EP1998752A2 - Polylactid-nanopartikel - Google Patents

Polylactid-nanopartikel

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Publication number
EP1998752A2
EP1998752A2 EP07711937A EP07711937A EP1998752A2 EP 1998752 A2 EP1998752 A2 EP 1998752A2 EP 07711937 A EP07711937 A EP 07711937A EP 07711937 A EP07711937 A EP 07711937A EP 1998752 A2 EP1998752 A2 EP 1998752A2
Authority
EP
European Patent Office
Prior art keywords
agents
nanoparticles
lactide
agent
primary emulsion
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Withdrawn
Application number
EP07711937A
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Jörg KREUTER
Svetlana Gelperina
Olga Maksimenko
Alexander Khalanskiy
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
LTS Lohmann Therapie Systeme AG
Original Assignee
LTS Lohmann Therapie Systeme AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by LTS Lohmann Therapie Systeme AG filed Critical LTS Lohmann Therapie Systeme AG
Publication of EP1998752A2 publication Critical patent/EP1998752A2/de
Withdrawn legal-status Critical Current

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    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery

Definitions

  • the present invention relates to systems for the targeted delivery of pharmacologically active agents to the central nervous system (CNS) of a mammal.
  • the present invention relates to nanoparticulate drug delivery systems which are capable of overcoming the mammalian blood-brain barrier.
  • the present invention relates to active ingredient beiade- ne nanoparticles based on polylactides and / or polylactide-Coglycoliden, processes for the preparation of drug-loaded nanoparticles based on polylactides and / or polylactide coglycolides and the use of drug-loaded nanoparticles Base of polylactides and / or polylactide-coglycolides for the treatment of diseases or disorders of the central nervous system, in particular for the treatment of neuronal cancer.
  • CNS central nervous system
  • drugs that affect the function of the nervous system.
  • These drugs are usually administered to the needy patient by conventional oral administration or injection.
  • agents such as adenosine, ⁇ -endorphin, synthetic analogs of endogenous peptides, excitatory and inhibitory amino acids, and trophic factors, are either unable to cross the blood-brain barrier or only in abundance, which are insufficient to achieve a therapeutic effect.
  • Such drugs only achieve a therapeutic Effect when administered directly into the brain, for example, by direct CNS infusion.
  • U.S. Patent No. 6,117,454 proposes a method for delivery of pharmaceutically active agents across the blood-brain barrier of a mammal, wherein nanoparticles are to be used to deliver drugs or diagnostics by overcoming the Targeted blood-brain barrier to the CNS.
  • suitable polymers such as butyl cyanoacrylate
  • an active ingredient is added which is either incorporated in the resulting polybutyl cyanoacrylate nanoparticles or adsorbed on its surface.
  • These nanoparticle-drug complexes should be able to cross the blood-brain barrier and target the drug to the CNS when coated with a suitable surfactant.
  • Polyoxyethylene 20 sorbitan monolaurate (Tween 20), polyoxyethylene 20 sorbitan monopalmitate (Tween 40), polyoxyethylene 20 sorbitan monostearate (Tween 60), polyoxyethylene 20 sorbitan monooleate (Tween 80), and
  • WO 98/56361 teaches that the use of surfactants is no longer required when the nanoparticles are prepared using dextran 12,000 or polysorbate 85 (polyoxyethylene 20 sorbitan trioleate; Tween® 85) as stabilizers during the polymerization of the butyl cyanoacrylate monomers.
  • polysorbate 85 polyoxyethylene 20 sorbitan trioleate; Tween® 85
  • Dalargin which is adsorbed to the stabilized polybutyl cyanoacrylate nanoparticles, has been shown to overcome the blood-brain barrier and amitriptyline adsorbed to polysorbate-stabilized nanoparticles accumulates at higher levels in the brain than amitriptyline such.
  • a targeted drug delivery system comprising nanoparticles based on poly (DL-lactide) (PLA) and / or poly (DL-lactide-co-glycolide) (PLGA), a pharmacologically active agent adsorbed, adsorbed and / or incorporated into the nanoparticles, and wherein the nanoparticles either contain TPGS or have a poloxamer 188 surfactant coating deposited on the drug-loaded nanoparticles.
  • PLA poly (DL-lactide)
  • PLGA poly (DL-lactide-co-glycolide)
  • drug-loaded nanoparticles refers to nanoparticles comprising a pharmacologically active agent.
  • a pharmacologically active agent may be either a therapeutic or a diagnostic agent.
  • the "drug-loaded nanoparticles" of the invention comprise at least one therapeutic agent and / or at least one diagnostic agent incorporated in the Nanoparticles absorbed, adsorbed on this or is incorporated into this / are.
  • blood-brain barrier refers to the blood-brain barrier as such, i. the endothelium of the cerebral vessels, the basal membrane and the neuroglial cells.
  • the blood-brain barrier serves to control the transfer of substances into the brain.
  • blood-brain barrier as used herein also refers to the blood-spinal cord barrier and the blood-retinal barrier.
  • Polylactides also called polylactic acids, are polyesters based on lactic acid. Polylactides are polyhydroxy acids. They are biocompatible and biodegradable.
  • the properties of the polylactides depend primarily on their molecular weight, the degree of their crystallinity and the proportion of the copolymers, if appropriate.
  • the glass transition temperature, the melting temperature, the tear strength and the modulus of elasticity of the polylactides increase with increasing molecular weight of the polylactides, but the elongation at break decreases.
  • Polylactides can be obtained by ring-opening polymerization of lactides.
  • the ring-opening polymerization is carried out at temperatures between 140 and 180 0 C in the presence of stannous octoate as a catalyst.
  • High molecular weight polylactides can be easily prepared by this method.
  • high-molecular and pure polylactides can be obtained directly from lactic acid by the so-called polycondensation.
  • Polylactidcoglycolides are biodegradable polymers consisting of lactic acid bound to glycolic acid, with the respective percentages of these components playing a key role in the rate of drug release.
  • the ratio of lactide to glycolide may be from 90:10 to 10:90, with ratios of from 20:80 to 80:20 being preferred, ratios of from 40:60 to 60:40 being more preferred, and a ratio of 50:50 being the most is preferred.
  • Lactide is optically active and can be any ratios of D and L isomers, ranging from pure D-lactide to pure L-lactide, with racemates comprising 50% D-lactide and 50% L-lactide ,
  • Poloxamers are nonionic polyoxyethylene-polyoxypropylene block copolymers of the general formula
  • Poloxamers are used as emulsifiers, solubilizers, surfactants, and surfactants used as a wetting agent for antibiotics.
  • Poloxamer 188 (Pluronic® F68 (BASF Corp.)) is a bifunctional, surface-active block copolymer that ends with primary hydroxyl groups. It is a non-ionic surfactant that is relatively non-toxic. Poloxamer 188 has an average molecular weight of 8.400, a viscosity of 1000 cP at 77 0 C, a cloud point (10% aqueous) of> 100 0 C and an HLB value of> 24.
  • Poloxamer 185 is a bifunctional block surfactant polymer that ends with primary hydroxyl groups. It is a nonionic surfactant that is relatively non-toxic. Pluronic P65 has an average molecular weight of 3,400, a viscosity of 180 cP at 60 0 C, a cloud point (10% aqueous) of 80-84 0 C and an HLB value of 12-18.
  • Pluronic® P85 (BASF Corp.), also referred to as Poloxamer 235, is a bifunctional, surface-active block copolymer that ends with primary hydroxyl groups. It is a nonionic surfactant that is relatively non-toxic. Pluronic® P85 has an average molecular weight of 4,600, a viscosity of 310 cP at 60 0 C, a cloud point (10 5s aqueous) of 83-89 0 C and an HLB value of 12-18.
  • Polysorbate 80 (polyoxyethylene sorbitan monooleate, Tween® 80) is a nonionic surfactant.
  • Polysor- bat 80 has an average molecular weight of 1,300, a viscosity of 375-480 mPa-s at 25 0 C and an HLB value of 14-16 at.
  • TPGS (D- ⁇ -tocopherol-polyethylene glycol-1000-succinate) is a water-soluble derivative of D- ⁇ -tocopherol succinate.
  • TPGS is used as a water-soluble form of administration for vitamins and min E in persons with poor fat absorption, such as chronic infantile cholestasis. It also finds use as an enhancer for the absorption and bioavailability of the water-insoluble HIV protease inhibitor amprevanir and fat-soluble vitamins such as vitamin D.
  • TPGS is synthesized by esterifying D- ⁇ -tocopherol succinate with polyethylene glycol (PEG) 1000 (the molecular weight of PEG 1000 is about 1000 daltons, the molecular weight of TPGS is about 1,513 daltons).
  • TPGS is a pale yellow, waxy solid substance which is amphipathic and hydrophilic.
  • the pharmacokinetics of TPGS has not yet been conclusively clarified.
  • TPGS is better absorbed by the lumen of the small intestine after ingestion than other forms of vitamin E.
  • the mechanism of absorption of TPGS in enterocytes is still unclear. Due to its amphipathic character (containing both hydrophilic and lipophilic ends) TPGS forms its own micelles and therefore does not require bile salts to form micelles.
  • TPGS can improve the absorption of lipophilic drugs when formulated with them. Furthermore, the improvement in oral bioavailability of some drugs when administered with TPGS may be due, in part, to the inhibition of P-glycoprotein in the gut.
  • the drug-loaded PLA nanoparticles and PLGA nanoparticles according to the invention can be used for targeted delivery of the active ingredient across the blood-brain barrier to the central nervous system and for the treatment of diseases or disorders of the central nervous system or for the production a drug used for the treatment of diseases or disorders of the central nervous system.
  • FIG. 1 is a graph showing survival of rats having intracranial 101/8 glioblastoma after chemotherapy with different doxorubicin-containing nanoparticle preparations.
  • Figure 2 is a graph showing the survival of rats having intracranial 101/8 glioblastoma after chemotherapy with different nanoparticle preparations containing doxorubicin and TPGS.
  • the drug loaded PLA and PLGA nanoparticles of the invention can be prepared by either a) high pressure homogenization solvent evaporation process or by b) double emulsion (water in oil in water emulsion) process
  • the polymer and the active ingredient are dissolved in an organic solvent.
  • This organic phase is poured slowly, with stirring, into an aqueous solution of a stabilizer.
  • the mixture is then emulsified using a high speed shear homogenizer.
  • the resulting primary emulsion is then passed through a high pressure homogenizer at high pressure.
  • the organic solvent t ⁇ l is removed either by evaporation at room temperature and normal pressure with stirring, or by rapid evaporation at reduced pressure. During this process, the nanotubes solidify.
  • the resulting nano-suspension is filtered through a sintered glass filter.
  • an antifreeze is added, preferably 5% (w / v) mannitol.
  • the suspension is then filled in vials, frozen at -35 0 C and then freeze-dried.
  • additional compounds such as cetyl phosphate, potassium cholesterol sulfate or tocopherol succinate are used as emulsifiers and / or counter ions
  • the polymer and the lipid compound are dissolved in an organic solvent, and the active ingredient is dissolved in water.
  • the organic and aqueous solutions are mixed together and incubated at room temperature. Then, the mixture is poured into a stirred aqueous solution containing a stabilizer and then further processed as described above.
  • the polymer is dissolved in an organic solvent and the active ingredient dissolved in water.
  • the aqueous solution is added to the organic phase.
  • the mixture is emulsified.
  • the resulting W ⁇ emulsion is added to an aqueous solution of a stabilizer and then further emulsified.
  • the resulting coarse emulsion is passed through a high pressure homogenizer.
  • the homogenization step is repeated several times to produce a stable W ⁇ W emulsion.
  • the organic solvent is removed by slow evaporation at room temperature and normal pressure.
  • the resulting nanosuspension is filtered through a glass-sintered filter.
  • an antifreeze is added and the nanosuspension is filled into vials and then freeze-dried.
  • nanoparticle formulations obtained are to be investigated for suspendability, particle size, active substance loading (theoretical) and active ingredient content.
  • the targeted drug delivery system of the present invention comprises nanoparticin based on poly (DL-lactide) and / or poly (DL-lactide-co-glycolide and at least one pharmacologically active agent and either contains TPGS or comprises a coating a surfactant deposited on the drug-loaded nanoparticles, wherein the surfactant is poloxamer 188.
  • the nanoparticles of the targeted drug delivery system have a diameter of less than 1,000 ⁇ m, preferably a diameter of between 100 and 800 nm and most preferably a diameter of between 130 and 160 nm.
  • the PLA- and / or PLGA-based nanoparticles of the invention may be loaded with virtually any pharmacologically active agent to produce this pharmacologically active agent, e.g. a therapeutic or diagnostic agent to deliver via the mammalian blood-brain barrier to the CNS of that mammal.
  • pharmacologically active agent e.g. a therapeutic or diagnostic agent to deliver via the mammalian blood-brain barrier to the CNS of that mammal.
  • the therapeutic may be selected from the group consisting of drugs that act at synaptic and neurofector node points; general and local analgesics and anesthetics; Hypnotics and sedatives; Drugs for the treatment of psychiatric disorders such as depression and schizophrenia; Antiepileptics and anticonvulsants; Drugs for the treatment of Huntington's disease, aging and Alzheimer's disease; excitatory amino acid antagonists and neurotropic factors and neuro-regenerative agents; trophic factors; Agents intended for the treatment of central nervous system trauma or stroke; Drugs for the treatment of addiction and drug abuse; autacoid and anti-inflammatory agents; chemotherapeutic agents for parasitic infections and microbial diseases; immunosuppressive and anticancer agents; Hormones and hormone antagonists; Heavy metals and heavy metal antagonists; Antagonists for non-metallic toxic agents; cytostatic agents for the treatment of cancer; diagnostic substances for use in nuclear medicine; ixnmunoactive and immunoreactive agents; Transmitters and their
  • Preferred therapeutics are anticancer agents, preferably antineoplastic agents.
  • the antineoplastic agents may be selected from the group consisting of alkaloids, alkylating agents such as alkylsulfonates, aziridines, ethyleneimines and methylmelamines, nitrogen mustards, nitrosoureas, antibiotics and analogs, preferably anthracyclines, antimetabolites such as folic acid analogs, Folic acid antagonists, purine analogs and pyrimidine analogues, enzymes, immunomodulators, immunotoxins, monoclonal antibodies and platinum complexes.
  • antineoplastic agents may be selected from the group consisting of 9-aminocamptothecin, docetaxel, ecteinascidines, etoposide, irinotecan, paclitaxel, rubitecan, teniposide, topotecan, vinblastine, vincristine, vindesine, busulfan, improsulfan, piposulfan, carboquone, uredepa, Altretamine, triethylene melamine, triethylene phosphoramide, triethylene thiophosphoramide, chlorambucil, chlornaphazine, cyclophosphamide, estramustine, ifosfamide, mechlorethamine, mechlorethamine oxide hydrochloride, melphalan, novembichin, perfosfamide, phenesterine, prednimustine, trichloromethine, trofosfamide, uracil-lost, carmustine, chlorozo
  • the targeted drug delivery system of the present invention may be prepared by a high pressure homogenization solvent evaporation process or a double emulsion process.
  • a preferred method for producing a TPGS-containing drug-loaded PLA and / or PLGA nanoparticle system for targeted drug delivery comprises the steps:
  • Another preferred method for producing a TPGS-containing drug-loaded PLA and / or PLGA nanoparticle system for targeted drug delivery comprises the steps:
  • the preferred process for preparing a PLA and / or PLGA nanoparticle system loaded with poloxamer 188 for targeted drug delivery comprises the steps: dissolving of poly (DL-lactide) and / or poly (DL-lactide-co-glycolide ) and at least one pharmacologically active agent and optionally a lipid compound in an organic solvent to obtain an organic phase; - pouring the organic phase into an aqueous solution optionally containing a stabilizer; Emulsifying the mixture to obtain a primary emulsion;
  • Another preferred method for preparing a drug loaded PLA and / or PLGA nanoparticle drug delivery system coated with poloxamer 188 comprises the steps of: - dissolving poly (DL-lactide) and / or poly (DL-lactide-co-glycolide ) in an organic solvent to obtain an organic phase;
  • Dissolving at least one pharmacologically active agent in an aqueous solution - pouring the aqueous solution into the organic phase; Emulsifying the mixture to obtain a primary emulsion;
  • the preferred organic solvents for the preparation of the targeted drug delivery system of the present invention are selected from the group consisting of dichloromethane and chloroform.
  • ethyl acetate can be used as a solvent for the preparation of PLA and / or PLGA nanoparticles, provided that the optional stabilizer is soluble in ethyl acetate.
  • the preferred lipid compound is selected from the group consisting of cetyl phosphate, potassium cholesterol sulfate and tocopherol succinate.
  • the preferred stabilizers are emulsifiers, surface-active substances or counterions.
  • the preferred stabilizers are selected from the group consisting of polyvinyl alcohols, seruxnalbuxine, ⁇ -cyclodextrin and tocopherol polyethylene glycol 1000 succinate (TPGS), the polyvinyl alcohols preferably having a molecular weight of
  • serum albumin is human serum albumin.
  • the resulting nanosuspension of the drug-loaded nanoparticles can be freeze-dried before being coated with Poloxamer 188.
  • an antifreeze is added to the nanosuspension before the nanosuspension is subjected to freeze-drying.
  • a suitable cryoprotectant is mannitol, this is preferably in an amount of 5% (w / v). added to the nanosuspension.
  • the coating of the drug-loaded nanoparticles is preferably accomplished with a solution of poloxamer 188 in a solution and by allowing a time sufficient for the surfactant to coat the drug-loaded nanoparticles.
  • the drug delivery system for administering a pharmacologically active agent to the mammalian central nervous system via its blood-brain barrier comprising nanoparticles of poly (DL-lactide) and / or poly (DL-lactide-co-glycolide), a therapeutic and TPGS, or having a coating of the surfactant poloxamer 188 deposited with the drug-loaded nanoparticles can be used for the treatment of diseases or disorders of the central nervous system of a mammal.
