EA023175B1 - Таргетирование раковых клеток с использованием наночастиц - Google Patents

Таргетирование раковых клеток с использованием наночастиц Download PDF

Info

Publication number
EA023175B1
EA023175B1 EA201070409A EA201070409A EA023175B1 EA 023175 B1 EA023175 B1 EA 023175B1 EA 201070409 A EA201070409 A EA 201070409A EA 201070409 A EA201070409 A EA 201070409A EA 023175 B1 EA023175 B1 EA 023175B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
polymer
nanoparticle
ligand
molecular weight
gene
Prior art date
Application number
EA201070409A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201070409A1 (ru
Inventor
Стефен И. Зейл
Мир Муккарам Али
Original Assignee
Бинд Терапьютикс, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Бинд Терапьютикс, Инк. filed Critical Бинд Терапьютикс, Инк.
Publication of EA201070409A1 publication Critical patent/EA201070409A1/ru
Publication of EA023175B1 publication Critical patent/EA023175B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
    • A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/136—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline having the amino group directly attached to the aromatic ring, e.g. benzeneamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/542—Carboxylic acids, e.g. a fatty acid or an amino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
    • A61K47/6927—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores
    • A61K47/6929—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle
    • A61K47/6931—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer
    • A61K47/6935—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer the polymer being obtained otherwise than by reactions involving carbon to carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamides or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
    • A61K47/6927—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores
    • A61K47/6929—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle
    • A61K47/6931—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer
    • A61K47/6935—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer the polymer being obtained otherwise than by reactions involving carbon to carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamides or polyglycerol
    • A61K47/6937—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer the polymer being obtained otherwise than by reactions involving carbon to carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamides or polyglycerol the polymer being PLGA, PLA or polyglycolic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/141—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers
    • A61K9/146—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers with organic macromolecular compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
    • A61K9/5146—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyamines, polyanhydrides
    • A61K9/5153—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5192—Processes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C275/00—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C275/04—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C275/06—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic and saturated carbon skeleton
    • C07C275/16—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic and saturated carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C275/00—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C275/04—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C275/20—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton
    • C07C275/24—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of urea groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G63/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain of the macromolecule
    • C08G63/66—Polyesters containing oxygen in the form of ether groups
    • C08G63/664—Polyesters containing oxygen in the form of ether groups derived from hydroxy carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G63/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain of the macromolecule
    • C08G63/68—Polyesters containing atoms other than carbon, hydrogen and oxygen
    • C08G63/685—Polyesters containing atoms other than carbon, hydrogen and oxygen containing nitrogen
    • C08G63/6852—Polyesters containing atoms other than carbon, hydrogen and oxygen containing nitrogen derived from hydroxy carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G63/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain of the macromolecule
    • C08G63/68—Polyesters containing atoms other than carbon, hydrogen and oxygen
    • C08G63/692—Polyesters containing atoms other than carbon, hydrogen and oxygen containing phosphorus
    • C08G63/6922—Polyesters containing atoms other than carbon, hydrogen and oxygen containing phosphorus derived from hydroxy carboxylic acids
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/902—Specified use of nanostructure
    • Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/902—Specified use of nanostructure
    • Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
    • Y10S977/905—Specially adapted for travel through blood circulatory system
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/902—Specified use of nanostructure
    • Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
    • Y10S977/906—Drug delivery
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/902—Specified use of nanostructure
    • Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
    • Y10S977/908—Mechanical repair performed/surgical
    • Y10S977/911—Cancer cell destruction
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/902—Specified use of nanostructure
    • Y10S977/904—Specified use of nanostructure for medical, immunological, body treatment, or diagnosis
    • Y10S977/915—Therapeutic or pharmaceutical composition

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Polyethers (AREA)
  • Processes Of Treating Macromolecular Substances (AREA)

Abstract

Изобретение в основном относится к полимерам и макромолекулам, в частности к полимерам, используемым в частицах, таких как наночастицы. Один аспект изобретения направлен на способ разработки наночастиц с желаемыми свойствами. В одной группе вариантов воплощения изобретения способ включает получение библиотек наночастиц, имеющих высококонтролируемые свойства, которые могут быть образованы путем смешивания вместе двух или более макромолекул в различных соотношениях. Одна или несколько из таких макромолекул могут представлять собой полимерный конъюгат составляющего фрагмента с биосовместимым полимером. В некоторых случаях наночастица может содержать лекарственное средство. Другие аспекты настоящего изобретения направлены на способы с использованием библиотек наночастиц.

