EA019534B1 - ПРОИЗВОДНЫЕ 3-(3-ПИРИМИДИН-2-ИЛБЕНЗИЛ)-1,2,4-ТРИАЗОЛО[4,3-b]ПИРИДАЗИНА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ Met КИНАЗЫ - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к соединениям формулы (I), где значения R, R, R, R, Rопределены далее, которые являются ингибиторами тирозинкиназ, в особенности Met киназы, и могут быть применены, в частности, для лечения новообразований.

Description

Задача изобретения состояла в том, чтобы найти новые соединения, имеющие ценные свойства, в особенности те, которые могут быть применены для получения лекарственных средств.

Настоящее изобретение относится к соединениям и применению соединений, в которых играет роль ингибирование, регулирование и/или модуляция сигнальной трансдукции киназ, в частности тирозинкиназ и/или серин/треонинкиназ, кроме того к фармацевтическим композициям, которые содержат эти соединения, и к применению соединений для лечения заболеваний, вызванных киназой. В особенности, настоящее изобретение относится к соединениям и к применению соединений, в которых играет роль ингибирование, регулирование и/или модуляция Ме! киназой.

Одним из принципиальных механизмов, с помощью которого осуществляется клеточная регуляция, является трансдукция внеклеточных сигналов сквозь мембрану, которые по очереди модулируют биохимические пути обмена в пределах клетки. Фосфорилирование белка представляет одно направление, которым внутриклеточные сигналы распространяются от молекулы к молекуле, окончательно приводя к клеточной реакции. Эти каскады сигнальной трансдукции являются высокорегулируемыми и часто совпадают, что является очевидным из существования множества протеинкиназ, также как и фосфатаз. Фосфорилирование белков осуществляется преимущественно возле остатков серина, треонина или тирозина, и протеинкиназы поэтому были классифицированы по их специфике места фосфорилирования, т.е. серин/треонинкиназы и тирозинкиназы. Поскольку фосфорилирование является таким распространенным процессом в пределах клеток и поскольку клеточные фенотипы находятся в значительной степени под влиянием активности этих путей обмена, в настоящее время считается, что множество болезненных состояний и/или болезней приписываются или к аберрантной активации, или к функциональным мутациям в молекулярных компонентах каскадов киназы. Следовательно, значительное внимание было уделено характеристике этих белков и соединений, которые могут модулировать их активность (см. обзор в ХУешЧет-Оррепйенпег е! а1., Рйатта. & Тйетар., 2000, 88, 229-279).

Роль рецептора тирозинкиназы Ме! в онкогенезе человека и возможности ингибирования НОР (фактор роста гепатоцитов) зависимой Ме! активации описана в 8. Вет!йои е! а1., Опсодепе, νοί. 23, Νο. 31, с. 5387-5393 (2004). Там же описан ингибитор 8И11274 - пирролиндольное соединение, которое является потенциально подходящим для борьбы с раком. Другой ингибитор Ме! киназы для раковой терапии описан в ТО. Сйп8!еп8еп е! а1., Сапсег Вее., 2003, 63(21), 7345-55.

Дополнительный ингибитор тирозинкиназы для борьбы с раком описан в Н. Ηον е! а1., С11шса1 Сапсег Вевеатсй, νοί. 10, 6686-6694 (2004). Соединение РНА-665752 - производное индола направлено против рецептора НОР с-Ме!. Кроме того, там же описано, что НОР и Ме! производят значительный вклад в злокачественный процесс различных форм рака, таких как, например, множественная миелома.

Исходя из этого, является желательным синтез небольших соединений, которые специфически ингибируют, регулируют и/или модулируют сигнальную трансдукцию тирозинкиназ и/или серин/треонинкиназ, в особенности Ме! киназу, что является целью настоящего изобретения.

Было найдено, что соединения соответственно изобретению и их соли имеют очень ценные фармакологические свойства, будучи высоко толерантными.

Настоящее изобретение особенно относится к соединениям формулы I, которые ингибируют, регулируют и/или модулируют сигнальную трансдукцию Ме! киназой, к композициям, которые содержат эти соединения, и к способам применения их для лечения заболеваний, вызванных Ме! киназой, таких как ангиогенез, рак, образование, рост и распространение опухоли, атеросклероз, глазные заболевания, такие как дегенерация желтого пятна, вызванная возрастом, хороидальная неоваскуляризация и диабетическая ретинопатия, воспалительные заболевания, артрит, тромбоз, фиброз, гломерулонефрит, нейродегенерация, псориаз, рестеноз, заживление ран, отторжение трансплантата, метаболические заболевания и заболевания иммунной системы, аутоиммунные заболевания, цирроз, диабет и заболевания кровеносных сосудов, такие как нестабильность и проницаемость, и т.п. у млекопитающих.

Солидные опухоли, в особенности быстрорастущие опухоли, могут лечиться ингибиторами Ме! киназы. Эти солидные опухоли включают моноцитарную лейкемию, карциному мозга, урогенитальную, лимфатической системы, желудка, ларингеальную и легкого, включая аденокарциному легкого и мелкоклеточную карциному легкого.

Настоящее изобретение направлено на процессы для регулирования, модуляции или ингибирования Ме! киназы для предупреждения и/или лечения заболеваний, связанных с нерегулируемой или нарушенной активностью Ме! киназы. В особенности соединения формулы I также могут быть использованы для лечения определенных форм рака. Соединения формулы I могут, кроме того, быть использованы для обеспечения аддитивного или синергетического эффектов в определенных существующих схемах химиотерапии рака и/или могут быть использованы для восстановления эффективности определенных существующих схем химиотерапии и радиотерапии рака.

Соединения формулы I могут, кроме того, быть использованы для выделения и исследования активности или экспрессии Ме! киназы. В дополнение, они являются особенно подходящими для применения в способах диагностики болезней, связанных с нерегулируемой или нарушенной активностью Ме! киназы.

- 1 019534

Может быть показано, что соединения соответственно изобретению имеют антипролиферативное действие ίη νίνο в ксенотрансплантатной модели опухоли. Соединения соответственно изобретению вводятся пациенту, имеющему гиперпролиферативную болезнь, например, чтобы ингибировать рост опухоли, чтобы уменьшить воспаление, связанное с лимфопролиферативной болезнью, ингибировать отторжение трансплантата или неврологическое повреждение из-за восстановления тканей и т.д. Настоящие соединения являются подходящими для профилактических или терапевтических целей. Как использовано здесь, термин лечение подразумевает и предупреждение заболевания, и лечение уже имеющихся заболеваний. Предупреждение пролиферации добиваются введением соединений соответственно изобретению, предшествуя развитию явных болезней, например, чтобы предупредить рост опухолей, предупредить рост метастаза, уменьшить рестеноз, связанный с сердечно-сосудистой хирургией, и т.д. Альтернативно, соединения применяются для лечения текущих заболеваний стабилизацией или улучшением клинических симптомов пациента.

Носитель или пациент может принадлежать к любому виду млекопитающих, например виду приматов, особенно человека; грызунов, включая мышей, крыс или хомяков; кроликов; лошадей, коров, собак, котов и т.д. Животные модели интересны для экспериментальных исследований, обеспечивая модель для лечения болезни человека.

Склонность особой клетки к лечению соединениями соответственно изобретению может быть определена тестами ίη νίΐτο. Обычно культура клетки комбинируется с соединением соответственно изобретению при различных концентрациях в течение периода времени, который является достаточным, чтобы позволить активным компонентам индуцировать клеточную смерть или ингибировать миграцию, как правило, между около одного часа и одной недели. Ιη νίΐτο тестирование может быть проведено, используя выращенные клетки из образца биопсии. Жизнеспособные клетки, оставшиеся после лечения, потом подсчитывают.

Доза меняется в зависимости от особенности используемого соединения, особенности болезни, состояния пациента и т.д. Терапевтическая доза обычно достаточно существенна, чтобы уменьшить нежелательную клеточную популяцию в ткани мишени, пока поддерживается жизнеспособность пациента. Лечение главным образом продолжается до тех пор, пока происходит существенное уменьшение, например по меньшей мере около 50% уменьшение клеточной нагрузки, и может быть продолжено до тех пор, пока, по существу, нежелательных клеток больше не обнаружено в теле.

Для определения пути обмена сигнальной трансдукции и для обнаружения взаимодействия между различными путями обмена сигнальной трансдукции различные ученые развивали подходящие модели или модельные системы, например модели клеточной культуры (например, К11\\ща с1 а1., ЕМВО, 1997, 16, 2783-93) и модели трансгенных животных (например, ^Ы1е е1 а1., Опсодепе, 2001, 20, 7064-7072). Для определения некоторых этапов в каскаде сигнальной трансдукции могут быть применены взаимодействующие соединения для того, чтобы смодулировать сигнал (например, 81ерйеп5 е1 а1., Вюсйет1са1 1., 2000, 351, 95-105). Соединения соответственно изобретению также могут быть применены как реагенты для тестирования зависимых от киназ путей обмена сигнальной трансдукции у животных и/или в моделях клеточных культур или при клинических болезнях, упомянутых в этом изобретении.

Измерение активности киназы является методикой, которая хорошо известна специалисту в данной области техники. Генерические тестовые системы для определения активности киназы, использующие субстраты, например гистон (например, А1е551 е1 а1., ЕЕВ8 Ье11., 1996, 399, 3, с. 333-338) или основной миелиновый белок, описаны в литературе (например, Сатро5-Сопха1е/. К. и С1еппеу, 1т., 1.К. 1992, 1. Вю1. Сйет., 267, с. 14535).

Для идентификации ингибиторов киназы допустимы различные системы анализа. В сцинтилляционном анализе сближения (8огд е1 а1., 1. о£ Вюто1еси1ат 8стеешпд, 2002, 7, 11-19) и Е1а5Йр1а1е анализе измеряется радиоактивное фосфорилирование белка или пептида в качестве субстрата γΑΤΦ. В присутствии соединения-ингибитора определяется уменьшение радиоактивного сигнала или его отсутствие. Кроме того, методики резонансного переноса энергии флуоресценции с однородным временным разрешением (НТК-ЕКЕТ) и флуоресцентной поляризации (ЕР) являются подходящими в качестве способов анализа (81115 е1 а1., 1. о£ Вюто1еси1ат 8стеешпд, 2002, 191-214).

Другие нерадиоактивные способы твердофазного иммуноферментного анализа используют специфические фосфоантитела (рйокрйо АВ5). Фосфоантитела связывают только фосфорилированный субстрат. Это связывание может быть определено хемилюминесценцией, в котором используется вторичное конъюгированное с пероксидазой антиовечье антитело (Ко55 е1 а1., 2002, Вюсйет. 1.).

Много болезней связано с регулированием клеточной пролиферации и клеточной смертью (апоптоз). Рассматриваемые состояния включают, но не ограничиваются, следующими. Соединения соответственно изобретению являются подходящими для лечения различных состояний, при которых пролиферация и/или миграция гладкомышечных клеток и/или воспалительных клеток в пределах интимального слоя сосуда приводит к ограничению потока крови через этот сосуд, например, в случае неоинтимальных окклюзионных поражений. Рассматриваемые сосудистые заболевания окклюзионного графта включают атеросклероз, коронарную сосудистую болезнь после пересадки, стеноз венозного трансплантата, перианастомозный протезный рестеноз, рестеноз после ангиопластики или помещения стента и т.п.

- 2 019534

Уровень техники

Другие производные триазолопиридазина описаны в качестве ингибиторов МЕТ киназы в ШО 2007/064797, ШО 2007/075567, ШО 2007/138472, ШО 2008/008539, ШО 2008/051805.

Краткое описание изобретения

Изобретение относится к соединениям формулы I к²

в которой К¹ означает тиазолил, тиофенил, фуранил, пирролил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, пиразолил, имидазолил, тиадиазолил, пиридазинил, пиразинил, пиридинил или пиримидинил, где эти радикалы могут также быть моно-, ди- или тризамещенными На1, [С(К⁵)2]_пОК⁵ и/или А, или означает фенил, который является моно-, ди- или тризамещенным На1 и/или СК, или означает А;

К² означает О[С(К⁵)2]пОК⁵, Не!, -[С(К⁵)2]пНе! или О[С(К⁵)₂]пНе!;

К³, К³, каждый независимо друг от друга, означают Н, Г или А, вместе также означают алкилен, имеющий 2-5 атомов С;

К⁴ означает Н;

К⁵ означает Н или А;

А означает неразветвленный или разветвленный алкил, имеющий 1-6 атомов С;

Аг означает фенил, который является моно-, ди- или тризамещенным На1 и/или СК;

Не! означает пиперидинил, пирролидинил, морфолинил, пиперазинил, оксазолидинил, пиразолил, пиридинил, пиримидинил, фурил, тиенил, оксазолил, оксадиазолил, имидазолил, пирролил, изоксазолил или имидазолидинил, где эти радикалы могут также быть моно- или дизамещенными А, [С(К⁵)₂]_пОК⁵ и/или [С(К⁵)2]пНе!¹;

Не!¹ означает пиперидинил, пирролидинил, морфолинил, пиперазинил, оксазолидинил или имидазолидинил, где эти радикалы могут также быть моно- или дизамещенными =О и/или А;

На1 означает Г, С1, Вг или I;

п означает 1, 2, 3 или 4;

и к их фармацевтически приемлемым солям.

Соединения формулы I также могут существовать в виде гидратов и сольватов, а также в виде фармацевтически приемлемых производных.

Соединения формулы I могут существовать в оптически активных формах, таких как стереоизомеры, энантиомеры, рацематы, диастереомеры, а также в виде гидратов и сольватов таких соединений и их фармацевтически приемлемых производных. Сольваты соединений подразумевают аддукты инертных молекул растворителя с соединениями, которые формируются под действием их взаимной силы притяжения. Сольватами являются, например, моно- или дигидраты или алкоголяты.

Фармацевтически приемлемые производные подразумевают, например, соли соединений соответственно изобретению, а также так называемые пролекарственные соединения.

Пролекарственные производные подразумевают соединения, которые могут быть модифицированы при помощи, например, алкильных или ацильных групп, сахаров или олигопептидов и которые являются быстро расщепляемыми в организме, чтобы образовывать эффективные соединения.

Они также включают биодеструктирующиеся полимерные производные соединений, как описано, например, в Ы. I. Рйагш., 115, 61-67 (1995).

Выражение эффективное количество означает количество лекарственного средства или фармацевтического активного компонента, которое вызывает в ткани, системе, животном или человеке биологическую или медицинскую реакцию, которая является искомой или желательной, например, исследователю или медику.

В дополнение, выражение терапевтически эффективное количество означает количество, которое сравнимо с соответствующим субъектом, который не получая это количество имеет следующий результат - улучшенное лечение, исцеление, предотвращение или устранение болезни, синдрома, состояния, недуга, расстройства или побочных эффектов или сокращения прогресса болезни, недуга или расстройства.

Термин терапевтически эффективное количество также охватывает количества, которые являются эффективными для возрастания нормальной физиологической функции.

Соединения формулы I могут существовать в виде смесей двух диастереоизомеров, например, в соотношении 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:10, 1:100 или 1:1000. Они являются особенно предпочтительными смесями стереизомерных соединений.

- 3 019534

Изобретение также относится к способу получения соединений формулы I и их фармацевтически приемлемых солей, которые характеризуются тем, что соединение формулы II

Б означает радикал бороновой кислоты или эфира бороновой кислоты, реагирует с соединением формулы III

в которой К² имеет значения, указанные выше, и при необходимости радикал К² превращают в другой радикал К² путем замещения атома галогена амино-, алкокси- или арильным радикалом и/или основание или кислоту формулы I превращают в одну из их солей.

Выше и ниже радикалы К¹, К², К³, К³ и К⁴ имеют значения, указанные для формулы I, если специально не указано иначе.

А означает алкил, неразветвленный (линейный) или разветвленный, имеющий 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомов С. Предпочтительно А означает метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил или трет-бутил, пентил, 1-, 2-или 3-метилбутил, 1,1-, 1,2- или 2,2-диметилпропил, 1-этилпропил, гексил, 1-, 2-, 3- или 4-метилпентил, 1,1-, 1,2-, 1,3-, 2,2-, 2,3- или 3,3-диметилбутил, 1- или 2-этилбутил, 1-этил-1метилпропил, 1-этил-2-метилпропил, 1,1,2- или 1,2,2-триметилпропил, также предпочтительно, например, трифторметил. Особенно предпочтительно А означает метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, гексил, трифторметил, пентафторэтил или 1,1,1-трифторэтил.

Аг предпочтительно означает 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- или 3,5-дифторфенил, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4или 3,5-дихлорфенил, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- или 3,5-дибромфенил, 2,3,4-, 2,3,5-, 2,3,6-, 2,4,6- или 3,4,5трихлорфенил, п-йодфенил, 4-фтор-3-хлорфенил, 2-фтор-4-бромфенил или 2,5-дифтор-4-бромфенил.

Независимо от дополнительных заместителей Не! означает, например, 2- или 3-фурил, 2- или 3тиенил, 1-, 2- или 3-пирролил, 1-, 2, 4- или 5-имидазолил, 1-, 3-, 4- или 5-пиразолил, 2-, 4- или 5оксазолил, 3-, 4- или 5-изоксазолил, 2-, 3- или 4-пиридил, 2-, 4-, 5- или 6-пиримидинил, предпочтительно

1.2.3- оксадиазол-4- или -5-ил, 1,2,4-оксадиазол-3- или -5-ил.

Г етероциклические радикалы могут также быть частично или полностью гидрогенизированы.

Независимо от дополнительных заместителей Не!, таким образом, может также означать, например

2.3- дигидро-2-, -3-, -4- или -5-фурил, 2,5-дигидро-2-, -3-, -4- или 5-фурил, тетрагидро-2- или -3-фурил, тетрагидро-2- или -3-тиенил, 2,3-дигидро-1-, -2-, -3-, -4- или -5-пирролил, 2,5-дигидро-1-, -2-, -3-, -4- или -5-пирролил, 1-, 2- или 3-пирролидинил, тетрагидро-1-, -2- или -4-имидазолил, 2,3-дигидро-1-, -2-, -3-, -4или -5-пиразолил, тетрагидро-1-, -3- или -4-пиразолил, 1,4-дигидро-1-, -2-, -3- или -4-пиридил, 1,2,3,4тетрагидро-1-, -2-, -3-, -4-, -5- или -6-пиридил, 1-, 2-, 3- или 4-пиперидинил, 2-, 3- или 4-морфолинил, гексагидро-1-, -2-, -4- или -5-пиримидинил, 1-, 2- или 3-пиперазинил, предпочтительно 2,3дигидробензофуран-5- или 6-ил, особенно предпочтительно 2,3-дигидробензофуранил.

На1 предпочтительно означает Г, С1 или Вг, а также I, особенно предпочтительно Г или С1.

Во всем изобретении все радикалы, которые встречаются больше чем один раз, могут быть одинаковыми или разными, то есть являются независимыми друг от друга.

Соединения формулы I могут иметь один или больше хиральных центров и могут, следовательно, встречаться в различных стереизомерных формах. Формула I охватывает все эти формы.

Следовательно, изобретение относится, в особенности, к соединениям формулы I, в которых по меньшей мере один из упомянутых радикалов имеет одно из предпочтительных значений, указанных выше.

