RU2423104C2 - Полилактидные наночастицы - Google Patents

Полилактидные наночастицы Download PDF

Info

Publication number
RU2423104C2
RU2423104C2 RU2008140367/15A RU2008140367A RU2423104C2 RU 2423104 C2 RU2423104 C2 RU 2423104C2 RU 2008140367/15 A RU2008140367/15 A RU 2008140367/15A RU 2008140367 A RU2008140367 A RU 2008140367A RU 2423104 C2 RU2423104 C2 RU 2423104C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
nanoparticles
lactide
poly
pharmacologically active
drug
Prior art date
Application number
RU2008140367/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2008140367A (ru
Inventor
Йорг КРОЙТЕР (DE)
Йорг КРОЙТЕР
Светлана ГЕЛПЕРИНА (RU)
Светлана Гелперина
Ольга МАКСИМЕНКО (RU)
Ольга Максименко
Александр ХАЛАНСКИЙ (RU)
Александр Халанский
Original Assignee
Лтс Ломанн Терапи-Зюстеме Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Лтс Ломанн Терапи-Зюстеме Аг filed Critical Лтс Ломанн Терапи-Зюстеме Аг
Publication of RU2008140367A publication Critical patent/RU2008140367A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2423104C2 publication Critical patent/RU2423104C2/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
    • A61K9/5146—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyamines, polyanhydrides
    • A61K9/5153—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0085—Brain, e.g. brain implants; Spinal cord
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5192—Processes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/06—Anti-spasmodics, e.g. drugs for colics, esophagic dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/08—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for nausea, cinetosis or vertigo; Antiemetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G63/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain of the macromolecule
    • C08G63/02—Polyesters derived from hydroxycarboxylic acids or from polycarboxylic acids and polyhydroxy compounds
    • C08G63/06—Polyesters derived from hydroxycarboxylic acids or from polycarboxylic acids and polyhydroxy compounds derived from hydroxycarboxylic acids
    • C08G63/08—Lactones or lactides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery

Abstract

Изобретение относится к области фармацевтической промышленности, в частности к способу получения системы направленной доставки лекарства для введения фармакологически активного вещества в центральную нервную систему млекопитающих через гематоэнцефалический барьер. Система содержит наночастицы на основе поли(DL-лактида) и/или поли(DL-лактид-согликолида), фармакологически активное вещество, абсорбируемое, адсорбируемое и/или включаемое в наночастицы, и содержит TPGS или имеет покрытие из поверхностно-активного вещества плуроник 188, которое осаждают на наполненные лекарством наночастицы. Описаны способы получения системы направленной доставки лекарства и применение системы направленной доставки лекарства для лечения заболевания или расстройства ЦНС. 9 н. и 11 з.п. ф-лы, 2 ил.

