EA023179B1 - Антитела против респираторного синцитиального вируса (pcb) и способы их применения - Google Patents

Антитела против респираторного синцитиального вируса (pcb) и способы их применения Download PDF

Info

Publication number
EA023179B1
EA023179B1 EA201200277A EA201200277A EA023179B1 EA 023179 B1 EA023179 B1 EA 023179B1 EA 201200277 A EA201200277 A EA 201200277A EA 201200277 A EA201200277 A EA 201200277A EA 023179 B1 EA023179 B1 EA 023179B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
antibody
antibodies
rsv
antigen
antigen binding
Prior art date
Application number
EA201200277A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201200277A1 (ru
Inventor
Роберт Энтони Виллиамсон
Джехангир Вадиа
Габриель Паскуал
Элисса Киогх
Original Assignee
Круселл Холланд Б.В.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Круселл Холланд Б.В. filed Critical Круселл Холланд Б.В.
Publication of EA201200277A1 publication Critical patent/EA201200277A1/ru
Publication of EA023179B1 publication Critical patent/EA023179B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
    • C07K16/1027—Paramyxoviridae, e.g. respiratory syncytial virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/06—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations
    • A61K49/08—Nuclear magnetic resonance [NMR] contrast preparations; Magnetic resonance imaging [MRI] contrast preparations characterised by the carrier
    • A61K49/10—Organic compounds
    • A61K49/14—Peptides, e.g. proteins
    • A61K49/16—Antibodies; Immunoglobulins; Fragments thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/67—General methods for enhancing the expression
    • C12N15/68—Stabilisation of the vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Radiology & Medical Imaging (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

В настоящем документе предусмотрены антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифически связывают белок слияния (F) респираторно-синцитиального вируса (РСВ). Также предусмотрены способы профилактики, лечения и диагностики вирусной инфекции и/или лечения симптомов РСВ-опосредованного заболевания. Также предусмотрены способы получения антител, которые иммуноспецифически связывают белок F РСВ.

