JP2007198824A - 包埋カセット - Google Patents

Abstract

【課題】置換処理時に容器として使用した際に固着した包埋剤を容易に取り除くことができ、包埋ブロックの固定台としても使用することが可能な包埋カセットを提供する。
【解決手段】包埋カセット１は、試料を収容した状態で包埋剤に浸漬させて、試料の置換処理を行うための容器として使用されるとともに、下面を載置面として、置換処理された試料が包埋された包埋ブロックを載置して、包埋ブロックの固定台として使用されるもので、上面２ａに、試料を収容する収容凹部３が開口して形成されたカセット本体２と、収容凹部３を閉塞する蓋４とを備え、カセット本体２の底部及び蓋４には、収容凹部３と外部とを連通するスリット７が設けられているとともに、カセット本体２の外側面、及び上面と下面の所定幅を有した外縁部は、着脱可能な剥離シート６によって覆われている。
【選択図】図１

Description

本発明は、人体や実験動物等から取り出した試料を収容し置換処理する容器として使用されるとともに、置換処理された試料が包埋された包埋ブロックの固定台として使用される包埋カセットに関する。

従来から、人体や実験動物等から取り出した生体試料を検査、観察する方法の１つとして、包埋剤によって生体試料を包埋した包埋ブロックを、厚さ数μｍの極薄の薄切片に薄切した後に、包埋剤を溶した生体試料を検査・観察する方法が知られている。このような検査・観察で使用される生体試料は、内部と外部とを連通するスリットを有し、識別文字が付与された包埋カセットに収容されて、脱水、脱脂処理が施され、最終的にパラフィン等の包埋剤による置換処理を施される。そして、パラフィン等の包埋剤によって包埋、すなわち周囲を覆い固めて包埋ブロックを成形した後に、裏返した包埋カセットの下面にこの包埋ブロックを載置、固定して、次工程において薄切片を作製していた（例えば、特許文献１参照）。このように、生体試料から薄切片を作製する工程においては、上記の包埋カセットを、生体試料に脱水、脱脂処理及び置換処理を施す際の容器として使用し、さらに、成形された包埋ブロックの固定台としても使用している。このように、包埋カセットを２種類の使用方法で使用するのは、生体試料から包埋ブロックを作製し、さらに包埋ブロックから薄切片を作製する一連の工程において、多数の生体試料を処理する際に生体試料同士の混同を防止するためである。
特開平９−１４５５７１号公報

しかしながら、上記のように生体試料に置換処理を施す際には、包埋カセットに生体試料を収容した状態で、包埋カセットごと包埋剤に浸漬させるため、包埋剤が包埋カセットに固着してしまう。このように固着してしまった包埋剤は、包埋カセットを包埋ブロックの固定台として使用する際には、がたつきの原因となり、包埋ブロックを正確かつ均一な厚さで薄切することができなくなってしまう。このため、従来においては、作業者がナイフ等により一つずつ固着した包埋剤を削ぎ落として使用していたが、非常に時間のかかる作業であり、作業時間及び労力の軽減が望まれていた。

この発明は、上述した事情に鑑みてなされたものであって、置換処理時に容器として使用した際に固着した包埋剤を容易に取り除くことができ、包埋ブロックの固定台としても使用することが可能な包埋カセットを提供するものである。

上記課題を解決するために、この発明は以下の手段を提案している。
本発明は、試料を収容した状態で包埋剤に浸漬させて、前記試料の置換処理を行うための容器として使用されるとともに、下面を載置面として、置換処理された前記試料が包埋された包埋ブロックを載置して、該包埋ブロックの固定台として使用される包埋カセットであって、上面に、前記試料を収容する収容凹部が開口して形成されたカセット本体と、前記収容凹部を閉塞する蓋とを備え、前記カセット本体の底部、または前記蓋の少なくともいずれか一方には、前記収容凹部と外部とを連通するスリットが設けられているとともに、前記カセット本体の外側面、及び上面と下面の所定幅を有した外縁部は、着脱可能な剥離シートによって覆われていることを特徴としている。

