del
A\beta_{1-42} fibrilar. Solomon et al.
(WO 01/18169) también intentó preparar un despliegue fago de un
epítope del péptido A\beta_{1-42} y administrar
el epítope del fago desplegado o el péptido que contiene el epítope
intraperitonialmente para los ratones que producen los anticuerpos
para el péptido A\beta_{1-42}. La prueba in
vitro con el fenocromocitoma de ratas mostró que una dilución
1:5 de antisuero previene la toxicidad de
A\beta_{1-42}. El antisuero en una dilución de
1:5 y 1:20 también mostró la interrupción de la estructura fibrilar
de A\beta in vitro con el deterioro extensivo de la
morfología fibrilar. Sin embargo, el adyuvante usado para la primera
inyección fue el Adyuvante de Freund Completo con el Adyuvante
Freund incompleto para la segunda inyección. Los adyuvantes usados
son completamente inapropiados para usarse en humanos. Por otra
parte, los niveles de anticuerpos generados fueron muy bajos para
ser efectivos a pesar del uso de estos adyuvantes ásperos.
Subsecuentemente, Schenk et al.
(Nature, 1999; 400:173-177) mostró que la
inmunización con el péptido A\beta_{1-42}
inhibe la formación de las placas amiloides y las neuritas
distróficas asociadas en un modelo de ratón de EA. Sin embargo,
debido a la baja inmunogenicidad del péptido
A\beta_{1-42}, el método empleado requirió
administraciones repetidas del antígeno con un adyuvante de
formación de lesión áspera para obtener los niveles más altos de
los anticuerpos
anti-placa-A\beta_{1-42}
para afectar la formación de la placa. Además, se advirtió que la
inmunización con A\beta_{1-42} puede inducir más
acumulación del amiloide tóxico por si mismo (Araujo, DM &
Cotman, CW, Brain Res, 1992; 569,
141-145).
A pesar de estas críticas, estudios adicionales
en los modelos de ratón EA transgénicos a través de la inmunización
similar han dejado la creencia de los avances de inmunoprofilaxis e
inmunoterapéuticos para ED. Janus et al. (Nature,
2000; 408: 979-982) describió la inmunización del
péptido A\beta_{1-42} en un modelo de ratón
para EA que redujo el deterioro del comportamiento y las placas.
Morgan et al. (Nature, 2000,
48:982-985) describió que la vacuna del péptido
A\beta_{1-42} previene la pérdida de la memoria
en el modelo de ratón.
El soporte directo para la efectividad de la
terapia inmune llega de la observación que la administración
periférica de los anticuerpos, monoclonal o policlonal, en contra de
la carga amiloide reducida del péptido A\beta (WO 99/27944; Bard
et al, Nature Medicine, 2000; 6:916-919). A
pesar de los niveles de suero relativamente modestos, estos
anticuerpos pasivamente administrados, el monoclonal 3D6
(anti-A\beta_{1-5}) y el 10D5
(anti-A\beta_{1-12}) o el
policlonal anti-A\beta_{1-42},
fueron capaces de ingresar al sistema nervioso central. Ahí, los
anticuerpos se unen a las placas e inducen el despeje de las placas
amiloides existentes. Bard et al., reportó que cuando se
examinó en una prueba ex vivo con las secciones cerebrales
de los ratones PDPPA (es decir, ratones transgénicos para un minigen
PPA conducido por un promotor del factor de crecimiento derivado de
las plaquetas) o un tejido cerebral de un paciente EA, los
anticuerpos en contra de las células microgliales para despejar las
placas a través de la fagocitosis y la degradación del péptido
subsecuente. Este estudio demostró que los anticuerpos pasivamente
administrados en contra del péptido
A\beta_{1-42} y la región del término N
A\beta_{1-42} redujo la extensión de la
deposición de la placa en un modelo de ratón de EA y esos
anticuerpos monoclonales o anticuerpos policlonales producidos por
las vacunas dirigidas en sitio son capaces de ingresar al CNS en
niveles terapéuticamente relevantes.
No obstante a los hallazgos prometidos de la
intervención inmunológica en el modelo de ratón para EA, una vacuna
en contra de la EA apropiada para los humanos continua muy lejos
(Chapman, Nature, 2000; 408:915-916). Los
obstáculos principales residen en el trabajo extensivo necesario
para diseñar y formular una composición inmunogénica que es útil en
los humanos antes de que pueda lograrse una vacuna práctica para la
EA. Algunos de los tejidos que cuentan con datos experimentales
para las guías son: (1) Cual es el sitio blanco específico para el
reconocimiento del anticuerpo dentro del A\beta? (2) En que forma
deberá presentarse el inmunogen? (3) Que otros sitios se necesitan
incluir antes de que el inmunogen logre producir un nivel
terapéutico del anticuerpo? (4) Que es un sistema de suministro de
vacuna efectivo que emplea un adyuvante clínicamente aceptable para
los humanos?.
Un hueco principal existe entre lo que se ha
descrito en la literatura y lo que permanece para hacerse. Cual es
el sitio de blanco específico apropiado (es decir, la placa
A\beta_{1-42} polimerizado o el péptido
A\beta_{1-42} monomérico soluble) y como el
sitio específico se fraguo par la intervención inmunogénica. No
obstante de algunas 5,000 publicaciones en
A\beta_{1-42} en la década pasada, la hipótesis
de la cascada amiloide se debate vehementemente y el tejido: la
forma en la cual A\beta_{1-42} deberá usarse
para la intervención que continua contencioso. En el corazón del
problema, discutido por Terry y sus colegas, es la débil
correlación entre la carga amiloide fibrilar y las medidas de
disfunción neurológica (The Neuropathology of Alzheimer Disease
and the Structure Basis of its Alterations, Ed. Por Terry et
al., Alzheimer Disease, p187-206, Lippincott
Williams y Wilkins, 1999).
En los pacientes con EA, los depósitos amiloides
comúnmente se forman en una distancia desde el sitio del daño del
neuron. La mejor correlación con la demencia patológica es la
pérdida de las terminales sinápticas. Sin embargo, la pérdida de
las terminales sinápticas se correlaciona pobremente con la carga
amiloide. Si las manifestaciones de la enfermedad se correlacionan
débilmente con la carga amiloide, entonces cual es el rol de
A\beta? El artículo por Klein et al, titulado ``Blanco de
oligómeros pequeños A\beta_{1-42}: la solución
a un enigma de la enfermedad de Alzheimer? (Trends in Neurosciences,
2001; 24:219-224) sugiere que las fibrilas no son
solamente una forma tóxica del A\beta y tal vez la neurotoxina no
es más relevante para la EA. Los oligómeros y fotofibrilos también
llamados como ligandos difusibles derivados de
A\beta_{1-42} (LDDAs) también pueden tener
potente actividad neurológica tóxica.
Una vacuna EA par la intervención inmunológica
exitosa requiere un inmunogen designado para producir anticuerpos de
alta afinidad dirigida en sitio que se unen a las placas seniles en
el tejido del cerebro para acelerar el desalojo de la placa mediante
las células Gliales e inmunoneutralizar las toxinas derivadas de
A\beta.
El problema de elevar los anticuerpos dirigidos
en sitio de alta afinidad en contra de los péptidos de sitio
específico pobremente inmunogénicos se ha conocido por décadas. Los
inmunólogos y los especialistas en el desarrollo de vacunas
comúnmente frecuentan el acercamiento del conjugado de proteína del
portador [péptido] hapten clásico como se demuestra en WO 99/27944.
Para el desarrollo de una vacuna dirigida en sitio en contra de EA,
Frenkel et al. intentó la inmunización en contra de las
placas A\beta_{1-42} a través de la
administración del fago "EFRH" (Proc Natl Acad Sci 2000;
97:11455-11459, WO 01/18169) como se mencionó
anteriormente.
Las aproximaciones: usando el agregado péptido
A\beta_{1-42} o los conjugados de la proteína
del cargador del fragmento péptido
A\beta_{1-42} (WO99/27944) y que usa el fago
filamentoso desplegando el "péptido EFRH" como los agentes
para inducir las respuestas inmunes en contra de un depósito
amiloide en un paciente, son enfadosas e inefectivas. Por ejemplo,
después de la cuarta inmunización de 10^{11} fagos desplegando el
epítope EFRH, >95% de los anticuerpos en el suero inmundo de los
conejillos de indias en contra de los fagos. Solamente una
población pequeña (<5%) de los anticuerpos está en contra del
péptido A\beta_{1-42} soluble (Frenkel et
al., Vaccine 2001, 19:2615-2619; WO
01/18169).
Se describieron métodos menos enfadosos en la
Patente Europea EP 526,511 y la WO 99/27944, que describe la
administración del péptido A\beta_{1-42} para
tratar a pacientes con EA pre-establecida y la
administración de A\beta_{1-42} u otros
inmunógenos a un paciente bajo condiciones que generan una respuesta
inmune "benéfica" en el paciente con EA. Sin embargo, una
revisión de WWO99/27944 muestra que existen deficiencias principales
en el diseño de vacuna descritos en este documento.
En particular, el problema reside en la falta de
un sistema de distribución de una vacuna efectiva y
farmacéuticamente aceptable. WO99/27944 describe el
A\beta_{1-42} o fragmentos activos de
A\beta_{1-42} conjugado a una molécula
portadora tal como la toxina del cólera como el componente de la
vacuna activa. Ver la página 4 de WO 99/27944. Aunque la página 5
enseña que una composición farmacéutica que comprende el inmunogen
deberá estar libre del Adyuvante de Freund Completo [AFC], los
ejemplos que solamente muestran la eficacia de la vacuna
A\beta_{1-42} para el tratamiento de EA en los
ratones transgénicos emplearon grandes dosis del péptido
A\beta_{1-42} agregado en AFC. No obstante la
relación repetitiva de los adyuvantes preferidos que son para
usarse con los agentes inmunogénicos descritos para mejorar la
respuesta inmune, los datos experimentales mostraron que solamente
las formulaciones que emplean AFC/IAFC proporcionan una
concentración de una solución suficientemente alta de anticuerpos.
Ver la página 25 de WO 99/2794. En el ejemplo 1, la eficacia
profiláctica de A\beta_{1-42} en contra de EA
se demostró en los ratones PDAPP. Sin embargo, las formulaciones
administradas consisten de una dosis de 100 ug por ratón del
A\beta_{1-42} agregado emulsificado en el
Adyuvante de Freund Completo [AFC] (p34 de WO 99/27944) seguido por
las múltiples dosis de fomentador del mismo péptido
A\beta_{1-42} emulsificado en el Adyuvante de
Freund Incompleto. En el Ejemplo IX, se estudiaron las respuestas
inmunes en los ratones a los diferentes adyuvantes. Cuando los
adyuvantes: MPL, Alum, QS21 y AFC/IAFC se usaron con el inmunogen
significativamente potente AN1792 (es decir,
A\beta_{1-42} humano agregado), el nivel de los
anticuerpos para el A\beta_{1-4} se redujo en un
nivel estadísticamente significante en comparación con los ratones
que reciben las vacunas AFC/IAFC. Ver, la Tabla 9 y las páginas
59-64 de WO 99/27944.
En el caso en donde los fragmentos del péptido
A\beta_{1-42} se usaron (péptidos
A\beta_{1-42} de loas aminoácidos
1-5, 1-12, 13-28 y
33-42), cada fragmento se conjugó para el IgG
anti-ratón de oveja como el portador de proteína.
En una descripción posterior, la eficacia de los anticuerpos para
los fragmentos del péptido A\beta solamente podrían mostrarse por
la inmunización pasiva con los anticuerpos monoclonales (Bard et
al., Nature Medicine 2000; 6:916-919). La
eficacia de estos fragmentos conjugados para el IgG
anti-ratón de oveja no se mostró. Por lo tanto, el
único inmunogen que mostró ser efectivo fue el péptido
A\beta_{1-42} agregado en AFC/IAFC.
