EA026656B1 - Гетероциклические ингибиторы глютаминазы - Google Patents

Гетероциклические ингибиторы глютаминазы Download PDF

Info

Publication number
EA026656B1
EA026656B1 EA201491012A EA201491012A EA026656B1 EA 026656 B1 EA026656 B1 EA 026656B1 EA 201491012 A EA201491012 A EA 201491012A EA 201491012 A EA201491012 A EA 201491012A EA 026656 B1 EA026656 B1 EA 026656B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
alkyl
mmol
heteroaryl
compound
heterocyclyl
Prior art date
Application number
EA201491012A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201491012A1 (ru
Inventor
Джим Ли
Лицзин Чэнь
Бинду Гоял
Гай Лайдиг
Тимоти Френд Стэнтон
Эрик Брайан Сьегрен
Original Assignee
Калитера Байосайенсиз Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Калитера Байосайенсиз Инк. filed Critical Калитера Байосайенсиз Инк.
Publication of EA201491012A1 publication Critical patent/EA201491012A1/ru
Publication of EA026656B1 publication Critical patent/EA026656B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4245—Oxadiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/433—Thidiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D237/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings
    • C07D237/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D237/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D237/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D237/20—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D271/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D271/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D271/10—1,3,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-oxadiazoles
    • C07D271/113—1,3,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-oxadiazoles with oxygen, sulfur or nitrogen atoms, directly attached to ring carbon atoms, the nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D285/00—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D275/00 - C07D283/00
    • C07D285/01—Five-membered rings
    • C07D285/02—Thiadiazoles; Hydrogenated thiadiazoles
    • C07D285/04—Thiadiazoles; Hydrogenated thiadiazoles not condensed with other rings
    • C07D285/12—1,3,4-Thiadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-thiadiazoles
    • C07D285/125—1,3,4-Thiadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-thiadiazoles with oxygen, sulfur or nitrogen atoms, directly attached to ring carbon atoms, the nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C07D285/135—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings

Abstract

Изобретение относится к новым гетероциклическим соединениям формулы (I), определенной в настоящем описании, и к фармацевтическим препаратам таких соединений. Изобретение также относится к способам лечения рака, иммунологических и неврологических заболеваний с использованием гетероциклических соединений по настоящему изобретению.