この発明に係る包埋カセットによれば、試料をカセット本体の収容凹部に収容し、蓋によって収容凹部を閉塞した状態で包埋剤に浸漬させる。カセット本体の底部または蓋の少なくともいずれか一方にはスリットが設けられているので、包埋剤はスリットから収容凹部の内部に流入して、収容凹部に収容された試料の置換処理を行うことができる。置換処理が完了した後に蓋を取り外して、置換処理された試料を他の包埋皿等に満たされた包埋剤の中に埋め込んで包埋ブロックを作製する。次に、カセット本体を裏返し、下面を載置面として包埋ブロックを載置して固定する。最後に、剥離シートを取り外すことで、置換処理時にカセット本体の外側面、及び上面と下面の外縁部に固着した包埋剤を容易に取り除くことができる。このため、カセット本体を包埋ブロックの固定台として使用し包埋ブロックを薄切する際に、カセット本体が、がたつくこと無く、正確かつ均一な厚さで薄切片を作製することができる。

また、上記の包埋ブロックにおいて、前記剥離シートの少なくとも一箇所には、表面から裏面まで貫通した切込部が形成されていることがより好ましいとされている。
この発明に係る包埋カセットによれば、切込部が形成された部分の剥離シートを引っ張ることで、剥離シートを切込部から容易に切断することができる。このため、さらに容易に剥離シートを取り外し、固着した包埋剤を取り除くことができる。

さらに、上記の包埋ブロックにおいて、前記剥離シートは、耐アルコール性と耐キシレン性を有する材質で形成されていることがより好ましいとされている。
この発明に係る包埋カセットによれば、試料の置換処理の前段階で、組織中の水分や脂質をアルコールで置換する場合、さらに試料をキシレンに浸漬させて、アルコールをキシレンで置換する場合において、剥離シートがアルコールやキシレンによって溶解してしまうことが無い。

また、上記の包埋ブロックにおいて、前記剥離シートは、熱収縮性を有する環状の部材であることがより好ましいとされている。
この発明に係る包埋カセットによれば、環状の剥離シートをカセット本体の周囲に覆い、加熱することで、剥離シートを熱収縮させて、カセット本体の外側面及び上面と下面の外縁部に密着させることができる。

また、上記の包埋ブロックにおいて、前記剥離シートは、自己融着性を有する帯状の部材であるものとしても良い。
この発明に係る包埋カセットによれば、帯状の剥離シートをカセット本体の周囲に巻き付けて引っ張ることで、自己融解させて、カセット本体の外側面及び上面と下面の外縁部に密着させることができる。

また、上記の包埋ブロックにおいて、前記剥離シートは、容易に弾性的に拡径し、かつ、収縮して前記カセット本体に密着可能な弾性を有する環状の部材であるものとしても良い。
この発明に係る包埋カセットによれば、環状の剥離シートを弾性的に拡径させ、カセット本体の周囲を覆うことで、剥離シートを収縮させて、カセット本体の外側面及び上面と下面の外縁部に密着させることができる。

また、上記の包埋ブロックにおいて、前記カセット本体の前記上面には、前記収容凹部と異なる位置に複数の係合凹部が設けられるとともに、前記蓋の下面の前記係合凹部と対応する位置には、前記係合凹部に挿入され係合可能な係合凸部が突出して設けられていることがより好ましいとされている。

この発明に係る包埋カセットによれば、カセット本体の係合凹部に蓋の係合凸部を挿入して係合させることで、カセット本体の収容凹部を閉塞した状態を保つことができる。この際、係合凹部がカセット本体の上面の収容凹部と異なる位置に設けられていることで、係合凹部に挿入された蓋の係合凸部が収容凹部側に突出し、収容凹部に収容された試料を損傷してしまう恐れが無い。また、蓋の係合凸部が外側面側に突出し、外側面に覆われた剥離シートを損傷してしまう恐れが無く、また剥離シートの密着性を妨げてしまうことも無い。

また、上記の包埋ブロックにおいて、前記蓋の角部の内、前記剥離シートによって覆われる前記カセット本体の前記上面の角部と対応する部分には、隅切りが形成されていることがより好ましいとされている。

この発明に係る包埋カセットによれば、蓋の角部に隅切りが形成されているので、カセット本体の上面の角部とは当接しない。このため、カセット本体の上面の角部を覆う剥離シートが、角部の形状に対応して折れ曲がり、凹凸が形成されてしまったとしても、剥離シートの凹凸によって蓋とカセット本体との間に隙間が生じてしまうようなことが無い。

