RS59705B1 - Heterociklični inhibitori glutaminaze - Google Patents

Heterociklični inhibitori glutaminaze

Info

Publication number
RS59705B1
RS59705B1 RS20191617A RSP20191617A RS59705B1 RS 59705 B1 RS59705 B1 RS 59705B1 RS 20191617 A RS20191617 A RS 20191617A RS P20191617 A RSP20191617 A RS P20191617A RS 59705 B1 RS59705 B1 RS 59705B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
alkyl
compound
mmol
membered
water
Prior art date
Application number
RS20191617A
Other languages
English (en)
Inventor
Jim Li
Lijing Chen
Bindu Goyal
Guy Laidig
Timothy Friend Stanton
Eric Brian Sjogren
Original Assignee
Calithera Biosciences Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Calithera Biosciences Inc filed Critical Calithera Biosciences Inc
Publication of RS59705B1 publication Critical patent/RS59705B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4245—Oxadiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/433—Thidiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D237/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings
    • C07D237/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D237/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D237/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D237/20—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D271/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D271/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D271/10—1,3,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-oxadiazoles
    • C07D271/113—1,3,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-oxadiazoles with oxygen, sulfur or nitrogen atoms, directly attached to ring carbon atoms, the nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D285/00—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D275/00 - C07D283/00
    • C07D285/01—Five-membered rings
    • C07D285/02—Thiadiazoles; Hydrogenated thiadiazoles
    • C07D285/04—Thiadiazoles; Hydrogenated thiadiazoles not condensed with other rings
    • C07D285/12—1,3,4-Thiadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-thiadiazoles
    • C07D285/125—1,3,4-Thiadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-thiadiazoles with oxygen, sulfur or nitrogen atoms, directly attached to ring carbon atoms, the nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C07D285/135—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen- Or Sulfur-Containing Heterocyclic Ring Compounds With Rings Of Six Or More Members (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)

