ES2345482T3 - Casete y ensamblado de incorporacion, dispositivos de estadificacion, y procedimientos para manipular muestras de tejido. - Google Patents
Casete y ensamblado de incorporacion, dispositivos de estadificacion, y procedimientos para manipular muestras de tejido. Download PDFInfo
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Abstract
Casete (10, 120) para encerrar una muestra de tejido que comprende un cuerpo (20) incluyendo una pared inferior (24, 126) y una pluralidad de paredes laterales (22, 124) que se extienden hacia arriba respecto a dicha pared inferior (24, 126) para definir un espacio interior que recibe la muestra de tejido, en el que al menos dos de dichas paredes laterales (22a, 22c, 124a, 124b) están posicionadas en una relación opuesta entre sí, caracterizado por el hecho de que dicha pared inferior (24, 126) y dicha pluralidad de paredes laterales (22, 124) están construidas de un material capaz de ser seccionado en un micrótomo, y por el hecho de que la dimensión entre dichas paredes laterales opuestas (22a, 22c, 124a, 124b) varía a lo largo de la longitud de dichas paredes laterales opuestas (22a, 22c, 124a, 124b).
Description
Casete y ensamblado de incorporación,
dispositivos de estadificación, y procedimientos para manipular
muestras de tejido.
La presente invención se refiere generalmente a
soportes para manipular e incorporar muestras de tejidos para
análisis patológicos y, más particularmente, a casetes que pueden
recibir una o más muestras de tejidos e incorporarse y
consecuentemente cortarse con un micrótomo con la muestra o muestras
de tejidos.
Para diagnosticar de forma precisa varias
enfermedades y condiciones del tejido, el personal médico debe
extraer una o más muestras de tejido del cuerpo de un paciente. Este
proceso de extracción de tejido del cuerpo se conoce como biopsia.
Tras retirar la muestra o muestras de tejido y enviarlas al
laboratorio patológico, el tejido pasará por una serie de
procedimientos realizados por un histólogo y, por último, por un
patólogo, con el objetivo de diagnosticar el tejido. La presente
invención se refiere generalmente a aquellos procedimientos que
realiza normalmente el histólogo para preparar la muestra o muestras
de tejido en portaobjetos que el patólogo puede analizar bajo el
microscopio.
Aunque el término "muestra" se utiliza en
toda la descripción, se debe comprender que este término también
implica el plural "muestras". Tras retirar una muestra de
tejido del cuerpo de un paciente, esta se coloca típicamente dentro
de un contenedor de ejemplares que contiene una solución que fija el
tejido y después el contenedor se transporta a un laboratorio
patológico. El tejido pasará por un proceso conocido como
"grossing-in" en el laboratorio
patológico, durante el que un histólogo recuperará la muestra de
tejido del contenedor, típicamente cortará el tejido en partes de
tamaño adecuado para procesar el tejido, colocará las muestras
individuales dentro de los casetes de tejido de plástico de tamaño
reducido adecuado, y asignará números de registro a cada casete.
Estos números de registro se cargan a continuación en un sistema de
registro utilizado en el laboratorio. Para las muestras de tejido
más pequeñas, que puede que solo sean rasgaduras, el casete tendrá
aberturas de malla precisas en los lados y en la parte inferior. En
otras situaciones que implican muestras de tejido muy pequeñas, las
muestras se colocan dentro de una bolsa parecida a una bolsa de té y
evita que las muestras de tejido más pequeñas se salgan. Las
muestras de tejido más grandes se colocan dentro de casetes que
tienen aberturas ranuradas mayores que son más pequeñas que la
muestra de tejido del interior del casete.
Los casetes se colocan a continuación dentro de
una cesta perforada de acero inoxidable y pasan por una máquina de
procesamiento de tejido, a menudo durante toda la noche. Esta
máquina utiliza una combinación de vacío, calor y productos
químicos para eliminar los líquidos intersticiales. Una vez que los
fluidos se han retirado de las muestras de tejido, la máquina de
procesamiento sumerge las muestras de tejido en una baño de
parafina fundida para que los intersticios del tejido sean
reemplazados por parafina. El histólogo, a continuación, retira la
cesta de la máquina y retira los casetes de tejido individuales. En
una estación de incorporación, que tiene una reserva y un
dispensador de parafina fundida, el histólogo retirará
individualmente el tejido de cada casete. El histólogo debe
orientar cuidadosamente la muestra de tejido, según el tipo de
tejido, hacia dentro de un molde base de acero inoxidable que tiene
aproximadamente el tamaño del casete de tejido y está parcialmente
lleno de parafina fundida. La muestra de tejido debe sostenerse
manualmente, típicamente utilizando fórceps, contra la parte
inferior del molde. Si no se hace, se podría poner en peligro la
capacidad de hacer porciones de tejido adecuadas a continuación en
el micrótomo. La parafina fundida se enfría rápidamente en una
placa de refrigeración, que puede ser un refrigerador termoeléctrico
(TEC del inglés, thermal electric cooler), para solidificar
parcialmente la parafina manteniendo así la muestra de tejido en una
orientación adecuada contra la parte inferior del molde. El casete
se coloca a continuación en la parte superior del molde base y la
parafina se vierte a través de la parte superior abierta del casete
hacia dentro del molde base. La casete cambia su función en este
punto del proceso, pasa de ser un componente para encerrar el tejido
a un dispositivo de fijación para un uso posterior en el momento de
tomar raspaduras o trozos de parafina solidificada en un micrótomo.
El molde base se enfría hasta que toda la parafina fundida se ha
solidificado y el histólogo retira el molde base de acero
inoxidable del bloque de parafina incorporada. La muestra de tejido
es incorpora dentro de un bloque rectangular de parafina con un
casete de tejido de plástico en el lado opuesto que se utilizará a
continuación como un soporte en el plato del micrótomo. Con esta
máquina de procesamiento de tejido, el proceso de incorporación se
logra en forma de lotes durante el que un histólogo puede incorporar
aproximadamente de 40 a 60 casetes por hora.
