KR100712380B1 - 전기 화학 어세이의 타이밍을 개시하는 샘플 검출 방법 - Google Patents

전기 화학 어세이의 타이밍을 개시하는 샘플 검출 방법 Download PDF

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Abstract

전기 화학 어세이(electrochemical assay)는 전기 화학 셀의 전극들 사이의 갭에 인가 샘플을 가교시킨(bridge) 시간을 높은 정확성으로 측정하는 방법을 포함한다. 이 방법은 갭 양단에 일정한 소량의 전류를 인가하고, 전극들 사이의 전위차를 모니터하는 단계를 포함한다. 샘플을 갭에 가교시킨 시간은 전위의 급강하에 의해 표시된다. 샘플이 검출된 후에 일정 전압이 인가되고, 샘플을 통과하는 전류 또는 전하는 시간 기간에 걸쳐 모니터된다. 측정 전류 또는 전하로부터 관련 에널리트(analyte) 농도가 계산될 수 있다.
어세이, 에널리트, 농도, 전기적 응답, 전위차, 전기 화학 진단 스트립

Description

전기 화학 어세이의 타이밍을 개시하는 샘플 검출 방법{Sample detection to initiate timing of an electrochemical assay}
도 1은 본 발명의 샘플 검출 과정을 도시하는 인가 전류 및 측정 전압 대 시간의 그래프.
도 2는 본 발명의 어세이 방법에 대해 인가 전압 및 결과로서 생긴 전류 응답 대 시간의 그래프.
도 3은 본 발명의 대안적 어세이 방법에 대해 인가 전압 및 전류응답 대 시간의 그래프.
도 4는 본 발명의 다른 대안적 어세이 방법에 대해 전하 대 시간의 그래프.
도 5는 본 발명의 어세이 방법에 사용하는데 적합한 전기 화학 디바이스를 도시한 도면.
도 6은 본 발명에서 사용하기에 적합한 회로도.
* 도면의 주요 부분에 대한 부호의 설명 *
10: 디바이스 14: 폴리에스테르 베이스
20: 이격층 22: 컷아웃
24: 상단층 28: Au 코팅
110: 연산 증폭기 112: 마이크로프로세서
본 발명은 생체 유체 내의 에널리트(analyte)의 농도를 측정하는 전기 화학 디바이스에 관한 것으로, 특히 유체가 디바이스의 작용 전극과 기준 전극 사이의 전기적인 접속을 제공하는 시간을 결정하는 메커니즘에 관한 것이다.
다양한 의료 진단 절차는 생체 유체 내의 에널리트 농도를 측정하기 위해서, 혈액, 뇨(urine), 또는 타액 등 생체 유체에 대한 테스트를 수반한다. 에널리트들 중에서 가장 흥미로운 것은 포도당이며, 포도당 농도에 대해서 생체 유체 샘플들을 테스트하기 위해서 임상 실험실, 의사실, 병원, 및 가정에서 효소-기반 합성물들을 함유한 건조 상태 시약 스트립들이 널리 사용된다. 사실, 시약 스트립들은 전 인구중 1600만 명으로 추정되는 당뇨가 있는 사람 대부분에게 일상 필수품이 되었다. 당뇨병은 혈액화학에서 위험한 이형들(anomaly)을 야기할 수 있기 때문에, 시력 상실, 신장 기능 부전 및 기타 심각한 의료상의 결과들을 유발할 수 있다. 이들 결과들의 위험을 최소화하기 위해서, 당뇨병이 있는 대부분의 사람은 그들 스스로 주기적으로 테스트해야 하며, 그에 따라 예를 들어 식이요법 조절(diet control) 및/또는 인슐린 주입들을 통해서 자신의 포도당 농도를 조정한다. 일부 환자들은 자신의 혈액 포도당 농도를 매일 4번 이상 테스트해야 한다.
당 섭취량을 조절하거나 인슐린 주입을 행하기 위해서 자신의 식이요법을 조정해야 하는 당뇨병이 있는 사람들과, 이러한 면에서 혈액 포도당 농도를 자주 테스트하여 관리해야 하는 사람들이 신속하고 저렴하며 정확한 포도당을 측정하는 시스템을 소지하는 것이 특히 중요하다.