Description

Настоящая заявка заявляет приоритет относительно временной заявки США № 60/976197, Айогпеу Носке! 3 № ΒΒΖ-014-1, поданной 28 сентября 2007 г., озаглавленной Таргетирование раковых клеток с использованием наночастиц; и международной заявки РСТ/и§2007/007927, АНогпеу Носке! № ΒΒΖ005РС, поданной 30 марта 2007 г., озаглавленной Системы для направленной доставки терапевтических средств, которые все включены в настоящую заявку посредством ссылки во всей их полноте. Кроме того, содержание любых патентов, патентных заявок и ссылки, указанные в тексте настоящего описания, включены в настоящую заявку посредством ссылки во всей их полноте.
Область изобретения
Настоящее изобретение в общем смысле относится к фармацевтическим композициям, включающим мишень-специфические наночастицы, полезные для лечения рака.
Предпосылки изобретения
Доставка пациенту лекарственного средства с контролируемым высвобождением активного ингредиента в течение десятилетий является областью активных исследований, и стимулом для этого явились многие последние разработки в области полимеров. Кроме того, полимерные системы контролируемого высвобождения могут быть разработаны специально для обеспечения уровня лекарственного средства в оптимальных пределах в течение более длительного периода времени по сравнению с другими способами доставки лекарственных средств, повышая таким образом эффективность лекарственного средства и сводя к минимуму проблемы податливости пациента лечению.
Биоразлагаемые частицы были разработаны в качестве носителей для длительного непрерывного высвобождения, которые используют при введении малых молекул лекарственных средств, белковых и пептидных лекарственных средств и нуклеиновых кислот. Лекарственные средства типично являются инкапсулированными в полимерной матрице, которая является биоразлагаемой и биосовместимой. По мере разложения полимера и/или диффундирования лекарственного средства из полимера, лекарственное средство высвобождается в организм.
Полимерные системы направленной доставки с контролируемым высвобождением (например, прицельно направленные на конкретную ткань или тип клеток или прицельно направленные на конкретную пораженную заболеванием ткань, но не на нормальную ткань) являются желательными, поскольку это снижает количество лекарственного средства, присутствующего в тканях организма, которые не являются мишенями. Это является особенно важным при лечении состояния, такого как рак, где желательно, чтобы цитотоксическую дозу лекарственного средства можно было доставить к раковым клеткам, не убивая при этом окружающую нераковую ткань. Эффективная направленная доставка лекарственного средства должна снижать нежелательные, а иногда и угрожающие жизни побочные эффекты, типичные для противораковой терапии. Кроме того, направленная доставка может обеспечить возможность достижения лекарственными средствами определенных тканей, которые иначе были бы недостижимыми без наночастиц направленной доставки. Соответственно существует необходимость в разработке систем доставки, которые могут доставлять терапевтические уровни лекарственного средства для лечения заболеваний, таких как рак, при этом также снижая побочные эффекты у пациента.
Краткое описание изобретения
Остается необходимость в композициях, полезных для лечения или профилактики или уменьшения интенсивности одного или нескольких симптомов рака, в частности рака, который экспрессирует простата-специфический мембранный антиген (Р8МА), включая, но не ограничиваясь этим, рак предстательной железы, немелкоклеточный рак легкого, колоректальную карциному и глиобластому и солидные опухоли, экспрессирующие Р8МА в опухолевой неоваскулатуре. В одном аспекте изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, включающую множество мишень-специфических наночастиц, которые включают терапевтическое средство; где указанные наночастицы содержат таргетирующие составляющие, присоединенные к ним, где таргетирующая составляющая представляет собой низкомолекулярный Р8МА лиганд.
В одном варианте воплощения фармацевтической композиции по настоящему изобретению наночастица содержит количество таргетирующей составляющей, эффективное для лечения рака предстательной железы у субъекта, нуждающегося в этом. В другом варианте воплощения наночастица содержит количество таргетирующей составляющей, эффективное для лечения солидных опухолей, экспрессирующих Р8МА в опухолевой неоваскулатуре у субъекта, нуждающегося в этом. В следующем варианте воплощения низкомолекулярный Р8МА лиганд имеет К1 в пределах от 0,5 до 10 нМ.
В одном варианте воплощения фармацевтической композиции по настоящему изобретению наночастица содержит количество терапевтического средства, эффективное для лечения рака предстательной железы у субъекта, нуждающегося в этом. В другом варианте воплощения наночастица содержит количество терапевтического средства, эффективное для лечения солидных опухолей, экспрессирующих Р8МА в опухолевой неоваскулатуре у субъекта, нуждающегося в этом.
В другом варианте воплощения мишень-специфических наночастиц по настоящему изобретению низкомолекулярный Р8МА лиганд имеет молекулярную массу меньше чем 1000 г/моль. В конкретных вариантах воплощения низкомолекулярный Р8МА лиганд выбран из группы, включающей соединения I,
- 1 023175
II, III и IV. В других вариантах воплощения низкомолекулярный Р5МЛ лиганд представляет собой
и его энантиомеры, стереоизомеры, ротамеры, таутомеры, диастереомеры или рацематы.
В других вариантах воплощения мишень-специфических наночастиц по настоящему изобретению наночастица включает полимерную матрицу. В одном варианте воплощения полимерная матрица включает два или более полимеров.
В другом варианте воплощения полимерная матрица включает полиэтилены, поликарбонаты, полиангидриды, полиоксикислоты, полипропилфумераты, поликапролактоны, полиамиды, полиацетали, простые полиэфиры, сложные полиэфиры, поли(ортоэфиры), полицианоакрилаты, поливиниловые спирты, полиуретаны, полифосфазены, полиакрилаты, полиметакрилаты, полицианоакрилаты, соединения полимочевины, полистиролы или полиамины или их сочетания. Еще в одном варианте воплощения полимерная матрица включает один или несколько сложных полиэфиров, полиангидридов, простых полиэфиров, полиуретанов, полиметакрилатов, полиакрилатов или полицианоакрилатов.
В другом варианте воплощения по меньшей мере один полимер представляет собой полиалкиленгликоль. Еще в одном варианте воплощения полиалкиленгликоль представляет собой полиэтиленгликоль. В следующем варианте воплощения по меньшей мере один полимер представляет собой сложный полиэфир.
В другом варианте воплощения сложный полиэфир выбран из группы, включающей РЙОЛ, РЙЛ, РОЛ и поликапролактоны. Еще в одном варианте воплощения сложный полиэфир представляет собой РЙОЛ или РЬЛ. В следующем варианте воплощения полимерная матрица включает сополимер, состоящий из двух или более полимеров.
В другом варианте воплощения сополимер представляет собой сополимер полиалкиленгликоля и сложного полиэфира. Еще в одном варианте воплощения сополимер представляет собой сополимер РЙОЛ или РЬЛ и ПЭГ. В следующем варианте воплощения полимерная матрица включает РЙОЛ или РЬЛ и сополимер РЬОЛ или РЬЛ и ПЭГ.
В другом варианте воплощения полимерная матрица включает содержащий липидную концевую группу полиалкиленгликоль и сложный полиэфир. В другом варианте воплощения фармацевтической композиции по настоящему изобретению полимерная матрица включает содержащий липидную концевую группу ПЭГ и РЙОЛ. В одном варианте воплощения липид имеет формулу V. В конкретном варианте воплощения липид представляет собой 1,2 дистеароил-зп-глицеро-3-фосфоэтаноламин (ΌδΡΕ) и его соли, например натриевую соль.
В другом варианте воплощения фармацевтической композиции по настоящему изобретению часть полимерной матрицы ковалентно связана с низкомолекулярным Р5МЛ лигандом. В другом варианте воплощения полимерная матрица ковалентно связана с низкомолекулярным Р5МЛ лигандом через свободный конец ПЭГ. Еще в одном варианте воплощения полимерная матрица ковалентно связана с низкомолекулярным Р5МЛ лигандом через карбоксильную группу на свободном конце ПЭГ. В следующем варианте воплощения полимерная матрица ковалентно связана с низкомолекулярным Р5МЛ лигандом через малеимидную функциональную группу на свободном конце ПЭГ.
В другом варианте воплощения фармацевтической композиции по настоящему изобретению наночастица имеет отношение лигандсвязанного полимера к нефункционализированному полимеру, эффективное для лечения рака предстательной железы. В другом варианте воплощения полимеры полимерной матрицы имеют молекулярную массу, эффективную для лечения рака предстательной железы. Еще в одном варианте воплощения наночастица имеет поверхностный заряд, эффективный для лечения рака предстательной железы.
В другом варианте воплощения фармацевтической композиции по настоящему изобретению указанная система является подходящей для мишень-специфического лечения заболевания или расстройства и доставки терапевтического средства. В другом варианте воплощения наночастица дополнительно включает терапевтическое средство. В одном варианте воплощения терапевтическое средство является связанным с поверхностью наночастицы, является инкапсулированным внутри нее, окружено ею или диспергировано в ней. Еще в одном варианте воплощения терапевтическое средство является инкапсулированным в гидрофобном ядре наночастицы. В конкретных вариантах воплощения терапевтическое средство выбрано из группы, включающей митоксантрон и доцетаксел.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способ лечения рака предстательной железы у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту эффективного количества фармацевтической композиции по настоящему изобретению. В одном варианте воплощения фармацевтическую композицию вводят непосредственно в предстательную железу субъекта. Еще в одном варианте воплощения фармацевтическую композицию вводят непосредственно в раковые клетки предстательной железы. В другом варианте воплощения фармацевтическую композицию вводят непосредственно в раковые клетки предстательной железы путем инъекции в ткань, включающую раковые клетки предстательной железы.
- 2 023175
В следующем варианте воплощения фармацевтическую композицию вводят субъекту путем имплантации наночастиц на участке или около раковых клеток предстательной железы в процессе хирургического удаления опухоли. В другом варианте воплощения фармацевтическую композицию вводят системно или путем внутривенного введения.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способ получения наночастицы, где наночастица имеет отношение лигандсвязанного полимера к нефункционализированному полимеру, эффективное для лечения рака предстательной железы, включающий обеспечение терапевтического средства; обеспечение полимера; обеспечение низкомолекулярного Р5МА лиганда; смешивание полимера с терапевтическим средством с получением частиц; и связывание этих частиц с низкомолекулярным Р5МА лигандом. В одном варианте воплощения способа полимер включает сополимер, состоящий из двух или более полимеров. В другом варианте воплощения сополимер представляет собой сополимер РЙОА и ПЭГ или РЬЛ и ПЭГ.
В другом аспекте изобретение обеспечивает способ получения наночастицы, где наночастица имеет отношение лигандсвязанного полимера к нефункционализированному полимеру, эффективное для лечения рака предстательной железы, включающий обеспечение терапевтического средства; обеспечение первого полимера; обеспечение низкомолекулярного Р5МА лиганда; взаимодействие первого полимера с низкомолекулярным Р5МА лигандом с получением лигандсвязанного полимера; и смешивание лигандсвязанного полимера со вторым нефункционализированным полимером и терапевтическим средством; таким образом получают наночастицу. В одном варианте воплощения этого способа первый полимер включает сополимер, состоящий из двух или более полимеров. В другом варианте воплощения второй нефункционализированный полимер включает сополимер, состоящий из двух или более полимеров.
В одном варианте воплощения способов, описанных выше, сополимер представляет собой сополимер РЙОА и ПЭГ или РЬЛ и ПЭГ. В другом варианте воплощения первый полимер представляет собой сополимер РЙСА и ПЭГ, где ПЭГ содержит карбоксильную группу на свободном конце. В другом варианте воплощения первый полимер сначала взаимодействует с липидом с образованием полимер/липидного конъюгата, который затем смешивают с низкомолекулярным Р8МЛ лигандом. Еще в одном варианте воплощения липид представляет собой 1,2 дистеароил-зп-глицеро-3-фосфоэтаноламин (Э5РЕ) и его соли, например натриевую соль.
В другом варианте воплощения фармацевтической композиции по настоящему изобретению наночастица содержит количество таргетирующей составляющей, эффективное для лечения рака у субъекта, нуждающегося в этом, где Р5МЛ экспрессируется на поверхности раковых клеток или в опухолевой неоваскулатуре. В одном варианте воплощения РЗМЛ-связанное показание выбрано из группы, включающей рак предстательной железы, немелкоклеточный рак легкого, колоректальную карциному и глиобластому.
В другом аспекте изобретение обеспечивает наночастицу, включающую сополимер РЕОА и ПЭГ; и терапевтическое средство, включающее митоксантрон или доцетаксел; где указанная наночастица содержит таргетирующие составляющие, присоединенные к ней, где таргетирующая составляющая представляет собой низкомолекулярный Р5МЛ лиганд.
В другом аспекте изобретение обеспечивает наночастицу, включающую полимерную матрицу, включающую комплекс, состоящий из фосфолипидсвязанного ПЭГ и РЕОЛ; и терапевтическое средство; где указанная наночастица содержит таргетирующие составляющие, присоединенные к ней, где таргетирующая составляющая представляет собой низкомолекулярный Р5МЛ лиганд. В одном варианте воплощения этой наночастицы терапевтическое средство представляет собой митоксантрон или доцетаксел.
В конкретных вариантах воплощения наночастиц, описанных выше, низкомолекулярный Р8МЛ лиганд представляет собой
и его энантиомеры, стереоизомеры, ротамеры, таутомеры, диастереомеры или рацематы.
В другом аспекте изобретение обеспечивает частицу направленной доставки, включающую таргетирующую составляющую и терапевтическое средство; где частица включает полимерную матрицу, где полимерная матрица включает сложный полиэфир, и где таргетирующая составляющая представляет собой низкомолекулярный Р5МА лиганд. В одном варианте воплощения этой частицы направленной доставки частица представляет собой наночастицу. В другом варианте воплощения сложный полиэфир выбран из группы, включающей РЕОЛ, РЕЛ, РОА, поликапролактон и полиангидриды. В одном варианте воплощения полимерной матрицы этой частицы направленной доставки по меньшей мере один полимер представляет собой полиалкиленгликоль. В некоторых вариантах воплощения частицы направленной доставки низкомолекулярный Р5МА лиганд выбран из группы, включающей фолиевую кислоту, тиольные и индолтиольные производные, гидроксаматные производные и ингибиторы на основе мочевины.
В другом аспекте изобретение обеспечивает композицию, включающую частицу, имеющую сред- 3 023175 ний характеристический размер меньше чем около 1 мкм, где указанная частица включает макромолекулу, включающую первую часть, включающую биосовместимый полимер, и вторую часть, включающую составляющую часть, выбранную из группы, состоящей из таргетирующей составляющей и терапевтической составляющей, где таргетирующая составляющая представляет собой низкомолекулярный ΡδΜΑ лиганд, и где таргетирующая составляющая имеет, по существу, ненулевую концентрацию внутри частицы, т.е. присутствует от небольшого до не поддающегося определению количества соединения внутри частицы. В одном варианте воплощения этой частицы биосовместимый полимер включает сополимер полилактида и полигликолида. В другом варианте воплощения этой частицы полимер включает полиэтиленгликоль.
В одном варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую низкомолекулярный ΡδΜΆ лиганд, биоразлагаемый полимер, полимер и терапевтическое средство. В одном варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую низкомолекулярный ΡδΜΑ лиганд, биоразлагаемый полимер, полимер и терапевтическое средство, где наночастица может селективно аккумулироваться в предстательной железе или в ткани сосудистого эндотелия, окружающей рак. В одном варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую низкомолекулярный ΡδΜΑ лиганд, биоразлагаемый полимер, полимер и терапевтическое средство, где наночастица может селективно аккумулироваться в предстательной железе или в ткани сосудистого эндотелия, окружающей рак, и где наночастица может поглощаться в результате эндоцитоза ΡδΜΑ экспрессирующей клеткой. В другом варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую низкомолекулярный ΡδΜΑ лиганд, биоразлагаемый полимер, полиэтиленгликоль и химиотерапевтическое средство. В другом варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую низкомолекулярный ΡδΜΑ лиганд, биоразлагаемый полимер, полиэтиленгликоль и доцетаксел. В другом варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую низкомолекулярный ΡδΜΑ лиганд, ΡΕΟΑ, полиэтиленгликоль и доцетаксел.
В одном аспекте изобретение обеспечивает мишень-специфическую наночастицу, включающую терапевтическое средство; где наночастица содержит таргетирующие составляющие, присоединенные к ней, где таргетирующая составляющая представляет собой низкомолекулярный ΡδΜΑ лиганд, и где терапевтическое средство представляет собой δίΡΗΚ. В другом аспекте молекула δίΡΗΚ является комплементарной опухолевым мишеням, например опухоли предстательной железы.
Краткое описание чертежей
Фиг. 1А, 1В и фиг. 2 представляют репрезентативные схемы синтеза мишень-специфических наночастиц по настоящему изобретению.
Фиг. 3 представляет репрезентативную схему синтеза наночастицы по настоящему изобретению.
Фиг. 4 представляет поглощение клеткой наночастиц по настоящему изобретению.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение в общем смысле относится к частицам и, в частности к наночастицам, где наночастицы включают систему контролируемого высвобождения для направленной доставки терапевтического средства. Один аспект настоящего изобретения направлен на способ разработки полимерных наночастиц с желаемыми свойствами, где наночастицы содержат таргетирующую составляющую, которая представляет собой низкомолекулярный ΡδΜΑ лиганд. В одной группе вариантов воплощения способ включает получение библиотек наночастиц, содержащих низкомолекулярные ΡδΜΑ лиганды, где библиотеки имеют высококонтролируемые свойства, и где библиотеки могут быть образованы путем смешивания вместе двух или более полимеров (например, лиганд-функционализированных полимеров и нефункционализированных полимеров) в различных соотношениях. Один или несколько из полимеров может представлять собой биосовместимый полимер (например, гомополимер, сополимер или блоксополимер), где биосовместимый полимер может быть конъюгирован с низкомолекулярным ΡδΜΑ лигандом. В некоторых случаях наночастица может содержать терапевтическое средство, например лекарственное средство.
В одном варианте воплощения наночастица системы контролируемого высвобождения имеет количество таргетирующей составляющей (т.е. низкомолекулярного ΡδΜΑ лиганда), эффективное для лечения рака предстательной железы у субъекта, нуждающегося в этом. В некоторых вариантах воплощения низкомолекулярный ΡδΜΑ лиганд является конъюгированным с полимером, и наночастица включает определенное отношение лиганд-конъюгированного полимера к нефункционализированному полимеру. Наночастица может иметь оптимизированное отношение этих двух полимеров, так чтобы эффективное количество лиганда связывалось с наночастицей для лечения рака. Например, повышенная плотность лиганда (например, на ΡΕΟΑ-ΡΕΟ сополимере) будет усиливать связывание с мишенью (связывание с клеткой/поглощение мишенью), что делает наночастицу мишень-специфической. Альтернативно, определенная концентрация нефункционализированного полимера (например, нефункционализированного ΡΕΟΑ-ΡΕΟ сополимера) в наночастице может контролировать воспаление и/или иммуногенность (т.е. способность вызывать иммунный ответ) и позволяет наночастице иметь период полужизни в системе кровообращения, который является адекватным для лечения рака (например, рака предстательной железы). Кроме того, нефункционализированный полимер может снижать скорость выведения из системы
- 4 023175 кровообращения через ретикулоэндотелиальную систему (РЕ8). В конкретном варианте воплощения полимер представляет собой ПЭГ. Кроме того, нефункционализированный полимер уравновешивает высокую, в противном случае, концентрацию лигандов, которая в отсутствие такого балансирующего действия может ускорять скорость выведения из организма субъекта, приводя к снижению доставки к клеткам-мишеням.
Поскольку они содержат таргетирующие составляющие, мишень-специфические наночастицы способны эффективно связываться или иным образом ассоциироваться с биологической структурой, например мембранным компонентом или клеточно-поверхностным рецептором. Направленная доставка терапевтического средства (например, к конкретной ткани или типу клеток, к специфической пораженной заболеванием ткани, но не к нормальной ткани и т.д.) является желательной для лечения тканеспецифических заболеваний, таких как рак (например, рак предстательной железы). Например, в отличие от системной доставки цитотоксического противоракового средства направленная доставка может предотвратить уничтожение здоровых клеток этим средством. Кроме того, направленная доставка делает возможным введение более низкой дозы такого средства, за счет чего можно уменьшить нежелательные побочные эффекты, обычно связанные с традиционной химиотерапией. Как обсуждалось выше, специфичность в отношении определенной мишени наночастиц по настоящему изобретению можно сделать максимальной путем оптимизации плотности лиганда на наночастице.
Мишень-специфические наночастицы, включающие полимеры.
В некоторых вариантах воплощения наночастицы по настоящему изобретению включают матрицу из полимеров. Как правило, наночастица относится к любой частице, имеющей диаметр меньше чем 1000 нм. В некоторых вариантах воплощения терапевтическое средство и/или таргетирующая составляющая (т.е. низкомолекулярный Р8МЛ лиганд) могут быть связаны с полимерной матрицей. В некоторых вариантах воплощения таргетирующая составляющая может быть ковалентно связана с поверхностью полимерной матрицы. В некоторых вариантах воплощения ковалентное связывание опосредовано линкером. В некоторых вариантах воплощения терапевтическое средство может быть связано с поверхностью полимерной матрицы, инкапсулировано в полимерной матрице, окружено ею и/или диспергировано в ней.
Большое количество разнообразных полимеров и способов образования частиц из этих полимеров являются известными в области, относящейся к доставке лекарственных средств. В некоторых вариантах воплощения настоящего изобретения матрица частицы включает один или несколько полимеров. Любой полимер можно использовать в соответствии с настоящим изобретением. Полимеры могут быть природного или неприродного происхождения (синтетическими) полимерами. Полимеры могут представлять собой гомополимеры или сополимеры, включающие два или более мономеров. Что касается последовательности, сополимеры могут быть статистическими, блок-сополимерами или могут включать комбинацию статистических и блок последовательностей. Типично, полимеры в соответствии с настоящим изобретением представляют собой органические полимеры.
Полимер, как этот термин используется в настоящей заявке, имеет свое обычное значение, используемое в данной области техники, т.е. означает молекулярную структуру, включающую одно или несколько повторяющихся звеньев (мономеры), соединенных ковалентными связями. Повторяющиеся звенья могут все быть одинаковыми или, в некоторых случаях, в полимере может присутствовать более чем один тип повторяющихся звеньев. В некоторых случаях полимер имеет биологическое происхождение, т.е. биополимер. Неограничивающие примеры полимеров включают пептиды или белки (т.е. полимеры, состоящие из различных аминокислот) или нуклеиновые кислоты, такие как ДНК или РНК, как обсуждается ниже. В некоторых случаях в полимере также могут присутствовать дополнительные группы, например биологические группы, такие как группы, описанные ниже.
Если в полимере присутствует более чем один тип повторяющегося звена, в этом случае полимер указан как сополимер. Должно быть понятно, что в любом варианте воплощения с использованием полимера, в некоторых случаях, используемый полимер может быть сополимером. Повторяющиеся звенья, образующие сополимер, могут быть расположены в любом порядке. Например, повторяющиеся звенья могут быть расположены неупорядоченно, в чередующемся порядке или в виде блок сополимера, т.е. включающего один или несколько участков, каждый из которых включает первое повторяющееся звено (например, первый блок), и один или несколько участков, каждый из которых включает второе повторяющееся звено (например, второй блок), и т.д. Блок-сополимеры могут содержать два (диблоксополимер), три (триблок-сополимер) или большее количество отдельных блоков.
Должно быть понятно, что, хотя термины первый, второй и т.д. можно использовать в настоящей заявке для описания различных элементов, включая полимерные компоненты, эти термины не следует понимать как ограничивающие (например, описывающие конкретный порядок или количество элементов), но они скорее являются чисто иллюстративными, т.е. метками, которые используются для отличия одного элемента от другого, как это обычно используется в области патентного законодательства. Таким образом, например, хотя один вариант воплощения настоящего изобретения может быть описан как включающий присутствие первого элемента и присутствие второго элемента, другие варианты воплощения настоящего изобретения могут включать присутствие первого элемента, но без присутст- 5 023175 вия второго элемента, присутствие второго элемента, но без присутствия первого элемента, присутствие двух (или более) первых элементов и/или присутствие двух (или более) вторых элементов и т.д., и/или дополнительные элементы, такие как первый элемент, второй элемент и третий элемент, без отступления от объема настоящего изобретения.
Различные варианты воплощения настоящего изобретения направлены на сополимеры, которые в конкретных вариантах воплощения описывают два или более полимеров (таких как описанные в настоящей заявке), которые связаны друг с другом, обычно при помощи ковалентного связывания двух или более полимеров вместе. Таким образом, сополимер может включать первый полимер и второй полимер, которые были конъюгированы вместе с образованием блок-сополимера, где первый полимер представляет собой первый блок блок-сополимера, а второй полимер представляет собой второй блок блоксополимера. Конечно, специалистам в данной области должно быть понятно, что блок-сополимер в некоторых случаях может содержать несколько блоков полимера, и что блок-сополимер, как этот термин используется в настоящей заявке, не ограничивается только блок-сополимерами, содержащими только один первый блок и один второй блок. Например, блок-сополимер может включать первый блок, включающий первый полимер, второй блок, включающий второй полимер, и третий блок, включающий третий полимер или первый полимер, и т.д. В некоторых случаях блок-сополимеры могут содержать любое количество первых блоков первого полимера и вторых блоков второго полимера (и в некоторых случаях третьих блоков, четвертых блоков и т.д.). Кроме того, следует указать, что блок-сополимеры, в некоторых случаях, также могут быть образованы из других блок-сополимеров.
Например, первый блок-сополимер может быть конъюгирован с другим полимером (который может представлять собой гомополимер, биополимер, другой блок-сополимер и т.д.) с образованием нового блок-сополимера, содержащего несколько типов блоков и/или с другими структурами (например, с неполимерными структурами).
В некоторых вариантах воплощения полимер (например, сополимер, например, блок-сополимер) является амфифильным, т.е. содержащим гидрофильную часть и гидрофобную часть, или относительно гидрофильную часть и относительно гидрофобную часть. Гидрофильный полимер представляет собой такой полимер, который, как правило, притягивает воду, а гидрофобный полимер представляет собой такой полимер, который, как правило, отталкивает воду. Гидрофильный или гидрофобный полимер может быть идентифицирован, например, путем получения образца полимера и измерения угла его контакта с водой (типично, полимер имеет угол контакта меньше чем 60°, тогда как гидрофобный полимер имеет угол контакта больше чем около 60°). В некоторых случаях можно измерить гидрофильность двух или более полимеров относительно друг друга, т.е. первый полимер может быть более гидрофильным, чем второй полимер. Например, первый полимер может иметь меньший угол контакта по сравнению со вторым полимером.
В одной группе вариантов воплощения полимер (например, сополимер, например, блок-сополимер) по настоящему изобретению включает биосовместимый полимер, т.е. полимер, который обычно не индуцирует неблагоприятный ответ при его включении или введении в организм живого субъекта, например, без существенного воспаления и/или резкого отторжения полимера иммунной системой, например, через Т-клеточный ответ. Конечно, должно быть понятно, что биосовместимость является относительным термином, и иммунный ответ в некоторой степени можно ожидать даже для полимеров, которые являются высокосовместимыми с живой тканью. Однако, как это используется в настоящей заявке, биосовместимость относится к резкому отторжению материала по меньшей мере частью иммунной системы, т.е. небиосовместимый материал, имплантированный в организм субъекта, вызывает иммунный ответ у субъекта, который является достаточно сильным, в такой степени, что отторжение материала иммунной системой невозможно адекватно контролировать, и часто в такой степени, что материал необходимо удалить из организма субъекта. В одном простом испытании биосовместимости полимер подвергают контакту с клетками ίη νίίτο; биосовместимые полимеры представляют собой полимеры, которые типично не приводят к существенной клеточной гибели при умеренных концентрациях, например при концентрациях 50 мкг/106 клеток. Например, биосовместимый полимер может вызывать менее чем около 20% клеточную гибель при его контактировании с клетками, такими как фибробласты или эпителиальные клетки, даже если он подвергался фагоцитозу или каким-либо иным образом был поглощен такими клетками. Неограничивающие примеры биосовместимых полимеров, которые могут быть полезными в различных вариантах воплощения настоящего изобретения, включают полидиоксанон (ΡΌΘ), полигидроксиалканоат, полигидроксибутират, полиглицеринсебасат, полигликолид, полилактид, РЬОЛ, поликапролактон, или сополимеры, или производные, включающие эти и/или другие полимеры.
В некоторых вариантах воплощения биосовместимый полимер является биоразлагаемым, т.е. полимер способен разлагаться, химически и/или биологически, в физиологическом окружении, например в организме. Например, полимер может быть таким, который спонтанно гидролизуется при воздействии на него воды (например, в организме субъекта), полимер может разлагаться под воздействием тепла {например, при температуре около 37°С). Разложение полимера может происходить с различной скоростью в зависимости от используемого полимера или сополимера. Например, период полужизни полимера (время, в течение которого 50% полимера разлагается на мономеры и/или другие неполимерные части- 6 023175 цы) может быть порядка нескольких дней, недель, месяцев или лет в зависимости от полимера. Полимеры могут биологически разлагаться, например, в результате ферментативной активности или клеточного механизма, в некоторых случаях, например, через воздействие лизозима (например, имеющего относительно низкое значение рН). В некоторых случаях полимеры могут разлагаться на мономеры и/или другие неполимерные частицы, которые клетки могут либо повторно использовать, либо ликвидировать без существенного токсического эффекта на эти клетки (например, полилактид может гидролизоваться с образованием молочной кислоты, полигликолид может гидролизоваться с образованием гликолевой кислоты и т.д.).
В некоторых вариантах воплощения полимеры могут представлять собой сложные полиэфиры, включая сополимеры, включающие звенья молочной кислоты и гликолевой кислоты, такие как сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты и сополимер лактида и гликолида, в общем виде указанные в настоящей заявке как РЬОЛ; и гомополимеры, включающие звенья гликолевой кислоты, указанные в настоящей заявке как РОЛ, и звенья молочной кислоты, такие как поли-Ь-молочная кислота, поли-Όмолочная кислота, поли-Э,Ь-молочная кислота, поли-Ь-лактид, поли-Э-лактид и поли-Э,Ь-лактид, в общем виде указанные в настоящей заявке как РЬЛ. В некоторых вариантах воплощения примеры сложных полиэфиров включают, например, полиоксикислоты; ПЭГилированные полимеры и сополимеры лактида и гликолида (например, ПЭГилированные РЬЛ, ПЭГилированные РОА, ПЭГилированные РЬСА и их производные). В некоторых вариантах воплощения сложные полиэфиры включают, например, полиангидриды, полиортоэфир, ПЭГилированный полиортоэфир, поликапролактон, ПЭГилированный поликапролактон, полилизин, ПЭГилированный полилизин, полиэтиленимин, ПЭГилированный полиэтиленимин, сополимер поли-Ь-лактида и поли-Ь-лизина, поли(сериновый эфир), поли(4-гидрокси-Ьпролиновый эфир), поли[а-(4-аминобутил)-Ь-гликолевая кислота] и их производные.
В некоторых вариантах воплощения полимер может представлять собой РЬОА. РЬОА представляет собой биосовместимый и биоразлагаемый сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты, и различные формы РЬОА характеризуются соотношением молочной кислоты:гликолевой кислоты. Молочная кислота может представлять собой Ь-молочную кислоту, Ό-молочную кислоту или Ό,Ε-молочную кислоту. Скорость разложения РЬОА можно регулировать, меняя соотношение молочной кислоты и гликолевой кислоты. В некоторых вариантах воплощения РЬОА для использования в соответствии с настоящим изобретением характеризуется отношением молочной кислоты к гликолевой кислоте приблизительно 85:15, приблизительно 75:25, приблизительно 60:40, приблизительно 50:50, приблизительно 40:60, приблизительно 25:75 или приблизительно 15:85.
В конкретных вариантах воплощения путем оптимизации отношения мономеров молочной кислоты к мономерам гликолевой кислоты в полимере наночастицы (например, РЬОА блок-сополимере или РЬОА-РЕО блок-сополимере), могут быть оптимизированы параметры наночастицы, такие как поглощение воды, высвобождение терапевтического средства (например, контролируемое высвобождение) и кинетика разложения полимера.
В некоторых вариантах воплощения полимеры могут представлять собой один или несколько акриловых полимеров. В некоторых вариантах воплощения акриловые полимеры включают, например, сополимеры акриловой кислоты и метакриловой кислоты, метилметакрилатные сополимеры, этоксиэтилметакрилаты, цианоэтилметакрилат, аминоалкилметакрилатный сополимер, поли(акриловая кислота), поли(метакриловая кислота), сополимеры метакриловой кислоты и алкиламида, полиметилметакрилат, поли(метакриловая кислота), полиакриламид, аминоалкилметакрилатный сополимер, глицидилметакрилатные сополимеры, полицианоакрилаты и сочетания, включающие один или несколько из перечисленных выше полимеров. Акриловый полимер может включать полностью полимеризованные сополимеры сложных эфиров акриловой и метакриловой кислоты с низким содержанием групп четвертичного аммония.
В некоторых вариантах воплощения полимеры могут представлять собой катионные полимеры. Как правило, катионные полимеры способны к конденсации и/или защите отрицательно заряженных цепей нуклеиновых кислот (например, ДНК, РНК или их производных). Аминсодержащие полимеры, такие как полилизин (2аипег е! а1., 1998, Айу. Эгид Эе1. Кеу., 30:97; и КаЬаиоу е! а1., 1995, Вюсоищда!е СЬет., 6:7), полиэтиленимин (РЕ1; ВоиккЬ е! а1., 1995, Ргос. Ыа11. Асай. Зсц ИЗА, 1995, 92:7297) и полиамидоаминовые дендримеры (Кико№8ка-Ьа!а11о е! а1., 1996, Ргос. Νηΐ1. Асай. Зсц ИЗА, 93:4897; Тапд е! а1., 1996, Вюсоп)ида!е СЬет., 7:703; и Наепз1ег е! а1., 1993, Вюсои)ида!е СЬет., 4:372) являются положительно заряженными при физиологическом рН, образуют ионные пары с нуклеиновыми кислотами и опосредуют трансфекцию в различных клеточных линиях.
В некоторых вариантах воплощения полимеры могут представлять собой разлагаемые сложные полиэфиры, содержащие катионные боковые цепи (Ри!пат е! а1., 1999, Масгото1еси1е8, 32:3658; Ваггега е! а1., 1993, 1. Ат. СЬет. Зос, 115:11010; Ит е! а1., 1999, 1. Ат. СЬет. Зос, 121:5633 и 2Ьои е! а1., 1990, Масгото1еси1е8, 23:3399). Примеры таких сложных полиэфиров включают сополимер поли-Ь-лактида и поли-Ь-лизина (Ваггега е! а1., 1993, 1. Ат. СЬет. Зос, 115:11010), поли(сериновый эфир) (2Ьои е! а1., 1990, Масготе1еси1е8, 23:3399), поли(4-гидрокси-Ь-пролиновый эфир) (Ри!пат е! а1., 1999, Масгото1еси1е8, 32:3658 и Ыт е! а1., 1999, 1. Ат. СЬет. Зос, 121:5633). Было продемонстрировано, что поли(4-гидрокси- 7 023175
Ь-пролиновый эфир) конденсируется с плазмидной ДНК через электростатические взаимодействия и опосредует перенос гена (Ри!пат е! а1, 1999, Масготе1еси1е8, 32:3658 и Ыт е1 а1., 1999, 1. Ат. СЬет. §ос, 121:5633). Эти новые полимеры менее токсичны по сравнению с полилизином и РЕ1, и они разлагаются на нетоксичные метаболиты.
Полимер (например, сополимер, блок-сополимер), содержащий полиэтиленгликолевые повторяющиеся звенья, также указан как ПЭГилированный полимер. Такие полимеры могут контролировать воспаление и/или иммуногенность (т.е. способность вызывать иммунный ответ) и/или снижать скорость выведения из системы кровообращения через ретикулоэндотелиальную систему (ΚΕδ) благодаря присутствию групп полиэтиленгликоля.
ПЭГилирование также можно использовать, в некоторых случаях, для снижения взаимодействия зарядов между полимером и биологической частицей, например, путем создания гидрофильного слоя на поверхности полимера, который может защищать полимер от взаимодействия с биологической частицей. В некоторых случаях добавление полиэтиленгликолевых повторяющихся звеньев может увеличивать период полужизни полимера (например, сополимера, блок-сополимера) в плазме, например, путем уменьшения поглощения полимера системой фагоцитоза, снижая при этом эффективность трансфекции/поглощения клетками. Специалистам в данной области должны быть известны способы и технологические приемы ПЭГилирования полимера, например с использованием ЕЭС (гидрохлорид 1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимида) и ΝΗδ (Ν-гидроксисукцинимид) для взаимодействия полимера с группой ПЭГ, содержащей на конце амин, используя методы полимеризации с раскрытием цикла (КОМР) или подобные.
Кроме того, некоторые варианты воплощения настоящего изобретения направлены на сополимеры, содержащие сложные полиэфиры и простые полиэфиры, например полимеры, содержащие повторяющиеся звенья, соединенные сложноэфирными связями (например, К-С(О)-О-К' связи) и простыми эфирными связями (например, К-О-К' связи). В некоторых вариантах воплощения настоящего изобретения биоразлагаемый полимер, такой как гидролизуемый полимер, содержащий карбоновокислотные группы, может быть конъюгирован с полиэтиленгликолевыми повторяющимися звеньями с образованием сополимера сложного полиэфира и простого полиэфира.
В конкретном варианте воплощения молекулярная масса полимеров наночастиц по настоящему изобретению является оптимизированной для эффективного лечения рака, например рака предстательной железы. Например, молекулярная масса полимера влияет на скорость разложения наночастиц (в частности, когда молекулярная масса биоразлагаемого полимера отрегулирована), растворимость, поглощение воды и кинетику высвобождения лекарственного средства (например, контролируемое высвобождение). В качестве еще одного примера молекулярная масса полимера может быть отрегулирована таким образом, чтобы происходило биоразложение наночастицы в организме субъекта, принимающего лечение, в течение разумного периода времени (в пределах от нескольких часов до 1-2 недель, 3-4 недель, 5-6 недель, 7-8 недель и т.д.). В конкретных вариантах воплощения наночастицы, включающей сополимер ПЭГ и РЬСА, ПЭГ имеет молекулярную массу 1000-20000, например 5000-20000, например 10000-20000, а РЬСА имеет молекулярную массу 5000-100000, например 20000-70000, например 2000050000.
В некоторых вариантах воплощения полимеры наночастиц могут быть конъюгированы с липидом. Полимер может представлять собой, например, ПЭГ, содержащий липид на конце цепи. Как описано ниже, липидную часть полимера можно использовать для самосборки с другим полимером, облегчая образование наночастицы. Например, гидрофильный полимер может быть конъюгирован с липидом, который будет осуществлять самосборку с гидрофобным полимером.
В некоторых вариантах воплощения липиды представляют собой масла. Как правило, любое масло, известное из уровня техники, может быть конъюгировано с полимерами, используемыми в настоящем изобретении. В некоторых вариантах воплощения масло может включать одну или несколько групп жирной кислоты или солей жирных кислот. В некоторых вариантах воплощения группа жирной кислоты может включать перевариваемые, длинноцепочечные (например, С8-С50), замещенные или незамещенные углеводороды. В некоторых вариантах воплощения группа жирной кислоты может представлять собой Сю-С20 жирную кислоту или ее соль. В некоторых вариантах воплощения группа жирной кислоты может представлять собой С15-С20 жирную кислоту или ее соль. В некоторых вариантах воплощения жирная кислота может быть ненасыщенной. В некоторых вариантах воплощения группа жирной кислоты может быть мононенасыщенной. В некоторых вариантах воплощения группа жирной кислоты может быть полиненасыщенной. В некоторых вариантах воплощения двойная связь группы ненасыщенной жирной кислоты может быть в цис-конформации. В некоторых вариантах воплощения двойная связь ненасыщенной жирной кислоты может быть в транс-конформации.
В некоторых вариантах воплощения группа жирной кислоты может представлять собой одну или несколько групп, выбранных из масляной, капроновой, каприловой, каприновой, лауриновой, миристиновой, пальмитиновой, стеариновой, арахидоновой, бегеновой или лигноцериновой кислоты. В некоторых вариантах воплощения группа жирной кислоты может представлять собой одну или несколько групп, выбранных из пальмитолеиновой, олеиновой, вакценовой, линолевой, альфа-линоленовой, гамма- 8 023175 линолевой, арахидоновой, гадолеиновой, арахидоновой, ейкозапентаеновой, докозагексаеновой или эруковой кислоты.
В конкретном варианте воплощения липид представляет собой липид формулы V ?
но-р-о (V) и его соли, где каждый К независимо представляет собой С^о алкил. В одном варианте воплощения формулы V липид представляет собой 1,2 дистеароил-кп-глицеро-3-фосфоэтаноламин (ΌδΡΕ) и его соли, например натриевую соль.
В одном варианте воплощения низкомолекулярные таргетирующие составляющие являются связанными, например, ковалентно связанными, с липидным компонентом наночастицы. Таким образом, изобретение также обеспечивает мишень-специфическую наночастицу, включающую терапевтическое средство, полимерную матрицу, липид и низкомолекулярный таргетирующий Ρ8ΜΆ лиганд, где таргетирующий лиганд является связанным, например, ковалентно связанным, с липидным компонентом наночастицы. В одном варианте воплощения липидный компонент, который является связанным с низкомолекулярной таргетирующей составляющей, имеет формулу V. В другом варианте воплощения изобретение обеспечивает мишень-специфическую наночастицу, включающую терапевтическое средство, полимерную матрицу, ΌδΡΕ и низкомолекулярный таргетирующий Ρ8ΜΆ лиганд, где лиганд является связанным, например ковалентно связанным, с ΌδΡΕ. Например, наночастица по настоящему изобретению включает полимерную матрицу, включающую ΡΕΟΆ-ΌδΡΕ-ПЭГ-Лиганд. Эти наночастицы можно использовать для лечения заболеваний и расстройств, обсуждаемых в настоящей заявке.
Свойства этих и других полимеров и способы их получения хорошо известны из уровня техники (см., например, патенты США №№ 6123727; 5804178; 5770417; 5736372; 5716404; 6095148; 5837752; 5902599; 5696175; 5514378; 5512600; 5399665; 5019379; 5010167; 4806621; 4638045 и 4946929; \\апу е! а1, 2001, 1. Ат. СЬет. δοο., 123:9480; Вт е! а1., 2001, 1. Ат. СЬет. δοο., 123:2460; Ьапдег, 2000, Асе. СЬет. Кек., 33:94; Ьапдег, 1999, 1. СойтоЬ Ке1еаке, 62:7; и ИЬгюЬ е! а1., 1999, СЬет. Кеу., 99:3181). В более широком смысле, различные способы синтеза подходящих полимеров описаны в СопсВе Εηсус1ορе61а οί ΡοΙυη^γ δ^ΐ'^ апб Ρο1уте^^с Аттек апб Аттопшт δаЬδ, Ε6. Ьу Сое1Ьа1ы Ρе^датοп Ριόκκ, 1980; ΡππαρΚκ οί Ρο1уте^^ζаί^οп Ьу Об1ап, ГОЬп \УПеу & δοπκ. Ροιιηΐι Εб^!^οп, 2004; Сοп!етρο^а^у Ρο1уте^ СЬет18Ьу Ьу АПтоск е! а1., Ρ^епί^се-Ηа11, 1981; Эеттд е! а1., 1997, Ыа!иге, 390:386; и в патентах США №№ 6506577, 6632922, 6686446 и 6818732.
Еще в одной группе вариантов воплощения, частица (включающая, например, сополимер, например, блок-сополимер) по настоящему изобретению включает терапевтическую составляющую, т.е. составляющую, которая имеет терапевтический или профилактический эффект при введении субъекту. Примеры терапевтических составляющих для использования с наночастицами по настоящему изобретению включают противоопухолевые или цитостатические средства, или другие средства с противораковыми свойствами, или их сочетание.
В некоторых случаях частица представляет собой наночастицу, т.е. частица имеет характеристический размер меньше чем около 1 мкм, где характеристический размер частицы представляет собой диаметр абсолютной сферы, имеющей такой же объем, как и частица. Например, частица может иметь характеристический размер частицы меньше чем около 300 нм, меньше чем около 200 нм, меньше чем около 150 нм, меньше чем около 100 нм, меньше чем около 50 нм, меньше чем около 30 нм, меньше чем около 10 нм, меньше чем около 3 нм или меньше чем около 1 нм в некоторых случаях. В конкретных вариантах воплощения наночастица по настоящему изобретению имеет диаметр 80-200 нм.
В одной группе вариантов воплощения частицы могут иметь внутреннюю часть и поверхность, ,где поверхность имеет композицию, отличную от внутренней части, т.е. может быть по меньшей мере одно соединение, присутствующее во внутренней части, но не присутствующее на поверхности (или наоборот), и/или по меньшей мере одно соединение присутствует во внутренней части и на поверхности в разных концентрациях. Например, в одном варианте воплощения соединение, такое как таргетирующая составляющая (т.е. низкомолекулярный ΡδΜА лиганд) полимерного конъюгата по настоящему изобретению, может присутствовать как во внутренней части, так и на поверхности частицы, но при более высокой концентрации на поверхности, чем во внутренней части частицы, хотя в некоторых случаях концентрация во внутренней части частицы может, по существу, отличаться от нулевой, т.е. во внутренней части частицы присутствует количество соединения, которое поддается определению.
В некоторых случаях внутренняя часть частицы является более гидрофобной, чем поверхность частицы. Например, внутренняя часть частицы может быть относительно гидрофобной по отношению к поверхности частицы, и лекарственное средство или другая полезная нагрузка может быть гидрофобной и легко связывается с относительно гидрофобным центром частицы. Лекарственное средство или другая полезная нагрузка могут, таким образом, содержаться во внутренней части частицы, которая, таким об- 9 023175 разом, может защищать их от внешней среды, окружающей частицу (или наоборот). Например, лекарственное средство или другая полезная нагрузка, содержащиеся внутри частицы, вводимой субъекту, будут защищены от организма субъекта, а организм также будет защищен от лекарственного средства. Таргетирующая составляющая, присутствующая на поверхности частицы, может обеспечить возможность локализации частицы на конкретном целевом участке, например в опухоли, на участке заболевания, в ткани, органе, типе клеток и т.д. Таким образом, наночастица является мишень-специфической. Лекарственное средство или другая полезная нагрузка может затем, в некоторых случаях, высвобождаться из частицы и иметь возможность локально взаимодействовать с конкретным целевым участком.
