ES2212969T3 - Deteccion de una muestra para iniciar la medicion de tiempos de una reaccion electroquimica. - Google Patents
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Abstract
Un método para medir la concentración de un analito en una muestra de fluido biológico que se aplica a una tira de diagnóstico electroquímica del tipo que incluye electrodos operativo y de referencia yuxtapuestos que consiste en: (a) aplicar una fuente de corriente constante determinada previamente entre los electrodos operativo y de referencia, (b) llevar un seguimiento de la diferencia de potencial a través de los electrodos, (c) aplicar la muestra a la tira, (d) determinar el tiempo de detección de la muestra anotando cuando desciende la diferencia de potencial por debajo de un voltaje umbral determinado previamente, (e) aplicar un voltaje constante determinado previamente a la muestra, (f) medir una respuesta eléctrica en un momento determinado previamente tras la aplicación del voltaje constante, y (g) calcular la concentración de analito utilizando la respuesta eléctrica medida.
Description
Detección de una muestra para iniciar la medición
de tiempos de una reacción electroquímica.
La presente invención se refiere a un dispositivo
electroquímico para medir la concentración de un analito en un
fluido biológico; más en particular, a un mecanismo para determinar
el momento en el que el fluido proporciona una conexión eléctrica
entre los electrodos de trabajo y de referencia del dispositivo.
Una serie de procedimientos de diagnóstico médico
implican análisis de los fluidos biológicos, tales como sangre,
orina o saliva, para determinar la concentración de un analito en el
fluido. Entre los analitos de mayor interés está la glucosa, y está
extendido el uso de tiras de reactivo en fase deshidratada que
llevan incorporadas composiciones a base de enzima en laboratorios
clínicos, departamentos médicos, hospitales y residencias para
analizar muestras de fluidos biológicos para determinar la
concentración de glucosa. De hecho, las tiras de reactivo se han
convertido en una necesidad cotidiana para muchas personas que se
incluyen entre los 16 millones de personas afectadas de diabetes,
según las estimaciones nacionales. Dado que la diabetes puede causar
peligrosas anomalías en la química de la sangre, puede contribuir a
una pérdida de la visión, insuficiencia renal y otras consecuencias
médicas graves. Para reducir al mínimo el riesgo de estas
consecuencias, la mayoría de las personas con diabetes deben
realizarse análisis periódicamente y ajustar después la
concentración de glucosa en consecuencia, por ejemplo a través del
control de la dieta y/o con inyecciones de insulina. Algunos
pacientes deben medir la concentración de glucosa en sangre hasta
cuatro a veces al día o más.
Es especialmente importante para las personas
afectadas con diabetes que deben controlar su dieta con el fin de
regular la ingestión de azúcar y/o administrase inyecciones de
insulina, y para quienes deben estar guiados en este sentido por
frecuentes análisis de sangre para determinar la concentración de
glucosa, contar con un sistema rápido, económico y preciso para
determinar la glucosa.
Existe un tipo de sistema de medida de la glucosa
que funciona electroquímicamente, y detecta la oxidación de la
glucosa en la sangre en una tira de reactivo seca. El reactivo
incluye generalmente una enzima, como por ejemplo glucosa oxidasa o
glucosa deshidrogenasa y un mediador redox, como por ejemplo
ferroceno o ferricianuro. Este tipo de sistema de medida se describe
en la patente EE.UU. 4.224.125 publicada el 23 de septiembre de
1980, para Nakamura y cols.; la patente 4.545.382 publicada el 8 de
octubre de 1985, para Higgins y cols; y la patente EE.UU. 5.266.179
publicada el 30 de noviembre de 1993, para Nankai y cols.; que se
incorpora al presente documento como referencia.
Los medidores de glucosa electroquímicos se
pueden caracterizar por ser culombimétricos, amperimétricos o
potenciométricos, dependiendo de si el sistema implica la medida de
carga, corriente o potencial, respectivamente, al realizar la
determinación de la concentración de glucosa en sangre. En cada uno
de estos casos, es importante definir el momento preciso en el que
la muestra de sangre entra en contacto con el reactivo, ya que la
señal eléctrica debe aplicarse en la tira en un período de tiempo
cronometrado con precisión, a continuación.