Los bloques de parafina endurecida que contienen
las muestras de tejido incorporado están entonces preparadas para
cortarse en secciones extremadamente finas con el fin de colocarse
en un portaobjetos de microscopio. El histólogo monta el bloque de
tejido incorporado en un plato sobre el micrótomo que está
dimensionado para aceptar el lado del bloque que tiene el casete de
plástico incorporado. El histólogo puede entonces empezar a cortar
el bloque de parafina que tiene la muestra de tejido incorporada
opuesta a la superficie de casete de plástico. Esto produce una
cinta de porciones individuales de tejido incorporadas en la
parafina. La acción del micrótomo provoca que las porciones
individuales se junten cuando se ha realizado correctamente y,
consecuentemente, estas cintas de porciones muy finas flotan en un
baño de agua y una lámina de cristal se coloca cuidadosamente por
debajo de la porción. La porción, con la fina muestra de tejido
seccionada e incorporada en la misma, se adhiere a continuación a
la parte superior de la porción.
Cuando el histólogo tiene suficientes porciones
de muestra de tejido, las porciones se colocan en una máquina de
tinción automática. La máquina de tinción pasa por una serie de
etapas de infiltración para teñir los diferentes tejidos y células
de los diferentes colores de la porción. Esto ayuda al patólogo a
identificar diferentes estructuras y facilita que pueda cualquier
anormalidad en el tejido. Cuando el procedimiento de tinción se ha
completado, las porciones se cubren y se preparan para que el
patólogo las coloque bajo el microscopio con tal de
analizarlas.
Según el resumen del proceso descrito
anteriormente, se apreciará que la manipulación y el procesamiento
de muestras de tejido convencionales es un proceso que requiere
mucho trabajo e implica diversas etapas manuales que debe realizar
un histólogo. Por tanto, las lesiones por sobrecarga profesional
como el síndrome del túnel carpiano son comunes. Esto es
especialmente cierto con el proceso de incorporación de muestras de
tejido. Estas múltiples operaciones manuales y la manipulación
reiterada del tejido aumentan la probabilidad de que se produzcan
errores humanos y, además, requieren que histólogos profesionales y
con mucha experiencia garanticen que las muestras de tejido que se
han adherido por último a las porciones para el análisis del
patólogo están en una condición y orientación óptima para realizar
un diagnóstico preciso.
La patente de EE.UU. n.º 5.817.032 (la patente
'032) describe varias mejoras en esta área de la tecnología,
incluyendo nuevas maneras de mantener las muestras de tejido durante
el "grossing-in", la incorporación, o
los procesos de micrótomo o corte en porciones. Más específicamente,
la patente '032 se refiere a un dispositivo par atrapar y soportar
el tejido, que puede ser un casete, y que se puede cortar con un
micrótomo. Cuando se utiliza un casete, la muestra de tejido se
inmoviliza dentro del casete y se expone al proceso para reemplazar
los líquidos del tejido por parafina. A continuación, la muestra de
tejido y el casete se cortan al miso tiempo para montarse en
portaobjetos de microcopio. Debido a que la muestra de tejido nunca
se retira del casete desde el momento en que se procesa en la
máquina de procesamiento de tejido hasta el momento en que se corta
con el micrótomo, se ahorra una cantidad significante de tiempo.
Además, la posibilidad de error humano o pérdida de tejido debido,
por ejemplo, a que caiga el tejido durante la manipulación, se
reduce significativamente debido a la eliminación de las etapas de
manipulación de tejido por separado. Esta patente también trata en
general sobre un proceso automático que, junto con las nuevas
casetes de tejido, reduce todavía más las etapas de manipulación
durante todo el proceso.
A pesar de los diferentes avances realizados en
este campo, existe una necesidad creciente de mejoras adicionales
relacionadas con el aumento de la capacidad de producción y el
aumento de la calidad y la consistencia de las muestras de tejido
incorporadas y las porciones o cintas resultantes de tejido
incorporado que se someterán al diagnóstico.
US5928934 describe un casete que incluye un
contenedor abierto con una pared inferior, dos paredes laterales,
una pared frontal y una pared posterior. La pared inferior tiene una
pluralidad de primeras aberturas dispuestas en la pared para el
paso de líquido a través del casete en una dirección ortogonal al
plano de la pared inferior. Al menos dos de las otras paredes
tienen también una pluralidad de segundas aberturas para el paso de
líquido a través del casete en una dirección paralela al plano de la
pared inferior. Cada una de las paredes laterales, la pared
posterior, y la pared frontal están dispuestas en un ángulo por
fuera de la pared inferior. Todas las aberturas de las paredes
inferior, superior y laterales internas del casete tienen una
dimensión no superior a aproximadamente 0,5 mm. Cada una de las
primeras aberturas y las segundas aberturas puede tener cualquier
forma adecuada como redonda, oval, cuadrada o rectangular siempre
que la dimensión más larga de la abertura sea inferior a
aproximadamente 0,5 mm. Otra característica de la invención es que
las paredes que comprenden las aberturas de la pared inferior están
dispuestas en un ángulo interior desde la base interior de la pared
inferior.
La presente invención proporciona un casete para
encerrar una muestra de tejido que comprende un cuerpo incluyendo
una pared inferior y una pluralidad de paredes laterales que se
extienden hacia arriba respecto a dicha pared inferior para definir
un espacio interior que recibe la muestra de tejido, en el que al
menos dos de dichas paredes laterales están posicionadas en una
relación opuesta entre sí, estando dicha pared inferior y dicha
pluralidad de paredes laterales construidas de un material capaz de
ser seccionado en un micrótomo, y en que la dimensión entre dichas
paredes laterales opuestas varía a lo largo de la longitud de dichas
paredes laterales opuestas.