  • the drug delivery system is particularly useful for administering pharmacologically active substances which act on the central nervous system but are unable to cross the blood-brain barrier of a mammal without modification or association with a carrier.
  • the system according to the invention for targeted drug delivery is particularly useful in the treatment of neuronal cancers, since with this system antineoplastic agents can be transported across the blood-brain barrier in order to supply these anti-cancer drugs targeted to the CNS.
  • the targeted drug delivery system of the present invention is to be administered so that it can enter the bloodstream, whereby the drug reaches the blood-brain barrier and passes therethrough.
  • the targeted drug delivery system of the invention is administered orally or by injection, most preferably by intravenous injection. Examples
  • Lactel® polymers poly (DL-lactide) (PLA) and poly (DL-lactide-co-glycolide) (PL6 ⁇ ) - were purchased from Absorbable Polymers, USA; Doxorubicin hydrochloride was provided by Sicor, Rho, Italy; Cetyl phosphate, potassium cholesterol sulfate, polyvinyl alcohol (PVA) (molecular weight 30-70 kDa) and human serum albumin (HSA) were purchased from Sigma; D- ⁇ -tocopherol-polyethylene glycol 10000 succinate (TPGS) was purchased from Eastman Chemical Company, USA.
  • the drug loaded PLA and PLGA nanoparticles were prepared using either the high pressure homogenization solvent evaporation process or the double emulsion process.
  • the polymer and drug were usually dissolved in dichloromethane.
  • This organic phase was slowly stirred with stirring into an aqueous solution of a stabilizer (PVA or HSA).
  • PVA or HSA a stabilizer
  • the mixture was emulsified using a high speed shear homogenizer (Ultra-Turrax T-25 (IKA)).
  • the resulting primary emulsion was then passed through the high pressure homogenizer (APV Micron Lab 40, Gaulin GmbH, Germany) at 400 bar.
  • the organic solvent was purified by slow evaporation at room temperature and normal pressure with stirring (3 h), or by rapid evaporation at reduced pressure Pressure (rotary evaporator BUCHI R-200), removed.
  • the nanodroplets solidified in the aqueous system.
  • the resulting nanosuspension was filtered through a sintered glass filter, and 5% (w / v) mannitol was added as antifreeze. Then the nano suspension was filled in vials, frozen at -35 0 C and freeze-dried.
  • Lipid compounds such as cetyl phosphate, potassium cholesterol sulfate or tocopherol succinate have been used as emulsifiers and / or counterions in some preparations.
  • the polymer and the lipid component in the organic solvent (dichloromethane or chloroform) and the active ingredient were dissolved in water.
  • the organic and aqueous solutions were mixed together and incubated at room temperature for 12 hours. Then, the mixture was poured into a stirred aqueous solution (25 ml) containing a stabilizer and then further treated as described above.
  • the polymer 500 mg was usually dissolved in dichloromethane (5 ml) (1 h with stirring with a magnetic stirrer).
  • the active ingredient 50 mg was dissolved in water (2 ml).
  • the aqueous solution was added dropwise to the organic phase.
  • the mixture was emulsified using an Ultra-Turrax T-25 (2 min at 19,500 rpm).
  • the obtained W ⁇ emulsion was emulsified to 25 ml of a 1% aqueous solution of a stabilizer (PVA, HSA or TGPS) and then using an Ultra-Turrax T-25.
  • the resulting coarse emulsion was then passed through a high pressure homogenizer (APV Micron Lab 40) at a pressure of 600 bar. The homogenization step was repeated several times to obtain stable W ⁇ W emulsions.
  • the organic solvent was removed from the W ⁇ W emulsion by slow evaporation at room temperature under normal pressure (magnetic stirrer, 3 h).
  • the resulting nanosuspension was filtered through a sintered glass filter, and 5% (w / v). Mannitol was added as antifreeze. Thereafter, the emulsion was in vials (1 ml / vial) filledrantfro- ren (-35 0 C) and freeze dried.
  • Dichloromethane is a solvent typically used in the preparation of PLA / PLGA nanoparticles.
  • certain counterions are not soluble in ethyl acetate. In these cases, ethyl acetate is not a suitable solvent for the production of PLA / PLGA nanoparticles.
  • the resulting formulations were tested for resuspendibility, particle size, drug loading (theoretical), and drug content.
  • the nanoparticulate formulation obtained was considered suitable if, after reconstitution of the freeze-dried nanoparticles with water, a uniform and stable colloidal system was found. The resuspensability of the nanoparticles was assessed visually. Therefore, the contents of a vial containing a lyophilized formulation were reconstituted with water to the initial volume (2 ml) and the vials were left for 2-4 min slightly shaken for a long time. Suitable reconstituted formulations become opalescent liquids without visible agglomerates or precipitates. Samples containing visible agglomerates or precipitates were discarded.
  • the size of the nanoparticles was adjusted by photon correlation spectroscopy (PCS), with an aliquot of the reconstituted formulations (50 ⁇ l) transferred to a Nanosizer tube containing 3 ml of double distilled water. The tube was shaken and then introduced into a Coulter N4MD Nanosizer (Coulter Electronics, UK).
  • PCS photon correlation spectroscopy
  • the drug loading was determined either after the filtration step in the reaction mixture or after reconstitution in the freeze-dried formulation.
  • the method of determining drug loading involves separation of the nanoparticles by ultrafiltration and subsequent quantitative analysis of a free drug in the filtrate by spectrophotometry.
  • the contents of a vial containing a freeze-dried formulation were reconstituted in 1 ml of water; 400 ⁇ l were transferred into a microcentrifuge filter (Microcon 30 kDa, Millipore) and the nanoparticles were centrifuged at 16,000 rpm for 50 min separated. 100 ⁇ l of the clear filtrate was transferred to a cuvette containing 3 ml of double distilled water and the absorbance was measured using a spectrophotometer (Spectronics He ⁇ ios, Thermospectron, UK) against water at 480 nm. The concentration of an active ingredient in the sample was determined using a suitable calibration curve.
  • the relative drug loading (% of total drug amount) was calculated as follows:
  • the method for determining the active ingredient content is a quantitative analysis after complete dissolution of the freeze-dried formulation.
  • the concentration of the drug in solution is measured by spectrophotometry using a calibration curve.
  • the contents of a vial containing a freeze-dried formulation were dissolved in 2 ml of dimethylsulfoxide (3 h, room temperature); 100 ⁇ l of this solution was transferred to a spectrophotometer cuvette containing 3 ml of double distilled water and absorbance was measured at 480 nm against water using a spectrophotometer (Spectronics He ⁇ ios, Thermospectronic, UK). The concentration of a Drug in the sample was determined using the appropriate calibration curve.
  • Nanoparticles were prepared by a high pressure homogenization solvent evaporation process. 250 mg of the polymer (PLGA 75:25, MW 90,000-126,000 Da) and 25 mg of doxorubicin were dissolved in 5 ml of dichloromethane. The organic phase was poured into a stirred aqueous solution (25 ml) containing 0.5% PVA as a stabilizer and the mixture was emulsified using an Ultra-Turrax T-25 (2 min; 15,100 rpm). The resulting primary emulsion was further homogenized at 400 bar using a high pressure homogenizer (APV Micron Lab 40). Dichloromethane was evaporated under reduced pressure (rotary evaporator BUCHI R-200).
  • the resulting nanosuspension was filtered through a sintered glass filter and freeze-dried after addition of 5% (w / v) mannitol as antifreeze.
  • the freeze-dried formulation was completely resuspendible.
  • the particle size determined by PCS was 140-220 ⁇ m, the doxorubicin loading was 40%.
  • Nanoparticles were prepared by a double emulsion process.
  • 25 mg of doxorubicin hydrochloride were dissolved in 2 ml of 0.001N HCl.
  • the aqueous solution was poured into the organic phase and the mixture was emulsified using an Ultra-Turrax T-25 (2 min; 19,500 rpm).
  • the resulting primary emulsion was poured into 25 ml of a 1% PVA aqueous solution and the mixture was rehomogenized using an Ultra-Turrax T-25; This was followed by a triple pass through a high pressure homogenizer (APV Micron Lab 40) at 600 bar. Dichloromethane was evaporated by stirring the emulsion at room temperature for 3h. The resulting nanosuspension was filtered through a sintered glass filter and, after addition of 5% (w / v). Mannitol as antifreeze, freeze-dried. The freeze-dried formulation was completely resuspendible. The particle size was determined by PCS and was 110-160 ⁇ m, the doxorubicin loading was 75%.
  • Nanoparticles were prepared by a double emulsion process. 500 mg of the polymer (PLGA 75:25, MW 90,000 - 126,000 Da) were dissolved in 3 ml of dichloromethane. 25 mg of douborubicin hydrochloride were dissolved in 2 ml of 0.00 N HCl. The aqueous solution was poured into the organic phase and the mixture was emulsified using an Ultra-Turrax T-25 (2 min; 19,500 rpm).
  • the resulting primary emulsion was poured into 25 ml of a 1% PVA aqueous solution, and this solution was re-homogenized using the Ultra-Turrax T-25; followed by four Run through a high-pressure homogenizer (APV Micron Lab 40) at 600 bar. Dichloromethane was evaporated by stirring the emulsion at room temperature for 3 hours. The resulting nanosuspension was filtered through a sintered glass filter and freeze-dried after the addition of 5% (w / v) of mannitol as antifreeze. The freeze-dried formulation was completely resuspendible. The particle size determined by PCS was 160-330 nm, the doxorubicin loading was 47%.
  • the resulting primary emulsion was poured into 25 ml of a 1% PVA aqueous solution and the mixture was rehomogenized using the Ultra-Turrax T-25; followed by four passes through a high pressure homogenizer (APV Micron Lab 40) at 600 bar. Dichloromethane was evaporated by stirring the emulsion at room temperature for 3 hours. The resulting nanosuspension was filtered through a sintered glass filter and freeze-dried after addition of 5% (w / v) mannitol as antifreeze. The freeze-dried formulation was completely resuspendible. The PCS The particle size was 126-210, the doxorubicin loading was 42%.
  • the resulting primary emulsion was poured into 25 ml of a 1% PVA aqueous solution and the mixture was rehomogenized using the Ultra-Turrax T-25; This was followed by a triple pass through a high pressure homogenizer (APV Micron Lab 40) at 600 bar. Dichloromethane was evaporated by stirring the emulsion at room temperature for 3h. The nano-suspension obtained was filtered through a sintered glass filter and freeze-dried after addition of 5% (w / v) mannitol as antifreeze. The freeze-dried formulation was completely resuspendible. The particle size was determined by PCS to be 140-200 ⁇ m, the doxorubicin loading was 73%.
  • the resulting primary emulsion was poured into 25 ml of a 1% PVA aqueous solution and the mixture was rehomogenized using the Ultra-Turraac T-25; This was followed by a triple pass through a high-pressure homogenizer (APV Micron Lab 40) at 600 bar.
  • AV Micron Lab 40 AMV Micron Lab 40
  • Dichloromethane was evaporated by stirring the emulsion at room temperature for 3h.
  • the resulting nanosuspension was filtered through a sintered glass filter and freeze-dried after the addition of 5% (w / v) mannitol as antifreeze. The freeze-dried formulation was completely resuspendible.
  • the particle size was determined by PCS and was 130-190 nm, the doxorubicin loading was 67%.
  • the resulting primary emulsion was poured into 25 ml of a 1% aqueous PVA solution and the mixture was purified using the Ultra-Turrax T-25 homogenized again; This was followed by a four-pass run through a high-pressure homogenizer (APV Micron Lab 40) at 600 bar.
  • AVS Micron Lab 40 high-pressure homogenizer
  • Dichloromethane was evaporated by stirring the emulsion at room temperature for 3h.
  • the nanosuspension obtained was filtered through a sintered glass filter and freeze-dried after addition of 5% (w / v) mannitol as antifreeze.
  • the freeze-dried formulation was completely resuspendible.
  • the particle size was determined by PCS to be 125-185 ⁇ m, the doxorubicin loading was 69%.
  • the resulting primary emulsion was poured into 25 ml of an aqueous 1% HSA solution and the mixture was rehomogenized using the Ultra-Turrax T-25; This was followed by a four-pass run through a high-pressure homogenizer (APV Micron Lab 40) at 600 bar.
  • AVS Micron Lab 40 high-pressure homogenizer
  • Dichloromethane was evaporated by stirring the emulsion at room temperature for 3h.
  • the nanosuspension obtained was filtered through a sintered glass filter and freeze-dried after addition of 5% (w / v) mannitol as antifreeze.
  • the freeze-dried formulation was completely resuspended. dierbar.
  • the particle size was determined by PCS and was 100-200 nm, the doxorubicin loading was 40%.
  • Nanoparticles were prepared by a high pressure homogenization solvent evaporation process. 250 mg of the polymer (PLA, MW 90,000 - 126,000 Da) and 15.1 mg of cetyl phosphate were dissolved in 4 ml of dichloromethane. 21.8 mg of doxorubicin hydrochloride were dissolved in 2 ml of water. The organic and aqueous solutions were mixed together and incubated for 12 hours at room temperature. The mixture was then poured into a stirred aqueous solution (25 ml) containing 1% HSA as a stabilizer and emulsified using an Ultra-Turrax T-25 (2 min; 19,100 rpm).
  • Nanoparticles were prepared by a high pressure homogenization solvent evaporation process. 250 mg of the
  • Dichloromethane was evaporated under reduced pressure (rotary evaporator BUCHI R-200).
  • the resulting nanosuspension was filtered through a sintered glass filter and freeze-dried after addition of 5% (w / v) mannitol as antifreeze.
  • the freeze-dried formulation was completely resuspendible.
  • the particle size determined by PCS was 500-600 nm, the doxorubicin loading was 89%.
  • Nanoparticles were prepared by a high pressure homogenization solvent evaporation process. 250 mg of the polymer (PLA, 0.34 dL / g) and 22.9 mg of D- ⁇ -tocopherol succinate were dissolved in 5 ml of chloroform. 25.4 mg of doxorubicin hydrochloride were dissolved in 2 ml of water. The organic and aqueous solutions were mixed together and incubated for 12 hours at room temperature. The mixture was then stirred into a stirred aqueous solution (23 ml) containing 0.5% PVA as a stabilizer and emulsified using an Ultra-Turrax T-25 (2 min, 23,600 rpm).
  • Nanoparticles were prepared by a high pressure homogenization solvent evaporation process. 250 mg of the polymer (PLA, 0.34 dL / g) and 14.9 mg of cetyl phosphate were dissolved in 5 ml of chloroform. 24.5 mg of doxorubicin hydrochloride were dissolved in 2 ml of water. The organic and the aqueous phases were mixed together and incubated for 12 hours at room temperature. The mixture was then poured into a stirred aqueous solution (23 ml) containing 0.5% PVA as a stabilizer and emulsified using an Ultra-Turrax T-25 (2 min, 23,600 rpm).
  • Nanoparticles were prepared by a double emulsion process.
  • An aqueous solution was poured into the organic phase; the mixture was purified using an Ultra-Turrax T-25 (2 min; 23,600
  • Model system with orthotopic tumor An experimental system was based on intracranial 101/8 glioblastoma implanted in rats. This tumor was first prepared by local injection of an ⁇ -dimethylbenzanthracene (DMBA) - Pellets produced in the Cerebell ⁇ m a Wistar rat and obtained by continuous passages by intracerebral implantation. For long-term storage, the tumor tissue was stored at -196 0 C and propagated by injection into the brains of rats.
  • DMBA ⁇ -dimethylbenzanthracene
  • 101/8 glioblastoma was previously used for experimental chemotherapy with doxorubicin, with the surface-modified poly (butyl cyanoacrylate nanoparticles) loaded with the latter.
  • the tumor has a stable monomorphic structure and exhibits the characteristic histological picture of aggressive glioblastomas with rapid diffuse growth in the brain parenchyma and a fairly low tendency to necrosis.
  • the transplantability of the tumor was approximately 100%, resulting in a predictable asymptomatic life span after inoculation.
  • the transplantation of the 101/8 glioblastoma was performed in the present study using fresh tumor tissue. This procedure was chosen in order to obtain the typical main features of the parent tumor, in particular its antigenic structure and differentiation.
  • Rats Male Wistar rats, weighing 200-250 g, were acclimated for 1 week and housed in groups of 5 rats in cages. The rats received
  • Standard laboratory feed and water ad libitum For tumor implantation, the animals were anesthetized by intraperitoneal injections of pentobarbital (50 mg / kg). A mediosagittal incision was made using a dental bur to drill a 1.5 mm diameter hole 2 mm behind the right coronal suture and 2 mm laterally generated sagittal midline point. Tumor material (approximately 10 6 cells) from the frozen stock was mounted on a tuberculin syringe connected to a 21 G cannula. The tip of the cannula was placed 4 mm below the bone surface and the tumor tissue was injected into the base of the right lateral ventricle. The skull section was sutured or closed with glue.
  • a ratio of drug to polymer of 1:10 was used for the preparation of doxorubicin-loaded PLGA nanoparticles.
  • the particle size was determined to be 144 ⁇ 12 nm, the doxorubicin loading was 75.5%.
  • the freeze-dried formulation was resuspended in an aqueous solution of the respective surfactant (Pluronic® F68, Pluronic® P85 and Polysorbate 80).
  • the resulting preparations were then Incubated with stirring for 30 min and used within 2 h.
  • formulations comprising doxorubicin-loaded PLGA nanoparticles based on acid-terminated PLGA (PLGA-COOH) and containing TPGS as a stabilizer (Dox / PLGA-COOH / TPGS; Preparation 10) or coated with TPGS were used (Dox / PLGA-COOH + TPGS) for their in vivo action in a 101/8-glioblastoma-bearing rat.
  • the latter formulation was obtained by resuspending nanoparticles according to Preparation 5 in 0.5% TPGS before injecting the nanoparticles into the animals.
  • Nanoparticles according to Preparation 10 i. Nanoparticles containing TPGS as a stabilizer resulted in a significant increase in the survival time of tumor-bearing rats and allowed a long-term survival of 20% of the tumor-bearing rats used for this experiment. Nanoparticles according to Preparation 5, which were coated with TPGS prior to their use, had no effect.