Nankai y cols., patente EE.UU. 5.266.179
publicada el 30 de noviembre de 1933, describe un sistema
electroquímico para medir la glucosa en sangre en el que se define
el momento de aplicación de la muestra como el momento en que se
produce una caída de la resistencia entre un par de electrodos a los
que se aplica un voltaje constante.
White y cols., patente EE.UU. 5.366.609,
publicada el 22 de noviembre de 1994, describe el mismo principio
de seguimiento de la caída de resistencia entre los electrodos para
determinar el momento en el que se aplica sangre en una tira de
reactivo de glucosa seca. En ambas patentes, se aplica un voltaje
constante entre los electrodos de trabajo y de referencia para
llevar un seguimiento de los cambios de resistencia que resultan de
la introducción de una muestra de reactivo en una tira de reactivo
seca.
Para conseguir resultados precisos, el
procedimiento de detección de la muestra no deberá perturbar la
concentración del analito, habiéndose descrito distintas técnicas
para reducir al mínimo la perturbación del analito.
Quade y cols., solicitud de patente alemana (DDR)
148.387, registrada el 28 de diciembre de 1979, describe una medida
electroquímica que emplea un nuevo circuito electrónico que permite
una rápida conmutación entre el modo potenciostático (voltaje
aplicado constante) y galvanostático (corriente aplicada constante),
al mismo tiempo que permite también la reducción del número de
componentes electrónicos. Una meta del circuito consiste en reducir
al mínimo la perturbación de la muestra antes de comenzar la
medida.
Bartels y cols., solicitud de patente alemana
(DDR) 208.230, registrada el 24 de noviembre de 1981, describe una
medida electroquímica con la que también se trata de reducir al
mínimo la perturbación de la muestra. El dispositivo de medida
incluye un circuito que emplea un diodo para reducir al mínimo el
flujo de corriente antes de comenzar la medida, sin utilizar un
bucle de control amperimétrico adicional. Asimismo, el circuito se
conmuta al modo potenciométrico de una manera rápida y precisa.
Littlejohn y cols., patente EE.UU. 4.940.945,
publicada el 10 de julio de 1990 describe un aparato portátil con el
que se puede medir el pH de una muestra de sangre. El aparato
detecta la presencia de una muestra en una célula inyectando una
corriente constante entre un electrodo de carga fuera de la cámara
de muestra y uno de los dos electrodos dentro de la cámara. Cuando
disminuye la impedancia en al menos dos órdenes de magnitud, el
medidor reconoce que se ha proporcionado suficiente muestra y emite
un pitido. Entonces se desconecta el electrodo de carga del circuito
que incluye los dos electrodos dentro de la célula de muestra, y se
realizan las medidas potenciométricamente. Así pues,
US-A-4940945 constituye la técnica
anterior más cercana.
La presente invención proporciona un método para
medir la concentración de un analito en una muestra de un fluido
biológico que se aplica a una tira de diagnóstico electroquímico del
tipo que incluye electrodos de trabajo y de referencia yuxtapuestos.
Dicho método consiste en:
(a) aplicar una fuente de corriente constante
determinada previamente entre los electrodos de trabajo y de
referencia,
(b) llevar un seguimiento de la diferencia de
potencial a través de los electrodos,
(c) aplicar la muestra a la tira,
(d) determinar el tiempo de detección de la
muestra anotando cuándo desciende la diferencia de potencial por
debajo de un voltaje umbral determinado previamente,
(e) aplicar un voltaje constante determinado
previamente a la muestra,
(f) medir una respuesta eléctrica en un momento
determinado previamente tras la aplicación del voltaje constante,
y
(g) calcular la concentración de analito
utilizando la respuesta eléctrica medida.