Соединения формулы I, а также исходные соединения для их получения, могут быть получены, по сути, известными способами, описанными в литературе (например, в стандартных работах, таких как НоиЪеп-^еу1, МеФобеп бег огдашзейеп Сйеш1е [МеФобз о£ Огдаше Сйеш18!гу], Оеогд-ТЫеше-Уег1ад, 8!и!!даг!), уточненными для условий реакции, которые известны, и подходящими для указанных реакций. Применение разновидностей также может быть сделано здесь, известных по существу, которые, однако, не упомянуты здесь более подробно.

Соединения формулы I предпочтительно могут быть получены взаимодействием соединения формулы II с соединением формулы III.

Реакцию проводят в условиях, которые известны специалисту в данной области техники для реакции Сузуки.

- 4 019534

Исходные соединения формул II и III являются общеизвестными. Если они являются неизвестными, тем не менее, они могут быть получены, по сути, известными способами. В соединениях формулы II к предпочтительно означает

НО >-) но или

Реакцию проводят в стандартных условиях сочетания по Сузуки. В зависимости от используемых условий время реакции составляет между несколькими минутами и 14 днями, температура реакции приблизительно между 30 и 140°С, обычно между 0 и 100°С, в особенности приблизительно между 60 и приблизительно 90°С.

Подходящими инертными растворителями являются, например, углеводороды, такие как гексан, петролейный эфир, бензол, толуол или ксилол; хлорированные углеводороды, такие как трихлорэтилен, 1,2-дихлорэтан, четыреххлористый углерод, хлороформ или дихлорметан; спирты, такие как метанол, этанол, изопропанол, н-пропанол, н-бутанол или трет-бутанол; простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, диизопропиловый эфир, тетрагидрофуран (ТИР) или диоксан; гликолевые простые эфиры, такие как монометиловый или моноэтиловый эфир этиленгликоля, диметиловый эфир этиленгликоля (диглим); кетоны, такие как ацетон или бутанон; амиды, такие как ацетамид, диметилацетамид или диметилформамид (ΌΜΡ); нитрилы, такие как ацетонитрил; сульфоксиды, такие как диметилсульфоксид (ΌΜ8Θ); сероуглерод; карбоновые кислоты, такие как муравьиная кислота или уксусная кислота; нитросоединения, такие как нитрометан или нитробензол; сложные эфиры, такие как этилацетат, или смеси упомянутых растворителей. Особое предпочтение отдают этанолу, толуолу, диметоксиэтану.

Соединения формулы I могут, кроме того, предпочтительно быть получены путем замещения радикала К² другим радикалом К². Предпочтительно атом галогена замещают амино-, алкокси- или арильным радикалом. Реакцию предпочтительно проводят в условиях сочетания по Сузуки.

Кроме того, является возможным превращение соединения формулы I в другое соединение формулы I путем превращения радикала К² в другой радикал К², например, восстановлением нитрогруппы до аминогруппы (например, гидрированием на никеле Реннея или палладий-на-угле в инертном растворителе, таком как метанол или этанол).

Кроме того, свободные аминогруппы могут быть проацилированы общепринятым способом с применением хлорангидрида кислоты или ангидрида или проалкилированы с применением незамещенного или замещенного алкилгалогенида преимущественно в инертном растворителе, таком как дихлорметан или ТНР, и/или в присутствии основания, такого как триэтиламин или пиридин, при температурах между -60 и 30°С.

Соединения формулы I могут, кроме того, быть получены выделением их из их функционализированных производных сольволизом, в особенности гидролизом, или гидрогенолизом.

Предпочтительными исходными соединениями для сольволиза или гидрогенолиза являются такие, которые содержат соответствующие защищенные амино- и/или гидроксильные группы вместо одной или больше свободной амино- и/или гидроксильных групп, предпочтительно те, которые несут аминозащитную группу вместо атома Н, связанного с атомом Ν, например, те, которые соответствуют формуле I, но содержат ΝΗΚ'-группу (в которой К' означает аминозащитную группу, например ВОС или ΟΒΖ) вместо NΗ₂-группы.

Предпочтение, кроме того, отдано исходным соединениям, которые несут гидроксильную защитную группу вместо атома Н гидроксильной группы, например, те, которые соответствуют формуле I, но содержат К''О-фенильную группу (в которой К означает гидроксильную защитную группу) вместо гидроксифенильной группы.

Также возможно присутствие в молекуле исходного соединения множества одинаковых или различных защищенных амино- и/или гидроксильных групп. Если имеющиеся защитные группы являются различными друг от друга, они во многих случаях могут быть сняты селективно.

Термин аминозащитная группа вообще известен и относится к группам, которые являются подходящими для защиты (блокирования) аминогруппы от химических реакций, но которые являются легко удаляемыми после того, как желаемая химическая реакция была выполнена в другом месте в молекулы. Обычными такими группами являются, в особенности, незамещенная или замещенная ацильная, арильная, аралкоксиметильная или аралкильная группы. Поскольку аминозащитные группы удаляют после желаемой реакции (или ряда реакций), их тип и размер, кроме того, не являются принципиальными; тем не менее, предпочтение дается таким, которые имеют 1-20, в особенности 1-8 атомов углерода. Термин ацильная группа следует понимать в самом широком смысле в связи с настоящим способом. Он включает ацильные группы, полученные из алифатических, аралифатических, ароматических или гетероциклических карбоновых кислот или сульфоновых кислот, и, в особенности, алкоксикарбонильные, арилоксикарбонильные и особенно аралкоксикарбонильные группы. Примерами таких ацильных групп являются алканоил, такой как ацетил, пропионил и бутирил; аралканоил, такой как фенилацетил; ароил, такой как бензоил и толил; арилоксиалканоил, такой как такой как РОА; алкоксикарбонил, такой как метокси

- 5 019534 карбонил, этоксикарбонил, 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил, ВОС и 2-йодэтоксикарбонил; аралкоксикарбонил, такой как ί'ΒΖ (карбобензокси), 4-метоксибензилоксикарбонил и РМОС; и арилсульфонил, такой как М1т, РЬ£ и Рте. Предпочтительными аминозащитными группами являются ВОС и М1т, кроме того, СΒΖ, Ртос, бензил и ацетил.

Термин гидроксильная защитная группа, вообще, известен и относится к группам, которые являются подходящими для защиты гидроксильной группы от химических реакций, но которые являются легкоудаляемыми после того, как желаемая химическая реакция была выполнена в другом месте в молекулы. Обычными такими группами являются, в особенности, незамещенная или замещенная арильная, аралкильная или ацильная группы, кроме того, также алкильные группы. Природа и размер гидроксильных защитных групп не являются решающими, поскольку их удаляют после желаемой реакции или ряда реакций; предпочтение дается группам, имеющим 1-20, в особенности 1-10 атомов углерода. Примерами гидроксильных защитных групп являются, в частности, трет-бутоксикарбонил, бензил, п-нитробензоил, п-толуолсульфонил, трет-бутил и ацетил, где бензил и трет-бутил являются особенно предпочтительными. СООН-группы в аспарагиновой кислоте и глутаминовой кислоте являются предпочтительно защищенными в виде их трет-бутильных сложных эфиров (например, Акр(ОВи1)).

Соединения формулы I освобождают из их функционализированных производных в зависимости от использованной защитной группы, например, применяя сильные кислоты, преимущественно применяя ТРА или перхлорную кислоту, а также применяя другие сильные неорганические кислоты, такие как хлористо-водородная кислота или серная кислота, сильные органические карбоновые кислоты, такие как трихлоруксусная кислота, или сульфоновые кислоты, такие как бензол- или п-толуолсульфоновая кислота. Возможно наличие дополнительного инертного растворителя, но он является всегда обязательным. Подходящими инертными растворителями являются предпочтительно органические, например, карбоновые кислоты, такие как уксусная кислота, простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диоксан, амиды, такие как ΌΜΡ, галогенированные углеводороды, такие как дихлорметан, кроме того, также спирты, такие как метанол, этанол или изопропанол, и вода. Кроме того, подходящими являются смеси вышеупомянутых растворителей. ТРА предпочтительно применяют в избытке без добавления дополнительного растворителя, и перхлорную кислота предпочтительно применяют в виде смеси уксусной кислоты и 70% перхлорной кислоты в соотношении 9:1. Температура реакции для расщепления преимущественно находится между около 0 и около 50°С, предпочтительно между 15 и 30°С (комнатная температура).

ВОС, ОВи1. РЬ£, Ртс и Μίτ группы могут, например, предпочтительно быть сняты, применяя ТРА в дихлорметане или применяя приблизительно от 3 до 5 N НС1 в диоксане при 15-30°С, и РМОС группу можно снять, применяя приблизительно от 5 до 50% раствор диметиламина, диэтиламина или пиперидина в ЭМГ при 15-30°С.

Тритильную группу используют для защиты аминокислот гистидин, аспаргин, глутамин и цистеин. Они расщепляются в зависимости от желаемого конечного продукта, применяя смесь ТРА/10% тиофенол, со снятием тритильной группы со всех упомянутых аминокислот; применяя смеси ТРА/анизол или ТРА/тиоанизол, снимают тритильную группу с Н1к, Аки и О1и, тогда как она сохраняется для Сук боковой цепи.

РЬ£ (пентаметилбензофуранил) группу используют для защиты Агд. Ее снимают, применяя, например, ТРА в дихлорметане.

Удаляемые при гидрогенолизе защитные группы (например, СВΖ или бензил) могут быть сняты, например, обработкой водородом в присутствии катализатора (например, катализатор на основе благородного металла, такого как палладий, преимущественно на носителе, таком как уголь). Подходящие здесь растворители указаны выше, в особенности, например, спирты, такие как метанол или этанол, или амиды, такие как ОМЕ. Гидрогенолиз, как правило, проводят при температурах между около 0 и 100°С и давлении между около 1 и 200 бар, предпочтительно при 20-30°С и 1-10 бар. Гидрогенолиз СВΖ группы хорошо получается, например, на 5-10% Р6/С в метаноле или применяя формиат аммония (вместо водорода) на Р6/С в смеси метанол/ОМР при 20-30°С.

Фармацевтические соли и другие формы.

Указанные соединения согласно изобретению могут быть использованы в их конечной несолевой форме. С другой стороны, настоящее изобретение также охватывает применение этих соединений в виде их фармацевтически приемлемых солей, которые могут быть получены их различных органических и неорганических кислот и оснований при помощи известных в технике способов.

Фармацевтически приемлемые солевые формы соединений формулы I в основном могут быть получены известными способами. Если соединение формулы I содержит карбоксильную группу, одна из подходящих солей может быть образована взаимодействием соединения с подходящим основанием с получением соответствующей соли присоединения основания. Такими основаниями являются, например, гидроксиды щелочных металлов, включая гидроксид калия, гидроксид натрия и гидроксид лития; гидроксиды щелочно-земельных металлов, такие как гидроксид бария и гидроксид кальция; алкоксиды щелочных металлов, например этоксид калия и пропоксид натрия; и различные органические основания, такие как пиперидин, диэтаноламин и Ν-метилглутамин. Алюминиевые соли соединений формулы I также включают. В случае конкретных соединений формулы I соли присоединения кислот могут быть

- 6 019534 образованы обработкой этих соединений фармацевтически приемлемыми органическими и неорганическими кислотами, например галогенидами водорода, такими как хлористый водород, бромистый водород или йодистый водород, другие минеральные кислоты и их соответствующие соли, такие как сульфат, нитрат или фосфат и т.п., и алкил- и моноарилсульфонаты, такие как этансульфонат, толуолсульфонат и бензолсульфонат, и другие органические кислоты и их соответствующие соли, такие как ацетат, трифторацетат, тартрат, малеат, сукцинат, цитрат, бензоат, салицилат, аскорбат и т.п. Таким образом, фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот соединений формулы I включают следующие: ацетат, адипат, альгинат, аргинат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат (безилат), бисульфат, бисульфит, бромид, бутират, камфорат, камфорсульфонат, каприлат, хлорид, хлорбензоат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, дигидрофосфат, динитробензоат, додецилсульфат, этансульфонат, фумарат, галактерат (из слизевой кислоты), галактуронат, глюкопентаноат, глюконат, глутамат, глицерофосфат, гемисукцинат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гиппурат, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, 2гидроксиэтансульфонат, йодид, изетионат, изобутират, лактат, лактобионат, малат, малеат, малонат, миндально-кислый, метафосфат, метансульфонат, метилбензоат, моногидрофосфат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, оксалат, олеат, пальмоат, пектинат, персульфат, фенилацетат, 3-фенилпропионат, фосфат, фосфонат, фталат, но это не представляет ограничения.

Кроме того, основные соли соединений согласно изобретению включают алюминиевые, аммониевые, кальциевые, медные, железные(Ш), железные(П), литиевые, магниевые, марганцевые(Ш), марганцевые(П), калиевые, натриевые и цинковые соли, но это не предназначено для ограничения. Из вышеупомянутых солей предпочтение дается аммониевым; щелочным натриевым и калиевым солям, щелочноземельным кальциевым и магниевым солям. Соли соединений формулы I, которые получены из фармацевтически приемлемых органических нетоксичных оснований, включают соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенных аминов, также включая встречающиеся в природе замещенные амины, циклические амины, и катионообменные смолы, например аргинин, бетаин, кофеин, хлорпрокаин, холин, Ν,Ν'-дибензилэтилендиамин (бензатин), дициклогексиламин, диэтаноламин, диэтиламин, 2-диэтиламиноэтанол, 2-диметиламиноэтанол, этаноламин, этилендиамин, Ν-этилморфолин, Ν-этилпиперидин, глюкамин, глюкозамин, гистидин, гидрабамин, изопропиламин, лидокаин, лизин, меглюмин, Ν-метил-Иглюкамин, морфолин, пиперазин, пиперидин, полиаминовые смолы, прокаин, пурины, теобромин, триэтаноламин, триэтиламин, триметиламин, трипропиламин и трис-(гидроксиметил)метиламин (трометамин), но это не предназначено для ограничения.

Соединения настоящего изобретения, которые содержат основные азотсодержащие группы, могут быть кватернизированы с применением агентов, таких как Щ-СДалкилгалогениды, например метил, этил, изопропил и трет-бутилхлорид, бромид и йодид; диЩ-СДалкилсульфаты, например диметил, диэтил и диамилсульфат; (С₁₀-С₁₈)алкилгалогениды, например децил, додецил, лаурил, миристил и стеарилхлорид, бромид и йодид; и арил(С1-С₄)алкилгалогениды, например бензилхлорид и фенэтилбромид. Согласно изобретению с применением этих солей могут быть приготовлены и водо- и маслорастворимые составы.

Вышеупомянутые фармацевтические соли, которые предпочтительно включают ацетат, трифторацетат, безилат, цитрат, фумарат, глюконат, гемисукцинат, гиппурат, гидрохлорид, гидробромид, изетионат, миндально-кислый, меглюмин, нитрат, олеат, фосфонат, пивалат, фосфат натрия, стеарат, сульфат, сульфосалицилат, тартрат, тиомалат, тозилат и трометамин, но это не предназначено для ограничения.

Особое предпочтение отдают гидрохлориду, дигидрохлориду, гидробромиду, малеату, мезилату, фосфату, сульфату и сукцинату.

Соли присоединения кислот основных соединений формулы I получают введением свободной основной формы в контакт с достаточным количеством необходимой кислоты, что приводит к формированию соли общепринятым способом. Свободное основание может быть регенерировано введением солевой формы в контакт с основанием и отделением свободного основания общепринятым способом. Свободные основные формы отличаются в определенном отношении от соответствующих солевых форм, вследствие того в отношении некоторых физических свойств, таких как растворимость в полярных растворителях; с целью изобретения, тем не менее, соли иными словами согласуются с соответствующими их свободными основными формами.

Как упомянуто, фармацевтически приемлемые соли присоединения основания соединений формулы I образованы с металлами или аминами, такими как щелочные металлы и щелочно-земельные металлы или органические амины. Предпочтительными металлами являются натрий, калий, магний и кальций. Предпочтительными органическими аминами являются Ν,Ν'-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, холин, диэтаноламин, этилендиамин, Ν-метил-И-глюкамин и прокаин.

Соли присоединения основания кислотных соединений согласно изобретению получены введением свободной кислотной формы в контакт с достаточным количеством необходимого основания, что приводит к формированию соли общепринятым способом. Свободная кислота может быть регенерирована введением солевой формы в контакт с кислотой и выделением свободной кислоты общепринятым способом. Свободные кислотные формы отличаются в определенном отношении от соответствующих солевых

- 7 019534 форм, вследствие того в отношении некоторых физических свойств, таких как растворимость в полярных растворителях; с целью изобретения, тем не менее, соли иными словами согласуются с их соответствующими свободными кислотными формами.

Если соединение согласно изобретению содержит более одной группы, способной образовать фармацевтически приемлемые соли этого типа, изобретение также охватывает множественные соли. Обычно множественные солевые формы включают, например, битартрат, диацетат, дифумарат, димеглюмин, дифосфат, динатрий и тригидрохлорид, но это не предназначено для ограничения.

Относительно вышеизложенного можно заметить, что выражение фармацевтически приемлемая соль в представленной связи подразумевает активный компонент, который включает соединение формулы I в форме одной из ее солей, в особенности, если эта солевая форма придает улучшенные фармакокинетические свойства активному компоненту по сравнению со свободной формой активного компонента или какой-либо другой солевой формой активного компонента, используемой ранее. Фармацевтически приемлемая солевая форма активного компонента может также обеспечить этот активный компонент для первого раза желательное фармакокинетическое свойство, которого оно не имело ранее и может даже иметь положительное влияние на фармакодинамику этого активного компонента относительно его терапевтической эффективности в теле.

Изобретение, кроме того, относится к лекарственным средствам, содержащим по меньшей мере одно соединение формулы I и/или его фармацевтически приемлемые соли и необязательно инертные наполнители и/или вспомогательные средства.

Фармацевтические препараты могут быть введены в форме единиц дозирования, которые содержат заданное количество активного компонента на единицу дозирования. Такая единица может содержать, например, 0,5-1 мг, предпочтительно 1-700 мг, особенно предпочтительно 5-100 мг соединения соответственно изобретению в зависимости от условий лечения, способа введения и возраста, веса и состояния пациента или фармацевтические препараты могут быть введены в форме единиц дозирования, которые содержат заданное количество активного компонента на единицу дозирования. Предпочтительно препараты единичного дозирования являются такими, которые содержат дневную дозу или полдозы, как определено выше, или соответствующую фракцию этого активного компонента. Кроме того, фармацевтические препараты этого типа могут быть приготовлены, используя процесс, который в целом известен в фармацевтической области.

Фармацевтические препараты могут быть адаптированы для введения любым желаемым подходящим способом, например перорально (включая буккальный или сублингвальный), ректальный, назальный, топический (включая буккальный, сублингвальный или трансдермальный), вагинальный или парентеральный (включая подкожный, внутримышечный, внутривенный или интрадермальный) способы. Такие составы могут быть приготовлены, используя все процессы, известные в фармацевтической области, например комбинированием активного компонента с экципиентом(ами) или адъювантом(ами).

Фармацевтические препараты, адаптированные для перорального введения, могут быть введены как отдельные единицы, такие как, например, капсулы или таблетки; порошки или гранулы; растворы или суспензии в водной или неводной жидкостях, пищевые пены или вспененные продукты или жидкие эмульсии масло-в-воде или жидкие эмульсии вода-в-масле.