Description

Настоящее изобретение относится к системам направленной доставки фармакологических активных веществ к центральной нервной системе млекопитающих. В частности, настоящее изобретение относится к системам направленной доставки лекарств в виде наночастиц, способных преодолевать гематоэнцефалический барьер млекопитающих. Более точно, настоящее изобретение относится к наполненным лекарством наночастицам на основе полиактидов и/или полиактид-согликолидов, способам получения наполненных лекарством наночастиц на основе полиактидов и/или полиактид-согликолидов и применению наполненных лекарством наночастиц на основе полиактидов и/или полиактид-согликолидов для лечения заболеваний или расстройств центральной нервной системы, в частности лечения нейронного рака.
Для лечения заболеваний или расстройств центральной нервной системы (ЦНС) могут применяться лекарства, действующие на функцию нервной системы. Эти лекарства обычно вводят нуждающемуся в них пациенту обычным пероральным путем и путем инъекции. К сожалению, многие лекарства, такие как аденозин, β-эндорфин, синтетические аналоги эндогенных пептидов, моторных и тормозных аминокислот и трофических факторов вообще не способны преодолеть гематоэнцефалический барьер или преодолевают его в недостаточной степени для обеспечения терапевтического эффекта. Такие лекарства терапевтически эффективны только при введении непосредственно в мозг, например путем прямого введения в ЦНС.
В качестве альтернативы прямому введению в ЦНС в патенте US 6117454 предложен способ переноса лекарственных веществ через гематоэнцефалический барьер млекопитающих, в котором для направленной доставки лекарств или диагностических средств к ЦНС путем преодоления гематоэнцефалического барьера используют наночастицы. Согласно патенту US 6117454 во время или после полимеризации соответствующих мономеров, таких как цианакрилат добавляют лекарство, которое включают в получаемые полибутилцианакрилатные наночастицы или адсорбируют на их поверхность. Как полагают, эти комплексы наночастиц и лекарства способны преодолевать гематоэнцефалический барьер и направленно доставлять лекарства к ЦНС, если они покрыты соответствующим поверхностно-активным веществом. Полиоксиэтилен 20 сорбитанмонолаурат (Tween® 20), полиоксиэтилен 20 сорбитанмонопальмитат (Tween® 40), полиоксиэтилен 20 сорбитанмоностеарат (Tween® 60), полиоксиэтилен 20 сорбитанмоноолеат (Tween® 80) и их смеси заявлены в качестве соответствующих поверхностно-активных веществ, позволяющих наполненным лекарством полибутилцианакрилатным наночастицам пересекать гематоэнцефалический барьер.
В данном патенте указано, что в целом любое лекарство может быть включено в покрытые поверхностно-активным веществом наночастицы или связано с ними и доставлено к головному мозгу без необходимости изменения структуры лекарства. Таким образом, в US 6117454 предложен первый универсальный способ направленной доставки лекарства к ЦНС путем преодоления гематоэнцефалического барьера.
Обеспокоенность вероятностью токсичных побочных эффектов поверхностно-активных веществ, используемых для покрытия получаемых полибутилцианакрилатных наночастиц, и желание упростить процесс получения наполненных лекарством наночастиц привели к созданию упрощенного и потенциально менее токсичного способа получения наночастиц, описанного в заявке WO 98/56361.
Согласно идее WO 98/56361 поверхностно-активные вещества не требуются, если наночастицы получают с использованием декстрана 12.000 или полисорбата 85 (полиоксиэтилен 20 сорбитантриолеата; Tween® 85) в качестве стабилизаторов во время полимеризации мономеров бутилцианакрилата. Было доказано, что даларгин, адсорбируемый на стабилизированные полибутилцианакрилатные наночастицы, способен преодолевать гематоэнцефалический барьер, а амитриптилин, адсорбируемый на стабилизированные полисорбатом 85 наночастицы, накапливается в головном мозге в более высоких концентрациях, чем амитриптилин как таковой.
Тем не менее, по-прежнему существует потребность в альтернативных системах наполненных лекарством наночастиц для направленной доставки лекарств к ЦНС млекопитающих через гематоэнцефалический барьер с целью улучшения одного или нескольких из следующих показателей, включающих эффективность, специфичность, токсичность или простоту получения.
В связи с этим в основу настоящего изобретения положена задача создания усовершенствованной системы направленной доставки лекарства для введения фармакологически активного вещества в центральную нервную систему млекопитающего через его гематоэнцефалический барьер.
Эта задача решена с помощью система направленной доставки лекарства, содержащей наночастицы на основе поли(DL-лактида) (PLA) и/или поли(DL-лактид-согликолида) (PLGA), в которой фармакологически активное вещество абсорбируют, адсорбируют и/или включают в наночастицы, а наночастицы содержат TPGS или имеют покрытие из поверхностно-активного вещества полоксамер 188, которое осаждают на наполненные лекарством наночастицы.
Подразумевается, что используемый в описании термин "наполненные лекарством наночастицы" относится к наночастицам, содержащим фармакологически активное вещество. Фармакологически активным веществом может являться терапевтическое средство или диагностическое средство. Следовательно, "наполненные лекарством наночастицы" согласно изобретению содержат по меньшей мере одно терапевтическое средство и/или по меньшей мере одно диагностическое средство, абсорбируемое, адсорбируемое или включаемое в упомянутые наночастицы.
Используемый в описании термин "гематоэнцефалический барьер" относится к гематоэнцефалическому барьеру как таковому, т.е. эндотелию сосудов головного мозга, базальной мембране и глиальным клеткам. Гематоэнцефалический барьер служит для регулирования поступления веществ в головной мозг. Используемый в описании термин "гематоэнцефалический барьер" также относится к гематоспинномозговому барьеру и гематоретинальному барьеру.
Полилактиды (PLA), также называемые полимолочными кислотами, являются сложными полиэфирами на основе молочной кислоты. Полилактиды являются полиоксикислотами. Они являются биологически совместимыми и поддающимися биологическому разложению.
Свойства полилактидов главным образом зависят от их молекулярной массы, степени кристаллизации и доли сополимеров, если это применимо. С увеличением молекулярной массы полилактидов повышается температура их перехода в стеклообразное состояние, температура плавления, прочность при растяжении и модуль упругости, но уменьшается относительное удлинение при разрыве.
Полилактиды могут быть получены методом полимеризации лактида с раскрытием цикла. Полимеризацию с раскрытием цикла осуществляют при температуре от 140 до 180°С в присутствии катализатора на основе октоата олова. Этим способом можно легко получить Полилактиды с высокой молекулярной массой.
Кроме того, высокомолекулярные и чистые полилактиды можно получать непосредственно из молочной кислоты путем так называемой поликонденсации.
Полилактидсогликолиды (PLGA) являются поддающимися биологическому разложению полимерами, которые состоят из молочной кислоты, связанной с гликолевой кислотой, соответствующие процентные концентрации которых оказывают основное влияние на скорость высвобождения лекарства. Соотношение лактида и гликолида может составлять от 90:10 до 10:90, предпочтительно от 20:80 до 80:20, более предпочтительно от 40:60 до 60:40 и наиболее предпочтительно 50:50. Лактид является оптически активным, при этом изомеры D и L могут присутствовать в любых пропорциях, начиная с соотношения чистый D-лактид : чистый L-лактид, при этом содержание рацематов составляет 50% D-лактида и 50% L-лактида.
Полоксамеры являются неионными блок-сополимерами полиоксиэтилена и полиоксипропилена с общей формулой HO(C2H4O)а(-C3H6O)b(C2H4O)aH. Существуют их различные виды, от жидких до твердых. Полоксамеры используют в качестве эмульгаторов, солюбилизаторов, поверхностно-активных веществ и увлажняющих средств для антибиотиков.
Полоксамер 188 (Pluronic® F68 (BASF Corp.)) является дифункциональным блок-сополимерным поверхностно-активным веществом с концевыми основными гидроксильными группами. Он представляет собой неионное, относительно нетоксичное поверхностно-активное вещество. Полоксамер 188 имеет среднюю молекулярную массу 8400, вязкость 1000 сПз при 77°С, точку помутнения (при водосодержании 10%)>100°С и показатель гидрофильно-липофильного баланса>24.
Полоксамер 185 (Pluronic® P65 (BASF Corp.)) является дифункциональным блок-сополимерным поверхностно-активным веществом с концевыми основными гидроксильными группами. Он представляет собой неионное, относительно нетоксичное поверхностно-активное вещество. Pluronic® P65 имеет среднюю молекулярную массу 3400, вязкость 180 сПз при 60°С, точку помутнения (при водосодержании 10%) 80-84°С и показатель гидрофильно-липофильного баланса 12-18.
Pluronic® P85 (BASF Corp.), также именуемый полоксамером 235, является дифункциональным блок-сополимерным поверхностно-активным веществом с концевыми основными гидроксильными группами. Он представляет собой неионное, относительно нетоксичное поверхностно-активное вещество. Pluronic® P85 имеет среднюю молекулярную массу 4600, вязкость 310 сПз при 60°С, точку помутнения (при водосодержании 10%) 83-89°С и показатель гидрофильно-липофильного баланса 12-18.
Полисорбат 80 (полиоксиэтилен-сорбитан-моноолеат, Tween® 80) является неионным поверхностно-активным веществом. Полисорбат 80 имеет среднюю молекулярную массу 1300, вязкость 375-480 мПа·с при 25°С и показатель гидрофильно-липофильного баланса 14-16.
TPGS (D-α-токоферолполиэтиленгликоль 1000 сукцинат) является растворимым в воде производным d-α-токоферолсукцината. TPGS применяют в качестве растворимой в воде формы витамина Е для лиц, страдающих синдромами нарушенной абсорбции жира, такими как детский хронический холестаз. Его также применяют в качестве усилителя абсорбции и биологической доступности ампренавира, являющегося нерастворимым в воде ингибитором протеазы ВИЧ, и растворимых в жирах витаминов, таких как витамин D. TPGS синтезируют путем эстерификации d-α-токоферолсукцината полиэтиленгликолем (ПЭГ) 1000 (молекулярная масса ПЭГ 1000 составляет примерно 1000 дальтон). Его молекулярная масса составляет 1513 дальтон. Это бледно-желтое воскообразное твердое амфипатическое и гидрофильное вещество. Фармакокинетика TPGS еще выясняется. После приема внутрь TPGS более эффективно абсорбируется из просвета тонкой кишки, чем другие формы витамина Е. Механизм его всасывания в кишечные клетки остается неясным. С учетом своей амфипатической природы (наличия как гидрофильных, так и липофильных окончаний) TPGS образует собственные мицеллы, и для этого не требуются соли желчных кислот. TPGS способен усиливать абсорбцию липофильных лекарств, если он входит в состав этих лекарств. Кроме того, повышение пероральной биологической доступности некоторых лекарств при их одновременном введении с TPGS может частично происходить вследствие ингибирования Р-гликопротеина в кишечнике.
Наполненные лекарством наночастицы на основе PLA и наночастицы на основе PLGA согласно изобретению могут использоваться для направленной доставки лекарства через гематоэнцефалический барьер к центральной нервной системе и для лечения заболеваний или расстройств центральной нервной системы или изготовления лекарственного средства для лечения заболеваний или расстройств центральной нервной системы.
На фиг.1 показана диаграмма, иллюстрирующая выживаемость крыс с внутричерепной 101/8 глиобластомой после химиотерапии различными препаратами наночастиц, содержащими доксорубицин.
На фиг.2 показана диаграмма, иллюстрирующая выживаемость крыс с внутричерепной глиобластомой 101/8 после химиотерапии различными препаратами наночастиц, содержащими доксорубицин и TPGS.
Наполненные лекарством наночастицы на основе PLA и наночастицы на основе PLGA согласно изобретению могут быть получены а) методом гомогенизации под высоким давлением - испарения растворителя или b) методом двойной эмульсии (водомасляной эмульсии в воде).
Метод гомогенизации под высоким давлением испарения растворителя
Обычно полимер и лекарство растворяют в органическом растворителе. Эту органическую фазу медленно вливают в водный раствор стабилизатора с одновременным помешиванием. Затем смесь эмульгируют с использованием высокоскоростного гомогенизатора сдвигового типа. Затем полученную первичную эмульсию под высоким давлением пропускают через гомогенизатор высокого давления. Органический растворитель удаляют путем медленного испарения при комнатной температуре и нормальном давлении с одновременным помешиванием или путем быстрого испарения при пониженном давлении. При этом происходит затвердевание нанокапель в водной системе.
Полученную наносуспензию фильтруют через фильтр из пористого стекла. Для хранения добавляют криозащитный агент, предпочтительно 5 мас./об.% маннитола. Затем суспензию разливают по пробиркам, замораживают при температуре -35°С и впоследствии подвергают сублимационной сушке.
Если при получении системы направленной доставки лекарства в качестве эмульгаторов и/или противоионов необходимо использовать дополнительные соединения, такие как цетилфосфат, холестериловый сульфат калия или токоферолсукцинат, полимер и липидное соединение делают растворимыми в органическом растворителе и растворяют лекарство в воде. Органический и водный растворы смешивают и выдерживают при комнатной температуре. Затем смесь вливают в перемешиваемый водный раствор, содержащий стабилизатор, после чего подвергают дальнейшей обработке, как это описано выше.
Метод двойной эмульсии
Обычно полимер растворяют в органическом растворителе, а лекарство растворяют в воде. К органической фазе добавляют водный раствор. Смесь эмульгируют. Полученную водомасляную эмульсию добавляют к водному раствору стабилизатора и затем дополнительно эмульгируют. Полученную грубую эмульсию пропускают через гомогенизатор высокого давления. Чтобы получить стабильную водомасляную эмульсию в воде, стадию гомогенизации повторяют несколько раз. Затем органический растворитель удаляют путем медленного испарения при комнатной температуре и нормальном давлении.