Un medidor para medir la concentración de un
analito en una muestra de un fluido biológico que ha sido aplicado a
una tira de diagnóstico incluye, en comunicación eléctrica,
(a) un medio para aplicar una corriente
determinada previamente entre los electrodos de trabajo y de
referencia,
(b) un medio para llevar un seguimiento de la
diferencia de potencial a través de los electrodos,
(c) un medio para determinar cuándo desciende la
diferencia de potencial por debajo del voltaje umbral determinado
previamente para indicar la detección de la muestra,
(d) un medio que responda a la detección de la
muestra para aplicar un voltaje constante determinado previamente a
la muestra,
(e) un medio para medir la respuesta eléctrica
resultante, y
(f) un medio para calcular la concentración de
analito utilizando la respuesta eléctrica medida.
La presente invención proporciona un método y un
aparato para medir la concentración de analitos electroquímicamente,
que incluye definir con gran precisión el momento en el que la
muestra que se aplica a la zona de reacción de una tira de
diagnóstico electroquímica llena el espacio entre los electrodos. El
hecho de determinar el momento de aplicación de la muestra (más
precisamente, el momento de detección de la muestra; en la presente
descripción se utilizan los términos indistintamente) permite una
mayor precisión y exactitud del ensayo realizado sobre la
muestra.
Una ventaja del método de la presente invención
para determinar el momento de aplicación de la muestra es que, al
aplicar una corriente pequeña constante para detectar la muestra, se
reduce al mínimo la perturbación de la muestra, en comparación con
los métodos de la técnica anterior que aplicaban un voltaje
constante. Al utilizar este segundo método, la aplicación de una
muestra provoca que la corriente que sobrepasa el umbral definido
inicie el cronometraje. Dado que la velocidad de la muestra es
limitada, la corriente será típicamente sustancial antes de que el
sensor reconozca que se ha superado el umbral. Cuando se observa una
corriente grande, se observa paralelamente una gran perturbación en
el mediador. Esto podría llevar a una medida inexacta, sobre todo
para concentraciones de analito bajas.
El método de la técnica anterior de aplicar un
potencial constante para detectar la aplicación de una muestra
presenta otro inconveniente más, ya que la corriente inicial
disminuye generalmente, reduciéndose la concentración de analito.
Por consiguiente, es más difícil determinar un momento de detección
de la muestra inicial para muestra con poco analito. Por la misma
razón, si se establece el umbral de corriente bajo, se puede activar
falsamente por ruido. Para complicar aún más el asunto, la presencia
de una alta concentración de glóbulos rojos de la sangre también
hace descender la corriente inicial.
Las concentraciones de analito y glóbulos rojos
de la sangre no afectan al método de la presente invención.
Asimismo, el ruido no constituye un problema significativo, ya que
el activador de la detección es un gran cambio del voltaje de
señal.
La figura 1 es un gráfico de corriente aplicada y
voltaje medido frente al tiempo que representa el proceso de
detección de muestra de la presente invención.
La figura 2 es un gráfico del voltaje aplicado y
la respuesta de corriente resultante frente al tiempo para un método
de análisis según la presente invención.
La figura 3 es un gráfico del voltaje aplicado y
la respuesta de corriente frente al tiempo para un método de
análisis alternativo de la presente invención.
La figura 4 es un gráfico de la carga frente al
tiempo para otro método de análisis alternativo de la presente
invención.
La figura 5 representa un dispositivo
electroquímico adecuado para su uso en el método de análisis de la
presente invención.
La figura 6 es un diagrama de un circuito
adecuado para su uso en la presente invención.
La presente invención se refiere a un método
electroquímico para medir la concentración de un analito en un
fluido biológico. Con fines de brevedad, en la descripción que se
expone a continuación se enfatiza la medida de la concentración de
glucosa en muestras de sangre completa; no obstante, las personas
especializadas en la técnica de diagnósticos médicos reconocerán
cómo se puede adaptar la descripción para llevar el seguimiento de
otros analitos (como colesterol, cuerpos de cetona, alcohol, etc.)
en otros fluidos (tales como saliva, orina, fluido intersticial,
etc.).