Таким образом, например, в случае перорального введения в форме таблеток или капсул активный компонент может быть комбинирован с пероральным, нетоксическим и фармацевтически приемлемым инертным наполнителем, таким как, например, этанол, глицерин, вода и т.п. Порошки готовятся измельчением соединения до подходящего малого размера и перемешиванием его с фармацевтическим наполнителем, измельченным подобным образом, таким как, например, пищевой углевод, такой как, например, крахмал или маннит. Ароматизатор, консервант, дисперсант и краситель могут также присутствовать.

Капсулы производятся приготовлением порошковой смеси, как описано выше, и наполнением ею сформированных желатиновых оболочек. Г лиданты и лубриканты, такие как, например, высокодисперсная силикатная кислота, тальк, стеарат магния, стеарат кальция или полиэтиленгликоль в твердой форме, могут быть добавлены в порошковую смесь до операции наполнения. Разрыхлитель или солюбилизатор, такие как, например, агар-агар, карбонат кальция или карбонат натрия, могут также быть добавлены для того, чтобы улучшить пригодность лекарственного средства после принятия капсулы.

В дополнение, если желательно или необходимо, также могут быть введены в смесь подходящие связывающие вещества, лубриканты и разрыхлители, а также красители. Подходящие связывающие вещества включают крахмал, желатин, природные сахара, такие как, например, глюкоза или бета-лактоза, подсластители, сделанные из кукурузы, природной или синтетической смолы, такие как, например, камедь, трагакантовая камедь или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлоза, полиэтиленгликоль, воски и т.п. Лубриканты, используемые в этих формах дозировки, включают олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.п. Разрыхлители включают, не будучи ограниченными этим, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь и т.п. Таблетки формируются, например, приготовлением порошковой смеси, гранулированием или сухим прессованием смеси, добавлением лубриканта и разрыхлителя и прессованием однородной смеси, чтобы получить таблетки. Порошковая смесь готовится перемешиванием соединения, измельченного подходящим способом,

- 8 019534 с разбавителем или основой, как описано выше, и необязательно со связывающим веществом, таким как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинат, желатин или поливинилпирролидон, замедлителем растворения, таким как, например, парафин, ускорителем абсорбции, таким как, например, соль четвертичного основания, и/или поглотителем, таким как, например, бентонит, каолин или гидрофосфат кальция. Порошковая смесь может быть гранулирована смачиванием ее связывающим веществом, таким как, например, сироп, крахмальная паста, клей из гуммиарабика или растворы целлюлозы либо полимерных материалов, и прессования ее через сито. Как альтернатива гранулированию порошковая смесь может быть пропущена через машину для таблетирования, дающую комочки неоднородной формы, которые дробятся, чтобы сформировать гранулы. Гранулы могут быть покрыты лубрикантом добавлением стеариновой кислоты, стеарата, талька или минерального масла для того, чтобы предупредить налипание к таблеточной пресс-форме. Смесь, покрытая лубрикантом, потом поддается прессованию, чтобы получить таблетки. Соединения соответственно изобретению также могут быть комбинированы с сыпучим инертным наполнителем и потом сразу поданы прессованию без применения этапов гранулирования или сухого прессования. Может присутствовать прозрачный или матовый защитный слой, состоящий из шеллачного герметизирующего слоя, слоя сахара или полимерного материала и глянцевого слоя воска. Красители могут быть добавлены к этим покрывающим слоям для того, чтобы способствовать различию между разными единицами дозирования.

Пероральные жидкости, такие как, например, раствор, сиропы или эликсиры, могут быть приготовлены в форме единиц дозирования таким образом, чтобы данное количество содержало заданное количество соединения. Сиропы могут быть приготовлены растворением соединения в водном растворе с подходящим ароматизатором, в то время как эликсиры готовятся, используя нетоксическую спиртовую среду. Суспензии могут быть сформулированы диспергированием соединения в нетоксической среде. Также могут быть добавлены солюбилизаторы и эмульгаторы, такие как, например, этоксилированные изостеариловые спирты и полиоксиэтиленовые эфиры сорбита, консерванты, ароматизирующие добавки, такие как, например, мятное масло или природные подсластители либо сахарин, или другие искусственные подсластители и т.п.

Препараты единичного дозирования для перорального введения могут, если желательно, быть инкапсулированы в микрокапсулы. Состав также может быть приготовлен таким путем, который продлевает или задерживает освобождение, таким как, например, покрытие или заливание аэрозольным материалом на полимерах, воске и т.п.

Соединения формулы I и их соли также могут быть введены в форме липосомных систем доставки, таких как, например, маленькие моноламеллярные везикулы, большие моноламеллярные везикулы и мультиламеллярные везикулы. Липосомы могут быть сформированы из различных фосфоролипидов, таких как, например, холестерин, стеариламин или фосфатидилхолины.

Соединения формулы I и их соли также могут быть доставлены, используя моноклональные антитела как индивидуальные носители, с которыми связаны молекулы соединения. Соединения также могут быть связаны с растворимыми полимерами как целенаправленными лекарственными носителями. Такие полимеры могут включать поливинилпирролидон, сополимер пирана, полигидроксипропилметакриламидофенол, полигидроксиэтиласпартамидофенол или полиэтиленоксид полилизин, замещенный радикалами пальмитоил. Соединения могут, кроме того, быть связаны с классом биодеградируемых полимеров, которые являются подходящими для достижения контролируемого освобождения лекарственного средства, например полимолочная кислота, поли-эпсилон-капролактон, полигидроксимасляная кислота, полиортоэфиры, полиацетали, полидигидроксипирены и сшитые или амфипатные блок-кополимеры гидрогелей.

Фармацевтические препараты, адаптированные для трансдермального введения, могут быть введены как независимые пластыри для длительного, закрытого контакта с эпидермисом реципиента. Таким образом, например, активный компонент может быть доставлен из пластыря ионотофорезом, как описано в общих терминах в Рйагтасеийса1 Кекеагсй, 3(6), 318 (1986).

Фармацевтические соединения, адаптированные для топического введения, могут быть сформулированы как мази, кремы, суспензии, лосьоны, пудры, растворы, пасты, гели, спреи, аэрозоли или масла.

Для лечения глаз или другой внешней ткани, например рта и кожи, составы предпочтительно применяют как топическую мазь или крем. В случае состава, чтобы получить мазь, активный компонент может быть применен или с парафиновой, или с водорастворимой кремовой основой. Альтернативно, активный компонент может быть сформулирован, чтобы дать крем с кремовой основой масло-в-воде или основой вода-в-масле.

Фармацевтические препараты, адаптированные для топического применения на глаза, включают глазные капли, в которых активный компонент растворен или суспендирован в подходящем носителе, в особенности в водном растворителе.

Фармацевтические препараты, адаптированные для топического применения в рот, включают таблетки для рассасывания, пастилки и полоскания для рта.

Фармацевтические препараты, адаптированные для ректального введения, могут быть введены в форме суппозиториев или клизм.

- 9 019534

Фармацевтические препараты, адаптированные для назального введения, в которых веществоноситель является твердым, содержат крупный порошок, имеющий размер частицы, например, в переделах 20-500 мкм, который вводится способом, в котором используется нюханье, т.е. быстрая ингаляция через назальные отверстия из контейнера, содержащего порошок, прижатого близко к носу. Подходящие составы для введения в качестве назального спрея или каплей для носа с жидкостью в качестве веществаносителя включают раствор активного компонента в воде или масле.

Фармацевтические препараты, адаптированные для введения ингаляцией, включают мелкодисперсные пудры или аэрозоли, которые могут быть получены различными типами герметичных флаконов с аэрозолями, небулайзерами или инсуффляторами.

Фармацевтические препараты, адаптированные для вагинального введения, могут быть введены как пессарии, тампоны, кремы, гели, пенные или орошающие составы.

Фармацевтические препараты, адаптированные для парентерального введения, включают водные и безводные стерильные растворы для инъекций, содержащие антиоксиданты, буферные системы, антисептики и раствор, посредством которого состав делается изотоническим, с кровью реципиента, которого лечат; и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут содержать суспензионную среду и загуститель. Составы могут быть введены через однодозовый или многодозовый контейнер, например, в виде запаянных ампул или виал и храниться в сухозамороженном (лиофилизированном) состоянии, так что только добавление стерильного жидкого носителя, например воды для инъекционных целей, являлось бы необходимым непосредственно перед применением. Инъекционные растворы и суспензии, приготовленные в соответствии с рецептом, могут быть приготовлены из стерильных порошков, гранул и таблеток.

Само собой разумеется, что в дополнение к вышеупомянутым особенно перечисленным элементам составы также могут включать другие вещества, обычные в области техники относительно особого типа состава; таким образом, например, составы, которые являются подходящими для перорального приема, могут содержать ароматизатор.

Терапевтически эффективное количество соединения формулы I зависит от числа факторов, включая, например, возраст и вес животного, точное состояние, которое нуждается в лечении, и его серьезность, природа состава и способ введения, и главное, определено лечение доктором или ветеринаром. Впрочем, эффективное количество соединения соответственно изобретению для лечения неопластического роста, например, карциномы толстой кишки или молочной железы составляет, главным образом, в пределах от 0,1 до 100 мг/кг массы тела больного (млекопитающего) на день и особенно обычно в пределах от 1 до 10 мг/кг массы тела на день. Таким образом, фактическое количество на день для взрослого млекопитающего, весящего 70 кг, обычно является между 70 и 700 мг, где это количество может быть введено как разовая доза на день или чаще серией частичных доз (таких как, например, две, три, четыре, пять или шесть) на день, таким образом, чтобы общая дневная доза являлась такой же. Эффективное количество соли или сольвата либо его физиологически функциональной производной может быть определено как часть эффективного количества соединения соответственно изобретению рег 8е. Можно допустить, что подобные дозы являются подходящими для лечения других состояний перечисленных выше.

Соединение формулы I и/или его фармацевтически приемлемые соли могут быть использованы в форме лекарственного средства, также содержащего по меньшей мере еще один лекарственно активный компонент.

Соединение формулы I и/или его фармацевтически приемлемые соли могут быть использованы в форме комплекта (набора), содержащего отдельные упаковки:

(a) эффективного количества соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемых солей и (b) эффективного количества дополнительного лекарственного активного компонента.

Комплект может содержать подходящие контейнеры, такие как коробки, индивидуальные бутылки, мешочки или ампулы. Комплект может, например, содержать отдельные ампулы, каждая вмещающая эффективное количество соединения формулы I и/или его фармацевтически приемлемых солей и эффективное количество дополнительного лекарственного активного компонента в растворенной или лиофилизированной форме.

Применение.

Настоящие соединения являются подходящими как фармацевтически активные компоненты для млекопитающих, особенно для людей, в лечении заболеваний, вызванных тирозинкиназой. Эти заболевания включают пролиферацию опухолевых клеток, патологическую реваскуляризацию (или ангиогенез), которая способствует росту солидных опухолей, глазную реваскуляризацию (диабетическая ретинопатия, дегенерация желтого пятна, вызванная возрастом, и т.п.) и воспаление (псориаз, ревматоидный артрит и т.п.).

Настоящее изобретение включает применение соединений формулы I и/или их физиологически приемлемых солей для приготовления лекарственного средства для лечения или предупреждения рака. Предпочтительные формы для лечения карциномы происходят из группы церебральной карциномы, карциномы мочеполового пути, карциномы лимфатической системы, карциномы желудка, ларингеальной

- 10 019534 карциномы и карциномы легкого. Дополнительной группой предпочтительных форм рака является моноцитарная лейкемия, аденокарцинома легкого, мелкоклеточная карцинома легкого, рак поджелудочной, глиобластома и карцинома яичника.

Также настоящее изобретение включает применение соединений формулы I и/или их физиологически приемлемых солей для приготовления лекарственного средства для лечения или предупреждения болезни, в которую вовлечен ангиогенез.

Такая болезнь, в которую вовлечен ангиогенез, является глазной болезнью, такой как ретинальная васкуляризация, диабетическая ретинопатия, дегенерация желтого пятна, вызванная возрастом и т.п.

Настоящее изобретение включает применение соединений формулы I и/или их физиологически приемлемых солей для приготовления лекарственного средства для лечения или предупреждения воспалительных заболеваний, которые также попадают под объем настоящего изобретения. Примеры таких воспалительных заболеваний включают ревматоидный артрит, псориаз, контактный дерматит, замедленную аллергическую реакцию и т.п. Также настоящее изобретение включает применение соединений формулы I и/или их физиологически приемлемых солей для приготовления лекарственного средства для лечения или предупреждения заболевания, вызванного тирозинкиназой, или состояния, вызванного тирозинкиназой у млекопитающего, где терапевтически активное количество соединения соответственно изобретению вводится больному млекопитающему, которому требуется такое лечение. Терапевтическое количество варьируется в зависимости от болезни и может быть определено специалистом в данной области техники без чрезмерного усилия.

Настоящее изобретение также включает применение соединений формулы I и/или их физиологически приемлемых солей для приготовления лекарственного средства для лечения или предупреждения ретинальной васкуляризации. Соединения формулы I могут быть использованы для лечения или предупреждения глазных болезней, таких как диабетическая ретинопатия и дегенерация желтого пятна, вызванная возрастом. Соединения формулы I могут быть использованы для лечения или предупреждения воспалительных заболеваний, таких как ревматоидный артрит, псориаз, контактный дерматит и замедленная аллергическая реакция, также как и для лечения или предупреждения патологий кости, выбранных из группы, включающей остеасаркому, остеоартрит и рахит.

Выражение заболевания или состояния, вызванные тирозинкиназой относится к патологическим состояниям, которые зависят от активности одной или более тирозинкиназ. Тирозинкиназы прямо или косвенно участвуют в сигнальной трансдукции путей обмена различных клеточных активностей, включая пролиферацию, адгезию и миграцию, а также дифференциацию. Заболевания, связанные с активностью тирозинкиназы, включают пролиферацию опухолевых клеток, патологическую реваскуляризацию, которая способствует росту солидных опухолей, глазной реваскуляризации (диабетическая ретинопатия, дегенерация желтого пятна, вызванная возрастом, и т.п.) и воспаления (псориаз, ревматоидный артрит и т.п.).

Соединения формулы I могут быть введены пациентам для лечения рака, в особенности быстрорастущих опухолей.

Изобретение, таким образом, относится к применению соединений формулы I и их фармацевтически приемлемых солей для приготовления лекарственного средства для лечения болезней, в которых играет роль ингибирование, регулирование и/или модуляция сигнальной трансдукции киназы.

Предпочтительно здесь подразумевается Мс1 киназа.

Предпочтительным является применение соединений формулы I и их фармацевтически приемлемых солей для приготовления лекарственного средства для лечения болезней, в которых играет роль ингибирование тирозинкиназ.

Особенно предпочтительным является применение соединений формулы I и их фармацевтически приемлемых солей для приготовления лекарственного средства для лечения болезней, в которых играет роль ингибирование Мс1 киназы.

Наиболее предпочтительным является применение соединений формулы I и их фармацевтически приемлемых солей для лечения болезни, которая представляет собой солидное новообразование.

Солидное новообразование предпочтительно происходит из группы опухолей легкого, плоского эпителия, мочевого пузыря, желудка, почек, головы и шеи, пищевода, шейки матки, щитовидной железы, кишечника, печени, мозга, простаты, урогенитального тракта, лимфатической системы, желудка и/или гортани.

Солидное новообразование особенно предпочтительно происходит из группы аденокарциномы легкого, мелкоклеточной карциномы легких, рака поджелудочной, глиобластомы, карциномы толстой кишки и карциномы молочной железы.

Предпочтение, кроме того, отдается применению для лечения опухоли крови и иммунной системы, предпочтительно для лечения опухоли выбранной из группы острой миелоидной лейкемии, хронической миелоидной лейкемии, острой лимфатической лейкемии и/или хронической лимфатической лейкемии.

Соединения формулы I могут быть введены в комбинации с другими известными лекарственными препаратами, включая антираковые препараты. Как используется здесь, термин антираковый препарат относится к любому препарату, который вводится пациенту с раком с целью лечения рака.

- 11 019534

Антираковое лечение, как упомянуто здесь, может быть использовано как самостоятельная терапия или может включать, в дополнение к соединению согласно настоящему изобретению, обычную хирургическую операцию или радиотерапию либо химиотерапию. Такая химиотерапия может включать одну или больше следующих категорий противоопухолевых препаратов:

(ί) антипролиферативные/антинеопластические/ДНК-повреждающие препараты и их комбинации, как используется в медицинской онкологии, такие как алкилирующие препараты (например, цис-платин, карбоплатин, циклофосфамид, азотистый иприт, мелфалан, хлорамбуцил, бусульфан и нитрозомочевина); антиметалболиты (например, антифолаты, такие как фторопиримидины типа 5-фтороурацил и тегафур, ралтитрексед, метотрексат, цитозина арабинозид, гидроксимочевина и гемцитабин); противоопухолевые антибиотики (например, антрациклины, типа адриамицина, блеомицина, доксорубицина, дауномицина, эпирубицина, идарубицина, митомицина-С, дактиномицина, митрамицина); антимитотические препараты (например, алкалоиды барвинка, типа винкристина, винбластина, виндезина и винорелбина, и таксоиды, типа таксола и таксотера); ингибиторы топоизомеразы (например, эпидофиллотоксины, типа этопозида и тенипозида, амсакрина, топотекана, иринотекана и камптотецина) и препараты, дифференцирующие клетку (например, полностью транс-ретиноевая кислота, 13-цис-ретиноевая кислота и фенретинид);

(ίί) цитостатические препараты, такие как антиэстрогены (например, тамоксифен, торемифен, ралоксифен, дролоксифен и иодоксифен), негативные регуляторы эстрогенового рецептора (например, фулвестрант), антиандрогены (например, бикалутамид, флутамид, нилутамид и ацетат ципротерона), антагонисты ЬНКН (рилизинг-фактор лютеинизирующего гормона) или агонисты ЬНКН (например, гозерелин, лейпрорелин и бусерелин), прогестероны (например, ацетат мегестрола), ингибиторы ароматазы (например, как анастрозол, летрозол, ворозол и эксеместан) и ингибиторы 5а-редуктазы, такой как финастерид;

(ш) препараты, которые ингибируют инвазию раковой клетки (например, ингибиторы металлопротеиназы, типа маримастата, и ингибиторы функции рецептора урокиназы активатора плазмогена);

(ίν) ингибиторы функции фактора роста, например, такие ингибиторы включают антитела фактора роста, антитела рецептора фактора роста (например, антитело анти-етЬЬ2 трастузумаб [Нетеерйи™] и антитело анти-егЬЬ1 цетуксимаб [С225]), ингибиторы фарнесилтрансферазы, ингибиторы тирозин киназы и ингибиторы серин/треонин киназы, например ингибиторы семейства фактора роста эпидермиса (например, ингибиторы ЕСТК семейства тирозин киназы, такие как Ы-(3-хлор-4-фторфенил)-7-метокси-6(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-амин (гефинитиб, ΆΖΌ1839), Ы-(3-этинилфенил)-6,7-бис-(2метоксиэтокси)хиназолин-4-амин (эрлотиниб, Θ8Ι-774) и 6-акрилоамидо-Ы-(3-хлор-4-фторфенил)-7-(3морфолинопропокси)хиназолин-4-амин (С1 1033)), например ингибиторы семейства фактора роста тромбоцитов и, например, ингибиторы семейства фактора роста гепатоцитов;

(ν) антиангиогенные препараты, такие как те, которые ингибируют эффекты фактора роста эндотелия сосудов (например, антитело фактора роста эндотелия сосудов бевацизумаб |Λνα5ΐίη™|. соединения, такие как те, что раскрыты в \УО 97/22596, \νϋ 97/30035, \νϋ 97/32856 и \νϋ 98/13354) и соединения, которые работают по другим механизмам (например, линомид, ингибиторы функции интегрина ανβ3 и ангистатин);

(νί) сосудоповреждающие препараты, такие как комбретастатин А4, и соединения, раскрытые в \νϋ 99/02166, νϋ 00/40529, νϋ 00/41669, νϋ 01/92224, νϋ 02/04434 и νϋ 02/08213;

(νίί) антисмысловая терапия, например, такая, которая наведена на цели, перечисленные выше, такая как Ι8Ι8 2503, анти-Как антисенс;

(νίίί) подходы генной терапии, включая, например, подходы для замещения аберрантных генов, таких как аберрантный р53 или аберрантный ВКСА1 или ВКСЛ2, подходы ΟΌΕΡΤ (ферментативная пролекарственная ген-управляемая терапия), такие как те, что используют цитозин дезаминазу, тимидин киназу или бактериальный фермент нитроредуктазы, и подходы для увеличения толерантности пациента к химиотерапии или радиотерапии, такие как мультирезистентная генная терапии; и (ίχ) подходы иммунотерапии, включая, например, ех-νίνο и ίη-νίνο подходы для увеличения иммуногенности опухолевых клеток пациента, такие как транфекция цитокинами, такими как интерлейкин 2, интерлейкин 4 или гранулоцитарно-моноцитарный колониестимулирующий фактор, подходы для уменьшения анергии Т-клетки, подходы, использующие трансфицированные иммуноциты, такие как цитокин-трансфицированные дендритные клетки, подходы, использующие цитокин-трансфицированные опухолевые клеточные линии, и подходы, использующие антиидиотипические антитела.