Перед добавлением раствора к органической фазе лекарство и дополнительный эмульгатор, такой как γ-циклодекстрин, необязательно растворяют в воде.
Полученную наносуспензию фильтруют через фильтр из пористого стекла. Для хранения добавляют криозащитный агент и разливают наносуспензию по пробиркам, замораживают и впоследствии подвергают сублимационной сушке.
Полученные составы на основе наночастиц необходимо испытать на возможность повторного получения суспензии, определить их гранулометрический состав, наполнение лекарством (теоретическое) и содержание лекарства.
Подразумевается, что, хотя в подробном описании и конкретных примерах раскрыты предпочтительные варианты осуществления изобретения, они приведены лишь для наглядности, поскольку из описания и приложенных чертежей, а также формулы изобретения для специалиста в данной области техники станут очевидными различные изменения и усовершенствования, не выходящие за пределы существа и объема изобретения.
Предложенная в изобретении система направленной доставки лекарства содержит наночастицы на основе поли(DL-лактида) и/или поли(DL-лактид-согликолида), одно фармакологически активное вещество, а также содержит TPGS или имеет покрытие из поверхностно-активного вещества, осажденное на наполненные лекарством наночастицы, при этом поверхностно-активным веществом является полоксамер 188.
В одном из вариантов осуществления наночастицы системы направленной доставки лекарства имеют диаметр менее 1000 нм, предпочтительно от 100 до 800 нм, наиболее предпочтительно от 130 до 160 нм.
Наночастицы на основе PLA и/или PLGA согласно настоящему изобретению могут быть наполнены практически любым фармакологически активным веществом с целью введения упомянутого фармакологически активного вещества, т.е. терапевтического средства или диагностического средства в ЦНС млекопитающих через гематоэнцефалический барьер.
Терапевтическое средство может быть выбрано из группы, включающей лекарства, действующие на синаптические и нейроэффекторные соединительные участки; обезболивающие и анестезирующие средства общего и местного действия; снотворные средства и седативные средства; лекарства для лечения психиатрических расстройств, таких как депрессия и шизофрения; антиэпилептические средства и противосудорожные средства; лекарства для лечения болезни Гентингтона, старения и Болезни Альцгеймера; антагонисты и нейротропные факторы моторных аминокислотных рецепторов и нейрорегенеративные средства; трофические факторы; лекарства для лечения повреждения ЦНС или нарушения мозгового кровообращения; лекарства для лечения привыкания и злоупотребления лекарственными средствами; физиологически активные вещества и противовоспалительные лекарства; хемиотерапевтические средства против паразитарных инфекций и микробных заболеваний; иммунодепрессивные средства и противораковые лекарства; гормоны и антагонисты гормонов; тяжелые металлы и антагонисты тяжелых металлов; антагонисты неметаллических токсичных веществ; цитостатики для лечения рака; диагностические вещества для применения в медицинской радиологии; иммуноактивные и иммунореактивные средства; медиаторы и их соответствующие агонисты и антагонисты рецепторов, их соответствующие предшественники или метаболиты; антибиотики, антиспазматические средства, антигистаминные средства, средства против рвоты, релаксанты, стимуляторы, "смысловые" и "антисмысловые" олигонуклеотиды, средства для расширения сосудов головного мозга, психотропные средства, противоманиакальные средства, сосудорасширяющие и сосудосуживающие средства, антигипертензивные средства, средства против мигрени, снотворные средства, гипер- или гипогликемические средства, минеральные или питательные добавки, лекарства против ожирения, анаболические средства и противоастматические средства и их смеси.
Предпочтительными терапевтическими средствами являются противораковые лекарства, предпочтительно противоопухолевые средства. Противоопухолевые средства могут быть выбраны из группы, включающей алкалоиды, алкилирующие средства, такие как алкилсульфонаты, азиридины, этиленимины и метилмеламины, азотистые иприты, нитрозомочевины, антибиотики и аналоги, предпочтительно антрациклины, антиметаболиты, такие как аналоги фолиевой кислоты, антагонисты фолиевой кислоты, аналоги пурина и аналоги пиримидина, ферменты, иммуномодулирующие средства, иммунотоксины, моноклональные антитела и комплексы платины.
Особо предпочтительное противоопухолевое средство может быть выбрано из группы, включающей 9-аминокамптотецин, доцетаксел, эктеинаспидины, этопозид, иринотекан, паклитаксел, рубитекан, тенипозид, топотекан, винбластин, винкристин, виндезин, бусульфан, импросульфан, пипосульфан, карбокуон, уредепа, альтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид, хлорамбуцил, хлорнафазин, циклофосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлорэтамин, хлористоводородный мехлорэтаминоксид, мелфалан, новэмбихин, перфосфамид, фенестерин, преднимустин, трихлорметин, трофосфамид, урациловый иприт, кармустин, хлорзотоцин, фотэмустин, ломустин, нимустин, ранимустин, дакарбазин, манномустин, митобронитол, митолактол, пипоброман, темозоломид, аклациномицины, антрамицин, азасерин, блеомицины, кактиномицин, карубицин, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, 6-диазо-5-оксо-Lнорлейцин, доксорубицин, эпирубицин, идарубицин, меногарил, митомицины, микофенольная кислота, ногаламицин, оливомицины, пеплеомицин, пирарубицин, пликамицин, порфиромицин, пуромицин, стрептонигрин, стрептозоцин, TNP-470, туберцидин, вальрубицин, зиностатин, зорубицин, деноптерин, эдатрексат, метотрексат, нолатрексед, пеметрексед, пиритрексим, птероптерин, ралитрексед, триметрексат, кладрибин, флударабин, бмеркаптопурин, тиампирин, тиогуанин, тиазофурин, антитабин, азацитидин, 6-азауридин, капецитабин, кармофур, цитарабин, децитабин, доксифлуридин, эмитефур, эноцитабин, флоксуридин, фторурацил, гемцитабин, тегафур, Lаспарагиназу, ранпирназу, бропиримин, α-интерферон, γ-интерферон, интерлейкин-2, лентинан, пропагерманиум, PSK®, рокинимекс, сизофиран, убенимекс, денилейкиндифтитокс, алемтузумаб, эдреколомаб, гемтузумабозогамицин, ибритумомабтиуксетан, ритуксимаб, тоситумомаб131I, трастузамаб, карбоплатин, цисплатин, лобаплатин, мибоплатин, оксалиплатин, амсакрин, триоксид мышьяка, бисантрен, дефосфамин, демеколцин, диазикуон, эфлорнитрин, ацетат эллиптиния, этоглуцид, фенретинид, флавопиридол, нитрат галлия, гидроксимочевина, иматиниб, лиарозол, лонидамин, милтефозин, митогуазон, митоксантрон, мопидамол, нитракрин, пентостатин, фенамет, 2-этилгидразид подофиллиновой кислоты, прокарбазин, разоксан, собузоксан, спирогерманий, тенуазоновую кислоту, тирапазамин, тиразикуон и уретан.
Система направленной доставки лекарства согласно изобретению может быть получена методом гомогенизации под высоким давлением испарения растворителя или методом двойной эмульсии.
Предпочтительный способ получения системы направленной доставки лекарства, содержащей наночастицы на основе поли(DL-лактида) и/или поли(DL-лактид-согликолида), которые содержат TPGS, включает стадии, на которых:
делают растворимым поли(DL-лактид) и/или поли(DL-лактид-согликолид), по меньшей мере, одно фармакологически активное вещество и необязательно липидное соединение в органическом растворителе с целью получения органической фазы,
вливают органическую фазу в водный раствор, содержащий TPGS,
эмульгируют смесь, чтобы получить первичную эмульсию,
гомогенизируют первичную эмульсию,
удаляют органический растворитель из первичной эмульсии и
фильтруют полученную наносуспензию, содержащую наполненные лекарством наночастицы.
Другой предпочтительный способ получения системы направленной доставки лекарства, содержащей наночастицы на основе поли(DL-лактида) и/или поли(DL-лактид-согликолида), которые содержат TPGS, включает стадии, на которых:
делают растворимым поли(DL-лактид) и/или поли(DL-лактид-согликолид) в органическом растворителе с целью получения органической фазы,
растворяют, по меньшей мере, одно фармакологически активное вещество в водном растворе,
вливают водный раствор в органическую фазу,
эмульгируют смесь, чтобы получить первичную эмульсию,
вливают первичную эмульсию в водный раствор TPGS,
гомогенизируют смесь первичной эмульсии и водного раствора TPGS,
удаляют органический растворитель из смеси первичной эмульсии и водного раствора стабилизатора,
фильтруют полученную наносуспензию, содержащую наполненные лекарством наночастицы.
Предпочтительный способ получения системы направленной доставки лекарства, содержащей наполненные лекарством наночастицы на основе PLA и/или PLGA, покрытые полоксамером 188, включает стадии, на которых:
делают растворимым поли(DL-лактид) и/или поли(DL-лактид-согликолид), по меньшей мере, одно фармакологически активное вещество и необязательно липидное соединение в органическом растворителе с целью получения органической фазы,
вливают органическую фазу в водный раствор, необязательно содержащий стабилизатор,
эмульгируют смесь, чтобы получить первичную эмульсию,
гомогенизируют первичную эмульсию,
удаляют органический растворитель из первичной эмульсии,
фильтруют полученную наносуспензию, содержащую наполненные лекарством наночастицы, и
покрывают наночастицы полоксамером 188.
Другой предпочтительный способ получения системы направленной доставки лекарства, содержащей наполненные лекарством наночастицы на основе PLA и/или PLGA, покрытые полоксамером 188, включает стадии, на которых:
делают растворимым поли(DL-лактид) и/или поли(DL-лактид-согликолид) в органическом растворителе с целью получения органической фазы,
растворяют, по меньшей мере, одно фармакологически активное вещество в водном растворе,
вливают водный раствор в органическую фазу,
эмульгируют смесь, чтобы получить первичную эмульсию,
вливают первичную эмульсию в водный раствор стабилизатора,
гомогенизируют смесь первичной эмульсии и водного раствора стабилизатора,
удаляют органический растворитель из смеси первичной эмульсии и водного раствора стабилизатора,
фильтруют полученную наносуспензию, содержащую наполненные лекарством наночастицы, и
покрывают наночастицы полоксамером 188.
Предпочтительные диагностические терапевтические средства, в частности, противоопухолевые средства для получения системы направленной доставки лекарства согласно изобретению, перечислены выше.
Предпочтительные органические растворители для получения системы направленной доставки лекарства согласно изобретению выбирают из группы, включающей дихлорметан и хлороформ. В качестве растворителя для получения наночастиц на основе PLA и/или PLGA также может использоваться этилацетат при условии, что необязательный стабилизатор растворим в этилацетате.
Также дополнительно могут использоваться смеси дихлорметана и этилацетата.
Предпочтительное липидное соединение выбирают из группы, включающей цетилфосфат, холестериловый сульфат калия или токоферолсукцинат.
Предпочтительными стабилизаторами являются эмульгаторы, поверхностно-активные вещества или противоионы. Предпочтительные стабилизаторы выбирают из группы, включающей поливиниловые спирты, сывороточные альбумины, γ-циклодекстрин и токоферолполиэтиленгликоль 1000 сукцинат (TPGS), при этом поливиниловые спирты предпочтительно имеют молекулярную массу 30-70 килодальтон, а особо предпочтительным сывороточным альбумином является человеческий сывороточный альбумин.
С целью хранения получаемая наносуспензия наполненных лекарством наночастиц может быть подвергнута сублимационной сушке до нанесения покрытия из полоксамера 188. Предпочтительно до сублимационной сушки в наносуспензию добавляют криозащитный агент. Применимым криозащитным агентом является маннитол, который предпочтительно вводят в наносуспензию в количестве 5 мас./об.%.
Наполненные лекарством наночастицы покрывают раствором полоксамера 188 предпочтительно в растворе и предусматривают достаточное время, чтобы поверхностно-активное вещество покрыло наполненные лекарством наночастицы.
Система направленной доставки лекарства для введения фармакологически активного вещества в центральную нервную систему млекопитающих через гематоэнцефалический барьер, содержащая наночастицы поли(DL-лактида) и/или поли(DL-лактид-согликолида), терапевтическое средство и TPGS или покрытие из поверхностно-активного вещества полоксамер 188, осажденное на наполненные лекарством наночастицы, может применяться для лечения заболеваний и расстройств центральной нервной системы млекопитающих. Система направленной доставки лекарства особо применима для введения фармакологически активных веществ, обладающих действием на центральную нервную систему, но не способных преодолевать гематоэнцефалический барьер млекопитающих, без их модификации или связывания с носителем.
Система направленной доставки лекарства согласно изобретению особо применима для лечения нейронных раков, поскольку она способна переносить противоопухолевые средства через гематоэнцефалический барьер и направленно доставлять эти противораковые лекарства к ЦНС.
Систему направленной доставки лекарства согласно изобретению вводят таким образом, чтобы она могла попасть в кровоток, за счет чего лекарство достигает гематоэнцефалического барьера и преодолевает его. Предпочтительно систему направленной доставки лекарства согласно изобретению вводят перорально или путем инъекции, наиболее предпочтительно путем внутривенной инъекции.
Примеры
1. Получение составов из наночастиц