El documento WO 00/72880 A2, entre otras cosas,
hace referencia a métodos para la prevención o el tratamiento de
una enfermedad asociada a depósitos amiloides de A\beta en el
cerebro de un paciente, por ejemplo la enfermedad de Alzheimer o el
Síndrome de Down o el deterioro cognitivo. Tales métodos implican
administrar fragmentos de A\beta o sus análogos, mientras que el
segmento N-terminal de A\beta puede estar enlazado
en su en su C-terminal a un polipétido heterólogo.
Los fragmentos comienzan en el residuo 1-3 de
A\beta y finalizan en los residuos 7-11 de
A\beta, sin embargo, fragmentos que sean de mayor longitud que la
comprendida entre los residuos 1-12 son menos
deseables ya que su actividad en eliminar o prevenir depósitos
amiloides no está clara.
En la actualidad, todas las formulaciones de
vacuna muestran ser efectivas empleando el AFC/IFA como el
adyuvante. Los imunogenes péptidos que señalan el
A\beta_{1-42} hasta el momento han sido
preparados mediante la conjugación de los varios fragmentos
A\beta_{1-42} para la inmunoglobulina
anti-ratón de oveja, la conjugación del
A\beta_{13-28} sintético vía el éster
m-meleimidobenzoil-N-hidroxisuccinimida
para el anticuerpo o el péptido A\beta_{1-42}
solo agregado. Estos inmunógenos, es decir el péptido
A\beta_{42} solo o los conjugados de la proteína del portador
del péptido A\beta_{1-42}, se emulsificaron con
el adyuvante de Freund para la primera inmunización seguida por los
fomentadores subsecuentes en el adyuvante de Freund incompleto
(Jonson-Wood et al., Proc Natl Acad Sci USA,
1997; 94:1550-1555; Seubert et al., Nature,
1992; 359:325-327; Schenk et al, Nature,
1999; 400: 173-177; Janus et al., Nature
2000; 408:979-982 y Morgan et al; Nature,
2000; 409:982-985). Las formulaciones descritas en
WO 99/27944 u otros usando AFC e IAFC como adyuvantes causan
lesiones y son muy ásperos para usarse en humanos. Además, ninguna
de las composiciones de vacuna para la EA descrita en el arte
previo es apropiada para usarse en humanos.
En resumen, a pesar de las declaraciones que
sugieren que el potencial del péptido
A\beta_{1-42} para el tratamiento de EA en vista
de las descripciones previas de Kline (EP 526,511), ningún problema
que resuelve las formulaciones de la vacuna se ofreció realmente en
WO99/27944 para dirigirse a este problema clave.
Otra desventaja con los conjugados de la
proteína del portador-péptido y los agregados
A\beta_{1-42} es que estas moléculas son
altamente complejas y son difíciles de caracterizar y es difícil de
desarrollar procedimientos de control de calidad efectiva para el
proceso de fabricación. Una desventaja adicional que el péptido
A\beta_{1-42} o sus fragmentos son sus propias
moléculas cuando se administran a los humanos. Además es necesario
desarrollar formulaciones de vacunas clínicamente aceptables para
la administración en humanos.
Se conoce que los epítopes Th promiscuos pueden
emplearse para evocar la célula T eficiente y pueden combinarse con
los epítopes de la célula B pobremente inmunogénica para
proporcionar los inmunógenos potentes. Se ha mostrado que los
péptidos quiméricos de los epítopes de la célula Th/B promiscuos
bien diseñados son útiles en la producción de respuestas Th y las
respuestas de los anticuerpos resultantes en la mayoría de los
miembros de una población genéticamente diversa que expresa
haplotipos MHC diversos. Se conoce el Th promiscuo de un número de
patógenos, tal como la proteína F del virus del sarampión y el
antígeno de la superficie del virus de la hepatitis B. Las tablas 1
y 2 listan muchos de los Th promiscuos conocidos que han demostrado
ser efectivos en un péptido potencial pobremente inmunogénico
corto, la hormona del decapéptido LHRH (EUA 5,759,551 y
6,025,468).
Los epítopes Th potentes oscilan en el tamaño de
aproximadamente 15-40 residuos de aminoácidos en
longitud, comúnmente comparten las características estructurales
comunes y pueden contener secuencias de punto destacado específico.
Por ejemplo, una característica común de un Th es que contiene
hélices amfipáticas, estructuras alfa-helicales con
los residuos aminoácidos hidrofóbicos que dominan una fase de la
hélice y con los residuos cargados y polares que dominan las fases
circundantes (Cease et al., Proc Natl Acad Sci EUA, 1987; 84:
4249-4253). Los epítopes frecuentemente contienen
modelos de aminoácidos primarios adicionales tales como un Gly o un
residuo cargado seguido por dos o tres residuos hidrofóbicos
seguidos a su vez pro un residuo pilar o cargado. Este modelo
define cuales son las secuencias llamadas Rothbard. Los epítopes Th
comúnmente obedecen la regla 1, 4, 5, 8, en donde un residuo
potencialmente cargado se sigue mediante los residuos hidrofóbicos
en la cuarta, quinta y octava posiciones después del residuo
cargado. Dado que todas estas estructuras se componen de
aminoácidos polares y cargados, cada estructura puede existir
simultáneamente dentro de un epítope Th simple (Partidos et al.,
J Gen Virol, 1991; 72:1293). La mayoría, si no todos los
epítopes de la célula T promiscua se ajustan en al menos una de las
periodicidades anteriormente descritas. Estas características
pueden incorporarse en los diseños de sitios Th artificiales
idealizados, incluyendo los epítopes Th combinatorios. Con respecto
al diseño de los sitios Th combinatorios, las listas de las
posiciones variables y los aminoácidos preferidos están disponibles
por motivos de unión del MHC (Meister et al., Vaccine, 1995;
13:581-591). Además, un método para producir el Th
combinatorio se ha descrito para los péptidos de biblioteca
combinatoria llamados biblioteca de antígeno sintético estructurado
(Wang et al., WO 95/11998). Además, la regla 1, 4, 5, 8
puede aplicarse junto con los motivos de enlace MHC combinatorios
conocidos para asignar las posiciones degenerativas e invariantes
en un sitio Th combinatorio y para seleccionar los residuos para los
sitios de degeneración para alargar en forma vasta el rango de la
conformidad de un Th artificial. Ver la Tabla 2, WO 99/66957 y WO
95/11998.
Wang et al (US 5,759,551) sugirió que el
uso de elementos inmunoestimulantes para hacer la proteína propia
Amilina inmunogénica. Wang et al. sugirió la administración
de los péptidos amilina sintéticos inmunogénicos como vacunas para
el tratamiento de la diabetes mellitus insulina no dependiente
(DMIND), una enfermedad amiloidogénica causada por la
sobreproducción de Amilina (columna 19, líneas 9-39,
US 5,759,551). La amilina es una hormona del péptido de los
residuos de 37 aminoácidos producida por las células \beta en las
isletas de Langerhans. La sobreproducción de la amilina resultará
en la deposición del amiloide insoluble que conduce a la enfermedad
amiloidogénico en el páncreas. Similar a la sobreproducción de la
Amilina, la sobreproducción del péptido
A\beta_{1-42} conducirá a la deposición del
amiloide insoluble en el cerebro de los pacientes con EA. Sin
embargo, existe la homología de secuencia limitada entre la Amilina
y el péptido A\beta_{1-42}. Solamente una corta
extensión de los residuos de los aminoácidos, VGSN de la
Amilina32-35 corresponde a
A\beta_{24-27}. Los anticuerpos producidos en
contra del péptido Amilina no se espera que sea reactivo en forma
cruzada para los péptidos A\beta_{1-42}
solubles que no aceleran el despeje de las placas amiloides en el
cerebro en vista de los estudios por Soloman et al. y Schenk
et al., que muestran que la secuencia EFRH es
crítica.
crítica.
Es el objeto de la invención desarrollar un
inmunogen que habilitaría la generación de altos niveles de
anticuerpos de alta afinidad en contra del sitio funcional
N-terminal del péptido
A\beta_{1-42} con alta reactividad cruzada para
las placas seniles en el cerebro de los pacientes EA. Los
anticuerpos generados mediante el enlace al péptido
A\beta_{1-42} y las placas seniles se esperan
que aceleren el despeje de estas placas del cerebro, promueven la
disgregación fibril, inhiben la agregación fibrilar y la
inmunoneutralización de las "toxinas derivadas de A\beta
solubles" [también llamadas ligandos difusibles
A\beta-derivadas o LDDAs].
Es un objeto adicional de la presente invención
desarrollar una vacuna para el suministro del vehículo que es
apropiada para el uso veterinario y en humanos para la profilaxis y
el tratamiento de la Enfermedad de Alzheimer.
Las Figuras 1a, 1b, 1c, 1d, 1e y 1f son
fotografías que muestran el marcado de inmunoperoxidasa de secciones
seriales de 2 cerebros EA, usando el método del Complejo del
Anticuerpo Avidin-Biotinilado (CAB) con suero
pre-inmune e inmune en una dilución de 1:100 bajo un
aumento de 10X. Las Figuras 1a y 1d muestran enlace significante de
los anticuerpos para ambas placas seniles y las placas A\beta
(ambas marcadas como "P") en los vasos sanguíneos positivos S
de tioflavina (marcados como "BV"). Los anticuerpos se
generaron en los conejillos de indias usando
A\beta_{1-28}-\varepsilonK-MVF
Th1-16 (SEC ID NO:74) preparada en una emulsión
ISA51 de agua en aceite. Las Figuras 1b y 1e muestran la
reactividad cruzada de los anticuerpos elevados en contra del mismo
péptido inmunógeno en AFC/IAFC. Las Figuras 1c y 1f muestran las
secciones del cerebro usando el suero
pre-inmune.
Las Figuras 2a, 2b, 2c, 2d y 2e son fotografías
que muestran el marcado Inmunoperoxidasa de las secciones en serie
del cerebro EA con suero inmune y pre-inmune en una
dilución de 1:100 y bajo aumento de 40X. Las Figuras 2a y 2d
mostraron que los anticuerpos en los conejillos de indias
inmunizados con
A\beta_{1-28}-\varepsilonK-MVF
Th1-16 (SEC ID NO:74) preparado en una emulsión
ISA51 agua en aceite marcó fuertemente las placas (P) que forman un
modelo de centros. La Figura 2b es una fotografía del modelo de EA
en secciones del cerebro de cerdo usando el mismo inmunogen en la
formulación AFC/IAFC. El anti-suero
predominantemente reaccionado con las placas en los vasos
sanguíneos (VS). La Figura 2c es una fotografía de una sección de
cerebro del conejillo de indias con suero preinmune y no mostró
coloración. La Figura 2e muestra la sección del cerebro con suero
hiperinmune generado mediante la inmunización con el péptido
A\beta_{1-28} solo en AFC/IAFC mostrando un
modelo de coloración sorpresivamente débil a pesar de la fuerte
reactividad con A\beta_{1-28} por ELISA.
La presente invención se refiere a una
composición inmunogénica que comprende péptidos sintéticos capaces
de inducir los anticuerpos en contra del sitio regulador/funcional
principal del péptido A\beta con alta reactividad cruzada ambos
para el péptido soluble A\beta_{1-42} y las
placas en el cerebro de pacientes con la Enfermedad de Alzheimer
(EA). La composición inmunogénica cuando se administra a una
paciente con EA o una persona predispuesta a EA se espera que
acelere el despeje de las placas amiloides y la inmunoneutralización
de las toxinas A\beta derivadas solubles en el cerebro para
prevenir y tratar el EA. En particular, un péptido inmunógeno de
esta invención comprende el epítope Th de SEC ID NO: 1 unido a un
fragmento corto del péptido A\beta_{1-42}
N-terminal que comprende EFRH del péptido
A\beta_{1-42,} SEC ID NO: 65. El fragmento del
péptido A\beta_{1-42} es la SEC ID NOS: 67.