また、上記の包埋ブロックにおいて、前記カセット本体の上面の前記蓋及び前記剥離シートに覆われない範囲には、識別文字を記入可能な識別文字記入部が設けられていることがより好ましいとされている。
この発明に係る包埋カセットによれば、識別文字記入部がカセット本体の上面の蓋及び剥離シートに覆われない範囲に設けられており、識別文字記入部に識別文字を記入することで、蓋で収容凹部を閉塞した状態でも、試料の種類を容易に判別することができる。

本発明の包埋ブロックによれば、カセット本体を着脱可能な剥離シートで覆っていることで、置換処理時に固着した包埋剤を容易に取り除くことができる。このため、包埋剤の取り除く作業時間及び労力の軽減を図ることができ、包埋ブロックの固定台としても使用することができる。

図１及び図１３は、この発明に係る実施形態を示している。生体試料を検査、観察する方法の１つとして、包埋剤によって生体試料を包埋した包埋ブロックを、厚さ３〜５μｍの極薄の薄切片に薄切した後に、包埋剤を溶した生体試料を検査・観察する方法がある。生体試料Ａとしては、例えば、人体や実験動物等から取り出した臓器などの組織であり、医療分野、製薬分野、食品分野、生物分野などで適時選択されるものであり、脱水、脱脂処理、さらに包埋剤によって置換処理されたものが使用される。また、包埋ブロックは、包埋剤によって生体試料を包埋、すなわち周囲を覆い固めたものであり、包埋剤には、パラフィンや樹脂などが用いられる。なお、本実施形態では、包埋剤としてパラフィンを使用している。図１に示す包埋カセット１は、予め適当な大きさに切断された各生体試料を別々に収容して識別するとともに、生体試料の置換処理等を行う際の容器として使用される。さらに、生体試料が包埋された包埋ブロックを作製した後は、包埋ブロックを薄切する際の固定台として使用されるものである。以下に、包埋カセット１の詳細、及び包埋カセット１を使用した包埋ブロックＢの作製手順について説明する。

図１及び図２に示すように、包埋カセット１は、上面２ａに、生体試料を収容する収容凹部３が開口して形成されたカセット本体２と、収容凹部３を閉塞する蓋４とを備えている。図３から図５のカセット本体２の上面図及び各断面図に示すように、カセット本体２の底部２ｂには、収容凹部３の内部と外部とを連通するスリット５が設けられている。また、カセット本体２の外側面２ｃ、及び上面２ａと下面２ｄの所定幅を有した外縁部２ｅは、着脱可能な剥離シート６によって覆われている。剥離シート６は、環状の部材で、その幅Ｂ６はカセット本体２の外側面２ｃの幅と、上面２ａ及び下面２ｄのそれぞれの外縁部２ｅの幅との和よりも大きく設定されている。また、剥離シート６は、耐アルコール性及び耐キシレン性並びに熱収縮性を有する材質、例えばＰＦＡ（テトラフルオロエチレン・パーフルオロアルキルビニルエーテル共重合体）やＦＥＰ（テトラフルオロエチレン・ヘキサフルオロプロピレン共重合体）などのフッ素樹脂で形成されている。すなわち、図３から図５に示すように、カセット本体２の外側面２ｃを覆うように剥離シート６を配置して、剥離シート６を加熱して熱収縮させることで、剥離シート６は、カセット本体２の外側面２ｃ、及び上面２ａと下面２ｄの外縁部２ｅに密着している。また、図１に示すように、剥離シート６の少なくとも一箇所には、表面６ａから裏面６ｂまで貫通したＶ字形の切込部６ｃが形成されている。

図１、図６及び図７に示すように、蓋４は、略板状の部材で、上面４ａから下面４ｂまで貫通するスリット７が設けられており、収容凹部３を閉塞した際に、収容凹部３の内部と外部とを連通することが可能である。また、図１に示すように、蓋４の角部の内、剥離シート６によって覆われるカセット本体２の上面２ａの角部２ｆと対応する部分には、隅切り４ｃが形成されているとともに、先端部４ｄは、蓋４が収容凹部３を閉塞した際に、カセット本体２から突出するように設定されている。