El método electroquímico (amperimétrico) para
medir la concentración de un analito en una muestra acuosa implica
colocar la muestra en una zona de reacción en una célula
electroquímica que tiene dos electrodos que tienen una impedancia
que es adecuada para la medida amperimétrica. Se deja reaccionar el
analito directamente con un electrodo o con un reactivo redox para
formar una sustancia oxidable (o reducible) en una cantidad que
corresponde a la concentración del analito. A continuación, se
determina electroquímicamente la cantidad de sustancia oxidable (o
reducible). Este tipo de análsis debe definir de forma precisa el
momento en el que se detecta la muestra en la zona de reacción. Esto
permite aplicar una forma de onda electroquímica (es decir, voltaje)
inmediatamente después de que se haya aplicado la muestra y define
de forma precisa un período de incubación o un periodo de reacción.
A su vez, esto mejora la precisión y la exactitud del análisis, tal
como se describe a continuación.
La presente invención proporciona un método y un
aparato mejorados para determinar el momento de detección de la
muestra. Dicho método implica la aplicación de una fuente de
corriente constante y reducida a través del electrodo de una tira de
diagnóstico electroquímica y el seguimiento de la diferencia de
potencial entre los electrodos. Dado que no existe un espacio seco
entre los electrodos, inicialmente fluye una corriente
insignificante. Cuando se aplica la muestra a la tira y se llena el
vacío, disminuye rápidamente el voltaje medido haciendo que se
inicie el período de análisis. Al reconocer de esta forma que se ha
aplicado la muestra, el aparato conmuta de un modo de corriente
constante a un modo de voltaje constante. En el modo de voltaje
constante, se miden o bien la corriente o bien la carga en función
del tiempo para permitir calcular la concentración de analito. Con
esta técnica se reduce al mínimo el error introducido en la
respuesta de señal a través del circuito de iniciación de
cronometraje y, de esta forma, se permiten límites de detección
bajos. Los componentes electrónicos son simples y económicos.
La figura 1 es un gráfico de la corriente
aplicada y el voltaje medido que representa el proceso de detección
de muestra de la presente invención. Antes del tiempo cero (es
decir, antes de introducir la muestra), se aplica una corriente
constante (aquí, para el ejemplo 1 \muA) entre los electrodos,
pero fluye una corriente insignificante. Una corriente más pequeña
reduce la perturbación y es preferible, en particular para
concentraciones de analito pequeñas. Se determina el voltaje medido
a través del voltaje de suministro de potencia del circuito, en este
caso, 5 voltios. Cuando se introduce la muestra en la célula (en el
tiempo cero), la corriente aplicada puede fluir entre los electrodos
y el voltaje medido desciende rápidamente. Cuando el voltaje
desciende por debajo del voltaje umbral, el aparato conmuta de la
corriente aplicada constante a voltaje aplicado constante.
La figura 2 es un gráfico en el que se representa
la corriente potencial y medida en función del tiempo después de la
detección de la muestra. Se detecta la muestra en el tiempo t = 0, y
se aplica un voltaje entre el electrodo de trabajo y el
contraelectrodo inmediatamente después. Como resultado, la corriente
fluye entre los electrodos. La corriente al cabo de un período de
tiempo determinado previamente es una medida de la concentración de
analito, una vez que se ha calibrado del sistema, utilizando
muestras que tienen concentraciones de analito conocidas. La
duración del período determinado previamente no es crítica.
Generalmente, es al menos aproximadamente 3 segundos cuando el
fluido es sangre y el analito es glucosa. Dicha duración proporciona
generalmente suficiente tiempo para disolver los reactivos y reducir
una cantidad de mediador que se puede medir fácilmente. Siendo todo
lo demás igual, a un alto nivel de hematocrito, se necesitan
períodos más prolongados. En la práctica, el usuario está interesado
por lo general en obtener una lectura lo más rápidamente posible.