Generalmente la invención se refiere a un casete
para mantener una muestra de tejido durante un proceso de
incorporación y corte mediante micrótomo o corte en porciones. El
casete incluye un cuerpo con una pared inferior y una pluralidad de
paredes laterales que se extienden hacia arriba respecto a la pared
inferior para definir un espacio interior que recibe la muestra de
tejido. La pared inferior y la pluralidad de paredes laterales
están hechas de un material capaz de ser seccionado en un micrótomo.
Preferiblemente, el material del casete también es resistente a
cualquier tipo de degradación durante el proceso que pondría en
peligro su capacidad de funcionar según la invención. En una
primera característica preferida de la invención, la pluralidad de
paredes laterales comprende primeras y segundas paredes laterales en
lados opuestos de la pared inferior, cada una incluyendo porciones
que crean un ángulo desde puntos intermedios aproximados de las
primeras y las segundas paredes laterales hacia las otras primeras
y segundas paredes laterales en el lado opuesto de la pared
inferior. En la realización preferida, las dos paredes laterales más
largas de las cuatro paredes laterales que comprenden un casete
rectangular tienen generalmente forma de V en una dirección alejada
del interior del casete. Esto presenta un ápice de la forma en V a
la cuchilla del micrótomo, después de que se haya completado el
proceso de incorporación, que ayuda a la acción de corte.
Específicamente, se ha hallado que esta característica reduce o
previene que la parafina endurecida rompa o agriete el material de
la pared lateral del casete y al mismo tiempo se corte en el
micrótomo.
\newpage
El casete incluye preferiblemente una tapa
configurada para acoplarse con el cuerpo para el movimiento entre
las posiciones abierta y cerrada. La tapa se puede presionar hacia
abajo en la parte superior de la muestra de tejido en el interior
del casete. La tapa es preferiblemente más rígida que la pared
inferior del casete. Esta característica permite que la tapa
posicione la muestra de tejido en el casete de forma paralela a la
parte inferior del molde durante el proceso de incorporación. Más
específicamente, la tapa más rígida presiona la muestra de tejido y
la pared inferior más flexible del casete contra la parte inferior
rígida de un molde base, mientras que la parafina fundida se
solidifica. Esto ayuda a garantizar que la pared inferior del
casete se puede retirar en su totalidad durante una operación en el
micrótomo antes del corte de la muestra de tejido, y que el tejido
se posicione plano contra la pared inferior del casete.
En otra característica preferida de la
invención, las paredes laterales del casete se perforan de tal modo
que hay al menos un ratio de aproximadamente 2,5:1 de zona abierta a
zona de material sólido mediante el que la parafina solidificada
ocupa la zona abierta de las paredes laterales. Este ratio se puede
alterar utilizando diferentes materiales para el casete y/o medios
de incorporación de parafina. Por ejemplo, una parafina de peso
molecular superior o un casete de peso molecular inferior permitirán
que el ratio varíe en cierto modo. Actualmente, una parafina
industrial estándar (e. Ej., medio de incorporación/procesamiento
Sakura VIP) funciona mejor con un ratio de al menos aproximadamente
3,0:1 y, más preferiblemente, al menos aproximadamente 3,5:1. Esto
reduce la cantidad de material de casete que debe cortar la cuchilla
del micrótomo cuando toma las porciones de tejido y, por tanto,
aumenta la vida útil de la cuchilla y la calidad de las muestras de
tejido incorporadas encintadas resultantes. Además, este ratio
asegura que la parafina sea suficientemente resistente para no
fracturarse cuando es cortada por la cuchilla del micrótomo. Otra
característica que tiene como resultado ventajas similares implica
la formación de paredes laterales a partir de salientes y desviar
los salientes de una de las primeras y segundas paredes laterales
respecto a las de la pared lateral opuesta a lo largo de la
longitud de la pared lateral. Así, la cuchilla del micrótomo entrará
en contacto con una cantidad más uniforme de material de casete a
lo largo de su longitud durante cada paso. Esto reduce
significativamente el desgaste de la cuchilla durante el corte del
material de casete. La reducción del desgaste de la cuchilla es
beneficioso para controlar los costes de la cuchilla, ya que la
mayoría de las cuchillas son de un solo uso.
En otra característica preferida de la
invención, el casete incluye además una pestaña que se extiende a
lo largo de porciones superiores de al menos dos de las paredes
laterales. La pestaña incluye depresiones configuradas para
coincidir con retenes en un marco durante el proceso de
incorporación del tejido. Esto aumenta la dimensión de altura
efectiva del interior del casete, permitiendo así que se coloque más
tejido en el casete y que pase más al micrótomo. A este respecto,
cada pase del micrótomo puede tomar solo una porción de 5 micrones.
Por tanto, la utilización de depresiones con una profundidad de, por
ejemplo, 0,14'', puede permitir que se tomen aproximadamente 70
porciones más en el micrótomo.
También se describen diferentes ensamblado
únicos de dos o más del casete de tejido, marco y molde base.
Respecto al marco y al molde base, por ejemplo, se proporciona una
estructura para mantener físicamente el marco contra el molde base.
En la realización referida, se proporciona un cierre de estanqueidad
para realizar esta función de sujeción y también para prevenir
fugas de parafina líquida procedentes del molde base.
Otra realización preferida proporciona un
dispositivo para la estadificación de un casete de muestras de
tejido desde una posición superior en un marco utilizado durante un
proceso de incorporación hasta una posición inferior en el marco.