さらに、図３及び図４に示すように、カセット本体２の上面２ａにおいて、収容凹部３の両側の収容凹部３と異なる位置で、剥離シート６に覆われていない部分には、複数の係合凹部８、９が設けられている。さらに図６及び図７に示すように、蓋４の下面４ｂにおいて、カセット本体２の係合凹部８、９と対応する位置には、係合凹部８、９に挿入し、係合可能な複数の係合凸部１０、１１が突出して設けられている。なお、図１に示すように、カセット本体２の上面２ａにおいて、蓋４及び剥離シート６の覆われない範囲には、識別文字を記入可能につや消し処理が施された識別文字記入部１２が設けられている。

次に、包埋カセット１の作用及び包埋カセット１を使用した包埋ブロックの作製手順について説明する。図８に示すように、まず、ホルマリンで固定された生体試料Ａを適当な大きさに切断し、剥離シート６で覆われているカセット本体２の収容凹部３の内部に収容する。次に、蓋４によって、収容凹部３を閉塞する。この際、まず、カセット本体２の係合凹部８に蓋４の係合凸部１０を挿入する。次に、カセット本体２の係合凹部９に蓋４の係合凸部１１を挿入する。この際、係合凸部１１は、弾性変形して係合凹部９に挿入されるとともに、復元することで係合凹部９に係合凸部１１が係合され、蓋４はカセット本体２の収容凹部３を閉塞した状態を保つことができる。また、図１及び図２に示すように、蓋４の角部に隅切り４ｃが形成されているので、カセット本体２の上面２ａの角部２ｆとは当接しない。このため、カセット本体２の上面２ａの角部２ｆを覆う剥離シート６が、角部２ｆの形状に対応して折れ曲がり、凹凸が形成されてしまったとしても、剥離シート６の凹凸によって蓋４とカセット本体２との間に隙間が生じること無く収容凹部３を閉塞することができる。

また、図８に示すように、カセット本体２の係合凹部８、９は、上面２ａにおいて収容凹部３と異なる位置に設けられているので、係合凹部８、９に挿入された係合凸部１０、１１が収容凹部３に突出してしまうことが無い。このため、係合凸部１０、１１によって、収容凹部３に収容された生体試料Ａを損傷してしまう恐れが無い。また、同様に、蓋４の係合凸部１０、１１が外側面２ｃ側に突出し、外側面２ｃに覆われた剥離シート６を損傷してしまう恐れも無い。また、記号、番号などを識別文字記入部１２に記入することで、各生体試料Ａを識別可能な状態とすることができる。識別文字記入部１２は、蓋４及び剥離シート６で覆われない範囲に設けられているので、蓋４で収容凹部３を閉塞した状態でも、生体試料Ａの種類を容易に判別することができる。

次に、包埋カセット１に生体試料Ａを収容した状態で、パレット２０に薬剤２１としてアルコール、キシレンを順に満たし、それぞれに包埋カセット１を浸漬させる。包埋カセット１のカセット本体２の底部２ｂ及び蓋４にはスリット５、７が設けられているので、これらスリット５、７から収容凹部３の内部に薬剤２１が流入する。このため、収容凹部３に収容された生体試料Ａは、薬剤２１としてアルコールを使用し、数回繰り返し浸漬されることで、組織中の水分や脂質がアルコールで置換、すなわち脱水、脱脂処理がされる。さらに、薬剤２１としてキシレンを使用し、数回繰り返し浸漬されることで、アルコールがキシレンに置換される。この際、剥離シート６は耐アルコール性及び耐キシレン性を有するフッ素樹脂で形成されているので、薬剤２１としてアルコールやキシレンを使用したとしても溶解する恐れが無い。

さらに、図８に示すように、パレット２０の内部を、薬剤２１から溶融した包埋剤であるパラフィンＢ１に入れ替えて、再び包埋カセット１を浸漬させる。同様に、スリット５、７から流入したパラフィンＢ１によって生体試料Ａは数回浸漬され、生体試料Ａ中のキシレンをパラフィンＢ１に置換される。この際、パラフィンＢ１は包埋カセット１にも付着し、付着したパラフィンＢ１は常温にて固化し、包埋カセット１に固着した状態となる。

