EA026134B1 - Трициклические ингибиторы pi3k и способы их применения - Google Patents

Трициклические ингибиторы pi3k и способы их применения Download PDF

Info

Publication number
EA026134B1
EA026134B1 EA201390879A EA201390879A EA026134B1 EA 026134 B1 EA026134 B1 EA 026134B1 EA 201390879 A EA201390879 A EA 201390879A EA 201390879 A EA201390879 A EA 201390879A EA 026134 B1 EA026134 B1 EA 026134B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
morpholino
oxazino
dihydro
purin
dimethyl
Prior art date
Application number
EA201390879A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201390879A1 (ru
Inventor
Дженафер Дотсон
Роберт Эндрю Хилд
Тимоти Хеффрон
Грэхэм Элджин Джонс
Сасси Лерш Кринтел
Невиль Джэймс Маклин
Чуди НДУБАКУ
Алан Г. Оливеро
Лоран Салфати
Лан Ванг
БинКинг Вей
Original Assignee
Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=45478511&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA026134(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг filed Critical Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг
Publication of EA201390879A1 publication Critical patent/EA201390879A1/ru
Publication of EA026134B1 publication Critical patent/EA026134B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D491/14—Ortho-condensed systems
    • C07D491/147—Ortho-condensed systems the condensed system containing one ring with oxygen as ring hetero atom and two rings with nitrogen as ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5383—1,4-Oxazines, e.g. morpholine ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5386—1,4-Oxazines, e.g. morpholine spiro-condensed or forming part of bridged ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D487/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D491/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D495/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D498/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D498/20—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/22—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed systems contains four or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)

Abstract

Описаны трициклические соединения ингибиторы PI3K формулы I с противораковой активностью, противовоспалительной активностью или иммунорегуляторными свойствами и, более конкретно, с модулирующей или ингибирующей PI3 киназу активностью. Описаны способы применения трициклических ингибиторов-соединений PI3K формулы I для in vitro, in situ и in vivo диагностики или лечения клеток млекопитающего, организмов или связанных патологических состоянийи соединения формулы I, включая их фармацевтически приемлемые соли. Прерывистая линия обозначает возможную двойную связь, и по меньшей мере одна прерывистая линия является двойной связью. Заместители являются такими, как приведено в описании.