Description

Opis
Povezane prijave
[0001] Ova prijava zahteva pravo prvenstva od privremene SAD patentne prijave br.61/562,266, podnete 21.11.2011, privremene SAD patentne prijave br. 61/665,370, podnete 28.6.2012, i privremene SAD patentne prijave br.61/727,195, podnete 16.11.2012.
Osnova pronalaska
[0002] Glutamin podržava preživljavanje, rast i proliferaciju ćelija putem metaboličkih i nemetaboličkih mehanizama. U ćelijama koje aktivno proliferišu, metabolizam glutamina do laktata, koji se takođe naziva "glutaminoliza", predstavlja glavni izvor energije u obliku NADPH. Prvi korak u glutaminolizi je deaminacija glutamina da bi se dobio glutamat i amonijak, koji katalizuje enzim glutaminaza. Stoga deaminacija putem glutaminaze predstavlja kontrolnu tačku metabolizma glutamina.
[0003] Još od Warburgovog zapažanja da ascitne tumorske ćelije pokazuju visoku stopu potrošnje glukoze i izlučivanja laktata u prisustvu kiseonika (Warburg, 1956), istraživači ispituju kako ćelije raka koriste metaboličke puteve da bi mogle da nastave aktivnu proliferaciju. Nekoliko izveštaja pokazalo je kako metabolizam glutamina podržava sintezu makromolekula neophodnu za replikaciju ćelija (Curthois, 1995; DeBardinis, 2008).
[0004] Zbog toga postoji teorijska pretpostavka da glutaminaza predstavlja potencijalni terapeutski cilj za lečenje bolesti koje karakteriše aktivna ćelijska proliferacija, poput kancera. Nedostatak odgovarajućih inhibitora glutaminaze onemogućio je validaciju ovog cilja. Zbog toga bi stvaranje inhibitora glutaminaze koji su specifični i mogu da se formulišu za upotrebu in vivo, moglo da dovede do nove klase terapeutika.
[0005] WO2011/143160 opisuje postupke za lečenje kancera koji ima mutiranu izocitrat dehidrogenazu (IDH) kod subjekta kome je potrebno lečenje, gde postupak uključuje davanje subjektu terapeutski efikasne količine inhibitora glutaminaze. US 6,451,828 opisuje jedinjenja za koja je navedeno da inhibiraju glutaminazu.
Rezime pronalaska
[0006] Predmetni pronalazak opisuje jedinjenje formule I,
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u kojoj:
L predstavlja CH2CH2;
jedno X predstavlja S, a drugo X predstavlja CH=CH, gde bilo koji atom vodonika u CH jedinici može da bude zamenjen sa (C1-6)alkil;
Y, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja H ili CH2O(CO)R7;
R7, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja H ili supstituisani ili nesupstituisani (C1-6)alkil, (C1-6)alkoksi, amino(C1-6)alkil, (C1-6)alkilamino(C1-6)alkil, 3-10-člani heterociklil(C1-6)alkil, ili 3-10-člani heterociklil(C1-6)alkoksi;
Z predstavlja R3(CO);
R1i R2svaki nezavisno predstavlja H;
R3, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja:
(a) supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril(C1-6)alkil, (C3-8)cikloalkil, heterocikloalkil, ili 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil; ili
(b) C(R8)(R9)(R10);
R8predstavlja supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril, 5-7-člani aril(C1-6)alkil, 5-7-člani heteroaril, ili 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil;
R9predstavlja H; i
R10predstavlja hidroksil, hidroksi(C1-6)alkil, (C1-6)alkoksi, ili (C1-6)alkoksi(C1-6)alkil; gde je, tamo gde je naznačeno, (C1-C6)alkil, hidroksi(C1-C6)alkil, amino(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkilamino(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil, 5-7-člani aril, 5-7-člani aril(C1-C6)alkil, (C3-C8)cikloalkil, 3-10-člani heterociklil, 3-10-člani heterociklil(C1-C6)alkil, 3-10-člani heterociklil(C1-C6)alkoksi, 5-7-člani heteroaril, ili 5-7-člani heteroaril(C1-C6)alkil opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata odabranim od halogena, hidroksila, karboksila, (C1-C6)alkoksikarbonila, formila, acila, tioestra, tioacetata, tioformata, (C1-C6)alkoksila, fosforila, fosfata, fosfonata, fosfinata, amino, amido, amidina, imina, cijano, nitro, azido, sulfhidrila, (C1-C6)alkiltio, sulfata, sulfonata, sulfamoila, sulfonamido, sulfonila, 3-10-članog heterociklila, (C5-C7)aril(C1-C6)alkila, (C5-C7)arila, i 5-7-članog heteroarila.
[0007] U određenim primerima izvođenja, predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutski preparat pogodan za upotrebu kod humanog pacijenta, koji sadrži efikasnu količinu bilo kog od ovde opisanih jedinjenja (npr., jedinjenje prema pronalasku, kao što je jedinjenje formule I), i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa. U određenim primerima izvođenja, farmaceutski preparati mogu da budu za upotrebu u lečenju ili prevenciji stanja ili bolesti kao što je ovde opisano. U određenim primerima izvođenja, farmaceutski preparati imaju dovoljno nisku pirogenu aktivnost da budu pogodni za intravensku upotrebu kod humanog pacijenta.
[0008] U ovom dokumentu opisani su postupci za lečenje ili prevenciju kancera, imunoloških ili neuroloških bolesti kao što je ovde opisano, koji obuhvataju primenu jedinjenja prema pronalasku.
Detaljan opis crteža
[0009] Slika 1 pokazuje da intraperitonealna primena jedinjenja 188 kod miševa rezultuje smanjenom veličinom tumora kod ksenograftskog modela karcinoma debelog creva HCT116.
Detaljan opis pronalaska
[0010] Predmetni pronalazak opisuje jedinjenje formule I,
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u kojoj:
L predstavlja CH2CH2;
jedno X predstavlja S, a drugo X predstavlja CH=CH, gde bilo koji atom vodonika u CH jedinici može da bude zamenjen sa (C1-6)alkil;
Y, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja H ili CH2O(CO)R7;
R7, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja H ili supstituisani ili nesupstituisani (C1-6)alkil, (C1-6)alkoksi, amino(C1-6)alkil, (C1-6)alkilamino(C1-6)alkil, 3-10-člani heterociklil(C1-6)alkil, ili 3-10-člani heterociklil(C1-6)alkoksi;
Z predstavlja R3(CO);
R1i R2svaki nezavisno predstavlja H;
R3, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja:
(a) supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril(C1-6)alkil, (C3-8)cikloalkil, heterocikloalkil, ili 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil; ili
(b) C(R8)(R9)(R10);
R8predstavlja supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril, 5-7-člani aril(C1-6)alkil, 5-7-člani heteroaril, ili 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil;
R9predstavlja H; i
R10predstavlja hidroksil, hidroksi(C1-6)alkil, (C1-6)alkoksi, ili (C1-6)alkoksi(C1-6)alkil; gde je, tamo gde je naznačeno, (C1-C6)alkil, hidroksi(C1-C6)alkil, amino(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkilamino(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil, 5-7-člani aril, 5-7-člani aril(C1-C6)alkil, (C3-C8)cikloalkil, 3-10-člani heterociklil, 3-10-člani heterociklil(C1-C6)alkil, 3-10-člani heterociklil(C1-C6)alkoksi, 5-7-člani heteroaril, ili 5-7-člani heteroaril(C1-C6)alkil opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata odabranim od halogena, hidroksila, karboksila, (C1-C6)alkoksikarbonila, formila, acila, tioestra, tioacetata, tioformata, (C1-C6)alkoksila, fosforila, fosfata, fosfonata, fosfinata, amino, amido, amidina, imina, cijano, nitro, azido, sulfhidrila, (C1-C6)alkiltio, sulfata, sulfonata, sulfamoila, sulfonamido, sulfonila, 3-10-članog heterociklila, (C5-C7)aril(C1-C6)alkila, (C5-C7)arila, i 5-7-članog heteroarila.
[0011] U određenim primerima izvođenja u kojima su alkil, hidroksialkil, amino, acilamino, aminoalkil, acilaminoalkil, alkenil, alkoksi, alkoksialkil, aril, arilalkil, ariloksi, ariloksialkil, cikloalkil, cikloalkilalkil, heterociklil, heterociklilalkil, heteroaril, heteroarilalkil, heteroariloksi, ili heteroariloksialkil supstituisani, oni su supstituisani jednim ili većim brojem supstituenata odabranih od supstituisanog ili nesupstituisanog alkila, kao što je perfluoroalkil (npr., trifluorometil), alkenila, alkoksi, alkoksialkila, arila, aralkila, arilalkoksi, ariloksi, ariloksialkila, hidroksila, halo, alkoksi, kao što je perfluoroalkoksi (npr., trifluorometoksi), alkoksialkoksi, hidroksialkila, hidroksialkilamino, hidroksialkoksi, amino, aminoalkila, alkilamino, aminoalkilalkoksi, aminoalkoksi, acilamino, acilaminoalkila, kao što je perfluoro acilaminoalkil (npr., trifluorometilacilaminoalkil), aciloksi, cikloalkila, cikloalkilalkila, cikloalkilalkoksi, heterociklila, heterociklilalkila, heterocikliloksi, heterociklilalkoksi, heteroarila, heteroarilalkila, heteroarilalkoksi, heteroariloksi, heteroariloksialkila, heterociklilaminoalkila, heterociklilaminoalkoksi, amido, amidoalkila, amidina, imina, okso, karbonila (kao što je karboksil, alkoksikarbonil, formil, ili acil, uključujući perfluoroacil (npr., C(O)CF3)), karbonilalkila (kao što je karboksialkil, alkoksikarbonilalkil, formilalkil, ili acilalkil, uključujući perfluoroacilalkil (npr., -alkilC(O)CF3)), karbamata, karbamatalkila, uree, ureaalkila, sulfata, sulfonata, sulfamoila, sulfona, sulfonamida, sulfonamidalkila, cijano, nitro, azido, sulfhidrila, alkiltio, tiokarbonila (kao što je tioestar, tioacetat, ili tioformat), fosforila, fosfata, fosfonata ili fosfinata.
[0012] U određenim primerima izvođenja, Y predstavlja H.
[0013] U određenim primerima izvođenja u kojima je Z R3(CO), svaka pojava R3nije identična (npr., jedinjenje formule I nije simetrično).
[0014] U određenim primerima izvođenja, R3predstavlja arilalkil, heteroarilalkil, cikloalkil ili heterocikloalkil. U određenim primerima izvođenja, R3predstavlja C(R8)(R9)(R10), gde R8predstavlja aril, arilalkil, heteroaril ili heteroaralkil, kao što je aril, arilalkil ili heteroaril, R9predstavlja H, i R10predstavlja hidroksi, hidroksialkil, alkoksi ili alkoksialkil, kao što je hidroksi, hidroksialkil ili alkoksi.
[0015] U određenim primerima izvođenja, Y predstavlja H, i svaki R3predstavlja supstituisani ili nesupstituisani arilalkil, heteroarilalkil, cikloalkil ili heterocikloalkil. U određenim primerima izvođenja gore navedenog, svaka pojava R3je identična.
[0016] U ovom dokumentu opisana su jedinjenja prikazana u tabeli 3, posebno jedinjenja 1,2,6,7,8,11,13,14,15,16,17,18,19,20,21,24,25,26,27,28,29,30,31,32, 33, 35, 36, 38, 39, 40, 41, 43, 44, 47, 48, 50, 51, 52, 54, 55, 58, 63, 64, 65, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 92, 93, 94, 95, 97, 99, 100, 102, 105, 107, 111, 112, 114, 115, 116, 117, 118, 120, 121, 122, 123, 126, 127, 133, 135, 136, 138, 140, 141, 143, 146, 147, 148, 152, 153, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 168, 169, 170, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 208, 210, 211, 213, 214, 216, 217, 219, 220, 226, 227, 228, 229, 231, 232, 234, 235, 236, 237, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 273, 274, 275, 276, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 285, 286, 287, 288, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 302, 304, 1038, 306, 307, 308, 309, 310, 311, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325, 327, 329, 332, 333, 334, 335, 336, 337, 338, 339, 340, 341, 342, 343, 344, 345, 346, 527, 347, 348, 349, 350, 351, 352, 353, 354, 355, 358, 359, 360, 361, 362, 363, 364, 365, 366, 367, 368, 369, 370, 371, 372, 373, 374, 375, 376, 377, 378, 379, 380, 381, 382, 383, 384, 385, 386, 387, 388, 389, 390, 391, 392, 393, 394, 395, 396, 397, 398, 399, 400, 401, 402, 403, 404, 405, 406, 407, 408, 409, 410, 411, 412, 413, 414, 415, 416, 417, 418, 419, 420, 421, 422, 423, 424, 425, 426, 427, 428, 429, 430, 431, 432, 433, 434, 435, 436, 437, 438, 439, 440, 441, 442, 443, 444, 445, 446, 447, 448, 449, 450, 451, 452, 453, 454, 455, 456, 457, 458, 459, 460, 461, 462, 463, 464, 465, 466, 467, 468, 469, 470, 471, 472, 473, 474, 475, 476, 477, 478, 479, 480, 481, 482, 483, 484, 485, 486, 487, 488, 489, 490, 491, 492, 493, 494, 495, 496, 497, 498, 499, 500, 501, 502, 503, 504, 505, 506, 507, 508, 509, 510, 511, 512, 513, 514, 515, 516, 517, 518, 519, 520, 521, 522, 523, 528, 529, 530, 531, 532, 533, 534, 535, 536, 537, 538, 539, 540, 541, 542, 543, 544, 545, 546, 547, 548, 549, 550, 551, 552, 553, 554, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 565, 566, 567, 568, 569, 570, 571, 572, 573, 574, 575, 576, 577, 578, 579, 580, 581, 582, 583, 584, 585, 586, 587, 588, 589, 590, 591, 592, 593, 594, 595, 596, 597, 598, 599, 600, 601, 602, 603, 604, 605, 606, 607, 608, 609, 610, 611, 612, 613, 614, 615, 616, 617, 618, 619, 620, 621, 622, 623, 624, 625, 626, 627, 628, 629, 630, 631, 632, 633, 634, 635, 636, 638, 639, 640, 641, 644, 645, 646, 647, 648, 649, 650, 651, 652, 653, 654, 655, 656, 657, 658, 659, 660, 661, 662, 663, 664, 665, 666, 667, 668, 669, 670, 671, 672, 673, 674, 675, 676, 677, 678, 679, 680, 681, 682, 683, 684, 685, 686, 687, 688, 689, 690, 692, 693, 694, 695, 696, 697, 698, 699, 700, 701, 702, 703, 704, 705, 707, 708, ili 709.
[0017] U određenim primerima izvođenja, jedinjenja prema pronalasku mogu da budu prolekovi jedinjenja formule I, npr., gde je hidroksil u parentalnom jedinjenju predstavljen kao estar ili karbonat, ili je karboksilna kiselina prisutna u parentalnom jedinjenju predstavljena kao estar. U izvesnim takvim primerima izvođenja, prolek se metaboliše u aktivno parentalno jedinjenje in vivo (npr., estar se hidrolizuje u odgovarajući hidroksil, ili karboksilnu kiselinu).
[0018] U određenim primerima izvođenja, jedinjenja prema pronalasku mogu da budu racemska. U određenim primerima izvođenja, jedinjenja prema pronalasku mogu da budu obogaćena jednim enantiomerom. Na primer, jedinjenje prema pronalasku može da ima više od 30% ee, 40% ee, 50% ee, 60% ee, 70% ee, 80% ee, 90% ee, ili čak 95% ili više ee. U određenim primerima izvođenja, jedinjenja prema pronalasku mogu da imaju više od jednog stereocentra. U izvesnim takvim primerima izvođenja, jedinjenja prema pronalasku mogu da budu obogaćena jednim ili većim brojem dijastereomera. Na primer, jedinjenje prema pronalasku mogu da imaju više od 30% de, 40% de, 50% de, 60% de, 70% de, 80% de, 90% de, ili čak 95% ili više de.
[0019] U ovom dokumentu opisani su postupci za lečenje jedinjenjem formule I, ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju. U određenim primerima izvođenja, terapeutski preparat može da bude obogaćen tako da obezbedi pretežno jedan enantiomer jedinjenja (npr., formule I). Enantiomerno obogaćena smeša može da sadrži, na primer, najmanje 60 mol procenata jednog enantiomera, ili poželjnije najmanje 75, 90, 95, ili čak 99 mol procenata. U određenim primerima izvođenja, jedinjenje obogaćeno jednim enantiomerom je suštinski bez drugog enantiomera, pri čemu suštinski bez znači da supstanca koja je u pitanju čini manje od 10%, ili manje od 5%, ili manje od 4%, ili manje od 3%, ili manje od 2%, ili manje od 1% u poređenju sa količinom drugog enantiomera, npr., u kompoziciji ili smeši jedinjenja. Na primer, ako kompozicija ili smeša jedinjenja sadrži 98 grama prvog enantiomera i 2 grama drugog enantiomera, bilo bi navedeno da sadrži 98 mol procenata prvog enantiomera i samo 2% drugog enantiomera.
[0020] U određenim primerima izvođenja, terapeutski preparat može da bude obogaćen da obezbedi pretežno jedan dijastereomer jedinjenja (npr., formule I). Dijastereomerno obogaćena smeša može da sadrži, na primer, najmanje 60 mol procenata jednog dijastereomera, ili poželjnije najmanje 75, 90, 95, ili čak 99 mol procenata.
[0021] U ovom dokumentu opisani su postupci za lečenje jedinjenjem formule I, ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju. U određenim primerima izvođenja, terapeutski preparat može da bude obogaćen da daje pretežno jedan enantiomer jedinjenja (npr., formule I). Enantiomerno obogaćena smeša može da sadrži, na primer, najmanje 60 mol procenata jednog enantiomera, ili poželjnije najmanje 75, 90, 95, ili čak 99 mol procenata. U određenim primerima izvođenja, jedinjenje obogaćeno jednim enantiomerom je suštinski bez drugog enantiomera, gde suštinski bez znači da supstanca o kojoj je reč čini manje od 10%, ili manje od 5%, ili manje od 4%, ili manje od 3%, ili manje od 2%, ili manje od 1% u poređenju sa količinom drugog enantiomera, npr., u kompoziciji ili smeši jedinjenja. Na primer, ako kompozicija ili smeša jedinjenja sadrži 98 grama prvog enantiomera i 2 grama drugog enantiomera, bilo bi navedeno da sadrži 98 mol procenata prvog enantiomera i samo 2% drugog enantiomera.
[0022] U određenim primerima izvođenja, terapeutski preparat može da bude obogaćen da obezbedi pretežno jedan dijastereomer jedinjenja (npr., formule I). Dijastereomerno obogaćena smeša može da sadrži, na primer, najmanje 60 mol procenata jednog dijastereomera, ili poželjnije najmanje 75, 90, 95, ili čak 99 mol procenata.
[0023] U određenim primerima izvođenja, predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutski preparat pogodan za upotrebu kod humanog pacijenta, koji sadrži jedinjenje formule I, i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa. U određenim primerima izvođenja, farmaceutski preparati mogu da budu za upotrebu u lečenju ili prevenciji stanja ili bolesti kao što je ovde opisano. U određenim primerima izvođenja, farmaceutski preparati imaju dovoljno nisku pirogenu aktivnost da budu pogodni za upotrebu kod humanog pacijenta.
[0024] Jedinjenja bilo koje od gore navedenih struktura mogu da se koriste u proizvodnji lekova za lečenje bilo koje od ovde opisanih bolesti i li stanja.
Upotrebe enzimskih inhibitora
[0025] Glutamin ima značajnu ulogu kao nosač azota, ugljenika i energije. On se koristi za sintezu uree u jetri, stvaranje amonijaka u bubrezima, za glukoneogenezu, i kao respiratorno gorivo za mnoge ćelije. Pretvaranje glutamina u glutamat pokreće mitohondrijalni enzim, glutaminaza ("GLS"). Postoje dva glavna oblika enzima, K-tip i L-tip, koja se razlikuju po svojim Km vrednostima za glutamin i odgovoru na glutamat, pri čemu je vrednost Km, ili Mikaelisova konstanta, koncentracija supstrata potrebna za postizanje polovine maksimalne brzine. L-tip, takođe poznat kao "jetreni tip" ili GLS2, ima visoku Km za glutamin i otporan je na glutamat. K-tip, poznat i kao "bubrežni tip" ili GLS1, ima nisku Km za glutamin i inhibiran je glutamatom. Alternativni oblik primarne obrade transkripta GLS1, označen kao glutminaza C ili "GAC", je nedavno identifikovan i ima slične odlike aktivnosti kao GLS1. U određenim primerima izvođenja, jedinjenja mogu selektivno da inhibiraju GLS1, GLS2 i GAC. U poželjnom primeru izvođenja, jedinjenja selektivni inhibiraju GLS1 i GAC.
[0026] Pored toga što služe kao osnovni gradivni blokovi u sintezi proteina, pokazano je da aminokiseline doprinose mnogim procesima kritičnim za rast i deobu ćelija, a ovo je posebno tačno za kancerske ćelije. Gotovo sve definicije kancera uključuju pozivanje na neregulisanu proliferaciju. Brojne studije metabolizma glutamina kod kancera ukazuju na to da su mnogi tumori veliki potrošači glutamina (Souba, Ann. Surg., 1993; Collins et al., J. Cell. Physiol., 1998; Medina, J. Nutr., 2001; Shanware et al., J. Mol. Med., 2011). Primer izvođenja pronalaska je upotreba ovde opisanih jedinjenja za lečenje kancera.
[0027] U određenim primerima izvođenja, kancer može da bude kancer, ili varijanta akutne limfoblastne leukemije (ALL), akutne mijeloidne leukemije (AML), adrenokortikalnog karcinoma, kancera povezanih sa AIDS-om (Kapošijev sarkom i limfom), analnog kancera, kancera slepog creva, atipičnog teratoidnog/rabdoidnog tumora, karcinoma bazalnih ćelija, kancera žučnih puteva (uključujući ekstrahepatične), kancera bešike, kancera kosti (uključujući osteosarkom i maligni fibrozni histiocitom), tumora mozga (kao što su astrocitomi, tumori mozga i kičmene moždine, gliom moždanog stabla, atipični teratoidni/rabdoidni tumor centralnog nervnog sistema, embrionalni tumori centralnog nervnog sistema, kraniofaringiom, ependimoblastom, ependimom, meduloblastom, meduloepiteliom, parenhimski tumori epifize srednje diferencijacije, supratentorijalni primitivni neuroektodermalni tumori i pineoblastom), kancera dojke, tumora bronhija, Burkitovog limfoma, karcinoma bazalnih ćelija, kancera žučnih puteva (uključujući ekstrahepatične), kancera bešike, kancera kosti (uključujući osteosarkom i maligni fibrozni histiocitom), karcinoidnog tumora, karcinoma nepoznatog porekla, centralnog nervnog sistema (kao što je atipični teratoidni/rabdoidni tumor, embrionalni tumori i limfom), kancera grlića materice, kancera dečijeg doba, hordoma, hronične limfocitne leukemije (CLL), hronične mijelogene leukemije (CML), hroničnih mijeloproliferativnih poremećaja, kancera debelog creva, kolorektalnog kancera, kraniofaringioma, T-ćelijskog limfoma kože (mycosis fungoides i Sezari sindrom), karcinoma žučnih puteva (ekstrahepatičkih), duktalnog karcinoma in situ (DCIS), embrionalnih tumora (centralnog nervnog sistema), kancera endometrijuma, ependimoblastoma, ependimoma, kancera jednjaka, estezioneuroblastoma, familije tumora Juingovog sarkoma, ekstrakranijalnog tumora klicinih ćelija, ekstragonadalnog tumora klicinih ćelija, ekstrahepatičkog kancera žučnih puteva, kancera oka (kao intraokularni melanom, retinoblastom), fibroznog histiocitoma kosti (uključujući maligni i osteosarkom), kancera žučne kese, kancera želuca, gastrointestinalnog karcinoidnog tumora, gastrointestinalnih stromalnih tumora (GIST), tumora klicinih ćelija (ekstrakranijalni, ekstragonadalni, jajnika), gestacionog trofoblastnog tumora, glioma, leukemije vlasatih ćelija, kancera glave i vrata, kancera srca, hepatocelularnog (kancera jetre) kancera, histiocitoze, Langerhansovih ćelija, Hočkinovog limfoma, hipofaringealnog kancera, intraokularnog melanoma, tumora ćelija ostrvaca (endokrini, pankreas), Kapošijevog sarkoma, bubrega (uključujući renalne ćelije), histiocitoze Langerhansovih ćelija, kancera grkljana, leukemije (uključujući akutnu limfoblastnu (ALL), akutnu mijeloidnu (AML), hroničnu limfocitnu (CLL), hroničnu mijelogenu (CML), vlasastih ćelija), kancera usana i usne šupljine, kancera jetre (primarnog), lobularnog karcinoma in situ (LCIS), kancera pluća (nesitnoćelijskog i sitnoćelijskog), limfoma (povezanog sa AIDS-om, Burkitovog, T-ćelija kože (mycosis fungoides i Sezari sindrom), Hočkina, Ne-Hočkina, primarnog centralnog nervnog sistema (CNS), makroglobulinemije, Waldenstroma, kancera dojke kod muškaraca, malignog fibroznog histiocitoma kosti i osteosarkoma, meduloblastoma, meduloepitelioma, melanoma (uključujući intraokularni (oko)), karcinoma Merkel ćelija, mezotelioma (malignog), metastatskog kancera skvamoznih ćelija vrata sa skrivenim poreklom, karcinoma srednjeg trakta koji uključuje NUT gen, kancera usta, sindroma multiple endokrine neoplazije, multiplog mijeloma/neoplazme plazma ćelija, mycosis fungoides, mijelodisplastičnih sindroma, mijelodisplastičnih/mijeloproliferativnih neoplazmi, mijelogene leukemije, hronične (CML), mijeloidne leukemije, akutne (AML), mijeloma i multiplog mijeloma, mijeloproliferativnih poremećaja (hroničnih), kancera nosne šupljine i paranazalnih sinusa, nazofaringealnog kancera, neuroblastoma, Ne-Hočkinovog limfoma, nesitnoćelijskog kancera pluća, oralnog kancera, kancera usne šupljine, usana i orofaringealnog kancera, osteosarkoma i malignog fibroznog histiocitoma kosti, kancera jajnika (kao što je epitelni, tumor klicinih ćelija, i tumor niskog malignog potencijala), kancera pankreasa (uključujući tumore ćelija ostrvaca), papilomatoze, paraganglioma, kancera paranazalnih sinusa i nosne šupljine, paratiroidnog kancera, kancera penisa, kancera ždrela, feohromocitoma, parenhimskih tumora epifize srednje diferencijacije, pineoblastoma i supratentorijalnih primitivnih neuroektodermalnih tumora, tumora hipofize, neoplazme plazma ćelija/multiplog mijeloma, pleuropulmonalnog blastoma, kancera trudnoće i dojke, primarnog limfoma centralnog nervnog sistema (CNS), kancera prostate, rektalnog kancera, kancera renalnih ćelija (bubrega), bubrežne karlice i uretera, kancera prelaznih ćelija, retinoblastoma, rabdomiosarkoma, kancera pljuvačne žlezde, sarkoma (kao familije tumora Juingovog sarkoma, Kapošijev, mekog tkiva, materice), Sezari sindroma, kancera kože (kao što je melanom, karcinom Merkel ćelija, nemelanom), sitnoćelijskog kancera pluća, kancera tankog creva, sarkoma mekog tkiva, karcinoma skvamoznih ćelija, kancera skvamoznih ćelija vrata sa skrivenim poreklom, metastaza, kancera želuca, supratentorijalnih primitivnih neuroektodermalnih tumora, T-ćelijskih limfoma (kožnih, mycosis fungoides i Sezari sindroma), kancera testisa, kancera grla, timoma i karcinoma timusa, kancera tiroidne žlezde, kancera prelaznih ćelija bubrežne karlice i uretera, trofoblastnog tumora (gestacionog), nepoznatog porekla, neuobičajenih kancera dečijeg doba, uretera i bubrežne karlice, kancera prelaznih ćelija, kancera uretre, kancera materice, endometrijalnog, sarkoma materice, Waldenstromove makroglobulinemije i Wilmsovog tumora.
[0028] U nekim slučajevima, onkogene mutacije podstiču metabolizam glutamina. Ćelije koje eksprimiraju onkogeni K-Ras ispoljavaju povećanu upotrebu glutamina (Weinberg et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2010; Gaglio et al., Mol. Syst. Biol., 2011). U određenim primerima izvođenja, kancerske ćelije imaju mutirani K-Ras gen. U određenim primerima izvođenja, kancer je povezan sa tkivom bešike, kosne srži, dojke, debelog creva, bubrega, jetre, pluća, jajnika, pankreasa, prostate, kože ili tiroidee. Poznato je da je c-Myc gen izmenjen kod brojnih kancera (Zeller et al., Genome biology, 2003). Povećana ekspresija Myc proteina je u korelaciji sa povećanom ekspresijom glutaminaze, što vodi ushodnoj regulaciji metabolizma glutamina (Dang eta 1., Clin. Cancer Res., 2009; Gao et al., Nature, 2009). U određenim primerima izvođenja, ćelije kancera imaju onkogeni c-Myc gen ili povišenu ekspresiju Myc proteina. U nekim primerima izvođenja, kancer je povezan sa tkivom bešike, kosti, creva, dojke, centralnog nervnog sistema (na primer mozga), debelog creva, želudačno-crevnog sistema (kao što je želudac i tanko crevo), jetre, pluća, jajnika, prostate, mišića, i kože.
[0029] Iako opstanak mnogih ćelija kancera zavisi od egzogenog glutamina, stepen zavisnosti od glutamina među podtipovima tumorskih ćelija može učiniti populaciju ćelija osetljivijom na smanjenje glutamina. Na primer, analiza genske ekspresije kod kancera dojke identifikovala je pet intrinzičkih podtipova (luminalni A, luminalni B, bazalni, HER2+, i sličan normalnom) (Sorlie et al., Proc Natl Acad Sci USA, 2001). Iako lišavanje glutamina utiče na rast i vijabilnost ćelija, čini se da su bazalne ćelije osetljivije na smanjenje egzogenog glutamina (Kung et al., PLoS Genetics, 2011). Ovo podržava koncept da je glutamin veoma važan izvor energije kod ćelijskih linija kancera dojke sličnih bazalnim, i sugeriše da bi inhibicija enzima glutaminaze bila korisna u lečenju kancera dojke sačinjenog od ćelija sličnih bazalnim. Trostruko-negativni kancer dojke (TNBC) odlikuje se nedostatkom ekspresije estrogenskog receptora, progesteronskog receptora i receptora 2 za humani epidermalni faktor rasta. Ima veću stopu recidiva posle hemoterapije, i lošiju prognozu od ostalih podtipova kancera dojke (Dent et al., Clin Cancer res, 2007). Interesantno je da izgleda da postoje značajne sličnosti u metaboličkom profilu između ćelija TNBC i ćelija kancera dojke sličnih bazalnim (neobjavljeni podaci). Prema tome, primer izvođenja prema pronalasku je upotreba ovde opisanih jedinjenja za lečenje TNBC i kancera dojke bazalnog tipa.
[0030] Kaheksija, masivni gubitak mišićne mase, često je povezana sa lošim statusom sposobnosti za rad i visokim stepenom smrtnosti pacijenata obolelih od kancera. Teorijsko razmatranje u osnovi ovog procesa je da tumor zahteva više glutamina nego što se normalno unosi hranom, tako da mišići, glavni izvor glutamina, počinju da se raspadaju kako bi snabdeli tumor dovoljnom količinom hranljivog sastojka. Prema tome, inhibicija glutaminaze može da smanji potrebu za razgradnjom mišića. Primer izvođenja pronalaska je upotreba predmetnog jedinjenja u sprečavanju, inhibiciji ili smanjenju kaheksije.
[0031] Najčešći neurotransmiter je glutamat, koji potiče od enzimske konverzije glutamina pomoću glutaminaze. Pokazano je da su visoki nivoi glutamata neurotoksični. Posle traumatične povrede neuronskih ćelija, dolazi do porasta oslobađanja neurotransmitera, posebno glutamata. Prema tome, pretpostavlja se da inhibicija glutaminaze može da bude način lečenja posle napada ishemije, kao što je moždani udar (Newcomb, PCT WO 99/09825, Kostandy, Neurol. Sci., 2011). Hantingtonova bolest je progresivno, fatalno neurološko stanje. U genetskim mišjim modelima Hantingtonove bolesti, zapaženo je da je rana manifestacija u korelaciji sa neregulisanim oslobađanjem glutamata (Raymond et al., Neuroscience, 2011). Kod demencije udružene sa HIV-om, makrofagi inficirani HIV-om ispoljavaju ushodno regulisanu aktivnost glutaminaze i povećano oslobađanje glutamata, što vodi oštećenju neurona (Huang et al.,J Neurosci., 2011). Slično tome, kod druge neurološke bolesti, aktivirana mikroglija kod Rettovog sindroma oslobađa glutamat dovodeći do oštećenja neurona. Oslobađanje viška glutamata udruženo je sa ushodnom regulacijom glutaminaze (Maezawa et al., J. Neurosci, 2010). Kod miševa uzgojenih da imaju snižene nivoe glutaminaze, osetljivost na psihostimulatorne lekove, kao što su amfetamini, dramatično je smanjena, što sugeriše da inhibicija glutaminaze može biti korisna u lečenju šizofrenije (Gaisler-Salomon et al., Neuropsychopharmacology, 2009). Bipolarni poremećaj je razarajuća bolest koja je obeležena ponovljenim epizodama manije i depresije. Ova bolest se leči stabilizatorima raspoloženja, kao što su litijum i valproat; međutim, izgleda da hronična upotreba ovih lekova povećava broj receptora za glutamat (Nanavati et al., J. Neurochem., 2011), što može da dovede do smanjenja efikasnosti leka tokom vremena. Prema tome, alternativno lečenje može da podrazumeva smanjenje količine glutamata inhibiranjem glutaminaze. Ovo može, i ne mora, da bude udruženo sa stabilizatorima raspoloženja. Memantin, parcijalni antagonist receptora za N-metil-D-aspartat (NMDAR), je odobreni terapeutik u lečenju Alchajmerove bolesti. Trenutno, sprovode se istraživanja u kojima se memantin posmatra kao sredstva za lečenje vaskularne demencije i Parkinsonove bolesti (Oliverares et al., Curr. Alzheimer Res., 2011). Budući da je pokazano da memantin parcijalno blokira i receptor za glutamat NMDA, nije nerazumno očekivati da bi smanjenje nivoa glutamata inhibicijom glutaminaze moglo takođe da leči Alchajmerovu bolest, vaskularnu demenciju i Parkinsonovu bolest. Alchajmerova bolest, bipolarni poremećaj, demencija udružena sa HIV-om, Hantingtonova bolest, ishemijska povreda, Parkinsonova bolest, šizofrenija, moždani udar, traumatska povreda i vaskularna demencija su samo neke neurološke bolesti koje su u korelaciji sa povišenim nivoima glutamata. Prema tome, inhibicija glutaminaze ovde opisanim jedinjenjem može da redukuje ili spreči neurološke bolesti. Prema tome, u jednom primeru izvođenja, jedinjenja mogu da se koriste za lečenje ili prevenciju neuroloških bolesti.
[0032] Aktivacija T limfocita indukuje ćelijski rast, proliferaciju, i proizvodnju citokina, na taj način postavljajući energetske i biosintetske zahteve ćeliji. Glutamin služi kao donor aminogrupe za sintezu nukleotida, a glutamat, prva komponenta u metabolizmu glutamina, ima direktnu ulogu u sintezi aminokiselina i glutationa, a može i da uđe u Krebsov ciklus za proizvodnju energije (Carr et al., J. Immunol., 2010). Mitogenom indukovana proliferacija T ćelija i proizvodnja citokina zahteva visoke nivoe metabolizma glutamina, tako da inhibiranje glutaminaze može da služi kao sredstvo za modulaciju imunološkog sistema. Kod multiple skleroze, inflamatorne autoimunske bolesti, aktivirana mikroglija ispoljava ushodno regulisanu glutaminazu i oslobađa povišene nivoe ekstracelularnog glutamata. Nivoi glutamina sniženi su kod sepse, povrede, opekotina, hirurških intervencija i vežbi izdržljivosti (Calder et al., Amino Acids, 1999). Ove situacije dovode osobu u rizik od imunosupresije. U stvari, uopšteno, ekspresija gena za glutaminazu i enzimska aktivnost su obe povećane tokom T-ćelijske aktivnosti. Davanje glutamina pacijentima posle transplantacije koštane srži rezultovalo je nižim nivoom infekcije i smanjenjem pojave bolesti kalema protiv domaćina (Crowther, Proc. Nutr. Soc., 2009). T-ćelijska proliferacija i aktivacija je uključena u mnoge imunološke bolesti, kao što je inflamatorna bolest creva, Kronova bolest, sepsa, psorijaza, artritis (uključujući reumatoidni artritis), multipla skleroza, bolest kalema protiv domaćina, infekcije, lupus i dijabetes. U jednom primeru izvođenja pronalaska, ovde opisana jedinjenja mogu da se koriste za lečenje ili sprečavanje imunoloških bolesti.
[0033] Hepatična encefalopatija (HE) predstavlja niz prolaznih i reverzibilnih neuroloških i psihijatrijskih disfunkcija kod pacijenata sa bolešću jetre ili portosistemskim šantom. HE nije jedinstveni klinički entitet i može da odražava reverzibilnu metaboličku encefalopatiju, atrofiju mozga, edem mozga, ili kombinaciju ovih faktora; međutim, važeća hipoteza je ta da nakupljanje amonijaka, koji većinom potiče iz tankog creva, ima ključnu ulogu u patofiziologiji (Khunger etal., Clin Liver Dis, 2012). Deaminacija glutamina u tankom crevu, sinteza u bubregu i mišićima doprinose proizvodnji amonijaka. Narušeni klirens u jetri izazvan hepatocelularnim klirensom ili portosistemskim šantom dovodi do povećanog nakupljanja amonijaka. Toksičnost amonijaka utiče na astrocite u mozgu preko glutamin sintetaze, koja metaboliše amonijak da bi proizvela povišeni nivo glutamina. Glutamin, zauzvrat, privlači vodu u astrocite, što dovodi do bubrenja i oksidativne disfunkcije mitohondrija. Smatra se da rezultujući cerebralni edem doprinosi neurološkoj disfunkciji koja se viđa kod HE (Kavitt et al., Clin Gastroenterol Hepatol, 2008). U jednom primeru izvođenja pronalaska, ovde opisana jedinjenja mogu da se koriste za lečenje ili prevenciju HE.
[0034] Pokazano je da primarni senzorni neuroni u ganglionu dorzalnog korena povećavaju aktivnost enzima glutaminaze nakon upale (Miller et al., Pain Research and Treatment, 2012). Veruje se da rezultujuća povećana proizvodnja glutamata doprinosi i centralnoj i perifernoj senzitizaciji, identifikovanoj kao bol. Jedan aspekt pronalaska je upotreba predmetnog jedinjenja za lečenje ili smanjenje bola. U određenim primerima izvođenja, bol može da bude neuropatski bol, bol izazvan hemoterapijom ili bol usled zapaljenskog procesa.
[0035] Visoki nivoi glukoze u krvi, visoki nivoi insulina, i rezistencija na insulin su faktori rizika za razvoj dijabetes melitusa. Slično tome, visoki krvni pritisak je faktor rizika za razvoj kardiovaskularne bolesti. U nedavnom izveštaju iz studije na velikoj humanoj kohorti, ova četiri faktora rizika su inverzno korelisana sa odnosima glutamina prema glutamatu u krvotoku (Chen et al, Circulation, 2012). Osim toga, odnosi glutamina prema glutamatu u plazmi su inverzno korelisani sa eventualnom incidencom dijabetes melitusa tokom 12 godina (Cheng et al, Circulation, 2012). Eksperimenti sa životinjskim modelima bili su konzistentni sa ovim nalazima. Miševi hranjeni dijetom bogatom glutaminom ispoljili su niže nivoe glukoze u krvi u testu tolerancije na glukozu posle 6 časova gladovanja, i intraperitonealna injekcija glutamina kod miševa brzo je snizila njihov krvni pritisak (Cheng et al, Circulation, 2012). Prema tome, verovatno je da bi inhibitori glutaminaze, koji dovode do povećanih nivoa glutamina i snižavaju nivoe glutamata, smanjili incidencu dijabetes melitusa i kardiovaskularne bolesti. Konkretno, jetra i tanko crevo su glavna mesta upotrebe glutamina kod životinja sa dijabetesom, i aktivnost glutaminaze je viša od normalne u ovim organima kod pacova sa dijabetesom indukovanim streptozotocinom (Watford et al, Biochem J, 1984; Mithieux et al, Am J Physiol Endrocrinol Metab, 2004). U jednom primeru izvođenja pronalaska, ovde opisana jedinjenja mogu da se koriste za lečenje dijabetesa. U još jednom primeru izvođenja pronalaska, predmetna jedinjenja mogu da se koriste za snižavanje povišenog krvnog pritiska.
[0036] Kao što je ovde opisano, postupak za lečenje ili prevenciju kancera, imunoloških i neuroloških bolesti može da obuhvata primenu jedinjenje prema pronalasku zajedno sa hemoterapeutskim agensom. Hemoterapeutski agensi koji mogu da se primenjuju zajedno sa jedinjenjima prema pronalasku uključuju: aminoglutetimid, amsakrin, anastrozol, asparaginazu, bcg, bikalutamid, bleomicin, buserelin, busulfan, kampotecin, kapecitabin, karboplatin, karmustin, hlorambucil, hlorokvin, cisplatin, kladribin, klodronat, kolhicin, ciklofosfamid, ciproteron, citarabin, dakarbazin, daktinomicin, daunorubicin, demetoksiviridin, dihloroacetat, dienestrol, dietilstilbestrol, docetaksel, doksorubicin, epirubicin, estradiol, estramustin, etoposid, everolimus, eksemestan, filgrastim, fludarabin, fludrokortizon, fluorouracil, fluoksimesteron, flutamid, gemcitabin, genistein, goserelin, hidroksiureu, idarubicin, ifosfamid, imatinib, interferon, irinotekan, ironotekan, letrozol, leukovorin, leuprolid, levamisol, lomustin, lonidamin, mehloretamin, medroksiprogesteron, megestrol, melfalan, merkaptopurin, mesnu, metformin, metotreksat, mitomicin, mitotan, mitoksantron, nilutamid, nokodazol, oktreotid, oksaliplatin, paklitaksel, pamidronat, pentostatin, perifosin, plikamicin, porfimer, prokarbazin, raltitreksed, rituksimab, sorafenib, streptozocin, sunitinib, suramin, tamoksifen, temozolomid, temsirolimus, teniposid, testosteron, tioguanin, tiotepu, titanocen dihlorid, topotekan, trastuzumab, tretinoin, vinblastin, vinkristin, vindesin i vinorelbin.
[0037] Razvijene su mnoge kombinovane terapije za lečenje kancera. U određenim primerima izvođenja, jedinjenja prema pronalasku mogu da budu za zajedničku primenu sa kombinovanom terapijom. Primeri kombinovanih terapija sa kojima jedinjenja prema pronalasku mogu da budu zajednički primenjena uključeni su u tabelu 1.
Tabela 1: Primeri kombinovanih terapija za lečenje kancera.
[0038] Proliferacija ćelija kancera zahteva sintezu lipida. Normalno, acetil-coA koji se koristi za sintezu lipida obrazuje se iz mitohondrijalne zalihe piruvata koji potiče iz glikolize. Ipak, pod hipoksičnim uslovima, kakvi su uobičajeni u tumorskom okruženju, konverzija piruvata u acetilcoA unutar mitohondrija je nishodno regulisana. Nedavne studije autora Metallo et al. (2011) i Mullen et al. (2011) otkrile su da pod takvim hipoksičnim uslovima, ćelije umesto toga uglavnom prelaze na upotrebu puta koji uključuje reduktivnu karboksilaciju alfa ketoglutarata da bi proizvele acetil-coA za sintezu lipida. Prvi korak u ovom putu uključuje pretvaranje glutamina u glutamat pomoću enzima glutaminaze. Zatim se glutamat pretvara u alfa-ketoglutarat, a nastali alfa-ketoglutarat se pretvara u izocitrat u koraku reduktivne karboksilacije posredovane enzimom izocitrat dehidrogenazom. Prelazak na ovaj put reduktivne karboksilacije javlja se i kod nekih ćelijskih linija renalnog karcinoma koje imaju oštećene mitohondrije ili oštećen signal za indukciju enzima odgovornog za pretvaranje glikolitičkog piruvata u acetil-coA (Mullen et al 2011). Sličan prelaz javlja se kod ćelija izloženih inhibitorima respiratornog lanca mitohondrija, kao što su metformin, rotenon i antimicin (Mullen at al.2011). Prema tome, u nekim primerima izvođenja ovog pronalaska, predlažemo upotrebu kombinacija inhibitora respiratornog lanca mitohondrija i inhibitora glutaminaze, kako bi se povećala zavisnost ćelija kancera od puteva sinteze lipida zavisnih od glutaminaze, uz istovremeno inhibiranje samih tih puteva.
[0039] Povećana zavisnost od glikolize u ćelijama tumora verovatno je uzrokovana time što hipoksično okruženje tumora oštećuje mitohondrijsku respiraciju. Osim toga, iscrpljivanje glukoze indukuje apoptozu u ćelijama koje su transformisane MYC onkogenom. Ovi nalazi sugerišu da bi inhibicija glikolize imala terapeutsku vrednost u prevenciji proliferacije ćelija kancera. U ovom trenutku postoje mnogi dokumentovani glikolitički inhibitori (Pelicano et al.
2006). Međutim, kao što je istakao Zhao et al. (2012), "dostupni glikolitički inhibitori uglavnom nisu mnogo snažni, i potrebne su visoke doze, koje mogu da dovedu do visokih nivoa sistemske toksičnosti". Budući da ćelije kancera tipično koriste i glukozu i glutamin na većem nivou od normalnih ćelija, narušavanje korišćenja svakog od ovih metabolita verovatno bi imalo sinergističko dejstvo. Prema tome, u nekim primerima izvođenja ovog pronalaska, predlažemo upotrebu kombinacija inhibitora glikolitičkog puta i inhibitora glutaminaze. Takvi glikolitički inhibitori uključuju 2-deoksiglukozu, lonidamin, 3-bromopiruvat, imatinib, oksitiamin, rapamicin, i njihove farmakološke ekvivalente. Glikoliza može da se inhibira indirektno iscrpljivanjem NAD+ putem oštećenja DNK indukovanog agensima koji alkiliraju DNK putem aktiviranim poli(ADP-riboza) polimerazom (Zong et al. 2004). Prema tome, u jednom primeru izvođenja ovog pronalaska, predlažemo upotrebu kombinacije agenasa koji alkiliraju DNK i inhibitora glutaminaze. Ćelije kancera koriste put pentozo-fosfata zajedno sa glikolitičkim putem za stvaranje metaboličkih intermedijera poreklom od glukoze. Stoga, u još jednom primeru izvođenja ovog pronalaska, predlažemo upotrebu kombinacije inhibitora pentozo-fosfata kao što je 6-aminonikotinamid, zajedno sa inhibitorima glutaminaze.
[0040] U određenim primerima izvođenja, jedinjenje prema pronalasku može da bude za zajedničku primenu sa postupcima za lečenje kancera koji nisu hemijski. U određenim primerima izvođenja, jedinjenje prema pronalasku može da bude za zajedničku primenu sa radijacionom terapijom. U određenim primerima izvođenja, jedinjenje prema pronalasku može da bude za zajedničku primenu sa hirurškom intervencijom, sa termoablacijom, sa fokusiranom ultrazvučnom terapijom, sa krioterapijom, ili sa bilo kojom kombinacijom navedenog.
[0041] U određenim primerima izvođenja, različita jedinjenja prema pronalasku mogu da budu za zajedničku primenu sa jednim ili većim brojem drugih jedinjenja prema pronalasku. Osim toga, takve kombinacije mogu da budu za zajedničku primenu sa drugim terapeutskim agensima, kao što su drugi agensi pogodni za lečenje kancera, imunoloških ili neuroloških bolesti, kao što su agensi identifikovani gore u tekstu.
[0042] U ovom dokumentu opisan je komplet koji sadrži: a) jedan ili više pojedinačnih doznih oblika jedinjenja prema pronalasku; b) jedan ili više pojedinačnih doznih oblika hemoterapeutskog agensa kao što je gore pomenuto; i c) uputstvo za upotrebu jedinjenja prema pronalasku i hemoterapeutskog agensa.
[0043] U ovom dokumentu opisan je komplet koji sadrži:
a) farmaceutsku formulaciju (npr., jedan ili više pojedinačnih doznih oblika) koja sadrži jedinjenje prema pronalasku; i
b) uputstvo za upotrebu farmaceutske formulacije, npr., za lečenje ili prevenciju bilo kog od gore razmatranih stanja.
[0044] Kao što je ovde opisano, komplet dodatno sadrži uputstvo za primenu farmaceutske formulacije koja sadrži jedinjenje prema pronalasku zajedno sa hemoterapeutskim agensom kao što je gore pomenuto. Kao što je ovde opisano, komplet dodatno sadrži drugu farmaceutsku formulaciju (npr., kao jedan ili više pojedinačnih doznih oblika) koja sadrži hemoterapeutski agens kao što je gore pomenuto.
Definicije
[0045] Pojam "acil" je poznat u stanju tehnike i odnosi se na grupu predstavljenu opštom formulom ugljovodonična grupaC(O)-, poželjno alkilC(O)-.
[0046] Pojam "acilamino" je poznat u stanju tehnike i odnosi se na amino grupu supstituisanu acil grupom i može da bude predstavljen, na primer, formulom ugljovodonična grupaC(O)NH-.
[0047] Pojam "aciloksi" je poznat u stanju tehnike i odnosi se na grupu predstavljenu opštom formulom ugljovodonična grupaC(O)O-, poželjno alkilC(O)O-.
[0048] Pojam "alkoksi" odnosi se na alkil grupu, poželjno nižu alkil grupu, koja ima kiseonik vezan za nju. Reprezentativne alkoksi grupe uključuju metoksi, etoksi, propoksi, terc-butoksi i slično.
[0049] Pojam "alkoksialkil" odnosi se na alkil grupu supstituisanu alkoksi grupom i može da bude predstavljen opštom formulom alkil-O-alkil.
[0050] Pojam "alkenil", kako se ovde koristi, odnosi se na alifatičnu grupu koja sadrži najmanje jednu dvostruku vezu i namenjena je da uključuje i "nesupstituisane alkenile" i "supstituisane alkenile", gde se ovo poslednje odnosi na alkenil fragmente koji imaju supstituente koji zamenjuju vodonik na jednom ili više ugljenika alkenil grupe. Takvi supstituenti mogu da se jave na jednom ili više ugljenika koji su uključeni ili nisu uključeni u jednu ili više dvostrukih veza. Osim toga, takvi supstituenti uključuju svi oni koji se razmatraju za alkil grupe, kao što je diskutirano u daljem tekstu, osim u slučaju kada to stabilnost ne dozvoljava. Na primer, razmatra se supstitucija alkenil grupa jednim ili većim brojem alkil, karbociklil, aril, heterociklil, ili heteroaril grupa.
[0051] "Alkil" grupa ili "alkan" je nearomatični ugljovodonik ravnog ili granatog lanca, koji je potpuno zasićen. Tipično, alkil grupa ravnog ili granatog lanca ima od 1 do oko 20 atoma ugljenika, poželjno od 1 do oko 10 osim ako nije drugačije definisano. Primeri alkil grupa ravnog ili granatog lanca uključuju metil, etil, n-propil, izo-propil, n-butil, sek-butil, terc-butil, pentil, heksil, pentil i oktil. Alkil grupa C1-C6ravnog ili granatog lanca označena je i kao "niža alkil" grupa.
[0052] Osim toga, pojam "alkil" (ili "niži alkil") kako se koristi u specifikaciji, primerima, i patentnim zahtevima namenjen je da uključuje i "nesupstituisane alkile" i "supstituisane alkile", pri čemu se ovo poslednje odnosi na alkil fragmente koji imaju supstituente koji zamenjuju vodonik na jednom ili više ugljenika ugljovodoničnog glavnog lanca. Takvi supstituenti, ako nije drugačije naznačeno, mogu da uključuju, na primer, halogen, hidroksil, karbonil (kao što je karboksil, alkoksikarbonil, formil, ili acil), tiokarbonil (kao što je tioestar, tioacetat, ili tioformat), alkoksil, fosforil, fosfat, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, alkiltio, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, ili aromatični ili heteroaromatični fragment. Stručnjaci u ovoj oblasti će razumeti da fragmenti koji su supstituenti na ugljovodoničnom lancu mogu sami da budu supstituisani, ako je pogodno. Na primer, supstituenti supstituisanog alkila mogu da uključuju supstituisane i nesupstituisane oblike amino, azido, imino, amido, fosforil (uključujući fosfonat i fosfinat), sulfonil (uključujući sulfat, sulfonamido, sulfamoil i sulfonat), i silil grupa, kao i etre, alkiltio, karbonil (uključujući ketone, aldehide, karboksilate i estre), -CF3, -CN i slično. Primeri supstituisanih alkila opisani su ispod. Cikloalkili mogu da budu dodatno supstituisani alkilima, alkenilima, alkoksi, alkiltio, aminoalkilima, karbonil-supstituisanim alkilima, -CF3, -CN, i slično.
[0053] Pojam "Cx-y" kada se koristi u vezi sa hemijskim fragmentom, kao što je acil, aciloksi, alkil, alkenil, alkinil, ili alkoksi namenjen je da uključuju grupe koje sadrže od x do y ugljenika u lancu. Na primer, pojam "Cx-yalkil" odnosi se na supstituisane ili nesupstituisane zasićene ugljovodonične grupe, uključujući alkil grupe pravog i razgranatog lanca koje sadrže od x do y ugljenika u lancu, uključujući haloalkil grupe kao što su trifluorometil i 2,2,2-tirfluoroetil, itd. C0alkil označava vodonik tamo gde je grupa u terminalnom položaju, a vezu ako je unutrašnja. Pojmovi "C2-yalkenil" i "C2-yalkinil" odnose se na supstituisane ili nesupstituisane nezasićene alifatične grupe analoge po dužini i moguću supstituciju alkila kao što je gore opisano, ali koja sadrži najmanje jednu dvostruku, odnosno trostruku vezu.
[0054] Pojam "alkilamino", kako se ovde koristi, odnosi se na amino grupu supstituisanu najmanje jednom alkil grupom.
[0055] Pojam "alkiltio", kako se ovde koristi, odnosi se na tiol grupu supstituisanu alkil grupom i može da bude predstavljen opštom formulom alkilS-.
[0056] Pojam "alkinil", kako se ovde koristi, odnosi se na alifatičnu grupu koja sadrži najmanje jednu trostruku vezu i namenjena je da uključuje i "nesupstituisane alkinile" i "supstituisane alkinile", pri čemu se ovo poslednje odnosi na alkinil fragmente koji imaju supstituente koji zamenjuju vodonik na jednom ili više ugljenika alkinil grupe. Takvi supstituenti mogu da se jave na jednom ili više ugljenika koji su uključeni ili nisu uključeni u jednu ili više trostrukih veza. Osim toga, takvi supstituenti uključuju sve one koji su razmatrani za alkil grupe, kao što je gore diskutovano, osim tamo gde to stabilnost ne dozvoljava. Na primer, predviđena je supstitucija alkinil grupa jednim ili većim brojem alkil, karbociklil, aril, heterociklil, ili heteroaril grupa.
[0057] Pojam "amid", kako se ovde koristi, odnosi se na grupu
u kojoj svako R10 nezavisno predstavlja vodonik ili ugljovodoničnu grupu, ili dva R<10>uzeta zajedno sa N atomom za koji su vezana čine heterocikl koji ima od 4 do 8 atoma u strukturi prstena.
[0058] Pojmovi "amin" i "amino" su poznati u stanju tehnike i odnose se i na nesupstituisane i supstituisane amine i njihove soli, npr., fragment koji može da bude predstavljen sa
gde svako R10 nezavisno predstavlja vodonik ili ugljovodoničnu grupu, ili dva R<10>uzeta zajedno sa N atomom za koji su vezana čine heterocikl koji ima od 4 do 8 atoma u strukturi prstena.
[0059] Pojam "aminoalkil", kako se ovde koristi, odnosi se na alkil grupu supstituisanu amino grupom.
[0060] Pojam "aralkil", kako se ovde koristi, odnosi se na alkil grupu supstituisanu aril grupom.
[0061] Pojam "aril" kako se ovde koristi uključuju supstituisanu ili nesupstituisanu aromatičnu grupu sa jednim prstenom u kome je svaki atom prstena ugljenik. Poželjno je prsten 5- do 7-člani prsten, poželjnije 6-člani prsten. Pojam "aril" takođe uključuje policiklične prstenaste sisteme koji imaju dva ili više cikličnih prstenova u kojima su dva ili više ugljenika zajednička za dva susedna prstena pri čemu je najmanje jedan od prstenova aromatičan, npr., drugi ciklični prstenovi mogu da budu cikloalkili, cikloalkenili, cikloalkinili, arili, heteroarili, i/ili heterociklili. Aril grupe uključuju benzen, naftalen, fenantren, fenol, anilin, i slično.
[0062] Pojam "karbamat" je poznat u stanju tehnike i odnosi se na grupu
u kojoj R9 i R10 nezavisno predstavljaju vodonik ili ugljovodoničnu grupu, kao što je alkil grupa, ili R9 i R10 uzeti zajedno sa umetnutim atomom/atomima čine heterocikl koji ima od 4 do 8 atoma u strukturi prstena.