次に、図９に示すように、段部２２ａが形成された包埋皿２２に液状化したパラフィンＢ１を満たしておく。また、包埋カセット１の蓋４を取り外す。この際、図１に示すように、蓋４の先端部４ｄがカセット本体２よりも突出しているので、パラフィンＢ１が固着していても容易に取り外しすることができる。そして、収容凹部３の内部の生体試料Ａを摘出し、包埋皿２２のパラフィンＢ１に浸漬させる。次に、図１０に示すように、生体試料Ａを摘出し、空になったカセット本体２を包埋皿２２のパラフィンＢ１に浸漬させ、下面２ｄを段部２２ａに当接させる。そして、供給口２３よりパラフィンＢ１をさらに供給してカセット本体２の収容凹部３に満たすことで、カセット本体２と、生体試料Ａを包埋したパラフィンＢ１とが、パラフィンＢ１が固化した際により強固に繋がるようにする。この状態で、包埋皿２２の底面側から冷却し、パラフィンＢ１を冷却固化させる。パラフィンＢ１が固化したのを確認した後に、図１１に示すように、包埋皿２２及び包埋カセット１のカセット本体２を逆さにして、包埋皿２２を取り外すことで、生体試料ＡをパラフィンＢ１で包埋した包埋ブロックＢが成形され、包埋カセット１のカセット本体２の下面２ｄを載置面として載置、固定された状態となる。最後に、図１２に示すように、カセット本体２を覆っている剥離シート６の切込部６ｃを引っ張ることによって、切込部６ｃから剥離シート６は切断され、カセット本体２から取り外される。この際、生体試料Ａの置換処理及び包埋ブロックＢの成形時に固着したパラフィンＢ１は、剥離シート６とともに取り除かれる。

このため、図１３に示すように、包埋カセット１のカセット本体２を固定台として、試料台２４に固定したとしても、固着したパラフィンなどによってがたついてしまうことも無く、確実に位置決めし、固定することができる。このため、カッター２５によって厚さ３〜５μｍという極薄の薄切片を正確かつ均一な厚さで作製することが可能となる。

以上のように、カセット本体２の外側面２ｃ、及び上面２ａと下面２ｄの外縁部２ｅを着脱可能な剥離シート６で覆っていることで、カセット本体２にパラフィンＢ１が固着したとしても、容易に取り除くことができる。このため、パラフィンＢ１を取り除く作業時間及び労力の軽減を図ることができ、生体試料Ａに置換処理を施すための容器として、また、生体試料Ａを包埋した包埋ブロックＢの固定台として使用することができる。

なお、剥離シート６は、熱収縮性を有する材質で形成されているとしたが、これに限ることは無い。例えば、自己融着性を有する帯状の部材（テフロン（登録商標）シールテープ：ＵＮＡＳＣＯ ＰＴＹ ＬＴＤ社製等）でも良い。このような帯状の剥離シートをカセット本体２の外側面２ｃに巻き付けて引っ張ることで、自己融解させて、カセット本体２の外側面２ｃ及び上面２ａと下面２ｄの外縁部２ｅを覆い、密着させることができる。さらに、弾性を有する環状の部材で、弾性的に拡径することでカセット本体２の外側面２ｃ及び上面２ａと下面２ｄの外縁部２ｅを覆い、復元して収縮することで、これらの面に密着することが可能なものでも良い。少なくとも、生体試料Ａを収容凹部３に収容し、置換処理時にはカセット本体２に密着した状態を保って直接カセット本体２の外側面２ｃ及び上面２ａと下面２ｄの外縁部２ｅにパラフィンＢ１が付着しないようにすることができる。さらに、包埋ブロックＢの固定台として使用する際に、容易に取り外すことが可能なものであれば良い。また、Ｖ字形の切込部６ｃが形成されているとしたが、少なくとも１箇所にＶ字形に限らず表面６ａから裏面６ｂに貫通する切込部が形成されていれば、剥離シート６の取り外しをより容易にする効果を期待することができる。また、カセット本体２の底部２ｂにはスリット５が設けられ、また蓋４にはスリット７が設けられるものとしたが、これに限ることは無く、少なくとも一方に設けられることで、包埋カセット１に生体試料Ａを収容したまま、生体試料Ａを各薬剤、包埋剤などに浸漬させることができる。