Description

Заявка на данное изобретение заявляет преимущество приоритета относительно временной патентной заявки США № 61/562266, поданной 21 ноября 2011 г., временной патентной заявки США № 61/665370, поданной 28 июня 2012 г., и временной патентной заявки США № 61/727195, поданной 16 ноября 2012 г., все эти заявки включены в настоящее описание посредством ссылки во всей их полноте.
Предпосылки изобретения
Глютамин поддерживает клеточное выживание, рост и пролиферацию через метаболические и неметаболические механизмы. В активно пролиферирующих клетках метаболизм глютамина до лактата, также называемый глютаминолизом является основным источником энергии в форме ΝΑΌΡΗ. Первой стадией глютаминолиза является дезаминирование глютамина с образованием глютамата и аммиака, который катализируется ферментом глютаминазой. Таким образом, дезаминирование через глютаминазу является контрольной точкой метаболизма глютамина.
Еще с того времени, когда согласно наблюдениям Варбурга асцитические опухолевые клетки демонстрировали высокие скорости поглощения глюкозы и секреции лактата в присутствии кислорода (АагЬигд, 1956), исследователи изучают, каким образом раковые клетки используют метаболические пути, чтобы быть способными к продолжению активной пролиферации. Некоторые сообщения показали, как метаболизм глютамина поддерживает макромолекулярный синтез, необходимый для репликации клеток (СийЬоук, 1995; ОеВагбищ. 2008).
Таким образом, появилась теория, что глютаминаза является потенциальной терапевтической мишенью для лечения заболеваний, характеризующихся активно пролиферирующими клетками, таких как рак. Отсутствие подходящих ингибиторов глютаминазы делает невозможным признание этой мишени. Поэтому создание ингибиторов глютаминазы, которые являются специфическими и могут быть сформулированы в композицию для ίη νίνο использования, может привести к новому классу терапевтических средств.
Краткое описание изобретения
В настоящем изобретении представлено соединение формулы (I)
или его фармацевтически приемлемая соль, где Ь представляет собой СН28СН2, СН2СН2, СН2СН2СН2, СН2, СН28, 8СН2, СН^СН2, СН=СН „Л, или А А, где любой атом водорода СН или СН2 структурной единицы может быть заменен (С1-С6)алкилом или (С1-С6)алкокси, любой водород NΗ структурной единицы может быть заменен (С1-С6)алкилом и любой атом водорода СН2 структурной единицы группы СН2СН2, СН2СН2СН2 или СН2 может быть заменен гидрокси группой;
один из X представляет собой 8, а другой представляет собой СН=СН, где любой атом водорода СН структурной единицы может быть заменен (С1-С6)алкилом;
Υ, независимо для каждого случая, представляет собой Н или СН2О(СО)К7;
К7, независимо для каждого случая, представляет собой Н или замещенный или незамещенный (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, амино(С1-С6)алкил, (С1-С6)алкиламино(С1-С6)алкил, гетероциклил(С1-С6)алкил или гетероциклил(С1-С6)алкокси;
Ζ представляет собой Н или К3(СО);
Κι и К2, каждый независимо, представляют собой Н, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси или гидрокси;
К3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С1-С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси, гетероарилокси(С1-С6)алкил или С(К8)(К9)(К10), Ν(Κ4)(Κ5) или ОК6, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7;
К4 и Κ5, каждый независимо, представляют собой Н или замещенный или незамещенный (С1-С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, ацил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7;
Кб, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С1-С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси,
- 1 026656 (С5-С7)арилокси(С1-Сб)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7; и
К8, К9 и К.10, каждый независимо, представляют собой Н или замещенный или незамещенный (С1-С6)алкил, гидрокси, гидрокси(С1-С6)алкил, амино, ациламино, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С1-С6)алкоксикарбонил, (С1-С6)алкоксикарбониламино, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил или
К8 и К9 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют (С5-С12)карбоциклическую или гетероциклическую кольцевую систему, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7 и где по меньшей мере два из К8, К9 и К10 являются отличными от Н;
каждый гетероциклил или гетероциклическая кольцевая система представляет собой 3-10-членное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, выбранных из азота, кислорода и серы; и каждый гетероарил представляет собой 5-7-членное ароматическое кольцо, содержащее по меньшей мере один гетероатом, выбранный из азота, кислорода и серы;
когда (С1-С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, (С1-С6)алкиламино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С4)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероциклил(С1-С6)алкокси, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил являются замещенными, они замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, гидроксила, карбоксила, (С1-С6)алкоксикарбонила, формила, ацила, тиоэфира, тиоацетата, тиоформиата, (С1-С6)алкоксила, фосфорила, фосфата, фосфоната, фосфината, амино, амидо, амидина, имина, циано, нитро, азида, сульфгидрила, (С1-С6)алкилтио, сульфата, сульфоната, сульфамоила, сульфонамидо, сульфонила, гетероциклила, (С5-С7)арил(С1-С6)алкила, (С5-С7)арила и гетероарила, где гетероциклил и гетероарил определены выше.
В некоторых вариантах воплощения настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию для лечения рака или иммунологического или неврологического заболевания, подходящую для применения для пациента-человека, включающий эффективное количество любого из соединений, описанных в настоящем изобретении (например, соединение по настоящему изобретению, такое как соединение формулы (I)), и один или несколько фармацевтически приемлемых эксципиентов.
В некоторых вариантах воплощения фармацевтические препараты имеют достаточно низкую пирогенную активность и поэтому являются подходящими для внутривенного введения пациенту-человеку.
В настоящем изобретении, кроме того, представлены способы лечения или профилактики рака, иммунологических или неврологических заболеваний, описанных в настоящем изобретении, включающие введение соединения по настоящему изобретению.
Описание чертежей
Фигура показывает, что интраперитонеальное введение соединения 188 мышам приводит к уменьшению размера опухоли в модели ксенотрансплантата НСТ116 карциномы толстой кишки.
Подробное описание изобретения
В настоящем изобретении представлено соединение формулы (I)
или его фармацевтически приемлемая соль, где Ь представляет собой СН28СН2, СН2СН2, СН2СН2СН2, СН2, СН28, 8СН2, СН2МНСН2, СН=СН или >А<
где любой атом водорода СН или СН2 структурной единицы может быть заменен (С1-С6)алкилом или (С1-С6)алкокси, любой водород ΝΉ структурной единицы может быть заменен (С1-С6)алкилом и любой атом водорода СН2 структурной единицы группы СН2СН2, СН2СН2СН2 или СН2 может быть заменен гидрокси группой;
один из X представляет собой 8, а другой представляет собой СН=СН, где любой атом водорода СН структурной единицы может быть заменен (С1-С6)алкилом;
Υ, независимо для каждого случая, представляет собой Н или СН2О(СО)К7.
К7, независимо для каждого случая, представляет собой Н или замещенный или незамещенный (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси, амино(С1-С6)алкил, (С1-С6)алкиламино(С1-С6)алкил, гетероциклил(С1-С6)алкил или гетероциклил(С1-С6)алкокси;
- 2 026656
Ζ представляет собой Н или К3(СО);
Κι и К2, каждый независимо, представляют собой Н, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси или гидрокси;
К3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С1-С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси, гетероарилокси(С1-С6)алкил или С(К8)(К9)(К10), Ν(Κ4)(Κ5) или ОК6, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7;
К4 и Κ5, каждый независимо, представляют собой Н или замещенный или незамещенный (С1-С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, ацил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7;
Кб, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С1-С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7; и
К8, К9 и К10, каждый независимо, представляют собой Н или замещенный или незамещенный (С1-С6)алкил, гидрокси, гидрокси(С1-С6)алкил, амино, ациламино, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С1-С6)алкоксикарбонил, (С1-С6)алкоксикарбониламино, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил или
К8 и К9 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют (С5-С12)карбоциклическую или гетероциклическую кольцевую систему, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7 и где по меньшей мере два из К8, К9 и К10 являются отличными от Н;
каждый гетероциклил или гетероциклическая кольцевая система представляет собой 3-10-членное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, выбранных из азота, кислорода и серы; и каждый гетероарил представляет собой 5-7-членное ароматическое кольцо, содержащее по меньшей мере один гетероатом, выбранный из азота, кислорода и серы;
когда (С1-С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, (С1-С6)алкиламино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С4)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероциклил(С1-С6)алкокси, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил являются замещенными, они замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, гидроксила, карбоксила, (С1-С6)алкоксикарбонила, формила, ацила, тиоэфира, тиоацетата, тиоформиата, (С1-С6)алкоксила, фосфорила, фосфата, фосфоната, фосфината, амино, амидо, амидина, имина, циано, нитро, азида, сульфгидрила, (С1-С6)алкилтио, сульфата, сульфоната, сульфамоила, сульфонамидо, сульфонила, гетероциклила, (С5-С7)арил(С1-С6)алкила, (С5-С7)арила и гетероарила, где гетероциклил и гетероарил определены выше.
В некоторых вариантах воплощения Ь представляет собой СН2§СН2, СН2СН2, СН2§ или §СН2.
В некоторых вариантах воплощения Υ представляет собой Н.
В некоторых вариантах воплощения Ζ представляет собой К3(СО). В некоторых вариантах воплощения, где Ζ представляет собой К3(СО), каждый из присутствующих К3 имеют значения, отличные друг от друга (например, соединение формулы (I) не является симметричным).
В некоторых вариантах воплощения К1 и К2, каждый, представляют собой Н.
В некоторых вариантах воплощения К3 представляет собой замещенный или незамещенный (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, гетероарил(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил или гетероциклоалкил.
В некоторых вариантах воплощения Ь представляет собой СН2СН2, СН2§ или §СН2, Υ представляет собой Н, Ζ представляет собой К3(СО), К1 и К2, каждый, представляют собой Н, К3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, гетероарил(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил или гетероциклоалкил и, необязательно, каждый из присутствующих К3 имеет одинаковые значения.
- 3 026656
В некоторых вариантах воплощения Ь представляет собой СН^СН^, Υ представляет собой Н, Ζ представляет собой Кз(СО), Κι и Κ2, каждый, представляют собой Н, Κ3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный гетероарил(С1-С6)алкил, (Сз-С8)циклоалкил или гетероциклоалкил и, необязательно, каждый из присутствующих Κ3 имеет одинаковые значения.
В некоторых вариантах воплощения Ь представляет собой СН2СН2, Υ представляет собой Н, Ζ представляет собой Кз(СО), Κι и Κ2, каждый, представляют собой Н, Κ3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С5-С;)арил(С1-Сб)алкил, гетероарил(С1-Сб)алкил, (Сз-С8)циклоалкил или гетероциклоалкил, необязательно, каждый из присутствующих Κ3 имеет одинаковые значения.
В некоторых вариантах воплощения соединение выбрано из любого из соединений, раскрытых в табл. 2. Предпочтительно соединение выбрано из соединения
1, 2, б, 7, 8, 11, 13, 14, 15,
210, 231, 245, 259, 271, 286, 299, 314, 327, 342, 353, 367, 379, 391, 403, 415, 427, 439, 451, 463, 475, 487, 499, 511, 523, 539, 551, 563, 575, 587, 599, 611, 623, 635, 650, 662, 674 , 686, 699,
211, 232, 246, 260, 273, 287, 300, 315, 329, 343, 354, 368, 380, 392, 404, 416, 428, 440, 452, 464, 476, 488, 500, 512, 528, 540, 552, 564, 576, 588, 600, 612, 624, 636, 651, 663 , 675, 687,
700,
213, 234, 247, 261, 274, 288, 302, 316, 332, 344, 355, 369, 381, 393, 405, 417, 429, 441, 453, 465, 477, 489, 501, 513 , 529, 541, 553, 565, 577, 589, 601, 613, 625, 638, 652, 664, 676, 688,
701,
214, 216, 217, 219, 220, 226,
235, 236, 237, 239, 240, 241,
248, 249, 250, 251, 252,
275, 276, 278, 279, 280,
290, 291, 292, 293, 294,
304, 1038, 306, 307, 308, 309,
317, 318, 319, 320, 321, 322,
359, 360, 361, 362, 363,
370, 371, 372, 373, 374, 375,
382, 383, 384, 385, 386, 387,
394, 395, 396, 397, 398, 399,
406, 407, 408, 409, 410, 411,
418, 419, 420, 421, 422, 423, 430, 431, 432, 433, 434, 435,
442, 443, 444, 445, 446, 447,
454, 455, 456, 457, 458, 459,
467, 468, 469, 470, 471,
490, 491, 492, 493, 494, 495,
502, 503, 504, 505, 506, 507,
530, 531, 532, 533, 534, 535,
542, 543, 544, 545, 546, 547,
554, 555, 556, 557, 558, 559,
566, 567, 568, 569, 570, 571,
578, 579, 580, 581, 582, 583,
590, 591, 592, 593, 594, 595,
602, 603, 604, 605, 606, 607,
614, 615, 616, 617, 618, 619,
626, 627, 628, 629, 630, 631,
639, 640, 641, 644, 645, 646,
653, 654, 655, 656, 657, 658,
665, 666, 667, 668, 669, 670,
677, 678, 679, 680, 681, 682,
689, 690, 692, 693, 694, 695,
702, 703, 704, 705, 707, 708 или
227,
242,
256,
268,
282,
296,
310,
323,
339,
350,
364,
376,
388,
400,
412,
424,
436,
448,
460,
472,
484,
496,
508,
520,
536,
548,
560,
572,
584,
596,
608,
620,
632,
647,
659,
671,
683,
696,
709.
228, 243, 2 57, 269, 2 83,
97, 311, 324, 340, 351, 365, 377, 389, 401, 413, 425, 437, 449, 461, 473, 485, 497, 509, 521, 537, 549, 561, 573, 585, 597, 609, 621, 633, 648, 660, 672, 684, 697,
229,
244,
258,
270,
285,
298,
313,
325,
341,
352,
366,
378,
390,
402,
414,
426,
438,
450,
462,
474,
486,
498,
510,
522,
538,
550,
562,
574,
586,
598,
610,
622,
634,
649,
661,
673,
685,
698,
- 4 026656
В некоторых вариантах воплощения соединения по настоящему изобретению могут быть рацемическими. В некоторых вариантах воплощения соединения по настоящему изобретению могут быть обогащены одним энантиомером. Например, соединение по настоящему изобретению может иметь больше чем 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 или даже 95% эи или более. В некоторых вариантах воплощения соединения по настоящему изобретению могут содержать более одного стереоцентра. В некоторых таких вариантах воплощения соединения по настоящему изобретению могут быть обогащены одним или несколькими диастереомерами. Например, соединение по настоящему изобретению может иметь больше чем 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 или даже 95% ди или более.
В некоторых вариантах воплощения настоящее изобретение относится к способам лечения соединением формулы (I) или его фармацевтически приемлемой солью. В некоторых вариантах воплощения терапевтический препарат может быть обогащен для обеспечения преимущественно одного энантиомера соединения (например, формулы (I)). Энантиомерно обогащенная смесь может включать, например, по меньшей мере 60 мол.% одного энантиомера или предпочтительно по меньшей мере 75, 90, 95 или даже 99 мол.%. В некоторых вариантах воплощения соединение, обогащенное одним энантиомером, является по существу свободным от другого энантиомера, где по существу свободный означает, что такое вещество составляет меньше чем 10%, или меньше чем 5%, или меньше чем 4%, или меньше чем 3%, или меньше чем 2%, или меньше чем 1% по сравнению с количеством другого энантиомера, например, в композиции или смеси соединения. Например, если композиция или смесь соединения содержит 98 г первого энантиомера и 2 г второго энантиомера, можно сказать, что она содержит 98 мол.% первого энантиомера и только 2 мол.% второго энантиомера.
В некоторых вариантах воплощения терапевтический препарат может быть обогащен для обеспечения преимущественно одного диастереомера соединения (например, формулы (I)). Диастереомерно обогащенная смесь может включать, например, по меньшей мере 60 мол.% одного диастереомера или более предпочтительно по меньшей мере 75, 90, 95 или даже 99 мол.%.
В некоторых вариантах воплощения настоящее изобретение относится к способам лечения соединением формулы (I) или его фармацевтически приемлемой солью. В некоторых вариантах воплощения терапевтический препарат может быть обогащен для обеспечения преимущественно одного энантиомера соединения (например, формулы (I)). Энантиомерно обогащенная смесь может включать, например, по меньшей мере 60 мол.% одного энантиомера или более предпочтительно по меньшей мере 75, 90, 95 или даже 99 мол.%. В некоторых вариантах воплощения соединение, обогащенное одним энантиомером, является по существу свободным от другого энантиомера, где по существу свободный означает, что такое вещество составляет меньше чем 10%, или меньше чем 5%, или меньше чем 4%, или меньше чем 3%, или меньше чем 2%, или меньше чем 1% по сравнению с количеством другого знантиомера, например, в композиции или смеси соединения. Например, если композиция или смесь соединения содержит 98 г первого энантиомера и 2 г второго энантиомера, можно сказать, что она содержит 98 мол.%, первого энантиомера и только 2% второго энантиомера.
В некоторых вариантах воплощения терапевтический препарат может быть обогащен для обеспечения преимущественно одного диастереомера соединения (например, формулы (I)). Диастереомерно обогащенная смесь может включать, например, по меньшей мере 60 мол.% одного диастереомера или более предпочтительно по меньшей мере 75, 90, 95 или даже 99 мол.%.
В некоторых вариантах воплощения настоящее изобретение обеспечивает фармацевтический препарат для лечения рака или иммунологического или неврологического заболевания, подходящий для применения, предназначенного для человека, который является пациентом, включающий любое из соединений, представленных выше (например, соединение по настоящему изобретению, такое как соединение формулы (I)), и один или несколько фармацевтически приемлемых эксципиентов. В некоторых вариантах воплощения фармацевтические препараты имеют достаточно низкую пирогенную активность, и поэтому являются подходящими для применения, предназначенного для человека, который является пациентом.
Соединения любой из описанных выше структур можно использовать для получения лекарственных средств для лечения рака или иммунологического или неврологического заболевания.
Применения ингибиторов фермента
Г лютамин играет важную роль в качестве носителя азота, углерода и энергии. Он используется для печеночного синтеза мочевины, для почечного аммиакогенеза, для глюконеогенеза и в качестве респираторного топлива для множества клеток. Преобразование глютамина в глютамат инициируется митохондриальным ферментом глютаминазой (ОЬ8). Существуют две основные формы фермента: К-тип и Ь-тип, которые различают по их Кт значениям для глютамина и ответу на глютамат, где Кт значение, или константа Михаэлиса, представляет собой концентрацию субстрата, необходимую для достижения полумаксимальной скорости. Ь-тип, также известный как печеночный тип или СЬ82, имеет высокое значение Кт для глютамина и является глютамат-резистентным. К-тип, также известный как почечный тип или СЬ81, имеет низкое значение Кт для глютамина и ингибируется глютаматом. Альтернативная сплайсинговая форма СЬ81, которую называют глютаминазой С или ОАС, была недавно идентифицирована и имеет такие же характеристики активности, как СЬ81. В некоторых вариантах воплощения со- 5 026656 единения могут селективно ингибировать ОЬ81, ОЬ82 и ОАС. В предпочтительном варианте воплощения соединения селективно ингибируют ОЬ81 и ОАС.
Помимо того, что они служат в качестве основных структурных блоков синтеза белков, аминокислоты, как было показано, способствуют многим процессам, критическим для роста и деления клеток, и это особенно касается раковых клеток. Почти все определения рака включают ссылку на нерегулируемую пролиферацию. Многочисленные исследования метаболизма глютамина в раке показывают, что многие опухоли являются алчными потребителями глютамина (8оиЬа, Αηη. 8игд., 1993; СоШпз е1 а1., 1. Се11. РЬу8ю1., 1998; Меб., 1. ΝιιΙγ.. 2001; 8Нап\уаге е1 а1., 1. Мо1. Меб., 2011). Один вариант воплощения настоящего изобретения включает применение соединений, описанных в настоящем документе, для лечения рака.
В некоторых вариантах воплощения рак может представлять собой одно из таких заболеваний или его вариант, как острый лимфобластный лейкоз (АЬЬ), острый миелобластный лейкоз (АМЬ), адренокортикальная карцинома, связанные со СПИДом раковые заболевания (саркома Капоши и лимфома), анальный рак, рак аппендикса, атипичная тератоидная/рабдоидная опухоль, базально-клеточная карцинома, рак желчных протоков (включая внепеченочный), рак мочевого пузыря, рак кости (включая остеосаркому и злокачественную фиброзную гистиоцитому), опухоль головного мозга (такая как астроцитомы, опухоли головного мозга и спинного мозга, глиома ствола головного мозга, атипичная тератоидная/рабдоидная опухоль центральной нервной системы, эмбриональные опухоли центральной нервной системы, краниофарингиома, эпендиобластома, эпендиома, медуллобластома, медуллоэпителиома, пинеальные паренхимальные опухоли промежуточной дифференциации, супратенториальные примитивные нейроэктодермальные опухоли и пинеобластома), рак молочной железы, бронхиальные опухоли, лимфома Беркитта, базально-клеточная карцинома, рак желчных протоков (включая внепеченочный), рак мочевого пузыря, рак кости (включая остеосаркому и злокачественную фиброзную гистиоцитому), карциноидная опухоль, карцинома неизвестного происхождения, опухоли центральной нервной системы (такие как атипичная тератоидная/рабдоидная опухоль, эмбриональные опухоли и лимфома), цервикальный рак, детские раковые заболевания, хордома, хронический лимфоцитарный лейкоз (СЬЬ), хронический миелогенный лейкоз (СМЬ), хронические миелопролиферативные расстройства, рак толстой кишки, колоректальный рак, краниофарингиома, кожная Т-клеточная лимфома (грибовидный микоз и синдром Сезари), дуктальная карцинома желчных протоков (внепеченочная) ίη δίΐιι (ИС18), эмбриональные опухолы (центральной нервной системы), эндометриальный рак, эпендиобластома, эпендиома, эзофагеальный рак, эстезионейробластома, опухоли, относящиеся к семейству сарком Юинга, экстракарниальная зародышевоклеточная опухоль, экстрагонадальная зародышевоклеточная опухоль, внепеченочный рак желчных протоков, рак глаза (такой как внутриглазная меланома, ретинобластома), фиброзная гистиоцитома кости (включая злокачественную и остеосаркому), рак желчного пузыря, гастральный рак (желудка), желудочно-кишечная карциноидная опухоль, желудочно-кишечные стромальные опухоли (О18Т), зародышевоклеточная опухоль (экстракарниальная, экстрагонадальная, яичника), гестационная трофобластная опухоль, глиома, волосистоклеточный лейкоз, рак головы и шеи, рак сердца, гепатоцеллюлярный рак (печени), гистиоцитоз клеток Лангерганса, лимфома Ходжкина, гипофаренгеальный рак, внутриглазная меланома, островково-клеточные опухоли (эндокринные, поджелудочной железы), саркома Капоши, почки (включая ренальноклеточную), гистиоцитоз клеток Лангерганса, ларингеальный рак, лейкоз (включая острый лимфобластный (АЬЬ), острый миелобластный (АМЬ), хронический лимфоцитарный (СЬЬ), хронический миелогенный (СМЬ), волосистоклеточный), рак губы и полости рта, рак печени (первичный), лобулярная карцинома ίη δίίυ (ЬС18), рак легкого (немелкоклеточный и мелкоклеточный), лимфома (связанная со СПИДом, Беркитта, кожная Т-клеточная (грибовидный микоз и синдром Сезари), Ходжкина, неходжкинская, первичная центральной нервной системы (ЦНС), макроглобулинемия, Вальденстрема, мужской рак груди, злокачественная фиброзная гистиоцитома кости и остеосаркома, медуллобластома, медуллоэпителиома, меланома (включая внутриглазную (глазную)), меркель-клеточная карцинома, мезотелиома (злокачественная), метастатический плоскоклеточный рак шеи со скрытой начальной стадией, карцинома среднего тракта с вовлечением ΝυΤ гена, рак рта, множественные эндокринные неопластические синдромы, множественная миелома/плазмаклеточная опухоль, грибовидный микоз, миелодиспластические синдромы, миелодиспластические/миелопролиферативные опухоли, миелогенный лейкоз, хронический (СМЬ), миелоидный лейкоз, острый (АМЬ), миелома и множественная миелома, миелопролиферативные расстройства (хронические), рак носового прохода и параназального синуса, назофаренгеальный рак, нейробластома, неходжкинская лимфома, немелкоклеточный рак легкого, оральный рак, рак полости рта, губы и орофаренгеальный рак, остеосаркома и злокачественная фиброзная гистиоцитома кости, рак яичника (такой как эпителиальная, зародышевоклеточная опухоль и опухоль с низким злокачественным потенциалом), панкреатический рак (включая островково-клеточные опухоли), папилломатоз, параганглиома, рак параназального синуса и носового прохода, рак паращитовидной железы, рак полового члена, фаренгеальный рак, феохромоцитома, пинеальные паренхимальные опухоли промежуточной дифференциации, пинеобластома и супратенториальные примитивные нейроэктодермальные опухоли, питуитарная опухоль, плазма-клеточная опухоль/множественная миелома, плевропульмональная бластома, беременность и рак молочной железы, первичная лимфома центральной
- 6 026656 нервной системы (ЦНС), рак предстательной железы, ректальный рак, ренальноклеточный (почечный)рак, рак почечных лоханок и уретры, переходно-клеточный, ретинобластома, рабдомиосаркома, рак слюнной железы, саркома (такая как опухоли, относящиеся к семейству сарком Юинга, Капоши, мягких тканей, матки), синдром Сезари, рак кожи (такой как меланома, меркель-клеточная карцинома, немеланома), мелкоклеточный рак легкого, рак тонкого кишечника, саркома мягких тканей, сквамозноклеточная карцинома, плоскоклеточный рак шеи со скрытой начальной стадией, метастатический, рак желудка (гастральный), супратенториальные примитивные нейроэктодермальные опухоли, Т-клеточная лимфома (кожная, грибовидный микоз и синдром Сезари), тестикулярный рак, рак горла, тимома и тимусная карцинома, рак щитовидной железы, переходно-клеточный рак почечных лоханок и уретры, трофобластная опухоль (гестационная), неиззестного происхождения, необычные раковые заболевания у детей, рак уретры и почечных лоханок, переходно-клеточный рак, рак уретры, рак матки, эндометриальный, саркома матки, макроглобулинемия Вальденстрема и опухоль Вильмса.
В некоторых случаях онкогенные мутации промотируют метаболизм глютамина. Клетки, экспрессирующие онкогенный К-Как, демонстрируют повышенную утилизацию глютамина (АешЬетд е! а1., Ргос. Май. Асаб. δει. υδΑ, 2010; Садйо е! а1., Мо1. δγκί. ΒίοΙ., 2011). В некоторых вариантах воплощения раковые клетки содержат мутантный К-Как ген. В некоторых вариантах воплощения рак ассоциируется с тканью мочевого пузыря, костного мозга, молочной железы, толстой кишки, почки, печени, легкого, яичника, поджелудочной железы, предстательной железы, кожи или щитовидной железы. Известно, что с-Мус ген изменен в различных типах рака (Ζείΐετ εΐ а1., Сеиоте Ью1оду, 2003). Повышенная экспрессия Мус белка соотносится с повышенной экспрессией глютаминазы, приводя к активирующей регуляции метаболизма глютамина (Эапд е! а1., С1ш. Сапсег Кек., 2009; Сао е! а1., ИаШте, 2009). В некоторых вариантах воплощения раковые клетки содержат онкогенный с-Мус ген или имеют повышенную экспрессию Мус белка. В некоторых вариантах воплощения рак ассоциируется с тканью мочевого пузыря, кости, кишечника, молочной железы, центральной нервной системы (например, головного мозга), толстой кишки, гастральной системы (такой как желудок и кишечник), печени, легкого, яичника, предстательной железы, мышцы и кожи.
Хотя многие раковые клетки зависят от экзогенного глютамина для их выживания, степень глютаминовой зависимости среди подтипов опухолевых клеток может сделать популяцию клеток более чувствительной к снижению уровня глютамина. В качестве примера анализ генной экспрессии в раковых заболеваниях молочной железы выявил пять характерных подтипов (люминальный А, люминальный В, базальный, НЕК2+ и подобный нормальному) (Ьогйе е! а1., Ргос. ЫаЙ. Асаб. δει. υδΑ, 2001). Хотя потеря глютамина влияет на клеточный рост и жизнеспособность, базально-подобные клетки оказались более чувствительными к снижению уровня экзогенного глютамина (Кипд е! а1., Ρ^δ Сепейск, 2011). Это подтверждает концепцию, что глютамин является очень важным источником энергии в базально-подобных клеточных линиях рака молочной железы, и дает основание предположить, что ингибирование фермента глютаминазы может иметь благоприятный эффект в лечении типов рака молочной железы, состоящих из базально-подобных клеток. Тройственно-отрицательный рак молочной железы (ТМВС)характеризуется недостатком экспрессии эстрогеновых рецепторов, прогестероновых рецепторов и рецепторов человеческого эпидермального ростового фактора 2. Он имеет более высокую частоту рецидивов после химиотерапии и более плохой прогноз по сравнению с другими подтипами рака молочной железы (Эеп! е! а1., С1ш Сапсег Кек, 2007). Интересно то, что, как оказалось, существуют существенные схожести в метаболическом профилировании между ТЫВС клетками и базально-подобными клетками рака молочной железы (неопубликованные данные). Поэтому один вариант воплощения настоящего изобретения включает применение соединений, описанных в настоящем изобретении, для лечения рака молочной железы ТМВС и базальноклеточного типа.
Кахексия, массивная потеря мышечной массы, часто ассоциируется с плохим статусом работоспособности и высокой смертностью раковых пациентов. Теория, объясняющая этот процесс, заключается в том, что опухоли требуют больше глютамина, чем количество, обычно поставляемое за счет питания, таким образом, мышца, основной источник глютамина, начинает разрушаться, чтобы поставлять достаточно питания опухоли. Таким образом, ингибирование глютаминазы может снизить необходимость разрушения мышц. Один вариант воплощения настоящего изобретения включает применение соединений по настоящему изобретению для предотвращения, ингибирования или уменьшения кахексии.
Наиболее распространенным нейротрансмиттером является глютамат, который образуется в результате ферментативного преобразования глютамина через глютаминазу. Было показано, что высокие уровни глютамата являются нейротоксичными. После травматического инсульта, повреждающего нервные клетки, происходит повышенное высвобождение нейротрансмиттеров, особенно глютамата. Соответственно, было сделано гипотетическое предположение об ингибировании глютаминазы как средства лечения после ишемического инсульта, такого как удар (Ые^сотЬ, РСТ АО 99/09825, Кок!апбу, №иго1. δα., 2011). Болезнь Гентингтона представляет собой прогрессирующее фатальное неврологическое состояние. В генетических мышиных моделях болезни Гентингтона наблюдали, что раннее проявление заболевания соотносилось с нерегулируемым высвобождением глютаматв (Каутопб е! а1., Меитокшепсе, 2011). В ВИЧ-ассоциированной деменции, ВИЧ-инфицированные макрофаги демонстрируют повышаю- 7 026656 щую регуляцию активности глютаминазы и повышенное высвобождение глютамата, приводящие к повреждению нейронов (Ниапд е! а1., 1. №иго8с1, 2011). Подобным образом, в другом неврологическом заболевании, активированные микроглии в синдроме Ретта высвобождают глютамат, вызывая повреждение нейронов. Высвобождение избыточного глютамата связывают с активирующей регуляцией глютаминазы (Мае/атеа е! а1., 1. №иго5ск 2010). У мышей, которые были специально выведены как имеющие пониженные уровни глютаминазы, чувствительность к психотически-стимулирующим лекарственным средствам, таким как амфетамины, была значительно снижена, таким образом, можно предположить, что ингибирование глютаминазы может иметь благоприятный эффект в лечении шизофрении (Са1к1ег-§а1отоп е! а1., №игор8усЬорНагтасо1о§у, 2009). Биполярное расстройство представляет собой разрушительное заболевание, которое характеризуется возвратными эпизодами мании и депрессии. Это заболевание лечат психотропными средствами, такими как литий и валпроат; однако оказалось, что постоянное применение этих лекарственных средств увеличивает избыток глютаматных рецепторов (МтауаБ е! а1., 1. №игосЬет., 2011), что может привести со временем к снижению эффективности лекарственного средства. Таким образом, альтернативным лечением может быть снижение количества глютамата путем ингибирования глютаминазы. Это возможно в сочетании, но необязательно, с психотропными средствами. Мемантин, частичный антагонист рецептора Ν-метил-Э-аспартата (ΝΜΟΆΚ), представляет собой разрешенное к применению терапевтическое средство для лечения болезни Альцгеймера. В настоящее время проводятся исследования для определения возможности использования мемантина как средства для лечения сосудистой деменции и болезни Паркинсона (ОБуегагек е! а1., Сигг. АПНеипег Кек., 2011). Поскольку было показано, что мемантин также частично блокирует ΝΜΌΑ глютаматный рецептор, есть основания предполагать, что снижение уровней глютамата путем ингибирования глютаминазы могло бы также лечить болезнь Альцгеймера, сосудистую деменцию и болезнь Паркинсона. Болезнь Альцгеймера, биполярное расстройство, ВИЧ-ассоциированная деменция, болезнь Гентингтона, ишемический инсульт, болезнь Паркинсона, шизофрения, удар, травматический инсульт и сосудистая деменция являются лишь немногими примерами неврологических заболеваний, которые соотносятся с повышенными уровнями глютамата. Таким образом, ингибирование глютаминазы соединением, описанным в настоящем изобретении, может ослабить или предотвратить неврологические заболевания. Поэтому в одном варианте воплощения соединения можно использовать для лечения или профилактики неврологических заболеваний.
Активация Т лимфоцитов индуцирует клеточный рост, пролиферацию и продукцию цитокинов, предъявляя, таким образом, энергетические и биосинтетические требования к клетке. Глютамин служит в качестве донора аминогруппы для синтеза нуклеотидов, а глютамат, первый компонент в метаболизме глютамина, играет непосредственную роль в синтезе аминокислот и глутатиона, а также может участвовать в цикле Кребса для продукции энергии (Сагг е! а1., 1. 1ттипо1., 2010). Митоген-индуцированная Т-клеточная пролиферация и продукция цитокинов требуют высоких уровней метаболизма глютамина, таким образом, ингибирование глютаминазы может служить в качестве средства иммунной модуляции. В рассеянном склерозе, воспалительном аутоиммунном заболевании, активированные микроглии демонстрируют активированную глютаминазу и высвобождают повышенные уровни внеклеточного глютамата. Уровни глютамина снижаются при сепсисе, травмах, ожогах, хирургическом вмешательстве и упражнениях на выносливость (Са1бег е! а1., Атто АсШк, 1999). Эти ситуации приводят к повышенному риску иммуносупрессии у субъектов. Действительно, как правило, и экспрессия гена глютаминазы и активность фермента повышаются при Т-клеточной активности. Пациенты, которые принимали глютамин после трансплантации костного мозга, показывали более низкий уровень инфекции и уменьшение случаев развития болезни трансплантат-против-хозяина (СготеШег, Ргос. ΝιιΙγ. 8ос., 2009). Т-клеточная пролиферация и активация вовлечены во многие иммунологические заболевания, такие как воспалительное заболевание кишечника, болезнь Крона, сепсис, псориаз, артрит (включая ревматоидный артрит), рассеянный склероз, болезнь трансплантат-против-хозяина, инфекции, волчанка и диабет. В одном варианте воплощения настоящего изобретения соединения, описанные в настоящем изобретении, можно использовать для лечения или профилактики иммунологических заболеваний.
Гепатическая энцефалопатия (НЕ) представляет собой ряд преходящих и обратимых неврологических и психиатрических нарушений у пациентов с заболеванием печени или портосистемным шунтированием. Гепатическая энцефалопатия не существует отдельно и может отражать обратимую метаболическую энцефалопатию, атрофию головного мозга, отек головного мозга или комбинацию этих факторов; однако существует гипотеза, что аккумуляция аммиака, в основном происходящего из кишечника, играет ключевую роль в патофизиологии (КБипдег е! а1., СПп Иуег Όίκ, 2012). Дезаминирование глютамина в тонком кишечнике, почечном и мышечном синтезе - все способствует продукции аммиака. Нарушенный печеночный клиренс, вызванный гепатоцеллюлярным клиренсом или портосистемным шунтированием, вызывает повышенную аккумуляцию аммиака. Аммиачная токсичность воздействует на астроциты в головном мозге через глютаминсинтетазу, которая метаболизирует аммиак, образуя повышенные уровни глютамина. Глютамин, в свою очередь, привлекает воду в астроциты, приводя к набуханию и окислительной дисфункции митохондрий. Образующийся церебральный отек, как считают, способствует неврологической дисфункции, наблюдаемой в НЕ (КауШ е! а1., СПп Сак!гоеп!его1 Нера!о1, 2008). В одном
- 8 026656 варианте воплощения настоящего изобретения, соединения, описанные в настоящем документе, можно использовать для лечения или профилактики НЕ.
Было показано, что первичные сенсорные нейроны в дорсальном корешковом ганглии усиливают их глютаминазную ферментную активность после воспаления (МШег с! а1., Раш ВсьсагсН апБ Тгса1тсп1. 2012). Считают, что являющаяся следствием этого повышенная продукция глютамата способствует как центральной, так и периферической сенсибилизации, определяемой как боль. Один аспект настоящего изобретения включает применение соединений по настоящему изобретению, описанных в настоящем изобретении, для лечения или ослабления боли. В некоторых вариантах воплощения боль может представлять собой невропатическую боль, химиотерапия-индуцированную боль или воспалительную боль.
Высокие уровни глюкозы в крови, высокие уровни инсулина и инсулинорезистентность являются факторами риска для развития сахарного диабета. Подобным образом, высокое кровяное давление является фактором риска для развития сердечно-сосудистого заболевания. Согласно появившемуся недавно сообщению об исследовании большой когорты людей, эти четыре фактора риска находятся в обратной взаимозависимости с отношениями глютамина к глютамату в кровотоке (СНсп с! а1., С1гси1а1юп, 2012). Кроме того, отношениями глютамина к глютамату в плазме находятся в обратной взаимозависимости с возможным развитием сахарного диабета в течение 12 лет (СНспд с! а1., С1гси1а!юп, 2012). Результаты экспериментов с животными моделями находились в соответствии с этими данными. Мыши, получавшие богатый глютамином корм, демонстрировали более низкие уровни глюкозы в крови в пробе на переносимость глюкозы после 6 ч голодания, и интраперитонеальная инъекция глютамина, вводимая мышам, быстро снижала их кровяное давление (СНспд с! а1., С1гси1а1юп, 2012). Поэтому вполне вероятно, что ингибиторы глютаминазы, которые вызывают повышенные уровни глютамина и снижают уровни глютамата, будут снижать вероятность развития сахарного диабета и сердечно-сосудистого заболевания. В частности, печень и тонкий кишечник являются основными участками утилизации глютамина у диабетических животных, и активность глютаминазы выше нормального уровня в этих органах у стрептозотоцининдуцированных диабетических крыс (ХУаГогБ с! а1., ВюсНст 1., 1984; МИШсих с! а1., Ат. 1. РНу8ю1. ЕпБгосгшоЕ Мс!аЬ, 2004).
Пролиферация раковых клеток требует синтеза липидов. В нормальных условиях ацетил-СоА, используемый для синтеза липидов, образуется из митохондриального пула пирувата, который происходит из гликолиза. Но в гипоксических условиях, таких как условия, обычно наблюдаемые в опухолевом окружении, происходит даун-регуляция преобразования пирувата в ацетил-СоА в митохондриях. Последние исследования, описанные в Мс!а11о с! а1. (2011) и Ми11сп с! а1. (2011), показали, что в таких гипоксических условиях клетки вместо этого главным образом переключаются на использование пути с вовлечением восстановительного карбоксилирования альфа-кетоглутарата с образованием ацетил-СоА для синтеза липидов. Первая стадия в этом пути включает преобразование глютамина в глютамат через ферменты глютаминазы. Затем глютамат преобразуется в альфа-кетоглутарат, и образовавшийся альфакетоглутарат преобразуется в изоцитрат на стадии восстановительного карбоксилирования, опосредованного ферментами изоцитратдегидрогеназами.
Переключение на этот путь восстановительного карбоксилирования также происходит в некоторых клеточных линиях почечной карциномы, которые содержат либо поврежденные митохондрии, либо нарушенный сигнал для индукции фермента, ответственного за преобразование гликолитического пирувата в ацетил-СоА (Ми11сп с! а1., 2011). Подобное переключение происходит в клетках, на которые воздействуют ингибиторами митохондриальной респираторной цепи, такими как метформин, ротенон и антимицин (Ми11сп а! а1. 2011). Поэтому в некоторых вариантах воплощения настоящего изобретения предлагается использование комбинаций ингибиторов митохондриальной респираторной цепи и ингибиторов глютаминазы для одновременного повышения зависимости раковых клеток от глютаминазы-зависимых путей для синтеза липидов с одновременным ингибированием именно этих путей.
Повышенная зависимость от гликолиза в опухолевых клетках по-видимому возникает из-за того, что гипоксическое опухолевое окружение нарушает митохондриальную респирацию. Кроме того, истощение глюкозы индуцирует апоптоз в клетках, трансформированных МУС онкогеном. Эти данные говорят о том, что ингибирование гликолиза могло бы иметь терапевтическое значение в предотвращении пролиферации раковых клеток. В настоящее время известно множество документально описанных гликолитических ингибиторов (Рсйсапо с! а1., 2006). Однако, как указано в 2Нао с! а1. (2012), существующие гликолитические ингибиторы в основном не обладают высокой эффективностью, и необходимы высокие дозы, которые могут вызывать высокие уровни системной токсичности. Поскольку раковые клетки типично используют как глюкозу, так и глютамин на более высоких уровнях по сравнению с нормальными клетками, нарушение утилизации каждого из таких метаболитов, вероятно, должно иметь синергический эффект. Поэтому в некоторых вариантах воплощения настоящего изобретения предлагается использование комбинаций ингибиторов гликолитического пути и ингибиторов глютаминазы. Такие гликолитические ингибиторы включают 2-дезоксиглюкозу, лонидамин, 3-бромпируват, иматиниб, окситиамин, рапамицин и их фармакологические эквиваленты. Гликолиз можно ингибировать опосредованно путем истощения ΝΑΌ+ через ДНК повреждение, индуцированное ДНК-алкилирующими средствами через путь, активированный поли(АЭР-рибоза)полимеразой (Уопд с! а1., 2004). Поэтому в одном вариан- 9 026656 те воплощения настоящего изобретения предлагается использование комбинации ДНК-алкилирующих средств и ингибиторов глютаминазы. Раковые клетки используют путь пентозафосфата вместе с гликолитическим путем для образования метаболических интермедиатов, происходящих из глюкозы. Поэтому в другом варианте воплощения настоящего изобретения предлагается использование комбинации ингибиторов пентозафосфата, таких как 6-аминоникотинамид, вместе с ингибиторами глютаминазы.
В некоторых вариантах воплощения различные соединения по настоящему изобретению можно вводить совместно с одним или несколькими другими соединениями по настоящему изобретению. Кроме того, такие комбинации можно вводить совместно с другими терапевтическими средствами, такими как другие средства, подходящие для лечения рака, иммунологических или неврологических заболеваний, такие как средства, указанные выше.
Определения
Термин ацил является общепринятым в данной области техники и относится к группе, представленной общей формулой гидрокарбил-С(О)-, предпочтительно алкил-С(О)-.
Термин ациламино является общепринятым в данной области техники и относится к амино группе, замещенной ацильной группой, и может быть представлен, например, формулой гидрокарбилС(О)МН-.
Термин алкокси относится к алкильной группе, предпочтительно к низшей алкильной группе, содержащей атом кислорода, присоединенный к ней. Репрезентативные алкокси группы включают метокси, этокси, пропокси, трет-бутокси и подобные.
Термин алкоксиалкил относится к алкильной группе, замещенной алкокси группой, и может быть представлен общей формулой алкил-О-алкил.
Термин алкенил, как он используется в настоящем описании, относится к алифатической группе, содержащей по меньшей мере одну двойную связь, и предполагается, что он включает как незамещенные алкенилы, так и замещенные алкенилы, последние относятся к алкенильным группам, содержащим заместители, замещающие атом водорода по одному или нескольким атомом углерода алкенильной группы. Такие заместители могут присутствовать по одному или нескольким атомом углерода, которые включены или не включены в одну или несколько двойных связей. Кроме того, такие заместители включают все заместители, предусматриваемые для алкильных групп, которые обсуждаются ниже, за исключением случаев, когда это недопустимо с точки зрения стабильности. Например, предусматривается замещение алкенильных групп одной или несколькими алкильными, карбоциклильными, арильными, гетероциклильными или гетероарильными группами.
Алкильная группа или алкан представляет собой линейный или разветвленный неароматический углеводород, который является полностью насыщенным. Типично, линейная или разветвленная алкильная группа содержит от 1 до около 20 атомов углерода, предпочтительно от 1 до около 10, если не определено иначе. Примеры линейных и разветвленных алкильных групп включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, гексил, пентил и октил. С1-С6-линейная или разветвленная алкильная группа также указана как низшая алкильная группа.
Кроме того, термин алкил (или низший алкил), как он используется повсеместно в описании изобретения, примерах и в формуле изобретения, включает как незамещенные алкилы, так и замещенные алкилы, последние относятся к алкильным группам, содержащим заместители, замещающие атом водорода по одному или нескольким атомом углерода углеводородного скелета. Указанные заместители, выбраны из галогена, гидроксила, карбоксила, (СуСЦалкоксикарбонила, формила, ацила, тиоэфира, тиоацетата, тиоформиата, (С1-С6)алкоксила, фосфорила, фосфата, фосфоната, фосфината, амино, амидо, амидина, имина, циано, нитро, азида, сульфгидрила, (С1-С6)алкилтио, сульфата, сульфоната, сульфамоила, сульфонамидо, сульфонила, гетероциклила, (С5-С7)арил(С1-С6)алкила, (С5-С7)арила и гетероарила, где каждый гетероциклил или гетероциклическая кольцевая система представляет собой 3-10членное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, выбранных из азота, кислорода и серы; и каждый гетероарил представляет собой 5-7-членное ароматическое кольцо, содержащее по меньшей мере один гетероатом, выбранный из азота, кислорода и серы.
Термин Сх-У, при использовании в сочетании с химической группой, такой как, ацил, ацилокси, алкил, алкенил, алкинил или алкокси, включает группы, которые содержат от х до у атомов углерода в цепи. Например, термин Сх-уалкил относится к замещенным или незамещенным насыщенным углеводородным группам, включая линейные алкильные и разветвленные алкильные группы, которые содержат от х до у атомов углерода в цепи, включая галогеналкильные группы, такие как трифторметил и 2,2,2-трифторэтил и т.п. С0алкил указывает водород, где эта группа находится в концевом положении, связь является внутренней. Термины С2-уалкенил и С2-уалкинил относятся к замещенным или незамещенным ненасыщенным алифатическим группам, аналогичным по длине и возможному замещению алкилам, описанным выше, но которые содержат по меньшей мере одну двойную или тройную связь соответственно.
Термин алкиламино, как он используется в настоящем описании, относится к амино группе, замещенной по меньшей мере одной алкильной группой.
- 10 026656
Термин алкилтио, как он используется в настоящем описании, относится к тиольной группе, замещенной алкильной группой, и может быть представлен общей формулой алкил-8-.
Термин амид, как он используется в настоящем описании, относится к группе У, где каждый К10 независимо представляет собой водород или гидрокарбильную группу или два К10, взятые вместе с N атомом, с которым они связаны, образуют гетероцикл, содержащий от 4 до 8 атомов в кольцевой структуре.
Термины амин и амино являются общепринятыми в данной области и относятся как к незамещенным, так и к замещенным аминам и их солям, например группе, которая может быть представлена формулой
Я-ιο или Н10 где каждый К10 независимо представляет собой атом водорода или гидрокарбильную группу или два К10, взятые вместе с N атомом, с которым они связаны, образуют гетероцикл, содержащий от 4 до 8 атомов в кольцевой структуре.
Термин аминоалкил, как он используется в настоящем описании, относится к алкильной группе, замещенной аминогруппой.
Термин арил как он используется в настоящем описании, включает замещенные или незамещенные моноциклические ароматические группы, в которых каждый атом кольца представляет собой углерод. Предпочтительно кольцо представляет собой 5-7-членное кольцо, более предпочтительно 6-членное кольцо. Термин арил также включает полициклические кольцевые системы, содержащие два или более циклических колец, в которых два или более атомов углерода являются общими для двух смежных колец, где по меньшей мере одно из колец является ароматическим, например, другие циклические кольца могут представлять собой циклоалкилы, циклоалкенилы, циклоалкинилы, арилы, гетероарилы и/или гетероциклилы. Арильные группы включают бензол, нафталин, фенантрен, фенол, анилин и подобные.
Термины карбоцикл и карбоциклический, как они используются в настоящем описании, относятся к насыщенному или ненасыщенному кольцу, в котором каждый атом кольца представляет собой углерод. Термин карбоцикл включает как ароматические карбоциклы, так и неароматические карбоциклы. Неароматические карбоциклы включают как циклоалкановые кольца, в которых все атомы углерода являются насыщенными, так и циклоалкеновые кольца, которые содержат по меньшей мере одну двойную связь. Карбоцикл включает 5-7-членные моноциклические и 8-12-членные бициклические кольца. Каждое кольцо бициклического карбоцикла может быть выбрано из насыщенных, ненасыщенных и ароматических колец. Карбоцикл включает бициклические молекулы, в которых один, два или три или более атомов являются общими для двух колец. Термин конденсированный карбоцикл относится к бициклическому карбоциклу, в котором каждое из колец содержит два смежных атома, общих с другим кольцом. Каждое кольцо конденсированного карбоцикла может быть выбрано из насыщенных, ненасыщенных и ароматических колец. В иллюстративном варианте воплощения ароматическое кольцо, например фенил, может быть конденсированным с насыщенным или ненасыщенным кольцом, например циклогексаном, циклопентаном или циклогексеном. Любая комбинация насыщенных, ненасыщенных и ароматических бициклических колец, которую позволяет валентность, включена в определение карбоциклический. Примеры карбоциклов включают циклопентан, циклогексан, бицикло[2.2.1]гептан, 1,5-циклооктадиен,1,2,3,4-тетрагидронафталин, бицикло[4.2.0]окт-3-ен, нафталин и адамантан. Примеры конденсированных карбоциклов включают декалин, нафталин, 1,2,3,4-тетрагидронафталин, бицикло[4.2.0]октан, 4,5,6,7-тетрагидро-1Н-инден и бицикло[4.1.0]гепт-3-ен. Карбоциклы могут быть замещены по любым одному или нескольким положениям, способным содержать атом водорода.
Циклоалкильная группа представляет собой циклический углеводород, который является полностью насыщенным.
Циклоалкил включает моноциклические и бициклические кольца. Типично, моноциклическая циклоалкильная группа содержит от 3 до около 10 атомов углерода, более типично от 3 до 8 атомов углерода, если не определено иначе. Второе кольцо бициклического циклоалкила может быть выбрано из насыщенных, ненасыщенных и ароматических колец. Циклоалкил включает бициклические молекулы, в которых один, два или три или более атомов являются общими для двух колец. Термин конденсированный циклоалкил относится к бициклическому циклоалкилу, в котором каждое из колец содержит два смежных атома, общих с другим кольцом. Второе кольцо конденсированного бициклического циклоалкила может быть выбрано из насыщенных, ненасыщенных и ароматических колец. Циклоалкенильная группа представляет собой циклический углеводород, содержащий одну или несколько двойных связей.
Термин карбоциклилалкил, как он используется в настоящем описании, относится к алкильной группе, замещенной карбоциклической группой.
Термин карбокси, как он используется в настоящем описании, относится к группе, представлен- 11 026656 ной формулой -СО2Н.
Термин сложный эфир, как он используется в настоящем описании, относится к группе -С(О)ОК10, где К.10 представляет собой гидрокарбильную группу.
Термины гало и галоген как они используются в настоящем описании, означают галоген и включают хлор, фтор, бром и йод.
Термины гетаралкил и гетероаралкил, как они используются в настоящем описании, относятся к алкильной группе, замещенной гетарильной группой.
Термин гетероалкил, как он используется в настоящем описании, относится к насыщенной или ненасыщенной цепи из атомов углерода и по меньшей мере одного гетероатома, где никакие два гетероатома не являются смежными.
Термины гетероарил и гетарил относится к собой 5-7-членным ароматическим кольцам, содержащим по меньшей мере один гетероатом, выбранный из азота, кислорода и серы.
Термины гетероциклил, гетероцикл и гетероциклический относятся к 3-10-членное кольцам, содержащим 1-4 гетероатома, выбранных из азота, кислорода и серы.
Термин гетероциклилалкил, как он используется в настоящем описании, относится к алкильной группе, замещенной гетероциклической группой.
Термин гидрокарбил, как он используется в настоящем описании, относится к группе, которая связана через углеродный атом, который не содержит =О или =8 заместителя, и типично содержит по меньшей мере одну углерод-водородную связь и в основном углеродный скелет, но необязательно может включать гетероатомы. Таким образом, группы, такие как метил, этоксиэтил, 2-пиридил и трифторметил, считаются гидрокарбилами для целей настоящей заявки, но заместители, такие как ацетил (который содержит =О заместитель по связывающему углероду) и этокси (который связан через кислород, а не углерод)не считаются гидрокарбилами. Гидрокарбильные группы включают, но не ограничиваются этим, арил, гетероарил, карбоцикл, гетероциклил, алкил, алкенил, алкинил и комбинации таких групп.