El dispositivo incluye una palanca, un mecanismo de estadificación
acoplado a la manivela y configurado para fijarse a una superficie
superior del casete, y un tope acoplado operativamente a la
manivela y configurado para parar el movimiento vertical del
mecanismo de estadificación cuando el casete alcanza una posición
inferior en el marco. El mecanismo de estadificación comprende
además una pluralidad de dedos que están configurados para fijarse
a una pluralidad correspondiente de ubicaciones en la superficie
superior del casete. Por ejemplo, se pueden proporcionar cuatro
dedos para acoplar cuatro ubicaciones angulares en el casete. Esto
ayuda a garantizar que el casete se acople con al menos cuatro pares
de dientes ubicados cerca de las porciones angulares del casete
posicionando así la pared inferior del casete de forma paralela a y
contra la pared inferior del molde base.
En una realización, el dispositivo de
estadificación es un elemento rígido y el tope comprende un elemento
de tope fijo acoplado con el movimiento con el mecanismo de
estadificación y configurado para detenerse contra una superficie
superior del marco. En otra realización, el dispositivo incluye un
mecanismo de estabilización acoplado con la manivela y que se puede
mover relativo al mecanismo de estadificación. El mecanismo de
estabilización está configurado para acoplarse a una superficie
superior del marco a medida que el mecanismo mueve el casete desde
la posición superior a la posición inferior dentro del marco. En
esta realización, el mecanismo de estadificación está normalmente
desviado por un muelle hacia una posición hacia arriba y es forzado
hacia abajo contra el muelle de derivación durante el movimiento
del casete desde la posición superior a la posición inferior. El
tope de esta realización incluye además superficies respectivas de
la manivela y el mecanismo de estabilización que se acoplan entre
sí cuando el mecanismo de estadificación ha colocado el casete
dentro de la posición inferior. Los dispositivos de estadificación
de esta invención aseguran que el casete está montado por completo
dentro del molde base, y al mismo tiempo aseguran que el casete no
es empujado demasiado lejos del marco. Además, los dispositivos de
estadificación garantizan que la pared inferior del casete y, por
tanto, la muestra de tejido, están extendidos contra la pared
inferior del molde base. Esto mejora la eficiencia y la calidad de
las raspaduras de tejido realizadas después en el micrótomo.
También se describen varios procedimientos de
utilización del casete de tejido y los ensamblados de
casete/marco/
molde base.
molde base.
Estos y otros objetos, ventajas y
características de la invención serán más fácilmente comprensibles
a aquellos expertos en la materia a partir de la siguiente
descripción detallada, al considerarse junto con los dibujos que se
acompañan.
\vskip1.000000\baselineskip
La figura 1 es una vista en perspectiva
aumentada de un ensamblado que incluye el casete de tejido, el marco
dentro del que se inserta el casete y el molde base dentro del que
se insertan el marco y el ensamblado de casete.
La figura 2 es una vista en perspectiva
ensamblada del casete de tejido, el marco y el molde base.
La figura 3 es una vista transversal tomada a lo
largo de la línea 3-3 de la figura 2 que muestra el
casete de tejido en su posición superior inicial.
La figura 4 es una vista en perspectiva
ensamblada, similar a la figura 2, pero que muestra la posición de
estadificación del casete de tejido.
La figura 5 es una vista transversal tomada a lo
largo de la línea 5-5 de la figura 4 que muestra el
casete de tejido en estadificación en su segunda posición inferior
contra la parte inferior del molde base.
La figura 6 es una vista transversal del marco y
el casete de tejido ensamblado en un material como parafina, tras
liberarse del molde base.
La figura 7 es una vista en perspectiva de un
dispositivo de estadificación desviado por muelle, manual.
La figura 8 es una vista transversal
longitudinal del dispositivo de estadificación de la figura 7
utilizándose para la estadificación de un casete de tejido a través
del marco y dentro del molde base.
La figura 9 es una vista en perspectiva de un
casete de tejido construido según una segunda realización de la
invención;
La figura 10 es una vista transversal tomada a
lo largo de la línea 10-10 de la figura 9.
La figura 11 es una vista en perspectiva de un
dispositivo de estadificación manual construido según una segunda
realización.
La figura 12 es una vista en perspectiva
inferior de un dispositivo de estadificación asociado con el
dispositivo de estadificación de la figura 11.
\vskip1.000000\baselineskip
En referencia primero a las figuras
1-3, un casete de tejido 10 construido según la
invención se recibe dentro de un marco 12 y el casete de tejido 10
y el marco 12 están posicionados en un molde base 14. Tras una
operación de estadificación, el molde base 14 es rellenado
subsiguientemente con parafina líquida, como se describe a
continuación. El casete de tejido 10 incluye un cuerpo perforado 20
formado por cuatro paredes laterales 22a, 22b, 22c, 22d y una pared
inferior 24. Cada pared está construida preferiblemente con
perforaciones o aberturas 26 y salientes 28. Una pestaña superior
30 rodea y se extiende hacia fuera desde las paredes laterales
respectivas 22 a-d.
Una tapa 32 está acoplada al cuerpo 20 mediante
una bisagra 34 que permite el movimiento vertical de la tapa 32
dentro del interior del cuerpo 20 para retener una o más muestras de
tejido contra la pared inferior 24. La tapa 32, asimismo, está
formada de perforaciones 36 que se pueden alargar y generalmente
separar mediante salientes 38. Como mejor se muestra en la figura
1, las perforaciones alargadas 2, 36 en la pared inferior 24 y la
tapa 32 se extienden respectivamente hacia áreas centrales 24a, 32a
de la pared inferior 24 y la tapa 32. Esto ayuda a permitir que un
molde (no mostrado) se llene de material, como PFA, durante el
proceso de moldeado del casete 10.