Típicamente resulta satisfactoria una duración de 10 segundos, sin
que haya motivo para esperar más. Naturalmente, una vez establecido
un período determinado previamente, unos resultados precisos y
exactos requieren que se utilice el mismo tiempo cada vez. En
cualquier caso, la exactitud de la determinación de la corriente
depende de la precisión de la determinación de t = 0.
La figura 3 representa un gráfico de la corriente
medida y el voltaje aplicado frente al tiempo en un método
alternativo. En este método, se aplica el pulso de un segundo
voltaje a través de los electrodos una vez transcurrido el período
determinado previamente. Generalmente, el segundo pulso se aplica
inmediatamente después del período determinado previamente (para
reducir al mínimo el tiempo de medida total), aunque es tolerable un
retraso. También en este caso, unos resultados reproducibles
requieren procedimientos reproducibles; por lo tanto, en este método
también es importante determinar con precisión el punto t = 0. El
segundo pulso causa una punta positiva en la corriente a través de
los electrodos, seguido de una corriente en descenso. Se puede
determinar la concentración de analito, una vez que se haya
calibrado el sistema, a partir de la velocidad de descenso, ya sea
en solitario o en combinación con la medida de corriente
representada en la figura 2. Generalmente, la corriente desciende
exponencialmente durante un período que comienza aproximadamente 1
segundo después de que se aplique el segundo pulso y continúa
durante al menos varios segundos después.
La figura 4 representa el método de la figura 3
en el que se mide la carga en lugar de la corriente. Al igual que
con el gráfico de la figura 3, se puede determinar la concentración
del analito a partir de la carga total en un momento determinado y/o
a partir de la velocidad de descenso después de aplicar el segundo
voltaje.
La figura 5 representa un aparato de "capa
fina" 10 que es adecuado para su uso en los métodos antes
descritos. El sustrato 12 es una base de poliéster 14 sobre la que
se ha depositado (típicamente por bombardeo) un recubrimiento de Pd
16, que forma el electrodo de trabajo. Se deposita un reactivo seco
que consiste en un tampón, un mediador y una enzima cerca de uno de
los extremos 18 del electrodo. La capa espaciadora 20 es adhesiva
por ambas caras que tienen un corte 22 que define la célula
electroquímica. Típicamente, el espaciador tiene un grosor inferior
a aproximadamente 200 \mum. La capa superior 24 es una capa de
poliéster 26 sobre la que se ha depositado (también típicamente por
bombardeo) un recubrimiento de Au 28, que forma el electrodo de
referencia.
Se puede utilizar en un dispositivo del tipo
descrito anteriormente un sistema glucosa oxidasa (GOD)/ferricianuro
para determinar las concentraciones de glucosa a través de las
siguientes reacciones, en las que GOD* es la enzima reducida.
Ferrocianuro
([Fe(CN)_{6}]^{3-}) es el mediador, que
retorna GOD* a su estado catalítico. GOD, un catalizador de enzima,
continuará oxidando la glucosa siempre que esté presente como exceso
de mediador. Ferrocianuro
([Fe(CN)_{6}]^{4-}) es el producto de la
reacción total. Idealmente, no hay ferrocianuro inicialmente, aunque
en la práctica a menudo hay una pequeña cantidad. Una vez completada
la reacción, la concentración de ferrocianuro (medida
electroquímicamente) indica la concentración inicial de glucosa. La
reacción total es la suma de las reacciones 1 y 2.
Los detalles de este sistema se describen en la
solicitud PCT Nº WO 97/18465, que se incorpora al presente documento
como referencia.
La figura 6 representa un modo de realización de
un circuito adecuado para poner en práctica la invención.