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Abstract

Die vorliegende Erfindung betrifft ein System zur gezielten Wirkstoffzufuhr zur Verabreichung eines pharmakologisch wirksamen Wirkstoffes an das zentrale Nervensystem eines Säugers über die Blut-Hirn-Schranke, wobei das System zur gezielten Arzneistoff zufuhr Nanopartikel aus PoIy(DL-lactid) und/oder PoIy (DL-lactid-co-glycolid sowie wenigstens einen pharmakologisch wirksamen Wirkstoff, der in den Nanopartikeln absorbiert, an diese adsorbiert oder in diese eingearbeitet ist, umfasst, und entweder TPGS enthält oder einen Überzug aus dem oberflächenaktiven Stoff Pluronic 188, welcher auf den mit Wirkstoff beladenen Nanopartikeln abgeschieden ist, aufweist, sowie Verfahren zur Herstellung des Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr und die Verwendung des Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr zur Behandlung einer Krankheit oder einer Störung des zentralen Nervensystems.

Description

Polylactid-Nanopartikβl
Die vorliegende Erfindung betrifft Systeme zur gezielten Zufuhr von pharmakologisch wirksamen Wirkstoffen an das zentrale Nervensystem (ZNS) eines Säugers. Insbesondere betrifft die vorliegende Erfindung nanopartikuläre Systeme zur gezielten Wirkstoffzufuhr, welche in der Lage sind, die Blut-Hirn-Schranke eines Säugers zu überwinden. Insbesondere betrifft die vorliegende Erfindung mit Wirkstoff beiade- ne Nanopartikel auf Basis von Polylactiden und/oder PoIy- lactid-Coglycoliden, Verfahren zur Herstellung mit Wirkstoff beladener Nanopartikel auf Basis von Polylactiden und/oder Polylactid-Coglycoliden sowie die Verwendung von mit Wirkstoff beladenen Nanopartikeln auf Basis von PoIy- lactiden und/oder Polylactid-Coglycoliden zur Behandlung von Krankheiten oder Störungen des zentralen Nervensystems, insbesondere zur Behandlung von neuronalem Krebs .
Krankheiten und Störungen des zentralen Nervensystems (ZNS) können durch Verabreichung von Wirkstoffen behandelt werden, welche die Funktion des Nervensystems beeinflussen. Diese Wirkstoffe werden dem bedürftigen Patienten gewöhnlich durch konventionelle orale Verabreichung oder Injektion verabreicht. Leider sind viele Wirkstoffe, wie z.B. Ade- nosin, ß-Endorphin, synthetische Analoga endogener Peptide, exzitatorische und inhibitorische Aminosäuren und trophi- sche Faktoren, entweder gar nicht in der Lage, die Blut- Hirn-Schranke zu überwinden oder nur in Mengen, die zur Erreichung einer therapeutischen Wirkung nicht ausreichen. Derartige Wirkstoffe erzielen nur dann eine therapeutische Wirkung, wenn sie direkt in das Gehirn verabreicht werden, beispielsweise durch direkte ZNS-Infusion.
Als eine Alternative zur direkten ZNS-Infusion wird in dem US-Patent Nr. 6,117,454 ein Verfahren zur Zuleitung von pharmazeutisch wirksamen Wirkstoffen über die Blut-Hirn- Schranke eines Säugers vorgeschlagen, wobei .Nanopartikel verwendet werden sollen, um Arzneistoffe oder Diagnostika durch Überwinden der Blut-Hirn-Schranke gezielt dem ZNS zu- zuführen. Gemäß US 6,117,454 wird während oder nach der Polymerisation geeigneter Polymere, wie Butylcyanoacrylat, ein Wirkstoff zugegeben, welcher entweder in die resultierenden Polybutylcyanoacrylat-Nanopartikel eingearbeitet oder an deren Oberfläche adsorbiert wird. Diese Nanoparti- kel-Wirkstoff-Komplexe sollen in der Lage sein, die Blut- Hirn-Schranke zu überwinden und den Wirkstoff gezielt dem ZNS zuzuführen, wenn sie mit einem geeigneten oberflächenaktiven Stoff überzogen sind. Polyoxyethylen-20-Sorbitanmonolaureat (Tween 20), Polyoxyethylen-20-Sorbitanmonopalmitat (Tween 40), Polyoxyethylen-20-Sorbitanmonostearat (Tween 60), Polyoxyethylen-20-Sorbitanmonooleat (Tween 80) und
Mischungen daraus sollen geeignete oberflächenaktive Stoffe sein, welche die Überwindung der Blut-Hirn-Schranke durch die wirkstoffbeladenen Polybutylcyanoacrylat-Nanopartikel ermöglichen.
In dem o.g. Dokument wird dargelegt, dass grundsätzlich jeder beliebige Wirkstoff in die mit einem oberflächenaktiven Stoff überzogenen Nanopartikel eingearbeitet oder an diese gebunden werden und zum Gehirn transportiert werden kann, ohne dass dabei eine Notwendigkeit zur Veränderung der Struktur des Wirkstoffs besteht. Somit scheint US 6# 117, 454 das erste universelle Verfahren zur gezielten Zufuhr eines Wirkstoffs an das ZNS durch Überwindung der Blut-Hirn- Schranke bereitzustellen.
Bedenken bezüglich der Wahrscheinlichkeit toxischer Nebenwirkungen der oberflächenaktiven Substanzen, welche zum Ü- herziehen der erhaltenen Polybutylcyanoacrylat-Nanopartikθl eingesetzt werden, sowie der Wunsch, den Prozess der Herstellung wirkstoffbeladener Nanopartikel zu vereinfachen, führten zur Entwicklung eines vereinfachten und potentiell weniger toxischen Verfahrens zur Herstellung von Nanoparti- kein, welches in WO 98/56361 offenbart ist.
WO 98/56361 lehrt, dass die Verwendung oberflächenaktiver Stoffe nicht mehr erforderlich ist, wenn die Nanopartikel unter Verwendung von Dextran 12.000 oder Polysorbat 85 (Po- lyoxyethylen 20 Sorbitantrioleat; Tween® 85) als Stabilisatoren während der Polymerisation der Butylcyanoacrylatmono- mere hergestellt werden. Es wurde gezeigt, dass Dalargin, das an die stabilisierten Polybutylcyanoacrylat- Nanopartikel adsorbiert ist, die Blut-Hirn-Schranke über- winden kann und dass Amitriptylin, das an durch Polysorbat 85 stabilisierte Nanopartikel adsorbiert ist, in höheren Konzentrationen im Gehirn akkumuliert als Amitriptylin als solches .
Es besteht jedoch nach wie vor ein Bedarf an alternativen Systemen mit Wirkstoff beladener Nanopartikel zur gezielten Zufuhr von Wirkstoffen an das ZNS eines Säugers über die Blut-Kirn-Schranke, um entweder eine Verbesserung der Wirksamkeit, der Spezifizität, der Toxizität oder der Einfachheit der Herstellung, oder mehrerer dieser Faktoren, zu er- zielen.
Es war daher ein Ziel der vorliegenden Erfindung, ein verbessertes System zur gezielten Wirkstoffzufuhr zur Verabreichung eines pharmakologisch wirksamen Wirkstoffes an das zentrale Nervensystem eines Säugers über dessen Blut-Hirn- Schranke bereitzustellen.
Dieses Ziel wurde durch ein System zur gezielten Wirkstoffzufuhr erreicht, welches Nanopartikel auf Basis von Po- ly(DL-lactid) (PLA) und/oder Poly(DL-lactid-co-glycolid) (PLGA) umfasst, wobei ein pharmakologisch wirksamer Wirkstoff in den Nanopartikeln absorbiert, an diese adsorbiert und/oder in die Nanopartikel eingearbeitet ist, und wobei die Nanopartikel entweder TPGS enthalten oder einen Überzug aus dem oberflächenaktiven Stoff Poloxamer 188 aufweisen, der auf den mit Wirkstoff beladenen Nanopartikeln abgeschieden ist .
Es wird darauf hingewiesen, dass sich der Begriff "mit Wirkstoff beladene Nanopartikel", so wie er hier verwendet wird, auf Nanopartikel bezieht, die einen pharmakologisch wirksamen Wirkstoff umfassen. Ein pharmakologisch wirksamer Wirkstoff kann entweder ein Therapeutikum oder ein Di- agnostikum sein. Somit umfassen die "mit Wirkstoff belade- nen Nanopartikel" der Erfindung wenigstens ein Therapeutikum und/oder wenigstens ein Diagnostikum, das/die in den Nanopartikeln absorbiert, an diese adsorbiert oder in diese eingearbeitet ist/sind.
Der Begriff "Blut-Hirn-Schranke" bezieht sich, so wie er hier verwendet wird, auf die Blut-Hirn-Schranke als solche, d.h. das Endothelium der Hirngefäße, die basale Membran und die neuroglialen Zellen. Die Blut-Hirn-Schranke dient der Steuerung des Transfers von Substanzen in das Gehirn. Der Begriff "Blut-Hirn-Schranke" bezeichnet, so wie er hier verwendet wird, ebenfalls die Blut-Rückenmark-Schranke und die Blut-Retina-Schranke.
Polylactide (PLA), auch PolymiIchsäuren genannt, sind Polyester auf Basis von Milchsäure. Polylactide sind Polyhydro- xysäuren. Sie sind biokompatibel und biologisch abbaubar.
Die Eigenschaften der Polylactide hängen in erster Linie von ihrem Molekulargewicht, dem Grad ihrer Kristallinität und dem Anteil der Copolymere, falls zutreffend, ab. Die Glassübergangstemperatur, die Schmelztemperatur, die Reißfestigkeit und der E-Modul der Polylactide nehmen mit zunehmendem Molekulargewicht der Polylactide zu, die Bruchdehnung jedoch nimmt ab.
Polylactide können durch ringöffnende Polymerisation von Lactiden erhalten werden. Die ringöffnende Polymerisation erfolgt bei Temperaturen zwischen 140 und 180 0C in Gegenwart von Zinnoktoat als Katalysator. Polylactide mit hohem Molekulargewicht können mit diesem Verfahren leicht herge- stellt werden. Darüber hinaus können hochmolekulare und reine Polylactide direkt aus Milchsäure durch die so genannte Polykondensati- on gewonnen werden.
Polylactidcoglycolide (PLGA) sind biologisch abbaubare Polymere, die aus Milchsäure bestehen, welche an Glycolsäure gebunden ist, wobei die jeweiligen Prozentanteile dieser Bestandteile für die Geschwindigkeit der Wirkstofffreisetzung eine wesentliche Rolle spielen. Das Verhältnis von Lactid zu Glycolid kann von 90:10 bis 10:90 betragen, wobei Verhältnisse von 20:80 bis 80:20 bevorzugt und Verhältnisse von 40:60 bis 60:40 stärker bevorzugt sind und ein Verhältnis von 50:50 am stärksten bevorzugt ist. Lactid ist optisch aktiv, und es können alle Verhältnisse von D- und L-Isomeren, in einer Bandbreite von reinem D-Lactid bis hin zu reinem L-Lactid, vorliegen, wobei Racemate 50 % D-Lactid und 50 % L-Lactid umfassen.
Poloxamere sind nichtionische Polyoxyethylen-Polyoxy- propylen-Blockcopolymere der allgemeinen Formel
HO (C2H4OJa (-C3H6OJb(C2H4OJaH. Sie sind in unterschiedlichen Sortierungen erhältlich, die von Flüssigkeiten bis hin zu Feststoffen variieren. Poloxamere werden als Emulgatoren, Lösungsvermittler, oberflächenaktive Stoffe und als Benet- zungsmittel für Antibiotika eingesetzt.
Poloxamer 188 (Pluronic® F68 (BASF Corp.)) ist ein bifunktionelles, oberflächenaktives Blockcopolymer, das mit primären Hydroxylgruppen endet. Es handelt sich um eine nicht- ionische oberflächenaktive Substanz, die relativ ungiftig ist. Poloxamer 188 hat ein mittleres Molekulargewicht von 8.400, eine Viskosität von 1.000 cP bei 77 0C, einen Trübungspunkt (10 % wässrig) von >100 0C und einen HLB-Wert von >24.
Poloxamer 185 (Pluronic® P65 (BASF Corp.)) ist ein bifunktionelles, oberflächenaktives Blockeopolymer, das mit primären Hydroxylgruppen endet. Es handelt sich um einen nichtionischen oberflächenaktiven Stoff, der relativ ungiftig ist. Pluronic® P65 hat ein mittleres Molekulargewicht von 3.400, eine Viskosität von 180 cP bei 60 0C, einen Trübungspunkt (10 % wässrig) von 80-84 0C und einen HLB-Wert von 12-18.
Pluronic® P85 (BASF Corp.), auch als Poloxamer 235 bezeich- net, ist ein bifunktionelles, oberflächenaktives Block- copolymer, das mit primären Hydroxylgruppen endet . Es handelt sich um eine nichtionische oberflächenaktive Substanz, die relativ ungiftig ist. Pluronic® P85 hat ein mittleres Molekulargewicht von 4.600, eine Viskosität von 310 cP bei 60 0C, einen Trübungspunkt (10 5s wässrig) von 83-89 0C und einen HLB-Wert von 12-18.
Polysorbat 80 (Polyoxethylensorbitanmonooleat, Tween® 80) ist eine nichtionische oberflächenaktive Substanz. Polysor- bat 80 weist ein mittleres Molekulargewicht von 1.300, eine Viskosität von 375-480 mPa-s bei 25 0C und einen HLB-Wert von 14-16 auf.
TPGS (D-α-Tocopherol-Polyethylenglycol-1000-Succinat) ist ein wasserlösliches Derivat des D-α-Tocopherolsuccinats. TPGS wird als wasserlösliche Verabreichungsform für Vita- min E bei Personen mit mangelhafter Fettabsorption, wie beispielsweise chronischer kindlicher Cholestase, verwendet. Es findet auch als ein Enhancer für die Absorption und biologische Verfügbarkeit des wasser-unlöslichen HIV- Protease-Hemmers Amprevanir und von fettlöslichen Vitaminen wie Vitamin D Verwendung. TPGS wird durch Verestern von D-α-Tocopherolsuccinat mit Polyethylenglycol (PEG) 1000 synthetisiert (das Molekulargewicht von PEG 1000 beträgt ungefähr 1000 Dalton. Das Molekulargewicht von TPGS beträgt ungefähr 1.513 Dalton). Es handelt sich um eine blassgelbe, waxartige feste Substanz, die amphipathisch und hydrophil ist. Die Pharmakokinetik von TPGS ist noch nicht abschließend geklärt . TPGS wird vom Lumen des Dünndarms nach Ingestion besser absorbiert als andere Formen von Vitamin E. Der Mechanismus der Absorption von TPGS in Enterocyten ist noch ungeklärt. Aufgrund seines amphipathisehen Charakters (enthält sowohl hydrophile als auch lipophile Enden) bildet TPGS seine eigenen Mizellen und benötigt daher zur Bildung von Mizellen keine Gallensalze. TPGS kann die Absorption lipophiler Wirkstoffe verbessern, wenn es zusammen mit diesen formuliert wird. Des Weiteren beruht die Verbesserung der oralen biologischen Verfügbarkeit einiger Wirkstoffe bei Verabreichung zusammen mit TPGS möglicherweise zum Teil auf der Hemmung des P-Glycoproteins im Darm.
Die erfindungsgemäßen, mit Wirkstoff beladenen PLA-Nano- partikel und PLGA-Nanopartikel können zur gezielten Zufuhr des Wirkstoffs über die Blut-Hirn-Schranke zum zentralen Nervensystem und zur Behandlung von Krankheiten oder Stö- rungen des zentralen Nervensystems oder für die Herstellung eines Medikamentes für die Behandlung von Krankheiten oder Störungen des zentralen Nervensystems eingesetzt werden.
Figur 1 zeigt ein Diagramm, welches das Überleben von Rat- ten, die ein intrakraniales 101/8-Glioblastom aufwiesen, nach einer Chemotherapie mit unterschiedlichen, Doxorubicin enthaltenden Nanopartikel-Zubereitungen darstellt.
Figur 2 zeigt ein Diagramm, welches das Überleben von Ratten, die ein intrakraniales 101/8-Glioblastom aufwiesen, nach einer Chemotherapie mit unterschiedlichen, Doxorubicin und TPGS enthaltenden Nanopartikel-Zubereitungen wiedergibt .
Die wirkstoffbeladenen PLA- und PLGA-Nanopartikel der Erfindung können entweder durch a) Hochdruckhomogenisierungs- Lösemittelverdampfungs-Verfahren oder durch b) Doppel- Emulsions-Verfahren (Wasser-in-Öl-in-Wasser-Emulsion) hergestellt werden
a) Hochdruckhomogenisierungs-Lösemittelverdampfungs- Verfahren
Typischerweise werden das Polymer und der Wirkstoff in einem organischen Lösemittel gelöst. Diese organische Phase wird langsam, unter Rühren, in eine wässrige Lösung eines Stabilisators gegossen. Die Mischung wird dann unter Verwendung eines Hochgeschwindigkeits- Scherhomogenisators emulgiert. Die erhaltene primäre Emulsion wird dann bei hohem Druck durch einen Hochdruck-Homogenisator geleitet. Das organische Lösemit- tθl wird entweder durch Verdampfen bei Raumtemperatur und normalem Druck unter Rühren entfernt oder durch schnelles Verdampfen bei vermindertem Druck. Während dieses Vorgangs verfestigen sich die Nanotröpfchen.
Die sich ergebende NanoSuspension wird durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert. Für die Lagerung wird ein Gefrierschutzmittel hinzugegeben, vorzugsweise 5 % (Gew. /Vol.) Mannitol. Dann wird die Suspension in Fläschchen gefüllt, bei -35 0C eingefroren und anschließend gefriergetrocknet .