У компании Absorbable Polymers (США) были приобретены различные сорта полимера Lactel®, включавшие поли(DL-лактид) (PLA) и поли(DL-лактид-согликолид) (PLGA); компания Sicor (Po, Италия) любезно предоставила гидрохлорид доксорубицина; у компании Sigma были приобретены цетилфосфат, холестериловый сульфат калия, поливиниловый спирт (ПВС) (молекулярная масса 30-70 килодальтон) и человеческий сывороточный альбумин (ЧСА); D-α-токоферолполиэтиленгликоль 1000 сукцинат (TPGS) был приобретен у компании Eastman Chemical Company (США).
Наполненные лекарством наночастицы на основе PLA и наночастицы на основе PLGA получили методом гомогенизации под высоким давлением - испарения растворителя или методом двойной эмульсии.
При получении методом гомогенизации под высоким давлением - испарения растворителя полимер и лекарство обычно растворяли в дихлорметане. Эту органическую фазу медленно вливали с одновременным помешиванием в водный раствор стабилизатора (ПВС или ЧСА). Смесь эмульгировали с использованием высокоскоростного гомогенизатора сдвигового типа (Ultra-Turrax T-25 (IKA)). Затем полученную первичную эмульсию пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40; Gaulin GmbH, Germany) под давлением 400 бар. Органический растворитель удалили путем медленного испарения при комнатной температуре и нормальном давлении с одновременным помешиванием (в течение 3 часов) или путем быстрого испарения при пониженном давлении (в роторном испарителе BUCHI R-200). При этом происходило затвердевание нанокапель в водной системе. Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и добавили 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Затем наносуспензию разлили по пробиркам, заморозили при температуре -35°С и подвергли сублимационной сушке.
В качестве эмульгаторов и/или противоионов в некоторых препаратах использовали липидные соединения, такие как цетилфосфат, холестериловый сульфат калия или токоферолсукцинат.В этом случае полимер и липидный компонент сделали растворимыми в органическом растворителе (дихлорметане или хлороформе) и растворили лекарство в воде. Органический и водный растворы смешали и выдерживали в течение 12 часов при комнатной температуре. Затем смесь влили в перемешиваемый водный раствор (25 мл), содержавший стабилизатор, после чего подвергли дальнейшей обработке, как это описано выше.
При получении методом двойной эмульсии полимер (500 мг) обычно растворяли в дихлорметане (5 мл) (в течение 1 часа с магнитным перемешиванием). Лекарство (50 мг) растворили в воде (2 мл). Водный раствор по каплям добавили в органическую фазу. Смесь эмульгировали с использованием Ultra-Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 19 500 об/мин). Полученную водомасляную эмульсию добавили в 25 мл 1% водного раствора стабилизатора (ПВС, HAS или TGPS) и затем эмульгировали с использованием Ultra-Turrax Т-25. Затем полученную грубую эмульсию пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40) под давлением 600 бар. Стадию гомогенизации повторили несколько раз с целью получения стабильных водомасляных эмульсий в воде. Органический растворитель удалили из водомасляной эмульсии в воде путем медленного испарения при комнатной температуре и нормальном давлении (в магнитном перемешивающем устройстве в течение 3 часов). Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и добавили 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Затем эмульсию разлили по пробиркам, заморозили при температуре -35°С и подвергли сублимационной сушке.
Стандартным растворителем, используемым при получении наночастиц на основе PLA/ PLGA, является дихлорметан. Тем не менее, также может использоваться этилацетат или смеси дихлорметана и этилацетата. Однако некоторые противоионы не растворимы в этилацетате. В этих случаях этилацетат неприемлем в качестве растворителя для получения наночастиц на основе PLA/PLGA.
Полученные составы испытали на возможность повторного получения суспензии, гранулометрический состав, наполнение лекарством (теоретическое) и содержание лекарства.
Полученный состав на основе наночастиц считался применимым, если после восстановления водой подвергнутых сублимационной сушке наночастиц получали однородную и стабильную коллоидную систему. Возможность повторного получения суспензии наночастиц оценивали визуально. Для этого содержимое пробирки с подвергнутым сублимационной сушке составом восстанавливали водой до первоначального объема (2 мл) и слегка встряхивали пробирку в течение 2-4 мин. Применимые восстановленные составы выглядели как опалесцирующая жидкость без заметных агломератов или осадка. Образцы, содержавшие заметные агломераты или осадок, отбраковывали.
Методом фотокорреляционной спектроскопии (PCS) определили размер наночастиц, для чего аликвоту восстановленного состава (50 µл) ввели в пробирку нанокалибратора с 3 мл воды двойной дистилляции. Пробирку встряхнули и затем поместили в нанокалибратор Coulter N4MD (производства компании Coulter Electronics, Великобритания). Использовали следующие рабочие параметры:
угол рассеяния: 90°
температура: 25°
вязкость: 0,01 пуаз
показатель преломления: 1,333.
После стадии фильтрации или сублимационной сушки состава после восстановления было измерено наполнение лекарством реакционной смеси. С целью определения наполнения лекарством наночастицы отделили методом ультрафильтрации и затем методом спектрофотометрии осуществили количественное исследование свободного лекарства в фильтрате.
Для определения наполнения лекарством состава наночастиц содержимое пробирки с подвергнутым сублимационной сушке составом восстановили в 1 мл воды; в фильтрующую микроцентрифугу (Microcon 30 килодальтон, с ультратонким фильтром) поместили 400 µл состава и отделили наночастицы путем центрифугирования со скоростью 16000 об/мин в течение 50 мин. 100 µл чистого фильтрата поместили в кювету с 3 мл воды двойной дистилляции и с помощью спектрофотометра (Spectronics Heλios, Thermospectronic, Великобритания) измерили на волне 480 нм абсорбцию воды. Концентрацию лекарства в образце определили с использованием соответствующей калибровочной кривой.
Относительное наполнение лекарством (в процентах от общего количества лекарства) вычислили с помощью следующей формулы:
Figure 00000001
,
в которой Ci означает исходную концентрацию лекарства в полимеризационной среде (мг/мл);
Cf означает концентрацию лекарства в фильтрате (мг/мл).
После полного растворения подвергнутого сублимационной сушке состава путем количественного исследования определили содержание лекарства (мг/пробирка). Концентрацию лекарства в растворе измерили методом спектрофотометрии с использованием калибровочной кривой.
Для определения содержания лекарства содержимое пробирки с подвергнутым сублимационной сушке составом растворили в 2 мл диметисульфоксида (в течение 3 часов при комнатной температуре); 100 µл этого раствора поместили в кювету спектрофотометра с 3 мл воды двойной дистилляции и с помощью спектрофотометра (Spectronics Heλios, Thermospectronic, Великобритания) на волне 480 нм измерили абсорбцию воды. Концентрацию лекарства в образце определили с использованием соответствующей калибровочной кривой.
Препарат 1
Наночастицы получили методом гомогенизации под высоким давлением - испарения растворителя. В 5 мл дихлорметана растворили 250 мг полимера (PLGA 75:25, молекулярная масса - 90000-126000 дальтон) и 25 мг доксорубицина. Органическую фазу влили в перемешиваемый водный раствор (25 мл), содержавший 0,5% ПВС в качестве стабилизатор, и эмульгировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 15100 об/мин). Полученную первичную эмульсию дополнительно гомогенизировали с использованием гомогенизатора высокого давления (APV Micron Lab 40) при давлении 400 бар. При пониженном давлении испарили дихлорметан (в роторном испарителе BUCHI R-200). Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и подвергли сублимационной сушке после добавления 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Подвергнутый сублимационной сушке состав являлся целиком ресуспендируемым. Методом PCS определили, что частицы имели размер 140-220 нм, наполнение доксорубицином составляло 40%.
Препарат 2
Наночастицы получили методом двойной эмульсии. 500 мг полимера (PLGA с кислотными концевыми группами и характеристической вязкостью η=0,20 децилитр грамм) сделали растворимыми в 3 мл дихлорметана. В 2 мл 0,001 N HC1 растворили 25 мг гидрохлорида доксорубицина. Водный раствор влили в органическую фазу и эмульгировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 19500 об/мин). Полученную первичную эмульсию влили в 25 мл 1% водного раствора ПВС и снова гомогенизировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25, после чего трижды пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40) при давлении 600 бар. Путем перемешивания эмульсии при комнатной температуре в течение 3 часов испарили дихлорметан. Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и подвергли сублимационной сушке после добавления 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Подвергнутый сублимационной сушке состав являлся целиком ресуспендируемым. Методом PCS определили, что частицы имели размер 110-160 нм, наполнение доксорубицином составляло 75%.
Препарат 3
Наночастицы получили методом двойной эмульсии. 500 мг полимера (PLGA 75:25, молекулярная масса - 90000-126000 дальтон) сделали растворимыми в 3 мл дихлорметана. 25 мг гидрохлодрида доксорубицина растворили в 2 мл 0,001 N HCl. Водный раствор влили в органическую фазу и эмульгировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 19 500 об/мин). Полученную первичную эмульсию влили в 25 мл 1% водного раствора ПВС, эту смесь снова гомогенизировали с использованием Ultra-Turrax T-25 и затем четыре раза пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40) при давлении 600 бар. Дихлорметан испарили путем перемешивания эмульсии при комнатной температуре в течение 3 часов. Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и подвергли сублимационной сушке после добавления 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Подвергнутый сублимационной сушке состав являлся целиком ресуспендируемым. Методом PCS определили, что частицы имели размер 160-330 нм, наполнение доксорубицином составляло 47%.
Препарат 4
Наночастицы получили методом двойной эмульсии. 500 мг полимера (PLA, η=0.36 децилитр грамм) сделали растворимыми в 3 мл дихлорметана. В 2 мл 0,001 N HCl растворили 25 мг гидрохлодрида доксорубицина. Водный раствор влили в органическую фазу и эмульгировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 19,500 об/мин). Полученную первичную эмульсию влили в 25 мл 1% водного раствора ПВС и снова гомогенизировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25, а затем четыре раза пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40) при давлении 600 бар. Дихлорметан испарили путем перемешивания эмульсии при комнатной температуре в течение 3 часов. Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и подвергли сублимационной сушке после добавления 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Подвергнутый сублимационной сушке состав являлся целиком ресуспендируемым. Методом PCS определили, что частицы имели размер 126-210 нм, наполнение доксорубицином составляло 42%.
Препарат 5
Наночастицы получили методом двойной эмульсии. 500 мг полимера (PLGA с кислотными концевыми группами, η=0,20 децилитр грамм) сделали растворимыми в 3 мл дихлорметана. В 2 мл 0,001 N HCl растворили 25 мг гидрохлодрида доксорубицина. Водный раствор влили в органическую фазу и эмульгировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 19,500 об/мин). Полученную первичную эмульсию влили в 25 мл 1% водного раствора ПВС, снова гомогенизировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25, после чего трижды пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40) при давлении 600 бар. Дихлорметан испарили путем перемешивания эмульсии при комнатной температуре в течение 3 часов. Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и подвергли сублимационной сушке после добавления 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Подвергнутый сублимационной сушке состав являлся целиком ресуспендируемым. Методом PCS определили, что частицы имели размер 140-200 нм, наполнение доксорубицином составляло 73%.
Препарат 6
Наночастицы получили методом двойной эмульсии. 500 мг полимера (PLGA 50:50 с кислотными концевыми группами, η=0,20 децилитр грамм) сделали растворимыми в 3 мл дихлорметана. В 2 мл 0,001 N HCl растворили 25 мг гидрохлодрида доксорубицина. Водный раствор влили в органическую фазу и эмульгировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 19,500 об/мин). Полученную первичную эмульсию влили в 25 мл 1% водного раствора ПВС, снова гомогенизировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25, после чего трижды пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40) при давлении 600 бар. Дихлорметан испарили путем перемешивания эмульсии при комнатной температуре в течение 3 часов. Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и подвергли сублимационной сушке после добавления 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Подвергнутый сублимационной сушке состав являлся целиком ресуспендируемым. Методом PCS определили, что частицы имели размер 130-190 нм, наполнение доксорубицином составляло 67%.
Препарат 7
Наночастицы получили методом двойной эмульсии. 500 мг полимера (PLGA 50:50 с кислотными концевыми группами, η=0,20 децилитр грамм) сделали растворимыми в 3 мл дихлорметана. 50 мг гидрохлодрида доксорубицина растворили в 2 мл 0,001 N HCl. Водный раствор влили в органическую фазу и эмульгировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 20,100 об/мин). Полученную первичную эмульсию влили в 25 мл 1% водного раствора ПВС, снова гомогенизировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25, а затем четыре раза пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40) при давлении 600 бар. Дихлорметан испарили путем перемешивания эмульсии при комнатной температуре в течение 3 часов. Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и подвергли сублимационной сушке после добавления 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Подвергнутый сублимационной сушке состав являлся целиком ресуспендируемым. Методом PCS определили, что частицы имели размер 125-185 нм, наполнение доксорубицином составляло 69%.