Opcionalmente, puede incluir espaciadores del aminoácido que
separan los dominios inmunogénicos. Los elementos del dominio
inmunogénico separados por los espaciadores pueden unirse
covalentemente en cualquier orden proporcionando que la
inmunoreactividad del péptido hapten se preserva sustancialmente o
que la inmunoreactividad para el fragmento del péptido
A\beta_{1-42} y las placas se generan.
La presente invención además proporciona una
composición inmunogénica que comprende una cantidad
inmunológicamente efectiva de una composición del péptido en una
formulación de vacuna farmacéuticamente aceptable que comprende un
adyuvante o un emulsificador seleccionado del grupo que consiste de
liposina, saponina, escualeno, L121, lípido monofosfirilo emulsigen
A (MPL), polisorbato 80, QS21, Montanido ISA51, ISA35, ISA206 e
ISA720, así como los otros adyuvantes y emulsificantes eficaces.
\global\parskip0.850000\baselineskip
La presente invención además proporciona un
medicamento útil para la inducción del despeje acelerado de las
placas amiloides y la inmunoneutralización de las toxinas
A\beta-derivadas solubles en el cerebro para
prevenir y tratar la Enfermedad de Alzheimer en un mamífero
mediante administrar uno o más péptidos inmunogénicos al mamífero
por un tiempo y bajo condiciones suficientes para inducir los
anticuerpos dirigidos en contra del sitio funcional/regulador del
péptido A\beta_{1-42}. Un ejemplo típico de una
vacuna de la presente invención es una composición del péptido que
comprende 5-1000 \mug del péptido inmunógeno en
una vacuna formulada como una emulsión de agua en aceite en un
adyuvante y/o portador farmacéuticamente aceptable. Un método típico
de la administración de la vacuna es para inyectar
intramuscularmente la formulación de vacuna en 0.5-2
ml por dosis en un programa de inmunización en intervalos de 0, 4 y
8 semanas.
Un factor importante que afecta la
inmunogenicidad de un péptido sintético para un inmunogen del
fragmento A\beta_{1-42}
N-terminal es su presentación para el sistema inmune
por los epítopes celulares del asistente T (Th). Dicha T se
suministra más confiablemente al péptido inmunógeno mediante los
epítopes Th extranjeros en un elemento de dominio del péptido Th
separado que son extrínsecos para el péptido A\beta blanco. Dichos
inmunógenos pueden producirse como polipéptidos híbridos mediante
la expresión ADN recombinante. También puede ser más simple y menos
costoso suministrarlos como un péptido inmunógeno sintético que
comprende el sitio celular del hapten B blanco del péptido A\beta
y los epítopes T auxiliares (Th) apropiados para el huésped. Dichos
péptidos reaccionan con los receptores de la célula T auxiliar y las
moléculas MHC clase II, además de los sitios de enlace del
anticuerpo (Babbitt et al., Nature, 1985; 317:359) y además
estimula estrechamente una respuesta del anticuerpo de sitio
específico. Previamente dicho Th se suministró para los inmunógenos
del péptido A\beta_{1-42} que es trabajable por
el Th intrínseco para el péptido A\beta de longitud completa
agregada (WO 99/66957; WO 1999/27944; Janus et al., 2000,
Morgan et al., 2000) pueden suministrarse por la proteína
portadora. Un péptido inmunógeno completamente sintético disfruta
de las siguientes ventajas sobre los agregados del péptido
A\beta_{1-42}, los conjugados del portador y los
polipéptidos recombinantes en ese producto que se define
químicamente para el fácil control de la calidad. El péptido
inmunógeno sintético es estable. Ni el procedimiento descendente
elaborado ni una instalación de fabricación elaborada se necesita.
La respuesta inmune está en sitio específico y se enfoca en el
blanco A\beta y no el portador. Además, las respuestas indeseables
tales como la supresión epitópica se evitan.
La inmunogenicidad de los inmunógenos del
péptido A\beta en sitio funcional N-terminal
sintéticos pueden optimizarse por (1) combinar el fragmento del
péptido A\beta1-42 N-terminal con
los sitios Th promiscuos extranjeros seleccionados al cual la
mayoría de una población es sensible y (2) combinar el fragmento
A\beta del péptido con el Th cuyo repertorio se prolonga a través
de la química combinatoria y por lo tanto acomoda la responsabilidad
inmune variable de una población genéticamente diversa.
Se ha encontrado que la composición de los
péptidos de la presente invención es efectiva en estimular la
producción de anticuerpos en contra del sitio regulador/funcional
principal del péptido A\beta, con las reactividades cruzadas para
el A\beta_{1-42} soluble y las placas en los
cerebros de los pacientes con EA. Con base en los datos de
inmunogenicidad obtenidos en los conejillos de indias y los
mandriles y los datos obtenidos del marcado de inmunoperoxidasa de
las placas amiloides presentes en las secciones del cerebro con EA
humano mediante el suero inmune específico obtenido, se espera que
los inmunógenos del péptido de la presente invención formulados
apropiadamente son efectivos en los humanos. Se nota que los datos
obtenidos en los mandriles son significativamente significantes en
que estos son una especie cuya respuesta inmune es cercanamente
parecida a la de los humanos.
La invención se dirige a una composición de
péptidos novedosa para la generación de anticuerpos policlonales de
alta concentración de solución con especificidad para el sitio
funcional/regulador principal del péptido A\beta, con
reactividades cruzadas para el A\beta_{1-42}
soluble y las placas en el cerebro de los pacientes con Enfermedad
de Alzheimer (EA). Los anticuerpos generados por la composición del
péptido son altamente de sitio específico y se unen a los péptidos
A\beta y las placas amiloides en el cerebro. Además, la presente
invención proporciona un método efectivo para acelerar el despeje de
las placas amiloides y la inmunoneutralización de toxinas A\beta
derivadas en los cerebros para la prevención y el tratamiento de
EA.
Los fragmentos del péptido
A\beta_{1-42} N-terminal
seleccionados del grupo que consiste de 10 a 28 aminoácidos en
donde cada fragmento comprende EFRH del péptido
A\beta_{1-42} (SEC ID NO:65) son péptidos
lineales cortos que por si mismos no son inmunogénicos. Los
fragmentos del péptido A\beta_{1-42} cortos
pueden ser inmuno-potenciados mediante el
acoplamiento químico para una proteína portadora, por ejemplo, la
hemocianina de lapa de ojo de cerradura (HLO) o mediante la fusión
a un polipéptido portador a través de la expresión ADN
recombinante, por ejemplo, el antígeno de la superficie de la
hepatitis B. La deficiencia de dichas vacunas de "proteína del
portador del (de los) péptido(s) A\beta" es una porción
principal de anticuerpos generados que no son anticuerpos no
funcionales dirigidos en contra de la proteína del portador.
Los inmunógenos de la presente invención son
inmunógenos de péptido completamente sintéticos que comprenden un
fragmento N-terminal del péptido
A\beta_{1-42} de SEC ID NO: 67 que comprende
EFRH del péptido A\beta_{1-42} unido
covalentemente a los epítopes Th promiscuos de SEC ID NO: 1. Los
inmunógenos de la invención educen la producción de los anticuerpos
de sitio específico que se unen al péptido
A\beta_{1-42} y sus agregados y son reactivos
en forma cruzada con las placas amiloides en el cerebro para
proporcionar el despeje acelerado de las placas amiloides y la
inmunoneutralización de las toxinas A\beta derivadas en el
cerebro. Además, el inmunogen de la presente invención es útil en
prevenir y tratar la EA.
\global\parskip1.000000\baselineskip
Son generados los resultados del
anti-suero de los animales inmunizados con los
péptidos del inmunogen de la presente invención demuestran esos
anticuerpos reactivos del péptido A\beta de sitio dirigido
potentes en una población de huésped genéticamente diversa.
El péptido inmunogénico sintético de la presente
invención comprende:
- (i)
- un epítope (Th) de la célula T de SEC ID No: 1;
- (ii)
- un fragmento N-terminal del péptido A\beta_{1-42} de SEC ID NO: 67, que comprende EFRH del péptido A\beta_{1-42}; y
- (iii)
- opcionalmente un espaciador para separar los dominios inmunogénicos.
\vskip1.000000\baselineskip
El péptido Th se une covalentemente al término N
o C del fragmento N-terminal del péptido
A\beta_{1-42} opcionalmente con un espaciador
(es decir Gly-Gly, \varepsilon-N
Lys).
El péptido inmunógeno de esta invención se
representa por uno de la siguiente fórmula:
- \quad
- (A)_{n}-(fragmento N-terminal del péptido A\beta_{1-42})-(B)_{o}-(Th)_{m}-X {}\hskip0.5cm ó
- \quad
- (A)_{n}-(Th)_{m}-(B)_{o}-(fragmento N-terminal del péptido A\beta_{1-42})-X;
en
donde
cada A es independientemente un aminoácido;
cada B es un grupo de enlace seleccionado del
grupo que consiste en Gly-Gly, (\alpha,
\varepsilon-N)Lys,
Pro-Pro-Xaa-Pro-Xaa-Pro
(SEC ID NO: 77).
Th es un epítope colaborador de la célula T de
SEC ID NO: 1;
(el fragmento N-terminal del
péptido A\beta_{1-42}) es el péptido de SEC ID
NO: 67.
X es un \alpha-COOH o
\alpha-CONH_{2} de un aminoácido
n es desde 0 a aproximadamente 10;
m es desde 1 a aproximadamente 4 y
o es desde 0 a aproximadamente 10.
\vskip1.000000\baselineskip
De preferencia, m = 1, n = 1 y o = 1 ó 2.
Cuando A es un aminoácido, es un aminoácido de
ocurrencia natural o de ocurrencia no natural. Los aminoácidos de
ocurrencia no natural incluyen pero no se limitan a
\varepsilon-N lisina,
\beta-alanina, ornitina, norleucina, norvalina,
hidroxiprolina, tiroxina, ácido \gamma-amino
butírico, homoserina, citrulina y los similares. Los aminoácidos de
ocurrencia natural incluyen alanina, arginina, asparagina, ácido
aspártico, cisteína, ácido glutámico, glutamina, glicina,
histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina,
prolina, serina, treonina, triptofano, tirosina y valina, cuando m
es mayor que uno y dos o más de A son aminoácidos, entonces cada
aminoácido puede ser independientemente el mismo o diferente.
(A)_{n} puede incluir un espaciador, es decir,
Gly-Gly, \varepsilon-N Lys.
Cada B es independientemente el mismo o
diferente. B también pueden proporcionar un espaciador, es decir,
Gly-Gly, \varepsilon-Lys o lisina
entre el epítope Th promiscuo y el fragmento
N-terminal del péptido
A\beta_{1-42} (SEC ID NO: 67). Además, al
separar físicamente el epítope Th del epítope celular B, es decir el
fragmento N-terminal del péptido
A\beta_{1-42}, el Gly-Gly o el
espaciador \varepsilon-Lys puede interrumpir
cualquier estructura secundaria instrumental creada por la unión
del epítope Th con un fragmento N-terminal del
péptido A\beta_{1-42} y por lo tanto elimina la
interferencia entre las respuestas de la célula B y/o Th. B también
pueden formar un espaciador que actúa como una bisagra flexible que
mejora la separación del fragmento N-terminal del
péptido A\beta_{1-42}. Se encuentran ejemplos de
secuencias de bisagras flexibles de codificación en la región de
bisagra de cadena pesada de inmunoglobulina. Las secuencias de
bisagra flexible son comúnmente ricas en prolina. Una bisagra
flexible particularmente útil se proporciona por la secuencia
Pro-Pro-Xaa-Pro-Xaa-Pro
(SEC ID NO:77), en donde Xaa es cualquier aminoácido, y
preferentemente ácido aspártico. La separación conformacional
proporcionada por B permite interacciones más eficientes entre el
péptido inmunógeno presentado y las células B y las células Th
apropiadas para mejorar las respuestas inmunes ante el epítope Th y
el epítope de producción de anticuerpos o sus análogos
inmunológicamente funcionales.