한 유형의 포도당 측정 시스템은 전기 화학적 방식으로 동작하며, 건조 시약 스트립 상에서 혈액 포도당의 산화를 검출한다. 시약은 일반적으로 포도당 산화효소(glucose oxidase) 또는 포도당 탈수소 효소 등의 효소, 및 페로신(ferrocene) 또는 페리시아나이드(ferricyanide) 등의 산화 환원 반응 매개자(mediator)를 포함한다. 이러한 종류의 측정 시스템은 Nakamura 등에게 1980년 9월 23일 허여된 미국특허 4,224,125호; Higgins 등에게 1985년 10월 8일 허여된 미국특허 제4,545,382호; Nankai 등에게 1993년 11월 30일 허여된 미국특허 제5,266,179호에 기술되어 있으며, 이들을 참조로서 본원에 포함되었다.
전기 화학 포도당 계측기(meter)는 포도당 농도를 측정할 때, 시스템이 전하, 전류, 또는 전위 각각을 측정하는 것을 포함하는지 여부에 따라, 전량 분석(coulometric), 암페로메트릭(amperometric), 또는 포텐셔메트릭(potentiometric)인 것으로서 특징화할 수 있다. 각 경우에, 혈액샘플을 시약에 접촉시키는 시점을 정의하는 것이 중요하며, 이것은 그 후에 정밀하게 시간을 맞춘 기간에 전기신호가 스트립에 인가되어야 하기 때문이다.
1993년 11월 30일에 허여된 Nankai 등에 의한 미국특허 제5,266,179호는 혈액 포도당을 측정하기 위한 전기 화학 시스템을 개시하고 있으며, 여기서 샘플 인가 시간은 일정 전압이 인가된 한 쌍의 전극 사이의 저항 강하 시간으로서 정의된다.
1994년 11월 22일에 허여된 White 등에 의한 미국특허 제5,366,609호는 건포도당 시약 스트립에 혈액을 인가한 시간을 측정하기 위해서 전극 사이의 저항 강하를 모니터하는 동일한 원리를 개시하고 있다. 두 특허에서, 혈액샘플을 건 시약 스트립에 도입함으로써 유발된 저항 변화들을 추적하기 위해서 작용 전극과 기준 전극 사이에 일정 전압을 인가한다.
정확한 결과를 위해서, 샘플 검출과정은 에널리트 농도를 교란(perturb)시키지 말아야 하며, 에널리트 교란을 최소화시키는 몇 가지 기술이 기술되었다.
1979년 12월 28일에 출원된 퀘이드 등의 독일(DDR) 특허출원 제148,387호는 포텐셔스태틱(일정한 인가 전압) 모드와 갈바노스태틱 (galvanostatic; 일정한 인가 전류) 모드 사이를 신속하게 스위칭시키며, 또한 전자 부품 수를 감소시킬 수 있는 새로운 전자 회로를 사용하는 전기 화학 측정을 개시하고 있다. 이 회로의 목적은 측정을 시작하기 전에 샘플의 교란을 최소화하는 것이다.
1981년 11월 24일 출원된 Bartels 등에 의한 독일(DDR) 특허출원 208,230호 역시 샘플 교란을 최소화하기 위한 전기 화학 측정을 개시하고 있다. 측정장치는 부가의 암페로메트릭 제어 루프를 사용하지 않고 측정시작 전에 전류 흐름을 최소화하기 위해 다이오드를 사용하는 회로를 포함한다. 더욱이, 회로는 정밀하고 신속한 방식으로 포텐셔메트릭 모드로 전환한다.
1990년 7월 10일에 허여된 Littlejohn 등에 의한 미국특허 제4,940,945호는 혈액샘플의 pH를 측정할 수 있는 휴대용 장치를 개시하고 있다. 이 장치는 샘플 챔버 외부의 충전 전극과 상기 챔버 내에 있는 2개의 전극 중 하나의 전극 사이에 일정한 전류를 주입함으로써 셀 내의 샘플의 유무를 검출한다. 임피던스가 적어도 2배 크기만큼 감소할 때, 계측기는 충분한 샘플이 제공되었음을 인식하고 비프 음을 낸다. 충전 전극은 샘플 셀 내에 2개의 전극을 포함하는 회로로부터 차단되며, 포텐셔메트릭 방식으로 측정한다.