Препарат 8
Наночастицы получили методом двойной эмульсии. 500 мг полимера (PLGA 50:50 с кислотными концевыми группами, η=0,20 децилитр грамм) сделали растворимыми в 3 мл дихлорметана. В 2 мл 0,001 N HCl растворили 25 мг гидрохлодрида доксорубицина. Водный раствор влили в органическую фазу и эмульгировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 22600 об/мин). Полученную первичную эмульсию влили в 25 мл 1% водного раствора ЧСА, снова гомогенизировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25, а затем четыре раза пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40) при давлении 600 бар. Дихлорметан испарили путем перемешивания эмульсии при комнатной температуре в течение 3 часов. Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и подвергли сублимационной сушке после добавления 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Подвергнутый сублимационной сушке состав являлся целиком ресуспендируемым. Методом PCS определили, что частицы имели размер 100-200 нм, наполнение доксорубицином составляло 40%.
Препарат 9
Наночастицы получили методом гомогенизации под высоким давлением - испарения растворителя. 250 мг полимера (PLA, молекулярная масса - 90000-126000 дальтон) и 15,1 мг цетилфосфата сделали растворимыми в 4 мл дихлорметана. В 2 мл воды растворили 21,8 мг гидрохлодрида доксорубицина. Органический и водный растворы смешали и выдерживали в течение 12 часов при комнатной температуре. Затем смесь влили в перемешиваемый водный раствор (25 мл), содержавший 1% ЧСА в качестве стабилизатора и эмульгировали с использованием Ultra Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 19100 об/мин). Полученную первичную эмульсию четыре раза пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40) при давлении 600 бар. Дихлорметан испарили при пониженном давлении (в роторном испарителе BUCHI R-200). Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и подвергли сублимационной сушке после добавления 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Подвергнутый сублимационной сушке состав являлся целиком ресуспендируемым. Методом PCS определили, что частицы имели размер 160-240 нм, наполнение доксорубицином составляло 60%.
Препарат 10
Наночастицы получили методом двойной эмульсии. 500 мг полимера (PLGA 50:50 с кислотными концевыми группами, η=0,20 децилитр грамм) сделали растворимыми в 3 мл дихлорметана. В 2 мл 0,001 N HCl растворили 25 мг гидрохлодрида доксорубицина. Водный раствор влили в органическую фазу и эмульгировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 19900 об/мин). Полученную первичную эмульсию влили в 25 мл 1% водного раствора TGPS, снова гомогенизировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25, а затем четыре раза пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40) при давлении 600 бар. Дихлорметан испарили путем перемешивания эмульсии при комнатной температуре в течение 3 часов. Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и подвергли сублимационной сушке после добавления 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Подвергнутый сублимационной сушке состав являлся целиком ресуспендируемым. Методом PCS определили, что частицы имели размер 300-380 нм, наполнение доксорубицином составляло 45%.
Препарат 11
Наночастицы получили методом гомогенизации под высоким давлением - испарения растворителя. 250 мг полимера (PLA, 0,34 децилитр грамм) 21,2 мг холестерилового сульфата калия сделали растворимыми в 5 мл хлороформа. В 2 мл воды растворили 21,8 мг гидрохлодрида доксорубицина. Органический и водный растворы смешали и выдерживали в течение 12 часов при комнатной температуре. Затем смесь влили в перемешиваемый водный раствор (23 мл), содержавший 1% ПВС в качестве стабилизатора, и эмульгировали с использованием Ultra Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 19100 об/мин). Полученную первичную эмульсию четыре раза пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40) при давлении 600 бар. Дихлорметан испарили при пониженном давлении (в роторном испарителе BUCHI R-200). Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и подвергли сублимационной сушке после добавления 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Подвергнутый сублимационной сушке состав являлся целиком ресуспендируемым. Методом PCS определили, что частицы имели размер 500-600 нм, наполнение доксорубицином составляло 89%.
Препарат 12
Наночастицы получили методом гомогенизации под высоким давлением - испарения растворителя. 250 мг полимера (PLA, 0,34 децилитр грамм) и 22,9 мг D-α-токоферолсукцината сделали растворимыми в 5 мл хлороформа. В 2 мл воды растворили 25,4 мг гидрохлодрида доксорубицина. Органический и водный растворы смешали и выдерживали в течение 12 часов при комнатной температуре. Затем смесь влили в перемешиваемый водный раствор (23 мл), содержавший 0,5% ПВС в качестве стабилизатора, и эмульгировали с использованием Ultra Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 23600 об/мин). Полученную первичную эмульсию четыре раза пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40) при давлении 600 бар. Хлороформ испарили при пониженном давлении (в роторном испарителе BUCHI R-200). Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и подвергли сублимационной сушке после добавления 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Подвергнутый сублимационной сушке состав являлся целиком ресуспендируемым. Методом PCS определили, что частицы имели размер 224-368 нм, наполнение доксорубицином составляло 50%.
Препарат 13
Наночастицы получили методом гомогенизации под высоким давлением - испарения растворителя. 250 мг полимера (PLA, 0,34 децилитр грамм) и 14,9 мг цетилфосфата сделали растворимыми в 5 мл хлороформа. В 2 мл воды растворили 24,5 мг гидрохлодрида доксорубицина. Органическую и водную фазы смешали и выдерживали в течение 12 часов при комнатной температуре. Затем смесь влили в перемешиваемый водный раствор (23 мл), содержавший 0,5% ПВС в качестве стабилизатора, и эмульгировали с использованием Ultra Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 23600 об/мин). Полученную первичную эмульсию четыре раза пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40) при давлении 600 бар. Хлороформ испарили при пониженном давлении (в роторном испарителе BUCHI R-200). Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и подвергли сублимационной сушке после добавления 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Подвергнутый сублимационной сушке состав являлся целиком ресуспендируемым. Методом PCS определили, что частицы имели размер 200-250 нм, наполнение доксорубицином составляло 53%.
Препарат 14
Наночастицы получили методом двойной эмульсии. 500 мг полимера (PLGA 50:50 с кислотными концевыми группами, η=0.67 децилитр грамм) сделали растворимыми в 3 мл дихлорметана. В 3 мл воды растворили 20 мг гидрохлодрида доксорубицина и 45 мг γ-циклодекстрина. Водный раствор влили в органическую фазу и эмульгировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25 (в течение 2 мин со скоростью 23600 об/мин). Полученную первичную эмульсию влили в 25 мл 0,5% водного раствора ПВС, снова гомогенизировали смесь с использованием Ultra-Turrax T-25, а затем четыре раза пропустили через гомогенизатор высокого давления (APV Micron Lab 40) при давлении 600 бар. Дихлорметан испарили путем перемешивания эмульсии при комнатной температуре в течение 3 часов. Полученную наносуспензию профильтровали через фильтр из пористого стекла и подвергли сублимационной сушке после добавления 5 мас./об.% маннитола в качестве криозащитного агента. Подвергнутый сублимационной сушке состав являлся целиком ресуспендируемым. Методом PCS определили, что частицы имели размер 200-250 нм, наполнение доксорубицином составляло 44%.
2. Исследование на животных
Система моделирования ортотопический опухоли
Использовали экспериментальную систему на основе интракраниально имплантированной крысам глиобластомы 101/8. Эту опухоль изначально получили путем местной инъекции гранулы α-диметилбензантрацена (DMBA) в мозжечок крыс Уистара и поддерживали непрерывными пассажами путем внутримозговой имплантации. Для длительного хранения опухолевую ткань выдерживали при температуре - 196°С и путем инъекции вводили в головной мозг крыс.
Глиобластома 101/8 применялась ранее в экспериментальной химиотерапии с использованием наполненных доксорубицином наночастиц на основе поли(бутил цианакрилата) с модифицированной поверхностью. Опухоль имеет стабильную мономорфную структуру и имеет характерные гистологические проявления агрессивной глиобластомы с быстрым диффузным ростом в паренхиме мозга и довольно медленной тенденцией некроза. Трансплантируемость опухоли составляла около 100%, в результате чего после инокуляции получали предсказуемый латентный период. Трансплантацию глиобластомы 101/8 в описываемом исследовании осуществляли с использованием свежей опухолевой ткани. Эта методика была выбрана с целью сохранения основных типичных свойств исходной опухоли, в особенности ее антигенной структуры и дифференциации.
Взрослых самцов крыс Уистара весом 200-250 г в течение 1 недели выдерживали с целью акклиматизации в клетках группами по пять особей. Им без ограничений давали стандартный лабораторный корм и воду. С целью имплантации опухоли животных подвергли глубокой анестезии путем внутрибрюшинной инъекции пентобарбитала (50 мг/кг). Через срединный сагиттальный разрез с помощью стоматологической бормашины было проделано трепанационное отверстие диаметром 1,5 мм в 2 мм за правым венечным швом и в 2 мм сбоку от срединного сагиттального разреза. Опухолевый материал (приблизительно 106 клеток) из замороженного запаса набрали в шприц для инъекций туберкулина, соединенный с иглой 21-го номера. Наконечник иглы ввели на 4 мм глубже поверхности костей и инъецировали опухолевую ткань в нижнюю часть правого бокового желудочка. Разрез скальпа зашили или закрыли клеем. После появления выраженных клинических признаков болезни (обычно на 14-й день) животных умертвили углекислым газом и затем обезглавили. Немедленно извлекли мозг. Опухоль рассекли и разрезали скальпелем; имплантат опухоли (5 мг) инокулировали в мозг новых подопытных животных, как это описано выше. Путем повторных пробных экспериментов были подтверждены соответствующие координаты и уточнена методика.
Для испытания на животных использовали наночастицы на основе низкомолекулярного PLGA 50:50 с кислотными концевыми группами η=0,20 децилитр грамм), наполненные доксорубицином, а именно гидрохлодридом доксорубицина. Для получения наполненных доксорубицином наночастиц на основе PLGA использовали соотношение лекарства и полимера 1:10. Частицы имели размер 144±12 нм, наполнение доксорубицином составляло 75,5%.
Для получения покрытых поверхностно-активным веществом частиц подвернутый сублимационной сушке состав повторно суспендировали в 1% водном растворе поверхностно-активного вещества (Pluronic® F68, Pluronic® P85 и полисорбата 80). Затем полученные препараты инкубировали в течение 30 мин с одновременным помешиванием и использовали в течение 2 часов.
Крыс-носителей опухоли произвольно поделили на шесть групп (n=10) и давали один из следующих составов: 1) плацебо; 2) доксорубицин в физиологическом растворе (DOX); 3) доксорубицин в 1% Pluronic® F68 (Dox/F68); 4) наполненные доксорубицином наночастицы на основе PLGA (DOX-PLGA); 5) наполненные доксорубицином наночастицы на основе PLGA, покрытые Pluronic® F68 (DOX-PLGA/F68); 6) наполненные доксорубицином наночастицы на основе PLGA, покрытые полисорбатом 80 (не показаны); 7) наполненные доксорубицином наночастицы на основе PLGA, покрытые Pluronic® Р85 (результаты не показаны на фиг.1).
Эти препараты вводили внутривенно в хвостовую вену согласно следующей схеме: 3×1,5 мг/кг на 2, 5 и 8 дни после имплантации опухоли.
Животных наблюдали в течение 100 дней после лечения; затем выживших животных умертвили и вскрыли. Результаты проиллюстрированы на фиг.1.
Все животные из контрольной группы погибли в течение 19 дней после имплантации опухоли. Наполненные доксорубицином наночастицы на основе PLGA, покрытые полоксамером 188, значительно увеличили выживаемость крыс-носителей опухоли: 40% животных (4 из 10) прожили по 100 дней. Из группы, получавшей доксорубицин в 1% растворе полоксамера 188, выжило только одно животное. Отсутствие опухоли у животных подтверждали морфологическим исследованием.
В отличие от результатов, полученных при использовании наполненных доксорубицином наночастиц на основе PLGA, покрытых полоксамером 188, при использовании для покрытия наполненных доксорубицином наночастиц полисорбатом 80 или Pluronic® Р85 эффективность связанного наночастицами доксорубицина не повышалась (данные не показаны).
Во второй серии опытов исследовали действие in vivo составов, содержащих наполненные доксорубицином наночастицы на основе PLGA с кислотными концевыми группами (PLGA-COOH) и TPGS в качестве стабилизатора (Dox/PLGA-COOH/TPGS; препарат 10) или покрытых TPGS (Dox/PLGA-COOH+TPGS), на крыс-носителей глиобластома 101/8. Последний состав получили путем повторного суспендирования наночастицы согласно препарату 5 в 0,5% TPGS, после чего их инъецировали животным.
Результаты этой серии опытов показаны на фиг.2. Видно, что наночастицы согласно препарату 10, т.е. содержащие TPGS в качестве стабилизатора, значительно увеличивают продолжительность выживания крыс-носителей опухоли и обеспечивают длительное выживание у 20% крыс-носителей, использованных в этом опыте. Действие у наночастиц согласно препарату 5, которые до использования были покрыты TPGS, отсутствовало.