Description

Предусмотрены антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифически связываются с Р-белком респираторно-синцитиального вируса (РСВ) и/или РСВ и/или нейтрализуют РСВ. Кроме того, предусмотрены способы диагностики и терапии, в которых применяются анти-РСВ антитела и их антигенсвязывающие фрагменты. Терапия включает введение предусмотренных антител против РСВ или их антигенсвязывающих фрагментов для профилактики или лечения инфекции РСВ и/или улучшения одного или нескольких симптомов инфекции РСВ, например инфекции у детей и инфекции, связанной с трансплантацией органов. Комбинации нескольких различных анти-РСВ антител и их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу с другими анти-РСВ антителами и их антигенсвязывающими фрагментами могут быть использованы для комбинированной терапии. Также предусмотрены композиции, содержащие смесь анти-РСВ антител и их антигенсвязывающих фрагментов.
Уровень техники
Респираторный синцитиальный вирус (РСВ) представляет собой основную причину тяжелых респираторных заболеваний у новорожденных и детей раннего возраста, а также основную причину детского бронхиолита (УеШуег (2003) 1 Реб1а1г 143:8112). По оценкам 64 млн случаев респираторных заболеваний и 160000 смертельных исходов в мире связаны с вызванными РСВ заболеваниями. Только в США десятки тысяч случаев госпитализации детей обусловлены инфекцией парамиксовирусом, таким как РСВ и вирус парагриппа (Р1У) (8Ьау е1 а1. (1999) ΙΑΜΑ 282:1440-1446). Тяжелая инфекция РСВ чаще всего встречается у детей и новорожденных, особенно у недоношенных детей. Такие состояния, как хронические заболевания легких или врожденный порок сердца, могут значительно увеличить тяжесть заболеваний. РСВ инфекция также может вызвать тяжелое заболевание у пожилых людей, лиц с хроническими легочными заболеваниями и взрослых с ослабленным иммунитетом, например, в результате пересадки костного мозга.
Были исследованы различные подходы к профилактике и лечению инфекции РСВ, включая вакцины, противовирусные соединения (рибавирин), препараты антисмысловых РНК, РНК-интерференция, антитела, например иммуноглобулины или внутривенно вводимые моноклональные антитела. Внутривенный иммуноглобулин (РСВ-Ю1У; КекрЮаш®), выделенный из доноров, и моноклональное антитело паливизумаб (8ΥΝΑΟΙ8™) были одобрены для профилактики РСВ у детей с высоким риском инфекции. Однако пока не существует доступной вакцины или коммерчески доступного препарата для лечения РСВ. Только рибавирин одобрен для лечения инфекции РСВ. Из-за низкой специфичности для эффективного лечения инфекции РСВ требуются высокие дозы, частое введение и/или большие объемы антител, таких как РСВ-Ю и паливизумаб. Кроме того, использование таких продуктов, как внутривенный иммуноглобулин, зависит от наличия донора. Соответственно, существует потребность в дополнительных агентах для профилактики и лечения инфекции РСВ.
Краткое описание изобретения
В настоящем документе предусмотрены выделенные полипептиды, антитела или их антигенсвязывающие фрагменты для профилактики и лечения вызванной респираторным синцитиальным вирусом (РСВ) инфекции и РСВ-опосредованных заболеваний или состояний. Кроме того, предусмотрены выделенные полипептиды, антитела или их антигенсвязывающие фрагменты для диагностики и/или мониторинга инфекции РСВ. В настоящем документе предусмотрены выделенные полипептиды, антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифически связывают и нейтрализуют РСВ. В некоторых примерах полипептиды по настоящему документу иммуноспецифически связывают и нейтрализуют РСВ, если указанные предусмотренные в настоящем документе полипептиды являются частью антитела или антигенсвязывающего фрагмента. Кроме того, предусмотрены антитела и антигенсвязывающие фрагменты, содержащие предусмотренный в настоящем документе полипептид, где антитело или антигенсвязывающие фрагменты иммуноспецифически связывают и нейтрализуют РСВ. Полипептиды, антитела и антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут специфически связывать Р-белок, а также нейтрализовать РСВ. В настоящем документе предусмотрены выделенные полипептиды, антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые могут нейтрализовать РСВ подтипов А и В. В настоящем документе предусмотрены выделенные полипептиды, антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифически связывают Р-белок РСВ. В некоторых приме- 1 023179 рах предусмотрены выделенные полипептиды, антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, включающие последовательность аминокислот, приведенную в любой из 8ЕС ГО N0: 1-16 и 1627-1628, где выделенные полипептиды иммуноспецифически связывают белок слияния (Р) РСВ. В некоторых примерах выделенные полипептиды включают полипептид, обладающий 60, 65, 70, 80, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96,
97, 98, 99% или большей идентичностью последовательности с последовательностью аминокислот, приведенной в любой из 8ЕС ГО N0: 1-16, где выделенные полипептиды иммуноспецифически связывают белок слияния (Р) РСВ.
В настоящем документе предусмотрены выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифически связывают белок слияния (Р) респираторно-синцитиального вируса (РСВ) и/или нейтрализуют РСВ и содержат Ун СГОР1 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕС ГО N0: 2 или 1627, Ун СГОР2 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 3; Ун СГОР3 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 4, Уь СГОР1 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 6, Уъ СГОР2 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 7, и Уъ СГОР3 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 8. В других примерах выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты содержат Ун СЭРЕ Ун СЭК2, Ун СЭК3, Уъ СОРЕ Уъ СЭК2 и Уъ СЭК3 с 60, 65, 70, 80, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97,
98, 99% или большей идентичностью последовательности с последовательностями аминокислот, приведенными в любой из 8ЕЦ ГО N0: 2-4, 6-8 и 1627. В настоящем документе предусмотрены выделенные антитела против РСВ или их антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифически связывают тот же эпитоп белка Р РСВ или вируса РСВ, где антитело или антигенсвязывающие фрагменты содержат Ун СГОР1 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 2 или 1627, Ун СГОР2 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 3; Ун СГОР3 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 4; Уъ СГОР1 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 6, Уь СГОР2 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 7, и Уь СГОР3 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 8, или выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты включают Ун СЭРЕ Ун СГОВ2. Ун СЭК3, Уъ СЭРЕ Уъ СГОР2 и Уъ СГОР3 с 60, 65, 70, 80, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или большей идентичностью последовательности с последовательностями аминокислот, приведенными в 8ЕЦ ГО N0: 2-4, 6-8 и 1627.
В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу включают тяжелую цепь с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 1. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат домен Ун с последовательностью аминокислот, приведенной как аминокислоты 1-125 в 8ЕЦ ГО N0: 1. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат легкую цепь с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 5. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Уъ домен с последовательностью аминокислот, приведенной как аминокислоты 1-10 в 8ЕЦ ГО N0: 5. Например, выделенное антитело или антигенсвязывающие фрагменты представляет собой 58с5.
В настоящем документе предусмотрены выделенные антитела против РСВ или их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие тяжелые вариабельные (Ун) цепи и легкие вариабельные (Уъ) цепи, где антитело или его антигенсвязывающие фрагменты иммуноспецифически связывают тот же эпитоп белка слияния (Р) респираторно-синцитиального вируса (РСВ), который связывает антитело или антигенсвязывающие фрагменты, который содержит тяжелую цепь, приведенную в 8ЕЦ ГО N0: 1, и легкую цепь, приведенную в 8ЕЦ ГО N0: 5.
В некоторых примерах выделенное антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат определяющий комплементарность район 1 Ун (СГОР1) с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 2 или 1627. В некоторых примерах выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Ун СГОР2 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 3. В некоторых примерах выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Ун СГОР3 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 4. В некоторых примерах выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Ун СГОР1 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 2 или 1627, Ун СГОР2 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 3, и Ун СГОР3 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 4.
В некоторых примерах выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Уъ СГОР1 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 6. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Уъ СЭК2, где аминокислотная последовательность Уъ СГОР2 приведена в 8ЕЦ ГО N0: 7. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Уъ СГОР3 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 8. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Уъ СГОР1 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 6, Уъ СГОР2 с последо- 2 023179 вательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 7, и Уь СГОР3 с последовательностью аминокислот, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 8.
В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат тяжелую цепь с последовательностью аминокислот, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 9. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат домен Ун с последовательностью аминокислот, приведенной как аминокислоты 1-125 в §ЕЦ ГО N0: 9. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат легкую цепь с последовательностью аминокислот, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 13. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Уъ домен с последовательностью аминокислот, приведенной как аминокислоты 1-107 в §ЕЦ ГО N0: 13. В частности, например, выделенное антитело или антигенсвязывающий фрагмент представляет собой 58с5.
В настоящем документе предусмотрены выделенные антитела против РСВ или их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие тяжелые вариабельные (Ун) цепи и легкие вариабельные (Уь) цепи, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент иммуноспецифически связывает тот же эпитоп белка слияния (Р) респираторно-синцитиального вируса (РСВ), который связывает антитело или антигенсвязывающий фрагмент, содержащий тяжелые цепи, приведенные в §ЕЦ ГО N0: 9, и легкие цепи, приведенные в 8ЕЦ ГО N0: 13.
В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Ун. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты содержат Ун СГОР1 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 10 или 1628. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Ун СГОР2 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 11. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Ун СГОР3 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 12. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Ун СГОР1 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 10 или 1628; Ун СГОР2 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 11, и Ун СГОР3 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 12.
В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Уъ СЭК1 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 14. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Уъ СЭК2, где аминокислотная последовательность Уъ СЭК2 приведена в 8ЕЦ ГО N0: 15. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Уъ СГОР3 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 16. В некоторых примерах выделенные антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат Уъ СГОР1 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 14, Уъ СГОР2 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0 15, и Уъ СГОР3 с последовательностью аминокислот, приведенной в 8ЕЦ ГО N0: 16.
В настоящем документе предусмотрены выделенные полипептиды, антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифически связывают часть белка Р РСВ, аминокислотная последовательность которой приведена в 8ЕЦ ГО N0: 25. Кроме того, предусмотрены выделенные полипептиды, антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифически связывают белок Р РСВ, аминокислотная последовательность которого приведена в 8ЕЦ ГО N0: 1629.
В настоящем документе предусмотрены выделенные полипептиды, антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие антигенсвязывающий домен, который представляет собой человеческое или гуманизированное антитело или антигенсвязывающий фрагмент. В некоторых примерах выделенный полипептид, антитело или антигенсвязывающий фрагмент, предусмотренные в настоящем документе, представляют собой химерные антитела. В некоторых примерах выделенный полипептид, антитело или антигенсвязывающий фрагмент представляют собой одноцепочечные фрагменты Ρν СсРу). РаЬ, РаЬ', Р(аЬ')2, Ρν, άδΡν, диатело, Рб или фрагмент Рб. В некоторых примерах выделенный полипептид, антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу содержат пептидный линкер. В некоторых примерах пептидный линкер содержит приблизительно от 1 до 50 аминокислот.
В некоторых примерах выделенный полипептид, антитело или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу конъюгированы с полиэтиленгликолем (ПЭГ). В некоторых примерах выделенный полипептид, антитело или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу содержат терапевтические или диагностические агенты. Примеры диагностических агентов включают, но не ограничиваются, ферментами, флуоресцентными соединениями, переносящими электроны соединениями и радиоактивными метками.
В настоящем документе предусмотрены выделенные полипептиды, антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, содержащих домен трансмембранного переноса белка. В некоторых примерах домен трансмембранного переноса белка выбран из пептидов с аминокислотной последовательностью, приве- 3 023179 денной в δΕΟ ΙΌ N0: 1529-1600. В некоторых примерах домен трансмембранного переноса белка представляет собой домен трансмембранного переноса ТАТ-белка ВИЧ.
В настоящем документе предусмотрены поливалентные антитела, содержащие антигенсвязывающую часть, включающую полипептид, антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу, конъюгированные с доменом мультимеризации; и вторую антигенсвязывающую часть, включающую антигенсвязывающий фрагмент противовирусного антитела, конъюгированный со вторым доменом мультимеризации. В некоторых примерах первый домен мультимеризации и второй домен мультимеризации комплементарны или одинаковы, в результате чего первая антигенсвязывающая часть и вторая антигенсвязывающая часть формируют поливалентное антитело. В некоторых примерах предусмотрены поливалентные антитела, содержащие 1, 2, 3, 4 или 5 дополнительных антигенсвязывающих фрагментов. Примеры поливалентных антител включают двухвалентные, трехвалентные, четырехвалентные, пятивалентные, шестивалентные или семивалентные антитела. Поливалентные антитела, предусмотренные в настоящем документе, включают гетеробивалентные или гомобивалентные антитела. Поливалентные антитела, предусмотренные в настоящем документе, включают мультиспецифичные антитела. В некоторых примерах мультиспецифичные антитела представляют собой биспецифичные, триспецифичные или тетраспецифичные антитела. В некоторых примерах предусмотрены поливалентные антитела, содержащие антигенсвязывающие фрагменты, которые представляют собой одноцепочечные Ρν (ксРу), РаЬ, РаЬ', Р(аЬ')2, Ρν, йкРу, диатела, Рй или фрагменты Рй'. Первая антигенсвязывающая часть и/или вторая антигенсвязывающая часть поливалентного антитела по настоящему документу может быть ковалентно или нековалентно конъюгирована с доменом мультимеризации. В некоторых примерах антигенсвязывающая часть конъюгирована с доменом мультимеризации через линкер, такой как химически синтезированный линкер или полипептидный линкер. В некоторых примерах домен мультимеризации поливалентного антитела, предусмотренного в настоящем документе, выбран из константного домена иммуноглобулина (Рс), лейциновой молнии, комплементарных гидрофобных районов, комплементарных гидрофильных районов или совместимых доменов, отвечающих за белок-белковые взаимодействия. В некоторых примерах Рс домен представляет собой Рс домен 1дО, 1дМ и 1дЕ.
В некоторых примерах предусмотрены поливалентные антитела, содержащие два или более антиРСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов. В частности, например, предусмотрены поливалентные антитела, содержащие два или более анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающих фрагментов.
В настоящем документе предусмотрены поливалентные антитела, содержащие антигенсвязывающий фрагмент, включающий анти-РСВ антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу, конъюгированный с доменом мультимеризации; и содержащие второй антигенсвязывающий фрагмент, включающий анти-РСВ антитело или антигенсвязывающий фрагмент, выбранный из паливизумаба, мотавизумаба, ΑΡΡΡ, Р1212, Р12Г4, Р11й4, А1е9, А12а6, А13с4, А17й4, А4В4, А8с7, 1Х-493Ы, ΡΚ Η3-3Ρ4, М3Н9, Υ10Η6, ΌΟ, АРРР(1), 6Н8, Ь1-7Е5, Ь2-15В10, А13а11, А1Ь5, А4В4(1), А4В4Ь1РК-828К, Α4Β4-Ρ52δ, Γδν6, Γ8ν11, Γ8ν13, Γ8ν19, Γ8ν21, Γ8ν22, Γ8ν23, ΚΡ-1, ΚΡ-2 или их антигенсвязывающих фрагментов, конъюгированный со вторым доменом мультимеризации.
В настоящем документе предусмотрены поливалентные антитела, содержащие антигенсвязывающий фрагмент, включающий анти-РСВ антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу, конъюгированный с доменом мультимеризации; и второй антигенсвязывающий фрагмент, включающий противовирусное антитело, которое иммуноспецифически связывает антиген вируса парагриппа (Ρίν) или человеческого метапневмовируса (ЬМРУ), конъюгированный со вторым доменом мультимеризации.
В настоящем документе предусмотрены комбинации, которые содержат выделенный полипептид, антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу или поливалентное антитело по настоящему документу и противовирусный агент. В некоторых примерах противовирусный агент представляет собой рибавирин. В настоящем документе предусмотрены комбинации, которые содержат выделенный полипептид, антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу и противовирусный агент, включенные в единую композицию или в виде отдельных композиций.
В настоящем документе предусмотрены комбинации, которые содержат выделенный полипептид, антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу, или поливалентное антитело по настоящему документу, а также один или несколько дополнительных противовирусных антител. В некоторых примерах комбинация включает два или более различных анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов. В некоторых примерах комбинация включает два или более различных анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов, выбранных из антител или антигенсвязывающих фрагментов, предусмотренных в настоящем документе. В некоторых примерах комбинация содержит антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу и антитела, выбранные из паливизумаба, мотавизумаба, АРРР, Р1212, Ρ12Ι4, Р11й4, А1е9, А12а6, А13с4, А17й4, А4В4, А8с7, 1Х-493Ы, ΡΚ Η3-3Ρ4, М3Н9, Υ10Η6, ΌΟ, АРРР(1), 6Н8, Ь1-7Е5, Ь2-15В10, А13а11, А1Ь5, А4В4(1), А4В4Ь1РК-828К, А4В4-Р528, Γ8ν6, Γ8ν11, Γ8ν13, Γ8ν19, Γ8ν21, Γ8ν22, Γ8ν23, ΚΡ-1, ΚΡ-2 или их антигенсвязывающих фрагментов. В некоторых примерах комбинация содержит антитела или антигенсвязывающие фрагменты по
- 4 023179 настоящему документу и антитела, выбранные из антител или антигенсвязывающих фрагментов, которые иммуноспецифически связывают антиген вируса парагриппа (Ρίν) или человеческого метапневмовируса (ЬМРУ). В некоторых примерах антиген Ρίν представляет собой антиген человеческого Ρίν типа 1, человеческого Ρίν типа 2, человеческого Ρίν типа 3 и/или человеческого Ρίν типа 4. В некоторых примерах антиген Ρίν выбран из фосфопротеина нуклеокапсида Ρίν, белка слияния (Ρ) Ρίν, фосфопротеина Ρίν, большого белка (Ь) Ρίν, белка матрикса (М) Ρίν, гликопротеина гемагглютинин-нейраминидазы (ΗΝ) Ρίν, РНК-зависимой РНК-полимеразы Ρίν, белка Υ1 Ρίν, белка Ό Ρίν, белка С Ρίν и их аллельных вариантов. В некоторых примерах антиген ΙιΜΡν представляет собой антиген ΙιΜΡν типа А или антиген ΙιΜΡν типа В. В некоторых примерах антиген ΙιΜΡν представляет собой антиген ΙιΜΡν подтипа А1, ΙιΜΡν подтипа А2, ΙιΜΡν подтипа В1 или ΙιΜΡν подтипа В2. В некоторых примерах антиген ΙιΜΡν выбран из нуклеопротеида ΙιΜΡν. фосфопротеина ΙιΜΡν. белка матрикса ΙιΜΡν. малого гидрофобного белка ΙιΜΡν, РНК-зависимой РНК-полимеразы ΙιΜΡν, белка Ρ ΙιΜΡν, белка С ΙιΜΡν и их аллельных вариантов.
В настоящем документе предусмотрены комбинации, которые содержат выделенный полипептид, антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу или поливалентные антитела по настоящему документу, а также одно или несколько дополнительных противовирусных антител, где одно или несколько дополнительных противовирусных антител представляют собой одноцепочечный Ρν (κοΡν), РаЬ, РаЬ', Р(аЬ')2, Ρν, άκΡν, диатело, Ρά или фрагмент Ρά.
В настоящем документе предусмотрены фармацевтические композиции, содержащие любой выделенный полипептид, антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу, любое поливалентное антитело по настоящему документу или любую комбинацию по настоящему документу, а также фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель. В некоторых примерах фармацевтические композиции по настоящему документу изготовлены в виде геля, мази, жидкости, суспензии, аэрозоли, таблеток, пилюль, порошка или назального спрея. В некоторых примерах фармацевтические композиции по настоящему документу изготовлены для легочного, интраназального или парентерального введения. В некоторых примерах фармацевтические композиции по настоящему документу изготовлены для однократного введения. В некоторых примерах фармацевтические композиции по настоящему документу изготовлены для пролонгированного высвобождения.
В настоящем документе предусмотрены фармацевтические композиции, содержащие выделенный полипептид, антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу или поливалентное антитело по настоящему документу, а также одно или несколько дополнительных противовирусных антител. В некоторых примерах фармацевтические композиции содержат два или более различных антиРСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов. В некоторых примерах фармацевтические композиции содержат два или более различных анти-РСВ антитела или антигенсвязывающих фрагментов, где антитела или антигенсвязывающие фрагменты предусмотрены в настоящем документе. В некоторых примерах фармацевтические композиции содержат антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу и антитела, выбранные из падивизумаба, мотавизумааб, ΑΡΡΡ, Ρ12£2, Ρ12ί4, Ρ11ά4, А1е9, А12а6, А13с4, Α17ά4, Α4Β4, А8с7, 1Х-493Ы, ΡΚ Η3-3Ρ4, М3Н9, Υ10Η6, ОС, ΑΡΡΡ(1), 6Η8, Ь1-7Е5, Ь2-15В10, Α^Π, Α1Ε5, Α4Β4(1), Α4Β4Ε1ΡΚ-828Κ, А4В4-Г528, Γκν6, Γκν11, Γκν13, Γκν19, Γκν21, Γκν22, Γκν23, ΚΡ-1, ΚΡ-2 или их антигенсвязывающих фрагментов. В некоторых примерах фармацевтические композиции содержат антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу и антитела, выбранные из антител или антигенсвязывающих фрагментов, которые иммуноспецифически связывают антиген вируса парагриппа (Ρίν) или человеческого метапневмовируса (ΗΜΡν). В некоторые примерах антиген Ρίν представляет собой антиген человеческого Ρίν типа 1, человеческого Ρίν типа 2, человеческого Ρίν типа 3 и/или человеческого Ρίν типа 4. В некоторых примерах антиген Ρίν выбран из фосфопротеина нуклеокапсида Ρίν, белка слияния (Ρ) Ρίν, фосфопротеина Ρίν, большого белка (Ь) Ρίν, белка матрикса (М) Ρίν, гликопротеина гемагглютинин-нейраминидазы (ΗΝ) Ρίν, РНК-зависимой РНКполимеразы Ρίν, белка Υ1 Ρίν, белка Ό Ρίν, белка С Ρίν и их аллельных вариантов. В некоторых примерах антиген ΙιΜΡν представляет собой антиген ΙιΜΡν типа А или ΙιΜΡν типа В. В некоторых примерах антиген ΙιΜΡν представляет собой антиген ΙιΜΡν подтипа Α1, ΙιΜΡν подтипа А2, ΙιΜΡν подтипа В1 или ΙιΜΡν подтипа В2. В некоторых примерах антиген ΙιΜΡν выбран из нуклеопротеида ΙιΜΡν, фосфопротеина ΙιΜΡν, белка матрикса ΙιΜΡν, малого гидрофобного белка ΙιΜΡν, РНК-зависимой РНКполимеразы ΙιΜΡν, белка Ρ ΙιΜΡν, белка С ΙιΜΡν и их аллельных вариантов.
В настоящем документе предусмотрены фармацевтические композиции, содержащие выделенный полипептид, антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу или поливалентные антитела по настоящему документу, а также одно или несколько дополнительных противовирусных антител, где одно или несколько дополнительных противовирусных антител представляют собой одноцепочечный Ρν (ксЕу), ΡаЬ, ΡаЬ', Ρ^^)2, Ρν, άκΡν, диатело, Ρά или фрагмент Ρά.
В настоящем документе предусмотрены фармацевтические композиции, содержащие выделенный полипептид, антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу или поливалентное антитело по настоящему документу, а также противовирусный агент. В некоторых примерах противовирусный препарат представляет собой рибавирин.
- 5 023179
В настоящем документе предусмотрен способ лечения вирусных инфекций у субъекта, который включает введение субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, предусмотренной в настоящем документе. В настоящем документе предусмотрен способ лечения или подавления одного или нескольких симптомов вирусной инфекции у субъекта, который включает введение субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции, предусмотренной в настоящем документе. Кроме того, предусмотрен способ профилактики вирусных инфекций у субъекта, который предусматривает введение субъекту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по настоящему документу. В частности, например, вирусная инфекция представляет собой инфекцию РСВ. В частности, например, инфекция РСВ представляет собой инфекцию верхних дыхательных путей.
Введение может осуществляться любым подходящим путем, включая, но не ограничиваясь, местным, парентеральным, локальным или системным введением, например интраназальным, внутримышечным, интрадермальным, внутрибрюшинным, внутривенным, подкожным, пероральным или легочным введением. В некоторых примерах фармацевтическую композицию, предусмотренную в настоящем документе, вводят с помощью распылителя или ингалятора. Фармацевтические композиции по настоящему документу могут быть введены любому подходящему субъекту, например млекопитающему, в частности человеку.
В некоторых примерах фармацевтическую композицию, предусмотренную в настоящем документе, вводят младенцу, недоношенному младенцу или младенцу с риском госпитализации в результате инфекции РСВ, пожилому человеку, субъекту с муковисцидозом, бронхолегочной дисплазией, врожденным пороком сердца, врожденным иммунодефицитом, приобретенным иммунодефицитом, лейкемией или неходжкинской лимфомой или субъекту, перенесшему пересадку органов или тканей, например пересадку костного мозга или пересадку печени.
В некоторых примерах фармацевтическую композицию по настоящему документу вводят один раз, два раза, три раза, четыре раза или пять раз в течение сезона распространения инфекции РСВ (например, с октября по май). В некоторых примерах фармацевтическую композицию по настоящему документу вводят один раз, два раза, три раза, четыре раза или пять раз в течение одного месяца, двух месяцев или трех месяца до сезона РСВ.
В некоторых примерах фармацевтическая композиция по настоящему документу может быть введена с одним или более противовирусными агентами. В некоторых примерах противовирусный препарат представляет собой рибавирин. В некоторых примерах фармацевтическая композиция и противовирусный агент включены одну композицию или предусмотрены в виде отдельных композиций. В способах по настоящему документу фармацевтическая композиция и противовирусный агент могут быть введены последовательно, одновременно или с перерывом.
В некоторых примерах фармацевтическая композиция по настоящему документу может быть введена совместно с гормональной терапией, иммунотерапией или противовоспалительным агентом. В некоторых примерах фармацевтическая композиция по настоящему документу может быть введена совместно с одним или несколькими дополнительными противовирусными антителами и их антигенсвязывающими фрагментами. Фармацевтическая композиция и один или несколько дополнительных противовирусных антител могут быть включены в одну композицию или предусмотрены в виде отдельных композиций. Фармацевтическая композиция и один или несколько дополнительных анти-РСВ антител могут быть введены последовательно, одновременно или с перерывом. В некоторых примерах антигенсвязывающие фрагменты представляют собой одноцепочечные Ρν (8сРу), РаЬ, РаЬ', Р(аЬ')2, Ру, άδΡν, диатело, Рб или фрагмент Рб.
В некоторых примерах фармацевтическая композиция по настоящему документу может быть введена с одним или несколькими дополнительными противовирусными антителами, выбранными из антител против РСВ или их антигенсвязывающих фрагментов, таких как, например, паливизумаб, мотавизумаб, АРРР, Р12£2, Р12Г4, Р1164, А1е9, А12а6, А13с4, А1764, А4В4, А8с7, 1Х-493Ы, РК Н3-3Р4, М3Н9, Υ10Η6, ΌΟ, АРРР(1), 6Н8, Ь1-7Е5, Б2-15В10, А13а11, А1Ь5, А4В4(1), А4В4ЫРК-828К, А4В4-Р528, Γδν6, Γδν11, Γ8ν13, Γδν19, Γ8ν21, Γδν22, Γδν23, КР-1, КР-2 или их антигенсвязывающие фрагменты.
В некоторых примерах фармацевтическая композиция по настоящему документу может быть введена с одним или несколькими дополнительными противовирусными антителами, выбранными из антител или антигенсвязывающих фрагментов, которые иммуноспецифически связывают антиген вируса парагриппа (Ρίν) или человеческого метапневмовируса (ЬМРУ). В некоторых примерах антиген Ρίν представляет собой антиген человеческого РЩ типа 1, человеческого РЩ типа 2, человеческого РЩ типа 3 и/или человеческого РЩ типа 4. В некоторых примерах антиген РЩ выбран из фосфопротеина нуклеокапсида РЮ, белка слияния (Р) РЮ, фосфопротеина РЮ, большого белка (Ь) РЮ, белка матрикса (М) РЮ, гликопротеина гемагглютинин-нейраминидазы (ΗΝ) РЮ, РНК-зависимой РНК-полимеразы РЮ, белка Υ1 РЮ, белка Ό РЮ, белка С РЩ и их аллельных вариантов. В некоторых примерах антиген ЬМΡV представляет собой антиген ЬМΡV типа А или ЬМΡV типа В. В некоторых примерах антиген ЬМΡV представляет собой антиген ЬМΡV подтипа А1, ЬМΡV подтипа А2, ЬМΡV подтипа В1 или ЬМΡV подтипа В2. В некоторых примерах антиген ЬМΡV выбран из нуклеопротеида ЬМΡV, фосфопротеина
- 6 023179
ЬМРУ. белка матрикса ЬМРУ. малого гидрофобного белка ЬМРУ. РНК-зависимой РНК-полимеразы ЬМРУ. белка Р ЬМРУ. белка О ЬМРУ и их аллельных вариантов.
В настоящем документе предусмотрен способ обнаружения инфекции РСВ. который включает:
(а) анализ уровня антигена РСВ в образцах жидкости. клеток или ткани с помощью антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу.
(б) сравнение измеренного уровня антигена РСВ с контрольным уровнем. где превышение измеренного уровня антигена РСВ по сравнению с контрольным уровнем антигена РСВ указывает на инфекцию РСВ.
В некоторых примерах образец клеток или ткани получают у человеческого субъекта. В некоторых примерах образец клеток или ткани представляет собой образец крови. мочи. слюны. мокроты легких. лаважа или лимфы.
В настоящем документе предусмотрены выделенные нуклеиновые кислоты. которые кодируют полипептид. антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу. В настоящем документе предусмотрены векторы. которые содержат нуклеиновую кислоту. кодирующую полипептид. антитело или его антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу.
В настоящем документе предусмотрены клетки. содержащие антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу. нуклеиновые кислоты по настоящему документу или вектор по настоящему документу. Клетки по настоящему документу могут представлять собой. например. прокариотические или эукариотические клетки. Кроме того. предусмотрены трансгенные животные. которые содержат нуклеиновые кислоты по настоящему документу или вектор по настоящему документу. Также предусмотрены способы экспрессии выделенных антител или антигенсвязывающих фрагментов. которые включают культивирование клеток по настоящему документу в условиях. которые приводят к экспрессии закодированных антител. или выделение антител или антигенсвязывающих фрагментов из трансгенных животных по настоящему документу. В некоторых примерах антитела или антигенсвязывающие фрагменты выделяют из сыворотки или молока трансгенных животных.
В настоящем документе предусмотрены наборы. включающие полипептид. антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу. поливалентные антитела по настоящему документу или комбинации по настоящему документу. помещенные в один или несколько контейнеров. а также инструкции по применению.
Кроме того. предусмотрено применение антител или антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу для профилактики и/или лечения вирусной инфекции у субъекта. Кроме того. предусмотрено применение антитела или антигенсвязывающего фрагмента по настоящему документу для лечения или подавления одного или нескольких симптомов вирусной инфекции у субъекта.
Также в настоящем документе предусмотрено применение антител или антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу для изготовления лекарственного средства для профилактики и/или лечения вирусной инфекции у субъекта. Кроме того. предусмотрено применение антител или антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу для изготовления лекарственного средства для лечения или подавления одного или нескольких симптомов вирусной инфекции у субъекта.
Подробное описание изобретения
Содержание
A. Определения
B. Обзор
1. Респираторно-синцитиальный вирус
C. Антитела против РСВ
1. Общая структура антител и функциональные домены
a. Структурные и функциональные домены антител
b. Фрагменты антител
2. Примеры анти-РСВ антител
а. Производные антител
I. Одноцепочечные антитела
II. Антиидиотипические антитела
III. Мультиспецифические антитела и мультимеризация антител
Ό. Дополнительные модификации анти-РСВ антител
1. Снижающие иммуногенность модификации
2. Модификации Рс
3. Пегилирование
4. Конъюгация с обнаруживаемой меткой
5. Конъюгация с терапевтическим агентом
б. Модификации. улучшающие специфичность связывания
Е. Способы выделения анти-РСВ антител
Р. Способы получения анти-РСВ антител. их модифицированных форм или различных вариантов. а также нуклеиновых кислот. кодирующих антитела
- 7 023179
1. Нуклеиновые кислоты
2. Векторы
3. Клеточные системы экспрессии
a. Прокариотические системы экспрессии
b. Дрожжевые клетки
c. Клетки насекомых
б. Клетки млекопитающих е. Растения
4. Очистка антител
О. Оценка свойств и активности анти-РСВ антител
1. Анализы на связывание
3. Ιη νίΐΓΟ анализы на нейтрализацию вирусов антителами
4. Ιη νίνο животные модели для оценки эффективности анти-РСВ антител
5. Ιη νίΐτο и ίη νίνο анализы для измерения эффективности антител
H. Применение в диагностических целях
I. Ιη νίίτο обнаружение патогенной инфекции
2. Ιη νίνο обнаружение патогенной инфекции
3. Контроль инфекции
Ι. Применение для профилактики и терапии
1. Субъекты для терапии
2. Дозировка
3. Пути введения
4. Комбинированная терапия
а. Противовирусные антитела для комбинированной терапии
Ι. Анти-РСВ антитела
ΙΙ. Антитела против других респираторных вирусов
5. Генная терапия
1. Фармацевтические композиции, комбинации и изделия/наборы
1. Фармацевтические композиции
2. Изделия/наборы
3. Комбинации
К. Примеры
А. Определения
Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые здесь, имеют тот же смысл, как это обычно понимается специалистом в области техники, к которой относится изобретение. Если не указано иное, все патенты, заявки, опубликованные заявки и публикации, последовательности ОенЬанк. базы данных, вебсайты и другие опубликованные материалы, упомянутые в настоящем документе, приведены в качестве ссылки в полном объеме. Если для упоминаемого в настоящем документе термина существует множество определений, предпочтительно приведенное в этом разделе определение. В случае приведения ссылки на ИКЕ или другого подобного идентификатора или адреса понимается, что идентификатор может изменяться и информация в сети Интернет может появляться и исчезать, но аналогичную информацию можно найти в сети Интернет. Подобная ссылка свидетельствует о наличии информации и открытом доступе.
В настоящем документе термин антитело относится к иммуноглобулинам и фрагментам иммуноглобулинов, природным или частично или полностью синтетическим, таким как рекомбинантные, включая любые их фрагменты, содержащие по меньшей мере часть вариабельного домена молекулы иммуноглобулина, которые сохраняют специфичность связывания полноразмерного иммуноглобулина. Таким образом, антитела включают любые белки, имеющие связывающий домен, гомологичный или существенно гомологичный антигенсвязывающему домену иммуноглобулинов (связывающий район антитела). Антитела включают фрагменты антител, такие как фрагменты анти-РСВ антител. Используемый в настоящем документе термин антитело, таким образом, включает в себя синтетические антитела, рекомбинантные антитела, мультиспецифичные антитела (например, биспецифичные антитела), человеческие антитела и не человеческие антитела, гуманизированные антитела, химерные антитела, внутриклеточные антитела и фрагменты антител, включая, но не ограничиваясь, РаЬ фрагментами, РаЬ' фрагментами, Р(аЬ')2-фрагментами, Ρν фрагментами, связанными дисульфидными мостами Ρν фрагментами (6δΡν), Рб фрагментами, Рб' фрагментами, одноцепочечными Ρν фрагментами (хсРу), одноцепочечными РаЬ (зсРаЬ), диателами, антиидиотипическими (анти-И) антителами или антигенсвязывающими фрагментами любой из вышеперечисленных молекул. Термин антитело по настоящему документу распространяется на представителей любого типа иммуноглобулинов (например, ΙβΟ, Ι§Μ, Ι§Ό, Ι§Ε, Ι§Α и ΙβΥ) любого класса (например, Ι§01, Ι§02, Ι§03, Ι§04, ΙβΑ1 и Ι§Α2) или подкласса (например, ΙβΟ2η и ΙβΟ2ό).
В настоящем документе фрагмент антитела или антигенсвязывающий фрагмент антитела относится к любой части полноразмерного антитела, которая меньше полноразмерной молекулы, но содер- 8 023179 жит по меньшей мере часть вариабельного домена антитела, который связывает антиген (например, один или несколько СГОК и/или один или более связывающих районов антитела), и тем самым сохраняет специфичность связывания полноразмерного антитела, по меньшей мере, частично. Фрагменты антител включают производные антител, полученные ферментативной обработкой полноразмерных антител, а также полученные синтетически, например, рекомбинантные производные. Фрагмент антитела включен в понятие антитело. Примеры фрагментов антител включают, но не ограничиваются РаЬ, РаЬ', Р(аЬ')2, одноцепочечными Ρν (ясРу), Ρν, йяРу, диателами, Рй и фрагментами Рй, а также другими фрагментами, включая модифицированные фрагменты (см., например, Мейюйя ίη Мо1еси1аг Вю1оду, т. 207: КесотЫпап1 АпйЬоФея Рог Сапсег ТЬегару Мейюйя апй Рго1осо1я (2003), глава 1, с. 3-25, Клрпуапоу). Фрагмент может содержать несколько цепей, связанных друг с другом, например, через дисульфидные мосты и/или пептидные линкеры. Фрагмент антитела обычно содержит, по меньшей мере, приблизительно 50 аминокислот, как правило, по меньшей мере приблизительно 200 аминокислот.
В настоящем документе антигенсвязывающий фрагмент относится к фрагменту антитела, который содержит антигенсвязывающий участок, связывающий тот же антиген, который связывает антитело, из которого получен фрагмент. Антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу включает любой фрагмент антитела, который при вставке в рамку считывания антитела (например, путем замены соответствующего домена) приводит к антителу, которое иммуноспецифически связывает (то есть демонстрирует Ка по меньшей мере приблизительно 107-108 М-1) с антигеном. Антигенсвязывающие фрагменты включают фрагменты антител, такие как фрагменты РаЬ, фрагменты РаЬ', фрагменты Р(аЬ')2, фрагменты Ру, связанные дисульфидными мостами Ру (йяРу), фрагменты Рй, фрагменты Рй', одноцепочечные Ру (ясРу), одноцепочечные РаЬ (ясРаЬ), а также включают в себя другие фрагменты, такие как СЭКсодержащие фрагменты, и полипептиды, которые иммуноспецифически связывают антиген, или при вставке в рамку считывания антитела приводят к антителу, которое иммуноспецифически связывается антигеном.
В настоящем документе терапевтическое антитело относится к любому антителу или антигенсвязывающему фрагменту, который вводят для лечения животных, включая человека. Такие антитела могут быть получены с помощью любого известного способа получения полипептидов и, следовательно, включают, но не ограничиваются рекомбинантными антителами, синтетическими антителами и терапевтическими антителами, выделенными из клеток, тканей и других источников. При выделении из любых источников или при другом способе получения терапевтические антитела могут быть гетерогенны по длине и различаться по посттрансляционным модификациям, таким как гликозилирование (т. е. содержание углеводов). Гетерогенность терапевтических антител также может зависеть от источника терапевтических антител. Таким образом, упоминание терапевтического антитела относится к гетерогенной популяции антител, как выделенных, так и полученных другим способом. Если упоминается гомогенный препарат, то об этом указано отдельно. Упоминание терапевтических антител в настоящем документе включает их мономерные, димерные или другие олигомерные формы, если это необходимо.
В настоящем документе нейтрализующие антитела относятся к любому антителу или антигенсвязывающему фрагменту, который связывает возбудителя и препятствует возбудителю инфицировать клетки и/или вызывать заболевание у субъекта. Примером нейтрализующих антител являются нейтрализующие антитела, которые связывают вирусы, бактерии и грибковые патогены. Как правило, нейтрализующие антитела по настоящему документу связывают поверхность патогена. В примерах, где возбудитель представляет собой вирус, нейтрализующие антитела, связывающие вирус, обычно связываются с белком на поверхности вируса. В зависимости от класса вирусов поверхностный белок может представлять собой белок капсида (например, белок капсида безоболочечного вируса) или белок оболочки вируса (например, белок оболочки оболочечного вируса). В некоторых примерах белок представляет собой гликопротеин. Способность антитела подавлять инфекционность вируса может быть измерена, например, с помощью анализа нейтрализации ίη уйго, например, анализа подавления бляшкообразования с применением клеток Уето.
В настоящем документе оболочечный вирус представляет собой вирус животных, который имеет наружную мембрану или оболочку, которая представляет собой липидный бислой, содержащий вирусные белки, окружающую капсид вируса. Белки оболочки вируса участвуют в сборке инфекционных частиц, а также участвуют в процессе проникновения вируса, связываясь с рецепторами поверхности клетки-хозяина и вызывая слияние вирусной оболочки и мембраны клетки-хозяина. Оболочечные вирусы могут быть сферическими или нитевидными (палочковидными). Примеры вирусов с оболочкой включают, но не ограничиваются членами семейств герпесвирусов, поксвирусов, гепаднавирусов, тогавирусов, аренавирусов, флавивирусов, ортомиксовирусов, паровксовирусов, буньявирусов, рабдовирусов, филовирусов, коронавирусов и борнавирусов. Респираторный синцитиальный вирус (РСВ) представляет собой оболочечный вирус семейства парамиксовирусов, подсемейства пневмовирусов, содержащий антисмысловую одноцепочечную РНК.
В настоящем документе безоболочечный вирус или голый вирус представляет собой вирус, который не имеет оболочки. Для заражения клетки-хозяина безоболочечный вирус для прикрепления к клетке-мишени использует белки вирусного капсида. Примеры безоболочечных вирусов включают, но
- 9 023179 не ограничиваются семейством аденовирусов, папилломавирусов, парвовирусов, полиомавирусов, цирковирусов, реовирусов, пикорнавирусов, калицивирусов и астровирусов.
В настоящем документе поверхностный белок патогена представляет собой любой белок, который находится на внешней поверхности патогена. Поверхностный белок может быть полностью или частично экспонирован во внешнюю среду (например, на наружной поверхности). Примерами поверхностных белков являются мембранные белки, например белок, расположенный на поверхности вирусной оболочки или бактериальной наружной мембране (например, гликопротеин мембран). Мембранные белки могут представлять собой трансмембранные белки (то есть белки, которые пересекают липидный бислой) или не трансмембранные белки, ассоциированные с клеточной поверхностью (например, заякоренные или ковалентно прикрепленные к поверхности мембраны, например приклепленные к другим белкам на поверхности патогена). Другие примеры белков включают поверхностные вирусные капсидные белки безоболочечных вирусов и оболочечных вирусов, которые хотя бы частично экспонированы во внешнюю среду.
В настоящем документе моноклональные антитела относятся к популяции идентичных антител, подразумевая, что каждая отдельная молекула антител в популяции моноклональных антител идентична другим молекулам. Это свойство отличается от популяции поликлональных антител, которая содержит антитела, имеющие множество различных последовательностей. Моноклональные антитела можно получать с помощью целого ряда известных методов (§тйЬ с1 а1. (2004) 1. СЬи. Ра11ю1. 57, 912-917; и №кои с1 а1., 1. СЬи. Ра11ю1. (2000), 53, 111-117). Например, моноклональные антитела могут быть получены иммортализацией клеток, например, слиянием с клетками миеломы для создания линии гибридомы или заражением В клеток вирусом, таким как ЕВУ. Рекомбинантная технология также может быть использована для получения антител ίη νίίτο из клональной популяции клеток-хозяев, где клетки-хозяева трансформированы плазмидой, несущей искусственную последовательность нуклеотидов, кодирующую антитело.
В настоящем документе обычное антитело относится к антителу, которое состоит из двух тяжелых цепей (которые можно обозначить Н и Н'), двух легких цепей (которые можно обозначить Ь и Ь') и двух участков связывания, где каждая тяжелая цепь может представлять собой полноразмерную тяжелую цепь иммуноглобулина или ее функциональный фрагмент, который сохраняет антигенсвязывающие свойства (например, тяжелая цепь включает, но не ограничивается Ун, Ун-Сн1 и Ун-Сн1-Сн2-Сн3), и каждая легкая цепь может представлять собой полноразмерную легкую цепь или любой ее функциональный домен (например, легкие цепи включают, но не ограничиваются, Уъ цепями и Уъ-Сь цепями). Каждая тяжелая цепь (Н и Н') образует пару с одной легкой цепью (Ь и Ь' соответственно).
В настоящем документе полноразмерное антитело представляет собой антитело, имеющее две полноразмерные тяжелые цепи (например, Ун-Сн1-Сн2-Сн3 или Ун-Сн1-Сн2-Сн3-Сн4) и две полноразмерные легкие цепи (Уь-Сь), а также шарнирные фрагменты, например человеческое антитело, вырабатываемое в естественных условиях секретирующими антитела В-клетками, и антитело с теми же доменами, которое получено синтетически.
В настоящем документе Εν фрагмент антитела состоит из одного вариабельного тяжелого домена (Ун) и одного вариабельного легкого домена (Уь), связанных нековалентно.
В настоящем документе άδΕν относится к Εν с искусственной межмолекулярной дисульфидной связью, которая стабилизирует Ун-Уь пару.
В настоящем документе фрагмент Εά представляет собой фрагмент антитела, содержащий вариабельный домен (Ун) и один константный домен (Сн1) тяжелой цепи антитела.
В настоящем документе фрагмент ЕаЬ представляет собой фрагмент антитела, полученный расщеплением полноразмерного иммуноглобулина папаином, или фрагмент, имеющий ту же структуру, но полученный синтетически, например, рекомбинантными методами. ЕаЬ фрагмент содержит легкую цепь (включающую Уь и Съ), и вторую цепь, содержащую вариабельный домен тяжелой цепи (Ун) и один домен константного района тяжелой цепи (Сн1).
В настоящем документе Е(аЬ')2 фрагмент представляет собой фрагмент антитела, полученный расщеплением иммуноглобулина пепсином при рН 4,0-4,5, или фрагмент, имеющий ту же структуру, но полученный синтетически, например, рекомбинантными методами. Е(аЬ')2 фрагмент, по существу, содержит два ЕаЬ фрагмента, где каждая часть тяжелой цепи содержит несколько дополнительных аминокислот, включая остатки цистеина, которые образуют дисульфидные связи, соединяющие два фрагмента.
В настоящем документе ЕаЬ'-фрагмент представляет собой фрагмент, содержащий половину (одну тяжелую цепь и одну легкую цепь) Е(аЬ')2-фрагмента.
В настоящем документе Εά' фрагмент представляет собой фрагмент антитела, содержащий часть тяжелой цепи Ε(аЬ')2-фрагмента.
В настоящем документе фрагмент Εν представляет собой фрагмент, содержащий только Ун и Уъ домены молекулы антитела.
В настоящем документе к 1δΕν фрагментам относится антитело, в котором константный домен, обычно присутствующий в ΕаЬ фрагменте, был заменен гетеродимерным биспиральным (οοί1οά-οοί1) доменом (см., например, Άτηάί с1 а1. (2001) ί Μο1 Βίο1. 7:312:221-228).
- 10 023179
В настоящем документе фрагмент 8сРу относится к фрагменту антитела, который содержит вариабельный домен легкой цепи (Уь) и вариабельный домен тяжелой цепи (Ун), ковалентно связанные полипептидным линкером в любом порядке. Линкер имеет такую длину, что два вариабельных домена соединяются без существенных затруднений. Примеры линкеров представляют собой (С1у-8ет)п последовательности с включенными для увеличения растворимости остатками С1и или Ьуз.
Используемый в настоящем документе термин производное относится к полипептиду, который содержит последовательность аминокислот анти-РСВ антитела или его фрагмента, которая была изменена, например, введением замен, удаления или добавления аминокислотных остатков, а также ковалентным присоединением к полипептиду молекул любого типа (например, гликозилированием, ацетилированием, пегилированием, фосфорилированием, амидированием, модификацией известными защитными/блокирующими группами, протеолитическим расщеплением, связыванием с клеточными лигандами или другими белками). Производные антител против РСВ или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть изменены химической модификацией с помощью методов, известных специалистам в данной области, включая, но не ограничиваясь, специфическим химическим расщеплением, ацетилированием, формилированием, метаболическим синтезом туникамицина. Кроме того, производные антител против РСВ или их антигенсвязывающие фрагменты могут содержать одну или несколько неклассических аминокислот. Как правило, полипептидное производное обладает схожими или идентичными функциями по сравнению с анти-РСВ антителом или его антигенсвязывающим фрагментом по настоящему документу (например, нейтрализация РСВ).
Используемая в настоящем документе фраза полученная из, употребляемая по отношению к фрагментам антител, полученным из другого антитела, такого как моноклональное антитело, относится к получению фрагментов антител (например, РаЬ, Р(аЬ'), Р(аЬ')2, одноцепочечных Ρν (бсРу), Ρν, 6δΡν, диател, Рб и Рб' фрагментов), которые сохраняют специфичность связывания исходного антитела. Такие фрагменты могут быть получены различными способами, известными в данной области, включая, но не ограничиваясь, ферментативным расщеплением, химическим сшиванием, рекомбинантными методами или их комбинацией. Как правило, вариабельный район тяжелой цепи (Ун) и вариабельный район легкой цепи (Уъ) фрагмента производного антитела идентичен или существенно идентичен аналогичным областям исходного антитела, так что фрагмент антитела и антитело связывают один эпитоп.
В настоящем документе исходное антитело или начальное антитело относится к антителу, из которого получен фрагмент антитела (например, РаЬ, Р(аЬ'), Р(аЬ')2, одноцепочечный Ρν (бсРу) Ρν, 6δΡν, диатело, Рб и Рб' фрагменты).
Используемый в настоящем документе термин эпитоп относится к любой антигенной детерминанте антигена, который связывает паратоп антитела. Эпитопы, как правило, содержат химически активные поверхностные группировки молекул, такие как боковые цепи аминокислот или сахара, и, как правило, имеют специфическую трехмерную структуру, а также особенности распределения зарядов.
В настоящем документе химерный полипептид относится к полипептиду, который содержит части по меньшей мере двух различных полипептидов или две части одного полипептида, не формирующие непрерывную последовательность. Таким образом, химерный полипептид обычно включает в себя целую последовательность аминокислотных остатков полипептида или ее часть и целую последовательность аминокислот другого полипептида или ее часть. Указанные две части могут быть связаны напрямую или не напрямую, могут быть связаны пептидной связью, другой ковалентной связью или нековалентными взаимодействиями достаточной силы, которые приводят к сохранению целостности значительной части химерного полипептида в равновесных физиологических условиях, таких как в изотонический буферный раствор с рН 7. В настоящем документе химерные полипептиды включают полипептиды, которые содержат полное анти-РСВ антитело или его часть, связанную с другим полипептидом, таким как, например, домен мультимеризации, константный домен или каркасный район гетерологичного иммуноглобулина, диагностический или терапевтический полипептид.
В настоящем документе гибридный белок представляет собой искусственный полипептид, содержащий последовательность аминокислот, соответствующую двум различным полипептидам, которые соединены вместе, полученный, например, экспрессией гибридного белка с помощью вектора, содержащего близко расположенные, например, примыкающие друг к другу в последовательности вектора, две нуклеиновые кислоты, кодирующие два полипептида. Как правило, гибридный белок по настоящему документу относится к полипептиду, содержащему полипептид с аминокислотной последовательностью антитела или антигенсвязывающего фрагмента и полипептид или пептид с аминокислотной последовательностью гетерологичного полипептида или пептида, такого как, например, диагностический или терапевтический полипептид. Таким образом, гибридный белок относится к химерному белку, содержащему два белка или части из двух или более белков или пептидов, которые связаны напрямую или не напрямую пептидной связью. Две молекулы могут примыкать друг к другу в конструкции или могут быть разделены линкером или разделяющим полипептидом. Разделяющий полипептид может кодировать полипептид, который изменяет свойства полипептида, такие как растворимость или внутриклеточная локализация.
В настоящем документе линкер или разделяющий пептид относится к короткой последователь- 11 023179 ности аминокислот, которая объединяет две полипептидные последовательности (или к нуклеиновой кислоте, кодирующей такую последовательность аминокислот). Пептидный линкер относится к короткой последовательности аминокислот, соединяющей две полипептидные последовательности. Примеры полипептидных линкеров включают линкеры, соединяющие домен переноса белка с антителом, или линкеры, соединяющие две цепи антитела в синтетический фрагмент антитела, такой как фрагмент 8сРу. Линкеры хорошо известны в уровне техники, и любой известный линкер может быть использован в предусмотренных настоящим документах способах. Примеры полипептидных линкеров включают (01у-8ег)п аминокислотные последовательности с включенными для увеличения растворимости остатками О1и или Ьу8. Другие примеры линкеров описаны в настоящем документе, и любой из указанных и других известных линкеров может быть использован в предусмотренных композициях и способах.
В настоящем документе шарнирный район антитела или шарнирный район относится к району полипептида, который присутствует в природных тяжелых цепях антител гамма-, дельта- и альфаизотипов между СН1 и Сн2 доменами и который не имеет гомологии с другими доменами антител. Этот фрагмент богат остатками пролина и придает гибкость 1§О, 1дА и Ι§Ό антителам, позволяя двум рукам (каждая из которых содержит один сайт связывания антитела) РаЬ фрагмента быть подвижными, то есть располагаться под различными углами по отношению друг к другу при связывании антигена. Такая гибкость позволяет РаЬ рукам двигаться для взаимодействия сайтов связывания антитела с эпитопами на поверхности клеток или другими антигенами. Две внутрицепочечные дисульфидные связи в шарнирном районе стабилизируют взаимодействия между двумя тяжелыми цепями. В некоторых вариантах по настоящему документу искусственные фрагменты антител содержат один или несколько шарнирных районов, например, способствующих стабилизации молекулы через взаимодействие двух цепей антитела. Шарнирный район является примером домена димеризации.
В настоящем документе диатело представляет собой димер 8сРу; диатела, как правило, имеют более короткие пептидные линкеры по сравнению с 8сРу, что приводит к их димеризации.
В настоящем документе гуманизированные антитела относятся к антителам, которые были модифицированы включением человеческих последовательностей аминокислот, так что введение антител человеку не вызывает иммунного ответа. Гуманизированные антитела, как правило, содержат определяющие комплементарность районы (СОК), полученные из иммуноглобулинов не человеческого происхождения, а остальная часть молекулы антитела получена, как правило, из человеческого иммуноглобулина. Методы получения таких антител известны в уровне техники. Например, ДНК, кодирующая моноклональное антитело, может быть изменена с помощью технологии рекомбинантной ДНК для кодирования антитела, в котором аминокислотный состав не вариабельных фрагментов основан на человеческих антителах. Методы определения таких фрагментов известны в уровне техники, включая компьютерные программы, которые предназначены для определения вариабельных и не переменная фрагментов иммуноглобулинов.
В настоящем документе идиотип относится к набору из одной или нескольких антигенных детерминант, характерных для вариабельного домена молекулы иммуноглобулина.
В настоящем документе антиидиотипическое антитело относится к антителу против антигенспецифической части последовательности антитела или Т-клеточного рецептора. Антиидиотипическое антитело ингибирует специфический иммунный ответ.
В настоящем документе домен 1д представляет собой домен, распознаваемый в качестве такового в уровне техники, который отличается характерной иммуноглобулиновой (1д) структурой, которая состоит из двух бета-листов, каждый из которых содержит антипараллельные бета-цепи аминокислот, соединенные петлями. Два бета-листа в 1д структуре соединены между собой гидрофобными взаимодействиями и консервативными внутрицепочечными дисульфидными связями. Индивидуальные домены иммуноглобулина в цепи антитела далее могут быть выделены на основе их функций. Например, легкая цепь содержит один домен с вариабельным районом (Уь) и один домен с константным районом (Сь), в то время как тяжелая цепь содержит один домен с вариабельным районом (Ун) и три или четыре домена с константным районом (Сн). Каждый Уъ, Съ, Ун и Сн домен представляет собой пример иммуноглобулинового домена.
Используемый в настоящем документе термин вариабельный домен или вариабельный район представляет собой определенный 1д домен тяжелой или легкой цепи антитела, который содержит последовательность аминокислот, которая различается в разных антителах. Каждая легкая цепь и каждая тяжелая цепь имеет один домен с вариабельным районом, Уъ и Ун соответственно. Вариабельные домены определяют антигенную специфичность и, следовательно, отвечают за распознавание антигена. Каждый вариабельный район содержит районы СОК, которые являются частью антигенсвязывающего домена, и каркасные районы (РК).
В настоящем документе антигенсвязывающий домен, антигенсвязывающий участок, район связывания антигена и связывающий район антитела используются как синонимы для обозначения домена антитела, который распознает и физически взаимодействует с распознаваемым антигеном. Нативная полноразмерная молекула антитела содержит два обычных антигенсвязывающих участка, каждый из которых содержит части вариабельного района тяжелой цепи и части вариабельного района легкой
- 12 023179 цепи. Обычный антигенсвязывающий сайт содержит петли, которые соединяют антипараллельные бетацепи в доменах с вариабельным районом. Связывающие антиген участки могут содержать другие части доменов с вариабельными районами. Каждый обычный антигенсвязывающий участок содержит три гипервариабельных района из тяжелой цепи и три гипервариабельных района из легкой цепи. Гипервариабельные районы также называют определяющими комплементарность районами (СЭР).
В настоящем документе гипервариабельный район, НУ, определяющий комплементарность район, СОК. и СОК антитела используются как синонимы для обозначения одной из нескольких частей внутри каждого вариабельного домена, которые вместе образуют антигенсвязывающий участок антитела. Каждый домен с вариабельным районом включает три СОК, обозначаемые СЭК1. СЭК2 и СЭК3. Три СОК не соседствуют друг с другом в линейной аминокислотной последовательности, но сближены в фолдированном полипептиде. СОК расположены в пределах петель, соединяющих параллельные цепи бета-листов вариабельного домена. Как описано в настоящем документе, специалист в данной области может определить СОК по нумерации Кабат или С1ю11иа (см., например, КаЬа1 Е.А. е1 а1. (1991) Зесщепсек οί Рго1еш8 οί 1ттипо1ощса1 1п1егек1, ΡίΓιΗ Εάίΐίοη, И.8. ОераПтеЩ οί НеаИЪ апй Нитап Зегуюек, ΝΙΗ РиЬиса1юп № 91-3242, и С^Ыа С. е1 а1. (1987) 1 Μο1. ΒίοΙ. 196:901-917).
В настоящем документе каркасные районы (РК) представляют собой домены антитела в доменах с вариабельными районами, которые находятся в бета-листах; РК районы сравнительно более консервативны по аминокислотным последовательностям по сравнению с гипервариабельными районами.
В настоящем документе домен константного района представляет собой домен в тяжелой или легкой цепи антитела, который содержит сравнительно более консервативную последовательность аминокислот относительно домена вариабельного района. В обычных полноразмерных молекулах антител каждая легкая цепь имеет один константный домен легкой цепи (Сь) И каждая тяжелая цепь содержит один или несколько доменов константного района тяжелой цепи (СН), которые включают СН1, СН2, СН3 и СН4. Полноразмерные молекулы 1§А, 1§О и Ι§Ό изотипов содержат СН1, СН2, СН3 и шарнирный район, а 1дЕ и 1дМ содержат СН1, СН2, СН3 и СН4. СН1 и Съ домены формируют РаЬ руку молекулы антитела, способствуя тем самым взаимодействию с антигеном и вращению рук антитела. Константный район антитела может выполнять эффекторные функции, включая, но не ограничиваясь, удалением антигенов, патогенов и токсинов, которые специфически связывает антитело, например, через взаимодействие с различными клетками, биомолекулами и тканями.
В настоящем документе функциональный район антитела представляет собой часть антитела, которая содержит, по меньшей мере, УН, Уь, СН (например, СН1, СН2 и СН3), Сь или шарнирный район антитела, или, по меньшей мере, его функциональный район.
В настоящем документе функциональный район домена УН представляет собой по меньшей мере часть полного домена УН, которая сохраняет по меньшей мере часть специфичности связывания полного домена УН (например, при сохранении одного или нескольких СОК полного домена УН), так что функциональный район домена УН либо самостоятельно, либо в комбинации с другими доменами антитела (например, Уъ доменом) или их фрагментами связывает антиген. Примеры функциональных районов доменов УН представляют собой районы, содержащие СОК1, СОК2 и/или СПК3 домена УН.
В настоящем документе функциональный район домена Уь представляет собой по меньшей мере часть полного домена Уь, которая сохраняет по меньшей мере часть специфичности связывания полного домена Уь (например, при сохранении одного или нескольких СОК полного домена Уь), так что функциональный район домена Уь либо самостоятельно, либо в комбинации с другими доменами антитела (например, УН доменом) или их фрагментами связывает антиген. Примеры функциональных районов доменов Уь представляют собой районы, содержащие СЭРЕ СЭК2 и/или СОК3 домена Уъ.
В настоящем документе специфическое связывание или иммуноспецифическое связывание в отношении антитела или его антигенсвязывающего фрагмента используются взаимозаменяемо и относятся к способности антитела или антигенсвязывающего фрагмента формировать одну или несколько нековалентных связей с распознаваемым антигеном за счет нековалентных взаимодействий между сайтом связывания антитела и антигена. Антиген может представлять собой выделенный антиген или может быть представлен в вирусе. Как правило, антитело, которое иммуноспецифически связывает (или специфически связывает) антиген вируса, или вирус представляет собой антитело, которое связывает антиген вируса (или антиген на вирусе или вирус) с константой аффинности Ка приблизительно 1 χ 107 М-1, или 1 χ 108 М-1, или выше (или константой диссоциации (Кй) 1 χ 10-7 М или 1 χ 10-8 М и менее). Константы аффинности могут быть определены с помощью стандартных кинетических тестов для антител, например, иммуноанализа, поверхностного плазмонного резонанса (ЗРК) (Шей и Мук/ка (2000) Сигг. Орш. ΒίοΚΟιποΙ 11:54; ЕпдкЫеппе (1998) Апа1ук1. 123:1599), изотермического калориметрического титрования (1ТС) и других известных кинетических анализов межмолекулярного взаимодействия (см., например, Раи1, РипйатепЫ ^тит^^у, 2пй ей., Кауеп Ргекк, Νον ΥοιΈ с. 332-336 (1989), см. также патент США № 7229619 для описания примеров применения методов ЗРК и 1ТС для определения аффинности антиРСВ антител). Оборудования и методы определения и отслеживания скоростей связывания в реальном времени известны и являются коммерчески доступными (например, Β^аСο^е 2000, Β^асο^е АВ, Ирка1а,
- 13 023179
8\ус6сп и ОЕ НеаИЬсаге ЫГе Заепсек; МаПшр'Ы (2000) ВюсЬет. Зос. Тгапк. 27:335). Антитело, которое иммуноспецифически связывает антиген вируса (или вирус), может связывать другие пептиды, полипептиды или белки или вирусы с равной или меньшей аффинностью. Как правило, антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу, которые иммуноспецифически связывают белок Р РСВ (или РСВ вирус), не связывают другие антигены или связывают такие антигены с существенно меньшей (по меньшей мере в 10-100 раз) аффинностью. Антитела и антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифически связывают определенные антигены вируса (например, белок Р РСВ), можно определить, например, иммунологически, например, с помощью радиоиммунного анализа (РИА), иммуноферментного анализа (ИФА), поверхностного плазмонного резонанса или других методов, которые известны специалистам в данной области. Антитела или антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифически связывают эпитоп белка Р РСВ, обычно связывают эпитоп (представленный в белке или вирусе) с большей аффинностью, чем любой перекрестно-реактивный эпитоп, как это определяется с помощью экспериментальных методов, включающих, но не ограничивающихся иммунохимическим анализом, поверхностным плазмонным резонансом или другими методами, известными специалистам в данной области. Иммуноспецифическое связывание выделенного белка РСВ (например, полученного рекомбинантно белка), такого как белок Р РСВ, не обязательно означает, что антитело будет так же иммуноспецифически связывать и/или нейтрализовать вирус. Подобные анализы и свойства различны. Может быть определена аффинность антитела или антигенсвязывающего фрагмента к вирусу или антигену, представленному в вирусе. В настоящем документе при описании аффинности или сходных понятий используется такая мишень, как выделенный белок или вирус.
Используемый в настоящем документе термин поверхностный плазмонный резонанс относится к оптическому явлению, которое позволяет анализировать взаимодействия в режиме реального времени путем выявления изменений концентрации белка на биосенсорной матрице, например, с помощью системы В1асоге (ОЕ НеаИЬсаге, ЫГе Зшепсек).
В настоящем документе поливалентное антитело представляет собой антитело, содержащее два или более антигенсвязывающих участков. Поливалентные антитела включают двухвалентные, трехвалентные, четырехвалентные, пятивалентные, шестивалентные, семивалентные или антитела большей валентности.
В настоящем документе моноспецифичное антитело представляет собой антитело, которое содержит два или более антигенсвязывающих участков, где каждый антигенсвязывающий участок иммуноспецифически связывает один и тот же эпитоп.
В настоящем документе мультиспецифичное антитело представляет собой антитело, которое содержит два или более антигенсвязывающих участков, где по меньшей мере два антигенсвязывающих участка иммуноспецифически связывают различные эпитопы.
В настоящем документе биспецифичное антитело представляет собой мультиспецифичное антитело, которое содержит два или более антигенсвязывающих участков и может иммуноспецифически связывать два различных эпитопа. Триспецифичное антитело представляет собой мультиспецифичное антитело, которое содержит три или более антигенсвязывающих участков и может иммуноспецифически связывать три различных эпитопа, тетраспецифичное антитело представляет собой мультиспецифичное антитело, которое состоит из четырех или более антигенсвязывающих участков и может иммуноспецифически связывать четыре различных эпитопа, и так далее.
В настоящем документе гетеробивалентное антитело представляет собой биспецифичное антитело, которое включает два участка связывания антигена, где антигенсвязывающие сайты иммуноспецифически связывают различные эпитопы.
В настоящем документе гомобивалентное антитело представляет собой моноспецифическое антитело, которое включает два участка связывания антигена, где антигенсвязывающие сайты иммуноспецифически связывают один и тот же эпитоп. Гомобивалентные антитела включают, но не ограничиваются обычными полноразмерными антителами, искусственными или синтетическими полноразмерными антителами, любыми мультимерами двух одинаковых антигенсвязывающих фрагментов или мультимерами двух антигенсвязывающих фрагментов, содержащих тот же антигенсвязывающий домен.
В настоящем документе домен мультимеризации относится к последовательности аминокислот, которая способствует стабильному взаимодействию полипептидной молекулы с одной или несколькими дополнительными полипептидными молекулами, каждая из которых содержит комплементарный домен мультимеризации, который может представлять собой тот же или другой домен мультимеризации, формирующий стабильный мультимер с первым доменом. Как правило, полипептид присоединен к домену мультимеризации напрямую или не напрямую. Примеры доменов мультимеризации включают последовательности иммуноглобулинов или их части, лейциновые молнии, гидрофобные фрагменты, гидрофильные фрагменты и совместимые домены, отвечающие за белок-белковые взаимодействия. Домен мультимеризации, например, может представлять собой константный домен или район иммуноглобулина, такой как, например, домен Рс или из 1дО, включая 1дО1, 1дО2, 1дО3 или 1дО4 подтипов, 1дА, 1дЕ, 1§И и 1дМ и их модифицированных форм, или часть указанного домена.
В настоящем документе домен димеризации представляет собой домен мультимеризации, который
- 14 023179 способствует взаимодействию двух полипептидных последовательностей (таких как, например, цепи антитела). Домен димеризации включает, но не ограничивается, аминокислотными последовательностями, содержащими остаток цистеина, которые способствуют формированию дисульфидной связи между двумя полипептидными цепями, такими как полноразмерный шарнирный домен антитела или его часть, или одной или несколькими димеризующимися последовательностями, которые представляют собой известные последовательности аминокислот, способствующие взаимодействию между полипептидами (например, лейциновые молнии, ΟΟΝ4 молнии).
В настоящем документе Рс, или Рс район, или Рс домен относится к полипептиду, содержащему константный район тяжелой цепи антитела, за исключением первого домена константного района иммуноглобулина. Таким образом, Рс относится к последним двум доменам константного района иммуноглобулинов 1дА, Ι§Ό и 1дЕ или к последним трем доменам константного района иммуноглобулинов 1дЕ и 1§М. При желании район Рс может включать в себя гибкие шарнирные Ν-концевые районы указанных доменов или их части. Для 1дА и 1дМ Рс может включать 1-цепь. Например, домен Рс из 1дС содержит иммуноглобулиновые домены Су2 и Су3, и, по желанию, шарнирный район между Су1 и Су2 или его часть. Границы домена Рс могут варьировать, но обычно включают по меньшей мере часть шарнирного района. Кроме того, Рс также включает любые видовые или аллельные варианты, любые модифицированные формы, такие как любые варианты или модифицированные формы, которые характеризуются измененным связыванием с РсК. или измененными Рс-опосредованными эффектерными функциями.
В настоящем документе химерный Рс относится к химерному полипептиду, в котором один или более полипептидов связаны, напрямую или не напрямую, с доменом Рс или его производным. Как правило, химерный Рс сочетает в себе Рс домен иммуноглобулина с другим полипептидом, таким как, например, фрагмент анти-РСВ антитела. Производные полипептида Рс или модифицированные полипептиды Рс известны специалистам в данной области.
В настоящем документе домены переноса белков или ΡΤΌ представляет собой пептидные домены, которые могут быть конъюгированы с белком, таким как антитела по настоящему документу, для прикрепления к клетке-мишени и/или поглощения белков клеткой-мишенью.
В настоящем документе метка или эпитопная метка относится к последовательности аминокислот, как правило, добавляемой к Ν- или С-концу полипептида, такого как антитело по настоящему документу. Включение метки, слитой с последовательностью полипептида, может быть использовано для очистки и/или обнаружения полипептида. Как правило, метка или полипептидная метка относится к полипептиду, который включает достаточное количество остатков для формирования эпитопа для антитела, и может служить для обнаружения и очистки, но в то же время является достаточно коротким, чтобы не мешать активности химерного полипептида, с которым она связана. Полипептидная метка обычно является достаточно уникальной, чтобы антитело, которое ее специфически связывает, не проявляло существенного перекрестного связывания с эпитопами полипептида, к которому она присоединена. Подходящая полипептидная метка состоит, как правило, по меньшей мере из 5 или 6 аминокислотных остатков, обычно приблизительно из 8-50 аминокислотных остатков, как правило, из 9-30 остатков. Метки могут быть связаны с одним или несколькими химерными полипептидами в мультимеры, что позволяет обнаружение мультимеров или их выделение из образца или смеси. Такие метки хорошо известны и могут быть легко синтезированы и сконструированы. Примеры полипептидных меток включают метки, которые используют для аффинной очистки, и включают Ηίδ метки, полипептидную метку гемагглютинина (НА) гриппа и ее антитело 12СА5 (Р1е1Н и др. (1988) Мо1 Се11. ΒίοΙ. 5:2159-2165); с-тус метку и 8Р9, 3С7, 6Е10, С4, В7 и 9Е10 антитела к ней (см., например, Еуап и др. (1985) Мо1еси1аг апй Се11и1аг Вю1оду 5:3610-3616) и метку гликопротеина Ό вируса простого герпеса (0Ό) и ее антитела (РаЬоткку и др. (1990) Рто1еш Епдшеетшд 5:547-553 (1990)). Антитела для обнаружения связанных с эпитопной меткой антител, как правило, упоминаются в настоящем документе как вторичные антитела.
В настоящем документе полипептид относится к двум или более ковалентно соединенным аминокислотам. Термины полипептид и белок используются в настоящем документе взаимозаменяемо.
В настоящем документе пептид относится к полипептиду, который включает от 2 до приблизительно 40 аминокислот в длину.
В настоящем документе аминокислота представляет собой органическое соединение, содержащее аминогруппу и карбоксильную группу. Полипептид содержит две или более аминокислот. В настоящем документе аминокислоты, содержащиеся в антителах по настоящему документу, включают двадцать природных аминокислот (табл. 1), неприродные аминокислоты и аналоги аминокислот (например, аминокислоты, в которых α-углерод имеет боковую цепь). В настоящем документе аминокислоты, включенные в различные аминокислотные последовательности полипептидов в настоящем документе, определяются в соответствии с их известными трехбуквенными или однобуквенными аббревиатурами (см. табл. 1). Нуклеотиды, которые включены в различные молекулы нуклеиновых кислот, и их фрагменты обозначены стандартными однобуквенными обозначениями, используемыми обычно в уровне техники.
В настоящем документе аминокислотный остаток относится к аминокислоте, образующейся при химическом расщеплении (гидролизе) полипептида по пептидным связям. Аминокислотные остатки,
- 15 023179 описанные в настоящем документе, как правило, представляют собой Ь изомерные формы. Остатки в Ό изомерной форме могут быть заменены на любой Ь-аминокислотный остаток, пока сохраняются желаемые функциональные свойства полипептида. ΝΗ2 относится к свободной аминогруппе на аминоконце полипептида. СООН относится к свободной карбоксильной группе, присутствующей на карбоксильном конце полипептида. В соответствии со стандартной полипептидной номенклатурой, описанной в 1. ΒίοΙ. Сйет., 243:3557-59 (1968), принятой на 37 С.Р.К. § 1,821-1,822, сокращения аминокислотных остатков приведены в табл. 1.
Таблица 1. Таблица соответствия
обозначение аминокислота
однобуквенное трехбуквенное Тирозин
Р РЬе Глицин
М Ме! Фенилаланин
А А1а Метионин аланин
5 Зег Серин
I Пе Изолейцин
Ь Ьеи Лейцин
т ТЬг Треонин
V Уа1 Валин
Р Рго Пролин
к Ьуз Лизин
н ΗΪ5 Гистидин
Ω С1п Глутамин
Е С1и Глутаминовая кислота
Ζ О1х О1и и/или О1п
\ν Тгр Триптофан
К Аг§ Аргинин
о Азр Аспарагиновая кислота
N Азп Аспарагин
В Азх Азр и/или Азп
с Суз Цистеин
X Хаа Неизвестная или другая
Следует отметить, что все последовательности аминокислотных остатков, представленные в настоящем документе в виде формулы, ориентированы слева направо в обычном направлении от аминоконца к карбоксильному концу. Кроме того, термин аминокислотный остаток в широком смысле включает аминокислоты, перечисленные в табл. соответствия (табл. 1), модифицированные и необычные аминокислоты. Кроме того, тире в начале или в конце аминокислотной последовательности указывает на пептидную связь с дальнейшей последовательностью из одного или более аминокислотных остатков, с аминоконцевой группой, такой как ΝΗ2, или с карбоксильной группой, такой как СООН.
В пептид или белок могут в целом без изменения биологической активности полученной молекулы быть введены подходящие консервативные замены аминокислот, как это известно специалистам в данной области. Специалистам в уровне техники очевидно, что, как правило, одна аминокислотная замена в несущественном районе полипептида существенно не изменяет биологическую активность (см., например, ХУаЮоп и др., Мо1еси1аг Βίοίοβν οί 1йе Оепе, 41й Εάίΐίοη, 1987, Тйе Веп)атш/Ситтт§8 Рий., с. 224).
Такая замена может быть сделана в соответствии с табл. 2 следующим образом.
Таблица 2
Исходный остаток Консервативная замена
А1а (А) С1у; Зег
Агё (К.) Ьуз
Азп (Ν) Οίη; ΗΪ3
Суз(С) 8ег
С1п(О) Азп
О1и (Е) А$р
о!у (0) А1а; Рго
ΗΪ5 (Н) Азп; О1п
Пе (1) Ьеи; Уа1
Ьеи (Ь) Не; Уа1
Ьуз (К) Агц; О1п; <31и
Ме! (М) Ьеи; Туг; 11е
РКе (Р) МеГ; Ьеи; Туг
8ег(8) ТКг
ТЬгСТ) Зег
Тгр (Ю Тут
Туг (Υ) Тгр; РЬе
\'а1 (V) 11е; Ьеи
Другие замены также допустимы и могут быть определены эмпирически или в соответствии с другим известными консервативными или не консервативными заменами.
В настоящем документе природные аминокислоты относятся к 20 Ь-аминокислотам, которые встречаются в полипептидах.
Используемый здесь термин не природные аминокислоты относится к органическим соединениям, которые имеют структуру, похожую на природные аминокислоты, но структурно измененным, чтобы имитировать строение и реакционную способность природных аминокислот. Не природные аминокислоты, таким образом, включают, например, аминокислоты или аналоги аминокислот, отличные от 20 при- 16 023179 родных аминокислот. и включают. но не ограничиваются Ό-изостереомерами аминокислот. Примеры не природных аминокислот известны специалистам в данной области и включают. но не ограничиваются 2аминоадипиновой кислотой (АаО). 3-аминоадипиновой кислотой (ВааБ). β-аланином/З-аминопропионовой кислотой (Ва1а). 2-аминомасляной кислотой (АЬи). 4-аминомасляной кислотой/пиперидиновой кислотой (4АЬи). 6-аминокапроновой кислотой (Аср). 2-аминогептановой кислотой (АЬе). 2-аминоизобутановой кислотой (АЛ). 3-аминоизобутановой кислотой (ВаЛ). 2-аминопимелиновой кислотой (Арт). 2.4-диаминобутановой кислотой (ЭЬи). десмозином (Эек). 2.2'-диаминопимелиновой кислотой (Орт). 2.3-диаминопропионовой кислотой (Эрг). Ν-этилглицином (Е1О1у). Ν-этиласпаранином (ΕίΛκη). гидроксилизином (Ну1). аллогидроксилизином (АЬу1). 3-гидроксипролином (3Нур). 4-гидроксипролином (4Нур). изодесмозином (ЛБе). аллоизолейцином (АБе). Ν-метилглицином. саркозином (МеО1у). Ν-метилизолейцином (МеПе). 6-Ы-метиллизином (МеЬук). Ν-метилвалином (МеУа1). норвалином (Νν:·ι)„ норлейцином (ΝΙ-е) и орнитином (От).
В настоящем документе нативный полипептид или нативная нуклеиновая кислота относится к молекуле полипептида или молекуле нуклеиновой кислоты соответственно. которые встречаются в природе. Нативный полипептид или нуклеиновая кислота может представлять собой молекулу полипептида или нуклеиновой кислоты дикого типа. Нативная молекула полипептида или нуклеиновой кислоты может представлять собой преобладающую форму полипептида или ее аллельный или другой природный вариант. Варианты полипептидов и нуклеиновых кислот по настоящему документу могут иметь модификации по сравнению с нативным полипептидом и нуклеиновой кислотой.
В настоящем документе молекула полипептида или нуклеиновой кислоты дикого типа представляет собой форму. кодирующуюся геном или кодирующей последовательностью. кодируемой геном. Как правило. форма гена дикого типа. кодируемая таким образом молекула. не содержит мутации или другие модификации. которые изменяют ее функцию или структуру. Термин дикий тип также включает в себя формы с аллельными различиями. встречающимися в рамках одного вида и между видами. В настоящем документе преобладающая форма полипептида или нуклеиновой кислоты относится к форме. которая представляет собой основную форму. синтезирующуюся с гена. Преобладающая форма варьирует от источника к источнику. Например. различные клетки или типы ткани может продуцировать различные формы полипептидов. например. за счет альтернативного сплайсинга и/или альтернативного процессинга белка. В каждом типе клеток или тканей различные полипептиды могут представлять собой преобладающую форму.
В настоящем документе аллельный вариант или аллельные различия относятся к любой из двух или более альтернативных форм гена. занимающих тот же хромосомный локус. Аллельные различия естественно возникают в результате мутаций и могут привести к фенотипическому полиморфизму в популяциях. Генные мутации могут быть молчащими (без изменений в закодированном полипептиде) или могут кодировать полипептиды. имеющие измененные аминокислотные последовательности. Термин аллельный вариант также используется здесь для обозначения белка. кодируемого аллельными вариантами гена. Обычно образцовая форма гена кодирует полипептид дикого типа и/или преобладающую форму полипептида в популяции или у одного представителя вида. Как правило. аллельные варианты. которые включают варианты между видами и внутри видов. обладают по меньшей мере 80. 85. 90. 95% или большей идентичностью аминокислотной последовательности с формой дикого типа и/или преобладающей формой у того же вида. причем степень идентичности зависит от гена и от того. является сравнение межвидовым или внутривидовым. Как правило. внутривидовые аллельные варианты обладают. по меньшей мере. приблизительно 80. 85. 90 или 95% или большей идентичностью с формой дикого типа и/или преобладающей формой. включая 96. 97. 98. 99% или большей идентичностью с формой дикого типа и/или преобладающей формой полипептида. Упоминание аллельного варианта в настоящем документе обычно относится к различиям в белках между представителями одного и того же вида.
Используемый здесь термин аллель является взаимозаменяемым с термином аллельный вариант и относится к альтернативным формам генов или их частей. Аллели занимают одинаковый локус или позицию в гомологичных хромосомах. Когда субъект имеет два одинаковых аллеля гена. субъект называется гомозиготным субъектом по этому гену или аллелю. Когда субъект имеет два различных аллеля гена. субъект называется гетерозиготным по гену. Аллели конкретного гена могут отличаться друг от друга одним нуклеотидом или несколькими нуклеотидами и могут включать изменения. такие как замены. делеции и вставки нуклеотидов. Аллель гена также может быть одной из форм гена. содержащей мутацию.
В настоящем документе видовой вариант относятся к вариантам полипептида среди различных видов. включая различные виды млекопитающих. такие как мышь и человек. и видов микроорганизмов. таких как вирусы и бактерии.
В настоящем документе домен полипептида представляет собой часть полипептида (последовательность из трех или более. как правило. 5. 10 или более аминокислот). которая является структурно и/или функционально различимой или отделимой. Пример полипептидного домена представляет собой часть полипептида. которая может самостоятельно формировать пространственную структуру в полипептиде. состоящую из одного или нескольких структурных мотивов (например. комбинации альфа- 17 023179 спиралей и/или бета-цепей, связанных петлевыми фрагментами), и/или которая проявляет частичную функциональную активность, такую как ферментативная активность, способность к димеризации или связывание антигена. Полипептид может иметь один или несколько, как правило, больше одного различных доменов. Например, полипептид может иметь один или несколько структурных доменов и один или несколько функциональных доменов. Полипептидный домен может быть выделен на основе структуры и функции. Домен может включать непрерывные линейные последовательности аминокислот. Кроме того, домен может включать множество не следующих непрерывно друг за другом частей последовательности аминокислот, которые не соседствуют в линейной последовательности аминокислот полипептида. Как правило, полипептид содержит множество доменов. Например, каждая тяжелая цепь и легкая цепь каждой молекулы антитела содержит множество иммуноглобулиновых (1д) доменов, каждый из которых включает приблизительно 110 аминокислот в длину.
Специалистам в данной области очевидно понятие полипептидного домена, и домены могут быть определены в силу их структурной и/или функциональной гомологии с другими такими доменами. Определения в настоящем документе даны в иллюстративных целях, но подразумевается, что специалист в данной области может определить конкретные домены. При необходимости для определения доменов может быть использовано соответствующее программное обеспечение.
В настоящем документе функциональный район полипептида представляет собой район полипептида, который содержит по меньшей мере один функциональный домен (который осуществляет ту или иную функцию, такую как способность взаимодействовать с биомолекулами, например связывать антиген, связывать ДНК, связывать лиганд, димеризоваться, или проявляет ферментативную активность, например киназную или протеолитическую активность), примеры функциональных районов полипептидов представляют собой домены антител, такие как νΗ, ν^ ΟΗ, Сь, и их части, например, СЭР, включая СЭРЕ СЭР2 и СЭР3, или антигенсвязывающие фрагменты, такие как районы связывания антител.
В настоящем документе структурный район полипептида представляет собой район полипептида, который содержит хотя бы один структурный домен.
В настоящем документе район полинуклеотида представляет собой часть полинуклеотида, содержащую два или более, как правило, по меньшей мере шесть или более, как правило, десять или более смежных нуклеотидов, например, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50 или более нуклеотидов полинуклеотида, но не обязательно все нуклеотиды, которые составляют полинуклеотид.
В настоящем документе свойство полипептида, такого как антитело, относится к любому свойству, проявляемому полипептидом, включая, но не ограничиваясь специфичностью связывания, структурной конфигурацией или конформацией белка, стабильностью, устойчивостью к протеолизу, конформационной стабильностью, тепловой стабильностью и рН стабильностью. Изменения свойств могут изменить активность полипептида. Например, изменения специфичности связывания антитела может изменить способность к связыванию антигена, и/или различных свойств связывания, таких как аффинность или авидность, либо активности полипептида ίη νίνο.
В настоящем документе активность или функциональная активность полипептида, такого как антитело, относится к любой активности, проявляемой полипептидом. Такая активность может быть определена эмпирически. Примеры активности включают, но не ограничиваются способностью взаимодействовать с биомолекулами, например, связывать антиген, связывать ДНК, связывать лиганд, димеризоваться, или ферментативной активностью, например киназной или протеолитической активностью. Для антител (включая фрагменты антител) активность включает, но не ограничивается возможностью специфически связывать определенный антиген, аффинностью связывания антигена (например, высокой или низкой аффинностью), авидностью связывания антигена (например, высокой или низкой авидностью), скоростью присоединения, скоростью диссоциации, эффекторными функциями, такими как способность содействовать нейтрализации антигена или клиренсу, нейтрализации вируса и активностью ίη νίνο, такой как способность предотвращать инфекцию или инвазию патогена, либо содействовать клиренсу, либо проникать в определенную ткань, или жидкость, или клетки в организме. Активность можно оценить ίη νίίτο или ίη νίνο с применением известных анализов, таких как ИФА, проточная цитометрия, поверхностный плазмонный резонанс, или эквивалентных анализов для измерения скорости связывания или скорости диссоциации, иммуногистохимии и иммунофлуоресцентной гистологии и микроскопии, клеточных анализов, проточной цитометрии и анализов связывания (например, пэннинга - связывания анализируемых антител с сорбентом или подложкой с иммобилизованным лигандом). Например, для антител активность может быть оценена путем измерения аффинности, авидности и/или коэффициентов связывания (например, скоростей связывания/диссоциации), и других параметров ίη νίίτο или путем измерения различных эффектов ίη νίνο, таких как иммунные эффекты, например, клиренс антигена, проникновение или локализация антител в тканях, защиты от заболевания, например, инфекции, титр антител в сыворотке или других жидкостях или другие анализы, которые хорошо известны в данной области. Результаты указанных тестов, которые показывают, что полипептид проявляет активность, могут коррелировать с активностью полипептида ίη νίνο, где активность ίη νίνο может быть отнесена к терапевтической активности или биологической активности. Активность модифицированного полипептида может составлять
- 18 023179 любую величину относительно активности не модифицированного полипептида, включая, но не ограничиваясь, 1% активности, 2, 3, 4, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 200, 300, 400, 500% или большей активностью по сравнению с не модифицированным полипептидом. Тесты для определения функциональности или активности модифицированных антител (например, вариантов по изобретению) хорошо известны в уровне техники.
Используемый в настоящем документе термин терапевтическая активность относится к активности терапевтического полипептида ίη νίνο. Как правило, терапевтическая активность представляет собой активность, которая используется для лечения заболевания или патологических состояний. Терапевтическая активность модифицированного полипептида может составлять любую величину относительно терапевтической активности не модифицированного полипептида, включая, но не ограничиваясь, 1% активности, 2, 3, 4, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 200, 300, 400, 500% или большей терапевтической активностью по сравнению с не модифицированным полипептидом.
В настоящем документе фраза проявляет по меньшей мере один вид активности или сохраняет по меньшей мере один вид активности относится к активности, проявляемой модифицированным полипептидом, таким как вариант полипептида, полученный в соответствии с предусмотренными способами, такой как модифицированное антитело, например вариант антитела, или другой терапевтический полипептид (например, модифицированное анти-РСВ антитело или его антигенсвязывающий фрагмент), по сравнению с целевым или не модифицированным полипептидом, который не содержит модификаций. Модифицированный полипептид или вариант полипептида, который сохраняет активность целевого полипептида, может обладать улучшенной активностью или сохранять активность не модифицированного полипептида. В некоторых случаях модифицированный полипептид или вариант полипептида может проявлять увеличенную активность по сравнению с целевым или не модифицированным полипептидом. В некоторых случаях модифицированный полипептид или вариант полипептида может проявлять активность, уменьшенную по сравнению с не модифицированным или целевым полипептидом. Активность модифицированного полипептида или варианта полипептида может составлять любую величину относительно активности не модифицированного или целевого полипептида, включая, но не ограничиваясь, 1% активности, 2, 3, 4, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 200, 300, 400, 500% или большей активностью по сравнению с не модифицированным или целевым полипептидом. В других вариантах изменение активности может составлять по меньшей мере приблизительно 2 раза, 3 раза, 4 раза, 5 раз, 6 раз, 7 раз, 8 раз, 9 раз, 10 раз, 20 раз, 30 раз, 40 раз, 50 раз, 60 раз, 70 раз, 80 раз, 90 раз, 100 раз, 200 раз, 300 раз, 400 раз, 500 раз, 600 раз, 700 раз, 800 раз, 900 раз, 1000 раз или более по сравнению с не модифицированным или целевым полипептидом. Анализы для определения сохраняемой активности зависят от активности, которую необходимо определить. Такие анализы могут быть проведены ίη νίίτο или ίη νίνο. Активность может быть измерена, например, с помощью известных и описанных в приведенных ниже примерах анализов активности, включая, но не ограничиваясь, ИФА и пэннингом. Активность модифицированного полипептида или варианта полипептида по сравнению с не модифицированным или целевым полипептидом также может быть оценена как терапевтическая или биологическая активность ίη νίνο или как результат после введения полипептида.
Используемый в настоящем документе термин оценка относятся к качественному и количественному определению абсолютного значения активности полипептида или его домена, присутствующего в образце, а также к получению индекса, коэффициента, процента, визуального показателя или другого показателя уровня активности. Оценка может быть прямой или косвенной, например, обнаружение расщепления субстрата может осуществляться не прямым измерением продукта, а косвенным путем, например, через определение его производных или других веществ. Например, обнаружение продукта расщепления белка системы комплемента может быть проведено с помощью δΌδ-РАОЕ и окрашивания белков Кумасси синим.
Используемый в настоящем документе термин нуклеиновая кислота означает по меньшей мере два связанных нуклеотида или производных нуклеотидов, соединенных вместе, как правило, фосфодиэфирной связью, включая дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) и рибонуклеиновую кислоту (РНК). Кроме того, в понятие нуклеиновая кислота включены аналоги нуклеиновых кислот, такие как пептидные нуклеиновые кислоты (ПНК), фосфоротиоатная ДНК и другие подобные аналоги и производные или их комбинации. Нуклеиновые кислоты также включают ДНК и РНК, содержащие производные, например, аналоги нуклеотидов, или отличные от фосфодиэфирной связи в скелете молекулы, например, фосфотриэфирные связи, фосфоамидатные связи, фосфоротиоатные связи, тиоэфирные связи или пептидные связи (в пептидных нуклеиновых кислотах). Этот термин также включает в себя эквиваленты, производные, варианты и аналоги молекул РНК или ДНК из аналогов нуклеотидов, одноцепочечные (смысловые или антисмысловые) и двухцепочечные нуклеиновые кислоты. Дезоксирибонуклеотиды включают дезоксиаденозин, дезоксицитидин, дезоксигуанозин и дезокситимидин. Для РНК урациловое основание представляет собой уридин.
Нуклеиновые кислоты могут содержать аналоги нуклеотидов, включая, например, нуклеотиды с измененной массой, которые позволяют дифференцировать молекулы нуклеиновых кислот по массе, нуклеотиды, содержащие обнаруживаемые метки, такие как люминесцентные, радиоактивные, люминес- 19 023179 центные или хемилюминесцентные метки, которые позволяют определять молекулы нуклеиновых кислот, или нуклеотиды, содержащие реактивные группы, такие как биотин или тиоловые группы, что способствует иммобилизации молекул нуклеиновой кислоты на твердом носителе. Нуклеиновые кислоты также могут содержать одну или несколько связей в скелете, которые являются селективно расщепляемыми, например, химически, ферментативно или фотолитически расщепляемыми. Так, например, нуклеиновые кислоты могут включать один или несколько дезоксирибонуклеотидов, а затем один или несколько рибонуклеотидов, за которыми могут следовать один или более дезоксирибонуклеотидов, такая последовательность является расщепляемой по рибонуклеотидной последовательности при щелочном гидролизе. Нуклеиновые кислоты также могут содержать одну или несколько связей, которые относительно устойчивы к расщеплению, например, химерный олигонуклеотидный праймер может включать нуклеотиды, связанные пептидными связями, и по меньшей мере один нуклеотид на 3'-конце, связанный фосфодиэфирной или другой подходящей связью, который может быть использован для элонгации полимеразой. Последовательности пептидных нуклеиновых кислот могут быть получены известными методами (см., например, Уейег и др. (1997), Ыис1е1с Аабк Кек. 25:2792-2799).
Используемый в настоящем документе термин полинуклеотид и молекула нуклеиновой кислоты относится к олигомеру или полимеру, содержащему по меньшей мере два связанных нуклеотида или производных нуклеотидов, соединенных вместе, как правило, фосфодиэфирной связью, включая дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) и рибонуклеиновую кислоту (РНК). Полинуклеотиды также включают ДНК и РНК, содержащие производные, например аналоги нуклеотидов, или отличные от фосфодиэфирной связи в скелете молекулы, например фосфотриэфирные связи, фосфоамидатные связи, фосфоротиоатные связи, тиоэфирные связи или пептидные связи (в пептидных нуклеиновых кислотах). Полинуклеотиды (молекулы нуклеиновых кислот) включают одноцепочечные и/или двухцепочечные полинуклеотиды, такие как дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК) и рибонуклеиновая кислота (РНК), а также аналоги или производные РНК или ДНК. Этот термин также включает в себя эквиваленты, производные, варианты и аналоги молекул РНК или ДНК из аналогов нуклеотидов, одноцепочечные (смысловые или антисмысловые) и двухцепочечные нуклеиновые кислоты. Дезоксирибонуклеотиды включают дезоксиаденозин, дезоксицитидин, дезоксигуанозин и дезокситимидин. Для РНК урациловое основание представляет собой уридин. Полинуклеотиды могут содержать аналоги нуклеотидов, включая, например, нуклеотиды с измененной массой, которые позволяют дифференцировать полинуклеотиды по массе, нуклеотиды, содержащие обнаруживаемые метки, такие как люминесцентные, радиоактивные, люминесцентные или хемилюминесцентные метки, которые позволяют определять полинуклеотиды, или нуклеотиды, содержащие реактивные группы, такие как биотин или тиоловые группы, что способствует иммобилизации полинуклеотидов на твердом носителе. Полинуклеотиды также могут содержать одну или несколько связей в скелете, которые являются селективно расщепляемыми, например, химически, ферментативно или фотолитически расщепляемыми. Так, например, полинуклеотиды могут включать один или несколько дезоксирибонуклеотидов, а затем один или несколько рибонуклеотидов, за которыми могут следовать один или более дезоксирибонуклеотидов, такая последовательность является расщепляемой по рибонуклеотидной последовательности при щелочном гидролизе. Полинуклеотиды также могут содержать одну или несколько связей, которые относительно устойчивы к расщеплению, например, химерный олигонуклеотидный праймер может включать нуклеотиды, связанные пептидными связями, и по меньшей мере один нуклеотид на 3'-конце, связанный фосфодиэфирной или другой подходящей связью, который может быть использован для элонгации полимеразой. Последовательности пептидных нуклеиновых кислот могут быть получены известными методами (см., например, УеПег и др. (1997), Ыис1ею Аабк Кек. 25:2792-2799). Примеры молекул нуклеиновых кислот (полинуклеотидов), предусмотренных в настоящем документе, представляют собой олигонуклеотиды, включая синтетические олигонуклеотиды, олигонуклеотидные дуплексы, праймеры, включая праймеры заполнения (ίΐ11-ίη рпшегк), и олигонуклеотидные дуплексные кассеты.
В настоящем документе ДНК конструкции представляет собой одноцепочечные или двуцепочечные, линейные или кольцевые молекулы ДНК, которые содержат сегменты ДНК, объединенные и составленные в порядке, не встречающемся в природе. Конструкции ДНК являются результатом человеческой манипуляции и включают в себя клоны и другие копии используемых молекул.
В настоящем документе сегмент ДНК представляет собой часть более длинной молекулы ДНК с заданными свойствами. Например, сегмент ДНК, кодирующий указанный полипептид, представляет собой часть более длинной молекулы ДНК, такой как плазмида или фрагмент плазмиды, который при чтении в направлении от 5' к 3' кодирует последовательность аминокислот указанного полипептида.
В настоящем документе полинуклеотидная плюс-цепь относится к смысловой цепи полинуклеотидного дуплекса, которая комплементарна минус-цепи или антисмысловой цепи. В случае полинуклеотидов, кодирующих гены, смысловая цепь представляет собой цепь, которая идентична цепи мРНК, которая транслируется в полипептид, а антисмысловая цепь комплементарна этой цепи. Плюс-цепь и минус-цепь дуплекса комплементарны.
В настоящем документе генетический элемент относится к гену или любому его району, которые кодируют полипептид, или белок, или его фрагмент. В некоторых примерах генетический элемент коди- 20 023179 рует белок слияния.
В настоящем документе регуляторный район молекулы нуклеиновой кислоты относится к цисдействующей нуклеотидной последовательности, которая влияет на экспрессию оперативно связанного гена, положительно или отрицательно. Регуляторные районы включают последовательности нуклеотидов, которые обеспечивают индуцибельную экспрессию гена (например, требующую вещества или стимула для увеличения транскрипции). Когда индуктор присутствует в среде или при повышении его концентрации в среде, может быть увеличена экспрессия гена. Регуляторные районы также включают последовательности, которые подавляют экспрессию генов (то есть вещество или стимул уменьшают транскрипцию). Когда репрессор присутствует в среде или при повышении его концентрации в среде, экспрессия гена может быть уменьшена. Регуляторные районы влияют, изменяют и контролируют многие биологические процессы ίη νίνο, включая пролиферацию клеток, клеточный рост и гибель, дифференцировку клеток и модуляцию иммунной системы. Регуляторные районы, как правило, связываются с одним или более транс-действующими белками, что приводит к увеличению или уменьшению транскрипции гена.
Конкретные примеры регуляторных районов генов включают промоторы и энхансеры. Промоторы представляют собой последовательности, расположенные вокруг места старта транскрипции или трансляции, как правило, к 5' концу от сайта начала трансляции. Промоторы обычно расположены в пределах 1 Кб от сайта начала трансляции, но могут быть расположены дальше, например, на расстоянии 2, 3, 4, 5 Кб и более, вплоть до 10 Кб. Энхансеры влияют на экспрессию генов, когда расположены к 5' и 3' концу от гена, находясь на расстоянии от гена или в экзоне или интроне. Энхансеры также могут функционировать, находясь на значительном расстоянии от гена, например, на расстоянии 3, 5, 7, 10, 15 Кб и более.
Регуляторные районы также включают, в дополнение к промоторам, последовательности, которые облегчают трансляцию, сигналы сплайсинга для интронов, обеспечивающие правильную рамку считывания гена для трансляции мРНК, стоп-кодоны, лидерные последовательности и последовательности слитого белка-партнера, внутренний сайт связывания рибосомы (1КЕ8) для создания мультигенного или полицистронного транскрипта, сигналы полиаденилирования, обеспечивающие надлежащее полиаденилирование транскрипта интересующего гена, и стоп-кодоны, и могут быть дополнительно включены в вектор экспрессии.
В настоящем документе термин функционально связанный, употребляемый в отношении последовательности нуклеиновой кислоты, районов, фрагментов или доменов, означает, что фрагменты нуклеиновой кислоты функционально связаны друг с другом. Например, нуклеиновая кислота, кодирующая лидерный пептид, может быть функционально связана с нуклеиновой кислотой, кодирующей полипептид, так что нуклеиновая кислота может быть транскрибирована и транслирована с образованием функционального белка слияния, в котором лидерный пептид вызывает секрецию полипептида слияния. В некоторых вариантах нуклеиновая кислота, кодирующая первый полипептид (например, лидерный пептид), функционально связана с нуклеиновой кислотой, кодирующей второй полипептид, и нуклеиновые кислоты транскрибируются как одна молекула мРНК, но трансляция мРНК может привести к одному из двух полипептидов. Например, нонсенс стоп-кодон может быть расположен между нуклеиновой кислотой, кодирующей первый полипептид, и нуклеиновой кислотой, кодирующей второй полипептид, так что при введении в частично супрессирующие нонсен стоп-кодоны клетки полученный транскрипт мРНК может быть транслирован с получением белка слияния, содержащим первый и второй полипептиды, или может быть транслирована с получением только первого полипептида. В другом примере промотор может быть функционально связан с нуклеиновой кислотой, кодирующей полипептид, в результате чего промотор регулирует или направляет транскрипцию нуклеиновой кислоты.
В настоящем документе термин синтетический, упомянутый в отношении, например, молекулы нуклеиновой кислоты, или гена, или пептида, относится к молекуле нуклеиновой кислоты или молекуле полипептида, которая получена рекомбинантными методами и/или методами химического синтеза.
В настоящем документе получение рекомбинантными методами с помощью методов рекомбинантной ДНК означает применение известных методов молекулярной биологии для экспрессии белков, кодируемых клонированной ДНК.
В настоящем документе экспрессия относится к процессу, при котором полипептиды получают транскрипцией и трансляцией полинуклеотидов. Уровень экспрессии полипептида можно оценить, используя любой метод, известный в уровне техники, включая, например, методы определения количества полипептида, получаемого в клетках-хозяевах. Такие методы включают, но не ограничиваются количественным определением полипептида в клеточном лизате с помощью ИФА, гель-электрофореза с последующим окрашиванием Кумасси синим, определением белка по методу Лоури и определением белка по методу Брэдфорд.
В настоящем документе клетка-хозяин представляет собой клетку, которая используется для получения, сохранения и амплификации вектора. Клетки-хозяева могут быть использованы для экспрессии полипептида, кодируемого вектором. Нуклеиновая кислота, содержащаяся в векторе, реплицируется при делении клетки-хозяина, тем самым амплифицируя нуклеиновую кислоту. В одном примере клеткахозяин представляет собой упаковку для гена, которая при индукции может экспрессировать вариант
- 21 023179 полипептида на ее поверхности. В другом примере клетка-хозяин заражена упаковкой для гена. Например, клетка-хозяин может представлять собой клетку-хозяина для фагового дисплея, которая может быть трансформирована фаговым или фагмидным вектором, и может быть использована для упаковки фага, экспрессирующего белки слияния, содержащие варианты полипептидов.
В настоящем документе вектор представляет собой реплицируемую нуклеиновую кислоту, с помощью которой при трансформации вектора в соответствующую клетку-хозяина могут быть экспрессированы один или более гетерологичных белков. Упоминание вектора включает в себя вектора, в которые может быть введена нуклеиновая кислота, кодирующая полипептид или его фрагмент, как правило, с помощью рестриктного расщепления и лигирования. Упоминание вектора также включает вектора, которые содержат нуклеиновую кислоту, кодирующую полипептид. Вектор используется для введения нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид, в клетку-хозяина для амплификации нуклеиновой кислоты или экспрессии/дисплея полипептида, кодируемого нуклеиновой кислотой. Векторы обычно остаются в эписомном состоянии, но могут быть предназначены для интеграции гена или его части в хромосому генома. Также предусмотрены векторы, которые представляют собой искусственные хромосомы, такие как искусственные хромосомы дрожжей и искусственные хромосомы млекопитающих. Выбор и применение таких носителей хорошо известны специалистам в данной области.
В настоящем документе вектор включает также вирусный вектор. Вирусные векторы представляют собой искусственные вирусы, которые оперативно связаны с экзогенными генами для переноса (как носители или челноки) экзогенных генов в клетки.
В настоящем документе вектор экспрессии включает вектора, способные экспрессировать ДНК, которая оперативно связана с регуляторными последовательностями, например, промоторным районом, которые способны осуществлять экспрессию таких фрагментов ДНК. Дополнительные последовательности могут включать промотор и терминатор и, по желанию, могут включать один или несколько ориджинов репликации, один или нескольких селективных маркеров, энхансер, сигнал полиаденилирования и тому подобное. Вектора экспрессии обычно являются производными плазмиды или вирусной ДНК или могут содержать элементы того и другого. Таким образом, вектор экспрессии относится к рекомбинантной ДНК или РНК конструкции, такой как плазмида, фаг, рекомбинантный вирус или другой вектор, которая при введении в соответствующую клетку-хозяина приводит к экспрессии клонированной ДНК. Соответствующие вектора экспрессии хорошо известны специалистам в данной области и включают вектора, которые реплицируются в эукариотических клетках и/или прокариотических клетках, вектора, которые остаются в эписомном состоянии, и вектора, которые интегрируются в геном клетки-хозяина.
Олигонуклеотиды представляют собой полинуклеотиды, которые содержат ограниченное число нуклеотидов в длину. Специалисту в данной области очевидно, что длина олигонуклеотида составляет, как правило, менее чем приблизительно двести пятьдесят, как правило, менее чем приблизительно двести, как правило, менее чем приблизительно сто нуклеотидов. Как правило, предусмотренные в настоящем документе олигонуклеотиды представляют собой синтетические олигонуклеотиды. Синтетические олигонуклеотиды содержат менее чем приблизительно 250 или 200 нуклеотидов в длину, например, менее 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190 или 200 нуклеотидов в длину. Как правило, олигонуклеотиды представляют собой одноцепочечные олигонуклеотид. Окончание -мер может быть использовано для обозначения длины олигонуклеотида. Например, понятие 100-мер может быть использовано для обозначения олигонуклеотида, содержащего 100 нуклеотидов в длину. Примеры синтетических олигонуклеотидов, предусмотренных в настоящем документе, включают цепи олигонуклеотидов, кодирующие часть плюс-цепи и минус-цепи, рандомизированные олигонуклеотиды, олигонуклеотиды сравнения, матричные олигонуклеотиды и праймеры заполнения.
В настоящем документе синтетические олигонуклеотиды представляют собой олигонуклеотиды, полученные путем химического синтеза. Химические способы синтеза олигонуклеотидов хорошо известны. Для получения олигонуклеотидов, разработанных и использованных в предусмотренных методах, могут быть использованы любые из известных методов синтеза. Например, синтетические олигонуклеотиды обычно получают химическим присоединением одиночных нуклеотидных мономеров или нуклеотидных триммеров, содержащих защитные группы. Как правило, в реакцию вводят по одному фосфорамидиту нуклеотида, содержащему защитные группы. Синтез обычно начинают с 3'-конца олигонуклеотида. 3'-Концевой фосфорамидит прикреплен к твердой поддержке, и синтез проводят, присоединяя каждый следующий фосфорамидит к 5'-концу предыдущего. После каждой реакции присоединения с 5'-фосфатной группой самого последнего основания удаляют защитную группу, что позволяет присоединить следующий фосфорамидит. Автоматизированные синтезаторы, как правило, могут синтезировать олигонуклеотиды до приблизительно 150-200 нуклеотидов в длину. Как правило, для получения олигонуклеотидов, разработанных и использованных в предусмотренных методах, применяли стандартную цианоэтильную реакцию фосфорамидитов мономеров. Синтетические олигонуклеотиды, полученные указанным стандартным методом, можно приобрести в ίηήβΗϊΚά ΌΝΑ ТесЬпо1од1ек (ШТ) (СогаМ11е, ίΑ) или ТпЬшк Вю1есЪпо1од1ек (8ап О1едо, СΑ).
В настоящем документе праймер относится к молекуле нуклеиновой кислоты (что более типично, к популяции таких молекул с идентичными последовательностями), которая может выступать в качестве
- 22 023179 точки начала матричного синтеза нуклеиновых кислот при соответствующих условиях (например, в при наличии четырех разных нуклеозидтрифосфатов и полимеризующего агента, такого как ДНКполимераза, РНК-полимераза или обратная транскриптаза) в соответствующем буфере и при подходящей температуре. Следует иметь в виду, что определенные молекулы нуклеиновых кислот могут служить зондом и праймером. Праймер обладает 3' гидроксильной группой для удлинения. Праймер можно использовать в различных методах, включая, например, полимеразную цепную реакцию (ПЦР), КТ-ПЦР (ПЦР с обратной транскриптазой), ПЦР на РНК. ЛЦР, мультиплексную ПЦР, супрессионную ПЦР, ПЦР с захватом, ПЦР с экспрессией, 3' и 5' КАСЕ (быстрая амплификация концов кДНК), ПЦР ίη яйи, ПЦР с лигированием и другие способы амплификации.
Используемый в настоящем документе термин пары праймеров относится к набору праймеров, который включает 5' праймер (прямой), который гибридизуется с 5' концом амплифицируемой (например, методом ПЦР) последовательности, и 3' праймер (обратный), который гибридизуется с 3' концом амплифицируемой последовательности. Посколько праймер может относиться к популяции одинаковых молекул нуклеиновой кислоты, пара праймеров обычно представляет собой пару из двух популяций праймеров.
В настоящем документе термины один праймер и одна популяция праймеров являются синонимами и относятся к популяции молекул праймера, где все праймеры популяции имеют сходные последовательности, например к популяции праймеров, в которой последовательности праймеров по меньшей мере приблизительно на 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% идентичны. Праймеры из одной популяции (обладающие сходными последовательностями) выступают в качестве 5' (прямого) праймера (специфически гибридизуются с 5' концом амплифицируемой (например, с помощью ПЦР) последовательности), а также 3' (обратного) праймера (специфически гибридизуются с 3' концом амплифицируемой последовательность). Таким образом, один праймер может быть использован без других праймеров для затравления синтеза комплементарных нитей и амплификации нуклеиновой кислоты в полимеразной реакции амплификации.
В настоящем документе термин комплементарность, употребленный в отношении двух нуклеотидов, относится к способности двух нуклеотидов образовывать пару друг с другом при гибридизации двух молекул нуклеиновых кислот. Две молекулы нуклеиновых кислот, проявляющие комплементарность, называются комплементарными молекулами нуклеиновой кислоты, примером комплементарных молекул нуклеиновых кислот являются плюс-цепь и минус-цепь в полинуклеотидном дуплексе. В настоящем документе, если молекула нуклеиновой кислоты или ее фрагмент комплементарны другой молекуле нуклеиновой кислоты или ее фрагменту, то молекулы и фрагменты специфически гибридизуются друг с другом. Две комплементарные молекулы нуклеиновой кислоты могут быть описаны в терминах процентов комплементарности. Например, две молекулы нуклеиновой кислоты, по 100 нуклеотидов в длину каждая, которые специфически гибридизуются друг с другом, но содержат 5 не комплементарных оснований по отношению друг к другу, комплементарны на 95%. Для двух молекул нуклеиновых кислот гибридизация со 100% комплементарностью не обязательно требует, чтобы комплементарность имела место по всей длине обеих молекул. Например, молекула нуклеиновой кислоты, содержащая 20 нуклеотидов в длину, может специфически гибридизоваться с частью второй молекулы нуклеиновой кислоты из 20 непрерывно расположенных нуклеотидов, где вторая молекула содержит 500 нуклеотидов в длину. Если в пределах содержащей 20 нуклеотидов части молекулы отсутствуют не комплементарные нуклеотиды, молекула, содержащая 20 нуклеотидов, гибридизуется со 100% комплементарностью. Как правило, комплементарные молекулы нуклеиновой кислоты выравниваются с менее чем 25, 20, 15, 10, 5, 4, 3, 2 или 1% несоответствия между комплементарными нуклеотидами (другими словами, обладают по меньшей мере приблизительно 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% комплементарностью). В другом примере комплементарные молекулы нуклеиновой кислоты обладают приблизительно по меньшей мере 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% комплементарностью. В одном из примеров комплементарные молекулы нуклеиновой кислоты содержат менее 5, 4, 3, 2 или 1 не комплементарных нуклеотидов. В одном из примеров комплементарные нуклеотиды комплементарны на 100%. При необходимости процент комплементарности может быть указан. Как правило, две молекулы выбраны так, что они специфически гибридизуются в жестких условиях.
В настоящем документе комплементарная цепь молекулы нуклеиновой кислоты относится к последовательности нуклеотидов, например молекуле нуклеиновой кислоты, которая специфически гибридизуется с молекулой нуклеиновой кислоты, такой как вторая молекула нуклеиновой кислоты в полинуклеотидном дуплексе. Например, в полинуклеотидном дуплексе олигонуклеотид, комплементарный плюсцепи, представляет собой минус-цепь, которая специфически гибридизуется с плюс-цепью в дуплексе. В одном из примеров в предусмотренных в настоящем документе способах для синтеза комплементарных цепей нуклеотидов для получения дуплексов используют полимеразную реакцию, как правило, начинающуюся с гибридизации олигонуклеотидных праймеров с полинуклеотидом.
В настоящем документе термин специфически гибридизуется относится к отжигу молекулы нуклеиновой кислоты (например, олигонуклеотида или полинуклеотида) за счет спаривания комплементарных оснований на другую молекулу нуклеиновой кислоты. Специалистам в данной области известны
- 23 023179 параметры ίη νίίΓο и ίη νίνο, которые влияют на специфичность гибридизации, такие как длина и состав конкретной молекулы. Параметры, особенно значимые для гибридизации ίη νίίτο, также включают температуры отжига и отмывания, состав буфера и концентрации соли. Для специфической гибридизации двух молекул нуклеиновой кислоты не обязательно наличие 100% комплементарности указанных молекул. Например, две комплементарных молекулы нуклеиновых кислот с комплементарностью последовательностей, например, приблизительно по меньшей мере 99, 98, 97, 96, 95, 90, 85, 80, 75, 70, 65, 60, 55 или 50% могут специфически гибридизоваться друг с другом. Чтобы изменить процент комплементарности, необходимый для конкретной гибридизации двух молекул нуклеиновых кислот, параметры, используемые в гибридизации ίη νίίτο по настоящему документу, например компоненты буфера, время и температура, могут быть скорректированы по строгости. Специалист в данной области может легко скорректировать эти параметры для достижения специфической гибридизации молекулы нуклеиновой кислоты с целевой молекулой нуклеиновой кислоты, подходящей для конкретного применения.
В настоящем документе первичная последовательность относится к последовательности аминокислотных остатков в полипептиде или последовательности нуклеотидов в молекуле нуклеиновой кислоты.
В настоящем документе сходство между двумя белками или нуклеиновыми кислотами относится к близости аминокислотных последовательностей белков или нуклеотидных последовательностей нуклеиновых кислот. Сходство может быть основано на степени идентичности и/или гомологии последовательностей остатков и идентичности и/или гомологии остатков, содержащихся в последовательностях. Способы оценки степени сходства белков или нуклеиновых кислот известны специалистам в данной области. Например, в одном способе оценки сходства последовательностей две аминокислотные или нуклеотидные последовательности выравнивают таким образом, чтобы достичь максимального уровня идентичности между последовательностями. Идентичность относится к степени, в которой аминокислотные или нуклеотидные последовательности инвариантны. При выравнивании аминокислотных последовательностей и, в некоторой степени, последовательностей нуклеотидов также можно принять во внимание консервативные различия и/или частые замены аминокислот (или нуклеотидов). Консервативными различиями являются те, при которых сохраняются физико-химические свойства участвующих остатков. Выравнивание может быть глобальным (выравнивание сравниваемых последовательностей по всей длине последовательностей и по всем остаткам) или локальным (выравнивание частей последовательностей, которые включают только наиболее близкий район или районы).
В настоящем документе, если полипептид или молекула нуклеиновой кислоты или ее фрагмент обладает или характеризуется идентичностью или гомологией с другим полипептидом или молекулой нуклеиновой кислоты или ее фрагментом, то две молекулы и/или фрагмента обладают идентичностью последовательности, большей или равной приблизительно 40%, как правило, большей или равной по меньшей мере приблизительно 50% идентичностью последовательности, например, по меньшей мере приблизительно 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99 или 100% идентичностью последовательности; точный процент идентичности может быть указан, если это необходимо. Молекула нуклеиновой кислоты, или ее район, идентичные или гомологичные второй молекуле нуклеиновой кислоты или ее фрагменту, могут специфически гибридизоваться с молекулой нуклеиновой кислоты или фрагментом, которые на 100% комплементарны второй молекуле нуклеиновой кислоты или ее фрагменту. Альтернативно процент идентичности можно определять между двумя теоретическими нуклеотидными или аминокислотными последовательностями или между нуклеиновой кислотой или полипептидной молекулой и теоретической последовательностью.
Идентичность в настоящем документе имеет значение, принятое в данной области техники, и процент идентичности двух молекул нуклеиновых кислот или полипептидов, или их фрагментов может быть рассчитан на основе известных из литературы способов. Процент идентичности может быть определен для полной длины полипептида или полинуклеотида или для районов молекул (см., например, Сοтриίаί^οηа1 Μο^Φατ Βίοίοβν, Ьекк, А.М., изд, Ох&гй Ишуегейу Рге88, №\ν ΥοιΊ<. 1988; В^^трий^: 1п&гтайс8 апй Сегюте Рго.)ес18, Зтйй, Ό.^., изд, Асайепис Рге88, №\ν ΥοιΊν 1993; Сοтриίе^ Апа1у818 οί Зедиепсе Оа1а, часть I, ΟτίΓίϊη, А.М., апй ΟτίΓίϊη, н.С., изд., нитапа Рге88, Ыете 1ег8еу, 1994; Зедиепсе Апа1у818 ш ΜοΚαιΡίΓ Βίοίο^ν, νοη неш)е, С., Асайетю Рге88, 1987; и Зедиепсе Апа1у818 Рйтег, Οτώδ^ν, М. апй □еуегеих, ί., изд., М ЗЮскЮп Рге88, №\ν ΥοιΊν 1991). Хотя существует множество способов определения идентичности двух полинуклеотидов или полипептидов, термин идентичность хорошо известен квалифицированному специалисту (Ο-ιπΠο, н. & ЫрЮп, Ό., ЗИМ ί Аррйей МаШ 48:1073 (1988)).
Идентичность последовательности при сравнении двух полинуклеотидов или полипептидов по всей длине означает процент одинаковых нуклеотидов или аминокислотных остатков по всей длине молекулы. Например, если полипептид А имеет 100 аминокислот в длину, а полипептид В имеет 95 аминокислот, которые являются идентичными аминокислотами 1-95 полипептида А, то полипептид В обладает 95% идентичностью при сравнении идентичности последовательности полипептида А по всей длине с последовательностью полипептида В по всей длине. Альтернативно, идентичность последовательностей полипептида А и полипептида В можно сравнить по фрагменту, такому как фрагмент из 20 аминокислот каждого полипептида. В этом случае, если полипептиды А и В имеют 20 идентичных аминокислот в рас- 24 023179 сматриваемом фрагменте, идентичность последовательности для фрагментов составляет 100%. Альтернативно, идентичность последовательности можно определять по длине молекулы по сравнению с районом другой молекулы. Альтернативно, идентичность последовательностей полипептида А и полипептида В можно сравнивать по фрагментам одинаковой длины, но с учетом наличия консервативных аминокислотных замен или неконсервативных аминокислотных замен. Как будет показано ниже и как известно специалистам в данной области, доступно множество различных программ и методов оценки идентичности. Высокий уровень идентичности, такой как 90 или 95%, легко может быть определен без программного обеспечения.
Обладают ли любые две молекулы нуклеотидными последовательностями или аминокислотными последовательностями, которые по меньшей мере на 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% идентичны или гомологичны, может быть определено с помощью известных алгоритмов, таких как программа РА8ТА. с использованием, например, параметров по умолчанию, как описано Реагзоп и др. (1988) Ргос. №Ш. Асаб. 8с1. И8А 85:2444 (другие программы включают пакет программ ОСО (Эеуегеих. 1. и др., Ыис1ею Аабз КезеагсЬ 12(1): 387 (1984)). ВЬА8ТР. ВЬА8ТЫ, РА8ТА (А1зс1ш1 8.Р. и др.. 1. Мо1ес. ΒίοΙ. 215:403 (1990); Ошбе 1о НидеСотрФегз. МагДп 1. В1зЬор. изд.. Асабетю Ргезз, 8ап Э1едо (1994). и СагШо и др. 81АМ ί Аррйеб МаШ 48:1073). Например, функция ВЬА8Т базы данных Национального центра биотехнологической информации может быть использована для определения идентичности. Другие коммерчески доступные или общедоступные программы включают программу ОУА81аг МедАйдп (Маб1зоп. Висконсин) и программу Оар генетической компьютерной группой университета Висконсина ипАегзйу оГ У1зсопзш Оепейсз СошрФег Огоир (ИУО) (Маб1зоп. Висконсин). Процент гомологии или идентичности белков и/или молекул нуклеиновых кислот может быть определен, например, путем сравнения информации о последовательностях с использованием программы ОАР (см.. например, №еб1ешап и др.. 1. Мо1. Вю1. 48:443 (1970). с изменениями, внесенными 8тйй и \Уа1егтап (Абν. Арр1. МаШ. 2:482 (1981)). Программа ОАР определяет сходство как число выровненных символов (т.е. нуклеотидов или аминокислот), которые являются одинаковыми, деленное на общее число символов в более короткой из двух последовательностей. Параметры по умолчанию для программы ОАР могут включать: (1) унарную матрицу сравнения (содержащую значение 1 для совпадения и 0 для не совпадения) и взвешенную матрицу сравнения ОпЬзко\' и др.. Ыис1. Аабз Кез. 14: 6745 (1986). как описано 8сН\уаг1/ и ОауНоГГ. АИаз оГ Рго1еш 8ециепсе апб 81гис1иге. Ыайопа1 Вютебюа1 КезеагсЬ Роипбайоп. с. 353-358 (1979); (2) штраф в размере 3.0 для каждого разрыва в последовательности, дополнительный штраф 0.10 для каждого символа в каждом разрыве и (3) штраф не применяется для разрывов в концах последовательности.
В общем. для определения процента гомологии или идентичности последовательности выравнивают для достижения наибольшего сходства (см.. например, Сотри1айопа1 Мо1еси1аг Вю1оду. Ьезк. А.М.. изд.. ОхГогб ишуегзПу Ргезз, №\у Уогк. 1988; ВюсотриДпд: 1пГогтайсз апб Оепоте Рго)ес1з. 8тЪЬ. ЭЛУ.. изд.. Асабетю Ргезз, №\у Уогк. 1993; СотрФег Апа1уз1з оГ 8ециепсе Эа1а. Рай I. ОпГПп. А.М.. и ОпГПп. Н.О.. изд.. Нитапа Ргезз, №\у 1егзеу. 1994; 8ециепсе Апа1уз1з ш Мо1еси1аг Вю1оду. νοп Неиде. О.. Асабетю Ргезз, 1987; и 8ециепсе Апа1уз1з Рйтег. ОпЬзкоу. М. и Эеуегеих. ί.. изд.. М 8Юск1оп Ргезз. №\у Уогк. 1991; СагШо е1 а1. (1988) 81АМ ί Аррйеб МаШ 48: 1073). По отношению к гомологии последовательностей количество консервативных аминокислот определяют с помощью стандартных программ с алгоритмами выравнивания, использующих выбранные по умолчанию штрафы за разрыв в последовательности, установленные разработчиком. Существенно гомологичные молекулы нуклеиновых кислот обычно гибридизуются в умеренных условиях или в жестких условиях по всей длине интересующей молекулы нуклеиновой кислоты. Также предусмотрены молекулы нуклеиновых кислот. которые содержат вырожденные кодоны вместо кодона в гибридизуемой молекуле нуклеиновой кислоты.
Таким образом. используемый здесь термин идентичность, выраженный в виде числового значения, относится к сравнению двух полипептидов или полинуклеотидов, их районов и/или двух. теоретических последовательностей нуклеотидов или аминокислот. Используемый здесь термин по меньшей мере на 90% идентичны относится к идентичности последовательности от 90 до 99.99% по отношению к образцовой нуклеотидной последовательности или аминокислотной последовательности полипептида. Принимая для иллюстративных целей длину исследуемого и образцового полипептидов за 100 аминокислот. идентичность на уровне 90% и более свидетельствует о том. что не более чем 10% (т.е. 10 из 100) аминокислот в исследуемом полипептиде отличаются от образцового полипептида. Подобные сравнения можно провести между исследуемым и начальным полинуклеотидами. Такие различия могут быть представлены в виде точечных мутаций. случайно распределенных по всей длине аминокислотной последовательности, или различия могут быть сосредоточены в одном или нескольких местах различной длины вплоть до максимально допустимой, например, длины 10 различающихся аминокислот из 100 (около 90% идентичности). Различия определяются как замены. вставки и удаления в нуклеиновых кислотах и последовательностях аминокислот. При уровне гомологии или идентичности выше приблизительно 8590% результат не должен зависеть от программы и параметров штрафа за разрыв. такие высокие уровни идентичности могут быть легко оценены часто вручную без использования программного обеспечения.
В настоящем документе выравнивание последовательности относится к использованию гомологии (сходства и/или идентичности) для выравнивания соответствующих позиций в последовательности
- 25 023179 нуклеотидов или аминокислот. Как правило, две или более последовательности, которые связаны 50% и большей идентичностью, выравниваются. Выровненное множество последовательностей относится к 2 или более последовательностям, которые являются выровненными в соответствующих позициях, и может включать выравнивание последовательностей, полученных из РНК, таких как Е8Т и другие кДНК, с последовательностью геномной ДНК.
Близкие полипептиды или молекулы нуклеиновых кислот или варианты полипептидов или молекул нуклеиновых кислот могут быть выровнены любым способом, известным специалистам в данной области. Такие способы обычно позволяют выровнить последовательности с достижением максимального количества совпадений и включают выравнивание вручную и многочисленные доступные программы выравнивания (например, ВЬЛЗТР и другие программы, известные специалистам в данной области). Используя выровненные последовательности полипептидов и нуклеиновых кислот, специалист в данной области может идентифицировать аналогичные части или позиции, используя консервативные и идентичные аминокислотные остатки в качестве ориентиров. Кроме того, чтобы найти соответствующие аминокислотные или нуклеотидные остатки в последовательностях человеческого и не человеческого происхождения, специалист в данной области также может использовать консервативные аминокислотные или нуклеотидные остатки в качестве ориентиров. Соответствующие позиции также могут быть выявлены на основе структурного выравнивания, например, с помощью компьютерного моделирования и выравнивания структур белков. В других случаях могут быть идентифицированы соответствующие фрагменты. Чтобы найти соответствующие аминокислотные остатки в последовательностях человеческого и не человеческого происхождения, специалист в данной области может использовать консервативные аминокислотные остатки в качестве ориентиров.
В настоящем документе аналогичные и соответствующие части, позиции или районы представляют собой части, позиции или районы, которые выравнены друг с другом посредством выравнивания двух или более родственных полипептидов или нуклеиновых кислот (включая последовательности молекул, фрагментов молекулы и/или теоретических последовательностей), с достижением наибольшего совпадения, используя методы выравнивания, которые известны специалистам в данной области. Другими словами, две аналогичные позиции (или части, или района) выравниваются при наилучшем выравнивании двух или более последовательностей полипептидов или нуклеиновых кислот. Аналогичные части/позиции/районы определяются по положению в линейной нуклеиновой кислоте или аминокислотной последовательности, когда две или более последовательности выровнены. Аналогичные части могут не иметь схожие последовательности. Например, выравнивание (например, при достижении максимального количества совпадений) последовательностей двух гомологичных молекул нуклеиновых кислот, по 100 нуклеотидов в длину каждая, может выявить идентичность 70 из 100 нуклеотидов. Части этих молекул нуклеиновой кислоты, содержащие некоторые из неидентичных 30 аминокислот или все такие аминокислоты, являются аналогичными частями с не идентичными последовательностями. Альтернативно, аналогичные части или их фрагменты могут характеризоваться определенным процентом идентичности последовательностей друг с другом, например, приблизительно 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98, 99% идентичностью. В одном из примеров аналогичные частей на 100% идентичны.
В настоящем документе модификация рассматривается в контексте модификации последовательности аминокислот полипептида или последовательности нуклеотидов в молекуле нуклеиновой кислоты и включает удаления, вставки и замены аминокислот и нуклеотидов соответственно. Методы модификации полипептидов известны специалистам в данной области и включают, например, технологию рекомбинантной ДНК.
В настоящем документе удаление, когда речь идет о последовательности нуклеиновой кислоты или полипептида, относится к удалению одного или нескольких нуклеотидов или аминокислот по сравнению с другой последовательностью, такой как целевой полинуклеотид или полипептид, или нативный полинуклеотид или полипептид, или полинуклеотид или полипептид дикого типа.
В настоящем документе вставка, когда речь идет о последовательности нуклеиновой кислоты или полипептида, относится к включению одного или нескольких дополнительных нуклеотидов или аминокислот, в целевую, нативную или другую близкую последовательность, или в последовательность дикого типа. Таким образом, молекула нуклеиновой кислоты, которая содержит одну или несколько вставок по сравнению с последовательностью дикого типа, содержит один или несколько дополнительных нуклеотидов в линейной последовательности. В настоящем документе добавления в отношении последовательностей нуклеиновых кислот и аминокислот описывают добавления нуклеотидов или аминокислот на концы последовательностей.
В настоящем документе замещение относится к замене одного или нескольких нуклеотидов или аминокислот в нативной, целевой или другой последовательности нуклеиновой кислоты или полипептида на альтернативные нуклеотиды или аминокислоты без модификации длины (выраженной в числе остатков) молекулы. Таким образом, одна или несколько замен в молекуле не меняют количество аминокислотных остатков и нуклеотидов в молекуле. Замена в определенном полипептиде может быть описана с указанием номера аминокислотного остатка по длине полипептидной последовательности. Например, модифицированный полипептид с модификацией в 19-й позиции в аминокислотной последовательности,
- 26 023179 которая представляет собой замену изолейцина (11е, I) на цистеин (Сук; С), может быть описан как 119С, 11е19С или просто С19, чтобы показать, что аминокислота в модифицированном 19-м положении представляет собой цистеин. В этом примере молекула с заменой имеет модификацию в положении 11е-19 немодифицированного полипептида.
В настоящем документе свойство связывания представляет собой характеристику молекулы, например полипептида, касающуюся связывания одного или нескольких партнеров, его степени или его отсутствия. Свойства связывания включают способность связывать партнер (партнеры), аффинность, с которой происходит связывание партнеров (например, высокая аффинность), авидность, с которой происходит связывание партнеров, прочность связывания и специфичность связывания.
В настоящем документе аффинность описывает силу взаимодействия между двумя или более молекулами, такими как связывающиеся партнеры, как правило, силу нековалентного взаимодействия между двумя связывающимися партнерами. Аффинность антитела или его антигенсвязывающего фрагмента к эпитопу антигена представляет собой меру силы всех нековалентных взаимодействий между одним сайтом связывания антитела и эпитопом. Взаимодействие антиген-антитело с низкой аффинностью является слабым, и молекулы стремятся быстро диссоциировать, в то время как взаимодействие антиген-антитело с высокой аффинностью является сильным, и молекулы остаются связанными в течение более длительного периода времени. Методы расчета аффинности хорошо известны и включают, например, способ определения константы ассоциации/диссоциации. Аффинность может быть оценена эмпирически или может быть определена сравнительно, например, путем сравнения аффинности одного антитела и другого антитела к определенному антигену.
В настоящем документе авидность антитела относится к силе нескольких взаимодействий между поливалентным антителом и распознаваемым им антигеном, например, взаимодействий антитела, содержащего несколько сайтов связывания, с антигеном, содержащим повторяющиеся эпитопы, или матрицей эпитопов. Антитело с высокой авидностью характеризуется более высокой прочностью такого взаимодействия по сравнению с антителом с низкой авидностью.
В настоящем документе связывание относится к участию любой молекулы во взаимодействии с другой молекулой, приводящем к устойчивой ассоциации, при которой две молекулы находятся в непосредственной близости друг к другу. Связывание включает, но не ограничивается нековалентным связыванием, ковалентным связыванием (таким как обратимое и необратимое ковалентное связывание), и включает в себя взаимодействие между молекулами, такими как, например, белки, нуклеиновые кислоты, углеводы, липиды, низкомолекулярные соединения, такие как химические соединения, включая лекарства. Примеры связывания включают взаимодействия антиген-антитело и рецептор-лиганд. Когда антитело связывает конкретный антиген, связывание относится к специфическому распознаванию антигена антителом через специфические взаимодействия антиген-антитело в сайте связывания антитела. Связывание также может включать объединение нескольких цепей полипептида, таких как цепи антитела, которые взаимодействуют через дисульфидные связи.
В настоящем документе константа аффинности относится к константе ассоциации (Ка), используемой для измерения аффинности антител к антигену. Чем больше константа аффинности, тем больше аффинность антитела к антигену. Константу аффинности выражают в единицах, обратных молярности (например, М-1), указанная константа может быть рассчитана из константы скорости реакции ассоциации-диссоциации, измеренной по стандартной кинетической методике для антител (например, с помощью иммуноанализа, поверхностного плазмонного резонанса или других известных кинетических анализов взаимодействия).
Используемый в настоящем документе термин то же, употребляемый в отношении аффинности антител, означает, что константа ассоциации (Ка) антител отличается в пределах от 1 до 100 раз или от 1 до 10 раз (аффинность антитела в 1-100 раз больше или 1-100 раз меньше по сравнению с референсным антителом, или отличается в любое число раз в пределах указанных диапазонов).
В настоящем документе термин в значительной степени то же, употребляемый в отношении аффинности антител, означает, что константа ассоциации (Ка) антител отличается в пределах от 5 до 5000 раз в большую или меньшую сторону по сравнению с константой ассоциации Ка антитела сравнения (55000 раз больше или 5-5000 раз меньше по сравнению с антителом сравнения). Аффинность антитела также может быть выражена в форме константы диссоциации или Κά. Константа диссоциации обратна константе ассоциации, Κά = 1/Ка.
В настоящем документе фраза одинаковая специфичность связывания, используемая для описания свойств антитела по сравнению с другим антителом, означает, что антитело специфически связывает (иммуноспецифически связывает или специфически связывает с вирусом) тот же антигенный эпитоп, что и антитело сравнения, или его часть. Таким образом, анти-РСВ антитело или его антигенсвязывающий фрагмент с такой же специфичностью связывания, как и антитело, обозначаемое 58с5, специфически связывает тот же эпитоп, который связывает анти-РСВ антитело 58с5 или его антигенсвязывающий фрагмент, или часть указанного эпитопа. Эпитоп может находиться в выделенном белке или в белке вируса. Возможность двух антител связывать один эпитоп может быть определена с помощью известных в данной области анализов, таких как, например, поверхностный плазмонный резонанс и анализы на кон- 27 023179 куренцию антител. Как правило, антитела, которые иммуноспецифически связывают один эпитоп, могут конкурировать за связывание эпитопа, что можно измерить, например, ίη νίίτο с помощью анализа на конкуренцию связывания (например, ИФА на конкуренцию связывания), используя известные протоколы. Как правило, первое антитело, которое иммуноспецифически связывает тот же эпитоп, что и второе антитело, может конкурировать за связывание с эпитопом приблизительно на 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100%, где доля конкуренции измеряется по способности второго антитела вытеснять первое антитело со связанного эпитопа. Например, в анализе на конкуренцию связывания антиген инкубируют в присутствии меченого антитела с предварительно определенной методом предельных разведений концентрацией (например, 50-70% концентрации насыщения), а также серийных разведений немеченого конкурирующего антитела. Степень конкуренции определяют путем измерения связывания меченого антитела с антигеном при снижении связывания в присутствии конкурирующего антитела. Варианты проведения таких анализов, включая различные способы мечения и обнаружения, включая, например, радиометрическое, люминесцентное, ферментативное и колориметрическое обнаружение, известны в уровне техники. Возможность первого антитела связывать тот же эпитоп, что и второе антитело, также может быть определена, например, с помощью анализа нейтрализации вируса с применением устойчивых к моноклональным антителам мутантов (МАЕМ). Например, если первое анти-РСВ антитело нейтрализует РСВ дикого типа, но не определенный мутант РСВ, то второе антитело, которое также нейтрализует РСВ дикого типа, но не определенный мутант РСВ, обычно связывает тот же эпитоп на РСВ, что и первое антитело. Если первое анти-РСВ антитело нейтрализует РСВ дикого типа, но не определенный мутант РСВ, то второе антитело, которое нейтрализует РСВ дикого типа, а также определенный мутант РСВ, обычно не связывает тот же эпитоп на РСВ, который связывает первое антитело.
В настоящем документе устойчивый к моноклональному антителу мутант (МАЕМ), также называемый не подавляемый моноклональным антителом мутант, представляет собой мутант респираторно-синцитиального вируса (РСВ), который обладает повышенной устойчивостью к нейтрализации моноклональным антителом, которое нейтрализует вирус РСВ дикого типа. МАЕМ создаются путем культивирования РСВ дикого типа в присутствии моноклональных антител, при последовательных циклах репликации вируса в присутствии антител, где после каждого цикла репликации вируса необходимо повышать концентрацию антител для получения эффекта нейтрализации вируса. Цитопатический эффект (СРЕ) наблюдается в присутствии возрастающих концентраций антител до получения мутанта вируса, который уже эффективно не нейтрализуется антителами. Если для появления МАЕМ в присутствии первого антитела по сравнению со вторым антителом требуется больше раундов репликации, можно сделать вывод, что первое антитело связывает эпитоп, который отличается от эпитопа, который связывает второе антитело. Если первое антитело может нейтрализовать МАЕМ, устойчивый ко второму антителу, можно сделать вывод, что антитела специфически связывают и взаимодействуют с различными эпитопами. С помощью МАЕМ можно более точно определить антигенсвязывающие эпитопы антител по сравнению с конкуренцией связывания, например антитело может конкурировать за связывание с антигеном, но при этом может нейтрализовать МАЕМ своего конкурента.
В настоящем документе ЕС50 относится к эффективной концентрации, при которой антитела могут ингибировать вирусную инфекцию на 50% в тесте нейтрализации ίη νίίτο, таком как, например, анализ подавления бляшкообразования, описанный в настоящем документе (например, анализ подавления бляшкообразования с применением для заражения клеток-хозяев Уега или других клеток-хозяев) или другой известный анализ на нейтрализацию вируса. Как правило, нейтрализующее вирус антитело представляет собой антитело, которое в анализе нейтрализации ίη νίίτο, таком как анализ подавления бляшкообразования, имеет ЕС50 для ингибирования вируса 2 нМ или меньше.
В настоящем документе партнер связывания относится к молекуле (например, полипептиду, липиду, гликолипиду, молекуле нуклеиновой кислоты, углеводу и другим молекулам), с которой специфически взаимодействует другая молекула, например, посредством ковалентного или нековалентного взаимодействия, такого как взаимодействие антитела с распознаваемым антигеном. Партнер связывания может быть естественным или синтетическим. В одном из примеров желаемые варианты полипептидов выделяют с помощью одного или более партнеров связывания, например, используя ίη νίίτο или ίη νίνο методы. Примеры ίη νίίτο методов включают выделение с помощью партнера связывания, иммобилизованного на твердой поддержке, такой как бусины, планшеты, колонки, матрицы или другой твердый носитель, или партнера связывания, конъюгированного с другой обнаруживаемой молекулой, такой как молекула биотина, с последующим отбором за счет связывания обнаруживаемой молекулы с твердой подложкой. Как правило, ίη νίίτο методы включают стадии промывания для удаления несвязанных полипептидов с последующей элюцией выбранного варианта полипептида (полипептидов). Этот процесс может повторяться один или несколько раз для дополнительного отбора вариантов полипептидов из выбранных полипептидов.
В настоящем документе дисульфидная связь (также называемая δ-δ связь или дисульфидный мост) представляет собой одинарную ковалентную связь, образованную конъюгацией тиоловых групп. Дисульфидные связи в белках образуются между тиоловыми группами остатков цистеина и стабилизируют взаимодействия полипептидных доменов, таких как домены антитела.
- 28 023179
В настоящем документе конъюгированные или соединенные означает связывание через ковалентные или нековалентные взаимодействия.
Используемые в настоящем документе выражения конъюгированные с антителом или связанные с антителом, а также их грамматические модификации в контексте присоединения различных молекул к антителу или его антигенсвязывающему фрагменту, например, предназначенных для диагностики или терапии молекул, означают, что молекула присоединена к антителу или антигенсвязывающему фрагменту любым известным способом, например, при получении гибридного белка с помощью рекомбинантных методов или пост-трансляционно химическим путем. Для конъюгации можно использовать любой из множества сшивающих агентов, включая, но не ограничиваясь пептидными или непептидными линкерами и химическими сшивающими агентами.
В настоящем документе фаговый дисплей относится к экспрессии полипептидов на поверхности нитевидных бактериофагов.
В настоящем документе совместимые с фаговым дисплеем клетки или совместимые с фаговым дисплеем клетки-хозяева представляют собой клетки-хозяева, как правило, бактериальные клеткихозяева, которые могут быть заражены бактериофагом для получения бактериофагов, несущих белки слияния, содержащие полипептиды, например варианты полипептидов, такие клетки вследствие этого могут быть использованы для фагового дисплея. Примеры совместимых с фаговым дисплеем клеток включают, но не ограничиваются клетками ХЬ1-В1ие.
В настоящем документе пэннинг относится к основанной на аффинности процедуре отбора бактериофагов, несущих специфичные к партнеру связывания молекулы, например связываемые молекулы (например, антигены) или последовательности аминокислот или нуклеотидов, или эпитопы, их фрагменты, части или локусы.
В настоящем документе дисплейный белок или дисплейный белок генетического пакета означает любой полипептид генетического пакета, используемый для дисплея полипептида на генетическом пакете, такой, что при получении белка слияния дисплейного белка (например, получения гибридного белка) с интересующим полипептидом (например, полипептидом, для которого желательно снижение экспрессии), полипептид экспрессируется на внешней поверхности генетического пакета. Дисплейный белок обычно присутствует на поверхности или в составе внешней поверхности или внешнего компартмента генетического пакета (например, мембраны, клеточной стенки, оболочки или другой внешней поверхности или компартмента), например вирусного генетического пакета, например, фага, так что после слияния с интересующим полипептидом полипептид экспрессируется на генетическом пакете.
В настоящем документе белок оболочки представляет собой дисплейный белок, по меньшей мере часть которого находится на внешней поверхности генетического пакета, такой, так что после слияния с интересующим полипептидом полипептид экспрессируется на внешней поверхности генетического пакета. Как правило, белки оболочки представляют собой вирусные белки оболочки, такие как белки оболочки фага. Вирусные белки оболочки, такие как белки оболочки фага, связываются с вирусной частицей во время сборки в клетке-хозяине. В одном примере белки оболочки используются в настоящем документе для дисплея (представления) полипептидов на генетическом пакете; белки оболочки экспрессируются как часть слитых белков, которые содержат последовательность аминокислот белка оболочки и последовательность аминокислот представляемого полипептида. Белки оболочки могут представлять собой полноразмерные белки оболочки или любые их части, способные представлять полипептид на поверхности генетического пакета.
Пример белков оболочки включает белки оболочки бактериофагов, включая, но не ограничиваясь (I) минорными белками оболочки нитчатых бактериофагов, такими как белок III (дШр, ср3) и (II) основными белками оболочки нитчатых бактериофагов (которые присутствуют в оболочке вируса в количестве 10 молекул и более, например, десятков, сотен или тысяч копий), такими как белок VIII (дУШр, ср8); также могут быть получены белки слияния с другими белками оболочки бактериофагов, такими как белок VI, белок VII или белок IX (см., например, АО 00/71694), а также частями (например, доменами или их фрагментами) указанных белков, включая, но не ограничиваясь доменами, которые стабильно включены в частицу бактериофага, например, такими как якорный домен §Шр или дУШр. Кроме того, могут быть использованы мутанты дУШр, которые оптимизированы для экспрессии больших пептидов, такие как мутанты с улучшенными свойствами для дисплея, например, мутанты дУПр (см., например, 8ί61ιιι е! а1. (2000) I. Мо1. Вю1. 296:487-495).
Используемый здесь термин заболевание или расстройство относится к патологическим состояниям организма, которые возникли в результате факторов или состояний, включающих, но не ограничивающихся инфекцией, приобретенными состояниями, генетическими состояниями, и характеризуются идентифицируемыми симптомами. Заболевания и расстройства в настоящем документе включают РСВ инфекцию или заболевания и расстройства, которые увеличивают риск инфекции РСВ.
В настоящем документе инфекция и РСВ инфекция относится ко всем стадиям жизненного цикла РСВ в хозяине (включая, но не ограничиваясь инвазией и репликацией РСВ в клетке или ткани организма), а также патологическому состоянию, являющемуся результатом инвазии и репликации РСВ. Инвазия и размножение РСВ включает, но не ограничивается следующими стадиями: докингом частицы
- 29 023179
РСВ на поверхности клетки, слиянием вируса с клеточной мембраной, введением вирусной генетической информации в клетку, экспрессией белков РСВ, образованием новых частиц РСВ и освобождением частиц РСВ из клетки. Инфекция РСВ может представлять собой инфекцию РСВ верхних дыхательных путей (υΚΙ), инфекцию РСВ нижних дыхательных путей (ЬР1) или их комбинацию. В некоторых примерах патологическое состояние, являющееся результатом инвазии и репликации РСВ, представляет собой острое заболевание РСВ.
В настоящем документе острое заболевание РСВ относится к клинически проявляемому заболеванию легких или нижних дыхательных путей в результате инфекции РСВ, которое может проявляться в виде пневмонии и/или бронхиолита, при этом симптомы могут включать, например, гипоксию, одышку, дыхательную недостаточность, учащенное дыхание, хрипы, цианоз. Острое заболевание РСВ требует получение медицинской помощи, такой как госпитализация, введение кислорода, интубация и/или легочная вентиляция.
В настоящем документе лечение субъекта с заболеванием или состоянием означает, что симптомы субъекта частично или полностью облегчаются или остаются неизменными после лечения. Поэтому лечение включает профилактику, лечение и/или излечение. Профилактика относится к предотвращению возможного заболеваний и/или предотвращению ухудшения симптомов или прогрессирования заболевания. Лечение также включает любое фармацевтическое применение любого предусмотренного антитела, его антигенсвязывающего фрагмента или композиции.
В настоящем документе профилактика, предотвращение и их грамматические эквиваленты относятся к способам уменьшения риска развития заболевания или состояния.
В настоящем документе фармацевтически эффективный агент включает любое терапевтическое средство или биологически активное вещество, включая, но не ограничиваясь, например, анестетиками, вазоконстрикторами, диспергирующими агентами, обычными терапевтическими препаратами, включая низкомолекулярные препараты и терапевтические белки.
В настоящем документе терапевтический эффект представляет собой эффект лечения субъекта, который заключается в изменении, как правило, улучшении или исправлении симптомов заболевания или состояния, или лечении заболевания или состояния.
Терапевтически эффективное количество или терапевтически эффективная доза относится к количеству агента, молекулы, соединения или композиции, содержащей соединение, которое приводит к терапевтическому эффекту после введения субъекту. Таким образом, это количество необходимо для профилактики, лечения, улучшения, устранения или частичного устранения симптомов заболевания или расстройства.
В настоящем документе терапевтическая эффективность относится к способности агента, соединения, вещества или композиции, содержащей соединение, оказать терапевтический эффект при введении агента, соединения, вещества или композиции, содержащей соединение, субъекту.
В настоящем документе профилактически эффективное количество или профилактически эффективная доза агента, соединения, вещества или композиции, содержащей соединение, при введении субъекту оказывает профилактическое действие, например, предотвращая или задерживая наступление или повторение заболевания или появления симптомов, снижая вероятность возникновения или повторения заболевания или появления симптомов или снижая вероятность вирусной инфекции. Полный профилактический эффект не обязательно достигается при введении одной дозы и может иметь место только после введения нескольких доз. Таким образом, профилактически эффективное количество может быть введено одним или несколькими введениями.
Используемый в настоящем документе термин иммунотерапевтический или иммунотерапия в комбинации с предусмотренными антителами обозначает профилактическое или терапевтическое введение. Таким образом, терапевтические антитела могут быть введены субъекту, подверженному риску заражения вирусной инфекцией (например, инфекцией РСВ), для уменьшения вероятности и/или тяжести заболевания, или могут быть введены субъекту, уже подтверженному активной вирусной инфекции (например, инфекции РСВ).
В настоящем документе улучшение симптомов заболевания или расстройства посредством лечения, например, фармацевтической композицией или лекарственным средством, относится к любому уменьшению, постоянному или временному, устойчивому или кратковременному, симптомов, связанному с введением или приписываемому введению композиции или лекарственного средства.
Используемый в настоящем документе термин диагностически эффективное количество относится к количеству агента, соединения, вещества или композиции, содержащей обнаруживаемое соединение, которое, по меньшей мере, достаточно для обнаружения соединения после введения субъекту. Как правило, диагностически эффективное количество анти-РСВ антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, например, детектируемо меченого антитела или антигенсвязывающего фрагмента или антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которые могут быть обнаружены с помощью вторичного агента, введенное субъекту для обнаружения, представляет собой количество антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которое является достаточным для обнаружение места, содержащего антиген РСВ, к которому специфично антитело или антигенсвязывающий фрагмент. При использовании антител
- 30 023179 по настоящему документу для обнаружения антигена ίη νίνο детектируемо меченое антитело или антигенсвязывающий фрагмент вводят в дозе, которая является диагностически эффективной.
В настоящем документе метка или обнаруживаемый фрагмент представляет собой обнаруживаемый маркер (например, флуоресцентную молекулу, хемилюминесцентную молекулу, биолюминесцентную молекулу, контрастирующее вещество (например, металл), радионуклид, хромофор, обнаруживаемый пептид или фермент, который катализирует образование обнаруживаемого продукта), который может быть связан или присоединен напрямую или не напрямую к молекуле (например, анти-РСВ антителу или его антигенсвязывающему фрагменту по настоящему документу) или ассоциирован с ней, и может быть обнаружен ίη νίνο и/или ίη νίΐτο. Метод обнаружения может представлять собой любой метод, известный в уровне техники, включая известные способы обнаружения ίη νίνο и/или ίη νίίτο (например, визуальное обнаружение, магнитная резонансная (МР) спектроскопия, ультразвуковой сигнал, рентген, гаммаспектроскопия (например, позитронно-эмиссионная томография (ПЭТ), однофотонная эмиссионная компьютерная томография (ОФЭКТ)), флуоресцентная спектроскопия или измерения абсорбции). Непрямое обнаружение относится к измерению физических явлений, таких как энергия или излучение и поглощение частиц атомом, молекулой или композицией, которая связана напрямую или не напрямую с обнаруживаемым фрагментом (например, обнаружение меченого вторичного антитела или антигенсвязывающего фрагмента, который связывает первичное антитело (например, анти-РСВ антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу).
Используемый в настоящем документе термин субъект относится к животным, включая млекопитающих, таким как человек.
В настоящем документе пациент представляет собой человека.
В настоящем документе животное включает любое животное, включая, но не ограничиваясь приматами, включая человека, горилл и низших приматов, грызунами, такими как мыши и крысы, птицами, такими как куры, жвачными животными, например, козами, коровами, оленями, овцами; домашним скотом, например свиньями, и другими животными. Термин животные, не представляющие собой человека исключает человека из круга предусмотренных животных. Полипептиды, предусмотренные здесь, представляют собой полипептиды из любого источника, включая животных, растения, прокариотов и грибы. Большая часть полипептидов представляют собой полипептиды животного происхождения, в том числе полипептиды млекопитающих.
В настоящем документе термин пожилой относится к субъекту, который в силу возраста имеет сниженный иммунный ответ и сниженную реакцию на вакцинацию. Как правило, пожилой субъект является человеком, чей возраст составляет шестьдесят пять лет и более, как правило, 70 лет и более.
В настоящем документе термин ребенок относится к человеку, чей возраст составляет менее приблизительно 24 месяцев (например, менее приблизительно 16 месяцев, менее приблизительно 12 месяцев, менее приблизительно 6 месяцев, менее приблизительно 3 месяцев, менее приблизительно 2 месяцев или менее приблизительно 1 месяца). Как правило, человеческий ребенок рождается с гестационным возрастом более 38 недель.
В настоящем документе недоношенный ребенок относится к человеку, который родился с гестационным возрастом менее приблизительно 40 недель, как правило, менее приблизительно 38 недель.
В настоящем документе единичная дозированная форма относится к физически дискретным единицам, пригодным для человека и животных, содержащимся в индивидуальной упаковке, как известно в уровне техники.
В настоящем документе единичная дозированная композиция относится к композиции для непосредственного введения.
В настоящем документе изделие представляет собой продукт, который изготавливается и продается. В настоящем документе термин охватывает композиции по настоящему документу, содержащиеся в упаковках.
В настоящем документе жидкая композиция относится к любой композиции, которая может течь. Таким образом, жидкие композиции включают композиции в полутвердой форме, пасты, растворы, водные смеси, гели, лосьоны, кремы и другие подобные композиции.
В настоящем документе выделенный или очищенный полипептид или белок (например, выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент) или его биологически-активная часть (например, выделенный антигенсвязывающий фрагмент) практически не содержит клеточного материала или других загрязняющих белков из клеток или тканей, из которых происходит белок, или является в значительной степени свободным от химических веществ-предшественников и других химических веществ при химическом синтезе. Препараты могут быть определены как существенно чистые, если они являются свободными от легко обнаруживаемых примесей, определяемых с помощью стандартных способов анализа, таких как тонкослойная хроматография (ТСХ), гель-электрофорез и высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), используемых специалистами в области техники для оценки чистоты, или препараты могут быть определены как достаточно чистые, если дальнейшая очистка не изменяет физические и химические свойства вещества, такие как энзиматическая и биологическая активность. Способы очистки соединений для получения существенно химически чистых соединений известны специалистам
- 31 023179 в данной области. Существенно химически чистые соединения, однако, могут представлять собой смесь стереоизомеров. В таких случаях дополнительная очистка может увеличить удельную активность соединения.
В настоящем документе клеточный экстракт или лизат относится к смеси или фракции, которая состоит из лизированных или разрушенных клеток.
В настоящем документе выделенная молекула нуклеиновой кислоты представляет собой молекулу нуклеиновой кислоты, которая отделена от других молекул нуклеиновых кислот, которые присутствуют в природном источнике молекулы нуклеиновой кислоты. Выделенные молекулы нуклеиновой кислоты, такие как молекулы кДНК, при получении рекомбинантными методами могут быть существенно свободны от другого клеточного материала или культуральной среды или могут практически не содержать химических веществ-предшественников и других химических веществ при химическом синтезе. Примеры выделенных молекул нуклеиновых кислот по настоящему документу включают выделенные молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие предусмотренные антитела или антигенсвязывающие фрагменты.
В настоящем документе контроль относится к образцу, который в значительной мере идентичен исследуемому образцу, за исключением того, что он не обладает в какой-то мере исследуемым параметром, или, если речь идет об образце плазмы, контроль может быть взят у нормального добровольца, не затронутого интересующим состоянием. Контроль также может представлять собой внутренний контроль.
В настоящем документе композиция относится к любой смеси. Композиция может представлять собой раствор, суспензию, жидкость, порошок, пасту, может быть водной или неводной или представлять собой комбинацию указанных типов.
В настоящем документе комбинация относится к любому соединению двух или более элементов. Комбинация может представлять собой два или более отдельных элемента, таких как две композиции или две совокупности, может представлять собой их смесь, например, смесь двух или более элементов, или любые их вариации. Элементы комбинации, как правило, функционально связаны или сходны.
В настоящем документе комбинированная терапия относится к введению двух или более различных лекарственных средств, например, двух или более различных анти-РСВ антител и/или анти-РСВ антител и их антигенсвязывающих фрагментов. Различные терапевтические агенты могут быть предусмотрены и введены отдельно, последовательно, с перерывами или могут быть предусмотрены в виде единой композиции.
В настоящем документе комплект представляет собой упакованную комбинацию, которая по желанию включает в себя другие элементы, такие как дополнительные реагенты и инструкции по применению комбинации или ее элементов, для целей, включающих, но не ограничивающихся, активацией, введением, диагностикой и оценкой биологической активности или свойства.
В настоящем документе упоминание понятий в единственном числе также включает множественное число, если контекст с очевидностью не указывает на иное.
Таким образом, например, упоминание полипептида, включающего иммуноглобулиновый домен, относится к полипептидам с одним или несколькими иммуноглобулиновыми доменами.
Используемый в настоящем документе термин или используется для обозначения и/или, если в контексте явно не указано его употребление для обозначения только альтернативы, или если альтернативные варианты не являются взаимоисключающими.
В настоящем документе диапазоны и количества могут быть обозначены как конкретные значения или диапазоны с добавлением термина приблизительно. Термин приблизительно также включает в себя точное значение. Следовательно, приблизительно 5 аминокислот означает приблизительно 5 аминокислот, а также 5 аминокислот.
В настоящем документе термины по желанию или необязательно означают, что описанные явления или обстоятельства могут иметь место или могут не иметь места и что описание включает случаи, когда указанное явление или обстоятельство происходит, и случаи, когда это не так. Например, необязательно присутствующая часть означает, что часть присутствует или не присутствует.
В настоящем документе аббревиатуры для любых защитных групп, аминокислот и других соединений, если не указано иное, употребляются в соответствии с их обычным использованием и являются признанными аббревиатурами, или употребляются в соответствии с Комиссией по биохимической номенклатуре ЮТАС-ШВ (см. (1972) ВюсЬет. И: 1726).
В. Обзор
В настоящем документе предусмотрены анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые связывают и нейтрализуют респираторно-синцитиальный вирус. Предусмотренные в настоящем документе анти-РСВ антитела представляют собой нейтрализующие антитела, которые распознают один или несколько эпитопов на поверхности РСВ. В частности, антитела по настоящему документу связывают белок слияния (Р) РСВ. Антитела по настоящему документу могут быть использованы в профилактике и лечении. Предусмотренные в настоящем документе антитела также могут быть использованы в качестве лекарственных средств.
Например, антитела могут быть использованы для предотвращения возникновения и/или распро- 32 023179 странения патогенных заболеваний, включая, но не ограничиваясь ингибированием передачи вируса между субъектами, ингибированием развития вирусной инфекции у хозяина и снижением вирусной нагрузки у субъекта. Антитела также могут быть использованы для профилактики, лечения и/или смягчения одного или нескольких симптомов инфекции РСВ или сокращения продолжительности инфекции РСВ. Таким образом, лечение пациентов антителами по настоящему документу может уменьшить смертность и/или заболеваемость, связанную с инфекцией РСВ.
Устойчивость РСВ связана с возникновением устойчивых мутантов, которые не могут быть нейтрализованы антителами. Таким образом, основной проблемой при разработке терапевтических антивирусных антител является создание или выявление антител, которые имеют нейтрализующий эпитоп со следующими характеристиками: 1) консервативность в различных штаммах и серотипах и 2) сложность образования устойчивого мутанта вируса. Антитела по настоящему документу связывают различные подгруппы и штаммы РСВ. Антитела по настоящему документу также демонстрируют улучшенную активность по нейтрализации вирусов по сравнению с существующими антителами. Предусмотренные антитела эффективно нейтрализуют вирус в течение последовательных раундов репликации, где РСВ обычно образовывает устойчивые мутанты, противостоящие нейтрализации. Возможность ограничить образование МАКМ означает, что антитела, предусмотренные в настоящем документе, связывают эпитоп, который менее подвержен изменению при образовании устойчивых мутантов. Этот эпитоп, следовательно, отличается от эпитопов других известных анти-РСВ антител. Таким образом, предусмотренные антиРСВ антитела в дополнение к применению для профилактики также полезны для лечения инфекции РСВ. В настоящее время не существует известных и одобренных для использования антител против инфекции РСВ. Таким образом, предусмотренные в настоящем документе антитела особенно важны для лечения инфекции РСВ у пожилых пациентов, например, находящихся в домах престарелых, где близость субъектов увеличивает риск распространения вируса среди пациентов. Лечение с помощью предусмотренных в настоящем документе антител также важно в ситуациях, когда несоблюдение режима дозирования повышает риск развития устойчивости у вируса, так как несоблюдение режима дозирования при профилактике РСВ с помощью паливизумаба вызывает резистентность вируса (см., например, Айапъ е1 а1., (2010) С1ш 1пГсс1 ϋΐδ. 51(2): 185-188).
Как правило, предусмотренные в настоящем документе анти-РСВ антитела связывают Р белок РСВ с высокой аффинностью. По сравнению с существующими разрешенными к применению анти-РСВ антителами (например, паливизумаб, 8упад15) высокоаффинные анти-РСВ антитела по настоящему документу позволяют реже вводить их для профилактики и/или лечения инфекции РСВ, для профилактики, лечения и/или смягчения одного или более симптомов инфекции РСВ или для уменьшения продолжительности инфекции РСВ. Таким образом, анти-РСВ антитела по настоящему документу могут использоваться в качестве терапевтических антител, т.е. для лечения инфекции РСВ. Более редкое введение облегчает соблюдение режима дозирования и, следовательно, уменьшает вероятность пропуска дозы, которые приводят к увеличению резистентности вируса к анти-РСВ антителам. Более низкие дозы антител, которые иммуноспецифически связывают РСВ, также могут уменьшить вероятность развития побочных эффектов введения иммуноглобулинов.
Как правило, анти-РСВ антитела по настоящему документу ингибируют или уменьшают один или более видов активности вируса, таких как, например, ассоциация вируса с мембраной клетки-мишени, слияние вируса с мембраной клетки-мишени и/или проникновение в клетку, образование новых вирусных частиц, включая подавление вирусной репликации, или слияние инфицированной клетки с другой клеткой (т.е. образование синцития). Предусмотренные анти-РСВ антитела могут быть использованы для увеличения иммунного ответа против РСВ инфекции.
1. Респираторно-синцитиальный вирус
РСВ человека является членом подсемейства Рпеитоу1ги8 семейства Рагатухоутйае. Существует две различные подгруппы РСВ человека, группа А и группа В. Кроме того, каждый подтип делится на две линии: А1 и А2 и В1 и В2. РСВ представляет собой оболочечный не сегментированный минус-РНК, содержащий вирус с геномом, состоящим приблизительно из 15000 нуклеотидов, который кодирует одиннадцать вирусных белков.
РСВ кодирует два основных поверхностных гликопротеина, гликопротеин О и гликопротеин Р. Гликопротеин О или белок прикрепления отвечает за связывание вируса с клеточным рецептором, в то время как гликопротеин Р или белок слияния способствует слиянию вирусной и клеточной мембраны, что приводит к проникновению вирусного рибонуклеопротеида в цитоплазму клеток (Боре/ е1 а1. (1998) 1. Уио1оду 72:6922-6928). Гликопротеин Р также способствует слиянию мембран инфицированных клеток с мембранами соседних клеток, что приводит к образованию синцития. Р белок содержит две связанные дисульфидным мостиком субъединицы, Р1 и Р2, которые образуются путем протеолитического расщепления неактивного Ν-гликозилированного предшественника. О-белок представляет собой трансмембранный гликопротеин II типа с массой 80-90 кДа, содержащий Ν- и О-связанные олигосахариды, прикрепленные к белку-предшественнику с массой 32 кДа.
Как было показано, анти-РСВ антитела против гликопротеинов Р или О нейтрализуют РСВ с высокой эффективностью ш νίΙΐΌ и имеют профилактический эффект ш У1уо (см., например, ХУайН е1 а1.
- 33 023179 (1986) I. Сеп. Μ^ι^μΙ. 67:505; Вее1ег е! а1. (1989) I. У1го1. 63:2941-2950, Сагаа-Воггепо е! а1. (1989) I. У1го1. 63:925-932, Тау1ог е! а1. (1984) 1шшипо1о§у 52:137-142, и патентах США 5824307 и 6818216). Антитела против белка Ρ РСВ также эффективны для ингибирования слияния РСВ-инфицированных клеток с соседними неинфицированными клетками.
Анализ различных моноклональных антител, которые иммуноспецифически связывают белок Ρ РСВ, привел к идентификации трех неперекрывающихся антигенных сайтов А, В и С, и одного сайта АВ (Вее1ег е! а1. (1989) I. У1го1. 63:2941-2950). Каждый из антигенных сайтов содержат различные эпитопы. В одном исследовании группой из 18 моноклональных антител пять эпитопов принадлежали антигенному сайту А, четыре эпитопа принадлежали антигенному сайту В, еще четыре эпитопа - антигенному сайту С, как было определено с помощью устойчивых к моноклональным антителам мутантов (ΜΑΚΜ) (см., например, Вее1ег е! а1. (1989) I. У1го1. 63:2941-2950). Мутации белка Ρ штамма А2 РСВ, приводящие к устойчивости вируса к указанным анти-РСВ антителам, включают одиночные мутации аминокислотных остатков N262, К272, 8275, N276, Р389 или Κ429 или двойные мутации аминокислотных остатков Ρ32 и К272 или К421 и А241 (см., например, Сго\уе е! а1. (1998) Уио1о§у 252:373-375; 2Ьао е! а1., (2004) I. Шесбоик И15еаке 190:1941-1946 и Ни е! а1., (2007) Уио1о§у 1оигпа1 4:71). Моноклональное антитело 1129, которое связывает эпитоп 4 антигенного сайта Α (Вее1ег е! а1. (1989) I. Упо1о§у 63(7):2841-2950), представляет собой исходное антитело, из которого было получено гуманизированное антитело паливизумаб (8ΥΝΑΏ8®) (см. ГоНпкоп е! а1. (1997) I. Шес!. 1)1кеакек 176:1215-1224 и патент США 5824307). Ранее было показано, что одиночные мутации аминокислотных остатков N262, N268 или К272 белка Ρ РСВ приводят к устойчивости к паливизумаб (8ΥNΑСί8®) (см. Ζΐκ-ю е! а1., (2004) I. ИтГескоик ЭПеаке 190:1941-1946). Также были выявлены дополнительные эпитопы белка Ρ РСВ. Например, ΡаЬ фрагмент ΡаЬ 19 против РСВ человека (см. ВагЬак е! а1. (1992) Ργθο. №н1. Αсаά. 8α. υ8Α 89:10164-10168 и Сго\уе е! а1., (1994) Ργθο. №!1. Αсаά. 8α. υ8Α 91:1386-1390) связывает эпитоп в антигенном сайте А, который отличается от эпитопов, определенных Вее1ег и др. (см. Сго\уе е! а1. (1998) Упо1о§у 252:373-375 и ВагЬак е! а1. (1992) Ρϊόο. №И. Αсаά. δοΐ. υ8Α 89:10164-10168).
Белок Ρ РСВ демонстрирует более 91% сходства в подгруппах РСВ А и В, а белок С РСВ демонстрирует только 53% сходства аминокислотных последовательностей в подгруппах РСВ А и В (8и11еЮег (2000) С1ш. Μ^с^оЬ^о1. Кеу. 13:1-15). Поскольку вирусы подтипов А и В совместно циркулируют при большинстве эпидемий РСВ, антитела, которые нейтрализуют РСВ подтипов А и В, такие как анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу, являются предпочтительными.
Инфекция респираторного синцитиального вируса (РСВ) является основной причиной заболевания нижних дыхательных путей у младенцев и маленьких детей. РСВ инфекция также является наиболее частой причиной бронхиолита или воспаления мелких бронхов в легких и пневмонии у детей в возрасте до 1 года в Соединенных Штатах Америки. Кроме того, РСВ инфекция также считается одной из основных причин респираторных заболеваний у пожилых людей. К симптомам и состояниям, связанным с инфекцией РСВ, относятся, например, астма, затрудненное дыхание, реактивные заболевания дыхательных путей (ΚΑΌ) и хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ). Таким образом, как описано в настоящем документе, анти-РСВ антитела по настоящему документу могут быть использованы для профилактики РСВ, для лечения РСВ-инфекции и/или для облегчения одного или нескольких симптомов опосредованных РСВ заболеваний.
С. Анти-РСВ антитела
В настоящем документе предусмотрены анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые могут быть использованы для лечения, профилактики и диагностики. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть использованы, например, для пассивной анти-РСВ иммунизации субъекта или для лечения субъекта с вирусной инфекцией. В одном примере анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу используют для профилактики, то есть профилактики инфекции РСВ. В другом примере, анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу используют в качестве терапевтических антител, то есть для лечения вирусной инфекции РСВ. В еще одном примере анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу используют для пассивной анти-РСВ иммунизации субъекта. Предусмотренные анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты также могут быть использованы для обнаружения инфекции РСВ или для мониторинга РСВ инфекции ш νί!ΐΌ и ш угуо.
1. Общая структура антител и их функциональные домены
Антитела в естественных условиях вырабатываются В-клетками в связанной с мембраной и секретируемой формах. Антитела специфически распознают и связывают эпитопы антигенов через специфические взаимодействия. Связывание антитела с антигеном может инициировать несколько эффекторных функций, которые вызывают нейтрализацию и клиренс токсинов, патогенных микроорганизмов и других инфекционных агентов.
Разнообразие специфических антител в естественных условиях возникает из-за рекомбинации в процессе развития В-клеток. В результате рекомбинации различные комбинации множества У, И и I ген- 34 023179 ных сегментов антител. кодирующих вариабельные районы молекул антител. соединяются с генами константного района с получением природного репертуара антител с большим количеством разнообразных антител. Репертуар человеческих антител содержит более 1010 различных специфичных к антигенам вариантов и. следовательно. теоретически может специфически распознавать любой чужеродный антиген. Антитела включают такие естественным образом вырабатываемые антитела. а также синтетические. т.е. рекомбинантные антитела. такие как фрагменты антител. включая анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу.
В фолдированных полипептидах антител специфичность связывания обусловлена доменами с антигенсвязывающими участками. которые содержат части несущих вариабельные районы доменов тяжелой и/или легкой цепи. Другие домены молекулы антитела выполняют эффекторные функции. участвуя. например. в передаче сигнала и взаимодействиях с другими клетками. полипептидами и биомолекулами. Указанные эффекторные функции вызывают нейтрализацию и/или клиренс распознаваемого антителами возбудителя. Чтобы изменить определенные свойства антител. их домены могут быть изменены в соответствии с описанными в настоящем документе методами.
a. Структурные и функциональные домены антител
Полноразмерные антитела содержать несколько цепей. доменов и районов. Обычные полноразмерные антитела состоят из двух тяжелых цепей и двух легких цепей. каждая из которых содержит множество иммуноглобулиновых Од) доменов. Домен Ц характеризуется иммуноглобулиновой Од) структурой. которая состоит из двух бета-листов. каждый из которых содержит антипараллельные бета-цепи аминокислот. соединенные петлями. Два бета-листа в Ц структуре соединены между собой гидрофобными взаимодействиями и консервативными внутрицепочечными дисульфидными связями. Ц домены в цепях антитела представляют собой домены с вариабельными (У) и константными (С) районами. Каждая тяжелая цепь связана с легкой цепью дисульфидными связями. две тяжелые цепи также связаны друг с другом дисульфидными связями. Связь между тяжелыми цепями опосредована гибким доменом тяжелой цепи. известным как шарнирный район.
Каждая легкая цепь полноразмерного обычного антитела содержит один домен с вариабельным районом (Уъ) и один константный домен (Съ). Каждая тяжелая цепь полноразмерного обычного антитела содержит один вариабельный домен (УН). три или четыре константных домена (СН) и. в некоторых случаях. шарнирный домен. Благодаря рекомбинации последовательности нуклеиновых кислот. кодирующие вариабельные домены. отличаются друг от друга в различных молекулах антител. что придает антителам специфичность к определенным антигенам. С другой стороны. константные районы кодируются последовательностями. которые являются более консервативными среди антител. Указанные домены обеспечивают функциональные свойства антител. например. способность взаимодействовать с клетками иммунной системы и сывороточными белками. обеспечивая клиренс инфекционных агентов. Различные классы антител. например. ЦМ. ЦО. и !дЕ. имеют различные константные районы. что позволяет им выполнять различные эффекторные функции.
Каждый вариабельный домен содержит три фрагмента. называющиеся определяющими комплементарность районами (СОК) или гипервариабельными (НУ) районами. которые кодируются высоко вариабельными последовательностями нуклеиновых кислот. СОК расположены в петлях. соединяющих беталисты вариабельного домена Ц. Вместе три СОК тяжелой цепи (СЭК1. СЭК2 и СЭК3) и три СОК легкой цепи (СЭКЕ СЭК2 и СЭК3) составляют обычный антигенсвязывающий участок антитела (сайт связывания антитела). который физически взаимодействует с распознаваемым антигеном и обеспечивает специфичность антитела. Полноразмерное антитело содержит два идентичных сайта связывания антитела. каждый из которых образован СОК одной тяжелой и одной легкой цепи. Посколько СОК расположены в соединяющих бета-цепи петлях. три СОК не следуют друг за другом в линейной аминокислотной последовательности вариабельного домена. После фолдинга полипептида антител СОК петли оказываются в непосредственной близости. образуя сайт связывания антигена. Бета-листы вариабельных доменов составляют каркасные районы (РК). которые содержат более консервативные последовательности. важные для других свойств антител. например их стабильности.
b. Фрагменты антител
Антитела по настоящему документу включают фрагменты антител. которые являются производными полноразмерных антител. последовательность которых меньше полной последовательности полноразмерного антитела. но которые сохраняют. по меньшей мере. частично способность специфического связывания полноразмерного антитела. Фрагменты антител также могут включать в себя антигенсвязывающие фрагменты антител. которые могут быть вставлены в каркасные районы антител (например. химерные антитела). чтобы сохранить аффинность исходного антитела. Примеры фрагментов антител включают. но не ограничиваются РаЬ. РаЬ'. Р(аЬ')2. одноцепочечными Ρν (ксРу). Ρν. БкРу. диателами. РБ и РБ' фрагментами. а также другими фрагментами. включая модифицированные фрагменты (см.. например. МеБюБк ίη Мо1еси1аг Вю1оду. т. 207: КесотЬшапГ АпБЬоБ1ек Гог Сапсег ТЬегару МеГЬоБк апБ РгоГосок (2003 г.); глава 1. с. 3-25. КТрпуапоу). Фрагменты антител могут включать несколько связанных друг с другом цепей. например. связанных дисульфидными мостиками. и могут быть получены рекомбинантно. Фрагменты антител для связывания двух или более доменов также могут содержать синтетические лин- 35 023179 керы, такие как пептидные линкеры. Методы получения антигенсвязывающих фрагментов хорошо известны и могут быть использованы для модификации любых антител по настоящему документу. Фрагменты молекул антител могут быть получены, например, ферментативным расщеплением. Например, при расщеплении протеазой папаином димер константных районов тяжелых цепей, домен Рс, отщепляется от двух РаЬ фрагментов (то есть частей, содержащих вариабельные районы).
Одноцепочечные антитела могут быть получены рекомбинантно путем соединения вариабельного района тяжелой цепи (Ун) И вариабельного района легкой цепи (Уъ) определенного антитела. Конкретные нуклеотидные последовательности вариабельных районов можно клонировать стандартными методами молекулярной биологии, например, с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) и других методов рекомбинантных нуклеиновых кислот. Способы получения 8сРу описаны (см., например, \νΐιίΐ1ο\ν и Рйри1а (1991) МеФобв, 2:97-105; ВЬб е! а1. (1988) §с1еисе 242:423-426; Раск е! а1. (1993) В1о/ТесЬио1оду 11:1271-77; и в патентах США 4946778, 5840300, 5667988, 5658727, 5258498). Одноцепочечные антитела также могут быть идентифицированы путем скрининга библиотек одноцепочечных антител на связывание антигена-мишени. Методы получения и скрининга таких библиотек хорошо известны в уровне техники.
2. Примеры анти-РСВ антител
В настоящем документе предусмотрены антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые связывают и нейтрализуют РСВ. В частности, антитела или антигенсвязывающие фрагменты иммуноспецифически связывают белок Р РСВ.
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу включают моноклональные антитела, мультиспецифичные антитела, биспецифичные антитела, человеческие антитела, гуманизированные антитела, камелизированные антитела, химерные антитела, одноцепочечные Ρν (8сРу), одноцепочечные антитела, антитела из одного домена, РаЬ фрагменты, Р(аЬ') фрагменты, связанные дисульфидными связями Ρν (8άΡν) и антиидиотипические (анти-И) антитела, внутриклеточные антитела или антигенсвязывающие фрагменты любого из вышеперечисленных типов. В частности, антитела включают молекулы иммуноглобулинов и иммунологически активные фрагменты молекул иммуноглобулинов, т. е. молекулы, содержащие антигенсвязывающий участок. Молекулы иммуноглобулинов могут представлять собой молекулы любого типа (например, 1§О, 1дЕ, 1дМ, Ι§Ό, 1§Л и Ι§Υ), класса (например, 1§О1, 1§О2, 1§О3, 1§О4, 1дА1 и 1дА2) или подкласса.
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть использованы для лечения и диагностики в различных формах, которые включают моноклональные антитела, мультиспецифичные антитела, человеческие антитела, гуманизированные антитела, камелизированные антитела, химерные антитела, одноцепочечные Ρν (8сΡν), одноцепочечные антитела, антитела из одного домена, РаЬ фрагменты, Р(аЬ') фрагменты, связанные дисульфидными связями Ρν (8άΡν) и антиидиотипические (анти-И) антитела, внутриклеточные антитела или антигенсвязывающие фрагменты любого из вышеперечисленных типов. В частности, антитела включают молекулы иммуноглобулинов и иммунологически активные фрагменты молекул иммуноглобулинов, т. е. молекулы, содержащие антигенсвязывающий участок. Молекулы иммуноглобулинов могут представлять собой молекулы любого типа (например, 1дО, 1дЕ, 1дМ, 1дЭ, 1дА и Ι§Υ), класса (например, 1дО1, 1дО2, 1§О3, 1§О4, 1дА1 и 1дА2) или подкласса.
Примеры анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов, предусмотренных в настоящем документе, иммуноспецифически связывают белок Р РСВ и включают 58с5 и 8с5, которые представляют собой РаЬ фрагменты, подробно описанные в настоящем документе ниже. Примеры анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу также включают анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие тяжелую цепь, которая содержит вариабельный домен тяжелой цепи (Ун) и константный домен тяжелой цепи 1 (Сн1), и/или содержащие легкую цепь, которая содержит вариабельный домен легкой цепи (Уъ) и константный домен легкой цепи (Сь) от 58с5 или 8с5. Примеры анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу включает анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 1 или 9, и/или легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 5 или 13. В частности, например, антиРСВ антитело представляет собой РаЬ фрагмент, который содержит тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 1, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 5. В частности, например, анти-РСВ антитело представляет собой РаЬ фрагмент, который содержит тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 9, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 13.
Антитела по настоящему документу включают полноразмерные формы антител 58с5 или 8с5. Антитела по настоящему документу также включают полноразмерные формы антител, содержащих антигенсвязывающий участок (например, СЭР) из 58с5 или 8с5. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу может содержать константный район, известный в уровне техники, такой как любой константный район человеческих антител, известный в уровне техники, включая, но не ограничиваясь человеческой легкой цепью каппа (к), человеческой легкой цепью лямбда (λ),
- 36 023179 константным районом 1дО1, константным районом 1дО2, константным районом 1§О3 или константным районом 1дО4. Антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут содержать константный район, который известен в уровне техники. В некоторых примерах один или несколько константных районов антител представляют собой человеческие константные районы.
Антитела по настоящему документу включают другие фрагменты антител 58с5 и яс5, которые иммуноспецифически связывают белок Р РСВ. Такие фрагменты включают любые антигенсвязывающие фрагменты или искусственные антитела, содержащие антигенсвязывающий фрагмент (фрагменты) 58с5 или яс5, которые сохраняют способность к связыванию белка Р РСВ. Такие антитела включают, например, химерные антитела, одноцепочечные Ру (ясРу), одноцепочечные антитела, антитела из одного домена, Р(аЬ') фрагменты, связанные дисульфидными связями Ру (яйРу), антиидиотипические (анти-1й) антитела, внутриклеточные антитела или антигенсвязывающие фрагменты любого из вышеперечисленных типов. В конкретном примере, антитела представляют собой РаЬ фрагменты 58с5 или яс5.
Примеры анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу включают анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие домен νΗ и/или вариабельный домен легкой цепи ν^ имеющие аминокислотную последовательность νΗ домена и/или V домена, соответственно, 58с5 или яс5. Например, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент может содержать домен νΗ с аминокислотной последовательностью, приведенной как аминокислоты 1-125 в §ЕЦ ГО N0: 1 или 9, и/или ν3 домен с аминокислотной последовательностью, приведенной как аминокислоты 1-107 в §ЕЦ ГО N0: 5 или 13. В одном примере антитела или антигенсвязывающие фрагменты содержат домен νΗ с аминокислотной последовательностью, приведенной как аминокислоты 1-125 в §ЕЦ ГО N0: 1, и ν домен с аминокислотной последовательностью, приведенной как аминокислоты 1107 из 8ЕЦ ГО N0: 5. В другом примере антитело или антигенсвязывающий фрагмент содержит домен νΗ с аминокислотной последовательностью, приведенной как аминокислоты 1-125 в §ЕЦ ГО N0: 9, и V!, домен с аминокислотной последовательностью, приведенной как аминокислоты 1-107 из 8ЕЦ ГО N0: 13.
Примеры анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу включают анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие νΗ домен и/или ν домен с аминокислотной последовательностью, которая по меньшей мере приблизительно на 80% идентична νΗ домену и/или ν домену, соответственно 58с5 или яс5. Например, антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу может содержать νΗ домен с последовательностью аминокислот, которая на 80% идентична аминокислотной последовательности, приведенной как аминокислоты 1-125 в §ЕЦ ГО N0: 1 или 9, и/или ν3 домен с последовательностью аминокислот, которая на 80% идентична аминокислотной последовательности, приведенной как аминокислоты 1-107 в §ЕЦ ГО N0: 5 или 13.
В некоторых примерах анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу может содержать домен νΗ с аминокислотной последовательностью, которая по меньшей мере приблизительно на 81%, по меньшей мере приблизительно на 82%, по меньшей мере приблизительно на 83%, по меньшей мере приблизительно на 84%, по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 86%, по меньшей мере приблизительно на 87%, по меньшей мере приблизительно на 88%, по меньшей мере приблизительно на 89%, по меньшей мере приблизительно на 90%, по меньшей мере приблизительно на 91%, по меньшей мере приблизительно на 92%, по меньшей мере приблизительно на 93%, по меньшей мере приблизительно на 94%, по меньшей мере приблизительно на 95%, по меньшей мере приблизительно на 96%, по меньшей мере приблизительно на 97%, по меньшей мере приблизительно на 98% или по меньшей мере приблизительно на 99% идентична аминокислотной последовательности, приведенной как аминокислоты 1-125 в §ЕЦ ГО N0: 1 или 9, и/или ν3 домен с аминокислотной последовательностью, которая по меньшей мере приблизительно на 81%, по меньшей мере приблизительно на 82%, по меньшей мере приблизительно на 83%, по меньшей мере приблизительно на 84%, по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 86%, по меньшей мере приблизительно на 87%, по меньшей мере приблизительно на 88%, по меньшей мере приблизительно на 89%, по меньшей мере приблизительно на 90%, по меньшей мере приблизительно на 91%, по меньшей мере приблизительно на 92%, по меньшей мере приблизительно на 93%, по меньшей мере приблизительно на 94%, по меньшей мере приблизительно на 95%, по меньшей мере приблизительно на 96%, по меньшей мере приблизительно на 97%, по меньшей мере приблизительно на 98% или по меньшей мере приблизительно на 99% идентична аминокислотной последовательности, приведенной как аминокислоты 1-107 в §ЕЦ ГО N0: 5 или 13.
Таким образом, в настоящем документе предусмотрены антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие νΗ домен с аминокислотной последовательностью, которая по меньшей мере приблизительно на 80-99% идентична, например, на 90-99% или по меньшей мере на 90-95% идентична, например, на 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентична аминокислотной последовательности, приведенной как аминокислоты 1-125 в §ЕЦ ГО N0: 1, и содержащие ν3 домен с аминокислотной последовательностью, которая по меньшей мере приблизительно на 80-99% идентична, например, на 90-99% или по меньшей мере на 90-95% идентична, например, на 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентична аминокислотной последовательно- 37 023179 сти, приведенной как аминокислоты 1-107 в 8ЕО ГО N0: 5.
Таким образом, в настоящем документе предусмотрены антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие Ун домен с аминокислотной последовательностью, которая по меньшей мере приблизительно на 80-99% идентична, например, на 90-99% или по меньшей мере на 90-95% идентична, например, на 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентична аминокислотной последовательности, приведенной как аминокислоты 1-125 в 8Е0 ГО N0: 9, и содержащие Уь домен с аминокислотной последовательностью, которая по меньшей мере приблизительно на 80-99% идентична, например, на 90-99% или по меньшей мере на 90-95% идентична, например, на 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 или 99% идентична аминокислотной последовательности, приведенной как аминокислоты 1-107 в 8Е0 ГО N0: 13.
Кроме того, предусмотрены анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие один или несколько определяющих комплементарность районов (СГОК) Ун, выбранных из СГОК 58с5 или 8с5. Например, анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут содержать СГОК1 Ун с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 2, 1627, 10 или 1628. Например, антиРСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут содержать СГОК1 Ун с аминокислотной последовательностью С.А81\81)¥¥¥\\'Т (8 ЕС) ГО N0: 2), 81)¥¥¥\\'Т (81 (С) ГО N0: 1627), С.1)818С.8\\\А\'\ (81 (С) ГО N0: 10) или С.8\\\А\'\ (81 (С) ГО N0: 1628).
В другом примере анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут содержать СГОК2 Ун с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 3 или 11. Например, анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут содержать СГОК2 Ун с аминокислотной последовательностью н18¥ТСНТ¥¥ТР8ЕК8 (81 (С) ГО N0: 3) или Е1¥¥КС.ТТ\¥К88ЕКС, (81 (С) ГО N0: 11).