La tapa 32 tiene una forma a lo largo de su
circunferencia igual a la forma de las paredes laterales 22ad. A
este respecto, los bordes laterales de longitud respectiva 40a, 40b
de la tapa 32 están formados en forma de V y cada uno incluye un
apéndice 42a, 42b generalmente en la porción central del mismo. Esto
a su vez se corresponde con la forma en V de la longitud de la
pared lateral 22a y la pared lateral opuesta 22c. Por tanto, cuando
el casete de tejido incorporado se coloca después en un micrótomo y
las secciones de cortan desde el casete de tejido incorporado, la
cuchilla de micrótomo inicialmente entrará en contacto con el ápice
correspondiente a la pared lateral 22a ó 22c, según qué lado esté
orientado hacia el micrótomo. Se ha hallado que esto aumenta la
calidad de las porciones encintadas hechas a partir del casete de
tejido incorporado. Es decir, la parafina no se romperá o se
romperá muy poco en las interfícies de parafina/casete.
\newpage
El marco 12 incluye más específicamente un
interior abierto 50 que recibe el casete 10, y una pared frontal
angular 52 que se puede utilizar para registrar indicios, como los
datos del paciente. Los conjuntos de retenes superior e inferior
respectivos 54, 56 y 58, 60 se extienden hacia dentro del interior
abierto 50 del marco 12. Inicialmente, el casete de tejido 10 se
mantiene entre los pares superiores de retenes 54, 46 presionando
la pestaña superior 30 hacia abajo hasta pasar los conjunto
superiores de retenes 54 y contra el conjunto inferior de retenes
56, después de que una o más muestras de tejido se hayan colocado
dentro del cuerpo del casete 20 y la tapa 32 se haya cerrado. Los
retenes respectivos 61 se extienden hacia dentro desde las paredes
laterales 22 a-d para permitir que la tapa 32 se
cierre de un golpe y se retenga en una posición cerrada. Durante
una operación de estadificación, el casete de tejido 10 se moverá
verticalmente y hacia abajo a través del marco 12 hasta que la
pestaña 30 pase los retenes 58 y descanse contra los retenes 60 en
una posición inferior (figura 5). Los recesos 62, 64 se forman en
al menos dos paredes laterales opuestas para permitir que los dedos
de un mecanismo de agarre coincidan con el ensamblado durante las
operaciones de manipulación automática e incorporación, como sea
necesario. Preferiblemente, las paredes laterales 66a, 66b contienen
estos recesos 62, 64, mientras que las paredes laterales
adicionales 66c, 66d pueden incluir una estructura adicional que
permite la manipulación automática, o permitir otras funciones como
sea necesario. El molde base 14 incluye un interior abierto 70 para
recibir el marco 12 y puede estar rodeado de un cierre elastomérico
resilente 72 que previene el escape de parafina líquida durante el
proceso de incorporación. Esto elimina la etapa adicional de
retirar el exceso de parafina endurecida del marco 12 después de
haber completado el proceso de incorporación. Tal exceso de
parafina puede evitar que el marco se acople adecuadamente en un
plato de micrótomo.
Al comparar las figuras 2 y 3 con las figuras 4
y 5, se apreciará que durante el proceso de estadificación, el
casete de tejido 10 se mueve verticalmente hacia abajo dentro del
interior 70 del molde base 14, de tal modo que la parte inferior 24
del casete de tejido 10 entra en contacto con la parte inferior 74
del molde base 14. En esta posición, la pestaña 30 del casete de
tejido 20 es recibida entre los retenes respectivos 58, 60,
manteniéndolo en su posición inferior. El marco 12 preferiblemente
se ajusta y se mantiene friccionalmente dentro del molde base 14
mediante uno o más cierres resilentes 72. El cierre 72 realiza dos
funciones en esta realización. Primero, mantiene físicamente el
marco 12 dentro del molde base 14 mediante fricción. Esto evita que
el marco 12 y el casete fijado 10 floten o de lo contrario se muevan
mientras que el molde base 14 se llena de parafina. Segundo, evita
que la parafina líquida se escape del molde base 14 en el área entre
las paredes exteriores 12a del marco 12 y el interior 70 del molde
base 14. Se apreciará que un elemento de sujeción diferente del
cierre de estanqueidad 72 se puede utilizar en lugar de mantener
físicamente el marco 12 contra el molde base 14. En este caso, el
cierre de estanqueidad 72 puede que no sea necesario. Por ejemplos,
tales elementos de sujeción pueden ser abrazaderas, cierres,
elementos de muelle o pesos. En estas figuras, la muestra o
muestras de tejido dentro del casete 10 se han borrado por claridad.
Sin embargo, se debe comprender que la tapa 32 se rebajará en una o
más muestras de tejido 80 contenidas en el interior del cuerpo del
casete 20 (figura 6). Mientras que el ensamblado del casete 10, el
marco 12 y el molde base 14 están en la configuración de
estadificación mostrada en las figuras 4 y 5, la parafina líquida se
introduce a través del interior abierto del marco 12 y a través de
las perforaciones 26, 36 del casete 10 dentro del interior 70 del
molde base 14. La parafina líquida se enfría entonces
preferiblemente en un dispositivo de enfriamiento adecuado, como un
TEC, y el ensamblado del casete de tejido 10, el marco 12, la
muestra de tejido incorporado 80 y la parafina endurecida 82 se
retiran del molde base 14 como se muestra en la figura 6. El marco
12 se puede utilizar como un dispositivo para fijar el ensamblado
en un plato de micrótomo y las porciones se toman desde la
superficie inferior 82a de parafina 82. Inicialmente, se utiliza
una cuchilla para eliminar la capa inicial de parafina 82 y la
pared inferior 24 del casete de tejido 10. En este punto, se puede
utilizar una cuchilla de micrótomo diferente para tomar las
porciones encintadas o rascaduras de la muestra de tejido 80 y la
parafina de alrededor 82 y las paredes laterales 22
a-d del cuerpo de casete de tejido. A menudo la
misma cuchilla que se utiliza para orientar se puede utilizar
también para seccionar.
Las figuras 7 y 8 ilustran un tipo de
dispositivo de estadificación 100 que se puede utilizar junto con
el casete de tejido 10, el marco 12 y el molde base 14 descritos
anteriormente. El dispositivo de estadificación 100 incluye una
manivela 102 en un extremo superior y un mecanismo de estadificación
104 en un extremo inferior. El mecanismo de estadificación 104 está
acoplado a un cilindro hueco 106 que se extiende hacia arriba dentro
de una carcasa 108 conectada de forma rígida a la manivela 102. Una
pluralidad de cuatro elementos de estabilización 110 está acoplada
de forma rígida al cilindro 106, mientras que una pluralidad de
dedos de estadificación preferiblemente móviles 112 está acoplada a
un eje oscilante 114 que se extiende a través del cilindro 106.
El eje 114 está conectado de forma rígida a la
manivela 102 y está desviado dentro de la misma en una posición
hacia arriba mediante un muelle 116 posicionado entre una superficie
inferior 102a de la manivela 102 y una superficie superior 106a de
cilindro 106.
Por tanto, se apreciará que los elementos de
estabilización 110 se pueden colocar contra un lado superior del
marco 12 con fines de estabilización y la manivela 102 se puede
rebajar hacia abajo como indica la flecha 118.
Esto mueve el eje oscilante 114 y los dedos de
estadificación adjuntos 112 hacia abajo contra el casete de tejido
10, moviendo así el casete de tejido 10 relativo al marco 12 desde
su posición superior mostrada en la figura 3 a su posición
inferior, de estadificación mostrada en la figura 5. Para evitar que
el casete 110 se empuje demasiado a través del marco 12, la
superficie 108a se para contra la superficie 110a cuando la pestaña
30 alcanza su posición inferior entre los retenes 58, 60.
Las figuras 9 y 10 ilustran una segunda
realización de un casete de tejido 120. El casete de tejido 120
incluye un cuerpo de casete 122 que tiene cuatro paredes laterales
124a-d que rodean un interior abierto y ligado en
un lado inferior mediante una pared inferior 126. Las paredes
laterales 124a-d están formadas de salientes 128
separados por perforaciones 130 y la pared inferior 126 está formada
de salientes 132 separados mediante perforaciones 134. Los
salientes 128 de la pared lateral 124a a menudo están desviados en
una dirección en sentido longitudinal relativa a los salientes 128
de la pared lateral opuesta 124b, como muestra la distancia
"d" en la figura 10. La distancia "d" puede variar, sin
embargo, en esta realización, como media, en aproximadamente
0,015'' a 0,030''. Los salientes 128 que sobresalen de este modo
aseguran que una cuchilla de micrótomo que pasa por las paredes
124a y 124b entre en contacto con una cantidad de material de casete
más uniforme a lo largo de su longitud. Esto conlleva una vida útil
mayor de la cuchilla, un desgaste de la cuchilla más uniforme y
unas porciones de tejido incorporado de mayor calidad y
consistencia. Los salientes 132 y las perforaciones 134 se
extienden en su dirección longitudinal hacia un área central 126a de
la pared inferior 1216. En esta realización preferida, las paredes
laterales 124a-d están hechas de tal modo que el
ratio de material de casete plástico, como PFA, hasta el área
formada por las perforaciones 130 es de aproximadamente 3,7:1. Para
lograr al menos este ratio en la realización preferida, los
salientes 128 tienen una anchura w1 de aproximadamente 0,010'' a
0,014'', mientras que las perforaciones 130 tiene una anchura w2 de
aproximadamente 0,040'' a 0,050''. Este área perforada, que está
por debajo de la porción de pared lateral sólida 136, es el área que
se cortará con un micrótomo tras la incorporación de la muestra de
tejido 80 (figura 6). Especialmente cuando se utiliza PFA con un
una dureza Shore de 48 a 55 como el material para el casete 120,
junto con el material de incorporación de parafina estándar
industrial mencionado anteriormente, se ha hallado que este ratio de
material de casete en el área abierta mejora la calidad de los
cortes hechos a través del casete incorporado y aumentan la vida
útil de la cuchilla significativamente. Según los respectivos pesos
moleculares del material de incorporación y el material de casete,
este ratio puede aumentarse o reducirse.
Una pestaña 140 rodea el lado superior del
cuerpo de casete 122 y contiene depresiones orientadas hacia arriba
respectivas 142a, 142b, 142c, 142d. Un número de depresiones
orientadas hacia abajo 142e, 142f (solo se hace referencia a dos)
también están contenidas en la pestaña 140. Estas depresiones
coinciden respectivamente con al menos los retenes 54, 56 y 58, 60
del marco 12 (véanse las figuras 3 y 5). Se apreciará que se pueden
formar retenes inferiores adicionales en el marco 12 para
proporcionar un soporte adicional y prevenir que el casete 10 se
empuje demasiado lejos a través del marco 12. En tal caso, se forman
depresiones adicionales en la parte inferior de la pestaña 140 para
dar cabida a los retenes de soporte adicionales. Las depresiones
permiten la extensión hacia fuera efectiva del cuerpo del casete 120
desde el marco 12 que aumenta al incrementar el número de porciones
que se deben tomar del casete incorporado en un micrótomo. Esto
puede ser importante en muchas situaciones para obtener las
porciones deseadas para el examen patológico.