- 12 019534

Лекарственные средства из табл. 1 ниже являются предпочтительно, но не исключительно, применимыми в комбинации с соединениями формулы I.__________________________

Таблица 1. ¹

Алкилирующие препараты

Циклофосфамид Бусульфан Ифофамид

Мелфалан

Г ексаметилмеламин Тиотепа хлороамбуцил Дакарбазин Кармустин

Ломустин Прокарбазин Аптретамин Эстрамустин фосфат Мехлорэтамин Стрептозоцин Темозоломид

Семустин

Платиновые препараты

Цисплатин Карбоплатин

Оксалиплатин Ζϋ-0473 (АпогМЕО)

Спироплатин Лабоплатин (Ае1ета)

Карбоксифталатоплатина Сатраплатин Тетраплатин (ΰοήπδοη МайЬеу)

Ормиплатин ВВП-3464

Ипроплатин (Нойтпапп-1_а НосЬе)

8М-11355 (ЗитИото) АР-5280 (Ассебб)

Антиметаболиты

Азацитидин Гемцитабин Капецитабин

5- фторурацил Флоксуридин 2-хлордезоксиаденозин

6- Меркаптопурин 6-Тиогуанин Цитарабин 2-фтордезоксицитидин Метотрексат Идатрексат

Томудекс Триметрексат Деоксикоформицин Флударабин Пентостатин Ралтитрексед Г идроксимочевина Децитабин (ЗирегСеп) Клофарабин (Βΐοβηνϊδΐοη) Ирофульвен (Μ6Ι РЬагта) ϋΜϋϋ (Нойтапп-1_а НосЬе) Этинилцитидин (ТаЛто)

Ингибиторы топоизомеразы

Амсакрин Рубитекан (ЗирегСеп)

Эпирубицин Эксатекан мезилат (ОаКсЫ)

Этопозид Ои1патес! (СЬетСепех)

Тенипозид или митоксантрон Гиматекан (3|дта- Таи) Дифломотекан (Веаи!оиг-1рбеп) ТАЗ-ЮЗ (Та1Ьо) Элсамитруцин (Зресйит) ΰ-107088 (Мегск & Со) ΒΝΡ-1350 (ВюЫитепк) СКЭ-602 (СЬопд Кип Эапд) Κνν-2170 (Куо\л/а Накко)

Иринотекан (СРТ-11) 7-этил-10-гидроксикамптотецин Топотекан

Дексразоксанет (ТороТагде!) Пиксантрон (МоуиврЬагта) Аналог ребеккамицина (ΕχβΙϊχΐδ)

ВВП-3576 (МоуиврЬагта)

Противоопухолевые антибиотики

Дактиномицин (Актиномицин ϋ) Доксорубицин (Адриамицин) Деоксирубицин Валрубицин

Даунорубицин (Дауномицин) Эпирубицин

Терарубицин Идарубицин Рубидазон Пликамицин Порфиромицин Цианоморфолинодоксорубицин Митоксантрон (Ыоуапйоп)

Анти митотические препараты

Паклитаксел Доцетаксел Колхицин Винбластин Винкристин Винорелбин Виндезин Доластатин 10 (ΝΟΙ) Ризоксин (Гирзаууа) Мивобулин 0Л/агпег-1_атЬег1) Цемадотин (ВАЗЕ) КРИ 109881Α (ΑνβηΙίδ) ΤΧϋ 258 (ΑνβηΙΐδ) Эпотилон В (Νονβιΐΐδ) Т 900607 (Ти1апк) Т 138067 (Ти1апк) Криптофицин 52 (ЕН 1_Н1у) Винфлюнин (ЕаЬге) Ауристатин РЕ (Те1коки Ногтопе) ВМ8 247550 (ВМ8) ВМ8 184476 (ВМ8) ВМ8 188797 (ВМ8) Таксопрексин (Ргсйагда)

Амонафид Азонафид Антрапиразол Оксантразол Лосоксантрон Блеомицин сульфат (Бленоксан) Блеомициновая кислота Блеомицин А Блеомицин В Митомицин С ΜΕΝ-10755 (Мепаго) СРХ-100 (Сет РЬагтасеийса1з)

8В408075 (С1ахо8тИЬКПпе) Е7010 (АЬЬой)

РС-ТХЬ (СеН ТЬегареийсв) ΙϋΝ 5109 (Вауег)

А 105972 (АЬЬой)

А 204197 (АЬЬой)

Ш 223651 (ВАЗЕ) ϋ 24851 (А8ТА МесИса)

ЕН-86526 (Εΐδθΐ) Комбретастатин А4 (ВМ8) Изогомогалихондрин-В (РЬагтаМаг)

Ζϋ 6126 (Азйагепеса) ΡΕΘ-Паклитаксел (Εηζοη) ΑΖ10992 (АеаЫ)

ΙϋΝ-5109 (1пс!епа) Ανΐ_Β (Ргезаеп!

ЫеигоРпагта) Азаэпотилон В (ВМ8)

ΒΝΡ- 7787 (В|оЫитепк) СА-4-ргос!гид (0ΧΪ6ΕΝΕ) Доластатин-10 (ΝγΗ)

СА-4 (ΟΧΐΘΕΝΕ)

- 13 019534

Ингибиторы	Аминоглутетимид	Эксеместан
ароматазы	Летрозол Анастразол Форместан	Атаместан (ΒϊοΜεόϊοΐηβδ) ΥΜ-511 (УатапоисЫ)

Ингибиторы тимидилат синтазы	Пеметрексед (ЕН 1-'|11у) Нолатрексед (ΕχίΓπίθδ) Ζϋ-9331 (ВТО) СоЕас(ог™ (ВюКеуз)
Антагонисты ДНК	Антагонисты Мафосфамид (Вах1ег ДНК(РНагтаМаг) 1п1егпа1юпа1) Глюфосфамид Апазиквон (Вах1ег 1п1егпайопа1) (Зрескит Рпагтасеи1юа18) Альбумин + 32Р 06-бензилгуанин (РаНдеп1) (Ιδοίορβ δοϊυιίΐοηδ) Тимектацин (ΝβννΒϊοίίοδ) Эдотреотид (ΝονθΓΐΐδ)
Ингибиторы фарнезилтрансфераз	Арглабин (МиОпсо1оду 1_аЬв) Типифарниб лонафарниб (8сЬеппд-Р1оид1п) (ΰοΗηδοη & ΰοΗηδοη) ΒΑΥ-43-9006 (Вауег) Периллиловый спирт (ϋΟΡ ВюРЬагта)
Ингибиторы протонного насоса	СВТ-1 (СВА РНагта) Зосуквидар тригидрохлорид Тапцик1аг (Χβηονβ) (ЕН !_Н1у) М8-209 (ЗсЬеппд АС) Бирикодар дицитрат (Х/егЕех)
Ингибиторы гистонацетил трансферазы	Тацединалин (РЛгег) Пивалоилоксиметил ЗАНА (Αΐοη РЬагта) бутират (ТИап) М8-275 (ЗсКеппд АС) Депсипептид (Еипвама)
Ингибиторы металлопротеиназы Ингибиторы рибонуклеозид редуктазы	Неовастат СМТ -3 (СоПаОепех) (Ае1егпа 1_аЬога1опез) ВМ8-275291 (Се11(ес11) Маримастат (Βπίίδή Βίοίβοϊι) Тезацитабин (Ανθπίϊδ) Малтолат галлия (Тйап) Дидокс (Мо1еси1ез Тог НеаИЬ) Триапин (νΐοη)
ΤΝΡ-альфа агонисты/ антагонисты	Вирулизин Ревимид (Се1депе) (1_огиб ТНегареийсз) СОС-394 (Се1депе)
Антагонисты рецептора эндотелина-А	Атрасентан (АЬЬоЦ ΥΜ-598 ^атапоисЫ) Ζϋ-4054 (Аб(гагепеса)
Агонисты рецептора ретиноевой кислоты	Фенретинид Апитретиноин (1_1дапс<) (ΰοΐΊΠδοη & ϋοΙ-ιηδοη) ίΟϋ-1550 (Ьдапс!)

- 14 019534

Иммуномодуляторы	Интерферон Оехозоте терапия (Апозуз) Онкофаг (Апйдепюз) Пентрикс (Аиз1гаПап Сапсег ОМК (Ргодепюз) ТесЬпо1оду) Вакцина аденокарциномы ϋδΕ-154 (Тгадеп) (В|от1га) Раковая вакцина (1п1егсе11) СТР-37 (А\/1 ВюРпагта) Норелин (Вюз(аг) ϋΡΧ-2 (1ттипо-Кх) ВЬР-25 (Вюпгнга) РЕР-005 (РерПп Вю1есЬ) МОХ/ (Ргодепюз) Вакцины ВупсЬгоуах (СТ1_ !3-ΑΙβΐΙιϊη (ΟονβΐβίΙ) 1ттипо) С1_1_-ТЬега (Х/азодеп) Вакцина меланомы (СТ1_ ΙπΊΐτιιιηο) вакцина р21-КА8 (ОетХ/ах)
Гормональные и антигормональные препараты	Оэстрогены Преднизон Конъюгированные Метилпреднизолон оэстрогены Преднизолон Этинилоэстрадиол Аминоглутетимид хлортрианизен Леупролид Иденестрол Гозерелин Гидроксипрогестерон Лейпрорелин капроат Бикалутамид Медроксипрогестерон Флутамид Тестостерон Октреотид Тестостеронпропионат Нилутамид Флуоксиместерон Митотан Метилтестостерон Р-04 (Ыоуодеп) Диэтилстильбэстрол 2-Метоксиоэстрадиол Мегестрол (ЕпкеМед) Тамоксифен Арзоксифен (ЕН 1_Шу) Торемофин Дексаметазон
Фотодинамические препараты	Талапорфин (ЫдМ 8с1епсез) Ρά-Бактериофеофорбид Тералюкс (ТЬега1есппо1од1ез) (Уес1а) Мотексафин-Г адолиний Лютеций-Тексафирин (РпагтасусНсз) (РпагтасусНсз) Гиперицин
Ингибиторы тирозинкиназы	Иматиниб (Νον3Γΐϊδ) Кагалид Е (РЬагтаМаг) Лефлуномид СЕР- 701 (Сергалоп) (8идеп/РЬагтас1а) СЕР-751 (Сергалоп) ΖϋΙ839 (А51гагепеса) ΜΙ.Ν518 (МШетит) Эрлотиниб РКС412 (Νονβιΐίδ) (Опсодепе 8с1епсе) Феноксодиол О Канертиниб(РЛгег) Трастузумаб (Сепеп(есп) Скваламин (Сепаега) С225 (1тС1опе) 8115416 (РЬагтас1а) гЬи-МаЬ (Оепеп(есЬ) 8116668 (РЬагтас1а) ΜϋΧ-Η210 (Мебагех) Ζϋ4190 (Аз1гагепеса) 2С4 (Оепеп1есп)

- 15 019534

Различные препараты

Ζϋ6474 (Азкагепеса) Ваталаниб (Νονβιΐΐδ) РКП 66 (ΝονθΓίΐδ) (3\Λ/2016 (61ахо8ткЬКНпе) ЕКВ-509 (\Л/уек!) ЕКВ-569 (УУуек)____________

8К-27897 (ССК-А ингибитор, 8апой-8уп1Ье1аЬо) Токладезин (циклический АМР агонист, К|ЬарНагт) Альвоцидиб (СОК ингибитор, ΑνβπΙίδ) СУ-247 (СОХ-2 ингибитор, Ινγ МесНса1)

Р54 (СОХ-2 ингибитор, РЬу1орЬагт) СарСеП™ (СУР450 стимулятор, Вауапап ΝοΓάίο) 0С8-Ю0 (да13 антагонист, О1усоСепезу8)

С17ОТ иммуноген (ингибитор гастрина, АрЫоп) Афапроксирал (оксигенатор, АН оз ТИегареийсз)

ΡΙ-88 (ингибитор гепараназы, Ргодел)

Тесмилифен (антагонист гистамина, ΥΜ Вю8с1епсез) Гистамин (агонист рецептора гистамина Н2, Мах1гп) Тиазофурин (ΙΜΡϋΗ ингибитор, К|ЬарЬагт) Циленгитид (антагонист интегрина, Мегск КСаА) 8К-31747 (||_-1 антагонист, 8апоП-8уп(11е1аЬо) СС1-779 (ингибитор киназы тТОК, Муе1Н) Эксисулинд (ΡϋΕ-ν ингибитор, Се11 Ракпл/ауз) СР-461 (ΡϋΕ-ν ингибитор, СеП РаЦи/ауз)

АС-2037 (САНТ ингибитор, РЛгег) ννχ-υκί (ингибитор активатора плазмогена, ννίΐβχ) ΡΒΙ-1402 (ΡΜΝ стимулятор, РгоМеНс 1_Ие8с1епсеэ) Бортезомид (ингибитор

ΜϋΧ-447 (Мебагех)

ΑΒΧ-ЕСЕ (АЬдеп1х) 1МС-1С11 (1тС1опе)

ВСХ-1777 (ΡΝΡ ингибитор, ВюСгуз!)

Ранпирназа (стимулятор рибонуклеазы, А1Тасе11) Галарубицин (Ингибитор синтеза РНК, Оопд-А) Тирапазамин (восстановительный препарат, 8ΚΙ 1п(егпа1юпа1) Ν-Ацетилцистеин (восстановительный препарат, гатЬоп) К-Флурбипрофен (Ингибитор ΝΕ-карраВ, Епсоге)

ЗСРА (Ингибитор ΝΕкарраВ, Αοΐΐνβ Вю1есЬ) Сеокальцитол (агонист рецептора витамина ϋ, 1_ео) 131-Ι-ΤΜ-601 (Антагонист ДНК, Тгап8Мо1еси1аг) Эфломитин (СЮС ингибитор, ИЕХ Опсо1оду) Минодроновая кислота (ингибитор остеокласта, УатапоисЫ) Индисулам (р53 стимулятор, ΕΪΒΒΪ) Аплидин (РРТ ингибитор, РИагтаМаг)

Ритуксимаб (Антитело СО20, (Зепеп(есЬ)

Гемтузумаб (Антитело СОЗЗ, \Л/уе1Н Ауегз!) РС2 (стимулятор гемопоэза, РЬагтадепез1з) 1ттипо1™ (триклозановая жидкость для полоскания рта, Εηάο) Триацетилуридин (уридиновое пролекарство, \Л/е11з1а1) 8Ν-4071 (саркомовый препарат, 8|дпа!иге

- 16 019534

	протеасомы, ΜΐΙΙβηηϊιιΠΊ)	Вю8с1епсе)
	5КЫ72 (Стимулятор Т-	Тгап8МЮ-107™
	клеток, 8К РНагта)	(иммунотоксин, КЗ
	ΤίΚ-286 (ингибитор	ВютесНх)
	глютатион-8 трансферазы,	РСК-3145 (стимулятор
	ТеНк)	апоптоза, Ргосуоп)
	РТ-100 (агонист фактора	Доранидазол (стимулятор
	роста, Ροΐηΐ ТНегареийсз)	апоптоза, Ро1а)
	Мидостаурин (РКС	СН8-828 (цитотоксическое
	ингибитор, ΝονθΓΐίδ)	средство, 1_ео)
	Бриостатин-1 (РКС	Транс-ретиноевая кислота
	стимулятор, 6РС Βϊοϊθοϊί)	(дифференциатор, ΝΙΗ)
	СОА-П (стимулятор апоптоза,	МХ6 (стимулятор апоптоза,
	ΕνβΓϋίβ)	ΜΑΧΙΑ)
	8ϋΧ-101 (стимулятор	Апомин (стимулятор
	апоптоза, 8а1тес1|х)	апоптоза, ИЕХ Опсо1оду)
	Цефлатонин (стимулятор	Уроцидин (стимулятор
	апоптоза, СИетСепех)	апоптоза, ВюлюЬе) Ко-31-7453 (стимулятор апоптоза, 1_а КосКе) Бросталлицин (стимулятор апоптоза, РНагтас1а)
Алкилирующие	Циклофосфамид	Ломустин
препараты	Бусульфан	Прокарбазин
	Ифофамид	Аптретамин
	Мелфалан	Эстрамустин фосфат
	Г ексаметилмеламин	Мехлорэтамин
	Тиотепа	Стрептозоцин
	Хлороамбуцил	Темозоломид
	Дакарбазин Кармустин	Семустин
Платиновые	Цисплатин	Карбоплатин
препараты	Оксалиплатин	Ζϋ-0473 (АпогМЕО)
	Спироплатин	Лабоплатин (Ае1ета)
	Карбоксифталатоплатина	Сатраплатин (ΰοΐΊΠδοη
	Тетраплатин	МайИеу)
	Ормиплатин	ВВК-3464
	Ипроплатин	(Нойтпапп-1_а КосЬе) 8М-11355 (битИото) АР-5280 (Ассевв)
Антиметаболиты	Азацитидин	Томудекс
	Гемцитабин	Триметрексат
	Капецитабин	Деоксикоформицин
	5-фторурацил	Флударабин
	Флоксуридин	Пентостатин
	2-хлордезоксиаденозин	Ралтитрексед
	6-Меркаптопурин	Г идроксимочевина