Термин гидроксиалкил, как он используется в настоящем описании, относится к алкильной группе, замещенной гидрокси группой.
Термин низший, при использовании в сочетании с химической группой, такой как, ацил, ацилокси, алкил, алкенил, алкинил или алкокси, включает группы, содержащие десять или меньше неводородных атомов в заместителе, предпочтительно шесть или меньше. Низший алкил, например, относится к алкильной группе, которая содержит десять или меньше атомов углерода, предпочтительно шесть или меньше. В некоторых вариантах воплощения ацильные, ацилокси, алкильные, алкенильные, алкинильные или алкокси заместители, определенные в настоящем описании, представляют собой, соответственно, низший ацил, низший ацилокси, низший алкил, низший алкенил, низший алкинил или низший алкокси, независимо от того присутствуют они отдельно или в комбинации с другими заместителями, такими, которые описаны для гидроксиалкила и аралкила (в этом случае, например, атомы в арильной группе не подсчитывают, когда подсчитывают атомы углерода в алкильном заместителе).
Термин силил относится к группе кремния с тремя гидрокарбильными группами, присоединенными к ней.
Термин замещенный относится к группам, содержащим заместители, замещающие атом водорода по одному или нескольким атомам углерода скелета. Должно быть понятно, что замещение или замещенный включает подразумеваемое условие, что такое замещение находится в соответствии с допустимой валентностью замещаемого атома и заместителя, и что замещение приводит к стабильному соединению, например, которое не претерпевает самопроизвольного преобразования, такого как путем перегруппировки, циклизации, элиминации и т.п. В широком аспекте, возможные заместители выбраны из галогена, гидроксила, карбоксила, (С1-С6)алкоксикарбонила, формила, ацила, тиоэфира, тиоацетата, тиоформиата, (С1-С6)алкоксила, фосфорила, фосфата, фосфоната, фосфината, амино, амидо, амидина, имина, циано, нитро, азида, сульфгидрила, (С1-С6)алкилтио, сульфата, сульфоната, сульфамоила, сульфонамидо, сульфонила, гетероциклила, (С5-С7)арил(С1-С6)алкила, (С5-С7)арила и гетероарила, где гетероциклил и гетероарил определены выше.
Термин сульфат является общепринятым в данной области техники и относится к группе -О8О3Н или ее фармацевтически приемлемой соли.
Термин сульфонамид является общепринятым в данной области техники и относится к группе, представленной общими формулами
где К9 и К10 независимо представляет собой водород или гидрокарбил, такой как алкил, или К9 и К10, взятые вместе с промежуточным атомом(атомами), образуют гетероцикл, содержащий от 4 до 8 атомов в кольцевой структуре.
Термин сульфоксид является общепринятым в данной области техники и относится к группе
- 12 026656
-8(О)-К10, где Кю представляет собой гидрокарбил.
Термин сульфонат является общепринятым в данной области техники и относится к группе §О3Н или ее фармацевтически приемлемой соли.
Термин сульфон является общепринятым в данной области техники и относится к группе -8(О)2-К10, где К10 представляет собой гидрокарбил.
Термин тиоалкил, как он используется в настоящем описании, относится к алкильной группе, замещенной тиольной группой.
Термин сложный тиоэфир, как он используется в настоящем описании, относится к группе -С(О)8К10 или -§С(О)К10, где К10 представляет собой гидрокарбил.
Термин простой тиоэфир, как он используется в настоящем описании, является эквивалентным простому эфиру, где кислород заменен серой.
Термин мочевина является общепринятым в данной области техники и может быть представлен общей формулой
ΑΝΛΝ-Βΐ1
где К9 и К10 независимо представляют собой водород или гидрокарбил, такой как алкил, или любой из К9, взятый вместе с К10 и промежуточным атомом(ами), образуют гетероцикл, содержащий от 4 до 8 атомов в кольцевой структуре.
Защитная группа относится к группе атомов, которые при присоединении к реакционноспособной функциональной группе в молекуле маскируют, уменьшают или препятствуют реакционной способности функциональной группы. Типично, защитная группа может быть селективно удалена, если это желательно, в процессе синтеза. Примеры защитных групп можно найти в Стееие апб \Уи1х. РгоЮеИуе Сгоирх ίη Отдаше Сйет1х1ту, 3гб Еб., 1999, 1оЬп \УПеу & Зопх, ΝΥ и в Нагпхоп е1 а1., Сотрепбшт о£ 5уп1Не11С Отдаше МеПтобх, Уо1х. 1-8, 1971-1996, 1оЬп \УПеу & δοηχ, ΝΥ. Репрезентативные азот-защитные группы включают, но не ограничиваются этим, формил, ацетил, трифторацетил, бензил, бензилоксикарбонил (’ΌΒΖ), трет-бутоксикарбонил (Вое), триметилсилил (ТМ§), 2-триметилсилил-этансульфонил (ТЕ§), тритил и замещенные тритильные группы, аллилоксикарбонил, 9-флуоренилметилоксикарбонил (РМОС), нитро-вератрилоксикарбонил (’^УОС) и подобные. Репрезентативные гидроксил-защитные группы включают, но не ограничиваются этим, группы, где гидроксильная группа является либо ацилированной, (этерифицированной), либо алкилированной, такие как бензил и тритиловые простые эфиры, а также алкиловые простые эфиры, тетрагидропираниловые простые эфиры, триалкилсилиловые простые эфиры (например, ТМ§ или Т1Р§ группы), гликолевые простые эфиры, такие как этиленгликолевые и пропиленгликолевые производные, и аллиловые простые эфиры.
Термин специалисты в области обеспечения здравоохранения относится к индивидуумам или организациям, которые обеспечивают услуги, связанные со здравоохранением, отдельным субъектам, сообществу и т.п. Примеры специалистов в области обеспечения здравоохранения включают лечащих врачей, больницы, поселки для пенсионеров с постоянным уходом, реабилитационные центры, учреждения, оказывающие помощь при подострых состояниях, клиники, специализированные клиники широкого профиля, автономные амбулаторные центры, агенства, осуществляющие помощь на дому, и организации медицинского обеспечения.
Как это используется в настоящем описании, терапевтическое средство, которое препятствует развитию расстройства или состояния, относится к соединению, которое, в статистическом образце, снижает частоту расстройства или состояния в обработанном образце по сравнению с необработанным контрольным образцом или замедляет начало развития или снижает тяжесть одного или нескольких симптомов расстройства или состояния по сравнению с необработанным контрольным образцом.
Термин лечение включает профилактическое и/или терапевтическое лечение. Термин профилактическое или терапевтическое лечение является общепринятым в данной области и включает введение хозяину одной или нескольких композиций по настоящему изобретению. Если композицию вводят до клинического проявления нежелательного состояния (например, заболевания или другого нежелательного состояния животного-хозяина), тогда лечение является профилактическим (т.е. оно защищает хозяина против развития нежелательного состояния), но если композицию вводят после проявления нежелательного состояния, лечение является терапевтическим (т.е. оно предназначено для снижения тяжести, облегчения или стабилизации существующего нежелательного состояния или его побочных эффектов).
- 13 026656
Фармацевтические композиции
Композиции и способы по настоящему изобретению можно использовать для лечения субъекта, нуждающегося в этом. В некоторых вариантах воплощения субъект представляет собой млекопитающее, такое как человек или отличное от человека млекопитающее. При введении животному, такому как человек, композицию или соединение предпочтительно вводят в виде фармацевтической композиции, включающей, например, соединение по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтически приемлемые носители хорошо известны в данной области техники и включают, например, водные растворы, такие как вода или физиологически забуференный солевой раствор или другие растворители или наполнители, такие как гликоли, глицерин, масла, такие как оливковое масло или органические сложные эфиры для инъекций. В предпочтительном варианте воплощения, когда такие фармацевтические композиции используют для введения человеку, особенно для инвазивных путей введения (т.е. путей, таких как инъекция или имплантация, которые включают транспорт или диффузию через эпителиальный барьер), водный раствор является апирогенным или по существу апирогенным. Эксципиенты могут быть выбраны, например, таким образом, чтобы осуществлять замедленное высвобождение средства или селективно действовать на одну или несколько клеток, тканей или органов. Фармацевтическая композиция может быть в виде стандартной лекарственной формы, такой как таблетка, капсула (включая капсулу, получаемую путем разбрызгивания, и желатиновую капсулу), гранула, лиофилизированный препарат для реструктурирования, порошок, раствор, сироп, суппозиторий, инъекция или подобные. Композиция также может присутствовать в системе чрескожной доставки, например, в наносимом на кожу пластыре. Композиция также может присутствовать в растворе, подходящем для местного введения, таком как глазные капли.
Фармацевтически приемлемый носитель может содержать физиологически приемлемые вещества, которые действуют, например, как стабилизирующие, повышающие растворимость или повышающие абсорбцию соединения, такого как соединение по настоящему изобретению. Такие физиологически приемлемые вещества включают, например, углеводы, такие как глюкоза, сахароза или декстраны, антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота или глутатион, хелатообразующие вещества, низкомолекулярные белки или другие стабилизаторы или эксципиенты. Выбор фармацевтически приемлемого носителя, включая физиологически приемлемое вещество, зависит, например, от пути введения композиции. Препарат или фармацевтическая композиция может представлять собой самоэмульгирующуюся систему доставки лекарственного средства или самомикроэмультирующуюся систему доставки лекарственного средства. Фармацевтическая композиция (препарат) также может представлять собой липосому или другую полимерную матрицу, которая может содержать включенное в нее, например, соединение по настоящему изобретению. Липосомы, например, которые включают фосфолипиды или другие липиды, представляют собой нетоксичные физиологически приемлемые и метаболизируемые носители, которые можно относительно просто получить и вводить.
Фраза фармацевтически приемлемый используется в настоящем описании как относящаяся к таким соединениям, веществам, композициям и/или лекарственным формам, которые, согласно взвешенной медицинской оценке, являются подходящими для применения в контакте с тканями человека и животных, без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергических реакций или других проблем или осложнений, соответствуя разумному соотношению польза/риск.
Фраза фармацевтически приемлемый носитель, как она используется в настоящем описании, означает фармацевтически приемлемое вещество, композицию или носитель, такой как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, эксципиент, растворитель или инкапсулирующее вещество. Каждый носитель должен быть приемлемым в том смысле, что он должен быть совместимым с другими ингредиентами композиции и не быть вредным для пациента. Некоторые примеры веществ, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают (1) сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; (2) крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; (3) целлюлозу и ее производные, такие как натрий карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; (4) порошкообразный трагакант; (5) солод; (6) желатин; (7) тальк; (8) эксципиенты, такие как масло какао и воски для суппозиториев; (9) масла, такие как арахисовое масле, масло семян хлопчатника, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; (10) гликоли, такие как пропиленгликоль; (11) полиолы, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; (12) сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; (13) агар; (14) буферные вещества, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; (15) альгиновую кислоту; (16) апирогенную воду; (17) изотонический солевой раствор; (18) раствор Рингера; (19) этиловый спирт; (20) фосфатно-буферные растворы и (21) другие нетоксичные совместимые вещества, используемые в фармацевтических композициях.
Фармацевтическую композицию (препарат) можно вводить субъекту любым из множества различных путей введения, включая, например, пероральный (например, вливания в виде водных или неводных растворов или суспензий, таблетки, капсулы (включая капсулы, получаемые путем разбрызгивания, и желатиновые капсулы), болюсы, порошки, гранулы, пасты для нанесения на язык); абсорбцию через слизистую оболочку полости рта (например, сублингвально); анальный, ректальный или вагинальный (например, в виде пессария, крема или пенки); парентерально (включая внутримышечный, внутривенный,
- 14 026656 подкожный или интратекальный, например, в виде стерильного раствора или суспензии); назальный; интраперитонеальный; подкожный; чрескожный (например, в виде пластыря, наносимого на кожу); и местный (например, в виде крема, мази или спрея, наносимого на кожу, или в виде глазных капель). Соединение также может быть сформулировано для ингаляции. В некоторых вариантах воплощения соединение можно просто растворить или суспендировать в стерильной воде. Подробную информацию о подходящих путях введения и композициях, подходящих для этого, можно найти, например, в патентах США № 6110973, 5763493, 5731000, 5541231, 5427798, 5358970 и 4172896, а также в патентах, на которые имеются ссылки в указанных выше патентах.
Композиции удобным образом могут быть представлены в стандартной лекарственной форме и могут быть получены любыми способами, хорошо известными в фармацевтике. Количество активного ингредиента, которое может быть объединено с веществом-носителем, для получения одноразовой лекарственной формы, варьируется в зависимости от хозяина, подлежащего лечению, конкретного способа введения. Количество активного ингредиента, которое может быть объединено с веществом-носителем, для получения одноразовой лекарственной формы, как правило, представляет собой такое количество соединения, которое дает терапевтический эффект. Как правило, исходя из 100%, это количество находится в пределах от около 1 до около 99% активного ингредиента, предпочтительно от около 5 до около 70%, наиболее предпочтительно от около 10 до около 30%.
Способы получения этих составов или композиций включают стадию приведения в ассоциацию активного соединения, такого как соединение по настоящему изобретению, с носителем и, необязательно, с одним или несколькими вспомогательными ингредиентами. Как правило, композицию получают путем приведения соединения по настоящему изобретению в однородную и тесную ассоциацию с жидкими носителями или тонкоизмельченными твердыми носителями, или и теми и другими, и затем, если необходимо, формования продукта.
Композиции по настоящему изобретению, подходящие для перорального введения, могут быть в форме капсул (включая капсулы, получаемую путем разбрызгивания, и желатиновые капсулы), саше, пилюль, таблеток, пастилок (с использованием ароматизированной основы, обычно сахарозы и аравийской камеди или трагаканта), лиофилизированного препарата, порошков, гранул, или в виде раствора или суспензии в водной или неводной жидкости, или в виде жидкой эмульсии масло-в-воде или вода-в-масле, или в виде эликсира или сиропа, или в виде пастилок (с использованием инертной основы, такой как желатин и глицерин или сахароза и аравийская камедь), и/или в виде полосканий для рта и т.п., при этом каждая форма содержит предварительно определенное количество соединения по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента. Композиции или соединения также можно вводить в виде болюса, электуария или пасты.
Для получения твердых лекарственных форм для перорального введения (капсулы (включая капсулы, получаемые путем разбрызгивания, и желатиновые капсулы), таблетки, пилюли, драже, порошки, гранулы и подобные) активный ингредиент смешивают с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми носителями, такими как цитрат натрия или дикальцийфосфат, и/или любым из следующих веществ: (1) наполнители или создающие объем вещества, такие как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и/или кремневая кислота; (2) связующие, такие как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и/или аравийская камедь; (3) увлажнители, такие как глицерин; (4) разрыхлители, такие как агар-агар, карбонат кальция, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия; (5) замедляющие растворение вещества, такие как парафин; (6) ускорители абсорбции, такие как четвертичные аммониевые соединения; (7) смачивающие вещества, такие как, например, цетиловый спирт и глицерин моностеарат; (8) абсорбенты, такие как каолин и бентонитовая глина; (9) смазывающие вещества, такие тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия и смеси таких веществ; (10) комплексообразующие вещества, такие как модифицированные и немодифицированные циклодекстрины; и (11) красители. В случае капсул (включая капсулы, получаемые путем разбрызгивания, и желатиновые капсулы), таблеток и пилюль, фармацевтические композиции также могут включать буферные вещества. Твердые композиции подобного типа также можно использовать в качестве наполнителей в желатиновых капсулах с мягким и твердым наполнением с использованием таких эксципиентов, как лактоза или молочные сахара, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и подобные вещества.
Таблетку можно получить путем прессования или формования, необязательно с одним или несколькими вспомогательными ингредиентами. Прессованные таблетки можно получить с использованием связующего (например, желатина или гидроксипропилметилцеллюлозы), смазывающего вещества, инертного разбавителя, консерванта, разрыхлителя (например, натрий крахмалгликолята или сшитой натрий карбоксиметилцеллюлозы), поверхностно-активного или диспергирующего вещества.
Формованные таблетки можно получить путем формования в подходящей машине смеси порошкообразного соединения, смоченного инертным жидким разбавителем.
Таблетки и другие твердые лекарственные формы фармацевтических композиций, такие как драже, капсулы (включая капсулы, получаемые путем разбрызгивания, и желатиновые капсулы), пилюли и гранулы, необязательно могут быть с насечкой или могут быть получены с покрытиями и оболочками, та- 15 026656 кими как энтеросолюбильные покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области формулирования фармацевтических препаратов. Они также могут быть сформулированы таким образом, чтобы обеспечивать медленное или контролируемое высвобождение активного ингредиента, содержащегося в них, с использованием, например, гидроксипропилметилцеллюлозы в разных пропорциях для обеспечения желаемого профиля высвобождения, других полимерных матриц, липосом и/или микросфер. Их можно стерилизовать, например, путем фильтрования через удерживающий бактерии фильтр или путем включения стеризирующих веществ в форме стерильных твердых композиций, которые можно растворить в стерильной воде или некоторых других стерильных средах для инъекций непосредственно перед применением. Эти композиции также необязательно содержат вещества, делающие композицию непрозрачной, и могут иметь такую композицию, которая позволяет высвобождать активный ингредиент (ингредиенты) только или преимущественно в определенной части желудочно-кишечного тракта, необязательно замедленным образом. Примеры композиций для включения в них лекарственного средства, которые можно использовать, включают полимерные вещества и воски. Активный ингредиент также может быть в микроинкапсулированной форме, если это является подходящим, с одним или несколькими из описанных выше эксципиентов.
Жидкие лекарственные формы, полезные для перорального введения, включают фармацевтически приемлемые эмульсии, лиофилизированные препараты для реструктурирования, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. В дополнение к активному ингредиенту, жидкие лекарственные формы могут содержать инертные разбавители, традиционно используемые в данной области, такие как, например, вода или другие растворители, циклодекстрины и их производные, солюбилизирующие вещества и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, масла (в частности, масло семян хлопчатника, арахисовое, кукурузное, из проростков семян, оливковое, касторовое и кунжутное масла), глицерин, тетрагидрофуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот сорбитана и смеси таких веществ.
Помимо инертных разбавителей, пероральные композиции также могут включать адъюванты, такие как смачивающие вещества, эмульгаторы и суспендирующие вещества, подсластители, отдушки, красители, ароматизаторы и консерванты.
Суспензии, в дополнение к активным соединениям, могут содержать суспендирующие вещества, такие как, например, этоксилированные изостеариловые спирты, полиоксиэтиленсорбит и сложные эфиры сорбитана, микрокристаллическая целлюлоза, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант и смеси таких веществ.
Сформулированные фармацевтические композиции для ректального, вагинального или уретрального введения могут быть представлены в виде суппозитория, который можно получить путем смешивания одного или нескольких активных соединений с одним или несколькими подходящими нераздражающими эксципиентами или носителями, включающими, например, масло какао, полиэтиленгликоль, воск для суппозиториев или салицилат, и который является твердым при комнатной температуре, но жидким при температуре тела и поэтому будет плавиться в прямой кишке или вагинальной полости и высвобождать активное соединение.
Сформулированные фармацевтические композиции для введения в рот могут быть представлены в виде полоскания для рта или перорального спрея или пероральной мази.
Альтернативно или дополнительно, композиции могут быть сформулированы для доставки через катетер, стент, проволоку или другое интралюминальное устройство. Доставка через такие устройства может быть особенно полезной для доставки в мочевой пузырь, уретру, мочеточник, прямую кишку или кишечник.
Композиции, которые являются подходящими для вагинального введения, также включают пессарии, тампоны, кремы, гели, пасты, пенки или композиции для нанесения спреем, содержащие такие носители, которые известны в данной области как подходящие.
Лекарственные формы для местного или чрескожного введения включают порошки, спреи, мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, растворы, пластыри и препараты для ингаляций. Активное соединение можно смешать в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и с любыми консервантами, буферами или пропеллентами, которые могут быть необходимыми.
Мази, пасты, кремы и гели могут содержать, в дополнение к активному соединению, эксципиенты, такие как животные и растительные жиры, масла, воски, парафины, крахмал, трагакант, производные целлюлозы, полиэтиленгликоли, силиконы, бентониты, кремневая кислота, тальк и оксид цинка или смеси таких веществ.
Порошки и спреи могут содержать, в дополнение к активному соединению, эксципиенты, такие как лактоза, тальк, кремневая кислота, гидроксид алюминия, силикаты кальция и полиамидный порошок или смеси этих веществ. Спреи могут дополнительно содержать традиционные пропелленты, такие как хлорфторуглеводороды и летучие незамещенные углеводороды, такие как бутан и пропан.
Чрескожные пластыри имеют дополнительное преимущество обеспечения контролируемой доставки соединения по настоящему изобретению в организм. Такие лекарственные формы можно получить
- 16 026656 путем растворения или диспергирования активного соединения в подходящей среде. Усилители абсорбции также можно использовать для увеличения потока соединения через кожу. Скорость такого потока можно контролировать либо путем обеспечения контролирующей скорость мембраны, либо путем диспергирования соединения в полимерной матрице или геле.
Композиции для глазного введения, глазные мази, порошки, растворы и т.п., также предусматриваются как охватываемые объемом настоящего изобретения. Примеры композиций для глазного введения описаны в публикациях США № 2005/0080056, 2005/0059744, 2005/0031697 и 2005/004074 и в патенте США № 6583124, содержание которых включено в настоящее описание посредством ссылки. Если желательно, жидкие композиции для глазного введения могут обладать свойствами, подобными свойствам слезной жидкости, внутриглазной жидкости или стекловидного тела глаза, или являются совместимыми с такими жидкостями. Предпочтительным путем введения является локальное введение (например, местное введение, такое как глазные капли или введение через имплантат).
Фразы парентеральное введение и вводимый парентерально, как они используются в настоящем описании, означают способы введения, отличные от энтерального и местного введения, обычно путем инъекции, и включают, без ограничения, внутривенную, внутримышечную, интраартериальную, интратекальную, интракапсулярную, интраорбитальную, интракардиальную, внутрикожную, интраперитонеальную, транстрахеальную, подкожную, субкутикулярную, интраартикулярную, субкапсулярную, субарахноидальную, интраспинальную и интрастернальную инъекцию и инфузию. Фармацевтические композиции, подходящие для парентерального введения, включают одно или несколько активных соединений в комбинации с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми стерильными изотоническими водными или неводными растворами, дисперсиями, суспензиями или эмульсиями или стерильными порошками, которые могут быть реструктурированы с получением стерильных растворов или дисперсий для инъекций непосредственно перед применением, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатические вещества, растворенные вещества, которые делают композицию изотонической с кровью предполагаемого реципиента, или суспендирующие вещества или загустители.
Примеры подходящих водных и неводных носителей, которые можно использовать в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, включают воду, этанол, полиолы (такие как глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и подобные) и подходящие смеси таких веществ, растительные масла, такие как оливковое масло, и органические сложные эфиры для инъекций, такие как этилолеат. Подходящую текучесть можно поддерживать, например, с использованием агентов покрытия, таких как лецитин, путем поддержания необходимого размера частиц в случае дисперсий и с использованием поверхностно-активных веществ.
Эти композиции также могут содержать адъюванты, такие как консерванты, смачивающие вещества, эмульгаторы и диспергирующие вещества. Предотвращение действия микроорганизмов можно обеспечить путем включения различных антибактериальных и противогрибковых средств, например, парабена, хлорбутанола, фенолсорбиновой кислоты и подобных. Также может быть желательным включение в композиции изотонических веществ, таких как сахара, хлорид натрия и подобные. Кроме того, пролонгированную абсорбцию фармацевтической формы для инъекций можно обеспечить путем включения вещества, которое замедляет абсорбцию, такого как моностеарат алюминия и желатин.
В некоторых случаях для пролонгирования эффекта лекарственного средства желательно замедлить абсорбцию лекарственного средства из подкожной или внутримышечной инъекции. Это можно осуществить с использованием жидкой суспензии кристаллического или аморфного вещества, имеющего плохую водорастворимость. Скорость абсорбции лекарственного средства в этом случае зависит от скорости его растворения, которая, в свою очередь, может зависеть от размера кристалла и кристаллической формы. Альтернативно, замедленную абсорбцию парентерально вводимой лекарственной формы получают путем растворения или суспендирования лекарственного средства в масляном носителе.
Депо формы для инъекций получают путем формирования микроинкапсулированных матриц соединений по настоящему изобретению в биоразлагаемых полимерах, таких как полилактидполигликолид. В зависимости от отношения лекарственного средства к полимеру и природы конкретного используемого полимера, можно контролировать скорость высвобождения лекарственного средства. Примеры других биоразлагаемых полимеров включают поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Депо препараты для инъекций также можно получить путем захвата лекарственного средства в липосомы или микроэмульсии, которые являются совместимыми с тканью организма.
Для использования в способах по настоящему изобретению, активные соединения можно вводить рег 8е или в виде фармацевтической композиции, содержащей, например, от 0,1 до 99,5% (более предпочтительно от 0,5 до 90%) активного ингредиента в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем.
Способы введения также могут быть обеспечены с использованием перезаряжаемых или биоразлагаемых устройств. Различные полимерные устройства для медленного высвобождения были разработаны и испытаны ίη νίνο в последние несколько лет для контролируемой доставки лекарственных средств, включая белковые биофармацевтические средства. Различные биосовместимые полимеры (в том числе гидрогели), включая как биоразлагаемые, так и неразлагаемые полимеры, можно использовать для полу- 17 026656 чения имплантата для замедленного высвобождения соединения на конкретном являющемся мишенью участке.
Реальные уровни доз активных ингредиентов в фармацевтических композициях могут варьироваться для получения такого количества активного ингредиента, которое является эффективным достижения желаемого терапевтического ответа для конкретного пациента, композиции и способа введения, не являясь при этом токсичными для пациента.
Уровень доз, который выбирают, зависит от ряда различных факторов, включая активность конкретного используемого соединения или комбинации соединений или их сложных эфиров, солей или амидов, путь введения, время введения, скорость экскреции конкретного используемого соединения (соединений), продолжительность лечения, другие лекарственные средства, соединения и/или вещества, используемые в комбинации с конкретным используемым соединением (соединениями), возраст, пол, массу тела, состояние, общее состояние здоровья и предшествующую медицинскую историю пациента, которого лечат, и подобные факторы, хорошо известные в медицине.
Лечащий врач или ветеринар со средней квалификацией легко сможет определить и прописать терапевтически эффективное количество фармацевтической композиции, которое необходимо. Например, лечащий врач или ветеринар может начать с доз фармацевтической композиции или соединения, уровни которых ниже, чем те, которые необходимы для достижения желаемого терапевтического эффекта, и постепенно увеличивать дозу вплоть до достижения желаемого эффекта. Под терапевтически эффективным количеством подразумевают концентрацию соединения, которая является достаточной, чтобы вызвать желаемый терапевтический эффект. Общеизвестно, что эффективное количество соединения варьируется в соответствии с массой тела, полом, возрастом и медицинской историей субъекта. Другие факторы, которые влияют на эффективное количество, могут включать, но не ограничиваются этим, тяжесть состояния пациента, расстройство, подлежащее лечению, стабильность соединения и, если это желательно, другой тип терапевтического средства, которое вводят с соединением по настоящему изобретению. Добавку более крупной общей дозы можно осуществлять с использованием нескольких введений средства. Способы определения эффективности и уровня доз известны специалистам в данной области (188е1ЬасЬег е1 а1. (1996), НатюЮ Ргтс1р1е8 о£ 1Шета1 Мебюше, 13 еб., 1814-1882, включен в настоящее описание посредством ссылки).
Как правило, подходящая суточная доза активного соединения, используемого в композициях и способах по настоящему изобретению, составляет такое количество соединения, которое представляет собой наименьшую дозу, эффективную для обеспечения терапевтического эффекта. Такая эффективная доза, как правило, зависит от факторов, описанных выше.
Если желательно, эффективную суточную дозу активного соединения можно вводить в виде одной, двух, трех, четырех, пяти, шести или более дробных доз, вводимых отдельно с подходящими интервалами в течение дня, необязательно в стандартных лекарственных формах. В некоторых вариантах воплощения настоящего изобретения, активное соединение можно вводить два или три раза в день. В предпочтительных вариантах воплощения, активное соединение можно вводить один раз в день.
Пациент, получающий такое лечение, представляет собой любое животное, нуждающееся в этом, включая приматов, в частности, человека и других млекопитающих, таких как лошади, крупный рогатый скот, свиньи и овцы; и домашнюю птицу и домашних животных в целом.
В некоторых вариантах воплощения соединения по настоящему изобретению можно использовать отдельно или вводить совместно с другим типом терапевтического средства. Как это используется в настоящем описании, фраза совместное введение относится к любой форме введения двух или более разных терапевтических соединений, так чтобы второе соединение вводили в период времени, когда ранее введенное терапевтическое соединение все еще было эффективным в организме (например, два соединения являются одновременно эффективными в организме пациента, что может включать синергические эффекты таких двух соединений). Например, разные терапевтические соединения можно вводить в одной и той же композиции или в отдельных композициях, одновременно или последовательно. В некоторых вариантах воплощения разные терапевтические соединения можно вводить с интервалом в пределах 1, 12, 24, 36, 48, 72 ч или недели. Таким образом, субъекты, которые получают такое лечение, могут получить выгоду от объединенного эффекта разных терапевтических соединений.
Настоящее изобретение включает использование фармацевтически приемлемых солей соединений по настоящему изобретению в композициях и способах по настоящему изобретению. В некоторых вариантах воплощения предусматриваемые соли по настоящему изобретению включают, но не ограничиваются этим, алкил-, диалкил-, триалкил- или тетра-алкиламмониевые соли. В некоторых вариантах воплощения предусматриваемые соли по настоящему изобретению включают, но не ограничиваются этим, соли Ь-аргинина, бенентамина, бензатина, бетаина, гидроксида кальция, холина, деанола, диэтаноламина, диэтиламина, 2-(диэтиламино)этанола, этаноламина, этилендиамина, Ν-метилглюкамина, гидрабамина, 1Н-имидазола, лития, Ь-лизина, магния, 4-(2-гидроксиэтил)морфолина, пиперазина, калия, 1-(2-гидроксиэтил)пирролидина, натрия, триэтаноламина, трометамина и цинка. В некоторых вариантах воплощения предусматриваемые соли по настоящему изобретению включают, но не ограничиваются этим, соли №, Са, К, Мд, Ζη или других металлов.
- 18 026656
Фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли также могут существовать в виде различных сольватов, такие как с водой, метанолом, этанолом, диметилформамидом и т.п. Смеси таких сольватов также могут быть получены. Источник такого сольвата может быть из растворителя кристаллизации, обязательно присутствующий в растворителе получения или кристаллизации или случайный для такого растворителя. Смачивающие вещества, эмульгаторы и смазывающие вещества, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, а также красители, агенты высвобождения, агенты покрытия, подсластители, отдушки и ароматизаторы, консерванты и антиоксиданты также могут присутствовать в композициях.
Примеры фармацевтически приемлемых антиоксидантов включают (1) водорастворимые антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота, цистеин гидрохлорид, бисульфат натрия, метабисульфит натрия, сульфит натрия и подобные; (2) масло-растворимые антиоксиданты, такие как аскорбилпальмитат, бутилированный гидроксианизол (ВНА), бутилированный гидрокситолуол (ВНТ), лецитин, пропилгаллат, альфа-токоферол и подобные и (3) образующие комплексы с металлами агенты, такие как лимонная кислота, этилендиаминтетрауксусная кислота (ΕΌΤΑ), сорбит, винная кислота, фосфорная кислота и подобные.
Примеры
Пример 1. Протоколы синтеза.
Синтез линкерных центров:
5,5'-(бутан-1,4-диил)-бис-(1,3,4-тиадиазол-2-амин) (1001)
Смесь адипонитрила (8,00 г, 73,98 ммоль) и тиосемикарбазида (13,48 г, 147,96 ммоль) в трифторуксусной кислоте (ТРА) (75 мл) нагревали при 80°С в течение 17 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в смесь льда и воды. Гранулы гидроксида натрия добавляли к смеси до тех пор, пока смесь не становилась щелочной (рН 14). Белый осадок собирали при помощи вакуумфильтрации, промывали водой и сушили с получением 5,5'-(бутан-1,4-диил)-бис-(1,3,4-тиадиазол-2амина) (1001, 13,07 г).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ 7,00 (с, 4Н), 2,84 (шир.с, 4Н), 1,68 (шир.с, 4Н).
Синтез 5,5'-(тио-бис-(этан-2,1-диил))-бис-(1,3,4-тиадиазол-2-амина) (1002)
Соединение 1002 получали, как описано в И8/2002/0115698 А1 5,5'-(2-метилбутан-1,4-диил)-бис(1,3,4-тиадиазол-2-амин) (1003)
Смесь 3-метиладипиновой кислоты (5,00 г, 31,22 ммоль) и тиосемикарбазида (5,69 г, 62,43 ммоль) в РОС13 (45 мл) нагревали при 90°С в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в смесь льда и воды. Гранулы гидроксида натрия добавляли к смеси до тех пор, пока смесь не становилась щелочной (рН 14). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой и сушили с получением 5, 5'-(2-метилбутан-1,4-диил)-бис-(1,3,4-тиадиазол-2-амина) (1003, 8,97 г).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 7,00 (с, 4Н), 2,89-2,81 (м, 3Н), 2,89-2,81 (м, 3Н), 2,69 (дд, 1=7,6, 7,6 Гц, 1Н), 1,89-1,46 (м, 3Н), 0,94 (д, 1=6,6 Гц, 3Н).
5,5'-(Пропан-1,3-диил)-бис-(1,3,4-тиадиазол-2-амин) (1004)
+ я — η2ν νηνη2
1004
Смесь глутаронитрила (5,00 г, 53,13 ммоль) и тиосемикарбазида (9,68 г, 106,26 ммоль) в ТРА (50 мл) нагревали при 85°С в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в смесь льда и воды. Гранулы гидроксида натрия добавляли к смеси до тех пор, пока смесь не становилась щелочной (рН 14). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой и сушили с получением 5,5'-(пропан-1,3-диил)-бис-(1,3,4-тиадиазол-2-амина) (1004, 13,72 г).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 7,06-7,03 (с, 4Н), 2,87 (т, 1=7,5 Гц, 4Н), 2,02-1,95 (м, 2Н).
- 19 026656
5-(2-((2-(5-Амино-1,3,4-тиадиазол-2-ил)этил)амино)этил)-1,3,4-тиадиазол-2-амин (1005)
Смесь 3,3'-иминодипропионитрила (1,50 г, 12,18 ммоль) и тиосемикарбазида (2,22 г, 24,36 ммоль) в ТРА (10 мл) нагревали при 85 в течение 4,5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в смесь льда и воды. Гранулы гидроксида натрия добавляли к смеси до тех пор, пока смесь не становилась щелочной (рН 14). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой и сушили с получением 5- (2-((2-(5-амино-1,3,4-тиадиазол-2-ил)этил)амино)этил)-1,3,4-тиадиазол2-амина (1005, 1,47 г).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Й) δ м.д. 6,95 (с, 4Н), 2,90 (д, 1=6,0 Гц, 4Н), 2,83 (д, 1=6,3 Гц, 4Н).
К раствору метил 3-((2-метокси-2-оксоэтил)тио)пропаноата (5,0 г, 26 ммоль) в ТГФ/МеОН/воде (60 мл, 4:1:1) добавляли гидроксид лития моногидрат (4,375 г, 101 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляли водой (~100 мл) и полученный раствор подкисляли при помощи 6н. раствора НС1. Смесь распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, выделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением 3-((карбоксиметил)тио)пропановой кислоты (3,64 г, 85%) в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 2,55-2,57 (т, 2Н), 2,75-2,79 (т, 2Н), 3,27 (с, 2Н), 12,41 (с, 2Н).
К смеси 3-((карбоксиметил)тио)пропановой кислоты (3,64 г, 22,2 ммоль) и тиосемикарбазида (4,1 г, 45 ммоль)медленно добавляли оксихлорид фосфора (25 мл). Полученную смесь перемешивали при 90°С в течение 3 ч, затем медленно выливали на измельченный лед. Отделившееся твердое вещество фильтровали и фильтрат подщелачивали до рН~13 при помощи твердого гидроксида натрия. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали водой и сушили при 45°С в вакууме в течение ночи с получением 1006 (~3 г, 50%) в виде желто-коричневого твердого вещества.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 2,79-2,83 (т, 2Н), 3,06-3,10 (т, 2Н), 3,99 (с, 2Н), 7,04 (с, 2Н), 7,16 (с, 2Н).
Смесь 2,2'-тиодиуксусной кислоты (5,00 г, 33,3 ммоль) и тиосемикарбазида (6,07 г, 66,6 ммоль) в РЭС13 (40 мл) нагревали при 90°С в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и осторожно выливали на смесь льда и воды. Гранулы гидроксида натрия добавляли к смеси до тех пор, пока смесь не становилась щелочной (рН 14). Белый осадок собирали при помощи вакуумфильтрации, промывали водой и сушили с получением соединения 1007.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 7,18 (с, 4Н), 3,96 (с, 4Н).
Η2Ν 1008 ΝΗ2
Смесь 1,5-дицианопентана (1,00 г, 8,19 ммоль) и тиосемикарбазида (1,5 г, 16,40 ммоль) в ТРА (3 мл) нагревали при 85°С в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в смесь льда и воды. Гранулы гидроксида натрия добавляли к смеси до тех пор, пока смесь не становилась щелочной (рН 14). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой и сушили с получением 1008.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 6,98 (с, 4Н), 2,81 (т, 4Н), 1,67 (м, 4Н), 1,20 (м, 2Н).
- 20 026656
Ацилирование диамино ядра.
Способ А. Через хлорангидрид кислоты Ы,№-[5,5'-(бутан-1,4-диил)-бис-(1,3,4-тиадиазол-5,2-диил)]бис-(2-фенилацетамид) (21)
К суспензии соединения 1001 (8,00 г, 31,21 ммоль) в 1-метил-2-пирролидиноне (ΝΜΡ) (100 мл) при 0°С добавляли фенилацетилхлорид (10,25 мл, 77,54 ммоль) по каплям. Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, затем гасили путем добавления воды (~200 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой и сушили с получением Н№-|5.5'-(бутан-1.4-диил)-бис(1,3,4-тиадиазоле-5,2-диил)]-бис-(2-фенилацетамида) (21, 14,02 г).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 12,66 (с, 2Н), 7,34 (м, 10Н), 3,81 (с, 4Н), 3,01 (шир.с, 4Н), 1,76 (шир.с, 4Н).
Соединение 43 получали, следуя способу А, с использованием феноксиацетилхлорида.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 12,68 (с, 2Н), 7,35-7,30 (м, 4Н), 6,99-6,97 (м, 6Н), 4,90 (с, 4Н),
3,05 (шир.с, 4Н), 1,79 (шир.с, 4Н).
Соединение 100 получали, следуя способу А.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 12,42 (с, 2Н), 3,64 (т, 1=5,6 Гц, 4Н), 3,24 (с, 6Н), 3,01 (шир.с, 4Н), 2,72 (т, 1=6,2 Гц, 4Н), 1,79 (шир.с, 4Н).
О Μ—Ν Ν-Ν о
Соединение 5 получали в соответствии со способом А.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 12,66 (с, 4Н), 3,27 (т, 1=6, 99 Гц, 4Н), 2,95 (т, 1=7,02 Гц, 4Н),
К суспензии 1001 (200 мг, 0,78 ммоль) в ΝΜΡ (2 мл) при 0°С добавляли хлорангидрид О-ацетилминдальной кислоты (0,44 мл, 1,95 ммоль) по каплям. Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч, затем гасили путем добавления воды (~10 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды и сушили. Неочищенное зещество очищали путем перекристаллизации со смесью ΌΜδΟ и МеОН с получением соединения 173.
В колбу загружали соединение 173 и 2н. раствор аммиака в МеОН (3 мл) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Растворитель удаляли и полученное вещество сушили в печи с получением соединения 174.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 12,42 (с, 2Н), 7,53-7,31 (м, 10Н), 6,35 (с, 2Н), 5,34 (д, 4=1,14 Гц, 2Н), 3,01 (шир.с, 4Н), 1,76 (шир.с, 4Н).
- 21 026656
Соединение 306 получали в соответствии с процедурой, описанной для соединения 174 выше.
К суспензии соединения 1001 (400 мг, 1,56 ммоль) в NМР (4 мл) при 0°С добавляли (К)-(-)-О-формилманделоилхлорид (0,61 мл, 3,90 ммоль) по каплям. Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч, затем гасили путем добавления воды (~10 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды и сушили. Неочищенное вещество очищали путем перекристаллизации со смесью ЭМ8О и МсОН с получением соединения 68.
В колбу загружали соединение 68 и 2н. раствор аммиака в МсОН (5 мл) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляли и полученное вещество сушили в печи с получением соединения 80.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 7,53-7,31 (м, 10Н), 6,34 (с, 2Н), 5,33 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 4Н), 1,75 (шир.с, 4Н).
К суспензии соединения 1002 (544 мг, 1,89 ммоль) в NМР (13 мл) при -15°С добавляли фенилацетилхлорид (0,249 мл, 1,89 ммоль) по каплям. Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч и гасили путем добавления воды (54 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой (27 мл) и этилацетатом (3x27 мл). Фильтрат подщелачивали до рН 11 с использованием 2,5 М №ЮН. Слои разделяли и водный слой экстрагировали дихлорметаном (3x54 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом магния и концентрировали с получением ^(5-(2-((2-(5-амино-1,3,4тиадиазол-2-ил)этил)тио)этил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фенилацетамида (17, 56 мг).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 12,71 (с, 1Н), 7,32 (с, 5Н), 3,81 (с, 2Н), 3,25 (т, 1=7,61 Гц, 2Н), 3,06 (т, 1=1,25 Гц, 2Н), 2,92 (т, 1=6,90 Гц, 2Н), 2,85 (т, 1=6,86 Гц, 2Н).
Фенилацетилхлорид (0,134 мл, 1,01 ммоль) и ацетоксиацетилхлорид (0,109 мл, 1,01 ммоль) смешивали вместе в NМР (0,5 мл). Эту смесь медленно добавляли к суспензии соединения 1002 (292 мг, 1,01 ммоль) в NМР (7 мл) при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и гасили путем добавления воды (20 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой и сушили в условиях высокого вакуума. Неочищенное вещество очищали препаративной ВЭЖХ.
Соединение 26: 'Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 12,69 (с, 2Н), 7,34 (3, 5Н), 4,81 (с, 2Н), 3,82 (с, 2Н), 2,96 (шир.с, 4Н), 2,14 (с, 3Н).
Соединение 44 получали, следуя процедуре, описанной для соединения 21 выше.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 12,66 (с, 2Н), 7,34-7,28 (м, 10Н), 3,81 (с, 4Н), 3,05-3,00 (м, 3Н),
2,87 (дд, 1=7,9, 8,2 Гц, 1Н), 1,95-1,77 (м, 3Н), 0,94 (д, 1=6,5 Гц, 3Н).
- 22 026656
Соединение 72 получали, следуя процедуре, описанной для соединения 21 выше. К суспензии диамина 1004 (0,70 г, 3,07 ммоль) в ΝΜΡ (15 мл) при 0°С добавляли фенилацетилхлорид (811 мкл, 6,13 ммоль) по каплям. Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, затем гасили путем добавления воды. Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой и сушили с получением Ы,№-[5,5'-(пропан-1,3-диил)-бис-(1,3,4-тиадиазол-5,2-диил)]-бис-(2-фенилацетамида) (72, 1,37 г).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,68 (с, 2Н), 7,27 (м, 10Н), 3,82 (с, 4Н), 3,06 (т, 1=7,2 Гц, 4Н), 2,17-2,12 (м, 2Н).
К суспензии соединения 1005 (100 мг, 0,37 ммоль) в ΌΜΡ (12 мл) при комнатной температуре добавляли раствор (1-Вос)2О (88 мг, 0,41 ммоль) в ΌΜΡ (2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. К этой реакционной смеси добавляли ΝΜΡ (2 мл) с последующим добавлением фенилацетилхлорида (97 мкл, 0,74 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, затем выливали в смесь лед-вода. Твердое вещество собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой и сушили с получением соединения 1010 (180 мг).
Полученный продукт 1010 (160 мг, 0,26 ммоль) в смеси ТРЛ (1,5 мл) и СН2СН2 (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, затем концентрировали. Снова осуществляли поглощение остатка в СН2С12 (3х) и концентрировали с получением ^№-(5,5'-(азандиил-бис-(этан-2,1-диил))бис-(1,3,4-тиадиазол-5,2-диил))-бис-(2-фенилацетамид)трифторуксусной кислоты (149, 122 мг).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,81 (с, 2Н), 8,75 (шир.с, 2Н), 7,38-7,27 (м, 10Н), 3,84 (с, 4Н), 3,45 (д, 1=2,9 Гц, 4Н), 3,39 (д, 1=6,0 Гц, 4Н).
К суспензии 1006 (0,274 г, 1 ммоль) в ΝΜΡ (5 мл) добавляли фенилацетилхлорид (0,263 мл, 2 ммоль) по каплям. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч и затем разбавляли водой. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали дополнительным количеством воды и сушили. Неочищенное вещество очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 199 в виде белого твердого вещества.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 2,87-2,91 (т, 2Н), 3,25-3,29 (т, 2Н), 3,82 (с, 4Н), 4,19 (с, 2Н), 7,26-7,33 (м, 10Н), 12,71-12,72 (шир.с, 2Н).
- 23 026656
Способ В: через кислоту с использованием агентов пептидного связывания о
Ν—N
Н2К'^'зХ^'
НО
НВТИ, НОВ1 ΟΙΕΑ □МР
О'х1 О Ν—N н
Ν-Ν О н
В колбу, содержащую 5,5'-(тио-бис-(этан-2,1-диил))-бис-(1,3,4-тиадиазол-2-амин) (1002) (0,69 ммоль, 0,20 г, 1,0 экв.) добавляли 2-морфолиноуксусную кислоту (1,52 ммоль, 0,22 г, 2,2 экв.), гексафторфосфат О-(бензотриазол-1-ил)-^^№,№-тетраметилурония (НВТИ) (2,20 ммоль, 0,83 г, 3,2 экв.), 1-гидроксибензотриазол (НОВТ) (2,2 ммоль, 0,29 г, 3,2 экв.) 5 мл ΌΜΡ с последующим добавлением Ν,Ν-диизопропилэтиламина (ΌΙΕΑ) (5,52 ммоль, 0,71 г, 0,960 мл, 8,0 экв.). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и затем разбавляли при помощи 15 мл воды. Смесь экстрагировали при помощи Е!ОАс и органические слои объединяли, промывали водой, насыщенным солевым раствором и сушили над №28О4. №28О4 удаляли путем фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении с получением 0,04 г соединения 12.
Соединение 12: 1Н ЯМР (300 МГц, СЭС!,) δ м.д. 3,80 (широкий мультиплет, 4Н), 3,34 (дд, 4Н, 1=7,2 Гц), 3,28 (с, 4Н), 3,00 (дд, 4Н, 1=7,1 Гц), 2,63 (широкий мультиплет, 4Н).
В колбу, содержащую 5,5'-(бутан-1,4-диил)бис-(1,3,4-тиадиазол-2-амин) (1101) (3,9 ммоль, 1,0 г, 1,0 экв.) добавляли (8)-2-((трет-бутоксикарбонил)амино)-2-фенилуксусную кислоту (8,58 ммоль, 2,15 г, 2,2 экв.), НВТИ (12,48 ммоль, 4,73 г, 3,2 экв.), НОВ! (12,48 ммоль, 1,69 г, 3,2 экв.)25 мл ΌΜΡ с последующим добавлением ΌΙΕΑ (31,2 ммоль, 4,03 г, 5,43 мл, 8,0 экв.). Смесь перемешивали в течение ночи и выливали е 150 мл воды. Образовавшиеся частицы белого твердого вещества собирали путем факуумфильтрации, промывали водой и сушили в вакууме с получением 2,47 г бис-Вос-защищенного промежуточного соединения.
К суспензии бис-Вос защищенного промежуточного соединения (2,76 ммоль, 2,0 г, 1,0 экв.) в 20 мл дихлорметана (ЭСМ) добавляли 4М НС1 в диоксане (40 ммоль, 10 мл) при интенсивном перемешивании. Смесь быстро становилась прозрачной и гомогенной, затем происходило образование белого осадка. Смесь перемешивали в течение ночи и разбавляли при помощи 20 мл диэтилового эфира. Твердые вещества собирали путем вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством диэтилового эфира и сушили в вакууме с получением 0,9 г соединения 187.
Соединение 187: 'Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 9,13 (с, 4Н), 7,61 (м, 4Н), 7,48 (м, 6Н), 6,2 (широкий синглет, 4Н), 5,32 (с, 2Н), 3,04 (широкий мультиплет, 4Н), 1,77 (широкий мультиплет, 4Н).
К раствору 2,2-бис-(гидроксиметил)пропионовой кислоты (5,00 г, 37,28 ммоль) в ацетоне (80 мл) при комнатной температуре добавляли 2,2-диметоксипропан (6,88 мл, 55,92 ммоль) и р-ТкОН-Н2О
- 24 026656 (0,36 г, 1,86 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч, затем гасили при помощи Ε!3Ν (0,30 мл). Органическое летучее вещество удаляли при пониженном давлении. Остаток распределяли между Е!ОАс и водой. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили (Μ§δΟ4) и концентрировали с получением желаемого продукта 1011 (5,17 г) в виде белого твердого вещества.
К суспензии диамина 1001 (500 мг, 1,95 ммоль), 3-фторфенилуксусной кислоты (361 мг, 2,34 ммоль) и кислоты 1011 (442 мг, 2,54 ммоль) в ΌΜΡ (20 мл) при 0°С добавляли НОВ! (791 мг, 5,85 ммоль) с последующим добавлением гидрохлорида М-(3-диметиламинопропил)-№этилкарбодиимида (ЕЭС) (1,12 г, 5,85 ммоль). Смесь перемешивали при температуре от 0°С до комнатной температуры в течение 18 ч, затем разбавляли водой. Осадок собирали при помощи вакуумфильтрации, промывали водой и сушили. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 1-10% МеОН в СН2С12 с получением Ν-(5-(4-(5-(2-(3фторфенил)ацетамидо)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)бутил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2,2,5-триметил-1,3-диоксан-5карбоксамида (1012, 208 мг).
Полученный продукт 1012 (87 мг, 0,16 ммоль) и ТРА (2 мл) в смеси ТГФ (8 мл) и воды (2 мл) нагревали при 50°С в течение 5 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали при помощи ВЭЖХ с получением М,№-(5-(4-(5-(2-(3-фторфенил)ацетамидо)-1,3,4тиадиазол-2-ил)бутил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-3-гидрокси-2-(гидроксиметил)-2-метилпропанамида (152).
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,68 (с, 1Н), 11,77 (с, 1Н), 7,04-7,38 (м, 1Н), 7,18-7,09 (м, 4Н), 4,98 (с, 2Н), 3,86 (с, 2Н), 3,62 (дд, 1=10,7, 29,0 Гц, 4Н), 3,03 (шир.с, 4Н), 1,77 (шир.с, 4Н), 1,14 (с, 3Н).
К суспензии диамина 1001 (400 мг, 1,56 ммоль), 3-фторфенилуксусной кислоты (313 мг, 2,03 ммоль), (К)-(-)-2,2-диметил-5-оксо-1,3-диоксолан-4-уксусной кислоты (353 мг, 2,03 ммоль) и Ε!3Ν (200 мкл) в ΌΜΡ (20 мл) при 0°С добавляли НОВ! (633 мг, 4,68 ммоль) с последующим добавлением ЕЭС (897 мг, 4,68 ммоль). Смесь перемешивали при температуре от 0°С до комнатной температуры в течение 18 ч, затем разбавляли водой. Осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации и промывали водой. Твердое вещество дополнительно промывали смесью горячего МеОН-ТГФ. Объединенный фильтрат концентрировали и очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 1-10% МеОН в СН2С12 с получением (К)-М-(5-(4-(5-(2-(3-фторфенил)ацетамидо)-1,3,4-тиадиазол-2ил)бутил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-3,4-дигидроксибутанамида (1013, 93 мг).
Полученный продукт 1013 (87 мг, 0,16 ммоль) и ТРА (2 мл) в смеси ТГФ (8 мл) и воды (2 мл) нагревали при 50°С в течение 5 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный остаток очищали при помощи ВЭЖХ с получением (К)-М-(5-(4-(5-(2-(3-фторфенил)ацетамидо)-1,3,4тиадиазол-2-ил)бутил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-3,4-дигидроксибутанамида (153).
'Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,67 (с, 1Н), 12,43 (с, 1Н), 7,41-7,38 (м, 1Н), 7,20-7,12 (м, 4Н), 4,45-4,40 (м, 1Н), 3,86 (с, 2Н), 3,03 (шир.с, 4Н), 2,85-2,77 (м, 2Н), 1,78 (шир.с, 4Н).
К суспензии ^)-(+)-О-ацетилминдальной кислоты (666 мг, 3,43 ммоль) и гексафторфосфата О-(7-азабензотриазол-1-ил)-М,М,№,№-тетраметилурония (НАТи) (1,47 г, 3,86 ммоль) в ΌΜΡ (4 мл) добавляли Э1ЕЛ (0,672 мл, 3,86 ммоль) с последующим добавлением соединения 1001 (400 мг, 1,56 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды (~10 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды и сушили. Неочищенное вещество очищали путем перекристаллизации со
- 25 026656 смесью ΌΜδΘ и МеОН с получением соединения 66.