본 발명은 병렬 위치된 작용 전극과 기준 전극을 포함하는 유형의 전기 화학 진단 스트립에 인가되는 생체 유체 샘플 내의 에널리트 농도를 측정하는 방법을 제공한다. 상기 방법은,
(a) 상기 작용 전극과 기준 전극 사이에 미리 결정된 일정 전류원을 인가하는 단계,
(b) 상기 전극 사이의 전위차를 모니터하는 단계,
(c) 상기 샘플을 상기 스트립에 인가하는 단계,
(d) 상기 전위차가 미리 결정된 임계 전압 아래로 강하할 때를 주목하여 샘플 검출 시간을 결정하는 단계,
(e) 미리 결정된 일정 전압을 상기 샘플에 인가하는 단계,
(f) 상기 일정 전압을 인가한 후 미리 결정된 시간에 전기적 응답을 측정하는 단계, 및
(g) 상기 측정 전기적 응답을 사용하여 에널리트 농도를 계산하는 단계를 포함한다.
전기통신에서, 진단 스트립에 인가된 생체 유체샘플 내의 에널리트 농도를 측정하는 계측기는,
(a) 상기 작용 전극과 기준 전극 사이에 미리 결정된 전류를 인가하는 수단,
(b) 상기 전극 사이의 전위차를 모니터하는 수단,
(c) 샘플 검출을 표시하도록 상기 전위차가 미리 결정된 임계 전압 아래로 강하할 때를 결정하는 수단,
(d) 샘플 검출에 응답하여 미리 결정된 일정 전압을 상기 샘플에 인가하는 수단,
(e) 결과로서 생긴 전기적 응답을 측정하는 수단, 및
(f) 상기 측정된 전기적 응답을 사용하여 에널리트 농도를 계산하는 수단을 포함한다.
본 발명은 전기 화학적으로 에널리트 농도를 측정하는 방법 및 장치를 제공하며, 전기 화학 진단 스트립의 반응 구역에 인가되는 샘플이 전극들 사이의 갭을 가교하는 시간을 높은 정확성으로 규정하는 것을 포함한다. 샘플 인가 시간(더욱 세밀하게는 샘플 검출 시간; 본원에서는 이 용어들을 상호 교환적으로 사용하였다)을 정확하게 측정하는 것은 샘플에서 행해진 어세이를 보다 높은 정확성 및 정밀도를 허용한다.
샘플 인가시간을 측정하는 본 발명의 이점은 샘플을 검출하기 위해 일정하고 낮은 전류를 인가하여, 일정 전압을 인가하는 종래기술의 방법에 비해 샘플 교란을 최소화한다는 것이다. 후자의 방식을 사용할 때, 샘플 인가는 정의된 임계치를 초과하는 전류로 하여금 타이밍을 개시하도록 한다. 샘플링 속도가 제한되기 때문에, 임계치를 초과하였음을 센서가 인식하기 전에, 통상적으로 충분한 전류가 존재한다. 큰 전류가 관찰될 때, 이에 대응하여 매개자에서 큰 교란이 관찰된다. 이것은 특히 낮은 에널리트 농도에서 부정확한 측정을 유발할 수 있다.
샘플인가를 검출하도록 일정전위를 인가하는 종래의 방법에서는 에널리트 농도가 감소함에 따라 초기 전류가 감소하는 또 다른 문제가 있었다. 따라서 낮은 에널리트 샘플들에 대한 초기 샘플 검출 시간을 결정하는 것이 더욱 어렵다. 같은 이유로, 전류 임계치가 너무 낮게 설정되면, 잡음에 의해 잘못 트리거될 수 있다. 더 복잡한 문제점은 고농도의 적혈구가 있을 때에도 초기 전류가 감소된다는 점이다.
에널리트 농도 및 적혈구 농도는 본 발명의 방법에 영향을 미치지 않는다. 마찬가지로, 검출 트리거가 신호 전압에서 큰 변화이기 때문에 노이즈도 큰 문제가 안 된다.
본 발명은 생체 유체 내의 에널리트 농도를 측정하는 전기 화학 방법에 관한 것이다. 간결하게 하기 위해서, 이하 설명은 전체 혈액의 샘플들 내의 포도당 농도를 측정하는 것을 강조하지만, 의료진단 기술에 통상의 지식을 가진 자는 본 기술된 내용을 다른 유체(이를테면, 타액, 뇨, 세포간 유체, 등) 내의 다른 에널리트(이를테면 콜레스테롤, 케톤체, 알콜, 등)을 모니터하도록 적응하는 방법을 알 것이다.