Еще один аспект настоящего изобретения направлен на полимерные частицы, содержащие более чем один полимер или макромолекулу, присутствующие в них, и библиотеки, включающие такие полимеры или макромолекулы. Например, в одной группе вариантов воплощения частицы могут содержать более одного различаемых полимеров (например, сополимеры, например, блок-сополимеры), и отношение таких двух (или более) полимеров может независимо контролироваться, что позволяет контролировать свойства частицы. Например, первый полимер может представлять собой полимерный конъюгат, включающий таргетирующую составляющую и биосовместимую часть, а второй полимер может включать биосовместимую часть, но не содержит таргетирующую составляющую, или второй полимер может содержать биосовместимую часть, отличимую от первого полимера. Контроль количеств этих полимеров внутри полимерной частицы можно, таким образом, использовать для контроля различных физических, биологических или химических свойств частицы, например размера частицы (например, путем изменения молекулярной массы одного или обоих полимеров), поверхностного заряда (например, путем регулирования соотношений полимеров, если полимеры имеют разные заряды или концевые группы), поверхностной гидрофильности (например, если полимеры имеют разную молекулярную массу и/или гидрофильность), плотности поверхности таргетирующей составляющей (например, путем регулирования соотношений двух или более полимеров) и т.д.
В качестве конкретного примера частица может включать первый полимер, включающий полиэтиленгликоль и таргетирующую составляющую, конъюгированную с полиэтиленгликолем, и второй полимер, включающий полиэтиленгликоль, но не таргетирующую составляющую, или включающий и полиэтиленгликоль и таргетирующую составляющую, где полиэтиленгликоль второго полимера имеет длину (или количество повторяющихся звеньев), отличную от полиэтиленгликоля первого полимера. В качестве другого примера частица может включать первый полимер, включающий первую биосовместимую часть и таргетирующую составляющую, и второй полимер, включающий вторую биосовместимую часть, отличную от первой биосовместимой части (например, имеющую другую композицию, по существу, другое количество повторяющихся звеньев и т.д.), и таргетирующую составляющую. В качестве еще одного примера первый полимер может включать биосовместимую часть и первую таргетирующую составляющую, а второй полимер может включать биосовместимую часть и вторую таргетирующую составляющую, отличную от первой таргетирующей составляющей.
В других вариантах воплощения наночастицы по настоящему изобретению представляют собой липосомы, комбинации липосомных полимеров, дендримеры и альбуминовые частицы, которые функционализированы низкомолекулярным ΡδΜΆ лигандом. Эти наночастицы можно использовать для доставки терапевтического средства субъекту, такого как противораковое средство, например митоксантрон или доцетаксел.
Как он используется в настоящей заявке, термин липосома относится в основном к сферическому пузырьку или капсиду, в основном состоящему из амфипатических молекул (например, содержащих как гидрофобную (неполярную) часть, так и гидрофильную (полярную) часть). Обычно липосому можно получить в виде одного (однослойная) закрытого бислоя или многосекционного (многослойная) закрытого бислоя. Липосома может быть образована из природных липидов, синтетических липидов или их сочетания. В предпочтительном варианте воплощения липосома включает один или несколько фосфолипидов. Липиды, известные из уровня техники для образования липосом, включают, но не ограничиваются этим, лецитин (соевый или яичный; фосфатидилхолин), дипальмитоилфосфатидилхолин, димиристоилфосфатидилхолин, дистеароилфосфатидилхолин, дицетилфосфат, фосфатидилглицерин, гидрированный фосфатидилхолин, фосфатидиновую кислоту, холестерин, фосфатидилинозит, гликолипид, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилсерин, малеимидил-дериватизированный фосфолипид (например, Ы-[4(пмалеимидофенил)бутирил] фосфатидилэтаноламин), диолеилфосфатидилхолин, дипальмитоилфосфатидилглицерин, димиристоилфосфатидиновую кислоту и их сочетание. Липосомы используются для доставки терапевтических средств к клеткам.
Наночастицы по настоящему изобретению также могут представлять собой липосомы, которые включают липиды, где головная группа модифицирована ПЭГ. Это в результате дает более долгий период полужизни в системе кровообращения у субъекта.
Дендритные полимеры (известные также как дендримеры) представляют собой однородные полимеры, которые в литературе называют по-разному, как гиперразветвленные дендримеры, арборолы, фрактальные полимеры и дендримеры типа звездного взрыва, имеющие центральное ядро, внутреннюю дендритную (гиперразветвленную) структуру и внешнюю поверхность с концевыми группами. Эти
- 10 023175 полимеры отличаются от классических линейных полимеров как формой, так и функцией. Химия дендримеров создает макромолекулы с жестким контролем размера, топологии формы, гибкости и поверхностных групп (например, низкомолекулярного Р8МА лиганда). В том, что известно как дивергентный синтез, начало этим макромолекулам дает взаимодействие исходного центра в высокопроизводительных повторяющихся последовательностях реакций для построения симметричных ответвлений, отходящих в виде лучей от ядра, с четко определенными поверхностными группами. Альтернативно, в том, что известно как конвергентный синтез, дендритные клинья строятся от периферии внутрь в направлении фокальной точки, а затем несколько дендритных клиньев соединяются в фокальных точках с полифункциональным ядром. В результате реакций дендритного синтеза образуются концентрические слои, известные как генерации, при этом каждая генерация удваивает молекулярную массу и количество реактивных групп на концах ответвлений, таким образом, конечный генерируемый дендример представляет собой высокочистую однородную монодисперсную макромолекулу, которая легко солюбилизируется в самых различных условиях. По причинам, которые обсуждаются ниже, молекулярная масса дендримеров находится в пределах от 300 до 700000 Да, и количество поверхностных групп (например, реактивных сайтов для связывания) существенно различается.
Альбуминовые частицы (также указаны как альбуминовые микросферы) были описаны как носители фармакологических или диагностических средств (см., например, патенты США №№ 5439686; 5498421; 5560933; 5665382; 6096331; 6506405; 6537579; 6749868 и 6753006; которые все включены в настоящую заявку посредством ссылки). Микросферы из альбумина получают либо путем тепловой денатурации, либо путем химической сшивки. Используя метод тепловой денатурации, микросферы получают из эмульгированной смеси (например, альбумин, средство, которое нужно включить в микросферы, и подходящее масло) при температуре в пределах от 100 до 150°С. Микросферы затем промывают подходящим растворителем и хранят. Ьеиси(а е! а1. (1п(егпа(юиа1 1оигиа1 οί РЪагшасеийск 41:213-217 (1988)) описывают способ получения микросфер методом тепловой денатурации.
Таргетирующие составляющие, представляющие собой малые молекулы.
Еще в одной группе вариантов воплощения полимерный конъюгат по настоящему изобретению включает таргетирующую составляющую, т.е. составляющую, способную связываться или каким-либо иным образом вступать в ассоциацию с биологической структурой, например мембранным компонентом, клеточно-поверхностным рецептором, простата-специфическим мембранным антигеном или подобными. В случае настоящего изобретения таргетирующая составляющая представляет собой низкомолекулярный Р8МА лиганд. Термин связываться или связывание, как он используется в настоящей заявке, относится к взаимодействию между соответствующей парой молекул или их частями, которые демонстрируют взаимное сродство или способность к связыванию, типично благодаря специфическому или неспецифическому связыванию или взаимодействию, включая, но не ограничиваясь этим, биохимическое, физиологическое и/или химическое взаимодействия. Биологическое связывание определяет тип взаимодействия, которое происходит между парами молекул, включая белки, нуклеиновые кислоты, гликопротеины, углеводы, гормоны или подобные. Термин связывающийся партнер относится к молекуле, которую можно подвергать связыванию с конкретной молекулой. Специфическое связывание относится к молекулам, таким как полинуклеотиды, которые способны связываться со связывающимся партнером (или ограниченным количеством связывающихся партнеров) или распознавать его в гораздо большей степени, чем с другими подобными биологическими структурами. В одной группе вариантов воплощения таргетирующая составляющая обладает сродством (как измерено через константу дисссоциации) меньше чем около 1 мкМ, по меньшей мере около 10 мкМ или по меньшей мере около 100 мкМ.
В предпочтительных вариантах воплощения таргетирующая составляющая по настоящему изобретению представляет собой малую молекулу. В некоторых вариантах воплощения термин малая молекула относится к органическим соединениям либо природного происхождения, либо искусственно созданным (например, через химический синтез), которые имеют относительно низкую молекулярную массу и которые не являются белками, полипептидами или нуклеиновыми кислотами. Малые молекулы типично содержат несколько углерод-углеродных связей. В некоторых вариантах воплощения малые молекулы имеют размер меньше чем около 2000 г/моль. В некоторых вариантах воплощения малые молекулы являются меньше чем около 1500 г/моль или меньше чем около 1000 г/моль. В некоторых вариантах воплощения малые молекулы меньше чем около 800 г/моль или меньше чем около 500 г/моль.
В особенно предпочтительных вариантах воплощения низкомолекулярная таргетирующая составляющая нацелена на раковые опухоли предстательной железы, и, в частности, низкомолекулярная таргетирующая составляющая представляет собой ингибитор Р8МА пептидазы. Эти составляющие также указаны в настоящей заявке как низкомолекулярные Р8МА лиганды. При сравнении с экспрессией в нормальных тканях экспрессия простата-специфического мембранного антигена (Р8МА) по меньшей мере в 10 раз больше в злокачественной предстательной железе по сравнению с нормальной тканью, и уровень экспрессии Р8МА еще больше повышается по мере прогрессирования заболевания в метастатические фазы (8йуег е! а1., 1997, С1ш. Сапсег Кек., 3:81).
- 11 023175
В варианте воплощения низкомолекулярный Ρ3ΜΆ лиганд представляет собой
и его энантиомеры, стереоизомеры, ротамеры, таутомеры, диастереомеры или рацематы. Для этого лиганда ΝΗ2 группа служит в качестве точки ковалентного связывания с наночастицей (например, -Ν(Η)ΡΕΟ).
Соответственно настоящее изобретение обеспечивает низкомолекулярный Ρ3ΜΆ лиганд, представленный выше, где аминовые заместители этих соединений ковалентно связаны с полиэтиленгликолем, например соединения
где η имеет значение от 20 до 1720.
Соединения по настоящему изобретению также включают
где К1 и К3 представляют собой алкильные группы, К2 представляет собой сложноэфирную или амидную связь, Х=0-1 мольных долей, Υ=0-0,5 мольных долей, Χ+Υ=20-1720 и Ζ=25-455.
Соответственно изобретение обеспечивает мишень-специфическую наночастицу, включающую терапевтическое средство и конъюгат полимер/низкомолекулярный Ρ3ΜΆ лиганд, описанный выше.
В некоторых вариантах воплощения низкомолекулярный Ρ3ΜΆ лиганд выбран из лигандов, описанных в ΖΗοπ е! а1., Ναι. Кеу. Эгид Όΐδεον. 4:1015-26 (2005); НитЫе!! е! а1., Μοί. 1тадтд 4:448-62 (2005); 1ауаргаказй е! а1., Сйет. Μеά. Сйет. 1:299-302 (2006); Υοο е! а1., Соп1го11еб Ке1еазе 96:273-83 (2004); Аддаг^а1 е! а1., Сапсег Кез. 66:9171-9177 (2006); и Ροδδ е! а1., СНп. Сапсег Кез. 11(11):4022-4028 (2005), которые все включены в настоящую заявку посредством ссылки во всей их полноте.
В некоторых вариантах воплощения низкомолекулярные таргетирующие составляющие, которые можно использовать для таргетирования клеток, ассоциированных с раковыми опухолями предстательной железы, включают ингибиторы Ρ8ΜΑ пептидазы, такие как 2-РМРА, ΟΡΙ5232, УА-033, фенилалкилфосфонамидаты (^аскзοη е! а1., 2001, Сигг. Μеά. Сйет., 8:949; Веппе!! е! а1., 1998, I. Ат. Сйет. Зек, 120:12139; ^аскзοη е! а1., 2001, I. Μеά. Сйет., 44:4170; ΙδΗ^ι^ο е! а1., 2002, Βϊοοι-д. Μеά. Сйет. Йе!!., 12:2189; Тапд е! а1., 2003, Вюсйет. Вюрйуз. Кез. (Ύιηηηιιι., 307:8; ОШег е! а1., 2003, Βϊοο^. Μеά. Сйет., 11:4455; и Μаиηд е! а1., 2004, Βϊοο^. Μеά. Сйет., 12:4969), и/или их аналоги и производные. В некоторых вариантах воплощения низкомолекулярные таргетирующие составляющие, которые можно использовать для таргетирования клеток, ассоциированных с раковыми опухолями предстательной железы, включают тиольные и индолтиольные производные, такие как производные 2-МРРА и 3-(2меркаптоэтил)-1Н-индол-2-карбоновой кислоты (\йрег е! а1., 2003, I. Μеά. Сйет., 46:1989; и патентная публикация США 2005/0080128). В некоторых вариантах воплощения низкомолекулярные таргетирующие составляющие, которые можно использовать для таргетирования клеток, ассоциированных с раковыми опухолями предстательной железы, включают гидроксаматные производные (ЗЮегтег е! а1., 2003, Βϊοο^. Μеά. Сйет. йей., 13:2097). В некоторых вариантах воплощения низкомолекулярные таргетирующие составляющие, которые можно использовать для таргетирования клеток, ассоциированных с раковыми опухолями предстательной железы, включают ингибиторы на основе ΡΒΌΑ и мочевины, такие как ΖΙ 43, ΖΙ 11, ΖΙ 17, ΖΙ 38 (Νω е! а1., 2000, I. Μ^. Сйет., 43:772; и Κοζϊ^δΗ е! а1., 2004, I. Μеά. Сйет., 47:1729), и/или и их аналоги и производные. В некоторых вариантах воплощения низкомолекулярные таргетирующие составляющие, которые можно использовать для таргетирования клеток, ассоциированных с раковыми опухолями предстательной железы, включают средства, направленно действующие на андрогеновые рецепторы (АКТА), такие как средства, описанные в патентах США №№ 7026500; 7022870; 6998500; 6995284; 6838484; 6569896; 6492554; и в патентных публикациях США 2006/0287547; 2006/0276540; 2006/0258628; 2006/0241180; 2006/0183931; 2006/0035966; 2006/0009529;
2006/0004042; 2005/0033074; 2004/0260108; 2004/0260092; 2004/0167103; 2004/0147550; 2004/0147489;
2004/0087810; 2004/0067979; 2004/0052727; 2004/0029913; 2004/0014975; 2003/0232792; 2003/0232013;
2003/0225040; 2003/0162761; 2004/0087810; 2003/0022868; 2002/0173495; 2002/0099096; 2002/0099036.
В некоторых вариантах воплощения низкомолекулярные таргетирующие составляющие, которые можно использовать для таргетирования клеток, ассоциированных с раковыми опухолями предстатель- 12 023175 ной железы, включают полиамины, такие как путресцин, спермин и спермидин (патентные публикации США 2005/0233948 и 2003/0035804).
В некоторых вариантах воплощения низкомолекулярный Р8МА лиганд представляет собой ингибитор фермента глутаматкарбоксилазы II (ОСР11), также известной как ΝΑΑΟ пептидаза или ЫААЬАО аза. Соответственно можно осуществить анализ оценки ингибиторной активности в отношении ОСРП или ΝΑΑΣΑΏ азы как основы для разработки/идентификации низкомолекулярных малых молекул, которые связываются с Р8МЛ. Таким образом, настоящее изобретение относится к наночастицам с низкомолекулярными Р8МЛ лигандами, которые можно использовать для лечения рака, ассоциированого с ОСРП активностью.
Способы скрининга для определения имеющих низкую молекулярную массу молекул, способных специфически связываться с клеточно-поверхностными белками РδМΑ или ОСР11, хорошо известны из уровня техники. В неограничивающем примере имеющие низкую молекулярную массу молекулыкандидаты могут быть мечеными либо радиоактивно (см. Ро88 е! а1., СПи Сапсег Кек, 2005, 11, 40224028), либо флуоресцентно (НитЫе! е! а1., Мо1еси1аг 1тадшд, 2005, 4, 448-462). Стандартная лабораторная клеточная линия, например клетки НеЬа, которые в нормальном состоянии не экспрессируют РМδΑ (контрольные клетки), может быть трансфицирована трансгеном, кодирующим РМδΑ белок, так чтобы РМδΑ экспрессировался на клеточной поверхности этих трансфицированных клеток. Способность имеющих низкую молекулярную массу меченых молекул связываться с клетками, эктопически экспрессирующими РМδΑ, но не с контрольными клетками, можно определить ίη νίίτο с использованием стандартных известных из уровня техники средств, таких как анализ с использованием сцинтилляционного счетчика или клеточного сортера с возбуждением флуоресценции (ΡΑСδ). Имеющие низкую молекулярную массу молекулы, которые связываются с клетками, экспрессирующими РМδΑ, но не с контрольными клетками, следует рассматривать как специфические в отношении РМδΑ. Связывание и поглощение наночастиц можно определить при помощи анализов с использованием ΕΝί'ΐιρ клеток, которые экспрессируют РδМΑ (см., например, пример 4 в настоящей заявке).
Молекулы, раскрытые в патентах, патентных заявках и непатентных ссылочных документах, указанных в настоящей заявке, могут быть дополнительно замещены функциональной группой, которая может взаимодействовать с полимером по настоящему изобретению (например, ПЭГ), для получения полимера, конъюгированного с таргетирующей составляющей. Функциональные группы включают любой фрагмент, который можно использовать для создания ковалентной связи с полимером (например, ПЭГ), такой как амино, гидрокси и тио. В конкретном варианте воплощения малые молекулы могут быть замещены группой ΝΗ2, 8Н или ОН, которые либо непосредственно связываются с малой молекулой, либо связываются с малой молекулой через дополнительную группу, например, алкил или фенил. В неограничивающем примере малые молекулы, раскрытые в патентах, патентных заявках и непатентных ссылочных документах, указанных в настоящей заявке, могут быть связаны с анилином, алкил-Ν^ (например, (ΟΗ2)1-6ΝΗ2) или алкил-8Н (например, (ΟΗ2)1-6ΝΗ2), где группы ΝΗ2 и 8Н могут взаимодействовать с полимером (например, ПЭГ), с образованием ковалентной связи с этим полимером, т.е. с образованием полимерного конъюгата.
Полимерный конъюгат по настоящему изобретению можно получить с использованием любого подходящего способа конъюгирования. Например, два соединения, такие как таргетирующая составляющая и биосовместимый полимер, биосовместимый полимер и полиэтиленгликоль и т.д., могут быть конъюгированы вместе с использованием таких методов, как химия ЕЭС-НН8 (гидрохлорид 1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимида и Ν-гидроксисукцинимид) или реакция с участием малеимида или карбоновой кислоты, которые могут быть конъюгированы с одним концом тиола, амина или аналогичным образом функционализированного простого полиэфира. Конъюгирование таких полимеров, например конъюгирование сложного полиэфира и простого полиэфира с образованием сополимера сложного эфира и простого эфира, можно осуществить в органическом растворителе, таком как, но не ограничиваясь этим, дихлорметан, ацетонитрил, хлороформ, диметилформамид, тетрагидрофуран, ацетон или подобные. Конкретные условия реакции может определить специалист в данной области с использованием обычных рутинных экспериментов.
В другой группе вариантов воплощения реакцию конъюгации можно осуществить путем взаимодействия полимера, который включает карбоновокислотную функциональную группу (например, сополимера сложного эфира и простого эфира) с полимером или другой частицей (такой как таргетирующая составляющая), включающей амин. Например, можно осуществить взаимодействие таргетирующей составляющей, такой как низкомолекулярный РδМΑ лиганд, с амином с образованием аминсодержащей составляющей, которая затем может быть конъюгирована с карбоновой кислотой полимера. Такую реакцию можно осуществить как одностадийную реакцию, т.е. конъюгирование осуществляют без использования промежуточных соединений, таких как Ν-гидроксисукцинимид или малеимид. Реакцию конъюгации между аминсодержащей составляющей и полимером с карбоновокислотной концевой группой (таким как сополимер сложного эфира и простого эфира) можно осуществить, в одной группе вариантов воплощения, путем добавления аминсодержащей составляющей, солюбилизированной в органическом растворителе, таком как (но не ограничиваясь этим) дихлорметан, ацетонитрил, хлороформ, тетрагидро- 13 023175 фуран, ацетон, формамид, диметилформамид, пиридины, диоксан или диметилсульфоксид, к раствору, содержащему полимер, имеющий карбоновокислотную концевую группу. Полимер, имеющий карбоновокислотную концевую группу, может содержаться в органическом растворителе, таком как, но не ограничиваясь этим, дихлорметан, ацетонитрил, хлороформ, диметилформамид, тетрагидрофуран или ацетон. Взаимодействие между аминсодержащей составляющей и полимером, имеющим карбоновокислотную концевую группу, в некоторых случаях может происходить самопроизвольно. Участвующие в реакции вещества, которые остались неконъюгированными, можно удалить путем промывки после таких реакций, и можно осуществить осаждение полимера в растворителях, таких как, например, этиловый эфир, гексан, метанол или этанол.
В качестве конкретного примера низкомолекулярный Р8МЛ лиганд может быть получен в качестве таргетирующей составляющей в частице следующим образом. Модифицированный карбоновой кислотой сополимер полилактида и полигликолида (РЬОЛ-СООН) может быть конъюгирован с аминмодифицированным гетеробифункциональным полиэтиленгликолем (ЫН2-ПЭГ-СООН) с образованием сополимера РЬОЛ-ПЭГ-СООН. С использованием аминмодифицированного низкомолекулярного Р8МЛ лиганда (МН2-Ыд) может быть получен триблок-полимер РЬОЛ-ПЭГ -Ы§ путем конъюгации карбоновокислотного конца ПЭГ с аминовой функциональной группой лиганда. Мультиблок-полимер затем можно использовать, например, как обсуждается ниже, например, для терапевтического применения.
Другой аспект настоящего изобретения направлен на частицы, которые включают полимерные конъюгаты, например, описанные выше. Такие частицы могут иметь, по существу, сферическую (т.е. частицы в основном являются сферическими) или несферическую конфигурацию. Например, частицы при их набухании или сжатии могут принимать несферическую конфигурацию. В некоторых случаях частицы могут включать полимерные смеси. Например, может быть получена полимерная смесь, которая включает первый полимер, включающий таргетирующую составляющую (т.е. низкомолекулярный Р8МЛ лиганд) и биосовместимый полимер, и второй полимер, включающий биосовместимый полимер, но не включающий таргетирующую составляющую. Путем контролирования соотношения первого и второго полимеров в конечном полимере концентрацию и местоположение таргетирующей составляющей в конечном полимере можно легко контролировать до любой подходящей степени.
Как используется в настоящем описании термин алкил включает насыщенные алифатические группы, включая линейные алкильные группы (например, метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, гептил, октил, нонил, децил и т.д.), алкильные группы с разветвленной цепью (изопропил, трет-бутил, изобутил и т.д.), циклоалкильные (алициклические) группы (циклопропил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил), алкилзамещенные циклоалкильные группы и циклоалкилзамещенные алкильные группы. Кроме того, выражение Сх-Су-алкил, где х имеет значение 1-5 и у имеет значение 210, указывает конкретную алкильную группу (с линейной или разветвленной цепью) с количеством атомов углерода в конкретных пределах. Например, выражение С1-С4-алкил включает, но не ограничивается этим, метил, этил, пропил, бутил, изопропил, трет-бутил и изобутил.
Термин алкил также включает алкильные группы, которые могут дополнительно включать атомы кислорода, азота, серы или фосфора, замещающие один или несколько атомов углерода углеводородного скелета. В одном варианте воплощения алкил с линейной или разветвленной цепью содержит 10 или меньше атомов углерода в своей основной цепи (например, С1-С10 для линейной, С3-С10 для разветвленной цепи), и более предпочтительно 6 или меньше атомов углерода. Подобным образом, предпочтительные циклоалкилы содержат 4-7 атомов углерода в их кольцевой структуре и более предпочтительно они содержат 5 или 6 атомов углерода в кольцевой структуре.
Более того, алкил (например, метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил и т.д.) включает как незамещенный алкил, так и замещенный алкил, из которых последний относится к алкильным группам, содержащим заместители, замещающие водород по одному или нескольким атомам углерода углеводородной основной цепи, что позволяет молекуле осуществлять ее предполагаемую функцию. Термин замещенный предназначен для описания групп, содержащих заместители, замещающие водород по одному или нескольким атомам, например С, О или Ν, в молекуле. Такие заместители могут включать, например, алкенил, алкинил, галоген, гидроксил, алкилкарбонилокси, арилкарбонилокси, алкоксикарбонилокси, арилоксикарбонилокси, карбоксилат, алкилкарбонил, арилкарбонил, алкоксикарбонил, аминокарбонил, алкиламинокарбонил, диалкиламинокарбонил, алкилтиокарбонил, алкоксил, фосфат, фосфонато, фосфинато, амино (включая алкиламино, диалкиламино, ариламино, диариламино и алкилариламино), ациламино (включая алкилкарбониламино, арилкарбониламино, карбамоил и уреидо), амидино, имино, сульфгидрил, алкилтио, арилтио, тиокарбоксилат, сульфаты, алкилсульфинил, сульфонат, сульфамоил, сульфонамидо, нитро, трифторметил, циано, азидо, гетероциклическую группу, алкиларил, морфолино, фенол, бензил, фенил, пиперазин, циклопентан, циклогексан, пиридин, 5Н-тетразол, триазол, пиперидин или ароматическую или гетероароматическую группу.
Следующие примеры заместителей по настоящему изобретению, которые не следует рассматривать как ограничивающие, включают группы, выбранные из линейного или разветвленного алкила (предпочтительно С1-С5), циклоалкила (предпочтительно С3-С8), алкокси (предпочтительно С1-С6), тиоалкила (предпочтительно С1-С6), алкенила (предпочтительно С2-С6), алкинила (предпочтительно С2-С6), гетеро- 14 023175 циклической группы, карбоциклической группы, арила (например, фенила), арилокси (например, фенокси), аралкила (например, бензила), арилоксиалкила (например, фенилоксиалкила), арилацетамидоила, алкиларила, гетероаралкила, алкилкарбонила и арилкарбонила или другой такой ацильной группы, гетероарилкарбонильной или гетероарильной группы, (СК'К)0-3ПК'К (например, -ΝΗ2), (Τ’Β'Ρ)0-3Τ’Ν (например, -ΟΝ), -ΝΟ2, галогена (например, -Р, -С1, -Вг или -I), (СК'К)0-3С(галоген)3 (например, -СР3), (СК'К)0-3СН (галоген)2, (СК'К)0-3СН2(галоген), (СК'К) ;СС)\К'КЕ (СК'К)0-3(СПН)ПК'К, (СК'К)0 38(Ο)1-2ΝΚιΚ, (СК'К)0-3СНО, (СК'К)0-3С(СК'К )0-3Н, (СК'К)0-35(О)0-3К' (например, -8Ο3Η, -Ο8Ο3Η), (СК'К )0-3О(СК'К)0-3Н (например, -СН2ОСН3 и -ΟϋΗ3), (СК'К)0-38(СК'К)0-3Н (например, -8Н и -8СН3), (Τ’Β'Ρ)0-3ΟΗ (например, -ΟΗ), ^Κ'Κ)0-^ΟΚ' , (СК'К)0-3 (замещенный или незамещенный фенил), (СК'К)0-3(С3-С8 циклоалкил), (Τ’Β'Β)0-3ΤΌ2Ρ' (например, -СО2Н) или (Τ’ΒΚ)0-3ΟΡ' группы, или боковой цепи любой природной аминокислоты; где К' и К каждый независимо представляет собой водород, С1С5 алкильную, СЕ-СЕ алкенильную, СЕ-СЕ алкинильную или арильную группу. Такие заместители могут включать, например, галоген, гидроксил, алкилкарбонилокси, арилкарбонилокси, алкоксикарбонилокси, арилоксикарбонилокси, карбоксилат, алкилкарбонил, алкоксикарбонил, аминокарбонил, алкилтиокарбонил, алкоксил, фосфат, фосфонато, фосфинато, циано, амино (включая алкиламино, диалкиламино, ариламино, диариламино и алкилариламино), ациламино (включая алкилкарбониламино, арилкарбониламино, карбамоил и уреидо), амидино, имино, оксим, тиол, алкилтио, арилтио, тиокарбоксилат, сульфаты, сульфонато, сульфамоил, сульфонамидо, нитро, трифторметил, циано, азидо, гетероциклил или ароматическую или гетероароматическую группу. В некоторых вариантах воплощения карбонильная группа (Ο=Ο) может быть дополнительно дериватизирована группой оксима, например, альдегидная группа может быть дериватизирована в виде его оксимного (-Ο=Ν-ΟΗ) аналога. Специалистам в данной области должно быть понятно, что группы, замещенные на углеводородной цепи, сами могут быть замещены, если это является подходящим. Циклоалкилы могут быть дополнительно замещены, например, заместителями, описанными выше. Группа аралкил представляет собой алкил, замещенный арилом (например, фенилметил (т.е. бензил)).
Термин арил включает группы, включающие 5- и 6-членные содержащие одно кольцо ароматические группы, которые могут включать от нуля до четырех гетероатомов, например фенил, пиррол, фуран, тиофен, тиазол, изотиазол, имидазол, триазол, тетразол, пиразол, оксазол, изоксазол, пиридин, пиразин, пиридазин и пиримидин и подобные. Кроме того, термин арил включает полициклические арильные группы, например трициклические, бициклические, например нафталин, бензоксазол, бензодиоксазол, бензотиазол, бензоимидазол, бензотиофен, метилендиоксифенил, хинолин, изохинолин, антрил, фенантрил, нафтиридин, индол, бензофуран, пурин, бензофуран, деазапурин или индолизин. Теарильные группы, которые содержат гетероатомы в кольцевой структуре, также могут быть указаны как арильные гетероциклы, гетероциклы, гетероарилы или гетероароматические группы. Ароматическое кольцо может быть замещено в одном или нескольких положениях кольца такими заместителями, как заместители, описанные выше, например алкил, галоген, гидроксил, алкокси, алкилкарбонилокси, арилкарбонилокси, алкоксикарбонилокси, арилоксикарбонилокси, карбоксилат, алкилкарбонил, алкиламиноакарбонил, аралкиламинокарбонил, алкениламинокарбонил, алкилкарбонил, арилкарбонил, аралкилкарбонил, алкенилкарбонил, алкоксикарбонил, аминокарбонил, алкилтиокарбонил, фосфат, фосфонато, фосфинато, циано, амино (включая алкиламино, диалкиламино, ариламино, диариламино и алкилариламино), ациламино (включая алкилкарбониламино, арилкарбониламино, карбамоил и уреидо), амидино, имино, сульфгидрил, алкилтио, арилтио, тиокарбоксилат, сульфат, алкилсульфинил, сульфонат, сульфамоил, сульфонамидо, нитро, трифторметил, циано, азидо, гетероциклил, алкиларил или ароматическая или гетероароматическая группа. Арильные группы также могут быть конденсированы или связаны мостиковой связью с алициклическими или гетероциклическими кольцами, которые не являются ароматическими, с образованием, таким образом, полицикла (например, тетралин).
Кроме того, фраза любое их сочетание предполагает, что любое количество перечисленных функциональных групп и молекул можно объединить для создания более крупной молекулярной архитектуры. Например, термины алкил и арил можно объединить с образованием - СН2РЬ или -РЬСН3 (тоуил) группы. Подобным образом, фраза любое сочетание С1-6-алкила или фенила, которые независимо замещены один или несколько раз группой ОН, 8Н, ΝΗ2 или СО2Н представляет структуру -(СН2)3-аналина или -РЬ- (ΤΉ2)3-ΝΗ2 заместитель. Должно быть понятно, что при объединении функциональных групп и молекул для создания более крупной молекулярной архитектуры атомы водорода могут быть удалены или добавлены, как это необходимо для соответствия валентности каждого атома.
Получение мишень-специфических наночастиц.
Другой аспект настоящего изобретения направлен на системы и способы получения таких мишеньспецифических наночастиц. В некоторых вариантах воплощения осуществляют контактирование раствора, содержащего полимер, с жидкостью, такой как несмешиваемая жидкость, с образованием наночастиц, содержащих полимерный конъюгат.
Как было указано, один аспект настоящего изобретения направлен на способ разработки наночастиц с желаемыми свойствами, такими как желаемые химические, биологические или физические свойства. В одной группе вариантов воплощения способ включает получение библиотеки наночастиц, имею- 15 023175 щих высококонтролируемые свойства, которую можно получить путем смешивания вместе двух или более полимеров в различных соотношениях. Путем смешивания вместе двух или более разных полимеров (например, сополимеров, например, блок-сополимеров) в различных соотношениях и получения частиц из этих полимеров (например, сополимеров, например, блок-сополимеров), можно получить частицы, обладающие высоко контролируемыми свойствами. Например, один полимер (например, сополимер, например, блок-сополимер) может включать низкомолекулярный Р8МЛ лиганд, тогда как другой полимер (например, сополимер, например, блок-сополимер) может быть выбран с учетом его биосовместимости и/или его способности контролировать иммуногенность получаемой в результате частицы.
В одной группе вариантов воплощения частицы получают путем обеспечения раствора, включающего один или несколько полимеров, и контактирования раствора с осадителем полимера с получением частицы. Раствор может быть смешиваемым или не смешиваемым с осадителем полимера. Например, смешиваемая с водой жидкость, такая как ацетонитрил, может содержать полимеры, и частицы образуются при контакте ацетонитрила с водой, осадителем полимера, например, при выливании ацетонитрила в воду с контролируемой скоростью. Полимер, содержащийся в растворе, при контакте с осадителем полимера может затем осаждаться с образованием частиц, таких как наночастицы. Две жидкости указываются как несмешиваемые или как жидкости, которые не могут смешиваться друг с другом, когда одна из них не является растворимой в другой до уровня по меньшей мере 10 мас.% при температуре и давлении окружающей среды. Типично, органический раствор (например, дихлорметан, ацетонитрил, хлороформ, тетрагидрофуран, ацетон, формамид, диметилформамид, пиридины, диоксан, диметилсульфоксид и т.д.) и водная жидкость (например, вода или вода, содержащая растворенные соли или другие молекулы, клеточную или биологическую среду, этанол и т.д.) являются несмешиваемыми по отношению друг к другу. Например, первый раствор можно выливать во второй раствор (с подходящей скоростью). В некоторых случаях частицы, такие как наночастицы, могут быть образованы при контактировании первого раствора с несмешиваемой второй жидкостью, например осаждение полимера при контакте приводит к образованию этим полимером наночастиц по мере того, как первый раствор выливают во вторую жидкость, и в некоторых случаях, например, когда скорость введения тщательно контролируют и поддерживают на относительно низком уровне, могут образовываться наночастицы. Контроль такого образования частиц легко может оптимизировать специалист, обладающий средней квалификацией, исключительно путем рутинного экспериментирования.
Путем создания библиотеки таких частиц можно идентифицировать частицы, обладающие любыми желательными свойствами. Например, свойства, такие как поверхностная функциональность, поверхностный заряд, размер, зета (ζ) потенциал, гидрофобность, способность контролировать иммуногенность и подобные, могут быть высоко контролируемыми. Например, библиотеку частиц можно синтезировать и скринировать для идентификации частиц, имеющих конкретное отношение полимеров, которое позволяет частицам иметь определенную плотность групп (например, низкомолекулярных Р8МЛ лигандов), присутствующих на поверхности частицы. Это дает возможность получать частицы, обладающие одним или несколькими специфическими свойствами, например имеющие специфический размер и специфическую поверхностную плотность групп, без излишних усилий. Соответственно некоторые варианты воплощения настоящего изобретения направлены на методы скрининга с использованием таких библиотек, а также на любые частицы, идентифицированные с использованием таких библиотек. Кроме того, идентификацию можно осуществить любым подходящим способом. Например, идентификация может быть прямой или косвенной или может проходить количественно или качественно.
В некоторых вариантах воплощения уже образовавшиеся наночастицы функционализируют таргетирующей составляющей с использованием процедур, аналогичных тем, которые описаны для получения лиганд-функционализированных полимерных конъюгатов. В качестве конкретного неограничивающего примера этот вариант воплощения схематически проиллюстрирован на фиг. 1А. На этой схеме первый сополимер (РЬСА-РЕС, сополимер полилактида и полигликолида-полиэтиленгликоля) смешивают с терапевтическим средством с образованием частиц. Частицы затем связывают с низкомолекулярным Р8МА лигандом с образованием наночастиц, которые можно использовать для лечения рака. Частицы можно связывать с разными количествами низкомолекулярных Р8МА лигандов, чтобы контролировать плотность Р8МА лиганда на поверхности наночастицы, изменяя, таким образом, терапевтические характеристики наночастиц. Кроме того, например, путем контролирования параметров, таких как молекулярная масса РЬСА, молекулярная масса ПЭГ и поверхностный заряд наночастицы, можно получить очень точно контролируемые частицы с использованием этого способа получения.
В качестве конкретного неограничивающего примера этот вариант воплощения схематически проиллюстрирован на фиг. 1В. На этой схеме первый сополимер (РЬСА-РЕС) конъюгируют с низкомолекулярным Р8МА лигандом (РЗМАЫд) с образованием РЬСА-ПЭГ-РЗМАид полимера. Этот лигандсвязанный полимер смешивают со вторым нефункционализированным полимером (в этом примере, РЬСА-ПЭГ) при разных соотношениях с образованием ряда частиц, имеющих разные свойства, например разную плотность Р8МА лиганда на их поверхности, как показано в этом примере. Например, путем контролирования параметров, таких как молекулярная масса РЬСА, молекулярная масса ПЭГ, плотность Р8МА лиганда на поверхности и поверхностный заряд наночастицы, можно получить очень точно кон- 16 023175 тролируемые частицы с использованием этого способа получения. Как показано на фиг. 1В, полученная наночастица также может включать терапевтическое средство.
В другом варианте воплощения изобретение обеспечивает способ получения наночастицы, где наночастица имеет отношение лигандсвязанного полимера к нефункционализированному полимеру, эффективное для лечения рака предстательной железы, где гидрофильный лигандсвязанный полимер конъюгирован с липидом, который будет осуществлять самосборку с гидрофобным полимером, таким образом, чтобы гидрофобный и гидрофильный полимеры, которые образуют наночастицу, не были ковалентно связаны. Самосборка относится к процессу самопроизвольной сборки структуры высшего порядка, который основан на естественном притяжении компонентов структуры высшего порядка (например, молекул) друг к другу. Это обычно происходит через неупорядоченные движения молекул и образование связей на основании размера, формы, композиции или химических свойств. Например, такой способ включает обеспечение первого полимера, который подвергают взаимодействию с липидом, с образованием полимер/липидного конъюгата. Полимер/липидный конъюгат затем подвергают взаимодействию с низкомолекулярным Ρ8ΜΆ лигандом с получением конъюгата лигандсвязанный полимер/липид; и смешивание конъюгата лигандсвязанный полимер/липид со вторым нефункционализированным полимером и терапевтическим средством с получением, таким образом, наночастицы. В некоторых вариантах воплощения первый полимер представляет собой ПЭГ, чтобы получить ПЭГ, содержащий липид на конце цепи. В одном варианте воплощения липид представляет собой липид формулы V, например 2 дистеароил-8и-глицеро-3-фосфоэтаноламин (Ό8ΡΕ) и его соли, например натриевую соль. ПЭГ, содержащий липид на конце цепи, затем может быть, например, смешан с РЬСА с образованием наночастицы.
Также могут быть получены библиотеки таких частиц. Например, путем изменения соотношения двух (или более) полимеров в частице эти библиотеки могут быть полезны для скрининговых испытаний, в высокопроизводительных анализах или т.п. Входящие в библиотеку частицы могут отличаться по своим свойствам, таким как описанные выше свойства, и в некоторых случаях более чем одно свойство частиц может отличаться в пределах библиотеки. Соответственно один вариант воплощения настоящего изобретения направлен на библиотеку наночастиц, имеющих разные соотношения полимеров с отличающимися свойствами. Библиотека может включать любое подходящее соотношение (соотношения) полимеров.
В некоторых случаях может присутствовать популяция частиц. Например, популяция частиц может включать по меньшей мере 20 частиц, по меньшей мере 50 частиц, по меньшей мере 100 частиц, по меньшей мере 300 частиц, по меньшей мере 1000 частиц, по меньшей мере 3000 частиц или по меньшей мере 10000 частиц. Различные варианты воплощения настоящего изобретения направлены на такие популяции частиц. Например, в некоторых вариантах воплощения частицы могут быть, каждая, по существу одинаковой формы и/или размера (монодисперсные). Например, частицы могут иметь такое распределение характеристических размеров, чтобы не более чем около 5% или около 10% частиц имели характеристический размер, больше чем примерно на 10% превышающий средний характеристический размер частиц, и в некоторых случаях, чтобы не более чем около 8%, около 5%, около 3%, около 1%, около 0,3%, около 0,1%, около 0,03% или около 0,01% имели характеристический размер, больше чем примерно на 10% превышающий средний характеристический размер частиц. В некоторых случаях не более чем около 5% частиц имеют характеристический размер, больше чем на около 5%, около 3%, около 1%, около 0,3%, около 0,1%, около 0,03% или около 0,01% превышающий средний характеристический размер частиц.
В более широком смысле полимеры, выбранные для использования в создании библиотеки частиц, могут представлять собой любые из широкого разнообразия полимеров, например которые описаны в настоящей заявке. Как правило, смешивают два, три, четыре или более полимеров, в широких пределах пропорций (например, каждый в пределах от 0 до 100%), с образованием частиц, таких как наночастицы, имеющих разные пропорции каждого из полимеров. Два или более полимеров могут различаться некоторым образом, например содержать разные полимерные группы, содержать одинаковые полимерные группы, но с разной молекулярной массой, содержать некоторые полимерные группы, которые являются одинаковыми, но содержать другие группы, которые отличаются в этих полимерах (например, один может содержать полимерную группу, которую другой не содержит), содержать одинаковые полимерные группы, но в разных порядках, и т.д. Библиотека частиц может содержать любое количество членов, например библиотека может содержать 2, 3, 5, 10, 30, 100, 300, 1000, 3000, 10000, 30000, 100000 и т.д. членов, которые могут быть идентифицированы определенным образом. В некоторых случаях библиотека может существовать одновременно; например библиотека может содержаться в одном или нескольких микротитровальных планшетах, флаконах и т.д., или в некоторых вариантах воплощения библиотека может включать члены, созданные в разное время.
Библиотеку частиц затем можно скринировать определенным образом для идентификации тех частиц, которые обладают одним или несколькими желаемыми свойствами, например поверхностной функциональностью, поверхностным зарядом, размером, зета (ζ) потенциалом, гидрофобностью, способностью контролировать иммуногенность и подобными. Одна или несколько макромолекул в частицах могут включать один или несколько полимеров, выбранных таким образом, чтобы они были биосовмести- 17 023175 мыми или биоразлагаемыми, один или несколько полимеров, выбранных для снижения иммуногенности, и/или один или несколько низкомолекулярных Р8МА лигандов. Макромолекулы, входящие в библиотеку, могут включать некоторые или все из этих полимеров в любом подходящем сочетании (включая, но не ограничиваясь этим, сочетания, в которых первый полимер включает низкомолекулярный Р8МА лиганд, а второй полимер не содержит ни одну из таких групп).
В качестве конкретного примера, в одном варианте воплощения частицы могут включать первую макромолекулу, включающую биосовместимый полимер и низкомолекулярный Р8МА лиганд, и вторую макромолекулу, включающую биосовместимый полимер, который может быть или может не быть, таким же, как в первой макромолекуле. В качестве другого примера, первая макромолекула может представлять собой блок-сополимер, включающий биосовместимый гидрофобный полимер, биосовместимый гидрофильный полимер и низкомолекулярный Р8МА лиганд; а вторая макромолекула отличается от первой макромолекулы некоторым образом. Например, вторая макромолекула может включать такой же (или другой) биосовместимый гидрофобный полимер и такой же (или другой) биосовместимый гидрофильный полимер, но другой низкомолекулярный Р8МА лиганд (или вообще никакого лиганда), отличный от первой макромолекулы.
Наночастица по настоящему изобретению также может состоять, в качестве еще одного примера, из первой макромолекулы, включающей биосовместимый гидрофобный полимер, биосовместимый гидрофильный полимер и низкомолекулярный Р8МА лиганд, и второй макромолекулы, которая отличается от первой макромолекулы. Например, вторая макромолекула может не содержать ни один из полимеров первой макромолекулы, вторая макромолекула может содержать один или несколько полимеров первой макромолекулы и один или несколько полимеров, не присутствующих в первой макромолекуле, вторая макромолекула может не включать один или несколько полимеров первой макромолекулы, вторая макромолекула может содержать все полимеры первой макромолекулы, но в другом порядке и/или при том, что один или несколько полимеров имеют другую молекулярную массу и т.д.
В качестве еще одного примера, первая макромолекула может включать биосовместимый гидрофобный полимер, биосовместимый гидрофильный полимер и низкомолекулярный Р8МА лиганд, а вторая макромолекула может включать биосовместимый гидрофобный полимер и биосовместимый гидрофильный полимер и отличаться от первой макромолекулы некоторым образом. В качестве еще одного примера, первая макромолекула может включать биосовместимый гидрофобный полимер и биосовместимый гидрофильный полимер, а вторая макромолекула может включать биосовместимый гидрофобный полимер и низкомолекулярный Р8МА лиганд, при этом вторая макромолекула отличается от первой макромолекулы некоторым образом.
Наночастицы, описанные выше, также могут содержать терапевтические средства. Примеры терапевтических средств включают, но не ограничиваются этим, химиотерапевтическое средство, радиоактивное средство, средство на основе нуклеиновой кислоты, средство на основе липидов, средство на основе углеводов, природную малую молекулу или синтетическую малую молекулу.
Полимеры или макромолекулы затем могут быть сформированы в частицу с использованием способов, таких как обсуждаемые подробно ниже. Геометрия, образуемая частицей из полимера или макромолекулы, может зависеть от таких факторов, как полимеры, которые образуют частицу.
На фиг. 2 проиллюстрировано, что библиотеки можно получить с использованием полимеров, таких как полимеры, описанные выше. Например, на фиг. 2 полимерные частицы, включающие первую макромолекулу, включающую биосовместимый гидрофобный полимер, биосовместимый гидрофильный полимер и низкомолекулярный Р8МА лиганд, и вторую макромолекулу, которая включает биосовместимый гидрофобный полимер и биосовместимый гидрофильный полимер, можно использовать для создания библиотеки частиц, имеющих разные соотношения первой и второй макромолекул.
Такая библиотека может быть полезной для получения частиц с любым числом желательных свойств, например, таких свойств, как поверхностная функциональность, поверхностный заряд, размер, зета (ζ) потенциал, гидрофобность, способность контролировать иммуногенность или подобные. На фиг. 2 разные соотношения первой и второй макромолекул (включая соотношения, где одна из макромолекул отсутствует) объединяют с получением частиц, которые образуют основу библиотеки.
Например, как показано на фиг. 2, с увеличением количества первой макромолекулы относительно второй макромолекулы количество составляющей (например, низкомолекулярного Р8МА лиганда), присутствующей на поверхности частицы, может увеличиваться. Таким образом, любую подходящую концентрацию составляющей, присутствующей на поверхности, можно получить просто путем контролирования соотношения первой и второй макромолекул в частицах. Соответственно такая библиотека частиц может быть полезной для выбора или идентификации частиц, обладающих определенной функциональностью.