В колбу загружали соединение 66 и 2н. раствор аммиака в МеОН (5 мл) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Растворитель удаляли и полученное вещество сушили в печи с получением соединения 92.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,42 (с, 2Н), 7,53-7,31 (м, 10Н), 6,35 (с, 2Н), 5,33 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 4Н), 1,76 (шир.с, 4Н).
В колбу загружали соединение 1001 (200 мг, 0,78 ммоль), ΌΕ-3-фенилмолочную кислоту (285 мг,
1,716 ммоль) и НОВТ (527 мг, 3,9 ммоль) в ΌΜΡ (3 мл), добавляли ЕЭС (897 мг, 4,68 ммоль) с последующим добавлением триэтиламина (0,87 мл, 6,24 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды (~5 мл). Смесь распределяли между водой и ЕЮАс. Органический экстракт промывали водой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% МеОН в СН2С12 с получением соединения 69.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,20 (с, 2Н), 7,24 (м, 10Н), 5,75 (д, 1=6, 87 Гц, 2Н), 4,43 (м, 2Н), 3,10 (м, 6Н), 2,89-2,81 (м, 2Н), 1,80 (шир.с, 4Н).
169
В колбу загружали соединение 1001 (200 мг, 0,78 ммоль), О-(+)-3-фенилмолочную кислоту (285 мг,
1,716 ммоль) и НОВ! (4 64 мг, 3,4 3 ммоль) в ΌΜΡ (3 мл), добавляли ЕЭС (822 мг, 4,2 8 ммоль) с последующим добавлением триэтиламина (0,718 мл, 5,15 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды (-5 мл). Смесь распределяли между водой и ЕЮАс. Органический экстракт промывали водой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% МеОН в СН2С12 с получением соединения 169.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6)5 12,20 (с, 2Н), 7,24 (м, 10Н), 5,75 (д, 1=6,87 Гц, 2Н), 4,43 (м, 2Н), 3,03 (м, 6Н), 2,89-2,81 (м, 2Н), 1,80 (шир.с, 4Н).
146
В колбу загружали соединение 1001 (200 мг, 0,78 ммоль), Ь-(-)-3-фенилмолочную кислоту (285 мг,
1,716 ммоль) и НОВ! (464 мг, 3,43 ммоль) в ΌΜΡ (3 мл), добавляли ЕЭС (822 мг, 4,28 ммоль) с последующим добавлением триэтиламина (0,718 мл, 5,15 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды (~5 мл). Смесь распределяли между водой и ЕЮАс. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% ΜеОН в СН2С12 с получением соединения 146.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,27 (с, 2Н), 7,31 (м, 10Н), 5,78 (м, 2Н), 4,44 (м, 2Н), 3,05 (м, 6Н), 2,87 (м, 2Н), 1,79 (шир.с, 4Н).
К суспензии (К)-(+)-3-гидрокси-3-фенилпропионовой кислоты (285 мг, 1,72 ммоль) и НАТи (719 мг, 1,89 ммоль) в ΌΜΡ (3 мл) добавляли Э1ЕА (0,329 мл, 1,89 ммоль) с последующим добавлением соединения 1001 (200 мг, 0,78 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды (~10 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды и сушили. Неочищенное вещество очищали путем перекристаллизации с ΟΜΕΌ и ΜеОН с получением соединения 127.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,38 (с, 2Н), 7,34 (м, 10Н), 5,56 (м, 2Н), 5,10 (м, 2Н), 3,04 (шир.с, 4Н), 2,80 (м, 4Н), 1,80 (шир.с, 4Н).
- 26 026656
К суспензии (К)-2-гидрокси-2-фенилмасляной кислоты (310 мг, 1,72 ммоль) и НЛТИ (719 мг,
1,89 ммоль) в ΌΜΡ (3 мл) добавляли ΌΙΕΑ (0,329 мл, 1,89 ммоль) с последующим добавлением соединения 1001 (200 мг, 0,78 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды (~10 мл). Неочищенное вещество очищали при помощи ВЭЖХ с получением соединения 143.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 7,61 (д, 1=7,65 Гц, 4Н), 7,34 (м, 6Н), 2,99 (шир.с, 4Н), 2,26 (м, 2Н), 2,10 (м, 2Н), 1,74 (шир.с, 4Н), 0, 80 (т, 6Н).
К суспензии 3-оксо-1-инданкарбоновой кислоты (604 мг, 3,43 ммоль) и НАТи (1,47 г, 3,86 ммоль) в ΌΜΡ (5 мл) добавляли ΌΙΕΑ (0,672 мл, 3,86 ммоль) с последующим добавлением соединения 1001 (400 мг, 1,56 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды (~10 мл). Светло-коричневый осадок собирали при помощи вакуумфильтрации, промывали водой и сушили. Неочищенное вещество очищали путем перекристаллизации со смесью ΌΜδΟ и МеОН с получением соединения 64.
К суспензии соединения 64 (100 мг, 0,175 ммоль) в ЕЮН (20 мл) при 0°С добавляли ЫаВН4 (15 мг, 0,384 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение 1 ч, затем гасили при помощи 1н. раствора НС1. Смесь распределяли между 1н. раствором НС1 и ЕЮАс. органический экстракт сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% МеОН в СН2С12 и дополнительно очищали путем перекристаллизации со смесью ОМ§О и МеОН с получением соединения 94.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,81 (с, 2Н), 7,34 (м, 8Н), 5,56 (м, 2Н), 5,11 (т, 2Н), 4,15 (т, 2Н), 3,05 (шир.с, 4Н), 2,70 (м, 2Н), 2,15 (м, 2Н), 1,80 (шир.с, 4Н).
К раствору ΌΌ-миндальной кислоты (1 г, 6,57 ммоль) в ΌΜΡ (10 мл) при 0°С добавляли ЫаН (700 мг, 19,7 ммоль) и смесь оставляли для перемешивания в течение 20 мин, затем добавляли по каплям 2-бромэтил метиловый эфир (1,24 мл, 13,1 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°С и медленно нагревали до комнатной температуры в течение ночи, затем гасили при помощи 1н. раствора НС1. Смесь распределяли между 1н. раствором НС1 и ЕЮАс, органический экстракт промывали водой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением соединения 1014.
- 27 026656
К суспензии соединения 1014 (500 мг, 2,37 ммоль) и НЛТИ (995 мг, 2,62 ммоль) в ΌΜΡ (3 мл) добавляли ΌΙΕΑ (0,456 мл, 2,62 ммоль) с последующим добавлением соединения 1001 (277 мг, 1,08 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды (~6 мл). Смесь распределяли между водой и ЕЮАс. Органический экстракт промывали водой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенное вещество очищали при помощи ВЭЖХ с получением соединения 203.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,58 (с, 2Н), 7,49-7,37 (м, 10Н), 5,22 (с, 2Н), 3,66-3,54 (м, 8Н), 3,27 (с, 6Н), 3,01 (шир.с, 4Н), 1,75 (шир.с, 4Н).
К суспензии 2-(4-Вос-пиперазинил)-2-фенилуксусной кислоты (1,1 г, 3,43 ммоль) и НАТИ (1,47 г, 3,86 ммоль) в ΌΜΡ (5 мл) добавляли ΌΙΕΑ (0,672 мл, 3,86 ммоль) с последующим добавлением соединения 1001 (400 мг, 1,5 6 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды (~10 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуумфильтрации, промывали водой и сушили. Неочищенное вещество очищали путем перекристаллизации с ΌΜδΟ и МеОН с получением соединения 63.
В колбу загружали соединение 63 и 4н. раствора НС1 в 1,4-диоксане (6 мл) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Осажденное вещество собирали путем фильтрования, промывали при помощи ЕЮАс/СН2С12 и сушили с получением соединения 77.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 9,10 (шир.с, 4Н), 7,51-7,41 (м, 10Н), 4,90 (шир.с, 2Н), 4,62 (с, 2Н), 3,15 (шир.с, 8Н), 3,03 (шир.с, 4Н), 2,73 (шир.с, 8Н), 1,76 (шир.с, 4Н).
К суспензии (К)-(+)-3-гидрокси-3-фенилпропионовой кислоты (254 мг, 1,53 ммоль) и НАТИ (640 мг, 1,68 ммоль) в ΌΜΡ (3 мл) добавляли ΌΙΕΑ (0,292 мл, 1,68 ммоль) с последующим добавлением соединения 1002 (200 мг, 0,693 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды (~10 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой и сушили. Неочищенное вещество очищали путем перекристаллизации со смесью ΌΜδΟ и ΜеОН с получением соединения 126.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,40 (с, 2Н), 7,38 (м, 10Н), 5,55 (м, 2Н), 5,09 (м, 2Н), 3,27 (т, 4Н), 2,95 (т, 4Н), 2,82 (м, 4Н).
- 28 026656
В колбу загружали соединение 1002 (200 мг, 0,693 ммоль), 2-(4-Вос-пиперазинил)-2фенилуксусную кислоту (244 мг, 0,763 ммоль) и НОВ! (187 мг, 1,39 ммоль) в ΌΜΡ (3 мл), добавляли ЕЭС (332 мг, 1,73 ммоль) с последующим добавлением триэтиламина (0,290 мл, 2,08 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем добавляли по каплям фенилацетилхлорид (0,037 мл, 0,277 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 1 ч, затем гасили путем добавления воды (~10 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой и сушили. Неочищенное вещество очищали при помощи ВЭЖХ с получением соединений 70 и 76.
В колбу загружали соединение 70 и 4н. раствор НС1 в 1,4-диоксане (6 мл) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Осажденное вещество собирали путем фильтрования, промывали при помощи Е!ОАс/СН2С12 и сушили с получением соединения 78.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,70 (с, 2Н), 8,97 (шир.с, 2Н), 7,50-7,29 (м, 10Н), 4,72 (шир.с, 1Н), 4,59 (с, 1Н), 3,82 (с, 2Н), 3,27 (т, 4Н), 3,15 (шир.с, 4Н), 2,92 (т, 4Н), 2,70 (шир.с, 4Н).
В колбу загружали соединение 76 и 4н. раствор НС1 в 1,4-диоксане (6 мл) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Осажденное вещество собирали путем фильтрования, промывали при помощи Е!ОАс/СН2С12 и сушили с получением соединения 79.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,87 (с, 2Н), 9,03 (шир.с, 4Н), 7,50-7,40 (м, 10Н), 4,67 (шир.с, 2Н), 4,59 (с, 2Н), 3,28 (т, 4Н), 3,14 (шир.с, 8Н), 2,97 (т, 4Н), 2,71 (шир.с, 8Н).
Общая процедура амидного связывания (использовали для следующих примеров).
К 0,2 молярной концентрации суспензии карбоновой кислоты (2 экв.) в ΌΜΡ добавляли НАТи (2 экв.) и перемешивали до тех пор, пока реакционная смесь не становилась прозрачной, с последующим добавлением амина (1 экв.) и ΌΙΡΕΑ (4 экв.). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали водой и сушили.
39: 'ΐ I ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,89-2,01 (м, 6Н), 2,18-2,29 (м, 2Н), 2,95-3 (м, 4Н), 3,79-3,86 (м, 2Н), 3,94-4,02 (м, 2Н), 4,55-4,6 (м, 2Н), 12,29 (шир.с, 2Н).
41: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 2,93-2,98 (м, 4Н), 3,27-3,32 (м, 4Н), 4,46 (с, 4Н), 5,18-5,2 (шир.с, 2Н), 6,88-7,03 (м, 8Н), 12,87-12,92 (шир.с, 2Н).
- 29 026656
51: Ή: ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,78 (шир.с, 4Н), 3,05-3,06 (шир.с, 4Н), 3,38-3,40 (м, 2Н), 3,54-3,63 (м, 2Н), 5,44-5,50 (м, 2Н), 6,92-7,26 (м, 8Н), 12,78 (шир.с, 2Н).
54: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,92-2,03 (м, 10Н), 2,17-2,28 (м, 2Н), 3,05 (шир.с, 4Н), 3,793,85 (м, 2Н), 3,94-4,01 (м, 2Н), 4,55-4,59 (м, 2Н), 12,27 (шир.с, 2Н).
V
60: Ίί ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,77 (шир.с, 4Н), 3,04 (шир.с, 4Н), 5,20 (с, 4Н), 6,31 (шир.с, 2Н), 7,49 (шир.с, 2Н), 7,79 (шир.с, 2Н), 12,80 (шир.с, 2Н).
85: Ίί ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 0,20-0,21 (шир.с, 4Н), 0,48-0,50 (шир.с, 4Н), 1,79 (шир.с, 4Н), 2,35-2,38 (шир.с, 4Н), 3,04 (шир.с, 4Н), 12,32 (шир.с, 2Н).
87: ' Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,78 (шир.с, 4Н), 3,03 (шир.с, 4Н), 4,05 (с, 4Н), 6,99 (шир.. с, 4Н), 7,42-7,44 (м, 2Н), 12,68 (шир.с, 2Н).
114: Ίί ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,01-1,12 (м, 4Н), 1,40 (с, 18Н), 1,61-1,65 (м, 4Н), 1,78 (шир.с, 4Н), 1,95 (шир.с, 2Н), 3,84 (м, 4Н), 2,65-2,75 (м, 4Н), 3,03 (шир.с, 4Н), 3,89-3,93 (м, 4Н), 12,39 (шир.с, 2Н).
- 30 026656
123: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 1,43 (с, 6Н), 1,79-1,94 (м, 10Н), 2,22-2,31 (м, 2Н), 3,05 (шир.с, 4Н), 3,85-4,01 (м, 4Н), 11,85 (шир.с, 2Н).
133: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 2,92-2,97 (м, 4Н), 3,26-3,30 (м, 4Н), 4,61-4,87 (м, 6Н), 6,836,89 (м, 4Н), 7,16-7,21 (м, 2Н), 7,36-7,38 (м, 2Н), 12,95 (шир.с, 2Н).
135: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 1,77 (шир.с, 4Н), 3,03 (шир.с, 4Н), 4,60-4,87 (м, 6Н), 6,836,89 (м, 4Н), 7,16-7,22 (м, 2Н), 7,36-7,38 (м, 2Н), 12,92 (шир.с, 2Н).
114: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 1,01-1,12 (м, 4Н), 1,40 (с, 18Н), 1,61-1,65 (м, 4Н), 1,78 (шир.с, 4Н), 1,95 (шир.с, 2Н), 3,84 (м, 4Н), 2,65-2,75 (м, 4Н), 3,03 (шир.с, 4Н), 3,89-3,93 (м, 4Н), 12,39 (шир.с, 2Н).
323: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 1,76 (шир.с, 4Н), 3,01 (шир.с, 4Н), 4,02 (с, 4Н), 6,56 (с, 2Н),
397: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 1,75 (шир.с, 4Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 3,02 (шир.с, 2Н), 3,673,82 (м, 10Н), 6,85-7,03 (м, 4Н), 7,26-7,36 (м, 5Н), 7,55-7,58 (д, 1Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
- 31 026656
398: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,75 (шир.с, 4Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 3,02 (шир.с, 2Н), 3,723,78 (м, 10Н), 6,42-6,51 (м, 4Н), 7,36 (м, 5Н), 7,54-7,58 (д, 1Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
399: ' Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,48 (с, 9Н), 1,75 (шир.с, 4Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 3,02 (шир.с, 2Н), 3,74-3,78 (м, 4Н), 6,92-6,94 (м, 1Н), 7,20-7,36 (м, 7Н), 7,51-7,58 (м, 2Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 9,34 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12, 65 (шир.с, 1Н).
400: ' Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,48 (с, 9Н), 1,75 (шир.с, 4Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 3,02 (шир.с, 2Н), 3,71-3,78 (м, 4Н), 7,18-7,42 (м, 9Н), 7,54-7,58 (м, 2Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 9,34 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
324: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,39 (с, 18Н), 1,76 (шир.с, 4Н), 3,01 (шир.с, 4Н), 3,79 (с, 4Н), 4,11-4,13 (шир.с, 4Н), 7,13-7,38 (м, 8Н), 12,65 (с, 2Н).
Способ С: через алюминий амидное связывание со сложными эфирами/лактонами
К суспензии соединения 1002 (288 мг, 1,00 ммоль) в толуоле (9 мл) добавляли 3-изохроманон (311 мг, 2,10 ммоль) с последующим добавлением триметилалюминия (2 М в толуоле, 1,0 мл, 2,00 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 75°С в течение 15 ч, охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом (50 мл). Органический слой промывали водой (3x20 мл), 10% раствором хлорида натрия (10 мл), сушили (сульфат магния) и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали при помощи ВЭЖХ с получением Ы,№-(5,5'-(тио-бис-(этан-2,1-диил))бис-(1,3,4-тиадиазол-5,2-диил))-бис-(2-(2-(гидроксиметил)фенил)ацетамида) (181, 78 мг).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 7,42 (д, 1=6,84 Гц, 2Н), 7,26 (шир.с, 6Н), 4,57 (с, 4Н), 3,90 (с, 4Н), 3,27 (т, 1=6,62 Гц, 4Н), 2,94 (т, 1=6,44 Гц, 4Н).
- 32 026656
К суспензии соединения 1001 (256 мг, 1,00 ммоль) в толуол (8 мл) добавляли 3-изохроманон (311 мг, 2,10 ммоль) с последующим добавлением триметилалюминия (2 М в толуоле, 1,0 мл, 2,00 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 75°С в течение 15 ч, охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом (50 мл). Органический слой промывали водой (3x20 мл), 10% раствором хлорида натрия (10 мл), сушили (сульфат магния) и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали при помощи ВЭЖХ с получением ^№-(5,5'-(тио-бис-(этан-2,1-диил))бис-(1,3,4-тиадиазол-5,2-диил))-бис-(2-(2-(гидроксиметил)фенил)ацетамида) (208, 62 мг).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 7,41 (с, 2Н), 7,26 (с, 6Н), 4,56 (с, 4Н), 3,01 (шир.с, 4Н), 1,76 (шир.с, 4Н).
К раствору соединения 1015 (3,2 г, 19,5 ммоль) в тетрахлориде углерода (150 мл) добавляли Ν-бромсукцинимид (3,47 г, 19,6 ммоль) и бензоилпероксид (10 мг, каталитическ.). Полученную смесь нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение ночи, затем фильтровали в горячем состоянии. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 20% этилацетата/гексана с получением соединения 1016 (2 г, 42% выход) в виде масла.
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-б) δ м.д. 3,66 (с, 2Н), 3,74 (с, 3Н), 4,51 (с, 2Н), 7,35 (м, 4Н).
К раствору соединения 1016 (0,243 г, 1 ммоль) в ацетоне (10 мл) добавляли 2-метилимидазол (0,41 г, 5 ммоль). Полученную смесь нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток разбавляли водой (~100 мл). Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования МеОН/дихлорметан с получением соединения 1017 (0,17 г, 69% выход) в виде масла.
1Н ЯМР (300 МГц, Хлороформ-б) δ м.д. 2,37 (с, 3Н), 3,63 (с, 2Н), 3,72 (с, 3Н), 5,07 (с, 2Н), 6,87 (с, 1Н), 6,96-7,02 (м, 2Н), 7,23-7,33 (м, 3Н).
К раствору соединения 1017 (0,17 г, 0,69 ммоль) в ТГФ/МеОН/вода (10 мл, 2 мл, 2 мл) добавляли гидроксид лития моногидрат (0,06 г, 1,42 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляли водой (~20 мл) и полученный раствор подкисляли уксусной кислотой. Водный слой концентрировали и продукт выделяли при помощи препаративной ВЭЖХ. Полученный остаток растворяли в воде (5 мл) и добавляли концентрированную хлористо-водородную кислоту (83 мкл), затем концентрировали и сушили с получением соединения 1018 (0,15 г) в виде гидрохлоридной соли.
К суспензии карбоновой кислоты 1018 (105 мг, 0,39 ммоль) в ЭМР (3 мл) добавляли НЛТИ (150 мг, 0,39 ммоль) и перемешивали до тех пор, пока реакционная смесь не становилась прозрачной, с последующим добавлением амина 1001 (50,5 мг, 0,197 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (0,14 мл, 0,8 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали водой и сушили с получением соединения 296
- 33 026656 (112 мг, 83%).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,76 (шир.с, 4Н), 2,38 (с, 6Н), 3,01 (шир.с, 4Н), 3,82 (с, 4Н), 5,25 (с, 4Н), 7,09-7,38 (м, 12Н), 12,64-12,67 (шир.с, 2Н).
К суспензии соединения 1019 (1,5 г, 6,8 ммоль) в СН2С12 (15 мл) при 0°С добавляли Εΐ3Ν (1,9 мл, 13,6 ммоль) по каплям, с последующим добавлением фенилацетилхлорида (1,07 мл, 8,1 ммоль) по каплям. Полученную смесь перемешивали при 0°С и затем медленно нагревали до комнатной температуры в течение 2 дней. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-25% ЕЮАс в гексане с получением соединения 1020.
К раствору 4-бром-1-бутина (7 г, 53 ммоль) в ΌΜδΟ (30 мл) при 0°С добавляли ΝαΙ (7,94 г, 53 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем охлаждали до 0°С с последующим добавлением NаСN (5,2 г, 106 ммоль). Полученную смесь нагревали при 80°С в течение 2,5 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь распределяли между водой и ЕЮАс. Органический экстракт промывали водой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением соединения 1021.
К смеси соединения 1020 (400 мг, 1,18 ммоль), РаС12(РРЬ3)2 (41 мг, 0,059 ммоль) и Си1 (11 мг, 0,059 ммоль) в Εΐ3Ν (3 мл) и ТГФ (6 мл) в атмосфере аргона добавляли соединение 1021 (187 мг, 2,36 ммоль), затем нагревали при 60°С в течение ночи. После удаления растворителя остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-60% ЕЮАс в гексане с получением соединения 1022.
К раствору соединения 1022 (118 мг, 0,406 ммоль) в смеси ЕЮАс (60 мл) и ЕЮН (15 мл) добавляли Ра(ОН)2/С (50 мг, 0,356 ммоль). Полученную смесь барботировали водородом и перемешивали в течение 1 ч. Ра катализатор отфильтровывали и фильтрат концентрировали с получением соединения 1023.
Смесь соединения 1023 (127 мг, 0,431 ммоль) и тиосемикарбазида (51 мг, 0,5 61 ммоль) в ТРА (3 мл) нагревали при 85°С в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали на смесь лед-вода. Смесь подщелачивали при помощи гранул №ЮН (рН 10). Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% МеОН в СН2С12 с получением соединения 1024.
К раствору соединения 1024 (38,4 мг, 0,104 ммоль) в NΜР (1 мл) при 0°С добавляли фенилацетилхлорид (0,017 мл, 0,125 ммоль) по каплям. Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч, затем гасили путем добавления воды (~10 мл). Смесь распределяли между водой и ЕЮАс. Органический экстракт промывали водой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% МеОН в СН2С12 с получением соединения 295.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,82 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=9,72 Гц, 1Н), 7,36-7,28 (м, 10Н), 3,81-3,78 (д, 1=8,43 Гц, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
- 34 026656
Соединение 1024 также можно получить в соответствии со следующей процедурой:
К раствору 3-амино-6-хлорпиридазина (11,14 г, 86,0 ммоль) в ΝΜΡ (27 9 мл) при 19°С добавляли фенилацетилхлорид (18,2 мл, 137,6 ммоль) по каплям в течение 5 мин, при этом поддерживали внутреннюю температуру раствора Т1<28°С. Полученную смесь перемешивали при 19°С в течение 90 мин и выливали в ледяную воду (557 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой (2x110 мл) и диэтиловым эфиром (110 мл). Продукт сушили в течение ночи в условиях высокого вакуума с получением ^(6-хлорпиридазин-3-ил)-2-фенилацетамида (ххх, 18,8 г).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 11,57 (с, 1Н), 8,40 (д, 1=9,636 Гц, 1Н), 7,90 (д, 1=9,516 Гц, 1Н), 7,36 (м, 5Н), 3,82 (с, 2Н).
1000-мл трехгорлую колбу, снабженную датчиком внутренней температуры и капельной воронкой продували газообразным Аг. При положительном давлении аргона, 4-цианобутилцинкбромид (0,5 М в ТГФ, 500 мл, 250 ммоль) загружали в капельную воронку, затем добавляли в реакционный сосуд при комнатной температуре. Твердый ^(6-хлорпиридазин-3-ил)-2-фенилацетамид (20,6 г, 83,3 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору при комнатной температуре под потоком газообразного Аг, с последующим добавлением №С12(аррр) (4,52 г, 8,33 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 19°С в течение 240 мин и затем гасили этанолом (120 мл). К перемешиваемому красному раствору добавляли воду (380 мл), с получением густого осадка. Добавляли этилацетат (760 мл) и тщательно перемешивали в течение 30 мин. Твердые вещества удаляли путем фильтрования через слой целита. Маточный раствор затем переносили в делительную воронку и органический слой промывали Н2О (380 мл), 0,5% раствором этилендиаминтетрауксусной кислоты (380 мл) и снова Н2О (380 мл). Органический слой концентрировали на роторном испарителе. Полученное красное масло снова растворяли в ЕЮАс (200 мл) и в колбу добавляли 1 М НС1 (380 мл) при тщательном перемешивании. Через 30 мин смесь переносили в делительную воронку и водный слой собирали. Органический слой экстрагировали при помощи 1 М НС1 (2x380 мл). РН водного слоя затем доводили до ~7 с использованием 7,5% раствора бикарбоната натрия и бледно-желтый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой (200 мл) и диэтиловым эфиром (2x200 мл). Твердое вещество сушили в течение ночи в условиях высокого вакуума с получением ^(6-(4-цианобутил)пиридазин-3-ил)-2-фенилацетамида (1023, 14,76 г).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 11,29 (с, 1Н), 8,23 (д, 1=9,036 Гц, 1Н), 7,59 (д, .1=9,246 Гц, 1Н), 7,32 (м, 5Н), 3,79 (с, 2Н), 2,90 (т, 4=7,357 Гц, 2Н), 2,56 (т, 1=7,038 Гц, 2Н), 1,79 (т, 1=7,311 Гц, 2Н), 1,63 (т, 1=7,01 Гц, 2Н).
^(6-(4-Цианобутил)пиридазин-3-ил)-2-фенилацетамид (14,7 г, 50,2 ммоль) загружали в 250-мл круглодонную колбу, снабженную обратным холодильником с открытым верхом. В колбу добавляли тиосемикарбазид (5,03 г, 55,2 ммсль) и трифторуксусную кислоту (88 мл). Реакционную суспензию нагревали в 65°С бане в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры добавляли Н2О (150 мл) и перемешивали в течение 30 мин. Смесь затем медленно переносили в перемешиваемый 7,5% раствор бикарбоната натрия (1400 мл), охлаждаемый в 0°С бане. Осадок собирали при помощи вакуумфильтрации, промывали водой (2x200 мл), диэтиловым эфиром (2x200 мл) и сушили в условиях высокого вакуума в течение ночи. Не совсем белое твердое вещество суспендировали в ЭМ8О (200 мл) и нагревали в 80°С бане до тех пор, пока внутренняя температура не достигала 65°С. ЭМ8О (105 мл) использовали для промывки стенок колбы. Медленно добавляли Н2О (120 мл) до тех пор, пока раствор не становился слегка мутным и затем смесь удаляли из нагревающей бани и давали охладиться до температуры окружающей среды при перемешивании. Бледно-зеленый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой (200 мл) и диэтиловым эфиром (2x200 мл). Твердое вещество сушили в течение ночи в условиях высокого вакуума с получением ^(6-(4-(5-амино-1,3,4-тиадиазол-2ил)бутил)пиридазин-3-ил)-2-фенилацетамида (1024, 15,01 г).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 11,28 (с, 1Н), 8,23 (д, 1=8,916 Гц, 1Н), 7,59 (д, 1=8,826 Гц, 1Н),
7,36 (м, 5Н), 7,07 (с, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 2,87 (т, 1=6,799 Гц, 4Н), 1,69 (шир.м, 4Н).
- 35 026656
К раствору диметиладипата (28,7 ммоль, 5,0 г, 4,7 мл, 1,0 экв.) в 20 мл МеОН добавляли безводный гидразин (229,6 ммоль, 7,36 г, 7,51 мл, 8,0 экв.) и смесь нагревали до 50°С с получением белого осадка. Смесь нагревали в течение 1 ч и затем давали охладиться до комнатной температуры. Белое твердое вещество собирали путем фильтрования и промывали дополнительным количеством МеОН, затем сушили в условиях высокого вакуума с получением 4,6 г адипогидризида.
1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-Ф) δ м.д. 8,91 (с, 2Н), 4,14 (с, 4Н), 2,00 (шир.с, 4Н), 1,46 (шир.с, 4Н).
К 0°С охлажденной суспензии адипогидризида (12,49 ммоль, 4,0 г, 1,0 экв.), бикарбоната калия (15,61 ммоль, 1,56 г, 1,25 экв.) в 25 мл МеОН добавляли твердый цианогенбромид (13,74 ммоль, 1,44 г, 1,1 экв.) одной порцией. Эту смесь перемешивали при 0°С и давали нагреться до комнатной температуры в течение 1 ч и затем перемешивали в течение ночи. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении и твердые вещества разбавляли водой. рН доводили до 12 при помощи 2,5н. раствора №ЮН и твердые вещества собирали путем фильтрования. Белое твердое вещество промывали водой и сушили в условиях высокого вакуума с получением 1,73 г оксадиазола 1025.
1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 6,85 (с, 4Н), 2,68 (с, 4Н), 1,68 (с, 4Н).
К суспензии оксадиазола 1025 (181 мг, 0,81 ммоль) в ΝΜΡ (9 мл) добавляли триэтиламин (0,564 мл, 4,05 ммоль) и смесь нагревали до 70°С. Смесь оставляли для перемешивания в течение 30 мин с последующим добавлением фенилацетилхлорида (0,234 мл, 1,77 ммоль). Температуру реакции поддерживали при 70°С в течение 15 ч, затем давали охладиться до комнатной температуры. Неочищенную реакционную смесь очищали при помощи обращенно-фазовой ВЭЖХ с получением соединения 305 (0,015 г).
1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 11,74 (с, 2Н), 7,33 (с, 10Н), 3,74 (с, 4Н), 2,85 (с, 4Н), 1,76 (с, 4Н).
Функционализация диацилированных ядер:
К суспензии соединения 21 (2,25 г, 4,57 ммоль) в смеси ТГФ (250 мл) и Н2О (20 мл) при комнатной температуре добавляли №ЮН (1,83 г, 45,67 ммоль) и раствор формальдегида (37% в воде, 14,83 мл, 182,70 ммоль). Полученную смесь нагревали при 60°С в течение 7 ч, затем охлаждали до 0°С и подкисляли до рН 7 водным раствором НС1. Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой и сушили с получением Ч№-[5,5'-(бутан-1,4-диил)-бис-(1,3,4-тиадиазол-5,2-диил)]-бис-(3гидрокси-2-фенилпропанамида) (36, 624 мг). 2-е осаждение из фильтрата давало дополнительный продукт (1,29 г).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,65 (шир.с, 2Н), 7,35-7,30 (м, 10Н), 5,09 (шир.с, 2Н), 4,10-4,02 (м, 4Н), 3,61 (д, 1=8,1 Гц, 2Н), 3,02 (шир.с, 4Н), 1,76 (шир.с, 4Н).
К суспензии соединения 199 (300 мг, 0,572 ммоль) в смеси ТГФ (50 мл) и МеОН (5 мл) добавляли калия карбонат (158 мг, 1,144 ммоль) и раствор формальдегида (37% в воде, 2 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 ч, затем охлаждали до 0°С и подкисляли до рН 7 водным раствором НС1. Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой и сушили. Неочищенное вещество очищали при помощи ВЭЖХ с получением соединения 29.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 7,34-7,26 (м, 10Н), 4,13-4,02 (м, 2Н), 3,81 (с, 2Н), 3,62 (м, 2Н),
3,24 (т, 4Н), 2,93 (т, 4Н).
- 36 026656
К суспензии соединения 199 (2,0 г, 3,81 ммоль) в смеси ТГФ (250 мл) и МеОН (20 мл) Н2О (20 мл) при комнатной температуре добавляли 1н. раствор №ЮН (20 мл) и раствор формальдегида (37% в воде, 15 мл). Полученную смесь нагревали при 50°С в течение ночи, затем охлаждали до 0°С и подкисляли до рН 7 водным раствором НС1. Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой и сушили. Неочищенное вещество очищали при помощи ВЭЖХ с получением соединения 24.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,67 (шир.с, 2Н), 7,36-7,30 (м, 10Н), 5,10 (шир.с, 2Н), 4,10-4,02 (м, 4Н), 3,61 (д, 2Н), 3,27 (т, 4Н), 2,95 (т, 4Н).
Пролекарства:
КгСО3. ОМР
О Ν’—ν ν—ν о ! О Ν-Ν Ν—N О Н к
В колбу, содержащую Ы,№-(5,5'-(тио-бис-(этан-2,1-диил))-бис-(1,3,4-тиадиазол-5,2-диил))-бис-(2фенилацетамид) (1) (9,4 ммоль, 5,0 г, 1,0 экв.), добавляли 100 мл ΌΜΡ, К2СО3 (20,98 ммоль, 2,89 г, 2,2 экв.) и хлорметилбутират (20,98 ммоль, 2,86 г, 2,62 мл, 2,2 экв.). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 ч, затем разбавляли при помощи 200 мл воды и 200 мл ЕЮАс. Слои разделяли и водный слой экстрагировали при помощи ЕЮАс (2x100 мл) и органические слои объединяли, промывали водой, насыщенным солевым раствором и сушили над Ыа28О4. Ыа28О4 удаляли путем фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Соединения очищали при помощи обращеннофазовой хроматографии (МеСЫ, Н2О) с получением 0,235 г соединения 8 и 0,126 г соединения 7.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) соединение 8: δ 7,31 (м, 10Н), 6,18 (с, 4Н), 3,82 (с, 4Н), 3,17 (дд, 2Н, 1=6,8 Гц), 2,92 (дд, 2Н, 1=6,8 Гц), 2,93 (м, 4Н), 2,32 (дд, 2Н, 1=7,2 Гц), 1,54 (дт, 2Н, 1=7,2, 7,4 Гц), 0,87 (т, 3Н, 1=7,4Гц).
соединение 7: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,68 (с, 1Н), 7,32 (м, 10Н), 6,18 (с, 2Н), 3,82 (с, 4Н), 3,26 (дд, 2Н, 1=7,0 Гц), 3,17 (дд, 2Н, 1=6,8 Гц), 2,93 (м, 4Н), 2,32 (дд, 2Н, 1=7,2 Гц), 1,54 (дт, 2Н, 1=7,2,
7,4 Гц), 0,87 (т, 3Н, 1=7,4Гц).
К суспензии гидрохлорида 3-морфолин-4-ил-пропионовой кислоты (500 мг, 2,56 ммоль) в ΌΜΡ (20 мл) при 0°С добавляли гидрохлорид Ы-(3-диметиламинопропил)-№-этилкарбодиимида (534 мг, 2,79 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 40 мин с последующим добавлением диола 36 (642 мг, 1,16 ммоль) и 4-ОМАР (454 мг, 3,72 ммоль). Полученную смесь перемешивали при температуре от 0°С до комнатной температуры в течение 3,5 ч, затем разбавляли ЕЮАс и холодной водой. Органический слой отделяли и промывали водой (3x50 мл), насыщенным солевым раствором, сушили (М§§О4) и концентрировали. Неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 10-25% МеОН в ЕЮАс, с получением {[5,5'-(бутан-1,4-диил)-бис(1,3,4-тиадиазол-5,2-диил)] -бис-(азандиил)} -бис-(3 -оксо-2-фенилпропан-3,1 -диил)-бис-(3 морфолинопропаноата) (188, 340 мг) и менее полярного продукта 3-((5-{4-[5-(3-гидрокси-2фенилпропанамидо)-1,3,4-тиадиазол-2-ил]бутил}-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино)-3 -оксо-2-фенилпропил 3-морфолинопропаноата (228, 103 мг).
188: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,80 (с, 2Н), 7,39 (м, 10Н), 4,62 (т, 1=9,6 Гц, 2Н), 4,33-4,27
- 37 026656 (м, 4Н), 3,48 (шир.с, 8Н), 3,02 (шир.с, 4Н), 2,45 (шир.с, 8Н), 2,25 (шир.с, 8Н), 1,76 (шир.с, 4Н).
228: Ή ЯМР (300 МГц, \1еО1)-Ч) δ м.д. 7,43-7,37 (м, 10Н), 4,71 (т, 1=10,5 Гц, 1Н), 4,41 (м, 1Н), 4,304,24 (м, 2Н), 4,06-4,03 (м, 1Н), 3,80-3,76 (м, 1Н), 3,62 (шир.с, 4Н), 3,11 (шир.с, 4Н), 2,63-2,52 (м, 4Н), 2,40 (шир.с, 4Н), 1,90 (шир.с, 4Н).
К раствору диэтил транс-1,2-циклопропандикарбоксилата (5,00 г, 26,85 ммоль) в ТГФ (20 мл) при 0°С добавляли раствор ЬАН (67,13 мл, 1,0 М в ТГФ, 67,13 ммоль) по каплям. Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 ч, затем гасили при помощи Н2О (20 мл), 2н. водного раствора №ЮН (20 мл) и Н2О (20 мл). Смесь интенсивно перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре, затем фильтровали через пробку из целита. Фильтрат сушили (Мд§О4) и концентрировали с получением желаемого диола (2,73 г) в виде бесцветного масла.
К смеси диола (2,00 г, 19,58 ммоль) в СН2С12 (75 мл) при 0°С добавляли пиридин (6,34 мл, 78,33 ммоль) с последующим добавлением М§С1 (3,33 мл, 43,08 ммоль) по каплям. Полученную смесь перемешивали 0°С в течение 1 ч, затем нагревали до комнатной температуры. Реакционную смесь гасили при помощи Н2О и разбавляли простым эфиром. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили (Мд§О4) и концентрировали с получением соединения 1039. Этот неочищенный продукт растворяли в ЭМ5О (75 мл) и добавляли NаСN (2,88 г, 58,75 ммоль) и №Д (294 мг, 1,96 ммоль). Полученную смесь нагревали при 45°С в течение 8 ч, затем давали охладиться до комнатной температуры и разбавляли при помощи ЕЮАс и Н2О. Органический слой отделяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили (Мд§О4) и концентрировали с получением неочищенного продукта 1040, который использовали на следующей стадии без очистки.
Смесь соединения 1040 и тиосемикарбазида (3,75 г, 41,12 ммоль) в трифторуксусной кислоте (ТРА) (20 мл) нагревали при 80°С в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в смесь льда и воды. Гранулы гидроксида натрия добавляли к смеси до тех пор, пока смесь не становилась щелочной (рН 14). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой, простым эфиром и сушили с получением соединения 1041 (472 мг).
К суспензии соединения 1041 (70 мг, 0,26 ммоль) в 1-метил-2-пирролидиноне (ΝΜΡ) (5 мл) при 0°С добавляли фенилацетилхлорид (72 мкл, 0,55 ммоль) по каплям. Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, затем гасили путем добавления воды (~3 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали водой и сушили с получением соединения 1035 (37 мг).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 12,65 (с, 2Н), 7,34-7,27 (м, 10Н), 3,82 (с, 4Н), 3,04-2,75 (м, 4Н), 1,14-1,12 (м, 2Н), 0,63-0,59 (м, 2Н).
К раствору соединения 1020 (1,50 г, 4,42 ммоль), этинилтриметилсилана (813 мкл, 5,75 ммоль), РДС12(РРЬ3)2 (310 мг, 0,44 ммоль) и Слй (59 мг, 0,31 ммоль) в ТГФ (20 мл) в атмосфере аргона при комнатной температуре добавляли Εΐ3Ν (6,16 мл, 4 4,23 ммоль). Полученную смесь нагревали при 50°С в течение 5 ч, затем давали охладиться до комнатной температуры и фильтровали через пробку из целита. Фильтрат концентрировали и неочищенный остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 10-50% ЕЮАс в гексане с получением желаемого продукта (1,21 г) в виде твердого вещества.
- 38 026656
Смесь описанного выше промежуточного соединения (1,07 г, 3,48 ммоль) и К2СО3 (0,40 г, 2,90 ммоль) в МсОН (100 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток снова растворяли в смеси Е!ОАс и Н2О и нейтрализовали при помощи 1н. водного раствора НС1 до рН 7. Органический слой отделяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили (Мд§О4) и концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной флэшхроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 10-50% Е!ОАс в гексане с получением желаемого алкина 1036 (0,48 г) в виде белого твердого вещества.
К раствору алкина 1036 (52 мг, 0,22 ммоль) в пиридине (5 мл) при комнатной температуре добавляли СиС1 (4,3 мг, 0,04 ммоль). Полученную смесь перемешивали под потоком воздуха в течение 40 мин до тех пор, пока все исходное вещество не было израсходовано. Реакционную смесь разбавляли насыщенным водным раствором ΝΉ4Ο (~2 мл). Не совсем белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали при помощи Н2О и сушили. Этот неочищенный бис-ацетиленовый продукт 1037 (52 мг) использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Смесь соединения 1037 (52 мг) и РБ(ОН)2/С (100 мг) в смеси ЭМР (5 мл) и ТГФ (10 мл) перемешивали при комнатной температуре при давлении 1 атмосферы Н2 в течение 3 ч до тех пор, пока все исходное вещество не было израсходовано. Палладиевый катализатор отфильтровывали и фильтрат концентрировали. Неочищенный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 1-10% МсОН в СН2С12, с получением желаемого продукта 1038 (18 мг) в виде твердого вещества.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 11,26 (с, 2Н), 8,20 (д, 1=8,97 Гц, 2Н), 7,56 (д, 1=8,77 Гц, 2Н), 7,36-7,24 (м, 10Н), 3,78 (с, 4Н), 2,90 (шир.с, 4Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
К раствору адипонитрила (19,02 г, 175,8 ммоль) в ТРА (50 мл) добавляли тиосемикарбазид (16,02 г, 175,8 ммоль) и смесь нагревали до 70°С в течение 4 ч в атмосфере аргона. Смеси давали охладиться до комнатной температуры и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (200 мл) и рН доводили до 7 при помощи твердого №ЮН с получением белого осадка, который собирали фильтрованием и промывали водой. Твердые вещества сушили в условиях высокого вакуума с получением 9,22 г соединения 1081.
Ή ЯМР (ДМСО-Б6) δ м.д. 7,02 (шир.с, 2Н), 2,84 (м, 2Н), 2,55 (м, 2Н), 1,67 (м, 4Н).
К раствору соединения 1081 (0,625 г, 2,87 ммоль) в NМР (12,5 мл) добавляли фенилацетилхлорид (0,487 г, 0,42 мл, 3,15 ммоль) по каплям и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч в атмосфере аргона. Смесь выливали в воду (100 мл) и твердые вещества собирали путем фильтрования. Твердые вещества промывали водой и сушили в условиях высокого вакуума с получением 0,805 г соединения 1082.
Ή ЯМР (ДМСО-Б6): δ 12,65 (с, 1Н), 7,31 (м, 5Н), 3,80 (с, 2Н), 3,00 (т, 2Н, 1=7,3 Гц), 2,53 (т, 2Н, 1=7,1 Гц), 1,78 (дкв., 2Н, 1=7,3, 7,1 Гц), 1,61 (дкв., 2Н, 1=7,3, 7,1 Гц).
К раствору соединения 1082 (0,49 г, 1,33 ммоль) в ТРА (10 мл) добавляли тиосемикарбазид (0,23 г, 1,46 ммоль) и смесь нагревали при 70°С в течение ночи в атмосфере аргона. Смеси давали охладиться до комнатной температуры, и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (50 мл) и рН доводили до 7 при помощи твердого №ЮН с получением белого осадка, который собирали путем фильтрования и промывали водой. Твердые вещества сушили в условиях высокого вакуу- 39 026656 ма с получением 0,367 г соединения 1083.
1Н ЯМР (ДМСО-б6) : δ 12,70 (с, 1Н), 7,34 (шир.с, 5Н), 7,16 (с, 2Н), 3,82 (с, 2Н), 3,01 (с, 2Н), 2,84 (с, 2Н), 1,71 (шир.с, 4Н).
К раствору соединения 1083 (0,10 г, 0,267 ммоль), 2,4-дифтор-3-метоксифенилуксусной кислоты (0,058 г, 0,267 ммоль), БОС (0,127 г, 0,667 ммоль), НОВ! (0,090 г, 0,667 ммоль) в ОМЕ (4 мл) добавляли Э1ЕА (0,171 г, 0,231 мл, 1,335 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи в атмосфере аргона. Смесь выливали в воду (20 мл) и образовавшиеся твердые вещества собирали путем фильтрования, промывали водой и сушили в условиях высокого вакуума. Неочищенное соединение 1084 использовали на следующей стадии без очистки. К раствору соединения 1084 (0,050 г, 0,091 ммоль) в дихлорметане (1 мл) добавляли ВВК3 (1,0 мл, 1 ммоль,
1,0 М в дихлорметане) и смесь перемешивали в течение 4 ч при комнатной температуре в атмосфере аргона. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении и остаток разбавляли дихлорметаном (5 мл). Летучие вещества удаляли при пониженном давлении и остаток разбавляли водой (15 мл) и рН доводили до 12. Водный слой промывали дихлорметаном (4x5 мл) и рН доводили до 4. Твердые вещества собирали путем фильтрования, промывали водой и сушили в условиях высокого вакуума с получением 0,029 г соединения 346.
'Н ЯМР (ДМСО-б6): δ 12,66 (с, 2Н), 10,12 (с, 1Н), 7,33 (с, 5Н), 7,00 (м, 1Н), 6,80 (м, 1Н), 3,84 (с, 2Н), 3,81 (с, 2Н), 3,02 (шир.с, 4Н), 1,76 (шир.с, 4Н).
К раствору соединения 1083 (0,05 г, 0,133 ммоль), Вос-3-аминометил-фенилуксусной кислоты (0,035 г, 0,133 ммоль), БОС (0,064 г, 0,332 ммоль), НОВ! (0,045 г, 0,332 ммоль) в ОМЕ (8 мл) добавляли Э1ЕА (0,086 г, 0,115 мл, 0,665 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи в атмосфере аргона. Смесь зыливали в воду (20 мл) и образовавшиеся твердые вещества собирали путем фильтрования, промывали водой и сушили в условиях высокого вакуума с получением 0,023 г соединения 375.
'II ЯМР (ДМСО-б6) : δ 12,66 (с, 2Н), 7,27 (м, 10Н), 4,11 (шир.с, 2Н), 3,81 (с, 2Н), 3,79 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 4Н), 1,76 (шир.с, 4Н), 1,39 (с, 9Н).
В колбу загружали соединение 1024 (100 мг, 0,27 ммоль), троповую кислоту (54 мг, 0,326 ммоль) в ЭМЕ (2 мл) при 0°С, добавляли НОВТ (88 мг, 0,652 ммоль) с последующим добавлением ЕЭС1 (156 мг, 0,815 ммоль). Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 ч, затем гасили путем добавления воды (~10 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуумфильтрации, промывали дополнительным количеством воды и сушили с получением соединения 314.
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,82 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=9,72 Гц, 1Н), 7,36-7,28 (м, 10Н), 4,10-4,05 (м, 2Н), 3,78 (с, 3Н), 3,65 (с, 1Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
- 40 026656
В колбу загружали соединение 1024 (500 мг, 1,36 ммоль), ОЬ-миндальную кислоту (248 мг, 1,63 ммоль) в ΌΜΡ (10 мл) при 0°С, добавляли НОВТ (441 мг, 3,26 ммоль) с последующим добавлением ЕЭС1 (781 мг, 4,08 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 10 мин, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 10 мин, затем гасили путем добавления воды (~50 мл) при 0°С. Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды и сушили с получением соединения 315.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, Л=8,82 Гц, 1Н), 7,587,50 (м, 3Н), 7,36-7,28 (м, 8Н), 6,35 (с, 1Н), 5,32 (с, 1Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
К суспензии гидрохлорида 3-морфолин-4-ил-пропионовой кислоты (209 мг, 1,07 ммоль) в ΌΜΡ (10 мл) добавляли ЕЭС1 (3 08 мг, 1,61 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, с последующим добавлением соединения 315 (44 7 мг, 0,889 ммоль) и 4-ΌΜΑΡ (261 мг, 2,14 ммоль). Полученную смесь перемешивали при температуре от 0°С до комнатной температуры в течение 6 ч, затем гасили путем добавления ледяной воды (~50 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуумфильтрации, промывали дополнительным количеством воды. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% ΜеΟН в ЕЮАс с получением соединения 334.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,95 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, Л=9,45 Гц, 1Н), 7,587,26 (м, 11Н), 6,14 (с, 1Н), 3,78 (с, 2Н), 3,54 (шир.с, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 2,63 (шир.с, 4Н), 2,38 (шир.с, 4Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 317 получали в соответствии с процедурой выше для соединения 315.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,40 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,03 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, .1=9,72 Гц, 1Н), 7,36-6,87 (м, 9Н), 6,35 (шир.с, 1Н), 5,30 (с, 1Н), 3,78 (м, 5Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 318 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для соединения 315.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,50 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, Л=9,43 Гц, 1Н), 7,607,27 (м, 10Н), 6,51 (шир.с, 1Н), 5,35 (с, 1Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
- 41 026656
В колбу загружали соединение 1024 (50 мг, 0,135 ммоль), 3-хлорфенилуксусную кислоту (28 мг, 0,163 ммоль) в ΌΜΡ (1 мл) при 0°С и добавляли НОВТ (44 мг, 0,326 ммоль) с последующим добавлением ΕΌΟ (78 мг, 0,408 ммоль). Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч, затем гасили путем добавления воды (~5 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды и простым эфиром, затем сушили с получением соединения 335.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,82 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=9,72 Гц, 1Н), 7,36-7,28 (м, 9Н), 3,84 (с, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 337 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для соединения 335.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 9,38 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,37 Гц,
1Н), 7,58-7,54 (д, 1=9,63 Гц, 1Н), 1,36-1,09 (м, 6Н), 6,75-6,65 (м, 3Н), 3,78 (с, 2Н), 3,70 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
339, 341, 382: В колбу загружали соединение 1024 (100 мг, 0,27 ммоль), Вос-3-аминометилфенилуксусную кислоту (86 мг, 0,325 ммоль) в ΌΜΡ (2 мл) при 0°С и добавляли НОВТ (88 мг, 0,65 ммоль) с последующим добавлением ΕΌΟ (156 мг, 0,812 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 5 мин, затем нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1,5 ч, затем гасили путем добавления воды (~10 мл) при 0°С. Белый осадок собирали при помощи вакуумфильтрации, промывали дополнительным количеством воды и простым эфиром, затем сушили с получением соединения 339.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,82 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=9,42 Гц, 1Н), 7,36-7,13 (м, 9Н), 4,13-4,11 (д, 1=10,62, 2Н), 3,78 (с, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н), 1,38 (с, 9Н).
К суспензии соединения 339 (50 мг, 0,081 ммоль) в дихлорметане (2 мл) добавляли ТРА (2 мл) при 0°С. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин, затем упаривали в вакууме досуха. Добавляли простой эфир и белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством простого эфира и дихлорметаном, затем сушили с получением соединения 341.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,82 Гц, 1Н), 8,14- 42 026656
8,11 (шир.с, 2Н), 7,58-7,54 (д, 1=9,42 Гц, 1Н), 7,36-7,13 (м, 9Н), 4,06-4,03 (м, 2Н), 3,84 (с, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
К раствору соединения 341 (10 мг, 0,0159ммоль) в ΌΜΡ (1 мл) при 0°С добавляли триэтиламин (4,4 мкл, 0,0317 ммоль) по каплям с последующим добавлением этилхлорформиата (1,8 мкл, 0,0191 ммоль) по каплям. Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 30 мин, затем гасили путем добавления воды (~1 мл) при 0°С. Смесь распределяли между водой и ЕЮАс. Органический экстракт промывали водой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% ΜеΟН в СН2С12, с получением соединения 382.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,82 Гц, 1Н), 7,677,58 (шир.с, 1Н), 7,58-7,54 (д, 1=9,42 Гц, 1Н), 7,36-7,13 (м, 9Н), 4,18-4,16 (м, 2Н), 4,06-4,0 (кв., 2Н), 3,78 (с, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н), 1,19-1,13 (т,3Н).
Соединение 431 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для соединения 382, с использованием подходящих реагентов.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,35 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,88 Гц, 1Н), 7,57-7,54 (д, 1=9,51 Гц, 1Н), 7,38-7,15 (м, 9Н), 4,25-4,24 (д, 1=5,64 Гц, 2Н), 3,76 (с, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 25 (шир.с, 2Н), 1,87 (с, 3Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 432 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для соединения 382, с использованием подходящих реагентов.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,63 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 9,04-9,01 (м, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,91 Гц, 1Н), 7,93-7,89 (д, 1=9,51 Гц, 2Н), 7,58-7,25 (м, 13Н), 4,50-4,48 (д, 1=5,91 Гц, 2Н), 3,78 (с, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 433 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для соединения 382, с использованием подходящих реагентов.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,63 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,31-8,21 (м, 1Н), 8,20-8,19 (д, 1=9,57 Гц, 1Н), 7,57-7,54 (д, 1=8,73 Гц, 1Н), 7,35-7,13 (м, 9Н), 4,26-4,24 (д, 1=5,52 Гц, 2Н), 3,78 (с, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 2,0 (с, 3Н), 1,73 (шир.с, 4Н), 0,86-0,85 (д, 1=3,99 Гц, 6Н).
К раствору соединения 341 (70 мг, 0,111ммоль) в ΌΜΡ (1 мл) при 0°С добавляли триэтиламин (31 мкл, 0,22 ммоль) по каплям с последующим добавлением 5-бромвалерилхлорида (12 мкл, 0,122 ммоль) по каплям. Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч. К реакционной смеси затем добавляли трет-бутоксид калия (50 мг, 0,445 ммоль)
- 43 026656 при 0°С. Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи, затем гасили путем добавления воды (~2 мл) при 0°С. Смесь распределяли между водой и ЕЮАс. Органический экстракт промывали водой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% МеОН в СН2С12, с получением соединения 476.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,82 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=9,42 Гц, 1Н), 7,36-7,13 (м, 9Н), 4,50 (с, 2Н), 3,78 (с, 4Н), 3,35 (шир.с, 2Н), 3,20 (шир.с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 2,30 (шир.с, 2Н), 1,68-1,80 (д, 6Н).
Соединение 340 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для соединения 315, с использованием подходящих реагентов.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,50 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,24 Гц, 1Н), 7,607,27 (м, 10Н), 6,51 (шир.с, 1Н), 5,35 (с, 1Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 349 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для соединения 315, с использованием подходящих реагентов.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,41 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,76 Гц, 1Н), 7,587,27 (м, 11Н), 6,36 (с, 1Н), 5,34 (с, 1Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 350 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для соединения 315, с использованием подходящих реагентов.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,41 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,67 Гц, 1Н), 7,587,27 (м, 11Н), 6,34 (с, 1Н), 5,34 (с, 1Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 351 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для соединения 315, с использованием подходящих реагентов.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,50 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,21-8,18 (д, 1=8,67 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=9,72 Гц, 1Н), 7,36-7,23 (м, 8Н), 6,67 (с, 1Н), 5,40 (с, 1Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
- 44 026656
К раствору соединения 1024 (50 мг, 0,136 ммоль) в ЭМР (1 мл) при 0°С добавляли триэтиламин (38 мкл, 0,271 ммоль) по каплям с последующим добавлением бензилизоцианата (20 мкл, 0,163 ммоль) по каплям. Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 40 мин, затем гасили путем добавления воды (~5 мл) при 0°С. Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% МеОН в СН2С12 с получением соединения 352.
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 11,26 (с, 1Н), 10,82 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,42 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=8,79 Гц, 1Н), 7,36-7,31 (м, 10Н), 7,06 (шир.с, 1Н), 4,37-4,35 (д, 1=5,22 Гц, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 2,992,90 (м, 4Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 353 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для получения соединения 335.
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,57 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,45 Гц, 1Н), 7,577,54 (д, 1=9,48 Гц, 1Н), 7,36-7,25 (м, 6Н), 6,91-6,84 (м, 3Н), 3,76 (м, 7Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
В колбу загружали соединение 1024 (50 мг, 0,135 ммоль), гидрохлорид 2-пиридинуксусной кислоты (27 мг, 0,156 ммоль) в ЭМР (1 мл) при 0°С и добавляли раствор пропилфосфонового ангидрида (91 мкл) с последующим добавлением триэтиламина (54 мкл, 0,39 ммоль). Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч, затем гасили путем добавления воды (~5 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды и простым эфиром, затем сушили с получением соединения 354.
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,51 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,97 Гц, 1Н), 7,81-7,76 (м, 1Н), 7,58-7,54 (д, 1=9,06 Гц, 1Н), 7,42-7,26 (м, 7Н), 4,02 (с, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 355 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для получения соединения 354.
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,70 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,53-8,49 (м, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 7,77-7,73 (д, 1=8,46 Гц, 1Н), 7,58-7,54 (д, 1=9,48 Гц, 1Н), 7,38-7,26 (м, 7Н), 3,88 (с, 2Н), 3,78
- 45 026656 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединения 309 и 310 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для получения соединения 354.
К раствору 1043 (3,2 г, 19,5 ммоль) в тетрахлориде углерода (150 мл) добавляли Ν-бромсукцинимид (3,47д, 19,6 ммоль) и бензоилпероксид (10 мг, каталитическ.). Полученную смесь нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение ночи, затем фильтровали в горячем состоянии. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 20% этилацетата/гексан с получением соединения 1044 (2 г, 42% выход) в виде масла.
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-а) δ м.д. 3,66 (с, 2Н), 3,74 (с, 3Н), 4,51 (с, 2Н), 7,35 (м, 4Н).
К раствору соединения 1044 (0,243 г, 1 ммоль) в ацетоне (10 мл) добавляли 2-метилимидазол (0,41 г, 5 ммоль). Полученную смесь нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток разбавляли водой (~100 мл). Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования МеОН/дихлорметан с получением соединения 1045 (0,17 г, 69% выход) в виде масла.
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-а) δ м.д. 2,37 (с, 3Н), 3,63 (с, 2Н), 3,72 (с, 3Н), 5,07 (с, 2Н), 6,87 (с, 1Н), 6,96-7,02 (м, 2Н), 7,23-7,33 (м, 3Н).
К раствору соединения 1045 (0,17 г, 0,69 ммоль) в ТГФ/МеОН/воде (10 мл, 2 мл, 2 мл) добавляли гидроксид лития моногидрат (0,06 г, 1,42ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляли водой (~20 мл) и полученный раствор подкисляли уксусной кислотой. Водный слой концентрировали и продукт выделяли препаративной ВЭЖХ. Полученный остаток растворяли в воде (мл) и добавляли концентрированную хлористо-водородную кислоту затем концентрировали и сушили с получением соединения 1046 (0,15 г) в виде гидрохлоридной соли.
К суспензии карбоновой кислоты 1046 (41,8 мг, 0,157 ммоль) в ΌΜΡ (3 мл) добавляли НАТИ (61,3 мг, 0,161 ммоль) и перемешивали до тех пор, пока реакционная смесь не становилась прозрачной, с последующим добавлением амина 1024 (52,5 мг, 0,142 ммоль) и Э1РЕА (50 мкл, 0,29 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды. Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток растирали в порошок с простым эфиром. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали простым эфиром и сушили с получением соединения 380 (40 мг, 48%).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,74 (шир.с, 4Н), 2,91-3,02 (шир.с, 4Н), 3,78-3,83 (м, 4Н), 5,34 (с, 2Н), 7,16-7,57 (м, 12Н), 8,19-8,22 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
- 46 026656
К охлажденному льдом раствору 1048 (5 г, 0,033 моль) в метаноле (50 мл) добавляли тионилхлорид (0,2 мл) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток сушили в условиях высокого вакуума в течение ночи с получением соединения 1049 (5 г) в виде масла, и его использовали как таковое на следующей стадии.
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-ά) δ м.д. 3,62 (с, 2Н), 3,74 (с, 3Н), 6,76-6,87 (м, 3Н), 7,18-7,21 (м, 1Н).
К раствору соединения 1049 (1 г, 6 ммоль) в ΌΜΡ (20 мл) добавляли карбонат калия (2,08 г, 15 ммоль), 1050 (1,225 г, 6,62 ммоль) и йодид натрия (10 мг). Полученную смесь перемешивали при 80°С в течение ночи, затем разбавляли водой (~100 мл). Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ΜеОН/дихлорметан, с получением соединения 1051 (1 г, 60% выход) в виде масла.