수성 샘플 내의 에널리트 농도를 측정하는 전기 화학(암페로메트릭) 방법은 암페로메트릭 측정에 적합한 임피던스를 갖는 2개의 전극을 갖는 전기 화학 셀 내의 반응 구역에 샘플을 배치하는 것을 포함한다. 에널리트는 전극 또는 산화 환원 반응(redox) 시약과 직접 반응하도록 허용되어 에널리트 농도에 대응하는 양으로 산화성(또는 환원성) 물질을 형성한다. 이어서 산화성(또는 환원성) 물질의 양은 전기 화학적으로 측정된다. 이러한 유형의 어세이는 샘플이 반응 구역 내에서 검출되는 시점을 정확하게 규정해야만 한다. 이것은 샘플이 인가된 직후에 전기 화학 파형(즉, 전압)이 인가되는 것을 허용하여, 잠복기간(incubation period) 또는 반응 시간을 정확하게 규정한다. 이하 기술하는 바와 같이, 이것은 어세이의 정확성 및 정밀도를 개선한다.
본 발명은 샘플 검출 시간을 측정하는 개선된 방법 및 장치를 제공한다. 본 발명의 방법은 전기 화학 진단 스트립의 전극 양단에 일정하고 낮은 전류원을 인가하고 전극 사이의 전위차를 모니터하는 것을 포함한다. 전극 간에 건식 갭(dry gap)이 있기 때문에, 초기엔 무시할 수 있는 정도의 낮은 전류가 흐른다. 샘플이 스트립에 인가되어 갭을 채웠을 때, 측정 전압은 급속하게 감소하여, 테스트 시간이 개시된다. 그러므로, 샘플이 인가되었음을 인식하면, 장치는 일정 전류 모드로부터 일정 전압 모드로 전환한다. 일정 전압 모드에서, 전류 또는 전하가 시간의 함수로서 측정됨으로써 에널리트 농도를 계산할 수 있게 된다. 이 기술은 타이밍 개시 회로에 의한 신호응답에 도입되는 에러를 최소화하여 검출한계를 낮게 할 수 있게 한다. 전자부품은 단순하고 저렴하다.
도 1은 본 발명의 샘플 검출 과정을 도시한 인가 전류 및 측정 전압을 도시한 것이다. 시간 제로(0) 전(즉, 샘플이 도입되기 전), 일정한(본원에서는, 예를 들면 1㎂) 전류가 전극 사이에 인가되지만, 무시할 수 있는 정도의 낮은 전류가 흐른다. 보다 낮은 전류는 교란을 감소시키고, 낮은 에널리트 농도에 특히 바람직하다. 측정된 전압은 회로 전력 공급 전압에 의해 결정되고, 이 경우 5V이다. 샘플이 셀에 도입되었을 때(시간 제로에서), 인가 전류는 전극 사이에 흐를 수 있고, 측정 전압은 급속하게 강하한다. 전압이 임계 전압 밑으로 강하할 때, 장치는 일정 인가 전류로부터 일정 인가 전압으로 전환한다.
도 2는 샘플 검출 후에 시간의 함수로서 인가 전위 및 측정 전류를 도시한 그래프이다. 샘플은 시간 t=0에서 검출되며, 전압은 그 후 즉시 작용 전극과 상대 전극 사이에 인가된다. 그 결과, 전류는 전극 사이에 흐른다. 공지된 에널리트 농도를 가진 샘플을 사용하여 시스템이 일단 교정되면, 미리 결정된 시간 후의 전류는 에널리트 농도 측정치가 된다. 미리 결정된 시간의 기간은 중요한 것은 아니다. 유체가 혈액이고 에널리트가 포도당일 때, 미리 결정된 시간은 일반적으로 적어도 약 3초이다. 이 기간은 일반적으로 시약을 용해하고, 쉽게 측정할 수 있는 매개자 양을 감소시키는데 충분한 시간을 제공한다. 모든 것들이 동일할 때, 높은 헤마토크리트에서, 보다 긴 시간이 필요하다. 실제로, 사용자는 일반적으로 가능한 빨리 판독하는 것에 관심이 있다. 보다 길게 기다리는 것에 대한 동기 부여가 없는 경우, 통상 10초가 충분하다. 물론, 일단 미리 결정된 시간이 설정되면, 정확하고 정밀한 결과는 매번 동일한 시간이 사용되는 것을 요구한다. 어쨌든, 전류측정 정확성은 t=0 결정의 정확성에 달려있다.