Th es una secuencia de aminoácidos (aminoácidos
no naturales o naturales) que comprende un epítope Th. Un epítope
Th puede ser un epítope continuo o discontinuo. En un epítope Th
discontinuo, no es necesario cada aminoácido de Th. Un epítope Th
es capaz de mejorar o estimular la respuesta inmune para el
fragmento N-terminal del péptido
A\beta_{1-42}. Los epítopes que son
inmunodominantes y promiscuos son altamente y ampliamente reactivos
de forma cruzada con las poblaciones humanas y animales con tipos
MHC ampliamente divergentes (Partidos et al., 1991; US
5,759,551). Un segmento Th comprende una porción contigua de un
epítope Th que es suficiente para mejorar o estimular una respuesta
inmune para el fragmento N-terminal del péptido
A\beta_{1-42}.
Los epítopes de la presente invención es
derivado de un patógeno (SEC ID No: 1).
En los péptidos sintéticos de esta invención, el
epítope Th se une covalentemente a través del espaciador B para el
término N o el término C del fragmento terminal N del péptido
A\beta_{1-42}.
Los inmunógenos del péptido de esta invención
pueden hacerse mediante métodos de síntesis químicos que son bien
conocidos por los expertos en la técnica. Ver, por ejemplo, Fields
et al., Capítulo 3 en Synthetic Peptides: A User's
Guide, ed. Grant, W. H. Freeman & Co., Nueva York, 1992, p.
77. De aquí, los péptidos pueden sintetizarse usando las técnicas
Merrifield automatizadas de la síntesis de fase sólida con el
\alpha-NH_{2} protegido por la química
t-Boc o F-moc usando los aminoácidos
protegido por la cadena lateral en, por ejemplo, un Modelo
Sintetizador del Péptido de Biosystems Applied 430A ó 431. La
preparación de las construcciones de péptidos comprenden los
péptidos de biblioteca combinatorios para los epítopes Th que pueden
llevarse a cabo mediante proporcionar una mezcla de aminoácidos
alternativos para acoplarse en una posición variable dada. Después
del montaje completo del péptido inmunógeno deseado, la resina se
trató de conformidad con los procedimientos estándares para
penetrar el péptido de la resina y desbloquear los grupos
funcionales en las cadenas laterales de aminoácidos. El péptido
libre se purifica mediante HPLC y es bioquímicamente caracterizado
por ejemplo, mediante el análisis de aminoácidos o mediante
secuenciación. Los métodos de caracterización y purificación para
los péptidos son bien conocidos por un experto en la técnica.
El inmunogen de la presente invención también
puede prepararse como un polímero ramificado mediante la síntesis
del péptido deseado construida directamente en una resina de centro
poli-lisil ramificado (Wang et al., Science,
1991; 254:285-288).
Alternativamente, los inmunógenos del péptido
sintéticos más grandes pueden sintetizarse mediante las técnicas de
ADN recombinante bien conocidas. Dichas técnicas se proporcionan en
manuales estándares bien conocidos con protocolos detallados. Para
construir un gen que codifica un péptido de esta invención, la
secuencia de aminoácidos se traduce inversamente para obtener una
secuencia de ácido nucleico que codifica la secuencia de
aminoácidos, de preferencia con codones que son óptimos para el
organismo en los cuales el gen se expresa. Después, se hace un gen
sintético, típicamente mediante los oligonucleótidos de
sintetización que codifican el péptido y cualquier elemento
regulador, si es necesario. El gen sintético se inserta en un vector
de clonación expresado y se transfiere a una célula huésped. El
péptido posteriormente se expresa bajo condiciones apropiadas
adecuadas para el sistema de expresión seleccionada y el huésped. El
péptido se purifica y se caracteriza por métodos estándares.
La eficacia de la composición de péptidos de la
presente invención puede establecerse mediante la inyección en un
animal, por ejemplo, los conejillos de indias con una composición
inmunogénica que comprende los péptidos de la invención. Ver la
Tabla 4, SEC ID NOS: 70-75. La respuesta inmune
humoral para el fragmento N-terminal del péptido
A\beta y el péptido A\beta_{1-42} soluble se
monitorean. Una descripción detallada de los procedimientos usados
se proporciona en los Ejemplos posteriores en este documento.
Otro aspecto de esta invención proporciona una
composición del péptido que comprende una cantidad inmunológicamente
efectiva de uno o más inmunógenos del péptido de esta invención en
un sistema de distribución farmacéuticamente aceptable. Por
consiguiente, la composición del péptido sujeto puede formularse
como una vacuna usando adyuvantes farmacéuticamente aceptables,
portadores u otros ingredientes rutinariamente empleados en las
formulaciones de vacunas. Entre los ingredientes que pueden usarse
en esta invención están los adyuvantes o emulsificadores que
incluyen alumbre, liposina, saponina, escualeno, L212, lípido A
monofosfiril emulsigen (LMF), polisorbato 80, QS21, Montanido
ISA51, ISA35, ISA206 e ISA720, así como los otros adyuvantes y
emulsificadores eficientes. La composición puede formularse para la
liberación inmediata o liberación sostenida. La composición también
puede formularse para la inducción de inmunidad sistémica, es decir,
mediante atraparla en o en la coadministración con las
micropartículas. Dichas formulaciones son rápidamente disponibles
por un experto en la
técnica.
técnica.
Los inmunógenos de la presente invención pueden
administrarse vía cualquier ruta convencional, tales como la ruta
subcutánea, oral, intramuscular, parenteral o enteral. Los
inmunógenos pueden administrarse en una sola dosis o en dosis
múltiples. Un programa de inmunización apropiada se determina
rápidamente y está disponible para cualquier experto en la
técnica.
La composición del péptido de la presente
invención comprende una cantidad efectiva de uno o más inmunógenos
del péptido de la presente invención y un portador farmacéuticamente
aceptable. Dicha composición en una forma de dosis unitaria
apropiada generalmente contiene aproximadamente 0.25 \mug a
aproximadamente 500 \mug del inmunogen por kg por peso corporal.
Cuando se envía en dosis múltiples, la cantidad efectiva puede
dividirse convenientemente por unidad de dosis. Por ejemplo, una
dosis inicial, es decir 0.0025-0.5 mg por kg de peso
corporal; de preferencia 1-50 \mug por kg de peso
corporal del péptido inmunógeno es para administrarse mediante
inyección, de preferencia intramuscularmente, seguido por dosis
(fomentadoras) repetidas de una cantidad similar. Las dosis
dependerán de la edad, el peso y la salud en general del sujeto que
son bien conocidas en las técnicas terapéuticas y de vacunación.
La respuesta inmune de los inmunógenos del
péptido A\beta_{1-42} sintéticos pueden
mejorarse mediante el suministro a través de atraparla o en
micropartículas biodegradables del tipo descrito por O'Hagan et
al. (Vacuna, 1991; 9: 768-771). Los
inmunógenos pueden encapsularse con o sin un adyuvante en
micropartículas biodegradables para las respuestas inmunes
potenciales y para proporcionar la liberación de tiempo controlado
para las respuestas periódicas o sostenidas y para la administración
oral (O'Hagan et al., 1991 y Eldridge et al., 1991;
28:287-294).
Se proporcionan los siguientes ejemplos para
ilustrar la invención. El alcance de la invención no se limita a
los inmunógenos del péptido específico y las composiciones
proporcionadas. Los ejemplos demuestran que los inmunógenos del
péptido de la presente invención son útiles para producir los
anticuerpos en sitio dirigidos para ambos fragmentos
A\beta_{1-10} y
A\beta_{1-14} así como los anticuerpos reactivos
en forma cruzada para los péptidos
A\beta_{1-42} tan pronto como 4 semanas después
de la inmunización inicial.
\vskip1.000000\baselineskip
(Solamente que
referencia)
Los inmunógenos listados en la Tabla 4 (SEC ID
NOS: 70-76) se sintetizaron individualmente por la
técnica de síntesis de fase sólida Merrifield en los sintetizadores
de péptidos automatizados de Applied Biosystems (Modelos 430, 431 y
433A) usando química Fmoc. La preparación de los inmunógenos del
péptido comprenden una biblioteca combinatoria Th, es decir sitio de
Th artificial idealizado tal como MvF derivado de
Th1-8 (SEC ID NOS: 38-40), que puede
llevarse a cabo mediante proporcionar una mezcla de los aminoácidos
deseados para el acoplamiento químico en una posición dada como se
especifica en el diseño. Después de montaje completo del péptido
deseado, la resina se trató de conformidad con el procedimiento
estándar usando ácido trifluoroacético para penetrar el péptido de
la resina y desbloquear los grupos de protección en las cadenas
laterales del aminoácido. Los péptidos lavados, extraídos y
penetrados se purificaron mediante HPLC y se caracterizaron por
espectrometría de masa y HPLC de fase inversa.
\vskip1.000000\baselineskip
Los inmunógenos del péptido A\beta derivados
se evaluaron en grupos de los conejillos de indias como se
especificó por el protocolo de inmunización experimental
posteriormente señalado y mediante las pruebas serológicas para la
determinación de la inmunogenicidad.
Diseño Experimental Estándar:
- Inmunógenos:
- (1) péptido inmunógeno individual o
- \quad
- (2) una mezcla de inmunógenos del péptido molar igual como se especifica en cada ejemplo.
- Dosis:
- 100 \mug en 0.5 ml por inmunización a menos que se especifique de otra manera
- Ruta:
- intramuscular a menos que se especifique de otra manera
- Adyuvantes:
- Adyuvante de Freund Completo (AFC)/Incompleto Adyuvante (IFA) o agua en emulsiones de aceite a menos que se especifique de otra manera. Los grupos AFC/IFA recibieron AFC en la semana 0, IFA en las semanas subsecuentes.
- Programa de dosis:
- 0, 3 y 6 semanas o especificado de otra manera.
- Programa de sangrado:
- semanas 0, 5, 8 o especificado de otra manera.
- Especies:
- conejillos de indias Duncan-Hartley o especificados de otra manera.
- Prueba:
- ELISAs específicas para cada actividad anti-péptido del suero inmune. El sustrato de fase sólida fue el fragmento del péptido A\beta es decir A\beta_{1-14} o la longitud completa del A\beta_{1-42} (SEC ID NOS: 67 y 65). La sangre se colectó y se proceso en el suero y se almaceno antes de ELISA con los péptidos blanco.
\vskip1.000000\baselineskip
Las inmunoreactividades de los anticuerpos
producidos en contra de los péptidos A\beta y en contra de los
péptidos A\beta_{1-42} solubles se determinaron
por ELISAs (pruebas inmunosorbentes de enzima unida) usando placas
de microconcentración de fondo plano de 96 pozos que se cubren con
los fragmentos del péptido A\beta_{1-42}, SEC ID
NOS: 67 ó 65 como el inmunosorbente. Las alícuotas (100 \muL) de
la solución del péptido inmunógeno en una concentración de 5
\mug/ml se incubaron por 1 hora en 37ºC. Las placas se bloquearon
mediante otra incubación a 37ºC por 1 hora con una solución de 3% de
gelatina/PBS. Las placas bloqueadas posteriormente se secaron y
usaron para la prueba. Las alícuotas (100 \mul) del suero inmune
de prueba, iniciando con una dilución de 1:100 en un estabilizador
de la dilución de muestra y diez veces la dilución en serie, se
agregaron a las placas cubiertas del péptido. Las placas se
incubaron por 1 hora a 37ºC.