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-ά) δ м.д. 2,61 (с, 4Н), 2,83 (т, 2Н), 3,62 (с, 2Н), 3,63 (с, 3Н), 3,73-3,77 (м, 4Н), 4,14 (т, 2Н), 6,88-6,91 (м, 3Н), 7,26-7,29 (м, 1Н).
К раствору соединения 1051 (1 г, 3,57 ммоль) в ^Ф^еОН/воде (30 мл, 5 мл, 5 мл) добавляли гидроксид лития моногидрат (0,3 г, 7,14 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляли водой (~50 мл) и полученный раствор подкисляли 1н. раствором хлористо-водородной кислоты. Водный слой концентрировали и продукт выделяли препаративной ВЭЖХ. Полученный остаток растворяли в воде (мл) и добавляли концентрированную хлористо-водородную кислоту (мл), затем концентрировали и сушили с получением соединения 1052 в виде гидрохлоридной соли.
К суспензии карбоновой кислоты 1052 (47,4 мг, 0,157 ммоль) в ΌΜΡ (3 мл) добавляли НАТИ (61,3 мг, 0,161 ммоль) и перемешивали до тех пор, пока реакционная смесь не становилась прозрачной, с последующим добавлением амина 1024 (52,5 мг, 0,142 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (50 мкл, 0,29 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды. Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ΜеОН/дихлорметан, с получением соединения 381 (40 мг, 46% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,74 (шир.с, 4Н), 2,72 (т, 2Н), 2,89-2,9 (м, 4Н), 3,02 (шир.с, 4Н), 3,336 (м, 2Н), 3,76-3,78 (м, 2Н), 4,09 (м, 2Н), 6,88-6,93 (м, 3Н), 7,24-7,36 (м, 6Н), 7,54-7,58 (д, 1Н), 8,188,21 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
- 47 026656
К раствору соединения 1044 (2,29 г, 0,01 моль) в ΌΜΡ (100 мл) добавляли карбонат калия (1,38 г, 0,01 ммоль) и пиразол (0,68 г, 0,01 моль). Полученную смесь перемешивали при 70°С в течение 5 ч, затем разбавляли водой (~100 мл). Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮАс/гексан, с получением соединения 1053 (1 г, 50% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-а) δ м.д. 3,94 (с, 3Н), 5,40 (с, 2Н), 6,33 (с, 1Н), 7,42-7,48 (м, 3Н), 7,58 (с, 1Н), 7,95 (с, 1Н), 8,00-8,02 (м, 1Н).
К охлажденному льдом раствору соединения 1053 (1 г, 4,62 ммоль) в ТГФ (20 мл) добавляли лития гидрид алюминия (2,5 мл, 2 М/ТГФ) по каплям и полученную реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 5 ч, затем гасили насыщенным раствором сегнетовой соли. Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали, с получением соединения 1054 (0,8 г, 92% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-а) δ м.д. 4,71 (с, 2Н), 5,35 (с, 2Н), 6,30 (с, 1Н), 7,15-7,43 (м, 5Н), 7,58 (с, 1Н).
К раствору соединения 1054 (0,8 г, 4,2 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавляли тионилхлорид и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток сушили в условиях высокого вакуума в течение ночи с получением соединения 1055 (1 г, 97% выход) в виде НС1 соли.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 4,75 (с, 2Н), 5,38 (с, 2Н), 6,30 (с, 1Н), 7,19-7,50 (м, 5Н), 7,86 (с, 1Н), 11,49-11,60 (шир.с, 1Н).
К раствору соединения 1055 (1 г, 4,1 ммоль) в ΌΜΡ (20 мл) добавляли цианид натрия (0,625 г, 12,7 ммоль) и йодид натрия (20 мг) и полученную реакционную смесь перемешивали при 70°С в течение 2 ч, затем разбавляли водой. Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮАс/гексан, с получением соединения 1056 (0,664 г, 83% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-а) δ м.д. 3,76 (с, 2Н), 5,38 (с, 2Н), 6,35 (с, 1Н), 7,19-7,46 (м, 5Н), 7,61 (с, 1Н).
К раствору соединения 1056 (0,664 г, 3,3 ммоль) в диоксане (5 мл) добавляли концентрированную хлористо-водородную кислоту (5 мл) и полученную реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ и преобразовывали в НС1 соль, с получением соединения 1057 (0,5 г, 40% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 3,55 (с, 2Н), 5,33 (с, 2Н), 6,29 (с, 1Н), 7,14-7,20 (м, 4Н), 7,48 (с, 1Н), 7,84 (с, 1Н), 11,97-11,99 (шир.с, 1Н).
К суспензии карбоновой кислоты 1057 (19,8 мг, 0,0785 ммоль) в ΌΜΡ (2 мл) добавляли НАТИ (30,6 мг, 0,08 ммоль) и перемешивали до тех пор, пока реакционная смесь не становилась прозрачной, с последующим добавлением амина 1024 (26,25 мг, 0,07 ммоль) и ЭГРЕА (25 мкл, 0,15 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали водой и сушили с получением соединения 395 (18 мг, 45% выход).
- 48 026656
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,74 (шир.с, 4Н), 2,89-3,04 (м, 4Н), 3,78 (с, 4Н), 5,33 (с, 2Н), 6,27-6,28 (с, 1Н), 7,09-7,58 (м, 11Н), 7,82 (с, 1Н), 8,19-8,21 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
К раствору соединения 1044 (1 г, 4,1 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли раствор 2 М метиламина в ТГФ (2 мл) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования МеОН/дихлорметан, с получением соединения 1058 (0,26 г, 33% выход).
1Н ЯМР (300 МГц, Хлороформ-б) δ м.д. 2,49 (с, 3Н), 3,66 (с, 2Н), 3,73 (с, 3Н), 3,79 (с, 2Н), 7,2-7,33 (м, 4Н).
К раствору соединения 1058 (0,26 г, 1,35 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли Ьое ангидрид (0,293 г, 1,35 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, затем очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮАе/гексан, с получением соединения 1059 (0,3 г, 77% выход).
1Н ЯМР (300 МГц, Хлороформ-б) δ м.д. 1,5 (с, 9Н), 2,84 (с, 3Н), 3,66 (с, 2Н), 3,73 (с, 3Н), 4,44 (с, 2Н), 7,17-7,32 (м, 4Н).
К охлажденному льдом раствору соединения 1059 (0,3 г, 1,02 ммоль) в диоксане (3 мл) и воде (2 мл) добавляли гидроксид лития моногидрат (0,086 г, 2,04 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 3 ч, затем подкисляли при помощи 1н. раствора НС1. Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток сушили в условиях высокого вакуума в течение ночи с получением соединения 1060 (0,2 г, 70% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-б) δ м.д. 1,5 (с, 9Н), 2,84 (с, 3Н), 3,66 (с, 2Н), 4,43 (с, 2Н), 7,17-7,32 (м, 4Н).
К суспензии карбоновой кислоты 1060 (51,1 мг, 0,183 ммоль) в ОМЕ (3 мл) добавляли НАТИ (69,7 мг, 0,183 ммоль) и перемешивали до тех пор, пока реакционная смесь не становилась прозрачной, с последующим добавлением амина 1024 (61,3 мг, 0,166 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (58 мкл, 0,33 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды. Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования МеОН/дихлорметан, с получением соединения 445 (0,06 г, 57% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,37-1,38 (с, 9Н), 1,74 (шир.с, 4Н), 2,76 (с, 3Н), 2,89 (шир.с, 2Н), 3,02 (шир.с, 2Н) 3,78-3,80 (м, 4Н), 4,36 (с, 2Н), 7,11-7,36 (м, 9Н), 7,54-7,57 (д, 1Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12, 65 (шир. с, 1Н).
- 49 026656
Получение соединения 445 через удаление защиты в соединении 396 с получением соединения 408 и повторное ацилирование:
К охлажденному льдом раствору соединения 408 (26 мг, 0,04 ммоль) в ΌΜΡ (1 мл) добавляли триэтиламин (12,3 мкл, 0,088 ммоль) и ацетилхлорид (3,16 мкл, 0,044 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем разбавляли водой. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали водой и сушили в условиях высокого вакуума в течение ночи с получением соединения 445 (10 мг, 48% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,74 (шир.с, 4Н), 2,05 (м, 3Н), 2,91-3,02 (м, 7Н), 3,78-3,82 (м, 4Н), 4,49-4,56 (м, 2Н), 7,18-7,36 (м, 9Н), 7,55-7,58 (д, 1Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 8,75-8,7 (шир.с, 2Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
Соединение 401 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для получения соединения 339.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,40 (с, 9Н), 1,75 (шир.с, 4Н), 2,87 (шир.с, 2Н), 2,89 (шир.с, 2Н), 3,78 (с, 4Н), 4,09-4,11 (шир.с, 2Н), 7,18-7,36 (м, 9Н), 7,54-7,58 (д, 1Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
Соединение 413 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для получения соединения 315.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,68 (шир.с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,46 Гц, 1Н), 7,587,26 (м, 10Н), 3,90 (с, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,02 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,74 (шир.с, 4Н).
Соединение 415 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для получения соединения 315.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,48 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=8,95 Гц, 1Н), 7,75 (с, 1Н), 7,58-7,26 (м, 9Н), 6,52 (м, 1Н), 5,35 (м, 1Н), 3,78 (с, 2Н), 3,02 (м, 2Н), 2,90 (м, 2Н), 1,74 (шир.с, 4Н).
- 50 026656
К раствору соединения 1063 (6,31 г, 24,9 ммоль) в этаноле добавляли гидроксид лития моногидрат (1,048 г, 24,9 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляли водой и подкисляли при помощи 6н раствора НС1. Раствор экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования Ε!ОΑс/гексан с получением соединения 1064 (3 г, 53% выход).
К суспензии карбоновой кислоты 1064 (0,1 г, 0,44 ммоль) в ΌΜΡ (2 мл) добавляли НАТИ (0,17 г, 0,44 ммоль) и перемешивали до тех пор, пока реакционная смесь не становилась прозрачной, с последующим добавлением амина 1024 (0,15 г, 0,4 ммоль) и ^IΡΕΑ (0,14 мл, 0,8 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали водой и сушили с получением соединения 456 (0,2 г, 86% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,18 (т,3Н), 1,74 (шир.с, 4Н), 2,88-2,90 (м, 2Н), 3,01-3,04 (м, 2Н), 3,66 (с, 2Н), 3,78 (с, 4Н), 4,05-4,12 (кв., 2Н), 7,19-7,36 (м, 9Н), 7,55-7,58 (м, 1Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
К раствору соединения 456 (0,205 г, 0,358 ммоль) в диоксане/воде (20 мл/6 мл) добавляли гидроксид лития моногидрат (0,06 г, 1,42 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем подкисляли уксусной кислотой. Раствор концентрировали при пониженном давлении и полученный остаток разбавляли водой. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали водой и сушили в условиях высокого вакуума в течение ночи. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ΜеОН/дихлорметан, с получением соединения 465 (0,15 г, 77% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,74 (шир.с, 4Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 3,5 (с, 2Н), 3,78 (с, 4Н), 7,19-7,36 (м, 9Н), 7,55-7,58 (м, 1Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,32 (шир.с, 1Н), 12,65 (с, 1Н).
К суспензии карбоновой кислоты 465 (25 мг, 0,046 ммоль) в ΌΜΡ (1 мл) добавляли НАТИ (19,2 мг, 0,05 ммоль) и перемешивали до тех пор, пока реакционная смесь не становилась прозрачной, с последующим добавлением Ν,Ν-диметиламина (2 М/ТТФ, 30 мкл, 0,05 ммоль) и ^IΡΕΑ (16 мкл, 0,092 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем гасили путем добавления воды. Отделившееся твердое зещество фильтровали, промывали водой и сушили с получением соединения 472 (19 мг, 73% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,74 (шир.с, 4Н), 2,83-2,90 (шир.с, 6Н), 3,01 (шир.с, 4Н), 3,68 (с, 2Н), 3,78 (с, 4Н), 7,14-7,36 (м, 9Н), 7,55-7,58 (д, 1Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
- 51 026656
К раствору соединения 1049 (1 г, 6 ммоль) в ΌΜΡ (20 мл) добавляли карбонат калия (1,662 г, 12 ммоль) и (2,16 г, 9 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 70 °С в течение ночи, затем разбавляли водой (~100 мл). Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮАс/гексан с получением соединения 1065 (1,78 г, 91% выход) в виде масла.
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-а) δ м.д. 0,13 (с, 6Н), 0,95 (с, 9Н), 3,63 (с, 2Н), 3,73 (с, 2Н), 3,99-4,06 (м, 4Н), 6,87 (м, 3Н), 7,3 (м, 1Н).
К раствору соединения 1065 (1,78 г, 5,5 ммоль) в ТГФ^еОН/воде (30 мл, 3 мл, 3 мл) добавляли гидроксид лития моногидрат (0,46 г, 10,9 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляли водой (~20 мл) и полученный раствор подкисляли 6н раствором хлористо-водородной кислоты. Раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для соединения 1065 и 1066.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 3,54 (с, 2Н), 3,72 (шир.с, 2Н), 3,96-3,98 (шир.с, 2Н), 4,85 (шир.с, 1Н), 6,82-6,85 (м, 3Н), 7,0-7,22 (м, 1Н), 12,3 (шир.с 1Н).
К суспензии карбоновой кислоты 1065 (27 мг, 0,137 ммоль) в ΌΜΡ (2 мл) добавляли НАТИ (52,2 мг, 0,137 ммоль) и перемешивали до тех пор, пока реакционная смесь не становилась прозрачной, с последующим добавлением амина 1024 (46 мг, 0,125 ммоль) и Э1РЕА (44 мкл, 0,25 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали водой и сушили. Полученное твердое вещество очищали препаративной ВЭЖХ с получением соединения 427 (16 мг, 23% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,75 (шир.с, 4Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 3,02 (шир.с, 2Н), 3,71-3,78 (м, 6Н), 3,98-3,99 (шир.с, 2Н), 4,84-4,87 (шир.с, 1Н), 6,83-6,92 (м, 3Н), 7,21-7,36 (м, 6Н), 7,54-7,58 (д, 1Н), 8,28,23 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
К раствору соединения 1049 (1 г, 6 ммоль) в ацетоне (50 мл) добавляли карбонат цезия (2,545 г, 7,83 ммоль), 2-бромэтилметиловый эфир (0,92 г, 6,62 ммоль) и йодид натрия (10 мг). Полученную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи, затем фильтровали. Фильтрат упаривали и полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮАс/гексан, с получением соединения 1075 (0,97 г, 72% выход) в виде масла.
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-а) δ м.д. 3,48 (с, 3Н), 3,63 (с, 2Н), 3,72 (шир.с, 2Н), 4,14-4,15 (т, 2Н), 6,86-6,9 (м, 3Н), 7,26-7,29 (м, 1Н).
В остальной части получения для соединения 428 следовали процедуре, описанной выше для соединения 427. 428: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,75 (шир.с, 4Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 3,02 (шир.с, 2Н), 3,32 (с, 3Н), 3,66 (шир.с, 2Н), 3,78 (шир.с, 4Н), 4,08 (шир.с, 2Н), 6,88-6,92 (м, 3Н), 7,25-7,27 (м, 6Н), 7,54-7,58 (д, 1Н), 8,2-8,23 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12, 65 (шир.с, 1Н).
- 52 026656
К охлажденному льдом раствору соединения 1068 (6 г, 30,9 ммоль) в этаноле (50 мл) добавляли тионилхлорид (2 мл) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением соединения 1063 (6 г).
К перемешиваемому раствору соединения 1063 (3,35 г, 13,4 ммоль) в ТГФ (50 мл) добавляли СЭ1 (2,44 г, 15 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение 2 ч с последующим добавлением воды (13 мл). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли борогидрид натрия (2,87 г, 76 ммоль) по порциям. Перемешивание продолжали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем разбавляли этилацетатом и подкисляли 6н раствором НС1. Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования Е!ОАс/гексан, с получением соединения 1069 (0,563 г, 20% выход) в виде масла.
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-Б) δ м.д. 1,27-1,31 (кв.,3Н), 2,87-2,92 (д, 2Н), 3,63 (с, 2Н), 3,87-3,92 (т, 2Н), 4,18-4,2 (кв., 2Н), 7,19-7,31 (м, 4Н).
К охлажденному льдом раствору соединения 1069 (0,563 г, 2,7 ммоль) в дихлорметане (40 мл) и триэтиламине (0,47 мл, 3,3 ммоль) добавляли метансульфонилхлорид (0,23 мл, 3,3 ммоль) и полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч и при комнатной температуре в течение 1 ч, затем разбавляли насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Раствор экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением соединения 1070 (0,78 г, 100% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-Б) δ м.д. 1,27-1,31 (кв.,3Н), 2,87 (с, 3Н), 3,08 (т, 2Н), 3,63 (с, 2Н), 4,18-4,2 (т, 2Н), 4,45 (кв., 2Н), 7,19-7,31 (м, 4Н).
К раствору соединения 1070 (0,787 г, 2,7 ммоль) в ЭМР (6 мл) добавляли азид натрия (0,358 г, 5,5 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 3 ч, затем распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования Е!ОАс/гексан с получением соединения 1071 (0,5 г, 78% выход) в виде масла.
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-Б) δ м.д. 1,27-1,31 (кв.,3Н), 2,92 (т, 2Н), 3,54 (т, 2Н), 3,63 (с, 2Н), 4,18-4,2 (кв., 2Н), 7,19-7,29 (м, 4Н).
К раствору соединения 1071 (0,5 г, 2,1 ммоль) в ТГФ (25 мл) добавляли трифенилфосфин (0,787 г, 3 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере аргона в течение ночи, затем разбавляли при помощи 1 мл воды. Реакция продолжалась при 50°С в течение 1 ч, затем смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток распределяли между насыщенным раство- 53 026656 ром бикарбоната натрия и дихлорметаном. Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования МеОН/дихлорметан, с получением соединения 1072 (0,43 г, 100% выход) в виде масла.
'II ЯМР (300 МГц, Хлороформ-б) δ м.д. 1,27-1,31 (кв., 3Н), 2,75-2,79 (т, 2Н), 2,98-3,02 (т, 2Н), 3,63 (с, 2Н), 4,18-4,2 (кв., 2Н), 7,13-7,29 (м, 4Н).
К раствору соединения 1072 (0,427 г, 2 ммоль) в дихлорметане (30 мл) добавляли ди-третбутилдикарбонат (0,447 г, 2 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч, затем очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования Е!ОАс/гексан, с получением соединения 1073 (0,577 г, 91% выход) в виде масла.
'II ЯМР (300 МГц, Хлороформ-б) δ м.д. 1,27-1,31 (кв.,3Н), 1,59 (с, 9Н), 2,82 (т, 2Н), 3,4 (м, 2Н), 3,63 (с, 2Н), 4,18 (кв., 2Н), 7,13-7,29 (м, 4Н).
К раствору соединения 1073 (0,577 г, 1,8 ммоль) в диоксане/воде (10 мл/3 мл) добавляли гидроксид лития моногидрат (0,158 г, 3,6 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток разбавляли водой (~20 мл) и полученный раствор подкисляли при помощи 1н. раствора хлористо-водородной кислоты. Раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением соединения 1074 (0,35 г, 67% выход).
'II ЯМР (300 МГц, Хлороформ-б) δ м.д. 2,82 (м, 2Н), 3,4 (м, 2Н), 3,63 (с, 2Н), 4,6 (шир.с, 1Н), 7,137,29 (м, 4Н).
К суспензии карбоновой кислоты 1074 (43,8 мг, 0,157 ммоль) в ОМЕ (2 мл) добавляли НАТи (61,3 мг, 0,161 ммоль) и перемешивали до тех пор, пока реакционная смесь не становилась прозрачной, с последующим добавлением амина 1024 (52,5 мг, 0,142 ммоль) и Э1РЕА (50 мкл, 0,287 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем гасили путем добавления воды. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали водой и сушили с получением соединения 429 (60 мг, 67% выход).
'Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,37-1,38 (с, 9Н), 1,74 (шир.с, 4Н), 2,69-2,71 (м,2Н), 2,87-2,88 (м, 2Н), 2,9-3,15 (м, 4Н), 3,78 (с, 4Н), 7,09 (шир.с, 1Н), 7,12-7,36 (м, 9Н), 7,54-7,57 (д, 1Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
К суспензии соединения 429 (50 мг, 79,5 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавляли ТЕА (1 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растирали в порошок с простым эфиром. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали простым эфиром и сушили в условиях высокого вакуума в течение ночи с получением соединения 441 (45 мг, 8 8% выход) в виде ТЕА соли.
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,74 (шир.с, 4Н), 2,86-3,02 (м, 8Н), 3,78-3,80 (с, 4Н), 7,12-7,36 (м, 8Н), 7,58 (д, 1Н), 7,78 (шир.с, 3Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
К охлажденному льдом раствору соединения 441 (23 мг, 0,035 ммоль) в ОМЕ (1 мл) добавляли триэтиламин (11 мкл, 0,079 ммоль) и ацетилхлорид (2,8 мкл, 0,038 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, затем разбавляли водой. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали водой и сушили в условиях высокого вакуума в течение ночи с получением соединения 454 (10 мг, 50% выход).
'Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,75-1,79 (м, 7Н), 2,67-2,70 (м, 2Н), 2,9 (шир.с, 2Н), 3,00-3,02 (м, 2Н), 3,21-3,26 (м, 2Н), 3,78 (с, 4Н), 7,12-7,36 (м, 9Н), 7,58 (д, 1Н), 7,9 (шир.с, 1Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
Соединение 409 получали через удаление ТЕА защиты соединения 399 в соответствии с процедурой, описанной выше для получения соединения 441.
'Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,75 (шир.с, 4Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 3,02 (шир.с, 2Н), 3,78 (шир.с, 4Н), 6,89-6,98 (м, 4Н), 7,25-7,36 (м, 7Н), 7,51-7,58 (д, 1Н), 8,2-8,23 (д, 1Н), 9,34 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
- 54 026656
Соединение 457 получали путем ацилирования соединения 409 в соответствии с процедурой амидного связывания, описанной выше для получения соединения 39.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,74 (шир.с, 4Н), 2,32 (с, 6Н), 2,89 (м, 2Н), 3,02 (м, 2Н), 3,13 (с, 2Н), 3,78 (с, 4Н), 7,01-7,04 (м, 1Н), 7,25-7,38 (м, 6Н), 7,54-7,58 (м, 3Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 9,77 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,65 (шир.с, 1Н).
К суспензии соединения 295 (30 мг, 0,0617 ммоль) в ΜеΟН (2 мл) при 0°С добавляли 2н. раствор ЫаОН (2 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель упаривали в вакууме и смесь подкисляли при помощи 1н. раствора НС1 до рН 6. Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды и сушили с получением соединения 348.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 7,32-7,24 (м, 5Н), 7,15-7,12 (д, 1=9,57 Гц, 1Н), 6,72-6,69 (д, 1=9,15 Гц, 1Н), 6,09 (с, 2Н), 3,77 (с, 2Н), 2,99-2,96 (шир.с, 2Н), 2,76-2,70 (шир.с, 2Н), 1,70 (шир.с, 4Н).
366: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,82 Гц, 1Н), 7,58-7,54 (д, 1=9,32 Гц, 1Н), 7,33-7,25 (м, 6Н), 6,95-6,82 (м, 3Н), 3,81 (с, 3Н), 3,75 (с, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
367: В колбу загружали соединение 348 (100 мг, 0,27 ммоль), Вос-3-аминометил-фенилуксусную кислоту (86 мг, 0,325 ммоль) в ΌΜΡ (2 мл) при 0°С и добавляли НОВТ (88 мг, 0,65 ммоль) с последующим добавлением ЕЭС'! (156 мг, 0,812 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 5 мин, затем нагревали до комнатной температуры в течение ночи, затем гасили путем добавления воды (~10 мл) при 0°С. Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% ΜеΟН в СН2С12 с получением соединения 367.
- 55 026656
Соединение 368 получали путем удаления защиты соединения 367 в соответствии с процедурой, описанной выше для соединения 341.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,16 (м, 3Н), 7,58-7,54 (д, 1=9,27 Гц, 1Н), 7,40-7,28 (м, 9Н), 4,04 (с, 2Н), 3,81 (с, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 383 получали из соединения 348 в соответствии с процедурой, описанной выше для получения соединения 354.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,51 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,09 Гц, 1Н), 7,81-7,76 (м, 1Н), 7,58-7,54 (д, 1=9,12 Гц, 1Н), 7,42-7,26 (м, 7Н), 4,0 (с, 2Н), 3,81 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
К раствору соединения 348 (56,5 мг, 0,153 ммоль) в ΌΜΡ (1 мл) при 0°С добавляли по каплям триэтиламин (43 мкл, 0,306 ммоль) с последующим добавлением бензилизоцианата (23 мкл, 0,184 ммоль) по каплям. Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 6 ч, затем гасили путем добавления воды (~5 мл) при 0°С. Белый осадок собирали при помощи вакуумфильтрации, промывали дополнительным количеством воды и простым эфиром и дихлорметаном, затем сушили с получением соединения 405.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 9,57 (с, 1Н), 8,25 (шир.с, 1Н), 7,74-7,71 (д, 1=8,61 Гц, 1Н), 7,50-7,47 (д, 1=9,42 Гц, 1Н), 7,34-7,27 (м, 10Н), 4,42-4,40 (д, 1=5,46 Гц, 2Н), 3,80 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
К суспензии соединения 339 (1 г, 1,62 ммоль) в МеОН (10 мл) при 0°С добавляли 2н. раствор ЫаОН (10 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель вы- 56 026656 паривали в вакууме и смесь подкисляли при помощи 6н раствора НС1 до рН 6 при 0°С. Смесь растирали в порошок с ЕЮАс и белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством ЕЮАс и сушили с получением соединения 412.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,66 (с, 1Н), 7,29-7,22 (м, 2Н), 7,19-7,13 (м, 4Н), 6,72 (д, 1=3,86 Гц, 1Н), 6,12 (шир.с, 2Н), 4,12 (д, 1=6,09 Гц, 2Н), 3,79 (с, 2Н), 3,01 (м, 2Н), 2,71 (м, 2Н), 1,70 (шир.с, 4Н), 1,39 (с, 9Н).
К раствору соединения 412 (60 мг, 0,121 ммоль) в ΌΜΡ (1 мл) при 0°С добавляли триэтиламин (34 мкл, 0,242 ммоль) по каплям с последующим добавлением этилизоцианата (11 мкл, 0,145 ммоль) по каплям. Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 6 ч, затем гасили путем добавления воды (~5 мл) при 0°С. Белый осадок собирали при помощи вакуумфильтрации. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% МеОН в СН2С12, с получением соединения 420.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) 12,65 (с, 1Н), 11,27 (с, 1Н), 9,42 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,61 Гц, 1Н), 7,77-7,13 (м, 5Н), 6,56-6,53 (шир.с, 1Н), 4,12-4,11 (д, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,23-3,16 (м, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н), 1,38 (с, 9Н), 1,10-1,07 (т, 3Н).
422: Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 10,74 (с, 1Н), 8,18-8,15 (д, 1=9,51 Гц, 1Н), 7,61-7,12 (м, 9Н), 6,62 (с, 1Н), 5,33 (с, 1Н), 4,13-4,11 (д, 1=5,58 Гц, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н), 1,38 (с, 9Н).
К раствору соединения 412 (40 мг, 0,0804 ммоль) е ΌΜΡ (1 мл) при 0°С добавляли триэтиламин (17 мкл, 0,121 ммоль) по каплям с последующим добавлением уксусного ангидрида (8 мкл, 0,0844 ммоль) по каплям. Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи, затем гасили путем добавления воды (~5 мл) при 0°С. Смесь распределяли между водой и ЕЮАс. Органический экстракт промывали водой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% МеОН в СН2С12, с получением соединения 424.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,65 (с, 1Н), 11,01 (с, 1Н), 8,23-8,20 (д, 1=8,61 Гц, 1Н), 7,577,55 (д, 1=8,16 Гц, 1Н), 7,38-7,12 (м, 4Н), 4,13-4,11 (д, 1=5,76 Гц, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 2,14 (с, 3Н), 1,75 (шир.с, 4Н), 1,39 (с, 9Н).
425
К суспензии соединения 424 (10 мг, 0,018 ммоль) в дихлорметане (1 мл) добавляли ТРА (1 мл) при 0°С. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем упаривали в вакууме досуха. Добавляли простой эфир и белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством простого эфира и сушили с получением соединения 425.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,70 (с, 1Н), 11,0 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,82 Гц, 1Н), 8,16-8,08 (шир.с, 2Н), 7,58-7,54 (д, 1=9,42 Гц, 1Н), 7,39-7,30 (м, 4Н), 4,06-4,03 (м, 2Н), 3,84 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 2,14 (с, 3Н), 1,75 (шир.с, 4Н).
- 57 026656
К раствору соединения 1076 (1,8 г, 10 ммоль) в этаноле/воде (40 мл/20 мл) добавляли цианид натрия (0,98 г, 20 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 90°С в течение 4 ч, затем охлаждали до 0°С. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали водой и сушили в условиях высокого вакуума в течение ночи с получением соединения 1077 (1,5 г, 85% выход).
К охлажденному льдом раствору соединения 1077 (1 г, 5,68 ммоль) в этаноле (50 мл) добавляли борогидрид натрия (0,86 г, 22,72 ммоль) с последующим добавлением хлорида висмута (2 г, 6,248 ммоль) по порциям. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем фильтровали через слой целита. Фильтрат концентрировали и полученный остаток распределяли между водным раствором бикарбоната натрия и этилацетатом. Органический экстракт отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением соединения 1078 (0,82 г, 100% выход).
'ΐ I ЯМР (300 МГц, Хлороформ-б) δ м.д. 2,17 (с, 3Н), 3,69-3,71 (шир.с, 4Н), 6,71-6,74 (д, 1Н), 6,806,83 (д, 1Н), 7,04-7,09 (м, 1Н).
К раствору соединения 1078 (0,3 г, 2 ммоль) в толуоле (10 мл) добавляли ацетат калия (0,2 г, 2,04 ммоль) и уксусный ангидрид (0,55 мл, 5,83 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 80°С в течение 1 ч с последующим добавлением изоамилнитрита (0,4 мл, 3 ммоль). Перемешивание продолжали при 80°С в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры. Раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования Е!ОАс/гексан, с получением соединения 1079 (0,22 г, 54% выход).
'Н ЯМР (300 МГц, Хлороформ-б) δ м.д. 2,85 (с, 3Н), 4,09 (с, 2Н), 7,39-7,41 (д, 1Н), 7,58-7,63 (м, 1Н), 8,28 (с, 1Н), 8,48-8,51 (д, 1Н).
К раствору соединения 1079 (0,44 г, 2,21 ммоль) в этаноле (5 мл) добавляли 20% водный раствор гидроксида натрия (5 мл). Полученную смесь перемешивали при 90°С в течение ночи, затем концентрировали. Полученный остаток разбавляли водой, подкисляли уксусной кислотой и экстрагировали этилацетатом. Органический экстракт отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением соединения 1080 (0,1 г, 51% выход).
'Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 3,89 (с, 2Н), 6,98-7,0 (д, 1Н), 7,27-7,32 (м, 1Н), 7,43-7,46 (д, 1Н), 8,10 (с, 1Н), 12,3-13,2 (широкий дублет, 2Н).
К суспензии карбоновой кислоты 1080 (60 мг, 0,34 ммоль) в ЭМР (2 мл) добавляли НАТи (130 мг, 0,34 ммоль) и перемешивали до тех пор, пока реакционная смесь не становилась прозрачной, с последующим добавлением амина 1024 (114 мг, 0,31 ммоль) и Э1РЕА (108 мкл, 0,62 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем гасили путем добавления воды. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали водой и сушили. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования МеОН/дихлорметан, с получением соединения 512 (14 мг, 9% выход).
'Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,74 (шир.с, 4Н), 2,89 (шир.с, 2Н), 2,91 (шир.с, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 4,13 (с, 2Н), 7,05-7,08 (м, 1Н), 7,27-7,57 (м, 8Н), 8,19 (д, 2Н), 11,26 (с, 1Н), 12,76-12,80 (шир.с, 1Н), 13,11 (с, 1Н).
- 58 026656
Соединение 389 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для получения соединения 334.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 12,95 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=8,91 Гц, 1Н), 7,617,26 (м, 10Н), 6,17 (с, 1Н), 3,78 (с, 2Н), 3,54 (шир.с, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 2,67-2,62 (м, 4Н), 2,38 (шир.с, 4Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 404 получали в соответствии с процедурой, описанной выше для получения соединения 334.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 12,95 (с, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=9,03 Гц, 1Н), 7,39-7,26 (м, 6Н), 7,12 (с, 2Н), 7,01-6,98 (м, 1Н), 6,10 (с, 1Н), 3,78 (с, 5Н), 3,54 (шир.с, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 2,64 (шир.с, 4Н), 2,38 (шир.с, 4Н), 1,74 (шир.с, 4Н).
В колбу добавляли К2СО3 (0,28 г, 2,06 ммоль), соединение 295 (0,5 г, 1,03 ммоль) с последующим добавлением 25 мл ΌΜΡ. Смесь перемешивали в течение 15 мин и добавляли хлорметилбутират (0,17 г, 1,23 ммоль) и реакционную смесь помещали в атмосферу аргона. Смесь нагревали до 80°С в течение 1,5 ч, давали охладиться до комнатной температуры и выливали в 200 мл воды. Смесь переносили в делительную воронку, экстрагировали при помощи ЕЮАс (3x100 мл), органические слои разделяли и промывали водой (3x50 мл), насыщенным солевым раствором (2x50 мл) и сушили над №28О4.-№28О4 удаляли путем фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали обращенно-фазовой хроматографией с получением 0,15 г соединения 402.
К раствору соединения 318 (100 мг, 0,19 ммоль) в СН2С12 (5 мл) при 0°С добавляли пиридин (300 мкл) с последующим добавлением по каплям раствора бутирилхлорида (43 мл, 0,41 ммоль) в СН2С12 (5 мл). Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч, затем распределяли между ЕЮАс и Н2О. Органический слой отделяли, сушили (Мд§О4) и концентрировали. Остаток очищали колоночной флэшхроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 1-10% МеОН в СН2С12 с получением желаемого продукта 439 (117 мг).
Ή ЯМР (300 МГц, СОС13) δ м.д. 13,01 (шир.с, 1Н), 10,12 (с, 1Н), 8,49 (д, 1=9,64 Гц, 1Н), 7,77 (с, 1Н), 7,57 (д, 1=7,11 Гц, 1Н), 7,40-7,30 (м, 8Н), 6,57 (с, 1Н), 3,97 (с, 2Н), 3,09 (шир.с, 2Н), 3,00 (шир.с, 2Н), 2,48
- 59 026656 (м, 2Н), 1,91 (шир.с, 4Н), 1,85-1,62 (м, 2Н), 0,98 (т, 1=7,07 Гц, 3Н).
К раствору тиометоксида натрия (0,266 г, 3,8 ммоль) в ΌΜΡ (10 мл) добавляли раствор соединения 1016 (0,657 г, 2,7 ммоль) в ΌΜΡ и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮЛс/гексан, с получением соединения 1085 (0,41 г, 72% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-а) δ м.д. 2,03-2,04 (с, 3Н), 3,66-3,73 (м, 7Н), 7,21-7,32 (м, 4Н).
К раствору соединения 1085 (0,503 г, 2,39 ммоль) в дихлорметане добавляли МСРВА (1,338 г, 7,78 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, затем разбавляли водным раствором тиосульфата натрия. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и водой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮЛс/гексан, с получением соединения 1086 (0,5 г, 86% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-а) δ м.д. 2,8 (с, 3Н), 3,7-3,74 (м, 5Н), 4,27 (с, 2Н), 7,30-7,4 (м, 4Н).
К охлажденному льдом раствору 1086 (0,5 г, 2,06 ммоль) в диоксане (10 мл) и воде (10 мл) добавляли гидроксид лития моногидрат (0,26 г, 6,19 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем концентрировали. Полученный остаток разбавляли водой и подкисляли уксусной кислотой. Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток растирали в порошок с простым эфиром. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали простым эфиром и сушили в условиях высокого вакуума в течение ночи с получением соединения 1087 (0,3 г, 64% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 2,92 (с, 3Н), 3,61 (с, 2Н), 4,48 (с, 2Н), 7,31-7,35 (м, 4Н), 12,37 (с,
1Н).
Соединение 634 получали с использованием процедур, аналогичных тем, которые описаны выше.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,74 (шир.с, 4Н), 2,91 (шир.с, 5Н), 3,03 (шир.с, 2Н), 3,78 (с, 2Н),
3,85 (с, 2Н), 4,49 (с, 2Н), 7,32-7,40 (м, 9Н), 7,55-7,58 (д, 1Н), 8,19 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12, 69 (с, 1Н).
Соединение 635 получали с использованием процедур, аналогичных тем, которые описаны выше.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,75 (шир.с, 4Н), 2,91 (шир.с, 5Н), 3,03 (шир.с, 2Н), 3,82 (с, 4Н),
4,49 (с, 2Н), 7,32-7,40 (м, 9Н), 7,55-7,58 (д, 1Н), 8,19 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,69 (с, 1Н).
- 60 026656
К раствору 1,3-бромхлорпропана (1,57 г, 10 ммоль) в ЭМЕ (10 мл) добавляли тиометоксид натрия (0,63 г, 9 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и при 70°С в течение еще одного дня. Раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением соединения 1088 (1,3 г), которое использовали на следующей стадии без очистки.
К раствору соединения 1088 (1,3 г, 7,7 ммоль) в дихлорметане (100 мл) добавляли МСРВА (5,15 г, 23,34 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем разбавляли водным раствором тиосульфата натрия. Органический слой отделяли, промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и водой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮАс/гексан, с получением соединения 1089 (0,3 г).
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-а) δ м.д. 2,38-2,49 (м, 2Н), 2,99 (с, 3Н), 3,22-3,27 (м, 2Н), 3,57-3,77 (м, 2Н).
К раствору соединения 1092 (0,525 г, 3,16 ммоль) в ЭМЕ (15 мл) добавляли карбонат калия (0,873 г, 6,32 ммоль), соединение 1089 (0,74 г, 4,74 ммоль) и йодид натрия (10 мг). Полученную смесь перемешивали при 70°С в течение ночи, затем разбавляли водой (~100 мл). Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮАс/гексан с получением соединения 1090 (0,53 г, 59% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-а) δ м.д. 2,35-2,40 (м, 2Н), 2,99 (с, 3Н), 3,26-3,31 (м, 2Н), 3,63 (с, 2Н), 3,73 (с, 3Н), 4,16 (т, 2Н), 6,81-6,93 (м, 3Н), 7,25 (м, 1Н).
К раствору соединения 1090 (0,53 г, 1,85 ммоль) в диоксане (8 мл) и воде (4 мл) добавляли гидроксид лития моногидрат (0,156 г, 3,71 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч, затем подкисляли уксусной кислотой. Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток растирали в порошок с простым эфиром. Отделившееся твердое вещество фильтровали, промывали простым эфиром и сушили в условиях высокого вакуума в течение ночи, с получением соединения 1091 (0,2 г, 40% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-а) δ м.д. 2,32-2,42 (м, 2Н), 2,99 (с, 3Н), 3,26-3,31 (м, 2Н), 3,66 (с, 2Н), 4,12-4,16 (т, 2Н), 6,83-6,94 (м, 3Н), 7,26-7,31 (м, 1Н).
- 61 026656
Соединение 583 получали путем связывания соединения 1091 с соединением 1024 с использованием процедуры, описанной для общей процедуры амидного связывания.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,74 (шир.с, 4Н), 2,15-2,19 (м, 2Н), 2,90-3,03 (м, 7Н), 3,27-3,39 (м, 2Н), 3,78 (с, 4Н), 4,07-4,11 (т, 2Н), 6,90-6,93 (м, 3Н), 7,24-7,37 (м, 6Н), 7,55-7,58 (д, 1Н), 8,19 (д, 1Н),
11,26 (с, 1Н), 12,69 (с, 1Н).
Соединение 623 получали путем связывания соединения 11 с соединением 348 с использованием процедуры, описанной для общей процедуры амидного связывания.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,74 (шир.с, 4Н), 2,15-2,19 (м, 2Н), 2,90-3,03 (м, 7Н), 3,27-3,39 (м, 2Н), 3,75-3,78 (м, 4Н), 4,07-4,11 (т, 2Н), 6,90-6,97 (м, 3Н), 7,26-7,34 (м, 6Н), 7,58 (д, 1Н), 8,19 (д, 1Н),
11,26 (с, 1Н), 12,69 (с, 1Н).
К раствору 3-гидроксифенилуксусной кислоты (1 г, 0,00657 моль) в МеОН (10 мл) при 0°С добавляли (триметилсилил) раствор диазометана (2 М в гексане, 20 мл) по каплям. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, затем упаривали досуха. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-25% ЕЮАс в гексане с получением соединения 1093.
Соединение 1094 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 1119.
Соединение 1095 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 1102.
Соединение 646 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 666.
Ή ЯМР (300 МГц, СПС13) δ м.д. 10,32 (с, 1Н), 8,50-8,47 (д, 1=8,52 Гц, 1Н), 7,90-7,70 (м, 1Н), 7,407,36 (м, 6Н), 7,03-6,86 (м, 3Н), 4,72 (с, 2Н), 4,02 (с, 2Н), 3,90 (с, 2Н), 3,44-3,39 (м, 4Н), 3,09-2,96 (д, 4Н), 1,87 (шир.с, 4Н), 1,24-1,16 (м, 6Н).
Соединение 647 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 666.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,61 (с, 1Н), 11,22 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,18 Гц, 1Н), 8,028,10 (т, 1Н), 7,58-7,55 (д, 1=9, 12 Гц, 1Н), 7,36-7,24 (м, 5Н), 6,99-6,84 (м, 3Н), 4,48 (с, 2Н), 3,82 (с, 2Н), 3,75 (с, 2Н), 3,50 (с, 2Н), 3,01-2,90 (м, 5Н), 1,73 (шир.с, 4Н), 0,82-0,80 (д, 1=6,69 Гц, 6Н).
- 62 026656
ΜβΟΝ, Η2ΝΟΗ Η2Ο, 90’С
ЮН
ΝΗ-,
1096
Раствор гидроксиламина (50% в воде, 7,4 мл) добавляли к ацетонитрилу (60 мл) и смесь нагревали до 90°С в течение 16 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, затем охлаждали на водно-ледяной бане с получением осадка. Твердые вещества собирали путем фильтрования и промывали холодным ацетонитрилом (10 мл) и сушили в условиях высокого вакуума с получением 4,47 г Ν'-гидроксиацетимидамида 1096. См. 2ето1ка, 8. е! а1., Международная заявка РСТ № 2009118174.
Ή ЯМР (300 МГц, С1)С1;) δ м.д. 4,57 (шир.с, 2Н), 1,89 (с, 3Н).
В колбу загружали Ν'-гидроксиацетимидамид 1096 (0,45 г, 6,17 ммоль), затем добавляли ТГФ (25 мл), NаН (60% в масле, 0,246 г, 6,17 ммоль), 4 А молекулярные сита (4,5 г) и смесь нагревали до 60°С в атмосфере аргона в течение 1 ч. К смеси Ν'-гидроксиацетимидамида добавляли раствор этил 2-(3-бромфенил)ацетата 1097 (1,5 г, 6,17 ммоль) в ТГФ (12,5 мл) и нагревали при 60°С в течение 16 ч. Смесь разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали при помощи Е!ОАс (2x25 мл). Органические слои объединяли, промывали водой (25 мл), насыщенным солевым раствором (2x25 мл) и сушили над №28О4. №28О4 удаляли путем фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой, 0-30% Е!ОАс/гексан, с получением 0,56 г 5-(3-бромбензил)-3-метил-1,2,4-оксадиазола 1098.
Ή ЯМР (300 МГц, СОСИ δ м.д. 7,48-7,42 (м, 2Н), 7,26-7,24 (м, 2Н), 4,15 (с, 2Н), 2,38 (с, 3Н).
К раствору 5-(3-бромбензил)-3-метил-1,2,4-оксадиазола 1098 (0,50 г, 1,97 ммоль) в диоксане (1 мл), в атмосфере аргона, добавляли бис-(три-трет-бутилфосфин)палладий(0) (0,15 г, 0,295 ммоль) с последующим добавлением 2-трет-бутокси-2-оксоэтилцинкхлорида (0,5 М в диэтиловом эфире, 4,92 ммоль, 9,84 мл). Смесь оставляли для перемешивания в атмосфере аргона в течение 20 ч и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Осуществляли поглощение остатка в Е!ОАс (10 мл) и промывали водой (2x5 мл), насыщенным солевым раствором (2x5 мл) и сушили над №28О4. №28О4 удаляли путем фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой 0-50% Е!ОАс/гексан, с получением 0,300 г трет-бутил 2-(3-((3-метил-1,2,4-охадиазол-5-ил)метил)фенил)ацетата 1099.
Ή ЯМР (300 МГц, СОСИ δ м.д. 7,40-7,18 (м, 4Н), 4,17 (с, 2Н), 3,51 (с, 2Н), 2,36 (с, 3Н), 1,43 (с, 9Н).
1099 1100
К смеси трет-бутил 2-(3-((3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)метил)фенил)ацетата 1099 (0,127 г, 0,44 ммоль) в диоксане (3 мл) добавляли 4н. раствора НС1 в диоксане (1 мл) и перемешивали в атмосфере аргона в течение 2 ч. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении и остаток разбавляли водой (5 мл) и рН доводили до 12 при помощи 2,5н. раствора №ОН. Смесь промывали дихлорметаном (4x2 мл) и рН доводили до 6 при помощи 1н. раствора НС1. Смесь экстрагировали при помощи Е!ОАс (3x2 мл) и органические слои объединяли, промывали насыщенным солевым раствором и сушили над №28О4. №28О4 удаляли путем фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении с получением 0,041г 2-(3-((3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)метил)фенил)уксусной кислоты 1100.
Ή ЯМР (300 МГц, С1)С1;) δ м.д. 7,40-7,18 (м, 4Н), 4,18 (с, 2Н), 3,63 (с, 2Н), 2,36 (с, 3Н).
- 63 026656
К раствору ^(5-(4-(6-аминопиридазин-3-ил)бутил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фенилацетамида 348 (0,061 г, 0,0165 ммоль), 2-(3-((3-метил-1,2,4-охадиазол-5-ил)метил)фенил)уксусной кислоты 1100 (0,040 г, 0,18 ммоль), 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (0,078 г, 0,41 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (0,055 г, 0,41 ммоль) в ЭМР (3 мл) добавляли ΌΙΕΑ (0,085 г, 0,115 мл, 0,66 ммоль) и смесь перемешивали в течение 16 ч. Смесь разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали при помощи ЕЮАе (3x20 мл). Органические слои объединяли, промывали водой (3x20 мл), насыщенным солевым раствором (2x20 мл) и сушили над №28О4. №28О4 удаляли путем фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой, 0-5% МеОН/дихлорметан, с получением 0,003 г 2-(3-((3-метил-1,2,4оксадиазол-5-ил)метил)фенил)-^(6-(4-(5-(2-фенилацетамидо)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)бутил)пиридазин-3ил)ацетамида 648.
Ή Н ЯМР (300 МГц, СОСЪ) δ м.д. 12,59 (с, 1Н), 10,53 (с, 1Н), 8,45 (д, 1Н, 1=12,2 Гц), 7,4-7,1 (м, 10Н), 4,15 (с, 2Н), 4,03 (с, 2Н), 3,94 (с, 2Н), 3,02 (м, 2Н), 2,94 (м, 2Н), 2,33 (с, 3Н), 1,85 (м, 4Н).
Соединение 1101 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 1119.
К раствору соединения 1101 (470 мг, 1,41 ммоль) в МеОН (5 мл) и Н2О (5 мл) при 0°С добавляли гидроксид лития моногидрат (296 мг, 7,05 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней, затем упаривали досуха. Смесь затем подкисляли при помощи 1н. раствора НС1 (рН 4) и распределяли между водой и ЕЮАе. Органический экстракт промывали водой, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали с получением соединения 1102.
Соединение 608 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 664.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,71 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,15 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=9,27 Гц, 1Н), 7,38-7,28 (м, 8Н), 4,63 (шир.с, 4Н), 3,82 (с, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н), 1,48-1,44 (д, 1=5,93 Гц, 9Н).
Соединение 612 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 666.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 11,32 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,78 Гц, 1Н), 7,58-7,54 (д,
1=9,72 Гц, 1Н), 7,48-7,28 (м, 7Н), 4,67-4,61 (м, 4Н), 3,88 (с, 2Н), 3,80 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н), 1,48-1,44 (д, 1=9,93 Гц, 9Н).
- 64 026656
Соединение 649 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 695.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 11,36 (с, 1Н), 8,20-8,17 (д, 1=9,78 Гц, 1Н), 7,60-7,57 (д,
1=8,92 Гц, 1Н), 7,52-7,32 (м, 7Н), 4,61-4,56 (д, 1=16,99 Гц, 4Н), 3,91 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 650 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 695.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,71 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 9,40 (шир.с, 1Н), 8,22-8,19 (д,
1=9,09 Гц, 1Н), 7,58-7,54 (д, 1=9,36 Гц, 1Н), 7,38-7,28 (м, 8Н), 4,63 (шир.с, 4Н), 3,82 (с, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
К раствору соединения 650 (30 мг, 0,0468 ммоль) в ΌΜΡ (1 мл) при 0°С добавляли триэтиламин (13 мкл, 0,0936 ммоль) по каплям, с последующим добавлением уксусного ангидрида (4,64 мкл, 0,0491 ммоль) по каплям. Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 20 мин, затем гасили путем добавления ледяной воды (~5 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% ΜеОН в СН2С12, с получением соединения 651.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,71 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,27 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=9,00 Гц, 1Н), 7,38-7,28 (м, 8Н), 4,88 (шир.с, 2Н), 4,67 (шир.с, 2Н), 3,82 (с, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 2,11 (с, 3Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
К раствору 2-(3-бромфенил)уксусной кислоты 1103 (10,0 г, 46,5 ммоль) в 100 мл Ε!ОН добавляли концентрированную Н2§О4 (10 капель) и смесь нагревали до температуры кипения с обратным холодильником в течение 3 ч. Смеси давали охладиться до комнатной температуры и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Осуществляли поглощение остатка в Ε!ОΑс (100 мл) и промывали водой (2x50 мл), насыщенным раствором NаНСОз (1x25 мл), насыщенным солевым раствором (2x25 мл) и сушили над №28О4. №28О4 удаляли путем фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении с получением этил 2-(3-бромфенил)ацетата 1097 (11,1 г) в виде жидкости).
Ή ЯМР (300 МГц, СПС13) δ м.д. 7,41 (м, 2Н), 7,20 (м, 2Н), 4,14 (кв., 2Н, 1=9,5 Гц), 3,57 (с, 2Н), 1,25 (т, 3Н, 1=9,5 Гц).
- 65 026656
К раствору этил 2-(3-бромфенил)ацетата 1097 (1,5 г, 6,17 ммоль) в ΜеОН (20 мл) добавляли гидразин (0,79 г, 24,7 ммоль) и смесь нагревали до температуры кипения с обратным холодильником в течение 4 ч. Смеси давали охладиться до комнатной температуры, промывая белый осадок, который собирали путем фильтрования и промывали при помощи ΜеОН (10 мл). После сушки при пониженном давлении выделяли 1,4 г 2-(3-бромфенил)ацетогидразида 1104.
Ή ЯМР (300 МГц, СЭС13) δ м.д. 7,42 (с, 2Н), 7,20 (с, 2Н), 6,73 (шир.с, 1Н), 3,51 (с, 2Н), 1,81 (шир.с,
2Н).
К раствору 2-(3-бромфенил)ацетогидразида 1104 (1,0 г, 4,37 ммоль) в АсОН (10 мл) добавляли триметилортоацетат (2,62 г, 21,83 ммоль) и смесь нагревали до 115°С в течение 18 ч. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении и остаток очищали при помощи обращенно-фазовой хроматографии с получением 0,5 9 г 2-(3-бромбензил)-5-метил-1,3,4-оксадиазола 1105.
Ή ЯМР (300 МГц, δ м.д. 7,45 (м, 2Н), 7,23 (м, 2Н), 4,12 (с, 2Н), 2,49 (с, 3Н).
К раствору 2-(3-бромбензил)-5-метил-1,3,4-оксадиазола 1105 (0,50 г, 1,97 ммоль) в диоксане (1 мл), в атмосфере аргона, добавляли бис-(три-трет-бутилфосфин)палладий(0) (0,15 г, 0,295 ммоль) с последующим добавлением 2-трет-бутокси-2-оксоэтилцинкхлорида (0,5 М в диэтиловом эфире, 4,92 ммоль, 9,84 мл). Смесь оставляли для перемешивания в атмосфере аргона в течение 20 ч и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Осуществляли поглощение остатка в Е!ОАс (10 мл) и промывали водой (2x5 мл), насыщенным солевым раствором (2x5 мл) и сушили над Ыа28О4. Ыа28О4 удаляли путем фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали при помощи хроматографии с нормальной фазой, 0-50% ЕЮАс/гексан, с получением 0,338 г трет-бутил 2-(3-((5-метил-1,3,4-охадиазол-2-ил)метил)фенил)ацетата 1106.
Ή ЯМР (300 МГц, δ м.д. 7,24 (м, 4Н), 4,12 (с, 2Н), 3,51 (с, 2Н), 2,46 (с, 3Н), 1,43 (с, 9Н).
К смеси трет-бутил 2-(3-((5-метил-1,3,4-охадназол-2-ил)метил)фенил)ацетата 1106 (0,127 г, 0,44 ммоль) в диоксане (3 мл) добавляли 4н. раствора НС1 в диоксане (1 мл) и перемешивали в атмосфере аргона в течение 2 ч. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении и остаток разбавляли водой (5 мл) и рН доводили до 12 при помощи 2,5н. раствора ЫаОН. Смесь промывали дихлорметаном (4x2 мл) и рН доводили до 6 при помощи 1н. раствора НС1. Смесь экстрагировали при помощи ЕЮАс (3x2 мл) и органические слои объединяли, промывали насыщенным солевым раствором и сушили над Ыа28О4. Ыа28О4 удаляли путем фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении с получением 0,023 г 2-(3-((5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-ил)метил)фенил)уксусной кислоты 1107.
- 66 026656
Раствор Ы-(5-(4-(6-аминопиридазин-3-ил)бутил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил)-2-фенилацетамида 348 (0,035 г, 0,094 ммоль), 2-(3-((5-метил-1,3,4-охадиазол-2-ил)метил)фенил)уксусной кислоты 1107 (0,023 г, 0,094 ммоль), 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (0,045 г, 0,235 ммоль), 1-гидроксибензотриазола (0,032 г, 0,235 ммоль) в ΌΜΡ (1,75 мл) перемешивали в течение 16 ч и разбавляли водой (20 мл). Смесь экстрагировали при помощи ЕЮАс (3x20 мл), органические слои объединяли, промывали водой (3x20 мл), насыщенным солевым раствором (2x20 мл) и сушили над Ыа28О4. Ыа28О4 удаляли путем фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали при помощи обращенно-фазовой хроматографи с получением 0,004 г 2-(3-((5-метил1,3,4-охадиазол-2-ил)метил)фенил)-М-(6-(4-(5-(2-фенилацетамидо)-1,3,4-тиадиазол-2ил)бутил)пиридазин-3-ил)ацетамида 652.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,62 (с, 1Н), 11,24 (с, 1Н), 8,16 (д, 1Н, 1=12,2 Гц), 7,54 (д, 1Н, 1=12,2 Гц), 7,3-7,1 (м, 9Н), 4,20 (с, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,74 (с, 2Н), 2,99 (м, 2Н), 2,87 (м, 2Н), 2,41 (с, 3Н), 1,72 (м, 4Н).
Смесь 3-бромацетофенона (5 г, 25,1 ммоль) в муравьиной кислоте (6 г) и формамиде (25 мл) нагревали до 170°С в течение ночи, затем экстрагировали толуолом. Органический слой отделяли и концентрировали. Полученный остаток разбавляли 3н раствором НС1 и полученную смесь нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в течение ночи, затем охлаждали до комнатной температуры. Раствор экстрагировали простым эфиром. Водный слой отделяли, подщелачивали водным раствором гидроксида натрия и экстрагировали простым эфиром. Органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением соединения 1108 (3 г, 60% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, Хлороформ-б) δ м.д. 1,22-1,25 (д, 3Н), 3,97-3,99 (кв., 1Н), 7,23-7,4 (м, 3Н), 7,6 (с,
1Н).
К раствору соединения 1108 (2,945 г, 14,7 ммоль) в дихлорметане (100 мл) добавляли Ьос ангидрид (3,21 г, 14,7 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем концентрировали и очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮАс/гексан, с получением соединения 1109 (3 г, 68% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,29-1,31 (д, 3Н), 1,38 (с, 9Н), 4,61-4,63 (кв., 1Н), 7,3 (шир.с, 2Н), 7,41-7,5 (м, 3Н).
К дегазированному раствору соединения 1109 (0,5 г, 1,66 ммоль) и бис-(три-третбутилфосфин)палладия(0) (0,085 г, 0,166 ммоль) в диоксане (3 мл) добавляли 2-трет-бутокси-2оксоэтилцинкхлорид (8,5 мл, 4,15 ммоль) в атмосфере а.ргона и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, затем гасили насыщенным водным раствором хлорида аммония. Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮАс/гексан, с получением соединения 1110 (0,35 г, 62% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 1,29-1,31 (д, 3Н), 1,388-1,42 (шир.с, 18Н), 3,53 (с, 2Н), 4,59-4,63 (кв., 1Н), 7,09 (шир.с, 1Н), 7,12-7,20 (шир.с, 2Н), 7,25-7,27 (м, 1Н), 7,27-7,30 (м, 1Н).
К раствору соединения 1110 (0,44 г, 1,3 ммоль) в метаноле (40 мл) и воде (10 мл) добавляли гидроксид лития моногидрат (0,4 г) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной темпера- 67 026656 туре в течение 2 дней, затем концентрировали. Полученный остаток разбавляли ледяной водой и подкисляли уксусной кислотой. Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования Е!ОАс/гексан, с получением соединения 1111 (0,316 г, 86% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,22-1,39 (м, 12Н), 3,55 (с, 2Н), 4,58-4,63 (кв., 1Н), 7,11-7,38 (м, 5Н), 12,29 (с, 1Н).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,43 (м, 12Н), 1,89 (шир.с, 4Н), 2,97-3,08 (м, 4Н), 3,95-4,03 (м, 4Н), 4,71-4,77 (кв., 1Н), 7,24-7,43 (м, 11Н), 8,45-8,48 (д, 1Н), 10,99 (с, 1Н), 12,4 (шир.с, 1Н).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,43 (м, 12Н), 1,89 (шир.с, 4Н), 2,97-3,08 (м, 4Н), 3,95-4,03 (м, 4Н), 4,71-4,77 (кв., 1Н), 7,24-7,43 (м, 11Н), 8,45-8,48 (д, 1Н), 10,22 (шир.с, 1Н), 12,4 (шир.с, 1Н).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,5-1,52 (д, 3Н), 1,75 (шир.с, 4Н), 2,88-2,93 (м, 2Н), 3,03-3,05 (м, 2Н), 3,79 (с, 2Н), 3,86 (с, 2Н), 4,38-4,44 (кв., 1Н), 7,27-7,59 (м, 10Н), 8,20-8,23 (м, 4Н), 11,27 (с, 1Н), 12,71 (с, 1Н).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,5-1,52 (д, 3Н), 1,75 (шир.с, 4Н), 2,88-2,93 (м, 2Н), 3,03-3,05 (м, 2Н), 3,86 (с, 4Н), 4,38-4,44 (кв., 1Н), 7,27-7,59 (м, 10Н), 8,20-8,23 (м, 4Н), 11,27 (с, 1Н), 12,71 (с, 1Н).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 1,5-1,52 (д, 3Н), 1,75 (шир.с, 4Н), 2,88-2,93 (м, 2Н), 3,03-3,05 (м, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,82 (с, 2Н), 4,91-4,96 (кв., 1Н), 7,20-7,35 (м, 9Н), 7,55-7,58 (д, 1Н), 8,20-8,23 (д, 1Н), 8,68-8,71 (м, 1Н), 11,27 (с, 1Н), 12,71 (с, 1Н).
- 68 026656
К охлажденному льдом раствору 1-(5-бром-2-фторфенил)этанона (4,5 г, 20,7 ммоль) в метаноле (100 мл) добавляли ацетат аммония (32 г, 414,7 ммоль) и цианоборогидрид натрия (6,15 г, 28,98 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение уикэнда, затем концентрировали. Полученный остаток разбавляли водой, подщелачивали до рН~13 при помощи 1н. раствора ЫаОН и экстрагировали дихлорметаном. Органический экстракт отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮАс/гексан, с получением соединения 1112 (1,8 г, 40% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,24-1,26 (д, 3Н), 4,22-4,24 (кв., 1Н), 7,1-7,16 (т, 1Н), 7,41-7,46 (м, 1Н), 7,76 (м, 1Н).
К раствору соединения 1112 (1,97 г, 9 ммоль) в дихлорметане (100 мл) добавляли Ьос ангидрид (1,97 г, 9 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем концентрировали и очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮАс/гексан с получением соединения 1113 (2,4 г, 83% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,29-1,32 (д, 3Н), 1,39 (с, 9Н), 4,87 (кв., 1Н), 7,14-7,21 (т, 1Н), 7,46-7,58 (м, 3Н).