- 17 019534

	6-Тиогуанин Децитабин (бирегбеп) Цитарабин Клофарабин (Βίοβηνίδίοη) 2-фтордезоксицитидин Ирофульвен (МС1 РЬагша) Метотрексат ЭМЭС (НоИтапп-1_а КосЬе) Идатрексат Этинил цитидин (ТаЛзо )
Топоизомеразы ингибиторы	Амсакрин Рубитекан (Зирегбеп) Эпирубицин Эксатекан мезилат (ЭаПсЫ) Этопозид Ои'татес! (СЬетСепех) Тенипозид или митоксантрон Гиматекан (8|дта- Таи) Иринотекан (СРТ-11) Дифломотекан (ВеаиГоиг- 7-этил-Ю- 1рзеп) гидроксикамптотецин ТА8-103 (ТаЛто) Топотекан Элсамитруцин (8рес1гит) Дексразоксанет (ТороТагде!) ΰ-107088 (Мегск & Со) Пиксантрон (Ь^изрпагта) ΒΝΡ-1350 (ВюМитепк) Аналог ребеккамицина СКЭ-602 (СЬопд Кип Эапд) (ΕχβΙίχίδ) Κνν-2170 (Ку ома Накко) ВВВ-3576 (ЫоуизрЬагта)
П роти воопухолевые антибиотики	Дактиномицин Амонафид (Актиномицин Э) Азонафид Доксорубицин (Адриамицин) Антрапиразол Деоксирубицин Оксантразол Валрубицин Лосоксантрон Даунорубицин (Дауномицин) Блеомицин сульфат Эпирубицин (Бленоксан) Терарубицин Блеомициновая кислота Идарубицин Блеомицин А Рубидазон Блеомицин В Пликамицин Митомицин С Порфиромицин ΜΕΝ-10755 (МепаппО Цианоморфолинодоксо- 6РХ-ЮО(Оет рубицин РЬагтасеийса18) Митоксантрон (ΝονβηίΓοη)
Анти м итотические препараты	Паклитаксел 8В 408075 (С1ахо8тИЬКНпе) Доцетаксел Е7010 (АЬЬой) Колхицин ΡΟ-ΤΧΪ (СеП ТЬегареиЬсэ) Винбластин ΙϋΝ 5109 (Вауег) Винкристин А 105972 (АЬЬоН) Винорелбин А 204197 (АЬЬой) Виндезин Ι_ΙΙ 223651 (ВАЗЕ) Доластатин 10 (ΝΘΙ) ϋ 24851 (А8ТА МесКса) Ризоксин (Еи^еама) ЕК-86526 (Είδθί) Мивобулин 0Л/атег-1_атЬег1) Комбретастатин А4 (ВМ8) Цемадотин (ВАЗЕ) Изогомогалихондрин-В КРК 109881Α (Ανβηίίδ) (РпагтаМаг) ТХЭ 258 (Ανβηίίδ) ΖΟ 6126 (Ав1гагепеса) Эпотилон В (ΝονβΓίίδ) РЕС-Паклитаксел (Εηζοη)

- 18 019534

	Т 900607 (Ти1апк) ΑΖ10992 (АзаЫ) Т 138067 (Ти1апк) ΙϋΝ-5109 (1пйепа) Криптофицин 52 (Ей 1_Н1у) АХ/ЬВ (Ргезс1еп1 Винфлюнин (РаЬге) ЫеигоРНагта) Ауристатин РЕ (Те1коки Азаэпотилон В (ВМ8) Ногтопе) ΒΝΡ- 7787 (ВюМитепк) ВМ8 247550 (ВМ8) СА-4-ргос1гид (ΟΧΐΟΕΝΕ) ВМ8 184476 (ВМ8) Доластатин-10 (ΝγΗ) ВМ8 188797 (ВМ8) СА-4 (ΟΧΐΟΕΝΕ) Таксопрексин (РгсЯагаа)
Ингибиторы ароматазы	Аминоглутетимид Эксеместан Летрозол Атаместан (ΒϊοΜβάΐοίηβε) Анастразол ΥΜ-511 (УатапоисЫ) Форместан
Ингибиторы тимидилатсинтазы	Пеметрексед (ЕН ЫНу) Нолатрексед (ΕχΐπΊΐθδ) Ζϋ-9331 (ВТО) СоЕасЮг™ (ВюКеуз)
Антагонисты ДНК	Трабектедин (РЬагтаМаг) Мафосфамид (Вах1ег Глюфосфамид (Вах!ег 1п1егпа1юпа1) 1п1егпа11опа1) Апазиквон (Зресйит Альбумин + 32Р (Ιεοίορε РНагтасеийса18) 6о1ийоп8) 06-бензилгуанин (РаПдеп!) Тимектацин (ΝβννΒΐοίΐοδ) Эдотреотид (ΝονβΓΐΐε)
Ингибиторы фарнезилтрансферазы	Арглабин (ЫиОпсо1оду 1_аЬз) Типифарниб (ϋοΚηδοη & лонафарниб (Зсйеппд- ΰοΚηδοη) Р1оидИ) Периллиловый спирт (ϋΟΡ ΒΑΥ-43-9006 (Вауег) ВюРйагта)
Ингибиторы протонного насоса	СВТ-1 (СВА Рйагта) Зосуквидар тригидрохлорид Тапяшдаг (Хепоуа) (ЕН !_Н1у) М8-209 (ЗсНеплд АС) Бирикодар дицитрат (Х/ег1ех)
Ингибиторы гистонацетил трансферазы	Тацединалин (РЛгег) Пивалоилоксиметил 8АНА (Αίοη РЬагта) бутират (Тйал) М8-275 (ЗсНеппд АС) Депсипептид (Еилэаууа)
Ингибиторы металлопротеиназы Ингибиторы рибонуклеозид редуктазы	Неовастат (Ае!егпа СМТ -3 (СоПаСепех) 1_аЬога1опез) ВМ8-275291 (СеШесК) Маримастат (ΒπΐϊεΐΊ ΒΐοΐβοΙι) Тезацитабин (Ανεηΐΐε) Малтолат галлия (ТЛап) Дидокс (Мо1еси1ез Тог Триапин (νΐοη) НеаКЬ)
ΤΝΕ-альфа агонисты/ антагонисты	Вирулизин (Ьогиз Ревимид (Се1депе) ТНегареийсз) СОС-394 (Се!депе)

- 19 019534

Антагонисты рецептора эндотелина-А	Атрасентан (АЬЬоЦ Ζϋ-4054 (Аз1га7епеса)	ΥΜ-598 (УатапоисЫ)
Агонисты рецептора	Фенретинид	Апитретиноин (Ыдапд)
ретиноевой кислоты	(ΰοήηβοη & ΰοΐιηβοη) Κ3ϋ-1550 (Ыдапс!)
Иммуномодуляторы	Интерферон	Оехозогпе терапия (Апозуз)
	Онкофаг (Апйдепюз)	Пентрикс (Аиз1га1|ап Сапсег
	ОМК (Ргодепюз)	ТесЬпо1оду)
	Вакцина аденокарциномы	ϋδΕ-154 (Тгадеп)
	(Вюгтпга)	Раковая вакцина (1п1егсе11)
	СТР-37 (Ανί ВюРЬагта)	Норелин (Вюз1аг)
	ΰΡΧ-2 (1ттипо-Кх)	ВЬР-25 (Вюпгпга)
	РЕР-005 (РерНп Вю1есЬ)	М6\/ (Ргодепюз)
	Вакцины ЗупсЬгоуах (СТ1_	!3-А1еф|п (ΟονβΐθϊΙ)
	1ттипо) Вакцина меланомы (СТ1_ 1ттипо) р21-КА8 вакцина (Оет\/ах)	С1_1_-ТЬега (Х/азодеп)
Гормональные и	Оэстрогены	Преднизон
антигормональные	Конъюгированные оэстрогены Метилпреднизолон
препараты	Этинилоэстрадиол	Преднизолон
	хлортрианизен	Аминоглутетимид
	Иденестрол	Леупролид
	Гидроксипрогестерон капроат Гозерелин
	Медроксипрогестерон	Лейпрорелин
	Тестостерон	Бикалутамид
	Тестостеронпропионат	Флутамид
	Флуоксиместерон	Октреотид
	Метилтестостерон	Нилутамид
	Диэтилстильбэстрол	Митотан
	Мегестрол	Р-04 (Иоуодеп)
	Тамоксифен	2-Метоксиоэстрадиол
	Торемофин	(Еп1геМеб)
	Дексаметазон	Арзоксифен (ЕН 1 Н1у)
Фотодинамические	Талапорфин (ЫдМ 8с1епсез)	Рб-Бактериофеофорбид
препараты	Тералюкс (ТЬега1есЬпо1од1ез)	(Уес1а)
	Мотексафин-Г адолиний	Лютеций-Тексафирин
	(РЬагтасусНсз)	(РКагтасусНсз) Гиперицин

- 20 019534

Ингибиторы тирозинкиназы

Иматиниба (Моуагйэ) Лефлуномид (8идеп/Рпагтас1а) ΖϋΙ839 (Азйагепеса) Эрлотиниб (Опсодепе 8с1епсе)

Канертиниб(Рйгег) Скваламин (Сепаега) 8115416 (РНагтас1а) 8иб668 (Рпагтас1а) ΖΟ4190 (Ав(гагепеса) Ζϋ6474 (Авйагепеса) Ваталаниб (ΝονβΓΐΐδ) РКП 66 (ΝονθΠΐδ)

СШ2016 (61ахо8тИМКНпе) ЕКВ-509 (ШуеЦ)

ЕКВ-569 (УУуеЦ)

Различные препараты

8К-27897 (ССК-А ингибитор, 8апой-8упЦе1аЬо) Токладезин (циклический АМР агонист, К|ЬарЬагт) Альвоцидиб (СОК ингибитор, Ανεηίίδ)

СУ-247 (СОХ-2 ингибитор, |уу МесНса1)

Р54 (СОХ-2 ингибитор, РНу1орЬагт)

СарСеП™ (СУР450 стимулятор, Вауапап ΝοΓάϊο) СС8-ЮО (да13 антагонист, О1усоСепе8уз)

С17ОТ иммуноген (ингибитор гастрина, Αρήίοη) Афапроксирал (оксигенатор, АНоз ТЬегареийсз)

ΡΙ-88 (ингибитор гепараназы, Ргодеп)

Тесмилифен (антагонист гистамина, ΥΜ ВюЗаепсез) Гистамин (агонист рецептора гистамина Н2 , Мах1пл) Тиазофурин (ΙΜΡϋΗ ингибитор, К|ЬарЬагт) Циленгитид (антагонист интегрина, Мегск КСаА) 8Р-31747 (И_-1 антагонист, 8апой-8уп1Ье1аЬо) СС1-779 (ингибитор киназы тТОК, УУуеЦ)

Эксисулинд (ΡϋΕ-ν ингибитор, СеП Райжауз) СР-461 (ΡϋΕ-ν ингибитор, СеП РаЩу/ауз)

АС-2037 (САЙТ ингибитор, ΡίΐζβΓ)

ШХ-иК1 (ингибитор активатора плазмогена, ννίΐβχ)

ΡΒΙ-1402 (ΡΜΝ стимулятор, РгоМейс 1_йе8с1епсез) Бортезомид (ингибитор протеасомы, МП1епп1ит) 8Ш-172 (Стимулятор Тклеток, 8К РЬагта) ТЬК-286 (ингибитор глютатион-8 трансферазы, ТеПк)

РТ-100 (агонист фактора роста, Ροΐηΐ ТИегареийсз) Мидостаурин (РКС ингибитор, ΝονθΓίΐδ) Бриостатин-1 (РКС стимулятор, СРС Вю1есЬ) СРА-П (стимулятор апоптоза, ΕνβΓϋΐβ)

8РХ-101 (стимулятор апоптоза, 8а1тесПх) Цефлатонин (стимулятор апоптоза, СИетСепех)

Кагалид Е (РЬагтаМаг) СЕР- 701 (Сергалоп) СЕР-751 (Сергалоп) ΜΙ.Ν518 (МШепшт) РКС412 (ΝονθΓΐίδ) Феноксодиол О Трастузумаб (Сепеп1есЬ) С225 (1тС1опе) гЬи-МаЬ (СепеЫесЬ) 1УЮХ-Н210 (Мебагех) 2С4 (Сепеп1есЬ) ΜϋΧ-447 (Мебагех) АВХ-ЕСЕ (АЬдеп)х) 1МС-1С11 (1тС!опе)

ВСХ-1777 (ΡΝΡ ингибитор, ВюСгуз1)

Ранпирназа (стимулятор рибонуклеазы, А1Гасе11) Галарубицин (Ингибитор синтеза РНК, Оопд-А) Тирапазамин (восстановительный препарат, 8ΡΙ 1п1егпайопа1) Ν-Ацетилцистеин (восстановительный препарат, Ζβιτιβοη) Р-Флурбипрофен (Ингибитор ΝΕ-карраВ, Епсоге)

ЗСРА (Ингибитор ΝΡкарраВ, Αοΐΐνβ Вю1есЬ) Сеокальцитол (агонист рецептора витамина ϋ, 1_ео) 131-Ι-ΤΜ-601 (Антагонист ДНК, ТгапэМо1еси1аг) Эфломитин (СЮС ингибитор, ИЕХ Опсо1оду) Минодроноваякислота (ингибитор остеокласта, УатапоисЫ)

Индисулам (р53 стимулятор, Е|за’|) Аплидин (РРТ ингибитор, РНаппаМаг)

Ритуксимаб (Антитело СР20, СепеЫесЬ)

Гемтузумаб (Антитело СРЗЗ, \Л/уе1Ь Ауегз{) РС2 (стимулятор гемопоэза, РЬагтадепе818) 1ттипо1™ (триклозановая жидкость для полоскания рта, Εηάο)

Т риацетилуридин (уридиновое пролекарство, ννβΙΙείθί)

8Ν-4071 (саркомовый препарат, 8|дпа1иге Вю8с1епсе) ТгапзМЮ-107™ (иммунотоксин, КЗ ВютесНх)

РСК-3145 (стимулятор апоптоза, Ргосуоп) Доранидазол (стимулятор апоптоза, Ро1а)

СН8-828 (цитотоксическое средство, 1_ео) Транс-ретиноевая кислота (дифференциатор, ΝΙΗ) МХ6 (стимулятор апоптоза, ΜΑΧΙΑ)

Апомин (стимулятор апоптоза, ЦЕХ Опсо1оду) Уроцидин (стимулятор апоптоза, Βΐοπΐοήβ) Ко-31-7453 (стимулятор апоптоза, 1_а Коспе) Бросталлицин (стимулятор апоптоза, Рпагтас1а)

Комбинированное лечение такого типа может быть достигнуто при помощи одновременного, последовательного или отдельного распределения отдельных компонентов лечения. Комбинированные

- 21 019534 продукты такого типа могут использовать соединения согласно изобретению.

Анализы.

Соединения формулы I, описанные в примерах, были протестированы с помощью анализов, описанных ниже, и было найдено, что они имеют ингибирующую активность в отношении киназы. Другие анализы, которые известны из литературы, могут легко быть применены специалистом в данной области техники (см., например, БйапаЬа1 е! а1., Сапсег Кек., 59:189-197; Χίη е! а1., 1. Βίο1. Сйет., 274:9116-9121; 8йеи е! а1., Апйсапсег Кек., 18:4435-4441; Ликргипк е! а1., Беу. Βίο1., 38:237-248; С1тЬгопе е! а1., I. Хай. Сапсег 1пк!., 52:413-427; №сок1а е! а1., 1п Уйго, 18:538- 549).

Измерение активности Ме! киназы.

Соответственно данным производителя (Ме!, асОуе, Ирк!а!е, кат. Νο. 14-526) Ме! киназу экспрессировали для целей производства белка в клетках насекомого (8121; 8. 1гид1регйа) и последующей очистки аффинной хроматографией как Ν-концевого 6Н1к-меченого рекомбинантного человеческого белка в экпрессирующем бакуловирусном векторе.

Активность киназы может быть измерена, используя различные доступные измерительные системы. В способе сцинтилляционного сближения (8огд е! а1., 1. о1 В1ото1еси1аг 8сгеешпд, 2002, 7, 11-19), в Р1акйр1а!е способе или тесте связывания на фильтрах радиоактивная фосфорилизация белка или пептида как субстрата измеряется, используя меченные радионуклидами АТФ (³²Р-АТФ, ³³Р-АТФ). В случае присутствия ингибирующего соединения может быть определено уменьшение радиоактивного сигнала или полное его отсутствие. Кроме того, как способы анализа могут быть применены методики резонансного переноса энергии флуоресценции с однородным временным разрешением (НТК-РКЕТ) и флуоресцентной поляризации (РР) (8111к е! а1., 1. Вюто1еси1аг 8сгеешпд, 2002, 191-214).

Другие нерадиоактивные способы твердофазного иммуноферментного анализа используют специфические фосфоантитела (рйокрйо АВк). Фосфоантитело связывает только фосфорилированный субстрат. Это связывание может быть детектировано хемилюминесценцией, используя вторичное конъюгированное с пероксидазой антитело (Кокк е! а1., 2002, Вюсйет. 1.).

Р1акйр1а!е способ (Ме! киназа).

Используемыми тестовыми планшетами являлись 96-ячеечные Р1акйр1а!е® микротитрационные планшеты от Регкт Е1тег (кат. № 8МР200). Компоненты реакции киназы, описанные ниже, вносились пипеткой на аналитический планшет. Ме! киназа и субстрат поли А1а-С1и-Ьук-Туг, (рАСЬТ, 6:2:5:1), инкубировались на протяжении 3 ч, при комнатной температуре с меченным радионуклидом ³³Р-АТФ в присутствии и в отсутствие тестируемых соединений в общем объеме 100 мкл. Реакция прекращалась, используя 150 мкл 60 мМ раствора ЭДТА. После инкубации на протяжении дополнительных 30 мин при комнатной температуре супернатанты фильтровали откачиванием и ячейки промывали три раза 200 мкл 0,9% раствором №1С1 каждый раз. Измерение скачка радиоактивности определяли при помощи прибора измерения сцинтилляции (Торсоип! ΝΧΤ, Регк1п-Е1тег).

Используемое полное значение являлось реакцией без ингибитора киназы. Она должна быть в пределах 6000-9000 срт (число импульсов в 1 мин). Используемое фармакологическое нулевое значение является страуроспорином в конечной концентрации 0,1 мМ. Ингибирующие значения (1С₅₀) определены, используя программу К81_МТ8.

Условия реакции киназы на ячейку: 30 мк буфера для анализа 10 мкл субстрата, который будет тестироваться в буфере для анализа с 10% ДМСО 10 мкл АТФ (конечная концентрация 1 мкМ точно, 0,35 мкКи ³³Р-АТФ) 50 мкл смеси Ме! киназа/субстрат в буфере для анализа; (10 нг фермент/ячейка, 50 нг рАСЬТ/ячейка).

Используемые растворы.

Буфер для анализа:

мМ НЕРЕ8 (Х-2-гидроксиэтилпиперазин-Х-2-этансульфоновая кислота), мМ хлорида магния, мкМ ортованадата натрия, мМ хлорида марганца(П), мМ дитиотреитола (БТТ) рН 7,5 (чтобы установить, используется ли гидроксид натрия).

Тормозящий раствор:

мМ Тйпр1ех III (ЭДТА), ³³Р-АТФ: Регкт. Е1тег;

Ме! ктаке: Ирк1а!е, кат. № 14-526, 8!оск 1 мкг/10 мкл; крес. асйуйу 954 и/тд;

Ро1у-А1а-С1и-Ьук-Туг, 6:2:5:1: 81дта кат. № Р1152.

[п-у|уо тесты.

Экспериментальная методика.