Description

В основном настоящее изобретение относится к соединениям с противоопухолевой или противовоспалительной активностью и, более конкретно, к соединениям, которые ингибируют активность киназы ΡΙ3Κ. Настоящее изобретение также относится к способам применения соединений для ίη νίίτο, ίη δίίπ и ίη νίνο диагностики или лечения клеток млекопитающих или ассоциированных патологических состояний.
Уровень техники
Фосфатидилинозитол является одним из фосфолипидов, содержащихся в клеточных мембранах, которые играют важную роль во внутриклеточной сигнальной трансдукции. Клеточный сигналинг через 3'-фосфорилированные фосфоинозитиды вовлечен в различные клеточные процессы, например злокачественную трансформацию, сигналинг факторов роста, воспаление и иммунитет (Катей е! а1., (1999), 1. ΒίοΙ. СЬет., 274:8347-8350). Фермент, отвечающий за генерацию этих фосфорилированных сигналинговых продуктов, фосфатидилинозитол-3-киназа (также называемая Р13-киназы или ΡΙ3Κ), первоначально был идентифицирован по активности, связанной с вирусными онкобелками и тирозинкиназами рецептора фактора роста, которая фосфорилирует фосфатидилинозитол (ΡΙ) и его фосфорилированные производные по 3'-гидроксилу на инозитольном кольце (РапауоЮи е! а1. (1992), ТгепБ5 Се11 ΒίοΙ. 2:358-60).
Фосфоинозитид-3-киназы (ΡΙ3Κ) являются липидкиназами, которые фосфорилируют липиды по
3-гидроксильному остатку инозитолового кольца (АУЬЬтап е! а1. (1988), ЫаШге, 332:664).
3-Фосфорилированные фосфолипиды (ΡΙΡ35), генерированные Р13-киназами действуют как вторичные мессенджеры, запуская киназы с липидсвязывающими доменами (в том числе домены гомологичные плекстрину (РН)), такие как Лк! и фосфоинозитид-зависимую киназу-1 (ΡΌΚ1). Связывание Лк! с мембранными ΡΙΡ35 вызывает перемещение Лк1 на плазматическую мембрану, приводя Лк1 в контакт с ΡΌΚ1, которая отвечает за активацию Лк1. Фосфатаза супрессор опухоли ΡΤΕΝ дефосфорилирует ΡΙΡ3 и, следовательно, действует как негативный регулятор активации Лк1. ΡI3-киназы Лк! и ΡΌΚ1 играют важную роль в регуляции многих клеточных процессов, включая регуляции клеточного цикла, пролиферацию, выживаемость, апоптоз и подвижность и являются важными компонентами молекулярных механизмов таких заболеваний, как рак, диабет и иммунное воспаление (νίνηηοο е! а1. (2002), №-11иге Кеу. Сапсег 2:489; ΡΗίΙΙίρβ е! а1. (1998), Сапсег, 83:41).
Основной изоформой ΡI3-киназы при раке является ΡΗ-киназа класса Ι, р110а (υδ 5824492; И8 5846824; υδ 6274327). Другие изоформы вовлечены в сердечно-сосудистые и иммуновоспалительные заболевания (№ο^ктаη Ρ. (2004), ВюсЬет. δοс Тгапз 32:393-396; Ρа!е1 е! а1. (2004), Ρ^οсееБ^ηд5 ο£ Не Атепсап ΑβδοαπΟοη ο£ Сапсег КезеагсЬ (АЬ51гас1 ЬВ-247) 95'1' Аппиа1 Меейпд, МагсЬ 27-31, ОКап^, Ρίοτίάπ. υδΑ; АЬтаФ Κ. апБ №а1егПе1Б Μ.Ό. (2004), ЕпсускреФа ο£ Вюкдка1 СЬепкИу (Ьеппаг/ №.!, Ьапе Μ.Ό. еБ5) ЕЬеутег/АсаБепис ΡΐΌ55). Путь ΡΙ3 киназа/Ак/ΡΤΕΝ является привлекательной мишенью для создания противораковых препаратов, поскольку от таких модуляторов или ингибирующих агентов можно было бы ожидать ингибирования пролиферации, возвращения репрессии апоптоза и подавления сопротивления к цитостатикам в раковых клетках (Γο11^5 е! а1. (2008), 1. МеБ. СЬет. 51:5522-5532; УадисЫ е! а1. (2006), кит, ο£ !Ье №и. Сапсег 1п5!. 98(8):545-55).
Злокачественные глиомы являются наиболее распространенными первичными опухолями головного мозга у взрослых. При глиобластоме (ОВМ), наиболее агрессивном подтипе глиомы, образование и рост опухоли, по-видимому, обусловлены амплификацией или сверхэкспрессией продуктов генов, участвующих в сигнальной трансдукции, инициируемой факторами роста, действующих совместно с генетическими изменениями, нарушающими контроль клеточного цикла (Ηο1Π^ Е.С. (2001), №1. Кеу. Оепе!. 2:120-129). Среди геномных изменений, описанных при ОВМ, мутации и/или делеции гена ΡΤΕΝ являются наиболее распространенными с частотой встречаемости 70-90% (Νηίί С., Εοιιί5 Ό.Ν. (2005), Сапсег ο£ !Ье №γ\όιι5 δу5!ет (МсОга^-НШ, №ν Υογ1<)„ 2пБ ЕБ, р. 837-847). Эти данные, наряду с прогностическим значением ΡΤΕΝ статуса для случаев ОВМ (ΡЬ^Шρ5 Η.δ., е! а1. (2006), Сапсег Се11, 9:157-163), предполагают важность сигнального пути фосфоинозитид-3-киназа (ΡΙ3Κ)/Α1<1 в активации очень агрессивных глиальных злокачественных новообразований, а также возможность для лечения ингибиторами ΡΙ3Κ, которые могут проникать через гематоэнцефалический барьер.
Злокачественные глиомы лечат комбинацией хирургии, радиации и темозоломида (ΤΕΜО^ΑК™), но эти способы в конечном итоге неэффективны из-за рецидива опухоли. Дополнительные способы лечения необходимы для доставки эффективной концентрации эффективных препаратов в мозг для лечения гиперпролиферативных заболеваний, таких как глиобластома и метастатический рак мозга.
- 1 026134
Краткое изложение сущности изобретения
Изобретение относится к трициклическим соединениям-ингибиторам ΡΙ3Κ формулы I с противоопухолевой активностью, противовоспалительной активностью или иммунорегуляторными свойствами, а более конкретно, с активностью, модулирующей или ингибирующей ΡΙ3 киназу. Некоторые гиперпролиферативные нарушения характеризуются модуляцией функции ΡΙ3 киназы, например мутацией или сверхэкспрессией белков. Соответственно, соединения по изобретению могут быть полезны при лечении гиперпролиферативных заболеваний, таких как рак. Соединения могут ингибировать рост опухоли у млекопитающих и могут быть полезны для лечения больных раком людей.
Изобретение также относится к способам применения трициклических соединений-ингибиторов ΡΙ3Κ формулы I для ίη νίίτο, ίη зйи и ίη νίνο диагностики или лечения клеток, организма млекопитающего или ассоциированных патологических состояний.
Соединения формулы I включают
и их фармацевтически приемлемые соли.
Прерывистая линия обозначает возможную двойную связь, и по меньшей мере одна прерывистая линия является двойной связью. Заместители являются такими, как здесь описано.
В другом аспекте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая трициклические соединения-ингибиторы ΡΙ3Κ формулы I и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтическая композиция также может содержать один или более дополнительных терапевтических агентов.
В другом аспекте настоящего изобретения предложены способы ингибирования активности ΡΙ3 киназы, включающие приведение в контакт ΡΙ3 киназы с эффективным ингибиторным количеством соединения формулы Ι.
В другом аспекте настоящего изобретения предложены способы профилактики или лечения гиперпролиферативных заболеваний или нарушений, модулируемых ΡΙ3 киназами, включающие введение нуждающемуся в таком лечении млекопитающему эффективного количества соединения формулы Ι. Примеры таких гиперпролиферативных заболеваний или нарушений включают, без ограничения, опухоли.
В другом аспекте настоящего изобретения предложены способы профилактики или лечения гиперпролиферативного заболевания, включающие введение нуждающемуся в таком лечении млекопитающему эффективного количества соединения формулы Ι, самостоятельно или в комбинации с одним или более дополнительным соединением, обладающим антигиперпролиферативными свойствами.
В еще одном аспекте в настоящем изобретении предложен способ применения соединения по настоящему изобретению для лечения гиперпролиферативного заболевания или состояния, модулируемых ΡΙ3 киназой, у млекопитающего.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является применение соединения по настоящему изобретению для лечения опухоли (злокачественного новообразования), модулируемой ΡΙ3 киназой, у млекопитающего.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является соединение по настоящему изобретению для применения в качестве терапевтически активного вещества.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является применение соединения по настоящему изобретению для лечения опухоли, модулируемой ΡΙ3 киназой, у млекопитающего.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является применение соединения по настоящему изобретению для приготовления лекарственного средства для лечения опухоли, модулируемой ΡΙ3 киназой, у млекопитающего.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является соединение по настоящему изобретению для применения при лечении опухоли, модулируемой ΡΙ3 киназой, у млекопитающего.
Другой аспект настоящего изобретения включает наборы, содержащие соединение формулы Ι, контейнер и, возможно, вкладыш или этикетку, указывающую лечение.
Другой аспект настоящего изобретения включает способы получения, способы разделения и способы очистки соединений формулы Ι.
Другой аспект настоящего изобретения включает новые промежуточные соединения, применяемые для получения соединений формулы Ι.
- 2 026134
Подробное описание изобретения
Далее будет сделана подробная отсылка на определенные воплощения изобретения, примеры которого проиллюстрированы на прилагаемых структурах и формулах. В то время как изобретение будет описано с использованием перечисленных воплощений, необходимо понимать, что они не предназначены для ограничения изобретения этими воплощениями. Напротив, изобретение охватывает все альтернативы, модификации и эквиваленты, которые могут быть включены в объем настоящего изобретения, как определено формулой изобретения. Специалисту в данной области техники будут очевидны многочисленные способы и материалы, подобные или эквивалентные описанным здесь, которые могут быть использованы при осуществлении настоящего изобретения. Настоящее изобретение никоим образом не ограничивается описанными способами и материалами. В случае, если один или более документов из включенной литературы, патентов и аналогичных материалов отличается от или противоречит настоящему изобретению, включая, но не ограничиваясь, определенные термины, использование терминов, описанные способы или т.п., настоящее изобретение является главным.
Определения
Термин алкил, используемый здесь, относится к насыщенному линейному или с разветвленной цепью одновалентному углеводородному радикалу из 1-12 атомов углерода (С1-С12), где алкильный радикал может быть возможно замещен независимо одним или более заместителями, описанными ниже. В другом воплощении алкильный радикал состоит из 1-8 атомов углерода (С1-С8), или 1-6 атомов углерода (С1-С6).
Примеры алкильных групп включают, без ограничения, метил (Ме, -СН3), этил (Εΐ, -СН2СН3), 1-пропил (η-Рг, н-пропил, -СН2СН2СН3), 2-пропил (ΐ-Рг, изопропил, -СН(СН3)2),
1- бутил (η-Ви, н-бутил, -СН2СН2СН2СН3), 2-метил-1-пропил (ί-Ви, изобутил, -СН2СН(СН3)2), 2-бутил (δ-Ви, втор-бутил, -СН(СН3)СН2СН3), 2-метил-2-пропил (ΐ-Ви, трет-бутил, -С(СН3)3), 1-пентил (н-пентил, -СН2СН2СН2СН2СН3), 2-пентил (-СН(СН3)СН2СН2СН3), 3-пентил (-СН(СН2СН3)2),
2- метил-2-бутил (-С(СН3)2СН2СН3), 3-метил-2-бутил (-СН(СН3)СН(СН3)2), 3-метил-1-бутил (-СН2СН2СН(СН3)2), 2-метил-1-бутил (-СН2СН(СН3)СН2СН3), 1-гексил (-СН2СН2СН2СН2СН2СН3), 2-гексил (-СН(СН3)СН2СН2СН2СН3), 3-гексил (-СН(СН2СН3)(СН2СН2СН3)), 2-метил-2-пентил (-С(СН3)2СН2СН2СН3), 3-метил-2-пентил (-СН(СН3)СН(СН3)СН2СН3), 4-метил-2-пентил (-СН(СН3)СН2СН(СН3)2), 3-метил-3-пентил (-С(СН3)(СН2СН3)2), 2-метил-3-пентил (-СН(СН2СН3)СН(СН3)2), 2,3-диметил-2-бутил (-С(СН3)2СН(СН3)2), 3,3-диметил-2-бутил (-СН(СН3)С(СН3)3, 1-гептил, 1-окстил и т.п.
Термин алкилен, используемый здесь, относится к насыщенному линейному или с разветвленной цепью двухвалентному углеводородному радикалу из 1-12 атомов углерода (С1-С12), где алкиленовый радикал может быть возможно замещен независимо одним или более заместителями, описанными далее. В другом воплощении алкиленовый радикал состоит из 1-8 атомов углерода (С1-С8) или 1-6 атомов углерода (С1-С6). Примеры алкиленовых групп включают, без ограничения, метилен (-СН2-), этилен (СН2СН2-), пропилен (-СН2СН2СН2-) и т.п.
Термин алкенил относится к линейному или с разветвленной цепью одновалентному углеводородному радикалу из 2-8 атомов углерода (С2-С8) по меньшей мере с одним ненасыщенным участком, т.е. углерод-углерод, δρ2 двойной связью, где алкениловый радикал может быть возможно замещен независимо одним или более заместителями, описанными здесь, и включает радикалы, имеющие цис и транс ориентации или, альтернативно, Е и Ζ ориентации. Примеры включают, без ограничения, этиленил или винил (-СН=СН2), аллил (-СН2СН=СН2) и т.п.
Термин алкенилен относится к линейному или с разветвленной цепью двухвалентному углеводородному радикалу из 2-8 атомов углерода (С2-С8) по меньшей мере с одним ненасыщенным участком, т.е. углерод-углерод, δρ2 двойной связью, где алкениловый радикал может быть возможно замещен, и включает радикалы, имеющие цис и транс ориентации или, альтернативно, Е и Ζ ориентации. Примеры включают, без ограничения, этиленилен или винилен (-СН=СН-), аллил (-СН2СН=СН-) и т.п.
Термин алкинил относится к линейному или с разветвленной цепью одновалентному углеводородному радикалу из 2-8 атомов углерода (С2-С8) по меньшей мере с одним ненасыщенным участком, т.е. углерод-углерод, δρ тройной связью, где алкиниловый радикал может быть возможно замещен независимо одним или более заместителями, описанными здесь. Примеры включают, без ограничения, этинил (-С'.=СН). пропинил (пропаргил, -СН2С'.=СН) и т.п.
Термин алкинилен относится к линейному или с разветвленной цепью двухвалентному углеводородному радикалу из 2-8 атомов углерода (С2-С8) по меньшей мере с одним ненасыщенным участком, т.е. углерод-углерод, δρ тройной связью, где алкиниловый радикал может быть возможно замещен независимо одним или более заместителями, описанными здесь. Примеры включают, без ограничения, этинилен (-С=С-), пропинилен (пропаргилен, -СН2С^С-) и т.п.
Термины карбоцикл, карбоциклил, карбоциклическое кольцо и циклоалкил относятся к одновалентному неароматическому, насыщенному или частично ненасыщенному кольцу, имеющему от 3 до 12 атомов углерода (С3-С12) в случае моноциклического кольца или от 7 до 12 атомов углерода в слу- 3 026134 чае бициклического кольца. Бициклические карбоциклы, содержащие от 7 до 12 атомов, могут быть образованы, например, в виде бицикло [4,5], [5,5], [5,6] или [6,6] систем, и бициклические карбоциклы, имеющие 9 или 10 атомов в кольце, могут быть образованы как бицикло [5,6] или [6,6] системы или как мостиковые системы, такие как бицикло[2.2.1]гептан, бицикло[2.2.2]октан и бицикло[3.2.2]нонан. Примеры моноциклических карбоциклов включают, без ограничения, циклопропил, циклобутил, циклопентил, 1-циклопент-1-енил, 1-циклопент-2-енил, 1-циклопент-3-енил, циклогексил, 1-циклогексен-1-енил,
1- циклогекс-2-енил, 1-циклогекс-3-енил, циклогексадиенил, циклогептил, циклооктил, циклононил, циклодецил, циклоундецил, циклододецил и т.п.
Арил означает ароматический одновалентный углеводородный радикал из 6-20 атомов углерода, (С6-С20), полученный удалением одного атома водорода от одного кольцевого атома углерода ароматической системы родительского соединения. Некоторые арильные группы представлены в структурах соединений как Аг. Арил включает бициклические радикалы, содержащие ароматическое кольцо, конденсированное с насыщенным, частично ненасыщенным кольцом или ароматическим карбоциклическим кольцом. Типичные арильные группы включают, без ограничения, радикалы, полученные из бензола (фенил), замещенных бензолов, нафталина, антрацена, бифенила, инденила, инданила, 1,2-дигидронафталина, 1,2,3,4-тетрагидронафтила и т.п. Арильные группы могут быть возможно независимо замещены одним или более заместителями, описанными здесь.
Арилен означает двухвалентный ароматический углеводородный радикал из 6-20 атомов углерода (С6-С20), полученный удалением двух атомов водорода от двух кольцевых атомов углерода ароматической системы родительского соединения. Некоторые ариленовые группы представлены в структурах соединений как Аг. Арилен включает бициклические радикалы, содержащие ароматическое кольцо, конденсированное с насыщенным, частично ненасыщенным кольцом или ароматическим карбоциклическим кольцом. Типичные ариленовые группы включают, без ограничения, радикалы, полученные из бензола (фенилен), замещенных бензолов, нафталина, антрацена, бифенилена, инденилена, инданилена, 1,2-дигидронафталина, 1,2,3,4-тетрагидронафтила и т.п. Ариленовые группы возможно независимо замещены одним или более заместителями, описанными здесь.
Термины гетероцикл, гетероциклил и гетероциклическое кольцо используются здесь взаимозаменяемо и относятся к насыщенному или частично ненасыщенному (т.е. имеющему одну или несколько двойных и/или тройных связей в кольце) карбоциклическому радикалу, содержащему от 3 до примерно 20 кольцевых атомов, в котором по меньшей мере один кольцевой атом представляет собой гетероатом, выбранный из азота, кислорода, фосфора и серы, а остальные кольцевые атомы представляют собой С, где один или несколько кольцевых атомов возможно замещен независимо одним или более заместителями, описанными ниже. Гетероцикл может быть моноциклом, содержащим от 3 до 7 кольцевых атомов (от 2 до 6 атомов углерода и от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из Ν, О, Р и 8), или бициклом, содержащим от 7 до 10 кольцевых атомов (от 4 до 9 атомов углерода и от 1 до 6 гетероатомов, выбранных из Ν, О, Р и 8), например бицикло [4,5], [5,5], [5,6] или [6,6] система. Гетероциклы описаны у Расщепе. Ьео А.; Ргшщркк οί Мобеги Не1егосусйс СНетМгу (\ν.Λ. Вефатт, Νον Уогк, 1968), в частности, главы 1, 3, 4, 6, 7 и 9; Тйе Сйет1к1гу οί Не1егосусйс Сотроиибк, А кепек οί Моподгарйк (1ойи νίΕν & 8оик, №ν Уогк, 1950 по настоящее время), в частности, главы 13, 14, 16, 19 и 28, а также в ί. Ат. Сйет. (1960), 82:5566. Гетероциклил также включает радикалы, где гетероциклические радикалы конденсированы с насыщенным, частично ненасыщенным кольцом или ароматическим карбоциклическим или гетероциклическим кольцом. Примеры гетероциклических колец включают в себя, без ограничения, морфолин-4-ил, пиперидин-1-ил, пиперазинил, пиперазин-4-ил-2-он, пиперазин-4-ил-3-он, пирролидин-1-ил, тиоморфолин-4-ил, 8-диоксотиоморфолин-4-ил, азокан-1-ил, азетидин-1-ил, октагидропиридо[1,2-а]пиразин-2-ил, [1,4]диазепан-1-ил, пирролидинил, тетрагидрофуранил, дигидрофуранил, тетрагидротиенил, тетрагидропиранил, дигидропиранил, тетрагидротиопиранил, пиперидино, морфолино, тиоморфолино, тиоксанил, пиперазинил, гомопиперазинил, азетидинил, оксетанил, тиетанил, гомопиперидинил, оксепанил, тиепанил, оксазепинил, диазепинил, тиазепинил, 2-пирролинил, 3-пирролинил, индолинил, 2Н-пиранил, 4Нпиранил, диоксанил, 1,3-диоксоланил, пиразолинил, дитианил, дитиоланил, дигидропиранил, дигидротиенил, дигидрофуранил, пиразолидинил, имидазолинил, имидазолидинил,
3- азабицикло[3.1.0]гексанил, 3-азабицикло[4.1.0]гептанил, азабицикло[2.2.2]гексанил, 3Н-индолилхинолизинил и Ν-пиридилмочевина. Спиро фрагменты также входят в объем этого определения. Примеры гетероциклических групп, в которых два кольцевых атома замещены оксо (= О), остатками являются пиримидинонил и 1,1-диоксотиоморфолинил. Гетероциклические группы в данном описании возможно замещены независимо одним или более заместителями, описанными здесь.
Термин гетероарил относится к одновалентному ароматическому радикалу 5-, 6- или 7-членных колец и включает конденсированные кольцевые системы (по меньшей мере одно из которых является ароматическим) из 5-20 атомов, содержащие один или более гетероатомов, независимо выбранных из азота, кислорода и серы. Примерами гетероарильных групп являются пиридинил (включая, например,
2- гидроксипиридинил), имидазолил, имидазопиридинил, пиримидинил (включая, например,
4- гидроксипиримидинил), пиразолил, триазолил, пиразинил, тетразолил, фурил, тиенил, изоксазолил, тиазолил, оксадиазолил, оксазолил, изотиазолил, пирролил, хинолинил, изохинолинил, тетрагидроизохи- 4 026134 нолинил, индолил, бензимидазолил, бензофуранил, циннолинил, индазолил, индолизинил, фталазинил, пиридазинил, триазинил, изоиндолил, птеридинил, пуринил, оксадиазолил, триазолил, тиадиазолил, тиадиазолил, фуразанил, бензофуразанил, бензотиофенил, бензотиазолил, бензоксазолил, хиназолинил, хиноксалинил, нафтиридинил и фуропиридинил. Гетероарильные группы возможно независимо замещены одним или более заместителями, описанными здесь.
Гетероциклическая или гетероарильная группа может быть присоединена по углероду (углеродсвязанный) или по азоту (азот-связанный), где такое возможно. В качестве примера, без ограничения, гетероциклы или гетероарилы, присоединенные по углероду, могут быть присоединены в положении 2, 3, 4, 5 или 6 пиридина, в положении 3, 4, 5 или 6 пиридазина, в положении 2, 4, 5 или 6 пиримидина, в положении 2, 3, 5 или 6 пиразина, в положении 2, 3, 4 или 5 фурана, тетрагидрофурана, тиофурана, тиофена, пиррола или тетрагидропиррола, в положении 2, 4 или 5 оксазола, имидазола или тиазола, в положении 3, 4 или 5 изоксазола, пиразола или изотиазола, в положении 2 или 3 азиридина, в положении 2, 3 или 4 азетидина, в положении 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 хинолина или в положении 1, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 изохинолина.
В качестве примера, а не ограничения, азотсвязанные гетероциклы или гетероарилы присоединены в положении 1 азиридина, азетидина, пиррола, пирролидина, 2-пирролин-3-пирролина, имидазола, имидазолидина, 2-имидазолина, 3-имидазолина, пиразола, пиразолина, 2-пиразолина, 3-пиразолина, пиперидина, пиперазина, индола, индолина, 1Н-индазола, в положении 2 изоиндола или изоиндолина, в положении 4 морфолина и в положении 9 карбазола или β-карболина.
Термины лечить и лечение относятся как к терапевтическому лечению, так и к профилактическим или превентивным мерам, для которых целью является предотвратить или замедлить (уменьшить) нежелательные физиологические изменения или нарушения, такие как развитие или распространение рака. Для целей настоящего изобретения благоприятные или желаемые клинические результаты включают, без ограничения, облегчение симптомов, уменьшение степени болезни, стабилизированное (т.е. без ухудшения) состояния болезни, задержку или замедление прогрессирования заболевания, улучшение или временное облегчение состояния болезни, и ремиссию (частичную или полную), как детектируемые, так и скрытые. Лечение может также означать продление выживаемости по сравнению с ожидаемым выживанием при неполучении лечения. Те, кто нуждается в лечении, включают тех, которые уже с состоянием или расстройством, а также склонны иметь состояние или расстройство, и тех, у которых состояние или расстройство должно быть предотвращено.
Фраза терапевтически эффективное количество означает количество соединения по настоящему изобретению, которое (ί) лечит или предотвращает конкретное заболевание, состояние или расстройство, (ίί) ослабляет, улучшает или устраняет один или более симптомов конкретного заболевания, состояния или расстройства или (ίίί) предотвращает или задерживает начало одного или более симптомов конкретного заболевания, состояния или расстройства, описанного здесь. В случае рака терапевтически эффективное количество лекарственного средства может уменьшать число раковых клеток; уменьшать размер опухоли; ингибировать (т.е. замедлять до некоторой степени и предпочтительно останавливать) инфильтрацию раковых клеток в периферические органы; ингибировать (т.е. замедлять до некоторой степени и, предпочтительно, останавливать) метастазирование опухоли; подавлять, в некоторой степени, рост опухоли, и/или облегчать до некоторой степени один или более симптомов, ассоциированных с раком. В тех случаях, когда, лекарственное средство может предотвращать рост и/или убивать существующие раковые клетки, это действие может быть цитостатическим и/или цитотоксическим. Для противораковой терапии, эффективность может быть оценена, например, путем оценки времени до прогрессирования заболевания (ТТР) и/или определения степени ответа (КК).
Термин рак относится или описывает физиологическое состояние у млекопитающих, которое обычно характеризуется неконтролируемым ростом клеток. Опухоль включает одну или несколько раковых клеток. Примеры рака включают, без ограничения, карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкоз или лимфоидные злокачественные опухоли. Более конкретные примеры таких опухолей включают плоскоклеточный рак (например, эпителиальный плоскоклеточный рак), рак легких, включая мелкоклеточный рак легких, немелкоклеточный рак легкого (ΝδΟΤΟ), аденокарциному легких и плоскоклеточный рак легких, рак брюшной полости, гепатоцеллюлярный рак, рак желудка, включая рак желудочно-кишечного тракта, рак поджелудочной железы, глиобластомы, рак шейки матки, рак яичников, рак печени, рак мочевого пузыря, гепатомы, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак прямой кишки, рак ободочной и прямой кишки, рак эндометрия или матки, карциному слюнной железы, рак почек, рак, рак простаты, рак вульвы, рак щитовидной железы, карциному печени, анальные карциномы, рак полового члена, а также рак головы и шеи.
Химиотерапевтический агент представляет собой химическое соединение, используемое для лечения рака, независимо от механизма действия. Классы химиотерапевтических агентов включают, без ограничения, алкилирующие агенты, антиметаболиты, веретенный яд, растительные алкалоиды, цитотоксические/противоопухолевые антибиотики, ингибиторы топоизомераз, антитела, фотосенсибилизаторы и ингибиторы киназ. Химиотерапевтические агенты включают соединения, используемые в целевой терапии и традиционной химиотерапии. Примеры химиотерапевтических агентов включают эрлотиниб
- 5 026134 (ТАКСЕУА®, Сспсп1ссН/О81 РЬагт.), доцетаксел (Таксотер®, 8апой-АуепЙ8), 5-РИ (фторурацил,
5- фторурацил, СА8 Νο. 51-21-8), гемцитабин (ΟΕΜΖΛΚ®, ЬШу), ΡΌ-0325901 (СА8 Νο. 391210-10-9,
РП/ег), цисплатин (цис-диамин, дихлорплатина (II), СА8 Νο. 15663-27-1), карбоплатин (СА8 Νο. 4157594-4), паклитаксел (таксол®, Вг181о1-Муег8 8ци1ЬЬ Опсо1оду, Ртшсе1оп, Ν.Τ), пеметрексед (АЫМТА®, Ей ЬШу), трастузумаб (Герцептин®, ОепеШесЬ), темозоломид (4-метил-5-оксо-2,3,4,6,8пентазабицикло[4.3.0]нона-2,7,9-триен-9-карбоновая кислота, СА8 №. 85622-93-1, ТЕМОДАР®,
ТЕМОДАЛ®, 8сЬеппд Р1оидЬ), тамоксифен (^)-2-[4-(1,2-дифенилбутил-1-енил)фенокси]-Ы,№ диметилэтанамин, КО^АВЕХ®, 18ТиВАЬ®, УАйОПЕХ®) и доксорубицин (Λ^КIΛΜΥСIN®), Акй-1/2, НРРЭ и рапамицин.
Дополнительные примеры химиотерапевтических агентов включают оксалиплатин (Элоксатин®, 8апой), бортезомибом (УЕЕСАПЕ®, МШеппшт РЬатт), сутент (Сунитиниб®, 8И11248, Рй/ег), летрозол (РЕМАКА®, №уагЙ5), иматиниба мезилат (О1ееуес®, №уагЙ5), ХЬ-518 (МЕК ингибитор, ЕхеЬх18, \УО 2007/044515), АККУ-886 (МЕК ингибитор ΛΖ^6244. Аггау ВюРЬатта, АкЛа Ζепеса), 8Р-1126 (ингибитор Р13К, 8ета&ге РЬагтасеийсаН), ВΕΖ-235 (ингибитор Р13К, №уатЙ8), ХЬ-147 (ингибитор Р13К, ЕхеИхЛ), РТК787УК 222584 (№уатЙ8), фулвестрант (Ра§1оДех®, Λ5ι^аΖепеса). лейковорин (фолиевая кислоты), рапамицин (сиролимус, Каратипе®, \Ууе1Ь), лапатиниб (ТукетЬ®, О8К572016, О1ахо 8тИЬ К1ше), лонафарниб ^АКАБАВ™, 8СН 66336, 8сЬеппд Р1оидЬ), сорафениб (Нексавар®, ВАУ43-9006, Вауег ЬаЬк), гефитиниб (1КЕ88А®, Λ5ι^аΖепеса). иринотекан (САМРТО8АК®, СРТ-11, Рй/ег), типифарниб (ΖΛКNΕ8ТКА™, ШЬпкоп & 1оЬп8оп), АВКАХАХЕ™ (свободный от кремофора), альбумининженерные композиции наночастиц паклитаксела (Атепсап РЬаттасеийса1 Райпетк, 8сЬаитЬегд, II), вандетаниб (τΓΝΝ, ΖΌ6474, ΖΛСТIΜΛ®, АйпУепеса), хлорамбуцил, АО1478, АО1571 (8И 5271; 8идеп), темсиролимус (Топ5е1®, ^уе!Ь), пазопаниб (О1ахо8тИЬК1ше), канфосфамид (ТЕЬСУГА®, ТеЬк), тиотепа и циклофосфамид (СУТОХАИ®, NΕО8ΛК®); алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбоквон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метиламеламины, включая алтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид и триметилмеламин; ацетогенины (в частности буллатацин и буллатацинон); камптотецин (включая синтетический аналог топотекан); бриостатин; каллистатин, СС-1065 (включая его синтетические аналоги адозелесин, карзелесин и бизелесин), криптофицины (в частности, криптофицин 1 и криптофицин 8); доластатин; дуокармицин (включая синтетические аналоги, К\У-2189 и СВ1-ТМ1), элеутеробин; панратистатин; саркодиктиин; спонгистатин, азотистые иприты, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, хлорфосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлоретамин, гидрохлорид оксида мехлоретамина, мелфалан, новембехин, фенестерин, преднимустин, трофосфамид, урамустин, нитрозомочевины, такие как кармустин, хлорозотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин и ранимнустин; антибиотики, такие как энедииновые антибиотики (например, калихеамицин, калихеамицин гамма-Н, калихеамицин омега-П (Апдете СЬет. ШП. ЕД. Епд1. (1994) 33:183-186); динемицин, динемицин А, бисфосфонаты, такие как клодронат; эсперамицином, а также хромофор неокарциностатина и родственные хромобелковые энедииновые антибиотик хромофоры), аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин, блеомицины, кактиномицин, карабицин, карминомицин, карцинофилин, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин,
6- диазо-5-оксо-Ь-норлейцин, морфолинодоксорубицин, цианоморфолинодоксорубицин,
2-пирролинодоксорубицин-доксорубицин и деоксидоксорубицин), эпирубицин, эзорубицин, идарубицин, неморубицин, марцелломицин, митомицины, такие как митомицин С, микофеноловая кислота, ногаламицин, оливомицины, пепломицин, порфиромицин, пуромицин, квеламицин, родорубицин, стрептонирин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, циностатин, зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат и 5-фторурацил (5-ФУ), аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин, триметрексат; пуриновые аналоги, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, тиогуанин; аналоги пиримидина, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидеоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин; андрогены, такие как калустерон, пропионат дромостанолона, эпитиостанол, мепитиостан, тестолактон; анти-адренергические агенты, такие как аминоглютетимид, митотан, трилостан; компенсаторы фолиевой кислоты, такие как фролиновая кислота; ацеглатон; альдофосфамидные гликозиды; аминолевулиновая кислота; энилурацил; амсакрин; бестрабуцил; бизантрен; эдатраксат; дефофамин; демеколцин; диазиквон; эльфорнитин; эллиптиния ацетат; эпотилоном; этоглуцид; нитрат галлия; гидроксимочевина; лентинан; лонидайнин; майтанзиноиды, такие как майтансин и ансамитоцины; митогуазон; митоксантрон; мопиданмол; нитраэрин; пентостатин; фенамет; пирарубицин; лозоксантрон; подофилиновая кислота, 2-этилгидразид; прокарбазин; Р8К® комплекс полисахаридов (1Н8 №1ига1 РтоДис18, Еидепе, ОК); разоксан; ризоксин; сизофиран; спирогерманий; тенуазоновая кислота; триазиквон; 2,2',2-трихлортриэтиламин; трихотецены, верракурин А, роридин А и ангуидин); уретан; виндезин; дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид (Ага-С); циклофосфамид, тиотепа, 6-тиогуанин, меркаптопурин, метотрексат; аналоги платины, такие как цисплатин и карбоплатин; винбластин; этопозид (УР-16); ифосфамид; митоксантрон; винкристин, винорелбин (№уе1Ьше®); новантрон; тенипозид; эдатрексат; даунорубицин, аминоптерин;
- 6 026134 капецитабин (ΧΕΕΟΌΑ®, КосЬе), ибандронат, СРТ-11; ингибитор топоизомеразы КЕ8 2000; дифторметилорнитин (ΌΜΡΟ); ретиноиды, такие как ретиноевая кислота, и их фармацевтически приемлемые соли, кислоты и производные любого из вышеуказанных.
Также включенными в определение химиотерапевтический агент являются:
(I) антигормональные препараты, которые действуют, регулируя или ингибируя действие гормонов на опухоли, такие как антиэстрогены и селективные модуляторы рецептора эстрогена (СМРЭ), включая, например, тамоксифен (включая ΝΟΕνΛΌΕΧ®; тамоксифен цитрат), ралоксифен, дролоксифен,
4-гидрокситамоксифен, триоксифен, кеоксифен, ЬУ117018, онапристон и ΡΑΚΕ8ΤΟΝ® (торемифин цитрат);
(II) , ингибиторы ароматазы, которые ингибируют фермент ароматазу, которая регулирует продукцию эстрогена в надпочечниках, такие как, например, 4(5)-имидазолы, аминоглютетимид, ΜΕΟΑ8Ε® (мегестролацетат), Аромазин® (экземестан, ΡΓί/ег). форместан, фадрозол, ΡίνίδΟΡ® (ворозол), ΡΕΜΑΚΑ® (летрозол; ΝονηΠίκ) и Аримидекс® (анастрозол; А§1га2епеса);
(III) , антиандрогены, такие как флутамид, нилутамид, бикалутамид, лейпролид и гозерелин, а также троксацитабин (1,3-диоксолан нуклеозида цитозиновый аналог);
(IV) ингибиторы протеинкиназ, такие как ингибиторы ΜΕΚ (ΥΟ 2007/044515);
(ν) ингибиторы липидкиназ;
(VI) антисмысловые олигонуклеотиды, в частности те, которые ингибируют экспрессию генов сигнальных путей, участвующих в аберрантной пролиферации клеток, например РКС-альфа, КаГ и Н-Как, такие как облимерсен (Оепакепке®, Оейа Шс.);
(VII) рибозимы, такие как ингибиторы экспрессии νΕΟΡ (например, ΑNΟIΟΖΥΜΕ®) и ингибиторы экспрессии ΗΕΚ2;
(VIII) вакцины, такие как вакцины для генной терапии, например, ΑΕΕΟνΕΓΤΓΝ®, ^ΕυVΕСΤIN®, и VΑXI^®; Пролекин® рИЛ-2; ингибиторы топоизомеразы 1, такие как ^υКΤΟΤΕСΑN®; абареликс® гтКН;
(IX) антиангиогенные агенты, такие как бевацизумаб ^уайт®, Оепеп1есЬ), и фармацевтически приемлемые соли, кислоты и производные любого из вышеперечисленных. Также включены в определение химиотерапевтический агент терапевтические антитела, такие как алемтузумаб (Сатра1Ь), бевацизумаб ^уак^®, ОепейесЬ), цетуксимаб (ΕΚΒΉυΧ®, ^Допе); панитумумабом ^есЬЫх®, Αт§еп), ритуксимаб (ΚΣΤυΧΑΝ®, ОепеШесЬ/юдеп Шес), пертузумаб (ΟΜΝΕ ΤΑΚΟ™, 2С4, Оепеп1есЬ), трастузумаб (Герцептин®, Оепеп1есЬ), тозитумомаб (Веххаг, Сопх1а), и лекарственные конъюгаты антител, гемтузумаб озогамицина (ΜνΙοΙηΓ^®, \Ууе1Ь).
Гуманизированные моноклональные антитела с терапевтическим потенциалом в качестве химиотерапевтических агентов в комбинации с ингибиторами РГ3К по изобретению, включают алемтузумаб, аполизумаб, азелизумаб, атлизумаб, бапинейзумаб, бевацизумаб, биватузумаба мертанзин, кантузумаба мертанзин, цеделизумаб, цертолизумаб пегол, цидфузитузумаб, цидтузумаб, даклизумаб, экулизумаб, эфализумаб, эпратузумаб, эрлизумаб, фелвизумаб, фонтолизумаб, гемтузумаб озогамицин, инотузумаб озогамицин, ипилимумаб, лабетузумаб, линтузумаб, матузумаб, меполизумаба, мотавизумаб, мотовизумаб, натализумаб, нимотузумаб, ноловизумаб, нумавизумаб, окрелизумаб, омализумаб, паливизумаб, пасколизумаб, пекфузитузумаб, пектузумаб, пертузумаб, пекселизумаб, раливизумаб, ранибизумаб, ресливизумаб, реслизумаб, ресивизумаб, ровелизумаб, руплизумаб, сибротузумаб, сиплизумаб, сонтузумаб, такатузумаб тетраксетан, тадоцизумаб, тализумаб, тефибазумаб, тоцилизумаб, торализумаб, трастузумаб, тукотузумаб целмолейкин, тукуситузумаб, умавизумаб, уртоксазумаб и визилизумаб.
Метаболит представляет собой продукт, полученный в процессе метаболизирования в теле указанного соединения или его соли. Метаболиты соединений могут быть определены с использованием обычных способов, известных в данной области техники, и их активность определяется с помощью тестов, таких как описано здесь. Такие продукты могут быть результатом, например, окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, дезамидирования, этерификация, деэтерификации, ферментативного расщепления и т.п. вводимого соединения. Соответственно, изобретение включает метаболиты соединений по настоящему изобретению, включая соединения, полученные способом, включающим контактирование соединения по настоящему изобретению с млекопитающим в течение периода времени, достаточного для получения продукта его метаболизма.
Термин вкладыш используется для обозначения инструкций, обычно включаемых в коммерческие упаковки терапевтических продуктов, которые содержат информацию о показаниях, использовании, дозировке, введении, противопоказаниях и/или предупреждениях, касающихся применения таких терапевтических продуктов.
Термин хиральный относится к молекулам, которые обладают свойством не наложимости зеркального отображения партнера, в то время как термин ахиральный относится к молекулам, которые совмещаются с зеркальным отображением их партнера.
Термин стереоизомеры относится к соединениям, которые имеют одинаковый химический состав, но отличаются в отношении расположения атомов или групп в пространстве.
- 7 026134
Диастереомер относится к стереоизомеру с двумя или более центрами хиральности, чьи молекулы не являются зеркальными отражениями друг друга. Диастереоизомеры обладают различными физическими свойствами, например температурами плавления, температурами кипения, спектральными свойствами и реакционной способностью. Смеси диастереомеров можно разделить с помощью аналитических способов с высоким разрешением, таких как электрофорез и хроматография.
Энантиомеры относятся к двум стереоизомерам соединения, которые не являются зеркальными отражениями друг друга.
Стереохимические определения и условные обозначения, используемые здесь, как правило, соответствуют 8.Р. Рагкег, Εά., МсСга^-НШ Оюйопагу οί Сйетка1 Тегпъ (1984), МсСга^-НШ Воок Сотрапу, №\ν Уогк; апй Ейе1, Ε. апй \УПеп. 8., §1егеосЬет181гу οί Огдатс Сотроипйз, ίοΗη \УПеу & 8оп§, 1пс., №ν Уогк, 1994. Соединения по изобретению могут содержать асимметричные или хиральные центры и, следовательно, существовать в различных стереоизомерных формах. Предполагается, что все стереоизомерные формы соединений по изобретению, включая, без ограничения, диастереомеры, энантиомеры и атропизомеры, а также их смеси, такие как рацемические смеси, являются частью настоящего изобретения. Многие органические соединения существуют в оптически активных формах, т.е. они обладают способностью вращать плоскость линейно поляризованного света. При описании оптически активных соединений префиксы Ό и Ь или К и 8 используются для обозначения абсолютной конфигурации молекулы относительно ее хирального центра(ов). Префиксы ά и 1 или (+) и (-) используются для обозначения знака вращения плоскости поляризованного света соединением, причем (-) или 1 означает, что соединение является левовращающим. Соединение с префиксом (+) или ά является правовращающим. Для данной химической структуры эти стереоизомеры являются идентичными, за исключением того, что они являются зеркальными отражениями друг друга. Конкретный стереоизомер может также упоминаться как энантиомер, а смесь таких изомеров часто называют энантиомерной смесью. 50:50 смесь энантиомеров называют рацемической смесью или рацематом, которые могут иметь место в случаях, когда стереоселективность или стереоспецифичность отсутствовала при химической реакции или процессе. Термины рацемическая смесь и рацемат относятся к эквимолярной смеси двух видов энантиомеров, лишенной оптической активности.
Термин таутомер или таутомерная форма относится к структурным изомерам с различной энергией, которые могут превращаться друг в друга через низкий энергетический барьер. Например, протонные таутомеры (также известные как прототропные таутомеры) включают взаимопревращения через миграцию протонов, такие как кетоенольная и имин-енамин изомеризации. Валентные таутомеры включают взаимопревращения путем реорганизации некоторых связывающих электронов.
Выражение фармацевтически приемлемая соль, используемая здесь, относится к фармацевтически приемлемым органическим или неорганическим солям соединения по настоящему изобретению. Примеры солей включают, без ограничения, сульфат, цитрат, ацетат, оксалат, хлорид, бромид, иодид, нитрат, бисульфат, фосфат, кислый фосфат, изоникотинат, лактат, салицилат, кислый цитрат, тартрат, олеат, таннат, пантотенат, битартрат, аскорбат, сукцинат, малеат, гентизинат, фумарат, глюконат, глюкуронат, сахарат, формиат, бензоат, глутамат, метансульфонат мезилат, этансульфонат, бензолсульфонат, п-толуолсульфонат и памоат (т.е. 1,1'-метилен-бис-(2-гидрокси-3-нафтоат)). Фармацевтически приемлемые соли могут содержать включение другой молекулой, такой как ацетат-ион, сукцинат-ион или другой противоион. Противоион может быть любым органическим или неорганическим фрагментом, который стабилизирует заряд на исходном соединении. Кроме того, фармацевтически приемлемая соль может иметь более чем один заряженный атом в своей структуре. В случаях, когда многозарядные атомы являются частью фармацевтически приемлемой соли, она может иметь несколько противоионов. Таким образом, фармацевтически приемлемая соль может иметь один или несколько заряженных атомов и/или один или более противоионов.
Если соединение по изобретению представляет собой основание, необходимые фармацевтически приемлемые соли могут быть получены любым подходящим способом, доступным в данной области техники, например обработкой свободного основания неорганической кислотой, такой как соляная кислота, бромисто-водородная кислота, серная кислота, азотная кислота, метансульфоновая кислота, фосфорная кислота и т.п., или органической кислотой, такой как уксусная кислота, трифторуксусная кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, миндальная кислота, фумаровая кислота, малоновая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, гликолевая кислота, салициловая кислота, пиранозидиловой кислотой, такой как глюкуроновая или галактуроновая кислоты, альфа гидроксикислотой, такой как лимонная кислота или винная кислота, аминокислотой, такой как аспарагиновая кислота и глутаминовая кислота, ароматической кислотой, такой как бензойная кислота или коричная кислота, сульфоновой кислотой, такой как п-толуолсульфоновая кислота или этансульфоновая кислота, и т.п.
Если соединение по изобретению представляет собой кислоту, необходимая фармацевтически приемлемая соль может быть получена любым подходящим способом, например обработкой свободной кислоты неорганическим или органическим основанием, таким как амин (первичный, вторичный или третичный), гидроксидом щелочного металла или гидроксидом щелочно-земельного металла и т.д. Иллюстративные примеры подходящих солей включают, без ограничения, органические соли, полученные из
- 8 026134 аминокислот, таких как глицин и аргинин, аммиака, первичных, вторичных и третичных аминов и циклических аминов, таких как пиперидин, морфолин и пиперазин, и неорганические соли, полученные из натрия, кальция, калия, магния, марганца, железа, меди, цинка, алюминия и лития.
Фраза фармацевтически приемлемый означает, что вещество или композиция должны быть совместимы химически и/или токсикологически с другими ингредиентами, содержащими композиции, и/или введены млекопитающим, подвергаемым лечению этим веществом или композицией.
Сольват относится к ассоциату или комплексу из одного или более молекул растворителя и соединения по настоящему изобретению. Примеры растворителей, которые образуют сольваты, включают, без ограничения, воду, изопропанол, этанол, метанол, ДМСО, этилацетат, уксусную кислоту и этаноламин.
Термины соединение настоящего изобретения, соединения по настоящему изобретению и соединения формулы Ι включают соединения формулы Ι и их стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры, сольваты, метаболиты и фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Любая формула или структура, приведенные здесь, в том числе соединения формулы I, также подразумевают гидраты, сольваты и полиморфные формы таких соединений и их смесей.
Трициклические соединения-ингибиторы ΡΙ3Κ формулы I.
В настоящем изобретении предложены трициклические соединения-ингибиторы ΡΙ3Κ формулы I и их фармацевтические композиции, которые являются потенциально полезными при лечении заболеваний, состояний и/или нарушений, модулируемых ΡΙ3 киназами. Более конкретно, в настоящем изобретении предложены соединения формулы I
и его фармацевтически приемлемые соли, где прерывистая линия обозначает возможную двойную связь и по меньшей мере одна прерывистая линия является двойной связью;
X1 представляет собой N или -С(К')2О-;
X2 представляет собой Ν;
X3 представляет собой С;
А представляет собой 5- или 6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, возможно содержащее один дополнительный гетероатом, выбранный из N и О, объединенное с Х2 и X3, возможно замещенное одной или двумя группами К5;
К1 представляет собой Н;
К4 выбран из фенила и гетероарила, обладающего 5-9 кольцевыми атомами и содержащего один или два гетероатома Ν, возможно замещенного одной или более К6 группами, независимо выбранными из -СН3, -СН2СН3, -СН2СН(СН3)2, -ΟΝ, -СРэ, -ΟΟΝΗ^ -СО^(СН3), -СО^СНэЕ -ΝΗ2, ^(СНэЕ -ЖСОСН3, -ОН, -ОСН(СН3)2, -\НС( О)\НСН;. -\НС( О)\НСН2С11;. -]ХНС(=О)]ХНСН(СН3Е -Ж§(О)2СН3, -^СН3)С(=О)ОС(СН3)з, бензила, бензилокси, морфолинила, морфолинометила и 4-метилпиперазин-1-ила, -СОNΗ-циклопропила, пиперидинила; и
К5 независимо выбран из С1-С2-алкила, СР3, =О, СН2ОН или две, присоединенные к одному и тому же атому, К5 группы образуют циклопропил или оксетанил;
тог выбран из:
-ΛΑ/1 возможно замещенных одной или двумя К7 группами, выбранными из -СН3.
- 9 026134
В другом воплощении предложено соединение формул 1а и Ιη:
где заместители являются такими, как определено в описании.
Ещё в одном воплощении предложено соединение, выбранное из структур:
где заместители являются такими, как определено в описании.
Ещё в одном воплощении предложено соединение, выбранное из структур:
где заместители являются такими, как определено в описании.
Ещё в одном воплощении предложено соединение, представляющее собой
где заместители являются такими, как определено в описании.
В некоторых воплощениях К4 представляет собой фенил, замещенный одной или более группами, выбранными из -СН3, -СН2СН3, -СИ, -СР3, -СОИН2, -СОИН(СН3), -СО\(СН;);. -ΝΗ2, -И(СН3)2, -М1СОСН;. -ОН, ОСН(СН3)2, -ИНС(=О)ИНСН3, -ИНС(=О)ИНСН2СН3, -ИН8(О)2СН3,
-И(СН3)С(=О)ОС(СН3)3.
- 10 026134
В некоторых воплощениях К4 представляет собой возможно замещенную бициклическую гетероарильную группу, выбранную из 1Н-индазолила, 1Н-пирроло[2,3-Ь]пиридинила.
В некоторых воплощениях возможно замещенный К4 выбран из:
где волнистая линия обозначает место присоединения.
В некоторых воплощениях К4 представляет собой 1Н-индазол-4-ил.
В некоторых воплощениях К4 представляет собой возможно замещенную моноциклическую гетероарильную группу, выбранную из 4-пиразолила, 2-пиразинила, 2-пиримидинила, 5-пиримидинила, 2-пиридила, 3-пиридила, 4-пиридила.
В некоторых воплощениях К4 представляет собой 2-аминопиримидин-5-ил.
В некоторых воплощениях возможно замещенный К4 выбран из:
где волнистая линия обозначает место присоединения.
В некоторых воплощениях одна или более групп К5 независимо выбрана из -СН3, -СН2СН3,
-СН2ОН, -СРэ, =0.
В некоторых воплощениях две геминальные группы К5 образуют циклопропил или оксетанил. В некоторых воплощениях тог представляет собой
где волнистая линия обозначает место присоединения, возможно замещенное одной или двумя К7 группами, независимо выбранными из -СН3.
Соединения формулы I по изобретению могут содержать асимметричные или хиральные центры и, следовательно, существовать в различных стереоизомерных формах. Предполагается, что все стереоизомерные формы соединений по изобретению, включая, без ограничения, диастереомеры, энантиомеры и атропизомеры, а также их смеси, такие как рацемические смеси, составляют часть настоящего изобретения.
Кроме того, настоящее изобретение охватывает все геометрические и позиционные изомеры. Например, если соединение формулы I содержит двойную связь или конденсированное кольцо, цис- и транс-формы, а также их смеси включены в объем настоящего изобретения. Как единичные позиционные изомеры, так и смеси позиционных изомеров также входят в объем настоящего изобретения.
В структурах, показанных здесь, где стереохимия любого конкретного хирального атома не указана, все стереоизомеры рассматриваются и включены в качестве соединений по изобретению. В случаях, когда стереохимия показана сплошным клином или пунктирной линией, отражающими конкретную конфигурацию, тогда именно этот стереоизомер уточнен и определен.
Соединения по настоящему изобретению могут существовать как в несольватированных, так и в сольватированных формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол и т.п., и предполагается, что изобретение охватывает как сольватированные. так и несольватированные формы.
Соединения по настоящему изобретению могут также существовать в различных таутомерных формах, и все такие формы включены в объем данного изобретения. Термин таутомер или таутомерная форма относится к структурным изомерам с различной энергией, которые превращаются друг в друга через низкий энергетический барьер. Например, протонные таутомеры (также известные как прототропные таутомеры) включают взаимопревращения через миграцию протонов, такие как кетоенольная и имин-енамин изомеризации.
Валентные таутомеры включают взаимопревращения путем реорганизации некоторых связывающих электронов.
Настоящее изобретение также охватывает меченные изотопами соединения по настоящему изобретению, которые идентичны соединениям, приведенным в настоящем изобретении, за исключением того, что один или более атомов заменены атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличные от атомной массы или массового числа, обычно встречающихся в природе. Все изотопы любого конкретного атома или элемента, как указано, рассматриваются в рамках соединений по изобретению и их применения. Примеры изотопов, которые могут быть включены в соединения по изобретению, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, серы, фтора, хлора и йода, такие как 2Н (Ό), 3Н, 11С,
- 11 026134 по настоящему изобретению (например, соединения, меченные 3Н и 14С) являются полезными в анализах тканевого распределения соединения и/или субстрата. Изотопы тритий (3Н) и углерод-14 (14С) могут быть использованы вследствие легкости их получения и обнаружения. Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий (например, 2Н), может давать определенные терапевтические преимущества в результате большей метаболической стабильности (например, увеличенный в естественных условиях период полураспада или снижение требуемой дозировки) и, следовательно, может быть предпочтительным в некоторых обстоятельствах. Позитронно излучающие изотопы, такие как 15О, 13Ν, 11С и 18Р, могут использоваться в исследованиях с помощью позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ) для изучения количества рецепторов, занятых субстратом. Меченные изотопами соединения по настоящему изобретению могут быть получены согласно следующим способам, аналогичным описанным на схемах и/или примерах, данных ниже, посредством замены не меченного изотопом реагента на меченный изотопом реагент.
Биологическая оценка.
Определение активности соединений формулы I на ΡΙ3 киназу возможно рядом прямых и косвенных способов обнаружения. Некоторые типичные соединения, описанные здесь, анализировали на их связывающую активность в отношении р110а и другие изоформы ΡΙ3Κ (пример 901) и активность ίη νίίτο в отношении опухолевых клеток (пример 902). Некоторые типичные соединения по настоящему изобретению обладают 1С50 значениями связывающей активности ΡΙ3Κ менее 10 нМ. Некоторые соединения по настоящему изобретению имеют значения ЕС50 активности в отношении опухолевых клеток менее чем 100 нМ.
Цитотоксическую или цитостатическую активность типичных соединений формулы I измеряли следующим образом: получение пролиферирующей опухолевой клеточной линии млекопитающих в среде для культивирования клеток, добавление соединения формулы Ι, культивирование клеток в течение от приблизительно 6 ч до 5 дней и измерение жизнеспособности клеток (пример 902). Клеточный ίη νίίτο анализ использовали для измерения жизнеспособности, т.е. пролиферации (1С50), цитотоксичности (ЕС50) и индукции апоптоза (активации каспазы).
Активность ίη νίίτο типичных соединений формулы I измеряли с помощью анализа пролиферации клеток, С’е11ТПег-С1о® ЕиттексеШ Се11 νίαόίίΐΐν Аккау, коммерчески доступного от Рготеда Согр., Μαάίκοη. VI (пример 902). Этот гомогенный способ анализа основан на рекомбинантной экспрессии люциферазы С’о1еор1ега (И8 5583024, И8 5674713, И8 5700670) и определяет количество жизнеспособных клеток в культуре на основе количества присутствующей АТФ, индикатора метаболически активных клеток (СгоисН еί а1. (1993), 1. 1ттипо1. Ме11т 160:81-88; И8 6602677). Анализ С’е11ТПег-С1о® проводится в форматах 96- или 384-луночных планшет, что делает его подходящим для автоматизированного высокопроизводительного скрининга (НТ8) (Сгее еί а1. (1995), АпОСапсег Огидк, 6:398-404). Гомогенный способ анализа включает добавление одного реагента (С’е11Тпег-С1о® РеадеШ) непосредственно к клеткам, культивируемым среде с добавлением сыворотки. Промывка клеток, удаление среды и несколько стадий пипетирования не требуется. Система обнаруживает от 15 клеток/лунку в 384-луночном формате в течение 10 мин после добавления реагента и перемешивания.
Гомогенный формат добавить-смешать-измерить приводит к лизису клеток и генерации люминесцентного сигнала, пропорционального количеству присутствующего АТФ. Количество АТФ прямо пропорционально количеству клеток в культуре. Се11Тйег-С1о® Аккау, генерирует светящийся люминесцентный сигнал, генерируемый люциферазной реакцией, который имеет период полужизни обычно больше чем 5 ч, в зависимости от типа клеток и используемого носителя. Жизнеспособные клетки показаны в относительных единицах люминесценции (РЬИ). Субстрат, люциферин жука, подвергается окислительному декарбоксилированию рекомбинантной люциферазой светлячка с сопутствующим преобразованием АТФ до АМФ и генерацией фотонов. Увеличенный период полужизни исключает необходимость использовать инжекторы реагентов и обеспечивает гибкость для непрерывного или периодического режима обработки нескольких планшет. Этот анализ пролиферации клеток может быть использован с различными мультилуночными форматами, например 96- или 384-луночный формат. Данные могут быть записаны люминометром или устройством отображения с ССЭ камерой. Выход люминесценции представлен в виде относительных световых единиц (КЬИ), измеренный стечением времени.
Антипролиферативные эффекты типичных соединений формулы I измеряли с помощью Се11ТПег-С1о® Аккау (пример 902) против нескольких опухолевых клеточных линий. ЕС50 значения активности были установлены для исследуемых соединений. Диапазон ίη νίίτο активности в отношении клеток составлял приблизительно от 100 нМ до 10 мкМ. Некоторые тестируемые соединения обладали значениями ЕС50 менее 1 микромоль (1 мкМ) в остановке пролиферации некоторых линий опухолевых клеток.
Некоторые ΑΌΜΕ свойства были измерены для некоторых типичных соединений с помощью анализов, включающих: Сасо-2 проницаемость (пример 903), клиренс гепатоцитов (пример 904), ингибирование цитохрома Р450 (пример 905), индуцирование цитохрома Р450 (пример 906), связывание белков плазмы (пример 907), а блокада НЕКС канала (пример 908).
- 12 026134
Некоторые типичные соединения были протестированы на эффективность в исследованиях эскалации дозы на опухолевых моделях голых мышей Тасошс Νί','Ρ (пример 909). Мышиную модель подкожного ксенотрансплантата И-87 МС МсгсНаШ (местный вариант, полученный из клеток И-87 МС из АТСС, Маиа88а8, УА) использовали для тетстирования соединений формулы I в возрастающих дозах вместе носителем (МСТ, отрицательный контроль). Задержку роста опухоли измеряли один раз в день после перорального приема в течение <28 дней. Изменение массы тела в течение курса лечения измеряли как показатель безопасности. Дозо- и времязависимые фармакокинетический и фармакодинамический ответы на введение препарата в той же модели подкожного ксенотрансплантата опухоли также исследовали (пример 913).
Потенциал проникновения через гематоэнцефалический барьер [проникающие свойства] был оценен ίη νίΐτο с использованием МЭСК клеток, стабильно трансфицированных Р-гликопротеином (МЭК1) или Ьсгр1 (пример 911). Мозговая проницаемость была определена ίη νίνο путем измерения концентрации соединения (пример 912) и/или путем измерения модуляции сигнального пути Р13К (пример 913) в головном мозге мышей после однократной внутривенной или пероральной дозы. Эффективность в отношении опухоли головного мозга была измерена в примере 914 с помощью С8-2 (мультиформная глиобластома человека (СВМ), сконструированная для экспрессии люциферазы). Эффект одноразового перорального приема в день соединений на рост С8-2 внутричерепных имплантатов оценивали с помощью магнитно-резонансной томографии (МРТ). Мышам с ксенотрансплантатами опухоли клеток И-87 МС вводили лекарственное средство или носитель и образцы анализировали с помощью РК, ΡΌ и/или 1НС способами (пример 915).
Примеры соединений формулы I 101-177, приведенные в таблице, были получены, охарактеризованы и протестированы на ингибирование Р13К альфа (1С50 или К1 связывание р110а менее 1 мкМ) и селективность в соответствии со способами по настоящему изобретению и имеют следующие структуры и соответствующие названия (СНетВюОгщу υΐΐπτ Уетзюп 11.0, СатЬпбдеЗой Согр., СатЬпбде МА).
- 13 026134
Νο. Структурная формула Название 1С6о, ΚΪ (мкМ) Анализ связывания ΡΙ3Κ, р110 альфа
101 '5 С Ν ΙίΕ О υ. ι Λ Η Η 1-[4-(За,8-диметил-7- морфолин-4-ил-3,За,8,8а- тетрагидро-211-1-окса-4,6,8- триаза-циклопента[а]инден-5- ил)-фенил]-3-этил-мочевина 2.1
102 0 ΗΪΛρΝ 1 ζί 5-(6,6-диметил-4-морфолино- 8,9-дигид ро-бИ- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)- 4-метилпиримидин-2-амин 0.0018
103 0 «Ад 4ν^νη2 5-(6,б-диметил-4-морфолино- 8,9-дигид ро-60- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиримидин-2-амин 0.00209
104 0 Ο ,υΟ. Ρ 5-(б,б-диметил-4-морфолино- 8,9-дигидро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)- 4-(трифторметил)пирцдил-2- амин 0.00389
105 0 ζ$ν„ 4 λ Ν ΝΗ2 5-(4-морфолино-8,9-дигидро- 7Н-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-2- ил)пиримидин-2-амин 0.00684
- 14 026134
106 0 οΧγ ί л Ν ΝΗ2 5-(4-морфолино-6,7,8,9- тетрагцдропиридо[2,1-е]пурин- 2-ил)пиримцдин-2-амин 0.00388
107 0 Ν ΝΗ2 5-(4-морфолино-6,7,8,9- тетрагидропиридо[2,1-е]пурин- 2-ил)пиридин-2-амин 0.0507
108 0 Ч'Фо. Р 5-(4- морфолино-8,9-дигидро- 6Ь-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)-4-(трифторметил)пиридил- 2-амин 0.0112
109 ύ N ΥϊΥ ^γ4νη2 5-(4-морфолино-7,8-дигидро- 6(1-пирроло[2,1-е]пурин-2- ил)пиримидин-2-амин 0.00826
по 0 <ν η 6,6-диметил-4-морфолино-2- (1Н-пирроло[2,3-Ь]пиридин-5- ил)-8,9-дигидро-6Н- [1,4]океазино[3,4-е]пурин 0.0140
111 0 ол-Чх 4^ΝΗ2 5-(6,6-диметил-4-морфол ин о- 8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиридин-2-амин 0.0186
- 15 026134
112 0 4ν^νη2 5-(4-морфолино-8,9- дигцдроспиро[[1,3]оксазино[2,3- е]пурин-7,1 '-циклопропан]-2- ил)пиримидин-2-амин 0.00137
113 0 ΟΥο. 4ιΎνη2 5-(4-морфолино-8,9-дигид ро- 6Ιί-[1 ,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиримидин-2-амин 0.00432
114 0 ϋ'Ά 4ν^νη2 5-(4-морфолино-8,9- дигцдроспиро[[1,4]оксазино[3,4- е]пурин-6,3’-оксетан]-2- ил)пиримидин-2-амин 0.00245
115 0 >θΎθ. ^ιΥνΗ;, 5-(7,7-диметил-4-морфолино- 8,9-дигид ро-70- [1,3]оксазино[2,3-е]пурин-2- ил)пиримидин-2-амин 0.00509
116 ή с ρ 4 ρ\τΎν 0¾ Ν ΝΗ2 5-(4-морфолино-6- (трифторметил)-8,9-дигид ро- 6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиридин-2-амин 0.0452
117 0 0 0 ίΎΝ4^Ν ί Λ Ν ΝΗ2 5-(6,6-(гексадейтерио)диметил- 4-морфолино-8,9-дигидро-6Л- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиримидин-2-амин 0.00259
- 16 026134
118 0 ί л Ν ΝΗ2 (3)-5-(6- этил- б- метил-4- морфолино-8,9-дигцдро-6Н- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиримидин-2-амин 0.00311
119 0 θ' Ν^Ν*4^Ν 4—Ч 4 Ν ΝΗ2 5-(6,6,9-триметил-4- морфолино-бИ- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиримидин-2-амин 0.00473
120 0 ^'-кхЧ ΟνΌ (К)- 5-(6-этил -6-метил- 4- морфолино-8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиримидин-2-амин 0.00596