В качестве конкретных примеров, в некоторых вариантах воплощения настоящего изобретения библиотека включает частицы, включающие полимерные конъюгаты биосовместимого полимера и низкомолекулярного Р8МА лиганда, как обсуждается в настоящей заявке. Обращаясь к фиг. 3, одна такая частица показана в качестве неограничивающего примера. На этой фигуре полимерный конъюгат по настоящему изобретению используют для получения частицы 10. Полимер, образующий частицу 10, вклю- 18 023175 чает низкомолекулярный ΡδΜΑ лиганд 15, присутствующий на поверхности частицы, и биосовместимую часть 17. В некоторых случаях, как показано на этой фигуре, таргетирующая составляющая 15 может быть конъюгирована с биосовместимой частью 17. Однако, показано, что не вся биосовместимая часть 17 является конъюгированной с таргетирующей составляющей 15. Например, в некоторых случаях частицы, такие как частица 10, могут быть образованы с использованием первого полимера, включающего биосовместимую часть 17 и низкомолекулярный ΡδΜΑ лиганд 15, и второго полимера, включающего биосовместимую часть 17, но не таргетирующую составляющую 15. Путем контролирования соотношения первого и второго полимеров могут быть образованы частицы, имеющие разные свойства, и в некоторых случаях могут быть образованы библиотеки таких частиц. Кроме того, присутствует содержащееся в центре частицы 10 лекарственное средство 12. В некоторых случаях лекарственное средство 12 может содержаться внутри частицы благодаря гидрофобным эффектам. Например, внутренняя часть частицы может быть относительно гидрофобной по сравнению с поверхностью частицы, и лекарственное средство может быть гидрофобным лекарственным средством, которое соединяется с относительно гидрофобным центром частицы. В одном варианте воплощения терапевтическое средство является связанным с поверхностью наночастицы, инкапсулировано внутри нее, окружено ею или диспергировано в ней. В другом варианте воплощения терапевтическое средство является инкапсулированным в гидрофобном ядре наночастицы.
В качестве конкретного примера частица 10 может содержать полимеры, включающие относительно гидрофобный биосовместимый полимер и относительно гидрофильную таргетирующую составляющую 15, так чтобы в процессе образования частицы более высокая концентрация гидрофильной таргетирующей составляющей была доступна на поверхности, а более высокая концентрация гидрофобного биосовместимого полимера присутствовала во внутренней части частицы.
В некоторых вариантах воплощения биосовместимый полимер является гидрофобным полимером. Неограничивающие примеры биосовместимых полимеров включают полилактид, полигликолид и/или сополимер полилактида и полигликолида.
В одном варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую 1) полимерную матрицу; 2) амфифильное соединение или слой, который окружает или является диспергированным в полимерной матрице, образуя непрерывную или прерывистую оболочку для частицы; 3) полимер и 4) ковалентно присоединенный низкомолекулярный ΡδΜΑ лиганд. Амфифильный слой может снижать проникновение воды в наночастицу, усиливая таким образом эффективность инкапсулирования лекарственного средства и замедляя высвобождение лекарственного средства. Кроме того, эти защищенные амфифильным слоем наночастицы могут обеспечить терапевтические преимущества путем высвобождения инкапсулированного лекарственного средства и полимера в подходящее время.
Как используется в настоящем описании, термин амфифильный относится к свойству, когда молекула содержит как полярную часть, так и неполярную часть. Часто амфифильное соединение содержит полярную головную часть, присоединенную к длинному гидрофобному хвосту. В некоторых вариантах воплощения полярная часть является растворимой в воде, тогда как неполярная часть не растворима в воде. Кроме того, полярная часть может иметь либо формальный положительный заряд, либо формальный отрицательный заряд. Альтернативно, полярная часть может иметь как положительный, так и отрицательный формальный заряд, и может представлять собой цвиттерион или внутреннюю соль. Для целей настоящего изобретения амфифильное соединение может представлять собой, но не ограничивается этим, одно или несколько из следующих: липиды природного происхождения, поверхностно-активные вещества или синтезированные соединения как с гидрофильными, так и с гидрофобными группами.
Конкретные примеры амфифильных соединений включают, но не ограничиваются этим, фосфолипиды, такие как 1,2 дистеароил-8п-глицеро-3-фосфоэтаноламин (ΌδΡΕ), дипальмитоилфосфатидилхолин (ΌΡΡΟ), дистеароилфосфатидилхолин (ΌδΡΟ), диарахидоилфосфатидилхолин (ΌΑΡΟ), дибегеноилфосфатидилхолин (ΌΒΡΟ), дитрикозаноилфосфатидилхолин (ΌΤΡΟ) и дилигноцероилфатидилхолин (ΌΕΡΟ), включенные при отношении в пределах 0,01-60 (масса липида/масса полимера), наиболее предпочтительно 0,1-30 (масса липида/масса полимера). Фосфолипиды, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются этим, фосфатидиновые кислоты, фосфатидилхолины как с насыщенными, так и ненасыщенными липидами, фосфатидилэтаноламины, фосфатидилглицерины, фосфатидилсерины, фосфатидилинозиты, лизофосфатидильные производные, кардиолипин и β-ацил-у-алкилфосфолипиды. Примеры фосфолипидов включают, но не ограничиваются этим, фосфатидилхолины, такие как диолеоилфосфатидилхолин, димиристоилфосфатидилхолин, дипентадеканоилфосфатидилхолин дилауроилфосфатидилхолин, дипальмитоилфосфатидилхолин (ΌΡΡΟ), дистеароилфосфатидилхолин (ΌδΡΕ), диарахидоилфосфатидилхолин (ΌΑΡΕ), дибегеноилфосфатидилхолин (ΌΒΡΟ), дитрикозаноилфосфатидилхолин (ΌΤΡΕ), дилигноцероилфатидилхолин (ΌΌΡΟ); и фосфатидилэтаноламины, такие как диолеоилфосфатидилэтаноламин или 1-гексадецил-2-пальмитоилглицерофосфоэтаноламин.
Синтетические фосфолипиды с асимметрическими ацильными цепями (например, с одной ацильной цепью из 6 атомов углерода и другой ацильной цепью из 12 атомов углерода) также можно использовать.
- 19 023175
В конкретном варианте воплощения амфифильный компонент, который можно использовать с образованием амфифильного слоя, представляет собой лецитин и, в частности фосфатидилхолин. Лецитин представляет собой амфифильный липид и, как таковой, образует фосфолипидный бислой, содержащий гидрофильные (полярные) головные группы, обращенные к их окружению, которое часто является водным, и гидрофобные хвостовые части, обращенные друг к другу. Лецитин обладает тем преимуществом, что он является природным липидом, который является доступным, например из сои, и он уже одобрен ΡΌΆ для использования в других устройствах доставки. Кроме того, смесь липидов, таких как лецитин, является более привлекательной, чем один чистый липид.
В некоторых вариантах воплощения настоящего изобретения амфифильный слой наночастицы, например слой лецитина, представляет собой монослой, и это означает, что слой не является фосфолипидным бислоем, но существует в виде единственного непрерывного или прерывистого слоя вокруг или внутри наночастицы. Амфифильный слой является ассоциированным с наночастицей по настоящему изобретению, это означает, что он расположен в некоторой близости к полимерной матрице, например окружая внешнюю часть полимерной оболочки, или диспергирован внутри полимеров, которые составляют наночастицу.
Таким образом, в одном варианте воплощения изобретение обеспечивает мишень-специфическую наночастицу, включающую 1) РЬСА; 2) ПЭГ; 3) амфифильное соединение или слой (например, лецитин), который окружает или является диспергированным в РЬСА/РЕС матрице с образованием непрерывной или прерывистой оболочки для частицы; и 4) присоединенный путем ковалентного связывания низкомолекулярный РЗМА лиганд. В одном варианте воплощения РЬСА и ПЭГ являются сополимерами, и низкомолекулярный РЗМА лиганд является ковалентно связанным с ПЭГ. В другом варианте воплощения ПЭГ является связанным с ЭЗРЕ, который осуществляет самосборку с РЬСА, и низкомолекулярный РЗМА лиганд является ковалентно связанным с ПЭГ. В другом варианте воплощения отношение амфифильного соединения к полимеру находится в пределах от 14:1 до 34:1 в расчете на массу.
В другом варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую 1) полимерную матрицу, включающую биоразлагаемый полимер; 2) амфифильное соединение или слой, который окружает или является диспергированным в полимерной матрице с образованием непрерывной или прерывистой оболочки для частицы; 3) полимер и 4) присоединенный путем ковалентного связывания низкомолекулярный РЗМА лиганд, где диаметр наночастицы находится в пределах 40-80 нм, и где отношение амфифильного соединения к полимеру находится в пределах от 14:1 до 34:1 в расчете на массу. В другом варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую 1) полимерную матрицу, включающую биоразлагаемый полимер; 2) лецитин; 3) полимер и 4) присоединенный путем ковалентного связывания низкомолекулярный РЗМА лиганд. В другом варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую 1) полимерную матрицу, включающую биоразлагаемый полимер; 2) лецитин; 3) полимер и 4) присоединенный путем ковалентного связывания низкомолекулярный РЗМА лиганд, где диаметр наночастицы находится в пределах 40-80 нм, и где отношение лецитина к полимеру находится в пределах от 14:1 до 34:1 в расчете на массу. В другом варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую 1) полимерную матрицу, включающую биоразлагаемый полимер; 2) смесь двух или более амфифильных соединений, выбранных из фосфатидилхолина, фосфатидилинозита, фосфатидилэтаноламина и фосфатидиновой кислоты; 3) полимер и 4) присоединенный путем ковалентного связывания низкомолекулярный РЗМА лиганд. В следующем варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую 1) полимерную матрицу, включающую биоразлагаемый полимер; 2) смесь трех или более амфифильных соединений, выбранных из фосфатидилхолина, фосфатидилинозита, фосфатидилэтаноламина и фосфатидиновой кислоты; 3) полимер и 4) присоединенный путем ковалентного связывания низкомолекулярный РЗМА лиганд. Еще в одном варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую 1) полимерную матрицу, включающую биоразлагаемый полимер; 2) амфифильное соединение или слой, который окружает или является диспергированным в полимерной матрице с образованием непрерывной или прерывистой оболочки для частицы; 3) полиэтиленгликоль и 4) присоединенный путем ковалентного связывания низкомолекулярный РЗМА лиганд. В другом варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую 1) полимерную матрицу, включающую биоразлагаемый полимер; 2) лецитин; 3) полиэтиленгликоль и 4) присоединенный путем ковалентного связывания низкомолекулярный РЗМА лиганд. В другом варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую 1) полимерную матрицу, включающую биоразлагаемый полимер; 2) смесь двух или более амфифильных соединений, выбранных из фосфатидилхолина, фосфатидилинозита, фосфатидилэтаноламина и фосфатидиновой кислоты; 3) полиэтиленгликоль и 4) присоединенный путем ковалентного связывания низкомолекулярный РЗМА лиганд. В одном варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую 1) полимерную матрицу, включающую биоразлагаемый полимер; 2) лецитин; 3) полиэтиленгликоль и 4) присоединенный путем ковалентного связывания низкомолекулярный РЗМА лиганд, где диаметр наночастицы находится в пределах 40-80 нм, и где отношение лецитин к полимеру находится в пределах от 14:1 до 34:1 в расчете на массу. В некоторых вариантах воплощения биоразлагаемый полимер представляет собой РЬСА. В других вариантах воплощения полимер представляет собой ПЭГ.
- 20 023175
Терапевтические средства.
В соответствии с настоящим изобретением любые средства (полезная нагрузка), включая, например терапевтические средства (например, противораковые средства), диагностические средства (например, контрастные средства; радионуклиды и флуоресцентные, люминесцентные и магнитные частицы), профилактические средства (например, вакцины) и/или питательные вещества (например, витамины, минералы и т.д.), могут доставляться наночастицами по настоящему изобретению. Примеры средств, доставку которых можно обеспечить в соответствии с настоящим изобретением, включают, но не ограничиваются этим, малые молекулы (например, цитотоксические средства), нуклеиновые кислоты (например, средства на основе δίΡΗΚ, ΡΗΚί и микроРНК), белки (например, антитела), пептиды, липиды, углеводы, гормоны, металлы, радиоактивные элементы и соединения, лекарственные средства, вакцины, иммунологические средства и т.д. и/или их сочетания. В некоторых вариантах воплощения средство, доставку которого нужно осуществить, представляет собой средство, полезное для лечения рака (например, рака предстательной железы).
Например, таргетирующая составляющая может направлять частицу или заставлять ее локализоваться на конкретных участках в организме субъекта, и полезная нагрузка может быть доставлена к этим участкам. В конкретном варианте воплощения лекарственное средство или другая полезная нагрузка может высвобождаться путем контролируемого высвобождения из частицы и имеет возможность локально взаимодействовать с конкретным участком-мишенью (например, опухолью). Термин контролируемое высвобождение (и варианты этого термина), как используется в настоящем описании (например, в контексте системы контролируемого высвобождения), в общем смысле включает высвобождение вещества (например, лекарственного средства) на избранном участке или же с контролируемой скоростью, интервалом и/или количеством. Контролируемое высвобождение охватывает, но не обязательно ограничивается этим, по существу, непрерывную доставку, доставку по определенному образцу (например, прерывистую доставку в течение определенного периода времени, которая прерывается регулярными или нерегулярными временными интервалами) и доставку болюса выбранного вещества (например, в виде предварительно определенного дискретного количества вещества в течение относительно короткого периода времени (например, несколько секунд или минут)).
Например, таргетирующая составляющая может заставлять частицы локализоваться к опухоли, участку заболевания, ткани, органу, типу клеток и т.д. в организме субъекта в зависимости от используемой таргетирующей составляющей. Например, низкомолекулярный Ρ§ΜΑ лиганд может локализоваться на раковых клетках предстательной железы. Субъект может представлять собой человека или животное. Примеры субъектов включают, но не ограничиваются этим, млекопитающее, такое как собака, кошка, лошадь, осел, кролик, корова, свинья, овца, коза, крыса, мышь, морская свинка, хомяк, обезьяна, человек или т.п.
В одной группе вариантов воплощения полезная нагрузка представляет собой лекарственное средство или сочетание более чем одного лекарственного средства. Такие частицы могут быть полезными, например, в вариантах воплощения, где таргетирующую составляющую можно использовать для направления частицы, содержащей лекарственное средство, на конкретное местоположение в организме субъекта, например для обеспечения возможности локализованной доставки лекарственного средства. Примеры терапевтических средств включают химиотерапевтические средства, такие как доксорубицин (адриамицин), гемцитабин (гемзар), даунорубицин, прокарбазин, митомицин, цитарабин, этопозид, метотрексат, 5-фторурацил (5-РИ), винбластин, винкристин, блеомицин, паклитаксел (таксол), доцетаксел (таксотер), альдеслейкин, аспарагиназа, бусульфан, карбоплатин, кладрибин, камптотецин, СРТ-11, 10гидрокси-7-этилкамптотецин (§N38), дакарбазин, §-1 капецитабин, фторафур, 5'-дезоксифторуридин, ПРТ, енилурацил, дезоксицитидин, 5-азацитозин, 5-азадезоксицитозин, аллопуринол, 2-хлораденозин, триметрексат, аминоптерин, метилен-10-деазааминоптерин (ΜΌΆΜ), оксаплатин, пикоплатин, тетраплатин, сатраплатин, платинум-ЭАСН, ормаплатин, С1-973, ΙΜ-216 и его аналоги, эпирубицин, этопозид фосфат, 9-аминокамптотецин, 10,11-метилендиоксикамптотецин, каренитецин, 9-нитрокамптотецин, ТА§ 103, виндезин, Ь-фенилаланин иприт, ифосфамидмефосфамид, перфосфамид, трофосфамид кармустин, семустин, эпотилоны А-Е, томудекс, 6-меркаптопурин, 6-тиогуанин, амсакрин, этопозид фосфат, каренитецин, ацикловир, валацикловир, ганцикловир, амантадин, римантадин, ламивудин, зидовудин, бевацизумаб, трастузумаб, ритуксимаб, 5-фторурацил и их сочетания.
Неограничивающие примеры потенциально подходящих лекарственных средств включают противораковые средства, включающие, например, доцетаксел, митоксантрон и митоксантрон гидрохлорид. В другом варианте воплощения полезная нагрузка может представлять собой противораковое лекарственное средство, такое как 20-эпи-1, 25 дигидрокси витамин Ό3, 4-ипомеанол, 5-этинилурацил, 9дигидротаксол, абиратерон, ацивицин, акларубицин, акодазол гидрохлорид, акронин, ацилфиилвен, адеципенол, адозелесин, альдеслейкин, антагонисты а11-1к, алтретамин, амбамустин, амбомицин, аметантрон ацетат, амидокс, амифостин, аминоглутетимид, аминолевулиновую кислоту, амрубицин, амсакрин, анагрелид, анастрозол, андрографолид, ингибиторы ангиогенеза, антагонист Ό, антагонист О, антареликс, антрамицин, антидорсализирующий морфогенетический белок-1, антиэстроген, антинеопластон, антисмысловые олигонуклеотиды, афидиколин глицинат, модуляторы гена апоптоза, регуляторы апоптоза,
- 21 023175 апуриновую кислоту, АКА-СПР-ОЬ-РТВА, аргининдезаминазу, аспарагиназу, асперлин, азулакрин, атаместан, атримустин, аксинастатин 1, аксинастатин 2, аксинастатин 3, азацитидин, азасетрон, азатоксин, азатирозин, азетепа, азотомицин, производные баккатина III, баланол, батимастат, бензохлорины, бензодепа, бензоилстауроспорин, бета-лактамные производные, бета-алетин, бета-кламицин В, бетулиновую кислоту, ингибитор ВРОР, бакалутамид, бисантрен, бисантрен гидрохлорид, бисазиудинилспермин, биснафид, биснафид димезилат, бистратен А, бицелезин, блеомицин, блеомицин сульфат, антагонисты ВКС/АВЬ, брефлат, бреквинар натрий, бропиримин, будотитан, бусульфан, бутионин сульфоксимин, кактиномицин, кальципотриол, калфостин С, калустерон, производные камптотецина, канарипокс 1Ь-2, капецитабин, карацераид, карбетимер, карбоплатин, карбоксамидаминотриазол, карбоксиамидотриазол, карест М3, кармустин, еарн 700, ингибитор, выделенный их хряща, карубицин гидрохлорид, карцелезин, ингибиторы казеинкиназы, кастаноспермин, цекропин В, цедефингол, цетрореликс, хлорамбуцил, хлорины, хлорхиноксалин сульфонамид, цикапрост, циролемицин, цисплатин, цис-порфирин, кладрибин, аналоги кломифена, клотримазол, коллисмицин А, коллисмицин В, комбретастатин А4, аналог комбретастатина, конагенин, крамбесцидин 816, криснатол, криснатол мезилат, криптофицин 8, производные криптофицина А, курацин А, циклопентантрахиноны, циклофосфамид, циклоплатам, ципемицин, цитарабин, цитарабин окфосфат, цитолитический фактор, цитостатин, дакарбазин, дакликсимаб, дактиномицин, даунорубицин гидрохлорид, децитабин, дегидродидемнин В, деслорелин, дексифосфамид, дексормаплатин, дексразоксан, дексверапамил, дезагуанин, дезагуанин мезилат, диазиквон, дидемнин В, дидокс, диэтигиорспермин, дигидро-5-азацитидин, диоксамицин, дифенил спиромустин, доцетаксел, доконазол, доласетрон, доксифлуридин, доксорубицин, доксорубицин гидрохлорид, дролоксифен, дролоксифен цитрат, дромостанолон пропионат, дронабинол, дуазомицин, дуоканницин 8А, эбселен, экомустин, эдатрексат, эделфосин, эдреколомаб, эфломитин, эфломитин гидрохлорид, элемене, элсарнитруцин, эмитефур, энлоплатин, энпромат, эпипропидин, эпирубицин, эпирубицин гидрохлорид, эпристерид, эрбулозол, векторную систему эритроцитной генной терапии, эзорубицин гидрохлорид, эстрамустин, аналог эстрамустина, натрий эстрамустинфосфат, агонисты эстрогена, антагонисты эстрогена, этанидазол, этопозид, этопозид фосфат, этоприн, эксеместан, фадрозол, фадрозол гидрохлорид, фазарабин, фентретинид, филграстим, финастерид, флавопиридол, флезеластин, флоксиридин, флуастерон, флударабин, флударабин фосфат, фтордаунорубицин гидрохлорид, фторурацил, флуроцитабин, форфенимекс, форместан, фосквидон, фостриецин, фостриецин натрий, фотемустин, гадолиний тексафирин, нитрат галлия, галоцитабин, ганиреликс, ингибиторы желатиназы, гемцитабин, гемцитабин гидрохлорид, ингибиторы глутатиона, гепсульфам, герегулин, гексаметилен бисацетамид, гидроксимочевину, гиперицин, ибандроновую кислоту, идарубицин, идарубицин гидрохлорид, идоксифен, идрамантон, ифосфамид, игнофосин, иломастат, имидазоакридоны, имиквимод, иммуностимулирующие пептиды, ингибитор рецептора инсулиноподобного ростового фактора-1, агонисты интерферона, интерферон альфа-2А, интерферон альфа-2В, интерферон альфа-ΝΙ, интерферон альфа-Ы3, интерферон бета-1А, интерферон гамма-1В, интерфероны, интерлейкины, иобенгуан, иододоксорубицин, ипроплатм, иринотекан, иринотекан гидрохлорид, иропласт, ирсогладин, изобенгазол, изогомогаликондрин В, итасетрон, иасплакинолид, кахалалил Р, ламелларин-Ν триацетат, лантреотид, лантреотид ацетат, лейнамицин, ленограстим, лентинан сульфат, лепролстатин, летрозол, лейкоз-ингибирующий фактор, лейкоцитарный альфа интерферон, леупролид ацетат, леупролид/эстроген/прогестерон, леупрорелин, левамизол, лиарозол, лиарозол гидрохлорид, линейный полиаминовый аналог, липофильный дисахаридный пептид, липофильные платиновые соединения, лиссоклинамид, лобаплатин, ломбрицин, лометрексол, лометрексол натрий, ломустин, лонидамин, лосоксантрон, лосоксантрон гидрохлорид, ловастатин, локсорибин, луртотекан, лютециум тексафирин лизофиллин, литические пептиды, мейтансин, манностатин А, маримастат, масопрокол, маспин, ингибиторы матрилизина, ингибиторы металлопротеиназы матрикса, майтансин, мехлоретамин гидрохлорид, мегестрол ацетат, меленгестрол ацетат, мелфалан, меногарил, мербарон, меркаптопурин, метерелин, метиониназу, метотрексат, метотрексат натрий, метоклопрамид, метоприн, метуридепа, ингибиторы микроводорослевой протеинкиназы С, ингибитор ΜΙΡ, мифепристон, милтефосин, миримостим, ошибочно спаренную двухцепочечную РНК, митиндомид, митокарцин, митокромин, митогиллин, митогуазон, митолактол, митомальцин, митомицин, аналоги митомицина, митонафид, митоспер, митотан, митотоксиновый фактор роста фибробластов-сапорин, митоксантрон, митоксантрон гидрохлорид, мофаротен, молграмостин, моноклональное антитело, человеческий хорионический гонадотропин, монофосфориллипид а/8К миобактериальной клеточной оболочки, мопидамол, ингибитор гена множественной лекарственной резистентности, терапевтическое средство на основе супрессора 1 различных опухолей, противораковое средство на основе иприта, микапероксид В, экстракт микобактериальной клеточной оболочки, микофеноловую кислоту, мириапорон, н-ацетилдиналин, нафарелин, нагрестип, налоксон/пентазоцин, напавин, нафтерпин, нартограстим, недаплатин, неморубицин, неридроновую кислоту, нейтральную эндопептидазу, нилутамид, нисамицин, модуляторы оксида азота, нитроксидный антиоксидант, нитруллин, нокодазол, ногаламицин, н-замещенные бензамиды, 06-бензилгуанин, октреотид, окицерон, олигонуклеотиды, онапристон, ондансетрон, орацин, пероральный индуктор цитокинов, ормаплатин, осатерон, оксалиплатин, оксауномицин, оксисуран, паклитаксел, аналоги паклитаксела, производные паклитаксела, палауамин, пальмитоилризоксин, памидроновую кислоту, панакситриол, паномифен, парабактин, пазеллиптин,
- 22 023175 пегаспаргазу, пелдесин, пелиомицин, пентамустин, пентосан полисульфат натрия, пентостатин, пентрозол, пепломицин сульфат, перфлуброн, перфосфамид, периллиловый спирт, феназиномицин, фенилацетат, ингибиторы фосфатазы, пицибанил, пилокарпин гидрохлорид, пипоброман, пипосульфан, пирарубицин, пиритрексим, пироксантрон гидрохлорид, плацетин А, плацетин В, ингибитор активатора плазминогена, комплекс платины, соединения платины, платина-триаминовый комплекс, пликамицин, пломестан, порфимер натрий, порфиромицин, преднимустин, прокарбазин гидрохлорид, пропил бис-акридон, простагландин 12. антиандроген карциномы простаты, ингибиторы протеасомы, иммуномодулятор на основе белка А, ингибитор протеинкиназы С, ингибиторы протеинтирозинфосфатазы, ингибиторы пуриннуклеозидфосфорилазы, пуромицин, пуромицин гидрохлорид, пурпурины, пиразорурин, пиразолоакридин, пиридоксилированный гемоглобин-полиоксиэтиленовый конъюгат, антагонисты КАР, ралтитрексед, рамосетрон, ингибиторы фарнезилпротеинтрансферазы КА§, ингибиторы КА§, ингибитор КА§САР, деметилированный рателлиптин, рений КЕ 18 6 этидронат, ризоксин, рибоприн, рибозимы, КН ретинарнид, РНК1, роглетимид, рогитукин, ромуртид, роквинимекс, рубигинон В1, рубоксил, сафингол, сафингол гидрохлорид, сайнтопин, саркну, саркофитол А, сарграмостим, 8ΌΙ1 миметики, семустин, ингибитор старения 1, смысловые олигонуклеотиды, ингибиторы сигнальной трансдукции, модуляторы сигнальной трансдукции, семтразен, белок, связывающийся с одноцепочечным антигеном, сизофиран, собузоксан, натрий борокаптат, натрий фенилацетат, солверол, белок, связывающийся с соматомедином, сонермин, спарфосат натрий, спарфосовую кислоту, спарсомицин, спикамицин Ό, спирогерманий гидрохлорид, спиромустин, спироплатин, спленопентин, спонгистатин 1, скваламин, ингибитор стволовых клеток, ингибиторы деления стволовых клеток, стипиамид, стрептонигрин, стрептозоцин, ингибиторы стромелизина, сульфиносин, сулофенур, суперактивный вазоактивный кишечный пептидный антагонист, сурадиста, сурамин, свайнсонин, синтетические гликозаминогликаны, тализомицин, таллимустин, тамоксифен метиодид, тауромустин, тазаротен, текогалан натрий, тегафур, теллурапирилиум, ингибиторы теломеразы, телоксантрон гидрохлорид, темопорфин, темозоломид, тенипозид, тероксирон, тестолактон, тетрахлордекаоксид, тетразомин, талибластин, талидомид, тиамиприн, тиокоралин, тиогуанин, тиотепа, тромбопоэтин, миметик тромбопоэтина, тималфасин, агонист рецептора тимопоэтина, тимотрианан, тиреотропный гормон, тиазофурин, оловоэтилэтиопурпурин, тирапазамин, титаноцен дихлорид, топотекан гидрохлорид, топсентин, торемифен, торемифен цитрат, тотипотентный фактор стволовых клеток, ингибиторы трансляции, трестолон ацетат, третионин, триацетилуридин, трицирибин, трицирибин фосфат, триметрексат, триметрексат глюкуронат, трипторелин, трописетрон, тубулозол гидрохлорид, туростерид, ингибиторы тирозинкиназы, тирфостины, ингибиторы иВС, убенимекс, урацилиприт, уридепа, фактор ингибирования роста урогенитального синуса, антагонисты рецептора урокиназы, вапреотид, вариолин В, веларесол, верамин, вердинс, вертепорфин, винбластин сульфат, винкристин сульфат, виндезин, виндезин сульфат, винепидин сульфат, винглицинат сульфат, винлеуросин сульфат, винорелбин, винорелбин тартрат, винрозидин сульфат, винксалтин, винзолидин сульфат, витаксин, вопозол, занотерон, зениплатин, зиласкорб, зиностатин, зиностатиновый стиламер или зорубицин гидрохлорид.
Получив конъюгаты в соответствии с настоящим изобретением, их можно объединить с фармацевтически приемлемыми носителями для получения фармацевтической композиции в соответствии с еще одним аспектом настоящего изобретения. Как должно быть понятно специалистам в данной области, носители могут быть выбраны с учетом пути введения, как описано ниже, местоположения объекта, на который направлено действие, лекарственного средства, подлежащего доставке, времени, в течение которого нужно осуществить доставку лекарственного средства, и т.д.
В одном варианте воплощения наночастицы по настоящему изобретению содержат нуклеиновые кислоты, такие как мРНК.
Предпочтительно молекула мРНК имеет длину около 10-50 или более нуклеотидов. Более предпочтительно молекула мРНК имеет длину около 15-45 нуклеотидов. Еще более предпочтительно молекула 81РНК имеет длину около 19-40 нуклеотидов. И еще более предпочтительно молекула мРНК имеет длину около 21-23 нуклеотидов.
81РНК по настоящему изобретению предпочтительно опосредует РНК1 против мРНК мишени. Молекула 81РНК может быть рассчитана таким образом, чтобы каждый остаток был комплементарным остатку в молекуле-мишени. Альтернативно, можно осуществить одно или несколько замещений в молекуле для повышения стабильности и/или усиления процессинговой активности указанной молекулы. Замещения могут быть осуществлены внутри цепи или могут быть осуществлены по остаткам на концах цепи.
Реакция расщепления мРНК мишени, направляемая молекулами 81РНК, является последовательность-специфической. Как правило, мРНК, имеющие нуклеотидную последовательность, идентичную части гена-мишени, являются предпочтительными для ингибирования. Однако для осуществления настоящего изобретения не требуется 100% идентичность последовательностей между 81РНК и геноммишенью. Возможны вариации последовательностей, включая те, которые могут быть ожидаемыми в результате генетической мутации, штаммового полиморфизма или эволюционной дивергенции. Например, было обнаружено, что последовательности мРНК с вставками, делециями и точечными мутациями относительно последовательности-мишени также являются эффективными для ингибирования. Альтер- 23 023175 нативно, последовательности кРНК с замещениями нуклеотидными аналогами или вставками могут быть эффективными для ингибирования.
Более того, не все положения кРНК в равной мере способствуют распознаванию мишени. Ошибочные спаривания в центре к1РНК являются наиболее критическими и, по существу, устраняют деградацию являющейся мишенью РНК. В отличие от этого, 3'-нуклеотиды в к1РНК не способствуют каким-либо существенным образом специфичности распознавания мишени. Как правило, остатки по 3'-концу последовательности 81РНК, которая является комплементарной РНК-мишени (например, направляющая последовательность), не являются критическими для деградации являющейся мишенью РНК.
Идентичность последовательностей легко можно определить путем сравнения последовательностей и при помощи алгоритмов выравнивания, известных из уровня техники. Для определения процента идентичности двух нуклеиновокислотных последовательностей (или двух аминокислотных последовательностей) последовательности выравнивают для оптимального сравнения (например, можно внести пробелы в первую последовательность или вторую последовательность для оптимального выравнивания). Затем осуществляют сравнение нуклеотидов (или аминокислотных остатков) в соответствующих положениях нуклеотидов (или аминокислот). Когда положение в первой последовательности занято тем же остатком, как в соответствующем положении во второй последовательности, тогда молекулы являются идентичными в этом положении. Процент идентичности между двумя последовательностями является функцией количества идентичных положений для этих последовательностей (т.е. % гомологии=количество идентичных положений/общее количество положенийх100) с необязательным штрафом за количество введенных пробелов и/или длину введенных пробелов.
Сравнение последовательностей и определение процента идентичности между двумя последовательностями можно осуществить с использованием математического алгоритма. В одном варианте воплощения выравнивание осуществляют по определенной части выравниваемой последовательности, имеющей достаточную идентичность, но не по тем частям, которые имеют низкую степень идентичности (т.е. локальное выравнивание). Предпочтительным неограничивающим примером алгоритма локального выравнивания, используемого для сравнения последовательностей, является алгоритм Каг1ш и АНксНЫ (1990) Ргос. Ыа1Ь Асаб 8сР И8А 87:2264-68, модифицированный, как описано в Каг1ш аиб АНксНЫ (1993) Ргос. Ыа1Ь Асаб. 8сР И8А 90:5873. Такой алгоритм включен в ВЬА8Т программы (версия 2.0) А1!кски1, е! а1. (1990) 1 Мо1 Вю1. 215:403-10.
В другом варианте воплощения выравнивание оптимизируют путем введения соответствующих пробелов, и процент идентичности определяют по длине выровненных последовательностей (т.е. выравнивание с пробелами). Для получения выравниваний с пробелами для сравнительных целей можно использовать Оарреб ВЬА8Т, как описано в А118сЬи1 е! а1., (1997) ЫисШс Аибк Кек. 25(17):3389. В другом варианте воплощения выравнивание оптимизируют путем введения соответствующих пробелов, и процент идентичности определяют по всей длине последовательностей, которые подлежат выравниванию (т.е. глобальное выравнивание). Предпочтительным неограничивающим примером математического алгоритма, используемого для глобального сравнения последовательностей, является алгоритм Муегк и МШег, САВ1О8 (1989). Такой алгоритм включен в ΆΠΟΝ программу (версия 2.0), которая является частью пакета программ ОСО для выравнивания последовательностей. При использовании Л^IΟN программы для сравнения аминокислотных последовательностей можно использовать таблицу РАМ 120 массы остатков, штраф за длину пробелов=12 и штраф за пробелы=4.
Предпочтительной является идентичность последовательностей больше чем 90%, например идентичность последовательностей 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99% или даже 100%, между 81РНК и частью м РНК-мишени. Альтернативно, 81РНК может быть функционально определена как нуклеотидная последовательность (или олигонуклеотидная последовательность), которая способна гибридизоваться с частью транскрипта мРНК-мишени (например, в условиях гибридизации 400 мМ №С1, 40 мМ Р1РЕ8 рН 6,4, 1 мМ ЕЭТА, 50 или 70°С в течение 12-16 ч с последующей промывкой). Дополнительные условия гибридизации включают гибридизацию при 70°С в 1х88С или 50°С в 1х88С, 50% формамида с последующей промывкой при 70°С в 0,3х88С или гибридизацию при 70°С в 4х88С или 50°С в 4х88С, 50% формамида с последующей промывкой при 67°С в 1х88С. Температура гибридизации для гибридов, которые, как ожидают, должны быть меньше чем 50 пар оснований в длину, должна быть на 5-10°С меньше, чем температура плавления (Тпл) гибрида, где Тпл определяют в соответствии со следующими уравнениями. Для гибридов меньше чем 18 пар оснований в длину Тпл (°С)=2 (количество А+Т оснований)+4(количество О+С оснований). Для гибридов, имеющих длину в пределах от 18 до 49 пар оснований, Тпл (°С)=81,5+16,6(1одю|№+])+0,41 (%О+С)-(600/Ц), где N представляет количество оснований в гибриде, и |Νη+| представляет концентрацию ионов натрия в гибридизационном буфере ([Nа+] для 1х88С=0,165М). Дополнительные примеры жесткости условий для гибридизации полинуклеотидов представлены в 8атЪгоок 1., Е.Р. Ргккск апб Т. Матакк, 1989, Мо1еси1аг С1опт§: А ЬаЪога!огу Мапиа1, Со1б 8рппд НагЪог ЬаЪога!огу Ргекк, Со1б 8рппд НагЪог, ΝΥ, скар!егк 9 апб 11; Сиггеп! Рго!осо1к ш Мо1еси1аг Вю1о§у, 1995, Р.М. АикиЪе1 е! а1., ебк., 1оНп ^беу & 8опк, 1пс., кескопк 2,10 апб 6,3-6,4, включенных в настоящую заявку посредством ссылки. Длина идентичных нуклеотидных последовательностей может
- 24 023175 быть, по меньшей мере, около или примерно около 10, 12, 15, 17, 20, 22, 25, 27, 30, 32, 35, 37, 40, 42, 45, 47 или 50 оснований.
В одном варианте воплощения молекулы κίΡΗΚ по настоящему изобретению являются модифицированными для улучшения стабильности в сыворотке или в питательной среде для клеточных культур. Для повышения стабильности 3'-остатки могут быть стабилизированы против разложения, например они могут быть выбраны так, чтобы они состояли из пуриновых нуклеотидов, в частности аденозиновых или гуанозиновых нуклеотидов.
Альтернативно, замещение пиримидиновых нуклеотидов модифицированными аналогами, например, замещение уридина 2'-дезокситимидином является допустимым и не влияет на эффективность РНК интерференции. Например, отсутствие 2'-гидроксила может существенно повышать резистентность к нуклеазе молекул κίΡΗΚ в среде с культурой ткани.
В другом варианте воплощения настоящего изобретения молекула κίΡΗΚ может содержать по меньшей мере один модифицированный нуклеотидный аналог. Нуклеотидные аналоги могут быть расположены в положениях, где мишень-специфическая активность, например ΡΗΚί опосредуемая активность, по существу, не подвергается влиянию, например, в области 5'-конца и/или 3'-конца молекулы РНК. В частности, эти концы могут быть стабилизированы путем включения модифицированных нуклеотидных аналогов.
Нуклеотидные аналоги включают модифицированные по группе сахара и/или основной цепи рибонуклеотиды (т.е. включают модификации фосфат-сахарной основной цепи). Например, фосфодисложноэфирные связи природной РНК могут быть модифицированы таким образом, чтобы они включали по меньшей мере один из гетероатомов азота или серы. В предпочтительных имеющих модификацию в основной цепи рибонуклеотидах группа сложного фосфоэфира, соединяющая смежные рибонуклеотиды, замещена модифицированной группой, например фосфотиоатной группой. В предпочтительных сахармодифицированных рибонуклеотидах 2'ОН-группа замещена группой, выбранной из Н, ОК, К, галогена, δΗ, δΡ, ΝΗ2, МИК, ΝΡ2 или ΝΟ2, где К представляет собой С)-С6 алкил, алкенил или алкинил, и галоген представляет собой Р, С1, Вг или I.
Нуклеотидные аналоги также включают нуклеооснование - модифицированные рибонуклеотиды, т.е. рибонуклеотиды, содержащие по меньшей мере одно не встречающееся в природе нуклеооснование вместо природного нуклеооснования. Основания могут быть модифицированы для блокирования активности аденозиндезаминазы. Примеры модифицированных нуклеооснований включают, но не ограничиваются этим, уридин и/или цитидин, модифицированный в 5-положении, например 5-(2амино)пропилуридин, 5-бромуридин; аденозин и/или гуанозины, модифицированные в 8 положении, например 8-бромгуанозин; деазануклеотиды, например 7-деаза-аденозин; О- и Ν-алкилированные нуклеотиды, например М6-метиладенозин, являются подходящими. Следует отметить, что указанные выше модификации можно сочетать.
РНК можно получить ферментативным путем или путем частичного/общего органического синтеза, любой модифицированный рибонуклеотид можно ввести посредством ш νίίΓο ферментативного или органического синтеза. В одном варианте воплощения κίΡΗΚ получают химическим путем. Способы синтеза молекул РНК известны из уровня техники, в частности способы химического синтеза, описанные в Vе^^ηа апб БскЧет (1998), Аппи1 Кем. ВюсЬет. 67:99. В другом варианте воплощения κίΡΗΚ получают ферментативным путем. Например, κίΡΗΚ можно получить путем ферментативного процессинга длинной двухцепочечной РНК, имеющей достаточную комплементарность с желаемой мРНК, которая является мишенью. Процессинг длинноцепочечной РНК можно осуществить ш νί!το, например, с использованием подходящих клеточных лизатов, и κίΡΗΚ могут быть затем очищены методом гель-электрофореза или гель-фильтрации. κίΡΗΚ затем может быть денатурирована в соответствии со способами, известными из уровня техники. В иллюстративном варианте воплощения κίΡΗΚ может быть очищена из смеси путем экстракции с использованием растворителя или смолы, осаждения, электрофореза, хроматографии или с использованием сочетания этих методов. Альтернативно, κίΡΗΚ можно использовать без какойлибо или с использованием минимальной очистки для избежания потерь в результате процессинга образца.
Альтернативно, κίΡΗΚ также могут быть получены путем ферментативной транскрипции из синтетических ДНК матриц или из ДНК плазмид, выделенных из рекомбинантных бактерий. Типично используют фаговые РНК полимеразы, такие как Т7, Т3 или δΡ6 РНК полимераза (МПНдап апб ИЬ1епЬеск (1989) Μе!Ьοбκ Εпζуп^ο^ 180:51-62). РНК можно высушить для хранения или растворить в водном растворе. Раствор может содержать буферы или соли для ингибирования гибридизации и/или промотирования стабилизации двойных цепей.
Коммерчески доступные инструменты для моделирования и наборы, например, которые доступны от АтЬюп, 1пс. (Аийш, ТХ) и !Ье ^ЬДеЬеаб ΙπκΙίΙιι^ οί Вютебюа1 Ке^ащЬ а! ΜΙΤ (СатЬпбде, МА), обеспечивают возможность конструирования и продукции κίΡΗΚ. В качестве примера желаемую последовательность мРНК можно ввести в программу последовательностей, которая будет создавать смысловые и антисмысловые целевые цепочки последовательностей. Эти последовательности затем можно ввести в программу, которая определяет смысловые и антисмысловые олигонуклеотидные матрицы κίΡΗΚ.
- 25 023175
Эти программы также можно использовать для добавления, например вставок шпилек или Т1 промоторных праймерных последовательностей. Наборы также можно затем использовать для создания кассет экспрессии δίΡΗΚ.
В различных вариантах воплощения δίΡΗΚ синтезируют ш νίνο, ш δίίι.ι и ш νίίτο. Эндогенная РНК полимераза клетки может опосредовать транскрипцию ш νίνο или ш δίίπ, или клонированную РНК полимеразу можно использовать для транскрипции ш νίνο или ш νίίτο. Для транскрипции из трансгена ш νίνο или экспрессирующей конструкции регуляторную область (например, промотор, энхансер, сайленсер, сплайсинг донор и акцептор, полиаденилирование) можно использовать для транскрипции δίΡΗΚ. Ингибирование можно направлять путем специфической транскрипции в органе, ткани или типе клеток; путем стимуляции окружающих условий (например, инфекции, стресса, температуры, химических индукторов); и/или использования инженерии для осуществления транскрипции на стадии или в период развития. Трансгенный организм, который экспрессирует δίΡΗΚ из рекомбинантной конструкции, можно получить путем введения такой конструкции в зиготу, эмбриональную стволовую клетку или другую обладающую множественной активностью клетку, выделенную из соответствующего организма.
В одном варианте воплощения являющаяся мишенью мРНК по настоящему изобретению определяет аминокислотную последовательность по меньшей мере одного белка, такого как клеточный белок (например, ядерного, цитоплазматического, трансмембранного или связанного с мембраной белка). В другом варианте воплощения являющаяся мишенью мРНК по настоящему изобретению определяет аминокислотную последовательность внеклеточного белка (например, белка внеклеточного матрикса или секретируемого белка). Как используется в настоящем описании, фраза определяет аминокислотную последовательность белка означает, что мРНК последовательность транслируется в аминокислотную последовательность в соответствии с правилами генетического кода. Следующие классы белков перечислены в иллюстративных целях: белки развития (например, молекулы адгезии, ингибиторы циклинкиназы, члены семейства Уп!, члены семейства Ρаx, члены семейства ХУнгдеб Не1т\. члены семейства Нох, цитокины/лимфокины и их рецепторы, факторы роста/дифференциации и их рецепторы, нейротрансмиттеры и их рецепторы); онкоген-кодируемые белки (например, АБЫ, ΒΡΈΕ ΒΟΒ2, ΒΟΒ6, СΒΡΑ2, СБК СЗР1К, ЕК8А, Ε^Β, ΕΒ^2, Ε^Β2, ΕΗΒΒλ ΕΊδΙ, ЕТУ6, РОК, РОЗ, ΡΥΝ, ИСК, ЖА8, .ΙΕΛ', ЫКАЗ, ЬСЮ ΡΥΝ, ΜΌΜ2, ΜΡΡ, ΜΥΒ, ΜΥΟ, ΜΥΟΟ, ΜΥΟΝ, ЯКАЗ, ΡΙΜ 1, ΡΜΡ, КИТ, ЗКС, ТАМ, ТСЬ3 и ΥΕδ); опухоль-супрессорные белки (например, АРС, ΒКСΑ1, ΒКСΑ2, [ОАЭ^, ΜСС, ΝΡ1, ΝΡ2, ΡΒ 1, ТР53 и УТ1); и ферменты (например, АСС синтазы и оксидазы, АСР десатуразы и гидроксилазы, АЭБ глюкоза-пирофорилазы, ацетилазы и деацетилазы, АТФазы, дегидрогеназы спиртов, амилазы, амилоглюкозидазы, каталазы, целлюлазы, халкон-синтазы, хитиназы, циклооксигеназы, декарбоксилазы, декстриназы, ДНК и РНК полимеразы, галактозидазы, глюканазы, глюкоза-оксидазы, гранулосвязанные крахмал-синтазы, ОТΡ азы, геликазы, геимцеллюлазы, интегразы, инулиназы, инвертазы, изомеразы, киназы, лактазы, липазы, липоксигеназы, лизозимы, нопалинсинтазы, октопинсинтазы, пектинэстеразы, пероксидазы, фосфатазы, фосфолипазы, фосфорилазы, фитазы, синтазы регулятора роста растений, полигалактуроназы, протеиназы и пептидазы, пулланазы, рекомбиназы, обратные транскриптазы, КυΒIδСОδ, топоизомеразы и ксиланазы), белки, вовлеченные в рост опухоли (включая васкуляризацию) или в метастатическую активность или потенциал, включая клеточно-поверхностные рецепторы и лиганды, а также секретируемые белки, белки регуляции клеточного цикла, регуляции генов и регуляции апоптоза, белки регуляции иммунного ответа, воспаления, комплемента или коагуляции.
Как используется в настоящем описании, термин онкоген относится к гену, который стимулирует клеточный рост, и, когда его уровень экспрессии в клетке снижается, скорость клеточного роста снижается, или клетка принимает состояние покоя. В контексте настоящего изобретения онкогены включают внутриклеточные белки, а также внеклеточные ростовые факторы, которые могут стимулировать клеточную пролиферацию через аутокринную или паракринную функцию. Примеры человеческих онкогенов, против которых могут быть направлены δίΡΗΚ и морфолиноконструкции, включают, среди прочих, с-тус, с-туЬ, тбт2, ΡΚΑ-I (протеинкиназа А типа I), АЬ1-1, ΒΟ2, Клз, с-КаГ киназу, СЭС25 фосфатазы, циклины, циклинзависимые киназы (сбкδ), теломеразу, ΡΌΟΡ/δίδ, егЬ-Β, Γοδ, |ип, тοδ и згс. В контексте настоящего изобретения онкогены также включают гибридный ген, образованный в результате хромосомной транслокации, например Ест/АЫ гибридный онкоген.
Следующие белки включают циклинзависимые киназы, с-туЬ, с-тус, пролиферирующий клеточноядерный антиген (ΡСNΑ), трансформирующий ростовой фактор-бета (ТОР-бета) и транскрипционные факторы: ядерный фактор каппа В (ΝΡ-.каппа.В), Ε2Ρ, ЖК^/пеи, ΡΚΑ, ТОР-альфа, ΕΟΡΉ, ТОР-бета, 1ОР1К, Ρ12, ΜΌΜ2, ΒКСΑ, ΒΒ-2, νΕΟΡ, ΜΟΒ, ферритин, рецептор трансферрина, гены ΙΕΕ, С-Γοδ, ΗδΡ27, С-гаГ и металлотионеина.
δίΡΗΚ, используемая в настоящем изобретении, может быть направлена против синтеза одного или нескольких белков. Дополнительно или альтернативно, может быть более одной δίΡΗΚ, направленной против белка, например дублет δίΡΗΚ или δίΡΗΚ, которая соответствует перекрывающимся или неперекрывающимся являющимися мишенями последовательностям против одного и того же белка-мишени. Соответственно в одном варианте воплощения две, три, четыре или любое количество δίΡΗΚ против одной и той же мРНК, которая является мишенью, могут быть включены в наночастицы по настоящему
- 26 023175 изобретению. Кроме того, можно использовать несколько 81РНК, направленных против нескольких белков. Альтернативно, 81РНК может быть направлена против структурных или регуляторных молекул РНК, которые не кодируют белки.
В предпочтительном аспекте настоящего изобретения являющаяся мишенью молекула мРНК по настоящему изобретению определяет аминокислотную последовательность белка, ассоциированного с патологическим состоянием. Например, белок может представлять собой патоген-ассоциированный белок (например, вирусный белок, вовлеченный в иммуносупрессию или иммуноизбегание хозяина, репликацию патогена, трансмиссию патогена или поддержание инфекции) или белок хозяина, который способствует проникновению патогена в организм хозяина, метаболизму лекарственного средства патогеном или хозяином, репликации или интеграции генома патогена, установлению или распространению инфекции в организме хозяина или сборке следующего поколения патогена. Альтернативно, белок может представлять собой ассоциированный с опухолью белок или ассоциированный с аутоиммунным заболеванием белок.
В одном варианте воплощения являющаяся мишенью молекула мРНК по настоящему изобретению определяет аминокислотную последовательность эндогенного белка (т.е. белка, присутствующего в геноме клетки или организма). В другом варианте воплощения являющаяся мишенью молекула мРНК по настоящему изобретению определяет аминокислотную последовательность гетерологичного белка, экспрессируемого в рекомбинантной клетке или генетически измененном организме. В другом варианте воплощения являющаяся мишенью молекула мРНК по настоящему изобретению определяет аминокислотную последовательность белка, кодируемого трансгеном (т.е. генной конструкцией, введенной на эктопическом участке в геном клетки). В следующем варианте воплощения являющаяся мишенью молекула мРНК по настоящему изобретению определяет аминокислотную последовательность белка, кодируемого патогенным геномом, который способен инфицировать клетку или организм, из которого происходит эта клетка.
Путем ингибирования экспрессии таких белков можно получить ценную информацию, касающуюся функции указанных белков и терапевтических преимуществ, которые могут быть получены в результате указанного ингибирования.