Женские особи мышей Ва1Ь/С (Ьгеейег: Сйаг1ек К1уег ^1да) 5 недель по прибытии. Они были акклиматизированы до наших условий содержания на протяжении 7 дней. Каждой мыши впоследствии было введено подкожно в область таза 4 млн ТРК-Ме1/МН3Т3 клеток в 100 мкл РВ8 (фосфатно-солевой буферный раствор) (без Са++ и Мд++). После 5 дней животные были случайным образом поделены на 3 группы таким образом, что каждая группа из 9 мышей имела среднее значение объема опухоли 110 мкл

- 22 019534 (пределы: 55-165). 100 мкл среды (0,25% метилцеллюлозы/100 мМ ацетатного буфера, рН 5,5) были введены ежедневно контрольной группе и 200 мг/кг А56 или А91, растворенных в среде (объем также 100 мкл/животное), были введены ежедневно группам, которые поддавались лечению, в каждом случае желудочным зондом. После 9 дней контрольные образцы имели среднее значение объема 1530 мкл, и эксперимент был закончен.

Измерение объема опухоли.

Длина (Ь) и ширина (В) были измерены, используя штангенциркуль с нониусом, и объем опухоли был рассчитан по формуле ЬхВхВ/2.

Условия содержания: 4 или 5 животных на клетку, кормление коммерческой едой для мышей (8шГГ).

Выше и ниже, все температуры определяются в °С. В следующем примере обычное исследование означает: вода добавляется, если необходимо, рН корректируется, если необходимо, до значений между 2 и 10, в зависимости от состава конечного продукта, смесь экстрагируется этилацетатом или дихлорметаном, фазы разделяются, органическая фаза высушивается над сульфатом натрия и испаряется и остаток очищается хроматографически на силикагеле и/или кристаллизацией. КГ значения на силикагеле; элюент: этилацетат/метанол 9:1.

Масс-спектрометрия (М8):

ΕI (ионизация электронным ударом) М⁺,

ЕЛБ (бомбардировка ускоренными атомами) (М+Н)⁺,

ЕИ (ионизация электрораспылением) (М+Н)⁺,

АРСЗ-МЗ (химическая ионизация при атмосферном давлении-масс-спектрометрия) (М+Н)⁺, т.пл.=температура плавления [°С].

Способы ВЭЖХ.

Способ А:

градиент: 4,5 мин/расход: 3 мл/мин 99:01-0:100, вода+0,1 об.%, ТЕЛ (трифторуксусная кислота): ацетонитрил+0,1 об.% ТЕЛ (трифторуксусная кислота),

0,0-0,5 мин: 99:01,

0,5-3,5 мин: 99:01 >0:100.

3,5-4,5 мин: 0:100.

Колонка: СйготоШК δρββάΚΘΌ КР18е 50-4,6.

Длина волны: 220 нм.

Способ В:

градиент: 4,2 мин/ расход: 2 мл/мин 99:01-0:100, вода+0,1 об.% ТЕА (трифторуксусная кислота): ацетонитрил+0,1 об.% ТЕА (трифторуксусная кислота),

0,0-0,2 мин: 99:01,

0,2-3,8 мин: 99:01>0:100,

3,8-4,2 мин: 0:100.

Колонка: СйготоШЕ РегГогтапсе КР18е; 100 мм длины, внутренний диаметр 3 мм,

Длина волны: 220 нм.

Время удерживания Κι в минутах [мин].

- 23 019534

Пример 1. Получение 3-[3-(5-бромпиримидин-2-ил)бензил]-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазина (А1) осуществляли аналогично следующей схеме:

1.1. 2,70 кг (18,0 моль) йодида натрия прибавляли порциями при комнатной температуре к смеси 5,0 л воды и 11,3 л 57% водной йодисто-водородной кислоты (75,2 моль). Затем к раствору прибавляли порциями 2,00 кг (13,4 моль) 3,6-дихлорпиридазина, поддерживая температуру 20°С. Реакционную смесь перемешивали при 20°С в течение 18 ч. К реакционной смеси прибавляли 10 л трет-бутилметилового эфира и 4 л воды. Органическую фазу отделяли, промывали водой и водным раствором сульфита натрия. Органическую фазу выпаривали, прибавляли гептан, полученный осадок отфильтровывали с отсасыванием и промывали гептаном. Остаток сушили в вакууме: 3-хлор-6-йодпиридазин в виде бесцветных листовидных кристаллов; Ε8Ι 241.

1.2. 705 г (3,39 моль) пинаколил 1-метил-1Н-пиразол-4-бороната и 1,44 кг тригидрата трикалийфосфата прибавляли к раствору 815 г (3,39 моль) 3-хлор-6-йодпиридазина в 3,8 л 1,2-диметоксиэтана. Полученную суспензию нагревали до 80°С под азотом и при перемешивании и прибавляли 59,5 г (85 ммоль) бис-(трифенилфосфин)палладий(11) хлорида. Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 3 ч. Смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и прибавляли 9 л воды. Полученный осадок отфильтровывали с отсасыванием, промывали водой и сушили в вакууме: 3-хлор-6-(1-метил-1Нпиразол-4-ил)пиридазин в виде коричневых кристаллов; Ε8Ι 195.

1.3. 4,86 мл (100 ммоль) гидроксида гидразина прибавляли к раствору 11,5 г (50,0 ммоль) метил 3бромфенилацетата в 35 мл 1-бутанол и смесь нагревали при кипении в течение 90 мин. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Полученный осадок отфильтровывали с отсасыванием, промывали петролейным эфиром и сушили в вакууме: (3-бромфенил)ацетогидразид в виде бесцветных тонких игл; Ε8Ι 229, 231.

1.4. Суспензию 3,89 г (20,0 ммоль) 3-хлор-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиридазина и 4,58 г (20,0 ммоль) (3-бромфенил)ацетогидразида в 40 мл 1-бутанол нагревали при 130°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали и разделяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и упаривали. Остаток хроматографировали на колонке с силикагелем при помощи смеси дихлорметан/трет-бутил метиловый эфир/метанол как элюент: 3-(3-бромбензил)-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин в виде бежевых кристаллов; Ε8Ι 369, 371.

1.5. 1,57 мг (16,1 ммоль) ацетата калия прибавляли к раствору 2,10 г (5.35 ммоль) 3-(3-бромбензил)6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина и 1,77 г (6.95 ммоль) бис-(пинаколато)дибора в 11 мл ΌΜΕ и смесь нагревали до 80°С под азотом. Затем прибавляли 118 мг (0,16 ммоль) 1,1-бис(дифенилфосфино)ферроценпалладий(П) дихлорид и смесь перемешивали при 80°С в течение 3 ч. Реакционную смесь разделяли между водой и дихлорметаном. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и упаривали. Остаток нагревали с трет-бутил метиловым эфиром, оставляли охлаждаться и отфильтровывали с отсасыванием, промывали трет-бутил метиловым эфиром и сушили в вакууме: 6-(1метил-1Н-пиразол-4-ил)-3-[3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензил]-1,2,4-триазоло[4,3Ь]пиридазин в виде зеленых кристаллов; Ε8Ι 417.

1.6. Раствор 581 мг (5,48 ммоль) карбоната натрия в 2,7 мл воды прибавляли к суспензии 1,14 г (2,74 ммоль) 6-(1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-3-[3 -(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензил] -

1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина в 2,7 мл толуола и 5,4 мл этанола и смесь нагревали до 80°С под азотом. Затем прибавляли 780 мг (2,74 ммоль) 5-бром-2-йодпиримидина и 38,4 мг (0,06 ммоль) бис

- 24 019534 (трифенилфосфин)палладий(П) хлорида и реакционную смесь перемешивали при 80°С под азотом в течение 18 ч. Реакционную смесь разделяли между водой и дихлорметаном. Органическую фазу выпаривали и остаток хроматографировали на колонке с силикагелем смесью петролейных эфир/дихлорметан/метанол как элюент: 3-[3-(5-бромпиримидин-2-ил)бензил]-6-(1-метил-1Н-пиразол-4ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин (А1) в виде бесцветных кристаллов; Ε8I 447/449; ¹Н-ЯМР (й₆ЭМ8О): δ [м.д.] 3,93 (к, 3Н), 4,63 (к, 2Н), 7,50 (ί, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,63 (й!, 11=7,5 Гц, 12=1,5 Гц, 1Н), 7,66 (й, 1=9,3 Гц, 1Н), 8,20 (к, 1Н), 8,23 (й!, 11=7,4 Гц, 12=1,3 Гц, 1Н), 8,32 (й, 1=9,6 Гц, 1Н), 8,48 (ί, 1=1,5 Гц, 1Н), 8,51 (к, 1Н), 9,06 (к, 2Н).

Пример 2. Получение 6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-3-(3-{5-[1-(2-пирролидин-1-илэтил)-1Нпиразол-4-ил]пиримидин-2-ил}бензил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина (А2) осуществляли аналогично следующей схеме:

2.1. 17,5 г (101 ммоль) гидрохлорида ^(2-хлорэтил)пирролидина и 49,4 г (152 ммоль) карбоната цезия прибавляли к раствору 10,0 г (50,5 ммоль) пинаколил пиразол-4-бороната в 100 мл ацетонитрила. Полученную суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтровали с отсасыванием и промывали ацетонитрилом. Фильтрат выпаривали и разделяли между этилацетатом и насыщенным раствором хлорида натрия. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и упаривали: 1-(2-пирролидин-1-илэтил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Нпиразол в виде бледно-оранжевого масла, которое постепенно кристаллизуется; ¹Н-ЯМР (й₆-ЭМ8О): δ [м.д.] 1,25 (к, 12Н), 1,65 (т, 4Н), 2,44 (т, 4Н), 2,79 (ί, 1=6,8 Гц, 2Н), 4,21 (ί, 1=6,8 Гц, 2Н), 7,56 (к, 1Н), 7,93 (к, 1Н).

2.2. Суспензию 112 мг (0,25 ммоль) 3-[3-(5-бромпиримидин-2-ил)бензил]-6-(1-метил-1Н-пиразол-4ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина, 100 мг (0,30 ммоль) 1-(2-пирролидин-1-илэтил)-4-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола и 106 мг (0,50 ммоль) тригидрата трикалийфосфата в 2 мл 1,2-диметоксиэтана нагревали до 80°С под азотом. Затем прибавляли 14 мг (20 мкмоль) бис(трифенилфосфин)палладий(П) хлорида и одну каплю триэтиламина и смесь перемешивали при 80°С в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждали и разделяли между водой и дихлорметаном. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и упаривали. Остаток хроматографировали на колонке с силикагелем при помощи смеси дихлорметан/метанол как элюент: 6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-3-(3-{5-[1-(2пирролидин-1-илэтил)-1Н-пиразол-4-ил]пиримидин-2-ил}бензил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин (А2) в виде бесцветных кристаллов; Ε8I 532; ¹Н-ЯМР (й₆-ОМ8О): δ [м.д.] 1,67 (т, 4Н), 2,48 (т, 4Н), 2,87 (ί, 1=6,6 Гц, 2Н), 3,93 (к, 3Н), 4,27 (ί, 1=6,6 Гц, 2Н), 4,64 (к, 2Н), 7,48 (ί, 1=8 Гц, 1Н), 7,57 (й, 1=8 Гц, 1Н), 7,67 (й, 1=9,6 Гц, 1Н), 8,09 (к, 1Н), 8,20 (к, 1Н), 8,26 (й, 1=7,8 Гц, 1Н), 8,33 (й, 1=9,6 Гц, 1Н), 8,44 (к, 1Н), 8,50 (Ьк, 1Н), 8,52 (к, 1Н), 9,12 (к, 2Н).

Пример 3. Получение 3-{[3-(5-бромпиримидин-2-ил)фенил]дифторметил}-6-(1-метил-1Н-пиразол4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина (А3) осуществляли аналогично следующей схеме:

3.1. 12,3 мл (253 ммоль) гидроксида гидразина прибавляли к раствору 15,0 г (50,5 ммоль) этил (3

- 25 019534 бромфенил)дифторацетата (получен согласно ШО 2007/014454) в 200 мл метанола и смесь перемешивали при 45°С в течение 10 мин. Реакционную смесь выпаривали. Остаток обрабатывали дихлорметаном и фильтровали. Остаток обрабатывали водой, фильтровали, промывали водой и сушили в вакууме: (3бромфенил)дифторацетогидразид в виде слегка желтоватых кристаллов; Е^ 265/267.

3.2. Суспензию 4,18 г (20,0 ммоль) 3-хлор-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)пиридазина и 5,46 г (20,0 ммоль) (З-бромфенил)дифторацетогидразида в 87 мл 1-бутанола нагревали при 30°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали и перемешивали при комнатной температуре в течение 4 дней. Полученный осадок отфильтровывали с отсасыванием и остаток хроматографировали на колонке с силикагелем при помощи смеси дихлорметан/метанол как элюент: 3-[(3-бромфенил)дифторметил]-6-(1-метил-1Н-пиразол4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин в виде бесцветного порошка; Е^ 405/407; ¹Н-ЯМР (ά₆-ΌΜ8Ο): δ [м.д.] 3,95 (8, 3Н), 7,55 (ΐ, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,76 (ά, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,83 (ά, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,86 (ά, 1=9,5 Гц, 1Н), 7,97 (8, 1Н), 8,09 (8, 1Н), 8,49 (ά, 1=9,5 Гц, 1Н), 8,51 (8, 1Н).

3.3. 2,45 г (25,0 ммоль) ацетата калия прибавляли к раствору 3,38 г (8,33 ммоль) 3-[(3бромфенил)дифторметил]-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина и 2,65 г (10,4 ммоль) бис-(пинаколато)дибора в 17 мл ΌΜΓ, и смесь нагревали до 80°С под азотом. Затем прибавляли 175 мг (0,25 ммоль) бис-(трифенилфосфин)палладий(П) хлорида и смесь перемешивали при 80°С в течение 18 ч. Реакционную смесь разделяли между водой и дихлорметаном. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и упаривали. Остаток нагревали с трет-бутилметиловым эфиром, оставляли охлаждаться, отфильтровывали с отсасыванием, промывали трет-бутилметиловым эфиром и сушили в вакууме: 3-{дифтор[3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]метил}-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-

1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин в виде бесцветных кристаллов; Е^ 453.

3.4. Раствор 1,07 г (10,1 ммоль) карбоната натрия в 5 мл воды прибавляли к суспензии 2,31 г (5,06 ммоль) 3-{дифтор-[3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]метил}-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина в 5 мл толуола и 10 мл этанола и смесь нагревали до 80°С под азотом. Затем прибавляли 1,44 г (5,06 ммоль) 5-бром-2-йодпиримидина и 71 мг (0,10 ммоль) бис(трифенилфосфин)палладий(П) хлорида и реакционную смесь перемешивали при 80°С под азотом в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, прибавляли воду и смесь фильтровали с отсасыванием. Остаток обрабатывали этанолом, перемешивали несколько минут и опять отфильтровывали с отсасыванием. Остаток сушили в вакууме: 3-{[3-(5-бромпиримидин-2ил)фенил]дифторметил}-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин в виде бежевого порошка; Е:^ 483,485; ¹Н-ЯМР (ά₆-ΌΜ8Ο): δ [м.д.] 3,92 (8, 3Н), 7,76 (ΐ, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,83 (ά, 1=9,9 Гц, 1Н), 7,95 (ά, 1=7,8 Гц, 1Н), 8,11 (8, 2Н), 8,46 (8, 2Н), 8,47 (ά, 1=9,8 Гц, 1Н), 8,58 (ά, 1=7,5 Гц, 1Н), 8,80 (Ь8, 1Н), 9,18 (8, 2Н).

Соединение 3-(3-{[3-(5-бромпиримидин-2-ил)фенил]дифторметил}-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин6-ил)бензонитрил (А3а)

Е^ 504/506, получен аналогично.

Пример 4. Аналогично получению А1 соединение А4 получено исходя из метил 1-(3бромфенил)циклопропанкарбоксилата

- 26 019534

Пример 5. Получение 3-{3-[3-(5-бромпиримидин-2-ил)бензил]-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин-6ил}бензонитрила (А5) осуществляли аналогично следующей схеме:

5.1. Раствор 10,6 г (100 ммоль) карбоната натрия в 50 мл воды прибавляли к раствору 7,34 г (50,0 моль) 3-цианобензолбороновой кислоты и 12,0 г (50,0 ммоль) 3-хлор-6-йодпиридазина в 100 мл этанола и 50 мл толуола и смесь нагревали до 80°С под азотом. Затем прибавляли 351 мг (0,50 ммоль) бис(трифенилфосфин)палладий(П) хлорида. Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 18 ч. Смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры, полученный осадок отфильтровывали с отсасыванием и промывали водой. Остаток перекристаллизовывали из 2-пропанола: 3-(6-хлорпиридазин-3ил)бензонитрил в виде коричневых кристаллов; Ε8Ι 216.

5.2. Суспензию 3,33 г (15,0 ммоль) 3-хлор-6-(3-цианофенил)пиридазина и 3,47 г (15,0 ммоль) (3бромфенил)ацетогидразида в 30 мл 1-бутанола нагревали при 130°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали, добавляли этилацетат и воду. Полученный осадок отфильтровывали с отсасыванием, хорошо промывали водой и сушили в вакууме: 3-[3-(3-бромбензил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин-6ил]бензонитрил в виде коричневых кристаллов; Ε8Ι 390/392.

5.3. Далее, как в получении А3.

Получен 3-{3- [3-(5-бромпиримидин-2-ил)бензил] -1,2,4-триазоло [4,3-Ь]пиридазин-6-ил } бензонитрил (А5), Ε8Ι 468/470.

Пример 6. Аналогично получению А1 соединение А6 получено исходя из 1-хлор-4метилпиридазина (получен согласно ЕР 1422218)

- 27 019534

Пример 7. Следующие соединения получены аналогично получению А2:

Соед. №	Название и/или структура	Ε8Ι
А7	Ζν;Ν Ζ > ΖΐΝ 'ν ζζζ	568
1Н-ЯМР ( 3.90 (8, 3 9.8 Гц, 11 ΰ = 9.8 Γί.	ά6-ϋΜ8Ο): δ [м.д.] = 1.68 (т, 4Η), 2.50 (т, 4Н), 2.89 (Ьз, 2Н), Н), 4.29 (1, ΰ = 6 Гц, 2Н), 7.74 (ΐ, ΰ = 7.6 Гц, 1Н), 7.83 (ό, ΰ = Η), 7.89 (ό, ΰ = 7.4 Гц, 1 Η), 8.11 (δ, 2Η), 8.46 (з, 2Η), 8.47 (ΰ, 1, 1Η), 8.58 (δ, ϋ = 7.5 Гц, 1 Η), 8.80 (Ьз, 1 Η), 9.18 (з, 2Η)
А8	,Ν )----4	558
Ч-ЯМР (ά6-ΟΜ8Ο): δ [м.д.] = 1.57 (δ, 2Н), 1.68 (т, 6Н), 2.50 (т, 4Н), 2.88 (ΐ, ΰ = 6.1 Гц, 2Н), 3.89 (з, ЗН), 4.28 (1, ϋ = 6.1 Гц, 2Н), 7.47 (1, ΰ = 7.4 Гц, 1Н), 7.58 (ά, ΰ = 7.1 Гц, 1Н), 7.64 (ά, ΰ = 9.8 Гц, 1Н), 8.07 (з, 1Н), 8.09 (з, 1Н), 8.24 (ά, ΰ = 7.4 Гц, 1Н), 8.30 (ά, ΰ = 9.8 Гц, 1Н), 8.38 (з, 1Н), 8.43 (з, 1Н), 8.52 (Ьз, 1Н), 9.13 (δ, 2Н)
А9	.	466

Пример 8. Получение 6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-3-[3-(5-морфолин-4-илпиримидин-2-ил)бензил]-

1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин (А10) осуществляли аналогично следующей схеме:

Пример 8а. Получение соединения 3-{3-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-2-ил]бензил}-6-(1метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина (А11) осуществляли аналогично следующей схеме:

Суспензию 546 мг (1,22 ммоль) 3-[3-(5-бромпиримидин-2-ил)бензил]-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-

1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина и 366 мг (2,44 ммоль) йодида натрия в 6 мл ΏΜΡ нагревали до 80°С под азотом. Затем прибавляли 26 мг (0,18 ммоль) транс-Н№-диметил-1,2-циклогександиамин, 18,6 мг (0,100 ммоль) йодида медиф и 6 мл диоксана и полученную суспензию перемешивали при температуре 95°С

- 28 019534 под азотом в течение 18 ч. Реакционную смесь разделяли между водой и дихлорметаном. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и упаривали. Остаток хроматографировали на колонке с силикагелем при помощи смеси дихлорметан/метанол как элюент: 3-[3-(5-йодпиримидин-2-ил)бензил]-6-(1-метил-1Нпиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин в виде коричневых кристаллов; Ε8Ι 495.