В другом примере анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут содержать СГОК3 Ун с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 4 или 12. Например, анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут содержать СГОК3 Ун с аминокислотной последовательностью ССАΥV^I8NСС\VΕ^8 (81 (С) ГО N0: 4) или С.С.К8ТРС,Р1)¥¥¥¥\11)¥ (81 (С) ΙΌ N0: 12).
В одном примере анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты содержат СГОК1 Ун с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 2, СГОК2 Ун с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 3, и СГОК3 Ун с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 4.
В другом конкретном примере анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты содержат СГОК1 Ун с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 10, СГОК2 Ун с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 11, и СГОК3 Ун с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 12.
Кроме того, предусмотрены анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, содержащие один или несколько определяющих комплементарность районов Уъ (СГОК), выбранных из СГОК 58с5 или 8с5. Например, анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут содержать СГОК1 Уъ с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 6 или 14. Например, анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут содержать СГОК 1 Уъ с аминокислотной последовательностью ОА8ОБ18Т¥ЕГО (81 (С) ГО N0: 6) или КЛ8С)МК\¥Е\ (81 (С) ГО N0: 14).
В другом примере анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут содержать СГОК2 Уь с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 7 или 15. Например, анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут содержать СГОК2 Уъ с аминокислотной последовательностью С.А8ХЕЕТ (81 (С) ГО N0: 7) или АА8ТЕС)8 (81 (С) ГО N0: 15).
В другом примере анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут содержать СГОК3 Уь с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 8 или 16. Например, анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут содержать СГОК3 Уъ с аминокислотной последовательностью С)С)¥С)¥ЕР¥Т (81 (С) ГО N0: 8) или С)С)8¥\\С)РТ (81 (С) ГО N0: 16).
В одном примере анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты содержат СГОК1 Уъ с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 6, СГОК2 Уъ с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 7, и СГОК3 Уъ с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 8.
В другом конкретном примере анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты содержат СГОК1 Уь с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 14, СГОК2 Уъ с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 15, и СГОК3 Уъ с аминокислотной последовательностью, приведенной в 8Е0 ГО N0: 16.
Для получения антител или антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу может быть выбрана любая комбинация СГОК по настоящему документу, при условии, что антитела или антигенсвязывающие фрагменты сохраняют способность иммуноспецифически связывать белок Ε РСВ. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут содержать антитела известных каркасных районов. Примеры каркасных районов включают выделенные природные или консенсусные каркасные районы, включая человеческие каркасные районы (см., например, С1ю11иа еί а1. (1998) ί. Μο1. Βίο1. 278:457-479). В некоторых примерах каркасный район антитела представляет собой человеческий кар- 38 023179 касный район антитела. В некоторых примерах антигенсвязывающие фрагменты содержат каркасные районы 58с5 или кс5.
Примеры выделенных анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу включают анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифически связывают тот же эпитоп на белке слияния (Р) респираторно-синцитиального вируса (РСВ), который связывают любые антитела по настоящему документу. В одном примере в настоящем документе предусмотрено антитело, которое связывает тот же эпитоп, который связывает 58с5, представляющее собой антитело, которое содержит тяжелую цепь, приведенную в 8Ε0 ГО N0: 1, и легкую цепь, приведенную в 8Ε0 ГО N0: 5. В другом примере в настоящем документе предусмотрено антитело, которое связывает тот же эпитоп, который связывает кс5, представляющее собой антитело, которое содержит тяжелую цепь, приведенную в 8Ε0 ГО N0: 9, и легкую цепь, приведенную в 8Ε0 ГО N0: 13. Как правило, такие антитела содержат вариабельный домен тяжелой цепи (Ун) и вариабельный домен легкой цепи (Уъ), или их антигенсвязывающие фрагменты.
Антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу характеризуются константой аффинности связывания (Ка) к эпитопу белка Р РСВ, составляющей по меньшей мере приблизительно 1 χ 108 М-1, по меньшей мере приблизительно 2,5 χ 108 М-1, по меньшей мере приблизительно 5 χ 108 М-1, по меньшей мере приблизительно 1 χ 109 М-1, по меньшей мере приблизительно 5 χ 109 М-1, по меньшей мере приблизительно 1 χ 1010 М-1, по меньшей мере приблизительно 5 х 10 М-1, по меньшей мере приблизительно 1 χ 1011 М-1, по меньшей мере приблизительно 5 χ 1011 М-1, по меньшей мере приблизительно 1 χ 1012 М-1, по меньшей мере приблизительно 5 χ 1012 М-1, по меньшей мере приблизительно 1 χ 1013 М-1, по меньшей мере приблизительно 5 χ 1013 М-1, по меньшей мере приблизительно 1 χ 10 М-1, по меньшей мере приблизительно 5 χ 1014 М-1, по меньшей мере приблизительно 1 χ 1015 М-1 или по меньшей мере приблизительно 5 χ 1015 М-1. Антитела по настоящему документу могут проявлять аффинность связывания к рекомбинантному очищенному белку Р, такому как внеклеточный домен белка Р штамма А2 РСВ, приведенному в 8Ε0 ГО N0: 25. Антитела по настоящему документу также могут обладать аффинностью к нативному белку Р РСВ, который образуется при инфекции и экспрессии РСВ в клетках. Аффинность связывания антител по настоящему документу с рекомбинантным очищенным белком Р и нативным белком Р РСВ может быть одинаковой или различной. Например, в примере 4 показано, что 58с5 имеет более высокую аффинность к нативному белку Р РСВ по сравнению с рекомбинантным очищенным белком Р. Напротив, кс5 обладает одинаковой аффинностью к нативному или рекомбинантно экспрессированному белкам Р РСВ.
В некоторых примерах антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу характеризуются константой диссоциации (Кб) для эпитопа белка Р РСВ, которая составляет менее приблизительно 1 χ 10-8 М, менее приблизительно 4 χ 10-9 М, менее приблизительно 2 χ 10-9 М, менее приблизительно 1χ 10-9 М, менее приблизительно 2 χ 10-10 М, менее приблизительно 1 χ 10-10 М, менее приблизительно 2 χ 10-11 М, менее приблизительно 1 χ 10-11 М, менее приблизительно 2χ 10-12 М, менее приблизительно 1 χ 10-12 М, менее приблизительно 2 χ 10-13 М, менее приблизительно 1 χ 10-13 М, менее приблизительно 2 χ 10-14 М, менее приблизительно 1 χ 10-14 М, менее приблизительно 2 χ 10-15 М, менее приблизительно 1 χ 10-15 М или менее приблизительно 2 χ 10-16 М.
В некоторых примерах антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу характеризуются ЕС50 менее приблизительно 0,005 нМ, менее приблизительно 0,01 нМ, менее приблизительно 0,025 нМ, менее приблизительно 0,05 нМ, менее приблизительно 0,075 нМ, менее приблизительно 0,1 нМ, менее приблизительно 0,5 нМ, менее приблизительно 0,75 нМ, менее приблизительно 1 нМ, менее приблизительно 1,25 нМ, менее приблизительно 1,5 нМ, менее приблизительно 1,75 нМ, менее приблизительно 2 нМ в ίη νίίτο тесте на микронейтрализацию РСВ. В частности, например, выделенные анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу характеризуются ЕС50 для нейтрализации РСВ в ίη νίίτο анализе подавления бляшкообразования от менее приблизительно 0,005 нМ до менее приблизительно 2 нМ, от менее приблизительно 0,005 нМ до менее приблизительно 1 нМ, от менее приблизительно 0,005 нМ до менее приблизительно 0,5 нМ, от менее приблизительно 0,01 нМ до менее приблизительно 1 нМ, от менее приблизительно 0,05 нМ до менее приблизительно 1 нМ, от менее приблизительно 0,05 нМ до менее приблизительно 0,5 нМ или от менее приблизительно 0,1 нМ до менее приблизительно 0,5 нМ.
В некоторых примерах анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу нейтрализуют устойчивые к моноклональным антителам мутанты (ΜΑΚΜ), резистентные к различным анти-РСВ антителам, в ίη νίίτο тесте на микронейтрализацию РСВ. В конкретном примере антиРСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу нейтрализует ΜΑΚΜ с ЕС50 для нейтрализации, которая является приблизительно равной ЕС50 для нейтрализации исходного штамма РСВ, из которого был получен ΜΑΚΜ. Если первое антитело может нейтрализовать ΜΑΚΜ против второго антитела, можно сделать вывод, что антитела специфически связывают и взаимодействуют с различными эпитопами.
В некоторых примерах анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему до- 39 023179 кументу ингибируют связывание РСВ с его рецептором на клетке-хозяине по меньшей мере приблизительно на 99%, по меньшей мере приблизительно на 95%, по меньшей мере приблизительно на 90%, по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 80%, по меньшей мере приблизительно на 75%, по меньшей мере приблизительно на 70%, по меньшей мере приблизительно на 65%, по меньшей мере приблизительно на 60%, по меньшей мере приблизительно на 55%, по меньшей мере приблизительно на 50%, по меньшей мере приблизительно на 45%, по меньшей мере приблизительно на 40%, по меньшей мере приблизительно на 35%, по меньшей мере приблизительно на 30%, по меньшей мере приблизительно на 25%, по меньшей мере приблизительно на 20%, по меньшей мере приблизительно на 15%, по меньшей мере приблизительно на 10% по сравнению со связыванием РСВ с его рецептором на клетке-хозяине в отсутствие анти-РСВ антитела или его антигенсвязывающего фрагмента.
В некоторых примерах анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу подавляют репликацию РСВ по меньшей мере приблизительно на 99%, по меньшей мере приблизительно на 95%, по меньшей мере приблизительно на 90%, по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 80%, по меньшей мере приблизительно на 75%, по меньшей мере приблизительно на 70%, по меньшей мере приблизительно на 65%, по меньшей мере приблизительно на 60%, по меньшей мере приблизительно на 55%, по меньшей мере приблизительно на 50%, по меньшей мере приблизительно на 45%, по меньшей мере приблизительно на 40%, по меньшей мере приблизительно на 35%, по меньшей мере приблизительно на 30%, по меньшей мере приблизительно на 25%, по меньшей мере приблизительно на 20%, по меньшей мере приблизительно на 15% или по меньшей мере приблизительно на 10% по сравнению с репликацией РСВ в отсутствие анти-РСВ антитела или его антигенсвязывающего фрагмента.
В некоторых примерах антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу имеют время полураспада 15 дней или более, 20 дней или более, 25 дней или более, 30 дней или более, 40 дней или более, 45 дней и более, 50 дней или более, 55 дней или более, 60 дней или более, 3 месяца или более, 4 месяца и более или 5 месяцев или более. Способы увеличения времени полураспада антител или антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу известны в уровне техники. Такие способы включают, например, пегилирование, гликозилирование и аминокислотные замены, например, описанные в настоящем документе.
а. Производные антител
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть использованы для получения производных антител, таких как химерные антитела или другие антигенсвязывающие фрагменты, такие как, например, РаЬ, РаЬ', Р(аЬ')2, одноцепочечные Ρν (ксРу), Ρν, йкРу, диатела, Рй и Рй' фрагменты. Как правило, производные антител или антигенсвязывающих фрагментов, полученные из исходного антитела, сохраняют специфичность связывания исходного антитела. Фрагменты антител могут быть получены любым методом, известным специалистам в данной области. Например, РаЬ и Р(аЬ')2-фрагменты могут быть получены путем протеолитического расщепления молекулы иммуноглобулина с использованием таких ферментов, как папаин (для получения РаЬ фрагмента) или пепсин (для получения Р(аЬ')2 фрагмента). Р(аЬ')2-фрагменты содержат вариабельный район антитела, константный район легкой цепи и СН1 домен тяжелой цепи. Кроме того, анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу также могут быть получены с помощью различных методик бактериофагового дисплея, известных в уровне техники. В некоторых примерах антигенсвязывающие вариабельные районы анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу могут быть рекомбинантно слиты с одним или несколькими известными константными районами для получения химерных полноразмерных антител, РаЬ, РаЬ', Р(аЬ')2 или других антигенсвязывающих фрагментов. Примеры способов получения полноразмерных антител из фрагментов антител известны в уровне техники и описаны в настоящем документе. Известны способы получения химерных антител (см., например, Μο^^^кοη (1985) Зс1епсе 229:1202; Οί е1 а1. (1986) ВюТескпкщек 4:214; ОППек е1 а1. (1989) ΐ Iттииο1 МеЛейз 125:191-202; и патенты США 5807715, 4816567 и 4816397).
Химерные антитела, включающие один или несколько СОК анти-РСВ антител по настоящему документу и каркасные районы из гетерологичных молекул иммуноглобулинов, могут быть получены с помощью различных методов, известных в данной области, включая, например, перенос СОК (ЕР 239400, \УО 91/09967; патенты США № 5225539, 5530101, 5585089), замену поверхностных остатков (ЕР 592106, ЕР 519596; Рай1ап (1991) ΜοΕαι1;·ΐΓ ^ти^^ду 28(4/5):489-498; Зййтска е1 а1. (1994) РгсЛет Епдтеегтд 7(6):805-814; апй ^дикка е1 а1. (1994) РNАЗ 91:969-973) и обмен фрагментов цепей (шаффлинг) (патент США № 5565332).
В некоторых примерах антитела содержат один или более СОК из 58с5 (например, один или несколько СОК, приведенных в ЗЕО ΙΌ ΝΟ: 2-4, 1627 и 6-8) и гетерологичный каркасный район. В некоторых примерах антитела содержат один или более СОК из кс5 (например, один или несколько СОК, приведенных в ЗЕО ГО ΝΟ: 10-12, 1628 и 14-16) и гетерологичный каркасный район. Каркасные остатки в каркасных районах могут быть заменены соответствующими остатками антитела донора СОК для изменения, такого как улучшение, связывания антигена. Указанные замены в каркасных районах определяются с помощью хорошо известных в данной области способов, например моделирования взаимодействия
- 40 023179
СОР и каркасных остатков для определения важных для связывания антигена каркасных остатков и сравнения последовательностей для выявления необычных каркасных остатков в определенных позициях (см., например, патент США № 5585089 и Р^есЪтаηη и др. (1988) №1иге 332:323).
В некоторых примерах производные анти-РСВ антител или их антигенсвязывающие фрагменты имеют константу аффинности (Ка) к эпитопу белка Ρ РСВ, которая составляет по меньшей мере приблизительно 1 х 108 М-1, по меньшей мере приблизительно 2,5 х 108 М-1, по меньшей мере приблизительно 5х 108 М-1, по меньшей мере приблизительно 1 х 109 М-1, по меньшей мере приблизительно 5 х 109 М-1, по меньшей мере приблизительно 1 х 1010 М-1 или по меньшей мере приблизительно 5 х 1010 М-1, по меньшей мере приблизительно 1 х 1011 М-1, по меньшей мере приблизительно 5 х 1011 М-1, по меньшей мере приблизительно 1 х 1012 М-1, по меньшей мере приблизительно 5 х 1012 М-1, по меньшей мере приблизительно 1 х 1013 М-1, по меньшей мере приблизительно 5 х 1013 М-1, по меньшей мере приблизительно 1х 1014 М-1, по меньшей мере приблизительно 5 х 1014 М-1, по меньшей мере приблизительно 1 х 1015 М-1 или по меньшей мере приблизительно 5 х 1015 М-1.
В некоторых примерах производные анти-РСВ антител или их антигенсвязывающие фрагменты имеют константу диссоциации (Кй) для эпитопа белка Ρ РСВ менее приблизительно 1 х 10-8 М, менее приблизительно 4 х 10-9М, менее приблизительно 2 х 10-9 М, менее приблизительно 1 х 10-9 М, менее приблизительно 2 х 10-10 М, менее приблизительно 1 х 10-10 М, менее приблизительно 2 х 10-11 М, менее приблизительно 1 х 10-11 М, менее приблизительно 2 х 10-12 М, менее приблизительно 1х 10-12 М, менее приблизительно 2 х 10-13 М, менее приблизительно 1 х 10-13 М, менее приблизительно 2 х 10-14 М, менее приблизительно 1 х 10-14 М, менее приблизительно 2 х 10-15 М, менее приблизительно 1 х 10-15 М или менее приблизительно 2 х 10-16 М.
В некоторых примерах производные анти-РСВ антител или их антигенсвязывающие фрагменты обладают ЕС50 менее приблизительно 0,005 нМ, менее приблизительно 0,01 нМ, менее приблизительно 0,025 нМ, менее приблизительно 0,05 нМ, менее приблизительно 0,075 нМ, менее приблизительно 0,1 нМ, менее приблизительно 0,5 нМ, менее приблизительно 0,75 нМ, менее приблизительно 1 нМ, менее приблизительно 1,25 нМ, менее приблизительно 1,5 нМ, менее приблизительно 1,75 нМ или менее приблизительно 2 нМ в ίη νίίτο тесте микронейтрализации РСВ. В частности, например, производные антиРСВ антител или их антигенсвязывающие фрагменты обладают ЕС50 для нейтрализации РСВ в ίη νίίτο анализе подавления бляшкообразования от менее приблизительно 0,005 нМ до менее приблизительно 2 нМ, от менее приблизительно 0,005 нМ до менее приблизительно 1 нМ, от менее приблизительно 0,005 нМ до менее приблизительно 0,5 нМ, от менее приблизительно 0,01 нМ до менее приблизительно 1 нМ, от менее приблизительно 0,05 нМ до менее приблизительно 1 нМ, от менее приблизительно 0,05 нМ до менее приблизительно 0,5 нМ или от менее приблизительно 0,1 нМ до менее приблизительно 0,5 нМ.
Любые производные анти-РСВ антител или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть использованы для терапии, профилактики и/или диагностики, например, так как предусмотрено в приведенных способах. Например, производные антител или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть использованы для связывания РСВ для лечения, профилактики и/или выявления РСВ инфекции или смягчения одного или нескольких симптомов инфекции РСВ.
ί. Одноцепочечные антитела
В одном из примеров анти-РСВ антитела представляют собой одноцепочечные антитела. Одноцепочечные антитела могут быть получены из антигенсвязывающих доменов любых анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу. Методы для получения одноцепочечных антител с применением рекомбинантных способов известны в данной области (см., например, Магазто е1 а1. (1993) Ргос. №И. Асай. 8ά. 90:7889-7893, \\Ίιιΐ1ο\\ и РПри1а (1991) Ме^йк, 2:97-105; Вий е1 а1. (1988) Баенсе 242:423-426; Раск е1 а1. (1993) Вю/Тескгюйду 11:1271-77; и в патентах США № 4946778, 5840300, 5667988, 5658727).
Одноцепочечные антитела могут содержать вариабельный домен легкой цепи (УД или ее функциональный район и вариабельный домен тяжелой цепи (νΗ) или ее функциональный район из любого антиРСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента по настоящему документу. В некоторых примерах ν домен или его функциональный район в одноцепочечном антителе содержит определяющий комплементарность район 1 (СОШ), определяющий комплементарность район 2 (СЭР2) и/или определяющий комплементарность район 3 (СЭР3) любого анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента по настоящему документу. В некоторых примерах νΗ домен или его функциональный район в одноцепочечном антителе содержит определяющий комплементарность район 1 (СОШ), определяющий комплементарность район 2 (СЭР2) и определяющий комплементарность район 3 (СЭР3) любого анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента по настоящему документу. В некоторых примерах одноцепочечное антитело дополнительно содержит пептидный линкер. В таких примерах пептидный линкер может быть расположен между вариабельным доменом легкой цепи (ν^ и вариабельным доменом тяжелой цепи (νΗ).
Одноцепочечные антитела могут содержать пептидный спейсер (линкер) между одной или несколькими доменами антитела. Например, вариабельный домен легкой цепи (Уъ) антитела может быть
- 41 023179 связан с вариабельным доменом тяжелой цепи (νΗ) через гибкий пептидный линкер. Различные пептидные линкеры хорошо известны и могут быть использованы в предусмотренных способах. Пептидный линкер может включать в себя несколько остатков глицина (О1у) или остатков серина (8ег). Примеры полипептидных линкеров включают пептиды с аминокислотной последовательностью (О1у-8ег)п, (О1ут8ег)п или (8егтО1у)п, где значение т варьирует от 1 до 6, как правило, от 1 до 4, обычно от 2 до 4, и η варьирует от 1 до 30 или от 1 до 10, как правило, от 1 до 4, при этом по всей длине линкера для увеличения растворимости расположено несколько остатков глутаминовой кислоты (О1и) и лизина (Ьук) (см., например, международную заявку РСТ № \νϋ 96/06641, в которой приведены примеры линкеров для использования в конъюгатах). Примеры пептидных линкеров включают, но не ограничиваются пептидами с последовательностями ОО88К8888ОООО8ОООО (8ΕΟ ГО N0: 1512), О8ОК8ОООО8ОООО8 (8ΕΟ ГО N0: 1513), ЕОК88О8О8Е8К8Т (δ ЕС) ΙΌ N0: 1514), ЕОК88О8О8Е8К8ТЦ (δ ЕС) Ιϋ N0: 1515) ЕОК88О8О8Е8К^ (δ ЕС) ГО N0: 1516), О8Т8О8ОК88ЕОКО (δ ЕС) ГО N0: 1517), КΕδОδVδδΕ(')ΕΆ(')ΕΗδΕΙ) (8ЕО ΙΌ N0: 1518), ΕδОδVδδΕΕ^АРΚδ^^ (δ ЕС) ΙΌ N0: 1519). Как правило, пептидные линкеры составляют приблизительно 1-50 аминокислот в длину. Линкеры, используемые в настоящем документе, также могут увеличить внутриклеточную доступность, стабильность в сыворотке, специфичность и растворимость или обеспечить большую гибкость и снять стерические препятствия. Линкерные фрагменты описаны (см., например, НикЮп е! а1. (1988) Ртос №·ιΐ1 Асай δα υδΑ 85:5879-5883, \νΐιίΐ1ο\ν е! а1. (1993) Рго1еш Епдшеегшд 6:989-995, и УнШ е1 а1., (1996) ВюсйетШгу 35:545-553). Другие подходящие пептидные линкеры включают линкеры, описанные в патентах США № 4751180 и 4935233, которые приведены в настоящем документе в качестве ссылки.
ΐΐ. Антиидиотипические антитела
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть использованы для создания антиидиотипических антител, которые имитируют антиген белка Р РСВ, с которым иммуноспецифически связываются антитела, с применением методов, хорошо известных специалистам в данной области (см., например, Огеепкрап и Βοικι (1989) РА8ЕВ ΐ. 7(5):437-444; и N^88^ηοίί (1991) I. ^тимЕ 147(8):2429-2438). Например, анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу, которые связывают и конкурентно ингибируют связывание РСВ с его рецептором на клетке-хозяине, как это определяется с помощью хорошо известных в уровне техники анализов, могут быть использованы для создания антиидиотипических антител, которые имитируют антиген РСВ и связывают рецепторы для РСВ, то есть конкурируют с этим вирусом за связывание с клеткой-хозяином, тем самым уменьшая уровень инфицирования клеток хозяина вирусом. В некоторых примерах с помощью хорошо известных специалистам методов могут быть получены антиантиидиотипические антитела. Антиантиидиотипические антитела имитируют связывающий домен анти-РСВ антитела или его антигенсвязывающие фрагмент и, как следствие, связывают и нейтрализуют РСВ.
ίίί. Мультиспецифические антитела и мультимеризация антител
Два или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу могут быть получены для формирования поливалентных производных антител или мультимеров, таких как двухвалентное, трехвалентное, четырехвалентное, пятивалентное, шестивалентное, семивалентное производное антитела или производное антитела большей валентности (например, содержащее 2, 3, 4, 5, 6, 7 и более антигенсвязывающих участков). Такие производные поливалентные антитела могут быть моноспецифическими, биспецифическими, триспецифическими или большей мультиспецифичности. В некоторых примерах поливалентные производные антител являются моноспецифическими, содержащими два или более антигенсвязывающих доменов, иммуноспецифически связывающих один и тот же эпитоп. В некоторых примерах поливалентные производные антител являются мультиспецифическими, содержащими два или более антигенсвязывающих домена, иммуноспецифически связывающих два или более различных эпитопов. В некоторых конкретных примерах поливалентные производные антител являются двухвалентными, содержащими два антигенсвязывающих домена. Такие двухвалентные антитела могут быть гомобивалентными или гетеробивалентными антителами, которые иммуноспецифически связывают одинаковые или различные эпитопы соответственно.
В некоторых примерах мультиспецифичные антитела могут иммуноспецифически связывать два или более различных эпитопов РСВ. Методы получения мультиспецифических антител известны и включают, например, связывание двух или более антигенсвязывающих фрагментов с помощью ковалентных или нековалентных химических связей. В некоторых случаях поливалентные производные антител могут быть образованы путем димеризации двух или более анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов. Мультимеризация двух анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов может быть спонтанной или может возникнуть в связи с вынужденным связыванием двух или более полипептидов. В одном из примеров мультимеры анти-РСВ антител могут быть связаны дисульфидными связями, образуемыми между остатками цистеина в различных анти-РСВ антителах. В другом примере поливалентные производные антител могут включать в себя анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, соединенные через ковалентные или нековалентные взаимодействия с пептидными фрагментами, слитыми с антителом или антигенсвязывающим фрагментом. Такие пептиды могут представлять собой пептидные линкеры (спейсеры) или пептиды, которые обладают свойством содействия
- 42 023179 мультимеризации. В некоторых примерах поливалентные производные антител могут образовываться между двумя антителами с помощью химического связывания, например, с помощью гетеробифункциональных линкеров.
Любые мультиспецифические и/или поливалентные производные антител могут быть получены из анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу при условии, что антитело биосовместимо (например, для введения в организм животных, включая человека) и сохраняет свою активность, такую как связывание одного или нескольких эпитопов и/или нейтрализация РСВ. Для мультиспецифических и поливалентных производных антител по настоящему документу производное антитела, по меньшей мере, иммуноспецифично к эпитопу, распознаваемому 58с5 или 8с5.
В некоторых примерах мультиспецифичные и/или поливалентные антитела содержат СЭЕ1 Ун с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 2 или 10, СГОЕ2 Ун с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 3 или 11, СГОЕ3 Ун с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 4 или 12, СГОЕ1 Уъ с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 6 или 14, СГОК2 Уъ с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 7 или 15, СГОЕ3 Уъ с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 8 или 16, или любые их комбинации.
В некоторых примерах могут быть получены мультиспецифичные антитела, которые иммуноспецифически связывают два или более эпитопов белка Р РСВ (например, белка Р РСВ с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 1527, 1629 или 1630). Например, мультиспецифичные антитела могут иммуноспецифически связывать два или более различных эпитопа в антигенных районах А, В или С белка Р РСВ. В некоторых примерах могут быть получены мультиспецифичные антитела, которые иммуноспецифически связывают эпитоп белка Р РСВ и другой эпитоп РСВ. Например, мультиспецифичные антитела могут иммуноспецифически связывать эпитоп белка Р РСВ и эпитоп другого поверхностного гликопротеина РСВ. В некоторых примерах мультиспецифичные антитела могут иммуноспецифически связывать эпитоп белка Р РСВ и эпитоп другого белка РСВ, выбранного из белка присоединения РСВ (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 1520), крупного структурного белка бета-субъединицы РНК-полимеразы РСВ (белка Ь) (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 1521), белка нуклеокапсида РСВ (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 1522), нуклеопротеина РСВ (М) (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 1523), фосфопротеина Р РСВ (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 1524), матриксного белка РСВ (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 1525), малого гидрофобного (§И) белка РСВ (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 1526), РНК-зависимой полимеразы РСВ, белка О РСВ (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 1528) или аллельного варианта любого из вышеперечисленных белков. В некоторых примерах мультиспецифичные антитела могут иммуноспецифически связывать эпитоп белка Р РСВ и эпитоп белка О РСВ.
В некоторых примерах мультиспецифичные антитела содержат анти-РСВ антигенсвязывающие фрагменты на основе 58с5 или 8с5 и анти-РСВ антигенсвязывающие фрагменты, полученные из других анти-РСВ антител. В некоторых примерах мультиспецифичные антитела содержат анти-РСВ антигенсвязывающие фрагменты на основе 58с5 или 8с5 и анти-РСВ антигенсвязывающие фрагменты на основе анти-РСВ антител, выбранных из паливизумаба (δΥ^ΑΟΙδ®) и его производных, включающих, но не ограничивающихся, мотавизумаб (NυМАX®), АРРР, Р12Р2, Р12Р4, Р1164, А1е9, А12а6, А13с4, А1764, А4В4, А8с7, 1Х-493Ы, РЕ н3-3Р4, М3Н9, У10н6, Ό0, АРРР(1), 6н8, Ь1-7Е5, Ь2-15В10, А13а11, А1Ь5, А4В4(1), А4В4ЫРЕ-828Е, А4В4-Р528 (см., например, патенты США № 5824307 и 6818216). В некоторых примерах мультиспецифичные антитела содержат анти-РСВ антигенсвязывающие фрагменты на основе 58с5 или 8с5 и анти-РСВ антигенсвязывающие фрагменты, полученные из человеческих антиРСВ антител, включающих, но не ограничивающихся Γ8ν6, Γ8ν1, Γ8ν13, Γ8ν19 (например, РаЬ 19), Γ8ν21, Γ8ν22, Γ8ν23, ЕР-1 и ЕР-2 (см., например, патенты США № 6685942 и 5811524). В некоторых примерах мультиспецифичные антитела содержат анти-РСВ антигенсвязывающие фрагменты на основе 58с5 или 8с5 и анти-РСВ антигенсвязывающие фрагменты на основе мышиных анти-РСВ моноклональных антител, включающих, но не ограничивающихся 1153 МАТ, 1142, 1200, 1214, 1237, 1129, 1121, 1107, 1112, 1269, 1269, 1243 (Вее1егеГ а1. (1989) 1. У^^ο1ο§у 63(7):2841-2950), тАЬ 51 (Мийюп и др. (1987), 1. СЬп. М1сгоЬю1. 25:1635-1539), тАЬ 43-1 и 13-1 (Регте е1 а1. (1982) Ргос. δοο. Ехр. ΒίοΙ. Меб. 171:266-271), тАЬ 1436С, 1302А, 1308Р и 1331Н (Аηбе^8οη е1 а1. (1984) 1. СЬп. М1сгоЬю1. 19:934-936) и на основе их гуманизированных производных. Дополнительные примеры антител или их антигенсвязывающих фрагментов, которые могут быть использованы для создания мультиспецифичных антител, которые содержат антиРСВ антигенсвязывающие фрагменты на основе 58с5 или 8с5, включают, но не ограничиваются антиРСВ антителами или их антигенсвязывающими фрагментами, описанными, например, в патентах США № 6413771, 5840298, 5811524, 6656467, 6537809, 7364742, 7070786, 5955364, 7488477, 6818216, 5824307, 7364737, 6685942, 5762905 и опубликованных заявках США № 2007-0082002, 2005-0175986, 2004- 43 023179
0234528, 2006-0198840, 2009-0110684, 2006-0159695, 2006-0013824, 2005-0288491, 2005-0019758, 20080226630, 2009-0137003, 2009-0092609. В некоторых примерах мультиспецифичные антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут иммуноспецифически связывать эпитоп белка Р РСВ и эпитоп другого гетерологичного полипептида или другого антигенного материала, такого как, например, твердый материал подложки (см., например, международную заявку РСТ УО 93/17715, УО 92/08802, УО 91/00360 и УО 92/05793, патенты США № 4474893, 4714681, 4925648, 5573920, 5601819, Тий, е1 а1., (1991) ΐ. 1ттимк 147:60-69; и Κοкίе1ηу еί а1., (1992) ΐ. Iттиηο1. 148:1547-1553.) (1) Мультимеризация через пептидные линкеры
Для получения поливалентных антител, таких как, например, мультимеры, в которых партнер мультимеризации представляет собой анти-РСВ антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу, могут быть использованы пептидные линкеры. В одном из примеров пептидные линкеры могут быть слиты с С-концом первого полипептида и Ν-концом второго полипептида. Эта структура может быть повторена несколько раз, так что по меньшей мере один, например, 2, 3, 4 или более растворимых полипептидов связаны друг с другом через пептидные линкеры на их концах. Например, мультимерный полипептид может иметь последовательность Ζ1-Χ-Ζ2, где Ζ1 и Ζ2 каждый представляют собой последовательности анти-РСВ антигенсвязывающих фрагментов (например, анти-РСВ одноцепочечные антитела, см., например, патент США № 6759518, описывающий мультимеризацию одноцепочечных антител), где X представляет собой последовательность пептидного линкера. В некоторых случаях Ζ1 и/или Ζ2 представляют собой анти-РСВ антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу. В другом примере Ζ1 и Ζ2 представляет собой различные анти-РСВ антигенсвязывающие фрагменты, где, по меньшей мере, Ζ1 или Ζ2 получены из анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу. В некоторых примерах мультимерный полипептид имеет последовательность Ζ1Χ-Ζ2-(Χ-Ζ)η, где η - любое целое число, обычно 1 или 2. Как правило, пептидный линкер имеет достаточную длину, чтобы каждый анти-РСВ антигенсвязывающий фрагмент связывал соответствующий эпитоп, без изменения специфичности связывания антитела.
(2) Мультимеризации с помощью гетеробифункциональных сшивающих агентов
Связь между анти-РСВ антителом или его антигенсвязывающим фрагментом по настоящему документу и другим анти-РСВ антителом или антигенсвязывающим фрагментом, приводящая к поливалентным антителам, может быть прямой или не прямой. Например, связывание двух или более анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов может быть достигнуто путем химического связывания или через гетеробифункциональные линкеры, такие как любые известные в данной области или описанные в настоящем документе.
Многочисленные гетеробифункциональные сшивающие реагенты, которые используются для формирования ковалентных связей между аминогруппами и тиоловыми группами и введения тиоловых групп в белки, известны специалистам в данной области (см., например, Р1ЕКСЕ каталог, каталог 1ттиηοТесЬηο1ο§у ί/Πι1ο§ & НаηάЬοοк, 1992-1993, в котором описывается подготовка и применение таких реагентов и коммерческий источник таких реагентов; см. также, например, СитЬег еί а1., (1992) Вютоп|ида1е СЬет. 3:397-401; Т^гре еί а1., (1987) Сансе!·Кек. 47:5924-5931; Οοτάοη еί а1., (1987) Ртос. №И. Асаб ЗсЕ 84:308-312; УаМет е1 а1., (1986) ΐ. Μο1. Се11 ΐΜΜϋηο1. 2:191-197; Сагк^ е1 а1., (1978) ВюсЬет. ΐ. 173: 723-737; МаЬаη еί а1., (1987) Аηа1. ВюсЬет. 162:163-170; Уа\угу/!1ас/ак еί а1., (1992) Вг. ΐ. Сагеег 66:361366; Ра1Ют еί а1., (1992) ΙηΚ/ίοη & Iттиη. 60:584-589). Эти реагенты могут быть использованы для формирования ковалентных связей между двумя антителами или между каждым из антител и линкером. Примеры реагентов включают, но не ограничиваются ^сукцинимидил-3-(2-пиридилдитио)пропионатом (8ΡΌΡ; дисульфидный линкер); сульфосукцинимидил 6-[3-(2-пиридилдитио)пропионамидо]гексаноатом (сульфо-ЬС-δΡΌΡ); сукцинимидилоксикарбонил-а-метилбензилтиосульфатом (ЗМВТ, нерасщепляемый дисульфидный линкер); сукцинимидил 6-[3-(2-пиридилдитио)пропионамидо]гексаноатом (ЬС-δΡΌΡ); сульфосукцинимидил 4-^-малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилатом (сульфо-ЗМСС); сукцинимидил 3-(2-пиридилдитио)бутиратом (ЗΡ^Β, нерасщепляемый дисульфидный линкер); сульфосукцинимидил 2-(7-азидо-4-метилкумарин-3-ацетамид)этил-1,3'-дитиопропионатом (ЗАЕЭ); сульфосукцинимидил 7-азидо-4-метилкумарин-3-ацетатом (ЗАМСА); сульфосукцинимидил-6-[альфа-метил-альфа-(2-пиридилдитио)толуамидо]гексаноатом (сульфо-ЬС-ЗМ^Т) 1; 4-ди[3'-(2'-пиридилдитио)пропионоамидо]бутаном (^Ρ^ΡΒ), 4-сукцинимидилоксикарбонил-а-метил-а-(2-пиридилтио)толуолом (ЗМ^Т, нерасщепляемый дисульфидный линкер); сульфосукцинимидил-6-[а-метил-а-(2-пиримидилтио)толуамидо]гексаноатом (сульфо-ЬС-ЗМ^Т), м-малеимидобензоилА-гидроксисукцинимидовым эфиром (МВЗ), м-малеимидобензоилА-гидроксисульфосукцинимидовым эфиром (сульфо-МВЗ), ^сукцинимидил(4-йодоацетил)аминобензоатом (З1АВ, тиоэфирный линкер); сульфосукцинимидил(4-йодоацетил)аминобензоатом (сульфо-З1АВ); сукцинимидил-4-(п-малеимидофенил)бутиратом (ЗМ^В); сульфосукцинимидил 4-(пмалеимидофенил)бутиратом (сульфо-ЗМ^В) и азидобензоилгидразидом (АВН). В некоторых примерах указанные линкеры могут быть использованы в комбинации с пептидными линкерами, такими как линкеры, которые повышают гибкость и растворимость или которые предусматривают снятие стерических препятствий. Могут быть использованы любые другие линкеры, которые известны специалистам в дан- 44 023179 ной области для соединения полипептидной молекулы с другой молекулой.
(3) Полипептидные домены мультимеризации
Взаимодействие двух или более антигенсвязывающих фрагментов с образованием поливалентных и/или мультиспецифических производных антител может быть облегчено их связыванием, прямым или не прямым, с любым фрагментом или другим полипептидом, которые сами способны взаимодействовать с образованием устойчивой структуры. Например, отдельно закодированные полипептидные цепи могут быть мультимеризованы, где мультимеризация полипептидов опосредована доменами мультимеризации. Как правило, домены мультимеризации обеспечивают формирование стабильных белок-белковых взаимодействий между одним химерным полипептидом и другим химерным полипептидом. Химерные полипептиды включают, например, полипептиды, в которых одна цепь (например, вариабельный домен тяжелой цепи или вариабельный домен легкой цепи) антитела или антигенсвязывающего фрагмента связана (напрямую или не напрямую) с доменом мультимеризации. Как правило, домен мультимеризации связан с доменом тяжелой цепи антитела или его антигенсвязывающим фрагментом. Такие химерные полипептиды могут быть получены как белки слияния с применением рекомбинантных методов слияния нуклеиновой кислоты, кодирующей цепь антитела, с нуклеиновой кислотой, кодирующей домен мультимеризации.
Для многовалентных и/или мультиспецифических производных антител по настоящему документу по меньшей мере один партнер мультимеризации представляет собой анти-РСВ антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, связанный напрямую или не напрямую с доменом мультимеризации. Гомо- и гетеромультимерные полипептиды могут быть получены при совместной экспрессии отдельных химерных полипептидов. Первый и второй химерные полипептиды могут быть одинаковыми или разными.
Как правило, домен мультимеризации включает любой полипептид, способный осуществлять стабильные белок-белковых взаимодействия с другим полипептидом. Домены мультимеризации могут взаимодействовать, например, через иммуноглобулиновые последовательности (например, домен Рс), лейциновые молнии, гидрофобные районы, гидрофильные районы или свободные тиоловые группы, которые образуют межмолекулярные дисульфидные связи между химерными молекулами гомо- или гетеромультимера. Кроме того, домены мультимеризации могут включать аминокислотную последовательность, формирующую выступ, связывающийся с аминокислотной последовательностью, формирующей отверстие или карман, как описано, например, в патенте США № 5731168. Могут быть разработаны такие домены мультимеризации, что стерические взаимодействия не только способствуют стабильному взаимодействию, но и дополнительно способствуют формированию гетеродимеров, а не гомодимеров из смеси химерных мономеров.
В некоторых примерах поливалентные и/или мультиспецифичные антитела образуются путем связывания двух анти-РСВ антигенсвязывающих фрагментов с помощью доменов мультимеризации. В таких примерах по меньшей мере один из антигенсвязывающих фрагментов происходит от анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента по настоящему документу, такого как, например, 58с5 или 8с5.
Антигенсвязывающий полипептид, например анти-РСВ антигенсвязывающий фрагмент, может быть конъюгирован с доменом мультимеризации с получением химерного полипептида. Для анти-РСВ антигенсвязывающих фрагментов, состоящих из более чем одной цепи (например, вариабельного домена тяжелой цепи и вариабельного домена легкой цепи), домен мультимеризации может быть конъюгирован с одной из цепей, как правило, тяжелой цепью. Антигенсвязывающие фрагменты, как правило, связаны с доменом мультимеризации через их Ν- или С-конец, соединенный с Ν- или С-концом домена мультимеризации. Как правило, домен мультимеризации конъюгирован с С-концом антигенсвязывающего фрагмента (например, С-концом одноцепочечного антитела или С-концом одноцепочечного антигенсвязывающего фрагмента). Связь может быть прямой или не прямой при помощи линкера. Кроме того, химерный полипептид может представлять собой гибридный белок или может быть получен химическим связыванием, например с помощью ковалентных или нековалентных взаимодействий. Например, для получения химерного полипептида, содержащего домен мультимеризации, нуклеиновая кислота, кодирующая полноразмерный анти-РСВ антигенсвязывающий фрагмент или его часть, может быть функционально связана с нуклеиновой кислотой, кодирующей последовательность домена мультимеризации, напрямую или не напрямую или опционально через линкерный домен. Как правило, конструкция кодирует химерный белок, где С-конец анти-РСВ антигенсвязывающего фрагмента (или одной цепи антигенсвязывающего фрагмента) соединена с Ν-концом домена мультимеризации.
Поливалентные антитела по настоящему документу содержат два химерных белка, полученные связыванием, напрямую или не напрямую, двух одинаковых или различных анти-РСВ антигенсвязывающих фрагментов с доменом мультимеризации. В некоторых примерах, где домен мультимеризации представляет собой полипептид, ген слияния, кодирующий химерный полипептид анти-РСВ антигенсвязывающего фрагмента (или одноцепочечными антигенсвязывающие фрагменты) и домена мультимеризации, вставлен в соответствующий вектор экспрессии. Полученный химерный белок анти-РСВ антигенсвязывающего фрагмента и домена мультимеризации может быть экспрессирован в клетках-хозяевах, трансформированных рекомбинантным вектором экспрессии, и может образовать мультимеры, где домены
- 45 023179 мультимеризации взаимодействуют с образованием поливалентных антител. Химическое связывание доменов мультимеризации с анти-РСВ антигенсвязывающими фрагментами также может осуществляться с применением гетеробифункциональных линкеров, как описано выше. В некоторых примерах поливалентные антитела представляют собой мультиспецифичные антитела, которые являются производными двух или более анти-РСВ антигенсвязывающих фрагментов, которые связывают различные эпитопы.
Полученные химерные полипептиды и образовавшиеся из них поливалентные антитела могут быть очищены с помощью любого подходящего метода, известного в данной области, например, с помощью аффинной хроматографии на колонках с белком А или белком О. Если клетки трансформированы двумя молекулами нуклеиновой кислоты, кодирующими различные анти-РСВ антигенсвязывающие химерные полипептиды, происходит формирование гомо- и гетеродимеров. Условия для экспрессии могут быть подобраны таким образом, что формирование гетеродимеров превалирует над формированием гомодимеров.
(А) Иммуноглобулиновые домены
Домены мультимеризации включают домены, которые содержат свободные тиоловые группы, способные реагировать с образованием межмолекулярных дисульфидных связей с доменом мультимеризации дополнительной аминокислотной последовательности. Например, домен мультимеризации может включать в себя часть молекулы иммуноглобулина, например иммуноглобулина 1дО1, 1дО2, 1дО3, 1дО4, 1дА, Ι§Ό, 1дМ, 1дЕ. Как правило, выбранная для применения в качестве домена мультимеризации часть молекулы иммуноглобулина представляет собой константный домен (Рс). Описано получение белков слияния, содержащих полипептиды, слитые с различными частями полипептидов - производных антител, включая домен Рс (см., например, АхНкепа/! е! а1. (1991) ΡΝΑδ 88:10535; Вугп е! а1. (1990) №Циге. 344:677; Но11епЬаидй и АгиГГо, (1992) Сопкйисйоп оГ 1ттипод1оЬи1ш Рикюп Рго!ет8, Сиггеп! Рго!осок ш 1ттипо1оду, Зирр1. 4, рр. 10.19.1-10.19.11).
У человека описано пять изотипов антител, классифицирующихся в зависимости от типа тяжелых цепей, обозначаемых дельта (δ), гамма (γ), мю (μ), альфа (а) и эпсилон (ε), что приводит к Ι§Ό, 1§О, 1дМ, 1дА и 1дЕ классам антител соответственно. 1дА и 1дО классы включают подклассы 1дА1, 1дА2, 1дО1, 1дО2, 1дО3 и 1дО4. Различия последовательностей тяжелых цепей иммуноглобулинов обуславливают различия изотипов, например, по количеству константных (С) доменов, наличию шарнирного района, а также количеству и расположению межцепочечных дисульфидных связей. Например, тяжелые цепи 1дМ и 1дЕ содержат дополнительный С домен (С4), который заменяет шарнирный район. Рс районы 1§О, Ι§Ό, и 1дА соединяются в пары друг с другом через свои Сδ3, Сγ3 и Са3 домены, в то время как Рс фрагменты 1§М и 1дЕ димеризуются через Сμ4 и Сε4 домены. 1§М и 1дА образуют поливалентные структуры с десятью и четырьмя антигенсвязывающими участками соответственно.
Антигенсвязывающие химерные полипептиды по настоящему документу включают полноразмерные полипептиды иммуноглобулинов (например, включающие все домены полноразмерного иммуноглобулина). В некоторых примерах химерный антигенсвязывающий полипептид меньше полноразмерного (например, химерный полипептид может содержать антигенсвязывающий домен и один или несколько доменов иммуноглобулина для мультимеризации, где химерный полипептид не представляет собой полноразмерный иммуноглобулин). В некоторых примерах анти-РСВ антигенсвязывающие химерные полипептиды ассоциируют как моновалентные или гетеро- или гомополивалентные антитела, такие как двухвалентные, трехвалентные, четырехвалентные, пятивалентные, шестивалентные, семивалентные антитела или антитела большей валентности. Цепи и основные узлы различной структуры (например, еще один константный гетерологичный фрагмент или домен) могут быть использованы для сборки моновалентного и гетеро- или гомополивалентного антитела. Анти-РСВ антигенсвязывающие химерные полипептиды могут быть легко получены и секретированы клетками млекопитающих, трансформированных соответствующей молекулой нуклеиновой кислоты. В некоторых примерах для получения поливалентных антител, где анти-РСВ антигенсвязывающие части поливалентного антитела являются одинаковыми или разными, клетки-хозяева могут быть трансформированы одной или несколькими молекулами гибридной нуклеиновой кислоты. Как правило, по меньшей мере одна анти-РСВ антигенсвязывающая часть поливалентного антитела получена из анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента по настоящему документу, такого как, например, 58с5 или §с5.
(ί) Рс домен
Примеры доменов мультимеризации, которые могут быть использованы для создания поливалентных и/или мультиспецифичных антител, содержащих анти-РСВ антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу, включают полипептиды, полученные из константного района тяжелой цепи или домена выбранной молекулы иммуноглобулина. Пример последовательностей константного района тяжелой цепи для подтипов человеческого 1дО приведен в ЗЕО ΙΌ ΝΟ: 1601 (1дО 1), ЗЕО ГО ΝΟ: 1602 (1дО2), ЗЕО ГО ΝΟ: 1603 (1дО3) и ЗЕО ГО ΝΟ: 1604 (1дО4). Для примера константного района тяжелой цепи, приведенного в ЗЕО ГО ΝΟ: 1601, СН1 домен соответствует аминокислотам 1-103, шарнирный район соответствует аминокислотам 104-119, домен С2 соответствует аминокислотам 120-223 и СН3 домен соответствует аминокислотам 224-330.
- 46 023179
В одном из примеров иммуноглобулиновый полипептид химерного белка может включать в себя Рс район полипептида иммуноглобулина. Как правило. такой белок слияния сохраняет. по меньшей мере. функционально активный шарнирный район. СН2 и СН3 домены константного района тяжелой цепи иммуноглобулина. Например. полноразмерный Рс !дО1 включает в себя аминокислоты 104-330 из последовательности. приведенной в §ЕЦ ГО ΝΟ: 1601. Пример последовательности Рс для ЫдО1 приведен в §ЕЦ ГО ΝΟ: 1605 и содержит шарнирную последовательность. соответствующую аминокислотам 104-119 в §ЕЦ ГО ΝΟ: 1601. и полную последовательность СН2 и СН3 доменов. см. §ЕЦ ГО ΝΟ: 1601. Другой пример полипептида Рс приведен в заявке РСТ ГСО 93/10151 и представляет собой одноцепочечный полипептид. включающий последовательность от Ν-конца шарнирного домена до нативного С-конца домена Рс человеческого ЦО1 (8ЕЦ ГО ΝΟ: 1606). Точное расположение сайтов связывания не является критичным: конкретные сайты хорошо известны и могут быть подобраны для оптимизации биологической активности. секреции или характеристик связывания анти-РСВ антигенсвязывающего химерного полипептида. Например. другие примеры последовательностей полипептидов Рс начинаются с аминокислот С109 и Р113 последовательности §ЕЦ ГО ΝΟ: 1601 (см.. например. США 2006/0024298).
В дополнение к Рс из ЫдО1 в анти-РСВ антигенсвязывающие химерные полипептиды по настоящему документу также могут быть включены другие фрагменты Рс. Например. белки слияния с Рс могут содержать иммуноглобулиновые последовательности. которые закодированы генами иммуноглобулинов. принадлежащих к любым классам антител. включая. но не ограничиваясь ЦО (включая подклассы ЦОЕ ЦО2. !дС3 или ЦО4 человека). ГдА (включая подклассы !дА1 и ЦА2 человека). !дО. !дЕ и ЦМ классы антител.
В некоторых примерах Рс домен может быть выбран на основе функциональных свойств домена. таких как. например. эффекторные функции домена Рс при иммунном ответе. Например. если эффекторные функции. опосредуемые Рс/РсуК взаимодействием. должны быть сведены к минимуму. могут быть использованы белки слияния с изотипами ЦО. которые плохо активируют комплемент или эффекторные клетки. такими как. например. Рс из ЦО2 или ЦО4.
Для применения в химерах с анти-РСВ антигенсвязывающими фрагментами также в настоящем документе предусмотрены модифицированные Рс домены. примеры модификаций описаны. например. в патенте США № 7217797 и заявках США 2006/0198840. 2006/0024298 и 2008/0287657. а также международной заявке ГСΟ 2005/063816. Примеры модификаций аминокислот домена Рс также приведены в данном описании.
Как правило. двухвалентное антитело представляет собой димер двух химерных белков. созданных путем связывания. напрямую или не напрямую. двух одинаковых или различных анти-РСВ антигенсвязывающих фрагментов с Рс полипептидом. В некоторых примерах ген слияния. кодирующий химерный белок. вставлен в соответствующий вектор экспрессии. Полученные химерные белки могут быть экспрессированы в клетках-хозяевах. трансформированных рекомбинантным вектором экспрессии. с последующей сборкой. где для получения двухвалентных анти-РСВ антител между фрагментами Рс образуются межцепочечные дисульфидные связи. Как правило. клетки-хозяева и системы экспрессии представляют собой системы экспрессии в клетках млекопитающих. осуществляющих гликозилирование химерных белков. Полученные химерные полипептиды. содержащие фрагменты Рс. и образовавшиеся из них поливалентные антитела могут быть легко очищены с помощью аффинной хроматографии на колонках с белком А или белком О. Если две нуклеиновые кислоты. кодирующие различные анти-РСВ химерные полипептиды. трансформированы в клетки. биохимически это приведет к формированию гетеродимеров. также анти-РСВ химерные молекулы. несущие Рс-домен. будут экспрессироваться в виде дисульфидсвязанных гомодимеров. Таким образом. количество гомодимеров может быть уменьшено в условиях. которые способствуют разрушению межцепочечных дисульфидных связей. но не влияют на внутрицепочечные дисульфидные связи. Как правило. химерные мономеры с различными связывающими частями смешивают в эквимолярном количестве и окисляют с образованием смеси гомо- и гетеродимеров. Компоненты этой смеси разделяют с помощью хроматографии.
Альтернативно. предпочтительного образования гетеродимеров можно добиться методами генной инженерии. экспрессируя анти-РСВ антигенсвязывающие гибридные молекулы. содержащие анти-РСВ антигенсвязывающие фрагменты. а затем Рс-домен ЫдО и с-_)ипе или с-Гок лейциновые молнии. Так как лейциновые молнии предпочтительно образуют гетеродимеры. они при желании могут быть использованы для предпочтительного формирования гетеродимеров. Анти-РСВ химерные полипептиды. содержащие Рс фрагменты. также могут включать металл-хелатную метку или другой эпитоп. Помеченный домен может быть использован для быстрой очистки с помощью металл-хелатной хроматографии и/или с помощью антител. что обеспечит обнаружение методом вестерн блотинг. иммунопреципитацией или анализы на исчезновение/блокировку активности.
- 47 023179
Ό. Дополнительные модификации анти-РСВ антител
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть модифицированы. Модификации анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов могут улучшить одно или несколько свойств антител, включая, но не ограничиваясь снижением иммуногенности антитела или антигенсвязывающего фрагмента, увеличением времени полураспада антител или антигенсвязывающих фрагментов, например, за счет уменьшения восприимчивости к протеолизу и/или снижению чувствительности к окислению, а также изменением или улучшением свойств связывания антитела или антигенсвязывающего фрагмента. Примеры модификаций включают, но не ограничиваются модификацией первичной аминокислотной последовательности анти-РСВ антитела или его антигенсвязывающего фрагмента и посттрансляционной модификацией анти-РСВ антитела или его антигенсвязывающего фрагмента. Примеры посттрансляционной модификации включают, например, гликозилирование, ацетилирование, пегилирование, фосфорилирование, амидирование, дериватизацию защитной/блокирующей группой, протеолитическим расщеплением, связыванием с клеточным лигандом или другими белками. Другие примеры модификации включают присоединение к анти-РСВ антителам или их антигенсвязывающим фрагментам одного или более гетерологичных пептидов для изменения или улучшения одного или нескольких свойств антитела или антигенсвязывающего фрагмента.
Как правило, модификации не приводят к увеличению иммуногенности антител или антигенсвязывающих фрагментов и существенно негативно не влияют на связывание антител или антигенсвязывающих фрагментов с РСВ. Методы оценки связывания, модифицированных антител или их антигенсвязывающих фрагментов с белком Р РСВ предусмотрены в настоящем документе и известны в данной области. Например, модифицированные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть проанализированы на связывание с белком Р РСВ, например, с помощью ИФА, поверхностного плазмонного резонанса (ЗРК) или с помощью ίη νίίτο анализов микронейтрализации.
В настоящем документе предусмотрен способ повышения времени полураспада предусмотренных анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов. Увеличение времени полураспада анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу может повысить терапевтическую эффективность анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов и позволяет реже вводить антитела или их антигенсвязывающие фрагменты для профилактики и/или лечения, например, предупреждения или лечения инфекции РСВ, предотвращения, лечения и/или облегчения одного или нескольких симптомов инфекции РСВ, или уменьшения продолжительности инфекции РСВ.
Модификация анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу может включать одну или несколько аминокислотных замен, делеций или вставок путем естественной мутации или человеческой манипуляции с исходными антителами. Методы модификации полипептидов, таких как антитела, известны и могут быть использованы для модификации любого антитела или антигенсвязывающего фрагмента по настоящему документу. В некоторых примерах фармакокинетические свойства анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу могут быть улучшены за счет модификаций Рс, известных специалистам в данной области. Для введения мутаций в нуклеотиды, кодирующие антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу, для получения полипептида с одной или более аминокислотными заменами могут быть использованы стандартные методы, известные специалистам в данной области. Примеры способов введения мутаций включают, но не ограничиваются сайт-направленным мутагенезом и ПЦР-опосредованным мутагенезом.
Анти-РСВ антитела и их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть модифицированы присоединением гетерологичных пептидов для облегчения очистки. Как правило, такие пептиды экспрессируются в виде гибридного белка, содержащего антитело, слитое с пептидом на Сили Ν-конце антитела или антигенсвязывающего фрагмента. Примеры обычно используемых для очистки пептидов включают, но не ограничиваются гексагистидиновым пептидом, пептидом гемагглютинина (НА) и Лад пептидом (см., например, ХУПюп е( а1. (1984) Се11 37:767; \УП/да11 е( а1. (1994) Апа1 ВюсНет 223:2, 291-8). Слияние не обязательно осуществляется напрямую, но может быть проведено через пептидный линкер. В некоторых примерах пептидный линкер содержит сайт расщепления протеазы, который позволяет удалить пептид после очистки расщеплением протеазой, которая специфически распознает сайт расщепления.
Анти-РСВ антитела и их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу также могут быть модифицированы присоединением гетерологичного полипептида, который направляет антитело или антигенсвязывающий фрагмент к определенному типу клеток (например, эпителиальным клеткам дыхательных путей) ίη νίίτο или ίη νίνο. В некоторых примерах анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть направлены на определенный тип клеток путем слияния или конъюгирования антитела или антигенсвязывающего фрагмента с антителом, специфичным к определенному рецептору клеточной поверхности, или с другим полипептидом, взаимодействующим со специфическим рецептором клетки.
В некоторых примерах анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть направлены к поверхности клетки-мишени и/или захвачены клеткой-мишенью путем слияния или конъюгирования антитела или антигенсвязывающего фрагмента с пептидом, который
- 48 023179 связывает гликопротеины клеточной поверхности, таким как домен трансдукции белков (например, ТАТ пептид). Примеры доменов трансдукции белков включают, но не ограничиваются РТЭ. полученными из белков, таких как ТАТ вируса иммунодефицита человека 1 (ВИЧ-1) (КиЬеп е! а1. (1989) I. νίτοί. 63:1-8; например, 8Е(') II) N08: 1571-1582, такие как, например, ОКККККЦККК (ТАТ 48-57) 8ЕО II) N0: 1575), белок оболочки вируса герпеса АТ22 (ЕШо!! и О'Наге (1997) Се11 88:223-233, например, 8ЕЦ ГО N0: 1587), гомеотический белок Ап!еппареб1а (Ап!р) Ого8орЫ1а те1апода8!ег (пенетратин РТЭ; Эего881 е! а1. (1996) I. Вю1. СЬет. 271:18188-18193, например, 8ЕЦ ГО N0: 1556-1559), антимикробный пептид 8упВ протегрин 1 (РО-1) (например, 8упВ1, 8упВ3 и 8упВ4; 1<окгуако\' е! а1. (1993) РЕВ8 Ьей. 327:231-236, например, 8ЕЦ ГО N0: 1568-1570 соответственно) и основной фактор роста фибробластов Цап8 (1994) РА8ЕВ1. 8:841-847, например, 8ЕЦ ГО N0: 1552). РТЭ также включают синтетические РТО, включая, но не ограничиваясь, полиаргининовыми пептидами (Ри1ак| е! а1. (2003) I. Мо1. Кесодпй. 16:260-264; 8ιιζιι1<ί е! а1. (2001) I. Вю1. СЬет. 276:5836-5840, например, 8ЕЦ ГО N0: 1560-1561), транспортаном (Роода е! а1. (1988) РА8ЕВ I. 12:67-77; Роода е! а1. (2001) РА8ЕВ I. 15:1451-1453, например, 8Е() ГО N0: 1583-1586), МАР (0еЬ1ке е! а1. (1998) ВюсЫт. ВюрЬу8. Ас!а. 1414:127-139; например, 8ЕЦ ГО N0: 1550), КАЬА (Аутап е! а1. (1997) ВюсЬет18Ьу 36:3008-3017; например, 8ЕЦ ГО N0: 1548) и другими катионными пептидами, такими как, например, различные β-катионные пептиды (Лккага\уопд8а е! а1. (2008) АпЬт1сгоЬ. Адеп!8 апб СЬетоШег. 52(6):2120-2129).
Анти-РСВ антитела и их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть модифицированы присоединением диагностической и/или терапевтической части к антителу или антигенсвязывающему фрагменту. Анти-РСВ антитела и их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть модифицированы ковалентным присоединением любого типа молекул, таких как диагностические или терапевтические молекулы, к антителу или антигенсвязывающему фрагменту, при условии, что ковалентное присоединение не мешает связыванию антитела или антигенсвязывающего фрагмента с соответствующим эпитопом. Например, анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть дополнительно модифицированы ковалентным присоединением молекулы таким образом, что ковалентное присоединение не мешает антителу или антигенсвязывающему фрагменту связывать РСВ. В некоторых примерах антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть слиты с рекомбинантным гетерологичным полипептидом на N или С-конце или химически конъюгированы, включая ковалентное и нековалентное конъюгирование, с гетерологичным полипептидом или другим веществом. Например, гетерологичный полипептид или композиция может представлять собой диагностический полипептид или другой фрагмент для диагностики или терапевтический полипептид или другой терапевтический фрагмент. Примеры диагностических и терапевтических фрагментов включают, но не ограничиваются лекарствами, радионуклидами, токсинами, флуоресцентными молекулами (см., например, международные заявки РСТ № А0 92/08495, А0 91/14438, А0 89/12624, патент США № 5314995 и ЕР 396387). Диагностические полипептиды или диагностические фрагменты могут быть использованы, например, как метки для ш угуо или ш νί!ΐΌ детекции. Терапевтические полипептиды или терапевтические фрагменты могут быть использованы, например, для лечения вирусных инфекций, таких как инфекция РСВ, или для лечения одного или нескольких симптомов вирусной инфекции.
Дополнительные белки слияния анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу могут быть получены методов шаффлинга (обмена и изменения порядка фрагментов) генов, шаффлинга мотивов, шаффлинга экзонов и/или шаффлинга кодонов (совместно обозначаемых шаффлинг ДНК). Шаффлинг ДНК может быть использован для модификации активности антиРСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу, например, для получения антител или их антигенсвязывающих фрагментов с более высокой аффинностью и сниженной скоростью диссоциации (см., например, патенты США № 5605793, 5811238, 5830721, 5834252, 5837458 и Ра!!еп е! а1. (1997) Сигг. 0ртюп Вю!есЬпо1. 8:724-33; Нагауата (1998) Тгепб8 Вю!есЬпо1. 16(2):76-82; Нап88оп е! а1. (1999) I. Мо1 Вю1. 287:265-76; и Ьоге^о и В1а8со (1998) Вю!есЬтдце8 24(2):308-13). Предусмотренные анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть прикреплены к твердой подложке, что облегчает иммунолоанализ или очистку антигена-мишени. Примеры твердых носителей включают, но не ограничиваются стеклом, целлюлозой, полиакриламидом, нейлоном, полистиролом, поливинилхлоридом или полипропиленом.
1. Модификации для снижения иммуногенности
В некоторых примерах антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть дополнительно модифицированы для уменьшения иммуногенности для субъекта, такого как человек. Например, для изменения потенциальных эпитопов для Т-клеток человека с целью устранения или уменьшения иммуногенности антитела или антигенсвязывающего фрагмента при контакте с иммунной системой субъекта можно изменить одну или несколько аминокислот в антителе или его антигенсвязывающем фрагменте. Примеры модификаций включают замены, делеции и вставки одной или более аминокислот, которые устраняют или уменьшают иммуногенность антитела или антигенсвязывающего фрагмента. Как правило, такие модификации не влияют на специфичность связывания антитела или антигенсвязывающего фрагмента для соответствующих антигенов. Снижение иммуногенности антитела
- 49 023179 или антигенсвязывающего фрагмента может улучшить одно или несколько свойств антитела или антигенсвязывающего фрагмента, например повысить терапевтическую эффективность антитела или его антигенсвязывающего фрагмента и/или увеличить период полураспада антитела или антигенсвязывающего фрагмента ίη νίνο.
2. Модификации Рс
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут содержать Рс район дикого типа или модифицированный Рс район. Как описано в настоящем документе, район Рс может быть связан с анти-РСВ антигенсвязывающим фрагментом по настоящему документу, например, 58с5 или кс5, или антигенсвязывающим фрагментом на основе 58с5 или кс5. В некоторых примерах район Рс может быть модифицирован для изменения одного или нескольких свойств полипептида Рс. Например, район Рс может быть модифицирован для изменения (то есть усиления или ослабления) эффекторных функций по сравнению с эффекторной функцией района Рс тяжелой цепи иммуноглобулина дикого типа. Рс район антитела взаимодействует с рядом рецепторов Рс и лигандов, участвуя в множестве важных функциональных процессов, называемых эффекторными функциями. Эффекторные функции Рс включают, например, связывание Рс рецепторов, комплемента и подавление активности Тклеток (см., например, патент США № 6136310). Методы определения подавления активности Т-клеток, эффекторных функций Рс и стабильности антител известны в уровне техники. Например, Рс домен молекулы Ι§0 взаимодействует с РсуК. Эти рецепторы экспрессируются на различных иммунных клетках, включая, например, моноциты, макрофаги, нейтрофилы, дендритные клетки, эозинофилы, тучные клетки, тромбоциты, В-клетки, большие зернистые лимфоциты, клетки Лангерганса, натуральные киллеры (ИК), γδ Т-клетки. Формирование Рс/РсуК комплекса привлекает эти клетки-эффекторы в места связывания антигена, как правило, приводя к сигнализации внутри клеток и важным последующим иммунным реакциям, таким как высвобождение медиаторов воспаления, активация В-клеток, эндоцитоз, фагоцитоз и цитотоксическая атака. Возможность выступать посредником при цитотоксической и фагоцитарной эффекторных функциях является потенциальным механизмом, посредством которого антитела разрушают клетки-мишени. Распознавание и лизис связанных антителами клеток-мишеней цитотоксическими клетками, которые экспрессируют РсуК, называют антителозависимой клеточной цитотоксичностью (ΑΩΟΥ). Другие Рс рецепторы для различных изотипов антител включают РсеК (Ι§Ε), РсаК (Ι§Α) и РсцК (Ι§Μ).
Таким образом, модифицированный Рс район может изменить аффинность, включая, но не ограничиваясь повышением, снижением или утратой аффинности к рецептору Рс. Например, различные подклассы Ι§0 имеют различную аффинность к РсуК, где ΙβΟ1 и Ι§03, как правило, связывают рецептор существенно лучше, чем ΙβΟ2 и ΙβΟ4. Кроме того, различные РсуК опосредуют различные эффекторные функции. РсуК1, РсуКНа/с и РсуКШа являются положительными регуляторами опосредованной иммунными комплексами активации, характеризуясь наличием внутриклеточного домена с иммунорецепторного активационного тирозинового мотива (ΙΤΑΜ). РсуКПЬ, однако, несет иммунорецепторный ингибиторный тирозиновый мотив (ΙΤΙΜ) и, следовательно, является ингибиторным. Таким образом, изменение аффинности Рс района к рецепторам может модулировать эффекторные функции, индуцированные доменом Рс.
В одном из примеров используется Рс район, модифицированный для оптимизации связывания с определенными РсуК для улучшенной активации эффекторных функций, таких как, например, антителозависимая клеточная цитотоксичность, ΑΩίΥ. Такой модифицированный Рс район может содержать модификации одной или нескольких аминокислот (в соответствии с нумерацией по КаЬа1, КаЬа1 е1 а1. (1991) 8ециепсек οί Рго1ешк οί Iттиηο1οд^са1 РИегекГ и.8. ОерагПпеШ οί Неа11Ь алб Нитал 8егуюек), включая, но не ограничиваясь, аминокислотами в позициях 249, 252, 259, 262, 268, 271, 273, 277, 280, 281, 285, 287, 296, 300, 317, 323, 343, 345, 346, 349, 351, 352, 353 и 424. Например, модификации района Рс могут включать, например, одну или более из О1198, Ο119Α, 8122Ω, 8122Ε, 8122^ 8122Р, 8122Τ, К129Н, К129Υ, Ω132Υ, Μ38Υ, Ε141Υ, Т143Н, ν147Ι, 8150Ε, Η151Ω, Ε155Υ, Ε155Ι, Е155Н, К157Е, Ο164Ω, Ε166Ω, Е166Н, 8181Α, 8181Ω, 8187Τ, 8207О, 8307Ι, К209Т, К209^ К209П, Α210Ω, Α213Υ, Α213Ω, Α213Ι, Ι215Ω, К15Е, Ι215Η Ι215Ρ, Ε216Υ, Е216А, К217Х К217Р, К217А и Р279Ь модификаций последовательности Ι§01, приведенной в 8ΕΟ ГО N0: 1601, или их комбинации. Модифицированные Рс, содержащие указанные мутации, могут характеризоваться повышенным связыванием с РсК, таким как, например, активирующий рецептор РсуШа, и/или могут характеризоваться сниженным связыванием с ингибиторным рецептором РсуКПЬ (см., например, заявку США 2006/0024298). Модифицированные для увеличения связывания с РсК районы Рс могут быть более эффективными в содействии уничтожению зараженных вирусом (например, РСВ) клеток у пациентов.
В некоторых примерах антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть модифицированы для улучшения взаимодействия антитела или антигенсвязывающего фрагмента с РсКп рецепторами для увеличения времени полураспада ίη νίνο и улучшения фармакокинетики антител или их антигенсвязывающих фрагментов (см., например, патент США № 7217797, заявки США № 2006/0198840 и 2008/0287657). РсКп представляет собой РсК новорожденных, связывание с которым
- 50 023179 возвращает эндоцитированное антитело или антигенсвязывающий фрагмент из эндосомы обратно в кровоток. Этот процесс в комбинации с невозможностью фильтрации в почках из-за большого размера полноразмерной молекулы приводит к благоприятным для антител временам полураспада в сыворотке от одной до трех недель. Связывание Рс с РсКп также играет важную роль в транспорте антител.
Примеры модификаций Рс района включают, но не ограничиваются мутациями Рс, описанными в патенте США № 7217797, заявках США № 2006/0198840, 2006/0024298 и 2008/0287657 и международной заявке \У0 2005/063816, например, мутации одного или нескольких аминокислотных остатков (по нумерации Кабат, КаЬа! е! а1. (1991)) 251-256, 285-90, 308-314, в Си2 домене и/или аминокислотных остатков 385-389 и 428-436 в Сн3 домене Рс константного района тяжелой цепи, где модификация изменяет аффинность к рецепторам и/или время полувыведения по сравнению с не модифицированным антителом или антигенсвязывающим фрагментом. В некоторых примерах Рс район изменен в константном районе 1дО по одной или нескольким аминокислотам в позициях 250, 251, 252, 254, 255, 256, 263, 308, 309, 311, 312 и 314 в домене и Си2 и/или аминокислотам в позициях 385, 386, 387, 389, 428, 433, 434, 436 и 459 в домене СЛ константного района тяжелой цепи 1дО. Такие модификации соответствуют, например, аминокислотам О1у120, Рго121, 8ег122, РЬе124, Ьеи125, РЬе126, ТЬг133, Рго174, Агд175, О1и177, О1п178 и Аяп180 в домене СН2 и аминокислотам О1п245, Vа1246, §ег247, ТЬг249, §ег283, О1у285, §ег286, РЬе288 и Ме!311 в домене ΟΗ3 в последовательности 1дО1, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 1601. В некоторых примерах модификации затрагивают один или несколько экспонированных на поверхности остатков, и модификация представляет собой замещение на остаток подобного заряда, полярности или гидрофобности по сравнению с заменяемым остатком.
В конкретном примере константный район Рс тяжелой цепи модифицирован по одной или нескольким аминокислотам в позициях 251, 252, 254, 255 и 256 (по нумерации Кабат), где в положении 251 аминокислоту заменяют на Ьеи или Агд, в положении 252 аминокислоту заменяют на Туг, РЬе, 8ег, Тгр или ТЬг, в положении 254 аминокислоту заменяют на ТЬг или §ег, в положении 255 заменяют на Ьеи, О1у, 11е или Агд и/или в положении 256 заменяют на 8ег, Агд, О1п, О1и, Аяр, А1а, Аяр или ТЬг. В некоторых примерах константный район Рс тяжелой цепи модифицирован по одной или нескольким аминокислотам в позициях 308, 309, 311, 312 и 314, где в положении 308 аминокислоту заменяют на ТЬг или 11е, в положении 309 аминокислоту заменяют на Рго, в положении 311 аминокислоту заменяют на 8ег или О1и, в положении 312 аминокислоту заменяют на Аяр и/или в положении 314 аминокислоту заменяют на Ьеи. В некоторых примерах константный район Рс тяжелой цепи модифицирован по одной или нескольким аминокислотам в позициях 428, 433, 434 и 436, где в положении 428 аминокислоту заменяют на Мер ТЬг, Ьеи, РЬе или §ег, в положении 433 аминокислоту заменяют на Ьуя, Агд, §ег, Рго, О1п или Ηίδ, в положении 434 аминокислоту заменяют на РЬе, Туг и Ηίδ и/или в положении 436 аминокислоту заменяют на Ηίδ, Аяп, Аяр, ТЬг, Ьуя, Ме! или ТЬг. В некоторых примерах константный район Рс тяжелой цепи модифицирован по одной или нескольким аминокислотам в позициях 263 и 459, где в положении 263 аминокислоту заменяют на О1п или О1и и/или в положении 459 аминокислоту заменяют на Ьеи или РЬе.
В некоторых примерах константный район Рс тяжелой цепи может быть модифицирован для повышения связывания с белком комплемента С1с|. В дополнение к взаимодействию с РсК, Рс также взаимодействует с белком С1с| комплемента, проявляя комплемент-зависимую цитотоксичность (СЭС). С1с| образует комплекс с сериновыми протеазами С1г и СИ и формирует С1 комплекс. С1с| способен связывать шесть антител, хотя связывание к двум 1дО достаточно для активации каскада комплемента. Как при взаимодействии Рс с РСК различные подклассы 1дО имеют различную аффинность к С1д, при этом 1дО1 и 1дО3, как правило, связывают белок комплемента существенно лучше, чем 1дО2 и 1дО4. Таким образом, модифицированный Рс с увеличенным связыванием С1с| может активнее вызывать СЭС и может активнее уничтожать зараженные вирусом (например, РСВ) клетки. Примеры модификаций домена Рс, которые повышают связывание С 1ц, включают, но не ограничиваются модификацией аминокислот в позициях 345 и 353 (по нумерации Кабат). Примеры модификации включают замены К209^, Κ209Υ и Е2168 в последовательности 1дО1, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 1601 в качестве примера.
В другом примере также предусмотрены различные мутанты Рс с заменами, уменьшающими или полностью устраняющими связывание с РсуР. Такие мутанты полезны в тех случаях, когда необходимо уменьшить или устранить эффекторные функции, опосредованные Рс. Такие варианты предпочтительны, когда желательно получить связывание, но не уничтожение клеток, несущих антиген-мишень. Примеры таких Рс представляют собой мутант Рс, описанный в патенте США № 5457035, который модифицирован по аминокислотным позициям 248, 249 и 251 (по нумерации Кабат). В приведенной в качестве примера последовательности 1дО1, приведенной в §ЕЦ ГО N0: 1601, Ьеи в положении 117 заменен на А1а, Ьеи в положении 118 заменен на О1и и О1у в положении 120 заменен на А1а. Подобные мутации могут быть введены в любую последовательность Рс, такую как, например, последовательность Рс, приведенная в качестве примера. Полученный мутант проявляет сниженную аффинность к рецепторам Рс.
Могут быть разработаны антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу, содержащие модифицированные Рс районы. Например, способы слияния или конъюгирования полипептидов с константными районами антител (т.е. получения белков слияния Рс) известны в уровне техники и описаны, например, в патентах США № 5336603, 5622929, 5359046, 5349053, 5447851,
- 51 023179
5723125, 5783181, 5908626, 5844095, 5112946; ЕР 307434, ЕР 367166, ЕР 394827, заявках νθ 91/06570, νθ 96/04388, νθ 96/22024, νΟ 97/34631 и νΟ 99/04813; Лкккепз/ι е1 а1. (1991) Ргос. Асай. Зск
ИЗА 88:10535-10539; Тгаипескег е1 а1. (1988) ХаПие 331:84-86; 2кепд е1 а1. (1995) ΐ. Iттиηο1. 154:55905600; и УП е1 а1. (1992) Ргос. Ν;·Π1. Асай. Зс1. ИЗА 89:11337-11341 (1992), а также описаны в настоящем документе. В некоторых примерах модифицированный район Рс, имеющий одну или несколько модификаций, которые увеличивают аффинность связывания РсКп и/или увеличивают время полураспада, могут быть слиты с анти-РСВ антителом или антигенсвязывающим фрагментом по настоящему документу.
3. Пегилирование
Для увеличения времени полураспада и/или улучшения фармакокинетических профилей анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть конъюгированы с полимерными молекулами, такими как высокомолекулярный полиэтиленгликоль (ПЭГ). Конъюгация может быть осуществлена с помощью методов, известных специалистам в данной области. Было показано, что конъюгация терапевтических антител с ПЭГ улучшает их фармакодинамику, не оказывая влияния на функции (см., например, ЭескеП е1 а1., 1п1. ΐ. Сапсег 87: 382-390, 2000; КтдЫ е1 а1., Р1а1е1е1к 15:409-418, 2004; Ρνοι^ е1 а1., Суйкше 16: 106-119, 2001; и Υаηд е1 а1., Ргойш Епд. 16:761-770, 2003). РЕО может быть присоединен к антителам или антигенсвязывающим фрагментам через многофункциональный линкер или без него, либо посредством сайт-специфического конъюгирования с Ν- или Сконцом антитела или антигенсвязывающего фрагмента, или через эпсилон-аминогруппы лизина. Для минимальной потери биологической активности может быть использована дериватизация линейным или разветвленным полимером. Уровень конъюгации можно контролировать с помощью ЗЭЗ-РАОЕ и массспектрометрии для обеспечения надлежащего конъюгирования молекулы ПЭГ с антителами. Непрореагировавший РЕО может быть отделен от конъюгатов антител с РЕО, например, с помощью эксклюзионной или ионно-обменной хроматографии. РЕО-производные антител или их антигенсвязывающих фрагментов могут быть проверены на способность связывать РСВ антигены, а также на эффективность ш νίνο с помощью известных специалистам в данной области способов, например с помощью иммуноанализов, описанных в настоящем документе.
4. Конъюгация с обнаруживаемой меткой
В некоторых примерах анти-РСВ антитела и фрагменты антител по настоящему документу могут быть модифицированы конъюгированием с обнаруживаемой меткой. Обнаруживаемые фрагменты можно детектировать напрямую или не напрямую. В зависимости от выбранного обнаруживаемого фрагмента он может быть детектирован ш νίνο и/или ш νίίτο. Обнаруживаемые метки могут быть использованы, например, в методах диагностики для определения наличия РСВ или локализации РСВ или в анализах связывания для определения аффинности анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов к РСВ. Обнаруживаемые метки также могут быть использованы в методах получения анти-РСВ антител, например при очистке антител или антигенсвязывающих фрагментов. Как правило, обнаруживаемые фрагменты подобраны таким образом, что конъюгация обнаруживаемого фрагмента не мешает связыванию антитела или антигенсвязывающего фрагмента с целевым эпитопом. Как правило, выбор обнаруживаемого фрагмента зависит от требуемой чувствительности, условий конъюгирования с соединением, стабильности, имеющихся приборов и утилизации положений. Специалисту в данной области известны методы работы с метками и очевиден выбор совместимой и подходящей для анализа обнаруживаемой метки. Методы мечения антител обнаруживаемыми фрагментами известны в данной области и включают, например, рекомбинантный и химический способы.
Обнаруживаемый фрагмент может представлять собой любой материал, имеющий обнаруживаемые физические или химические свойства. Такие обнаруживаемые метки хорошо известны в области иммунохимии и, как правило, практически любая используемая в таких методах метка может быть применена в предусмотренных методах. Таким образом метка представляет собой любую композицию, обнаруживаемую спектроскопическими, фотохимическими, биохимическими, иммунохимическими, электрическими, оптическими или химическими средствами. Полезные метки включают, но не ограничиваются флуоресцентными красителями (например, флуоресцеин изотиоцианатом, техасским красным, родамином и тому подобным), радиоактивными метками (например, 3Н, 125Ι, 35З, 14С или 32Р), в частности, гамма- и позитронизлучающими изотопами (например, 157Ой, 55Мп, 162Эу, 52Сг и 56Ре), ионами металлов (например, 1П1п, 97Ки, 67Оа, 68Оа, 72Ак, 89Ζτ и 201Т1), ферментами (например, пероксидазой хрена, щелочной фосфатазой и другими, обычно используемыми в ИФА), переносящими электроны агентами (например, связывающими металл белками и соединениями), люминесцентными и хемилюминесцентными метками (например, люциферином и 2,3-дигидрофталазиндионами, например люминолом), магнитными шариками (например, ^ΥNАΒΕА^З™) и колориметрическими метками, такими как коллоидное золото или цветные стеклянные или пластиковые шарики (например, из полистирола, полипропилена, латекса и т.п.). Обзор различных меток или сигнальных систем, которые могут быть использованы по настоящему документу, см., например, в патенте США № 4391904.
5. Конъюгация терапевтического фрагмента
В некоторых примерах анти-РСВ антитела и антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть модифицированы конъюгированием с терапевтическим фрагментом. Примеры тера- 52 023179 певтических фрагментов включают, но не ограничиваются цитотоксинами (например, цитостатическими или разрушающими клетки агентами), терапевтическими агентами или радиоактивными ионами металлов (например, альфа-излучателями). Примеры цитотоксинов или цитостатиков включают, но не ограничиваются любыми агентами, которые отрицательно влияют на клетки, включая, но не ограничиваясь паклитаксолом, цитохалазином, грамицидином Ό, бромистым этидием, эметином, митомицином, этопозидом, тенопозидом, винкристином, винбластином, колхицином, доксорубицином, даунорубицином, дигидроксиантрациндионом, митоксантроном, митрамицином, актиномицином Ό, 1-дегидротестостероном, глюкокортикоидами, прокаином, тетракаином, лидокаином, пропранололом, пуромицином и их аналогами или гомологами. Примеры терапевтических агентов включают, но не ограничиваются антиметаболитами (например, метотрексатом, 6-меркаптопурином, 6-тиогуанином, цитарабином, 5-фторурацилом, декарбазином), алкилирующими агентами (например, мехлорэтамином, тиотепа, хлорамбуцилом, мелфаланом, кармустином (Β8Nυ) и ломустином (ССNυ), циклофосфамидом, бусульфаном, дибромоманнитолом, стрептозотоцином, митомицином С и цис-дихлородиамин платиной (ίί) (ДДП), цисплатином), антрациклинами (например, даунорубицином (ранее дауномицин) и доксорубицином), антибиотиками (например, дактиномицином (ранее актиномицин), блеомицином, митрамициномом и антрамицином (АМС)), антимитотическими агентами (например, винкристином и винбластином) и противовирусными агентами, включая, но не ограничиваясь, аналогами нуклеозидов, такими как зидовудин, ацикловир, гангцикловир, видарабин, идоксуридин, трифлуридин и рибавирин; фоскаметом, амантадином, римантадином, саквинавиром, индинавиром, ритонавиром и альфа-интерфероном.
В некоторых примерах анти-РСВ антитела и антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть модифицированы конъюгированием с терапевтическим фрагментом, который представляет собой терапевтический полипептид. Примеры терапевтических полипептидов включают, но не ограничиваются токсинами, такими как абрин, рицин, экзотоксин Ρ5еиάотоηа5 или токсин дифтерии, или иммуностимулирующими агентами, например, цитокинами, включая, но не ограничиваясь интерфероном (например, ИФН-α, β, γ, ω), лимфокинами, гемопоэтическими факторами роста, такими как, например, СΜ-С8Ρ (гранулоцитарный макрофагальный колониестимулирующий фактор), интерлейкин-2 (ИЛ-2), интерлейкин-3 (ИЛ-3), интерлейкин-4 (ИЛ-4), интерлейкин-7 (ИЛ-7), интерлейкин-10 (ИЛ-10), интерлейкин-12 (ИЛ-12), интерлейкин-14 (ИЛ-14) и фактора некроза опухоли (ФНО).
6. Модификации, улучшающие специфичность связывания
Специфичность связывания анти-РСВ антител и фрагментов антител может быть изменена или улучшена с помощью известных способов, таких как бактериофаговый дисплей. Метод бактериофагового дисплея обычно связан с применением векторной системы экспрессии на поверхности нитчатых бактериофагов (фагмид) для клонирования и экспрессии библиотеки антител. В литературе для создания комбинаторных библиотек описаны различные фагмидные системы клонирования (см., например, описание получения комбинаторных библиотек антител в фагмидах Капд е! а1., (1991) Ριυα №·ι11. Αсаά. 8α., υ8Α, 88:4363-4366; ВагЬак е! а1., (1991) ΡϊΌς. №ί1. Αсаά. 8α., υ8Α, 88:7978-7982; ΖеЬеάее е! а1., (1992) Ρι-ос. №к. Αсаά. 8α., υ8Α, 89:3175-3179; Кап§ е! а1., (1991) ΡϊΌς. №ί1. Αсаά. 8α., υ8Α, 88:11120-11123; ВагЬак е! а1., (1992) Ρι-ос. №ι11. Αсаά. 8α., υ8Α, 89:4457-4461; ;·ιπά Сгат е! а1., (1992) Ρι-ос. №!1. Αсаά. 8е!, υ8Α, 89:3576-3580, которые включены в настоящий документ в качестве ссылки).
В конкретных примерах последовательности ДНК, кодирующие νΗ и Уъ домены, амплифицируют с библиотеки кДНК животного (например, библиотеки кДНК из лимфоидной ткани человека или мыши). ДНК, кодирующую νι ι и Уъ домены, рекомбинируют вместе с линкером для 5сΡν методом ПЦР и клонируют в фагмидный вектор (например, ρСΑNТΑΒ 6 или рСотЬ 3 Η88). Вектор вводят электропорацией в Е. сок и Е. сок заражают бактериофагом-помощником. Используемые в указанных методах бактериофаги, как правило, представляют собой нитчатые бактериофаги, включая ΡΌ и М13, и νΗ и Уъ домены, как правило, рекомбинантно сливают геном ίίί или геном νίίί бактериофага. Бактериофаги, экспрессирующие антигенсвязывающий домен, который связывает антиген РСВ, например, белок Ρ РСВ, могут быть отобраны или идентифицированы с помощью антигена, например, с помощью меченого антигена или антигена, связанного или иммобилизованного на твердой подложке или бусине. Примеры методов бактериофагового дисплея, которые могут быть использованы для бактериофагового дисплея антител, описаны, например, в Вппктап е! а1. (1995) I. ίттиηо1. ΜеίЬоά5 182:41-50; Αте5 е! а1. (1995) I. ίттиηо1. Μе!Ьоά5 184:177-186; КеШеЬогоидк е! а1. (1994) Еиг. I. ίттиηо1. 24:952-958; Ρе^5^с е! а1. (1997) Сепе 187:9-18; Вийоп е! а1. (1994) Αάνаηсе5 т кптипоКду 57:191-280; заявках XVО 90/02809, XVО 91/10737, ХХ'О 92/01047, ХХ'О 92/18619, ХХ'О 93/1 1236, ХХ'О 95/15982, ХХ'О 95/20401, и ХО97/13844; патентах США № 5698426, 5223409, 5403484, 5580717, 5427908, 5750753, 5821047, 5571698, 5427908, 5516637, 5780225, 5658727, 5733743 и 5969108, каждый из которых включен в настоящий документ в качестве ссылки в полном объеме.
Как описано в приведенных выше ссылках, после отбора бактериофагов из них могут быть выделены кодирующие антитела районы, которые могут быть использованы для создания целого антитела, включая человеческие антитела, или любого другого желаемого антигенсвязывающего фрагмента, с последующей экспрессией в любом хозяине, включая клетки млекопитающих, клетки насекомых, клетки растений, дрожжей и бактерий, например, как описано в настоящем документе. В методах рекомбинант- 53 023179 ного получения РаЬ, РаЬ' и Р(аЬ')2 фрагментов могут быть также использованы другие известные способы, такие как описано в А0 92/22324; МиШиах е! а1. (1992) ВюТесЬтциез 12(6):864-869; За\уа1 е! а1. (1995) АДИ 34:26-34; и Ве!!ег е! а1. (1988) Зс1епсе 240:1041-1043.
С полученными фагмидными библиотеками можно манипулировать для увеличения и/или изменения иммуноспецифичности получаемых антител или антигенсвязывающих фрагментов, а также получения дополнительных антител с улучшенными свойствами, такими как увеличенное связывание антигенамишени. Например, ДНК, кодирующую тяжелую или легкую цепь или обе цепи, можно подвергнуть мутагенезу в области определяющего комплементарность района (СЭР) вариабельного домена полипептида иммуноглобулина, а затем скринировать полученные варианты на желаемую иммунореактивность и активность нейтрализации. Полученные антитела могут быть скринированы с помощью одного или нескольких тестов для определения активности нейтрализации, описанных в настоящем документе.
Для некоторых применений, включая применение антител ίη νίνο на человеке и для детекции ίη νί!го, используются человеческие или химерные антитела. Полностью человеческие антитела особенно предпочтительны для лечения человеческого субъекта. Человеческие антитела могут быть получены различными способами, известными в данной области, включая бактериофаговый дисплей, описанный выше, с применением библиотеки антител, полученной из человеческих последовательностей иммуноглобулинов или синтетических последовательностей, гомологичных последовательностям человеческих иммуноглобулинов, см. патенты США № 4444887 и 4716111, а также заявки № А0 98/46645, XV0 98/50433, А0 98/24893, А098/16654, А0 96/34096, А0 96/33735 и А0 91/10741, которые включены в настоящий документ в качестве ссылки в полном объеме.
Е. Методы выделения анти-РСВ антител
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть идентифицированы и выделены с помощью различных методов, хорошо известных в данной области, включая, но не ограничиваясь, мышиными гибридомами (см., например, 01ззоп и Кар1ап (1980) Ргос N6 Асаб. За. ИЗА 77:54295431, такие антитела могут быть гуманизированы для применения на человеке, как описано в данном описании), трансгенными мышами, экспрессирующими гены иммуноглобулинов человека (см., например, Ке11егтап и Огееп (2000) Сигг. 0ρίη Вю!есЬпо1. 13:593-597), бактериофаговым дисплеем (см., например, Мапат (2004) №\у М1сгоЬю1. 27:315-28), а также выделением из зрелых человеческих иммунных клеток, таких как В-клетки (см., например, Вапсйегеаи и Роиззе! (1992) Абν 1ттипо1. 52:125-262, Сгобу и АНтеб (2004) Зетт 1ттипо1. 16:197-203, СагзеШ (2004) Мебюбз Мо1 Вю1. 271:25-35, МсИеу/егАПНатз и Мснеу/ег-ХАИПатз (2005) Аппи Реν 1ттипо1. 23:487-513). Например, в предусмотренных в настоящем документе способах человеческие анти-РСВ антитела и их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу идентифицированы и выделены из человеческих клеток.
Учитывая трудности в получении стабильных гибридом из человеческих клеток, секретирующих антитела, примером метода, который широко используется для получения и выделения человеческих секретирующих антитела клеток, является иммортализация человеческих клеток вирусом ЭпштейнаБарр (ЕВУ), который также вызывает активацию и пролиферацию поликлональных В-клеток (см., например, ЗидипоЮ е! а1., (2004) Сапсег Рез. 64:3361-3364.; В1зйор и ВизсН (2002) М1сгоЬез 1пГес1. 4:853857). Секретирующие антитела клетки были получены, например, иммортализацией ЕВУ клеток человека, например, из периферической крови, лимфатических узлов, селезенки, миндалин или плевральной жидкости пациентов или других лиц, которые подвергались воздействию антигена, или здоровых людей, предварительно выбранных с помощью меченого антигена (см., например, СазаЬ е! а1. (1986) Заепсе 234:476-9, ΥатадисН^ е! а1. (1987) Ргос №6 Асаб. За. ИЗА 84:2416-2420, Розпег е! а1. (1991) ί 1ттипо1. 146:4325-4332, РаР е! а1. (1988) ί Ехр Меб. 168:905-917, З!еепЬаккегз е! а1. (1993) нит АпЬЬоб нуЬпб. 4:166-173, З!еепЬаккегз е! а1. (1994) Мо1. Вю1. Рер. 19:125-134, Еνаηз е! а1. (1988) ί 1ттипо1 140:941-943, апб АаШз Р. е! а1. (1989) ί С1т 1жез! 84:214-219).
В связи с низкой трансформируемостью, низкой пролиферацией и нестабильностью при культивации и гетерогенностью ЕВУ-инфицированных человеческих клеток (СНап М е! а1. (1986) ί 1ттипо1 136:106-112 и Датез и Ве11 (1987) ί 1ттипо1 Мебюбз. 100:5-40) могут быть использованы другие известные способы, такие как слияние клеток, например слияние с миеломной клеточной линией (см., например, Вгоп е! а1. (1984) РЫЛЗ 81:3214-3217; ХАтадисШ е! а1. (1987) Ргос Ыаб. Асаб. 8οΐ. ИЗА 84:2416-2420; Розпег е! а1. (1991) ί 1ттипо1. 146:4325-4332, №ебЬа1а и З!о!! (1998) ИуЬпбота 17:299-304; Ы е! а1. (2006) Ргос N6. Аасб. За. ИЗА 103:3557-62). Дополнительные способы улучшения иммортализации ЕВУ включают, например, иммортализацию онкогенными вирусами, трансформацию онкогенами, миниэлектрослиянием и гетерослиянием мышиных и человеческих клеток в одну стадию (см., например, патент США № 4997764. З!еепЬаккегз е! а1. (1993) нит АпЬЬоб ИуЬпб. 4:166-173; Эеззат е! а1. (2004) ί 1ттипо1 Ме!Нобз. 291:109-22). Человеческие моноклональные антитела могут быть выделены из Вклеток при активации и иммортализации в присутствии или в отсутствие антигена и комбинации различных манипуляций в культуре клеток, как известно в данной области (см., например, ВоггеЬаеск С е! а1. (1988) Ргос. №б. Асаб. За. ИЗА 85:3995-3999, ЭауепроП е! а1. (1992) РЕМЗ М1сгоЫо1 1ттипо1. 4:335343, ЬагосЬе-Тгатеаи е! а1. (1994) нит АпбЬ ИуЬпб. 5:165-177, Мог§еййа1ег е! а1. (1996) ί. СНп Епбосппо1оду. 81:3155-3161, №ебЬа1а апб Кпгр1з/ (1993) 1ттипо1 Ьей. 35:93-100, Ми1бег е! а1. (1993) нит 1т- 54 023179 типо1. 36:186-192. Ниг е! а1. (2005) Се11 РгоЬГ. 38:35-45. ТгаддЫ е! а1. (2004) \а1 Меб 10:871-875. ТзисЫуата е! а1. (1997) Нит АпйЬобез 8:43-47 и заявки № УО 91109115. УО 041076677. УО 88101642. УО 90102795. УО 96140252. УО 02146233).
Способы выделения человеческих антител из зрелых В-клеток. как правило. предполагают выделение популяции зрелых В-клеток и скрининг антител. экспрессируемых В-клетками. против определенного антигена. Различные популяции секретирующих антитела клеток могут быть выделены от человеческого донора. имеющего специфический профиль (например, наивного, привитого, более или менее недавно инфицированного или серопозитивного), и из различных тканей (например, крови. миндалин, селезенки, лимфатических узлов). где находятся и проявляют активность В-клетки (У1аи апб 2оиаЬ (2005) СЬп 1ттипо1. 114:17-26). В примерах предусмотренных в настоящем документе способов анти-РСВ антитела по настоящему документу могут быть выделены из образцов мононуклеарных клеток периферической крови (МНПК). которые содержат В-клетки, выделенных из человеческих доноров и/или от здоровых человеческих доноров. которые были подвержены РСВ или для которых есть высокая вероятность, что они были подвержены РСВ. например от медицинских работников.
После выделения МНПК из биологических образцов может быть проведена специфическая селекция секретирующих антитела клеток с помощью одного из способов, известных в данной области. например, по экспрессии маркеров на клеточной поверхности и. при необходимости, по другим белкам. а также по пролиферативной активности, обмену веществ и/или морфологическим признакам клеток. В частности, в различных технологиях очистки секретирующих антитела клеток из человеческих образцов используются различные средства и условия для положительного или отрицательного отбора. Указанные клетки можно более легко и эффективно отобрать при физическом отделении клеток. которые экспрессируют маркеры клеточной поверхности, специфичные для клеток. которые экспрессируют и секретируют антитела (например, человеческие В-клетки). Конкретные протоколы известны и могут быть найдены в литературе (см.. например, Са11агб и Ко1о\У1С/ Нитап В-се11 гезропзез 1о суФкшез в СуФкше Се11 Вю1оду: А ргасйса1 АрргоасЬ. Ва1к\\з11 Р. (изд.) ОхГогб Ипке^ку Ргезз, 2000. 17-31).
Отбор специфических иммунных клеток. таких как В-клетки, как правило. проводят с помощью антител, которые иммуноспецифически связывают специфические белки клеточной поверхности В-клеток, где антитела могут быть связаны с твердой подложкой (например, микробусинами или пластиковыми планшетами) или с меткой. представляющей собой флуорохром. который может быть обнаружен с помощью флуоресцентного клеточного сортера (РАС8). Так. например, до иммортализации ЕВУ В-клетки человека были отобраны по их аффинности к подложке (например, микробусинам), связывающим СГО19. С.ГО27 и/или СГО22. или по отсутствию аффинности к антителам, специфичным к определенным изотипам (см.. например, Ы е! а1. (1995) ВюсЬет ВюрЬуз Кез Соттип 207:985-993. Вегпазсош е! а1. (2003) В1ооб 101:4500-4504 апб ТгаддЫ е1 а1. (2004) Ыа1 Меб 10:871-875). Выбор клеточного маркера для очистки может повлиять на эффективность процесса иммортализации, например, в связи с внутриклеточными сигналами, которые запускаются в процессе отбора и которые могут повлиять на рост и жизнеспособность клеток. Например, СГО22. который представляет собой специфичный В-клеточный трансмембранный белок. который управляет сигнальными путями. связанными с распознаванием антигена и активацией Вклеток. является примером молекулы для первоначального отбора В-клеток. Так как СГО22 положительная, население содержит клетки. которые экспрессируют антитела различных изотипов и специфичностей, для отбора клеток до либо после этапа стимуляции также могут быть использованы другие маркеры клеточной поверхности.
В некоторых примерах специфическое обогащение секретирующими антитела клетками может быть достигнуто за счет применения отбора по СГО27 в дополнение к отбору по СГО22. Как известно, СГО27 представляет собой маркер В-клеток человека, в которых произошла соматическая мутация генов вариабельного района (Вогз! ί. е1 а1. (2005) Сигг Орш 1ттипо1. 17:275-281). Дополнительные маркеры. такие как СО5. СЭ24. СО25. СО86. СО38. СО45. СЭ70 и СО69. также могут быть использованы для отбраковывания или обогащения желаемой популяции клеток. Таким образом. в зависимости от таких факторов, как история воздействия антигена на донора (например, антигена РСВ) и титр антител. могут быть отобраны общая популяция СГО22 обогащенных В-клеток или обогащенная субпопуляция В-клеток, такая как СГО27 положительные В-клетки.
После клеточной селекции и до иммортализации клеток популяция клеток может быть подвергнута действию соответствующего стимулирующего агента. Примеры стимулирующих агентов включают, например, активаторы поликлональных В-клеток, включая. но не ограничиваясь агонистами врожденного иммунного ответа (например, агонистами Толл-подобных рецепторов, таких как СрО олигонуклеотиды (Вегпазсош е1 а1. (2003) В1ооб 101:4500-4504. Вегпазсош е1 а1. (2002) 8с1епсе 298:2199-2202. Вошке е1 а1. (2003) В1ооб 102:956-63; например. СрО нуклеотидами, такими как. например, СрО2006. СрО2395 и СрО2395. доступные от Се11 8с1епсез, СаШоп. МА) и иммуномодулирующими молекулами, такими как цитокины (например. интерлейкины с известной иммуностимулирующей активностью, например, ИЛ-2. ИЛ-4. ИЛ-6. ИЛ-10 и ИЛ-13 (см. Са11агб апб 1<о1о\ую/ Нитап В-се11 гезропзез 1о суФкшез в СуЮкте Се11 Вю1оду: А ргасйса1 АрргоасЬ. Ва1куй1 Р (изд.) ОхГогб ипке^ку Ргезз. 2000. 17-31). и агонистами рецепторов клеточной мембраны семейства рецепторов ТОТ1. в частности агонистами, активирующими
- 55 023179
ΝΡ-кВ путь и пролиферацию В-клеток, включая, но не ограничиваясь АРРШ, ВАРР, СО 40 лиганд (СЭ40Ь) (см., например, 8сЬпе1йег (2005) Сигг Ορίη ^тимЕ 17:282-289, Η е1 а1. (2004) I Iттиηο1. 172:3268-79, СгахШ е! а1. (2003) В№й 101:4464-4471, и Талдуе е! а1. (2003) 1 Iттиηο1. 170:261-269). Примеры способов стимуляции В-клеток с использованием иммортализации ΕΒV в комбинации с одновременным или последующим применением одного или нескольких поликлональных активаторов известны в данной области (см., например, Тгадд1аг е1 а1. (2004) Νηΐ Мей 10:871-875, ТкисЫуата е1 а1. (1997) №т АпйЬсШеб! 8:43-47, 1та^те е! а1. (2003) Ргос Νηΐ1. Асай. δα. и§А 100:7836-7840, заявки № ΧνΟ 2007/068758, XVΟ 04/76677, XVΟ 91/09115 и XVΟ 94/24164). Комбинации стимулирующих агентов могут быть добавлены в культуральную среду перед иммортализацией, одновременно при иммортализации или после нее (например, добавление первого стимулирующего агента сразу же после первого отбора клеток, а добавление второго стимулирующего агента через несколько часов или дней). Стимулирующие агенты могут быть добавлены прямо в культуральную среду из разбавленных исходных растворов или после специальной подготовки, например, с помощью липосом или других соединений, которые могут улучшить их поглощение и иммуностимулирующую активность (Оигке1 е1 а1. (2001) I Iттиηο1. 167:33243328). Стимулирующие агенты также могут быть прикреплены к твердой подложке (к микрошарикам или непосредственно на культуральные планшеты), что может обеспечить эффективное удаление агента (агентов). Клетки можно промыть свежей средой один или более раз и, по желанию, культивировать в нормальной культуральной среде (например, от 1 до 6 дней) для дальнейшего разбавления и устранения влияния остатков стимулирующих агентов. Стимулирующий агент (агенты) также могут быть заингибированы добавлением определенных веществ в культуру клеток.
Клетки могут быть дополнительно отобраны по изотипу экспрессируемых антител после стимулирования клеток до иммортализации указанных отобранных и стимулированных клеток (то есть между этапом стимуляции и этапом иммортализации). Отбор клеток по изотипу может осуществляться путем положительного (выделение специфических клеток) или отрицательного (устранение нежелательных клеток) отбора. Например, популяция стимулированных 1дО-положительных клеток может быть отобрана положительной селекцией (с помощью РАС8 или магнитного сепаратора клеток) или разрушением клеток, которые экспрессируют 1дМ, вследствие чего популяция обогащается клетками, которые экспрессируют 1дО. Способы разделения секретирующих антитела клеток с помощью флуоресцентных или магнитных сепараторов клеток описаны в литературе (см., например, Ы е1 а1. (1995) ВюсЬет ВюрЬук Рек (Όηιη™ 207:985-93, Тгадд1а1 е1 а1. (2004) Νηΐ Мей 10:871-875). В зависимости от источника секретирующих антитела клеток и их конечного применения также может быть проведена отрицательная селекция (или обогащение) экспрессирующих другие изотипы антител клеток, таких как клетки, экспрессирующие 1дЭ или 1дА. Аналогичный подход может быть использован для выделения клеток на основе конкретного подкласса, если такой точный отбор предпочтителен (например, отбор клеток человека, которые экспрессируют 1дО1, 1дО2, 1дО3 или 1дО4 антитела).
Для иммортализации секретирующих антитела клеток указанные клетки могут быть обработаны различными вирусными агентами иммортализации, известными в уровне техники. Заражающие и иммортализирующие антителосекретирующие клетки вирусы известны как лимфотропные вирусы. Примерами таких вирусов являются вирусы, включенные в класс гамма-герпесвирусов. Члены этого семейства вирусов видоспецифично инфицируют лимфоциты и вызывают лимфопролиферативные заболевания и развитие нескольких видов злокачественных опухолей (ΝΕΗοΕικ (2000) I. Мο1 Ра11ю1. 53:222-237 и Рюкшκοη (2001) РЫЕк Тглпк Р δοс Биай В Вю1 δα. 356:595-604). Примеры вирусов, которые можно применить в качестве иммортализующих агентов в предусмотренных способах, включают ΕΒV (вирус ЭпштейнаБарр, также известный как вирус герпеса 4) и ΗΗν-8 (вирус герпеса человека 8, также известный как ΚδΗν, ассоциированный с саркомой Капоши герпесвирус), которые могут заразить и иммортализовать лимфоциты человека. Другие примеры вирусов, которые могут быть использованы в предусмотренных способах, включают, но не ограничиваются МΗV-68 (мышиный вирус герпеса 68), Ηνδ (герпесвирус Самири), РРV (радиновирус макаки-резуса), БСУ (лимфокриптовирус приматов), ΕΗν-2 (герпесвирус 2 лошадей), ΗVΑ (герпесвирус ателес) и ΑΗV-1 (А1се1арЬше герпесвирус 1) и другими онкогенными лимфотропными вирусами герпеса, имеющими некоторые общие консервативные среди них генетические особенности и сходные патогенные эффекты в разных клетках-хозяевах млекопитающих.
Для иммортализации В-клеток также можно использовать рекомбинантные конструкции ДНК, которые содержат определенные вирусные белки используемых для иммортализации вирусов (см. Эаташа (2004) Ν·ι1 Реу М1сгоЬю1. 2:656-668 и КПдег е! а1. (1998) ЕМВ0 I. 17:1700-1709). Содержащие вирусные гены вектора могут быть введены в клетки предусмотренными методами. Методы создания таких конструкций хорошо известны специалистам и включают, например, применение ретровирусной системы или вирусподобных частиц и упаковочных линий клеток, которые обеспечивают все необходимые факторы для формирования таких частиц.
Стадия иммортализации может длиться от одного или нескольких часов до 2-4 дней. Длительность стадии иммортализации может быть скорректирована в зависимости от различных факторов, таких как жизнеспособность клеток и эффективность иммортализации. В некоторых примерах клетки иммортализируют с помощью ΕΒV в течение приблизительно от 4 до 24 ч. В частности, например, клетки имморта- 56 023179 лизируют с помощью ЕВУ в течение приблизительно 16 ч.
ЕВУ-опосредованная иммортализация клеток требует экспрессии рецептора СЭ21 на поверхности клеток, который рассматривается в качестве основного рецептора ЕВУ. СЭ21 присутствует на большинстве субпопуляций В-клеток и регулирует В-клеточные реакции, образуя комплекс с СО 19 и рецептором антигена В-клеток (Реагоп и Сагго11 (2000) Апп Кеу 1ттип. 18:393-422). Способность клеток трансформироваться ЕВУ может быть повышена за счет добавления стимулирующих В-клетки агентов, но условия должны гарантировать сохранение СЭ21 на поверхности клеток, что позволяет ЕВУ осуществить иммортализацию с высокой эффективностью.
После стадии иммортализации иммортализованные клетки культивируют при низкой плотности на слоях фидерных клеток. Фидерный слой может быть получен из препарата облученных не аллогенных клеток периферической крови, клеток лимфобластоидной или фибробластной линий, лимфоцитов пуповинной крови или различных типов эмбриональных клеток. Примером клеточной линии с такими свойствами является ЕЬ4-В5, мутант ЕЬ4 клеточной линии тимомы, который эффективно поддерживает рост и пролиферацию клеток. Другие примеры фидерных клеток включают облученные обедненные Вклетками фидерные клетки РМВС, как описано в данном документе. Для поддержания популяции иммортализованных В-клеток также могут быть использованы ростовые агенты, такие как агенты, используемые для стимуляции популяции В-клеток.
Иммортализованные популяции клеток могут быть использованы для ряда применений, в частности, связанных с выделением, характеристикой и получением антител. В некоторых примерах из ДНК, выделенной из суммарной популяции клеток с помощью обычных рекомбинантных методов, могут быть получены библиотеки ДНК, кодирующие антитела, экспрессируемые клетками, или фрагменты таких антител. В некоторых примерах, как описано в настоящем документе, иммортализованные клетки могут быть далее культивированы и разделены на популяции антителосекретирующих клеток. Популяции клеток можно культивировать, например, на фидерном слое клеток.
В некоторых примерах для идентификации клеток, которые экспрессируют антитела с определенной антигенной специфичностью (например, антитела, которые иммуноспецифически связывают белок Р РСВ), культуральный супернатант от популяции клеток может быть скринирован в один или нескольких раундов. Примеры способов скрининга антител и определения специфичности связывания описаны в настоящем документе и известны в данной области. После идентификации антител из пула клеток, используя известные рекомбинантные методы, может быть выделена ДНК, кодирующая антитела или их антигенсвязывающие части. Как описано в настоящем документе, ДНК, выделенная из популяции клеток, может быть экспрессирована (например, в прокариотических или эукариотических клеткаххозяевах) и повторно исследована для выявления индивидуальных клонов, которые экспрессируют желаемое антитело или антигенсвязывающий фрагмент.
В некоторых примерах, как описано в настоящем документе, иммортализованные клетки могут быть сортированы по одной клетке с помощью сортировщика клеток (например, РАСЗ) с помощью меченого антигена. В частности, например, клетки, экспрессирующие анти-РСВ антитела, могут быть выделены с помощью антигена Р РСВ, меченого А1еха РНюг 647. После сортировки ДНК, кодирующая анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты, может быть выделена с помощью известных рекомбинантных методов. ДНК, выделенная из пула клеток, может быть экспрессирована (например, в прокариотических или эукариотических клетках-хозяевах), чтобы подтвердить связывание антигена РСВ.
Как правило, способ скрининга, применяемый для идентификации отдельных антител, которые связывают определенный антиген, приводит к идентификации антигенсвязывающих частей таких антител. Для создания полноразмерных или других производных антител из антигенсвязывающих фрагментов нуклеотидные последовательности, кодирующие Ун и/или Уъ цепи или их антигенсвязывающие части, могут быть выделены и клонированы в векторы, экспрессирующие константный район Ун (например, человеческий константный район гамма-1) и константный район Уъ (например, человеческий константный район каппа- или лямбда) соответственно. Ун и Уъ домены также могут быть клонированы в вектор, экспрессирующий выбранные константные районы. Кодирующий тяжелую цепь вектор и кодирующий легкую цепь векторы затем, используя известные специалистам в данной области способы, могут быть котрансфецированы в линию клеток для получения стабильной или транзиентно трансфицированной клеточной линии, которая экспрессирует полноразмерное антитело, например, 1дС.
Р. Способы получения анти-РСВ антител, их модифицированных форм или вариантов и нуклеиновых кислот, кодирующих антитела
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть получены любым подходящим способом получения антител, известным в уровне технике, включая химический синтез и рекомбинантную экспрессию. Для получения, сохранения, воспроизведения и амплификации нуклеиновых кислот (например, нуклеиновых кислот, кодирующих антитела, такие как предусмотренные анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты), а также экспрессии полипептидов, кодируемых нуклеиновыми кислоты, могут быть использованы различные комбинации клетокхозяев и векторов. В общем, выбор клетки-хозяина и вектора зависит от желаемой цели: амплификации,
- 57 023179 экспрессии полипептида и/или дисплея на генетическом пакете. например бактериофаге. Способы трансформации клеток-хозяев хорошо известны. Для трансформации клетки-хозяина нуклеиновыми кислотами может быть использован любой известный метод трансформации (например. трансформация. трансфекция. инфекция. электропорация и сонопорация). Процедуры получения антител. например. моноклональных антител и фрагментов антител. включая. но не ограничиваясь РаЬ фрагментами и одноцепочечными антителами. хорошо известны в данной области.
Моноклональные антитела могут быть получены с применением самых разнообразных методов. известных в данной области. включая. но не ограничиваясь применением гибридом. рекомбинантной экспрессией. технологией бактериофагового дисплея или их комбинацией. Например. моноклональные антитела могут быть получены с применением гибридомных методов. включая известные в данной области и изложенные. например. Наг1о\у е! а1.. АпБЬоБ1ек: А ЬаЬога!огу Мапиа1 (Со1Б 8ргшд НагЬог ЬаЬога!огу Ргекк. 2-е изд. 1988); НаттегНпд. Мопос1опа1 АпБЬоБ1ек апБ Т-Се11 НуЬпБотак 5630681 (Е1кеу1ег Ν.Υ. 1981).
Полипептиды. такие как любые приведенные в настоящем документе. включая анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу. могут быть получены любым способом. известным специалистам в данной области. включая ίη угуо и ίη У11го способы. Желаемый полипептид может быть экспрессирован в любом организме. подходящем для получения требуемого количества и формы белка. например. необходимого для анализа. введения и лечения. Хозяева систем экспрессии включают прокариотические и эукариотические организмы. такие как Е. соЬ. дрожжи. растения. клетки насекомых. клетки млекопитающих. включая человеческие клеточные линии. и трансгенных животных (например. кроликов. мышей. крыс и скота. включая. но не ограничиваясь козами. овцами и крупным рогатым скотом). включая получение в сыворотке крови. молоке и яйцах. Хозяева систем экспрессии могут различаться по уровню продукции белка. а также типам посттрансляционных модификаций. которые присутствуют на экспрессируемом белке. Выбор хозяев систем экспрессии может быть сделан на основе указанных и других факторов. таких как нормативные ограничения и соображения безопасности. издержки получения. а также необходимость и способы очистки.
1. Нуклеиновые кислоты
В настоящем документе предусмотрены выделенные молекулы нуклеиновой кислоты. кодирующие анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу. В некоторых примерах выделенные молекулы нуклеиновой кислоты кодируют антитело. которое представляет собой 58с5. В некоторых примерах выделенные молекулы нуклеиновой кислоты кодируют антигенсвязывающий фрагмент. который представляет собой антигенсвязывающий фрагмент 58с5.
В некоторых примерах предусмотрены выделенные молекулы нуклеиновой кислоты. кодирующие антитело или антигенсвязывающие фрагменты. содержащие тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью. приведенной в §ЕЦ ГО ΝΟ: 1. В некоторых примерах предусмотренные выделенные молекулы нуклеиновой кислоты содержат нуклеиновые кислоты с последовательностью нуклеотидов. приведенной в §ЕЦ ГО ΝΟ: 18.
В некоторых примерах предусмотренные выделенные молекулы нуклеиновой кислоты кодируют антитела или антигенсвязывающие фрагменты. содержащие легкую цепь с аминокислотной последовательностью. приведенной в §ЕЦ ГО ΝΟ: 5. В некоторых примерах предусмотренные выделенные молекулы нуклеиновой кислоты содержат нуклеиновые кислоты с последовательностью нуклеотидов. приведенной в §ЕЦ ГО ΝΟ: 17.
В некоторых примерах предусмотренные выделенные молекулы нуклеиновой кислоты кодируют антитело или его фрагмент. содержащие СГОК1 УН с аминокислотной последовательностью. приведенной в §ЕЦ ГО ΝΟ: 2 или 1627. В некоторых примерах предусмотренные выделенные молекулы нуклеиновой кислоты кодируют антитело или его фрагмент. содержащие СГОК2 УН с аминокислотной последовательностью. приведенной в §ЕЦ ГО ΝΟ: 3. В некоторых примерах предусмотренные выделенные молекулы нуклеиновой кислоты кодируют антитело или его фрагмент. содержащие СГОК3 УН с аминокислотной последовательностью. приведенной в §ЕЦ ГО ΝΟ: 4.
В некоторых примерах предусмотренные выделенные молекулы нуклеиновой кислоты кодируют антитело или его фрагмент. содержащие СГОК1 Уъ с аминокислотной последовательностью. приведенной в §ЕЦ ГО ΝΟ: 6. В некоторых примерах предусмотренные выделенные молекулы нуклеиновой кислоты кодируют антитело или его фрагмент. содержащие СГОК2 Уъ с аминокислотной последовательностью. приведенной в §ЕЦ ГО ΝΟ: 7. В некоторых примерах предусмотренные выделенные молекулы нуклеиновой кислоты кодируют антитело или его фрагмент. содержащие СГОК3 Уъ с аминокислотной последовательностью. приведенной в §ЕЦ ГО ΝΟ: 8.
Молекулы нуклеиновых кислот. кодирующие анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу. могут быть получены с применением известных рекомбинантных методов манипуляции молекулами нуклеиновых кислот (см.. например. методы. описанные 8атЬгоок е! а1. (1990) Мо1еси1аг Оошид. А ЬаЬогакгу Маииа1. 2-е изд.. Со1Б 8ргшд НагЬог ЬаЬогакгу. Со1Б 8ргшд НагЬог. Ν.Υ. и АикиЬе1 е! а1.. (1998) СиггеШ Рго1осо1к ίη Мо1еси1аг Вю1оду. ЛЬи ГСПеу & 8оик. ΝΥ). В некоторых примерах для создания модифицированных антител или их антигенсвязывающих фрагментов с
- 58 023179 различными аминокислотными последовательностями, например, для введения аминокислотных замен, делеций и/или вставок могут быть использованы методы, включающие, но не ограничивающиеся методами рекомбинантной ДНК, сайт-направленным мутагенезом и полимеразной цепной реакцией (ПЦР).
В некоторых примерах один или несколько СОЕ анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента по настоящему документу вводят в каркасные районы с помощью обычных методов рекомбинантной ДНК. Каркасные районы могут быть выбраны из природных или консенсусных каркасных районов, включая человеческие каркасные районы (см. примеры каркасных районов в С1ю11иа е1 а1. (1998) 1. Мο1. Βίο1. 278:457-479). Как правило, полинуклеотид, полученный комбинированием каркасных районов и СОЕ, кодирует антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые сохраняют антигенсвязывающую специфичность исходного анти-РСВ антитела или его антигенсвязывающего фрагмента. Для улучшения одного или нескольких свойств закодированного антитела или антигенсвязывающего фрагмента специалист в данной области может ввести модификации в полинуклеотид. В некоторых примерах в полинуклеотид могут быть введены одна или несколько модификаций, приводящих к аминокислотным заменам в каркасных районах, которые, например, повышают связывание антитела или антигенсвязывающего фрагмента с антигеном. Кроме того, такие способы могут быть использованы для замены или удаления одного или нескольких остатков цистеина вариабельных фрагментов, которые участвуют в образовании внутрицепочечных дисульфидных связей, для создания молекул антител без одной или нескольких внутрицепочечных дисульфидных связей.
2. Векторы
В настоящем документе предусмотрены векторы, которые содержат нуклеиновые кислоты, кодирующие анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты. Многие векторы экспрессии доступны и известны специалистам в данной области и могут быть использованы для экспрессии полипептидов. Выбор вектора экспрессии будет зависеть от выбора хозяина системы экспрессии. Такой выбор вполне соответствует уровню специалиста в данной области. Векторы экспрессии могут включать в себя транскрипционные промоторы и, по желанию, энхансеры, сигналы трансляции и сигналы терминации транскрипции и трансляции. Векторы экспрессии, которые используют для стабильной трансформации, обычно включают селективный маркер, который позволяет отобрать и поддерживать трансформированные клетки. В некоторых случаях ориджин репликации может быть использован для амплификации количества копий вектора в клетке.
Векторы также могут содержать дополнительные нуклеотидные последовательности, функционально связанные с лигируемой молекулой нуклеиновой кислоты, такие как, например, эпитопные метки, используемые, например, для локализации белка, например, Ш86-метка или тус-метка, или метка для очистки, например, ΟδΤ-метка, или последовательность для секреции белка и/или ассоциации с мембраной.
Экспрессию антител или их антигенсвязывающих фрагментов можно контролировать с помощью любого промотора/энхансера, известного в данной области. Подходящие бактериальные промоторы хорошо известны и описаны в настоящем документе ниже. Другие промоторы, подходящие для клеток млекопитающих, дрожжевых клеток и клеток насекомых, также хорошо известны, и некоторые из них описаны ниже. Выбор промотора, используемого для экспрессии гетерологичной нуклеиновой кислоты, зависит от конкретного применения и очевиден специалистам в данной области. Промоторы, которые могут быть использованы, включают, но не ограничиваются ранним промотором δУ40, содержащимся в эукариотических векторах экспрессии (Βетο^8ΐ и СЬатЬοη, (1981) №1иге 290:304-310), промотором, содержащимся в 3' длинном концевом повторе вируса саркомы Рауса (Υататοΐο е1 а1. (1980) Се11 22:787797), промотором тимидинкиназы герпеса (^адпег е1 а1., (1981) Ргос. НаЙ. Асаб. δα. ϋδΛ 75:1441-1445), регуляторной последовательностью гена металлотионеина (Впп81ег е1 а1., (1982) №1иге 296:39-42), промоторами прокариотических векторов экспрессии, включающими промотор β-лактамазы Цау и др., (1981). Ргос. №ιύ. Асаб. δ^ ΙΙδΛ 75:5543) или 1ас промотор (^еΒοе^ и др., Ргос. №ιΐ1. Асаб. δ^ 0 80:21-25 (1983)), см. также и8еГи1 Рго1еш8 Ггот ЕесοтЬ^ηапΐ Вас1епа в журнале δ^ηΙίΓχ Атейсап 242:79-94 (1980); векторы экспрессии растений включают промотор нопалин-синтетазы (Иеггага-Е81ге11а и др., №йиге 305:209-213 (1984)), промотор 35δ РНК вируса мозаики цветной капусты (Оагбег и др., N11с1ек Ааб8 Ее8. 9:2871 (1981)) и промотор фермента фотосинтеза рибулозобисфосфаткарбоксилазы (неггега-Е8йе11а и др., Шипе 310:115-120 (1984)); промоторные элементы дрожжей и других грибов включают промотор Оа14, промотор алкогольдегидрогеназы, промотор фосфоглицеролкиназы, промотор щелочной фосфатазы; районы контроля транскрипции животных, которые проявляют тканеспецифичность и которые были использованы в трансгенных животных, включают контролирующий район гена эластазы I, который активен в ацинарных клетках поджелудочной железы (δχνίΠ и др., Се11 35:639-646 (1984); 0ιηίΐζ и др., Ε’ο16 δρηη§ ИагЬсг δутр. ЦиапЕ Βίο1 50:399-409 (1986); Мас^οηа1б, ИераГО^ду 7:425-515 (1987)); контролирующий район гена инсулина, активный в бета-клетках поджелудочной железы (ИапаНап и др., №1иге 315:115-122 (1985)), контролирующий район генов иммуноглобулинов, который активен в лимфоидных клетках (Ого88сЬеб1 и др., Се11 35:647-658 (1984); Абат8 и др., №1Шге 318:533-538 (1985); А1ехапбег и др., Мο1. Се11 Βίο1. 7:1436-1444 (1987)), контролирующий район вируса опухоли молочной железы мыши, активный в яичках, молочной железе, лимфоидных и тучных клетках (Ьебег и др., Се11
- 59 023179
45:485-495 (1986)), контролирующий район гена альбумина (Ршскей и др., Оепек апй Эеуе1 7:268-276 (1987)), активный в печени, контролирующий район гена альфа-фетобелка, активный в печени (Кгит1аиГ и др., Мо1 Се11 Вю1 5:1639-1648 (1985); Наттег и др., Заепсе 235:53-58, 1987)), контролирующий район гена альфа-1-антитрипсина, активный в печени (Ке1кеу и др., Оепек апй Эеуе1 7:161-171 (1987)), контролирующий район гена бета-глобина, активный в миелоидных клетках (Модгат и др., №Циге 375:338-340 (1985); КоШак и др., Се11 46:89-94 (1986)), контролирующий район гена основного белка миелина, активный в олигодендроцитах мозга (Кеаййеай и др., Се11 45:703-712 (1987)), контролирующий район гена легких цепей-2 миозина, активный в скелетных мышцах (Зйаш, №Циге 374:283-286 (1985)) и контролирующий район гена гонадотропного рилизинг-гормона, активный в гонадотрофоцитах гипоталамуса (Макоп и др., Заепсе 234:1372-1378 (1986)).
В дополнение к промотору вектор экспрессии обычно содержит транскрипционную единицу или кассету экспрессии, которые содержат все дополнительные элементы, необходимые для экспрессии антитела или его фрагмента в клетках-хозяевах. Типичная экспрессионная кассета содержит промотор, функционально связанный с нуклеиновой кислотой, кодирующей цепи антитела, и сигналы, необходимые для эффективного полиаденилирования транскрипта, сайт связывания рибосомы и терминации трансляции. Дополнительные элементы кассеты могут включать в себя энхансеры. Кроме того, для обеспечения эффективной терминации кассета обычно содержит район терминации транскрипции после структурных генов. Район терминации может быть получен из того же гена, что и промоторная последовательность, или может быть получен из другого гена.
Некоторые системы экспрессии имеют маркеры, которые обеспечивают амплификацию гена, такие как тимидинкиназа и дигидрофолатредуктаза. Кроме того, также подходят системы экспрессии с высоким выходом белка, не связанные с амплификацией гена, например, может быть применен бакуловирусный вектор, введенный в клетки насекомых, несущий нуклеиновую кислоту, кодирующую цепи антитела под контролем промотора полиэдрина или другого сильного бакуловирусного промотора.
Для конструирования экспрессионных векторов, содержащих нуклеиновые кислоты, кодирующие антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу, могут быть использованы любые способы вставки фрагментов ДНК в вектор, которые известны специалистам в данной области. Эти способы могут включать рекомбинацию ДНК ш уйго и синтетические методики и ш У1уо рекомбинацию (генетическую рекомбинацию). Вставка в вектор клонирования может, например, быть проведена путем лигирования фрагмента ДНК в вектор клонирования, который имеет комплементарные липкие концы. Если комплементарные сайты рестрикции, используемые для фрагментации ДНК, не присутствуют в векторе клонирования, концы молекулы ДНК могут быть ферментативно модифицированы. Кроме того, любой желаемый сайт может быть получен путем лигирования нуклеотидных последовательностей (линкеров) на концах ДНК, указанные лигированные линкеры могут содержать определенные химически синтезированные нуклеиновые кислоты, кодирующие последовательности, распознаваемые эндонуклеазами рестрикции.
Примеры плазмидных векторов, полезных для получения предусмотренных антител или антигенсвязывающих фрагментов, содержат сильный промотор, такой как немедленный ранний энхансер/промотор ЙСМУ или промотор МНС I класса, интрон для повышения процессинга транскрипта, такой как интрон немедленного раннего гена ЙСМУ и сигнал полиаденилирования (полиА), такой как поздний сигнал полиаденилирования ЗУ40. Для экспрессии полноразмерных тяжелых и легких цепей антитела, одноцепочечного фрагмента Ру или других фрагментов иммуноглобулина плазмида может быть мультицистронной.
3. Клеточные системы экспрессии
Нуклеиновая кислота, кодирующая анти-РСВ антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу, может быть экспрессирована в соответствующем хозяине. Предусмотрены клетки, содержащие векторы и нуклеиновые кислоты, кодирующие анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу. Как правило, подходят любые типы клеток, которые могут экспрессировать гетерологичную ДНК и имеют секреторный путь. Экспрессионные хозяева включает прокариотические и эукариотические организмы, такие как бактериальные клетки (например, Е. сой), дрожжевые клетки, клетки грибов, архей, растительные клетки, клетки насекомых и клетки животных, включая клетки человека. Экспрессионные хозяева могут различаться по уровню экспрессии белка, а также типам посттрансляционных модификаций, которые присутствуют на экспрессируемом белке. Кроме того, выбор экспрессионного хозяина часто связан с выбором вектора и используемых транскрипционных и трансляционных элементов. Например, выбор экспрессионного хозяина зачастую зависит от выбора использованной последовательности-предшественника. Например, многие гетерологичные сигнальные последовательности могут быть экспрессированы только в клетке-хозяине того же вида (например, сигнальные последовательности клеток насекомых оптимально экспрессируются в клетках насекомых). Напротив, другие сигнальные последовательности могут быть использованы в гетерологичных хозяевах, например, сигнальная последовательность человеческого сывороточного альбумина (ЙНЗА) активна в клетках дрожжей, насекомых или млекопитающих, а пре/пропоследовательность тканевого активатора плазминогена функциональна в клетках насекомых и млекопитающих (Тап е! а1., (2002) Рго- 60 023179
1е1п Епд. 15:337). Выбор экспрессионного хозяина может быть сделан на основе указанных и других факторов, таких как нормативные ограничения и соображения безопасности, издержки получения, а также необходимость и способы очистки. Векторная система должна быть совместимой с используемой клеткой-хозяином.
Экспрессия в эукариотических хозяевах может включать в себя экспрессию в дрожжах, таких как Зассйаготусек сегеу1к1ае и РюЫа ракЮпк, в клетках насекомых, таких как клетки ОгоюрЫк·! и клетки чешуекрылых, в растениях и растительных клетках, таких как табак, кукуруза, рис, водоросли и ряска. Эукариотические клетки для экспрессии также включают линии клеток млекопитающих, такие как клетки яичников китайского хомяка (СНО) или клетки эмбриональной почки хомяка (ВНК). Экспрессия в эукариотических хозяевах также включает получение белка в трансгенных животных, например, включая получение в сыворотке крови, молоке и яйцах.
Рекомбинантные молекулы могут быть введены в клетку-хозяина с помощью, например, трансформации, трансфекции, инфекции, электропорации и сонопорации, так что вводятся многие копии последовательности гена. Как правило, для получения бактерий, клеточных линий млекопитающих, дрожжей или насекомых, которые экспрессируют большое количество цепей антител, применяют стандартные способы трансфекции, белок затем очищают с помощью стандартных методов (см., например, ^йеу е! а1. (1989) I. Βίο1 Сйет., 264:17619-17622; Ошйе ΐο РгоЮт Ри^^ί^саΐ^οη, в Мейюйк т Εηζутο1ο§у, т. 182 (изд. ОеЫксйег), 1990). Трансформация эукариотических и прокариотических клеток осуществляется в соответствии со стандартными способами (см., например, Μογπκογι (1977) ΐ. Вас!. 132:349-351; С1агкСигйкк апй Сигйкк (1983) МеБюйк ш Εηζутο1ο§у, 101, 347-362). Например, может быть использована любая известная процедура введения чужеродных нуклеотидных последовательностей в клетку-хозяина. Они включают трансфекцию с помощью фосфата кальция, полибрена, слияние протопластов, электропорацию, бомбардировку частицами с ДНК, применение липосом, микроинъекцию, плазменные векторы, вирусные векторы (например, на основе бакуловируса, вируса коровьей оспы, аденовируса и других вирусов), а также любые другие известные методы введения клонированной геномной ДНК, кДНК, плазмидной ДНК, космидной ДНК, синтетической ДНК или другого чужеродного генетического материала в клетку-хозяина.
a. Экспрессия в прокариотах
Прокариоты, особенно Е. гой представляют собой системы для получения большого количества белка. Трансформация Е. гоП представляет собой простой и быстрый метод, хорошо известный специалистам в данной области. Векторы экспрессии Е. той могут содержать индуцибельный промотор, полезный для стимулирования высоких уровней экспрессии белка и для экспрессии белков, которые проявляют токсичность для клеток-хозяев. Примеры индуцибельных промоторов включают 1ас-промотор, 1гр промотор, гибридный !ас промотор, Т7 и ЗР6 РНК промоторы и термочувствительный ХРЬ промотор.
Белок может быть экспрессирован в цитоплазматической среде Е. гой. Цитоплазма представляет собой восстановительную среду, и для некоторых молекул это может привести к образованию нерастворимых телец включения. Для ресолюбилизации белков могут быть использованы восстанавливающие агенты, такие как дитиотреитол и β-меркаптоэтанол, и денатурирующие агенты, такие как гуанидин-НС1 и мочевина. Альтернативный подход состоит в экспрессии белка в периплазматическом пространстве бактерий, которое предоставляет окислительную среду, шаперонинподобные белки и дисульфидизомеразы, что приводит к образованию растворимого белка. Как правило, с экспрессируемым белком сливают лидерную последовательность, которая направляет белок в периплазму. Затем лидерная последовательность удаляется сигнальной пептидазой внутри периплазмы. Примеры лидерных последовательностей, направляющих белки в периплазму, включают лидерную последовательность ре1В гена пектатлиазы и лидерную последовательность гена щелочной фосфатазы. В некоторых случаях периплазматическая экспрессия приводит к утечке экспрессированного белка в культуральную среду. Секреция белков позволяет быстро и просто очистить белки от культурального супернатанта. Не секретируемые белки могут быть получены из периплазмы с помощью осмотического лизиса. Как и при цитоплазматической экспрессии, в некоторых случаях белки могут стать нерастворимыми и для облегчения растворения и рефолдинга белков могут быть использованы денатурирующие агенты и восстановители. Температуры индукции и культивирования также могут влиять на уровень экспрессии и растворимость белков, как правило, используются температуры между 25 и 37°С. Как правило, бактерии производят агликозилированные белки. Таким образом, если для функционирования белки требуют гликозилирования, то гликозилирование может быть осуществлено ш уйго после очистки из клетки-хозяина.
b. Дрожжевые клетки
Дрожжи, такие как Зассйаготусек сегеуШае, Зсй^ζοкассйа^οтусек рοтЬе, Уагго\\за Ηρο^ΐ^, К1иууеготусек 1асйк и РюЫа ρΗδΙοΓίκ, являются хорошо известными дрожжевыми хозяевами систем экспрессии и могут быть полезны для получения белков, таких как описано в настоящем документе. Дрожжи могут быть трансформированы эписомными репликативными векторами или стабильной интеграцией в хромосомы путем гомологичной рекомбинации. Как правило, для регулирования экспрессии генов используются индуцируемые промоторы. Примеры таких промоторов включают промоторы ОАЬ1, ОАЬ7,
- 61 023179
ОАЬ5 и металлотионеиновые промоторы, такие как ΟϋΡ1, АОХ или другие промоторы ΡΚηία или других дрожжей. Для отбора и поддержания трансформированной ДНК векторы экспрессии часто включают селективные маркеры, такие как ЬЕИ2, ТКК1, Н1З3 и ИКА3. Экспрессируемые в дрожжах белки часто являются растворимыми, а коэкспрессия с шаперонинами, такими как В1р и протеиндисульфидизомераза, может повысить уровень экспрессии и растворимость белка. Кроме того, экспрессируемые в дрожжах белки могут быть направлены для секреции с использованием слитого сигнального пептида секреции, такого как сигнал секреции альфа-фактора типа спаривания дрожжей из ЗассЬатотусек сегеу1К1ае. и слитого сигнального пептида белков поверхности клетки дрожжей, таких как адгезивный рецептор спаривания Ада2р или глюкоамилаза Агхи1а αώιηίηίνοπιηκ. Для удаления слитой последовательности из полипептидов после секреции может быть введен сайт расщепления протеазой, например, Кех-2. Дрожжи также способны к гликозилированию мотива Λκη-Χ-Зег/ТНг.
с. Клетки насекомых
Клетки насекомых, в частности при использовании системы бакуловирусной экспрессии, полезны для экспрессии полипептидов, таких как анти-РСВ антитела и их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу. Клетки насекомых экспрессируют высокие уровни белка и способны осуществлять большинство посттрансляционных модификаций высших эукариот. Бакуловирусы имеют ограниченный диапазон хозяев, что повышает безопасность и снижает нормативные ограничения, присущие системам эукариотической экспрессии. Как правило, в векторах экспрессии для высокого уровня экспрессии белка используют промотор полиэдрина бакуловируса. Обычно используемые бакуловирусные системы включают такие бакуловирусы, как вирус ядерного полиэдроза АиЮдгарЬа саййгтса (Ас№У) и вирус ядерного полиэдроза ΒοтЬуx ιηοπ (ΒтNΡV) и линии клеток насекомых, такие как ЗГ9, полученные из Зροάορίе^а Ггидрегба, Ρкеиάа1еί^а шириисЮ (А7З) и Оаиаик р1ех1ррик (ΌρΝ1). Для достижения высокого уровня экспрессии нуклеотидную последовательность молекулы, которая будет экспрессирована, присоединяют непосредственно после инициаторного кодона полиэдрина вируса. Сигналы секреции млекопитающих точно процессируются в клетках насекомых и могут быть использованы для секреции экспрессированного белка в культуральную среду. Кроме того, клеточные линии Ρ^ιιώ-ιΚίία шириисЮ (А7З) и Оаиаик р1ех1ррик (ОрМ) производят белки, гликозилирование которых похоже на гликозилирование в клеточных системах млекопитающих.
Альтернативной системой экспрессии в клетках насекомых является использование стабильно трансформированных клеток. Для экспрессии могут быть использованы такие клеточные линии, как ЗсЬтебег 2 (З2) и Кс клетки (Ото^рЬИа те1аηοдакίе^) и С7 клетки (Аебек а^рю^к). Для достижения высокого уровня экспрессии может быть использован промотор металлотионеина □готорНКа с индукцией тяжелыми металлами кадмием и медью. Векторы экспрессии, как правило, поддерживают за счет использования селективных маркеров, таких как неомицин и гигромицин.
6. Клетки млекопитающих
Для экспрессии анти-РСВ антител и их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу могут быть использованы системы экспрессии млекопитающих. Экспрессионные конструкции могут быть введены в клетки млекопитающих посредством вирусной инфекции, например, с помощью аденовируса, или путем прямого переноса ДНК, например, с помощью липосом, фосфата кальция, ДЭАЭдекстрана и физических методов, таких как электропорация и микроинъекция. Векторы экспрессии для клеток млекопитающих обычно включают сайт кэпирования мРНК, ТАТА-бокс, последовательность инициации трансляции (консенсусную последовательность Козака) и элементы полиаденилирования. Такие векторы для достижения высокого уровня экспрессии часто включают промоторы и энхансеры транскрипции, например промотор-энхансер ЗУ40, промотор цитомегаловируса человека (СМУ) и длинный концевой повтор вируса саркомы Рауса (КЗУ). Указанные промоторы-энхансеры действуют во многих типах клеток. Также для экспрессии могут быть использованы тканеспецифичные и специфичные к определенным типам клеток промоторы и энхансерные районы. Примеры промоторных/энхансерных районов включают, но не ограничиваются районами из таких генов, как ген эластазы ΐ, ген инсулина, гены иммуноглобулинов, промоторным/энхансерным районом вируса опухоли молочной железы мыши, ген альбумина, ген альфа-фетобелка, альфа-1-антитрипсина, бета-глобина, основного белка миелина, легкой цепи-2 миозина и гонадотропного рилизинг-гормона. Для отбора и поддержания клеток с экспрессионными конструкциями могут быть использованы селективные маркеры. Примеры селективных маркеров включают, но не ограничиваются генами гигромицин В фосфотрансферазы, аденозиндезаминазы, ксантингуанинфосфорибозилтрансферазы, аминогликозидфосфотрансферазы, дигидрофолатредуктазы и тимидинкиназы. Слитые с сигнальными молекулами клеточной поверхности, такими как ТСК- ζ и РсЕК1-у, белки могут непосредственно экспрессироваться в активном состоянии на поверхность клеток.
Для экспрессии в млекопитающих доступны многие клеточные линии, включая клетки мыши, крысы, человека, обезьяны, курицы и хомяка. Примеры линий клеток включают, но не ограничиваются СНО, Ва1Ь/3Т3, НеЬа, МТ2, мышиными ЖО (не секретирующие) и другими клеточными линиями миеломы, гибридомными и гетерогибридомными клеточными линиями, лимфоцитами, фибробластами, ЗΡ2/0, СОЗ, МН3Т3, НЕК293, 293З, 293Т, 2В8 и НКВ клетками. Также доступны адаптированные к бессыворо- 62 023179 точной среде клеточные линии, что облегчает очистку секретируемых белков из культуральной среды. Примеры включают клетки СнО-З (1^йгодеп, СагНЬай, Калифорния, лот # 11619-012) и бессывороточную линию клеток ЕВNА-I (РНат и др., (2003) Вю1есНгю1 Вюепд. 84:332-42).
е. Растения
Для экспрессии белков, таких как любые описанные в настоящем изобретении белки, могут быть использованы трансгенные клетки растений и растения. Экспрессионные конструкции, как правило, переносят в растения с использованием прямого переноса ДНК, такого как бомбардировка микрочастицами и ПЭГ-опосредованный перенос в протопласты, или с использованием агробактериальной трансформации. Векторы экспрессии могут включать промоторные и энхансерные последовательности, элементы терминации транскрипции и элементы контроля трансляции. Векторы экспрессии и методы трансформации, как правило, отличаются для двудольных хозяев, таких как А^аЬ^йοрδ^δ и табак, и однодольных хозяев, таких как кукуруза и рис. Примеры промоторов растений, используемых для экспрессии, включают промотор вируса мозаики цветной капусты, промотор нопалинсинтазы, промотор рибулозобисфосфаткарбоксилазы и промотор убиквитина и ИВЦ3. Для облегчения отбора и поддержания трансформированных клеток часто используют селективные маркеры, такие как гигромицин, фосфоманнозоизомераза и неомицинфосфотрансфераза. Трансформированные клетки растений можно поддерживать в культуре в виде клеток, агрегатов (каллусной ткани) или регенерировать в целые растения. Трансгенные клетки растений также могут включать генетически модифицированные водоросли, предназначенные для получения гетерологичных полипептидов. Поскольку паттерны гликозилирования у растений отличаются от гликозилирования в клетках млекопитающих, это может повлиять на выбор белков, продуцируемых в этих хозяевах.
4. Очистка антител
Методы очистки полипептидов, включая анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу, из клеток-хозяев будет зависеть от выбранной клетки-хозяина и системы экспрессии. В случае секреции белки, в общем, являются очищенными из культуральной среды после удаления клеток. В случае внутриклеточной экспрессии клетки могут быть лизированы, и белки очищают из экстракта. В одном из примеров полипептиды выделяют из клеток-хозяев путем центрифугирования и лизиса клеток (например, путем повторяющегося замораживания-оттаивания в бане сухой лед/этанол) с последующим центрифугированием и собиранием супернатанта, содержащего полипептиды. Если для экспрессии используют трансгенные организмы, такие как трансгенные растения и животные, в качестве исходного материала для получения экстракта лизированных клеток могут быть использованы ткани или органы. Кроме того, получение белков в трансгенных животных может включать получение полипептидов в молоке или яйцах, которые могут быть собраны, и затем при необходимости белки могут быть выделены и очищены с использованием стандартных способов, известных в уровне техники.
Белки, такие как анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу, могут быть очищены, например, из экстракта лизированных клеток с использованием стандартных способов очистки белков, известных в уровне техники, включая, но не ограничиваясь ЗОЗ-РАСЕ, эксклюзионной хроматографией и хроматографией по размеру, осаждением сульфатом аммония, хелатной хроматографией и ионообменной хроматографией, такой как анионообменная хроматография. Для увеличения эффективности очистки и улучшения чистоты получаемых препаратов может быть использована аффинная очистка. В экспрессионных конструкциях к белку может быть добавлена аффинная метка, такая как тус эпитоп, гибридная последовательность СЗТ или Ш86, и аффинная очистка может быть проведена с помощью тус антител, смолы с глутатионом и Νί-смолы соответственно. Чистота может быть оценена любым способом, известным в уровне техники, включая гель-электрофорез с окрашиванием и спектрофотометрические методы.
Выделенные полипептиды затем могут быть проанализированы, например, путем разделения в геле (например, ЗОЗ-геле), фракционирования по размеру, например, разделения на ЗерНасгу1™ З-200 ШРгер™ 16 х 60 эксклюзионных колонках (АтегкНат от СЕ неаННсаге ЫГе Зиепсев, Р18са1а№ау, N1). Чтобы определить их способность связывать желаемые партнеры, выделенные полипептиды также могут быть проанализированы в анализах связывания, как правило, в анализах связывания с применением связываемого партнера, иммобилизованного на твердой подложке, например на планшете (например, в анализах связывания методом ИФА) или шариках. Анализы связывания, которые используются для оценки связывания осажденного бактериофага, несущего полипептиды, а также для оценки полипептидов, выделенных непосредственно из лизатов клеток-хозяев, описаны ниже. Например, анализы связывания можно проводить с целью определения наличия связывания полипептидов антител с одним или несколькими антигенами, например, путем нанесения антигена на твердую подложку, например, в лунку планшета для анализа, и инкубации выделенных полипептидов с твердой подложкой с последующим отмыванием и обнаружением вторичным реагентом, например фермент-меченым антителом с субстратом.
С. Оценка свойств и активности анти-РСВ антител
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть
- 63 023179 охарактеризованы с помощью различных способов, хорошо известных специалисту в данной области. Например, анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть исследованы на способность иммуноспенифически связывать белок Р респираторно-синцитиального вируса (РСВ) человека. Такие анализы могут быть проведены, например, в растворе (например, Нсидййп (1992) Вй/Тесйпкщек 13:412-421), на поверхности бусин (Ъат (1991) Х-Лиге 354:82-84), на чипах (Ройст (1993) №Лиге 364:555-556), на поверхности бактерий (патент США № 5223409), на спорах (патенты США № 5571698, 5403484 и 5223409), на плазмидах (Си11 е! а1. (1992) Ргос. Νηΐ1. Асай. Зс1. ИЗА 89:1865-1869) или на бактериофагах (З^й апй Зтйй (1990) Заепсе 249:386-390; Эеукп (1990) Заепсе 249:404-406; Сч1г1а е! а1. (1990) Ргос. №Й Асай. За. ИЗА 87:6378-6382; и Рейа (1991) ΐ. Μο1. Вй1. 222:301-310). Антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифически связывают антиген РСВ или его фрагмент, можно также проанализировать на их специфичность и аффинность к антигену РСВ. Специфичность связывания или эпитоп могут быть определены, например, в анализах на конкуренцию связывания с другими анти-РСВ антителами и/или в анализах нейтрализации вируса с применением устойчивых к моноклональным антителам мутантов (МАКМ). Кроме того, для измерения уровня нейтрализации РСВ анти-РСВ антителами или их антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу могут быть использованы ш νίίτο анализы и ш νίνο модели на животных с введением анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов.
1. Анализы связывания
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть оценены на их способность связывать выбранную мишень (например, вирус РСВ или выделенный белок Р РСВ) и специфичность к такой мишени любыми способами, известными специалистам в данной области. Примеры анализов приведены в примерах 5 и 8 ниже и описаны в настоящем документе ниже. Анализы связывания могут быть проведены в растворе, суспензии или на твердом носителе. Например, целевые антигены могут быть иммобилизованы на твердой подложке (например, угле или пластиковой поверхности, культуральной чашке или чипе) и введены в контакт с антителами или антигенсвязывающими фрагментами. Свободные антитела или белок-мишень могут быть отмыты и связанные комплексы могут быть обнаружены. Анализ связывания может быть проведен в условиях, уменьшающих неспецифическое связывание, например в буфере с высокой ионной силой (например, 0,3-0,4 М Ν;·ιΟ) с неионными детергентами (например, 0,1% Тййп Х-100, Твин-20) и/или блокировкой белком (например, бычьим сывороточным альбумином или желатином). Для оценки фонового связывания в такие анализы также может быть включен отрицательный контроль. Аффинность можно определить с помощью анализа Скэтчарда (Μиηкοη е1 а1, (1980) Апа1. Вюсйет., 107:220), поверхностного плазмонного резонанса, изотермической калориметрии или другими способами, известными специалистам в данной области техники.
Примеры иммуноанализа, которые могут быть использованы для анализа иммуноспецифичного связывания и перекрестной реактивности, включают, но не ограничиваются конкурентными и неконкурентными тест-системами с применением таких методов, как, например, вестерн-блоттинг, радиоиммуноанализ, ИФА (иммуноферментный анализ), Мею Зса1е ^^ксονе^у (МЗЭ, ОаййегкЬигд, Магу1апй, сэндвич иммуноанализ, анализ иммунопреципитации, ЕЫЗРОТ, реакции преципитации, реакции преципитации с диффузией в геле, иммунодиффузионный анализ, анализы агглютинации, анализы фиксации комплемента, иммунорадиометрический анализ, флуоресцентный иммуноанализ, иммуноанализ с белком А. Такие анализы хорошо известны (см., например, АикиЬе1 е1 а1., 1994, Сиггеп! Рю^юк ш Μο1еси1а^ Вййду, т. 1, изд. ййп \УПеу & Зοηк, 1пс., №\ν Υοτίν который включен в настоящий документ в качестве ссылки в полном объеме). Другие форматы анализа включают иммуноанализ с липосомами (Ь1А), в котором используют липосомы, предназначенные для связывания специфических молекул (например, антител) и высвобождения инкапсулированных реагентов или маркеров. Высвобожденные химические вещества затем детектируют в соответствии со стандартными способами (см. Μοигое е1 а1., (1986) Атег. С1т. Ргой. Ксу. 5:34-41). Не ограничивающие примеры иммуноанализов кратко описаны ниже.
Протоколы иммунопреципитации, как правило, включают лизис популяции клеток в буфере для лизиса, таком как буфер К1РА (1% ХР-40 или Тритон Х-100, 1% раствор дезоксихолата натрия, 0,1% ЗЭЗ, 0,15 М ХаС1, 0,01 М фосфат натрия при рН 7,2, 1% Тразилол) с добавлением ингибиторов протеин фосфатаз и/или протеаз (например, ЭДТА, РМЗР, апротинина, ванадата натрия), добавление представляющих интерес антител или антигенсвязывающих фрагментов к клеточному лизату, инкубацию в течение определенного периода времени (например, от 1 до 4 ч) при 40°С, добавление сефарозных бусин с белком А и/или белком О к клеточному лизату, инкубацию в течение часа или более при температуре 40°С, отмывание бусин в буфере для лизиса и ресуспендирование бусин в ЗЭЗ/буфере для образцов. Способность представляющего интерес антитела или антигенсвязывающего фрагмента иммунопреципитировать определенный антиген может быть оценена, например, с помощью вестерн-блоттинга. Специалист в данной области хорошо осведомлен относительно параметров, которые могут быть модифицированы для увеличения связывания антитела или антигенсвязывающего фрагмента с антигеном и уменьшения фона (например, предварительная очистка клеточного лизата с сефарозными бусинами). Для дальнейшего изучения протоколов иммунопреципитации см., например, АикиЬе1 е1 а1., ейк, 1994, Сиггеп! Рг^^к ш Μο1еси1а^ Вййду, т. 1, ййп V^1еу & Зοηк, 1пс., Νον Υοτίν 10.16.1.
- 64 023179
Вестерн-блот анализ обычно включает в себя подготовку образцов белков, электрофорез образцов белков в полиакриламидном геле (например, 8-20% 8Ό8-ΓΑΟΕ в зависимости от молекулярного веса антигена), перенос образцов белков из полиакриламидного геля на мембрану, такую как мембрана из нитроцеллюлозы, РУЭР или нейлона, блокировка мембраны в растворе для блокировки (например, РВ8 с 3% БСА или обезжиренного молока), отмывание мембраны в промывочном буфере (например, РВ8Твин 20), блокировку мембраны первичными антителами или их антигенсвязывающими фрагментами (например, интересующими антителами или антигенсвязывающими фрагментами), разведенными в блокирующем буфере, отмывание мембраны в промывочном буфере, блокировку мембраны вторичными антителами (которые распознают первичное антитело, например, античеловеческими антителами), конъюгированными с ферментом (например, пероксидазой хрена или щелочной фосфатазой) или радиоактивной молекулой (например, 32Р или 125Ι), разведенными в блокирующем буфере, отмывание мембраны в промывочном буфере и обнаружение присутствия антигена. Специалист в данной области хорошо осведомлен относительно параметров, которые могут быть модифицированы для увеличения обнаруживаемого сигнала и уменьшения фонового шума (для дальнейшего изучения протоколов вестернблоттинга см., например, Αιικιι^1 е1 а1., ебк, 1994, Сштей РшИ^к ίη ΜοΒα-ΐΕ-π ВюИду, т. 1, ίοΐιη УПеу & 8οηκ, Ιηα, №ν Υοιίγ 10.8.1).
ИФА включает подготовку антигена, покрытие 96-луночного планшета антигеном, добавление интересующего антитела или антигенсвязывающего фрагмента, конъюгированного с обнаруживаемым соединением, таким как фермент (например, пероксидаза хрена или щелочная фосфатаза), в лунки и инкубацию в течение определенного времени с последующим обнаружением присутствия антигена. В ИФА интересующее антитело или его антигенсвязывающий фрагмент не обязательно конъюгированы с обнаруживаемым соединением, вместо этого в лунку может быть добавлено второе антитело (которое распознает интересующее антитело), конъюгированное с обнаруживаемым соединением. Кроме того, вместо покрытия лунок антигеном они могут быть покрыты антителами. В этом случае второе конъюгированное с обнаруживаемым соединением антитело может быть добавлено после внесения интересующего антигена в покрытую первичным антителом лунку. Специалист в данной области хорошо осведомлен относительно параметров, которые могут быть модифицированы для увеличения обнаруживаемого сигнала, а также о применении других известных в данной области вариантов ИФА (для дальнейшего изучения протоколов ИФА см., например, Αιικιι^1 е1 а1., ебк, 1994, Сиггей РшИ^к ίη Μο^υ^ ВюИду, т. 1, ίοΐιη УПеу & 8οη^ Ιηα, №ν Υοιίγ 11.2.1). Примеры 5 и 8 иллюстрируют анализы на связывание анти-РСВ антител с белком Р РСВ.
Аффинность связывания антитела или антигенсвязывающих фрагментов с антигеном и скорость диссоциации антитела от антигена могут быть определены, например, с помощью конкурентного анализа связывания. Одним из примеров конкурентного анализа связывания является радиоиммуноанализ, включающий инкубацию меченых антигенов (например, меченых 3Н или 125Ι) с интересующими антителами или антигенсвязывающими фрагментами в присутствии возрастающих количеств немеченого антигена, а также обнаружение антител или антигенсвязывающих фрагментов, связанных с меченым антигеном. Аффинность анти-РСВ антитела или антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу к антигену РСВ и скорости диссоциации могут быть определены по полученным данным с помощью анализа Скэтчарда. Конкуренция со вторым антителом также может быть определена с помощью радиоиммуноанализа. В этом случае антиген РСВ инкубируют с анти-РСВ антителом или антигенсвязывающим фрагментом по настоящему документу, конъюгированным с меткой (например, 3Н или 125Ι) в присутствии увеличивающихся количеств немеченого второго антитела. В некоторых примерах для определения связывания и скоростей диссоциации антител или их антигенсвязывающих фрагментов от антигена РСВ может быть использован кинетический анализ с помощью поверхностного плазмонного резонанса (В1аС.оге 2000, Вхатоге ΑВ, Ирка1а, 8^ебеп и ΟΕ НеаЬЬсаге ЫГе 8аепсек; Μа1т^ν^кί (2000) ВюсЬет. 8οα Шапк. 27:335). Кинетический анализ методом поверхностного плазмонного резонанса включает анализ связывания и диссоциации антигена РСВ от чипов с иммобилизованными на их поверхности антителами или их фрагментами.
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу также могут быть исследованы на их способность ингибировать связывание РСВ с его рецептором на клетке-хозяине с помощью методов, которые известны специалистам в данной области. Например, клетки, экспрессирующие рецептор для РСВ, можно ввести в контакт с РСВ в присутствии или отсутствие антител или их антигенсвязывающих фрагментов, посредством чего может быть измерена, например, с помощью проточной цитометрии или сцинтилляционного анализа способность антитела или его фрагмента ингибировать связывание РСВ. Для обнаружения взаимодействия РСВ и рецепторов клетки-хозяина РСВ (например, антиген РСВ, такой как гликопротеин Р или гликопротеин О) или антитело, или фрагмент антитела могут быть помечены обнаруживаемым соединением, таким как радиоактивная метка (например, 32Р, 358 и 125Ι) или флуоресцентная метка (например, флуоресцеинизотиоцианатом, родамином, фикоэритрином, фикоцианином, аллофикоцианином, о-фталевым альдегидом и флуорескамином).
Способность антител или их антигенсвязывающих фрагментов подавлять связывание РСВ с его рецептором также может быть определена в анализах без применения клеток. Например, РСВ или антиген
- 65 023179
РСВ, такой как гликопротеин Р, можно ввести в контакт с антителом или его фрагментом, после чего может быть определена способность антитела или фрагмента антитела подавлять связывание РСВ или антигена РСВ с рецептором клетки-хозяина. В некоторых примерах антитело или антигенсвязывающий фрагмент иммобилизован на твердой подложке и РСВ или антиген РСВ помечен обнаруживаемым соединением. В некоторых примерах РСВ или антиген РСВ иммобилизован на твердой подложке и антитело или его фрагмент помечен обнаруживаемым соединением. РСВ или антиген РСВ может быть частично или полностью очищен (например, частично или полностью свободен от других полипептидов) или может быть в составе клеточного лизата. В некоторых примерах антиген РСВ может представлять собой белок слияния, включающий антиген РСВ и другой домен, такой как глутатион-8-трансферазу. В некоторых примерах антиген РСВ можно быть биотинилирован с применением методов, хорошо известных специалистам в данной области (например, с помощью набора для биотинилирования, Р1егсе СЬетюак; КоскШгб, Ш).
2. Специфичность связывания
Специфичность связывания или эпитоп анти-РСВ антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по настоящему документу может быть определен любым способом, известным специалисту в данной области, включая, но не ограничиваясь поверхностным плазмонным резонансом, анализами на конкуренцию связывания и анализами на нейтрализацию вирусов с применением устойчивых к моноклональным антителам мутантов (МАКМ). Эпитоп может присутствовать на выделенном белке, то есть на выделенном белке Р, или на белке в составе вируса. Возможность двух антител связывать один и тот же эпитоп может быть определена с помощью известных в данной области анализов, таких как, например, поверхностный плазмонный резонанс и анализы на конкуренцию антител. Как правило, антитела, которые иммуноспецифически связывают один эпитоп, могут конкурировать за связывание с эпитопом, которое можно измерить, например, в ш ν 11го анализе на конкуренцию связывания (например, конкуренцию в ИФА), как известно в уровне техники. Как правило, первое антитело, которое иммуноспецифически связывает тот же эпитоп, который связывает второе антитело, может конкурировать за связывание с эпитопом приблизительно на 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100%, где доля конкуренции измеряется способностью второго антитела вытеснять первое связанное антитело из комплекса с эпитопом. В примере анализа на конкуренцию антиген инкубируют в присутствии предварительно определенных разведений меченого антитела (например, при 50-70% от концентрации насыщения), а также серийных разведений немеченого конкурирующего антитела. Конкуренцию определяют путем измерения связывания меченого антитела с антигеном при уменьшении связывания в присутствии конкурирующего антитела. Вариации таких анализов, включая различные способы мечения и способы обнаружения, включая, например, радиометрическое, люминесцентное, ферментативное и колориметрическое обнаружение, известны в уровне техники. Например, как описано в примере 10 ниже, антитела ЦС 58с5 и мотавизумаб не конкурируют за связывание с белком Р РСВ, что свидетельствует о том, что антитело ЦС 58с5 и мотавизумаб связывают различные эпитопы.
Способность первого антитела связывать тот же эпитоп, что и второе антитело, также может быть определена, например, с помощью анализов нейтрализации вируса с применением устойчивых к моноклональным антителам мутантов. МАКМ представляют собой мутанты респираторно-синцитиального вируса (РСВ), которые не нейтрализуются моноклональными антителами, которые нейтрализуют вирус РСВ дикого типа, т.е. МАКМ представляют собой устойчивые мутанты РСВ. МАКМ получают путем культивирования РСВ дикого типа в присутствии моноклональных антител до успешных раундов репликации вируса в присутствии антител, так что после каждого успешного раунда репликации вируса в присутствии возрастающих концентраций антител наблюдается цитопатический эффект (СРЕ), в результате чего получается мутант вируса, который не нейтрализуется антителами. Если первое антитело может нейтрализовать МАКМ против второго антитела, можно сделать вывод, что антитела специфически связывают и взаимодействуют с различными эпитопами. Например, если первое анти-РСВ антитело нейтрализует РСВ дикого типа, но не конкретный мутант РСВ (например, МАКМ), и второе антитело нейтрализует РСВ дикого типа, но не конкретный мутант РСВ, то второе антитело, как правило, связывает тот же эпитоп на РСВ, что и первое антитело. Если первое анти-РСВ антитело нейтрализует РСВ дикого типа, но не конкретный мутант РСВ, а второе антитело нейтрализует РСВ дикого типа и конкретный мутант РСВ, то второе антитело, как правило, не связывает тот эпитоп РСВ, который связывает первое антитело.
Например, как показано в примере 9 ниже, предусмотренное в настоящем документе ЦС 58с5 способно нейтрализовать МАКМ, устойчивые к различным анти-РСВ антителам, включая МАКМ 1129, против тАЬ 1129, исходного антитела для паливизумаба и мотавизумаба (см. 1оЬп8оп е! а1. (1997) I. Мес!. Э|8еа8е8 176:1215-1224 и патент США № 5824307), МАКМ 19, против РаЬ 19 (см. ВагЬа8 е! а1. (1992) Ргос. №!1. Асаб. 8а. И8А 89:10164-10168) и МАКМ 151, против тАЬ 151 (см. МЫбоп е! а1., (1985) I. Сеп. Юго1, 66:2111-2124). Таким образом, ЦС 58с5 связывает другие эпитопы на белке Р по сравнению с антителами РаЬ 19, тАЬ 151 и тАЬ 1129.
Как показано в примере 11 ниже, были получены МАКМ, устойчивые к мотавизумаб и ЦС 58с5. МАКМ против мотавизумаб, полученный после 5-7 раундов отбора, содержит одну аминокислотную
- 66 023179 мутацию (К272Е, 8ЕЦ ίΌ N0: 1642) по сравнению с белком Ρ РСВ дикого типа. Аминокислотная мутация К272 согласуется с известной мутацией, которая нарушает связывание исходного антитела, из которого было получено мотавизумаб (см. Ζΐκω е! а1., (2004) I. Шесйоик О|кеаке 190:1941-1946). ΜΑΚΜ против 1§С 58с5, полученный после 10 раундов отбора, содержит 3 аминокислоты аминокислотные мутации (Ж)3К, Μ115К и Е295С, 8ЕЦ ίΌ N0: 1643) по сравнению с белком Ρ РСВ дикого типа. Мутации, опосредующие устойчивость ΜΑΚΜ к 1§С 58с5, ранее не были определены как антигенные сайты для различных моноклональных антител, которые иммуноспецифически связывают белок Ρ РСВ (см., например, Вее1ег е! а1. (1989) I. Уио1о§у 63(7):2841-2950, Сгоме е! а1. (1998) Уио1о§у 252:373-375; ΖΙςιθ е! а1., (2004)
I. Шесйоик О|кеаке 190:1941-1946; Ни е! а1., (2007) Уио1о§у 1оигпа1 4:71). Кроме того, как показано в примере 11 ниже, ЦС 58с5 нейтрализует ΜΑΚΜ против мотавизумаба и мотавизумаб нейтрализует ΜΑΚΜ против 1§С 58с5. Таким образом, 1§С 58с5 связывает другой эпитоп белка Ρ РСВ по сравнению с мотавизумаб.
3. 1п νί!ΐΌ анализы на нейтрализацию вирусов антителами
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть проанализированы с помощью любого подходящего метода выявления нейтрализации вируса, известного в уровне техники. Методы обнаружения нейтрализации вирусов включают, но не ограничиваются анализами на выявление бляшек и анализами на ингибирование образования синцития. Такие анализы могут быть использованы для оценки, например подавления прикрепления вируса, проникновения вируса в клетку и распространения вируса от клетки к клетке (см., например, Вигют е! а1. (1994) Ρι-ос. №И. Αсаά. 8α. υ.8.Α. 91:355-359; 8аппа е! а1. (2000) Уио1о§у 270:386-3961; и Эе Ьо§и е! а1. (1998) I С1ш ΜίсгоЬю1 36:3198-3204). Специалист в данной области может выбрать любой тест, способный измерять нейтрализацию вируса.
Стандартные анализы бляшкообразования включают, например, анализ подавления бляшкообразования, анализ на уменьшение размера бляшек, анализы нейтрализации и кинетические анализы нейтрализации. В указанных анализах измеряют образование вирусных бляшек (т.е. областей лизированных клеток) после заражения монослоя клеток-мишеней вирусом. Примеры клеточных линий мишеней, которые могут быть использованы в анализах подавления бляшкообразования, включают, но не ограничиваются клетками Vе^о. ΜΚί'.'-5 клетками, РС-37 клетками, ВИК-21/С13 клетками и клетками НЕр-2. Специалист в данной области можно выбрать соответствующие линии клеток-мишеней для применения в анализах на бляшкообразование. Выбор соответствующей линии клеток для анализа бляшкообразования может зависеть от известных факторов, таких как, например, заражаемость клеток вирусом и способность вируса размножаться и лизировать клетки-мишени. Примеры 6 и 9 иллюстрируют ш у 11го тесты нейтрализации.
Анализы подавления бляшкообразования могут быть использованы для измерения способности анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента нейтрализовать вирус в растворе. В примере анализа подавления бляшкообразования антитело или антигенсвязывающий фрагмент и вирус предварительно инкубируют до добавления к клеткам-мишеням. Затем клетки-мишени инфицируют смесью антитело/вирус и после заданного периода инфекции проводят анализ бляшкообразования. На основе известных примеров в уровне техники специалист в данной области может определить необходимое время инкубации. Уменьшение количества вирусных бляшек, образовавшихся после инфицирования клетокмишеней, свидетельствует о способности антитела или антигенсвязывающего фрагмента предотвращать связывание вируса с клетками-мишенями независимо от связывания антитела или антигенсвязывающего фрагменты с клетками-мишенями и/или интернализации антитела или антигенсвязывающего фрагмента.
Анализы подавления бляшкообразования могут быть использованы для измерения способности анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента подавлять распространение вируса от клетки к клетке. В примере анализа подавления бляшкообразования клетки-мишени сначала инфицируют вирусом в течение определенного периода инфекции, а затем к инфицированным клеткам добавляют антитела или антигенсвязывающие фрагменты. На основе известных примеров в уровне техники специалист в данной области может определить необходимое время инкубации. Уменьшение размеров (например, диаметра) бляшек вируса указывает, что антитела или антигенсвязывающие фрагменты способны предотвращать распространение вируса от клетки к клетке.
Анализы нейтрализации вируса могут быть использованы для измерения способности анти-РСВ антитела или антитенсвязывающего фрагмента нейтрализовать вирус на поверхности клетки-мишени путем связывания антитела или антигенсвязывающего фрагмента с клеткой-мишенью до воздействия вируса. В примере анализа нейтрализации вирусов антитело или его антигенсвязывающий фрагмент и клеткимишени предварительно инкубировали в течение определенного периода времени для обеспечения связывания антитела или антигенсвязывающего фрагмента с целевой клеткой. После предварительной инкубации несвязанные антитела удаляли, а клетки-мишени инфицировали вирусом. Уменьшение количества бляшек в этом анализе указывает на способность антитела или антигенсвязывающего фрагмента предотвращать вирусную инфекцию на стадии прикрепления в клетки-мишени и/или интернализации антитела или антигенсвязывающего фрагмента. Этот анализ также может быть использован для измерения кинетики нейтрализации при различных концентрациях антител и антигенсвязывающих фрагментов
- 67 023179 и временах предварительной инкубации.
Примеры анализов на ингибирование образования синцития могут быть использованы для измерения опосредованного антителами ингибирования цитопатического эффекта, блокирования образования синцития при использовании фазогенного штамма вируса. Специалист в данной области можно определить соответствующие фазогенные штаммы вируса для применения в анализе.
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу также могут быть исследованы на их способность ингибировать или подавлять репликацию РСВ с применением методов, которые известны специалистам в данной области. Например, репликация РСВ может быть проанализирована с помощью анализа бляшкообразования, как описано, например, .ТоЬщоп е! а1. (1997) 1оигпа1 оР 1пРесЬош ^^δеаδеδ 176:1215-1224. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу также могут быть исследованы на их способность ингибировать или подавлять экспрессию полипептидов РСВ. Для измерения экспрессии полипептидов РСВ могут быть использованы методы, которые известны специалистам в данной области, включая, но не ограничиваясь вестернблоттингом, нозерн-блоттингом и ПЦР.
4. 1п у1уо модели на животных для оценки эффективности анти-РСВ антител
Для оценки эффективности анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу могут быть проведены ш у1уо исследования с применением моделей на животных. 1п у1уо исследования с применением моделей на животных могут быть также проведены для оценки токсичности при введении таких антител или их антигенсвязывающих фрагментов. Для оценки способности анти-РСВ антител подавлять или лечить вирусную инфекцию РСВ и анализа токсичности специалистам в данной области известны разнообразные тесты, такие как применение моделей на животных ш у1уо. Терапевтический эффект анти-РСВ антител может быть оценен с применением моделей патогенных инфекций на животных, включая модели вирусной инфекции на животных. Такие модели на животных известны в уровне техники и включают, но не ограничиваются моделями инфекции РСВ на животных, таких как, например, хлопковый хомяк, инбредные мыши, скот, хорьки, хомяки, морские свиньи, шимпанзе, трёхполосый дурукули, макака резус, африканская зеленая мартышка, обезьяна цебус, беличья обезьяна, индийский макак, павиан (см., например, Рппсе е! а1. (1978) Ат. Р Ра1йо1. 93:771-791; Рппсе е! а1. (1979) 1пРесР 1ттипо1. 26:764-766; Вугй и Рппсе (1997) С1шюа1 1пРесйош ^^δеаδеδ 25:1363-1368, включая приведенные в указанных статьях ссылки на примеры моделей инфекции РСВ). Для тестирования антител или антигенсвязывающих фрагментов или токсичности композиции ш у1уо может быть использована любая известная в данной области модель на животном, включая, но не ограничиваясь моделями на крысах, мышах, коровах, обезьянах и кроликах.
5. 1п уйго и 1п у1уо анализы для измерения эффективности антител
Эффективность лечения или профилактики вирусной инфекции может быть продемонстрирована с помощью обнаружения способности анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента по настоящему документу подавлять репликацию вируса, препятствовать заражению или развитию вирусной инфекции у хозяина, снижать уровень заболеваемости РСВ или предотвращать, улучшать или облегчать один или несколько симптомов, связанных с инфекцией РСВ. Лечение оказывает терапевтический эффект, если вызывает, например, снижение вирусной нагрузки, улучшение одного или нескольких симптомов, уменьшение продолжительности инфекции РСВ или снижение смертности и/или вероятности возникновения осложнений после введения антител или композиций по настоящему документу. Кроме того, лечение считается терапевтическим, если после введения одного или нескольких антител или их антигенсвязывающих фрагментов, которые иммуноспецифически связывают один или несколько антигенов РСВ, наблюдается увеличение иммунного ответа.
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть проверены на способность индуцировать экспрессию цитокинов, таких как ИФН-а, ИФН-β, ИФН-γ, ИЛ2, ИЛ-3, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, ИЛ-7, ИЛ-8, ИЛ-9, ИЛ-10, ИЛ-12 и ИЛ-15 1п уйго и 1п у1уо. Для измерения уровня экспрессии цитокинов могут быть использованы известные специалистам в данной области методы. Например, уровень экспрессии цитокинов может быть измерен по уровню РНК цитокинов, например, с помощью ОТ-ПЦР и нозерн-блоттинга, или непосредственно с помощью анализа уровня цитокинов, например, с помощью иммунопреципитации с последующим вестерн-блоттингом или ИФА.
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть проверены ш У11го и ш у1уо на их способность модулировать биологическую активность иммунных клеток, включая человеческие иммунные клетки (например, Т-клетки, В-клетки и натуральные киллеры). Способность анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов модулировать биологическую активность иммунных клеток можно оценить путем определения экспрессии антигенов, выявления пролиферации клеток иммунной системы, выявления активации сигнальных молекул, обнаружения эффекторных функций иммунных клеток или обнаружения дифференциации клеток иммунной системы. Для измерения этих видов активности могут быть использованы известные специалистам в данной области методы. Например, пролиферация клеток может быть проанализирована по включению Н-тимидина и подсчету клеток с окрашиванием трипановым синим. Экспрессия антигена может быть проанализирована, например, методом иммуноанализа, включая, но не ограничиваясь конкурентными и неконкурентными
- 68 023179 системами анализа с применением таких методов, как вестерн-блоттинг, иммуногистохимический радиоиммуноанализ, ИФА (иммуноферментный анализ), сэндвич иммуноанализ, иммунопреципитация, реакции преципитации, реакции преципитации с диффузией в геле, иммунодиффузионный анализ, анализы агглютинации, анализ фиксации комплемента, иммунорадиометрический анализ, флуоресцентный иммуноанализ, иммуноанализ с белком А и ΕАС8 анализ. Активация сигнальных молекул может быть проанализирована, например, анализами на киназную активность и анализом на сдвиг при электрофорезе (ЕМ8А).
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу также могут быть проверены на их способность ингибировать репликацию вируса или снижать вирусную нагрузку ίη νίίΓο, ех νίνο или ίη νίνο. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты также могут быть исследованы на их способность уменьшать время течения инфекции РСВ. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты также могут быть исследованы на их способность увеличивать процент выживаемости людей, страдающих от инфекции РСВ, по меньшей мере приблизительно на 25%, по меньшей мере приблизительно на 50%, по меньшей мере приблизительно на 60%, по меньшей мере приблизительно на 75%, по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 95% или по меньшей мере приблизительно на 99%. Кроме того, анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть исследованы на их способность уменьшать время госпитализации людей, страдающих от инфекции РСВ, по меньшей мере приблизительно на 60%, по меньшей мере приблизительно на 75%, по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 95% или по меньшей мере приблизительно на 99%. Для анализа функций анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов, предусмотренных в настоящем документе, могут быть использованы известные специалистам в данной области методы ίη νίνο.
Чтобы продемонстрировать профилактическую и/или терапевтическую эффективность анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу в соответствии со способами и применением по настоящему документу должны быть проведены клинические испытания с человеком в качестве субъекта. Исследования ίη νίίτο и модели на животных с применением анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу могут быть экстраполированы на людей и достаточны для демонстрации профилактического и/или терапевтического применения анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов.
H. Диагностическое применение
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть использованы в диагностических анализах для выявления, очистки и/или нейтрализации РСВ. Примеры диагностических анализов включают обнаружение РСВ ίη νίίτο и ίη νίνο. Например, предусмотрены анализы с использованием анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу для качественного и количественного измерения уровня РСВ в выделенном биологическом образце (например, мокроте) или ίη νίνο.
Как описано в настоящем документе, анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть конъюгированы с обнаруживаемым фрагментом для детекции ίη νίίτο или ίη νίνο. Такие антитела могут быть использованы, например, для оценки локализации и/или персистенции анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов ίη νίνο, например, в слизистой оболочке. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, связанные с обнаруживаемым фрагментом, могут быть обнаружены ίη νίνο любым подходящим способом, известным в уровне техники. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, связанные с обнаруживаемым фрагментом, также могут быть обнаружены в выделенных биологических образцах, таких как образцы тканей или жидкостей, полученные от субъекта после введения антител или антигенсвязывающих фрагментов.
I. Обнаружение патогенной инфекции ίη νίίτο
РСВ может быть обнаружен у субъекта или пациента по наличию одного или нескольких белков РСВ и/или полинуклеотидов, кодирующих такие белки, в биологическом образце (например, в крови, сыворотке, моче, мокроты и/или других подходящих клетках или тканях), полученном от субъекта или пациента. Такие белки могут быть использованы в качестве маркеров, указывающих на наличие или отсутствие РСВ у субъекта или пациента. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть использованы для выявления уровня антигена и/или эпитопа, который связывается агентом в биологической пробе.
Специалистам в данной области известно множество различных форматов анализа для применения анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов для обнаружения полипептидных маркеров в пробе (см., например, ИатШу ;·ιηά Ьаие, Аηί^Ьοά^еδ: А Ьа^таФту Маииа1, Οο1ά 8ρτίη§ нат^т ^аЬο^аίο^у, 1988). В общем, наличие или отсутствие РСВ у субъекта или пациента может быть определено через взаимодействие полученной от субъекта или пациента биологической пробы с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу и измерение уровня полипептида, который связывается с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами.
В некоторых примерах анализ предполагает применение анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу, иммобилизованных на твердой подложке, позволяющих свя- 69 023179 зать и отделить целевые полипептиды от остальной части образца. Связанные полипептиды могут быть обнаружены с помощью детектирующего реагента, содержащего репортерную группу и специфически связывающегося с комплексом антитело/полипептид. Такие детектирующие реагенты могут содержать, например, связывающий агент, который специфически связывает полипептид, или антитело или другой агент, который специфически связывает связывающий агент.
В некоторых примерах может быть использован конкурентный анализ, в котором меченый репортерной группой полипептид связывается с иммобилизованным анти-РСВ антителом или антигенсвязывающим фрагментом при инкубации анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента с образцом. Степень ингибирования связывания меченого полипептида анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами компонентами образца свидетельствует о способности образца реагировать с иммобилизованными анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами. Подходящие для применения в таких тестах полипептиды включают полноразмерный белок Р РСВ и его части, включая внеклеточный домен белка Р РСВ, который связывают анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты, как описано выше.
Твердая подложка может представлять собой любой материал, известный специалистам в данной области техники, к которому может быть присоединен белок. Например, твердая подложка может представлять собой поверхность лунки микротитровального планшета или нитроцеллюлозу или другие подходящие мембраны. Подложка также может представлять собой бусину или диск из такого материала, как стекло, стекловолокно, латекс или пластик, например, полистирол или поливинилхлорид. Подложка также может представлять собой магнитные частицы или волоконно-оптический датчик, как описано, например, в патенте США № 5359681. С использованием различных известных специалистам в данной области способов анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут быть иммобилизованы на твердом носителе. Анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты также могут быть иммобилизованы адсорбцией в планшете или на мембране. В таких случаях адсорбция может быть достигнута инкубацией анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов с твердой подложкой в соответствующем буфере в течение подходящего времени. Время инкубации зависит от температуры, но обычно составляет от приблизительно 1 ч и приблизительно 1 дня. Как правило, инкубации приблизительно 10 нг-10 мкг, как правило приблизительно 100 нг-1 мкг анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента в лунке пластикового микротитровального планшета (например, полистирольного или поливинилхлоридного) достаточно для иммобилизации достаточного количества анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента.
Ковалентное присоединение анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов к твердой подложке может быть достигнуто взаимодействием подложки с бифункциональным реагентом, который реагирует с подложкой и функциональной группой, такой как гидроксильная группа или аминогруппа, анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента. Например, анти-РСВ антитело или антигенсвязывающий фрагмент могут быть ковалентно связаны с подложкой, имеющей соответствующее полимерное покрытие, с применением бензохинона или конденсацией альдегидной группой подложки с аминогруппой или активным водородом связываемого партнера (см., например, Р1егсе 1ттипо!есйпо1оду Са!а1од апй НапйЬоок, 1991, А12-А13).
В некоторых примерах анализ проводят в проточном варианте или в формате тест-полосок, где анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты иммобилизованы на мембране, такой как нитроцеллюлозная мембрана. В проточном варианте анализа полипептиды в образце связываются иммобилизованными анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами при прохождении образца через мембрану. Второй меченый связывающий агент затем связывает комплекс анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента с полипептидом при прохождении через мембрану раствора, содержащего второй агент.
В уровне техники описаны дополнительные протоколы анализа, которые подходят для применения с белками РСВ или предусмотренными анти-РСВ антителами или их антигенсвязывающими фрагментами. Приведенное выше описание предназначено только для иллюстративных целей. Например, специалисту в данной области очевидно, что приведенные выше протоколы могут быть легко модифицированы для применения полипептидов РСВ для обнаружения антител, которые связывают такие полипептиды в биологическом образце. Обнаружение таких белокспецифичных антител может позволить выявлять инфекцию РСВ.
Для повышения чувствительности в образце могут быть проанализированы несколько белковмаркеров РСВ. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, специфичные к различным полипептидам РСВ, могут быть применены в одном анализе. Кроме того, одновременно могут быть использованы несколько праймеров или зондов. Выбор белков-маркеров РСВ может быть основан на рутинных экспериментах, позволяющих определить комбинации, приводящие к оптимальной чувствительности. Кроме того, анализы на белки РСВ по настоящему документу могут быть объединены с анализами на другие известные антигены РСВ.
- 70 023179
2. Обнаружение патогенной инфекции ίη у|уо
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть использованы как диагностические агенты ίη угуо. Например. анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут дать картину инфицированных тканей (например. инфекции РСВ в легких) с применением специальных методов обнаружения. таких как. например. магнитно-резонансная томография. рентгенография. компьютерная эмиссионная томографии и другие технологии получения изображений. Для визуализации инфицированных РСВ тканей. например. часть анти-РСВ антитела связывает РСВ (например. связывает эпитоп белка Р РСВ). при этом неся на себе обнаруживаемый агент для визуализации. такой как парамагнитный. радиоактивный или флуоресцентный агент. Как правило. для применения в качестве диагностического средства анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты связаны с агентом для визуализации напрямую или не напрямую.
Многие подходящие агенты для визуализации. а также способы их присоединения к анти-РСВ антителам или антигенсвязывающим фрагментам известны в уровне техники (см.. например. патенты США № 5021236 и 4472509). Примеры способов присоединения включают связывание с применением металлхелатных комплексов. например. с применением органических хелатообразователей. таких как ОТРА. прикрепленных к антителу или антигенсвязывающему фрагменту (патент США № 4472509). Антитела также могут реагировать с ферментом в присутствии связывающего агента. такого как глутаральдегид или перийодат. Конъюгаты с флуоресцентными маркерами получают в присутствии таких сшивающих агентов или в результате реакции с изотиоцианатом.
Ведь диагностической визуализации ίη угуо тип инструмента для визуализации учитывается при выборе конкретного изотопа. Выбранный радиоизотоп должен иметь тип распада. которой обнаруживается прибором данного типа. Еще одним фактором при выборе радиоизотопа для диагностики является период полураспада радиоактивного изотопа. который должен быть достаточно длинным для возможности его обнаружения в момент максимального поглощения мишенью. но достаточно коротким для сведения вредного для пациента излучения к минимуму. Как правило. используемые для ίη \'ί\Ό визуализации радиоизотопы не испускают частицы. но продуцируют большое количество фотонов с энергией 140250 кэВ. которые могут быть легко обнаружены обычными гамма-камерами.
Для диагностики радиоактивные изотопы могут быть связаны с антителами или их антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу напрямую или не напрямую с помощью промежуточных функциональных групп. Примеры промежуточных функциональных групп. которые могут быть использованы для связывания радиоизотопов. существующих в виде ионов металлов. с антителами. включают бифункциональные хелатообразователи. такие как диэтилентриаминпентауксусную кислоту (ОТРА) и этилендиаминтетрауксусную кислоту (ЭДТА) и подобные молекулы. Примеры ионов металлов. которые могут быть связаны с предусмотренными анти-РСВ антителами или их антигенсвязывающими фрагментами. включают. но не ограничиваются 72мышьяком. 211астатом. 14углеродом. 51хромом.
1 23 водородом. йодом.
75 рутением. селеном.
36хлором. 57кобальтом. 58кобальтом. 67медью. 152европием 125йодом. 131йодом. 111индием. 59железом. 32фосфором. 186рением. 188рением 35 ~ 99 201 90 89 серой. технецием. талием. иттрием и цирконием.
Для диагностики. например. методом магнитно-резонансной томографии (МРТ) или электронного парамагнитного резонанса (ЭПР) анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть помечены парамагнитными изотопами. В общем. может быть использован любой обычный метод диагностической визуализации. Как правило. для визуализации используют излучающие гамма-кванты и позитроны радиоизотопы. для МРТ используют парамагнитные изотопы. Элементы. которые особенно полезны для таких методов. включают. но не ограничиваются 157ОБ. 55Ми. 162Эу. 52Сг и 56Ре.
Примеры парамагнитных ионов включают. но не ограничиваются хромом (III). марганцем (II). железом (III). железом (II). кобальтом (II). никелем (II). медью (II). неодимом (III). самарием (III). иттербием (III). гадолинием (III). ванадием (II). тербием (III). диспрозием (III). гольмием (III) и эрбием (III). Используемые. например. для рентгеновских изображений ионы включают. но не ограничиваются лантаном (III). золотом (III). свинцом (II) и висмутом (III).
Концентрация вводимых меченых обнаруживаемой меткой анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов должна быть достаточной для обнаружения связывания с РСВ по сравнению с фоном. Кроме того. для получения лучшего отношения целевого и фонового сигналов желательно быстрое выведение обнаруживаемо меченых анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов из кровеносной системы.
Дозировка обнаруживаемо меченых анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов для диагностики зависит от таких факторов. как возраст. пол и тяжесть заболевания человека. Дозировка человеческих моноклональных антител может меняться. например. от приблизительно 0.01 мг/м2 до приблизительно 500 мг/м2. от приблизительно 0.1 мг/м2 до приблизительно 200 мг/м2. от приблизительно 0.1 мг/м2 до приблизительно 10 мг/м2. Такие дозы могут меняться. например. в зависимости от количества инъекций. типа ткани и других факторов. которые известны специалистам в данной области.
67галлием. 68галлием.
- 71 023179
3. Контроль инфекции
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть использованы ίη νίίτο и ίη νίνο для наблюдения за ходом лечения заболевания. Так, например, может быть измерено увеличение или уменьшение количества клеток, инфицированных РСВ, или изменение концентрации вирусных частиц РСВ в организме или в различных жидкостях организма. С применением таких способов с помощью анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов возможно определить, является ли конкретный терапевтический режим, направленный на лечение заболевания, эффективным.
Ι. Профилактическое и терапевтическое применение
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу и фармацевтические композиции, содержащие анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу, могут быть введены субъекту для профилактики и лечения. Например, антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть введены для лечения заболевания или состояния, такого как инфекция РСВ. В некоторых примерах антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть введены субъекту в профилактических целях, таких как предотвращение возникновения и/или распространения инфекции РСВ, включая, но не ограничиваясь ингибированием возникновения инфекции РСВ у субъекта или ингибированием передачи РСВ между субъектами. В некоторых примерах антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть введены субъекту для снижения вирусной нагрузки РСВ у данного субъекта. Антитела или их антигенсвязывающие фрагменты также можно вводить субъекту для профилактики, лечения и/или облегчения одного или нескольких симптомов инфекции РСВ или уменьшения продолжительности инфекции РСВ.
В некоторых примерах анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу снижают уровень заболеваемости РСВ по меньшей мере приблизительно на 99%, по меньшей мере приблизительно на 95%, по меньшей мере приблизительно на 90% или по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 80%, по меньшей мере приблизительно на 75%, по меньшей мере приблизительно на 70%, по меньшей мере приблизительно на 65%, по меньшей мере приблизительно на 60%, по меньшей мере приблизительно на 55%, по меньшей мере приблизительно на 50%, по меньшей мере приблизительно на 45%, по меньшей мере приблизительно на 40%, по меньшей мере приблизительно на 35%, по меньшей мере приблизительно на 30%, по меньшей мере приблизительно на 25%, по меньшей мере приблизительно на 20%, по меньшей мере приблизительно на 15% или по меньшей мере приблизительно на 10% по отношению к заболеваемости РСВ в отсутствие анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов. В некоторых примерах анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу уменьшают тяжесть одного или нескольких симптомов инфекции РСВ по меньшей мере приблизительно на 99%, по меньшей мере приблизительно на 95%, по меньшей мере приблизительно на 90%, по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 80%, по меньшей мере приблизительно на 75%, по меньшей мере приблизительно на 70%, по меньшей мере приблизительно на 65%, по меньшей мере приблизительно на 60%, по меньшей мере приблизительно на 55%, по меньшей мере приблизительно на 50%, по меньшей мере приблизительно на 45%, по меньшей мере приблизительно на 40%, по меньшей мере приблизительно на 35%, по меньшей мере приблизительно на 30%, по меньшей мере приблизительно на 25%, по меньшей мере приблизительно на 20%, по меньшей мере приблизительно на 15% или по меньшей мере приблизительно на 10% по сравнению с тяжестью одного или нескольких симптомов инфекции РСВ в отсутствие анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов.
1. Субъекты для терапии
Субъекты или кандидаты на терапию анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают, но не ограничиваются пациентом, который заражен вирусом РСВ, пациентом, который проявляет один или несколько симптомов инфекции РСВ, и пациентом, который находится под угрозой инфекции РСВ. Примеры вирусных инфекций РСВ включают вызванные вирусом РСВ заболевания, включающие, но не ограничивающиеся острым заболеванием РСВ, вызванной РСВ инфекцией верхних дыхательных путей (ЦР1) и/или вызванной РСВ инфекцией нижних дыхательных путей (ЕР1), включая, например, бронхит и пневмонию.
В некоторых примерах субъект для терапии предусмотренными в настоящем документе анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами представляет собой млекопитающее. В некоторых примерах субъект для терапии предусмотренными в настоящем документе анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами представляет собой примата. В частности, например, субъект для терапии анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу представляет собой человека.
Предусмотренные анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть введены субъекту, такому как пациенту, для лечения любого опосредованного РСВ заболевания. Например, антиРСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть введены субъекту для облегчения одного или нескольких симптомов или состояний, связанных с вирусной инфекцией РСВ, включая, но не ограничиваясь астмой, затрудненным дыханием, реактивным заболеванием
- 72 023179 дыхательных путей (ЕЛО) и хронической обструктивной болезнью легких (ХОБЛ). Такие заболевания и состояния хорошо известны и легко диагностируются врачами или специалистами.
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть введены субъекту, такому как пациент с инфекцией вирусом РСВ, в качестве поддерживающей терапии или для подавления рецидива опосредованного вирусом РСВ заболевания.
Предусмотренные анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть введены субъекту, такому как пациент с риском возникновения инфекции вирусом РСВ, включая, но не ограничиваясь недоношенным (досрочно родившимся) ребенком (например, ребенком, родившимся с гестационным возрастом менее 38 недель, например, 29 недель, 30 недель, 31 неделя, 32 недели, 33 недели, 34 недели, 35 недель, 36 недель или 37 недель), ребенком (например, ребенком, родившимся с гестационным возрастом более 37 недель), субъектом с кистозным фиброзом, бронхолегочной дисплазией, врожденным пороком сердца, врожденным иммунодефицитом или приобретенным иммунодефицитом (например, больного СПИДом), лейкемией, неходжкинской лимфомой, пациентом с подавленным иммунитетом, например, при трансплантации (например, пересадке костного мозга или пересадке почки), или пожилым субъектом, включая людей в домах престарелых или реабилитационных центрах. В некоторых примерах анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть введены таким субъектам, как недоношенный ребенок или ребенок, подверженный воздействию одного или более факторов риска окружающей среды, например, посещающий детский сад, имеющий братьев и сестер школьного возраста, подверженный воздействию экологических загрязнителей воздуха, имеющий врожденные аномалии дыхательных путей и/или тяжелые нервно-мышечные заболевания. В некоторых примерах предусмотренные анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть введены таким субъектам, как младенец или ребенок младше двух лет с хроническими заболеваниями легких или врожденным пороком сердца, включая сердечную недостаточность, легочную гипертензию и врожденный порок сердца синего типа.
Для оценки того, является ли субъект кандидатом на терапию анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу, могут быть использованы известные тесты на различные патогены и патогенные инфекции. Например, известные тесты на вирус РСВ включают, например, тесты на бляшкообразование в культуре, тест на выявление антигена, полимеразную цепную реакцию (ПЦР), а также различные серологические тесты на антитела. Тесты на вирусную инфекцию могут быть выполнены на образцах, полученных из образцов тканей или жидкостей, такие как спинномозговая жидкость, кровь или моча. Дополнительные тесты включают, но не ограничиваются рентгеном грудной клетки, который может показать признаки пневмонии, другими анализами крови, такими как химический скрининг, анализом форменных элементов крови или анализ газов артериальной крови (ГАК), оксиметрией для измерения количества кислорода в крови.
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть введены субъекту, подверженному повышенному риску заражения РСВ в определенное время года. Сезон РСВ обычно продолжается с октября по май. Субъектам с повышенной восприимчивостью к вирусной инфекции, таким как младенцы или пожилые пациенты с ослабленным иммунитетом, в течение этого времени для профилактики и/или лечения инфекции РСВ непосредственно перед сезоном и/или во время сезона РСВ могут быть введены анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу. В некоторых примерах анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу вводят один раз, два раза, три раза, четыре раза или пять раз в течение сезона РСВ. В некоторых примерах анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу вводят один раз, два раза, три раза, четыре раза или пять раз в течение одного месяца, двух месяцев или трех месяцев до сезона РСВ.
2. Дозировки
Анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу вводят в количестве, достаточном для оказания терапевтически полезного эффекта при отсутствии нежелательных побочных эффектов у подвергаемого лечению пациента. Терапевтически эффективная концентрация анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов может быть определена эмпирически путем тестирования полипептидов в известных ίη νίίτο и ίη νίνο системах, например, с помощью анализов по настоящему документу или известных в данной области анализов.
Эффективное для терапевтического введения количество антитела или антигенсвязывающего фрагмента будет зависеть, например, от терапевтической цели, пути введения и состояния пациента. Кроме того, лечащий врач принимает во внимание различные факторы, изменяющие действие лекарств, включая тип и степень тяжести заболевания, состояние здоровья пациента, массу тела, пол, диету, время и путь введения, применение других лекарственных средств и другие соответствующие клинические факторы. Соответственно, для получения оптимального терапевтического эффекта терапевту необходимо титровать дозу антитела или антигенсвязывающего фрагмента и изменять пути введения. Как правило, врач вводит антитело или антигенсвязывающий фрагмент, пока не будет достигнута доза, позволяющая получить желаемый эффект. Прогресс такой терапии легко контролируется обычными способами. Примеры анализов для мониторинга лечения вирусных инфекций известны в данной области и включают,
- 73 023179 например, анализы на титр вируса.
Как правило, доза для введения предусмотренных в настоящем документе анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов является достаточной для получения желаемого эффекта, при котором облегчается симптом (симптомы) опосредованного возбудителем заболевания (например, вирусного заболевания) или снижается вероятность вирусной инфекции. В некоторых примерах анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу вводят в количестве, достаточном для индукции иммунного ответа субъекта. Доза должна быть не настолько большой, чтобы вызывать побочные эффекты, такие как синдром повышенной вязкости крови, отек легких или застойная сердечная недостаточность. Как правило, доза варьируется в зависимости от возраста, состояния, пола и тяжести заболевания у пациента и может быть определена специалистом в данной области. Дозировка может изменяться лечащим врачом в случае появления каких-либо неблагоприятных побочных эффектов. Примеры доз для профилактики или лечения инфекции РСВ и/или улучшения одного или нескольких симптомов инфекции РСВ включают, но не ограничиваются дозой от приблизительно 0,01 мг/кг до приблизительно 300 мг/кг, например, приблизительно 0,01 мг/кг, приблизительно 0,1 мг/кг, приблизительно 0,5 мг/кг, приблизительно 1 мг/кг, приблизительно 5 мг/кг, приблизительно 10 мг/кг, приблизительно 15 мг/кг, приблизительно 20 мг/кг, приблизительно 25 мг/кг, приблизительно 30 мг/кг, приблизительно 35 мг/кг, приблизительно 40 мг/кг, приблизительно 45 мг/кг, приблизительно 50 мг/кг, приблизительно 100 мг/кг., приблизительно 150 мг/кг, приблизительно 200 мг/кг, приблизительно 250 мг/кг, приблизительно 300 мг/кг.