121 ό Ν лЧ Ν ><^Ν °—^гЧгчн2 5-(1-морфолин-4-ил-5,6,8а,9- тетрагцдро-бп-7,10-диокса- 2,4,4Ь-триаза-фенантрен-3-ил)- пиримидин-2-иламин 0.00572
122 Ο0 4ν^ν·4|-^ν ^ν^νη2 5-((3)-6-морфопин-4-ип- 2,3,3а,4-тетрагид ро-1 Μ-5-окса- 7,9,9Ь-триаза- циклопента[а]нафтален-8-ил)- пиримидин-2-иламин 0.0779
123 ό Ν чч γ\ ο^χ 4-(6,6-диметил-4-морфолино- 8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)анилин 0.541
- 17 026134
124 ό Ν Αχν Η Η 1 -(4-(6,6-диметил-4- морфолино-8,9-дигид ро-бН- В^оксазинорМ-е^урин-г- ил)фенил)-3-метилмочевина 0.00671
125 0 <νΥυνη 6,6-диметил-4-морфопино-2- (1 Н-пиразол-4-ил)-8,9-дигидро- 6 Н-[ 1,4]оксазино[3,4-е]пурин 0.382
126 0 <^νΑ ^Ν_^Ν**γγΝΗ2 4^.Ν 4-(6,6-диметил-4-морфолино- 8,9-дигид ро-бН- (1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиридин-2-амин 0.685
127 0 ο'ΥΑύ^'ν <Д Ν γΑ- 6,6-диметил-2-(1-метил-1 Н- пиразол-4-ил)-4-морфолино- 8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин >0.695
128 0 #-/Άϊ ΌΜφ ΟΗ 3-(6,6-диметил-4-морфолино- 8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)фенол 0.00458
129 ό Ν ΥΤ^Ν ο Άο Η 2-( 1 Н-индазол-5-ил)-6,6- диметил-4-морфолино-8,9- дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4- е]пурин >0.695
- 18 026134
130 0 0, ύ Ν 6,6-диметил-2-(2-(4- метиллиперазин-1-ил) иридин- 4-ил)-4-морфолино-8,9- дигидро-бН-[1,4]оксазино[3,4- е]пурин >0.695
131 0 φ Ы-(2-(6,6-диметил-4- морфолино-8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)фенил)метансульфонамид 0.638
132 0 <^Ν?Ν <-ν^.νΑ^ν <-□ 6,6-диметил-4-морфолино-2-(6- морфолинопиридин-3-ил )-8,9- дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4- е]пурин >0.695
133 0 оХ.»Д„ ачд^ 4} 2-( 1-бензил-1 Н-пиразол-4-ил)- 6,6-диметил-4-морфолино-8,9- дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4- е]пурин >0.695
134 0 ΥγΝγΥ Ο Ν Α 2-(2-изопропоксипиридин-3-ил)- 6,6-диметил-4-морфолино-8,9- дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4- е]пурин >0.695
- 19 026134
135 0 ο-Ρ М-(2-(6,6-диметип-4- морфолино-8,9-дигвдро-б Η- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)фенил)ацетамид >0.695
136 0 Υνη 2-(3,5-диметил-1Н-пиразол-4- ип)-б,б-диметил-4-морфолино- 8,9-дигидро-6Н- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин >0.695
137 0 ιί4 ^Чон 5-(6,6-диметил-4-морфолино- 8,9-дигидро-6Н- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ип)лиридин-2-ол >0.695
138 0 «ΎΛ ΥΑΑλ Υνη2 6-(6,6-диметил-4-морфолино- 8,9-дигидро-6Н- [1 4]оксазино[3 4-е]пурин-2- ил)пиридин-3-амин >0.695
139 ,, ο 4“ϊ4 Ο Ν'^ν'Μν 1 Λ Ν ΝΗ2 (К)-5-(4-морфолино-6- (трифторметил)-8,9-дигидро- 6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиримидин-2-амин 0.00357
140 ή Ρ Ρ Ν ρ\ ν^Λν ηΙ4 ί Λ Ν ΝΗ2 (8)-5-(4-морфолино-6- (трифторметил)-8,9-дигидро- 6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиримидин-2-амин 0 00345
- 20 026134
141 0 οΆΥν 2-(1-этил-1 Н-пира зол-4-ипфб.б- диметил^-морфолино^Э- дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4- е]пурин >0.695
142 0 —ΝΟ.·Λ 0 4-(6,6-диметил-4-морфолино- 8,9-дигцдро-6Н- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)- N, Ν-диметилбензамид >0.695
143 0 Алл 1 трет-бутил 4-(6,6-диметил-4- морфолино-8,9-дигццро-6Н- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)фенил(метил)саФата!е >0.695
144 0 Τ 2-(3-(6,б-диметил-4- морфолино-8,9-дигццро-6Н- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)фенил)ацетонитрил >0.695
145 0 Ο>γΝγ4Ν ^'Ά,Αθ.ιΆ 6,6-диметил-4-морфолино-2-(3- морфолинофен ил )-8,9- дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4- е]пурин >0.695
146 0 Λ (Χ,νΑ V 6,6-диметил-4-морфолино-2-(3- (морфолинометил)фенил )-8,9- дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4- е]пурин >0.695
- 21 026134
147 0 η γγγ 2-(3-(бензилокси)фенил)-6,6- диметил-4-морфолино-8,9- дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4- е]пурин >0.695
148 0 γ/ν 4 2-(1-изобутил-1 Н-пиразол-4- ил)-6,6-диметил-4-морфолино- 8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин >0.695
149 0 ΥΝ— Μ'Ν^ кА 6,6-диметил-2-(6-(4- метилпиперазин-1-ил)иридин- 3-ил)-4-морфолино-8,9- дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4- е]пурин >0 695
150 ύ Ν «γ 2-( 1 Н-индазол-4-ил )-6,6- диметил-4-морфолино-8,9- дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4- е]пурин 0.0198
151 0 Х>мКДк1 ° «ι 4-(6,6-диметил-4-морфолино- 8,9-дигидро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)бензонитрил >0.695
152 0 ο><ΤΝίΛν 0 4Ν^ιΑγΑΝΗ2 ''‘►Γ 5-(6,6-диметил-4-морфолино- 8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)никотинамид 0.0352
- 22 026134
153 0 νγ о 5-(6,6-диметил-4-морфолино- 8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)- Ν-метилпиколинамид >0.695
154 0 йЧ 2-(4-(бензилокси)фенил)-6,6- диметил-4-морфолино-8,9- дигцдро-6Н-[1,4]оксазино[3,4- е]пурин >0.695
155 0 „><,»γ» γΝ-ΧΝΛρ 3-(б,б-диметил-4-морфолино- 8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)- Ν,Ν-диметиламин >0.695
156 0 Мч 6,б-диметил-2-(4-(4- метилпиперазин-1-ил)фенил)- 4-морфолино-8,9-дигидро-6Н- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин >0.695
157 0 Μ-Ν0 6,6-диметил-4-морфолино-2-(4- (пиперидин- 1-ил)фенил)-8,9- дигцдро-6Н-[1,4]оксазино[3,4- е]пурин >0.695
- 23 026134
158 0 οΆΝΑν Η М-(5-(6,6-диметил-4- морфолино-8,9-дигцдро-6 Η- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиридин-2-ил)ацетамид 0.0490
159 0 —Α νη2 5-(6,6-диметил-4-морфолино- 8,9-дигидро-6Н- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиколинамид
160 0 θχ^ ^Αίχ, 6-(6,6-диметил-4-морфолино- 8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиридин-3-ол
161 0 Λ\0' ο (4-(6,6-диметил- 4-морфолино- 8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)фенил)(4-метилпиперазин- 1-ил)метанон >0.695
162 ύ Ν Ы-циклопропил-3-(6.6-диметил- 4-морфолино-8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)бензамид >0.695
163 0 ο>ΎΝγ4 Υν^ιΑΛ 4Λν' 1 5-(6,6-диметил-4-морфолино- 8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)- Ν, 14-диметилпиразин-2-амин >0.695
- 24 026134
164 0 Η Η 1 -(4-(6, б-диметил-4- морфолино-8,9-дигцдро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)фенил)-3-этилмоч евина 0.0417
165 0 ΉϊΥ ο ΊΥΛΛ Η Η 1 -(4-(6,6-диметил-4- морфолино-8,9-дигцдро-6Н- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)фенил)-3- изопропилмочевина 0.337
166 0 Дч Τχ η°ν νί ν νη2 (2-(2-аминопиримидин-5-ил)-4- морфолино-8,9-дигцдро-6Н- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,6- диил)диметанол 0.0128
167 0 Ν Ν-ΥΝ θνίΑ'ΐ'Υγ'Ν Ύ 4Λνη2 2-(2-аминопирим идин-5- ил)-7- метил-4-морфолино-8,9- дигидропиразино[2,1-е]пурин- 6(7Н)-он 0.0215
163 0 I γ5Υ^Ν Ч/ ν τΥ Ν ΝΗ2 5-(8,8-диметил-1-морфолин-4- ил-5,8-дигидро-6Н-7-окса-9- тиа-2,4-диаза-флуорен-3-ил)- пиримидин-2-иламин 0.00100
169 ό Ρ Ρ Ν Ч/Ч г ΥνΙΎ7νη 2-(1 Н-индазол-4-ил)-4- морфолино-б-(трифторметип)- 8,9-дигцдро-6Н- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин 0.0452
- 25 026134
170 ό N Р. Р | 3-(4-морфолино-6- (трифторметил)-8,9-дигид ρο- 6Η-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)фенол 0.0797
171 ТГ N УтЛ 4Υη2 5-(4-((25,6Р)-2,6- диметилморфолино)-6,6- диметил-8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ип)пиримидин-2-амин 0.01398
172 Υ Ν ΥίΥ ί Λ Ν ΝΗ2 5-(4-(2,2-д иметилморфолино)- 6,6-диметил-8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиримидин-2-амин 0.201
173 ό Ν υϊΥ 0 ΝΑΝ'γ*Ν ο ν-/ 1 ι I ^ΥίΥ· Η М-(5-(6,6-диметил-4- морфолино-8,9-дигид ро-бН- [1,4]оксазино[3,4-е]лурин-2- ил)пиримидин-2-ил)ацетамид 0.242
174 £ γΥγ 1 λ Ν ΝΗ2 5-(4-((15,45)-2-окса-5- азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)- 6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н- [1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2- ил)пиримидин-2-амин 0.394
175 0 Ν-(Υν ηνΥ 4Ανη2 0 2-(2-аминопиримцдин-5-ил)-6- метил-4-морфолино-6,7- дигидропиразино[2,1-е]пурин- 8(9Н)-он 0.00428
176 ύ Ν Ν- -Ύ 4Ανη2 5-(6,7-диметил-4-морфолино- 6,7,8,9- тетрагидропиразино[2,1- е]пурин-2-ил)пиримидин-2- амин 0.00689
177 0 Α<γ. 4Ανη2 5-(8,8-диметил-1-морфолин-4- ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса- 2,4,4Ь-триаза-флуорен-3-ил)- пиримидин-2-иламин 0.000831
Введение соединений формулы I.
Соединения формулы I по изобретению могут быть введены любым способом, соответствующим состоянию, подлежащему лечению. Подходящие способы включают пероральный, парентеральный (включая подкожное, внутримышечное, внутривенное, внутриартериальное, внутрикожное, интратекальное и эпидуральное введение), трансдермальный, ректальный, назальный, местный (включа буккальный и сублингвальный), вагинальный, внутрибрюшинный, внутрилегочный и интраназальный. Для местной иммуносупрессивной терапии соединения могут быть введены внутриочаговым способом, в том числе перфузией или иным способом контактирования трансплантата с ингибитором перед трансплантацией. Следует понимать, что предпочтительный путь может изменяться в зависимости, например, от со- 26 026134 стояния реципиента. Когда соединение вводят перорально, оно может быть приготовлено в виде пилюли, капсулы, таблетки и т.д. вместе с фармацевтически приемлемым носителем или эксципиентом. В случае, когда соединение вводят парентерально, его можно приготовить с фармацевтически приемлемым парентеральным носителем и в единичной дозированной формы для инъекций, как подробно описано ниже.
Доза для лечения людей может составлять от приблизительно 10 до приблизительно 1000 мг соединения формулы I. Обычная доза может составлять от приблизительно 100 до приблизительно 300 мг соединения. Доза может быть введена один раз в день (ЦГО), два раза в день (ВШ) или чаще, в зависимости от фармакокинетических и фармакодинамических свойств, включая всасывание, распределение, метаболизм и выведение конкретного соединения. Кроме того, на дозировку и режим введения могут оказывать влияние факторы токсичности. При пероральном введении пилюли, капсулы или таблетки могут поступать в организм ежедневно или реже в течение определенного периода времени. Лечение можно повторить в виде нескольких циклов терапии.
Способы лечения соединениями формулы I.
Соединения формулы I по настоящему изобретению являются полезными для лечения гиперпролиферативных заболеваний, состояний и/или расстройств, включая, без ограничения, характеризующиеся сверхэкспрессией липидкиназ, например Р^ киназы. Соответственно, один аспект настоящего изобретения относится к способам лечения или профилактики заболеваний или состояний, которые можно лечить или предупреждать посредством ингибирования липидкиназ, в том числе Р^. В одном воплощении способ включает введение млекопитающему, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его стереоизомера, геометрического изомера, таутомера или фармацевтически приемлемой соли.
Один вариант осуществления изобретения включает способ лечения рака у пациента, содержащий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению, где рак представляет собой рак молочной железы, яичника, шейки матки, предстательной железы, яичка, мочеполовых путей, пищевода, гортани, глиобластому, нейробластому, желудка, кожи, кератоакантому, легкого, плоскоклеточный рак, крупноклеточный рак, немелкоклеточный рак легкого (Ν8ί'.Ύ), мелкоклеточный рак, аденокарциному легких, костей, толстой кишки, аденому, рак поджелудочной железы, аденокарциному, рак щитовидной железы, фолликулярную карциному, недифференцированную карциному, папиллярную карциному, семиному, меланому, саркому, рак мочевого пузыря, рак печени и желчных протоков, карциному почки, рак почек, рак поджелудочной железы, миелоидные нарушения, лимфому, волосатые клетки, рак полости рта, носоглотки, глотки, губ, языка, рта, тонкой кишки, прямой и ободочной кишок, толстой кишки, прямой кишки, мозга и центральной нервной системы, болезнь Ходжкина и лейкемию.
В одном варианте осуществления рак представляет собой рак мозга.
В одном из воплощений настоящего изобретения способ дополнительно включает введение указанному пациенту дополнительного терапевтического агента, выбранного из химиотерапевтического агента, антиангиогенного терапевтического агента, противовоспалительного агента, иммуномодулирующего агента, нейротропного фактора, агента для лечения сердечно-сосудистые заболевания, агента для лечения заболеваний печени, противовирусного агента, агента для лечения заболеваний крови, агента для лечения диабета и агента для лечения иммунодефицитных состояний.
В одном из воплощений настоящего изобретения дополнительный терапевтический агент представляет собой бевацизумаб.
В одном из воплощений пациента, которым является человек, лечат соединением формулы I и фармацевтически приемлемым носителем, адъювантом или наполнителем, где соединение формулы I присутствует в количестве, при котором ингибирование активности киназы РШ является обнаруживаемым.
Соединения формулы I также могут быть полезны для лечения гиперпролиферативных заболеваний, характеризующихся сверхэкспрессией протеинкиназ, таких как, кодируемые РГМ; генами Рш-1, Р1т-2 и Р1т-3 (Ргоуиа1 Пъегйоп, Мо1опеу), которые вовлечены в развитие лимфомы и твердых опухолей (Сиурегк е! а1. (1984), Се11, уо1. 37 (1), р. 141-50; 8е1Геп е! а1. (1985), ЕМВО I., уо1. 4 (7), р. 1793-8; уап Дег ЬидГ е! а1. (1995), ЕМВО I., уо1. 14 (11), р. 2536-44; МДскегк е! а1. (2002), \а1иге Оепейск, уо1. 32 (1), р. 1539; уап ЬоЬш/еп еГ а1. (1991), Се11, уо1. 65 (5), р. 737-52).
Раковые заболевания, которые можно лечить в соответствии со способами настоящего изобретения, включают, без ограничения, рак молочной железы, яичника, шейки матки, предстательной железы, яичка, мочеполовых путей, пищевода, гортани, глиобластомы, нейробластомы, рак желудка, кожи, кератоакантому, легкого, плоскоклеточный рак, крупноклеточный рак, немелкоклеточный рак легкого (Ν8ί'.Ύ), мелкоклеточный рак, аденокарциному легких, костей, толстой кишки, аденому, рак поджелудочной железы, аденокарциному, рак щитовидной железы, фолликулярную карциному, недифференцированную карциному, папиллярную карциному, семиному, меланому, саркому, рак мочевого пузыря, рак печени и желчных протоков, карциному почки, рак почек, рак поджелудочной железы, миелоидные нарушения, лимфому, волосатые клетки, рак полости рта, носоглотки, глотки, губ, языка, рта, тонкой кишки, прямой и ободочной кишок, толстой кишки, прямой кишки, мозга и центральной нервной системы, болезнь Ходжкина и лейкемию.
- 27 026134
Соединения формулы I могут быть полезны для ίη νίίτο, ίη δίΐιι и ίη νίνο диагностики или лечения клеток млекопитающего, организмов или связанных патологических состояний, таких как системное и местное воспаление, иммуновоспалительные заболевания, такие как ревматоидный артрит, иммуносупрессия, отторжение трансплантатов органов, аллергия, язвенный колит, болезнь Крона, дерматит, бронхиальная астма, системная красная волчанка, синдром Шегрена, рассеянный склероз, склеродермия/системный склероз, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ΙΤΡ), цитоплазматические антитела к нейтрофилам (ΑΝΟΆ), васкулит, хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ), псориаз, а также для общих совместных защитных эффектов.
Соединения формулы I могут быть полезны для лечения заболеваний головного мозга и центральной нервной системы, для которых необходим транспорт через гематоэнцефалический барьер. Некоторые соединения формулы I обладают благоприятными проникающими свойствами через гематоэнцефалический барьер для доставки в мозг. Мозговые нарушения, которые можно эффективно лечить соединениями формулы I включают метастатические и первичные опухоли головного мозга, такие как глиобластома и меланома.
Соединения формулы I могут быть полезны для лечения глазных заболеваний, таких как влажная и сухая макулярная дистрофия (ΑΜΌ) и отек сетчатки посредством локализованной доставки в глаз. Некоторые соединения формулы I обладают благоприятными свойствами для доставки и поглощения в глазах. Некоторые соединения формулы I могут повысить эффективность и увеличить продолжительность ответа для лечения влажной ΑΜΌ в сочетании с ранибизумабом (БиссШ/®. СспсШссН. Ше) и бевацизумабом (Άναδίίη®, СспсШсск Шс.)
В другом аспекте настоящего изобретения предложено соединение по настоящему изобретению для применения при лечении заболеваний или состояний, описанных здесь, у млекопитающего, например, человека, страдающего от такого заболевания или состояния. Предложено также применение соединения по настоящему изобретению при изготовлении лекарственного средства для лечения заболеваний и состояний, описанных здесь, у теплокровного животного, такого как млекопитающее, например, человека, страдающего от такого расстройства.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является соединение по настоящему изобретению для применения в качестве терапевтически активного вещества.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является применение соединения по настоящему изобретению для лечения рака.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является применение соединения по настоящему изобретению для получения лекарственного средства для лечения рака.
Дополнительным аспектом настоящего изобретения является соединение по настоящему изобретению для применения при лечении рака.
В другом аспекте настоящего изобретения рак представляет собой рак молочной железы, яичника, шейки матки, предстательной железы, яичка, мочеполовых путей, пищевода, гортани, глиобластому, нейробластому, рак желудка, кожи, кератоакантому, рак легкого, плоскоклеточный рак, крупноклеточный рак, немелкоклеточный рак легкого (№СЬС), мелкоклеточную карциному, аденокарциному легких, костей, толстой кишки, аденому, рак поджелудочной железы, аденокарциному, рак щитовидной железы, фолликулярный рак, недифференцированную карциному, папиллярную карциному, семиному, меланому, саркому, рак мочевого пузыря, рак печени и желчных протоков, карциному почки, рак почек, поджелудочной железы, миелоидные нарушения, лимфому, волосатые клетки, рак полости рта, носоглотки, глотки, губ, языка, рта, тонкой кишки, прямой и ободочной кишок, толстой кишки, прямой кишки, мозга и центральной нервной системы, лимфому или лейкемию.
В другом аспекте настоящего изобретения рак является раком мозга.
Фармацевтические композиции.
Для того чтобы использовать соединение формулы I для терапевтического лечения (включая профилактическое лечение) млекопитающих, включая человека, оно обычно приготовлено в соответствии со стандартной фармацевтической практикой в виде фармацевтической композиции. В соответствии с этим аспектом изобретения предлагается фармацевтическая композиция, содержащая соединение по настоящему изобретению в сочетании с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.
Один вариант осуществления изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель, скользящее вещество, разбавитель или эксципиент.
Один вариант осуществления изобретения включает способ получения фармацевтической композиции, который включает объединение соединения по настоящему изобретению с фармацевтически приемлемым носителем.
Один из вариантов осуществления изобретение включает фармацевтическую композицию, как описано выше, дополнительно содержащую дополнительный терапевтический агент, выбранный из химиотерапевтического агента, противовоспалительного агента, иммуномодулирующего агента, нейротропного фактора, агента для лечения сердечно-сосудистого заболевания, агента для лечения заболеваний пече- 28 026134 ни, противовирусного агента, агента для лечения заболеваний крови, агента для лечения диабета и агента для лечения иммунодефицитных состояний.
Типичную композицию получают смешиванием соединения формулы I и носителя, разбавителя или эксципиента. Подходящие носители, разбавители и эксципиенты хорошо известны специалистам в данной области техники и включают материалы, такие как углеводы, воски, водорастворимые и/или набухающие в воде полимеры, гидрофильные или гидрофобные материалы, желатин, масла, растворители, воду и т.п. Использование конкретного носителя, разбавителя или эксципиента будет зависеть от средств и цели, для которой соединение по настоящему изобретению применяется. Растворители обычно выбирают на основе растворителей, признанных специалистами в данной области техники как безопасные (ОКА8) для введения млекопитающим. В общем, безопасные растворители являются нетоксичными водными растворителями, такими как вода и другие нетоксичные растворители, которые растворяются или смешиваются с водой. Подходящие водные растворители включают воду, этанол, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль (например, ПЭГ 400, ПЭГ 300) и т.д. и их смеси. Композиции могут также включать один или более буферов, стабилизирующих агентов, поверхностно-активных веществ, смачивающих агентов, смазывающих агентов, эмульгаторов, суспендирующих агентов, консервантов, антиоксидантов, кроющие агенты, скользящие вещества, технологические добавки, красители, подсластители, отдушки, ароматизаторы и другие известные добавки, обеспечивающие улучшенные потребительские качества препарата (то есть, соединения по настоящему изобретению или его фармацевтической композиции) или помощь в изготовлении фармацевтического продукта (т.е. лекарственного средства).
Композиции могут быть приготовлены с использованием обычных процедур растворения и смешивания. Например, нерасфасованную лекарственную форму (например, соединение по настоящему изобретению или стабилизированные формы соединения формулы I, например, комплекс с производным циклодекстрина или другим известным агентом комплексообразования) растворяют в подходящем растворителе в присутствии одного или более эксципиентов, описанных выше. Соединение по настоящему изобретению обычно приготавливают в виде фармацевтических дозированных форм для обеспечения легко контролируемой дозировки препарата и для обеспечения соблюдения пациентом предписанного режима.
Фармацевтическая композиция (или состав) может быть упакована различными способами, в зависимости от способа введения препарата. Как правило, товар для распространения включает в себя контейнер с размещенной в нем для хранения фармацевтической композиции в соответствующей форме. Подходящие контейнеры хорошо известны специалистам в данной области техники и включают такие материалы, как бутылки (пластик и стекло), саше, ампулы, пластиковые мешки, металлические цилиндры и т.п. Контейнер может также включать в себя защитный механизм для предотвращения неосторожного доступа к содержимому упаковки. Кроме того, на контейнере может находиться этикетка, которая описывает содержимое контейнера. Этикетка может также включать соответствующие предупреждения.
Фармацевтические композиции соединений по настоящему изобретению могут быть получены для различных путей и типов введения. Например, соединение формулы I, имеющее желаемую степень чистоты, может быть смешано с фармацевтически приемлемыми разбавителями, носителями, эксципиентами или стабилизаторами (КетшдГоп'к РЬагтасеиДса1 8аепсе5 (1980), 16* еДНюп, Око1, А. ЕД.), в виде лиофилизированной композиции, измельченного порошка или водного раствора. Композиция может быть получена путем смешивания при температуре окружающей среды при соответствующем рН и в нужной степени чистоты, с физиологически приемлемым носителем, т.е. носителями, которые являются нетоксичными для реципиентов в используемых дозах и концентрациях. РН композиции в основном зависит от конкретного применения и концентрации соединения, но может варьироваться от примерно 3 до примерно 8. Композиция в ацетатном буфере при рН 5 является подходящим воплощением.
Соединения по настоящему изобретению для применения в настоящем изобретении предпочтительно стерильны. В частности, композиции, которые будут применяться для введения ш νί\Ό, должны быть стерильными. Такую стерилизацию легко осуществлять фильтрацией через стерильные фильтрующие мембраны.
Соединение обычно может храниться в виде твердой композиции, лиофилизированной композиции или в виде водного раствора.
Фармацевтические композиции по изобретению, содержащие соединение формулы I, будут приготовлены, дозированы и введены таким образом, т.е. в количествах, концентрации, графиках, курсами, носителями и путями введения, в соответствии с надлежащей медицинской практикой. Факторы для рассмотрения в данном контексте включают конкретное заболевание, подлежащее лечению, конкретного млекопитающего, подвергаемого лечению, клиническое состояние конкретного пациента, причину расстройства, место доставки агента, способ введения, схему введения и другие факторы, известные практикующим врачам. Терапевтически эффективное количество соединения для введения будет определяться указанными факторами и минимальным количеством, необходимым для профилактики, облегчения или лечения заболеваний, связанных с факторами свертывания крови. Такое количество предпочтительно ниже токсичного количества для пациента или количества, делающего пациента значительно более восприимчивым к кровотечению.
- 29 026134
В качестве общего предложения начальное фармацевтически эффективное количество соединения формулы I, вводимого парентерально на одну дозу, будет находиться в диапазоне от приблизительно 0,01-100 мг/кг, в частности от приблизительно 0,1 до 20 мг/кг веса тела пациента в день, при этом типичный первоначальный диапазон используемого соединения от 0,3 до 15 мг/кг/день.
Приемлемые разбавители, носители, эксципиенты и стабилизаторы являются нетоксичными для реципиентов в используемых дозах и концентрациях и включают буферы, такие как фосфат, цитрат и другие органические кислоты, антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту и метионин; консерванты (такие как хлорид октадецилдиметилбензиламмония; хлорид гексаметония; хлорид бензалкония, хлорид бензетония; фенол, бутиловый или бензиловый спирт; алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен, катехол, резорцин, циклогексанол, 3-пентанол и м-крезол); полипептиды с низкой молекулярной массой (приблизительно менее 10 остатков); белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон, аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу и декстрины; хелатирующие агенты, такие как ΕΌΤΆ; сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбит; солеобразующие противоионы, такие как натрий; комплексы металлов (например, Ζη-белок), и/или неионные поверхностно-активные вещества, такие как Τ\νΕΕΝτ™, или Р//НОМС5™ или полиэтиленгликоль (ПЭГ). Активные фармацевтические ингредиенты могут быть также заключены в микрокапсулы, полученные, например, способами коацервации или путем межфазной полимеризации, например гидроксиметилцеллюлозные или желатиновые микрокапсулы и поли(метилметакрилатные) микрокапсулы соответственно, в коллоидные системы доставки лекарственных средств (например, липосомы, альбуминовые микросферы, микроэмульсии, наночастицы и нанокапсулы) или в макроэмульсии. Такие способы описаны в ΚαηίηβΙοη'δ РЬагтасеийса1 8с1Спсс5, 16'1' сйПюп, Οδοί, Ά. Ей. (1980).
Могут быть получены препараты соединений формулы I с замедленным высвобождением. Подходящие примеры препаратов с замедленным высвобождением включают полупроницаемые матрицы из твердых гидрофобных полимеров, содержащие соединение формулы I, где матрицы находятся в виде формованных изделий, например пленок или микрокапсул. Примеры матриц с замедленным высвобождением включают сложные полиэфиры, гидрогели (например, поли(2-гидроксиэтилметакрилат) или поливиниловый спирт)), полилактиды (И8 3773919), сополимеры Ь-глутаминовой кислоты и гамма-этил-Ьглутамата, неразлагающийся этилен-винилацетат, разлагаемые сополимеры молочной и гликолевой кислоты, такие как ΕυΡΚΟΝ ΌΕΡΟΤ™ (инъецируемые микросферы, состоящие из сополимера молочной и гликолевой кислот и ацетата лейпролида), и поли-Э-(-)-3-гидроксимасляную кислоту.
Композиции включают такие, которые подходят для способов введения описанных в настоящем изобретении. Композиции могут быть удобно представлены в виде единичной дозированной формы и могут быть приготовлены любым из способов, хорошо известных в области фармацевтики. Способы и композиции в основном можно найти в ΚαηίηβΙοη'δ РЬагтасеийса1 8с1Спсс5 (Маск Ριιόίίδΐιίηβ Со., ΕαδΙοη, ΡΑ). Такие способы включают стадию ассоциации активного ингредиента с носителем, который состоит из одного или нескольких вспомогательных ингредиентов. В общем, композиции получают путем равномерного и тщательного смешивания активного ингредиента с жидкими носителями или тонко измельченными твердыми носителями или и теми и другими, а затем, если необходимо, формованием продукта.
Композиции соединения формулы I, пригодные для перорального введения, могут быть приготовлены в виде отдельных единиц, таких как пилюли, капсулы, сашеты или таблетки, каждая из которых содержит определенное количество соединения формулы I.
Прессованные таблетки могут быть получены прессованием в соответствующем аппарате активного ингредиента в свободно-текучей форме, такой как порошок или гранулы, возможно смешанного со связующим веществом, смазывающим веществом, инертным разбавителем, консервантом, поверхностноактивным или диспергирующим агентом. Формованные таблетки могут быть изготовлены формованием в соответствующем аппарате смеси порошкообразного активного ингредиента, увлажненного инертным жидким разбавителем. Таблетки необязательно можно покрывать оболочкой или наносить на них бороздки и можно приготовить таким образом, чтобы обеспечить замедленное или контролируемое высвобождение активного ингредиента из них.
Таблетки, пастилки, таблетки для рассасывания, водные или масляные суспензии, диспергируемые порошки или гранулы, эмульсии, твердые или мягкие капсулы, например желатиновые капсулы, сиропы или эликсиры могут быть приготовлены для перорального применения. Композиции соединений формулы I, предназначенные для перорального применения, могут быть получены в соответствии с любым способом, известным в данной области для производства фармацевтических композиций, и такие композиции могут содержать один или более агентов, в том числе подсластители, ароматизаторы, красители и консерванты для обеспечения приятного вкуса препарата. Таблетки, содержащие активный ингредиент в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемым эксципиентом, который подходит для изготовления таблеток, являются приемлемыми. Эти наполнители могут представлять собой, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция или карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция или натрия; гра- 30 026134 нулирующие и дезинтегрирующие агенты, такие как кукурузный крахмал или альгиновая кислота; связующие агенты, такие как крахмал, желатин или камедь; и смазывающие агенты, такие как стеарат магния, стеариновая кислота или тальк. Таблетки могут быть непокрытыми или могут быть покрыты оболочкой известными способами, в том числе микрокапсулированием для задержки дезинтеграции и адсорбции в желудочно-кишечном тракте и, тем самым, обеспечения пролонгированного действия в течение более длительного периода. Например, может быть использован материал для временной задержки, такой как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат, самостоятельно или вместе с воском.
Для лечения глаз или других наружных тканей, например рта и кожи, композиции могут применяться в качестве местной мази или крема, содержащих активный ингредиент(ы) в количестве, например, от 0,075 до 20% мас./мас. При приготовлении в виде мази активные ингредиенты могут быть использованы либо с парафиновой, либо смешивающейся с водой мазевой основой. Альтернативно, активные ингредиенты могут быть приготовлены в виде крема с основой масло-в-воде.
Если необходимо, водная фаза кремовой основы может содержать многоатомный спирт, т.е. спирт, имеющий две или более гидроксильные группы, такие как пропиленгликоль, бутан-1,3-диол, маннит, сорбит, глицерин и полиэтиленгликоль (включая ПЭГ 400) и их смеси. Композиции для местного применения могут при необходимости включать соединение, которое увеличивает поглощение или проникновение активного ингредиента через кожу или другие пораженные участки. Примеры таких усилителей проникновения через кожу включают диметилсульфоксид и родственные аналоги.
Масляная фаза эмульсий по настоящему изобретению может быть составлена из известных ингредиентов известным способом. В то время как фаза может содержать только эмульгатор, она желательно содержит смесь по меньшей мере одного эмульгатора с жиром или маслом, или и с жиром и маслом. Предпочтительно гидрофильный эмульгатор включают вместе с липофильным эмульгатором, который действует в качестве стабилизатора. Вместе эмульгатор(ы) с или без стабилизатора(ов) образует так называемый эмульгирующий воск и воск вместе с маслом и жиром образуют так называемую эмульгирующую основу мази, которая образует масляную дисперсную фазу кремовых композиций. Эмульгаторы и стабилизаторы эмульсии, пригодные для использования в композиции по изобретению, включают Т\уееи® 60, 8раи® 80, цетостеариловый спирт, бензиловый спирт, миристиловый спирт, глицерилмоностеарат и лаурилсульфат натрия.
Водные суспензии соединений формулы I содержат активные вещества в смеси с эксципиентами, подходящими для получения водных суспензий. Такие эксципиенты включают суспендирующий агент, такой как натрий-карбоксиметилцеллюлоза, кроскармеллоза, повидон, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, трагакантовая камедь и гуммиарабик, и диспергирующие или смачивающие агенты, такие как природные фосфатиды (например, лецитин), продукты конденсации алкиленоксида с жирной кислотой (например, полиоксиэтиленстеарат), продукт конденсации этиленоксида с длинноцепочечным алифатическим спиртом (например, гептадекаэтиленоксицетанол), продукты конденсации этиленоксида с неполным эфиром жирной кислоты и гекситангидрида (например, моноолеат полиоксиэтиленсорбитана). Водная суспензия может также содержать один или более консервантов, таких как этил- или н-пропил- п-гидроксибензоат, один или более красителей, один или более ароматизирующих агентов и один или более подсластителей, таких как сахароза или сахарин.
Фармацевтические композиции соединений формулы I могут быть в форме стерильного инъекционного препарата, например стерильной водной или маслянистой суспензии для инъекций. Эти суспензии могут быть получены в соответствии с известными способами с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов, которые были упомянуты выше. Стерильный инъекционный препарат может также представлять собой стерильный инъекционный раствор или суспензию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например раствор в 1,3-бутандиоле или приготовлен в виде лиофилизированного порошка. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые можно использовать, можно указать воду, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, обычно могут быть использованы стерильные нелетучие масла в качестве растворителя или суспендирующей среды. Для данной цели может быть использовано любое мягкое нелетучее масло, в том числе синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, также могут быть использованы при получении препаратов для инъекций.
Количество активного ингредиента, которое можно комбинировать с материалом носителя для получения единичной дозированной формы, будет варьироваться в зависимости от подвергаемого лечению субъекта и конкретного способа введения. Например, композиция с замедленным высвобождением, предназначенная для перорального введения человеку, может содержать приблизительно от 1 до 1000 мг активного вещества, смешанного с соответствующим и подходящим количеством материала носителя, которое может варьировать от примерно 5 до примерно 95% от общей композиции (мас./мас.). Фармацевтическая композиция может быть приготовлена для предоставления легко измеримых количеств для введения. Например, водный раствор, предназначенный для внутривенной инфузии, может содержать от приблизительно 3 до 500 мкг активного ингредиента на 1 мл раствора для проведения инфузии подходящего объема со скоростью примерно 30 мл/ч.
- 31 026134
Композиции, пригодные для парентерального введения, включают водные и неводные стерильные инъекционные растворы, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатические факторы и растворенные вещества, которые придают композиции изотоничность с кровью предполагаемого реципиента, а также водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать суспендирующие агенты и загустители.
Композиции, пригодные для местного введения в глаз, включают также глазные капли, в которых активный ингредиент растворен или суспендирован в подходящем носителе, особенно в водном растворителе для активного ингредиента. Активный компонент предпочтительно присутствует в таких композициях в концентрации от приблизительно 0,5 до 20% мас./мас, приблизительно от 0,5 до 10% мас./мас, или приблизительно 1,5% мас./мас.
Композиции, пригодные для местного применения в полости рта, включают таблетки для рассасывания, содержащие активный ингредиент в ароматизированной основе, обычно сахарозе и гуммиарабике или трагаканте, пастилки, содержащие активный ингредиент в инертной основе, такой как желатин и глицерин, или сахарозе и гуммиарабике; и растворы полоскания, содержащие активный ингредиент в соответствующем жидком носителе.
Композиции для ректального введения могут быть представлены в виде суппозиториев с подходящим основанием, содержащих, например, масло какао или салицилат.
Композиции, подходящие для внутрилегочного или назального введения, обладают, например, размером частиц в диапазоне от 0,1 до 500 мкм (в том числе размером частиц в диапазоне между 0,1 и 500 мкм с шагом, таким как 0,5, 1, 30, 35 мкм и т.д.), которые вводят путем быстрой ингаляции через носовой ход или при вдыхании через рот так, чтобы достигать альвеолярных мешочков. Подходящие композиции включают водные или масляные растворы активного ингредиента. Композиции, пригодные для аэрозольного введения или введения в виде сухого порошка, могут быть получены в соответствии с обычными способами и могут доставляться с другими терапевтическими агентами, такими как соединения, до сих пор использующиеся при лечении или профилактике расстройств, как описано ниже.
Композиции, пригодные для вагинального введения, могут быть представлены в виде вагинальных суппозиториев, тампонов, кремов, гелей, паст, пен или спреев, содержащих в дополнение к активному ингредиенту такие носители, которые известны в данной области техники как подходящие.
Композиции могут быть упакованы в однодозовый или в многодозовый контейнеры, например запечатанные ампулы и флаконы, и могут храниться в высушенном сублимацией (лиофилизированном) состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого носителя, например воды, для инъекций непосредственно перед использованием. Приготовленные для немедленного приема растворы и суспензии для инъекций получают из стерильных порошков, гранул и таблеток ранее описанного вида. Предпочтительные единичные дозированные формы представляют собой те, которые содержат дневную дозу или единичную дневную субдозу, как описано выше, или соответствующую ее часть активного ингредиента.
В настоящем изобретении также предложены ветеринарные композиции, содержащие по меньшей мере один активный ингредиент, как определено выше, вместе с ветеринарным носителем. Ветеринарными носителями являются вещества, используемые для введения композиции, они могут быть твердыми, жидкими или газообразными веществами, которые также являются инертным или приемлемыми в ветеринарии и совместимыми с активным ингредиентом. Эти ветеринарные композиции могут быть введены парентерально, перорально или любым другим желаемым способом.
Комбинированная терапия.
Соединения формулы I могут применяться самостоятельно или в комбинации с другими терапевтическими агентами для лечения заболевания или расстройства, описанного здесь, например гиперпролиферативных расстройств (например, рака). В некоторых воплощениях соединение формулы I комбинируют в фармацевтической комбинированной композиции или режиме дозирования в качестве комбинированной терапии, со вторым соединением, которое обладает противовоспалительными свойствами или которое является полезным для лечения гиперпролиферативных расстройств (например, рака). Второе соединение фармацевтической комбинированной композиции или режима дозирования предпочтительно имеет взаимодополняющую активность по отношению к соединению формулы I, таким образом, что они не оказывают отрицательного влияния друг на друга. Такие соединения предпочтительно присутствуют в комбинации в количествах, которые эффективны для заданных целей. В одном воплощении композиция по изобретению включает соединение формулы I в комбинации с химиотерапевтическим агентом, таким как здесь описано.
Комбинированное лечение можно проводить в виде одновременного или последовательного режима. При последовательном введении комбинации можно вводить в два или более приемов. Комбинированное введение включает совместное введение с использованием отдельных препаратов или одного фармацевтического препарата и последовательное введение в любом порядке, где предпочтительно имеется период времени, когда оба (или все) активные средства одновременно проявляют свои биологические активности.
- 32 026134
Подходящие дозировки для любого из вышеуказанных совместно вводимых агентов являются такими, как здесь применяются и могут быть снижены за счет комбинированного действия (синергии) нового идентифицированного агента и других химиотерапевтических агентов или лечения.
Комбинированная терапия может обеспечить синергию и оказаться синергичной, т.е. достигнутый эффект в случае, когда активные ингредиенты используются вместе, больше, чем сумма эффектов полученных при использовании соединений по отдельности. Синергетический эффект может достигаться в случаях, когда активные ингредиенты (1) совместно приготовлены и введены одновременно или доставлены в комбинированной единичной дозированной форме, (2) доставляются чередованием или одновременно в виде отдельных препаратов или (3) при некоторых других режимах. При доставке чередующейся терапией синергетический эффект может быть достигнут при последовательных введении или доставке соединений, например разными инъекциями с помощью отдельных шприцев, отдельными таблетками или капсулами или отдельными инфузиями. В общем, во время чередующейся терапии эффективную дозу каждого активного ингредиента вводят последовательно, т.е. сериями, тогда как в комбинированной терапии эффективные дозы двух или более активных ингредиентов вводят вместе.
В одном из воплощений антираковой терапии соединение формулы Ι или его стереоизомер, геометрический изомер, таутомер, сольват, метаболит или фармацевтически приемлемая соль или пролекарство могут быть комбинированы с другими химиотерапевтическими агентами, гормональными агентами или антителами, такими как описано здесь, а также в комбинации с хирургической терапией и лучевой терапией. Комбинированная терапия по настоящему изобретению включает, таким образом, введение по меньшей мере одного соединения формулы Ι или его стереоизомера, геометрического изомера, таутомера, сольвата, метаболита или фармацевтически приемлемой соли или пролекарства, а также использование по меньшей мере одного другого способа лечения рака. Количества соединения(ий) формулы Ι и другого фармацевтически активного химиотерапевтического агента(ов) и относительный временной режим введения будут выбраны для достижения желаемого комбинированного терапевтического эффекта.
Метаболиты соединений формулы Ι.
Кроме того, подпадающими под объем настоящего изобретения являются продукты метаболизма ίη νίνο соединений формулы I, описанных здесь. Такие продукты могут быть результатом, например, окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, дезамидирования, этерификации, деэтерификации, ферментативного расщепления и т.п. вводимого соединения. Соответственно, изобретение включает метаболиты соединений формулы I, в том числе соединений, полученных способом, включающим контактирование соединения по настоящему изобретению с млекопитающим в течение времени, достаточного для получения его метаболического продукта.
Метаболиты обычно определяются путем получения меченного (например, 14С или 3Н) изотопом соединения по настоящему изобретению, его введения парентерально в детектируемой дозе (например, больше чем примерно 0,5 мг/кг) животному, такому как крыса, мышь, морская свинка, обезьяна или человеку, выдерживания достаточного времени для обмена веществ (обычно около от 30 с до 30 ч) и выделения продуктов его переработки из мочи, крови или других биологических образцов. Эти продукты легко выделить, поскольку они являются мечеными (другие выделяют с помощью антител, способных связывать эпитопы, оставшиеся в метаболитах). Структуры метаболитов определяются обычным образом, например Μδ, ЬС/Μδ или ЯМР-анализом. В общем, анализ метаболитов осуществляется таким же образом, как и обычные исследования метаболизма лекарств, хорошо известные специалистам в данной области техники. Метаболиты, до тех пор, пока для них не нашли другого в живом организме, могут быть полезны в диагностических анализах для терапевтического дозирования соединений по изобретению.
Г отовые изделия.
В другом воплощении изобретения предложено изделие или набор, содержащие вещества, пригодные для лечения заболеваний и расстройств, описанных выше. Набор включает контейнер, содержащий соединение формулы I. Этот набор может дополнительно включать этикетку или листок-вкладыш на или вместе с контейнером. Термин листок-вкладыш используется для обозначения инструкций, обычно включаемых в коммерческие упаковки терапевтических продуктов, которые содержат информацию о показаниях, использовании, дозировке, введении, противопоказаниях и/или предупреждениях, касающихся применения таких терапевтических продуктов.
Одно воплощение настоящего изобретения включает набор для лечения ΡI3Κ-опосредованного состояния, включающий соединение по настоящему изобретению и инструкции по применению.
Подходящие контейнеры включают, например, бутылки, флаконы, шприцы, блистерную упаковку и т.п. Контейнер может быть выполнен из различных материалов, таких как стекло или пластик. Контейнер может содержать соединение формулы I или его композицию, которые являются эффективными для лечения состояния, и может иметь стерильное входное отверстие (например, контейнер может представлять собой пакет для внутривенного раствора или флакон, имеющий пробку, прокалываемую иглой для подкожной инъекции). По меньшей мере один активный агент в композиции представляет собой соединение формулы I. На этикетке или вкладыше указывается, что композиция используется для лечения выбранного состояния, такого как рак. Кроме того, этикетка или вкладыш могут указывать, что пациент, подлежащий лечению, обладает расстройством, таким как гиперпролиферативные расстройства, нейро- 33 026134 дегенерация, гипертрофия сердца, боль, мигрень или нейротравматические заболевания или случаи. В одном варианте осуществления этикетка или вкладыш указывает, что композиция, содержащая соединение формулы I, может быть использована для лечения расстройства, являющегося результатом аномального роста клеток. На этикетке или вкладыше также может быть показано, что композиция может быть использована для лечения других расстройств. Альтернативно или дополнительно, изделие может также включать второй контейнер, содержащий фармацевтически приемлемый буфер, такой как бактериостатическая вода для инъекций (В^И), фосфатно-солевой буфер, раствор Рингера и раствор декстрозы. Он может дополнительно включать другие вещества, желательные с коммерческой точки зрения и точки зрения пользователя, включая другие буферы, разбавители, фильтры, иглы и шприцы.
Набор может дополнительно содержать инструкции по введению соединения формулы I и, если присутствует, второй фармацевтической композиции. Например, если набор содержит первую композицию, содержащую соединение формулы I, и вторую фармацевтическую композицию, набор может дополнительно содержать инструкции для одновременного, последовательного или раздельного введения первой и второй фармацевтических композиций пациенту, нуждающемуся в этом.
В другом воплощении наборы подходят для доставки твердых пероральных форм соединения формулы I, например таблеток или капсул. Такой набор предпочтительно включает множество единичных доз. Такие наборы могут включать в себя карты, содержащие дозы, ориентированные в порядке их предполагаемого использования. Примером такого набора является блистер. Блистерные упаковки хорошо известны в упаковочной промышленности и широко используются для упаковки фармацевтических единичных дозированных форм. При желании, может быть предложена памятка, например, в виде цифр, букв или другой маркировки или с календарем-вкладышем, обозначающим дни в графике лечения, согласно которому могут вводиться дозы.
Согласно одному воплощению набор может включать (а) первый контейнер с соединением формулы I, содержащимся в нем, и, возможно, (б) второй контейнер со второй фармацевтической композицией, содержащейся в нем, причем вторая фармацевтическая композиция содержит второе соединение с антигиперпролиферативной активностью. Альтернативно или дополнительно, набор может также содержать третий контейнер, включающий фармацевтически приемлемый буфер, такой как бактериостатическая вода для инъекций (В^Р!), фосфатно-солевой буфер, раствор Рингера и раствор декстрозы. Он может дополнительно включать другие вещества, желательные с коммерческой точки зрения или точки зрения пользователя, включая другие буферы, разбавители, фильтры, иглы и шприцы.
В некоторых других воплощениях, где набор содержит композицию формулы I и второй терапевтический агент, набор может включать контейнер для содержания отдельных композиций, такой как разделенный флакон или разделенный пакет из фольги, однако отдельные композиции могут также содержаться в одном, цельном контейнере. Обычно набор включает инструкции по введению отдельных компонентов. Форма в виде набора особенно желательна, когда отдельные компоненты предпочтительно вводить в различных дозированных формах (например, пероральной и парентеральной), вводятся с различными интервалами дозирования или при необходимости титрования отдельных компонентов комбинации лечащим врачом.
Получение соединений формулы I.
Трициклические соединения формулы I могут быть синтезированы способами синтеза, которые включают процессы, аналогичные хорошо известным в области химии, в частности в свете содержащегося здесь описания. Исходные материалы, как правило, доступны из коммерческих источников, таких как А1Дг1сЬ СЬетка1к (Мйетаикее, XVI) или могут быть легко получены с использованием способов, хорошо известных специалистам в данной области (например, получение способами, в основном описанными в Ьошк Р. Иекет и Магу Иекет, Кеадеп!к Тот Огдатс 8уп!Ьек1к, ν. 1-23, \νίΕν, Ν.Υ. (1967-2006 еД.) или Вейк!ешк НапДЬисЬ Дег огдатксЬеп СЬет1е, 4, Аий. еД. 8рйпдет-Ует1ад, Ветйп, включая дополнения (также доступно через онлайн базу данных ВеПйет).
В некоторых воплощениях соединения формулы I могут быть без труда получены с использованием хорошо известных способов получения пуриновых соединений (НаттагкЛот е! а1. (2007) ТеЛаЬеДгоп ЬеЛ. 48(16):2823-2827; Сета е! а1. (2006), Огдатс Ьейегк, 8(23):5389-5392; СЬапд е! а1. (2006), 1. МеД. СЬет. 49(10):2861-2867; Υапд е! а1. (2005), 1. СотЬ. СЬет. 7:474-482; Ьт е! а1. (2005), 1. СотЬ. СЬет. 7:627-636; Носек е! а1. (2004), 8уп!Ьек1К, 17:2869-2876; НаттагкЛот е! а1. (2003), ТеЛаЬеДгоп Ьей. 44:8361-8363; НаттагкЛот е! а1. (2002), ТеЛаЬеДгоп Ье!!. 43:8071-8073; Воо!Ь е! а1. (1987), 1. СЬет. 8ос., Регкт Тгапк. 1: Огдатс апД Вю-Огдатс СЬет. 7:1521-1526; Воо!Ь е! а1. (1981), 1. СЬет. 8ос., СЬетка1 СоттитсаЬопк 15:788-789; ΥοпеДа е! а1. (1976), 1. СЬет. 8ос, Регкт Тгапк. 1: Огдашс апД Вю-Огдатс СЬет. 14:1547-1550; Тау1ог е! а1. (1971), 1. Огд. СЬет. 36(21):3211-3217; Пк!ег, !Н.; Репп, МБ. ТЬе Рийпек, 8ирр1етейату 1, 1оЬп νίΡν & 8опк, 1996, Уо1ите 54; ТЬе СЬепикЛ оТ Не!етосусйс СотроипДк, ЕДйотк Vе^ккЬе^де^, А.; Тау1ог Е.С., νίΡν Шеткаепсе, 1971, Уо1ите 24; БедплегепД, М.; Ойеткоп, Ό.8. (2006), Вюотд. МеД. СЬет. 14:3987-4006; Носек, М. (2003), Еиг. 1. Огд. СЬет. 245-254;И8 7122665; И8 6743919; И8 5332744; И8 4728644; И8 3016378; И8 2008/0058297; И8 2003/0139427; VО 2008/043031); и других гетероциклов, которые описаны в: СотргеЬепкле Не!етосусйс СЬеттЛу II, ЕДйотк КайтЛку апД Кеек, Е1ке\аег, 1997, е.д. Уо1ите 3; ЫеЫдк Аппа1еп Дег СЬет1е, (9):1910-16 (1985);
- 34 026134
Некейса СЫтюа Ас1а, 41:1052-60 (1958); Аг/пе1т1йе1-Рог5сЬип§, 40(12):1328-31 (1990).
Соединения формулы I могут быть получены отдельно или в виде библиотек соединений, содержащих по меньшей мере 2, например от 5 до 1000 соединений или от 10 до 100 соединений. Библиотеки соединений формулы I могут быть получены путем комбинаторного подхода разделение и смешивание или несколькими параллельными синтезами с использованием либо жидкофазной, либо твердофазной химии, по методикам, известным специалистам в данной области. Таким образом, согласно еще одному аспекту изобретения предложена библиотека соединений, содержащая по меньшей мере два соединения или их фармацевтически приемлемые соли.
С целью иллюстрирования общие методики показывают общие способы, которые могут использоваться для получения соединений формулы I, а также ключевых промежуточных соединений. Разделы Схемы и Примеры содержат более подробное описание отдельных стадий реакций. Специалистам в данной области техники должно быть понятно, что другие способы синтеза могут быть использованы для синтеза соединений по изобретению. Несмотря на то, что некоторые исходные материалы и пути синтеза изображены на схемах, в общих методиках и примерах, исходные материалы и пути синтеза могут быть заменены другими аналогичными для получения различных производных и/или условий реакции. Кроме того, многие из соединений, полученных способами, описанными ниже, могут быть далее модифицированы в свете данного описания с использованием обычных химических реакций, хорошо известных специалистам в данной области.
При получении соединений формулы I может быть необходима защита функциональных групп (например, первичных или вторичных аминов) промежуточных соединений. Необходимость такой защиты будет варьироваться в зависимости от природы функциональной группы и условий способов получения. Подходящие аминозащитных группы включают ацетил, трифторацетил, трет-бутоксикарбонил (ВОС), бензилоксикарбонил (СЬ/) и 9-флуоренметиленоксикарбонил (Ртос). Необходимость в такой защите может быть легко определена специалистом в данной области. Для общего описания защитных групп и их использования, см. Т.У. Сгеепе, Ргсйесйуе Сгоирк ίη Огдашс 8уп1йе515, 1оНп \УПеу & 8опк, №у Уогк, Т1йгб Еб., 1999.
Способы разделения.
В способах получения соединений по данному изобретению может быть предпочтительным разделение продуктов реакции друг от друга и/или от исходных материалов. Целевые продукты каждой стадии или ряда стадий отделяют и/или очищают (далее разделяют) до желаемой степени однородности по общим методикам в данной области. Обычно такое разделение включает многофазную экстракцию, кристаллизацию из растворителя или смеси растворителей, дистилляцию, сублимацию или хроматографию. Хроматография может включать в себя любое количество способов, включая, например, обратнофазовую и с нормальной фазой; гель-фильтрацию, ионнообменную, высокого, среднего и низкого давления жидкостную хроматографию и устройства; аналитическую в малом масштабе; хроматографию псевдодвижущегося слоя (8МВ) и препаративную тонкослойную хроматографию, а также способы тонкослойной хроматографии малого масштаба и флэш-хроматографию.
Другой класс способов разделения включает обработку смеси реагентом, избирательно связывающим или другим способом, делающим желаемый продукт, непрореагировавший исходный материал, продукт реакции т.п. отделяемым. Такие реагенты включают адсорбенты или абсорбенты, такие как активированный уголь, молекулярные сита, ионообменные среды и т.п. В альтернативном варианте реагенты могут быть кислотами в случае оснований, оснований, в случае кислотного материала, связывающими реагентами, такими как антитела, белки, селективными хелатирующими агентами, такими как краунэфиры, жидкими/жидкими ионными реагентами экстракции (ЫХ) и т.п.
Выбор соответствующих способов разделения зависит от природы используемых материалов. Например, температура кипения и молекулярный вес при дистилляции и сублимации, наличие или отсутствие полярных функциональных групп при хроматографии, стабильность материалов в кислой и щелочной среде в многофазной экстракции и т.п. Специалисты в данной области техники будут применять способы, наиболее подходящие для достижения желаемого разделения.
Смеси диастереомеров могут быть разделены на индивидуальные диастереомеры на основе их физических и химических различий способами, хорошо известными специалистам в данной области техники, например с помощью хроматографии и/или фракционной кристаллизации. Энантиомеры могут быть разделены путем превращения энантиомерной смеси в диастереомерную смесь реакцией с соответствующим оптически активным соединением (например, хиральным вспомогательным агентом, таким как хиральный спирт или хлорангидрид кислоты Мошера), разделением диастереомеров и преобразованием (например, гидролизом) отдельных диастереомеров в соответствующие чистые энантиомеры. Кроме того, некоторые из соединений по настоящему изобретению могут быть атропизомерами (например, замещенные биарилы) и рассматриваются в рамках объема настоящего изобретения. Энантиомеры могут быть разделены с использованием колонки хиральной ВЭЖХ.
Отдельный стереоизомер, например энантиомер, по существу свободный от его стереоизомеров, может быть получен разделением рацемической смеси с использованием такого способа, как образование диастереомеров с использованием оптически активного разделяющего агента (Е11е1, Е. апб ХУПеп, 8.
- 35 026134
5>1егеосЬепш1гу о£ Огдатс Сοтροиηйδ, ΐοΐιη ХУПеу & δοηδ, 1пс., №\у Уогк, 1994; ЬосктиНег, С.Н., (1975), ΐ. СЬгота!одг., 113(3):283-302). Рацемические смеси хиральных соединений по изобретению могут быть разделены и выделены любым подходящим способом, включая (1) формирование ионных диастереомерных солей с хиральными соединениями и разделение путем фракционной кристаллизации или других способов, (2) образование диастереомерных соединений с хиральными дериватизирующими реагентами, разделение диастереомеров и превращение в чистые стереоизомеры и (3) разделение, по существу чистых или обогащенных стереоизомеров непосредственно в хиральных условиях. См.: Эгид δΐе^еοсЬет^δί^у, Апа1уйса1 МеΐЬοйδ апй РЬагтасо1оду, 1гушд V. ХУатег, Ей., Магсе1 Эеккег, 1пс., №\у Уогк (1993).
По способу (1) диастереомерные соли могут быть получены реакцией энантиомерно чистых хиральных оснований, таких как бруцин, хинин, эфедрин, стрихнин-метил-6-фенилэтиламина (амфетамин) и т.п. с асимметричными соединениями, несущими кислотную функциональную группу, таких как карбоновые кислоты и сульфоновые кислоты. Диастереомерные соли могут быть активированы для разделения фракционной кристаллизацией или ионной хроматографией. Для разделения оптических изомеров аминосоединений добавление хиральных карбоновых или сульфоновых кислот, таких как камфорсульфоновой кислоты, винной кислоты, миндальной кислоты или молочной кислоты, может привести к образованию диастереомерных солей.