[0063] Pojmovi "karbocikl" i "karbociklični", kako se ovde koriste, odnose se na zasićen ili nezasićen prsten u kome je svaki atom prstena ugljenik. Pojam karbocikl uključuje i aromatične karbocikle i nearomatične karbocikle. Nearomatični karbocikli uključuju i cikloalkanske prstenove, u kojima su svi atomi ugljenika zasićeni, i cikloalkanske prstenove, koji sadrže najmanje jednu dvostruku vezu. "Karbocikl" uključuje 5-7-člane monociklične i 8-12-člane biciklične prstenove. Svaki prsten bicikličnog karbocikla može da bude odabran od zasićenih, nezasićenih i aromatičnih prstenova. Karbocikl uključuje biciklične molekule u kojima dva prstena dele jedan, dva ili tri ili više atoma. Pojam "fuzionisani karbocikl" odnosi se na biciklični karbocikl u kome svaki od prstenova deli dva susedna atoma sa drugim prstenom. Svaki prsten fuzionisanog karbocikla može da bude odabran od zasićenih, nezasićenih i aromatičnih prstenova. U jednom primeru izvođenja, aromatični prsten, npr., fenil, može da bude fuzionisan sa zasićenim ili nezasićenim prstenom, npr., cikloheksan, ciklopentan, ili cikloheksen. Bilo koja kombinacija zasićenih, nezasićenih i aromatičnih bicikličnih prstenova, kako dopušta valenca, uključena je u definiciju karbociklika. Primeri "karbocikla" uključuju ciklopentan, cikloheksan, biciklo[2.2.1] heptan, 1,5-ciklooktadien, 1,2,3,4-tetrahidronaftalen, biciklo[4.2.0]okt-3-en, naftalen i adamantan. Primeri fuzionisanih karbocikla uključuju dekalin, naftalen, 1,2,3,4 tetrahidronaftalen, biciklo[4.2.0]oktan, 4,5,6,7- tetrahidro-1H-inden i biciklo[4.1.0]hept-3-en. "Karbocikli" mogu da budu supstituisani na bilo kojoj ili više pozicija koje mogu da nose atom vodonika.
[0064] "Cikloalkil" grupa je ciklični ugljovodonik koji je potpuno zasićen. "Cikloalkil" uključuje monociklične i biciklične prstenove. Tipično, monociklična cikloalkil grupa ima od 3 do oko 10 atoma ugljenika, tipičnije 3 do 8 atoma ugljenika osim ako nije drugačije definisano. Drugi prsten bicikličnog cikloalkila može da bude odabran od zasićenih, nezasićenih i aromatičnih prstenova. Cikloalkil uključuje biciklične molekule u kojima dva prstena dele jedan, dva ili tri ili više atoma. Pojam "fuzionisani cikloalkil" odnosi se na biciklični cikloalkil u kome svaki od prstenova deli dva susedna atoma sa drugim prstenom. Drugi prsten fuzionisanog bicikličnog cikloalkila može da bude odabran od zasićenih, nezasićenih i aromatičnih prstenova. "Cikloalkenil" grupa je ciklični ugljovodonik koji sadrži jednu ili više dvostrukih veza.
[0065] Pojam "karbociklilalkil", kako se ovde koristi, odnosi se na alkil grupu supstituisanu karbocikličnom grupom.
[0066] Pojam "karbonat" je poznat u stanju tehnike i odnosi se na grupu -OCO2-R10, u kojoj R10 predstavlja ugljovodoničnu grupu.
[0067] Pojam "karboksi", kako se ovde koristi, odnosi se na grupu predstavljenu formulom -CO2H.
[0068] Pojam "estar", kako se ovde koristi, odnosi se na grupu -C(O)OR10 u kojoj R10 predstavlja ugljovodoničnu grupu.
[0069] Pojam "etar", kako se ovde koristi, odnosi se na ugljovodoničnu grupu vezanu preko kiseonika za drugu ugljovodoničnu grupu. Prema tome, etarski supstituent ugljovodonične grupe može da bude ugljovodonična grupa-O-. Etri mogu da budu simetrični ili nesimetrični. Primeri etara uključuju, ali nisu ograničeni na heterocikl-O-heterocikl i aril-O-heterocikl. Etri uključuju "alkoksialkil" grupe, koje mogu da budu predstavljene opštom formulom alkil-O-alkil.
[0070] Pojmovi "halo" i "halogen", kako se ovde koriste, označavaju halogen i uključuju hloro, fluoro, bromo i jodo.
[0071] Pojmovi "hetaralkil" i "heteroaralkil", kako se ovde koriste, odnose se na alkil grupu supstituisanu hetaril grupom.
[0072] Pojam "heteroalkil", kako se ovde koristi, odnosi se na zasićen ili nezasićen lanac atoma ugljenika i najmanje jedan heteroatom, pri čemu nijedna dva heteroatoma nisu susedna.
[0073] Pojmovi "heteroaril" i "hetaril" uključuju supstituisane ili nesupstituisane aromatične strukture sa jednim prstenom, poželjno 5- do 7-članim prstenom, poželjnije 5- do 6-članim prstenom, čije prstenaste strukture uključuju najmanje jedan heteroatom, poželjno jedan do četiri heteroatoma, poželjnije jedan ili dva heteroatoma. Pojmovi "heteroaril" i "hetaril" takođe uključuju policiklične prstenaste sisteme koji imaju dva ili više cikličnih prstenova u kojima su dva ili više ugljenika zajednička za dva susedna prstena u kojima je najmanje jedan od prstenova heteroaromatičan, npr., drugi ciklični prstenovi mogu da budu cikloalkili, cikloalkenili, cikloalkinili, arili, heteroarili, i/ili heterociklili. Heteroaril grupe uključuju, na primer, pirol, furan, tiofen, imidazol, oksazol, tiazol, pirazol, piridin, pirazin, piridazin i pirimidin, i slično.
[0074] Pojam "heteroatom", kako se ovde koristi, označava atom bilo kog elementa koji nije ugljenik ili vodonik. Poželjni heteroatomi su azot, kiseonik i sumpor.
[0075] Pojmovi "heterociklil", "heterocikl" i "heterociklični" odnose se na supstituisane ili nesupstituisane nearomatične prstenaste strukture, poželjno 3- do 10-člane prstenove, poželjnije 3- do 7-člane prstenove, čije prstenaste strukture uključuju najmanje jedan heteroatom, poželjno jedan do četiri heteroatoma, poželjnije jedan ili dva heteroatoma. Pojmovi "heterociklil" i "heterociklični" takođe uključuju policiklične prstenaste sisteme koji imaju dva ili više cikličnih prstenova u kojima su dva ili više ugljenika zajednička za dva susedna prstena u kojima je najmanje jedan od prstenova heterocikličan, npr., drugi ciklični prstenovi mogu da budu cikloalkili, cikloalkenili, cikloalkinili, arili, heteroarili, i/ili heterociklili. Heterociklil grupe uključuju, na primer, piperidin, piperazin, pirolidin, morfolin, laktone, laktame, i slično.
[0076] Pojam "heterociklilalkil", kako se ovde koristi, odnosi se na alkil grupu supstituisanu heterociklil grupom.
[0077] Pojam "ugljovodonična grupa", kako se ovde koristi, odnosi se na grupu koja je vezana preko atoma ugljenika koji nema =O ili =S supstituent, i tipično ima najmanje jednu vezu ugljenik-vodonik i primarni ugljenični glavni lanac, ali može opciono da uključuje heteroatome. Prema tome, grupe kao metil, etoksietil, 2-piridil i trifluorometil smatraju se ugljovodoničnim grupama u svrhu ove prijave, ali se supstituenti kao što je acetil (koji ima =O supstituent na vezujućem ugljeniku) i etoksi (koji je vezan preko kiseonika, a ne ugljenika) ne smatraju ugljovodoničnim grupama. Ugljovodonične grupe uključuju, ali nisu ograničene na aril, heteroaril, karbociklil, heterociklil, alkil, alkenil, alkinil i njihove kombinacije.
[0078] Pojam "hidroksialkil", kako se ovde koristi, odnosi se na alkil grupu supstituisanu hidroksi grupom.
[0079] Pojam "niži", kada se koristi u vezi sa hemijskim fragmentom, kao što je, acil, aciloksi, alkil, alkenil, alkinil, ili alkoksi namenjen je da uključuju grupe u kojima ima deset ili manje atoma koji nisu vodonik u supstituentu, poželjno šest ili manje. "Niži alkil", na primer, odnosi se na alkil grupu koja sadrži deset ili manje atoma ugljenika, poželjno šest ili manje. U određenim primerima izvođenja, acil, aciloksi, alkil, alkenil, alkinil, ili alkoksi supstituenti koji su ovde definisani su redom niži acil, niži aciloksi, niži alkil, niži alkenil, niži alkinil, ili niži alkoksi, bilo da se pojavljuju sami, ili u kombinaciji sa drugim supstituentima, kao što je opisano za hidroksialkil i aralkil (u kom slučaju se, na primer, atomi u aril grupi ne računaju pri brojanju atoma ugljenika u alkil supstituentu).
[0080] Pojmovi "policiklil", "policikl" i "policiklični" odnose se na dva ili više prstenova (npr., cikloalkile, cikloalkenile, cikloalkinile, arile, heteroarile, i/ili heterociklile) u kojima su dva ili više atoma zajednički za dva susedna prstena, npr., prstenovi su "fuzionisani prstenovi". Svaki od prstenova policikla može da bude supstituisan ili nesupstituisan. U određenim primerima izvođenja, svaki prsten policikla sadrži od 3 do 10 atoma u prstenu, poželjno od 5 do 7.
[0081] Pojam "silil" odnosi se na silicijumski fragment sa tri ugljovodonična fragmenta vezana za njega.
[0082] Pojam "supstituisan" odnosi se na fragmente koji imaju supstituente koji zamenjuju vodonik na jednom ili više ugljenika glavnog lanca. Jasno je da "supstitucija" ili "supstituisan sa" uključuje implicitnu odredbu da je takva supstitucija u skladu sa dopuštenom valencom supstituisanog atoma i supstituenta, i da supstitucija rezultuje stabilnim jedinjenjem, npr., koje ne podleže spontanoj transformaciji kao što je rearanžman, ciklizacija, eliminacija, itd. Kako se ovde koristi, pojam "supstituisan" predviđen je da uključuje sve prihvatljive supstituente organskih jedinjenja. U širokom aspektu, prihvatljivi supstituenti uključuju aciklične i ciklične, granate i negranate, karbociklične i heterociklične, aromatične i nearomatične supstituente organskih jedinjenja. Prihvatljivi supstituenti mogu da budu jedan ili više, i isti ili različiti za odgovarajuća organska jedinjenja. U svrhu ovog pronalaska, heteroatomi kao što je azot mogu da imaju vodonične supstituente i/ili bilo koje prihvatljive supstituente organskih jedinjenja koji su ovde opisani koji odgovaraju valenci heteroatoma. Supstituenti mogu da uključuju bilo koje supstituente opisane u ovom dokumentu, na primer, halogen, hidroksil, karbonil (kao što je karboksil, alkoksikarbonil, formil, ili acil), tiokarbonil (kao što je tioestar, tioacetat, ili tioformat), alkoksil, fosforil, fosfat, fosfonat, fosfinat, amino, amido, amidin, imin, cijano, nitro, azido, sulfhidril, alkiltio, sulfat, sulfonat, sulfamoil, sulfonamido, sulfonil, heterociklil, aralkil, ili aromatični ili heteroaromatični fragment. Stručnjaci u ovoj oblasti će znati da supstituenti mogu i sami da budu supstituisani, ako je prikladno. Osim ako nisu izričito naznačene kao "nesupstituisane", podrazumeva se da pominjanje hemijskih fragmenata u ovom dokumentu uključuje supstituisane varijante. Na primer, pominjanje "aril" grupe ili fragmenta implicitno uključuje i supstituisane i nesupstituisane varijante.
[0083] Pojam "sulfat" je poznat u stanju tehnike i odnosi se na grupu -OSO3H, ili njenu farmaceutski prihvatljivu so.
[0084] Pojam "sulfonamid" je poznat u stanju tehnike i odnosi se na grupu predstavljenu opštim formulama
u kojima R9 i R10 nezavisno predstavljaju vodonik ili ugljovodoničnu grupu, kao što je alkil, ili R9 i R10 uzeti zajedno sa umetnutim atomom/atomima čine heterocikl koji ima od 4 do 8 atoma u strukturi prstena.
[0085] Pojam "sulfoksid" je poznat u stanju tehnike i odnosi se na grupu -S(O)-R10, u kojoj R10 predstavlja ugljovodoničnu grupu.
[0086] Pojam "sulfonat" je poznat u stanju tehnike i odnosi se na grupu SO3H, ili njenu farmaceutski prihvatljivu so.
[0087] Pojam "sulfon" je poznat u stanju tehnike i odnosi se na grupu -S(O)2-R10, u kojoj R10 predstavlja ugljovodoničnu grupu.
[0088] Pojam "tioalkil", kako se ovde koristi, odnosi se na alkil grupu supstituisanu tiol grupom.
[0089] Pojam "tioestar", kako se ovde koristi, odnosi se na grupu -C(O)SR10 ili -SC(O)R10 u kojoj R10 predstavlja ugljovodoničnu grupu.
[0090] Pojam "tioetar", kako se ovde koristi, predstavlja ekvivalent etru, u kome je kiseonik zamenjen sumporom.
[0091] Pojam "urea" je poznat u stanju tehnike i može da bude predstavljena opštom formulom
u kojoj R9 i R10 nezavisno predstavljaju vodonik ili ugljovodoničnu grupu, kao što je alkil, ili svaka pojava R9 zajedno sa R10 i umetnutim atomom/atomima čini heterocikl koji ima od 4 do 8 atoma u strukturi prstena.
[0092] "Zaštitna grupa" se odnosi na grupu atoma koja, kada je vezana za reaktivnu funkcionalnu grupu u molekulu, maskira, redukuje ili sprečava reaktivnost funkcionalne grupe. Tipično, zaštitna grupa može selektivno da se ukloni po želji tokom sinteze. Primeri zaštitnih grupa mogu da se nađu u Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, 3rd Ed., 1999, John Wiley & Sons, NY i Harrison et al., Compendium of Synthetic Organic Methods, Vols. 1-8, 1971-1996, John Wiley & Sons, NY. Reprezentativne zaštitne grupe za azot uključuju, ali nisu ograničene na formil, acetil, trifluoroacetil, benzil, benziloksikarbonil ("CBZ"), tercbutoksikarbonil ("Boc"), trimetilsilil ("TMS"), 2 trimetilsilil-etansulfonil ("TES"), tritil i supstituisane tritil grupe, aliloksikarbonil, 9 fluorenilmetiloksikarbonil ("FMOC"), nitroveratriloksikarbonil ("NVOC") i slično. Reprezentativne zaštitne grupe za hidroksil uključuju, ali nisu ograničene na one u kojima je hidroksil grupa ili acilovana (esterifikovana) ili alkilovana kao što su benzil i tritil etri, kao i alkil etri, tetrahidropiranil etri, trialkilsilil etri (npr., TMS ili TIPS grupe), glikol etri, kao što su derivati etilen glikola i propilen glikola i ail etri.
[0093] Pojam "pružaoci zdravstvenih usluga" odnosi se na pojedince ili organizacije koje pružaju zdravstvene usluge osobi, zajednici, itd. Primeri "pružalaca zdravstvenih usluga" uključuju lekare, bolnice, penzione zajednice sa kontinuiranom negom, rehabilitacione centre, ustanove subakutne nege, klinike, specijalizovane klinike širokog profila, samostalne ambulantne centre, agencije za kućnu zdravstvenu negu i organizacije zdravstvenog osiguranja.
[0094] Kako se ovde koristi, terapeutik koji "sprečava" poremećaj ili stanje odnosi se na jedinjenje koje, u statističkom uzorku, smanjuje pojavu poremećaja ili stanja u tretiranom uzorku u odnosu na netretirani kontrolni uzorak, ili odlaže početak ili smanjuje ozbiljnost jednog ili više simptoma poremećaja ili stanja u odnosu na netretirani kontrolni uzorak.
[0095] Pojam "lečenje" uključuje profilaktičke i/ili terapeutske tretmane. Pojam "profilaktički ili terapeutski" tretman je poznat u stanju tehnike i uključuje primenu kod domaćina jednog ili više predmetnih kompozicija. Ako se primenjuje pre kliničkog ispoljavanja neželjenog stanja (npr., bolesti ili drugog neželjenog stanja životinje-domaćina) tada je tretman profilaktički (tj., on štiti domaćina od razvoja neželjenog stanja), dok ako se primenjuje posle ispoljavanja neželjenog stanja, tretman je terapeutski, (tj., namenjen je da smanji, poboljša ili stabilizuje postojeće neželjeno stanje ili njegova sporedna dejstva).
[0096] Pojam "prolek" je namenjen da obuhvati jedinjenja koja se, pod fiziološkim uslovima, pretvaraju u terapeutski aktivne agense predmetnog pronalaska (npr., jedinjenje formule I). Opšti postupak za pravljenje proleka uključuje jedan ili više odabranih fragmenata koji hidrolizuju pod fiziološkim uslovima kako bi se željeni molekul oslobodio. U drugim primerima izvođenja, prolek se pretvara u aktivni molekul enzimskom aktivnošću životinje-domaćina. Na primer, estri ili karbonati (npr., estri ili karbonati alkohola ili karboksilnih kiselina) su poželjni prolekovi predmetnog pronalaska. U određenim primerima izvođenja, neka ili sva jedinjenja formule I u formulaciji prikazanoj iznad u tekstu mogu da se zamene odgovarajućim pogodnim prolekom, npr., kada je hidroksil u parentalnom jedinjenju predstavljen estrom ili karbonatom, ili je karboksilna kiselina prisutna u parentalnom jedinjenju predstavljena estrom.
Farmaceutske kompozicije
[0097] Kompozicije i postupci koji su ovde opisani mogu da se koriste za lečenje subjekta kome je to potrebno. U određenim primerima izvođenja, subjekt je sisar kao što je čovek, ili sisar koji nije čovek. Kada se primenjuje kod životinje, kao što je čovek, kompozicija ili jedinjenje se poželjno primenjuje kao farmaceutska kompozicija koja sadrži, na primer, jedinjenje prema pronalasku i farmaceutski prihvatljiv nosač. Farmaceutski prihvatljivi nosači su dobro poznati u stanju tehnike i uključuju, na primer, vodene rastvore kao što je voda ili fiziološki puferisani slani rastvor ili drugi rastvarači ili vehikulumi kao što su glikoli, glicerol, ulja kao što je maslinovo ulje, ili injektabilni organski estri. U poželjnom primeru izvođenja, kada su takve farmaceutske kompozicije za primenu kod čoveka, posebno za invazivne puteve primene (tj., puteve, kao što je injekcija ili implantacija, koja zaobilazi transport ili difuziju kroz epitelnu barijeru), vodeni rastvor je bez pirogena, ili suštinski bez pirogena. Ekscipijensi mogu da budu odabrani, na primer, za postizanje odloženog oslobađanja agensa ili za selektivno delovanje na jednu ili više ćelija, tkiva ili organa. Farmaceutska kompozicija može da bude u jediničnom doznom obliku kao što je tableta, kapsula (uključujući kapsulu za posipanje i želatinsku kapsulu), granula, liofilizovani oblik za rekonstituciju, prašak, rastvor, sirup, supozitorija, injekcija ili slično. Kompozicija može takođe da bude prisutna u sistemu za transdermalnu dostavu, npr., flaster za kožu. Kompozicija takođe može da bude prisutna u rastvoru pogodnom za topikalnu primenu, kao što su kapi za oči.
[0098] Farmaceutski prihvatljiv nosač može da sadrži fiziološki prihvatljive agense koji deluju, na primer, tako da stabilizuju, povećaju rastvorljivost ili da povećaju apsorpciju jedinjenja kao što je jedinjenje prema pronalasku. Takvi fiziološki prihvatljivi agensi uključuju, na primer, ugljene hidrate, kao što su glukoza, saharoza ili dekstrani, antioksidanse, kao što je askorbinska kiselina ili glutation, helirajuće agense, proteine niske molekulske težine ili druge stabilizatore ili ekscipijense. Izbor farmaceutski prihvatljivog nosača, uključujući fiziološki prihvatljivi agens, zavisi, na primer, od puta primene kompozicije. Preparat ili farmaceutska kompozicija može da bude samo-emulgujući sistem za isporuku lekova ili samo-mikroemulgujući sistem za isporuku lekova. Farmaceutska kompozicija (preparat) može da bude i lipozom ili druga polimerna matrica, koja može da ima inkorporisano u sebi, na primer, jedinjenje prema pronalasku. Lipozomi, na primer, koji sadrže fosfolipide ili druge lipide, su netoksični, fiziološki prihvatljivi nosači koji mogu da se metabolišu, i relativno su jednostavni za pripremu i primenu.
[0099] Izraz "farmaceutski prihvatljiv" se ovde koristi da označi ona jedinjenja, materijale, kompozicije, i/ili dozne oblike koji su, u okviru razumne medicinske procene, pogodni za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudi i životinja bez prekomerne toksičnosti, iritacija, alergijskog odgovora, ili drugih problema ili komplikacija, srazmerno razumnom odnosu koristi i rizika.
[0100] Izraz "farmaceutski prihvatljiv nosač", kako se ovde koristi, označava farmaceutski prihvatljiv materijal, kompoziciju ili vehikulum, kao što je tečni ili čvrsti punilac, razblaživač, ekscipijens, rastvarač ili materijal za inkapsulaciju. Svaki nosač mora da bude "prihvatljiv" u smislu da je kompatibilan sa drugim sastojcima formulacije i nije štetan za pacijenta. Neki primeri materijala koji mogu da služe kao farmaceutski prihvatljivi nosači uključuju: (1) šećere, kao što su laktoza, glukoza i saharoza; (2) skrobove, kao što je kukuruzni skrob i skrob krompira; (3) celulozu, i njene derivate, kao što su natrijum karboksimetil celuloza, etil celuloza i celulozni acetat; (4) sprašeni tragakant; (5) slad; (6) želatin; (7) talk; (8) ekscipijense, kao što su kakao buter i voskovi za supozitorije; (9) ulja, kao što su ulje kikirikija, pamučno ulje, ulje šafranike, susamovo ulje, maslinovo ulje, kukuruzno ulje i sojino ulje; (10) glikole, kao što je propilen glikol; (11) poliole, kao što su glicerin, sorbitol, manitol i polietilen glikol; (12) estre, kao što su etil oleat i etil laurat; (13) agar; (14) puferske agense, kao što su magnezijum hidroksid i aluminijum hidroksid; (15) alginsku kiselinu; (16) vodu bez pirogena; (17) izotonični slani rastvor; (18) Ringerov rastvor; (19) etil alkohol; (20) fosfatno puferisane rastvore; i (21) druge netoksične kompatibilne supstance koje se koriste u farmaceutskim formulacijama.
[0101] Farmaceutska kompozicija (preparat) može da se primeni kod subjekta bilo kojim od brojnih puteva primene uključujući, na primer, oralno (na primer, natapanje u vodenim ili nevodenim rastvorima ili suspenzije, tablete, kapsule (uključujući kapsule za posipanje i želatinske kapsule), boluse, praškove, granule, paste za primenu na jeziku); apsorpcijom kroz oralnu sluzokožu (npr., podjezično); analno, rektalno ili vaginalno (na primer, vagitorija, krema ili pena); parenteralno (uključujući intramuskularno, intravenski, subkutano ili intratekalno kao, na primer, sterilni rastvor ili suspenzija); nazalno; intraperitonealno; subkutano; transdermalno (na primer kao flaster za primenu na koži); i topikalno (na primer, kao krema, mast ili sprej primenjen na kožu, ili kao kapi za oči). Jedinjenje može takođe da bude formulisano za inhalaciju. U određenim primerima izvođenja, jedinjenje može da bude jednostavno rastvoreno ili suspendovano u sterilnoj vodi. Detalji o pogodnim putevima primene i kompozicijama pogodnim za njih mogu da se nađu u, na primer, SAD pat. br. 6,110,973, 5,763,493, 5,731,000, 5,541,231, 5,427,798, 5,358,970 i 4,172,896, kao i u patentima koji su tamo citirani.
[0102] Formulacije mogu biti prikladno predstavljene u obliku jedinične doze i mogu da se pripreme bilo kojim postupkom dobro poznatim u oblasti farmacije. Količina aktivnog sastojka koja može da se kombinuje sa nosačem za proizvodnju oblika jedinične doze varira u zavisnosti od domaćina koji se leči, od određenog načina primene. Količina aktivnog sastojka koja može da se kombinuje sa nosačem za dobijanje oblika jedinične doze će uglavnom biti ona količina jedinjenja koja proizvodi terapeutski efekat. Uopšteno, od sto procenata, ova količina će se kretati od oko 1 procenata do oko devedeset i devet procenata aktivnog sastojka, poželjno od oko 5 procenata do oko 70 procenata, a najpoželjnije od oko 10 procenata do oko 30 procenata.
[0103] Postupci za pripremu ovih formulacija ili kompozicija uključuju korak povezivanja aktivnog jedinjenja, kao što je jedinjenje prema pronalasku, sa nosačem i, opciono, jednim ili više pomoćnih sastojaka. Uopšteno, formulacije se pripremaju ravnomernim i bliskim povezivanjem jedinjenja predmetnog pronalaska sa tečnim nosačima, ili fino razdeljenim čvrstim nosačima, ili oba, i zatim, ako je potrebno, oblikovanjem proizvoda.
[0104] Formulacije prema pronalasku pogodne za oralnu primenu mogu da budu u obliku kapsula (uključujući kapsule za posipanje i želatinske kapsule), skrobnih kapsula, pilula, tableta, lozengi (upotrebom aromatizovane baze, obično saharoze i akacije ili tragakanta), liofilizovanih oblika, praškova, granula, ili u vidu rastvora ili suspenzija u vodenoj ili ne-vodenoj tečnosti, ili u vidu tečne emulzije ulje-u-vodi ili voda-u-ulju, ili u vidu eliksira ili sirupa, ili u vidu pastila (upotrebom inertne baze, kao što je želatin i glicerin, ili saharoza i akacija) i/ili u vidu rastvora za ispiranje usta i slično, pri čemu sve od navedenog sadrži unapred određenu količinu jedinjenja predmetnog pronalaska kao aktivni sastojak. Kompozicije ili jedinjenja mogu takođe da se primene kao bolus, elektuarijum ili pasta.
[0105] Za pripremu čvrstih doznih oblika za oralnu primenu (kapsula (uključujući kapsule za posipanje i želatinske kapsule), tableta, pilula, dražeja, praškova, granula i slično), aktivni sastojak se meša sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, kao što je natrijum citrat ili dikalcijum fosfat, i/ili bilo šta od sledećeg: (1) punioci ili sredstva za povećanje zapremine, kao što su skrobovi, laktoza, saharoza, glukoza, manitol, i/ili silicijumska kiselina; (2) veziva, kao što su, na primer, karboksimetilceluloza, alginati, želatin, polivinil pirolidon, saharoza i/ili akacija; (3) humektanti, kao što je glicerol; (4) agensi za raspadanje, kao što je agar-agar, kalcijum karbonat, skrob krompira ili tapioke, alginska kiselina, određeni silikati, i natrijum karbonat; (5) agensi za usporavanje rastvaranja, kao što je parafin; (6) ubrzivači apsorpcije, kao što su kvaternarna amonijumova jedinjenja; (7) agensi za kvašenje, kao što je, na primer, cetil alkohol i glicerol monostearat; (8) apsorbensi, kao što je glina kaolin i bentonit; (9) lubrikansi, kao talk, kalcijum stearat, magnezijum stearat, čvrsti polietilen glikoli, natrijum lauril sulfat, i njihove smeše; (10) agensi za obrazovanje kompleksa, kao što su modifikovani i nemodifikovani ciklodekstrini; i (11) agensi za bojenje. U slučaju kapsula (uključujući kapsule za posipanje i želatinske kapsule), tableta i pilula, farmaceutske kompozicije mogu da sadrže i puferske agense. Čvrste kompozicije sličnog tipa mogu takođe da se koriste kao punioci u meko i čvrsto punjenim želatinskim kapsulama upotrebom takvih ekscipijenasa kao laktoza ili mlečni šećeri, kao i visoko molekulski polietilen glikoli i slično.
[0106] Tableta može da se napravi presovanjem ili livenjem, opciono sa jednim ili više pomoćnih sastojaka. Presovane tablete mogu da se pripreme upotrebom vezivnog sredstva (na primer, želatina ili hidroksipropilmetil celuloze), lubrikansa, inertnog razblaživača, konzervansa, agensa za raspadanje (na primer, natrijum skrob glikolata ili umrežene natrijum karboksimetil celuloze), površinski aktivnog agensa ili agensa za dispergovanje. Livene tablete mogu da se naprave livenjem u pogodnoj mašini smeše praškastog jedinjenja navlaženog inertnim tečnim razblaživačem.
[0107] Tablete, i drugi čvrsti dozni oblici farmaceutskih kompozicija, kao što su dražeje, kapsule (uključujući kapsule za posipanje i želatinske kapsule), pilule i granule, mogu opciono da se ostvare ili pripreme sa premazima i omotačima, kao što su enterični premazi i drugi premazi dobro poznati u oblasti farmaceutske formulacije. Oni mogu takođe da budu formulisani tako da obezbede sporo ili kontrolisano oslobađanje aktivnog sastojka u njima upotrebom, na primer, hidroksipropilmetil celuloze u promenljivim proporcijama tako da obezbede željeni profil oslobađanja, drugih polimernih matrica, lipozoma i/ili mikrosfera. Oni mogu da se sterilišu, na primer, filtracijom kroz filter koji zadržava bakterije, ili uključivanjem agenasa za sterilizaciju u obliku sterilnih čvrstih kompozicija koje mogu da budu rastvorene u sterilnoj vodi, ili nekom drugom sterilnom injektabilnom medijumu neposredno pre upotrebe. Ove kompozicije mogu takođe opciono da sadrže agense za postizanje neprozirnosti i mogu da budu kompozicija koje oslobađaju aktivno sredstvo/sredstva isključivo, ili prvenstveno, u određenom delu gastrointestinalnog trakta, opciono, na odloženi način. Primeri kompozicija za oblaganje koje mogu da se koriste uključuju polimerne supstance i voskove. Aktivni sastojak može da bude i u mikro-inkapsuliranom obliku, ako je pogodno, sa jednim ili više od gore opisanih ekscipijenasa.
[0108] Tečni dozni oblici korisni za oralnu primenu uključuju farmaceutski prihvatljive emulzije, liofilizovane oblike za rekonstituciju, mikroemulzije, rastvore, suspenzije, sirupe i eliksire. Pored aktivnog sastojka, tečni dozni oblici mogu da sadrže inertne razblaživače koji se uobičajeno koriste u ovoj oblasti, kao što su, na primer, voda ili drugi rastvarači, ciklodekstrini i njihovi derivati, agensi koji poboljšavaju rastvaranje i emulgatori, kao što su etil alkohol, izopropil alkohol, etil karbonat, etil acetat, benzil alkohol, benzil benzoat, propilen glikol, 1,3-butilen glikol, ulja (posebno, ulje pamučnog semena, kikirikija, kukuruza, klica, maslinovo, ricinusovo i susamovo ulje), glicerol, tetrahidrofuril alkohol, polietilen glikoli i estri masnih kiselina sorbitana, i njihove smeše.
[0109] Pored inertnih razblaživača, oralne kompozicije mogu da uključuju i adjuvanse kao što su agensi za kvašenje, emulgatori i agensi za suspendovanje, zaslađivači, arome, agensi za bojenje, agensi za davanje mirisa i konzervansi.
[0110] Suspenzije, pored aktivnih jedinjenja, mogu da sadrže agense za suspendovanje kao, na primer, etoksilisane izostearil alkohole, polioksietilen sorbitol i sorbitan estre, mikrokristalnu celulozu, aluminijum metahidroksid, bentonit, agar-agar i tragakant, i njihove smeše.
[0111] Formulacije farmaceutskih kompozicija za rektalnu, vaginalnu, ili uretralnu primenu mogu da budu predstavljene kao supozitorije, koje mogu da se pripreme mešanjem jednog ili više aktivnih jedinjenja sa jednim ili više pogodnih neiritabilnih ekscipijenasa ili nosača koji sadrže, na primer, kakao buter, polietilen glikol, vosak za supozitorije ili salicilat, koji su čvrsti na sobnoj temperaturi, a tečni na temperaturi tela i stoga će se topiti u rektumu ili vagini i oslobađati aktivno jedinjenje.
[0112] Formulacije farmaceutskih kompozicija za primenu u ustima mogu da budu predstavljene kao rastvor za ispiranje usta, ili oralni sprej, ili oralna mast.
[0113] Alternativno ili dodatno, kompozicije mogu da budu formulisane za isporuku putem katetera, stenta, žice, ili drugog intraluminalnog uređaja. Isporuka putem takvih uređaja može da bude posebno korisna za isporuku u bešiku, uretru, ureter, rektum, ili tanko crevo.
[0114] Formulacije koje su pogodne za vaginalnu primenu takođe uključuju vagitorije, tampone, kreme, gelove, paste, pene ili formulacije spreja koje sadrže takve nosače za koje je u stanju tehnike poznato da su odgovarajući.
[0115] Dozni oblici za topikalnu ili transdermalnu primenu uključuju praškove, sprejeve, masti, paste, kreme, losione, gelove, rastvore, flastere i inhalante. Aktivno jedinjenje može da bude pomešano pod sterilnim uslovima sa farmaceutski prihvatljivim nosačem, i sa bilo kojim konzervansima, puferima, ili propelantima koji mogu da budu potrebni.
[0116] Masti, paste, kreme i gelovi mogu da sadrže, pored aktivnog jedinjenja, ekscipijense, kao što su životinjske i biljne masti, ulja, voskovi, parafini, skrob, tragakant, derivati celuloze, polietilen glikoli, silikoni, bentoniti, silicijumska kiselina, talk i cink oksid, ili njihove smeše.
[0117] Praškovi i sprejevi mogu da sadrže, pored aktivnog jedinjenja, ekscipijense kao što su laktoza, talk, silicijumska kiselina, aluminijum hidroksid, kalcijum silikati i poliamidni prah, ili smeše ovih supstanci. Sprejevi mogu dodatno da sadrže uobičajene propelante, kao što su hlorofluorougljovodonici i isparljivi nesupstituisani ugljovodonici, kao što su butan i propan.
[0118] Transdermalni flasteri imaju dodatnu prednost obezbeđivanja kontrolisane isporuke jedinjenja predmetnog pronalaska u telo. Takvi dozni oblici mogu da se naprave rastvaranjem ili disperzijom aktivnog jedinjenja u odgovarajućem medijumu. Mogu da se koriste i poboljšivači apsorpcije za povećanje difuzije jedinjenja kroz kožu. Brzina takve difuzije može da se kontroliše obezbeđivanjem membrane za kontrolu brzine, ili dispergovanjem jedinjenja u polimernoj matrici ili gelu.
[0119] Oftamološke formulacije, masti za oči, praškovi, rastvori i slično, takođe su obuhvaćeni obimom ovog pronalaska. Primeri oftamoloških formulacija opisani su u SAD objavama br.
2005/0080056, 2005/0059744, 2005/0031697 i 2005/004074 i SAD patentu br.6,583,124, čiji je sadržaj ovde obuhvaćen putem reference. Po želji, tečne oftamološke formulacije imaju svojstva slična onima kod suza, očne vodice ili tečnosti staklastog tela ili su kompatibilne sa tim tečnostima. Poželjni put primene je lokalna primena (npr., topikalna primena, kao što su kapi za oči, ili primena putem implanta).
[0120] Izrazi "parenteralna primena" i "primenjen parenteralno", kako se ovde koriste, označavaju načine primene koji nisu enteralna i topikalna primena, obično pomoću injekcije, i uključuju, bez ograničenja, intravensku, intramuskularnu, intraarterijalnu, intratekalnu, intrakapsularnu, intraorbitalnu, intrakardijalnu, intradermalnu, intraperitonealnu, transtrahealnu, subkutanu, subkutikularnu, intraartikularnu, subkapsularnu, subarahnoidalnu, intraspinalnu i intrasternalnu injekciju i infuziju.
[0121] Farmaceutske kompozicije pogodne za parenteralnu primenu sadrže jedno ili više aktivnih jedinjenja u kombinaciji sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih sterilnih izotoničnih vodenih ili nevodenih rastvora, disperzija, suspenzija ili emulzija, ili sterilne praškove koji mogu da budu rekonstituisani u sterilnim injektabilnim rastvorima ili disperzijama neposredno pre upotrebe, koji mogu da sadrže antioksidanse, pufere, bakteriostatske agense, supstance koje se rastvaraju koje čine formulaciju izotoničnom sa krvlju predviđenog primaoca ili agense za suspendovanje ili agense za zgušnjavanje.
[0122] Primeri pogodnih vodenih i nevodenih nosača koji mogu da se koriste u farmaceutskim kompozicijama prema pronalasku uključuju vodu, etanol, poliole (kao što je glierol, propilen glikol, polietilen glikol, i slično) i njihove pogodne smeše, biljna ulja, kao što je maslinovo ulje, i injektabilne organske estre, kao što je etil oleat. Ispravna fluidnost može da se održava, na primer, upotrebom materijala za oblaganje, kao što je lecitin, održavanjem potrebne veličine čestica u slučaju disperzija i upotrebom surfaktanata.
[0123] Ove kompozicije mogu da sadrže i adjuvanse kao što su konzervansi, agensi za kvašenje, emulgatori i agensi za dispergovanje. Sprečavanje delovanja mikroorganizama može da se osigura uključivanjem različitih antibakterijskih i antifungalnih agenasa, na primer, parabena, hlorobutanola, fenol sorbinske kiseline, i slično. Može da bude poželjno i uključivanje izotoničnih agenasa, kao što su šećeri, natrijum hlorid, i slično u kompozicije. Pored toga, produžena apsorpcija injektabilnog farmaceutskog oblika može da se postigne uključivanjem agenasa koji odlaži apsorpciju kao što su aluminijum monostearat i želatin.
[0124] U nekim slučajevima, u cilju produžavanja dejstva leka, poželjno je usporiti apsorpciju leka iz subkutane ili intramuskularne injekcije. Ovo može da se postigne upotrebom tečne suspenzije kristalnog ili amorfnog materijala koji ima slabu rastvorljivost u vodi. Brzina apsorpcije leka tada zavisi od brzine njegovog rastvaranja, koja, zauzvrat, može da zavisi od veličine kristala i kristalne forme. Alternativno, usporena apsorpcija parenteralno primenjenog oblika leka postiže se rastvaranjem ili suspendovanje leka u uljanom vehikulumu.
[0125] Injektabilni depo-oblici se prave obrazovanjem mikroinkapsuliranih matrica predmetnog jedinjenja u biorazgradivim polimerima kao što je polilaktid-poliglikolid. U zavisnosti od odnosa leka prema polimeru i prirode konkretnog polimera koji se koristi, brzina oslobađanja leka može da se kontroliše. Primeri drugih biorazgradivih polimera uključuju poli(ortoestre) i poli(anhidride). Depo-injektabilne formulacije se takođe pripremaju zarobljavanjem leka u lipozomima ili mikroemulzijama koje su kompatibilne sa tkivom tela.
[0126] Za upotrebu u ovde opisanim postupcima, aktivna jedinjenja mogu da se daju sami po sebi, ili kao farmaceutska kompozicija koja sadrži, na primer, 0.1 do 99.5% (poželjnije, 0.5 do 90%) aktivnog sastojka u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim nosačem.
[0127] Postupci za uvođenje mogu takođe da budu obezbeđeni pomoću punjivih ili biorazgradivih uređaja. Poslednjih godina razvijeni su i ispitani in vivo, različiti polimerni uređaji sa sporim oslobađanjem za kontrolisanu isporuku lekova, uključujući proteinske biofarmaceutike. Razni biokompatibilni polimeri (uključujući hidrogelove), uključujući i biorazgradive i nerazgradive polimere, mogu da se koriste za obrazovanje implanta za produženo oslobađanje jedinjenja na konkretnom ciljnom mestu.
[0128] Stvarni nivoi doziranja aktivnih sastojaka u farmaceutskim kompozicijama mogu da se variraju tako da se dobije količina aktivnog sastojka koja je efikasna za postizanje željenog terapijskog odgovora za određenog pacijenta, kompoziciju i način primene, a nije toksična za pacijenta.
[0129] Odabrani nivo doziranja će zavisiti od različitih faktora, uključujući aktivnost određenog jedinjenja ili kombinacije korišćenih jedinjenja, ili njegovog estra, soli ili amida, načina primene, vremena davanja, brzine izlučivanja određenog jedinjenja koje/koja se koriste, trajanja lečenja, drugih lekova, jedinjenja i/ili materijala koji se koriste u kombinaciji sa određenim upotrebljenim jedinjenjem/jedinjenjima, starosti, pola, težine, stanja, opšteg zdravstvenog stanja i anamneze pacijenta koji se leči, i sličnih faktora koji su dobro poznati u oblasti medicine.
[0130] Lekar ili veterinar sa uobičajenim znanjem u ovoj oblasti može lako da odredi i propiše potrebnu terapeutski efikasnu količinu farmaceutske kompozicije. Na primer, lekar ili veterinar može da počne doziranje farmaceutske kompozicije ili jedinjenja na nižim nivoima od onih potrebnih za postizanje željenog terapeutskog dejstva i da postepeno povećava dozu dok željeno dejstvo ne bude postignuto. Pod "terapeutski efikasnom količinom" podrazumeva se koncentracija jedinjenja koja je dovoljna za izazivanje željenog terapeutskog dejstva. Podrazumeva se da će efikasna količina jedinjenja varirati u skladu sa težinom, polom, godinama i anamnezom subjekta. Drugi faktori koji utiču na efikasnu količinu mogu da uključuju, ali nisu ograničeni na ozbiljnost pacijentovog stanja, poremećaj koji se leči, stabilnost jedinjenja, i, po želji, druge vrste terapeutskog agensa koji se primenjuje sa jedinjenjem prema pronalasku. Veća ukupna doza može da bude isporučena višestrukim primenama agensa. Postupci za određivanje efikasnosti i doziranja poznati su stručnjacima u ovoj oblasti (Isselbacher et al. (1996) Harrison’s Principles of Internal Medicine 13 ed., 1814-1882, ovde obuhvaćen referencom).
[0131] Uopšteno, pogodna dnevna doza aktivnog jedinjenja koje se koristi u kompozicijama i postupcima prema pronalasku biće količina jedinjenja koja predstavlja najnižu dozu koja je delotvorna da proizvede terapeutsko dejstvo. Takva efikasna doza će uopšteno zavisiti od faktora koji su ovde opisani.
[0132] Po želji, efikasna dnevna doza aktivnog jedinjenja može da se primeni kao jedna, dve, tri, četiri, pet, šest ili više pod-doza primenjenih odvojeno u odgovarajućim intervalima tokom dana, opciono, u pojedinačnim doznim oblicima. U određenim primerima izvođenja predmetnog pronalaska, aktivno jedinjenje može da se primeni dva ili tri puta dnevno. U poželjnim primerima izvođenja, aktivno jedinjenje biće primenjeno jednom dnevno.
[0133] Pacijent koji prima ovaj tretman je bilo koja životinja kojoj je to potrebno, uključujući primate, posebno ljude, i druge životinje kao što su konji, goveda, svinje i ovce; i živina i uopšteno kućni ljubimci.
[0134] U određenim primerima izvođenja, jedinjenja prema pronalasku mogu da budu za samostalnu upotrebu ili za zajedničku primenu sa drugom vrstom terapeutskog agensa. Kako se ovde koristi, izraz "zajednička primena" odnosi se na bilo koji oblik primene dva ili više različitih terapeutskih jedinjenja, kod koje se drugo jedinjenje primenjuje dok je prethodno primenjeno terapeutsko jedinjenje i dalje efikasno u organizmu (npr., dva jedinjenja su istovremeno efikasna u organizmu pacijenta, što može da uključuje sinergistička dejstva dva jedinjenja). Na primer, različita terapeutska jedinjenja mogu da se primene ili u istoj formulaciji ili u odvojenim formulacijama, bilo istovremeno ili jedno za drugim. U određenim primerima izvođenja, različita terapeutska jedinjenja mogu da se primene u okviru jednog časa, 12 časova, 24 časa, 36 časova, 48 časova, 72 časa, ili nedelju dana jedno u odnosu na drugo. Prema tome, osoba koja prima takav tretman može da ima koristi od kombinovanog dejstva različitih terapeutskih jedinjenja.
[0135] Ovaj pronalazak uključuje upotrebu farmaceutski prihvatljivih soli jedinjenja prema pronalasku u ovde opisanim kompozicijama i postupcima. U određenim primerima izvođenja, razmatrane soli prema pronalasku uključuju, ali nisu ograničene na alkil, dialkil, trialkil ili tetraalkil amonijumove soli. U određenim primerima izvođenja, razmatrane soli prema pronalasku uključuju, ali nisu ograničene na L-arginin, benentamin, benzatin, betain, kalcijum hidroksid, holin, deanol, dietanolamin, dietilamin, 2-(dietilamino)etanol, etanolamin, etilendiamin, N metilglukamin, hidrabamin, 1H-imidazol, litijum, L-lizin, magnezijum, 4-(2-hidroksietil)morfolin, piperazin, kalijum, 1-(2-hidroksietil)pirolidin, natrijum, trietanolamin, trometamin i cinkove soli. U određenim primerima izvođenja, razmatrane soli prema pronalasku uključuju, ali nisu ograničene na soli Na, Ca, K, Mg, Zn ili drugih metala.
[0136] Farmaceutski prihvatljive kisele adicione soli mogu takođe da postoje kao različiti solvati, na primer sa vodom, metanolom, etanolom, dimetilformamidom, i slično. Mogu da se pripreme i smeše takvih solvata. Izvor takvog solvata može da bude rastvarač za kristalizaciju, svojstven rastvaraču za pripremu ili kristalizaciju, ili dodat takvom rastvaraču.
[0137] Agensi za kvašenje, emulgatori i lubrikanti, kao što su natrijum lauril sulfat i magnezijum stearat, kao i agensi za bojenje, agensi za oslobađanje, agensi za oblaganje, zaslađivači, arome i agensi za davanje mirisa, konzervansi i antioksidansi mogu takođe da budu prisutni u kompozicijama.
[0138] Primeri farmaceutski prihvatljivih antioksidanasa uključuju: (1) antioksidanse rastvorljive u vodi, kao što su askorbinska kiselina, cistein hidrohlorid, natrijum bisulfat, natrijum metabisulfit, natrijum sulfit i slično; (2) antioksidanse rastvorljive u ulju, kao što su askorbil palmitat, butilovani hidroksianisol (BHA), butilovani hidroksitoluen (BHT), lecitin, propil galat, alfa-tokoferol, i slično; i (3) metal-helirajuće agense, kao što je limunska kiselina, etilendiamin tetrasirćetna kiselina (EDTA), sorbitol, vinska kiselina, fosforna kiselina, i slično.
[0139] U ovom dokumentu opisan je postupak za obavljanje farmaceutskih poslova, proizvodnjom formulacije jedinjenja prema pronalasku, ili kompleta kao što je ovde opisano, i plasiranja pružaocima zdravstvenih usluga prednosti korišćenja formulacije ili kompleta za lečenje ili prevenciju bilo koje od bolesti ili stanja kao što je ovde opisano.
[0140] U ovom dokumentu opisan je postupak za obavljanje farmaceutskih poslova, obezbeđivanjem distributivne mreže za prodaju formulacije jedinjenja ovog pronalaska ili kompleta kako je ovde opisano, i pružanjem uputstva pacijentima ili lekarima za upotrebu formulacije za lečenje ili sprečavanje bilo koje bolesti ili stanja kako je ovde opisano.
[0141] U ovom dokumentu opisan je postupak za obavljanje farmaceutskih poslova, određivanjem odgovarajuće formulacije i doze jedinjenja ovog pronalaska za lečenje ili prevenciju bilo koje od bolesti ili stanja kao što je ovde opisano, sprovođenjem terapeutskog profilisanja identifikovanih formulacija za efikasnost i toksičnost na životinjama i obezbeđivanjem distributivne mreže za prodaju identifikovanog preparata kao onog koji ima prihvatljiv terapeutski profil. U određenim primerima izvođenja, postupak dalje uključuje obezbeđivanje prodajne grupe za plasiranje preparata pružaocima zdravstvenih usluga.
[0142] U ovom dokumentu opisan je postupak za obavljanje farmaceutskih poslova određivanjem odgovarajuće formulacije i doze jedinjenja prema pronalasku za lečenje ili prevenciju bilo koje bolesti ili stanja kao što je ovde opisano, i licenciranje prava trećem licu za dalji razvoj i prodaju formulacije.
Primeri
[0143] Bilo koja jedinjenja koja nisu obuhvaćena obimom patentnih zahteva uključena su kao referentni primeri.
Primer 1: Protokoli za sintezu
Sinteza linkerskih jezgara:
5,5’-(butan-1,4-diil)-bis(1,3,4-tiadiazol-2-amin) (1001)
[0144]
[0145] Smeša adiponitrila (8.00 g, 73.98 mmol) i tiosemikarbazida (13.48 g, 147.96 mmol) u trifluorosirćetnoj kiselini (TFA) (75 mL) zagrevana je na 80 °C tokom 17 sati. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i sipana u smešu leda i vode. Peleti natrijum hidroksida dodavani su u smešu sve dok ona nije postala bazna (pH 14). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen kako bi obezbedio 5,5’-(butan-1,4-diil)-bis(1,3,4- tiadiazol-2-amin) (1001, 13.07 g). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.00 (s, 4H), 2.84 (bs, 4H), 1.68 (bs, 4H).
Sinteza 5,5’-(tiobis(etan-2,1-diil))bis(1,3,4-tiadiazol-2-amina) (1002)
[0146]
[0147] Jedinjenje 1002 pripremljeno je na način opisan u publikaciji US/2002/0115698 A15,5’-(2-metilbutan-1,4-diil)-bis(1,3,4-tiadiazol-2-amin) (1003)
[0148] Smeša 3-metil adipinske kiseline (5.00 g, 31.22 mmol) i tiosemikarbazida (5.69 g, 62.43 mmol) u POCl3(45 mL) zagrevana je na 90 °C tokom 4 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i sipana u smešu leda i vode. Peleti natrijum hidroksida dodavani su u smešu sve dok ona nije postala bazna (pH 14). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen kako bi obezbedio 5,5’-(2-metilbutan-1,4-diil)-bis(1,3,4-tiadiazol-2-amin) (1003, 8.97 g). 1HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.00 (s, 4H), 2.89-2.81 (m, 3H), 2.89-2.81 (m, 3H), 2.69 (dd, J = 7.6, 7.6 Hz, 1H), 1.89-1.46 (m, 3H), 0.94 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
5,5’-(propan-1,3-diil)-bis(1,3,4-tiadiazol-2-amin) (1004)
[0149]
[0150] Smeša glutaronitrila (5.00 g, 53.13 mmol) i tiosemikarbazida (9.68 g, 106.26 mmol) u TFA (50 mL) zagrevana je na 85 °C tokom 4 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i sipana u smešu leda i vode. Peleti natrijum hidroksida dodavani su u smešu sve dok ona nije postala bazna (pH 14). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen kako bi obezbedio 5,5’-(propan-1,3-diil)-bis(1,3,4-tiadiazol-2-amin) (1004, 13.72 g).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.06-7.03 (s, 4H), 2.87 (t, J = 7.5 Hz, 4H), 2.02 - 1.95 (m, 2H).
5-(2-((2-(5-amino-1,3,4-tiadiazol-2-il)etil)amino)etil)-1,3,4-tiadiazol-2-amin
[0151] (1005)
[0152] Smeša 3,3’-iminodipropionitrila (1.50 g, 12.18 mmol) i tiosemikarbazida (2.22 g, 24.36 mmol) u TFA (10 mL) zagrevana je na 85 tokom 4.5 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i sipana u smešu leda i vode. Peleti natrijum hidroksida dodavani su u smešu sve dok ona nije postala bazna (pH 14). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen kako bi obezbedio 5-(2-((2-(5-amino-1,3,4-tiadiazol-2-il)etil)amino)etil)-1,3,4-tiadiazol-2-amin (1005, 1.47 g).1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 6.95 (s, 4H), 2.90 (d, J = 6.0 Hz, 4H), 2.83 (d, J = 6.3 Hz, 4H).
[0153] U rastvor metil 3-((2-metoksi-2-oksoetil)tio)propanoata (5.0 g, 26 mmol) u THF/MeOH/vodi (60mL, 4:1:1) dodat je litijum hidroksid monohidrat (4.375 g, 101 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Dobijeni ostatak je razblažen vodom (∼100mL) i dobijeni rastvor je zakišeljen pomoću 6N HCl. Smeša je podeljena između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen kako bi se dobila 3-((karboksimetil)tio)propionska kiselina (3.64g, 85%) u vidu bele čvrste supstance.<1>H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.55-2.57 (t, 2H) 2.75-2.79 (t, 2H) 3.27 (s, 2H) 12.41 (s, 2H)
[0154] U smešu 3-((karboksimetil)tio)propionske kiseline (3.64g, 22.2 mmol) i tiosemikarbazida (4.1g, 45 mmol) dodavan je polako fosfor oksihlorid (25mL). Dobijena smeša je mešana na 90°C tokom 3 sata pre nego što je polako sipana preko izlomljenog leda. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana i filtrat je alkalizovan do pH∼13 čvrstim natrijum hidroksidom. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana vodom i osušena preko noći na 45°C u vakuumu kako bi dala jedinjenje 1006 (∼3g, 50%) u vidu čvrste supstance boje kože.<1>H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.79-2.83 (t, 2H) 3.06-3.10 (t, 2H) 3.99 (s, 2H) 7.04 (s, 2H) 7.16 (s, 2H)
[0155] Smeša 2,2’-tiodisirćetne kiseline (5.00 g, 33.3 mmol) i tiosemikarbazida (6.07 g, 66.6 mmol) u POCl3(40 mL) zagrevana je na 90 °C tokom 5 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i pažljivo sipana preko smeše leda i vode. Peleti natrijum hidroksida dodavani su u smešu sve dok ona nije postala bazna (pH 14). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen kako bi se dao jedinjenje 1007.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.18 (s, 4H), 3.96 (s, 4H).
[0156] Smeša 1,5-dicijanopentana (1.00 g, 8.19 mmol) i tiosemikarbazida (1.5 g, 16.40 mmol) u TFA (3 mL), zagrevana je na 85 °C tokom 5 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i sipana u smešu leda i vode. Peleti natrijum hidroksida dodavani su u smešu sve dok ona nije postala bazna (pH 14). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen kako bi dao jedinjenje 1008.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 6.98 (s, 4H), 2.81 (t, 4H), 1.67 (m, 4H), 1.20 (m, 2H).
Acilacija diamino jezgra:
Postupak A: pomoću hlorida kiseline
N,N’-[5,5’-(butan-1,4-diil)-bis(1,3,4-tiadiazol-5,2-diil)]-bis(2-fenilacetamid) (21)
[0157]
[0158] U suspenziju jedinjenja 1001 (8.00 g, 31.21 mmol) u 1-metil-2-pirolidinonu (NMP) 100 mL) na 0 °C, dodat je u kapima fenilacetil hlorid (10.25 mL, 77.54 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼200 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen, kako bi obezbedio N,N’-[5,5’-(butan-1,4-diil)-bis(1,3,4-tiadiazol-5,2-diil)]-bis(2-fenilacetamid) (21, 14.02 g).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.66 (s, 2H), 7.34 (m, 10H), 3.81 (s, 4H), 3.01 (bs, 4H), 1.76 (bs, 4H).
[0159] Jedinjenje 43 je pripremljeno prateći postupak A uz upotrebu fenoksiacetil hlorida.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.68 (s, 2H), 7.35-7.30 (m, 4H), 6.99-6.97 (m, 6H), 4.90 (s, 4H), 3.05 (bs, 4H), 1.79 (bs, 4H).
[0160] Jedinjenje 100 je pripremljeno prateći postupak A.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.42 (s, 2H), 3.64 (t, J = 5.6 Hz, 4H), 3.24 (s, 6H), 3.01 (bs, 4H), 2.72 (t, J = 6.2 Hz, 4H), 1.79 (bs, 4H).
[0161] Jedinjenje 5 je pripremljeno prema postupku A: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.66 (s, 4H), 3.27 (t, J=6.99 Hz, 4H), 2.95 (t, J=7.02 Hz, 4H), 2.12 (s, 6H).
[0162] U suspenziju jedinjenja 1001 (200 mg, 0.78 mmol) u NMP (2 mL) na 0 °C dodat je u kapima hlorid O-acetilbademove kiseline (0.44 mL, 1.95 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 1.5 h pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼10 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode i osušen. Sirovi materijal je prečišćen rekristalizacijom uz pomoć smeše DMSO i MeOH kako bi dao jedinjenje 173.
[0163] U balon je stavljeno jedinjenje 173 i 2N amonijak u MeOH (3 ml) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 6 h. Rastvarač je uklonjen i dobijeni materijal je osušen u sušnici kako bi dao jedinjenje 174.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.42 (s, 2H), 7.53-7.31 (m, 10H), 6.35 (s, 2H), 5.34 (d, J = 1.14 Hz, 2H), 3.01 (bs, 4H), 1.76 (bs, 4H).
[0164] Jedinjenje 306 je pripremljeno prema postupku za jedinjenje 174 koji je prethodno naveden.
[0165] U suspenziju jedinjenja 1001 (400 mg, 1.56 mmol) u NMP (4 mL) na 0 °C dodat je u kapima (R)-(-)-O-formilmandeloil hlorid (0.61 mL, 3.90 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 1.5 h pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼10 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode i osušen. Sirovi materijal je prečišćen rekristalizacijom uz pomoć smeše DMSO i MeOH kako bi dao jedinjenje 68.
[0166] U balon je stavljeno jedinjenje 68 i 2N amonijak u MeOH (5 ml) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen i dobijeni materijal je osušen u sušnici kako bi dao jedinjenje 80.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.53-7.31 (m, 10H), 6.34 (s, 2H), 5.33 (s, 2H), 3.01 (bs, 4H), 1.75 (bs, 4H).