В некоторых примерах анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу вводят субъекту в дозах, эффективных для достижения желаемого титра в сыворотке. В частности, например, анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу вводят для предотвращения или лечения инфекции РСВ и/или улучшения одного или нескольких симптомов инфекции РСВ в количестве, достаточном для достижения титра в сыворотке, по меньшей мере приблизительно 1 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 2 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 3 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 4 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 5 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 6 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 7 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 8 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 9 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 10 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 15 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 20 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 25 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 30 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 40 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 50 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 60 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 70 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 80 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 90 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 100 мкг/мл, приблизительно на 1 день, 2 день, 3 день, 4 день, 5 день, 6 день, 7 день, 8 день, 9 день, 10 день, 15 день, 20 день, 25 день, 30 день, 35 день или 40 день после введения первой дозы антитела или антигенсвязывающего фрагмента и до введения последующей дозы антитела или антигенсвязывающего фрагмента.
В некоторых примерах анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу вводят путем легочной доставки субъекту в дозах, эффективных для достижения желаемого титра антител в образце, полученном при интубации, образце мокроты или легочного лаважа. В частности, например, анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу вводят для предотвращения или лечения инфекции РСВ и/или улучшения одного или нескольких симптомов инфекции РСВ в количестве, достаточном для достижения титра 10 нг/мг (нг белка анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента в мг ткани легких) или приблизительно 10, 15 нг/мг или приблизительно 15, 20 нг/мг или приблизительно 20, 25 нг/мг или приблизительно 25, 30 мг/мг или приблизительно 30, 40 нг/мг или приблизительно 40, 50 нг/мг или приблизительно 50, 60 нг/мг или приблизительно 60, 70 нг/мг или приблизительно 70, 80 нг/мг или приблизительно 80, 90 нг/мг или приблизительно 90, 100 нг/мг или приблизительно 100, 110 нг/мг или приблизительно 110, 120 нг/мг или приблизительно 120, 130 нг/мг или приблизительно 130, 140 нг/мг или приблизительно 140, 150 нг/мг или приблизительно 150 нг/мг в образце, полученном при интубации, или образце легочного лаважа на 10 день, 15 день, 20 день, 25 день, 30 день, 35 день или 40 день после введения первой дозы антитела или его антигенсвязывающего фрагмента и до введения последующей дозы антитела или антигенсвязывающего фрагмента.
Для лечения вирусной инфекции доза анти-РСВ антитела или его антигенсвязывающего фрагмента может варьировать в зависимости от типа и тяжести заболевания. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть введены разовой дозой, несколькими отдельными введениями или путем непрерывной инфузии. При повторных введениях черех несколько дней или дольше в зависимости от состояния лечение можно повторить до желаемого подавления симптомов заболевания или желаемого улучшения состояния пациента. Повторные введения могут включать в себя увеличенное или уменьшенное количество анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов в зависимости от хода лечения. Также предусмотрены другие схемы введения.
В некоторых примерах анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу вводятся один раз, два раза, три раза, четыре раза, пять раз, шесть раз, семь раз, восемь раз,
- 74 023179 девять раз, десять раз и более в течение дня или в течение нескольких дней. В частности, например, для профилактики и лечения инфекции РСВ и/или улучшения одного или нескольких симптомов инфекции РСВ анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу вводят один раз, два раза, три раза, четыре раза, пять раз, шесть раз, семь раз, восемь раз, девять раз, десять раз и более в количестве, достаточном для достижения титра в сыворотке по меньшей мере приблизительно 1 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 2 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 3 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 4 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 5 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 6 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 7 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 8 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 9 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 10 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 15 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 20 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 25 мкг/мл, как минимум приблизительно 30 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 40 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 50 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 60 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 70 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 80 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 90 мкг/мл, по меньшей мере приблизительно 100 мкг/мл приблизительно на 1 день, 2 день, 3 день, 4 день, 5 день, 6 день, 7 день, 8 день, 9 день, 10 день, 15 день, 20 день, 25 день, 30 день, 35 день или 40 день после введения первой дозы, второй дозы, третьей дозы, четвертой дозы, пятой дозы, шестой дозы, седьмой дозы, восьмой дозы, девятый дозы, десятой дозы антитела или антигенсвязывающего фрагмента и до введения последующих доз антитела или антигенсвязывающего фрагмента. В частности, например, для профилактики или лечения инфекции РСВ и/или улучшения одного или нескольких симптомов инфекции РСВ анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу вводят четыре раза в количестве, достаточном для достижения титра в сыворотке, по меньшей мере приблизительно 72 мкг/мл приблизительно на 1 день, 2 день, 3 день, 4 день, 5 день, 6 день, 7 день, 8 день, 9 день, 10 день, 15 день, 20 день, 25 день, 30 день, 35 день или 40 день после введения четвертой дозы антитела или антигенсвязывающего фрагмента и до введения последующей дозы антитела или антигенсвязывающего фрагмента.
В некоторых примерах анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты вводят в последовательности из двух или более введений, где введения разделены выбранным периодом времени. В некоторых примерах выбранный период времени составляет по меньшей мере приблизительно 1 день, 2 дня, 3 дня, 4 дня, 5 дней, 6 дней, 1 неделю, 2 недели, 3 недели, 1 месяц, 2 месяца или 3 месяца.
В некоторых примерах профилактически эффективное количество анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента по настоящему документу вводят один или несколько раз незадолго до начала сезона РСВ. В некоторых примерах профилактически эффективное количество анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу вводят один или несколько раз незадолго до начала сезона РСВ и/или вводят один или несколько раз в течение сезона РСВ.
Терапевтическая эффективность определенной дозы или режима дозирования также может быть оценена, например, путем измерения вирусного титра у субъекта до и после введения одной или нескольких доз анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов. Дозировка и/или частота введения может быть изменена в зависимости от желаемой скорости клиренса вируса у субъекта.
Специалисту в данной области очевидно, что оптимальные схемы лечения могут изменяться, и в процессе лечения для определения оптимальной терапевтической дозы и частоты введения необходимо оценивать течение заболевания и общее состояние здоровья пациента до и после одного или более циклов терапии. Подразумевается, что для любого конкретного субъекта с течением времени в зависимости от индивидуальных потребностей и профессионального суждения врача, осуществляющего контроль за введением фармацевтической композиции, конкретные схемы дозирования могут быть скорректированы, также подразумевается, что приведенные в настоящем документе дозы указаны только в качестве примеров и не предназначены для ограничения изобретения. Количество анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента, вводимого для лечения заболевания или состояния, например вирусной инфекции (например, инфекции РСВ), может быть определено стандартными клиническими способами (например, анализами на вирусный титр или выявлением антигена). Кроме того, чтобы помочь определить оптимальный диапазон доз, могут быть использованы ίη νίίτο анализы и модели на животных. Такие анализы могут обеспечить диапазоны доз, которые могут быть экстраполированы для введения такому субъекту, как человек. Методы определения оптимального диапазона доз, основанные на моделях на животных, хорошо известны специалистам в данной области.
3. Пути введения
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть введены субъекту любыми способами введения полипептидов, известными в данной области, включая, например, системное или местное введение. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть введены, например, парентерально (например, внутрикожно, внутримышечно, внутрибрюшинно, внутривенно, подкожно или через внутриполостное введение), местно, эпидурально или через слизистые оболочки (например, интраназально или перорально). Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть введены субъекту наружно в подверженном заболеванию месте для местного или трансдермального действия. Композиции, содержащие анти-РСВ антитела или их антиген- 75 023179 связывающие фрагменты, могут быть введены любым удобным путем. например путем инъекции или болюсной инфузии. абсорбцией через эпителиальные или слизистые оболочки (например, слизистую оболочку полости рта. прямой кишки и слизистую оболочку кишечника). Композиции, содержащие анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, могут быть введены вместе с другими биологически активными веществами. Способ введения может включать в себя местное или другое введение композиции на область тела. в область или вокруг области тела. которые могут контактировать с жидкостью, клетками или тканями. которые заражены, загрязнены или связаны с вирусом. таким как вирус РСВ. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть введены местно или с помощью аэрозоля для непосредственной доставки в органы-мишени. такие как легкие (например, с помощью легочных аэрозолей). В некоторых примерах предусмотренные анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть введены в виде композиции с контролируемым высвобождением. например, с помощью насоса (см.. например, Ьаидег (1990) 8с1епсе 249:15271533; 8ей!оп (1987) СКС СгП. КеГ. Вютеб. Епд. 14:20; ВисЬуа1б е! а1. (1980) 8игдегу 88:507; и 8аибек е! а1. (1989) N. Епд1. ί. Меб. 321:574). либо через применение различных известных и описанных в настоящем документе полимеров. В некоторых примерах системы с контролируемым или замедленным высвобождением могут быть размещены в непосредственной близости от терапевтической цели. примера. в легких, что потребует введения лишь части от системной дозы (см.. например, Оообзоп. Мебюа1 АррПсайопз оГ Сойго11еб Ке1еазе. т. 2. с. 115-138 (1984)).
В конкретных примерах предусмотренные анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты вводят с помощью легочной доставки (см.. например, патенты США № 6019968. 5985320. 5985309. 5934272. 5874064. 5855913. 5290540. 4880078 и заявках РСТ № УО 92/19244. УО 97/32572. УО 97/44013. УО 98/31346 и УО 99/66903). Примеры способом легочной доставки известны и включают, но не ограничиваются аэрозолями, полученными, например, с помощью ингаляторов (например, дозированных ингаляторов под давлением, ингаляторов с сухим порошком, распылителей (например, струйных или ультразвуковых распылителей) и других жидкостных систем для вдыхания лекарств), эндотрахеальным введением и инсуффляцией. В некоторых примерах легочная доставка может быть улучшена за счет одновременного введения или совместного введения в одной композиции препарата, содержащего антиРСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу, и усилителя проникновения, такого как. например, поверхностно-активное вещество, жирные кислоты. сахариды, хелатирующие агенты и ингибиторы ферментов, такие как ингибиторы протеаз.
Соответствующие способы доставки, такие как легочная доставка, могут быть выбраны специалистом в данной области на основе свойств анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента или его фармацевтической композиции, содержащей антитела или антигенсвязывающие фрагменты. Такие свойства включают, но не ограничиваются растворимостью, гигроскопичностью, кристаллизационными свойствами, температурой плавления, плотностью, вязкостью, текучестью, стабильностью и скоростью деградации.
В некоторых примерах анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу повышают эффективность иммунизации против вируса через слизистую оболочку. Таким образом. в конкретных примерах анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты вводят через поверхность слизистой оболочки. Например, анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть доставлены, например, орально (например, буккально, сублингвально), окулярно (например, через роговицу, конъюнктиву, инъекцией внутрь стекловидного тела. внутрь глазной камеры). интраназально. генитально (например, вагинально). ректально, через легкие, желудок или кишечник. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть введены системно. например, парентерально, например, путем инъекции или постепенной инфузии в течение долгого времени. или энтерально (например, через желудочно-кишечный тракт). Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу также могут применяться местно. например, с помощью местного нанесения (например, эндотрахеальное введение или инсуффляция с использованием бронхоскопа или другого искусственного воздуховода), жидких растворов, гелей. мазей. порошков или в виде ингаляций (например, назальных спреев. ингаляторов (например, дозированных ингаляторов под давлением, ингаляторов с сухим порошком, распылителей (например, струйных или ультразвуковых распылителей) и с помощью других жидкостных систем для введения агентов вдыханием)). Введение может осуществляться до контакта с вирусом или после контакта с вирусом.
4. Комбинированная терапия
Для профилактики и/или лечения заболеваний или состояний анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть введены отдельно или в комбинации с одним или более терапевтическими агентами или лекарственными средствами. Например, для профилактики и/или лечения вирусной инфекции, такой как респираторная вирусная инфекция, предусмотренные анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть введены в комбинации с одним или более противовирусными препаратами. В некоторых примерах респираторная вирусная инфекция представляет собой инфекцию РСВ. Противовирусные препараты могут включать агенты. уменьшающие и/или элиминирующие патогенную инфекцию, или агенты. облегчающие один или несколько симптомов
- 76 023179 патогенной инфекции. В некоторых примерах множество антител или их антигенсвязывающих фрагментов (например, одно или несколько противовирусных антител) также можно применять в комбинации, где по меньшей мере одно из антител представляет собой анти-РСВ антитело или антигенсвязывающий фрагмент, предусмотренный в настоящем документе. В некоторых примерах множество антител можно вводить в комбинации для профилактики и/или лечения инфекции РСВ или нескольких вирусных инфекций, где по меньшей мере одно из антител представляет собой анти-РСВ антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу. В некоторых примерах анти-РСВ антитела могут быть введены в комбинации с одним или более противовирусными антителами, которые связывают и нейтрализуют вирусы, такие как РСВ. В некоторых примерах анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты могут быть введены в комбинации с одним или более антителами, которые могут подавлять или облегчать один или нескольких симптомов вирусной инфекции, такой как инфекция РСВ. В некоторых примерах два или более анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу вводят в комбинации.
Один или несколько дополнительных агентов могут быть введены с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами одновременно, последовательно или с перерывом. Агенты могут быть введены совместно с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами, например, как часть той же фармацевтической композиции и с помощью того же способа доставки. В некоторых примерах агенты могут быть введены совместно и одновременно с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами, но с помощью других средств доставки. Агенты также могут быть введены не одновременно с анти-РСВ антителами или их антигенсвязывающими фрагментами, но достаточно близко по времени к введению анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов для обеспечения комбинированного профилактического или терапевтического эффекта. В некоторых примерах один или несколько дополнительных агентов вводят через некоторое время после введения анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов или за некоторое время до их введения. В некоторых примерах указанный промежуток времени составляет 1 день, 2 дня, 3 дня, 4 дня, 5 дней, 6 дней, 1 неделю, 2 недели, 3 недели, 1 месяц, 2 месяца или 3 месяца. В некоторых примерах один или более дополнительных агентов вводят несколько раз и/или анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу вводят несколько раз.
В некоторых примерах введение комбинации снижает уровень заболеваемости РСВ по меньшей мере приблизительно на 99%, по меньшей мере приблизительно на 95%, по меньшей мере приблизительно на 90% или по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 80%, по меньшей мере приблизительно на 75%, по меньшей мере приблизительно на 70%, по меньшей мере приблизительно на 65%, по меньшей мере приблизительно на 60%, по меньшей мере приблизительно на 55%, по меньшей мере приблизительно на 50%, по меньшей мере приблизительно на 45%, по меньшей мере приблизительно на 40%, по меньшей мере приблизительно на 35%, по меньшей мере приблизительно на 30%, по меньшей мере приблизительно на 25%, по меньшей мере приблизительно на 20%, по меньшей мере приблизительно на 15% или по меньшей мере приблизительно на 10% по отношению к заболеваемости РСВ в отсутствие комбинации. В некоторых примерах введение комбинации снижает тяжесть одного или нескольких симптомов инфекции РСВ по меньшей мере приблизительно на 99%, по меньшей мере приблизительно на 95%, по меньшей мере приблизительно на 90% или по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 80%, по меньшей мере приблизительно на 75%, по меньшей мере приблизительно на 70%, по меньшей мере приблизительно на 65%, по меньшей мере приблизительно на 60%, по меньшей мере приблизительно на 55%, по меньшей мере приблизительно на 50%, по меньшей мере приблизительно на 45%, по меньшей мере приблизительно на 40%, по меньшей мере приблизительно на 35%, по меньшей мере приблизительно на 30%, по меньшей мере приблизительно на 25%, по меньшей мере приблизительно на 20%, по меньшей мере приблизительно на 15% или по меньшей мере приблизительно на 10% по сравнению с тяжестью одного или нескольких симптомов инфекции РСВ в отсутствие комбинации.
В некоторых примерах комбинация подавляет связывание РСВ с его рецептором на клетке-хозяине по меньшей мере приблизительно на 99%, по меньшей мере приблизительно на 95%, по меньшей мере приблизительно на 90% или по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 80%, по меньшей мере приблизительно на 75%, по меньшей мере приблизительно на 70%, по меньшей мере приблизительно на 65%, по меньшей мере приблизительно на 60%, по меньшей мере приблизительно на 55%, по меньшей мере приблизительно на 50%, по меньшей мере приблизительно на 45%, по меньшей мере приблизительно на 40%, по меньшей мере приблизительно на 35%, по меньшей мере приблизительно на 30%, по меньшей мере приблизительно на 25%, по меньшей мере приблизительно на 20%, по меньшей мере приблизительно на 15% или по меньшей мере приблизительно на 10% по сравнению со связыванием РСВ с его рецептором на клетке-хозяине в отсутствие комбинации. В некоторых примерах комбинация подавляет репликацию РСВ по меньшей мере приблизительно на 99%, по меньшей мере приблизительно на 95%, по меньшей мере приблизительно на 90% или по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 80%, по меньшей мере приблизительно на 75%, по меньшей мере приблизительно на 70%, по меньшей мере приблизительно на 65%, по меньшей
- 77 023179 мере приблизительно на 60%, по меньшей мере приблизительно на 55%, по меньшей мере приблизительно на 50%, по меньшей мере приблизительно на 45%, по меньшей мере приблизительно на 40%, по меньшей мере приблизительно на 35%, по меньшей мере приблизительно на 30%, по меньшей мере приблизительно на 25%, по меньшей мере приблизительно на 20%, по меньшей мере приблизительно на 15% или по меньшей мере приблизительно на 10% по сравнению с репликацией РСВ в отсутствие комбинации.
Любая терапия, которая является полезной или которая используется для предотвращения, регулирования, лечения или облегчения инфекции РСВ или одного или нескольких ее симптомов, может быть использована в комбинации с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу (для получения информации о терапии (например, профилактических или лечебных агентах), которую использовали или используют для предотвращения, лечения, регулирования и облегчения инфекции РСВ или одного или нескольких ее симптомов, см., например, СПтап е! а1., Ооойтап апй Ойтап'к: Тйе Рйагтасо1од1са1 Вак1к оГ Тйегареийск, 10-е изд., МсОга^-НШ, №ν Уогк, 2001; Тйе Мегск Мапиа1 оГ О1адпок1к апй Тйегару, Вегкоте, М. Ό. е! а1., 17-е изд., Мегск Зйагр & Эойте Кекеагсй ЬаЬога!опек, Кайетау, Ν.Ι, 1999; Сесй Тех!Ьоок оГ Мейюше, 20-е изд., Вейлей апй Р1ит, изд. \У.В. Заипйегк, Рййайе1рй1а, 1996). Примеры таких агентов включают, но не ограничиваются иммуномодулирующими агентами, противовоспалительными агентами (например, адренокортикоидами, кортикостероидами (например, беклометазоном, будесонидом, флунизолидом, флутиказоном, триамцинолоном, метилпреднизолоном, преднизолоном, преднизоном, гидрокортизоном), глюкокортикоидами, стероидами, нестероидными противовоспалительными препаратами (например, аспирином, ибупрофеном, диклофенаком и ингибиторами ЦОГ-2)), обезболивающими, антагонистами лейкотриенов (например, монтелукастом, метилксантином, зафирлукастом и зилеутоном), бронходилататорами, такими как 32-агонисты (например, бамбутеролом, битолтеролом, кленбутеролом, фенотеролом, формотеролом, индакатеролом, изоэтарином, метапротеренолом, пирбутеролом, прокатеролом, репротеролом, римитеролом, сальбутамолом (альбутеролом, вентолином), левозалбутамолом, сальметеролом, тулобутеролом и тербуталином) и антихолинергическими агентами (например, ипратропия бромидом и окситропия бромидом), сульфасалазином, пеницилламином, дапсоном, антигистаминными агентами, противомалярийными агентами (например, гидроксихлорохином) и противовирусными препаратами. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу также могут быть введены в комбинации с одним или несколькими лекарственными средствами для лечения инфекции РСВ, включающими, но не ограничивающимися внутривенным введением иммуноглобулина, введением дополнительного кислорода и жидкости или вспомогательным дыханием. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу также могут быть введены в комбинации с одним или несколькими агентами, которые регулируют созревание легких и экспрессию белков сурфактанта, такими как, например, глюкокортикоиды, лиганды РРАКу и фактор роста эндотелия сосудов (УЕОР).
Примеры противовирусных препаратов, которые могут быть выбраны для комбинированной терапии с анти-РСЕ1 антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу, включают, но не ограничиваются противовирусными соединениями, противовирусными белками, противовирусными пептидами, конъюгатами противовирусных белков и конъюгатами противовирусных пептидов, включая, но не ограничиваясь аналогами нуклеотидов, иммуномодуляторами (например, интерфероном) и иммуностимуляторами. Комбинированная терапия с применением антител и/или анти-РСВ антител и антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу предполагает комбинацию антител и/или анти-РСВ антител и антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу с другими анти-РСВ антителами и антигенсвязывающими фрагментами.
Примеры противовирусных препаратов для лечения вирусных инфекций, которые могут быть введены в комбинации с анти-РСВ антителами или их антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу, включают, но не ограничиваются ацикловиром, фамцикловиром, ганцикловиром, пенцикловиром, валацикловиром, валганцикловиром, идоксуридином, трифлуридином, бривудином, цидофовиром, докозанолом, фомивирсеном, фоскарнетом, тромантадином, имиквимодом, подофиллотоксином, энтекавиром, ламивудином, телбивудином, клевудином, адефовиром, тенофовиром, боцепревиром, телапревиром, плеконарилом, арбидолом, амантадином, римантадином, осельтамивиром, занамивиром, перамивиром, инозином, интерфероном (например, интерфероном альфа-2Ь, пегинтерфероном альфа-2а), рибавирин/тарибавирином, абакавиром, эмтрицитабином, ламивудином, диданозином, зидовудином, априцитабином, стампидином, элвуцитабином, рацивиром, амдоксовиром, ставудином, зальцитабином, тенофовиром, эфавирензом, невирапином, этравирином, рилпивирином, ловиридом, делавирдином, атазанавиром, фосампренавиром, лопинавиром, дарунавиром, нелфинавиром, ритонавиром, саквинавиром, типранавиром, ампренавиром, индинавиром, энфувиртидом, маравироком, викривироком, РИД 140, ибализумабом, ралтегравиром, элвитегравиром, бевириматом, вивеконом, включая их таутомерные формы, аналоги, изомеры, полиморфные формы, сольваты, производные или соли.
Примеры противовирусных препаратов для профилактики и/или лечения инфекции РСВ, которые можно вводить в комбинации с анти-РСВ антителами или их антигенсвязывающими фрагментами по
- 78 023179 настоящему документу, включают, но не ограничиваются рибавирином, МН-351 (Оетт ТесЬпо1од1е8), рекомбинантной вакциной РСВ (Ау1гоп), РСВГ-2 (ШгасеЦ Р-50042 (Р1егге РаЬге), Т-786 (Тптег18), УР36676 (МгоРЬагта), КИ-641 (Атепсап Ноте Ргобис!8), УР-14637 (МгоРЬагта), РРР-1 и РРР-2 (Атепсап Ноте Ргобис!8), РСВ вакциной (Аνаη! Iттиηο!Ье^аρеиί^сδ), Р-50077 (Р1егге РаЬге) и другими анти-РСВ антителами или их антигенсвязывающими фрагментами.
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу также могут быть введены в комбинации с одним или несколькими агентами, способными стимулировать клеточный иммунитет, такой как клеточный иммунитет слизистой оболочки. Может быть использован любой агент, способный стимулировать клеточный иммунитет. Примеры иммуностимулирующих агентов включают цитокины, такие как, например, интерфероны (например, интерферон-α, β, γ, ω), лимфокины и гемопоэтические факторы роста, такие как, например, СМ-С8Р (гранулоцитарный макрофагальный колониестимулирующий фактор), интерлейкин-2 (ИЛ-2), интерлейкин-3 (ИЛ-3), интерлейкин-4 (ИЛ-4), интерлейкин-7 (ИЛ-7), интерлейкин-10 (ИЛ-10), интерлейкин-12 (ИЛ-12), интерлейкин-14 (ИЛ-14) и фактор некроза опухоли (ФНО).
При комбинированной терапии с антипатогенными агентами дозировки для введения таких соединений известны в уровне техники или могут быть определены специалистом в данной области в соответствии с известными клиническими факторами (например, видом субъекта, размером, площадью поверхности тела, возрастом, полом, состоянием иммунной системы и общим состоянием здоровья, продолжительностью и способом введения, видом и стадией заболевания, наличия других способов лечения, таких как другие антипатогенные агенты, вводимые одновременно).
а. Противовирусные антитела для комбинированной терапии
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть введены в комбинации с одним или несколькими дополнительными антителами или их антигенсвязывающими фрагментами. В некоторых примерах одно или несколько дополнительных антител представляют собой противовирусные антитела. В некоторых примерах один или несколько дополнительных антител связывают вирусный антиген. В некоторых примерах один или несколько дополнительных антител связывают вирусный антиген, который представляет собой поверхностный белок, такой как белок вирусного капсида или белок оболочки вируса. В некоторых примерах один или несколько дополнительных антител связывают вирусный антиген, который экспрессируется на поверхности инфицированной клетки. В некоторых примерах один или несколько дополнительных антител связывают вирусный антиген, который экспрессируется внутриклеточно (например, в инфицированной клетке). В некоторых примерах один или несколько дополнительных антител связывают вирус, который вызывает заболевания дыхательных путей, включая, но не ограничиваясь РСВ, вирусом парагриппа (РГУ) или человеческим метапневмовирусом (ЬМРУ). Композиции, содержащие смеси антител, также предусмотрены в настоящем документе.
Антитела для применения в комбинациях с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают, но не ограничиваются моноклональными антителами, мультиспецифичными антителами, синтетическими антителами, человеческими антителами, гуманизированными антителами, химерными антителами, внутриклеточными антителами, одноцепочечными Ру (8сРу), одноцепочечными антителами, РаЬ фрагментами, Р(аЬ') фрагментами, связанными дисульфидными связями Ру (8бРу) и антиидиотипическими (анти-Тб) антителами (включая, например, анти-И антитела к антителам по настоящему документу) и эпитопсвязывающими фрагментами любых из вышеперечисленных антител. Антитела для применения в комбинациях с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу могут быть молекулами иммуноглобулинов любого типа (например, ЦС, ЦЕ, ЦМ, ЦА и ^Υ), класса (например, ЦСЕ ^02, ЦС3 , ЦС4, ЦА1 и ^А2) или подкласса.
Антитела для применения в комбинациях с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу могут быть антителами любого животного происхождения, включая птиц и млекопитающих (например, человеческие, мышиные, ослиные, овечьи, кроличьи, козьи антитела, антитела морской свинки, верблюжьи, лошадиные или куриные антитела). Как правило, антитела для применения в комбинациях с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу представляют собой человеческие и гуманизированные антитела. Антитела для применения в комбинациях с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу могут быть моноспецифичными, биспецифичными, триспецифичными или большей мультиспецифичности.
Антитела для применения в комбинациях с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу могут включать в себя производные антител, которые были модифицированы, например, присоединением, например, ковалентным присоединением к антителу или антигенсвязывающему фрагменту молекулы любого типа. Примеры производных антител или антигенсвязывающих фрагментов включают антитела, которые были модифицированы, например, гликозилированием, ацетилированием, пегилированием, фосфорилированием, амидированием, дериватизацией известными защитными/блокирующими группами, протеолитическим расщеплением, связыванием с клеточными
- 79 023179 лигандами или другими белками, или производные, содержащие гетерологичный Рс домен с более высокой аффинностью к рецептору РсКп (см., например, патент США № 7083784). Любая из многочисленных химических модификаций может быть осуществлена с помощью известных методов, включая, но не ограничиваясь специфическим химическим расщеплением, ацетилированием, формилированием или синтезом в присутствии туникамицина. Кроме того, производное может содержать одну или несколько неклассических аминокислот.
Одно или несколько дополнительных антител для применения в комбинациях с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу могут быть введены одновременно, последовательно или с перерывами с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами. Одно или несколько дополнительных антител могут быть введены совместно с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами, например, как часть той же фармацевтической композиции или с помощью одного способа доставки. В некоторых примерах одно или несколько дополнительных антител могут быть введены одновременно совместно с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами, но при этом различными способами доставки. Одно или несколько дополнительных антител также могут быть введены не одновременно с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу, но достаточно близко по времени к введению антиРСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов для обеспечения комбинированного профилактического или терапевтического эффекта. В некоторых примерах одно или несколько дополнительных антител вводят через некоторое время после введения анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов или за некоторое время до их введения. В некоторых примерах указанный промежуток времени составляет 1 день, 2 дня, 3 дня, 4 дня, 5 дней, 6 дней, 1 неделю, 2 недели, 3 недели, 1 месяц, 2 месяца или 3 месяца. В некоторых примерах одно или более дополнительных антител вводят несколько раз и/или анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу вводят несколько раз.
ί. Анти-РСВ антитела
В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител представляют собой анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты. В некоторых примерах для профилактики и/или лечения инфекции РСВ анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты, предусмотренные в настоящем документе, вводят в комбинации с одним или несколькими дополнительными анти-РСВ антителами или их антигенсвязывающими фрагментами. Примеры анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифически связывают и нейтрализуют РСВ. В некоторых примерах одно или несколько дополнительных анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, которые иммуноспецифически связывают подтип А РСВ и/или подтип В РСВ.
В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают анти-РСВ антитела, которые связывают белок прикрепления РСВ (например, белок с аминокислотной последовательностью, приведенной в ЗЕО ГО NО: 1520), большой структурный белок бета-субъединицу РНК-полимеразы РСВ (Ь белок) (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в ЗЕО ГО NО: 1521), белок нуклеокапсида РСВ (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в ЗЕО ГО NО: 1522), нуклеопротеид РСВ (Ν) (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в ЗЕО ГО NО: 1523), фосфопротеин Р РСВ (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в ЗЕО ГО NО: 1524), матриксный белок РСВ (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в ЗЕО ГО NО: 1525), малый гидрофобный (ЗН) белок РСВ (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в ЗЕО ГО NО: 1526), РНКзависимую полимеразу РСВ, белок О РСВ (например, с аминокислотной последовательностью, приведенной в ЗЕО ГО NО: 1528) или аллельные варианты любого из вышеперечисленных белков. В частности, например, одно или несколько дополнительных противовирусных антител включают анти-РСВ антитела, которые связывают белок Р РСВ. В частности, например, одно или несколько дополнительных противовирусных антител, которые связывают белок Р РСВ, связывают антигенные участки А, В, С, ΐ, ΐΐ, IV, У или VI гликопротеина Р РСВ (см., например, Бюре/ еί а1. (1998) ΐ. У1го1. 72:6922-6928).
В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают, но не ограничиваются паливизумабом (Зупадк®), мотавизумабом Антах®®), АРРР, Ρ12Γ2, Ρ12Γ4, Р1164, А1е9, А12а6, А13с4, А1764, А4В4, А8с7, 1Х-493Ы, РК Н3-3Р4, М3Н9, У10Н6, ΌΟ, АРРР(1), 6Н8, Ы-7Е5, Б2-15В10, А13а11, А1Ь5, А4В4(1), А4В4ЫРК-З28К, А4В4-Р52З (см. патенты США № 5824307 и 6818216), Γκν6, Γκν11, Γκν13, Γκν19, Γκν21, Γκν22, Γκν23 (см. патент США № 6685942), КР-1, КР-2 (см. патент США № 5811524) или их антигенсвязывающими фрагментами. В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие УН цепь и/или Уъ цепь с
- 80 023179 аминокислотной последовательностью Ун цепи и/или Уъ цепи паливизумаб (8упадк®), мотавизумаб (№тах®), ΑΡΡΡ, Р12Г2, Р12Г4, Р11б4, ΑΗ9, Α12а6, Α13ο4, Α1764, Α4В4, Α8с7, 1Х-493Ы, РК Н3-3Р4, Μ3Η9, Υ10Η6, ΌΟ, ΑΡΡΡ(1), 6Н8, Ό1-7Ε5, Ь2-15В10, Α^Π, Α1Η5, Α4В4(1), Α4В4^1ΡΚ-828Κ, Α4В4Р528, гку6, гк\'11, гку13, гку19, гк\'21, гку22, гку23, КР-1 или КР-2. В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие один или более СОК из паливизумаб (8упадк®), мотавизумаб (Яитах®), ΑΕΤΈ, Р12Г2, Р12Г4, Р11б4, ΑΗ9, Α12а6, Α13ο4, Α1764, Α4В4, Α8с7, 1Х-493Ы, РК Н3-3Р4, Μ3Η9, Υ10Η6, ΌΟ, ΑΡΡΡ(1), 6Н8, Ό1-7Ε5, Ь2-15В10, Α^Π, Α1Η5, Α4В4(1), Α4В4^1ΡΚ-828Κ, Α4В4-Ρ528, гку6, гку1Е гку13, гку19, гку2Е гку22, гку23, КР-1 или КР-2. В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие один или более СОК из мышиных моноклональных анти-РСВ антител, таких как, например, моноклональные антитела тΑЬ 1153, 1142, 1200, 1214, 1237, 1129, 1121, 1107, 1112, 1269, 1269, 1243 (Вее1ег е! а1. (1989) 1. Уганду 63(7):2841-2950), тΑЬ 151 (ΜυΤϊοη е! а1. (1987) 1. СЬп. ΜίαοΜο1. 25:1635-1539), тΑЬ 43-1 и 13-1 (Регте е! а1. (1982) Ртос. δοο. Εχρ. Вю1. Μеб. 171:266-271), тΑЬ 1436С, 1302Α, 1308Р и 1331Н (Απ^κοπ е! а1. (1984) 1. СЬп. ΜίαοΜο1. 19:934936). Дополнительные примеры антител или их антигенсвязывающих фрагментов, которые могут быть использованы для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу, включают, но не ограничиваются анти-РСВ антителами или их антигенсвязывающими фрагментами, описанными, например, в патентах США № 6413771, 5840298, 5811524, 6656467, 6537809, 7364742, 7070786, 5955364, 7488477, 6818216, 5824307, 7364737, 6685942, 5762905 и заявках США № 2007-0082002, 2005-0175986, 2004-0234528, 2006-0198840, 2009-0110684, 2006-0159695, 2006-0013824, 2005-0288491, 2005-0019758, 2008-0226630, 2009-0137003, 2009-0092609.
В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие УН цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в любой из 8ΕΟ ГО N0: 103, 113, 122, 131, 137, 144, 149, 155,
161, 167, 172, 176, 179, 182, 186, 190, 194, 198, 201, 205, 210, 215, 222,356, 363, 369, 376, 382, 387, 1607 и 1611. В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие домен УН с аминокислотной последовательностью, приведенной в любой из 8ΕΟ ГО N0: 104, 114, 123, 132, 138, 145, 150, 156,
162, 168, 173, 187, 206, 357, 362, 364, 370, 377, 383 и 388. В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие СГОК1 УН с аминокислотной последовательностью, приведенной в любой из 8ΕΟ ГО N0: 105, 115, 124, 1608 и 1612. В частности, например, одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие СГОК1 УН с аминокислотной последовательностью Τ8ΟΜ8νθ (8ΕΟ ΙΌ N0: 105), ΤΑΟΜ8νθ (8ΕΟ ΙΌ N0: 115), ΑΥΑΜ8 (8ΕΟ ГО N0: 1608) или ΟΥΤΜΗ (8ΕΟ ГО N0: 1612). В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с антиРСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие СГОК2 УН с аминокислотной последовательностью, приведенной в любой из 8ΕΟ ГО N0: 106, 125, 133, 157, 226-235, 365, 389, 397-408, 1609 и 1613. В частности, например, одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие СГОК2 УН с аминокислотной последовательностью ^I\\^^КК^ΥNР8^К8 (8ΕΟ ГО N0: 106), ^I\\^^ККΗΥNР8^К^ (8ΕΟ ГО N0: 125), ΟI8Ο8Ο^8Τ^ΥΑ^8УКΟ (8 НС) ГО N0: 1609) или 8П’ОО8№1КГ8В8УКО (8 НС) ГО N0: 1613). В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие СГОК3 УН с аминокислотной последовательностью, приведенной в любой из 8Ε0 ГО N0: 107, 116, 126, 139, 188, 236-238, 371, 1610 и 1614. В частности, например, одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие СГОК3 УН с аминокислотной последовательностью 8\1]Τ\\\ΎΙ·Όν (8ΕΟ ГО N0: 107), ^ΜIΡNΡΥΡ^У (8ΕΟ ГО N0: 126), 11ЕР]С\\'\Е]У]КР1ЛЛ\ГОУ (8ΕΟ ГО N0: 1610) или ΑРIΑРРΥΡ^Η (8ΕΟ ГО N0: 1614).
В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие Уъ цепь с аминокис- 81 023179 лотной последовательностью, приведенной в любой из 8ЕО ГО N0: 108, 117,127, 134, 140, 146, 152, 158, 164, 169, 174, 177, 180, 183, 189, 191, 195, 199, 202, 207, 211, 216, 220, 223, 358, 366, 372, 378, 384, 390, 393, 1615, 1619 и 1623. В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие Уь домен с аминокислотной последовательностью, приведенной в любой из 8ЕО ГО N0: 109, 118, 128, 135, 141, 147, 153, 159, 165, 170, 175, 178, 181, 184, 192, 196, 200, 203, 208, 212, 217, 221, 224, 359, 367, 373, 379, 385, 391 и 394. В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие СГОК1 Уъ с аминокислотной последовательностью, приведенной в любой из 8Е0 ГО N0: 110, 119, 129, 142, 154, 166, 239-255, 257-297, 299-314, 374, 380, 395, 409-544, 1616, 1620 и 1624. В частности, например, одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащий СГОК1 Уъ с аминокислотной последовательностью КСрЬ8УОУМн (8 ЕС) ГО N0: 110), 8А88КУОУМн (8 ЕС) ГО N0: 154), КАТр8188ЦУЬА (8 ЕС) ГО N0: 1616), КА80ШНОЖ.А (8ЕО ГО N0: 1620) или КАТ^8У8NΕ^N (8ЕО ГО N0: 1624). В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие СГОК2 Уъ с аминокислотной последовательностью, приведенной в любой из 8Е0 ГО N0: 111, 120, 136, 143, 160, 171, 185, 218, 225, 315-355, 360, 368, 375, 381, 386, 392, 396, 545-1509. 1617, 1621, и 1625. В частности, например, одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие СГОК2 Уъ с аминокислотной последовательностью БТ8КЬА8 (8Е0 ГО N0: 111), 1)ТЕ1,1,1)8 (8ЕС) ГО N0: 218), С.А8ХКАТ (8ЕС) ГО N0: 1617), СА88КАТ (8ЕС) ГО N0: 1621) или БА8Т8О8 (8Е0 ГО N0: 1625). В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие СГОК3 Уь с аминокислотной последовательностью, приведенной в любой из 8Е0 ГО N0: 112, 121, 193, 1510-1511, 1618, 1622 и 1626. В частности, например, одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты, содержащие СГОК3 Уъ с аминокислотной последовательностью Ε^С8СΥРΕТ (8Е0 ГО N0: 112), 00ΥΩΙ8РУТ (8 ЕС) ГО N0: 1618), РРУ008РУТ (8Е() ГО N0: 1622) или С)А81\ТРЕ (8Е() ГО N0: 1626).
В некоторых примерах анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть введены в комбинации с гипериммунной сывороткой или препаратом иммуноглобулинов, обогащенным анти-РСВ антителами, например гипериммунными глобулинами против РСВ (К8У 1У1С; КекрЮат®; ΜеάIттиηе 1пс., ОаЪЬегкЬигд, МБ; см., например, ΟΐΌοΙΙιίιΐδ еί а1. (1993) №\уЕп8. ί. Μеά 329:1524-1530).
ίί. Антитела против других респираторных вирусов
В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу включают антитела или антигенсвязывающие фрагменты против респираторных вирусов, отличных от РСВ, например, выбранные из антител против человеческого метапневмовируса (1 МРУ), антител против вируса парагриппа (Р1У), антител против птичьего пневмовируса (АРУ) или других известных противовирусных антител.
В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу представляют собой анти-Р1У антитела, антитела, которые иммуноспецифически связывают антиген Р1У, такие как, например, фосфопротеин нуклеокапсида Р1У, белок слияния (Ε) Р1У, фосфопротеин Р1У, большой белок (Ь) Р1У, матриксный белок (М) Р1У, гликопротеин гемагглютининнейраминидазы Р1У (н^, РНК-зависимую РНК-полимеразу Р1У, белок Υ1 Р1У, белок Б Р1У, белок С Р1У или аллельные варианты любого из вышеперечисленных белков. В частности, например, антиген Р1У представляет собой белок Ε Р1У. В некоторых примерах анти-Р1У антитела представляют собой антитела, которые иммуноспецифически связывают антиген Р1У человека 1 типа, Р1У человека 2 типа, Р1У человека 3 типа и/или Р1У человека 4 типа.
В некоторых примерах одно или несколько дополнительных противовирусных антител для комбинированной терапии с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу представляет собой анти-1МРУ антитела, которые иммуноспецифически связывают антиген 1МРУ, такой как, например, нуклеопротеид 1МРУ, фосфопротеин 1МРУ, матриксный белок 1МРУ, малый гидрофобный белок 1МРУ, РНК-зависимую РНК-полимеразу 1МРУ, белок Ε 1МРУ, белок С 1МРУ
- 82 023179 или аллельные варианты любого из вышеперечисленных белков. В частности, например, антиген НМРУ представляет собой белок Р НМРУ. В некоторых примерах анти-НМРУ антитела представляют собой антитела, которые иммуноспецифически связывают антиген НМРУ типа А и/или антиген НМРУ типа В. В некоторых примерах анти-НМРУ антитела представляют собой антитела, которые иммуноспецифически связывают антиген НМРУ субтипа А1 и/или А2 и/или НМРУ подтипа В1 и/или В2.
Антитела, вводимые в комбинации с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу, могут представлять собой антитела или антигенсвязывающие фрагменты любого типа, известные в данной области. Например, вводимые в комбинации с анти-РСВ антителами или антигенсвязывающими фрагментами по настоящему документу антитела или антигенсвязывающие фрагменты могут включать, например, моноклональные антитела, человеческие антитела, не человеческие антитела, рекомбинантные антитела, химерные антитела, гуманизированные антитела, мультиспецифичные антитела (например, биспецифичные антитела), интраантитела и фрагменты антител, такие как, например, фрагменты РаЬ, фрагменты РаЬ', Р(аЬ')2-фрагменты, фрагменты Ру, дисульфидсвязанные Ρν (68Ру), фрагменты Рб, Рб'-фрагменты, одноцепочечные Ру (8сРу), одноцепочечные РаЬ (8сРаЬ), диатела, антиидиотипические (анти-1б) антитела или антигенсвязывающие фрагменты любого из вышеперечисленных типов антител. Вводимые в комбинации с анти-РСВ антителами по настоящему документу антитела могут включать представителей любых типов иммуноглобулинов (например, 1дО, 1дМ, Ι§Ό, 1дЕ, 1дА и Ι§Υ), любых классов (например, 1дО1, 1дО2, 1дО3, 1дО4, 1дА1 и 1дА2) или подклассов (например, 1дО2а и 1дО2Ь).
В некоторых примерах введение комбинации противовирусных антител или антигенсвязывающих фрагментов снижает уровень заболеваемости РСВ по меньшей мере приблизительно на 99%, по меньшей мере приблизительно на 95%, по меньшей мере приблизительно на 90% или по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 80%, по меньшей мере приблизительно на 75%, по меньшей мере приблизительно на 70%, по меньшей мере приблизительно на 65%, по меньшей мере приблизительно на 60%, по меньшей мере приблизительно на 55%, по меньшей мере приблизительно на 50%, по меньшей мере приблизительно на 45%, по меньшей мере приблизительно на 40%, по меньшей мере приблизительно на 35%, по меньшей мере приблизительно на 30%, по меньшей мере приблизительно на 25%, по меньшей мере приблизительно на 20%, по меньшей мере приблизительно на 15% или по меньшей мере приблизительно на 10% по отношению к заболеваемости РСВ в отсутствие анти-РСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов. В некоторых примерах введение комбинации противовирусных антител или антигенсвязывающих фрагментов уменьшает тяжесть одного или нескольких симптомов инфекции РСВ по меньшей мере приблизительно на 99%, по меньшей мере приблизительно на 95%, по меньшей мере приблизительно на 90% или по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 80%, по меньшей мере приблизительно на 75%, по меньшей мере приблизительно на 70%, по меньшей мере приблизительно на 65%, по меньшей мере приблизительно на 60%, по меньшей мере приблизительно на 55%, по меньшей мере приблизительно на 50%, по меньшей мере приблизительно на 45%, по меньшей мере приблизительно на 40%, по меньшей мере приблизительно на 35%, по меньшей мере приблизительно на 30%, по меньшей мере приблизительно на 25%, по меньшей мере приблизительно на 20%, по меньшей мере приблизительно на 15% или по меньшей мере приблизительно на 10% по сравнению с тяжестью одного или нескольких симптомов инфекции РСВ в отсутствие комбинации противовирусных антител или антигенсвязывающих фрагментов.
В некоторых примерах комбинации противовирусных антител и антигенсвязывающих фрагментов ингибируют связывание РСВ с его рецептором на клетке-хозяине по меньшей мере приблизительно на 99%, по меньшей мере приблизительно на 95%, по меньшей мере приблизительно на 90% или по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 80%, по меньшей мере приблизительно на 75%, по меньшей мере приблизительно на 70%, по меньшей мере приблизительно на 65%, по меньшей мере приблизительно на 60%, по меньшей мере приблизительно на 55%, по меньшей мере приблизительно на 50%, по меньшей мере приблизительно на 45%, по меньшей мере приблизительно на 40%, по меньшей мере приблизительно на 35%, по меньшей мере приблизительно на 30%, по меньшей мере приблизительно на 25%, по меньшей мере приблизительно на 20%, по меньшей мере приблизительно на 15% или по меньшей мере приблизительно на 10% по сравнению со связыванием РСВ с его рецептором на клетке-хозяине в отсутствие комбинации противовирусных антител или антигенсвязывающих фрагментов. В некоторых примерах комбинация противовирусных антител и антигенсвязывающих фрагментов подавляет репликацию РСВ по меньшей мере приблизительно на 99%, по меньшей мере приблизительно на 95%, по меньшей мере приблизительно на 90% или по меньшей мере приблизительно на 85%, по меньшей мере приблизительно на 80%, по меньшей мере приблизительно на 75%, по меньшей мере приблизительно на 70%, по меньшей мере приблизительно на 65%, по меньшей мере приблизительно на 60%, по меньшей мере приблизительно на 55%, по меньшей мере приблизительно на 50%, по меньшей мере приблизительно на 45%, по меньшей мере приблизительно на 40%, по меньшей мере приблизительно на 35%, по меньшей мере приблизительно на 30%, по меньшей мере приблизительно на 25%, по меньшей мере приблизительно на 20%, по меньшей мере приблизительно на 15% или по меньшей мере приблизительно на 10% по сравнению с репликацией РСВ в отсутствие комбинации противо- 83 023179 вирусных антител или антигенсвязывающих фрагментов.
5. Генная терапия
В некоторых примерах для лечения, предотвращения или смягчения одного или нескольких симптомов, связанных с инфекцией РСВ, в качестве генной терапии вводят нуклеиновые кислоты, включающие последовательности, кодирующие анти-РСВ антитела, антигенсвязывающие фрагменты и/или их производные. Генная терапия относится к терапии, проводимой введением субъекту экспрессирующей или способной к экспрессии нуклеиновой кислоты. Например, нуклеиновые кислоты опосредуют продукцию кодируемых ими антител или антигенсвязывающих фрагментов, которые обеспечивают профилактический или лечебный эффект.
Для введения нуклеиновых кислот, кодирующих анти-РСВ антитела, антигенсвязывающие фрагменты и/или их производные, может быть использован любой из методов генной терапии, доступных в данной области. Примеры способов описаны ниже.
Для общего обзора методов генной терапии см., например, Оо№|йе1 е! а1. (1993) СПшса1 РЬагтасу 12:488-505; XVи и XVи (1991) ВюИегару 3:87-95; Той^Ьеу (1993) Апп. Кеу. РЬагтасо1. Тох1со1. 32:573596; МиШдап (1993) §с1епсе 260:926-932; Могдап и Апйегеоп (1993) Апп. Кеу. ВюсЬет. 62:191-217; и ΉΒΊΈΟΗ 11(5): 155-215. Известные в уровне техники методы работы с рекомбинантной ДНК описаны в АшиЬе1 е! а1., СиггеШ РгоЮсой ш Мо1еси1аг Вю1оду, изд. 1оЬп Χνί^ν & §ощ, NΥ (1993); и Кпед1ег, Оепе ТгатаРег апй Еxр^еδδ^оη, А ЬаЬогаЮгу Мапиа1, ЧоскЮп ΓϊΌδδ, ΗΥ (1990).
В некоторых примерах композиции по настоящему документу содержат нуклеиновые кислоты, кодирующие анти-РСВ антитела, антигенсвязывающие фрагменты и/или их производные, где нуклеиновые кислоты входят в состав вектора экспрессии, экспрессирующего анти-РСВ антитела, антигенсвязывающие фрагменты и/или их производные в подходящем хозяине. В частности, такие нуклеиновые кислоты включают промоторы, такие как гетерологичные промоторы, функционально связанные с кодирующим антитело районом, где промотор может быть индуцибельным или конститутивным и, по желанию, тканеспецифичным. В другом конкретном варианте используемые молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие последовательности антител и любые другие желаемые последовательности, фланкированы фрагментами, которые способствуют гомологичной рекомбинации с заданными районами в геноме, тем самым обеспечивая экспрессию внутрихромосомной кодирующей антитело нуклеиновой кислоты (Ко11ег и διηΜ^δ (1989) Ргос. №·ιΐ1. Асай. δα. И8А 56:8932-8935; 2ук!га е! а1. (1989) №1иге 342:435-438). В некоторых примерах экспрессируемая молекула антитела представляет собой одноцепочечное антитело. В некоторых примерах нуклеиновые кислоты включают последовательности, кодирующие тяжелую и легкую цепи антитела или их фрагменты. В частности, например, последовательности нуклеиновых кислот включают последовательности, кодирующие анти-РСВ РаЬ-фрагмент. В частности, например, последовательности нуклеиновых кислот включают последовательности, кодирующие полноразмерное антиРСВ антитело. В некоторых примерах закодированные анти-РСВ антитела представляют собой химерные антитела.
Доставка нуклеиновых кислот субъекту может быть либо прямой, в этом случае субъект непосредственно подвергается воздействию нуклеиновой кислоты или несущих нуклеиновую кислоту векторов, или не прямой, в этом случае клетки сначала трансформируют нуклеиновыми кислотами ш уйго, затем пересаживают субъекту. Два указанных подхода известны соответственно как генная терапия ш у1уо или ех у1уо.
В некоторых примерах последовательности нуклеиновых кислот непосредственно вводят ш у1уо, где они экспрессируются для получения закодированного продукта. Это может быть достигнуто любым из многочисленных способов, известных в данной области, например встраиванием нуклеиновых кислот в соответствующие векторы экспрессии и введением векторов таким образом, что векторы попадают внутрь клеток, например, путем инфекции с использованием дефектного или ослабленного ретровирусного или другого вирусного вектора (см. патент США № 4980286), либо непосредственным введением неупакованной ДНК, либо с применением бомбардировки микрочастицами (например, с помощью генной пушки, ВюГОйс, Пироп!), или покрытия ДНК липидами, рецепторами клеточной поверхности или трансфекционными агентами, инкапсуляции в липосомы, микрочастицы или микрокапсулы, или путем введения ДНК в связи с известным пептидом, который проникает в ядро, путем введения ДНК, связанной с лигандом, опосредующим рецептор-опосредованный эндоцитоз (см., например, XVII и XVII (1987) ί. Вю1. СЬет. 262:4429-4432), который может быть использован, например, для переноса ДНК в клеткимишени определенного типа, специфически экспрессирующие определенные рецепторы. В некоторых примерах могут быть получены комплексы нуклеиновых кислот с лигандами, в которых лиганд содержит фазогенный вирусный пептид, разрушающий эндосомы, позволяющий нуклеиновой кислоте избежать лизосомальной деградации. В некоторых примерах нуклеиновые кислоты могут быть направлены ш у1уо для клетка-специфического поглощения и экспрессии путем захвата специфических рецепторов (см., например, заявки РСТ ν0 92/06180, ν0 92/22635, ν092/20316; ν0 93/14188 и ν0 93/20221). Кроме того, нуклеиновые кислоты могут быть введены внутриклеточно и включены в ДНК клеткихозяина для экспрессии путем гомологичной рекомбинации (Ко11ег и δтйЬ^еδ (1989) Ргос. №!1. Асай. δα. И8А 86:8932-8935; и Ζΐ)1δΐΗ е! а1. (1989) ХаПие 342:435-438).
- 84 023179
В некоторых примерах используются вирусные векторы, которые содержат последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие анти-РСВ антитела, антигенсвязывающие фрагменты и/или их производные. Например, могут быть использованы ретровирусные векторы (см., например, МШег и др. (1993) Ме1Ь. Εпζутο1. 217:581-599). Ретровирусные векторы содержат компоненты, необходимые для правильной упаковки вирусного генома и интеграции в ДНК клетки-хозяина. Последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие антитела или антигенсвязывающие фрагменты, которые будут использованы в генной терапии, клонируют в один или нескольких векторов, что облегчает доставку гена субъекту. Более подробное описание ретровирусных векторов можно найти, например, Βοе8еη е1 а1. (1994) ВюШегару 6:291-302. Другие ссылки, иллюстрирующие применение ретровирусных векторов в генотерапии, включают, например, Οο\\Ό5 е1 а1. (1994) 1. СНп. 1пуек1. 93:644-651; К1еш е1 а1. (1994) В^й 83:1467-1473; §а1тοη8 и Оаа/Ьегд (1993) Ηитаη Оеае ТЬегару 4:129-141; и Ο^ο88таη и ΧνΠκοη (1993) Сигг. 0рш. ίη Оеае1Ю5 аай Эеуе1. 3:110-114.
Аденовирусы также представляют собой вирусные векторы, которые можно использовать в генной терапии. Аденовирусы являются особенно привлекательными носителями для доставки генов в дыхательный эпителий. Аденовирусы естественно заражают дыхательный эпителий, вызывая легко протекающее заболевание. Другие мишени аденовирусной системы доставки включают печень, центральную нервную систему, эндотелиальные клетки и мышцы. Аденовирусы имеют преимущество, обладая способностью заражать не делящиеся клетки (обзор по применению аденовирусов в генной терапии написан Кю/агкку аай νί1κοη (1993) СиггеШ 0ршюп ίη Оепейск аай ЭеуеЕртеШ 3:499-503). В Βοиι е1 а1. (1994) Ηитап Оепе ТЬегару 5:3-10 продемонстрировано применение аденовирусных векторов для передачи генов в дыхательный эпителий макак-резусов. Другие примеры применения аденовирусов в генной терапии могут быть найдены, например, в Κο8епΓе1й е1 а1. (1991) Заепсе 252:431-434; Κο8епΓе1й е1 а1. (1992) Се11 68:143-155; Ма51гап§еН е1 а1. (1993) 1. С1ш. 1пуек1. 91:225-234; заявка РСТ ν0 94/12649; и Vапё е1 а1. (1995) Оепе ТЬегару 2:775-783. В частности, например, аденовирусные векторы используют для доставки нуклеиновых кислот, кодирующих анти-РСВ антитела, антигенсвязывающие фрагменты и/или их производные по настоящему документу.
Адено-ассоциированный вирус (ААУ) также может быть использован в генной терапии ^акЬ е1 а1. (1993) Ргос. δοα Ехр. Вю1. Мей. 204:289-300, и патент США № 5436146). В частности, например, основанные на адено-ассоциированном вирусе (ААУ) векторы используются для доставки нуклеиновых кислот, кодирующих анти-РСВ антитела, антигенсвязывающие фрагменты и/или их производных по настоящему документу.
Другой подход к генной терапии заключается в переносе генов в клетки в культуре ткани с помощью таких методов, как электропорация, липофекция, опосредованная фосфатом кальция трансфекция или вирусная инфекция. Как правило, способ переноса включает в себя перенос селективного маркера в клетки. Затем для выделения клеток, которые поглотили и экспрессируют перенесенный ген, клетки высевают в планшеты в присутствии селективного давления. Клетки, экспрессирующие ген, затем доставляют субъекту.
В некоторых примерах нуклеиновые кислоты, кодирующие анти-РСВ антитела, антигенсвязывающие фрагменты и/или их производные, предусмотренные в настоящем документе, вводят в клетки до введения полученных рекомбинантных клеток ίη νίνο. Такое введение нуклеиновых кислот может осуществляться любым способом, известным в данной области, включая, но не ограничиваясь трансфекцией, электропорацией, микроинъекцией, заражением вирусным или бактериофаговым вектором, содержащим последовательности нуклеиновых кислот, слиянием клеток, хромосома-опосредованным переносом генов, переносом генов с помощью микроклеток и слиянием сферопластов. Для введения чужеродных генов в клетки известно множество способов (см., например, Ε^ΓΓΕγ и ВеЬг (1993) Ме1Ь. Εпζутο1. 217:599-618; «Ли е1 а1. (1993) МеШ Επ^οΙ 217:618-644; С1ше (1985) РЬагтасс1. ТЬег. 29:69-92), которые могут быть использованы для введения нуклеиновых кислот, кодирующих анти-РСВ антитела, антигенсвязывающие фрагменты и/или их производные по настоящему документу, где указанные методы не нарушают процесс развития и необходимые физиологические функции клеток-реципиентов. Указанные способы обеспечивают стабильный перенос нуклеиновой кислоты в клетки таким образом, что нуклеиновые кислоты экспрессируются в клетке и, как правило, наследуются и экспрессируются в клеткахпотомках.
Полученные рекомбинантные клетки могут быть доставлены субъекту различными способами, известными в данной области. Рекомбинантные клетки крови (например, гемопоэтические стволовые клетки или клетки-предшественники) можно вводить внутривенно. Количество клеток для введения зависит от многих факторов, включая, например, желаемый профилактический и/или терапевтический эффект и состояния пациента, и может быть определено специалистом в данной области.
Клетки, в которые в целях генной терапии могут быть введены нуклеиновые кислоты, включают любой доступный тип клеток, включая, но не ограничиваясь эпителиальными клетками, эндотелиальными клетками, кератиноцитами, фибробластами, клетками мышц, гепатоцитами, клетками крови, такими как Т-лимфоциты, В-лимфоциты, моноциты, макрофаги, нейтрофилы, эозинофилы, мегакариоциты, гранулоциты, различными стволовыми клетками или клетками-предшественниками, в частности гемопоэти- 85 023179 ческими стволовыми клетками или клетками-предшественниками, например, полученными из костного мозга, пуповинной крови, периферической крови и печени плода. В частности, например, используемые для генной терапии клетки аутологичны для субъекта.
В некоторых примерах при использовании в генной терапии рекомбинантных клеток последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие анти-РСВ антитела, антигенсвязывающие фрагменты и/или их производные, предусмотренные в настоящем документе, вводят в клетки так, что они экспрессируются в клетках или их потомках, а рекомбинантные клетки затем вводят ш νίνο для достижения терапевтического эффекта. В частности, например, используют стволовые клетки или клетки-предшественники. Могут быть использованы любые стволовые клетки и/или клетки-предшественники, которые могут быть выделены и культивируемы ш νίίτο (см., например, заявку РСТ νΟ 94/08598; З1етр1е и Аηйе^кοη (1992) Се11 7 1:973-985; КЬеш№а1й (1980) Ме1й. Се11 Вю. 21А:229; и РШсПгосу и Зсοй (1986) Μауο СИптс Ргос. 61:771).
В частности, например, нуклеиновые кислоты, вводимые для генной терапии, содержат индуцируемый промотор, функционально связанный с кодирующим районом, так что экспрессия нуклеиновой кислоты контролируется наличием или отсутствием соответствующего индуктора транскрипции.
ΐ. Фармацевтические композиции, комбинации и изделия/наборы
1. Фармацевтические композиции
В настоящем документе предусмотрены фармацевтические композиции, содержащие анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу. Фармацевтическая композиция может быть использована для терапевтического, профилактического и/или диагностического применения. Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть введены в композицию с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. Как правило, в таких фармацевтических композициях используют компоненты, которые значительно не ухудшают биологические свойства антител и антигенсвязывающих фрагментов, например, не ухудшают связывание со специфическим эпитопом (например, связывание с эпитопом белка Р РСВ). Каждый компонент является фармацевтически и физиологически приемлемым в смысле совместимости с другими ингредиентами и отсутствия вреда для пациента. Композиции могут быть представлены в виде единичных дозированных форм и могут быть получены способами, хорошо известными в области фармацевтики, включая, но не ограничиваясь формой таблеток, пилюль, порошков, жидких растворов или суспензий (например, включая композиции для инъекций, приема внутрь и местного применения (например, глазные капли, гели или мази), аэрозолей (например, назальных спреев), липосом, суппозиториев, растворов для инъекций и форм с замедленным высвобождением (см. ОПтап е1 а1. (ейк. 1990) Оοοйтаи апй ОПтап'к: ТЬе РЬагта^^^1 Вакек οί ТЬегареийск, 8-е изд., Регдапюп Ргекк; Кеттпдйп'к РЬаттасеийса1 Заепсек, 17-е изд. (1990), Маск РиЫкЫпд Οο., Еакйп, Ра.; Лук, е1 а1. (изд. 1993) РЬагтасеийса1 Όο^·^ Ρο^тк: Рагеп1ега1 Мейка^^, Эеккег, ΝΥ; ЫеЬегтап, е1 а1. (изд. 1990) РЬагтасеийса1 Όο^·^ Ρο^тκ: ТаЬ1е1к, Эеккег, ΝΥ; и ЫеЬегтап, е1 а1. (изд. 1990) РЬагтасеийса1 Όο^·^ Ρο^тκ: Экрегке Зук1етк, Эеккег, ΝΥ). При системном введении терапевтическая композиция является стерильной, апирогенной, как правило, свободной от твердых частиц и содержится в приемлемом для парентерального введения растворе с учетом рН, изотоничности и стабильности. Эти условия известны специалистам в данной области. Способы приготовления композиций для парентерального введения хорошо известны или очевидны для специалистов в данной области техники и описаны более подробно (см., например, в Кеттпдйп: ТЬе Заепсе апй Ргасйсе οί РЬагтасу (ранее Кеттпдйп'к РЬагтасеийса1 Заепсек), 19-е изд., Маск РиЫкЫпд Со трапу, Еакйп, Ра. (1995)).
Фармацевтические композиции по настоящему документу могут быть представлены в различных формах, например в твердой, полутвердой, жидкой, порошковой, водной или лиофилизированной форме. Примеры подходящих фармацевтических носителей известны и включают, но не ограничиваются водой, буферами, солевыми растворами, фосфатным буферным солевым раствором, различными видами смачивателей, стерильными растворами, спиртами, гуммиарабиком, растительными маслами, бензиловым спиртом, желатином, глицерином, углеводами, такими как лактоза, сахароза, амилоза или крахмал, стеаратом магния, тальком, кремниевой кислотой, вязким парафином, ароматическими маслами, жирными кислотами, моноглицеридами и диглицеридами, эфирами пентаэритрита и жирных кислот, гидроксиметилцеллюлозой, различными порошками и другими веществами. Фармацевтические композиции по настоящему документу могут содержать другие добавки, включая, например, антиоксиданты, консерванты, антимикробные агенты, анальгетики, связующие вещества, разрыхлители, красители, способствующие растворению агенты, наполнители, формообразующие, глиданты, разбавители, стабилизаторы, тонические агенты, носители, регулирующие вязкость агенты, ароматизаторы, эмульсии, такие как эмульсии масло/вода, эмульгаторы и суспендирующие агенты, такие как гуммиарабик, агар, альгиновая кислота, альгинат натрия, бентонит, карбомер, каррагинан, карбоксиметилцеллюлоза, целлюлоза, холестерин, желатин, гидроксиэтилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, октоксинол 9, олеиловый спирт, повидон, пропиленгликоль моностеарат, лаурилсульфат натрия, эфиры сорбита, стеариловый спирт, трагакант, ксантановая смола и их производные, растворители и прочие ингредиенты, такие как кристаллическая целлюлоза, микрокристаллическая целлюлоза, лимон- 86 023179 ная кислота, декстрин, глюкоза, жидкий сахар, молочная кислота, лактоза, хлорид магния, метафосфат калия, крахмал и др. (см. Λίοιικο К. Оеппаго (2000) КенипдЮп: Тйе Заепсе апй Ргасйсе οί Рйагтасу, 20-е изд., ВаШп-юге, ΜΌ: Оррт^й ^ййатк & ^йктк). Такие носители и/или добавки могут быть введены в композицию с помощью традиционных методов, а затем могут быть введены субъекту в подходящей дозе. Стабилизующие агенты, такие как липиды, ингибиторы нуклеаз, полимеры и хелатирующие агенты могут сохранять композиции от деградации в организме.
Пригодные для применения фармацевтические композиции включают композиции, в которых одно или несколько анти-РСВ антител содержатся в количестве, достаточном для достижения цели по предназначению. Определение терапевтически эффективного количества находится в компетенции специалиста в данной области. Терапевтически эффективные дозы могут быть определены с помощью ш νίΐΓο и ш νίνο методов, как описано в настоящем документе. Таким образом, анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу в составе фармацевтического препарата могут быть представлены в виде единичных дозированных форм.
Анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть лиофилизированы для хранения и восстановлены в подходящем носителе перед применением. Эффективность такой техники была продемонстрирована на обычных иммуноглобулинах и препаратах белков, при этом могут быть использованы известные способы лиофилизации и восстановления.
Анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу могут быть представлены в виде композиций с контролируемым высвобождением или замедленным высвобождением. В данной области известны полимерные материалы для изготовлении таблеток и капсул с контролируемым или замедленным высвобождением антител или их антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу (см., например, МеФса1 Аррйса!юпк οί Сοη!^ο11еά Ке1еаке, Ьапдег и ^йе (изд.), СКС Ргек., Βοса КаЮп, Р1а. (1974); Сοη!^ο11еά Эгид ВгоауайаЬййу, Эгид Ргойис! Эе^дп апй РегФгтапсе, Зтο1еη и Ва11 (изд.), ^йеу, ΥοιΊ< (1984); Капдег и Реррак (1983) ί., Масгопю1 За. Кеу. Масгопюк Сйет.
23:61; см. также Ьеуу е! а1. (1985) Заепсе 228:190; Оигтд е! а1. (1989) Апп. №иго1. 25:351; Ηο^ιύ е! а1. (1989) ί. Аигокигд. 7 1:105; патенты США № 5679377, 5916597, 5912015, 5989463, 5128326, заявки РСТ № ν0 99/15154 и \ν0 99/20253). Примеры полимеров, используемых в композициях с замедленным высвобождением, включают, но не ограничиваются поли-2-гидроксиэтилметакрилатом, полиметилметакрилатом, полиакриловой кислотой, полиэтилен-ко-винилацетатом, полиметакриловой кислотой, полигликолидами, полиангидридами, поли-^винилпирролидоном, поливиниловым спиртом, полиакриламидом, полиэтиленгликолем, полилактидами, полилактид-ко-гликодидами и полиортоэфирами. Как правило, полимер, используемый в композиции с замедленным высвобождением, инертен, свободен от выщелачивающихся примесей, стабилен при хранении, стерилен и биологически разлагаем. Любой метод получения композиций с замедленным высвобождением, известный в данной области, может быть использован для получения композиций с замедленным высвобождением, содержащих одно или более антиРСВ антител или антигенсвязывающих фрагментов по настоящему документу.
В некоторых примерах фармацевтическая композиция содержит анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу и одно или несколько дополнительных антител. В некоторых примерах одно или несколько дополнительных антител включают (но не ограничиваются) паливизумаб (ЗΥNАОIЗ®) и его производные, такие как, например, мотавизумаб (NυΜАX®), АРРР, Р12С, РШ4, Р11Й4, А1е9, А12а6, А13с4, А17й4, А4В4, А8с7, 1Х-493Й1, РК Н3-3Р4, М3Н9, Υ10Η6, ПО, АРРР(1), 6Η8, Ы-7Е5, Й2-15В10, А13а11, А1й5, А4В4(1), А4В4Й1РК-З28К и А4В4-Р52З (см. патенты США № 5824307 и 6818216), гку6, гку11, гку13, гку19, гку21, гку22, гку23 (см., например, патенты США № 5824307, 6685942 и 6818216), человеческие анти-РСВ антитела, включающие, но не ограничивающиеся гку6, гку11, гку13, гку19 (например, РаЬ 19), гку21, гку22, гку23, КР-1, КР-2 (см., например, патенты США № 6685942 и 5811524), гуманизированные антитела, полученные из анти-РСВ мышиных моноклональных антител, такие как, например, тАЬ 1153, 1142, 1200, 1214, 1237, 1129, 1121, 1107, 1112, 1269, 1269, 1243 (Вее1ег е! а1. (1989)1. ^гоЫду 63(7):2841-2950), тАЬ 151 ιΜιΑοι и др. (1987) ί. Сйп. ΜίαοΜοί 25:1635-1539), тАЬ 43-1 и 13-1 Регте е! а1. (1982) Ртос. Зοс. Ехр. Вю1. Мей. 171:266-271), тАЬ 1436С, 1302А, 1308Р и 1331Н (АЫеггоп е! а1. (1984) ί. Сйп. МюгоЬюй 19:934-936) или их антигенсвязывающие фрагменты. Дополнительные примеры антител или их антигенсвязывающих фрагментов, которые могут быть использованы в фармацевтической композиции, содержащей анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу, включают, но не ограничиваются анти-РСВ антителами или их антигенсвязывающими фрагментами, описанными, например, в патентах США № 6413771, 5840298, 5811524, 6656467, 6537809, 7364742, 7070786, 5955364, 7488477, 6818216, 5824307, 7364737, 6685942, 5762905 и заявках США № 2007-0082002, 2005-0175986, 2004-0234528, 2006-0198840, 20090110684, 2006-0159695, 2006-0013824, 2005-0288491, 2005-0019758, 2008-0226630, 2009-0137003, 20090092609.
2. Изделия/наборы
Фармацевтические композиции анти-РСВ антител или нуклеиновых кислот, кодирующих анти-РСВ антитела, или их производные или биологически активные части, могут быть упакованы в виде изделий, содержащих упаковочный материал, фармацевтическую композицию, которая является эффективной для
- 87 023179 профилактики (например, вакцинации, пассивной иммунизации) и/или лечения РСВ-опосредованного заболевания или расстройства, а также этикетку, которая указывает, что антитела или молекулы нуклеиновой кислоты предназначены для вакцинации и/или лечения заболевания или расстройства. Фармацевтические композиции могут быть упакованы в виде единичных дозированных форм, содержащих определенное количество фармацевтической композиции для введения одной дозы или нескольких доз. Упакованные композиции могут содержать фармацевтическую композицию в виде лиофилизированного порошка, содержащего предусмотренные анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которая может быть восстановлена (например, водой или физиологическим раствором) перед введением.
Предусмотренные изделия содержат упаковочный материал. Упаковочные материалы, применяемые для упаковки фармацевтической продукции, хорошо известны специалистам в данной области. Примеры фармацевтических упаковочных материалов включают, но не ограничиваются блистерной упаковкой, бутылками, пробирками, ингаляторами (например, дозированными ингаляторами под давлением, ингаляторами с сухим порошком, распылителями (например, струйными или ультразвуковыми распылителями) и другими системами доставки жидкой композиции вдыханием), насосами, пакетами, флаконами, контейнерами, шприцами и любым упаковочным материалом, подходящим для выбранной композиции и выбранного способа введения и лечения. Фармацевтическая композиция также может быть включена или нанесена на барьер или другое защитное приспособление, которое используется для защиты от инфекции.
Анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие антитела, их фармацевтические композиции или комбинации по настоящему документу также могут быть предоставлены в виде наборов. Наборы могут включать один или несколько компонентов, таких как инструкции по эксплуатации, устройства и дополнительные реагенты (например, стерилизованную воду и солевые растворы для разведения композиции и/или восстановления лиофилизированного белка), а также другие компоненты, такие как пробирки, контейнеры и шприцы для практического осуществления предусмотренных способов. Примеры наборов могут включать в себя анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу, инструкции по эксплуатации, устройство для введения анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов субъекту, устройство для обнаружения анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов в субъекте, устройство для обнаружения анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов в образцах, полученных от субъекта, и устройство для введения дополнительных терапевтических агентов субъекту.
Набор может, при необходимости, включать в себя инструкции. Инструкции обычно включают в себя описание анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов и, по желанию, описание других компонентов, входящих в набор, а также описание способа введения, включая способ определения надлежащего состояния объекта, необходимое количество доз, режимы дозирования и правильный метод введения анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов. Инструкция также может включать руководство по наблюдению за субъектом в течение срока лечения.
Наборы также могут включать в себя фармацевтическую композицию, описанную в настоящем документе, и изделие для установления диагноза. Например, такие наборы могут включать в себя изделие для измерения концентрации, количества и активности выбранного анти-РСВ антитела или антигенсвязывающего фрагмента у субъекта.
В некоторых примерах анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты предусмотрены в виде диагностического набора для выявления РСВ в выделенной биологической пробе (например, полученном от субъекта образце жидкости, такой как кровь, мокрота, лаваж, образец, отобранный при интубации легких, слюна, моча или лимфа). В некоторых примерах диагностический набор содержит набор из одного или более анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов и/или одного или нескольких контрольных антител (т.е. антител, не связывающих РСВ), где одно или несколько антител в наборе представляет собой анти-РСВ антитело или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему документу.
Наборы по настоящему документу также могут включать в себя устройство для введения анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов субъекту. Любое из различных известных в данной области устройств для введения лекарства субъекту может быть включено в набор по настоящему документу. Примеры устройств включают, но не ограничиваются ингаляторами (например, дозированными ингаляторами под давлением, ингаляторами с сухим порошком, распылителями (например, струйными или ультразвуковыми распылителями) и другими системами доставки жидкой композиции вдыханием), шприцами, иглами для внутривенного введения, катетерами и дозаторами жидкости, такими как пипетки. Как правило, устройство для введения анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов из набора совместимо с желаемым способом введения анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов. Например, анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты, предусмотренные для легочного введения, могут быть включены в набор с ингалятором или распылителем или содержаться в ингаляторе или распылителе.
3. Комбинации
Предусмотрены комбинации анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов по на- 88 023179 стоящему документу и второго агента. такого как второе анти-РСВ антитело или его антигенсвязывающий фрагмент. или другой терапевтический или диагностический агент. Комбинации могут включать любые анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты или реагент для лечения в соответствии со способами по настоящему документу. Например. комбинация может включать любые анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты и противовирусный агент. Комбинации также могут включать анти-РСВ антитела или антигенсвязывающие фрагменты по настоящему документу с одним или более дополнительными терапевтическими антителами. Комбинации предусмотренных анти-РСВ антител или их антигенсвязывающих фрагментов также могут содержать фармацевтические композиции. содержащие анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты или клетки-хозяева. содержащие нуклеиновые кислоты. кодирующие анти-РСВ антитела или их антигенсвязывающие фрагменты. как описано в настоящем документе. Комбинации по настоящему документу могут быть введены в одну композицию или предусмотрены в виде отдельных композиций.
К. Примеры
Следующие примеры приведены только в иллюстративных целях и не предназначены для ограничения объема изобретения.
Пример 1. Экспрессия белка Р РСВ
В этом примере белок слияния РСВ (Р белок) штамма А2 респираторно-синцитиального вируса экспрессировали и очищали с помощью захвата на планшетах для ИФА с применением анти-РСВ моноклональных антител (клон 2Р7). которые распознавали Р0 и Р1 субъединицы гликопротеина слияния. В первом примере рекомбинантный белок Р РСВ. содержащий только внеклеточный домен (ЗЕЦ ГО ΝΟ: 25). клонировали и экспрессировали в клетках 293Р. Во втором примере нативный белок Р РСВ экспрессировали заражением клеток НЕр-2 штаммом А2 РСВ (ЗЕЦ ГО ΝΟ: 1629).
A. Рекомбинантный белок Р РСВ
В этом примере клонировали и экспрессировали ген. кодирующий белок Р из штамма А2 РСВ. Ген Р А2 РСВ (ЗЕЦ ГО ΝΟ: 21). содержащий только внеклеточный домен (полноразмерный белок Р А2 РСВ приведен в ЗЕЦ ГО ΝΟ: 1630). был синтезирован в соответствии со стандартными методами синтеза ДНК в Ое^АЯ: (Виг1шдате. СА). В ген Р А2 РСВ включили последовательность Козака (нуклеотиды 7-16 из ЗЕЦ ГО ΝΟ: 21). с-тус последовательность (нуклеотиды 1600-1629 в ЗЕЦ ГО ΝΟ: 21). 6хНк метку (нуклеотиды 1645-1662 в ЗЕЦ ГО ΝΟ: 21). Кроме того. для клонирования в вектор экспрессии на 5' и 3' концах последовательности были предусмотрены сайты рестрикции NЬеI (ЗЕЦ ГО ΝΟ: 22) и НшБШ (ЗЕЦ ГО ΝΟ: 23) соответственно. ДНК расщепляли с применением стандартных методов молекулярной биологии и лигировали в аналогично расщепленный вектор экспрессии млекопитающих рсЭНА™ 3.1/тус-Нк(-) С (ЗЕЦ ГО ΝΟ: 24. Iην^ί^одеη). Вектор. содержащий ген Р А2 РСВ. трансформировали в электрокомпетентные клетки ХЬ1-В1ие (Зт-Цедеие). Были отобраны и выращены отдельные колонии. после чего была очищена плазмидная ДНК. Наличие вставки гена Р А2 РСВ в выделенном векторе проверяли секвенированием ДНК. и один клон. содержащий вставку. использовали для крупномасштабного выделения препаратов ДНК (набор Медаргер от ЦГадец).
Белок Р А2 РСВ экспрессировали в клетках млекопитающих с применением системы экспрессии Ргее8Гу1е™ 293 (Iην^ΐ^одеη) в соответствии с инструкциями производителя. Кратко. 3 х 107 клеток котрансфицировали 30 мкг плазмидной ДНК Р А2 РСВ/рс^NА3.1/тус-Н^к(-) С и 5 мкг рАБУАЩаде (Рготеда) и инкубировали при 37°С в течение 72 ч. Клетки осаждали центрифугированием и к 3х107 Р РСВ-трансфицированных 293-Р клеток добавляли 3 мл холодного буфера для лизиса (300 мМ №С1. 50 мМ NаН2РΟ4. 1% Тритон Х-100. смесь ингибиторов протеаз Сотр1е!е™ (кс-29131. ЗаШа Ουζ). рН 8). Смесь перемешивали при 4°С в течение 30 мин с последующим центрифугированием при 14000 оборотов в минуту в течение 30 мин при 4°С. Просветленный супернатант переносили в новую пробирку и замораживали при -80°С до использования. До захвата на планшетах для ИФА супернатант размораживали. быстро центрифугировали и разбавляли 1:1 об./об. в РВЗ. содержащем 0.8% обезжиренного сухого молока (конечная концентрация 0.4% обезжиренного сухого молока).
B. Нативный белок Р РСВ
В этом примере нативный белок Р РСВ из штамма А2 РСВ (аминокислотная последовательность приведена в ЗЕЦ ГО ΝΟ: 1629) очищали из инфицированных РСВ клеток НЕр-2. НЕр-2 клетки высевали в десятислойную камеру для культивирования клеток (Сотшд 3270) в полный ЕМЕМ (АТСС 30-2003. содержащий 10% РВЗ. 1% Ь-глутамина. и 1% пенициллин-стрептомицина) и инкубировали при 37°С и 5% СΟ2. Когда клетки достигли 80% покрытия поверхности. монослой НЕр-2 заражали вирусом А2 РСВ (АТСС УК-1540) при множественности заражения ^ΟΣ) 0.01-0.1. Инфицированные клетки культивировали в течение 3-5 дней до образования хорошо заметного синцития клеток. Инфицированные клетки один раз промывали РВЗ и собирали добавлением 500 мл РВЗ с 5 мМ ЭДТА в культуральную камеру и инкубацией при температуре 37°С в течение 1 ч. Клетки собирали в 50 мл конические пробирки (5х107 клеток на пробирку) и центрифугировали. Клеточный осадок промывали 2 раза РВЗ и центрифугировали при 1200 оборотах в минуту в течение 5 мин. Клеточный осадок хранили при -20°С до использования. Замороженные клетки размораживали и к осадку клеток добавляли 3 мл холодного буфера для лизиса
- 89 023179 (300 мМ №С1, 50 мМ NаΗ2Р04, 1% Тритон Х-100, смесь ингибиторов протеаз Сотр1е!е™ (зс-29131, ЗапСт/), рн 8). Клетки перемешивали при 4°С в течение 30 мин, а затем подвергали воздействию ультразвука (3 импульса в течение 10 с каждый при 10% мощности) и, наконец, центрифугировали при 14000 оборотов в минуту в течение 30 мин при 4°С. Осветленный супернатант переносили в новую пробирку и замораживали при -80°С до использования. До захвата на планшетах для ИФА супернатант размораживали, быстро центрифугировали и разбавляли 1:2000.
С. Захват с анти-РСВ тАЬ
ИФА планшеты покрывали 50 мкл/лунку 1:400 разбавления анти-РСВ тАЬ (N8110-37246, клон 2Р7, Шуиз Вю1од1са1з) в РВЗ. Свободные антитела удаляли и планшеты немедленно использовали для ИФА (см. примеры 2 и 4). Альтернативно планшеты замораживали и хранили до 2 недель при температуре -20°С. Непосредственно перед применением планшеты блокировали 4% обезжиренным сухим молоком в 1хРВЗ в течение 2 ч при температуре 37°С. Перед добавлением лизата планшеты дважды промывали РВЗ, содержащим 0,05% Твин-20 (промывочный буфер). Захват белка Р РСВ (рекомбинантного или нативного) проводили путем добавления 50 мкл любого из указанных выше подготовленных лизатов в каждую лунку планшета для ИФА с анти-РСВ тАЬ и инкубации при температуре 37°С в течение 2 ч.
Пример 2. Выделение анти-РСВ РаЬ антител из трансформированных ЕВУ В-клеток
В этом примере анти-РСВ антитела выделяли из стимулированных трансформированных вирусом Эпштейна-Барра В-клеток памяти доноров, которые были исследованы на связывание с белком Р РСВ после продукции антител ш νίΙΐΌ.
А. Очистка мононуклеарных клеток из периферической крови доноров
Мононуклеарные клетки периферической крови (МНПК) были получены от работника, ухаживающего за детьми, который мог быть подвержен РСВ при контакте с детьми. МНПК выделяли центрифугированием в градиенте плотности с Р1со11 нурацие в соответствии с инструкциями производителя.
1. Выделение СЭ22 + клеток и активация СЭ22 + В-клеток
3,2 х 106 СЭ22+ В-клеток выделяли из МНПК донора с использованием СЭ22 магнитных шариков (МШепуц # 130-046-401) и ЬЗ колонок (МШепуц # 130-042-401). Выделенные СЭ22+ В-клетки культивировали при плотности 1 х 106 клеток на лунку в 48-луночном планшете в РРМ1 (Иус1опе, # Зн30096.01), содержащей 10% инактивированной прогреванием телячьей эмбриональной сыворотки с низким содержанием 1дО (РВЗ, Iην^!^οдеη, # 16250-078), 1% антибиотиков (нус1опе, # ЗУ30010), 1% раствор пирувата натрия (нус1опе, # Зн30239.01) и 1% Ь-глутамин (нус1опе, # Зн30034.01). Чтобы вызвать пролиферацию и продукцию антител, выделенные клетки были активированы стимулирующим агентом для поликлональных В-клеток.
2. ЕВУ-опосредованная иммортализация 1дО+ В-клеток
4,5х106 активированных СЭ22+ В-клеток отмывали и инкубировали с 40 мкл Р1ТС-конъюгированных анти-1дМ (ВЭ Вюзаепсез, # 555782), 40 мкл Р1ТС-конъюгированных анти-1дЭ (ВЭ Вюзаепсез, # 555778) и 4 мкл Р1ТС-конъюгированных анти-1дА Цаскзопз 1ттипогезеагсЬ, 309-096-043) антител в течение 15 мин при 4°С. Клетки промывали 1хРВЗ (содержащим 0,5% ВЗА и 2 мМ ЭДТА) и ресуспендировали в 90 мкл того же буфера. Обогащение 1дО+ В-клетками добивались негативной селекцией экспрессирующих 1дМ, 1дЭ, 1дА клеток с применением 10 мкл анти-Р1ТС магнитных шариков (МП!епу1, # 130-048-701) и ЬЗ колонок (МШепуц # 130-042-401) в соответствии с инструкциями производителя.
Массовую иммортализацию клеток проводили путем инкубации 1,87 х 106 СЭ22+, 1дО+ обогащенных В-клеток с 0,5 мл ЕВУ супернатанта (50% об./об. в РМР1-1640 с 10% РСЗ, АТСС. УР-1492, инфицировали В95-8 клетки) в течение 16 ч. После заражения клетки отмывали и культивировали при плотности 106 клеток/мл в каждой из двух лунок в РРМ1 (нус1опе, # Зн30096.01) с 10% инактивированной прогреванием телячьей эмбриональной сывороткой с низким содержанием 1дО (РВЗ, # 16250-078),
1% антибиотиков (нус1опе, # ЗУ30010), 1% пируватом натрия (нус1опе, # Зн30239.01) и 1% Ьглутамином (нус1опе, # Зн30034.01), 200 Ед/мл рекомбинантного человеческого ИЛ-2 (Р&Э Зуз!етз 202-1Ь-50) с 0,5 х 106 облученных фидерных клеток на лунку 24-луночного планшета в течение еще 9 дней.
3. Клонирование В-клеток
а. Подготовка облученных обедненных В-клетками фидерных клеток для клонирования В-клеток
Облученные обедненные В-клетками фидерные клетки использовали для поддержания роста трансформированных ЕВУ В-клеток. Смесь МНПК от 3 здоровых доноров получали разделением в фиколле, облучали дозой 3250 рад (в онкологическом центре Мура Калифорнийского Университета в СанДиего) и обедняли по В-клеткам с применением анти-СЭ19 магнитных шариков (МШепуз Вю!ес, номер по каталогу 130-050-301) и ЬЭ колонок (МП!епу1 Вю!ес, # 130-091-509). Замороженные и облученные МНПК, полученные разделением в фиколле, размораживали, дважды промывали и подсчитывали. Затем клетки центрифугировали при 300 д в течение 10 мин, а супернатант отбрасывали. Осадок клеток (каждые 107 клеток) ресуспендировали в 80 мкл буфера МАСЗ (РВЗ с 0,5% БСА и 2 мМ ЭДТА) и добавляли 20 мкл СЭ19 микрошариков (на каждые 107 клеток). После тщательного перемешивания клетки инкубировали при 4°С в течение 15 мин. Клетки затем промывали добавлением 1-2 мл буфера (на каждые 107
- 90 023179 клеток) с последующим центрифугированием при 300 д в течение 10 мин, супернатант отбрасывали. Затем до 108 клеток ресуспендировали в 500 мкл буфера. Магнитное разделение проводили, помещая колонку ΌΌ (состоит из ферромагнитных сфер с пластиковым покрытием, что позволяет быстро и мягко разделять клетки) в магнитное поле сепаратора ΜΑС8. Колонки ΌΌ промывали 2 мл буфера и клеточную суспензию наносили на верхнюю часть колонки. Образец клеток, не содержащий В-клеток, собирали при пропускании через колонку 2 х 1 мл буфера.
Ь. Клонирование В-клеток
Приблизительно 20 трансформированных Еву В-клеток культивировали совместно со стимулирующим агентом для поликлональных В-клеток и 50000 облученных обедненных В-клетками фидерных клеток на лунку в 96-луночном планшете в течение 13 дней. В общей сложности было высеяно 120 96луночных планшетов.
4. Скрининг супернатанта В-клеток на связывание белка Ρ РСВ
Супернатант из каждой лунки переносили в новый 96-луночный планшет и клетки промывали 1х ΡΒ8 и замораживали при -80°С в 100 мкл буфера РЬТ (Ц1адеп, # 79216), содержащего 10 мкл/мл 2меркаптоэтанола. Чтобы определить, в каких лунках представлены антитела, способные связываться с белком Ρ РСВ, супернатант использовали в ИФА. ΗΜ8Α проводили следующим образом: (1) ИФА планшеты с белком Ρ РСВ были подготовлены, как описано в примере 1, с использованием 96-луночных планшетов с половинным объемом лунок со следующими модификациями: анти-РСВ тΑЬ (клон 2Ρ7, асцитная жидкость мыши, аЬ43812, ΑЬеат) использовали в качестве антитела для захвата белка Ρ РСВ, белок инкубировали с антителом для захвата в течение ночи при 4°С. (2) 10 мкл супернатанта от Вклеток из каждой из 2 лунок (всего 20 мкл супернатанта) добавляли в 96-луночный планшет для ИФА с половинным объемом лунок и инкубировали в течение 2 ч при температуре 37°С. Плазму от доноров из банка крови (собранную и замороженную после разделения В-клеток в фиколле ^рацие, разбавленную 1:1000) использовали в качестве положительного контроля. (3) Планшеты отмывали 4 раза, как описано выше, и в каждую лунку планшета добавляли 50 мкл козьих ΗΚΡ-конъюгированных антител против Ρс ίдС человека (разбавленных 1:1000 в ΡΒ8 с 0,05% Твин-20) и инкубировали при 37°С 1 ч. (4) Планшеты промывали 6 раз, как описано выше, и проявляли с использованием 50 мкл 1:1 об./об. раствора субстрата ТМВ:перекись водорода (Ρ^е^се, 34021), окрашивание развивалось в течение 7 мин. Реакцию немедленно останавливали добавлением 50 мкл 2 н Η2804 и с помощью планшетного спектрофотометра измеряли поглощение на длине волны 450 нМ. Положительным связыванием считали 0Ό450 более 0,5 (0,5-0,9 умеренное связывание, >1 - сильное связывание), ответом считали превышение значения фона в 3 раза.
Чтобы определить, супернатант какой из двух объединенных лунок содержит анти-РСВ антитела, 20 мкл супернатанта от В-клеток (разбавленный 1:02/о с ΡΒ8/0,05% Твин-20) из каждой лунки повторно индивидуально тестировали с захваченным в планшетах белком Ρ РСВ.
В общей сложности 18 планшетов (или 1080 лунок) были исследованы на связывание с Ρ РСВ лизатом (очищенным, как описано в примере 1). Были определены шесть лунок, содержащих супернатант, связывающий Ρ РСВ лизат. Пять из шести лунок были подтверждены в дополнительном ИФА и использованы для получения анти-РСВ антител методом ПЦР (см. ниже).
В. Получение анти-РСВ антител методом ПЦР
После первоначального скрининга трансформированных ЕВУ В-клеток для получения антител, которые связывают белок Ρ РСВ, из РНК В-клеток с помощью ПЦР были амплифицированы гены, кодирующие отдельные антитела. Для клонирования были отобраны пять лунок, идентифицированные в разделе А как содержащие желаемые антитела.
1. Выделение РНК
РНК выделяли из В-клеток (для каждой лунки, соответствующей положительному связыванию с белком Ρ РСВ) с помощью набора ΚNеаκу Μ^ιό Кб (Ц1адеп, 1402-2408) в соответствии с инструкциями изготовителя со следующими модификациями:
1) В клетки были заморожены в 100 мкл буфера РЬТ с β-меркаптоэтанолом (10 мкл на мл буфера),
2) клетки не гомогенизировали,
3) клетки промывали 70% этанолом (в свободной от РНКазы воде) и
4) обработку ДНКазой проводили на колонке по дополнительным рекомендациям производителя. РНК элюировали в конечном объеме 26 мкл.
2. Синтез первой цепи кДНК
После выделения РНК кДНК синтезировали в соответствии с протоколом синтеза первой цепи 8ирегкспр! ίίί (ίηνб^одеη; 19090-051). 8 мкл РНК (выделенной, как описано выше), 1 мкл олиго άТ праймера и 1 мкл άΚΙΤ смешивали в стерильной 0,2 мл пробирке и инкубировали при 65°С в течение 5 мин, а затем на льду в течение 1 мин. Затем в пробирку добавляли 2 мкл 0,1 мМ ИТТ, 4 мкл 25 мМ ΜдС12, 2 мкл буфера ΚΓ, 1 мкл Р№-1ке0и1 и 1 мкл 8ирегкспр! ίίί РТ и реакционную смесь инкубировали при 50°С в течение 50 мин с последующей инкубацией при 80°С в течение 15 мин. кДНК использовали сразу или замораживали при -80°С для длительного хранения.
3. Амплификация тяжелой цепи ίдС и каппа и лямбда-генов легких цепей методом ПЦР
- 91 023179
Тяжелую цепь 1дС и каппа и лямбда легкие цепи получали ПЦР-амплификацией первой цепи кДНК из В-клеток (см. выше). Каппа гены легких цепей были амплифицированы ПЦР в одну стадию, в то время как гены тяжелой цепи и гены лямбда легкой цепи были амплифицированы в две стадии с помощью ПЦР с заглубленными праймерами. Амплифипированные гены тяжелой и легкой цепей впоследствии были объединены в одну кассету с помощью ПЦР с перекрыванием праймеров.
Стадия 1. Амплификация генов тяжелых цепей 1дС и генов лямбда легких цепей
На стадии Ι 2 мкл кДНК, полученной реакцией синтеза первой цепи (см. выше), использовали в качестве матрицы для индивидуальной амплификации тяжелых цепей 1дС с помощью ПЦР. На этой стадии использовали праймеры для стадии 1 (см. табл. 3А ниже). Условия реакции были следующими:
ПЦР Стадия I: тяжелые цепи:
Реагент мкл
Н2О 16
10-кратный буфер 2,5
10-кратный ЕпЬапсег буфер 2,5
4ΝΤΡ (10 мМ каждый) 0,75
кДНК 2,0
νΗ прямой праймер (9 мкМ каждый) 0,5
νΗ обратный праймер (20 мкМ) 0,25
Р£*50 0,5
На стадии Ι для лямбда легких цепей 2,5 мкл кДНК, полученной реакцией синтеза первой цепи (см. выше), использовали в качестве матрицы для индивидуальной амплификация легких цепей 1дС с помощью ПЦР. На этом этапе в качестве прямых праймеров использовали праймеры для стадии 1 и в качестве обратных праймеров использовали рСАЬСЬ (Т)-К. (см. табл. 3В ниже). Условия реакции были следующими:
ПЦР Стадия I: тяжелые цепи:
Реагент мкл
Н2О 16
10-кратный буфер 2,5
10-кратный ЕпЬапсег буфер 2,5
4ΝΤΡ (10 мМ каждый) 0,75
кДНК 2,0
νλ праймер (14,2 мкМ каждый) 0,5
рСЛЬС1.(Т)-Р (20 мкМ) 0,25
РА 50 0,5
Для реакции ПЦР для увеличения специфичности реакции амплификации был использован метод уменьшения температуры отжига праймеров в ходе реакции. На каждом цикле реакции температуру отжига понижали на 1°С. Условия ПЦР были следующими:
1) 94°С в течение 2 мин
2) 10 циклов
94°С в течение 15 с,
62°С в течение 20 с (снижение температуры отжига с каждым циклом),
68°С в течение 1 мин,
3) 25 циклов
94°С в течение 15 с,
52°С в течение 20 с,
68°С в течение 1 мин,
4) 68°С в течение 3 мин,
5) 4°С
Полученную реакционную смесь использовали в качестве матрицы для стадии ΙΙ (см. ниже) без дополнительной очистки.
- 92 023179
Таблица 3А. Праймеры для стадии I амплификации генов тяжелой цепи 1§О
ΥΗ прямые праймеры $Εζ) ГО N0
УН1а ООАТССТСТТСТТООТСОСАОСАО 26
УН1Ь ОСАТССТТТТСТТООТООСАОСАС 27
УН1с ООСТСТТСТОСТТОСТООСТОТАО 28
УН1<1 ООАТССТСТТСТТООТОООАОСАО 29
УН2а СТОАССАТСССТТСАТООСТСТТС 30
УН2Ь СТСАССАССССТТССТОСОТСТТО 31
УНЗа ОСТАТТТТАКААООТОТССАОТОТ 32
УНЗЬ ОСТСТТТТААОАООТОТССАОТОТ 33
УНЗс ОСТАТТТАААААООТОТССААТОТ 34
УН4а СТС ОТСОС АОСТССС АО АТОООТС 35
УН5а СТССТООСТОТТСТССААООАОТС 36
УН обратные праймеры 8Е0 ГО ΝΟ
УН-8 1-КЕУ АСААОАТТТОСССТСААСТТТСТТСТСС 37
УН-§ 2- КЕУ ТТТОСОСТСААСТОТ СТТОТСС АССТТС 38
УН-ё 3- КЕУ ТТТОАОСТСААСТСТСТТОТССАССТТО 39
УН-ё 4- КЕУ АТАТТТСОАСТСААСТСТСТТСТССАСС 40
Таблица 3В. Праймеры для стадии I амплификации генов легкой лямбда цепи
УН прямые праймеры 8Е0 ГО ΝΟ
5Ένλ1 ООТССТСООСССАОТСТОТССТО 1631
5Έ УХ2 ООТССТОООСССАОТСТОСССТО 1632
5Έ УХЗ ОСТСТСТСАССТССТАТОАОСТО 1633
5Ένλ4/5 СОТСТСТСТСЗСАОСУТСТОСТС 1634
5'ЬУХ6 ОТТСТТСОСССААТТТТАТОСТС 1635
5'ЬУХ7 ООТССААТТСУСАООСТОТООТО 1636
5Ένλ8 ОАОТССАТТСТСАОАСТОТОСТО 1637
Обратный праймер: 8Е<3 ГО N0
рСАЕСЬ(Т)-К СТССТТАТТААТТААТТАТОАОСАТТСТОУАКООО СМАУ'ГОТС 80
Стадия II. Амплификация генов тяжелой цепи 1§О и лямбда легкой цепи
На стадии II реакционные смеси для тяжелой цепи и легкой лямбда цепи стадии I были использованы в качестве матрицы для второго раунда реакции ПЦР с прямыми и обратными праймерами, которые амплифицируют фрагменты от 1 каркасного района до конца первого константного района каждой цепи (СН1 для тяжелой цепи, С|, для легкой цепи).
Прямые праймеры для тяжелой цепи (см. табл. 4) вводили сайт рестрикции 8Гй (8ЕЦ ГО ΝΘ: 41). Условия реакции были следующими:
ПЦР Стадия II: тяжелые цепи:
Реагент мкл
Н2О 12,75
10-кратный буфер 2,5
10-кратный ЕпЬапсег буфер 2,5
6ΝΤΡ (10 мМ каждый) 0,75
кДНК 2,5
рСАЬ24\'Н-Р праймер (2 мкМ) 2,5
СН1-К-8Й (20 мкМ) 1
Ρί>50 0,5
Прямые праймеры для легкой лямбда цепи (см. табл. 6) вводили сайт рестрикции 8Ш (8ЕЦ ГО NΘ: 41). Условия реакции были следующими:
ПЦР стадия II: лямбда легкие цепи
Реагент мкл
Н2О 15,5
10-кратный буфер 2,5
10-кратный ЕпЬапсег буфер 2,5
4ΝΤΡ (10 мМ каждый) 0,75
кДНК 2,5
νλ праймеры (2 мкМ) 0,5
ρ('ΆΙ.(Ί,(Τ)Κ (20 мкМ) 0,25
РГ50 0,5
Условия ПЦР для стадии II были следующими:
1) 94°С в течение 2 мин,
2) 30 циклов
94°С в течение 15 с,
52°С в течение 20 с,
- 93 023179
68°С в течение 1 мин,
3) 68°С в течение 3 мин,
4) 4°С.
Для амплификации генов легких цепей 2 мкл кДНК, полученной реакцией синтеза первой цепи (см. выше), использовали в качестве матрицы для индивидуальной амплификация каппа и лямбда легких цепей 1дО с помощью ПЦР. Прямые праймеры каппа легкой цепи (см. табл. 5) вводили сайт рестрикции ЗЙ1 (ЗЕ^ ΙΌ ΝΟ: 41).
Условия реакции были следующими:
ПЦР Стадия И: каппа легкие цепи:
Реагент мкл
Н2О 16
10-кратный буфер 2,5
10-кратный ЕпЬапсег буфер 2,5 άΝΤΡ {10 мМ каждый) 0,75 кДНК 2,0 νλ праймеры (2 мкМ) 0,5 рСАЬСЬ(Т)К (20 мкМ) 0,5
Условия ПЦР для стадии ΙΙ были следующими:
1) 94°С в течение 2 мин,
2) 35 циклов
94°С в течение 15 с,
52°С в течение 20 с,
68°С в течение 1 мин,
3) 68°С в течение 3 мин,
4) 4°С.
После амплификации продукты ПЦР реакции разделяли на 1% агарозном геле и ДНК из полос, соответствующих тяжелой цепи (675 п.о.) и легкой цепи (650 п.о.), очищали путем экстракции их геля (набор Ое1 ^^адеη Ех!гас!юп Κι!;. 28706). Продукты ПЦР элюировали в 30 мкл.
Таблица 4. Праймеры для амплификации генов тяжелой цепи ^О
Прямые праймеры 5Е<5 ГО N0
рСаВО УН1а ддскккдсИассдСадсдСАСССССССССАСАССТКСАССТ ССТССАС 42
рСаВО УН1Ь ддскккдсИассдИадсдСАСССССССССАСАССТССАССТ ТСТССАС 43
рСаВО УН1с ддсЪЪЪдскассдкадсдСАСССССССССАЗАССТССАССТ ССТАСАС 44
рСаВО УНН ддсккйдскассдкадсдСАСССССССССАСАКАТССАССТ ССТССАС 45
рСаВО УН2а ддсТЛЬдскассдкадсдСАСССССССССАСАСАТСАССТТ СААССАС 46
рСаВО УНЗа ддскйкдскассдкадсдСАСССССССССАСАЕСТССАССТ ССТССАС 47
рСаВО УН4а ддскккдскассдЪадсдСАСССССССССАСАСЗТССАССТ ССАССАС 48
рСаВО УН4Ь ддсСккдсЬассдкадсдСАСССССССССАСАССТССАССТ АСАССАС 49
рСаВО УН5а ддсккйдскассдйадсдСАСССССССССАСАКСТССАССТ ССТССАС 50
рСаВО УН6 ддскккдсЬассдЬадсдСАСССССССССАСАССТАСАССТ ССАССАС 51
рСаВО ΥΗ7 ддсЪЪкдсЬассдкадсдСАСССССССССАСАССТЗСАССТ ССТССАА 52
Обратные праймеры 8Εζ) ГО ΝΟ
УН11-§1-Кеу ТОСООССООССТООССОАССАСААОАТТТОООСТС ААСТТТС 53
νΗΠ-£2-Κβν ТОССОССООССТССССОАССТТТССССТСААСТСТС ттотсс 54
νΗΙΙ-§3-Κβν ТССООССССССТООССОАССТТТОАОСТСААСТСТС ТТОТСС 55
УНИ-§4-Кеу ТОСООССССССТООССОАССАТАТТТООАСТСААСТ стстто 56
- 94 023179
Таблица 5. Праймеры для амплификации генов каппа легкой цепи
Прямые праймеры 8ЕО ГО ΝΟ
УК1а ААддсссадссддссаЕддссдссддТСАСАТССАСАТСАСССАС 57
νκιδ ААддсссадссддссаъддссдссддкСАСАТССАСТТСАСССАС 58
УК1с ААддсссадссддссаЕддссдссдд/СССАТСССОТТСАСССАС 59
УК2а ААддсссадссддссаЕддссдссддкСАТАТТСТСАТСАСУСАС 60
УКЗа ААддсссадссддссаЕддссдссддЕСАААТТСТСТТСАСССАС 61
УКЗЬ ААддсссадссддссаЪддссдссддЕСАААТТСТСТТСАСАСАС 62
УКЗс ААддсссадссддссаЬддссдссддЪСАААТАСТСАТСАСССАС 63
УК4а ААддсссадссддссаЪддссдссддйСАСАТССТСАТСАСССАС 64
УК5а ААддсссадссддссаС-ддссдссддкСАААССАСАСТСАСССАС 65
УКба ААддсссадссддссаЪддссдссддкСАААТТСТССТСАСТСАС 66
УК6Ь ААддсссадссддссаЬддссдссддССАТСТТСТСАТСАСАСАС 67
Обратный праймер 8ЕО ГО ΝΟ
рСАЕСК. СТССТТАТТААТТААТТАССАСТСТССССТСТТСААССТСТТ (О)Ь ТС 68
Таблица 6. Праймеры для амплификации генов лямбда легкой цепи
Прямые праймеры 8ЕО ГО ΝΟ
νπ-ρ ААСССССАСССССССАТСССССССССТСТТСАСТСТСТС СТСАСКСАССС 69
УЬ2-Р ААСССССАСССССССАТСССССССССТСТТСАСТСТССС СТСАСТСАССС 70
УЬЗА-Р ААСССССАСССССССАТСССССССССТСТТТССТАТСАС СТСАСНСАССУ 71
УЬЗВ-Р ААСССССАСССССССАТСССССССССТСТТТСТТСТСАС СТСАСТСАССАС 72
УЬЗС-Р ААСССССАСССССССАТСССССССССТСТТТССТАТСИС СТСАСТСАССС 73
УЬ4А-Р ААСССССАСССССССАТСССССССССТСТТСТСССТСТС СТСАСТСАСССС 74
УЬ4В-Р ААСССССАСССССССАТСССССССССТСТТСАССУТСТС СТСАСТСААТСВ 75
УЬ5/9-Р ААСССССАСССССССАТСССССССССТСТТСАСЗСТСТС СТСАСТСАСССВ 76
УЬ6-Р ААСССССАСССССССАТСССССССССТСТТААТТТТАТС СТСАСТСАСССС 77
УЕ7/8-Р ААСССССАСССССССАТСССССССССТСТТСАСВСТСТС СТСАСТСАССАС 78
УЫ0-Р ААСССССАСССССССАТСССССССССТСТТСАСССАССС СТСАСТСАСССА 79
Обратный праймер 8Е0 ГО ΝΟ
рСАЬСЦТ)-К СТССТТАТТААТТААТТАТСАССАТТСТСУАКССССМАУ ТСТС 80
Стадия III. ПЦР с перекрыванием праймеров
На стадии III сегменты ДНК тяжелой цепи и легкой цепи, полученные на стадии II, были:
1) связаны вместе в реакции с перекрыванием фрагментов через РаЬ линкер (см. табл. 7 ниже), который отжигался на 3' конец легкой цепи и 5' конец тяжелой цепи, и
2) амплифицированы с ЗГЕпрямого и обратного праймеров (см. табл. 7 ниже), что привело к амплификации фрагмента антитела длиной 1200 пар оснований (п.о.), содержащего последовательность легкая цепь-линкер-тяжелая цепь.
Линкер РаЬ каппа амплифицированы с 2§12/рСАЬ вектора (ЗЕ^ ГО NО: 81). Условия ПЦР для получения линкера РаЬ были следующими:
РаЬ каппа линкер
Н2О 19,75
10-кратный буфер 2,5
4ΝΤΡ (10 мМ каждый) 0,75
2§12/рСАЬ вектор (10 нг) 1
РаЬ линкер прямой (20 мкМ) 0,25
РаЬ линкер обратный (20 мкМ) 0,25
Ρί*50 0,5
Линкер РаЬ лямбда амплифицировали с 28611/рСАЕ вектора (ЗЕ^ ГО NО: 1638). Условия ПЦР для получения линкера РаЬ лямбда были следующими:
РаЬ лямбда линкер реагент
Н2О
10-кратный буфер
10-кратный ЕпЬапсег буфер άΝΤΡ (10 мМ каждый)
28011/рСАЬ вектор (10 нг)
РаЬ линкер СХ прямой (20 мкМ) РаЬ линкер обратный ΙΤ* (20 мкМ) РГ*50 мкл
35.5 5
1.5
0,5
0,5
- 95 023179
Условия ПЦР для получения линкера РаЬ были следующими:
1) 94°С в течение 2 мин,
2) 30 циклов
94°С в течение 15 с,
52°С в течение 20 с,
68°С в течение 1 мин,
3) 68°С в течение 3 мин,
4) 4°С.
Продукты ПЦР разделяли на 1% агарозном геле и линкер длиной 120 п. о. выделяли из геля в соответствии с протоколом очистки из геля Ц1адеп. 2 мкл очищенного линкера использовали для каждой реакции с перекрыванием фрагментов.
Условия ПЦР с перекрыванием были следующими (δβ прямой/обратный праймеры добавляли в реакцию ПЦР после первых 15 циклов):
ПЦР с перекрыванием реагент
Н2О
10-кратный буфер
10-кратный ЕпЬапсег буфер
4ΝΤΡ (10 мМ каждый) легкая цепь тяжелая цепь линкер
8й прямой/обратный праймеры РС50 мкл
24.5 5
1.5 5
Условия ПЦР были следующими:
1) 94°С в течение 2 мин,
2) 15 циклов
94°С в течение 15 с,
68°С в течение 1 мин.
Добавление δβ прямой/обратный праймеров (1 мкл).
3) 94°С в течение 2 мин,
4) 30 циклов
94°С в течение 15 с,
60°С в течение 20 с,
68°С в течение 2 мин,
5) 68°С в течение 3 мин,
6) 4°С.
После амплификации 10 мкл из 50 мкл продукта реакции ПЦР с перекрыванием легкая цепьлинкер-тяжелая цепь разделяли в 1% агарозном геле для определения размера, а остальные 40 мкл продукта ПЦР очищали с помощью набора для очистки Ц1адеп (Ц1адеп, 28106) с конечным объемом 30 мкл. К ПЦР-продукту ПЦР реакции добавили 5 объемов РВ1 буфера. Смесь нанесли на колонку Ц1А δρίη и дважды промыли буфером РЕ. Образец элюировали в 30 мкл и центрифугировали 1,5 мин на максимальной скорости для элюции всех 30 мкл. На 50 мкл реакции перекрывания типичный выход продукта составлял приблизительно 1 мкг.
Таблица 7. Олигонуклеотиды для стадии III
Олигонуклеотид δΕΟ ГО ΝΟ
РаЬ- линкерСК- прямой САССТТСААСАССССАСАСТССТААТТААТТААТААССА С 82
РаЬ-линкер- обратный ТСССССССССТССеСТАСССТАССАААСССАСССАОТСС САС 83
РаЬ- линкерСХ- прямой САСААТКеСССМТКСАСААТССТСАТААТТААТТААТАА ССАССАТЙТААТТАТСАААААС 1639
РаЬ-линкер- обратный-ίΓ* ТССССССеССТАСССТАСССТАССАААСССАСССАСТОС САС 1640
5ίί прямой ТСССддсссадссддссаъддс 84
δίϊ обратный Т6СССССССССТСССССА 85
Стадия ГУ. Расщепление δβ и клонирование в вектор экспрессии рСАЬ или вектор экспрессии рСАЬ РТ*
После реакции ПЦР с перекрыванием и очистки продуктов ПЦР продукт реакции расщепляли δΓΠ.
- 96 023179
К 30 мкл элюата (см. выше) для расщепления добавляли:
мкл реакционного буфера 2 (№те Епд1апб Вю1аЬ8),
0,4 мкл БСА,
1,6 мкл 8Ы ДОет Епд1апб Вю1аЬ8), мкл Н2О.
Общий объем 40 мкл.
Реакцию проводили в течение 1 ч при температуре 37°С. После расщепления продукт перекрывания разделяли на 1% агарозном геле, и полосу, соответствующую антителу (~ 1,45 Кб), очищали с помощью экстракции из геля (набор для экстракции из геля Ц1адеп 28706). Гель растворяли в 500 мкл буфера ОС (Ц1адеп). К образцу добавляли 150 мкл изопропанола, и образец наносили на колонку Ц1а8рт. Колонку промывали дважды буфером РЕ (Ц1адеп) и образец элюировали в 30 мкл буфера ЕВ (Ц1адеп). Было выделено приблизительно 15 нг/мкл расщепленного продукта из приблизительно 1 мкг продукта ПЦР с перекрыванием.
Расщепленный продукт перекрывания лигировали в рСАЬ бактериальный вектор экспрессии (8ЕЦ ГО N0: 86) или рСАЬ ГТ* (8ЕЦ ГО N0: 1641) бактериальный вектор экспрессии. Условия реакции лигирования были следующими:
нг 8ГП расщепленного рСАЬ или рСАЬ РТ* вектора, нг расщепленного продукта перекрывания, мкл Т4 лигазы ЩЕВ МС202Ц 400000 Ед/мл), доводили Н2О до объема 20 мкл.
Образец лигировали в течение 1 ч при комнатной температуре. Прежде чем приступить к трансформации, 1 мкл лигирования разбавляли в 4 мкл Н2О.
Стадия V. Трансформация Е сой
После лигирования продукт трансформировали в ЭН5а Мах ЕГйаепсу клетки Цпуйгодеп; 18258; генотип: Р- φ 801ас2АМ 15 Δ(1асΖΥА-а^дΡ) И169 гесА1 епбА1 Ь8бК17 (гк-, тк+) рЬоА 8ирЕ44 λ- 1Ы-1 дугА96 ге1А1). 1 мкл продукта лигирования (1/5 разбавления) добавляли к 50 мкл ЭН5а и инкубировали на льду в течение 30 мин. Трансформацию проводили тепловым шоком при 42°С в течение 45 с, затем клетки держали 2 мин на льду. К клеткам добавляли 0,9 мл среды 80С и клетки инкубировали при 37°С в течение 1 ч при перемешивании. Клетки высевали на чашки с ЬВ, дополненной карбенициллином (100 мкг/мл) и 20 мМ глюкозы. Чашки инкубировали в течение ночи при температуре 37°С.
Стадия VI. Отбор отдельных колоний.
Для амплификации каждого антитела было отобрано в общей сложности 88 отдельных колоний, которые выращивали в 1 мл среды 8ирег ВгоТЬ (8В) с добавлением карбенициллина (100 мкг/мл) в 96луночном планшете в течение 2 ч при температуре 37°С. Дочерний планшет засевали переносом 500 мкл культуральной среды из каждой лунки в другой 96-луночный бактериальный планшет с 500 мкл 8В, дополненной 40 мМ глюкозы (конечная концентрация 20 мМ) и 100 мкг/мл карбенициллина. Исходный или материнский планшет дополнили 500 мкл 8В, дополненной 100 мкг/мл карбенициллина. Исходный планшет культивировали при температуре 30°С в течение ночи и дочерний планшет (содержащий глюкозу) культивировали при 37°С в течение ночи. Клеточный лизат из культивируемого на 30°С планшета использовали для бактериального ИФА (см. пример 4 ниже), а культивируемый при 37°С планшет использовали для получения мини-препаратов ДНК (Ц1адеп).
Заключение
Последовательности антител из пяти лунок, содержащих антитела, были амплифицированы с применением праймеров на каппа легкую цепь и клонированы в рСАЬ вектор экспрессии.
Пример 3. Выделение анти-РСВ РаЬ антител сортировкой клеток
В этом примере анти-РСВ антитела были выделены из СГОРТ/СГОЗЗ/ЦС положительных клеток. СО 19/СО27ЛдО положительные клетки были получены:
1) выделением В-клеток и
2) сортировкой с помощью РАС8.
Отсортированные клетки были использованы для выделения РНК, которая служила в качестве матрицы для получения антител РаЬ ш уйго.
Выделение В-клеток
В-клетки были выделены из МНПК (собраны от анонимного донора из банка крови), используя набор для выделения В-клеток (МП!епу1 Вю!ес, 130-091-151). Набор использовали для выделения особо чистых В-клеток магнитным мечением и негативным отбором СЭ2, СЭ14, СЭ16, СЭ36, СГО43 и СГО235аэкспрессирующих клеток (активированных В-клеток, плазматических клеток и СГО5+ В-1а клеток) и не В-клеток (например, Т-клеток, NК клеток, дендритных клеток, макрофагов, гранулоцитов и эритроидных клеток). В соответствии с рекомендациями производителя не В клетки были не напрямую магнитно помечены с помощью коктейля из биотин-конъюгированных моноклональных антител в качестве первичного реагента мечения (коктейль биотин-антитела) и антибиотин моноклональных антител, конъюгированных с микрошариками в качестве вторичного реагента мечения (антибиотин микрошарики). Не В- 97 023179 клетки были удалены из чистых В-клеток путем магнитной сепарации.
Замороженные МНПК, полученные разделением в фиколле, размораживали, дважды промывали и подсчитывали. Затем клетки центрифугировали при 300 д в течение 10 мин, а супернатант отбрасывали. Осадок клеток ресуспендировали в 40 мкл буфера ΜΑС8 (на каждые 107 клеток) и к клеткам добавляли 10 мкл коктейля биотинилированных антител (на каждые 107 клеток). После тщательного перемешивания клетки инкубировали при 4°С в течение 10 мин. После инкубации добавляли 30 мкл буфера (на каждые 107 клеток) и 20 мкл антибиотин микрошариков (на каждые 107 клеток). После тщательного перемешивания клетки инкубировали при 4°С в течение 15 мин. Клетки затем промывали добавлением 1-2 мл буфера (на каждые 107 клеток) с последующим центрифугированием при 300 д в течение 10 мин, супернатант отсасывали. Затем 10 клеток ресуспендировали в 500 мкл буфера.
Магнитное разделение проводили, помещая колонку Ь8 (состоит из ферромагнитных сфер с пластиковым покрытием, что позволяет быстро и мягко разделять клетки) в магнитное поле сепаратора ΜΑС8. Колонки Ь8 промывали 3 мл буфера и клеточную суспензию наносили на верхнюю часть колонки. Образец не меченых клеток собирали при пропускании через колонку 3 х 3 мл буфера.
Сортировка клеток
В этом примере выделенные клетки сортировали по антигенной специфичности с применением проточного цитометра ΡΑС8Α^^а (ΒΌ Вюкаепсек). Отобранные клетки были ί'Ό19/ί'Ό27/φΟ положительными. ΡСΒ-Ρ антиген был помечен Α1еxа Пиог 647 в соответствии с инструкцией производителя (Μо1еси1а^ Ριτ^κ, Α-20186).
Выделенные В-клетки были расфасованы в 16 отдельных пробирок. В четырнадцать пробирок поместили 1 х 105 клеток, которые были использованы для определения параметров ФЭУ и параметров сортировки на ΡΑС8Α^^а. Остальные 1,8 х 106 клеток были помечены Α1еxа Пиог 647/ΡСΒ-Ρ в конечной концентрации 20 нМ. Маркированный белок добавляли к образцу за 15 мин до добавления антител. СЭ19 и СЭ27 антитела были использованы в разведении 1:20, в то время как ίдС антитела были использованы в разведении 1:50. После добавления Α1еxа Пиог 647/ΡСΒ-Ρ белка и антител пробирки инкубировали на льду в течение 30 мин, а затем промывали два раза. Сортировку клеток проводили с применением проточного цитометра ΡΑС8Α^^а (ΒΌ Вюкаепсек). Метки включали РЕ-Су5 (анти-СЭ19 человека), РЕ-Су7 (анти-СО27 человека), РЕ (козьи антитела против Ρσγ ίдС человека), Ρас^Πс В1ие (мышь античеловек СЭ3), ПТС (мышь антиПдЭ человека, мышь анти-ίдΜ человека, мышь анти-ίдΑ человека и мышь анти-СЭ14 человека), пропидий йодид и Α1еxа Пиог 647 (помечен ΡСΒ-Ρ белок).
При сортировке клеток сначала исключали мертвые клетки, затем исключали СЭ3 положительные клетки. Затем были выявлены СЭ19 и СО27-положительные клетки и в этой популяции были отобраны клетки, экспрессирующие Ρσγ ίдС. Из оставшихся клеток были исключены клетки, экспрессирующие ί^Ρ, ί§Μ и ίдΑ. Наконец, ί'Ό19/ί'Ό27/φΟ Ρσγ положительные клетки были отсортированы по связыванию ΡСΒ-Ρ и каждая положительная клетка была помещена в отдельную лунку 96-луночного планшета, содержащую 2 мкл буфера для синтеза кДНК (8ирегкспр1 ίίί 10х буфер, ПцЦгодеп; 19090-051), 0,5 мкл ΚNа5еОυТ и 7,5 мкл стерильной воды. Планшеты хранили при температуре -80°С до дальнейшего использования.
Синтез первой цепи кДНК
После сортировки кДНК синтезировали индивидуально для каждой лунки в соответствии с протоколом синтеза первой цепи [птйгодеп. 0,5 мкл 10% №-40, 1 мкл олиго άТ праймера и 1 мкл άΜΎΡ добавляли в каждую лунку и планшета инкубировали при 65°С в течение 5 мин с последующей инкубацией на льду в течение 1 мин. Затем добавляли 2 мкл ОТТ, 4 мкл ΜдС12 и 1 мкл 8ирегкспр! ίίί ИТ и реакционную смесь инкубировали при 50°С в течение 1 ч с последующей инкубацией при 85°С в течение 5 мин. кДНК использовали сразу или замораживали при -80°С для длительного хранения.
Амплификация тяжелой цепи и легкой каппа цепи ίдС
Тяжелую цепь и каппа легкую цепь ίдС затем получали с помощью четырех последовательных стадий
ПЦР.
Стадия 1. Амплификация
На стадии ί 2,5 мкл кДНК, полученной в реакции синтеза первой цепи (см. выше), использовали в качестве матрицы для индивидуальной амплификации каппа легкой цепи и тяжелой цепи ίдС с помощью ПЦР. На этом этапе использовали праймеры для стадии ί (см. табл. 8 и 9 ниже). Условия реакции были следующими:
ПЦР Стадия I:
Реагент мкл
И2О 16
10-кратный буфер 2,5
10-кратный ЕпЬапсег буфер 2,5
άΝΤΡ (10 мМ каждый) 0,75
кДНК 2,5
праймер для Стадии ί (20 мкМ каждый) 0,25
обратный праймер (20 мкМ) 0,25
РГ*50 0,25
25
- 98 023179
Условия ПЦР были следующими:
1) 94°С в течение 2 мин,
2) 10 циклов
94°С в течение 15 с,
62°С в течение 20 с (снижение температуры отжига с каждым циклом),
68°С в течение 1 мин,
3) 40 циклов
94°С в течение 15 с,
52°С в течение 20 с, 68°С в течение 1 мин,
4) 68°С в течение 3 мин,
5) 4°С.
Полученную реакционную смесь использовали в качестве матрицы для стадии II (см. ниже) без дополнительной очистки.
Таблица 8. Праймеры для стадии I для амплификации каппа легкой цепи
Прямые праймеры ЗЕр Ιϋ ΝΟ
5'ίνκ1/2 АТ6АСС5ТСССУССТСАССТССТСС 87
5гЬУкЗ СТСТТССТССТССТАСТСТС6СТСССАС 88
5'0Ук4 АТТТСТСТСЭТТОСТСТССАТСТСТС 89
Обратный праймер 8Е010 N0
\'К-Кст ОСЙСТСТССССТСТТСААОСТСТТТС 90
Таблица 9. Праймеры для стадии I для амплификации тяжелой цепи 1дО
Прямые праймеры 5Ер ГО N0
5’Ь-УН1 АСАССТССССАСТСССАССТССАС 91
5' Ь-УНЗ ААССТСТССАСТСТСАКСТССАС 92
5' Ь-УН4/6 СССАСАТ5ССТССТСТСССАССТССА0 93
5Έ-ΥΗ5 СААССАСТСТСТТСССАССТССАС 94
Обратный праймер 5Ε0ΙΟΝΟ
3' СуСН! СЗСААССТСТССАССССССТССТС 95
Стадия II. Амплификация
На стадии II реакционную смесь, полученную на стадии I, использовали в качестве матрицы для второй реакции ПЦР с прямыми и обратными праймерами для легкой цепи и тяжелой цепи соответственно. В реакциях амплифицировали ДНК, начиная с 1 каркасного района каждой цепи. Прямые праймеры для легкой цепи (см. табл. 10) вводили сайт рестрикции δΡϋ (ЛЕО ГО N0: 41). Условия реакции были следующими:
ПЦР Стадия II: легкая цепь
Реагент МКЛ
Н20 15,75
10-кратный буфер 2,5
10-кратный ЕпНапсег буфер 2,5
άΝΤΡ (10 мМ каждый) 0,75
реакционная смесь Стадии I 2,5
праймер \'к (9,1 мкМ) 0,5
рСАЬСК(О)Ь (20 мкМ) 0,25
Ρίχ50 0,25
25
Прямые праймеры для тяжелой цепи в (см. табл. 11) вводили сайт рестрикции δа1I (ЛЕО ГО N0: 96). Условия реакции были следующими:
ПЦР Стадия II: тяжелая цепь
Реагент мкл
Н2О 14,25
10-кратный буфер 2,5
10-кратный ЕпНапсег буфер 2,5
0ΝΤΡ (10 мМ каждый) 0,75
реакционная смесь Стадии I 2,5
рСАЬ24Ун-Р (2 мкМ) 0,5
ЗаП Ш-Кеу (20 мкМ) 0,25
Р£*50 0,25
Условия ПЦР были следующими:
1) 94°С в течение 2 мин,
2) 50 циклов
- 99 023179
94°С в течение 15 с,
54°С в течение 20 с,
68°С в течение 1 мин,
3) 68°С в течение 3 мин,
4) 4°С.
После амплификации продукты реакции ПЦР разделяли в 1% агарозном геле и полосы, соответствующие тяжелой цепи (400 п.о.) и легкой цепи (650 п.о.), очищали экстракцией из геля (Ц1адеп).
Таблица 10. Праймеры для амплификации каппа легкой цепи
Прямые праймеры 5Е<5 ΙΟ ΝΟ
УК1а ААддсссадссддссаЬддссдссддИСАСАТССАСАТС АСССАС 57
УК1Ь ААддсссадссддссаЬддссдссддЬСАСАТССАСТТС АСССАС 58
УК1с ААддсссадссддссаЪддссдссддССССАТССССТТС АСССАС 59
УК2а ААддсссадссддссайддссдссддЬСАТАТТСТСАТС АСУСАС 60
УКЗа ААддсссадссддссаЬддссдссддССАААТТСТСТТС АСССАС 61
УКЗЬ ААддсссадссддссаЬддссдссддйСАААТТСТСТТС АСАСАС 62
УКЗс ААддсссадссддссаТддссдссддЬСАААТАСТСАТС АСССАС 63
УК4а ААддсссадссддссаСддссдссддССАСАТССТСАТС АСССАС 64
УК5а ААддсссадссддссаТддссдссддТСАААССАСАСТС АСССАС 65
УКба ААддсссадссддссайддссдссддтСАААТТСТССТС АСТСАС 66
УК6Ь ААддсссадссддссаЬддссдссддТСАТСТТСТСАТС АСАСАС 67
Обратный праймер 5Е<3 ΙϋΝΟ
рСАЬСК (С) Ь СТССТТАТТААТТААТТАССАСТСТССССТСТТСААССТ СТТТС 68
Таблица 11. Праймеры для амплификации тяжелой цепи 1дО
Прямые праймеры ЗЕО ГО ΝΟ
рСа130 УН 1а ддсТЫдсГ-ассдкадсдСАСССССССССАСАССТКСАС СТССТССАС 42
рСа130 УН1Ь ддсЫШдсСассдйадсдСАСССССССССАСАССТССАС СТТСТССАС 43
рСа130 УН1с ддсЬЬЬдсЬассдйадсдСАСССССССССАЗАССТССАС СТССТАСАС 44
рСа130 УНН ддсЬЬйдсйассдйадсдСАСССССССССАСАВАТССАС СТССТССАС 45
рСа130 УН2а ддсЬЬЬдсЬассдЬадсдСАСССССССССАСАСАТСАСС ТТСААССАС 46
рСа!30 УНЗа ддсНСЪдсЪассдЪадсдСАСССССССССАСАКбТбСАС СТССТССАС 47
рСа130 УН4а ддс-ЫЛдсЕассдЦадсдСАСССССССССАСАСЗТССАС СТССАССАС 48
рСаВО УН4Ь ддсФЬЬдсИассдИадсдСАСССССССССАСАССТССАС СТАСАССАС 49
рСа130 УН5а ддсЫзйдсйассдйадсдСАСССССССССАСАКСТССАС СТССТССАС 50
рСа130 УН6 ддсБЬГдсИассдСадсдСАСССССССССАСАССТАСАС СТССАССАС 51
рСа!30 УН7 ддсБййдсйассд'ЬадсдСАСССССССССАСАССТЗСАС СТССТССАА 52
Обратные праймеры ЗЕО ГО ΝΟ
3’ ЗаПДН 1/2/4/5 ТСССААСТССАСССТСАССАСАСССТСАССАС 97
3’ 8а1ПНЗ ТСССААСТССАСССТСААСАСАСССТСАССАТТС 98
3’8а1НН6 ТСССААСТССАСССТ6АССА5АСССТ6АСССТС 99
Стадия III. ПЦР с перекрыванием фрагментов
На стадии III сегменты ДНК тяжелой цепи и легкой цепи, полученные на стадии II, были:
1) связаны вместе в реакции с перекрыванием фрагментов через РаЬ линкер (см. табл. 12 ниже), который отжигался на 3' конец легкой цепи и 5' конец тяжелой цепи, и
2) амплифицированы с Зй-прямого праймера (см. табл. 12 ниже), который отжигался на 5' конце легкой цепи, и 1Н обратного праймера (см. табл. 11 ниже), который отжигался на 3' конце тяжелой цепи, что привело к амплификации фрагмента антитела длиной 1200 пар оснований (п.о.), содержащего последовательность легкая цепь-линкер-тяжелая цепь. Условия ПЦР были следующими (линкер синтезировали, как описано в примере 2 выше):
- 100 023179
Н2О
10-кратный буфер
10-кратный ЕпЬапсег буфер
ΟΝΤΡ (10 мМ каждый) легкая цепь тяжелая цепь линкер
8П прямой/ ДН обратный праймеры (20 мкМ) Р®50
24,5
1,5
Условия ПЦР были следующими: перекрывание с линкером
1) 94°С в течение 2 мин,
2) 15 циклов
94°С в течение 15 с,
68°С в течение 1 мин.
Добавление праймеров
3) 94°С в течение 2 мин,
4) 30 циклов
94°С в течение 15 с,
60°С в течение 20 с,
68°С в течение 1 мин,
5) 68°С в течение 3 мин,
6) 4°С.
После амплификации продукт реакции ПЦР легкая цепь-линкер-тяжелая цепь был разделен в 1% агарозном геле и очищен экстракцией из геля (Ц1адеп).
Стадия 1У. Введение Сн1 района
После перекрывания амплифицированный фрагмент легкая цепь-линкер-тяжелая цепь расщепляли За11 и лигировали с расщепленным За11 1 константным доменом тяжелой цепи (Сну1 районом), вводя сайт рестрикции Зй1 на 3' конец константного района тяжелой цепи. Условия реакции лигирования были следующими:
мкл буфера для реакции лигирования, мкл СН1, мкл очищенного из геля продукта, полученного на стадии III, длиной 1,2 Кб, мкл воды, мкл Т4 лигазы.
Реакционную смесь для лигирования инкубировали в течение 30 мин при комнатной температуре.
После лигирования полноразмерный РаЬ амплифицированы с помощью ПЦР с Зй1 прямого и обратного праймеров (см. табл. 12 ниже), получая фрагмент длиной 1,45 Кб.
Условия реакции были следующими:
Н2О 31,5
10-кратный буфер 5
10-кратный ЕпЬапсег буфер 5
4Ν ΓΡ (10 мМ каждый) 1,5 реакционная смесь для лигирования 5
8й прямой/обратный праймеры (20 мкМ) 1 РГ*50 1
Условия ПЦР были следующими:
1) 94°С в течение 2 мин,
2) 30 циклов
94°С в течение 15 с,
60°С в течение 20 с,
68°С в течение 1 мин,
3) 68°С в течение 3 мин,
4) 4°С.
Продукт реакции представлял собой легкую цепь и тяжелую цепь, связанные друг с другом в одной
- 101 023179 кассете, длина фрагмента 1,45 Кб.
Таблица 12. Олигонуклеотиды для стадии III и стадии ίν
Олигонуклеотид δΕΟ ГО ΝΟ
РаЬ линкер САССТТС&АСАССССАСАСТССТААТТААТТААТААССА ССайайааййайдааааадасадсйайсдсдаййдсаСТ еССАСТСССТСССТТТеСТАСССТАССеСАССССССССС А 100
8й прямой праймер ТСССддсссадссддссайддс 84
δίί обратный праймер ТССССССССССТ6ССССА 85
СН1 фрагмент дйсдассаааддйссдйсйдййййсссдсйддсйссдйс ййсйааайсйассйсйддйддйассдсйдсйсйдддййд ссйддййааадасйасййсссддаассддййассдйййс ййддаасйсйддйдсйсйдассйсйддйдййсасассйй сссддсйдййсйдсадйсййсйддйсйдйасйсйсйдйс ййсйдййдййассдййссдйсййсййсйсйдддйассса дассйасайсйдсаасдййаассасааассдйсйаасас сааадййдасаадааадййдаассдааайсййдссйдсд айсдсддссаддссддссдсассайсассайсассайдд сдсайасссдйасдасдййссддасйасдсййсйасйад й 101
Стадия ν. Расщепление δΓί и клонирование в рСАЬ вектор экспрессии
После реакции ПЦР с перекрыванием и очистки продукта ПЦР продукт реакции расщепляли δΓίΙ. К 30 мкл элюата (см. выше) для расщепления добавляли:
мкл реакционного буфера 2 (Ν^ Επ§1οπά Вю1аЬ8),
0,4 мкл БСА,
1,6 мкл фермента δΠΙ (Ν^ Εηд1апй Вю1аЬ8), мкл Н2О.
Общий объем 40 мкл.
Реакцию проводили в течение 1 ч при температуре 37°С. После расщепления расщепленный продукт перекрывания разделяли в 1% агарозном геле и полосу, соответствующую антителу (~ 1,45 Кб), очищали с помощью экстракции из геля (набор для очистки ДНК из геля 01адеп 28706). Гель растворяли в 500 мкл буфера ОС (01адеп). К образцу добавляли 150 мкл изопропанола и образец наносили на колонку О1аЗрт. Колонку промывали дважды буфером РЕ <01адеп) и образец элюировали в 30 мкл буфера ЕВ (01адеп). Было выделено приблизительно 15 нг/мкл расщепленного продукта из приблизительно 1 мкг продукта ПЦР с перекрыванием.
Расщепленный продукт перекрывания лигировали в рСАЬ бактериальный вектор экспрессии (δΕΟ ΙΌ N0: 86). Условия реакции лигирования были следующими:
нг δΓίΙ расщепленного рСАЬ вектора, нг расщепленного продукта перекрывания, мкл Т4 лигазы (ЖВ МС202Й, 400000 Ед/мл), доводили Н2О до объема 20 мкл.
Образец лигировали в течение 1 ч при комнатной температуре. Прежде чем приступить к трансформации, 1 мкл лигирования разбавляли в 4 мкл Н2О.
Стадия νΙ. Трансформация Е. той
После лигирования продукт трансформировали в ΌΗ5α Мах ΕΓΓ^с^еηсу клетки (Iην^1^οдеη; 18258; генотип: Ρ- <р801ас2АМ15 А(1ас2УА-агдР) Ш69 гесА1 епйА1 ЬкйР17 (гк-, тк+) рЬюА 5иρΕ44 λ- 1Ы-1 дугА96 ге1А1). 1 мкл продукта лигирования (1/5 разбавления) добавляли к 50 мкл ΌΗ5α и инкубировали на льду в течение 30 мин. Трансформацию проводили тепловым шоком при 42°С в течение 45 с, затем клетки держали 2 мин на льду. К клеткам добавляли 0,9 мл среды З0С и клетки инкубировали при 37°С в течение 1 ч при перемешивании. Клетки высевали на чашки с ЬВ, дополненной карбенициллином (100 мкг/мл) и 20 мМ глюкозы. Чашки инкубировали в течение ночи при температуре 37°С.
Стадия νΙ. Отбор отдельных колоний
Было отобрано в общей сложности 88 отдельных колоний, которые выращивали в 1 мл среды Зирег Вго1Ь (ЗВ) с добавлением карбенициллина (100 мкг/мл) в 96-луночном планшете в течение 2 ч при температуре 37°С. Дочерний планшет засевали переносом 500 мкл культуральной среды из каждой лунки в другой 96-луночный бактериальный планшет с 500 мкл ЗВ, дополненной 40 мМ глюкозы (конечная концентрация 20 мМ) и 100 мкг/мл карбенициллина. Исходный или материнский планшет дополнили 500 мкл ЗВ, дополненной 100 мкг/мл карбенициллина. Исходный планшет культивировали при температуре 30°С в течение ночи и дочерний планшет (содержащий глюкозу) культивировали при 37°С в течение ночи. Клеточный лизат из культивируемого на 30°С планшета использовали для бактериального ИФА (см. пример 4 ниже), а культивируемый при 37°С планшет использовали для получения мини-препаратов ДНК (фадеп).
Пример 4. Связывание антител с белком Ρ РСВ
В этом примере РаЬ антитела, полученные в примерах 2 и 3, были протестированы на их способность связывать очищенный Ρ1 РСВ лизат методом ИФА. 50 мкл лизата бактериальных клеток, разбавленного в 3 раза РВБ/3% БСА/0,01% Твин-20, добавляли в лунки 96-луночного планшета для ИФА, ранее
- 102 023179 покрытого Р1 РСВ лизатом (см. пример 1 выше). Планшеты инкубировали при 37°С в течение 2 ч или при 4°С в течение ночи с последующим промыванием 4 раза промывочным буфером (РВЗ/0.05% Твин20). В лунки добавляли 50 мкл козьих НКР-антител против Р(аЬ) ЦО человека (^асккоη ЬаЬк 109-036097). разбавленных 1:1000 в РВЗ/3% БСА/0.01% Твин-20. и планшеты инкубировали при 37°С в течение 1 ч. После отмывания 6х промывочным буфером в лунки добавляли 50 мкл раствора ТМВ:перекись водорода 1:1 об./об. (Р1егсе. 34021). окраска развивалась в течение 7 мин. Реакцию немедленно останавливали добавлением 50 мкл 2 н Н2ЗΟ4 и с помощью планшетного спектрофотометра измеряли поглощение на длине волны 450 нМ. Положительным связыванием считали ΟΌ450 более 0.5 (0.5-0.9 - умеренное связывание. >1 - сильное связывание). ответом считали превышение значения фона в 3 раза.
В дополнение к связыванию к Р1 РСВ лизата было использовано несколько антигенов в качестве положительных и отрицательных контролей. В качестве положительного контроля для связывания Р1 РСВ лизата использовали плазму донора из банка крови (собранную и замороженную после разделения в фиколле Нурацие. разбавленную 1:1000). В качестве положительного контроля. чтобы определить. что каждый образец лизата бактериальных клеток содержит интактный РаЬ. для захвата интактных РаЬ для покрытия 96-луночного планшета для ИФА использовали козьи антитела против человеческого Р(аЬ)2 АГйтриге (1 мкг/мл ^асккоη [ттигюгекеагсЬ 109-006-097). Указанные антитела связывают только Р(аЬ) часть антитела ЦО. Экспрессию РаЬ обнаруживали с помощью анти-НА пероксидазы (КосЬе. # 12013819001; экспрессируемые в бактериях РаЬ несли НА-метку). Актин (1 мкг/мл. З1дта А3653) использовали в качестве отрицательного контроля для связывания РаЬ с посторонними белками и в качестве положительного контроля в реакции ИФА с помощью мышиных антител против актина (1.25 мкг/мл. З1дта А3853) и НКР-антител против мышиного Р(аЬ) ЦО (Зайа Спю Вю1есЬ ЗС3697). Мышиные антиРСВ тАЬ (клон 2Р7. из асцитной жидкости мыши. АЬ43812. АЬсат) также были включены в качестве отрицательного контроля на специфичность связывания с белком Р РСВ. так как это антитело было использовано для связывания белка Р РСВ в планшете для ИФА и. следовательно. присутствовало на планшете во время проверки человеческих анти-РСВ антител.
A. Связывания клеточных лизатов с РаЬ. полученными из трансформированных ЕВУ В-клеток (см. пример 2)
Восемьдесят восемь клеточных лизатов. полученных в примере 2. были протестированы с помощью ИФА на их способность
1) связывать анти-РаЬ антитело и
2) связывать Р1 РСВ лизат.
ИФА подтвердил. что 76 из 88 лизатов клеток содержали РаЬ. а 59 из 88 клеточных лизатов связывали Р РСВ лизат. Повторный ИФА показал. что 72 из 76 лизатов клеток действительно содержали РаЬ. а 46 из исходных 59 положительных лизатов связывали Р РСВ лизат.
Три положительных связывающих антитела были идентифицированы секвенированием соответствующих препаратов ДНК. Секвенирование показало. все они обладают одной последовательностью. определенной как РаЬ 58с5. которая имеет следующие легкие и тяжелые цепи:
РаЬ 58с5
Легкая цепь
Е1УМТ08Р38Е8А81ОЦКУТ]ТС0А80И8ТУЬИ\УУ00КРО0АРКЕЫУОА8ЦЕЕТОУР 8КРТО8ОУОТИР8УТ188Ь0РЕМАТУУС00У0УЕРУТРАРСТКУЕ1ККТУААР8УР1РР Р30Е<5ЬК8ОТА5УУСЦ.МЦРУРКЕАКУ0\УКУОЦА1.<Э8ОК8(ЗЕ8УТЕрЦЗКО8ТУЗЬЗ ЗТЬТЕЗКАЦУЕКНКУУАСЕУТНРОЬЗЗРУТКЗРККОЕС (ЗЕО Ю ΝΟ: 5)
Тяжелая цепь
0У0РУ08еРО[УКР30ТРА[/ГСКУ8а43ГХ'8ШУУ\УТ\У1К0РГЮОаЕЕ\У1ОН18У'ГС КТУУТР8ЬК8]Ц,5М8ЕЕТ8<28<2Р8ЬКЬТЗУТААО8АУУРСААСОАУУЬ18НСО\УРО8 \УО0ОТ0УТУ83А8ТКОР8УРРЬАР38КЗТ5ООТААЕОСЬУКЦУРРЕРУТУ8\УЦЗОАЬ Т8ОУНТЕРАУЕр88аЕУ8Е58УУТУР388ЕОТ0ТУ1СКУННКРЗЬ1ТКУОККУЕРК5С {ЗЕО ΙϋΝΟ: 1)
B. Связывание клеточных лизатов с РаЬ полученными сортировкой клеток (см. пример 3)
Результаты показали. что 64 из 88 клеточных лизатов. полученных в примере 3. связывают белок Р1
РСВ. Двадцать четыре положительных связывающих антитела были идентифицированы секвенированием соответствующих препаратов ДНК.
Одно из положительных связывающих антител было определено как РаЬ кс5. которое имеет следующие легкие и тяжелые цепи:
РаЬ кс5
Легкая цепь
Ц10МТ<38Р83Ь8А8У(ЦЖУТП'СКА80М1КХУиЧ'УУ0(ЗКРаКУРКШУАА8ТЕ(}8ОУ Р8КР5О8а5ОТЦРТЕТ138Е<ЭРЕЦРАТУ8С<Ю5У№ЛЗЕТРОООТКУЕ1ККТУААР5УГ1Г ΡΡ8ΟΕ<3ΕΚ8ΟΤΑ8νν<3ΕΕΝΝΡΥΡΚΕΑΚν<}\νκνθΝΑΕ08ΟΝ80Ε3νΤΕ<3Ο8ΚΟ8ΤΥ8Ε ЗЗТЕТЬЗКАОУЕКНКУУАСЕУТНООЬЗЗРУТКЗРЫКОЕС (ЗЕО ГО ΝΟ: 13)
- 103 023179
Тяжелая цепь
0У0Е0ЕЗСРО1Л'КРЗОТ1.3ЬТСТУ8ОО818О8Н%'’М'РУУК()РРОКОЬЕ\У1СЕ1УУК.ОТ ΤΝΥΚδδΕΚΟΚ.νΤΜδνΟΤδΚΝΟΡδΙΧΕΤδνΤΑΑΟΤΑνΥΥΩΑΚΟΟΚδΤί'ΟΡΟΥΥΥΥΜΟ УХУОКОТТУТУБЗАЗТКОРЗУРРЬАРЗЗКЗТЗООТААЕОСЬУКОУРРЕРУТУЗЛПЗОА ΕΤδΟνΗΤΡΡΑνΐφδδΟΙ.ΥδΕ5δνντνΡδ8δΕΟΤΟΓΥΙΟΝνΝΗΚΡ5ΝΤΚνΒΚΚνΕΡΚδΟ (5Ε<5 Ю ΝΟ: 9)
Домены антител и СБК фрагменты выделенных ΕаЬ 58с5 и кс5 приведены в табл. 13А-13В ниже. Таблица 13А. Домены антител и СБК фрагменты выделенных ΕаЬ
антитело УН цепь УН домен УН СОК1 УНС0К2 УН сокз
58с5 ЗЕО 10 N0:1 аминокислот ы 1-125 из ЗЕО ГО N0:1 ΟΑδΙΝδϋΝΥΥ ШТ (8Е<3 ГО N0:2) ΗΙ5ΥΤ0ΝΤΥΥΤΡ ЗЬКЗ (ЗЕО ГО N0:3) οοΑΥνυδΝοο ШР05 (ЗЕО ГО N0:4)
$с5 ЗЕО 10 N0:9 аминокислот ы 1-125 из ЗЕО ГО N0:9 ΟΡ8Ι5Ο8Ν\ν\ν N (ЗЕО ГО N0:10) Ε1ΥΥΚ0ΤΤΝΥΚ3 зько (ЗЕО ΙΟ N0:11) οοκδτρορϋγγ ΥΥΜΟν (ЗЕО ГО N0:12)
УЬ цепь УЬ домен УЬ СОК1 УЬ СОК2 УЬ сокз
58с5 ЗЕО ГО N0:5 аминокислот ы 1-107 из ЗЕО ГО N0:5 0Α50Ο13ΤΥΕΝ (ЗЕО ГО N0:6) САЗИЬЕТ (ЗЕО ГО N0:7) ΟΟΥΟΥίΡΥΤ (ЗЕО ГО N0:8)
5СЙ ЗЕО ГО N0:13 аминокислот ы 1-107 из ЗЕО ГО N0:13 ΚΑ30ΝΙΚΝΥΕΝ (ЗЕО 10 N0:14) ААЗТЮЗ (ЗЕО ГО N0:15) 003ΥΝΝ0ΕΤ (ЗЕО ГО N0:16)
Таблица 13В. СБК1 тяжелой цепи (нумерация по Кабат )
антитело VII СИК1 антитело УН СИК1
58С5 30ΝΥΥΗΤ (5Е<ЭЮ N0:1627) $с5 β3ΝΜΜΝ (5Е<2 ГО N0.1628)
Пример 5. Экспрессия и очистка выделенных ΕаЬ
В этом примере отдельные ΕаЬ антитела, которые связывали Ε РСВ лизат в ИФА с использованием клеточного лизата, были экспрессированы и очищены из бактериальных клеток с помощью колоночной хроматографии.
ДНК, кодирующая каждое антитело ΕаЬ, для экспрессии была трансформирована в Тор10 клетки (Ιηνίίτο^η). Бактерии, экспрессирующие каждое ΕаЬ антитело, растили в 2 л 8В при 37°С до 0Б600 0,8. Экспрессию белка индуцировали добавлением 1 мМ 1РТС и проводили в течение ночи при 30°С. После экспрессии бактериальную культуру центрифугировали и осадок клеток ресуспендировали в 10 мл фосфатного буфера (РВ8) с ингибиторами протеаз (полный коктейль ингибиторов протеаз, 8аШа Сги/ Βίο1есН„ # 8С-29131). К ресуспендированным клеткам добавляли лизоцим (0,2 мг) и смесь выдерживали при комнатной температуре в течение 15 мин. Клетки лизировали с помощью двух циклов замораживания/оттаивания. Ресуспендированные бактериальные клетки были заморожены в бане этанол/сухой лед с последующим оттаиванием при 37°С на водяной бане. После лизиса бактериальный лизат центрифугировали при 18000 об/мин и супернатант фильтровали и стерилизовали пропусканием через фильтр с порами 0,4 мкм.
Каждое антитело ΕаЬ затем очищали колоночной аффинной хроматографией. Для связывания ΕаЬ белка фильтрованный супернатант медленно пропускали через анти-РаЬ/протеин А колонку. После промывания 50 мл РВ8 связанный ΕаЬ элюировали 9 мл 0,2 М глицина, рН 2,2 и собирали в конические пробирки, содержащие 1 мл 2М Трис, тем самым нейтрализуя элюат с белком. Элюированный ΕаЬ затем диализовали с помощью диализных кассет с М\ С0 (порогом пропускания по молекулярной массе) 10 кДа (Р1егсе) против 4 л РВ8. Белок хранили при температуре 4°С в течение ночи и затем концентрировали до объема 1 мл с применением ультра-фильтров Λιηχοη 10 кДа ^Π^οκ). Связывание каждого очищенного антитела ΕаЬ с Ε РСВ лизатом (рекомбинантного происхождения, пример 1А) и НЕр2 лизатом (нативного происхождения, пример 1В) подтверждали методом ИФА (см. пример 4). Кроме того, каждое очищенное антитело ΕаЬ с помощью анализа, описанного в примере 6, было протестировано на способность нейтрализовать РСВ.
Связывание ΕаЬ 58с5 и кс5 с Ε РСВ лизатом и очищенным белком Ε РСВ
Связывания антител 58С5 и кс5 с захваченным белком Ε РСВ из трансфицированных клеток 293 (рекомбинантным) или очищенным белком Ε РСВ от инфицированных РСВ А2 клеток Нер2 (нативным) измеряли с помощью ИФА. Результаты показывают, что ΕаЬ 58с5 и ΕаЬ кс5 дозозависимо связывают белок Ε РСВ (рекомбинантный), но только кс5 распознает очищенный белок Ε (нативный) (см. табл. 14-15 ниже).
- 104 023179
Таблица 14. Связывание РаЬ зс5 и 58с5 с захваченным Р РСВ лизатом (рекомбинантным)
ГаЬ [мкг/мл] 8С5 58с5
2 2,963 2,9165
0,4 2,827 2,9705
0,08 2,151 2,518
0,016 0,651 1,433
0,0032 0,3205 0,5905
0,00064 0,284 0,415
0,000128 0,337 0,3785
0,0000256 0,22 0,2485
Таблица 15. Связывание РаЬ зс5 и 58с5 с очищенным белком Р РСВ (нативным)
ГаЬ [мкг/мл] 8С5 58с5
2 2,623 0,417
0,4 2,704 0,2665
0,08 2,744 0,1505
0,016 2,66 0,098
0,0032 1,7685 0,0805
0,00064 0,6035 0,087
0,000128 0,2325 0,1065
0,0000256 0,1445 0,13
Пример 6. Нейтрализация РСВ т νίΐΐΌ
В этом примере анти-РСВ антитела были проанализированы на их способность связывать и нейтрализовать вирус РСВ в растворе с помощью анализа подавления бляшкообразования. В этом эксперименте вирус РСВ и антитела предварительно инкубировали в отсутствие клеток-мишеней. Затем смесь добавляли к клеткам и наличие и степень вирусной инфекции измеряли по стандартному протоколу анализа бляшкообразования, описанному в настоящем документе. Анти-РСВ антитела были проанализированы на их способность нейтрализовать несколько штаммов вируса РСВ, включая РСВ А2 (АТСС УК1540), РСВ В-^азН (АТСС УР-1580, штамм 18537) и РСВ В-1 (АТСС кат. № 1400).
В качестве клеток-хозяев для инфекции клетки использовали клетки Веро (АТСС, ССЬ-81; Мапаззаз, УА). Клетки Веро выращивали в БМЕМ (нус1опе, Зн 30285,01) с 10% эмбриональной телячьей сыворотки (РВЗ) (Иус1опе, Зн30070.03) с добавлением 1% Ь-глутамина (Иус1опе, Зн30034.01) и 1% пенициллин-стрептомицина (нус1опе, ЗУ30010). Клетки Веро культивировали в 37°С инкубаторе с 5% СО2 и пересевали два раза в неделю.
На 1-й день эксперимента клетки Веро культивировали в 24-луночных культуральных планшетах. Клетки высевали при плотности (приблизительно 1 х 106 клеток на лунку), которая позволяет сформировать монослой клеток (> 90% покрытия) на 2-й день. На 2-й день каждое антитела серийно разводили в простой минимальной среде Игла (ЕМЕМ, АТСС, 30-2003) (конечная концентрация антител: 20, 4, 0,8, 0,16, 0,032 и 0,006 мкг/мл). Вирус РСВ также разводили в простой ЕМЕМ в концентрации 2х 103 БОЕ/мл (100 БОЕ/50 мкл) и 110 мкл разбавленного вируса РСВ добавляли к 110 мкл разбавленного раствора антител, и перемешивали с помощью пипетки. Для контрольного образца вируса 110 мкл разбавленного вируса РСВ добавляли к 110 мкл простой ЕМЕМ. Смесь антител и вируса или контрольную смесь вируса со средой инкубировали при 37°С в течение 2 ч. После инкубации из лунок 24-луночного культурального планшета, содержащих клетки-хозяева Уего, убирали среду и в каждую лунку переносили 100 мкл пре-инкубированной смеси вирус-антитело или контрольной смеси вирус-среда. Каждый тестовый и контрольный образец был исследован в трех повторностях. Затем клетки инкубировали при 37°С в течение 1 ч с перемешиванием каждые 15 мин.
После инкубационного периода питательную среду, содержащую смесь вирус-антитело или контрольную смесь вирус-среда, убирали и в каждую лунку добавляли 1 мл полной среды (полная среда содержала ЕМЕМ, 2% РВЗ, 1% Ь-глутамина, 0,75% метилцеллюлозы). 24-луночные культуральные планшеты инкубировали при 37°С (с 5% СО2) в течение приблизительно 72 ч. Клетки фиксировали в 10% растворе формалина в течение 1 ч при комнатной температуре, промывали 10 раз бидистиллированной Н2О и блокировали 5% сухим обезжиренным молоком (ЫРБМ) в РВЗ с 0,05% Твин-20 при 37°С в течение 1 ч.
После инкубации раствор для блокирования сливали и в каждую лунку добавляли 200 мкл мышиных анти-РСВ антител (аЬ10018, АЬсат, разведение 1:1000 в 5% ЫРБМ). Планшеты инкубировали при 37°С в течение 2 ч, промывали 10 раз бидистиллированной Н2О и в каждую лунку добавляли 200 мкл нРРконъюгированных антимышиных Ι§θ (Ыегсе, 31432, разведение 1:1000 в 5% Ж’1)М). Планшеты инкубировали при 37°С в течение 2 ч. Планшеты промывали 10 раз бидистиллированной Н2О и в каждую лунку добавляли 200 мкл 200 мкл субстрата пероксидазы ТгиеВ1ие™ (КРЬ 50-78-02). Планшеты инкубировали в течение 10 мин при комнатной температуре. Планшеты дважды промывали бидистиллированной Н2О и сушили на бумажном полотенце, после чего подсчитывали количество синих бляшек. ЫА, (эффективное разведение для 50% нейтрализации) рассчитывали с применением Рпзт (ОгарЬРаб). Степень подавления бляшкообразования была рассчитана по следующей формуле:
степень подавления бляшкообразования (в процентах) = (1 - среднее количество бляшек при каждом разведении антитела/ среднее количество бляшек в контрольной лунке с вирусом) х 100
- 105 023179
Данные приведены в табл. 16-18 ниже. В табл. 16 приведены ЕО50 для каждого РаЬ для различных штаммов РСВ. В табл. 17 приведены количества бляшек для различных штаммов РСВ и различных концентраций РаЬ 58с5. В табл. 18 приведена степень подавления бляшкообразования для РаЬ 58с5. Полученные результаты показывают, что РаЬ 58с5 способно нейтрализовать все 3 штамма РСВ, в то время как РаЬ кс5 нейтрализует только РСВ А2 и РСВ В-1, хотя и при гораздо более высокой концентрации антител. На основании данных, полученных в анализе нейтрализации, и молекулярной массы фрагмента РаЬ 58с5 (приблизительно 50 кДа) ЕС50 для РаЬ 58с5 для нейтрализации РСВ ш νίΐΓο оценивается приблизительно в 320 пМ.
Таблица 16. ЕЭ50 для РаЬ 58с5 и РаЬ кс5
РаЬ 58с5 РаЬ 8с5
Антиген ЕЦ50 ГО50
РСВ А2 320 пМ (0,016 мкг/мл) 0,016 мкМ (0,8 мкг/мл)
РСВ В/теазЬ 500 пМ (0,025 мкг/мл) > 0,2 мкМ (>10 мкг/мл)
РСВ В-1 840 пМ (0,042 мкг/мл) 0,042 мкМ (2,1 мкг/мл)
Таблица 17. Среднее количество бляшек при нейтрализации с РаЬ 58с5
Антиген 10 мкг/мл 2 мкг/мл 0,4 мкг/мл 0,08 мкг/мл 0,016 мкг/мл 0,003 мкг/мл 0 мкг/мл
РСВА2 0 0 0 5,7 28,7 52,3 57,7
РСВ В/наэЬ 1,3 0,7 0 5 16,3 23,3 26,3
РСВ В-1 0,3 0 0 4,7 8,7 11,7 12,3
Таблица 18. Подавление бляшкообразования (%) при нейтрализации с РаЬ 58с5
Антиген 10 мкг/мл 2 мкг/мл 0,4 мкг/ми 0,08 мкг/мл 0,016 мкг/мл 0,003 мкг/мл 0 мкг/мл
РСВ А2 100 100 100 90 50 9,4 0
РСВ В/иа$Ъ 95 97 100 81 38 11 0
РСВ В-1 97,6 100 100 62 29 5 0
Пример 7. Клонирование и экспрессия ЦС
В этом примере РаЬ антитела, которые показали способность нейтрализовать РСВ, были преобразованы в ЦО путем клонирования в вектор экспрессии млекопитающих рСАЬМ (ЗЕЦ ГО N0: 102). Были написаны праймеры, специфичные для каждого антитела, и тяжелую и легкую цепи каждого РаЬ, клонированного в рСАЬ вектор (см. пример 2), амплифицированы с помощью ПЦР. Амплификация легкой цепи привела к продукту 650 п.о., а амплификация тяжелой цепи дала фрагмент с 400 п.о. Кроме того, был синтезирован линкер для соединения тяжелой цепи и легкой цепи. Линкер также включал стандартный константный район тяжелой цепи. Перекрывание тяжелой и легкой цепей привело к кассете 2,1 Кб для каждого антитела с сайтами рестрикции ЗГП (ЗЕЦ ГО N0: 41) на обоих концах. Каждую кассету расщепляли ЗГП и клонировали в вектор рСАЬМ. После подтверждения правильности последовательности в бактериях для трансфекции клеток млекопитающих ДНК выделяли с помощью набора Мах1 Ргер Кй (Οίадеп).
Для экспрессии каждого ЦО каждый вектор рСАЬМ использовали для трансфекции приблизительно 200 миллионов 293Р клеток, что приводило приблизительно к 200 мкг ЦО. 293Р клетки трансфицировали с применением реагента 293ГесПп (Iην^!^οдеη, 51-0031), в которых нарабатывали ЦО в течение 72 ч. Через 72 ч после трансфекции культуральную среду собирали, центрифугировали для удаления клеток и стерилизовали через фильтр с порами 0,4 мкм. Очистку проводили путем колоночной хроматографии с применением колонки с белком А. Фильтрованную среду, содержащую экспрессированный ^О, пропускали два раза через колонку с белком А. После промывания 50 мл РВЗ ЦО элюировали 9 мл 0,2 М глицина при рН 2,2 и элюат собирали в 2 М Трис для нейтрализации. Элюат диализовали против 4 л РВЗ с применением диализной кассеты 10 кДа (Р1егсе). Образец сконцентрировали до 1 мл ультрафильтрацией через Ат^сοη И1!га с М^С0 10 кДа ^Π^οκ).
Пример 8. Анализ связывания ЦО
В этом примере ЦО 58с5, полученный, как описано в примере 7, и анти-РСВ антитело мотавизумаб (\νιι е! а1. (2007) I. Μο1. Вю1. 368(3):652-665) проверяли на их способность связывать белок Р РСВ (рекомбинантный) или белок Р РСВ (нативный) из лизата с помощью ИФА (см. пример 4). Измеренные ЕС50 для связывания (определенные титрованием каждого ^О) приведены в табл. 19 ниже. ЦО 58с5 характеризуется приблизительно такой же аффинностью к Р белку штамма А2 РСВ, как и мотавизумаб.
Таблица 19. Связывание !дО с белком Р ΡΑν
антитело измеренная ЕСда 1§О
1”(. 58с5 24 пМ
мотавизумаб 27 пИ
- 106 023179
Пример 9. Анализы нейтрализации РСВ 1дС 58с5
В этом примере 1дС 58с5, полученный, как описано в примере 7 выше, и мотавизумаб были испытаны на их способность нейтрализовать различные штаммы РСВ. Кроме того, 1дС 58с5 проанализировали на его способность нейтрализовать различные устойчивые к моноклональным антителам мутанты РСВ (МАКМ). МАКМ представляет собой мутантный штамм РСВ, который не нейтрализуется антителами, против которых он был создан. Таким образом, способность 1дС 58с5 нейтрализовать специфический МАКМ показывает, что эпитоп, связываемый 58с5, отличается от эпитопа антитела, против которого был создан МАКМ.
А. Нейтрализация РСВ
1дС 58с5 и мотавизумаб были испытаны на их способность нейтрализовать РСВ (как описано в примере 6 выше). Данные приведены в табл. 19-21 ниже. В табл. 20 приведены ЕО50 (эффективные разведения для 50% нейтрализации) для каждого штамма РСВ. В табл. 21 приведены количества бляшек для различных штаммов РСВ и различных концентраций антител. В табл. 22 приведена степень подавления бляшкообразования для различных штаммов РСВ и в различной концентрации антител. Полученные результаты показывают, что 1дС 58с5 способен нейтрализовать все 3 штамма РСВ. На основании данных, полученных в анализе нейтрализации, и молекулярной массы фрагмента 1дС 58с5 (приблизительно 150 кДа), ЕС50 1дС 58с5 для нейтрализации РСВ ίη νίίτο составляет приблизительно 133 пМ. Мотавизумаб характеризуется соответствующей ЕС50 360 пМ.
Таблица 20. Данные по нейтрализации 1дС (ЕЭ50)
антитело РСВ А2 РСВ В-1 РСВ В/игавЬ
|8С 58с5 133 пМ (0,02 мкг/мл) 280 пМ (0,042 мкг/мл) 193 пМ (0,029 мкг/мл)
мотавизумаб 360 пМ 833 пМ 2,9 нМ
Таблица 21. Среднее количество бляшек при нейтрализации с 1дС 58с5
Антиген 10 мкг/мл 2 мкг/мл 0,4 мкг/мл 0,08 мкг/мл 0,016 мкг/мл 0,003 мкг/мл 0 мкг/мл
РСВА2 0,3 0 0,7 16,3 31 40,3 57,7
РСВ В/тазЬ 0 0 1,3 7,7 16,3 20,7 26,3
РСВ В-1 0 0 0,3 4 9,3 11,7 12,3
Таблица 22. Подавление бляшкообразования (%) при нейтрализации с 1дС 58с5
Антиген 10 мкг/мл 2 мкг/мл 0,4 мкг/мл 0,08 мкг/мл 0,016 мкг/мл 0,003 мкг/мл 0 мкг/мл
РСВ А2 99,5 100 99 72 46 30 0
РСВ В/у/азЬ 100 100 95 71 38 21 0
РСВ В-1 100 100 97,6 67,5 24 5 0
Б. Нейтрализация устойчивых к моноклональным антителам мутантов РСВ
1дС 58с5 также проверяли на способность нейтрализовать несколько устойчивых к моноклональным антителам мутантов РСВ (предоставлены доктором 1ате8 Сгозсе, УапйегЬШ Иигуегейу), как описано в примере 6 выше. МАКМ, перечисленные в табл. 23 ниже, были получены из штамма А2 РСВ дикого типа. МАКМ 19, полученный против РаЬ 19 человека (см., например, Сго\уе е1 а1., УтоФду, 252:373-375 (1998)), содержит аминокислотную замену изолейцина в положении 266 на метионин. МАКМ 151, полученный против тАЬ 151 мыши, содержит аминокислотную замену лизина в положении 272 на аспарагин. МАКМ 1129, полученный против тАЬ 1129 мыши, которое является предшественником паливизумаба (ЗΥNАСIЗ), содержит аминокислотную замену серина в положении 275 на фенилаланин.
1дС 58с5 был исследован на способность нейтрализовать несколько устойчивых к моноклональным антителам мутантов РСВ (МАКМ). Данные приведены в табл. 23-24 ниже. В табл. 23 приведены количества бляшек при нейтрализации различных МАКМ различными концентрациями антител. В табл. 24 приведены степени подавления бляшкообразования для нейтрализации различных МАКМ различными концентрациями антител. Результаты показывают, что 1дС 58с5 способен нейтрализовать все 3 МАКМ РСВ. Таким образом, 58с5 связывает другой эпитоп штамма А2 РСВ по сравнению с эпитопом РаЬ 19, мышиного тАЬ 1129 и мышиного тАЬ 151.
Таблица 23. Среднее количество бляшек при нейтрализации МАКМ РСВ 1дС 58с5
МАКМ 10 мкг/мл 2 мкг/мл 0.4 мкг/мл 0.08 мкг/мл 0.016 мкг/мл 0.003 мкг/мл 0 мкг/мл
МАКМ 19 0,7 16,7 72 89,3 135 143 156
МАКМ 151 0 15,3 64,7 112 128 151 151
МАКМ 1129 0 0 2,3 5,7 П,7 17,7 22,3
Таблица 24. Степень подавления бляшкообразования при нейтрализации МАКМ РСВ 1дС 58с5
МАКМ 10 мкг/мл 2 мкг/мл 0.4 мкг/мл 0.08 мкг/мл 0.016 мкг/мл 0.003 мкг/мл 0 мкг/мл
МАКМ 19 100 89 53,8 42.7 14 8 0
МАКМ 151 100 90 57 26 15 0 0
МАКМ 1129 100 100 90 74 47 21 0
- 107 023179
Пример 10. Анализы на конкуренцию связывания
В этом примере были проведены анализы на конкуренцию связывания, в которых 1дО мотавизумаб (\и е! а1. (2007) 1. Μο1. Вю1. 368(3):652-665) тестировали на способность конкурировать с РаЬ 58с5 за связывание с белком Р РСВ. В качестве положительного контроля 1дО 58с5 конкурировал с РаЬ 58с5.
Планшеты для ИФА готовили, как описано выше в примере 1, с применением рекомбинантного или нативного белка Р штамма А2 РСВ. Планшеты блокировали 4% обезжиренным сухим молоком в 1χ РВ8 в течение 2 ч при 37°С с последующим промыванием 4χ промывочным буфером (РВ8/0,05% Твин-20). РаЬ 58с5 титровали в РВ8/3% БСА/0,01% Твин-20 от 9 мкг/мл до 0,0001 мг/мл (фактические исследованные концентрации: 9, 3, 1, 0,3, 0,1, 0,03, 0,01, 0.003, 0,001, 0,0003, 0,0001 мкг/мл). ЦО 58с5 и мотавизумаб добавляли в фиксированных концентрациях 0,5, 0,1, 0,05 и 0,01 мкг/мл (как указано в табл. 25 ниже). 50 мкл каждого разбавленного РаЬ и фиксированные концентрации ЦО одновременно добавляли в каждую лунку планшета в двух повторностях, как указано в табл. 26 ниже, с последующим промыванием 4χ промывочным буфером. В лунки добавляли козьи НКР-антитела против человеческого Рс-гамма 1дО Даск^п ^тимКе^аток, 109-035-098, разбавленные 1:1000) и планшеты инкубировали при 37°С в течение 1 ч. После отмывания 6χ промывочным буфером в лунки добавляли 50 мкл 1:1 об./об. раствора ТМВ:перекись водорода (Иегсе, 34021), после инкубации в течение 7 мин реакцию немедленно останавливали добавлением 50 мкл 2 н Н2804, после чего с помощью планшетного спектрофотометра измеряли поглощение на длине волны 450 нМ.
Таблица 25. Анализ на конкуренцию связывания
Антиген
РаЬ 58с5 Рекомбинантный белок Г Нативный белок Р
От 9 до 0.0001 ц£/тЬ 0,05 μ^ιη!.. ΐ£θ 58с5 0,05 μ^/ιηΐ, 1иСг 58с5
0,1 цд/тЬ мотавизумаб 1§О 0,01 цд/тЬ мотавизумаб 1^0
Результаты приведены в табл. 26 ниже. Мотавизумаб не конкурировал с РаЬ 58с5 за связывание с нативным или рекомбинантным белком Р штамма А2 РСВ.
Таблица 26. Краткая информация об анализе на конкуренцию связывания
Мотавизумаб 1дО ДО 58с5
58С5 РаЬ Нет Да
Пример 11. Получение ΜΑΡΜ РСВ и анализы нейтрализации
В этом примере были получены устойчивые к моноклональным антителам мутанты РСВ (ΜΑΡΜ) против мотавизумаб и ЦО 58С5. Мотавизумаб и ЦО 58С5 были дополнительно проанализированы на их способность нейтрализовать вновь созданные ΜΑΡΜ.
А. Получение ΜΑΚΜ
1. Мотавизумаб
Ранее была определена концентрация мотавизумаб ДО, которая снижает титр вируса РСВ на 3 порядка (соответствующая ингибированию на 99,9% в анализе нейтрализации вируса РСВ А2), которая составляла 3,2 мкг/мл. Вирусные частицы РСВ А2 (2 χ 106) предварительно инкубировали с разведениями мотавизумаб ДО, и эту смесь использовали для заражения клетки монослоя клеток Веро (как описано в примере 6 выше). Лунки с наибольшей концентрацией антител, демонстрирующие цитотоксический эффект, были выбраны для дополнительных раундов селекции. После 10 раундов отбора были получены вирусные бляшки в присутствии 8 мкг/мл мотавизумаба. Вирусные частицы из этих бляшек были протестированы в анализе нейтрализации (как описано в примере 6 выше) и из позитивных частиц с помощью набора КЫеаку была выделена РНК (Д|адеп). Были отобраны шесть устойчивых мутантов, из которых с помощью ПЦР амплифицировали ген Р. ДНК была секвенирована, все шесть клонов содержали одну аминокислотную замену глутаминовой кислоты на лизин в позиции 272 (К272Е, 8БЦ ΙΌ N0: 1642) по сравнению с исходным штаммом А2 РСВ (приведенным в 8БЦ ΙΌ N0: 1629).
В табл.27 ниже приведены наибольшие концентрации антител для каждого раунда отбора, при которых наблюдался цитопатический эффект (СРЕ). Как показано в табл. 27 ниже, устойчивые к мотавизумаб мутанты, которые демонстрировали СРЕ при большей концентрации антител, чем концентрация мотавизумаба, соответствующая 99,9% ингибированию вируса РСВ А2, как это определено в анализе нейтрализации (например, > 3,2 мкг/мл), были выявлены после 7 раундов отбора.
Таблица 27. Отбор ΜΑΡΜ против мотавизумаб
Раунд отбора Концентрация антител (мкг/мл)
0,5
2 0,5
3 0,75
4 1
5 2
6 3
7 4
8 8
9 8
10 8
- 108 023179
2. 58с5
Ранее была определена концентрация ЦС 58с5, которая снижает титр вируса РСВ на 3 порядка (соответствующая ингибированию на 99,9% в анализе нейтрализации вируса РСВ А2), которая составляла 0,8 мкг/мл. Вирусные частицы РСВ А2 (2 х 106) предварительно инкубировали с разведениями ЦС 58с5, и эту смесь использовали для заражения клетки монослоя клеток Веро (как описано в примере 6 выше). Лунки с наибольшей концентрацией антител, демонстрирующие цитотоксический эффект, были выбраны для дополнительных раундов селекции. После 12 раундов отбора были получены вирусные бляшки в присутствии 2 мкг/мл ЦС 58с5. Вирусные частицы из этих бляшек были протестированы в анализе нейтрализации (как описано в примере 6 выше) и из позитивных частиц с помощью набора К№а8у была выделена РНК (Ц1адеп). Были отобраны пять устойчивых мутантов, из которых с помощью ПЦР амплифицировали ген Р. ДНК была секвенирована, все пять клонов содержали три аминокислотных замены Щ63К, М115К и Е295С, 8ЕЦ ГО N0: 1643) по сравнению с исходным штаммом А2 РСВ (приведенным в 81Т) ГО N0: 1629).
В табл. 28 ниже приведены наибольшие концентрации антител для каждого раунда отбора, при которых наблюдался цитопатический эффект (СРЕ). Как показано в табл. 28 ниже, устойчивые к ЦС 58с5 мутанты, которые демонстрировали СРЕ при большей концентрации антител, чем концентрация ЦС 58с5, соответствующая 99,9% ингибированию вируса РСВ А2, как это определено в анализе нейтрализации (например, > 0,8 мкг/мл), были выявлены после 10 раундов отбора.
Таблица 28. Отбор МАКМ против !дС 58с5
В. Анализ нейтрализации
Мотавизумаб и ЦС 58с5 были испытаны на их способность нейтрализовать исходный штамм вируса РСВ А2, мотавизумаб МАКМ и ЦС 58с5 МАКМ. Процедура анализа нейтрализации описана в примере 6 выше. Данные приведены в табл. 29-32 ниже. В табл. 29 приведены степени подавления бляшкообразования для нейтрализации исходного вируса РСВ А2. В табл. 30 приведены степени подавления бляшкообразования для нейтрализации МАКМ против мотавизумаб. В табл. 31 приведены степени подавления бляшкообразования для нейтрализации МАКМ против ЦС 58С5. В табл. 32 приведены окончательные данные по нейтрализации (значения ЕЭ50).
Результаты показывают, что оба антитела способны нейтрализовать исходный штамм РСВ А2, при этом ЦС 58с5 проявляет большую активность (см. табл. 29). ЦС 58с5 нейтрализует МАКМ против мотавизумаб с такой же активностью, как исходный штамм (см. табл. 30). Как и ожидалось, мотавизумаб не нейтрализует МАКМ против мотавизумаб при любой из испытанных концентраций. Мотавизумаб нейтрализует МАКМ против ЦС 58с5 с такой же активностью, как исходный штамм (см. табл. 31). Как и ожидалось, ЦС 58с5 не нейтрализует МАКМ против ЦС 58с5 при любой из испытанных концентраций. Результаты показывают, что ЦС 58с5 нейтрализует МАКМ против мотавизумаб без конкуренции.
Таблица 29. Анализ подавления бляшкообразования для нейтрализации исходного вируса К8V А2
антитело 10000 нг/мл 2000 нг/мл 400 нг/мл 80 нг/мл 16 нг/мл 3,2 нг/мл
Мотавизумаб 100,0 98,87 82,27 50,40 19,25 0,40
1§С 58С5 100,0 100,0 99,6 87,0 49,2 6,1
Таблица 30. Анализ подавления бляшкообразования для нейтрализации МАКМ против мотавизумаб
антитело 10000 нг/мл 2000 нг/мл 400 нг/мл 80 нг/мл 16 нг/мл 3,2 нг/мл
Мотавизумаб 13,3 1,7 0,0 0,2 3,3 0,0
1еС 58С5 97,6 95,8 92,0 74,6 43,0 1,5
Таблица 31. Анализ подавления бляшкообразования для нейтрализации МАКМ против !дС 58с5
антитело 10000 нг/мл 2000 нг/мл 400 нг/мл 80 нг/мл 16 нг/мл 3,2 нг/мл
Мотавизумаб 94,8 92,9 83,9 47,1 6,5 0,0
1вС 58С5 3,3 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
- 109 023179
Таблица 32. Конечные данные по нейтрализации (ЕЭ50)
Исходный Κδν А2 (Γ.Η50) Мотавизумаб МАКМ (ЕВ50) 1§С 58С5 МАКМ (ЕП50)
Мотавизумаб 519 пМ >66,7 нМ 641 пМ
1еС 58С5 115 пМ 173 пМ >66,7 нМ
Если модификации изобретения будут очевидны специалистам в данной области, предполагается, что изобретение ограничено только приведенной формулой изобретения.
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ <110> Кальмун Корпорейшн
Виллиамсон, Энтони Вадиа, Джехангир Паскуал, Габриель Киогх, Элисса <120> АНТИТЕЛА ПРОТИВ РЕСПИРАТОРНО-СИНЦИТИАЛЬНОГО ВИРУСА (РСВ)
И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ <130> 33335.01152.ЕА01/1152ЕА <140> Неизвестен <141> Подано настоящим документом <160> 1643 <170> ЕазНЗЕО для Игпбомз Версия 4.0 <210> 1 <211> 228 <212> белок <213> Ното зартепз <220>
<223> 58с5 тяжелой цепи
<400> 1
С1п Уа1 С1п Геи Уа1 С1п Зег С1у Рго С1у Геи Уа1 Гуз Рго Зег С1п
1 5 10 15
ТНг Геи А1а Геи ТНг Суз Азп Уа1 Зег С1у А1а Зег 11е Азп Зег Азр
20 25 30
Азп Туг Туг Тгр ТНг Тгр 11е Агд С1п Агд Рго С1у С1у С1у Геи С1и
35 40 45
- 110
Тгр 11е 50 С1у Низ 11е Зег Туг 55 ТНг С1у Азп ТНг Туг 60 Туг ТНг Рго Зег
Теи Туз Зег Агд Теи Зег МеН Зег Теи С1и ТНг Зег С1п Зег С1п РНе
65 70 75 80
Зег Теи Агд Теи ТНг Зег Уа1 ТНг А1а А1а Азр Зег А1а Уа1 Туг РНе
85 90 95
Суз А1а А1а Суз С1у А1а Туг Уа1 Теи 11е Зег Азп Суз С1у Тгр РНе
100 105 110
Азр Зег Тгр С1у С1п С1у ТНг С1п Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТНг
115 120 125
Туз С1у Рго Зег Уа1 РНе Рго Теи А1а Рго Зег Зег Туз Зег ТНг Зег
130 135 140
С1у С1у ТНг А1а А1а Теи С1у Суз Теи Уа1 Туз Азр Туг РНе Рго С1и
145 150 155 160
Рго Уа1 ТНг Уа1 Зег Тгр Азп Зег С1у А1а Теи ТНг Зег С1у Уа1 Низ
165 170 175
ТНг РНе Рго А1а Уа1 Теи С1п Зег Зег С1у Теи Туг Зег Теи Зег Зег
180 185 190
Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго Зег Зег Зег Теи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз
195 200 205
Азп Уа1 Азп Низ Туз Рго Зег Азп ТНг Туз Уа1 Азр Туз Туз Уа1 С1и
210 215 220
Рго Ьуз Зег Суз 225 <210> 2 <211> 12 <212> БЕЛОК <213> Ното зарйепз <220>
<223> 58с5 УН СБК1 <400> 2
С1у А1а Зег 11е Азп Зег Азр Азп Туг Туг Тгр ТНг
1 5 10
<210> 3
- 111 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз <220>
<223> 58с5 УН ΟΌΚ2 <400> 3
ΗΪ3 11е Бег Туг ТНг С1у Азп ТНг Туг Туг ТНг Рго Бег Теи Туз Бег 1 5 10 15 <210> 4 <211> 15 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз <220>
<223> 58с5 УН ΟΌΚ3 <400> 4
Суз С1у А1а Туг Уа1 Теи 11е Бег Азп Суз С1у Тгр РНе Азр Бег 1 5 10 15 <210> 5 <211> 214 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз <220>
<223> 58с5 Легкая цепь <400> 5
С1и 11е Уа1 МеН ТНг С1п Бег Рго Бег Бег Теи Бег А1а Бег 11е С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз С1п А1а Бег С1п Азр 11е Бег ТНг Туг
20 25 30
Теи Азп Тгр Туг С1п С1п Туз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Теи Теи 11е
35 40 45
- 112 023179
Туг С1у 50 А1а Зег Азп Ъеи С1и 55 ТНг С1у Уа1 Рго Зег 60 Агд РНе ТНг С1у
Зег С1у Туг С1у ТНг Азр РНе Зег Уа1 ТНг 11е Зег Зег Ъеи С1п Рго
65 70 75 80
С1и Азр 11е А1а ТНг Туг Туг Суз С1п С1п Туг С1п Туг Ъеи Рго Туг
85 90 95
ТНг РНе А1а Рго С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз Агд ТНг Уа1 А1а А1а
100 105 110
Рго Зег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Ъеи Ъуз Зег С1у
115 120 125
ТНг А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Геи Ъеи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а
130 135 140
Ъуз Уа1 С1п Тгр Ъуз Уа1 Азр Азп А1а Ъеи С1п Зег С1у Азп Зег С1п
145 150 155 160
С1и Зег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Зег Ъуз Азр Зег ТНг Туг Зег Ъеи Зег
165 170 175
Зег ТНг Ъеи ТНг Ъеи Зег Ъуз А1а Азр Туг С1и Ъуз Нтз Ъуз Уа1 Туг
180 185 190
А1а Суз С1и Уа1 ТНг Нтз С1п С1у Ъеи Зег Зег Рго Уа1 ТНг Ъуз Зег
195 200 205
РНе Азп Агд С1у С1и Суз
210 <210> 6 <211> 11 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз <220>
<223> 58с5 УЪ СЪК1 <400> 6
С1п А1а Зег С1п Азр 11е Зег ТНг Туг Ъеи Азп
1 5 10
<210> 7 <211> 7 <212> БЕЛОК
- 113 <213> Ното зариепз <220>
<223> 58с5 УТ СБК2 <400> 7
С1у А1а Зег Азп Ней С1и ТНг 1 5 <210> 8 <211> 9 <212> БЕЛОК <213> Ното зариепз <220>
<223> 58с5 УТ ΟΌΚ3 <400> 8
С1п С1п Туг С1п Туг Теи Рго Туг ТНг 1 5 <210> 9 <211> 228 <212> БЕЛОК <213> Ното зариепз <220>
<223> зс5 Тяжелая цепь <400> 9
С1п Уа1 С1п Теи С1п С1и Зег С1у Рго С1у Теи Уа1 Туз Рго Зег С1у
1 5 10 15
ТНг Теи Зег Теи ТНг Суз ТНг Уа1 Зег С1у Азр Зег 11е Зег С1у Зег
20 25 30
Азп Тгр Тгр Азп Тгр Уа1 Агд С1п Рго Рго С1у Туз С1у Теи С1и Тгр
35 40 45
11е С1у С1и 11е Туг Туг Агд С1у ТНг ТНг Азп Туг Туз Зег Зег Теи
50 55 60
Туз С1у Агд Уа1 ТНг МеН Зег Уа1 Азр ТНг Зег Туз Азп С1п РНе Зег
- 114 023179
65 70 75 80
Беи Буз Беи ТНг Зег Уа1 ТНг А1а А1а Азр ТНг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд С1у С1у Агд Зег ТНг РНе С1у Рго Азр Туг Туг Туг Туг МеН
100 105 110
Азр Уа1 Тгр С1у Агд С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТНг
115 120 125
Буз С1у Рго Зег Уа1 РНе Рго Беи А1а Рго Зег Зег Буз Зег ТНг Зег
130 135 140
С1у С1у ТНг А1а А1а Беи С1у Суз Беи Уа1 Буз Азр Туг РНе Рго С1и
145 150 155 160
Рго Уа1 ТНг Уа1 Зег Тгр Азп Зег С1у А1а Беи ТНг Зег С1у Уа1 Нгз
165 170 175
ТНг РНе Рго А1а Уа1 Беи С1п Зег Зег С1у Беи Туг Зег Беи Зег Зег
180 185 190
Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго Зег Зег Зег Беи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз
195 200 205
Азп Уа1 Азп Нгз Буз Рго Зег Азп ТНг Буз Уа1 Азр Буз Буз Уа1 С1и
210 215 220
Рго Ьуз Зег Суз 225 <210> 10 <211> 11 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <220>
<223> зс5 УН СБК1 <400> 10
С1у Азр Зег 11е Зег С1у Зег Азп Тгр Тгр Азп
1 5 10
<210> 11
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Ното заргепз
- 115 <220>
<223> зс5 УН СБР2 <400> 11
С1и 11е Туг Туг Агд С1у ТАг ТАг Азп Туг Туз Зег Зег Теи Туз С1у 1 5 10 15 <210> 12 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <220>
<223> зс5 УН СБР3 <400> 12
С1у С1у Агд Зег ТАг РАе С1у Рго Азр Туг Туг Туг Туг МеЛ Азр Уа1 1 5 10 15 <210> 13 <211> 214 <212> БЕЛОК <213> Ното заргепз <220>
<223> зс5 Легкая цепь <400> 13
Азр 11е С1п МеЛ ТАг С1п Зег Рго Зег Зег Теи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТАг 11е ТАг Суз Агд А1а Зег С1п Азп 11е Туз Азп Туг
20 25 30
Теи Азп Тгр Туг С1п С1п Туз Рго С1у Туз Уа1 Рго Туз Теи Теи 11е
35 40 45
Туг А1а А1а Зег ТАг Теи С1п Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РАе Зег С1у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у ТАг Азр РАе ТАг Теи ТАг 11е Зег Зег Теи С1п Рго
- 116
65 70 75 80
С1и Азр РНе А1а ТНг Туг Бег Суз С1п С1п Бег Туг Азп Азп С1п Ъеи
85 90 95
ТНг РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз Агд ТНг Уа1 А1а А1а
100 105 110
Рго Бег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Бег Азр С1и С1п Ъеи Ъуз Бег С1у
115 120 125
ТНг А1а Бег Уа1 Уа1 Суз Ъеи Ъеи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а
130 135 140
Ъуз Уа1 С1п Тгр Ъуз Уа1 Азр Азп А1а Ъеи С1п Бег С1у Азп Бег С1п
145 150 155 160
С1и Бег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Бег Ъуз Азр Бег ТНг Туг Бег Ъеи Бег
165 170 175
Бег ТНг Ъеи ТНг Ъеи Бег Ъуз А1а Азр Туг С1и Ъуз Нтз Ъуз Уа1 Туг
180 185 190
А1а Суз С1и Уа1 ТНг Нтз С1п С1у Ъеи Бег Бег Рго Уа1 ТНг Ъуз Бег
195 200 205
РНе Азп Агд С1у С1и Суз
210 <210> 14 <211> 11 <212> БЕЛОК <213> Ното зартепз <220>
<223> зс5 УЪ ΟΌΚ1 <400> 14
Агд А1а Бег С1п Азп 11е Ъуз Азп Туг Ъеи Азп
1 5 10
<210> 15
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Ното зартепз
<220>
- 117 <223> зс5 Ά. ΟΌΗ2 <400> 15
А1а А1а Зег ТАг Ьеи С1п Зег
5 <210> 16 <211> 9 <212> БЕЛОК <213> Ното зараепз <220>
<223> зс5 УЪ ΟΌΗ3 <400> 16
С1п С1п Зег Туг Азп Азп С1п Ъеи ТАг 1 5 <210> 17 <211> 702 <212> ДНК <213> Ното зараепз <220>
<223> 58с5 Тяжелая цепь <400> 17
саддЛссадс ААдАдсадАс дддсссадда сАддАдаадс сААсасадас ссАддсссАс
ассЛдсааЛд АсАсАддАдс сАссаАсааА адАдаАааАА асАасАддас дАддаАссдА
садсдсссад дддддддссА ддадАддаАА ддссасаАсА сААасасАдд даасассАас
ЛасассссдЛ сасАсаадад ссдасАААсс аАдАсасАад адасаАсАса дадссааААс
ЛсссЛдаддс АдассАсАдА дасАдссдсд дасАсддссд АсАаАААсАд АдсддссАдс
- 118 023179
ддддсаЕаЕд ЕЕЕЕааЕаЕс ааасЕдЕддс ЕддЕЕсдасЕ ссЕддддсса дддаасссад
дЕсассдЕсЕ ссЕсадссЕс сассаадддс ссаЕсддЕсЕ ЕсссссЕддс асссЕссЕсс
аададсассЕ сЕдддддсас адсддсссЕд ддсЕдссЕдд ЕсааддасЕа сЕЕссссдаа
ссддЕдасдд ЕдЕсдЕддаа сЕсаддсдсс сЕдассадсд дсдЕдсасас сЕЕсссддсЕ
дЕссЕасадЕ ссЕсаддасЕ сЕасЕсссЕс адсадсдЕдд ЕдассдЕдсс сЕссадсадс
ЕЕдддсассс адассЕасаЕ сЕдсаасдЕд ааЕсасаадс ссадсаасас сааддЕддас
аадааадЕЕд адсссаааЕс ЕЕдЕддЕсдд ссаддссддс сд
<210> 18 <211> 645 <212> ДНК <213> Ното заргепз
<220> <223> 58с5 Легкая цепь
<400> 18 даааЕадЕда ЕдасдсадЕс ЕссаЕссЕсс сЕдЕсЕдсаЕ сЕаЕаддада сададЕсасс
аЕсасЕЕдсс аддсдадЕса ддасаЕЕадс ассЕаЕЕЕаа аЕЕддЕаЕса дсадааасса
дддсаадссс сЕаддсЕссЕ даЕсЕасдда дсдЕссааЕЕ Еддадасадд ддЕсссаЕса
аддЕЕсасЕд даадЕддаЕа Едддасадас ЕЕсЕсЕдЕса ссаЕсадсад ссЕдсадссЕ
даадаЕаЕЕд саасаЕаЕЕа сЕдЕсаасад ЕассааЕаЕс ЕсссдЕасас ЕЕЕЕдссссд
дддассаадд ЕсдадаЕсаа асдаасЕдЕд дсЕдсассаЕ сЕдЕсЕЕсаЕ сЕЕсссдсса
ЕсЕдаЕдадс адЕЕдаааЕс ЕддаасЕдсс ЕсЕдЕЕдЕдЕ дссЕдсЕдаа ЕаасЕЕсЕаЕ
сссадададд ссааадЕаса дЕддааддЕд даЕаасдссс ЕссааЕсддд ЕаасЕсссад
- 119 023179
дададНдНса сададсадда садсааддас адсассНаса дссНсадсад сасссНдасд
сНдадсааад садасНасда дааасасааа дНсНасдссН дсдаадНсас ссаНсадддс
сНдадсНсдс ссдНсасааа дадсННсаас аддддададН дсНаа
<210> 19 <211> 687 <212> ДНК <213> Ното зартепз
<220> <223> зс5 Тяжелая цепь
<400> 19 саддНдсадс НдсаддадНс дддсссадда сНддНдаадс сННсддддас ссНдНсссНс
асННдсасНд НсНсНддНда сНссаНсадс ддсНсНаасН ддНддааННд ддНссдссад
сссссаддда аддддсНдда дНддаННддд даааНсНаНН аНсдНдддас НассааННаН
аадНсдНссс НсаадддНсд адНсассаНд НсадННдаса сдНссаадаа ссадННсНсс
сНдаадсНда ссНсНдНдас сдссдсддас асддссдНаН аННаННдНдс дададддддд
аддНссассН ННддНссдда сНасНасНас НасаНддасд НсНддддсад адддассасд
дНсассдНсН ссНсадсдНс дассаааддН ссдНсНдННН НсссдсНддс НссдНсННсН
аааНсНассН сНддНддНас сдсНдсНсНд ддННдссНдд ННааадасНа сННсссддаа
ссддННассд НННсННддаа сНсНддНдсН сНдассНсНд дНдННсасас сННсссддсН
дННсНдсадН сННсНддНсН дНасНсНсНд НсННсНдННд ННассдННсс дНсННсННсН
сНдддНассс адассНасаН сНдсаасдНН аассасааас сдНсНаасас сааадННдас
аадааадННд аассдаааНс ННдссНд
- 120 023179 <210> 20 <211> 642 <212> ДНК <213> Ното заргепз <220>
<223> зс5 Легкая цепь
<400> 20
дасаНссада НдасссадНс НссаНссНсс сНдНсНдссН сНдНаддНда сададНсасс
аНсасННдсс дддсаадНса даасаННаад аасНаНННаа аННддНаНса асааааасса
дддааадНсс сдаадсНссН даНсНаНдсН дсаНссасНН НдсададНдд ддНсссаНсд
аддННсадНд дсадНддаНс Ндддасадас ННсасНсНса ссаНсадсад НсНдсаассН
даадаННННд саасННасНс сНдНсаасад адННасааНа ассадсНсас НННсддсддН
дддассаадд НддадаНсаа асдаасНдНд дсНдсассаН сНдНсННсаН сННсссдсса
НсНдаНдадс адННдаааНс НддаасНдсс НсНдННдНдН дссНдсНдаа НаасННсНаН
сссадададд ссааадНаса дНддааддНд даНаасдссс НссааНсддд НаасНсссад
дададНдНса сададсадда садсааддас адсассНаса дссНсадсад сасссНдасд
сНдадсааад садасНасда дааасасааа дНсНасдссН дсдаадНсас ссаНсадддс
сНдадсНсдс ссдНсасааа дадсННсаас аддддададН дс
<210> 21 <211> 1665 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220>
<223> НЗУ А2 Г белок
- 121 023179
<400> 21
дс/адсдд/а сса/дддсда дс/сс/са/с с/дааддсса асдсса/сас сасса/сс/д
ассдс/д/да сс//с/дс// сдссадсддс садааса/са ссдаддаа// с/ассададс
асс/дсадсд ссд/дадсаа дддс/асс/д адсдссс/дс ддассддс/д д/асассадс
д/да/сасса /сдадс/д/с сааса/сааа даааасаад/ дсаасддсас сдасдссааа
д/даадс/да /саадсадда ас/ддасаад /асаадаасд ссд/дассда дс/дсадс/д
с/да/дсада дсассссссс сассаасаас сдддссадаа дадаас/дсс ссдд//са/д
аас/асассс /даасаасдс саадаааасс аасд/дассс /дадсаадаа дсддаадсдд
сдд//сс/дд дс//сс/дс/ дддсд/дддс адсдсса//д ссадсддсд/ ддссд/д/сс
ааад/дс/дс асс/ддаадд сдаад/даас аада/саад/ ссдссс/дс/ д/ссассаас
ааддссд/дд /д/ссс/дад саасддсд/д адсд/дс/да ссадсаадд/ дс/дда/с/д
аадаас/аса /сдасаадса дс/дс/дссс а/сд/дааса адсададс/д садса/садс
ааса/сдада сад/да/сда д//ссадсад аадаасаасс ддс/дс/дда аа/сасссдд
дад//садсд /даасдс/дд сд/дассасс сссд/д/сса сс/аса/дс/ дассаас/сс
дадс/дс/с/ ссс/да/саа /даса/дссс а/сассаасд ассадааааа дс/да/дадс
аасаасд/дс ада/сд/дсд дсадсададс /ас/сса/са /дадса/са/ сааадаадад
д/дс/ддсс/ асд/дд/дса дс/дсссс/д /асддсд/да /сдасасссс с/дс/ддаад
с/дсасасса дссссс/д/д сассассаас ассааададд дсадсааса/ с/дсс/дасс
сддассдасс ддддс/дд/а с/дсдасаас дссддсадсд /д/са//с// сссасаадсс
дадаса/дса адд/дсадад саассддд/д //с/дсдаса сса/даасад сс/дассс/д
- 122 023179
сссадсдада НсаассНдНд саасдНддас аНсННсаасс ссаадНасда сНдсаадаНс
аНдассНсса адассдасдН дНссадсНсс дНдаНсассН сссНдддсдс саНсдНдНсс
НдсНасддса адассаадНд сассдссадс аасаадаасс ддддсаНсаН саадассННс
адсаасддсН дсдасНасдН дНссаасаад ддсаНддаса ссдНдНссдН дддсаасаса
сНдНасНасд НдааНаадса ддааддсаад адссНдНасд Ндаадддсда дсссаНсаНс
аасННсНасд асссссНддН дННссссадс дасдадННсд асдссадсаН садссаддНд
аасдадаада Нсаассадад ссНддссННс аНсадааада дсдасдадсН дсНдсасааН
дНдааНдссд дсаадНссас сассаассаа дсННасдНад аасааааасН саНсНсадаа
даддаНсНда аНадсдссдН сдассаНсаН саНсаНсаНс аННда
<210> 22 <211> 6 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ЫНе1 сайт рестрикции <400> 22 дсНадс <210> 23 <211> 6 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΗίηάΙΙΙ сайт рестрикции <400> 23
- 123 023179 аадсКК <210> 24 <211> 5521 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ροΌΝΑ 3.1/шус-Н1з(-) С вектор
<400> 24
дасддаКсдд дадаКсКссс даКссссКаК ддКдсасКсК садКасааКс КдсКсКдаКд
ссдсаКадКК аадссадКаК сКдсКсссКд сККдКдКдКК ддаддКсдсК дадКадКдсд
сдадсааааК ККаадсКаса асааддсаад дсККдассда сааККдсаКд аадааКсКдс
ККадддККад дсдККККдсд сКдсККсдсд аКдКасдддс садаКаКасд сдККдасаКК
даККаККдас КадККаККаа КадКааКсаа ККасддддКс аККадККсаК адсссаКаКа
КддадККссд сдККасаКаа сККасддКаа аКддсссдсс КддсКдассд сссаасдасс
сссдсссаКК дасдКсааКа аКдасдКаКд ККсссаКадК аасдссааКа дддасКККсс
аККдасдКса аКдддКддад КаКККасддК ааасКдссса сККддсадКа саКсаадКдК
аКсаКаКдсс аадКасдссс ссКаККдасд КсааКдасдд КаааКддссс дссКддсаКК
аКдсссадКа саКдассККа КдддасКККс сКасККддса дКасаКсКас дКаККадКса
КсдсКаККас саКддКдаКд сддККККддс адКасаКсаа КдддсдКдда КадсддКККд
асКсасдддд аКККссаадК сКссасссса ККдасдКсаа КдддадКККд ККККддсасс
ааааКсаасд ддасКККсса аааКдКсдКа асаасКссдс сссаККдасд саааКдддсд
дКаддсдКдК асддКдддад дКсКаКаКаа дсададсКсК сКддсКаасК ададаассса
- 124 023179
сЕдсЕЕасЕд дсЕЕаЕсдаа аЕЕааЕасда сЕсасЕаЕад ддадасссаа дсЕддсЕадс
дЕЕЕааасдд дсссЕсЕада сЕсдадсддс сдссасЕдЕд сЕддаЕаЕсЕ дсадааЕЕсс
ассасасЕдд асЕадЕддаЕ ссдадсЕсдд ЕассаадсЕЕ асдЕадааса аааасЕсаЕс
Есадаададд аЕсЕдааЕад сдссдЕсдас саЕсаЕсаЕс аЕсаЕсаЕЕд адЕЕЕааасд
дЕсЕссадсЕ ЕаадЕЕЕааа ссдсЕдаЕса дссЕсдасЕд ЕдссЕЕсЕад ЕЕдссадсса
ЕсЕдЕЕдЕЕЕ дссссЕсссс сдЕдссЕЕсс ЕЕдасссЕдд ааддЕдссас ЕсссасЕдЕс
сЕЕЕссЕааЕ ааааЕдадда ааЕЕдсаЕсд саЕЕдЕсЕда дЕаддЕдЕса ЕЕсЕаЕЕсЕд
дддддЕдддд Еддддсадда садсаадддд даддаЕЕддд аадасааЕад саддсаЕдсЕ
ддддаЕдсдд ЕдддсЕсЕаЕ ддсЕЕсЕдад дсддааадаа ссадсЕдддд сЕсЕаддддд
ЕаЕссссасд сдсссЕдЕад сддсдсаЕЕа адсдсддсдд дЕдЕддЕддЕ Еасдсдсадс
дЕдассдсЕа сасЕЕдссад сдсссЕадсд сссдсЕссЕЕ ЕсдсЕЕЕсЕЕ сссЕЕссЕЕЕ
сЕсдссасдЕ ЕсдссддсЕЕ ЕссссдЕсаа дсЕсЕаааЕс дддддсЕссс ЕЕЕадддЕЕс
сдаЕЕЕадЕд сЕЕЕасддса ссЕсдасссс аааааасЕЕд аЕЕадддЕда ЕддЕЕсасдЕ
адЕдддссаЕ сдсссЕдаЕа дасддЕЕЕЕЕ сдсссЕЕЕда сдЕЕддадЕс сасдЕЕсЕЕЕ
ааЕадЕддас ЕсЕЕдЕЕсса аасЕддааса асасЕсаасс сЕаЕсЕсддЕ сЕаЕЕсЕЕЕЕ
даЕЕЕаЕаад ддаЕЕЕЕдсс даЕЕЕсддсс ЕаЕЕддЕЕаа ааааЕдадсЕ даЕЕЕаасаа
аааЕЕЕаасд сдааЕЕааЕЕ сЕдЕддааЕд ЕдЕдЕсадЕЕ адддЕдЕдда аадЕссссад
дсЕссссадс аддсадаадЕ аЕдсааадса ЕдсаЕсЕсаа ЕЕадЕсадса ассаддЕдЕд
дааадЕсссс аддсЕсссса дсаддсадаа дЕаЕдсааад саЕдсаЕсЕс ааЕЕадЕсад
саассаЕадЕ сссдссссЕа асЕссдссса ЕсссдссссЕ аасЕссдссс адЕЕссдссс
- 125 023179
аННсНссдсс ссаНддсНда сНааНННННН ННаНННаНдс ададдссдад дссдссНсНд
ссНсНдадсН аННссадаад НадНдаддад дсННННННдд аддссНаддс ННННдсаааа
адсНсссддд адсННдНаНа НссаННННсд даНсНдаНса ададасадда НдаддаНсдН
ННсдсаНдаН НдаасаадаН ддаННдсасд саддННсНсс ддссдсННдд дНддададдс
НаННсддсНа НдасНдддса саасадасаа НсддсНдсНс НдаНдссдсс дНдННссддс
НдНсадсдса ддддсдсссд дННсНННННд Нсаадассда ссНдНссддН дсссНдааНд
аасНдсадда сдаддсадсд сддсНаНсдН ддсНддссас дасдддсдНН ссННдсдсад
сНдНдсНсда сдННдНсасН даадсдддаа дддасНддсН дсНаННдддс даадНдссдд
ддсаддаНсН ссНдНсаНсН сассННдсНс сНдссдадаа адНаНссаНс аНддсНдаНд
сааНдсддсд дсНдсаНасд сННдаНссдд сНассНдссс аННсдассас саадсдааас
аНсдсаНсда дсдадсасдН асНсддаНдд аадссддНсН НдНсдаНсад даНдаНсНдд
асдаададса НсаддддсНс дсдссадссд аасНдННсдс саддсНсаад дсдсдсаНдс
ссдасддсда ддаНсНсдНс дНдасссаНд дсдаНдссНд сННдссдааН аНсаНддНдд
ааааНддссд сННННсНдда ННсаНсдасН дНддссддсН дддНдНддсд дассдсНаНс
аддасаНадс дННддсНасс сдНдаНаННд сНдаададсН Нддсддсдаа НдддсНдасс
дсННссНсдН дсНННасддН аНсдссдсНс ссдаННсдса дсдсаНсдсс ННсНаНсдсс
ННсННдасда дННсННсНда дсдддасНсН ддддННсдаа аНдассдасс аадсдасдсс
саассНдсса НсасдадаНН НсдаННссас сдссдссННс НаНдаааддН НдддсННсдд
ааНсдННННс сдддасдссд дсНддаНдаН ссНссадсдс ддддаНсНса НдсНддадНН
сННсдсссас сссаасННдН ННаННдсадс ННаНааНддН НасаааНааа дсааНадсаН
- 126 023179
сасаааНННс асаааНааад саНННННННс асНдсаННсН адННдНддНН НдНссааасН
саНсааНдНа НсННаНсаНд НсНдНаНасс дНсдассНсН адсНададсН НддсдНааНс
аНддНсаНад сНдНННссНд НдНдаааННд ННаНссдсНс асааННссас асаасаНасд
адссддаадс аНааадНдНа аадссНдддд НдссНааНда дНдадсНаас НсасаННааН
НдсдННдсдс НсасНдсссд сНННссадНс дддааассНд НсдНдссадс НдсаННааНд
ааНсддссаа сдсдсдддда даддсддННН дсдНаННддд сдсНсННссд сННссНсдсН
сасНдасНсд сНдсдсНсдд НсдННсддсН дсддсдадсд дНаНсадсНс асНсаааддс
ддНааНасдд ННаНссасад ааНсадддда Наасдсадда аадаасаНдН дадсаааадд
ссадсаааад дссаддаасс дНаааааддс сдсдННдсНд дсдНННННсс аНаддсНссд
ссссссНдас дадсаНсаса ааааНсдасд сНсаадНсад аддНддсдаа асссдасадд
асНаНааада НассаддсдН ННсссссНдд аадсНсссНс дНдсдсНсНс сНдННссдас
ссНдссдсНН ассддаНасс НдНссдссНН НсНсссННсд ддаадсдНдд сдсНННсНса
НадсНсасдс НдНаддНаНс НсадННсддН дНаддНсдНН сдсНссаадс НдддсНдНдН
дсасдаассс сссдННсадс ссдассдсНд сдссННаНсс ддНаасНаНс дНсННдадНс
саасссддНа адасасдасН НаНсдссасН ддсадсадсс асНддНааса ддаННадсад
адсдаддНаН дНаддсддНд сНасададНН сННдаадНдд НддссНаасН асддсНасас
Надаадааса дНаНННддНа НсНдсдсНсН дсНдаадсса дННассННсд дааааададН
НддНадсНсН НдаНссддса аасааассас сдсНддНадс ддНддННННН ННдНННдсаа
дсадсадаНН асдсдсадаа аааааддаНс НсаадаадаН ссНННдаНсН НННсНасддд
дНсНдасдсН садНддаасд аааасНсасд ННаадддаНН ННддНсаНда даННаНсааа
- 127 023179
ааддаНсННс ассНадаНсс ННННаааННа ааааНдаадН НННаааНсаа НсНааадНаН
аНаНдадНаа асННддНсНд асадННасса аНдсННааНс адНдаддсас сНаНсНсадс
даНсНдНсНа НННсдННсаН ссаНадННдс сНдасНсссс дНсдНдНада НаасНасдаН
асдддадддс ННассаНсНд дссссадНдс НдсааНдаНа ссдсдадасс сасдсНсасс
ддсНссадаН ННаНсадсаа Нааассадсс адссддаадд дссдадсдса даадНддНсс
НдсаасНННа НссдссНсса НссадНсНаН НааННдННдс сдддаадсНа дадНаадНад
ННсдссадНН ааНадНННдс дсаасдННдН НдссаННдсН асаддсаНсд НддНдНсасд
сНсдНсдННН ддНаНддсНН саННсадсНс сддННсссаа сдаНсааддс дадННасаНд
аНсссссаНд ННдНдсаааа аадсддННад сНссННсддН ссНссдаНсд ННдНсадаад
НаадННддсс дсадНдННаН сасНсаНддН НаНддсадса сНдсаНааНН сНсННасНдН
саНдссаНсс дНаадаНдсН НННсНдНдас НддНдадНас НсаассаадН саННсНдада
аНадНдНаНд сддсдассда дННдсНсННд сссддсдНса аНасдддаНа аНассдсдсс
асаНадсада асНННаааад НдсНсаНсаН НддаааасдН НсННсддддс даааасНсНс
ааддаНсННа ссдсНдННда даНссадННс даНдНаассс асНсдНдсас ссаасНдаНс
ННсадсаНсН НННасНННса ссадсдНННс НдддНдадса аааасаддаа ддсааааНдс
сдсаааааад ддааНааддд сдасасддаа аНдННдааНа сНсаНасНсН НссНННННса
аНаННаННда адсаНННаНс адддННаННд НсНсаНдадс ддаНасаНаН ННдааНдНаН
ННадаааааН ааасаааНад дддННссдсд сасаНННссс сдаааадНдс сассНдасдН
- 128 023179 <210> 25 <211> 550 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> КЗУ А2 Г белок <400> 25
МеА С1у С1и Ъеи Ъеи 11е Ъеи Ъуз А1а Азп А1а 11е ТАг ТАг 11е Ъеи
1 5 10 15
ТАг А1а Уа1 ТАг РАе Суз РАе А1а Зег С1у С1п Азп 11е ТАг С1и С1и
20 25 30
РАе Туг С1п Зег ТАг Суз Зег А1а Уа1 Зег Ъуз С1у Туг Ъеи Зег А1а
35 40 45
Ъеи Агд ТАг С1у Тгр Туг ТАг Зег Уа1 11е ТАг 11е С1и Ъеи Зег Азп
50 55 60
11е Ъуз С1и Азп Ъуз Суз Азп С1у ТАг Азр А1а Ъуз Уа1 Ъуз Ъеи 11е
65 70 75 80
Ъуз С1п С1и Ъеи Азр Ъуз Туг Ъуз Азп А1а Уа1 ТАг С1и Ъеи С1п Ъеи
85 90 95
Ъеи МеА С1п Зег ТАг Рго Рго ТАг Азп Азп Агд А1а Агд Агд С1и Ъеи
100 105 110
Рго Агд РАе МеА Азп Туг ТАг Ъеи Азп Азп А1а Ъуз Ъуз ТАг Азп Уа1
115 120 125
ТАг Ъеи Зег Ъуз Ъуз Агд Ъуз Агд Агд РАе Ъеи С1у РАе Ъеи Ъеи С1у
130 135 140
Уа1 С1у Зег А1а 11е А1а Зег С1у Уа1 А1а Уа1 Зег Ъуз Уа1 Ъеи Нтз
145 150 155 160
Ъеи С1и С1у С1и Уа1 Азп Ъуз 11е Ъуз Зег А1а Ъеи Ъеи Зег ТАг Азп
165 170 175
Ъуз А1а Уа1 Уа1 Зег Ъеи Зег Азп С1у Уа1 Зег Уа1 Ъеи ТАг Зег Ъуз
180 185 190
Уа1 Ъеи Азр Ъеи Ъуз Азп Туг 11е Азр Ъуз С1п Ъеи Ъеи Рго 11е Уа1
195 200 205
Азп Ъуз С1п Зег Суз Зег 11е Зег Азп 11е С1и ТАг Уа1 11е С1и РАе
210 215 220
С1п С1п Ъуз Азп Азп Агд Ъеи Ъеи С1и 11е ТАг Агд С1и РАе Зег Уа1
225 230 235 240
- 129 023179
Азп А1а С1у Уа1 ТАг 245 ТАг Рго Уа1 Зег ТАг 250 Туг МеЛ Теи ТАг Азп 255 Зег
С1и Теи Теи Зег Теи 11е Азп Азр МеЛ Рго 11е ТАг Азп Азр С1п Туз
260 265 270
Туз Теи МеЛ Зег Азп Азп Уа1 С1п 11е Уа1 Агд С1п С1п Зег Туг Зег
275 280 285
11е МеЛ Зег 11е 11е Туз С1и С1и Уа1 Теи А1а Туг Уа1 Уа1 С1п Теи
290 295 300
Рго Теи Туг С1у Уа1 11е Азр ТАг Рго Суз Тгр Туз Теи Нгз ТАг Зег
305 310 315 320
Рго Теи Суз ТАг ТАг Азп ТАг Туз С1и С1у Зег Азп 11е Суз Теи ТАг
325 330 335
Агд ТАг Азр Агд С1у Тгр Туг Суз Азр Азп А1а С1у Зег Уа1 Зег РАе
340 345 350
РАе Рго С1п А1а С1и ТАг Суз Туз Уа1 С1п Зег Азп Агд Уа1 РАе Суз
355 360 365
Азр ТАг МеЛ Азп Зег Теи ТАг Теи Рго Зег С1и 11е Азп Теи Суз Азп
370 375 380
Уа1 Азр 11е РАе Азп Рго Туз Туг Азр Суз Туз 11е МеЛ ТАг Зег Туз
385 390 395 400
ТАг Азр Уа1 Зег Зег Зег Уа1 11е ТАг Зег Теи С1у А1а 11е Уа1 Зег
405 410 415
Суз Туг С1у Туз ТАг Туз Суз ТАг А1а Зег Азп Туз Азп Агд С1у 11е
420 425 430
11е Туз ТАг РАе Зег Азп С1у Суз Азр Туг Уа1 Зег Азп Туз С1у МеЛ
435 440 445
Азр ТАг Уа1 Зег Уа1 С1у Азп ТАг Теи Туг Туг Уа1 Азп Туз С1п С1и
450 455 460
С1у Туз Зег Теи Туг Уа1 Туз С1у С1и Рго 11е 11е Азп РАе Туг Азр
465 470 475 480
Рго Теи Уа1 РАе Рго Зег Азр С1и РАе Азр А1а Зег 11е Зег С1п Уа1
485 490 495
Азп С1и Туз 11е Азп С1п Зег Теи А1а РАе 11е Агд Туз Зег Азр С1и
500 505 510
Теи Теи Нгз Азп Уа1 Азп А1а С1у Туз Зег ТАг ТАг Азп С1п А1а Туг
515 520 525
Уа1 С1и С1п Туз Теи 11е Зег С1и С1и Азр Теи Азп Зег А1а Уа1 Азр
530 535 540
Нгз Нгз Нгз Нгз Нгз Нгз
545 550
- 130 <210> 26 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН1а прямой праймер <400> 26 ддаНссНсНН сННддНддса дсад <210> 27 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН1Ь прямой праймер <400> 27 дсаНссНННН сННддНддса дсас <210> 28 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН1с прямой праймер <400> 28 дддНсННсНд сННдсНддсН дНад <210> 29 <211> 24
- 131 023179 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΗ1ά прямой праймер <400> 29 дда/сс/с// с//дд/ддда дсад <210> 30 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> VΗ2а прямой праймер <400> 30 с/дасса/сс с//са/ддс/ с//д <210> 31 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΗ2Β прямой праймер <400> 31 с/дассассс с//сс/ддд/ с//д <210> 32 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
- 132 023179 <223> ¥Н3а прямой праймер <400> 32 дсЕаЕЕЕЕаг ааддЕдЕсса дЕдЕ <210> 33 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН3Ь прямой праймер <400> 33 дсЕсЕЕЕЕаа даддЕдЕсса дЕдЕ <210> 34 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН3с прямой праймер <400> 34 дсЕаЕЕЕааа ааддЕдЕсса аЕдЕ <210> 35 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН4а прямой праймер <400> 35
- 133 023179 сНддНддсад сНсссадаНд ддНс <210> 36 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН5а прямой праймер <400> 36 сНссНддсНд ННсНссаадд адНс <210> 37 <211> 28 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН-д 1-КЕУ обратный праймер <400> 37 асаадаНННд ддсНсаасНН НсННдНсс <210> 38 <211> 28 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН-д 2-КЕУ обратный праймер <400> 38
НННдсдсНса асНдНсННдН ссассННд <210> 39
- 134 023179
<211> 28
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УН-д 3-КЕУ обратный праймер
<400> 39
НННдадсНса асНсНсННдН ссассННд
<210> 40
<211> 28
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УН-д 4-КЕУ обратный праймер
<400> 40
аНаНННддас НсаасНсНсН НдНссасс
<210> 41
<211> 13
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> 5ίί! сайт рестрикции
<220>
<221> тгзс НеаНиге
<222> (5)...(9)
<223> N = а ог д ог с ог Н
<400> 41
ддсспппппд дсс <210> 42
- 135 023179 <211> 48 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> рСа130 УН1а прямой праймер <400> 42 ддсНННдсНа ссдНадсдса ддсддссдса саддНксадс НддНдсад 48 <210> 43 <211> 48 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> рСа130 УН1Ь прямой праймер <400> 43 ддсНННдсНа ссдНадсдса ддсддссдса саддНссадс ННдНдсад 48 <210> 44 <211> 48 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> рСа130 УН1с прямой праймер <400> 44 ддсНННдсНа ссдНадсдса ддсддссдса заддНссадс НддНасад 48 <210> 45 <211> 48 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
- 136 023179 <220>
<223> рСа130 νΗ1ά прямой праймер <400> 45 ддсКККдсКа ссдКадсдса ддсддссдса сагаКдсадс КддКдсад 48 <210> 46 <211> 48 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> рСа130 VΗ2а прямой праймер <400> 46 ддсКККдсКа ссдКадсдса ддсддссдса садаКсассК Кдааддад 48 <210> 47 <211> 48 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> рСа130 VΗ3а прямой праймер <400> 47 ддсКККдсКа ссдКадсдса ддсддссдса дагдКдсадс КддКддад 48 <210> 48 <211> 48 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> рСа130 VΗ4а прямой праймер <400> 48
- 137 023179 ддсНННдсНа ссдНадсдса ддсддссдса садзНдсадс 48 <210> 49 <211> 48 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> рСа130 УН4Ь прямой праймер <400> 49 ддсНННдсНа ссдНадсдса ддсддссдса саддНдсадс 48 <210> 50 <211> 48 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> рСа130 УН5а прямой праймер <400> 50 ддсНННдсНа ссдНадсдса ддсддссдса дагдНдсадс 48 <210> 51 <211> 48 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> рСа130 УН6 прямой праймер <400> 51 ддсНННдсНа ссдНадсдса ддсддссдса саддНасадс 48
Ндсаддад
Насадсад
НддНдсад
Ндсадсад <210> 52
- 138 023179 <211> 48 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> рСа130 νΗ7 прямой праймер <400> 52 ддс///дс/а ссд/адсдса ддсддссдса садд/зсадс /дд/дсаа 48 <210> 53 <211> 42 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΗΙΙ-91-Κθν обратный праймер <400> 53 /дсддссддс с/ддссдасс асаада///д ддс/саас// /с 42 <210> 54 <211> 42 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΗΙΙ^2-Κβν обратный праймер <400> 54 /дсддссддс с/ддссдасс ///дсдс/са ас/д/с//д/ сс 42 <210> 55 <211> 42 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
- 139 023179 <220>
<223> VНII-д3-Κеν обратный праймер <400> 55
Едсддссддс сЕддссдасс ЕЕЕдадсЕса асЕсЕсЕЕдЕ сс 42 <210> 56 <211> 42 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> VНII-д4-Κеν обратный праймер <400> 56
Едсддссддс сЕддссдасс аЕаЕЕЕддас ЕсаасЕсЕсЕ Ед 42 <210> 57 <211> 45 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νκ 1а прямой праймер <400> 57 ааддсссадс сддссаЕддс сдссддЕдас аЕссадаЕда сссад 45 <210> 58 <211> 45 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νκ 1Ь прямой праймер <400> 58
- 140 023179 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдас аНссадННда 45 <210> 59 <211> 45 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УК 1с прямой праймер <400> 59 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдсс аНссддННда 45 <210> 60 <211> 45 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УК 2а прямой праймер <400> 60 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдаН аННдНдаНда 45 <210> 61 <211> 45 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УК 3а прямой праймер <400> 61 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдаа аННдНдННда 45 сссад сссад сусад сдсад <210> 62
- 141 023179 <211> 45 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УК 3Ь прямой праймер <400> 62 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдаа аННдНдННда 45 <210> 63 <211> 45 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УК 4а прямой праймер <400> 63 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдаа аНадНдаНда 45 <210> 64 <211> 45 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УК 4а прямой праймер <400> 64 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдас аНсдНдаНда 45 сасад сдсад сссад <210> 65 <211> 45 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
- 142 023179 <220>
<223> УК 5а прямой праймер <400> 65 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдаа асдасасНса сдсад 45 <210> 66 <211> 45 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УК 6а прямой праймер <400> 66 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдаа аННдНдсНда сНсад 45 <210> 67 <211> 45 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УК 6Ь прямой праймер <400> 67 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдаН дННдНдаНда сасад 45 <210> 68 <211> 44 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> рСАЪСК(С)Ъ обратный праймер <400> 68
- 143 023179 сНссННаННа аННааННадс асНсНссссН дННдаадсНс 44 <210> 69 <211> 50 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ1-Р прямой праймер <400> 69 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдНН садНсНдНдс 50 <210> 70 <211> 50 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ2-Р прямой праймер <400> 70 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдНН садНсНдссс 50 <210> 71 <211> 50 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ3А-Р прямой праймер <400> 71 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдНН НссНаНдадс 50
НННд
Ндасксадсс
НдасНсадсс
Ндасмсадсу <210> 72
- 144 023179 <211> 51 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ3В-Г прямой праймер <400> 72 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдНН НсННсНдадс 51 <210> 73 <211> 50 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ3С-Г прямой праймер <400> 73 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдНН НссНаНдмдс <210> 74 <211> 51 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ4А-Г прямой праймер <400> 74 ааддсссадс сддссаНддс сдссддНдНН сНдссНдНдс
НдасНсадда с
НдасНсадсс
НдасНсадсс с <210> 75 <211> 51 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
- 145 023179 <220>
<223> νΣ4Β-Ρ прямой праймер <400> 75 ааддсссадс сддссаКддс сдссддКдКК садсуКдКдс 51 <210> 76 <211> 51 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ5/9-Ρ прямой праймер <400> 76 ааддсссадс сддссаКддс сдссддКдКК садзсКдКдс 51 <210> 77 <211> 51 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ6-Ρ прямой праймер <400> 77 ааддсссадс сддссаКддс сдссддКдКК ааККККаКдс 51
КдасКсааКс г
КдасКсадсс г
КдасКсадсс с <210> 78 <211> 51 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ7/8-Ρ прямой праймер <400> 78
- 146 023179 ааддсссадс сддссаЕддс сдссддЕдЕЕ садгсЕдЕдд ЕдасЕсадда д 51 <210> 79 <211> 51 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ10-Ρ прямой праймер <400> 79 ааддсссадс сддссаЕддс сдссддЕдЕЕ саддсадддс ЕдасЕсадсс а 51 <210> 80 <211> 43 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> рСАЪСЪ(Т)-К обратный праймер <400> 80 сЕссЕЕаЕЕа аЕЕааЕЕаЕд адсаЕЕсЕду акдддстауЕ дЕс 43 <210> 81 <211> 4765 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 2д12/рСа1 VесЕо^ <400> 81
дЕддсасЕЕЕ ЕсддддаааЕ дЕдсдсддаа ссссЕаЕЕЕд ЕЕЕаЕЕЕЕЕс ЕаааЕасаЕЕ
60
саааЕаЕдЕа ЕссдсЕсаЕд адасааЕаас ссЕдаЕаааЕ дсЕЕсааЕаа ЕаЕЕдааааа
120
- 147 023179
ддаадад/а/ дад/а//саа са///ссд/д /сдссс//а/ /ссс////// дсддса////
дсс//сс/д/ ////дс/сас ссадааасдс /дд/дааад/ аааада/дс/ даада/сад/
/ддд/дсасд ад/ддд//ас а/сдаас/дд а/с/саасад сдд/аада/с с//дадад//
//сдссссда адаасд//// ссаа/да/да дсас////аа ад//с/дс/а /д/ддсдсдд
/а//а/сссд /а//дасдсс дддсаададс аас/сдд/сд ссдса/асас /а//с/сада
а/дас//дд/ /дад/ас/са ссад/сасад аааадса/с/ /асдда/ддс а/дасад/аа
дадаа//а/д сад/дс/дсс а/аасса/да д/да/аасас /дсддссаас //ас//с/да
саасда/сдд аддассдаад дадс/аассд с//////дса сааса/дддд да/са/д/аа
с/сдсс//да /сд//дддаа ссддадс/да а/даадсса/ ассааасдас дадсд/даса
ссасда/дсс /д/адсаа/д дсаасаасд/ /дсдсааас/ а//аас/ддс даас/ас//а
с/с/адс//с ссддсаасаа //аа/адас/ дда/ддаддс дда/ааад// дсаддассас
//с/дсдс/с ддссс//ссд дс/ддс/дд/ //а//дс/да /ааа/с/дда дссдд/дадс
д/ддд/с/сд сдд/а/са// дсадсас/дд ддссада/дд /аадссс/сс сд/а/сд/ад
//а/с/асас дасддддад/ саддсаас/а /дда/даасд ааа/адасад а/сдс/дада
/адд/дсс/с ас/да//аад са//дд/аас /д/садасса ад///ас/са /а/а/ас///
ада//да/// аааас//са/ ////аа///а ааадда/с/а дд/даада/с с/////да/а
а/с/са/дас саааа/ссс/ /аасд/дад/ ///сд//сса с/дадсд/са дассссд/ад
аааада/саа адда/с//с/ /дада/сс// /////с/дсд сд/аа/с/дс /дс//дсааа
сааааааасс ассдс/асса дсдд/дд/// д///дссдда /саададс/а ссаас/с///
//ссдаадд/ аас/ддс//с адсададсдс ада/ассааа /ас/д/сс// с/ад/д/адс
- 148 023179
сдНадННадд ссассасННс аадаасНсНд Надсассдсс НасаНассНс дсНсНдсНаа
НссНдННасс адНддсНдсН дссадНддсд аНаадНсдНд НсННассддд ННддасНсаа
дасдаНадНН ассддаНаад дсдсадсддН сдддсНдаас ддддддННсд Ндсасасадс
ссадсННдда дсдаасдасс Насассдаас НдадаНассН асадсдНдад сНаНдадааа
дсдссасдсН Нсссдааддд адаааддсдд асаддНаНсс ддНаадсддс адддНсддаа
саддададсд сасдадддад сННссадддд дааасдссНд дНаНсНННаН адНссНдНсд
ддНННсдсса ссНсНдасНН дадсдНсдаН ННННдНдаНд сНсдНсаддд дддсддадсс
НаНддааааа сдссадсаас дсддссНННН НасддННссН ддссННННдс НддссННННд
сНсасаНдНН сНННссНдсд ННаНссссНд аННсНдНдда НаассдНаНН ассдссНННд
адНдадсНда НассдсНсдс сдсадссдаа сдассдадсд садсдадНса дНдадсдадд
аадсддаада дсдсссааНа сдсааассдс сНсНссссдс дсдННддссд аННсаННааН
дсадсНддса сдасаддННН сссдасНдда аадсдддсад Ндадсдсаас дсааННааНд
НдадННадсН сасНсаННад дсассссадд сНННасасНН НаНдсННссд дсНсдНаНдН
НдНдНддааН НдНдадсдда НаасааННда аННааддадд аНаНааННаН даааНассНд
сНдссдассд садссдсНдд НсНдсНдсНд сНсдсддссс адссддссаН ддссдссддН
дННдННаНда сссадНсНсс дНсНасссНд НсНдсННсНд ННддНдасас саНсассаНс
ассНдссдНд сННсНсадНс НаНсдааасс НддсНддсНН ддНассадса дааассдддН
ааадсНссда аасНдсНдаН сНасааддсН НсНасссНда ааассддНдН НссдНсНсдН
ННсНсНддНН сНддННсНдд НассдадННс асссНдасса НсНсНддНсН дсадННсдас
дасННсдсНа ссНассасНд ссадсасНас дсНддННасН сНдсНассНН сддНсадддН
- 149 023179
асссдНдННд аааНсааасд НассдННдсН дсНссдНсНд ННННсаНсНН сссдссдНсН
дасдаасадс НдаааНсНдд НассдсННсН дННдНННдсс НдсНдаасаа сННсНасссд
сдНдаадсНа аадННсадНд дааадННдас аасдсНсНдс адНсНддНаа сНсНсаддаа
НсНдННассд аасаддасНс НааадасНсН ассНасНсНс НдНсННсНас ссНдасссНд
НсНааадсНд асНасдаааа дсасааадНН НасдсННдсд аадННассса ссадддНсНд
НсННсНссдд ННассаааНс НННсаассдН ддНдааНдсН ааННааННаа НааддаддаН
аНааННаНда аааадасадс НаНсдсдаНН дсадНддсас НддсНддННН сдсНассдНа
дсссаддсдд ссдсадаадН НсадсНддНН дааНсНддНд дНддНсНддН НааадсНддН
ддННсНсНда НссНдНсННд сддНдНННсН аасННссдНа НсНсНдсНса сассаНдаас
НдддННсдНс дНдННссддд НддНддНсНд дааНдддННд сННсНаНсНс НассНсННсН
ассНассдНд асНасдсНда сдсНдННааа ддНсдНННса ссдНННсНсд НдасдассНд
даадасННсд НННассНдса даНдсаНааа аНдсдНдННд аадасассдс НаНсНасНас
НдсдсНсдНа ааддННсНда ссдНсНдНсН дасаасдасс сдННсдасдс ННддддНссд
ддНассдННд ННассдНННс НссддсдНсд ассаааддНс сдНсНдНННН сссдсНддсН
ссдНсННсНа ааНсНассНс НддНддНасс дсНдсНсНдд дННдссНддН НааадасНас
ННсссддаас сддННассдН ННсННддаас НсНддНдсНс НдассНсНдд НдННсасасс
ННсссддсНд ННсНдсадНс ННсНддНсНд НасНсНсНдН сННсНдННдН НассдННссд
НсННсННсНс НдддНассса дассНасаНс НдсаасдННа ассасааасс дНсНаасасс
ааадННдаса адааадННда ассдаааНсН НдссНдсдаН сдсддссадд ссддссдсас
саНсассаНс ассаНддсдс аНасссдНас дасдННссдд асНасдсННс НасНадННад
- 150 023179
аадддНддНд дсНсНдаддд НддсддННсН дадддНддсд дсНсНдаддд аддсддННсс
ддНддНддсН сНддННссдд НдаННННдаН НаНдаааада Нддсааасдс НааНаадддд
дсНаНдассд ааааНдссда Ндаааасдсд сНасадНсНд асдсНааадд сааасННдаН
НсНдНсдсНа сНдаННасдд НдсНдсНаНс даНддНННса ННддНдасдН ННссддссНН
дсНааНддНа аНддНдсНас НддНдаНННН дсНддсНсНа аННсссаааН ддсНсаадНс
ддНдасддНд аНааННсасс НННааНдааН ааНННссдНс ааНаНННасс ННсссНсссН
сааНсддННд ааНдНсдссс ННННдНсННН ддсдсНддНа аассаНаНда аННННсНаНН
даННдНдаса аааНааасНН аННссдНддН дНсНННдсдН ННсННННаНа НдННдссасс
НННаНдНаНд НаННННсНас дНННдсНаас аНасНдсдНа аНааддадНс ННаадсНадс
НаасдаНсдс ссННсссаас адННдсдсад ссНдааНддс дааНдддасд сдсссНдНад
сддсдсаННа адсдсддсдд дНдНддНддН Насдсдсадс дНдассдсНа сасННдссад
сдсссНадсд сссдсНссНН НсдсНННсНН сссННссННН сНсдссасдН НсдссддсНН
НссссдНсаа дсНсНаааНс дддддсНссс НННадддННс сдаНННадНд сНННасддса
ссНсдасссс аааааасННд аННадддНда НддННсасдН адНдддссаН сдсссНдаНа
дасддННННН сдсссНННда сдННддадНс сасдННсННН ааНадНддас НсННдННсса
аасНддааса асасНсаасс сНаНсНсддН сНаННсНННН даНННаНаад ддаННННдсс
даНННсддсс НаННддННаа ааааНдадсН даНННаасаа аааНННаасд сдааННННаа
сааааНаННа асдсННасаа НННад
<210> 82 <211> 40 <212> ДНК
- 151 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> РаЬЛинкерСК-Ρνά <400> 82 дадсННсаас аддддададН дсНааННааН НааНааддад 40 <210> 83 <211> 42 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> РаЬЛинкер-Κеν <400> 83
Ндсддссдсс НдсдсНасдд Надсааадсс адссадНдсс ас 42 <210> 84 <211> 22 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 2ίί прямой праймер <400> 84
Нсдсддссса дссддссаНд дс <210> 85 <211> 18 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 2ίί обратный праймер
- 152 023179 <400> 85
Ндсддссддс сНддссда <210> 86 <211> 4779 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 4Е10 рСАЪ вектор <400> 86
дНддсасННН НсддддаааН дНдсдсддаа ссссНаНННд НННаНННННс НаааНасаНН
саааНаНдНа НссдсНсаНд адасааНаас ссНдаНаааН дсННсааНаа НаННдааааа
ддаададНаН дадНаННсаа саНННссдНд НсдсссННаН НсссНННННН дсддсаНННН
дссННссНдН ННННдсНсас ссадааасдс НддНдааадН аааадаНдсН даадаНсадН
НдддНдсасд адНдддННас аНсдаасНдд аНсНсаасад сддНаадаНс сННдададНН
ННсдссссда адаасдНННН ссааНдаНда дсасННННаа адННсНдсНа НдНддсдсдд
НаННаНсссд НаННдасдсс дддсаададс аасНсддНсд ссдсаНасас НаННсНсада
аНдасННддН НдадНасНса ссадНсасад аааадсаНсН НасддаНддс аНдасадНаа
дадааННаНд садНдсНдсс аНаассаНда дНдаНаасас Ндсддссаас ННасННсНда
саасдаНсдд аддассдаад дадсНаассд сННННННдса саасаНдддд даНсаНдНаа
сНсдссННда НсдННдддаа ссддадсНда аНдаадссаН ассааасдас дадсдНдаса
ссасдаНдсс НдНадсааНд дсаасаасдН НдсдсааасН аННаасНддс даасНасННа
сНсНадсННс ссддсаасаа ННааНадасН ддаНддаддс ддаНааадНН дсаддассас
- 153 023179
ННсНдсдсНс ддсссННссд дсНддсНддН ННаННдсНда НаааНсНдда дссддНдадс
днддднснсд сддНаНсаНН дсадсасНдд ддссадаНдд НаадсссНсс сдНаНсдНад
ННаНсНасас дасддддадН саддсаасНа НддаНдаасд аааНадасад аНсдсНдада
НаддНдссНс асНдаННаад саННддНаас НдНсадасса адНННасНса НаНаНасННН
адаННдаННН аааасННсаН ННННааНННа аааддаНсНа ддНдаадаНс сНННННдаНа
аНсНсаНдас сааааНсссН НаасдНдадН НННсдННсса сНдадсдНса дассссдНад
аааадаНсаа аддаНсННсН НдадаНссНН НННННсНдсд сдНааНсНдс НдсННдсааа
сааааааасс ассдсНасса дсддНддННН дНННдссдда НсаададсНа ссаасНсННН
ННссдааддН аасНддсННс адсададсдс адаНассааа НасНдНссНН сНадНдНадс
сдНадННадд ссассасННс аадаасНсНд Надсассдсс НасаНассНс дсНсНдсНаа
НссНдННасс адНддсНдсН дссадНддсд аНаадНсдНд НсННассддд ННддасНсаа
дасдаНадНН ассддаНаад дсдсадсддН сдддсНдаас ддддддннсд Ндсасасадс
ссадсННдда дсдаасдасс Насассдаас НдадаНассН асадсдНдад сНаНдадааа
дсдссасдсН Нсссдааддд адаааддсдд асаддНаНсс ддНаадсддс адддНсддаа
саддададсд сасдадддад сННссадддд дааасдссНд дНаНсНННаН адНссНдНсд
ддНННсдсса ссНсНдасНН дадсдНсдаН ННННдНдаНд сНсдНсаддд дддсддадсс
НаНддааааа сдссадсаас дсддссНННН НасддННссН ддссННННдс НддссННННд
сНсасаНдНН сНННссНдсд ННаНссссНд аННсНдНдда НаассдНаНН ассдссНННд
адНдадсНда НассдсНсдс сдсадссдаа сдассдадсд садсдадНса дНдадсдадд
аадсддаада дсдсссааНа сдсааассдс сНсНссссдс дсдННддссд аННсаННааН
- 154 023179
дсадсКддса сдасаддККК сссдасКдда аадсдддсад Кдадсдсаас дсааККааКд
КдадККадсК сасКсаККад дсассссадд сКККасасКК КаКдсККссд дсКсдКаКдК
КдКдКддааК КдКдадсдда КаасааККда аККааддадд аКаКааККаК даааКассКд
сКдссдассд садссдсКдд КсКдсКдсКд сКсдсддссс адссддссаК ддссдссддК
даааККдКсК Кдасдсааад сссддддасс садКсдсКдК ссссдддада дсдсдсдасс
сКдКсаКдКс дКдсдадКса аадКдКсддК аасааКааас КддсККддКа ссадсаасдК
ссКдддсадд сассдсдсКК асКсаКККас ддадссКсКК сасдКсссад сддддКадсд
даКсдКККсК ссддККсКдд садсддсасК даКККсассК КаасааКсКс дсдКсКддаа
ссддаадаКК ККдссдКсКа ККасКдКсад сааКасддсс адКссККдКс КасаКККддс
садддаасда аадКддаддК аааасдКасс дККдсКдссс ссадКдКККК саКсКККсса
ссдКсадасд адсадсКдаа дКсКддКасс дсаадКдКдд КККдссКссК дааКаасККК
КаКссКсдсд аадсдааадК КсадКддаад дКддаКааКд сссКдсадКс дддКааКадс
саддааадсд Кдассдааса адаККсаааа дасКссасаК аККсКсКдад ККсдасКсКК
асдККаадса аадсКдасКа Кдаааадсас ааадКККаКд саКдсдаддК дасдсаКсад
ддКсКККсса дсссадКаас КаааКсаККс аассдсддсд ааКдККааКК ааКааддадд
аКаКааККаК дааааадаса дсКаКсдсда ККдсадКддс асКддсКддК ККсдсКассд
Кадсссаддс ддссдсасад дКдсаасКдд КдсададКдд ддссдаадКК ааасдсссад
дККсдКссдК аассдКсКса Кдсааддсса дсддКддсКс КККсКсКасд КасдсдсКдК
ссКдддККсд Ксаддссссд ддКсдКддас ККдааКддаК дддсддсдКа аКассдсКдс
КсассаКсас КааККасдса ссдсдКККсс адддссдсаК КасааКсасс дсддассдКК
- 155 023179
сдасс/саас ддса/а/с/с дад//ааас/ сас/дсд/сс /даада/асс дсад/д/а//
ас/дсдс/сд /даадд/асс ас/ддс/ддд дс/дд//ддд /ааассда// дд/дсд//сд
саса//дддд дсааддсаса с//д//ас/д /садс/с/дс с/с/асдааа ддассдадсд
/с///ссс// ддс/ссаад/ адсааа/саа сдадсддадд дасадссдсд //адда/д/с
/дд/даадда с/а////ссд даассад//а ссд/сад//д даас/сдддс дсд//аас//
ссдд/д//са саса///ссс дс/д//с/дс ааад/адсдд /с/д/а//сс с/д/сс/сад
/ад/дасад/ /сс//сдад/ /с/с/дддса с/садасс/а /а///дсаа/ д/даасса/а
аасс/адсаа /асдааад/д да/аадааад /ададссдаа а/с//д/с/д сда/сдсддс
саддссддсс дсасса/сас са/сасса/д дсдса/ассс д/асдасд// ссддас/асд
с//с/ас/ад //адааддд/ дд/ддс/с/д аддд/ддсдд //с/даддд/ ддсддс/с/д
адддаддсдд //ссдд/дд/ ддс/с/дд// ссдд/да/// /да//а/даа аада/ддсаа
асдс/аа/аа дддддс/а/д ассдаааа/д ссда/даааа сдсдс/асад /с/дасдс/а
ааддсааас/ /да//с/д/с дс/ас/да// асдд/дс/дс /а/сда/дд/ //са//дд/д
асд///ссдд сс//дс/аа/ дд/аа/дд/д с/ас/дд/да ////дс/ддс /с/аа//ссс
ааа/ддс/са ад/сдд/дас дд/да/аа// сасс///аа/ даа/аа///с сд/саа/а//
/асс//ссс/ ссс/саа/сд д//даа/д/с дссс////д/ с///ддсдс/ дд/ааасса/
а/даа////с /а//да//д/ дасаааа/аа ас//а//ссд /дд/д/с/// дсд///с///
/а/а/д//дс сасс///а/д /а/д/а//// с/асд///дс /ааса/ас/д сд/аа/аадд
ад/с//аадс /адс/аасда /сдссс//сс саасад//дс дсадсс/даа /ддсдаа/дд
дасдсдссс/ д/адсддсдс а//аадсдсд дсддд/д/дд /дд//асдсд садсд/дасс
- 156 023179
4440
4500
4560
4620
4680
4740
дсНасасННд ссадсдсссН адсдсссдсН ссНННсдсНН НсННсссННс сНННсНсдсс
асдННсдссд дсНННссссд НсаадсНсНа ааНсдддддс НсссНННадд дННссдаННН
адНдсНННас ддсассНсда ссссаааааа сННдаННадд дНдаНддННс асдНадНддд
ссаНсдсссН даНадасддН ННННсдсссН ННдасдННдд адНссасдНН сНННааНадН
ддасНсННдН НссааасНдд аасаасасНс аасссНаНсН сддНсНаННс ННННдаНННа
НаадддаННН НдссдаНННс ддссНаННдд ННааааааНд адсНдаНННа асаааааННН
аасдсдааНН ННаасааааН аННаасдсНН асааНННад
4779 <210> 87 <211> 25 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 5' ЪУКарра1/2 прямой праймер <400> 87 аНдаддзНсс судсНсадсН дсНдд 25 <210> 88 <211> 28 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 5' ЪУКарра3 прямой праймер <400> 88 сНсННссНсс НдсНасНсНд дсНсссад <210> 89
- 157 023179 <211> 25 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 5' ЪУКарра4 прямой праймер <400> 89 аНННсНсНдН НдсНсНддаН сНсНд <210> 90 <211> 26 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УК-Γθν обратный праймер <400> 90 дсасНсНссс сНдННдаадс НсНННд <210> 91 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 5' Б-УН1 прямой праймер <400> 91 асаддНдссс асНсссаддН дсад <210> 92 <211> 23 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
- 158 023179 <220>
<223> 5' Ъ^Н3 прямой праймер <400> 92 ааддЕдЕсса дЕдЕдагдЕд сад 23 <210> 93 <211> 27 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 5' Ъ^Н4/6 прямой праймер <400> 93 сссадаЕддд ЕссЕдЕссса ддЕдсад 27 <210> 94 <211> 24 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 5' Σ-νΚ5 прямой праймер <400> 94 сааддадЕсЕ дЕЕссдаддЕ дсад <210> 95 <211> 23 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 3' СдаттаСН1 обратный праймер <400> 95
- 159 023179 ддааддНдНд сасдссдсНд дНс 23 <210> 96 <211> 6 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Ба11 сайт рестрикции <400> 96 дНсдас <210> 97 <211> 32 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 3' БаИДН 1/2/4/5 прямой праймер <400> 97
НдсдаадНсд асдсНдадда дасддНдасс ад 32 <210> 98 <211> 34 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 3' Ба11ДН3 прямой праймер <400> 98
НдсдаадНсд асдсНдаада дасддНдасс аННд <210> 99
- 160 023179 <211> 33 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 3' За11ДН6 прямой праймер <400> 99
НдсдаадНсд асдсНдадда дасддНдасс дНд 33 <210> 100 <211> 118 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> РаЬ Линкер <400> 100 дадсННсаас аддддададН дсНааННааН НааНааддад даНаНааННа Ндааааадас адсНаНсдсд аННдсадНдд сасНддсНдд сНННдсНасс дНадсдсадд сддссдса
118 <210> 101 <211> 391 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СН1 фрагмент
<400> 101
60 дНсдассааа ддНссдНсНд ННННсссдсН ддсНссдНсН НсНаааНсНа ссНсНддНдд
120 НассдсНдсН сНдддННдсс НддННааада сНасННсссд даассддННа ссдНННсННд
даасНсНддН дсНсНдассН сНддНдННса сассННсссд дсНдННсНдс адНсННсНдд
180
- 161 023179
КсКдКасКсК сКдКсККсКд ККдККассдК КссдКсККсК КсКсКдддКа сссадассКа
саКсКдсаас дККаассаса аассдКсКаа сассааадКК дасаадааад ККдаассдаа
аКсККдссКд сдаКсдсддс саддссддсс дсассаКсас саКсассаКд дсдсаКассс
дКасдасдКК ссддасКасд сККсКасКад к
<210> 102
<211> 5432
<212> ДНК
<213> рСАЪМ
<400> 102
аКдсаККадК КаККааКадК ааКсааККас ддддКсаККа дККсаКадсс саКаКаКдда
дККссдсдКК асаКаасККа сддКаааКдд сссдссКддс Кдассдссса асдасссссд
сссаККдасд КсааКааКда сдКаКдККсс саКадКаасд ссааКаддда сКККссаККд
асдКсааКдд дКддадКаКК КасддКааас КдсссасККд дсадКасаКс аадКдКаКса
КаКдссаадК асдсссссКа ККдасдКсаа КдасддКааа КддсссдссК ддсаККаКдс
ссадКасаКд ассККаКддд асКККссКас ККддсадКас аКсКасдКаК КадКсаКсдс
КаККассаКд дКдаКдсддК КККддсадКа саКсааКддд сдКддаКадс ддКККдасКс
асддддаККК ссаадКсКсс ассссаККда сдКсааКддд адКККдКККК ддсассаааа
Ксаасдддас КККссааааК дКсдКаасаа сКссдсссса ККдасдсааа КдддсддКад