Альтернативно, по способу (2) субстрат для разделения подвергают взаимодействию с одним энантиомером хирального соединения с образованием диастереомерной пары (Е. апй ХУПеп, 8. 81егеосЬепш1гу о£ Огдатс Сοтροиηйδ, 1оЬп ХУПеу & 8ош, 1пс., 1994, ρ. 322). Диастереомерные соединения могут быть получены реакцией асимметричных соединений с энантиомерно чистыми хиральными дериватизирующими реагентами, такими как ментилпроизводные, с последующим разделением диастереомеров и гидролизом с получением чистого или обогащенного энантиомера. Способ определения оптической чистоты включает получение хиральных сложных эфиров рацемической смеси, например ментиловых эфиров, например с (-)ментилхлорформиатом, в присутствии основания, или эфира Мошера, альфа-метокси-альфа-(трифторметил)фенилацетата (1асоЬ III. I. Огд. СЬет. (1982), 47:4165) и анализа спектра ЯМР 1Н в присутствии двух атропизомерных энантиомеров или диастереомеров. Стабильные диастереомеры атропизомерных соединений могут быть разделены и выделены нормальной и обращенно-фазовой хроматографией в соответствии со способами разделения атропизомерных нафтилизохинолинов (ХУО 1996/015111).
По способу (3) рацемическая смесь двух энантиомеров может быть разделена с помощью хроматографии с использованием хиральной неподвижной фазы (СЫга1 Ысций СЬгота!одгарЬу (1989), У.1. ЬоидЬ, Ей., СЬартап апй На11, №\у Уогк; Окато1о, I. СЬгота!одг. (1990), 513:375-378). Обогащенные или очищенные энантиомеры можно выделить способами, используемыми для разделения других хиральных молекул с асимметричными атомами углерода, такими как оптическое вращение и круговой дихроизм.
Основные методики получения.
Основная методика А.
Реакция Сузуки:
Реакция сочетания по типу Сузуки используется для присоединения моноциклического гетероарила, конденсированного бициклического гетероцикла, а конденсированного бициклического гетероарила, или фенила по 2 позиции пиримидинового кольца 2-хлор-пурина 21. Например, 21 можно объединить с 1,5 экв. 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индазола 24 и растворить приблизительно в 3 экв. карбоната натрия в виде приблизительно 1 молярного раствора в воде и приблизительно эквивалентном объеме ацетонитрила. Добавили каталитическое количество, или более, низковалентного палладиевого реагента, такого как бис-(трифенилфосфин)палладий(11) дихлорид. Различные бороновые кисло- 36 026134 ты или бороновые эфиры могут использоваться вместо показанного индазолборонового эфира. Также альтернативно, азот в составе индазола может быть защищен, например, Ν-ТНР защитным соединением 41. В некоторых случаях используют ацетат палладия вместо карбоната натрия для доведения рН водного слоя. Реакция связывания Сузуки в присутствии палладия может быть оптимизирована и/или ускорена в условиях микроволнового излучения. Реакцию можно нагревать приблизительно до 100-150°С под давлением в микроволновой печи, такой как Вю1аде ΘρΙίιηί/сг (Вю1аде, 1пс.), в течение приблизительно 10-30 мин. Содержимое охлаждают, концентрируют и экстрагируют этилацетатом или другим органическим растворителем. После эвапорации органического слоя продукты сочетания Сузуки, 6,8,9-замещенный 2-(1Н-индазол-4-ил)пурин 22, или 6,8,9-замещенный 2-(5-пиримидин-2-амин)пурин 23, можно очистить на силикагеле или обратно-фазовой ВЭЖХ. Заместители К2, К3 могут быть К2, К3, как определено, или их защищенные формы или предшественники.
Различные палладиевые катализаторы могут использоваться на стадии сочетания Сузуки с образованием соединений, включая иллюстративные воплощения 22 и 23. Сочетание Сузуки представляет собой палладий катализируемую реакцию кросс-сочетания арилгалида, такого как 21, с бороновой кислотой или эфиром, таким как 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индазол 24 или 5-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин 25. Низковалентные, Рй(11) и Рй(0) катализаторы могут использоваться в реакции сочетания Сузуки, включая РйС12(РРЬ3)2, Рй(1-Ви)3, РйС12йрр£СН2С12, Рй(РРЬ3)4, Рй(ОАс)/РРЬ3, С12Рй[(Ре13)]2, Ра(Л1РНО§)2, С12Рй(В1ру), [РйС1(РЬ2РСН2РРЬ2)]2, С12Рй[Р(о-1о1)3]2, Ра2(йЬа)3/Р(о-Ю1)3, Ра2(аЪа)/Р(Гшу1)3, С12Рй[Р(1игу1)3]2, С12Рй(РМеРЬ2)2, С12Рй[Р(4-Р-РЬ)3]2,
С12Рй[Р(С6Р6)3]2, С12Рй[Р(2-СООН-РЬ)(РЬ)2]2, С12Рй[Р(4-СоОН-РЬ)(РЬ)2]2, и инкапсулированные катализаторы Рй ЕпСа1™ 30, Ра ЕпСа1™ ТРР30 и Рй(И)ЕпСа1™ В1ЫАР30 (И§ 2004/0254066). Одним из таких палладиевых катализаторов для реакции Сузуки является [1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(11), комплекс с дихлорметаном, обозначенный как Рй(йрр£)С12.
Общая методика В.
С-6 азотзамещение:
К 2,6-дихлорпуриновому промежуточному соединению 27 в растворителе, таком как этанол, добавили морфолиноамин (тог, 1.1 экв.) и ненуклеофильное основание, такое как триэтиламин (ΝΕΐ3, 1,5 экв.). Альтернативно, ацетонитрил может быть использован в качестве растворителя, а карбонат калия может быть использован в качестве основания. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение приблизительно 1 ч или в течение ночи, летуче компоненты удаляют под вакуумом и остаток разделяют между ДХМ и солевым раствором. Если смесь является нерастворимой, она может быть подвергнута воздействию ультразвуком и твердый продукт собирают фильтрацией. Высушивание над сульфатом магния и эвапорация растворителя приводит к №-(2-хлорпурин-6-ил)амин замещенному промежуточному соединению 28, часто в виде кристаллического осадка, или с помощью тритурирования. Заместители К2 и К3 могут быть К2 и К3, как определено, или их защищенные формы или предшественники.
Общая методика С.
Ν-9-азотное алкилирование:
9-Н-пуриновое промежуточное соединение 29 развели в ДМФ и в реакционную смесь добавили 2 экв. карбоната цезия, реакцию нагрели до 50°С, после чего добавили к реакционной смеси 3 экв. алкилгалида К2 -X. За протеканием реакции следят с помощью ТСХ или ЬС/М§ и перемешивают до завершения, обычно несколько часов. Реакционную смесь экстрагировали ЕЮАс и водой, органический слой высушили, отфильтровали и сконцентрировали с получением неочищенного 9-алкилированного пурина 30, который сразу используют в следующей реакции или очищают обратно-фазовой ВЭЖХ.
2' 3' 4' 2 3 4
Заместители К , К и К могут быть К , К и К , как определено, или их защищенные формы или предшественники.
- 37 026134
Общая методика Ό. ТНР депротекция:
В основном Ν-9-тетрагидропиранил замещенное соединение 31 можно обработать каталитическим количеством паратолуолсульфоновой кислоты (РТ8Л) в растворе метанола и нагревать приблизительно при 50°С до тех пор, пока не отсоединится тетрагидропирановая группа (ТНР), с получением соединения 32. За протеканием реакции следят с помощью ЬС-М8 или ТСХ. Заместители К3 и К4 могут быть К3 и К4, как определено, или их защищенные формы или предшественники.
Общая методика Е.
Вос-депротекция:
В основном Вос-замещенные соединения 33 обрабатывают ТФУ или 4н. НС1 для удаления трет-бутоксикарбонильной группы (групп) и за протеканием реакции следят с помощью ЬС-М8 до завершения. Неочищенный продукт затем концентрируют и очищают обратно-фазовой ВЭЖХ с получением продукта 34 в виде чистого осадка. Заместители К2 и К3 могут быть К2 и К3, как определено, или их защищенные формы или предшественники.
Общая методика Р.
2,6,8-Замещенный 9-алкилкарбоксилпурин 35, где п представляет собой 1-3, обработали 1,5 экв. НАТи (2-(7-аза-1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат), избытком (таким как 3 экв.) алкиламина (ННК10^1) и избытком (таким как 3 экв.) карбоната цезия в диметилформамиде (ЭМР). Альтернативно, может быть использован другой связывающий реагент. Реакционную смесь перемешивали до завершения реакции и экстрагировали этилацетатом с насыщенным раствором бикарбоната. Органический слой высушили, отфильтровали и сконцентрировали с получением ацилированного, неочищенного промежуточного соединения, которое очистили с помощью обратно-фазовой ВЭЖХ с получением продукта 36. Заместители К3 и К4 могут быть К3 и К4, как определено, или их защищенные формы или предшественники.
- 38 026134
Общая методика О.
Синтез пиримидооксазина (формула Ιη).
Схема 1
Пиримидооксазины формулы (Ιη) получены в соответствии с реакциями, описанными далее и показанными на схеме 1, или способами, известными из уровня техники. Защищенные трихлорпиримидины формулы (II) можно получить с использованием способов, описанных в литературе. Трихлориды могут взаимодействовать с циклическими аминами формулы (ΙΙΑ) в присутствии основания, такого как триэтиламин в растворителе, таком как этанол, приблизительно при комнатной температуре с получением дихлоридов формулы (ΙΙΙ). Метоксипиримидин может быть подвергнут депротекции с использованием реагента, такого как ЫС1, в растворителе, таком как ДМФ, под воздействием микроволнового излучения, при РО=Ме, или обработкой кислотой, такой как ТФУ, в растворителе, таком как ДХМ, когда РО=р-метоксибензил, с получением фенолов формулы (Ιν). Трициклические пиримидооксазины формулы (V) затем могут быть получены из диолов формулы (Ιν) с азосоединением, таким как ΌΙΑΌ, в присутствии фосфина, такого как трифенилфосфин, в растворителе, таком как 1,4-диоксан. Альтернативно, образование соединений (V) может быть достигнуто первоначальным трансформированием гидроксильной группы в подходящую покидающую группу с последующей внутримолекулярной реакцией замещения, катализируемой реакцией с реагентом, таким как метансульфонилхлорид, в присутствии основания, такого как триэтиламин, в растворителе, таком как ТГФ. Соединения формулы (νΙ) можно получить из соединений (V) взаимодействием с производным морфолина (содержащим подходящие заместители К) в присутствии основания, такого как триэтиламин, в растворителе, таком как этанол, при повышенной температуре. Для η=2, А=О добавление морфолина происходит региоспецифичным образом, тогда как для η=1, А=СН2 эта реакция может также приводить к образованию нежелательного региоизомера. Пиримидооксазины формулы (Ι) могут быть образованы взаимодействием соединений формулы (νΙ) с арилили гетероарилметилированным реагентом, таким как гетероарилбороновая кислота, бороновый эфир или станнан, в присутствии катализатора на основе переходного металла, такого как Рб(РРЬ3)2С12, и основания, такого как водный раствор карбоната натрия, в растворителе, таком как ацетонитрил, под воздействием микроволнового излучения при температурах вплоть до 150°С.
Альтернативно, пиримидооксазины формулы (Ιη) можно получить в соответствии со схемой 2. Защищенные трихлорпиримидины формулы (ΙΙ) могут быть получены из соединений формулы (νΙΙ) (полученные в соответствии со способами, описанными в разделе Уровень техники), взаимодействием со спиртом, таким как п-метоксибензиловый спирт, в присутствии азосоединения, такого как ΌΙΑΌ, в присутствии фосфина, такого как трифенилфосфин, в растворителе, таком как 1,4-диоксан. Альтернативно, образование соединений (ΙΙ) может быть достигнуто обработкой соединения (νΙΙ) силилгалидом, таким как трет-бутилхлордифенилсилан, в присутствии основания, такого как триэтиламин, с добавкой, такой как Ν,Ν-диметиламинопиридин, в растворителе, таком как ДМФ. Трихлорпиримидины (ΙΙ) могут взаи- 39 026134 модействовать с циклическим амином формулы (ΙΙΑ) в присутствии основания, такого как триэтиламин, в растворителе, таком как этанол, при температуре окружающей среды с получением дихлоридов формулы (VII). Соединения формулы (IX) можно получить путем взаимодействия соединений формулы (VIII) с арил- или гетероарилметилированным реагентом, таким как гетероарилбороновая кислота, бороновый эфир или станнан, в присутствии катализатора на основе переходного металла, такого как Рб(РРЬ3)2С12, и основания, такого как водный раствор карбоната натрия, в растворителе, таком как ацетонитрил, под воздействием микроволнового излучения при температурах вплоть до 150°С. Для больших защитных групп, например РС = п-метоксибензол или РС = трет-бутилдифенилсилан, это замещение может произойти с региоспецифичным контролем, давая 2-арил или 2-гетероарильные соединения формулы (IX). Фенолы формулы (X) могут быть образованы путем удаления защитной группы из соединения (IX) с использованием кислоты, такой как ТФУ, в растворителе, таком как ДХМ, при комнатной температуре. Соединения формулы (X) могут быть превращены в соединения формулы (XI) с помощью способов, описанных для превращения соединений формулы (IV) в соединения формулы (V) на схеме 1. Наконец, пиримидооксазины формулы (Ш) можно получить путем взаимодействия соединений формулы (XI) посредством реакции с морфолином (содержащим соответствующие заместители К) в присутствии основания, такого как триэтиламин, в растворителе, таком как этанол, при температурах вплоть до температуры кипения.
Схема 2
АгМ, катализатор, основание, растворитель
РС
(IX) кислота, растворитель
С1
(X)
Связывающий агент, фосфин, растворитель или
МзС1, основание, растворитель
С)
С1
(XI) т = 1 ог 2 η = 0,1 ог 2
А=СН2, если о=1 или Ы или О, если 0=2
К=подходящий заместитель Аг=фенил или подходящее ароматическое кольцо М=металл
РС=защитная группа
- 40 026134
Примеры
Химические реакции, описанные в это разделе, могут быть легко адаптированы для получения ряда других ингибиторов И3К согласно настоящему изобретению, а также альтернативные способы получения соединений настоящего изобретения считаются входящими в объем настоящего изобретения. Например, синтез не приведенных в примерах соединений согласно изобретению может быть успешно проведен модификациями, очевидными для специалистов в данной области техники, например путем соответствующей защиты реакционноспособных функциональных групп за счет использования других подходящих реагентов, известных в данной области техники, отличных от описанных, и/или путем обычных модификаций условий реакции. Альтернативно, другие реакции, раскрытые здесь или известные в данной области, могут применяться для получения других соединений по изобретению.
В описанных ниже примерах, если не указано иное, все температуры приведены в градусах Цельсия. Реагенты были приобретены у коммерческих поставщиков, таких как §1§ша А1йпсН СЬет1са1 Сотрапу, Ьапса8Тег, ТС1 или МауЬпйде, и были использованы без дополнительной очистки, если не указано иное. Реакции, изложенные ниже, обычно проводились при положительном давлении азота или аргона или с хлоркальциевой трубкой (если не указано иначе) в безводных растворителях, и реакционные колбы обычно снабжались резиновыми перегородками для введения субстратов и реагентов через шприц. Посуда была высушена в печи и/или при температуре. Колоночную хроматографию проводили на системе ВюТаде (производитель: Эуах Согрогайоп), имеющей колонку с силикагелем, или на силикагелевом картридже §ЕР РАК® (^аТег8). 'Н ЯМР-спектры были получены при 400 МГц в дейтерированном СЭС13, й6-ДМСО, СНЮЭ или й6-ацетона растворах (в м.д.) с использованием хлороформа в качестве эталона (7,25 м.д.). Когда наблюдалось наложение пиков, использовались следующие сокращения: 8 (синглет), й (дублет), ΐ (триплет), ш (мультиплет), Ьг (расширенный), йй (двойной дублет), Й1 (дублет триплетов). Константы взаимодействия, когда они приведены, даны в герцах (Гц).
- 41 026134
ВЭЖХ проводилась следующими иллюстративными способами: (А) ВЭЖХ короткий способ -10 мин продолжительность ВЭЖХ-АдПеп! 1200
Подвижная фаза А Подвижная фаза В
Вода с0.05%ТФУ Ацетонитрил с 0.05%ТФУ
Колонка Температура колонки ЖХ градиент ЖХ скорость
АдПеп! ΖΟΡΒΑΧ ЗО-С18, 1.8 мкм,
2.1*30 мм градусов С
3-95%В - 8.5 мин, 95% - 2.5 мин потока
Длина волны
400 мкл/мин 220нм и 254нм
Масс-спектрометр - АдПеп! яиас1гиро1е 6140 Ионизация Электроспрей положительная
Диапазон сканирования 110-800 а.е.м.
(В) №а!егз АсриПу/ЬСТ длинный способ - 20 мин п род о лжител ьн ость \Л/а1егз АсциПу СВЭЖХ
Подвижная фаза А Подвижная фаза В
Вода с 0.05%ТФУ Ацетонитрил с 0.05%ТФУ
Колонка Температура колонки ЖХ градиент ЖХ скорость
АсциНу и РЬС ВЕН С18, 1.7
2.1*50мм градусов С
2-98%В - 17.0 мин, 98% - 1.5 мин мкм, потока
Длина волны
600 мкл/мин 254 нм
Масс-спектрометр - \Л/а!егз 1_СТ Ргегтнег ХЕ Ионизация Электроспрей положительная
Диапазон сканирования 110-800 а.е.м.
- 42 026134 (С) ЖХМС 2.5 мин хиральный способ Подвижная фаза А: С02 Подвижная фаза В: метанол Условия изократичности: 25%В Скорость потока: 5 мл/мин Выпускное давление: 120 Бар Температура: 40 градусов С Колонка: СИ|га1Се1 СЫ (4.6x50 мм, 3 мкм)
Длина волны:230 нм Прибор: Вегдег Апа1уИса1 ЗРС/МЗ
Хиральная очистка:
Условия А:
Подвижная фаза А: СО2
Подвижная фаза В: метанол
Условия изократичности: 25%В
Скорость потока: 60 мл/мин
Выпускное давление: 100 Бар
Температура: 40 градусов С
Колонка: СЫга1Се1 СС (21.2x250 мм, 5 мкм)
Длина волны:230 нм Прибор: Вегдег МОП
Пример 1. 2,6-Дихлор-9-метил-9Н-пурин 4
Циангруппу 5-амино-1-метил-1Н-имидазол-4-карбонитрила 1 гидролизовали до амида в серной кислоте с получением 5-амино-1-метил-1Н-имидазол-4-карбоксамида 2, который циклизовали с мочевиной до 9-метил-1Н-пурин-2,6-(3Н,9Н)-диона 3. Хлорирование соединения 3 дало 2,6-дихлор-9-метил-9Нпурин 4.
Пример 2. 4-(4,4,5,5-Тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-индазол 24 (путь 1)
К раствору 3-бром-2-метиланилина (5.0 г, 26.9 ммоль) в хлороформе (50 мл) добавили ацетат калия (1.05 экв., 28.2 ммоль, 2.77 г). Добавили уксусный ангидрид (2.0 экв., 53.7 ммоль, 5.07 мл) с сопутствующим охлаждением на ледяной воде. Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, после чего сформировался белый желатинообразный осадок. 18-Краун-6 (0.2 экв., 5.37 ммоль, 1.42 г) добавили с последующим изоамилнитритом (2.2 экв., 59.1 ммоль, 7.94 мл) и смесь нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 18 ч. Реакционной смеси дали остыть и разделили между хлороформом (3x100 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (100 мл). Объединенные органические экстракты промыли солевым раствором (100 мл), разделили и высушили (М§8О4). Неочищенный продукт эвапорировали на силикагеле и очистили хроматографией, элюируя от 20 до 40% ЕЮАс-бензин, с получением 1-(4-броминдазол-1-ил)этанона А (3.14 г, 49%) в виде оранжевого осадка и
- 43 026134
4-бром-1Н-индазола В (2.13 г, 40%) в виде бледно-оранжевого осадка.
А: ' 11 ЯМР (400 МГц, СПС13): δ 2.80 (3Н, 5), 7.41 (1Н, !, 1=7.8 Гц), 7.50 (1Н, Б, 1=7.8 Гц), 8.15 (1Н, 5), 8.40 (1Н, Б, 1=7.8 Гц).
В: Ή ЯМР (400 МГц, СПС13): δ 7.25 (1Н, !, 1=7.3 Гц), 7.33 (1Н, Б, 1=7.3 Гц), 7.46 (1Н, Б, 1=7.3 Гц), 8.11 (1Н, 5), 10.20 (1Н, Ьг5).
К раствору 1-(4-бром-индазол-1-ил)этанона А (3.09 г, 12.9 ммоль) в МеОН (50 мл) добавили 6н. водную НС1 (30 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 7 ч. МеОН эвапорировали и смесь разделили между Ε!ОΑс (2x50 мл) и водой (50 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (50 мл), разделили и высушили (Μ§δО4). Растворитель удалили эвапорацией при пониженном давлении с получением 4-бром-1Н-индазола В (2.36 г, 93%).
К раствору 4-бром-1Н-индазола В (500 мг, 2.54 ммоль) и бис-(пинаколато)дибора (1.5 экв., 3.81 ммоль) в ДМСО (20 мл) добавили ацетат калия (3.0 экв., 7.61 ммоль, 747 мг; высушенный в пистолете для сушки) и ΡБС12(Бρρί)2 (3 мол.%, 0.076 ммоль, 62 мг). Смесь дегазировали аргоном и нагревали при 80°С в течение 40 ч. Реакционной смеси дали остыть и разделили между водой (50 мл) и эфиром (3x50 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (50 мл), разделили и высушили (Μ§δО4). Неочищенный материал очистили хроматографией, элюируя от 30 до 40% Ε!ОΑс-бензин, с получением неразделимой 3:1 смеси 4-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-индазола 24 (369 мг, 60%) и индазола (60 мг, 20%), выделенных в виде желтой смолы, которая при хранении отвердевала с получением серо-белого осадка.
Ή ЯМР (400 МГц, ί1..-1)\1δθ): δ 1.41 (12Н, 5), 7.40 (1Н, ББ, 1=8.4 Гц, 6.9 Гц), 7.59 (1Н, Б, 1=8.4 Гц), 7.67 (1Н, Б, 1=6.9 Гц), 10.00 (1Н, Ьг5), 8.45 (1Н, 5) и индазол: 7.40 (1Н, !), 7.18 (1Н, !, 1=7.9 Гц), 7.50 (1Н, Б, 1=9.1 Гц), 7.77 (1Н, Б, 1=7.9 Гц), 8.09 (1Н, 5); примесь при 1.25.
Пример 3. 4-(4,4,5,5-Тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-индазол 24 (путь 2)
К раствору 2-метил-3-нитроанилина (2.27 г, 14.91 ммоль) в уксусной кислоте (60 мл) добавили раствор нитрита натрия (1.13 г, 1.1 экв.) в воде (5 мл). Через 2 ч темно-красный раствор влили в лед/вода и полученный преципитат собрали фильтрацией с получением 4-нитро-1Н-индазола С (1.98 г, 81%). Смесь 4-нитро-1Н-индазола С (760 мг, 4.68 ммоль), палладия на угле (10%, са!.) и этанола (30 мл) перемешивали под водородом в течение 4 ч. Реакционную смесь затем отфильтровали через целит, и растворитель удалили под вакуумом с получением 1Н-индазол-4-иламина Ό (631 мг, 100%). Водный раствор нитрита натрия (337 мг, 4.89 ммоль) в воде (2 мл) добавили по каплям к суспензии 1Н-индазол-4-иламина Ό (631 мг, 4.74 ммоль) в 6 М соляной кислоте (7.2 мл) при температуре ниже 0°С. После перемешивания в течение 30 мин, в реакционную смесь добавили тетрафторборат натрия (724 мг). Образовался вязкий раствор, который отфильтровали и быстро промыли водой с получением 1Н-индазол-4-диазониевой соли тетрафторбората Е (218 мг, 20%) в виде темно-красного осадка. Безводный метанол (4 мл) продули аргоном в течение 5 мин. К нему добавили 1Н-индазол-4-диазониевую соль тетрафторбората (218 мг, 0.94 ммоль), бис-пинаколатодибор (239 мг, 1.0 экв.) и [1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроцен]палладий(11) хлорид (20 мг). Реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч и затем отфильтровали через целит. Остаток очистили с использованием флэш-хроматографии с получением 4-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-индазола 24 (117 мг).
Пример 4. 1-(Тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Ниндазол (путь А)
А
- 44 026134
Стадия Ά. Получение 4-хлор-1Н-индазола.
К 250 мл колбе с магнитным якорем добавили 2-метил-3-хлоранилин (8.4 мл, 9.95 г, 70.6 ммоль), ацетат калия (8.3 г, 84.7 ммоль) и хлороформ (120 мл). Эту смесь охладили до 0°С при перемешивании. К охлажденной смеси добавили уксусный ангидрид (20.0 мл, 212 ммоль) по каплям в течение 2 мин. Реакционную смесь нагрели до 25°С и перемешивали в течение 1 ч. В это время реакцию нагревали до 60°С. Добавили изоамилнитрит (18.9 мл, 141 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 60°С. После завершения добавили воду (75 мл) и ТГФ (150 мл) и реакционную смесь охладили до 0°С. ЬЮН (20.7 г, 494 ммоль) добавили и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 3 ч. Воду (200 мл) добавили и продукт экстрагировали ΕίΟΆ (300 мл, 100 мл). Органические слои объединили, высушили над Мд§О4 и сконцентрировали под вакуумом с получением 4-хлор-1Н-индазола 11.07 г (100%) в виде оранжевого осадка.
!Н ЯМР (400 МГц, СИС13): δ 8.18 (й, 1=1 Гц, 1Н), 7.33 (й, 1=8 Гц, 1Н), 7.31 (ί, 1=7 Гц, 1Н), 7.17 (йй, 1=7 Гц, 1 Гц, 1Н).
ЬСМ8 (ΕδI ροδ) т/е 153 (М+1).
Стадия В. Получение 4-хлор-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-индазола.
В 1 л колбу с механической мешалкой добавили 4-хлор-1Н-индазол (75.0 г, 0.492 моль), п-толуолсульфонат пиримидиния (1.24 г, 4.92 ммоль), СН2С12 (500 мл) и 3,4-дигидро-2Н-пиран (98.6 мл, 1.08 моль). При перемешивании эту смесь нагревали до 45°С в течение 16 ч. Анализ реакционной смеси показал продукцию двух изомеров продукта. Реакционную смесь охладили до 25°С и добавили СН2С12 (200 мл). Промыли раствор водой (300 мл) и насыщенным NаНСΟ3 (250 мл). Высушили органику над Мд§О4 и сконцентрировали досуха. Очистили неочищенный продукт растворением в ΕίΟΆс/гексаны (4:6, 1 Ь) и добавили δίΟ2 (1.2 Ь). Смесь отфильтровали и остаток промыли ΕίΟ^^^Β^ι (4:6, 2 Ь). Органические слои сконцентрировали под вакуумом с получением 4-хлор-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)1Н-индазола 110.2 г (95%) в виде оранжевого осадка.
Изомер 1: !Н ЯМР (400 МГц, СИС13): δ 8.10 (й, 1=1 Гц, 1Н), 7.50 (йй, 1=9 Гц, 1 Гц, 1Н), 7.29 (йй, 1=9 Гц, 8 Гц, 1Н), 7.15 (йй, 1=8 Гц, 1 Гц, 1Н), 5.71 (йй, 1=9 Гц, 3 Гц, 1Н), 4.02 (т, 1Н), 3.55 (т, 1Н), 2.51 (т, 1Н), 2.02 (т, 2Н), 1.55 (т, 3Н).
ЬСМ8 ροδ) т/е 237 (М+1);
Изомер 2: !Н ЯМР (400 МГц, СИС13): δ 8.25 (й, 1=1 Гц, 1Н), 7.62 (йй, 1=9 Гц, 1 Гц, 1Н), 7.20 (йй, 1=9 Гц, 8 Гц, 1Н), 7.06 (йй, 1=8 Гц, 1 Гц, 1Н), 5.69 (йй, 1=9 Гц, 3 Гц, 1Н), 4.15 (т, 1Н), 3.80 (т, 1Н), 2.22 (т, 2Н), 2.05 (т, 1Н), 1.75 (т, 3Н).
ЬСМ8 ροδ) т/е 237 (М+1).
Стадия С. Получение 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)-1Н-индазола.
В 500 мл колбу с магнитным якорем добавили 4-хлор-1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-индазол (10.0 г, 42.2 ммоль), ДМСО (176 мл), РйС12(РРЬ3)2 (6.2 г, 8.86 ммоль), трициклогексилфосфин (0.47 г, 1.69 ммоль), бис-(пинаколато)дибор (16.1 г, 63.4 ммоль) и ацетат калия (12.4 г, 0.127 моль). При перемешивании смесь нагревали до 130°С в течение 16 ч. Реакционную смесь охладили до 25°С и добавили ΕίΟΆ (600 мл) и промыли водой (2x250 мл). Органические слои высушили над Μ§δΟ4 и сконцентрировали под вакуумом досуха. Неочищенный продукт очистили с помощью слоя δίΟ2 (120 г), элюируя 10% ΕίΟΆс/гексаны (1 л) и 30% ΕίΟΆс/гексаны (1 л). Фильтрат сконцентрировали под вакуумом с получением 13.9 г (100%) 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Ниндазола в виде 20% (мас./мас.) раствора в этилацетате. 1Н ЯМР показал присутствие приблизительно 20% (мас./мас.) бис-(пинаколато)дибора.
!Н ЯМР (400 МГц, СИС13): δ 8.37 (δ, 1Н), 7.62 (йй, 1=14 Гц, 2 Гц, 1Н), 7.60 (йй, 1=7 Гц, 1 Гц, 1Н), 7.31 (йй, 1=8 Гц, 7 Гц, 1Н), 5.65 (йй, 1=9 Гц, 3 Гц, 1Н), 4.05 (т, 1Н), 3.75 (т, 1Н), 2.59 (т, 1Н), 2.15 (т, 1Н)2.05(т, 1Н), 1.75 (т,3Н), 1.34 (δ, 12Н).
ЬСМ8 ροδ) т/е 245 (М+1).
Пример 5. 1-(Тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Ниндазол (путь В)
Стадия Α. Получение 4-нитро-1Н-индазола.
Смесь 2-метил-3-нитроанилина (200 г, 1.315 моль), уксусной кислоты (8000 мл) охладили до 1520°С и медленно, в течение 30 мин, добавили раствор нитрита натрия (90.6 г, 1.315 моль) в воде (200 мл). После добавления реакционную температуру увеличили до 25-30°С и реакционную смесь перемешивали
- 45 026134 при этой температуре в течение 2-3 ч. За протеканием реакции следили с помощью ТСХ и после завершения реакционный продукт отфильтровали и остаток промыли уксусной кислотой (1000 мл). Уксусную кислоту выпарили под вакуумом (550 мм рт.ст.) при температуре ниже 80°С и добавили воду (8000 мл), охладили до 25-30°С и перемешивали в течение 30 мин. Суспензию отфильтровали и промыли водой (1000 мл). Неочищенный продукт высушили при нагревании до 70-80°С в течение 2 ч, затем растворили в 5% растворе этилацетат/н-гексан (100:2000 мл) и перемешивали в течение 1-1.5 ч при комнатной температуре. Суспензию отфильтровали и промыли 5% смесью этилацетат/н-гексан (25:475 мл). Полученный продукт высушили под вакуумом при температуре ниже 80°С в течение 10-12 ч с получением 4-нитро-1Н-индазола в виде коричневого осадка (150 г, 70%), т.пл.: 200-203°С.
¥ ЯМР (200 МГц, СОС13): δ 13.4 (Ьг, 1Н), 8.6 (5, 1Н), 8.2-7.95 (бб, 2Н), 7.4 (т, 1Н).
ΕδΜδ т/ζ 164 (М+1).
Чистота: 95% (ВЭЖХ).
Стадия В. Получение 4-амино-1Н-индазола.
Смесь 4-нитро-1Н-индазола (200 г, 1.22 моль) и 10% палладия на угле (20.0 г) в ЕЮН (3000 мл) гидрогенезировали при комнатной температуре (реакция была изотермической и температура увеличилась до 50°С). После завершения реакции катализатор удалили фильтрацией. Растворитель эвапорировали под вакуумом при температуре ниже 80°С и охладили до комнатной температуры и н-гексан (1000 мл) добавили к остатку и перемешивали в течение 30 мин. Выделенный осадок отфильтровали и промыли н-гексаном (200 мл). Продукт высушили под вакуумом при 70-80°С в течение 10-12 ч с получением 4-амино-1Н-индазола в виде коричневого осадка (114 г, 70%), т.пл.: 136-143°С.
¥ ЯМР (200 МГц, СОС13): δ 12 (Ьг, 1Н), 8.0 (5, 1Н), 7.1-7.0 (бб, 2Н), 6.5 (б, 1Н), 3.9 (т, 2Н).
ΕδΜδ т/ζ 134 (М+1).
Чистота 90-95% (ВЭЖХ)
Стадия С. Получение 4-йодо-1Н-индазола.
Смесь 4-амино-1Н-индазола (50.0 г, 0.375 моль) в воде (100 мл) и конц. соляной кислоты (182 мл) охладили до -10°С. К этому добавили раствор нитрита натрия (51.7 г, 0.75 моль) в воде (75 мл) по каплям при -10°С в течение приблизительно 30-60 мин (во время добавления наблюдалось пенообразование). В другой колбе приготовили смесь йодида калия (311 г, 1.87 моль) в воде (3000 мл) при комнатной температуре и к ней добавляли охлажденную выше соль диазония при 30-40°С в течение приблизительно 3040 мин. Реакцию выдерживали при 30°С в течение 1 ч и после завершения реакции, добавили этилацетат (500 мл) и реакционную смесь отфильтровали через целит. Слои разделили и водный слой экстрагировали этилацетатом (2x500 мл). Объединенные органические слои промыли 5% раствором гипосульфита (2x500 мл), солевым раствором (500 мл), высушили (№¥О4) и сконцентрировали. Неочищенный продукт очистили хроматографией (силикагель, гексан, 15-20% этилацетат/гексан) с получением 4-йодо-1Н-индазола в виде оранжевого осадка (23.0 г, 25%). т.пл.: 151-177°С.
¥ ЯМР (200 МГц, СОС13): δ 12.4 (Ьг, 1Н), 8.0 (5, 1Н), 7.6 (бб, 2Н), 7.1 (б, 1Н).
ΕδΜδ т/ζ 245 (Μ+1).
Чистота: 95-98% (ВЭЖХ).
Стадия Ό.
Получение 4-йодо-1-(2-тетрагидропиранил)индазол.
Смесь 4-амино-1Н-индазола (250.0 г, 1.024 моль), 3,4-дигидро-2Н-пирана (126.0 г, 1.5 моль) и ΡΡΤδ (2.57 г, 0.01 моль) в СН2С12 (1250 мл) нагревали при 50°С в течение 2 ч. Реакцию охладили до комнатной температуры и влили в воду (625 мл), слои разделили, анб водный слой экстрагировали СН2С12 (250 мл). Объединенные органические слои промыли водой (625 мл), высушили (№^О4) и сконцентрировали. Неочищенный остаток очистили хроматографией (силикагель, гексан, 5-10% этилацетат/гексан) с получением 4-йодо-1-(2-тетрагидропиранил)индазола в виде масла (807.0 г, 60%).
¥ ЯМР (200 МГц, СОС13): δ 8.5 (5, 1Н), 7.8 (т, 1Н), 7.6 (б, 1Н), 7,.25 (т, 1Н), 5.7 (бб, 1Н), 4.2-3.8 (бб, 1Н), 2.2-2.0 (т, 4Н) 2.0-1.8 (т, 4Н).
ΕδΜδ т/ζ 329 (Μ+1).
Стадия Е. Получение 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)-1Н-индазола.
Смесь 4-йодо-1-(2-тетрагидропиранил)индазола (100 г, 0.304 моль), бис-пинаколатобиборана (96.4 г, 0.381 моль), ГбСЕ/бррТ) (8.91 г, 0.012 моль) и ацетата калия (85.97 г, 0.905 моль) в ДМСО (500 мл) нагревали при 80°С в течение 2-3 ч. После завершения реакцию охладили до комнатной температуры и добавили воду (1500 мл). Реакционную массу экстрагировали этилацетатом (3x200 мл) и объединенные органические слои выпарили, высушили (№¥О4) и сконцентрировали. Неочищенный продукт очистили с помощью колончатой хроматографии (силикагель, гексан, 5-10% этилацетат/гексан) с получением 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индазола в виде вязкого коричневого масла (70.0 г, 70%).
¥ ЯМР (СБС13): δ 8.5 (5, 1Н), 7.8 (т, 1Н), 7.6 (б, 1Н), 7.25 (т, 1Н), 5.7 (бб, 1Н), 4.2-3.8 (бб, 1Н), 2.22.0 (т, 4Н), 2.0-1.8 (т, 4Н), 1.4-1.2 (5, 12Н).
- 46 026134
Е8М8 т/ζ 329 (М+1).
Пример 6. 4-Метил-5-(4,4,5,5-тетраметил(1,3,2-диоксаборолан-2-ил))пиримидин-2-иламин
К раствору 4-метилпиримидин-2-иламина (8.0 г, 0.073 моль) в хлороформе (320 мл) добавили Ν-бромсукцинимид (13.7 г, 0.077 моль). Реакционную смесь перемешивали в темноте в течение 18 ч. ЬС/Μδ показала завершение реакции. Смесь разбавили ДХМ, затем промыли 1н. №ЮН водным раствором и солевым раствором, высушили над М§§04, отфильтровали и сконцентрировали с получением
5-бром-4-метилпиримидин-2-иламина (12 г, Выход: 86%).
Смесь 5-бром-4-метилпиримидин-2-иламина (5.0 г, 26 ммоль), ацетата калия (7.83 г, 79.8 ммоль), 4,4,5,5-тетраметил-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,3,2-диоксаборолана (7.43 г, 29.2 ммоль) в диоксане (140 мл) перемешивали в течение 20 мин в атмосфере азота. 1,1'-бис-(Дифенилфосфино)ферроцен палладий(П) хлорида дихлорметановый аддукт (1.08 г, 1.33 ммоль) добавили в реакционную смесь. Реакционную смесь нагревали при 115°С в течение 18 ч в атмосфере азота. После завершения реакции смесь охладили и добавили ЕЮАс. Получившуюся смесь обработали ультразвуком и отфильтровали. Использовали дополнительное количество ЕЮАс для промывания осадка. Объединенные органические экстракты промыли водой, высушили над М§§04, отфильтровали и сконцентрировали. Неочищенный продукт очистили хроматографией, элюируя 20-100% ЕЮАс/гексан с получением 4.5 г 4-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил(1,3,2-диоксаборолан-2-ил))пиримидин-2-иламина (выход: 74%).
Ή-ЯМР (ДМСО, 400 МГц): δ 8.28 (5, 1Н), 6.86 (Ьг 5, 2Н), 2.35 (в, 3Н), 1.25 (в, 12Н).
М8 (Е8Ц т/е (М+Н+) 236.15, 154.07.
Пример 7. 2,4,6-Трихлор-5-гидроксипиримидин
Стадия 1. 6-Гидрокси-5-метокси-1Н-пиримидин-2,4-дион, натриевая соль ι О
X г
ΗΟ^'Ν^Ο -N8 Н
В атмосфере азота металлический натрий (1.15 г, 0.05 моль) добавили порциями к этанолу (высушенному над 4 А молекулярными ситами, 50 мл) при 40°С и смесь перемешивали до образования раствора. Добавили мочевину (3.0 г, 0.05 моль) и смесь нагревали при 100°С в течение 15 мин до полного растворения. Реакционной смеси дали немного остыть и добавили метоксиметилмалонат (8.1 г, 0.05 моль), почти сразу образовался розовый/белый преципитат. Дополнительное количество сухого метанола (10 мл) добавили к перемешиваемой смеси. Получившуюся суспензию нагревали при 100°С (кипение с обратным холодильником) в течение 4 ч. Реакционную смесь сконцентрировали под вакуумом и остаток высушили в глубоком вакууме с получением 6-гидрокси-5-метокси-1Н-пиримидин-2,4-диона, натриевой соли в виде розового/белого осадка, использовавшегося на следующей стадии без анализа и очистки.
Стадия 2. 2,4,6-Трихлор-5-метоксипиримидин
6-Гидрокси-5-метокси-1Н-пиримидин-2,4-дион, натриевую соль (21 ммоль) суспендировали в хлорокиси фосфора (20 мл) и смесь разделили между двумя 20 мл пробирками для микроволновой печи. Реакционный смеси нагревали при 130-140°С (~10-12 бар) в течение 30 мин, используя микроволновое облучение (достоверное увеличение давления). Охлажденные реакционные смеси осторожно объединили и влили в теплую (приблизительно 40°С) воду и получившуюся смесь экстрагировали дважды этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушили (№28О4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 2,4,6-трихлор-5-метоксипиримидина в виде кристаллического желтого- 47 026134 коричневого осадка (3.75 г, 84%).
Ή ЯМР (СБС13): δ 3.98 (3Н, 5).
Стадия 3. В атмосфере азота раствор 2,4,6-трихлор-5-метоксипиримидина (4.0 г, 18.7 ммоль) в ДХМ (200 мл) охладили до 0°С и обработали трибромидом бора (чистый, 6.6 мл, 65 ммоль) по каплям. После перемешивания в течение 18 ч при комнатной температуре ЬСМ§ анализ показал завершение реакции. Реакционную смесь охладили и осторожно разбавили метанолом (25 мл) и реакционную смесь разбавили водой (200 мл). Водный слой промыли ДХМ и объединенные органические экстракты высушили (Иа28О4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 2,4,6-трихлор-5гидроксипиримидина в виде бледно-рыжего осадка (2.55 г, 71%).
13С ЯМР (ДМСО-б6): δ 149.23 (С), 145.25 (С), 145.08 (С).
ЬСМ§: Кт=2.65/2.77 [М-Н]-=197/199.
Пример 101. 1-[4-(3а,8-Диметил-7-морфолин-4-ил-3,3а,8,8а-тетрагидро-2Н-1-окса-4,6,8триазациклопента[а]инден-5-ил)фенил]-3-этилмочевина 101
Стадия 1. Смесь 2,4-дихлор-5Н-пирроло[3,2-б]пиримидина (2.67 г, 14.2 ммоль), метилового эфира метансульфоновой кислоты (1.26 мл, 14.9 ммоль) и карбоната цезия (9.25 г, 28.4 ммоль) в безводном Ν,Ν-диметилформамиде (21 мл) перемешивали при КТ (комнатной температуре) в атмосфере Ν2 в течение 15 ч. Реакционную смесь разбавили этилацетатом и органический слой промыли смесью 1:1 вода/солевой раствор (3х) и солевой раствор (1х), высушили над №2§О4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очистили с помощью хроматографии на силикагеле с получением 2.50 г (87.1%) 2,4-дихлор-5-метил-5Н-пирроло[3,2-б]пиримидина в виде белого осадка.
М§ (Ε§Ι) т/ζ: 202.2/204.1 [М+1]+.
Стадия 2. Смесь 2,4-дихлор-5-метил-5Н-пирроло[3,2-б]пиримидина (1.25 г, 6.19 ммоль), морфолина (1.08 мл, 12.37 ммоль) и Ν,Ν-диизопропилэтиламин (2.37 мл, 13.61 ммоль) в Ν,Ν-диметилформамиде (36 мл) перемешивали при КТ в атмосфере Ν2 в течение 15 ч. Реакционную смесь разбавили смесью 1:1 диэтиловый эфир/этилацетат и органический слой промыли смесью 1:1 вода/солевой раствор (3х) и солевым раствором (1х), высушили над №2§О4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очистили с помощью хроматографии на силикагеле с получением 1.47 г (94%) 4-(2-хлор-5-метил-5Н-пирроло[3,2-б]пиримидин-4-ил)морфолина в виде белого осадка.
- 48 026134
Μδ (ΕδΙ) т/ζ: 253.1/255.1 [М+1]+.
Стадия 3. К перемешиваемой смеси 4-(2-хлор-5-метил-5Н-пирроло[3,2-б]пиримидин-4ил)морфолина (1.46 г, 5.78 ммоль) в трет-бутиловом спирте (50 мл) и воде (20 мл) при КТ добавили ΝΒδ (3.08 г, 17.33 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 30°С в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавили этилацетатом и органический слой промыли водой и солевым раствором, высушили над Να2δΟ4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очистили с помощью хроматографии на силикагеле с получением 2.45 г (99.4%) 7,7-дибром-2-хлор-5-метил-4-морфолино-5Нпирроло[3,2-б]пиримидин-6(7Н)-она в виде осадка.
Μδ (ΕδΙ) т/ζ: 427 [М+1]+.
Стадия 4. К 7,7-дибром-2-хлор-5-метил-4-морфолино-5Н-пирроло[3,2-б]пиримидин-6(7Н)-ону (1.70 г, 3.99 ммоль) в 2 М водном растворе хлорида аммония (9.96 мл, 19.9 ммоль) и ТГФ (40 мл) при 0°С добавили цинковую пыль (573.4 мг, 8.775 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин и затем разбавили ДХМ (40 мл). Реакционную смесь отфильтровали через слой целита. Слои разделили и органический слой промыли насыщенным водным раствором NаНСΟз, водой и солевым раствором, высушили над Να2δΟ4. отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очистили с помощью хроматографии на силикагеле с получением 679 мг (63.4%) 2-хлор-5-метил-4морфолино-5Н-пирроло[3,2-б]пиримидин-6(7Н)-она в виде осадка.
Μδ (ΕδΙ) т/ζ: 269.2 [М+1]+.
Стадия 5. К 2-хлор-5-метил-4-морфолино-5Н-пирроло[3,2-б]пиримидин-6(7Н)-ону (466.0 мг, 1.73 ммоль) в безводном ТГФ (25 мл) в атмосфере Ν2 при -78°С добавили по каплям 1.0 М гексаметилдисилазид лития в ТГФ (3.8 мл, 3.8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в атмосфере Ν2 в течение 60 мин. Затем добавили метилйодид (0.32 мл, 5.20 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь погасили насыщенным водным раствором ΝΉ40 и разбавили этилацетатом. Органический слой промыли водой и солевым раствором, высушили над №2δΟ4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле с элюцией 20-100% этилацетат/гептан дала два соединения: 2-хлор-5,7,7-триметил-4морфолино-5Н-пирроло[3,2-б]пиримидин-6(7Н)-он (169.0 мг, 32.8%) в качестве первого элюанта; Μδ (ΕδΙ) т/ζ: 297.0 [М+1]+, и 2-хлор-5,7-диметил-4-морфолино-5Н-пирроло[3,2-б]пиримидин-6(7Н)-он в качестве второго элюанта (63.8 мг, 13%); Μδ (ΕδΙ) т/ζ: 283.2 [М+1]+.
Стадия 6. К 2-хлор-5,7-диметил-4-морфолино-5Н-пирроло[3,2-б]пиримидин-6(7Н)-ону (92.0 мг, 0.32 ммоль) в безводном ТГФ (5 мл) в атмосфере Ν2 при -78°С добавили по каплям 1.0 М гексаметилдисилазид лития в ТГФ (0.65 мл, 0.65 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в атмосфере Ν2 в течение 60 мин. Добавили аллилбромид (0.062 мл, 0.72 ммоль), растворенный в 0.5 мл ТГФ, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь погасили насыщенным водным раствором ΝΉ40 и разбавили этилацетатом. Органический слой промыли водой и солевым раствором, высушили над Να2δΟ4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле с элюцией 10-100% этилацетат/гептан дала 84.3 мг (80.3%)
7-аллил-2-хлор-5,7-диметил-4-морфолино-5Н-пирроло [3,2-б]пиримидин-6(7Н)-он.
Μδ (ΕδΙ) т/ζ: 323.1 [М+1]+.
Стадия 7. К перемешанному раствору 7-аллил-2-хлор-5,7-диметил-4-морфолино-5Н-пирроло[3,2б]пиримидин-6(7Н)-она (80.0 мг, 0.25 ммоль) в безводном ТГФ (3.0 мл) и воде (1.0 мл), охлажденному до 0°С, добавили Ν-метилморфолин Ν-оксид (34.8 мг, 0.29 ммоль) с последующими 2.5% тетраоксидом осмия в трет-бутаноле (0.033 мл, 0.025 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере Ν2 в течение 16 ч. Затем добавили сульфит натрия (312.4 мг, 2.48 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 20 мин. Реакционную смесь разбавили водой и затем экстрагировали этилацетатом (2х). Объединенные органические слои высушили над Να2δΟ4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Неочищенное промежуточное соединение затем разбавили безводным ТГФ (3.0 мл) и водой (1.0). Добавили перйодат натрия (79.5 мг, 0.372 ммоль) и реакционную смесь обработали ультразвуком в течение 1 мин и затем перемешивали при КТ в течение 2 дней. Реакционную смесь разбавили этилацетатом и органический слой промыли водой и солевым раствором, высушили над №2δΟ4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 80.4 мг (99%) 2-(2-хлор-5,7-диметил-4-морфолино-6-оксо-6,7-дигидро-5Н-пирроло[3,2-б]пиримидин-7ил)ацетальдегида.
Μδ (ΕδΙ) т/ζ: 325.1 [М+1]+.
Стадия 8. К перемешанному раствору 2-(2-хлор-5,7-диметил-4-морфолино-6-оксо-6,7-дигидро-5Нпирроло[3,2-б]пиримидин-7-ил)ацетальдегида (80.4 мг, 0.248 ммоль) в ТГФ (3.7 мл) и метаноле (0.25 мл) при 0°С добавили борогидрид натрия (20.6 мг, 0.55 ммоль) за одну порцию. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере Ν2 в течение 5 ч и затем разбавили этилацетатом. Органический слой промыли водой и солевым раствором, высушили над №2δΟ4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле с элюцией 15-100% этилацетат/гептан дала 76 мг (99%) 4-(2-хлор-5-метил-{3а,6-диметилгексагидро-2Н-фуро[2,3Ь] пирроло }[3,2-ά] пиримидин-4-ил)морфолин.
- 49 026134
М8 (Ε8Ι) т/ζ: 311.2 [М+1]+.
Стадия 9. В пробирку для микроволновой печи поместили 4-(2-хлор-5-метил-{3а,6диметилгексагидро-2Н-фуро[2,3-Ь]пирроло}[3,2-й]пиримидин-4-ил)морфолин (70.0 мг, 0.225 ммоль), 4-нитрофенилбороновой кислоты пинаколиновый эфир (70.1 мг, 0.281 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (18.2 мг, 0.016 ммоль), карбонат натрия (41.1 мг, 0.38 ммоль) и карбонат калия (49.8 мг, 0.36 ммоль). Добавили дегазированный ацетонитрил (3.5 мл) и дегазированную воду (1.0 мл). Реакционную смесь подвергали микроволновому излучению при 120°С в течение 15 мин. Охлажденную реакционную смесь разбавили этилацетатом и реакционную смесь отфильтровали через слой целита для удаления избытка Ρά. Органический слой промыли водой и солевым раствором, высушили над №28О4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Очистка с помощью хроматографии на силикагеле с элюцией от 10 до 100% этилацетат/гептан дала 75.3 мг (84.1%) 4-(5-метил-2-(4нитрофенил)-{3а,6-диметилгексагидро-2Н-фуро[2,3-Ь]пирроло}[3,2-й]пиримидин-4-ил)морфолина.
М8 (Ε8Ι) т/ζ: 398.3 [М+1]+.
Стадия 10. К перемешанному раствору 4-(5-метил-2-(4-нитрофенил)-{3а,6-диметилгексагидро-2Нфуро[2,3-Ь]пирроло}[3,2-й]пиримидин-4-ил)морфолина (78.0 мг, 0.196 ммоль), растворенному в этаноле (4.7 мл) и воде (3.1 мл), добавили хлорид аммония (210 мг, 3.93 ммоль) с последующим железом (54.8 мг, 0.982 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 95°С в течение 2 ч и затем разбавили 10% МеОН/ДХМ и насыщенным водным раствором NаНСОз. Реакционную смесь обработали ультразвуком и затем отфильтровали через слой целита для удаления железа. Фильтрат экстрагировали ДХМ (3х) и объединенные органические слои промыли солевым раствором, высушили над №28О4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 68.0 мг (94.2%) 4-(5-метил-4-морфолино-{3а,6диметилгексагидро-2Н-фуро[2,3-Ь]пирроло}[3,2-й]пиримидин-2-ил)анилина в виде белой пены.
М8 (Ε8Ι) т/ζ: 368.2 [М+1]+.
Стадия 11. К перемешанному раствору 4-(5-метил-4-морфолино-{3а,6-диметилгексагидро-2Нфуро[2,3-Ь]пирроло}[3,2-й]пиримидин-2-ил)анилина (17.4 мг, 0.047 ммоль) в безводном 1,2-дихлорэтане (1.4 мл) добавили этилизоцианат (0.037 мл, 0.47 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 50°С в атмосфере Ν2 в течение 2 ч. Реакцию погасили МеОН (1 мл). Летучий растворитель удалили при пониженном давлении и неочищенный продукт очистили с помощью ВЭЖХ с получением 11.50 мг (55.4%) соединения 101 в виде неустойчиво белого осадка.
'II ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.57 (5, 1Н), 8.14 (ά, 1=8.8 Гц, 2Н), 7.45 (ά, 1=8.8 Гц, 2Н), 6.12 (ί, 1=5.6 Гц, 1Н), 4.98 (5, 1Н), 3.87 (ί, 1=7.0 Гц, 1Н), 3.84-3.66 (т, 4Н), 3.60-3.48 (т, 2Н), 3.43-3.36 (т, 1Н), 3.34-3.28 (т, 2Н), 3.16-3.06 (т, 2Н), 2.81 (5, 3Н), 2.15 (άά, 1=12.2, 3.4 Гц, 1Н), 2.03-1.88 (т, 1Н), 1.47 (5, 3Н), 1.06 (ί, 1=7.2 Гц, 3Н).
М8 (Ε8Ι) т/ζ: 439.2 [М+1]+.
Пример 102. 5-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4метилпиримидин-2-амин 102
Смесь 2-(2-(2-амино-4-метилпиримидин-5-ил)-9-(2-гидроксиэтил)-6-морфолино-9Н-пурин-8ил)пропан-2-ола (550 мг, 1.3 ммоль) и ТФУ (0.36 мл, 4.7 ммоль) в толуоле (9 мл) нагревали при 110°С и перемешивали 4 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и сконцентрировали под вакуумом. Аналитическая ЬС-М8 показала конверсию превращение в циклический продукт, а также удаление побочного продукта, 2-(2-(2-амино-4-метилпиримидин-5-ил)-6-морфолино-8-(проп-1-ен-2-ил)9Н-пурин-9-ил)этанола. Неочищенный остаток растворили в ДМФ (1 мл) и очистили препаративной оф-ВЭЖХ. Этот процесс обеспечил 302 мг (57% выход) 102.
М8 (Ε8Ι+) т/ζ: 397.4 (М+Н+).
'II ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.79 (5, 1Н), 6.78 (5, 2Н), 4.20 (5, 4Н), 4.12 (5, 4Н), 3.74 (5, 5Н), 2.63 (5, 4Н), 1.58 (5, 7Н).
- 50 026134
Пример 10.3 5-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)пиримидин-2-амин 103.
Стадия 1. 2-(2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)пропан-2-ол
4-(2-Хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолин (20.0 г, 0.062 моль) охладили до -42°С в ТГФ (400 мл). Раствор н-бутиллития (2.5 М в гексанах, 48 мл, 0.12 моль) добавили порциями в течение 10 мин. Смесь постепенно стала желтой. Реакционную смесь затем оставили перемешиваться при -42°С в течение 30 мин и затем одной порцией добавили безводный ацетон (10 мл, 0.1 моль). Получившуюся реакционную смесь медленно нагрели до 0°С в течение 2 ч. Смесь последовательно погасили водой, экстрагировали ЕЮАс и высушили над М§§04. Суспензию отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 2-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8ил)пропан-2-ола (23 г, 98%) в виде желтого осадка.
М8 (Е8Н) ш/ζ: 382.1 (М+Н+).
Стадия 2. 2-Хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
2-(2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)пропан-2-ол (23 г, 0.06 моль) суспендировали в МеОН (270 мл) и добавили каталитическое количество моногидрата п-толуолсульфоновой кислоты (1.22 г, 7.1 ммоль). Реакционную смесь нагрели до 50°С и перемешивали в течение 16 ч. Раствор стал гомогенным при дальнейшем нагревании. ЬС-М§ показала полную конверсию в продукт без ТНР-защитной группы. Реакционную смесь сконцентрировали для полного удаления МеОН и полученный осадок последовательно разбавили водой и ЕЮАс. Фазы разделили и водную фазу экстрагировали три раза ЕЮАс, высушили над М§§04, отфильтровали и сконцентрировали. Неочищенный 2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)пропан-2-ол (15.0 г, 50.4 ммоль) обработали 1,2-дибромэтаном (8.7 мл, 100 ммоль) и карбонатом цезия (41.0 г, 126 ммоль) в ДМФ (200 мл). Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 1.5 ч. ЬС-М§ показала полную конверсию в циклический продукт с ~10% присутствием продукта отщепления Е2. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и влили в разделительную воронку, содержащую 1н. НС1 и ЕЮАс (50:50). Водный слой экстрагировали несколько раз ЕЮАс и объединенные органические части промыли один раз водой. Последующая сушка над М§§04 с дальнейшей фильтрацией и концентрированием дала неочищенный маслянистый осадок. Этот материал загрузили на 300-г КСО колонку и очистили посредством флэшколончатой хроматографии с медленным градиентом (15-30% ЕЮАс в гептане). Фракции, содержащие целевой продукт, сконцентрировали и высушили в глубоком вакууме в течение ночи с получением соединения 14.3 г (88% выход) 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурина.
М8 (Е8Н) ш/ζ: 324.2 (М+Н+).
!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 4.07 (ш, 8Н), 3.72 (ш, 4Н), 1.57 (5, 6Н).
Стадия 3. К 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурину (180 мг, 0.56 ммоль) в 1,2-диметоксиэтане (5.1 мл) добавили 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)пиримидин-2-амин 25 (180 мг, 0.83 ммоль) и 1.0 М карбоната цезия в воде (1.7 мл). Реакционную смесь дегазировали в течение 5 мин и снова поместили в атмосферу азота. Далее добавили 1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроценпалладий(П) хлорид (54 мг, 0.067 ммоль) и смесь дегазировали и снова поместили в атмосферу азота. Реакционную пробирку затем подвергли микроволновому излучению в течение 20 мин при 140°С. Твердый преципитат, который образовался в течение реакции, отфильтровали и промыли избытком воды. Преципитат растворили в ДХМ и очистили посредством РСС (40 г, 0.5-4% МеОН в ДХМ, медленный градиент) с выделением соединения 103 в виде бронзового порошка (56 мг, 27% выход).
М8 (Е8Н) ш/ζ: 383.1 (М+Н+).
!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.09 (5, 2Н), 7.00 (5, 2Н), 4.23 (ш, 4Н), 4.13 (ш, 4Н), 3.79-3.68 (ш, 4Н), 2.50 (5, 6Н).
- 51 026134
Пример 104. 5-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4(трифторметил)пиридил-2-амин 104.
2-Хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (180 мг, 0.56 ммоль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-амин (240 мг, 0.83 ммоль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с получением 104 (204 мг, 70% выход).
ЬС/М8 (Е81+) т/ζ: 450 (М+Н).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.47 (δ, 1Н), 6.82 (δ, 1Н), 6.70 (δ, 2Н), 4.19 (δ, 4Н), 4.11 (δ, 4Н), 3.71 (δ, 4Н), 1.59 (δ, 6Н).
Пример 105. 5-(4-Морфолино-8,9-дигидро-7Н-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин
105.
Стадия 1. 4-(2-Хлор-8-йодо-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолин
К раствору 4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (1.0 г, 3.1 ммоль) и Ν,Ν,Ν',Ν'-тетраметилендиамина (0.7 мл, 4.6 ммоль) в безводном ТГФ (23 мл) при -42°С по каплям добавили 2.5 М раствор н-бутиллития в гексане (4.3 мл, 11.0 ммоль), капая по краю реакционной колбы. Реакционную смесь перемешивали при низкой температуре и выдерживали в течение 1 ч перед добавлением 1-хлор-2-йодэтана (1.4 мл, 15 ммоль). Перемешивание продолжили в течение 1.5 ч. ЬС-М8 показала, что реакция прошла с полной конверсией в желаемый продукт. Реакционную смесь последовательно погасили и обработали насыщенным водным раствором ΝΉ4Ο, который экстрагировали ЕЮАс (3 раза), высушили над Мд8О4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 4-(2-хлор-8-йодо-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (1.4 г, 84% выход), с чистотой, определенной с помощью ЬС-М8 более >90%.
М8 (Е81+) т/ζ: 450.1 (М+Н+).
Стадия 2. 4-(2-Хлор-8-йодо-9-(3-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)пропил)-9Н-пурин-6-ил)морфолин
К суспензии 4-(2-хлор-8-йодо-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (0.655 г, 1.46 ммоль) в метаноле (6 мл) добавили каталитическое количество п-толуолсульфоновой кислоты (25 мг, 0.14 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение ночи. После этого времени смесь охладили до комнатной температуры и объем метанола уменьшили с помощью вакуумной эвапорации. Получившийся остаток разбавили насыщенным водным раствором NаНСОз. Образовавшийся преципитат собрали фильтрацией. В общем, 295 мг (56%) 4-(2-хлор-8-йодо-9Н-пурин-6-ил)морфолина получили в виде белого осадка, который растворили в безводном ДМФ (2.5 мл). Карбонат цезия (0.53 г, 1.61 ммоль) добавили и смесь перемешивали вместе 10 мин при 23°С. После этого в смесь добавили
1-(2Н-3,4,5,6-тетрагидропиран-2-илокси)-3-бромпропан (0.54 г, 2.42 ммоль). Получившуюся реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 2 ч. Полную конверсию наблюдали в конце указанного периода. Реакцию продолжили разбавлением 1н. НС1 и ЕЮАс. Фазы разделили и водный слой экстрагировали дважды ЕЮАс. Объединенные органические части высушили над Мд8О4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством РСС (40 г колонка с силикагелем, 0-50% ЕЮАс в гептане) с получением 385 мг (94% выход) 4-(2-хлор-8-йодо-9-(3-(тетрагидро-2Н-пиран-2илокси)пропил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина в виде бледно-желтого осадка.
М8 (Е81+) т/ζ: 508.0 (М+Н+)
- 52 026134
Стадия 3. 2-Хлор-4-морфолино-8,9-дигидро-7Н-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин
К 4-(2-хлор-8-йодо-9-(3-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)пропил)-9Н-пурин-6-ил)морфолину (0.39 г, 0.8 ммоль) в метаноле (5 мл) добавили п-толуолсульфоновую кислоту (10 мг, 0.08 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 30 мин до тех пор, пока не наблюдалась преципитация, свидетельствующая об окончании реакции. Это было подтверждено аналитической ЬС-М8. Реакционную смесь сконцентрировали под вакуумом с получением 3-(2-хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропан-1ола. Йодид меди(1) (9 мг, 0.05 ммоль), пиколиновую кислоту (10 мг, 0.09 ммоль) и фосфат калия (0.4 г, 1.9 ммоль) смешали в высушенной в печи 50-мл круглодонной колбе и заполнили ей атмосферой Ν2. После 3-(2-хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропан-1-ол растворили в безводном диметилсульфоксиде (6.7 мл) и добавили через шприц. Всю смесь нагревали при 80°С в течение 20 ч. ЬС-М8 показала хорошую конверсию в желаемый продукт. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры, разбавили водой и ЕЮАс. высушили над М§8О4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством РСС (40 г колонка с силикагелем, 0-100% ЕЮАс в гептане) с получением 112 мг 2-хлор-4-морфолино-8,9-дигидро-7Н-[1,3]оксазино[2,3-е]пурина (40%).
М8 (Е81+) т/ζ: 296.2 (М+Н+).
Стадия 4. 2-Хлор-4-морфолино-8,9-дигидро-7Н-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин (112 мг, 0.38 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин 25 (0.1 г, 0.454 ммоль), 1 М карбонат цезия в воде (0.8 мл, 0.8 ммоль) и ацетонитрил (0.8 мл) поместили в 10-мл СЕМ реакционную пробирку для микроволновой печи и закрыли. Колбу медленно продули под вакуумом и заменили атмосферу на азотную. тетракис-(Трифенилфосфин)палладий(0) (43.8 мг, 0.038 ммоль) добавили и цикл продувки/Ν повторили. Реакционную смесь облучали в микроволновой печи при 140°С в течение 20 мин. ЬС-М8 показала полную конверсию. Смесь отфильтровали через тонкий слой СеШе®, элюируя ЕЮАс, и после сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили с помощью оф-ВЭЖХ с получением соединения 105 (62.3 мг, 46% выход).
М8 (Е81+) т/ζ: 355.1 (М+Н+).
Пример 106. 5-(4-Морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 106.
Стадия 1. 4-(8-(4-Бромбутил)-2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолин
Раствор 4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (пример 118) (5.0 г, 15 ммоль) и Ν,Ν,Ν',Ν'-тетраметилэтилендиамина (3.5 мл, 23 ммоль) в ТГФ (110 мл) охладили до -42°С и обработали раствором 2.5 М н-бутиллития в гексане (22 мл, 54 ммоль) по каплям в течение 5 мин. Через 30 мин при -42°С добавили 1,4-дибром-бутан (8.9 мл, 75 ммоль) и реакционную смесь медленно нагрели до 0°С в течение 1 ч и затем нагрели до комнатной температуры в течение 90 мин. Смесь погасили насыщенным раствором ΝΗ.4Ε1 и разбавили этилацетатом. Водный слой экстрагировали этилацетатом (3х) и объединенные органические слои высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением4-(8-(4-бромбутил)-2-хлор-9(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина в виде белого осадка (1.1 г, 15%).
ЬС/М8 (Е81+) т/ζ: 459 (М+Н).
Стадия 2. 4-(8-(4-Бромбутил)-2-хлор-9Н-пурин-6-ил)морфолин
Суспензию 4-(8-(4-бромбутил)-2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (1.1 г, 2.4 ммоль) в метаноле (10 мл) обработали п-толуолсульфоновой кислотой (40 мг, 0.24 ммоль) и нагревали в течение ночи при 50°С. Растворитель удалили под вакуумом с получением 4-(8-(4-бромбутил)-2-хлор-9Н-пурин-6-ил)морфолина в виде белого осадка, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки (880 мг, колич).
ЬС/М8 (Е81+) т/ζ: 375 (М+Н).
- 53 026134
Стадия 3. 4-(2-Хлор-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-4-ил)морфолин
Суспензию 4-(8-(4-бромбутил)-2-хлор-9Н-пурин-6-ил)морфолина (880 мг, 2.4 ммоль) в ДМСО (6.7 мл) обработали карбонатом цезия (1.5 г, 4.7 ммоль) и нагревали при 50°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и разбавили водой и ДХМ и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ДХМ (3х), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением 4-(2-хлор-6,7,8,9тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-4-ил)морфолина в виде белого осадка (460 мг, 67%).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 4.28-4.03 (т, 4Н), 4.00 (т, 2Н), 3.69 (т, 4Н), 2.90 (т, 2Н), 2.01-1.86 (т,
4Н).
ЬС/М8 (Ε8Σ+) т/ζ: 294 (М+Н).
Стадия 4. Следуя общей методике А, 4-(2-хлор-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-4ил)морфолин (310 мг, 1.0 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (300 мг, 1.4 ммоль) и тетракис-(трифенилфосфин)палладий(0) (61 мг, 52 мкмоль, 5.0 мол.%), суспендированный в ΜеСN (2.6 мл) и 1.0 М №-ьСО3 (2.0 мл), нагревали под воздействием микроволнового излучения при 140°С в течение 15 мин. Охлажденную реакционную смесь сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью ВЭЖХ с получением соединения 106 в виде белого осадка (220 мг, 60%).
Ή ЯМР (500 МГц, ДМСО): δ 9.09 (к, 2Н), 7.01 (к, 2Н), 4.23 (к, 4Н), 4.08 (к, 2Н), 3.73 (к, 4Н), 2.92 (к, 2Н), 2.00 (к, 2Н), 1.93 (к, 2Н).
ЬСМ8: КТ=6.13 мин, М+Н+=353.1.
Пример 107. 5-(4-Морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин 107.
4-(2-Хлор-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-4-ил)морфолин из примера 106 (150 мг,
0.50 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-амин (140 мг, 0.64 ммоль) и тетракис-(трифенилфосфин)палладий(0) (29 мг, 25 мкмоль, 5.0 мол.%), суспендированный в ΜеСN (1.2 мл) и 1.0 М №2СО3(водн) (0.94 мл), нагревали под воздействием микроволнового излучения при 140°С в течение 15 мин. Охлажденную реакционную смесь сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью ВЭЖХ с получением 107 в виде белого осадка (170 мг, 63%).
Ή ЯМР (500 МГц, ДМСО): δ 8.91 (к, 1Н), 8.27 (б, Л=8.6 Гц, 1Н), 6.48 (б, 6=8.5 Гц, 1Н), 6.27 (к, 2Н), 4.22 (к, 4Н), 4.07 (к, 2Н), 3.73 (к, 4Н), 2.91 (к, 2Н), 2.01 (к, 2Н), 1.92 (к, 2Н).
ЬСМ8: КТ=6.23 мин, М+Н+=352.1.
Пример 108. 5-(4-Морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4(трифторметил)пиридил-2-амин 108.
2-Хлор-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (80 мг, 0.0003 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-4-(трифторметил)пиридин-2-амин (120 мг, 0.0004 моль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и под микроволновым излучением с получением 108 (40 мг, 40% выход).
ЬС/М8 (Ε8Σ+) т/ζ: 422 (М+Н).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.56-8.42 (т, 1Н), 6.81 (к, 1Н), 6.76 (к, 2Н), 4.93 (к, 2Н), 4.16 (б, .1=20.6 Гц, 8Н), 3.80-3.58 (т, 4Н).
Пример 109. 5-(4-Морфолино-7,8-дигидро-6Н-пирроло[2,1-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 109.
Стадия 1. 4-(9-Аллил-2-хлор-8-йодо-9Н-пурин-6-ил)морфолин
4-(2-Хлор-8-йодо-9Н-пурин-6-ил)морфолин (500 мг, 1.0 ммоль) перемешивали вместе с карбонатом цезия (890 мг, 2.7 ммоль) в ДМФ (4.2 мл) при комнатной температуре в течение 10 мин. Добавили аллилбромид (0.36 мл, 4.1 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 2 ч. Смесь охладили до комнатной температуры и разбавили солевым раствором и ДХМ и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ДХМ (3х), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением 4-(9-аллил-2-хлор-8-йодо-9Н-пурин-6ил)морфолина в виде белой пены (480 мг, 90%).