Inicialmente, se aplica una fuente de corriente constante a las
tiras que conmutan 105 en la posición 1. La fuente de corriente
consiste en un amplificador operativo 104, referencia de voltaje
102, y resistencias eléctricas 101 y 103. Se determina la corriente
según la relación entre la referencia de voltaje 102 y la
resistencia eléctrica 103. Se utiliza la resistencia eléctrica 101
para generar la polarización requerida. El amplificador operativo
110 y la resistencia eléctrica 109 se utilizan como convertidor de
corriente a voltaje. Inicialmente, sin muestra en la tira, la
resistencia entre los puntos 107 y 108 es muy grande, y la corriente
que pasa a través de la tira es insignificante. El voltaje de salida
del amplificador operativo 104 (V1) es alto en estas condiciones.
Cuando se aplica una muestra a la tira, su resistencia desciende
significativamente y, dado que fluye una corriente constante a
través de la tira, el V1 desciende. Se suministra V1 al
microprocesador 112 a través de un convertidor
analógico-a-digital 111. El
microprocesador 112, que reconoce este voltaje reducido como
detección de la muestra, conmuta 105 a la posición 2 para
desconectar la tira de la fuente de corriente y conectarla con la
fuente de voltaje 106. En estas condiciones, se puede conseguir una
medida cronoamperimétrica midiendo el voltaje de salida del
amplificador operativo 110 (V2). Este voltaje es proporcional a la
corriente que pasa a través de la tira.
El ejemplo que se expone a continuación sirve
para demostrar la presente invención, sin pretender con ello
limitarla.
Se estableció el circuito de la figura 6, siendo
la tira S una tira de glucosa electroquímica de capa fina del tipo
que se muestra en la figura 5, que tenía electrodos Pd y Au. Se
recubrió el electrodo Pd con una capa de un tampón, glucosa
dehidrogenasa (PQQ), y ferricianuro. Se aplicó una corriente no
perturbante constante, pequeña (\sim1 \muA) entre el electrodo
de trabajo y el contraelectrodo/corriente de referencia de la tira
de glucosa seca. Dado que la tira estaba seca, la resistencia entre
el electrodo operativo y el contraelectrodo/electrodo de referencia
fue esencialmente infinita. Después de aplicar una muestra de sangre
completa a través de la célula, se observó un descenso del voltaje.
Un umbral de aproximadamente 50 a 500 mV inició el tiempo de
arranque (es preferible un umbral de aproximadamente 300 mV).
Después de detectar la muestra, el instrumento pasó de aplicar una
corriente constante a aplicar un voltaje constante. La medida de la
corriente a través de la muestra en función del tiempo permitió
calcular la concentración de glucosa.
Los especialistas en este campo podrán comprender
que tanto la descripción anterior como el ejemplo tienen como único
fin ilustrar la práctica de la presente invención, sin pretender
limitarla.
Claims (15)
1. Un método para medir la concentración de un
analito en una muestra de fluido biológico que se aplica a una tira
de diagnóstico electroquímica del tipo que incluye electrodos
operativo y de referencia yuxtapuestos que consiste en:
(a) aplicar una fuente de corriente constante
determinada previamente entre los electrodos operativo y de
referencia,
(b) llevar un seguimiento de la diferencia de
potencial a través de los electrodos,
(c) aplicar la muestra a la tira,
(d) determinar el tiempo de detección de la
muestra anotando cuando desciende la diferencia de potencial por
debajo de un voltaje umbral determinado previamente,
(e) aplicar un voltaje constante determinado
previamente a la muestra,
(f) medir una respuesta eléctrica en un momento
determinado previamente tras la aplicación del voltaje constante,
y
(g) calcular la concentración de analito
utilizando la respuesta eléctrica medida.
2. El método de la reivindicación 1 en el que la
respuesta eléctrica medida es la corriente a través de la muestra en
el momento determinado previamente.
3. El método de la reivindicación 1, en el que la
respuesta eléctrica medida es la carga que pasa a través de la
muestra desde el momento de detección de la muestra al tiempo
determinado previamente.