[0167] U suspenziju jedinjenja 1002 (544 mg, 1.89 mmol) u NMP (13 mL) na -15°C dodat je u kapima fenilacetil hlorid (0.249 mL, 1.89 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0°C tokom 1 h i reakcija je zaustavljena dodavanjem vode (54 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom (27 mL) i etil acetatom (3x27 mL). Filtrat je alkalizovan do pH 11 upotrebom 2.5M NaOH. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan dihlorometanom (3x54 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata i koncentrovani kako bi dali N-(5-(2-((2-(5-amino-1,3,4-tiadiazol-2-il)etil)tio)etil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2-fenilacetamid (jedinjenje 17, 56 mg) 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (s, 1H), 7.32 (s, 5H), 3.81 (s, 2H), 3.25 (t, J=7.61 Hz, 2H) 3.06 (t, J=7.25 Hz, 2H), 2.92 (t, J=6.90 Hz, 2H), 2.85 (t, J=6.86 Hz, 2H)
[0168] Fenilacetil hlorid (0.134 mL, 1.01 mmol) i acetoksiacetil hlorid (0.109 mL, 1.01 mmol) pomešani su zajedno u NMP (0.5 mL). Ova smeša je polako dodavana u suspenziju jedinjenja 1002 (292 mg, 1.01 mmol) u NMP (7 mL) na ST. Dobijena smeša je mešana na ST tokom 1 h i reakcija je zaustavljena dodavanjem vode (20 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen pod visokim vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom HPLC. Jedinjenje 26: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.69 (s, 2H), 7.34 (3, 5H), 4.81 (s, 2H), 3.82 (s, 2H), 2.96 (bs, 4H), 2.14 (s, 3H).
[0169] Jedinjenje 44 je pripremljeno prateći prethodno opisani postupak za jedinjenje 21.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.66 (s, 2H), 7.34-7.28 (m, 10H), 3.81 (s, 4H), 3.05-3.00 (m, 3H), 2.87 (dd, J = 7.9, 8.2 Hz, 1H), 1.95-1.77 (m, 3H), 0.94 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
[0170] Jedinjenje 72 je pripremljeno prateći prethodno opisani postupak za jedinjenje 21. U suspenziju diamina 1004 (0.70 g, 3.07 mmol) u NMP (15 mL) na 0 °C, dodat je u kapima fenilacetil hlorid (811 µL, 6.13 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode. Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen kako bi obezbedio N,N’-[5,5’-(propan-1,3-diil)-bis(1,3,4-tiadiazol-5,2-diil)]-bis(2-fenilacetamid) (jedinjenje 72, 1.37 g).1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.68 (s, 2H), 7.38-7.27 (m, 10H), 3.82 (s, 4H), 3.06 (t, J = 7.2 Hz, 4H), 2.17-2.12 (m, 2H).
[0171] U suspenziju jedinjenja 1005 (100 mg, 0.37 mmol) u DMF (12 mL) na sobnoj temperaturi dodat je rastvor (t-Boc)2O (88 mg, 0.41 mmol) u DMF (2 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 24 h. U ovu reakcionu smešu dodat je NMP (2 mL), a zatim i fenilacetil hlorid (97 µL, 0.74 mmol). Reakcija je mešana tokom 1 h pre nego što je sipana u smešu led-voda. Čvrsta supstanca je sakupljena vakuumskom filtracijom, isprana vodom i osušena kako bi obezbedila jedinjenje 1010 (180 mg).
[0172] Upravo navedeni proizvod 1010 (160 mg, 0.26 mmol), u smeši TFA (1.5 mL) i CH2CH2(10 mL), mešan je na sobnoj temperaturi tokom 4 h pre nego što je koncentrovan. Ostatak je ponovo prebačen u CH2Cl2(3x) i koncentrovan kako bi obezbedio N,N’-(5,5’-(azandiil-bis(etan-2,1-diil))-bis(1,3,4-tiadiazol-5,2-diil))-bis(2-fenilacetamid) trifluorosirćetnu kiselinu (jedinjenje 149, 122 mg). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.81 (s, 2H), 8.75 (bs, 2H), 7.38-7.27 (m, 10H), 3.84 (s, 4H), 3.45 (d, J = 2.9 Hz, 4H), 3.39 (d, J = 6.0 Hz, 4H).
[0173] U suspenziju jedinjenja 1006 (0.274 g, 1 mmol) u NMP (5mL) dodat je u kapima fenil acetil hlorid (0.263 mL, 2 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1sata i nakon toga je razblažena vodom. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana sa još vode i osušena. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom HPLC kako bi dao jedinjenje 199 u vidu bele čvrste supstance. 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 2.87-2.91 (t, 2H) 3.25-3.29 (t, 2H) 3.82 (s, 4H) 4.19 (s, 2H) 7.26-7.33 (m, 10H) 12.71-12.72 (br s, 2H).
Postupak B: pomoću kiseline, koristeći reagense za kuplovanje peptida
[0174]
[0175] U balon sa 5,5’-(tiobis(etan-2,1-diil))bis(1,3,4-tiadiazol-2-aminom) (jedinjenje 1002) (0.69 mmol, 0.20 g, 1.0 ekviv.), dodata je 2-morfolinosirćetna kiselina (1.52 mmol, 0.22 g, 2.2 ekviv.), O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (HBTU) (2.20 mmol, 0.83 g, 3.2 ekviv.), 1-hidroksibenzotriazol (HOBT) (2.2 mmol, 0.29 g, 3.2 ekviv.) 5 mL DMF, a nakon toga i N,N-diizopropiletilamin (DIEA) (5.52 mmol, 0.71 g, 0.960 mL, 8.0 ekviv.). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i zatim razblažena sa 15 mL vode. Smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc i organski slojevi su kombinovani, oprani vodom, fiziološkim rastvorom i osušeni preko Na2SO4. Na2SO4je uklonjen filtracijom i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska kako bi dale 0.04 g jedinjenja 12.<1>HNMR (300 MHz, CDCl3) Jedinjenje 12: δ 3.80 (široki multiplet, 4H), 3.34 (dd, 4H, J = 7.2 Hz), 3.28 (s, 4 H), 3.00 (dd, 4H, J= 7.1 Hz), 2.63 (široki multiplet, 4H).
[0176] U balon sa 5,5’-(butan-1,4-diil)bis(1,3,4-tiadiazol-2-aminom) (jedinjenje 1101) (3.9 mmol, 1.0 g, 1.0 ekviv.) dodata je (S)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)-2-fenilsirćetna kiselina (8.58 mmol, 2.15 g, 2.2 ekviv.), HBTU (12.48 mmol, 4.73 g, 3.2 ekviv.), HOBt (12.48 mmol, 1.69 g, 3.2 ekviv.) 25 mL DMF, a nakon toga i DIEA (31.2 mmol, 4.03 g, 5.43 mL, 8.0 ekviv.). Smeša je mešana preko noći i sipana u 150 mL vode. Bele čvrste supstance koje su se formirale su sakupljene vakuumskom filtracijom, oprane vodom i osušene pod vakuumom dajući 2.47 g bis-Boc zaštićenog intermedijera.
[0177] U suspenziju bis-Boc zaštićenog intermedijera (2.76 mmol, 2.0 g, 1.0 ekviv.) u 20 mL dihlorometana (DCM) dodat je 4 M HCl u dioksanu (40 mmol, 10 mL) uz snažno mešanje. Smeša je nakratko postala bistra i homogena, a zatim se obrazovao beli precipitat. Smeša je mešana preko noći i razblažena sa 20 mL dietil etra. Čvrste supstance su sakupljene vakuumskom filtracijom, oprane dodatnim dietil etrom i osušene pod vakuumom pri čemu su dale 0.9 g jedinjenja187. 1HNMR (300 MHz , DMSO, d6) Jedinjenje 187: δ 9.13 (s, 4H), 7.61 (m, 4H), 7.48 (m, 6H), 6.2 (široki singlet, 4H), 5.32 (s, 2H), 3.04 (široki multiplet, 4H), 1.77 (široki multiplet, 4H).
[0178] U rastvor 2,2-bis(hidroksimetil)propionske kiseline (5.00 g, 37.28 mmol) u acetonu (80 mL) na sobnoj temperaturi, dodat je 2,2-dimetoksipropan (6.88 mL, 55.92 mmol) i p-TsOH·H2O (0.36 g, 1.86 mmol). Reakcija je mešana tokom 2 h pre nego što je zaustavljena pomoću Et3N (0.30 mL). Organska isparljiva supstanca je uklonjena u uslovima sniženog pritiska. Ostatak je podeljen između EtOAc i vode. Organski sloj je opran fiziološkim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrovan kako bi obezbedio željeni proizvod 1011 (5.17 g) u vidu bele čvrste supstance.
[0179] U suspenziju diamina 1001 (500 mg, 1.95 mmol), 3-fluorofenilsirćetne kiseline (361 mg, 2.34 mmol) i kiseline 1011 (442 mg, 2.54 mmol) u DMF (20 mL) na 0 °C dodat je HOBt (791 mg, 5.85 mmol), a nakon njega i N-(3-dimetilaminopropil)-N’-etilkarbodiimid hidrohlorid (EDC) (1.12 g, 5.85 mmol). Smeša je mešana tokom 18 h od 0°C do sobne temperature, pre nego što je razblažena vodom. Precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, opran vodom i osušen. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 1-10% MeOH u CH2Cl2kako bi obezbedio N-(5-(4-(5-(2-(3-fluorofenil)acetamido)-1,3,4-tiadiazol-2-il)butil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2,2,5-trimetil-1,3-dioksan-5-karboksamid (jedinjenje 1012, 208 mg).
[0180] Navedeni proizvod 1012 (87 mg, 0.16 mmol) i TFA (2 mL) u smeši THF (8 mL) i vode (2 mL) zagrevan je na 50 °C tokom 5 h pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću HPLC kako bi obezbedio N,N’-(5-(4-(5-(2-(3-fluorofenil)acetamido)-1,3,4-tiadiazol-2-il)butil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-3-hidroksi-2-(hidroksimetil)-2-metilpropanamid (jedinjenje 152). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.68 (s, 1H), 11.77 (s, 1H), 7.04-7.38 (m, 1H), 7.18-7.09 (m, 4H), 4.98 (s, 2H), 3.86 (s, 2H), 3.62 (dd, J = 10.7, 29.0 Hz, 4H), 3.03 (bs, 4H), 1.77 (bs, 4H), 1.14 (s, 3H).
[0181] U suspenziju diamina 1001 (400 mg, 1.56 mmol), 3-fluorofenilsirćetne kiseline (313 mg, 2.03 mmol), (R)-(-)-2,2-dimetil-5-okso-1,3-dioksolan-4-sirćetne kiseline (353 mg, 2.03 mmol) i Et3N (200 µL) u DMF (20 mL) na 0 °C, dodat je HOBt (633 mg, 4.68 mmol), a nakon toga i EDC (897 mg, 4.68 mmol). Smeša je mešana tokom 18 h, od 0°C do sobne temperature, pre nego što je razblažena vodom. Precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom i opran vodom. Čvrsta supstanca je dodatno isprana smešom vrelog MeOH-THF. Kombinovani filtrat je koncentrovan i prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 1-10% MeOH u CH2Cl2kako bi obezbedio (R)-N-(5-(4-(5-(2-(3-fluorofenil)acetamido)-1,3,4-tiadiazol-2-il)butil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-3,4-dihidroksibutanamid (jedinjenje 1013, 93 mg).
[0182] Navedeni proizvod 1013 (87 mg, 0.16 mmol) i TFA (2 mL) u smeši THF (8 mL) i vode (2 mL) zagrevan je na 50 °C tokom 5 h pre nego što je koncentrovan u uslovima sniženog pritiska. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću HPLC kako bi obezbedio (R)-N-(5-(4-(5-(2-(3-fluorofenil)acetamido)-1,3,4-tiadiazol-2-il)butil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-3,4-dihidroksibutanamid (jedinjenje 153). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.67 (s, 1H), 12.43 (s, 1H), 7.41-7.38 (m, 1H), 7.20-7.12 (m, 4H), 4.45-4.40 (m, 1H), 3.86 (s, 2H), 3.03 (bs, 4H), 2.85-2.77 (m, 2H), 1.78 (bs, 4H).
[0183] U suspenziju (S)-(+)-O-acetilbademove kiseline (666 mg, 3.43 mmol) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfata (HATU) (1.47 g, 3.86 mmol) u DMF (4 mL) dodat je DIEA (0.672 ml, 3.86 mmol), a nakon toga i jedinjenje 1001 (400 mg, 1.56 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼10 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode i osušen. Sirovi materijal je prečišćen rekristalizacijom pomoću smeše DMSO i MeOH kako bi dao jedinjenje 66.
[0184] U balon je stavljeno jedinjenje 66 i 2N amonijak u MeOH (5 ml) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 6 h. Rastvarač je uklonjen i dobijeni materijal je osušen u sušnici kako bi dao jedinjenje 92.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.42 (s, 2H), 7.53-7.31 (m, 10H), 6.35 (s, 2H), 5.33 (s, 2H), 3.01 (bs, 4H), 1.76 (bs, 4H).
[0185] U balon je stavljeno jedinjenje 1001 (200 mg, 0.78 mmol), DL-3-fenilmlečna kiselina (285 mg, 1.716 mmol), i HOBT (527 mg, 3.9 mmol) u DMF (3 ml), dodat je EDC (897 mg, 4.68 mmol), a zatim i trietilamin (0.87 ml, 6.24 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼5 mL). Smeša je podeljena između vode i EtOAc. Organski ekstrakt je opran vodom, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u CH2Cl2kako bi dao jedinjenje 69. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.20 (s, 2H), 7.24 (m, 10H), 5.75 (d, J = 6.87 Hz, 2H), 4.43 (m, 2H), 3.10 (m, 6H), 2.89-2.81 (m, 2H), 1.80 (bs, 4H).
[0186] U balon je stavljeno jedinjenje 1001 (200 mg, 0.78 mmol), D-(+)-3- fenilmlečna kiselina (285 mg, 1.716 mmol), i HOBt (464 mg, 3.43 mmol) u DMF (3 ml), dodat je EDC (822 mg, 4.28 mmol), a zatim i trietilamin (0.718 ml, 5.15 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼5 mL). Smeša je podeljena između vode i EtOAc. Organski ekstrakt je opran vodom, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u CH2Cl2kako bi dao jedinjenje 169. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.20 (s, 2H), 7.24 (m, 10H), 5.75 (d, J = 6.87 Hz, 2H), 4.43 (m, 2H), 3.03 (m, 6H), 2.89-2.81 (m, 2H), 1.80 (bs, 4H).
[0187] U balon je stavljeno jedinjenje 1001 (200 mg, 0.78 mmol), D-(+)-3- fenilmlečna kiselina (285 mg, 1.716 mmol), i HOBt (464 mg, 3.43 mmol) u DMF (3 ml), dodat je EDC (822 mg, 4.28 mmol), a zatim i trietilamin (0.718 ml, 5.15 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼5 mL). Smeša je podeljena između vode i EtOAc. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u CH2Cl2kako bi dao jedinjenje 146.1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.27 (s, 2H), 7.31 (m, 10H), 5.78 (m, 2H), 4.44 (m, 2H), 3.05 (m, 6H), 2.87 (m, 2H), 1.79 (bs, 4H).
[0188] U suspenziju (R)-(+)-3-hidroksi-3-fenilpropionske kiseline (285 mg, 1.72 mmol) i HATU (719 mg, 1.89 mmol) u DMF (3 mL) dodat je DIEA (0.329 ml, 1.89 mmol) a nakon toga i jedinjenje 1001 (200 mg, 0.78 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼10 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode i osušen. Sirovi materijal je prečišćen rekristalizacijom pomoću DMSO i MeOH kako bi dao jedinjenje 127.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.38 (s, 2H), 7.34 (m, 10H), 5.56 (m, 2H), 5.10 (m, 2H), 3.04 (bs, 4H), 2.80 (m, 4H), 1.80 (bs, 4H).
[0189] U suspenziju (R)-2-hidroksi-2-feniluljne kiseline (310 mg, 1.72 mmol) i HATU (719 mg, 1.89 mmol) u DMF (3 mL) dodat je DIEA (0.329 ml, 1.89 mmol), a nakon toga i jedinjenje 1001 (200 mg, 0.78 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼10 mL). Sirovi materijal je prečišćen pomoću HPLC kako bi dao jedinjenje 143. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.61 (d, J = 7.65 Hz, 4H), 7.34 (m, 6H), 2.99 (bs, 4H), 2.26 (m, 2H), 2.10 (m, 2H) 1.74 (bs, 4H), 0.80 (t, 6H).
[0190] U suspenziju 3-okso-1-indankarboksilne kiseline (604 mg, 3.43 mmol) i HATU (1.47g, 3.86 mmol) u DMF (5 mL) dodat je DIEA (0.672 ml, 3.86 mmol), a nakon toga i jedinjenje 1001 (400 mg, 1.56 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼10 mL). Svetlo smeđi precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen. Sirovi materijal je prečišćen rekristalizacijom pomoću smeše DMSO i MeOH, kako bi dao jedinjenje 64.
[0191] U suspenziju jedinjenja 64 (100 mg, 0.175 mmol) u EtOH (20 ml) na 0 °C dodat je NaBH4(15 mg, 0.384 mmol) i dobijena smeša je mešana tokom 1 h pre nego što je reakcija zaustavljena pomoću 1N HCl. Smeša je podeljena između 1N HCl i EtOAc, organski ekstrakt je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u CH2Cl2i dodatno prečišćen rekristalizacijom pomoću smeše DMSO i MeOH, kako bi dao jedinjenje 94.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.81 (s, 2H), 7.34 (m, 8H), 5.56 (m, 2H), 5.11 (t, 2H), 4.15 (t, 2H), 3.05 (bs, 4H), 2.70 (m, 2H), 2.15 (m, 2H), 1.80 (bs, 4H).
[0192] U rastvor DL-bademove kiseline (1 g, 6.57 mmol) u DMF (10 ml) na 0 °C dodat je NaH (700 mg, 19.7 mmol) i smeša je ostavljena da se meša 20 minuta, pre nego što je u kapima dodat 2-bromoetil metil etar (1.24 ml, 13.1 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C i polako preko noći zagrevana do sobne temperature pre nego što je reakcija zaustavljena pomoću 1N HCl. Smeša je podeljena između 1N HCl i EtOAc, organski ekstrakt je opran vodom, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen kako bi dao jedinjenje 1014.
[0193] U suspenziju jedinjenja 1014 (500 mg, 2.37 mmol) i HATU (995 mg, 2.62 mmol) u DMF (3 mL) dodat je DIEA (0.456 ml, 2.62 mmol), a nakon toga i jedinjenje 1001 (277 mg, 1.08 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼6 mL). Smeša je podeljena između vode i EtOAc. Organski ekstrakt je opran vodom, osušen preko natrijum sulfate, filtriran i isparen. Sirovi materijal je prečišćen pomoću HPLC kako bi dao jedinjenje 203.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.58 (s, 2H), 7.49-7.37 (m, 10H), 5.22 (s, 2H), 3.66-3.54 (m, 8H), 3.27 (s, 6H), 3.01 (bs, 4H), 1.75 (bs, 4H).
[0194] U suspenziju 2-(4-Boc-piperazinil)-2-fenilsirćetne kiseline (1.1 g, 3.43 mmol) i HATU (1.47g, 3.86 mmol) u DMF (5 mL) dodat je DIEA (0.672 ml, 3.86 mmol), a nakon toga i jedinjenje 1001 (400 mg, 1.56 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼10 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen. Sirovi materijal je prečišćen rekristalizacijom pomoću DMSO i MeOH kako bi dao jedinjenje 63.
[0195] U balon je stavljeno jedinjenje 63 i 4N HCl u 1,4-dioksanu (6 ml) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Precipitat je sakupljen filtracijom, ispran pomoću EtOAc/CH2Cl2i osušen kako bi dao jedinjenje 77. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.10 (bs, 4H), 7.51-7.41 (m, 10H), 4.90 (bs, 2H), 4.62 (s, 2H), 3.15 (bs, 8H), 3.03 (bs, 4H), 2.73 (bs, 8H), 1.76 (bs, 4H).
[0196] U suspenziju (R)-(+)-3-hidroksi-3-fenilpropionske kiseline (254 mg, 1.53 mmol) i HATU (640 mg, 1.68 mmol) u DMF (3 mL) dodat je DIEA (0.292 ml, 1.68 mmol), a nakon toga i jedinjenje 1002 (200 mg, 0.693 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼10 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen. Sirovi materijal je prečišćen rekristalizacijom pomoću smeše DMSO i MeOH kako bi dao jedinjenje 126.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.40 (s, 2H), 7.38 (m, 10H), 5.55 (m, 2H), 5.09 (m, 2H), 3.27 (t, 4H), 2.95 (t, 4H), 2.82 (m, 4H).
[0197] U balon je stavljeno jedinjenje 1002 (200 mg, 0.693 mmol), 2-(4-Boc-piperazinil)-2-fenilsirćetna kiselina (244 mg, 0.763 mmol), i HOBt (187 mg, 1.39 mmol) u DMF (3 ml) dodat je EDC (332 mg, 1.73 mmol), a nakon toga i trietilamin (0.290 ml, 2.08 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je u kapima dodat fenilacetil hlorid (0.037 ml, 0.277 mmol) na 0 °C, a zatim mešana tokom 1 h pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼10 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen. Sirovi materijal je prečišćen pomoću HPLC kako bi dao jedinjenja 70 i 76.
[0198] U balon je stavljeno jedinjenje 70 i 4N HCl u 1,4-dioksanu (6 ml) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Precipitat je sakupljen filtracijom, ispran pomoću EtOAc/CH2Cl2i osušen kako bi dao jedinjenje 78. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.70 (s, 2H), 8.97 (bs, 2H), 7.50-7.29 (m, 10H), 4.72 (bs, 1H), 4.59 (s, 1H), 3.82 (s, 2H), 3.27 (t, 4H), 3.15 (bs, 4H), 2.92 (t, 4H), 2.70 (bs, 4H).
[0199] U balon je stavljeno jedinjenje 76 i 4N HCl u 1,4-dioksanu (6 ml) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Precipitat je sakupljen filtracijom, ispran pomoću EtOAc/CH2Cl2i osušen kako bi dao jedinjenje 79. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.87 (s, 2H), 9.03 (bs, 4H), 7.50-7.40 (m, 10H), 4.67 (bs, 2H), 4.59 (s, 2H), 3.28 (t, 4H), 3.14 (bs, 8H), 2.97 (t, 4H), 2.71 (bs, 8H).
[0200] Opšti postupak amidnog kuplovanja (koristi se za sledeće primere): U suspenziju karboksilne kiseline u DMF, 0.2 molarne koncentracije (2 ekvivalenta), dodat je HATU (2 ekvivalenta) i reakciona smeša je mešana dok se nije izbistrila nakon čega je dodat amin (1 ekvivalent) i DIPEA (4 ekvivalenta). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana vodom i osušena.
39: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.89-2.01 (m, 6H) 2.18-2.29 (m, 2H) 2.95-3 (m, 4H) 3.79-3.86 (m, 2H) 3.94-4.02 (m, 2H) 4.55-4.6 (m, 2H) 12.29 (brs, 2H).
41: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 2.93-2.98 (m, 4H) 3.27-3.32 (m, 4H), 4.46 (s, 4H), 5.18-5.2 (br s, 2H) 6.88-7.03 (m, 8H) 12.87-12.92 (br s, 2H).
1: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.78 (br s, 4H) 3.05-3.06 (br s, 4H), .38-3.40 (m, 2H) 3.54-3.63 (m, 2H) 5.44-5.50 (m, 2H) 6.92-7.26 (m, 8H) 12.78 (br s, H).
4: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.92-2.03 (m, 10H) 2.17-2.28 (m, H) 3.05 (br s, 4H) 3.79-3.85 (m, 2H) 3.94-4.01 (m, 2H) 4.55-4.59 (m, 2H) 12.27 (br s, H).
0: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.77 (br s, 4H) 3.04 (br s, 4H) 5.20 (s, H) 6.31 (br s, 2H) 7.49 (br s, 2H) 7.79 (br s, 2H) 12.80 (br s, 2H).
5: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 0.20-0.21 (br s, 4H) 0.48-0.50 (br s, H) 1.79 (br s, 4H) 2.35-2.38 (br s, 4H) 3.04 (br s, 4H) 12.32 (br s, 2H).
87: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.78 (br s, 4H) 3.03 (br s, 4H) 4.05 (s, 4H) 6.99 (br s, 4H) 7.42-7.44 (m, 2H) 12.68 (br s, 2H).
114: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.01-1.12 (m, 4H) 1,40 (s, 18H) 1.61-1.65 (m, 4H) 1.78 (br s, 4H) 1.95 (br s, 2H) 3.84 (m, 4H) 2.65-2.75 (m, 4H) 3.03 (br s, 4H) 3.89-3.93 (m, 4H) 12.39 (br s, 2H).
123: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.43 (s, 6H) 1.79-1.94 (m, 10H) 2.22-2.31 (m, 2H) 3.05 (br s, 4H) 3.85-4.01 (m, 4H) 11.85 (br s, 2H).
133: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 2.92-2.97 (m, 4H) 3.26-3.30 (m, 4H) 4.61-4.87 (m, 6H) 6.83-6.89 (m, 4H) 7.16-7.21 (m, 2H) 7.36-7.38 (m, 2H) 12.95 (br s, 2H).
135: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.77 (br s, 4H) 3.03 (br s, 4H) 4.60-4.87 (m, 6H) 6.83-6.89 (m, 4H) 7.16-7.22 (m, 2H) 7.36-7.38 (m, 2H) 12.92 (br s, 2H).
114: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.01-1.12 (m, 4H) 1,40 (s, 18H) 1.61-1.65 (m, 4H) 1.78 (br s, 4H) 1.95 (br s, 2H) 3.84 (m, 4H) 2.65-2.75 (m, 4H) 3.03 (br s, 4H) 3.89-3.93 (m, 4H) 12.39 (br s, 2H).
323: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.76 (brs, 4H) 3.01(brs, 4H) 4.02 (s, 4H) 6.56 (s, 2H) 6.94-7.05 (m, 4H) 7.31-7.33 (m, 4H) 11.12 (brs, 2H) 12.69 (s, 2H).
397: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.75 (brs, 4H) 2.90 (brs, 2H) 3.02 (brs, 2H) 3.67-3.82 (m, 10H) 6.85-7.03 (m, 4H) 7.26-7.36 (m, 5H) 7.55-7.58 (d, 1H) 8.18-8.21 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
398: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm ppm 1.75 (brs, 4H) 2.90 (brs, 2H) 3.02 (brs, 2H) 3.72-3.78 (m, 10H) 6.42-6.51 (m, 4H) 7.36 (m, 5H) 7.54-7.58 (d, 1H) 8.18-8.21 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
399: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.48 (s, 9H) 1.75 (brs, 4H) 2.90 (brs, 2H) 3.02 (brs, 2H) 3.74-3.78 (m, 4H) 6.92-6.94 (m,1H) 7.20-7.36 (m, 7H) 7.51-7.58 (m, 2H) 8.18-8.21 (d, 1H) 9.34 (s, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
400: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.48 (s, 9H) 1.75 (brs, 4H) 2.90 (brs, 2H) 3.02 (brs, 2H) 3.71-3.78 (m, 4H) 7.18-7.42 (m, 9H) 7.54-7.58 (m, 2H) 8.18-8.21 (d, 1H) 9.34 (s, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
324: 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.39 (s, 18H) 1.76 (brs, 4H) 3.01(brs, 4H) 3.79 (s, 4H) 4.11-4.13 (brs, 4H) 7.13-7.38 (m, 8H) 12.65 (s, 2H).
Postupak C: preko aluminijum-amidnog kuplovanja sa estrima/laktonima
[0201]
[0202] U suspenziju jedinjenja 1002 (288 mg, 1.00 mmol) u toluenu (9 mL) dodat je 3-izohromanon (311 mg, 2.10 mmol), a nakon toga i trimetil aluminijum (2M u toluenu, 1.0 mL, 2.00 mmol). Dobijena smeša je mešana na 75°C tokom 15 h, ohlađena do sobne temperature i razblažena etil acetatom (50 mL). Organski sloj je opran vodom (3x20 mL), 10% rastvorom natrijum hlorida (10 mL), osušen (magnezijum sulfat) i koncentrovan u uslovima sniženog pritiska. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću HPLC kako bi dao N,N’-(5,5’-(tiobis(etan-2,1-diil))bis(1,3,4-tiadiazol-5,2-diil)) bis(2-(2-(hidroksimetil)fenil)acetamid) (jedinjenje 181, 78 mg).
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.42(d, J=6.84 Hz, 2H), 7.26 (bs, 6H), 4.57 (s, 4H), 3.90 (s, 4H), 3.27 (t, J =6.62 Hz, 4H), 2.94 (t, J =6.44 Hz, 4H)
[0203] U suspenziju jedinjenja 1001 (256 mg, 1.00 mmol) u toluenu (8 mL) dodat je 3-izohromanon (311 mg, 2.10 mmol), a nakon toga i trimetil aluminijum (2M u toluenu, 1.0 mL, 2.00 mmol). Dobijena smeša je mešana na 75°C tokom 15 h, ohlađena do sobne temperature i razblažena etil acetatom (50 mL). Organski sloj je opran vodom (3x20 mL), rastvorom 10% natrijum hlorida (10 mL), osušen (magnezijum sulfat) i koncentrovan u uslovima sniženog pritiska. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću HPLC kako bi dao N,N’-(5,5’-(tiobis(etan-2,1-diil))bis(1,3,4-tiadiazol-5,2-diil)) bis(2-(2-(hidroksimetil)fenil)acetamid) (jedinjenja 208, 62 mg).
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.41 (s, 2H), 7.26 (s, 6H), 4.56 (s, 4H), 3.01 (bs, 4H), 1.76 (bs, 4H)
[0204] U rastvor jedinjenja 1015 (3.2 g, 19.5 mmol) u ugljenik tetrahloridu (150 mL) dodati su N-bromosukcinimid (3.47 g, 19.6 mmol) i benzoil peroksid (10 mg, katalitički). Dobijena smeša je podvrgnuta rektifikaciji preko noći pre nego što je vruća filtrirana. Filtrat je koncentrovan u uslovima sniženog pritiska i dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju 20% etilacetatom/heksanom kako bi dao jedinjenje 1016 (2g, prinos 42%) u vidu ulja.1H NMR (300MHz, hloroform-d) δ ppm 3.66 (s, 2H) 3.74 (s, 3H) 4.51(s, 2H) 7.35 (m, 4H).
[0205] U rastvor jedinjenja 1016 (0.243 g, 1 mmol) u acetonu (10mL) dodat je 2-metil imidazol (0.41 g, 5 mmol). Dobijena smeša je podvrgnuta rektifikaciji preko noći pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska i dobijeni ostatak je razblažen vodom (∼100mL). Dobijeni rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću MeOH/dihlorometana kako bi dao jedinjenje 1017 (0.17 g, prinos 69%) u vidu ulja.1H NMR (300MHz, hloroform-d) δ ppm 2.37 (s, 3H) 3.63 (s, 2H) 3.72 (s, 3H) 5.07 (s, 2H) 6.87 (s, 1H) 6.96-7.02 (9m, 2H) 7.23-7.33 (m, 3H)
[0206] U rastvor jedinjenja 1017 (0.17 g, 0.69 mmol) u THF/MeOH/vodi (10 mL, 2 mL, 2 mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (0.06 g, 1.42 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Dobijeni ostatak je razblažen vodom (∼20mL) i dobijeni rastvor je zakišeljen sirćetnom kiselinom. Vodeni sloj je koncentrovan i proizvod je izolovan preparativnom HPLC. Dobijeni ostatak je rastvoren u vodi (5 mL) i u rastvor je dodata je koncentrovana hlorovodonična kiselina (83 µL) pre nego što je koncentrovan i osušen kako bi dao jedinjenje 1018 (0.15 gm) u vidu hidrohloridne soli.
[0207] U suspenziju karboksilne kiseline 1018 (105 mg, 0.39 mmol) u DMF (3 mL) dodat je HATU (150 mg, 0.39 mmol) i reakciona smeša je mešana dok se nije izbistrila nakon čega je dodat amin 1001 (50.5 mg, 0.197 mmol) i DIPEA (0.14 mL, 0.8 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana vodom i osušen kako bi dala jedinjenje 296 (112mg, 83%). 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.76 (brs, 4H) 2.38 (s, 6H) 3.01 (brs, 4H) 3.82 (s, 4H) 5.25 (s, 4H) 7.09-7.38 (m,12H) 12.64-12.67 (brs, 2H).
[0208] U suspenziju jedinjenja 1019 (1.5 g, 6.8 mmol) u CH2Cl2(15 mL) na 0 °C dodavan je u kapima Et3N (1.9 ml, 13.6 mmol), a nakon toga i fenil acetil hlorid (1.07 ml, 8.1 mmol), takođe u kapima. Dobijena smeša je mešana na 0 °C, a zatim polako zagrevana do sobne temperature tokom 2 dana. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-25% EtOAc u heksanu kako bi dao jedinjenje 1020.
[0209] U rastvor 4-bromo-1-butina (7 g, 53 mmol) u DMSO (30 ml) na 0 °C dodat je NaI (7.94 g, 53 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h pre nego što je ohlađena do 0 °C i nakon toga je dodat NaCN (5.2 g, 106 mmol). Dobijena smeša zagrevana je na 80 °C tokom 2.5 h, a zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je podeljena između vode i EtOAc. Organski ekstrakt je opran vodom, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen kako bi dao jedinjenje 1021.
[0210] U smešu jedinjenja 1020 (400 mg, 1.18 mmol), PdCl2(PPh3)2(41 mg, 0.059 mmol) i CuI (11 mg, 0.059 mmol) u Et3N (3 ml) i THF (6 ml) pod atmosferom argona, dodato je jedinjenje 1021 (187 mg, 2.36 mmol), a zatim zagrevano na 60 °C preko noći. Nakon uklanjanja rastvarača, ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-60% EtOAc u heksanu, kako bi dao jedinjenje 1022.
[0211] U rastvor jedinjenja 1022 (118 mg, 0.406 mmol) u smeši EtOAc (60 ml) i EtOH (15 ml) dodat je Pd(OH)2/C (50 mg, 0.356 mmol). Kroz dobijenu smešu su uz mešanje propuštani mehurići vodonika tokom 1 h. Pd katalizator je uklonjen filtracijom i filtrat je koncentrovan kako bi dao jedinjenje 1023.
[0212] Smeša jedinjenja 1023 (127 mg, 0.431 mmol) i tiosemikarbazida (51 mg, 0.561 mmol) u TFA (3 mL) zagrevana je na 85 °C tokom 5 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i sipana preko smeše led-voda. Smeša je alkalizovana pomoću peleta NaOH (pH 10). Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u CH2Cl2kako bi dao jedinjenje 1024.
[0213] U rastvor jedinjenja 1024 (38.4 mg, 0.104 mmol) u NMP (1 mL) na 0 °C dodat je u kapima fenil acetil hlorid (0.017 mL, 0.125 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 1.5 h pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼10 mL). Smeša je podeljena između vode i EtOAc. Organski ekstrakt je opran vodom, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u CH2Cl2kako bi dao jedinjenje 295. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J= 8.82 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.72 Hz, 1H), 7.36-7.28 (m, 10H), 3.81-3.78 (d, J = 8.43 Hz, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0214] Jedinjenje 1024 takođe može da se pripremi i prema sledećem postupku:
[0215] U rastvor 3-amino-6-hloropiridazina (11.14 g, 86.0 mmol) u NMP (279 mL) na 19°C, dodavan je u kapima fenilacetil hlorid (18.2 mL, 137.6 mmol) tokom 5 minuta pri čemu je unutrašnja temperatura rastvora održavana na Ti ≤ 28 °C. Dobijena smeša je mešana na 19°C tokom 90 minuta i sipana u ledenu vodu (557 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom (2x110 mL) i dietil etrom (110 mL). Proizvod je osušen preko noći pod visokim vakuumom kako bi dao N-(6-hloropiridazin-3-il)-2-fenilacetamid (xxx, 18.8 g). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.57 (s, 1H), 8.40 (d, J=9.636 Hz, 1H), 7.90 (d, J=9.516 Hz, 1H), 7.36 (m, 5H) 3.82 (s, 2H)
[0216] Balon sa tri grlića, od 1000 mL, opremljen unutrašnjim temperaturnim senzorom i levkom za dodavanje, ispran je argonom Ar(g). Pod pozitivnim pritiskom argona 4cijanobutilcink bromid (0.5M u THF, 500mL, 250 mmol) je sipan u levak za dodavanje a zatim dodat i u reakcioni sud na sobnoj temperaturi. Čvrsti N-(6-hloropiridazin-3-il)-2-fenilacetamid (20.6 g, 83.3 mmol) dodat je u rastvor na ST uz mešanje, pod tokom Ar(g), nakon čega je dodat i NiCl2(dppp) (4.52 g, 8.33 mmol). Dobijena smeša je mešana na 19°C tokom 240 minuta i reakcija je zatim zaustavljena etanolom (120 mL). Voda (380mL) je dodata uz mešanje u crveni rastvor, pri čemu je nastao gusti precipitat. Etil acetat (760 mL) je dodat i dobro mešan tokom 30 minuta. Čvrste supstance su uklonjene filtracijom kroz sloj celita. Matična tečnost je zatim prebačena u levak za odvajanje i organski sloj je opran pomoću H2O (380mL), 0.5% rastvorom etilendiamintetrasirćetne kiseline (380 mL) i ponovo pomoću H2O (380mL). Organski sloj je koncentrovan rotacionim isparavanjem. Dobijeno crveno ulje je ponovo rastvoreno u EtOAc (200 mL) i, uz temeljno mešanje, u balon je dodata 1M HCl (380 mL). Nakon 30 minuta smeša je prebačena u levak za razdvajanje i sakupljen je vodeni sloj. Organski sloj je ekstrahovan pomoću 1M HCl (2x380mL). pH vrednost vodenog sloja je zatim podešena na ∼7 upotrebom 7.5% rastvora natrijum bikarbonata i bledo žuti precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom (200 mL) i dietil etrom (2x200 mL). Čvrsta supstanca je osušena preko noći pod visokim vakuumom kako bi dala N-(6-(4-cijanobutil)piridazin-3-il)-2-fenilacetamid (jedinjenje 1023, 14.76 g). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.29 (s, 1H), 8.23 (d, J=9.036 Hz, 1H), 7.59 (d, J=9.246 Hz, 1H), 7.32 (m, 5H), 3.79 (s, 2H), 2.90 (t, J= 7.357 Hz, 2H), 2.56 (t, J= 7.038 Hz, 2H), 1.79 (t, J= 7.311 Hz, 2H), 1.63 (t, J= 7.01 Hz, 2H)
[0217] N-(6-(4-cijanobutil)piridazin-3-il)-2-fenilacetamid (14.7 g, 50.2 mmol) je sipan u balon od 250 mL sa okruglim dnom i montiranim spiralnim kondenzatorom sa otvorenim vrhom. U balon je dodat tiosemikarbazid (5.03 g, 55.2 mmol) i trifluorosirćetna kiselina (88 mL). Reakciona suspenzija je zagrevana u kupatilu na 65°C tokom 2 h. Nakon hlađenja do ST, dodata je H2O (150 mL) i mešano je tokom 30 minuta. Smeša je zatim polako, uz mešanje prebačena u 7.5% rastvor natrijum bikarbonata (1400 mL) ohlađena u kupatilu na 0°C. Precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom (2x200 mL), dietil etrom (2x200 mL) i osušen preko noći pod visokim vakuumom. Beličasta čvrsta supstanca je suspendovana u DMSO (200 mL) i zagrevana u kupatilu na 80°C dok unutrašnja temperatura nije dostigla 65°C. DMSO (105 mL) je upotrebljen za ispiranje zidova balona. H2O (120 mL) je polako dodavana dok rastvor nije postao blago zamućen, a zatim je smeša uklonjena iz toplotnog kupatila i ostavljena da se, uz mešanje, ohladi do temperature okoline. Svetlo zeleni precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom (200 mL) i dietil etrom (2x200 mL). Čvrsta supstanca je osušena preko noći pod visokim vakuumom, kako bi dala N-(6-(4-(5-amino-1,3,4-tiadiazol-2-il)butil)piridazin-3-il)-2-fenilacetamid (jedinjenje 1024, 15.01 g). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.28 (s, 1H), 8.23 (d, J=8.916 Hz, 1H), 7.59 (d, J=8.826 Hz, 1H), 7.36 (m, 5H), 7.07 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 2.87 (t, J= 6.799 Hz, 4H), 1.69 (bm, 4H)
[0218] U rastvor dimetil adipata (28.7 mmol, 5.0 g, 4.7 mL, 1.0 ekviv.) u 20 mL MeOH dodat je anhidrovani hidrazin (229.6 mmol, 7.36 g, 7.51 mL, 8.0 ekviv.) i smeša je zagrevana do 50°C, pri čemu je dala beli precipitat. Smeša je zagrevana tokom jednog sata, a zatim ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Bela čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i oprana dodatnim MeOH a zatim osušena pod visokim vakuumom pri čemu je dala 4.6 g adipohidrizida.<1>HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.91 (s, 2H), 4.14 (s, 4H), 2.00 (br s, 4H), 1.46 (br s, 4H).
[0219] U suspenziju adipohidrizida (12.49 mmol, 4.0 g, 1.0 ekviv.), kalijum bikarbonata (15.61 mmol, 1.56 g, 1.25 ekviv.) u 25 mL MeOH, ohlađenu na 0°C, dodat je odjednom čvrsti cijanogen bromid (13.74 mmol, 1.44 g, 1.1 ekviv.). Ova smeša je mešana na 0°C i ostavljena da se zagreje do ST tokom jednog sata, a zatim je mešana preko noći. Isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska i čvrste supstance su razblažene vodom. pH je podešen na 12 pomoću 2.5 N NaOH i čvrste supstance su sakupljene filtracijom. Bela čvrsta supstanca je oprana vodom i osušena pod visokim vakuumom kako bi dala 1.73 g oksadiazola 1025.<1>HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 6.85 (s, 4H), 2.68 (s, 4H), 1.68 (s, 4H).
[0220] U suspenziju oksadiazola 1025 (181 mg, 0.81 mmol) u NMP (9 mL) dodat je trietilamin (0.564 mL, 4.05 mmol) i smeša je zagrejana do 70°C. Smeša je ostavljena da se meša tokom 30 minuta nakon čega je dodat fenilacetil hlorid (0.234 mL, 1.77 mmol). Temperatura reakcije je održavana na 70°C tokom 15 sati a zatim je reakcija ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Sirova reakciona smeša je prečišćena reversno-faznom HPLC, dajući jedinjenje 305 (0.015 g). 1HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.74 (s, 2H), 7.33 (s, 10H), 3.74 (s, 4H), 2.85 (s, 4H), 1.76 (s, 4H).
Funkcionalizacija diacilovanih jezgara:
[0221]
[0222] U suspenziju jedinjenja 21 (2.25 g, 4.57 mmol) u smeši THF (250 mL) i H2O (20 mL) na sobnoj temperaturi, dodat je NaOH (1.83 g, 45.67 mmol) i rastvor formaldehida (37% u vodi, 14.83 mL, 182.70 mmol). Dobijena smeša zagrevana je na 60 °C tokom 7 h pre nego što jer ohlađena do 0 °C i zakišeljena do pH 7 vodenim rastvorom HCl. Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen kako bi obezbedio N,N’-[5,5’-(butan-1,4-diil)-bis(1,3,4-tiadiazol-5,2-diil)]-bis(3-hidroksi-2-fenilpropanamid) (jedinjenje 36, 624 mg). Precipitacija broj 2 iz filtrata obezbedila je dodatni proizvod (1.29 g). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (bs, 2H), 7.35-7.30 (m, 10H), 5.09 (bs, 2H), 4.10-4.02 (m, 4H), 3.61 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 3.02 (bs, 4H), 1.76 (bs, 4H).
[0223] U suspenziju jedinjenja 199 (300 mg, 0.572 mmol) u smeši THF (50 mL) i MeOH (5 ml) dodat je kalijum karbonat (158 mg, 1.144 mmol) i rastvor formaldehida (37% u vodi, 2 mL). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi for 48 h pre nego što je ohlađena do 0 °C i zakišeljena do pH 7 pomoću vodenog rastvora HCl. Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen. Sirovi materijal je prečišćen pomoću HPLC kako bi dao jedinjenje 29. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.34-7.26 (m, 10H), 4.13-4.02 (m, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.62 (m, 2H), 3.24 (t, 4H), 2.93 (t, 4H).
[0224] U suspenziju jedinjenja 199 (2.0 g, 3.81 mmol) u smeši THF (250 mL) i MeOH (20 ml) H2O (20 mL) na sobnoj temperaturi dodat je 1N NaOH (20 ml) i rastvor formaldehida (37% u vodi, 15 mL). Dobijena smeša je zagrevana na 50 °C preko noći pre nego što je ohlađena do 0 °C i zakišeljena do pH 7 pomoću vodenog rastvora HCl. Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen. Sirovi materijal je prečišćen pomoću HPLC kako bi dao jedinjenje 24. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.67 (bs, 2H), 7.36-7.30 (m, 10H), 5.10 (bs, 2H), 4.10-4.02 (m, 4H), 3.61 (d, 2H), 3.27 (t, 4H), 2.95 (t, 4H).
Prolekovi:
[0225]
[0226] U balon sa N,N’-(5,5’-(tiobis(etan-2,1-diil))bis(1,3,4-tiadiazol-5,2-diil))bis(2-fenilacetamidom) (jedinjenje 1) (9.4 mmol, 5.0 g, 1.0 ekviv.) dodato je 100 mL DMF, K2CO3(20.98 mmol, 2.89 g, 2.2 ekviv.), i hlorometil butirat (20.98 mmol, 2.86 g, 2.62 mL, 2.2 ekviv.). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 sati a zatim razblažena pomoću 200 mL vode i 200 mL EtOAc. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan pomoću EtOAc (2 x 100mL), a organski slojevi su kombinovani, oprani vodom, fiziološkim rastvorom i osušeni preko Na2SO4. Na2SO4je uklonjen filtracijom i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska. Jedinjenja su prečišćena reversno-faznom hromatografijom (MeCN, H2O), dajući 0.235 g jedinjenja 8 i 0.126 g jedinjenja 7.
1HNMR (300 MHz, DMSO, d6) Jedinjenje 8: δ 7.31 (m, 10H), 6.18 (s, 4H), 3.82 (s, 4H), 3.17 (dd, 2H, J =6.8 Hz), 2.92 (dd, 2H, J =6.8 Hz), 2.93 (m, 4H), 2.32 (dd, 2H, J=7.2 Hz), 1.54 (dt, 2H, J =7.2, 7.4 Hz), 0.87 (t, 3H, J = 7.4Hz).
1HNMR (300 MHz, DMSO, d6) Jedinjenje 7: δ 12.68 (s, 1H), 7.32 (m, 10H), 6.18 (s, 2H), 3.82 (s, 4H), 3.26 (dd, 2H, J =7.0 Hz), 3.17 (dd, 2H, J =6.8 Hz), 2.93 (m, 4H), 2.32 (dd, 2H, J =7.2 Hz), 1.54 (dt, 2H, J =7.2, 7.4 Hz), 0.87 (t, 3H, J = 7.4Hz).
[0227] U suspenziju hidrohlorida 3-morfolin-4-il-propionske kiseline (500 mg, 2.56 mmol) u DMF (20 mL) na 0°C dodat je N-(3-dimetilaminopropil)-N’-etilkarbodiimid hidrohlorid (534 mg, 2.79 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 40 min, nakon čega je dodat diol 36 (642 mg, 1.16 mmol) i 4-DMAP (454 mg, 3.72 mmol). Dobijena smeša je mešana uz podizanje temperature od 0 °C do sobne temperature tokom perioda od 3.5 h pre nego što je razblažena pomoću EtOAc i hladne vode. Organski sloj je odvojen i opran vodom (3x50 mL), fiziološkim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 10-25% MeOH u EtOAc kako bi dao {[5,5’-(butan-1,4-diil)-bis(1,3,4-tiadiazol-5,2-diil)]-bis(azandiil)}-bis(3-okso-2-fenilpropan-3,1-diil)-bis(3 morfolinopropanoat) (jedinjenje 188, 340 mg) i manje polarni proizvod, 3-((5-{4-[5-(3-hidroksi-2-fenilpropanamido)-1,3,4-tiadiazol-2-il]butil}-1,3,4-tiadiazol-2-il)amino)-3-okso-2-fenilpropil 3-morfolinopropanoat (jedinjenje 228, 103 mg). Jedinjenje 188: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.80 (s, 2H), 7.39 (m, 10H), 4.62 (t, J = 9.6 Hz, 2H), 4.33-4.27 (m, 4H), 3.48 (bs, 8H), 3.02 (bs, 4H), 2.45 (bs, 8H), 2.25 (bs, 8H), 1.76 (bs, 4H).
Jedinjenje 228: 1H NMR (300 MHz, MeOD-d4) δ 7.43-7.37 (m, 10H), 4.71 (t, J = 10.5 Hz, 1H), 4.41 (m, 1H), 4.30-4.24 (m, 2H), 4.06-4.03 (m, 1H), 3.80-3.76 (m, 1H), 3.62 (bs, 4H), 3.11 (bs, 4H), 2.63-2.52 (m, 4H), 2.40 (bs, 4H), 1.90 (bs, 4H).
[0228] U rastvor dietil trans-1,2-ciklopropandikarboksilata (5.00 g, 26.85 mmol) u THF (20 mL) na 0 °C dodat je u kapima rastvor LAH (67.13 mL, 1.0 M u THF, 67.13 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 1.5 h pre nego što je reakcija zaustavljena pomoću H2O (20 mL), 2N vodenog rastvora NaOH (20 mL) i H2O (20 mL). Smeša je žustro mešana tokom 1 h na sobnoj temperaturi pre nego što je filtrirana kroz sloj celita. Filtrat je osušen (MgSO4) i koncentrovan kako bi obezbedio željeni diol (2.73 g) u vidu bezbojnog ulja.
[0229] U smešu diola (2.00 g, 19.58 mmol) u CH2Cl2(75 mL) na 0 °C dodat je piridin (6.34 mL, 78.33 mmol), a nakon toga, u kapima, i MsCl (3.33 mL, 43.08 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h pre nego što je zagrejana do sobne temperature. Reakcija je zaustavljena pomoću H2O i razblažena etrom. Organski sloj je opran fiziološkim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrovan kako bi obezbedio jedinjenje 1039. Ovaj sirovi proizvod je rastvoren u DMSO (75 mL), i dodati su NaCN (2.88 g, 58.75 mmol) i NaI (294 mg, 1.96 mmol). Dobijena smeša zagrevana je na 45 °C tokom 8 h pre nego što je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i razblažena pomoću EtOAc i H2O. Organski sloj je razdvojen, opran fiziološkim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrovan kako bi obezbedio sirovi proizvod 1040 koji je bez prečišćavanja korišćen u sledećem koraku.
[0230] Smeša jedinjenja 1040 i tiosemikarbazida (3.75 g, 41.12 mmol) u trifluorosirćetnoj kiselini (TFA) (20 mL) zagrevana je na 80 °C tokom 5 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i sipana u smešu leda i vode. Peleti natrijum hidroksida dodavani su u smešu sve dok ona nije postala bazna (pH 14). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom, etrom, i osušen, kako bi se dobilo jedinjenje 1041 (472 mg).
[0231] U suspenziju jedinjenja 1041 (70 mg, 0.26 mmol) u 1-metil-2-pirolidinonu (NMP) (5 mL) na 0 °C dodat je u kapima fenilacetil hlorid (72 µL, 0.55 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼3 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran vodom i osušen, kako bi obezbedio jedinjenje 1035 (37 mg).1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 2H), 7.34-7.27 (m, 10H), 3.82 (s, 4H), 3.04 -2.75 (m, 4H), 1.14-1.12 (m, 2H), 0.63-0.59 (m, 2H).
[0232] U rastvor jedinjenja 1020 (1.50 g, 4.42 mmol), etiniltrimetilsilana (813 uL, 5.75 mmol), PdCl2(PPh3)2(310 mg, 0.44 mmol) i CuI (59 mg, 0.31 mmol) u THF (20 mL) pod atmosferom argona na sobnoj temperaturi, dodat je Et3N (6.16 mL, 44.23 mmol). Dobijena smeša zagrevana je na 50 °C tokom 5 h pre nego što je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i filtrirana kroz sloj celita. Filtrat je koncentrovan i sirovi ostatak je prečišćen brzom hromatografijom na koloni sa silika gelom uz eluciju pomoću 10-50% EtOAc u heksanima, kako bi obezbedio željeni proizvod (1.21 g) u vidu čvrste supstance.
[0233] Smeša prethodnog intermedijera (1.07 g, 3.48 mmol) i K2CO3(0.40 g, 2.90 mmol) u MeOH (100 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 h pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Ostatak je ponovo rastvoren u smeši EtOAc i H2O, i neutralisan pomoću 1N vodenog rastvora HCl do pH 7. Organski sloj je odvojen, opran fiziološkim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen brzom hromatografijom na koloni sa silika gelom uz eluciju pomoću 10-50% EtOAc u heksanima kako bi obezbedio željeni alkin 1036 (0.48 g) u vidu bele čvrste supstance.
[0234] U rastvor alkina 1036 (52 mg, 0.22 mmol) u piridinu (5 mL) na sobnoj temperaturi dodat je CuCl (4.3 mg, 0.04 mmol). Dobijena smeša je mešana pod protokom vazduha u toku 40 min dok sav polazni materijal nije potrošen. Reakciona smeša je razblažena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (∼2 mL). Beličasti precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, opran pomoću H2O i osušen. Ovaj sirovi bis-acetilenski proizvod 1037 (52 mg) korišćen je u narednom koraku bez dodatnog prečišćavanja.
[0235] Smeša jedinjenja 1037 (52 mg) i Pd(OH)2/C (100 mg) u smeši DMF (5 mL) i THF (10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3h pod pritiskom H2od 1 atmosfere sve dok sav početni materijal nije potrošen. Paladijumski katalizator je uklonjen filtracijom i filtrat je koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom uz eluciju pomoću 1-10% MeOH u CH2Cl2kako bi obezbedio željeni proizvod 1038 (18 mg) u vidu čvrste supstance. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.26 (s, 2H), 8.20 (d, J = 8.97 Hz, 2H), 7.56 (d, J = 8.77 Hz, 2H), 7.36-7.24 (m, 10H), 3.78 (s, 4H), 2.90 (bs, 4H), 1.73 (bs, 4H).
[0236] U rastvor adiponitrila (19.02 g, 175.8 mmol) u TFA (50 mL) dodat je tiosemikarbazid (16.02 g, 175.8 mmol) i smeša je zagrevana do 70°C tokom 4 sata pod atmosferom argona. Smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska. Ostatak je razblažen vodom (200 mL) i pH je podešen na 7 pomoću čvrstog NaOH, što je dalo beli precipitat koji je sakupljen filtracijom i opran vodom. Čvrste supstance su osušene pod visokim vakuumom dajući 9.22 g jedinjenja 1081.<1>HNMR (DMSO, d6): δ 7.02 (br s, 2H) 2.84 (m, 2H), 2.55 (m, 2H), 1.67 (m, 4H).
[0237] U rastvor 1081 (0.625 g, 2.87 mmol) u NMP (12.5 mL) dodat je u kapima fenilacetil hlorid (0.487 g, 0.42 mL, 3.15 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom jednog sata pod atmosferom argona. Smeša je sipana u vodu (100 mL) i čvrste supstance su sakupljene filtracijom. Čvrste supstance su oprane vodom i osušene pod visokim vakuumom to kako bi dale 0.805 g jedinjenja 1082.1HNMR (DMSO, d6): δ 12.65 (s, 1H) 7.31 (m, 5H), 3.80 (s, 2H), 3.00 (t, 2H, J= 7.3 Hz), 2.53 (t, 2H, J= 7.1 Hz), 1.78 (dq, 2H, J= 7.3, 7.1 Hz), 1.61 (dq, 2H, J= 7.3, 7.1 Hz).
[0238] U rastvor jedinjenja 1082 (0.49 g, 1.33 mmol) u TFA (10 mL) dodat je tiosemikarbazid (0.23 g, 1.46 mmol) i smeša je zagrevana na 70°C preko noći pod atmosferom argona. Smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska. Ostatak je razblažen vodom (50 mL) i pH je podešen na 7 pomoću čvrstog NaOH što je dalo beli precipitat koji je sakupljen filtracijom i opran vodom. Čvrste supstance su osušene pod visokim vakuumom dajući 0.367 g jedinjenja 1083.<1>HNMR (DMSO, d6): δ 12.70 (s, 1H) 7.34 (br s, 5H), 7.16 (s, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.01 (s, 2H), 2.84 (S, 2H), 1.71 (br s, 4H).
[0239] U rastvor jedinjenja 1083 (0.10 g, 0.267 mmol), 2,4-difluoro-3-metoksifenilsirćetne kiseline (0.058 g, 0.267 mmol), EDC (0.127 g, 0.667 mmol), HOBt (0.090 g, 0.667 mmol) u DMF (4 mL) dodat je DIEA (0.171 g, 0.231 mL, 1.335 mmol) i smeša je mešana preko noći pod atmosferom argona. Smeša je sipana u vodu (20 mL) i obrazovane čvrste supstance su sakupljene filtracijom, oprane vodom i osušene pod visokim vakuumom. Sirovo jedinjenje 1084 je bez prečišćavanja korišćeno u narednom koraku. U rastvor jedinjenja 1084 (0.050 g, 0.091 mmol) u dihlorometanu (1 mL) dodat je BBr3(1.0 mL, 1 mmol, 1.0 M u dihlorometanu) i smeša je mešana tokom 4 sata na sobnoj temperaturi pod atmosferom argona. Isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska i ostatak je razblažen dihlorometanom (5 mL). Isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska, a ostatak je razblažen vodom (15 mL) i pH je podešen na 12. Vodeni sloj je opran dihlorometanom (4 x 5 mL) i pH je podešen na 4. Čvrste supstance su sakupljene filtracijom, oprane vodom i osušene pod visokim vakuumom dajući 0.029 g jedinjenja 346. 1HNMR (DMSO, d6): δ 12.66 (s, 2H), 10.12 (s, 1H), 7.33 (s, 5H), 7.00 (m, 1H), 6.80 (m, 1H), 3.84 (s, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.02 (br s, 4H), 1.76 (br s, 4H).
[0240] U rastvor jedinjenja 1083 (0.05 g, 0.133 mmol), Boc-3-aminometil-fenilsirćetne kiseline (0.035 g, 0.133 mmol), EDC (0.064 g, 0.332 mmol), HOBt (0.045 g, 0.332 mmol) u DMF (8 mL) dodat je DIEA (0.086 g, 0.115 mL, 0.665 mmol) i smeša je mešana preko noći pod atmosferom argona. Smeša je sipana u vodu (20 mL) i obrazovane čvrste supstance su sakupljene filtracijom, oprane vodom i osušene pod visokim vakuumom kako bi dale 0.023 g jedinjenja 375. 1HNMR (DMSO, d6): δ 12.66 (s, 2H), 7.27 (m, 10H), 4.11 (br s, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.01 (br s, 4H), 1.76 (br s, 4H), 1.39 (s, 9H).
[0241] U balon je stavljeno jedinjenje 1024 (100 mg, 0.27 mmol), tropna kiselina (54 mg, 0.326 mmol) u DMF (2 ml) na 0 °C, dodat je HOBT (88 mg, 0.652 mmol), a nakon toga i EDCI (156 mg, 0.815 mmol). Dobijena smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana tokom 3 h pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼10 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode i osušen kako bi dao jedinjenje 314.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.82 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.72 Hz, 1H), 7.36-7.28 (m, 10H), 4.10-4.05 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.65 (s, 1H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0242] U balon je stavljeno jedinjenje 1024 (500 mg, 1.36 mmol), DL-bademova kiselina (248 mg, 1.63 mmol) u DMF (10 ml) na 0 °C, dodat je HOBT (441 mg, 3.26 mmol), a nakon toga u EDCI (781 mg, 4.08 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 10 minuta, a zatim zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 10 minuta pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼50 mL) na 0 °C. Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode i osušen kako bi dao jedinjenje 315.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.82 Hz, 1H), 7.58-7.50 (m, 3H), 7.36-7.28 (m, 8H), 6.35 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0243] U suspenziju hidrohlorida 3-morfolin-4-il-propionske kiseline (209 mg, 1.07 mmol) u DMF (10 ml) dodat je EDCI (308 mg, 1.61 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 1 sata, nakon čega je dodato jedinjenje 315 (447 mg, 0.889 mmol) i 4-DMAP (261 mg, 2.14 mmol). Dobijena smeša je mešana od 0 °C do sobne temperature tokom perioda od 6 h pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem ledene vode (∼50mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u EtOAc kako bi dao jedinjenje 334.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.95 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.45 Hz, 1H), 7.58-7.26 (m, 11H), 6.14 (s, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.54 (bs, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 2.63 (bs, 4H), 2.38 (bs, 4H), 1.73 (bs, 4H).