Las placas se lavaron seis veces con
estabilizador PBS/Tween® al 0.05%. 100 \mul del anticuerpo
específico de las especies anti-cabra marcado con
peroxidasa de rábano agregado en diluciones apropiadas en
estabilizador de la dilución del conjugado (estabilizador de fosfato
que contiene 0.5 M de NaCl y suero de cabra normal). Las placas se
incubaron por 1 hora en 37ºC antes de ser lavadas como se estableció
anteriormente. Las alícuotas (100 \mul) de la solución del
sustrato de o-fenilenodiamina posteriormente se
agregaron. El color se permitió desarrollarse por
5-15 minutos antes de que se detuviera la reacción
de color enzimático mediante la adición de 50 \mul de 2N
H_{2}SO_{4}. El A_{492 \ nm} de los contenidos de cada pozo se
leyó en un lector de placas. Las concentraciones de ELISA se
calcularon con base en el análisis de regresión lineal de los
absorbentes con el corte del juego A_{492 \ nm} en 0.5. El valor
de corte seleccionado fue riguroso con los valores de las muestras
de control normal diluidas siendo menos de 0.15.
\vskip1.000000\baselineskip
Para diseñar una vacuna sintética total que
genere un alto nivel de los anticuerpos de alta afinidad en contra
de los péptidos A\beta con alta reactividad cruzada para los
péptidos A\beta_{1-42} soluble y las placas en
el cerebro de pacientes con EA, las inmunogenicidades relativas del
A\beta_{1-42} y sus fragmentos
N-terminal se caracterizaron inicialmente. Para
determinar las propiedades inmunológicas relativas de varias
regiones dentro del péptido A\beta_{1-42}, un
adyuvante suave apropiado para el uso con humanos, el alumbre se
empleó en el primer estudio. Las inmunogenicidades del péptido
A\beta_{1-42} y el fragmento
N-terminal del mismo, el
A\beta_{1-28} se comparó. La evaluación de la
inmunogenicidad se llevó a cabo de conformidad con los
procedimientos descritos en el Ejemplo 2. Inesperadamente, el
A\beta_{1-28} se encontró que era más
inmunogénico que el péptido A\beta_{1-42},
indicando que existe inmunosupresión dentro del fragmento
C-terminal A\beta_{29-42} (Tabla
5).
Subsecuentemente, las inmunogenicidades de
A\beta_{1-28} se compararon a
A\beta_{1-14}, un fragmento
N-terminal de A\beta_{1-42}. Un
adyuvante más potente apropiado para el uso humano (Montanide ISA51,
Seppic, Paris, FR) se empleó para la preparación de una emulsión de
agua en aceite para la formulación de la vacuna. Con base a los
datos obtenidos como se muestran en la Tabla 6, las
inmunogenicidades relativas para los tres péptidos A\beta (es
decir A\beta_{1-14},
A\beta_{1-28} y
A\beta_{1-42}) se alinearon
A\beta_{1-28} >
A\beta_{1-42} >
A\beta_{1-14}. Sorpresivamente, la pérdida de la
terminal C 14mer de A\beta_{1-42} mejoró más que
reducir la inmunogenicidad. La respuesta del anticuerpo en contra
del A\beta se dirigió primeramente a la región
N-terminal, particularmente el fragmento
N-terminal de A\beta_{1-14} como
se muestra por los datos de ELISA (Tabla 6). Sin embargo, un
acortamiento adicional del fragmento A\beta1-28 de
la terminal C para formar el fragmento
A\beta_{1-14} resultó en una pérdida en la
inmunogenicidad.
El fragmento A\beta_{1-14}
contiene el sitio regulatorio/funcional principal EFRH, ubicado en
las posiciones 3-6 del péptido
A\beta_{1-42} como se reportó por Solomon et
al. El bloqueo de este epítope por los anticuerpos modulo los
dinámicos de la agregación así como la resolubilización de los
agregados recientemente formados (Soloman et al., Proc
Natl Acad. Sci, 1996; 93:452-455; Proc Natl
Aca Sci 1997; 94:4109-4112). La mayoría de los
anticuerpos anti-A\beta_{1-28} y
A\beta_{1-42} se dirigen en contra del fragmento
N-terminal del péptido
A\beta_{1-42} que contiene este epítope (Tabla
6). Sin embargo, el fragmento A\beta_{1-14} por
si mismo fue pobremente inmunogénico. Los resultados de este
experimento sugieren la presencia de un epítope Th intrínseco dentro
del segmento A\beta_{15-28}. Este epítope Th
intrínseco cuenta para las inmunogenicidades modestas de los
péptidos A\beta_{1-28} y
A\beta_{1-42} en los conejillos de indias.
La presencia de un epítope Th en el fragmento
A\beta_{15-28} es deseable. Sin embargo, es
deseable ser capaz de producir un inmunogen más potente para una
vacuna humana exitosa cuando se enfrentó con la limitación de una
molécula MHC humana restringida, el número de dosis apropiadas y el
tipo de adyuvantes permitidos para el uso humano. Por consiguiente,
se intenta la unión de un Th extrínseco o extranjero tal como aquel
derivado del HBV Th (SEC ID NO: 1) para la terminal C del péptido
A\beta_{1-28} (SEC ID NO:66). El epítope pH
extrínseco mejoró significativamente la inmunogenicidad del
fragmento A\beta_{1-28} como se muestra en la
Tabla 6. La respuesta del anticuerpo al inmunogen producido por
ingeniería con el fragmento A\beta_{1-28}
permanece dirigido al fragmento N-terminal funcional
del péptido inmunógeno (SEC ID NO: 70) marcando este para construir
un mejor inmunogen que el fragmento
A\beta_{1-28} o el fragmento
A\beta_{1-42} solo. Este péptido inmunógeno (SEC
ID NO:70) representa un péptido inmunógeno con la fórmula:
(A)_{n} (fragmento
N-terminal del péptido
A\beta)-(B)_{o}-(Th)_{m}
en
donde:
A es \alphaNH_{2} con
A\beta_{1-28} siendo un fragmento
N-terminal del
A\beta_{1-42};
B es glicina;
Th es un epítope de la célula T auxiliar
derivada de un patógeno extranjero,
HbsAg Th (SEC ID NO. 1) y en donde n es 1, m es
1 y o es 2.
\vskip1.000000\baselineskip
Dado Que el sitio regulador/funcional principal
que comprende los residuos EFRH se ubica en las posiciones
3-6 del péptido A\beta_{1-42}
(Soloman et al. Proc Natl Acad. Sci, 1996;
93:452-455; Proc Natl Aca Sci, 1997;
94:4109-4112) fue útil para explorar el fragmento
N-terminal más corto del péptido
A\beta_{1-42} como un sitio blanco de la célula
B óptimo en el A\beta para la incorporación en el inmunogen
sintético de la presente invención.
Cada uno de los varios fragmentos
N-terminales no inmunogénicos cortos de A\beta,
A\beta_{1-10},
A\beta_{1-12}, A\beta_{1-14}
junto con A\beta_{1-28} se incorpora en los
inmunógenos designados con un Th idealizado artificial
representativo (SEC ID NO:51). La unión se hizo a través de un
espaciador \varepsilonN-Lys. Las construcciones
producidas por ingeniería se formularon con fuertes adyuvantes
debido a la baja inmunogenicidad esperada de los fragmentos A\beta
cortos. Las tres construcciones sintéticas se formularon en el
adyuvante de Freud incompleto y completo y se probaron para sus
inmunogenicidades con base en los procedimientos descritos en el
Ejemplo 2. Como se muestra en la Tabla 7, todos los cuatro
inmunógenos del péptido fueron altamente inmunogénicos con las
concentraciones de ELISA Log_{10} en el rango de 4.3 a 5.6 [es
decir 10^{4.3} para 10^{5.6}] con altas reactividades cruzadas
para el péptido de longitud completa
A\beta_{1-42} después de solamente cuatro
semanas de la inmunización inicial. Los fragmentos más importantes
tan pequeños como el A\beta_{1-10},
A\beta_{1-12} y el
A\beta_{1-14}, cada uno unido al Th artificial
idealizado (SEC ID NO:51) se encontraron para ser altamente
inmunogénicos después de la unión de un epítope Th artificial
descrito (Tabla 7). Estos inmunógenos del péptido se designaron de
conformidad con la fórmula:
(A)_{n}-(fragmento
terminal N del péptido
A\beta)-(B)_{o}-(Th)_{m}
en
donde:
A es \alphaNH_{2}, en donde el fragmento
N-terminal es A\beta_{1-10},
A\beta_{1-12}, A\beta_{1-14}
o A\beta_{1-28};
B es \varepsilon-N lisina, un
espaciador unido a través de su grupo epsilon al siguiente
aminoácido;
Th es un epítope de la célula T auxiliar
derivada de un Th artificial idealizado, MVF Th1-16
(SEC ID NO:51), en donde n es 1, m es 1 y o es 1.
\vskip1.000000\baselineskip
Se encontró que la reducción adicional en la
longitud del fragmento N-terminal de A\beta para
disminuir más de 10mer resultaría en más limitada además de
inmunogenicidad indeseable. Parece que los péptidos más pequeños que
los 10 aminoácidos son problemáticos para el reconocimiento del
receptor mediante las moléculas MHC clase II (Immunology,
quinta edición, ed. Roitt et al., 1998; Mosby International
Ltd. Londres, pp88-89).
Con base a este estudio de A\beta, el sitio de
la célula B útil derivado de A\beta_{1-42}
debería estar en el rango de tamaño de aproximadamente 10 hasta
aproximadamente 28 residuos.
\vskip1.000000\baselineskip
El fragmento N-terminal no
inmunogénico tal como el A\beta_{1-14} del
péptido A\beta se unió a través de un espaciador
\varepsilonN-lisina para un péptido Th artificial
designado como MVF Th 1-16 (SEC ID NO:51) o a través
de un procedimiento de acoplamiento químico estándar para una
proteína portadora convencional HLO. Las dos construcciones
inmunogénicas se evaluaron en los conejillos de indias para sus
inmunogenicidades en "sitio dirigidas" relativas al péptido
A\beta y la reactividad respectiva resultante de los anticuerpos
hacia sus portadores respectivos, el epítope Th artificial o la
proteína portadora HLO, de conformidad con los procedimientos
descritos en el Ejemplo 2. El péptido
A\beta_{1-14} solo como un inmunogen de control
y las dos construcciones inmunogénicas se formularon en una emulsión
agua en aceite que contiene el adyuvante ISA51, una formulación que
es apropiada para el uso humano. Como se muestra en la Tabla 8, el
fragmento A\beta_{1-14}
N-terminal por si mismo no es inmunogénico como se
esperaba. El inmunogen sintético que comprende el fragmento
A\beta_{1-14} y el Th artificial (SEC ID NO:73)
se encontró que era altamente inmunogénico en la producción de
anticuerpos en sitio dirigidos para el
A\beta_{1-14}. Los anticuerpos también se
encontraron para ser altamente reactivos en forma cruzada para el
péptido A\beta_{1-42} soluble tan pronto como 4
semanas después de la inmunización inicial respectivamente). Cuando
estos sueros inmunes de la concentración alta reactiva A\beta se
probaron mediante ELISA en la placa cubierta con el péptido MVF
Th1-16 (SEC ID NO:51), se encontraron para ser
negativos (concentración Log_{10} de 0.038 y 0.064 por 4 a 6
semanas post inmunización inicial respectivamente) mostrando que no
se produjeron anticuerpos irrelevantes. Los datos obtenidos como se
muestran en la Tabla 8 claramente demostraron la característica de
sitio dirigida altamente específica del péptido inmunógeno de la
presente invención.
Los inmunógenos con la proteína portadora HLO se
encontraron para ser altamente inmunoreactivos con el conjugado de
la proteína portadora del péptido convencional (es decir
concentraciones Log_{10} de 4.903 y 5.018 por 4 a 6 semanas post
inmunización inicial respectivamente). Sin embargo, los anticuerpos
producidos fueron solamente moderadamente reactivos en forma cruzada
con el péptido A\beta_{1-42} soluble (es decir
con las concentraciones Log_{10} de 3.342 y 2.736 para 4 y 6
semanas post inmunización inicial respectivamente). Esto es
aproximadamente 10X para 100X menos que la SEC ID NO:73.
Inesperadamente, lo inmunógeno del péptido de la presente invención
fueron altamente enfocado y en sitio dirigidos. Solamente los
anticuerpos funcionalmente importantes hacia los sitios de
anti-agregación y disgregación en el fragmento
N-terminal del péptido A\beta se generaron más que
hacia los sitios portadores irrelevantes.
\vskip1.000000\baselineskip
Los cerebros en pacientes con EA con placas y
ovillos y vasos sanguíneos positivos S de tioflavina (VSST) que
contienen las placas amiloides se usaron para la evaluación de las
reactividades cruzadas para las placas seniles poliméricas del suero
inmune elevado en conejillos de indias y mandriles en contra de los
inmunógenos del péptido A\beta. Las placas y las reactividades
VSST se detectaron mediante el marcado de inmunoperoxidasa usando el
método del Complejo del anticuerpo Avidina Biotinilado (CBA) o
mediante el marcado de inmunofluorescencia usando el fragmento Fab
conjugado de rodamina de las especies específicas
anti-IgG. Todo el suero de los conejillos de indias
se probó en una dilución de 1:100 con las concentraciones del punto
terminal determinadas por algunas de las muestras. Todo el suero de
los mandriles se probó en una dilución de 1:50. La evaluación del
suero inmune y preinmune fue benignamente realizada bajo código por
el Dr. Gaskin como se describió (Gaskin et al., J. Exp Med.
165:245, 1987).
En la Figura 1, las secciones transversales
seriales de los cerebros de los 2 pacientes con EA fueron examinados
inicialmente en un aumento de 10X. Las secciones (a), (b) y (c) son
del Cerebro del paciente 1 con EA y (d), (e) y (f) fueron del
cerebro del paciente 2 con EA. El suero inmune y el suero normal
preinmune de los conejillos de indias se colectaron en las 6 semanas
post inmunización inicial y se probaron mediante el marcado con
inmunoperoxidasa en las secciones criostato de la corteza temporal
de EA rica en placas y ovillos de neurofilamentos (NFT). El suero
inmune usado en el primer estudio mostrado en las diapositivas de
las Figuras 1a y 1d se obtuvieron de los animales inmunizados con
A\beta_{1-28}-\varepsilonK-MvF
Th1-16 (SEC ID NO:74) preparado en una emulsión agua
en aceite ISA51. Los resultados mostraron enlace significativo en
ambas placas seniles y las placas amiloides en los vasos sanguíneos
S positivos de tioflavina (VSST). Las reactividades cruzadas del
suero inmune elevadas en contra del inmunogen equivalente preparados
en el AFC/IAFC se mostraron en las diapositivas de las Figuras 1b y
1d. Inesperadamente, en contraste con los resultados obtenidos con
la vacuna formulada con ISA51, el enlace preferencial para las
placas A\beta_{1-28} en los vasos sanguíneos
(VSST) se observaron para el suero elevado en contra de la vacuna
AFC/IAFC. Esto significa que los anticuerpos producido por la vacuna
formulada con ISA51 es distinguible de los anticuerpos elevados por
la vacuna formulada en AFC/IAFC. Además, los anticuerpos generados
por las vacunas formuladas de conformidad con la presente invención
proporcionaron anticuerpos que tienen más alta reactividad cruzada
para las placas seniles en el tejido del cerebro. El suero
pre-inmune no proporcionó el macado en
correspondencia con las secciones seriales mostradas en las
diapositivas de las Figuras 1c y 1f.
El marcado de Inmunoperoxidasa adicional de las
secciones transversales en serie del cerebro 1 con EA con suero
inmune y preinmune en la dilución 1:100 se muestran en las Figuras
2a a 2e en un aumento de 40X. El suero obtenido de los animales
inmunizados con
A\beta_{1-28}-\varepsilonK-MVF
Th1-16 (SEC ID NO:74) preparado en emulsión de agua
en aceite ISA 51 marcó fuertemente las placas que forman un modelo
de centros como se muestra en las diapositivas de las Figuras 2a y
2d. De nuevo, sorpresivamente el marcado con el suero inmune
preparado en contra de la formulación AFC/IAFC correspondiente
proporcionó un modelo de marcado diferente en esas reactividades con
las placas que estuvieron predominantemente en los vasos sanguíneos
como se muestran en la Figura 2b más que con las placas en el tejido
del cerebro. El suero preinmune no marcó las secciones como se
muestra en la Figura 2c. El suero hiperinmune generado por la
inmunización con el péptido A\beta_{1-42} solo
en AFC/IAFC a pesar de sus fuertes reactividades con
A\beta_{1-28} por ELISA, proporcionó un modelo
de marcado sorpresivamente débil en la sección mostrada en la Figura
2e.
El inmunomarcado similar del tejido cerebral con
EA se realizó con el suero preinmune e inmune agrupado en 11
obtenido de loas conejillos de indias se inmunizó con varias
formulaciones de vacuna descritas en los Ejemplos 3, 4 y 5. Estos
sueros también se evaluaron para sus reactividades de anticuerpos
con el sitio funcional por ELISA A\beta_{1-14} y
con el A\beta_{1-42} soluble mediante ELISA
A\beta_{1-42} (Tabla 9). En general, se
encontraron tendencias paralelas con el suero probado en todas las
tres pruebas. Como se muestra en la Tabla 9, las reactividades del
anti-péptido del suero pre-inmune y
el suero elevado en contra del péptido
A\beta_{1-14} corto formulado solo en la
emulsión de agua en aceite ISA51 por ELISA fueron bajas y las
reactividades cruzadas de las placas fueron insignificantes. Las
reactividades modestas se encontraron con el suero de loas animales
vacunados con el péptido A\beta_{1-28} solo
formulado con Alumbre y en ISA51 y el
A\beta_{1-14} conjugado con HLO y formulado en
ISA51. Puesto que, las reactividades dirigidas en sitio
significantes para el sitio A\beta_{1-14}
funcional para el A\beta soluble y para las placas y el VSST en
las secciones de tejido cerebral en pacientes con EA se encontraron
con el suero de los animales inmunizados con los inmunógenos
Th/A\beta sintéticos de la presente invención. Los resultados
obtenidos de estos estudios, por lo tanto demostraron excelente y
útil inmunogenicidad de los inmunógenos del péptido que comprende el
fragmento N-terminal del
A\beta_{1-42} teniendo aminoácidos de
1-28 a aproximadamente 1-10 unido a
los epítopes Th extranjeros. Además, los resultados mostraron que la
presencia de un epítope Th extranjero mejora la inmunogenicidad de
los inmunógenos del péptido de la presente invención a una extensión
sorprendente. Los inmunógenos del péptido de la presente invención
en las formulaciones de la vacuna clínicamente aceptables para
usarse en los anticuerpos generados por los humanos que tienen la
reactividad cruzada deseada para las placas seniles en los tejidos
cerebrales de los pacientes con EA.
\vskip1.000000\baselineskip
Se colectó un inmunogen sintético
representativo,
A\beta_{1-28}-\varepsilon-K-MvF
Th1-16 (SEC ID NO:74), formulado en la emulsión agua
en aceite ISA51 en los niveles de dosis de 25 ug/0.5 ml, 100 ug/0.5
ml y 400 ug/0.5 ml se les dieron a tres mandriles Y299, X398, X1198
en un programa de 0, 3 y 6 semanas post inmunización inicial (spi).
Por comparación a un cuarto mandril X798 se le dieron dosis de 100
ug/0.5 ml de una mezcla equimolar de los péptidos libres
A\beta_{128} y A\beta_{1-42} formulados en
alumbre, el adyuvante estándar aprobado para el uso humano. El suero
preinmune se usó como el control negativo.
El suero de todos los cuatro animales
inmunizados se colectó y se evaluó por sus reactividades al
anticuerpo con el sitio funcional mediante ELISA
A\beta_{1-14} y para las reactividades con el
A\beta_{1-42} mediante
A\beta_{1-42} (para el suero colectado en 0, 5 y
8 spi). Las reactividades cruzadas del anti-suero
(solamente 8 spi) con las placas seniles y las placas en los vasos
sanguíneos S positivos de tioflavina se evaluaron por el
inmunomarcado como se describió en el Ejemplo 6. En lugar de usar el
Ig anti-mandril, el detector de anticuerpos usado es
un fragmento Fab del IgG anti-humano que reconoce
todos los isotipos humanos y es reactivo en forma cruzada con el IgG
de mandril.
De nuevo las tendencias paralelas se encontraron
con el suero probado en todas las tres pruebas. Como se muestra en
la Tabla 10, el suero pre-inmune fue negativo. Las
reactividades de ELISA modestas se encontraron con el suero del
animal X798 activado con A\beta_{1-28} y
A\beta_{1-42} formulado en Alumbre. Sin embargo,
la reactividad de este suero fue débil para el reconocimiento de las
placas seniles. En contraste, las reactividades en sitio dirigidas
significantes para el sitio funcional de
A\beta_{1-14} para el
A\beta_{1-42} y las placas y VSST en secciones
cerebrales de pacientes con EA se encontraron con el suero colectado
en las 8 semanas post inmunización inicial de los animales
inmunizados con la composición representativa de la invención (SEC
ID NO:74) en ambas dosis de 100 ug/0.5 ml y 400 ug/0.5 ml formuladas
con ISA51. Los resultados obtenidos de este estudio en mandriles,
por lo tanto demostró la utilidad del inmunogen de la presente
invención en una formulación de vacuna apropiada para los humanos.
La mejora en la inmunogenicidad (incremento de 10 a 100X en las
concentraciones del anticuerpo específico para el sitio funcional de
A\beta) es muy significante en comparación con la vacuna del
péptido del arte previo con la sensibilidad inmune en los mandriles
muy parecido con la de los humanos.