4. El método de la reivindicación 1, que incluye
además la aplicación de un segundo voltaje determinado previamente
después del tiempo determinado previamente y la medida de la segunda
respuesta eléctrica aplicando el segundo voltaje determinado
previamente.
5. El método de la reivindicación 4 en el que la
segunda respuesta eléctrica es la velocidad de disminución de la
corriente a través de la muestra.
6. El método de la reivindicación 4 en el que la
segunda respuesta eléctrica es la carga que pasa a través de la
muestra durante un intervalo de tiempo determinado previamente
después de aplicar el segundo voltaje.
7. Un medidor para medir la concentración de un
analito en una muestra de fluido biológico que se ha aplicado entre
un electrodo operativo (16) y un electrodo de referencia (28) de una
tira de diagnóstico que consiste en comunicación eléctrica,
(a) un medio (101-104) para
aplicar una corriente determinada previamente entre los electrodos
operativo y de referencia,
(b) un medio (110) para llevar un seguimiento de
la diferencia de potencial a través de los electrodos,
(c) un medio (112) para determinar cuando
desciende la diferencia de potencial por debajo del voltaje umbral
determinado previamente para indicar la detección de la muestra,
(d) un medio que responda a la detección de la
muestra para aplicar un voltaje constante determinado previamente a
la muestra,
(e) un medio para medir la respuesta eléctrica
resultante, y
(f) un medio para calcular la concentración de
analito utilizando la respuesta eléctrica medida.
8. El medidor de la reivindicación 7 en el que el
medio para medir la respuesta eléctrica resultante es un
amperímetro.
9. El medidor de la reivindicación 7 en el que el
medio para medir la respuesta eléctrica resultante es un
culombímetro.
10. El medidor de la reivindicación 7 que incluye
además un medio para aplicar un segundo voltaje determinado
previamente a la muestra y un medio para medir la segunda respuesta
eléctrica resultante.
11. El medidor de la reivindicación 10 en la que
el medio para medir una segunda respuesta eléctrica resultante es un
amperímetro.
12. El medidor de la reivindicación 10 en el que
el medio para medir una segunda respuesta eléctrica resultante es un
culombímetro.
13. Un método para medir la concentración de un
analito en una muestra de un fluido biológico que se aplica a una
tira de diagnóstico electroquímica del tipo que incluye electrodos
operativo y de referencia yuxtapuestos que consiste en:
(a) aplicar una fuente de corriente constante
determinada previamente entre los electrodos operativo y de
referencia,
(b) llevar un seguimiento de la diferencia de
potencial a través de los electrodos,
(c) aplicar la muestra a la tira,
(d) determinar el tiempo de detección de la
muestra anotando cuando desciende la diferencia de potencial por
debajo de un voltaje umbral determinado previamente,
(e) aplicar un voltaje constante determinado
previamente a la muestra,
(f) aplicar un segundo voltaje determinado
previamente a la muestra después del primer momento determinado
previamente,
(g) medir una respuesta eléctrica en un momento
determinado previamente después de un momento de tiempo constante;
y
(g) calcular la concentración de analito
utilizando la respuesta eléctrica medida.
14. El método de la reivindicación 13 en el que
la respuesta eléctrica medida es la velocidad de disminución de la
corriente a través de la muestra.
15. El método de la reivindicación 13 en el que
la respuesta eléctrica medida es la carga que pasa a través de la
muestra durante un intervalo de tiempo determinado previamente
después de aplicar un segundo voltaje determinado previamente.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US333793 | 1994-11-03 | ||
| US09/333,793 US6193873B1 (en) | 1999-06-15 | 1999-06-15 | Sample detection to initiate timing of an electrochemical assay |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2212969T3 true ES2212969T3 (es) | 2004-08-16 |
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ID=23304277
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES00305037T Expired - Lifetime ES2212969T3 (es) | 1999-06-15 | 2000-06-14 | Deteccion de una muestra para iniciar la medicion de tiempos de una reaccion electroquimica. |
Country Status (23)
| Country | Link |
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| US (1) | US6193873B1 (es) |
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