К дегазированному раствору соединения 1113 (2,4 г, 7,54 ммоль) и бис-(три-третбутилфосфин)палладия(0) (0,77 г, 1,508 ммоль) в диоксане (12 мл) добавляли 2-трет-бутокси-2оксоэтилцинкхлорид (38 мл, 18,85 ммоль) в атмосфере аргона и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, затем гасили насыщенным водным раствором хлорида аммония. Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮАс/гексан. с получением соединения 1114 (2 г, 75% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,29-1,32 (д, 3Н), 1,38-1,41 (м, 18Н), 3,53 (с, 2Н), 4,87 (кз., 1Н), 7,05-7,16 (м, 2Н), 7,26-7,29 (м, 1Н), 7,48 (м, 1Н).
К раствору соединения 1114 (2 г, 5,66 ммоль) в метаноле (100 мл) и воде (25 мл) добавляли гидроксид лития моногидрат (2 г) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней, затем концентрировали. Полученный остаток разбавляли ледяной водой и подкисляли уксусной кислотой. Полученный раствор распределяли между водой и этилацетатом. Органический экстракт промывали дополнительным количеством воды, разделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования ЕЮАс/гексан с получением соединения 1115 (1,5 г, 89% выход).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,29-1,31 (д, 3Н), 1,38 (с, 9Н), 3,53 (с, 2Н), 4,87 (кв., 1Н), 7,057,19 (м, 2Н), 7,26-7,29 (м, 1Н), 7,45-7,48 (м, 1Н), 12,32 (с, 1Н).
- 69 026656
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,30-1,33 (м, 12Н), 1,74 (шир.с, 4Н), 2,89 (м, 2Н), 3,02 (м, 2Н), 3,78 (с, 4Н), 4,85 (кв., 1Н), 7,10-7,57 (м, 11Н), 8,19-8,22 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,64 (с, 1Н).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,28-1,32 (м, 12Н), 1,73-1,75 (шир.с, 4Н), 2,87 (м, 2Н), 2,89 (м, 2Н), 3,75 (с, 2Н), 3,81 (с, 2Н), 4,85 (кв., 1Н), 7,06-7,57 (м, 11Н), 8,18-8,21 (д, 1Н), 11,26 (с, 1Н), 12,64 (с, 1Н).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,51-1,53 (м, 3Н), 1,75 (шир.с, 4Н), 2,90 (м, 2Н), 3,02 (м, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,85 (с, 2Н), 4,65 (кв., 1Н), 7,25-7,61 (м, 10Н), 8,21-8,25 (д, 1Н), 8,33-8,35 (шир.с, 3Н), 11,29 (с, 1Н), 12,68 (с, 1Н).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 1,54 (д, 3Н), 1,75-1,76 (шир.с, 4Н), 2,91 (м, 2Н), 3,02 (м, 2Н), 3,81-3,83 (м, 4Н), 4,65 (кв., 1Н), 7,24-7,63 (м, 10Н), 8,22-8,25 (д, 1Н), 8,36 (шир.с, 3Н), 11,35 (с, 1Н), 12,66 (с, 1Н).
К смеси соединения 413 (1,62 г) в ΜеΟН (25 мл), ТГФ (10 мл) и Н2О (10 мл) при комнатной температуре добавляли 1н. водный раствор ЫаОН (8 мл). Эту смесь перемешивали в течение 24 ч, затем органическое летучее вещество удаляли при пониженном давлении. Остаток нейтрализовали до рН 7 при помощи 1н. водного раствора НС1 и экстрагировали при помощи ЕЮАс (2x20 мл). Объединенный экстракт сушили ^дЗОд) и концентрировали. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 1-15% ΜеΟН в дихлорметане, с получением аминв 1116. Полученный амин 1116 преобразовывали в соединение 660, как описано для соединения 335.
- 70 026656
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 12,68 (шир.с, 1Н), 11,31 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=92 Гц, 1Н), 7,57 (д,
1=8,8 Гц, 1Н), 7,52-7,21 (м, 8Н), 3,90 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,06-2,86 (м, 4Н), 1,77-1,72 (м, 4Н).
н
ОСР3 ОСРз ήή-17
3-Амино-6-хлорпиридазин (55,5 г, 0,428 моль) и 3-(трифторметокси)фенилуксусную кислоту (1,1 экв., 0,471 моль, 104 г)растворяли в ΌΜΡ (30,0 об., 1,66 л) в 3000-мл трехгорлой круглодонной колбе. Добавление ЭША (1,1 экв., 0,471 моль, 82 мл) через капельную воронку осуществляли в течение 5 мин. Раствор пропилфосфонового ангидрида (300 мл 50% раствора в ΌΜΡ, 1,1 экв., 0,471 моль) загружали в 500-мл капельную воронку и добавляли по каплям к реакционному раствору (поддерживая температуру реакции <+30°С). Реакция обычно завершается через 3 ч (ТСХ: 6:4 гексан-этилацетат). Реакционную смесь затем выливали в 7,5% раствор бикарбоната натрия (80,0 об., 4,4 л), который охлаждали на ледяной бане. Не совсем белый кристаллический порошок фильтровали через воронку Бюхнера, промывали водой (20,0 об., 1,1 л). Сушили в 50°С вакуумной печи до постоянной массы, с получением ^(6-хлорпиридазин-3-ил)-2-(3-(трифторметокси)фенил)ацетамида 1117: выход 119,6 г (77%).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 11,63 (с, 1Н), 8,38 (д, 1=9,4 Гц, 1Н), 7,88 (д, 1=9,4 Гц, 1Н), 7,527,27 (м, 4Н), 3,90 (с, 2Н).
Раствор 4-цианобутилцинкбромида (3,0 экв., 0,50 моль, 1,0 л) загружали в 5000-мл 3-горлую круглодонную колбу, которую продували аргоном. Продувку газообразным аргоном осуществляли в течение 5 мин, затем добавляли соединение 1117 (1,0 экв., 0,167 моль, 55,3 г) и №С12(Дррр) (0,15 экв., 0,0251 моль, 13,6 г) в атмосфере аргона. Реакция обычно завершается через 4 ч (ТСХ: 1:1 гексанэтилацетат). К темно-красному раствору добавляли ЕЮАс (15 об., 832 мл). Добавляли воду (15 об., 832 мл), происходило образование густой суспензии. Добавляли 1н. раствора НС1 до тех пор, пока суспензия не разделялась с образованием бледно-голубого слоя (~6 об., 333 мл). Переносили в делительную воронку и органический слой промывали 1н. раствором НС1 (2x500 мл), сушили (Мд§О4) и концентрировали на роторном испарителе (баня <30°С) с получением твердого красноватого масла. Масло растворяли в дихлорметане (15 об., 832 мл), силикагель (100 г) суспендировали в красном растворе, эту смесь концентрировали на роторном испарителе (баня <30°С) с получением твердого красноватого порошка. Загружали на слой силикагеля (5x11 см), промывали смесью 25% гексана в этилацетате (3 л), объединенные органические фазы концентрировали на роторном испарителе (баня <30°С). Сушили в условиях высокого вакуума до постоянной массы, с получением ^(6-(4-цианобутил)пиридазин-3-ил)-2-(3(трифторметокси)фенил)ацетамида 1118: выход 58,2 г (92%).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 11,41 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=92 Гц, 1Н), 7,65 (д, 1=9,2 Гц, 1Н), 7,527,27 (м, 4Н), 3,89 (с, 2Н), 2,92 (т, 1=7,5 Гц, 2Н), 2,56 (т, 1=7,0 Гц, 2Н), 1,80 (м, 2Н), 1,61 (м, 2Н).
Соединение 1118 (1,0 экв., 0,154 моль, 58,2 г) загружали в 500-мл круглодонную колбу вместе с тиосемикарбазидом (1,2 экв., 0,184 моль, 16,8 г). ТРА (5 об., 291 мл)медленно добавляли в реакционный сосуд при перемешивании. Реакционную суспензию нагревали на 65°С бане с обратным холодильником с открытым верхом. Реакция обычно завершается через 5 ч (определяли при помощи ЖХ/МС). К темнокрасному раствору добавляли толуол (10 об., 582 мл), подвергали азеотропной сушке на роторном испарителе (баня <30°С) с получением красного масла. Масло медленно переносили в тщательно перемешиваемую 6000-мл колбу Эрленмейера, содержащую 7,5% раствор бикарбоната натрия (69 об., 4,0 л), охлажденный на 0°С бане. Кристаллы фильтровали через воронку Бюхнера и промывали два раза диэтиловым эфиром (5 об., 2x250 мл). Сушили в условиях высокого вакуума до постоянной массы с получением №(6-(4-(5-амино-1,3,4-тиадиазол-2-ил)бутил)пиридазин-3 -ил)-2-(3 -(трифторметокси)фенил)ацетамида 657; выход 55,7 г (80%).
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6) δ м.д. 11,33 (с, 1Н), 8,21 (д, 1=92 Гц, 1Н), 7,58 (д, 1=92 Гц, 1Н), 7,517,26 (м, 4Н), 6,99 (с, 2Н), 3,88 (с, 2Н), 2,87 (м, 4Н), 1,71 (м, 4Н).
- 71 026656
К раствору соединения 657 (50 мг, 0,11 ммоль) в ΌΜΡ (3 мл) при 0°С добавляли 4-фторфенилуксусную кислоту (22 мг, 0,14 ммоль), НОВ1 (30 мг, 0,22 ммоль) и ЕЭС1 (42 мг, 0,22 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч, затем охлаждали до 0°С и гасили при помощи Н2О. Осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации и дополнительно очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 1-10% МеОН в дихлорметане, с получением соединения 661.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,65 (шир.с, 1Н), 11,31 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,1 Гц, 1Н), 7,57 (д, 1=9,4 Гц, 1Н), 7,49-7,14 (м, 8Н), 3,87 (с, 2Н), 3,81 (с, 2Н), 3,06-2,86 (м, 4Н), 1,77-1,72 (м, 4Н).
Соединение 662 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 661.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,67 (шир.с, 1Н), 11,31 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,1 Гц, 1Н), 7,57 (д,
1=9,1 Гц, 1Н), 7,51-7,07 (м, 7Н), 3,89 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,06-2,86 (м, 4Н), 1,77-1,72 (м, 4Н).
Соединение 663 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 661.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,74 (шир.с, 1Н), 11,31 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,2 Гц, 1Н), 7,57 (д,
1=9,2 Гц, 1Н), 7,51-7,19 (м, 7Н), 3,97 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,06-2,86 (м, 4Н), 1,77-1,72 (м, 4Н).
К смеси 1-бром-3-(дифторметокси)бензола (1 г, 4,5 ммоль), бис-(три-трет-бутилфосфин)палладия(0) (460 мг, 0,9 ммоль) в 1,4-диоксане (30 мл) в атмосфере аргона добавляли 0,5 М 2-трет-бутокси-2оксоэтилцинкхлорида в простом эфире (22,5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь распределяли между насыщенным раствором ΝΉ4Ο и ЕЮАс. Органический экстракт промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-10% ЕЮАс в гексане с получением соединения 1119.
К раствору соединения 1119 (300 мг, 1,16 ммоль) в дихлорметане (5 мл) при 0°С добавляли ТРА (3 мл) по каплям. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем упаривали досуха, затем остаток растирали в порошок с простым эфиром с получением соединения 1120.
- 72 026656
Соединение 1121 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 1120, из 1-бром-3-(2,2,2-трифторэтокси)бензола.
В колбу загружали соединение 1024 (50 мг, 0,135 ммоль), соединение 1120 (28 мг, 0,142 ммоль) в ΌΜΡ (1 мл) при 0°С, добавляли НОВТ (39 мг, 0,285 ммоль) с последующим добавлением ЕЭС1 (68 мг, 0,356 ммоль). Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 ч, затем гасили путем добавления ледяной воды (~5 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды с получением соединения 664.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,71 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,12 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=9,03 Гц, 1Н), 7,48-6,99 (м, 10Н), 3,85 (с, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 665 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 664.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,71 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,12 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=9,03 Гц, 1Н), 7,38-7,28 (м, 6Н), 7,03-6,97 (м, 3Н), 4,77-4,74 (кв., 2Н), 3,80-3,78 (д, 1=5,82 Гц, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
В колбу загружали соединение 348 (50 мг, 0,135 ммоль), соединение 1120 (28 мг, 0,142 ммоль) в ΌΜΡ (1 мл) при 0°С, добавляли НОВТ (39 мг, 0,285 ммоль) с последующим добавлением ЕЭС1 (68 мг, 0,356 ммоль). Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи, затем гасили путем добавления ледяной воды (~5 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% ΜеОН в дихлорметане, с получением соединения 666.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,71 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,12 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=9,03 Гц, 1Н), 7,48-15 6,98 (м, 10Н), 3,81 (шир.с, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 667 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 666.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,71 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,12 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=8,97 Гц, 1Н), 7,35-7,28 (м, 6Н), 7,03-6,97 (м, 3Н), 4,77-4,74 (кв., 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,78 (с, 2Н),
- 73 026656
3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 668 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 675.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,71 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,15 Гц, 1Н), 7,586,99 (м, 10Н), 3,87-3,84 (д, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 669 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 675.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,71 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,09 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=9,37 Гц, 1Н), 7,48-7,28 (м, 6Н), 7,03-6,97 (м, 2Н), 4,77-4,74 (кв., 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,78 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
В колбу загружали соединение 657 (50 мг, 0,111 ммоль), гидрохлорид 2-пиридинуксусной кислоты (20 мг, 0,116 ммоль) в ΌΜΡ (1 мл) при 0°С и обрабатывали раствором пропилфосфонового ангидрида (91 мкл), затем триэтиламином (40 мкл, 0,29 ммоль). Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 ч, затем гасили путем добавления ледяной воды (~5 мл). Желтый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% МеОН в дихлорметане, с получением соединения 670.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,67 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,53-8,49 (м, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,12 Гц, 1Н), 7,78-7,76 (т, 1Н), 7,58-7,26 (м, 7Н), 4,01 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 671 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 670.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,70 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,53-8,48 (м, 2Н), 8,22-8,19 (д,
1=9,12 Гц, 1Н), 1,16-126 (м, 7Н), 3,87 (с, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
- 74 026656
Соединение 672 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 670.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 11,32 (с, 1Н), 8,53-8,52 (шир.с, 2Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,12 Гц, 1Н),
7,58-7,26 (м, 7Н), 3,87 (с, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 673 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 661.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,69 (шир.с, 1Н), 11,31 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,1 Гц, 1Н), 7,57 (д,
1=9,1 Гц, 1Н), 7,51-7,21 (м, 8Н), 3,90 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,06-2,86 (м, 4Н), 1,77-1,72 (м, 4Н).
Соединение 674 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 661.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,63 (шир.с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,2 Гц, 1Н), 7,57 (д,
1=9,2 Гц, 1Н), 7,51-7,38 (м, 3Н), 7,33-7,09 (м, 5Н), 3,87 (с, 2Н), 3,79 (с, 2Н), 3,06-2,86 (м, 4Н), 2,48 (с, 3Н), 1,77-1,72 (м, 4Н).
В колбу загружали соединение 657 (70 мг, 0,155 ммоль), 5-пиримидинуксусную кислоту (22 мг, 0,162 ммоль) в ОМЕ (1 мл) при 0°С и добавляли НОВТ (44 мг, 0,326 ммоль) с последующим добавлением ЕОС1 (78 мг, 0,408 ммоль). Полученную смесь медленно нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи, затем гасили путем добавления ледяной воды (~5 мл). Белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством воды. Неочищенное вещество очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 0-6% МеОН в дихлорметане, с получением соединения 675.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,75 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 9,11 (с, 1Н), 8,76 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,12 Гц, 1Н), 7,59-7,26 (м, 6Н), 3,94 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
- 75 026656
Соединение 676 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 675.
'ίί ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,75 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,70 (с, 1Н), 8,61-8,57 (м, 2Н), 8,228,19 (д, 1=9,36 Гц, 1Н), 7,59-7,26 (м, 5Н), 4,11 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 677 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 675.
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,75 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,89 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,15 Гц,
1Н), 7,59-7,26 (м, 5Н), 6,62 (с, 1Н), 3,99 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 678 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 675.
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,75 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 9,06 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,21 Гц,
1Н), 7,59-7,26 (м, 6Н), 4,03 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 679 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 661.
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,67 (шир.с, 1Н), 11,31 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,2 Гц, 1Н), 7,57 (д,
1=9,2 Гц, 1Н), 7,51-7,36 (м, 4Н), 7,29-7,12 (м, 4Н), 3,87 (с, 2Н), 3,85 (с, 2Н), 3,06-2,86 (м, 4Н), 1,77-1,72 (м, 4Н).
Соединение 680 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 661.
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,67 (шир.с, 1Н), 11,31 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 7,57 (д,
1=9,0 Гц, 1Н), 7,51-7,28 (м, 8Н), 3,87 (с, 2Н), 3,84 (с, 2Н), 3,06-2,86 (м, 4Н), 1,77-1,72 (м, 4Н).
- 76 026656
К раствору соединения 674 (100 мг, 0,16 ммоль) в дихлорметане при -78°С добавляли т-СРВА (60 мг, 0,24 ммоль)4 порциями. Полученную смесь перемешивали при указанной температуре в течение 1 ч, затем медленно нагревали до -10°С и гасили при помощи 25% водного раствора №282О3. Реакционную смесь разбавляли при помощи Е!ОАс, промывали насыщенным водным раствором NаНСО3 (3x10 мл). Объединенный органический слой отделяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили (Мд§О4) и концентрировали. Неочищенное вещество очищали при помощи ВЭЖХ с получением соединения 682.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 12,72 (шир.с, 1Н), 11,31 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 7,68 (м, 1Н), 7,60-7,26 (м, 8Н), 3,91 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,06-2,86 (м, 4Н), 2,76 (с, 3Н), 1,77-1,72 (м, 4Н).
Соединение 681 получали из соединения 657 и 3-метилсульфонилфенилуксусной кислоты с использованием процедуры, описанной для соединения 661.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 12,72 (шир.с, 1Н), 11,31 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 7,92-7,83 (м, 2Н), 7,70-7,26 (м, 7Н), 3,93 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,23 (с, 3Н), 3,06-2,86 (м, 4Н), 1,77-1,72 (м, 4Н).
Соединение 683 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 675.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 12,75 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,36 (с, 1Н), 8,21-8,18 (д, 1=9,18 Гц,
1Н), 7,84-7,80 (д, 1=9,36 Гц, 1Н), 7,59-7,26 (м, 6Н), 3,90-3,87 (д, 4Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 684 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 675.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-Б6) δ м.д. 12,75 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,57 (с, 1Н), 8,51-8,49 (д, 1=9,18 Гц,
1Н), 8,21-8,18 (д, 1=9,06 Гц, 1Н), 7,79-7,75 (д, 1=9,36 Гц, 1Н), 7,59-7,26 (м, 6Н), 4,07 (т, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,30-3,28 (м, 1Н), 3,19 (с, 3Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 2,3-2,5 (м, 1Н), 1,99-1,96 (м, 1Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
- 77 026656
Соединение 685 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 661.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,52 (шир.с, 1Н), 11,31 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,1 Гц, 1Н), 7,61-7,25 (м, 7Н), 3,87 (с, 2Н), 3,80 (с, 3Н), 3,62 (с, 2Н), 3,06-2,86 (м, 4Н), 1,77-1,72 (м, 4Н).
Соединение 686 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 661.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,53 (шир.с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,1 Гц, 1Н), 7,58 (д,
1=9,2 Гц, 1Н), 7,52-7,26 (м, 4Н), 5,96 (с, 1Н), 3,87 (с, 2Н), 3,67 (с, 2Н), 3,64 (с, 3Н), 3,06-2,86 (м, 4Н), 2,21 (с, 3Н), 1,77-1,72 (м, 4Н).
Соединение 687 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 661.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,56 (шир.с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 7,61-7,38 (м, 6Н), 6,17 (д, 1=2,2 Гц, 1Н), 3,87 (с, 2Н), 3,79 (с, 3Н), 3,75 (с, 2Н), 3,03-2,90 (м, 4Н), 1,7-1,72 (м, 4Н).
Соединение 688 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 661.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-а6) δ м.д. 12,61 (шир.с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,3Гц, 1Н), 7,58 (д,
К раствору соединения 657 (200 мг, 0,44 ммоль) в ΌΜΡ (4 мл) при 0°С добавляли миндальную кислоту (124 мг, 0,66 ммоль), НОВ! (119 мг, 0,88 ммоль) и ΕΌΟ (170 мг, 0,88 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч, затем охлаждали до 0°С и гасили при помощи
- 78 026656
Н2О. Осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации и дополнительно очищали хроматографией на силикагеле с использованием для элюирования 1-10% МеОН в дихлорметане с получением соединения 690 и более полярного 689.
689: ΊI ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,42 (шир.с, 1Н), 11,31 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,2 Гц, 1Н), 7,587,27 (м, 10Н), 6,35 (д, 1=4,4 Гц, 1Н), 5,34 (д, 1=4,3 Гц, 1Н), 3,87 (с, 2Н), 3,03-2,89 (м, 4Н), 1,77-1,73 (м, 4Н).
690: 'Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 13,05 (шир.с, 1Н), 11,31 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 7,597,26 (м, 15Н), 6,26 (д, 1=5,5 Гц, 1Н), 6,11 (с, 1Н), 5,38 (д, 1=5,3 Гц, 1Н), 3,87 (с, 2Н), 3,03-2,88 (м, 4Н), 1,761,73 (м, 4Н).
Соединение 447 получали из соединения 657 и 3-хлорминдальной кислоты с использованием процедуры, описанной для соединения 689.
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,48 (шир.с, 1Н), 11,31 (с, 1Н), 8,20 (д, 1=9,2 Гц, 1Н), 7,59-7,26 (м, 9Н), 6,53 (м, 1Н), 5,36 (т, 1=0,7 Гц, 1Н), 3,87 (с, 2Н), 3,03-2,90 (м, 4Н), 1,75-1,71 (м, 4Н).
Соединение 692 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 675.
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,75 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,21-8,18 (д, 1=9,18 Гц, 1Н), 7,807,26 (м, 9Н), 3,92 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 693 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 675.
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,75 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,06 Гц, 1Н), 7,79 (с,
1Н), 7,59-7,26 (м, 6Н), 6,31 (с, 1Н), 5,20 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 694 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 675.
'II ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,71 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,22-8,18 (д, 1=9,15 Гц, 1Н), 7,587,54 (д, 1=9,18 Гц, 1Н), 7,48-7,26 (м, 4Н), 3,87 (с, 2Н), 3,63 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 2,39 (с, 3Н), 2,13 (с, 3Н), 1,73 (шир.с, 4Н), 1,57 (с, 9Н).
- 79 026656
К раствору соединения 694 (50 мг, 0,081 ммоль) в дихлорметане (2 мл) добавляли ТРА (2 мл) при 0°С. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем упаривали в вакууме досуха. Добавляли простой эфир и белый осадок собирали при помощи вакуум-фильтрации, промывали дополнительным количеством простого эфира, с получением соединения 695.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,71 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,36 Гц, 1Н), 7,607,57 (д, 1=9,27 Гц, 1Н), 7,51-7,28 (м, 4Н), 3,88 (с, 2Н), 3,57 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 2,45 (с, 3Н), 2,15 (с, 3Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Соединение 696 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 695.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 12,71 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,30 Гц, 1Н),8,15 (с,
1Н), 7,58-7,54 (д, 1=9,30 Гц, 1Н), 7,48-7,28 (м, 5Н), 3,87 (с, 2Н), 3,76 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с,
Соединение 697 получали с использованием процедуры, описанной для соединения 695.
Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 14,22 (с, 1Н), 12,71 (с, 1Н), 11,32 (с, 1Н), 9,01 (с, 1Н), 8,22-8,19 (д, 1=9,15 Гц, 1Н), 7,59-7,26 (м, 6Н), 4,04 (с, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,01 (шир.с, 2Н), 2,90 (шир.с, 2Н), 1,73 (шир.с, 4Н).
Очистка методом препаративной ВЭЖХ.
Все очистки при помощи обращено-фазовой препаративной ВЭЖХ осуществляли с использованием хроматографа 5>1йтаб/и Рготтепее Ргерагайуе Ысцйб СНготаЮдгарН с колонкой при температуре окружающей среды. Подвижные фазы А и В состояли из 0,1% муравьиной кислоты в воде и 0,1% муравьиной кислоты в ацетонитриле соответственно. Содержащие неочищенный продукт смеси растворяли в ЭМР, ЭМЗО или в смеси таких веществ при концентрациях приблизительно 100 мг/мл и хроматографировали в соответствии со способами, описанными в табл. 1. Соответствующие хроматографические фракции затем упаривали в условиях высокого вакуума при 45°С с использованием 5>ауап1 §рееб Уае Р1их Мобе1 8С210А с получением очищенных продуктов.
- 80 026656
Описания методов препаративной ВЭЖХ
Таблица 1
Соединение № Колонка время (мин) % МРВ Скорость потока (мл/мин) Время удерживания продукта (мин)
7 1 0 20 2 7,4
1 20 2
2 20 5
3 70 5
14 100 5
8 1 0 20 2 11,5
1 20 2
2 20 5
3 70 5
14 100 5
26 1 0 40 1 6
1 40 2
3,5 40 4
4 40 4,73
10 90 4,73
29 2 0 40 2 7,7
1 40 3
2 40 18,9
13 50 18,9
36 2 0 32 3 12,1
0,5 32 5
1 32 18, 9
13 35 18,9
143 2 0 50 3 9,1
1 50 3
2 50 18,9
5 50 18,9
15 80 18, 9
153 2 0 35 3 6,2
1 35 3
2 35 18,9
4 35 18,9
14 75 18,9
199 2 0 45 3 8,3
1 45 3
2 45 18,9
3 45 18,9
13 65 18,9
203 2 0 50 3 9,6
- 81 026656
1 50 3
2 50 18,9
5 50 18,9
15 60 18,9
208 0 35 3 7,6
1 35 3
2 35 18,9
4 35 18,9
14 50 18,9
Следующие репрезентативные протоколы синтеза также можно использовать для получения соединений по настоящему изобретению.
3,6-Дихлорпиридазин обрабатывают ди-трет-бутилмалснатом и гидридом натрия в ТГФ или ΌΜΡ с получением соединения 1026. Промежуточное соединение 1026 затем обрабатывают гидридом натрия в ТГФ или ΌΜΡ, затем бис-(хлорметил) сульфидом, с получением соединения 1027. Промежуточное соединение 1027 обрабатывают при помощи ТРА в дихлорметане с получением соединения 1028. Промежуточное соединение 1028 обрабатывают аммиаком с получением соединения 1029. Промежуточное соединение 1028 также преобразовывают в соединение 1029 путем последовательной обработки 2,4-диметоксибензиламином и ТРА. бис-Амино промежуточное соединение 1029 можно преобразовать в ацилированные продукты, аналогичные тем, которые описаны в табл. 2, с использованием способов, описанных в разделе Протоколы синтеза выше для ацилирования соединений 1001-1008.
Как транс-, так и цис-циклопропан-1,2-диилдиметанолы преобразовывают в соответствующий биснитрил 1031 через бис-мезилированное промежуточное соединение 1030. бис-Мезилатное промежуточное соединение 1030 получают путем обработки диола метансульфонилхлоридом в присутствии пиридина или триэтиламина в дихлорметане. Биснитрил 1031 получают путем обработки соединения 1030 цианидом натрия в ОЮ8О или этаноле/воде. С использованием процедуры, аналогичной той, которая описана для получения соединения 1001, бис-нитрил 1031 подвергают циклизации тиосемикарбазидом в ТРА с получением промежуточного бис-амино соединения 1032. Промежуточное бис-амино соединение 1032 можно преобразовать в ацилированные продукты, аналогичные тем, которые описаны в табл. 2, с использованием способов, описанных в разделе Протоколы синтеза выше для ацилирования соединений
1001-1008.
- 82 026656
Алкеновый аналог 1033 получают из транс-3-гексендинитрила с использованием процедуры, аналогичной той, которая описана для получения соединения 1001. Промежуточное бис-амино соединение 1033 можно преобразовать в ацилированные продукты, аналогичные тем, которые описаны в табл. 2 (например, 1034) с использованием способов, описанных в разделе Протоколы синтеза выше для ацилирования соединений 1001-1008. Продукты могут быть далее преобразованы в циклопропильные аналоги (в качестве примера, соединение 1035) в условиях Симмонса-Смита (ΈρΖπ, СН212, 1,2-диметоксиэтан).
Пример 2. Анализы соединений.
Соединения анализировали как в биохимическом анализе ίη νίίΐΌ, так и в анализе клеточной пролиферации следующим образом. ИК50 значения представлены в табл. 2.
Рекомбинантный ферментый анализ.
Соединения оценивали на их способность ингибировать ферментативную активность рекомбинантной формы глютаминазы 1 (ОАС) с использованием биохимического анализа, который связывает продукцию глютамата (который высвобождается ОАС) с глютаматдегидрогеназой (ООН), и измеряя изменение поглощательной способности для восстановления ΝΛΌ' до бАЭН. Получали раствор субстрата (50 мМ ТГ18-НС1 рН 8,0, 0,2 мМ ЕОТА, 150 мМ К2НРО4, 0,1 мг/мл В8А, 1 мМ ОТТ, 20 мМ Ь-глютамина, 2 мМ КАО' и 10 ч./млн антивспенивателя) и 50 мкл добавляли в 96-луночный наполовину прозрачный планшет (Согтпд #3695). Соединение (2 мкл) добавляли с получением конечной ОЮ8О концентрации 2% при 2Х желаемой концентрации соединения. Ферментативную реакцию начинали при добавлении 50 мкл ферментного раствора (50 мМ Тп5-НС1 рН 8,0, 0,2 мМ ЕЭТА, 150 мМ К2НРО4, 0,1 мг/мл В8А, 1 мМ ОТТ, 10 ч./млн антивспенивателя, 4 единиц/мл ООН, 4 мМ аденозиндифосфата и 4 нМ ОАС) и считывали в Μо1еси1а^ Ое\зсек Μ5 планшет-ридере при 20°С. Планшет-ридер был сконфигурирован таким образом, что он считывал поглощение (λ=340 нм) в кинетическом режиме в течение 15 мин. Данные регистрировали как миллиединицы поглощения в минуту, и углы наклона сравнивали с контрольным соединением и с контролем с использованием только ^Μ8О в том же планшете. Соединения с углом наклона кривой меньше чем у ^Μ8О контроля считались ингибиторами и изменчивость планшетов оценивали с использованием контрольного соединения.
Результаты этого анализа для некоторых соединений по настоящему изобретению представлены в табл. 2, и они выражены как ИК50 или полумаксимальная ингибиторная концентрация, ИК50 представляет собой количественное значение, показывающее, какое количество соединения необходимо для 50% ингибирования данной биологической активности.
Рекомбинантный ферментый анализ - зависимость от времени.
Соединения оценивали на их способность ингибировать ферментативную активность рекомбинантной формы глютаминазы 1 (ОАС) с использованием биохимического анализа, который связывает продукцию глютамата (который высвобождается ОАС) с глютаматдегидрогеназой (ООН), и измеряя изменение поглотительной способности для восстановления НАО' до НАОН. Получали раствор фермента (50 мМ ТГ18-НС1 рН 8,0, 0,2 мМ ЕОТА, 150 мМ К2НРО4, 0,1 мг/мл В8А, 1 мМ ОТТ, 10 ч./млн антивспенивателя, 4 единиц/мл ООН, 4 мМ аденозиндифосфата и 4 нМ ОАС) и 50 мкл добавляли в 96-луночный наполовину прозрачный планшет (Согтпд #3695). Соединение (2 мкл) добавляли с получением конечной ^Μ8О концентрации 2% при 2Х желаемой концентрации соединения. Смесь фермент/соединение герметично закрывали уплотнительной фольгой (И8А 8с1епИПс) и осуществляли инкубирование, при осторожном встряхивании в течение 60 мин при 20°С. Ферментативную реакцию начинали при добавлении 50 мкл раствора субстрата (50 мМ Тг18-НС1 рН 8,0, 0,2 мМ ЕОТА, 150 мМ К2НРО4, 0,1 мг/мл В8А, 1 мМ ОТТ, 20 мМ Ь-глютамина, 2 мМ NΛ^' и 10 ч./млн антивспенивателя) и считывали в Μо1еси1а^ Ое\зсе5 Μ5 планшет-ридере при 20°С. Планшет-ридер был сконфигурирован таким образом, что он считывал поглощение (λ=340 нм) в кинетическим режиме в течение 15 мин. Данные регистрировали как миллиединицы поглощения в минуту и углы наклона сравнивали с контрольным соединением и с контролем с использованием только ^Μ8О в том же планшете. Соединения с углом наклона кривой меньше, чем у ^Μ8О контроля, считались ингибиторами, и изменчивость планшетов оценивали с использованием контрольного соединения.
- 83 026656
Результаты этого анализа для некоторых соединений по настоящему изобретению представлены в табл. 2, и они выражены как ИК50 или полумаксимальная ингибиторная концентрация, ИК50 представляет собой количественное значение, показывающее, какое количество соединения необходимо для 50% ингибирования данной биологической активности.
Анализ клеточной пролиферации.
Клетки Р493-6 (тус оп) поддерживали в питательной среде (КРМ1-1640, 10% РВ§, 2 мМ глютамина, 100 единиц/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина) при 37°С и 5% СО2. Для анализа соединений Р493-6 клетки высевали в 96-луночные У-донные планшеты в день, когда добавляли соединение к 50 мкл питательной среды, при плотности клеток 200000 клеток/мл (10000 клеток/лунка). Осуществляли серийные разведения соединений в 100% ЭМ8О при 200Х конечной концентрации. Соединения разбавляли 100-кратно в питательной среде и затем 50 мкл этой смеси добавляли в клеточные планшеты, получая конечную концентрацию ЭМ8О 0,5%. Клетки инкубировали с соединением в течение 72 ч при 37°С и 5% СО2 и анализировали на антипролиферативные эффекты либо при помощи Се11 ТНег С1о (Рготеда) либо РАС8 анализа с использованием набора У1асоип1 (МПНроге) на устройстве Сиауа.
Результаты этого анализа для некоторых соединений по настоящему изобретению представлены в табл. 2, и они выражены как ИК50 или полумаксимальная ингибиторная концентрация, ИК50 представляет собой количественное значение, показывающее, какое количество соединения необходимо для 50% ингибирования данной биологической активности.
Таблица 2
Соед № Структура САС Дельта N2 ИК50 60 мин пре дин к. (мкМ) САС Дельта N2 ИК50 без прединк. (мкМ) Клеточн, пролиф. Р4ЭЗ 72 час ИК50 (мкМ)
1 н ь ь н 0.10 0.20 0.47
2 О Ν—Ν Ν-Ν О I 4.1 0.63
3 О Ν-Ν Ν'Ν О ΜοΟ''^''-Х ΉΉ0Η). >50 >50
4 ι О Ν-Ν Ν-Ν О ι Ν X 3 ΧΝ Η Η 13 >50
5 Ο Ν-Ν Ν-Ν О >50 >50
6 ο Ν-Ν Ν-Ν О >50 2.7
7 Ϊ 5 5 5 Н ХО >50 1.0
8 Г 5 Ь 3 ] % СГ >50 1.6
- 84 026656
- 85 026656
16 θΜ __/'Ν ν-Ν Ν—К Ά. л л Л ζ—Ν 0 0 “Υ °ν >50 0.80
17 χ4^Ζνθ\/ν3νΝΗ2 Γη Τ Υ Γ Ύ α 0 Ν-Ν Ν—Ν 15 4.2
18 ΗΝ—Ζ /Г Τ >—ΝΗ Κ-Ν Ν-/ 4,5 8.2
19 /=< ΗΝ—Ζ Τ Ύ ^-ΝΗ ν-ν ν-ν' ) 11 1.7
20 Ζ-?^ ,5'ухч^-5'-^г'5ч ο “Ч-ϊ^ 2 6.6 2.6
21 > 0.16 0.02
22 ζ\£ч зг^з'^5Д'“С1 Ρ'-γζΑ» Ν-Ν Ν-Ν Ό^\' Ρ Ρ ΡΡ >50 >50
23 ζΗ° ν^Αχν, ν ΗΝ~< « П }>~νη2 ρ^/^Ο Ν-ν ν-Ν >50 >50
24 Ν, Ύ Τ ,ν ^-5 5-^ ΗΝ ΝΗ НС\У° Ζοη Ο ο 0.51 2.3
25 Η _ „ Η λλ,ν ν'3 \х^'5^-хХу'Э'у'М я''' ΙΙ^Ζ 0 Ν-Ν Ν-Ν 0 1.2 1.5
- 86 026656
26 0 Ν—Ν Ν-Ν 0 5.6 0.70
27 у2г5 3Л-д-0 О-^ 0 >50 0.47
28 А η лгО А у«Г /° \ л-ЛЧ Я и °Д ΝΝ Ν-Ν До >50 1.0
29 Ν'. 7 Г ,Ν Дз зД ΗΝ ΝΗ Н°\__?=0 0=( О о 0.56 4.1
30 I сА X 1.2 2.5
31 ν' ι А Η Μ ΗΝ ΝΗ ^=0 ΗΝ ΝΗ ,Ρ Ρ. Ο 0 / \ >50 4.3
32 О °х/Нг О / 7.0 11
- 87 026656
33 \-Ν N-,7 ' 13; 5.3
34 Ά°4 Λ~ΝΗ ο θ ΗΝ— >50 >50
35 ,-0^ 5^8^3 Ά'ζΡ Ο ~-<ϊ Х»-но0, Ρ ρ 18 3.8
36 он но ЗЗ^^^л-с /=\ ΗΝ-4 Т У >-ΝΗ У-\ V/ Ν-Ν Ν-/ 0.04 0.22 0.16
37 0=^0; Ο >50 >50
38 © °Α >50 3.2
39 Ω χ% °=( υ Β'ΝΝ'ν 26 4.5
- 88 026656
40 Ρ ο - °> υ Ν,ν Ζ' 3.7 0.56
41 Ο Μ Ш θ< Ο ο & 7.9 33
42 Χ°1 7°Χ Λ-ΝΗ ο ο ΗΝ^ 0 _γΛ _.-_5 Μ_° —( ΗΝ-^ Г ιΓ >-νη /~ ' ν-ν Ν-ν ' >50 >50
43 СУо^тг—Όγ8Ργ·°-Ο Ν-Μ ν~Ν 2.3 >50
44 ,0 Г Λ °Ρ-Λ Ь 4.9 2.6
45 \ 7Ο ν-ν Κ^-ρ ΗΓΉ Τ Ν-Ν >50 >50
46 <Ρ| 9 Ν-ν Ν-Ν 0 иДЛА/^ΛΑΝΑΛ о ЙН Η Η Τ ψ ψ >50 16
47 0 Ν-Ν Ν-Ν 0 ДД 2НС1 н 8.3 35
48 0 Ν-Ν Ν-Ν 0 Η Η >50 0.42
- 89 026656
Ο Ν—Ν Ν-Ν Ο
- 90 026656
55 Г ° />- ν'Ν >50 3.9
56 Ν-Ν οχ-.Ν η ')---Ν нуЛ3 Ц ΝΗ 0=4 Ρ /ξΑ НО 4 Ρ >50
57 ν«, ο=ΑΝ^ -Ν, и ,ΝΗ Ανν. Α 40
58 «Α3 ΑτΑ^Α >50 3.7
59 г ί> Ά^ν .-Α» >50
60 ο<<1 ,Ν, η ΝΗ 24 14
61 •У >50'
- 91 026656
- 92 026656
- 93 026656
76 V и ΗΝ ΝΗ сЛ/ руу Ν Ν—' )ίΖ°4ξ >50
77 4-01 Λ-/Ά 0 505 Η 0 Η Η 6.1 34
78 Ν^Χ\ζ5χ^-χ,Ν Ν, 7 \ ,Ν 03 50 ΗΝ ΝΗ ο%, /ο ΗΝ—/ 0.84 10
79 Ν τ V ,Ν 05 80 ΗΝ ΝΗ ор · ио ΝΗ ΗΝ-/ 2.0 20
80 ν-ν ν-ν 0е5^ но ΗΝ0λχ-χΛ3^Η °Η 1.8 1.3
81 Ο/\Α4/\.,Ν Ν'. Ύ £ ,Ν λ8 4 0С °>ο 10 7.6
- 94 026656
82 0¾ 0 Μ />- ν-ν 3 0.80 1.3
0-С4
83 0 ίΔ ΝΗ 3^ Δ-^Άι'Ν 3.9 1.4
Ο<Δ
84 ° -λ ΝΗ 0.23 0.89
85 ΔτΥν. ΝΗ 5-^ —Λ 'Ν 1.5 1.8
86 ΟύΔ 0 Ο- ΝΗ 3-4 ^Λν-Ν 0.32 0.52
3 \
87 0-ΎΥν о II )>-— ν'νΖ/^ °=( ΝΗ 3^ /--X -Ν 0.18 0.06
°Χ
88 Δνγν 0 ιι /)— 'Ν ΝΗ 3ΐ- ,Ν 0.20 0.12
- 95 026656
- 96 026656
96 оХ У- \ О=\ >О ΝΗ ХА_ф НМ й Ν-Ν >20
97 А N ^--МН НМ-^ 'Ν=\ у\—° 0.56 17
98 χχ о Ν-Ν Ν—N О Χ°γ^Η Ηΰγ°>< Ιο О 1 >20 3.9
99 О Ν-Ν Ν-Ν 0 /А ΝΗ2 2 НС1 ΝΗ2 2.7 1.0
100 ,О °ч Ю-5 Л\_О ° ΗΝ—Г- Т Т ΝΗ \-Ν Ν-Ν Ζ 8.1 9.0
101 олА/31^8^иг3СА--о Λ-Ν Λ-,Γ' 24 17
102 0 ЧГ Ή./* р Р Р 0.24 1.4
103 рЛч—юиА °^θ Ν-Ν Ν-Ν 0^/ Э 3 19 >50
104 р/Н' ГЧ ΗΝ-^ Т У /У-ΝΗ ίλ °^0 Ν-Ν Ά 0^ 9 3 >20
- 97 026656
105 О Ν—Ν Ν—N О 9.9 119
106 О Ν—Ν Ν—N О φρΛ,ΛΚ. л—ф >20
107 О Ν—Ν Ν—N О “ч 4.3 1.2
108 О Ν—Ν Ν—N О ι >20
109 X Р р /\ОН р\Цр 0=( 4 >20
НО л хЬ Ο+ΝΗ О=(Х^ >20
111 -Υ О=<° 3 Τ'- Н Чн νθν\3 к о 0 Д./' 0.95 0,88
- 98 026656
112 о „Л 0=< ? Η ΝΗ 0.51 0.89
113 Ή ь °>=о X ΗΝρΛ сАмн о=(Х- ] >20
114 л 0=< 3 \Г о=( / г-\ Η ΝΗ 0 0 Μ./- 0.60 0.56
115 уУо оЛ °л /Э МЛ^ Η ΝΗ -к σγν^,_?ч Ν'ΐΓ^ 0.62 1.1
116 Λ 0=( 3' .3χ Η ΝΗ ΟΥΝγ3 ΚΝ ] 0.24 0.72
- 99 026656
- 100 026656
122 Вг У / к ° ι у-— 3.5 43
123 /> °=< А-укХ о V-- 12 6.6
124 ΗΝ~Λ 2 ТРА 0=\ н^'Х-х И _/н >20'
125 οΖΌ „ 2ЛРД °-<Ν„ А ° Ν-Ζ~^δ^ΛΝ' >20
126 Ν-^-χ^·5χ^„Ν Ν, 7 V > Μ Μ ΗΝ ΝΗ но^ У^0 θ=3( /°Н 5.8 12
127 о θ А У; Ν-м Ν-Ν а/7-ОН !ί~\2г ΗΝ—4, ί ί %Ν V Ζ 5^—Η 1.8 0.45
- 101 026656
128 2 Ν—Ν Ν—Ν 0 («“Ή) -^5 А^-5>-^АдХхм ί Η Η 4 Ο^ΝΗ π Π ΗΝ^Ο 32 >50
12Э ΗΝ—\ 4 2 НСО2Н ) ο=< г—\ Η ΝΗ >20 >50
130 ηνΓ3 2ΓΕΑ НЧА И /ΝΗ ->> >20
131 Αα νη2 °Κ 19
132 ΗΝγ 2 НС1 \ ,—·\ Η ΝΗ ΗΟ>\νχ---^ Η 0 ν-^ Αν >20
133 СХ Ο Α Μ. Η Η Ы'Ы^ δ^^Ν 0.51 0.15
- 102 026656
- 103 026656
141 У5 η;ν ΗΝ ΝΗ _*\=Ο Ο=Ζ ноАи ΗΟ7\'β'1 1.7 4.3
142 ν' ?Ν η 4 ΗΝ ΝΗ _ \=Ο Ο=Ζ Η Ο^|'3} ноА^ >20
143 0.57 2.2
144 Ο Ο ο Ο ν-ν ν-ν но/ НМУ-К/—^А?~н у>н >20
145 0_4° ν-ν Ν-ν %Ρ нА5Л.е<Л8>-~н >20
146 О^У^° Λ!? Ν' Ν ηο^ην-45Λ^^Λ3>-ν 8η ν-/ 0.43 0.46
147 Ο ο 0 0 ν-ν ν-ν ^4βΖ °\ ΗΝ ν^-δ η ζ° 0.62 0.37
148 Ν-Ы ν-ν >οί^ о0мЛ-%—-Л-Лй > 0.59 0.39
- 104 026656
- 105 026656
- 106 026656
161 Ζ 0 Ην о II /К/4;; ч. >3;..' ν Ν-ν*^ 5—Χ^ν 0.15 1.4
162 / —Ν 0.23 0.15
163 / Χο^θ^ν\/-_ гЧ θ ΪΛ-~^ν'Ν 0.1:1 >50
164 / —Ν ° ν-ν^ 0.24 0.13
165 Я^л ιμ>χΡ / \ 0.51 33
- 107 026656
166 7.4 6.8
167 И 34
168 Η 1.3 >50
169 0.71 3.4
170 (3--0 гцЬАЭ НО ΗΝ^8Λν^^Λ5Ζ'ΝΗ он 7.4 9.3
171 гV °Η^~θ Υ3ην48Λ^Λ3Ανη 0^ >20
172 ^Η° Λ Г ν °ч^ ΗΟ ην^5Α^χΑ-8/^ΝΗ 0Η 1.7 3.7
173 Цц Ν-Η »-Ν Цр 24 0.76
174 Α-Ά~ϊ ϊΆ+Ά но ΗΝ\Α^—У50 он 0.29 0.44
175 (¢01 О Ν—Ν Ν—N О (¢01 ЦчАЛ^-^Л^ЛХ11 к н н νη2 2НС1 6.3 23
- 108 026656
- 109 026656
183 р\ Р Р \ О р ° Д />—^з—^Ч' >20
184 >20
185 °)=0 ΗΝ N ™-ОЭгйу5 Ή оЧо 0 ί>-^5~ν >20 0.09
186 ί^>\ 0 Ν—Ν Ν—Ν Ο 2„с, Η Ъ 3.1 13
187 <^Λ Ο Ν—Ν Ν—Ν Ο и^лл^--лл»М9 ΝΗ2 Η 2 НС| Η ΝΗ2 2.3 21
188 Г4 Ν-, ί ΗΝ4 Υ Ύ Ήνη 7 Γκ \_Г \ ,° Ν-Ν ν-ν °-Л X- 0 0 V У 2.0 0.46
- 110 026656
189 к / Λ / Η ΝΗ 4,4
190 Ο 5-^ уЭН % ο=< 0¼_Ρ Ν-ΓΪ 0.25 0.49
191 Ην >20
192 Α ^=ο ΗΝ V ηκ-ΟύΑ» Α ° ΐ>—+ν·ν >20 0.03
193 •мИЛ сааа ν'Ν 5^-^Ν 3.4
- 111 026656
194 10
195 η2ν о 2 ТРА 0==\ Η2Ν·42λ04γ5 и 0.30 1.3
196 Η2Ν ^''СУ^Иу'З Αν о П У—-—. Л/ 2 ТРА 0.19 0.61
197 Р0° О Ν—Ν Ν—N 0 °09 ί^,Ν'0^'Ν У'З'У' '8 '''''У''5'^''' 1<3> н н к О 0 6.9
198 0 νη2 /С о О0 НА Г\-\ И ,ΝΗ Ν-Ν ν ν 0.18 >50
199 Ού\α 3 Ν'Γ1 5 Ύ 0ΝΗ ρ 0.12 0.17
- 112 026656
- 113 026656
- 114 026656
213 ~ °7 А Уя К Ν'ΝζΧ^'5-^ΛΝ'Ν 2.5 4.4
214 ο νη2 „^Α^8^8 ο 0.82: 1.2
215 % > 16.
216 € Ο гОУу^А Ν ° Μ-Α^δ^^Ν 0.89 >50
217 ΝΗ, °Ы 0 )=\ Ο Η!%-Ο>Α а 0.24 >50
218 *-\α Η, >20
- 115 026656
- 116 026656
- 117 026656
- 118 026656
240 0 Ο-( ΝΗ 0.54 1.3
Ν-Νκ_
Ιί ')--- Λ5 4 ΝΗ
°χ
241 _/ 0.38 0.87
Γ~ Η.)
/— Ν Ο
Ν Ν ,Ν
ΗΝ^ —°
ΝΗ
242 πθ-ίΧ0 °5>-οη 0.36 0.22
0 )
Ρ’Ϋ'0 0 Ν—Ν < 1. ιί /I \\ Ν // —Ν ή. ν°
243 ΰ 5 ^ '3'^^ '8^ й г 2.7 33
0 4
244 Ολλχ- Ν _Ιί -Ν ύ 5^ ο Ν'Χ)^4 0.84 1.7
Η 4
/=\ ζ
<Ц“( 0 он
\
245 0 ΛΟΗ ο=< 0.52 2.5
ίΆ / Η ΝΗ
θ7Ννν^8_ ’η ” 4Χ*»Ν
- 119 026656
- 120 026656
252 9-0-, л°>-Р 'ОН 1.2 6.3
253 но о Н Ηθ'^Χ^Νγζ3γ^^8'χΧ0^δ^'Ν'γΛ'θΗ 0 Ν-ν Ν-Ν О 21
254 г„ V ° ΗΝ—ί л л $ ΔΝΗ >20
255 О-с| ,С1 <0 ίΤΔ- Н ΝΗ ΟΎ4~-,Δ» 0.38
256 О-с| 7 0=/ 0Та-~-Ц6. υ νν^ 0.11
257 'ο О он —0 г'0 ο=< ' Η ΝΗ Ού4—<< 0.12 0.073
258 \ ο рн —-Ο <ΟΗ 0=< / γ-γ—ί Η ΝΗ ΟΥ 80 0.19 0.18
- 121 026656
- 122 026656
- 123 026656
- 124 026656
- 125 026656
- 126 026656
- 127 026656
297 О о 8 1 к-5 Ν'Ν Αλ.__ О Ν 6.4
298 р Ол- рч Λ Λ-ΝΗ ΝΗ ° μ» зЧ 0.73 5.1
299 Ζ. -,Ч ΗΝ—\ 0 Э-ΝΗ δ'0ζχ/ν4 0.33
300 Ον^^γγχ) Ν'4 0 0.16 0.16
301 >20 0.23
302 *Х- ур ηΟ-< /Г ту- уОн 7.0 0.87
303 Я/ з^^^з V? Ν'ν Ν'Ν >20
- 128 026656
304 X' ν-ν ΉΌ ΗΝ-< Υ Υ Υ-ΝΗ [ ν-ν Ν-у Η0-γ_ 1.2 4.9
305 νΡ Ν~4 Й сГ° >20 102
103 8 Η Ν Η 0.080 1.5
306 С1~О О о 0-С Η-Л ΓνΛ< ио 5Ή—- '-Ή'ε' η 0Η 0.031 0.52 0.066
307 5 1 ΥΡ-Ν!1 Ρό 6.4 9.3
308 η „ νΡ %, 4Ί ТУ-Υ 0,60' 1.2
- 129 026656
- 130 026656
- 131 026656
- 132 026656
325 NN.__ А? ΗΝ 5 Αο X 0.17 0.66 0.030
Η2Ν^ζ 0
η2ν
•ϊίν^- ΗΝΛδ ζ-χ-Ν ~^αν νη 04
326 θ' 1 υ 0 0 Α >20 Ν/β
νΝ4)__„ ΗΝ'ί'δ ί^θ 4> ΝΗ 04
327 Α Ο >20 0.15
ΗΝ Λο ΝΗ °4
/
Ν'!, ΗΝ 5 < ° ϊ> ΝΗ 04
328 λ; Α ν / ο^°ζ >20 Ν/ϋ
329 αΛ^— ΗΝ 5 Г ° ζ-χ^Ν %Ν ΝΗ 04 0.17 0.45
Η2Ν^ у νη2
- 133 026656
- 134 026656
335 Μ 0.062 0.050
336 ул Τανη 0.063 0.052
337 Α Λ . -/ ΗΝ—\ 4. Ν /*=\ Ν* Ν X ΙΑ Χ-\ ΓΊΗ ОН 1 0.073 0.021
338 Χ’—Ο, ъ 0.15 0.043
339 4« Α гл 0.005 0.16 0.009
- 135 026656
- 136 026656
- 137 026656
- 138 026656
- 139 026656
- 140 026656
369 Н Ν—N О 0.81 1.9
370 Н Ν—N О 0.28 0.70
371 Окл Л_к^ч^ч 5 й О Π Ν-Ν О 0.43 5.2
372 0Ύ8νι 0 />-ИН 0.16 0.15
373 Ού V. ° Ν-,Ρ^'δ'^ί' ,)-ΝΗ 0.17 0.28
374 СЩ5-,νν.Χ Μ »ι *., Η Ν—Ν ο 0.26 0.47
375 Окл Н^/ч δ Й Ν-Ν о 1Ц- экл7 Η 0.005 0.38 0.041
376 Ού ν °' 3 0.35 0,091
377 °™Г} 0.28 0.10
- 141 026656
- 142 026656
- 143 026656
- 144 026656
- 145 026656
- 146 026656
- 147 026656
410 Ο Α * 0 0.009 0.057
411 НО 0 Υ=/ Ν'Ν 0.22 0.74
412 “У° 0 Ζ-ΝΗ _/~Ζ 3^/γ. , ° χΡχτ-χχ 0.028 0.11
413 ’%<Αχ'-χαλχ Η 0.007 0.045
414 /ЧУЧ'Г-Хл.ХС 0.010 0.058
415 но θ ’<ρ-<χ~Τνυθ ... Η 0.005 0.018
416 силиуЛ’А Η Ν—Ν 0 0.055 0.35
417 0^ΛΝχ5κ^χ-γ3γ·Ν χΑΧ Η Ν—Ν Ο 0.056 0.32
418 0 ΗΝ—Λ ,Ν-Ν __/ ΗΝ—\ X . . Ν ^ΝΗ Υ 0.14 0.32
- 148 026656
- 149 026656
- 150 026656
- 151 026656
- 152 026656
- 153 026656
- 154 026656
- 155 026656
- 156 026656
- 157 026656
- 158 026656
- 159 026656
- 160 026656
- 161 026656
497 Ν-Ν ΗΝ-< к Λ Λ Ν А __1 >· Э 0.004 0.032
498 Ν-Ν % 'Л 0.003 0.017
499 Ν-Μ ην-< χ ~ Ν οχ Ο Υ 0.010 0.19
500 Ν-Ν ο °α 0Α0 0.004 0.029
501 Ν-Ν η,ν А -ΙΓλλ,ν ·. °Α θ^-^Άί' ϊ < 0.004 0.069
- 162 026656
502 ν-ν _/ Ο X Го-0 он 0.007 0.075
503 Ν'Ν оД >κ 3 7 0.008 0.15
504 Ηί*ϊ ,θ Η0^\Χ4;ν^Ν )— 0 7 0.007 0.12
505 НО Ην ζ-/ Η 0.008 0.24
506 У» ο Ч^Чг^ХхлО Η 0.010 0.17
507 ^·4'ν^γ,Ν ά 0.013 0.041
- 163 026656
508 / ΗΝ—< П л „ м /=*\ з-4-Χ/ΧΛν М^н <Хн >° оА-°- ό 0.011 0.020
509 \—» ^=^ΝΗ ЧхЧ-Му° Ох|х- 0.010 0.009
510 Л~ У=о .Р ΗΝ, г-/ \ 3-χ^^_Χ^χΧΝ-Μ „ ην~4 Дг N о V/ ν-ν Μ-νΑ< 0.022 0.094
511 о ι-ζ^-ΖΥ'—4Т ϊ Π 0.58 1.1
512 ,Ν'Ν ηνΉ X _ Λ Ν 0 , 3-4^-γΝ > νη Λ Ν ι4ι н Ο 0.005 0.046
513 ν-ν θ . § ν' ν ) ήανη 7, 'ОН 0.007 0.022
- 164 026656
- 165 026656
- 166 026656
528 И о Λ Άι 0.007 0.044
529 УЛГ I у 0 Ν-Ν —Ύ*Ν'Ν 0 < ΆΧ Η Ρ Α 0.032 0.16
530 λ __/ АЗ о ИН-Р'/И’ Ν-Ν —->% 0 ΑλΑ Η .он χ^ΟΗ 0.055 0.28
531 0 А> Ν—N АА— /хА ιΓ Ν 0 αΛνΑ^ Η Ρ С1 0.006 0.042
532 А х° Ν—Ν ЛА- 0 АЧА Η Α4 Α^ Ρ ) 0.006 0.059
533 0 Ρ Ν—Ν ЛА- '-''Ύ^'Ν 0 Η 3¾¾^ С ) 0.007 0.041
534 ГЛ- Ρ д Ν—Ν '-ЛгЧ ο 0ΛΝΛ. Η 1^ Α^, Ρ I 0.008 0.044
535 А Ν—Ν ΑΑ— '/ΧιΓΝΝ 0 ααα Η С 3 0.007 0.090
- 167 026656
- 168 026656
- 169 026656
- 170 026656
- 171 026656
- 172 026656
562 Ν'Ν ο=< 8 ιΓ 7 ό Λ° 0.003 0.002
563 ν-ν ΗΝ—\ (ί - Λ μ 0 , ) <^ΝΗ Ο °Α 0ито ' А/ 0.003 0.003
564 30—0, 0.004 0.002
565 00 0 Ν—Ν θ' н υρ^υυ Η ίι 0.005 0.013
566 00 Ο Ν—Ν ΥΡνΑΡχζΧ/Ν^ θ ά н αχνααα η τ 0.006 0.015
567 ν-ϋτ-Γ0^—%ιν-ϊ Α о Н/ 0 II 2 1 0.43 0.021
568 У- уч° ν-ν 0^ к цГ'^Хг. Xе Ρ Η ] 0.009 0.028
- 173 026656
569 οβ/ уХ/-— X) Г-О 5 0. X р Н 0.006 0.011
570 '^-^'Ο'Λ'νΧΝ_Α N , χχ Ά А α 0 Р 0.43 0.009
571 х- ρ УЛ °к”. Χ/Ν ·=χχ~~γ>„ X о ΐι X X Η 0.011 0.010
572 Η '-χ^Χ'Κ \ ο Π 1 Г чэ - γ> Α Η 0.003 0.004
573 Η ^°ΥΝΊ / α ν-ν ° Α уХЧх^л ΧΑ ° ί А Α Η 0.004 0,015
574 χΑΑν-χΑ г Η 0.006 0.028
- 174 026656
- 175 026656
- 176 026656
585 О о -ΰ Ν-Μ НмД N АА гГ н р>к г Аз г Аи % ) 0.006 0.070
586 р ν»ϋ о Ό з— 1^ Р Р *ν г н Р А А 0.013 0.031
587 о о7 Ό о Ч ΗΝ-Ч X - л Си ν н *е 0> ) 0.007 0.057
588 \>— О о 0 л N <· лк N Н Ό Ό 0.008 0.27
Ν-Ν ΗΝ—Ρ А оД 8^
589 V/ А 0.004 0.025
и £ Ή>γΝγΆ о 1 )
-Ν-Ν ηνΑ х о4 8 ААт
590 о А 0.007 0.087
н г °γΝγ4 )
- 177 026656
- 178 026656
- 179 026656
- 180 026656
- 181 026656
- 182 026656
614 р /А χν ,__( ΗΝ—\ X л л V? I РзСО,-^ X Χ^Ν^Ο Η ] 0.008 0.082
615 р Г-Ч /-Ν __/ ΗΝ—\ 1 л л V/ 1 % £0 Η -ОСРз 0.009 0.12
616 . р ΥΧ Λ*'Ν У ΗΝ-—( К л л /=\ р-'Х^х'Х/Х V/ % ί -^Ρ’Χ'Ν'Χρ Η ) 0.008 0.13
617 О ζΑ ,ν-ν У ΗΝ-С Х_/\ р3со-к_/ Хи Χί^Ν-Χ Η 0 ΟΜβ ύ 0.005 0.040
618 О /-Л д-м X ΗΝ—\ X л /=\ 'δ-'Χ.-'Χ РзСО-4^ л -Νχ - Хи Η *< С1 ό Э 0.008 0.035
619 Ν-ν ηνΧ м 0. Б^^'1 N У О <Л 0.013 0.15
620 Ν-ν ην4 1 _____Ν о , _> ^ΝΗ Ο °Λ 0.005 0.011
Λχ 0 1 )
- 183 026656
- 184 026656
- 185 026656
- 186 026656
- 187 026656
- 188 026656
- 189 026656
Ρ
659 1- Η 5 η \ ν Λ η Τ' Λ -Ό 0.010 0.058
660 0 «кнм-Χ; р3со-А/ Α>, ОСР, ώ 1Λ° 0.025 0.037
661 ο Α ν-ν аа 1 Λ у/ Ρ Αχ Η ОСР3 ό 0 0.007 0.12
0 ОСР3
662 Α ν~ν ΧηΑ χΛ ρ-Λχ Ρ γΝ γ Ό ^0 0.007 0.055
663 ,0 Ρ Α /X \_( ΗΝ—Κ Λ р-Ά 5 Χυ α^-ν Η ОСР3 Л 0.007 0.089
664 г χα ι +Ό 5 ΑΧ 'ΝΗ 1 0.005 0.060
0 ό
Μ
665 ΑηΑνΤ РзСи<> Α> ΝΗ 1 0.005 0.10
0' ο
Μ
- 190 026656
- 191 026656
671 4> 0' г3со' ΝΗ 1 0.004 0.035
672 б Ν—1 ο 4 _7'(ί Ύ> 0.010 0.045
СЯ X
РзССГ υ
673 \ / ρ Я Д'М ΗΝ-< 1 Λ Ν Г ОСР3 Я 0.006 0.033
0 и Η '0
0 ОСР3
674 г-4. >_( ΗΝ—^ ϊ /\ 3'^^' Μβ5—/ 'Ν Η χθ чэ 0.008 0.024
Я 'ΊΑ
675 ^-Ν ЯА ΝΗ 1 0.040
ο' ί
Р3СО' -Μ
676 ν ζ.. ΊΊ ζ 47 ΝΗ 1 0.030
СГ ί
Р3СО' •V
- 192 026656
677 Ο 5 ίϊ 0.056
678 ό Ύ ΐ 5 αανη аЬ 0.026
679 о ?СР= Λ-Ч ,ν-ν /Ц ΠΝ^Α-ΧΧ^γΝ-Ν ΑΡ Η 0.036
680 о ГРз Ζ-4 Ν-ν Αγ, /=< ΗΝ^3Χ^-^Ύ-ΝίΝ χρι РД-МАО Η 0.033
681 ОСР Г-Ч ,Ν-'Ν Λ 0 X ΑΡ / α^-% 0.019
682 о ?°ρ> Л-Ч Д~М ГЙ 7-ν Μ-Α Η 0.017
683 УЦАху,,, У-Ν ХХн 1/ РзССГ^ 0.024
- 193 026656
- 194 026656
692 4 с Ν Δ ο Р3СО ΝΗ 0.020
Υ ,?-Ν —-Ν II ’м 55
693 Υ^ΝΗ 0.070
Сг ό
Р3СО υ
X Υ V?
694 Ν 9 ο 0* “ΝΗ ϊ 0.029
Р3СО Υ
X Υυ
695 ν-ν Η ΝΗ 1 0.030
ϋ>
РЭСО' Μ
696 °ν Μ .Ν.„, V0 1 0.034
р3соА/
- 195 026656
697 ηνΟν ,„ο 0.050
698 И0'« Ν ΗΝ-\ Γν 5 ^2 Λ 0.098
699 Λϋ1 --Ν ΗΝΛλζ^ν^ I ” ~^ΝΗ 7 ρ3οο·Ά ) 0.12
700 αΧ' (Д. С1 \ί^ΝΗ иЬ 0.17
701 V, 5^^(д .ΐ 0,11
- 196 026656
702 —а Ν Ν—\ 0.31
703 но Р ы /в> ΗΝ-Ч X Л Л Ν XV ΧΧΝΗ ζ 0.012
704 г-А Г>0 'Ν ΗΟίϊΧ СХиН X 0.88
705 Η°χ ,»-» /ί^ΗΝ—< К Ν Ο 4χΝΗ X 0.032
706 Ο '4—' 14
707 о 0СРз Η 0.085
708 оег3 Η 2.8
709 Η 0.14
Пример 3. Исследования эффективности ксенотрансплантата.
Некоторые соединения анализировали на ίη νίνο эффективность в моделях ксенотрансплантата следующим образом.
Самкам 8сШ/Ьд мышей приблизительно 6-недельного возраста имплантировали подкожно в правый бок 5х106 НСТ116 клеток на мышь в объеме 100 мкл стерильного РВ8. Когда опухоли достигали объема 50-100 мм3, мышей рандомизированно распределяли по группам η=10 для введения либо носителя, либо испытываемого соединения при введении два раза в день путем интраперитонеальной инъекции. Опухоли измеряли три раза в неделю с использованием циркулей Вернье и объем опухоли рассчитывали с использованием формулы: Объем = (длинахширина2/2), где длина и ширина представляют собой самые длинные перпендикулярные стороны опухоли. Введение доз продолжали два раза в день до тех пор, пока контрольные опухоли не достигали размера 2000 мм3. Статистические сравнения осуществляли с исполь- 197 026656 зованием 2-стороннего анализа ΑΝΟνΑ с ροδί-критерием Бонферрони.
Фигура показывает, что интраперитонеальное зведение соединения 188 мышам приводит к уменьшению размера опухоли в этой модели ксенотрансплантата НСТ116 карциномы толстой кишки.
Пример 4. Анализ проницаемости Сасо-2.
Клетки Сасо-2 традиционно используют в конфлюентном монослое на фильтре с клеточной культурой. При культивировании в этой формате и в специфических условиях клетки становятся дифференцированными и поляризированными таким образом, что их фенотип морфологически и функционально напоминает энтероциты, выстилающие тонкий кишечник. Клеточный монослой обеспечивает физический и биохимический барьер для проникновения малых молекул, и это широко используют в фармацевтической промышленности как ίη νίίτο модель слизистой оболочки тонкого кишечника человека, для прогнозирования абсорбции перорально вводимых лекарственных средств (НИа1до с1 а1., Сак1гоеп1его1оду, 1989; Аг1нгк5оп. ί. РЬагт. δοΐ., 1990). Взаимосвязь между ίη νίίτο кажущейся проницаемостью (Р-арр) через Сасо-2 монослои и ίη νίνο абсорбцией хорошо известна (Айигккоп с1 а1., ВюсЬет. ВюрЬук. Кек. Сотт., 1991).
Этот анализ использовали для определения двунаправленной проницаемости соединений по настоящему изобретению через Сасо-2 клеточные монослои. Клетки Сасо-2 выращивали в конфлюентных монослоях, где среды как апикальной (А), так и базолатеральной (В) сторон имели рН 7,4. Соединения вводили при дозе при 1 мкМ в присутствии 200 мкМ Ьисйег Желтого, на апикальной стороне (А^В) или базолатеральной стороне В^А) для оценки в двух повторах. Образцы из А и В сторон брали по прошествии 120 мин воздействия и концентрацию соединения (указана как процент восстановления) определяли с использованием общего ЬС-Μδ/Μδ способа с минимальной четырех-точечной калибровочной кривой.
Потенциал абсорбции соединений классифицировали либо как Низкий (Р-арр<1х10-5 см/с) либо Высокий (Р-арр>1х10-6 см/с). Отношение вытекающего потока рассчитывали как (Рарр В^А)/(Рарр А^В), при этом значимымыми отношениями вытекающего потока считались отношения больше чем или равные 3, когда Рарр (В^А) больше чем или равен 1 х 10-6 см/с. Результаты для некоторых соединений по настоящему изобретению представлены в табл. 3.
- 198 026656
Таблица 3
Результаты Сасо-2 проницаемости
Соед. Направ- ление Восста- новление (%) Рарр (среди.) Отно- шение вытека -юще го потока Класси’ фикация проница -емости Значимый вытека- ющий поток
533 А - В 41 4,94 7,6 Высокая Да
В - А 52 37,5
585 А - В 42 7,52 3,1 Высокая Да
В А 53 23,4
616 А - В 65 8,23 6,0 Высокая Да
В - А 76 49,5
295 А - В 39 8,17 7,3 Высокая Да
В - А 96 59,8
313 А - В 73 2,45 18 Высокая Да
В - А 82 44,5
339 А - В 73 2,39 17 Высокая Да
В - А 80 41,6
354 А -» В 117 1,38 33 Высокая Да
В - А 101 45,0
436 А - В 44 3,75 Высокая Да
В - А 57 24,7
660 А - В 56 0,61 з, 9 Низкая Да
В А 68 2,37
670 А - В 70 9,64 6,2 Высокая Да
В А 72 59,6
679 А -. В 34 7,59 2,6 Высокая Ко
В - А 42 19,6
447 А - В 71 7,76 3,5 Высокая Да
В - А 56 27,2
703 А -> В 51 6,26 6, 6 Высокая Да
В . А 66 41,0
705 А -» В 60 8,52 6,0 Высокая Да
В -> А 67 51, 0 |
Пример 5. Растворимость.
Примерно 1-мг порции испытываемого соединения объединяли с 120 мкл растворителя в лунках 96x2 мл полипропиленового планшета. Планшет подвергали интенсивному вихревому перемешиванию при комнатной температуре (~20°С) в течение 18 ч и каждую лунку контролировали визуально для определения нерастворимого твердого вещества; в лунки, не содержащие никакого визуально определяемого твердого вещества, загружали дополнительное количество твердого испытываемого соединения и осуществляли вихревое перемешивание еще в течение 6 ч при комнатной температуре, после этого все лунки показали видимое твердое вещество. Содержимое всех лунок затем фильтровали через 0,45 мкм СНР фильтровальный планшет с получением прозрачных фильтратов. 5 мкл каждого фильтрата разбавляли в 100 мкл ΌΜΡ и осуществляли вихревое перемешивание с получением образцов для ВЭЖХ. Дублированные стандарты для количественного анализа для каждого испытываемого соединения получали путем разбавления отвешенных порций твердого испытываемого соединения в отмеренных объемах ΌΜΡ. 2 мкл каждого ВЭЖХ образца и стандарта для количественного анализа анализировали при помощи ВЭЖХ с использованием способа, в общем виде описанного в табл. 4. Концентрации растворенных испытываемых соединений рассчитывали по отношению площади пика против соответствующих стандартов для количественного определения. Результаты растворимости представлены в табл. 5.
- 199 026656
Таблица 4
Описание ВЭЖХ способа
Оборудование ЗЬхтадги Ргош±пепсе иРЬС υν/νίδ детектором с диодно-матричным
Колонка УИК Золота С8(2), 3,5 мкм, 2,1x50 мм
Температура 40°С
колонки
Подвижная 0,1% (об/об) муравьиной кислоты в воде
фага А
Подвижная 0,1% (об/об) муравьиной кислоты в ацетонитриле
фаза В
Скорость 0,4 мл/мин
потока
Градиент Время (мин) % Подвижной фазы В
0 20
8 100
8,5 100
8,6 20
9,6 завершение
Таблица 5
Измеренная растворимость
Растворитель Растворимость (мг/мл)
1 295 402 585
вода < 0,002 < 0,002 < 0,004 < 0,002
0,9% ЫаС1 < 0,002 < 0,002 < 0,004 < 0,002
0,1 М НС1 < 0,002 0,003 < 0,004 < 0,002
50 мМ СИ рН 2,3 < 0,002 < 0,002 < 0,004 < 0,002
50 мМ С1Ъ рН 3,3 < 0,002 < 0,002 < 0,004 < 0,002
50 мМ СлЛ рН 4,4 < 0,002 < 0,002 < 0,004 < 0,002
50 мМ С1Ь рН 5,4 < 0,002 < 0,002 < 0,004 < 0,002
РВ5 < 0,002 < 0,002 < 0,004 < 0,002
0,1 М ЫаОН 14,420 0,268 < 0,004 0,192
10% Р380 / 50 мМ сП 0,050 0,027 0,153 0,261
10% СгЕЬ / 50 мМ сП; 0,076 0,055 0,157 0,228
- 200 026656
20% ЗВЕСО / 50 мМ οίΐ 0,046 0,090 0,019 0,125
20% НРВСО / 50 мМ οΐΐ. 0,042 0,167 0,056 0,327
Лабразол 0,258 0,918 31,032 5,004
Каприол РЕЙС 0,042 1,540 11,210 1,780
Каприол 90 0,081 0,215 13,676 1, 744
масло канола < 0,002 < 0,002 0,529 0,072
РЕС400 0,451 1,644 30,179 3,944
РС 0,048 0,234 1,365 1,422
ЕРОН 0,040 0,083 2,958 1,991
Растворитель Растворимость (мт/ мл)
670 447 703
вода 0,007 < 0,004 < 0,004
0,9% КаС1 < 0,002 0,005 < 0,004
0,1 М НС1 0,005 < 0,004 < 0,004
50 мМ СП; рН 2,3 0,066 < 0,004 < 0,004
50 мМ С1Р рН 3,3 0,003 < 0,004 < 0,004
50 мМ СП; рН 4,4 < 0,002 с 0,004 < 0,004
50 мМ СИ рН 5,4 < 0,002 < 0,004 < 0,004
РВ5 < 0,002 < 0,004 < 0,004
0,1 М ЫаОН 0,227 0,192 0,656
10% Р380 / 50 мМ сП 1,204 0,851 0,378
10% СгЕЬ / 50 мМ сП; 0,458 0,732 0,309
20% ЗВЕСО / 50 мМ с1Р 5,256 2,718 0,476
20% НРВСО / 50 мМ С1Р 9,685 2,177 0,651
Лабразол 5,042 77,164 20,727
Каприол РСМС 1,519 7,916 3,683
Каприол 90 1,974 11,114 7,409
масло канола 0,012 0,071 0,014
РЕС400 9,901 57,334 22,419
РС 2,569 8,265 4,698
ЕРОН 0,964 3,921 2,645
Включение посредством ссылки
Все публикации и патенты, указанные в настоящем описании, включены в настоящее описание посредством ссылки во всей их полноте, как если бы каждая отдельная публикация или патент были специально и индивидуально указаны как .включенные посредством ссылки. В случае конфликта, преимущество имеет настоящая заявка, включая любые определении, содержащиеся в ней.
- 201 026656
Эквиваленты.
Хотя были обсуждены конкретные варианты воплощения настоящего изобретения, представленное выше описание изобретения является иллюстративным, а не ограничивающим. Многие варианты настоящего изобретения будут очевидны для специалистов в данной области при ознакомлении с этим описанием и формулой изобретения, представленной ниже. Полный объем настоящего изобретения должен определяться со ссылкой на формулу изобретения вместе с полным объемом ее эквивалентов и на описание изобретения вместе с такими вариантами.