Sollen bei der Herstellung des Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr zusätzliche Verbindungen wie Cetyl- phosphat, Kaliumcholesterinsulfat oder Tocopherolsuc- cinat als Emulgatoren und/oder Gegen-Ionen eingesetzt werden, so werden das Polymer und die Lipid-Verbindung in einem organischen Lösemittel gelöst, und der Wirkstoff wird in Wasser gelöst. Die organische und die wässrige Lösung werden miteinander gemischt und bei Raumtemperatur inkubiert. Dann wird die Mischung in eine gerührte, einen Stabilisator enthaltende wässrige Lösung gegossen und danach wie oben beschrieben weiter verarbeitet .
Doppel-Emulsions-Verfahren
Typischerweise wird das Polymer in einem organischen Lösemittel und der Wirkstoff in Wasser gelöst. Die wässrige Lösung wird zu der organischen Phase gegeben. Die Mischung wird emulgiert. Die erhaltene WÖ-Emulsion wird zu einer wässrigen Lösung eines Stabilisators gegeben und dann weiter emulgiert. Die resultierende grobe Emulsion wird durch einen Hochdruck-Homogenisator geleitet. Der Homogenisierungsschritt wird mehr- fach wiederholt, um eine stabile WÖW-Emulsion zu erzeugen. Dann wird das organische Lösemittel durch langsames Verdampfen bei Raumtemperatur und normalem Druck, entfernt.
Es besteht die Möglichkeit, den Wirkstoff und einen zusätzlichen Emulgator, wie beispielsweise γ-Cyclodextrin, in Wasser zu lösen, bevor die Lösung zu der organischen Phase hinzugegeben wird.
Die erhaltene Nanosuspension wird durch einen glasgesinter- ten Filter gefiltert. Für die Lagerung wird ein Gefrierschutzmittel hinzugefügt und die Nanosuspension in Fläsch- chen eingefüllt und sodann gefriergetrocknet.
Die erhaltenen Nanopartikel-Formulierungen sind auf Re- suspendierbarkeit, Partikelgröße, Wirkstoffbeladung (theoretisch) und Wirkstoffgehalt zu untersuchen.
Es wird darauf hingewiesen, dass die detaillierte Beschrei- bung und die spezifischen Beispiele zwar bevorzugte Ausführungsformen der Erfindung aufzeigen jedoch nur der Erläuterung dienen, da verschiedene Änderungen und Modifikationen innerhalb des Umfangs der Erfindung für den Fachmann aus der vorliegenden Beschreibung, den begleitenden Zeichnungen sowie aus den Ansprüchen ersichtlich werden. Das erfindungsgemäße System zur gezielten Wirkstoffzufuhr umfasst Nanopartikθl auf der Basis von PoIy(DL-lactid) und/oder PoIy(DL-lactid-co-glycolid und wenigstens einen pharmakologisch wirksamen Wirkstoff, und es enthält entwe- der TPGS oder es umfasst einen Überzug aus einem oberflächenaktiven Stoff, der auf den mit Wirkstoff beladenen Na- nopartikeln abgeschieden ist, wobei der oberflächenaktive Stoff Poloxamer 188 ist.
Gemäß einer bevorzugten Ausführungsform weisen die Nanopar- tikel des Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr einen Durchmesser von weniger als 1.000 um, vorzugsweise einen Durchmesser zwischen 100 und 800 nm und mit größtem Vorzug einen Durchmesser zwischen 130 und 160 nm auf.
Die erfindungsgemäßen Nanopartikel auf PLA- und/oder PLGA- Basis können mit praktisch jedem pharmakologisch wirksamen Wirkstoff beladen werden, um diesen pharmakologisch wirksamen Wirkstoff, z.B. ein Therapeutikum oder ein Diagnosti- kum, über die Blut-Hirn-Schranke eines Säugers an das ZNS dieses Säugers zu verabreichen.
Das Therapeutikum kann ausgewählt sein aus der Gruppe bestehend aus Wirkstoffen, die an synaptischen und Neuroef- fektor-Knotenpunkten wirken; allgemeinen und lokalen Analgetika und Anästhetika; Hypnotika und Sedativa; Wirkstoffen für die Behandlung psychiatrischer Störungen wie beispielsweise Depressionen und Schizophrenie; Antiepileptika und Antikonvulsiva; Wirkstoffen zur Behandlung der Huntington- Krankheit, des Alterns und der Alzheimer-Krankheit; exzita- torischen Aminosäure-Antagonisten und neurotropen Faktoren und neurogenerativen Mitteln; trophisehen Faktoren; Wirkstoffen, die zur Behandlung von Traumata des zentralen Nervensystems oder Schlaganfällen vorgesehen sind; Wirkstoffen zur Behandlung von Sucht und Drogenmissbrauch; autakoiden und entzündungshemmenden Wirkstoffen; chemotherapeutischen Mitteln für Parasiten-Infektionen und mikrobiell bedingte Krankheiten; immunosuppressiven Mitteln und Antikrebs- Mitteln; Hormonen und Hormon-Antagonisten; Schwermetallen und Schwermetall-Antagonisten; Antagonisten für nichtmetal- lische toxische Mittel; zytostatischen Mitteln zur Behandlung von Krebs; diagnostischen Substanzen zur Verwendung in der Nuklearmedizin; ixnmunoaktiven und immunoreaktiven Mitteln; Transmittern und ihren jeweiligen Rezeptor-Agonisten und Rezeptor-Antagonisten, ihren entsprechenden Vorläufern oder Metaboliten; Antibiotika, Antispasmodika, Antihistami- nen, Mitteln gegen Nausea, Relaxantien, Stimulantia "Sense- 11 und "Anti-Sense-"Oligonukleotiden, Cerebral-Dilatatoren, Psychotropika, gegen Manie gerichtete Mittel, gefäßerweiternde und -verengende Mittel Antihypertensiva, Mittel zur Migräne-Behandlung, Hypnotika, hyperglykämische oder hy- poglykämische Mittel, mineralische oder der Ernährung dienende Mittel, gegen Fettleibigkeit gerichtete Mittel, Anabolika und Antiasthmatika sowie Mischungen daraus.
Bevorzugte Therapeutika sind Antikrebs-Mittel, vorzugsweise antineoplastische Mittel. Die antineoplastischen Mittel können ausgewählt sein aus der Gruppe bestehend aus Alka- loiden, alkylierenden Mitteln wie Alkylsulfonaten, Aziridi- nen, Ethyleniminen und Methylmelaminen, Stickstofflosten, Nitrosoharnstoffen, Antibiotika und Analoga, vorzugsweise Anthracyclinen, Antimetaboliten wie Analoga der Folsäure, Antagonisten der Folsäure, Purin-Analoga und Pyrimidin- Analoga, Enzymen, Immunmodulatoren, Immuntoxinen, monoklonalen Antikörpern und Platinkomplexen.
Besonders bevorzugte antineoplastische Mittel können ausgewählt sein aus der Gruppe bestehend aus 9-Aminocampto- thecin, Docetaxel, Ecteinascidinen, Etoposid, Irinotecan, Paclitaxel, Rubitecan, Teniposid, Topotecan, Vinblastin, Vincristin, Vindesin, Busulfan, Improsulfan, Piposulfan, Carboquon, Uredepa, Altretamin, Triethylenmelamin, Triethy- lenphosphoramid, Triethylenthiophosphoramid, Chlorambucil, Chlornaphazin, Cyclophosphamid, Estramustin, Ifosfamid, Mechlorethamin, Mechlorethaminoxidhydrochlorid, Melphalan, Novembichin, Perfosfamid, Phenesterin, Prednimustin, Tri- chlormethin, Trofosfamid, Uracil-Lost, Carmustin, Chloro- zotocin, Fotemustin, Lomustin, Nimustin, Ranimustin, Dacar- bazin, Mannomustin, Mitobronitol, Mitolactol, Pipobroman, Temozolomid, Aclacinomycinen, Anthramycin, Azaserin, Bleo- mycinen, Cactinomycin, Carubicin, Chromomycin, Dactinomy- ein, Daunorubicin, 6-Diazo-5-oxo-L-norleucin, Doxorubicin, Epirubicin, Idarubicin, Menogaril, Mitomycinen, Mycophenol- säure, Nogalamycin, Olivomycinen, Peplomycin, Pirarubicin, Plicamycin, Porfiromycin, Puromycin, Streptonigrin, Strep- tozocin, TNP-470, Tubercidin, Valrubicin, Zinostatin, Zoru- bicin, Denopterin, Edatrexat, Methotrexat, Nolatrexed, Pe- metrexed, Piritrexim, Pteropterin, Ralitrexed, Trimetrexat, Cladribin, Fludarabin, 6-Mercaptopurin, Thiamiprin, Thiogu- anin, Tiazofurin, Ancitabin, Azacitidin, 6-Azauridin, Cape- citabin, Carmofur, Cytarabin, Decitabin, Doxifluridin, Emi- tefur, Enocitabin, Floxuridin, Fluorouracil, Gemcitabin, Tegafur, L-Asparaginase, Ranpirnase, Bropirimin, Interfe- ron-α, Interferon-γ, Intθrlβukin-2, Lentinan, Propagermani- um, PSK®, Roquinimex, Sizofiran, Ubenimex, Denileukin Dif- titox, Alemtuzumab, Edrecolomab, Gemtuzυmab Ozogamicin, Ibritυmomab Tiuxetan, Rituximab, Tositumomab 131I, Trastuzu- mab, Carboplatin, Cisplatin, Lobaplatin, Miboplatin, Oxa- liplatin, Amsacrin, Arsentrioxid, Bisantren, Defosfamin, Demecolcin, Diaziquon, Eflornithin, Elliptiniumacetat, Etoglucid, Fenretinid, Flavopiridol, GaIliumnitrat, Hydro- xyharnstoff, Imatinib, Liarozol, Lonidamin, Miltefosin, Mi- toguazon, Mitoxantron, Mopidamol, Nitracrin, Pentostatin, Phβnamet, Podophyllinsäure-2-ethylhydrazid, Procarbazin, Razoxan, Sobuzoxan, Spirogermanium, Tenuazonsäure, Tirapa- zamin, Triaziquon und Urethan.
Das erfindungsgemäße System zur gezielten Wirkstoffzufuhr kann durch ein Hochdruckhomogenisierungs-Lösemittel- verdampfungs-Verfahren oder ein Doppel-Emulsions-Verfahren hergestellt werden.
Ein bevorzugtes Verfahren zur Herstellung eines TPGS enthaltenden wirkstoffbeladenen PLA- und/oder PLGA- Nanopartikel-Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr umfasst die Schritte:
Lösen von PoIy (DL-lactid) und/oder Poly(DL-lactid-co- glycolid) sowie wenigstens eines pharmakologisch wirksamen Wirkstoffs und wahlweise einer Lipid-Verbindung in einem organischen Lösemittel, um eine organische Phase zu erhalten;
Gießen der organischen Phase in eine wässrige Lösung, die TPGS enthält; Emulgieren der Mischung, um eine primäre Emulsion zu erhalten;
Homogenisieren der primären Emulsion;
Entfernen des organischen Lösemittels aus der primären Emulsion; und
Filtern der resultierenden Nanosuspension, welche mit Wirkstoff beladene Nanopartikel enthält.
Ein weiteres bevorzugtes Verfahren zur Herstellung eines TPGS enthaltenden wirkstoffbeladenen PLA- und/oder PLGA- Nanopartikel-Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr umfasst die Schritte:
Lösen von Poly(DL-lactid) und/oder Poly(DL-lactid-co- glycolid) in einem organischen Lösemittel, um eine or- ganische Phase zu erhalten;
Lösen wenigstens eines pharmakologisch wirksamen Wirkstoffs in einer wässrigen Lösung;
Gießen der wässrigen Lösung in die organische Phase; Emulgieren der Mischung, um eine primäre Emulsion zu erhalten;
Gießen der primären Emulsion in eine wässrige TPGS-
Lösung;
Homogenisieren der Mischung aus primärer Emulsion und wässriger TPGS-Lösung; - Entfernen des organischen Lösemittels aus der Mischung aus primärer Emulsion und wässriger Lösung eines Stabilisators; und
Filtern der resultierenden Nanosuspension, welche mit Wirkstoff beladene Nanopartikel enthält. Ein. bevorzugtes Verfahren zur Herstellung eines mit Poloxa- mer 188 überzogenen Wirkstoffbeladenen PLA- und/oder PLGA- Nanopartikel-Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr umfasst die Schritte: - Lösen von PoIy(DL-lactid) und/oder PoIy(DL-lactid-co- glycolid) und wenigstens eines pharmakologisch wirksamen Wirkstoffes sowie wahlweise einer Lipid-Verbindung in einem organischen Lösemittel, um eine organische Phase zu erhalten; - Gießen der organischen Phase in eine wässrige Lösung, die wahlweise einen Stabilisator enthält; Emulgieren der Mischung, um eine primäre Emulsion zu erhalten;
Homogenisieren der primären Emulsion; - Entfernen des organischen Lösemittels aus der primären Emulsion;
Filtern der resultierenden NanoSuspension, welche mit Wirkstoff beladene Nanopartikel enthält, und Überziehen der Nanopartikel mit Poloxamer 188.
Ein weiteres bevorzugtes Verfahren zur Herstellung eines mit Poloxamer 188 überzogenen wirkstoffbeladenen PLA- und/oder PLGA-Nanopartikel-Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr umfasst die Schritte: - Lösen von PoIy(DL-lactid) und/oder PoIy(DL-lactid-co- glycolid) in einem organischen Lösemittel, um eine organische Phase zu erhalten;
Lösen wenigstens eines pharmakologisch wirksamen Wirkstoffs in einer wässrigen Lösung; - Gießen der wässrigen Lösung in die organische Phase; Emulgieren der Mischung, um eine primäre Emulsion zu erhalten;
Gießen der primären Emulsion in eine wassrige Lösung eines Stabilisators; - Homogenisieren der Mischung aus primärer Emulsion und wässriger Lösung eines Stabilisators;
Entfernen des organischen Lösemittels aus der Mischung aus primärer Emulsion und wässriger Lösung eines Stabilisators; - Filtern der resultierenden Nanosuspension, welche mit Wirkstoff beladene Nanopartikel enthält; und Überziehen der Nanopartikel mit Poloxamer 188.
Bevorzugte Diagnostika und Therapeutika, insbesondere anti- neoplastische Mittel, für die Herstellung des erfindungsgemäßen Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr wurden weiter oben im Einzelnen aufgeführt .
Die bevorzugten organischen Lösemittel für die Herstellung des erfindungsgemäßen Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr sind ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Dichlormethan und Chloroform. Weiterhin kann Ethylacetat als Lösemittel für die Herstellung von PLA- und/oder PLGA-Nanopartikeln verwendet werden, vorausgesetzt, dass der optionale Stabi- lisator in Ethylacetat löslich ist.
Darüber hinaus können Mischungen von Dichlormethan und Ethylacetat verwendet werden. Die bevorzugte Lipidverbindung ist aus der Gruppe bestehend aus Cetylphosphat, Kaliumcholesterinsulfat und Tocopherol- succinat ausgewählt.
Die bevorzugten Stabilisatoren sind Emulgatoren, oberflächenaktive Substanzen oder Gegenionen. Die bevorzugten Stabilisatoren sind ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Polyvinylalkoholen, Seruxnalbuxnin, γ-Cyclodextrin und To- copherolpolyethylenglycol-1000-Succinat (TPGS), wobei die Polyvinylalkohole vorzugsweise ein Molekulargewicht von
30-70 dDa aufweisen und das besonders bevorzugte Serumalbumin Humanserumalbumin ist .
Zum Zwecke der Lagerung kann die erhaltene Nanosuspension der wirkstoffbeladenen Nanopartikel gefriergetrocknet werden, bevor sie mit Poloxamer 188 beschichtet werden. Vorzugsweise wird der Nanosuspension ein Gefrierschutzmittel zugesetzt, bevor die Nanosuspension der Gefriertrocknung unterzogen wird. Ein geeignetes Gefrierschutzmittel ist Mannitol, dieses wird vorzugsweise in einer Menge von 5 % (Gew. /Vol. ). der Nanosuspension hinzugefügt.
Das Überziehen der mit Wirkstoff beladenen Nanopartikel erfolgt vorzugsweise mit einer Lösung aus Poloxamer 188 in einer Lösung und durch Verstreichenlassen einer Zeitspanne, die ausreicht, damit das oberflächenaktive Mittel die mit Wirkstoff beladenen Nanopartikel überziehen kann.
Das System zur gezielten Wirkstoffzufuhr zur Verabreichung eines pharmakologisch wirksamen Wirkstoffes an das zentrale Nervensystem eines Säugers über dessen Blut-Hirn-Schranke, wobei das System zur gezielten Arzneistoffzufuhr Nanoparti- kel aus PoIy (DL-lactid) und/oder PoIy(DL-lactid-co- glycolid) , ein Therapeutikum und TPGS umfasst oder einen Überzug aus dem oberflächenaktiven Stoff Poloxamer 188 auf- weist, der auf den mit Wirkstoff beladenen Nanopartikeln abgeschieden ist, kann zur Behandlung von Krankheiten oder Störungen des zentralen Nervensystems eines Säugers eingesetzt werden. Das System zur gezielten Wirkstoffzufuhr ist insbesondere zur Verabreichung von pharmakologisch wirksa- men Substanzen geeignet, welche auf das zentrale Nervensystem wirken jedoch nicht in der Lage sind, die Blut-Hirn- Schranke eines Säugers ohne Modifikation oder Assoziierung mit einem Träger zu überwinden.
Das erfindungsgemäße System zur gezielten Wirkstoffzufuhr ist besonders nützlich bei der Behandlung neuronaler Krebserkrankungen, da mit diesem System antineoplastische Wirkstoffe über die Blut-Hirn-Schranke transportiert werden können, um diese Antikrebs-Wirkstoffe dem ZNS gezielt zuzu- führen.