Claims (20)

1. Способ получения системы направленной доставки лекарства для введения фармакологически активного вещества в центральную нервную систему млекопитающих через гематоэнцефалический барьер, включающий стадии, на которых:
делают растворимым поли(DL-лактид) и/или поли(DL-лактид-согликолид), по меньшей мере, одно фармакологически активное вещество и липидное соединение, выбранное из группы липидных соединений, включающей цетилфосфат, холестериловый сульфат калия и токоферолсукцинат, в органическом растворителе с целью получения органической фазы, вливают органическую фазу в водный раствор, содержащий TPGS,
эмульгируют смесь, чтобы получить первичную эмульсию,
гомогенизируют первичную эмульсию,
удаляют органический растворитель из первичной эмульсии и
фильтруют полученную наносуспензию, содержащую наполненные лекарством наночастицы.
2. Способ получения системы направленной доставки лекарства для введения фармакологически активного вещества в центральную нервную систему млекопитающих через гематоэнцефалический барьер, включающий стадии, на которых:
делают растворимым поли(DL-лактид) и/или поли(DL-лактид-согликолид), по меньшей мере, одно фармакологически активное вещество и липидное соединение, выбранное из группы липидных соединений, включающей цетилфосфат, холестериновый сульфат калия и токоферолсукцинат, в органическом растворителе с целью получения органической фазы,
вливают органическую фазу в водный раствор, необязательно содержащий стабилизатор,
эмульгируют смесь, чтобы получить первичную эмульсию,
гомогенизируют первичную эмульсию,
удаляют органический растворитель из первичной эмульсии,
фильтруют полученную наносуспензию, содержащую наполненные лекарством наночастицы, и
покрывают наночастицы полоксамером 188.
3. Способ получения системы направленной доставки лекарства для введения фармакологически активного вещества в центральную нервную систему млекопитающих через гематоэнцефалический барьер, включающий стадии, на которых:
делают растворимым поли(DL-лактид) и/или поли(DL-лактид-согликолид) в органическом растворителе с целью получения органической фазы, растворяют, по меньшей мере, одно фармакологически активное вещество в водном растворе,
вливают водный раствор в органическую фазу,
эмульгируют смесь, чтобы получить первичную эмульсию,
вливают первичную эмульсию в водный раствор TPGS,
гомогенизируют смесь первичной эмульсии и водного раствора TPGS,
удаляют органический растворитель из смеси первичной эмульсии и водного раствора стабилизатора, выбранного из группы, включающей поливиниловые спирты, сывороточный альбумин, TPGS и γ-циклодекстрин, и
фильтруют полученную наносуспензию, содержащую наполненные лекарством наночастицы.
4. Способ получения системы направленной доставки лекарства для введения фармакологически активного вещества в центральную нервную систему млекопитающих через гематоэнцефалический барьер, включающий стадии, на которых:
делают растворимым поли(DL-лактид) и/или поли(DL-лактид-согликолид) в органическом растворителе с целью получения органической фазы,
растворяют, по меньшей мере, одно фармакологически активное вещество в водном растворе,
вливают водный раствор в органическую фазу,
эмульгируют смесь, чтобы получить первичную эмульсию,
вливают первичную эмульсию в водный раствор стабилизатора,
гомогенизируют смесь первичной эмульсии и водного раствора стабилизатора,
удаляют органический растворитель из смеси первичной эмульсии и водного раствора стабилизатора, выбранного из группы, включающей поливиниловые спирты, сывороточный альбумин, TPGS и γ-циклодекстрин,
фильтруют полученную наносуспензию, содержащую наполненные лекарством наночастицы, и
покрывают наночастицы полоксамером 188.
5. Способ по п.3 или 4, отличающийся тем, что поливиниловый спирт имеет молекулярную массу 30-70 килодальтон.
6. Способ по п.3 или 4, отличающийся тем, что сывороточным альбумином является человеческий сывороточный альбумин.
7. Способ по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что фармакологически активным веществом является терапевтическое средство или диагностическое средство.
8. Способ по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что фармакологически активным веществом является терапевтическое средство, выбранное из группы, включающей лекарства, действующие на синаптические и нейроэффекторные соединительные участки; обезболивающие и анестезирующие средства общего и местного действия; снотворные средства и седативные средства; лекарства для лечения психиатрических расстройств, таких как депрессия и шизофрения; антиэпилептические средства и противосудорожные средства; лекарства для лечения болезни Гентингтона, старения и болезни Альцгеймера; антагонисты и нейротропные факторы моторных аминокислотных рецепторов и нейрорегенеративные средства; трофические факторы; лекарства для лечения повреждения ЦНС или нарушения мозгового кровообращения; лекарства для лечения привыкания и злоупотребления лекарственными средствами; физиологически активные вещества и противовоспалительные лекарства; хемиотерапевтические средства против паразитарных инфекций и микробных заболеваний; иммунодепрессивные средства и противораковые лекарства; гормоны и антагонисты гормонов; тяжелые металлы и антагонисты тяжелых металлов; антагонисты неметаллических токсичных веществ; цитостатики для лечения рака; диагностические вещества для применения в медицинской радиологии; иммуноактивные и иммунореактивные средства; медиаторы и их соответствующие агонисты и антагонисты рецепторов, их соответствующие предшественники или метаболиты; антибиотики, антиспазматические средства, антигистаминные средства, средства против рвоты, релаксанты, стимуляторы, "смысловые" и "антисмысловые" олигонуклеотиды, средства для расширения сосудов головного мозга, психотропные средства, противоманиакальные средства, сосудорасширяющие и сосудосуживающие средства, антигипертензивные средства, средства для лечения мигрени, снотворные средства, гипер- или гипогликемические средства, минеральные или питательные добавки, лекарства против ожирения, анаболические средства и противоастматические средства и их смеси.
9. Способ по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что фармакологически активным веществом является противоопухолевое средство, выбранное из группы, включающей алкалоиды, алкилирующие средства, такие как алкилсульфонаты, азиридины, этиленимины и метилмеламины, азотистые иприты, нитрозомочевины, антибиотики и аналоги, предпочтительно антрациклины, антиметаболиты, такие как аналоги фолиевой кислоты, антагонисты фолиевой кислоты, аналоги пурина и аналоги пиримидина, ферменты, иммуномодулирующие средства, иммунотоксины, моноклональные антитела и комплексы платины.
10. Способ по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что фармакологически активным веществом является диагностическое средство, которое применяют для диагностики в радиационной медицине и/или при лучевой терапии.
11. Способ по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что органический растворитель выбирают из группы, включающей дихлорметан, хлороформ, этилацетат и их смеси.
12. Способ по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что после добавления криозащитного агента наносуспензию подвергают сублимационной сушке.
13. Способ по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что после добавления криозащитного агента наносуспензию подвергают сублимационной сушке, при этом криозащитным агентом является маннитол.
14. Способ по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что после добавления криозащитного агента наносуспензию подвергают сублимационной сушке, при этом криозащитный агент добавляют в наносуспензию в количестве 5 мас./об%.
15. Система направленной доставки лекарства для введения фармакологически активного вещества в центральную нервную систему млекопитающих через гематоэнцефалический барьер, содержащая наночастицы на основе поли(DL-лактида) и/или поли(DL-лактид-согликолида) и, по меньшей мере, одно фармакологически активное вещество, абсорбируемое, адсорбируемое и/или включаемое в наночастицы, при этом система содержит TPGS или имеет покрытие из поверхностно-активного вещества плуроник 188, которое осаждают на наполненные лекарством наночастицы, отличающаяся тем, что систему получают способом по любому из пп.1-4.
16. Система направленной доставки лекарства для введения фармакологически активного вещества в центральную нервную систему млекопитающих через гематоэнцефалический барьер, содержащая наночастицы на основе поли(DL-лактида) и/или поли(DL-лактид-согликолида) и, по меньшей мере, одно фармакологически активное вещество, абсорбируемое, адсорбируемое и/или включаемое в наночастицы, при этом система содержит TPGS или имеет покрытие из поверхностно-активного вещества плуроник 188, которое осаждают на наполненные лекарством наночастицы, отличающаяся тем, что систему получают способом по любому из пп.1-4, при этом наночастицы представляют собой частицы, имеющие диаметр менее 1000 нм, предпочтительно от 100 до 800 нм и наиболее предпочтительно от 150 до 600 нм.
17. Способ лечения заболевания или расстройства центральной нервной системы млекопитающих, включающий стадии, на которых:
получают наполненные лекарством наночастицы на основе поли(DL-лактида) или поли(DL-лактид-согликолида),
покрывают наполненные лекарством наночастицы на основе PLGA полоксамером 188,
вводят покрытые полоксамером 188 наполненные лекарством наночастицы в кровоток млекопитающих и
дают лекарству оказать свое фармакологическое действие.
18. Способ по п.17, отличающийся тем, что стадия введения включает пероральное или внутривенное введение.
19. Применение системы направленной доставки лекарства по п.15 для лечения заболевания или расстройства центральной нервной системы млекопитающих.
20. Применение системы направленной доставки лекарства по п.16 для лечения заболевания или расстройства центральной нервной системы млекопитающих.
RU2008140367/15A 2006-03-24 2007-03-13 Полилактидные наночастицы RU2423104C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102006013531.8 2006-03-24
DE102006013531A DE102006013531A1 (de) 2006-03-24 2006-03-24 Polylactid-Nanopartikel