Суспензию 288 мг (0,582 ммоль) 3-[3-(5-йодпиримидин-2-ил)бензил]-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-

1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина в 1,5 мл толуола нагревали до 110°С под азотом и охлаждали до комнатной температуры. Затем прибавляли 178 мг (0,815 ммоль) трикалий фосфата, 97 мкл (0,874 ммоль) 1метилпиперазина, 19,7 мг (0,047 ммоль) 2-дициклогексилфосфино-2',6'-диметоксибифенила и 10,7 ммоль (0,012 ммоль) трис-(дибензилиденацетон)дипалладия и полученную суспензию перемешивали при 110°С под азотом в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и прибавляли этилацетат. Полученный осадок отфильтровывали с отсасыванием и остаток хроматографировали на колонке с силикагелем при помощи смеси дихлорметан/метанол как элюент: 3-{3-[5-(4-метилпиперазин-1ил)пиримидин-2-ил]бензил}-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин в виде бежевых кристаллов; Ε8Ι 467; ¹Н-ЯМР (6₆-ΌΜ8Θ): δ [м.д.] 2,31 (з, 3Н), 2,58 (т, 4Н), 3,34 (т, 4Н), 3,94 (з, 3Н), 4,61 (з, 2Н), 7,42 (1, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,63 (б, 1=7,3 Гц, 1Н), 7,67 (б, 1=9,8 Гц, 1Н), 8,14 (б, 1=7,4 Гц, 1Н), 8,20 (з, 1Н), 8,32 (б, 1=9,6 Гц, 1Н), 8,39 (Ьз, 1Н), 8,51 (з, 1Н), 8,58 (з, 2Н).

Следующие соединения получены аналогично:

Соед. №	Название и/или структура
А 10 Соед. №	6-(1-Метил-1Н-пиразол-4-ил)-3-[3-(5-морфолин- 4-илпиримидин-2-ил)-бензил]-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазин Название и/или структура
А16	/ ζ^ν	503
	Гт» -Ν·γΝ
1Н-ЯМР ( 3.91 (8, 3 9.6 Гц, 11 4 = 9.6 П А17	ά6-ϋΜ8Ο): δ [м.д.] = 2.30 (8, ЗН), 2.56 (т, 4Н), 3 Н), 7.67 (ί, ΰ = 7.9 Гц, 1Н), 7.78 (ά, ϋ = 7.7 Гц, 1Н), 4), 8.12 (з, 1Н), 8.45 (ά, ΰ = 7.7 Гц, 1Н), 8.46 (з, ' I, 1Н), 8.63 (δ, 2Н) 8.69 (Ьз, 1Н) у	.36 (т, 4Н), 7.83 (ό, ϋ = 1Н), 8.47 (б, 401
	УУ У
	к/

Пример 9. Получение 3-(дифтор-{3-[5-(2-морфолин-4-илэтокси)пиримидин-2-ил]фенил}метил)-6(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина (А12) и 3-[дифтор-(3-пиримидин-2илфенил)метил]-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина (А26) осуществляли аналогично следующей схеме:

мг (0,105 ммоль) йодида меди(1) и 25 мкл (0,16 ммоль) транс-№,№-диметил-1,2циклогександиамина прибавляли в атмосфере аргона к суспензии 700 мг (1,41 ммоль) 3-{[3-(5бромпиримидин-2-ил)фенил]дифторметил} -6-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло [4,3-Ь]пиридази

- 29 019534 на и 449 мг (2,93 ммоль) йодида натрия в 3 мл диоксана и смесь перемешивали при 110°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, прибавляли воду и полученный осадок отфильтровывали с отсасыванием. Остаток перемешивали ацетонитрилом, отфильтровывали с отсасыванием и остаток сушили в вакууме: 3-{дифтор-[3-(5-йодпиримидин-2-ил)фенил]метил}-6-(1-метил-1Нпиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин в виде бежевых кристаллов; Ε8Ι 531.

207 мкл (1,68 ммоль) 2-морфолиноэтанола прибавляли в атмосфере аргона к суспензии 593 мг (1,12 ммоль) 3-{дифтор- [3-(5-йодпиримидин-2-ил)фенил]метил} -6-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазина, 547 мг (1,68 ммоль) карбоната цезия, 21,3 мг (0,11 ммоль) йодида меди(1) и 53 мг (0,22 ммоль) 3,4,7,8-тетраметил-1,10-фенантролина в 4 мл толуола и смесь перемешивали при 100°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, прибавляли воду и дихлорметан и смесь фильтровали с отсасыванием через кизельгур. Органическую фазу отделяли, промывали водой, сушили над сульфатом натрия и упаривали. Остаток хроматографировали на колонке с силикагелем при помощи смеси дихлорметан/метанол как элюент, что дает продукты: 3-(дифтор-{3-[5-(2морфолин-4-илэтокси)пиримидин-2-ил] фенил} метил)-6-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло [4,3Ь]пиридазин в виде бесцветных кристаллов; Ε8Ι 534; *Н-ЯМР (6₆-ΌΜ8Ο): δ [м.д.] 2,50 (т, 4Н), 2,75 (ΐ, 1=5,6 Гц, 2Н), 3,59 (т, 4Н), 3,92 (з, 3Н), 4,34 (ΐ, 1=5,6 Гц, 2Н), 7,71 (ΐ, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,83 (б, 1=9,6 Гц, 1Н), 7,85 (б, 1=7,5 Гц, 1Н), 8,13 (з, 1Н), 8,48 (з, 1Н), 8,48 (б, 1=9,6 Гц, 1Н), 8,50 (б, 1=7,7 Гц, 1Н), 8,71 (з, 2н), 8,73 (Ьз, 1Н) и 3-[дифтор-(3-пиримидин-2-илфенил)метил]-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазин в виде бесцветных кристаллов; Ε8Ι 406; *Н-ЯМР (6₆-ΌΜ8Θ): δ [м.д.] 3,90 (δ, 3Н), 7,52 (ΐ, 1=4,8 Гц, 1Н), 7,74 (ΐ, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,82 (б, 1=9,7 Гц, 1Н), 7,91 (б, 1=7,5 Гц, 1Н), 8,13 (з, 1Н), 8,46 (б, 1=9,7 Гц, 1Н), 8,47 (з, 1Н), 8,59 (б, 1=7,7 Гц, 1Н), 8,85 (Ьз, 1Н), 8,96 (б, 1=4,7 Гц, 2Н).

Соответствующая литература: КА. АЕтап οΐ а1., I. Огд. Сйет., 73, р. 284 (2008).

Следующие соединения получены аналогично:

Соед. №	Название и/или структура
А13	0-^~О 7г\ <<
А14
А15	Xм Ό

Пример 10. Соединение 3-{1-[3-(5-бромпиримидин-2-ил)фенил]-этил}-6-(1-метил-1Н-пиразол-4ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин (А18)

Ε8Ι 462, получено аналогично получению А4 исходя из метил 2-(3-бромфенил)пропионата.

- 30 019534

Пример 11. Следующие соединения получены аналогично получению А7:

Соед. №	Название и/или структура	ΕδΙ
А19	3-{3-[Дифтор-(3-{5-[1-(2-пирролидин-1-илэтил)1Н-пиразол-4-ил]-пиримидин-2-ил}-фенил)метил]-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин-6-ил}бензонитрил ν5. ρρ ν\ > ρν~Ό	589
А20	3-[3-(3-{5-[1 -(2-Пирролидин-1 -илэтил)-1 Нпиразол-4-ил]-пиримидин-2-ил}-бензил)-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазин-6-ил]-бензонитрил ,ν ΐ—, ро I ΖΝ Ч \\	553

502

3-[Дифтор-(3-{5-( 1-(2-пиррол идин-1-илэти л )-1Нпиразол-4-ип]-пиримидин-2-ил}-фе«ил)-метил]6-метил -1,2,4-триазоло[4,3 -Ь]п «ридазин, трифторацетат

пирролидим-1-ил-згил}-1Н-пиразол-4-ил]пиримидин-2-ил}-фенил)-этил]-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазин .Ν .; -

. 7.2 Гц, 1Н), 7.48 (I. ΰ = 7.8 Гц, 1Н), 7.60 (ά, Л = 7.1 Гц, 1Н), 7.63 (ά, ΰ =.

^! 9.9 Гц. 1Н). 8.10 (8. 1Н). 8.12 (8. 1Н), 8.24 (ф 3 = 7.6 Гц, 1Н). 8.30 (ф Λ

524

3[3-(Дифтер-(3-[5-(4-метилпиперазин-1-илу пиримидин-2Ил]-фенил}’метил) 1,2,4’ триазоло[4,ЗФ]лиридазин-6-ил)-бензонитрил

- 31 019534

Соед. №	Название и/или структура	Ε8Ι
А24	3-(3-{Дифтор-[3-(5-пиперазин-1-илпиримидин-2ил)-фенил]-метил}-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазин-6-ил)-бензонитрил	509/511
	ν / II Ν
’Н-ЯМР (ά6-ϋΜ8Ο): δ [м.д.] = 2.65 (т, 1Н), 2.98 (т, 4Н), 3.35 (т, 4Н), 7.68 (ί, ϋ = 7.8 Гц, 1Н), 7.75 (ΐ, ϋ = 8.0 Гц, 1Н), 7.77 (ά, ΰ = 7.7 Гц, 1Н), 8.07 Гц (δ, 3 = 7.8 Гц, 1Н), 8.20 (6, Л = 9.6 Гц, 1Н), 8.34 (6, Л = 7.9 Гц, 1Н), 8.45 (5, 1Н), 8.48 (ά, ΰ = 8.8 Гц, 1Н), 8.61 (з, 2Н), 8.66 (ά, ΰ = 9.7 Гц, 1Н), 8.70 (Ьз, 1Н)
А25	3-(Дифтор-{3-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-2-ил]-фенил}-метил)-6-метил-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазин /	437
	Γ’Ζν;ν Ζ4
	4Т/

Пример 12. Получение 3-{[3-(5-бромпиримидин-2-ил)фенил]дифторметил}-6-метил-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазина (А27) осуществляли аналогично следующей схеме:

1. 29,4 г (300 ммоль) ацетата калия прибавляли в атмосфере аргона к раствору 27,9 г (100 ммоль) этил (3-бромфенил)дифторацетата (получен согласно νϋ 2007/014454) и 31,7 г (125 ммоль) бис(пинаколато)дибора в 200 мл ТНГ и смесь нагревали до 80°С. Затем прибавляли 2,11 г (3,00 ммоль) бис(трифенилфосфин)палладий(П) хлорида и смесь перемешивали при 90°С в течение 42 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и прибавляли насыщенный раствор хлорида натрия. Органическую фазу отделяли, сушили над сульфатом натрия и упаривали сырой этил дифтор-[3-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]ацетат (Ε8Ι 327) в виде оранжево-коричневого масла, которое использовали в следующей стадии без дополнительной очистки.

2. Раствор 21 г (198 ммоль) карбоната натрия в 100 мл воды прибавляли в атмосфере аргона к раствору 54,7 г (около 99 ммоль) этил дифтор[3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)фенил]ацетата в 100 мл толуола и 200 мл этанола и смесь нагревали до 80°С. Затем прибавляли 33,8 г (119 ммоль) 5-бром-2-йодпиримидина и 1,39 г (1,98 ммоль) бис-(трифенилфосфин)палладий(П) хлорида и реакционную смесь перемешивали при 80°С под азотом в течение 66 ч. Реакционную смесь выпаривали и разделяли между ТНГ и насыщенным раствором хлорида натрия. Органическую фазу выпаривали и остаток перемешивали с 2-пропанолом 3-(5-бромпиримидин-2-ил)фенил]дифторуксусная кислота в виде бежевых кристаллов; Ε8Ι 329/331.

- 32 019534

Аналогичное приготовление исходя из метил [3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)фенил]ацетата, который получен согласно I. Меб. СНет. 50(6), 1101-115 (2007), дает

3-(5-бромпиримидин-2-ил)фенил]уксусную кислоту (температура плавления 211-213°С).

3. 15,2 мл триметилортоформиата и 1,8 мл конц. серной кислоты прибавляли к суспензии 15,2 г (46,2 ммоль) 3-(5-бромпиримидин-2-ил)фенил]дифторуксусной кислоты в 45 мл метанола и смесь перемешивали при 35°С в течение 24 ч. К реакционной смеси прибавляли воду. Полученный осадок отфильтровывали с отсасыванием, промывали водой и сушили в вакууме: метил [3-(5-бромпиримидин-2ил)фенил]дифторацетат в виде бежевых кристаллов; Ε8Ι 343/345.

Следующее соединение получено аналогично:

4. Суспензию 12,1 г (35,2 ммоль) метил [3-(5-бромпиримидин-2-ил)фенил]дифторацетата в 140 мл метанола нагревали до 45°С и прибавляли 8,57 мл (176 ммоль) гидроксида гидразина. Сначала образуется прозрачный раствор, затем снова выпадает осадок. После реакционную смесь перемешивали при 45°С в течение 18 ч, прибавляли воду, осадок отфильтровывали с отсасыванием, промывали водой и сушили в вакууме: [3-(5-бромпиримидин-2-ил)фенил]дифторацетогидразид в виде коричневатых кристаллов; Ε8Ι 343, 345; ¹Н-ЯМР (ά₆-ΏΜ8Ο): δ [м.д.] 4,58 (Ьа, 2Н), 7,71 (ί, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,78 (ά, 1=7,8 Гц, 1Н), 8,52 (ά, 1=7,8 Гц, 1Н), 8,58 (а, 1Н), 9,13 (а, 2Н), 10,4 (Ьа, 1Н).

Следующее получено аналогично (температура реакции 70°С):

[3-(5-бромпиримидин-2-ил)фенил]ацетогидразид; Ε8Ι 307/309; т.пл. 229-231 °С.

5. Раствор 900 мг (7,0 ммоль) 3-хлор-6-метилпиридазина и 2,40 г (7,00 ммоль) [3-(5бромпиримидин-2-ил)фенил]дифторацетогидразид в 28 мл 1-бутанола нагревали при 130°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Полученный осадок отфильтровывали с отсасыванием, промывали 2-пропанолом и сушили в вакууме: 3-{[3-(5-бромпиримидин-2ил)фенил]дифторметил}-6-метил-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин в виде зеленых кристаллов; Ε8Ι 417/419; ¹Н-ЯМР (ά₆-ΏΜ8Ο): δ [м.д.] 2,64 (а, 3Н), 7,51 (ά, 1=9,6 Гц, 1Н), 7,82 (ί, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,95 (ά, 1=7,8 Гц, 1Н), 8,46 (ά, 1=9,3 Гц, 1Н), 8,63 (ά, 1=7,9 Гц, 1Н), 8,76 (Ьа, 1Н), 9,19 (а, 2Н).

Следующие тоже получены этим методом аналогично: 3-[3-(5-бромпиримидин-2-ил)бензил]-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин (АГ’) и 3-{[3-(5-бромпиримидин-2-ил)фенил]дифторметил}-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазин (А3).

Пример 13. Получение 3-(дифтор-{3-[5-(2-морфолин-4-илэтокси)пиримидин-2-ил]фенил}метил)-6метил-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина (А28) осуществляли аналогично следующей схеме:

1. 827 мг (8,43 ммоль) ацетата калия прибавляли в атмосфере аргона к раствору 1,17 г (2,81 ммоль) 3-{[3-(5-бромпиримидин-2-ил)фенил]дифторметил}-6-метил-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина и 892 мг (3,51 ммоль) бис-(пинаколато)дибора в 6 мл ТНЕ, смесь нагревали до 80°С, прибавляли 30 мг (0,056 ммоль) бис-(трифенилфосфин)палладий(П) хлорида и реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильровали и промывали небольшим количеством ТНЕ. К фильтрату прибавляли 10 мл воды и 476 мг (3,09 ммоль) тетрагидрата пербората натрия и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь подкисляли при помощи 1 N НС1 и ТНЕ удаляли вакууме. Полученный осадок отфильтровывали с отсасыванием, промывали водой и сушили в вакууме: 2-{3-[дифтор(6-метил-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин- 33 019534

3-ил)метил]фенил}пиримидин-5-ол в виде коричневых кристаллов; Ε8Ι 355. Следующее получено аналогично:

2-(3-{дифтор-[6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин-3-ил]метил}фенил)пиримидин-5-ол (А29); бесцветные кристаллы, Ε8Ι 421;

2-{3-[6-(1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло [4,3-Ь]пиридазин-3 -илметил] фенил } пиримидин-5ол (А30); бесцветные кристаллы, Ε8Ι 385.

2. 119 мкл (0,60 ммоль) диизопропилазодикарбоксилата прибавляют медленно по каплям при перемешивании к суспензии 177 мг (0,50 ммоль) 2-{3-[дифтор-(6-метил-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин-3ил)метил]фенил}пиримидин-5-ола, 80,4 мкл (0,65 ммоль) 2-морфолиноэтанол и 157 мг (0,60 ммоль) трифенилфосфина в 1 мл ТНЕ. Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь выпаривали и хроматографировали на колонке с силикагелем при помощи смеси дихлорметан/метанол как элюент: 3-(дифтор-{3-[5-(2-морфолин-4-илэтокси)пиримидин-2ил]фенил}метил)-6-метил-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин в виде бесцветных кристаллов; Ε8Ι 468; ¹НЯМР (06-ОМ8О): δ [м.д.] 2,51 (т, 4Н), 2,57 (8, 3Н), 2,75 (ΐ, 1=5,4 Гц, 2Н), 3,58 (т, 4Н), 4,33 (ΐ, 1=5,4 Гц, 2Н), 7,44 (ά, 1=9,5 Гц, 1Н), 7,70 (ΐ, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,79 (ά, 1=7,6 Гц, 1Н), 8,39 (ά, 1=9,5 Гц, 1Н), 8,51 (ά, 1=7,7 Гц, 1Н), 8,63 (Ь8, 1Н), 8,69 (8, 2Н).