도 3은 대안 방법에서 측정 전류 및 인가 전압 대 시간의 그래프를 도시한 것이다. 이 방법에서, 제 2 전압펄스는 미리 결정된 시간 후에 전극들에 인가된다. 일반적으로, 제 2 펄스는 미리 결정된 시간 직후에 인가되나(총 측정시간을 최소화하기 위해서), 지연이 허용될 수 있다. 다시, 재현가능 결과는 재현가능 결과를 요구하므로, 이 방법에서도, t=0 시점을 정확하게 측정하는 것이 중요하다. 제2 펄스는 전극을 통하는 전류에 양의 스파이크를 야기하고, 감쇄 전류가 따른다. 에널리트 농도는 시스템이 교정된 후에, 도 2에 도시한 전류측정 단독으로 또는 이와 결합하여 감쇄 속도(decay rate)로부터 측정될 수 있다. 일반적으로, 전류는 제 2 펄스가 인가된 후 약 1초 후에 시작하여 그 후 적어도 몇 초 동안 지속하는 기간에 걸쳐 지수함수적으로 감쇄한다.
도 4는 전류가 아니라 전하를 측정한 도 3의 방법을 도시한 것이다. 도 3의 그래프와 같이, 에널리트 농도는 일정시간에 총 전하로부터, 및/또는 제 2 전압이 인가된 후 감쇄 속도로부터 측정될 수 있다.
도 5는 전술한 방법에서 사용하는데 적합한 "박층" 디바이스(10)를 도시한 것이다. 기판(12)은 통상 작용 전극을 형성하는 Pd 코팅(16)이 스퍼터링에 의해 증착된 폴리에스테르 베이스(14)이다. 완충제, 매개자, 및 효소로 구성된 건식 시약은 전극의 일 단부(18) 근처에 증착된다. 이격층(20)은 전기 화학 셀을 형성하는 컷아웃(22)을 갖는 양면 접착층이다. 통상 스페이서는 약 200㎛ 두께보다 작다. 상단층(24)은 기준 전극을 형성하는 통상 스퍼터링에 의해 Au 코팅(28)이 증착된 폴리에스테르층(26)이다.
전술한 유형의 디바이스는 다음 반응식을 통해 포도당 농도를 측정하기 위해서 포도당 산화효소(GOD)/페리시아나이드 시스템을 사용할 수 있으며, GOD*는 환원된 효소이다.
포도당 + GOD
Figure 112005029132017-pat00001
포도당 산(gluconic acid) + GOD*
삭제
GOD* + 2페리시아나이드
Figure 112005029132017-pat00002
GOD + 2페리시아나이드
삭제
페리시아나이드([Fe(CN)6]3-)는 매개자로서, GOD*를 촉매상태로 복귀시킨다. 효소 촉매인 GOD는 잉여의 매개자가 존재하는 한 포도당을 계속하여 산화시킬 것이다. 페로시아나이드([Fe(CN)6]4-)는 총 반응 생성물이다. 실제로는 소량의 페로시아나이드가 가끔 존재할지라도, 이상적으로는 초기에는 존재하지 않는다. 반응이 완료된 후, 페리시아나이드의 농도(전기 화학적으로 측정됨)는 초기 포도당의 농도를 나타낸다. 총 반응은 반응식 1과 2의 합이다.
포도당 + 2페리시아나이드
Figure 112005029132017-pat00003
포도당 산 + 2페리시아나이드
삭제
"포도당"은 구체적으로는 β- D - 포도당을 말한다.
이러한 시스템의 세부사항은 PCT 출원번호 WO 97/18465에 기술되어 있고 본 명세서에 참조로서 포함되었다.