[0244] Jedinjenje 317 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za jedinjenje 315.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.40 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.03 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.72 Hz, 1H), 7.36-6.87 (m, 9H), 6.35 (bs, 1H), 5.30 (s, 1H), 3.78 (m, 5H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0245] Jedinjenje 318 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za jedinjenje 315.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.50 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.43 Hz, 1H), 7.60-7.27 (m, 10H), 6.51 (bs, 1H), 5.35 (s, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0246] U balon je stavljeno jedinjenje 1024 (50 mg, 0.135 mmol), 3-hlorofenilsirćetna kiselina (28 mg, 0.163 mmol) u DMF (1 ml) na 0 °C, dodat je HOBT (44 mg, 0.326 mmol), a nakon toga i EDCI (78 mg, 0.408 mmol). Dobijena smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana tokom 1 h pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼5 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode i etra i zatim osušen kako bi dao jedinjenje 335.1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.82 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.72 Hz, 1H), 7.36-7.28 (m, 9H), 3.84 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0247] Jedinjenje 337 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za jedinjenje 335.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 9.38 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.37 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.63 Hz, 1H), 7.36-7.09 (m, 6H), 6.75-6.65 (m, 3H), 3.78 (s, 2H), 3.70 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0248] Jedinjenja 339, 341, 382: U balon je stavljeno jedinjenje 1024 (100 mg, 0.27 mmol), Boc-3-aminometil-fenilsirćetna kiselina (86 mg, 0.325 mmol) u DMF (2 ml) na 0 °C, dodat je HOBT (88 mg, 0.65 mmol), a nakon toga i EDCI (156 mg, 0.812 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 5 minuta, a zatim zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 1.5 h pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼10 mL) na 0 °C. Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode i etra, a zatim osušen kako bi dao jedinjenje 339.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.82 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.42 Hz, 1H), 7.36-7.13 (m, 9H), 4.13-4.11 (d, J = 10.62, 2H), 3.78 (s, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H), 1.38 (s, 9H).
[0249] U suspenziju jedinjenja 339 (50 mg, 0.081 mmol) u dihlorometanu (2 ml) dodat je TFA (2 ml) na 0 °C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 minuta, pre nego što je uparena do suva pod vakuumom. Dodat je etar i beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još etra i dihlorometana, a zatim osušen kako bi dao jedinjenje 341.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.82 Hz, 1H), 8.14-8.11 (bs, 2H), 7.58-7.54 (d, J = 9.42 Hz, 1H), 7.36-7.13 (m, 9H), 4.06-4.03 (m, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0250] U rastvor jedinjenja 341 (10 mg, 0.0159 mmol) u DMF (1 ml) na 0 °C, dodat je u kapima trietilamin (4.4 ul, 0.0317 mmol), a nakon toga, takođe u kapima, etil hloroformat (1.8 ul, 0.0191 mmol). Dobijena smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana tokom 30 minuta pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼1 mL) na 0 °C. Smeša je podeljena između vode i EtOAc. Organski ekstrakt je opran vodom, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u CH2Cl2kako bi dao jedinjenje 382. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.82 Hz, 1H), 7.67-7.58 (bs, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.42 Hz, 1H), 7.36-7.13 (m, 9H), 4.18-4.16 (m, 2H), 4.06-4.0 (q, 2H), 3.78 (s, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H), 1.19-1.13 (t, 3H).
[0251] Jedinjenje 431 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za jedinjenje 382 sa odgovarajućim reagensima.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.88 Hz, 1H), 7.57-7.54 (d, J = 9.51 Hz, 1H), 7.38-7.15 (m, 9H), 4.25-4.24 (d, J = 5.64 Hz, 2H), 3.76 (s, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.87 (s, 3H), 1.73 (bs, 4H).
[0252] Jedinjenje 432 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za jedinjenje 382 sa odgovarajućim reagensima.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.63 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 9.04-9.01 (m, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.91 Hz, 1H), 7.93-7.89 (d, J = 9.51 Hz, 2H), 7.58-7.25 (m, 13H), 4.50-4.48 (d, J = 5.91 Hz, 2H), 3.78 (s, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0253] Jedinjenje 433 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za jedinjenje 382 sa odgovarajućim reagensima.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.63 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.31-8.21 (m, 1H), 8.20-8.19 (d, J = 9.57 Hz, 1H), 7.57-7.54 (d, J = 8.73 Hz, 1H), 7.35-7.13 (m, 9H), 4.26-4.24 (d, J = 5.52 Hz, 2H), 3.78 (s, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 2.0 (s, 3H), 1.73 (bs, 4H), 0.86-0.85 (d, J = 3.99 Hz, 6H).
[0254] U rastvor jedinjenja 341 (70 mg, 0.111 mmol) u DMF (1 ml) na 0 °C, dodat je u kapima trietilamin (31 ul, 0.22 mmol), a nakon toga, taođe u kapima, 5-bromovaleril hlorid (12 ul, 0.122 mmol). Dobijena smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana tokom 1h. Zatim je u reakcionu smešu na 0 °C dodat kalijum terc-butoksid (50 mg, 0.445 mmol). Dobijena smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼2 mL) na 0 °C. Smeša je podeljena između vode i EtOAc. Organski ekstrakt je opran vodom, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u CH2Cl2, kako bi dao jedinjenje 476. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.82 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.42 Hz, 1H), 7.36-7.13 (m, 9H), 4.50 (s, 2H), 3.78 (s, 4H), 3.35 (bs, 2H), 3.20 (bs, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 2.30 (bs, 2H), 1.68-1.80 (d, 6H).
[0255] Jedinjenje 340 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za jedinjenje 315, sa odgovarajućim reagensima.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.50 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.24 Hz, 1H), 7.60-7.27 (m, 10H), 6.51 (bs, 1H), 5.35 (s, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0256] Jedinjenje 349 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za jedinjenje 315, sa odgovarajućim reagensima.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.41 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.76 Hz, 1H), 7.58-7.27 (m, 11H), 6.36 (s, 1H), 5.34 (s, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0257] Jedinjenje 350 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za jedinjenje 315, sa odgovarajućim reagensima.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.41 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.67 Hz, 1H), 7.58-7.27 (m, 11H), 6.34 (s, 1H), 5.34 (s, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0258] Jedinjenje 351 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za jedinjenje 315, sa odgovarajućim reagensima.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.50 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.21-8.18 (d, J = 8.67 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.72 Hz, 1H), 7.36-7.23 (m, 8H), 6.67 (s, 1H), 5.40 (s, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0259] U rastvor jedinjenja 1024 (50 mg, 0.136 mmol) u DMF (1 ml) na 0 °C dodat je u kapima trietilamin (38 ul, 0.271 mmol), a nakon toga, takođe u kapima, benzil izocijanat (20 ul, 0.163 mmol). Dobijena smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana tokom 40 minuta pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼5 mL) na 0 °C. Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u CH2Cl2kako bi dao jedinjenje 352. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.26 (s, 1H), 10.82 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.42 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 8.79 Hz, 1H), 7.36-7.31 (m, 10H), 7.06 (bs, 1H), 4.37-4.35 (d, J = 5.22 Hz, 2H), 3.78 (s, 2H), 2.99-2.90 (m, 4H), 1.73 (bs, 4H).
[0260] Jedinjenje 353 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za jedinjenje 335.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.57 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.45 Hz, 1H), 7.57-7.54 (d, J = 9.48 Hz, 1H), 7.36-7.25 (m, 6H), 6.91-6.84 (m, 3H), 3.76 (m, 7H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0261] U balon je stavljeno jedinjenje 1024 (50 mg, 0.135 mmol), hidrohlorid 2-piridin sirćetne kiseline (27 mg, 0.156 mmol) u DMF (1 ml) na 0 °C, dodat je rastvor propilenfosfonskog anhidrida (91 ul), a nakon toga i trietilamin (54 ul, 0.39 mmol). Dobijena smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana tokom 1 h pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼5 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode i etra i zatim osušen kako bi dao jedinjenje 354.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.97 Hz, 1H), 7.81-7.76 (m, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.06 Hz, 1H), 7.42-7.26 (m, 7H), 4.02 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0262] Jedinjenje 355 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za jedinjenje 354.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.70 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.53-8.49 (m, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.77-7.73 (d, J = 8.46 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.48 Hz, 1H), 7.38-7.26 (m, 7H), 3.88 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0263] Jedinjenja 309 i 310 su pripremljena prema prethodno navedenom postupku za pripremu jedinjenja 354.
[0264] U rastvor 1043 (3.2g, 19.5mmol) u ugljenik tetrahloridu (150mL) dodat je N-bromosukcinimid (3.47g, 19.6mmol) i benzoil peroksid (10mg, katalitički). Dobijena smeša je podvrgnuta rektifikaciji preko noći pre nego što je vruća filtrirana. Filtrat je koncentrovan u uslovima sniženog pritiska i dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 20% etilacetat/heksana kako bi dao jedinjenje 1044 (2g, 42% prinos) u vidu ulja.
1H NMR (300MHz, hloroform-d) δ ppm 3.66 (s, 2H) 3.74 (s, 3H) 4.51(s, 2H) 7.35 (m, 4H)
[0265] U rastvor jedinjenja 1044 (0.243g, 1mmol) u acetonu (10mL) dodat je 2-metil imidazol (0.41g, 5mmol). Dobijena smeša je podvrgnuta rektifikaciji preko noći pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska i dobijeni ostatak je razblažen vodom (∼100mL). Dobijeni rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfate, filtriran i isparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću MeOH/dihlorometana kako bi dao jedinjenje 1045 (0.17g, prinos 69%) u vidu ulja. 1H NMR (300MHz, hloroform-d) δ ppm 2.37 (s, 3H) 3.63 (s, 2H) 3.72 (s, 3H) 5.07 (s, 2H) 6.87 (s, 1H) 6.96-7.02, 9m, 2H) 7.23-7.33 (m, 3H)
[0266] U rastvor 1045 (0.17g, 0.69mmol) u THF/MeOH/vodi (10mL, 2mL, 2mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (0.06g, 1.42mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Dobijeni ostatak je razblažen vodom (∼20mL) i dobijeni rastvor je zakišeljen sirćetnom kiselinom. Vodeni sloj je koncentrovan i proizvod je izolovan preparativnom HPLC. Dobijeni ostatak je rastvoren u vodi (mL) i rastvoru je dodata koncentrovana hlorovodonična kiselina (mL) pre nego što je koncentrovan i osušen kako bi dao jedinjenje 1046 (0.15gm) u vidu hidrohloridne soli.
[0267] U suspenziju karboksilne kiselina 1046 (41.8mg, 0.157mmol) u DMF (3mL) dodat je HATU (61.3mg, 0.161mmol) i reakciona smeša je mešana dok se nije izbistrila nakon čega je dodat amin 1024 (52.5mg, 0.142mmol) i DIPEA (50ul, 0.29mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode. Dobijeni rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Dobijeni ostatak je triturisan etrom. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana etrom i osušena kako bi dala jedinjenje 380 (40mg, 48%).1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.74 (brs, 4H) 2.91-3.02 (brs, 4H) 3.78-3.83 (m, 4H) 5.34 (s, 2H) 7.16-7.57 (m, 12H) 8.19-8.22 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H)
[0268] u ledeni rastvor jedinjenja 1048 (5g, 0.033mol) u metanolu (50mL) dodat je tionil hlorid (0.2mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Dobijeni ostatak je osušen pri visokom vakuumu preko noći, kako bi dao jedinjenje 1049 (5gm) u vidu ulja i takav je upotrebljen u sledećem koraku. 1H NMR (300MHz, hloroform-d) δ ppm 3.62 (s, 2H) 3.74 (s, 3H) 6.76-6.87 (m, 3H) 7.18-7.21(m, 1H).
[0269] U rastvor jedinjenja 1049 (1g, 6mmol) u DMF (20mL) dodat je kalijum karbonat (2.08g, 15mmol), jedinjenje 1050 (1.225g, 6.62mmol) i natrijum jodid (10mg). Dobijena smeša je mešana na 80 °C preko noći pre nego što je razblažena vodom (∼100mL). Dobijeni rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfate, filtriran i isparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću MeOH/dihlorometana kako bi dao jedinjenje 1051 (1g, prinos 60% prinos) u vidu ulja. 1H NMR (300MHz, hloroform-d) δ ppm 2.61 (s, 4H) 2.83 (t, 2H) 3.62 (s, 2H) 3.63 (s, 3H) 3.73-3.77 (m, 4H) 4.14 (t, 2H) 6.88-6.91 (m, 3H) 7.26-7.29 (m, 1H)
[0270] U rastvor jedinjenja 1051 (1g, 3.57mmol) u THF/MeOH/vodi (30mL, 5mL, 5mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (0.3g, 7.14mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Dobijeni ostatak je razblažen vodom (∼50mL) i dobijeni rastvor je zakišeljen pomoću 1N hlorovodonične kiselina. Vodeni sloj je koncentrovan i proizvod je izolovan preparativnom HPLC. Dobijeni ostatak je rastvoren u vodi (mL) i rastvoru je dodata koncentrovana hlorovodonična kiselina (mL) pre nego što je koncentrovan i osušen kako bi dao jedinjenje 1052 u vidu hidrohloridne soli.
[0271] U suspenziju karboksilne kiseline 1052 (47.4 mg, 0.157 mmol) u DMF (3mL) dodat je HATU (61.3 mg, 0.161 mmol) i reakciona smeša je mešana dok se nije izbistrila, nakon čega je dodat amin 1024 (52.5 mg, 0.142 mmol) i DIPEA (50 ul, 0.29 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode. Dobijeni rastvor je podeljena između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću MeOH/dihlorometana kako bi dao jedinjenje 381 (40mg, 46% prinos). 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.74 (brs, 4H) 2.72 (t, 2H) 2.89-2.9 (m, 4H) 3.02 (brs, 4H) 3.336 (m, 2H) 3.76-3.78 (m,2H) 4.09 (m, 2H) 6.88-6.93 (m, 3H) 7.24-7.36 (m, 6H) 7.54-7.58 (d, 1H) 8.18-8.21 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
[0272] U rastvor jedinjenja 1044 (2.29 g, 0.01 mol) u DMF (100 mL) dodat je kalijum karbonat (1.38 g, 0.01 mmol) i pirazol (0.68 g, 0.01 mol). Dobijena smeša je mešana na 70 °C tokom 5 sati pre nego što je razblažena vodom (∼100 mL). Dobijeni rastvor je podeljena između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1053 (1 g, prinos 50%). 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 3.94 (s, 3H) 5.40 (s, 2H) 6.33 (s, 1H) 7.42-7.48 (m, 3H) 7.58 (s, 1H) 7.95 (s, 1H) 8.008.02 (m, 1H)
[0273] U ledeni rastvor jedinjenja 1053 (1 g, 4.62 mmol) u THF (20 mL) dodat je u kapima litijum aluminijum hidrid (2.5 mL, 2M/THF) i dobijena reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 5 sati pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem zasićenog rastvora soli po Rochelle-u. Dobijeni rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen kako bi dao jedinjenje 1054 (0.8 g, prinos 92%). 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 4.71 (s, 2H) 5.35 (s, 2H) 6.30 (s, 1H) 7.15-7.43 (m, 5H) 7.58 (s, 1H)
[0274] U rastvor jedinjenja 1054 (0.8 g, 4.2 mmol) u dihlorometanu (20 mL) dodat je tionil hlorid i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 sati pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Dobijeni ostatak je osušen pri visokom vakuumu preko noći kako bi dao jedinjenje 1055 (1 g, prinos 97%) u vidu soli HCl.<1>H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 4.75 (s, 2H) 5.38 (s, 2H) 6.30 (s, 1H) 7.19-7.50 (m, 5H) 7.86 (s, 1H) 11.49-11.60 (brs, 1H)
[0275] U rastvor jedinjenja 1055 (1 g, 4.1 mmol) u DMF (20 mL) dodati su natrijum cijanid (0.625 g, 12.7 mmol) i natrijum jodid (20 mg) i dobijena reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 2 sata pre nego što je razblažena vodom. Dobijeni rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1056 (0.664 g, prinos 83%). 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 3.76 (s, 2H) 5.38 (s, 2H) 6.35 (s, 1H) 7.19-7.46 (m, 5H) 7.61 (s, 1H)
[0276] U rastvor jedinjenja 1056 (0.664 g, 3.3 mmol) u dioksanu (5 mL) dodata je koncentrovana hlorovodonična kiselina (5 mL) i dobijena reakciona smeša je mešana na 90 °C preko noći, pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Dobijeni ostatak je prečišćen putem preparativne HPLC i konvertovan je u HCl so, kako bi dao jedinjenje 1057 (0.5 g, prinos 40%). 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 3.55 (s, 2H) 5.33 (s, 2H) 6.29 (s, 1H) 7.14-7.20 (m, 4H) 7.48 (s, 1H) 7.84 (s, 1H) 11.97-11.99 (brs, 1H)
[0277] U suspenziju karboksilne kiseline 1057 (19.8 mg, 0.0785 mmol) u DMF (2 mL) dodat je HATU (30.6 mg, 0.08 mmol) i reakciona smeša je mešana dok se nije izbistrila, nakon čega je dodat amin 1024 (26.25 mg, 0.07 mmol) i DIPEA (25 ul, 0.15 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana vodom i osušena kako bi dala jedinjenje 395 (18 mg, prinos 45%). 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.74 (brs, 4H) 2.89-3.04 (m, 4H) 3.78 (s, 4H) 5.33 (s, 2H) 6.27-6.28 (s, 1H) 7.09-7.58 (m, 11H) 7.82 (s, 1H) 8.19-8.21 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H)
[0278] U rastvor jedinjenja 1044 (1 g, 4.1 mmol) u THF(5 mL) dodat je 2M/THF rastvor metil amina (2 mL) i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Dobijeni ostatak je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću MeOH/dihlorometana kako bi dao jedinjenje 1058 (0.26 g, prinos 33%). 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 2.49 (s, 3H) 3.66 (s, 2H) 3.73 (s, 3H) 3.79 (s, 2H) 7.2-7.33 (m, 4H).
[0279] U rastvor jedinjenja 1058 (0.26 g, 1.35mmol) u dihlorometanu (5mL) dodat je boc anhidrid (0.293 g, 1.35 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata pre nego što je prečišćena hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dala jedinjenje 1059 (0.3 g, prinos 77%). 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 1.5 (s, 9H) 2.84 (s, 3H) 3.66 (s, 2H) 3.73 (s, 3H) 4.44 (s, 2H) 7.17-7.32 (m, 4H).
[0280] U ledeni rastvor jedinjenja 1059 (0.3 g, 1.02 mmol) u dioksanu (3 mL) i vodi (2 mL), dodat je litijum hidroksid monohidrat (0.086 g, 2.04 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 3 sata pre nego što je zakišeljena pomoću 1N HCl. Dobijeni rastvor je podeljena između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je osušen pri visokom vakuumu preko noći kako bi dao jedinjenje 1060 (0.2g, prinos 70%).<1>H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 1.5 (s, 9H) 2.84 (s, 3H) 3.66 (s, 2H) 4.43 (s, 2H) 7.17-7.32 (m, 4H)
[0281] U suspenziju karboksilne kiseline 1060 (51.1 mg, 0.183 mmol) u DMF (3 mL) dodat je HATU (69.7 mg, 0.183 mmol) i reakciona smeša je mešana dok se nije izbistrila, nakon čega je dodat amin 1024 (61.3 mg, 0.166 mmol) i DIPEA (58 ul, 0.33 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode. Dobijeni rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću MeOH/dihlorometana kako bi dao jedinjenje 445 (0.06 g, prinos 57%).1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.37-1.38 (s, 9H) 1.74 (brs, 4H) 2.76 (s,3H) 2.89 (brs, 2H) 3.02 (brs, 2H)3.78-3.80 (m, 4H) 4.36 (s, 2H) 7.11-7.36 (m, 9H) 7.54-7.57 (d, 1H) 8.18-8.21 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
Priprema jedinjenja 445 putem deprotekcije jedinjenja 396 do jedinjenja 408 i re-acilacije:
[0282]
[0283] U ledeni rastvor jedinjenja 408 (26 mg, 0.04 mmol) u DMF (1 mL) dodati su trietilamin (12.3 uL, 0.088 mmol) i acetil hlorid (3.16 uL, 0.044 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata pre nego što je razblažena vodom. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana vodom i osušena pri visokom vakuumu preko noći kako bi dala jedinjenje 445 (10 mg, prinos 48%). 1H NMR (300MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.74 (brs, 4H) 2.05 (m, 3H) 2.91-3.02 (m,7H) 3.78-3.82 (m, 4H) 4.49-4.56 (m, 2H) 7.18-7.36 (m, 9H) 7.55-7.58 (d, 1H) 8.18-8.21 (d, 1H) 8.75-8.7 (brs, 2H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
[0284] Jedinjenje 401 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za pripremu jedinjenja 339. 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.40 (s, 9H) 1.75 (brs, 4H) 2.87 (brs, 2H) 2.89 (brs, 2H) 3.78 (s, 4H) 4.09-4.11 (brs, 2H) 7.18-7.36 (m, 9H) 7.54-7.58 (d, 1H) 8.18-8.21 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H)
[0285] Jedinjenje 413 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za pripremu jedinjenja 315.1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.68 (bs, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.46 Hz, 1H), 7.58-7.26 (m, 10H), 3.90 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.02 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.74 (bs, 4H).
[0286] Jedinjenje 415 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za pripremu jedinjenja 315.: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.48 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.20 (d, J = 8.95 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.58-7.26 (m, 9H), 6.52 (m, 1H), 5.35 (m, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.02 (m, 2H), 2.90 (m, 2H), 1.74 (bs, 4H).
[0287] U rastvor jedinjenja 1063 (6.31 g, 24.9 mmol) u etanolu dodat je litijum hidroksid monohidrat (1.048 g, 24.9 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Dobijeni ostatak je razblažen vodom i zakišeljen pomoću 6N HCl. Rastvor je ekstrahovan etil acetatom. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1064 (3 g, prinos 53%).
[0288] U suspenziju karboksilne kiselina 1064 (0.1 g, 0.44 mmol) u DMF (2 mL) dodat je HATU (0.17 g, 0.44 mmol) i reakciona smeša je mešana dok se nije izbistrila, nakon čega je dodat amin 1024 (0.15 g, 0.4 mmol) i DIPEA (0.14 mL, 0.8 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana vodom i osušena kako bi dala jedinjenje 456 (0.2, prinos 86%). 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.18 (t, 3H) 1.74 (brs, 4H) 2.88-2.90 (m,2H) 3.01-3.04 (m, 2H) 3.66 (s, 2H) 3.78 (s, 4H) 4.05-4.12 (q, 2H) 7.19-7.36 (m, 9H) 7.55-7.58 (m, 1H) 8.18-8.21 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
[0289] U rastvor jedinjenja 456 (0.205 g, 0.358 mmol) u dioksanu/vodi (20 mL/ 6 mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (0.06 g, 1.42 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata pre nego što je zakišeljena sirćetnom kiselinom. Rastvor je koncentrovan u uslovima sniženog pritiska i dobijeni ostatak je razblažen vodom. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana vodom i osušena pri visokom vakuumu preko noći. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću MeOH/dihlorometana kako bi dao jedinjenje 465 (0.15 g, prinos 77%).1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.74 (brs, 4H) 2.90 (brs, 2H) 3.01 (brs, 2H) 3.5 (s, 2H) 3.78 (s, 4H) 7.19-7.36 (m, 9H) 7.55-7.58 (m, 1H) 8.18-8.21 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.32 (brs, 1H) 12.65 (s, 1H).
[0290] U suspenziju karboksilne kiseline 465 (25 mg, 0.046 mmol) u DMF (1 mL) dodat je HATU (19.2 mg, 0.05 mmol) i reakciona smeša je mešana dok se nije izbistrila, nakon čega su dodati N,N-dimetilamin (2M/THF, 30 uL, 0.05 mmol) i DIPEA (16 uL, 0.092 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana vodom i osušena kako bi dala jedinjenje 472 (19 mg, prinos 73%).1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.74 (brs, 4H) 2.83-2.90 (brs, 6H) 3.01 (brs, 4H) 3.68 (s, 2H) 3.78 (s, 4H) 7.14-7.36 (m, 9H) 7.55-7.58 (d, 1H) 8.18-8.21 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
[0291] U rastvor jedinjenja 1049 (1 g, 6 mmol) u DMF (20 mL) dodat je kalijum karbonat (1.662 g, 12 mmol) i (2.16 g, 9 mmol). Dobijena smeša je mešana na 70 °C preko noći pre nego što je razblažena vodom (∼100 mL). Dobijeni rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1065 (1.78 g, prinos 91%) u vidu ulja. 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 0.13 (s, 6H) 0.95 (s, 9H) 3.63 (s, 2H) 3.73 (s, 2H) 3.99-4.06 (m, 4H) 6.87 (m, 3H) 7.3 (m, 1H).
[0292] U rastvor jedinjenja 1065 (1.78 g, 5.5 mmol) u THF/MeOH/vodi (30 mL, 3 mL, 3 mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (0.46 g, 10.9 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Dobijeni ostatak je razblažen vodom (∼20 mL) i dobijeni rastvor je zakišeljen pomoću 6N hlorovodonične kiseline. Rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenja 1065 i 1066.
1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid- d6) δ ppm 3.54 (s, 2H) 3.72 (brs, 2H) 3.96-3.98 (brs, 2H) 4.85 (brs, 1H) 6.82-6.85 (m, 3H) 7.0-7.22 (m, 1H) 12.3 (brs, 1H).
[0293] U suspenziju karboksilne kiseline 1065 (27 mg, 0.137 mmol) u DMF (2 mL) dodat je HATU (52.2 mg, 0.137 mmol) i reakciona smeša je mešana dok se nije izbistrila, nakon čega je dodat amin 1024 (46 mg, 0.125 mmol) i DIPEA (44 ul, 0.25 mmol).
[0294] Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana vodom i osušena. Dobijena čvrsta supstanca je prečišćena pomoću preparativne HPLC kako bi dala jedinjenje 427 (16 mg, prinos 23%). 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.75 (brs, 4H) 2.90 (brs, 2H) 3.02 (brs, 2H) 3.71-3.78 (m, 6H) 3.98-3.99 (brs, 2H) 4.84-4.87 (brs, 1H) 6.83-6.92 (m,3H) 7.21-7.36 (m, 6H) 7.54-7.58 (d, 1H) 8.2-8.23 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
[0295] U rastvor jedinjenja 1049 (1 g, 6 mmol) u acetonu (50 mL) dodati su cezijum karbonat (2.545 g, 7.83 mmol), 2-bromoetil metil etar (0.92 g, 6.62 mmol) i natrijum jodid (10 mg). Dobijena smeša je mešana na 50 °C preko noći pre nego što je filtrirana. Filtrat je uparen i dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1075 (0.97 g, prinos 72%) u vidu ulja. 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 3.48 (s, 3H) 3.63 (s, 2H) 3.72(brs, 2H) 4.14-4.15 (t, 2H) 6.86-6.9 (m, 3H) 7.26-7.29 (m, 1H).
[0296] Ostatak pripreme za jedinjenje 428 pratio je prethodno navedeni postupak za jedinjenje 427. 428: 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.75 (brs, 4H) 2.90 (brs, 2H) 3.02 (brs, 2H) 3.32 (s, 3H) 3.66 (brs,2H) 3.78 (brs, 4H) 4.08 (brs, 2H) 6.88-6.92 (m,3H) 7.25-7.27 (m, 6H) 7.54-7.58 (d, 1H) 8.2-8.23 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
[0297] U ledeni rastvor jedinjenja 1068 (6 g, 30.9 mmoL) u etanolu (50 mL) dodat je tionil hlorid (2mL) i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Dobijeni ostatak je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen kako bi dao jedinjenje 1063 (6 gm).
[0298] U rastvor jedinjenja 1063 (3.35 g, 13.4 mmol) u THF (50 mL), koji se mešao, dodat je CDI (2.44 g, 15 mmol) i dobijena smeša je mešana tokom 2 sata, nakon čega je dodata voda (13 mL). Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i natrijum borohidrid (2.87 g, 76 mmol) je dodavan, deo po deo. Mešanje se nastavilo na sobnoj temperaturi tokom 3 sata pre nego što je reakciona smeša razblažena etil acetatom i zakišeljena pomoću 6N HCl. Organski sloj je razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću EtOAc/heksana kako bi dao jedinjenje 1069 (0.563 g, prinos 20%) u vidu ulja. 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 1.27-1.31 (q, 3H) 2.87-2.92 (d, 2H) 3.63 (s, 2H) 3.87-3.92 (t, 2H) 4.18-4.2 (q, 2H) 7.19-7.31 (m, 4H).
[0299] U ledeni rastvor jedinjenja 1069 (0.563 g, 2.7 mmol) u dihlorometanu (40 mL) i trietilaminu (0.47 mL, 3.3 mmol) dodat je metan sulfonilhlorid (0.23 mL, 3.3 mmol) i dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 2 sata i na sobnoj temperaturi tokom 1 sata pre nego što je razblažena zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Rastvor je ekstrahovan etil acetatom. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen kako bi dao jedinjenje 1070 (0.78 g, prinos 100%). 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 1.27-1.31 (q, 3H) 2.87 (s, 3H) 3.08 (t, 2H) 3.63 (s, 2H) 4.18-4.2 (t, 2H) 4.45 (q, 2H) 7.19-7.31 (m, 4H).
[0300] U rastvor jedinjenja 1070 (0.787 g, 2.7 mmol) u DMF (6 mL) dodat je natrijum azid (0.358 g, 5.5 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana na 60 °C tokom 3 sata pre nego što je podeljena između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1071 (0.5 g, prinos 78%) u vidu ulja.1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 1.27-1.31 (q, 3H) 2.92 (t, 2H) 3.54 (t, 2H) 3.63 (s, 2H) 4.18-4.2 (q, 2H) 7.19-7.29 (m, 4H).
[0301] U rastvor jedinjenja 1071 (0.5 g, 2.1 mmol) u THF (25 mL) dodat je trifenilfosfin (0.787 g, 3 mmol) i reakciona smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi pod atmosferom argona, pre nego što je razblažena pomoću 1mL vode. Reakcija je nastavljena na 50 °C tokom 1 sata pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Ostatak je podeljen između zasićenog rastvora natrijum bikarbonata i dihlorometana. Organski sloj je razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću MeOH/dihlorometana kako bi dao jedinjenje 1072 (0.43 g, prinos 100%) u vidu ulja. 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 1.27-1.31 (q, 3H) 2.75-2.79 (t, 2H) 2.98-3.02 (t, 2H) 3.63 (s, 2H) 4.18-4.2 (q, 2H) 7.13-7.29 (m, 4H).
[0302] U rastvor jedinjenja 1072 (0.427 g, 2 mmol) u dihlorometanu (30 mL) dodat je di-tercbutil dikarbonat (0.447 g, 2 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 sati pre nego što je prečišćena hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dala jedinjenje 1073 (0.577 g, prinos 91%) u vidu ulja. 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 1.27-1.31 (q, 3H) 1.59 (s, 9H) 2.82 (t, 2H) 3.4 (m, 2H) 3.63 (s, 2H) 4.18 (q, 2H) 7.13-7.29 (m, 4H).
[0303] U rastvor jedinjenja 1073 (0.577 g, 1.8 mmol) u dioksanu/vodi (10 mL/ 3 mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (0.158 g, 3.6 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Dobijeni ostatak je razblažen vodom (∼20 mL) i dobijeni rastvor je zakišeljen 1N hlorovodoničnom kiselinom. Rastvor je podeljena između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen kako bi dao jedinjenje 1074 (0.35 g, prinos 67%).1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 2.82 (m, 2H) 3.4 (m, 2H) 3.63 (s, 2H) 4.6 (brs, 1H) 7.13-7.29 (m, 4H).
[0304] U suspenziju karboksilne kiseline 1074 (43.8 mg, 0.157 mmol) u DMF (2 mL) dodat je HATU (61.3 mg, 0.161 mmol) i reakciona smeša je mešana dok se nije izbistrila, nakon čega su dodati jedinjenje 1024 (52.5 mg, 0.142 mmol) i DIPEA (50 ul, 0.287 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana vodom i osušena kako bi dala jedinjenje 429 (60 mg, prinos 67%). 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.37-1.38 (s, 9H) 1.74 (brs, 4H) 2.69-2.71 (m,2H) 2.87-2.88 (m, 2H) 2.9-3.15 (m, 4H) 3.78 (s, 4H) 7.09 (brs, 1H) 7.12-7.36 (m, 9H) 7.54-7.57 (d, 1H) 8.18-8.21 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
[0305] U suspenziju jedinjenja 429 (50 mg, 79.5 mmol) u dihlorometanu (5 mL) dodat je TFA (1 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je koncentrovana u uslovima sniženog pritiska. Dobijeni ostatak je triturisan etrom. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana etrom i osušena pri visokom vakuumu preko noći, kako bi dala jedinjenje 441 (45 mg, prinos 88%) u vidu soli TFA.1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksidd6) δ ppm 1.74 (brs, 4H) 2.86-3.02 (m, 8H) 3.78-3.80 (s, 4H) 7.12-7.36 (m, 8H) 7.58 (d, 1H) 7.78 (brs, 3H) 8.18-8.21 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
[0306] U ledeni rastvor jedinjenja 441 (23 mg, 0.035 mmol) u DMF (1 mL) dodati su trietilamin (11 uL, 0.079 mmol) i acetil hlorid (2.8 uL, 0.038 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, pre nego što je razblažena vodom. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana vodom i osušena pri visokom vakuumu preko noći kako bi dala jedinjenje 454 (10 mg, prinos 50%). 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.75-1.79 (m, 7H) 2.67-2.70 (m, 2H) 2.9 (brs, 2H) 3.00-3.02 (m, 2H) 3.21-3.26 (m, 2H) 3.78 (s, 4H) 7.12-7.36 (m, 9H) 7.58 (d, 1H) 7.9 (brs, 1H) 8.18-8.21 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
[0307] Jedinjenje 409 je pripremljeno putem TFA deprotekcije jedinjenja 399 u skladu sa prethodno navedenim postupkom za pripremu jedinjenja 441. 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.75 (brs, 4H) 2.90 (brs, 2H) 3.02 (brs, 2H) 3.78 (brs, 4H) 6.89-6.98 (m,4H) 7.25-7.36 (m, 7H) 7.51-7.58 (d, 1H) 8.2-8.23 (d, 1H) 9.34 (s, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H).
[0308] Jedinjenje 457 je pripremljeno acilacijom jedinjenja 409 u skladu sa prethodno navedenim postupkom amidnog kuplovanja za pripremu jedinjenja 39. 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.74 (brs, 4H) 2.32 (s, 6H) 2.89 (m, 2H) 3.02 (m, 2H) 3.13 (s, 2H) 3.78 (s, 4H) 7.01-7.04 (m, 1H) 7.25-7.38 (m, 6H) 7.54-7.58 (m, 3H) 8.18-8.21 (d, 1H) 9.77 (s, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.65 (brs, 1H)
[0309] U suspenziju jedinjenja 295 (30 mg, 0.0617 mmol) u MeOH (2 ml) na 0 °C dodat je 2N rastvor NaOH (2 ml). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je isparen u vakuumu i smeša je zakišeljena do pH 6 pomoću 1N HCl. Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode i osušen kako bi dao jedinjenje 348.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7.32-7.24 (m, 5H), 7.15-7.12 (d, J = 9.57 Hz, 1H), 6.72-6.69 (d, J = 9.15 Hz, 1H), 6.09 (s, 2H), 3.77 (s, 2H), 2.99-2.96 (bs, 2H), 2.76-2.70 (bs, 2H), 1.70 (bs, 4H).
[0310] 366: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.82 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.32 Hz, 1H), 7.33-7.25 (m, 6H), 6.95-6.82 (m, 3H), 3.81 (s.3H), 3.75 (s, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0311] Jedinjenje 367: U balon je na 0 °C stavljeno jedinjenje 348 (100 mg, 0.27 mmol), Boc-3-aminometil-fenilsirćetna kiselina (86 mg, 0.325 mmol) u DMF (2 ml), dodat je HOBT (88 mg, 0.65 mmol), a nakon toga i EDCI (156 mg, 0.812 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 5 minuta, a zatim je zagrevana do sobne temperature preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼10 mL) na 0 °C. Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u CH2Cl2kako bi dao jedinjenje 367.
[0312] Jedinjenje 368 je pripremljeno putem deprotekcije jedinjenja 367 u skladu sa prethodno navedenim postupkom za jedinjenje 341.1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.16 (m, 3H), 7.58-7.54 (d, J = 9.27 Hz, 1H), 7.40-7.28 (m, 9H), 4.04 (s, 2H), 3.81 (s. 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0313] Jedinjenje 383 je pripremljeno od jedinjenja 348 u skladu sa prethodno navedenim postupkom za pripremu jedinjenja 354. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.09 Hz, 1H), 7.81-7.76 (m, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.12 Hz, 1H), 7.42-7.26 (m, 7H), 4.0 (s, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0314] U rastvor jedinjenja 348 (56.5 mg, 0.153 mmol) u DMF (1 ml) na 0 °C, dodat je u kapima trietilamin (43 ul, 0.306 mmol), a nakon toga, takođe u kapima, benzil izocijanat (23 ul, 0.184 mmol). Dobijena smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana tokom 6 h, pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼5 mL) na 0 °C. Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode i etrom i dihlorometanom, a zatim osušen kako bi dao jedinjenje 405.1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 9.57 (s, 1H), 8.25 (bs, 1H), 7.74-7.71 (d, J = 8.61 Hz, 1H), 7.50-7.47 (d, J = 9.42 Hz, 1H), 7.34-7.27 (m, 10H), 4.42-4.40 (d, J = 5.46 Hz, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0315] U suspenziju jedinjenja 339 (1 g, 1.62 mmol) u MeOH (10 ml) na 0 °C, dodat je 2N rastvor NaOH (10 ml). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uparen u vakuumu i smeša je zakišeljena do pH 6 pomoću 6N HCl na 0 °C. Smeša je triturisana pomoću EtOAc i beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još EtOAc i osušen kako bi dao jedinjenje 412.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.66 (s, 1H), 7.29-7.22 (m, 2H), 7.19-7.13 (m, 4H), 6.72 (d, J = 8.86 Hz, 1H), 6.12 (bs, 2H), 4.12 (d, J = 6.09 Hz, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.01 (m, 2H), 2.71 (m, 2H), 1.70 (bs, 4H), 1.39 (s, 9H).
[0316] U rastvor jedinjenja 412 (60 mg, 0.121 mmol) u DMF (1 ml) na 0 °C, dodat je u kapima trietilamin (34 ul, 0.242 mmol), a nakon toga, takođe u kapima, etil izocijanat (11 ul, 0.145 mmol). Dobijena smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana tokom 6 h, pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼5 mL) na 0 °C. Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u CH2Cl2kako bi dao jedinjenje 420. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 12.65 (s, 1H), 11.27 (s, 1H), 9.42 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.61 Hz, 1H), 7.77-7.13 (m, 5H), 6.56-6.53 (bs, 1H), 4.12-4.11 (d, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.23-3.16 (m, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H), 1.38 (s, 9H), 1.10-1.07 (t, 3H).
[0317] Jedinjenje 422: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 10.74 (s, 1H), 8.18-8.15 (d, J = 9.51 Hz, 1H), 7.61-7.12 (m, 9H), 6.62 (s, 1H), 5.33 (s, 1H), 4.13-4.11 (d, J = 5.58 Hz, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H), 1.38 (s, 9H).
[0318] U rastvor jedinjenja 412 (40 mg, 0.0804 mmol) u DMF (1 ml) na 0 °C, dodat je u kapima trietilamin (17 ul, 0.121 mmol), a nakon toga, takođe u kapima, anhidrid sirćetne kiseline (8 ul, 0.0844 mmol). Dobijena smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći, pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (∼5 mL) na 0 °C. Smeša je podeljena između vode i EtOAc. Organski ekstrakt je opran vodom, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u CH2Cl2kako bi dao jedinjenje 424. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (s, 1H), 11.01 (s, 1H), 8.23-8.20 (d, J = 8.61 Hz, 1H), 7.57-7.55 (d, J = 8.16 Hz, 1H), 7.38-7.12 (m, 4H), 4.13-4.11 (d, J = 5.76 Hz, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.75 (bs, 4H), 1.39 (s, 9H).
[0319] U suspenziju jedinjenja 424 (10 mg, 0.018 mmol) u dihlorometanu (1 ml) dodat je TFA (1 ml) na 0 °C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h pre nego što je uparena do suva pod vakuumom. Dodat je etar i beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još etra i osušen kako bi dao jedinjenje 425.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.70 (s, 1H), 11.0 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.82 Hz, 1H), 8.16-8.08 (bs, 2H), 7.58-7.54 (d, J = 9.42 Hz, 1H), 7.39-7.30 (m, 4H), 4.06-4.03 (m, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 2.14 (s, 3H), 1.75 (bs, 4H).
[0320] U rastvor jedinjenja 1076 (1.8 g, 10 mmol) u etanolu/vodi (40 mL/20 mL) dodat je natrijum cijanid (0.98 g, 20 mmol). Dobijena smeša je mešana na 90 °C tokom 4 sata, pre nego što je ohlađena do 0 °C. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana vodom i osušena pri visokom vakuumu preko noći, kako bi dala jedinjenje 1077 (1.5 g, prinos 85%).
[0321] U ledeni rastvor jedinjenja 1077 (1 g, 5.68 mmol) u etanolu (50 mL) dodat je natrijum borohidrid (0.86 g, 22.72 mmol), a nakon toga, i bizmut hlorid (2 g, 6.248 mmol), deo po deo. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata pre nego što je filtrirana kroz sloj celita. Filtrat je koncentrovan i dobijeni ostatak je podeljen između vodenog rastvora natrijum bikarbonata i etil acetata. Organski ekstrakt je razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen kako bi dao jedinjenje 1078 (0.82 g, prinos 100%). 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 2.17 (s, 3H) 3.69-3.71 (brs, 4H) 6.71-6.74 (d, 1H) 6.80-6.83 (d, 1H) 7.04-7.09 (m, 1H).
[0322] U rastvor jedinjenja 1078 (0.3 g, 2 mmol) u toluenu (10 mL) dodati su kalijum acetat (0.2 g, 2.04 mmol) i anhidrid sirćetne kiseline (0.55 mL, 5.83 mmol). Dobijena smeša je mešana na 80 °C tokom 1 sata, nakon čega je dodat izoamil nitrit (0.4 mL, 3 mmol). Mešanje je nastavljeno na 80 °C preko noći, pre nego što je smeša ohlađena do sobne temperature. Rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1079 (0.22 g, prinos 54%). 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 2.85 (s, 3H) 4.09 (s, 2H) 7.39-7.41 (d, 1H) 7.58-7.63 (m, 1H) 8.28 (s, 1H) 8.48-8.51 (d, 1H)
[0323] U rastvor jedinjenja 1079 (0.44 g, 2.21 mmol) u etanolu (5 mL) dodat je 20% vodeni natrijum hidroksid (5 mL). Dobijena smeša je mešana na 90° preko noći pre nego što je koncentrovana. Dobijeni ostatak je razblažen vodom, zakišeljen sirćetnom kiselinom i ekstrahovan etil acetatom. Organski ekstrakt je razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen kako bi dao jedinjenje 1080 (0.1 g, prinos 51%).1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksidd6) δ ppm 3.89 (s, 2H) 6.98-7.0 (d, 1H) 7.27-7.32 (m, 1H) 7.43-7.46 (d, 1H) 8.10(s, 1H) 12.3-13.2 (široki dublet, 2H)
[0324] U suspenziju karboksilne kiseline 1080 (60 mg, 0.34 mmol) u DMF (2 mL), dodat je HATU (130 mg, 0.34 mmol) i reakciona smeša je mešana dok se nije izbistrila, nakon čega su dodati amin 1024 (114 mg, 0.31 mmol) i DIPEA (108 uL, 0.62 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem vode. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana vodom i osušena. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću MeOH/dihlorometana, kako bi dao jedinjenje 512 (14 mg, prinos 9%). 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.74 (brs, 4H) 2.89 (brs, 2H) 2.91 (brs, 2H) 3.78 (s, 2H) 4.13 (s, 2H) 7.05-7.08 (m, 1H) 7.27-7.57 (m, 8H) 8.19 (d, 2H) 11.26 (s, 1H) 12.76-12.80 (brs, 1H) 13.11 (s, 1H).
[0325] Jedinjenje 389 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za pripremu jedinjenja 334. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.95 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 8.91 Hz, 1H), 7.61-7.26 (m, 10H), 6.17 (s, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.54 (bs, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 2.67-2.62 (m, 4H), 2.38 (bs, 4H), 1.73 (bs, 4H).
[0326] Jedinjenje 404 je pripremljeno prema prethodno navedenom postupku za pripremu jedinjenja 334. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.95 (s, 1H), 11.26 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.60 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.03 Hz, 1H),7.39-7.26 (m, 6H), 7.12 (s, 2H), 7.01-6.98 (m, 1H), 6.10 (s, 1H), 3.78 (s, 5H), 3.54 (bs, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 2.64 (bs, 4H), 2.38 (bs, 4H), 1.74 (bs, 4H).
[0327] U balon su dodati K2CO3(0.28 g, 2.06 mmol), jedinjenje 295 (0.5 g, 1.03 mmol), a nakon toga i 25 mL DMF. Smeša je mešana tokom 15 minuta i dodat je hlorometil butirat (0.17 g, 1.23 mmol) pa je reakcija smeštena pod atmosferu argona. Smeša je zagrevana do 80°C tokom 1.5 sata, ostavljena da se ohladi do sobne temperature i sipana u 200 ml vode. Smeša je prebačena u levak za razdvajanje, ekstrahovana pomoću EtOAc (3x100 mL), organski slojevi su razdvojeni i oprani vodom (3x50 mL), fiziološkim rastvorom (2x50 ml) i osušeni preko Na2SO4. Na2SO4je uklonjen filtracijom i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska. Sirovi materijal je prečišćen reversno-faznom hromatografijom, dajući 0.15 g jedinjenja 402.
[0328] U rastvor jedinjenja 318 (100 mg, 0.19 mmol) u CH2Cl2(5 mL) na 0 °C dodat je piridin (300 µL), a nakon toga, u kapima, i rastvor butiril hlorida (43 mL, 0.41 mmol) u CH2Cl2(5 mL). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h, pre nego što je podeljena između EtOAc i H2O.
Organski sloj je odvojen, osušen (MgSO4) i koncentrovan. Ostatak je prečišćen brzom hromatografijom na koloni sa silika gelom uz eluciju pomoću 1-10% MeOH u CH2Cl2kako bi obezbedio željeni proizvod 439 (117 mg).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 13.01 (bs, 1H), 10.12 (s, 1H), 8.49 (d, J = 9.64 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.57 (d, J = 7.11 Hz, 1H), 7.40-7.30 (m, 8H), 6.57 (s, 1H), 3.97 (s, 2H), 3.09 (bs, 2H), 3.00 (bs, 2H), 2.48 (m, 2H), 1.91 (bs, 4H), 1.85-1.62 (m, 2H), 0.98 (t, J = 7.07 Hz, 3H).
[0329] U rastvor natrijum tiometoksida (0.266 g, 3.8 mmol) u DMF(10 mL) dodat je rastvor jedinjenja 1016 (0.657 g, 2.7 mmol) u DMF i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1085 (0.41 g, prinos 72%). 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 2.03-2.04(s, 3H) 3.663.73(m, 7H) 7.21-7.32(m, 4H).
[0330] U rastvor jedinjenja 1085 (0.503 g, 2.39 mmol) u dihlorometanu, dodat je MCPBA (1.338 g, 7.78 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata pre nego što je razblažena vodenim rastvorom natrijum tiosulfata. Organski sloj je odvojen, opran zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i vodom, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1086 (0.5 g, prinos 86%). 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 2.8 (s, 3H) 3.7-3.74 (m, 5H) 4.27 (s, 2H) 7.30-7.4 (m, 4H).
[0331] U ledeni rastvor jedinjenja 1086 (0.5 g, 2.06 mmol) u dioksanu (10 mL) i vodi (10 mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (0.26 g, 6.19 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, pre nego što je koncentrovana. Dobijeni ostatak je razblažen vodom i zakišeljen sirćetnom kiselinom. Dobijeni rastvor je podeljena između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je triturisan etrom. Razdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana etrom i osušena pri visokom vakuumu preko noći kako bi dala jedinjenje 1087 (0.3 g, prinos 64%). 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 2.92 (s, 3H) 3.61 (s, 2H) 4.48 (s, 2H) 7.31-7.35 (m, 4H) 12.37 (s, 1H).
[0332] Jedinjenje 634 je pripremljeno upotrebom postupaka koji su analogni prethodno navedenim postupcima. 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.74 (brs, 4H) 2.91 (brs, 5H) 3.03 (brs, 2H) 3.78 (s, 2H) 3.85 (s, 2H) 4.49 (s, 2H) 7.32-7.40 (m, 9H) 7.55-7.58 (d, 1H) 8.19 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.69 (s, 1H).
[0333] Jedinjenje 635 je pripremljeno upotrebom postupaka koji su analogni prethodno navedenim postupcima. 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.75 (brs, 4H) 2.91 (brs, 5H) 3.03 (brs, 2H) 3.82 (s, 4H) 4.49 (s, 2H) 7.32-7.40 (m, 9H) 7.55-7.58 (d, 1H) 8.19 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.69 (s, 1H).
[0334] U rastvor 1,3-bromo hloropropana (1.57 g, 10 mmol) u DMF (10 mL), dodat je natrijum tiometoksid (0.63 g, 9 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i na 70 °C tokom još jednog dana. Rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen kako bi dao jedinjenje 1088 (1.3 gm) koje je korišćeno za sledeći korak bez prečišćavanja.
[0335] U rastvor jedinjenja 1088 (1.3 g, 7.7 mmol) u dihlorometanu (100 mL), dodat je MCPBA (5.15 g, 23.34 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je razblažena vodenim rastvorom natrijum tiosulfata. Organski sloj je odvojen, opran zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i vodom, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1089 (0.3 gm). 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 2.38-2.49 (m, 2H) 2.99 (s, 3H) 3.22-3.27 (m, 2H) 3.57-3.77 (m, 2H).
[0336] U rastvor jedinjenja 1092 (0.525 g, 3.16 mmol) u DMF (15 mL) dodati su kalijum karbonat (0.873 g, 6.32 mmol), jedinjenje 1089 (0.74 g, 4.74 mmol) i natrijum jodid (10 mg). Dobijena smeša je mešana na 70 °C preko noći pre nego što je razblažena vodom (∼100 mL). Dobijeni rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1090 (0.53 g, prinos 59%). 1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 2.35-2.40 (m, 2H) 2.99 (s, 3H) 3.26-3.31 (m, 2H) 3.63 (s, 2H) 3.73 (s, 3H) 4.16(t, 2H) 6.81-6.93 (m, 3H) 7.25 (m, 1H).
[0337] U rastvor jedinjenja 1090 (0.53 g, 1.85 mmol) u dioksanu (8 mL) i vodi (4 mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (0.156 g, 3.71 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 sati pre nego što je zakišeljena sirćetnom kiselinom. Dobijeni rastvor je podeljena između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je triturisan etrom. Izdvojena čvrsta supstanca je filtrirana, oprana etrom i osušena pri visokom vakuumu preko noći kako bi dala jedinjenje 1091 (0.2 g, prinos 40%).1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 2.32-2.42 (m, 2H) 2.99 (s, 3H) 3.26-3.31 (m, 2H) 3.66 (s, 2H) 4.12-4.16 (t, 2H) 6.83-6.94( m, 3H) 7.26-7.31 (m, 1H).
[0338] Jedinjenje 583 je pripremljeno kuplovanjem jedinjenja 1091 sa jedinjenjem 1024 prema postupku opisanom za opšti postupak amidnog kuplovanja.<1>H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.74 (brs, 4H) 2.15-2.19 (m, 2H) 2.90-3.03 (m, 7H) 3.27-3.39 (m, 2H) 3.78(s, 4H) 4.07-4.11 (t, 2H) 6.90-6.93 (m, 3H) 7.24-7.37 (m, 6H) 7.55-7.58 (d, 1H) 8.19 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.69 (s, 1H).
[0339] Jedinjenje 623 je pripremljeno kuplovanjem jedinjenja 11 sa jedinjenjem 348 prema postupku opisanom za opšti postupak amidnog kuplovanja.<1>H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.74 (brs, 4H) 2.15-2.19 (m, 2H) 2.90-3.03 (m, 7H) 3.27-3.39 (m, 2H) 3.75-3.78 (m, 4H) 4.07-4.11 (t, 2H) 6.90-6.97 (m, 3H) 7.26-7.34 (m, 6H) 7.58 (d, 1H) 8.19 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.69 (s, 1H).
[0340] U rastvor 3-hidroksifenilsirćetne kiseline (1 g, 0.00657 mol) u MeOH (10 ml) na 0 °C , dodat je u kapima rastvor (trimetilsilil) diazometana (2 M u heksanima, 20 ml). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta pre nego što je uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-25% EtOAc u heksanima kako bi dao jedinjenje 1093.
[0341] Jedinjenje 1094 je napravljeno upotrebom postupka opisanog za jedinjenje 1119.
[0342] Jedinjenje 1095 je napravljeno upotrebom postupka opisanog za jedinjenje 1102.
[0343] Jedinjenje 646 je napravljeno upotrebom postupka opisanog za jedinjenje 666. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10.32 (s, 1H), 8.50-8.47 (d, J = 8.52 Hz, 1H), 7.90-7.70 (m, 1H), 7.40-7.36 (m, 6H), 7.03-6.86 (m, 3H), 4.72 (s, 2H), 4.02 (s, 2H), 3.90 (s, 2H), 3.44-3.39 (m, 4H), 3.09-2.96 (d, 4H), 1.87 (bs, 4H), 1.24-1.16 (m, 6H).
[0344] Jedinjenje 647 je napravljeno upotrebom postupka opisanog za jedinjenje 666. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.61 (s, 1H), 11.22 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.18 Hz, 1H), 8.02-8.10 (t, 1H), 7.58-7.55 (d, , J = 9.12 Hz, 1H), 7.36-7.24 (m, 5H), 6.99-6.84 (m, 3H), 4.48 (s, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.75 (s, 2H), 3.50 (s, 2H), 3.01-2.90 (m, 5H), 1.73 (bs, 4H), 0.82-0.80 (d, , J = 6.69 Hz, 6H).
[0345] Rastvor hidroksilamina (50% u vodi, 7.4 mL) dodat je u acetonitril (60 mL) i smeša je zagrevana do 90°C tokom 16 sati. Smeša je ohlađena do sobne temperature, a zatim u mokrom ledenom kupatilu, dajući precipitat. Čvrste supstance su sakupljene filtracijom i isprane hladnim acetonitrilom (10 mL), pa osušene pod visokim vakuumom dajući 4.47 g N’-hidroksiacetimidamida 1096. Videti Zemolka, S. et al, PCT međunarodna patentna prijava 2009118174. 1H NMR 300 MHz CDCl3: δ 4.57 (br s, 2H), 1.89 (s, 3H).
[0346] U balon je stavljen N’-hidroksiacetimidamid 1096 (0.45 g, 6.17 mmol), a nakon njega i THF (25 mL), NaH (60% u ulju, 0.246 g, 6.17 mmol), molekulska sita 4A (4.5 g) i smeša je zagrevana do 60°C pod atmosferom argona tokom 1 sata. Rastvor etil 2-(3-bromofenil)acetata 1097 (1.5 g, 6.17 mmol) u THF (12.5 mL), dodat je u smešu N’-hidroksiacetimidamida i zagrevan do 60°C tokom 16 sati. Smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana pomoću EtOAc (2 x 25 mL). Organski slojevi su kombinovani, oprani vodom (25 mL), fiziološkim rastvorom (2 x 25 mL) i osušeni preko Na2SO4. Na2SO4je uklonjen filtracijom i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska. Sirovi materijal je prečišćen normalnom faznom hromatografijom pomoću 0-30% EtOAc / heksana, dajući 0.56 g 5-(3-bromobenzil)-3-metil-1,2,4-oksadiazola 1098. 1H NMR 300 MHz CDCl3: δ 7.48-7.42 (m, 2H), 7.26-7.24 (m, 2H), 4.15 (s, 2H), 2.38 (s, 3H).