Das erfindungsgemäße System zur gezielten Wirkstoffzufuhr ist so zu verabreichen, dass es in den Blutkreislauf eintreten kann, wodurch der Wirkstoff die Blut-Hirn-Schranke erreicht und durch diese hindurch tritt. Vorzugsweise wird das erfindungsgemäße System zur gezielten Wirkstoffzufuhr oral oder durch Injektion verabreicht, mit größtem Vorzug durch intravenöse Injektion. Beispiele
1. Herstellung von nanopartikulären Formulierungen
Verschiedene Sortierungen von Lactel®-Polymeren - PoIy(DL- lactid) (PLA) und PoIy(DL-lactid-co-glycolid) (PL6Λ) - wurden bei Absorbable Polymers, USA, erworben; Doxorubicin- hydrochlorid wurde von Sicor, Rho, Italien zur Verfügung gestellt; Cetylphosphat, Kaliumcholesterinsulfat, Polyvi- nylalkohol (PVA) (Molekulargewicht 30-70 kDa) und Humanserumalbumin (HSA) wurden von Sigma bezogen; D-α-Tocopherol- Polyethylenglycol-lOOO-Succinat (TPGS) wurde von Eastman Chemical Company, USA, bezogen.
Die wirkstoffbeladenen PLA- und PLGA-Nanopartikel wurden entweder unter Verwendung des Hochdruckhomogenisierungs- Lösemittelverdampfungs-Verfahrens oder des Doppelemulsions- verfahrens hergestellt.
Für das Hochdruckhomogenisierungs-Lösemittelverdampfungs- Verfahren wurden das Polymer und der Wirkstoff üblicherweise in Dichlormethan gelöst . Diese organische Phase wurde langsam unter Rühren in eine wässrige Lösung eines Stabilisators (PVA oder HSA) eingerührt. Die Mischung wurde unter Verwendung eines Hochgeschwindigkeits-Scherhomogenisators (Ultra-Turrax T-25 (IKA)) emulgiert. Die erhaltene primäre Emulsion wurde dann bei 400 bar durch den Hochdruck- Homogenisator (APV Micron Lab 40; Gaulin GmbH, Deutschland) geleitet. Das organische Lösemittel wurde durch langsames Verdampfen bei Raumtemperatur und normalem Druck unter Rühren (3 h), oder durch schnelles Verdampfen bei reduziertem Druck (Rotationsverdampfer BUCHI R-200), entfernt. Dabei verfestigten sich die Nanotröpfchen in dem wässrigen System. Die erhaltene Nanosuspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert, und 5 % (Gew. /Vol.) Mannitol wurde als Gefrierschutzmittel hinzugefügt. Dann wurde die Nanosuspension in Fläschchen gefüllt, bei -35 0C gefroren und gefriergetrocknet .
Lipidverbindungen wie Cetylphosphat, Kaliumcholesterinsul- fat oder Tocopherolsuccinat wurden in einigen Zubereitungen als Emulgatoren und/oder Gegenionen verwendet. In diesem Falle wurde das Polymer und die Lipid-Komponente in dem organischen Lösemittel (Dichlormethan oder Chloroform) und der Wirkstoff in Wasser gelöst. Die organische und die wässrige Lösung wurden miteinander gemischt und bei Raumtemperatur 12 h lang inkubiert. Dann wurde die Mischung in eine gerührte wässrige Lösung (25 ml) gegossen, welche einen Stabilisator enthielt, und dann wie oben beschrieben weiter behandelt.
Für das Doppelemulsionsverfahren wurde das Polymer (500 mg) üblicherweise in Dichlormethan (5 ml) (I h unter Rühren mit einem Magnetrührer) gelöst. Der Wirkstoff (50 mg) wurde in Wasser (2 ml) gelöst. Die wässrige Lösung wurde tropfenwei- se zu der organischen Phase hinzugegeben. Die Mischung wurde unter Verwendung eines Ultra-Turrax T-25 (2 min bei 19.500 U/min) emulgiert. Die erhaltene WÖ-Emulsion wurde zu 25 ml einer l%igen wässrigen Lösung eines Stabilisators (PVA, HSA oder TGPS) und dann unter Verwendung eines Ultra- Turrax T-25 emulgiert. Die erhaltene grobe Emulsion wurde dann durch einen Hochdruck-Homogenisator (APV Micron Lab 40) bei einem Druck von 600 bar geleitet. Der Homogenisie- rungsschritt wurde mehrfach wiederholt, um stabile WÖW- Emulsionen zu erhalten. Das organische Lösemittel wurde aus der WÖW-Emulsion durch langsames Verdampfen bei Raumtempe- ratur unter normalem Druck (Magnetrührer, 3h) entfernt. Die erhaltene Nanosuspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert, und 5 % (Gew. /Vol.). Mannitol wurden als Gefrierschutzmittel hinzugefügt. Anschließend wurde die Emulsion in Fläschchen (1 ml/Fläschchen) gefüllt, eingefro- ren (-35 0C) und gefriergetrocknet.
Dichlormethan ist ein bei der Herstellung von PLA/PLGA- Nanopartikeln typischer Weise verwendetes Lösemittel. Es ist jedoch auch möglich, Ethylacetat oder Mischungen aus Dichlormethan und Ethylacetat zu verwenden. Allerdings sind bestimmte Gegenionen nicht in Ethylacetat löslich. In diesen Fällen ist Ethylacetat kein geeignetes Lösemittel für die Herstellung von PLA/PLGA-Nanopartikeln.
Die erhaltenen Formulierungen wurden auf Resuspendierbar- keit, Partikelgröße, Wirkstoffbeladung (theoretisch) und Wirkstoffgehalt untersucht.
Die erhaltene nanopartikuläre Formulierung wurde als geeig- net erachtet, wenn nach der Rekonstituierung der gefriergetrockneten Nanopartikel mit Wasser ein einheitliches und stabiles kolloidales System festgestellt wurde. Die Re- suspendierbarkeit der Nanopartikel wurde visuell bewertet . Daher wurde der Inhalt einer eine gefriergetrocknete Formu- lierung enthaltenen Fläschchen bis zum anfänglichen Volumen (2 ml) mit Wasser rekonstituiert und die Fläschchen 2-4 min lang leicht geschüttelt. Geeignete rekonstituierte Formulierungen werden zu opaleszenten Flüssigkeiten ohne sichtbare Agglomerate oder Präzipitate. Proben, die sichtbare Agglomeratθ oder Präzipitate enthielten, wurden verworfen.
Die Größenbθstiπunung der Nanopartikel erfolgte durch Photonenkorrelationsspektroskopie (PCS), wobei ein Aliquot der rekonstituierten Formulierungen (50 μl) in ein Nanosizer- Röhrchen, das 3 ml doppelt destilliertes Wasser enthielt, transferiert wurde. Das Röhrchen wurde geschüttelt und dann in einen Coulter N4MD Nanosizer (Coulter Electronics, UK) eingeführt. Die Arbeitsparameter waren wie folgt:
Streuungswinkel: 90°
Temperatur: 25° Viskosität: 0,01 Poise
Brechungsindex: 1,333
Die Wirkstoffbeladung wurde entweder nach dem Filtrationsschritt in der Reaktionsmischung oder nach der Rekonstitu- tion in der gefriergetrockneten Formulierung bestimmt. Das Verfahren zur Bestimmung der Wirkstoffbeladung umfasst die Trennung der Nanopartikel durch Ultrafiltration und die anschließende quantitative Analyse eines freien Wirkstoffs im Filtrat durch Spektrophotometrie .
Zur Bestimmung der Wirkstoffbeladung einer Nanopartikel- Formulierung wurde der Inhalt eines Fläschchens, das eine gefriergetrocknete Formulierung enthielt, in 1 ml Wasser rekonstituiert; 400 μl wurden in einen Mikrozentrifugenfil- ter (Microcon 30 kDa, Millipore) transferiert und die Nanopartikel durch Zentrifugieren bei 16.000 U/min für 50 min abgetrennt. 100 μl des klaren Filtrats wurden in eine Kü- vette, die 3 ml doppelt destilliertes Wasser enthielt, transferiert, und die Absorption wurde unter Verwendung eines Spektrophotometers (Spectronics Heλios, Thermospectro- nie, GB) gegen Wasser bei 480 nm gemessen. Die Konzentration eines Wirkstoffs in der Probe wurde unter Verwendung einer geeigneten Kalibrierungskurve bestimmt.
Die relative Wirkstoffbeladung (% der Gesamtwirkstoffmenge) wurde wie folgt berechnet :
Ci - Cf
% Wirkstof fbeladung = — xlOO% , wobei
Ci
Ci = anfängliche Wirkstoffkonzentration im Polymerisations- medium (mg/ml) ; Cf = Wirkstoffkonzentration im Filtrat (mg/ml) .
Das Verfahren zur Bestimmung des Wirkstoffgehalts (mg/Fläschchen) ist eine quantitative Analyse nach vollständiger Lösung der gefriergetrockneten Formulierung. Die Konzentration des in Lösung befindlichen Wirkstoffs wird durch Spektrophotometrie unter Verwendung einer Kalibrierungskurve gemessen.
Zur Bestimmung des Wirkstoffgehalts wurde der Inhalt eines Fläschchens mit einer gefriergetrockneten Formulierung in 2 ml Dirnethylsulfoxid) (3 h, Raumtemperatur) gelöst; 100 μl dieser Lösung wurden in eine Spektrophotometer-Küvette, die 3 ml doppelt destilliertes Wasser enthielt, transferiert, und die Absorption wurde bei 480 nm gegen Wasser, unter Verwendung eines Spektrophotometers (Spectronics Heλios; Thermospectronic, GB) gemessen. Die Konzentration eines Wirkstoffs in der Probe wurde unter Verwendung der geeigneten Kalibrierungskurve bestimmt.
Zubereitung 1
Nanopartikel wurden durch ein Hochdruckhomogenisierungs- Lösemittelverdampfungs-Verfahren hergestellt. 250 mg des Polymers (PLGA 75:25, MW 90.000-126,000 Da) und 25 mg Doxo- rubicin wurden in 5 ml Dichlormethan gelöst. Die organische Phase wurde in eine gerührte wässrige Lösung (25 ml), die 0,5 % PVA als Stabilisator enthielt, gegossen und die Mischung unter Verwendung eines Ultra-Turrax T-25 (2 min; 15.100 U/min) emulgiert. Die resultierende primäre Emulsion wurde unter Verwendung eines Hochdruckhomogenisators (APV Micron Lab 40) bei 400 bar weiter homogenisiert. Dichlormethan wurde unter vermindertem Druck (Rotationsverdampfer BUCHI R-200) verdampft. Die resultierende Nanosuspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert und nach Zugabe von 5 % (Gew. /Vol.) Mannitol als Gefrierschutzmittel gefriergetrocknet . Die gefriergetrocknete Formulierung war vollständig resuspendierbar. Die durch PCS bestimmte Partikelgröße betrug 140-220 um, die Doxorubicin-Beladung betrug 40 %.
Zubereitung 2
Nanopartikel wurden durch ein Doppelemulsionsverfahren her- gestellt. 500 mg eines Polymers (PLGA mit Säure-Endgruppen, logarithmische Viskositätszahl: η= 0,20 dL/g) wurden in 3 ml Dichlormethan gelöst. 25 mg Doxorubicinhydrochlorid wurden in 2 ml 0,001N HCl gelöst. Die wässrige Lösung wurde in die organische Phase gegossen und die Mischung unter Verwendung eines Ultra-Turrax T-25 (2 min; 19.500 U/min) emul- giert. Die erhaltene primäre Emulsion wurde in 25 ml einer wässrigen l%igen PVA-Lösung gegossen und die Mischung unter Verwendung eines Ultra-Turrax T-25 erneut homogenisiert; es folgte ein dreimaliger Durchlauf durch einen Hochdruckhomogenisator (APV Micron Lab 40) bei 600 bar. Dichlormethan wurde durch Rühren der Emulsion bei Raumtemperatur für 3h verdampft. Die erhaltene Nanosuspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert und, nach Zugabe von 5 % (Gew. /Vol.). Mannitol als Gefrierschutzmittel, gefriergetrocknet. Die gefriergetrocknete Formulierung war vollstän- dig resuspendierbar. Die Partikelgröße wurde durch PCS bestimmt und betrug 110-160 um, die Doxorubicin-Beladung betrug 75 %.
Zubereitung 3
Nanopartikel wurden durch ein Doppelemulsionsverfahren hergestellt. 500 mg des Polymers (PLGA 75:25, MG 90.000 - 126.000 Da) wurden in 3 ml Dichlormethan gelöst. 25 mg Do- xorubicinhydrochlorid wurden in 2 ml 0,00IN HCl gelöst. Die wässrige Lösung wurde in die organische Phase gegossen und die Mischung unter Verwendung eines Ultra-Turrax T-25 (2 min; 19.500 U/min) emulgiert. Die resultierende primäre E- mulsion wurde in 25 ml einer wässrigen l%igen PVA-Lösung gegossen, diese Lösung wurde unter Verwendung des Ultra- Turrax T-25 erneut homogenisiert; anschließend folgten vier Durchlaufe durch einen Hochdruckhomogenisator (APV Micron Lab 40) bei 600 bar. Dichlormethan wurde durch Rühren der Emulsion bei Raumtemperatur für 3 h verdampft. Die resultierende Nanosuspension wurde durch einen gesinterten Glas- filter gefiltert und, nach Zugabe von 5 % (Gew. /Vol.) Man- nitol als Gefrierschutzmittel, gefriergetrocknet. Die gefriergetrocknete Formulierung war vollständig resuspendier- bar. Die durch PCS bestimmte Partikelgröße betrug 160-330 nm, die Doxorubicin-Beladung betrug 47 %.
Zubereitung 4
Nanopartikel wurden durch ein Doppelemulsionsverfahren her- gestellt. 500 mg des Polymers (PLA, η=0,36 dL/g) wurden in 3 ml Dichlormethan gelöst. 25 mg Doxorubicinhydrochlorid wurden in 2 ml 0,001N HCl gelöst. Die wässrige Lösung wurde in die organische Phase gegossen; die Mischung wurde unter Verwendung eines Ultra-Turrax T-25 (2 min; 19.500 U/min) emulgiert . Die erhaltene primäre Emulsion wurde in 25 ml einer wässrigen l%igen PVA-Lösung gegossen und die Mischung unter Verwendung des Ultra-Turrax T-25 erneut homogenisiert; anschließend folgten vier Durchlaufe durch einen Hochdruckhomogenisator (APV Micron Lab 40) bei 600 bar. Dichlormethan wurde durch Rühren der Emulsion bei Raumtemperatur für 3 h verdampft. Die resultierende Nanosuspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert und, nach Zugabe von 5 % (Gew. /Vol.) Mannitol als Gefrierschutzmittel gefriergetrocknet. Die gefriergetrocknete Formulie- rung war vollständig resuspendierbar. Die durch PCS be- stimmte Partikelgröße betrug 126-210 im, die Doxorubicin- Beladung betrug 42 %.
Zubereitung 5
Nanopartikel wurden durch ein Doppelemulsionsverfahren hergestellt. 500 mg des Polymers (PLGA mit Säure-Endgruppen, η = 0,20 dL/g) wurden in 3 ml Dichlormethan gelöst. 25 mg Doxorubicinhydrochlorid wurden in 2 ml 0,001N HCl gelöst. Die wässrige Lösung wurde in die organische Phase gegossen und die Mischung unter Verwendung eines Ultra-Turrax T-25 (2 min; 19.500 U/min) emulgiert. Die erhaltene primäre Emulsion wurde in 25 ml einer wässrigen l%igen PVA-Lösung gegossen und die Mischung unter Verwendung des Ultra-Turrax T-25 erneut homogenisiert; es folgte ein dreimaliger Durchlauf durch einen Hochdruckhomogenisator (APV Micron Lab 40) bei 600 bar. Dichlormethan wurde durch Rühren der Emulsion bei Raumtemperatur für 3h verdampft. Die erhaltene Nano- Suspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert und, nach Zugabe von 5 % (Gew. /Vol.) Mannitol als Gefrierschutzmittel, gefriergetrocknet. Die gefriergetrocknete Formulierung war vollständig resuspendierbar. Die Partikelgröße wurde durch PCS bestimmt und betrug 140-200 um, die Doxorubicin-Beladung betrug 73 %.
Zubereitung 6
Nanopartikel wurden durch ein Doppelemulsionsverfahren hergestellt. 500 mg des Polymers (PLGA 50:50 mit Säure-End- gruppen, η= 0,20 dL/g) wurden in 3 ml Dichlormethan gelöst. 25 mg Doxorubicinhydrochlorid wurden in 2 ml 0,001N HCl gelöst. Die wässrige Lösung wurde in die organische Phase gegossen und die Mischung unter Verwendung eines UIt- ra-Turrax T-25 (2 min; 19.500 U/min) emulgiert. Die erhaltene primäre Emulsion wurde in 25 ml einer wässrigen l%igen PVA-Lösung gegossen und die Mischung unter Verwendung des Ultra-Turraac T-25 erneut homogenisiert; es folgte ein dreimaliger Durchlauf durch einen Hochdruckhomogenisa- tor (APV Micron Lab 40) bei 600 bar. Dichlormethan wurde durch Rühren der Emulsion bei Raumtemperatur für 3h verdampft. Die erhaltene Nanosuspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert und, nach Zugabe von 5 % (Gew. /Vol.) Mannitol als Gefrierschutzmittel, gefrierge- trocknet. Die gefriergetrocknete Formulierung war vollständig resuspendierbar. Die Partikelgröße wurde durch PCS bestimmt und betrug 130-190 nm, die Doxorubicin-Beladung betrug 67 %.
Zubereitung 7
Nanopartikel wurden durch ein Doppelemulsionsverfahren hergestellt. 500 mg des Polymers (PLGA 50:50 mit Säure-End- gruppen, η = 0,20 dL/g) wurden in 3 ml Dichlormethan gelöst. 50 mg Doxorubicinhydrochlorid wurden in 2 ml 0,001N HCl gelöst. Die wässrige Lösung wurde in die organische Phase gegossen und die Mischung unter Verwendung eines Ult- ra-Turrax T-25 (2 min; 20.100 U/min) emulgiert. Die erhal- tene primäre Emulsion wurde in 25 ml einer wässrigen l%igen PVA-Lösung gegossen und die Mischung unter Verwendung des Ultra-Turrax T-25 erneut homogenisiert; es folgte ein viermaliger Durchlauf durch einen Hochdruckhomogenisator (APV Micron Lab 40) bei 600 bar. Dichlormethan wurde durch Rühren der Emulsion bei Raumtemperatur für 3h verdampft. Die erhaltene Nanosuspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert und, nach Zugabe von 5 % (Gew. /Vol.) Mannitol als Gefrierschutzmittel, gefriergetrocknet. Die gefriergetrocknete Formulierung war vollständig resuspen- dierbar. Die Partikelgröße wurde durch PCS bestimmt und be- trug 125-185 um, die Doxorubicin-Beladung betrug 69 %.