도 6은 본 발명을 실시하는데 적합한 회로의 일 실시예를 도시한 것이다. 초기에, 일정 전류원은 스위치(105)가 위치 1에서 스트립에 인가된다. 전류원은 연산 증폭기(104), 전압 기준(102), 및 저항기(101, 103)로 구성된다. 전류는 전압 기준(102) 대 저항기(103)의 비(ratio)로 결정된다. 저항기(101)는 필요한 바이어스를 생성하는데 사용된다. 연산 증폭기(110) 및 저항기(109)는 전류-전압 변환기로서 사용된다. 초기에, 스트립에 샘플이 없을 때, 점(107)과 점(108) 사이의 저항이 매우 크므로, 스트립을 통과하는 전류는 무시할 수 있다. 연산 증폭기(104)의 출력전압(V1)은 이 상태에서 높다. 샘플이 스트립에 인가되었을 때, 이의 저항은 현저하게 떨어지고, 일정전류가 스트립을 통해 흐르기 때문에 V1이 떨어진다. V1은 아날로그-디지털 변환기(111)를 통해 마이크로프로세서(112)로 공급된다. 마이크로프로세서(112)는 이 감소된 전압을 샘플 검출로서 인식하고, 스위치(105)를 위치 2로 하여 스트립을 전류원으로부터 단절시키고, 스트립을 전압원(106)에 접속시킨다. 이 상태에서, 연산 증폭기(110)의 출력전압(V2)을 측정함으로써 대시간전류(chronoamperometric) 측정이 달성될 수 있다. 이 전압은 스트립을 통과하는 전류에 비례한다.
다음의 실시예는 본 발명을 설명하는 것이지만 본 발명을 한정시키는 것은 아니다.
실시예
도 6의 회로를 만들고 스트립(S)은 Pd 및 Au 전극을 갖는 도 5에 도시한 유형의 박층 전기 화학 포도당 스트립을 사용하였다. Pd 전극엔 버퍼, 포도당 탈수소효소(PQQ), 및 페리시아나이드층을 코팅하였다. 일정하고 낮은(~1㎂) 비교란 전류를 건식 포도당 스트립의 작용 전극과 상대/기준 전극 사이에 인가하였다. 스트립이 건조상태이었기 때문에, 작용 전극과 상대/기준 전극 사이의 저항은 근본적으론 무한대였다. 전혈 샘플을 셀에 인가한 후에, 전압강하를 관측하였다. 약 50 내지 500mV의 임계치는 시작시간을 시작하였다(약 300mV의 임계치가 바람직하다). 샘플이 검출된 후에, 기기는 일정전류를 인가하는 것으로부터 일정 전압을 인가하는 것으로 전환하였다. 시간의 함수로서 샘플을 통하는 전류를 측정함으로써 포도당 농도를 계산할 수 있었다.
따라서, 본 발명에 따른 방법은 갭에 일정하고 낮은 전류를 인가하고, 전극들 사이의 전위차를 모니터하는 것을 포함한다. 샘플을 갭에 가교한 시간은 전위에서 급격한 강하에 의해 표시된다. 샘플이 검출된 후에 일정 전압이 인가되고, 샘플을 통하는 전류 또는 전하는 시간 기간에 걸쳐 모니터된다. 측정 전류 또는 전하로부터, 관련 에널리트 농도를 계산할 수 있다.
이 분야에 숙련된 자들은 전술한 설명 및 실시예가 본 발명을 실시하는 것을 예시하는 것이지, 제한하는 것이 아님을 알 수 있을 것이다. 본 발명의 범위 및 정신을 벗어나지 않고, 본원에 제공된 상세한 설명은 다양하게 변화될 수 있다.

Claims (15)

  1. 병렬 위치된 작용 전극 및 기준 전극을 포함하는 유형의 전기 화학 진단 스트립에 인가되는 생체 유체의 샘플 내의 에널리트(analyte) 농도를 측정하는 방법으로서,
    (a) 상기 작용 전극과 기준 전극 사이에 미리 결정된 일정 전류원을 인가하는 단계,
    (b) 상기 전극들 간의 전위차를 모니터하는 단계,
    (c) 상기 샘플을 상기 스트립에 인가하는 단계,
    (d) 상기 전위차가 미리 결정된 임계 전압 아래로 강하할 때를 주목하여 샘플 검출 시간을 결정하는 단계,
    (e) 미리 결정된 일정 전압을 상기 샘플에 인가하는 단계,
    (f) 상기 일정 전압을 인가한 후 미리 결정된 시간에 전기적 응답을 측정하는 단계, 및
    (g) 상기 측정된 전기적 응답을 사용하여 상기 에널리트 농도를 계산하는 단계를 포함하는, 에널리트 농도 측정 방법.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 측정된 전기적 응답은 상기 미리 결정된 시간에 상기 샘플을 통과하는 전류인, 에널리트 농도 측정 방법.