- 54 026134
Ή ЯМР (500 МГц, ДМСО): δ 5.94 (Б, 1=10.6 Гц, 2Н), 5.76 (5, 1Н), 5.19 (Б, 1=10.3 Гц, 2Н), 4.79 (Б, 1=16.9 Гц, 2Н), 4.69 (5, 2Н), 3.73 (5, 4Н).
ЬС^ (ΕδΙ+) т/ζ: 406 (М+Н).
Стадия 2. 4-(2-Хлор-7,8-дигидро-6Н-пирроло[2,1-е]пурин-4-ил)морфолин
4-(9-Аллил-2-хлор-8-йодо-9Н-пурин-6-ил)морфолин (230 мг, 0.57 ммоль) добавили к раствору 0.50 М 9-борабицикло[3.3.1]нонана в гексане (1.7 мл) при комнатной температуре. ТГФ добавили для растворения реакционной смеси. Добавление 0.50 М 9-борабицикло[3.3.1]нонана в гексане (1.7 мл) не вызвало конверсии и реакционную смесь перемешивали в течение 15 ч. Добавили моногидрат фосфата калия (200 мг, 0.85 ммоль) и тетракис-(трифенилфосфин)палладий(0) (16 мг, 14 мкмоль, 2.5 мол.%) и реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 15 ч. Смесь охладили до комнатной температуры и разбавили водой и ДХМ и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ДХМ (3х), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением 4-(2-хлор-7,8-дигидро-6Н-пирроло[2,1-е]пурин-4-ил)морфолина в виде осадка (32 мг, 20%).
ЬС^ (ΕδΙ+) т/ζ: 280 (М+Н).
Стадия 3. 4-(2-Хлор-7,8-дигидро-6Н-пирроло[2,1-е]пурин-4-ил)морфолин (32 мг, 0.11 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (33 мг, 0.15 ммоль), и тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (6.6 мг, 5.7 мкмоль, 5.0 мол.%) суспендированный в ΜеСN (0.28 мл) и 1.0 М №-ьСО3, (0.22 мл), нагревали под воздействием микроволнового излучения при 140°С в течение 15 мин. Охлажденную реакционную смесь сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью ВЭЖХ с получением соединения 109 в виде белого осадка (1.7 мг, 4.4%).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.99 (5, 1Н), 7.75 (5, 1Н), 6.95 (Б, 1=1.5 Гц, 1Н), 6.92 (5, 1Н), 6.88 (5, 1Н), 6.02 (5, 1Н), 5.85 (Ьер!, 1=6.6 Гц, 1Н), 4.65 (5, 1Н), 4.50-4.36 (т, 6Н), 3.73 (5, 6Н), 2.24 (5, 3Н), 1.44 (Б, 1=6.6 Гц, 6Н).
Ι,('\1δ: КТ=3.48 мин, М+Н+=339.1.
Пример 110. 6,6-Диметил-4-морфолино-2-(1Н-пирроло[2,3-Ь]пиридин-5-ил)-8,9-дигидро-6Н[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 110.
2-Хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (100 мг, 0.0003 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пирроло[2,3-Ь]пиридин (110 мг, 0.00046 моль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и под микроволновым излучением с получением соединения 110 (54 мг, 50% выход).
ЬС^ (ΕδΙ+) т/ζ: 406 (М+Н).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 11.75 (5, 1Н), 9.27 (Б, 1=1.8 Гц, 1Н), 8.88 (Б, 1=1.6 Гц, 1Н), 7.60-7.41 (т, 1Н), 6.57 (Б, 1=1.6 Гц, 1Н), 4.29 (5, 4Н), 4.17 (ББ, 1=18.0, 5.1 Гц, 4Н), 3.88-3.69 (т, 4Н), 1.60 (5, 6Н).
Пример 111. 5-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин2-амин 111.
2-Хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (100 мг, 0.0003 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-амин (110 мг, 0.0005 моль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с получением соединения 111 (75 мг, 70% выход).
ЬС^ (ΕδΙ+) т/ζ: 382 (М+Н).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.92 (Б, 1=2.1 Гц, 1Н), 8.27 (ББ, 1=8.7, 2.2 Гц, 1Н), 8.16 (5, 1Н), 6.49 (Б, 1=8.7 Гц, 1Н), 6.26 (5, 2Н), 4.22 (5, 4Н), 4.12 (5, 4Н), 3.86-3.65 (т, 4Н), 1.57 (5, 6Н).
Пример 112. 5-(4-Морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-7,1'-циклопропан]-2ил)пиримидин-2-амин 112.
Стадия 1. 1-(2-(2-Хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)этил)циклопропанол
Раствор этил 3-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаноата (500 мг, 1.5 ммоль) в диэтиловом эфире (37 мл) обработали этоксидом титана(А) (31 мкл, 0.15 ммоль) с последующим добавлением по каплям 3.0 М этилмагния бромида в эфире (0.98 мл, 2.9 ммоль) при комнатной температуре в течение
- 55 026134 мин. Частичная конверсия потребовала добавления этоксида титана(1У) (31 мкл, 0.15 ммоль) и 3.0 М этилмагния бромида в эфире (0.98 мл, 2.9 ммоль). Через 2 ч реакционную смесь погасили водным раствором 1.0 М НС1 (20 мл) и отфильтровали через слой целита, промыли этилацетатом. Смесь разбавили водой и этилацетатом и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ЕЮАс (3х), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали, и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением 1-(2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)этил)циклопропанола в виде бесцветного масла (220 мг, 46%).
ЬС/М§ (Е§1+) т/ζ: 324 (М+Н).
Стадия 2. 1-(2-(2-Хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)этил)циклопропанол
Раствор 1-(2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)этил)циклопропанол (220 мг, 0.68 ммоль) и Ν,Ν,Ν',Ν'-тетраметилэтилендиамин (0.15 мл, 1.0 ммоль) в ТГФ (4.9 мл) охладили до -42°С и обработали раствором 2.5 М н-бутиллития в гексане (1.5 мл, 3.7 ммоль) по каплям в течение 5 мин. Через 30 мин при -42°С, 1-хлор-2-йодэтан (0.31 мл, 3.3 ммоль) добавили и реакционную смесь медленно нагрели до 0°С в течение 1 ч. Смесь погасили насыщенным раствором ΝΉ4Ο и разбавили этилацетатом. Водный слой экстрагировали этилацетатом (3х) и объединенные органические слои высушили над сульфатом натрия, отфильтровали, и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением
1-(2-(2-хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)этил)циклопропанола в виде бесцветного масла (220 мг, 71%).
ЬС/М§ (Е§1+) т/ζ: 450 (М+Н).
Стадия 3. 2-Хлор-4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-7,1'-циклопропан]
Йодид меди(1) (4.6 мг, 24 мкмоль), пинаколиновую кислоту (6.0 мг, 48 мкмоль) и фосфат калия (210 мг, 0.97 ммоль) смешали в высушенной в печи круглодонной колбе и продули Ν2 (3х). После, раствор 1-(2-(2-хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)этил)циклопропанола (220 мг, 0.48 ммоль), растворенный в ДМСО (3.4 мл) добавили через шприц. Реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 20 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и разбавили водой и этилацетатом и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ЕЮАс (3х), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением 2-хлор-4морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-7,1'-циклопропана] в виде желтого осадка (41 мг, 26%).
ЬС/М§ (Е§1+) т/ζ: 322 (М+Н).
Стадия 4. 2-Хлор-4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-7,1'-циклопропан] (37 мг, 0.11 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (33 мг, 0.15 ммоль) и тетракис-(трифенилфосфин)палладий(0) (6.6 мг, 5.7 мкмоль, 5.0 мол.%), суспендированный в МеСN (0.28 мл) и 1.0 М №-ьСО3, (0.22 мл), нагревали под воздействием микроволнового излучения при 140°С в течение 15 мин. Охлажденную реакционную смесь сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью ВЭЖХ с получением соединения 112 в виде белого осадка (22 мг, 50%).
Ч ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.07 (5, 2Н), 6.96 (5, 2Н), 4.22 (ΐ, 1=6.0 Гц, 2Н), 4.11 (5, 4Н), 3.75-3.65 (т, 4Н), 2.26 (ΐ, 1=5.9 Гц, 2Н), 1.08 (ΐ, 1=6.4 Гц, 2Н), 0.90 (ΐ, 1=6.6 Гц, 2Н).
ЬСМ§: КТ=3.57 мин, М+Н+=381.1.
- 56 026134
Пример 113. 5-(4-Морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин
113.
Стадия 1. 2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-карбальдегид
К смеси 4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (5 г, 20 ммоль) в ТГФ (100 мл) при -78°С добавили тетраметилэтилендиамин (3.5 мл, 23 ммоль) с последующим 2.5 М п-ВиЫ (9.3 мл, 23 ммоль) по каплям. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч и затем добавили Ν,Ν-диметилформамид (2.4 мл, 31 ммоль), продолжили перемешивание в течение 1 ч при -78°С. Реакционную смесь погасили водой и экстрагировали ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над М§§04 и сконцентрировали. Неочищенный материал тритурировали с ЕЮАс с получением чистого 2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8карбальдегида в виде белого осадка (4.5 г, 80% выход).
ЬС/М8 (Е8Н) т/ζ: 353 (М+Н).
Стадия 2. (2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)метанол
2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-карбальдегид (3.8 г, 11 ммоль) в МеОН (22 мл) обработали тетрагидроборатом натрия (0.817 г, 22 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь погасили водой и экстрагировали ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над М§§04 и сконцентрировали. Неочищенный материал очистили с помощью колонки РЗС0 с 0-80% ЕЮАс/гексан с получением чистого (2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)метанола (3.4 г, 89% выход).
ЬС/М8 (Е8Н) т/ζ: 354 (М+Н).
Стадия 3. (2-Хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)метанол
(2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)метанол (3.4 г, 0.0096 моль) в МеОН (20 мл) обработали каталитическим количеством п-толуолсульфоновой кислоты (0.25 г, 0.00144 моль). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение ночи и затем сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой и ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над М§§04 и сконцентрировали досуха с получением (2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)метанола (2.6 г, 100% выход).
ЬС/М8 (Е8Н) т/ζ: 271 (М+Н).
Стадия 4. 2-Хлор-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
Смесь (2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)метанола (1 г, 0.004 моль), 1,2-дибромэтан (0.64 мл, 0.0074 моль) и карбонат цезия (3.6 г, 0.011 моль) в ДМФ (14 мл) нагревали до 90°С в течение 12 ч. Реакционную смесь отфильтровали и разделили между водой и ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором и высушили над М§§04 и сконцентрировали. Неочищенный продукт очистили с помощью колонки ЮСЮ с 0-50% ЕЮАс/гексан с получением 2-хлор-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н[1,4]оксазино[3,4-е]пурина (0.7 г, 60%).
ЬС/М8 (Е8Н) т/ζ: 297 (М+Н).
- 57 026134
Стадия 5. 2-Хлор-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (160 мг, 0.00056 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (180 мг, 0.00083 моль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с получением соединения 113 (40 мг, 15% выход) вместе с некоторым количеством побочного продукта, (2-(2-аминопиримидин-5-ил)-6-морфолино-9-винил-9Н-пурин-8-ил)метанола (7 мг).
ЬС/М§ (Ε§Ι+) т/ζ: 355 (М+Н).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.10 (5, 2Н), 7.00 (5, 2Н), 4.91 (5, 2Н), 4.34-4.07 (т, 8Н), 3.90-3.63 (т,
4Н).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.10 (5, 2Н), 7.35 (άά, 1=15.9, 9.5 Гц, 1Н), 7.05 (5, 2Н), 6.47 (ά, 1=15.9 Гц, 1Н), 5.73 (ί, 1=5.6 Гц, 1Н), 5.28 (ά, 1=9.4 Гц, 1Н), 4.71 (ά, 1=5.6 Гц, 2Н), 4.27 (5, 4Н), 3.88-3.63 (т, 4Н).
Пример 114. 5-(4-Морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,3'-оксетан]-2ил)пиримидин-2-амин 114.
Стадия 1. 3-(2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)оксетан-3-ол
К смеси 4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (2.9 г, 9 ммоль) в ТГФ (50 мл) при -78°С добавили 2.5 М η-ВиЫ (9 мл, 22 ммоль) по каплям. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин и затем добавили 3-оксетанон (1.3 мл, 18 ммоль), продолжили перемешивание в течение 2 ч при -78°С. Реакционную смесь погасили водой и экстрагировали ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над Мд§О4 и сконцентрировали. Неочищенный материал очистили с помощью Ι§ί'.Ό хроматографии с 0-100% ЕЮАс/гексан с получением чистого
3-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)оксетан-3-ола в виде белого осадка (2.5 г, 70% выход).
ЬС/М§ (Ε§Ι+) т/ζ: 397 (М+Н).
Стадия 2. 3-(2-Хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)оксетан-3-ол
3-(2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)оксетан-3-ол (1.8 г, 0.0045 моль) в МеОН (50 мл) обработали каталитическим количеством п-толуолсульфоновой кислоты 78 мг, 0.00044 моль). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение ночи и затем сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой и ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над Мд§О4 и сконцентрировали досуха с получением 3-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)оксетан-3-ола (1.2 г, 84% выход).
ЬС/М§ (Ε§Ι+) т/ζ: 312 (М+Н).
Стадия 3. 2-Хлор-4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,3'-оксетан]
Смесь 3-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)оксетан-3-ола (356 мг, 0.0011 моль), 1,2-дибромэтана (0.21 мл, 0.0024 моль) и карбоната цезия (1.13 г, 0.0034 моль) в ДМФ (4 мл) нагревали при 90°С в течение 12 ч. Реакционную смесь отфильтровали и разделили между водой и ΕίΘΑα Органические экстракты промыли водой, солевым раствором и высушили над Мд§О4 и сконцентрировали. Неочищенный продукт очистили с помощью Ι§ί.Ό хроматографии с 0-80% ΕЮΑс/гексан с получением 2-хлор-4-морфолино-8,9дигидроспиро[[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,3'-оксетана] (0.34 г, 85%).
ЬС/М§ (Ε§Ι+) т/ζ: 339 (М+Н).
Стадия 4. 2-Хлор-4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,3'-оксетан] (200 мг, 0.0006 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (210 мг, 0.00095 моль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с получением соединения 114 (0.123 мг, 60% выход).
ЬС/М§ (Ε§Ι+) т/ζ: 397 (М+Н).
- 58 026134
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.10 (δ, 2Н), 7.02 (δ, 2Н), 4.97 (й, 1=7.1 Гц, 2Н), 4.72 (й, 1=7.1 Гц, 2Н), 4.29 (δ, 4Н), 4.16 (δ, 4Н), 3.90-3.62 (т, 4Н).
Пример 115. 5-(7,7-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-7Н-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-2ил)пиримидин-2-амин 115.
Стадия 1. Этил 3-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаноат
Раствор 4-(2-хлор-9Н-пурин-6-ил)морфолина (3.0 г, 13 ммоль) в ДМФ (39 мл) обработали карбонатом цезия (8.2 г, 25 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Добавили 3-бромпропановой кислоты этиловый эфир (6.8 г, 38 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 2 ч. Частичная конверсия потребовала добавления карбоната цезия (8.2 г, 25 ммоль) и
3-бромпропановой кислоты этилового эфира (6.8 г, 38 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 70°С. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и разбавили солевым раствором и ДХМ и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ДХМ (3х), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением этил 3-(2-хлор-6морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаноата в виде белого осадка (3.5 г, 83%).
ЬС/М8 (Е81+) т/ζ: 340 (М+Н).
Стадия 2. 4-(2-Хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)-2-метилбутан-2-ол
Раствор этил 3-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаноата (500 мг, 1.5 ммоль) в ТГФ (30 мл) при 0°С обработали по каплям раствором 3.0 М метилмагния хлорида в ТГФ (2.0 мл). Через 90 мин при 0°С реакционную смесь обработали насыщенным раствором ИН4С1 и разбавили солевым раствором и ДХМ и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ДХМ (3х), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением
4-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)-2-метилбутан-2-ола в виде белой пены (452 мг, 94%).
ЬС/М8 (Е81+) т/ζ: 326 (М+Н).
Стадия 3. 4-(2-Хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)-2-метилбутан-2-ол
Раствор 4-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)-2-метилбутан-2-ола (360 мг, 1.1 ммоль) и Ν,Ν,Ν',Ν'-тетраметилэтилендиамина (0.25 мл, 1.7 ммоль) в ТГФ (8.1 мл) охладили до -42°С и обработали раствором 2.5 М н-бутиллития в гексане (ВиЫ, 2.0 мл, 5.0 ммоль) по каплям в течение 5 мин. Через 30 мин при -42°С 1-хлор-2-йодэтан (0.51 мл, 5.4 ммоль) добавили и реакционную смесь медленно нагрели до 0°С в течение 1 ч. Смесь погасили насыщенным раствором ИН4С1 и разбавили этилацетатом. Водный слой экстрагировали этилацетатом (3х) и объединенные органические слои высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением 4-(2-хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)-2-метилбутан-2-ола в виде белой пены (390 мг, 78%).
ЬС/М8 (Е81+) т/ζ: 452 (М+Н).
- 59 026134
Стадия 4. 2-Хлор-7,7-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-7Н-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин
Йодид медиД) (3.2 мг, 17 мкмоль), пинаколиновую кислоту (4.1 мг, 33 мкмоль) и фосфат калия (140 мг, 0.67 ммоль) смешали в высушенной в печи круглодонной колбе и продули Ν2 (3х). После этого раствор 4-(2-хлор-8-йодо-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)-2-метилбутан-2-ола (150 мг, 0.33 ммоль), растворенного в ДМСО (2.4 мл), добавили через шприц. Реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 20 ч. Частичная конверсия потребовала добавления йодида медиД) (3.2 мг, 17 мкмоль), пинаколиновой кислоты (4.1 мг, 33 мкмоль) и фосфат калия (140 мг, 0.67 ммоль) и реакционную смесь продолжили перемешивать при 80°С в течение 20 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и разбавили водой и этилацетатом и слои разделили. Водную фазу экстрагировали Е!ОАс (3х), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением 2-хлор-7,7-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-7Н-[1,3]оксазино[2,3-е]пурина в виде белого осадка (61 мг, 56%).
ЬС/М8 (Е8Н·) т/ζ: 324 (М+Н).
Стадия 5. 2-Хлор-7,7-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-7Н-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин (61 мг, 0.19 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (54 мг, 0.24 ммоль) и тетракис-(трифенилфосфин)палладий(0) (11 мг, 9.4 мкмоль, 5.0 мол.%), суспендированный в ΜеСN (0.46 мл) и 1.0 М Ма2СО3(водн) (0.36 мл), нагревали под воздействием микроволнового излучения при 140°С в течение 15 мин. Охлажденную реакционную смесь сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью ВЭЖХ с получением соединения 115 в виде белого осадка (27 мг, 37%).
!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.06 (к, 2Н), 6.95 (к, 2Н), 4.18-4.06 (т, 6Н), 3.75-3.65 (т, 4Н), 2.15 (!, 1=6.2 Гц, 2Н), 1.46 (к, 6Н).
ЬСМ8: КТ=2.75 мин, М+Н+=383.1.
Пример 116. 5-(4-Морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)пиридин-2-амин 116.
2-Хлор-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин из примеров 139 и 140 (100 мг, 0.0003 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-амин (120 мг, 0.00055 моль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с получением соединения 116 (56 мг, 56% выход).
ЬС/М8 (Е8И) т/ζ: 422 (М+Н).
!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.94 (Д, 1=2.0 Гц, 1Н), 8.28 (ДД, 1=8.7, 2.2 Гц, 1Н), 6.50 (Д, 1=8.7 Гц, 1Н), 6.32 (к, 2Н), 5.87 (ф 1=6.9 Гц, 1Н), 4.49-4.10 (т, 8Н), 3.75 (!, 1=4.6 Гц, 4Н).
Пример 117. 5-(6,6-(Гексадейтерио)диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 117.
Стадия 1. 2-(2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-1,3гексадейтериопропан-2-ол
К смеси 4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (5 г, 0.02 моль) в ТГФ (100 мл) при -78°С добавили 2.5 М п-ВиЫ (12 мл, 0.031 моль) по каплям. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин и затем добавили ацетон-Д6 (2.5 мл, 0.034 моль), продолжили перемешивание в течение 2 ч при -78°С. Реакционную смесь погасили водой и экстрагировали Е!ОАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над Мд8О4 и сконцентрировали. Неочищенный материал очистили с помощью ЫСО хроматографии с 0-100% Е!ОАс/гексан с получением чистого 2-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-1,3-гексадейтериопропан-2ола в виде белого осадка (5.7 г, 95% выход).
ЬС/М8 (Е8Т+) т/ζ: 389 (М+Н).
- 60 026134
Стадия 2. 2-(2-Хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)-1,3-гексадейтериопропан-2-ол
2-(2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-1,3-гексадейтериопропан-2ол (5.7 г, 0.015 моль) в МеОН (59 мл) обработали каталитическим количеством п-толуолсульфоновой кислоты (253 мг, 0.00147 моль). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение ночи и затем сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой и ΕΐΟΑ^ Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над Μ§δΟ4 и сконцентрировали досуха с получением 2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)-1,3-гексадейтериопропан-2-ола (4.5 г, 100% выход).
ЬС/Μδ (Ε8Σ+) т/ζ: 304 (М+Н).
Стадия 3. 2-Хлор-6,6-(гексадейтерио)диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин
Смесь 2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)-1,3-гексадейтериопропан-2-ола (2 г, 0.006 моль), 1,2-дибромэтана (1.13 мл, 0.013 моль) и карбоната цезия (6.4 г, 0.02 моль) в ДМФ (4 мл) нагревали при 90°С в течение 12 ч. Реакционную смесь отфильтровали и разделили между водой и ΕΐΟΑ^ Органические экстракты промыли водой, солевым раствором и высушили над Μ§δΟ4 и сконцентрировали. Неочищенный продукт очистили с помощью IδСΟ хроматографии с 0-80% ΕίΟΑс/гексан с получением чистого 2-хлор-6,6-(гексадейтерио)диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурина (1.64 г, 82%).
ЬС/Μδ (Ε8Σ+) т/ζ: 331 (М+Н).
Стадия 4. 2-Хлор-6,6-(гексадейтерио)диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (1.6 г, 0.0048 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (1.6 г, 0.00073 моль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием с получением соединения 117 (600 мг, 32% выход).
ЬС/Μδ (Ε8Σ+) т/ζ: 389 (М+Н).
'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.09 (к, 1Н), 7.00 (к, 1Н), 4.23 (к, 2Н), 4.10 (ί, Σ=13.7 Гц, 2Н), 3.85-3.67 (т, 2Н).
Пример 118. (8)-5-(6-Этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)пиримидин-2-амин 118.
Стадия 1. 2-(2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)бутан-2-ол
Раствор 4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (5.0 г, 15 ммоль) в ТГФ (100 мл) охладили до -42°С и обработали раствором 2.5 М н-бутиллития (п-ВиЫ) в гексане (12.35 мл, 31 ммоль) по каплям в течение 5 мин. Через 15 мин при -42°С добавили 2-бутанон (3.1 мл, 34 ммоль) и реакционную смесь медленно нагрели до 0°С в течение 2 ч. Смесь погасили водой и разбавили этилацетатом. Водный слой экстрагировали этилацетатом (3х) и объединенные органические слои высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 2-(2-хлор-6морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)бутан-2-ола в виде желто-оранжевой пены (колич.).
ЬС/Μδ (Ε8Σ+) т/ζ: 396 (М+Н).
Стадия 2. 2-(2-Хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)бутан-2-ол
- 61 026134
Суспензию 2-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)бутан-2-ола (3.87 г, 9.8 ммоль) в метаноле (110 мл) обработали п-толуолсульфоновой кислотой (170 мг, 0.98 ммоль) и нагревали в течение ночи при 50°С. Растворитель удалили под вакуумом с получением 2-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)бутан-2-ола в виде белого осадка, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки (3.0 г, колич.).
ЬС/М8 (Ε8Η) т/ζ: 312 (М+Н).
Стадия 3. 2-Хлор-6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
2-(2-Хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)бутан-2-ол (1.0 г, 3.3 ммоль) растворили в ДМФ (13 мл) и обработали 1,2-дибромэтаном (0.57 мл, 6.6ммоль) и карбонатом цезия (3.2 г, 9.9 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 2 ч и охладили до комнатной температуры. Смесь разбавили водой и ДХМ и слои разделили. Водную фазу экстрагировали ДХМ (3х), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением 2-хлор-6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурина в виде белого осадка (730 мг, 66%).
!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 4.22 (т, 4Н), 4.01 (т, 2Н), 3.78-3.63 (т, 4Н), 2.01 (δ, 2Н), 1.87-1.73 (т, 2Н), 1.49 (δ, 3Н), 0.77 (ί, 1=7.4 Гц, 3Н).
ЬС/М8 (Ε8Η) т/ζ: 338 (М+Н).
Стадия 4. 2-Хлор-6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (730 мг, 2.2 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (620 мг, 2.8 ммоль) и тетракис-(трифенилфосфин)палладий(0) (120 мг, 0.11 ммоль, 5.0 мол.%), суспендированный в ΜеСN (5.2 мл) и 1.0 М Nа2СΟз(водн) (4.1 мл), нагревали под воздействием микроволнового излучения при 140°С в течение 15 мин. Охлажденную реакционную смесь сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью 8РС (условия А) в течение 30 мин, 35 мл/мин для разделения двух энантиомеров 118 и 120 с получением 118 в виде белого осадка (120 мг и 116 мг, 30%).
!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.09 (δ, 2Н), 7.00 (δ, 2Н), 4.29-4.01 (т, 8Н), 3.80-3.68 (т, 4Н), 2.00 (йц, 1=14.5, 7.3 Гц, 1Н), 1.84 (й/ 1=14.4, 7.2 Гц, 1Н), 1.52 (δ, 3Н), 0.82 (ί, 1=7.3 Гц, 3Н).
ЬСМЗ: ΚΤ=9.49 мин, М+Н+=397.1.
Энантиомеры 118 и 120 анализировались и разделялись хиральной ЬСМЗ, время хроматографирования = 1.20 мин и 1.65 мин с подвижной фазой А = СО2, подвижная фаза В = метанол, изократический 25% В, скорость потока 5 мл/мин, 40°С, СЫга1Се1 Ο1 (4.6x50 мм, 3 мкм частицы, 230 нм УФ-детекция, Вегдег Аца1уРса1 8РС/М8.
Пример 119. 5-(6,6,9-Триметил-4-морфолино-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин
119.
Стадия 1. Метил 2-(2-хлор-8-(2-гидроксипропан-2-ил)-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаноат
2-(2-Хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)пропан-2-ол (4.6 г, 15 ммоль) растворили в ДМФ (16 мл), обработали карбонатом цезия (10 г, 31 ммоль) и метил 2-бромпропаноатом (7.6 г, 46 ммоль) и нагревали при 50°С в течение 3 ч. Частичная конверсия потребовала добавления карбоната цезия (10 г, 31 ммоль) и метил 2-бромпропаноата (7.6 г, 46 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 50°С в течение 20 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и разбавили водой и этилацетатом и слои разделили. Водную фазу экстрагировали этилацетатом (3х), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением метил 2-(2-хлор-8-(2-гидроксипропан-2-ил)-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаноата в виде желтой пены (1.6 г, 26%).
ЬС/М8 (Ε8Η) т/ζ: 384 (М+Н).
- 62 026134
Стадия 2. 2-(2-Хлор-8-(2-гидроксипропан-2-ил)-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаналь
н
Метил 2-(2-хлор-8-(2-гидроксипропан-2-ил)-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаноат (1.6 г, 4.1 ммоль) растворили в ТГФ (30 мл) и охладили до -78°С. Реакционную смесь обработали 1.0 М раствором лития тетрагидроалюмината в ТГФ (8.6 мл) и перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Насыщенный раствор ΝΗ.·|0 добавили и смесь разбавили ДХМ. Реакционную смесь обработали насыщенным раствором сегнетовой соли и перемешивали на свету (оп Ιιίβΐι) при комнатной температуре в течение 1 ч. Слои разделили и водную фазу экстрагировали ДХМ/МеОН (3х), высушили над сульфатом натрия, отфильтровали и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением 2-(2-хлор-8-(2-гидроксипропан-2-ил)-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаналя в виде белой пены (900 мг, 62%).
ЬС/М8 (Е8Н) ш/ζ: 384 (М+Н).
Стадия 3. 2-Хлор-6,6,9-триметил-4-морфолино-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
Раствор 2-(2-хлор-8-(2-гидроксипропан-2-ил)-6-морфолино-9Н-пурин-9-ил)пропаналя (900 мг, 2.5 ммоль) в толуоле (8.1 мл) обработали трифторуксусной кислотой (0.58 мл, 7.6 ммоль) и нагревали при 110°С в течение 4 ч. Частичная конверсия потребовала добавления трифторуксусной кислоты (1.0 мл) и смесь оставили перемешиваться в течение ночи при 110°С. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток перерастворили в ДХМ и абсорбировали на целите для очистки с помощью флэш-хроматографии с получением 2-хлор-6,6,9-триметил-4-морфолино-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурина в виде осадка (190 мг, 22%).
ЬС/М8 (Е8Н) ш/ζ: 336/338 (М+Н).
Стадия 4. 2-Хлор-6,6,9-триметил-4-морфолино-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (190 мг, 0.55 ммоль),
5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (160 мг, 0.71 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (32 мг, 27 мкмоль, 5.0 мол.%), суспендированный в МеСN (1.3 мл) и 1.0 М Ма2СО3(водн) (10 мл), нагревали под воздействием микроволнового излучения при 140°С в течение 15 мин. Охлажденную реакционную смесь сконцентрировали досуха под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью ВЭЖХ с получением соединения 119 в виде белого осадка (120 мг, 54%).
ЬС/М8 (Е8Н) ш/ζ: 395 (М+Н).
!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.06 (5, 2Н), 7.03 (5, 2Н), 6.34 (5, 1Н), 4.24 (5, 4Н), 3.80-3.70 (ш, 4Н), 2.52 (5, 3Н), 1.62 (5, 6Н).
ЬСМ8: КТ=4.57 мин, М+Н+=395.2.
Пример 120. (К)-5-(6-Этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)пиримидин-2-амин 120.
В соответствии со способом примера 118, был выделен К-энантиомер 120.
Пример 121. 5-(1-Морфолин-4-ил-5,6,8а,9-тетрагидро-8Н-7,10-диокса-2,4,4Ь-триазафенантрен-3ил)пиримидин-2-иламин 121.
Стадия 1. [4-(2,6-Дихлор-5-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-3-ил]метанол
С1
он
Смесь 2,4,6-трихлор-5-метоксипиримидина (1 г, 4.68 ммоль), морфолин-3-илметанола гидрохлорида (0.86 г, 5.6 ммоль) и триэтиламина (0.9 мл, 6.5 ммоль) в ГМ8 (30 мл) перемешивали при КТ в течение 3 ч, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (δί02, 0-50% этилацетат в циклогексане) с получением [4-(2,6-дихлор-5метоксипиримидин-4-ил)морфолин-3-ил]метанола (614 мг, 45%).
ЬСМ8 (способ А): КТ=2.63 мин, [М+Н]+=294/296.
- 63 026134
Стадия 2. 1,3-Дихлор-5,6,8а,9-тетрагидро-8Н-7,10-диокса-2,4,4Ь-триазафенантрен
С1
Смесь [4-(2,6-дихлор-5-метоксипиримидин-4-ил)морфолин-3-ил]метанола (614 мг, 2.09 ммоль) и хлорида лития (246 мг, 5.80 ммоль) в безводном ДМФ (5 мл) нагревали при 160°С в течение 10 мин в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом с получением 2,4-дихлор-6-(3гидроксиметилморфолин-4-ил)пиримидин-5-ола. ЭМЭ (452 мкл, 2.3 ммоль) добавили к раствору 2,4-дихлор-6-(3-гидроксиметилморфолин-4-ил)пиримидин-5-ола (2 ммоль) и трифенилфосфина (603 мг, 2.3 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (8ίΟ2, 0-50% этилацетат в циклогексане) с получением 1,3-дихлор-5,6,8а,9-тетрагидро-8Н-7,10-диокса-2,4,4Ьтриазафенантрена (200 мг, 37%).
ЬСМ8 (способ А): КТ=2.91 мин, [М+Н]+=262/264.
Стадия 3. 3-Хлор-1-морфолин-4-ил-5,6,8а,9-тетрагидро-8Н-7,10-диокса-2,4,4Ь-триазафенантрен
Смесь 1,3-дихлор-5,6,8а,9-тетрагидро-8Н-7,10-диокса-2,4,4Ь-триазафенантрена (100 мг, 0.38 ммоль), морфолина (80 мкл, 0.92 ммоль) и триэтиламина (70 мкл, 0.50 ммоль) в 1М8 (5 мл) нагревали при 140°С в течение 25 мин в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (8ίΟ2, от 0-10 до 15-25% этилацетат в пентане) с получением 3-хлор-1-морфолин-4-ил-5,6,8а,9-тетрагидро-8Н-7,10-диокса-2,4,4Ь-триазафенантрена (45 мг, 38%).
ЬСМ8 (способ А): КТ=2.92 мин, [М+Н]+=313.
Ч ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 4.37 (1Н, άά, 1=13.2, 3.0 Гц), 4.19 (1Н, άά, 1=10.8, 3.3 Гц), 3.99 (1Н, άά, 1=11.1, 3.9 Гц), 3.88 (1Н, άά, 1=10.8, 3.2 Гц), 3.80 (άά, 1=11.1, 8.4 Гц), 3.75 (4Н, т), 3.66-3.53 (6Н, т), 3.24 (1Н, 1, 1=11.1 Гц), 3.00 (1Н, т).
Стадия 4. Смесь 3-хлор-1-морфолин-4-ил-5,6,8а,9-тетрагидро-8Н-7,10-диокса-2,4,4Ьтриазафенантрена (45 мг, 0.144 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2иламина (60 мг, 0.271 ммоль), Р6С12(РРй3)2 (10 мг, 0.014 ммоль) и карбоната натрия (460 мкл, 0.46 ммоль, 1 М водный раствор) в ацетонитриле (2 мл) дегазировали и нагревали при 120°С в течение 30 мин в микроволновой печи. Реакционную смесь загрузили на картридж 1ко1и1е® 8СХ-2, который промыли метанолом и продукт элюировали 2 М аммиаком в метаноле. Основные фракции смешали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили обратно-фазовой ВЭЖХ (Рйеиотеиех Сетии 5 мкм С18, 0.1% НСО2Н в воде на градиенте ацетонитрила 5-98%) с получением соединения 121 в виде белого осадка (3 мг, 6%).
ЬСМ8 (способ В): КТ=3.08 мин, [М+Н]+=372.
Ч ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 9.11 (2Н, к), 5.18 (2Н, Ьгоас! к), 4.55 (1Н, άά, 1=13.5, 2.4 Гц), 4.22 (1Н, άά, 1=10.8, 3.1 Гц), 4.05 (1Н, άά, 1=11.5, 3.5 Гц), 3.88 (2Н, т), 3.81 (4Н, т), 3.69-3.56 (6Н, т), 3.29 (1Н, 1, 1=11.5 Гц), 3.02 (1Н, т).
Пример 122. 5-((8)-6-Морфолин-4-ил-2,3,3а,4-тетрагидро-1Н-5-окса-7,9,9Ьтриазациклопента[а]нафтален-8-ил)пиримидин-2-иламин 122.
Стадия 1. [(8)-1-(2,6-Дихлор-5-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-2-ил]метанол
Смесь 2,4,6-трихлор-5-метоксипиримидина (1.2 г, 5.62 ммоль), (8)-1-пирролидин-2-илметанола (1.1 мл, 11.3 ммоль) и триэтиламина (1.08 мл, 7.75 ммоль) в 1М8 (36 мл) перемешивали при КТ в течение 20 мин, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (8ίΟ2, 0-50% этилацетат в циклогексане) с получением [(8)-1-(2,6-дихлор-5метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-2-ил]метанола (1.08 мг, 70%).
ЬСМ8 (способ А): КТ=2.98 мин, [М+Н]+=278/280.
- 64 026134
Стадия 2. (8)-6,8-Дихлор-2,3,3а,4-тетрагидро-1Н-5-окса-7,9,9Ь-триазациклопента[а]нафтален
Смесь [(8)-1-(2,6-дихлор-5-метоксипиримидин-4-ил)пирролидин-2-ил]метанол (900 мг, 3.24 ммоль) и хлорида лития (360 мг, 8.48 ммоль) в безводном ДМФ (10 мл) нагревали при 160°С в течение 10 мин в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом с получением 2,4-дихлор-6-((8)-2гидроксиметилпирролидин-1-ил)пиримидин-5-ола. ΌΙΑΌ (700 мкл, 3.56 ммоль) добавили к раствору 2,4-дихлор-6-((8)-2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)пиримидин-5-ола (3 ммоль) и трифенилфосфина (900 мг, 3.43 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (8Ю2, 0-20% этилацетат в циклогексане) с получением (8)-6,8-дихлор-2,3,3а,4-тетрагидро-1Н-5-окса-7,9,9Ьтриазациклопента[а]нафталена.
ЬСМ8 (способ А): КТ=2.98 мин, [М+Н]+=246/248.
Стадия 3. Смесь (8)-6,8-дихлор-2,3,3а,4-тетрагидро-1Н-5-окса-7,9,9Ь-триазациклопента[а]нафталена (290 мг, 1.18 ммоль), морфолина (275 мкл, 3.14 ммоль) и триэтиламина (242 мкл, 1.74 ммоль) в ГМ8 (11 мл) нагревали при 140°С в течение 20 мин в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток перерастворили в ацетонитриле (2 мл) и добавили 5-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-иламин (500 мг, 2.26 ммоль), РйС12(РРЬ3)2 (88 мг, 0.125 ммоль) и карбонат натрия (4 мл, 4.0 ммоль, 1 М водный раствор). Реакционную смесь дегазировали и нагревали при 120°С в течение 30 мин в микроволновой печи. Реакционную смесь загрузили на картридж коЫе® 8СХ-2, который промыли метанолом и продукт элюировали 2 М аммиаком в метаноле. Основные фракции смешали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили обратно-фазовой ВЭЖХ (РЬепотепех Сетпи 5 мкм С18, 0.1% НСО2Н в воде градиент ацетонитрила 5-60%) с получением соединения 122 в виде белого осадка (30 мг, 8%).
ЬСМ8 (способ В): КТ=3.34 мин, [М+Н]+=356.
'II ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 9.15 (2Н, 5), 5.14 (2Н, Ьгоас! 5), 4.48 (1Н, άά, 1=10.4, 3.5 Гц), 3.87-3.68 (10Н, т), 3.62 (1Н, т), 3.31 (1Н, ί, 1=10.1 Гц), 2.21-1.94 (3Н, т), 1.50 (1Н, т).
Также был выделен региоизомер, 5-((8)-8-морфолин-4-ил-2,3,3а,4-тетрагидро-1Н-5-окса-7,9,9Ьтриазациклопента[а]нафтален-6-ил)пиримидин-2-иламин (25 мг, 6%).
ЬСМ8 (способ В): КТ=2.47 мин, [М+Н]+=356.
'II ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 9.09 (2Н, 5), 5.14 (2Н, Ьгоас) 5), 4.49 (1Н, άά, 1=10.8, 3.8 Гц), 3.80-3.65 (10Н, т), 3.66 (1Н, т), 3.34 (1Н, ί, 1=9.7 Гц), 2.20-1.94 (3Н, т), 1.48 (1Н, т).
Пример 123. 4-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)анилин
123.
К 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурину из примера 103 и, следуя общей методике А (266 мг, 0.82 ммоль), в ацетонитриле (2.5 мл) добавили 4-аминофенилбороновой кислоты пинаколовый эфир (270 мг, 1.2 ммоль) и 1.0 М карбоната цезия в воде (2.5 мл). Реакционную смесь дегазировали в течение 5 мин и снова поместили в атмосферу азота. После этого добавили бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)палладий(П) дихлорид (29 мг, 0.041 ммоль) и смесь дегазировали и снова дегазировали. Реакционную пробирку затем подвергли микроволновому излучению в течение 25 мин при 100°С. Пробирку охладили до комнатной температуры и экстрагировали дважды ΕΏΑ^ Высушили над Мд8О4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Очистили посредством оф-ВЭЖХ с получением соединения 123 (151 мг, 48% выход).
М8 (Ε8Ι+) т/ζ: 381.2 (М+Н+).
'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.08 (ά, 1=8.5 Гц, 1Н), 6.59 (ά, 1=8.5 Гц, 1Н), 5.42 (5, 1Н), 4.22 (5, 2Н), 4.11 (5, 2Н), 3.80-3.67 (т, 2Н), 1.57 (5, 3Н).
Пример 124. 1-(4-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)фенил)-3-метилмочевина 124.
К раствору 4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)анилина 123 (0.44 г, 1.2 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (10 мл) добавили триэтиламин (0.35 мл, 2.5 ммоль) и реакционную смесь охладили до 0°С. Трифосген (0.17 г, 0.57 ммоль) добавили медленно и смесь затем нагрели до 70°С в течение 1 ч. Реакционную смесь затем охладили до комнатной температуры для добавления 2.0 М
- 65 026134 метиламина в ТГФ (2.2 мл, 4.4 ммоль) и получившуюся реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. ЬС-Μδ показала полную конверсию и в завершение реакционную смесь разбавили водой и ΕΐΌΛο. Фазы разделили и водный слой экстрагировали 3х ΕΐΌΛο. Органические экстракты собрали и высушили над Μ§δО4, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Очистили посредством оф-ВЭЖХ с получением соединения 124 (122 мг, 25% выход).
Μδ (ΕδΙ+) т/ζ: 438.2 (М+Н+).
¥ ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.68 (5, 1Н), 8.24 (б, 1=8.7 Гц, 2Н), 7.48 (б, 1=8.7 Гц, 2Н), 6.04 (ф 1=4.4 Гц, 1Н), 4.25 (5, 4Н), 4.14 (б, 1=3.4 Гц, 4Н), 3.82-3.67 (т, 4Н), 2.66 (б, 1=4.6 Гц, 3Н), 1.58 (5,6Н).
Пример 125. 6,6-Диметил-4-морфолино-2-(1Н-пиразол-4-ил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин 125.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 125.
¥ ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 12.98 (5, 1Н), 8.23 (5, 1Н), 8.01 (5, 1Н), 4.22 (5, 4Н), 4.10 (5, 4Н), 3.803.67 (т, 4Н), 1.57 (5, 6Н).
ΡίΜδ: Кт=3.67 мин, М+Н+=356.
Пример 126. 4-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин2-амин 126.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-амин (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 126.
¥ ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 7.99 (б, 1=5.3 Гц, 1Н), 7.41 (5, 1Н), 7.38 (б, 1=5.3 Гц, 1Н), 5.97 (5, 2Н), 4.27 (5, 4Н), 4.15 (б, 1=3.5 Гц, 4Н), 3.82-3.71 (т, 4Н), 1.59 (5, 6Н).
ΡίΜδ: Кт=3.64 мин, М+Н+=382.
Пример 127. 6,6-Диметил-2-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 127.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 127.
¥ ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.23 (5, 1Н), 7.93 (5, 1Н), 4.21 (5, 4Н), 4.10 (5, 4Н), 3.88 (5, 3Н), 3.73 (бб, 1=12.3, 7.7 Гц, 4Н), 1.57 (5, 6Н).
ΡίΜδ: Кт=3.94 мин, М+Н+=370.
Пример 128. 3-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенол
128.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенол (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 128.
¥ ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.41 (5, 1Н), 7.82 (бб, 1=4.5, 2.5 Гц, 2Н), 7.28-7.20 (т, 1Н), 6.82 (бб, 1=7.7, 1.8 Гц, 1Н), 4.26 (5, 4Н), 4.19-4.08 (т, 4Н), 3.82-3.71 (т, 4Н), 1.59 (5, 6Н).
ΡίΜδ: КТ=4.46 мин, М+Н+=382.
Пример 129. 2-(1Н-Индазол-5-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин 129.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индазол (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 129. ¥ ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 13.11 (5, 1Н), 8.81 (5, 1Н), 8.48-8.43 (т, 1Н), 8.19 (5, 1Н), 7.58 (б, 1=8.8 Гц, 1Н), 4.29 (5, 4Н), 4.17 (бб, 1=16.1, 5.1 Гц, 4Н), 3.82-3.74 (т, 4Н), 1.60 (5, 6Н).
ΡίΜδ: КТ=4.47 мин, М+Н+=406.
Пример 130. 6,6-Диметил-2-(2-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-4-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 130.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-метил-4-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2ил)пиперазин (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 130.
¥ ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.21 (б, 1=4.7 Гц, 1Н), 7.68 (5, 1Н), 7.56 (б, 1=4.7 Гц, 1Н), 4.27 (5, 4Н), 4.16 (б, 1=26.1 Гц, 4Н), 3.77 (5, 4Н), 3.55 (5, 4Н), 2.46 (5, 4Н), 2.25 (5, 3Н), 1.59 (5, 6Н).
- 66 026134
ЬСМ8: КТ=3.40 мин, М+Н+=465.
Пример 131. ^(2-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)фенил)метансульфонамид 131.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), ^(2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил) метансульфонамид (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 131.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 12.87 (к, 1Н), 8.58 (б, 1=8.0 Гц, 1Н), 7.60 (б, 1=8.1 Гц, 1Н), 7.48 (ΐ, 1=7.5 Гц, 1Н), 7.22 (ΐ, 1=7.4 Гц, 1Н), 4.26 (к, 4Н), 4.16 (к, 4Н), 3.78 (к, 4Н), 3.07 (к, 3Н), 1.62 (б, 1=11.5 Гц, 6Н).
ЬСМ8: КТ=5.36 мин, М+Н+=459.
Пример 132. 6,6-Диметил-4-морфолино-2-(6-морфолинопиридин-3-ил)-8,9-дигидро-6Н[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 132.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 4-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)морфолин (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 132.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.11 (к, 1Н), 8.42 (б, 1=8.7 Гц, 1Н), 6.89 (б, 1=8.9 Гц, 1Н), 4.24 (к, 4Н), 4.14 (к, 4Н), 3.74 (б, 1=14.7 Гц, 8Н), 3.55 (б, 1=3.9 Гц, 4Н), 1.60 (б, 1=15.6 Гц, 6Н).
ЬСМ8: КТ=3.79 мин, М+Н+=452.
Пример 133. 2-(1-Бензил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 133.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-бензил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 133.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.37 (к, 1Н), 7.99 (к, 1Н), 7.35 (б, 1=7.6 Гц, 2Н), 7.29 (б, 1=6.9 Гц, 3Н), 5.37 (к, 2Н), 4.21 (к, 4Н), 4.09 (к, 4Н), 3.74 (к, 4Н), 1.58 (б, 1=9.4 Гц, 6Н).
ЬСМ8: КТ=4.82 мин, М+Н+=446.
Пример 134. 2-(2-Изопропоксипиридин-3-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 134.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 2-изопропокси-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 134.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.20 (к, 1Н), 8.03 (б, 1=7.2 Гц, 1Н), 7.07-6.99 (т, 1Н), 5.43-5.31 (т, 1Н), 4.22 (к, 4Н), 4.11 (к, 4Н), 3.73 (к, 4Н), 1.59 (к, 6Н), 1.26 (б, 1=6.1 Гц, 6Н).
ЬСМ8: КТ=4.56 мин, М+Н+=425
Пример 135. ^(2-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)фенил)ацетамид 135.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), ^(2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)ацетамид (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 135.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 12.45 (к, 1Н), 8.53 (б, 1=8.2 Гц, 1Н), 8.44 (б, 1=8.2 Гц, 1Н), 7.40 (ΐ, 1=7.5 Гц, 1Н), 7.15 (ΐ, 1=7.5 Гц, 1Н), 4.23 (ΐ, 1=18.4 Гц, 4Н), 4.16 (к, 2Н), 3.78 (к, 4Н), 2.21 (к, 3Н), 1.62 (б, 1=10.6 Гц, 6Н).
ЬСМ8: КТ=5.16 мин, М+Н+=423.
Пример 136. 2-(3,5-Диметил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 136.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 3,5-диметил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 136.
ЬСМ8: КТ=3.81 мин, М+Н+=384.
Пример 137. 5-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин2-ол 137.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ол (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 137.
- 67 026134
Ч ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 11.82 (5, 1Н), 8.34 (й, 1=9.7 Гц, 1Н), 8.27 (5, 1Н), 6.41 (й, 1=9.6 Гц, 1Н), 4.22 (5, 4Н), 4.12 (5, 4Н), 3.75 (5, 4Н), 1.57 (5, 6Н).
ЬСМ§: КТ=3.95 мин, М+Н+=383.
Пример 138. 6-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин3-амин 138.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-3-амин (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(11) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 138.
Ч ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.20 (5, 1Н), 8.91 (5, 1Н), 8.22 (й, 1=8.4 Гц, 1Н), 8.07 (й, 1=3.8 Гц, 1Н), 7.25 (йй, 1=8.1, 4.3 Гц, 1Н), 4.25-3.97 (т, 8Н), 3.74 (й, 1=3.9 Гц, 4Н), 1.55 (5, 6Н).
ЬСМ§: КТ=3.44 мин, М+Н+=382.
Примеры 139 и 140. (К)-5-(4-Морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 139 и (§)-5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н[ 1,4]оксазино [3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 140.
Стадия 1. 1-(2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2трифторэтанон
К смеси 4-(2-хлор-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-6-ил)морфолина (1 г, 9 ммоль) в ТГФ (25 мл) при -78°С добавили тетраметилэтилендиамин (0.93 мл, 0.0062 моль) с последующим 2.5 М п-ВиЫ (2.5 мл, 0.0062 моль) по каплям. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин и затем добавили этилтрифторацетат (0.74 мл, 0.0062 моль), продолжили перемешивание в течение 2 ч при -78°С. Реакционную смесь погасили водой и экстрагировали ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над Мд§О4 и сконцентрировали. Неочищенный материал очистили с помощью 1§СО хроматографии с 0-100% ЕЮАс/гексан с получением чистого 1-(2-хлор-6-морфолино9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанона в виде белого осадка (2.5 г, 70% выход).
ЬС/М§ (Е§1+) т/ζ: 421 (М+Н).
Стадия 2. 1-(2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2трифторэтанол
1-(2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанон (1.5 г, 0.0036 моль) в МеОН (22 мл) обработали тетрагидроборатом натрия (0.27 г, 0.0072 моль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь погасили водой и экстрагировали ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над Мд§О4 и сконцентрировали. Неочищенный материал очистили хроматографией 1§СО с 0-80% ЕЮАс/гексан с получением чистого 1-(2-хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанола (1.3 г, 86% выход).
ЬС/М§ (Е§1+) т/ζ: 423 (М+Н).
Стадия 3. 1-(2-Хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанол
1-(2-Хлор-6-морфолино-9-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанол (1.3 г, 0.0031 моль) в МеОН (12 мл) обработали каталитическим количеством п-толуолсульфоновой кислоты (53 мг, 0.00031 моль). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение ночи и затем сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой и ЕЮАс. Органические экстракты промыли
- 68 026134 водой, солевым раствором, высушили над МдЗ04 и сконцентрировали досуха с получением
1-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанола (1 г, 100% выход).
ЬС/МЗ (ЕЗН) т/ζ: 338 (М+Н).
Стадия 4. 2-Хлор-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
Смесь 1-(2-хлор-6-морфолино-9Н-пурин-8-ил)-2,2,2-трифторэтанола (1 г, 0.003 моль), 1,2-дибромэтана (0.51 мл, 0.006 моль) и карбоната цезия (2.9 г, 0.089 моль) в ДМФ (18 мл) нагревали при 90°С в течение 12 ч. Реакционную смесь отфильтровали и разделили между водой и ЕЮАс. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором и высушили над МдЗ04 и сконцентрировали. Неочищенный продукт очистили с помощью хроматографии ЦЗС0 с 0-50% ЕЮАс/гексан с получением чистого 2-хлор-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурина (0.3 г, 30%).
ЬС/МЗ (ЕЗН) т/ζ: 364 (М+Н).
Стадия 5. 2-Хлор-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (140 мг, 0.0004 моль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2-амин (130 мг, 0.00058 моль) взаимодействовали в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с получением рацемата 5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амина (36 мг, 32% выход), который разделили на (К)-энантиомер 139 и (З)-энантиомер 140.
ЬС/МЗ (ЕЗН) т/ζ: 423 (М+Н).
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.11 (5, 2Н), 7.05 (5, 2Н), 5.88 (ά, 1=6.8 Гц, 1Н), 4.38 (1, 1=12.2 Гц, 2Н), 4.35-4.09 (т, 6Н), 3.76 (в, 4Н)
Пример 141. 2-(1-Этил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 141.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-этил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 141.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.26 (в, 1Н), 7.95 (в, 1Н), 4.28-4.12 (т, 6Н), 4.10 (в, 4Н), 3.78-3.69 (т, 4Н), 1.58 (в, 6Н), 1.40 (1, 1=7.3 Гц, 3Н).
ЬСМЗ: КТ=4.13 мин, М+Н+=384.
Пример 142. 4-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-^^ диметилбензамид 142.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), ^^диметил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензамид (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 142.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.42 (ά, 1=8.2 Гц, 2Н), 7.49 (ά, 1=8.2 Гц, 2Н), 4.28 (в, 4Н), 4.16 (т, 4Н), 3.81-3.73 (т, 4Н), 3.06-2.87 (т, 6Н), 1.60 (в, 6Н).
ЬСМЗ: КТ=4.60 мин, М+Н+=437.
Пример 143. трет-Бутил 4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)фенил(метил)карбамат 143.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), трет-бутил метил (4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)фенил)карбамат (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 143.
ЬСМЗ: КТ=6.07 мин, М+Н+=495.
Пример 144. 2-(3-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)фенил)ацетонитрил 144.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 2-(3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)ацетонитрил (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 144.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.37 (в, 1Н), 8.35 (ά, 1=7.8 Гц, 1Н), 7.50 (1, 1=7.6 Гц, 1Н), 7.43 (ά,
1=7.5 Гц, 1Н), 4.28 (в, 4Н), 4.21-4.11 (т, 6Н), 3.84-3.70 (т, 4Н), 1.59 (в, 6Н).
ЬСМЗ: КТ=5.11 мин, М+Н+=405.
- 69 026134
Пример 145. 6,6-Диметил-4-морфолино-2-(3-морфолинофенил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин 145.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 4-(3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)морфолин (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(11) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 145.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 7.96 (δ, 1Н), 7.86 (й, 1=7.7 Гц, 1Н), 7.32 (ΐ, 1=7.9 Гц, 1Н), 7.04 (йй, 1=8.1, 2.2 Гц, 1Н), 4.25 (δ, 4Н), 4.15 (т, 4Н), 3.77 (т, 8Н), 3.21-3.12 (т, 4Н), 1.59 (δ, 6Н).
ЬСМ8: КТ=4.66 мин, М+Н+=451.
Пример 146. 6,6-Диметил-4-морфолино-2-(3-(морфолинометил)фенил)-8,9-дигидро-6Н[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 146.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 4-(3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензил)морфолин (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(11) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 146.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.30 (δ, 1Н), 8.27 (й, 1=7.3 Гц, 1Н), 7.46-7.34 (т, 2Н), 4.27 (δ, 4Н), 4.16 (т, 4Н), 3.83-3.72 (т, 4Н), 3.58 (т, 4Н), 3.55 (δ, 2Н), 2.38 (т, 4Н), 1.59 (δ, 6Н).
ЬСМ8: КТ=3.84 мин, М+Н+=465.
Пример 147. 2-(3-(Бензилокси)фенил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин 147.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 2-(3-(бензилокси)фенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(11) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 147.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.00-7.94 (т, 2Н), 7.50 (й, 1=7.2 Гц, 2Н), 7.44-7.37 (т, 3Н), 7.37-7.30 (т, 1Н), 7.14-7.07 (т, 1Н), 5.20 (δ, 2Н), 4.21 (δ, 4Н), 4.15 (т, 4Н), 3.82-3.69 (т, 4Н), 1.59 (δ, 6Н).
ЬСМ8: КТ=6.33 мин, М+Н+=472.
Пример 148. 2-(1-Изобутил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 148.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-изобутил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(11) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 148.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.24 (δ, 1Н), 7.95 (й, 1=8.5 Гц, 1Н), 4.22 (δ, 4Н), 4.10 (δ, 4Н), 3.95 (й, 1=7.2 Гц, 2Н), 3.78-3.69 (т, 4Н), 2.15 (йр, 1=13.8, 6.8 Гц, 1Н), 1.57 (8,6Н), 0.86 (й, 1=6.7 Гц, 6Н).
ЬСМ8: КТ=4.67 мин, М+Н+=412.
Пример 149. 6,6-Диметил-2-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3 -ил)-4-морфолино-8,9-дигидро6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 149.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-метил-4-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2ил)пиперазин (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(11) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 149.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.08 (й, 1=2.3 Гц, 1Н), 8.39 (йй, 1=9.0, 2.3 Гц, 1Н), 6.89 (ΐ, 1=7.1 Гц, 1Н), 4.24 (δ, 4Н), 4.14 (ΐ, 1=5.2 Гц, 4Н), 3.81-3.70 (т, 4Н), 3.64-3.52 (т, 4Н), 2.44-2.36 (т, 4Н), 2.23 (δ, 3Н), 1.58 (δ, 6Н).
ЬСМ8: КТ=3.45 мин, М+Н+=465.
Пример 150. 2-(1Н-Индазол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин 150.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индазол 24 (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(11) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 150.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 13.16 (й, 1=20.9 Гц, 1Н), 8.91 (δ, 1Н), 8.20 (й, 1=7.2 Гц, 1Н), 7.64 (ΐ, 1=8.3 Гц, 1Н), 7.45 (ΐ, 1=7.8 Гц, 1Н), 4.28 (т, 6Н), 4.17 (т, 2Н), 3.85-3.75 (т, 4Н), 1.61 (δ, 6Н).
ЬСМ8: КТ=4.61 мин, М+Н+=406.
Пример 151. 4-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)бензонитрил 151.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензонитрил (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(11) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 151.
- 70 026134
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.54 (Б, 1=8.5 Гц, 2Н), 7.94 (Б, 1=8.4 Гц, 2Н), 4.28 (т, 4Н), 4.16 (т, 4Н), 3.77 (т, 4Н), 1.60 (5, 6Н).
Ι,('\1δ: КТ=5.53 мин, М+Н+=391.
Пример 152. 5-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)никотинамид 152.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)никотинамид (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(11) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 152.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.61 (ББ, 1=5.2, 2.0 Гц, 1Н), 9.08 (!, 1=2.7 Гц, 1Н), 9.02 (!, 1=2.1 Гц, 1Н), 8.30 (5, 1Н), 7.65 (5, 1Н),4.30(5, 4Н), 4.18 (Б!, 1=9.7, 4.5 Гц, 4Н), 3.81-3.71 (т, 4Н), 1.60 (5, 6Н).
Ι,('\1δ: КТ=3.71 мин, М+Н+=410.
Пример 153. 5-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-Ыметилпиколинамид 153
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), ^метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиколинамид (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(11) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 153. 'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.51 (5, 1Н), 8.81 (Б, 1=6.1 Гц, 1Н), 8.79-8.72 (т, 1Н), 8.13 (Б, 1=8.2 Гц, 1Н), 4.28 (т, 4Н), 4.17 (т, 4Н), 3.78 (т, 4Н), 2.86 (Б, 1=4.9 Гц, 3Н), 1.60 (5, 6Н).
Ι,('\1δ: КТ=4.64 мин, М+Н+=424.
Пример 154. 2-(4-(Бензилокси)фенил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин 154.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 2-(4-(бензилокси)фенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(11) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 154.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.31 (!, 1=7.6 Гц, 2Н), 7.48 (Б, 1=7.2 Гц, 2Н), 7.41 (!, 1=7.4 Гц, 2Н), 7.34 (!, 1=7.2 Гц, 1Н), 7.10 (!, 1=7.4 Гц, 2Н), 5.17 (5, 2Н), 4.25 (5, 4Н), 4.14 (ББ, 1=6.7, 2.6 Гц, 4Н), 3.81-3.71 (т, 4Н), 1.58 (5, 6Н).
Ι,('\1δ: КТ=6.21 мин, М+Н+=472.
Пример 155. 3-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)- Ν,Νдиметиланилин 155.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), ^^диметил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)анилин (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(11) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 155.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 7.80 (5, 1Н), 7.71 (Б, 1=7.7 Гц, 1Н), 7.26 (!, 1=7.9 Гц, 1Н), 6.82 (ББ, 1=8.2, 2.5 Гц, 1Н), 4.25 (5, 4Н), 4.23-4.06 (т, 4Н), 3.84-3.69 (т, 4Н), 2.96 (5, 6Н), 1.59 (5, 6Н).
Ι,('\1δ: КТ=3.88 мин, М+Н+=409.
Пример 156. 6,6-Диметил-2-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 156.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-метил-4-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)фенил)пиперазин (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 156.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.22 (Б, 1=8.9 Гц, 2Н), 6.98 (Б, 1=8.9 Гц, 2Н), 4.24 (5, 4Н), 4.13 (Б, 1=3.2 Гц, 4Н), 3.80-3.72 (т, 4Н), 3.26-3.20 (т, 4Н), 2.48-2.43 (т, 4Н), 2.23 (5, 3Н), 1.58 (5, 6Н).
Ι,('\1δ: КТ=3.76 мин, М+Н+=464.
Пример 157. 6,6-Диметил-4-морфолино-2-(4-(пиперидин-1-ил)фенил)-8,9-дигидро-6Н[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 157.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 1-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)пиперидин (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(11) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 157.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.21 (Б, 1=8.9 Гц, 2Н), 6.96 (Б, 1=9.0 Гц, 2Н), 4.23 (5, 4Н), 4.13 (!,
1=4.8 Гц, 4Н), 3.81-3.69 (т, 4Н), 3.27-3.21 (т, 4Н), 1.61 (т, 6Н), 1.58 (5, 6Н).
Ι,('\1δ: КТ=4.13 мин, М+Н+=449.
- 71 026134
Пример 158. N-(5-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)пиридин-2-ил)ацетамид 158.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), N-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2-ил)ацетамид (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 158.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 10.64 (5, 1Н), 9.23 (ά, 1=2.2 Гц, 1Н), 8.63 (άά, 1=8.7, 2.3 Гц, 1Н), 8.17 (ά, 1=8.8 Гц, 1Н), 4.27 (5, 4Н), 4.15 (άά, 1=15.2, 5.1 Гц, 4Н), 3.81-3.71 (т, 4Н), 2.12 (5, 3Н), 1.59 (5, 6Н).
ЬСМ§: Кт=3.95 мин, М+Н+=424.
Пример 159. 5-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)пиколинамид 159.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиколинамид (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 159.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.52 (ά, 1=1.8 Гц, 1Н), 8.81 (άά, 1=8.2, 2.1 Гц, 1Н), 8.14 (ά, 1=8.2 Гц, 1Н), 8.12 (5, 1Н), 7.69 (5, 1Н), 4.29 (5, 4Н), 4.18 (т, 4Н), 3.83-3.71 (т, 4Н), 1.60 (5, 6Н).
ЬСМ§: Кт=4.39 мин, М+Н+=410.
Пример 160. 6-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин3-ол 160.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), 6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-3-ол (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 160.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.24 (т, 2Н), 7.24 (άά, 1=8.6, 2.9 Гц, 1Н), 6.62 (5, 1Н), 4.25 (5, 4Н), 4.14 (ά, 1=2.5 Гц, 4Н), 3.81-3.70 (т, 4Н), 1.59 (5, 6Н).
ЬСМ§: Кт=3.73 мин, М+Н+=383.
Пример 161. (4-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)фенил)(4-метилпиперазин-1-ил)метанон 161.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), (4-метилпиперазин-1-ил)(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)фенил)метанон (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 161.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.43 (ά, 1=8.2 Гц, 2Н), 7.47 (ά, 1=8.2 Гц, 2Н), 4.28 (5, 4Н), 4.21-4.08 (т, 4Н), 3.82-3.71 (т, 4Н), 3.62 (5, 4Н), 2.33 (5, 4Н), 2.20 (5, 3Н), 1.60 (5, 6Н).
ЬСМ§: Кт=3.64 мин, М+Н+=492.
Пример 162. N-Циклопропил-3-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин-2-ил)бензамид 162.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), N-циклопропил-3-(4,4,5,5-теΊраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензамид (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 162.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8.77 (5, 1Н), 8.53 (ά, 1=4.0 Гц, 1Н), 8.50 (ά, 1=7.8 Гц, 1Н), 7.84 (ά, 1=7.7 Гц, 1Н), 7.53 (ί, 1=7.7 Гц, 1Н), 4.28 (5, 4Н), 4.17 (άί, 1=9.5, 4.4 Гц, 4Н), 3.84-3.70 (т, 4Н), 2.88 (Ц, 1=7.8, 4.0 Гц, 1Н), 0.76-0.67 (т, 2Н), 0.64-0.54 (т, 2Н).
ЬСМ§: Кт=4.68 мин, М+Н+=449.
Пример 163. 5-(6,6-Диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-N,Nдиметилпиразин-2-амин 163.
Следуя общей методике А, 2-хлор-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин (102 мг, 0.31 ммоль), N,N-диметил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиразин-2амин (0.31 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (11 мг, 16 мкмоль) взаимодействовали с получением соединения 163.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 9.04 (5, 1Н), 8.21 (5, 1Н), 4.24 (5, 4Н), 4.14 (ί, 1=5.3 Гц, 4Н), 3.81-3.66 (т, 4Н), 3.15 (5, 6Н), 1.59 (5, 6Н).