В одном варианте воплощения наночастица по настоящему изобретению включает одну или несколько молекул 81РНК, опосредующих молчание РБОР бета гена, ЕгЬ-В гена, 8гс гена, СКК гена, ОКВ2 гена, ΚΑδ гена, МЕКК гена, ΙΝΚ гена, ΚΑΡ гена, Егк1/2 гена, РСNΑ(ρ21) гена, ΜΥΒ гена, ΙΒΝ гена, ΡΘδ гена, ВСЬ-2 гена, Циклин Ό гена, УЕОР гена, ЕОРК гена, Циклин А гена, Циклин Е гена, ΑΝΤ-Ι гена, гена бета-катенина, с-МЕТ гена, РКС гена, 8кр2 гена, гена кинезинового веретенного белка, Всг-ΑΜ гена, 8!а!3 гена, с8гс гена, РКС гена, Вах гена, Вс1-2 гена, ЕОРК гена, УЕОР гена, тус гена, ΝΕΙ<Β гена, δΤΑΤ3 гена, гена сурвинина, Нег2/№и гена, гена топоизомеразы I, РЬК1 гена, гена протеинкиназы 3, СБ31 гена, 1ОР-1 гена, гена топоизомеразы II альфа, мутаций в р73 гене, мутаций в р21 (ΑΑΕ 1/С1Р 1) гене, мутаций в р27(КРР1) гене, мутаций в РРМ1Б гене, мутаций в ΚΑδ гене, мутаций в гене кавеолина I, мутаций в МГВ I гене, мутаций в ΜΤΑI гене, мутаций в М68 гене, мутаций в опухольсупрессорных генах, мутаций в р53 опухоль-супрессорном гене, мутаций в БН-р63 - члене семейства р53, мутаций в рКЬ опухоль-супрессорном гене, мутаций в ЛРС1 опухоль-супрессорном гене, мутаций в ВΚСΑ1 опухоль-супрессорном гене, мутаций в РΤЕN опухоль-супрессорном гене, тРЬ слитого гена, ВСК^ВЕ слитого гена, ΤЕ^/ΑΜ^1 слитого гена, Ξ^δ/ΡΕΠ слитого гена, ΤΡδ/Ρυδ1 слитого гена, РΑX3/РКНΚ слитого гена, ЛΜ^1/ЕΤ0 слитого гена, гена альфа ν-интегрина, гена Ρίί-ί рецептора, гена тубулина, гена вируса папилломы человека, гена, необходимого для репликации вируса папилломы человека, гена иммунодефицита человека, гена, необходимого для репликации вируса иммунодефицита человека, гена вируса гепатита А, гена, необходимого для репликации вируса гепатита А, гена вируса гепатита В, гена, необходимого для репликации вируса гепатита В, гена вируса гепатита С, гена, необходимого для репликации вируса гепатита С, гена вируса гепатита Ό, гена, необходимого для репликации вируса гепатита Ό, гена вируса гепатита Е, гена, необходимого для репликации вируса гепатита Е, гена вируса гепатита Р, гена, необходимого для репликации вируса гепатита Р, гена вируса гепатита О, гена, необходимого для репликации вируса гепатита О, гена вируса гепатита Н, гена, необходимого для репликации вируса гепатита Н, гена респираторно-синцитиального вируса, гена, необходимого для репликации респираторно-синцитиального вируса, гена вируса простого герпеса, гена, необходимого для репликации вируса простого герпеса, гена цитомегаловирусного герпеса, гена, необходимого для репликации цитомегаловируса герпеса, гена вируса герпеса Эпштейна-Барра, гена, необходимого для репликации вируса герпеса Эпштейна-Барра, гена вируса герпеса, ассоциированного с саркомой Калоши, гена, необходимого для репликации вируса герпеса, ассоциированного с саркомой Капоши, гена вируса 1С. человеческого гена, необходимого для репликации вируса 1С. гена миксовируса, гена, необходимого для репликации миксовируса, гена риновируса, гена, необходимого для репликации риновируса, гена коронавируса, гена, необходимого для репликации коронавируса, гена вируса Западного Нила, гена, необходимого для репликации вируса Западного Нила, гена вируса американского энцефалита, гена, необходимого для репликации вируса американского энцефалита, гена вируса клещевого энцефалита, гена, необходимого для репликации вируса клещевого энцефалита, гена вируса австралийского энцефалита, гена, необ- 27 023175 ходимого для репликации вируса австралийского энцефалита, гена вируса денге, гена, необходимого для репликации вируса денге, гена вакуолизирующего обезьяньего вируса ОВ-40, гена, необходимого для репликации вакуолизирующего обезьяньего вируса ОВ-40, гена человеческого Т-клеточного лимфотропного вируса, гена, необходимого для репликации человеческого Т-клеточного лимфотропного вируса, гена вируса лейкоза Мо1опеу-Мшгпе, гена, необходимого для репликации вируса лейкоза Мо1опеуМшгпе, гена вируса энцефаломиокардита, гена, необходимого для репликации вируса энцефаломиокардита, гена вируса кори, гена, необходимого для репликации вируса кори, гена вируса опоясывающего лишая УепсеПа, гена, необходимого для репликации вируса опоясывающего лишая Уепсе11а, гена аденовируса, гена, необходимого для репликации аденовируса, гена вируса желтой лихорадки, гена, необходимого для репликации вируса желтой лихорадки, гена вируса полиомиелита, гена, необходимого для репликации вируса полиомиелита, гена вируса оспы, гена, необходимого для репликации вируса оспы, гена р1актоб1ит, гена, необходимого для репликации гена р1актоб1ит, гена МусоЬасЮгшт и1сегапк, гена, необходимого для репликации МусоЬасЮгтт и1сегапк, гена МусоЬасЮгшт 1иЬегси1ок1к, гена, необходимого для репликации МусоЬас1епит тЬегсЫокк, гена МусоЬасЮгтт 1ергае, -185-а, гена, необходимого для репликации МусоЬасЮгшт 1ергае, гена 81арНу1ососсик аигеик, гена, необходимого для репликации 81арНу1ососспк аигеик, гена 81гер1ососсик рпеитотае, гена, необходимого для репликации 8йер1ососсик рпеитотае, гена 8йер1ососсик руодепек, гена, необходимого для репликации 8йер1ососсик руодепек, гена СЫатуФа рпеитошае, гена, необходимого для репликации СЫатуФа рпеитотае, гена Мусор1акта рпеитотае, гена, необходимого для репликации Мусор1акта рпеитотае, гена интегрина, гена селектина, гена системы комплемента, гена хемокина, гена рецептора хемокина, ОС8Р гена, Ого1 гена, Ого2 гена, Ого3 гена, РР4 гена, М1О гена, гена основного белка про-тромбоцитов, М1Р-11 гена, М1Р-П гена, ΚΛΝΤΕ8 гена, МСР-1 гена, МСР-2 гена, МСР-3 гена, СМВКК1 гена, СМВКК2 гена, СМВКК3 гена, СМВКК5у, А1Р-1 гена, 1-309 гена, гена для компонента ионного канала, гена для рецептора нейротрансмиттера, гена для лиганда нейротрансмиттера, гена семейства амилоидов, гена пресенилина, ΗΌ гена, ОРРЙА гена, 8СА1 гена, 8СА2 гена, МГО1 гена, САС4Й1А4 гена, 8СА7 гена, 8СА8 гена, аллельного гена, обнаруженного в ЬОН клетках, или одного аллельного гена из полиморфного гена. Примеры соответствующих молекул 81РНК, обусловливающих молчание генов, и способы получения молекул кШНК можно найти в коммерческих источниках, таких как ОНагтасоп, или в следующих патентных заявках: И8 2005017667, УО 2006066158, УО 2006078278, И8 7056704, И8 7078196, И8 5898031, И8 6107094, ЕР 1144623, Ευ 1144623. Хотя были перечислены некоторые специфические мишени генного сайлесинга, этот перечень является чисто иллюстративным, и другие молекулы к1РНК также можно использовать с наночастицами по настоящему изобретению.
В одном варианте воплощения наночастицы по настоящему изобретению включают молекулу 81РНК, обладающую РНК1 активностью против РНК, где молекула кШНК включает последовательность, комплементарную любой РНК, имеющей кодирующую или некодирующую последовательность, такую как последовательности, указанные в соответствии с ОеиВапк Ассеккюп Νθδ., описанные в табл. У РСТ/и803/05028 (Международная РСТ публикация № УО 03/4654), или другие, известные из уровня техники.
В одном варианте воплощения наночастицы по настоящему изобретению включают молекулу 81РНК, которая обусловливает молчание гена фактора роста эндотелия сосудов. В другом варианте воплощения наночастицы по настоящему изобретению включают молекулу 81РНК, которая обусловливает молчание гена рецептора фактора роста эндотелия сосудов.
В другом варианте воплощения наночастицы по настоящему изобретению включают молекулу 81РНК, где последовательность молекулы 81РНК является комплементарной связанным с опухолью мишеням, включая, но не ограничиваясь этим, гипоксия-индуцируемый фактор-1 (Н1Р-1), который обнаружен в человеческих метастатических раковых клетках предстательной железы РС3-М (Мо1 Сагсшод. 2008 1ап 31 [ЕриЬ айеаб о£ рг1п1|); находящийся ниже Н1Р-1 ген-мишень (Мо1 Сагсшод. 2008 1ап 31 [ЕриЬ айеаб о£ рг1п1|), митогенактивируемые протеинкиназы (МАРК), ростовый фактор гепатоцитов (НОР), интерлейкин 12р70 (1Ь12), рецептор фактора некроза глюкокортикоид-индуцируемой опухоли (О1ТК), молекула межклеточной адгезии 1 (1САМ-1), нейротрофин-3 (ΝΤ-3), интерлейкин 17 (1Ь17), белок, связывающийся с интерлейкином 18 (1Ь18Вра) и эпителиальный нейтрофил-активирующий пептид (ΕNА78) (см., например, СуЮкте ргоййпд о£ ргоккайс йшб Ггот сапсегоик ргокПИе д1апбк 1бепййек суЮктек аккоааЮб ινίΐΐι е\1еп1 о£ киог апб шйаттайоп, ТНе Ргок1а1е Еаг1у Ое\у РиЬйкйеб ОпПпе: 24 Маг 2008); Р8МА (см., например, Се11-8шГасе 1аЬе1шд апб пИегпаП/аНоп Ьу а ГПюгексеШ тЫЬйог о£ ргоккаке-кресГЛс тетЬгапе апйдеп ТНе Ргок1а1е Еаг1у Ое\у РиЬйкйеб ОпПпе: 24 Маг 2008); рецептор андрогена (АК), кератин, эпителиальный мембранный антиген, рецептор ЕОР и Е кадхерин (см., например, СНагас1еп/аПоп о£ РасМеГОТП а гесепйу 1ко1а1еб Нитап ргоккаке сапсег се11 1ше); рецептор Υ, активируемый пролиферацией пероксисом (РР АКу; см., например, ТНе Ргок1а1е уо1ите 68, 1ккие 6, 1 Мау 2008, радек 588-598); рецептор для развитых конечных продуктов гликирования (КАОЕ) и развитые конечные продукты гликирования (АОЕ), (см., например, У боташ о£ КАОЕ пИегас1к νίΐΐι АОЕк оп ргоккаке сагстота се11к ТНе Ргок1а1е Еаг1у \ае\у РиЬйкйеб ОпПпе: 26 РеЬ 2008); рецепторную тирозинкиназу егЬ-В2 (Нег2/пеи), рецептор фактора роста гепатоцитов (Мек), рецептор трансформирующего ростового фактора-бета 1 (Γ0ΡβΚ1), ядерный фактор кап- 28 023175 па В (ΝΡΚΒ), йаддей-1, Зотс ЬейдеЬод (ЗЬЬ), металлопротеиназы матрикса (ММР, в частности, ММР-7), рецептор эндотелина типа А (ЕТА), эндотелин-1 (ЕТ-1), субсемейство 3 ядерных рецепторов, группа С, член 1 (ΝΚ3Ο), ко-активатор 1 ядерного рецептора (Νί.ΌΛ1). Νί.ΌΛ2. NСΟА3, Е1А связывающий белок р300 (ЕР300), СКЕВ связывающий белок (СКЕВВР), циклин О-ассоциированную киназу (ОАК), гелсолин(ОЗЫ), семейство 1 альдо-кеторедуктаз, член С1 (АКК1С1), АКК1С2, АКК1С3, нейротенсин(ЭТЗ), енолазу 2(ΕΝΟ2), хромогранин В (СНОВ, секретогранин 1), секретагогин (ЗСОЫ или ЕР-сторонний кальций-связывающий белок), допа-декарбоксилазу (ЭЭС или ароматическую Ь-аминокислотную декарбоксилазу), ко-активатор-1 стероидного рецептора (ЗКС-1), ЗКС-2 (а.к.а. Т1Р2), ЗКС-3 (а.к.а. А1В-1) (см., например, ЕопдЬийта1 апа1уя1я о£ апйгодеп йерпуакоп о£ ргоя!а!е сапсег се11я 1йепййея ра!Ь^ауя !о апйгодеп шйерепйепсе ТЬе Ргоя!а!е Еаг1у у1е№ РиЬИяЬей ОпПпе: 26 РеЬ 2008); эстрогеновые рецепторы (ЕКа, ЕКв или ОРК30) (см., например, ТЬе Ргоя!а!е уо1ите 68, 1яяие 5, радея 508-516); молекула адгезии клеток меланомы (МСАМ) (см., например, ТЬе Ргоя!а!е уо1ите 68, Ыне 4, радея 418-426; ангиогенные факторы (такие как сосудистый эндотелиальный ростовый фактор (УЕОР) и эритропоэтин), транспортеры глюкозы (такие как ОЬиТ1), белок 3, взаимодействующий с ВСЬ2/аденовирусом Е1В, 19 кДа (В№Р3) (см., например, ТЬе Ргоя!а!е уо1ите 68, 1яяие 3, радея 336-343); типы 1 и 2 5а-редуктазы (см., например, ТЬе .Тоигпа1 о£ Иго1о§у, уо1ите 179, 1яяие 4, радея 1235-1242); ЕКО и ЕТУ1, простата-специфический антиген (РЗА), простата-специфический мембранный антиген (РЗМА), антиген стволовых клеток предстательной железы (РЗСА), α-метилацил кофермент А рацемазу (АМАСК), РСА3™3, глутатион-З-трансферазу, р1 1 (ОЗТР1), р16, фактор АОР-рибозилирования (АКР), О-6-метилгуанин-ДНК метилтрансферазу (МОМТ), человеческую теломераза-обратную транскриптазу (ЬТЕКТ), ранний антиген рака предстательной железы (ЕРСА), человеческий калликреин 2 (НК2) и гепсин (см., например, ТЬе 1оигпа1 о£ Иго1о§у, уо1ите 178, 1яяие 6, радея 2252-2259); бромодоменсодержащий 2 (ВКЭ2), эукариотический фактор 4 гамма инициации трансляции, 1 (е1Р4О1), рибосомальный белок Ь13а (КРЬ13а) и рибосомальный белок Ь22 (КРЙ22) (см., например, Ν Епд1 ί Мей 353 (2005), р. 1224); НЕК2/пеи, ОегПп-1, ЕКВВ2, АКТ, циклооксигеназу-2 (СОХ-2), РЗМО3, СКККЗ, РЕ1К.Ш и С17ОКР37, РРР4С, РАЖ АТР6У0С, С16отй4, ОВЬ, НАОН, 1ТРО3, МОС13114, МКРЗ34, ХОИРВ10, НМКАЬ1, ЭТНЫ, ^ВР2, РОЬК3К, КЫРЗ1, ЗТИВ1, ТВЬ3 и ИЗР7. Все ссылки, описанные в настоящей заявке, включены в настоящую заявку посредством ссылки во всей их полноте.
Таким образом, в одном варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую низкомолекулярный РЗМА лиганд, биоразлагаемый полимер, полимер и молекулу я!РНК. В одном варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую низкомолекулярный РЗМА лиганд, биоразлагаемый полимер, компонент и молекулу я|РНК, которая обусловливает молчание гена фактора роста эндотелия сосудов. В одном варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую низкомолекулярный РЗМА лиганд, биоразлагаемый полимер, компонент и молекулу я1РНК, которая обусловливает молчание гена рецептора фактора роста эндотелия сосудов. В другом варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую низкомолекулярный РЗМА лиганд, РЬОА, полиэтиленгликоль и молекулу я1РНК. В одном варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую низкомолекулярный РЗМА лиганд, биоразлагаемый полимер, компонент и молекулу я1РНК, где наночастица может селективно аккумулироваться в предстательной железе или в ткани сосудистого эндотелия, окружающего рак. В одном варианте воплощения изобретение включает наночастицу, включающую низкомолекулярный РЗМА лиганд, биоразлагаемый полимер, компонент и молекулу я1РНК, где наночастица может селективно аккумулироваться в предстательной железе или в ткани сосудистого эндотелия, окружающего рак, и где наночастица может поглощаться в результате эндоцитоза РЗМА экспрессирующей клеткой.
В другом варианте воплощения я1РНК, которую включают в наночастицу по настоящему изобретению, представляет собой такую, которая лечит рак предстательной железы, например, такие, которые раскрыты в заявке США № 11/021159 (я1РНК последовательность является комплементарной ЗЕО ГО ΝΟ:8: дааддссади идиаиддас) и заявке США № 11/349473 (раскрывает я1РНК, которые связываются с областью от нуклеотида 3023 до 3727 ЗЕО ГО ΝΟ:1). Оба указанных ссылочных документа включены в настоящую заявку посредством ссылки во всей их полноте.
В другом варианте воплощения терапевтические средства наночастиц по настоящему изобретению включают РНК, которые можно использовать для лечения рака, такие как антисмысловые мРНК и микроРНК. Примеры микроРНК, которые можно использовать в качестве терапевтических средств для лечения рака, включают такие, которые раскрыты в ЭТ!ите 435 (7043): 828-833; ЭТ!ите 435 (7043): 839-843; и ЭТ!ите 435 (7043): 834-838, которые все включены в настоящую заявку посредством ссылки во всей их полноте.
Способы лечения.
В некоторых вариантах воплощения частицы направленной доставки в соответствии с настоящим изобретением можно использовать для лечения, облегчения, улучшения, ослабления, задержки развития, ингибирования прогрессии, уменьшения тяжести и/или сокращения случаев проявления одного или нескольких симптомов или признаков заболевания, расстройства и/или состояния. В некоторых вариантах
- 29 023175 воплощения частицы направленной доставки по настоящему изобретению можно использовать для лечения рака и/или раковых клеток. В некоторых вариантах воплощения частицы направленной доставки по настоящему изобретению можно использовать для лечения любого типа рака, где Р8МА экспрессируется на поверхности раковых клеток или в опухолевой неоваскулатуре у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включая неоваскулатуру предстательной железы или не относящиеся к предстательной железе солидные опухоли. Примеры Р§МА-связанного показания включают, но не ограничиваются этим, рак предстательной железы, немелкоклеточный рак легкого, колоректальную карциному и глиобластому.
Термин рак включает предзлокачественный, а также злокачественный рак. Рак включает, но не ограничивается этим, рак предстательной железы, рак желудка, колоректальный рак, рак кожи, например меланомы или базально-клеточные карциномы, рак легкого, рак головы и шеи, рак бронхов, рак поджелудочной железы, рак мочевого пузыря, рак головного мозга или центральной нервной системы, рак периферической нервной системы, рак пищевода, рак полости рта или глотки, рак печени, рак почки, тестикулярный рак, рак желчных путей, рак тонкого кишечника или аппендикса, рак слюной железы, рак щитовидной железы, рак надпочечников, остеосаркому, хондросаркому, рак гематологических тканей и подобные. Раковые клетки могут быть в форме опухоли существовать отдельно в организме субъекта (например, лейкозные клетки) или представлять собой клеточные линии, происходящие из рака.
Рак может быть ассоциирован с различными физическими симптомами. Симптомы рака в основном зависят от типа и местоположения опухоли. Например, рак легкого может вызывать кашель, одышку и боль в груди, тогда как рак толстой кишки часто вызывает диарею, запор и кровянистый стул. Однако, в качестве некоторых примеров, следующие симптомы, как правило, часто ассоциируются со многими типами рака: лихорадка, озноб, ночная потливость, кашель, одышка, потеря веса, потеря аппетита, анорексия, тошнота, рвота, диарея, анемия, желтуха, гепатомегалия, кровохарканье, слабость, недомогание, когнитивная дисфункция, депрессия, гормональные нарушения, нейтропения, боль, незаживающие язвы, увеличенные лимфатические узлы, периферическая невропатия и сексуальная дисфункция.
В одном аспекте настоящего изобретения обеспечивается способ лечения рака (например, рака предстательной железы). В некоторых вариантах воплощения лечение рака включает введение терапевтически эффективного количества частиц направленной доставки по настоящему изобретению субъекту, нуждающемуся в этом, в таких количествах и в течение такого времени, как это необходимо для достижения желаемого результата. В некоторых вариантах воплощения настоящего изобретения терапевтически эффективное количество частицы направленной доставки по настоящему изобретению представляет собой количество, эффективное для лечения, облегчения, улучшения, ослабления, задержки развития, ингибирования прогрессии, уменьшения тяжести и/или сокращения случаев проявления одного или нескольких симптомов или признаков рака.
В одном аспекте настоящего изобретения обеспечивается способ введения композиций по настоящему изобретению субъекту, страдающему от рака (например, рака предстательной железы). В некоторых вариантах воплощения обеспечиваются частицы для введения субъекту в таких количествах и в течение такого времени, как это необходимо для достижения желаемого результата (т.е. лечения рака). В некоторых вариантах воплощения настоящего изобретения терапевтически эффективное количество частицы направленной доставки по настоящему изобретению представляет собой количество, эффективное для лечения, облегчения, улучшения, ослабления, задержки развития, ингибирования прогрессии, уменьшения тяжести и/или сокращения случаев проявления одного или нескольких симптомов или признаков рака.
Терапевтические протоколы включают введение терапевтически эффективного количества частицы направленной доставки по настоящему изобретению здоровому субъекту (т.е. субъекту, который не демонстрирует никаких симптомов рака и/или у которого не был диагностирован рак). Например, можно осуществить иммунизацию здорового субъекта частицей направленной доставки по настоящему изобретению до развития рака и/или возникновения симптомов рака; субъектов группы риска (например, пациентов, которые имеют семейную историю рака; пациентов, имеющих одну или несколько генетических мутаций, ассоциированных с развитием рака; пациентов, имеющих генетический полиморфизм, ассоциированный с развитием рака; пациентов, инфицированных вирусом, ассоциированным с развитием рака; пациентов с привычками и/или образом жизни, ассоциированным с развитием рака; и т.д.) можно лечить, по существу, одновременно (например, в пределах периода времени 48, 24 или 12 ч) с возникновением симптомов рака. Конечно, субъекты, о которых известно, что они больны раком, могут принимать лечение в соответствии с настоящим изобретением в любое время.
В других вариантах воплощения наночастицы по настоящему изобретению можно использовать для ингибирования роста раковых клеток, например раковых клеток предстательной железы. Как используется в настоящем описании, термин ингибирует рост раковых клеток или ингибирующий рост раковых клеток относится к любому замедлению скорости пролиферации и/или миграции раковых клеток, остановке пролиферации и/или миграции раковых клеток или убиванию раковых клеток, так чтобы скорость роста раковых клеток снижалась по сравнению с наблюдаемой или предсказуемой скоростью роста необработанных контрольных раковых клеток. Термин ингибирует рост также может относиться к уменьшению размера или исчезновению раковых клеток или опухоли, а также к снижению их метаста- 30 023175 тического потенциала. Предпочтительно такое ингибирование на клеточном уровне может уменьшать размер, замедлять рост, уменьшать агрессивность или предотвращать или ингибировать метастазы рака у пациента. Специалисты в данной области легко могут определить при помощи различных подходящих показателей, ингибируется или нет рост раковых клеток.
Показателем ингибирования роста раковых клеток может быть, например, остановка раковых клеток в конкретной фазе клеточного цикла, например остановка в Ο2/Μ фазе клеточного цикла. Ингибирование роста раковых клеток также можно определить путем прямого или косвенного измерения размера раковых клеток или опухоли. У людей, которые являются раковыми пациентами, такие изверения в основном осуществляют с использованием хорошо известных методов визуализации, таких как метод магнитного резонанса, компьютерная аксиальная томография и рентгеновский метод. Рост раковых клеток также можно определить опосредованно, например, путем определения уровней циркулирующего в системе кровообращения карциноэмбриогенного антигена, простата-специфического антигена или других рак-специфических антигенов, которые соотносят с ростом раковых клеток. Ингибирование роста рака также в основном соотносят с пролонгированным периодом выживания и/или улучшением здоровья и самочувствия субъекта.
Фармацевтические композиции.
Как используется в настоящем описании, термин фармацевтически приемлемый носитель означает нетоксичный, инертный твердый, полутвердый или жидкий наполнитель, разбавитель, инкапсулирующее вещество или вспомогательное вещество для формулирования композиции любого типа. Кетίηβίοη'β РЬаттасеиЬса1 8<лепсе5. Еб. Ьу Оеииаго, Маск РиЫЫйпд. ЕаЧоп, Ра., 1995 раскрывает различные носители, используемые для формулирования фармацевтических композиций и известные способы получения композиций. Некоторые примеры веществ, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают, но не ограничиваются этим, сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, такие как натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; порошкообразный трагакант; солод; желатин; тальк; эксципиенты, такие как масло какао и воски для суппозиториев; масла, такие как арахисовое масло, масло семян хлопчатника; саффлоровое масло; кунжутное масло; оливковое масло; кукурузное масло и соевое масло; гликоли, такие как пропиленгликоль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; разрыхлители, такие как ΤΑΕΕΝ™ 80; буферные вещества, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; альгиновую кислоту; апирогенную воду; изотонический солевой раствор; раствор Рингера; этиловый спирт; и фосфано-буферные растворы, а также другие нетоксичные совместимые смазывающие вещества, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, а также красители, вещества, способствующие высвобождению лекарственного средства, вещества покрытия, подсластители, отдушки и ароматизаторы, консерванты и антиоксиданты также могут присутствовать в композиции, по усмотрению специалиста, осуществляющего формулирование композиции. Когда нельзя осуществить фильтрацию или другие способы конечной стерилизации, получение композиций можно осуществлять в асептических условиях.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно вводить пациенту любыми способами, известными из уровня техники, включая пероральный и парентеральный пути введения. Термин пациент, как используется в настоящем описании, относится к человеку, а также к пациентам, отличным от человека, включая, например, млекопитающеих, птиц, рептилий, земноводных и рыб. Например, отличными от человека пациентами могут быть млекопитающие (например, животное из отряда грызунов, мышь, крыса, кролик, обезьяна, собака, кошка, примат или свинья). В некоторых вариантах воплощения парентеральные пути явдяются желательными, поскольку избегается контакт с пищеварительными ферментами, которые присутствуют в пищеварительном тракте. В соответствии с такими вариантами воплощения композиции по настоящему изобретению можно вводить путем инъекции (например, внутривенной, подкожной или внутримышечной, интраперитонеальной инъекции), ректально, вагинально, местным путем (например, в виде порошков, кремов, мазей или капель) или путем ингаляции (например, при помощи спрея).
В конкретном варианте воплощения наночастицы по настоящему изобретению вводят субъекту, нуждающемуся в этом, системно, например, путем внутривенной инфузии или инъекции.
Препараты для инъекций, например стерильные водные или масляные суспензии для инъекций, можно сформулировать в соответствии со способами, известными из уровня техники, с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих веществ и суспендирующих веществ. Стерильный препарат для инъекций также может представлять собой стерильный раствор, суспензию или эмульсию для инъекций в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Из приемлемых носителей и растворителей, которые можно использовать, можно указать воду, раствор Рингера, И.8.Р. и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные нелетучие масла обычно используют в качестве растворителя или среды для суспендирования. Для этой цели можно использовать любое нераздражающее нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, используют для получения препаратов для инъекций. В одном варианте воплощения конъюгат по настоящему изобретению
- 31 023175 суспендируют в жидком носителе, включающем 1% мас./об. натрий карбоксиметилцеллюлозы и 0,1% об./об. Τ\νΕΕΝτ™ 80. Композиции для инъекций можно стерилизовать, например, путем фильтрования через удерживающий бактерии фильтр или путем включения стерилизующих средств в форме стерильных твердых композиций, которые можно растворять или диспергировать в стерильной воде или другой стерильной среде для инъекций перед применением.
Композиции для ректального или вагинального введения могут представлять собой суппозитории, которые можно получить путем смешивания конъюгата по настоящему изобретению с подходящими нераздражающими эксципиентами или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или воск для суппозиториев, которые являются твердыми при температуре окружающей среды, но жидкими при температуре тела, и поэтому плавятся в прямой кишке или влагалище и высвобождают конъюгат по настоящему изобретению.
Лекарственные формы для местного или чрескожного введения фармацевтической композиции по настоящему изобретению включают мази, пасты, кремы, лосьоны, гели, порошки, растворы, спреи, препараты для ингаляций или пластыри. Конъюгат по настоящему изобретению смешивают в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и любыми необходимыми консервантами или буферами, которые могут потребоваться. Глазные препараты, ушные капли и глазные капли также предусматриваются как входящие в объем настоящего изобретения. Мази, пасты, кремы и гели могут содержать, помимо конъюгатов по настоящему изобретению, эксципиенты, такие как животные и растительные жиры, масла, воски, парафины, крахмал, трагакант, производные целлюлозы, полиэтиленгликоли, силиконы, бентониты, кремневую кислоту, тальк и оксид цинка или смеси таких веществ. Чрескожные пластыри имеют дополнительное преимущество обеспечения контролируемой доставки соединения в организм. Такие лекарственные формы можно получить путем растворения или диспергирования конъюгата по настоящему изобретению в соответствующей среде. Также можно использовать усилители абсорбции для лучшего прохождения соединения через кожу. Скорость можно контролировать либо путем обеспечения контролирующей скорость мембраны, либо путем диспергирования конъюгата по настоящему изобретению в полимерной матрице или геле.
Порошки и спреи могут содержать, помимо конъюгатов по настоящему изобретению, эксципиенты, такие как лактоза, тальк, кремневая кислота, гидроксид алюминия, силикаты кальция и полиамидный порошок или смеси таких веществ. Спреи дополнительно могут содержать традиционно используемые пропелленты, такие как хлорфторуглеводороды.
Для перорального введения наночастицы по настоящему изобретению могут быть, но необязательно, инкапсулированы. Различные подходящие системы инкапсулирования известны из уровня техники (Мюгосарки1ек аий №июрагПс1ек ίη Мейюше аий РЬагтасу, Еййсй Ьу ЭонЬгслу. М., СКС Ргекк, Воса Ка!ои, 1992; Ма1Ью\УЙ/ аий Ьаидег ί. Сойго1. Ке1еаке 5:13, 1987; Ма1Ью\УЙ/ е! а1. Кеасйуе Ро1утегк 6:275, 1987; МаШютой е! а1. I. Арр1. Ро1утег δα. 35:755, 1988; Ьаидег Асе. СЬет. Кек. 33:94, 2000; Ьаидег I. Сои!го1. Ке1еаке 62:7, 1999; ИЬгюЬ е! а1. СЬет. Кеу. 99:3181, 1999; ΖΙιοιι е! а1. I. Сои!го1. Ке1еаке 75:27, 2001; и Наиек е! а1. РЬагт. Вю!есЬио1. 6:389, 1995). Конъюгаты по настоящему изобретению могут быть инкапсулированы в биоразлагаемых полимерных микросферах или липосомах. Примеры природных и синтетических полимеров, полезных для получения биоразлагаемых микросфер, включают углеводы, такие как альгинат, целлюлоза, полигидроксиалканоаты, полиамиды, полифосфазены, полипропилфумараты, полиэфиры, полиацетали, полицианоакрилаты, биоразлагаемые полиуретаны, поликарбонаты, полиангидриды, полиоксикислоты, полиортоэфиры и другие биоразлагаемые сложные полиэфиры. Примеры липидов, полезных для получения липосом, включают фосфатидильные соединения, такие как фосфатидилглицерин, фосфатидилхолин, фосфатидилсерин, фосфатидилэтаноламин, сфинголипиды, цереброзиды и ганглиозиды.
Фармацевтические композиции для перорального введения могут быть жидкими или твердыми. Жидкие лекарственные формы, подходящие для перорального введения композиций по настоящему изобретению, включают фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. Помимо инкапсулированного или неинкапсулированного конъюгата, жидкие лекарственные формы могут содержать инертные разбавители, традиционно используемые в данной области, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие вещества и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла (в частности, масло семян хлопчатника, арахисовое масло, кукурузное масло, масло из зародышей семян, оливковое, касторовое и кунжутное масло), глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот сорбитана и смеси таких веществ. Помимо инертных разбавителей, композиции для перорального введения также могут включать адъюванты, смачивающие вещества, эмульгаторы и суспендирующие вещества, подсластители, отдушки и ароматизаторы. Как используется в настоящем описании, термин адъювант относится к любому соединению, которое является неспецифическим модулятором иммунного ответа. В некоторых вариантах воплощения адъювант стимулирует иммунный ответ. Любой адъювант можно использовать в соответствии с настоящим изобретением. Большое количество адъювантов известно из уровня техники (АШкои Эеу. ΒίοΙ. §!аий. 92:3-11, 1998; Иике1екк е! а1. Аиии. Кеу. !ттипо1.
- 32 023175
6:251-281, 1998; апй ΡΗίΙΙίρδ с1 а1. Уассте 10:151-158, 1992). Твердые лекарственные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах инкапсулированный или неинкапсулированный конъюгат является смешанным с по меньшей мере одним инертным фармацевтически приемлемым эксципиентом или носителем, таким как цитрат натрия или дикальцийфосфат, и/или (а) наполнителями или создающими объем веществами, такими как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремневая кислота, (Ь) связующими, такими как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и аравийская камедь, (с) увлажняющими веществами, такими как глицерин, (й) разрыхлителями, такими как агар-агар, карбонат кальция, картофельный или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия, (е) веществами, замедляющими растворение, такими как парафин, (£) ускорителями абсорбции, такими как четвертичные аммониевые соединения, (д) смачивающими веществами, такими как, например, цетиловый спирт и глицеринмоностеарат, (Ь) абсорбентами, такими как каолин и бентонит, и (ί) смазывающими веществами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия, и смесями таких веществ. В случае капсул, таблеток и пилюль лекарственная форма также может включать буферные вещества.
Твердые композиции подобного типа также можно использовать в качестве наполнителей в мягких или твердых желатиновых капсулах с использованием таких эксципиентов, как лактоза или молочный сахар, а также высокомолекулярных полиэтиленгликолей и подобных веществ. Твердые лекарственные формы, такие как таблетки, драже, капсулы, пилюли и гранулы, можно получить с покрытиями и оболочками, такими как энтеросолюбильные покрытия и другие покрытия, хорошо известные в области формулирования фармацевтических композиций.
Должно быть понятно, что конкретную дозу ΡδΜΑ-направляемой частицы выбирает лечащий врач с учетом конкретного пациента, которого нужно лечить, как правило, дозу и введение регулируют таким образом, чтобы обеспечить эффективное количество ΡδΜΑ-направляемой частицы пациенту, принимающему лечение. Как используется в настоящем описании, термин эффективное количество ΡδΜΑнаправляемой частицы относится к количеству, которое необходимо, чтобы вызвать желаемый биологический ответ. Как должно быть понятно специалистам в данной области, обладающим средней квалификацией, эффективное количество ΡδΜΑ-направляемой частицы может варьировать в зависимости от таких факторов, как желаемый биологический результат, лекарственное средство, доставку которого нужно осуществить, ткань, которая является мишенью, путь введения и т.д. Например, эффективное количество ΡδΜΑ-направляемой частицы, содержащей противоракое лекарственное средство, может представлять собой такое количество, которое приводит к уменьшению размера опухоли на желаемую величину в течение желаемого периода времени. Дополнительные факторы, которые следует учитывать, включают тяжесть болезненного состояния; возраст, массу тела и пол пациента, которого лечат; режим питания, время и частоту введения; комбинирование лекарственных средств; аллергические реакции и переносимость/ответ на терапию.
Наночастицы по настоящему изобретению можно сформулировать в стандартную лекарственную форму для простоты введения и равномерного дозирования. Выражение стандартная лекарственная форма, как используется в настоящем описании, относится к физически дискретной единице наночастицы, подходящей для пациента, подлежащего лечению. Должно быть понятно, однако, что общая суточная доза композиций по настоящему изобретению будет определяться лечащим врачом в соответствии с взвешенной медицинской оценкой. Для любой наночастицы терапевтически эффективную дозу можно изначально определить либо в клеточном анализе, либо с использованием животных моделей, обычно мышей, кроликов, собак или свиней. Животную модель также используют для определения желательных пределов концентрации и пути введения. Такую информацию затем можно использовать для определения полезных доз и путей для введения человеку. Терапевтическую эффективность и токсичность наночастиц можно определить при помощи стандартных фармацевтических процедур в клеточных культурах или на экспериментальных животных, например ΕΌ50 (доза, которая является терапевтически эффективной для 50% популяции) и ЬО50 (доза, которая является летальной для 50% популяции). Дозовое отношение токсического эффекта к терапевтическому эффекту представляет собой терапевтический индекс и его можно выразить как отношение ΤΌ50/ΕΌ50. Фармацевтические композиции, которые демонстрируют большие терапевтические индексы, могут быть полезными в некоторых вариантах воплощения. Данные результатов клеточных анализов и испытаний на животных можно использовать для формулирования различных доз для человека.
Настоящее изобретение также обеспечивает любую из вышеуказаных композиций в наборах, необязательно с инструкциями по введению любой из композиций, описанных в настоящей заявке, любым подходящим путем, как описано выше, например перорально, внутривенно, с использованием насоса или устройства доставки путем имплантации или с использованием других известных путей доставки лекарственного средства. Инструкции могут определять рекламируемый компонент и обычно включают письменные инструкции на упаковке или связанные с упаковкой композиций по настоящему изобретению. Инструкции также могут включать любые устные или электронные инструкции, обеспечиваемые любым способом. Набор типично означает упаковку, включающую любую одну или сочетание компо- 33 023175 зиций по настоящему изобретению и инструкции, но также может включать композицию по настоящему изобретению и инструкции в любой форме, которые предоставляются в связи с композицией таким образом, чтобы специалист в области медицины мог легко понять, что данные инструкции связаны с конкретной композицией.
Наборы, описанные в настоящей заявке, также могут включать один или несколько контейнеров, которые могут содержать композицию по настоящему изобретению и другие ингредиенты, как описано выше. Наборы также могут содержать инструкции по смешиванию, разведению и/или введению композиций по настоящему изобретению, в некоторых случаях. Наборы также могут включать другие контейнеры с одним или несколькими растворителями, поверхностно-активными веществами, консервантами и/или разбавителями (например, нормальный физиологический раствор (0,9% №С1) или 5% декстрозы), а также контейнеры для смешивания, разведения или введения компонентов в образец или субъекту, нуждающемуся в таком лечении.
Композиции в наборе могут быть представлены в любой подходящей форме, например в виде жидких растворов или в виде сухих порошков. Когда предоставляемая композиция представляет собой сухой порошок, эта композиция может быть реструктурирована путем добавления подходящего растворителя, который также может предоставляться. В тех вариантах воплощения, где используют жидкие формы композиции, жидкая форма может быть концентрированной или готовой для применения. Растворитель зависит от наночастицы и способа применения или введения. Подходящие растворители для композиций лекарственных средств хорошо известны, например, как описано выше, и доступны из литературных источников. Растворитель зависит от наночастицы и способа применения или введения.
Изобретение также включает еще в одном аспекте продвижение введения любой наночастицы, описанной в настоящей заявке. В некоторых вариантах воплощения одну или несколько композиций по настоящему изобретению продвигают для профилактики или лечения различных заболеваний, таких, которые описаны в настоящей заявке, через введение любой из композиций по настоящему изобретению. Как используется в настоящем описании, термин продвигаемый включает все способы ведения бизнеса, включая способы обучения, больничные и другие клинические инструкции, активность фармацевтической промышленности, включая фармацевтические продажи и любую рекламу или другую активность, связанную с продвижением, включая письменную, устную и электронную информацию в любой форме, связанную с композициями по настоящему изобретению.
Следующие примеры предназначены для иллюстрации некоторых вариантов воплощения настоящего изобретения, но не представляют полный объем настоящего изобретения.
Примеры
Изобретение далее иллюстрируется следующими примерами. Примеры не следует рассматривать как дополнительно ограничивающие.
Пример 1. Синтез низкомолекулярного Р8МА лиганда (ОЬ2).
г (10,67 ммоль) исходного соединения растворяли в 150 мл безводного ДМФА. К этому раствору добавляли аллилбромид (6,3 мл, 72 ммоль) и К2СО3 (1,47 г, 10,67 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч, растворитель удаляли, неочищенное вещество растворяли в АсОЕ! и промывали при помощи Н2О до достижения нейтрального рН. Органическую фазу сушили при помощи МдЗО4 (безводный) и упаривали с получением 5,15 г (95%) вещества. (ТСХ в СН2С12:МеОН 20:1 Κί=0,9, исходное соединение Κί=0,1, выявляли при помощи нингидрина и УФ-излучения).
К раствору соединения (5,15 г, 10,13 ммоль) в СН3СК (50 мл) добавляли Е!2ХН (20 мл, 0,19 моль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 мин.
Растворитель удаляли и соединение очищали колоночной хроматографией (гексан:АсОЕ! 3:2) с получением 2,6 г (90%). (ТСХ в СН2С12:МеОН 10:1 Κί=0,4, выявляли при помощи нингидрина (соединение имеет фиолетовую окраску).
Ή-ЯМР (СОС13, 300 МГц) δ 5,95-5,85 (м, 1Н, -СН2СНСН2), 5,36-5,24 (м, 2Н, -СН2СНСН2), 4,62-4,60 (м, 3Н, -СН2СНСН2, ХНВос), 3,46 (т, 1Н, СН(Ьуз)), 3,11-3,07 (м, 2Н, СН2ХНВое), 1,79 (уш.с, 2Н, ΝΊΕ),
- 34 023175
1,79-1,43 (м, 6Н, 3СЩРуз)), 1,43 (с, 9Н, Вос).
К перемешиваемому раствору диаллилглутамата (3,96 г, 15 ммоль) и трифосгена (1,47 г, 4,95 ммоль) в СН2С12 (143 мл) при -78°С добавляли Εΐ3Ν (6,4 мл, 46 ммоль) в 0¾¾ (28 мл). Реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 1,5 ч. Затем добавляли лизиновое производое (2,6 г, 9,09 ммоль) в растворе СЩС12 (36 мл) при -78°С, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Раствор разбавляли при помощи СЩС12, промывали два раза при помощи Н2О, сушили над Мд§О4 (безводный) и очищали колоночной хроматографией (гексан:АсОΕί 3:1 2:1^АсОЕЕ с получением 4 г (82%) (ТСХ в С^С^МеОН 20:1 Κί=0,3, выявляли при помощи нингидрина).
1Н-ЯМР (СОС13, 300 МГц) δ 5,97-5,84 (м, 3Н, 3-СН2СНСН2), 5,50 (уш.т, 2Н, 2Ш мочевина), 5,365,20 (м, 6Н, 3-СН2СНСН2), 4,81 (уш.с, 1Н, ЖВос), 4,68-4,40 (м, 8Н, 3-СН2СНСН2, СН(Ьус), СН(д1и)), 3,09-3,05 (м, 2Н, СН^Вос), 2,52-2,39 (м, 2Н, СЩ^и)), 2,25-2,14 и 2,02-1,92 (2 м, 2Н, СЩдШ)), 1,871,64 (м, 4Н, 2СН2(Ьуз)), 1,51-1,35 (м, 2Н, СЩфуз)), 1,44 (с, 9Н, Вос).
К раствору соединения (4 г, 7,42 ммоль) в безводном СН2С12 (40 мл) добавляли при 0°С ТРА (9 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляли в вакууме до полного высушивания с получением 4,1 г (количественный). (ТСХ в СЩС^МеОН 20:1 Κί=0,1, выявляли при помощи нингидрина).
1Н-ЯМР (СЭС13, 300 МГц) δ 6,27-6,16 (2д, 2Н, 2NΗ мочевина), 5,96-5,82 (м, 3Н, 3-СН2СНСН2), 5,355,20 (м, 6Н, 3-СН2СНСН2), 4,61-4,55 (м, 6Н, 3-СН2СНСН2), 4,46-4,41 (м, 2Н, СН(Ьуз), СН(д1и)), 2,99 (м, 2Н, СНМНВос), 2,46 (м, 2Н, СЩдШ)), 2,23-2,11 и 2,01-1,88 (2м, 2Н, СЩдЬ)), 1,88-1,67 (м, 4Н, 2СН2(Ьуз)), 1,45 (м, 2Н, СЩЬуз)).
К раствору соединения (2 г, 3,6 ммоль) в ДМФА (безводный) (62 мл) в атмосфере аргона добавляли Ρά(ΡΡΡ3)4 (0,7 г, 0,6 ммоль) и морфолин (5,4 мл, 60,7 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляли. Неочищенный продукт промывали два раза при помощи СН2С12 и затем растворяли в Н2О. К этому раствору добавляли разбавленный раствор №ОП (0,01н.) до получения сильнощелочного рН. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Твердое вещество промывали снова при помощи СН2С12, Α^Εί и смеси МеОН-СЩС12 (1:1), растворяли в Н2О и нейтрализовали при помощи смолы АтЪегШе ΙΡ-120 Н+. Растворитель выпаривали, и соединение осаждали при помощи МеОН с получением 1 г (87%) ОЬ2.
1Н-ЯМР Ф2О, 300 МГц) δ 4,07 (м, 2Н, СН(Ьуз), СН(д1и)), 2,98 (м, 2Н, СН2Ш2), 2,36 (м, 2Н, СН2(д1и)), 2,08-2,00(м, 1Н, СЩ^и)), 1,93-1,60 (м, 5Н, СЩдЬ), 2СН2(Ьуз)), 1,41 (м, 2Н, СЩЬуз)). Мазз Ε8Ι: 320,47 [М+Н+], 342,42 [Μ+Να+].
Пример 3. Получение наночастиц.
Неограничивающий пример получения наночастиц по настоящему изобретению включает использование процедуры синтеза, показанной на фиг. 1В, где лиганд представляет собой ОЬ2. Ρ8ΜΑ ингибитор ОЬ2 на основе мочевины, который содержит свободную аминогруппу, расположенную в области, не являющейся критической для связывания Ρ8ΜΑ, синтезируют из коммерчески доступных исходных веществ Вοс-ΡΡе(4NΗРтοс)-ОН и диаллилглутаминовой кислоты в соответствии с процедурой, показанной на схеме 1. Аналог присоединяют к Ρ^ОΑ-ΡΕО диблок-сополимеру, содержащему карбоксильную группу на свободном конце ПЭГ, с использованием стандартной химии конъюгирования, например с использованием водорастворимого карбодиимида ЕЭС и Ν-гидроксисукцинимида. Наночастицы образуются
- 35 023175 при использовании нанопреципитации: Конъюгированный полимерный лиганд растворяют в смешиваемом с водой органическом растворителе вместе с другим лекарственным средством для отслеживания поглощения частиц. Дополнительный нефункционализированный полимер может быть включен для модуляции плотности поверхности лиганда. Полимерный раствор диспергируют в водной фазе, и образовавшиеся частицы собирают фильтрованием. Частицы могут быть высушены или сразу испытаны на поглощение клетками ίπ νίίτο или на активность против опухоли предстательной железы ίπ νίνο.
С использованием процедуры, описанной выше, можно получить различные мишеньспецифические действующие наночастицы, такие как наночастицы, включающие ПЭГ, ΓΊ.Λ или РЬСА, химиотерапевтические средства, описанные в настоящей заявке, и 01,2. Конкретные примеры наночастиц, которые могут быть получены, представлены в таблице
Терапевтическое средство Биосовместимый полимер Полимер, обеспечивающий скрытное действие Таргетирующая составляющая
митоксантрон РЬОА РЕО ОЬ2
митоксантрон РЬА РЕО ОЬ2
митоксантрон РСА РЕО ОЬ2
митоксантрон РЬСА ΡΕΟ-ϋδΡΕ ОЬ2
митоксантрон РЬА ΡΕΟ-ϋδΡΕ ОЬ2
митоксантоон РОА ΡΕΟ-ϋδΡΕ ОЬ2
доцетаксел РЬСА РЕО ОЬ2
доцетаксел РЬА РЕО СЬ2
доцетаксел РОА РЕО ОЬ2
доцетаксел РЬСА ΡΕΟ-ϋδΡΕ ОЬ2
доцетаксел РЬА ΡΕΟ-ϋδΡΕ ОЬ2
доцетаксел РОА ΡΕΟ-ϋδΡΕ ОЬ2
доксорубицин РЬСА РЕО ОЬ2
доксорубицин РЬА РЕО ОЬ2
доксорубицин РСА РЕО ОЬ2
доксорубицин РЬОА ΡΕΟ-ϋδΡΕ ОЬ2
доксорубицин РЬА ΡΕΟ-ϋδΡΕ ОЬ2
доксорубицин РОА ΡΕΟ-ϋδΡΕ ОЬ2
гемцитабин РЬОА РЕО ОЬ2
гемцитабин РЬА РЕО ОЬ2
гемцитабин РОА РЕО ОЬ2
гемцитабин РЬОА ΡΕΟ-ϋδΡΕ _
Пример 5. Инкапсулированная в амфифильном слое мишень-специфическая наночастица.
Инкапсулированную в амфифильном слое мишень-специфическую наночастицу можно получить с использованием следующей процедуры. Как указано выше, амфифильный слой может уменьшать проникновение воды в наночастицу, усиляя таким образом эффективность инкапсулированного лекарственного средства и замедляя высвобождение лекарственного средства.
1) Амфифильный слой: отвешивают 10 мг соевого лецитина (МР ВютеФсак, ББС: 1-800-854-0530, тегете.трЪю.сот) в защитном боксе с перчатками в 20-мл сцинтилляционный флакон и растворяют в 10 мл Н2О+4% Е!ОН с получением 1 мг/мл раствора.
2) Нефлуоресцентный полимер: отвешивают 6 мг РБСА-полимера со сложноэфирной концевой группой |Г)(ЖНСТ Согрогайоп (205)-620-0025, БАСТЕБ® АЪзогЪаЫе Ро1утегз; 50:50 сополимера 1)1,лактида и гликолида со сложноэфирной концевой группой. Характеристическая вязкость в пределах 0,76-0,94 дл/г в НР1Р. Хранят при <-10°С в виде кристаллов. Влагочувствительный. Открывать после того, как бутыль нагреется] в защитном боксе с перчатками в 7-мл сцинтилляционный флакон. Добавляют 0,6 мл АСN для получения конечной концентрации 10 мг/мл. Интенсивно перемешивают для смешивания.
3) О8РЕ-ПЭГ-ОМЕ: отвешивают 10 мг ПЭГ (Ауап!!® Ро1аг Ε-ΐριάχ, 1пс.: \\л\лт.а\'ап1Й1]'ж1з.сот: 1,2дистеароил-8п-глицеро-3-фосфоэтаноламин-№[метокси(полиэтиленгликоль)2000] (аммониевая соль) 880120Р; МА: 2805,54) отвешивают в защитном боксе с перчатками в 10-мл сцинтилляционный флакон. Добавляют 10 мл 4% раствора ЕЮН в деионизированной Н2О для получения конечной концентрации 1 мг/мл. Интенсивно перемешивают для смешивания.
- 36 023175
Протокол (получают 5 мг партии при 5 мг/мл РЬОА) в расчете на партию ΝΡ:
1) Липидная смесь: каждую получают в 7-мл сцинтилляционном флаконе. а) Липидный раствор
Лецитин (1 мг/мл) 0,35 мг или 0,35 мл
Ό3ΡΕ-Π3Γ (1 мг/мл) или Ό3ΡΕ- ПЭГ-СЕ2 0,15 мг или 0,15 мл
НгО+4% этанол 1,5 мл
2) Добавляют стержневую мешалку и перемешивают.
3) РЬОА растворы: отбирают аликвоты в 7-мл сцинтилляционные флаконы. Ь) РЬОА раствор
РЪСА 0, 5 мл
АСИ 0, 5 мл
а. Перемешивание с завихрением.
4) Нагревают липидную смесь при 68°С в течение ~3-4 мин.
5) РЬОА добавляют по каплям в процессе нагревания липидов.
6) Осуществляют перемешивание с завихрением в течение 3 мин.
7) Добавляют по каплям 1 мл деионизированной Н2О, при перемешивании (общий объем 4 мл).
8) Перемешивают в течение 2 ч с открытой крышкой при комнатной температуре.
9) Переносят в кассету для диализа (Р1ЕКСЕ ЗЬБе-А-Ьу/ег 10К МГССО Όίαίνδίδ Са55с11с5) на 3 ч в 1000-кратном объеме Н2О.
10) Буфер для диализа меняют спустя 1, 2 и 3 ч.
11) В процессе диализа получают 5 об.% Т\\ееп 80 буфер (100 мл) для замораживания наночастиц с 0,5 об.% Т\\ееп 80.
12) Подготавливают/метят пробирки Ашкоп.
13) После диализа отбирают аликвоту (1,0 мг) для измерения размера и зета потенциала.
14) Используют фильтр Ашкоп (Ашкоп® иИга-15 иИгасе1 10К Са! #: ИРС8 010 96) для центрифугирования ~3х при 4000 об/мин в течение 10 мин для концентрации до 1 мл, осуществляя отгонку легких фракций при помощи РВ§.
15) Осуществляют отбор аликвот 1,0 мг из каждой партии и измеряют размер и зета потенциал.
16) Осуществляют отбор аликвот 3,0 мг из каждой партии в пробирки Эппендорфа.
17) Добавляют Т\\ееп до 0,5 об.% в пробирки Эппендорфа для каждой партии.
18) Пробирки мгновенно замораживают в жидком N2 и помещают в морозильник.
Эквиваленты.
Специалистам в данной области должны быть известны или они могут определить путем не более чем рутинного экспериментирования множество эквивалентов конкретных вариантов воплощения настоящего изобретения, описанных в настоящей заявке. Такие эквивалентны предусматриваются как охватываемые следующей далее формулой изобретения.
Включение посредством ссылки.
Полное содержание всех патентов, опубликованных патентных заявок, веб-сайтов и других ссылочных документов, указанных в настоящей заявке, определенным образом включено в настоящую заявку во всей их полноте посредством ссылки.