дсдКдКасдд Кдддаддкск аКаКаадсад адсКддКККа дКдаассдКс адаКссдсКа
дсдаККасдс саадсКсдаа аККаасссКс асКаааддда асаааадсКд дадсКссасс
дсддКддсдд ссдсссасса КддасКддас сКддсддаКс сКдККссКдд Кддссдсддс
- 162 023179
сассддддсс сасадсааад ддааадддаа аддддсНадс ассаадддсс ссадсдНдНН
сссссНддсс сссадсадса ададсассад сддсддсасс дссдсссНдд дсНдссНддН
дааддасНас ННссссдадс ссдНдассдН дадсНддаас адсддсдссс Ндассадсдд
сдНдсасасс ННссссдссд НдсНдсадад садсддссНд НасадссНда дсадсдНддН
дассдНдссс адсадсадсс Ндддсассса дассНасаНс НдсаасдНда ассасаадсс
садсаасасс ааддНддаса адааддНдда дсссаададс Ндсдасаааа сНсасасаНд
сссассдНдс ссадсассНд аасНссНддд дддассдНса дНсННссНсН Нссссссааа
асссааддас асссНсаНда НсНсссддас сссНдаддНс асаНдсдНдд НддНддасдН
дадссасдаа дасссНдадд НсаадННсаа сНддНасдНд дасддсдНдд аддНдсаНаа
Ндссаадаса аадссдсддд аддадсадНа саасадсасд НассдддНдд НсадсдНссН
сассдНссНд сассаддасН ддсНдааНдд сааддадНас аадНдсаадд НсНссаасаа
адсссНссса дсссссаНсд адаааассаН сНссааадсс ааадддсадс сссдадаасс
асаддНдНас асссНдсссс саНсссддда НдадсНдасс аадаассадд НсадссНдас
сНдссНддНс аааддсННсН аНсссадсда саНсдссдНд дадНдддада дсааНдддса
дссддадаас аасНасаада ссасдссНсс сдНдсНддас НссдасддсН ссННсННссН
сНасадсаад сНсассдНдд асаададсад дНддсадсад дддаасдНсН НсНсаНдсНс
сдНдаНдсаН даддсНсНдс асаассасНа сасдсадаад адссНсНссс НдНсНссддд
Нааасдддсс аадсдддсас ссдНдаадса дасссНдаас ННсдассНдс НдаадсНддс
сддсдасдНд дададсаасс ссддссссаН даддсНсссН дсНсадсНсс НддддсНдсН
ааНдсНсНдд дНсссНддсН сдадНдадаа адддаааддд аааНааддНа ссаддНаадН
- 163 023179
дНасссааНН сдсссНаНад НдадНсдНаН НасааННсас НсдаНсдссс ННсссаасад
ННдсдсадсс НдааНддсда аНддадаНсс ааНННННаад НдНаНааНдН дННааасНас
НдаННсНааН НдНННдНдНа ННННадаННс асадНсссаа ддсНсаНННс аддссссНса
дНссНсасад НсНдННсаНд аНсаНааНса дссаНассас аНННдНадад дННННасННд
сНННаааааа ссНсссасас сНсссссНда ассНдаааса НааааНдааН дсааННдННд
ННдННаасНН дНННаННдса дсННаНааНд дННасаааНа аадсааНадс аНсасаааНН
НсасаааНаа адсаНННННН НсасНдсаНН сНадННдНдд НННдНссааа сНсаНсааНд
НаНсННаасд сдНаааННдН аадсдННааН аННННдННаа ааННсдсдНН аааНННННдН
НаааНсадсН саННННННаа ссааНаддсс даааНсддса аааНсссННа НаааНсаааа
дааНадассд адаНадддНН дадНдННдНН ссадНННдда асаададНсс асНаННааад
аасдНддасН ссаасдНсаа адддсдаааа ассдНсНаНс адддсдаНдд сссасНасдН
даассаНсас ссНааНсаад ННННННдддд НсдаддНдсс дНааадсасН аааНсддаас
ссНаааддда дсссссдаНН НададсННда сддддааадс сддсдаасдН ддсдадааад
даадддаада аадсдааадд адсдддсдсН адддсдсНдд саадНдНадс ддНсасдсНд
сдсдНаасса ссасасссдс сдсдсННааН дсдссдсНас адддсдсдНс аддНддсасН
НННсддддаа аНдНдсдсдд аассссНаНН НдНННаНННН НсНаааНаса ННсаааНаНд
НаНссдсНса НдадасааНа асссНдаНаа аНдсННсааН ааНаННдааа ааддаадааН
ссНдаддсдд ааадаассад сНдНддааНд НдНдНсадНН адддНдНдда аадНссссад
дсНссссадс аддсадаадН аНдсааадса НдсаНсНсаа ННадНсадса ассаддНдНд
дааадНсссс аддсНсссса дсаддсадаа дНаНдсааад саНдсаНсНс ааННадНсад
- 164 023179
саассаКадК сссдссссКа асКссдссса КсссдссссК аасКссдссс адККссдссс
аККсКссдсс ссаКддсКда сКааКККККК ККаКККаКдс ададдссдад дссдссКсдд
ссКсКдадсК аККссадаад КадКдаддад дсККККККдд аддссКаддс ККККдсааад
аКсдаКсаад адасаддаКд аддаКсдККК сдсаКдаККд аасаадаКдд аККдсасдса
ддККсКссдд ссдсККдддК ддададдсКа ККсддсКаКд асКдддсаса асадасааКс
ддсКдсКсКд аКдссдссдК дККссддсКд Ксадсдсадд ддсдсссддК КсКККККдКс
аадассдасс КдКссддКдс ссКдааКдаа сКдсаадасд аддсадсдсд дсКаКсдКдд
сКддссасда сдддсдККсс ККдсдсадсК дКдсКсдасд ККдКсасКда адсдддаадд
дасКддсКдс КаККдддсда адКдссдддд саддаКсКсс КдКсаКсКса ссККдсКссК
дссдадааад КаКссаКсаК ддсКдаКдса аКдсддсддс КдсаКасдсК КдаКссддсК
ассКдсссаК Ксдассасса адсдааасаК сдсаКсдадс дадсасдКас КсддаКддаа
дссддКсККд КсдаКсадда КдаКсКддас даадаасаКс аддддсКсдс дссадссдаа
сКдККсдсса ддсКсааддс дадсаКдссс дасддсдадд аКсКсдКсдК дасссаКддс
даКдссКдсК КдссдааКаК саКддКддаа ааКддссдсК КККсКддаКК саКсдасКдК
ддссддсКдд дКдКддсдда ссдсКаКсад дасаКадсдК КддсКасссд КдаКаККдсК
даадаасККд дсддсдааКд ддсКдассдс ККссКсдКдс КККасддКаК сдссдсКссс
даККсдсадс дсаКсдссКК сКаКсдссКК сККдасдадК КсККсКдадс дддасКсКдд
ддККсдаааК дассдассаа дсдасдссса ассКдссаКс асдадаКККс даККссассд
ссдссККсКа КдаааддККд ддсККсддаа КсдККККссд ддасдссддс КддаКдаКсс
Кссадсдсдд ддаКсКсаКд сКддадККсК Ксдсссассс Кадддддадд сКаасКдааа
- 165 023179
сасддаадда дасааНассд дааддаассс дсдсНаНдас ддсааНаааа адасадааНа
ааасдсасдд НдННдддНсд НННдННсаНа аасдсддддН НсддНсссад ддсНддсасН
сНдНсдаНас сссассдада ссссаННддд дссааНасдс ссдсдНННсН НссННННссс
сассссассс сссаадННсд ддНдааддсс садддсНсдс адссаасдНс ддддсддсад
дсссНдссаН адссНсаддН НасНсаНаНа НасНННадаН НдаНННаааа сННсаННННН
ааНННаааад даНсНаддНд аадаНссННН ННдаНааНсН саНдассааа аНсссННаас
дНдадННННс дННссасНда дсдНсадасс ссдНадаааа даНсааадда НсННсННдад
аНссНННННН НсНдсдсдНа аНсНдсНдсН Ндсааасааа аааассассд сНассадсдд
НддНННдННН дссддаНсаа дадсНассаа сНсНННННсс дааддНаасН ддсННсадса
дадсдсадаН ассаааНасН дНссННсНад НдНадссдНа дННаддссас сасННсаада
асНсНдНадс ассдссНаса НассНсдсНс НдсНааНссН дННассадНд дсНдсНдсса
дНддсдаНаа дНсдНдНсНН ассдддННдд асНсаадасд аНадННассд даНааддсдс
адсддНсддд сНдаасдддд ддННсдНдса сасадсссад сННддадсда асдассНаса
ссдаасНдад аНассНасад сдНдадсНаН дадааадсдс сасдсННссс даадддадаа
аддсддасад дНаНссддНа адсддсаддд Нсддаасадд ададсдсасд адддадсННс
садддддааа сдссНддНаН сНННаНадНс сНдНсдддНН НсдссассНс НдасННдадс
дНсдаННННН дНдаНдсНсд Нсаддддддс ддадссНаНд дааааасдсс адсаасдсдд
ссНННННасд дННссНддсс ННННдсНддс сННННдсНса саНдННсННН ссНдсдННаН
ссссНдаННс НдНддаНаас сдНаННассд сс
- 166 023179 <210> 103 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Зупадтз УН цепь <400> 103
С1п 1 Уа1 ТНг Ъеи Агд 5 С1и Зег С1у Рго А1а 10 Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТНг 15 С1п
ТНг Ъеи ТНг Ъеи ТНг Суз ТНг РНе Зег С1у РНе Зег Ъеи Зег ТНг Зег
20 25 30
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Ъеи С1и
35 40 45
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз Ъуз Азр Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Ъеи Ъуз Зег Агд Ъеи ТНг 11е Зег Ъуз Азр ТНг Зег Ъуз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Зег МеН 11е ТНг Азп Тгр Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТНг Ъуз С1у Рго Зег Уа1
115 120 125
РНе Рго Ъеи А1а Рго Зег Зег Ъуз Зег ТНг Зег С1у С1у ТНг А1а А1а
130 135 140
Геи С1у Суз Ъеи Уа1 Ъуз Азр Туг РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Зег
145 150 155 160
Тгр Азп Зег С1у А1а Ъеи ТНг Зег С1у Уа1 Нтз ТНг РНе Рго А1а Уа1
165 170 175
Ъеи С1п Зег Зег С1у Ъеи Туг Зег Ъеи Зег Зег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Ъеи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Ъуз
195 200 205
Рго Зег Азп ТНг Ъуз Уа1 Азр Ъуз Агд Уа1 С1и Рго Ъуз Зег Суз Азр
210 215 220
Ъуз ТНг Нтз ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ъеи Ъеи С1у С1у
225 230 235 240
- 167 023179
Рго Бег νβ1 РНе Беи 245 РНе Рго Рго Буз Рго 250 Буз Азр ТНг Беи МеЕ 255 11е
Бег Агд ТНг Рго С1и νβ1 ТНг Суз νβ1 νβ1 νβ1 Азр νβ1 Бег Нгз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и νβ1 Буз РНе Азп Тгр Туг νβ1 Азр С1у νβ1 С1и νβ1 Нгз
275 280 285
Азп А1а Буз ТНг Буз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Бег ТНг Туг Агд
290 295 300
νβ1 νβ1 Бег νβ1 Беи ТНг νβ1 Беи Нгз С1п Азр Тгр Беи Азп С1у Буз
305 310 315 320
С1и Туг Буз Суз Буз νβ1 Бег Азп Буз А1а Беи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Буз ТНг 11е Бег Буз А1а Буз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п νβ1 Туг
340 345 350
ТНг Беи Рго Рго Бег Агд С1и С1и МеЕ ТНг Буз Азп С1п νβ1 Бег Беи
355 360 365
ТНг Суз Беи νβ1 Буз С1у РНе Туг Рго Бег Азр 11е А1а νβ1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Бег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Буз ТНг ТНг Рго Рго νβ1
385 390 395 400
Беи Азр Бег Азр С1у Бег РНе РНе Беи Туг Бег Буз Беи ТНг νβ1 Азр
405 410 415
Буз Бег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп νβ1 РНе Бег Суз Бег νβ1 МеЕ Нгз
420 425 430
С1и А1а Беи Нгз Азп Нгз Туг ТНг С1п Буз Бег Беи Бег Беи Бег Рго
435 440 445
С1у Ьуз 450 <210> 104 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Бупадгз VН домен <400> 104
С1п ν&1 ТНг Беи Агд С1и Бег С1у Рго А1а Беи ν&1 Буз Рго ТНг С1п
- 168 023179
1 5 10 15
ТНг Теи ТНг Теи ТНг Суз ТНг РНе Зег С1у РНе Зег Теи Зег ТНг Зег
20 25 30
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Туз А1а Теи С1и
35 40 45
Тгр Теи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Туз Туз Азр Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Теи Туз Зег Агд Теи ТНг 11е Зег Туз Азр ТНг Зег Туз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Теи Туз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Зег МеН 11е ТНг Азп Тгр Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у А1а
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120 <210> 105 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Зупадиз УН СЕ>К1 <400> 105
ТНг Зег С1у МеН Зег Уа1 С1у 1 5 <210> 106 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Зупадиз УН СЕ>К2 <400> 106
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Туз Туз Азр Туг Азп Рго Зег Теи Туз Зег
- 169 023179
5 10 15 <210> 107 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Бупадиз νΗ ΟΌΚ3 <400> 107
Бег Ме/ 11е ТНг Азп Тгр Туг РНе Азр ν&1 1 5 10 <210> 108 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Бупадиз ντ цепь <400> 108
Азр 11е С1п Ме/ ТНг С1п Бег Рго
1 5
Азр Агд νβ1 ТНг 11е ТНг Суз Туз
20
ΗΪ3 Тгр Туг С1п С1п Туз Рго С1у
35 40
Азр ТНг Бег Туз Теи А1а Бег С1у
50 55
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Теи
65 70
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе
85
РНе С1у С1у С1у ТНг Туз νβ1 С1и
100
Бег νβ1 РНе 11е РНе Рго Рго Бег
Бег ТНг 10 Теи Бег А1а Бег νβ1 15 С1у
Суз С1п Теи Бег νβ1 С1у Туг Ме/
25 30
Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
45
νβ1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
60
ТНг 11е Бег Бег Теи С1п Рго Азр
75 80
С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
90 95
11е Туз Агд ТНг νβ1 А1а А1а Рго
105 110
Азр С1и С1п Теи Туз Бег С1у ТНг
- 170 023179
115 120 125
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Теи Теи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Туз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Туз Уа1 Азр Азп А1а Теи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
145 150 155 160
Зег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Зег Туз Азр Зег ТНг Туг Зег Теи Зег Зег
165 170 175
ТНг Теи ТНг Теи Зег Туз А1а Азр Туг С1и Туз Нгз Туз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТНг Нгз С1п С1у Теи Зег Зег Рго Уа1 ТНг Туз Зег РНе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210 <210> 109 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Зупадгз УТ домен <400> 109
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго Зег ТНг Теи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Туз Суз С1п Теи Зег Уа1 С1у Туг МеН
20 25 30
Нгз Тгр Туг С1п С1п Туз Рго С1у Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг Зег Туз Теи А1а Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг Теи ТНг 11е Зег Зег Теи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Туз Теи С1и 11е Туз
100 105
- 171 <210> 110 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Бупадтз УЪ ΟΌΚ1 <400> 110
Ъуз Суз С1п Ъеи Бег Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 111 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Бупадтз УЪ СБР2 <400> 111
Азр ТНг Бег Ъуз Ъеи А1а Бег 1 5 <210> 112 <211> 9 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Бупадтз УЪ СБР3 <400> 112
РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг 1 5 <210> 113
- 172 023179 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΑΕΕΕ νΗ ЦЕПЬ <400> 113
С1п νβ1 ТНг Беи Агд С1и Бег С1у Рго А1а Беи νβ1 Буз Рго ТНг С1п
1 5 10 15
ТНг Беи ТНг Беи ТНг Суз ТНг РНе Бег С1у РНе Бег Беи Бег ТНг А1а
20 25 30
С1у МеК Бег νβ1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Буз А1а Беи С1и
35 40 45
Тгр Беи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Буз Буз Азр Туг Азп Рго Бег
50 55 60
Беи Буз Бег Агд Беи ТНг 11е Бег Буз Азр ТНг Бег Буз Азп С1п νβ1
65 70 75 80
νβ1 Беи Буз νβ1 ТНг Азп МеК Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Бег МеК 11е ТНг Азп РНе Туг РНе Азр νβ1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг νβ1 ТНг νβ1 Бег Бег А1а Бег ТНг Буз С1у Рго Бег νβ1
115 120 125
РНе Рго Беи А1а Рго Бег Бег Буз Бег ТНг Бег С1у С1у ТНг А1а А1а
130 135 140
Беи С1у Суз Беи νβ1 Буз Азр Туг РНе Рго С1и Рго νβ1 ТНг νβ1 Бег
145 150 155 160
Тгр Азп Бег С1у А1а Беи ТНг Бег С1у νβ1 Низ ТНг РНе Рго А1а νβ1
165 170 175
Беи С1п Бег Бег С1у Беи Туг Бег Беи Бег Бег νβ1 νβ1 ТНг νβ1 Рго
180 185 190
Бег Бег Бег Беи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп νβ1 Азп Низ Буз
195 200 205
Рго Бег Азп ТНг Буз νβ1 Азр Буз Агд νβ1 С1и Рго Буз Бег Суз Азр
210 215 220
Буз ТНг Низ ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Беи Беи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Бег νβ1 РНе Беи РНе Рго Рго Буз Рго Буз Азр ТНг Беи МеК 11е
245 250 255
- 173
Зег Агд ТНг Рго 260 С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 265 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег 270 Нгз С1и
Азр Рго С1и Уа1 Буз РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нгз
275 280 285
Азп А1а Буз ТНг Буз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТНг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Зег Уа1 Беи ТНг Уа1 Беи Нгз С1п Азр Тгр Беи Азп С1у Буз
305 310 315 320
С1и Туг Буз Суз Буз Уа1 Зег Азп Буз А1а Беи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Буз ТНг 11е Зег Буз А1а Буз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТНг Беи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеН ТНг Буз Азп С1п Уа1 Зег Беи
355 360 365
ТНг Суз Беи Уа1 Буз С1у РНе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Буз ТНг ТНг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Беи Азр Зег Азр С1у Зег РНе РНе Беи Туг Зег Буз Беи ТНг Уа1 Азр
405 410 415
Буз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Зег Суз Зег Уа1 МеН Нгз
420 425 430
С1и А1а Беи Нгз Азп Нгз Туг ТНг С1п Буз Зег Беи Зег Беи Зег Рго
435 440 445
С1у Буз 450 <210> 114 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> АГРБ УН ДОМЕН <400> 114
С1п 1 Уа1 ТНг Беи Агд 5 С1и Зег С1у Рго А1а 10 Беи Уа1 Буз Рго ТНг 15 С1п
ТНг Беи ТНг Беи ТНг Суз ТНг РНе Зег С1у РНе Зег Беи Зег ТНг А1а
- 174 023179
20 25 30
С1у МеН Бег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Туз А1а Теи С1и
35 40 45
Тгр Теи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Туз Туз Азр Туг Азп Рго Бег
50 55 60
Теи Туз Бег Агд Теи ТНг 11е Бег Туз Азр ТНг Бег Туз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Теи Туз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Бег МеН 11е ТНг Азп РНе Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у А1а
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Бег Бег
115 120 <210> 115 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> АЕЕЕ УН ΟΌΚ1 <400> 115
ТНг А1а С1у МеН Бег Уа1 С1у 1 5 <210> 116 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> АЕЕЕ УН ΟΌΚ3
<400> 116
Бег МеН 11е ТНг Азп РНе Туг РНе Азр Уа1
1 5 10
- 175 023179 <210> 117 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> АГГГ УЪ ЦЕПЬ <400> 117
Азр 11е С1п МеА ТАг С1п Зег Рго
1 5
Азр Агд Уа1 ТАг 11е ТАг Суз Зег
20
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у
35 40
Азр ТАг РАе Ъуз Ъеи А1а Зег С1у
50 55
С1у Зег С1у ТАг С1и РАе ТАг Ъеи
65 70
Азр РАе А1а ТАг Туг Туг Суз РАе
85
РАе С1у С1у С1у ТАг Ъуз Уа1 С1и
100
Зег Уа1 РАе 11е РАе Рго Рго Зег
115 120
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Ъеи Ъеи Азп
130 135
Уа1 С1п Тгр Ъуз Уа1 Азр Азп А1а
145 150
Зег Уа1 ТАг С1и С1п Азр Зег Ъуз
165
ТАг Ъеи ТАг Ъеи Зег Ъуз А1а Азр
180
Суз С1и Уа1 ТАг Нтз С1п С1у Ъеи
195 200
Азп Агд С1у С1и Суз
210
Зег ТАг 10 Ъеи Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
А1а Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеА
25 30
Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
45
Уа1 Рго Зег Агд РАе Зег С1у Зег
60
ТАг 11е Зег Зег Ъеи С1п Рго Азр
75 80
С1п РАе Зег С1у Туг Рго РАе ТАг
90 95
11е Ъуз Агд ТАг Уа1 А1а А1а Рго
105 110
Азр С1и С1п Ъеи Ъуз Зег С1у ТАг
125
Азп РАе Туг Рго Агд С1и А1а Ъуз
140
Ъеи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
155 160
Азр Зег ТАг Туг Зег Ъеи Зег Зег
170 175
Туг С1и Ъуз Нтз Ъуз Уа1 Туг А1а
185 190
Зег Зег Рго Уа1 ТАг Ъуз Зег РАе
205
- 176 <210> 118 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> АРРР УТ ДОМЕН <400> 118
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго
1 5
Азр Агд Уа1 ТНг 20 11е ТНг Суз Зег
Низ Тгр Туг 35 С1п С1п Туз Рго С1у 40
Азр ТНг 50 РНе Туз Теи А1а Зег 55 С1у
С1у 65 Зег С1у ТНг С1и РНе 70 ТНг Теи
Азр РНе А1а ТНг Туг 85 Туг Суз РНе
РНе С1у С1у С1у 100 ТНг Туз Теи С1и
11е Туз
105
Зег ТНг 10 Теи Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
А1а Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеН
25 30
Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
45
Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
60
ТНг 11е Зег Зег Теи С1п Рго Азр
75 80
С1п РНе Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
90 95
<210> 119
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> АРРР УТ СЕ>К1
<400> 119
Зег А1а Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеН Низ
1 5 10
<210> 120 <211> 7
- 177 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> АГРБ УЪ СБК2 <400> 120
Азр ТНг РНе Ъуз Ъеи А1а Бег 1 5 <210> 121 <211> 9 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> АБББ УЪ СБК3 <400> 121
РНе С1п РНе Бег С1у Туг Рго РНе ТНг 1 5 <210> 122 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р1212 УН ЦЕПЬ <400> 122
С1п 1 Уа1 ТНг Ъеи Агд 5 С1и Бег С1у Рго А1а 10 Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТНг 15 С1п
ТНг Ъеи ТНг Ъеи ТНг Суз ТНг РНе Бег С1у РНе Бег Ъеи Бег ТНг Рго
20 25 30
С1у МеЪ Бег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Ъеи С1и
35 40 45
- 178
Тгр Теи 50 А1а Азр 11е Тгр Тгр 55 Азр Азр Туз Туз Низ 60 Туг Азп Рго Зег
Теи Туз Азр Агд Теи ТТг 11е Зег Туз Азр ТТг Зег Туз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Теи Туз Уа1 ТТг Азп МеК Азр Рго А1а Азр ТТг А1а ТТг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеК 11е РТе Азп РТе Туг РТе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТТг ТТг Уа1 ТТг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТТг Туз С1у Рго Зег Уа1
115 120 125
РТе Рго Теи А1а Рго Зег Зег Туз Зег ТТг Зег С1у С1у ТТг А1а А1а
130 135 140
Теи С1у Суз Теи Уа1 Туз Азр Туг РТе Рго С1и Рго Уа1 ТТг Уа1 Зег
145 150 155 160
Тгр Азп Зег С1у А1а Теи ТТг Зег С1у Уа1 Низ ТТг РТе Рго А1а Уа1
165 170 175
Теи С1п Зег Зег С1у Теи Туг Зег Теи Зег Зег Уа1 Уа1 ТТг Уа1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Теи С1у ТТг С1п ТТг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Низ Туз
195 200 205
Рго Зег Азп ТТг Туз Уа1 Азр Туз Агд Уа1 С1и Рго Туз Зег Суз Азр
210 215 220
Туз ТТг Низ ТТг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Теи Теи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Зег Уа1 РТе Теи РТе Рго Рго Туз Рго Туз Азр ТТг Теи МеК 11е
245 250 255
Зег Агд ТТг Рго С1и Уа1 ТТг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Низ С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Туз РТе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Низ
275 280 285
Азп А1а Туз ТТг Туз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТТг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Зег Уа1 Теи ТТг Уа1 Теи Низ С1п Азр Тгр Теи Азп С1у Туз
305 310 315 320
С1и Туг Туз Суз Туз Уа1 Зег Азп Туз А1а Теи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Туз ТТг 11е Зег Туз А1а Туз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТТг Теи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеК ТТг Туз Азп С1п Уа1 Зег Теи
355 360 365
- 179 023179
ТАг Суз 370 Теи Уа1 Туз С1у РАе 375 Туг Рго Зег Азр 11е 380 А1а Уа1 С1и Тгр
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Туз ТАг ТАг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Теи Азр Зег Азр С1у Зег РАе РАе Теи Туг Зег Туз Теи ТАг Уа1 Азр
405 410 415
Туз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РАе Зег Суз Зег Уа1 МеЛ Нгз
420 425 430
С1и А1а Теи Нгз Азп Нгз Туг ТАг С1п Туз Зег Теи Зег Теи Зег Рго
435 440 445
С1у Туз 450 <210> 123 <211> 120 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Р1212 УН ДОМЕН
<400> 123
С1п Уа1 ТАг Теи Агд С1и Зег С1у Рго А1а Теи Уа1 Туз Рго ТАг С1п
1 5 10 15
ТАг Теи ТАг Теи ТАг Суз ТАг РАе Зег С1у РАе Зег Теи Зег ТАг Рго
20 25 30
С1у МеЛ Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Туз А1а Теи С1и
35 40 45
Тгр Теи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Туз Туз Нгз Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Теи Туз Азр Агд Теи ТАг 11е Зег Туз Азр ТАг Зег Туз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Теи Туз Уа1 ТАг Азп МеЛ Азр Рго А1а Азр ТАг А1а ТАг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеЛ 11е РАе Азп РАе Туг РАе Азр Уа1 Тгр С1у А1а
100 105 110
С1у ТАг ТАг Уа1 ТАг Уа1 Зег Зег
115 120
- 180 <210> 124 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р1212 УН СЪК1 <400> 124
ТНг Рго С1у МеН Бег Уа1 С1у 1 5 <210> 125 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р1212 УН СЪК2 <400> 125
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз Ъуз Нтз Туг Азп Рго Бег Ъеи Ъуз Азр 1 5 10 15 <210> 126 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р1212 УН СЪК3 <400> 126
Азр МеН 11е РНе Азп РНе Туг РНе Азр Уа1
5 10
- 181 023179 <210> 127 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р1212 УЪ ЦЕПЬ <400> 127
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Ъеи Бег А1а Бег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Бег Ъеи Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеН
20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Теи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг РНе Туг Ъеи Бег Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Бег Бег Ъеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз Агд ТНг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Бег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Бег Азр С1и С1п Теи Ъуз Бег С1у ТНг
115 120 125
А1а Бег Уа1 Уа1 Суз Ъеи Ъеи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Туз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Туз Уа1 Азр Азп А1а Ъеи С1п Бег С1у Азп Бег С1п С1и
145 150 155 160
Бег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Бег Ъуз Азр Бег ТНг Туг Бег Ъеи Бег Бег
165 170 175
ТНг Ъеи ТНг Ъеи Бег Ъуз А1а Азр Туг С1и Ъуз Нтз Туз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТНг Нтз С1п С1у Ъеи Бег Бег Рго Уа1 ТНг Ъуз Бег РНе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
<210> 128
210
- 182 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р1212 ντ ДОМЕН <400> 128
Азр 11е С1п Ме/ ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Теи Бег А1а Бег νβ1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд νβ1 ТНг 11е ТНг Суз Бег Теи Бег Бег Агд νβ1 С1у Туг Ме/
20 25 30
Η^з Тгр Туг С1п С1п Туз Рго С1у Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг РНе Туг Теи Бег Бег С1у νβ1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Теи ТНг 11е Бег Бег Теи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Туз νβ1 С1и 11е Туз
100 105 <210> 129 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р1212 ντ СЕ>К1
<400> 129
Бег Теи Бег Бег Агд ν&1 С1у Туг Ме/ Тз
1 5 10
<210> 130
<211> 7
<212> БЕЛОК
- 183 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р1212 УЪ СЪК2 <400> 130
Азр ТНг РНе Туг Геи Зег Зег 1 5 <210> 131 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р12Г4 УН ЦЕПЬ <400> 131
С1п Уа1 ТНг Ъеи Агд С1и Зег С1у
1 5
ТНг Геи ТНг Ъеи ТНг Суз ТНг РНе
20
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд
35 40
Тгр Геи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр
50 55
Ъеи Ъуз Азр Агд Ъеи ТНг 11е Зег
65 70
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр
85
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп
100
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120
РНе Рго Ъеи А1а Рго Зег Зег Ъуз
130 135
Ъеи С1у Суз Ъеи Уа1 Ъуз Азр Туг
145 150
Тгр Азп Зег С1у А1а Ъеи ТНг Зег
Рго А1а 10 Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТНг 15 С1п
Зег С1у РНе Зег Ъеи Зег ТНг Рго
25 30
С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Ъеи С1и
45
Азр Ъуз Ъуз Нтз Туг Азп Рго Зег
60
Ъуз Азр ТНг Зег Ъуз Азп С1п Уа1
75 80
Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
90 95
РНе Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
105 110
А1а Зег ТНг Ъуз С1у Рго Зег Уа1
125
Зег ТНг Зег С1у С1у ТНг А1а А1а
140
РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Зег
155 160
С1у Уа1 Нтз ТНг РНе Рго А1а Уа1
170 175
165
- 184
Ьеи С1п Зег Зег 180 С1у Ьеи Туг Зег Ьеи 185 Зег Зег Уа1 Уа1 ТАг 190 Уа1 Рго
Зег Зег Зег Ьеи С1у ТАг С1п ТАг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Н±з Ьуз
195 200 205
Рго Зег Азп ТАг Ьуз Уа1 Азр Ьуз Агд Уа1 С1и Рго Ьуз Зег Суз Азр
210 215 220
Ьуз ТАг ΗΪ8 ТАг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ьеи Ьеи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Зег Уа1 РАе Ьеи РАе Рго Рго Ьуз Рго Ьуз Азр ТАг Ьеи МеА 11е
245 250 255
Зег Агд ТАг Рго С1и Уа1 ТАг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Н±з С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ьуз РАе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Н±з
275 280 285
Азп А1а Ьуз ТАг Ьуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТАг Туг Агд
290 295 300
ναι Уа1 Зег Уа1 Ьеи ТАг Уа1 Ьеи Н±з С1п Азр Тгр Ьеи Азп С1у Ьуз
305 310 315 320
С1и Туг Ьуз Суз Ьуз Уа1 Зег Азп Ьуз А1а Ьеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Ьуз ТАг 11е Зег Ьуз А1а Ьуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТАг Ьеи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеА ТАг Ьуз Азп С1п Уа1 Зег Ьеи
355 360 365
ТАг Суз Ьеи Уа1 Ьуз С1у РАе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ьуз ТАг ТАг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Ьеи Азр Зег Азр С1у Зег РАе РАе Ьеи Туг Зег Ьуз Ьеи ТАг Уа1 Азр
405 410 415
Ьуз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РАе Зег Суз Зег Уа1 МеА Н±з
420 425 430
С1и А1а Ьеи ΗΪ8 Азп ΗΪ8 Туг ТАг С1п Ьуз Зег Ьеи Зег Ьеи Зег Рго
435 440 445
С1у Ьуз 450 <210> 132 <211> 120
- 185 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р12£4 УН ДОМЕН <400> 132
С1п Уа1 ТНг Ъеи Агд С1и Бег С1у Рго А1а Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТНг С1п
1 5 10 15
ТНг Ъеи ТНг Ъеи ТНг Суз ТНг РНе Бег С1у РНе Бег Ъеи Бег ТНг Рго
20 25 30
С1у МеН Бег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Ъеи С1и
35 40 45
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Ъуз Ъуз Нтз Туг Азп Рго Бег
50 55 60
Ъеи Ъуз Азр Агд Ъеи ТНг 11е Бег Ъуз Азр ТНг Бег Ъуз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп РНе Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Бег Бег
115 120
<210> 133 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р12£4 УН СЪК2 <400> 133
Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Ъуз Ъуз Нтз Туг Азп Рго Бег Ъеи Ъуз Азр 1 5 10 15 <210> 134 <211> 208
- 186 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р12Г4 УЪ ЦЕПЬ <400> 134
Азр 11е С1п МеЪ ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Ъеи Бег А1а Бег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Бег Ъеи Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеЪ
20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг Агд С1у Ъеи Рго Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Бег Бег Ъеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз Агд ТНг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Бег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Бег Азр С1и С1п Ъеи Ъуз Бег С1у ТНг
115 120 125
А1а Бег Уа1 Уа1 Суз Ъеи Ъеи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Ъуз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Ъуз Уа1 Азр Азп А1а Ъеи С1п Бег С1у Азп Бег С1п С1и
145 150 155 160
Бег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Бег Ъуз Азр Бег ТНг Туг Бег Ъеи Бег Бег
165 170 175
ТНг Ъеи ТНг Ъеи Бег Ъуз А1а Азр Туг С1и Ъуз Нтз Ъуз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТНг Нтз С1п С1у Ъеи Бег Бег Рго Уа1 ТНг Ъуз Бег РНе
195 200 205
<210> 135 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 187 023179 <220>
<223> Р12£4 УЪ ДОМЕН <400> 135
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго Зег ТНг Ъеи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Зег Ъеи Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеН
20 25 30
Нгз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг Агд С1у Ъеи Рго Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Зег Зег Ъеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз
100 105
<210> 136 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р12£4 УЪ ΟΌΚ2 <400> 136
Азр ТНг Агд С1у Ъеи Рго Зег 1 5 <210> 137 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р11М4 УН ЦЕПЬ
- 188 023179 <400> 137
С1п 1 νβ1 ТНг Беи Агд 5 С1и Бег С1у Рго А1а 10 Беи νβ1 Буз Рго ТНг 15 С1п
ТНг Беи ТНг Беи ТНг Суз ТНг РНе Бег С1у РНе Бег Беи Бег ТНг Рго
20 25 30
С1у МеЕ Бег νβ1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Буз А1а Беи С1и
35 40 45
Тгр Беи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Буз Буз Нгз Туг Азп Рго Бег
50 55 60
Беи Буз Азр Агд Беи ТНг 11е Бег Буз Азр ТНг Бег Буз Азп С1п νβ1
65 70 75 80
νβ1 Беи Буз νβ1 ТНг Азп МеЕ Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеЕ 11е РНе Азп Тгр Туг РНе Азр νβ1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг νβ1 ТНг νβ1 Бег Бег А1а Бег ТНг Буз С1у Рго Бег νβ1
115 120 125
РНе Рго Беи А1а Рго Бег Бег Буз Бег ТНг Бег С1у С1у ТНг А1а А1а
130 135 140
Беи С1у Суз Беи νβ1 Буз Азр Туг РНе Рго С1и Рго νβ1 ТНг νβ1 Бег
145 150 155 160
Тгр Азп Бег С1у А1а Беи ТНг Бег С1у νβ1 Нгз ТНг РНе Рго А1а νβ1
165 170 175
Беи С1п Бег Бег С1у Беи Туг Бег Беи Бег Бег νβ1 νβ1 ТНг νβ1 Рго
180 185 190
Бег Бег Бег Беи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп νβ1 Азп Нгз Буз
195 200 205
Рго Бег Азп ТНг Буз νβ1 Азр Буз Агд νβ1 С1и Рго Буз Бег Суз Азр
210 215 220
Буз ТНг Нгз ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Беи Беи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Бег νβ1 РНе Беи РНе Рго Рго Буз Рго Буз Азр ТНг Беи МеЕ 11е
245 250 255
Бег Агд ТНг Рго С1и νβ1 ТНг Суз νβ1 νβ1 νβ1 Азр νβ1 Бег Нгз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и νβ1 Буз РНе Азп Тгр Туг νβ1 Азр С1у νβ1 С1и νβ1 Нгз
275 280 285
Азп А1а Буз ТНг Буз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Бег ТНг Туг Агд
290 295 300
- 189
Уа1 305 Уа1 Зег Уа1 Теи ТНг 310 Уа1 Теи Низ С1п Азр 315 Тгр Теи Азп С1у Туз 320
С1и Туг Туз Суз Туз Уа1 Зег Азп Туз А1а Теи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Туз ТНг 11е Зег Туз А1а Туз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТНг Теи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеН ТНг Туз Азп С1п Уа1 Зег Теи
355 360 365
ТНг Суз Теи Уа1 Туз С1у РНе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Туз ТНг ТНг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Теи Азр Зег Азр С1у Зег РНе РНе Теи Туг Зег Туз Теи ТНг Уа1 Азр
405 410 415
Туз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Зег Суз Зег Уа1 МеН Низ
420 425 430
С1и А1а Теи Низ Азп Низ Туг ТНг С1п Туз Зег Теи Зег Теи Зег Рго
435 440 445
С1у Туз 450 <210> 138 <211> 120 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Р1104 УН ДОМЕН
<400> 138
С1п Уа1 ТНг Теи Агд С1и Зег С1у Рго А1а Теи Уа1 Туз Рго ТНг С1п
1 5 10 15
ТНг Теи ТНг Теи ТНг Суз ТНг РНе Зег С1у РНе Зег Теи Зег ТНг Рго
20 25 30
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Туз А1а Теи С1и
35 40 45
Тгр Теи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Туз Туз Низ Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Теи Туз Азр Агд Теи ТНг 11е Зег Туз Азр ТНг Зег Туз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
- 190
Уа1 Теи Туз Уа1 ТНг 85 Азп МеН Азр Рго А1а 90 Азр ТНг А1а ТНг Туг 95 Туг
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп Тгр Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 139 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р1Ш4 УН СИК3 <400> 139
Азр МеН 11е РНе Азп Тгр Туг РНе Азр Уа1 1 5 10 <210> 140 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р1Ш4 УТ ЦЕПЬ <400> 140
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго Зег ТНг Теи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Зег Рго Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеН
20 25 30
Нгз Тгр Туг С1п С1п Туз Рго С1у Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг МеН Агд Теи А1а Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг Теи ТНг 11е Зег Зег Теи С1п Рго Азр
- 191
65 70
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе
85
РНе С1у С1у С1у ТНг Ьуз νβ1 С1и
100
Бег νβ1 РНе 11е РНе Рго Рго Бег
115 120
А1а Бег νβ1 νβ1 Суз Ьеи Ьеи Азп
130 135
νβ1 С1п Тгр Ьуз νβ1 Азр Азп А1а
145 150
Бег νβ1 ТНг С1и С1п Азр Бег Ьуз
165
ТНг Беи ТНг Ьеи Бег Ьуз А1а Азр
180
Суз С1и νβ1 ТНг Низ С1п С1у Ьеи
195 200
Азп Агд С1у С1и Суз
210
75 80
С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
90 95
11е Ьуз Агд ТНг νβ1 А1а А1а Рго
105 110
Азр С1и С1п Ьеи Ьуз Бег С1у ТНг
125
Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Ьуз
140
Ьеи С1п Бег С1у Азп Бег С1п С1и
155 160
Азр Бег ТНг Туг Бег Ьеи Бег Бег
170 175
Туг С1и Ьуз Низ Ьуз νβ1 Туг А1а
185 190
Бег Бег Рго νβ1 ТНг Ьуз Бег РНе
205 <210> 141 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последоват <220>
<223> Р11М4 Ы ДОМЕН ьность <400> 141
Азр 11е С1п МеК ТНг С1п Бег Рго
1 5
Азр Агд νβ1 ТНг 11е ТНг Суз Бег
20
Низ Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у
35 40
Азр ТНг МеК Агд Ьеи А1а Бег С1у
50 55
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ьеи
65 70
Бег ТНг 10 Ьеи Бег А1а Бег νβ1 15 С1у
Рго Бег Бег Агд νβ1 С1у Туг МеК
25 30
Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е Туг
45
νβ1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
60
ТНг 11е Бег Бег Ьеи С1п Рго Азр
75 80
- 192 023179
Азр РАе А1а ТАг Туг 85 Туг Суз РАе С1п С1у Зег С1у Туг 90 Рго РАе ТАг 95
РАе С1у С1у С1у ТАг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз
100 105 <210> 142 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р1164 УЪ СЪК1 <400> 142
Зег Рго Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеА Нтз 1 5 10 <210> 143 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р1164 УЪ СЪК2 <400> 143
Азр ТАг МеА Агд Ъеи А1а Зег 1 5 <210> 144 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А1е9 УН ЦЕПЬ
- 193 023179 <400> 144
С1п 1 νβ1 ТНг Теи Агд 5 С1и Бег С1у Рго А1а 10 Теи νβ1 Туз Рго ТНг 15 С1п
ТНг Теи ТНг Теи ТНг Суз ТНг РНе Бег С1у РНе Бег Теи Бег ТНг А1а
20 25 30
С1у Ме/ Бег νβ1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Туз А1а Теи С1и
35 40 45
Тгр Теи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Туз Туз Η^з Туг Азп Рго Бег
50 55 60
Теи Туз Азр Агд Теи ТНг 11е Бег Туз Азр ТНг Бег Туз Азп С1п νβ1
65 70 75 80
νβ1 Теи Туз νβ1 ТНг Азп Ме/ Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр Ме/ 11е РНе Азп Тгр Туг РНе Азр νβ1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг νβ1 ТНг νβ1 Бег Бег А1а Бег ТНг Туз С1у Рго Бег νβ1
115 120 125
РНе Рго Теи А1а Рго Бег Бег Туз Бег ТНг Бег С1у С1у ТНг А1а А1а
130 135 140
Теи С1у Суз Теи νβ1 Туз Азр Туг РНе Рго С1и Рго νβ1 ТНг νβ1 Бег
145 150 155 160
Тгр Азп Бег С1у А1а Теи ТНг Бег С1у νβ1 Η^з ТНг РНе Рго А1а νβ1
165 170 175
Теи С1п Бег Бег С1у Теи Туг Бег Теи Бег Бег νβ1 νβ1 ТНг νβ1 Рго
180 185 190
Бег Бег Бег Теи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп νβ1 Азп Η^з Туз
195 200 205
Рго Бег Азп ТНг Туз νβ1 Азр Туз Агд νβ1 С1и Рго Туз Бег Суз Азр
210 215 220
Туз ТНг Η^з ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Теи Теи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Бег νβ1 РНе Теи РНе Рго Рго Туз Рго Туз Азр ТНг Теи Ме/ 11е
245 250 255
Бег Агд ТНг Рго С1и νβ1 ТНг Суз νβ1 νβ1 νβ1 Азр νβ1 Бег Η^з С1и
260 265 270
Азр Рго С1и νβ1 Туз РНе Азп Тгр Туг νβ1 Азр С1у νβ1 С1и νβ1 Η^з
275 280 285
Азп А1а Туз ТНг Туз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Бег ТНг Туг Агд
290 295 300
νβ1 νβ1 Бег νβ1 Теи ТНг νβ1 Теи Η^з С1п Азр Тгр Теи Азп С1у Туз
- 194
305 310 315 320
С1и Туг Гуз Суз Гуз Уа1 Зег Азп Гуз А1а Ъеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Гуз ТНг 11е Зег Гуз А1а Ъуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТНг Ъеи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеН ТНг Гуз Азп С1п Уа1 Зег Ъеи
355 360 365
ТНг Суз Ъеи Уа1 Ъуз С1у РНе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Гуз ТНг ТНг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Геи Азр Зег Азр С1у Зег РНе РНе Геи Туг Зег Ъуз Геи ТНг Уа1 Азр
405 410 415
Ъуз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Зег Суз Зег Уа1 МеН Нтз
420 425 430
С1и А1а Ъеи Нтз Азп Нтз Туг ТНг С1п Ъуз Зег Ъеи Зег Геи Зег Рго
435 440 445
С1у Гуз
450
<210> 145 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А1е9 УН ДОМЕН <400> 145
С1п Уа1 ТНг Ъеи Агд С1и Зег С1у Рго А1а Геи Уа1 Ъуз Рго ТНг С1п 1 5 10 15
ТНг Ъеи ТНг Геи ТНг Суз ТНг РНе Зег С1у РНе Зег Геи Зег ТНг Рго 20 25 30
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Ъеи С1и 35 40 45
Тгр Геи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Гуз Ъуз Нтз Туг Азп Рго Зег 50 55 60
Ъеи Гуз Азр Агд Геи ТНг 11е Зег Ъуз Азр ТНг Зег Ъуз Азп С1п Уа1 65 70 75 80
- 195
Уа1 Теи Туз Уа1 ТАг 85 Азп МеЛ Азр Рго А1а Азр 90 ТАг А1а ТАг Туг 95 Туг
Суз А1а Агд Азр МеЛ 11е РАе Азп Тгр Туг РАе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТАг ТАг Уа1 ТАг Уа1 Зег Зег
115 120 <210> 146 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А1е9 УТ ЦЕПЬ <400> 146
Азр 11е С1п МеЛ ТАг С1п Зег Рго Зег ТАг Теи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТАг 11е ТАг Суз Зег Теи Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеЛ
20 25 30
Нгз Тгр Туг С1п С1п Туз Рго С1у Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
35 40 45
Азр ТАг РАе Туз Теи Зег Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РАе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТАг С1и РАе ТАг Теи ТАг 11е Зег Зег Теи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РАе А1а ТАг Туг Туг Суз РАе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РАе ТАг
85 90 95
РАе С1у С1у С1у ТАг Туз Уа1 С1и 11е Туз Агд ТАг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Зег Уа1 РАе 11е РАе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Теи Туз Зег С1у ТАг
115 120 125
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Теи Теи Азп Азп РАе Туг Рго Агд С1и А1а Туз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Туз Уа1 Азр Азп А1а Теи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
145 150 155 160
Зег Уа1 ТАг С1и С1п Азр Зег Туз Азр Зег ТАг Туг Зег Теи Зег Зег
165 170 175
ТАг Теи ТАг Теи Зег Туз А1а Азр Туг С1и Туз Нгз Туз Уа1 Туг А1а
- 196 023179
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТНг Нтз С1п С1у Ъеи Бег Бег Рго Уа1 ТНг Ъуз Бег РНе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210 <210> 147 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А1е9 УЪ ДОМЕН <400> 147
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Ъеи Бег А1а Бег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Бег Ъеи Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеН
20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг РНе Ъуз Ъеи Бег Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Бег Бег Ъеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз
100 105
<210> 148 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А1е9 УЪ СЪК2
- 197 023179 <400> 148
Азр ТНг РНе Ъуз Теи Бег Бег 1 5 <210> 149 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А12а6 УН ЦЕПЬ <400> 149
С1п Уа1 ТНг Ъеи Агд С1и Бег С1у
1 5
ТНг Теи ТНг Теи ТНг Суз ТНг РНе
20
С1у МеН Бег Уа1 С1у Тгр 11е Агд
35 40
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр
50 55
Ъеи Ъуз Азр Агд Ъеи ТНг 11е Бег
65 70
Уа1 Теи Туз Уа1 ТНг Азп МеН Азр
85
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп
100
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Бег Бег
115 120
РНе Рго Ъеи А1а Рго Бег Бег Ъуз
130 135
Ъеи С1у Суз Теи Уа1 Туз Азр Туг
145 150
Тгр Азп Бег С1у А1а Теи ТНг Бег
165
Теи С1п Бег Бег С1у Ъеи Туг Бег
180
Бег Бег Бег Ъеи С1у ТНг С1п ТНг
195 200
Рго А1а 10 Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТНг 15 С1п
Бег С1у РНе Бег Ъеи Бег ТНг А1а
25 30
С1п Рго Рго С1у Туз А1а Ъеи С1и
45
С1у Ъуз Туз Азр Туг Азп Рго Бег
60
Туз Азр ТНг Бег Туз Азп С1п Уа1
75 80
Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
90 95
РНе Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
105 110
А1а Бег ТНг Туз С1у Рго Бег Уа1
125
Бег ТНг Бег С1у С1у ТНг А1а А1а
140
РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Бег
155 160
С1у Уа1 Нтз ТНг РНе Рго А1а Уа1
170 175
Теи Бег Бег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго
185 190
Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Ъуз
205
- 198
Рго Зег 210 Азп ТАг Ъуз Уа1 Азр 215 Ъуз Агд Уа1 С1и Рго 220 Ъуз Зег Суз Азр
Ъуз ТАг Нтз ТАг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ъеи Ъеи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Зег Уа1 РАе Ъеи РАе Рго Рго Ъуз Рго Ъуз Азр ТАг Ъеи МеА 11е
245 250 255
Зег Агд ТАг Рго С1и Уа1 ТАг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Нтз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ъуз РАе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз
275 280 285
Азп А1а Ъуз ТАг Ъуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТАг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Зег Уа1 Ъеи ТАг Уа1 Ъеи Нтз С1п Азр Тгр Ъеи Азп С1у Ъуз
305 310 315 320
С1и Туг Ъуз Суз Ъуз Уа1 Зег Азп Ъуз А1а Ъеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Ъуз ТАг 11е Зег Ъуз А1а Ъуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТАг Ъеи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеА ТАг Ъуз Азп С1п Уа1 Зег Ъеи
355 360 365
ТАг Суз Ъеи Уа1 Ъуз С1у РАе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ъуз ТАг ТАг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Ъеи Азр Зег Азр С1у Зег РАе РАе Ъеи Туг Зег Ъуз Ъеи ТАг Уа1 Азр
405 410 415
Ъуз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РАе Зег Суз Зег Уа1 МеА Нтз
420 425 430
С1и А1а Ъеи Нтз Азп Нтз Туг ТАг С1п Ъуз Зег Ъеи Зег Ъеи Зег Рго
435 440 445
С1у Ъуз 450 <210> 150 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
- 199 023179 <223> А12а6 УН ДОМЕН <400> 150
С1п Уа1 ТНг Ъеи Агд С1и Зег С1у Рго А1а Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТНг С1п
1 5 10 15
ТНг Ъеи ТНг Ъеи ТНг Суз ТНг РНе Зег С1у РНе Зег Ъеи Зег ТНг А1а
20 25 30
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Ъеи С1и
35 40 45
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Ъуз Ъуз Азр Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Ъеи Ъуз Азр Агд Ъеи ТНг 11е Зег Ъуз Азр ТНг Зег Ъуз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп РНе Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 151 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А12а6 УН СЪК2 <400> 151
Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Ъуз Ъуз Азр Туг Азп Рго Зег Ъеи Ъуз Азр 1 5 10 15 <210> 152 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
- 200 023179 <223> А12а6 УТ ЦЕПЬ <400> 152
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго Зег ТНг Теи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Зег А1а Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеН
20 25 30
Нгз Тгр Туг С1п С1п Туз Рго С1у Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг РНе Туз Теи Зег Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг Теи ТНг 11е Зег Зег Теи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Туз Уа1 С1и 11е Туз Агд ТНг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Зег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Теи Туз Зег С1у ТНг
115 120 125
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Теи Теи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Туз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Туз Уа1 Азр Азп А1а Теи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
145 150 155 160
Зег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Зег Туз Азр Зег ТНг Туг Зег Теи Зег Зег
165 170 175
ТНг Теи ТНг Теи Зег Туз А1а Азр Туг С1и Туз Нгз Туз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТНг Нгз С1п С1у Теи Зег Зег Рго Уа1 ТНг Туз Зег РНе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210 <210> 153 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А12а6 УТ ДОМЕН
- 201 023179 <400> 153
Азр 11е С1п МеЪ ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Ъеи Бег А1а Бег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Бег А1а Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеЪ
20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг РНе Ъуз Ъеи Бег Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Бег Бег Ъеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз
100 105 <210> 154 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А12а6 УЪ СЪК1 <400> 154
Бег А1а Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеЪ Нтз 1 5 10 <210> 155 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А13с4 УН ЦЕПЬ <400> 155
С1п Уа1 ТНг Ъеи Агд С1и Бег С1у Рго А1а Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТНг С1п
- 202 023179
1 5 10 15
ТЬг Ьеи ТЬг Ьеи ТЬг Суз ТЬг РЬе Зег С1у РЬе Зег Ьеи Зег ТЬг А1а
20 25 30
С1у МеС Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ьуз А1а Ьеи С1и
35 40 45
Тгр Ьеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Ьуз Ьуз Зег Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Ьеи Ьуз Азр Агд Ьеи ТЬг 11е Зег Ьуз Азр ТЬг Зег Ьуз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
ναι Ьеи Ьуз Уа1 ТЬг Азп МеС Азр Рго А1а Азр ТЬг А1а ТЬг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеС 11е РЬе Азп РЬе Туг РЬе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТЬг ТЬг Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТЬг Ьуз С1у Рго Зег Уа1
115 120 125
РЬе Рго Ьеи А1а Рго Зег Зег Ьуз Зег ТЬг Зег С1у С1у ТЬг А1а А1а
130 135 140
Ьеи С1у Суз Ьеи Уа1 Ьуз Азр Туг РЬе Рго С1и Рго Уа1 ТЬг Уа1 Зег
145 150 155 160
Тгр Азп Зег С1у А1а Ьеи ТЬг Зег С1у Уа1 ΗΪ8 ТЬг РЬе Рго А1а Уа1
165 170 175
Ьеи С1п Зег Зег С1у Ьеи Туг Зег Ьеи Зег Зег Уа1 Уа1 ТЬг Уа1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Ьеи С1у ТЬг С1п ТЬг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Н±з Ьуз
195 200 205
Рго Зег Азп ТЬг Ьуз Уа1 Азр Ьуз Агд Уа1 С1и Рго Ьуз Зег Суз Азр
210 215 220
Ьуз ТЬг ΗΪ8 ТЬг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ьеи Ьеи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Зег Уа1 РЬе Ьеи РЬе Рго Рго Ьуз Рго Ьуз Азр ТЬг Ьеи МеС 11е
245 250 255
Зег Агд ТЬг Рго С1и Уа1 ТЬг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Н±з С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ьуз РЬе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Н±з
275 280 285
Азп А1а Ьуз ТЬг Ьуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТЬг Туг Агд
290 295 300
ναι Уа1 Зег Уа1 Ьеи ТЬг Уа1 Ьеи ΗΪ8 С1п Азр Тгр Ьеи Азп С1у Ьуз
305 310 315 320
С1и Туг Ьуз Суз Ьуз Уа1 Зег Азп Ьуз А1а Ьеи Рго А1а Рго 11е С1и
- 203
325
Туз ТНг 11е Зег Туз А1а Туз С1у
340
ТНг Теи Рго Рго Зег Агд С1и С1и
355 360
ТНг Суз Теи Уа1 Туз С1у РНе Туг
370 375
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп
385 390
Теи Азр Зег Азр С1у Зег РНе РНе
405
Туз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп
420
С1и А1а Теи Низ Азп Низ Туг ТНг
435 440
330 335
С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
345 350
МеН ТНг Туз Азп С1п Уа1 Зег Теи
365
Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
380
Азп Туг Туз ТНг ТНг Рго Рго Уа1
395 400
Теи Туг Зег Туз Теи ТНг Уа1 Азр
410 415
Уа1 РНе Зег Суз Зег Уа1 МеН Низ
425 430
С1п Туз Зег Теи Зег Теи Зег Рго
445
С1у Туз 450 <210> 156 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>
<223> А13с4 УН ДОМЕН ьность <400> 156
С1п Уа1 ТНг Теи Агд С1и Зег С1у
1 5
ТНг Теи ТНг Теи ТНг Суз ТНг РНе
20
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд
35 40
Тгр Теи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр
50 55
Теи Туз Азр Агд Теи ТНг 11е Зег
65 70
Уа1 Теи Туз Уа1 ТНг Азп МеН Азр
Рго А1а 10 Теи Уа1 Туз Рго ТНг 15 С1п
Зег С1у РНе Зег Теи Зег ТНг А1а
25 30
С1п Рго Рго С1у Туз А1а Теи С1и
45
С1у Туз Туз Зег Туг Азп Рго Зег
60
Туз Азр ТНг Зег Туз Азп С1п Уа1
75 80
Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
90 95
- 204
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп РНе Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п 100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Бег Бег 115 120 <210> 157 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А13с4 УН СЪК2 <400> 157
Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Ъуз Ъуз Бег Туг Азп Рго Бег Ъеи Ъуз Азр 1 5 10 15 <210> 158 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А13с4 УЪ ЦЕПЬ <400> 158
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Ъеи Бег А1а Бег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Бег Ъеи Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеН
20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг МеН Туг С1п Бег Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Бег Бег Ъеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
- 205
РНе С1у С1у С1у 100 ТНг Ьуз νβ1 С1и
Бег νβ1 РНе 11е РНе Рго Рго Бег
115 120
А1а Бег νβ1 νβ1 Суз Ьеи Ьеи Азп
130 135
νβ1 С1п Тгр Ьуз νβ1 Азр Азп А1а
145 150
Бег νβ1 ТНг С1и С1п Азр Бег Ьуз
165
ТНг Ьеи ТНг Ьеи Бег Ьуз А1а Азр
180
Суз С1и νβ1 ТНг Низ С1п С1у Ьеи
195 200
Азп Агд С1у С1и Суз
210
11е Ьуз Агд ТНг νβ1 А1а А1а Рго
105 110
Азр С1и С1п Ьеи Ьуз Бег С1у ТНг
125
Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Ьуз
140
Ьеи С1п Бег С1у Азп Бег С1п С1и
155 160
Азр Бег ТНг Туг Бег Беи Бег Бег
170 175
Туг С1и Ьуз Низ Буз νβ1 Туг А1а
185 190
Бег Бег Рго νβ1 ТНг Ьуз Бег РНе
205 <210> 159 <211> 106 <212> БЕЛОК ьность <220>
<223> А13с4 Ы ДОМЕН <400> 159
Азр 11е С1п МеК ТНг С1п Бег Рго
1 5
Азр Агд νβ1 ТНг 11е ТНг Суз Бег
20
Низ Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у
35 40
Азр ТНг МеК Туг С1п Бег Бег С1у
50 55
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ьеи
65 70
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе
85
РНе С1у С1у С1у ТНг Ьуз νβ1 С1и
Бег ТНг 10 Ьеи Бег А1а Бег νβ1 15 С1у
Беи Бег Бег Агд νβ1 С1у Туг МеК
25 30
Буз А1а Рго Ьуз Беи Ьеи 11е Туг
45
νβ1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
60
ТНг 11е Бег Бег Беи С1п Рго Азр
75 80
С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
90 95
11е Буз
- 206
100 105 <210> 160 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А13с4 УЪ СЪК2 <400> 160
Азр ТНг МеН Туг С1п Зег Зег 1 5 <210> 161 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А1764 УН ЦЕПЬ <400> 161
С1п Уа1 ТНг Ъеи Агд С1и Зег С1у
1 5
ТНг Ъеи ТНг Ъеи ТНг Суз ТНг РНе
20
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд
35 40
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр
50 55
Ъеи Ъуз Азр Агд Ъеи ТНг 11е Зег
65 70
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр
85
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп
100
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
Рго А1а 10 Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТНг 15 С1п
Зег С1у РНе Зег Ъеи Зег ТНг А1а
25 30
С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Ъеи С1и
45
С1у Ъуз Ъуз Зег Туг Азп Рго Зег
60
Ъуз Азр ТНг Зег Ъуз Азп С1п Уа1
75 80
Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
90 95
РНе Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
105 110
А1а Зег ТНг Ъуз С1у Рго Зег Уа1
- 207 023179
115 120 125
РТе Рго Ъеи А1а Рго Зег Зег Ъуз Зег ТТг Зег С1у С1у ТТг А1а А1а
130 135 140
Ъеи С1у Суз Ъеи Уа1 Ъуз Азр Туг РТе Рго С1и Рго Уа1 ТТг Уа1 Зег
145 150 155 160
Тгр Азп Зег С1у А1а Ъеи ТТг Зег С1у Уа1 Низ ТТг РТе Рго А1а Уа1
165 170 175
Ъеи С1п Зег Зег С1у Ъеи Туг Зег Ъеи Зег Зег Уа1 Уа1 ТТг Уа1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Ъеи С1у ТТг С1п ТТг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Низ Ъуз
195 200 205
Рго Зег Азп ТТг Ъуз Уа1 Азр Ъуз Агд Уа1 С1и Рго Ъуз Зег Суз Азр
210 215 220
Ъуз ТТг Низ ТТг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ъеи Ъеи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Зег Уа1 РТе Ъеи РТе Рго Рго Ъуз Рго Ъуз Азр ТТг Ъеи МеК 11е
245 250 255
Зег Агд ТТг Рго С1и Уа1 ТТг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Низ С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ъуз РТе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Низ
275 280 285
Азп А1а Ъуз ТТг Ъуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТТг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Зег Уа1 Ъеи ТТг Уа1 Ъеи Низ С1п Азр Тгр Ъеи Азп С1у Ъуз
305 310 315 320
С1и Туг Ъуз Суз Ъуз Уа1 Зег Азп Ъуз А1а Ъеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Ъуз ТТг 11е Зег Ъуз А1а Ъуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТТг Ъеи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеК ТТг Ъуз Азп С1п Уа1 Зег Ъеи
355 360 365
ТТг Суз Ъеи Уа1 Ъуз С1у РТе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ъуз ТТг ТТг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Ъеи Азр Зег Азр С1у Зег РТе РТе Ъеи Туг Зег Ъуз Ъеи ТТг Уа1 Азр
405 410 415
Ъуз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РТе Зег Суз Зег Уа1 МеК Низ
420 425 430
С1и А1а Ъеи Низ Азп Низ Туг ТТг С1п Ъуз Зег Ъеи Зег Теи Зег Рго
- 208 023179
435 440 445
С1у Гуз 450 <210> 162 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А1764 УН ДОМЕН <400> 162
С1п Уа1 ТНг Геи Агд С1и Зег С1у Рго А1а Геи Уа1 Ъуз Рго ТНг С1п
1 5 10 15
ТНг Ъеи ТНг Геи ТНг Суз ТНг РНе Зег С1у РНе Зег Геи Зег ТНг А1а
20 25 30
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Гуз А1а Ъеи С1и
35 40 45
Тгр Геи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Гуз Ъуз Зег Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Ъеи Гуз Азр Агд Ъеи ТНг 11е Зег Ъуз Азр ТНг Зег Ъуз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп РНе Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 163 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А1764 УН СЪК2
- 209 023179 <400> 163
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Буз Буз Бег Туг Азп Рго Бег Беи Буз Азр 1 5 10 15 <210> 164 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А17Д4 VI ЦЕПЬ <400> 164
Азр 11е С1п МеЕ ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Беи Бег А1а Бег νβ1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд νβ1 ТНг 11е ТНг Суз Беи Рго Бег Бег Агд νβ1 С1у Туг МеЕ
20 25 30
Нгз Тгр Туг С1п С1п Буз Рго С1у Буз А1а Рго Буз Беи Беи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг МеЕ Туг С1п Бег Бег С1у νβ1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Беи ТНг 11е Бег Бег Беи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Буз νβ1 С1и 11е Буз Агд ТНг νβ1 А1а А1а Рго
100 105 110
Бег νβ1 РНе 11е РНе Рго Рго Бег Азр С1и С1п Беи Буз Бег С1у ТНг
115 120 125
А1а Бег νβ1 νβ1 Суз Беи Беи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Буз
130 135 140
νβ1 С1п Тгр Буз νβ1 Азр Азп А1а Беи С1п Бег С1у Азп Бег С1п С1и
145 150 155 160
Бег νβ1 ТНг С1и С1п Азр Бег Буз Азр Бег ТНг Туг Бег Беи Бег Бег
165 170 175
ТНг Беи ТНг Беи Бег Буз А1а Азр Туг С1и Буз Нгз Буз νβ1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и νβ1 ТНг Нгз С1п С1у Беи Бег Бег Рго νβ1 ТНг Буз Бег РНе
195 200 205
- 210
Азп Агд С1у С1и Суз 210 <210> 165 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А1704 УТ ДОМЕН <400> 165
Азр 11е С1п МеЛ ТАг С1п Зег Рго Зег ТАг Теи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТАг 11е ТАг Суз Теи Рго Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеЛ
20 25 30
Нгз Тгр Туг С1п С1п Туз Рго С1у Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
35 40 45
Азр ТАг МеЛ Туг С1п А1а Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РАе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТАг С1и РАе ТАг Теи ТАг 11е Зег Зег Теи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РАе А1а ТАг Туг Туг Суз РАе С1п РАе Зег С1у Туг Рго РАе ТАг
85 90 95
РАе С1у С1у С1у ТАг Туз Теи С1и 11е Туз
100 105 <210> 166 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А1704 УТ СЕ>К1
<400> 166
Теи Рго Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеЛ Нгз
1 5 10
- 211 023179 <210> 167 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А4В4 УН ЦЕПЬ <400> 167
С1п Уа1 ТНг Теи Агд С1и Бег С1у Рго А1а Ъеи Уа1 Туз Рго ТНг С1п
1 5 10 15
ТНг Ъеи ТНг Теи ТНг Суз ТНг РНе Бег С1у РНе Бег Ъеи Бег ТНг А1а
20 25 30
С1у МеН Бег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Теи С1и
35 40 45
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Туз Ъуз Нтз Туг Азп Рго Бег
50 55 60
Ъеи Туз Азр Агд Теи ТНг 11е Бег Ъуз Азр ТНг Бег Туз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Теи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп РНе Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Бег Бег А1а Бег ТНг Туз С1у Рго Бег Уа1
115 120 125
РНе Рго Ъеи А1а Рго Бег Бег Туз Бег ТНг Бег С1у С1у ТНг А1а А1а
130 135 140
Теи С1у Суз Ъеи Уа1 Ъуз Азр Туг РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Бег
145 150 155 160
Тгр Азп Бег С1у А1а Ъеи ТНг Бег С1у Уа1 Нтз ТНг РНе Рго А1а Уа1
165 170 175
Теи С1п Бег Бег С1у Теи Туг Бег Теи Бег Бег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго
180 185 190
Бег Бег Бег Ъеи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Туз
195 200 205
Рго Бег Азп ТНг Туз Уа1 Азр Ъуз Агд Уа1 С1и Рго Туз Бег Суз Азр
210 215 220
Туз ТНг Нтз ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ъеи Ъеи С1у С1у
- 212 023179
225 230 235 240
Рго Зег νβ1 РАе Беи РАе Рго Рго Буз Рго Буз Азр ТАг Беи МеА 11е
245 250 255
Зег Агд ТАг Рго С1и νβ1 ТАг Суз νβ1 νβ1 νβ1 Азр νβ1 Зег Η^з С1и
260 265 270
Азр Рго С1и νβ1 Буз РАе Азп Тгр Туг νβ1 Азр С1у νβ1 С1и νβ1 Η^з
275 280 285
Азп А1а Буз ТАг Буз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТАг Туг Агд
290 295 300
νβ1 νβ1 Зег νβ1 Беи ТАг νβ1 Беи Η^з С1п Азр Тгр Беи Азп С1у Буз
305 310 315 320
С1и Туг Буз Суз Буз νβ1 Зег Азп Буз А1а Беи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Буз ТАг 11е Зег Буз А1а Буз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п νβ1 Туг
340 345 350
ТАг Беи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеА ТАг Буз Азп С1п νβ1 Зег Беи
355 360 365
ТАг Суз Беи νβ1 Буз С1у РАе Туг Рго Зег Азр 11е А1а νβ1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Буз ТАг ТАг Рго Рго νβ1
385 390 395 400
Беи Азр Зег Азр С1у Зег РАе РАе Беи Туг Зег Буз Беи ТАг νβ1 Азр
405 410 415
Буз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп νβ1 РАе Зег Суз Зег νβ1 МеА Η^з
420 425 430
С1и А1а Беи Η^з Азп Η^з Туг ТАг С1п Буз Зег Беи Зег Беи Зег Рго
435 440 445
С1у Ьуз 450 <210> 168 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А4В4 νΗ ДОМЕН <400> 168
- 213 023179
С1п Уа1 ТНг Ъеи Агд С1и Бег С1у Рго А1а Ъеи
1 5 10
ТНг Ъеи ТНг Ъеи ТНг Суз ТНг РНе Бег С1у РНе
20 25
С1у МеЪ Бег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго
35 40
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз Ъуз
50 55
Ъеи Ъуз Азр Агд Ъеи ТНг 11е Бег Ъуз Азр ТНг
65 70 75
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеЪ Азр Рго А1а Азр
85 90
Суз А1а Агд Азр МеЪ 11е РНе Азп РНе Туг РНе
100 105
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Бег Бег
115 120
Уа1 Ъуз Рго ТНг С1п
Бег Ъеи Бег ТНг А1а
С1у Ъуз А1а Ъеи С1и 45
Нтз Туг Азп Рго Бег 60
Бег Ъуз Азп С1п Уа1 80
ТНг А1а ТНг Туг Туг 95
Азр Уа1 Тгр С1у С1п 110
<210> <211> <212> <213> 169 213 БЕЛОК
Искусственная последовательность
<220>
<223> А4В4 УЪ ЦЕПЬ
<400> 169
Азр 11е С1п МеЪ ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Ъеи
1 5 10
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Бег А1а Бег Бег
20 25
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго
35 40
Азр ТНг РНе РНе Ъеи Азр Бег С1у Уа1 Рго Бег
50 55
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Бег
65 70 75
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег
85 90
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз Агд
Бег А1а Бег Уа1 С1у 15
Агд Уа1 С1у Туг МеЪ 30
Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг 45
Агд РНе Бег С1у Бег 60
Бег Ъеи С1п Рго Азр 80
С1у Туг Рго РНе ТНг 95
ТНг Уа1 А1а А1а Рго
- 214
100 105 110
Зег Уа1 РАе 11е РАе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Ъеи Ъуз Зег С1у ТАг
115 120 125
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Ъеи Ъеи Азп Азп РАе Туг Рго Агд С1и А1а Ъуз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Ъуз Уа1 Азр Азп А1а Ъеи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
145 150 155 160
Зег Уа1 ТАг С1и С1п Азр Зег Ъуз Азр Зег ТАг Туг Зег Ъеи Зег Зег
165 170 175
ТАг Ъеи ТАг Ъеи Зег Ъуз А1а Азр Туг С1и Ъуз Нтз Ъуз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТАг Нтз С1п С1у Ъеи Зег Зег Рго Уа1 ТАг Ъуз Зег РАе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210
<210> 170 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А4В4 УЪ ДОМЕН <400> 170
Азр 11е С1п МеА ТАг С1п Зег Рго Зег ТАг Ъеи Зег А1а Зег Уа1 С1у 1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТАг 11е ТАг Суз Зег А1а Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеА 20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг 35 40 45
Азр ТАг РАе РАе Ъеи Азр Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РАе Зег С1у Зег 50 55 60
С1у Зег С1у ТАг С1и РАе ТАг Ъеи ТАг 11е Зег Зег Ъеи С1п Рго Азр
70 75 80
Азр РАе А1а ТАг Туг Туг Суз РАе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РАе ТАг
90 95
РАе С1у С1у С1у ТАг Ъуз Ъеи С1и 11е Ъуз
100 105
- 215 <210> 171 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А4В4 ντ СЬК2 <400> 171
Азр ТНг РНе РНе Теи Азр Бег 1 5 <210> 172 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А8с7 νΗ ЦЕПЬ <400> 172
С1п Уа1 ТНг Теи Агд С1и Бег С1у
1 5
ТНг Теи ТНг Теи ТНг Суз ТНг РНе
20
С1у Ме/ Бег Уа1 С1у Тгр 11е Агд
35 40
Тгр Теи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр
50 55
Теи Туз Азр Агд Теи ТНг 11е Бег
65 70
Уа1 Теи Туз Уа1 ТНг Азп Ме/ Азр
85
Суз А1а Агд Азр Ме/ 11е РНе Азп
100
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Бег Бег
115 120
Рго А1а 10 Теи Уа1 Туз Рго ТНг 15 С1п
Бег С1у РНе Бег Теи Бег ТНг А1а
25 30
С1п Рго Рго С1у Туз А1а Теи С1и
45
Азр Туз Туз Бег Туг Азп Рго Бег
60
Туз Азр ТНг Бег Туз Азп С1п Уа1
75 80
Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
90 95
Тгр Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
105 110
А1а Бег ТНг Туз С1у Рго Бег Уа1
125
- 216 023179
РНе Рго 130 Ъеи А1а Рго Бег Бег 135 Ъуз Бег ТНг Бег С1у 140 С1у ТНг А1а А1а
Ъеи С1у Суз Ъеи Уа1 Ъуз Азр Туг РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Бег
145 150 155 160
Тгр Азп Бег С1у А1а Ъеи ТНг Бег С1у Уа1 Нтз ТНг РНе Рго А1а Уа1
165 170 175
Ъеи С1п Бег Бег С1у Ъеи Туг Бег Ъеи Бег Бег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго
180 185 190
Бег Бег Бег Ъеи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Ъуз
195 200 205
Рго Бег Азп ТНг Ъуз Уа1 Азр Ъуз Агд Уа1 С1и Рго Ъуз Бег Суз Азр
210 215 220
Ъуз ТНг Нтз ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ъеи Ъеи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Бег Уа1 РНе Ъеи РНе Рго Рго Ъуз Рго Ъуз Азр ТНг Ъеи МеН 11е
245 250 255
Бег Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Бег Нтз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ъуз РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз
275 280 285
Азп А1а Ъуз ТНг Ъуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Бег ТНг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Бег Уа1 Ъеи ТНг Уа1 Ъеи Нтз С1п Азр Тгр Ъеи Азп С1у Ъуз
305 310 315 320
С1и Туг Ъуз Суз Ъуз Уа1 Бег Азп Ъуз А1а Ъеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Ъуз ТНг 11е Бег Ъуз А1а Ъуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТНг Ъеи Рго Рго Бег Агд С1и С1и МеН ТНг Ъуз Азп С1п Уа1 Бег Ъеи
355 360 365
ТНг Суз Ъеи Уа1 Ъуз С1у РНе Туг Рго Бег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Бег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ъуз ТНг ТНг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Ъеи Азр Бег Азр С1у Бег РНе РНе Ъеи Туг Бег Ъуз Ъеи ТНг Уа1 Азр
405 410 415
Ъуз Бег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Бег Суз Бег Уа1 МеН Нтз
420 425 430
С1и А1а Ъеи Нтз Азп Нтз Туг ТНг С1п Ъуз Бег Ъеи Бег Ъеи Бег Рго
435 440 445
- 217 023179
С1у Туз 450 <210> 173 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А8с7 УН ДОМЕН <400> 173
С1п Уа1 ТНг Теи Агд С1и Зег С1у Рго А1а Теи Уа1 Туз Рго ТНг С1п
1 5 10 15
ТНг Теи ТНг Теи ТНг Суз ТНг РНе Зег С1у РНе Зег Теи Зег ТНг А1а
20 25 30
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Туз А1а Теи С1и
35 40 45
Тгр Теи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Туз Туз Зег Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Теи Туз Азр Агд Теи ТНг 11е Зег Туз Азр ТНг Зег Туз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Теи Туз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп Тгр Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 174 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А8с7 УТ ЦЕПЬ <400> 174
- 218 023179
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго Зег ТНг Геи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Зег Рго Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеН
20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Геи Геи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг Агд Туг С1п Зег Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Зег Зег Ъеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Гуз Агд ТНг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Зег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Геи Ъуз Зег С1у ТНг
115 120 125
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Геи Ъеи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Гуз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Гуз Уа1 Азр Азп А1а Ъеи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
145 150 155 160
Зег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Зег Гуз Азр Зег ТНг Туг Зег Ъеи Зег Зег
165 170 175
ТНг Геи ТНг Геи Зег Гуз А1а Азр Туг С1и Ъуз Нтз Гуз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТНг Нтз С1п С1у Геи Зег Зег Рго Уа1 ТНг Ъуз Зег РНе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210 <210> 175 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А8с7 УЪ ДОМЕН <400> 175
- 219 023179
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго Зег ТНг Ъеи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Зег А1а Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеН
20 25 30
Нгз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг Агд Туг С1п Зег Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Зег Зег Ъеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Ъеи С1и 11е Ъуз
100 105
<210> 176 <211> 451 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 1Х-493Ъ1РК УН ЦЕПЬ <400> 176
С1п Уа1 ТНг Ъеи Агд С1и Зег С1у Рго А1а Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТНг С1п 1 5 10 15
ТНг Ъеи ТНг Ъеи ТНг Суз ТНг РНе Зег С1у РНе Зег Ъеи Зег ТНг Зег 20 25 30
С1у МеН Зег Уа1 С1у Туг Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Ъеи 35 40 45
С1и Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз Ъуз Азр Туг Азп Рго 50 55 60
Зег Ъеи Ъуз Зег Агд Ъеи ТНг 11е Зег Ъуз Азр ТНг Зег Ъуз Азп С1п
70 75 80
Уа1 Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг
90 95
Туг Суз А1а Агд Зег МеН 11е ТНг Азп Тгр Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у
100 105 110
С1п С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТНг Ъуз С1у Рго Зег
- 220 023179
115 120 125
Уа1 РНе Рго Теи А1а Рго Зег Зег Туз Зег ТНг Зег С1у С1у ТНг А1а
130 135 140
А1а Теи С1у Суз Теи Уа1 Туз Азр Туг РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1
145 150 155 160
Зег Тгр Азп Зег С1у А1а Теи ТНг Зег С1у Уа1 Низ ТНг РНе Рго А1а
165 170 175
Уа1 Теи С1п Зег Зег С1у Теи Туг Зег Теи Зег Зег Уа1 Уа1 ТНг Уа1
180 185 190
Рго Зег Зег Зег Теи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Низ
195 200 205
Туз Рго Зег Азп ТНг Туз Уа1 Азр Туз Агд Уа1 С1и Рго Туз Зег Суз
210 215 220
Азр Туз ТНг Низ ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Теи Теи С1у
225 230 235 240
С1у Рго Зег Уа1 РНе Теи РНе Рго Рго Туз Рго Туз Азр ТНг Теи МеН
245 250 255
11е Зег Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Низ
260 265 270
С1и Азр Рго С1и Уа1 Туз РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1
275 280 285
Низ Азп А1а Туз ТНг Туз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТНг Туг
290 295 300
Агд Уа1 Уа1 Зег Уа1 Теи ТНг Уа1 Теи Низ С1п Азр Тгр Теи Азп С1у
305 310 315 320
Туз С1и Туг Туз Суз Туз Уа1 Зег Азп Туз А1а Теи Рго А1а Рго 11е
325 330 335
С1и Туз ТНг 11е Зег Туз А1а Туз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1
340 345 350
Туг ТНг Теи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеН ТНг Туз Азп С1п Уа1 Зег
355 360 365
Теи ТНг Суз Теи Уа1 Туз С1у РНе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и
370 375 380
Тгр С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Туз ТНг ТНг Рго Рго
385 390 395 400
Уа1 Теи Азр Зег Азр С1у Зег РНе РНе Теи Туг Зег Туз Теи ТНг Уа1
405 410 415
Азр Туз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Зег Суз Зег Уа1 МеН
420 425 430
Низ С1и А1а Теи Низ Азп Низ Туг ТНг С1п Туз Зег Теи Зег Теи Зег
- 221
435 440 445
Рго С1у Туз
450 <210> 177 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΙΧ-493Τ1ΡΚ УТ ЦЕПЬ <400> 177
Азр 11е С1п МеЛ ТАг С1п Зег Рго Зег ТАг Теи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТАг 11е ТАг Суз Зег А1а Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеЛ
20 25 30
Нгз Тгр Туг С1п С1п Туз Рго С1у Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
35 40 45
Азр ТАг Зег Туз Теи А1а Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РАе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТАг С1и РАе ТАг Теи ТАг 11е Зег Зег Теи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РАе А1а ТАг Туг Туг Суз РАе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РАе ТАг
85 90 95
РАе С1у С1у С1у ТАг Туз Уа1 С1и 11е Туз Агд ТАг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Зег Уа1 РАе 11е РАе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Теи Туз Зег С1у ТАг
115 120 125
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Теи Теи Азп Азп РАе Туг Рго Агд С1и А1а Туз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Туз Уа1 Азр Азп А1а Теи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
145 150 155 160
Зег Уа1 ТАг С1и С1п Азр Зег Туз Азр Зег ТАг Туг Зег Теи Зег Зег
165 170 175
ТАг Теи ТАг Теи Зег Туз А1а Азр Туг С1и Туз Нгз Туз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТАг Нгз С1п С1у Теи Зег Зег Рго Уа1 ТАг Туз Зег РАе
195 200 205
- 222
Азп Агд С1у С1и Суз 210 <210> 178 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>
<223> ΙΧ-493Τ1ΡΚ ντ последовательность
ДОМЕН <400> 178
Азр 11е С1п Ме/ ТНг
1 5
Азр Агд Уа1 ТНг 20 11е
Η^з Тгр Туг 35 С1п С1п
Азр ТНг 50 Бег Туз Теи
С1у 65 Бег С1у ТНг С1и
Азр РНе А1а ТНг Туг 85
РНе С1у С1у С1у 100 ТНг
С1п Бег Рго Бег ТНг 10 Теи Бег А1а Бег Уа1 15 С1у
ТНг Суз Бег А1а Бег Бег Бег Уа1 С1у Туг Ме/
25 30
Туз Рго С1у Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
40 45
А1а Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
55 60
РНе ТНг Теи ТНг 11е Бег Бег Теи С1п Рго Азр
70 75 80
Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
90 95
Туз Теи С1и 11е Туз
105 <210> 179 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>
<223> Μ3Η9 νΗ ЦЕПЬ последовательность <400> 179
С1п Уа1 ТНг Теи Агд
1 5
ТНг Теи ТНг Теи 20 ТНг
С1и Бег С1у Рго А1а 10 Теи Уа1 Туз Рго ТНг 15 С1п
Суз ТНг РНе Бег С1у РНе Бег Теи Бег ТНг А1а
25 30
- 223
С1у МеК Бег 35 νβ1 С1у Тгр 11е Агд 40 С1п Рго Рго С1у Ьуз 45 А1а Ьеи С1и
Тгр Ьеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ьуз Ьуз Азр Туг Азп Рго Бег
50 55 60
Беи Ьуз Бег Агд Ьеи ТНг 11е Бег Ьуз Азр ТНг Бег Буз Азп С1п νβ1
65 70 75 80
νβ1 Беи Буз νβ1 ТНг Азп МеК Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеК 11е РНе Азп Тгр Туг РНе Азр νβ1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг νβ1 ТНг νβ1 Бег Бег А1а Бег ТНг Ьуз С1у Рго Бег νβ1
115 120 125
РНе Рго Ьеи А1а Рго Бег Бег Ьуз Бег ТНг Бег С1у С1у ТНг А1а А1а
130 135 140
Ьеи С1у Суз Беи νβ1 Ьуз Азр Туг РНе Рго С1и Рго νβ1 ТНг νβ1 Бег
145 150 155 160
Тгр Азп Бег С1у А1а Беи ТНг Бег С1у νβ1 Низ ТНг РНе Рго А1а νβ1
165 170 175
Ьеи С1п Бег Бег С1у Беи Туг Бег Ьеи Бег Бег νβ1 νβ1 ТНг νβ1 Рго
180 185 190
Бег Бег Бег Ьеи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп νβ1 Азп Низ Ьуз
195 200 205
Рго Бег Азп ТНг Буз νβ1 Азр Буз Агд νβ1 С1и Рго Буз Бег Суз Азр
210 215 220
Буз ТНг Низ ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ьеи Беи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Бег νβ1 РНе Беи РНе Рго Рго Буз Рго Буз Азр ТНг Беи МеК 11е
245 250 255
Бег Агд ТНг Рго С1и νβ1 ТНг Суз νβ1 νβ1 νβ1 Азр νβ1 Бег Низ С1и
260 265 270
Азр Рго С1и νβ1 Ьуз РНе Азп Тгр Туг νβ1 Азр С1у νβ1 С1и νβ1 Низ
275 280 285
Азп А1а Ьуз ТНг Ьуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Бег ТНг Туг Агд
290 295 300
νβ1 νβ1 Бег νβ1 Беи ТНг νβ1 Беи Низ С1п Азр Тгр Ьеи Азп С1у Буз
305 310 315 320
С1и Туг Буз Суз Буз νβ1 Бег Азп Буз А1а Беи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Буз ТНг 11е Бег Ьуз А1а Ьуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п νβ1 Туг
340 345 350
- 224
ТНг Теи Рго 355 Рго Бег Агд С1и С1и 360 МеН ТНг Ъуз Азп С1п 365 Уа1 Бег Теи
ТНг Суз Ъеи Уа1 Туз С1у РНе Туг Рго Бег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Бег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Туз ТНг ТНг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Ъеи Азр Бег Азр С1у Бег РНе РНе Теи Туг Бег Туз Ъеи ТНг Уа1 Азр
405 410 415
Ъуз Бег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Бег Суз Бег Уа1 МеН Нтз
420 425 430
С1и А1а Ъеи Нтз Азп Нтз Туг ТНг С1п Ъуз Бег Ъеи Бег Теи Бег Рго
435 440 445
С1у Туз
450
<210> 180 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> М3Н9 УЪ ЦЕПЬ <400> 180
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Теи Бег А1а Бег Уа1 С1у 1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Бег А1а Бег Бег Бег Уа1 С1у Туг МеН 20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Туз Теи Ъеи 11е Туг 35 40 45
Азр ТНг Туг Ъуз С1п ТНг Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег 50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Теи ТНг 11е Бег Бег Теи С1п Рго Азр
70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз Агд ТНг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Бег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Бег Азр С1и С1п Теи Туз Бег С1у ТНг
- 225
115
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз 130
Уа1 С1п Тгр Туз Уа1 145
Зег Уа1 ТНг С1и С1п
165
ТНг Теи ТНг Теи Зег
180
Суз С1и Уа1 ТНг Нгз 195
Азп Агд С1у С1и Суз 210 <210> 181 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>
<223> М3Н9 УТ ДОМЕН <400> 181
Азр 11е С1п МеН ТНг 1 5
Азр Агд Уа1 ТНг 11е
Нгз Тгр Туг С1п С1п 35
Азр ТНг Туг Туз С1п 50
С1у Зег С1у ТНг С1и 65
Азр РНе А1а ТНг Туг 85
РНе С1у С1у С1у ТНг
100
120 125
Теи Теи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Туз
135 140
Азр Азп А1а Теи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
150 155 160
Азр Зег Туз Азр Зег ТНг Туг Зег Теи Зег Зег
170 175
Туз А1а Азр Туг С1и Туз Нгз Туз Уа1 Туг А1а
185 190
С1п С1у Теи Зег Зег Рго Уа1 ТНг Туз Зег РНе
200 205 последовательность
С1п Зег Рго Зег ТНг 10 Теи Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
ТНг Суз Зег А1а Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеН
25 30
Туз Рго С1у Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
40 45
ТНг Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
55 60
РНе ТНг Теи ТНг 11е Зег Зег Теи С1п Рго Азр
70 75 80
Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
90 95
Туз Теи С1и 11е Туз
105
- 226
<210> 182
<211> 450
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> У10Н6 УН ЦЕПЬ
последовательность <400> 182
С1п 1 Уа1 ТАг Ъеи Агд 5
ТАг Ъеи ТАг Ъеи 20 ТАг
С1у МеА Зег 35 Уа1 С1у
Тгр Ъеи 50 А1а Азр 11е
Ъеи 65 Ъуз Зег Агд Ъеи
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТАг 85
Суз А1а Агд Азр 100 МеА
С1у ТАг ТАг 115 Уа1 ТАг
РАе Рго 130 Ъеи А1а Рго
Ъеи 145 С1у Суз Ъеи Уа1
Тгр Азп Зег С1у А1а 165
Ъеи С1п Зег Зег 180 С1у
Зег Зег Зег 195 Ъеи С1у
Рго Зег 210 Азп ТАг Ъуз
Ъуз 225 ТАг Нтз ТАг Суз
Рго Зег Уа1 РАе Ъеи
С1и Зег С1у Рго А1а 10 Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТАг 15 С1п
Суз ТАг РАе Зег С1у РАе Зег Ъеи Зег ТАг А1а
25 30
Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Ъеи С1и
40 45
Тгр Тгр Азр Азр Ъуз Ъуз Азр Туг Азп Рго Зег
55 60
ТАг 11е Зег Ъуз Азр ТАг Зег Ъуз Азп С1п Уа1
70 75 80
Азп МеА Азр Рго А1а Азр ТАг А1а ТАг Туг Туг
90 95
11е РАе Азп Тгр Туг РАе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
105 110
Уа1 Зег Зег А1а Зег ТАг Ъуз С1у Рго Зег Уа1
120 125
Зег Зег Ъуз Зег ТАг Зег С1у С1у ТАг А1а А1а
135 140
Ъуз Азр Туг РАе Рго С1и Рго Уа1 ТАг Уа1 Зег
150 155 160
Ъеи ТАг Зег С1у Уа1 Нтз ТАг РАе Рго А1а Уа1
170 175
Ъеи Туг Зег Ъеи Зег Зег Уа1 Уа1 ТАг Уа1 Рго
185 190
ТАг С1п ТАг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Ъуз
200 205
Уа1 Азр Ъуз Агд Уа1 С1и Рго Ъуз Зег Суз Азр
215 220
Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ъеи Ъеи С1у С1у
230 235 240
РАе Рго Рго Ъуз Рго Ъуз Азр ТАг Ъеи МеА 11е
250 255
245
- 227 023179
Бег Агд ТНг Рго 260 С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 265 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Бег 270 Нтз С1и
Азр Рго С1и Уа1 Ъуз РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз
275 280 285
Азп А1а Ъуз ТНг Ъуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Бег ТНг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Бег Уа1 Ъеи ТНг Уа1 Ъеи Нтз С1п Азр Тгр Ъеи Азп С1у Ъуз
305 310 315 320
С1и Туг Ъуз Суз Ъуз Уа1 Бег Азп Ъуз А1а Ъеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Ъуз ТНг 11е Бег Ъуз А1а Ъуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТНг Ъеи Рго Рго Бег Агд С1и С1и МеЪ ТНг Ъуз Азп С1п Уа1 Бег Ъеи
355 360 365
ТНг Суз Ъеи Уа1 Ъуз С1у РНе Туг Рго Бег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Бег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ъуз ТНг ТНг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Ъеи Азр Бег Азр С1у Бег РНе РНе Ъеи Туг Бег Ъуз Ъеи ТНг Уа1 Азр
405 410 415
Ъуз Бег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Бег Суз Бег Уа1 МеЪ Нтз
420 425 430
С1и А1а Ъеи Нтз Азп Нтз Туг ТНг С1п Ъуз Бег Ъеи Бег Ъеи Бег Рго
435 440 445
С1у Ъуз 450 <210> 183 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> У10Н6 УЪ ЦЕПЬ <400> 183
Азр 11е С1п МеЪ ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Ъеи Бег А1а Бег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Бег А1а Бег Бег Бег Уа1 С1у Туг МеЪ
- 228 023179
20 25 30
Η^з Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТАг Агд Туг Ьеи Зег Зег С1у νβ1 Рго Зег Агд РАе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТАг С1и РАе ТАг Ьеи ТАг 11е Зег Зег Ьеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РАе А1а ТАг Туг Туг Суз РАе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РАе ТАг
85 90 95
РАе С1у С1у С1у ТАг Ьуз νβ1 С1и 11е Ьуз Агд ТАг νβ1 А1а А1а Рго
100 105 110
Зег νβ1 РАе 11е РАе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Ьеи Ьуз Зег С1у ТАг
115 120 125
А1а Зег νβ1 νβ1 Суз Ьеи Ьеи Азп Азп РАе Туг Рго Агд С1и А1а Ьуз
130 135 140
νβ1 С1п Тгр Ьуз νβ1 Азр Азп А1а Ьеи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
145 150 155 160
Зег νβ1 ТАг С1и С1п Азр Зег Ьуз Азр Зег ТАг Туг Зег Ьеи Зег Зег
165 170 175
ТАг Беи ТАг Ьеи Зег Ьуз А1а Азр Туг С1и Ьуз Η^з Ьуз νβ1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и νβ1 ТАг Η^з С1п С1у Ьеи Зег Зег Рго νβ1 ТАг Ьуз Зег РАе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210 <210> 184 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Υ10Η6 V! ДОМЕН <400> 184
Азр 11е С1п МеА ТАг С1п Зег Рго Зег ТАг Ьеи Зег А1а Зег νβ1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд νβ1 ТАг 11е ТАг Суз Зег А1а Зег Зег Зег νβ1 С1у Туг МеА
20 25 30
- 229 023179
Нгз Тгр Туг 35 С1п С1п Ьуз Рго С1у 40 Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи 45 Ьеи 11е Туг
Азр ТНг Агд Туг Ьеи Бег Бег С1у νβ1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ьеи ТНг 11е Бег Бег Ьеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ьуз Ьеи С1и 11е Ьуз
100 105
<210> 185 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> У10Н6 νΣ СБК2 <400> 185
Азр ТНг Агд Туг Беи Бег Бег 1 5 <210> 186 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> БС VН ЦЕПЬ <400> 186
С1п 1 νβ1 ТНг Ьеи Агд 5 С1и Бег С1у Рго А1а 10 Ьеи νβ1 Ьуз Рго ТНг 15 С1п
ТНг Ьеи ТНг Ьеи ТНг Суз ТНг РНе Бег С1у РНе Бег Ьеи Бег ТНг А1а
20 25 30
С1у МеЕ Бег νβ1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ьуз А1а Ьеи С1и
35 40 45
- 230
Тгр Ьеи 50 А1а Азр 11е Тгр Тгр 55 Азр Азр Ьуз Ьуз Азр 60 Туг Азп Рго Зег
Ьеи Ьуз Зег Агд Ьеи ТЬг 11е Зег Ьуз Азр ТЬг Зег Ьуз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Ьеи Ьуз Уа1 ТЬг Азп МеС Азр Рго А1а Азр ТЬг А1а ТЬг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеС 11е ТЬг Азп РЬе Туг РЬе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТЬг ТЬг Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТЬг Ьуз С1у Рго Зег Уа1
115 120 125
РЬе Рго Ьеи А1а Рго Зег Зег Ьуз Зег ТЬг Зег С1у С1у ТЬг А1а А1а
130 135 140
Ьеи С1у Суз Ьеи Уа1 Ьуз Азр Туг РЬе Рго С1и Рго Уа1 ТЬг Уа1 Зег
145 150 155 160
Тгр Азп Зег С1у А1а Ьеи ТЬг Зег С1у Уа1 Нтз ТЬг РЬе Рго А1а Уа1
165 170 175
Ьеи С1п Зег Зег С1у Ьеи Туг Зег Ьеи Зег Зег Уа1 Уа1 ТЬг Уа1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Ьеи С1у ТЬг С1п ТЬг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Ьуз
195 200 205
Рго Зег Азп ТЬг Ьуз Уа1 Азр Ьуз Агд Уа1 С1и Рго Ьуз Зег Суз Азр
210 215 220
Ьуз ТЬг Нтз ТЬг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ьеи Ьеи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Зег Уа1 РЬе Ьеи РЬе Рго Рго Ьуз Рго Ьуз Азр ТЬг Ьеи МеС 11е
245 250 255
Зег Агд ТЬг Рго С1и Уа1 ТЬг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Нтз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ьуз РЬе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз
275 280 285
Азп А1а Ьуз ТЬг Ьуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТЬг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Зег Уа1 Ьеи ТЬг Уа1 Ьеи Нтз С1п Азр Тгр Ьеи Азп С1у Ьуз
305 310 315 320
С1и Туг Ьуз Суз Ьуз Уа1 Зег Азп Ьуз А1а Ьеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Ьуз ТЬг 11е Зег Ьуз А1а Ьуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТЬг Ьеи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеС ТЬг Ьуз Азп С1п Уа1 Зег Ьеи
355 360 365
- 231
ТНг Суз Ъеи Уа1 Гуз 370
С1и Зег Азп С1у С1п 385
Геи Азр Зег Азр С1у 405
Ъуз Зег Агд Тгр С1п 420
С1и А1а Ъеи Нтз Азп
435
С1у Гуз 450
С1у РНе 375 Туг Рго Зег Азр 11е 380 А1а Уа1 С1и Тгр
Рго С1и Азп Азп Туг Гуз ТНг ТНг Рго Рго Уа1
390 395 400
Зег РНе РНе Ъеи Туг Зег Гуз Ъеи ТНг Уа1 Азр
410 415
С1п С1у Азп Уа1 РНе Зег Суз Зег Уа1 МеН Нтз
425 430
Нтз Туг ТНг С1п Ъуз Зег Ъеи Зег Геи Зег Рго
440 445 <210> 187 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>
<223> ЪС УН ДОМЕН <400> 187
С1п Уа1 ТНг Геи Агд 1 5
ТНг Ъеи ТНг Ъеи ТНг
С1у МеН Зег Уа1 С1у 35
Тгр Геи А1а Азр 11е 50
Геи Ъуз Зег Агд Ъеи 65
Уа1 Геи Гуз Уа1 ТНг 85
Суз А1а Агд Азр МеН 100
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг 115 последовательность
С1и Зег С1у Рго А1а 10 Ъеи Уа1 Гуз Рго ТНг 15 С1п
Суз ТНг РНе Зег С1у РНе Зег Ъеи Зег ТНг А1а
25 30
Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Геи С1и
40 45
Тгр Тгр Азр Азр Ъуз Гуз Азр Туг Азп Рго Зег
55 60
ТНг 11е Зег Гуз Азр ТНг Зег Гуз Азп С1п Уа1
70 75 80
Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
90 95
11е ТНг Азп РНе Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у А1а
105 110
Уа1 Зег Зег
120
- 232 <210> 188 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>
<223> ЪС УН СЪК3 <400> 188
Азр МеН 11е ТНг Азп 1 5 последовательность
РНе Туг РНе Азр Уа1 10 <210> 189 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>
<223> ЪС УЪ ЦЕПЬ последовательность <400> 189
Азр 1 11е С1п МеН ТНг 5
Азр Агд Уа1 ТНг 20 11е
Нгз Тгр Туг 35 С1п С1п
Азр ТНг 50 РНе Ъуз Ъеи
С1у 65 Зег С1у ТНг С1и
Азр РНе А1а ТНг Туг 85
РНе С1у С1у С1у 100 ТНг
Зег Уа1 РНе 115 11е РНе
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз
С1п Зег Рго Зег ТНг 10 Ъеи Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
ТНг Суз Зег А1а Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеН
25 30
Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
40 45
А1а Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
55 60
РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Зег Зег Ъеи С1п Рго Азр
70 75 80
Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
90 95
Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз Агд ТНг Уа1 А1а А1а Рго
105 110
Рго Рго Зег Азр С1и С1п Ъеи Ъуз Зег С1у ТНг
120 125
Ъеи Ъеи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Ъуз
- 233
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Ъуз Уа1 Азр Азп А1а Ъеи С1п Бег С1у Азп Бег С1п С1и
145 150 155 160
Бег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Бег Ъуз Азр Бег ТНг Туг Бег Ъеи Бег Бег
165 170 175
ТНг Ъеи ТНг Ъеи Бег Ъуз А1а Азр Туг С1и Ъуз Нтз Ъуз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТНг Нтз С1п С1у Ъеи Бег Бег Рго Уа1 ТНг Ъуз Бег РНе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210
<210> 190 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> АГГГ(1) УН ЦЕПЬ <400> 190
С1п Уа1 ТНг Ъеи Агд С1и Бег С1у Рго А1а Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТНг С1п 1 5 10 15
ТНг Ъеи ТНг Ъеи ТНг Суз ТНг РНе Бег С1у РНе Бег Ъеи Бег ТНг А1а 20 25 30
С1у МеН Бег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Ъеи С1и 35 40 45
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз Ъуз Азр Туг Азп Рго Бег 50 55 60
Ъеи Ъуз Бег Агд Ъеи ТНг 11е Бег Ъуз Азр ТНг Бег Ъуз Азп С1п Уа1
70 75 80
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
90 95
Суз А1а Агд Бег МеН 11е ТНг Азп РНе Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Бег Бег А1а Бег ТНг Ъуз С1у Рго Бег Уа1
115 120 125
РНе Рго Ъеи А1а Рго Бег Бег Ъуз Бег ТНг Бег С1у С1у ТНг А1а А1а
130 135 140
- 234 023179
Теи С1у Суз Теи Уа1 Туз Азр Туг РАе Рго С1и Рго Уа1 ТАг Уа1 Зег
145 150 155 160
Тгр Азп Зег С1у А1а Теи ТАг Зег С1у Уа1 Нгз ТАг РАе Рго А1а Уа1
165 170 175
Теи С1п Зег Зег С1у Теи Туг Зег Теи Зег Зег Уа1 Уа1 ТАг Уа1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Теи С1у ТАг С1п ТАг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нгз Туз
195 200 205
Рго Зег Азп ТАг Туз Уа1 Азр Туз Агд Уа1 С1и Рго Туз Зег Суз Азр
210 215 220
Туз ТАг Нгз ТАг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Теи Теи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Зег Уа1 РАе Теи РАе Рго Рго Туз Рго Туз Азр ТАг Теи МеЛ 11е
245 250 255
Зег Агд ТАг Рго С1и Уа1 ТАг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Нгз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Туз РАе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нгз
275 280 285
Азп А1а Туз ТАг Туз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТАг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Зег Уа1 Теи ТАг Уа1 Теи Нгз С1п Азр Тгр Теи Азп С1у Туз
305 310 315 320
С1и Туг Туз Суз Туз Уа1 Зег Азп Туз А1а Теи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Туз ТАг 11е Зег Туз А1а Туз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТАг Теи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеЛ ТАг Туз Азп С1п Уа1 Зег Теи
355 360 365
ТАг Суз Теи Уа1 Туз С1у РАе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Туз ТАг ТАг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Теи Азр Зег Азр С1у Зег РАе РАе Теи Туг Зег Туз Теи ТАг Уа1 Азр
405 410 415
Туз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РАе Зег Суз Зег Уа1 МеЛ Нгз
420 425 430
С1и А1а Теи Нгз Азп Нгз Туг ТАг С1п Туз Зег Теи Зег Теи Зег Рго
435 440 445
С1у Туз 450
- 235 <210> 191 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> АГГГ(1) УЪ ЦЕПЬ <400> 191
Азр 11е С1п МеК ТТг С1п Зег Рго Зег ТТг Пей Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТТг 11е ТТг Суз Зег А1а Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеК
20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Пуз Рго С1у Пуз А1а Рго Пуз Пей Пей 11е Туг
35 40 45
Азр ТТг РТе Пуз Пей А1а Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РТе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТТг С1и РТе ТТг Пей ТТг 11е Зег Зег Пей С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РТе А1а ТТг Туг Туг Суз РТе С1п С1у Зег РТе Туг Рго РТе ТТг
85 90 95
РТе С1у С1у С1у ТТг Пуз Уа1 С1и 11е Пуз Агд ТТг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Зег Уа1 РТе 11е РТе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Пей Пуз Зег С1у ТТг
115 120 125
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Пей Пей Азп Азп РТе Туг Рго Агд С1и А1а Пуз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Пуз Уа1 Азр Азп А1а Пей С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
145 150 155 160
Зег Уа1 ТТг С1и С1п Азр Зег Пуз Азр Зег ТТг Туг Зег Пей Зег Зег
165 170 175
ТТг Ъеи ТТг Пей Зег Пуз А1а Азр Туг С1и Пуз Нтз Пуз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТТг Нтз С1п С1у Пей Зег Зег Рго Уа1 ТТг Пуз Зег РТе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210
- 236 <210> 192 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> АГГГ(1) ντ ДОМЕН <400> 192
Азр 11е С1п Ме/ ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Теи Бег А1а Бег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Бег А1а Бег Бег Бег Уа1 С1у Туг Ме/
20 25 30
Η^з Тгр Туг С1п С1п Туз Рго С1у Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг РНе Туз Теи А1а Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Теи ТНг 11е Бег Бег Теи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег РНе Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Туз Теи С1и 11е Туз
100 105
<210> 193 <211> 9 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> АГГГ(1) ντ СЕ>К3 <400> 193
РНе С1п С1у Бег РНе Туг Рго РНе ТНг 1 5 <210> 194
- 237 023179 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 6Н8 УН ЦЕПЬ <400> 194
С1п 1 Уа1 ТНг Теи Агд 5 С1и Зег С1у Рго А1а 10 Теи Уа1 Туз Рго ТНг 15 С1п
ТНг Теи ТНг Теи ТНг Суз ТНг РНе Зег С1у РНе Зег Теи Зег ТНг А1а
20 25 30
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Туз А1а Теи С1и
35 40 45
Тгр Теи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Туз Туз Азр Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Теи Туз Зег Агд Теи ТНг 11е Зег Туз Азр ТНг Зег Туз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Теи Туз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеН 11е ТНг Азп РНе Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТНг Туз С1у Рго Зег Уа1
115 120 125
РНе Рго Теи А1а Рго Зег Зег Туз Зег ТНг Зег С1у С1у ТНг А1а А1а
130 135 140
Теи С1у Суз Теи Уа1 Туз Азр Туг РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Зег
145 150 155 160
Тгр Азп Зег С1у А1а Теи ТНг Зег С1у Уа1 Низ ТНг РНе Рго А1а Уа1
165 170 175
Теи С1п Зег Зег С1у Теи Туг Зег Теи Зег Зег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Теи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Низ Туз
195 200 205
Рго Зег Азп ТНг Туз Уа1 Азр Туз Агд Уа1 С1и Рго Туз Зег Суз Азр
210 215 220
Туз ТНг Низ ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Теи Теи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Зег Уа1 РНе Теи РНе Рго Рго Туз Рго Туз Азр ТНг Теи МеН 11е
- 238 023179
245 250 255
Зег Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Нгз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Туз РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нгз
275 280 285
Азп А1а Туз ТНг Туз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТНг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Зег Уа1 Теи ТНг Уа1 Теи Нгз С1п Азр Тгр Теи Азп С1у Туз
305 310 315 320
С1и Туг Туз Суз Туз Уа1 Зег Азп Туз А1а Теи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Туз ТНг 11е Зег Туз А1а Туз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТНг Теи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеН ТНг Туз Азп С1п Уа1 Зег Теи
355 360 365
ТНг Суз Теи Уа1 Туз С1у РНе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Туз ТНг ТНг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Теи Азр Зег Азр С1у Зег РНе РНе Теи Туг Зег Туз Теи ТНг Уа1 Азр
405 410 415
Туз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Зег Суз Зег Уа1 МеН Нгз
420 425 430
С1и А1а Теи Нгз Азп Нгз Туг ТНг С1п Туз Зег Теи Зег Теи Зег Рго
435 440 445
С1у Туз 450 <210> 195 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 6Н8 УТ ЦЕПЬ <400> 195
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго Зег ТНг Теи Зег А1а Зег Уа1 С1у 1 5 10 15
- 239 023179
Азр Агд Уа1 ТНг 20 11е ТНг Суз Бег А1а 25 Бег Бег Бег Уа1 С1у 30 Туг МеН
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Теи Теи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг РНе Ъуз Теи ТНг Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Бег Бег Теи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Туз Агд ТНг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Бег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Бег Азр С1и С1п Ъеи Ъуз Бег С1у ТНг
115 120 125
А1а Бег Уа1 Уа1 Суз Теи Ъеи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Ъуз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Ъуз Уа1 Азр Азп А1а Ъеи С1п Бег С1у Азп Бег С1п С1и
145 150 155 160
Бег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Бег Туз Азр Бег ТНг Туг Бег Теи Бег Бег
165 170 175
ТНг Теи ТНг Теи Бег Туз А1а Азр Туг С1и Туз Нтз Ъуз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТНг Нтз С1п С1у Теи Бег Бег Рго Уа1 ТНг Ъуз Бег РНе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210 <210> 196 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 6Н8 УЪ ДОМЕН <400> 196
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Теи Бег А1а Бег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Бег А1а Бег Бег Бег Уа1 С1у Туг МеН
- 240 023179
20 25 30
Нгз Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг РНе Ьуз Ьеи ТНг Бег С1у νβ1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ьеи ТНг 11е Бег Бег Ьеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ьуз Ьеи С1и 11е Ьуз
100 105
<210> 197 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 6Н8 νΣ СБК2 <400> 197
Азр ТНг РНе Буз Ьеи ТНг Бег 1 5 <210> 198 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Ь1-7Е5 VН ЦЕПЬ <400> 198
С1п νβ1 ТНг Ьеи Агд С1и Бег С1у
1 5
ТНг Ьеи ТНг Ьеи ТНг Суз ТНг РНе
20
С1у МеЕ Бег νβ1 С1у Тгр 11е Агд
Рго А1а 10 Ьеи νβ1 Ьуз Рго ТНг 15 С1п
Бег С1у РНе Бег Ьеи Бег ТНг А1а
25 30
С1п Рго Рго С1у Ьуз А1а Ьеи С1и
- 241
35 40 45
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз Ъуз Азр Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Ъеи Ъуз Зег Агд Ъеи ТАг 11е Зег Ъуз Азр ТАг Зег Ъуз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТАг Азп МеА Азр Рго А1а Азр ТАг А1а ТАг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеА 11е ТАг Азп РАе Туг РАе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТАг ТАг Уа1 ТАг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТАг Ъуз С1у Рго Зег Уа1
115 120 125
РАе Рго Ъеи А1а Рго Зег Зег Ъуз Зег ТАг Зег С1у С1у ТАг А1а А1а
130 135 140
Ъеи С1у Суз Ъеи Уа1 Ъуз Азр Туг РАе Рго С1и Рго Уа1 ТАг Уа1 Зег
145 150 155 160
Тгр Азп Зег С1у А1а Ъеи ТАг Зег С1у Уа1 Нтз ТАг РАе Рго А1а Уа1
165 170 175
Ъеи С1п Зег Зег С1у Ъеи Туг Зег Ъеи Зег Зег Уа1 Уа1 ТАг Уа1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Ъеи С1у ТАг С1п ТАг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Ъуз
195 200 205
Рго Зег Азп ТАг Ъуз Уа1 Азр Ъуз Агд Уа1 С1и Рго Ъуз Зег Суз Азр
210 215 220
Ъуз ТАг Нтз ТАг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ъеи Ъеи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Зег Уа1 РАе Ъеи РАе Рго Рго Ъуз Рго Ъуз Азр ТАг Ъеи МеА 11е
245 250 255
Зег Агд ТАг Рго С1и Уа1 ТАг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Нтз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ъуз РАе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз
275 280 285
Азп А1а Ъуз ТАг Ъуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТАг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Зег Уа1 Ъеи ТАг Уа1 Ъеи Нтз С1п Азр Тгр Ъеи Азп С1у Ъуз
305 310 315 320
С1и Туг Ъуз Суз Ъуз Уа1 Зег Азп Ъуз А1а Ъеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Ъуз ТАг 11е Зег Ъуз А1а Ъуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
- 242
ТНг Ъеи Рго 355 Рго Зег Агд С1и С1и 360 МеН ТНг Гуз Азп С1п 365 Уа1 Зег Ъеи
ТНг Суз Геи Уа1 Ъуз С1у РНе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ъуз ТНг ТНг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Ъеи Азр Зег Азр С1у Зег РНе РНе Ъеи Туг Зег Ъуз Геи ТНг Уа1 Азр
405 410 415
Ъуз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Зег Суз Зег Уа1 МеН Нтз
420 425 430
С1и А1а Геи Нтз Азп Нтз Туг ТНг С1п Гуз Зег Геи Зег Ъеи Зег Рго
435 440 445
С1у Гуз 450 <210> 199 <211> 213 <212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Г1-7Е5 УГ ЦЕПЬ
<400> 199
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго Зег ТНг Ъеи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Зег А1а Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеН
20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Гуз А1а Рго Гуз Ъеи Ъеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг РНе Гуз Геи А1а Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг Геи ТНг 11е Зег Зег Геи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз Агд ТНг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Зег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Геи Гуз Зег С1у ТНг
115 120 125
- 243
А1а Бег 130 Уа1 Уа1 Суз Ъеи Ъеи 135 Азп Азп РНе Туг Рго 140 Агд С1и А1а Ъуз
Уа1 С1п Тгр Ъуз Уа1 Азр Азп А1а Ъеи С1п Бег С1у Азп Бег С1п С1и
145 150 155 160
Бег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Бег Ъуз Азр Бег ТНг Туг Бег Ъеи Бег Бег
165 170 175
ТНг Ъеи ТНг Ъеи Бег Ъуз А1а Азр Туг С1и Ъуз Нтз Ъуз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТНг Нтз С1п С1у Ъеи Бег Бег Рго Уа1 ТНг Ъуз Бег РНе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210 <210> 200 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Σ1-7Ε5 УЪ ДОМЕН <400> 200
Азр 11е С1п МеЪ ТНг С1п Бег Рго
1 5
Азр Агд Уа1 ТНг 20 11е ТНг Суз Бег
Нтз Тгр Туг 35 С1п С1п Ъуз Рго С1у 40
Азр ТНг 50 РНе Агд Ъеи А1а Бег 55 С1у
С1у 65 Бег С1у ТНг С1и РНе 70 ТНг Ъеи
Азр РНе А1а ТНг Туг 85 Туг Суз РНе
РНе С1у С1у С1у 100 ТНг Ъуз Ъеи С1и
Бег ТНг 10 Ъеи Бег А1а Бег Уа1 15 С1у
А1а Бег Бег Бег Уа1 С1у Туг МеЪ
25 30
Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
45
Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
60
ТНг 11е Бег Бег Ъеи С1п Рго Азр
75 80
С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
90 95
11е Ъуз
105 <210> 201
- 244 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Б2-15В10 νΗ ЦЕПЬ <400> 201
С1п νβ1 ТАг Ьеи Агд С1и Зег С1у Рго А1а Ьеи νβ1 Ьуз Рго ТАг С1п
1 5 10 15
ТАг Ьеи ТАг Беи ТАг Суз ТАг РАе Зег С1у РАе Зег Беи Зег ТАг А1а
20 25 30
С1у МеА Зег νβ1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Буз А1а Ьеи С1и
35 40 45
Тгр Ьеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ьуз Буз Азр Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Беи Ьуз Зег Агд Ьеи ТАг 11е Зег Ьуз Азр ТАг Зег Ьуз Азп С1п νβ1
65 70 75 80
νβ1 Ьеи Ьуз νβ1 ТАг Азп МеА Азр Рго А1а Азр ТАг А1а ТАг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеА 11е ТАг Азп РАе Туг РАе Азр νβ1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТАг ТАг νβ1 ТАг νβ1 Зег Зег А1а Зег ТАг Ьуз С1у Рго Зег νβ1
115 120 125
РАе Рго Ьеи А1а Рго Зег Зег Буз Зег ТАг Зег С1у С1у ТАг А1а А1а
130 135 140
Ьеи С1у Суз Беи νβ1 Ьуз Азр Туг РАе Рго С1и Рго νβ1 ТАг νβ1 Зег
145 150 155 160
Тгр Азп Зег С1у А1а Ьеи ТАг Зег С1у νβ1 Η^з ТАг РАе Рго А1а νβ1
165 170 175
Ьеи С1п Зег Зег С1у Беи Туг Зег Беи Зег Зег νβ1 νβ1 ТАг νβ1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Ьеи С1у ТАг С1п ТАг Туг 11е Суз Азп νβ1 Азп Η^з Буз
195 200 205
Рго Зег Азп ТАг Буз νβ1 Азр Ьуз Агд νβ1 С1и Рго Ьуз Зег Суз Азр
210 215 220
Ьуз ТАг Η^з ТАг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Беи Беи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Зег νβ1 РАе Беи РАе Рго Рго Буз Рго Буз Азр ТАг Ьеи МеА 11е
- 245
245 250 255
Зег Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Нгз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ъуз РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нгз
275 280 285
Азп А1а Ъуз ТНг Ъуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТНг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Зег Уа1 Ъеи ТНг Уа1 Ъеи Нгз С1п Азр Тгр Ъеи Азп С1у Ъуз
305 310 315 320
С1и Туг Ъуз Суз Ъуз Уа1 Зег Азп Ъуз А1а Ъеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Ъуз ТНг 11е Зег Ъуз А1а Ъуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТНг Ъеи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеН ТНг Ъуз Азп С1п Уа1 Зег Ъеи
355 360 365
ТНг Суз Ъеи Уа1 Ъуз С1у РНе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ъуз ТНг ТНг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Ъеи Азр Зег Азр С1у Зег РНе РНе Ъеи Туг Зег Ъуз Ъеи ТНг Уа1 Азр
405 410 415
Ъуз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Зег Суз Зег Уа1 МеН Нгз
420 425 430
С1и А1а Ъеи Нгз Азп Нгз Туг ТНг С1п Ъуз Зег Ъеи Зег Ъеи Зег Рго
435 440 445
С1у Ъуз 450 <210> 202 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Ъ2-15В10 УЪ ЦЕПЬ <400> 202
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго Зег ТНг Ъеи Зег А1а Зег Уа1 С1у
- 246 023179
1 5 10 15
Азр Агд νβ1 ТНг 11е ТНг Суз Бег А1а Бег Бег Бег νβ1 С1у Туг МеК
20 25 30
Низ Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Беи Беи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг РНе Агд Беи А1а Бег С1у νβ1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ьеи ТНг 11е Бег Бег Беи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ьуз νβ1 С1и 11е Буз Агд ТНг νβ1 А1а А1а Рго
100 105 110
Бег νβ1 РНе 11е РНе Рго Рго Бег Азр С1и С1п Ьеи Ьуз Бег С1у ТНг
115 120 125
А1а Бег νβ1 νβ1 Суз Беи Ьеи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Ьуз
130 135 140
νβ1 С1п Тгр Ьуз νβ1 Азр Азп А1а Ьеи С1п Бег С1у Азп Бег С1п С1и
145 150 155 160
Бег νβ1 ТНг С1и С1п Азр Бег Буз Азр Бег ТНг Туг Бег Беи Бег Бег
165 170 175
ТНг Ьеи ТНг Беи Бег Буз А1а Азр Туг С1и Буз Низ Ьуз νβ1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и νβ1 ТНг Низ С1п С1у Беи Бег Бег Рго νβ1 ТНг Ьуз Бег РНе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210 <210> 203 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Б2-15В10 '.7. ДОМЕН <400> 203
Азр 11е С1п МеК ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Беи Бег А1а Бег ν&1 С1у 1 5 10 15
- 247 023179
Азр Агд Уа1 ТНг 20 11е ТНг Суз Бег А1а 25 Бег Бег Бег Уа1 С1у 30 Туг МеН
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг РНе Агд Ъеи А1а Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Бег Бег Ъеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Ъеи С1и 11е Ъуз
100 105 <210> 204 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Σ2-15Β10 УЪ СЪК2 <400> 204
Азр ТНг РНе Агд Ъеи А1а Бег 1 5 <210> 205 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А13а11 УН ЦЕПЬ
<400> 205
С1п Уа1 ТНг Ъеи Агд С1и Бег С1у
1 5
ТНг Ъеи ТНг Ъеи ТНг Суз ТНг РНе
20
Рго А1а 10 Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТНг 15 С1п
Бег С1у РНе Бег Ъеи Бег ТНг А1а
25 30
- 248
С1у Ме/ Бег 35 Уа1 С1у Тгр 11е Агд 40 С1п Рго Рго С1у Туз 45 А1а Теи С1и
Тгр Теи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Туз Туз Η^з Туг Азп Рго Бег
50 55 60
Теи Туз Азр Агд Теи ТНг 11е Бег Туз Азр ТНг Бег Туз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Теи Туз Уа1 ТНг Азп Ме/ Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Бег Ме/ 11е ТНг Азп Тгр Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Бег Бег А1а Бег ТНг Туз С1у Рго Бег Уа1
115 120 125
РНе Рго Теи А1а Рго Бег Бег Туз Бег ТНг Бег С1у С1у ТНг А1а А1а
130 135 140
Теи С1у Суз Теи Уа1 Туз Азр Туг РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Бег
145 150 155 160
Тгр Азп Бег С1у А1а Теи ТНг Бег С1у Уа1 Η^з ТНг РНе Рго А1а Уа1
165 170 175
Теи С1п Бег Бег С1у Теи Туг Бег Теи Бег Бег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго
180 185 190
Бег Бег Бег Теи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Η^з Туз
195 200 205
Рго Бег Азп ТНг Туз Уа1 Азр Туз Агд Уа1 С1и Рго Туз Бег Суз Азр
210 215 220
Туз ТНг Η^з ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Теи Теи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Бег Уа1 РНе Теи РНе Рго Рго Туз Рго Туз Азр ТНг Теи Ме/ 11е
245 250 255
Бег Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Бег Η^з С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Туз РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Η^з
275 280 285
Азп А1а Туз ТНг Туз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Бег ТНг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Бег Уа1 Теи ТНг Уа1 Теи Η^з С1п Азр Тгр Теи Азп С1у Туз
305 310 315 320
С1и Туг Туз Суз Туз Уа1 Бег Азп Туз А1а Теи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Туз ТНг 11е Бег Туз А1а Туз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
- 249
340
ТНг Ьеи Рго Рго Бег Агд С1и С1и
355 360
ТНг Суз Ьеи νβ1 Ьуз С1у РНе Туг
370 375
С1и Бег Азп С1у С1п Рго С1и Азп
385 390
Ьеи Азр Бег Азр С1у Бег РНе РНе
405
Ьуз Бег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп
420
С1и А1а Ьеи Нгз Азп Нгз Туг ТНг
435 440
345 350
МеЕ ТНг Ьуз Азп С1п νβ1 Бег Ьеи
365
Рго Бег Азр 11е А1а νβ1 С1и Тгр
380
Азп Туг Ьуз ТНг ТНг Рго Рго νβ1
395 400
Ьеи Туг Бег Ьуз Ьеи ТНг νβ1 Азр
410 415
νβ1 РНе Бег Суз Бег νβ1 МеЕ Нгз
425 430
С1п Ьуз Бег Ьеи Бег Ьеи Бег Рго
445
С1у Буз 450 <210> 206 <211> 120 <212> БЕЛОК ьность <220>
<223> А13а11 VН ДОМЕН <400> 206
С1п νβ1 ТНг Ьеи Агд С1и Бег С1у
1 5
ТНг Ьеи ТНг Ьеи ТНг Суз ТНг РНе
20
С1у МеЕ Бег νβ1 С1у Тгр 11е Агд
35 40
Тгр Ьеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр
50 55
Ьеи Ьуз Азр Агд Ьеи ТНг 11е Бег
65 70
νβ1 Ьеи Ьуз νβ1 ТНг Азп МеЕ Азр
85
Суз А1а Агд Азр МеЕ 11е РНе Азп
100
Рго А1а 10 Ьеи νβ1 Ьуз Рго ТНг 15 С1п
Бег С1у РНе Бег Ьеи Бег ТНг А1а
25 30
С1п Рго Рго С1у Ьуз А1а Ьеи С1и
45
Азр Ьуз Ьуз Нгз Туг Азп Рго Бег
60
Ьуз Азр ТНг Бег Ьуз Азп С1п νβ1
75 80
Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
90 95
Тгр Туг РНе Азр νβ1 Тгр С1у А1а
105 110
- 250
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег 115 120 <210> 207 <211> 214 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А13а11 УТ ЦЕПЬ <400> 207
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго
1 5
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Зег
20
Низ Тгр Туг С1п С1п Туз Рго С1у
35 40
Азр ТНг Туг Агд Низ Теи А1а Зег
50 55
Зег С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг
65 70
Азр Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз
85
ТНг РНе С1у С1у С1у ТНг Туз Уа1
100
Рго Зег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго
115 120
ТНг А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Теи Теи
130 135
Туз Уа1 С1п Тгр Туз Уа1 Азр Азп
145 150
С1и Зег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Зег
165
Зег ТНг Теи ТНг Теи Зег Туз А1а
180
А1а Суз С1и Уа1 ТНг Низ С1п С1у
195 200
РНе Азп Агд С1у С1и Суз
Зег ТНг 10 Теи Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
Рго Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеН
25 30
Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
45
С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у
60
Теи ТНг 11е Зег Зег Теи С1п Рго
75 80
РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе
90 95
С1и 11е Туз Агд ТНг Уа1 А1а А1а
105 110
Зег Азр С1и С1п Теи Туз Зег С1у
125
Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а
140
А1а Теи С1п Зег С1у Азп Зег С1п
155 160
Туз Азр Зег ТНг Туг Зег Теи Зег
170 175
Азр Туг С1и Туз Низ Туз Уа1 Туг
185 190
Теи Зег Зег Рго Уа1 ТНг Туз Зег
205
- 251
210 <210> 208 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А13а11 УТ ДОМЕН <400> 208
Азр 11е С1п МеЛ ТАг С1п Зег Рго Зег ТАг Теи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТАг 11е ТАг Суз Зег А1а Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеЛ
20 25 30
Нгз Тгр Туг С1п С1п Туз Рго С1у Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
35 40 45
Азр ТАг Туг Агд Нгз А1а Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РАе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТАг С1и РАе ТАг Теи ТАг 11е Зег Зег Теи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РАе А1а ТАг Туг Туг Суз РАе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РАе ТАг
85 90 95
РАе С1у С1у С1у ТАг Туз Теи С1и 11е Туз
100 105
<210> 209 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А13а11 УТ СЕ>К2 <400> 209
Азр ТАг Туг Агд Нгз Зег Зег 1 5
- 252 023179 <210> 210 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А1Т5 УН ЦЕПЬ <400> 210
С1п Уа1 ТТг Ъеи Агд С1и Зег С1у Рго А1а Пей Уа1 Пуз Рго ТТг С1п
1 5 10 15
ТТг Ъеи ТТг Ъеи ТТг Суз ТТг РТе Зег С1у РТе Зег Пей Зег ТТг А1а
20 25 30
С1у МеК Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Пуз А1а Пей С1и
35 40 45
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Пуз Пуз Нтз Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Ъеи Ъуз Азр Агд Пей ТТг 11е Зег Пуз Азр ТТг Зег Пуз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТТг Азп МеК Азр Рго А1а Азр ТТг А1а ТТг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеК 11е РТе Азп Тгр Туг РТе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТТг ТТг Уа1 ТТг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТТг Пуз С1у Рго Зег Уа1
115 120 125
РТе Рго Ъеи А1а Рго Зег Зег Пуз Зег ТТг Зег С1у С1у ТТг А1а А1а
130 135 140
Ъеи С1у Суз Ъеи Уа1 Пуз Азр Туг РТе Рго С1и Рго Уа1 ТТг Уа1 Зег
145 150 155 160
Тгр Азп Зег С1у А1а Пей ТТг Зег С1у Уа1 Нтз ТТг РТе Рго А1а Уа1
165 170 175
Ъеи С1п Зег Зег С1у Пей Туг Зег Пей Зег Зег Уа1 Уа1 ТТг Уа1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Пей С1у ТТг С1п ТТг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Пуз
195 200 205
Рго Зег Азп ТТг Пуз Уа1 Азр Пуз Агд Уа1 С1и Рго Пуз Зег Суз Азр
210 215 220
Ъуз ТТг Нтз ТТг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Пей Пей С1у С1у
- 253
225 230 235 240
Рго Бег Уа1 РНе Теи РНе Рго Рго Ъуз Рго Ъуз Азр ТНг Ъеи МеН 11е
245 250 255
Бег Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Бег Нтз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ъуз РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз
275 280 285
Азп А1а Туз ТНг Ъуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Бег ТНг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Бег Уа1 Теи ТНг Уа1 Теи Нтз С1п Азр Тгр Теи Азп С1у Туз
305 310 315 320
С1и Туг Ъуз Суз Туз Уа1 Бег Азп Ъуз А1а Ъеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Туз ТНг 11е Бег Ъуз А1а Туз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТНг Теи Рго Рго Бег Агд С1и С1и МеН ТНг Туз Азп С1п Уа1 Бег Теи
355 360 365
ТНг Суз Ъеи Уа1 Ъуз С1у РНе Туг Рго Бег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Бег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Туз ТНг ТНг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Ъеи Азр Бег Азр С1у Бег РНе РНе Теи Туг Бег Ъуз Теи ТНг Уа1 Азр
405 410 415
Ъуз Бег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Бег Суз Бег Уа1 МеН Нтз
420 425 430
С1и А1а Теи Нтз Азп Нтз Туг ТНг С1п Туз Бег Ъеи Бег Ъеи Бег Рго
435 440 445
С1у Ъуз 450 <210> 211 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А1Н5 УТ ЦЕПЬ
- 254 023179 <400> 211
Азр 11е С1п МеС ТЬг С1п Зег Рго Зег ТЬг Беи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТЬг 11е ТЬг Суз Зег Беи Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеС
20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Буз Рго С1у Буз А1а Рго Буз Беи Беи 11е Туг
35 40 45
Азр ТЬг РЬе РЬе Нтз Агд Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РЬе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТЬг С1и РЬе ТЬг Беи ТЬг 11е Зег Зег Беи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РЬе А1а ТЬг Туг Туг Суз РЬе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РЬе ТЬг
85 90 95
РЬе С1у С1у С1у ТЬг Буз Уа1 С1и 11е Буз Агд ТЬг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Зег Уа1 РЬе 11е РЬе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Беи Буз Зег С1у ТЬг
115 120 125
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Беи Беи Азп Азп РЬе Туг Рго Агд С1и А1а Буз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Ьуз Уа1 Азр Азп А1а Беи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
145 150 155 160
Зег Уа1 ТЬг С1и С1п Азр Зег Буз Азр Зег ТЬг Туг Зег Беи Зег Зег
165 170 175
ТЬг Беи ТЬг Беи Зег Буз А1а Азр Туг С1и Буз Нтз Буз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТЬг Нтз С1п С1у Беи Зег Зег Рго Уа1 ТЬг Буз Зег РЬе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210 <210> 212 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А1Ь5 УЪ ДОМЕН <400> 212
- 255 023179
Азр 11е С1п МеН ТНг
1 5
Азр Агд Уа1 ТНг 20 11е
Нгз Тгр Туг 35 С1п С1п
Азр ТНг 50 РНе РНе Нгз
С1у 65 Зег С1у ТНг С1и
Азр РНе А1а ТНг Туг 85
РНе С1у С1у С1у 100 ТНг
С1п Зег Рго Зег ТНг 10 Теи Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
ТНг Суз Зег Теи Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеН
25 30
Туз Рго С1у Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
40 45
Агд Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
55 60
РНе ТНг Теи ТНг 11е Зег Зег Теи С1п Рго Азр
70 75 80
Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
90 95
Туз Теи С1и 11е Туз
105
<210> 213 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>
<223> А1Н5 УТ СЕ>К1 <400> 213
Зег Теи Зег Зег Зег
5 последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нгз 10 <210> 214 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>
<223> А1Н5 УТ СЕ>К2 <400> 214
Азр ТНг РНе РНе Нгз 1 5 последовательность
Агд Зег
- 256 023179 <210> 215 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А4В4(1) УН ЦЕПЬ <400> 215
С1п Уа1 ТНг Ъеи Агд С1и Зег С1у Рго А1а Геи Уа1 Ъуз Рго ТНг С1п
1 5 10 15
ТНг Геи ТНг Ъеи ТНг Суз ТНг РНе Зег С1у РНе Зег Геи Зег ТНг А1а
20 25 30
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Гуз А1а Ъеи С1и
35 40 45
Тгр Геи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз Гуз Нтз Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Ъеи Ъуз Азр Агд Ъеи ТНг 11е Зег Гуз Азр ТНг Зег Ъуз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Ъеи Гуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп РНе Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТНг Ъуз С1у Рго Зег Уа1
115 120 125
РНе Рго Геи А1а Рго Зег Зег Ъуз Зег ТНг Зег С1у С1у ТНг А1а А1а
130 135 140
Геи С1у Суз Геи Уа1 Гуз Азр Туг РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Зег
145 150 155 160
Тгр Азп Зег С1у А1а Геи ТНг Зег С1у Уа1 Нтз ТНг РНе Рго А1а Уа1
165 170 175
Ъеи С1п Зег Зег С1у Ъеи Туг Зег Ъеи Зег Зег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Геи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Ъуз
195 200 205
Рго Зег Азп ТНг Ъуз Уа1 Азр Гуз Агд Уа1 С1и Рго Ъуз Зег Суз Азр
210 215 220
Ъуз ТНг Нтз ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Геи Геи С1у С1у
- 257 023179
225 230 235 240
Рго Зег Уа1 РАе Ъеи РАе Рго Рго Ъуз Рго Ъуз Азр ТАг Ъеи МеА 11е
245 250 255
Зег Агд ТАг Рго С1и Уа1 ТАг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Нтз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ъуз РАе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз
275 280 285
Азп А1а Ъуз ТАг Ъуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТАг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Зег Уа1 Ъеи ТАг Уа1 Ъеи Нтз С1п Азр Тгр Ъеи Азп С1у Ъуз
305 310 315 320
С1и Туг Ъуз Суз Ъуз Уа1 Зег Азп Ъуз А1а Ъеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Ъуз ТАг 11е Зег Ъуз А1а Ъуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТАг Ъеи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеА ТАг Ъуз Азп С1п Уа1 Зег Ъеи
355 360 365
ТАг Суз Ъеи Уа1 Ъуз С1у РАе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ъуз ТАг ТАг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Ъеи Азр Зег Азр С1у Зег РАе РАе Ъеи Туг Зег Ъуз Ъеи ТАг Уа1 Азр
405 410 415
Ъуз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РАе Зег Суз Зег Уа1 МеА Нтз
420 425 430
С1и А1а Ъеи Нтз Азп Нтз Туг ТАг С1п Ъуз Зег Ъеи Зег Ъеи Зег Рго
435 440 445
С1у Ъуз 450 <210> 216 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А4В4(1) УЪ ЦЕПЬ <400> 216
Азр 11е С1п МеА ТАг С1п Зег Рго Зег ТАг Ъеи Зег А1а Зег Уа1 С1у
- 258 023179
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Бег А1а Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеН
20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг Ъеи Ъеи Ъеи Азр Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Бег Бег Ъеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз Агд ТНг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Бег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Бег Азр С1и С1п Ъеи Ъуз Бег С1у ТНг
115 120 125
А1а Бег Уа1 Уа1 Суз Ъеи Ъеи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Ъуз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Ъуз Уа1 Азр Азп А1а Ъеи С1п Бег С1у Азп Бег С1п С1и
145 150 155 160
Бег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Бег Ъуз Азр Бег ТНг Туг Бег Ъеи Бег Бег
165 170 175
ТНг Ъеи ТНг Ъеи Бег Ъуз А1а Азр Туг С1и Ъуз Нтз Ъуз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТНг Нтз С1п С1у Ъеи Бег Бег Рго Уа1 ТНг Ъуз Бег РНе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210 <210> 217 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А4В4(1) УЪ ДОМЕН <400> 217
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Ъеи Бег А1а Бег Уа1 С1у 1 5 10 15
- 259 023179
Азр Агд Уа1 ТНг 20 11е ТНг Суз Бег А1а 25 Бег Бег Агд Уа1 С1у 30 Туг МеЪ
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг Ъеи Ъеи Ъеи Азр Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Бег Бег Ъеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Ъеи С1и 11е Ъуз
100 105
<210> 218 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А4В4(1) УЪ СЪК2 <400> 218
Азр ТНг Ъеи Ъеи Ъеи Азр Бег 1 5 <210> 219 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А4В4Ъ1 УН ЦЕПЬ
<400> 219
С1п Уа1 ТНг Ъеи Агд С1и Бег С1у
1 5
ТНг Ъеи ТНг Ъеи ТНг Суз ТНг РНе
20
Рго А1а 10 Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТНг 15 С1п
Бег С1у РНе Бег Ъеи Бег ТНг А1а
25 30
- 260
С1у МеН Зег 35 Уа1 С1у Тгр 11е Агд 40 С1п Рго Рго С1у Ъуз 45 А1а Ъеи С1и
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз Ъуз Нгз Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Ъеи Ъуз Азр Агд Ъеи ТНг 11е Зег Ъуз Азр ТНг Зег Ъуз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп РНе Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТНг Ъуз С1у Рго Зег Уа1
115 120 125
РНе Рго Ъеи А1а Рго Зег Зег Ъуз Зег ТНг Зег С1у С1у ТНг А1а А1а
130 135 140
Ъеи С1у Суз Ъеи Уа1 Ъуз Азр Туг РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Зег
145 150 155 160
Тгр Азп Зег С1у А1а Ъеи ТНг Зег С1у Уа1 Нгз ТНг РНе Рго А1а Уа1
165 170 175
Ъеи С1п Зег Зег С1у Ъеи Туг Зег Ъеи Зег Зег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Ъеи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нгз Ъуз
195 200 205
Рго Зег Азп ТНг Ъуз Уа1 Азр Ъуз Агд Уа1 С1и Рго Ъуз Зег Суз Азр
210 215 220
Ъуз ТНг Нгз ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ъеи Ъеи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Зег Уа1 РНе Ъеи РНе Рго Рго Ъуз Рго Ъуз Азр ТНг Ъеи МеН 11е
245 250 255
Зег Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Нгз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ъуз РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нгз
275 280 285
Азп А1а Ъуз ТНг Ъуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТНг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Зег Уа1 Ъеи ТНг Уа1 Ъеи Нгз С1п Азр Тгр Ъеи Азп С1у Ъуз
305 310 315 320
С1и Туг Ъуз Суз Ъуз Уа1 Зег Азп Ъуз А1а Ъеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Ъуз ТНг 11е Зег Ъуз А1а Ъуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
- 261
340
ТАг Ьеи Рго Рго Зег Агд С1и С1и
355 360
ТАг Суз Ьеи νβ1 Ьуз С1у РАе Туг
370 375
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп
385 390
Ьеи Азр Зег Азр С1у Зег РАе РАе
405
Ьуз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп
420
С1и А1а Ьеи Η^з Азп Η^з Туг ТАг
435 440
345 350
МеА ТАг Ьуз Азп С1п νβ1 Зег Ьеи
365
Рго Зег Азр 11е А1а νβ1 С1и Тгр
380
Азп Туг Ьуз ТАг ТАг Рго Рго νβ1
395 400
Ьеи Туг Зег Ьуз Ьеи ТАг νβ1 Азр
410 415
νβ1 РАе Зег Суз Зег νβ1 МеА Η^з
425 430
С1п Ьуз Зег Ьеи Зег Ьеи Зег Рго
445
С1у Ьуз 450 <210> 220 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последоват <220>
<223> А4В4Б1 ЦЕПЬ ьность <400> 220
Азр 11е С1п МеА ТАг С1п Зег Рго
1 5
Азр Агд νβ1 ТАг 20 11е ТАг Суз Зег
Η^з Тгр Туг 35 С1п С1п Ьуз Рго С1у 40
Азр ТАг 50 Зег Ьуз Ьеи А1а Зег 55 С1у
С1у 65 Зег С1у ТАг С1и РАе 70 ТАг Ьеи
Азр РАе А1а ТАг Туг 85 Туг Суз РАе
РАе С1у С1у С1у 100 ТАг Ьуз νβ1 С1и
Зег ТАг 10 Ьеи Зег А1а Зег νβ1 15 С1у
А1а Зег Зег Агд νβ1 С1у Туг МеА
25 30
Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи 11е Туг
45
νβ1 Рго Зег Агд РАе Зег С1у Зег
60
ТАг 11е Зег Зег Ьеи С1п Рго Азр
75 80
С1п С1у Зег С1у Туг Рго РАе ТАг
90 95
11е Ьуз Агд ТАг νβ1 А1а А1а Рго
105 110
- 262
Бег Уа1 РНе 115 11е РНе Рго Рго Бег 120 Азр С1и С1п Беи Ьуз 125 Бег С1у ТНг
А1а Бег Уа1 Уа1 Суз Ьеи Беи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Ьуз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Буз Уа1 Азр Азп А1а Ьеи С1п Бег С1у Азп Бег С1п С1и
145 150 155 160
Бег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Бег Буз Азр Бег ТНг Туг Бег Беи Бег Бег
165 170 175
ТНг Ьеи ТНг Беи Бег Ьуз А1а Азр Туг С1и Буз Низ Ьуз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТНг Низ С1п С1у Ьеи Бег Бег Рго Уа1 ТНг Буз Бег РНе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210
<210> 221 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А4В4Б1 '.7. ДОМЕН <400> 221
Азр 11е С1п МеК ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Беи Бег А1а Бег Уа1 С1у 1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Бег А1а Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеК 20 25 30
Низ Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у Буз А1а Рго Буз Ьеи Ьеи 11е Туг 35 40 45
Азр ТНг Бег Буз Беи А1а Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег 50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ьеи ТНг 11е Бег Бег Ьеи С1п Рго Азр
70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Буз Беи С1и 11е Ьуз
100 105
- 263 <210> 222 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А4В4-Р25З УН ЦЕПЬ <400> 222
С1п 1 Уа1 ТАг Теи Агд 5 С1и Зег С1у Рго А1а 10 Теи Уа1 Туз Рго ТАг 15 С1п
ТАг Теи ТАг Теи ТАг Суз ТАг РАе Зег С1у РАе Зег Теи Зег ТАг А1а
20 25 30
С1у МеЛ Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Туз А1а Теи С1и
35 40 45
Тгр Теи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Туз Туз Нгз Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Теи Туз Азр Агд Теи ТАг 11е Зег Туз Азр ТАг Зег Туз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Теи Туз Уа1 ТАг Азп МеЛ Азр Рго А1а Азр ТАг А1а ТАг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеЛ 11е РАе Азп РАе Туг РАе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТАг ТАг Уа1 ТАг Уа1 Зег Зег А1а Зег ТАг Туз С1у Рго Зег Уа1
115 120 125
РАе Рго Теи А1а Рго Зег Зег Туз Зег ТАг Зег С1у С1у ТАг А1а А1а
130 135 140
Теи С1у Суз Теи Уа1 Туз Азр Туг РАе Рго С1и Рго Уа1 ТАг Уа1 Зег
145 150 155 160
Тгр Азп Зег С1у А1а Теи ТАг Зег С1у Уа1 Нгз ТАг РАе Рго А1а Уа1
165 170 175
Теи С1п Зег Зег С1у Теи Туг Зег Теи Зег Зег Уа1 Уа1 ТАг Уа1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Теи С1у ТАг С1п ТАг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нгз Туз
195 200 205
Рго Зег Азп ТАг Туз Уа1 Азр Туз Агд Уа1 С1и Рго Туз Зег Суз Азр
210 215 220
Туз ТАг Нгз ТАг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Теи Теи С1у С1у
225 230 235 240
- 264 023179
Рго Бег νβ1 РНе Ьеи 245 РНе Рго Рго Ьуз Рго 250 Ьуз Азр ТНг Ьеи МеЕ 255 11е
Бег Агд ТНг Рго С1и νβ1 ТНг Суз νβ1 νβ1 νβ1 Азр νβ1 Бег Нгз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и νβ1 Ьуз РНе Азп Тгр Туг νβ1 Азр С1у νβ1 С1и νβ1 Нгз
275 280 285
Азп А1а Ьуз ТНг Ьуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Бег ТНг Туг Агд
290 295 300
νβ1 νβ1 Бег νβ1 Ьеи ТНг νβ1 Ьеи Нгз С1п Азр Тгр Ьеи Азп С1у Ьуз
305 310 315 320
С1и Туг Ьуз Суз Ьуз νβ1 Бег Азп Ьуз А1а Ьеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Ьуз ТНг 11е Бег Ьуз А1а Ьуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п νβ1 Туг
340 345 350
ТНг Ьеи Рго Рго Бег Агд С1и С1и МеЕ ТНг Ьуз Азп С1п νβ1 Бег Ьеи
355 360 365
ТНг Суз Ьеи νβ1 Ьуз С1у РНе Туг Рго Бег Азр 11е А1а νβ1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Бег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ьуз ТНг ТНг Рго Рго νβ1
385 390 395 400
Ьеи Азр Бег Азр С1у Бег РНе РНе Ьеи Туг Бег Ьуз Ьеи ТНг νβ1 Азр
405 410 415
Ьуз Бег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп νβ1 РНе Бег Суз Бег νβ1 МеЕ Нгз
420 425 430
С1и А1а Ьеи Нгз Азп Нгз Туг ТНг С1п Ьуз Бег Ьеи Бег Ьеи Бег Рго
435 440 445
С1у Буз 450 <210> 223 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А4В4-Е25Б ЦЕПЬ <400> 223
Азр 11е С1п МеЕ ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Ьеи Бег А1а Бег ν&1 С1у 1 5 10 15
- 265 023179
Азр Агд Уа1 ТНг 20 11е ТНг Суз Зег А1а 25 Зег Зег Агд Уа1 С1у 30 Туг МеН
Нгз Тгр Туг С1п С1п Вуз Рго С1у Вуз А1а Рго Вуз Вей Вей 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг Зег РНе Теи Азр Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг Вей ТНг 11е Зег Зег Вей С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Вуз Уа1 С1и 11е Вуз Агд ТНг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Зег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Вей Вуз Зег С1у ТНг
115 120 125
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Вей Вей Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Вуз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Вуз Уа1 Азр Азп А1а Вей С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
145 150 155 160
Зег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Зег Вуз Азр Зег ТНг Туг Зег Вей Зег Зег
165 170 175
ТНг Теи ТНг Теи Зег Вуз А1а Азр Туг С1и Вуз Нгз Вуз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТНг Нгз С1п С1у Вей Зег Зег Рго Уа1 ТНг Вуз Зег РНе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210 <210> 224 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А4В4-Р25З УТ ДОМЕН <400> 224
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго Зег ТНг Теи Зег А1а Зег Уа1 С1у 1 5 10 15
- 266 023179
Азр Агд Уа1 ТНг 20 11е ТНг Суз Бег А1а 25 Бег Бег Агд Уа1 С1у 30 Туг МеЪ
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг Бег РНе Ъеи Азр Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Бег Бег Ъеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Ъеи С1и 11е Ъуз
100 105
<210> 225 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А4В4-Р25Б УЪ СЪК2 <400> 225
Азр ТНг Бег РНе Ъеи Азр Бег 1 5 <210> 226 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 226
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз Ъуз Нтз Туг Азп Рго Бег Ъеи Ъуз Бег
1 5 10 15
<210> 227
- 267 023179 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЕ>К2 <400> 227
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Туз Туз Азр Туг Азп Рго Зег Теи Туз Азр 1 5 10 15 <210> 228 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЕ>К2 <400> 228
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Туз Туз Низ Туг Азп Рго Зег Теи Туз Зег 1 5 10 15 <210> 229 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЕ>К2 <400> 229
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Туз Туз Азр Туг Азп Рго Зег Теи Туз Азр 1 5 10 15 <210> 230 <211> 16
- 268 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 230
Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Ъуз Гуз Азр Туг Азп Рго Зег Геи Гуз Зег 1 5 10 15 <210> 231 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 231
Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Ъуз Ъуз Азр Туг Азп Рго Зег Геи Гуз Азр 1 5 10 15 <210> 232 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 232
Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Ъуз Ъуз Нтз Туг Азп Рго Зег Геи Гуз Зег 1 5 10 15 <210> 233 <211> 16 <212> БЕЛОК
- 269 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 233
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз Туз Бег Туг Азп Рго Бег Ъеи Ъуз Бег 1 5 10 15 <210> 234 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 234
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Туз Туз Бег Туг Азп Рго Бег Ъеи Ъуз Азр 1 5 10 15 <210> 235 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 235
Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Туз Туз Бег Туг Азп Рго Бег Ъеи Ъуз Бег 1 5 10 15 <210> 236 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 270 023179 <220>
<223> УН СЪК3 <400> 236
Азр МеН 11е ТНг Азп Тгр Туг РНе Азр Уа1 1 5 10
<210> 237
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УН СЪК3
<400> 237
Бег МеН 11е РНе Азп Тгр Туг РНе Азр Уа1 1 5 10
<210> 238
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УН СЪК3
<400> 238
Бег МеН 11е РНе Азп РНе Туг РНе Азр Уа1 1 5 10
<210> 239
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
- 271 023179 <400> 239
Ъуз Суз С1п Зег Зег Уа1 С1у Туг МеА Нтз 1 5 10
<210> 240
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 240
Ъуз Суз С1п Зег Агд Уа1 С1у Туг МеА Нтз 1 5 10
<210> 241
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 241
Ъуз Суз С1п Ъеи Агд Уа1 С1у Туг МеА Нтз 1 5 10
<210> 242
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
- 272 023179 <400> 242
Туз Теи С1п Теи Зег Уа1 С1у Туг МеН Низ 1 5 10 <210> 243 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К1 <400> 243
Туз Теи С1п Зег Зег Уа1 С1у Туг МеН Низ 1 5 10 <210> 244 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К1 <400> 244
Туз Теи С1п Зег Агд Уа1 С1у Туг МеН Низ 1 5 10 <210> 245 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К1 <400> 245
Туз Теи С1п Теи Агд Уа1 С1у Туг МеН Низ
- 273 023179
5 10
<210> 246
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 246
Ъуз Ъеи Зег Ъеи Зег Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10
<210> 247
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 247
Ъуз Ъеи Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10
<210> 248
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 248
Ъуз Ъеи Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеК Нтз
5 10
- 274 023179
<210> 249
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 249
Ъуз Геи Зег Ъеи Агд
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10
<210> 250
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 250
Гуз Суз Зег Геи Зег
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10
<210> 251
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УГ СЪК1
<400> 251
Ъуз Суз Зег Зег Зег
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10
- 275 023179
<210> 252
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УБ СБК1
<400> 252
Буз Суз Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеС Нтз 1 5 10
<210> 253
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УБ СБК1
<400> 253
Буз Суз Зег Беи Агд Уа1 С1у Туг МеС Нтз 1 5 10
<210> 254
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УБ СБК1
<400> 254
Зег Беи Зег Беи Зег Уа1 С1у Туг МеС Нтз 1 5 10 <210> 255 <211> 10
- 276 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К1 <400> 255
Бег Теи Бег Бег Бег Уа1 С1у Туг Ме/ Η^з 1 5 10 <210> 256 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К1 <400> 256
Бег Теи Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг Ме/ Η^з 1 5 10 <210> 257 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К1 <400> 257
Бег Теи Бег Теи Агд Уа1 С1у Туг Ме/ Η^з 1 5 10 <210> 258 <211> 10
- 277 023179
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЪК1
<400> 258
Бег Суз С1п Ъеи Бег Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 259
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЪК1
<400> 259
Бег Суз С1п Бег Бег Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 260
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЪК1
<400> 260
Бег Суз С1п Бег Агд Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 261
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
- 278 023179 <220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 261
Зег Суз С1п Ъеи Агд Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10
<210> 262
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 262
Зег Ъеи С1п Ъеи Зег Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10
<210> 263
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 263
Зег Ъеи С1п Зег Зег Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10
<210> 264
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
- 279 023179
<223> УЪ СЪК1
<400> 264
Бег Ъеи С1п Бег Агд
1 5
<210> 265
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 265
Бег Ъеи С1п Ъеи Агд
1 5
<210> 266
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 266
Бег Суз Бег Ъеи Бег
1 5
<210> 267
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10 последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10 последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10 последовательность
- 280 023179 <400> 267
Зег Суз Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеА Нтз 1 5 10
<210> 268
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 268
Зег Суз Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеА Нтз 1 5 10
<210> 269
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 269
Зег Суз Зег Ъеи Агд Уа1 С1у Туг МеА Нтз 1 5 10
<210> 270
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 270
Ъуз Рго Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеА Нтз
- 281 023179 <210> 271 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К1 <400> 271
Ьуз Рго Зег Ьеи Агд Уа1 С1у Туг МеА Η^з 1 5 10 <210> 272 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К1 <400> 272
Ьуз Рго Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеА Η^з 1 5 10 <210> 273 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К1 <400> 273
Ьуз Рго Зег Ьеи Зег Уа1 С1у Туг МеА Η^з
- 282 023179 <210> 274 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СИК1 <400> 274
Туз Рго С1п Зег Агд Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз 1 5 10 <210> 275 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СИК1 <400> 275
Туз Рго С1п Теи Агд Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз 1 5 10 <210> 276 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СИК1 <400> 276
Туз Рго С1п Зег Зег Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз
5 10
- 283 023179 <210> 277 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 277
Ъуз Рго С1п Ъеи Зег Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10 <210> 278 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 278
Зег Рго Зег Ъеи Агд Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10 <210> 279 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 279
Зег Рго Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10 <210> 280
- 284 023179
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕЖ1
<400> 280
Зег Рго Зег Теи Зег
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Низ 10
<210> 281
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕЖ1
<400> 281
Зег Рго С1п Зег Агд
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Низ 10
<210> 282
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕЖ1
<400> 282
Зег Рго С1п Теи Агд
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Низ 10
<210> 283
<211> 10
<212> БЕЛОК
- 285 023179
<213> Искусственная
<220>
<223> '.7. СБК1
<400> 283
Бег Рго С1п Бег Бег
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеК Нтз 10
<210> 284
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> 77. СБК1
<400> 284
Бег Рго С1п Беи Бег
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеК Нтз 10
<210> 285
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> 77. СБК1
<400> 285
Ьуз А1а С1п Бег Агд
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеК Нтз 10
<210> 286
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 286 023179 <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 286 Ъуз А1а С1п Ъеи Агд
1 5
<210> 287 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная
<220> <223> УЪ СЪК1 <400> 287 Ъуз А1а С1п Бег Бег
1 5
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10 последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10
<210> 288
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 288
Ъуз А1а С1п Ъеи Бег
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10
<210> 289
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 287 023179 <220>
<223> ντ СЕ>К1 <400> 289
Туз А1а Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг Ме/ Η^з 1 5 10 <210> 290 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К1 <400> 290
Туз А1а Бег Теи Агд Уа1 С1у Туг Ме/ Η^з 1 5 10 <210> 291 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К1 <400> 291
Туз А1а Бег Бег Бег Уа1 С1у Туг Ме/ Η^з 1 5 10 <210> 292 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К1
- 288 023179 <400> 292
Ъуз А1а Зег Геи Зег Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 293 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК1 <400> 293
Зег А1а Зег Ъеи Агд Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 294 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 294
Зег А1а Зег Геи Зег Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 295 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК1 <400> 295
- 289 023179
Бег А1а С1п Бег Агд
1 5
<210> 296
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЪК1
<400> 296
Бег А1а С1п Ъеи Агд
1 5
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10 последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10
<210> 297
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 297
Бег А1а С1п Бег Бег
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10
<210> 298
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЪК1
<400> 298
Ъеи Рго Бег Бег Агд
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз
- 290 023179
<210> 299
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УБ СБК1
<400> 299
Беи Рго Зег Беи Зег Уа1 С1у Туг МеС Нтз 1 5 10
<210> 300
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УБ СБК1
<400> 300
Беи Рго Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеС Нтз 1 5 10
<210> 301
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УБ СБК1
<400> 301
Беи Рго Зег Беи Агд Уа1 С1у Туг МеС Нтз
5 10
- 291 023179
<210> 302
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 302
Ъеи Суз Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10
<210> 303
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 303
Ъеи Суз Зег Ъеи Зег Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10
<210> 304
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 304
Ъеи Суз Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеН Нгз
5 10
- 292 023179
<210> 305
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 305
Ъеи Суз Бег Ъеи Агд Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 306
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 306
Ъеи Рго С1п Бег Агд Уа1 С1у Туг МеН Нтз
1 5 10
<210> 307
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 307
Ъеи Рго С1п Ъеи Бег Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 308
<211> 10
<212> БЕЛОК
- 293 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К1 <400> 308 ^еи Рго С1п Зег Зег Уа1 С1у Туг МеА Η^з 1 5 10 <210> 309 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К1 <400> 309 ^еи Рго С1п ^еи Агд Уа1 С1у Туг МеА Η^з 1 5 10 <210> 310 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К1 <400> 310 ^еи Суз С1п Зег Агд Уа1 С1у Туг МеА Η^з 1 5 10 <210> 311 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 294 023179 <220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 311
Ъеи Суз С1п Ъеи Зег Уа1 С1у Туг МеА Нтз 1 5 10
<210> 312
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 312
Ъеи Суз С1п Зег Зег Уа1 С1у Туг МеА Нтз 1 5 10
<210> 313
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 313
Ъеи Суз С1п Ъеи Агд Уа1 С1у Туг МеА Нтз 1 5 10
<210> 314
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
- 295 023179 <223> УТ СЕ>К1 <400> 314
Зег А1а С1п Теи Зег Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз 1 5 10 <210> 315 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2 <400> 315
Азр ТАг Зег Туг Теи А1а Зег 1 5 <210> 316 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2 <400> 316
Азр ТАг Зег Туг Теи Зег Зег 1 5 <210> 317 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2
- 296 023179 <400> 317
Азр ТТг Ъуз Ъуз Ъеи Зег Зег 1 5 <210> 318 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 318
Азр ТТг РТе Туг Ъеи Зег Зег 1 5 <210> 319 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 319
Азр ТТг РТе Ъуз Ъеи Зег Зег 1 5 <210> 320 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2
- 297 023179 <400> 320
Азр ТНг РНе Туг Ъеи А1а Зег 1 5 <210> 321 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 321
Азр ТНг Зег Ъуз Ъеи Рго Зег 1 5 <210> 322 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 322
Азр ТНг Зег С1у Геи А1а Зег 1 5 <210> 323 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 323
Азр ТНг Зег С1у Ъеи Рго Зег 1 5
- 298 023179 <210> 324 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К2 <400> 324
Азр ТНг Агд Туз Теи А1а Бег 1 5 <210> 325 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К2 <400> 325
Азр ТНг Агд С1у Теи А1а Бег 1 5 <210> 326 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К2 <400> 326
Азр ТНг Агд Туз Теи Рго Бег 1 5
- 299 023179
<210> 327
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 327
Азр ТНг МеН Вуз Вей
1 5
А1а Зег последовательность
<210> 328
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 328
Азр ТНг Зег Агд Вей
1 5
А1а Зег последовательность
<210> 329
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
последовательность <400> 329
Азр ТНг Зег Вей Вей 1 5 <210> 330
А1а Зег
- 300 023179 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 330
Азр ТЬг Зег Беи Беи Азр Зег 1 5 <210> 331 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 331
Азр ТЬг Зег Буз Беи Азр Зег 1 5 <210> 332 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 332
Азр ТЬг Беи Буз Беи Азр Зег 1 5 <210> 333 <211> 7 <212> БЕЛОК
- 301 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 333
Азр ТНг Ъеи Ъеи Ъеи А1а Бег 1 5 <210> 334 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 334
Азр ТНг Ъеи Ъуз Ъеи А1а Бег 1 5 <210> 335 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 335
Азр ТНг Бег Ъуз Ъеи Бег Бег 1 5 <210> 336 <211> 7 <212> БЕЛОК
- 302 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 336
Азр ТНг Зег Туз С1п А1а Зег 1 5 <210> 337 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 337
Азр ТНг Зег Туз С1п Зег Зег 1 5 <210> 338 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 338
Азр ТНг Зег Туг Теи А1а Зег 1 5 <210> 339 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
- 303 023179 <223> УЪ СЪК2 <400> 339
Азр ТНг Зег Туг Ъеи Зег Зег 1 5 <210> 340 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 340
Азр ТНг Зег Туг С1п А1а Зег 1 5 <210> 341 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 341
Азр ТНг Зег Туг С1п Зег Зег 1 5 <210> 342 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2
- 304 023179
<400> 342
Азр ТНг МеК Туг С1п
1 5
А1а Бег
<210> 343
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> '.7. СБК2
<400> 343
Азр ТНг МеК Буз С1п
1 5
А1а Бег последовательность
<210> 344
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> 77. СБК2
<400> 344
Азр ТНг МеК Ьуз С1п
1 5
Бег Бег последовательность
<210> 345
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> 77. СБК2
<400> 345
последовательность
- 305 023179
Азр ТНг МеЕ Туг Беи А1а Бег 1 5 <210> 346 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СБК2 <400> 346
Азр ТНг МеЕ Туг Ьеи Бег Бег 1 5 <210> 347 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СБК2 <400> 347
Азр ТНг МеЕ Ьуз Ьеи А1а Бег 1 5 <210> 348 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СБК2 <400> 348
Азр ТНг МеЕ Ьуз Ьеи Бег Бег 1 5
- 306 023179 <210> 349 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 349
Азр ТНг Бег Туз Теи Бег Бег 1 5 <210> 350 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 350
Азр ТНг Агд Туг С1п А1а Бег 1 5 <210> 351 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 351
Азр ТНг Агд Туз С1п А1а Бег 1 5
- 307 023179 <210> 352 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 352
Азр ТНг Агд Ъуз С1п Бег Бег 1 5 <210> 353 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 353
Азр ТНг Агд Ъуз Ъеи А1а Бег 1 5 <210> 354 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 354
Азр ТНг Агд Ъуз Ъеи Бег Бег 1 5 <210> 355
- 308 023179 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 355
Азр ТТг Агд Туг Ъеи А1а Зег 1 5 <210> 356 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Н3-3Р4 УН ЦЕПЬ <400> 356
С1п Уа1 ТТг Ъеи Агд С1и Зег С1у
1 5
ТТг Ъеи ТТг Ъеи ТТг Суз ТТг РТе
20
С1у МеК Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд
35 40
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр
50 55
Ъеи Ъуз Зег Агд Ъеи ТТг 11е Зег
65 70
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТТг Азп МеК Азр
85
Суз А1а Агд Азр МеК 11е РТе Азп
100
С1у ТТг ТТг Уа1 ТТг Уа1 Зег Зег
115 120
РТе Рго Ъеи А1а Рго Зег Зег Ъуз
130 135
Рго А1а 10 Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТТг 15 С1п
Зег С1у РТе Зег Ъеи Зег ТТг А1а
25 30
С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Ъеи С1и
45
Азр Ъуз Ъуз Азр Туг Азп Рго Зег
60
Ъуз Азр ТТг Зег Ъуз Азп С1п Уа1
75 80
Рго А1а Азр ТТг А1а ТТг Туг Туг
90 95
Тгр Туг РТе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
105 110
А1а Зег ТТг Ъуз С1у Рго Зег Уа1
125
Зег ТТг Зег С1у С1у ТТг А1а А1а
140
- 309 023179
Теи С1у Суз Теи Уа1 Туз Азр Туг РАе Рго С1и Рго Уа1 ТАг Уа1 Зег
145 150 155 160
Тгр Азп Зег С1у А1а Теи ТАг Зег С1у Уа1 Нтз ТАг РАе Рго А1а Уа1
165 170 175
Теи С1п Зег Зег С1у Теи Туг Зег Теи Зег Зег Уа1 Уа1 ТАг Уа1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Теи С1у ТАг С1п ТАг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Туз
195 200 205
Рго Зег Азп ТАг Туз Уа1 Азр Туз Агд Уа1 С1и Рго Туз Зег Суз Азр
210 215 220
Туз ТАг Нтз ТАг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Теи Теи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Зег Уа1 РАе Теи РАе Рго Рго Туз Рго Туз Азр ТАг Теи МеЛ 11е
245 250 255
Зег Агд ТАг Рго С1и Уа1 ТАг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Нтз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Туз РАе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз
275 280 285
Азп А1а Туз ТАг Туз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТАг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Зег Уа1 Теи ТАг Уа1 Теи Нтз С1п Азр Тгр Теи Азп С1у Туз
305 310 315 320
С1и Туг Туз Суз Туз Уа1 Зег Азп Туз А1а Теи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Туз ТАг 11е Зег Туз А1а Туз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТАг Теи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеЛ ТАг Туз Азп С1п Уа1 Зег Теи
355 360 365
ТАг Суз Теи Уа1 Туз С1у РАе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Туз ТАг ТАг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Теи Азр Зег Азр С1у Зег РАе РАе Теи Туг Зег Туз Теи ТАг Уа1 Азр
405 410 415
Туз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РАе Зег Суз Зег Уа1 МеЛ Нтз
420 425 430
С1и А1а Теи Нтз Азп Нтз Туг ТАг С1п Туз Зег Теи Зег Теи Зег Рго
435 440 445
С1у Туз 450
- 310 023179 <210> 357 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Н3-3Р4 УН ДОМЕН <400> 357
С1п Уа1 ТАг Ъеи Агд С1и Зег С1у Рго А1а Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТАг С1п
1 5 10 15
ТАг Ъеи ТАг Ъеи ТАг Суз ТАг РАе Зег С1у РАе Зег Ъеи Зег ТАг А1а
20 25 30
С1у МеА Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Ъеи С1и
35 40 45
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз Ъуз Азр Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Ъеи Ъуз Зег Агд Ъеи ТАг 11е Зег Ъуз Азр ТАг Зег Ъуз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТАг Азп МеА Азр Рго А1а Азр ТАг А1а ТАг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеА 11е РАе Азп Тгр Туг РАе Азр Уа1 Тгр С1у А1а
100 105 110
С1у ТАг ТАг Уа1 ТАг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 358 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Н3-3Р4 УЪ ЦЕПЬ <400> 358
Азр 11е С1п МеА ТАг С1п Зег Рго Зег ТАг Ъеи Зег А1а Зег Уа1 С1у 1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТАг 11е ТАг Суз Зег А1а Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеА
- 311 023179
20 25 30
Η^з Тгр Туг С1п С1п ^уз Рго С1у ^уз А1а Рго ^уз ^еи ^еи 11е Туг
35 40 45
Азр ТАг РАе ^уз ^еи А1а Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РАе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТАг С1и РАе ТАг ^еи ТАг 11е Зег Зег ^еи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РАе А1а ТАг Туг Туг Суз РАе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РАе ТАг
85 90 95
РАе С1у С1у С1у ТАг ^уз Уа1 С1и 11е ^уз Агд ТАг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Зег Уа1 РАе 11е РАе Рго Рго Зег Азр С1и С1п ^еи ^уз Зег С1у ТАг
115 120 125
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз ^еи ^еи Азп Азп РАе Туг Рго Агд С1и А1а ^уз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр ^уз Уа1 Азр Азп А1а ^еи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
145 150 155 160
Зег Уа1 ТАг С1и С1п Азр Зег ^уз Азр Зег ТАг Туг Зег ^еи Зег Зег
165 170 175
ТАг ^еи ТАг ^еи Зег ^уз А1а Азр Туг С1и ^уз Η^з ^уз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТАг Η^з С1п С1у ^еи Зег Зег Рго Уа1 ТАг ^уз Зег РАе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210 <210> 359 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Η3-3Ρ4 νΣ ДОМЕН <400> 359
Азр 11е С1п МеА ТАг С1п Зег Рго Зег ТАг ^еи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТАг 11е ТАг Суз Зег А1а Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеА
- 312 023179
20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Гуз Геи Ъеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг РНе Гуз Геи А1а Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг Геи ТНг 11е Зег Зег Ъеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Геи С1и 11е Ъуз
100 105
<210> 360
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УГ СЪК2
<400> 360
Азр ТНг Агд Туг С1п Зег Зег
1 5
<210> 361 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> М3Н9 УЪ СЪК2 <400> 361
Азр ТНг Туг Гуз С1п ТНг Зег 1 5 <210> 362
- 313 023179 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 1Х-493Б1РК УН домен <400> 362
С1п Уа1 ТЬг Беи Агд С1и Зег С1у Рго А1а Беи Уа1 Буз Рго ТЬг С1п
1 5 10 15
ТЬг Беи ТЬг Беи ТЬг Суз ТЬг РЬе Зег С1у РЬе Зег Беи Зег ТЬг Зег
20 25 30
С1у МеС Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Буз А1а Беи С1и
35 40 45
Тгр Беи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Буз Буз Азр Туг Азп Рго Зег
50 55 60
Беи Буз Зег Агд Беи ТЬг 11е Зег Буз Азр ТЬг Зег Буз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Беи Буз Уа1 ТЬг Азп МеС Азр Рго А1а Азр ТЬг А1а ТЬг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Зег МеС 11е ТЬг Азп Тгр Туг РЬе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТЬг ТЬг Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 363 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А3е2 УН цепь <400> 363
С1п Уа1 ТЬг Беи Агд С1и Зег С1у Рго А1а Беи Уа1 Буз Рго ТЬг С1п 1 5 10 15
ТЬг Беи ТЬг Беи ТЬг Суз ТЬг РЬе Зег С1у РЬе Зег Беи Зег ТЬг А1а 20 25 30
С1у МеС Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Буз А1а Беи С1и
- 314
35 40 45
Тгр Теи А1а Азр 11е Тгр Тгр С1у Азр Туз С1у Η^з Туг Азп Рго Бег
50 55 60
Теи Туз Азр Агд Теи ТНг 11е Бег Туз Азр ТНг Бег Туз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Теи Туз Уа1 ТНг Азп Ме/ Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр Ме/ 11е РНе Азп Тгр Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Бег Бег А1а Бег ТНг Туз С1у Рго Бег Уа1
115 120 125
РНе Рго Теи А1а Рго Бег Бег Туз Бег ТНг Бег С1у С1у ТНг А1а А1а
130 135 140
Теи С1у Суз Теи Уа1 Туз Азр Туг РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Бег
145 150 155 160
Тгр Азп Бег С1у А1а Теи ТНг Бег С1у Уа1 Η^з ТНг РНе Рго А1а Уа1
165 170 175
Теи С1п Бег Бег С1у Теи Туг Бег Теи Бег Бег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго
180 185 190
Бег Бег Бег Теи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Η^з Туз
195 200 205
Рго Бег Азп ТНг Туз Уа1 Азр Туз Агд Уа1 С1и Рго Туз Бег Суз Азр
210 215 220
Туз ТНг Η^з ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Теи Теи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Бег Уа1 РНе Теи РНе Рго Рго Туз Рго Туз Азр ТНг Теи Ме/ 11е
245 250 255
Бег Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Бег Η^з С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Туз РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Η^з
275 280 285
Азп А1а Туз ТНг Туз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Бег ТНг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Бег Уа1 Теи ТНг Уа1 Теи Η^з С1п Азр Тгр Теи Азп С1у Туз
305 310 315 320
С1и Туг Туз Суз Туз Уа1 Бег Азп Туз А1а Теи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Туз ТНг 11е Бег Туз А1а Туз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТНг Теи Рго Рго Бег Агд С1и С1и Ме/ ТНг Туз Азп С1п Уа1 Бег Теи
- 315
355 360 365 Тгр Уа1 400
ТНг С1и 385 Суз 370 Бег Ъеи Уа1 Ъуз С1п С1у Рго 390 РНе 375 С1и Туг Азп Рго Азп Бег Туг Азр Ъуз 395 11е 380 ТНг А1а ТНг Уа1 Рго С1и Рго
Азп С1у
Ъеи Азр Бег Азр С1у Бег РНе РНе Ъеи Туг Бег Ъуз Ъеи ТНг Уа1 Азр
405 410 415
Ъуз Бег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Бег Суз Бег Уа1 МеН Нтз
420 425 430
С1и А1а Ъеи Нтз Азп Нтз Туг ТНг С1п Ъуз Бег Ъеи Бег Ъеи Бег Рго
435 440 445
С1у Ъуз
450
<210> 364 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А3е2 УН домен <400> 364
С1п Уа1 ТНг Ъеи Агд С1и Бег С1у Рго А1а Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТНг С1п 1 5 10 15
ТНг Ъеи ТНг Ъеи ТНг Суз ТНг РНе Бег С1у РНе Бег Ъеи Бег ТНг А1а 20 25 30
С1у МеН Бег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ъуз А1а Ъеи С1и 35 40 45
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр С1у Азр Ъуз С1у Нтз Туг Азп Рго Бег 50 55 60
Ъеи Ъуз Азр Агд Ъеи ТНг 11е Бег Ъуз Азр ТНг Бег Ъуз Азп С1п Уа1
70 75 80
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
90 95
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп Тгр Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Бег Бег
- 316
115 120
<210> 365
<211> 16
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> А3е2 УН СЕ>К2
<400> 365
Азр 11е Тгр Тгр С1у Азр Вуз С1у Нгз Туг Азп Рго Зег Вей Вуз Азр
1 5 10 15
<210> 366 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А3е2 УВ цепь <400> 366
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго Зег ТНг Вей Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Зег А1а Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеН
20 25 30
Нгз Тгр Туг С1п С1п Вуз Рго С1у Вуз А1а Рго Вуз Вей Вей 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг РНе Туг Вей Нгз Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг Вей ТНг 11е Зег Зег Вей С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Вуз Уа1 С1и 11е Вуз Агд ТНг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Зег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Вей Вуз Зег С1у ТНг
115 120 125
- 317 023179
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз 130
Уа1 С1п Тгр Ъуз Уа1 145
Зег Уа1 ТНг С1и С1п
165
ТНг Ъеи ТНг Ъеи Зег
180
Суз С1и Уа1 ТНг Нгз 195
Азп Агд С1у С1и Суз 210
Ъеи Ъеи 135 Азп Азп РНе Туг Рго 140 Агд С1и А1а Ъуз
Азр Азп А1а Ъеи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
150 155 160
Азр Зег Ъуз Азр Зег ТНг Туг Зег Ъеи Зег Зег
170 175
Ъуз А1а Азр Туг С1и Ъуз Нгз Ъуз Уа1 Туг А1а
185 190
С1п С1у Ъеи Зег Зег Рго Уа1 ТНг Ъуз Зег РНе
200 205 <210> 367 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>
<223> А3е2 УЪ домен <400> 367
Азр 11е С1п МеН ТНг 1 5
Азр Агд Уа1 ТНг 11е
Нгз Тгр Туг С1п С1п 35
Азр ТНг РНе Туг Ъеи 50
С1у Зег С1у ТНг С1и 65
Азр РНе А1а ТНг Туг 85
РНе С1у С1у С1у ТНг
100 последовательность
С1п Зег Рго Зег ТНг 10 Ъеи Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
ТНг Суз Зег А1а Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеН
25 30
Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
40 45
Нгз Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
55 60
РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Зег Зег Ъеи С1п Рго Азр
70 75 80
Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
90 95
Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз
105
<210> 368
- 318 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А3е2 УТ ΟΌΚ2 <400> 368
Азр ТНг РНе Туг Теи Низ Зег 1 5 <210> 369 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А14а4 УН цепь <400> 369
С1п Уа1 ТНг Теи Агд С1и Зег С1у
1 5
ТНг Теи ТНг Теи ТНг Суз ТНг РНе
20
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд
35 40
Тгр Теи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр
50 55
Теи Туз Азр Агд Теи ТНг 11е Зег
65 70
Уа1 Теи Туз Уа1 ТНг Азп МеН Азр
85
Суз А1а Агд Азр МеН 11е ТНг Азп
100
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120
РНе Рго Теи А1а Рго Зег Зег Туз
130 135
Рго А1а 10 Теи Уа1 Туз Рго ТНг 15 С1п
Зег С1у РНе Зег Теи Зег ТНг А1а
25 30
С1п Рго Рго С1у Туз А1а Теи С1и
45
Азр Туз Туз Зег Туг Азп Рго Зег
60
Туз Азр ТНг Зег Туз Азп С1п Уа1
75 80
Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
90 95
Тгр Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
105 110
А1а Зег ТНг Туз С1у Рго Зег Уа1
125
Зег ТНг Зег С1у С1у ТНг А1а А1а
140
- 319 023179
Теи С1у Суз Ъеи Уа1 Туз Азр Туг РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Бег
145 150 155 160
Тгр Азп Бег С1у А1а Ъеи ТНг Бег С1у Уа1 Нтз ТНг РНе Рго А1а Уа1
165 170 175
Теи С1п Бег Бег С1у Ъеи Туг Бег Ъеи Бег Бег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго
180 185 190
Бег Бег Бег Теи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Туз
195 200 205
Рго Бег Азп ТНг Туз Уа1 Азр Туз Агд Уа1 С1и Рго Ъуз Бег Суз Азр
210 215 220
Ъуз ТНг Нтз ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ъеи Ъеи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Бег Уа1 РНе Ъеи РНе Рго Рго Туз Рго Туз Азр ТНг Ъеи МеН 11е
245 250 255
Бег Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Бег Нтз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ъуз РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз
275 280 285
Азп А1а Ъуз ТНг Туз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Бег ТНг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Бег Уа1 Теи ТНг Уа1 Ъеи Нтз С1п Азр Тгр Теи Азп С1у Ъуз
305 310 315 320
С1и Туг Туз Суз Ъуз Уа1 Бег Азп Туз А1а Теи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Ъуз ТНг 11е Бег Ъуз А1а Туз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТНг Ъеи Рго Рго Бег Агд С1и С1и МеН ТНг Ъуз Азп С1п Уа1 Бег Ъеи
355 360 365
ТНг Суз Теи Уа1 Туз С1у РНе Туг Рго Бег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Бег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ъуз ТНг ТНг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Теи Азр Бег Азр С1у Бег РНе РНе Ъеи Туг Бег Туз Теи ТНг Уа1 Азр
405 410 415
Туз Бег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Бег Суз Бег Уа1 МеН Нтз
420 425 430
С1и А1а Ъеи Нтз Азп Нтз Туг ТНг С1п Ъуз Бег Теи Бег Теи Бег Рго
435 440 445
С1у Ъуз 450
- 320 023179 <210> 370 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>
<223> А14а4 VΗ домен последовательность <400> 370
С1п Уа1 ТНг Ьеи Агд
1 5
ТНг Ьеи ТНг Беи 20 ТНг
С1у МеК Бег 35 Уа1 С1у
Тгр Ьеи 50 А1а Азр 11е
Беи 65 Буз Азр Агд Беи
Уа1 Беи Ьуз Уа1 ТНг 85
Суз А1а Агд Азр 100 МеК
С1у ТНг ТНг 115 Уа1 ТНг
С1и Бег С1у Рго А1а 10
Суз ТНг РНе Бег 25 С1у
Тгр 11е Агд 40 С1п Рго
Тгр Тгр 55 Азр Азр Ьуз
ТНг 70 11е Бег Ьуз Азр
Азп МеК Азр Рго А1а 90
11е Уа1 ТНг Бег Азп Бег Тгр 105 Туг
120
Беи Уа1 Ьуз Рго ТНг 15 С1п
РНе Бег Ьеи Бег 30 ТНг А1а
Рго С1у Буз 45 А1а Ьеи С1и
Буз Бег 60 Туг Азп Рго Бег
ТНг 75 Бег Буз Азп С1п Уа1 80
Азр ТНг А1а ТНг Туг 95 Туг
РНе Азр Уа1 Тгр 110 С1у С1п
<210> 371 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А14а4 VΗ СБК3 <400> 371
Азр МеК 11е 1
ТНг Азп
Тгр Туг РНе Азр Уа1 10
- 321 023179 <210> 372 <211> 197 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А14а4 УЪ цепь <400> 372
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Ъеи Ъеи Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеН
1 5 10 15
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
20 25 30
Азр ТНг Туг Туг С1п ТНг Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
35 40 45
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Бег Бег Ъеи С1п Рго Азр
50 55 60
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
65 70 75 80
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз Агд ТНг Уа1 А1а А1а Рго
85 90 95
Бег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Бег Азр С1и С1п Ъеи Ъуз Бег С1у ТНг
100 105 110
А1а Бег Уа1 Уа1 Суз Ъеи Ъеи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Ъуз
115 120 125
Уа1 С1п Тгр Ъуз Уа1 Азр Азп А1а Ъеи С1п Бег С1у Азп Бег С1п С1и
130 135 140
Бег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Бег Ъуз Азр Бег ТНг Туг Бег Ъеи Бег Бег
145 150 155 160
ТНг Ъеи ТНг Ъеи Бег Ъуз А1а Азр Туг С1и Ъуз Нтз Ъуз Уа1 Туг А1а
165 170 175
Суз С1и Уа1 ТНг Нтз С1п С1у Ъеи Бег Бег Рго Уа1 ТНг Ъуз Бег РНе
180 185 190
Азп Агд С1у С1и Суз
195
- 322 <210> 373 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А14а4 νΐ домен <400> 373
Азр 11е С1п МеЕ ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Беи Бег А1а Бег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Ьеи Ьеи Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеЕ
20 25 30
Нгз Тгр Туг С1п С1п Буз Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи Беи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг Туг Туг С1п ТНг Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ьеи ТНг 11е Бег Бег Беи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ьуз Уа1 С1и 11е Буз
100 105 <210> 374 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А14а4 Ж. СБК1
<400> 374
Ьеи Ьеи Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеЕ Нгз
1 5 10
<210> 375
<211> 7
- 323 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А14а4 УЪ СЪК2 <400> 375
Азр ТНг Туг Туг С1п ТНг Зег 1 5 <210> 376 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А16Н4 УН цепь <400> 376
С1п Уа1 ТНг Геи Агд С1и Зег С1у
1 5
ТНг Ъеи ТНг Геи ТНг Суз ТНг РНе
20
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд
35 40
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр
50 55
Геи Гуз Азр Агд Ъеи ТНг 11е Зег
65 70
Уа1 Геи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр
85
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп
100
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120
РНе Рго Ъеи А1а Рго Зег Зег Гуз
130 135
Геи С1у Суз Ъеи Уа1 Гуз Азр Туг
145 150
Рго А1а 10 Геи Уа1 Ъуз Рго ТНг 15 С1п
Зег С1у РНе Зег Геи Зег ТНг А1а
25 30
С1п Рго Рго С1у Гуз А1а Ъеи С1и
45
Азр Ъуз Гуз Нтз Туг Азп Рго Зег
60
Ъуз Азр ТНг Зег Ъуз Азп С1п Уа1
75 80
Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
90 95
Тгр Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
105 110
А1а Зег ТНг Ъуз С1у Рго Зег Уа1
125
Зег ТНг Зег С1у С1у ТНг А1а А1а
140
РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Зег
155 160
- 324 023179
Тгр Азп Зег С1у А1а 165 Ъеи ТТг Зег С1у Уа1 170 Нтз ТТг РТе Рго А1а 175 Уа1
Ъеи С1п Зег Зег С1у Ъеи Туг Зег Ъеи Зег Зег Уа1 Уа1 ТТг Уа1 Рго
180 185 190
Зег Зег Зег Ъеи С1у ТТг С1п ТТг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Ъуз
195 200 205
Рго Зег Азп ТТг Ъуз Уа1 Азр Ъуз Агд Уа1 С1и Рго Ъуз Зег Суз Азр
210 215 220
Ъуз ТТг Нтз ТТг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ъеи Ъеи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Зег Уа1 РТе Ъеи РТе Рго Рго Ъуз Рго Ъуз Азр ТТг Ъеи МеК 11е
245 250 255
Зег Агд ТТг Рго С1и Уа1 ТТг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Зег Нтз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ъуз РТе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз
275 280 285
Азп А1а Ъуз ТТг Ъуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТТг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Зег Уа1 Ъеи ТТг Уа1 Ъеи Нтз С1п Азр Тгр Ъеи Азп С1у Ъуз
305 310 315 320
С1и Туг Ъуз Суз Ъуз Уа1 Зег Азп Ъуз А1а Ъеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Ъуз ТТг 11е Зег Ъуз А1а Ъуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТТг Ъеи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеК ТТг Ъуз Азп С1п Уа1 Зег Ъеи
355 360 365
ТТг Суз Ъеи Уа1 Ъуз С1у РТе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ъуз ТТг ТТг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Ъеи Азр Зег Азр С1у Зег РТе РТе Ъеи Туг Зег Ъуз Ъеи ТТг Уа1 Азр
405 410 415
Ъуз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РТе Зег Суз Зег Уа1 МеК Нтз
420 425 430
С1и А1а Ъеи Нтз Азп Нтз Туг ТТг С1п Ъуз Зег Ъеи Зег Ъеи Зег Рго
435 440 445
С1у Ъуз 450
- 325 <210> 377 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>
<223> А16А4 УН домен последовательность <400> 377
С1п Уа1 ТАг Ъеи Агд
1 5
ТАг Ъеи ТАг Ъеи 20 ТАг
С1у МеА Зег 35 Уа1 С1у
Тгр Ъеи 50 А1а Азр 11е
Ъеи 65 Ъуз Азр Агд Ъеи
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТАг 85
Суз А1а Агд Азр 100 МеА
С1у ТАг ТАг 115 Уа1 ТАг
С1и Зег С1у Рго А1а 10
Суз ТАг РАе Зег 25 С1у
Тгр 11е Агд 40 С1п Рго
Тгр Тгр 55 Азр Азр Ъуз
ТАг 70 11е Зег Ъуз Азр
Азп МеА Азр Рго А1а 90
11е Уа1 РАе Зег Азп Зег Тгр 105 Туг
120
Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТАг 15 С1п
РАе Зег Ъеи Зег 30 ТАг А1а
Рго С1у Ъуз 45 А1а Ъеи С1и
Ъуз Нтз 60 Туг Азп Рго Зег
ТАг 75 Зег Ъуз Азп С1п Уа1 80
Азр ТАг А1а ТАг Туг 95 Туг
РАе Азр Уа1 Тгр 110 С1у С1п
<210> 378 <211> 197 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А16А4 УЪ цепь <400> 378
Азр Агд Уа1 ТАг 11е ТАг Суз Ъеи Ъеи Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеА 1 5 10 15
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
- 326 023179
20 25 30
Азр ТНг МеН Туг С1п А1а Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
35 40 45
С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг Теи ТНг 11е Зег Зег Теи С1п Рго Азр
50 55 60
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
65 70 75 80
РНе С1у С1у С1у ТНг Туз Уа1 С1и 11е Туз Агд ТНг Уа1 А1а А1а Рго
85 90 95
Зег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Теи Туз Зег С1у ТНг
100 105 110
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Теи Теи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Туз
115 120 125
Уа1 С1п Тгр Туз Уа1 Азр Азп А1а Теи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
130 135 140
Зег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Зег Туз Азр Зег ТНг Туг Зег Теи Зег Зег
145 150 155 160
ТНг Теи ТНг Теи Зег Туз А1а Азр Туг С1и Туз Низ Туз Уа1 Туг А1а
165 170 175
Суз С1и Уа1 ТНг Низ С1п С1у Теи Зег Зег Рго Уа1 ТНг Туз Зег РНе
180 185 190
Азп Агд С1у С1и Суз
195 <210> 379 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А16Т4 УТ домен <400> 379
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго Зег ТНг Теи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Теи Теи Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеН
20 25 30
Низ Тгр Туг С1п С1п Туз Рго С1у Туз А1а Рго Туз Теи Теи 11е Туг
35 40 45
- 327
Азр ТНг 50 МеЕ Туг С1п А1а Бег 55 С1у Уа1 Рго Бег Агд 60 РНе Бег С1у Бег
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Беи ТНг 11е Бег Бег Ьеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Буз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105
<210> 380 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А16Б4 Ж. СБН1 <400> 380
Беи Ьеи Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеЕ НЬз 1 5 10 <210> 381 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А16Б4 νΗ СБН2 <400> 381
Азр ТНг МеЕ Туг С1п А1а Бег 1 5 <210> 382 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 328 023179 <220>
<223> А17Н5 VΗ цепь <400> 382
С1п Уа1 ТНг Ьеи Агд С1и Бег С1у Рго А1а Беи Уа1 Буз Рго ТНг С1п
1 5 10 15
ТНг Беи ТНг Беи ТНг Суз ТНг РНе Бег С1у РНе Бег Беи Бег ТНг А1а
20 25 30
С1у МеК Бег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Ьуз А1а Беи С1и
35 40 45
Тгр Ьеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ьуз Буз Нтз Туг Азп Рго Бег
50 55 60
Беи Ьуз Азр Агд Ьеи ТНг 11е Бег Буз Азр ТНг Бег Ьуз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Беи Буз Уа1 ТНг Азп МеК Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеК 11е РНе Азп Тгр Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Бег Бег А1а Бег ТНг Ьуз С1у Рго Бег Уа1
115 120 125
РНе Рго Ьеи А1а Рго Бег Бег Ьуз Бег ТНг Бег С1у С1у ТНг А1а А1а
130 135 140
Ьеи С1у Суз Беи Уа1 Ьуз Азр Туг РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Бег
145 150 155 160
Тгр Азп Бег С1у А1а Беи ТНг Бег С1у Уа1 Нтз ТНг РНе Рго А1а Уа1
165 170 175
Ьеи С1п Бег Бег С1у Беи Туг Бег Беи Бег Бег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго
180 185 190
Бег Бег Бег Ьеи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Буз
195 200 205
Рго Бег Азп ТНг Буз Уа1 Азр Ьуз Агд Уа1 С1и Рго Буз Бег Суз Азр
210 215 220
Буз ТНг Нтз ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Беи Ьеи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Бег Уа1 РНе Беи РНе Рго Рго Ьуз Рго Ьуз Азр ТНг Ьеи МеК 11е
245 250 255
Бег Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Бег Нтз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ьуз РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз
- 329 023179
275 280 285
Азп А1а Буз ТЬг Буз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Зег ТЬг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Зег Уа1 Беи ТЬг Уа1 Беи Нтз С1п Азр Тгр Беи Азп С1у Буз
305 310 315 320
С1и Туг Буз Суз Буз Уа1 Зег Азп Буз А1а Беи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Буз ТЬг 11е Зег Буз А1а Буз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТЬг Беи Рго Рго Зег Агд С1и С1и МеС ТЬг Буз Азп С1п Уа1 Зег Беи
355 360 365
ТЬг Суз Беи Уа1 Буз С1у РЬе Туг Рго Зег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Буз ТЬг ТЬг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Беи Азр Зег Азр С1у Зег РЬе РЬе Беи Туг Зег Буз Беи ТЬг Уа1 Азр
405 410 415
Буз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РЬе Зег Суз Зег Уа1 МеС Нтз
420 425 430
С1и А1а Беи Нтз Азп Нтз Туг ТЬг С1п Буз Зег Беи Зег Беи Зег Рго
435 440 445
С1у Буз 450 <210> 383 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А17Б5 УН домен <400> 383
С1п Уа1 ТЬг Беи Агд С1и Зег С1у Рго А1а Беи Уа1 Буз Рго ТЬг С1п
1 5 10 15
ТЬг Беи ТЬг Беи ТЬг Суз ТЬг РЬе Зег С1у РЬе Зег Беи Зег ТЬг А1а
20 25 30
С1у МеС Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд С1п Рго Рго С1у Буз А1а Беи С1и
- 330
35 40 45
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз Ъуз Нтз Туг Азп Рго Бег
50 55 60
Ъеи Ъуз Азр Агд Ъеи ТНг 11е Бег Ъуз Азр ТНг Бег Ъуз Азп С1п Уа1
65 70 75 80
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр Рго А1а Азр ТНг А1а ТНг Туг Туг
85 90 95
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп Тгр Туг РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Бег Бег
115 120
<210> 384 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А17Н5 УЪ цепь <400> 384
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Ъеи Бег А1а Бег Уа1 С1у 1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Бег Ъеи Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеН 20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг 35 40 45
Азр ТНг Туг Туг Ъеи Рго Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег 50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Бег Бег Ъеи С1п Рго Азр
70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз Агд ТНг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Бег Уа1 РНе 11е РНе Рго Рго Бег Азр С1и С1п Ъеи Ъуз Бег С1у ТНг
115 120 125
А1а Бег Уа1 Уа1 Суз Ъеи Ъеи Азп Азп РНе Туг Рго Агд С1и А1а Ъуз
130 135 140
- 331
Уа1 С1п Тгр Вуз Уа1 Азр Азп А1а Вей С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
145 150 155 160
Зег Уа1 ТНг С1и С1п Азр Зег Вуз Азр Зег ТНг Туг Зег Вей Зег Зег
165 170 175
ТНг Вей ТНг Вей Зег Вуз А1а Азр Туг С1и Вуз Нгз Вуз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТНг Нгз С1п С1у Вей Зег Зег Рго Уа1 ТНг Вуз Зег РНе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210
<210> 385 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А17Н5 УВ домен <400> 385
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег
1 5
Азр Агд Уа1 ТНг 20 11е ТНг Суз
Нгз Тгр Туг 35 С1п С1п Вуз Рго
Азр ТНг 50 Туг Туг Вей Рго Зег 55
С1у 65 Зег С1у ТНг С1и РНе 70 ТНг
Азр РНе А1а ТНг Туг 85 Туг Суз
РНе С1у С1у С1у 100 ТНг Вуз Уа1
Рго Зег ТНг 10 Вей Зег А1а Зег Уа1 15 С1у
Зег Вей Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеН
25 30
С1у Вуз А1а Рго Вуз Вей Вей 11е Туг
40 45
С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
60
Вей ТНг 11е Зег Зег Вей С1п Рго Азр
75 80
РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
90 95
С1и 11е Вуз
<210> 386 <211> 7
105
- 332 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А17Н5 УЪСЪК2 <400> 386
Азр ТНг Туг Туг Ъеи Рго Зег 1 5 <210> 387 <211> 450 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А17£5 УН цепь <400> 387
С1п 1 Уа1 ТНг Ъеи Агд 5 С1и Зег С1у
ТНг Ъеи ТНг Ъеи ТНг Суз ТНг РНе
20
С1у МеН Зег Уа1 С1у Тгр 11е Агд
35 40
Тгр Ъеи А1а Азр 11е Тгр Тгр Азр
50 55
Ъеи Ъуз Азр Агд Ъеи ТНг 11е Зег
65 70
Уа1 Ъеи Ъуз Уа1 ТНг Азп МеН Азр
85
Суз А1а Агд Азр МеН 11е РНе Азп
100
С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120
РНе Рго Ъеи А1а Рго Зег Зег Ъуз
130 135
Ъеи С1у Суз Ъеи Уа1 Ъуз Азр Туг
Рго А1а 10 Ъеи Уа1 Ъуз Рго ТНг 15 С1п
Зег 25 С1у РНе Зег Ъеи Зег 30 ТНг А1а
С1п Рго Рго С1у Ъуз 45 А1а Ъеи С1и
Азр Ъуз Ъуз Азр 60 Туг Азп Рго Зег
Ъуз Азр ТНг 75 Зег Ъуз Азп С1п Уа1 80
Рго А1а 90 Азр ТНг А1а ТНг Туг 95 Туг
Тгр 105 Туг РНе Азр Уа1 Тгр 110 С1у С1п
А1а Зег ТНг Ъуз С1у 125 Рго Зег Уа1
Зег ТНг Зег С1у 140 С1у ТНг А1а А1а
РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Зег
- 333
145 150 155 160
Тгр Азп Бег С1у А1а Ъеи ТНг Бег С1у Уа1 Нтз ТНг РНе Рго А1а Уа1
165 170 175
Ъеи С1п Бег Бег С1у Ъеи Туг Бег Ъеи Бег Бег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго
180 185 190
Бег Бег Бег Ъеи С1у ТНг С1п ТНг Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Ъуз
195 200 205
Рго Бег Азп ТНг Ъуз Уа1 Азр Ъуз Агд Уа1 С1и Рго Ъуз Бег Суз Азр
210 215 220
Ъуз ТНг Нтз ТНг Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго С1и Ъеи Ъеи С1у С1у
225 230 235 240
Рго Бег Уа1 РНе Ъеи РНе Рго Рго Ъуз Рго Ъуз Азр ТНг Ъеи МеН 11е
245 250 255
Бег Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Бег Нтз С1и
260 265 270
Азр Рго С1и Уа1 Ъуз РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз
275 280 285
Азп А1а Ъуз ТНг Ъуз Рго Агд С1и С1и С1п Туг Азп Бег ТНг Туг Агд
290 295 300
Уа1 Уа1 Бег Уа1 Ъеи ТНг Уа1 Ъеи Нтз С1п Азр Тгр Ъеи Азп С1у Ъуз
305 310 315 320
С1и Туг Ъуз Суз Ъуз Уа1 Бег Азп Ъуз А1а Ъеи Рго А1а Рго 11е С1и
325 330 335
Ъуз ТНг 11е Бег Ъуз А1а Ъуз С1у С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг
340 345 350
ТНг Ъеи Рго Рго Бег Агд С1и С1и МеН ТНг Ъуз Азп С1п Уа1 Бег Ъеи
355 360 365
ТНг Суз Ъеи Уа1 Ъуз С1у РНе Туг Рго Бег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр
370 375 380
С1и Бег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Ъуз ТНг ТНг Рго Рго Уа1
385 390 395 400
Ъеи Азр Бег Азр С1у Бег РНе РНе Ъеи Туг Бег Ъуз Ъеи ТНг Уа1 Азр
405 410 415
Ъуз Бег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Бег Суз Бег Уа1 МеН Нтз
420 425 430
С1и А1а Ъеи Нтз Азп Нтз Туг ТНг С1п Ъуз Бег Ъеи Бег Ъеи Бег Рго
435 440 445
С1у Ъуз 450
- 334 023179 <210> 388 <211> 120 <212> БЕЛОК <213> Искусственная <220>
<223> А17Г5 УН домен последовательность <400> 388
С1п Уа1 ТАг Теи Агд
1 5
ТАг Теи ТАг Теи 20 ТАг
С1у МеЛ Зег 35 Уа1 С1у
Тгр Теи 50 А1а Азр 11е
Теи 65 Туз Азр Агд Теи
Уа1 Теи Туз Уа1 ТАг 85
Суз А1а Агд Азр 100 МеЛ
С1у ТАг ТАг 115 Уа1 ТАг
С1и Зег С1у Рго А1а 10
Суз ТАг РАе Зег 25 С1у
Тгр 11е Агд 40 С1п Рго
Тгр Тгр 55 Азр Азр Туз
ТАг 70 11е Зег Туз Азр
Азп МеЛ Азр Рго А1а 90
11е Уа1 РАе Зег Азп Зег Тгр 105 Туг
120
Теи Уа1 Туз Рго ТАг 15 С1п
РАе Зег Теи Зег 30 ТАг А1а
Рго С1у Туз 45 А1а Теи С1и
Туз Азр 60 Туг Азп Рго Зег
ТАг 75 Зег Туз Азп С1п Уа1 80
Азр ТАг А1а ТАг Туг 95 Туг
РАе Азр Уа1 Тгр 110 С1у С1п
<210> 389 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А17Г5 УН СЕ>К2 <400> 389
Азр 11е Тгр
Тгр Азр Азр Туз Туз Азр Туг Азп
Рго Зег Теи Туз Азр
- 335 023179 <210> 390 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А17£5 νΣ цепь <400> 390
Азр 11е С1п МеА ТАг С1п Зег Рго Зег ТАг ^еи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТАг 11е ТАг Суз Зег ^еи Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеА
20 25 30
Η^з Тгр Туг С1п С1п ^уз Рго С1у ^уз А1а Рго ^уз ^еи ^еи 11е Туг
35 40 45
Азр ТАг РАе Агд Η^з ТАг Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РАе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТАг С1и РАе ТАг ^еи ТАг 11е Зег Зег ^еи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РАе А1а ТАг Туг Туг Суз РАе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РАе ТАг
85 90 95
РАе С1у С1у С1у ТАг ^уз Уа1 С1и 11е ^уз Агд ТАг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Зег Уа1 РАе 11е РАе Рго Рго Зег Азр С1и С1п ^еи ^уз Зег С1у ТАг
115 120 125
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз ^еи ^еи Азп Азп РАе Туг Рго Агд С1и А1а ^уз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр ^уз Уа1 Азр Азп А1а ^еи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
145 150 155 160
Зег Уа1 ТАг С1и С1п Азр Зег ^уз Азр Зег ТАг Туг Зег ^еи Зег Зег
165 170 175
ТАг ^еи ТАг ^еи Зег ^уз А1а Азр Туг С1и ^уз Η^з ^уз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТАг Η^з С1п С1у ^еи Зег Зег Рго Уа1 ТАг ^уз Зег РАе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210
- 336 <210> 391 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А17£5 νΐ домен <400> 391
Азр 11е С1п МеЕ ТНг С1п Бег Рго Бег ТНг Беи Бег А1а Бег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Бег Беи Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеЕ
20 25 30
НЬз Тгр Туг С1п С1п Буз Рго С1у Ьуз А1а Рго Буз Ьеи Беи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг РНе Агд НЬз ТНг Бег С1у Уа1 Рго Бег Агд РНе Бег С1у Бег
50 55 60
С1у Бег С1у ТНг С1и РНе ТНг Беи ТНг 11е Бег Бег Ьеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Бег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105
<210> 392 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А17£5 Ж. СБК2 <400> 392
Азр ТНг РНе Агд НЬз ТНг Бег 1 5
- 337 023179 <210> 393 <211> 213 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А17А4 УЪ цепь <400> 393
Азр 11е С1п МеА ТАг С1п Зег Рго Зег ТАг Ъеи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТАг 11е ТАг Суз Зег Рго Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеА
20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Ъуз Рго С1у Ъуз А1а Рго Ъуз Ъеи Ъеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТАг Туг Туг Ъеи А1а Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РАе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТАг С1и РАе ТАг Ъеи ТАг 11е Зег Зег Ъеи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РАе А1а ТАг Туг Туг Суз РАе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РАе ТАг
85 90 95
РАе С1у С1у С1у ТАг Ъуз Уа1 С1и 11е Ъуз Агд ТАг Уа1 А1а А1а Рго
100 105 110
Зег Уа1 РАе 11е РАе Рго Рго Зег Азр С1и С1п Ъеи Ъуз Зег С1у ТАг
115 120 125
А1а Зег Уа1 Уа1 Суз Ъеи Ъеи Азп Азп РАе Туг Рго Агд С1и А1а Ъуз
130 135 140
Уа1 С1п Тгр Ъуз Уа1 Азр Азп А1а Ъеи С1п Зег С1у Азп Зег С1п С1и
145 150 155 160
Зег Уа1 ТАг С1и С1п Азр Зег Ъуз Азр Зег ТАг Туг Зег Ъеи Зег Зег
165 170 175
ТАг Ъеи ТАг Ъеи Зег Ъуз А1а Азр Туг С1и Ъуз Нтз Ъуз Уа1 Туг А1а
180 185 190
Суз С1и Уа1 ТАг Нтз С1п С1у Ъеи Зег Зег Рго Уа1 ТАг Ъуз Зег РАе
195 200 205
Азп Агд С1у С1и Суз
210
- 338 <210> 394 <211> 106 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А17Н4 УЪ домен <400> 394
Азр 11е С1п МеН ТНг С1п Зег Рго Зег ТНг Ъеи Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТНг 11е ТНг Суз Зег Рго Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеН
20 25 30
Нтз Тгр Туг С1п С1п Гуз Рго С1у Гуз А1а Рго Ъуз Геи Ъеи 11е Туг
35 40 45
Азр ТНг Туг Туг Геи А1а Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РНе Зег С1у Зег
50 55 60
С1у Зег С1у ТНг С1и РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Зег Зег Геи С1п Рго Азр
65 70 75 80
Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз РНе С1п С1у Зег С1у Туг Рго РНе ТНг
85 90 95
РНе С1у С1у С1у ТНг Ъуз Уа1 С1и 11е Гуз
100 105 <210> 395 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А17Н4 УГ СЪК1 <400> 395
Зег Рго Зег Зег Зег Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 396 <211> 7 <212> БЕЛОК
- 339 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> А17Н4 УЪ СЪК2 <400> 396
Азр ТНг Туг Туг Теи А1а Бег 1 5 <210> 397 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 397
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Туз С1у Азр Туг Азп Рго Бег Теи Ъуз Бег 1 5 10 15 <210> 398 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 398
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз С1у Азр Туг Азп Рго Бег Теи Туз Азр 1 5 10 15 <210> 399 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 340 023179 <220>
<223> УН СЪК2 <400> 399
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз С1у Нгз Туг Азп Рго Зег Ъеи Ъуз Зег 1 5 10 15 <210> 400 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 400
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз С1у Нгз Туг Азп Рго Зег Ъеи Ъуз Азр 1 5 10 15 <210> 401 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 401
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз С1у Зег Туг Азп Рго Зег Ъеи Ъуз Зег 1 5 10 15 <210> 402 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 341 023179 <220>
<223> УН СЪК2 <400> 402
Азр 11е Тгр Тгр Азр Азр Ъуз С1у Бег Туг Азп Рго Бег Ъеи Ъуз Азр 1 5 10 15 <210> 403 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 403
Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Ъуз С1у Азр Туг Азп Рго Бег Ъеи Ъуз Бег 1 5 10 15 <210> 404 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 404
Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Ъуз С1у Азр Туг Азп Рго Бег Ъеи Ъуз Азр 1 5 10 15 <210> 405 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2
- 342 023179 <400> 405
Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Ъуз С1у Нтз Туг Азп Рго Бег Теи Ъуз Бег 1 5 10 15 <210> 406 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 406
Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Ъуз С1у Нтз Туг Азп Рго Бег Теи Туз Азр 1 5 10 15 <210> 407 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 407
Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Ъуз С1у Бег Туг Азп Рго Бег Ъеи Туз Бег 1 5 10 15 <210> 408 <211> 16 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УН СЪК2 <400> 408
- 343 023179
Азр 11е Тгр Тгр Азр С1у Туз С1у Зег Туг Азп Рго Зег Теи Туз Азр 1 5 10 15 <210> 409 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К1 <400> 409
Туз Суз С1п Теи РНе Уа1 С1у Туг МеН Низ 1 5 10 <210> 410 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К1 <400> 410
Туз Суз С1п Зег РНе Уа1 С1у Туг МеН Низ 1 5 10 <210> 411 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К1 <400> 411
Туз Суз С1п Уа1 Зег Уа1 С1у Туг МеН Низ
5 10
- 344 023179
<210> 412
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 412
Ъуз Суз С1п Уа1 Агд Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10
<210> 413
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 413
Ъуз Суз С1п Уа1 РТе Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10
<210> 414
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 414
Ъуз Суз Зег Ъеи РТе Уа1 С1у Туг МеК Нтз
5 10
- 345 023179
<210> 415
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 415
Туз Суз Зег Зег РАе Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз 1 5 10
<210> 416
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 416
Туз Суз Зег Уа1 Зег Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз 1 5 10
<210> 417
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 417
Туз Суз Зег Уа1 Агд Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз
5 10
- 346 023179
<210> 418
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ντ СИК1
<400> 418
Туз Суз Бег Уа1 РНе Уа1 С1у Туг Ме/ Нтз 1 5 10
<210> 419
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ντ СИК1
<400> 419
Туз А1а С1п Теи РНе Уа1 С1у Туг Ме/ Низ 1 5 10
<210> 420
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ντ СИК1
<400> 420
Бег Суз С1п Теи РНе Уа1 С1у Туг Ме/ Низ 1 5 10
<210> 421
<211> 10
<212> БЕЛОК
- 347 023179
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УБ СБК1
<400> 421
Зег Суз С1п Зег РЬе Уа1 С1у Туг МеС Нтз 1 5 10
<210> 422
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УБ СБК1
<400> 422
Зег Суз С1п Уа1 Зег Уа1 С1у Туг МеС Нтз 1 5 10
<210> 423
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УБ СБК1
<400> 423
Зег Суз С1п Уа1 Агд Уа1 С1у Туг МеС Нтз 1 5 10
<210> 424
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
- 348 023179 <220>
<223> УВ СЕ>К1
<400> 424
Зег Суз С1п Уа1 РНе Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10
<210> 425
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УВ СЕ>К1
<400> 425
Зег Суз Зег Вей РНе Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10
<210> 426
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УВ СЕ>К1
<400> 426
Зег Суз Зег Зег РНе Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10
<210> 427
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
- 349 023179
<223> νΣ СБК1
<400> 427
Бег Суз Бег Уа1 Бег Уа1 С1у Туг МеЕ НЬз 1 5 10
<210> 428
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СБК1
<400> 428
Бег Суз Бег Уа1 Агд Уа1 С1у Туг МеЕ НЬз 1 5 10
<210> 429
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СБК1
<400> 429
Бег Суз Бег Уа1 РНе Уа1 С1у Туг МеЕ НЬз 1 5 10
<210> 430
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СБК1
- 350 023179 <400> 430
Зег А1а С1п Ъеи РНе Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10
<210> 431
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 431
Ъеи Суз С1п Ъеи РНе Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10
<210> 432
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 432
Ъеи Суз С1п Зег РНе Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10
<210> 433
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 433
- 351 023179
Ъеи Суз С1п Уа1 Зег Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 434
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 434
Геи Суз С1п Уа1 Агд Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 435
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 435
Геи Суз С1п Уа1 РНе Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 436
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УГ СЪК1
<400> 436
- 352 023179
Ъеи Суз Зег Ъеи РТе Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10
<210> 437
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 437
Ъеи Суз Зег Зег РТе Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10
<210> 438
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 438
Ъеи Суз Зег Уа1 Зег Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10
<210> 439
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 439
Ъеи Суз Зег Уа1 Агд Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10
- 353 023179
<210> 440
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 440
Ъеи Суз Бег Уа1 РНе Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 441
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 441
Ъеи А1а С1п Ъеи Бег Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 442
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 442
Ъеи А1а С1п Ъеи Агд Уа1 С1у Туг МеН Нтз
5 10
- 354 023179
<210> 443
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 443
Ъеи А1а С1п Теи РНе Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 444
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЪК1
<400> 444
Теи А1а С1п Бег Бег Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 445
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЪК1
<400> 445
Ъуз А1а С1п Бег РНе Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 446 <211> 10
- 355 023179
<212> <213> БЕЛОК Искусственная
<220> <223> УТ СЕ>К1 <400> 446 Туз А1а С1п Уа1 Зег
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз 10
<210> 447
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 447
Туз А1а С1п Уа1 Агд
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз 10
<210> 448
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 448
Туз А1а С1п Уа1 РАе
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз 10
<210> 449
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 356 023179 <220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 449
Туз А1а Зег Теи РНе Уа1 С1у Туг МеН Низ 1 5 10
<210> 450
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 450
Туз А1а Зег Зег РНе Уа1 С1у Туг МеН Низ 1 5 10
<210> 451
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 451
Туз А1а Зег Уа1 Зег Уа1 С1у Туг МеН Низ 1 5 10
<210> 452
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
- 357 023179 <220>
<223> ντ СЕ>К1
<400> 452
Туз А1а Бег Уа1 Агд Уа1 С1у Туг Ме/ Нтз
1 5 10
<210> 453
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΤ СЕ>К1
<400> 453
Туз А1а Бег Уа1 РНе Уа1 С1у Туг Ме/ Нтз 1 5 10
<210> 454
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΤ СЕ>К1
<400> 454
Туз Теи С1п Теи РНе Уа1 С1у Туг Ме/ Низ 1 5 10
<210> 455
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΤ СЕ>К1
- 358 023179 <400> 455
Вуз Вей С1п Зег РНе Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10 <210> 456 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К1 <400> 456
Вуз Вей С1п Уа1 Зег Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10 <210> 457 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К1 <400> 457
Вуз Вей С1п Уа1 Агд Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10 <210> 458 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К1
- 359 023179 <400> 458
Ьуз Ьеи С1п Уа1 РНе Уа1 С1у Туг МеЕ НЬз 1 5 10
<210> 459
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СБК1
<400> 459
Ьуз Ьеи Бег Ьеи РНе Уа1 С1у Туг МеЕ НЬз 1 5 10
<210> 460
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СБК1
<400> 460
Ьуз Ьеи Бег Бег РНе Уа1 С1у Туг МеЕ НЬз 1 5 10
<210> 461
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СБК1
<400> 461
Ьуз Ьеи Бег Уа1 Бег Уа1 С1у Туг МеЕ НЬз
- 360 023179 <210> 462 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК1 <400> 462
Буз Беи Зег Уа1 Агд Уа1 С1у Туг МеС Нтз 1 5 10 <210> 463 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК1 <400> 463
Буз Беи Зег Уа1 РЬе Уа1 С1у Туг МеС Нтз 1 5 10 <210> 464 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК1 <400> 464
Буз Рго С1п Беи РЬе Уа1 С1у Туг МеС Нтз 1 5 10
- 361 023179
<210> 465
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 465
Ъуз Рго С1п Зег РНе Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10
<210> 466
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 466
Ъуз Рго С1п Уа1 Зег Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10
<210> 467
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 467
Ъуз Рго С1п Уа1 Агд Уа1 С1у Туг МеН Нгз 1 5 10
- 362 023179
<210> 468
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 468
Ъуз Рго С1п Уа1 РНе Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 469
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УГ СЪК1
<400> 469
Гуз Рго Зег Геи РНе Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 470
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УГ СЪК1
<400> 470
Ъуз Рго Зег Зег РНе Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 471 <211> 10
- 363 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 471
Ъуз Рго Бег Уа1 Бег Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 472 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 472
Ъуз Рго Бег Уа1 Агд Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 473 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 473
Ъуз Рго Бег Уа1 РНе Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 474 <211> 10 <212> БЕЛОК
- 364 023179
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К1
<400> 474
Бег А1а С1п Бег РНе
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеК Нтз 10
<210> 475
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К1
<400> 475
Бег А1а С1п Уа1 Бег
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеК Нтз 10
<210> 476
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К1
<400> 476
Бег А1а С1п Уа1 Агд
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеК Нтз 10
<210> 477
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 365 023179 <220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 477
Зег А1а С1п Уа1 РАе Уа1 С1у Туг МеА Нтз 1 5 10
<210> 478
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 478
Зег А1а Зег Ъеи РАе Уа1 С1у Туг МеА Нтз 1 5 10
<210> 479
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 479
Зег А1а Зег Зег РАе Уа1 С1у Туг МеА Нтз 1 5 10
<210> 480
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
- 366 023179 <400> 480
Бег А1а Бег Уа1 Бег
Уа1 С1у Туг МеН Нтз <210> 481 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 481
Бег А1а Бег Уа1 Агд
Уа1 С1у Туг МеН Нтз <210> 482 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 482
Бег А1а Бег Уа1 РНе Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 483 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1
- 367 023179 <400> 483
Зег Ъеи С1п Ъеи РТе Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10
<210> 484
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 484
Зег Ъеи С1п Зег РТе Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10
<210> 485
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 485
Зег Ъеи С1п Уа1 Зег Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10
<210> 486
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 486
Зег Ъеи С1п Уа1 Агд Уа1 С1у Туг МеК Нтз
- 368 023179
5 10
<210> 487
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЪК1
<400> 487
Бег Ъеи С1п Уа1 РНе Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 488
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЪК1
<400> 488
Бег Теи Бег Ъеи РНе Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
<210> 489
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 489
Бег Ъеи Бег Бег РНе Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
- 369 023179
<210> 490
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 490
Зег Теи Зег Уа1 Зег
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Низ 10
<210> 491
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 491
Зег Теи Зег Уа1 Агд
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Низ 10
<210> 492
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 492
Зег Теи Зег Уа1 РНе
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Низ 10
- 370 023179
<210> 493
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 493
Зег Рго С1п Теи РАе Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз 1 5 10
<210> 494
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 494
Зег Рго С1п Зег РАе Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз 1 5 10
<210> 495
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 495
Зег Рго С1п Уа1 Зег Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз 1 5 10 <210> 496 <211> 10
- 371 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К1 <400> 496
Бег Рго С1п Уа1 Агд Уа1 С1у Туг Ме/ Нтз 1 5 10 <210> 497 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К1 <400> 497
Бег Рго С1п Уа1 РНе
Уа1 С1у Туг Ме/ Нтз <210> 498 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К1 <400> 498
Бег Рго Бег Теи РНе Уа1 С1у Туг Ме/ Низ 1 5 10 <210> 499 <211> 10
- 372 023179
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К1
<400> 499
Зег Рго Зег Зег РНе
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нгз 10
<210> 500
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К1
<400> 500
Зег Рго Зег Уа1 Зег
1 5
<210> 501
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К1
<400> 501
Зег Рго Зег Уа1 Агд
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нгз 10 последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нгз 10
<210> 502
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 373 023179 <220>
<223> νΣ СЕ>К1 <400> 502
Зег Рго Зег Уа1 РАе Уа1 С1у Туг МеА Η^з 1 5 10 <210> 503 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К1 <400> 503 ^еи А1а С1п Зег Агд Уа1 С1у Туг МеА Η^з 1 5 10 <210> 504 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К1 <400> 504 ^еи А1а С1п Зег РАе Уа1 С1у Туг МеА Η^з 1 5 10 <210> 505 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
- 374 023179
<223> УЪ СЪК1
<400> 505 Ъеи А1а С1п Уа1 Зег
1 5
Уа1 С1у Туг МеН Нгз 10
<210> 506
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 506
Ъеи А1а С1п Уа1 Агд
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нгз 10
<210> 507
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 507
Ъеи А1а С1п Уа1 РНе
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нгз 10
<210> 508
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
последовательность
- 375 023179 <400> 508
Ьеи А1а Бег Ьеи Бег Уа1 С1у Туг МеЕ НЬз 1 5 10 <210> 509 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК1 <400> 509
Ьеи А1а Бег Ьеи Агд Уа1 С1у Туг МеЕ НЬз 1 5 10 <210> 510 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК1 <400> 510