[0347] U rastvor 5-(3-bromobenzil)-3-metil-1,2,4-oksadiazola 1098 (0.50 g, 1.97 mmol) u dioksanu (1 mL), pod atmosferom argona, dodat je bis(tri-t-butilfosfin)paladijum(0) (0.15 g, 0.295 mmol) nakon čega je dodat i 2-terc-butoksi-2 oksoetilcink hlorid (0.5 M u dietil etru, 4.92 mmol, 9.84 mL). Smeša je ostavljena da se meša pod atmosferom argona tokom 20 sati i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska. Ostatak je prebačen u EtOAc (10 mL) i opran vodom (2 x 5 mL), fiziološkim rastvorom (2 x 5 mL) i osušen preko Na2SO4. Na2SO4je uklonjen filtracijom i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska. Sirovi materijal je prečišćen normalnom faznom hromatografijom sa 0-50% EtOAc/heksana, kako bi dao 0.300 g terc-butil 2-(3-((3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil)fenil)acetata 1099. 1H NMR 300 MHz CDCl3: δ 7.40-7.18 (m, 4H), 4.17 (s, 2H), 3.51 (s, 2H), 2.36 (s, 3H), 1.43 (s, 9H).
[0348] U smešu terc-butil 2-(3-((3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil)fenil)acetata 1099 (0.127 g, 0.44 mmol) u dioksanu (3 mL) dodat je 4N HCl u dioksanu (1 mL) i mešan pod atmosferom argona tokom 2 sata. Isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska i ostatak je razblažen vodom (5 mL) i pH je podešen na 12 pomoću 2.5 N NaOH. Smeša je oprana dihlorometanom (4 x 2 mL) i pH je podešen na 6 pomoću 1 N HCl. Smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (3 x 2 mL) i organski slojevi su kombinovani, oprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko Na2SO4. Na2SO4je uklonjen filtracijom i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska kako bi se dobio 0.041 g 2-(3-((3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil)fenil)sirćetne kiseline 1100.<1>H NMR 300 MHz CDCl3: δ 7.40-7.18 (m, 4H), 4.18 (s, 2H), 3.63 (s, 2H), 2.36 (s, 3H).
[0349] U rastvor N-(5-(4-(6-aminopiridazin-3-il)butil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2-fenilacetamida 348 (0.061 g, 0.0165 mmol), 2-(3-((3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil)fenil)sirćetne kiseline 1100 (0.040 g, 0.18 mmol), 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) karbodiimida (0.078 g, 0.41 mmol), 1-hidroksibenzotriazola (0.055 g, 0.41 mmol) u DMF (3 mL), dodat je DIEA (0.085 g, 0.115 mL, 0.66 mmol) i smeša je mešana tokom 16 sati. Smeša je razblažena vodom (20 mL) i ekstrahovana pomoću EtOAc (3 x 20 mL). Organski slojevi su kombinovani, oprani vodom (3 x 20 mL), fiziološkim rastvorom (2 x 20 mL) i osušeni preko Na2SO4. Na2SO4je uklonjen filtracijom i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska. Sirovi materijal je prečišćen normalnom faznom hromatografijom sa 0-5% MeOH / dihlorometana dajući 0.003 g 2-(3-((3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil)fenil)-N-(6-(4-(5-(2-fenilacetamido)-1,3,4-tiadiazol-2-il)butil)piridazin-3-il)acetamida 648. 1H NMR 300 MHz CDCl3: δ 12.59 (s, 1H), 10.53 (s, 1H), 8.45 (d, 1H, J = 12.2 Hz), 7.4-7.1 (m, 10H), 4.15 (s, 2H), 4.03 (s, 2H), 3.94 (s, 2H), 3.02 (m, 2H), 2.94 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 1.85 (m, 4H).
[0350] Jedinjenje 1101 je napravljeno upotrebom postupka opisanog za jedinjenje 1119.
[0351] U rastvor jedinjenja 1101 (470 mg, 1.41 mmol) u MeOH (5 ml) i H2O (5 ml) na 0 °C dodat je litijum hidroksid monohidrat (296 mg, 7.05 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 dana pre nego što je uparena do suva. Smeša je zatim zakišeljena pomoću 1N HCl (pH 4), i podeljena je između vode i EtOAc. Organski ekstrakt je opran vodom, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen kako bi dao jedinjenje 1102.
[0352] Jedinjenje 608 je napravljeno upotrebom postupka opisanog za jedinjenje 664. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.15 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.27 Hz, 1H), 7.38-7.28 (m, 8H), 4.63 (bs, 4H), 3.82 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H), 1.48-1.44 (d, , J = 5.93 Hz, 9H).
[0353] Jedinjenje 612 je napravljeno upotrebom postupka opisanog za jedinjenje 666. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.32 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.78 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.72 Hz, 1H), 7.48-7.28 (m, 7H), 4.67-4.61 (m, 4H), 3.88 (s, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H), 1.48-1.44 (d, , J = 9.93 Hz, 9H).
[0354] Jedinjenje 649 je napravljeno upotrebom postupka opisanog za jedinjenje 695. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.36 (s, 1H), 8.20-8.17 (d, J = 9.78 Hz, 1H), 7.60-7.57 (d, J = 8.92 Hz, 1H), 7.52-7.32 (m, 7H), 4.61-4.56 (d, J = 16.99 Hz, 4H), 3.91 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0355] Jedinjenje 650 je napravljeno upotrebom postupka opisanog za jedinjenje 695. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 9.40 (bs, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.09 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.36 Hz, 1H), 7.38-7.28 (m, 8H), 4.63 (bs, 4H), 3.82 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0356] U rastvor jedinjenja 650 (30 mg, 0.0468 mmol) u DMF (1 ml) na 0 °C, dodat je u kapima trietilamin (13 ul, 0.0936 mmol), a nakon toga, takođe u kapima, anhidrid sirćetne kiseline (4.64 ul, 0.0491 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 20 minuta pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem ledene vode (∼5 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u CH2Cl2, kako bi dao jedinjenje 651.1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.27 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J= 9.00 Hz, 1H), 7.38-7.28 (m, 8H), 4.88 (bs, 2H), 4.67 (bs, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.73 (bs, 4H).
[0357] U rastvor 2-(3-bromofenil)sirćetne kiseline 1103 (10.0 g, 46.5 mmol) u 100 mL EtOH, dodata je koncentrovana H2SO4(10 kapi) i smeša je zagrevana do temperature refluksa tokom 3 sata. Smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska. Ostatak je prebačen u EtOAc (100 mL) i opran vodom (2 x 50 mL), zasićenim NaHCO3(1 x 25 mL), fiziološkim rastvorom (2 x 25 mL) i osušen preko Na2SO4. Na2SO4je uklonjen filtracijom i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska kako bi se dobio etil 2-(3-bromofenil)acetat 1097 (11.1 grama) u vidu tečnosti).<1>H NMR 300 MHz CDCl3: δ 7.41 (m, 2 H), 7.20 (m, 2H), 4.14 (q, 2H, J = 9.5 Hz), 3.57 (s, 2H), 1.25 (t, 3H, J = 9.5 Hz).
[0358] U rastvor etil 2-(3-bromofenil)acetata 1097 (1.5 g, 6.17 mmol) u MeOH (20 mL) dodat je hidrazin (0.79 g, 24.7 mmol) i smeša je zagrevana do temperature refluksa tokom 4 sata. Smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature pri čemu je nastao beli precipitat koji je sakupljen filtracijom i ispran pomoću MeOH (10 mL). Nakon sušenja u uslovima sniženog pritiska, izolovano je 1.4 grama 2-(3-bromofenil)acetohidrazida 1104. 1H NMR 300 MHz CDCl3: δ 7.42 (s, 2H), 7.20 (s, 2H), 6.73 (br s, 1H), 3.51 (s, 2H), 1.81 (br s, 2H).
[0359] U rastvor 2-(3-bromofenil)acetohidrazida 1104 (1.0 g, 4.37 mmol) u AcOH (10 mL) dodat je trimetilortoacetat (2.62 g, 21.83 mmol) i smeša je zagrevana do 115°C tokom 18 sati. Isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska i ostatak je prečišćen reversnofaznom hromatografijom kako bi dao 0.59 g 2-(3-bromobenzil)-5-metil-1,3,4-oksadiazola 1105.
1H NMR 300 MHz CDCl3: δ 7.45 (m, 2H), 7.23 (m, 2H), 4.12 (s, 2H), 2.49 (s, 3H).
[0360] U rastvor 2-(3-bromobenzil)-5-metil-1,3,4-oksadiazola 1105 (0.50 g, 1.97 mmol) u dioksanu (1 mL), pod atmosferom argona, dodat je bis(tri-t-butilfosfin)paladijum(0) (0.15 g, 0.295 mmol), a nakon toga i 2-terc-butoksi-2-oksoetilcink hlorid (0.5 M u dietil etru, 4.92 mmol, 9.84 mL). Smeša je ostavljena da se meša pod atmosferom argona tokom 20 sati i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska. Ostatak je prebačen u EtOAc (10 mL) i opran vodom (2 x 5 mL), fiziološkim rastvorom (2 x 5 mL) i osušen preko Na2SO4. Na2SO4je uklonjen filtracijom i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska. Sirovi materijal je prečišćen normalnom faznom hromatografijom pomoću 0-50% EtOAc / heksana kako bi dao 0.338 g terc-butil 2-(3-((5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)metil)fenil)acetata 1106. 1H NMR 300 MHz CDCl3: δ 7.24 (m, 4H), 4.12 (s, 2H), 3.51 (s, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.43 (s, 9H).
[0361] U smešu terc-butil 2-(3-((5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)metil)fenil)acetata 1106 (0.127 g, 0.44 mmol) u dioksanu (3 mL), dodat je 4N HCl u dioksanu (1 mL) i mešan pod atmosferom argona tokom 2 sata. Isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska i ostatak je razblažen vodom (5 mL) i pH podešen na 12 pomoću 2.5 N NaOH. Smeša je oprana dihlorometanom (4 x 2 mL) i pH podešen na 6 pomoću 1 N HCl. Smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (3 x 2 mL) i organski slojevi su kombinovani, oprani fiziološkim rastvorom i osušeni preko Na2SO4. Na2SO4je uklonjen filtracijom i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska kako bi se dobilo 0.023 g 2-(3-((5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)metil)fenil)sirćetne kiseline 1107.
[0362] Rastvor N-(5-(4-(6-aminopiridazin-3-il)butil)-1,3,4-tiadiazol-2-il)-2-fenilacetamida 348 (0.035 g, 0.094 mmol), 2-(3-((5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)metil)fenil)sirćetne kiseline 1107 (0.023 g, 0.094 mmol), 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) karbodiimida (0.045 g, 0.235 mmol), 1-hidroksibenzotriazola (0.032 g, 0.235 mmol) u DMF (1.75 mL), mešan je tokom 16 sati i razblažen vodom (20 mL). Smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc (3 x 20 mL), organski slojevi su kombinovani, oprani vodom (3 x 20 mL), fiziološkim rastvorom (2 x 20 mL) i osušeni preko Na2SO4. Na2SO4je uklonjen filtracijom i isparljive supstance su uklonjene u uslovima sniženog pritiska. Sirovi materijal je prečišćen reversno-faznom hromatografijom dajući 0.004 g 2-(3-((5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)metil)fenil)-N-(6-(4-(5-(2-fenilacetamido)-1,3,4-tiadiazol-2-il)butil)piridazin-3-il)acetamida 652. 1H NMR 300 MHz DMSO-d6: δ 12.62 (s, 1H), 11.24 (s, 1H), 8.16 (d, 1H, J=12.2 Hz), 7.54 (d, 1H, J = 12.2 Hz), 7.3-7.1 (m, 9H), 4.20 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.74 (s, 2H), 2.99 (m, 2H), 2.87 (m, 2H), 2.41 (s, 3H), 1.72 (m, 4H).
[0363] Smeša 3-bromoacetofenona (5 g, 25.1 mmol) u mravljoj kiselini (6 gm) i formamida (25 mL) zagrevana je do 170 °C preko noći, pre nego što je ekstrahovana toluenom. Organski sloj je odvojen i koncentrovan. Dobijeni ostatak je razblažen pomoću 3N HCl i dobijena smeša je podvrgnuta rektifikaciji preko noći pre nego što je ohlađena do sobne temperature. Rastvor je ekstrahovan etrom. Vodeni sloj je razdvojen, alkalizovan vodenim rastvorom natrijum hidroksida i ekstrahovan etrom. Organski sloj je razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan kako bi dao jedinjenje 1108 (3 g, prinos 60%).1H NMR (300 MHz, hloroform-d) δ ppm 1.22-1.25 (d, 3H) 3.97-3.99 (q, 1H) 7.23-7.4 (m, 3H) 7.6 (s, 1H).
[0364] U rastvor jedinjenja 1108 (2.945 g, 14.7 mmol) u dihlorometanu (100 mL) je dodat boc anhidrid (3.21 g, 14.7 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, pre nego što je koncentrovana i prečišćena hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dala jedinjenje 1109 (3 g, prinos 68%). 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.29-1.31 (d, 3H) 1.38 (s, 9H) 4.61-4.63 (q, 1H) 7.3 (brs, 2H) 7.41-7.5 (m, 3H).
[0365] U degazirani rastvor jedinjenja 1109 (0.5 g, 1.66 mmol) i bis(tri-tercbutilfosfin)paladijuma(0) (0.085 g, 0.166 mmol) u dioksanu (3 mL), dodat je 2-terc-butoksi-2-oksoetilcink hlorid (8.5 mL, 4.15 mmol) pod atmosferom argona, i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata pre nego što je reakcija zaustavljena zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida. Dobijeni rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1110 (0.35 g, prinos 62%). 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.29-1.31 (d, 3H) 1.388-1.42 (brs, 18H) 3.53 (s, 2H) 4.59-4.63 (q, 1H) 7.09 (brs, 1H) 7.12-7.20 (brs, 2H) 7.25-7.27 (m, 1H) 7.27-7.30 (m, 1H).
[0366] U rastvor jedinjenja 1110 (0.44 g, 1.3 mmol) u metanolu (40 mL) i vodi (10 mL), dodat je litijum hidroksid monohidrat (0.4 gm) i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 dana pre nego što je koncentrovana. Dobijeni ostatak je razblažen ledenom vodom i zakišeljen sirćetnom kiselinom. Dobijeni rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1111 (0.316 g, prinos 86%). 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.22-1.39 (m, 12H) 3.55 (s, 2H) 4.58-4.63 (q, 1H) 7.11-7.38 (m, 5H) 12.29 (s, 1H).
[0367] 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.43 (m, 12H) 1.89 (brs, 4H) 2.97-3.08 (m, 4H) 3.95-4.03 (m, 4H) 4.71-4.77 (q, 1H) 7.24-7.43 (m, 11H) 8.45-8.48 (d, 1H) 10.99 (s, 1H) 12.4 (brs, 1H).
[0368] 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.43 (m, 12H) 1.89 (brs, 4H) 2.97-3.08 (m, 4H) 3.95-4.03 (m, 4H) 4.71-4.77 (q, 1H) 7.24-7.43 (m, 11H) 8.45-8.48 (d, 1H) 10.22 (brs, 1H) 12.4 (brs, 1H).
[0369] 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.5-1.52 (d, 3H) 1.75 (brs, 4H) 2.88-2.93 (m, 2H) 3.03-3.05 (m, 2H) 3.79(s, 2H) 3.86(s, 2H) 4.38-4.44 (q, 1H) 7.27-7.59 (m, 10H) 8.20-8.23 (m, 4H) 11.27 (s, 1H) 12.71 (s, 1H).
[0370] 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.5-1.52 (d, 3H) 1.75 (brs, 4H) 2.88-2.93 (m, 2H) 3.03-3.05 (m, 2H) 3.86(s, 4H) 4.38-4.44 (q, 1H) 7.27-7.59 (m, 10H) 8.20-8.23 (m, 4H) 11.27 (s, 1H) 12.71 (s, 1H).
[0371] 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.5-1.52 (d, 3H) 1.75 (brs, 4H) 2.88-2.93 (m, 2H) 3.03-3.05 (m, 2H) 3.78 (s, 2H) 3.82 (s, 2H) 4.91-4.96 (q, 1H) 7.20-7.35 (m, 9H) 7.55-7.58 (d, 1H) 8.20-8.23 (d, 1H) 8.68-8.71 (m, 1H) 11.27 (s, 1H) 12.71 (s, 1H).
[0372] U ledeni rastvor 1-(5-bromo-2-fluorofenil)etanona (4.5 g, 20.7 mmol) u metanolu (100 mL), dodati su amonijum acetat (32 g, 414.7 mmol) i natrijum cijanoborohidrid (6.15 g, 28.98 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom vikenda, pre nego što je koncentrovana. Dobijeni ostatak je razblažen vodom, alkalizovan do pH∼13 pomoću 1N NaOH, i ekstrahovan dihlorometanom. Organski ekstrakt je razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1112 (1.8 g, prinos 40%). 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.24-1.26 (d, 3H) 4.22-4.24 (q, 1H) 7.1-7.16 (t, 1H) 7.41-7.46 (m, 1H) 7.76 (m, 1H).
[0373] U rastvor jedinjenja 1112 (1.97 g, 9 mmol) u dihlorometanu (100 mL), dodat je boc anhidrid (1.97 g, 9 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je koncentrovana i prečišćena hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dala jedinjenje 1113 (2.4 g, prinos 83%). 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.29-1.32 (d, 3H) 1.39 (s, 9H) 4.87 (q, 1H) 7.14-7.21 (t, 1H) 7.46-7.58 (m, 3H).
[0374] U degazirani rastvor jedinjenja 1113 (2.4 g, 7.54 mmol) i bis(tri-tercbutilfosfin)paladijuma(0) (0.77 g, 1.508 mmol) u dioksanu (12 mL), dodat je 2-terc-butoksi-2-oksoetilcink hlorid (38 mL, 18.85 mmol) pod atmosferom argona, i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata pre nego što je reakcija zaustavljena zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida. Dobijeni rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1114 (2 g, prinos 75%).1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.29-1.32 (d, 3H) 1.38-1.41 (m, 18H) 3.53 (s, 2H) 4.87 (q, 1H) 7.05-7.16 (m, 2H) 7.26-7.29 (m, 1H) 7.48 (m, 1H).
[0375] U rastvor 1114 (2 g, 5.66 mmol) u metanolu (100 mL) i vodi (25 mL), dodat je litijum hidroksid monohidrat (2 gm) i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 dana pre nego što je koncentrovana. Dobijeni ostatak je razblažen ledenom vodom i zakišeljen sirćetnom kiselinom. Dobijeni rastvor je podeljen između vode i etil acetata. Organski ekstrakt je opran sa još vode, razdvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju EtOAc/heksanom kako bi dao jedinjenje 1115 (1.5 g, prinos 89%).1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.29-1.31(d, 3H) 1.38 (s, 9H) 3.53(s, 2H) 4.87(q, 1H) 7.05-7.19(m, 2H) 7.26-7.29(m, 1H) 7.45- 7.48(m, 1H) 12.32(s, 1H).
[0376] 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.30-1.33 (m, 12H) 1.74 (brs, 4H) 2.89(m, 2H) 3.02 (m, 2H) 3.78 (s, 4H) 4.85 (q, 1H) 7.10-7.57 (m, 11H) 8.19-8.22 (d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.64 (s, 1H).
[0377] 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.28-1.32 (m, 12H) 1.73-1.75 (brs, 4H) 2.87(m, 2H) 2.89 (m, 2H) 3.75 (s, 2H) 3.81(s, 2H) 4.85 (q, 1H) 7.06-7.57 (m, 11H) 8.18-8.21(d, 1H) 11.26 (s, 1H) 12.64 (s, 1H).
[0378] 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.51-1.53 (m, 3H) 1.75 (brs, 4H) 2.90(m, 2H) 3.02 (m, 2H) 3.78 (s, 2H) 3.85(s, 2H) 4.65 (q, 1H) 7.25-7.61 (m, 10H) 8.21-8.25 (d, 1H) 8.33-8.35(brs, 3H) 11.29 (s, 1H) 12.68 (s, 1H).
[0379] 1H NMR (300 MHz, dimetilsulfoksid-d6) δ ppm 1.54 (d, 3H) 1.75-1.76 (brs, 4H) 2.91(m, 2H) 3.02 (m, 2H) 3.81-3.83(m, 4H) 4.65 (q, 1H) 7.24-7.63 (m, 10H) 8.22-8.25 (d, 1H) 8.36 (brs, 3H) 11.35 (s, 1H) 12.66 (s, 1H).
[0380] U smešu jedinjenja 413 (1.62 g) u MeOH (25 mL), THF (10 mL) i H2O (10 mL) na sobnoj temperaturi, dodat je 1N vodeni rastvor NaOH (8 mL). Ova smeša je mešana tokom 24 h pre nego što su organske isparljive supstance uklonjene u uslovima sniženog pritiska. Ostatak je neutralisan do pH 7 pomoću 1N vodenog rastvora HCl i ekstrahovan pomoću EtOAc (2x20 mL). Kombinovani ekstrakt je osušen (MgSO4) i koncentrovan. Sirova supstanca je prečišćena hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 1-15% MeOH u dihlorometanu kako bi dala amin 1116. Dobijeni amin 1116 je konvertovan u jedinjenje 660 kao što je opisano za jedinjenje 335. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.68 (bs, 1H), 11.31 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.52-7.21 (m, 8H), 3.90 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.06-2.86 (m, 4H), 1.77-1.72 (m, 4H).
[0381] 3-amino-6-hloropiridazin (55.5 g, 0.428 mol) i 3-(trifluorometoksi)fenilsirćetna kiselina (1.1 ekviv., 0.471 mol, 104 g) rastvoreni su u DMF (30.0 vol., 1.66 L) u balonu od 3000 mL sa okruglim dnom i sa tri grlića. Dodavanje DIEA (1.1 ekviv., 0.471 mol, 82 mL) pomoću levka za dodavanje je obavljeno tokom 5 minuta. Rastvor propilfosfonskog anhidrida (300 mL 50% rastvora u DMF, 1.1 ekviv., 0.471 mol, ) sipan je u levak za dodavanje od 500 mL i dodat u kapima u reakcioni rastvor (održavajući temperaturu reakcije ≤ 30 °C). Reakcija se obično sasvim završava nakon 3 sata (TLC:6:4 heksani-etil acetat). Reakciona smeša je zatim sipana u 7.5% natrijum bikarbonat (80.0 vol., 4.4 L) koji je hlađen u ledenom kupatilu. Beličasti kristalni prah je filtriran kroz Bihnerov levak, ispran vodom (20.0 vol., 1.1 L). Osušen u vakuumu na 50 °C do konstantne težine, kako bi dao N-(6-hloropiridazin-3-il)-2-(3-(trifluorometoksi)fenil)acetamid 1117: prinos od 119.6 g (77%).1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.63 (s, 1H), 8.38(d, J=9.4 Hz, 1H), 7.88 (d, J=9.4 Hz, 1H), 7.52 - 7.27 (m, 4H), 3.90 (s, 2H).
[0382] Rastvor 4-cijanobutilcink bromida (3.0 ekviv., 0.50 mol, 1.0 L) je sipan u balon od 5000 mL sa okruglim dnom i sa 3 grlića, pročišćen argonom. Nakon pročišćavanja argonom(g)tokom 5 minuta dodato je jedinjenje 1117 (1.0 ekviv., 0.167 mol, 55.3 g) i NiCl2(dppp) (0.15 ekviv., 0.0251 mol, 13.6 g) pod slojem argona(g).Reakcija se obično sasvim završava nakon 4 sata (TLC: 1:1 heksani-etil acetat). EtOAc (15 vol., 832 mL) je dodat u tamno crveni rastvor. Voda (15 vol., 832 mL) je dodata, obrazovala se gusta suspenzija. 1N HCl je dodavan dok suspenzija nije prešla u bledo plavi sloj (∼6 vol., 333 mL). Prebačen je u levak za odvajanje i organski sloj je opran pomoću 1N HCl (2x500 mL), osušen (MgSO4) i koncentrovan rotacionim isparavanjem (kupatilo ≤ 30 °C) do čvrstog crvenkastog ulja. Ulje je rastvoreno u dihlorometanu (15 vol., 832 mL), silika gel (100 g) je suspendovan u crvenom rastvoru, i zatim je suspenzija koncentrovana rotacionim isparavanjem (kupatilo ≤ 30 °C) do čvrstog crvenkastog praha. Nanet je na sloj silika gela (5 cm x 11 cm), ispran pomoću 25% heksana u etil acetatu (3 L), kombinovani organski slojevi su koncentrovani rotacionim isparavanjem (kupatilo ≤ 30 °C). Osušeni su pod visokim vakuumom do konstantne težine kako bi dali N-(6-(4-cijanobutil)piridazin-3-il)-2-(3-(trifluorometoksi)fenil)acetamid 1118: prinos od 58.2 g (92%).
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.41 (s, 1H), 8.28(d, J=9.2 Hz, 1H), 7.65(d, J=9.2 Hz, 1H), 7.52 - 7.27(m, 4H), 3.89(s, 2H), 2.92(t, J=7.5 Hz, 2H), 2.56(t, J=7.0 Hz, 2H), 1.80 (m, 2H), 1.61 (m, 2H).
[0383] Jedinjenje 1118 (1.0 ekviv., 0.154 mol, 58.2 g) je stavljeno u balon od 500 mL sa okruglim dnom, zajedno sa tiosemikarbazidom (1.2 ekviv., 0.184 mol, 16.8 g). TFA (5 vol., 291 mL) je polako dodavan u reakcioni sud uz mešanje. Reakciona suspenzija je zagrevana u kupatilu na 65°C sa spiralnim kondenzatorom otvorenim na vrhu. Reakcija se obično sasvim završava nakon 5 sati (što se određuje putem LC/MS). Toluen (10 vol., 582 mL) je dodat u tamno crveni rastvor koji je azeotropski razdvojen rotacionim isparavanjem (kupatilo ≤ 30 °C) do crvenog ulja. Ulje je polako, uz temeljno mešanje, prebačeno u erlenmajer od 6000 mL sa 7.5% rastvorom natrijum bikarbonata (69 zapr., 4.0 L), ohlađen u kupatilu na 0°C. Kristali su filtrirani kroz Bihnerov levak i dvaput isprani dietil etrom (5 vol., 2x250 mL). Osušeni su pod visokim vakuumom do konstantne težine kako bi dali N-(6-(4-(5-amino-1,3,4-tiadiazol-2-il)butil)piridazin-3-il)-2-(3-(trifluorometoksi) fenil)acetamid 657; prinos od 55.7 g (80%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.33 (s, 1H), 8.21 (d, J=9.2 Hz, 1H), 7.58 (d, J=9.2 Hz, 1H), 7.51 - 7.26 (m, 4H), 6.99 (s, 2H), 3.88 (s, 2H), 2.87 (m, 4H), 1.71 (m, 4H).
[0384] U rastvor jedinjenja 657 (50 mg, 0.11 mmol) u DMF (3 mL) na 0 °C, dodati su 4-fluorofenil sirćetna kiselina (22 mg, 0.14 mmol), HOBt (30 mg, 0.22 mmol) i EDCI (42 mg, 0.22 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h pre nego što je ohlađena do 0 °C i reakcija zaustavljena pomoću H2O. Precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom i dodatno prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 1-10% MeOH u dihlorometanu kako bi dao jedinjenje 661. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.65 (bs, 1H), 11.31 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 7.49-7.14 (m, 8H), 3.87 (s, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.06-2.86 (m, 4H), 1.77-1.72 (m, 4H).
[0385] Jedinjenje 662 je pripremljeno postupkom koji je isti kao postupak opisan za jedinjenje 661. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.67 (bs, 1H), 11.31 (s, 1H), 8.20 (d, J= 9.1 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.51-7.07 (m, 7H), 3.89 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.06-2.86 (m, 4H), 1.77-1.72 (m, 4H).
[0386] Jedinjenje 663 je pripremljeno postupkom koji je isti kao postupak opisan za jedinjenje 661. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.74 (bs, 1H), 11.31 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.51-7.19 (m, 7H), 3.97 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.06-2.86 (m, 4H), 1.77-1.72 (m, 4H).
[0387] U smešu 1-bromo-3-(difluorometoksi) benzena (1 g, 4.5 mmol), bis(tri-terc-butilfosfin) paladijuma(0) (460 mg, 0.9 mmol) u 1,4-dioksanu (30 ml), dodat je pod atmosferom argona, 0.5 M 2-terc-butoksi-2-oksoetil cink hlorid u etru (22.5 ml). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je podeljena između zasićenog NH4Cl i EtOAc. Organski ekstrakt je opran fiziološkim rastvorom, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-10% EtOAc u heksanu kako bi dao jedinjenje 1119.
[0388] U rastvor jedinjenja 1119 (300 mg, 1.16 mmol) u dihlorometanu (5 ml) na 0 °C dodat je u kapima TFA (3 ml). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pre nego što je uparena do suva, a zatim je ostatak triturisan etrom kako bi dao jedinjenje 1120.
[0389] Jedinjenje 1121 je napravljeno od 1-bromo-3-(2,2,2-trifluoroetoksi)benzena, upotrebom postupka koji je opisan za jedinjenje 1120.
[0390] U balon je stavljeno jedinjenje 1024 (50 mg, 0.135 mmol), jedinjenje 1120 (28 mg, 0.142 mmol) u DMF (1 ml) na 0 °C, dodat je HOBT (39 mg, 0.285 mmol), a nakon toga i EDCI (68 mg, 0.356 mmol). Dobijena smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana tokom 2 h pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem ledene vode (∼5 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode kako bi dao jedinjenje 664.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.12 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.03 Hz, 1H), 7.48-6.99 (m, 10H), 3.85 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0391] Jedinjenje 665 je napravljeno upotrebom postupka koji je opisan za jedinjenje 664. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.12 Hz, 1H), 7.58 7.54 (d, J = 9.03 Hz, 1H), 7.38-7.28 (m, 6H), 7.03-6.97 (m, 3H), 4.77-4.74 (q, 2H), 3.80-3.78 (d, J = 5.82 Hz, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0392] U balon je stavljeno jedinjenje 348 (50 mg, 0.135 mmol), jedinjenje 1120 (28 mg, 0.142 mmol) u DMF (1 ml) na 0 °C, dodat je HOBT (39 mg, 0.285 mmol), a nakon toga i EDCI (68 mg, 0.356 mmol). Dobijena smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem ledene vode (∼5 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u dihlorometanu kako bi dao jedinjenje 666. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.12 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 9.03 Hz, 1H), 7.48-6.98 (m, 10H), 3.81 (bs, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0393] Jedinjenje 667 je napravljeno upotrebom postupka koji je opisan za jedinjenje 666. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.12 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J = 8.97 Hz, 1H), 7.35-7.28 (m, 6H), 7.03-6.97 (m, 3H), 4.77-4.74 (q, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0394] Jedinjenje 668 je napravljeno upotrebom postupka koji je opisan za jedinjenje 675. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.15 Hz, 1H), 7.58-6.99 (m, 10H), 3.87-3.84 (d, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0395] Jedinjenje 669 je napravljeno upotrebom postupka koji je opisan za jedinjenje 675. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.09 Hz, 1H), 7.58 7.54 (d, J = 9.37 Hz, 1H), 7.48-7.28 (m, 6H), 7.03-6.97 (m, 2H), 4.77-4.74 (q, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0396] U balon je stavljeno jedinjenje 657 (50 mg, 0.111 mmol), hidrohlorid 2-piridin sirćetne kiseline (20 mg, 0.116 mmol) u DMF (1 ml) na 0 °C je primenjen tretman rastvorom propilfosfonskog anhidrida (91 ul), a nakon toga trietilaminom (40 ul, 0.29 mmol). Dobijena smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana tokom 1 h pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem ledene vode (∼5 mL). Žuti precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u dihlorometanu kako bi dao jedinjenje 670.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.67 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.53-8.49 (m, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.12 Hz, 1H), 7.78-7.76 (t, 1H), 7.587.26 (m, 7H), 4.01 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0397] Jedinjenje 671 je napravljeno upotrebom postupka koji je opisan za jedinjenje 670. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.70 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.53-8.48 (m, 2H), 8.22-8.19 (d, J = 9.12 Hz, 1H), 7.76-7.26 (m, 7H), 3.87 (s, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0398] Jedinjenje 672 je napravljeno upotrebom postupka koji je opisan za pripremu jedinjenja 670. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 11.32 (s, 1H), 8.53-8.52 (bs, 2H), 8.22-8.19 (d, J = 9.12 Hz, 1H), 7.58-7.26 (m, 7H), 3.87 (s, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0399] Jedinjenje 673 je napravljeno upotrebom postupka koji je opisan za pripremu jedinjenja 661. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.69 (bs, 1H), 11.31 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.51-7.21 (m, 8H), 3.90 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.06-2.86 (m, 4H), 1.77-1.72 (m, 4H).
[0400] Jedinjenje 674 je napravljeno upotrebom postupka koji je opisan za pripremu jedinjenja 661. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.63 (bs, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.51-7.38 (m, 3H), 7.33-7.09 (m, 5H), 3.87 (s, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.06-2.86 (m, 4H), 2.48 (s, 3H), 1.77-1.72 (m, 4H).
[0401] U balon je stavljeno jedinjenje 657 (70 mg, 0.155 mmol), 5-pirimidinsirćetna kiselina (22 mg, 0.162 mmol) u DMF (1 ml) na 0 °C, dodat je HOBT (44 mg, 0.326 mmol), a zatim i EDCI (78 mg, 0.408 mmol). Dobijena smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći pre nego što je reakcija zaustavljena dodavanjem ledene vode (∼5 mL). Beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još vode. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 0-6% MeOH u dihlorometanu, kako bi dao jedinjenje 675.1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.75 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 9.11 (s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.12 Hz, 1H), 7.59-7.26 (m, 6H), 3.94 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0402] Jedinjenje 676 je napravljeno upotrebom postupka koji je opisan za jedinjenje 675. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.75 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.61-8.57 (m, 2H), 8.22-8.19 (d, J = 9.36 Hz, 1H), 7.59-7.26 (m, 5H), 4.11 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0403] Jedinjenje 677 je napravljeno upotrebom postupka koji je opisan za jedinjenje 675. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.75 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.15 Hz, 1H), 7.59-7.26 (m, 5H), 6.62 (s, 1H), 3.99 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0404] Jedinjenje 678 je napravljeno upotrebom postupka koji je opisan za jedinjenje 675. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.75 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.21 Hz, 1H), 7.59-7.26 (m, 6H), 4.03 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0405] Jedinjenje 679 je napravljeno postupkom kao što je postupak opisan za jedinjenje 661.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.67 (bs, 1H), 11.31 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.51-7.36 (m, 4H), 7.29-7.12 (m, 4H), 3.87 (s, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.06-2.86 (m, 4H), 1.77-1.72 (m, 4H).
[0406] Jedinjenje 680 je pripremljeno postupkom kao što je postupak opisan za jedinjenje 661.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.67 (bs, 1H), 11.31 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.51-7.28 (m, 8H), 3.87 (s, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.06-2.86 (m, 4H), 1.77-1.72 (m, 4H).
[0407] U rastvor jedinjenja 674 (100 mg, 0.16 mmol) u dihlorometanu na -78 °C dodat je mCPBA (60 mg, 0.24 mmol), u 4 dela. Dobijena smeša je mešana na toj temperaturi tokom 1 h pre nego što je polako zagrejana do -10 °C i reakcija zaustavljena 25% vodenim rastvorom Na2S2O3. Reakcija je razblažena pomoću EtOAc, oprana zasićenim vodenim NaHCO3(3x10 mL). Kombinovani organski sloj je odvojen, opran fiziološkim rastvorom, osušen (MgSO4) i koncentrovan. Sirova supstanca je prečišćena pomoću HPLC kako bi dala jedinjenje 682.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.72 (bs, 1H), 11.31 (s, 1H), 8.20 (d, J= 9.0 Hz, 1H), 7.68 (m, 1H), 7.60-7.26 (m, 8H), 3.91 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.06-2.86 (m, 4H), 2.76 (s, 3H), 1.77-1.72 (m, 4H).
[0408] Jedinjenje 681 je pripremljeno od jedinjenja 657 i 3-metilsulfonilfenil sirćetne kiseline postupkom koji je opisan za jedinjenje 661. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.72 (bs, 1H), 11.31 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.92 -7.83 (m, 2H), 7.70-7.26 (m, 7H), 3.93 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.23 (s, 3H), 3.06-2.86 (m, 4H), 1.77-1.72 (m, 4H).
[0409] Jedinjenje 683 je napravljeno upotrebom postupka koji je opisan za jedinjenje 675. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.75 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.21-8.18 (d, J= 9.18 Hz, 1H), 7.84-7.80 (d, J= 9.36 Hz, 1H), 7.59-7.26 (m, 6H), 3.90-3.87 (d, 4H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0410] Jedinjenje 684 je napravljeno upotrebom postupka koji je opisan za jedinjenje 675. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.75 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.51-8.49 (d, J = 9.18 Hz, 1H), 8.21-8.18 (d, J= 9.06 Hz, 1H), 7.79-7.75 (d, J = 9.36 Hz, 1H), 7.59-7.26 (m, 6H), 4.07 (t, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.30-3.28 (m, 1H), 3.19 (s, 3H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 2.3-2.5 (m, 1H), 1.99-1.96 (m, 1H), 1.73 (bs, 4H).
[0411] Jedinjenje 685 je pripremljeno po postupku opisanom za jedinjenje 661. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.52 (bs, 1H), 11.31 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.61-7.25 (m, 7H), 3.87 (s, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.62 (s, 2H), 3.06-2.86 (m, 4H), 1.77-1.72 (m, 4H).
[0412] Jedinjenje 686 je pripremljeno po postupku opisanom za jedinjenje 661. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.53 (bs, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.52-7.26 (m, 4H), 5.96 (s, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.67 (s, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.06-2.86 (m, 4H), 2.21 (s, 3H), 1.77-1.72 (m, 4H).
[0413] Jedinjenje 687 je pripremljeno po postupku opisanom za jedinjenje 661. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.56 (bs, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.61-7.38 (m, 6H), 6.17 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.79 (s, 3H), 3.75 (s, 2H), 3.03-2.90 (m, 4H), 1.7-1.72 (m, 4H).
[0414] Jedinjenje 688 je pripremljeno postupkom koji je opisan za jedinjenje 661.1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.61 (bs, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.51-7.26 (m, 4H), 3.87 (s, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.07-2.86 (m, 4H), 1.77-1.72 (m, 4H).
[0415] U rastvor jedinjenja 657 (200 mg, 0.44 mmol) u DMF (4 mL) na 0 °C dodati su bademova kiselina (124 mg, 0.66 mmol), HOBt (119 mg, 0.88 mmol) i EDCI (170 mg, 0.88 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h pre nego što je ohlađena do 0 °C i reakcija zaustavljena pomoću H2O. Precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom i dodatno prečišćen hromatografijom na silika gelu uz eluciju pomoću 1-10% MeOH u dihlorometanu kako bi dao jedinjenje 690 i polarnije jedinjenje 689. 689: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.42 (bs, 1H), 11.31 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.58-7.27 (m, 10H), 6.35 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 5.34 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.03-2.89 (m, 4H), 1.77-1.73 (m, 4H).
690: 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.05 (bs, 1H), 11.31 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.59-7.26 (m, 15H), 6.26 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.38 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.03-2.88 (m, 4H), 1.76-1.73 (m, 4H).
[0416] Jedinjenje 447 je pripremljeno od jedinjenja 657 i 3-hlorobademove kiseline postupkom kao što je postupak opisan za jedinjenje 689.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.48 (bs, 1H), 11.31 (s, 1H), 8.20 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.59-7.26 (m, 9H), 6.53 (m, 1H), 5.36 (t, J = 0.7 Hz, 1H), 3.87 (s, 2H), 3.03-2.90 (m, 4H), 1.75-1.71 (m, 4H).
[0417] Jedinjenje 692 je napravljeno upotrebom postupka opisanog za jedinjenje 675. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.75 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.21-8.18 (d, J = 9.18 Hz, 1H), 7.80-7.26 (m, 9H), 3.92 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0418] Jedinjenje 693 je napravljeno upotrebom postupka opisanog za jedinjenje 675. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.75 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.06 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.59-7.26 (m, 6H), 6.31 (s, 1H), 5.20 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
[0419] Jedinjenje 694 je napravljeno upotrebom postupka opisanog za jedinjenje 675. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.22-8.18 (d, J = 9.15 Hz, 1H), 7.58-7.54 (d, J= 9.18 Hz, 1H), 7.48-7.26 (m, 4H), 3.87 (s, 2H), 3.63 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.73 (bs, 4H), 1.57 (s, 9H).
[0420] U rastvor jedinjenja 694 (50 mg, 0.081 mmol) u dihlorometanu (2 ml) dodat je TFA (2 ml) na 0 °C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h pre nego što je uparena pod vakuumom do suva. Dodat je etar i beli precipitat je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa još etra kako bi dao jedinjenje 695.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.36 Hz, 1H), 7.60-7.57 (d, J = 9.27 Hz, 1H), 7.51-7.28 (m, 4H), 3.88 (s, 2H), 3.57 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.73 (bs, 4H).
[0421] Jedinjenje 696 je napravljeno upotrebom postupka opisanog za jedinjenje 695. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.71 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J= 9.30 Hz, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.58-7.54 (d, J= 9.30 Hz, 1H), 7.48-7.28 (m, 5H), 3.87 (s, 2H), 3.76 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H), 1.59 (s, 9H).
[0422] Jedinjenje 697 je napravljeno upotrebom postupka opisanog za jedinjenje 695. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.22 (s, 1H), 12.71 (s, 1H), 11.32 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 8.22-8.19 (d, J = 9.15 Hz, 1H), 7.59-7.26 (m, 6H), 4.04 (s, 2H), 3.87 (s, 2H), 3.01 (bs, 2H), 2.90 (bs, 2H), 1.73 (bs, 4H).
Preparativno prečišćavanje pomoću HPLC
[0423] Sva preparativna reversno-fazna HPLC prečiščavanja su izvedena na preparativnom tečnom hromatografu Shimadzu Prominence sa kolonom na temperaturi okoline. Mobilne faze A i B sastojale su se od 0.1% mravlje kiseline u vodi i 0.1% mravlje kiseline u acetonitrilu, redom. Smeše sirovih proizvoda su rastvorene u DMF, DMSO ili njihovim smešama pri koncentracijama od približno 100 mg/mL i podvrgnute hromatografiji prema postupcima opisanim u tabeli 2. Odgovarajuće hromatografske frakcije su zatim uparene pod visokim vakuumom na 45° C, na instrumentu Savant Speed Vac Plus Model SC210A, kako bi dale prečišćene proizvode.
TABELA 2: Opis preparativnih HPLC postupaka
[0424] Sledeći reprezentativni protokoli za sintezu takođe mogu da se koriste za proizvodnju jedinjenja prema pronalasku.
3,6-dihloropiridazin je tretiran di-tercbutil malonatom i natrijum hidridom u THF ili DMF, kako bi dao intermedijer 1026. Intermedijer 1026 je zatim tretiran natrijum hidridom u THF ili DMF, a nakon toga i bis-(hlorometil)sulfidom kako bi dao intermedijer 1027. Intermedijer 1027 je tretiran pomoću TFA u dihlorometanu kako bi dao intermedijer 1028. Intermedijer 1028 je tretiran amonijakom kako bi dao intermedijer 1029. Intermedijer 1028 se takođe konvertuje u intermedijer 1029 sekvencijalnim tretmanom pomoću 2,4-dimetoksibenzil amina i TFA. Bisamino intermedijer 1029 može da se prevede u acilovane proizvode analogne proizvodima opisanim u tabeli 3 koristeći postupke za acilaciju jedinjenja 1001-1008, koji su prethodno opisani u odeljku Protokoli za sintezu.
[0425] I trans- i cis-ciklopropan-1,2-diildimetanoli su prevedeni u odgovarajući bis-nitril 1031 preko bis-mezilovanog intermedijera 1030. Bismezilovani intermedijer 1030 je pripremljen tako što je diol tretiran metansulfonil hloridom u prisustvu piridina ili trietilamina u dihlorometanu. Bisnitril 1031 je pripremljen tako što je jedinjenje 1030 tretirano natrijum cijanidom u DMSO ili etanolu/vodi. Koristeći postupak sličan postupku koji je opisan za pripremu jedinjenja 1001, bisnitril 1031 podleže ciklizaciji sa tiosemikarbazidom u TFA, kako bi dao bis-amino intermedijer 1032. Bis-amino intermedijer 1032 može da se konvertuje u acilovane proizvode analogne proizvodima opisanim u tabeli 3, koristeći postupke za acilaciju jedinjenja 1001-1008, koji su prethodno opisani u odeljku Protokoli za sintezu.
[0426] Alkenski analog 1033 pripremljen je od trans-3-heksendinitrila koristeći postupak sličan postupku koji je opisan za pripremu jedinjenja 1001. Bis-amino intermedijer 1033 može da se konvertuje u acilovane proizvode analogne proizvodima opisanim u tabeli 3 (na primer, jedinjenje 1034), koristeći postupke za acilaciju jedinjenja 1001-1008, koji su prethodno opisani u odeljku Protokoli za sintezu. Proizvodi mogu dalje da se konvertuju u ciklopropilne analoge (primer je jedinjenje 1035) u uslovima po Simmons-Smith-u (Et2Zn, CH2I2,1,2-dimetoksietan).
Primer 2: Testovi za jedinjenja
[0427] Jedinjenja su testirana i in vitro biohemijskim testom i testom za proliferaciju ćelija, na sledeći način. Rezultati za IC50 su obezbeđeni u tabeli 3.
Test sa rekombinantnim enzimom
[0428] Sposobnost jedinjenja da inhibiraju enzimsku aktivnost rekombinanatnog oblika glutaminaze 1 (GAC) je procenjena upotrebom biohemijskog testa koji povezuje proizvodnju glutamata (oslobađa ga GAC) sa glutamat dehidrogenazom (GDH) i meri promene apsorbancije pri redukciji NAD+ do NADH. Rastvor supstrata je pripremljen (50 mM Tris-HCl pH 8.0, 0.2 mM EDTA, 150 mM K2HPO4, 0.1 mg/ml BSA, 1 mM DTT, 20mM L-glutamin, 2 mM NAD+ , i 10 ppm sredstva protiv stvaranja pene) i 50 µL je dodato u bunarčiće ploče polu-iskorišćene površine sa 96 bunarčića sa providnim dnom (Corning #3695). Jedinjenje (2 µL) je dodato da bi se dobila finalna koncentracija DMSO od 2% pri 2X željene koncentracije jedinjenja. Enzimska reakcija je započeta dodavanjem 50 µL rastvora enzima (50 mM Tris-HCl pH 8.0, 0.2 mM EDTA, 150 mM K2HPO4, 0.1 mg/ml BSA, 1 mM DTT, 10 ppm sredstva protiv stvaranja pene, 4 jedinice/ml GDH, 4 mM adenozin difosfata i 4 nM GAC) i očitana na Molecular Devices M5 čitaču mikrotitar ploča na 20°C. Čitač mikrotitar ploča je konfigurisan tako da očitava apsorbanciju ( λ =340 nm) u kinetičkom modu tokom 15 minuta. Podaci su zabeleženi kao milijedinice apsorbancije po minuti i nagibi su poređeni sa kontrolnim jedinjenjem i kontrolom koja sadrži samo DMSO, sa iste ploče. Smatrano je da jedinjenja sa nagibima manjim nego kod DMSO kontrole predstavljaju inhibitore i varijabilnost u okviru ploče je procenjena upotrebom kontrolnog jedinjenja.
[0429] Rezultati ovog testa za nekoliko jedinjenja prema pronalasku su prikazani u tabeli 3, izraženi kao IC50, ili polovina maksimalne inhibitorne koncentracije, gde je IC50 kvantitativna mera koja pokazuje koliko je jedinjenja potrebno da se data biološka aktivnost inhibira za polovinu.
Test sa rekombinantnim enzimom – zavisnost od vremena
[0430] Sposobnost jedinjenja da inhibiraju enzimsku aktivnost rekombinanatnog oblika glutaminaze 1 (GAC) je procenjena upotrebom biohemijskog testa koji povezuje proizvodnju glutamata (oslobađa ga GAC) sa glutamat dehidrogenazom (GDH) i meri promene apsorbancije pri redukciji NAD+ do NADH. Rastvor enzima je pripremljen (50 mM Tris-HCl pH 8.0, 0.2 mM EDTA, 150 mM K2HPO4, 0.1 mg/ml BSA, 1 mM DTT, 10 ppm sredstva protiv stvaranja pene, 4 jedinice/ml GDH, 4 mM adenozin difosfata i 4 nM GAC) i 50 µL je dodato u bunarčiće ploče polu-iskorišćene površine sa 96 bunarčića sa providnim dnom (Corning #3695). Jedinjenje (2 µL) je dodato da bi se dobila finalna koncentracija DMSO od 2% pri 2X željene koncentracije jedinjenja. Mešavina enzim/jedinjenje je hermetički zatvorena zaptivajućom folijom (proizvođač USA Scientific) i ostavljena da se, uz blago mućkanje, inkubira tokom 60 minuta na 20°C. Enzimska reakcija je započeta dodavanjem 50 µL rastvora supstrata (50 mM Tris-HCl pH 8.0, 0.2 mM EDTA, 150 mM K2HPO4, 0.1 mg/ml BSA, 1 mM DTT, 20mM L-glutamin, 2 mM NAD+ i 10 ppm sredstva protiv stvaranja pene) i očitana na Molecular Devices M5 čitaču mikrotitar ploča na 20°C. Čitač mikrotitar ploča je konfigurisan tako da očitava apsorbanciju ( λ =340 nm) u kinetičkom modu tokom 15 minuta. Podaci su zabeleženi kao mili-jedinice apsorbancije po minuti i nagibi su poređeni sa kontrolnim jedinjenjem i kontrolom koja sadrži samo DMSO, sa iste ploče. Smatrano je da jedinjenja sa nagibima manjim nego kod DMSO kontrole predstavljaju inhibitore i varijabilnost u okviru ploče je procenjena upotrebom kontrolnog jedinjenja.
[0431] Rezultati ovog testa za nekoliko jedinjenja prema pronalasku su prikazani u tabeli 3, izraženi kao IC50, ili polovina maksimalne inhibitorne koncentracije, gde je IC50 kvantitativna mera koja pokazuje koliko je jedinjenja potrebno da se data biološka aktivnost inhibira za polovinu.
Test proliferacije ćelija
[0432] Ćelije P493-6 (myc "uključen") su gajene u medijumu za gajenje (RPMI-1640, 10%FBS, 2mM glutamin, 100 jedinica/ml penicilina i 100µg/ml streptomicina) na 37°C sa 5% CO2. Za testiranje jedinjenja, P493-6 ćelije su zasejane u mikrotitar ploče sa 96 bunarčića sa dnom u obliku slova V, u 50 µl medijuma za gajenje pri gustini ćelija od 200,000 ćelija/ml (10,000 ćelija/bunarčiću), istog dana kada se i dodaje jedinjenje. Jedinjenja su serijski razblažena u 100% DMSO na koncentraciju 200 puta veću od finalne. Jedinjenja su 100 puta razblažena u medijumu za gajenje ćelija i zatim je 50 µl ove smeše dodato u mikrotitar ploče sa ćelijama dajući finalnu koncentraciju DMSO od 0.5%. Ćelije su inkubirane sa jedinjenjem tokom 72 sata na 37°C sa 5% CO2i njihovi antiproliferativni efekti su analizirani ili putem Cell Titer Glo (proizvođač Promega) ili putem FACS analize, koristeći kit Viacount (proizvođač Millipore) na instrumentu Guava.
[0433] Rezultati ovog testa za nekoliko jedinjenja prema pronalasku su prikazani u tabeli 3, izraženi kao IC50, ili polovina maksimalne inhibitorne koncentracije, gde je IC50 kvantitativna mera koja pokazuje koliko je jedinjenja potrebno da se data biološka aktivnost inhibira za polovinu.
Tabela 3:
Primer 3: Studije efikasnosti ksenografta
[0434] In vivo efikasnost nekih jedinjenja je testirana pomoću modela ksenografta, na sledeći način.
[0435] Kod ženki scid/bg miševa, starih približno 6 nedelja, potkožno je u desni bok implantirano 5 x 106 HCT116 ćelija po mišu, u zapremini od 100 uL sterilnog PBS. Kada su tumori dostigli zapreminu od 50 – 100 mm<3>, miševi su metodom slučajnog izbora podeljeni u grupe od po n=10, kako bi dva puta dnevno, putem intraperitonealne injekcije, primali ili vehikulum ili testirano jedinjenje. Tumori su mereni tri puta nedeljno, pomoću kalipera i zapremina tumora je izračunavana pomoću formule: zapremina = (dužina x širina<2>/2), gde su dužina i širina dve najduže strane tumora, normalne jedna na drugu. Doziranje se nastavilo dva puta dnevno, sve dok kontrolni tumori nisu dostigli veličinu od 2000 mm<3>. Sprovedena su statistička poređenja pomoću 2-strane ANOVA analize sa Bonferonijevim post-testom.
[0436] Slika 1 pokazuje da intraperitonealna primena jedinjenja 188 kod miševa dovodi do smanjenja veličine tumora u ovom modelu ksenografta za karcinom debelog creva, HCT116.
Primer 4: Test permeabilnosti Caco-2 ćelija
[0437] Caco-2 ćelije se uobičajeno koriste u konfluentnom monosloju na filter-ulošku za ćelijsku kulturu. Kada se gaje u ovom formatu i u specifičnim uslovima, ove ćelije postaju diferencirane i polarizovane tako da njihov fenotip, morfološki i funkcionalno liči na enterocite koji oblažu tanko crevo. Ćelijski monosloj obezbeđuje fizičku i biohemijsku barijeru za prolaz malih molekula, i široko je u upotrebi u farmaceutskoj industriji kao in vitro model humane mukoze tankog creva u cilju predviđanja apsorpcije oralno primenjenih lekova (Hidalgo et al., Gastroenterology, 1989; Artursson, J. Pharm. Sci., 1990). Korelacija između prividne in vitro permeabilnosti (P¬app) kroz Caco-2 monoslojeve i in vivo apsorpcije je dobro ustanovljena (Artursson et al., Biochem. Biophys. Res. Comm., 1991).
[0438] Ovaj test je korišćen da bi se utvrdila dvosmerna permeabilnost jedinjenja prema pronalasku kroz monoslojeve Caco-2 ćelija. Caco-2 ćelije su gajene u konfluentnim monoslojevima pri čemu su medijumi i na apikalnoj (A) i na bazolateralnoj strani (B) bili na pH 7.4. Jedinjenja su u cilju procene dozirana u koncentraciji od 1µM, u prisustvu 200 µM agensa Lucifer Yellow, na apikalnoj strani (A→B) ili na bazolateralnoj strani (B→A), u duplikatu. Uzorci i sa A i sa B strane uzeti su nakon izlaganja od 120 minuta i koncentracija jedinjenja (izražena kao procenat oporavka) je određena pomoću generičkog LC-MS/MS postupka sa kalibracionom krivom od minimalno četiri tačke.
[0439] Apsorpcioni potencijal jedinjenja je klasifikovan ili kao nizak (P-app < 1X10-6 cm/s) ili kao visok (P-app > 1X10-6 cm/s). Odnos efluksa je izračunat kao (Papp B→A)/(Papp A→B), pri čemu su odnosi efluksa bili značajni ako su bili veći ili jednaki 3, kada je Papp (B→A) veći ili jednak 1X10-6 cm/s. Rezultati za neka od jedinjenja prema pronalasku su prikazani u tabeli 4.
Tabela 4: Rezultati za permeabilnost Caco-2
Primer 5: Rastvorljivost
[0440] Porcije od otprilike 1 mg testiranog artikla su kombinovane sa 120 µL rastvarača u bunarčićima polipropilenske ploče sa 96 x 2 mL bunarčića. Ploča je žustro vorteksovana na sobnoj temperaturi (otprilike 20° C) tokom 18 sati i za svaki bunarčić je vizuelno provereno da li u njemu ima nerastvorene čvrste supstance; u bunarčiće u kojima nije bilo vidljive čvrste supstance dodavano je još čvrstog tretiranog artikla i vorteksovano tokom dodatnih 6 sati na sobnoj temperaturi nakon čega je u svim bunarčićima bila vidljiva čvrsta supstanca. Zatim je sadržaj svih bunarčića filtriran kroz GHP filtersku ploču od 0.45 µm kako bi se dobili bistri filtrati. 5 µL svakog od filtrata je razblaženo u 100 µL DMF i vorteksovano kako bi se dobili uzorci za HPLC. Duplikati standarda za kvantifikaciju za svaki testirani artikal pripremljeni su razblaživanjem odmerenih porcija čvrstih testiranih artikala u izmerene zapremine DMF. 2 µL svakog uzorka za HPLC i standarda za kvantifikaciju, analizirani su pomoću HPLC, koristeći metod ukratko prikazan u tabeli 5. Koncentracije rastvorenih testiranih artikala izračunate su kao površine pikova u odnosu na odgovarajuće standarde za kvantifikaciju. Rezultati za rastvorljivost su prikazani u tabeli 6.
Tabela 5: Pregled HPLC metode
Tabela 6: Izmerene rastvorljivosti
(nastavak)

Claims (25)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u lečenju kancera ili imunološke ili neurološke bolesti, naznačeno time, što je formula (I):
    u kojoj: L predstavlja CH2CH2; jedno X predstavlja S, a drugo X predstavlja CH=CH, gde bilo koji atom vodonika u CH jedinici može da bude zamenjen sa (C1-6)alkil; Y, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja H ili CH2O(CO)R7; R7, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja H ili supstituisani ili nesupstituisani (C1-6)alkil, (C1-6)alkoksi, amino(C1-6)alkil, (C1-6)alkilamino(C1-6)alkil, 3-10-člani heterociklil(C1-6)alkil, ili 3-10-člani heterociklil(C1-6)alkoksi; Z predstavlja R3(CO); R1i R2svaki nezavisno predstavlja H; R3, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja: (a) supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril(C1-6)alkil, (C3-8)cikloalkil, heterocikloalkil, ili 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil; ili (b) C(R8)(R9)(R10); R8predstavlja supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril, 5-7-člani aril(C1-6)alkil, 5-7-člani heteroaril, ili 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil; R9predstavlja H; i R10predstavlja hidroksil, hidroksi(C1-6)alkil, (C1-6)alkoksi, ili (C1-6)alkoksi(C1-6)alkil; gde je, tamo gde je naznačeno, (C1-C6)alkil, hidroksi(C1-C6)alkil, amino(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkilamino(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil, 5-7-člani aril, 5-7-člani aril(C1-C6)alkil, (C3-C8)cikloalkil, 3-10-člani heterociklil, 3-10-člani heterociklil(C1-C6)alkil, 3-10-člani heterociklil(C1-C6)alkoksi, 5-7-člani heteroaril, ili 5-7-člani heteroaril(C1-C6)alkil opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata odabranim od halogena, hidroksila, karboksila, (C1-C6)alkoksikarbonila, formila, acila, tioestra, tioacetata, tioformata, (C1-C6)alkoksila, fosforila, fosfata, fosfonata, fosfinata, amino, amido, amidina, imina, cijano, nitro, azido, sulfhidrila, (C1-C6)alkiltio, sulfata, sulfonata, sulfamoila, sulfonamido, sulfonila, 3-10-članog heterociklila, (C5-C7)aril(C1-C6)alkila, (C5-C7)arila, i 5-7-članog heteroarila.
  2. 2. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, naznačeno time, što Y predstavlja H.
  3. 3. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, naznačeno time, što svaka pojava R3nije identična.
  4. 4. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, naznačeno time, što R3, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril(C1-6)alkil, 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil, (C3-8)cikloalkil ili heterocikloalkil.
  5. 5. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, što Y predstavlja H, R3, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja 5-7-člani aril(C1-6)alkil, 5-7-člani heteroaril(C1- 6)alkil, (C3-8)cikloalkil ili heterocikloalkil.
  6. 6. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedan ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa i jedinjenje formule I,
    ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, naznačena time, što: L predstavlja CH2CH2; jedno X predstavlja S, a drugo X predstavlja CH=CH, gde bilo koji atom vodonika u CH jedinici može da bude zamenjen sa (C1-6)alkil; Y, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja H ili CH2O(CO)R7; R7, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja H ili supstituisani ili nesupstituisani (C1-6)alkil, (C1-6)alkoksi, amino(C1-6)alkil, (C1-6)alkilamino(C1-6)alkil, 3-10-člani heterociklil(C1-6)alkil, ili 3-10-člani heterociklil(C1-6)alkoksi; Z predstavlja R3(CO); R1i R2svaki nezavisno predstavlja H; R3, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja: (a) supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril(C1-6)alkil, (C3-8)cikloalkil, heterocikloalkil, ili 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil; ili (b) C(R8)(R9)(R10); R8predstavlja supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril, 5-7-člani aril(C1-6)alkil, 5-7-člani heteroaril, ili 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil; R9predstavlja H; i R10predstavlja hidroksil, hidroksi(C1-6)alkil, (C1-6)alkoksi, ili (C1-6)alkoksi(C1-6)alkil; gde je, tamo gde je naznačeno, (C1-C6)alkil, hidroksi(C1-C6)alkil, amino(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkilamino(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil, 5-7-člani aril, 5-7-člani aril(C1-C6)alkil, (C3-C8)cikloalkil, 3-10-člani heterociklil, 3-10-člani heterociklil(C1-C6)alkil, 3-10-člani heterociklil(C1-C6)alkoksi, 5-7-člani heteroaril, ili 5-7-člani heteroaril(C1-C6)alkil opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata odabranim od halogena, hidroksila, karboksila, (C1-C6)alkoksikarbonila, formila, acila, tioestra, tioacetata, tioformata, (C1-C6)alkoksila, fosforila, fosfata, fosfonata, fosfinata, amino, amido, amidina, imina, cijano, nitro, azido, sulfhidrila, (C1-C6)alkiltio, sulfata, sulfonata, sulfamoila, sulfonamido, sulfonila, 3-10-članog heterociklila, (C5-C7)aril(C1-C6)alkila, (C5-C7)arila, i 5-7-članog heteroarila.
  7. 7. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 6, naznačena time, što Y predstavlja H.
  8. 8. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 6 ili 7, naznačena time, što svaka pojava R3nije identična.
  9. 9. Farmaceutska kompozicija prema bilo kom od patentnih zahteva 6-8, naznačena time, što R3, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril(C1- 6)alkil, 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil, (C3-8)cikloalkil ili heterocikloalkil.
  10. 10. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 6, naznačena time, što Y predstavlja H, R3, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril(C1-6)alkil, 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil, (C3-8)cikloalkil ili heterocikloalkil.
  11. 11. Jedinjenje formule I,
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time, što: L predstavlja CH2CH2; jedno X predstavlja S, a drugo X predstavlja CH=CH, gde bilo koji atom vodonika u CH jedinici može da bude zamenjen sa (C1-6)alkil; Y, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja H ili CH2O(CO)R7; R7, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja H ili supstituisani ili nesupstituisani (C1-6)alkil, (C1-6)alkoksi, amino(C1-6)alkil, (C1-6)alkilamino(C1-6)alkil, 3-10-člani heterociklil(C1-6)alkil, ili 3-10-člani heterociklil(C1-6)alkoksi; Z predstavlja R3(CO); R1i R2svaki nezavisno predstavlja H; R3, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja: (a) supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril(C1-6)alkil, (C3-8)cikloalkil, heterocikloalkil, ili 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil; ili (b) C(R8)(R9)(R10); R8predstavlja supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril, 5-7-člani aril(C1-6)alkil, 5-7-člani heteroaril, ili 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil; R9predstavlja H; i R10predstavlja hidroksil, hidroksi(C1-6)alkil, (C1-6)alkoksi, ili (C1-6)alkoksi(C1-6)alkil; gde je, tamo gde je naznačeno, (C1-C6)alkil, hidroksi(C1-C6)alkil, amino(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkilamino(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil, 5-7-člani aril, 5-7-člani aril(C1-C6)alkil, (C3-C8)cikloalkil, 3-10-člani heterociklil, 3-10-člani heterociklil(C1-C6)alkil, 3-10-člani heterociklil(C1-C6)alkoksi, 5-7-člani heteroaril, ili 5-7-člani heteroaril(C1-C6)alkil opciono supstituisan jednim ili većim brojem supstituenata odabranim od halogena, hidroksila, karboksila, (C1-C6)alkoksikarbonila, formila, acila, tioestra, tioacetata, tioformata, (C1-C6)alkoksila, fosforila, fosfata, fosfonata, fosfinata, amino, amido, amidina, imina, cijano, nitro, azido, sulfhidrila, (C1-C6)alkiltio, sulfata, sulfonata, sulfamoila, sulfonamido, sulfonila, 3-10-članog heterociklila, (C5-C7)aril(C1-C6)alkila, (C5-C7)arila, i 5-7-članog heteroarila.
  12. 12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 11, naznačeno time, što Y predstavlja H.
  13. 13. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 11, naznačeno time, što svaka pojava R3nije identična.
  14. 14. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 11-13, naznačeno time, što R3, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril(C1-6)alkil, 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil, (C3-8)cikloalkil ili heterocikloalkil.
  15. 15. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 11, naznačeno time, što Y predstavlja H, R3, nezavisno pri svakom pojavljivanju, predstavlja supstituisani ili nesupstituisani 5-7-člani aril(C1-6)alkil, 5-7-člani heteroaril(C1-6)alkil, (C3-8)cikloalkil ili heterocikloalkil.
  16. 16. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 11, odabrano iz sledeće tabele:
  17. 17. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1-5, za upotrebu u lečenju kancera.
  18. 18. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 17, naznačeno time, što kancer predstavlja kancer renalnih ćelija.
  19. 19. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 17, naznačeno time, što je kancer trostruko negativni kancer dojke.
  20. 20. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 17, naznačeno time, što je kancer kolorektalni kancer.
  21. 21. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 17, naznačeno time, što je kancer akutna mijeloidna leukemija.
  22. 22. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 17, naznačeno time, što kancer predstavlja kancer dojke.
  23. 23. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 17, naznačeno time, što kancer predstavlja kancer pluća.
  24. 24. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 17, naznačeno time, što je kancer melanom.
  25. 25. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 17, naznačeno time, što kancer predstavlja kancer jajnika.
RS20191617A 2011-11-21 2012-11-19 Heterociklični inhibitori glutaminaze RS59705B1 (sr)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161562266P 2011-11-21 2011-11-21
US201261665370P 2012-06-28 2012-06-28
US201261727195P 2012-11-16 2012-11-16
PCT/US2012/065816 WO2013078123A1 (en) 2011-11-21 2012-11-19 Heterocyclic inhibitors of glutaminase
EP12850989.0A EP2782570B1 (en) 2011-11-21 2012-11-19 Heterocyclic inhibitors of glutaminase