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2008140367A RU2008140367A (ru) 2010-04-20
RU2423104C2 true RU2423104C2 (ru) 2011-07-10

Family

ID=38110479

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2008140367/15A RU2423104C2 (ru) 2006-03-24 2007-03-13 Полилактидные наночастицы

Country Status (14)

Country Link
US (2) US8003128B2 (ru)
EP (1) EP1998752A2 (ru)
JP (1) JP2009530325A (ru)
KR (1) KR20080111079A (ru)
CN (1) CN101410099A (ru)
AU (1) AU2007229738A1 (ru)
BR (1) BRPI0709352A2 (ru)
CA (1) CA2644411A1 (ru)
DE (1) DE102006013531A1 (ru)
IN (1) IN2008DE08036A (ru)
MX (1) MX2008011892A (ru)
NZ (1) NZ571354A (ru)
RU (1) RU2423104C2 (ru)
WO (1) WO2007110152A2 (ru)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2606839C1 (ru) * 2015-10-26 2017-01-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" Лекарственный препарат противотуберкулезного действия на основе D-циклосерина в виде лиофилизата и способ получения лекарственного препарата
RU2649743C1 (ru) * 2016-10-24 2018-04-04 Станислав Анатольевич Кедик Жидкая лекарственная форма, содержащая лекарственное вещество, помещенное в биоразлагаемые полимеры
RU2663120C2 (ru) * 2012-08-29 2018-08-01 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Шаттл для гематоэнцефалического барьера
RU2734710C1 (ru) * 2019-06-14 2020-10-22 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства" (ФГБУН НЦБТМ ФМБА России) Наночастицы на основе биодеградирующих полимеров с инкапсулированными в них противоопухолевыми препаратами