Ьеи А1а Бег Ьеи РНе Уа1 С1у Туг МеЕ НЬз 1 5 10 <210> 511 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК1 <400> 511
Ьеи А1а Бег Бег Бег Уа1 С1у Туг МеЕ НЬз
- 376 023179 <210> 512 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК1 <400> 512
Беи А1а Зег Зег Агд Уа1 С1у Туг МеС Нтз 1 5 10 <210> 513 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК1 <400> 513
Беи А1а Зег Зег РЬе Уа1 С1у Туг МеС Нтз 1 5 10 <210> 514 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК1 <400> 514
Беи А1а Зег Уа1 Зег Уа1 С1у Туг МеС Нтз
- 377 023179 <210> 515 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 515
Геи А1а Зег Уа1 Агд Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 516 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 516
Ъеи А1а Зег Уа1 РНе Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 517 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК1 <400> 517
Геи Ъеи С1п Ъеи Зег Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10
- 378 023179 <210> 518 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 518
Ъеи Ъеи С1п Ъеи Агд Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 519 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 519
Ъеи Ъеи С1п Ъеи РНе Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 520 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК1 <400> 520
Ъеи Ъеи С1п Бег Бег Уа1 С1у Туг МеН Нтз 1 5 10 <210> 521
- 379 023179
<211> <212> <213> 10 БЕЛОК Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 521
Ъеи Ъеи С1п Бег Агд
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10
<210> 522
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 522
Ъеи Ъеи С1п Бег РНе
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10
<210> 523
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
последовательность <400> 523
Ъеи Ъеи С1п Уа1 Бег
5 <210> 524 <211> 10 <212> БЕЛОК
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10
- 380 023179
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЪК1
<400> 524
Ъеи Теи С1п Уа1 Агд
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10
<210> 525
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЪК1
<400> 525
Ъеи Ъеи С1п Уа1 РНе
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10
<210> 526
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЪК1
<400> 526
Теи Ъеи Бег Ъеи Бег
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Нтз 10
<210> 527
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 381 023179 <220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 527
Ъеи Ъеи Зег Ъеи Агд
1 5
Уа1 С1у Туг МеА Нтз 10
<210> 528
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 528
Ъеи Ъеи Зег Ъеи РАе
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеА Нтз 10
<210> 529
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК1
<400> 529
Ъеи Ъеи Зег Зег Зег
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеА Нтз 10
<210> 530
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 382 023179 <220>
<223> νΣ СЕ>К1 <400> 530 ^еи ^еи Бег Бег Агд Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10 <210> 531 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К1 <400> 531 ^еи ^еи Бег Бег РНе Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10 <210> 532 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К1 <400> 532 ^еи ^еи Бег Уа1 Бег Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10 <210> 533 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К1
- 383 023179 <400> 533
Ъеи Ъеи Зег Уа1 Агд Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10 <210> 534 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СБК1 <400> 534
Ъеи Ъеи Зег Уа1 РТе Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10 <210> 535 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СБК1 <400> 535
Ъеи Рго С1п Ъеи РТе Уа1 С1у Туг МеК Нтз 1 5 10 <210> 536 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СБК1 <400> 536
- 384 023179
Теи Рго С1п Зег РНе
1 5
<210> 537
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 537
Теи Рго С1п Уа1 Зег
1 5
Уа1 С1у Туг МеН Низ 10 последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Низ 10
<210> 538
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 538
Теи Рго С1п Уа1 Агд
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Низ 10
<210> 539
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К1
<400> 539
Теи Рго С1п Уа1 РНе
1 5
последовательность
Уа1 С1у Туг МеН Низ 10
- 385 023179
<210> 540
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СИК1
<400> 540
Теи Рго Зег Теи РАе Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз 1 5 10
<210> 541
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СИК1
<400> 541
Теи Рго Зег Зег РАе Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз 1 5 10
<210> 542
<211> 10
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СИК1
<400> 542
Теи Рго Зег Уа1 Зег Уа1 С1у Туг МеЛ Нтз 1 5 10
- 386 023179 <210> 543 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К1 <400> 543
Теи Рго Бег Уа1 Агд Уа1 С1у Туг Ме/ Низ 1 5 10 <210> 544 <211> 10 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К1 <400> 544
Теи Рго Бег Уа1 РНе Уа1 С1у Туг Ме/ Низ 1 5 10 <210> 545 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К2 <400> 545
Азр ТНг Бег Туз Теи Туз Бег 1 5
- 387 023179
<210> 546
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СБК2
<400> 546
Азр ТНг Бег Ьуз Ьеи Агд Бег
1 5
<210> 547
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СБК2
<400> 547
Азр ТНг Бег Ьуз Ьеи НЬз Бег
1 5
<210> 548
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СБК2
<400> 548
Азр ТНг РНе Ьуз Ьеи Ьуз Бег
1 5
<210> 549
<211> 7
<212> БЕЛОК
- 388 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 549
Азр ТЬг РЬе Буз Беи Агд Зег 1 5 <210> 550 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 550
Азр ТЬг РЬе Буз Беи Нтз Зег 1 5 <210> 551 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 551
Азр ТЬг Туг Буз Беи А1а Зег 1 5 <210> 552 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 389 023179 <220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 552
Азр ТАг Туг ^уз ^еи
1 5
<210> 553
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 553
Азр ТАг Туг ^уз ^еи
1 5
Ц'з Зег последовательность
<210> 554
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 554
Азр ТАг Туг ^уз ^еи
1 5
Агд Зег последовательность
<210> 555
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
последовательность
- 390 023179 <223> УВ СЕ>К2 <400> 555
Азр ТНг Туг Вуз Вей Нгз Зег 1 5 <210> 556 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 556
Азр ТНг Агд Вуз Вей Вуз Зег 1 5 <210> 557 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 557
Азр ТНг Агд Вуз Вей Агд Зег 1 5 <210> 558 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2
- 391 023179 <400> 558
Азр ТНг Агд Ъуз Ъеи Нгз Зег 1 5 <210> 559 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 559
Азр ТНг МеН Ъуз Ъеи Ъуз Зег 1 5 <210> 560 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 560
Азр ТНг МеН Ъуз Ъеи Агд Зег 1 5 <210> 561 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 561
- 392 023179
Азр ТНг МеН Ъуз Геи Нтз Зег 1 5 <210> 562 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 562
Азр ТНг Гуз Ъуз Ъеи А1а Зег 1 5 <210> 563 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 563
Азр ТНг Гуз Ъуз Ъеи Зег Зег 1 5 <210> 564 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 564
- 393 023179
Азр ТНг Ъуз Ъуз Ъеи Ъуз Бег 1 5 <210> 565 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 565
Азр ТНг Ъуз Ъуз Ъеи Агд Бег 1 5 <210> 566 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 566
Азр ТНг Ъуз Ъуз Ъеи Нтз Бег 1 5 <210> 567 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 567
Азр ТНг Ъеи Ъуз Ъеи Бег Бег 1 5
- 394 023179 <210> 568 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 568
Азр ТНг Ъеи Ъуз Ъеи Ъуз Бег 1 5 <210> 569 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 569
Азр ТНг Ъеи Ъуз Ъеи Агд Бег 1 5 <210> 570 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 570
Азр ТНг Ъеи Ъуз Ъеи Нтз Бег 1 5
- 395 023179 <210> 571 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 571
Азр ТАг Зег Ъуз Ъеи ТАг Зег 1 5 <210> 572 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 572
Азр ТАг Зег Ъуз Нтз А1а Зег 1 5 <210> 573 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 573
Азр ТАг Зег Ъуз Нтз Зег Зег 1 5 <210> 574 <211> 7
- 396 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 574
Азр ТНг Бег Туз Нтз Туз Бег 1 5 <210> 575 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 575
Азр ТНг Бег Ъуз Нтз Агд Бег 1 5 <210> 576 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЪК2 <400> 576
Азр ТНг Бег Туз Нтз Нтз Бег 1 5 <210> 577 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 397 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 577
Азр ТТг Зег Ъуз Нтз
1 5
Рго Зег
<210> 578
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 578
Азр ТТг Зег Ъуз Нтз
1 5
ТТг Зег последовательность
<210> 579
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 579
Азр ТТг Зег Ъуз Нтз
1 5
Азр Зег последовательность
<210> 580
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 398 023179 <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 580
Азр ТНг Бег ^уз С1п ^уз Бег 1 5 <210> 581 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ ΟΌΚ2 <400> 581
Азр ТНг Бег ^уз С1п Агд Бег 1 5 <210> 582 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ ΟΌΚ2 <400> 582
Азр ТНг Бег ^уз С1п Нтз Бег 1 5 <210> 583 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ ΟΌΚ2
- 399 023179 <400> 583
Азр ТНг Бег Ьуз С1п Рго Бег 1 5 <210> 584 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 584
Азр ТНг Бег ^уз С1п ТНг Бег 1 5 <210> 585 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 585
Азр ТНг Бег ^уз С1п Азр Бег 1 5 <210> 586 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2
- 400 023179 <400> 586
Азр ТЬг Зег С1у Беи 1 5
<210> 587
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УБ СБК2
<400> 587
Азр ТЬг Зег С1у Беи
1 5
Буз Зег последовательность
<210> 588
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УБ СБК2
<400> 588
Азр ТЬг Зег С1у Беи
1 5
Агд Зег последовательность
<210> 589
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УБ СБК2
<400> 589
Азр ТЬг Зег С1у Беи последовательность
Нтз Зег
- 401 023179
5 <210> 590 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 590
Азр ТНг Зег С1у Ъеи ТНг Зег 1 5 <210> 591 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 591
Азр ТНг Зег С1у Ъеи Азр Зег 1 5 <210> 592 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 592
Азр ТНг Зег С1у Нгз А1а Зег 1 5
- 402 023179 <210> 593 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К2 <400> 593
Азр ТНг Бег С1у Нтз Бег Бег 1 5 <210> 594 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К2 <400> 594
Азр ТНг Бег С1у Нтз Туз Бег 1 5 <210> 595 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К2 <400> 595
Азр ТНг Бег С1у Нтз Агд Бег 1 5
- 403 023179 <210> 596 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 596
Азр ТНг Бег С1у Нтз Нтз Бег 1 5 <210> 597 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 597
Азр ТНг Бег С1у Нтз Рго Бег 1 5 <210> 598 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 598
Азр ТНг Бег С1у Нтз ТНг Бег 1 5 <210> 599 <211> 7
- 404 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 599
Азр ТНг Зег С1у Нтз Азр Зег 1 5 <210> 600 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 600
Азр ТНг Зег С1у С1п А1а Зег 1 5 <210> 601 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 601
Азр ТНг Зег С1у С1п Зег Зег 1 5 <210> 602 <211> 7 <212> БЕЛОК
- 405 023179 <213> Искусственная <220>
<223> УТ СЕ>К2 <400> 602
Азр ТАг РАе Туз Теи 1 5 последовательность
Рго Зег
<210> 603
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 603
Азр ТАг РАе Туз Теи
1 5
ТАг Зег последовательность
<210> 604
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 604
Азр ТАг РАе Туз Теи
1 5
Азр Зег последовательность
<210> 605
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 406 023179 <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 605
Азр ТНг РНе Вуз Нтз А1а Зег 1 5 <210> 606 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 606
Азр ТНг РНе Вуз Нтз Зег Зег 1 5 <210> 607 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 607
Азр ТНг РНе Вуз Нтз Вуз Зег 1 5 <210> 608 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2
- 407 023179 <400> 608
Азр ТАг РАе Ьуз Нтз Агд Зег 1 5 <210> 609 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 609
Азр ТАг РАе ^уз Нтз Нтз Зег 1 5 <210> 610 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 610
Азр ТАг РАе ^уз Нтз Рго Зег 1 5 <210> 611 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2
- 408 023179 <400> 611
Азр ТНг РНе Туз Низ ТНг Зег 1 5 <210> 612 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2 <400> 612
Азр ТНг РНе Туз Низ Азр Зег 1 5 <210> 613 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2 <400> 613
Азр ТНг РНе Туз С1п А1а Зег 1 5 <210> 614 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2 <400> 614
Азр ТНг РНе Туз С1п Зег Зег
- 409 023179
5 <210> 615 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 615
Азр ТНг РНе Ъуз С1п Ъуз Бег 1 5 <210> 616 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 616
Азр ТНг РНе Ъуз С1п Агд Бег 1 5 <210> 617 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 617
Азр ТНг РНе Ъуз С1п Нтз Бег 1 5
- 410 023179
<210> 618
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 618
Азр ТАг РАе Ъуз С1п
1 5
Рго Зег последовательность
<210> 619
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 619
Азр ТАг РАе Ъуз С1п
1 5
ТАг Зег последовательность
<210> 620
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 620
Азр ТАг РАе Ъуз С1п
1 5
Азр Зег последовательность
- 411 023179 <210> 621 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 621
Азр ТНг РНе С1у Теи А1а Бег 1 5 <210> 622 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 622
Азр ТНг РНе С1у Ъеи Бег Бег 1 5 <210> 623 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЪК2 <400> 623
Азр ТНг РНе С1у Теи Ъуз Бег 1 5 <210> 624 <211> 7
- 412 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 624
Азр ТТг РТе С1у Ъеи Агд Зег 1 5 <210> 625 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 625
Азр ТТг РТе С1у Ъеи Нтз Зег 1 5 <210> 626 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 626
Азр ТТг РТе С1у Ъеи Рго Зег 1 5 <210> 627 <211> 7
- 413 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 627
Азр ТНг РНе С1у Ьеи ТНг Бег 1 5 <210> 628 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 628
Азр ТНг РНе С1у Ьеи Азр Бег 1 5 <210> 629 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 629
Азр ТНг РНе С1у НЬз А1а Бег <210> 630 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 414 023179 <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 630
Азр ТНг РНе С1у Нтз Бег Бег 1 5 <210> 631 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 631
Азр ТНг РНе С1у Нтз ^уз Бег 1 5 <210> 632 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 632
Азр ТНг РНе С1у Нтз Агд Бег 1 5 <210> 633 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
- 415 023179
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 633
Азр ТАг РАе С1у Нтз
1 5
<210> 634
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 634
Азр ТАг РАе С1у Нтз
1 5
<210> 635
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 635
Азр ТАг РАе С1у Нтз
1 5
<210> 636
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
Нтз Зег
Рго Зег
ТАг Зег последовательность последовательность последовательность
- 416 023179 <400> 636
Азр ТНг РНе С1у Нгз Азр Зег 1 5 <210> 637 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 637
Азр ТНг РНе С1у С1п А1а Зег 1 5 <210> 638 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 638
Азр ТНг РНе С1у С1п Зег Зег 1 5 <210> 639 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 639
Азр ТНг Туг Ъуз Ъеи Рго Зег
- 417 023179
5 <210> 640 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2 <400> 640
Азр ТАг Туг Туз Теи ТАг Зег 1 5 <210> 641 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2 <400> 641
Азр ТАг Туг Туз Теи Азр Зег 1 5 <210> 642 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2 <400> 642
Азр ТАг Туг Туз Нтз А1а Зег
- 418 023179
5 <210> 643 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К2 <400> 643
Азр ТНг Туг Туз Нтз Бег Бег 1 5 <210> 644 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К2 <400> 644
Азр ТНг Туг Туз Нтз Туз Бег 1 5 <210> 645 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К2 <400> 645
Азр ТНг Туг Туз Нтз Агд Бег 1 5
- 419 023179 <210> 646 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 646
Азр ТНг Туг Вуз Нтз Нтз Зег 1 5 <210> 647 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 647
Азр ТНг Туг Вуз Нтз Рго Зег 1 5 <210> 648 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 648
Азр ТНг Туг Вуз Нтз ТНг Зег 1 5 <210> 649
- 420 023179
<211> <212> <213> 7 БЕЛОК Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 649
Азр ТНг Туг Ъуз Нтз
1 5
Азр Бег последовательность
<210> 650
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 650
Азр ТНг Туг Ъуз С1п
1 5
А1а Бег последовательность
<210> 651
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
последовательность <400> 651
Азр ТНг Туг Ъуз С1п 1 5 <210> 652 <211> 7 <212> БЕЛОК
- 421 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 652
Азр ТНг Туг Гуз С1п Ъуз Зег 1 5 <210> 653 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 653
Азр ТНг Туг Гуз С1п Агд Зег 1 5 <210> 654 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 654
Азр ТНг Туг Ъуз С1п Нтз Зег 1 5 <210> 655 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 422 023179 <220>
<223> УБ СБК2
<400> 655 Азр ТЬг Туг Буз С1п
1 5
Рго Зег
<210> 656
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УБ СБК2
<400> 656
Азр ТЬг Туг Буз С1п
1 5
ТЬг Зег последовательность
<210> 657
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УБ СБК2
<400> 657
Азр ТЬг Туг Буз С1п
1 5
Азр Зег последовательность
<210> 658
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 423 023179 <220>
<223> УТ СЕ>К2 <400> 658
Азр ТНг Туг С1у Теи А1а Зег 1 5 <210> 659 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2 <400> 659
Азр ТНг Туг С1у Теи Зег Зег 1 5 <210> 660 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2 <400> 660
Азр ТНг Туг С1у Теи Туз Зег 1 5 <210> 661 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2
- 424 023179 <400> 661
Азр ТНг Туг С1у Ъеи Агд Бег 1 5 <210> 662 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 662
Азр ТНг Туг С1у Ъеи Нтз Бег 1 5 <210> 663 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 663
Азр ТНг Туг С1у Ъеи Рго Бег 1 5 <210> 664 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 664
- 425 023179
Азр ТНг Туг С1у Ъеи ТНг Бег 1 5 <210> 665 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЪК2 <400> 665
Азр ТНг Туг С1у Теи Азр Бег 1 5 <210> 666 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 666
Азр ТНг Туг С1у Нтз А1а Бег 1 5 <210> 667 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 667
Азр ТНг Туг С1у Нтз Бег Бег
5
- 426 023179 <210> 668 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 668
Азр ТАг Туг С1у Нтз Ъуз Зег 1 5 <210> 669 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 669
Азр ТАг Туг С1у Нтз Агд Зег 1 5 <210> 670 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 670
Азр ТАг Туг С1у Нтз Нтз Зег
5
- 427 023179 <210> 671 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 671
Азр ТТг Туг С1у Нтз Рго Зег 1 5 <210> 672 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 672
Азр ТТг Туг С1у Нтз ТТг Зег 1 5 <210> 673 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 673
Азр ТТг Туг С1у Нтз Азр Зег
5
- 428 023179
<210> 674
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СБК2
<400> 674
Азр ТНг Туг С1у С1п А1а Бег
1 5
<210> 675
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СБК2
<400> 675
Азр ТНг Туг С1у С1п Бег Бег
1 5
<210> 676
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СБК2
<400> 676
Азр ТНг Агд Ьуз Ьеи Рго Бег
1 5
<210> 677
<211> 7
<212> БЕЛОК
- 429 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К2 <400> 677
Азр ТНг Агд Туз Теи ТНг Бег 1 5 <210> 678 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К2 <400> 678
Азр ТНг Агд Туз Теи Азр Бег 1 5 <210> 679 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К2 <400> 679
Азр ТНг Агд Туз Низ А1а Бег 1 5 <210> 680 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 430 023179 <220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 680
Азр ТНг Агд Вуз Нтз
1 5
<210> 681
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 681
Азр ТНг Агд Вуз Нтз
1 5
Вуз Зег последовательность
<210> 682
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 682
Азр ТНг Агд Вуз Нтз
1 5
Агд Зег последовательность
<210> 683
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
последовательность
- 431 023179 <223> УТ СЕ>К2 <400> 683
Азр ТАг Агд Туз Нтз Нтз Зег 1 5 <210> 684 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2 <400> 684
Азр ТАг Агд Туз Нтз Рго Зег 1 5 <210> 685 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2 <400> 685
Азр ТАг Агд Туз Нтз ТАг Зег 1 5 <210> 686 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЕ>К2
- 432 023179 <400> 686
Азр ТНг Агд Ьуз Нтз Азр Бег 1 5 <210> 687 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ ΟΌΚ2 <400> 687
Азр ТНг Агд ^уз С1п ^уз Бег 1 5 <210> 688 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ ΟΌΚ2 <400> 688
Азр ТНг Агд ^уз С1п Агд Бег 1 5 <210> 689 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ ΟΌΚ2 <400> 689
- 433 023179
Азр ТАг Агд Ьуз С1п Нтз Зег 1 5 <210> 690 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 690
Азр ТАг Агд ^уз С1п Рго Зег 1 5 <210> 691 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 691
Азр ТАг Агд ^уз С1п ТАг Зег 1 5 <210> 692 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 692
- 434 023179
Азр ТНг Агд Ъуз С1п Азр Зег 1 5 <210> 693 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 693
Азр ТНг Агд С1у Ъеи Зег Зег 1 5 <210> 694 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 694
Азр ТНг Агд С1у Ъеи Ъуз Зег 1 5 <210> 695 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 695
Азр ТНг Агд С1у Ъеи Агд Зег 1 5
- 435 023179 <210> 696 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 696
Азр ТНг Агд С1у Геи Нтз Зег 1 5 <210> 697 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 697
Азр ТНг Агд С1у Ъеи ТНг Зег 1 5 <210> 698 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 698
Азр ТНг Агд С1у Геи Азр Зег 1 5
- 436 023179 <210> 699 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 699
Азр ТНг Агд С1у Нтз А1а Бег 1 5 <210> 700 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 700
Азр ТНг Агд С1у Нтз Бег Бег 1 5 <210> 701 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 701
Азр ТНг Агд С1у Нтз Ъуз Бег 1 5 <210> 702 <211> 7
- 437 023179
<212> <213> БЕЛОК Искусственная
<220> <223> УТ СЕ>К2 <400> 702 Азр ТНг Агд С1у Низ
1 5
Агд Зег последовательность
<210> 703
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 703
Азр ТНг Агд С1у Низ
1 5
Низ Зег последовательность
<210> 704
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 704
Азр ТНг Агд С1у Низ
1 5
Рго Зег последовательность
<210> 705
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 438 023179 <220>
<223> УБ СБК2
<400> 705
Азр ТЬг Агд С1у Нтз
1 5
<210> 706
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УБ СБК2
<400> 706
Азр ТЬг Агд С1у Нтз
1 5
<210> 707
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УБ СБК2
<400> 707
Азр ТЬг Агд С1у С1п
1 5
ТЬг Зег
Азр Зег
А1а Зег последовательность последовательность
<210> 708
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 439 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 708
Азр ТНг Агд С1у С1п Бег Бег 1 5 <210> 709 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 709
Азр ТНг МеН Ъуз Ъеи Рго Бег 1 5 <210> 710 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 710
Азр ТНг МеН Ъуз Ъеи ТНг Бег 1 5 <210> 711 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2
- 440 023179 <400> 711
Азр ТАг МеА Ъуз Ъеи Азр Зег 1 5 <210> 712 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 712
Азр ТАг МеА Ъуз Нтз А1а Зег 1 5 <210> 713 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 713
Азр ТАг МеА Ъуз Нтз Зег Зег 1 5 <210> 714 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2
- 441 023179 <400> 714
Азр ТНг Ме/ Туз Нтз 1 5
Туз Бег
<210> 715
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> ντ СЕ>К2
<400> 715
Азр ТНг Ме/ Туз Нтз
1 5
Агд Бег последовательность
<210> 716
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> ντ СЕ>К2
<400> 716
Азр ТНг Ме/ Туз Нтз
1 5
Нтз Бег последовательность
<210> 717
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> ντ СЕ>К2
<400> 717
Азр ТНг Ме/ Туз Нтз последовательность
Рго Бег
- 442 023179
5 <210> 718 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 718
Азр ТНг МеН Туз Нтз ТНг Бег 1 5 <210> 719 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЪК2 <400> 719
Азр ТНг МеН Туз Нтз Азр Бег 1 5 <210> 720 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 720
Азр ТНг МеН Ъуз С1п Туз Бег 1 5
- 443 023179 <210> 721 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 721
Азр ТТг МеК Ъуз С1п Агд Зег 1 5 <210> 722 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 722
Азр ТТг МеК Ъуз С1п Нтз Зег 1 5 <210> 723 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 723
Азр ТТг МеК Ъуз С1п Рго Зег 1 5
- 444 023179 <210> 724 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 724
Азр ТАг МеЛ Туз С1п ТАг Зег 1 5 <210> 725 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 725
Азр ТАг МеЛ Туз С1п Азр Зег 1 5 <210> 726 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 726
Азр ТАг МеЛ С1у Теи А1а Зег 1 5 <210> 727 <211> 7
- 445 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 727
Азр ТНг МеН С1у Вей Зег Зег 1 5 <210> 728 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 728
Азр ТНг МеН С1у Вей Вуз Зег 1 5 <210> 729 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 729
Азр ТНг МеН С1у Вей Агд Зег 1 5 <210> 730 <211> 7 <212> БЕЛОК
- 446 023179
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СБК2
<400> 730
Азр ТНг МеЕ С1у Ьеи
1 5
НЬз Бег последовательность
<210> 731
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СБК2
<400> 731
Азр ТНг МеЕ С1у ^еи
1 5
Рго Бег последовательность
<210> 732
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СБК2
<400> 732
Азр ТНг МеЕ С1у ^еи
1 5
ТНг Бег последовательность
<210> 733
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 447 023179 <220>
<223> νΣ ΟΌΚ2 <400> 733
Азр ТНг МеК С1у ^еи Азр Бег 1 5 <210> 734 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ ΟΌΚ2 <400> 734
Азр ТНг МеК С1у Нтз А1а Бег 1 5 <210> 735 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ ΟΌΚ2 <400> 735
Азр ТНг МеК С1у Нтз Бег Бег 1 5 <210> 736 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ ΟΌΚ2
- 448 023179 <400> 736
Азр ТНг МеН С1у Нгз Ъуз Зег 1 5 <210> 737 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 737
Азр ТНг МеН С1у Нгз Агд Зег 1 5 <210> 738 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 738
Азр ТНг МеН С1у Нгз Нгз Зег 1 5 <210> 739 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2
- 449 023179 <400> 739
Азр ТНг МеН С1у Нтз Рго Зег 1 5 <210> 740 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 740
Азр ТНг МеН С1у Нтз ТНг Зег 1 5 <210> 741 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 741
Азр ТНг МеН С1у Нтз Азр Зег 1 5 <210> 742 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 742
Азр ТНг МеН С1у С1п А1а Зег
- 450 023179
5 <210> 743 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 743
Азр ТАг МеА С1у С1п Зег Зег 1 5 <210> 744 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 744
Азр ТАг ^уз ^уз ^еи Рго Зег 1 5 <210> 745 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 745
Азр ТАг ^уз ^уз ^еи ТАг Зег 1 5
- 451 023179
<210> 746
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 746
Азр ТНг Ъуз Ъуз Ъеи
1 5
Азр Бег последовательность
<210> 747
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 747
Азр ТНг Ъуз Ъуз Нтз
1 5
А1а Бег последовательность
<210> 748
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 748
Азр ТНг Ъуз Ъуз Нтз
1 5
последовательность
- 452 023179 <210> 749 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 749
Азр ТНг Туз Туз Низ Туз Зег 1 5 <210> 750 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 750
Азр ТНг Туз Туз Низ Агд Зег 1 5 <210> 751 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 751
Азр ТНг Туз Туз Низ Низ Зег 1 5 <210> 752 <211> 7
- 453 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 752
Азр ТНг Ъуз Ъуз Нтз Рго Бег 1 5 <210> 753 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 753
Азр ТНг Ъуз Ъуз Нтз ТНг Бег 1 5 <210> 754 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 754
Азр ТНг Ъуз Ъуз Нтз Азр Бег 1 5 <210> 755 <211> 7
- 454 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 755
Азр ТЬг Буз Буз С1п А1а Зег 1 5 <210> 756 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 756
Азр ТЬг Буз Буз С1п Зег Зег 1 5 <210> 757 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 757
Азр ТЬг Буз Буз С1п Буз Зег <210> 758 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 455 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 758
Азр ТАг Ъуз Ъуз С1п Агд Зег 1 5 <210> 759 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 759
Азр ТАг Ъуз Ъуз С1п Нтз Зег 1 5 <210> 760 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 760
Азр ТАг Ъуз Ъуз С1п Рго Зег 1 5 <210> 761 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
- 456 023179
<223> УТ СЪК2
<400> 761 Азр ТНг Ъуз Туз С1п
1 5
ТНг Бег
<210> 762
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЪК2
<400> 762
Азр ТНг Ъуз Ъуз С1п
1 5
Азр Бег последовательность
<210> 763
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 763
Азр ТНг Туз С1у Ъеи
1 5
А1а Бег последовательность
<210> 764
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЪК2
последовательность
- 457 023179 <400> 764
Азр ТТг Ъуз С1у Ъеи Зег Зег 1 5 <210> 765 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 765
Азр ТТг Ъуз С1у Ъеи Ъуз Зег 1 5 <210> 766 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 766
Азр ТТг Ъуз С1у Ъеи Агд Зег 1 5 <210> 767 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 767
Азр ТТг Ъуз С1у Ъеи Нтз Зег
- 458 023179
5 <210> 768 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 768
Азр ТНг Туз С1у Теи Рго Бег 1 5 <210> 769 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 769
Азр ТНг Туз С1у Теи ТНг Бег 1 5 <210> 770 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 770
Азр ТНг Туз С1у Теи Азр Бег
- 459 023179
5 <210> 771 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 771
Азр ТНг Вуз С1у Нтз А1а Зег 1 5 <210> 772 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 772
Азр ТНг Вуз С1у Нтз Зег Зег 1 5 <210> 773 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 773
Азр ТНг Вуз С1у Нтз Вуз Зег 1 5
- 460 023179 <210> 774 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 774
Азр ТАг Туз С1у Нтз Агд Зег 1 5 <210> 775 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 775
Азр ТАг Туз С1у Нтз Нтз Зег 1 5 <210> 776 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 776
Азр ТАг Туз С1у Нтз Рго Зег 1 5 <210> 777
- 461 023179
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СБК2
<400> 777
Азр ТНг Ьуз С1у НЬз
1 5
ТНг Бег последовательность
<210> 778
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СБК2
<400> 778
Азр ТНг Ьуз С1у НЬз
1 5
Азр Бег последовательность
<210> 779
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СБК2
последовательность <400> 779
Азр ТНг Ьуз С1у С1п 1 5
А1а Бег <210> 780 <211> 7 <212> БЕЛОК
- 462 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 780
Азр ТНг Ъуз С1у С1п Зег Зег 1 5 <210> 781 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 781
Азр ТНг Ъеи Ъуз Ъеи Рго Зег 1 5 <210> 782 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 782
Азр ТНг Ъеи Ъуз Ъеи ТНг Зег 1 5 <210> 783 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 463 023179 <220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 783 Азр ТНг Ьеи Ьуз Нтз
1 5
А1а Бег
<210> 784
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 784
Азр ТНг ^еи ^уз Нтз
1 5
Бег Бег последовательность
<210> 785
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 785
Азр ТНг ^еи ^уз Нтз
1 5
Ьуз Бег последовательность
<210> 786
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 464 023179 <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 786
Азр ТАг ^еи ^уз Нтз Агд Зег 1 5 <210> 787 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 787
Азр ТАг ^еи ^уз Нтз Нтз Зег 1 5 <210> 788 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 788
Азр ТАг ^еи ^уз Нтз Рго Зег 1 5 <210> 789 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2
- 465 023179 <400> 789
Азр ТНг Ъеи Ъуз Нтз ТНг Бег 1 5 <210> 790 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 790
Азр ТНг Ъеи Ъуз Нтз Азр Бег 1 5 <210> 791 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 791
Азр ТНг Ъеи Ъуз С1п А1а Бег 1 5 <210> 792 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 792
- 466 023179
Азр ТНг Ъеи Гуз С1п
1 5
<210> 793
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УГ СЪК2
<400> 793
Азр ТНг Ъеи Ъуз С1п
1 5
Ъуз Зег последовательность
<210> 794
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 794
Азр ТНг Геи Ъуз С1п
1 5
Агд Зег последовательность <210> 795 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 795
Азр ТНг Геи Гуз С1п Нтз Зег 1 5
- 467 023179 <210> 796 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 796
Азр ТНг Теи Туз С1п Рго Зег 1 5 <210> 797 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 797
Азр ТНг Теи Туз С1п ТНг Зег 1 5 <210> 798 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 798
Азр ТНг Теи Туз С1п Азр Зег 1 5
- 468 023179 <210> 799 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 799
Азр ТНг Ъеи С1у Ъеи А1а Бег 1 5 <210> 800 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 800
Азр ТНг Ъеи С1у Ъеи Бег Бег 1 5 <210> 801 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 801
Азр ТНг Ъеи С1у Ъеи Ъуз Бег 1 5
- 469 023179
<210> 802
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 802
Азр ТАг Ъеи С1у Ъеи Агд Зег
1 5
<210> 803
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 803
Азр ТАг Ъеи С1у Ъеи Нтз Зег
1 5
<210> 804
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 804
Азр ТАг Ъеи С1у Ъеи Рго Зег
1 5
<210> 805
<211> 7
<212> БЕЛОК
- 470 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 805
Азр ТЬг Беи С1у Беи ТЬг Зег 1 5 <210> 806 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 806
Азр ТЬг Беи С1у Беи Азр Зег 1 5 <210> 807 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 807
Азр ТЬг Беи С1у Нтз А1а Зег 1 5 <210> 808 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 471 023179 <220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 808
Азр ТНг Вей С1у Нтз
1 5
<210> 809
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 809
Азр ТНг Вей С1у Нтз
1 5
Вуз Зег последовательность
<210> 810
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 810
Азр ТНг Вей С1у Нтз
1 5
Агд Зег последовательность
<210> 811
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
последовательность
- 472 023179 <223> УЪ СЪК2 <400> 811
Азр ТНг Теи С1у Нтз Нтз Бег 1 5 <210> 812 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЪК2 <400> 812
Азр ТНг Ъеи С1у Нтз Рго Бег 1 5 <210> 813 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 813
Азр ТНг Теи С1у Нтз ТНг Бег 1 5 <210> 814 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЪК2
- 473 023179 <400> 814
Азр ТТг Ъеи С1у Нтз Азр Зег 1 5 <210> 815 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 815
Азр ТТг Ъеи С1у С1п А1а Зег 1 5 <210> 816 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 816
Азр ТТг Ъеи С1у С1п Зег Зег 1 5 <210> 817 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 817
- 474 023179
Азр ТНг Бег С1у С1п Туз Бег 1 5 <210> 818 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 818
Азр ТНг Бег С1у С1п Агд Бег 1 5 <210> 819 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 819
Азр ТНг Бег С1у С1п Нтз Бег 1 5 <210> 820 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 820
- 475 023179
Азр ТАг Зег С1у С1п Рго Зег 1 5 <210> 821 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 821
Азр ТАг Зег С1у С1п ТАг Зег 1 5 <210> 822 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 822
Азр ТАг Зег С1у С1п Азр Зег 1 5 <210> 823 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 823
Азр ТАг Зег Агд Теи Зег Зег 1 5
- 476 023179 <210> 824 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 824
Азр ТНг Зег Агд Ъеи Ъуз Зег 1 5 <210> 825 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 825
Азр ТНг Зег Агд Ъеи Агд Зег 1 5 <210> 826 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 826
Азр ТНг Зег Агд Ъеи Нтз Зег 1 5
- 477 023179 <210> 827 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 827
Азр ТНг Бег Агд Ъеи Рго Бег 1 5 <210> 828 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 828
Азр ТНг Бег Агд Ъеи ТНг Бег 1 5 <210> 829 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 829
Азр ТНг Бег Агд Ъеи Азр Бег 1 5 <210> 830 <211> 7
- 478 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 830
Азр ТАг Зег Агд Нтз А1а Зег 1 5 <210> 831 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 831
Азр ТАг Зег Агд Нтз Зег Зег 1 5 <210> 832 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 832
Азр ТАг Зег Агд Нтз ^уз Зег 1 5 <210> 833 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность
- 479 023179 <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2
<400> 833
Азр ТНг Бег Агд Нтз
1 5
Агд Бег
<210> 834
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ ΟΌΚ2
<400> 834
Азр ТНг Бег Агд Нтз
1 5
Нтз Бег последовательность
<210> 835
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ ΟΌΚ2
<400> 835
Азр ТНг Бег Агд Нтз
1 5
Рго Бег последовательность
<210> 836
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 480 023179 <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 836
Азр ТНг Бег Агд НЬз ТНг Бег 1 5 <210> 837 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 837
Азр ТНг Бег Агд НЬз Азр Бег 1 5 <210> 838 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 838
Азр ТНг Бег Агд С1п А1а Бег 1 5 <210> 839 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2
- 481 023179 <400> 839
Азр ТНг Зег Агд С1п Зег Зег 1 5 <210> 840 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 840
Азр ТНг Зег Агд С1п Гуз Зег 1 5 <210> 841 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 841
Азр ТНг Зег Агд С1п Агд Зег 1 5 <210> 842 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2
- 482 023179 <400> 842
Азр ТНг Зег Агд С1п 1 5
Низ Зег
<210> 843
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 843
Азр ТНг Зег Агд С1п
1 5
Рго Зег последовательность
<210> 844
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 844
Азр ТНг Зег Агд С1п
1 5
ТНг Зег последовательность
<210> 845
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 845
Азр ТНг Зег Агд С1п последовательность
Азр Зег
- 483 023179
5 <210> 846 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 846
Азр ТНг Бег Туг Ъеи Ъуз Бег 1 5 <210> 847 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 847
Азр ТНг Бег Туг Ъеи Агд Бег 1 5 <210> 848 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 848
Азр ТНг Бег Туг Ъеи Нтз Бег 1 5
- 484 023179 <210> 849 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 849
Азр ТАг Зег Туг Ъеи Рго Зег 1 5 <210> 850 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 850
Азр ТАг РАе С1у С1п Ъуз Зег 1 5 <210> 851 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 851
Азр ТАг РАе С1у С1п Агд Зег 1 5
- 485 023179 <210> 852 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 852
Азр ТЬг РЬе С1у С1п Нтз Зег 1 5 <210> 853 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 853
Азр ТЬг РЬе С1у С1п Рго Зег 1 5 <210> 854 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 854
Азр ТЬг РЬе С1у С1п ТЬг Зег 1 5 <210> 855 <211> 7
- 486 023179 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 855
Азр ТНг РНе С1у С1п Азр Бег 1 5 <210> 856 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЪК2 <400> 856
Азр ТНг РНе Агд Ъеи А1а Бег 1 5 <210> 857 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 857
Азр ТНг РНе Агд Теи Бег Бег 1 5 <210> 858 <211> 7 <212> БЕЛОК
- 487 023179 <213> Искусственная <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 858
Азр ТНг РНе Вуз Вей 1 5 последовательность
Вуз Зег
<210> 859
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 859
Азр ТНг РНе Агд Вей
1 5
Агд Зег последовательность
<210> 860
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 860
Азр ТНг РНе Агд Вей
1 5
Нтз Зег последовательность
<210> 861
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственна
последовательность
- 488 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 861
Азр ТНг РНе Агд Ъеи Рго Бег 1 5 <210> 862 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 862
Азр ТНг РНе Агд Ъеи ТНг Бег 1 5 <210> 863 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 863
Азр ТНг РНе Агд Ъеи Азр Бег 1 5 <210> 864 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2
- 489 023179 <400> 864
Азр ТНг РНе Агд Нтз А1а Зег 1 5 <210> 865 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 865
Азр ТНг РНе Агд Нтз Зег Зег 1 5 <210> 866 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 866
Азр ТНг РНе Агд Нтз Ъуз Зег 1 5 <210> 867 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2
- 490 023179 <400> 867
Азр ТТг РТе Агд Нтз Агд Зег 1 5 <210> 868 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 868
Азр ТТг РТе Агд Нтз Нтз Зег 1 5 <210> 869 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 869
Азр ТТг РТе Агд Нтз Рго Зег 1 5 <210> 870 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 870
Азр ТТг РТе Агд Нтз ТТг Зег
- 491 023179
5 <210> 871 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 871
Азр ТНг РНе Агд Нтз Азр Бег 1 5 <210> 872 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 872
Азр ТНг РНе Агд С1п А1а Бег 1 5 <210> 873 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 873
Азр ТНг РНе Агд С1п Бег Бег 1 5
- 492 023179
<210> 874
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 874
Азр ТАг РАе Агд С1п
1 5
Туз Зег последовательность
<210> 875
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 875
Азр ТАг РАе Агд С1п
1 5
Агд Зег последовательность
<210> 876
<211> 7
<212> БЕЛОК
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 876
Азр ТАг РАе Агд С1п
1 5
Нтз Зег последовательность
- 493 023179 <210> 877 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 877
Азр ТАг РАе Агд С1п Рго Зег 1 5 <210> 878 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 878
Азр ТАг РАе Агд С1п ТАг Зег 1 5 <210> 879 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 879
Азр ТАг РАе Агд С1п Азр Зег 1 5 <210> 880
- 494 023179 <211> 7 <212> БЕЛОК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 880
Азр ТНг РНе Туг Геи Ъуз Зег 1 5 <210> 881 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 881
Азр ТНг РНе Туг Геи Агд Зег 1 5 <210> 882 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 882
Азр ТНг РНе Туг Ъеи Нтз Зег 1 5 <210> 883 <211> 7
- 495 023179
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 883
Азр ТНг РНе Туг ^еи
1 5
Рго Бег последовательность
<210> 884
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 884
Азр ТНг Туг С1у С1п
1 5
<210> 885
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 885
Азр ТНг Туг С1у С1п
1 5
Ьуз Бег
Агд Бег последовательность последовательность
<210> 886
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственна
последовательность
- 496 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 886
Азр ТНг Туг С1у С1п Нтз Бег 1 5 <210> 887 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 887
Азр ТНг Туг С1у С1п Рго Бег 1 5 <210> 888 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 888
Азр ТНг Туг С1у С1п ТНг Бег 1 5 <210> 889 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
- 497 023179
<223> νΣ СБК2
<400> 889
Азр ТНг Туг С1у С1п
1 5
<210> 890
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СБК2
<400> 890
Азр ТНг Туг Агд Ьеи
1 5
<210> 891
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СБК2
<400> 891
Азр ТНг Туг Агд Ьеи
1 5
<210> 892
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СБК2
Азр Бег
А1а Бег
Бег Бег последовательность последовательность последовательность
- 498 023179 <400> 892
Азр ТАг Туг Агд Ъеи Ъуз Зег 1 5 <210> 893 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 893
Азр ТАг Туг Агд Ъеи Агд Зег 1 5 <210> 894 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 894
Азр ТАг Туг Агд Ъеи Нтз Зег 1 5 <210> 895 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 895
- 499 023179
Азр ТНг Туг Агд Теи Рго Зег 1 5 <210> 896 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 896
Азр ТНг Туг Агд Теи ТНг Зег 1 5 <210> 897 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 897
Азр ТНг Туг Агд Теи Азр Зег 1 5 <210> 898 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 898
Азр ТНг Туг Агд Низ А1а Зег
- 500 023179
5 <210> 899 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 899
Азр ТНг Туг Агд Нтз Зег Зег 1 5 <210> 900 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 900
Азр ТНг Туг Агд Нтз Ъуз Зег 1 5 <210> 901 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 901
Азр ТНг Туг Агд Нтз Агд Зег 1 5
- 501 023179 <210> 902 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 902
Азр ТНг Туг Агд Нтз Нтз Бег 1 5 <210> 903 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 903
Азр ТНг Туг Агд Нтз Рго Бег 1 5 <210> 904 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 904
Азр ТНг Туг Агд Нтз ТНг Бег 1 5 <210> 905
- 502 023179
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 905
Азр ТНг Туг Агд Нтз
1 5
Азр Бег последовательность
<210> 906
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЪК2
<400> 906
Азр ТНг Туг Агд С1п
1 5
А1а Бег последовательность
<210> 907
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЪК2
последовательность <400> 907
Азр ТНг Туг Агд С1п 1 5 <210> 908 <211> 7 <212> белок
- 503 023179
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 908
Азр ТНг Туг Агд С1п
1 5
Вуз Зег последовательность
<210> 909
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 909
Азр ТНг Туг Агд С1п
1 5
Агд Зег последовательность
<210> 910
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 910
Азр ТНг Туг Агд С1п
1 5
Нтз Зег последовательность
<210> 911
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственна
последовательность
- 504 023179 <220>
<223> УБ СБК2
<400> 911 Азр ТЬг Туг Агд С1п
1 5
Рго Зег
<210> 912
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УБ СБК2
<400> 912
Азр ТЬг Туг Агд С1п
1 5
ТЬг Зег последовательность
<210> 913
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УБ СБК2
<400> 913
Азр ТЬг Туг Агд С1п
1 5
Азр Зег последовательность
<210> 914
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственна
последовательность
- 505 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 914
Азр ТТг Туг Туг Ъеи А1а Зег 1 5 <210> 915 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 915
Азр ТТг Туг Туг Ъеи Зег Зег 1 5 <210> 916 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 916
Азр ТТг Туг Туг Ъеи Ъуз Зег 1 5 <210> 917 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2
- 506 023179 <400> 917
Азр ТНг Туг Туг Ъеи Агд Зег 1 5 <210> 918 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 918
Азр ТНг Туг Туг Геи Нтз Зег 1 5 <210> 919 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 919
Азр ТНг Туг Туг Ъеи Рго Зег 1 5 <210> 920 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 920
- 507 023179
Туз Бег
Азр ТНг Агд С1у С1п
1 5
<210> 921
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> ντ ΟΌΚ2
<400> 921
Азр ТНг Агд С1у С1п
1 5
Агд Бег последовательность
<210> 922
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> ντ ΟΌΚ2
<400> 922
Азр ТНг Агд С1у С1п
1 5
Нтз Бег последовательность <210> 923 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СЕ>К2 <400> 923
Азр ТНг Агд С1у С1п Рго Бег
5
- 508 023179 <210> 924 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 924
Азр ТАг Агд С1у С1п ТАг Зег 1 5 <210> 925 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 925
Азр ТАг Агд С1у С1п Азр Зег 1 5 <210> 926 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 926
Азр ТАг Агд Агд ^еи А1а Зег
5
- 509 023179 <210> 927 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 927
Азр ТАг Агд Агд Теи Зег Зег 1 5 <210> 928 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 928
Азр ТАг Агд Агд Теи Туз Зег 1 5 <210> 929 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 929
Азр ТАг Агд Агд Теи Агд Зег
5
- 510 023179
<210> 930
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 930
Азр ТАг Агд Агд Ъеи Нтз Зег
1 5
<210> 931
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 931
Азр ТАг Агд Агд Ъеи Рго Зег
1 5
<210> 932
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 932
Азр ТАг Агд Агд Ъеи ТАг Зег
1 5
<210> 933
<211> 7
<212> белок
- 511 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 933
Азр ТНг Агд Агд Ьеи Азр Бег 1 5 <210> 934 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 934
Азр ТНг Агд Агд НЬз А1а Бег 1 5 <210> 935 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 935
Азр ТНг Агд Агд НЬз Бег Бег 1 5 <210> 936 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность
- 512 023179 <220>
<223> УТ 0ΌΚ2
<400> 936
Азр ТНг Агд Агд Нтз
1 5
Туз Зег
<210> 937
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СИК2
<400> 937
Азр ТНг Агд Агд Нтз
1 5
Агд Зег последовательность
<210> 938
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СИК2
<400> 938
Азр ТНг Агд Агд Нтз
1 5
Нтз Зег последовательность
<210> 939
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
последовательность
- 513 023179 <223> УЪ СЪК2 <400> 939
Азр ТНг Агд Агд Нтз Рго Бег 1 5 <210> 940 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 940
Азр ТНг Агд Агд Нтз ТНг Бег 1 5 <210> 941 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 941
Азр ТНг Агд Агд Нтз Азр Бег 1 5 <210> 942 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2
- 514 023179 <400> 942
Азр ТНг Агд Агд С1п А1а Зег 1 5 <210> 943 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 943
Азр ТНг Агд Агд С1п Зег Зег 1 5 <210> 944 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 944
Азр ТНг Агд Агд С1п Ъуз Зег 1 5 <210> 945 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2
- 515 023179 <400> 945
Азр ТНг Агд Агд С1п Агд Бег 1 5 <210> 946 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 946
Азр ТНг Агд Агд С1п Нтз Бег 1 5 <210> 947 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 947
Азр ТНг Агд Агд С1п Рго Бег 1 5 <210> 948 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 948
- 516 023179
Азр ТНг Агд Агд С1п ТНг Бег 1 5 <210> 949 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 949
Азр ТНг Агд Агд С1п Азр Бег 1 5 <210> 950 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 950
Азр ТНг Агд Туг Ъеи Ъуз Бег 1 5 <210> 951 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 951
Азр ТНг Агд Туг Ъеи Агд Бег 1 5
- 517 023179 <210> 952 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 952
Азр ТНг Агд Туг Теи Нтз Бег 1 5 <210> 953 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 953
Азр ТНг Агд Туг Ъеи Рго Бег 1 5 <210> 954 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЪК2 <400> 954
Азр ТНг МеН С1у С1п Туз Бег 1 5
- 518 023179 <210> 955 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 955
Азр ТНг МеН С1у С1п Агд Зег 1 5 <210> 956 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 956
Азр ТНг МеН С1у С1п Нтз Зег 1 5 <210> 957 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 957
Азр ТНг МеН С1у С1п Рго Зег 1 5 <210> 958 <211> 7
- 519 023179 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 958
Азр ТНг МеН С1у С1п ТНг Зег 1 5 <210> 959 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 959
Азр ТНг МеН С1у С1п Азр Зег 1 5 <210> 960 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 960
Азр ТНг МеН Агд Вей Зег Зег 1 5 <210> 961 <211> 7 <212> белок
- 520 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 961
Азр ТТг МеК Агд Ъеи Ъуз Зег 1 5 <210> 962 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 962
Азр ТТг МеК Агд Ъеи Агд Зег 1 5 <210> 963 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 963
Азр ТТг МеК Агд Ъеи Нтз Зег 1 5 <210> 964 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность
- 521 023179 <220>
<223> УБ СБК2 <400> 964
Азр ТЬг МеС Агд Беи Рго Зег 1 5 <210> 965 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 965
Азр ТЬг МеС Агд Беи ТЬг Зег 1 5 <210> 966 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 966
Азр ТЬг МеС Агд Беи Азр Зег 1 5 <210> 967 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2
- 522 023179 <400> 967
Азр ТАг МеЛ Агд Нтз А1а Зег 1 5 <210> 968 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 968
Азр ТАг МеЛ Агд Нтз Зег Зег 1 5 <210> 969 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 969
Азр ТАг МеЛ Агд Нтз Туз Зег 1 5 <210> 970 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2
- 523 023179 <400> 970
Азр ТАг МеА Агд Нтз 1 5
Агд Зег
<210> 971
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 971
Азр ТАг МеА Агд Нтз
1 5
Нтз Зег последовательность
<210> 972
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 972
Азр ТАг МеА Агд Нтз
1 5
Рго Зег последовательность
<210> 973
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 973
Азр ТАг МеА Агд Нтз последовательность
ТАг Зег
- 524 023179
5 <210> 974 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 974
Азр ТАг МеА Агд Нтз Азр Зег 1 5 <210> 975 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 975
Азр ТАг МеА Агд С1п А1а Зег 1 5 <210> 976 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 976
Азр ТАг МеА Агд С1п Зег Зег 1 5
- 525 023179 <210> 977 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 977
Азр ТНг МеЕ Агд С1п Ьуз Бег 1 5 <210> 978 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 978
Азр ТНг МеЕ Агд С1п Агд Бег 1 5 <210> 979 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 979
Азр ТНг МеЕ Агд С1п НЬз Бег 1 5
- 526 023179 <210> 980 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 980
Азр ТНг МеН Агд С1п Рго Бег 1 5 <210> 981 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 981
Азр ТНг МеН Агд С1п ТНг Бег 1 5 <210> 982 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 982
Азр ТНг МеН Агд С1п Азр Бег 1 5 <210> 983 <211> 7
- 527 023179 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 983
Азр ТНг Ме/ Туг Теи Туз Бег 1 5 <210> 984 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 984
Азр ТНг Ме/ Туг Теи Агд Бег 1 5 <210> 985 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 985
Азр ТНг Ме/ Туг Теи Нтз Бег 1 5 <210> 986 <211> 7 <212> белок
- 528 023179
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 986
Азр ТНг МеЪ Туг Ъеи
1 5
Рго Бег последовательность
<210> 987
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 987
Азр ТНг Ъуз С1у С1п
1 5
Ъуз Бег последовательность
<210> 988
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 988
Азр ТНг Ъуз С1у С1п
1 5
Агд Бег последовательность
<210> 989
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственна
последовательность
- 529 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 989
Азр ТНг Ъуз С1у С1п Нтз Зег 1 5 <210> 990 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 990
Азр ТНг Ъуз С1у С1п Рго Зег 1 5 <210> 991 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 991
Азр ТНг Ъуз С1у С1п ТНг Зег 1 5 <210> 992 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
- 530 023179 <223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 992
Азр ТНг ^уз С1у С1п Азр Бег 1 5 <210> 993 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 993
Азр ТНг ^уз Агд ^еи А1а Бег 1 5 <210> 994 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 994
Азр ТНг ^уз Агд ^еи Бег Бег 1 5 <210> 995 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2
- 531 023179 <400> 995
Азр ТНг Туз Агд Теи Туз Зег 1 5 <210> 996 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 996
Азр ТНг Туз Агд Теи Агд Зег 1 5 <210> 997 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 997
Азр ТНг Туз Агд Теи Нтз Зег 1 5 <210> 998 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 998
Азр ТНг Туз Агд Теи Рго Зег
- 532 023179
5 <210> 999 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 999
Азр ТНг Туз Агд Ъеи ТНг Бег 1 5 <210> 1000 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1000
Азр Туз ТНг Агд Теи Азр Бег 1 5 <210> 1001 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1001
Азр ТНг Ъуз Агд Нтз А1а Бег 1 5
- 533 023179
<210> 1002
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 1002
Азр ТНг Вуз Агд Нтз
1 5
Зег Зег последовательность
<210> 1003
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 1003
Азр ТНг Вуз Агд Нтз
1 5
Вуз Зег последовательность
<210> 1004
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 1004
Азр ТНг Вуз Агд Нтз
1 5
Агд Зег последовательность
- 534 023179 <210> 1005 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1005
Азр ТНг Гуз Агд Нтз Нтз Зег 1 5 <210> 1006 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1006
Азр ТНг Ъуз Агд Нтз Рго Зег 1 5 <210> 1007 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 1007
Азр ТНг Гуз Агд Нтз ТНг Зег 1 5 <210> 1008
- 535 023179 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1008
Азр ТТг Ъуз Агд Нтз Азр Зег 1 5 <210> 1009 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1009
Азр ТТг Ъуз Агд С1п А1а Зег 1 5 <210> 1010 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1010
Азр ТТг Агд Ъуз С1п Зег Зег 1 5 <210> 1011 <211> 7
- 536 023179
<212> <213> белок Искусственная
<220>
<223> УТ 0ΌΚ2
<400> 1011
Азр ТАг Туз Агд С1п
1 5
Туз Зег последовательность
<210> 1012
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ 0ΌΚ2
<400> 1012
Азр ТАг Туз Агд С1п
1 5
<210> 1013
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ 0ΌΚ2
<400> 1013
Азр ТАг Туз Агд С1п
1 5
Агд Зег
Нтз Зег последовательность последовательность
<210> 1014
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственна
последовательность
- 537 023179 <220>
<223> УБ СБК2 <400> 1014
Азр ТЬг Буз Агд С1п Рго Зег 1 5 <210> 1015 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 1015
Азр ТЬг Буз Агд С1п ТЬг Зег 1 5 <210> 1016 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СБК2 <400> 1016
Азр ТЬг Буз Агд С1п Азр Зег 1 5 <210> 1017 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
- 538 023179
<223> УЪ СЪК2
<400> 1017 Азр ТАг Ъуз Туг Ъеи
1 5
А1а Зег
<210> 1018
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1018
Азр ТАг Ъуз Туг Ъеи
1 5
Зег Зег последовательность
<210> 1019
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1019
Азр ТАг Ъуз Туг Ъеи
1 5
Ъуз Зег последовательность
<210> 1020
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
последовательность
- 539 023179 <400> 1020
Азр ТАг Ьуз Туг Ьеи Агд Зег 1 5 <210> 1021 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1021
Азр ТАг ^уз Туг ^еи Нтз Зег 1 5 <210> 1022 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1022
Азр ТАг ^уз Туг ^еи Рго Зег 1 5 <210> 1023 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1023
- 540 023179
Азр ТНг Теи С1у С1п Туз Бег 1 5 <210> 1024 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 1024
Азр ТНг Теи С1у С1п Агд Бег 1 5 <210> 1025 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 1025
Азр ТНг Теи С1у С1п Нтз Бег 1 5 <210> 1026 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ ΟΌΚ2 <400> 1026
Азр ТНг Теи С1у С1п Рго Бег
- 541 023179
5 <210> 1027 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1027
Азр ТНг Ъеи С1у С1п ТНг Бег 1 5 <210> 1028 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1028
Азр ТНг Ъеи С1у С1п Азр Бег 1 5 <210> 1029 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1029
Азр ТНг Ъеи Агд Ъеи А1а Бег 1 5
- 542 023179 <210> 1030 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 1030
Азр ТНг Ьеи Агд Ьеи Бег Бег 1 5 <210> 1031 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 1031
Азр ТНг Ьеи Агд Ьеи Ьуз Бег 1 5 <210> 1032 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СБК2 <400> 1032
Азр ТНг Ьеи Агд Ьеи Агд Бег 1 5 <210> 1033
- 543 023179
<211> <212> <213> 7 белок Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 1033
Азр ТНг Теи Агд Теи
1 5
Нтз Зег последовательность
<210> 1034
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 1034
Азр ТНг Теи Агд Теи
1 5
Рго Зег последовательность
<210> 1035
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЕ>К2
последовательность <400> 1035
Азр ТНг Теи Агд Теи 1 5 <210> 1036 <211> 7 <212> белок
ТНг Зег
- 544 023179
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЪК2
<400> 1036
Азр ТНг Ъеи Агд Теи
1 5
Азр Бег последовательность
<210> 1037
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1037
Азр ТНг Теи Агд Нтз
1 5
А1а Бег последовательность
<210> 1038
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ СЪК2
<400> 1038
Азр ТНг Ъеи Агд Нтз
1 5
Бег Бег последовательность
<210> 1039
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственна
последовательность
- 545 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1039 Азр ТНг Ъеи Агд Нтз
1 5
Ъуз Зег
<210> 1040
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1040
Азр ТНг Ъеи Агд Нтз
1 5
Агд Зег последовательность
<210> 1041
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1041
Азр ТНг Ъеи Агд Нтз
1 5
Нтз Зег последовательность
<210> 1042
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственна
последовательность
- 546 023179 <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 1042
Азр ТНг ^еи Агд Нтз Рго Бег 1 5 <210> 1043 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 1043
Азр ТНг ^еи Агд Нтз ТНг Бег 1 5 <210> 1044 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 1044
Азр ТНг ^еи Агд Нтз Азр Бег 1 5 <210> 1045 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2
- 547 023179 <400> 1045
Азр ТНг Ъеи Агд С1п А1а Зег 1 5 <210> 1046 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 1046
Азр ТНг Ъеи Агд С1п Зег Зег 1 5 <210> 1047 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1047
Азр ТНг Геи Агд С1п Гуз Зег 1 5 <210> 1048 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1048
- 548 023179
Агд Зег
Азр ТНг Вей Агд С1п
1 5
<210> 1049
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 1049
Азр ТНг Вей Агд С1п
1 5
Нтз Зег последовательность
<210> 1050
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 1050
Азр ТНг Вей Агд С1п
1 5
Рго Зег последовательность <210> 1051 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1051
Азр ТНг Вей Агд С1п ТНг Зег 1 5
- 549 023179 <210> 1052 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1052
Азр ТНг Ъеи Агд С1п Азр Бег 1 5 <210> 1053 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1053
Азр ТНг Ъеи Туг Ъеи А1а Бег 1 5 <210> 1054 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1054
Азр ТНг Ъеи Туг Ъеи Бег Бег 1 5
- 550 023179 <210> 1055 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1055
Азр ТТг Ъеи Туг Ъеи Ъуз Зег 1 5 <210> 1056 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1056
Азр ТТг Ъеи Туг Ъеи Агд Зег 1 5 <210> 1057 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1057
Азр ТТг Ъеи Туг Ъеи Нтз Зег 1 5
- 551 023179
<210> 1058
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ ΟΌΚ2
<400> 1058
Азр ТАг Теи Туг Теи Рго Зег
1 5
<210> 1059
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ ΟΌΚ2
<400> 1059
Азр ТАг Зег Туг Теи ТАг Зег
1 5
<210> 1060
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ΟΌΚ Ъ2
<400> 1060
Азр ТАг Зег Туг Теи Азр Зег
1 5
<210> 1061
<211> 7
<212> белок
- 552 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СБК Б2 <400> 1061
Азр ТЬг Зег Туг Нтз А1а Зег 1 5 <210> 1062 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СБК Б2 <400> 1062
Азр ТЬг Зег Туг Нтз Зег Зег 1 5 <210> 1063 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СБК Б2 <400> 1063
Азр ТЬг Зег Туг Нтз Буз Зег 1 5 <210> 1064 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность
- 553 023179 <220>
<223> СВР. В2
<400> 1064 Азр ТАг Зег Туг Нтз
1 5
Агд Зег
<210> 1065
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> СВР. В2
<400> 1065
Азр ТАг Зег Туг Нтз
1 5
Нтз Зег последовательность
<210> 1066
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> СВР В2
<400> 1066
Азр ТАг Зег Туг Нтз
1 5
Рго Зег последовательность
<210> 1067
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
последовательность
- 554 023179 <223> ΟΌΚ Ъ2 <400> 1067
Азр ТАг Зег Туг Нтз ТАг Зег 1 5 <210> 1068 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΟΌΚ Ъ2 <400> 1068
Азр ТАг Зег Туг Нтз Азр Зег 1 5 <210> 1069 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΟΌΚ Ъ2 <400> 1069
Азр ТАг Зег Туг С1п Ьуз Зег 1 5 <210> 1070 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΟΌΚ Ъ2
- 555 023179 <400> 1070
Азр ТНг Бег Туг С1п Агд Бег 1 5 <210> 1071 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СВР. В2 <400> 1071
Азр ТНг Бег Туг С1п Нтз Бег 1 5 <210> 1072 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СВР. В2 <400> 1072
Азр ТНг Бег Туг С1п Рго Бег 1 5 <210> 1073 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СВР В2
- 556 023179 <400> 1073
Азр ТНг Бег Туг С1п ТНг Бег 1 5 <210> 1074 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СЕЖ Е2 <400> 1074
Азр ТНг Бег Туг С1п Азр Бег 1 5 <210> 1075 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СЕЖ Е2 <400> 1075
Азр ТНг Бег РНе Ееи А1а Бег 1 5 <210> 1076 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СЕЖ Е2 <400> 1076
- 557 023179
Азр ТНг Зег РНе Теи Зег Зег 1 5
<210> 1077
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ΟΌΚ Ъ2
<400> 1077
Азр ТНг Зег РНе Теи Туз Зег 1 5
<210> 1078
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ΟΌΚ Ъ2
<400> 1078
Азр ТНг Зег РНе Теи Агд Зег 1 5
<210> 1079
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ΟΌΚ Ъ2
<400> 1079
Азр ТНг Зег РНе Теи Нтз Зег 1 5
- 558 023179
<210> 1080
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЪК Т2
<400> 1080
Азр ТНг Бег РНе Ъеи Рго Бег 1 5
<210> 1081
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЪК Т2
<400> 1081
Азр ТНг Бег РНе Теи ТНг Бег 1 5
<210> 1082
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЪК Т2
<400> 1082
Азр ТНг Бег РНе Нтз А1а Бег 1 5
- 559 023179
<210> 1083
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЪК Ъ2
<400> 1083
Азр ТНг Зег РНе Нтз Зег Зег 1 5
<210> 1084
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЪК Ъ2
<400> 1084
Азр ТНг Зег РНе Нтз Ъуз Зег 1 5
<210> 1085
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЪК Ъ2
<400> 1085
Азр ТНг Зег РНе Нтз Агд Зег 1 5 <210> 1086 <211> 7
- 560 023179
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ΟΌΚ Ъ2
<400> 1086
Азр ТНг Бег РНе Нтз Нтз Бег 1 5
<210> 1087
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ΟΌΚ Ъ2
<400> 1087
Азр ТНг Бег РНе Нтз Рго Бег 1 5
<210> 1088
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ΟΌΚ Ъ2
<400> 1088
Азр ТНг Бег РНе Нтз ТНг Бег 1 5
<210> 1089
<211> 7
<212> белок
- 561 023179
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СВК Ъ2
<400> 1089
Азр ТНг Зег РНе Нтз Азр Зег 1 5
<210> 1090
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СОК Ъ2
<400> 1090
Азр ТНг Зег РНе С1п А1а Зег 1 5
<210> 1091
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СВК Ъ2
<400> 1091
Азр ТНг Зег РНе С1п Зег Зег 1 5
<210> 1092
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
- 562 023179 <220>
<223> ΟΌΚ Т2 <400> 1092
Азр ТНг Бег РНе С1п Туз Бег 1 5 <210> 1093 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΟΌΚ Т2 <400> 1093
Азр ТНг РНе Туг Теи ТНг Бег 1 5 <210> 1094 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΟΌΚ Т2 <400> 1094
Азр ТНг РНе Туг Теи Азр Бег 1 5 <210> 1095 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΟΌΚ Т2
- 563 023179 <400> 1095
Азр ТТг РТе Туг Нтз А1а Зег 1 5 <210> 1096 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СЪК Ъ2 <400> 1096
Азр ТТг РТе Туг Нтз Зег Зег 1 5 <210> 1097 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СЪК Ъ2 <400> 1097
Азр ТТг РТе Туг Нтз Ъуз Зег 1 5 <210> 1098 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СЪК Ъ2
- 564 023179 <400> 1098
Азр ТНг РНе Туг Нтз 1 5
Агд Бег
<210> 1099
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> ΟΌΚ Ъ2
<400> 1099
Азр ТНг РНе Туг Нтз
1 5
Нтз Бег последовательность
<210> 1100
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> ΟΌΚ Ъ2
<400> 1100
Азр ТНг РНе Туг Нтз
1 5
Рго Бег последовательность
<210> 1101
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> ΟΌΚ Ъ2
<400> 1101
Азр ТНг РНе Туг Нтз последовательность
ТНг Бег
- 565 023179
5 <210> 1102 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СВК Ъ2 <400> 1102
Азр ТНг РНе Туг Нтз Азр Зег 1 5 <210> 1103 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СВК Ъ2 <400> 1103
Азр ТНг РНе Туг С1п А1а Зег 1 5 <210> 1104 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СВК Ъ2 <400> 1104
Азр ТНг РНе Туг С1п Зег Зег 1 5
- 566 023179 <210> 1105 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΟΌΚ Т2 <400> 1105
Азр ТАг РАе Туг С1п Туз Зег 1 5 <210> 1106 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΟΌΚ Т2 <400> 1106
Азр ТАг РАе Туг С1п Агд Зег 1 5 <210> 1107 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΟΌΚ Т2 <400> 1107
Азр ТАг РАе Туг С1п Нтз Зег 1 5
- 567 023179 <210> 1108 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СИР Ъ2 <400> 1108
Азр ТАг РАе Туг С1п Рго Зег 1 5 <210> 1109 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СИР Ъ2 <400> 1109
Азр ТАг РАе Туг С1п ТАг Зег <210> 1110 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СИР Ъ2 <400> 1110
Азр ТАг РАе Туг С1п Азр Зег 1 5 <210> 1111 <211> 7
- 568 023179
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЕЖ Е2
<400> 1111
Азр ТЬг РЬе РЬе Беи А1а Зег 1 5
<210> 1112
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЕЖ Е2
<400> 1112
Азр ТЬг РЬе РЬе Беи Зег Зег 1 5
<210> 1113
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЕЖ Е2
<400> 1113
Азр ТЬг РЬе РЬе Беи Буз Зег 1 5
<210> 1114
<211> 7
<212> белок
- 569 023179
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СИК Ъ2
<400> 1114
Азр ТАг РАе РАе Ьеи Агд Зег 1 5
<210> 1115
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СИК Ъ2
<400> 1115
Азр ТАг РАе РАе Ьеи Нтз Зег 1 5
<210> 1116
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СИК Ъ2
<400> 1116
Азр ТАг РАе РАе Ьеи Рго Зег 1 5
<210> 1117
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
- 570 023179 <220>
<223> СЪР Ъ2
<400> 1117
Азр ТНг РНе РНе Ъеи ТНг Бег 1 5
<210> 1118
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЪР Ъ2
<400> 1118
Азр ТНг РНе РНе Нтз А1а Бег 1 5
<210> 1119
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЪР Ъ2
<400> 1119
Азр ТНг РНе РНе Нтз Бег Бег 1 5
<210> 1120
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
- 571 023179
<223> СЪК Ъ2
<400> 1120
Азр ТНг РНе РНе Нтз Ъуз Зег 1 5
<210> 1121
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЪК Ъ2
<400> 1121
Азр ТНг РНе РНе Нтз Агд Зег 1 5
<210> 1122
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЪК Ъ2
<400> 1122
Азр ТНг РНе РНе Нтз Нтз Зег 1 5
<210> 1123
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЪК Ъ2
- 572 023179 <400> 1123
Азр ТНг РНе РНе Нтз Рго Бег 1 5
<210> 1124
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СВК Ъ2
<400> 1124
Азр ТНг РНе РНе Нтз ТНг Бег 1 5
<210> 1125
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СВК Ъ2
<400> 1125
Азр ТНг РНе РНе Нтз Азр Бег 1 5
<210> 1126
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СВК Ъ2
<400> 1126
Азр ТНг РНе РНе С1п А1а Бег
- 573 023179
<210> 1127
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЕЖ Е2
<400> 1127
Азр ТНг РНе РНе С1п Бег Бег 1 5
<210> 1128
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЕЖ Е2
<400> 1128
Азр ТНг РНе РНе С1п Ьуз Бег 1 5
<210> 1129
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> СЕЖ Е2
<400> 1129
Азр ТНг Туг Туг Ееи ТНг Бег 1 5
- 574 023179
<210> 1130
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> ΟΌΚ Ъ2
<400> 1130
Азр ТНг Туг Туг Теи
1 5
Азр Зег последовательность
<210> 1131
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> ΟΌΚ Ъ2
<400> 1131
Азр ТНг Туг Туг Нтз
1 5
А1а Зег последовательность
<210> 1132
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> ΟΌΚ Ъ2
<400> 1132
Азр ТНг Туг Туг Нтз
1 5
последовательность
- 575 023179 <210> 1133 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΟΌΚ Ъ2 <400> 1133
Азр ТНг Туг Туг Нтз Ьуз Бег 1 5 <210> 1134 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΟΌΚ Ъ2 <400> 1134
Азр ТНг Туг Туг Нтз Агд Бег 1 5 <210> 1135 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ΟΌΚ Ъ2 <400> 1135
Азр ТНг Туг Туг Нтз Нтз Бег 1 5 <210> 1136
- 576 023179 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СВК Ъ2 <400> 1136
Азр ТНг Туг Туг Нтз Рго Зег 1 5 <210> 1137 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СВК Ъ2 <400> 1137
Азр ТНг Туг Туг Нтз ТНг Зег 1 5 <210> 1138 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> СВК Ъ2 <400> 1138
Азр ТНг Туг Туг Нтз Азр Зег 1 5 <210> 1139 <211> 7
- 577 023179
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1139
Азр ТТг Туг Туг С1п
1 5
А1а Зег последовательность
<210> 1140
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1140
Азр ТТг Туг Туг С1п
1 5
<210> 1141
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1141
Азр ТТг Туг Туг С1п
1 5
Зег Зег
Ъуз Зег последовательность последовательность
<210> 1142
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственна
последовательность
- 578 023179 <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1142
Азр ТНг Туг Туг С1п Агд Зег 1 5 <210> 1143 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1143
Азр ТНг Туг Туг С1п Нтз Зег 1 5 <210> 1144 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1144
Азр ТНг Туг Туг С1п Рго Зег 1 5 <210> 1145 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
- 579 023179
<223> ντ 0ΌΚ2
<400> 1145 Азр ТНг Туг Туг С1п
1 5
ТНг Бег
<210> 1146
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> ντ 0ΌΚ2
<400> 1146
Азр ТНг Туг Туг С1п
1 5
Азр Бег последовательность
<210> 1147
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> ντ 0ΌΚ2
<400> 1147
Азр ТНг Туг РНе Теи
1 5
А1а Бег последовательность
<210> 1148
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> ντ 0ΌΚ2
последовательность
- 580 023179 <400> 1148
Азр ТНг Туг РНе Ъеи Бег Бег 1 5 <210> 1149 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1149
Азр ТНг Туг РНе Ъеи Ъуз Бег 1 5 <210> 1150 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1150
Азр ТНг Туг РНе Ъеи Агд Бег 1 5 <210> 1151 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1151
- 581 023179
Азр ТАг Туг РАе Ъеи Нтз Зег 1 5 <210> 1152 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1152
Азр ТАг Туг РАе Ъеи Рго Зег 1 5 <210> 1153 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1153
Азр ТАг Туг РАе Ъеи ТАг Зег 1 5 <210> 1154 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1154
Азр ТАг Туг РАе Ъеи Азр Зег
- 582 023179
5 <210> 1155 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1155
Азр ТНг Туг РНе Нтз А1а Бег 1 5 <210> 1156 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1156
Азр ТНг Туг РНе Нтз Бег Бег 1 5 <210> 1157 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1157
Азр ТНг Туг РНе Нтз Ъуз Бег 1 5
- 583 023179 <210> 1158 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1158
Азр ТАг Туг РАе Нтз Агд Зег 1 5 <210> 1159 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1159
Азр ТАг Туг РАе Нтз Нтз Зег 1 5 <210> 1160 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1160
Азр ТАг Туг РАе Нтз Рго Зег 1 5 <210> 1161
- 584 023179
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УБ СЕЖ2
<400> 1161
Азр ТЬг Туг РЬе Нтз
1 5
ТЬг Зег последовательность
<210> 1162
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЕ СЕЖ2
<400> 1162
Азр ТЬг Туг РЬе Нтз
1 5
Азр Зег последовательность
<210> 1163
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЕ СЕЖ2
последовательность <400> 1163
Азр ТЬг Туг РЬе С1п 1 5
А1а Зег <210> 1164 <211> 7 <212> белок
- 585 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1164
Азр ТНг Туг РНе С1п Зег Зег 1 5 <210> 1165 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1165
Азр ТНг Туг РНе С1п Ъуз Зег 1 5 <210> 1166 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1166
Азр ТНг Агд Туг Ъеи ТНг Зег 1 5 <210> 1167 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность
- 586 023179 <220>
<223> УТ 0ΌΚ2
<400> 1167 Азр ТАг Агд Туг Теи
1 5
Азр Зег
<210> 1168
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ 0ΌΚ2
<400> 1168
Азр ТАг Агд Туг Нтз
1 5
А1а Зег последовательность
<210> 1169
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УТ 0ΌΚ2
<400> 1169
Азр ТАг Агд Туг Нтз
1 5
Зег Зег последовательность
<210> 1170
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственна
последовательность
- 587 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1170
Азр ТНг Агд Туг Нтз Туз Бег 1 5 <210> 1171 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЪК2 <400> 1171
Азр ТНг Агд Туг Нтз Агд Бег 1 5 <210> 1172 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1172
Азр ТНг Агд Туг Нтз Нтз Бег 1 5 <210> 1173 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2
- 588 023179 <400> 1173
Азр ТНг Агд Туг НЬз Рго Бег 1 5 <210> 1174 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΕ СЕЖ2 <400> 1174
Азр ТНг Агд Туг НЬз ТНг Бег 1 5 <210> 1175 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΕ СЕЖ2 <400> 1175
Азр ТНг Агд Туг НЬз Азр Бег 1 5 <210> 1176 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΕ СЕЖ2 <400> 1176
- 589 023179
Ъуз Зег
Азр ТНг Агд Туг С1п
1 5
<210> 1177
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УГ СЪК2
<400> 1177
Азр ТНг Агд Туг С1п
1 5
Агд Зег последовательность
<210> 1178
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1178
Азр ТНг Агд Туг С1п
1 5
Нтз Зег последовательность <210> 1179 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 1179
Азр ТНг Агд Туг С1п Рго Зег
5
- 590 023179 <210> 1180 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 1180
Азр ТНг Агд Туг С1п ТНг Зег 1 5 <210> 1181 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 1181
Азр ТНг Агд Туг С1п Азр Зег 1 5 <210> 1182 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 1182
Азр ТНг Агд РНе Теи А1а Зег
5
- 591 023179 <210> 1183 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 1183
Азр ТНг Агд РНе ^еи Бег Бег 1 5 <210> 1184 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 1184
Азр ТНг Агд РНе ^еи ^уз Бег 1 5 <210> 1185 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 1185
Азр ТНг Агд РНе ^еи Агд Бег
5
- 592 023179
<210> 1186
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 1186
Азр ТНг Агд РНе Вей Нтз Зег
1 5
<210> 1187
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 1187
Азр ТНг Агд РНе Вей Рго Зег
1 5
<210> 1188
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 1188
Азр ТНг Агд РНе Вей ТНг Зег
1 5
<210> 1189
<211> 7
<212> белок
- 593 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1189
Азр ТАг Агд РАе Ъеи Азр Зег 1 5 <210> 1190 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1190
Азр ТАг Агд РАе Нтз А1а Зег 1 5 <210> 1191 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1191
Азр ТАг Агд РАе Нтз Зег Зег 1 5 <210> 1192 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность
- 594 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1192 Азр ТНг Агд РНе Нтз
1 5
Ъуз Бег
<210> 1193
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1193
Азр ТНг Агд РНе Нтз
1 5
Агд Бег последовательность
<210> 1194
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1194
Азр ТНг Агд РНе Нтз
1 5
Нтз Бег последовательность
<210> 1195
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
последовательность
- 595 023179 <223> νΣ СЕ>К2 <400> 1195
Азр ТАг Агд РАе Нтз Рго Зег 1 5 <210> 1196 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1196
Азр ТАг Агд РАе Нтз ТАг Зег 1 5 <210> 1197 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1197
Азр ТАг Агд РАе Нтз Азр Зег 1 5 <210> 1198 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2
- 596 023179 <400> 1198
Азр ТТг Агд РТе С1п А1а Зег 1 5 <210> 1199 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1199
Азр ТТг Агд РТе С1п Зег Зег 1 5 <210> 1200 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1200
Азр ТТг Агд РТе С1п Ъуз Зег 1 5 <210> 1201 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2
- 597 023179 <400> 1201
Азр ТНг МеН Туг Ъеи ТНг Бег 1 5 <210> 1202 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1202
Азр ТНг МеН Туг Ъеи Азр Бег 1 5 <210> 1203 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1203
Азр ТНг МеН Туг Нтз А1а Бег 1 5 <210> 1204 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1204
- 598 023179
Азр ТНг МеЪ Туг Нтз Зег Зег 1 5 <210> 1205 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1205
Азр ТНг МеЪ Туг Нтз Ъуз Зег 1 5 <210> 1206 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1206
Азр ТНг МеЪ Туг Нтз Агд Зег 1 5 <210> 1207 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1207
Азр ТНг МеЪ Туг Нтз Нтз Зег 1 5
- 599 023179 <210> 1208 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1208
Азр ТНг МеН Туг Нтз Рго Бег 1 5 <210> 1209 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЪК2 <400> 1209
Азр ТНг МеН Туг Нтз ТНг Бег 1 5 <210> 1210 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЪК2 <400> 1210
Азр ТНг МеН Туг Нтз Азр Бег 1 5
- 600 023179 <210> 1211 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ 0ΌΚ2 <400> 1211
Азр ТНг Ме/ Туг С1п Туз Бег 1 5 <210> 1212 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ 0ΌΚ2 <400> 1212
Азр ТНг Ме/ Туг С1п Агд Бег 1 5 <210> 1213 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ 0ΌΚ2 <400> 1213
Азр ТНг Ме/ Туг С1п Нтз Бег 1 5 <210> 1214 <211> 7
- 601 023179 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СЕЖ2 <400> 1214
Азр ТЬг МеС Туг С1п Рго Зег 1 5 <210> 1215 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЕ СЕЖ2 <400> 1215
Азр ТЬг МеС Туг С1п ТЬг Зег 1 5 <210> 1216 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЕ СЕЖ2 <400> 1216
Азр ТЬг МеС Туг С1п Азр Зег 1 5 <210> 1217 <211> 7 <212> белок
- 602 023179
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ ΟΌΚ2
<400> 1217
Азр ТАг МеЛ РАе Теи А1а Зег 1 5
<210> 1218
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ ΟΌΚ2
<400> 1218
Азр ТАг МеЛ РАе Теи Зег Зег 1 5
<210> 1219
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ ΟΌΚ2
<400> 1219
Азр ТАг МеЛ РАе Теи Туз Зег 1 5
<210> 1220
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
- 603 023179 <220>
<223> νΕ СЕЖ2
<400> 1220
Азр ТНг МеЕ РНе Ееи Агд Бег 1 5
<210> 1221
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΕ СЕЖ2
<400> 1221
Азр ТНг МеЕ РНе Ееи НЬз Бег 1 5
<210> 1222
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΕ СЕЖ2
<400> 1222
Азр ТНг МеЕ РНе Ееи Рго Бег 1 5
<210> 1223
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΕ СЕЖ2
- 604 023179 <400> 1223
Азр ТНг МеН РНе Ъеи ТНг Зег 1 5
<210> 1224
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УГ СЪК2
<400> 1224
Азр ТНг МеН РНе Геи Азр Зег 1 5
<210> 1225
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1225
Азр ТНг МеН РНе Нтз А1а Зег 1 5
<210> 1226
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
- 605 023179 <400> 1226
Азр ТАг МеА РАе Нтз Зег Зег 1 5
<210> 1227
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1227
Азр ТАг МеА РАе Нтз Ъуз Зег 1 5
<210> 1228
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1228
Азр ТАг МеА РАе Нтз Агд Зег 1 5
<210> 1229
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1229
Азр ТАг МеА РАе Нтз Нтз Зег
- 606 023179
<210> 1230
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 1230
Азр ТНг МеН РНе Нтз Рго Бег 1 5
<210> 1231
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 1231
Азр ТНг МеН РНе Нтз ТНг Бег 1 5
<210> 1232
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 1232
Азр ТНг МеН РНе Нтз Азр Бег 1 5
- 607 023179
<210> 1233
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 1233
Азр ТНг МеН РНе С1п А1а Зег 1 5
<210> 1234
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 1234
Азр ТНг МеН РНе С1п Зег Зег 1 5
<210> 1235
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 1235
Азр ТНг МеН РНе С1п Вуз Зег 1 5
- 608 023179 <210> 1236 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1236
Азр ТАг ^уз Туг Ьеи ТАг Зег 1 5 <210> 1237 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1237
Азр ТАг Ьуз Туг Ьеи Азр Зег 1 5 <210> 1238 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1238
Азр ТАг Ьуз Туг Нтз А1а Зег 1 5 <210> 1239 <211> 7
- 609 023179 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 1239
Азр ТНг Туз Туг Нтз Зег Зег 1 5 <210> 1240 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 1240
Азр ТНг Туз Туг Нтз Туз Зег 1 5 <210> 1241 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 1241
Азр ТНг Туз Туг Нтз Агд Зег 1 5 <210> 1242 <211> 7 <212> белок
- 610 023179
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1242
Азр ТНг Ъуз Туг Нтз
1 5
Нтз Бег последовательность
<210> 1243
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1243
Азр ТНг Ъуз Туг Нтз
1 5
Рго Бег последовательность
<210> 1244
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1244
Азр ТНг Ъуз Туг Нтз
1 5
ТНг Бег последовательность
<210> 1245
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственна
последовательность
- 611 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1245
Азр ТНг Ъуз Туг Нтз Азр Бег 1 5 <210> 1246 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1246
Азр ТНг Ъуз Туг С1п А1а Бег 1 5 <210> 1247 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1247
Азр ТНг Ъуз Туг С1п Бег Бег 1 5 <210> 1248 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
- 612 023179 <223> УЪ СЪК2 <400> 1248
Азр ТНг Туз Туг С1п Туз Бег 1 5 <210> 1249 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1249
Азр ТНг Ъуз Туг С1п Агд Бег 1 5 <210> 1250 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЪК2 <400> 1250
Азр ТНг Туз Туг С1п Нтз Бег 1 5 <210> 1251 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2
- 613 023179 <400> 1251
Азр ТТг Ъуз Туг С1п Рго Зег 1 5 <210> 1252 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1252
Азр ТТг Ъуз Туг С1п ТТг Зег 1 5 <210> 1253 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1253
Азр ТТг Ъуз Туг С1п Азр Зег 1 5 <210> 1254 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1254
Азр ТТг Ъуз РТе Ъеи А1а Зег
- 614 023179
5 <210> 1255 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1255
Азр ТНг Ъуз РНе Ъеи Зег Зег 1 5 <210> 1256 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1256
Азр ТНг Ъуз РНе Ъеи Ъуз Зег 1 5 <210> 1257 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1257
Азр ТНг Ъуз РНе Ъеи Агд Зег 1 5
- 615 023179
<210> 1258
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> ντ 0ΌΚ2
<400> 1258
Азр ТНг Туз РНе Теи
1 5
Нтз Бег последовательность
<210> 1259
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> ντ 0ΌΚ2
<400> 1259
Азр ТНг Туз РНе Теи
1 5
Рго Бег последовательность
<210> 1260
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> ντ 0ΌΚ2
<400> 1260
Азр ТНг Туз РНе Теи
1 5
ТНг Бег последовательность
- 616 023179 <210> 1261 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СЕЖ2 <400> 1261
Азр ТЬг Ьуз РЬе Ьеи Азр Зег 1 5 <210> 1262 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЬ СЕЖ2 <400> 1262
Азр ТЬг Ьуз РЬе Нтз А1а Зег 1 5 <210> 1263 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЬ СЕЖ2 <400> 1263
Азр ТЬг Ьуз РЬе Нтз Зег Зег 1 5 <210> 1264
- 617 023179 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 1264
Азр ТАг Туз РАе Нтз Туз Зег 1 5 <210> 1265 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 1265
Азр ТАг Туз РАе Нтз Агд Зег 1 5 <210> 1266 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 1266
Азр ТАг Туз РАе Нтз Нтз Зег 1 5 <210> 1267 <211> 7
- 618 023179 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΕ СЕЖ2 <400> 1267
Азр ТНг Еуз РНе НЬз Рго Бег 1 5 <210> 1268 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΕ СЕЖ2 <400> 1268
Азр ТНг Еуз РНе НЬз ТНг Бег 1 5 <210> 1269 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΕ СЕЖ2 <400> 1269
Азр ТНг Еуз РНе НЬз Азр Бег <210> 1270 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность
- 619 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1270
Азр ТНг Гуз РНе С1п А1а Зег 1 5 <210> 1271 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УГ СЪК2 <400> 1271
Азр ТНг Гуз РНе С1п Зег Зег 1 5 <210> 1272 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1272
Азр ТНг Ъуз РНе С1п Гуз Зег 1 5 <210> 1273 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
- 620 023179
<223> УЪ СЪР2
<400> 1273 Азр ТАг Ъеи Туг Ъеи
1 5
ТАг Зег
<210> 1274
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1274
Азр ТАг Ъеи Туг Ъеи
1 5
Азр Зег последовательность
<210> 1275
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1275
Азр ТАг Ъеи Туг Нтз
1 5
А1а Зег последовательность
<210> 1276
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪР2
последовательность
- 621 023179 <400> 1276
Азр ТАг Ьеи Туг Нтз Зег Зег 1 5 <210> 1277 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1277
Азр ТАг Ьеи Туг Нтз Ьуз Зег 1 5 <210> 1278 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1278
Азр ТАг Ьеи Туг Нтз Агд Зег 1 5 <210> 1279 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1279
- 622 023179
Азр ТНг Ьеи Туг Нтз Нтз Бег 1 5 <210> 1280 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 1280
Азр ТНг ^еи Туг Нтз Рго Бег 1 5 <210> 1281 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 1281
Азр ТНг Ьеи Туг Нтз ТНг Бег 1 5 <210> 1282 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 1282
Азр ТНг Ьеи Туг Нтз Азр Бег
- 623 023179
5 <210> 1283 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СИК2 <400> 1283
Азр ТНг Теи Туг С1п А1а Зег 1 5 <210> 1284 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СИК2 <400> 1284
Азр ТНг Теи Туг С1п Зег Зег 1 5 <210> 1285 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СИК2 <400> 1285
Азр ТНг Теи Туг С1п Туз Зег 1 5
- 624 023179 <210> 1286 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1286
Азр ТНг Вей Туг С1п Агд Зег 1 5 <210> 1287 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1287
Азр ТНг Вей Туг С1п Нтз Зег 1 5 <210> 1288 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1288
Азр ТНг Вей Туг С1п Рго Зег 1 5 <210> 1289
- 625 023179
<211> <212> <213> 7 белок Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1289
Азр ТНг Ъеи Туг С1п
1 5
ТНг Бег последовательность
<210> 1290
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1290
Азр ТНг Ъеи Туг С1п
1 5
Азр Бег последовательность
<210> 1291
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪР2
последовательность <400> 1291
Азр ТНг Ъеи РНе Ъеи 1 5
А1а Бег <210> 1292 <211> 7 <212> белок
- 626 023179
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1292
Азр ТНг Ъеи РНе Ъеи Бег Бег 1 5
<210> 1293
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1293
Азр ТНг Ъеи РНе Ъеи Ъуз Бег 1 5
<210> 1294
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1294
Азр ТНг Ъеи РНе Ъеи Агд Бег 1 5
<210> 1295
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
- 627 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1295
Азр ТНг Ъеи РНе Ъеи Нтз Зег 1 5
<210> 1296
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1296
Азр ТНг Ъеи РНе Ъеи Рго Зег 1 5
<210> 1297
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1297
Азр ТНг Ъеи РНе Ъеи ТНг Зег 1 5
<210> 1298
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
- 628 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1298
Азр ТНг Ъеи РНе Теи Азр Бег 1 5
<210> 1299
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЪК2
<400> 1299
Азр ТНг Теи РНе Нтз А1а Бег 1 5
<210> 1300
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЪК2
<400> 1300
Азр ТНг Ъеи РНе Нтз Бег Бег 1 5
<210> 1301
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
- 629 023179 <400> 1301
Азр ТЬг Беи РЬе Нтз Ьуз Зег 1 5
<210> 1302
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЬ СЕЖ2
<400> 1302
Азр ТЬг Ьеи РЬе Нтз Агд Зег 1 5
<210> 1303
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЬ СЕЖ2
<400> 1303
Азр ТЬг Ьеи РЬе Нтз Нтз Зег 1 5
<210> 1304
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЬ СЕЖ2
<400> 1304
- 630 023179
Азр ТТг Ъеи РТе Нтз Рго Зег 1 5
<210> 1305
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1305
Азр ТТг Ъеи РТе Нтз ТТг Зег 1 5
<210> 1306
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1306
Азр ТТг Ъеи РТе Нтз Азр Зег 1 5
<210> 1307
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1307
Азр ТТг Ъеи РТе С1п А1а Зег
5
- 631 023179
<210> 1308
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ντ ΟΌΚ2
<400> 1308
Азр ТНг Теи РНе С1п Бег Бег 1 5
<210> 1309
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ντ ΟΌΚ2
<400> 1309
Азр ТНг Теи РНе С1п Туз Бег 1 5
<210> 1310
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ντ ΟΌΚ2
<400> 1310
Азр ТНг Бег РНе С1п Агд Бег
5
- 632 023179
<210> 1311
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΕ СЕЖ2
<400> 1311
Азр ТНг Бег РНе С1п НЬз Бег 1 5
<210> 1312
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΕ СЕЖ2
<400> 1312
Азр ТНг Бег РНе С1п Рго Бег 1 5
<210> 1313
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΕ СЕЖ2
<400> 1313
Азр ТНг Бег РНе С1п ТНг Бег
5
- 633 023179
<210> 1314
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ 0ΌΚ2
<400> 1314
Азр ТАг Зег РАе С1п Азр Зег 1 5
<210> 1315
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ 0ΌΚ2
<400> 1315
Азр ТАг Зег Теи Теи Зег Зег 1 5
<210> 1316
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ 0ΌΚ2
<400> 1316
Азр ТАг Зег Теи Теи Туз Зег 1 5
<210> 1317
<211> 7
<212> белок
- 634 023179
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УГ СЪК2
<400> 1317
Азр ТНг Зег Ъеи Геи Агд Зег 1 5
<210> 1318
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1318
Азр ТНг Зег Геи Ъеи Нтз Зег 1 5
<210> 1319
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1319
Азр ТНг Зег Ъеи Геи Рго Зег 1 5
<210> 1320
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
- 635 023179 <220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1320
Азр ТАг Зег Ъеи Ъеи ТАг Зег 1 5
<210> 1321
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1321
Азр ТАг Зег Ъеи Нтз А1а Зег 1 5
<210> 1322
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1322
Азр ТАг Зег Ъеи Нтз Зег Зег 1 5
<210> 1323
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
- 636 023179
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 1323
Азр ТАг Зег Ьеи Нтз Ьуз Зег 1 5
<210> 1324
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 1324
Азр ТАг Зег Ьеи Нтз Агд Зег 1 5
<210> 1325
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 1325
Азр ТАг Зег Ьеи Нтз Нтз Зег 1 5
<210> 1326
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
- 637 023179 <400> 1326
Азр ТНг Бег Ьеи Нтз Рго Бег 1 5
<210> 1327
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ 0ΌΚ2
<400> 1327
Азр ТНг Бег Ьеи Нтз ТНг Бег 1 5
<210> 1328
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ 0ΌΚ2
<400> 1328
Азр ТНг Бег Ьеи Нтз Азр Бег 1 5
<210> 1329
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΣ 0ΌΚ2
- 638 023179 <400> 1329
Азр ТНг Зег Вей С1п А1а Зег 1 5
<210> 1330
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 1330
Азр ТНг Зег Вей С1п Зег Зег 1 5
<210> 1331
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 1331
Азр ТНг Зег Вей С1п Вуз Зег 1 5
<210> 1332
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УВ СЕ>К2
<400> 1332
- 639 023179
Азр ТНг Бег Ъеи С1п Агд Бег 1 5
<210> 1333
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1333
Азр ТНг Бег Ъеи С1п Нтз Бег 1 5
<210> 1334
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1334
Азр ТНг Бег Ъеи С1п Рго Бег 1 5
<210> 1335
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1335
Азр ТНг Бег Ъеи С1п ТНг Бег 1 5
- 640 023179
<210> 1336
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 1336
Азр ТНг Зег Теи С1п Азр Зег 1 5
<210> 1337
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 1337
Азр ТНг РНе РНе С1п Агд Зег 1 5
<210> 1338
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 1338
Азр ТНг РНе РНе С1п Нтз Зег 1 5
- 641 023179
<210> 1339
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1339
Азр ТНг РНе РНе С1п Рго Бег 1 5
<210> 1340
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1340
Азр ТНг РНе РНе С1п ТНг Бег 1 5
<210> 1341
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1341
Азр ТНг РНе РНе С1п Азр Бег 1 5 <210> 1342 <211> 7
- 642 023179
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1342
Азр ТНг РНе Ъеи Ъеи А1а Зег 1 5
<210> 1343
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1343
Азр ТНг РНе Ъеи Ъеи Зег Зег 1 5
<210> 1344
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1344
Азр ТНг РНе Ъеи Ъеи Ъуз Зег 1 5
<210> 1345
<211> 7
<212> белок
- 643 023179
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЪК2
<400> 1345
Азр ТНг РНе Ъеи Теи Агд Бег 1 5
<210> 1346
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1346
Азр ТНг РНе Теи Ъеи Нтз Бег 1 5
<210> 1347
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1347
Азр ТНг РНе Ъеи Теи Рго Бег 1 5
<210> 1348
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
- 644 023179 <220>
<223> УЬ СЕЖ2
<400> 1348
Азр ТЬг РЬе Беи Ьеи ТЬг Зег 1 5
<210> 1349
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЬ СЕЖ2
<400> 1349
Азр ТЬг РЬе Ьеи Ьеи Азр Зег 1 5
<210> 1350
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЬ СЕЖ2
<400> 1350
Азр ТЬг РЬе Ьеи Нтз А1а Зег 1 5
<210> 1351
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЬ СЕЖ2
- 645 023179 <400> 1351
Азр ТТг РТе Ъеи Нтз Зег Зег 1 5
<210> 1352
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1352
Азр ТТг РТе Ъеи Нтз Ъуз Зег 1 5
<210> 1353
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1353
Азр ТТг РТе Ъеи Нтз Агд Зег 1 5
<210> 1354
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
- 646 023179 <400> 1354
Азр ТНг РНе Ъеи Нтз Нтз Зег 1 5
<210> 1355
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1355
Азр ТНг РНе Геи Нтз Рго Зег 1 5
<210> 1356
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1356
Азр ТНг РНе Геи Нтз ТНг Зег 1 5
<210> 1357
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УГ СЪК2
<400> 1357
Азр ТНг РНе Геи Нтз Азр Зег
- 647 023179
<210> 1358
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΕ СЕЖ2
<400> 1358
Азр ТНг РНе Ееи С1п А1а Бег 1 5
<210> 1359
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΕ СЕЖ2
<400> 1359
Азр ТНг РНе Ееи С1п Бег Бег 1 5
<210> 1360
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΕ СЕЖ2
<400> 1360
Азр ТНг РНе Ееи С1п Еуз Бег 1 5
- 648 023179
<210> 1361
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1361
Азр ТАг РАе Ъеи С1п Агд Зег 1 5
<210> 1362
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1362
Азр ТАг РАе Ъеи С1п Нтз Зег 1 5
<210> 1363
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1363
Азр ТАг РАе Ъеи С1п Рго Зег 1 5
- 649 023179 <210> 1364 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 1364
Азр ТАг РАе Теи С1п ТАг Зег 1 5 <210> 1365 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 1365
Азр ТАг РАе Теи С1п Азр Зег 1 5 <210> 1366 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 1366
Азр ТАг Туг РАе С1п Агд Зег 1 5 <210> 1367 <211> 7
- 650 023179 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СИК2 <400> 1367
Азр ТНг Туг РНе С1п Нтз Бег 1 5 <210> 1368 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СИК2 <400> 1368
Азр ТНг Туг РНе С1п Рго Бег 1 5 <210> 1369 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ СИК2 <400> 1369
Азр ТНг Туг РНе С1п ТНг Бег 1 5 <210> 1370 <211> 7 <212> белок
- 651 023179
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 1370
Азр ТАг Туг РАе С1п
1 5
Азр Зег последовательность
<210> 1371
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 1371
Азр ТАг Туг Ьеи Ьеи
1 5
А1а Зег последовательность
<210> 1372
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 1372
Азр ТАг Туг Ьеи Ьеи
1 5
Зег Зег последовательность
<210> 1373
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственна
последовательность
- 652 023179 <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 1373
Азр ТНг Туг ^еи ^еи ^уз Бег 1 5 <210> 1374 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 1374
Азр ТНг Туг ^еи ^еи Агд Бег 1 5 <210> 1375 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ 0ΌΚ2 <400> 1375
Азр ТНг Туг ^еи ^еи Нтз Бег 1 5 <210> 1376 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
- 653 023179 <223> УВ СЕ>К2 <400> 1376
Азр ТНг Туг Вей Вей Рго Зег 1 5 <210> 1377 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1377
Азр ТНг Туг Вей Вей ТНг Зег 1 5 <210> 1378 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1378
Азр ТНг Туг Вей Вей Азр Зег 1 5 <210> 1379 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2
- 654 023179 <400> 1379
Азр ТНг Туг Ъеи Нтз А1а Зег 1 5 <210> 1380 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1380
Азр ТНг Туг Ъеи Нтз Зег Зег 1 5 <210> 1381 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1381
Азр ТНг Туг Ъеи Нтз Ъуз Зег 1 5 <210> 1382 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1382
Азр ТНг Туг Ъеи Нтз Агд Зег
- 655 023179
5 <210> 1383 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1383
Азр ТНг Туг Ъеи Нтз Нтз Бег 1 5 <210> 1384 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1384
Азр ТНг Туг Ъеи Нтз Рго Бег 1 5 <210> 1385 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1385
Азр ТНг Туг Ъеи Нтз ТНг Бег 1 5
- 656 023179
<210> 1386
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1386
Азр ТНг Туг Ъеи Нтз
1 5
Азр Бег последовательность
<210> 1387
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1387
Азр ТНг Туг Ъеи С1п
1 5
А1а Бег последовательность
<210> 1388
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1388
Азр ТНг Туг Ъеи С1п
1 5
последовательность
- 657 023179 <210> 1389 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 1389
Азр ТНг Туг Теи С1п Туз Зег 1 5 <210> 1390 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 1390
Азр ТНг Туг Теи С1п Агд Зег 1 5 <210> 1391 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ 0ΌΚ2 <400> 1391
Азр ТНг Туг Теи С1п Нтз Зег 1 5 <210> 1392
- 658 023179 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1392
Азр ТНг Туг Теи С1п Рго Бег 1 5 <210> 1393 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СЪК2 <400> 1393
Азр ТНг Туг Теи С1п ТНг Бег 1 5 <210> 1394 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1394
Азр ТНг Туг Ъеи С1п Азр Бег 1 5 <210> 1395 <211> 7
- 659 023179 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УБ СЕЖ2 <400> 1395
Азр ТЬг Агд РЬе С1п Агд Зег 1 5 <210> 1396 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЬ СЕЖ2 <400> 1396
Азр ТЬг Агд РЬе С1п Нтз Зег 1 5 <210> 1397 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЬ СЕЖ2 <400> 1397
Азр ТЬг Агд РЬе С1п Рго Зег <210> 1398 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность
- 660 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1398
Азр ТТг Агд РТе С1п ТТг Зег 1 5 <210> 1399 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1399
Азр ТТг Агд РТе С1п Азр Зег 1 5 <210> 1400 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪК2 <400> 1400
Азр ТТг Агд Ъеи Ъеи А1а Зег 1 5 <210> 1401 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
- 661 023179
<223> УЪ СЪК2
<400> 1401
Азр ТНг Агд Геи Геи
1 5
<210> 1402
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1402
Азр ТНг Агд Ъеи Ъеи
1 5
<210> 1403
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УГ СЪК2
<400> 1403
Азр ТНг Агд Геи Геи
1 5
<210> 1404
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УГ СЪК2
Ъуз Зег
Агд Зег последовательность последовательность последовательность
- 662 023179 <400> 1404
Азр ТАг Агд Ъеи Ъеи Нтз Зег 1 5 <210> 1405 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1405
Азр ТАг Агд Ъеи Ъеи Рго Зег 1 5 <210> 1406 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1406
Азр ТАг Агд Ъеи Ъеи ТАг Зег 1 5 <210> 1407 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1407
- 663 023179
Азр ТАг Агд Теи Теи Азр Зег 1 5 <210> 1408 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 1408
Азр ТАг Агд Теи Нтз А1а Зег 1 5 <210> 1409 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 1409
Азр ТАг Агд Теи Нтз Зег Зег 1 5 <210> 1410 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ ΟΌΚ2 <400> 1410
Азр ТАг Агд Теи Нтз Туз Зег
- 664 023179
5 <210> 1411 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΕ СЕЖ2 <400> 1411
Азр ТНг Агд Ееи НЬз Агд Бег 1 5 <210> 1412 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΕ СЕЖ2 <400> 1412
Азр ТНг Агд Ееи НЬз НЬз Бег 1 5 <210> 1413 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΕ СЕЖ2 <400> 1413
Азр ТНг Агд Ееи НЬз Рго Бег 1 5
- 665 023179 <210> 1414 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ 0ΌΚ2 <400> 1414
Азр ТНг Агд Теи Нтз ТНг Бег 1 5 <210> 1415 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ 0ΌΚ2 <400> 1415
Азр ТНг Агд Теи Нтз Азр Бег 1 5 <210> 1416 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ 0ΌΚ2 <400> 1416
Азр ТНг Агд Теи С1п А1а Бег 1 5 <210> 1417
- 666 023179
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 1417
Азр ТАг Агд Ьеи С1п
1 5
Зег Зег последовательность
<210> 1418
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
<400> 1418
Азр ТАг Агд Ьеи С1п
1 5
Ьуз Зег последовательность
<210> 1419
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ СЕ>К2
последовательность <400> 1419
Азр ТАг Агд Ьеи С1п 1 5
Агд Зег <210> 1420 <211> 7 <212> белок
- 667 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1420
Азр ТНг Агд Вей С1п Нтз Зег 1 5 <210> 1421 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1421
Азр ТНг Агд Вей С1п Рго Зег 1 5 <210> 1422 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1422
Азр ТНг Агд Вей С1п ТНг Зег 1 5 <210> 1423 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность
- 668 023179 <220>
<223> νΣ ΟΌΚ2
<400> 1423 Азр ТНг Агд Ьеи С1п
1 5
Азр Бег
<210> 1424
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ ΟΌΚ2
<400> 1424
Азр ТНг МеН РНе С1п
1 5
Агд Бег последовательность
<210> 1425
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> νΣ ΟΌΚ2
<400> 1425
Азр ТНг МеН РНе С1п
1 5
Нтз Бег последовательность
<210> 1426
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственна
последовательность
- 669 023179 <220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1426
Азр ТНг МеН РНе С1п Рго Бег 1 5
<210> 1427
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1427
Азр ТНг МеН РНе С1п ТНг Бег 1 5
<210> 1428
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1428
Азр ТНг МеН РНе С1п Азр Бег 1 5
<210> 1429
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
- 670 023179 <400> 1429
Азр ТНг МеЪ. Ъеи Ъеи А1а Зег 1 5
<210> 1430
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1430
Азр ТНг МеЪ. Ъеи Ъеи Зег Зег 1 5
<210> 1431
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1431
Азр ТНг МеЪ. Ъеи Ъеи Ъуз Зег 1 5
<210> 1432
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1432
- 671 023179
Азр ТАг МеА Ъеи Ъеи Агд Зег 1 5
<210> 1433
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1433
Азр ТАг МеА Ъеи Ъеи Нтз Зег 1 5
<210> 1434
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1434
Азр ТАг МеА Ъеи Ъеи Рго Зег 1 5
<210> 1435
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪР2
<400> 1435
Азр ТАг МеА Ъеи Ъеи ТАг Зег
5
- 672 023179
<210> 1436
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1436
Азр ТНг МеН Ъеи Теи Азр Бег 1 5
<210> 1437
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1437
Азр ТНг МеН Теи Нтз А1а Бег 1 5
<210> 1438
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЪК2
<400> 1438
Азр ТНг МеН Теи Нтз Бег Бег
5
- 673 023179
<210> 1439
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 1439
Азр ТНг МеН Теи Нтз Туз Зег 1 5
<210> 1440
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 1440
Азр ТНг МеН Теи Нтз Агд Зег 1 5
<210> 1441
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 1441
Азр ТНг МеН Теи Нтз Нтз Зег
5
- 674 023179
<210> 1442
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1442
Азр ТНг МеЪ. Ъеи Нтз Рго Бег 1 5
<210> 1443
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1443
Азр ТНг МеЪ. Ъеи Нтз ТНг Бег 1 5
<210> 1444
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1444
Азр ТНг МеЪ. Ъеи Нтз Азр Бег 1 5
<210> 1445
<211> 7
<212> белок
- 675 023179
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УГ СЪК2
<400> 1445
Азр ТНг МеН Ъеи С1п А1а Зег 1 5
<210> 1446
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УГ СЪК2
<400> 1446
Азр ТНг МеН Геи С1п Зег Зег 1 5
<210> 1447
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1447
Азр ТНг МеН Ъеи С1п Ъуз Зег 1 5
<210> 1448
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
- 676 023179 <220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1448
Азр ТТг Меб Ъеи С1п Агд Зег 1 5
<210> 1449
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1449
Азр ТТг Меб Ъеи С1п Нтз Зег 1 5
<210> 1450
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1450
Азр ТТг Меб Ъеи С1п Рго Зег 1 5
<210> 1451
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
- 677 023179 <223> УБ СЕЖ2 <400> 1451
Азр ТЬг МеС Ьеи С1п ТЬг Зег 1 5 <210> 1452 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЬ СЕЖ2 <400> 1452
Азр ТЬг МеС Ьеи С1п Азр Зег 1 5 <210> 1453 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЬ СЕЖ2 <400> 1453
Азр ТЬг Ьуз РЬе С1п Агд Зег 1 5 <210> 1454 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЬ СЕЖ2
- 678 023179 <400> 1454
Азр ТАг Туз РАе С1п Нтз Зег 1 5 <210> 1455 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СИК2 <400> 1455
Азр ТАг Туз РАе С1п Рго Зег 1 5 <210> 1456 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СИК2 <400> 1456
Азр ТАг Туз РАе С1п ТАг Зег 1 5 <210> 1457 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ СИК2
- 679 023179 <400> 1457
Азр ТНг Еуз РНе С1п Азр Бег 1 5 <210> 1458 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΕ СЕЖ2 <400> 1458
Азр ТНг Еуз Ееи Ееи А1а Бег 1 5 <210> 1459 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΕ СЕЖ2 <400> 1459
Азр ТНг Еуз Ееи Ееи Бег Бег 1 5 <210> 1460 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΕ СЕЖ2 <400> 1460
- 680 023179
Азр ТНг Туз Теи Теи Туз Бег 1 5 <210> 1461 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ 0ΌΚ2 <400> 1461
Азр ТНг Туз Теи Теи Агд Бег 1 5 <210> 1462 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ 0ΌΚ2 <400> 1462
Азр ТНг Туз Теи Теи Нтз Бег 1 5 <210> 1463 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ντ 0ΌΚ2 <400> 1463
Азр ТНг Туз Теи Теи Рго Бег 1 5
- 681 023179 <210> 1464 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1464
Азр ТАг Ьуз Ьеи Ьеи ТАг Зег 1 5 <210> 1465 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1465
Азр ТАг Ьуз Ьеи Ьеи Азр Зег 1 5 <210> 1466 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕ>К2 <400> 1466
Азр ТАг Ьуз Ьеи Нтз А1а Зег 1 5
- 682 023179 <210> 1467 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1467
Азр ТНг Вуз Вей Нтз Зег Зег 1 5 <210> 1468 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1468
Азр ТНг Вуз Вей Нтз Вуз Зег 1 5 <210> 1469 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УВ СЕ>К2 <400> 1469
Азр ТНг Вуз Вей Нтз Агд Зег 1 5 <210> 1470 <211> 7
- 683 023179 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1470
Азр ТНг Ъуз Ъеи Нтз Нтз Бег 1 5 <210> 1471 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1471
Азр ТНг Ъуз Ъеи Нтз Рго Бег 1 5 <210> 1472 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1472
Азр ТНг Ъуз Ъеи Нтз ТНг Бег 1 5 <210> 1473 <211> 7 <212> белок
- 684 023179
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1473
Азр ТНг Ъуз Ъеи Нтз
1 5
Азр Зег последовательность
<210> 1474
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1474
Азр ТНг Ъуз Ъеи С1п
1 5
А1а Зег последовательность
<210> 1475
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1475
Азр ТНг Ъуз Ъеи С1п
1 5
Зег Зег последовательность
<210> 1476
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственна
последовательность
- 685 023179 <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1476
Азр ТАг Ъуз Ъеи С1п Ъуз Зег 1 5 <210> 1477 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1477
Азр ТАг Ъуз Ъеи С1п Агд Зег 1 5 <210> 1478 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2 <400> 1478
Азр ТАг Ъуз Ъеи С1п Нтз Зег 1 5 <210> 1479 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УЪ СЪР2
- 686 023179 <400> 1479
Азр ТНг Ьуз Ьеи С1п Рго Бег 1 5 <210> 1480 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ ΟΌΚ2 <400> 1480
Азр ТНг ^уз ^еи С1п ТНг Бег 1 5 <210> 1481 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ ΟΌΚ2 <400> 1481
Азр ТНг ^уз ^еи С1п Азр Бег 1 5 <210> 1482 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ ΟΌΚ2
- 687 023179 <400> 1482
Азр ТНг Ъеи РНе С1п Агд Бег 1 5
<210> 1483
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1483
Азр ТНг Теи РНе С1п Нтз Бег 1 5
<210> 1484
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЪК2
<400> 1484
Азр ТНг Теи РНе С1п Рго Бег 1 5
<210> 1485
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЪК2
<400> 1485
Азр ТНг Ъеи РНе С1п ТНг Бег
- 688 023179
<210> 1486
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 1486
Азр ТНг Теи РНе С1п Азр Зег 1 5
<210> 1487
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 1487
Азр ТНг Теи Теи Теи А1а Зег 1 5
<210> 1488
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 1488
Азр ТНг Теи Теи Теи Зег Зег 1 5
- 689 023179
<210> 1489
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УГ СЪК2
<400> 1489
Азр ТНг Ъеи Геи Геи Ъуз Зег 1 5
<210> 1490
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1490
Азр ТНг Ъеи Геи Геи Агд Зег 1 5
<210> 1491
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1491
Азр ТНг Ъеи Ъеи Геи Нтз Зег 1 5
- 690 023179
<210> 1492
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1492
Азр ТНг Ъеи Ъеи Ъеи Рго Бег 1 5
<210> 1493
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1493
Азр ТНг Ъеи Ъеи Ъеи ТНг Бег 1 5
<210> 1494
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1494
Азр ТНг Ъеи Ъеи Нтз А1а Бег 1 5 <210> 1495 <211> 7
- 691 023179
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1495
Азр ТТг Ъеи Ъеи Нтз Зег Зег 1 5
<210> 1496
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1496
Азр ТТг Ъеи Ъеи Нтз Ъуз Зег 1 5
<210> 1497
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УЪ СЪК2
<400> 1497
Азр ТТг Ъеи Ъеи Нтз Агд Зег 1 5
<210> 1498
<211> 7
<212> белок
- 692 023179
<213> Искусственная
<220>
<223> УЬ СЕЖ2
<400> 1498
Азр ТЬг Беи Ьеи Нтз
1 5
Нтз Зег последовательность
<210> 1499
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЬ СЕЖ2
<400> 1499
Азр ТЬг Ьеи Ьеи Нтз
1 5
Рго Зег последовательность
<210> 1500
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная
<220>
<223> УЬ СЕЖ2
<400> 1500
Азр ТЬг Ьеи Ьеи Нтз
1 5
ТЬг Зег последовательность
<210> 1501
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственна
последовательность
- 693 023179 <220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 1501
Азр ТАг Теи Теи Нтз Азр Зег 1 5
<210> 1502
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 1502
Азр ТАг Теи Теи С1п А1а Зег 1 5
<210> 1503
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> УТ СЕ>К2
<400> 1503
Азр ТАг Теи Теи С1п Зег Зег 1 5
<210> 1504
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
- 694 023179
<223> νΕ СЕЖ2
<400> 1504
Азр ТНг Ееи Ееи С1п Еуз Бег 1 5
<210> 1505
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΕ СЕЖ2
<400> 1505
Азр ТНг Ееи Ееи С1п Агд Бег 1 5
<210> 1506
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΕ СЕЖ2
<400> 1506
Азр ТНг Ееи Ееи С1п НЬз Бег 1 5
<210> 1507
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> νΕ СЕЖ2
- 695 023179 <400> 1507
Азр ТНг Теи Теи С1п Рго Бег 1 5
<210> 1508
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ντ ΟΌΚ2
<400> 1508
Азр ТНг Теи Теи С1п ТНг Бег 1 5
<210> 1509
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ντ ΟΌΚ2
<400> 1509
Азр ТНг Теи Теи С1п Азр Бег 1 5
<210> 1510
<211> 9
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ντ СЕЖ3
<400> 1510
РНе С1п С1у Бег Туг Туг Рго РНе ТНг
- 696 023179
5 <210> 1511 <211> 9 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> νΣ СЕЖ3 <400> 1511
РАе С1п С1у Зег Тгр Туг Рго РАе ТАг 1 5 <210> 1512 <211> 18 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Линкер <400> 1512
С1у С1у Зег Зег Агд Зег Зег Зег Зег С1у С1у С1у С1у Зег С1у С1у 1 5 10 15
С1у С1у <210> 1513 <211> 15 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Линкер <400> 1513
- 697 Зег
С1у Зег С1у Агд 1 Зег 5 С1у С1у С1у С1у Зег 10 С1у С1у С1у С1у
<210> 1514
<211> 14
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Линкер
<400> 1514
С1и С1у Вуз Зег Зег С1у Зег С1у Зег С1и Зег Вуз Зег ТНг
1 5 10
<210> 1515
<211> 15
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Линкер
<400> 1515
С1и С1у Вуз Зег Зег С1у Зег С1у Зег С1и Зег Вуз Зег ТНг
1 5 10
<210> 1516
<211> 14
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Линкер
<400> 1516
С1и С1у Вуз Зег Зег С1у Зег С1у Зег С1и Зег Вуз Уа1 Азр
С1п
- 698 023179
5 10 <210> 1517 <211> 14 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Линкер <400> 1517
С1у Бег ТНг Бег С1у Бег С1у Ъуз Бег Бег С1и С1у Ъуз С1у 1 5 10 <210> 1518 <211> 18 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Линкер <400> 1518
Ъуз С1и Бег С1у Бег Уа1 Бег Бег С1и С1п Ъеи А1а С1п РНе Агд Бег 1 5 10 15
Ъеи Азр <210> 1519 <211> 16 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Линкер <400> 1519
С1и Бег С1у Бег Уа1 Бег Бег С1и С1и Ъеи А1а РНе Агд Бег Ъеи Азр
- 699 023179
5 10 15 <210> 1520 <211> 298 <212> белок <213> Респираторно-синцитиальный вирус человека <400> 1520
МеА Зег Ъуз ТАг Ъуз Азр С1п Агд ТАг А1а Ъуз ТАг Ъеи С1и Агд ТАг
1 5 10 15
Тгр Азр ТАг Ъеи Азп Нтз Ъеи Ъеи РАе 11е Зег Зег Суз Ъеи Туг Ъуз
20 25 30
Ъеи Азп Ъеи Ъуз Зег 11е А1а С1п 11е ТАг Ъеи Зег 11е Ъеи А1а МеА
35 40 45
11е 11е Зег ТАг Зег Ъеи 11е 11е А1а А1а 11е 11е РАе 11е А1а Зег
50 55 60
А1а Азп Нтз Ъуз Уа1 ТАг Ъеи ТАг ТАг А1а 11е 11е С1п Азр А1а ТАг
65 70 75 80
Азп С1п 11е Ъуз Азп ТАг ТАг Рго ТАг Туг Ъеи ТАг С1п Азп Рго С1п
85 90 95
Ъеи С1у 11е Зег РАе Зег Азп Ъеи Зег С1и ТАг ТАг Зег С1п Рго 11е
100 105 110
ТАг 11е Ъеи А1а Зег ТАг ТАг Рго Зег А1а С1и Зег ТАг Рго С1п Зег
115 120 125
ТАг ТАг Уа1 Ъуз ТАг Ъуз Азп ТАг ТАг ТАг ТАг С1п 11е С1п Рго Зег
130 135 140
Ъуз Зег ТАг ТАг Ъуз С1п Агд С1п Азп Ъуз Рго С1п Азп Ъуз Рго Азп
145 150 155 160
Азп Азр РАе Нтз РАе С1и Уа1 РАе Азп РАе Уа1 Рго Суз Зег 11е Суз
165 170 175
Зег Азп Азп Рго ТАг Суз Тгр А1а 11е Суз Ъуз Агд 11е Рго Азп Ъуз
180 185 190
Ъуз Рго С1у Ъуз Ъуз ТАг ТАг ТАг Ъуз Рго ТАг Ъуз Ъуз Рго ТАг 11е
195 200 205
Ъуз ТАг ТАг Ъуз Ъуз Азр Ъеи Ъуз Рго С1п ТАг ТАг Ъуз Зег Ъуз С1и
210 215 220
Уа1 Ъеи ТАг ТАг Ъуз Рго ТАг С1и Ъуз Рго ТАг 11е Азп ТАг ТАг Ъуз
225 230 235 240
ТАг Азп 11е Агд ТАг ТАг Ъеи Ъеи 11е Зег Азп ТАг ТАг С1у Азп Рго
- 700
245 250 255
С1и Нтз ТНг Зег С1п Ъуз С1и ТНг Ъеи Нтз Зег ТНг ТНг Зег С1и С1у
260 265 270
Азп Рго Зег Рго Зег С1п Уа1 Туг ТНг ТНг Зег С1и Туг Ъеи Зег С1п
275 280 285
Зег Ъеи Зег Рго Зег Азп ТНг ТНг Туг Туг
290 295 <210> 1521 <211> 2165 <212> белок <213> Респираторно-синцитиальный вирус человека <400> 1521
МеЪ Азр Рго 11е 11е Азп С1у Азп Зег А1а Азп Уа1 Туг Ъеи ТНг Азр
1 5 10 15
Зег Туг Ъеи Ъуз С1у Уа1 11е Зег РНе Зег С1и Суз Азп А1а Ъеи С1у
20 25 30
Зег Туг 11е РНе Азп С1у Рго Туг Ъеи Ъуз Азп Азр Туг ТНг Азп Ъеи
35 40 45
11е Зег Агд С1п Азп Рго Ъеи 11е С1и Нтз МеЪ Азп Ъеи Ъуз Ъуз Ъеи
50 55 60
Азп 11е ТНг С1п Зег Ъеи 11е Зег Ъуз Туг Нтз Ъуз С1у С1и 11е Ъуз
65 70 75 80
Ъеи С1и С1и Рго ТНг Туг РНе С1п Зег Ъеи Ъеи МеЪ ТНг Туг Ъуз Зег
85 90 95
МеЪ ТНг Зег Зег С1и С1п 11е А1а ТНг ТНг Азп Ъеи Ъеи Ъуз Ъуз 11е
100 105 110
11е Агд Агд А1а 11е С1и 11е Зег Азр Уа1 Ъуз Уа1 Туг А1а 11е Ъеи
115 120 125
Азп Ъуз Ъеи С1у Ъеи Ъуз С1и Ъуз Азр Ъуз 11е Ъуз Зег Азп Азп С1у
130 135 140
С1п Азр С1и Азр Азп Зег Уа1 11е ТНг ТНг 11е 11е Ъуз Азр Азр 11е
145 150 155 160
Ъеи Зег А1а Уа1 Ъуз Азр Азп С1п Зег Нтз Ъеи Ъуз А1а Азр Ъуз Азп
165 170 175
Нтз Зег ТНг Ъуз С1п Ъуз Азр ТНг 11е Ъуз ТНг ТНг Ъеи Ъеи Ъуз Ъуз
180 185 190
Ъеи МеЪ Суз Зег МеЪ С1п Нтз Рго Рго Зег Тгр Ъеи 11е Нтз Тгр РНе
195 200 205
- 701
Азп Теи 210 Туг ТНг Туз Теи Азп 215 Азп 11е Теи ТНг С1п 220 Туг Агд Бег Азп
С1и Уа1 Ъуз Азп Нтз С1у РНе ТНг Теи 11е Азр Азп С1п ТНг Теи Бег
225 230 235 240
С1у РНе С1п РНе 11е Ъеи Азп С1п Туг С1у Суз 11е Уа1 Туг Нтз Ъуз
245 250 255
С1и Теи Туз Агд 11е ТНг Уа1 ТНг ТНг Туг Азп С1п РНе Ъеи ТНг Тгр
260 265 270
Ъуз Азр 11е Бег Ъеи Бег Агд Ъеи Азп Уа1 Суз Теи 11е ТНг Тгр 11е
275 280 285
Бег Азп Суз Ъеи Азп ТНг Теи Азп Ъуз Бег Теи С1у Ъеи Агд Суз С1у
290 295 300
РНе Азп Азп Уа1 11е Ъеи ТНг С1п Ъеи РНе Ъеи Туг С1у Азр Суз 11е
305 310 315 320
Теи Ъуз Теи РНе Нтз Азп С1и С1у РНе Туг 11е 11е Туз С1и Уа1 С1и
325 330 335
С1у РНе 11е МеН Бег Теи 11е Ъеи Азп 11е ТНг С1и С1и Азр С1п РНе
340 345 350
Агд Ъуз Агд РНе Туг Азп Бег МеН Теи Азп Азп 11е ТНг Азр А1а А1а
355 360 365
Азп Туз А1а С1п Ъуз Азп Теи Теи Бег Агд Уа1 Суз Нтз ТНг Теи Теи
370 375 380
Азр Туз ТНг Уа1 Бег Азр Азп 11е 11е Азп С1у Агд Тгр 11е 11е Теи
385 390 395 400
Ъеи Бег Ъуз РНе Теи Туз Ъеи 11е Туз Ъеи А1а С1у Азр Азп Азп Ъеи
405 410 415
Азп Азп Ъеи Бег С1и Ъеи Туг РНе Ъеи РНе Агд 11е РНе С1у Нтз Рго
420 425 430
МеН Уа1 Азр С1и Агд С1п А1а МеН Азр А1а Уа1 Туз 11е Азп Суз Азп
435 440 445
С1и ТНг Туз РНе Туг Ъеи Ъеи Бег Бег Ъеи Бег МеН Теи Агд С1у А1а
450 455 460
РНе 11е Туг Агд 11е 11е Туз С1у РНе Уа1 Азп Азп Туг Азп Агд Тгр
465 470 475 480
Рго ТНг Теи Агд Азп А1а 11е Уа1 Ъеи Рго Ъеи Агд Тгр Ъеи ТНг Туг
485 490 495
Туг Ъуз Ъеи Азп ТНг Туг Рго Бег Теи Теи С1и Ъеи ТНг С1и Агд Азр
500 505 510
Ъеи 11е Уа1 Теи Бег С1у Теи Агд РНе Туг Агд С1и РНе Агд Ъеи Рго
- 702
515 520 525
Ьуз Ьуз Уа1 Азр Ьеи С1и МеН 11е 11е Азп Азр Ьуз А1а 11е Бег Рго
530 535 540
Рго Ьуз Азп Ьеи 11е Тгр ТНг Бег РНе Рго Агд Азп Туг МеН Рго Бег
545 550 555 560
Нтз 11е С1п Азп Туг 11е С1и Нтз С1и Ьуз Ьеи Ьуз РНе Бег С1и Бег
565 570 575
Азр Ьуз Бег Агд Агд Уа1 Ьеи С1и Туг Туг Ьеи Агд Азр Азп Ьуз РНе
580 585 590
Азп С1и Суз Азр Ьеи Туг Азп Суз Уа1 Уа1 Азп С1п Бег Туг Ьеи Азп
595 600 605
Азп Рго Азп Нтз Уа1 Уа1 Бег Ьеи ТНг С1у Ьуз С1и Агд С1и Ьеи Бег
610 615 620
Уа1 С1у Агд МеН РНе А1а МеН С1п Рго С1у МеН РНе Агд С1п Уа1 С1п
625 630 635 640
11е Ьеи А1а С1и Ьуз МеН 11е А1а С1и Азп 11е Ьеи С1п РНе РНе Рго
645 650 655
С1и Бег Ьеи ТНг Агд Туг С1у Азр Ьеи С1и Ьеи С1п Ьуз 11е Ьеи С1и
660 665 670
Ьеи Ьуз А1а С1у 11е Бег Азп Ьуз Бег Азп Агд Туг Азп Азр Азп Туг
675 680 685
Азп Азп Туг 11е Бег Ьуз Суз Бег 11е 11е ТНг Азр Ьеи Бег Ьуз РНе
690 695 700
Азп С1п А1а РНе Агд Туг С1и ТНг Бег Суз 11е Суз Бег Азр Уа1 Ьеи
705 710 715 720
Азр С1и Ьеи Нтз С1у Уа1 С1п Бег Ьеи РНе Бег Тгр Ьеи Нтз Ьеи ТНг
725 730 735
11е Рго Нтз Уа1 ТНг 11е 11е Суз ТНг Туг Агд Нтз А1а Рго Рго Туг
740 745 750
11е С1у Азр Нтз 11е Уа1 Азр Ьеи Азп Азп Уа1 Азр С1и С1п Бег С1у
755 760 765
Ьеи Туг Агд Туг Нтз МеН С1у С1у 11е С1и С1у Тгр Суз С1п Ьуз Ьеи
770 775 780
Тгр ТНг 11е С1и А1а 11е Бег Ьеи Ьеи Азр Ьеи 11е Бег Ьеи Ьуз С1у
785 790 795 800
Ьуз РНе Бег 11е ТНг А1а Ьеи 11е Азп С1у Азр Азп С1п Бег 11е Азр
805 810 815
11е Бег Ьуз Рго 11е Агд Ьеи МеН С1и С1у С1п ТНг Нтз А1а С1п А1а
820 825 830
- 703
Азр Туг Ъеи 835 Геи А1а Ъеи Азп Зег 840 Геи Гуз Ъеи Ъеи Туг 845 Ъуз С1и Туг
А1а С1у 11е С1у Нтз Ъуз Ъеи Гуз С1у ТНг С1и ТНг Туг 11е Зег Агд
850 855 860
Азр МеН С1п РНе МеН Зег Гуз ТНг 11е С1п Нтз Азп С1у Уа1 Туг Туг
865 870 875 880
Рго А1а Зег 11е Ъуз Гуз Уа1 Ъеи Агд Уа1 С1у Рго Тгр 11е Азп ТНг
885 890 895
11е Ъеи Азр Азр РНе Гуз Уа1 Зег Геи С1и Зег 11е С1у Зег Ъеи ТНг
900 905 910
С1п С1и Ъеи С1и Туг Агд С1у С1и Зег Ъеи Геи Суз Зег Ъеи 11е РНе
915 920 925
Агд Азп Уа1 Тгр Геи Туг Азп С1п 11е А1а Геи С1п Геи Гуз Азп Нтз
930 935 940
А1а Ъеи Суз Азп Азп Ъуз Геи Туг Ъеи Азр 11е Ъеи Ъуз Уа1 Ъеи Ъуз
945 950 955 960
Нтз Геи Гуз ТНг РНе РНе Азп Ъеи Азр Азп 11е Азр ТНг А1а Геи ТНг
965 970 975
Ъеи Туг МеН Азп Геи Рго МеН Геи РНе С1у С1у С1у Азр Рго Азп Геи
980 985 990
Геи Туг Агд Зег РНе Туг Агд Агд ТНг Рго Азр РНе Ъеи ТНг С1и А1а
995 1000 1005
11е Уа1 Нтз Зег Уа1 РНе 11е Геи Зег Туг Туг ТНг Азп Нтз Азр Геи
1010 1015 1020
Гуз Азр Гуз Геи С1п Азр Ъеи Зег Азр Азр Агд Геи Азп Гуз РНе Ъеи
1025 1030 1035 1040
ТНг Суз 11е 11е ТНг РНе Азр Ъуз Азп Рго Азп А1а С1и РНе Уа1 ТНг
1045 1050 1055
Геи МеН Агд Азр Рго С1п А1а Ъеи С1у Зег С1и Агд С1п А1а Гуз 11е
1060 1065 1070
ТНг Зег С1и 11е Азп Агд Ъеи А1а Уа1 ТНг С1и Уа1 Геи Зег ТНг А1а
1075 1080 1085
Рго Азп Ъуз 11е РНе Зег Гуз Зег А1а С1п Нтз Туг ТНг ТНг ТНг С1и
1090 1095 1100
11е Азр Ъеи Азп Азр 11е МеН С1п Азп 11е С1и Рго ТНг Туг Рго Нтз
1105 1110 1115 1120
С1у Геи Агд Уа1 Уа1 Туг С1и Зег Ъеи Рго РНе Туг Гуз А1а С1и Ъуз
1125 1130 1135
11е Уа1 Азп Ъеи 11е Зег С1у ТНг Гуз Зег 11е ТНг Азп 11е Ъеи С1и
- 704 023179
1140 1145 1150
Туз ТНг Зег А1а 11е Азр Теи ТНг Азр 11е Азр Агд А1а ТНг С1и МеН
1155 1160 1165
МеН Агд Туз Азп 11е ТНг Теи Теи 11е Агд 11е Теи Рго Теи Азр Суз
1170 1175 1180
Азп Агд Азр Туз Агд С1и 11е Теи Зег МеН С1и Азп Теи Зег 11е ТНг
1185 1190 1195 1200
С1и Теи Зег Туз Туг Уа1 Агд С1и Агд Зег Тгр Зег Теи Зег Азп 11е
1205 1210 1215
Уа1 С1у Уа1 ТНг Зег Рго Зег 11е МеН Туг ТНг МеН Азр 11е Туз Туг
1220 1225 1230
ТНг ТНг Зег ТНг 11е Зег Зег С1у 11е 11е 11е С1и Туз Туг Азп Уа1
1235 1240 1245
Азп Зег Теи ТНг Агд С1у С1и Агд С1у Рго ТНг Туз Рго Тгр Уа1 С1у
1250 1255 1260
Зег Зег ТНг С1п С1и Туз Туз ТНг МеН Рго Уа1 Туг Азп Агд С1п Уа1
1265 1270 1275 1280
Теи ТНг Туз Туз С1п Агд Азр С1п 11е Азр Теи Теи А1а Туз Теи Азр
1285 1290 1295
Тгр Уа1 Туг А1а Зег 11е Азр Азп Туз Азр С1и РНе МеН С1и С1и Теи
1300 1305 1310
Зег 11е С1у ТНг Теи С1у Теи ТНг Туг С1и Туз А1а Туз Туз Теи РНе
1315 1320 1325
Рго С1п Туг Теи Зег Уа1 Азп Туг Теи Нтз Агд Теи ТНг Уа1 Зег Зег
1330 1335 1340
Агд Рго Суз С1и РНе Рго А1а Зег 11е Рго А1а Туг Агд ТНг ТНг Азп
1345 1350 1355 1360
Туг Нтз РНе Азр ТНг Зег Рго 11е Азп Агд 11е Теи ТНг С1и Туз Туг
1365 1370 1375
С1у Азр С1и Азр 11е Азр 11е Уа1 РНе С1п Азп Суз 11е Зег РНе С1у
1380 1385 1390
Теи Зег Теи МеН Зег Уа1 Уа1 С1и С1п РНе ТНг Азп Уа1 Суз Рго Азп
1395 1400 1405
Агд 11е 11е Теи 11е Рго Туз Теи Азп С1и 11е Нтз Теи МеН Туз Рго
1410 1415 1420
Рго 11е РНе ТНг С1у Азр Уа1 Азр 11е Нтз Туз Теи Туз С1п Уа1 11е
1425 1430 1435 1440
С1п Туз С1п Нтз МеН РНе Теи Рго Азр Туз 11е Зег Теи ТНг С1п Туг
1445 1450 1455
- 705
Уа1 С1и Ъеи РНе 1460 Ъеи Бег Азп Ъуз ТНг 1465 Ъеи 1 Ъуз Бег С1у Бег 1470 Нтз 1 Уа1
Азп Бег Азп Ъеи 11е Ъеи А1а Нтз Ъуз 11е Бег Азр Туг РНе Нтз Азп
1475 1480 1485
ТНг Туг 11е Ъеи Бег ТНг Азп Ъеи А1а С1у Нтз Тгр 11е Ъеи 11е 11е
1490 1495 1500
С1п Ъеи МеЪ Ъуз Азр Бег Ъуз С1у 11е РНе С1и Ъуз Азр Тгр С1у С1и
1505 1510 1515 1520
С1у Туг 11е ТНг Азр Нтз МеЪ РНе 11е Азп Ъеи Ъуз Уа1 РНе РНе Азп
1525 1530 1535
А1а Туг Ъуз ТНг Туг Ъеи Ъеи Суз РНе Нтз Ъуз С1у Туг С1у Ъуз А1а
1540 1545 1550
Ъуз Ъеи С1и Суз Азр МеЪ Азп ТНг Бег Азр Ъеи Ъеи Суз Уа1 Ъеи С1и
1555 1560 1565
Ъеи 11е Азр Бег Бег Туг Тгр Ъуз Бег МеЪ Бег Ъуз Уа1 РНе Ъеи С1и
1570 1575 1580
С1п Ъуз Уа1 11е Ъуз Туг 11е Ъеи Бег С1п Азр А1а Бег Ъеи Нтз Агд
1585 1590 1595 1600
Уа1 Ъуз С1у Суз Нтз Бег РНе Ъуз Ъеи Тгр РНе Ъеи Ъуз Агд Ъеи Азп
1605 1610 1615
Уа1 А1а С1и РНе ТНг Уа1 Суз Рго Тгр Уа1 Уа1 Азп 11е Азр Туг Нтз
1620 1625 1630
Рго ТНг Нтз МеЪ Ъуз А1а 11е Ъеи ТНг Туг 11е Азр Ъеи Уа1 Агд МеЪ
1635 1640 1645
С1у Ъеи 11е Азп 11е Азр Агд 11е Нтз 11е Ъуз Азп Ъуз Нтз Ъуз РНе
1650 1655 1660
Азп Азр С1и РНе Туг ТНг Бег Азп Ъеи РНе Туг 11е Азп Туг Азп РНе
1665 1670 1675 1680
Бег Азр Азп ТНг Нтз Ъеи Ъеи ТНг Ъуз Нтз 11е Агд 11е А1а Азп Бег
1685 1690 1695
С1и Ъеи С1и Азп Азп Туг Азп Ъуз Ъеи Туг Нтз Рго ТНг Рго С1и ТНг
1700 1705 1710
Ъеи С1и Азп 11е Ъеи А1а Азп Рго 11е Ъуз Бег Азп Азр Ъуз Ъуз ТНг
1715 1720 1725
Ъеи Азп Азр Туг Суз 11е С1у Ъуз Азп Уа1 Азр Бег 11е МеЪ Ъеи Рго
1730 1735 1740
Ъеи Ъеи Бег Азп Ъуз Ъуз Ъеи 11е Ъуз Бег Бег А1а МеЪ 11е Агд ТНг
1745 1750 1755 1760
Азп Туг Бег Ъуз С1п Азр Ъеи Туг Азп Ъеи РНе Рго МеЪ Уа1 Уа1 11е
- 706 023179
1765 1770 1775
Азр Агд 11е 11е Азр Нтз Зег С1у Азп ТТг А1а Ъуз Зег Азп С1п Ъеи
1780 1785 1790
Туг ТТг ТТг ТТг Зег Нтз С1п 11е Зег Ъеи Уа1 Нтз Азп Зег ТТг Зег
1795 1800 1805
Ъеи Туг Суз Меб Ъеи Рго Тгр Нтз Нтз 11е Азп Агд РТе Азп РТе Уа1
1810 1815 1820
РТе Зег Зег ТТг С1у Суз Ъуз 11е Зег 11е С1и Туг 11е Ъеи Ъуз Азр
1825 1830 1835 . 1840
Ъеи Ъуз 11е Ъуз Азр Рго Азп Суз 11е А1а РТе 11е С1у С1и С1у А1а
1845 1850 1855
С1у Азп Ъеи Ъеи Ъеи Агд ТТг Уа1 Уа1 С1и Ъеи Нтз Рго Азр 11е Агд
1860 1865 1870
Туг 11е Туг Агд Зег Ъеи Ъуз Азр Суз Азп Азр Нтз Зег Ъеи Рго 11е
1875 1880 1885
С1и РТе Ъеи Агд Ъеи Туг Азп С1у Нтз 11е Азп 11е Азр Туг С1у С1и
1890 1895 1900
Азп Ъеи ТТг 11е Рго А1а ТТг Азр А1а ТТг Азп Азп 11е Нтз Тгр Зег
1905 1910 1915 1920
Туг Ъеи Нтз 11е Ъуз РТе А1а С1и Рго 11е Зег Ъеи РТе Уа1 Суз Азр
1925 1930 1935
А1а С1и Ъеи Зег Уа1 ТТг Уа1 Азп Тгр Зег Ъуз 11е 11е 11е С1и Тгр
1940 1945 1950
Зег Ъуз Нтз Уа1 Агд Ъуз Суз Ъуз Туг Суз Зег Зег Уа1 Азп Ъуз Суз
1955 1960 1965
Меб Ъеи 11е Уа1 Ъуз Туг Нтз А1а С1п Азр Азр 11е Азр РТе Ъуз Ъеи
1970 1975 1980
Азр Азп 11е ТТг 11е Ъеи Ъуз ТТг Туг Уа1 Суз Ъеи С1у Зег Ъуз Ъеи
1985 1990 1995 . 2000
Ъуз С1у Зег С1и Уа1 Туг Ъеи Уа1 Ъеи ТТг 11е С1у Рго А1а Азп 11е
2005 2010 2015
РТе Рго Уа1 РТе Азп Уа1 Уа1 С1п Азп А1а Ъуз Ъеи 11е Ъеи Зег Агд
2020 2025 2030
ТТг Ъуз Азп РТе 11е Меб Рго Ъуз Ъуз А1а Азр Ъуз С1и Зег 11е Азр
2035 2040 2045
А1а Азп 11е Ъуз Зег Ъеи 11е Рго РТе Ъеи Суз Туг Рго 11е ТТг Ъуз
2050 2055 2060
Ъуз С1у 11е Азп ТТг А1а Ъеи Зег Ъуз Ъеи Ъуз Зег Уа1 Уа1 Зег С1у
2065 2070 2075 . 2080
- 707 023179
Азр 11е Теи Зег Туг 2085 Зег ) 11е А1а С1у Агд 2090 Азп ) С1и Уа1 РАе Зег Азп 2095
Туз Теи 11е Азп Нтз Туз Нтз Ме£ Азп 11е Теи Туз Тгр РАе Азп Нтз
2100 2105 2110
Уа1 Теи Азп РАе Агд Зег ТАг С1и Теи Азп Туг Азп Нтз Теи Туг МеЛ
2115 2120 2125
Уа1 С1и Зег ТАг Туг Рго Туг Теи Зег С1и Теи Теи Азп Зег Теи ТАг
2130 2135 2140
ТАг Азп С1и Теи Туз Туз Теи 11е Туз 11е ТАг С1у Зег Теи Теи Туг
2145 2150 2155 2160
Азп РАе Нтз Азп С1и
2165
<210> 1522
<211> 391
<212> белок
<213> Респираторно-синцитиальный [ вирус человека
<400> 1522
Ме£ А1а Теи Зег Туз Уа1 Туз Теи Азп Азр ТАг Теи Азп Туз Азр С1п
1 5 10 15
Теи Теи Зег Зег Зег Туз Туг ТАг 11е С1п Агд Зег ТАг С1у Азр Азп
20 25 30
11е Азр ТАг Рго Азп Туг Азр Уа1 С1п Туз Нтз Теи Азп Туз Теи Суз
35 40 45
С1у Ме£ Теи Теи 11е ТАг С1и Азр А1а Азп Нтз Туз РАе ТАг С1у Теи
50 55 60
11е С1у Ме£ Теи Туг А1а Ме£ Зег Агд Теи С1у Агд С1и Азр ТАг 11е
65 70 75 80
Туз 11е Теи Туз Азр А1а С1у Туг Нтз Уа1 Туз А1а Азп С1у Уа1 Азр
85 90 95
11е ТАг ТАг Туг Агд С1п Азр 11е Азп С1у Туз С1и Ме£ Туз РАе С1и
100 105 110
Уа1 Теи ТАг Теи Зег Зег Теи ТАг Зег С1и 11е С1п Уа1 Азп 11е С1и
115 120 125
11е С1и Зег Агд Туз Зег Туг Туз Туз Теи Теи Туз С1и Ме£ С1у С1и
130 135 140
Уа1 А1а Рго С1и Туг Агд Нтз Азр Зег Рго Азр Суз С1у Ме£ 11е 11е
- 708
145 150 155 160
Беи Суз 11е А1а А1а Ьеи Уа1 11е ТЬг Ьуз Ьеи А1а А1а С1у Азр Агд
165 170 175
Зег С1у Ьеи ТЬг А1а Уа1 11е Агд Агд А1а Азп Азп Уа1 Ьеи Ьуз Азп
180 185 190
С1и 11е Ьуз Агд Туг Ьуз С1у Ьеи 11е Рго Ьуз Азр 11е А1а Азп Зег
195 200 205
РЬе Туг С1и Уа1 РЬе С1и Ьуз Нтз Рго Нтз Ьеи 11е Азр Уа1 РЬе Уа1
210 215 220
Нтз РЬе С1у 11е А1а С1п Зег Зег ТЬг Агд С1у С1у Зег Агд Уа1 С1и
225 230 235 240
С1у 11е РЬе А1а С1у Ьеи РЬе МеС Азп А1а Туг С1у Зег С1у С1п Уа1
245 250 255
МеС Ьеи Агд Тгр С1у Уа1 Ьеи А1а Ьуз Зег Уа1 Ьуз Азп 11е МеС Ьеи
260 265 270
С1у Нтз А1а Зег Уа1 С1п А1а С1и МеС С1и С1п Уа1 Уа1 С1и Уа1 Туг
275 280 285
С1и Туг А1а С1п Ьуз Ьеи С1у С1у С1и А1а С1у РЬе Туг Нтз 11е Ьеи
290 295 300
Азп Азп Рго Ьуз А1а Зег Ьеи Ьеи Зег Ьеи ТЬг С1п РЬе Рго Азп РЬе
305 310 315 320
Зег Зег Уа1 Уа1 Ьеи С1у Азп А1а А1а С1у Ьеи С1у 11е МеС С1у С1и
325 330 335
Туг Агд С1у ТЬг Рго Агд Азп С1п Азр Ьеи Туг Азр А1а А1а Ьуз А1а
340 345 350
Туг А1а С1и С1п Ьеи Ьуз С1и Азп С1у Уа1 11е Азп Туг Зег Уа1 Ьеи
355 360 365
Азр Ьеи ТЬг А1а С1и С1и Ьеи С1и А1а 11е Ьуз Нтз С1п Ьеи Азп Рго
370 375 380
Ьуз С1и Азр Азр Уа1 С1и Ьеи
385 390 <210> 1523 <211> 391 <212> белок <213> Респираторно-синцитиальный вирус человека <400> 1523
- 709 023179
МеЕ А1а Ееи Бег Еуз Уа1 Еуз Ееи Азп Азр ТНг Ееи Азп Еуз Азр С1п
1 5 10 15
Ееи Ееи Бег Бег Бег Еуз Туг ТНг 11е С1п Агд Бег ТНг С1у Азр Бег
20 25 30
11е Азр ТНг Рго Азп Туг Азр Уа1 С1п Еуз НЬз 11е Азп Еуз Ееи Суз
35 40 45
С1у МеЕ Ееи Ееи 11е ТНг С1и Азр А1а Азп НЬз Еуз РНе ТНг С1у Ееи
50 55 60
11е С1у МеЕ Ееи Туг А1а МеЕ Бег Агд Ееи С1у Агд С1и Азр ТНг 11е
65 70 75 80
Еуз 11е Ееи Агд Азр А1а С1у Туг НЬз Уа1 Еуз А1а Азп С1у Уа1 Азр
85 90 95
Уа1 ТНг ТНг НЬз Агд С1п Азр 11е Азп С1у Еуз С1и МеЕ Еуз РНе С1и
100 105 110
Уа1 Ееи ТНг Ееи Бег Бег Ееи ТНг ТНг С1и 11е С1п 11е Азп 11е С1и
115 120 125
11е С1и Бег Агд Еуз Бег Туг Еуз Еуз МеЕ Ееи Еуз С1и МеЕ С1у С1и
130 135 140
Уа1 А1а Рго С1и Туг Агд НЬз Азр Бег Рго Азр Суз С1у МеЕ 11е 11е
145 150 155 160
Ееи Суз 11е А1а А1а Ееи Уа1 11е ТНг Еуз Ееи А1а А1а С1у Азр Агд
165 170 175
Бег С1у Ееи ТНг А1а Уа1 11е Агд Агд А1а Азп Азп Уа1 Ееи Еуз Азп
180 185 190
С1и МеЕ Еуз Агд Туг Еуз С1у Ееи Ееи Рго Еуз Азр 11е А1а Азп Бег
195 200 205
РНе Туг С1и Уа1 РНе С1и Еуз Туг Рго НЬз РНе 11е Азр Уа1 РНе Уа1
210 215 220
НЬз РНе С1у 11е А1а С1п Бег Бег ТНг Агд С1у С1у Бег Агд Уа1 С1и
225 230 235 240
С1у 11е РНе А1а С1у Ееи РНе МеЕ Азп А1а Туг С1у А1а С1у С1п Уа1
245 250 255
МеЕ Ееи Агд Тгр С1у Уа1 Ееи А1а Еуз Бег Уа1 Еуз Азп 11е МеЕ Ееи
260 265 270
С1у НЬз А1а Бег Уа1 С1п А1а С1и МеЕ С1и С1п Уа1 Уа1 С1и Уа1 Туг
275 280 285
С1и Туг А1а С1п Еуз Ееи С1у С1у С1и А1а С1у РНе Туг НЬз 11е Ееи
290 295 300
Азп Азп Рго Еуз А1а Бег Ееи Ееи Бег Ееи ТНг С1п РНе Рго НЬз РНе
- 710 023179
305 310 315 320
Бег Бег Уа1 Уа1 Теи С1у Азп А1а А1а С1у Теи С1у 11е Ме/ С1у С1и
325 330 335
Туг Агд С1у ТНг Рго Агд Азп С1п Азр Теи Туг Азр А1а А1а Туз А1а
340 345 350
Туг А1а С1и С1п Теи Туз С1и Азп С1у Уа1 11е Азп Туг Бег Уа1 Теи
355 360 365
Азр Теи ТНг А1а С1и С1и Теи С1и А1а 11е Туз Нтз С1п Теи Азп Рго
370 375 380
Туз Азр Азп Азр Уа1 С1и Теи
385 390
<210> 1524
<211> 241
<212> белок
<213> Респираторно-синцитиальный вирус человека
<400> 1524
Ме/ С1и Туз РНе А1а Рго С1и РНе Нтз С1у С1и Азр А1а Азп Азп Агд
1 5 10 15
А1а ТНг Туз РНе Теи С1и Бег 11е Туз С1у Туз РНе ТНг Бег Рго Туз
20 25 30
Азр Рго Туз Туз Туз Азр Бег 11е 11е Бег Уа1 Азп Бег 11е Азр 11е
35 40 45
С1и Уа1 ТНг Туз С1и Бег Рго 11е ТНг Бег Азп Бег ТНг 11е Ме/ Азп
50 55 60
Рго ТНг Азп С1и ТНг Азр Азр ТНг Уа1 С1у Азп Туз Рго Азп Туг С1п
65 70 75 80
Агд Туз Рго Теи Уа1 Бег РНе Туз С1и Азр Рго Ме/ Теи Бег Азр Азп
85 90 95
Рго РНе Бег Туз Теи Туг Туз С1и ТНг 11е С1и ТНг РНе Азр Азп Азп
100 105 110
С1и С1и С1и Бег Бег Туг Бег Туг С1и С1и 11е Азп Азр С1п ТНг Азп
115 120 125
Азр Азп 11е ТНг А1а Агд Теи Азр Агд 11е Азр С1и Туз Теи Бег С1и
130 135 140
11е Теи С1у Ме/ Теи Нтз ТНг Теи Уа1 Уа1 А1а Бег А1а С1у Рго ТНг
145 150 155 160
- 711
Зег А1а Агд Азр С1у 165 11е Агд Азр А1а Меб 170 Уа1 С1у беи Агд С1и 175 С1и
Меб 11е С1и буз 11е Агд ТАг С1и А1а беи Меб ТАг Азп Азп Агд беи
180 185 190
С1и А1а Меб А1а Агд беи Агд Азп С1и С1и Зег С1и буз Меб А1а буз
195 200 205
Азр ТАг Зег Азр С1и Уа1 Зег беи Азп Рго ТАг Зег С1и буз беи Азп
210 215 220
Азп Ьеи беи С1и С1у Азп Азр Зег Азр Азр Азр беи Зег беи С1и Азр
225 230 235 240
РАе
<210> 1525
<211> 256
<212> белок
<213> Респираторно-ι синцитиальный вирус человека
<400> 1525
Меб С1и ТАг Туг Уа1 Азп буз беи Нбз С1и С1у Зег ТАг Туг ТАг А1а
1 5 10 15
А1а Уа1 С1п Туг Азп Уа1 беи С1и буз Азр Азр Азр Рго А1а Зег беи
20 25 30
ТАг 11е Тгр Уа1 Рго Меб РАе С1п Зег Зег Меб Рго А1а Азр беи беи
35 40 45
11е Ьуз С1и беи А1а Азп Уа1 Азп 11е беи Уа1 буз С1п 11е Зег ТАг
50 55 60
Рго Ьуз С1у Рго Зег беи Агд Уа1 Меб 11е Азп Зег Агд Зег А1а Уа1
65 70 75 80
Ьеи А1а С1п Меб Рго Зег буз РАе ТАг 11е Суз А1а Азп Уа1 Зег беи
85 90 95
Азр С1и Агд Зег буз беи А1а Туг Азр Уа1 ТАг ТАг Рго Суз С1и 11е
100 105 110
Ьуз А1а Суз Зег беи ТАг Суз беи буз Зег буз Азп Меб беи ТАг ТАг
115 120 125
Уа1 Ьуз Азр беи ТАг Меб буз ТАг беи Азп Рго ТАг Нбз Азр 11е 11е
130 135 140
А1а Ьеи Суз С1и РАе С1и Азп 11е Уа1 ТАг Зег буз буз Уа1 11е 11е
- 712 023179
145 150 155 160
Рго ТНг Туг Ъеи Агд Бег 11е Бег Уа1 Агд Азп Ъуз Азр Ъеи Азп ТНг
165 170 175
Ъеи С1и Азп 11е ТНг ТНг ТНг С1и РНе Ъуз Азп А1а 11е ТНг Азп А1а
180 185 190
Ъуз 11е 11е Рго Туг Бег С1у Ъеи Ъеи Ъеи Уа1 11е ТНг Уа1 ТНг Азр
195 200 205
Азп Ъуз С1у А1а РНе Ъуз Туг 11е Ъуз Рго С1п Бег С1п РНе 11е Уа1
210 215 220
Азр Ъеи С1у А1а Туг Ъеи С1и Ъуз С1и Бег 11е Туг Туг Уа1 ТНг ТНг
225 230 235 240
Азп Тгр Ъуз Нтз ТНг А1а ТНг Агд РНе А1а 11е Ъуз Рго МеН С1и Азр
245 250 255
<210> <211> <212> <213> 1526
64 белок вирус человека
Респираторно- синцитиальный
<400> 1526
МеН С1и Азп ТНг Бег 11е ТНг 11е С1и РНе Бег Бег Ъуз РНе Тгр Рго
1 5 10 15
Туг РНе ТНг Ъеи 11е Нтз МеН 11е ТНг ТНг 11е 11е Бег Ъеи Ъеи 11е
20 25 30
11е 11е Бег 11е МеН 11е А1а 11е Ъеи Азп Ъуз Ъеи Суз С1и Туг Азп
35 40 45
А1а РНе Нтз Азп Ъуз ТНг РНе С1и Ъеи Рго Агд А1а Агд 11е Азп ТНг
50 55 60
<210> 1527
<211> 574
<212> белок
<213> Респираторно- синцитиальный вирус человека
<220>
<400> 1527
МеН С1и Ъеи Рго 11е Ъеи Ъуз А1а Азп А1а 11е ТНг ТНг 11е Ъеи А1а
- 713 023179
1 5 10 15
А1а Уа1 ТНг Вей Суз РНе Уа1 Зег Зег С1п Азп 11е ТНг С1и С1и РНе
20 25 30
Туг С1п Зег ТНг Суз Зег А1а Уа1 Зег Вуз С1у Туг Вей Зег А1а Вей
35 40 45
Агд ТНг С1у Тгр Туг ТНг Зег Уа1 11е ТНг 11е С1и Вей Зег Азп 11е
50 55 60
Вуз С1и Азп Вуз Суз Азп С1у ТНг Азр А1а Вуз Уа1 Вуз Вей 11е Вуз
65 70 75 80
С1п С1и Вей Азр Вуз Туг Вуз Азп А1а Уа1 ТНг С1и Вей С1п Вей Вей
85 90 95
МеН С1п Зег ТНг Рго А1а А1а Азп Азп Агд А1а Агд Агд С1и Вей Рго
100 105 110
Агд РНе МеН Азп Туг ТНг Вей Азп Азп ТНг Вуз Азп ТНг Азп Уа1 ТНг
115 120 125
Вей Зег Вуз Вуз Агд Вуз Агд Агд РНе Вей С1у РНе Вей Вей С1у Уа1
130 135 140
С1у Зег А1а 11е А1а Зег С1у 11е А1а Уа1 Зег Вуз Уа1 Вей Нтз Вей
145 150 155 160
С1и С1у С1и Уа1 Азп Вуз 11е Вуз Зег А1а Вей Вей Зег ТНг Азп Вуз
165 170 175
А1а Уа1 Уа1 Зег Вей Зег Азп С1у Уа1 Зег Уа1 Вей ТНг Зег Вуз Уа1
180 185 190
Вей Азр Вей Вуз Азп Туг 11е Азр Вуз С1п Вей Вей Рго 11е Уа1 Азп
195 200 205
Вуз С1п Зег Суз Зег 11е Зег Азп 11е С1и ТНг Уа1 11е С1и РНе С1п
210 215 220
С1п Вуз Азп Азп Агд Вей Вей С1и 11е ТНг Агд С1и РНе Зег Уа1 Азп
225 230 235 240
А1а С1у Уа1 ТНг ТНг Рго Уа1 Зег ТНг Туг МеН Вей ТНг Азп Зег С1и
245 250 255
Вей Вей Зег Вей 11е Азп Азр МеН Рго 11е ТНг Азп Азр С1п Вуз Вуз
260 265 270
Вей МеН Зег Азп Азп Уа1 С1п 11е Уа1 Агд С1п С1п Зег Туг Зег 11е
275 280 285
МеН Зег 11е 11е Вуз С1и С1и Уа1 Вей А1а Туг Уа1 Уа1 С1п Вей Рго
290 295 300
Вей Туг С1у Уа1 11е Азр ТНг Рго Суз Тгр Вуз Вей Нтз ТНг Зег Рго
305 310 315 320
Вей Суз ТНг ТНг Азп ТНг Вуз С1и С1у Зег Азп 11е Суз Вей ТНг Агд
- 714
325 330 335
ТАг Азр Агд С1у 340 Тгр Туг Суз Азр Азп 345 А1а С1у Зег Уа1 Зег 350 РАе РАе
Рго С1п А1а С1и ТАг Суз Ъуз Уа1 С1п Зег Азп Агд Уа1 РАе Суз Азр
355 360 365
ТАг МеА Азп Зег Ъеи ТАг Ъеи Рго Зег С1и Уа1 Азп Ъеи Суз Азп Уа1
370 375 380
Азр 11е РАе Азп Рго Ъуз Туг Азр Суз Ъуз 11е МеА ТАг Зег Ъуз ТАг
385 390 395 400
Азр Уа1 Зег Зег Зег Уа1 11е ТАг Зег Ъеи С1у А1а 11е Уа1 Зег Суз
405 410 415
Туг С1у Ъуз ТАг Ъуз Суз ТАг А1а Зег Азп Ъуз Азп Агд С1у 11е 11е
420 425 430
Ъуз ТАг РАе Зег Азп С1у Суз Азр Туг Уа1 Зег Азп Ъуз С1у Уа1 Азр
435 440 445
ТАг Уа1 Зег Уа1 С1у Азп ТАг Ъеи Туг Туг Уа1 Азп Ъуз С1п С1и С1у
450 455 460
Ъуз Азп Ъеи Туг Уа1 Ъуз С1у С1и Рго 11е 11е Азп РАе Туг Азр Рго
465 470 475 480
Ъеи Уа1 РАе Рго Зег Азр С1и РАе Азр А1а Зег 11е Зег С1п Уа1 Азп
485 490 495
С1и Ъуз 11е Азп С1п Зег Ъеи А1а РАе 11е Агд Ъуз Зег Азр С1и Ъеи
500 505 510
Ъеи Нтз Азп Уа1 Азп А1а С1у Ъуз Зег ТАг ТАг Азп 11е МеА 11е ТАг
515 520 525
ТАг 11е 11е 11е Уа1 11е 11е Уа1 11е Ъеи Ъеи Зег Ъеи 11е А1а Уа1
530 535 540
С1у Ъеи Ъеи Ъеи Туг Суз Ъуз А1а Агд Зег ТАг Рго Уа1 ТАг Ъеи Зег
545 550 555 560
Ъуз Азр С1п Ъеи Зег С1у 11е Азп Азп 11е А1а РАе Зег Зег
565 570 <210> 1528 <211> 83 <212> белок <213> Респираторно-синцитиальный вирус человека <400> 1528
Ъуз Агд Азр Рго Ъуз ТАг Рго А1а Ъуз МеА Ъеи Азп Ъуз С1и ТАг ТАг
- 715 023179
1 5 10 15
ТНг Азп Рго ТНг Ъуз Азп Ъеи ТНг Ъеи Ъуз ТНг ТНг С1и Агд Азр ТНг
20 25 30
Бег ТНг Бег С1п Бег ТНг Уа1 Ъеи Азр ТНг Бег ТНг Бег Ъуз Нтз 11е
35 40 45
11е Ъеи С1п С1п Бег Ъеи Нтз Бег ТНг ТНг Рго С1и Азп ТНг Рго Азп
50 55 60
РНе ТНг С1п ТНг Рго ТНг А1а Бег С1и Рго Бег ТНг Бег Азп Бег ТНг
65 70 75 80
С1п Ъуз ТНг <210> 1529 <211> 21 <212> белок <213> Ви£о дагдагттапз <220>
<223> Азтап Ноаб. Ви£огтп II <400> 1529
ТНг Агд Бег Бег Агд А1а С1у Ъеи С1п РНе Рго Уа1 С1у Агд Уа1 Нтз 1 5 10 15
Агд Ъеи Ъеи Агд Ъуз 20 <210> 1530 <211> 16 <212> белок <213> Ното зартепз <220>
<223> ЪРУ3 <400> 1530
Агд Ъуз Ъуз Агд Агд Агд С1и Бег Агд Ъуз Ъуз Агд Агд Агд С1и Бег
1 5 10 15
- 716 023179 <210> 1531 <211> 17 <212> белок <213> Ното заргепз <220>
<223> ЪРУ6 <400> 1531
С1у Агд Рго Агд С1и Зег С1у Ъуз Ъуз Агд Ъуз Агд Ъуз Агд Ъеи Ъуз 1 5 10 15
Рго <210> 1532 <211> 15 <212> белок <213> Ното зарЪепз <220>
<223> ЪРУ7 <400> 1532
С1у Ъуз Агд Ъуз Ъуз Ъуз С1у Ъуз Ъеи С1у Ъуз Ъуз Агд Азр Рго 1 5 10 15 <210> 1533 <211> 17 <212> белок <213> Ното зарЪепз <220>
<223> ЪРУ7Ь <400> 1533
С1у Ъуз Агд Ъуз Ъуз Ъуз С1у Ъуз Ъеи С1у Ъуз Ъуз Агд Рго Агд Зег 1 5 10 15
- 717
Агд
<210> 1534
<211> 18
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ЪРУ3/10
<400> 1534
Агд Ъуз Туз Агд Агд Агд С1и Бег Агд Агд А1а Агд Агд Бег Рго Агд 1 5 10 15
Нтз Теи
<210> 1535
<211> 19
<212> белок
<213> Ното зартепз
<220>
<223> ЪРУ10/6
<400> 1535
Бег Агд Агд А1а Агд Агд Бег Рго Агд С1и Бег С1у Ъуз Ъуз Агд Туз 1 5 10 15
Агд Туз Агд
<210> 1536
<211> 19
<212> белок
<213> Ното зартепз
<220>
- 718 023179 <223> ЪРУ1047 <400> 1536
Уа1 Ъуз Агд С1у Ъеи Ъуз Ъеи Агд Нтз Уа1 Агд Рго Агд Уа1 ТНг Агд 1 5 10 15
МеЪ Азр Уа1 <210> 1537 <211> 18 <212> белок <213> Ното зартепз <220>
<223> ЪРУ1048 <400> 1537
Уа1 Ъуз Агд С1у Ъеи Ъуз Ъеи Агд Нтз Уа1 Агд Рго Агд Уа1 ТНг Агд 1 5 10 15
Азр Уа1
<210> 1538
<211> 14
<212> белок
<213> Ното зартепз
<220>
<223> ЪРУ10
<400> 1538
Бег Агд Агд А1а Агд Агд Бег Рго Агд Нтз Ъеи С1у Бег С1у
1 5 10
<210> 1539
<211> 16
<212> белок
- 719 023179 <213> Ното зартепз <220>
<223> ЪРУ15 <400> 1539
Ъеи Агд Агд С1и Агд С1п Зег Агд Ъеи Агд Агд С1и Агд С1п Зег Агд 1 5 10 15 <210> 1540 <211> 22 <212> белок <213> Ното зарЪепз <220>
<223> ЪРУ15Ь <400> 1540
С1у А1а Туг Азр Ъеи Агд Агд Агд С1и Агд С1п Зег Агд Ъеи Агд Агд 1 5 10 15
Агд С1и Агд С1п Зег Агд 20 <210> 1541 <211> 30 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> САЪА <400> 1541
Тгр С1и А1а А1а Ъеи А1а С1и А1а Ъеи А1а С1и А1а Ъеи А1а С1и Нтз
1 5 10 15
Ъеи А1а С1и А1а Ъеи А1а С1и А1а Ъеи С1и А1а Ъеи А1а А1а
20 25 30
- 720 <210> 1542 <211> 21 <212> белок <213> Ното зартепз <220>
<223> Человеческий ЪтЬгтподеп ЬеНа цепь
<400> 1542
Гуз С1у Зег Тгр Туг Зег МеН Агд Ъуз МеН Зег МеН Ъуз 11е Агд Рго
1 5 10 15
РНе РНе Рго С1п С1п
20
<210> 1543 <211> 20 <212> белок <213> Ното зартепз <220>
<223> Человеческий ЪтЬгтподеп датта цепь ргесигзог <400> 1543
Ъуз ТНг Агд Туг Туг Зег МеН Гуз Гуз ТНг ТНг МеН Гуз 11е 11е Рго 1 5 10 15
РНе Азп Агд Ъеи 20 <210> 1544 <211> 20 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Человеческий ПЬгтподеп а1рНа цепь <400> 1544
Агд С1у А1а Азр Туг Зег Ъеи Агд А1а Уа1 Агд МеН Гуз 11е Агд Рго
- 721 023179
5 10 15
Теи Уа1 ТАг С1п <210> 1545 <211> 24 <212> белок <213> Ното зартепз <220>
<223> Человеческий АСТ (9-32) <400> 1545
Теи С1у ТАг Туг ТАг С1п Азр РАе Азп Туз РАе Нтз ТАг РАе Рго С1п 1 5 10 15
ТАг А1а 11е С1у Уа1 С1у А1а Рго 20 <210> 1546 <211> 12 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> НЫ-1 <400> 1546
ТАг Зег Рго Теи Азп 11е Нтз Азп С1у С1п Туз Теи 1 5 10 <210> 1547 <211> 12 <212> белок <213> 1п£1иепта утгиз <220>
- 722 023179
<223> Нуклеопротеид вируса гриппа (ЫЪБ)
<400> 1547
Азп Бег А1а А1а РНе С1и Азр Теи Агд Уа1 Теи Бег
1 5 10
<210> 1548
<211> 30
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> КАТА
<400> 1548
Тгр С1и А1а Туз Теи А1а Туз А1а Теи А1а Туз А1а Теи А1а Туз Нгз
1 5 10 15
Теи А1а Туз А1а Теи А1а Туз А1а Теи Туз А1а Суз С1и А1а
20 25 30
<210> 1549
<211> 10
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Ки7 0
<400> 1549
Уа1 Рго Ме/ Теи Туз Рго Ме/ Теи Туз С1и
1 5 10
<210> 1550
<211> 18
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
- 723 023179 <220>
<223> МАР <400> 1550
Туз Теи А1а Теи Туз Теи А1а Теи Туз А1а Теи Туз А1а А1а Теи Туз 1 5 10 15
Теи А1а <210> 1551 <211> 27 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> МРС <400> 1551
С1у А1а Теи РНе Теи С1у РНе Теи С1у А1а А1а С1у Зег ТНг МеН С1у
1 5 10 15
А1а Тгр Зег С1п Рго Туз Туз Туз Агд Туз Уа1
20 25
<210> 1552 <211> 16 <212> белок <213> Ното зарФепз <220>
<223> Человеческий фактор роста фибробластов 4 <400> 1552
А1а А1а Уа1 А1а Теи Теи Рго А1а Уа1 Теи Теи А1а Теи Теи А1а Рго
5 10 15 <210> 1553 <211> 9
- 724 023179 <212> белок <213> Ното зартепз <220>
<223> Человеческий N50 (ЫЪЗ ΝΡ-кВ Р50) <400> 1553
Уа1 С1п Агд Вуз Агд С1п Вуз Вей МеС 1 5 <210> 1554 <211> 21 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Рер-1 <400> 1554
Вуз С1и ТЬг Тгр Тгр С1и ТЬг Тгр Тгр ТЬг С1и Тгр Зег С1п Рго Вуз 1 5 10 15
Вуз Вуз Агд Вуз Уа1 20 <210> 1555 <211> 15 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Рер-7 <400> 1555
Зег Азр Вей Тгр С1и МеС МеС МеС Уа1 Зег Вей А1а Суз С1п Туг 1 5 10 15 <210> 1556 <211> 16
- 725 023179 <212> белок <213> БгозорНИа апЕеппаребЬа <220>
<223> Пенетратин дрозофилы <400> 1556
Агд С1п 11е Еуз 11е Тгр РНе С1п Азп Агд Агд МеЕ Еуз Тгр Еуз Еуз 1 5 10 15 <210> 1557 <211> 17 <212> белок <213> БгозорНИа апЕеппаребЬа <220>
<223> Вариант пенетратина дрозофилы <400> 1557
С1у Агд С1п 11е Еуз 11е Тгр РНе С1п Азп Агд Агд МеЕ Еуз Тгр Еуз 1 5 10 15
Еуз <210> 1558 <211> 7 <212> белок <213> БгозорНИа апЕеппаребЬа <220>
<223> Короткий пенетратин дрозофилы <400> 1558
Агд Агд МеЕ Еуз Тгр Еуз Еуз 1 5 <210> 1559
- 726 023179 <211> 17 <212> белок <213> бгозорАНа апбеппареОга <220>
<223> Пенетратин дрозофилы 42-58 <400> 1559
С1и Агд С1п 11е буз 11е Тгр РАе С1п Азп Агд Агд Меб буз Тгр буз 1 5 10 15 буз <210> 1560 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Полиаргинин К7 <400> 1560
Агд Агд Агд Агд Агд Агд Агд 1 5 <210> 1561 <211> 9 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Полиаргинин К9 <400> 1561
Агд Агд Агд Агд Агд Агд Агд Агд Агд 1 5
- 727 023179 <210> 1562 <211> 16 <212> белок <213> КаННиз ηо^νед^сиз <220>
<223> КаН р1БТ <400> 1562
Агд Уа1 11е Агд Уа1 Тгр РНе С1п Азп Туз Агд Суз Ъуз Азр Ъуз Туз
1 5 10 15
<210> 1563
<211> 28
<212> белок
<213> Миз тизси1из
<220>
<223> РгРс1-28 прионовой мыши
<400> 1563
МеН А1а Азп Теи С1у Туг Тгр Теи Ъеи А1а Ъеи РНе Уа1 ТНг МеН Тгр
1 5 10 15
ТНг Азр Уа1 С1у Ъеи Суз Ъуз Туз Агд Рго Туз Рго
20 25
<210> 1564
<211> 18
<212> белок
<213> Миз тизси1из
<220>
<223> Мышиный рУЕС
<400> 1564
Теи Ъеи 11е 11е Ъеи Агд Агд Агд 11е Агд Туз С1п А1а Нтз А1а Нтз
1 5 10 15
Бег Ъуз
- 728 023179 <210> 1565 <211> 16 <212> белок <213> Миз тизси1из <220>
<223> Вариант мышиного рУЕС <400> 1565
Ъеи Ъеи 11е 11е Ъеи Агд Агд Агд 11е Агд Ъуз С1п А1а Нгз А1а Нгз 1 5 10 15 <210> 1566 <211> 18 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> ЗАР <400> 1566
Уа1 Агд Ъеи Рго Рго Рго Уа1 Агд Ъеи Рго Рго Рго Уа1 Агд Ъеи Рго 1 5 10 15
Рго Рго <210> 1567 <211> 7 <212> белок <213> Згтгап чггиз <220>
<223> ЗУ-40 (ЫЪЗ) <400> 1567
- 729 023179
Рго Вуз Вуз Вуз Агд Вуз Уа1
1 5
<210> 1568
<211> 18
<212> белок
<213> Биз зсго£а
<220>
<223> Свиной БупВ1
<400> 1568
Агд С1у С1у Агд Вей Бег Туг Бег Агд Агд Агд РНе Бег ТНг Бег ТНг
1 5 10 15
С1у Агд <210> 1569 <211> 10 <212> белок <213> Биз зсго£а <220>
<223> Свиной БупВ3 <400> 1569
Агд Агд Вей Бег Туг Бег Агд Агд Агд РНе
1 5 10
<210> 1570
<211> 17
<212> белок
<213> Биз зсго£а
<220>
<223> Свиной БупВ4
- 730 023179 <400> 1570
А1а Тгр Бег РНе Агд Уа1 Бег Туг Агд С1у 11е Бег Туг Агд Агд Бег 1 5 10 15
Агд <210> 1571 <211> 14 <212> белок <213> Вирус иммунодефицита человека <220>
<223> Н1У Нуре I ТаН 47-60 <400> 1571
Туг С1у Агд Вуз Вуз Агд Агд С1п Агд Агд Агд Рго Рго С1п 1 5 10 <210> 1572 <211> 11 <212> белок <213> Вирус иммунодефицита человека <220>
<223> Н1У Нуре I ТаН 47-57 <400> 1572
Туг С1у Агд Вуз Вуз Агд Агд С1п Агд Агд Агд 1 5 10 <210> 1573 <211> 10 <212> белок <213> Вирус иммунодефицита человека <220>
<223> НГУ Нуре I ТаН 47-56
- 731 023179 <400> 1573
Туг С1у Агд Ьуз Ьуз Агд Агд С1п Агд Агд <210> 1574 <211> 9 <212> белок <213> Вирус иммунодефицита человека <220>
<223> Н1У Нуре I ТаН 48-56 <400> 1574
С1у Агд Вуз Вуз Агд Агд С1п Агд Агд <210> 1575 <211> 10 <212> белок <213> Вирус иммунодефицита человека <220>
<223> Н1У Нуре I ТаН 48-57 <400> 1575
С1у Агд Вуз Вуз Агд Агд С1п Агд Агд Агд <210> 1576 <211> 9 <212> белок <213> Вирус иммунодефицита человека <220>
<223> Н1У Нуре I ТаН 49-57 <400> 1576
- 732 023179
Агд Туз Туз Агд Агд С1п Агд Агд Агд 1 5 <210> 1577 <211> 8 <212> белок <213> Вирус иммунодефицита человека <220>
<223> Н1У Туре I ТаТ 49-56 <400> 1577
Агд Вуз Вуз Агд Агд С1п Агд Агд 1 5 <210> 1578 <211> 13 <212> белок <213> Вирус иммунодефицита человека <220>
<223> Н1У Туре I ТаТ 48-60 <400> 1578
С1у Агд Вуз Вуз Агд Агд С1п Агд Агд Агд Рго Рго С1п 1 5 10 <210> 1579 <211> 5 <212> белок <213> Вирус иммунодефицита человека <220>
<223> Н1У Туре I ТаТ 48-52 <400> 1579
С1у Агд Вуз Вуз Агд
- 733 023179
5 <210> 1580 <211> 36 <212> белок <213> Вирус иммунодефицита человека <220>
<223> Н1У Суре I ТаС 37-72 <400> 1580
Суз РЬе 11е ТЬг Вуз А1а Вей С1у 11е Зег Туг С1у Агд Вуз Вуз Агд
1 5 10 15
Агд С1п Агд Агд Агд Рго Рго С1п РЬе Зег С1п ТЬг Нтз С1п Уа1 Зег
20 25 30
Вей Зег Вуз С1п
35
<210> 1581 <211> 35 <212> белок <213> Вирус иммунодефицита человека <220>
<223> Н1У Суре I ТаС 38-72 <400> 1581
РЬе 11е ТЬг Вуз А1а Вей С1у 11е Зег Туг С1у Агд Вуз Вуз Агд Агд
1 5 10 15
С1п Агд Агд Агд Рго Рго С1п РЬе Зег С1п ТЬг Нтз С1п Уа1 Зег Вей
20 25 30
Зег Вуз С1п
35
<210> 1582 <211> 13 <212> белок
- 734 <213> Вирус иммунодефицита человека <220>
<223> Н1У Нуре I ТаН 47-59 <400> 1582
Туг С1у Агд Туз Туз Агд Агд С1п Агд Агд Агд Рго Рго 1 5 10 <210> 1583 <211> 27 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Транспортан
<400> 1583 С1у Тгр ТНг Теи Азп Зег А1а С1у Туг Теи Теи С1у Туз 11е Азп Теи
1 Туз А1а Теи А1а 5 А1а Теи А1а Туз Туз 10 11е Теи 15
<210> 1584 <211> 21 <212> белок 20 25
<213> Искусственная последовательность <220>
<223> Транспортан 10
<400> 1584
А1а С1у Туг Теи Теи С1у Туз 11е Азп Теи Туз А1а Теи А1а А1а Теи
1 5 10 15
А1а Туз Туз 11е Теи
20
- 735 023179 <210> 1585 <211> 12 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Производное транспортана <400> 1585
С1у Тгр ТНг Ееи Азп Бег А1а С1у Туг Ееи Ееи С1у 1 5 10 <210> 1586 <211> 14 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Производное транспортана <400> 1586
11е Азп Ееи Еуз А1а Ееи А1а А1а Ееи А1а Еуз Еуз 11е Ееи 1 5 10 <210> 1587 <211> 34 <212> белок <213> Вирус простого герпеса <220>
<223> Вирус простого герпеса 1 VР22 <400> 1587
Азр А1а А1а ТНг А1а ТНг Агд С1у Агд Бег А1а А1а Бег Агд Рго ТНг
1 5 10 15
С1и Агд Рго Агд А1а Рго А1а Агд Бег А1а Бег Агд Рго Агд Агд Рго
20 25 30
Уа1 Азр
- 736 023179 <210> 1588 <211> 26 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> УТ5 <400> 1588
Азр Рго Ъуз С1у Азр Рго Гуз С1у Уа1 ТНг Уа1 ТНг Уа1 ТНг Уа1 ТНг 1 5 10 15
Уа1 ТНг С1у Гуз С1у Азр Рго Гуз Рго Азр 20 25 <210> 1589 <211> 27 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Пептид на основе сигнальной последовательности <400> 1589
С1у А1а Ъеи РНе Ъеи С1у Тгр Геи С1у А1а А1а С1у Зег ТНг МеН С1у 1 5 10 15
А1а Тгр Зег С1п Рго Гуз Ъуз Ъуз Агд Гуз Уа1 20 25 <210> 1590 <211> 18 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Амфифильный модельный пептид <400> 1590
- 737 023179
Туз Теи А1а Теи Туз Теи А1а Теи Туз А1а Теи Туз А1а А1а Теи Туз 1 5 10 15
Теи А1а <210> 1591 <211> 10 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Пермеат бактериальной клетосной стенки <400> 1591
Туз РНе РНе Туз РНе РНе Туз РНе РНе Туз 1 5 10 <210> 1592 <211> 37 <212> белок <213> Ното заргепз <220>
<223> Человеческий ЪЪ-37
<400> 1592
Теи Теи С1у Азр РНе РНе Агд Ьуз Бег Туз С1и Туз 11е С1у Туз С1и
1 5 10 15
РНе Туз Агд 11е Уа1 С1п Агд 11е Туз Азр РНе Теи Агд Азп Теи Уа1
20 25 30
Рго Агд ТНг С1и Бег
35
<210> 1593
<211> 31
<212> белок
<213> Биз зсго£а
- 738 <220>
<223> Свиной цекропин (сесгорбп) Р1
<400> 1593
Зег Тгр беи Зег буз ТАг А1а Ьуз буз беи С1и Азп Зег А1а буз буз
1 5 10 15
Агд 11е Зег С1и С1у 11е А1а 11е А1а 11е С1п С1у С1у Рго Агд
20 25 30
<210> 1594 <211> 30 <212> белок <213> Ното зарбепз <220>
<223> Человеческий альфа дефензин
<400> 1594 А1а Суз Туг Суз Агд 11е Рго А1а Суз 11е А1а С1у С1и Агд Агд Туг
1 С1у ТАг Суз 11е 5 Туг С1п С1у Агд беи 10 Тгр А1а РАе Суз Суз 15
<210> 1595 <211> 36 <212> белок 20 25 30
<213> Ното зарбепз <220>
<223> Человеческий бета дефензин <400> 1595
Азр Нбз Туг Азп Суз Уа1 Зег Зег Сбу Сбу Сбп Суз беи Туг Зег А1а 1 5 10 15
Суз Рго 11е РАе ТАг буз 11е С1п С1у ТАг Суз Туг Агд С1у буз А1а 20 25 30 буз Суз Суз буз 35
- 739 <210> 1596 <211> 11 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Бактенецин <400> 1596
Агд Ъуз Суз Агд 11е Тгр 11е Агд Уа1 Суз Агд 1 5 10 <210> 1597 <211> 42 <212> белок <213> Зиз зсгоЪа <220>
<223> Свиной РК-39 <400> 1597
Агд Агд Агд Рго Агд Рго Рго Туг Ъеи Рго Агд Рго Агд Рго Рго Рго
1 5 10 15
РТе РТе Рго Рго Агд Ъеи Рго Рго Агд 11е Рго Рго С1у РТе Рго Рго
20 25 30
Агд РТе Рго Рго Агд РТе Рго С1у Ъуз Агд
35 40
<210> 1598 <211> 13 <212> белок <213> Воз баигиз <220>
<223> Свиной индолицидин (ТпбоИстбтп)
- 740 023179 <400> 1598
11е Ъеи Рго Тгр Ъуз Тгр Рго Тгр Тгр Рго Тгр Агд Агд 1 5 10 <210> 1599 <211> 27 <212> белок <213> Вирус иммунодефицита обезьян <220>
<223> З1У МРЗ <400> 1599
С1у А1а Ъеи РНе Ъеи С1у Тгр Ъеи С1у А1а А1а С1у Зег ТНг МеЪ. С1у 1 5 10 15
А1а Тгр Зег С1п Рго Ъуз Ъуз Ъуз Агд Ъуз Уа1 20 25 <210> 1600 <211> 17 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> р1з1 <400> 1600
Рго Уа1 11е Агд Агд Уа1 Тгр РНе С1п Азп Ъуз Агд Суз Ъуз Азр Ъуз 1 5 10 15
Ъуз <210> 1601 <211> 330 <212> белок <213> Ното заргепз
- 741 023179 <220>
<223> константный район тяжелой цепи Н!дС1 <400> 1601
А1а Бег ТНг Ъуз С1у Рго Бег Уа1 РНе Рго Ъеи А1а Рго Бег Бег Ъуз
1 5 10 15
Бег ТНг Бег С1у С1у ТНг А1а А1а Ъеи С1у Суз Ъеи Уа1 Ъуз Азр Туг
20 25 30
РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Бег Тгр Азп Бег С1у А1а Ъеи ТНг Бег
35 40 45
С1у Уа1 Нтз ТНг РНе Рго А1а Уа1 Ъеи С1п Бег Бег С1у Ъеи Туг Бег
50 55 60
Ъеи Бег Бег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго Бег Бег Бег Ъеи С1у ТНг С1п ТНг
65 70 75 80
Туг 11е Суз Азп Уа1 Азп Нтз Ъуз Рго Бег Азп ТНг Ъуз Уа1 Азр Ъуз
85 90 95
Ъуз Уа1 С1и Рго Ъуз Бег Суз Азр Ъуз ТНг Нтз ТНг Суз Рго Рго Суз
100 105 110
Рго А1а Рго С1и Ъеи Ъеи С1у С1у Рго Бег Уа1 РНе Ъеи РНе Рго Рго
115 120 125
Ъуз Рго Ъуз Азр ТНг Ъеи МеВ 11е Бег Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз
130 135 140
Уа1 Уа1 Уа1 Азр Уа1 Бег Нтз С1и Азр Рго С1и Уа1 Ъуз РНе Азп Тгр
145 150 155 160
Туг Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз Азп А1а Ъуз ТНг Ъуз Рго Агд С1и
165 170 175
С1и С1п Туг Азп Бег ТНг Туг Агд Уа1 Уа1 Бег Уа1 Ъеи ТНг Уа1 Ъеи
180 185 190
Нтз С1п Азр Тгр Ъеи Азп С1у Ъуз С1и Туг Ъуз Суз Ъуз Уа1 Бег Азп
195 200 205
Ъуз А1а Вей Рго А1а Рго 11е С1и Ъуз ТНг 11е Бег Ъуз А1а Ъуз С1у
210 215 220
С1п Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг ТНг Ъеи Рго Рго Бег Агд Азр С1и
225 230 235 240
Ъеи ТНг Ъуз Азп С1п Уа1 Бег Ъеи ТНг Суз Ъеи Уа1 Ъуз С1у РНе Туг
245 250 255
Рго Бег Азр 11е А1а Уа1 С1и Тгр С1и Бег Азп С1у С1п Рго С1и Азп
260 265 270
Азп Туг Ъуз ТНг ТНг Рго Рго Уа1 Ъеи Азр Бег Азр С1у Бег РНе РНе
275 280 285
- 742
Вей Туг 290 Зег Вуз Вей ТНг Уа1 295 Азр Вуз Зег Агд Тгр 300 С1п С1п С1у Азп
Уа1 РНе Зег Суз Зег Уа1 МеН Нтз С1и А1а Вей Нтз Азп Нтз Туг ТНг
305 310 315 320
С1п Вуз Зег Вей Зег Вей Зег Рго С1у Вуз
325 330 <210> 1602 <211> 326 <212> белок <213> Ното зартепз <220>
<223> константный район тяжелой цепи Н!дС2 <400> 1602
А1а Зег ТНг Вуз С1у Рго Зег Уа1 РНе Рго Вей А1а Рго Суз Зег Агд
1 5 10 15
Зег ТНг Зег С1и Зег ТНг А1а А1а Вей С1у Суз Вей Уа1 Вуз Азр Туг
20 25 30
РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Зег Тгр Азп Зег С1у А1а Вей ТНг Зег
35 40 45
С1у Уа1 Нтз ТНг РНе Рго А1а Уа1 Вей С1п Зег Зег С1у Вей Туг Зег
50 55 60
Вей Зег Зег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго Зег Зег Азп РНе С1у ТНг С1п ТНг
65 70 75 80
Туг ТНг Суз Азп Уа1 Азр Нтз Вуз Рго Зег Азп ТНг Вуз Уа1 Азр Вуз
85 90 95
ТНг Уа1 С1и Агд Вуз Суз Суз Уа1 С1и Суз Рго Рго Суз Рго А1а Рго
100 105 110
Рго Уа1 А1а С1у Рго Зег Уа1 РНе Вей РНе Рго Рго Вуз Рго Вуз Азр
115 120 125
ТНг Вей МеН 11е Зег Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 Уа1 Уа1 Азр
130 135 140
Уа1 Зег Нтз С1и Азр Рго С1и Уа1 С1п РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр С1у
145 150 155 160
Уа1 С1и Уа1 Нтз Азп А1а Вуз ТНг Вуз Рго Агд С1и С1и С1п РНе Азп
165 170 175
Зег ТНг РНе Агд Уа1 Уа1 Зег Уа1 Вей ТНг Уа1 Уа1 Нтз С1п Азр Тгр
- 743
180 185 190
Ъеи Азп С1у Ъуз С1и Туг Туз Суз Туз Уа1 Бег Азп Туз С1у Ъеи Рго
195 200 205
А1а Рго 11е С1и Туз ТНг 11е Бег Туз ТНг Ъуз С1у С1п Рго Агд С1и
210 215 220
Рго С1п Уа1 Туг ТНг Ъеи Рго Рго Бег Агд С1и С1и МеН ТНг Туз Азп
225 230 235 240
С1п Уа1 Бег Ъеи ТНг Суз Ъеи Уа1 Ъуз С1у РНе Туг Рго Бег Азр 11е
245 250 255
А1а Уа1 С1и Тгр С1и Бег Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг Туз ТНг
260 265 270
ТНг Рго Рго МеН Теи Азр Бег Азр С1у Бег РНе РНе Теи Туг Бег Ъуз
275 280 285
Теи ТНг Уа1 Азр Ъуз Бег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе Бег Суз
290 295 300
Бег Уа1 МеН Нтз С1и А1а Ъеи Нтз Азп Нтз Туг ТНг С1п Ъуз Бег Ъеи
305 310 315 320
Бег Теи Бег Рго С1у Туз
325
<210> 1603
<211> 377
<212> белок
<213> Ното зартепз
<220>
<223> константный район тяжелой цепи : Н!дС3
<400> 1603
А1а Бег ТНг Туз С1у Рго Бег Уа1 РНе Рго Теи А1а Рго Суз Бег Агд
1 5 10 15
Бег ТНг Бег С1у С1у ТНг А1а А1а Ъеи С1у Суз Теи Уа1 Ъуз Азр Туг
20 25 30
РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Бег Тгр Азп Бег С1у А1а Теи ТНг Бег
35 40 45
С1у Уа1 Нтз ТНг РНе Рго А1а Уа1 Ъеи С1п Бег Бег С1у Теи Туг Бег
50 55 60
Теи Бег Бег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго Бег Бег Бег Ъеи С1у ТНг С1п ТНг
65 70 75 80
- 744
Туг ТНг Суз Азп Уа1 85 Азп Нтз Вуз Рго Бег 90 Азп ТНг Вуз Уа1 Азр 95 Вуз
Агд Уа1 С1и Вей Вуз ТНг Рго Вей С1у Азр ТНг ТНг Нтз ТНг Суз Рго
100 105 110
Агд Суз Рго С1и Рго Вуз Бег Суз Азр ТНг Рго Рго Рго Суз Рго Агд
115 120 125
Суз Рго С1и Рго Вуз Бег Суз Азр ТНг Рго Рго Рго Суз Рго Агд Суз
130 135 140
Рго С1и Рго Вуз Бег Суз Азр ТНг Рго Рго Рго Суз Рго Агд Суз Рго
145 150 155 160
А1а Рго С1и Вей Вей С1у С1у Рго Бег Уа1 РНе Вей РНе Рго Рго Вуз
165 170 175
Рго Вуз Азр ТНг Вей МеН Не Бег Агд ТНг Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1
180 185 190
Уа1 Уа1 Азр Уа1 Бег Нтз С1и Азр Рго С1и Уа1 С1п РНе Вуз Тгр Туг
195 200 205
Уа1 Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз Азп А1а Вуз ТНг Вуз Рго Агд С1и С1и
210 215 220
С1п Туг Азп Бег ТНг РНе Агд Уа1 Уа1 Бег Уа1 Вей ТНг Уа1 Вей Нтз
225 230 235 240
С1п Азр Тгр Вей Азп С1у Вуз С1и Туг Вуз Суз Вуз Уа1 Бег Азп Вуз
245 250 255
А1а Вей Рго А1а Рго Не С1и Вуз ТНг Не Бег Вуз ТНг Вуз С1у С1п
260 265 270
Рго Агд С1и Рго С1п Уа1 Туг ТНг Вей Рго Рго Бег Агд С1и С1и МеН
275 280 285
ТНг Вуз Азп С1п Уа1 Бег Вей ТНг Суз Вей Уа1 Вуз С1у РНе Туг Рго
290 295 300
Бег Азр Не А1а Уа1 С1и Тгр С1и Бег Бег С1у С1п Рго С1и Азп Азп
305 310 315 320
Туг Азп ТНг ТНг Рго Рго МеН Вей Азр Бег Азр С1у Бег РНе РНе Вей
325 330 335
Туг Бег Вуз Вей ТНг Уа1 Азр Вуз Бег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Не
340 345 350
РНе Бег Суз Бег Уа1 МеН Нтз С1и А1а Вей Нтз Азп Агд РНе ТНг С1п
355 360 365
Вуз Бег Вей Бег Вей Бег Рго С1у Вуз
370 375
- 745 <210> 1604 <211> 327 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> константный район тяжелой цепи Н1дС4 <400> 1604
А1а Бег ТНг Вуз С1у Рго Бег Уа1
1 5
Бег ТНг Бег С1и Бег ТНг А1а А1а
20
РНе Рго С1и Рго Уа1 ТНг Уа1 Бег
35 40
С1у Уа1 Нтз ТНг РНе Рго А1а Уа1
50 55
Вей Бег Бег Уа1 Уа1 ТНг Уа1 Рго
65 70
Туг ТНг Суз Азп Уа1 Азр Нтз Вуз
85
Агд Уа1 С1и Бег Вуз Туг С1у Рго
100
С1и РНе Вей С1у С1у Рго Бег Уа1
115 120
Азр ТНг Вей МеН 11е Бег Агд ТНг
130 135
Азр Уа1 Бег С1п С1и Азр Рго С1и
145 150
С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз Азп А1а Вуз
165
Азп Бег ТНг Туг Агд Уа1 Уа1 Бег
180
Тгр Вей Азп С1у Вуз С1и Туг Вуз
195 200
Рго Бег Бег 11е С1и Вуз ТНг 11е
210 215
С1и Рго С1п Уа1 Туг ТНг Вей Рго
225 230
РНе Рго 10 Вей А1а Рго Суз Бег 15 Агд
Вей С1у Суз Вей Уа1 Вуз Азр Туг
25 30
Тгр Азп Бег С1у А1а Вей ТНг Бег
45
Вей С1п Бег Бег С1у Вей Туг Бег
60
Бег Бег Бег Вей С1у ТНг Вуз ТНг
75 80
Рго Бег Азп ТНг Вуз Уа1 Азр Вуз
90 95
Рго Суз Рго Бег Суз Рго А1а Рго
105 110
РНе Вей РНе Рго Рго Вуз Рго Вуз
125
Рго С1и Уа1 ТНг Суз Уа1 Уа1 Уа1
140
Уа1 С1п РНе Азп Тгр Туг Уа1 Азр
155 160
ТНг Вуз Рго Агд С1и С1и С1п РНе
170 175
Уа1 Вей ТНг Уа1 Вей Нтз С1п Азр
185 190
Суз Вуз Уа1 Бег Азп Вуз С1у Вей
205
Бег Вуз А1а Вуз С1у С1п Рго Агд
220
Рго Бег С1п С1и С1и МеН ТНг Вуз
235 240
- 746
Азп С1п Уа1 Зег Вей 245 ТАг Суз Вей Уа1 Вуз 250 С1у
11е А1а Уа1 С1и Тгр С1и Зег Азп С1у С1п Рго
260 265
ТАг ТАг Рго Рго Уа1 Вей Азр Зег Азр С1у Зег
275 280
Агд Вей ТАг Уа1 Азр Вуз Зег Агд Тгр С1п С1и
290 295
Суз Зег Уа1 МеТ Нтз С1и А1а Вей Нтз Азп Нтз
305 310 315
Вей Зег Вей Зег Вей С1у Вуз
325
РАе Туг Рго
С1и Азп Азп
270
РАе РАе Вей
285
С1у Азп Уа1 300
Туг ТАг С1п
Зег
255
Туг
Туг
РАе
Вуз
Азр
Вуз
Зег
Зег
Зег
320
<210> 1605
<211> 231
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ЫдС1 Рс
<400> 1605
Рго Вуз Зег Суз Азр Вуз ТАг Нтз ТАг Суз Рго
1 5 10
С1и Вей Вей С1у С1у Рго Зег Уа1 РАе Вей РАе
20 25
Азр ТАг Вей МеТ 11е Зег Агд ТАг Рго С1и Уа1
35 40
Азр Уа1 Зег Нтз С1и Азр Рго С1и Уа1 Вуз РАе
50 55
С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз Азп А1а Вуз ТАг Вуз Рго
65 70 75
Азп Зег ТАг Туг Агд Уа1 Уа1 Зег Уа1 Вей ТАг
85 90
Тгр Вей Азп С1у Вуз С1и Туг Вуз Суз Вуз Уа1
100 105
Рго А1а Рго 11е С1и Вуз ТАг 11е Зег Вуз А1а
115 120
С1и Рго С1п Уа1 Туг ТАг Вей Рго Рго Зег Агд
Рго Суз Рго
Рго Рго Вуз 30
ТАг Суз Уа1 45
Азп Тгр Туг 60
Агд С1и С1и
Уа1 Вей Нтз
Зег Азп Вуз 110
Вуз С1у С1п 125
С1и С1и МеТ
А1а
Рго
Уа1
Уа1
С1п
С1п
А1а
Рго
ТАг
Рго
Вуз
Уа1
Азр
Туг
Азр
Вей
Агд
Вуз
- 747
130 135 140
Азп С1п Уа1 Зег Ъеи ТАг Суз Ъеи Уа1 Ъуз С1у РАе Туг
145 150 155
11е А1а Уа1 С1и Тгр С1и Зег Азп С1у С1п Рго С1и Азп
165 170
ТАг ТАг Рго Рго Уа1 Ъеи Азр Зег Азр С1у Зег РАе РАе
180 185
Ъуз Ъеи ТАг Уа1 Азр Ъуз Зег Агд Тгр С1п С1п С1у Азп
195 200 205
Суз Зег Уа1 МеА Нтз С1и А1а Ъеи Нтз Азп Нтз Туг ТАг
210 215 220
Ъеи Зег Ъеи Зег Рго С1у Ъуз
225 230
Рго Зег Азр
160
Азп Туг Ъуз 175
Ъеи Туг Зег 190
Уа1 РАе Зег
С1п Ъуз Зег
<210> 1606
<211> 232
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> ЫдС1 Рс
<400> 1606
С1и Рго Агд Зег Суз Азр Ъуз ТАг Нтз ТАг Суз Рго Рго
1 5 10
Рго С1и Ъеи Ъеи С1у С1у Рго Зег Уа1 РАе Ъеи РАе Рго
20 25
Ъуз Азр ТАг Ъеи МеА 11е Зег Агд ТАг Рго С1и Уа1 ТАг
35 40 45
Уа1 Азр Уа1 Зег Нтз С1и Азр Рго С1и Уа1 Ъуз РАе Азп
50 55 60
Азр С1у Уа1 С1и Уа1 Нтз Азп А1а Ъуз ТАг Ъуз Рго Агд
65 70 75
Туг Азп Зег ТАг Туг Агд Уа1 Уа1 Зег Уа1 Ъеи ТАг Уа1
85 90
Азр Тгр Ъеи Азп С1у Ъуз Азр Туг Ъуз Суз Ъуз Уа1 Зег
100 105
Ъеи Рго А1а Рго МеА С1п Ъуз ТАг 11е Зег Ъуз А1а Ъуз
115 120 125
Суз Рго А1а 15
Рго Ъуз Рго 30
Суз Уа1 Уа1
Тгр Туг Уа1
С1и С1и С1п
Ъеи Нтз С1п
Азп Ъуз А1а 110
С1у С1п Рго
- 748
Агд С1и 130 Рго С1п Уа1 Туг ТНг 135 Ееи
Еуз Азп С1п Уа1 Бег Ееи ТНг Суз
145 150
НЬз 11е А1а Уа1 С1и Тгр С1и Бег
165
Еуз ТНг ТНг Рго Рго Уа1 Ееи Азр
180
Бег Еуз Ееи ТНг Уа1 Азр Еуз Бег
195 200
Бег Суз Бег Уа1 МеЕ НЬз С1и А1а
210 215
Бег Ееи Бег Ееи Бег Рго С1у Еуз
225 230
Рго Рго Бег Агд 140 Азр С1и Ееи ТНг
Ееи Уа1 Еуз С1у РНе Туг Рго Агд
155 160
Азп С1у С1п Рго С1и Азп Азп Туг
170 175
Бег Азр С1у Бег РНе РНе Ееи Туг
185 190
Агд Тгр С1п С1п С1у Азп Уа1 РНе
205
Ееи НЬз Азп НЬз Туг ТНг С1п Еуз
220 <210> 1607 <211> 129 <212> белок <213> Искусственная последоват <220>
<223> Κзν6/11/21/22/23 тяжелой ьность цепи <400> 1607
С1п Уа1 Еуз Ееи Ееи С1и С1п Бег
1 5
С1у Бег Ееи Агд Ееи Бег Суз А1а
20
Туг А1а МеЕ Бег Тгр Уа1 Агд С1п
35 40
Уа1 Бег С1у 11е Бег С1у Бег С1у
50 55
Уа1 Еуз С1у Агд Ееи ТНг 11е Бег
65 70
Туг Ееи С1п МеЕ Азп Бег Ееи Агд
85
Суз А1а Бег НЬз Ееи Рго Азр Туг
100
РНе Туг Туг МеЕ Азр Уа1 Тгр С1у
С1у С1у 10 С1у Ееи Уа1 С1п Рго 15 С1у
Уа1 Бег С1у Уа1 ТНг РНе Бег А1а
25 30
А1а Рго С1у Еуз С1у Ееи С1и Тгр
45
Азр Бег ТНг Азр Туг А1а Азр Бег
60
Агд Азр Азп Бег Еуз Азп ТНг Ееи
75 80
А1а С1и Азр ТНг А1а 11е Туг Туг
90 95
Тгр Азп Ееи Азр Туг ТНг Агд РНе
105 110
Еуз С1у ТНг ТНг Уа1 ТНг Уа1 Бег
- 749
115 120 125
Зег <210> 1608 <211> 5 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзч6/11/21/22/23 Неачу СЕ>К1 <400> 1608
А1а Туг А1а МеН Зег 1 5 <210> 1609 <211> 17 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзч6/11/21/22/23 Неачу СЕ>К2 <400> 1609
С1у 11е Зег С1у Зег С1у Азр Зег ТНг Азр Туг А1а Азр Зег Уа1 Туз 1 5 10 15
С1у <210> 1610 <211> 19 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзч6/11/21/22/23 Неачу СЕ>К3 <400> 1610
Нтз Теи Рго Азр Туг Тгр Азп Теи Азр Туг ТНг Агд РНе РНе Туг Туг
- 750 023179
5 10 15
МеН Азр Уа1 <210> 1611 <211> 120 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Р.зч13/19Н тяжелой цепи <400> 1611
С1п Уа1 Гуз Геи Геи С1и С1и Зег С1у С1у С1у Геи Уа1 Агд Геи А1а
1 5 10 15
С1у Зег Ъеи Агд Ъеи Зег Суз А1а А1а Зег С1у ТНг ТНг Ъеи Зег С1у
20 25 30
Туг ТНг МеН Нтз Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у Гуз С1у Геи С1и Тгр
35 40 45
Уа1 Зег Зег 11е ТНг С1у С1у Зег Азп РНе 11е Азп Туг Зег Азр Зег
50 55 60
Уа1 Ъуз С1у Агд РНе ТНг 11е Зег Агд Азр Азп А1а Ъуз Азп Зег Ъеи
65 70 75 80
Туг Геи С1п МеН Азп Зег Ъеи ТНг А1а С1и Азр ТНг А1а Уа1 Туг Туг
85 90 95
Суз А1а ТНг А1а Рго 11е А1а Рго Рго Туг РНе Азр Нтз Тгр С1у С1п
100 105 110
С1у ТНг Ъеи Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 1612 <211> 5 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзч13/19Н Неачу СЪК1 <400> 1612
- 751 023179
С1у Туг ТТг Меб Нтз 1 5 <210> 1613 <211> 17 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзу13/19Н Неауу СЪК2 <400> 1613
Зег 11е ТТг С1у С1у Зег Азп РТе 11е Азп Туг Зег Азр Зег Уа1 Ъуз 1 5 10 15
С1у <210> 1614 <211> 10 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзу13/19Н Неауу СЪК3 <400> 1614
А1а Рго 11е А1а Рго Рго Туг РТе Азр Нтз 1 5 10 <210> 1615 <211> 109 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзу 6/11/21/22 легкой цепи
- 752 023179 <400> 1615
МеЪ А1а С1и Ъеи ТНг С1п Зег Рго С1у ТНг Ъеи Зег Ъеи Зег Рго С1у
1 5 10 15
С1и Агд А1а ТНг Ъеи Зег Суз Агд А1а ТНг С1п Зег 11е Зег Зег Азп
20 25 30
Туг Ъеи А1а Тгр Туг С1п С1п Агд Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ъеи Ъеи
35 40 45
11е Туг С1у А1а Зег Азп Агд А1а ТНг Азр 11е Рго Азр Агд РНе Зег
50 55 60
С1у Зег С1у Зег С1у ТНг Азр РНе ТНг Ъеи ТНг 11е Зег Агд Ъеи С1и
65 70 75 80
Рго С1и Азр РНе А1а МеЪ Туг Туг Суз С1п С1п Туг Азр 11е Зег Рго
85 90 95
Туг ТНг РНе С1у С1п С1у ТНг Ъуз Ъеи С1и 11е Ъуз Агд
100 105
<210> 1616 <211> 12 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзч 6/11/21/22 ЪгдНЪ СЪК1 <400> 1616
Агд А1а ТНг С1п Зег 11е Зег Зег Азп Туг Ъеи А1а 1 5 10 <210> 1617 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзч 6/11/21/22 ЪгдНЪ СЪК2 <400> 1617
С1у А1а Зег Азп Агд А1а ТНг
- 753 023179
5 <210> 1618 <211> 9 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзч 6/11/21/22 ЫдН/ СИК3 <400> 1618
С1п С1п Туг Азр 11е Бег Рго Туг ТНг 1 5 <210> 1619 <211> 109 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзч23 легкой цепи <400> 1619
Ме/ А1а С1и Теи ТНг С1п Бег Рго
1 5
С1и Агд Уа1 А1а 20 Теи Бег Суз Туз
Теи А1а Тгр 35 Туг С1п С1п Туз Рго 40
Туг С1у 50 А1а Бег Бег Агд А1а 55 ТНг
Бег 65 С1у Бег С1у ТНг Азр 70 РНе ТНг
С1и Азр РНе А1а Уа1 85 Туг Туг Суз
ТНг РНе С1у С1п 100 С1у ТНг Туз Теи
Уа1 ТНг 10 Теи Бег Уа1 Бег Рго 15 С1у
А1а Бег С1п Азп 11е Азп Азр Азп
25 30
С1у С1п А1а Рго Агд Теи Теи 11е
45
С1у 11е Рго Азр Агд РНе Бег С1у
60
Теи ТНг 11е ТНг Агд Теи С1и Рго
75 80
С1п С1п Туг С1у С1у Бег Рго Туг
90 95
С1и 11е Туз Агд ТНг
105
- 754 <210> 1620 <211> 11 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзу23 ббдАб СЕ>К1 <400> 1620 буз А1а Зег С1п Азп 11е Азп Азр Азп беи А1а 1 5 10 <210> 1621 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзу23 ббдАб С6К2 <400> 1621
С1у А1а Зег Зег Агд А1а ТАг 1 5 <210> 1622 <211> 9 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзу23 ббдАб С6К3 <400> 1622
С1п С1п Туг С1у С1у Зег Рго Туг ТАг 1 5
- 755 023179 <210> 1623 <211> 108 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзч13/19 легкой цепи <400> 1623
МеС А1а С1и Вей ТЬг С1п Зег Рго Зег Зег Вей Зег А1а Зег Уа1 С1у
1 5 10 15
Азр Агд Уа1 ТЬг 11е ТЬг Суз Агд А1а ТЬг С1п Зег Уа1 Зег Азп РЬе
20 25 30
Вей Азп Тгр Туг С1п С1п Вуз Рго С1у С1и А1а Рго ТЬг Вей Вей 11е
35 40 45
Туг Азр А1а Зег ТЬг Зег С1п Зег С1у Уа1 Рго Зег Агд РЬе Зег С1у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у МеС Азр РЬе Зег Вей ТЬг 11е Зег Зег Вей С1п Рго
65 70 75 80
С1и Азр Вей А1а МеС Туг Туг Суз С1п А1а Зег 11е Азп ТЬг Рго Вей
85 90 95
РЬе С1у С1у С1у ТЬг Агд 11е Азр МеС Агд Агд ТЬг
100 105
<210> 1624 <211> 11 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> Кзч13/19 ВгдЬС СЕЖ1 <400> 1624
Агд А1а ТЬг С1п Зег Уа1 Зег Азп РЬе Вей Азп 1 5 10 <210> 1625 <211> 7 <212> белок <213> Искусственная последовательность
- 756 023179 <220>
<223> Кзч13/19 ЫдНН СЕ>К2
<400> 1625
Азр А1а Зег ТНг Зег С1п Зег 1 5
<210> 1626
<211> 8
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> Кзч13/19 ЫдНН СЕ>К3
<400> 1626
С1п А1а Зег 11е Азп ТНг Рго Теи
5
<210> 1627
<211> 7
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> 58С5 СЕ>КН1
<400> 1627
Зег Азр Азп Туг Туг Тгр ТНг 1 5
<210> 1628
<211> 6
<212> белок
<213> Искусственная последовательность
- 757 023179 <220>
<223> зс5 С6КН1 <400> 1628
С1у Зег Азп Тгр Тгр Азп 1 5 <210> 1629 <211> 574 <212> белок <213> респираторно-синцитиальный вирус <220>
<223> Р белок <400> 1629
Меб С1и беи беи 11е беи буз А1а Азп А1а 11е ТАг ТАг 11е беи ТАг
1 5 10 15
А1а ν&1 ТАг РАе Суз РАе А1а Зег С1у С1п Азп 11е ТАг С1и С1и РАе
20 25 30
Туг С1п Зег ТАг Суз Зег А1а ν&1 Зег буз С1у Туг беи Зег А1а беи
35 40 45
Агд ТАг С1у Тгр Туг ТАг Зег ν&1 11е ТАг 11е С1и беи Зег Азп 11е
50 55 60
буз буз Азп буз Суз Азп С1у ТАг Азр А1а буз А1а буз беи 11е буз
65 70 75 80
С1п С1и беи Азр буз Туг буз Азп А1а ν&1 ТАг С1и беи С1п беи беи
85 90 95
Меб С1п Зег ТАг С1п А1а ТАг Азп Азп Агд А1а Агд Агд С1и беи Рго
100 105 110
Агд РАе Меб Азп Туг ТАг беи Азп Азп А1а буз буз ТАг Азп ν&1 ТАг
115 120 125
беи Зег буз буз Агд буз Агд Агд РАе беи С1у РАе беи беи С1у ν&1
130 135 140
С1у Зег А1а 11е А1а Зег С1у ν&1 А1а ν&1 Зег буз ν&1 беи Нбз беи
145 150 155 160
С1и С1у С1и ν&1 Азп буз 11е буз Зег А1а беи беи Зег ТАг Азп буз
165 170 175
- 758 023179
А1а Уа1 Уа1 Зег 180 Ъеи Зег Азп С1у Уа1 185 Зег Уа1 Ъеи ТТг Зег 190 Ъуз Уа1
Ъеи Азр Ъеи Ъуз Азп Туг 11е Азр Ъуз С1п Ъеи Ъеи Рго 11е Уа1 Азп
195 200 205
Ъуз С1п Зег Суз Зег 11е Зег Азп 11е С1и ТТг Уа1 11е С1и РТе С1п
210 215 220
С1п Ъуз Азп Азп Агд Ъеи Ъеи С1и 11е ТТг Агд С1и РТе Зег Уа1 Азп
225 230 235 240
А1а С1у Уа1 ТТг ТТг Рго Уа1 Зег ТТг Туг Меб Ъеи ТТг Азп Зег С1и
245 250 255
Ъеи Ъеи Зег Ъеи 11е Азп Азр Меб Рго 11е ТТг Азп Азр С1п Ъуз Ъуз
260 265 270
Ъеи Меб Зег Азп Азп Уа1 С1п 11е Уа1 Агд С1п С1п Зег Туг Зег 11е
275 280 285
Меб Зег 11е 11е Ъуз С1и С1и Уа1 Ъеи А1а Туг Уа1 Уа1 С1п Ъеи Рго
290 295 300
Ъеи Туг С1у Уа1 11е Азр ТТг Рго Суз Тгр Ъуз Ъеи Нтз ТТг Зег Рго
305 310 315 320
Ъеи Суз ТТг ТТг Азп ТТг Ъуз С1и С1у Зег Азп 11е Суз Ъеи ТТг Агд
325 330 335
ТТг Азр Агд С1у Тгр Туг Суз Азр Азп А1а С1у Зег Уа1 Зег РТе РТе
340 345 350
Рго С1п А1а С1и ТТг Суз Ъуз Уа1 С1п Зег Азп Агд Уа1 РТе Суз Азр
355 360 365
ТТг Меб Азп Зег Ъеи ТТг Ъеи Рго Зег С1и Уа1 Азп Ъеи Суз Азп Уа1
370 375 380
Азр 11е РТе Азп Рго Ъуз Туг Азр Суз Ъуз 11е Меб ТТг Зег Ъуз ТТг
385 390 395 400
Азр Уа1 Зег Зег Зег Уа1 11е ТТг Зег Ъеи С1у А1а 11е Уа1 Зег Суз
405 410 415
Туг С1у Ъуз ТТг Ъуз Суз ТТг А1а Зег Азп Ъуз Азп Агд С1у 11е 11е
420 425 430
Ъуз ТТг РТе Зег Азп С1у Суз Азр Туг Уа1 Зег Азп Ъуз С1у Уа1 Азр
435 440 445
ТТг Уа1 Зег Уа1 С1у Азп ТТг Ъеи Туг Туг Уа1 Азп Ъуз С1п С1и С1у
450 455 460
Ъуз Зег Ъеи Туг Уа1 Ъуз С1у С1и Рго 11е 11е Азп РТе Туг Азр Рго
465 470 475 480
Ъеи Уа1 РТе Рго Зег Азр С1и РТе Азр А1а Зег 11е Зег С1п Уа1 Азп
- 759 023179
485 490 495
С1и Туз 11е Азп С1п Зег Теи А1а РНе 11е Агд Туз Зег Азр С1и Теи
500 505 510
Теи Нгз Азп Уа1 11е А1а С1у Туз Зег ТНг ТНг Азп 11е МеН 11е ТНг
515 520 525
ТНг 11е 11е 11е Уа1 11е 11е Уа1 11е Теи Теи Зег Теи 11е А1а Уа1
530 535 540
С1у Теи Теи Теи Туг Суз Туз А1а Агд Зег ТНг Рго Уа1 ТНг Теи Зег
545 550 555 560
Туз Азр С1п Теи Зег С1у 11е Азп Азп 11е А1а РНе Зег Азп
565 570
<210> 1630 <211> 574 <212> белок <213> КезртгаНогу зупсуНта1 чггиз <220>
<223> Р белок (Р03420) <400> 1630
МеН С1и Теи Теи 11е Теи Туз А1а Азп А1а 11е ТНг ТНг 11е Теи ТНг 1 5 10 15
А1а Уа1 ТНг РНе Суз РНе А1а Зег С1у С1п Азп 11е ТНг С1и С1и РНе 20 25 30
Туг С1п Зег ТНг Суз Зег А1а Уа1 Зег Туз С1у Туг Теи Зег А1а Теи 35 40 45
Агд ТНг С1у Тгр Туг ТНг Зег Уа1 11е ТНг 11е С1и Теи Зег Азп 11е 50 55 60
Туз С1и Азп Туз Суз Азп С1у ТНг Азр А1а Туз Уа1 Туз Теи 11е Туз
70 75 80
С1п С1и Теи Азр Туз Туг Туз Азп А1а Уа1 ТНг С1и Теи С1п Теи Теи
90 95
МеН С1п Зег ТНг Рго Рго ТНг Азп Азп Агд А1а Агд Агд С1и Теи Рго
100 105 110
Агд РНе МеН Азп Туг ТНг Теи Азп Азп А1а Туз Туз ТНг Азп Уа1 ТНг
115 120 125
Теи Зег Туз Туз Агд Туз Агд Агд РНе Теи С1у РНе Теи Теи С1у Уа1
130 135 140
- 760 023179
С1у Зег А1а 11е А1а Зег С1у Уа1 А1а Уа1 Зег Гуз Уа1 Ъеи Нтз Геи
145 150 155 160
С1и С1у С1и Уа1 Азп Гуз 11е Ъуз Зег А1а Геи Ъеи Зег ТНг Азп Гуз
165 170 175
А1а Уа1 Уа1 Зег Геи Зег Азп С1у Уа1 Зег Уа1 Ъеи ТНг Зег Гуз Уа1
180 185 190
Ъеи Азр Геи Ъуз Азп Туг 11е Азр Гуз С1п Ъеи Геи Рго 11е Уа1 Азп
195 200 205
Гуз С1п Зег Суз Зег 11е Зег Азп 11е С1и ТНг Уа1 11е С1и РНе С1п
210 215 220
С1п Ъуз Азп Азп Агд Геи Ъеи С1и 11е ТНг Агд С1и РНе Зег Уа1 Азп
225 230 235 240
А1а С1у Уа1 ТНг ТНг Рго Уа1 Зег ТНг Туг МеН Геи ТНг Азп Зег С1и
245 250 255
Геи Ъеи Зег Ъеи 11е Азп Азр МеН Рго 11е ТНг Азп Азр С1п Гуз Ъуз
260 265 270
Ъеи МеН Зег Азп Азп Уа1 С1п 11е Уа1 Агд С1п С1п Зег Туг Зег 11е
275 280 285
МеН Зег 11е 11е Гуз С1и С1и Уа1 Ъеи А1а Туг Уа1 Уа1 С1п Ъеи Рго
290 295 300
Ъеи Туг С1у Уа1 11е Азр ТНг Рго Суз Тгр Ъуз Ъеи Нтз ТНг Зег Рго
305 310 315 320
Геи Суз ТНг ТНг Азп ТНг Гуз С1и С1у Зег Азп 11е Суз Ъеи ТНг Агд
325 330 335
ТНг Азр Агд С1у Тгр Туг Суз Азр Азп А1а С1у Зег Уа1 Зег РНе РНе
340 345 350
Рго С1п А1а С1и ТНг Суз Гуз Уа1 С1п Зег Азп Агд Уа1 РНе Суз Азр
355 360 365
ТНг МеН Азп Зег Ъеи ТНг Ъеи Рго Зег С1и 11е Азп Ъеи Суз Азп Уа1
370 375 380
Азр 11е РНе Азп Рго Ъуз Туг Азр Суз Ъуз 11е МеН ТНг Зег Ъуз ТНг
385 390 395 400
Азр Уа1 Зег Зег Зег Уа1 11е ТНг Зег Геи С1у А1а 11е Уа1 Зег Суз
405 410 415
Туг С1у Гуз ТНг Ъуз Суз ТНг А1а Зег Азп Гуз Азп Агд С1у 11е 11е
420 425 430
Гуз ТНг РНе Зег Азп С1у Суз Азр Туг Уа1 Зег Азп Гуз С1у МеН Азр
435 440 445
ТНг Уа1 Зег Уа1 С1у Азп ТНг Геи Туг Туг Уа1 Азп Гуз С1п С1и С1у
450 455 460
- 761
Вуз Зег Вей Туг Уа1 Вуз С1у С1и Рго 11е 11е Азп РНе Туг Азр Рго
465 470 475 480
Вей Уа1 РНе Рго Зег Азр С1и РНе Азр А1а Зег 11е Зег С1п Уа1 Азп
485 490 495
С1и Вуз 11е Азп С1п Зег Вей А1а РНе 11е Агд Вуз Зег Азр С1и Вей
500 505 510
Вей Нтз Азп Уа1 Азп А1а С1у Вуз Зег ТНг ТНг Азп 11е МеН 11е ТНг
515 520 525
ТНг 11е 11е 11е Уа1 11е 11е Уа1 11е Вей Вей Зег Вей 11е А1а Уа1
530 535 540
С1у Вей Вей Вей Туг Суз Вуз А1а Агд Зег ТНг Рго Уа1 ТНг Вей Зег
545 550 555 560
Вуз Азр С1п Вей Зег С1у 11е Азп Азп 11е А1а РНе Зег Азп
565 570
<210> 1631 <211> 23 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 5' В У1атЬДа 1 <400> 1631 ддНссНдддс ссадНсНдНд сНд 23 <210> 1632 <211> 23 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 5' В У1атЬДа 2 праймер <400> 1632 ддНссНдддс ссадНсНдсс сНд 23
- 762 023179 <210> 1633 <211> 23 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 5' Ъ V1атЬάа 3 праймер <400> 1633 дс/с/д/дас с/сс/а/дад с/д 23 <210> 1634 <211> 23 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 5' Ъ V1атЬάа 4/5 праймер <400> 1634 дд/с/с/с/с зсадсу/д/д с/д 23 <210> 1635 <211> 23 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 5' Ъ V1атЬάа 6 праймер <400> 1635 д//с//дддс саа////а/д с/д 23 <210> 1636 <211> 23 <212> ДНК
- 763 023179 <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 5' Ъ У1атЬба 7 праймер <400> 1636 дд£ссаа££с усаддсКдКд д£д 23 <210> 1637 <211> 23 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 5' Ъ У1атЬДа 8 праймер <400> 1637 дад£дда££с £садас£д£д д£д 23 <210> 1638 <211> 6822 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 28Д11/рСАЪ вектор
<400> 1638 а£дса££ад£ £а££аа£ад£ аа£саа££ас ддддКсаККа д££са£адсс са£а£а£дда
60 д££ссдсд££ асаКаасККа сддКаааКдд сссдссКддс Кдассдссса асдасссссд
120 сссаККдасд £саа£аа£да сд£а£д££сс саКадКаасд ссааКаддда с£££сса££д
180 асдКсааКдд д£ддад£а££ КасддКааас КдсссасККд дсадКасаКс аад£д£а£са
240 КаКдссаадК асдсссссКа ККдасдКсаа КдасддКааа КддсссдссК ддсаККаКдс
300
- 764 023179
ссадЕасаЕд ассЕЕаЕддд асЕЕЕссЕас ЕЕддсадЕас аЕсЕасдЕаЕ ЕадЕсаЕсдс
ЕаЕЕассаЕд дЕдаЕдсддЕ ЕЕЕддсадЕа саЕсааЕддд сдЕддаЕадс ддЕЕЕдасЕс
асддддаЕЕЕ ссаадЕсЕсс ассссаЕЕда сдЕсааЕддд адЕЕЕдЕЕЕЕ ддсассаааа
Есаасдддас ЕЕЕссааааЕ дЕсдЕаасаа сЕссдсссса ЕЕдасдсааа ЕдддсддЕад
дсдЕдЕасдд ЕдддаддЕсЕ аЕаЕаадсад адсЕддЕЕЕа дЕдаассдЕс адаЕссдсЕа
дсдаЕЕасдс саадсЕсдаа аЕЕаасссЕс асЕаааддда асаааадсЕд дадсЕссасс
дсддЕддсдд ссдсссасса ЕддасЕддас сЕддсддаЕс сЕдЕЕссЕдд Еддссдсддс
сассддддсс сасадссадс ЕдсадсЕдса ддадЕсдддс ссаддасЕдд ЕдааддЕЕЕс
ддасасссЕд ЕсссЕсадсЕ дсасЕдЕсЕс ЕддЕдасЕсс аЕсааЕадЕЕ аЕЕссЕддад
ЕЕддаЕссдд садсссссад ддаадддасЕ ЕдадЕддаЕЕ ддаЕаЕсЕсЕ аЕЕасадЕдд
дадсЕссааЕ ЕаЕадЕсссЕ сссЕсааддд ссдадЕсасс аЕдЕсдсЕад асасдЕссаа
даассадЕЕЕ ЕсссЕдаадс ЕЕсасЕсЕсЕ дассдсЕдсд дасасддссд ЕсЕаЕЕасЕд
Едсдададда ЕсЕЕдЕддЕа даассассЕд сЕасЕдддаа аассасЕасЕ асаЕддасдЕ
сЕддддсааа дддассдсдд ЕсассдЕсЕс сЕсасадсЕд садсЕдсадд адЕсдддссс
аддасЕддЕд ааддЕЕЕсдд асасссЕдЕс ссЕсадсЕдс асЕдЕсЕсЕд дЕдасЕссаЕ
сааЕадЕЕаЕ ЕссЕддадЕЕ ддаЕссддса дсссссаддд аадддасЕЕд адЕддаЕЕдд
аЕаЕсЕсЕаЕ ЕасадЕддда дсЕссааЕЕа ЕадЕсссЕсс сЕсаадддсс дадЕсассаЕ
дЕсдсЕадас асдЕссаада ассадЕЕЕЕс ссЕдаадсЕЕ сасЕсЕсЕда ссдсЕдсдда
сасддссдЕс ЕаЕЕасЕдЕд сдададдаЕс ЕЕдЕддЕада ассассЕдсЕ асЕдддаааа
ссасЕасЕас аЕддасдЕсЕ ддддсааадд дассдсддЕс ассдЕсЕссЕ садсЕадсас
- 765 023179
саадддсссс адсдТдТТсс сссТддсссс садсадсаад адсассадсд дсддсассдс
сдсссТдддс ТдссТддТда аддасТасТТ ссссдадссс дТдассдТда дсТддаасад
сддсдсссТд ассадсддсд ТдсасассТТ ссссдссдТд сТдсададса дсддссТдТа
садссТдадс адсдТддТда ссдТдсссад садсадссТд ддсасссада ссТасаТсТд
саасдТдаас сасаадссса дсаасассаа ддТддасаад ааддТддадс ссаададсТд
сдасаааасТ сасасаТдсс сассдТдссс адсассТдаа сТссТддддд дассдТсадТ
сТТссТсТТс сссссаааас ссааддасас ссТсаТдаТс Тсссддассс сТдаддТсас
аТдсдТддТд дТддасдТда дссасдаада сссТдаддТс аадТТсаасТ ддТасдТдда
сддсдТддад дТдсаТааТд ссаадасааа дссдсдддад дадсадТаса асадсасдТа
ссдддТддТс адсдТссТса ссдТссТдса ссаддасТдд сТдааТддса аддадТасаа
дТдсааддТс Тссаасааад сссТсссадс ссссаТсдад аааассаТсТ ссааадссаа
адддсадссс сдадаассас аддТдТасас ссТдссссса ТсссдддаТд адсТдассаа
даассаддТс адссТдассТ дссТддТсаа аддсТТсТаТ сссадсдаса ТсдссдТдда
дТдддададс ааТдддсадс сддадаасаа сТасаадасс асдссТсссд ТдсТддасТс
сдасддсТсс ТТсТТссТсТ асадсаадсТ сассдТддас аададсаддТ ддсадсаддд
даасдТсТТс ТсаТдсТссд ТдаТдсаТда ддсТсТдсас аассасТаса сдсадаадад
ссТсТсссТд ТсТссдддТа аасдддссаа дсдддсассс дТдаадсада сссТдаасТТ
сдассТдсТд аадсТддссд дсдасдТдда дадсаасссс ддссссаТда ддсТсссТдс
ТсадсТссТд дддсТдсТаа ТдсТсТдддТ сссТддсТсд адТдаддТТс ТдссТдТдсТ
дасТсадсса сссТсадсдТ сТдсдасссс сдддсададд дТсассаТсТ сТТдТТсТдд
- 766 023179
аадсадсСсс аасаСсдддс дСааСасСдС ааасСддСас садсдСсСсс саддаасддс
ссссааасСс сСсаСсСаСа аСасСааСса дсддсссСса ддддСсссСд ассдаССсСс
СддсСссаад СсСддсассС садссдсссС ддссаСсадС ддасСссадС сСдаддаСда
ддсСдадСаС СасСдСдсад ссСдддаСда садссСдааС ддссСССсСС дддСдССсдд
сддадддасс аадсСдассд СссСаадСса дсссааддсС дсссссСсдд СсасСсСдСС
сссдсссСсс СсСдаддадс ССсаадссаа сааддссаса сСддСдСдСс СсаСаадСда
сССсСасссд ддадссдСда садссСддаа ддсадаСадс адссасдСса аддсдддадС
ддадассасс асасссСсса аасааадсаа саасаадСас дсддссадса дсСассСдад
ссСдасдссС дадсадСдда адСсссасаа аадсСасадс СдссаддСса сдсаСдаадд
дадсассдСд дадаадасаа ССдссссСас адааСдсСса Сааддссддд асддссддСа
ссаддСаадС дСасссааСС сдсссСаСад СдадСсдСаС СасааССсас СсдаСсдссс
ССсссаасад ССдсдсадсс СдааСддсда аСддадаСсс ааСССССаад СдСаСааСдС
дССааасСас СдаССсСааС СдСССдСдСа ССССадаССс асадСсссаа ддсСсаСССс
аддссссСса дСссСсасад СсСдССсаСд аСсаСааСса дссаСассас аСССдСадад
дССССасССд сСССаааааа ссСсссасас сСсссссСда ассСдаааса СааааСдааС
дсааССдССд ССдССаасСС дСССаССдса дсССаСааСд дССасаааСа аадсааСадс
аСсасаааСС СсасаааСаа адсаСССССС СсасСдсаСС сСадССдСдд СССдСссааа
сСсаСсааСд СаСсССаасд сдСаааССдС аадсдССааС аССССдССаа ааССсдсдСС
аааСССССдС СаааСсадсС саССССССаа ссааСаддсс даааСсддса аааСсссССа
СаааСсаааа дааСадассд адаСадддСС дадСдССдСС ссадСССдда асаададСсс
- 767 023179
асНаННааад аасдНддасН ссаасдНсаа адддсдаааа ассдНсНаНс адддсдаНдд
сссасНасдН даассаНсас ссНааНсаад ННННННдддд НсдаддНдсс дНааадсасН
аааНсддаас ссНаааддда дсссссдаНН НададсННда сддддааадс сддсдаасдН
ддсдадааад даадддаада аадсдааадд адсдддсдсН адддсдсНдд саадНдНадс
ддНсасдсНд сдсдНаасса ссасасссдс сдсдсННааН дсдссдсНас адддсдсдНс
аддНддсасН НННсддддаа аНдНдсдсдд аассссНаНН НдНННаНННН НсНаааНаса
ННсаааНаНд НаНссдсНса НдадасааНа асссНдаНаа аНдсННсааН ааНаННдааа
ааддаадааН ссНдаддсдд ааадаассад сНдНддааНд НдНдНсадНН адддНдНдда
аадНссссад дсНссссадс аддсадаадН аНдсааадса НдсаНсНсаа ННадНсадса
ассаддНдНд дааадНсссс аддсНсссса дсаддсадаа дНаНдсааад саНдсаНсНс
ааННадНсад саассаНадН сссдссссНа асНссдссса НсссдссссН аасНссдссс
адННссдссс аННсНссдсс ссаНддсНда сНааНННННН ННаНННаНдс ададдссдад
дссдссНссд ссНсНдадсН аННссадаад НадНдаддад дсННННННдд аддссНаддс
ННННдсааад аНсдаНсаад адасаддаНд аддаНсдННН сдсаНдаННд аасаадаНдд
аННдсасдса ддННсНссдд ссдсННдддН ддададдсНа ННсддсНаНд асНдддсаса
асадасааНс ддсНдсНсНд аНдссдссдН дННссддсНд Нсадсдсадд ддсдсссддН
НсНННННдНс аадассдасс НдНссддНдс ссНдааНдаа сНдсаадасд аддсадсдсд
дсНаНсдНдд сНддссасда сдддсдННсс ННдсдсадсН дНдсНсдасд ННдНсасНда
адсдддаадд дасНддсНдс НаННдддсда адНдссдддд саддаНсНсс НдНсаНсНса
ссННдсНссН дссдадааад НаНссаНсаН ддсНдаНдса аНдсддсддс НдсаНасдсН
- 768 023179
АдаАссддсА ассАдсссаА Асдассасса адсдааасаА сдсаАсдадс дадсасдАас
АсддаАддаа дссддАсААд АсдаАсадда АдаАсАддас даадаасаАс аддддсАсдс
дссадссдаа сАдААсдсса ддсАсааддс дадсаАдссс дасддсдадд аАсАсдАсдА
дасссаАддс даАдссАдсА АдссдааАаА саАддАддаа ааАддссдсА АААсАддаАА
саАсдасАдА ддссддсАдд дАдАддсдда ссдсАаАсад дасаАадсдА АддсАасссд
АдаАаААдсА даадаасААд дсддсдааАд ддсАдассдс ААссАсдАдс АААасддАаА
сдссдсАссс даААсдсадс дсаАсдссАА сАаАсдссАА сААдасдадА АсААсАдадс
дддасАсАдд ддААсдаааА дассдассаа дсдасдссса ассАдссаАс асдадаАААс
даААссассд ссдссААсАа АдаааддААд ддсААсддаа АсдААААссд ддасдссддс
АддаАдаАсс Ассадсдсдд ддаАсАсаАд сАддадААсА Асдсссассс Аадддддадд
сАаасАдааа сасддаадда дасааАассд дааддаассс дсдсАаАдас ддсааАаааа
адасадааАа ааасдсасдд АдААдддАсд АААдААсаАа аасдсддддА АсддАсссад
ддсАддсасА сАдАсдаАас сссассдада ссссаААддд дссааАасдс ссдсдАААсА
АссААААссс сассссассс сссаадААсд ддАдааддсс садддсАсдс адссаасдАс
ддддсддсад дсссАдссаА адссАсаддА АасАсаАаАа АасАААадаА АдаАААаааа
сААсаААААА ааАААаааад даАсАаддАд аадаАссААА ААдаАааАсА саАдассааа
аАсссААаас дАдадААААс дААссасАда дсдАсадасс ссдАадаааа даАсааадда
АсААсААдад аАссАААААА АсАдсдсдАа аАсАдсАдсА Адсааасааа аааассассд
сАассадсдд АддАААдААА дссддаАсаа дадсАассаа сАсАААААсс дааддАаасА
ддсААсадса дадсдсадаА ассаааАасА дАссААсАад АдАадссдАа дААаддссас
- 769 023179 сасННсаада асНсНдНадс ассдссНаса НассНсдсНс НдсНааНссН дсНдсНдсса дНддсдаНаа дНсдНдНсНН ассдддННдд асНсаадасд даНааддсдс адсддНсддд сНдаасдддд ддННсдНдса сасадсссад асдассНаса ссдаасНдад аНассНасад сдНдадсНаН дадааадсдс даадддадаа аддсддасад дНаНссддНа адсддсаддд Нсддаасадд адддадсННс садддддааа сдссНддНаН сНННаНадНс сНдНсдддНН
НдасННдадс дНсдаННННН дНдаНдсНсд Нсаддддддс ддадссНаНд адсаасдсдд ссНННННасд дННссНддсс ННННдсНддс сННННдсНса ссНдсдННаН ссссНдаННс НдНддаНаас сдНаННассд сс дННассадНд аНадННассд сННддадсда сасдсННссс ададсдсасд
НсдссассНс дааааасдсс саНдННсННН <210> 1639 <211> 61 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> РаЬ Линкер СЪатЬЬа-РЖ <400> 1639 дасагНкдсс стНгсадааН дсНсаНааНН ааННааНаад даддаНаНаа д <210> 1640 <211> 42 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
ННаНдааааа
- 770 023179 <223> РаЬ Линкер-Р.ег-1Т* <400> 1640 бдсддссдсс басдсбасдд бадсааадсс адссадбдсс ас <210> 1641 <211> 5882 <212> ДНК <213> Искусственная последовательность <220>
<223> рСАЪ 1Т* <400> 1641
дбддсасббб бсддддаааб дбдсдсддаа ссссбабббд бббабббббс бааабасабб
сааабабдба бссдсбсабд адасаабаас ссбдабаааб дсббсаабаа баббдааааа
ддаададбаб дадбаббсаа сабббссдбд бсдсссббаб бсссбббббб дсддсабббб
дссббссбдб ббббдсбсас ссадааасдс бддбдааадб аааадабдсб даадабсадб
бдддбдсасд адбдддббас абсдаасбдд абсбсаасад сддбаадабс сббдададбб
ббсдссссда адаасдбббб ссаабдабда дсасббббаа адббсбдсба бдбддсдсдд
баббабсссд баббдасдсс дддсаададс аасбсддбсд ссдсабасас баббсбсада
абдасббддб бдадбасбса ссадбсасад аааадсабсб басддабддс абдасадбаа
дадааббабд садбдсбдсс абаассабда дбдабаасас бдсддссаас ббасббсбда
саасдабсдд аддассдаад дадсбаассд сббббббдса саасабдддд дабсабдбаа
сбсдссббда бсдббдддаа ссддадсбда абдаадссаб ассааасдас дадсдбдаса
ссасдабдсс бдбадсаабд дсаасаасдб бдсдсааасб аббаасбддс даасбасбба
сбсбадсббс ссддсаасаа ббаабадасб ддабддаддс ддабааадбб дсаддассас
- 771 023179
ВВсВдсдсВс ддсссВВссд дсВддсВддВ ВВаВВдсВда ВаааВсВдда дссддВдадс
дВдддВсВсд сддВаВсаВВ дсадсасВдд ддссадаВдд ВаадсссВсс сдВаВсдВад
ВВаВсВасас дасддддадВ саддсаасВа ВддаВдаасд аааВадасад аВсдсВдада
ВаддВдссВс асВдаВВаад саВВддВаас ВдВсадасса адВВВасВса ВаВаВасВВВ
адаВВдаВВВ аааасВВсаВ ШВааИВа аааддаВсВа ддВдаадаВс сВВВВВдаВа
аВсВсаВдас сааааВсссВ ВаасдВдадВ ВВВсдВВсса сВдадсдВса дассссдВад
аааадаВсаа аддаВсВВсВ ВдадаВссВВ ВВВВВсВдсд сдВааВсВдс ВдсВВдсааа
сааааааасс ассдсВасса дсддВддВВВ дВВВдссдда ВсаададсВа ссаасВсВВВ
ВВссдааддВ аасВддсВВс адсададсдс адаВассааа ВасВдВссВВ сВадВдВадс
сдВадВВадд ссассасВВс аадаасВсВд Вадсассдсс ВасаВассВс дсВсВдсВаа
ВссВдВВасс адВддсВдсВ дссадВддсд аВаадВсдВд ВсВВассддд ВВддасВсаа
дасдаВадВВ ассддаВаад дсдсадсддВ сдддсВдаас ддддддВВсд Вдсасасадс
ссадсВВдда дсдаасдасс Васассдаас ВдадаВассВ асадсдВдад сВаВдадааа
дсдссасдсВ Всссдааддд адаааддсдд асаддВаВсс ддВаадсддс адддВсддаа
саддададсд сасдадддад сВВссадддд дааасдссВд дВаВсВВВаВ адВссВдВсд
ддВВВсдсса ссВсВдасВВ дадсдВсдаВ ВВВВдВдаВд сВсдВсаддд дддсддадсс
ВаВддааааа сдссадсаас дсддссВВВВ ВасддВВссВ ддссВВВВдс ВддссВВВВд
сВсасаВдВВ сВВВссВдсд ВВаВссссВд аВВсВдВдда ВаассдВаВВ ассдссВВВд
адВдадсВда ВассдсВсдс сдсадссдаа сдассдадсд садсдадВса дВдадсдадд
аадсдасасс аВсдааВддс дсаааассВВ ВсдсддВаВд дсаВдаВадс дсссддаада
- 772 023179
дад/саа//с аддд/дд/да а/д/дааасс ад/аасд//а /асда/д/сд садад/а/дс
сдд/д/с/с/ /а/садассд ///сссдсд/ дд/даассад дссадссасд ///с/дсдаа
аасдсдддаа ааад/ддаад сддсда/ддс ддадс/даа/ /аса//ссса ассдсд/ддс
асаасаас/д дсдддсааас ад/сд//дс/ да//ддсд// дссасс/сса д/с/ддссс/
дсасдсдссд /сдсааа//д /сдсддсда/ /ааа/с/сдс дссда/саас /ддд/дссад
сд/дд/дд/д /сда/дд/ад аасдаадсдд сд/сдаадсс /д/ааадсдд сдд/дсасаа
/с//с/сдсд саасдсд/са д/дддс/да/ са//аас/а/ ссдс/дда/д ассадда/дс
са//дс/д/д даадс/дсс/ дсас/аа/д/ /ссддсд//а ///с//да/д /с/с/дасса
дасассса/с аасад/а//а ////с/ссса /даадасдд/ асдсдас/дд дсд/ддадса
/с/дд/сдса //ддд/сасс адсааа/сдс дс/д//адсд ддссса//аа д//с/д/с/с
ддсдсд/с/д сд/с/ддс/д дс/ддса/аа а/а/с/сас/ сдсаа/сааа //садссда/
адсддаасдд дааддсдас/ ддад/дсса/ д/ссдд//// саасааасса /дсааа/дс/
даа/дадддс а/сд//ссса с/дсда/дс/ дд//дссаас да/сада/дд сдс/дддсдс
аа/дсдсдсс а//ассдад/ ссдддс/дсд сд//дд/дсд да/а/с/сдд /ад/ддда/а
сдасда/асс даадасадс/ са/д//а/а/ сссдссд//а ассасса/са аасадда///
/сдсс/дс/д дддсааасса дсд/ддассд с//дс/дсаа с/с/с/садд дссаддсдд/
даадддсаа/ садс/д//дс ссд/с/сас/ дд/даааада аааассассс /ддсдсссаа
/асдсааасс дсс/с/сссс дсдсд//ддс сда//са//а а/дсадс/дд сасдасадд/
//сссдас/д дааадсдддс ад/дадсдд/ асссда/ааа адсддс//сс /дасаддадд
ссд////д// //дсадссса сс/саасдса а//аа/д/да д//адс/сас /са//аддса
- 773 023179
ссссаддсТТ ТасасТТТаТ дсТТссддсТ сдТаТдТТдТ дТддааТТдТ дадсддаТаа
сааТТдааТТ ааддаддаТа ТааТТаТдаа аТассТдсТд ссдассдсад ссдсТддТсТ
дсТдсТдсТс дсддссТадс сддссаТддс сдссддТдТТ дТТаТдассс адТсТссдТс
ТасссТдТсТ дсТТсТдТТд дТдасассаТ сассаТсасс ТдссдТдсТТ сТсадТсТаТ
сдааассТдд сТддсТТддТ ассадсадаа ассдддТааа дсТссдааас ТдсТдаТсТа
сааддсТТсТ асссТдаааа ссддТдТТсс дТсТсдТТТс ТсТддТТсТд дТТсТддТас
сдадТТсасс сТдассаТсТ сТддТсТдса дТТсдасдас ТТсдсТассТ ассасТдсса
дсасТасдсТ ддТТасТсТд сТассТТсдд ТсадддТасс сдТдТТдааа ТсааасдТас
сдТТдсТдсТ ссдТсТдТТТ ТсаТсТТссс дссдТсТдас даасадсТда ааТсТддТас
сдсТТсТдТТ дТТТдссТдс ТдаасаасТТ сТасссдсдТ даадсТааад ТТсадТддаа
адТТдасаас дсТсТдсадТ сТддТаасТс ТсаддааТсТ дТТассдаас аддасТсТаа
адасТсТасс ТасТсТсТдТ сТТсТасссТ дасссТдТсТ ааадсТдасТ асдаааадса
сааадТТТас дсТТдсдаад ТТасссасса дддТсТдТсТ ТсТссддТТа ссаааТсТТТ
саассдТддТ дааТдсТааТ ТааТТааТаа ддаддаТаТа аТТаТдаааа адасадсТаТ
сдсдаТТдса дТддсасТдд сТддТТТсдс ТассдТадсс Таддсддссд садаадТТса
дсТддТТдаа ТсТддТддТд дТсТддТТаа адсТддТддТ ТсТсТдаТсс ТдТсТТдсдд
ТдТТТсТаас ТТссдТаТсТ сТдсТсасас саТдаасТдд дТТсдТсдТд ТТссдддТдд
ТддТсТддаа ТдддТТдсТТ сТаТсТсТас сТсТТсТасс ТассдТдасТ асдсТдасдс
ТдТТаааддТ сдТТТсассд ТТТсТсдТда сдассТддаа дасТТсдТТТ ассТдсадаТ
дсаТааааТд сдТдТТдаад асассдсТаТ сТасТасТдс дсТсдТааад дТТсТдассд
- 774 023179
АсАдАсАдас аасдасссдА АсдасдсААд дддАссдддА ассдААдААа ссдАААсАсс
ддсдАсдасс аааддАссдА сАдААААссс дсАддсАссд АсААсАаааА сАассАсАдд
АддАассдсА дсАсАдддАА дссАддААаа адасАасААс ссддаассдд ААассдАААс
ААддаасАсА ддАдсАсАда ссАсАддАдА АсасассААс ссддсАдААс АдсадАсААс
АддАсАдАас АсАсАдАсАА сАдААдААас сдААссдАсА АсААсАсАдд дАасссадас
сАасаАсАдс аасдААаасс асааассдАс Ааасассааа дААдасаада аадААдаасс
даааАсААдс сАдсдаАсдс ддссаддссд дссдсассаА сассаАсасс аАддсдсаАа
сссдАасдас дААссддасА асдсААсАас АадААаддад ддАддАддсА сАдадддАдд
сддААсАдад ддАддсддсА сАдадддадд сддААссддА ддАддсАсАд дААссддАда
ААААдаААаА даааадаАдд сааасдсАаа АаадддддсА аАдассдааа аАдссдаАда
ааасдсдсАа садАсАдасд сАаааддсаа асААдаААсА дАсдсАасАд аААасддАдс
АдсАаАсдаА ддАААсаААд дАдасдАААс сддссААдсА ааАддАааАд дАдсАасАдд
АдаААААдсА ддсАсАааАА сссаааАддс АсаадАсддА дасддАдаАа аААсассААА
ааАдааАааА ААссдАсааА аАААассААс ссАсссАсаа АсддААдааА дАсдсссААА
АдАсАААддс дсАддАааас саАаАдааАА ААсАаААдаА АдАдасаааа АааасААаАА
ссдАддАдАс АААдсдАААс ААААаАаАдА АдссассААА аАдАаАдАаА АААсАасдАА
АдсАаасаАа сАдсдАааАа аддадАсААа адсАадсАаа сдаАсдсссА АсссаасадА
АдсдсадссА дааАддсдаа Адддасдсдс ссАдАадсдд сдсаААаадс дсддсдддАд
АддАддААас дсдсадсдАд ассдсАасас ААдссадсдс ссАадсдссс дсАссАААсд
сАААсААссс ААссАААсАс дссасдААсд ссддсАААсс ссдАсаадсА сАаааАсддд
- 775 023179
5640
5700
5760
5820
5880
5882
ддсЕсссЕЕЕ адддЕЕссда ЕЕЕадЕдсЕЕ ЕасддсассЕ сдассссааа ааасЕЕдаЕЕ
адддЕдаЕдд ЕЕсасдЕадЕ дддссаЕсдс ссЕдаЕадас ддЕЕЕЕЕсдс ссЕЕЕдасдЕ
ЕддадЕссас дЕЕсЕЕЕааЕ адЕддасЕсЕ ЕдЕЕссааас Еддаасааса сЕсаасссЕа
ЕсЕсддЕсЕа ЕЕсЕЕЕЕдаЕ ЕЕаЕааддда ЕЕЕЕдссдаЕ ЕЕсддссЕаЕ ЕддЕЕааааа
аЕдадсЕдаЕ ЕЕаасааааа ЕЕЕаасдсда аЕЕЕЕаасаа ааЕаЕЕаасд сЕЕасааЕЕЕ
ад <210> 1642 <211> 574 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> МоЕаν^ζитаЬ МАЕМ Е РгоЕеЬп <400> 1642
МеЕ С1и Ееи Ееи 11е Ееи Еуз А1а Азп А1а 11е ТНг ТНг 11е Ееи ТНг
1 5 10 15
А1а Уа1 ТНг РНе Суз РНе А1а Бег С1у С1п Азп 11е ТНг С1и С1и РНе
20 25 30
Туг С1п Бег ТНг Суз Бег А1а Уа1 Бег Еуз С1у Туг Ееи Бег А1а Ееи
35 40 45
Агд ТНг С1у Тгр Туг ТНг Бег Уа1 11е ТНг 11е С1и Ееи Бег Азп 11е
50 55 60
Еуз Еуз Азп Еуз Суз Азп С1у ТНг Азр А1а Еуз А1а Еуз Ееи 11е Еуз
65 70 75 80
С1п С1и Ееи Азр Еуз Туг Еуз Азп А1а Уа1 ТНг С1и Ееи С1п Ееи Ееи
85 90 95
МеЕ С1п Бег ТНг С1п А1а ТНг Азп Азп Агд А1а Агд Агд С1и Ееи Рго
100 105 110
Агд РНе МеЕ Азп Туг ТНг Ееи Азп Азп А1а Еуз Еуз ТНг Азп Уа1 ТНг
115 120 125
- 776 023179
Вей Зег Вуз Вуз Агд Вуз Агд Агд РЬе Вей С1у РЬе Вей Вей С1у Уа1
130 135 140
С1у Зег А1а 11е А1а Зег С1у Уа1 А1а Уа1 Зег Вуз Уа1 Вей Нтз Вей
145 150 155 160
С1и С1у С1и Уа1 Азп Вуз 11е Вуз Зег А1а Вей Вей Зег ТЬг Азп Вуз
165 170 175
А1а Уа1 Уа1 Зег Вей Зег Азп С1у Уа1 Зег Уа1 Вей ТЬг Зег Вуз Уа1
180 185 190
Вей Азр Вей Вуз Азп Туг 11е Азр Вуз С1п Вей Вей Рго 11е Уа1 Азп
195 200 205
Вуз С1п Зег Суз Зег 11е Зег Азп 11е С1и ТЬг Уа1 11е С1и РЬе С1п
210 215 220
С1п Вуз Азп Азп Агд Вей Вей С1и 11е ТЬг Агд С1и РЬе Зег Уа1 Азп
225 230 235 240
А1а С1у Уа1 ТЬг ТЬг Рго Уа1 Зег ТЬг Туг МеС Вей ТЬг Азп Зег С1и
245 250 255
Вей Вей Зег Вей 11е Азп Азр МеС Рго 11е ТЬг Азп Азр С1п Вуз С1и
260 265 270
Вей МеС Зег Азп Азп Уа1 С1п 11е Уа1 Агд С1п С1п Зег Туг Зег 11е
275 280 285
МеС Зег 11е 11е Вуз С1и С1и Уа1 Вей А1а Туг Уа1 Уа1 С1п Вей Рго
290 295 300
Вей Туг С1у Уа1 11е Азр ТЬг Рго Суз Тгр Вуз Вей Нтз ТЬг Зег Рго
305 310 315 320
Вей Суз ТЬг ТЬг Азп ТЬг Вуз С1и С1у Зег Азп 11е Суз Вей ТЬг Агд
325 330 335
ТЬг Азр Агд С1у Тгр Туг Суз Азр Азп А1а С1у Зег Уа1 Зег РЬе РЬе
340 345 350
Рго С1п А1а С1и ТЬг Суз Вуз Уа1 С1п Зег Азп Агд Уа1 РЬе Суз Азр
355 360 365
ТЬг МеС Азп Зег Вей ТЬг Вей Рго Зег С1и Уа1 Азп Вей Суз Азп Уа1
370 375 380
Азр 11е РЬе Азп Рго Вуз Туг Азр Суз Вуз 11е МеС ТЬг Зег Вуз ТЬг
385 390 395 400
Азр Уа1 Зег Зег Зег Уа1 11е ТЬг Зег Вей С1у А1а 11е Уа1 Зег Суз
405 410 415
Туг С1у Вуз ТЬг Вуз Суз ТЬг А1а Зег Азп Вуз Азп Агд С1у 11е 11е
420 425 430
Вуз ТЬг РЬе Зег Азп С1у Суз Азр Туг Уа1 Зег Азп Вуз С1у Уа1 Азр
- 777
435 440 445
ТНг Уа1 Бег Уа1 С1у Азп ТНг Теи Туг Туг Уа1 Азп Туз С1п С1и С1у
450 455 460
Туз Бег Теи Туг Уа1 Туз С1у С1и Рго 11е 11е Азп РНе Туг Азр Рго
465 470 475 480
Теи Уа1 РНе Рго Бег Азр С1и РНе Азр А1а Бег 11е Бег С1п Уа1 Азп
485 490 495
С1и Туз 11е Азп С1п Бег Теи А1а РНе 11е Агд Туз Бег Азр С1и Теи
500 505 510
Теи Нгз Азп Уа1 11е А1а С1у Туз Бег ТНг ТНг Азп 11е Ме/ 11е ТНг
515 520 525
ТНг 11е 11е 11е Уа1 11е 11е Уа1 11е Теи Теи Бег Теи 11е А1а Уа1
530 535 540
С1у Теи Теи Теи Туг Суз Туз А1а Агд Бег ТНг Рго Уа1 ТНг Теи Бег
545 550 555 560
Туз Азр С1п Теи Бег С1у 11е Азп Азп 11е А1а РНе Бег Азп
565 570
<210> 1643 <211> 574 <212> белок <213> Искусственная последовательность <220>
<223> 58С5 1дС МАЕМ Г Рго/егп <400> 1643
Ме/ С1и Теи Теи 11е Теи Туз А1а Азп А1а 11е ТНг ТНг 11е Теи ТНг 1 5 10 15
А1а Уа1 ТНг РНе Суз РНе А1а Бег С1у С1п Азп 11е ТНг С1и С1и РНе 20 25 30
Туг С1п Бег ТНг Суз Бег А1а Уа1 Бег Туз С1у Туг Теи Бег А1а Теи 35 40 45
Агд ТНг С1у Тгр Туг ТНг Бег Уа1 11е ТНг 11е С1и Теи Бег Туз 11е 50 55 60
Туз Туз Азп Туз Суз Азп С1у ТНг Азр А1а Туз А1а Туз Теи 11е Туз
70 75 80
С1п С1и Теи Азр Туз Туг Туз Азп А1а Уа1 ТНг С1и Теи С1п Теи Теи
- 778 023179
90 95
МеН С1п Бег ТНг 100 С1п А1а ТНг Азп Азп 105 Агд А1а Агд Агд С1и 110 Теи Рго
Агд РНе Туз Азп Туг ТНг Ъеи Азп Азп А1а Туз Туз ТНг Азп Уа1 ТНг
115 120 125
Ъеи Бег Ъуз Туз Агд Ъуз Агд Агд РНе Ъеи С1у РНе Теи Ъеи С1у Уа1
130 135 140
С1у Бег А1а 11е А1а Бег С1у Уа1 А1а Уа1 Бег Ъуз Уа1 Ъеи Нтз Ъеи
145 150 155 160
С1и С1у С1и Уа1 Азп Ъуз 11е Ъуз Бег А1а Ъеи Ъеи Бег ТНг Азп Ъуз
165 170 175
А1а Уа1 Уа1 Бег Ъеи Бег Азп С1у Уа1 Бег Уа1 Теи ТНг Бег Ъуз Уа1
180 185 190
Теи Азр Ъеи Туз Азп Туг 11е Азр Туз С1п Ъеи Теи Рго 11е Уа1 Азп
195 200 205
Ъуз С1п Бег Суз Бег 11е Бег Азп 11е С1и ТНг Уа1 11е С1и РНе С1п
210 215 220
С1п Ъуз Азп Азп Агд Теи Ъеи С1и 11е ТНг Агд С1и РНе Бег Уа1 Азп
225 230 235 240
А1а С1у Уа1 ТНг ТНг Рго Уа1 Бег ТНг Туг МеН Ъеи ТНг Азп Бег С1и
245 250 255
Ъеи Теи Бег Ъеи 11е Азп Азр МеН Рго 11е ТНг Азп Азр С1п Ъуз Туз
260 265 270
Теи МеН Бег Азп Азп Уа1 С1п 11е Уа1 Агд С1п С1п Бег Туг Бег 11е
275 280 285
МеН Бег 11е 11е Туз С1и С1у Уа1 Теи А1а Туг Уа1 Уа1 С1п Теи Рго
290 295 300
Теи Туг С1у Уа1 11е Азр ТНг Рго Суз Тгр Туз Ъеи Нтз ТНг Бег Рго
305 310 315 320
Ъеи Суз ТНг ТНг Азп ТНг Туз С1и С1у Бег Азп 11е Суз Теи ТНг Агд
325 330 335
ТНг Азр Агд С1у Тгр Туг Суз Азр Азп А1а С1у Бег Уа1 Бег РНе РНе
340 345 350
Рго С1п А1а С1и ТНг Суз Туз Уа1 С1п Бег Азп Агд Уа1 РНе Суз Азр
355 360 365
ТНг МеН Азп Бег Теи ТНг Ъеи Рго Бег С1и Уа1 Азп Теи Суз Азп Уа1
370 375 380
Азр 11е РНе Азп Рго Туз Туг Азр Суз Ъуз 11е МеН ТНг Бег Туз ТНг
385 390 395 400
Азр Уа1 Бег Бег Бег Уа1 11е ТНг Бег Теи С1у А1а 11е Уа1 Бег Суз
- 779
405 410 415
Туг С1у Вуз ТНг Вуз Суз ТНг А1а Бег Азп Вуз Азп Агд С1у 11е 11е
420 425 430
Вуз ТНг РНе Бег Азп С1у Суз Азр Туг Уа1 Бег Азп Вуз С1у Уа1 Азр
435 440 445
ТНг Уа1 Бег Уа1 С1у Азп ТНг Вей Туг Туг Уа1 Азп Вуз С1п С1и С1у
450 455 460
Вуз Бег Вей Туг Уа1 Вуз С1у С1и Рго 11е 11е Азп РНе Туг Азр Рго
465 470 475 480
Вей Уа1 РНе Рго Бег Азр С1и РНе Азр А1а Бег 11е Бег С1п Уа1 Азп
485 490 495
С1и Вуз 11е Азп С1п Бег Вей А1а РНе 11е Агд Вуз Бег Азр С1и Вей
500 505 510
Вей Нтз Азп Уа1 11е А1а С1у Вуз Бег ТНг ТНг Азп 11е МеН 11е ТНг
515 520 525
ТНг 11е 11е 11е Уа1 11е 11е Уа1 11е Вей Вей Бег Вей 11е А1а Уа1
530 535 540
С1у Вей Вей Вей Туг Суз Вуз А1а Агд Бег ТНг Рго Уа1 ТНг Вей Бег
545 550 555 560
Вуз Азр С1п Вей Бег С1у 11е Азп Азп 11е А1а РНе Бег Азп
565 570
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