ЬСМ§: Кт=3.93 мин, М+Н+=411.
- 72 026134
Пример 167. 2-(2-Аминопиримидин-5-ил)-7-метил-4-морфолино-8,9-дигидропиразино[2,1-е]пурин6(7Н)-он 167.
Стадия 1. 2-Хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-карбоновой кислоты метиламид
Раствор 2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурина (0.50 г, 1.55 ммоль) и Ν,Ν,Ν',Ν-тетраметилэтилендиамина (0.35 мл, 2.33 ммоль) в безводном ТГФ (14 мл) охладили до -78°С. По каплям добавили бутиллитий (2.5 М в гексанах, 1.22 мл, 3.05 ммоль) и темно-желтый раствор перемешивали при -78°С в течение 45 мин. Добавили Ν-сукцинимидила Ν-метилкарбамат (0.4 г, 2.33 ммоль) в виде суспензии в небольшом объеме ТГФ и смесь оставили нагреваться до комнатной температуры с перемешиванием в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавили водой, нейтрализовали 1 М соляной кислотой и экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные экстракты высушили (№2δΟ4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток подвергли флэш-хроматографии (δίΟ2, градиент 0-100% этилацетат в циклогексане) с получением 2-хлор-6-морфолин-4-ил-9(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-карбоновой кислоты метиламида (104 мг, 18%).
^Μδ ΚΤ=3.26, [М+Н]+=381/383.
Стадия 2. 2-Хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-карбоновой кислоты метиламид
2-Хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-карбоновой кислоты метиламид (104 мг, 0.27 ммоль) суспендировали в метаноле (6 мл) и добавили моногидрат п-толуолсульфоновой кислоты (10 мг, 0.05 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 68 ч, затем разбавили водой и нейтрализовали водным бикарбонатом натрия. Твердый преципитат отфильтровали и высушили при 50°С под вакуумом с получением 2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-карбоновой кислоты метиламида (56 мг, 70%).
^Μδ ΚΤ=2.43, [М+Н]+=297/299.
Стадия 3. 3-Хлор-7-метил-1-морфолин-4-ил-6,7-дигидро-5Н-2,4,4Ь,7,9-пентаазафлуорен-8-он
Смесь 2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-карбоновой кислоты метиламида (56 мг, 0.19 ммоль), 1,2-дибромэтана (0.058 мл, 0.68 ммоль) и карбоната цезия ( 0.25 г, 0.76 ммоль) в ДМФ (2 мл) нагревали при 100°С в течение 2 ч, затем охладили, разбавили водой и экстрагировали пять раз этилацетатом. Объединенные экстракты высушили (№2δΟ4) и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток тритурировали дважды с диэтиловым эфиром и осадок высушили под вакуумом с получением
3-хлор-7-метил-1-морфолин-4-ил-6,7-дигидро-5Н-2,4,4Ь,7,9-пентаазафлуорен-8-она (47 мг, 77%).
^Μδ ΚΤ=2.36, [М+Н]+=323/325.
Стадия 4. Смесь 3-хлор-7-метил-1-морфолин-4-ил-6,7-дигидро-5Н-2,4,4Ь,7,9-пентаазафлуорен-8-она (47 мг, 0.15 ммоль), 2-аминопиримидин-5-бороновой кислоты пинаколового эфира (39 мг, 0.18 ммоль) и карбоната цезия (131 мг, 0.40 ммоль) в 1,4-диоксане (1.5 мл) и воде ( 1.5 мл) продули аргоном. тетракис-(Трифенилфосфин)палладий(0) (9 мг, 0.008 ммоль) добавили, смесь снова продули аргоном и затем нагревали при 100°С в течение ночи. Смесь охладили и разбавили водой. Преципитат отфильтровали, промыли водой и затем тритурировали с этанолом. Осадок отфильтровали и высушили (вакуум, 50°С) с получением соединения 167 (15 мг, 26%).
^Μδ ΚΤ=2.47, [М+Н]+=382.
ΊI ЯМР (ДМСО-й6 + ф-ТФУ, 400 МГц): δ 9.38 (2Н, к), 4.79-4.06 (4Н, ν. Ьгоай), 4.44 (2Н, ί, 1=6.0 Гц),
3.90 (2Н, ί, .1=6.0 Гц), 3.80 (4Н, ί, 1=4.7 Гц), 3.11 (3Н, к).
- 73 026134
Пример 168. 5-(8,8-Диметил-1-морфолин-4-ил-5,8-дигидро-6Н-7-окса-9-тиа-2,4-диазафлуорен-3ил)пиримидин-2-иламин 168.
Стадия 1. 7-Бромтиено[3,2-Д]пиримидин-2,4(1Н,3Н)-дион
Тиено[3,2-Д]пиримидин-2,4(1Н,3Н)-дион (10.38 г, 61.72 ммоль) растворили в уксусной кислоте (230 мл) и добавили бром (11.13 мл, 216 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 3.5 ч. Завершение реакции подтвердили с помощью ЬСМ8. Реакционную смесь медленно влили в ледяную воду и отфильтровали преципитат, который высушили в течение ночи под вакуумом с получением 7-бромтиено[3,2-Д]пиримидин-2,4(1Н,3Н)-диона (9.1 г, 60% выход).
Стадия 2. 7-Бром-2,4-дихлортиено[3,2-Д]пиримидин
7-Бромтиено[3,2-Д]пиримидин-2,4(1Н,3Н)-дион (9.1 г, 37 ммоль) растворили в РОС13 (140 мл, 1500 ммоль) и нагревали при 110°С с конденсационной колонкой ν^д^еиx, присоединенной на 20 ч. Завершение реакции подтвердили с помощью ЬСМ8. Медленно влили в ледяную воду и отфильтровали преципитат. Продукт очистили с помощью хроматографии на силикагеле (0-100% этилацетат/гептаны) на системе СотЫИакЬ® (Те1еДупе ИСО Со.) КТ и сконцентрировали под вакуумом с получением 7-бром-2,4-дихлортиено[3,2-Д]пиримидина (8.4 г, 80% выход).
Стадия 3. 4-(7-Бром-2-хлортиено[3,2-Д]пиримидин-4-ил)морфолин
7-бром-2,4-дихлортиено[3,2-Д]пиримидин (2.9 г, 10.0 ммоль) растворили в метаноле (100 мл, 2000 ммоль) и добавили морфолин (2 мл, 22 ммоль) и перемешивали реакционную смесь в течение 1.5 ч. Завершение реакции подтвердили с помощью ЬСМ8. Сконцентрировали под вакуумом и разбавили водой. Экстрагировали ДХМ и сконцентрировали под вакуумом снова. Продукт очистили с помощью хроматографии на силикагеле (0-100% этилацетат/гептаны) на системе СотЫИакЬ® КТ и сконцентрировали под вакуумом с получением 4-(7-бром-2-хлортиено[3,2-Д]пиримидин-4-ил)морфолина (1.2 г, 35% выход).
!Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 7.78 (к, 1Н), 4.01 (т, 4Н), 3.85 (т, 4Н).
Стадия 4. 4-(2-Хлор-7-винилтиено[3,2-Д]пиримидин-4-ил)морфолин
4-(7-Бром-2-хлортиено[3,2-Д]пиримидин-4-ил)морфолин (3.55 г, 10.6 ммоль), (2-этенил)три-пбутилолово (3.41 мл, 11.7 ммоль), РД(РРЬ3)4 (613 мг, 0.53 ммоль) и 1,4-диоксан (30 мл, 400 ммоль) смешали в закрытой пробирке и нагревали при 100°С 19.5 ч. Завершение реакции подтвердили с помощью ЬСМ8. Сконцентрировали под вакуумом и очистили посредством хроматографии на силикагеле (0-50% этилацетат/гептаны) на системе СотЫИакЬ® КТ и сконцентрировали под вакуумом с получением 4-(2-хлор-7-винилтиено[3,2-Д]пиримидин-4-ил)морфолина (1.18 г, 39.5% выход).
Стадия 5. 2-(2-Хлор-4-морфолинотиено[3,2-Д]пиримидин-7-ил)этанол
- 74 026134
4-(2-Хлор-7-винилтиено[3,2-й]пиримидин-4-ил)морфолин (170 мг, 0.6 ммоль) растворили в тетрагидрофуране (10 мл, ЮОммоль) и охладили до 0°С в атмосфере азота. 0.5 М 9-ΒΒΝ в гексанах (3.4 мл, 2 ммоль) добавили и реакционную смесь оставили нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. ЬСМ8 показало большее количество исходных веществ, так что реакционную смесь охладили до 0°С снова и добавили 0.5 М 9-ΒΒΝ в гексанах (8.0 мл, 4 ммоль) и оставили нагреваться до комнатной температуры и снова перемешивали в течение ночи. Добавили 20 М пероксид водорода (1.4 мл, 20 ммоль) с последующим 5 М гидроксидом натрия в воде (2.4 мл, 10 ммоль). Реакционную смесь разбавили водой и экстрагировали этилацетатом, высушили над сульфатом магния и сконцентрировали под вакуумом и очистили с помощью хроматографии на силикагеле (0-50% этилацетат/гептаны) на системе ί'.'οιηόίΗ;·ΐδ1ι® Κί и сконцентрировали под вакуумом с получением 2-(2-хлор-4-морфолинотиено[3,2-й]пиримидин-7-ил)этанола (110 мг, 61% выход).
Стадия 6. 2-(2-Хлор-7-(2-гидроксиэтил)-4-морфолинотиено[3,2-й]пиримидин-6-ил)пропан-2-ол
2-(2-Хлор-4-морфолинотиено[3,2-й]пиримидин-7-ил)этанол (70 мг, 0.2 ммоль) растворили в тетрагидрофуране (5 мл, 60ммоль) и охладили до -40°С в атмосфере азота. Добавили 2.5 М η-ВиЫ в гексанах (370 мл, 0.93 ммоль) и оставили перемешиваться на 1 ч. Добавили ацетон (86 мкл, 1.2 ммоль) и снова перемешивали при -40°С в течение 5 ч. Реакция не завершилась и её погасили насыщенным хлоридом аммония и экстрагировали этилацетатом, высушили над сульфатом магния и сконцентрировали под вакуумом с получением неочищенной смеси исходных веществ и 2-(2-хлор-7-(2-гидроксиэтил)-4морфолинотиено[3,2-й]пиримидин-6-ил)пропан-2-ола (30 мг).
Стадия 7. 3-Хлор-8,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,8-дигидро-6Н-7-окса-9-тиа-2,4-диазафлуорен
Загрязненный 2-(2-хлор-7-(2-гидроксиэтил)-4-морфолинотиено[3,2-й]пиримидин-6-ил)пропан-2-ол (30 мг) растворили в толуоле (5 мл, 50 ммоль). Добавили трифторуксусную кислоту (0.5 мл, 6 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 120°С в течение 2 ч. Завершение реакции подтвердили с помощью ЬСМ§. Разбавили водой и экстрагировали этилацетатом, высушили над сульфатом магния, сконцентрировали под вакуумом и очистили с помощью хроматографии на силикагеле (0-100% этил ацетат/гептаны) на системе ί'.'οιηόίί1;·ΐδ1ι® Κί, используя аминную колонку, и сконцентрировали под вакуумом с получением 3-хлор-8,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,8-дигидро-6Н-7-окса-9-тиа-2,4-диазафлуорена (10 мг, 10% выход).
Стадия 8. 3-Хлор-8,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,8-дигидро-6Н-7-окса-9-тиа-2,4-диазафлуорен (10 мг, 0.03 ммоль) растворили в ацетонитриле (2 мл, 40 ммоль) и добавили 1 М карбонат натрия в воде (2 мл, 2 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3-диоксолан-2-ил)пиримидин-2-амин (9.0 мг, 0.041 ммоль) и бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(П) (1.1 мг, 0.001 6ммоль). Реакционную смесь поместили в микроволновую печь Вю1аде при 120°С в течение 15 мин. Водный слой удалили пипеткой и органический слой сконцентрировали под вакуумом и очистили с помощью хроматографии на силикагеле (0-100% этил ацетат/гептан ы) на системе ί'.'οιηόίί1;·ΐδ1ι®® Κί, используя колонку с щелочным оксидом алюминия и сконцентрировали под вакуумом с получением (85% чистота) соединения 168 (2.7 мг, 20% выход).
М+1: 399.3.
!Н ЯМР (400 МГц, СИС13): δ 9.30 (δ, 2Н), 5.34 (Ьг8, 2Н), 4.08 (ί, 2Н), 4.01 (т, 4Н), 3.87 (т, 4Н), 2.95 (ί, 2Н), 1.62 (δ, 6Н).
- 75 026134
Пример 169. 2-(1Н-Индазол-4-ил)-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н[1,4]оксазино[3,4-е]пурин 169.
Стадия 1. 4-Морфолино-2-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-индазол-4-ил)-6-(трифторметил)-8,9дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин
2-Хлор-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин из примеров 139 и 140 (90 мг, 0.0002 моль) и 1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)-1Н-индазол (160 мг, 0.0005 моль) взаимодействовали с РП(ПррГ)С12 ([1,1-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(П), комплекс с дихлорметаном) и карбонатом цезия в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с получением 4-морфолино-2-(1(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-индазол-4-ил)-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурина (90 мг, 90% выход).
ЬС/Μδ (ΕδΙ+) т/ζ: 530 (М+Н).
Стадия 2. 4-Морфолино-2-(1-(тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)-1Н-индазол-4-ил)-6-(трифторметил)-8,9дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин (100 мг, 0.0002 моль) в МеОН (1 мл) обработали каталитическим количеством п-толуолсульфоновой кислоты (3 мг, 0.02 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 50°С в течение ночи и затем сконцентрировали при пониженном давлении. Остаток разделили между водой и ΕίΟΛα. Органические экстракты промыли водой, солевым раствором, высушили над Μ§δΟ4 и сконцентрировали досуха с получением соединения 169 (13 г, 16% выход).
ЬС/Μδ (ΕδΙ+) т/ζ: 446 (М+Н).
'II ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 13.16 (5, 1Н), 8.92 (5, 1Н), 8.22 (ά, 1=7.2 Гц, 1Н), 7.66 (ά, 1=8.2 Гц, 1Н), 7.47 (1, 1=7.8 Гц, 1Н), 5.93 (φ 1=6.8 Гц, 1Н), 4.55-4.17 (т, 8Н), 3.80 (1, 1=4.6 Гц, 4Н).
Пример 170. 3-(4-Морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)фенол 170.
2-Хлор-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин из примеров 139 и 140 (50 мг, 0.00015 моль) и 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенол (76 мг, 0.00034 моль) взаимодействовали с Ρά(άρρΓ)02 и карбонатом цезия в условиях для реакции Сузуки с палладием и микроволновым излучением с получением соединения 170 (10 мг, 15% выход).
ЬС/Μδ (ΕδΙ+) т/ζ: 422 (М+Н).
'II ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 7.96-7.74 (т, 2Н), 7.26 (1, 1=8.1 Гц, 1Н), 6.83 (ά1, 1=23.4, 11.6 Гц, 1Н), 5.89 (ф 1=6.9 Гц, 1Н), 4.51-4.08 (т, 8Н), 3.77 (1, 1=4.6 Гц, 4Н), 1.23-0.98 (т, 1Н).
Пример 171. 5-(4-(^,6К)-2,6-Диметилморфолино)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 171.
Стадия 1. 2,6-Дихлор-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин
Смесь 2,6-дихлор-9Н-пурина (10.0 г, 53 ммоль), 3,4-дигидро-2Н-пирана (9.5 мл, 93 ммоль) и моногидрата п-толуолульфоновой кислоты (1.0 г, 5.0 ммоль) в ТГФ (100 мл) нагревали при 100°С в течение 18 ч, затем охладили до КТ и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (δίΟ2, 0-10% этилацетат в циклогексане) с получением 2,6-дихлор-9(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурина в виде кремообразного осадка (10.9 г, 75%).
'II ЯМР (400 МГц, СПС13): δ 8.33 (1Н, 5), 5.77 (1Н, άά, 1=10.4, 2.4 Гц), 4.19 (1Н, т), 3.78 (1Н, ά1, 1=11.6, 2.9 Гц), 2.17 (1Н, т), 2.09 (1Н, т), 1.98 (1Н, т), 1.87-1.69 (3Н, т).
Стадия 2. 2-[2,6-Дихлор-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]пропан-2-ол
С1
ВиЫ (20 мл, 40.0 ммоль, 2 Μ в пентане) добавили по каплям к раствору 2,6-дихлор-9(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурина (8.0 г, 29.3 ммоль) и ΤΜΕΌΑ (6.4 мл, 42.4 ммоль) в безводном ТГФ
- 76 026134 (100 мл) при -78°С. Получившийся темный раствор перемешивали при -78°С в течение 45 мин, затем добавили ацетон (4 мл, 54.5 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин, затем при КТ в течение 30 мин. Реакционную смесь погасили водой и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушили (М§§04) и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (δί02, 0-20% этилацетат в циклогексане) с получением 2-[2,6-дихлор-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]пропан-2-ола в виде темного осадка (6.0 г, 62%).
!Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 6.19 (1Н, йй, 1=11.2, 2.8 Гц), 4.26 (1Н, ш), 3.77 (1Н, ш), 2.87 (1Н, ш), 2.09 (1Н, ш), 1.90-1.71 (11Н, ш).
Стадия 3. 2-(2,6-Дихлор-9Н-пурин-8-ил)пропан-2-ол
С1
НС1 (5 мл, 5 ммоль, 1 М водный раствор) добавили к раствору 2-[2,6-дихлор-9-(тетрагидропиран-2ил)-9Н-пурин-8-ил]пропан-2-ола (6.0 г, 20.66 ммоль) в смеси ДХМ (15 мл) и метанола (15 мл) и получившийся раствор перемешивали при КТ в течение 1 ч, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (δϊ02, градиент 0-50% метанол в ДХМ) с получением 2-(2,6-дихлор-9Н-пурин-8-ил)пропан-2-ола в виде темного осадка (3.38 г, 66%).
Ι.ίΑΙδ (способ А): КТ=2.12 мин, [М-Н]=245/247.
!Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 1.50 (6Н, 5).
Стадия 4. 1,3-Дихлор-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетраазафлуорен
С1
Карбонат цезия (9.3 г, 28.5 ммоль) и 1,2-дибромэтан (4.1 мл, 47.6 ммоль) добавили к раствору 2-(2,6-дихлор-9Н-пурин-8-ил)пропан-2-ола (3.3 г, 13.36 ммоль) в ДМФ (100 мл) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 2 ч, затем разделили между водой и этилацетатом. Органический экстракт отделили и промыли солевым раствором, затем высушили (М^04) и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (δί02, 0 до 10-20% этилацетат в циклогексане) с получением 1,3-дихлор-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетраазафлуорена в виде желтого осадка (1.0 г, 27%).
!Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 4.26 (2Н, йй, 1=6,4 Гц), 4.19 (2Н, йй, 1=6,4 Гц).
Стадия 5. 3-Хлор-1-((2К^)-2,6-диметилморфолин-4-ил)-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса2,4,4Ь,9-тетраазафлуорен
Смесь 1,3-дихлор-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетраазафлуорена (100 мг, 0.366 ммоль), (2К^)-2,6-диметилморфолина (84 мг, 0.732 ммоль) и триэтиламина (77 мкл, 0.55 ммоль) в ^δ (2 мл) нагревали при 140°С в течение 20 мин в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (δί02, 10% этилацетат в циклогексане) с получением 3-хлор-1-((2К^)-2,6-диметилморфолин-4-ил)-8,8-диметил-5,6дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетраазафлуорена в виде белого осадка (128 мг, 99%).
Ι.ίΑΙδ (способ А): КТ=3.62 мин, [М+Н]+=352.
Стадия 6. Смесь 3-хлор-1-((2К^)-2,6-диметилморфолин-4-ил)-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса2,4,4Ь,9-тетраазафлуорена (128 мг, 0.36 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2ил)пиримидин-2-иламина (121 мг, 0.55 ммоль), РйС12(РРЬ3)2 (26 мг, 0.036 ммоль) и карбоната натрия (1 мл, 1.0 ммоль, 1 М водный раствор) в ацетонитриле (4 мл) дегазировали и нагревали при 120°С в течение 30 мин в микроволновой печи, затем просто нагревали при 100°С в течение 18 ч. Реакционную смесь загрузили на колонку ПоШТе® δСX-2, которую промыли метанолом и продукт элюировали 2 М аммиаком в метаноле. Основные фракции смешали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили обратно-фазовой ВЭЖХ (РЬепошепех Сепнш 5 мкм С18, 0.1% НСО2Н в воде градиент 5-98% ацетонитрил) с получением соединения 171 в виде белого осадка (10 мг, 7%).
Ι.ίΑΙδ (способ В): КТ=4.14 мин, [М+Н]+=411.
!Н ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 9.26 (2Н, 5), 5.49-5.30 (2Н, ν. Ьгоай 5), 5.20 (2Н, Ьгоай 5), 4.21 (2Н, ш),
4.15 (2Н, ш), 3.75 (2Н, ш), 2.80 (2Н, ш), 1.67 (6Н, 5), 1.30 (6Н, й, 1=6.8 Гц).
- 77 026134
Пример 172. 5-(4-(2,2-Диметилморфолино)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин2-ил)пиримидин-2-амин 172.
Стадия 1. 3-Хлор-1-(2,2-диметилморфолин-4-ил)-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9тетраазафлуорен
Смесь 1,3-дихлор-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетраазафлуорена (100 мг, 0.366 ммоль), 2,2-диметилморфолина (84 мг, 0.732 ммоль) и триэтиламина (77 мкл, 0.55 ммоль) в 1М8 (2 мл) нагревали при 140°С в течение 20 мин в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (8ίΟ2, 10% этилацетат в циклогексане) с получением 3-хлор-1-(2,2-диметилморфолин-4-ил)-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса2,4,4Ь,9-тетраазафлуорена в виде белого осадка (110 мг, 85%).
ЬСМ8 (способ А): КТ=3.51 мин, [М+Н]+=352.
Стадия 2. Смесь 3-хлор-1-(2,2-диметилморфолин-4-ил)-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9тетраазафлуорена (110 мг, 0.31 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2иламина (104 мг, 0.47 ммоль), Р6С12(РРй3)2 (22 мг, 0.031 ммоль) и карбоната натрия (1 мл, 1.0 ммоль, 1 М водный раствор) в ацетонитриле (4 мл) дегазировали и нагревали при 120°С в течение 30 мин в микроволновой печи, затем нагревали при 100°С в течение 18 ч. Реакционную смесь загрузили на колонку 1ко1и1е® 8СХ-2, которую промыли метанолом и продукт элюировали 2 М аммиаком в метаноле. Основные фракции смешали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили обратно-фазовой ВЭЖХ (Рйеиотеиех Сетйй 5 мкм С18, 0.1% НСО2Н в воде градиент 5-98% ацетонитрил) с получением соединения 172 в виде белого осадка (11 мг, 9%).
ЬСМ8 (способ В): КТ=4.00 мин, [М+Н]+=411.
Ч ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 9.25 (2Н, к), 5.20 (2Н, Ьгоай к), 4.46-4.13 (8Н, т), 3.88 (2Н, т), 1.66 (6Н, к), 1.28 (6Н, к).
Пример 174. 5-(4-((18,48)-2-Окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин 174.
Стадия 1. 3-Хлор-8,8-диметил-1-(18,48)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гепт-5-ил-5,6-дигидро-8Н-7окса-2,4,4Ь,9-тетраазафлуорен
Смесь 1,3-дихлор-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетраазафлуорена (100 мг, 0.366 ммоль), (18,48)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептана (73 мг, 0.732 ммоль) и триэтиламина (77 мкл, 0.55 ммоль) в 1М8 (2 мл) нагревали при 140°С в течение 20 мин в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (8ίΟ2, 10% этилацетат в пентане) с получением 3-хлор-8,8-диметил-1-(18,48)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гепт-5ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь,9-тетраазафлуорена в виде желтого осадка (120 мг, 98%).
ЬСМ8 (способ А): КТ=2.81 мин, [М+Н]+=336.
Стадия 2. Смесь 3-хлор-8,8-диметил-1-(18,48)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гепт-5-ил-5,6-дигидро-8Н7-окса-2,4,4Ь,9-тетраазафлуорена (120 мг, 0.36 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2ил)пиримидин-2-иламина (87 мг, 0.39 ммоль), Р6(РРй3)4 (21 мг, 0.018 ммоль) и карбоната цезия (163 мг, 0.5 ммоль) в смеси 1,4-диоксана (1.5 мл) и воды (0.5 мл) дегазировали и нагревали при 130°С в течение 20 мин в микроволновой печи. Реакционную смесь загрузили на колонку 1ко1и1е® 8СХ-2, которую промыли метанолом и продукт элюировали 2 М аммиаком в метаноле. Основные фракции смешали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили обратно-фазовой ВЭЖХ (Рйеиотеиех Сет1И1 5 мкм С18, 0.1% НСО2Н в воде градиент 5-98% ацетонитрил) с получением соединения 174 в виде белого осадка (45 мг, 32%).
ЬСМ8 (способ В): КТ=3.31 мин, [М+Н]+=395.
Ч ЯМР (400 МГц, ДМСО-66, 80°С): δ 9.08 (2Н, к), 6.54 (2Н, Ьгоай к), 5.75 (1Н, Ьгоай к), 4.71 (1Н, к),
4.12 (4Н, т), 3.87 (1Н, άά, 1=7.4, 1.4 Гц), 3.79 (2Н, к), 3.75 (1Н, ά, 1=7.4 Гц), 1.95 (2Н, к), 1.59 (6Н, ά,
1=6.7 Гц).
- 78 026134
Пример 175 2-(2-Аминопиримидин-5-ил)-6-метил-4-морфолино-6,7-дигидропиразино[2,1-е]пурин8(9Н)-он 175.
Стадия 1. 1-[2-Хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этанон
Раствор 2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурина (0.50 г, 1.55 ммоль) и Ν,Ν,Ν',Ν-тетраметилэтилендиамина (0.35 мл, 2.33 ммоль) в безводном ТГФ (14 мл) охладили до -78°С. п-ВиЫ (2.5 М в гексанах, 1.22 мл, 3.05 ммоль) добавили по каплям и смесь перемешивали при -78°С в течение 40 мин. ^метил-Ы-метоксиацетамид (0.25 мл, 2.33 ммоль) добавили по каплям и смесь перемешивали при -78°С в течение 1.5 ч, затем дали нагреться до -30°С. Добавили воду и затем 1 М водную НС1 и смесь экстрагировали семь раз этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушили (№2§О4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток подвергли флэшхроматографии (§Ю2), градиент 0-50% этилацетат в циклогексане с получением 1-[2-хлор-6-морфолин-4ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этанона (0.47 г, 83%).
ЬСМ§ КТ=3.57 мин, [М+Н]+=366/368.
Стадия 2. 1-[2-Хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этанол
К перемешанной суспензии 1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8ил]этанона (0.47 г, 1.29 ммоль) в этаноле (8 мл) и ТГФ (8 мл) добавили борогидрид натрия (49 мг, 1.30 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 ч, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток растворили в этилацетате и водном бикарбонате натрия и фазы разделили. Водную фазу экстрагировали дважды этилацетатом. Объединенные органические фракции высушили (№2§О4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этанола (0.50 г, количественно).
ЬСМ§ КТ=3.20 мин, [М+Н]+=368/370.
Стадия 3. 8-(1-Азидоэтил)-2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин
1-[2-Хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этанол (0.37 г, 1.01 ммоль) растворили в безводном толуоле (5.6 мл) и ДМФ (0.9 мл) и раствор охладили на льду. Добавили дифенилфосфорилазид (0.56 мл, 2.54 ммоль) и после по каплям добавили 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (0.37 мл, 2.54 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, затем разбавили этилацетатом с последующей водой и фазы разделили. Водную фазу экстрагировали дважды этилацетатом и объединенные органические фракции высушили (№2§О4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток, вместе с неочищенным продуктом реакции, проведенной в меньшем масштабе (0.10 г, 0.27 ммоль 1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2ил)-9Н-пурин-8-ил]этанола), подвергли флэш-хроматографии (§Ю2) градиент 0-50% этилацетат в циклогексане с получением 8-(1-Азидо-этил)-2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурина в виде двух разделенных пар диастереомеров (0.25 г и 0.27 г, всего 0.52 г, 100%).
ЬСМ§ КТ=4.05 мин, [М+Н]+=393/395.
ЬСМ§ КТ=4.16 мин, [М+Н]+=393/395.
- 79 026134
Стадия 4. 1-[2-Хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этиламин
К раствору 8-(1-азидо-этил)-2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурина (0.47 г, 1.20 ммоль) в ТГФ (13 мл) и воде (4 мл) добавили трифенилфосфин (0.33 г, 1.28 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 70°С в течение 2 ч, затем охладили до КТ. Этилацетат добавили и фазы разделили. Водную фазу экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические фракции высушили (№28О4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток, вместе с неочищенным продуктом реакции, проведенной в меньшем масштабе (0.05 г, 0.14 ммоль 8-(1-азидоэтил)-2хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурина), подвергли флэш-хроматографии (8Ю2) градиент 0-10% метанол в ДХМ). Элюированный материал, содержащий соединение, указанное в заголовке, и трифенилфосфиноксид подвергли флэш-хроматографии (8Ю2) (градиент 0-20% метанол в ТВМЕ), и чистый материал с двух колонок объединили с получением 1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этиламина (0.41 г, 84%, смесь двух пар диастереомеров).
ЬСМ8 КТ=2.15 мин и 2.19 мин, [М+Н]+=367/369.
Стадия 5. 2-Бром-^{1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8ил] этил } ацетамид
К раствору 1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этиламина (0.25 г, 0.68 ммоль) в безводном ДХМ добавили бромид бромацетила (62 мкл, 0.74 ммоль) и триэтиламин (0.13 мл, 0.93 ммоль). Смесь перемешивали при КТ. Через 2 ч, добавили другую порцию бромида бромацетила (12 мкл) и перемешивание продолжили в течение 1.5 ч. Добавили воду, фазы разделили и водную фазу экстрагировали дважды ДХМ. Объединенные органические фракции высушили (№28О4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением 2-бром-^{1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этил}ацетамида (385 мг, смесь двух пар диастереомеров), который использовали на следующей стадии без очистки.
ЬСМ8 КТ=3.45 мин и 3.52 мин, [М+Н]+=487/489/491.
Стадия 6. 2-Бром-^[1-(2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-ил)этил]ацетамид
2-Бром-^{1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этил}ацетамид (неочищенный со стадии 5, 385 мг) растворили в метаноле (15 мл) и добавили моногидрат п-толуолульфоновой кислоты (35 мг). Смесь перемешивали при КТ в течение 16 ч. Добавили воду, водный бикарбонат натрия добавили с получением рН 7 и отфильтровали преципитат, промыли водой и высушили (под вакуумом, 50°С) с получением 2-бром^-[1-(2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8ил)этил]ацетамида (207 мг, 76%). Водный фильтрат экстрагировали три раза этилацетатом. Органический слой разделили и высушили (№28О4), затем сконцентрировали под вакуумом с получением дополнительной порции менее чистого 2-бром^-[1-(2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-ил)этил]ацетамида (39 мг).
ЬСМ8 КТ=2.57 мин, [М+Н]+=403/405/407.
Стадия 7. 3-Хлор-8-метил-1-морфолин-4-ил-7,8-дигидро-2,4,4Ь,7,9-пентаазафлуорен-6-он
о
- 80 026134
Смесь 2-бром-Н-[1-(2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-ил)этил]ацетамида (275 мг, 0.68 ммоль) и карбоната цезия (0.48 г, 1.36 ммоль) в безводном ДМФ (10 мл) перемешивали при КТ в течение 2 ч, затем разбавили водой и экстрагировали пять раз этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушили (№28О4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток подвергали флэш-хроматографии (8Ю2) (градиент 0-5% метанол в ДХМ) с получением 3-хлор-8-метил-1морфолин-4-ил-7,8-дигидро-2,4,4Ь,7,9-пентаазафлуорен-6-она (93 мг, 42%).
ЬСМ8 КТ=2.41 мин, [М+Н]+=323/325.
Стадия 8. Смесь 3-хлор-8-метил-1-морфолин-4-ил-7,8-дигидро-2,4,4Ь,7,9-пентаазафлуорен-6-она (46 мг, 0.14 ммоль), 2-аминопиримидин-5-бороновой кислоты пинаколового эфира (78 мг, 0.36 ммоль), фторида калия (46 мг, 0.80 ммоль) и РД(РРЬ3)4 (18 мг, 0.016 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (5 мл) нагревали при 100°С в течение 16 ч. После охлаждения до КТ смесь разбавили водой и образовавшийся преципитат отфильтровали и промыли водой. Осадок тритурировали с метанолом, ДХМ и в заключение с ацетонитрилом с получением соединения 175 (8 мг, 15%).
ЬСМ8 КТ=2.59 мин, [М+Н]+=382.
!Н ЯМР (ДМСО-Д6, 400 МГц): δ 9.11 (2Н, к), 8.68 (1Н, к), 7.05 (2Н, к), 4.84 (1Н, φ 1=6.9 Гц), 4.76 (1Н, Д, 1=17.2 Гц), 4 69 (1Н, Д, 1=17.2 Гц), 4.25 (4Н, ЬгоаД), 3.75 (4Н, !, 1=4.5 Гц), 1.56 (3Н, Д, 1=6.9 Гц).
Пример 176. 5-(6,7-Диметил-4-морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиразино[2,1-е]пурин-2ил)пиримидин-2-амин 176.
Стадия 1. {1-[2-Хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8ил]этил}карбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир
К раствору 1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этиламина (0.41 г, 1.12 ммоль) в безводном ДХМ (10 мл) добавили триэтиламин (0.17 мл, 1.23 ммоль) и ди-трет-бутил дикарбамат (0.268 г, 1.23 ммоль). Смесь перемешивали при КТ в течение 2 ч, затем промыли 10% водной лимонной кислотой. Водную фазу экстрагировали три раза ДХМ, и объединенные органические фракции высушили (№28О4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток тритурировали с диэтиловым эфиром, собрали фильтрацией и высушили (под вакуумом, 50°С) с получением {1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этил}карбаминовой кислоты третбутилового эфира (0.425 г, 81%, смесь двух пар диастереомеров).
ЬСМ8 КТ=4.06 и 4.13 мин, [М+Н]+=467/469.
Стадия 2. {1-[2-Хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этил}метилкарбаминовой кислоты трет-бутиловый эфир
Раствор {1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этил}карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (218 мг, 0.47 ммоль) в безводном ТГФ (15 мл) охладили до 0°С. Добавили гидрид натрия (60% суспензия в масле, 22 мг, 0.56 ммоль) и смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин. Добавили йодометан (10 об.% раствор в ТГФ, 0.35 мл, 0.56 ммоль) и смесь перемешивали в течение 16 ч при КТ. Реакционную смесь смешали с другой смесью, полученной аналогичным образом из 210 мг карбамата исходного вещества, и разбавили водой. После доведения рН до 7 добавлением 1 М водной НС1 и водного бикарбоната натрия, смесь экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные экстракты высушили (Яа28О4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением смеси 2:1 соединения, указанного в заголовке, и карбамата исходного вещества (0.46 г). Эту смесь растворили в безводном ТГФ (20 мл) и обработали гидридом натрия (19 мг) и йодометаном (10 об.% раствор в ТГФ, 0.29 мл), как и ранее. После добавления дополнительного йодометана (чистый, 0.050 мл) и перемешивания дополнительно в течение 8 ч реакционную смесь разбавили водой, нейтрализовали и экстрагировали, как указано ранее. Органические экстракты высушили (№28О4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток подвергли флэш-хроматографии (8Ю2) (градиент 0-20% этилацетат в циклогексане) с получением {1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8ил]этил}метилкарбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (316 мг, 72%).
ЬСМ8 КТ=4.48 мин, [М+Н]+=481/483.
- 81 026134
Стадия 3. [1-(2-Хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-ил)этил]метиламин
Смесь {1-[2-хлор-6-морфолин-4-ил-9-(тетрагидропиран-2-ил)-9Н-пурин-8-ил]этил}метилкарбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (316 мг, 0.66 ммоль) и моногидрата п-толуолульфоновой кислоты (30 мг) в метаноле перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, затем оставили на 56
ч. Реакционную смесь сконцентрировали под вакуумом до небольшого объема, затем добавили ДХМ (3 мл) и трифторуксусную кислоту (3 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 4.75 ч при КТ. Другую порцию трифторуксусной кислоты (3 мл) добавили и перемешивание продолжили в течение 2 ч. Смесь сконцентрировали под вакуумом и получившийся остаток тритурировали три раза с диэтиловым эфиром. Получившийся осадок разделили между 10% раствором метанола в ДХМ и водным бикарбонатом натрия. Фазы разделили, и водную фазу экстрагировали четыре раза 10% раствором метанола в ДХМ. Объединенные органические фракции высушили (№2δΟ4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом с получением [1-(2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-ил)этил]метиламина (0.19 г, 97%).
^Μδ ΚΤ=1.68 мин, [М+Н]+=297.
Стадия 4. 3-Хлор-7,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,6,7,8-тетрагидро-2,4,4Ь,7,9-пентаазафлуорен
Смесь [1-(2-хлор-6-морфолин-4-ил-9Н-пурин-8-ил)этил]метиламина (95 мг, 0.32 ммоль), карбоната цезия (652 мг, 2 ммоль) и 1,2-дибромэтана (0.030 мл, 0.35 ммоль) в ДМФ (5 мл) перемешивали при КТ в течение 4 ч. Другую порцию 1,2-дибромэтана (0.030 мл, 0.35 ммоль) добавили и перемешивание продолжили в течение 20 ч. Реакционную смесь разбавили водой и экстрагировали семь раз эфиром. Объединенные органические экстракты высушили (Nа2δΟ4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток подвергли флэш-хроматографии (δίΟ2) (градиент 0-4% метанол в ДХМ) с получением 3-хлор-7,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,6,7,8-тетрагидро-2,4,4Ь,7,9-пентаазафлуорена (76 мг, 74%).
^Μδ ΚΤ=1.82 мин, [М+Н]+=323/325.
Стадия 5. Смесь 3-хлор-7,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,6,7,8-тетрагидро-2,4,4Ь,7,9пентаазафлуорена (70 мг, 0.22 ммоль), 2-аминопиримидин-5-бороновой кислоты пинаколового эфира (57 мг, 0.26 ммоль) и карбоната цезия (216 мг, 0.66 ммоль) в 1,4-диоксане (2.5 мл) и воде (2.5 мл) продули аргоном. Добавили Рй(РРЬ3)4 (12 мг, 0.011 ммоль), смесь продули аргоном снова и затем нагревали при 100°С в течение 16 ч. Добавили дополнительную порцию боронатного эфира (29 мг) и Рй(РРЬ3)4 (6 мг) и нагревание продолжили в течение 5.5 ч. Смесь разбавили водой и экстрагировали пять раз этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушили (Nа2δΟ4), отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток подвергали флэш-хроматографии (δίΟ2) (градиент 010% метанол в ДХМ) с получением соединения 176 (58 мг, 69%).
^Μδ ΚΤ=2.11 мин, [М+Н]+=382.
'Н ЯМР (ДМСО-й6, 400 МГц: δ 9.08 (2Н, к), 7.01 (2Н, к), 4.24 (4Н, Ьгоай), 4.20 (1Н, т), 4.00 (1Н, т), 3.75 (4Н, ί, .1=4.8 Гц), 3.55 (1Н, ф 1=6.6 Гц), 3.21 (1Н, т), 2.78 (1Н, т), 2.43 (3Н, к), 1.50 (3Н, й, 1=6.6 Гц).
Пример 177. 5-(8,8-Диметил-1-морфолин-4-ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь-триазафлуорен-3ил)пиримидин-2-иламин 177.
Стадия 1. 7-Бензолсульфонил-2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3-й]пиримидин
Раствор 2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3-й]пиримидина (1 г, 5.3 ммоль) в безводном ТГФ (5 мл) добавили к суспензии гидрида натрия (234 мг, 5.83 ммоль, 60% дисперсия в минеральном масле) в безводном
ТГФ (15 мл) при 0°С. Получившуюся смесь перемешивали при 0°С в течение 45 мин, и бензолсульфонилхлорид (1.12 г, 6.36 ммоль) добавили по каплям. Реакционную смесь оставили нагреваться до комнатной температуры и перемешивали при КТ в течение 1 ч. Реакционную смесь погасили насыщенным
- 82 026134 водным хлоридом аммония и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушили (№¥О4) и сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток тритурировали с циклогексаном с получением 7-бензолсульфонил-2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3-б]пиримидина в виде желтого осадка (1.52 г, 87%).
¥ ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 8.24 (2Н, т), 7.76 (1Н, б, 1=4.0 Гц), 7.69 (1Н, т), 7.58 (2Н, т), 6.69 (1Н, б, 1=4.0 Гц).
Стадия 2. 2-(2,4-Дихлор-7Н-пирроло[2,3-б]пиримидин-6-ил)пропан-2-ол
С1
Лития диизопропиламид (2 мл, 4.0 ммоль, 2 Μ в ТГФ) добавили по каплям к раствору 7-бензолсульфонил-2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3-б]пиримидина (656 мг, 2.0 ммоль) в безводном ТГФ (15 мл) при -78°С. Получившийся раствор перемешивали при -78°С в течение 90 мин, затем добавили ацетон (0.4 мл, 5.5 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 30 мин. Реакционную смесь погасили насыщенным водным хлоридом аммония и экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушили ^^ОД и сконцентрировали под вакуумом с получением 2-(7-бензолсульфонил-2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3-б]пиримидин-6-ил)пропан-2-ола. К раствору 2-(7-бензолсульфонил-2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3-б]пиримидин-6-ил)пропан-2-ола (2 ммоль) в смеси изопропилового спирта (11 мл) и воды (3 мл) добавили гидроксид натрия (6 мл, 36 ммоль, 6 М водный раствор). Получившуюся смесь перемешивали при КТ в течение 2 ч, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (УЮ2, градиент 0-40% этилацетат в циклогексане) с получением 2-(2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3-б]пиримидин-6-ил)пропан-2-ола (304 мг, 64%).
^Μδ (способ А): Кт=2.70 мин, [М]-=244/246.
Стадия 3. 3-Хлор-8,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь-триазафлуорен
Карбонат цезия (1.2 г, 3.7 ммоль) и 1,2-дибромэтан (316 мкл, 3.7 ммоль) добавили к раствору 2-(2,4-дихлор-7Н-пирроло[2,3-б]пиримидин-6-ил)пропан-2-ола (304 мг, 1.23 ммоль) в ДМФ (4 мл) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 45 мин, затем разделили между водой и этилацетатом. Органический экстракт отделили и промыли солевым раствором, затем высушили (№¥О4) и сконцентрировали под вакуумом с получением 1,3-дихлор-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ьтриазафлуорена. Смесь 1,3-дихлор-8,8-диметил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь-триазафлуорена (1.23 ммоль), морфолина (236 мкл, 2.69 ммоль) и триэтиламина (342 мкл, 2.46 ммоль) в ΙΜδ (3 мл) нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 3 ч, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (ЫО2, градиент 0-40% этилацетат в циклогексане) с получением 3-хлор-8,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ьтриазафлуорена (159 мг, 40%).
^Μδ (способ А): Кт=3.13 мин, [М+Н]+=323.
Стадия 4. Смесь 3-хлор-8,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ьтриазафлуорена (75 мг, 0.23 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)пиримидин-2иламина (115 мг, 0.52 ммоль), бис-(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладия(П) (25 мг, 0.035 ммоль) и карбоната натрия (1 мл, 1.0 ммоль, 1 М водный раствор) в ацетонитриле (3 мл) дегазировали и нагревали при 150°С в течение 30 мин в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Получившийся остаток очистили с помощью колончатой хроматографии (ЫО2, градиент 0-75% этилацетат в циклогексане) с последующей обратно-фазовой ВЭЖХ (ГНспошспсх Сстии 5 мкм С18, 0.1% НСО2Н в воде на градиенте ацетонитрила 5-98%) с получением соединения 177 в виде серобелого осадка (13 мг, 15%).
^Μδ (способ В): Кт=3.50 мин, [М+Н]+=382.
¥ ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 9.27 (2Н, 5), 6.12 (1Н, 5), 5.27 (2Н, Ьгоаб 5), 4.21 (2Н, т), 4.14 (2Н, т), 3.97 (4Н, т), 3.88 (4Н, т), 1.62 (6Н, 5).
Пример 901. Анализ связывания р110а (альфа) ΡΙ3Κ.
Анализы связывания.
Первоначальные эксперименты поляризации проводились на Λη;·ι1ν5ΐ НТ® 96-384 (Μο1οοιι1;·ΐΓ
Оеу1се5 ίοη!, δυηηννα1ο, СА.). Образцы для измерения аффинности флуоресцентной поляризации готовили добавлением 1:3 серийных разведений р110 альфа ΡΙ3Κ (Ир51а1е Се11 δίβηαΠηβ δο1πίίοη5,
- 83 026134
0ι;·ιι1ο1^δνί1Κ. УА), начиная с конечной концентрации 20 мкг/мл в поляризационном буфере (10 мМ Трис, рН 7,5, 50 мМ №С1, 4 мМ МдС12, 0,05% сЬаρδ и 1 мМ ΌΤΤ) до 10 мм РГО2 (Εсйе1οη-Iηс. 8аП Ьаке СНу, υΤ.) конечной концентрации. После инкубации в течение 30 мин при комнатной температуре, реакции остановили добавлением ΟΚΡ-1 и ΡIΡ3-ΤΑΜΚΆ-зонда (Εсйе1οη-1ηс. 5>аЙ Ьаке СНу, υΤ.) 100 и 5 нм конечные концентрации соответственно. Считывали со стандартными пороговыми фильтрами для родаминового флуорофора (/ех=530 нм; /_ет=590 нм) в 384-луночных черных планшетах малого объема ΡΐΌ.\ίρ1;·ι^δ®® ^0<ίηΕ1πκι/ \Уе1^1еу, МА). Значения флуоресцентной поляризации были нанесены в виде функции концентрации белка, а значения ЕС50 были получены путем аппроксимации данных 4-параметрическом уравнении с использованием программного обеспечение Κ/ιΡ^-ιΟπιρΙι®® (Зунегду Зсй^аге, Кеайшд, РА). Этот эксперимент также установил соответствующую концентрацию белка для использования в последующих экспериментах конкуренции с ингибиторами.
Значения К.', ингибиторов определили путем добавления 0,04 мг/мл р110 альфа РПК (конечная концентрация) в комбинации с Р№2 (10 мМ конечная концентрация) в лунки, содержащие 1:3 серийные разведения антагонистов в конечной концентрации 25 мМ АТФ (Се11 δί^ηη1ίη^ ΤесЬηο1οду, Шс, Оануеге, МА) в поляризационном буфере. После инкубации в течение 30 мин при комнатной температуре, реакции остановили добавлением СКР-1 и ΡIΡ3-ΤΑΜΚΑ-зонда (РсНеки-Ок, 5>аЙ Ьаке Сйу, υΤ.) 100 и 5 нм конечные концентрации соответственно. Считывали со стандартными пороговыми фильтрами для родаминового флуорофора (/ех=530 нм; /ет=590 нм) в 384-луночных черных планшетах малого объема Ρ^ο\^ρ1аίеδ® ^0<ίηΕ1ιικι/ \Уе1^1еу, МА). Значения флуоресцентной поляризации были нанесены в зависимости от концентрации антагониста, а величины К.', были получены путем аппроксимации данных 4-параметрическом уравнении с использованием программного обеспечение Αδδау Ε\ρ1ο^е^® (МОЬ, §аи Каиюн, СА.).
Альтернативно, ингибирование РПК определяли с помощью радиометрического анализа с использованием очищенного, рекомбинантного фермента и АТФ в концентрации 1 мкМ. Соединения формулы I последовательно разводили в 100% ДМСО. Киназную реакцию инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре, и реакцию останавливали добавлением РВ8. Значения К.', впоследствии определялись с использованием аппроксимации сигмоидальной кривой доза-реакция (переменным наклоном). Примеры приведены в таблице.
Пример 902. Ш уйго анализ пролиферации клеток.
Эффективность соединений формулы I измеряли с помощью анализа клеточной пролиферации в соответствии со следующим протоколом (Рготеда ί.’οιρ. Τесйη^са1 Βιι1Ρ0η ΤΒ288; Μеηйοζа еί а1. (2002), Сансе!· ^δ. 62:5485-5488).
1. Аликвоту 100 мл клеточной культуры, содержащей приблизительно 104 клеток (РС3, ^еί^ο^ί562, или МЭАМБ361.1) в среде разлили в каждую лунку 384-луночного планшета с непрозрачными стенками.
2. Контрольные лунки содержали среду и не содержали клеток.
3. Соединение добавили в экспериментальные лунки и инкубировали в течение 3-5 дней.
4. Планшеты доводили до комнатной температуры в течение приблизительно 30 мин.
5. Добавили объем реагента ί'.ο11Τί^ΐ'-01ο®®, эквивалентный объему клеточной среды, присутствующей в каждой лунке.
6. Содержимое перемешивали в течение 2 мин на орбитальном шейкере для индукции лизиса клеток.
7. Планшет инкубировали при комнатной температуре в течение 10 мин для стабилизации сигнала люминесценции.
8. Люминесценцию записали и выразили на графиках как КРИ = относительные единицы люминесценции.
Альтернативно, клетки высевали при оптимальной плотности в 96-луночный планшет и инкубировали в течение 4 дней в присутствии тестируемого соединения. Впоследствии к среде для анализа добавили А1атаг Β1ικ™ и клетки инкубировали в течение 6 ч перед считыванием при 544 нм длине волны возбуждения, 590 нм эмиссии. ЕС50 значения были рассчитаны с использованием аппроксимации сигмоидальной кривой доза-эффект. Термин ЕС50 относится к половине максимальной эффективной концентрации и представляет собой концентрацию, при которой лекарственное средство вызывает ответ на полпути между базовой линией и максимумом после некоторого заданного времени экспозиции. Он широко используется в качестве меры активности лекарственных средств.
- 84 026134
Антипролиферативное действие типичных соединений формулы I измеряли с помощью Се11Т11ег-С1о® Аввау против различных опухолевых клеточных линий, включая следующие:
Соединение №. Клеточная линия: ΜϋΑ- МВ-361.1 Тип ткани: грудная Изменения: ΡΙ3Κ ЕС50 (мкмоль) Клеточная линия: РСЗ Тип ткани: ргоз(а(е Изменения: ΡΤΕΝ ЕС50 (мкмоль)
101 0.315 0.208
103 0.269 0.44
115 0.958 1.8
121 0.36 -
122 3.2 2
138 10+ 10+
139 0.424 0.697
148 10+ 10+
163 10+ 10+
165 1.2 1.3
168 0.237 0.215
169 4.4 6.9
170 0.92 1.1
171 3.1 3.8
172 1.5 1.4
174 3.4 3.6
176 0.889 1.9
177 0.094 0.185
Пример 903. Сасо-2 проницаемость.
Сасо-2 клетки высевали на планшеты МПНроге МиШвсгееп® при концентрации 1х105 клеток/см2 и культивировали в течение 20 дней. Затем проводилась оценка проницаемости соединений. Соединения наносили на апикальную поверхность (А) и монослоя клеток и измерялось проникновение соединений в базолатеральный компартмент (В). Аналогично делали для обратного направления (В-А), чтобы исследовать активный транспорт. Рассчитывали значение коэффициента проницаемости, Рарр, для каждого соединения, скорость проникновения соединения через мембрану. Соединения сгруппировали в группы с низким (Рарр</=1.0х106 см/с) или высоким (Рарр>/=1.0х106 см/с) потенциалом абсорбции, основанном на сравнении с контрольными соединениями с известной абсорбцией для человека.
Для оценки способности соединения подвергаться активному выведению, определялось отношение базолатерального (В) к апикальному (А) транспорту по сравнению с А к В. Значения ВА/АВ>/=1,0 указывают на наличие активного клеточного выведения.
Пример 904. Клиренс гепатоцитов.
Использовали суспензии криоконсервированных гепатоцитов человека. Инкубацию проводили при концентрации соединения 1 мМ или 3 мкм при плотности клеток 0,5х106 живых клеток/мл. Конечная концентрация ДМСО в инкубационном объеме составляла около 0,25%. Контрольные инкубации также выполняются в отсутствие клеток для обнаружения любой неферментативной деградации. Повторы проб (50 мкл) удаляют из инкубационной смеси через 0, 5, 10, 20, 40 и 60 мин (контрольный образец только на 60 мин) и добавляют к метанолсодержащему внутреннему стандарту (100 мкл) - остановить реакцию. Толбутамид, 7-гидроксикумарин и тестостерон могут быть использованы в качестве контрольных соединений. Образцы центрифугировали и надосадочную жидкость в каждый момент времени собирали для анализа ЬС-МЗ. Из графика Ш соотношения площади пиков (площадь пика исходного соединения/ площадь пика внутреннего стандарта) от времени, собственный клиренс (СЬ1п1) рассчитывается следующим образом: СЬ1п1 (мкл/мин/млн клеток) = Vхк, где к - константа скорости элиминации, полученная из градиента концентрации Ш в зависимости от времени; V является объемом, полученным из инкубационного объема и выражается как 106 клеток/мкл.
Пример 905. Ингибирование цитохрома Р450.
Соединения формулы I могут быть подвергнуты скринингу против СУР450 целей (1А2, 2С9, 2С19,
2Ό6, 3А4) примерно при 10 концентрациях в повторе, с максимальной концентрацией около 100 мкм.
Стандартные ингибиторы (фурафиллин, сульфафеназол, транилципромин, хинидин, кетоконазол) могут быть использованы в качестве контроля. Планшеты могут быть считаны с помощью прибора
- 85 026134
ЬаЬТесЬпо1од1е5 Ро1аг§1аг™ в режиме флуоресценции.
Пример 906. Индукция цитохрома Р450.
Свежевыделенные гепатоциты человека от одного донора можно культивировать в течение приблизительно 48 ч перед добавлением соединения формулы I в трех концентрациях и инкубировать в течение 72 ч. Зонды субстраты для СУР3А4 и СУР1А2 добавили в течение 30 мин и 1 ч до завершения инкубации. Через 72 ч клетки и среду удаляют и степень метаболизма каждого субстрата зонда подсчитывают количественно с помощью ЬС-М§/М§. Эксперимент контролируют с помощью индукторов отдельных цитохромов Р450, инкубированных при одной концентрации в трех повторах.
Пример 907. Связывание протеинов плазмы.
Растворы соединений формулы I (5 мкм, 0,5% конечная концентрация ДМСО) готовят в буфере и 10% плазме (об./об. в буфере). 96-луночные планшеты НТ для диализа собраны таким образом, что каждая лунка разделена на две полупроницаемой целлюлозной мембраной. Буферный раствор добавляют с одной стороны мембраны и раствор плазмы - с другой стороны, затем проводят инкубацию при 37°С в течение 2 ч в трех повторах. Лунки последовательно освобождают и растворы для каждой партии соединений объединяют в две группы (свободную от плазмы и плазмасодержащую), затем анализируют с помощью ЬС-М§/М§, используя два набора калибровочных стандартов для свободного от плазмы раствора (6 баллов) и плазмасодержащего раствора (7 баллов). Рассчитывают значение несвязавшейся фракции.
Пример 908. Блокада каналов ЬЕКО.
Соединения формулы I оценивали на способность модулировать отток рубидия из НЕК-294 клеток, стабильно экспрессирующие ЬЕКО калиевые каналы с использованием установленной методологии потока. Клетки готовят в среде, содержащей КЬС1, высевают на 96-луночные планшеты и выращивают в течение ночи, чтобы сформировать монослои. Эксперимент оттока инициируется аспирацией среды и промывания каждой лунки 3х100 мкл преинкубационного буфера (содержащего незначительное количество [К+]) при комнатной температуре. После заключительной аспирации 50 мкл рабочего стока (2х) соединения добавили в каждую лунку и инкубировали при комнатной температуре в течение 10 мин. Затем добавили стимулирующий буфер 50 мкл (с высоким содержанием [К+]) в каждую лунку с получением конечных концентраций тестируемого соединения. Планшеты затем инкубировали при комнатной температуре в течение еще 10 мин. Супернатант 80 мкл из каждой лунки затем переносили в эквивалентные лунки 96-луночного планшета и анализировали методом атомно-эмиссионной спектроскопии. Соединение подвергали скринингу как 10-точечные кривые 1С50 в повторе, п=2, от верхней концентрации 100 мкМ.
Пример 909. Ксенотрансплантат опухоли ш νί\Ό.
ΝΕΈ голым мышам (Тасошс Ратт5, ΙΝ) вводили подкожно в правый боковой отдел грудной клетки 5 млн клеток И-87 МО МегсЬаШ (внутренний вариант, полученный из варианта И-87 МО клеток из АТСС, Мапа55а5, УА) в НВ§§/Майгде1 (1:1, об./об.). Мышам с ксенотрансплантатами опухоли ежедневно вводили перорально через желудочный зонд в течение <28 дней лекарство или носитель и после разделили на различные дозовые группы по похожим размерам опухолей. Размеры опухолей записывали по меньшей мере два раза в неделю в течение всего исследования. Веса тел мышей также записывали по меньшей мере дважды в неделю и мышей наблюдали ежедневно. Измеряли объем опухоли в двух перпендикулярных измерениях (ширина и длина), используя ультра САБ IV штангенциркули (модель 54-10111; Ртей V. Роу1ег Со., Шс.; №\у1оп, МА) и анализировали с помощью Ехсе1 ν. 11.2 (Мюто5ой СотротаЬоп; Кейтопй, \УА). Графики ингибирования опухоли строили с применением ОгарЬРай Рг15т™, версия 5.0с (ОгарЬРай §ойуате, Шс.; Ьа 1о11а, СА). Объем опухоли рассчитывали по формуле размер опухоли (мм3) = (большее измерениехменьшее измерение2) х 0,5.
Веса тела животных измеряли с помощью весов АЛуеШигег Рго™ АУ812 (ОЬаи5 Сотротайоп; Рше Вгоок, Νί). Графики были получены с использованием ОгарЬРай Рп5т ™, версия 5.0с. Изменение массы в процентах вычисляют по формуле индивидуальный процент изменения веса = ((новый вес/ начальный вес) - 1) х 100.
Мыши, у которых объем опухоли превысил 2000 мм3 или у которых потери массы тела превышали 20% от их начального веса, были подвергнуты эвтаназии в соответствии с нормативным руководством.
Процент ингибирования роста опухоли (% ТОО в конце исследования (ЕО§) рассчитывали по формуле % ΤΟΙ- (’1-[(АиО/ДбНЬ)0бработиа “ (АиС/ДвНЬ)ИоНтропь]) X 100, где АИС/день представляет собой площадь под аппроксимированной кривой роста опухоли в естественном масштабе, деленном на количество дней исследования.
Ьод2 (объем опухоли) следы роста были аппроксимированы на каждую дозовую группу с ограниченными кубическими сплайнами для фиксированного времени и эффекта дозы в каждой группе. Аппроксимация была сделана с помощью линейной модели смешанных эффектов, с помощью К пакета п1те, версия 3.1-97 (11) в версии К 2.12.0 (К ^еνе1ортепΐ Соге Теат 2008; К Роипйайоп £ог §1а115Иса1
Сотрийпд; У1еппа, Аи51па).
- 86 026134
Частичный ответ (РК) была определен как >50% снижение начального объема опухоли, которая никогда не даст полный ответ (СК) в любой день исследования. СК был определен как 100%-ное снижение начального объема опухоли в любой день исследования. Исследование частоты опухолей (δΤΙ) отражает количество животных в группе с измеримой опухолью для их последнего измерения объема опухоли.
Линейный анализ смешанных эффектов также использовался для моделирования процентного изменения веса тела стечением времени и в ответ на дозу.
Пример 910. Анализ индукции фосфо-Ак1.
В 6-луночные планшеты для культивирования тканей клетки засевали при плотности 5х105 клеток/лунку в течение ночи. Клетки обработали ЕС80 соединения формулы Ι. После обработки клетки промыли один раз холодным ΡΒδ и лизировали в 1х клеточного буфера для экстракции от Вю5оитсе ^αΓ^αά, СА) с добавлением ингибиторов протеаз (Косйе, Μαηηΐιοίιη, Оегтапу), 1 мМ ΡΜδΡ, и коктейлей ингибиторов фосфатазы 1 и 2 от δίβΐηα (δ1. Ьош5, МО). Определение концентрации белка проводили с использованием Р1етсе ВСА Рто1еш А55ау Κί1 (КоскГоМ, ΙΠ). Уровни рАк( 0ег473) и общей Ак1 оценивались с помощью комплектов шариков Вю5оитсе (Са^15Ьаά, СА) и системы ЬитШех™ Вю-Р1ех (Вю-К^, Негси1е5, СА).
Пример 911 Анализ проницаемости/активности гематоэнцефалического барьера ΜΟΡΚΙ-ΜΟΒ1 и ΜΟί.’ΚΙΙ-Β^ρ1 тестированием.
Μаά^η-^а^Ьу клетки почек собак (ΜΟΡΚ), гетерологично экспрессирующие либо человеческий гликопротеин Р, либо мышиный Всгр1, использовали для определения того, являются ли соединения субстратами для указанных транспортеров, и таким образом можно оценить потенциал для проникновения через гематоэнцефалический барьер. 100^1-100010 клетки получили от ΝΟΙ (Национальный институт рака, ВеБв^а, ΜΟ), Βс^р1-Μ^СΚII клетки получили от Института рака Нидерланд (Амстердам, Нидерланды). Клетки высевали на 24-луночные фильтровальные планшеты ЮППроге за 4 дня перед использованием (полиэфирная мембрана, размер пор 1 мкм; ΜΠ^μιό, ВШепса, ΜΑ) при плотности посева 1.3 х105 клеток/мл. Соединения тестировали при концентрации 5 мкм в апикально базолатеральном (АВ) и базолатерально апикальном (ВА) направлениях. Соединения растворяли в транспортном буфере, состоящем из сбалансированного солевого раствора Хэнка (Μδδ) с 10 мМ НΕΡΕδ (ШуШодеп СогрогаИоп, Οηιηά Ι51αηά, ΝΥ). ЬисЛег Уе11о\у 01дта-АШпск δ1 Ьош5, ΜΟ) использовали в качестве параклеточного маркера. Эффективная проницаемость (Рарр) в А-В и В-А направлениях была рассчитана после 2-часовой инкубации с использованием следующего уравнения:
Рарр = (сКЖ) х 1/Со х 1/А где άρ/άΐ представляет скорость появления соединения в принимающем компартменте;
С0 представляет концентрацию в донорском компартменте;
А является площадью поверхности вставки.
Коэффициент оттока, определяемый как Рарр(В-А)/Рарр(А-В), использовался для оценки масштабов активного оттока соединений с тестируемым транспортером (Р-гликопротеин или Ьсгр1). Соединения анализировали с помощью ЬС-Μδ/Μδ.
Пример 912. Определение концентрации соединения в мозге.
Мозги собрали через 1 и 6 ч после введения доз у 3 различных животных в каждый момент времени, промыли ледяным солевым раствором, взвешивали и хранили при температуре -80°С до анализа. Для количественного определения соединение, мозг мыши гомогенизировали в 3 объемах воды. Гомогенатах экстрагировали путем осаждения белка с ацетонитрилом, содержащим внутренний стандарт. Проводили ЬС-Μδ/Μδ анализ. Концентрации в гомогенатах мозга были преобразованы в мозговые концентрации для расчета соотношения мозга к плазме.
Пример 913. Измерение модуляции сигнального пути РОК в мозге.
Для анализа модуляции сигнального пути РОК буфер экстракции клеток ДпуФодеп, СатагШо, СА), содержащей 10 мМ Трис, рН 7,4, 100 мМ ЫаС1, 1 мМ ЭДТА, 1 мМ ΕОΤΑ, 1 мМ ΝηΕ, 20 мМ КаЛб, 2 мМ Ν;·ι3νΟ,·μ 1% Тритон Х-100, 10% глицерина, 0,1% δϋδ, и 0,5% дезоксихолата дополнили фосфатазой, ингибиторами протеаз 01дта, δ1 Ьош5, МО) и 1 мМ ΡΜδΡ и добавили к замороженным биоптатам мозга. Мозги, собранные через 1 и 6 ч после введения дозы, гомогенизировали небольшим пестиком (Коп1е О1а55 Сотрапу, νίικ1;πιά, ΝΙ), быстро обработали ультразвуком на льду и центрифугировали при 20000 д в течение 20 мин при 4°С. Концентрацию белка определяли с помощью белкового анализа ВСА (Р1етсе, КоскГоМ, ΙΠ). Белки разделяли с помощью электрофореза и переносили на NиΡΑОΕ нитроцеллюлозные мембраны ДпуФодеп, СатагШо, СА). Использовали инфракрасную систему обнаружения Ысот Οάу55еу™ (Ысот, Ьшсо1п, ΝΕ) для количественной оценки экспрессии белка. Маркеры сигнального пути РОК были оценены с помощью иммуноблоттинга с использованием антител против рАк15ег473 и общего Ак1 ДпуШодеп, СатагШо, СА и Се11 δ^дηа1^ηд, Оапует, ΜΑ).
- 87 026134
Пример 914. Анализ эффективности ίη νίνο на опухоли мозга.
СО-1 голые мышам (СЬаг1е5 Кгуег ЬаЪога&пе5, Но1Й51ег. СА) были привиты интракраниально с помощью стереотаксической хирургией клетки О§-2 (мультиформная глиобластома человека), созданные самостоятельно для экспрессии люциферазы в НВ§§. Мыши с подтвержденными ксенотрансплантатами мозга посредством магнитно-резонансной томографии (МРТ) на четвертой неделе после введения клеток получали один раз в день перорально через желудочный зонд в течение 28 дней лекарство или носитель и после были разделены на группы с аналогичными размерами опухолей. МРт (4.7т, ναπαη, Шс, Ра1о Α1ίο, СА) повторили в конце 28-дневного периода дозирования для оценки реакции на лечение.
Веса тел мышей записывали по меньшей мере дважды в неделю, и мышей наблюдали ежедневно. Веса тел животных были измерены с помощью весов Αάνеηίи^е^ Рго™ ΑV812 (ОЬаи5 СогрогаРот Рте Вгоок, Νί). Графики были получены с использованием ОгаркР;Л Рп5т, версия 5.0с. Изменение веса тела в процентах вычисляют по формуле индивидуальный процент изменения веса = ((новый вес/начальный вес) - 1) х 100.
Мышей, потеря массы тела которых превышала 20% от их начального веса, подвергали эвтаназии в соответствии с нормативным руководством.
Изменение объема опухоли было смоделировано как линейное за два раза, при котором каждое животное подвергалось МРТ. Линейная модель смешанных эффектов аппроксимировалась на эти данные с помощью Ыте пакета К версии 3.1-97, версия К 2.12.0 (К Оеуе1ортеШ Соге теат 2010; К Ροиηάаί^οη Гог §1а115Иса1 СотриРид; V^еηηа. Аи51па). Модель смешанных эффектов учитывает повторные измерения на отдельных мышах в течение долгого времени и обрабатывает внутримышинные корреляции соответствующим образом. Линейный анализ смешанных эффектов также использовали для моделирования процентного изменения веса тела стечением времени.
Образцы плазмы и мозга собрали через 2 и 8 ч после введения последнего лечения для фармакокинетического (РК), фармакодинамического (РИ) и/или иммуногистохимического (ШС) анализа.
Пример 915. Исследование ίη νί\Ό опухолевого ксенотрансплантата РК/РИ показателей.
Νί','Β голым мышам (Ласошс Рагт5, ΙΝ) вводили подкожно в правый боковой отдел грудной клетки 5 млн клеток И-87 МО МегскаШ (внутренний вариант, полученный из варианта И-87 МО клеток из АТСС, М;та55а5, VΑ) в НВ§§/Ма1пде1 (1:1, об./об.). Мышам с опухолевыми ксенотрансплантатами >600 мм3 вводили однократно лекарство или носитель после их разделили на группы с одинаковыми размерами опухолей. Плазму, подкожный ксенотрансплантат опухоли, скелетные мышцы и образцы мозга собрали через 1, 4, 12 и 24 ч после лечебного введения для анализа РК, РИ и/или ИС.
Слова содержит, содержащий, включает и включающий при использовании в данном описании и в формуле изобретения предназначены для определения присутствия заявленных признаков, целых чисел, компонентов или стадий, при этом они не исключают наличия или добавления одного или более других признаков, целых чисел, компонентов, стадий или их групп.