Claims (39)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Мишень-специфическая наночастица для лечения заболевания или расстройства и доставки терапевтического средства, включающая полимерную матрицу, содержащую сополимер РЬА (поли- молочная кислота) и ПЭГ (полиэтиленгликоль) или РЬОА (сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты) и ПЭГ, где часть полимерной матрицы ковалентно связана с низкомолекулярным Р8МА лигандом через свободный конец ПЭГ;
    и терапевтическое средство;
    где низкомолекулярный Р8МА лиганд представляет собой его энантиомеры, стереоизомеры, ротамеры, таутомеры, диастереомеры или рацематы; и где NН2-группа служит в качестве точки ковалентного присоединения к ПЭГ.
  2. 2. Наночастица по п.1, где полимерная матрица включает содержащий липидную концевую группу ПЭГ и РЬОА.
  3. 3. Наночастица по п.2, где липид представляет собой липид формулы V
    - 37 023175 и его соли, где каждый К независимо представляет собой С1-30 алкил.
  4. 4. Наночастица по п.2, где липид представляет собой 1,2 дистеароил-8п-глицеро-3-фосфоэтаноламин (ТО8РЕ) и его соли.
  5. 5. Наночастица по п.1, где заболеванием или расстройством является рак предстательной железы.
  6. 6. Наночастица по п.1, где терапевтическое средство связано с поверхностью наночастицы, инкапсулировано внутри нее, окружено ею или диспергировано в ней.
  7. 7. Наночастица по п.1, где наночастица имеет гидрофобное ядро и терапевтическое средство инкапсулировано внутри него.
  8. 8. Наночастица по п.1, где терапевтическое средство выбрано из группы, включающей митоксантрон и доцетаксел.
  9. 9. Наночастица по п.1, где терапевтическое средство выбрано из группы, включающей химиотерапевтические средства, такие как доксорубицин (адриамицин), гемцитабин (гемзар), даунорубицин, прокарбазин, митомицин, цитарабин, этопозид, метотрексат, 5-фторурацил (5-РИ), винбластин, винкристин, блеомицин, паклитаксел (таксол), доцетаксел (таксотер), альдеслейкин, аспарагиназу, бусульфан, карбоплатин, кладрибин, камптотецин, СРТ-11, 10-гидрокси-7-этилкамптотецин (8Ν38), дакарбазин, 8-1 капецитабин, фторафур, 5'-дезоксифторуридин, ПРТ, енилурацил, дезоксицитидин, 5-азацитозин, 5азадезоксицитозин, аллопуринол, 2-хлораденозин, триметрексат, аминоптерин, метилен-10деазааминоптерин (МЭЛМ), оксаплатин, пикоплатин, тетраплатин, сатраплатин, платинум-ЭАСН, ормаплатин, С1-973, 1М-216 и его аналоги, эпирубицин, этопозид фосфат, 9-аминокамптотецин, 10,11метилендиоксикамптотецин, каренитецин, 9-нитрокамптотецин, ТА8 103, виндезин, Ьфенилаланиниприт, ифосфамидмефосфамид, перфосфамид, трофосфамид кармустин, семустин, эпотилоны А-Е, томудекс, 6-меркаптопурин, 6-тиогуанин, амсакрин, этопозид фосфат, каренитецин, ацикловир, валацикловир, ганцикловир, амантадин, римантадин, ламивудин, зидовудин, бевацизумаб, трастузумаб, ритуксимаб и 5-фторурацил и их сочетания.
  10. 10. Наночастица по п.1, где терапевтическое средство представляет собой ДРНК.
  11. 11. Наночастица по п.10, где молекула ДРНК является комплементарной связанным с опухолью мишеням.
  12. 12. Наночастица по п.1, где наночастица содержит количество низкомолекулярного Р8МА лиганда, эффективное для лечения рака, где Р8МА экспрессируется на поверхности раковых клеток или в опухолевой неоваскулатуре, у субъекта, нуждающегося в этом.
  13. 13. Наночастица по п.12, где рак выбирают из группы, состоящей из следующих: рак предстательной железы, немелкоклеточный рак легкого, колоректальная карцинома и глиобластома.
  14. 14. Наночастица по п.1, где наночастица имеет диаметр от 80 до 200 нм.
  15. 15. Наночастица по п.1, где полимерная матрица дополнительно содержит РЬА (полимолочная кислота).
  16. 16. Наночастица по п.1, где полимерная матрица дополнительно содержит РЬСА (сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты).
  17. 17. Наночастица по п.1, содержащая лигандсвязанный сополимер и нефункционализированный сополимер РЬА (полимолочная кислота) или РЬСА (сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты) и ПЭГ (полиэтиленгликоль).
  18. 18. Способ получения наночастицы по п.1, имеющей отношение лигандсвязанного полимера к нефункционализированному полимеру, эффективное для лечения рака предстательной железы, включающий обеспечение терапевтического средства;
    обеспечение первого полимера, включающего сополимер РЬА (полимолочная кислота) и ПЭГ (полиэтиленгликоль) или РЬСА (сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты) и ПЭГ (полиэтиленгликоль);
    обеспечение низкомолекулярного Р8МА лиганда;
    взаимодействие первого полимера с низкомолекулярным Р8МА лигандом с получением лигандсвязанного полимера, где низкомолекулярный Р8МА лиганд представляет собой
    - 38 023175 его энантиомеры, стереоизомеры, ротамеры, таутомеры, диастереомеры или рацематы, первый полимер является ковалентно связанным с МЫ^-группой низкомолекулярного ΡδΜΆ лиганда; и смешивание лигандсвязанного полимера со вторым нефункционализированным полимером, включающим сополимер ГБА (полимолочная кислота) и ПЭГ (полиэтиленгликоль) или ГЬСА (сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты) и ПЭГ (полиэтиленгликоль), и терапевтическим средством, с получением наночастицы.
  19. 19. Способ по п.18, где первый полимер представляет собой сополимер Ρ^СΆ и ПЭГ, где ПЭГ содержит карбоксильную группу на свободном конце.
  20. 20. Способ по п.18, где первый полимер сначала взаимодействует с липидом с образованием полимер/липидного конъюгата, который затем смешивают с низкомолекулярным ΡδΜΆ лигандом.
  21. 21. Способ по п.20, где липид представляет собой 1,2 дистеароил-κη-глицеро-3-фосфоэтаноламин (ΌδΡΕ) и его соли.
  22. 22. Мишень-специфическая наночастица, включающая полимерную матрицу, включающую комплекс фосфолипидсвязанного ΡΕΟ (полиэтиленгликоль) и Ρ^ (полимолочная кислота) или фосфолипидсвязанного ΡΕΟ (полиэтиленгликоль) и Ρ^СΆ (сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты), где часть полимерной матрицы ковалентно связана с низкомолекулярным ΡδΜΆ лигандом через свободный конец ПЭГ; и терапевтическое средство;
    где указанный низкомолекулярный ΡδΜΆ лиганд представляет собой его энантиомеры, стереоизомеры, ротамеры, таутомеры, диастереомеры или рацематы; и где ΝΗ^-группа служит в качестве точки ковалентного присоединения к ПЭГ.
  23. 23. Наночастица по п.22, где терапевтическое средство представляет собой митоксантрон или доцетаксел.
  24. 24. Фармацевтическая композиция, включающая множество мишень-специфических наночастиц, включающих аКМА терапевтическое средство; где указанные наночастицы содержат полимерную матрицу, содержащую сополимер Ρ^ (полимолочная кислота) и ПЭГ (полиэтиленгликоль), где часть полимерной матрицы ковалентно связана с низкомолекулярным ΡδΜΆ лигандом через свободный конец ПЭГ, где указанный низкомолекулярный ΡδΜΆ лиганд представляет собой его энантиомеры, стереоизомеры, ротамеры, таутомеры, диастереомеры или рацематы или; и где ΝΗ^-группа служит в качестве точки ковалентного присоединения к ПЭГ.
  25. 25. Фармацевтическая композиция по п.24, где κίΡΗΚ обусловливает молчание ΥΈΟΡ.
  26. 26. Фармацевтическая композиция по п.24, где композиция подходит для системного введения путем внутривенной инфузии или инъекции.
  27. 27. Фармацевтическая композиция, включающая наночастицы в соответствии с любым из пп.1-17 и фармацевтически приемлемый носитель.
  28. 28. Фармацевтическая композиция по п.24 для лечения рака предстательной железы у субъекта, нуждающегося в этом.
  29. 29. Фармацевтическая композиция по п.24 для лечения солидных опухолей, экспрессирующих ΡδΜΆ в опухолевой неоваскулатуре, у субъекта, нуждающегося в этом.
  30. 30. Применение фармацевтической композиции по п.27 для получения лекарственного средства для лечения рака.
  31. 31. Применение по п.30, где рак представляет собой рак предстательной железы.
  32. 32. Применение по п.30, где фармацевтическую композицию вводят внутривенно.
  33. 33. Способ лечения рака предстательной железы у субъекта, нуждающегося в этом, включающий введение субъекту эффективного количества фармацевтической композиции по любому из пп.24-29.
  34. 34. Способ по п.33, где фармацевтическую композицию вводят непосредственно в предстательную железу субъекта.
  35. 35. Способ по п.33, где фармацевтическую композицию вводят непосредственно в раковые клетки предстательной железы.
  36. 36. Способ по п.33, где фармацевтическую композицию вводят непосредственно в раковые клетки предстательной железы путем инъекции в ткань, включающую раковые клетки предстательной железы.
  37. 37. Способ по п.33, где фармацевтическую композицию вводят субъекту путем имплантации на участке или около раковых клеток предстательной железы в процессе хирургического удаления опухоли.
  38. 38. Способ по п.33, где фармацевтическую композицию вводят системно путем внутривенной ин- 39 023175 фузии или инъекции.
  39. 39. Способ по п.33, где фармацевтическую композицию вводят внутривенно.
EA201070409A 2007-09-28 2008-03-31 Таргетирование раковых клеток с использованием наночастиц EA023175B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US97619707P 2007-09-28 2007-09-28
PCT/US2008/058873 WO2008121949A1 (en) 2007-03-30 2008-03-31 Cancer cell targeting using nanoparticles

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201070409A1 EA201070409A1 (ru) 2010-10-29
EA023175B1 true EA023175B1 (ru) 2016-05-31

Family

ID=39808707

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201070409A EA023175B1 (ru) 2007-09-28 2008-03-31 Таргетирование раковых клеток с использованием наночастиц

Country Status (13)

Country Link
US (9) US8246968B2 (ru)
EP (4) EP2436376B1 (ru)
JP (3) JP5410434B2 (ru)
AT (1) ATE530169T1 (ru)
CA (2) CA2891005A1 (ru)
DK (2) DK2644192T3 (ru)
EA (1) EA023175B1 (ru)
ES (4) ES2510396T3 (ru)
HU (2) HUE035101T2 (ru)
PL (2) PL2644192T3 (ru)
PT (3) PT2644594T (ru)
SI (2) SI2644594T1 (ru)
WO (1) WO2008121949A1 (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2669937C1 (ru) * 2017-10-17 2018-10-17 федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Казанский (Приволжский) федеральный университет" (ФГАОУ ВО КФУ) Фармацевтическая противоопухолевая композиция паклитаксела с гистоном Н1.3 в качестве носителя и способ получения композиции
WO2020046163A1 (ru) * 2018-08-28 2020-03-05 Общество С Ограниченной Ответственностью "Нпк Альфа-Онкотехнологии" Препарат для лечения онкологических заболеваний

Families Citing this family (280)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0011903D0 (en) * 2000-05-18 2000-07-05 Astrazeneca Ab Combination chemotherapy
WO2007001448A2 (en) 2004-11-04 2007-01-04 Massachusetts Institute Of Technology Coated controlled release polymer particles as efficient oral delivery vehicles for biopharmaceuticals
US9267937B2 (en) 2005-12-15 2016-02-23 Massachusetts Institute Of Technology System for screening particles
CA2648099C (en) 2006-03-31 2012-05-29 The Brigham And Women's Hospital, Inc System for targeted delivery of therapeutic agents
WO2007137117A2 (en) * 2006-05-17 2007-11-29 Massachusetts Institute Of Technology Aptamer-directed drug delivery
WO2007150030A2 (en) 2006-06-23 2007-12-27 Massachusetts Institute Of Technology Microfluidic synthesis of organic nanoparticles
US20100144845A1 (en) * 2006-08-04 2010-06-10 Massachusetts Institute Of Technology Oligonucleotide systems for targeted intracellular delivery
CN101511348B (zh) * 2006-08-30 2012-04-18 国立大学法人九州大学 含有包封他汀类之纳米颗粒的药物组合物
US8168662B1 (en) 2006-11-06 2012-05-01 Poniard Pharmaceuticals, Inc. Use of picoplatin to treat colorectal cancer
US8168661B2 (en) * 2006-11-06 2012-05-01 Poniard Pharmaceuticals, Inc. Use of picoplatin to treat colorectal cancer
US8178564B2 (en) * 2006-11-06 2012-05-15 Poniard Pharmaceuticals, Inc. Use of picoplatin to treat colorectal cancer
US8173686B2 (en) 2006-11-06 2012-05-08 Poniard Pharmaceuticals, Inc. Use of picoplatin to treat colorectal cancer
US20100303723A1 (en) * 2006-11-20 2010-12-02 Massachusetts Institute Of Technology Drug delivery systems using fc fragments
EP2134830A2 (en) 2007-02-09 2009-12-23 Massachusetts Institute of Technology Oscillating cell culture bioreactor
US20110033528A1 (en) * 2009-08-05 2011-02-10 Poniard Pharmaceuticals, Inc. Stabilized picoplatin oral dosage form
US20090074828A1 (en) * 2007-04-04 2009-03-19 Massachusetts Institute Of Technology Poly(amino acid) targeting moieties
CN104774175B (zh) 2007-06-26 2019-04-16 约翰·霍普金斯大学 标记的前列腺特异性膜抗原(psma)的抑制子、生物学评估及作为成像试剂的用途
TW200916094A (en) * 2007-06-27 2009-04-16 Poniard Pharmaceuticals Inc Stabilized picoplatin dosage form
US20100260832A1 (en) * 2007-06-27 2010-10-14 Poniard Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for ovarian cancer
JP2010533714A (ja) * 2007-07-16 2010-10-28 ポニアード ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド ピコプラチンのための経口製剤
CN102014956B (zh) 2007-08-17 2015-06-03 普渡研究基金会 Psma结合配体-接头缀合物及其使用方法
PT2644594T (pt) 2007-09-28 2017-11-20 Pfizer Direcionamento a células cancerosas utilizando nanopartículas
JP2011500569A (ja) 2007-10-12 2011-01-06 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー ワクチンナノテクノロジー
WO2009070302A1 (en) * 2007-11-30 2009-06-04 The Johns Hopkins University Prostate specific membrane antigen (psma) targeted nanoparticles for therapy of prostate cancer
CA2715348A1 (en) * 2008-02-08 2009-08-13 Poniard Pharmaceuticals, Inc. Use of picoplatin and bevacizumab to treat colorectal cancer
US8034396B2 (en) * 2008-04-01 2011-10-11 Tyco Healthcare Group Lp Bioadhesive composition formed using click chemistry
WO2010005721A2 (en) 2008-06-16 2010-01-14 Bind Biosciences, Inc. Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same
WO2009134769A1 (en) * 2008-04-28 2009-11-05 Novartis Ag Nanoparticles for use in pharmaceutical compositions
EP2309991B1 (en) 2008-06-16 2019-03-06 Pfizer Inc Therapeutic polymeric nanoparticles comprising vinca alkaloids and methods of making and using same
WO2010005726A2 (en) 2008-06-16 2010-01-14 Bind Biosciences Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles with mtor inhibitors and methods of making and using same
DK3222615T3 (da) * 2008-08-01 2022-06-20 Univ Johns Hopkins Psma-bindende stoffer og anvendelser deraf
US9265747B2 (en) 2008-08-26 2016-02-23 Massachusetts Institute Of Technology Platinum (IV) complexes for use in dual mode pharmaceutical therapy
US8277812B2 (en) 2008-10-12 2012-10-02 Massachusetts Institute Of Technology Immunonanotherapeutics that provide IgG humoral response without T-cell antigen
US8591905B2 (en) 2008-10-12 2013-11-26 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Nicotine immunonanotherapeutics
WO2010047765A2 (en) 2008-10-20 2010-04-29 Massachussetts Institute Of Technology Nanostructures for drug delivery
WO2010068866A2 (en) 2008-12-12 2010-06-17 Bind Biosciences Therapeutic particles suitable for parenteral administration and methods of making and using same
US8846096B2 (en) * 2008-12-12 2014-09-30 Creighton University Nanoparticles and methods of use
ES2776126T3 (es) * 2008-12-15 2020-07-29 Pfizer Nanopartículas de circulación prolongada para la liberación sostenida de agentes terapéuticos
EP2210584A1 (en) * 2009-01-27 2010-07-28 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Stable polymeric composition comprising an epothilone and an amphiphilic block copolymer
EP2398941B1 (en) 2009-02-21 2016-07-13 Sofradim Production Crosslinked fibers and method of making same by extrusion
AU2010215194A1 (en) 2009-02-21 2011-10-13 Sofradim Production Apparatus and method of reacting polymers passing through metal ion chelated resin matrix to produce injectable medical devices
US8956603B2 (en) 2009-02-21 2015-02-17 Sofradim Production Amphiphilic compounds and self-assembling compositions made therefrom
US8535477B2 (en) 2009-02-21 2013-09-17 Sofradim Production Medical devices incorporating functional adhesives
US8968733B2 (en) * 2009-02-21 2015-03-03 Sofradim Production Functionalized surgical adhesives
AU2010215202A1 (en) 2009-02-21 2011-10-13 Covidien Lp Crosslinked fibers and method of making same using UV radiation
US8663689B2 (en) * 2009-02-21 2014-03-04 Sofradim Production Functionalized adhesive medical gel
WO2010096649A1 (en) 2009-02-21 2010-08-26 Tyco Healthcare Group Lp Medical devices having activated surfaces
CA2753165A1 (en) 2009-02-21 2010-08-26 Sofradim Production Compounds and medical devices activated with solvophobic linkers
US8512728B2 (en) 2009-02-21 2013-08-20 Sofradim Production Method of forming a medical device on biological tissue
US9273191B2 (en) 2009-02-21 2016-03-01 Sofradim Production Medical devices with an activated coating
US8877170B2 (en) * 2009-02-21 2014-11-04 Sofradim Production Medical device with inflammatory response-reducing coating
EP2398524B1 (en) 2009-02-21 2017-07-12 Covidien LP Medical devices having activated surfaces
AU2010215200A1 (en) 2009-02-21 2011-10-13 Sofradim Production Apparatus and method of reaching polymers by exposure to UV radiation to produce injectable medical devices
AU2010234916A1 (en) * 2009-03-30 2011-10-13 Cerulean Pharma Inc. Polymer-agent conjugates, particles, compositions, and related methods of use
WO2010114770A1 (en) * 2009-03-30 2010-10-07 Cerulean Pharma Inc. Polymer-agent conjugates, particles, compositions, and related methods of use
WO2010114768A1 (en) * 2009-03-30 2010-10-07 Cerulean Pharma Inc. Polymer-epothilone conjugates, particles, compositions, and related methods of use
CN101536982B (zh) * 2009-04-27 2011-11-09 中国人民解放军第二军医大学 Trastuzumab修饰的包裹毒素蛋白的PEG化免疫脂质体及其制备与应用
US20120114710A1 (en) * 2009-05-18 2012-05-10 Lynn Kirkpatrick Carbon nanotubes complexed with multiple bioactive agents and methods related thereto
WO2011017297A2 (en) 2009-08-03 2011-02-10 The University Of North Carolina At Chapel Hill Biodegradable delivery system complexes for the delivery of bioactive compounds
WO2011063356A2 (en) * 2009-11-22 2011-05-26 Sirnaomics, Inc. Rare earth-doped up-conversion nanoparticles for therapeutic and diagnostic applications
CN102811743B (zh) 2009-12-11 2015-11-25 佰恩德治疗股份有限公司 冻干治疗颗粒的稳定制剂
EA201290499A1 (ru) 2009-12-15 2013-01-30 Байнд Байосайенсиз, Инк. Композиции терапевтических полимерных наночастиц с высокой температурой стеклования и высокомолекулярными сополимерами
EP2512459A4 (en) * 2009-12-15 2013-08-07 THERAPEUTIC POLYMERIC NANOPARTICLES COMPRISING EPOTHILONE AND METHODS OF MAKING AND USING SAME
EP2512487A4 (en) * 2009-12-15 2013-08-07 THERAPEUTIC POLYMERNANOPARTICLES WITH CORTICOSTEROIDS AND METHOD FOR THE PRODUCTION AND USE THEREOF
US9951324B2 (en) 2010-02-25 2018-04-24 Purdue Research Foundation PSMA binding ligand-linker conjugates and methods for using
WO2011117745A2 (en) * 2010-03-25 2011-09-29 Sofradim Production Surgical fasteners and methods for sealing wounds
US8795331B2 (en) 2010-03-25 2014-08-05 Covidien Lp Medical devices incorporating functional adhesives
WO2011133617A1 (en) * 2010-04-23 2011-10-27 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Nano-hybrid delivery system for sequential utilization of passive and active targeting
WO2011143524A2 (en) 2010-05-14 2011-11-17 Mallinckrodt Llc Functional, cross-linked nanostructures for tandem optical imaging and therapy
CA2804263A1 (en) 2010-06-29 2012-01-12 Tyco Healthcare Group Lp Microwave-powered reactor and method for in situ forming implants
US8865857B2 (en) 2010-07-01 2014-10-21 Sofradim Production Medical device with predefined activated cellular integration
CA2805987C (en) 2010-07-27 2019-04-09 Sofradim Production Polymeric fibers having tissue reactive members
CA2807552A1 (en) 2010-08-06 2012-02-09 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
US9549901B2 (en) 2010-09-03 2017-01-24 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Lipid-polymer hybrid particles
EP3431485B1 (en) 2010-10-01 2020-12-30 ModernaTX, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
EP2629760A4 (en) * 2010-10-22 2014-04-02 Bind Therapeutics Inc THERAPEUTIC NANOPARTICLES CONTAINING COPOLYMERS OF HIGH MOLECULAR WEIGHT
WO2012059936A1 (en) 2010-11-03 2012-05-10 Padma Venkitachalam Devarajan Pharmaceutical compositions for colloidal drug delivery
US10285943B2 (en) 2010-12-02 2019-05-14 Greenmark Biomedical Inc. Aptamer bioconjugate drug delivery device
US10363309B2 (en) 2011-02-04 2019-07-30 Case Western Reserve University Targeted nanoparticle conjugates
WO2012135805A2 (en) 2011-03-31 2012-10-04 modeRNA Therapeutics Delivery and formulation of engineered nucleic acids
US20140308363A1 (en) * 2011-05-31 2014-10-16 Bind Therapeutics, Inc. Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same
EA201490067A1 (ru) 2011-06-21 2014-05-30 Массачусетс Инститьют Оф Текнолоджи Композиции и способы для лечения рака
US9605304B2 (en) * 2011-07-20 2017-03-28 The Hong Kong Polytechnic University Ultra-stable oligonucleotide-gold and-silver nanoparticle conjugates and method of their preparation
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
WO2013044219A1 (en) * 2011-09-22 2013-03-28 Bind Biosciences Methods of treating cancers with therapeutic nanoparticles
AU2012318752B2 (en) 2011-10-03 2017-08-31 Modernatx, Inc. Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids, and uses thereof
WO2013059634A1 (en) 2011-10-20 2013-04-25 The Regents Of The University Of California Use of cdk9 inhibitors to reduce cartilage degradation
US9006199B2 (en) * 2011-11-14 2015-04-14 Silenseed Ltd. Methods and compositions for treating prostate cancer
AU2012318273B2 (en) * 2011-12-02 2016-05-19 Greenmark Biomedical Inc. Aptamer bioconjugate drug delivery device
CN104114572A (zh) 2011-12-16 2014-10-22 现代治疗公司 经修饰的核苷、核苷酸和核酸组合物
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US10501512B2 (en) 2012-04-02 2019-12-10 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
EP2833923A4 (en) 2012-04-02 2016-02-24 Moderna Therapeutics Inc MODIFIED POLYNUCLEOTIDES FOR THE PRODUCTION OF PROTEINS
CA2868391A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 Stephane Bancel Polynucleotides comprising n1-methyl-pseudouridine and methods for preparing the same
ES2731524T3 (es) 2012-04-05 2019-11-15 Massachusetts Inst Technology Composiciones inmunoestimuladoras y métodos de uso de las mismas
EP2841098A4 (en) 2012-04-23 2016-03-02 Allertein Therapeutics Llc NANOPARTICLES FOR THE TREATMENT OF ALLERGIES
US8729286B2 (en) 2012-05-10 2014-05-20 Massachusetts Institute Of Technology Platinum compounds as treatment for cancers, and related methods, kits, and compositions
CN103566377A (zh) 2012-07-18 2014-02-12 上海博笛生物科技有限公司 癌症的靶向免疫治疗
JP2015525799A (ja) 2012-08-10 2015-09-07 ユニバーシティ・オブ・ノース・テキサス・ヘルス・サイエンス・センターＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｎｏｒｔｈ Ｔｅｘａｓ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｃｅｎｔｅｒ ターゲティングポリアミノ酸および脂肪酸のコンジュゲートを含む薬物送達ビークル
JP2014051478A (ja) * 2012-09-10 2014-03-20 Panasonic Corp 機能性物質、生体活性用薬剤及び機能性物質の生体内への浸透方法、並びに機能性物質放散装置及び空気清浄装置
US9877923B2 (en) 2012-09-17 2018-01-30 Pfizer Inc. Process for preparing therapeutic nanoparticles
WO2014059022A1 (en) * 2012-10-09 2014-04-17 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Nanoparticles for targeted delivery of multiple therapeutic agents and methods of use
US9801953B2 (en) 2012-10-15 2017-10-31 Emory University Nanoparticles carrying nucleic acid cassettes for expressing RNA
EP2911701A4 (en) * 2012-10-23 2016-06-08 Univ Johns Hopkins Novel self-assembling drug amphiphiles and methods for synthesis and application
JP6892218B2 (ja) * 2012-11-15 2021-06-23 エンドサイト・インコーポレイテッドＥｎｄｏｃｙｔｅ， Ｉｎｃ． 薬物送達結合体およびｐｓｍａ発現細胞によって引き起こされる疾患の治療方法
US9597380B2 (en) 2012-11-26 2017-03-21 Modernatx, Inc. Terminally modified RNA
WO2014106208A1 (en) * 2012-12-28 2014-07-03 Blend Therapeutics, Inc. Targeted conjugates encapsulated in particles and formulations thereof
WO2014121291A2 (en) 2013-02-04 2014-08-07 University Of Notre Dame Du Lac Nanoparticle drug delivery systems
US10207005B2 (en) 2013-02-15 2019-02-19 Case Western Reserve University Photodynamic therapy composition
US11975074B2 (en) 2013-02-15 2024-05-07 Case Western Reserve University Photodynamic therapy composition
EP2958596B1 (en) 2013-02-15 2019-12-04 Case Western Reserve University Psma ligands and uses thereof
CZ308409B6 (cs) * 2013-02-26 2020-08-05 Elmarco S.R.O. Přípravek pro aplikaci alespoň jedné biologicky a/nebo farmaceuticky aktivní látky
WO2014160216A2 (en) 2013-03-13 2014-10-02 Massachusetts Institute Of Technology Dual targeting anticancer agents
AU2014241442B2 (en) 2013-03-14 2018-11-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Human antibodies to GREM 1
US10258698B2 (en) 2013-03-14 2019-04-16 Modernatx, Inc. Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
MX2015013894A (es) * 2013-04-03 2015-12-11 Allertein Therapeutics Llc Composiciones de nanoparticulas novedosas.
WO2014165782A2 (en) 2013-04-05 2014-10-09 Massachusetts Institute Of Technology Compositions, methods, and kits comprising platinum compounds associated with a ligand comprising a targeting moiety
WO2014197500A1 (en) * 2013-06-03 2014-12-11 University Of Southern California Targeted crosslinked multilamellar liposomes
US9775928B2 (en) 2013-06-18 2017-10-03 Covidien Lp Adhesive barbed filament
US10434194B2 (en) 2013-06-20 2019-10-08 Case Western Reserve University PSMA targeted nanobubbles for diagnostic and therapeutic applications
US9657094B2 (en) * 2013-06-24 2017-05-23 Colorado School Of Mines Biodegradable polymers for delivery of therapeutic agents
PT3019619T (pt) 2013-07-11 2021-11-11 Modernatx Inc Composições que compreendem polinucleótidos sintéticos que codificam proteínas relacionadas com crispr e sgarn sintéticos e métodos de utilização
US20160194368A1 (en) 2013-09-03 2016-07-07 Moderna Therapeutics, Inc. Circular polynucleotides
EP3041934A1 (en) 2013-09-03 2016-07-13 Moderna Therapeutics, Inc. Chimeric polynucleotides
WO2015048744A2 (en) 2013-09-30 2015-04-02 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
JP2016538829A (ja) 2013-10-03 2016-12-15 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドＭｏｄｅｒｎａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ． 低密度リポタンパク質受容体をコードするポリヌクレオチド
GEP20237497B (en) 2013-10-18 2023-04-10 Deutsches Krebsforsch Labeled inhibitors of prostate specific membrane antigen (psma), their use as imaging agents and pharmaceutical agents for the treatment of prostate cancer
US9504405B2 (en) 2013-10-23 2016-11-29 Verily Life Sciences Llc Spatial modulation of magnetic particles in vasculature by external magnetic field
US10542918B2 (en) 2013-10-23 2020-01-28 Verily Life Sciences Llc Modulation of a response signal to distinguish between analyte and background signals
CA2930243A1 (en) 2013-11-11 2015-05-14 Wake Forest University Health Sciences Epha3 and multi-valent targeting of tumors
CN105849568B (zh) * 2013-11-14 2018-05-04 恩多塞特公司 用于正电子发射断层术的化合物
KR102252561B1 (ko) 2013-11-22 2021-05-20 미나 테라퓨틱스 리미티드 Ｃ/ｅｂｐ 알파 짧은 활성화 ｒｎａ 조성물 및 사용 방법
EP3079668A1 (en) 2013-12-09 2016-10-19 Durect Corporation Pharmaceutically active agent complexes, polymer complexes, and compositions and methods involving the same
JP2017502950A (ja) 2013-12-11 2017-01-26 ユニバーシティー オブ マサチューセッツＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ サルモネラＴ３ＳＳエフェクタータンパク質（ＳｉｐＡ）を使用した疾患を治療するための組成物および方法
WO2015095351A1 (en) 2013-12-19 2015-06-25 Novartis Ag LEPTIN mRNA COMPOSITIONS AND FORMULATIONS
AU2015205756A1 (en) 2014-01-10 2016-07-21 Birdie Biopharmaceuticals Inc. Compounds and compositions for treating EGFR expressing tumors
CA2938742A1 (en) * 2014-02-10 2015-08-13 Salk Institute For Biological Studies Increasing storage of vitamin a, vitamin d and/or lipids
CA2942859A1 (en) 2014-03-14 2015-09-17 Pfizer Inc. Therapeutic nanoparticles comprising a therapeutic agent and methods of making and using same
CN103861112B (zh) * 2014-03-25 2015-12-30 国家纳米科学中心 基于聚合物纳米粒子载体的药物组合物及其制备方法
WO2015164779A1 (en) * 2014-04-24 2015-10-29 Rensselaer Polytechnic Institute Matrix-free polymer nanocomposites and related products and methods thereof
SG10201911695SA (en) 2014-05-14 2020-01-30 Targimmune Therapeutics Ag Improved polyethyleneimine polyethyleneglycol vectors
ES2931832T3 (es) 2014-06-25 2023-01-03 Acuitas Therapeutics Inc Lípidos y formulaciones de nanopartículas lipídicas novedosos para la entrega de ácidos nucleicos
EP3166976B1 (en) 2014-07-09 2022-02-23 Birdie Biopharmaceuticals Inc. Anti-pd-l1 combinations for treating tumors
CN105233291A (zh) 2014-07-09 2016-01-13 博笛生物科技有限公司 用于治疗癌症的联合治疗组合物和联合治疗方法
EP4159741A1 (en) 2014-07-16 2023-04-05 ModernaTX, Inc. Method for producing a chimeric polynucleotide encoding a polypeptide having a triazole-containing internucleotide linkage
EP3171895A1 (en) 2014-07-23 2017-05-31 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of intrabodies
CN112546238A (zh) 2014-09-01 2021-03-26 博笛生物科技有限公司 用于治疗肿瘤的抗-pd-l1结合物
CN104306332B (zh) * 2014-09-24 2017-02-15 东南大学 一种喜树碱类磷脂化合物、其药物组合物及应用
US9968688B2 (en) 2014-11-12 2018-05-15 Verily Life Sciences Llc Shielded targeting agents, methods, and in vivo diagnostic system
WO2016081835A2 (en) * 2014-11-21 2016-05-26 University Of Maryland, Baltimore Targeted structure-specific particulate delivery systems
US11045428B2 (en) 2014-11-21 2021-06-29 University Of Maryland, Baltimore Decreased adhesivity receptor-targeted nanoparticles for Fn14-positive tumors
US10188759B2 (en) 2015-01-07 2019-01-29 Endocyte, Inc. Conjugates for imaging
US9861710B1 (en) 2015-01-16 2018-01-09 Verily Life Sciences Llc Composite particles, methods, and in vivo diagnostic system
US10758520B1 (en) 2015-05-20 2020-09-01 University Of South Florida Glutathione-coated nanoparticles for delivery of MKT-077 across the blood-brain barrier
CN115554399A (zh) 2015-05-31 2023-01-03 源生公司 用于免疫疗法的组合组合物
US10221127B2 (en) 2015-06-29 2019-03-05 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids
CA2993823C (en) 2015-07-28 2024-01-02 Board Of Regents, The University Of Texas System Implant compositions for the unidirectional delivery of therapeutic compounds to the brain
HUE057613T2 (hu) 2015-09-17 2022-05-28 Modernatx Inc Vegyületek és készítmények terápiás szerek intracelluláris bejuttatására
WO2017053720A1 (en) * 2015-09-25 2017-03-30 Tarveda Therapeutics, Inc. RNAi CONJUGATES, PARTICLES AND FORMULATIONS THEREOF
ES2844586T3 (es) 2015-09-30 2021-07-22 Deutsches Krebsforsch Inhibidores del antígeno prostático específico de membrana (PSMA) etiquetados con 18F y su uso como agentes de obtención de imágenes para el cáncer de próstata
US20170128592A1 (en) * 2015-10-01 2017-05-11 Indian Institute Of Technology, Bombay Targeted polymeric nano-complexes as drug delivery system
SG11201803365RA (en) 2015-10-22 2018-05-30 Modernatx Inc Herpes simplex virus vaccine
AU2016342045A1 (en) 2015-10-22 2018-06-07 Modernatx, Inc. Human cytomegalovirus vaccine
US20180271970A1 (en) 2015-10-22 2018-09-27 Modernatx, Inc. Respiratory syncytial virus vaccine
PL3718565T3 (pl) 2015-10-22 2022-09-19 Modernatx, Inc. Szczepionki przeciwko wirusom układu oddechowego
PE20181529A1 (es) 2015-10-22 2018-09-26 Modernatx Inc Vacunas de acido nucleico para el virus varicela-zoster (vzv)
CN109310751A (zh) 2015-10-22 2019-02-05 摩登纳特斯有限公司 广谱流感病毒疫苗
ES2938557T3 (es) 2015-10-28 2023-04-12 Acuitas Therapeutics Inc Lípidos y formulaciones de nanopartículas lipídicas novedosos para la entrega de ácidos nucleicos
US20180271998A1 (en) 2015-12-04 2018-09-27 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Disulfide-stabilized fabs
HUE057877T2 (hu) 2015-12-22 2022-06-28 Modernatx Inc Vegyületek és készítmények terápiás szerek intracelluláris bejuttatására
EP3394093B1 (en) 2015-12-23 2022-01-26 Modernatx, Inc. Methods of using ox40 ligand encoding polynucleotides
CN108713021A (zh) 2015-12-30 2018-10-26 耶路撒冷希伯来大学伊森姆研究发展有限公司 Pt(IV)前药
CN106943596A (zh) 2016-01-07 2017-07-14 博笛生物科技（北京）有限公司 用于治疗肿瘤的抗-cd20组合
CN106943597A (zh) 2016-01-07 2017-07-14 博笛生物科技（北京）有限公司 用于治疗肿瘤的抗-egfr组合
CN115350279A (zh) 2016-01-07 2022-11-18 博笛生物科技有限公司 用于治疗肿瘤的抗-her2组合
WO2017120612A1 (en) 2016-01-10 2017-07-13 Modernatx, Inc. Therapeutic mrnas encoding anti ctla-4 antibodies
EP3416623B1 (en) 2016-02-15 2021-08-11 University of Georgia Research Foundation, Inc. Ipa-3-loaded liposomes and methods of use thereof
KR20180112060A (ko) 2016-02-23 2018-10-11 타베다 세라퓨틱스, 인코포레이티드 Hsp90 표적화된 접합체 및 이의 입자 및 제형
JP2019513756A (ja) 2016-04-08 2019-05-30 ザ クリーブランド クリニック ファウンデーションＴｈｅ Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ ＣｌｉｎｉｃＦｏｕｎｄａｔｉｏｎ 骨疾患を治療するための薬物送達用ナノ粒子
US10940112B2 (en) 2016-05-04 2021-03-09 L.E.A.F. Holdings Group Llc Targeted liposomal gemcitabine compositions and methods thereof
JP6757061B2 (ja) * 2016-05-09 2020-09-16 東京都公立大学法人 ドラッグデリバリー用脂質単層被覆型ナノ粒子
WO2018013924A1 (en) 2016-07-15 2018-01-18 Massachusetts Institute Of Technology Synthetic nanoparticles for delivery of immunomodulatory compounds
CN106176595B (zh) * 2016-08-31 2019-10-22 辰欣药业股份有限公司 一种更昔洛韦注射液及其制备工艺
US11583504B2 (en) 2016-11-08 2023-02-21 Modernatx, Inc. Stabilized formulations of lipid nanoparticles
TW202311284A (zh) 2017-01-03 2023-03-16 美商再生元醫藥公司 抗金黃色葡萄球菌溶血素ａ毒素之人類抗體
HRP20230063T1 (hr) 2017-03-15 2023-03-17 Modernatx, Inc. Spoj i pripravci za intracelularnu isporuku terapijskih sredstava
DK3596042T3 (da) 2017-03-15 2022-04-11 Modernatx Inc Krystalformer af aminolipider
WO2018170336A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticle formulation
EP3600371A4 (en) * 2017-03-21 2021-06-09 The Regents of The University of Michigan AGAINST ERG THERAPY
US10369230B2 (en) 2017-04-06 2019-08-06 National Guard Health Affairs Sustained release of a therapeutic agent from PLA-PEG-PLA nanoparticles for cancer therapy
CN108794467A (zh) 2017-04-27 2018-11-13 博笛生物科技有限公司 2-氨基-喹啉衍生物
IL301115A (en) 2017-04-28 2023-05-01 Acuitas Therapeutics Inc New lipid carbonyl and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids
CA3063723A1 (en) 2017-05-18 2018-11-22 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding tethered interleukin-12 (il12) polypeptides and uses thereof
WO2018213789A1 (en) 2017-05-18 2018-11-22 Modernatx, Inc. Modified messenger rna comprising functional rna elements
US20200268666A1 (en) 2017-06-14 2020-08-27 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding coagulation factor viii
WO2018232357A1 (en) 2017-06-15 2018-12-20 Modernatx, Inc. Rna formulations
EP3641730B1 (en) * 2017-06-22 2021-03-03 SNBioscience Inc. Particle and pharmaceutical composition comprising an insoluble camptothecin compound with double core-shell structure and method for manufacturing the same
CN110769827A (zh) 2017-06-23 2020-02-07 博笛生物科技有限公司 药物组合物
CA3069787A1 (en) 2017-07-17 2019-01-24 Medincell S.A. Pharmaceutical composition
JP7275111B2 (ja) 2017-08-31 2023-05-17 モデルナティエックス インコーポレイテッド 脂質ナノ粒子の生成方法
WO2019048631A1 (en) 2017-09-08 2019-03-14 Mina Therapeutics Limited SMALL HNF4A ACTIVATOR RNA COMPOSITIONS AND METHODS OF USE
US20200208152A1 (en) 2017-09-08 2020-07-02 Mina Therapeutics Limited Stabilized sarna compositions and methods of use
EP3470056B1 (en) 2017-10-16 2022-04-27 Medtronic Vascular Inc. Therapeutic nanoparticles for treating vascular diseases
US11939601B2 (en) 2017-11-22 2024-03-26 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding phenylalanine hydroxylase for the treatment of phenylketonuria
JP7424976B2 (ja) 2017-11-22 2024-01-30 モダーナティエックス・インコーポレイテッド プロピオン酸血症の治療用のプロピオニルＣｏＡカルボキシラーゼアルファ及びベータサブユニットをコードするポリヌクレオチド
MA50803A (fr) 2017-11-22 2020-09-30 Modernatx Inc Polynucléotides codant pour l'ornithine transcarbamylase pour le traitement de troubles du cycle de l'urée
US11802146B2 (en) 2018-01-05 2023-10-31 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding anti-chikungunya virus antibodies
EP3765007A4 (en) * 2018-03-15 2021-12-15 Atossa Therapeutics, Inc. IN SITU METHODS FOR INDUCING AN IMMUNE REACTION
WO2019183633A1 (en) 2018-03-23 2019-09-26 Case Western Reserve Univeristy Psma targeted conjugate compounds and uses thereof
BR112020016701A2 (pt) 2018-03-28 2020-12-15 Greenmark Biomedical Inc. Métodos para fabricar nanopartículas, para tratar dentes e para fabricar uma nanopartícula de biopolímero, nanopartículas, uso das nanopartículas, nanopartícula de amido reticulada com polifosfato, e, uso de uma nanopartícula de amido reticulada com polifosfato.
US20210023219A1 (en) * 2018-04-06 2021-01-28 North Carolina State University Cell assembly-mediated delivery of checkpoint inhibitors for cancer immunotherapy
US20210163928A1 (en) 2018-04-11 2021-06-03 Modernatx, Inc. Messenger rna comprising functional rna elements
US11566246B2 (en) 2018-04-12 2023-01-31 Mina Therapeutics Limited SIRT1-saRNA compositions and methods of use
AU2019257680A1 (en) * 2018-04-23 2020-12-03 Tesio Pharmaceuticals, Inc. Sustained release formulation for local delivery of CDK9 inhibitors
JP2021523151A (ja) 2018-05-11 2021-09-02 ホスホレックス、インコーポレイテッド 負の表面電荷を有するマイクロ粒子及びナノ粒子
US20210346306A1 (en) 2018-05-23 2021-11-11 Modernatx, Inc. Delivery of dna
US20220184185A1 (en) 2018-07-25 2022-06-16 Modernatx, Inc. Mrna based enzyme replacement therapy combined with a pharmacological chaperone for the treatment of lysosomal storage disorders
US20210317461A1 (en) 2018-08-09 2021-10-14 Verseau Therapeutics, Inc. Oligonucleotide compositions for targeting ccr2 and csf1r and uses thereof
EP3846776A1 (en) 2018-09-02 2021-07-14 ModernaTX, Inc. Polynucleotides encoding very long-chain acyl-coa dehydrogenase for the treatment of very long-chain acyl-coa dehydrogenase deficiency
US20220243182A1 (en) 2018-09-13 2022-08-04 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding branched-chain alpha-ketoacid dehydrogenase complex e1-alpha, e1-beta, and e2 subunits for the treatment of maple syrup urine disease
MA53609A (fr) 2018-09-13 2021-07-21 Modernatx Inc Polynucléotides codant la glucose-6-phosphatase pour le traitement de la glycogénose
CA3112398A1 (en) 2018-09-14 2020-03-19 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding uridine diphosphate glycosyltransferase 1 family, polypeptide a1 for the treatment of crigler-najjar syndrome
MA53734A (fr) 2018-09-27 2021-08-04 Modernatx Inc Polynucléotides codant pour l'arginase 1 pour le traitement d'une déficience en arginase
WO2020097409A2 (en) 2018-11-08 2020-05-14 Modernatx, Inc. Use of mrna encoding ox40l to treat cancer in human patients
KR102615834B1 (ko) * 2018-12-31 2023-12-21 생-고뱅 퍼포먼스 플라스틱스 코포레이션 분해성 담체를 수용하는 용기
KR20210138569A (ko) 2019-01-11 2021-11-19 아퀴타스 테라퓨틱스 인크. 활성제의 지질 나노입자 전달을 위한 지질
US20220096663A1 (en) * 2019-01-18 2022-03-31 Case Western Reserve University Psma ligand targeted compounds and uses thereof
WO2020208361A1 (en) 2019-04-12 2020-10-15 Mina Therapeutics Limited Sirt1-sarna compositions and methods of use
CN114375190A (zh) 2019-05-08 2022-04-19 阿斯利康(瑞典)有限公司 用于皮肤和伤口的组合物及其使用方法
WO2020251924A1 (en) 2019-06-12 2020-12-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Human antibodies to bone morphogenetic protein 6
WO2020263883A1 (en) 2019-06-24 2020-12-30 Modernatx, Inc. Endonuclease-resistant messenger rna and uses thereof
MA56517A (fr) 2019-06-24 2022-04-27 Modernatx Inc Arn messager comprenant des éléments d'arn fonctionnels et leurs utilisations
BR112022004759A2 (pt) 2019-09-19 2022-06-21 Modernatx Inc Composições e compostos lipídicos com cauda ramificada para entrega intracelular de agentes terapêuticos
CN114729376A (zh) 2019-09-23 2022-07-08 欧米茄治疗公司 用于调节肝细胞核因子4α(HNF4α)基因表达的组合物和方法
CA3147641A1 (en) 2019-09-23 2021-04-01 Omega Therapeutics, Inc. Compositions and methods for modulating apolipoprotein b (apob) gene expression
CA3163503A1 (en) * 2019-12-03 2021-06-10 Onselex Pharmaceuticals, Inc. Polyphosphazene drug carriers
WO2021183318A2 (en) * 2020-03-09 2021-09-16 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions relating to improved combination therapies
WO2021183720A1 (en) 2020-03-11 2021-09-16 Omega Therapeutics, Inc. Compositions and methods for modulating forkhead box p3 (foxp3) gene expression
WO2021247507A1 (en) 2020-06-01 2021-12-09 Modernatx, Inc. Phenylalanine hydroxylase variants and uses thereof
CN116133668A (zh) 2020-06-12 2023-05-16 罗切斯特大学 ACE-tRNA的编码和表达
IL299787A (en) 2020-07-16 2023-03-01 Acuitas Therapeutics Inc Cationic lipids for use in lipid nanoparticles
IL301906A (en) 2020-10-08 2023-06-01 Targimmune Therapeutics Ag Immunotherapy for cancer treatment
IL302625A (en) 2020-11-13 2023-07-01 Modernatx Inc Cystic fibrosis-encoding polynucleotides transmembrane conductance regulator for the treatment of cystic fibrosis
GB2603454A (en) 2020-12-09 2022-08-10 Ucl Business Ltd Novel therapeutics for the treatment of neurodegenerative disorders
WO2022150356A1 (en) * 2021-01-06 2022-07-14 Florida Atlantic University Board Of Trustees Cancer treatment regimen using anti-parasitic compounds and gut microbiome modulating agents
US20220242943A1 (en) 2021-01-25 2022-08-04 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Anti- pdgf-b antibodies and methods of use for treating pulmonary arterial hypertension (pah)
US11524023B2 (en) 2021-02-19 2022-12-13 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticle compositions and methods of formulating the same
US20240189449A1 (en) 2021-03-24 2024-06-13 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticles and polynucleotides encoding ornithine transcarbamylase for the treatment of ornithine transcarbamylase deficiency
WO2022204380A1 (en) 2021-03-24 2022-09-29 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticles containing polynucleotides encoding propionyl-coa carboxylase alpha and beta subunits and uses thereof
WO2022204371A1 (en) 2021-03-24 2022-09-29 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticles containing polynucleotides encoding glucose-6-phosphatase and uses thereof
WO2022204390A1 (en) 2021-03-24 2022-09-29 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticles containing polynucleotides encoding phenylalanine hydroxylase and uses thereof
WO2022204369A1 (en) 2021-03-24 2022-09-29 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding methylmalonyl-coa mutase for the treatment of methylmalonic acidemia
JP2024511092A (ja) 2021-03-26 2024-03-12 ミナ セラピューティクス リミテッド ＴＭＥＭ１７３ｓａＲＮＡ組成物及び使用方法
EP4337177A1 (en) 2021-05-11 2024-03-20 Modernatx, Inc. Non-viral delivery of dna for prolonged polypeptide expression in vivo
EP4355882A2 (en) 2021-06-15 2024-04-24 Modernatx, Inc. Engineered polynucleotides for cell-type or microenvironment-specific expression
WO2022271776A1 (en) 2021-06-22 2022-12-29 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding uridine diphosphate glycosyltransferase 1 family, polypeptide a1 for the treatment of crigler-najjar syndrome
EP4367242A2 (en) 2021-07-07 2024-05-15 Omega Therapeutics, Inc. Compositions and methods for modulating secreted frizzled receptor protein 1 (sfrp1) gene expression
WO2023056044A1 (en) 2021-10-01 2023-04-06 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding relaxin for the treatment of fibrosis and/or cardiovascular disease
WO2023059809A2 (en) * 2021-10-06 2023-04-13 The Regents Of The University Of California Methods and agents for prevention of viral proliferation
WO2023079142A2 (en) 2021-11-05 2023-05-11 Targimmune Therapeutics Ag Targeted linear conjugates comprising polyethyleneimine and polyethylene glycol and polyplexes comprising the same
WO2023086833A1 (en) 2021-11-09 2023-05-19 Case Western Reserve University Psma targeted conjugate compounds and uses thereof
WO2023099884A1 (en) 2021-12-01 2023-06-08 Mina Therapeutics Limited Pax6 sarna compositions and methods of use
GB202117758D0 (en) 2021-12-09 2022-01-26 Ucl Business Ltd Therapeutics for the treatment of neurodegenerative disorders
WO2023150753A1 (en) 2022-02-07 2023-08-10 University Of Rochester Optimized sequences for enhanced trna expression or/and nonsense mutation suppression
WO2023161350A1 (en) 2022-02-24 2023-08-31 Io Biotech Aps Nucleotide delivery of cancer therapy
WO2023170435A1 (en) 2022-03-07 2023-09-14 Mina Therapeutics Limited Il10 sarna compositions and methods of use
WO2023177904A1 (en) 2022-03-18 2023-09-21 Modernatx, Inc. Sterile filtration of lipid nanoparticles and filtration analysis thereof for biological applications
WO2023183909A2 (en) 2022-03-25 2023-09-28 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding fanconi anemia, complementation group proteins for the treatment of fanconi anemia
WO2023196399A1 (en) 2022-04-06 2023-10-12 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticles and polynucleotides encoding argininosuccinate lyase for the treatment of argininosuccinic aciduria
WO2023215498A2 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Modernatx, Inc. Compositions and methods for cd28 antagonism
WO2024026254A1 (en) 2022-07-26 2024-02-01 Modernatx, Inc. Engineered polynucleotides for temporal control of expression
WO2024044147A1 (en) 2022-08-23 2024-02-29 Modernatx, Inc. Methods for purification of ionizable lipids
WO2024097639A1 (en) 2022-10-31 2024-05-10 Modernatx, Inc. Hsa-binding antibodies and binding proteins and uses thereof
WO2024100040A1 (en) 2022-11-07 2024-05-16 Targimmune Therapeutics Ag Psma-targeting linear conjugates comprising polyethyleneimine and polyethylene glycol and polyplexes comprising the same
WO2024100044A1 (en) 2022-11-07 2024-05-16 Targimmune Therapeutics Ag Polyplexes of nucleic acids and targeted conjugates comprising polyethyleneimine and polyethylene glycol
WO2024100046A1 (en) 2022-11-07 2024-05-16 Targimmune Therapeutics Ag Targeted linear conjugates comprising polyethyleneimine and polyethylene glycol and polyplexes comprising the same
CN115844822B (zh) * 2022-11-23 2024-05-14 上海交通大学医学院附属第九人民医院 一种口服载药胶束组合物及其制备方法
WO2024118866A1 (en) 2022-12-01 2024-06-06 Modernatx, Inc. Gpc3-specific antibodies, binding domains, and related proteins and uses thereof