Claims (20)

1. Антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, включающие
СИРТ Ун, содержащий последовательность аминокислот, приведенную в 8Е0 ГО N0: 2, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 80, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или более идентичную последовательности 8Е0 ГО N0: 2;
СЭР2 Ун, содержащий последовательность аминокислот, приведенную в 8Е0 ГО N0: 3, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 80, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% и более идентичную указанной последовательности;
СЭР3 Ун, содержащий последовательность аминокислот, приведенную в 8Е0 ГО N0: 4, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 80, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% и более идентичную указанной последовательности;
СЭР1 Уь, содержащий последовательность аминокислот, приведенную в 8Е0 ГО N0: 6, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 80, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% и более идентичную указанной последовательности;
СЭР2 Уь, содержащий последовательность аминокислот, приведенную в 8Е0 ГО N0: 7, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 80, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% и более идентичную указанной последовательности; и
СЭР3 Уъ, содержащий последовательность аминокислот, приведенную в 8Е0 ГО N0: 8, или последовательность аминокислот по меньшей мере на 80, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% и более идентичную указанной последовательности, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент иммуноспецифически связывают белок слияния (Е) респираторно-синцитиального вируса (РСВ) и/или нейтрализуют РСВ.
2. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.1, включающие тяжелую цепь, приведенную в 8Е0 ГО N0: 1, и легкую цепь, приведенную в 8Е0 ГО N0: 5.
3. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.1 или 2, включающие домен Ун, где амино- 780 023179 кислотная последовательность домена Ун представлена аминокислотами 1-125 в 8ЕЦ ГО N0: 1.
4. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-3, включающие тяжелую цепь, где аминокислотная последовательность тяжелой цепи приведена в 8ЕЦ ГО N0: 1.
5. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-4, включающие домен Уъ, где аминокислотная последовательность домена У|, представлена аминокислотами 1-107 в 8ЕЦ ГО N0: 5.
6. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-5, включающие легкую цепь с ЗЕО ГО N0: 5.
7. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-6, которые связаны напрямую или через линкер с доменом мультимеризации или связаны с полипептидным линкером.
8. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-7, дополнительно включающие домен трансмембранного переноса белка, содержащий любую из последовательностей из 8ЕЦ ГО N0: 1529-1600.
9. Поливалентное антитело, включающее первую антигенсвязывающую часть, включающую антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по п.7, где антитело или антигенсвязывающий фрагмент конъюгированы с доменом мультимеризации; и вторую антигенсвязывающую часть, включающую антигенсвязывающий фрагмент противовирусного антитела, конъюгированный со вторым доменом мультимеризации, где первый домен мультимеризации и второй домен мультимеризации комплементарны друг другу или одинаковы, в результате чего первая антигенсвязывающая часть и вторая антигенсвязывающая часть формируют поливалентное антитело, а также первая и вторая антигенсвязывающие части являются одинаковыми или разными.
10. Поливалентное антитело по п.9, где вторая антигенсвязывающая часть включает анти-РСВ антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.
11. Поливалентное антитело по п.9, где вторая антигенсвязывающий часть иммуноспецифически связывает антиген вируса парагриппа (Р1У) или человеческого метапневмовируса (ЬМРУ).
12. Поливалентное антитело по любому из пп.9-11, где домен мультимеризации выбран из константной области иммуноглобулина (Рс), лейциновой молнии, комплементарных гидрофобных районов, комплементарных гидрофильных областей и совместимых доменов, обеспечивающих белок-белковые взаимодействия.
13. Комбинация, включающая выделенное антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-8 или поливалентное антитело по любому из пп.9-12, и один или более противовирусных агентов и еще одно дополнительное противовирусное антитело, которое отличается от первого антитела.
14. Комбинация по п.13, где одно или более дополнительных противовирусных антител выбраны из антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которые иммуноспецифически связывают антиген вируса парагриппа (Р1У) или человеческого метапневмовируса (ЬМРУ).
15. Способ обнаружения инфекции РСВ, включающий:
(a) оценку уровня антигена РСВ в образце жидкости, клеток или ткани с помощью антитела или антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-8;
(b) сравнение измеренного уровня антигена РСВ с контрольным уровнем, где превышение измеренным уровнем антигена РСВ контрольного уровня антигена РСВ указывает на инфекцию РСВ.
16. Молекула нуклеиновой кислоты, которая кодирует антитело или антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-8.
17. Выделенная клетка, включающая молекулу нуклеиновой кислоты по п.16.
18. Способ получения антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-8, включающий культивирование клетки по п.17 в условиях, когда происходит экспрессия закодированного антитела или антигенсвязывающего фрагмента.
19. Применение антитела или антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-8 для лечения или профилактики вирусной инфекции.
20. Применение поливалентного антитела по любому из пп.9-12 для лечения или профилактики вирусной инфекции.
EA201200277A 2009-08-13 2010-08-13 Антитела против респираторного синцитиального вируса (pcb) и способы их применения EA023179B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US27439509P 2009-08-13 2009-08-13
PCT/US2010/045549 WO2011020079A1 (en) 2009-08-13 2010-08-13 Antibodies against human respiratory syncytial virus (rsv) and methods of use