Claims (25)

1- (4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)-3изопропилмочевину,
1-(4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)-3этилмочевина,
1- (4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)-3метилмочевину,
1. Соединение формулы I
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ и его фармацевтически приемлемые соли, где прерывистая линия обозначает возможную двойную связь и по меньшей мере одна прерывистая линия является двойной связью;
X1 представляет собой N или -С(К?)2О-;
Х2 представляет собой Ν;
X3 представляет собой С;
А представляет собой 5- или 6-членное насыщенное гетероциклическое кольцо, возможно содержащее один дополнительный гетероатом, выбранный из N и О, объединенное с Х2 и X3, возможно замещенное одной или двумя группами К5;
К1 представляет собой Н;
К4 выбран из фенила и гетероарила, обладающего 5-9-кольцевыми атомами и содержащего один или два гетероатома Ν, возможно замещенного одной или более К6 группами, независимо выбранными из -СН3, -СН2СН3, -СН2СН(СН3)2, <Ν, -СРэ, -СО^2, -СО^(СН3), -СОЛОДЕ -Ν··/- -Ν(^Ε -ЖСОСН3, -ОН, -ОСН(СН3)2, -1МНС(=О)]МНСН3, -]МНС(=О)]МНСН2СН3, -ЖС(=О)]МНСН(СН3Е -Ж§(О)2СН3, -^СН3)С(=О)ОС(СН3)з, бензила, бензилокси, морфолинила, морфолинометила и
2-(2-аминопиримидин-5-ил)-6-метил-4-морфолино-6,7-дигидропиразино[2,1-е]пурин-8(9Н)-он,
2- (1Н-индазол-4-ил)-4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2-(2-аминопиримидин-5-ил)-7-метил-4-морфолино-8,9-дигидропиразино[2,1-е]пурин-6(7Н)-он,
2- (2-аминопиримидин-5-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,6диил)диметанол,
2- (4-(бензилокси)фенил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2-(1Н-индазол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2-(1-изобутил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин,
2-(3-(бензилокси)фенил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2-(3-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)ацетонитрил,
2-(1-этил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2-(3,5-диметил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин,
2-(2-изопропоксипиридин-3-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин,
М-(2-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)ацетамид,
2-(1-бензил-1Н-пиразол-4-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
2- (1Н-индазол-5-ил)-6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
3- (4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенол,
3- (6,6-диметил-
3- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенол,
3. Соединение по п.2, выбранное из следующих структур:
4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-Н^-диметиланилин,
4- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)бензонитрил,
4- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-Н,Ыдиметилбензамид, трет-бутил 4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)фенил(метил)карбамат,
4- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин,
4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)анилин,
4. Соединение по п.2, выбранное из следующих структур:
- 89 026134
4-метилпиперазин-1-ила, -СОNН-циклопропила, пиперидинила; и
К5 независимо выбран из С1-С2-алкила, СР3, =О, СН2ОН или две, присоединенные к одному и тому же атому, К5 группы образуют циклопропил или оксетанил;
тог выбран из:
возможно замещенных одной или двумя К7 группами, выбранными из -СН3. 2. Соединение по п.1 формул Та и Тп:
5-(6,6,9-триметил-4-морфолино-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амина.
5-(4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амина, (8)-5-(6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2амина и
5-(4-морфолино-7,8-дигидро-6Н-пирроло[2,1-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амина,
5-(4-морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амина,
5-(4-морфолино-8,9-дигидро-7Н-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амина,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4(трифторметил)пиридил-2-амина,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амина,
5-(6,7-диметил-4-морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиразино[2,1-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин и (5-(8,8-диметил-1-морфолин-4-ил-5,6-дигидро-8Н-7-окса-2,4,4Ь-триазафлуорен-3-ил)пиримидин-2иламин.
5-(4-((18,48)-2-окса-5-азабицикло[2.2.1]гептан-5-ил)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(4-(2,2-диметилморфолино)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)пиримидин-2-амин, ^(5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2ил)ацетамид,
5-(4-((28,6К)-2,6-диметилморфолино)-6,6-диметил-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)пиримидин-2-амин,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-Н^-диметилпиразин2-амин,
5- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиколинамид,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-Мметилпиколинамид,
- 91 026134
5- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)никотинамид,
^)-5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин2-амин,
5- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-ол,
5-(^)-6-морфолин-4-ил-2,3,3а,4-тетрагидро-1Н-5-окса-7,9,9Ь-триазациклопента[а]нафтален-8ил)пиримидин-2-иламин,
5-(1-морфолин-4-ил-5,6,8а,9-тетрагидро-8Н-7,10-диокса-2,4,4Ь-триазафенантрен-3-ил)пиримидин-2иламин,
5-(6,6,9-триметил-4-морфолино-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин, (К)-5-(6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2амин,
^)-5-(6-этил-6-метил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2амин,
5-(6,6-(гексадейтерио)диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)пиримидин-2-амин,
5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин,
5-(7,7-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-7Н-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-6,3'-оксетан]-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(4-морфолино-8,9-дигидроспиро[[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-7,1'-циклопропан]-2-ил)пиримидин-2амин,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин,
- 90 026134
5-(4-морфолино-7,8-дигидро-6Н-пирроло[2,1-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4-(трифторметил)пиридил-2-амин,
5-(4-морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-2-ил)пиридин-2-амин,
5-(4-морфолино-6,7,8,9-тетрагидропиридо[2,1-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(4-морфолино-8,9-дигидро-7Н-[1,3]оксазино[2,3-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4(трифторметил)пиридил-2-амин,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин-2-амин,
5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)-4-метилпиримидин-2амин,
5-пиримидинила, 2-пиридила, 3-пиридила, 4-пиридила.
5. Соединение по п.2, представляющее собой
6- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-3-ол, (4-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)фенил)(4метилпиперазин-1-ил)метанон, ^циклопропил-3-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)бензамид,
6.6- диметил-4-морфолино-2-(4-(пиперидин-1-ил)фенил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин, ^(5-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-2ил)ацетамид,
6.6- диметил-2-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)фенил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин,
6.6- диметил-2-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н[1.4] оксазино [3,4-е] пурин,
6.6- диметил-4-морфолино-2-(3-(морфолинометил)фенил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин,
6.6- диметил-4-морфолино-2-(3-морфолинофенил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
6- (6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиридин-3-амин, (К)-5-(4-морфолино-6-(трифторметил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2-ил)пиримидин2-амин,
6.6- диметил-4-морфолино-2-(6-морфолинопиридин-3-ил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин,
6.6- диметил-2-(2-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-4-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н[1.4] оксазино[3,4-е]пурин,
М-(2-(6,6-диметил-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин-2ил)фенил)метансульфонамид,
6.6- диметил-2-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-4-морфолино-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
6.6- диметил-4-морфолино-2-(1Н-пиразол-4-ил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4-е]пурин,
6,6-диметил-4-морфолино-2-(1Н-пирроло[2,3-Ь]пиридин-5-ил)-8,9-дигидро-6Н-[1,4]оксазино[3,4е]пурин,
6. Соединение по любому из пп.1-5, где К4 представляет собой фенил, замещенный одной или более группами, выбранными из -СН3, -СН2СН3, -ΟΝ, -СР3, -СОХН2, -СОХН(СН3), -СО^СН3)2, -ΝΉ2, -Ы(СНз)2, -МНСОСНз, -ОН, -ОСН(СН3)2, -МНС(=О)МНСНз, -МНС(=О)МНСН2СН3, -МН8(О)2СН3, -Ы(СН3)С(=О)ОС(СН3)3.
7. Соединение по любому из пп.1-5, где К4 представляет собой возможно замещенную бициклическую гетероарильную группу, выбранную из 1Н-индазолила, 1Н-пирроло[2,3-Ь]пиридинила.
8. Соединение по любому из пп.1-5, где возможно замещенный К4 выбран из:
где волнистая линия обозначает место присоединения.
9. Соединение по п.7, где К4 представляет собой 1Н-индазол-4-ил.
10. Соединение по любому из пп.1-5, где К4 представляет собой возможно замещенную моноциклическую гетероарильную группу, выбранную из 4-пиразолила, 2-пиразинила, 2-пиримидинила,
11. Соединение по п.10, где К4 представляет собой 2-аминопиримидин-5-ил.
12. Соединение по любому из пп.1-5, где возможно замещенный К4 выбран из:
где волнистая линия обозначает место присоединения.
13. Соединение по любому из пп.1-12, где одна или более групп К5 независимо выбраны из -СН3, -СН2СН3, -СН2ОН, -СРз, =О.
14. Соединение по любому из пп.1-13, где две геминальные группы К5 образуют циклопропил или оксетанил.
15. Соединение по любому из пп.1-14, где тог представляет собой лЪ (где волнистая линия обозначает место присоединения), возможно замещенный одной или двумя К7 группами, независимо выбранными из -СН3.
16. Соединение по п.1, выбранное из группы, включающей
17. Соединение, выбранное из группы, состоящей из
18. Фармацевтическая композиция, обладающая противораковым действием, содержащая соединение по любому из пп.1-17 и фармацевтически приемлемый носитель, скользящее вещество, разбавитель или эксципиент.
19. Фармацевтическая композиция по п.18, также содержащая дополнительный терапевтический агент, выбранный из химиотерапевтического агента, противовоспалительного агента, иммуномодулирующего агента, нейротропного фактора, агента для лечения сердечно-сосудистого заболевания, агента для лечения заболеваний печени, противовирусного агента, агента для лечения заболеваний крови, агента для лечения диабета и агента для лечения иммунодефицитных состояний.
20. Способ лечения рака у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-17, где рак представляет собой собой рак молочной железы, яичника, шейки матки, предстательной железы, яичка, мочеполовых путей, пищевода, гортани, глиобластому, нейробластому, рак желудка, кожи, кератоакантому, рак легкого, плоскоклеточный рак, крупноклеточный рак, немелкоклеточный рак легкого (Ν8ΟΕΟ), мелкоклеточный рак, аденокарциному легких, рак костей, толстой кишки, аденому, рак поджелудочной железы, аденокарциному, рак щитовидной железы, фолликулярную карциному, недифференцированную карциному, папиллярную
- 92 026134 карциному, семиному, меланому, саркому, рак мочевого пузыря, рак печени и желчных протоков, карциному почки, рак почек, рак поджелудочной железы, миелоидные нарушения, лимфому, волосатые клетки, рак полости рта, носоглотки, глотки, губ, языка, рта, тонкой кишки, прямой и ободочной кишок, толстой кишки, прямой кишки, мозга и центральной нервной системы, болезнь Ходжкина и лейкемию.
21. Способ по п.20, где рак представляет собой рак мозга.
22. Способ по п.20 или 21, включающий введение пациенту дополнительного терапевтического агента, выбранного из химиотерапевтического агента, противовоспалительного агента, иммуномодулирующего агента, нейротропного фактора, агента для лечения сердечно-сосудистого заболевания, агента для лечения заболеваний печени, противовирусного агента, агента для лечения заболеваний крови, агента для лечения диабета и агента для лечения иммунодефицитных состояний.
23. Способ по п.22, где дополнительный терапевтический агент представляет собой бевацизумаб.
24. Применение соединения по любому из пп.1-17 в качестве противоракового средства.
25. Применение соединения по любому из пп.1-17 для получения лекарственного средства для лечения рака.
EA201390879A 2010-12-16 2011-12-15 Трициклические ингибиторы pi3k и способы их применения EA026134B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US42369410P 2010-12-16 2010-12-16
PCT/US2011/065101 WO2012082997A1 (en) 2010-12-16 2011-12-15 Tricyclic pi3k inhibitor compounds and methods of use