以上、本発明の実施形態について図面を参照して詳述したが、具体的な構成はこの実施形態に限られるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲の設計変更等も含まれる。

この発明の実施形態の包埋カセットの斜視図である。 この発明の実施形態の包埋カセットの上面図である。 この発明の実施形態のカセット本体の上面図である。 この発明の実施形態のカセット本体の断面図である。 この発明の実施形態のカセット本体の断面図である。 この発明の実施形態の蓋の上面図である。 この発明の実施形態の蓋の側面図である。 この発明の実施形態の包埋ブロックを作製する説明図である。 この発明の実施形態の包埋ブロックを作製する説明図である。 この発明の実施形態の包埋ブロックを作製する説明図である。 この発明の実施形態の包埋ブロックを作製する説明図である。 この発明の実施形態の包埋ブロックを作製する説明図である。 この発明の実施形態の包埋ブロックから薄切片を作製する説明図である。

符号の説明

１ 包埋カセット
２ カセット本体
２ａ 上面
２ｂ 底部
２ｃ 外側面
２ｄ 下面
２ｅ 外縁部
２ｆ 角部
３ 収容凹部
４ 蓋
４ａ 上面
４ｂ 下面
４ｃ 隅切り
５、７ スリット
６ 剥離シート
６ａ 表面
６ｂ 裏面
６ｃ 切込部
８、９ 係合凹部
１０、１１ 係合凸部
１２ 識別文字記入部

Claims (9)

1. 試料を収容した状態で包埋剤に浸漬させて、前記試料の置換処理を行うための容器として使用されるとともに、下面を載置面として、置換処理された前記試料が包埋された包埋ブロックを載置して、該包埋ブロックの固定台として使用される包埋カセットであって、
   上面に、前記試料を収容する収容凹部が開口して形成されたカセット本体と、
   前記収容凹部を閉塞する蓋とを備え、
   前記カセット本体の底部、または前記蓋の少なくともいずれか一方には、前記収容凹部と外部とを連通するスリットが設けられているとともに、
   前記カセット本体の外側面、及び上面と下面の所定幅を有した外縁部は、着脱可能な剥離シートによって覆われていることを特徴とする包埋カセット。
2. 請求項１に記載の包埋カセットにおいて、
   前記剥離シートの少なくとも一箇所には、表面から裏面まで貫通した切込部が形成されていることを特徴とする包埋カセット。
3. 請求項１または請求項２に記載の包埋カセットにおいて、
   前記剥離シートは、耐アルコール性と耐キシレン性を有する材質で形成されていることを特徴とする包埋カセット。
4. 請求項１から請求項３のいずれかに記載の包埋カセットにおいて、
   前記剥離シートは、熱収縮性を有する環状の部材であることを特徴とする包埋カセット。
5. 請求項１から請求項３のいずれかに記載の包埋カセットにおいて、
   前記剥離シートは、自己融着性を有する帯状の部材であることを特徴とする包埋カセット。
6. 請求項１から請求項３のいずれかに記載の包埋カセットにおいて、
   前記剥離シートは、容易に弾性的に拡径し、かつ、収縮して前記カセット本体に密着可能な弾性を有する環状の部材であることを特徴とする包埋カセット。
7. 請求項１から請求項６のいずれかに記載の包埋カセットにおいて、
   前記カセット本体の前記上面には、前記収容凹部と異なる位置に複数の係合凹部が設けられるとともに、前記蓋の下面の前記係合凹部と対応する位置には、前記係合凹部に挿入され係合可能な係合凸部が突出して設けられていることを特徴とする包埋カセット。
8. 請求項１から請求項７のいずれかに記載の包埋カセットにおいて、
   前記蓋の角部の内、前記剥離シートによって覆われる前記カセット本体の前記上面の角部と対応する部分には、隅切りが形成されていることを特徴とする包埋カセット。
9. 請求項１から請求項８のいずれかに記載の包埋カセットにおいて、
   前記カセット本体の上面の前記蓋及び前記剥離シートに覆われない範囲には、識別文字を記入可能な識別文字記入部が設けられていることを特徴とする包埋カセット。

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