Claims (29)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Применение соединения формулы (Ι) для лечения рака или иммунологического или неврологического заболевания, где соединение формулы (I) представляет собой или его фармацевтически приемлемой соли, где Ь представляет собой СН28СН2, СН2СН2, СН2СН2СН2, СН2, СН28, 8СН2, СН2ИНСН2, СН=СН или >А<, где любой атом водорода СН или СН2 структурной единицы может быть заменен (С1С6)алкилом или (С1-С6)алкокси, любой атом водорода ΝΉ структурной единицы может быть заменен (С1С6)алкилом и любой атом водорода СН2 структурной единицы группы СН2СН2, СН2СН2СН2 или СН2 может быть заменен гидрокси группой;
    один из X представляет собой 8, а другой представляет собой СН=СН, где любой атом водорода СН структурной единицы может быть заменен (С1-С6)алкилом;
    Υ, независимо для каждого случая, представляет собой Н или СН2О(СО)К7;
    К7, независимо для каждого случая, представляет собой Н или замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, (С1-С6)алкокси, амино(С1-С6)алкил, (С1-С6)алкиламино(С1-С6)алкил, гетероциклил(С1-С6)алкил или гетероциклил(С1-С6)алкокси;
    Ζ представляет собой Н или К3(СО);
    Κι и К2, каждый независимо, представляют собой Н, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси или гидрокси;
    К3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1С6)алкокси, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси, гетероарилокси(С1-С6)алкил или С(К8)(К9)(К10), Ν(Κ4)(Κ5) или ОК6, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7;
    К4 и К5, каждый независимо, представляют собой Н или замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, ацил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7;
    К6, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7;
    К8, К9 и К10, каждый независимо, представляют собой Н или замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, гидрокси, гидрокси(С1-С6)алкил, амино, ациламино, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1С6)алкил, (С1-С6)алкоксикарбонил, (С1-С6)алкоксикарбониламино, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси, (С1С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил или
    К8 и К9 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют (С5-С12)карбоциклическую или гетероциклическую кольцевую систему, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7;
    по меньшей мере два из К8, К9 и К10 являются отличными от Н;
    каждый гетероциклил или гетероциклическая кольцевая система представляют собой 3-10-членное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, выбранных из азота, кислорода и серы;
    каждый гетероарил представляет собой 5-7-членное ароматическое кольцо, содержащее по мень- 202 026656 шей мере один гетероатом, выбранный из азота, кислорода и серы;
    когда (С1-С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, (С1-С6)алкиламино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероциклил(С1-С6)алкокси, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил являются замещенными, они замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, гидроксила, карбоксила, (С1-С6)алкоксикарбонила, формила, ацила, тиоэфира, тиоацетата, тиоформиата, (С1-С6)алкоксила, фосфорила, фосфата, фосфоната, фосфината, амино, амидо, амидина, имина, циано, нитро, азида, сульфгидрила, (С1-С6)алкилтио, сульфата, сульфоната, сульфамоила, сульфонамидо, сульфонила, гетероциклила, (С5-С7)арил(С1-С6)алкила, (С5-С7)арила и гетероарила, где гетероциклил и гетероарил определены выше.
  2. 2. Применение по п.1, где Ь представляет собой СН28СН2, СН2СН2, СН28 или 8СН2.
  3. 3. Применение по п.1, где Ь представляет собой СН2СН2.
  4. 4. Применение по любому из пп.1-3, где Υ представляет собой Н.
  5. 5. Применение по п.1, где Ь представляет собой СН28СН2, СН2СН2, СН28 или 8СН2, Υ представляет собой Н, Ζ представляет собой К3(СО), К! и К2, каждый, представляют собой Н, К3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, гетероарил(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил или гетероциклоалкил и, необязательно, каждый из присутствующих К3 имеет одинаковые значения.
  6. 6. Применение по любому из пп.1-3, где каждый из К! и К2 представляет собой Н.
  7. 7. Применение по любому из пп.1-3, где Ζ представляет собой К3(СО), где, необязательно, каждый из присутствующих К3 имеет отличные друг от друга значения.
  8. 8. Применение по любому из пп.1-3, где К3, независимо в каждом случае, представляет собой замещенный или незамещенный (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, гетероарил(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил или гетероциклоалкил.
  9. 9. Применение по п.1, где Ь представляет собой СН2СН2, Υ представляет собой Н, Ζ представляет собой К3(СО), К, и К2, каждый, представляют собой Н, К3, независимо для каждого случая, представляет собой (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, гетероарил(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил или гетероциклоалкил и, необязательно, каждый из присутствующих К3 имеет одинаковые значения.
  10. 10. Фармацевтическая композиция для лечения рака или иммунологического или неврологического заболевания, включающая один или несколько фармацевтически приемлемых эксципиентов и соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, где Ь представляет собой СН28СН2, СН2СН2, СН2СН2СН2, СН2, СН28, 8СН2, СН2ИНСН2, СН=СН или А А, где любой атом водорода СН или СН2 структурной единицы может быть заменен (0С6)алкилом или (С1-С6)алкокси, любой атом водорода ΝΉ структурной единицы может быть заменен (СгС6)алкилом и любой атом водорода СН2 структурной единицы группы СН2СН2, СН2СН2СН2 или СН2 может быть заменен гидрокси группой;
    один из X представляет собой 8, а другой представляет собой СН=СН, где любой атом водорода СН структурной единицы может быть заменен (С1-С6)алкилом;
    Υ, независимо для каждого случая, представляет собой Н или СН2О(СО)К7;
    К7, независимо для каждого случая, представляет собой Н или замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, (С1-С6)алкокси, амино(С1-С6)алкил, (С1-С6)алкиламино(С1-С6)алкил, гетероциклил(С1-С6)алкил или гетероциклил(С1-С6)алкокси;
    Ζ представляет собой Н или К3(СО);
    К, и К2, каждый независимо, представляют собой Н, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси или гидрокси;
    К3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1С6)алкокси, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси, гетероарилокси(С1-С6)алкил или С(К8)(К9)(К10), Ν(Κ4)(Κ5) или ОК6, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7;
    К4 и К5, каждый независимо, представляют собой Н или замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, ацил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил,
    - 203 026656 гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7;
    Кб, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7;
    К8, К9 и К10, каждый независимо, представляют собой Н или замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, гидрокси, гидрокси(С1-С6)алкил, амино, ациламино, амино(С1-С6)алкил, ациламино(ЦС6)алкил, (С1-С6)алкоксикарбонил, (С1-С6)алкоксикарбониламино, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси, (С1С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил или
    К8 и К9 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют (С5-С12)карбоциклическую или гетероциклическую кольцевую систему, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7;
    по меньшей мере два из К8, К9 и К10 являются отличными от Н;
    каждый гетероциклил или гетероциклическая кольцевая система представляют собой 3-10-членное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, выбранных из азота, кислорода и серы;
    каждый гетероарил представляет собой 5-7-членное ароматическое кольцо, содержащее по меньшей мере один гетероатом, выбранный из азота, кислорода и серы;
    когда (С1-С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, (С1-С6)алкиламино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероциклил(С1-С6)алкокси, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил являются замещенными, они замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, гидроксила, карбоксила, (С1-С6)алкоксикарбонила, формила, ацила, тиоэфира, тиоацетата, тиоформиата, (С1-С6)алкоксила, фосфорила, фосфата, фосфоната, фосфината, амино, амидо, амидина, имина, циано, нитро, азида, сульфгидрила, (С1-С6)алкилтио, сульфата, сульфоната, сульфамоила, сульфонамидо, сульфонила, гетероциклила, (С5-С7)арил(С1-С6)алкила, (С5-С7)арила и гетероарила, где гетероциклил и гетероарил определены выше.
  11. 11. Фармацевтическая композиция по п.10, где Ь представляет собой СН2§СН2, СН2СН2, СН2§ или 8СН2.
  12. 12. Фармацевтическая композиция по п.10, где Ь представляет собой СН2СН2.
  13. 13. Фармацевтическая композиция по п.10, где Ь представляет собой СН2СН2, СН2§ или §СН2, Υ представляет собой Н, Ζ представляет собой К3(СО), Κι и К2, каждый, представляют собой Н, К3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, гетероарил(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил или гетероциклоалкил и, необязательно, каждый из присутствующих К3 имеет одинаковые значения.
  14. 14. Фармацевтическая композиция по п.10, где Ь представляет собой СН2§СН2, Υ представляет собой Н, Ζ представляет собой К3(СО), К1 и К2, каждый, представляют собой Н, К3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный гетероарил(С1-С6)алкил, (С3С8)циклоалкил или гетероциклоалкил и, необязательно, каждый из присутствующих К3 имеет одинаковые значения.
  15. 15. Фармацевтическая композиция по п.10, где Υ представляет собой Н.
  16. 16. Фармацевтическая композиция по п.10, где каждый из Κι и К2 представляет собой Н.
  17. 17. Фармацевтическая композиция по п.10, где Ζ представляет собой К3(СО), где, необязательно, каждый из присутствующих К3 имеет отличные друг от друга значения.
  18. 18. Фармацевтическая композиция по п.10, где К3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, гетероарил(С1-С6)алкил, (С3С8)циклоалкил или гетероциклоалкил.
  19. 19. Фармацевтическая композиция по п.10, где Ь представляет собой СН2СН2, Υ представляет собой Н, Ζ представляет собой К3(СО), К1 и К2, каждый, представляют собой Н, К3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, гетероарил(ЦС6)алкил, (С3-С8)циклоалкил или гетероциклоалкил и, необязательно, каждый из присутствующих К3 имеет одинаковые значения.
  20. 20. Соединение формулы (I)
    - 204 026656 или его фармацевтически приемлемая соль, где Ь представляет собой СН28СН2, СН2СН2, СН2СН2СН2, СН2, СН28, 8СН2, СН;\НСН;. СН=СН или Τν ?ч, где любой атом водорода СН или СН2 структурной единицы может быть заменен (С1С6)алкилом или (С1-С6)алкокси, любой атом водорода ΝΉ структурной единицы может быть заменен (С1С6)алкилом и любой атом водорода СН2 структурной единицы группы СН2СН2, СН2СН2СН2 или СН2 может быть заменен гидрокси группой;
    один из X представляет собой 8, а другой представляет собой СН=СН, где любой атом водорода СН структурной единицы может быть заменен (С1-С6)алкилом;
    Υ, независимо для каждого случая, представляет собой Н или СН2О(СО)К7;
    К7, независимо для каждого случая, представляет собой Н или замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, (С1-С6)алкокси, амино(С1-С6)алкил, (С1-С6)алкиламино(С1-С6)алкил, гетероциклил(С1-С6)алкил или гетероциклил(С1-С6)алкокси;
    Ζ представляет собой Н или К3(СО);
    К1 и К2, каждый независимо, представляют собой Н, (С1-С6)алкил, (С1-С6)алкокси или гидрокси;
    К3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1С6)алкокси, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси, гетероарилокси(С1-С6)алкил или С(К8)(К9)(К10), Ν(Κ4)(Κ5) или ОК6, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7;
    К4 и К5, каждый независимо, представляют собой Н или замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, ацил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7;
    Кб, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7; и
    К8, К9 и К10, каждый независимо, представляют собой Н или замещенный или незамещенный (С1С6)алкил, гидрокси, гидрокси(С1-С6)алкил, амино, ациламино, амино(С1-С6)алкил, ациламино(С1С6)алкил, (С1-С6)алкоксикарбонил, (С1-С6)алкоксикарбониламино, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси, (С1С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3-С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил или
    К8 и К9 вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют (С5-С12)карбоциклическую или гетероциклическую кольцевую систему, где любая свободная гидроксильная группа может присутствовать как сложноэфирная группа С(О)К7; и по меньшей мере два из К8, К9 и К10 являются отличными от Н;
    каждый гетероциклил или гетероциклическая кольцевая система представляют собой 3-10-членное кольцо, содержащее 1-4 гетероатома, выбранных из азота, кислорода и серы; и каждый гетероарил представляет собой 5-7-членное ароматическое кольцо, содержащее по меньшей мере один гетероатом, выбранный из азота, кислорода и серы;
    когда (С1-С6)алкил, гидрокси(С1-С6)алкил, амино(С1-С6)алкил, (С1-С6)алкиламино(С1-С6)алкил, ациламино(С1-С6)алкил, (С2-С6)алкенил, (С1-С6)алкокси, (С1-С6)алкокси(С1-С6)алкил, (С5-С7)арил, (С5С7)арил(С1-С6)алкил, (С5-С7)арилокси, (С5-С7)арилокси(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил, (С3С8)циклоалкил(С1-С6)алкил, гетероциклил, гетероциклил(С1-С6)алкил, гетероциклил(С1-С6)алкокси, гетероарил, гетероарил(С1-С6)алкил, гетероарилокси или гетероарилокси(С1-С6)алкил являются замещенными, они замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, гидроксила, карбоксила, (С1-С6)алкоксикарбонила, формила, ацила, тиоэфира, тиоацетата, тиоформиата, (С1-С6)алкоксила, фосфорила, фосфата, фосфоната, фосфината, амино, амидо, амидина, имина, циано, нитро, азида, сульфгидрила, (С1-С6)алкилтио, сульфата, сульфоната, сульфамоила, сульфонамидо, сульфонила, гетероциклила,
    - 205 026656 (С5-С7)арил(С1-С6)алкила, (С5-С7)арила и гетероарила, где гетероциклил и гетероарил определены выше.
  21. 21. Соединение по п.20, где Ь представляет собой СН2§СН2, СН2СН2, СН2§ или §СН2.
  22. 22. Соединение по п.20, где Ь представляет собой СН2СН2.
  23. 23. Соединение по любому из пп.20-22, где Υ представляет собой Н.
  24. 24. Соединение по п.20, где Ь представляет собой СН2СН2, СН2§ или §СН2, Υ представляет собой Н, Ζ представляет собой К3(СО), К! и К2, каждый, представляют собой Н, К3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, гетероарил(С1С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил или гетероциклоалкил и, необязательно, каждый из присутствующих К3 имеет одинаковые значения.
  25. 25. Соединение по п.20, где Ь представляет собой СН2§СН2, Υ представляет собой Н, Ζ представляет собой К3(СО), Κι и К2, каждый, представляют собой Н, К3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный гетероарил(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил или гетероциклоалкил и, необязательно, каждый из присутствующих К3 имеет одинаковое значение.
  26. 26. Соединение по любому из пп.20-22, где каждый из К1 и К2 представляет собой Н.
  27. 27. Соединение по любому из пп.20-22, где Ζ представляет собой К3(СО), где, необязательно, каждый из присутствующих К3 имеет отличные друг от друга значения.
  28. 28. Соединение по любому из пп.20-22, где К3, независимо в каждом случае, представляет собой замещенный или незамещенный (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, гетероарил(С1-С6)алкил, (С3-С8)циклоалкил или гетероциклоалкил.
  29. 29. Соединение по п.20, где Ь представляет собой СН2СН2, Υ представляет собой Н, Ζ представляет собой К3(СО), Κι и К2, каждый, представляют собой Н, К3, независимо для каждого случая, представляет собой замещенный или незамещенный (С5-С7)арил(С1-С6)алкил, гетероарил(С1-С6)алкил, (С3С8)циклоалкил или гетероциклоалкил и, необязательно, каждый из присутствующих К3 имеет одинаковые значения.
EA201491012A 2011-11-21 2012-11-19 Гетероциклические ингибиторы глютаминазы EA026656B1 (ru)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161562266P 2011-11-21 2011-11-21
US201261665370P 2012-06-28 2012-06-28
US201261727195P 2012-11-16 2012-11-16
PCT/US2012/065816 WO2013078123A1 (en) 2011-11-21 2012-11-19 Heterocyclic inhibitors of glutaminase