Los retenes 144 también se forman en las paredes
laterales 124a-d para retener una tapa 150 en su
lugar. La tapa 150 está acoplada al cuerpo del casete 122 mediante
una bisagra 152. La tapa 150 esta hecha para ser más rígida que la
pared inferior 126 del cuerpo del casete 122, de tal modo que la
tapa 150 se puede utilizar para presionar la muestra de tejido
contra la pared inferior 126 y presionar la pared inferior 126
contra la parte inferior rígida 74 del molde base 14 (figura 5). La
tapa 150 está formada por una pluralidad de salientes 154 separados
generalmente por perforaciones 156 y cada uno se extiende de forma
alargada por toda su longitud hacia un área central 150a de una
tapa 150. La tapa 150 incluye además bordes laterales 158a, 158b que
se extienden por toda la longitud de la misma y tiene forma de V
con un ápice central 160a, 160b. El ángulo a (figura 10) es
preferiblemente de aproximadamente 4º. Como en la primera
realización, la forma de los bordes laterales 158a, 158b tiene una
forma similar a las paredes laterales 124a, 124b del cuerpo de
casete 122. A este respecto, estas paredes laterales 124a, 124b, la
pared inicial de una de ellas puede estar cortada en el micrótomo,
incluyen ápices respectivos 162, 162a. Los extremos respectivos
164a, 164b de la tapa 150 también complementan la forma similar de
las paredes laterales del cuerpo del casete 124c, 124d para lograr
un cierre perfecto de la tapa 150 dentro del cuerpo de casete 122.
La utilización del casete 120 en el proceso de incorporar una o más
muestras de tejido, incluyendo el proceso de estadificación dentro
del marco 12 y el proceso de incorporación o moldeado dentro del
molde base 14, es el mismo que el que se ha descrito anteriormente
en referencia a las
figuras 1-8.
figuras 1-8.
Las figuras 11 y 12 ilustran un dispositivo de
estadificación manual 200 según una segunda realización. El
dispositivo de estadificación 200 comprende una manivela superior
202 y un mecanismo de estadificación inferior 204 acoplados de
forma rígida mediante un eje 206. En la figura 12, la manivela 202 y
el eje 206 se han borrado por claridad. El mecanismo de
estadificación 204 comprende preferiblemente una pluralidad de
elementos de estadificación 210, 212, 214, 216 que se extiende en
general radialmente hacia fuera desde el eje 206 y cada uno incluye
una porción de dedos 210a, 212a, 214a, 216a. Las porciones de dedo
210a.216a se acoplan respectivamente a las porciones angulares del
casete 10 (figura 1) o casete 120 (figura 9). Cuando el usuario
empuja hacia abajo la manivela 202, la porciones de dedo 210a -216a
impulsan el casete 10 o casete 120 hacia abajo en la posición
inferior, de estadificación (figura 5). Para evitar que el casete se
mueva demasiado hacia abajo, se proporcionan un par de topes 218,
220 en el mecanismo de estadificación 204. En esta realización, las
superficies de tope 218a, 220a se detienen contra la superficie
superior del marco 12 cuando el casete 10 o casete 120 alcanza la
posición inferior, de estadificación (figura 5). Por tanto, la
distancia entre los extremos inferiores de las porciones de dedos
210a-216a y las superficies de tope 218a, 220a
equivalen a la distancia entre el par de retenes superior 54, 56 y
el par de retenes inferior 58, 60. Se apreciará que se pueden
proporcionar otras formas de mecanismos de estadificación y topes,
sin apartarse del espíritu y el ámbito de la invención.
\newpage
Esta lista de referencias citadas por el
solicitante está prevista únicamente para ayudar al lector y no
forma parte del documento de patente europea. Aunque se ha puesto
el máximo cuidado en su realización, no se pueden excluir errores u
omisiones y la OEP declina cualquier responsabilidad al
respecto.
- \bullet US 5817032 A [0008]
- \bullet US 5928934 A [0010]
Claims (21)
1. Casete (10, 120) para encerrar una muestra de
tejido que comprende un cuerpo (20) incluyendo una pared inferior
(24, 126) y una pluralidad de paredes laterales (22, 124) que se
extienden hacia arriba respecto a dicha pared inferior (24, 126)
para definir un espacio interior que recibe la muestra de tejido, en
el que al menos dos de dichas paredes laterales (22a, 22c, 124a,
124b) están posicionadas en una relación opuesta entre sí,
caracterizado por el hecho de que dicha pared inferior (24,
126) y dicha pluralidad de paredes laterales (22, 124) están
construidas de un material capaz de ser seccionado en un micrótomo,
y por el hecho de que la dimensión entre dichas paredes laterales
opuestas (22a, 22c, 124a, 124b) varía a lo largo de la longitud de
dichas paredes laterales opuestas (22a, 22c, 124a, 124b).
2. Casete según la reivindicación 1, en el que
cada una de dichas paredes laterales opuestas (22a, 22c, 124a,
124b) incluye porciones que hacen un ángulo desde aproximadamente
puntos intermedios de dichas paredes laterales opuestas (22a, 22c,
124a, 124b) hacia la otra de dichas paredes laterales opuestas (22a,
22c, 124a, 124b).
3. Casete según la reivindicación 2, incluyendo
además una tapa (32, 150) configurada para acoplarse con dicho
cuerpo (20) y que puede moverse entre la posición abierta y cerrada,
siendo dicha tapa (32, 150) más rígida que dicha pared inferior
(24, 126).
4. Casete según cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, en el que dicha pared inferior (24,
126) incluye un área central (24, 126a) y comprende una pared
perforada construida con salientes separados entre sí (28, 132),
formando dichos salientes (28, 132) un ángulo hacia dicha área
central (24a, 126a).
5. Casete según cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, en el que dicha pluralidad de paredes
laterales comprende primeras y segundas paredes laterales (22a,
22c, 124a, 124b) en lados opuestos de dicha pared inferior (24,
126), y en el que dichas primeras y segundas paredes (22a, 22c,
124a, 124b) comprenden paredes perforadas construidas con salientes
separados entre sí (28, 128), estando dichos salientes (28, 128) de
dicha pared lateral (22a, 124a) desviados en toda su longitud
respecto a dichos salientes (28, 128) de dicha segunda pared
lateral (22c, 124b).
6. Casete según cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, en el que dicha pluralidad de paredes
laterales comprende paredes perforadas (22, 124) en las que el
ratio de área abierta y área sólida es de al menos 2,5:1.