Zubereitung 8
Nanopartikel wurden durch ein Doppelemulsionsverfahren hergestellt. 500 mg des Polymers (PLGA 50:50 mit Säure-Endgruppen., η= 0,20 dL/g) wurden in 3 ml Dichlormethan gelöst. 25 mg Doxorubicinhydrochlorid wurden in 2 ml 0,001N HCl gelöst . Die wässrige Lösung wurde in die organische Phase gegossen und die Mischung unter Verwendung eines Ultra-Turrax T-25 (2 min; 22.600 U/min) emulgiert. Die erhaltene primäre Emulsion wurde in 25 ml einer wässrigen l%igen HSA-Lösung gegossen und die Mischung unter Verwendung des Ultra-Turrax T-25 erneut homogenisiert; es folgte ein vier- maliger Durchlauf durch einen Hochdruckhomogenisator (APV Micron Lab 40) bei 600 bar. Dichlormethan wurde durch Rühren der Emulsion bei Raumtemperatur für 3h verdampft. Die erhaltene Nanosuspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert und, nach Zugabe von 5 % (Gew. /Vol.) Mannitol als Gefrierschutzmittel, gefriergetrocknet. Die gefriergetrocknete Formulierung war vollständig resuspen- dierbar. Die Partikelgröße wurde durch PCS bestimmt und betrug 100-200 nm, die Doxorubicin-Beladung betrug 40 %.
Zubereitung 9
Nanopartikel wurden durch ein Hochdruckhomogenisierungs- Lösemittelverdampfungs-Verfahren hergestellt. 250 mg des Polymers (PLA, MG 90.000 - 126.000 Da) und 15.1 mg Cetyl- phosphat wurden in 4 ml Dichlormethan gelöst. 21,8 mg Doxo- rubicinhydrochlorid wurden in 2 ml Wasser gelöst. Die organische und die wässrige Lösung wurden miteinander gemischt und 12 h lang bei Raumtemperatur inkubiert. Anschließend wurde die Mischung in eine gerührte wässrige Lösung (25 ml) , die 1 % HSA als Stabilisator enthielt, gegossen und unter Verwendung eines Ultra-Turrax T-25 (2 min; 19.100 U/min) emulgiert. Anschließend folgte ein viermaliger Durchlauf der resultierenden primären Emulsion durch einen Hochdruckhomogenisator (APV Micron Lab 40) bei 600 bar. Di- chlormethan wurde unter vermindertem Druck (Rotationsverdampfer BUCHI R-200) verdampft. Die resultierende Nano- suspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert und, nach Zugabe von 5 % (Gew. /Vol.) Mannitol als Gefrierschutzmittel, gefriergetrocknet. Die gefriergetrockne- te Formulierung war vollständig resuspendierbar. Die durch PCS bestimmte Partikelgröße betrug 160-240 nm, die Doxorubicin-Beladung betrug 60 %.
Zubereitung 10 Nanopartikel wurden durch ein Doppelemulsionsverfahren hergestellt. 500 mg des Polymers (PLGA 50:50 mit Säure-Endgruppen, η = 0,20 dL/g) wurden in 3 ml Dichlormethan gelöst. 25 mg Doxorubicinhydrochlorid wurden in 2 ml 0,001N HCl gelöst. Die wässrige Lösung wurde in die organische
Phase gegossen und die Mischung unter Verwendung eines UIt- ra-Turrax T-25 (2 min; 19.900 U/min) emulgiert. Die erhaltene primäre Emulsion wurde in 25 ml einer wässrigen l%igen TGPS-Lösung gegossen und die Mischung unter Verwendung des Ultra-Turrax T-25 erneut homogenisiert; es folgte ein viermaliger Durchlauf durch einen Hochdruckhomogenisator (APV Micron Lab 40) bei 600 bar. Dichlormethan wurde durch Rühren der Emulsion bei Raumtemperatur für 3h verdampft . Die erhaltene Nanosuspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert und, nach Zugabe von 5 % (Gew. /Vol.) Mannitol als Gefrierschutzmittel, gefriergetrocknet. Die gefriergetrocknete Formulierung war vollständig resuspen- dierbar. Die Partikelgröße wurde durch PCS bestimmt und betrug 300-380 um, die Doxorubicin-Beladung betrug 45 %.
Zubereitung 11
Nanopartikel wurden durch ein Hochdruckhomogenisierungs- Lösemittelverdampfungs-Verfahren hergestellt. 250 mg des
Polymers (PLA, 0,34 dL/g) und 21,2 mg Kaliumcholesterinsul- fat wurden in 5 ml Chloroform gelöst. 21,8 mg Doxorubicinhydrochlorid wurden in 2 ml Wasser gelöst. Die organische und die wässrige Lösung wurden miteinander gemischt und 12 h lang bei Raumtemperatur inkubiert. Anschließend wurde die Mischung in eine gerührte wässrige Lösung (23 ml) , die 1 % PVA als Stabilisator enthielt, gegossen und unter Verwendung eines Ultra-Turrax T-25 (2 min; 19.100 U/min) emul- giert. Anschließend folgte ein viermaliger Durchlauf der resultierenden primären Emulsion durch einen Hochdruckhomo- genisator (APV Micron Lab 40) bei 600 bar. Dichlormethan wurde unter vermindertem Druck (Rotationsverdampfer BUCHI R-200) verdampft. Die resultierende Nanosuspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert und nach Zugabe von 5 % (Gew. /Vol.) Mannitol als Gefrierschutzmittel ge- friergetrocknet . Die gefriergetrocknete Formulierung war vollständig resuspendierbar. Die durch PCS bestimmte Partikelgröße betrug 500-600 nm, die Doxorubicin-Beladung betrug 89 %.
Zubereitung 12
Nanopartikel wurden durch ein Hochdruckhomogenisierungs- Lösemittelverdampfungs-Verfahren hergestellt. 250 mg des Polymers (PLA, 0,34 dL/g) und 22,9 mg D-α-Tocopherol- succinat wurden in 5 ml Chloroform gelöst. 25,4 mg Doxoru- bicinhydrochlorid wurden in 2 ml Wasser gelöst. Die organische und die wässrige Lösung wurden miteinander gemischt und 12 h lang bei Raumtemperatur inkubiert . Anschließend wurde die Mischung in eine gerührte wässrige Lösung (23 ml), die 0,5 % PVA als Stabilisator enthielt, eingerührt und unter Verwendung eines Ultra-Turrax T-25 (2 min; 23.600 U/min) emulgiert. Es folgte ein viermaliger Durchlauf der resultierenden primären Emulsion durch einen Hochdruckhomo- genisator (APV Micron Lab 40) bei 600 bar. Chloroform wurde unter vermindertem Druck (Rotationsverdampfer BUCHI R-200) verdampft. Die resultierende Nanosuspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert und, nach Zugabe von 5 % (Gew. /Vol.) Mannitol als Gefrierschutzmittel gefriergetrocknet . Die gefriergetrocknete Formulierung war vollständig resuspendierbar. Die durch PCS bestimmte Partikelgröße betrug 224-368 um, die Doxorubicin-Beladung betrug 50 %.
Zubereitung 13
Nanopartikel wurden durch ein Hochdruckhomogenisierungs- Lösemittelverdampfungs-Verfahren hergestellt. 250 mg des Polymers (PLA, 0,34 dL/g) und 14,9 mg Cetylphosphat wurden in 5 ml Chloroform gelöst. 24,5 mg Doxorubicinhydrochlorid wurden in 2 ml Wasser gelöst. Die organische und die wäss- rige Phase wurden miteinander gemischt und 12 h lang bei Raumtemperatur inkubiert . Anschließend wurde die Mischung in eine gerührte wässrige Lösung (23 ml), die 0,5 % PVA als Stabilisator enthielt, gegossen und unter Verwendung eines Ultra-Turrax T-25 (2 min; 23.600 U/min) emulgiert. Dann folgte ein viermaliger Durchlauf der resultierenden primären Emulsion durch einen Hochdruckhomogenisator (APV Micron Lab 40) bei 600 bar. Chloroform wurde unter vermindertem Druck (Rotationsverdampfer BUCHI R-200) verdampft. Die re- sultierende Nanosuspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert und nach Zugabe von 5 % (Gew. /Vol.) Mannitol als Gefrierschutzmittel gefriergetrocknet. Die gefriergetrocknete Formulierung war vollständig resuspendierbar. Die durch PCS bestimmte Partikelgröße betrug 200-250 nm, die Doxorubicin-Beladung betrug 53 %. Zubereitung 14
Nanopartikel wurden durch ein Doppelemulsionsverfahren her- gestellt. 500 mg des Polymers (PLGA 50:50 mit Säure- Endgruppen, η= 0,67 dL/g) wurden in 3 ml Dichlormethan gelöst. 20 mg Doxorubicinhydrochlorid und 45 mg γ-Cyclodex- trin wurden in 3 ml Wasser gelöst . Eine wässrige Lösung wurde in die organische Phase gegossen; die Mischung wurde unter Verwendung eines Ultra-Turrax T-25 (2 min; 23.600
(U/min) emulgiert. Die erhaltene primäre Emulsion wurde in 25 ml einer wässrigen 0,5%igen PVA-Lösung gegossen und die Mischung unter Verwendung eines Ultra-Turrax T-25 erneut homogenisiert; anschließend folgten vier Durchläufe durch einen Hochdruckhomogenisator (APV Micron Lab 40) bei 600 bar. Dichlormethan wurde durch Rühren der Emulsion bei Raumtemperatur für 3 h verdampft. Die resultierende Nano- suspension wurde durch einen gesinterten Glasfilter gefiltert und, nach Zugabe von 5 % (Gew. /Vol.) Mannitol als Ge- frierSchutzmittel, gefriergetrocknet. Die gefriergetrocknete Formulierung war vollständig resuspendierbar. Die durch PCS bestimmte Partikelgröße betrug 200-250 um, die Doxoru- bicin-Beladung betrug 44 %.
2. Tierstudien
Modell-System mit orthotopem Tumor. Ein experimentelles System basierte auf einem intrakranial in Ratten implan- tierten 101/8-Glioblastom. Dieser Tumor wurde zunächst durch lokale Injektion eines α-Dirnethylbenzanthracen(DMBA) - Pellets in das Cerebellυm einer Wistar-Ratte erzeugt und durch kontinuierliche Passagen mittels intracerebraler Implantation erhalten. Für die langfristige Lagerung wurde das Tumorgewebe bei -196 0C gelagert und durch Injektion in die Gehirne der Ratten propagiert .
Das 101/8-Glioblastom wurde früher für die experimentelle Chemotherapie mit Doxorubicin verwendet, wobei die oberflächenmodifizierten Poly(butylcyanoacrylatnanopartikel) mit letzterem beladen waren. Der Tumor hat eine stabile monomorphe Struktur und zeigt das charakteristische histologi- sche Bild aggressiver Glioblastome mit schnellem diffusem Wachstum im Hirnparenchym und einer recht geringen Tendenz zur Nekrose. Die Transplantierbarkeit des Tumors betrug et- wa 100 % und ergab eine vorhersagbare symptomfreie Lebens- spanne nach der Inokulation. Die Transplantation des 101/8- Glioblastoms erfolgte in der vorliegenden Studie unter Anwendung frischen Tumorgewebes. Diese Vorgehensweise wurde gewählt, um die typischen Hauptmerkmale des Stammtumors, insbesondere dessen antigene Struktur und Differentierung, zu erhalten.
Adulte männliche Wistar-Ratten mit einem Gewicht von 200- 250 g wurden 1 Woche lang akklimatisiert und in Gruppen von 5 Ratten in Käfigen untergebracht. Die Ratten erhielten
Standard-Laborfutter und Wasser ad libitum. Für die Tumorimplantation wurden die Tiere durch intraperitoneale Injektionen mit Pentobarbital (50 mg/kg) tief narkotisiert. Durch einen mediosagittalen Einschnitt wurde mit einem Den- talbohrer ein Bohrloch von 1,5 mm Durchmesser an einem 2 mm hinter der rechten Sutura coronalis und 2 mm seitlich der sagittalen Mittellinie gelegenen Punkt erzeugt. Tumormaterial (ungefähr 106 Zellen) aus dem gefrorenen Vorrat wurden auf eine Tuberkulinspritze aufgezogen, die mit einer 21 G- Kanüle verbunden war. Die Spitze der Kanüle wurde 4 mm un- terhalb der Knochenfläche platziert und das Tumorgewebe in den Grund des rechten Seitenventrikels injiziert. Der Schädelschnitt wurde vernäht oder mit Kleber geschlossen. Nach Entwicklung deutlicher klinischer Symptome der Krankheit (gewöhnlich etwa am 14. Tag) wurden die Tiere durch Kohlen- dioxid-Asphyxiation getötet und dann dekapitiert. Das Gehirn wurde unmittelbar danach entfernt. Der Tumor wurde ex- zidiert und mit einem Skalpell zerkleinert; ein Tumorimplantat (5 mg) wurde in das Gehirn neuer Versuchstiere, wie oben beschrieben, inokuliert. Die entsprechenden Koordina- ten wurden bestätigt und das Verfahren durch wiederholte Pilotversuche verfeinert.
Die für die Tierversuche zu verwendenden Nanopartikel wurden auf Basis von niedermolekularem PLGA 50:50 mit Säure- Endgruppen (η = 0,20 dl/g) hergestellt und mit Doxorubicin beladen, wobei Doxorubicinhydrochlorid verwendet wurde. Für die Herstellung der mit Doxorubicin beladenen PLGA-Nanopartikel wurde ein Verhältnis von Wirkstoff zu Polymer von 1:10 verwendet. Die Partikelgröße wurde bestimmt und betrug 144 ± 12 nm, die Doxorubicin-Beladung betrug 75,5 %.
Um mit einem oberflächenaktiven Stoff beschichtete Partikel zu erhalten, wurde die gefriergetrocknete Formulierung in einer wässrigen Innigen Lösung der jeweiligen oberflächenak- tiven Substanz (Pluronic® F68, Pluronic® P85 und Polysorbat 80) resuspendiert. Die erhaltenen Zubereitungen wurden dann 30 min lang unter Rühren inkubiert und innerhalb von 2 h verwendet .
Tumor-tragende Ratten wurden nach dem Zufallsprinzip in sechs Gruppen (n = 10) aufgeteilt und erhielten eine der folgenden Formulierungen: 1) unbehandelte Kontrolle; 2) Do- xorubicin in Salzlösung (DOX); 3) Doxorubicin in lSsiger Pluronic® F68-Lösung (Dox/F68); 4) mit Doxorubicin beladene PLGA-Nanopartikel (DOX-PLGA); 5) mit Doxorubicin beladene PLGA-Nanopartikel mit einem Überzug aus Pluronic® F68 (DOX- PLGA/F68); 6) mit Doxorubicin beladene PLGA-Nanopartikel mit einem Überzug aus Polysorbat 80 (nicht gezeigt); 7) mit Doxorubicin beladene PLGA-Nanopartikel mit einem Überzug aus Pluronic® F85 (Ergebnisse in Fig. 1 nicht dargestellt) .
Diese Zubereitungen wurden intravenös in die Schwanzvene injiziert, und zwar nach dem Regime: 3 x 1,5 mg/kg am Tag 2, Tag 5 und Tag 8 nach Tumorimplantation.
Die Tiere wurden über einen Zeitraum von 100 Tagen nach der Behandlung beobachtet; Tiere, die bis zu diesem Zeitpunkt überlebt hatten, wurden getötet und autopsiert. Die Ergebnisse sind in Fig. 1 dargestellt.
In der Kontrollgruppe starben alle Tiere innerhalb von 19 Tagen nach der Tumorimplantation. Die mit Doxorubicin bela- denen und mit Poloxamer 188 beschichteten PLGA-Nanopartikel verbesserten die Überlebensrate der tumortragenden Ratten erheblich: 40 % der Tiere (4/10) überlebten über einen Zeitraum von 100 Tagen. Lediglich ein Tier der mit Doxorubicin in einer l%igen Lösung von Poloxamer 188 behandelten Gruppe überlebte. Das Nichtvorliegen eines Tumors wurde bei diesen Tieren durch morphologische Untersuchung bestätigt.
Im Gegensatz zu den Resultaten, die mit den mit Doxorubicin beladenen und mit Poloxamer 188 überzogenen PLGA-Nanopar- tikeln erhalten wurden, führte das Überziehen der mit Doxorubicin beladenen Nanopartikel mit Polysorbat 80 oder PIu- ronic® P85 zu keiner Verbesserung der Wirksamkeit des an die Nanopartikel gebundenen Doxorubicins (Daten nicht dar- gestellt) .
In einer zweiten Versuchsreihe wurden Formulierungen, die mit Doxorubicin beladene PLGA-Nanopartikel auf Basis von PLGA mit Säure-Endgruppen (PLGA-COOH) umfassten und TPGS als Stabilisator enthielten (Dox/PLGA-COOH/TPGS; Zubereitung 10) oder mit TPGS beschichtet waren (Dox/PLGA- COOH+TPGS), auf ihre in-vivo-Wirkung bei ein 101/8-Glio- blastom tragenden Ratten untersucht. Letztere Formulierung wurde durch Resuspendieren von Nanopartikeln gemäß Zuberei- tung 5 in 0,5 % TPGS erhalten, bevor die Nanopartikel in die Tiere injiziert wurden.
Die Ergebnisse dieser Versuchsreihe sind in Fig. 2 dargestellt. Es ist ersichtlich, dass die Nanopartikel gemäß Zu- bereitung 10, d.h. Nanopartikel, die TPGS als Stabilisator enthielten, zu einer erheblichen Steigerung der Überlebens- Zeitspanne tumortragender Ratten führte und ein langfristiges Überleben von 20 % der für dieses Experiment verwendeten tumortragenden Ratten erlaubte. Nanopartikel gemäß Zu- bereitung 5, welche vor deren Verwendung mit TPGS überzogen wurden, zeigten keine Wirkung.