Similarmente, una mezcla que contiene dos o tres
inmunógenos sintéticos de la presente invención pueden usarse para
la formulación en las vacunas en desde aproximadamente 25 a 1000 ug
por dosis para producir los anticuerpos
anti-A\beta_{1-14} funcionales
en las poblaciones humanas genéticamente diversas para la prevención
y tratamiento de la EA. Se espera inmunogenicidad amplia en humanos
debido a la presencia de un epítope Th promiscuo en el péptido
inmunógeno de la invención que se proporciona para llevar a cabo el
reconocimiento amplio de MHC.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(Tabla pasa a página
siguiente)
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\global\parskip0.000000\baselineskip
<110> Wang, Chang Yi
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<120> Composición de péptido inmunógeno
como vacunas para la prevención y tratamiento del Alzheimer
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<130> 1151-4167
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<140> TBA
\vskip0.400000\baselineskip
<141>
2001-5-25
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<160> 76
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<170> PatentIn Ver. 2.0
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 1
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 2
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 30
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Bordetella pertussis
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 2
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 3
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 17
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Clostridium tetani
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 3
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 4
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 22
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Clostridium tetani
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 4
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 5
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Bordetella pertussis
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 5
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 6
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 27
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Clostridium tetani
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 6
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 7
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 24
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Pertusaria trachythallina
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 7
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 8
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 8
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 9
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 20
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Escherichia coli
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 9
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 10
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 17
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Clostridium tetani
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 10
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 11
\vskip0.400000\baselineskip
<211>16
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Clostridium tetani
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 11
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 12
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 25
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Chlamydia trachomatis
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 12
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 13
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 23
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Diphtheria
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 13
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 14
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 39
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Diphtheria
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 14
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 21
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Plasmodium falciparum
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 15
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 16
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 17
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Schistosoma mansoni
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 16
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 17
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 14
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Escherichia coli
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 17
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 18
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Escherichia coli
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 18
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 20
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Escherichia coli
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 19
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 20
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 20
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 20
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 21
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 12
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Chlamydia trachimatis
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 21
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 22
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 22
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 23
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 16
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 23
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 24
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 16
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 24
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 25
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 16
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 25
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 26
\vskip0.400000\baselineskip
<211>16
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 26
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 27
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 27
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 28
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 28
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 29
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 29
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 30
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 30
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 31
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 31
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 32
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 32
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 33
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 33
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 34
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 34
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 35
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 35
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 36
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 36
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 37
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 37
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 38
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 38
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 39
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 18
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 39
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 40
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 40
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 41
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 41
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 42
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 42
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 43
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 43
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 44
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 44
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 45
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 45
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 46
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 46
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 47
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 47
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 48
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 48
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 49
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 49
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 50
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 50
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 51
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 51
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 52
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 15
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 52
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 53
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 18
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 53
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 54
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 14
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 54
\vskip1.000000\baselineskip
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 55
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 18
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 55
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 56
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 18
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 56
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 57
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 18
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 57
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 58
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 18
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 58
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 59
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 18
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 59
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 60
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 18
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 60
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 61
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 17
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 61
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 62
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 18
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
<2Í3> Virus de la Hepatitis B
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 62
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 63
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 16
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 63
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 64
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 19
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 64
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 65
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 42
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo sapiens
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 65
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 66
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 28
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo sapiens
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 66
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 67
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 14
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo sapiens
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 67
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 68
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 12
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo sapiens
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 68
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 69
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 10
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Homo sapiens
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 69
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 70
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 45
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus de la Hepatitis B
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 70
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 71
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 30
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 71
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 72
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 32
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 72
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 73
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 34
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 73
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 74
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 48
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\newpage
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 74
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 75
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 34
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 75
\hskip1cm
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 76
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 34
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Virus del Sarampión
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 76
\hskip1cm
Claims (6)
1. Un péptido inmunógeno representado por una de
las siguientes fórmulas:
- \quad
- (A)_{n}-(fragmento N-terminal del péptido A\beta_{1-42})-(B)_{o}-(Th)_{m}-X {}\hskip0.5cm ó
- \quad
- (A)_{n}-(Th)_{m}-(B)_{o}-(fragmento N-terminal del péptido A\beta_{1-42})-X;
en
donde
cada A es independientemente un aminoácido;
Th es el epítope de la célula T de SEC ID NO:
1;
el fragmento N-terminal del
péptido A\beta_{1-42} es el péptido de SEC ID
NO: 67;
cada B es un grupo de enlace seleccionado del
grupo que consiste de gly-gly, (\alpha,
\varepsilon-N)Lys,
Pro-Pro-Xaa-Pro-Xaa-Pro;
X es un \alpha-COOH o
\alpha-CONH_{2} de un aminoácido;
n es desde 0 a aproximadamente 10;
m es desde 1 a aproximadamente 4 y
o es desde 0 a aproximadamente 10.
\vskip1.000000\baselineskip
2. Un péptido inmunógeno de conformidad con la
reivindicación 1, en donde el espaciador es
Gly-Gly.
3. Un péptido inmunógeno de conformidad con la
reivindicación 1, en donde el espaciador es
\varepsilon-N-Lys.
4. Un péptido inmunógeno de conformidad con la
reivindicación 1, en donde el espaciador es
Pro-Pro-Xaa-Pro-Xaa-Pro.
5. Una composición que comprende un péptido
inmunógeno de conformidad con la reivindicación 1 a 4 y un adyuvante
y/o portador farmacéuticamente aceptable.
6. El uso de la composición de la reivindicación
5 para la preparación de un medicamento para la prevención o
tratamiento de la Enfermedad de Alzheimer.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US865294 | 1986-05-21 | ||
US09/865,294 US6906169B2 (en) | 2001-05-25 | 2001-05-25 | Immunogenic peptide composition comprising measles virus Fprotein Thelper cell epitope (MUFThl-16) and N-terminus of β-amyloid peptide |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
ES2348975T3 true ES2348975T3 (es) | 2010-12-20 |
Family
ID=25345158
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES02731223T Expired - Lifetime ES2348975T3 (es) | 2001-05-25 | 2002-04-02 | Composicion de péptido inmunógeno para la prevencion y tratamiento de la enfermedad de alzehimer. |
ES09168110T Expired - Lifetime ES2360465T3 (es) | 2001-05-25 | 2002-04-02 | Composición de péptido inmunogénico para la prevención y el tratamiento de la enfermedad de alzheimer. |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
ES09168110T Expired - Lifetime ES2360465T3 (es) | 2001-05-25 | 2002-04-02 | Composición de péptido inmunogénico para la prevención y el tratamiento de la enfermedad de alzheimer. |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US6906169B2 (es) |