7. Casete según cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, en el que dicha pluralidad de paredes
laterales comprende paredes perforadas (22, 124) en las que el
ratio de área abierta y área sólida es de al menos 3,5:1.
8. Casete según cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, en el que dicha pluralidad de paredes
laterales comprende paredes perforadas (22, 124) en las que el
ratio de área abierta y área sólida es de al menos 3,0:1.
9. Casete según cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, comprendiendo además una pestaña (140)
que se extiende a lo largo de porciones superiores de al menos dos
de dichas paredes laterales (124), dicha pestaña incluyendo
depresiones (142).
10. Casete según cualquiera de las
reivindicaciones anteriores, en el que dicha pared inferior se
transforma en dichas paredes laterales con una curvatura
redondeada.
11. Ensamblado para incorporar una muestra de
tejido antes de un proceso de corte mediante micrótomo utilizado
para obtener porciones de la muestra de tejido incorporado, el
ensamblado comprendiendo un casete (120) como se reivindica en la
reivindicación 9 y un marco (12) configurado para recibir dicho
casete (120), dicho marco (12) incluyendo retenes superior (54, 56)
y retenes inferiores (58, 60) que se pueden acoplar a dicha pestaña
(140) para definir posiciones superiores e inferiores de dicho
casete (120) en dicho marco (12), dichos retenes (58, 60)
coincidiendo con dichas depresiones (142).
12. Casete según la reivindicación 11, en el que
dichas depresiones (142) están en los lados superior e inferior de
dicha pestaña (140) y cada uno coincide con un retén separado de
dicho marco (12).
13. Ensamblado para incorporar una muestra de
tejido antes de un proceso de corte mediante micrótomo utilizado
para obtener porciones de la muestra de tejido incorporado, el
ensamblado comprendiendo un casete (120) como se reivindica en
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, un marco (12) configurado
para recibir y encerrar dicho casete (10), un molde base (14) que
tiene un interior configurado para recibir material de
incorporación, y un elemento de fijación (72) configurado para
fijar dicho marco (12) contra dicho molde base (14) mientras el
material de incorporación es introducido en el molde base (14).
14. Ensamblado según la reivindicación 12, en el
que dicho marco (12) incluye paredes exteriores (66) y dicho
elemento de fijación comprende además una unión de estanqueidad
elástica (72) que se puede acoplar a dichas paredes exteriores (66)
para prevenir fugas de material de incorporación líquido de dicho
molde base (14) tras la introducción en el mismo a través de dicho
casete (10) y marco (12).
15. Dispositivo de estadificación de un casete
de muestra de tejido (10) como se reivindica en cualquiera de lasa
reivindicaciones 1 a 10, desde una posición superior en un marco
(12) utilizado durante un proceso de incorporación de tejido a una
posición inferior en el marco (12), el dispositivo comprendiendo una
manivela (102, 202), un mecanismo de estadificación (104, 204)
acoplado a dicha manivela (102, 202) y configurado para acoplarse a
una superficie superior del casete (10, 120), y un tope (108s, 218,
220) acoplado de forma operativa a dicha manivela (102, 202) y
configurado para parar el movimiento vertical de dicho mecanismo de
estadificación (104, 204) cuando el casete (10, 120) alcanza la
posición inferior en el marco (12).
16. Dispositivo según la reivindicación 15, en
el que el tope comprende un elemento de tope fijo (108a, 218, 220)
acoplado para el movimiento con el mecanismo de estadificación (104)
y configurado para detenerse contra una superficie superior del
marco (12).
17. Dispositivo según la reivindicación 15 o la
reivindicación 16, en el que el mecanismo de estadificación (104)
comprende además una pluralidad de dedos (112, 210a, 212a, 214a,
216a) configurados para acoplarse en una pluralidad correspondiente
de ubicaciones en la superficie superior del casete (10, 120).
18. Dispositivo según la reivindicación 15,
comprendiendo además un mecanismo de estadificación (110) acoplado
a dicha manivela (102) y que puede moverse de forma relativa a dicho
mecanismo de estadificación (104), estando dicho mecanismo de
estadificación (110) configurado para acoplarse con una superficie
superior del marco (12) a medida que dicho mecanismo de
estadificación (104) mueve el casete (10) desde la posición superior
a la posición inferior.
19. Dispositivo según cualquiera de las
reivindicaciones 15 a 18, en el que dicho mecanismo de
estadificación (104, 204) está desviado por muelle en una posición
superior y es forzado hacia abajo contra la desviación por muelle
cuando se mueve el casete (10, 120) desde la posición superior a la
posición inferior.
20. Dispositivo según la reivindicación 18 en el
que dicho tope comprende además superficies respectivas (110a) de
dicha manivela (102) y dicho mecanismo de estabilización (110).
21. Procedimiento para seccionar un casete (10,
120) que encierra una muestra de tejido en un medio de
incorporación, el casete incluyendo una pared inferior (24, 126) y
una pared lateral (22, 124) construida de un material capaz de ser
seccionado en un micrótomo, el procedimiento comprendiendo
posicionar la pared lateral (22, 124) relativa a una cuchilla de un
micrótomo de tal modo que un borde de la cuchilla y la pared lateral
(22, 124) no sean paralelas, y hacer porciones a través de la pared
lateral (22, 124), el medio de incorporación y la muestra de tejido
con la cuchilla, mientras que el borde de la cuchilla y la pared
lateral (22, 124) están en una posición no paralela, en el que al
menos una primera de las paredes laterales (22, 124a) incluye
porciones que forman un ángulo desde un punto intermedio aproximado
del mismo hacia una segunda de las paredes laterales (22c, 124) en
el lado opuesto de la pared inferior (24, 126) y en el que el
posicionamiento de la pared lateral (22, 124) relativo a la
cuchilla comprende además tener el casete (10, 120) en el micrótomo
con la pared lateral (22, 124) orientada hacia la cuchilla.
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