Следующее получено аналогично 3-(дифтор-{3-[5-(2-метоксиэтокси)пиримидин-2ил]фенил}метил)-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин (А31):

Ε8Ι 479;

2-[2-(3-{ дифтор-[6-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло [4,3-Ь]пиридазин-3 ил]метил}фенил)пиримидин-5-илокси]-этанол (А32) (через 2-ацетоксиэтокси производное и гидролизом сложного эфира, применяя гидроксид натрия/метанол)

Ε8Ι 465;

3-{3-[5-(2-метоксиэтокси)пиримидин-2-ил]бензил}-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3Ь]пиридазин (А33)

Ε8Ι 443;

2-(2-{3-[6-(1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло [4,3-Ь]пиридазин-3 -илметил] фенил } пиримидин-5-илокси)этанол (А34) (через 2-ацетоксиэтокси производное и гидролизом сложного эфира, при-

- 34 019534

Ε8Ι 429;

3-[3-(5 -метоксипиримидин-2-ил)бензил] -6-(1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло [4,3-Ь]пиридазин (А35)

Ε8Ι 399;

3-{3-[5-(3 -метоксипропокси)пиримидин-2-ил] бензил} -6-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин (А36)

Ε8Ι 457;

3-(3-{5- [2-(4-метилпиперазин-1 -ил)-этокси] пиримидин-2-ил} бензил)-6-( 1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)1,2,4-триазоло [4,3-Ь] пиридазин (А37)

Ε8Ι 511;

(А38);

(А39), (через 3-ацетоксипропокси производное и гидролизом сложного эфира, применяя гидроксид натрия/метанол);

- 35 019534

Пример 14. Получение 3-(дифтор-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)пиримидин-2ил]фенил}метил)-6-метил-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина (А41) осуществляли аналогично следующей схеме:

1. 109 мкл (0,55 ммоль) диизопропилазодикарбоксилата прибавляют медленно по каплям при перемешивании к суспензии 177 мг (0,50 ммоль) 2-{3-[дифтор(6-метил-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин-3ил)метил]фенил}пиримидин-5-ола, 129 мг (0,60 ммоль) трет-бутил 4-гидроксиметилпиперидин-1карбоксилата и 144 мг (0,55 ммоль) трифенилфосфина в 1 мл ТНР и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь разводили 2-пропанолом и охлаждали до 0°С. Полученный осадок отфильтровывали с отсасыванием, промывали 2-пропанолом и сушили в вакууме : трет-бутил 4-(2-{3-[дифтор-(6-метил-1,2,4-триазоло [4,3-Ь]пиридазин-3-ил)метил] фенил} пиримидин5-илоксиметил)пиперидин-1-карбоксилат в виде бежевых кристаллов; Ε8I 552.

2. Раствор 20 мг параформальдегида в 1 мл муравьиной кислоты перемешивали при 80°С в течение 1 ч, охлаждали до комнатной температуры и затем прибавляли по каплям к суспензии при температуре 80°С, 195 мг (0,353 ммоль) трет-бутил 4-(2-{3-[дифтор(6-метил-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин-3ил)метил]фенил}пиримидин-5-илоксиметил)пиперидин-1-карбоксилата в 1 мл диоксана. Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, прибавляли ТНР, насыщенный раствор хлорида натрия и 1,7 мл 50 % раствора гидроксида натрия. Органическую фазу отделяли, сушили над сульфатом натрия и упаривали. Остаток очищали при помощи препаративной ВЭЖХ: 3-(дифтор-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)пиримидин-2-ил]фенил}метил)-6-метил-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазина трифторацетат в виде бесцветных кристаллов; Ε8I 466; ¹НЯМР (й6-ОМ8О): δ [м.д.] 1,53 (т, 2Н), 2,01 (т, 2Н), 2,07 (т, 1Н), 2,57 (к, 3Н), 2,78 (к, 3Н), 2,99 (т, 2Н), 3,49 (т, 2Н), 4,12 (й, 1=5,9 Гц, 2Н), 7,44 (й, 1=9,6 Гц, 1Н), 7,71 (ί, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,79 (й, 1=7,8 Гц, 1Н), 8,40 (й, 1=9,6 Гц, 1Н), 8,51 (й, 1=7,8 Гц, 1Н), 8,63 (Ьк, 1Н), 8,69 (к, 2Н), 9,49 (Ьк, 1Н).

Соединение 3-(дифтор- {3-[5-(1 -метилпиперидин-4-илметокси)пиримидин-2-ил] фенил} метил)-6-( 1 метил-1Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин (А42)

получен аналогично (очистка путем хроматографии на колонке с силикагелем при помощи смеси дихлорметан/метанол); бесцветные кристаллы, Ε8I 532; ¹Н-ЯМР (й₆-ОМ8О): δ [м.д.] 1,32 (т, 2Н), 1,74 (т, 3Н), 1,85 (ί, Э=11 Гц, 2Н), 2,15 (к, 3Н), 2,78 (й, Э=11 Гц, 2Н), 3,91 (к, 3Н), 4,06 (й, 1=5.5 Гц, 2Н), 7,70 (ί, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,83 (т, 2Н), 8,11 (к, 1Н), 8,47 (т, 3Н), 8,67 (к, 2Н), 8,73 (к, 1Н).

- 36 019534

Пример 15. Получение 2-(4-{3-[3-(5-бромпиримидин-2-ил)бензил]-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин6-ил}пиразол-1 -ил)этанола (А43) и 2-(4-{3-[3 -(5 -метилпиримидин-2-ил)бензил] -1,2,4-триазоло [4,3Ь]пиридазин-6-ил}пиразол-1-ил)этанола (А44) осуществляли аналогично следующей схеме:

1. 2,93 г (9,09 ммоль) 1-[2-(тетрагидропиран-2-илокси)этил]-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (получен взаимодействием 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан2-ил)-1Н-пиразола и 2-(2-бромэтокси)тетрагидропирана с карбонатом цезия в ацетонитриле) и 4,25 г (20,0 ммоль) тригидрата трикалийфосфата прибавляли к раствору 2,40 г (10,0 ммоль) 3-хлор-6йодпиридазина в 12 мл 1,2-диметоксиэтана. Полученную суспензию нагревали до 80°С под азотом и при перемешивании и прибавляли 210 мг (0,30 ммоль) бис-(трифенилфосфин)палладий(П) хлорида. Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 18 ч. Смесь оставляли охлаждаться до комнатной температуры и прибавляли 60 мл воды и 30 мл дихлорметана. Органическую фазу отделяли, промывали водой, сушили над сульфатом натрия и упаривали: 3-хлор-6-{1-[2-(тетрагидропиран-2-илокси)этил]-1Нпиразол-4-ил}пиридазин в виде коричневого воскоподобного вещества; Ε8Σ 309.

2. Суспензию 1,02 г (3,26 ммоль) 3-хлор-6-{1-[2-(тетрагидропиран-2-илокси)этил]-1Н-пиразол-4ил}пиридазина, 1,00 г [3-(5-бромпиримидин-2-ил)фенил]ацетогидразида и 54 мг (0,33 ммоль) йодида калия в 18 мл 1-бутанола нагревали до кипения, во время чего образуется прозрачный раствор.

Реакционную смесь кипятили в течение 20 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Полученный осадок отфильтровывали с отсасыванием, промывали ацетоном и сушили в вакууме: 2-(4-{3-[3(5-бромпиримидин-2-ил)бензил]-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин-6-ил}пиразол-1 -ил)этанол в виде коричневатых кристаллов; Ε8Σ 477/479; т.пл. 237-239°С.

3. 630 мкл (1,26 ммоль) в 2 М раствора триметилалюминия в толуоле и 50 мг (0,04 ммоль) тетракис(трифенилфосфин)палладия прибавляли к раствору 300 мг (0,63 ммоль) 2-(4-{3-[3-(5бромпиримидин-2-ил)бензил]-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин-6-ил}пиразол-1-ил)этанол в 6 мл ТНГ и смесь нагревали при кипении в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, прибавляли метанол и смесь выпаривали. Остаток хроматографировали на колонке с силикагелем при помощи смеси дихлорметан/метанол как элюент: 2-(4-{3-[3-(5-метилпиримидин-2-ил)бензил]-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазин-6-ил}пиразол-1-ил)этанол в виде бесцветных кристаллов; Ε8Σ 413; т.пл. 204206°С; ¹Н-ЯМР (66-ΌΜ8Ο): δ [м.д.] 2,31 (з, 3Н), 3,78 (т, 2Н), 4,22 (!, 1=5.5 Гц, 2Н), 4,63 (з, 2Н), 4,95 (Ьз, 1Н), 7,46 (!, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,56 (б, 1=7,9 Гц, 1Н), 7,69 (б, 1=9,8 Гц, 1Н), 8,23 (т, 2Н), 8,31 (б, 1=9,8 Гц, 1Н), 8,51 (Ьз, 1Н), 8,52 (з, 1Н), 8,74 (з, 2Н).

Фармакологические данные.

Ингибирование Ме! киназы

- 37 019534

0,1 μΜ-10 μΜ=Β, >10 μΜ С.

Следующие примеры относятся к лекарственным средствам.

Пример А. Ампулы для инъекций.

Раствор 100 г активного компонента формулы I и 5 г динатрий гидрофосфата в 3 л бидистиллированной воды доводят до рН 6,5, применяя 2 Ν хлористо-водородную кислоту, стерильно фильтруют, переносят в ампулы для инъекций, лиофилизируют в стерильных условиях и запаивают в стерильных условиях. Каждая ампула для инъекций содержит 5 мг активного компонента.

Пример В. Суппозитории.

Смесь 20 г активного компонента формулы I с 100 г соевого лецитина и 1400 г масла какао растапливают, наливают в формы и оставляют охлаждаться. Каждый суппозиторий содержит 20 мг активного компонента.

Пример С. Раствор.

Раствор приготовлен из 1 г активного компонента формулы I 9,38 г ΝαΙ 1₂РО₂х211₂О, 28,48 г Να^ΡΟ^Π Н₂О и 0,1 г бензалконий хлорида в 940 мл бидистиллированной воды. рН доводят до 6,8, раствор доводят до 1 л и стерилизуют облучением. Этот раствор может быть применен в форме глазных капель.

Пример I). Мазь.

500 мг активного компонента формулы I смешивают с 99,5 г вазелина в асептических условиях.

Пример Е. Таблетки.

Смесь 1 кг активного компонента формулы I, 4 кг лактозы, 1,2 кг картофельного крахмала, 0,2 кг талька и 0,1 кг стеарата магния спрессовывают общепринятым способом с получением таблеток таким образом, что каждая таблетка содержит 10 мг активного компонента.

Пример Р. Драже.

Таблетки спрессовывают аналогично примеру Е и затем покрывают общепринятым способом слоем сахарозы, картофельного крахмала, талька, трагакантовой камеди и красителя.

Пример О. Капсулы.

кг активного компонента формулы I помещают в твердые желатиновые капсулы общепринятым способом таким образом, что каждая капсула содержит 20 мг активного компонента.

Пример Н. Ампулы.

Раствор 1 кг активного компонента формулы I в 60 л бидистиллированной воды стерильно фильтруют, переносят в ампулы, лиофилизируют в стерильных условиях и запаивают в стерильных условиях. Каждая ампула содержит 10 мг активного компонента.

Claims (12)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Соединения формулы I в которой К¹ означает тиазолил, тиофенил, фуранил, пирролил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазо лил, пиразолил, имидазолил, тиадиазолил, пиридазинил, пиразинил, пиридинил или пиримидинил, где эти радикалы могут также быть моно-, ди- или тризамещенными На1, [С(К⁵)₂]_пОК⁵ и/или А, или означает фенил, который является моно-, ди- или тризамещенным На1 и/или СХ или означает А;

   К² означает О[С(К⁵)2]пОК⁵, Не!, -[С(К⁵)2]пНе! или О[С(К⁵)₂]пНе!;

   К³, К³, каждый независимо друг от друга, означают Н, Р или А, вместе также означают алкилен, имеющий 2-5 атомов С;

   К⁴ означает Н;

   К⁵ означает Н или А;

   А означает неразветвленный или разветвленный алкил, имеющий 1-6 атомов С;

   Аг означает фенил, который является моно-, ди- или тризамещенным На1 и/или СХ

   Не! означает пиперидинил, пирролидинил, морфолинил, пиперазинил, оксазолидинил, пиразолил, пиридинил, пиримидинил, фурил, тиенил, оксазолил, оксадиазолил, имидазолил, пирролил, изоксазолил или имидазолидинил, где эти радикалы могут также быть моно- или дизамещенными А, [С(К⁵)₂]_пОК⁵ и/или [С(К⁵)2]пНе!¹;

   Не!¹ означает пиперидинил, пирролидинил, морфолинил, пиперазинил, оксазолидинил или имидазолидинил, где эти радикалы могут также быть моно- или дизамещенными =О и/или А;

   На1 означает Р, С1, Вг или I;

   п означает 1, 2, 3 или 4;

   и их фармацевтически приемлемые соли.
2. 2. Соединения по п.1, выбранные из группы, включающей

   № Структура и/или название А2 6-(1 -Метил-1 Н-пиразол-4-ил)-3-(3-{5-[1 -(2-пиррол идин-1 -илэтил)- 1 Н-пиразол-4-ил]пиримидин-2-ил}бензил)-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазин А7 ,Ν _г—. ~^ν/ύ^^ν,ν г /Ή~^ν А8 А9 ρ-''Λ3 ββ Τ) ^Ν \ А10 6-(1 -Метил-1 Н-пиразол-4-ил)-3-[3-(5-морфол ин-4-илпиримидин-2- ил)бензил]-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин

   - 39 019534

   № Структура и/или название АН / -У- 00- А12 3-(Дифтор-{3-[5-(2-морфолин-4-илэтокси)пиримидин-2-ил]фенил}метил)-6-(1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазин А 13 Ζ'<^Ν- А14 00 0 А15 ο-Ζ~~^Ν0_ο ο 00 А16 <0 /ν^Ν> ^ν/4 -N^0 0 _/=0'^ν '^{Ν ρ}000

   - 40 019534

   № Структура и/или название А 17 0 Х0 0 А А18 /^Вг I _ΖΝ Ч \\ -СГ 00 А 19 3-{3-[Дифтор-(3-{5-[1 -(2-пирролидин-1 -илэтил)-1 Н-пиразол-4-ил]пиримидин-2-ил}фенил)метил]-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин-6ил}бензонитрил / _Ν Г ' ^{Ν Ν}\ 2 /ι ^Ν ТУ А20 3-[3-(3-{5-[1-(2-Пирролидин-1-илэтил)-1Н-пиразол-4-ил]пиримидин-2-ил}бензил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин-6-ил]бензонитрил /Ν / Ν Ν<. | \ ?Ν ^Ν/ Λ Ά/ Α / V 00

   № Структура и/или название Α21 3-[Дифтор-(3-{5-[1-(2-пирролидин-1-илэтил)-1Н-пиразол-4-ил]- пиримидин-2-ил}фенил)метил]-6-метил-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазин Ау А аа Α22 6-(1 -Метил-1 Н-пиразол-4-ил)-3-[1 -(3-{5-[1 -(2-пиррол идин-1 -илэтил)-1 Н-пиразол-4-ил]пиримидин-2-ил}фенил)этил]-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазин 00> А) ААР Α23 3-[3-(Дифтор-{3-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиримидин-2-ил]- фенил}метил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин-6-ил]бензонитрил / /—^Ν Ν-Α ааа, ^Ν <х, Ι.Ν ^Ν\ \\ α αΑ

   - 41 019534

   № Структура и/или название А24 3-(3-{Дифтор-[3-(5-пиперазин-1-илпиримидин-2-ил)фенил]метил}-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин-6-ил)бензонитрил Н № гг А Аг} А25 3-(Дифтор-{3-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)лиримидин-2-ил]- фенил}метил)-6-метил-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин € КГ} А28 3-(Дифтор-{3-[5-(2-морфолин-4-илэтокси)пиримидин-2-ил]- фенил}метил)-6-метил-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин АЗ Г 3-(Дифтор-{3-[5-(2-метоксиэтокси)пиримидин-2-ил]фенил}метил )-6-(1-метил-1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин А32 2-[2-(3-{Дифтор-[6-(1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазин-3-ил]метил}фенил)пиримидин-5илокси]этанол АЗЗ 3-{3-[5-(2-Метоксиэтокси)пиримидин-2-ил]бензил )-6-(1-метил-1 Нпиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин А34 2-(2-{3-[6-(1-Метил-1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]- пиридазин-3-илметил]фенил}пиримидин-5-илокси)этанол А36 3-{3-[5-(3-Метоксипропокси)пиримидин-2-ил]бензил}-6-(1-метил- 1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин

   - 42 019534

   № Структура и/или название А37 3-(3-{5-[2-(4-Метилпиперазин-1-ил)этокси]пиримидин-2ил}бензил)-6-(1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин А38 - ; А39 [Ж Ν'ΝγΝ _ν^Ο^^,ΟΗ А40 А41 3-(Дифтор-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)пиримидин-2- ил]фенил}метил)-6-метил-1,2,4-триазоло[4,3-Ь]пиридазин А42 3-(Дифтор-{3-[5-(1-метилпиперидин-4-илметокси)пиримидин-2ил]фенил}метил)-6-(1 -метил-1 Н-пиразол-4-ил)-1,2,4триазоло[4,3-Ь]пиридазин

   и их фармацевтически приемлемые соли.
3. 3. Способ получения соединений формулы I по пп.1, 2 и их фармацевтически приемлемых солей, характеризующийся тем, что соединение формулы II в которой К¹, К³, К³ и К⁴ имеют значения, указанные в п.1; и

   Ь означает радикал бороновой кислоты или эфира бороновой кислоты, реагирует с соединением формулы III в которой К² имеет значения, указанные в п.1, и при необходимости радикал К² превращают в другой радикал К² путем замещения атома галогена амино-, алкокси- или арильным радикалом, и/или основание или кислоту формулы I превращают в одну из их солей.
4. 4. Лекарственные средства, включающие по меньшей мере одно соединение формулы I по пп.1, 2 и/или их фармацевтически приемлемые соли и необязательно инертные наполнители и/или вспомога тельные средства.
5. 5. Применение соединений по пп.1, 2 и их фармацевтически приемлемых солей для получения лекарственного средства для лечения заболеваний, в которых играют роль ингибирование, регулирование и/или модуляция сигнальной трансдукции киназы.
6. 6. Применение по п.5 для получения лекарственного средства для лечения заболеваний, на которые действуют ингибированием Μеΐ киназы с помощью соединений по пп.1, 2.
7. 7. Применение по п.5 или 6, где заболевание, подвергаемое лечению, является солидным новообразованием.
8. 8. Применение по п.7, где солидное новообразование происходит из группы опухолей плоского эпителия, мочевого пузыря, желудка, почек, головы и шеи, пищевода, шейки матки, щитовидной железы, кишечника, печени, мозга, простаты, урогенитального тракта, лимфатической системы, гортани и/или легкого.

   - 43 019534
9. 9. Применение по п.7, где солидное новообразование происходит из группы моноцитарной лейкемии, аденокарциномы легкого, мелкоклеточной карциномы легких, рака поджелудочной железы, глиобластомы и карциномы молочной железы.
10. 10. Применение по п.7, где солидное новообразование происходит из группы аденокарциномы легкого, мелкоклеточной карциномы легкого, рака поджелудочной железы, глиобластомы, карциномы толстой кишки и карциномы молочной железы.
11. 11. Применение по п.5 или 6, где заболевание, подвергаемое лечению, является новообразованием крови и иммунной системы.
12. 12. Применение по п.11, где новообразование происходит из группы острой миелоидной лейкемии, хронической миелоидной лейкемии, острой лимфатической лейкемии и/или хронической лимфатической лейкемии.

    Евразийская патентная организация, ЕАПВ

    Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2