EP (2) | EP2123671B1 (es) |
JP (3) | JP4440544B2 (es) |
CN (2) | CN101372511B (es) |
AT (2) | ATE496937T1 (es) |
AU (2) | AU2002303211B2 (es) |
BR (1) | BRPI0210010B8 (es) |
CA (2) | CA2448171A1 (es) |
DE (2) | DE60237044D1 (es) |
DK (2) | DK2123671T3 (es) |
ES (2) | ES2348975T3 (es) |
HK (2) | HK1127898A1 (es) |
MX (1) | MXPA03010631A (es) |
TW (1) | TWI252233B (es) |
WO (1) | WO2002096350A2 (es) |
ZA (1) | ZA200308767B (es) |
Families Citing this family (78)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
TWI239847B (en) | 1997-12-02 | 2005-09-21 | Elan Pharm Inc | N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease |
US6905686B1 (en) | 1997-12-02 | 2005-06-14 | Neuralab Limited | Active immunization for treatment of alzheimer's disease |
US6787523B1 (en) | 1997-12-02 | 2004-09-07 | Neuralab Limited | Prevention and treatment of amyloidogenic disease |
US6913745B1 (en) | 1997-12-02 | 2005-07-05 | Neuralab Limited | Passive immunization of Alzheimer's disease |
US7964192B1 (en) | 1997-12-02 | 2011-06-21 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Prevention and treatment of amyloidgenic disease |
US20080050367A1 (en) * | 1998-04-07 | 2008-02-28 | Guriq Basi | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US7790856B2 (en) * | 1998-04-07 | 2010-09-07 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US6750324B1 (en) | 1997-12-02 | 2004-06-15 | Neuralab Limited | Humanized and chimeric N-terminal amyloid beta-antibodies |
US7179892B2 (en) * | 2000-12-06 | 2007-02-20 | Neuralab Limited | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
US6761888B1 (en) * | 2000-05-26 | 2004-07-13 | Neuralab Limited | Passive immunization treatment of Alzheimer's disease |
US20050059591A1 (en) * | 1998-04-07 | 2005-03-17 | Neuralab Limited | Prevention and treatment of amyloidogenic disease |
US20030147882A1 (en) * | 1998-05-21 | 2003-08-07 | Alan Solomon | Methods for amyloid removal using anti-amyloid antibodies |
US6787637B1 (en) | 1999-05-28 | 2004-09-07 | Neuralab Limited | N-Terminal amyloid-β antibodies |
RS51164B (sr) * | 2000-02-21 | 2010-10-31 | H. Lundbeck A/S. | Postupak za smanjenje količine amiloida |
MXPA02007796A (es) * | 2000-02-21 | 2003-12-08 | Pharmexa As | Metodo novedoso para la disminucion de cuerpos amiloides. |
US7700751B2 (en) | 2000-12-06 | 2010-04-20 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize β-amyloid peptide |
PE20020574A1 (es) * | 2000-12-06 | 2002-07-02 | Wyeth Corp | Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido amiloideo beta |
US6906169B2 (en) * | 2001-05-25 | 2005-06-14 | United Biomedical, Inc. | Immunogenic peptide composition comprising measles virus Fprotein Thelper cell epitope (MUFThl-16) and N-terminus of β-amyloid peptide |
MY144532A (en) * | 2001-08-20 | 2011-09-30 | Lundbeck & Co As H | Novel method for down-regulation of amyloid |
CA2466841A1 (en) * | 2001-11-21 | 2003-06-05 | New York University | Synthetic immunogenic but non-deposit-forming polypeptides and peptides homologous to amyloid .beta., prion protein, amylin, .alpha.-synuclein, or polyglutamine repeats for induction of an immune response thereto |
US8088388B2 (en) * | 2002-02-14 | 2012-01-03 | United Biomedical, Inc. | Stabilized synthetic immunogen delivery system |
US20040001848A1 (en) * | 2002-03-01 | 2004-01-01 | Szu-Yi Chou | Method of producing disease-specific antigens |
MY139983A (en) * | 2002-03-12 | 2009-11-30 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
NZ536064A (en) * | 2002-04-19 | 2008-06-30 | Univ Toronto | Immunological methods and compositions for the treatment of alzheimer's disease |
EP1523499A2 (en) * | 2002-07-24 | 2005-04-20 | Innogenetics N.V. | Fragments of beta-amyloid as targets for vaccination against alzheimer disease |
DE10303974A1 (de) | 2003-01-31 | 2004-08-05 | Abbott Gmbh & Co. Kg | Amyloid-β(1-42)-Oligomere, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung |
TWI374893B (en) | 2003-05-30 | 2012-10-21 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
JP4888876B2 (ja) | 2003-06-13 | 2012-02-29 | 田平 武 | アルツハイマー病の治療のための組換えアデノ随伴ウィルスベクター |
EP1515158B1 (en) * | 2003-09-09 | 2013-07-17 | Esaote S.p.A. | Ultrasound imaging method combined with the presence of contrast media in the body under examination |
US8227403B2 (en) | 2003-12-17 | 2012-07-24 | Wyeth Llc | A-β immunogenic peptide carrier conjugates and methods of producing same |
WO2005072777A2 (en) * | 2004-01-28 | 2005-08-11 | Curix Aps | Conjugates of amyloid proteins as vaccines for amyloid-related diseases |
CU23297A1 (es) * | 2004-11-16 | 2008-07-24 | Ct De Inmunologa A Molecular | Formulaciones inmunoterapã0/00uticas para la inducciã"n de autoanticuerpos bloqueadores de la uniã"n de interleucina-2 a su receptor. su uso en el tratamiento del cã ncer |
GB0427267D0 (en) * | 2004-12-13 | 2005-01-12 | Maria Teresa De Magistris | Peptide adjuvants |
US7625560B2 (en) * | 2004-12-15 | 2009-12-01 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
TW200635608A (en) * | 2004-12-15 | 2006-10-16 | Neuralab Ltd | Aβ antibodies for use in improving cognition |
WO2006066089A1 (en) * | 2004-12-15 | 2006-06-22 | Neuralab Limited | Humanized amyloid beta antibodies for use in improving cognition |
RU2432362C2 (ru) | 2005-11-30 | 2011-10-27 | Эбботт Лэборетриз | Моноклональные антитела и их применения |
BRPI0619249A2 (pt) | 2005-11-30 | 2011-09-20 | Abbott Lab | anticorpos anti-globulÈmeros-aß, frações que se ligam a antìgeno destes, hibridomas correspondentes, ácidos nucléicos, vetores, células hospedeiras, métodos de produzir os ditos anticorpos, composições compreendendo os ditos anticorpos, usos dos ditos anticorpos e métodos de usar os ditos anticorpos |
NO346055B1 (no) * | 2005-12-12 | 2022-01-24 | Ac Immune Sa | Antigen konstruksjon, vaksinesammensetning og fremgangsmåte for produksjon derav. |
GB0613977D0 (en) | 2006-02-07 | 2006-08-23 | Peptcell Ltd | Peptide sequences and compositions |
US8034353B2 (en) | 2006-02-22 | 2011-10-11 | Kabushiki Kaisha Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo | Peptide vaccine for inducing the production of anti-amyloid β-peptide antibody |
US8784810B2 (en) * | 2006-04-18 | 2014-07-22 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of amyloidogenic diseases |
CN101058608B (zh) * | 2006-04-21 | 2011-02-23 | 杜如昱 | 人类抗Aβ1-32淀粉样蛋白抗体、其纯化方法及用途 |
WO2008042024A2 (en) | 2006-06-01 | 2008-04-10 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | Neuroactive fragments of app |
US8455626B2 (en) | 2006-11-30 | 2013-06-04 | Abbott Laboratories | Aβ conformer selective anti-aβ globulomer monoclonal antibodies |
EP2486928A1 (en) | 2007-02-27 | 2012-08-15 | Abbott GmbH & Co. KG | Method for the treatment of amyloidoses |
US20080292625A1 (en) * | 2007-04-18 | 2008-11-27 | Sally Schroeter | Prevention and treatment of cerebral amyloid angiopathy |
US8003097B2 (en) * | 2007-04-18 | 2011-08-23 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of cerebral amyloid angiopathy |
JP5349297B2 (ja) * | 2007-04-20 | 2013-11-20 | 一般財団法人化学及血清療法研究所 | ペプチド免疫応答増強方法 |
PT2182983E (pt) | 2007-07-27 | 2014-09-01 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Tratamento de doenças amiloidogénicas com anticorpos anti-abeta humanizados |
JO3076B1 (ar) * | 2007-10-17 | 2017-03-15 | Janssen Alzheimer Immunotherap | نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe |
EP2106802A1 (en) | 2008-04-02 | 2009-10-07 | SIGMA-TAU Industrie Farmaceutiche Riunite S.p.A. | Modified peptides as synthetic vaccines in amyloid-associated disease |
WO2010016912A2 (en) | 2008-08-07 | 2010-02-11 | Mercia Pharma, Llc | Immunotherapeutic compositions for the treatment of alzheimer's disease |
WO2010080188A2 (en) * | 2008-10-14 | 2010-07-15 | The Regents Of The University Of Michigan | Epitope targeted anthrax vaccine |
EP2348042B1 (en) * | 2008-10-16 | 2017-07-05 | The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute | Modified amyloid beta peptide |
US9067981B1 (en) | 2008-10-30 | 2015-06-30 | Janssen Sciences Ireland Uc | Hybrid amyloid-beta antibodies |
DE102008037564A1 (de) | 2008-11-19 | 2010-05-20 | Forschungszentrum Jülich GmbH | Zusammensetzung zur Herstellung von anti-Amyloid beta-Peptid-Antikörpern mit D-Peptiden |
EP2440234A4 (en) | 2009-06-10 | 2013-11-06 | Univ New York | IMMUNOLOGICAL TARGETING OF PATHOLOGICAL TAU PROTEINS |
US20110221240A1 (en) * | 2010-03-11 | 2011-09-15 | Ziming Shen | Compact children's table and stool set |
WO2011130377A2 (en) | 2010-04-15 | 2011-10-20 | Abbott Laboratories | Amyloid-beta binding proteins |
US9932372B2 (en) | 2010-07-08 | 2018-04-03 | United Biomedical, Inc. | Designer peptide-based PCV2 vaccine |
WO2012024187A1 (en) | 2010-08-14 | 2012-02-23 | Abbott Laboratories | Amyloid-beta binding proteins |
US20120328605A1 (en) * | 2010-10-27 | 2012-12-27 | Daniel Larocque | Compositions and uses |
GB201113570D0 (en) | 2011-08-05 | 2011-09-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | Vaccine |
CN102775478B (zh) * | 2012-08-10 | 2013-06-19 | 申联生物医药(上海)有限公司 | 口蹄疫病毒抗原多肽及疫苗 |
WO2014031697A2 (en) * | 2012-08-21 | 2014-02-27 | The Institute Of Molecular Medicine | COMPOSITIONS AND METHODS RELATED TO DISEASES ASSOCIATED WITH DEPOSITS OF AMYLOID, TAU, AND α-SYNUCLEIN |
US9102752B2 (en) * | 2013-03-15 | 2015-08-11 | United Biomedical, Inc. | Peptide vaccine for prevention and immunotherapy of dementia of the Alzheimer's type |
EP3027205A4 (en) | 2013-07-28 | 2017-07-19 | Qantu Therapeutics, Inc. | Vaccine formulations that induce a th2 immune response |
TWI609026B (zh) * | 2014-03-14 | 2017-12-21 | 美國聯合生物醫學公司 | 抑制與免疫治療阿茲海默型癡呆的胜肽疫苗 |
US20210138049A1 (en) * | 2017-06-16 | 2021-05-13 | United Neuroscience | Peptide immunogens from the c-terminal end of alpha-synuclein protein and formulations thereof for treatment of synucleinopathies |
WO2019084488A1 (en) * | 2017-10-27 | 2019-05-02 | United Neuroscience | IMMUNOGENIC CONSTRUCTS OF PEPTIDE TAU |
JP7239203B2 (ja) * | 2017-12-31 | 2023-03-14 | ユナイテッド・バイオメディカル・インコーポレーテッド | IgE媒介型アレルギー性疾患治療のための、膜結合型IgEを標的とするペプチド免疫原及びそれらの製剤 |
AU2019262609A1 (en) * | 2018-05-04 | 2020-12-03 | Ubi Ip Holdings | Artificial promiscuous T helper cell epitopes that facilitate targeted antibody production with limited T cell inflammatory response |
AU2019354291A1 (en) * | 2018-10-01 | 2021-05-06 | United Neuroscience | Peptide immunogen constructs directed against dipeptide repeat proteins from C9ORF72 |
CN110684122B (zh) * | 2019-10-29 | 2021-03-02 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 重组Tau表位嵌合多聚体抗原、其制备方法和应用 |
CN113603773B (zh) * | 2021-08-17 | 2023-05-09 | 中国医科大学附属第一医院 | 靶向淀粉样蛋白的单克隆抗体7b8、分泌该抗体的杂交瘤细胞株及应用 |
TW202323275A (zh) * | 2021-09-01 | 2023-06-16 | 美商瓦辛尼帝股份有限公司 | 預防及治療突觸核蛋白病的方法 |
CN116063447B (zh) * | 2022-09-13 | 2023-11-03 | 北京湃德智健科技有限公司 | 用于检测adap自身抗体的抗原多肽及其应用 |
Family Cites Families (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2980677B2 (ja) | 1990-04-27 | 1999-11-22 | マクマイケル,ジョン | 不正常なアミロイドβタンパク質と関連する中枢神経系疾患状態の治療のための方法および組成物 |
US5753624A (en) * | 1990-04-27 | 1998-05-19 | Milkhaus Laboratory, Inc. | Materials and methods for treatment of plaquing disease |
EP1308461A3 (en) * | 1993-01-25 | 2004-02-11 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Antibodies to beta-amyloids or their derivatives and use thereof |
US5955317A (en) * | 1993-01-25 | 1999-09-21 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Antibodies to β-amyloids or their derivatives and use thereof |
US5759551A (en) | 1993-04-27 | 1998-06-02 | United Biomedical, Inc. | Immunogenic LHRH peptide constructs and synthetic universal immune stimulators for vaccines |
JP3795914B2 (ja) * | 1993-04-27 | 2006-07-12 | ユナイテッド・バイオメディカル・インコーポレイテッド | ワクチン用免疫原性lhrhペプチド構築体および合成普遍免疫刺激器 |
WO1994028412A1 (en) * | 1993-05-28 | 1994-12-08 | The Miriam Hospital | Composition and method for in vivo imaging of amyloid deposits |
WO1995011998A1 (en) | 1993-10-26 | 1995-05-04 | United Biomedical, Inc. | Structured synthetic antigen libraries as diagnostics, vaccines and therapeutics |
US7964192B1 (en) * | 1997-12-02 | 2011-06-21 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Prevention and treatment of amyloidgenic disease |
US6787523B1 (en) * | 1997-12-02 | 2004-09-07 | Neuralab Limited | Prevention and treatment of amyloidogenic disease |
US6750324B1 (en) * | 1997-12-02 | 2004-06-15 | Neuralab Limited | Humanized and chimeric N-terminal amyloid beta-antibodies |
TWI239847B (en) | 1997-12-02 | 2005-09-21 | Elan Pharm Inc | N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease |
TWI229679B (en) | 1998-06-20 | 2005-03-21 | United Biomedical Inc | Artificial T helper cell epitopes as immune stimulators for synthetic peptide immunogens |
US6025468A (en) * | 1998-06-20 | 2000-02-15 | United Biomedical, Inc. | Artificial T helper cell epitopes as immune stimulators for synthetic peptide immunogens including immunogenic LHRH peptides |
UA81216C2 (en) * | 1999-06-01 | 2007-12-25 | Prevention and treatment of amyloid disease | |
IL142948A0 (en) * | 1999-09-03 | 2002-04-21 | Univ Ramot | Agents and compositions and methods utilizing same useful in diagnosing and/or treating or preventing plaque forming diseases |
IL149976A0 (en) | 1999-12-08 | 2002-12-01 | Mindset Biopharmaceuticals Usa | Chimeric peptides as immunogens, antibodies thereto, and methods for immunization using chimeric peptides or antibodies |
US20030165481A1 (en) | 2000-02-24 | 2003-09-04 | Hersh Louis B. | Amyloid peptide inactivating enzyme to treat Alzheimer's disease |
US6906169B2 (en) * | 2001-05-25 | 2005-06-14 | United Biomedical, Inc. | Immunogenic peptide composition comprising measles virus Fprotein Thelper cell epitope (MUFThl-16) and N-terminus of β-amyloid peptide |
-
2001
- 2001-05-25 US US09/865,294 patent/US6906169B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2002
- 2002-03-18 TW TW091105087A patent/TWI252233B/zh not_active IP Right Cessation
- 2002-04-02 AT AT09168110T patent/ATE496937T1/de active
- 2002-04-02 DK DK09168110.6T patent/DK2123671T3/da active
- 2002-04-02 DE DE60237044T patent/DE60237044D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-04-02 AU AU2002303211A patent/AU2002303211B2/en not_active Ceased
- 2002-04-02 WO PCT/US2002/010293 patent/WO2002096350A2/en active Search and Examination
- 2002-04-02 CA CA002448171A patent/CA2448171A1/en not_active Abandoned
- 2002-04-02 ES ES02731223T patent/ES2348975T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-04-02 CA CA2665748A patent/CA2665748C/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-04-02 BR BR0210010-0 patent/BRPI0210010B8/pt not_active IP Right Cessation
- 2002-04-02 ES ES09168110T patent/ES2360465T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-04-02 EP EP09168110A patent/EP2123671B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-04-02 AT AT02731223T patent/ATE474000T1/de active
- 2002-04-02 EP EP02731223A patent/EP1497313B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-04-02 DE DE60239093T patent/DE60239093D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-04-02 CN CN2008101692748A patent/CN101372511B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2002-04-02 DK DK02731223.0T patent/DK1497313T3/da active
- 2002-04-02 CN CN028106210A patent/CN1568329B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2002-04-02 MX MXPA03010631A patent/MXPA03010631A/es active IP Right Grant
- 2002-04-02 JP JP2002592863A patent/JP4440544B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2003
- 2003-11-11 ZA ZA2003/08767A patent/ZA200308767B/en unknown
-
2004
- 2004-06-04 US US10/861,614 patent/US7951909B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2005
- 2005-03-08 HK HK09107043.3A patent/HK1127898A1/xx not_active IP Right Cessation
- 2005-03-08 HK HK05102035.8A patent/HK1068215A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2008
- 2008-05-22 AU AU2008202270A patent/AU2008202270B2/en not_active Ceased
-
2009
- 2009-05-22 JP JP2009123671A patent/JP5300593B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2009-05-22 JP JP2009123670A patent/JP5300592B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2010
- 2010-12-03 US US12/960,125 patent/US8232373B2/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
ES2348975T3 (es) | Composicion de péptido inmunógeno para la prevencion y tratamiento de la enfermedad de alzehimer. | |
AU2002303211A1 (en) | Immunogenic peptide composition for the prevention and treatment of alzheimer's disease | |
AU2006326283B2 (en) | Therapeutic vaccine | |
ES2397641T3 (es) | Vacuna contra el intermediario de plegado amiloide | |
PT1237930E (pt) | Péptidos beta amiloides quiméricos | |
Wang et al. | Immunogenic peptide composition comprising a promiscuous helper T cell epitope and an N-terminal fragment of Abeta (1-42) peptide |