Claims

Ansprüche
1. System zur gezielten Wirkstoffzufuhr zur Verabreichung eines pharmakologisch wirksamen Wirkstoffes an das zentrale
Nervensystem eines Säugers über die Blut-Hirn-Schranke, wobei das System zur gezielten Arzneistoffzufuhr Nanoparti- kel aus PoIy(DL-lactid) und/oder Poly(DL-lactid-co-glycolid und wenigstens einen pharmakologisch wirksamen Wirkstoff umfasst, der in den Nanopartikeln absorbiert, an diese adsorbiert und/oder in diese eingearbeitet ist, und wobei das System TPGS enthält oder einen Überzug aus dem oberflächenaktiven Stoff Pluronic 188 aufweist, der auf den mit Wirkstoff beladenen Nanopartikeln abgeschieden ist .
2. System zur gezielten Wirkstoffzufuhr nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass die Nanopartikel Partikel mit einem Durchmesser von weniger als 1000 am, vorzugsweise zwischen 100 und 800 nm und mit größtem Vorzug zwischen 150 und 600 nm umfassen.
3. System zur gezielten Wirkstoffzufuhr nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass es sich bei dem pharmakologisch wirksamen Wirkstoff um ein Therapeutikum oder ein Diagnostikum handelt.
4. System zur gezielten Wirkstoffzufuhr nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, dass das Therapeutikum ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Wirkstoffen, die an synap- tischen und Neuroeffektor-Knotenpunkten wirken; allgemeinen und lokalen Analgetika und Anästhetika; Hypnotika und Seda- tiva; Wirkstoffen für die Behandlung psychiatrischer Störungen wie beispielsweise Depressionen und Schizophrenie; Antiepileptika und Antikonvulsiva; Wirkstoffen zur Behandlung der Huntington-Krankheit, des Alterns und der Alzhei- mer-Krankheit; exzitatorischen Aminosäure-Antagonisten und neurotropen Faktoren und neurogenerativen Mitteln; trophi- schen Faktoren; Wirkstoffen, die zur Behandlung von Traumata des zentralen Nervensystems oder Schlaganfällen vorgesehen sind; Wirkstoffen zur Behandlung von Sucht und Drogen- missbrauch; autakoiden und entzündungshemmenden Wirkstoffen; chemotherapeutischen Mitteln für Parasiten-Infektionen und mikrobiell bedingte Krankheiten; immunosuppressiven Mitteln und Antikrebs-Mitteln; Hormonen und Hormon-Anta- gonisten; Schwermetallen und Schwermetall-Antagonisten; An- tagonisten für nichtmetallische toxische Mittel; zytostatischen Mitteln zur Behandlung von Krebs; diagnostischen Substanzen zur Verwendung in der Nuklearmedizin; ixnmunoaktiven und immunoreaktiven Mitteln; Transmittern und ihren jeweiligen Rezeptor-Agonisten und Rezeptor-Antagonisten, ihren entsprechenden Vorläufern oder Metaboliten; Antibiotika, Antispasmodika, Antihistaminen, Mittel gegen Nausea, ReIa- xantien, Stimulantia, "Sense-" und "Anti-Sense- "Oligo- nukleotiden, Cerebral-Dilatatoren, Psychotropika, gegen Manie gerichtete Mittel, gefäßerweiternde und -verengende Mittel, Antihypertensiva, Mittel zur Migräne-Behandlung, Hypnotika, hyperglykämische oder hypoglykämische Mittel, mineralische oder der Ernährung dienende Mittel, gegen Fettleibigkeit gerichtete Mittel, Anabolika und Antiasthma- tika sowie Mischungen daraus.
5. System zur gezielten Wirkstoffzufuhr nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass es sich bei dem Antikrebs- Mittel um ein antineoplastisches Mittel handelt, welches ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Alkaloiden, alkylierenden Mitteln wie Alkylsulfonaten, Aziridinen,
Ethyleniminen und Methylmelaminen, Stickstofflosten, Nitro- soharnstoffen, Antibiotika und Analoga, vorzugsweise Anthracyclinen, Antimetaboliten wie Analoga der Folsäure, Antagonisten der Folsäure, Purin-Analoga und Pyrimidin- Analoga, Enzymen, Immunmodulatoren, Xxnmuntoxinen, monoklonalen Antikörpern und Platinkomplexen.
6. System zur gezielten Wirkstoffzufuhr nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, dass das Diagnostikum nützlich bei der Diagnose in der Nuklearmedizin und/oder der Strahlentherapie ist .
7. Verfahren zur Herstellung eines Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr zur Verabreichung eines pharmakologisch wirksamen Wirkstoffes an das zentrale Nervensystem eines Säugers über die Blut-Hirn-Schranke, wobei das Verfahren die folgenden Schritte umfasst :
Lösen von PoIy(DL-lactid) und/oder Poly(DL-lactid-co- glycolid) sowie wenigstens eines pharmakologisch wirk- samen Wirkstoffs und wahlweise einer Lipid-Verbindung in einem organischen Lösemittel, um eine organische
Phase zu erhalten;
Gießen der organischen Phase in eine wässrige Lösung, die TPGS enthält; - Emulgieren der Mischung, um eine primäre Emulsion zu erhalten; Homogenisieren der primären Emulsion;
Entfernen des organischen Lösemittels aus der primären Emulsion; und
Filtern der resultierenden Nanosuspension, welche mit Wirkstoff beladene Nanopartikel enthält.
8. Verfahren zur Herstellung eines Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr zur Verabreichung eines pharmakologisch wirksamen Wirkstoffes an das zentrale Nervensystem eines Säugers über die Blut-Hirn-Schranke, wobei das Verfahren die folgenden Schritte umfasst:
Lösen von PoIy(DL-lactid) und/oder Poly(DL-lactid-co- glycolid) sowie wenigstens eines pharmakologisch wirksamen Wirkstoffs und wahlweise einer Lipid-Verbindung in einem organischen Lösemittel, um eine organische Phase zu erhalten;
Gießen der organischen Phase in eine wässrige Lösung, die wahlweise ein Stabilisierungsmittel enthält; Emulgieren der Mischung, um eine primäre Emulsion zu erhalten;
Homogenisieren der primären Emulsion;
Entfernen des organischen Lösemittels aus der primären
Emulsion;
Filtern der resultierenden Nanosuspension, welche mit Wirkstoff beladene Nanopartikel enthält; und
Überziehen der Nanopartikel mit Poloxamer 188.
9. Verfahren nach Anspruch 7 oder 8, dadurch gekennzeichnet, dass die Lipid-Verbindung ausgewählt ist aus der Grup- pe bestehend aus Cetylphosphat, Kaliumcholesterinsulfat und Tocopherolsuccinat .
10. Verfahren zur Herstellung eines Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr zur Verabreichung eines pharmakologisch wirksamen Wirkstoffes an das zentrale Nervensystem eines Säugers über die Blut-Hirn-Schranke, wobei das Verfahren die folgenden Schritte umfasst :
Lösen von PoIy(DL-lactid) und/oder Poly(DL-lactid-co- glycolid) in einem organischen Lösemittel, um eine organische Phase zu erhalten; - Lösen wenigstens eines pharmakologisch wirksamen Wirkstoffs in einer wässrigen Lösung;
Gießen der wässrigen Lösung in die organische Phase; Emulgieren der Mischung, um eine primäre Emulsion zu erhalten; - Gießen der primären Emulsion in eine wässrige TPGS- Lösung;
Homogenisieren der Mischung aus primärer Emulsion und wässriger TPGS-Lösung;
Entfernen des organischen Lösemittels aus der Mischung aus primärer Emulsion und wässriger Lösung eines Stabilisators; und
Filtern der resultierenden Nanosuspension, welche mit Wirkstoff beladene Nanopartikel enthält.
11. Verfahren zur Herstellung eines Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr zur Verabreichung eines pharmakologisch wirksamen Wirkstoffes an das zentrale Nervensystem eines Säugers über die Blut-Hirn-Schranke, wobei das Verfahren die folgenden Schritte umfasst: Lösen von PoIy(DL-lactid) und/oder PoIy(DL-lactid-co- glycolid) in einem organischen Lösemittel, um eine organische Phase zu erhalten;
Lösen wenigstens eines pharmakologisch wirksamen Wirk- Stoffs in einer wässrigen Lösung;
Gießen der wässrigen Lösung in die organische Phase;
Emulgieren der Mischung, um eine primäre Emulsion zu erhalten;
Gießen der primären Emulsion in eine wässrige Lösung eines Stabilisierungsmittels;
Homogenisieren der Mischung aus primärer Emulsion und wässriger Lösung eines Stabilisierungsmittels; Entfernen des organischen Lösemittels aus der Mischung aus primärer Emulsion und wässriger Lösung eines Sta- bilisierungsmittels;
Filtern der resultierenden Nanosuspension, welche mit Wirkstoff beladene Nanopartikel enthält, und Überziehen der Nanopartikel mit Poloxamer 188.
12. Verfahren nach einem der Ansprüche 7 bis 11, dadurch gekennzeichnet, dass das Stabilisierungsmittel ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Polyvinylalkoholen, Serumalbumin, TPGS und γ-Cyclodextrin.
13. Verfahren nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, dass der Polyvinylalkohol ein Molekulargewicht von 30-70 kDa aufweist.
14. Verfahren nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, dass das Serumalbumin humanes Serumalbumin ist.
15. Verfahren nach einem der Ansprüche 7 bis 14, dadurch gekennzeichnet, dass der pharmakologisch wirksame Wirkstoff ein Therapeutikum oder ein Diagnostikum ist.
16. Verfahren nach Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet, dass das Therapeutikum ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Wirkstoffen, die an synaptischen und Neuroeffek- tor-Knotenpunkten wirken; allgemeinen und lokalen Analgetika und Anästhetika; Hypnotika und Sedativa; Wirkstoffen für die Behandlung psychiatrischer Störungen wie beispielsweise Depressionen und Schizophrenie; Antiepileptika und Antikon- vulsiva; Wirkstoffen zur Behandlung der Huntington- Krankheit, des Alterns und der Alzheimer-Krankheit; exzita- torischen Aminosäure-Antagonisten und neurotropen Faktoren und neurogenerativen Mitteln; trophischen Faktoren; Wirkstoffen, die zur Behandlung von Traumata des zentralen Nervensystems oder Schlaganfällen vorgesehen sind; Wirkstoffen zur Behandlung von Sucht und Drogenmissbrauch; autakoiden und entzündungshemmenden Wirkstoffen; chemotherapeutischen Mitteln für Parasiten-Infektionen und mikrobiell bedingte Krankheiten; immunosuppressiven Mitteln und Antikrebs- Mitteln; Hormonen und Hormon-Antagonisten; Schwermetallen und Schwermetall-Antagonisten; Antagonisten für nichtmetallische toxische Mittel; zytostatischen Mitteln zur Behand- lung von Krebs; diagnostischen Substanzen zur Verwendung in der Nuklearmedizin; immunoaktiven und immunoreaktiven Mitteln; Transmittern und ihren jeweiligen Rezeptor-Agonisten und Rezeptor-Antagonisten, ihren entsprechenden Vorläufern oder Metaboliten; Antibiotika, Antispasmodika, Antihistami- nen, Mitteln gegen Nausea, Relaxantien, Stimulantia "Sensβ- 11 und "Anti-Sense-"Oligonukleotiden, Cerebral-Dilatatoren, Psychotropika, gegen Manie gerichtete Mittel, gefäßerweiternde und -verengende Mittel, Antihypertensiva, Mittel zur Migräne-Behandlung, Hypnotika, hyperglykämische oder hy- poglykämische Mittel, mineralische oder der Ernährung die- nende Mittel, gegen Fettleibigkeit gerichtete Mittel, Anabolika und Antiasthmatika sowie Mischungen daraus.
17. Verfahren nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, dass es sich bei dem Antikrebs-Mittel um ein antineoplasti- sches Mittel handelt, welches ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Alkaloiden, alkylierenden Mitteln wie Alkyl- sulfonaten, Aziridinen, Ethyleniminen und Methylmelaminen, Stickstofflosten, Nitrosoharnstoffen, Antibiotika und Analoga, vorzugsweise Anthracyclinen, Antimetaboliten wie Ana- loga der Folsäure, Antagonisten der Folsäure, Purin-Analoga und Pyrimidin-Analoga, Enzymen, Ixnmunmodulatoren, Immunto- xinen, monoklonalen Antikörpern und Platinkomplexen.
18. Verfahren nach Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet, dass das Diagnostikum nützlich bei der Diagnose in der Nuklearmedizin und/oder der Strahlentherapie ist.
19. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass das organische Lösemittel ausge- wählt ist aus der Gruppe bestehend aus Dichlormethan, Chloroform, Ethylacetat und Mischungen daraus.
20. Verfahren nach einem der Ansprüche 7 bis 19, dadurch gekennzeichnet, dass die Nanosuspβnsion nach Zugabe eines Gefrierschutzmittels gefriergetrocknet wird.
21. Verfahren nach Anspruch 20, dadurch gekennzeichnet, dass das Gefrierschutzmittel Mannitol ist.
22. Verfahren nach Anspruch 20 oder 21, dadurch gekenn- zeichnet, dass das Gefrierschutzmittel in einer Menge von 5 % (Gew. /Vol.) zu der Nanosuspension hinzugegeben wird.
23. Verfahren zur Behandlung einer Krankheit oder einer Störung des zentralen Nervensystems eines Säugers, umfas- send die Schritte:
Herstellen von mit Wirkstoff beladenen Nanopartikeln aus PoIy (DL-lactid) und/oder PoIy(DL-lactid-co- glycolid) ;
Überziehen der mit Wirkstoff beladenen PLGA- Nanopartikel mit Poloxamer 188;
Verabreichen der Wirkstoffbeladenen, mit Poloxamer 188 überzogenen Nanopartikel an den Blutkreislauf eines
Säugers; und den Wirkstoff zur Wirkung kommen lassen, so dass er seine pharmakologische Wirkung entfalten kann.
24. Verfahren nach Anspruch 23, dadurch gekennzeichnet, dass der Schritt der Verabreichung die orale oder intravenöse Verabreichung umfasst.
25. Verwendung des Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr nach einem der Ansprüche 1 bis 6 zur Behandlung einer Krankheit oder einer Störung des zentralen Nervensystems eines Säugers .
26. Verwendung des Systems zur gezielten Wirkstoffzufuhr nach einem der Ansprüche 1 bis 6 zur Herstellung eines Medikamentes zur Behandlung einer Krankheit oder einer Störung des zentralen Nervensystems, eines Säugers.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111939151A (zh) * 2020-07-04 2020-11-17 浙江工业大学 一种复合型阿霉素白蛋白纳米粒及其制备方法和应用