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201491012A1 EA201491012A1 (ru) 2014-12-30
EA026656B1 true EA026656B1 (ru) 2017-05-31

Family

ID=48470227

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201692166A EA201692166A1 (ru) 2011-11-21 2012-11-19 Гетероциклические ингибиторы глютаминазы
EA201491012A EA026656B1 (ru) 2011-11-21 2012-11-19 Гетероциклические ингибиторы глютаминазы

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201692166A EA201692166A1 (ru) 2011-11-21 2012-11-19 Гетероциклические ингибиторы глютаминазы

Country Status (26)

Country Link
EP (2) EP2782570B1 (ru)
JP (3) JP6031527B2 (ru)
KR (2) KR20190127971A (ru)
CN (2) CN104220070B (ru)
AR (1) AR090398A1 (ru)
AU (1) AU2012340866B2 (ru)
BR (1) BR112014012129A8 (ru)
CA (1) CA2856386C (ru)
CY (1) CY1122707T1 (ru)
DK (1) DK2782570T3 (ru)
EA (2) EA201692166A1 (ru)
ES (1) ES2761866T3 (ru)
HK (1) HK1204768A1 (ru)
HR (1) HRP20192144T1 (ru)
HU (1) HUE047642T2 (ru)
IL (2) IL232665A0 (ru)
LT (1) LT2782570T (ru)
MX (1) MX362550B (ru)
PL (1) PL2782570T3 (ru)
PT (1) PT2782570T (ru)
RS (1) RS59705B1 (ru)
SG (2) SG11201402305WA (ru)
SI (1) SI2782570T1 (ru)
TW (1) TWI585084B (ru)
WO (1) WO2013078123A1 (ru)
ZA (2) ZA201404518B (ru)

Families Citing this family (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8604016B2 (en) 2011-11-21 2013-12-10 Calithera Biosciences Inc. Heterocyclic inhibitors of glutaminase
ES2690829T3 (es) 2012-09-17 2018-11-22 Agios Pharmaceuticals, Inc. Uso de e-cadherina y vimentina para la selección de pacientes que responden al tratamiento
WO2014078645A1 (en) * 2012-11-16 2014-05-22 Calithera Biosciences, Inc. Heterocyclic glutaminase inhibitors
EA029531B1 (ru) 2012-11-21 2018-04-30 Аджиос Фармасьютикалз, Инк. Соединения, ингибирующие глутаминазу, и содержащие эти соединения фармацевтические композиции и их применение
US9029531B2 (en) 2012-11-22 2015-05-12 Agios Pharmaceuticals, Inc. Compounds and their methods of use
WO2014079011A1 (en) * 2012-11-22 2014-05-30 Agios Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds for inhibiting glutaminase and their methods of use
CA2892817A1 (en) * 2012-12-03 2014-06-12 Calithera Biosciences Inc. Treatment of cancer with heterocyclic inhibitors of glutaminase
US9457016B2 (en) 2013-08-29 2016-10-04 New York University Methods for treating polycystic kidney disease
WO2015061432A1 (en) * 2013-10-25 2015-04-30 Calithera Biosciences, Inc. Treatment of viral infections with inhibitors of glutaminase
KR20160100407A (ko) 2014-01-06 2016-08-23 리젠 파마슈티컬스 소시에떼 아노님 신규한 글루타미나제의 저해제
CN103880777B (zh) * 2014-03-06 2015-12-30 陕西科技大学 一种制备双噻二唑二胺的方法
EP3116872A4 (en) * 2014-03-14 2017-08-30 Calithera Biosciences, Inc. Combination therapy with glutaminase inhibitors
MX2016012244A (es) * 2014-03-21 2017-05-08 Agios Pharmaceuticals Inc Compuestos y sus metodos de uso.
JP6574203B2 (ja) 2014-04-30 2019-09-11 ファイザー・インク シクロアルキル結合ジヘテロ環誘導体
GB201409624D0 (en) * 2014-05-30 2014-07-16 Astrazeneca Ab 1,3,4-thiadiazole compounds and their use in treating cancer
MX2016016364A (es) 2014-06-13 2017-04-06 Calithera Biosciences Inc Terapia de combinacion con inhibidores de glutaminasa.
AU2015283850B2 (en) 2014-07-03 2020-06-04 Board Of Regents, University Of Texas System GLS1 inhibitors for treating disease
US10660861B2 (en) * 2014-07-09 2020-05-26 The Johns Hopkins University Glutaminase inhibitor discovery and nanoparticle-enhanced delivery for cancer therapy
SG11201700816YA (en) * 2014-08-07 2017-02-27 Calithera Biosciences Inc Crystal forms of glutaminase inhibitors
US10245254B2 (en) 2014-10-03 2019-04-02 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Glutaminase inhibitors
CN107921031A (zh) * 2015-03-30 2018-04-17 卡利泰拉生物科技公司 给予谷氨酰胺酶抑制剂的方法
KR20170132333A (ko) 2015-04-06 2017-12-01 칼리테라 바이오사이언시즈, 인코포레이티드 글루타미나제 억제제에 의한 폐암의 치료
ES2794868T3 (es) 2015-06-30 2020-11-19 Univ Texas Inhibidores de GLS1 para el tratamiento de enfermedades
SG11201802830QA (en) * 2015-10-05 2018-05-30 Calithera Biosciences Inc Combination therapy with glutaminase inhibitors and immuno-oncology agents
GB201520959D0 (en) 2015-11-27 2016-01-13 Astrazeneca Ab And Cancer Res Technology Ltd Bis-pyridazine compounds and their use in treating cancer
TW201731511A (zh) * 2015-11-30 2017-09-16 阿斯特捷利康公司 １，３，４-噻二唑化合物及其在治療癌症中之用途
TW201730188A (zh) * 2015-11-30 2017-09-01 阿斯特捷利康公司 1,3,4-噻二唑化合物及其在治療癌症中之用途
US10323028B2 (en) * 2015-11-30 2019-06-18 Astrazeneca Ab 1,3,4-thiadiazole compounds and their use in treating cancer
CN108602782B (zh) 2015-12-22 2022-06-17 德克萨斯大学系统董事会 N-甲基-1h-1,2,3-三唑-4-甲酰胺化合物的盐形式和多晶型物
JP2019524852A (ja) 2016-08-25 2019-09-05 キャリセラ バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド グルタミナーゼ阻害剤を用いる併用療法
BR112019003533A2 (pt) 2016-08-25 2019-05-21 Calithera Biosciences Inc. terapia de combinação com inibidores de glutaminase
EP3576726A1 (en) 2017-02-06 2019-12-11 Massachusetts Institute Of Technology Methods and products related to glutaminase inhibitors
CN107137401A (zh) * 2017-03-28 2017-09-08 刘纪君 一种治疗产后抑郁症的药物组合物
CN106860460B (zh) * 2017-03-29 2019-04-23 上海市第一人民医院 谷氨酰胺酶抑制剂cb-839在制备治疗雌激素敏感型子宫内膜癌的药物中的应用
ES2903182T3 (es) 2017-06-13 2022-03-31 Medshine Discovery Inc Compuesto como inhibidor GLS1
US10722487B2 (en) 2017-10-18 2020-07-28 Board Of Regents, The University Of Texas System Glutaminase inhibitor therapy
WO2020078350A1 (zh) * 2018-10-16 2020-04-23 南京明德新药研发有限公司 噻二唑衍生物及其作为gls1抑制剂的应用
CN110746416A (zh) * 2019-09-05 2020-02-04 中国药科大学 含有三氮唑结构的谷氨酰胺酶gls1抑制剂或其可药用的盐、其制备方法及用途
KR102649592B1 (ko) * 2021-08-18 2024-03-20 한국화학연구원 신규한 마크로사이클 화합물, 이의 제조방법, 이를 유효성분으로 포함하는 암 또는 자가면역질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6451828B1 (en) * 2000-08-10 2002-09-17 Elan Pharmaceuticals, Inc. Selective inhibition of glutaminase by bis-thiadiazoles
WO2012006506A1 (en) * 2010-07-09 2012-01-12 Massachusetts Institute Of Technology Metabolic gene, enzyme, and flux targets for cancer therapy

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4172896A (en) 1978-06-05 1979-10-30 Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd. Methane-sulfonamide derivatives, the preparation thereof and composition comprising the same
GB9217295D0 (en) 1992-08-14 1992-09-30 Wellcome Found Controlled released tablets
US5358970A (en) 1993-08-12 1994-10-25 Burroughs Wellcome Co. Pharmaceutical composition containing bupropion hydrochloride and a stabilizer
US5541231A (en) 1993-07-30 1996-07-30 Glaxo Wellcome Inc. Stabilized Pharmaceutical
GB9315856D0 (en) 1993-07-30 1993-09-15 Wellcome Found Stabilized pharmaceutical
WO1999006023A1 (en) 1997-07-29 1999-02-11 Alcon Laboratories, Inc. Ophthalmic compositions containing galactomannan polymers and borate
US6310093B1 (en) 1997-08-29 2001-10-30 Elan Pharmaceuticals, Inc. Method of preventing neuronal death
CA2318920A1 (en) 1998-01-29 1999-08-05 James W. Young Pharmaceutical uses of optically pure (-)-bupropion
US8889112B2 (en) 1999-09-16 2014-11-18 Ocularis Pharma, Llc Ophthalmic formulations including selective alpha 1 antagonists
US6933289B2 (en) 2003-07-01 2005-08-23 Allergan, Inc. Inhibition of irritating side effects associated with use of a topical ophthalmic medication
DK1654002T4 (da) 2003-08-07 2014-02-17 Allergan Inc Sammensætninger til fremføring af terapeutiske midler til øjnene
US20050059744A1 (en) 2003-09-12 2005-03-17 Allergan, Inc. Methods and compositions for the treatment of pain and other alpha 2 adrenergic-mediated conditions
EP2183232B1 (en) * 2007-08-02 2013-03-06 Amgen, Inc Pi3 kinase modulators and methods of use
JP5529843B2 (ja) 2008-03-27 2014-06-25 グリュネンタール・ゲゼルシャフト・ミト・ベシュレンクテル・ハフツング 置換シクロヘキシルジアミン
US20130109643A1 (en) * 2010-05-10 2013-05-02 The Johns Hopkins University Metabolic inhibitor against tumors having an idh mutation

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6451828B1 (en) * 2000-08-10 2002-09-17 Elan Pharmaceuticals, Inc. Selective inhibition of glutaminase by bis-thiadiazoles
WO2012006506A1 (en) * 2010-07-09 2012-01-12 Massachusetts Institute Of Technology Metabolic gene, enzyme, and flux targets for cancer therapy

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DeLaBARRE B. et al., "Full-Length Human Glutaminase in Complex with an Allosteric Inhibitor", Biochemistry, 2011, Vol. 50, Pages 10764-10770, Figure 1 page 10765, Figure 4 page 10768, Abstract, paragraph 1 page 10764 and last paragraph page 10769 *
ROBINSON M.M. et al., "Novel mechanism of inhibition of rat kidney-type glutaminase by bis-2-(5-phenylacetamido-1,2,4-thiadiazol-2-yl)ethyl sulfide (BPTES)", Biochem. J., 2007, Vol. 406, pages 407-414, Figure 1, page 408, page 413, last paragraph and the Abstract *

Also Published As

Publication number Publication date
DK2782570T3 (da) 2019-12-09
ZA201404518B (en) 2017-04-26
AU2012340866A1 (en) 2014-06-26
JP6577623B2 (ja) 2019-09-18
SI2782570T1 (sl) 2020-02-28
CA2856386C (en) 2022-05-31
CA2856386A1 (en) 2013-05-30
PT2782570T (pt) 2019-12-17
IL259958B (en) 2021-06-30
ES2761866T3 (es) 2020-05-21
JP6031527B2 (ja) 2016-11-24
SG10201607685SA (en) 2016-11-29
JP6329226B2 (ja) 2018-05-23
EP3620162A1 (en) 2020-03-11
MX362550B (es) 2019-01-24
KR102042290B1 (ko) 2019-11-07
AR090398A1 (es) 2014-11-12
HK1204768A1 (en) 2015-12-04
CY1122707T1 (el) 2021-03-12
CN108785305A (zh) 2018-11-13
BR112014012129A2 (pt) 2017-06-13
EA201491012A1 (ru) 2014-12-30
IL232665A0 (en) 2014-07-31
ZA201601655B (en) 2017-06-28
HUE047642T2 (hu) 2020-05-28
JP2018111729A (ja) 2018-07-19
CN104220070A (zh) 2014-12-17
LT2782570T (lt) 2020-01-10
CN108785305B (zh) 2021-10-29
BR112014012129A8 (pt) 2017-06-20
EP2782570A4 (en) 2015-05-27
EP2782570A1 (en) 2014-10-01
TW201329071A (zh) 2013-07-16
AU2012340866B2 (en) 2017-03-16
KR20150000866A (ko) 2015-01-05
JP2014533699A (ja) 2014-12-15
SG11201402305WA (en) 2014-06-27
IL259958A (en) 2018-07-31
PL2782570T3 (pl) 2020-04-30
TWI585084B (zh) 2017-06-01
NZ625913A (en) 2015-12-24
KR20190127971A (ko) 2019-11-13
EA201692166A1 (ru) 2017-07-31
HRP20192144T1 (hr) 2020-02-21
MX2014005928A (es) 2014-08-27
RS59705B1 (sr) 2020-01-31
WO2013078123A1 (en) 2013-05-30
EP2782570B1 (en) 2019-09-18
JP2016210810A (ja) 2016-12-15
CN104220070B (zh) 2020-01-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA026656B1 (ru) Гетероциклические ингибиторы глютаминазы
US9938267B2 (en) Heterocyclic inhibitors of glutaminase
KR20150091389A (ko) 글루타미나제의 헤테로사이클릭 억제제에 의한 암 치료
EP2590655A1 (en) Compounds and methods for inhibiting phosphate transport
US11603365B2 (en) Salt forms and polymorphs of (r)-1-(4-(6-(2-(4-(3,3-difluorocyclobutoxy)-6-methylpyridin-2-yl)acetamido) pyridazin-3-yl)-2-fluorobutyl)-n-methyl-1H-1,2,3-triazole-4-carboxamide
CA3083228A1 (en) Small molecule degraders that recruit dcaft15
US20160060260A1 (en) Bromodomain inhibitors for treating disease
CN112105602A (zh) 基于喹啉和异喹啉的hdac抑制剂及其使用方法
WO2006101102A1 (ja) 固形腫瘍治療剤
BR112012004533B1 (pt) Composto, composição farmacêutica, e uso do composto

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM