SE445676B - Forfarande och anordning for beredning av cellprover - Google Patents

Description

8005023-0 k) Sedan provet inkommit till laboratoriet, beredes det genom färg- ning och inspekteras i ett mikroskop. Förekomst av atypiska cel- ler noteras och rapporteras. Speciellt arbetet med mikroskoperin- gen och bedömningen är utomordentligt uppmärksamhetskrävande och tidsödande och att betrakta som ett mycket krävande arbete. Varje prov belastas med en kostnad som (1980) uppgår till mellan 50 och 100 SEK.

Följaktligen pågår ett intensivt utvecklingsarbete för att förbil- liga och förenkla provtagning, provberedning och provbedömning.

För att underlätta arbetet med bedömningen av proverna genom mik- roskopering har man utvecklat en rad system för automatisk bedöm- ning av celler som normala respektive atypiska. Man har därvid ska- pat algoritmer för automatisk bedömning och kommit tämligen långt i utvecklingen av kommersiella system.

Det är sålunda möjligt att med tämligen stor säkerhet bestämma om atypiska celler föreligger i ett cellprov, om cellprovet beretts så att en väsentlig del av cellerna föreligger som fria celler på preparatet. En mänsklig avläsare kan emellertid även i cellklumpar under vissa omständigheter igenkänna atypiska celler.

Detta är icke fallet när man använder automatisk avsökning av ett cellprov och det är i detta fall av avgörande betydelse att man i största möjliga utsträckning har friliggande celler. Man har ti- digare berett prover genom att exempelvis med en konventionell in- jektionsspruta, försedd med en kanyl med en diameter på 500lpm, växelvis uppsuga och utspruta uppslamningen av avskrapade celler.

Därvid erhölls cellprover som kunde avläsas av en erfaren mänsklig avläsare. För att kunna avläsas på automatisk väg måste provbered- ningen förbättras så att väsentligt större andel av cellerna i provet föreligger som fria celler. Ändamålet med föreliggande ansökan är således att tillhandahålla ett effektivt förfarande för provberedning av cellprover samt en anordning för genomförande av förfarandet.

'Det nya förfarandet är nödvändigt för att en fungerande anläggning för automatisk cellprovundersökning skall kunna ske och underlät- tar även väsentligen den icke automatiserade bedömningen av cell- prover. 8005023-0 Det nya förfarandet avsett för beredning av cellprover ge- nom friläggning av enstaka celler till cytologiska undersökningar av exfolierade celler, där cellprovet föreligger i form av en uppslamning i vätska, kännetecknas av att uppslamningen införes i ett första rum försett med en vägg med ett stort antal hål med ett tvärsnitt på 10-100 pm och i förbindelse med ett andra rum och att uppslamningen under inverkan av en tryckdifferens mellan det första och det andra rummet bringas att passera den med hål för- sedda väggen en eller flera gånger och att material som efter pas- sage av den med hål försedda väggen uttages från det andra rummet och utnyttjas för framställning av utstryk på ett preparatglas.

Det föredrages att hålens tvärsnitt är 10-40 pm. Vid ett tvärsnitt mindre än 5 pm blir resultaten ej reproducerbara och vid ett tvär- snitt över 100 pm blir resultatet av provberedningen mindre till- fredsställande.

Vätskan får efter en eller flera passager genom den med hål för- sedda väggen sedimentera i det andra rummet och utstryk på ett preparatglas göres från det sedimenterade materialet.

Det har visat sig lämpligt att utnyttja en tryckdifferens mellan det första och det andra rummet på 50-1000 kPa för att pressa upp- slamningen genom den med hål försedda väggen.

Tryckdifferensen upprättas lämpligen genom att en kolv pressas in i ett cylinderformat hålrum, varvid detta hålrum står i förbindel- se med det första rummet.

Uppslamningen innehåller lämpligen ett celldissocieringsmedel, som exempelvis kan utgöras av hyaluonidas, chymotrypsin eller 1,4- -dimerkapto-2,3-butandiol. Vidare ingår fixeringsmedel, såsom exempelvis 50-95% etanol och lämpligen även en mindre mängd natri- umhydroxid.

En anordning för utförande av det nya förfarandet utgöres av ett första och ett andra rum skilda från varandra genom en vägg, för- sedd med ett stort antal hål med ett tvärsnitt på 10-100 pm. Den är vidare försedd med organ för upprättande av en tryckdifferens mellan det första och det andra rummet. Vidare är möjligheter an- ordnade att i det första rummet införa uppslamning och att ur det . ............_f..-...-_-,~q-_,~v-- _ 8005023-0 andra rummet uttaga berett, eventuellt sedimenterat provmaterial.

Anordningen kan utgöras av ett i ena änden slutet första rör i vilket delvis införts ett andra rör, som i sin införda ände är för- sett med ett stort antal hål och i stort sett i tätande anslutning till det första röret. I det andra röret är en rörlig kolv anord- nad, vilken där kan föras fram och tillbaka och vilken kolv även kan införas och uttagas ur det andra röret för införande av upp- slamníngen i det andra röret.

En föredragen utföringsform av uppfinningen skall nu närmare be- skrivas med hänvisning till bifogade figur.

Anordningen består av tre delar, nämligen ett rör 1 försett med en vägg 2 med flera hål, en kolv 3 och ett yttre slutet rör 4. Röret 1 med väggen 2 och kolven 3 avgränsar det första rummet 5. Röret 1 kan införas i det yttre röret 4 lämpligen tätande mot varandra. I röret 4 avgränsas det andra rummet 6 av det slutna rörets nedre ände och den med hål försedda väggen 2. Det yttre röret 4 utgöres lämpligen av ett centrifugrör med spetsig nedre ände 7. Röret 1 och kolven 3 är lämpligen utformade som en injektionsspruta med en fläns 8 och en tryckyta 9 samt vingar 10 för att centrera kolvens rörel- se i röret 1, när tryck utövas på tryckytan 9. Kolven 3 är lämpli- gen försedd med en gummipackning 11 för att ge bättre tätning mel- lan kolven 3 och röret 1.

Den visade anordningen är avsedd för en manuell provberedning, var- vid kolven 3 först avlägsnas ur röret 1 och det i fysiologisk väts- ka uppslammade provet hälles ned i röret 1. Kolven 3 isättes där- efter och pressas ned genom röret 1. Vätskan kommer därvid att pressas genom den hålförsedda väggen, lämpligen representerad av ett metalltrådsnät eller ett nät av konstfibrer med en tvärsnitts- diameter av 10-100 pm. Rören 1 och 4 kan sedan vändas och kolven 3 dras ut, varigenom vätskan suges genom den hålförsedda väggen, varefter vätskan åter med kolven pressas genom den hålförsedda väg- gen. Processen upprepas lämpligt antal gånger, varefter vätskan får sedimentera eller centrifugeras i röret 4. Material för utstryk kan sedan tagas från det sedimenterade materialetoch därvid erhålles utstryk som i stor utsträckning ger fria celler och lämpar sig väl för automatisk undersökning. 8005023-0 Fackmannen torde icke ha svårt att föreställa sig automatiserade enheter, där provberedningen kan ske på helt automatisk väg, även om här icke beskrivas någon exemplifierad anordning härför.

Claims (10)

10 15 20 25 30 \.>l Ul UU šbasezs-o 6 Patentkrav

1. Förfarande för beredning av cellprover genom friläggning av enstaka celler till cytologiska undersökningar av ex- folierade celler, där cellprovet föreligger i form av en uppslamning i vätska, k ä n n e t e c k n a t av att uppslam- ningen ínföres i ett första rum försett med en vägg med ett stort antal hål med ett tvärsnitt på 10-100 fm och i förbin- delse med ett andra rum och att uppslamningen under inverkan av en tryckdifferens mellan det första och det andra rummet bringas att passera den med hål försedda väggen en eller flera gånger och att material som efter passage av den med hål försedda väggen uttages från det andra rummet och utnyttjas för framställning av utstryk på ett preparatglas.

2. Förfarande enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t av att hålens tvärsnitt är 10-H0 fm.

3. Förfarande enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t av att tryckdifferens pâ 50-1000 kPa utnyttjas för att pressa upp- slamningen genom den med hål försedda väggen. Ä.

4. Fmfæmmeemigzmevl,kär1net;eck11at avafi vätskan får sedimentera i det andra rummet och att utstryk göres från det sedimenterade materialet.

5. Förfarande enligt krav 1, k ä n n e t_e c k n a t av att tryckdifferensen upprättas genom att en kolv pressas in i ett cylinderformat hålrum varvid detta hålrum står i förbin- delse med det första rummet.

6. Förfarande enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t av att till uppslamningen sättes ett celldissocieringsmedel och ett fixeringsmedel.

7. Förfarande enligt krav 6, k ä n n e t e c k n a t av att celldissocieringsmedlet utgöres av hyaluoxidas, chymotrypsin eller 1,H-dimerkapto-2,5-butandiol och fixeringsmedlet av 50-95% etanol samt att till uppslamningen sättas en mindre mängd natriumhydroxid. n' 8005025-0

8. Förfarande enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a t av att uppslamningen bringas att passera väggen genom en omväxlande tryckinverkan och sugverkan.

9. Anordning för genomförande av förfarandet enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a d av att den består av ett första (5) och ett andra rum (6) skilda från varandra, genom en vägg (2), för- sedd med ett stort antal hål med ett tvärsnitt på 10-100 Pm, att den är försedd med organ (3) för upprättande av en tryckdif- ferens mellan det första och det andra rummet, att den är försedd med en införingsöppning för uppslamning och organ för uttagning av berett, eventuellt sedimenterat provmaterial.

10. Anordning enligt krav 9, k ä n n e t e c k n a d av att den utgöres av ett i ena änden slutet första rör (4), i vilket delvis införts ett andra rör (1), som i sin införda ände är för- sett med ett stort antal hål och i stort sett tätande ansluter sig till det första röret (4), samt en kolv (3), som tätande an- sluter till den inre ytan av det andra röret (1) och vilken kan införas i och uttagas ur det andra röret och däri föras fram och tillbaka.