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8946200B2 (en) * 2006-11-02 2015-02-03 Southwest Research Institute Pharmaceutically active nanosuspensions
US8404850B2 (en) * 2008-03-13 2013-03-26 Southwest Research Institute Bis-quaternary pyridinium-aldoxime salts and treatment of exposure to cholinesterase inhibitors
CN102088963A (zh) * 2008-05-06 2011-06-08 葛兰素集团有限公司 生物活性剂的囊封方法
WO2010005725A2 (en) 2008-06-16 2010-01-14 Bind Biosciences, Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles comprising vinca alkaloids and methods of making and using same
JP2012501965A (ja) * 2008-06-16 2012-01-26 バインド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド 薬剤を装填したポリマーナノ粒子及びその製造方法と使用方法
US8613951B2 (en) * 2008-06-16 2013-12-24 Bind Therapeutics, Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles with mTor inhibitors and methods of making and using same
EA014044B1 (ru) * 2008-07-09 2010-08-30 Общество С Ограниченной Ответственностью "Аква-Альянс" Наносомальная лекарственная форма препарата пролонгированного действия для лечения гепатита с (варианты)
US8722706B2 (en) * 2008-08-15 2014-05-13 Southwest Research Institute Two phase bioactive formulations of bis-quaternary pyridinium oxime sulfonate salts
US8309134B2 (en) * 2008-10-03 2012-11-13 Southwest Research Institute Modified calcium phosphate nanoparticle formation
US8563041B2 (en) * 2008-12-12 2013-10-22 Bind Therapeutics, Inc. Therapeutic particles suitable for parenteral administration and methods of making and using same
WO2010075072A2 (en) 2008-12-15 2010-07-01 Bind Biosciences Long circulating nanoparticles for sustained release of therapeutic agents
EP2509634B1 (en) 2009-12-11 2019-03-06 Pfizer Inc Stable formulations for lyophilizing therapeutic particles
JP5965844B2 (ja) 2009-12-15 2016-08-10 バインド セラピューティックス インコーポレイテッド 高いガラス転移温度または高分子量のコポリマーを有する治療用ポリマーナノ粒子組成物
US9028873B2 (en) * 2010-02-08 2015-05-12 Southwest Research Institute Nanoparticles for drug delivery to the central nervous system
US8974691B2 (en) 2010-09-24 2015-03-10 Fujimi Incorporated Composition for polishing and composition for rinsing
JP5687354B2 (ja) * 2010-11-26 2015-03-18 ユニバーシティ・オブ・ザ・ウィットウォータースランド・ヨハネスブルグＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｏｆ Ｔｈｅ Ｗｉｔｗａｔｅｒｓｒａｎｄ， Ｊｏｈａｎｎｅｓｂｕｒｇ 薬物送達デバイス
WO2012135010A2 (en) * 2011-03-25 2012-10-04 Selecta Biosciences, Inc. Osmotic mediated release synthetic nanocarriers
US10555911B2 (en) 2012-05-04 2020-02-11 Yale University Highly penetrative nanocarriers for treatment of CNS disease
GB201209517D0 (en) * 2012-05-29 2012-07-11 Univ Birmingham Nanoparticles
ES2656091T3 (es) * 2012-07-27 2018-02-23 Izumi Technology, Llc. Composiciones de inhibidores de eflujo y métodos de tratamiento que las utilizan
ES2732377T3 (es) 2012-09-17 2019-11-22 Pfizer Procedimiento de preparación de nanopartículas terapéuticas
CL2012003209A1 (es) * 2012-11-16 2013-04-19 Univ Santiago Chile Metodo de sintesis de nanoparticulas de acido poli (lactico-glicolico) (plga) con pentoxifilina; composicion farmaceutica que comprende nanoparticulas de plga con pentoxifilina; y uso de las nanoparticulas de plga cargada con pentoxifilina en el tratamiento del alivio y prevencion del dolor cronico.
BR112016021130A2 (pt) 2014-03-14 2017-08-15 Pfizer Nanopartículas terapêuticas, composição farmacêutica compreendendo as referidas nanopartículas, processo para a preparação e uso das mesmas
CN103893769B (zh) * 2014-04-16 2016-03-23 江西科技师范大学 含聚乙丙交酯靶向高分子药物载体及其制备方法
CN109613177B (zh) * 2014-07-01 2021-08-20 科蒙森斯公司 用于鉴定羊水的诊断组合物
US10758520B1 (en) 2015-05-20 2020-09-01 University Of South Florida Glutathione-coated nanoparticles for delivery of MKT-077 across the blood-brain barrier
HRP20220304T1 (hr) 2015-06-24 2022-05-13 F. Hoffmann - La Roche Ag Anti-transferinska receptorska protutijela s prilagođenim afinitetom
RU2595859C1 (ru) * 2015-07-20 2016-08-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" Полимеросодержащее лекарственное средство на основе противоопухолевого препарата этопозида
AR106189A1 (es) 2015-10-02 2017-12-20 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS BIESPECÍFICOS CONTRA EL A-b HUMANO Y EL RECEPTOR DE TRANSFERRINA HUMANO Y MÉTODOS DE USO
PE20181004A1 (es) 2015-10-02 2018-06-26 Hoffmann La Roche Anticuerpos biespecificos contra el cd20 humano y el receptor de transferrina humano y metodos de uso
CN106806352B (zh) * 2017-01-26 2019-01-15 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 一种可缓释、靶向应用于神经退行性疾病的纳米药物
WO2018237004A1 (en) * 2017-06-20 2018-12-27 University Of Maryland, Baltimore RARY LIGAND CHARGED SELECTIVE NANOPARTICLES FOR HANDLING TARGET BONE GROWTH
RU2675810C1 (ru) * 2017-12-19 2018-12-25 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" Полимерный комплекс для молекулярно-прицельной терапии и способ его получения
US10842755B2 (en) 2018-03-23 2020-11-24 University Of South Carolina Nanoparticles for brain targeted drug delivery
CN108395543B (zh) * 2018-05-31 2020-09-22 华南理工大学 一种改性聚轮烷、基于聚轮烷的载药胶束及其制备方法与应用
US20220175687A1 (en) * 2019-04-11 2022-06-09 The Johns Hopkins University Nanoparticles for drug delivery to brain
EP3750524A1 (en) * 2019-06-13 2020-12-16 CAPNOMED GmbH Delayed and sustained delivery of anticancer drugs
EP3750523A1 (en) * 2019-06-13 2020-12-16 CAPNOMED GmbH Active substance delivery system
CN111939151A (zh) * 2020-07-04 2020-11-17 浙江工业大学 一种复合型阿霉素白蛋白纳米粒及其制备方法和应用
CN116018401A (zh) * 2020-07-29 2023-04-25 加利福尼亚大学董事会 驱动生肌性干细胞扩增的化学物混合物

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0725689B2 (ja) * 1986-10-07 1995-03-22 中外製薬株式会社 顆粒球コロニ−刺激因子を含有する徐放性製剤
WO1995022963A1 (en) * 1994-02-28 1995-08-31 Medinova Medical Consulting Gmbh Drug targeting system, method for preparing same and its use
WO1998056361A1 (en) 1997-06-13 1998-12-17 Medinova Medical Consulting Gmbh Drug targeting system, method of its preparation and its use
US6309663B1 (en) * 1999-08-17 2001-10-30 Lipocine Inc. Triglyceride-free compositions and methods for enhanced absorption of hydrophilic therapeutic agents
US7731947B2 (en) * 2003-11-17 2010-06-08 Intarcia Therapeutics, Inc. Composition and dosage form comprising an interferon particle formulation and suspending vehicle
US20060024248A1 (en) * 2003-03-23 2006-02-02 Combe Incorporated Composition and method employing membrane structured solid nanoparticles for enhanced delivery of oral care actives
WO2004084871A1 (en) 2003-03-26 2004-10-07 Ltt Bio-Pharma Co., Ltd. Intravenous nanoparticles for targenting drug delivery and sustained drug release
WO2005003180A2 (en) * 2003-04-10 2005-01-13 Pr Pharmaceuticals A method for the production of emulsion-based micro particles
JP2006528700A (ja) * 2003-05-20 2006-12-21 エリモス・ファーマスーティカルズ・エルエルシー 肥満の治療のためのカテコールブタンの投与のための方法と組成物
US7728036B2 (en) * 2003-05-20 2010-06-01 Erimos Pharmaceuticals, Llc Methods for delivery of catecholic butanes for treatment of tumors
US20050084456A1 (en) * 2003-10-21 2005-04-21 Liping Tang Functionalized particles
KR101123520B1 (ko) * 2003-12-04 2012-03-13 디에스엠 아이피 어셋츠 비.브이. 자외선 필터 활성을 갖는 미세캡슐 및 그의 제조방법
US20070128289A1 (en) * 2005-12-07 2007-06-07 Zhao Jonathon Z Nano-and/or micro-particulate formulations for local injection-based treatment of vascular diseases

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
L.MU et al: "Application of TPGS in polymeric nanoparticulate drug delivery system" COLLOIDS AND SURFACES. B, BIOINTERFACES, ELSEVIER, Amsterdam Bd. 47, №.1, p.90-97, 15.01.2006. *
Промышленная технология лекарств. / Под ред.проф. В.И.Чуешова. - Харьков, 2002, т.1, гл.9.3.2 «Фильтрование», гл.9.3.3 «Центрифугирование». *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2663120C2 (ru) * 2012-08-29 2018-08-01 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Шаттл для гематоэнцефалического барьера
RU2711552C2 (ru) * 2012-08-29 2020-01-17 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Шаттл для гематоэнцефалического барьера
RU2754794C2 (ru) * 2012-08-29 2021-09-07 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Шаттл для гематоэнцефалического барьера
RU2606839C1 (ru) * 2015-10-26 2017-01-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" Лекарственный препарат противотуберкулезного действия на основе D-циклосерина в виде лиофилизата и способ получения лекарственного препарата
RU2649743C1 (ru) * 2016-10-24 2018-04-04 Станислав Анатольевич Кедик Жидкая лекарственная форма, содержащая лекарственное вещество, помещенное в биоразлагаемые полимеры
RU2734710C1 (ru) * 2019-06-14 2020-10-22 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Научный центр биомедицинских технологий Федерального медико-биологического агентства" (ФГБУН НЦБТМ ФМБА России) Наночастицы на основе биодеградирующих полимеров с инкапсулированными в них противоопухолевыми препаратами

Also Published As

Publication number Publication date
EP1998752A2 (de) 2008-12-10
US20110293730A1 (en) 2011-12-01
WO2007110152A8 (de) 2007-12-13
US8003128B2 (en) 2011-08-23
IN2008DE08036A (ru) 2009-03-20
DE102006013531A1 (de) 2007-09-27
US20090263491A1 (en) 2009-10-22
AU2007229738A1 (en) 2007-10-04
KR20080111079A (ko) 2008-12-22
MX2008011892A (es) 2008-11-14
WO2007110152A3 (de) 2008-02-21
BRPI0709352A2 (pt) 2011-07-12
CA2644411A1 (en) 2007-10-04
CN101410099A (zh) 2009-04-15
RU2008140367A (ru) 2010-04-20
JP2009530325A (ja) 2009-08-27
NZ571354A (en) 2011-02-25
WO2007110152A2 (de) 2007-10-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2423104C2 (ru) Полилактидные наночастицы
JP2019142924A (ja) 治療薬を徐放するための長時間循環性ナノ粒子
US9579284B2 (en) Therapeutic polymeric nanoparticles with mTOR inhibitors and methods of making and using same
US9351933B2 (en) Therapeutic polymeric nanoparticles comprising vinca alkaloids and methods of making and using same
JP6175237B2 (ja) コルチコステロイドを含む治療用ポリマーナノ粒およびそれを製造かつ使用する方法
US8916203B2 (en) Stable formulations for lyophilizing therapeutic particles
JP2009512682A (ja) 少なくとも１種の抗癌性薬物および少なくとも１種のポリマーを含む医薬組成物
WO2011084521A2 (en) Therapeutic polymeric nanoparticles comprising epothilone and methods of making and using same
CN101495148B (zh) 包括至少一种抗癌药和至少一种聚合物的药物组合物
CN102099016A (zh) 载药的聚合物纳米微粒及其制备和使用方法
RU2706791C2 (ru) Направленно доставляемые терапевтические наночастицы и способы их получения и использования
US20150010616A1 (en) Biocompatible Particles and Method for Preparing Same
KR20220152263A (ko) 합성 나노담체와 관련된 방법 및 조성물
JP6824535B2 (ja) 脳間質内のナノ粒子分布を改善するための組成物および方法

Legal Events

Date Code Title Description
HE4A Change of address of a patent owner
PC41 Official registration of the transfer of exclusive right

Effective date: 20130514

QB4A Licence on use of patent

Free format text: LICENCE

Effective date: 20131119

MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20140314

NF4A Reinstatement of patent

Effective date: 20150210