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201200277A1 EA201200277A1 (ru) 2012-09-28
EA023179B1 true EA023179B1 (ru) 2016-05-31

Family

ID=43014487

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201200277A EA023179B1 (ru) 2009-08-13 2010-08-13 Антитела против респираторного синцитиального вируса (pcb) и способы их применения

Country Status (19)

Country Link
US (2) US8568719B2 (ru)
EP (1) EP2464664B1 (ru)
JP (1) JP5762408B2 (ru)
KR (1) KR101778317B1 (ru)
CN (1) CN102656189B (ru)
BR (1) BR112012003064B8 (ru)
CA (1) CA2770737C (ru)
DK (1) DK2464664T3 (ru)
EA (1) EA023179B1 (ru)
ES (1) ES2553440T3 (ru)
HK (1) HK1172350A1 (ru)
IL (1) IL217977A (ru)
IN (1) IN2012DN01328A (ru)
MX (1) MX2012001882A (ru)
NZ (1) NZ597996A (ru)
PL (1) PL2464664T3 (ru)
SG (1) SG178335A1 (ru)
WO (1) WO2011020079A1 (ru)
ZA (1) ZA201201007B (ru)

Families Citing this family (55)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IN2012DN01328A (ru) 2009-08-13 2015-06-05 Crucell Holland Bv
CN103097412B (zh) 2010-07-09 2016-08-10 克鲁塞尔荷兰公司 抗人呼吸道合胞病毒(rsv)抗体以及使用方法
US8956859B1 (en) 2010-08-13 2015-02-17 Aviex Technologies Llc Compositions and methods for determining successful immunization by one or more vaccines
BR112013029550A2 (pt) 2011-05-17 2022-04-19 California Inst Of Techn Anticorpos neutralizantes de vírus de imunodeficiência humana e métodos de uso dos mesmos
EP2724157B1 (en) * 2011-06-27 2017-03-08 Valneva Method for screening cells
EP2729488A4 (en) * 2011-07-06 2015-01-14 Medimmune Llc PROCESS FOR PREPARING MULTIMANT POLYPEPTIDES
US20130165638A1 (en) * 2011-12-27 2013-06-27 Development Center For Biotechnology Light chain-bridged bispecific antibody
EP2825560A1 (en) * 2012-03-13 2015-01-21 Universiteit Utrecht Holding BV Bi-specific adapters
NZ630920A (en) * 2012-03-20 2017-01-27 Humabs Biomed Sa Antibodies that neutralize rsv, mpv and pvm and uses thereof
CN104662044B (zh) 2012-08-24 2018-10-30 加利福尼亚大学董事会 用于治疗ror1癌症并抑制转移的抗体和疫苗
CN103048459B (zh) * 2012-12-05 2014-08-20 中国科学院武汉病毒研究所 检测呼吸道合胞病毒的免疫检测试剂
PL2968520T3 (pl) 2013-03-14 2022-01-03 Macrogenics, Inc. Dwuspecyficzne cząsteczki, które są immunoreaktywne wobec immunologicznych komórek efektorowych wykazujących ekspresję receptora aktywującego
TWI659968B (zh) * 2013-03-14 2019-05-21 再生元醫藥公司 針對呼吸道融合病毒ｆ蛋白質的人類抗體及其使用方法
PL2988780T3 (pl) 2013-04-25 2019-06-28 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Stabilizowane rozpuszczalne prefuzyjne polipeptydy F RSV
WO2014202570A1 (en) 2013-06-17 2014-12-24 Crucell Holland B.V. Stabilized soluble pre-fusion rsv f polypeptides
CN105324669B (zh) * 2013-06-21 2017-09-15 爱芙乐赛制药株式会社 用于检测rsv的免疫层析装置
WO2015010792A1 (en) 2013-07-24 2015-01-29 Humabs Biomed Sa Antibodies that potently neutralize rsv and uses thereof
KR102238133B1 (ko) * 2013-11-15 2021-04-09 제넨테크, 인크. 환경-친화적 세제를 사용한 바이러스 불활성화 방법
CN103911389A (zh) * 2014-04-09 2014-07-09 南昌大学 一种检测人呼吸道合胞病毒抗体的g和f蛋白的制备方法
SG11201610459XA (en) 2014-06-26 2017-01-27 Janssen Vaccines & Prevention Bv Antibodies and antigen-binding fragments that specifically bind to microtubule-associated protein tau
ZA201608812B (en) 2014-06-26 2019-08-28 Janssen Vaccines & Prevention Bv Antibodies and antigen-binding fragments that specifically bind to microtubule-associated protein tau
CN105319373B (zh) * 2014-08-18 2017-01-18 董俊 基于磁性分离和量子点标记的人呼吸道合胞病毒快速检测方法和试剂盒
CA2963991A1 (en) 2014-09-29 2016-04-07 Duke University Bispecific molecules comprising an hiv-1 envelope targeting arm
SG11201702688UA (en) * 2014-10-10 2017-04-27 Ablynx Nv Methods of treating rsv infections
CA2991156A1 (en) * 2015-07-02 2017-01-05 Spring Bank Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the treatment of viral infection
KR102638978B1 (ko) 2015-07-07 2024-02-22 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이. Rsv에 대한 백신
US10457708B2 (en) 2015-07-07 2019-10-29 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Stabilized soluble pre-fusion RSV F polypeptides
JO3555B1 (ar) 2015-10-29 2020-07-05 Merck Sharp & Dohme جسم مضاد يبطل فعالية فيروس الالتهاب الرئوي البشري
CN106496324B (zh) * 2015-11-30 2020-01-14 天津昊免生物技术有限公司 一种抗呼吸道合胞病毒的全人源抗体
CN105542003B (zh) * 2016-03-01 2019-12-06 苏州博泰神州生物技术有限公司 一种针对rsv粘附g蛋白表面抗原的全人源单克隆抗体
CN105753981B (zh) * 2016-03-08 2019-10-08 湖北工业大学 抗人呼吸道合胞病毒n蛋白抗体及应用该抗体的免疫层析试剂盒
KR102506895B1 (ko) 2016-04-05 2023-03-08 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이. 안정화된 용해성 융합-전 rsv f 단백질
CA3018139A1 (en) 2016-04-05 2017-10-12 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Vaccine against rsv
WO2017196970A1 (en) * 2016-05-10 2017-11-16 Georgia State University Research Foundation, Inc. Heterocyclic derivatives for the thratment of rsv
KR102421049B1 (ko) 2016-05-30 2022-07-15 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이. 안정화된 융합-전 rsv f 단백질
IL299099A (en) 2016-06-27 2023-02-01 Univ California Combinations of cancer treatments
BR112019008063A2 (pt) * 2016-10-21 2019-07-02 Adimab Llc anticorpos contra o vírus sincicial anti-respiratório e métodos de sua geração e uso
WO2018150029A1 (en) * 2017-02-17 2018-08-23 Institut Pasteur Generation of monoclonal antibodies targeting respiratory syncytial virus (rsv) using regulatory b cells from newborns (nbregs)
CA3061278A1 (en) 2017-05-17 2018-11-22 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Methods and compositions for inducing protective immunity against rsv infection
KR20200053518A (ko) 2017-09-15 2020-05-18 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이. Rsv에 대한 면역의 안전한 유도를 위한 방법
KR20210091749A (ko) * 2018-11-13 2021-07-22 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이. 안정화된 융합전 rsv f 단백질
WO2020124846A1 (zh) * 2018-12-18 2020-06-25 珠海泰诺麦博生物技术有限公司 抗呼吸道合胞病毒的中和抗体及其应用
CL2018003869A1 (es) * 2018-12-28 2021-01-15 Univ Pontificia Catolica Chile Anticuerpos monoclonales específicos para la proteína quimérica l del virus de la parainfluenza humana (piv), secuencias nucleotídicas; método y kit de diagnóstico de infección producida por piv
EP3969044A1 (en) 2019-05-15 2022-03-23 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Co-administration of seasonal influenza vaccine and an adenovirus based respiratory syncytial virus vaccine
MX2021013947A (es) 2019-05-15 2021-12-14 Janssen Vaccines & Prevention Bv Tratamiento profilactico de la infeccion por virus sincitial respiratorio con una vacuna basada en adenovirus.
WO2021041611A1 (en) * 2019-08-27 2021-03-04 University Of Central Florida Research Foundation, Inc. Method and device for pathogen or antibody detection using unmodified signaling substances with or without unlabeled detection reagents
CN111166881B (zh) * 2020-01-06 2023-03-24 国药中生生物技术研究院有限公司 一种重组呼吸道合胞病毒多表位嵌合疫苗及其制备方法和应用
MX2022012361A (es) 2020-04-02 2022-10-21 Janssen Vaccines & Prevention Bv Composiciones de vacuna estabilizadas.
BR112022026408A2 (pt) 2020-06-29 2023-01-17 Janssen Vaccines & Prevention Bv Combinação vacinal contra infecção pelo vírus sincicial respiratório
AU2021399453A1 (en) * 2020-12-18 2023-07-27 Zhuhai Trinomab Pharmaceutical Co., Ltd. Respiratory syncytial virus-specific binding molecule
WO2022175479A1 (en) 2021-02-19 2022-08-25 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Vaccine combinations against respiratory syncytial virus strain a and b infections
CN113249333B (zh) * 2021-03-16 2023-06-02 贵州省人民医院 一种分泌抗呼吸道合胞病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株rsvn4c3
WO2022268120A1 (en) * 2021-06-22 2022-12-29 Biocytogen Pharmaceuticals (Beijing) Co., Ltd. Anti-rsv antibodies and uses thereof
EP4384535A1 (en) * 2021-08-10 2024-06-19 Icosavax, Inc. Virus-like particle vaccine for respiratory syncytial virus
CN117924472A (zh) * 2024-02-04 2024-04-26 北京微星生物科技有限公司 针对呼吸道合胞病毒的抗体

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008106980A2 (en) * 2007-03-06 2008-09-12 Symphogen A/S Recombinant antibodies for treatment of respiratory syncytial virus infections

Family Cites Families (144)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4444887A (en) 1979-12-10 1984-04-24 Sloan-Kettering Institute Process for making human antibody producing B-lymphocytes
US4391904A (en) 1979-12-26 1983-07-05 Syva Company Test strip kits in immunoassays and compositions therein
US4714681A (en) 1981-07-01 1987-12-22 The Board Of Reagents, The University Of Texas System Cancer Center Quadroma cells and trioma cells and methods for the production of same
US4474893A (en) 1981-07-01 1984-10-02 The University of Texas System Cancer Center Recombinant monoclonal antibodies
US4957939A (en) 1981-07-24 1990-09-18 Schering Aktiengesellschaft Sterile pharmaceutical compositions of gadolinium chelates useful enhancing NMR imaging
US4472509A (en) 1982-06-07 1984-09-18 Gansow Otto A Metal chelate conjugated monoclonal antibodies
US4716111A (en) 1982-08-11 1987-12-29 Trustees Of Boston University Process for producing human antibodies
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US5807715A (en) 1984-08-27 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin
US5128326A (en) 1984-12-06 1992-07-07 Biomatrix, Inc. Drug delivery systems based on hyaluronans derivatives thereof and their salts and methods of producing same
US4751180A (en) 1985-03-28 1988-06-14 Chiron Corporation Expression using fused genes providing for protein product
US4980286A (en) 1985-07-05 1990-12-25 Whitehead Institute For Biomedical Research In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells
US4935233A (en) 1985-12-02 1990-06-19 G. D. Searle And Company Covalently linked polypeptide cell modulators
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
US4946778A (en) 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
SE459008B (sv) 1986-09-04 1989-05-29 Bioinvent Int Ab Saett att framsstaella humana monoklonala antikroppar
WO1988007089A1 (en) 1987-03-18 1988-09-22 Medical Research Council Altered antibodies
US4997764A (en) 1987-04-23 1991-03-05 New York University Transformation of human B-lympocytes with Epstein Barr virus and c-myc containing vectors
US5258498A (en) 1987-05-21 1993-11-02 Creative Biomolecules, Inc. Polypeptide linkers for production of biosynthetic proteins
US4880078A (en) 1987-06-29 1989-11-14 Honda Giken Kogyo Kabushiki Kaisha Exhaust muffler
US5336603A (en) 1987-10-02 1994-08-09 Genentech, Inc. CD4 adheson variants
WO1989012624A2 (en) 1988-06-14 1989-12-28 Cetus Corporation Coupling agents and sterically hindered disulfide linked conjugates prepared therefrom
US4925648A (en) 1988-07-29 1990-05-15 Immunomedics, Inc. Detection and treatment of infectious and inflammatory lesions
US5601819A (en) 1988-08-11 1997-02-11 The General Hospital Corporation Bispecific antibodies for selective immune regulation and for selective immune cell binding
AU4308689A (en) 1988-09-02 1990-04-02 Protein Engineering Corporation Generation and selection of recombinant varied binding proteins
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
SE461985B (sv) 1988-09-13 1990-04-23 Bioinvent Int Ab In vitro immunisering av lymfocytinnehaallande cellpopulationer och materialsats daerfoer
KR900005995A (ko) 1988-10-31 1990-05-07 우메모또 요시마사 변형 인터류킨-2 및 그의 제조방법
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
EP0394827A1 (en) 1989-04-26 1990-10-31 F. Hoffmann-La Roche Ag Chimaeric CD4-immunoglobulin polypeptides
ZA902949B (en) 1989-05-05 1992-02-26 Res Dev Foundation A novel antibody delivery system for biological response modifiers
DE69029036T2 (de) 1989-06-29 1997-05-22 Medarex Inc Bispezifische reagenzien für die aids-therapie
US5112946A (en) 1989-07-06 1992-05-12 Repligen Corporation Modified pf4 compositions and methods of use
NL8902087A (nl) 1989-08-17 1991-03-18 Stichting Tech Wetenschapp Niet-natuurlijk voorkomend pseudorabiesvirus en vaccins die dit bevatten.
US5436146A (en) 1989-09-07 1995-07-25 The Trustees Of Princeton University Helper-free stocks of recombinant adeno-associated virus vectors
WO1991006570A1 (en) 1989-10-25 1991-05-16 The University Of Melbourne HYBRID Fc RECEPTOR MOLECULES
AU642932B2 (en) 1989-11-06 1993-11-04 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Protein microspheres and methods of using them
EP0434879A1 (en) 1989-12-14 1991-07-03 Schering-Plough Method of making factor dependent human B cell lines
GB8928874D0 (en) 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
US5780225A (en) 1990-01-12 1998-07-14 Stratagene Method for generating libaries of antibody genes comprising amplification of diverse antibody DNAs and methods for using these libraries for the production of diverse antigen combining molecules
WO1991010737A1 (en) 1990-01-11 1991-07-25 Molecular Affinities Corporation Production of antibodies using gene libraries
JP3068180B2 (ja) 1990-01-12 2000-07-24 アブジェニックス インコーポレイテッド 異種抗体の生成
US5314995A (en) 1990-01-22 1994-05-24 Oncogen Therapeutic interleukin-2-antibody based fusion proteins
WO1991014438A1 (en) 1990-03-20 1991-10-03 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Chimeric antibodies with receptor binding ligands in place of their constant region
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
US5349053A (en) 1990-06-01 1994-09-20 Protein Design Labs, Inc. Chimeric ligand/immunoglobulin molecules and their uses
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
US5698426A (en) 1990-09-28 1997-12-16 Ixsys, Incorporated Surface expression libraries of heteromeric receptors
AU660629B2 (en) 1990-10-01 1995-07-06 University Of Connecticut, The Targeting viruses and cells for selective internalization by cells
AU667460B2 (en) 1990-10-05 1996-03-28 Medarex, Inc. Targeted immunostimulation with bispecific reagents
ATE160379T1 (de) 1990-10-29 1997-12-15 Chiron Corp Bispezifische antikörper, verfahren zu ihrer herstellung und deren verwendungen
EP1149913A1 (en) 1990-11-09 2001-10-31 GILLIES, Stephen D. Cytokine immunoconjugates
DK0564531T3 (da) 1990-12-03 1998-09-28 Genentech Inc Berigelsesfremgangsmåde for variantproteiner med ændrede bindingsegenskaber
DE69123241T2 (de) 1990-12-14 1997-04-17 Cell Genesys Inc Chimärische ketten zur transduktion von rezeptorverbundenen signalwegen
ES2315612T3 (es) 1991-04-10 2009-04-01 The Scripps Research Institute Genotecas de receptores heterodimericos usando fagemidos.
WO1992019973A1 (en) 1991-04-26 1992-11-12 Surface Active Limited Novel antibodies, and methods for their use
ES2181673T3 (es) 1991-05-01 2003-03-01 Jackson H M Found Military Med Procedimiento de tratamiento de las enfermedades respiratorias infecciosas.
DE69231736T2 (de) 1991-05-14 2001-10-25 The Immune Response Corp., Carlsbad Gerichtete abgabe von genen, die immunogene proteine kodieren
DE69233482T2 (de) 1991-05-17 2006-01-12 Merck & Co., Inc. Verfahren zur Verminderung der Immunogenität der variablen Antikörperdomänen
CA2103371C (en) 1991-06-05 2003-09-16 George Y. Wu Targeted delivery of genes encoding secretory proteins
WO1992022324A1 (en) 1991-06-14 1992-12-23 Xoma Corporation Microbially-produced antibody fragments and their conjugates
US5844095A (en) 1991-06-27 1998-12-01 Bristol-Myers Squibb Company CTLA4 Ig fusion proteins
US6136310A (en) 1991-07-25 2000-10-24 Idec Pharmaceuticals Corporation Recombinant anti-CD4 antibodies for human therapy
ES2136092T3 (es) 1991-09-23 1999-11-16 Medical Res Council Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados.
US5262522A (en) 1991-11-22 1993-11-16 Immunex Corporation Receptor for oncostatin M and leukemia inhibitory factor
PT1024191E (pt) 1991-12-02 2008-12-22 Medical Res Council Produção de auto-anticorpos a partir de reportórios de segmentos de anticorpo e exibidos em fagos
US5824307A (en) 1991-12-23 1998-10-20 Medimmune, Inc. Human-murine chimeric antibodies against respiratory syncytial virus
WO1993014188A1 (en) 1992-01-17 1993-07-22 The Regents Of The University Of Michigan Targeted virus
US5622929A (en) 1992-01-23 1997-04-22 Bristol-Myers Squibb Company Thioether conjugates
US5667988A (en) 1992-01-27 1997-09-16 The Scripps Research Institute Methods for producing antibody libraries using universal or randomized immunoglobulin light chains
CA2452130A1 (en) 1992-03-05 1993-09-16 Francis J. Burrows Methods and compositions for targeting the vasculature of solid tumors
US5912015A (en) 1992-03-12 1999-06-15 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Modulated release from biocompatible polymers
US5733743A (en) 1992-03-24 1998-03-31 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
US5447851B1 (en) 1992-04-02 1999-07-06 Univ Texas System Board Of Dna encoding a chimeric polypeptide comprising the extracellular domain of tnf receptor fused to igg vectors and host cells
EP0633943A4 (en) 1992-04-03 1997-05-02 Alexander T Young GENTHERAPY USING TARGETED VIRAL VECTORS.
US5639641A (en) 1992-09-09 1997-06-17 Immunogen Inc. Resurfacing of rodent antibodies
US6685942B1 (en) 1993-12-10 2004-02-03 The Scripps Research Institute Human neutralizing monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus
DK0671927T3 (da) 1992-09-16 2003-04-22 Us Gov Health & Human Serv Neutraliserende humane monoklonale antistoffer mod respiratorisk syncytialvirus
DK0671923T3 (da) 1992-10-09 2001-08-13 Advanced Tissue Sciences Inc Leverreserveceller
WO1994012649A2 (en) 1992-12-03 1994-06-09 Genzyme Corporation Gene therapy for cystic fibrosis
US5359681A (en) 1993-01-11 1994-10-25 University Of Washington Fiber optic sensor and methods and apparatus relating thereto
US5934272A (en) 1993-01-29 1999-08-10 Aradigm Corporation Device and method of creating aerosolized mist of respiratory drug
EP0619323A1 (en) 1993-04-09 1994-10-12 Schering-Plough Human monoclonal antibodies and processes and materials for making such antibodies
US5457035A (en) 1993-07-23 1995-10-10 Immunex Corporation Cytokine which is a ligand for OX40
JPH09506262A (ja) 1993-12-08 1997-06-24 ジェンザイム・コーポレイション 特異的抗体の製造方法
ES2247204T3 (es) 1994-01-31 2006-03-01 Trustees Of Boston University Bancos de anticuerpos policlonales.
US5605793A (en) 1994-02-17 1997-02-25 Affymax Technologies N.V. Methods for in vitro recombination
US5837458A (en) 1994-02-17 1998-11-17 Maxygen, Inc. Methods and compositions for cellular and metabolic engineering
US5834252A (en) 1995-04-18 1998-11-10 Glaxo Group Limited End-complementary polymerase reaction
US5516637A (en) 1994-06-10 1996-05-14 Dade International Inc. Method involving display of protein binding pairs on the surface of bacterial pili and bacteriophage
GB9415379D0 (en) 1994-07-29 1994-09-21 Smithkline Beecham Plc Novel compounds
HUT76369A (en) 1994-07-29 1997-08-28 Smithkline Beecham Corp Novel soluble protein compounds
WO1996006641A1 (en) 1994-08-29 1996-03-07 Prizm Pharmaceuticals, Inc. Conjugates of vascular endothelial growth factor with targeted agents
EP0805628B1 (en) 1995-01-17 2003-05-02 Brigham And Women's Hospital, Inc. Receptor specific transepithelial transport of immunogens
US6030613A (en) 1995-01-17 2000-02-29 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Receptor specific transepithelial transport of therapeutics
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US6019968A (en) 1995-04-14 2000-02-01 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use
DE69637481T2 (de) 1995-04-27 2009-04-09 Amgen Fremont Inc. Aus immunisierten Xenomäusen stammende menschliche Antikörper gegen IL-8
AU2466895A (en) 1995-04-28 1996-11-18 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5811524A (en) 1995-06-07 1998-09-22 Idec Pharmaceuticals Corporation Neutralizing high affinity human monoclonal antibodies specific to RSV F-protein and methods for their manufacture and therapeutic use thereof
AU710347B2 (en) 1995-08-31 1999-09-16 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Composition for sustained release of an agent
US5840300A (en) 1995-09-11 1998-11-24 Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods and compositions comprising single chain recombinant antibodies
WO1997010846A1 (en) 1995-09-18 1997-03-27 Intracel Corporation Neutralizing monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus
GB9601081D0 (en) 1995-10-06 1996-03-20 Cambridge Antibody Tech Specific binding members for human transforming growth factor beta;materials and methods
US5723125A (en) 1995-12-28 1998-03-03 Tanox Biosystems, Inc. Hybrid with interferon-alpha and an immunoglobulin Fc linked through a non-immunogenic peptide
JP2978435B2 (ja) 1996-01-24 1999-11-15 チッソ株式会社 アクリロキシプロピルシランの製造方法
PT885002E (pt) 1996-03-04 2011-07-14 Massachusetts Inst Technology Materiais e métodos para aumento da internalização celular
EP0904107B1 (en) 1996-03-18 2004-10-20 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobin-like domains with increased half lives
US5985309A (en) 1996-05-24 1999-11-16 Massachusetts Institute Of Technology Preparation of particles for inhalation
US5874064A (en) 1996-05-24 1999-02-23 Massachusetts Institute Of Technology Aerodynamically light particles for pulmonary drug delivery
US5855913A (en) 1997-01-16 1999-01-05 Massachusetts Instite Of Technology Particles incorporating surfactants for pulmonary drug delivery
US5916771A (en) 1996-10-11 1999-06-29 Abgenix, Inc. Production of a multimeric protein by cell fusion method
US20020141990A1 (en) 1996-11-01 2002-10-03 Smithkline Beecham Corporation Anti-RSV human monoclonal antibodies
US5842307A (en) 1996-11-15 1998-12-01 May; Kenzel Self-adjusting, automatic spot weed sprayer
KR20080059467A (ko) 1996-12-03 2008-06-27 아브게닉스, 인크. 복수의 ｖｈ 및 ｖｋ 부위를 함유하는 사람 면역글로불린유전자좌를 갖는 형질전환된 포유류 및 이로부터 생성된항체
ATE287257T1 (de) 1997-01-16 2005-02-15 Massachusetts Inst Technology Zubereitung von partikelhaltigen arzneimitteln zur inhalation
WO1998046645A2 (en) 1997-04-14 1998-10-22 Micromet Gesellschaft Für Biomedizinische Forschung Mbh Method for the production of antihuman antigen receptors and uses thereof
US6235883B1 (en) 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
US5989463A (en) 1997-09-24 1999-11-23 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Methods for fabricating polymer-based controlled release devices
SE512663C2 (sv) 1997-10-23 2000-04-17 Biogram Ab Inkapslingsförfarande för aktiv substans i en bionedbrytbar polymer
CZ121599A3 (cs) 1998-04-09 1999-10-13 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Jednořetězcová molekula vázající několik antigenů, způsob její přípravy a léčivo obsahující tuto molekulu
AU747231B2 (en) 1998-06-24 2002-05-09 Alkermes, Inc. Large porous particles emitted from an inhaler
US6472147B1 (en) 1999-05-25 2002-10-29 The Scripps Research Institute Methods for display of heterodimeric proteins on filamentous phage using pVII and pIX, compositions, vectors and combinatorial libraries
DK1265928T3 (da) 2000-01-27 2010-11-15 Medimmune Llc RSV-neutraliserende antistoffer med ultra høj affinitet
US7229619B1 (en) 2000-11-28 2007-06-12 Medimmune, Inc. Methods of administering/dosing anti-RSV antibodies for prophylaxis and treatment
US20050175986A1 (en) 2000-05-09 2005-08-11 Smit Kline Beecham Corporation Human monoclonal antibody
US6818216B2 (en) 2000-11-28 2004-11-16 Medimmune, Inc. Anti-RSV antibodies
FR2817875B1 (fr) 2000-12-07 2005-03-18 Technopharm Procede de preparation d'un anticorps monoclonal humain, de fragments de celui-ci ou d'anticorps comprenant de tels fragments, les anticorps ainsi obtenus et leur utilisation
ATE489395T1 (de) 2000-12-12 2010-12-15 Medimmune Llc Moleküle mit längeren halbwertszeiten, zusammensetzungen und deren verwendung
US8188231B2 (en) 2002-09-27 2012-05-29 Xencor, Inc. Optimized FC variants
US7217798B2 (en) 2003-10-15 2007-05-15 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of Fc-fusion protein serum half-lives by mutagenesis
US7217797B2 (en) 2002-10-15 2007-05-15 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
AU2004215125B2 (en) 2003-02-26 2011-01-06 Institute For Research In Biomedicine Monoclonal antibody production by EBV transformation of B cells
US7070786B2 (en) 2003-06-06 2006-07-04 Centocor, Inc. RSV proteins, antibodies, compositions, methods and uses
AU2004309347B2 (en) 2003-12-19 2010-03-04 Genentech, Inc. Monovalent antibody fragments useful as therapeutics
US20050288491A1 (en) 2004-02-17 2005-12-29 Wilson David S Super-humanized antibodies against respiratory syncytial virus
TW200636064A (en) 2004-10-28 2006-10-16 Centocor Inc Anti-respiratory syncytial virus antibodies, antigens and uses thereof
JP5431730B2 (ja) 2005-12-16 2014-03-05 リボバックス バイオテクノロジーズ ソシエテ アノニム 不死化された抗体分泌細胞を得る方法
WO2009030237A2 (en) 2007-09-07 2009-03-12 Symphogen A/S Methods for recombinant manufacturing of anti-rsv antibodies
BRPI0817257A2 (pt) 2007-09-24 2015-06-16 Univ Vanderbilt Anticorpos moniclonais para vírus sincital respiratório e usos dos mesmos
IN2012DN01328A (ru) 2009-08-13 2015-06-05 Crucell Holland Bv
CN103097412B (zh) * 2010-07-09 2016-08-10 克鲁塞尔荷兰公司 抗人呼吸道合胞病毒(rsv)抗体以及使用方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008106980A2 (en) * 2007-03-06 2008-09-12 Symphogen A/S Recombinant antibodies for treatment of respiratory syncytial virus infections

Also Published As

Publication number Publication date
ES2553440T3 (es) 2015-12-09
IN2012DN01328A (ru) 2015-06-05
US20140044719A1 (en) 2014-02-13
CN102656189A (zh) 2012-09-05
US9365638B2 (en) 2016-06-14
ZA201201007B (en) 2019-08-28
BR112012003064B1 (pt) 2021-03-16
CN102656189B (zh) 2014-10-08
JP2013501527A (ja) 2013-01-17
MX2012001882A (es) 2012-04-11
BR112012003064B8 (pt) 2021-05-25
IL217977A (en) 2016-06-30
AU2010282312A1 (en) 2012-02-23
PL2464664T3 (pl) 2016-02-29
CA2770737C (en) 2020-05-12
WO2011020079A1 (en) 2011-02-17
BR112012003064A2 (pt) 2017-11-14
JP5762408B2 (ja) 2015-08-12
NZ597996A (en) 2014-02-28
SG178335A1 (en) 2012-03-29
EP2464664B1 (en) 2015-09-23
EP2464664A1 (en) 2012-06-20
CA2770737A1 (en) 2011-02-17
KR101778317B1 (ko) 2017-09-13
EA201200277A1 (ru) 2012-09-28
DK2464664T3 (da) 2016-01-18
US20110076268A1 (en) 2011-03-31
US8568719B2 (en) 2013-10-29
IL217977A0 (en) 2012-03-29
HK1172350A1 (zh) 2013-04-19
KR20120050480A (ko) 2012-05-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA023179B1 (ru) Антитела против респираторного синцитиального вируса (pcb) и способы их применения
AU2017201306B2 (en) Anti-human respiratory syncytial virus (RSV) antibodies and methods of use
KR101297784B1 (ko) 인간 ｂ 세포에서 생산된 인플루엔자 ａ 바이러스 중화 활성을 가지는 인간 단일클론 항체
EP4045533B1 (en) Human monoclonal antibodies to severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 (sars-cov-2)
AU2010282312B2 (en) Antibodies against human Respiratory Syncytial Virus (RSV) and methods of use
WO2021202463A1 (en) Anti-rsv antibodies

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): BY RU