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS59705B1 true RS59705B1 (sr) 2020-01-31

Family

ID=48470227

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20191617A RS59705B1 (sr) 2011-11-21 2012-11-19 Heterociklični inhibitori glutaminaze

Country Status (26)

Country Link
EP (2) EP2782570B1 (sr)
JP (3) JP6031527B2 (sr)
KR (2) KR102042290B1 (sr)
CN (2) CN108785305B (sr)
AR (1) AR090398A1 (sr)
AU (1) AU2012340866B2 (sr)
BR (1) BR112014012129A8 (sr)
CA (1) CA2856386C (sr)
CY (1) CY1122707T1 (sr)
DK (1) DK2782570T3 (sr)
EA (2) EA201692166A1 (sr)
ES (1) ES2761866T3 (sr)
HR (1) HRP20192144T1 (sr)
HU (1) HUE047642T2 (sr)
IL (2) IL232665A0 (sr)
LT (1) LT2782570T (sr)
MX (1) MX362550B (sr)
PL (1) PL2782570T3 (sr)
PT (1) PT2782570T (sr)
RS (1) RS59705B1 (sr)
SG (2) SG10201607685SA (sr)
SI (1) SI2782570T1 (sr)
SM (1) SMT201900738T1 (sr)
TW (1) TWI585084B (sr)
WO (1) WO2013078123A1 (sr)
ZA (2) ZA201404518B (sr)

Families Citing this family (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8604016B2 (en) 2011-11-21 2013-12-10 Calithera Biosciences Inc. Heterocyclic inhibitors of glutaminase
ES2690829T3 (es) 2012-09-17 2018-11-22 Agios Pharmaceuticals, Inc. Uso de e-cadherina y vimentina para la selección de pacientes que responden al tratamiento
PT2920168T (pt) * 2012-11-16 2021-10-18 Calithera Biosciences Inc Inibidores heterocíclicos de glutaminase
CA2892089A1 (en) 2012-11-21 2014-05-30 Rene M. Lemieux Glutaminase inhibitors and methods of use
WO2014079011A1 (en) * 2012-11-22 2014-05-30 Agios Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compounds for inhibiting glutaminase and their methods of use
US9029531B2 (en) 2012-11-22 2015-05-12 Agios Pharmaceuticals, Inc. Compounds and their methods of use
SG11201504184PA (en) * 2012-12-03 2015-06-29 Calithera Biosciences Inc Treatment of cancer with heterocyclic inhibitors of glutaminase
US9457016B2 (en) 2013-08-29 2016-10-04 New York University Methods for treating polycystic kidney disease
WO2015061432A1 (en) * 2013-10-25 2015-04-30 Calithera Biosciences, Inc. Treatment of viral infections with inhibitors of glutaminase
CA2934702A1 (en) 2014-01-06 2015-07-09 Rhizen Pharmaceuticals Sa Inhibitors of glutaminase
CN103880777B (zh) * 2014-03-06 2015-12-30 陕西科技大学 一种制备双噻二唑二胺的方法
WO2015138902A1 (en) * 2014-03-14 2015-09-17 Calithera Biosciences, Inc. Combination therapy with glutaminase inhibitors
KR20160127149A (ko) 2014-03-21 2016-11-02 아지오스 파마슈티컬스 아이엔씨. 화합물 및 이의 사용 방법
WO2015166373A1 (en) * 2014-04-30 2015-11-05 Pfizer Inc. Cycloalkyl-linked diheterocycle derivatives
GB201409624D0 (en) * 2014-05-30 2014-07-16 Astrazeneca Ab 1,3,4-thiadiazole compounds and their use in treating cancer
EA036001B1 (ru) * 2014-06-13 2020-09-11 Калитера Байосайенсиз, Инк. Комбинация эрлотиниба и ингибитора глутаминазы для лечения рака легких
CN107074805B (zh) 2014-07-03 2021-02-26 德州大学系统董事会 用于治疗疾病的gls1抑制剂
WO2016007647A1 (en) * 2014-07-09 2016-01-14 The Johns Hopkins University Glutaminase inhibitor discovery and nanoparticle-enhanced delivery for cancer therapy
CA2957225A1 (en) * 2014-08-07 2016-02-11 Calithera Biosciences, Inc. Crystal forms of glutaminase inhibitors
WO2016054388A1 (en) * 2014-10-03 2016-04-07 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Glutaminase inhibitors
EP3277276B1 (en) * 2015-03-30 2020-11-04 Calithera Biosciences, Inc. Methods of administering glutaminase inhibitors
SG11201708153XA (en) 2015-04-06 2017-11-29 Calithera Biosciences Inc Treatment of lung cancer with inhibitors of glutaminase
EP3316887B1 (en) * 2015-06-30 2020-04-08 Board of Regents, The University of Texas System Gls1 inhibitors for treating disease
JP6971239B2 (ja) * 2015-10-05 2021-11-24 キャリセラ バイオサイエンシーズ， インコーポレイテッド グルタミナーゼ阻害剤とイムノオンコロジー薬剤との併用療法
GB201520959D0 (en) 2015-11-27 2016-01-13 Astrazeneca Ab And Cancer Res Technology Ltd Bis-pyridazine compounds and their use in treating cancer
US10040789B2 (en) * 2015-11-30 2018-08-07 Astrazeneca Ab 1,3,4-thiadiazole compounds and their use in treating cancer
TW201730188A (zh) 2015-11-30 2017-09-01 阿斯特捷利康公司 1,3,4-噻二唑化合物及其在治療癌症中之用途
US10323028B2 (en) * 2015-11-30 2019-06-18 Astrazeneca Ab 1,3,4-thiadiazole compounds and their use in treating cancer
BR112018012660B1 (pt) 2015-12-22 2023-12-19 Board Of Regents, The University Of Texas System Sal, solvato, ou polimorfo de um composto; polimorfo de composto sólido; composição; e uso de um sal, solvato ou polimorfo
CN109982703A (zh) * 2016-08-25 2019-07-05 卡利泰拉生物科技公司 用谷氨酰胺酶抑制剂的组合疗法
US10278968B2 (en) * 2016-08-25 2019-05-07 Calithera Biosciences, Inc. Combination therapy with glutaminase inhibitors
WO2018145109A1 (en) 2017-02-06 2018-08-09 Massachusetts Institute Of Technology Methods and products related to glutaminase inhibitors
CN107137401A (zh) * 2017-03-28 2017-09-08 刘纪君 一种治疗产后抑郁症的药物组合物
CN106860460B (zh) * 2017-03-29 2019-04-23 上海市第一人民医院 谷氨酰胺酶抑制剂cb-839在制备治疗雌激素敏感型子宫内膜癌的药物中的应用
WO2018228435A1 (zh) * 2017-06-13 2018-12-20 南京明德新药研发股份有限公司 作为gls1抑制剂的化合物
US10722487B2 (en) 2017-10-18 2020-07-28 Board Of Regents, The University Of Texas System Glutaminase inhibitor therapy
CA3116440C (en) * 2018-10-16 2022-03-08 Medshine Discovery Inc. Thiadiazole derivative and uses thereof as a gls1 inhibitor
CN110746416A (zh) * 2019-09-05 2020-02-04 中国药科大学 含有三氮唑结构的谷氨酰胺酶gls1抑制剂或其可药用的盐、其制备方法及用途
KR102649592B1 (ko) * 2021-08-18 2024-03-20 한국화학연구원 신규한 마크로사이클 화합물, 이의 제조방법, 이를 유효성분으로 포함하는 암 또는 자가면역질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물
CN116023375A (zh) * 2021-10-25 2023-04-28 成都苑东生物制药股份有限公司 一种杂环类衍生物、其制备方法及用途
US12337274B2 (en) 2022-07-01 2025-06-24 Saudi Arabian Oil Company Methods for absorption and desorption of carbon dioxide

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4172896A (en) 1978-06-05 1979-10-30 Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd. Methane-sulfonamide derivatives, the preparation thereof and composition comprising the same
GB9217295D0 (en) 1992-08-14 1992-09-30 Wellcome Found Controlled released tablets
US5358970A (en) 1993-08-12 1994-10-25 Burroughs Wellcome Co. Pharmaceutical composition containing bupropion hydrochloride and a stabilizer
GB9315856D0 (en) 1993-07-30 1993-09-15 Wellcome Found Stabilized pharmaceutical
US5541231A (en) 1993-07-30 1996-07-30 Glaxo Wellcome Inc. Stabilized Pharmaceutical
ATE391492T1 (de) 1997-07-29 2008-04-15 Alcon Lab Inc Ophthalmische zusammensetzungen enthaltend galaktomannanpolymere und borat
US6310093B1 (en) 1997-08-29 2001-10-30 Elan Pharmaceuticals, Inc. Method of preventing neuronal death
EP1051167A1 (en) 1998-01-29 2000-11-15 Sepracor, Inc. Pharmaceutical uses of optically pure (-) -bupropion
US8889112B2 (en) 1999-09-16 2014-11-18 Ocularis Pharma, Llc Ophthalmic formulations including selective alpha 1 antagonists
US6451828B1 (en) * 2000-08-10 2002-09-17 Elan Pharmaceuticals, Inc. Selective inhibition of glutaminase by bis-thiadiazoles
US6933289B2 (en) 2003-07-01 2005-08-23 Allergan, Inc. Inhibition of irritating side effects associated with use of a topical ophthalmic medication
ES2593113T3 (es) 2003-08-07 2016-12-05 Allergan, Inc. Composiciones para el suministro de agentes terapéuticos en los ojos y métodos para obtener y usar los mismos
US20050059744A1 (en) 2003-09-12 2005-03-17 Allergan, Inc. Methods and compositions for the treatment of pain and other alpha 2 adrenergic-mediated conditions
ES2401557T3 (es) * 2007-08-02 2013-04-22 Amgen, Inc Moduladores de Pl3 cinasas y métodos de uso
PE20091823A1 (es) 2008-03-27 2009-12-10 Gruenenthal Chemie Ciclohexildiaminas sustituidas
US20130109643A1 (en) * 2010-05-10 2013-05-02 The Johns Hopkins University Metabolic inhibitor against tumors having an idh mutation
US10064885B2 (en) * 2010-07-09 2018-09-04 Massachusetts Institute Of Technology Metabolic gene, enzyme, and flux targets for cancer therapy

Also Published As

Publication number Publication date
KR102042290B1 (ko) 2019-11-07
PT2782570T (pt) 2019-12-17
EA026656B1 (ru) 2017-05-31
CA2856386C (en) 2022-05-31
CN108785305B (zh) 2021-10-29
EP2782570A1 (en) 2014-10-01
IL232665A0 (en) 2014-07-31
JP2018111729A (ja) 2018-07-19
EP3620162A1 (en) 2020-03-11
LT2782570T (lt) 2020-01-10
JP2016210810A (ja) 2016-12-15
AU2012340866A1 (en) 2014-06-26
PL2782570T3 (pl) 2020-04-30
TW201329071A (zh) 2013-07-16
IL259958A (en) 2018-07-31
ES2761866T3 (es) 2020-05-21
HRP20192144T1 (hr) 2020-02-21
AU2012340866B2 (en) 2017-03-16
TWI585084B (zh) 2017-06-01
EA201692166A1 (ru) 2017-07-31
AR090398A1 (es) 2014-11-12
EA201491012A1 (ru) 2014-12-30
BR112014012129A8 (pt) 2017-06-20
IL259958B (en) 2021-06-30
JP6031527B2 (ja) 2016-11-24
KR20150000866A (ko) 2015-01-05
SG10201607685SA (en) 2016-11-29
SI2782570T1 (sl) 2020-02-28
CN104220070A (zh) 2014-12-17
EP2782570A4 (en) 2015-05-27
JP2014533699A (ja) 2014-12-15
WO2013078123A1 (en) 2013-05-30
NZ625913A (en) 2015-12-24
JP6329226B2 (ja) 2018-05-23
MX2014005928A (es) 2014-08-27
MX362550B (es) 2019-01-24
BR112014012129A2 (pt) 2017-06-13
CY1122707T1 (el) 2021-03-12
CN104220070B (zh) 2020-01-21
ZA201404518B (en) 2017-04-26
HK1204768A1 (en) 2015-12-04
EP2782570B1 (en) 2019-09-18
JP6577623B2 (ja) 2019-09-18
CA2856386A1 (en) 2013-05-30
SG11201402305WA (en) 2014-06-27
ZA201601655B (en) 2017-06-28
HUE047642T2 (hu) 2020-05-28
DK2782570T3 (da) 2019-12-09
SMT201900738T1 (it) 2020-01-14
CN108785305A (zh) 2018-11-13
KR20190127971A (ko) 2019-11-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RS59705B1 (sr) Heterociklični inhibitori glutaminaze
US9938267B2 (en) Heterocyclic inhibitors of glutaminase
JP6285950B2 (ja) グルタミナーゼの複素環式阻害剤を用いるがんの処置
ES2899461T3 (es) Inhibidores heterocíclicos de glutaminasa
HK1217484A1 (zh) 取代的5-(3，5-二甲基异恶唑-4-基)二氢吲哚-2-酮类衍生物
HK40000283A (en) Heterocyclic inhibitors of glutaminase
HK1204768B (zh) 谷氨酰胺酶的杂环抑制剂
NZ625913B2 (en) Heterocyclic inhibitors of glutaminase