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201390879A1 EA201390879A1 (ru) 2013-09-30
EA026134B1 true EA026134B1 (ru) 2017-03-31

Family

ID=45478511

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201390879A EA026134B1 (ru) 2010-12-16 2011-12-15 Трициклические ингибиторы pi3k и способы их применения

Country Status (32)

Country Link
US (5) US8883799B2 (ru)
EP (3) EP2651951B1 (ru)
JP (1) JP5775171B2 (ru)
KR (2) KR20140099556A (ru)
CN (2) CN103313989B (ru)
AR (2) AR084312A1 (ru)
AU (1) AU2011343712B2 (ru)
BR (1) BR112013014914B8 (ru)
CA (1) CA2820078C (ru)
CL (1) CL2013001093A1 (ru)
CO (1) CO6710942A2 (ru)
CR (1) CR20130247A (ru)
DK (1) DK2651951T3 (ru)
EA (1) EA026134B1 (ru)
EC (1) ECSP13012692A (ru)
ES (1) ES2530545T3 (ru)
HK (1) HK1185871A1 (ru)
HR (1) HRP20150127T1 (ru)
IL (1) IL225778A (ru)
MX (1) MX2013006858A (ru)
MY (1) MY164910A (ru)
NZ (1) NZ609448A (ru)
PE (1) PE20140314A1 (ru)
PL (1) PL2651951T3 (ru)
PT (1) PT2651951E (ru)
RS (1) RS53768B1 (ru)
SG (2) SG190890A1 (ru)
SI (1) SI2651951T1 (ru)
TW (2) TW201500358A (ru)
UA (1) UA109688C2 (ru)
WO (1) WO2012082997A1 (ru)
ZA (1) ZA201304128B (ru)

Families Citing this family (51)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9346817B2 (en) 2012-08-30 2016-05-24 Genentech, Inc. Dioxino- and oxazin-[2,3-D]pyrimidine PI3K inhibitor compounds and methods of use
EP2917202B1 (en) 2012-11-07 2018-05-02 Karus Therapeutics Limited Novel histone deacetylase inhibitors and their use in therapy
AR095443A1 (es) * 2013-03-15 2015-10-14 Fundación Centro Nac De Investig Oncológicas Carlos Iii Heterociclos condensados con acción sobre atr
AU2014264370B2 (en) 2013-05-10 2017-12-14 Karus Therapeutics Ltd Novel histone deacetylase inhibitors
WO2014185367A1 (ja) * 2013-05-13 2014-11-20 第一三共株式会社 モルホリノプリン誘導体の製造方法
CN104557955B (zh) * 2013-10-23 2017-05-03 上海汇伦生命科技有限公司 作为PI3K/mTOR抑制剂的三环类化合物，其制备方法和用途
DK3466949T3 (da) * 2013-12-24 2021-03-15 Bristol Myers Squibb Co Tricyklisk forbindelse som anticancermidler
KR102359214B1 (ko) 2014-04-04 2022-02-07 델 마 파마슈티컬스 폐의 비소세포 암종 및 난소암을 치료하기 위한 디안하이드로갈락티톨 및 이의 유사체 또는 유도체
GB201419264D0 (en) 2014-10-29 2014-12-10 Karus Therapeutics Ltd Compounds
GB201419228D0 (en) 2014-10-29 2014-12-10 Karus Therapeutics Ltd Compounds
CN118005631A (zh) * 2014-12-18 2024-05-10 豪夫迈·罗氏有限公司 四氢-吡啶并[3,4-b]吲哚雌激素受体调节剂及其用途
JP6038111B2 (ja) * 2014-12-27 2016-12-07 ヤマサ醤油株式会社 多置換７−デアザプリン誘導体合成のための２，６−ジクロロ−８−ヨード−７−デアザプリン
CN111171047B (zh) * 2015-02-11 2023-06-23 赛诺维信制药公司 用于治疗cns障碍的稠合二氢-4h-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪基化合物
WO2016142310A1 (en) * 2015-03-09 2016-09-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Tricyclic dlk inhibitors and uses thereof
MX2017012390A (es) 2015-03-30 2018-01-26 Daiichi Sankyo Co Ltd Derivados de 6-morfolinil-2-pirazolil-9h-purina y su uso como inhibidores de fosfoinositol-3-cinasa (pi3k).
WO2017004133A1 (en) * 2015-06-29 2017-01-05 Nimbus Iris, Inc. Irak inhibitors and uses thereof
GB201514751D0 (en) * 2015-08-19 2015-09-30 Karus Therapeutics Ltd Compounds
WO2017090058A1 (en) * 2015-11-23 2017-06-01 Council Of Scientific & Industrial Research Fused pyrimidines as isoform selective phosphoinositide-3-kinase-alpha inhibitors and process for preparation thereof
EP3978500B1 (en) * 2015-12-16 2023-11-22 Genentech, Inc. Process for the preparation of tricyclic pi3k inhibitor compounds
ES2788348T3 (es) * 2016-05-24 2020-10-21 Merck Patent Gmbh Derivados heterocíclicos tricíclicos
AU2017290748A1 (en) 2016-07-01 2019-01-17 G1 Therapeutics, Inc. Pyrimidine-based antiproliferative agents
CN106008528A (zh) * 2016-07-28 2016-10-12 安徽赛迪生物科技有限公司 一种合成4-氯-5,7-二氢-6h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮的方法
WO2018023070A1 (en) 2016-07-29 2018-02-01 Sunovion Pharmaceuticals, Inc. Compounds and compositions and uses thereof
MX2019000980A (es) 2016-07-29 2019-07-04 Sunovion Pharmaceuticals Inc Compuestos y composiciones y usos de los mismos.
TW201825465A (zh) 2016-09-23 2018-07-16 美商基利科學股份有限公司 磷脂醯肌醇3-激酶抑制劑
TW201815787A (zh) 2016-09-23 2018-05-01 美商基利科學股份有限公司 磷脂醯肌醇3-激酶抑制劑
TW201813963A (zh) 2016-09-23 2018-04-16 美商基利科學股份有限公司 磷脂醯肌醇3-激酶抑制劑
WO2018062382A1 (ja) * 2016-09-29 2018-04-05 第一三共株式会社 ［２－（１－メチル－１ｈ－ピラゾール－４－イル）－６－（モルホリン－４－イル）－９ｈ－プリン－８－イル］［４－（モルホリン－４－イル）ピペリジン－１－イル］メタノン及びその製薬上許容される塩の結晶
JP7082120B2 (ja) * 2016-10-21 2022-06-07 ニンバス ラクシュミ， インコーポレイテッド Ｔｙｋ２阻害剤およびその使用
KR102399639B1 (ko) 2016-12-02 2022-05-18 다이이찌 산쿄 가부시키가이샤 신규 엔도-β-N-아세틸글루코사미니다아제
WO2019028165A1 (en) 2017-08-02 2019-02-07 Sunovion Pharmaceuticals Inc. ISOCHROMAN COMPOUNDS AND USES THEREOF
AU2019335968B2 (en) 2018-09-07 2024-03-07 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Heterocyclic compound
US20210395228A1 (en) 2018-10-02 2021-12-23 Syngenta Participations Ag Pesticidally active benzene- and azine-amide compounds
CN109134480A (zh) * 2018-10-19 2019-01-04 辽宁大学 一种新型4-苯氨基苯并呋喃并[2,3-d]嘧啶类化合物及其应用
JP2022525169A (ja) 2019-03-14 2022-05-11 サノビオン ファーマシューティカルズ インク イソクロマニル化合物の塩およびその結晶体、ならびにそれらの製造方法、治療用途および医薬組成物
UY38623A (es) 2019-03-29 2020-10-30 Syngenta Crop Protection Ag Compuestos de diazina-amida activos como pesticidas
EP3947359A1 (en) 2019-04-05 2022-02-09 Syngenta Crop Protection AG Pesticidally active diazine-amide compounds
MA55587A (fr) 2019-04-11 2022-02-16 Syngenta Crop Protection Ag Composés diazine-amide à action pesticide
BR112022003375A2 (pt) 2019-08-23 2022-05-17 Syngenta Crop Protection Ag Compostos de pirazina-amida pesticidamente ativos
GB201913921D0 (en) * 2019-09-26 2019-11-13 Sentinel Oncology Ltd Pharmaceutical compounds
CN113004303A (zh) * 2019-12-18 2021-06-22 江苏恒瑞医药股份有限公司 嘧啶并噁嗪类三环衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
KR20230012547A (ko) 2020-05-19 2023-01-26 쥐원 쎄라퓨틱스, 인크. 의학적 장애의 치료를 위한 시클린-의존성 키나제 억제 화합물
US20240287047A1 (en) 2021-06-09 2024-08-29 Syngenta Crop Protection Ag Pesticidally active diazine-amide compounds
WO2022268025A1 (zh) * 2021-06-22 2022-12-29 成都苑东生物制药股份有限公司 Atr抑制剂及其用途
EP4423077A1 (en) 2021-10-27 2024-09-04 Syngenta Crop Protection AG Pesticidally active pyridazinone compounds
WO2023104714A1 (en) 2021-12-10 2023-06-15 Syngenta Crop Protection Ag Pesticidally active pyridazinone compounds
KR20230115493A (ko) 2022-01-27 2023-08-03 인제대학교 산학협력단 특이적 PI3K p110δ 억제제를 유효성분으로 함유하는 스타스민1 관련 질환 예방 또는 치료용 조성물
CN115413669B (zh) * 2022-06-14 2024-03-15 湖南大学 激酶抑制剂及其组合剂在提高植物青枯病抗性中的应用
CN115403593B (zh) * 2022-09-22 2024-02-02 河南师范大学 一种环加成合成手性嘌呤[3,2-c]并噁唑化合物的方法
WO2024110554A1 (en) 2022-11-23 2024-05-30 Syngenta Crop Protection Ag N-[(1 -[2-[6-(pyridazin-3-yl]-1,2,4-triazol-3-yl]ethyl]-quinazolin-4-amine and n-[1-[3-(6-(pyridazin-3-yl)pyrazin-2-yl]ethyl]-8-quinazolin-4-amine derivatives as pesticides
WO2024133551A1 (en) 2022-12-21 2024-06-27 Syngenta Crop Protection Ag Pesticidally active pyridazine compounds

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030236271A1 (en) * 2000-04-27 2003-12-25 Masahiko Hayakawa Fused heteroaryl derivatives
US20080039459A1 (en) * 2006-04-26 2008-02-14 Plramed Limited Phosphoinositide 3-kinase inhibitor compounds and methods of use
WO2009146406A1 (en) * 2008-05-30 2009-12-03 Genentech, Inc. Purine pi3k inhibitor compounds and methods of use
WO2010052569A2 (en) * 2008-11-10 2010-05-14 University Of Basel Triazine, pyrimidine and pyridine analogs and their use as therapeutic agents and diagnostic probes
WO2011021038A1 (en) * 2009-08-20 2011-02-24 Karus Therapeutics Limited Tricyclic heterocyclic compounds as phosphoinositide 3-kinase inhibitors
WO2011029279A1 (zh) * 2009-09-11 2011-03-17 上海艾力斯医药科技有限公司 稠合杂芳基化合物及其制备方法和应用

Family Cites Families (83)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3016378A (en) 1959-07-01 1962-01-09 Thomae Gmbh Dr K Amino-substituted purine derivatives
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
JPS4872196U (ru) 1971-12-11 1973-09-10
JPS4872196A (ru) 1971-12-27 1973-09-29
GB1570494A (en) 1975-11-28 1980-07-02 Ici Ltd Thienopyrimidine derivatives and their use as pesticides
US4510144A (en) * 1981-08-26 1985-04-09 Newport Pharmaceuticals International Methods of imparting immunomodulating activity with dihydrothiazolo purine derivatives
JPS60260579A (ja) 1984-01-13 1985-12-23 Yoshitomi Pharmaceut Ind Ltd プリン誘導体
DE3406533A1 (de) 1984-02-23 1985-08-29 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verwendung von adenosin-derivaten als antiallergica und arzneimittel, die diese enthalten
JPS6216477A (ja) 1985-07-15 1987-01-24 Maruishi Seiyaku Kk 抗ウイルス活性を有する２−（４−ピリジルアミノメチル）−ベンズイミダゾ−ル誘導体
US4740230A (en) 1985-09-13 1988-04-26 Idemitsu Kosan Company Limited Triazine derivatives, and herbicides containing the derivatives as the effective component
US5583024A (en) 1985-12-02 1996-12-10 The Regents Of The University Of California Recombinant expression of Coleoptera luciferase
CA1279648C (en) 1986-07-11 1991-01-29 Haruo Kuriyama 2-(4-pyridylaminometyl)-benzimidazole derivatives having antiviral activity
US4932998A (en) 1986-09-30 1990-06-12 Idemitsu Kosan Company Limited Triazine derivatives, and herbicides comprising the same as the effective ingredient
US5332744A (en) 1989-05-30 1994-07-26 Merck & Co., Inc. Substituted imidazo-fused 6-membered heterocycles as angiotensin II antagonists
GB9208135D0 (en) 1992-04-13 1992-05-27 Ludwig Inst Cancer Res Polypeptides having kinase activity,their preparation and use
US6274327B1 (en) 1992-04-13 2001-08-14 Ludwig Institute For Cancer Research Polypeptides having kinase activity, their preparation and use
US5846824A (en) 1994-02-07 1998-12-08 Ludwig Institute For Cancer Research Polypeptides having kinase activity, their preparation and use
JP3093112B2 (ja) 1994-09-01 2000-10-03 新日本製鐵株式会社 塗覆装鋼製打ち込み部材
US5543523A (en) 1994-11-15 1996-08-06 Regents Of The University Of Minnesota Method and intermediates for the synthesis of korupensamines
JPH08336393A (ja) 1995-04-13 1996-12-24 Mitsubishi Chem Corp 光学活性なγ−置換−β−ヒドロキシ酪酸エステルの製造法
US5866702A (en) 1996-08-02 1999-02-02 Cv Therapeutics, Incorporation Purine inhibitors of cyclin dependent kinase 2
US6602677B1 (en) 1997-09-19 2003-08-05 Promega Corporation Thermostable luciferases and methods of production
DE19920936A1 (de) 1999-05-07 2000-11-09 Basf Ag Heterozyklisch substituierte Benzimidazole, deren Herstellung und Anwendung
DE60144322D1 (de) * 2000-04-27 2011-05-12 Astellas Pharma Inc Kondensierte heteroarylderivate
CA2453113A1 (en) 2001-07-12 2003-01-23 Avecia Limited Microencapsulated catalyst, methods of preparation and methods of use thereof
CA2460345A1 (en) 2001-09-13 2003-03-20 Synta Pharmaceuticals Corp. 2-aroylimidazole compounds for treating cancer
US6949644B2 (en) 2001-10-12 2005-09-27 Irm Llc Methods for the synthesis of substituted purines
AU2002342051B2 (en) 2001-10-12 2009-06-11 Irm Llc Kinase inhibitor scaffolds and methods for their preparation
US7354932B2 (en) 2001-12-21 2008-04-08 Anormed, Inc. Chemokine receptor binding heterocyclic compounds with enhanced efficacy
US20030139427A1 (en) 2002-08-23 2003-07-24 Osi Pharmaceuticals Inc. Bicyclic pyrimidinyl derivatives and methods of use thereof
US20050288503A1 (en) 2002-09-06 2005-12-29 Adams Jerry L Novel compounds
CA2502356A1 (en) 2002-10-15 2004-04-29 Synta Pharmaceuticals Corp. Aromatic bicyclic heterocyles to modulate 1l - 12 production
TW200510394A (en) 2003-05-29 2005-03-16 Synta Pharmaceuticals Corp Heterocyclic compounds for preventing and treating disorders associated with excessive bone loss
MXPA06001494A (es) 2003-08-05 2007-05-11 Vertex Pharma Compuestos de piramidina condensados como inhibidores de canales ionicos gatillados por tension.
US20060074124A1 (en) 2003-09-12 2006-04-06 Andrew Napper Methods of treating a disorder
US7148228B2 (en) 2003-09-18 2006-12-12 Conforma Therapeutics Corporation Pyrazolopyrimidines and related analogs as HSP90-inhibitors
JP4800216B2 (ja) 2003-10-24 2011-10-26 エグゼリクシス， インコーポレイテッド ｐ７０Ｓ６キナーゼモジュレーターおよび使用方法
US20050153989A1 (en) 2004-01-13 2005-07-14 Ambit Biosciences Corporation Pyrrolopyrimidine derivatives and analogs and their use in the treatment and prevention of diseases
US20080096861A1 (en) 2004-08-02 2008-04-24 Smithkline Beecham Corporation Chemical Compounds
GB0423653D0 (en) 2004-10-25 2004-11-24 Piramed Ltd Pharmaceutical compounds
EP1812113A1 (en) 2004-11-11 2007-08-01 Argenta Discovery Limited Pyrimidine compounds as histamine modulators
WO2007044515A1 (en) 2005-10-07 2007-04-19 Exelixis, Inc. Azetidines as mek inhibitors for the treatment of proliferative diseases
GB2431156A (en) 2005-10-11 2007-04-18 Piramed Ltd 1-cyclyl-3-substituted- -benzenes and -azines as inhibitors of phosphatidylinositol 3-kinase
TWI498332B (zh) 2006-04-26 2015-09-01 Hoffmann La Roche 作為pi3k抑制劑之嘧啶衍生物及相關製備方法、醫藥組合物、用途、套組及產物
RU2008141356A (ru) 2006-04-26 2010-06-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг (Ch) Производные пиримидина в качестве ингибиторов фосфатидилинозитол-3-киназы (pi3k)
UA95799C2 (en) 2006-04-26 2011-09-12 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Pharmaceutical compounds
GB0608820D0 (en) 2006-05-04 2006-06-14 Piramed Ltd Pharmaceutical compounds
JP5227321B2 (ja) 2006-08-23 2013-07-03 クドス ファーマシューティカルズ リミテッド Ｍｔｏｒ阻害剤としての２−メチルモルホリンピリド−、ピラゾ−及びピリミド−ピリミジン誘導体
EP2074122B9 (en) 2006-09-15 2013-09-11 Pfizer Products Inc. Pyrido (2, 3-d) pyrimidin0ne compounds and their use as pi3 inhibitors
WO2008039882A1 (en) 2006-09-30 2008-04-03 Sanofi-Aventis U.S. Llc A combination of niacin and a prostaglandin d2 receptor antagonist
TW200831104A (en) 2006-10-04 2008-08-01 Pharmacopeia Inc 6-substituted 2-(benzimidazolyl)purine and purinone derivatives for immunosuppression
ES2559521T3 (es) 2006-10-16 2016-02-12 Thesan Pharmaceuticals, Inc. Pirazolil tienopiridinas terapéuticas
JP5500990B2 (ja) 2006-12-07 2014-05-21 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト ホスホイノシチド３−キナーゼ阻害剤化合物及び使用方法
MY180595A (en) 2006-12-07 2020-12-03 Genentech Inc Phosphoinositide 3-kinase inhibitor compounds and methods of use
US20080233127A1 (en) 2007-03-21 2008-09-25 Wyeth Imidazolopyrimidine analogs and their use as pi3 kinase and mtor inhibitors
EP2142546B1 (en) 2007-03-28 2017-06-07 Saniona A/S Purinyl derivatives and their use as potassium channel modulators
JP2010523639A (ja) 2007-04-12 2010-07-15 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 医薬化合物
WO2008152387A1 (en) 2007-06-12 2008-12-18 F.Hoffmann-La Roche Ag Quinazoline derivatives as pi3 kinase inhibitors
WO2008152394A1 (en) 2007-06-12 2008-12-18 F.Hoffmann-La Roche Ag Pharmaceutical compounds
US7893060B2 (en) 2007-06-12 2011-02-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Thiazolopyrimidines and their use as inhibitors of phosphatidylinositol-3 kinase
BRPI0813273A2 (pt) * 2007-06-26 2014-12-30 Sanofi Aventis Síntese catalisada por metal regiosseletivo de benzimidazóis e azabenzimidazóis anelados
WO2009034386A1 (en) 2007-09-13 2009-03-19 Astrazeneca Ab Derivatives of adenine and 8-aza-adenine and uses thereof-796
CN101932587A (zh) 2007-09-24 2010-12-29 吉宁特有限公司 噻唑并嘧啶pi3k抑制剂化合物及使用方法
WO2009045174A1 (en) 2007-10-05 2009-04-09 S*Bio Pte Ltd 2-morpholinylpurines as inhibitors of pi3k
EP2215090B1 (en) 2007-10-26 2015-03-04 F. Hoffmann-La Roche AG Purine derivatives useful as pi3 kinase inhibitors
GB0721095D0 (en) 2007-10-26 2007-12-05 Piramed Ltd Pharmaceutical compounds
GB0725218D0 (en) 2007-12-24 2008-02-06 Syngenta Ltd Chemical compounds
CN101981037B (zh) 2008-01-30 2013-09-04 吉宁特有限公司 吡唑并嘧啶pi3k抑制剂化合物及使用方法
MX2010014230A (es) 2008-06-20 2011-03-29 Astrazeneca Ab Composiciones que contienen pirido [2,3-d] pirimidinas sustituidas con metilmorfolina y proceso relacionado.
AR073354A1 (es) 2008-07-31 2010-11-03 Genentech Inc Compuestos de pirimidina, composiciones farmaceuticas y su uso en el tratamiento del cancer.
WO2010036544A1 (en) 2008-09-26 2010-04-01 Merck Sharp & Dohme Corp. Oxazolobenzimidazole derivatives
TWI378933B (en) 2008-10-14 2012-12-11 Daiichi Sankyo Co Ltd Morpholinopurine derivatives
SG171765A1 (en) 2008-11-20 2011-07-28 Genentech Inc Pyrazolopyridine pi3k inhibitor compounds and methods of use
AU2010254161A1 (en) 2009-05-27 2011-11-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic pyrimidine PI3K inhibitor compounds selective for p110 delta, and methods of use
SG182247A1 (en) 2009-05-27 2012-08-30 Hoffmann La Roche Bicyclic indole-pyrimidine pi3k inhibitor compounds selective for p110 delta, and methods of use
SG176959A1 (en) 2009-06-24 2012-01-30 Genentech Inc Oxo-heterocycle fused pyrimidine compounds, compositions and methods of use
JP2013505965A (ja) 2009-09-29 2013-02-21 エックスカバリー ホールディング カンパニー エルエルシー Ｐｉ３ｋ（デルタ）選択的阻害剤
RU2012139182A (ru) 2010-02-22 2014-03-27 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг ПИРИДО[3,2-d]ПИРИМИДИНЫ - ИНГИБИТОРЫ PI3К ДЕЛЬТА И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
UY33304A (es) 2010-04-02 2011-10-31 Amgen Inc Compuestos heterocíclicos y sus usos
US9062055B2 (en) 2010-06-21 2015-06-23 Incyte Corporation Fused pyrrole derivatives as PI3K inhibitors
MX2013000389A (es) 2010-07-14 2013-03-08 Hoffmann La Roche Compuestos de purina selectivos para fosfatidilinositol 3-cinasa p110 delta, y metodods de uso.
JP5766820B2 (ja) 2011-02-09 2015-08-19 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ Ｐｉ３キナーゼ阻害剤としての複素環化合物
AR086647A1 (es) 2011-06-03 2014-01-15 Hoffmann La Roche Metodos para tratar el mesotelioma con un compuesto inhibidor de la pi3k

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030236271A1 (en) * 2000-04-27 2003-12-25 Masahiko Hayakawa Fused heteroaryl derivatives
US20080039459A1 (en) * 2006-04-26 2008-02-14 Plramed Limited Phosphoinositide 3-kinase inhibitor compounds and methods of use
WO2009146406A1 (en) * 2008-05-30 2009-12-03 Genentech, Inc. Purine pi3k inhibitor compounds and methods of use
WO2010052569A2 (en) * 2008-11-10 2010-05-14 University Of Basel Triazine, pyrimidine and pyridine analogs and their use as therapeutic agents and diagnostic probes
WO2011021038A1 (en) * 2009-08-20 2011-02-24 Karus Therapeutics Limited Tricyclic heterocyclic compounds as phosphoinositide 3-kinase inhibitors
WO2011029279A1 (zh) * 2009-09-11 2011-03-17 上海艾力斯医药科技有限公司 稠合杂芳基化合物及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
M. HAYAKAWA ET AL.: "Synthesis and biological evaluation of pyrido[3',2':4,5]furo[3,2-d]pyrimidine derivatives as novel PI3K p110alpha inhibitors.", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, PERGAMON, AMSTERDAM, NL, vol. 17, no. 9, 1 May 2007 (2007-05-01), AMSTERDAM, NL, pages 2438 - 2442, XP002602756, ISSN: 0960-894X, DOI: 10.1016/J.BMCL.2007.02.032 *

Also Published As

Publication number Publication date
TW201302752A (zh) 2013-01-16
KR20140099556A (ko) 2014-08-12
EP2651951B1 (en) 2014-11-19
JP2014503535A (ja) 2014-02-13
RS53768B1 (en) 2015-06-30
EP2813506A1 (en) 2014-12-17
KR20130105707A (ko) 2013-09-25
PE20140314A1 (es) 2014-03-22
US20120171199A1 (en) 2012-07-05
EP2813506B1 (en) 2016-05-25
US20150079081A1 (en) 2015-03-19
PL2651951T3 (pl) 2015-04-30
CO6710942A2 (es) 2013-07-15
BR112013014914B8 (pt) 2020-08-04
US20220348593A1 (en) 2022-11-03
AU2011343712A1 (en) 2013-05-02
MY164910A (en) 2018-02-15
ECSP13012692A (es) 2013-08-30
AU2011343712B2 (en) 2015-09-17
IL225778A0 (en) 2013-06-27
CL2013001093A1 (es) 2013-09-27
TWI441824B (zh) 2014-06-21
CA2820078C (en) 2019-02-12
MX2013006858A (es) 2013-07-29
PT2651951E (pt) 2015-01-14
UA109688C2 (xx) 2015-09-25
SI2651951T1 (sl) 2015-01-30
US9546182B2 (en) 2017-01-17
NZ609448A (en) 2015-07-31
ES2530545T3 (es) 2015-03-03
WO2012082997A1 (en) 2012-06-21
CN105859735B (zh) 2018-03-09
CN103313989A (zh) 2013-09-18
HK1185871A1 (zh) 2014-02-28
CN105859735A (zh) 2016-08-17
SG190890A1 (en) 2013-07-31
BR112013014914A2 (pt) 2016-11-22
BR112013014914B1 (pt) 2020-07-14
EP3053925A1 (en) 2016-08-10
SG10201510347QA (en) 2016-01-28
EP2651951A1 (en) 2013-10-23
ZA201304128B (en) 2014-02-26
CR20130247A (es) 2013-06-28
JP5775171B2 (ja) 2015-09-09
AR084312A1 (es) 2013-05-08
CA2820078A1 (en) 2012-06-21
US20170233407A1 (en) 2017-08-17
HRP20150127T1 (en) 2015-03-13
CN103313989B (zh) 2016-05-04
IL225778A (en) 2016-10-31
US20190330235A1 (en) 2019-10-31
AR122019A2 (es) 2022-08-03
US8883799B2 (en) 2014-11-11
DK2651951T3 (en) 2014-12-08
TW201500358A (zh) 2015-01-01
EA201390879A1 (ru) 2013-09-30
KR101548439B1 (ko) 2015-08-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA026134B1 (ru) Трициклические ингибиторы pi3k и способы их применения
RU2509081C2 (ru) Пуриновые соединения, ингибирующие рi3к, и способы применения
BR112012006807A2 (pt) compostos da fórmula i, composição farmacêutica, composta por composto, método de tratamento de câncer em um mamífero, uso de um composto, kit para tratar um condição mediada por pi3k e processo para a preparação de um composto
RU2612251C2 (ru) Соединения диоксин- и оксазин[2,3-d]пиримидина в качестве ингибиторов фосфоинозитид-3-киназы и способы их применения
AU2015268776B2 (en) Tricyclic PI3k inhibitor compounds and methods of use