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 측정된 전기적 응답은 상기 샘플 검출 시간부터 미리 결정된 시간까지 상기 샘플을 통과한 전하인, 에널리트 농도 측정방법.
  4. 제 1 항에 있어서,
    상기 미리 결정된 시간 후에 제 2 미리 결정된 전압을 인가하고 상기 제 2 미리 결정된 전압을 인가한 후에 제 2 전기적 응답을 측정하는 단계를 더 포함하는, 에널리트 농도 측정 방법.
  5. 제 4 항에 있어서,
    상기 제 2 전기적 응답은 상기 샘플을 통과하는 전류의 감쇄 속도인, 에널리트 농도 측정 방법.
  6. 제 4 항에 있어서,
    상기 제 2 전기적 응답은 상기 제 2 전압이 인가된 후 미리 결정된 시간 간격 동안 상기 샘플을 통과하는 전하인, 에널리트 농도 측정 방법.
  7. 진단 스트립의 작용 전극과 기준 전극 사이에 인가된 생체 유체 샘플 내의 에널리트 농도를 측정하는 계측기로서,
    (a) 상기 작용 전극과 기준 전극 사이에 미리 결정된 전류를 인가하는 수단,
    (b) 상기 전극들 간의 전위차를 모니터하는 수단,
    (c) 샘플 검출을 지시하기 위해 상기 전위차가 미리 결정된 임계 전압 아래로 강하할 때를 결정하는 수단,
    (d) 샘플 검출에 응답하여 미리 결정된 일정 전압을 상기 샘플에 인가하는 수단,
    (e) 결과로서 생긴 전기적 응답을 측정하는 수단, 및
    (f) 상기 측정된 전기적 응답을 사용하여 상기 에널리트 농도를 계산하는 수단을 포함하는, 에널리트 농도 측정 계측기.
  8. 제 7 항에 있어서,
    상기 결과로서 생긴 전기적 응답을 측정하는 수단은 전류계인, 에널리트 농도 측정 계측기.
  9. 제 7 항에 있어서,
    상기 결과로서 생긴 전기적 응답을 측정하는 수단은 전량계(coulometer)인, 에널리트 농도 측정 계측기.
  10. 제 7 항에 있어서,
    제 2 미리 결정된 전압을 상기 샘플에 인가하는 수단 및 제 2 결과로서 생긴 전기적 응답을 측정하는 수단을 더 포함하는, 에널리트 농도 측정 계측기.
  11. 제 10 항에 있어서,
    상기 제 2 결과로서 생긴 전기적 응답을 측정하는 수단은 전류계인, 에널리트 농도 측정 계측기.
  12. 제 10 항에 있어서,
    상기 제 2 결과로서 생긴 전기적 응답을 측정하는 수단은 전량계인, 에널리트 농도 측정 계측기.
  13. 병렬 위치된 작용 전극 및 기준 전극을 포함하는 유형의 전기 화학 진단 스트립에 인가되는 생체 유체의 샘플 내의 에널리트 농도를 측정하는 방법으로서,
    (a) 상기 작용 전극과 기준 전극 사이에 미리 결정된 일정 전류원을 인가하는 단계,
    (b) 상기 전극들 사이의 전위차를 모니터하는 단계,
    (c) 상기 샘플을 상기 스트립에 인가하는 단계,
    (d) 상기 전위차가 미리 결정된 임계 전압 아래로 강하할 때를 주목하여 샘플 검출 시간을 결정하는 단계,
    (e) 미리 결정된 일정 전압을 상기 샘플에 인가하는 단계,
    (f) 제 1 미리 결정된 시간 후에 제 2 미리 결정된 전압을 상기 샘플에 인가하는 단계,
    (g) 상기 제 1 미리 결정된 시간 후 미리 결정된 시간에 전기적 응답을 측정하는 단계, 및
    (h) 상기 측정된 전기적 응답을 사용하여 상기 에널리트 농도를 계산하는 단계를 포함하는, 에널리트 농도 측정 방법.
  14. 제 13 항에 있어서,
    상기 측정된 전기적 응답은 상기 샘플을 통과하는 전류의 감쇄 속도인, 에널리트 농도 측정 방법.
  15. 제 13 항에 있어서,
    상기 측정된 전기적 응답은 상기 제 2 미리 결정된 전압이 인가된 후 미리 결정된 시간 간격 동안 상기 샘플을 통과하는 전하인, 에널리트 농도 측정 방법.
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