Families Citing this family (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8946200B2 (en) * 2006-11-02 2015-02-03 Southwest Research Institute Pharmaceutically active nanosuspensions
US8404850B2 (en) * 2008-03-13 2013-03-26 Southwest Research Institute Bis-quaternary pyridinium-aldoxime salts and treatment of exposure to cholinesterase inhibitors
CN102088963A (zh) * 2008-05-06 2011-06-08 葛兰素集团有限公司 生物活性剂的囊封方法
US8318211B2 (en) 2008-06-16 2012-11-27 Bind Biosciences, Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles comprising vinca alkaloids and methods of making and using same
WO2010005726A2 (en) * 2008-06-16 2010-01-14 Bind Biosciences Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles with mtor inhibitors and methods of making and using same
EA020954B1 (ru) 2008-06-16 2015-03-31 Бинд Терапьютикс, Инк. Загруженные лекарственным средством полимерные наночастицы, фармацевтическая композиция и способ лечения рака
EA014044B1 (ru) * 2008-07-09 2010-08-30 Общество С Ограниченной Ответственностью "Аква-Альянс" Наносомальная лекарственная форма препарата пролонгированного действия для лечения гепатита с (варианты)
US8722706B2 (en) * 2008-08-15 2014-05-13 Southwest Research Institute Two phase bioactive formulations of bis-quaternary pyridinium oxime sulfonate salts
US8309134B2 (en) * 2008-10-03 2012-11-13 Southwest Research Institute Modified calcium phosphate nanoparticle formation
US8563041B2 (en) 2008-12-12 2013-10-22 Bind Therapeutics, Inc. Therapeutic particles suitable for parenteral administration and methods of making and using same
JP2012512175A (ja) 2008-12-15 2012-05-31 バインド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド 治療薬を徐放するための長時間循環性ナノ粒子
DK2509634T3 (en) 2009-12-11 2019-04-23 Pfizer Stable formulations for lyophilization of therapeutic particles
EP2515942B1 (de) 2009-12-15 2020-02-12 Pfizer Inc. Therapeutische polymernanopartikelzusammensetzungen mit hoher glasübergangstemperatur oder copolymeren von hohem molekulargewicht
US9028873B2 (en) * 2010-02-08 2015-05-12 Southwest Research Institute Nanoparticles for drug delivery to the central nervous system
WO2011106702A2 (en) 2010-02-25 2011-09-01 The Johns Hopkins University Sustained delivery of therapeutic agents to an eye compartment
JP6040029B2 (ja) * 2010-09-24 2016-12-07 株式会社フジミインコーポレーテッド 研磨用組成物及び研磨方法
JP5687354B2 (ja) * 2010-11-26 2015-03-18 ユニバーシティ・オブ・ザ・ウィットウォータースランド・ヨハネスブルグＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｏｆ Ｔｈｅ Ｗｉｔｗａｔｅｒｓｒａｎｄ， Ｊｏｈａｎｎｅｓｂｕｒｇ 薬物送達デバイス
MX366228B (es) * 2011-03-25 2019-07-03 Selecta Biosciences Inc Nanoportadores sinteticos de liberacion mediada por osmosis.
WO2013166487A1 (en) 2012-05-04 2013-11-07 Yale University Highly penetrative nanocarriers for treatment of cns disease
GB201209517D0 (en) * 2012-05-29 2012-07-11 Univ Birmingham Nanoparticles
JP6464084B2 (ja) * 2012-07-27 2019-02-06 イズミ テクノロジー，エルエルシー 排出阻害剤およびこれを用いる治療法
HUE045144T2 (hu) * 2012-08-29 2019-12-30 Hoffmann La Roche Véragygát-shuttle
WO2014043618A1 (en) 2012-09-17 2014-03-20 Bind Therapeutics, Inc. Process for preparing therapeutic nanoparticles
CL2012003209A1 (es) * 2012-11-16 2013-04-19 Univ Santiago Chile Metodo de sintesis de nanoparticulas de acido poli (lactico-glicolico) (plga) con pentoxifilina; composicion farmaceutica que comprende nanoparticulas de plga con pentoxifilina; y uso de las nanoparticulas de plga cargada con pentoxifilina en el tratamiento del alivio y prevencion del dolor cronico.
PE20170312A1 (es) 2014-03-14 2017-03-30 Pfizer Nanoparticulas terapeuticas que comprenden un agente terapeutico, y metodos para su elaboracion y uso
CN103893769B (zh) * 2014-04-16 2016-03-23 江西科技师范大学 含聚乙丙交酯靶向高分子药物载体及其制备方法
CN109613177B (zh) * 2014-07-01 2021-08-20 科蒙森斯公司 用于鉴定羊水的诊断组合物
US10758520B1 (en) 2015-05-20 2020-09-01 University Of South Florida Glutathione-coated nanoparticles for delivery of MKT-077 across the blood-brain barrier
HUE057952T2 (hu) 2015-06-24 2022-06-28 Hoffmann La Roche Anti-transzferrin receptor antitestek testreszabott affinitással
RU2595859C1 (ru) * 2015-07-20 2016-08-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" Полимеросодержащее лекарственное средство на основе противоопухолевого препарата этопозида
TWI873952B (zh) 2015-10-02 2025-02-21 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 雙特異性抗‐人類cd20/人類轉鐵蛋白受體抗體及使用方法
AR106189A1 (es) 2015-10-02 2017-12-20 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS BIESPECÍFICOS CONTRA EL A-b HUMANO Y EL RECEPTOR DE TRANSFERRINA HUMANO Y MÉTODOS DE USO
RU2606839C1 (ru) * 2015-10-26 2017-01-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" Лекарственный препарат противотуберкулезного действия на основе D-циклосерина в виде лиофилизата и способ получения лекарственного препарата
US20190105282A1 (en) * 2016-03-23 2019-04-11 Che-Ming Jack Hu Thin-shell polymeric nanoparticles and uses thereof
RU2649743C1 (ru) * 2016-10-24 2018-04-04 Станислав Анатольевич Кедик Жидкая лекарственная форма, содержащая лекарственное вещество, помещенное в биоразлагаемые полимеры
CN106806352B (zh) * 2017-01-26 2019-01-15 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 一种可缓释、靶向应用于神经退行性疾病的纳米药物
US11833256B2 (en) 2017-06-20 2023-12-05 University Of Maryland, Baltimore Selective RARγ ligand-loaded nanoparticles for manipulation of targeted bone growth
RU2675810C1 (ru) * 2017-12-19 2018-12-25 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" Полимерный комплекс для молекулярно-прицельной терапии и способ его получения
US10842755B2 (en) 2018-03-23 2020-11-24 University Of South Carolina Nanoparticles for brain targeted drug delivery
CN108395543B (zh) * 2018-05-31 2020-09-22 华南理工大学 一种改性聚轮烷、基于聚轮烷的载药胶束及其制备方法与应用
US12496279B2 (en) * 2019-04-11 2025-12-16 The Johns Hopkins University Nanoparticles for drug delivery to brain
EP3750524A1 (de) * 2019-06-13 2020-12-16 CAPNOMED GmbH Verzögerte und anhaltende abgabe von antikrebsmitteln
EP3750523A1 (de) * 2019-06-13 2020-12-16 CAPNOMED GmbH System zur abgabe eines wirkstoffes
RU2734710C1 (ru) * 2019-06-14 2020-10-22 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства" (ФГБУН НЦБТМ ФМБА России) Наночастицы на основе биодеградирующих полимеров с инкапсулированными в них противоопухолевыми препаратами
IL299937A (en) * 2020-07-29 2023-03-01 Univ California A chemical cocktail that drives the expansion of myogenic stem cells
CN118252817A (zh) * 2022-12-27 2024-06-28 广东粤港澳大湾区国家纳米科技创新研究院 一种复合物纳米粒及其规模化制备方法
CN119345356B (zh) * 2024-10-22 2025-10-10 深圳大学 一种抗转移纳米药物及其制备方法和应用、一种化疗-光动力联合抗转移诊疗试剂

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0725689B2 (ja) * 1986-10-07 1995-03-22 中外製薬株式会社 顆粒球コロニ−刺激因子を含有する徐放性製剤
WO1995022963A1 (en) * 1994-02-28 1995-08-31 Medinova Medical Consulting Gmbh Drug targeting system, method for preparing same and its use
CA2295177C (en) 1997-06-13 2007-01-09 Medinova Medical Consulting Gmbh Drug targeting system, method of its preparation and its use
US6309663B1 (en) * 1999-08-17 2001-10-30 Lipocine Inc. Triglyceride-free compositions and methods for enhanced absorption of hydrophilic therapeutic agents
US7731947B2 (en) * 2003-11-17 2010-06-08 Intarcia Therapeutics, Inc. Composition and dosage form comprising an interferon particle formulation and suspending vehicle
US20060024248A1 (en) * 2003-03-23 2006-02-02 Combe Incorporated Composition and method employing membrane structured solid nanoparticles for enhanced delivery of oral care actives
WO2004084871A1 (en) * 2003-03-26 2004-10-07 Ltt Bio-Pharma Co., Ltd. Intravenous nanoparticles for targenting drug delivery and sustained drug release
ES2427092T3 (es) * 2003-04-10 2013-10-28 Evonik Corporation Un método para la producción de micropartículas a base de emulsión
WO2004112695A2 (en) 2003-05-20 2004-12-29 Erimos Pharmaceutical Llc Methods and compositions for delivery of catecholic butanes for treatment of obesity
US7728036B2 (en) * 2003-05-20 2010-06-01 Erimos Pharmaceuticals, Llc Methods for delivery of catecholic butanes for treatment of tumors
US20050084456A1 (en) * 2003-10-21 2005-04-21 Liping Tang Functionalized particles
EP1722863B1 (de) * 2003-12-04 2012-02-08 DSM IP Assets B.V. Mikrokapseln mit uv-filter-wirkung udn verfahren zu ihrer herstellung
US20070128289A1 (en) 2005-12-07 2007-06-07 Zhao Jonathon Z Nano-and/or micro-particulate formulations for local injection-based treatment of vascular diseases

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See references of WO2007110152A2 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111939151A (zh) * 2020-07-04 2020-11-17 浙江工业大学 一种复合型阿霉素白蛋白纳米粒及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
WO2007110152A3 (de) 2008-02-21
WO2007110152A2 (de) 2007-10-04
DE102006013531A1 (de) 2007-09-27
BRPI0709352A2 (pt) 2011-07-12
RU2423104C2 (ru) 2011-07-10
CN101410099A (zh) 2009-04-15
IN2008DE08036A (de) 2009-03-20
KR20080111079A (ko) 2008-12-22
WO2007110152A8 (de) 2007-12-13
RU2008140367A (ru) 2010-04-20
US20110293730A1 (en) 2011-12-01
AU2007229738A1 (en) 2007-10-04
JP2009530325A (ja) 2009-08-27
US8003128B2 (en) 2011-08-23
NZ571354A (en) 2011-02-25
MX2008011892A (es) 2008-11-14
US20090263491A1 (en) 2009-10-22
CA2644411A1 (en) 2007-10-04

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