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6902743B1 (en) * 1995-05-22 2005-06-07 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Therapeutic treatment and prevention of infections with a bioactive material(s) encapuslated within a biodegradable-bio-compatable polymeric matrix
US20050136258A1 (en) * 2003-12-22 2005-06-23 Shuming Nie Bioconjugated nanostructures, methods of fabrication thereof, and methods of use thereof
US20050256071A1 (en) * 2003-07-15 2005-11-17 California Institute Of Technology Inhibitor nucleic acids
US20060002852A1 (en) * 2004-07-01 2006-01-05 Yale University Targeted and high density drug loaded polymeric materials
US20070041901A1 (en) * 2002-06-18 2007-02-22 Diener John L Stabilized aptamers to PSMA and their use as prostate cancer therapeutics
US20070053845A1 (en) * 2004-03-02 2007-03-08 Shiladitya Sengupta Nanocell drug delivery system

Family Cites Families (111)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2115904A (en) 1934-10-04 1938-05-03 Carborundum Co Curved abrasive fabric
US4946929A (en) 1983-03-22 1990-08-07 Massachusetts Institute Of Technology Bioerodible articles useful as implants and prostheses having predictable degradation rates
US4638045A (en) 1985-02-19 1987-01-20 Massachusetts Institute Of Technology Non-peptide polyamino acid bioerodible polymers
US4806621A (en) 1986-01-21 1989-02-21 Massachusetts Institute Of Technology Biocompatible, bioerodible, hydrophobic, implantable polyimino carbonate article
CA1340581C (en) 1986-11-20 1999-06-08 Joseph P. Vacanti Chimeric neomorphogenesis of organs by controlled cellular implantation using artificial matrices
US5736372A (en) 1986-11-20 1998-04-07 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable synthetic polymeric fibrous matrix containing chondrocyte for in vivo production of a cartilaginous structure
US5804178A (en) 1986-11-20 1998-09-08 Massachusetts Institute Of Technology Implantation of cell-matrix structure adjacent mesentery, omentum or peritoneum tissue
US5019379A (en) 1987-07-31 1991-05-28 Massachusetts Institute Of Technology Unsaturated polyanhydrides
US5010167A (en) 1989-03-31 1991-04-23 Massachusetts Institute Of Technology Poly(amide-and imide-co-anhydride) for biological application
US5399665A (en) 1992-11-05 1995-03-21 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable polymers for cell transplantation
US5512600A (en) 1993-01-15 1996-04-30 Massachusetts Institute Of Technology Preparation of bonded fiber structures for cell implantation
US5514378A (en) 1993-02-01 1996-05-07 Massachusetts Institute Of Technology Biocompatible polymer membranes and methods of preparation of three dimensional membrane structures
US6537579B1 (en) 1993-02-22 2003-03-25 American Bioscience, Inc. Compositions and methods for administration of pharmacologically active compounds
US6749868B1 (en) 1993-02-22 2004-06-15 American Bioscience, Inc. Protein stabilized pharmacologically active agents, methods for the preparation thereof and methods for the use thereof
US6753006B1 (en) 1993-02-22 2004-06-22 American Bioscience, Inc. Paclitaxel-containing formulations
US5439686A (en) 1993-02-22 1995-08-08 Vivorx Pharmaceuticals, Inc. Methods for in vivo delivery of substantially water insoluble pharmacologically active agents and compositions useful therefor
CN1245156C (zh) 1993-02-22 2006-03-15 美国生物科学有限公司 用于体内传送生物制品的方法及用于该方法的组合物
US5665382A (en) 1993-02-22 1997-09-09 Vivorx Pharmaceuticals, Inc. Methods for the preparation of pharmaceutically active agents for in vivo delivery
US6096331A (en) 1993-02-22 2000-08-01 Vivorx Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions useful for administration of chemotherapeutic agents
US5543158A (en) * 1993-07-23 1996-08-06 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable injectable nanoparticles
US5565215A (en) * 1993-07-23 1996-10-15 Massachusettes Institute Of Technology Biodegradable injectable particles for imaging
US6007845A (en) * 1994-07-22 1999-12-28 Massachusetts Institute Of Technology Nanoparticles and microparticles of non-linear hydrophilic-hydrophobic multiblock copolymers
US5716404A (en) 1994-12-16 1998-02-10 Massachusetts Institute Of Technology Breast tissue engineering
US6123727A (en) 1995-05-01 2000-09-26 Massachusetts Institute Of Technology Tissue engineered tendons and ligaments
US7422902B1 (en) * 1995-06-07 2008-09-09 The University Of British Columbia Lipid-nucleic acid particles prepared via a hydrophobic lipid-nucleic acid complex intermediate and use for gene transfer
US6095148A (en) 1995-11-03 2000-08-01 Children's Medical Center Corporation Neuronal stimulation using electrically conducting polymers
FR2742357B1 (fr) * 1995-12-19 1998-01-09 Rhone Poulenc Rorer Sa Nanoparticules stabilisees et filtrables dans des conditions steriles
US5902599A (en) 1996-02-20 1999-05-11 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable polymer networks for use in orthopedic and dental applications
US5898031A (en) 1996-06-06 1999-04-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligoribonucleotides for cleaving RNA
US6368598B1 (en) 1996-09-16 2002-04-09 Jcrt Radiation Oncology Support Services, Inc. Drug complex for treatment of metastatic prostate cancer
US7205437B2 (en) 1996-11-27 2007-04-17 University Of Tennessee Research Foundation Selective androgen receptor modulators
US7518013B2 (en) 2000-08-24 2009-04-14 University Of Tennessee Research Foundation Selective androgen receptor modulators
US6995284B2 (en) 2000-08-24 2006-02-07 The University Of Tennessee Research Foundation Synthesis of selective androgen receptor modulators
US7759520B2 (en) 1996-11-27 2010-07-20 University Of Tennessee Research Foundation Synthesis of selective androgen receptor modulators
US5837752A (en) 1997-07-17 1998-11-17 Massachusetts Institute Of Technology Semi-interpenetrating polymer networks
US6254890B1 (en) * 1997-12-12 2001-07-03 Massachusetts Institute Of Technology Sub-100nm biodegradable polymer spheres capable of transporting and releasing nucleic acids
US6686446B2 (en) 1998-03-19 2004-02-03 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for controlled polypeptide synthesis
US6632922B1 (en) 1998-03-19 2003-10-14 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for controlled polypeptide synthesis
US6506577B1 (en) 1998-03-19 2003-01-14 The Regents Of The University Of California Synthesis and crosslinking of catechol containing copolypeptides
US6395718B1 (en) * 1998-07-06 2002-05-28 Guilford Pharmaceuticals Inc. Pharmaceutical compositions and methods of inhibiting angiogenesis using naaladase inhibitors
US6265609B1 (en) * 1998-07-06 2001-07-24 Guilford Pharmaceuticals Inc. Thio-substituted pentanedioic acid derivatives
DE19956568A1 (de) 1999-01-30 2000-08-17 Roland Kreutzer Verfahren und Medikament zur Hemmung der Expression eines vorgegebenen Gens
EP1177200B1 (en) * 1999-04-28 2005-06-22 Georgetown University Ligands for metabotropic glutamate receptors
US6528499B1 (en) * 2000-04-27 2003-03-04 Georgetown University Ligands for metabotropic glutamate receptors and inhibitors of NAALADase
CA2321321A1 (en) * 1999-09-30 2001-03-30 Isotis B.V. Polymers loaded with bioactive agents
US6136846A (en) 1999-10-25 2000-10-24 Supergen, Inc. Formulation for paclitaxel
AU2001251137A1 (en) * 2000-04-03 2001-10-15 Gesellschaft Fuer Biotechnologische Forschung Gmbh Methods and products for regulating cell motility
US7217770B2 (en) * 2000-05-17 2007-05-15 Samyang Corporation Stable polymeric micelle-type drug composition and method for the preparation thereof
US20040260108A1 (en) 2001-06-25 2004-12-23 Dalton James T. Metabolites of selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
US20020173495A1 (en) 2000-08-24 2002-11-21 Dalton James T. Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
US6998500B2 (en) 2000-08-24 2006-02-14 University Of Tennessee Research Foundation Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
PT1491524E (pt) 2000-08-24 2009-04-16 Univ Tennessee Res Foundation Moduladores selectivos do receptor androgénico e processos para a sua utilização
US20030232792A1 (en) 2000-08-24 2003-12-18 Dalton James T. Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
IL154425A0 (en) 2000-08-24 2003-09-17 Univ Tennessee Res H Corp Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
US6838484B2 (en) 2000-08-24 2005-01-04 University Of Tennessee Research Foundation Formulations comprising selective androgen receptor modulators
US7026500B2 (en) 2000-08-24 2006-04-11 University Of Tennessee Research Foundation Halogenated selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
KR100418916B1 (ko) 2000-11-28 2004-02-14 한국과학기술원 생분해성 고분자와 항암제의 접합체를 이용한 서방형미셀제제의 제조방법
MXPA03004836A (es) 2000-12-01 2005-09-08 Max Planck Gesellschaft Moleculas pequenas de arn que median la interferencia de arn.
US6623761B2 (en) * 2000-12-22 2003-09-23 Hassan Emadeldin M. Method of making nanoparticles of substantially water insoluble materials
JP2005507857A (ja) * 2001-02-07 2005-03-24 ベズ イズレイル ディーコネス メディカル センター 改変ｐｓｍａリガンド及びそれに関する利用
US20030022868A1 (en) 2001-06-25 2003-01-30 Dalton James T. Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
US7863014B2 (en) 2001-07-02 2011-01-04 Oriental Yeast Co., Ltd. Process for preparing nicotinamide adenine dinucleotide phosphate(NADP)
US20060004042A1 (en) 2001-08-23 2006-01-05 Dalton James T Formulations comprising selective androgen receptor modulators
US6818732B2 (en) 2001-08-30 2004-11-16 The Regents Of The University Of California Transition metal initiators for controlled poly (beta-peptide) synthesis from beta-lactam monomers
EP1450766B1 (fr) * 2001-10-10 2015-04-22 Pierre Fabre Medicament Microspheres biodegradables a liberation prolongee et leur procede de preparation
AU2002348660B2 (en) * 2001-10-18 2006-01-12 Samyang Holdings Corporation Polymeric micelle composition with improved stability
WO2003057670A2 (en) 2001-12-28 2003-07-17 Guilford Pharmaceuticals Inc. Indoles as naaladase inhibitors
WO2003060523A1 (en) * 2002-01-10 2003-07-24 Johns Hopkins University Imaging agents and methods of imaging naaladase of psma
AU2003207708A1 (en) 2002-02-20 2003-09-09 Sirna Therapeutics, Inc. Rna interference mediated inhibition of map kinase genes
US20030232013A1 (en) 2002-02-22 2003-12-18 Gary Sieckman Therapeutic and diagnostic targeting of cancers cells with tumor homing peptides
WO2003074471A1 (en) 2002-02-28 2003-09-12 University Of Tennessee Research Foundation Haloacetamide and azide substituted compounds and methods of use thereof
US7803970B2 (en) 2002-02-28 2010-09-28 University Of Tennessee Research Foundation Multi-substitued selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
EP1487458B1 (en) 2002-02-28 2011-11-16 University Of Tennessee Research Foundation Multi-substituted selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
AU2003217304A1 (en) 2002-02-28 2003-09-16 The University Of Tennessee Research Corporation Radiolabeled selective androgen receptor modulators and their use in prostate cancer imaging and therapy
WO2003086369A2 (en) * 2002-04-05 2003-10-23 Valorisation-Recherche, Societe En Commandite Stealthy polymeric biodegradable nanospheres and uses thereof
JP2003342168A (ja) * 2002-05-24 2003-12-03 Nano Career Kk 注射用薬物含有ポリマーミセル製剤の製造方法
US7741371B2 (en) 2002-06-17 2010-06-22 University Of Tennessee Research Foundation Selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
US7022870B2 (en) 2002-06-17 2006-04-04 University Of Tennessee Research Foundation N-bridged selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
JP2006506369A (ja) 2002-10-15 2006-02-23 ユニバーシティ・オブ・テネシー・リサーチ・ファウンデーション メチレン架橋選択的アンドロゲン受容体調節剤及びその使用方法
US20040087810A1 (en) 2002-10-23 2004-05-06 Dalton James T. Irreversible selective androgen receptor modulators and methods of use thereof
PT1592658E (pt) 2003-01-13 2013-06-25 Univ Tennessee Res Foundation Síntese em larga escala de modulador selectivo de receptor de androgénio
US20040167103A1 (en) 2003-02-24 2004-08-26 Dalton James T. Haloacetamide and azide substituted compounds and methods of use thereof
US6841547B2 (en) * 2003-02-28 2005-01-11 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshevia University Method for decreasing low density lipoprotein
US7727969B2 (en) 2003-06-06 2010-06-01 Massachusetts Institute Of Technology Controlled release nanoparticle having bound oligonucleotide for targeted delivery
US7362068B2 (en) 2003-07-23 2008-04-22 Asmo Co., Ltd. Closing member control system
WO2005040247A1 (en) * 2003-10-24 2005-05-06 Samyang Corporation Polymeric composition for drug delivery
EP1768998A2 (en) 2004-04-27 2007-04-04 Alnylam Pharmaceuticals Inc. Single-stranded and double-stranded oligonucleotides comprising a 2-arylpropyl moiety
US20080124400A1 (en) * 2004-06-24 2008-05-29 Angiotech International Ag Microparticles With High Loadings Of A Bioactive Agent
US20060258628A1 (en) 2004-07-20 2006-11-16 Steiner Mitchell S Compositions comprising 5-alpha reductase inhibitors, and SARMs and methods of use thereof
US7361752B2 (en) 2004-12-14 2008-04-22 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. RNAi modulation of MLL-AF4 and uses thereof
WO2006093991A1 (en) 2005-03-02 2006-09-08 The Cleveland Clinic Foundation Compounds which bind psma and uses thereof
KR20080031379A (ko) * 2005-07-11 2008-04-08 와이어쓰 글루타메이트 아그레카나제 저해제
CA2623293A1 (en) 2005-09-20 2007-03-29 Shimon Benita Nanoparticles for targeted delivery of active agents
CA2648099C (en) 2006-03-31 2012-05-29 The Brigham And Women's Hospital, Inc System for targeted delivery of therapeutic agents
EP2019691B1 (en) * 2006-05-15 2020-08-12 Massachusetts Institute of Technology Polymers for functional particles
US20100144845A1 (en) 2006-08-04 2010-06-10 Massachusetts Institute Of Technology Oligonucleotide systems for targeted intracellular delivery
US20080057103A1 (en) * 2006-08-21 2008-03-06 Wouter Roorda Methods of using medical devices for controlled drug release
DK2097111T3 (en) * 2006-11-08 2015-08-24 Molecular Insight Pharm Inc Heterodimers of glutamic acid
WO2008124634A1 (en) 2007-04-04 2008-10-16 Massachusetts Institute Of Technology Polymer-encapsulated reverse micelles
US20090074828A1 (en) * 2007-04-04 2009-03-19 Massachusetts Institute Of Technology Poly(amino acid) targeting moieties
PT2644594T (pt) 2007-09-28 2017-11-20 Pfizer Direcionamento a células cancerosas utilizando nanopartículas
WO2009070302A1 (en) 2007-11-30 2009-06-04 The Johns Hopkins University Prostate specific membrane antigen (psma) targeted nanoparticles for therapy of prostate cancer
EP2106806A1 (en) 2008-03-31 2009-10-07 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der Angewandten Forschung e.V. Nanoparticles for targeted delivery of active agents to the lung
WO2010005721A2 (en) 2008-06-16 2010-01-14 Bind Biosciences, Inc. Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same
EP2309991B1 (en) 2008-06-16 2019-03-06 Pfizer Inc Therapeutic polymeric nanoparticles comprising vinca alkaloids and methods of making and using same
WO2010005726A2 (en) 2008-06-16 2010-01-14 Bind Biosciences Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles with mtor inhibitors and methods of making and using same
WO2010068866A2 (en) 2008-12-12 2010-06-17 Bind Biosciences Therapeutic particles suitable for parenteral administration and methods of making and using same
ES2776126T3 (es) * 2008-12-15 2020-07-29 Pfizer Nanopartículas de circulación prolongada para la liberación sostenida de agentes terapéuticos
WO2010114768A1 (en) 2009-03-30 2010-10-07 Cerulean Pharma Inc. Polymer-epothilone conjugates, particles, compositions, and related methods of use
WO2010114770A1 (en) 2009-03-30 2010-10-07 Cerulean Pharma Inc. Polymer-agent conjugates, particles, compositions, and related methods of use
CN102811743B (zh) 2009-12-11 2015-11-25 佰恩德治疗股份有限公司 冻干治疗颗粒的稳定制剂

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6902743B1 (en) * 1995-05-22 2005-06-07 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Therapeutic treatment and prevention of infections with a bioactive material(s) encapuslated within a biodegradable-bio-compatable polymeric matrix
US20070041901A1 (en) * 2002-06-18 2007-02-22 Diener John L Stabilized aptamers to PSMA and their use as prostate cancer therapeutics
US20050256071A1 (en) * 2003-07-15 2005-11-17 California Institute Of Technology Inhibitor nucleic acids
US20050136258A1 (en) * 2003-12-22 2005-06-23 Shuming Nie Bioconjugated nanostructures, methods of fabrication thereof, and methods of use thereof
US20070053845A1 (en) * 2004-03-02 2007-03-08 Shiladitya Sengupta Nanocell drug delivery system
US20060002852A1 (en) * 2004-07-01 2006-01-05 Yale University Targeted and high density drug loaded polymeric materials
US20060002971A1 (en) * 2004-07-01 2006-01-05 Yale University Methods of treatment with drug loaded polymeric materials

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FOSS et al. "Radiolabeled Small-Molecule Ligands for Prostate-Specific Membrane Antigen: In Vivo Imaging in Experimental Models of Prostate Cancer". Clinical Cancer Research, v. 11, No. 11, pages 4022-4028, june 2005 esp Abstract and pages 4022 and 4026 *
ZHOU et al. "NAAG Peptidase Inhibitors and Their Potential for Diagnosis and Therapy", Nature Reviews Drug Discovery. December 2005, v. 4, pages 1015-1026, esp page 1020 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2669937C1 (ru) * 2017-10-17 2018-10-17 федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Казанский (Приволжский) федеральный университет" (ФГАОУ ВО КФУ) Фармацевтическая противоопухолевая композиция паклитаксела с гистоном Н1.3 в качестве носителя и способ получения композиции
WO2020046163A1 (ru) * 2018-08-28 2020-03-05 Общество С Ограниченной Ответственностью "Нпк Альфа-Онкотехнологии" Препарат для лечения онкологических заболеваний

Also Published As

Publication number Publication date
PT2136788E (pt) 2012-02-03
HUE035101T2 (hu) 2018-05-02
PT2644192T (pt) 2017-07-12
JP2016084354A (ja) 2016-05-19
US20130251816A1 (en) 2013-09-26
SI2644192T1 (sl) 2017-08-31
US20110224288A1 (en) 2011-09-15
ES2632052T3 (es) 2017-09-08
US8273363B2 (en) 2012-09-25
JP5410434B2 (ja) 2014-02-05
EP2136788A4 (en) 2010-06-09
JP2010540535A (ja) 2010-12-24
CA2702305A1 (en) 2008-10-09
DK2644192T3 (en) 2017-06-26
ES2647538T3 (es) 2017-12-22
US8236330B2 (en) 2012-08-07
US20130172406A1 (en) 2013-07-04
ATE530169T1 (de) 2011-11-15
JP2014051520A (ja) 2014-03-20
SI2644594T1 (sl) 2017-10-30
EP2436376B1 (en) 2014-07-09
PL2644594T3 (pl) 2018-01-31
EP2436376A1 (en) 2012-04-04
PT2644594T (pt) 2017-11-20
US20120004293A1 (en) 2012-01-05
EP2644594B1 (en) 2017-08-23
EP2136788B1 (en) 2011-10-26
US20140235706A1 (en) 2014-08-21
ES2376175T3 (es) 2012-03-09
US20160367481A1 (en) 2016-12-22
WO2008121949A1 (en) 2008-10-09
EP2644192B1 (en) 2017-05-10
EP2644192A1 (en) 2013-10-02
US20130251766A1 (en) 2013-09-26
US8603500B2 (en) 2013-12-10
EP2136788A1 (en) 2009-12-30
EA201070409A1 (ru) 2010-10-29
PL2644192T3 (pl) 2017-09-29
US8246968B2 (en) 2012-08-21
US20090061010A1 (en) 2009-03-05
US8603501B2 (en) 2013-12-10
US20130251817A1 (en) 2013-09-26
EP2644594A1 (en) 2013-10-02
ES2510396T3 (es) 2014-10-21
US8603499B2 (en) 2013-12-10
DK2644594T3 (en) 2017-10-02
HUE034775T2 (hu) 2018-02-28
CA2891005A1 (en) 2008-10-09
CA2702305C (en) 2015-07-21
US10071056B2 (en) 2018-09-11
US9295727B2 (en) 2016-03-29
JP5873855B2 (ja) 2016-03-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA023175B1 (ru) Таргетирование раковых клеток с использованием наночастиц
ES2462090T3 (es) Nanopartículas poliméricas cargadas de fármaco y métodos para preparar y usar las mismas
US20160354320A1 (en) Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same
US20180256584A1 (en) Pemetrexed Polymeric Nanoparticles And Methods Of Making And Using Same

Legal Events

Date Code Title Description
PC4A Registration of transfer of a eurasian patent by assignment
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU