EA019524B1 - СОЕДИНЕНИЯ И КОМПОЗИЦИИ КАК ИНГИБИТОРЫ КИНАЗЫ с-kit И PDGFR - Google Patents

СОЕДИНЕНИЯ И КОМПОЗИЦИИ КАК ИНГИБИТОРЫ КИНАЗЫ с-kit И PDGFR Download PDF

Info

Publication number
EA019524B1
EA019524B1 EA200901486A EA200901486A EA019524B1 EA 019524 B1 EA019524 B1 EA 019524B1 EA 200901486 A EA200901486 A EA 200901486A EA 200901486 A EA200901486 A EA 200901486A EA 019524 B1 EA019524 B1 EA 019524B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
pyrimidin
methylsulfonyl
methyl
ylamino
benzamide
Prior art date
Application number
EA200901486A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200901486A1 (ru
Inventor
Сяолинь ЛИ
Сяодон Лю
Валентина Мольтени
Донателла Чянелли
Джон Лорен
Джульет Набакка
Тимоти Рамси
Вернер Брайтенштайн
Original Assignee
Айрм Ллк
Новартис Аг
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Айрм Ллк, Новартис Аг filed Critical Айрм Ллк
Publication of EA200901486A1 publication Critical patent/EA200901486A1/ru
Publication of EA019524B1 publication Critical patent/EA019524B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/14—Decongestants or antiallergics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Addiction (AREA)

Abstract

В изобретении приведено описание соединений формулы I, фармацевтических композиций, включающих такие соединения, и способов применения таких соединений для лечения или предупреждения заболеваний или нарушений, связанных с аномальной или характеризующейся нарушенной регуляцией активностью киназы, в особенности заболеваний или нарушений, которые включают аномальную активацию киназ c-kit, ТРФРРα и ТРФРРβ.

Description

Настоящее изобретение относится к новому классу соединений, фармацевтическим композициям, включающим такие соединения, и к способам применения таких соединений для лечения или предупреждения заболеваний или нарушений, связанных с аномальной или характеризующейся нарушенной регуляцией активностью киназы, в особенности заболеваний или нарушений, которые включают аномальную активацию киназ с-кй, ТРФРРа и ΤΡΦΡΡβ.
Уровень техники
Протеинкиназы представляют собой большую группу белков, которые играют центральную роль в регуляции большого количества клеточных процессов и обеспечивают регулирование клеточных функций. Частичный, неограничивающий перечень этих киназ включает рецепторные тирозинкиназы, такие как киназа рецептора тромбоцитарного фактора роста (ТРФРР), рецептора фактора роста нервов, 1гкБ и рецептора фактора роста фибробластов, РОРК3; нерецепторные тирозинкиназы, такие как ЛЫ, и киназы слияния ВСК-ЛЫ, Ьск, Втх и с-кгс и серин/треонинкиназы, такие как киназы, с-КАР, кдк, МАР (например, МКК4, МКК6 и т.п.) и 8АРК2а и 8ΑΡΚ2β. Аберрантная активность киназ обнаружена при многих патологических состояниях, включая доброкачественные и злокачественные пролиферативные заболевания, а также заболевания, обусловленные неадекватной активацией иммунной и нервной систем.
Новые соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, ингибируют активность одной или большего количества протеинкиназ и поэтому предположительно применимы для лечения связанных с киназами заболеваний.
Краткое изложение сущности изобретения
Первым объектом настоящего изобретения является соединение формулы I
I в которой Ь выбран из -ПНС(О)- и -ί.’(Ό)ΝΗ-;
К2а и В2Ь, каждый независимо, представляют собой водород;
К1 выбран из группы, включающей водород, гидроксил, 3-8-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, С1-С4-алкил, С1-С4-алкоксигруппу, галогензамещенную С1-С4-алкоксигруппу, галогензамещенный С1-С4-алкил, -ОХ1К8, где Х1 обозначает С1-С4-алкилен и К8 обозначает С3-С12-циклоалкил; или
Κι и К2а вместе с атомами углерода, к которым К1 и К2а присоединены, образуют фенил;
К3 и К- независимо выбраны из водорода и галогена;
К4 и К6 независимо выбраны из группы, включающей водород, С1-С6-алкил, С1-С6-алкоксигруппу, галогензамещенную С1-С6-алкоксигруппу, -ОХ2К9 и -8(О)2К9, где Х2 обозначает С1-С4-алкилен;
К5 выбран из группы, включающей водород, галоген, С1-С6-алкил, С1-С6-алкоксигруппу, 3-8-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, и -8(ОЖ;
каждый К9 независимо выбран из группы, включающей С1-С6-алкил, С3-С12-циклоалкил и 3-8-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, где указанный циклоалкил или гетероциклоалкил в качестве К9 необязательно может быть замещен 1-3 радикалами, которые независимо представляют собой С1-С6-алкил;
при условии, что по меньшей мере один из К4, К5 или К6 обозначает -8(О)2К9, непосредственно связанный с фенильным кольцом, и его фармацевтически приемлемые соли.
Вторым объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, которая содержит соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в смеси с одним или большим количеством подходящих инертных наполнителей.
- 1 019524
Подробное описание изобретения
Определения.
Алкил в качестве группы или структурного элемента других групп, например галогензамещенного алкила и алкоксигруппы, может обладать линейной или разветвленной цепью. С1-С4-Алкоксигруппы включают метоксигруппу, этоксигруппу и т.п. Галогензамещенный алкил включает трифторметил, пентафторэтил и т.п.
Арил означает моноциклическую или конденсированную бициклическую ароматическую кольцевую систему, содержащую 6-10 кольцевых атомов углерода. Например, С6-С10-арил при использовании в настоящем описании включает, но не ограничивается только ими, фенил или нафтил, предпочтительно фенил. Арилен означает двухвалентный радикал, образованный из арильной группы.
Гетероарил означает 5-15-членную ненасыщенную кольцевую систему, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей -О-, -Ν=, -ΝΚ-, -С(О)-, -8-, -8(0)- и -8(0)2-, где В обозначает водород, С1-С4-алкил или защитную группу атома азота. Например, С1-С10-гетероарил (С1-С10- указывает, что в кольцевой системе содержатся от 1 до 10 атомов углерода) при использовании в настоящем описании включает, но не ограничивается только ими, пиразолил, пиридинил, индолил, тиазолил, 3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-6-ил, фуранил, бензо[Ь]фуранил, пирролил, 1Н-индазолил, имидазо[1,2-а]пиридин-3-ил, оксазолил, бензо[й]тиазол-6-ил, 1Н-бензо[й][1,2,3]триазол-5ил, хинолинил, 1Н-индолил, 3,4-дигидро-2Н-пирано[2,3-Ь]пиридинил и 2,3-дигидрофуро[2,3Ь]пиридинил, 3-оксо-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]оксазин-7-ил и т.п.
Циклоалкил означает насыщенную или частично ненасыщенную моноциклическую, конденсированную бициклическую или мостиковую полициклическую кольцевую систему, содержащую указанное количество кольцевых атомов. Например, Сз-Сю-циклоалкил включает циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и т.п.
Гетероциклоалкил означает 3-8-членную насыщенную или частично ненасыщенную кольцевую систему, содержащую от 1 до 3 гетероатомов, независимо выбранных из группы, включающей -О-, -Ν=, -ΝΒ-, -С(О)-, -8-, -8(0)- и -8(О)2-, где В обозначает водород, С1-С4-алкил или защитную группу атома азота. Например, С3-С8-гетероциклоалкил при использовании в настоящем описании изобретении для описания соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, включает, но не ограничивается только ими, морфолиновую группу, пирролидинил, азепанил, пиперидинил, изохинолинил, тетрагидрофуранил, пирролидинил, пирролидинил-2-он, пиперазинил, пиперидинилон, 1,4-диокса-8-азаспиро[4,5]дец-8-ил и т.п.
Галоген предпочтительно означает хлор или фтор, но также может означать бром или йод.
Набор киназ представляет собой перечень киназ, включающий АЬ1 (человека), АЬ1 (Т3151), 1АК2, 1АК3, АЬК, ЖК1а1, АЬК4, КЭВ, Аигога-А, Ьск, В1к, МАРК1, Втх, МАРКАР-К2, ВВК, МЕК1, СаМК11 (крысы), Мер СЭК1/циклин В, р7086К, СНК2, РАК2, СК1, ΡΌΟΡΒα, СК2, РОК1, с-кй, Р1т-2, с-ВАР, РКА(й), С8К, РКВа, с8гс, РКСа, ОУВК2, Р1к3, ЕОРВ, ВОСК-Ι, Рек, Воп, РОРВ3, Вок, РЙ3, 8АРК2а, Ртк, 8ОК, Руп, 81К, О8К3|, 8ук, ЮР-1В, Те-2, 1КК|, ТгКВ, 1В, АХК^х 1ВАК4, 2АР-70, 1ТК, АМРК (крысы), Ь1МК1, Вкк2, Ах1, ЬКВ1, 8АРК2|, Вг8К2, Ьуп (й), 8АРК3, ВТК, МАРКАР-К3, 8АРК4, СаМК1У, МАВК1, 8пк, СОК2/циклин А, МПМК, 8ВРК1, СОК3/циклин Е, МКК4(т), ТАК1, СОК5/р25, МКК6(й), ТВК1, СОК6/циклин Ό3, МЬСК, ТгкА, СОК7/циклин Н/МАТ1, МВСК|, Т88К1, СНК1, М8К1, Уек, СК1й, М8Т2, 21РК, с-кй (Ό816ν), Ми8К, ОАРК2, №К2, ОПВ2, №К6, ОМРК, РАК4, БВАК1, РАВ-1Ва, ЕрЬА1, РП6РВ|, ЕрйА2, Р1т-1, ЕрйА5, РКВ|, ЕрйВ2, РКС|1, ЕрйВ4, РКС5, Р0РВ1, РКСц, Р0РВ2, РКС0, РОРВ4, РКЭ2, Рдг, РКО1|, РЙ1, РВК2, Нск, РУК2, Н1РК2, Вер 1ККа, В1РК2, 1ВВ, ВОСК-ΙΙ (человека), 1МК2а2, Вке, Ш3, Вкк1(й), Р13 Ку, Р13 К5 и Р13 К|. Для соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, проведен скрининг воздействия на этот набор киназ (дикого типа и/или их мутаций) и установлено, что они ингибируют активность по меньшей мере одного представителя указанного набора киназ.
Лечение относится к способу облегчения или смягчения заболевания и/или сопутствующих ему симптомов.
Описание предпочтительных вариантов осуществления
Ген с-кй кодирует рецепторную тирозинкиназу и лиганд рецептора с-Βί! называется фактором стволовых клеток (ФСК), который является главным фактором роста, обеспечивающим жизнеспособность мастоцитов. Активность с-кй рецепторной протеинтирозинкиназы в нормальных клетках регулируется, и нормальная функциональная активность продукта гена с-кй важна для поддержания нормального гематопоэза, меланогенеза, генетогенеза и роста и дифференциации мастоцитов. Мутации, которые вызывают конститутивную активацию киназной активности с-Βί! при отсутствии связывания с ФСК, участвуют в различных заболеваниях в диапазоне от мастоцитоза до раковых заболеваний человека.
В одном варианте осуществления соединений формулы I Ь выбран из -N40(0)- и -0(0)ΝΉ-; В2а и В2Ь, каждый независимо, представляют собой водород; В1 выбран из группы, включающей водород, гидроксил, 5-6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-2 гетероатома, независимо выбранных из N и О, С1-С2-алкил, С1-С2-алкоксигруппу, галогензамещенную С1-С2-алкоксигруппу, галогензамещенный
- 2 019524
С1-С2-алкил, -ОХ| к- где Χι обозначает С1-С4-алкилен и В8 обозначает С3-циклоалкил; или Κι и В2а вместе с атомами углерода, к которым Κι и В2а присоединены, образуют фенил; В3 и К- независимо выбраны из водорода и галогена; В , и к независимо выбраны из группы, включающей водород, С1-С6-алкил, С1-С6-алкоксигруппу, галогензамещенную С1-С6-алкоксигруппу и -8(О)2В9; и В5 выбран из группы, включающей водород, галоген, С1-С6-алкил, С1-С6-алкоксигруппу, 5-6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-2 гетероатома, независимо выбранных из N и О, и -8(О)2В9; каждый В9 независимо выбран из группы, включающей С1-С6-алкил, С3-С12-циклоалкил и 5-6-членный гетероциклоалкил, содержащий
1-3 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, где указанный циклоалкил или гетероциклоалкил в качестве В9 необязательно может быть замещен 1-3 радикалами, которые независимо представляют собой С1-С6-алкил; при условии, что по меньшей мере один из к. В5 или В6 обозначает -8(О)2В9, непосредственно связанный с фенильным кольцом.
В другом варианте осуществления к выбран из группы, включающей водород, гидроксил, пирролидинил, морфолиновую группу, метоксигруппу, дифторметоксигруппу, 2-фторэтоксигруппу и метил; или к и В2а вместе с атомами углерода, к которым к и В2а присоединены, образуют фенил.
В другом варианте осуществления к| и В6 независимо выбраны из группы, включающей водород, метилсульфонил, метил, 2-фторэтоксигруппу, метилпиперазинилсульфонил, пропоксигруппу, изобутоксигруппу, 2,2,2-трифторэтоксигруппу, 2,3-дифтор-2-(фторметил)пропоксигруппу, бутоксигруппу и циклопропилметоксигруппу; и к выбран из группы, включающей водород, галоген, метилсульфонил, метил, метоксигруппу, этоксигруппу и морфолиновую группу.
Другой вариант осуществления относится к соединениям, выбранным из группы, включающей: ]\1-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-3-(метилсульфонил)бензамид; ]\1-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4-(метилсульфонил)бензамид; 4-хлор-1\Г-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-3(метилсульфонил)бензамид;
2- хлор-1\Г-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
-метил-1\Г-(4-метил-3 -(4-(пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
4-метил-1\Г-(4-метил-3 -(4-(пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-3 (метилсульфо нил)бензамид;
4-это кси-М-(4-метил-3 -(4-(пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-3 (метилсульфо нил)бензамид; ]\1-(4-метил-3-(4-(5-морфолинопиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфо нил)бензамид;
1\1-(4-метил-3-(4-(5-(пирро лидин-1 -ил)пиридин-3-ил)пиримидин-2 -иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
]\1-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-3-(метилсульфонил)-4морфолинобензамид;
Х-(3-(4-(5-метоксипиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
]\Г-(3-(4-(5-(2-фторэтокси)пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-4(метилсульфо нил)бензамид;
Х-(3-(4-(5-(циклопропилметокси)пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-4(метилсульфо нил)бензамид;
]\1-(4-метил-3-(4-(5-метилпиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфо нил)бензамид;
3- (2-фторэтокси)-М-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
]\1-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4-(метилсульфонил)-3пропоксибензамид;
-метокси-М-(4-метил-3 -(4-(пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
-бутокси-М-(4-метил-3 -(4-(пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
3- (циклопропилметокси)-М-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
]\Г-(3-(4-(изохинолин-4-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-3 -(метилсульфо нил)бензамид;
4- метокси-М-(4-метил-3 -(4-(пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-3 - (метилсульфо нил)бензамид;
Х-(3-(4-(5-(дифторметокси)пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-4(метилсульфо нил)бензамид;
1\1-(4-метил-3 -(4-(пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-3 -(4-метилпиперазин-1
-3 019524 илсульфонил)бензамид;
И-(3-(4-(5-гидроксипиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
-изобутокси-Ы-(4-метил-3 -(4-(пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)фенцил)-4(метилсульфонил)бензамид;
И-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4-(метилсульфонил)-3-(2,2,2трифторэтокси)бензамид и
3-(2,3-дифтор-2-(фторметил)пропокси)-Ы-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2иламино)фенил)-4-(метилсульфонил)бензамид.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей терапевтически эффективное количество соединения формулы I, в комбинации с фармацевтически приемлемым инертным наполнителем.
Фармакология и применение.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, модулируют активность киназ и, как таковые, применимы для лечения заболеваний или нарушений, при которых киназы способствуют патологии и/или симптоматике этого заболевания. Примеры киназ, которые ингибируются соединениями и композициями, описанными в настоящем изобретении, и по отношению к которым применимы способы, описанные в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваются только ими, киназы с-кй, АЫ, Ьуп, МАРК14 (р38-дельта), РИСРКа, ΡΌΟΡΚβ, АКС, ВСК-АЫ, ВКК, ЕрйВ, Рш8, Руп, КИК, ЬСК, Ь-КаР, с-КаР, 8АРК2, 8гс, Т1е2 и ТгкВ.
Мастоциты (МЦ) являются тканевыми элементами, образованными из особой подгруппы гематопоэтических стволовых клеток, которые продуцируют много разных медиаторов, большинство из которых обладает высокой провоспалительной активностью. Поскольку МЦ распределены почти по всем участкам организма, гиперсекреция медиаторов активированными элементами может привести к поражениям множества органов. Поэтому мастоциты являются главными элементами, участвующими во многих заболеваниях. Настоящее изобретение относится к способу лечения связанных с мастоцитами заболеваний, включающему введение человеку, нуждающемуся в таком лечении, соединения, способного уменьшать количество мастоцитов, или соединения, подавляющего дегрануляцию мастоцитов. Такие соединения можно выбрать из числа ингибиторов с-кй и более предпочтительно - из числа не токсичных, селективных и активных ингибиторов с-кй. Предпочтительно, если указанные ингибиторы неспособны стимулировать гибель зависимых от 1Ь-3 клеток, выращенных в присутствии 1Ь-3.
Связанные с мастоцитами заболевания включают, но не ограничиваются только ими, акне и акне, вызыванные Ргорюп1Ьас1егшт (акне включает все формы хронического воспаления кожи, включая вызванные акне, вызванные Ргорюп1Ьас1егшт); чрезвычайно редкое и приводящее к потере трудоспособности генетическое заболевание соединительной ткани, известное как прогрессирующая оссифицирующая фибродисплазия (ПОФ); вредные последствия воспаления и разрушения ткани, вызванного воздействием химического или бактериологического оружия (такого как сибирская язва, сернистый иприт и т.п.); муковисцидоз (генетическое заболевание легких, пищеварительной и репродуктивной системы); заболевание почек, такое как синдром острого нефрита, гломерулонефрит, почечный амилоидоз, почечный интерстициальный фиброз (конечное общее направление, приводящее к терминальной стадии заболевания почек при различных нефропатиях); воспалительные мышечные нарушения, включая миозит и мышечную дистрофию; ВИЧ (например, уменьшение количества инфицированных посредством ВИЧ мастоцитов может представлять собой новый путь лечения инфицирования посредством ВИЧ и родственных заболеваний); лечения диабета типа II, ожирения и родственных нарушений (мастоциты регулируют целый ряд процессов, которые способствуют развитию атеросклероза, включая гипергликемию, гиперхолестеринемию, гипертензию, эндотелиальную дисфункцию, резистентность к инсулину и ремоделирование сосудов); ишемию головного мозга; мастоцитоз (очень неоднородная группа нарушений, характеризующаяся аномальным накоплением мастоцитов в различных тканях, преимущественно в коже и костном мозге, а также в селезенке, печени, лимфатических узлах и желудочно-кишечном тракте); токсикоманию и симптомы отмены (в особенности привыкание к чрезмерному употреблению лекарственного средства или наркотика, злоупотребление лекарственным средством или наркотиком, привыкание к лекарственному средству или наркотику, зависимость от лекарственного средства или наркотика, синдром отмены и передозировку); нарушения ЦНС (в особенности депрессию, шизофрению, тревожное состояние, мигрень, потерю памяти, боль и нейродегенеративные заболевания); стимулирование роста волос (включая предупреждение или сведение к минимуму потери волос); бактериальные инфекции (в особенности инфекции, вызванные бактериями, экспрессирующими Р1тН); интерстициальный цистит (хроническое воспаление стенки мочевого пузыря, приводящее к повреждению ткани, в особенности в интерстициальном пространстве между клетками в выстилке мочевого пузыря); воспалительные заболевания кишечника (обычно это относится к четырем заболеваниям кишечника, а именно болезни Крона, язвенному колиту, колиту неопределенной этиологии и инфекционному колиту); ангиогенез опухоли; аутоиммунные заболевания (в особенности рассеянный склероз, язвенный колит, болезнь Крона, ревматоидный артрит и полиартрит, склеродермия, красная волчанка, дерматомиозит, пемфигус, полимиозит, васкулит и заболе
- 4 019524 вания трансплантат против хозяина); воспалительные заболевания, такие как ревматоидный артрит (РА); рассеянный склероз (РС); аллергические нарушения (в особенности аллергический ринит, аллергический синусит, анафилактический синдром, уртикария, ангионевротический отек, атопический дерматит, аллергический контактный дерматит, нодозная эритема, полиморфная эритема, кожный некротический венулит и кожное воспаление вследствие укуса насекомого, бронхиальная астма); полипоз носа и потерю костной массы.
ТРФР (тромбоцитарный фактор роста) является широко распространенным фактором роста, который играет важную роль и при нормальном росте, и при патологической пролиферации клеток, такой как наблюдающаяся при канцерогенезе и заболеваниях гладкомышечных клеток кровеносных сосудов, например при атеросклерозе и тромбозе. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, могут ингибировать активность рецептора ТРФР (ТРФРР) и поэтому пригодны для лечения опухолевых заболеваний, таких как глиомы, саркомы, опухоли предстательной железы и опухоли толстой кишки, молочной железы и яичников, гиперэозинофилии, фиброза, такого как фиброз легких, легочной гипертензии и сердечно-сосудистых заболеваний.
Путь передачи сигнала Вак-ВаР-МЕК-ЕВК опосредует клеточный ответ на сигналы роста. Вак мутирует в онкогенную форму в ~15% случаях рака человека. Группа ВаР относится к серин/треонинпротеинкиназам и включает трех представителей, А-ВаР, В-ВаР и с-ВаР (или ВаР-1). Воздействие на ВаР, как на мишень лекарственного средства, направлено на роль ВаР, как расположенного в прямом направлении эффектора Вак. Однако последние данные показывают, что В-ВаР может играть заметную роль в образовании некоторых опухолей без необходимости наличия активированного Вак аллеля (№Ш.1гс. 417, 949-954 (1 Л.11. 2002). В частности, мутации В-ВаР обнаружены в значительной части злокачественных меланом.
Имеющиеся медицинские средства лечения меланомы обладают ограниченной эффективностью, в особенности на поздних стадиях меланом. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, также подавляют клеточные процессы, включающие Ь-ВаР киназу, и предоставляют новые возможности для лечения раковых заболеваний людей, в особенности меланомы.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, также подавляют клеточные процессы, включающие с-ВаР киназу. с-ВаР активируется онкогеном гак, который мутрован при большом количестве раковых заболеваний людей. Поэтому ингибирование киназной активности с-ВаР может предоставить средство для предупреждения роста опухоли, опосредуемого гак [СатрЬе11, 8.Б., Опсодепе, 17, 1395 (1998)].
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно применять и для лечения незлокачественных пролиферативных нарушений, таких как атеросклероз, тромбоз, псориаз, склеродермия и фиброз, а также для защиты стволовых клеток, например для противодействия гемотоксическому воздействию химиотерапевтических средств, таких как 5-фторурацил, и при астме.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, оказывают полезное воздействие при лечении нарушений, возникающих вследствие трансплантации, например аллогенной трансплантации, в особенности отторжения тканей, в особенности такого как облитерирующий бронхиолит (ОБ), т.е. хроническое отторжение аллогенных трансплантатов легких. В отличие от пациентов, не страдающих ОБ, у страдающих ОБ часто обнаруживается повышенная концентрация ТРФР в жидких бронхоальвеолярных выделениях.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, также эффективны при заболеваниях, связанных с миграцией и пролиферацией гладкомышечных клеток сосудов (при которых часто играют роль ТРФР и ТРФРР), таких как рестеноз и атеросклероз. Эти эффекты и их последствия для пролиферации или миграции гладкомышечных клеток сосудов ίη νίίτο и ίη νίνο можно продемонстрировать путем введения соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, а также путем исследования их влияния на утолщение интимы сосудов ίη νίνο после механического повреждения.
Группа Ргк нейротропиновых рецепторов (РгкА, 1гкВ, 1гкС) стимулирует жизнеспособность, рост и дифференциацию нейронных и не нейронных тканей. Белок ТгкВ экспрессируется в клетках нейроэндокринного типа в тонком кишечнике и толстой кишке, в альфа-клетках поджелудочной железы, в моноцитах и макрофагах лимфатических узлов и селезенки и в зернистом слое эпидермиса (81Ьауата апб Κοίζιιιητ 1996). Экспрессирование белка ТгкВ связывали с неблагоприятным прогрессированием опухолей Вилма и нейробластомами. Кроме того, ТкгВ экспрессируется в раковых клетках предстательной железы, но не в нормальных клетках. Путь передачи сигналов в прямом направлении от рецепторов Ргк включает каскад активации АМПК с помощью 811с, активированный Вак, гены ЕВК-1 и ЕВК-2 и путь трансдукции РЬС-гамма (8ιΐβίιηοΙο е1 а1., 2001).
Киназа с-кгс передает онкогенные сигналы многих рецепторов. Например, сверхэкспрессирование ЕОРВ или НЕВ2/пеи в опухолях приводит к конститутивной активации с-кгс, характерной для злокачественной клетки, но отсутствующей в нормальной клетке. С другой стороны, мыши, у которых отсутствует экспрессирование с-кгс, обладают остеопетротическим фенотипом, что указывает о ключевой роли с-кгс в функции остеокластов и о возможном участии в связанных с этим нарушениях.
- 5 019524
Киназа семейства Тес, Втх, нерецепторная протеинтирозинкиназа, регулирует пролиферацию раковых клеток эпителия млекопитающих.
Показано, что рецептор 3 фактора роста фибробластов оказывает негативное регуляторное влияние на рост костей и ингибирование пролиферации хондроцитов. Летальная дисплазия вызывается различными мутациями рецептора 3 фактора роста фибробластов, и одна мутация, ΤΌΙΙ РСРК3. обладает конститутивной тирозинкиназной активностью, что активирует фактор транскрипции §!а!1, что приводит к экспрессированию ингибитора клеточного цикла, остановке роста и аномальному развитию костей (§и е! а1., Ма!ите, 1997, 386, 288-292). РСРК.3 также часто экспрессируется при раковых заболеваниях типа множественной миеломы. Ингибиторы активности РСРЬ3 применимы для лечения опосредуемых Т-клетками воспалительных или аутоиммунных заболеваний, включая, но не ограничиваясь только ими, ревматоидный артрит (РА), коллагеновый II артрит, рассеянный склероз (РС), системную красную волчанку (СКВ), псориаз, юношеский диабет, болезнь Шегрена, заболевание щитовидной железы, саркоидоз, аутоиммунный увеит, воспалительную болезнь кишечника (болезнь Крона и язвенный колит), глютеиновую болезнь и миастению дгасЬ.
Активность киназы, экспрессируемой под действием сыворотки или глюкокортикоидов (СГК), коррелирует с измененными активностями ионных каналов, в частности натриевых и/или калиевых каналов, и соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно использовать для лечения гипертензии.
Ьт е! а1. (1997), 1. Сйи. 1п\еМ. 100, 8:2072-2078 и Р. Ьт (1998), ΡΝΑ8, 95, 8829-8834 с помощью моделей ксенотрансплататов опухоли молочной железы и меланомы показали, что происходит подавление роста опухоли и васкуляризации, а также уменьшение метастазирования в легкие при аденовирусных инфекциях или при инъекции внутриклеточного домена Т1е-2 (Тек). Ингибиторы Т1е2 можно использовать в случаях, когда происходит неприемлемая неоваскуляризация (т.е. при диабетической ретинопатии, хроническом воспалении, псориазе, саркоме Капоши, хронической неоваскуляризации вследствие дегенерации желтого пятна, ревматоидном артрите, младенческой гемангиоме и раковых заболеваниях).
Ьск участвует в Т-клеточной сигнализации. Мыши, лишенные гена Ьск, обладают плохой способностью вырабатывать тимоциты. Функция Ьск, как положительного активатора Т-клеточной сигнализации, показывает, что ингибиторы Ьск могут быть полезными для лечения аутоиммунного заболевания, такого как ревматоидный артрит.
Разные ΡΝΚ, как и другие АМПК, участвуют в опосредовании клеточного ответа на рак, индуцируемой тромбином агрегации тромбоцитов, иммунодефицитных состояниях, аутоиммунных заболеваниях, гибели клеток, аллергиях, остеопорозе и заболевании сердца. Объекты лечебного воздействия, связанные с активацией пути ΡΝΚ, включают хронический миелолейкоз (ХМЛ), ревматоидный артрит, астму, остеоартрит, ишемию, рак и нейродегенеративные заболевания. Вследствие важности активации 1ΝΚ, связанной с заболеванием печени или приступами печеночной ишемии, соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, также могут быть применимы для лечения различных заболеваний печени. Также описана роль ΡΝΚ в сердечно-сосудистом заболевании, таком как инфаркт миокарда или застойная сердечная недостаточность, и было показано, что 1ΝΚ опосредует гипертрофический ответ на различные формы сердечного стресса. Показано, что каскад ΡΝΚ также участвует в активации Т-клеток, включая активацию промотора 1Ь-2, таким образом, ингибиторы ΡΝΚ могут быть полезны для применения при измененных патологических иммунных ответах. Также выявлена роль активации 1ΝΚ при различных раковых заболеваниях, что свидетельствует о возможности применения ингибиторов 1ΝΚ при раке. Например, конститутивно активированный 1ΝΚ связан с опосредуемым НТЬУ-1 онкогенезом [Опсодепе. 13:135-42 (1996)]. ΡΝΚ может играть роль при саркоме Капоши (СК). Другие пролиферативные эффекты других цитокинов, участвующих в пролиферации при СК, таких как сосудистый эндотелиальный фактор роста (СЭФР), 1Ь-6 и ТИРа, также могут опосредоваться с помощью 1ΝΚ. Кроме того, регуляция гена с-щп в р210 ВСВ-АВЬ трансформированных клетках соответствует активности ΡΝΚ и свидетельствует о роли ингибиторов ΡΝΚ при лечении хронического миелолейкоза (ХМЛ) [В1ооб. 92:2450-60 (1998)].
Предполагается, что некоторые аномальные пролиферативные патологические состояния связаны с экспрессированием та! и поэтому предположительно чувствительны к подавлению экспрессирования та!. Аномально высокие уровни экспрессирования белка га! также связаны с трансформацией и аномальной пролиферацией клеток. Также предполагается, что эти аномальные пролиферативные патологические состояния чувствительны к ингибированию экспрессирования га!. Например, экспрессирование белка сга! предположительно играет роль при аномальной пролиферации клеток, поскольку сообщали, что 60% всех линий клеток карциномы легких экспрессируют необычно высокие уровни мРНК и белка с-га!. Другими примерами аномальных пролиферативных патологических состояний являются гиперпролиферативные нарушения, такие как раковые заболевания, опухоли, гиперплазия, фиброз легких, ангиогенез, псориаз, атеросклероз и пролиферация гладкомышечных клеток кровеносных сосудов, такие как стеноз или рестеноз после ангиопластики. Клеточные сигнальные пути, частью которых является га!, также участвуют в воспалительных нарушениях, характеризующихся пролиферацией Т-клеток (активация и рост Т-клеток), таких как, например, отторжение тканевого лоскута, эндотоксиновый шок и гломерулонефрит.
Активированные стрессом протеинкиназы (АСПК) представляют собой семейство протеинкиназ,
- 6 019524 которые характеризуют предпоследнюю стадию путей передачи сигналов, которые приводят к активации фактора транскрипции с-)ип и экспрессированию генов, регулируемых с помощью едии. В частности, с_)ип участвует в транскрипции генов, кодирующих белки, участвующие в репарации ДНК, которая повреждена вследствие генотоксичных инсультов. Поэтому средства, которые ингибируют активность АСПК в клетке, предотвращают репарацию ДНК и сенсибилизируют клетку по отношению к средствам, которые индуцируют повреждение ДНК или ингибируют синтез ДНК и индуцируют апоптоз клетки, или по отношению к средствам, которые подавляют пролиферацию клеток.
Активированные митогеном протеинкиназы (АМПК) являются представителями консервативных путей передачи сигналов, которые активируют факторы транскрипции, факторы трансляции и другие целевые молекулы в ответ на различные внеклеточные сигналы. АМПК активируются фосфорилированием по двойному мотиву фосфорилирования, обладающему последовательностью ТЬг-Х-Туг, с помощью активированных митогеном протеинкиназкиназ (МКК). У высших эукариотов физиологическая роль передачи сигналов с помощью АМПК была скоррелирована с такими клеточными проявлениями, как пролиферация, онкогенез, развитие и дифференциация. В соответствии с этим способность регулировать трансдукцию сигналов по этим путям (в особенности через МКК4 и МКК6) может привести к разработке средств лечения и профилактики заболеваний, связанных с передачей сигналов с помощью АМПК, таких как воспалительные заболевания, аутоиммунные заболевания и рак.
Группа рибосомных протеинкиназ 86 человека включает по меньшей мере 8 представителей (В8К1, В8К2, В8К3, В8К4, М8К1, М8К2, р7086К и р7086 КЬ). Протеинкиназы рибосомного белка 86 выполняют важные плейотропные функции, в частности играют ключевую роль в регуляции трансляции мРНК при биосинтезе белка (Еиг. 1. ВюсЬеш. 2000 ХоуетЬет; 267(21):6321-30, Ехр. Се11 Век. Νον. 25, 1999; 253(1):100-9, Мо1. Се11 Еи6остто1. Мау 25, 1999; 151(1-2):65-77). Также показано, что фосфорилирование рибосомного белка 86 посредством р7086 участвует в регуляции клеточной подвижности (1ттипо1. Се11 Вю1. 2000 Лидий; 78(4):447-51) и росте клеток (Ргод. №.1с1ею ЛсИ Век. Мо1. Вю1., 2000; 65:101-27) и поэтому может быть важным для метастазирования опухоли, иммунного ответа и восстановления ткани, а также для других патологических состояний.
АСПК (также называющиеся _)ип Ν-концевые киназы или ΙΝΒ'κ) представляют собой семейство протеинкиназ, которые характеризуют предпоследнюю стадию путей передачи сигналов, которые приводят к активации фактора транскрипции с-)ип и экспрессированию генов, регулируемых с помощью с_)ип. В частности, с-)ип участвует в транскрипции генов, кодирующих белки, участвующие в репарации ДНК, которая повреждена вследствие генотоксичных инсультов. Средства, которые ингибируют активность АСПК в клетке, предотвращают репарацию ДНК и сенсибилизируют клетку по отношению к средствам лечения рака, которые действуют путем индуцирования повреждения ДНК.
ВТК играет роль в аутоиммунном и/или воспалительном заболевании, таком как системная красная волчанка (СКВ), ревматоидный артрит, множественные васкулиты, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ИТП), миастения βηνίκ и астма. Вследствие участия ВТК в активации В-клеток ингибиторы ВТК применимы в качестве ингибиторов опосредуемой В-клетками патогенной активности, такой как продуцирование аутоантител, и применимы для лечения В-клеточной лимфомы и лейкоза.
СНК2 является представителем семейства сйескрош! киназ серин/треонинпротеинкиназ и участвует в механизме, использующемся для контроля повреждения ДНК, такого как повреждение, вызванное мутагенами окружающей среды и эндогенными реакционноспособными кислородсодержащими соединениями. В результате она связана с подавлением опухоли и является объектом противораковой терапии.
С8К влияет на метастатическую способность раковых клеток, в особенности при колоректальном раке.
Гек является нерецепторной протеинтирозинкиназой, которая участвует в различных путях передачи сигналов цитокинов, а также в дифференциации миелоидных клеток. Гек также является основным компонентом дифференциации гранулоцитов.
Активность Г113 рецепторной тирозинкиназы связана с лейкозами и миелодиспластическим синдромом. Примерно в 25% случаев ОМЛ лейкозные клетки экспрессируют конститутивно активную форму аутофосфорилированной (р) ГЬТ3 тирозинкиназы на поверхности клеток. Активность р-ГЬТ3 способствует росту и жизнеспособности лейкозных клеток. Для пациентов, страдающих острым лейкозом, лейкозные клетки которых экспрессируют активную киназу р-ГЬТ3, прогноз результатов химиотерапии является плохим. Ингибирование активности киназы р-ГЬТ3 индуцирует апоптоз (запрограммированную гибель клеток) лейкозных клеток.
Ингибиторы 1ККа и 11<1<β (1 и 2) являются средствами лечения заболеваний, которые включают ревматоидный артрит, отторжение трансплантата, воспалительную болезнь кишечника, остеоартрит, астму, хроническое обструктивное заболевание легких, атеросклероз, псориаз, рассеянный склероз, удар, системную красную волчанку, болезнь Альцгеймера, ишемию головного мозга, травматическое поражение головного мозга, болезнь Паркинсона, боковой амиотрофический склероз, субарахноидальное кровоизлияние и другие заболевания или нарушения, связанные с избыточным продуцированием воспалительных медиаторов в головном мозге и центральной нервной системе.
Ме1 связана с большинством типов основных раковых заболеваний человека, и ее экспрессия часто
- 7 019524 коррелирует с плохим прогнозом и метастазами. Ингибиторы Ме1 являются средствами лечения заболеваний, которые включают раковые заболевания, такие как рак легких, НМКРЛ (немелкоклеточный рак легких), рак кости, рак поджелудочной железы, рак кожи, рак головы и шеи, кожную или внутриглазную меланому, рак матки, рак яичников, рак прямой кишки, рак анальной области, рак желудка, колоректальный рак, рак молочной железы, гинекологические опухоли (например, саркомы матки, карцинома фаллопиевых труб, карцинома эндометрия, карцинома шейки матки, карцинома влагалища и карцинома вульвы), болезнь Ходжкина, рак пищевода, рак тонкой кишки, рак эндокринной системы (например, рак щитовидной железы, паращитовидной железы или надпочечников), саркомы мягких тканей, рак мочеиспускательного канала, рак пениса, рак предстательной железы, хронический или острый лейкоз, солидные опухоли у детей, лимфоцитарные лимфомы, рак мочевого пузыря, рак почек или мочеточника (например, почечно-клеточная карцинома, карцинома почечной лоханки), злокачественные новообразования у детей, неоплазмы центральной нервной системы (например, первичная лимфома ЦНС, опухоли оси позвоночника, глиома ствола головного мозга или аденомы гипофиза), раковые заболевания крови, такие как острый миелолейкоз, хронический миелолейкоз и т.п., язву пищевода Баррета (предраковый синдром), опухолевое кожное заболевание, псориаз, фунгоидную гранулему и доброкачественную гипертрофию предстательной железы, связанные с диабетом заболевания, такие как диабетическая ретинопатия, ретинальная ишемия и ретинальная реваскуляризация, цирроз печени, сердечно-сосудистое заболевание, такое как атеросклероз, иммунологическое заболевание, такое как аутоиммунное заболевание и заболевание почек. Предпочтительным заболеванием является рак, такой как острый миелолейкоз и колоректальный рак.
Связанная с №та киназа 2 (Иек2) является регуляторной протеинкиназой клеточного цикла с максимальной активностью в начале митоза, которая локализуется в центросоме. Исследования ее воздействия показали, что Ыек2 участвует в регуляции отделения центросомы и образовании веретена. В линиях клеток, полученных из опухолей человека, включая опухоли шейки матки, яичников, предстательной железы и в особенности молочной железы, белок Ыек2 содержит от 2 до 5 складок.
Опосредуемые с помощью р7086К заболевания или патологические состояния включают, но не ограничиваются только ими, пролиферативные нарушения, такие как рак и туберозный склероз.
Введение и фармацевтические композиции.
Обычно соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, вводят в терапевтически эффективных количествах посредством любого из обычных и приемлемых путей, известных в данной области техники, по отдельности или в комбинации с одним или большим количеством терапевтических средств. Терапевтически эффективное количество может меняться в широких пределах в зависимости от тяжести заболевания, возраста и относительного состояния здоровья субъекта, активности применяющегося соединения и других факторов. Имеются указания о том, что обычно удовлетворительные результаты получают при системном воздействии и суточных дозах, равных примерно от 0,03 до 2,5 мг/кг массы тела. Указанная суточная доза для более крупного млекопитающего, например человека, находится в диапазоне от примерно 0,5 до примерно 100 мг, обычно вводится, например, в виде разделенных доз вплоть до 4 раз в сутки или в форме пролонгированного действия. Разовые дозированные формы, подходящие для перорального введения, включают примерно от 1 до 50 мг активного ингредиента.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно вводить в виде фармацевтических композиций любым обычным путем, в частности энтерально, например перорально, например в виде таблеток или капсул, или парентерально, например в виде растворов или суспензий для инъекций, местно, например в виде лосьонов, гелей, мазей или кремов, или в назальной, ингаляционной форме или в форме суппозиториев. Фармацевтические композиции, включающие соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли совместно по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем можно приготовить обычным путем по методикам смешивания, гранулирования или нанесения покрытий. Например, композиции для перорального введения могут представлять собой таблетки или желатиновые капсулы, включающие активный ингредиент совместно с а) разбавителями, например лактозой, декстрозой, сахарозой, маннитом, сорбитом, целлюлозой и/или глицином; Ь) смазывающими веществами, например диоксидом кремния, тальком, стеариновой кислотой, ее магниевой или кальциевой солью и/или полиэтиленгликолем; для таблеток также со с) связующими, например алюмосиликатом магния, крахмальной пастой, желатином, трагакантовой камедью, метилцеллюлозой, натриевой солью карбоксиметилцеллюлозы и/или поливинилпирролидоном; при необходимости с 6) разрыхлителями, например крахмалами, агаром, альгиновой кислотой или ее натриевой солью, или шипучими смесями; и/или е) абсорбентами, красителями, вкусовыми добавками и подсластителями. Композиции для инъекций могут представлять собой водные изотонические растворы или суспензии, и суппозитории можно приготовить из эмульсий или суспензий жирных веществ. Композиции могут быть стерилизованы и/или содержать вспомогательные вещества, такие как консервирующие, стабилизирующие, смачивающие или эмульгирующие агенты, стимуляторы растворения, соли для регулирования осмотического давления и/или буферные вещества. Кроме того, они также могут содержать другие терапевтически полезные вещества. Препараты, подходящие для чрескожного введения, включают эффективное количество соединения, предлагаемого в настоящем изобре
- 8 019524 тении, вместе с носителем. Носитель может включать впитывающиеся фармакологически приемлемые растворители, содействующие проникновению через кожу реципиента. Например, чрескожные устройства представляют собой повязку, включающую защитный элемент, резервуар, содержащий соединение, необязательно совместно с носителями, необязательно регулирующий скорость барьерный элемент для доставки соединения к коже реципиента с регулируемой и заранее заданной скоростью в течение продолжительного периода времени и средства для закрепления устройства на коже. Также можно использовать матричные препараты для чрескожного введения. Препаратами, подходящими для местного нанесения, например на кожу и в глаза, предпочтительно являются водные растворы, мази, кремы или гели, хорошо известные в данной области техники. Они могут содержать солюбилизаторы, стабилизаторы, усиливающие тоничность агенты, буферные вещества и консерванты.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно вводить в терапевтически эффективных количествах в комбинации с одним или большим количеством терапевтических средств (фармацевтические комбинации). Например, синергетический эффект может проявляться при использовании других средств лечения астмы, например стероидов и антагонистов лейкотриена.
Например, синергетический эффект может проявляться при использовании других иммуномодулирующих или противовоспалительных средств, например при использовании в комбинации с циклоспорином, рапамицином или аскомицином или с их иммунодепрессантными аналогами, например циклоспорином А (СУЛ), циклоспорином О, ЕК-506, рапамицином или сравнимыми соединениями, кортикостероидами, циклофосфамидом, азатиоприном, метотрексатом, брехинаром, лефлуномидом, мизорибином, микофеноловой кислотой, микофенолятмитефилом, 15-дезоксиспергуалином, иммунодепрессантными антителами, в особенности моноклональными антителами к рецепторам лейкоцитов, например МНС, СЭ2, СЭ3, ΟΌ4, СЭ7, СЭ25, ΟΌ28, В7, СЭ45, ΟΌ58 или их лигандами, или другими иммуномодулирующими соединениями, такими как СТЬА41д. Когда соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, вводят совместно с другими средствами, разумеется, дозы вводимых совместно соединений будут меняться в зависимости от типа используемого совместно лекарственного средства, конкретного используемого лекарственного средства, подвергающегося лечению патологического состояния и т.п.
Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим комбинациям, например к набору, включающему а) первое средство, которое является соединением, предлагаемым в настоящем изобретении, описанным в настоящем изобретении, в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли, и Ь) по меньшей мере одно дополнительное средство. Набор может включать инструкции по его введению.
Термины совместное введение или комбинированное введение и т.п. при использовании в настоящем изобретении означают введение выбранных терапевтических средств одному пациенту и включает режимы лечения, при которых средства необязательно вводят по одному и тому же пути введения или в одно и то же время.
Термин фармацевтическая комбинация при использовании в настоящем изобретении означает препарат, который получен смешиванием или объединением более одного активного ингредиента и включает и фиксированные, и нефиксированные комбинации активных ингредиентов. Термин фиксированная комбинация означает, что активные ингредиенты, например соединение формулы I и дополнительное средство, оба, вводят пациенту одновременно в виде одного препарата или дозированной формы. Термин нефиксированная комбинация означает, что активные ингредиенты, например соединение формулы I и дополнительное средство, оба, вводят пациенту в виде отдельных препаратов одновременно, по отдельности или последовательно без наложения специальных ограничений по времени, и при таком введении в организме пациента создаются терапевтически эффективные уровни этих 2 соединений. Последнее также относится к смешанному лечению, например с введением 3 или большего количества активных ингредиентов.
Способы получения соединений, предлагаемых в настоящем изобретении.
Настоящее изобретение также относится к способам получения соединений, предлагаемых в настоящем изобретении. Для описанных реакций может оказаться необходимой защита реакционноспособных функциональных групп, например гидрокси-, амино-, имино-, тио- или карбоксигрупп, если необходимо, чтобы они содержались в конечном продукте, чтобы избежать их нежелательного участия в реакциях. Можно использовать обычные защитные группы в соответствии со стандартной практикой; см., например, Т.^. Отееие аиб Р.О.М. \Уи15 ίη Рго1сс6ус Огоирк ίη Отдаше СйетШту, ίοΐιη \УПсу & 8ои5, 1991.
Соединения формулы I, в которой Ь обозначает -ΝΗΟ(Ο)-, можно получить по следующей схеме реакций I.
- 9 019524
Схема реакций I
где К1, К2а, К2Ь, Я3, Кд, К5, Кб и К7 являются такими, как описано в Кратком изложении сущности изобретения.
Соединение формулы I можно получить по реакции соединения формулы 2 с соединением формулы 3 в присутствии подходящего растворителя (например, ДМФ (диметилформамид) и т.п.), подходящего реагента сочетания (например, НАТИ и т.п.) и подходящего основания (например, ДИЭА (диизопропилэтиламин) и т.п.). Реакция протекает в температурном диапазоне от примерно 0 до примерно 60°С и до завершения может продолжаться в течение до 24 ч.
Соединения формулы I, в которой Ь обозначает -ί.'(Ο)ΝΗ-, можно получить по следующей схеме реакций II.
Схема реакций II
где К!, К2, К3, К4, К5, К6 и К7 являются такими, как описано в Кратком изложении сущности изобретения.
Соединение формулы I можно получить по реакции соединения формулы 4 с соединением формулы 5 в присутствии подходящего растворителя (например, ДМФ и т.п.), подходящего реагента сочетания (например, НАТИ и т.п.) и подходящего основания (например, ДИЭА и т.п.). Реакция протекает в температурном диапазоне от примерно 0 до примерно 60°С и до завершения может продолжаться в течение до 24 ч.
Подробное описание синтеза соединение формулы I приведено в представленных ниже примерах. Дополнительные методики синтеза соединений, предлагаемых в настоящем изобретении.
Соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, можно получить в виде фармацевтически приемлемой соли присоединения с кислотой по реакции соединения в свободной форме с фармацевтически приемлемой неорганической или органической кислотой. Альтернативно, фармацевтически приемлемую соль присоединения соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, с основанием можно получить по реакции соединения в форме свободной кислоты с фармацевтически приемлемым неорганическим или органическим основанием. Альтернативно, солевые формы соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, можно получить с использованием солей исходных веществ или промежуточных продуктов.
Формы свободной кислоты или свободного основания соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, можно получить из соответствующих солей присоединения с основаниями или солей присоединения с кислотами соответственно. Например, соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, в форме соли присоединения с кислотой можно превратить в соответствующее свободное основание путем обработки подходящим основанием (например, раствором гидроксида аммония, гидроксидом натрия и т.п.). Например, соединение, предлагаемое в настоящем изобретении, в форме соли присоединения с основанием можно превратить в соответствующую свободную кислоту путем обработки подходящей кислотой (например, хлористо-водородной кислотой и т.п.).
- 10 019524
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, в неокисленной форме можно получить из Ν-оксидов соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, путем обработки восстановительным реагентом (например, серой, диоксидом серы, трифенилфосфином, борогидридом лития, борогидридом натрия, трихлоридом, трибромидом фосфора и т.п.) в подходящем инертном органическом растворителе (например, ацетонитриле, этаноле, водном растворе диоксана и т.п.) при температуре от 0 до 80°С.
Пролекарственные производные соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, можно получить по методикам, известным специалистам с общей подготовкой в данной области техники (дополнительные подробности см., например, в публикации 8аи1шет с1 а1. (1994), Вюотдашс апб Ме61сша1 СНепиЧгу Ьейега, νοί. 4, р. 1985). Например, подходящие пролекарства можно получить по реакции не являющегося производным соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, с подходящим карбамоилирующим реагентом (например, 1,1-ацилоксиалкилкарбанохлоридатом, п-нитрофенилкарбонатом и т.п.).
Защищенные производные соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, можно получить по методикам, известным специалистам с общей подготовкой в данной области техники. Подробное описание методик, применимых для введения защитных групп и их удаления, приведено в публикации Т.^. Стеепе, РгсЛесйпд Сгоирк ίη Огдашс СйетщЦу, 3гб ебН1оп, Ιοίιη \УПеу & 8оп§, 1пс., 1999.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно легко получить или сформировать способом, предлагаемым в настоящем изобретении, в виде сольватов (например, гидратов). Гидраты соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, можно легко получить путем перекристаллизации из водно/органических смесей растворителей с использованием органических растворителей, таких как диоксан, тетрагидрофуран или метанол.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, можно получить в виде отдельных стереоизомеров с помощью реакции рацемической смеси соединения с оптически активным разделяющим реагентом с образованием пары диастереоизомерных соединений, разделения диастереоизомеров и выделения оптически чистых энантиомеров. Хотя разделение энантиомеров можно провести с использованием ковалентных диастереоизомерных производных соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, предпочтительны диссоциирующие комплексы (например, кристаллические соли диастереоизомеров). Диастереоизомеры обладают разными физическими характеристиками (например, температурами плавления, температурами кипения, растворимостями, реакционной способностью и т.п.), и их можно легко разделить с использованием этих различий. Диастереоизомеры можно разделить с помощью хроматографии или предпочтительно по методикам разделения, основанным на различиях их растворимостей. Затем оптически чистый энантиомер вместе с разделяющим реагентом извлекают по любой возможной методике, которая не приводит к рацемизации. Более подробное описание методик, пригодных для выделения стереоизомерных соединений из их рацемической смеси, приведено в публикации 1еап 1асцие8, Апбте Со11е1. 8атие1 Н. \УПеп. Епапкотещ Расета1е5 и КекоЫНопк, 1о1т \УПеу & 8опк, 1пс., 1981.
Резюмируя, можно сказать, что соединения формулы I можно получить способом, который включает:
(a) проведение реакций по схемам реакций I и II;
(b) необязательное превращение соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, в фармацевтически приемлемую соль;
(c) необязательное превращение солевой формы соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, в несолевую форму;
(6) необязательное превращение неокисленной формы соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, в фармацевтически приемлемый Ν-оксид;
(е) необязательное превращение Ν-оксидной формы соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, в его неокисленную форму;
(1) необязательное выделение индивидуального изомера соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, из смеси изомеров;
(д) необязательное превращение не являющегося производным соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, в фармацевтически приемлемое пролекарственное производное;
(1) необязательное превращение пролекарственного производного соединения, предлагаемого в настоящем изобретении, в его не являющуюся производным форму.
Если получение исходных веществ не описано, то эти соединения являются известными или их можно получить по методикам, аналогичным известным в данной области техники или раскрытым в приведенных ниже примерах.
Специалист в данной области техники должен понимать, что описанные выше превращения являются только примерами методик получения соединений, предлагаемых в настоящем изобретении, и что также можно использовать другие хорошо известные методики.
- 11 019524
Примеры
Настоящее изобретение дополнительно описывается, но не ограничивается, приведенными ниже примерами, которые иллюстрируют получение соединений формулы I, предлагаемых в настоящем изобретении.
Получение промежуточных продуктов.
Синтез 6-метил-Ы1-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил)бензол-1,3-диамина 5.
К 2-амино-4-нитротолуолу 1 (0,033 моль) в н-бутаноле (29 мл) прибавляют азотную кислоту (2,1 г, 65% в воде) и затем раствор цианамида в воде (2 мл, 0,047 ммоль). Полученную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 25 ч. После охлаждения до 0°С, фильтрования и промывки смесью 1:1 = этанол:диэтиловый эфир (30 мл) получают 2-метил-5-нитрофенилгуанидиннитрат 2.
К 2-метил-5-нитрофенилгуанидину 2 (0,0074 моль) в изопропаноле (15 мл) прибавляют 3 (0,0074 моль) и чешуйки гидроксида натрия (0,008 моль). Полученную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 12 ч. После охлаждения до 0°С продукт собирают фильтрованием и промывают изопропанолом (6 мл) и метанолом (3 мл) и получают 4.
Ή ЯМР (400 МГц, 66-ДМСО) δ 9,31 (8, 1Н), 9,24 (8, 1Н), 8,78 (т, 1Н), 8,70 (т, 1Н), 8,61 (т, 1Н), 8,47 (т, 1Н), 7,88 (т, 1Н), 7,55 (т, 3Н), 2,39 (8, 3Н).
МС (т/ζ) (М+1)+: 278,2.
Реагент 3 можно получить по следующим методикам.
Смесь 3-ацетилпиридина (2,47 моль) и диметилацеталя Ν,Ν-диметилформамид (240 мл) кипятят с обратным холодильником в течение 16 ч. Растворитель удаляют в вакууме и гексаны (100 мл) прибавляют к остатку для кристаллизации твердого вещества. Твердое вещество перекристаллизовывают из смеси метилен хлорид-гексаны и получают 3-диметиламино-1-(3-пиридил)-2-пропен-1-он.
Ή ЯМР (400 МГц, 6-хлороформ) δ 9,08 (6, 1=2,4 Гц, 1Н), 8,66 (т, 1Н), 8,20 (т, 1Н), 7,87 (т, 1Н), 7,37 (т, 1Н), 5,68 (6, 1=16,4 Гц, 1Н), 3,18 (8, 3Н), 2,97 (8, 3Н).
В реактор помещают концентрированную хлористо-водородную кислоту (17 мл) и затем безводный хлорид олова(11) (0,03 моль). Смесь перемешивают в течение 10 мин и затем охлаждают до 0-5°С. Затем медленно прибавляют (в течение 3-4 мин) раствор соединения 4 (5,6 ммоль) в этилацетате (3 мл), поддерживая температуру равной 0-5°С. Реакционную смесь нагревают до КТ (комнатная температура) и перемешивают в течение 1,5 ч. К ней прибавляют воду (50 мл) и затем медленно прибавляют 50% раствор гидроксида натрия (40 мл). Полученную смесь экстрагируют хлороформом (2x25 мл). Органический слой тщательно промывают водой и выпаривают. Остаток растворяют в этилацетате (2 мл), охлаждают до 0-10°С, выдерживают при этой температуре в течение 1 ч. Полученный осадок собирают фильтрованием и промывают этилацетатом (1 мл) и получают 1,0 г 5.
Ή ЯМР (400 МГц, 6-хлороформ) δ 9,26 (6, 1=2,0 Гц, 1Н), 8,71 (т, 1Н), 8,48 (6, 1=6,8 Гц, 1Н), 8,34 (т, 1Н), 7,59 (6, 1=4,0 Гц, 1Н), 7,41 (т, 1Н), 7,12 (т, 1Н), 7,04 (т, 1Н), 6,42 (т, 1Н), 3,50 (Ь8, 2Н), 2,24 (8, 3Н).
Синтез 4-(5-бромпиридин-3-ил)-№(2-метил-5-нитрофенил)пиримидин-2-амина 8
1-(5-Бромпиридин-3-ил)-3-диметиламинопропенон 7 по методике, аналогичной использованной для синтеза 3.
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 386,1, 388,1.
получают из
1-(5 -бромпиридин-3 -ил)этанона
- 12 019524
Конденсация с М-(2-метил-5-нитрофенил)гуанидиннитратом по методике, аналогичной использованной для получения 4, дает [4-(5-бромпиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]-(2-метил-5-нитрофенил)амин 8.
Ή ЯМР (400 МГц, 6-СЭС13) δ 9,33 (6, 1=2,4 Гц, 1Н), 9,09 (6, 1=1,6 Гц, 1Н), 8,74 (6, 1=2,4 Гц, 1Н), 8,61 (1, 1=2,0 Гц, 1Н), 8,53 (6, 1=4,8 Гц, 1Н), 8,01 (5, 1Н), 7,82 (66, 1=8,4, 2,4 Гц, 1Н), 7,29 (6, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,22 (6, 1=4,8 Гц, 1Н), 7,10 (5, 1Н), 2,41 (5, 3Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 255,0, 257,0.
Синтез б-метил-Ν 1-(4-(5 -(пирролидин-1 -ил)пиридин-3 -ил)пиримидин-2-ил)бензол-1,3 -диамина 10
9 10 (2-Метил-5-нитрофенил)-[4-(5-пирролидин-1-илпиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амин 9 получают путем смешивания 8 (0,40 г, 1,04 ммоль), пирролидина (3,12 ммоль), К3РО4 (0,44 г, 2,08 ммоль), Си1 (38,5 мг, 0,10 ммоль) и аминокислоты Ь-пролина (48,1 мг, 0,21 ммоль) в ДМСО (8 мл) нагревания при 160°С в микроволновой печи в течение 20 мин. Охлажденную смесь подвергают распределению между водой и этилацетатом. Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические слои промывают рассолом, сушат над Να28Ο4 и концентрируют в вакууме. Остаток растворяют в 4 мл ДМСО и очищают с помощью ВЭЖХ (высокоэффективная жидкостная хроматография) и получают чистый продукт 9 (25%).
Ή ЯМР (400 МГц, 6-СЭС13) δ 9,23 (6, 1=2,4 Гц, 1Н), 8,63 (6, 1=5,2 Гц, 1Н), 8,58 (5, 1Н), 8,10 (5, 1Н), 8,04 (5, 1Н), 7,90 (66, 1=8,4, 2,4 Гц, 1Н), 7,44 (5, 1Н), 7,39 (6, 1=8,4 Гц, 1Н), 7,30 (6, 1=5,2 Гц, 1Н), 3,43-3,48 (т, 4Н), 2,49 (5, 3Н), 2,12-2,16 (т, 4Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 377,2.
4-Метил-№3-|4 -(5 -пирролидин-1 -илпиридин-3 -ил)пиримидин-2-ил] бензол-1,3 -диамин 10 получают гидрированием 9 в Е1ОН в присутствии 10% Р6/С при давлении водорода, равном 1 атм., при КТ (30 %). Растворитель удаляют после фильтрования через целит и продукт используют без дополнительной очистки.
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 347,2.
Путем замены пирролидина на другие амины (например, морфолин) можно синтезировать различные промежуточные продукты, аналогичные 9 и 10.
Синтез N1 -(4-(5 -метоксипиридин-3 -ил)пиримидин-2 -ил) -6-метилбензол-1,3 -диамина 14
Смесь 3-бром-5-метоксипиридина (3,0 г, 16 ммоль) и Р6(РР13)4 несколько раз дегазируют и продувают с помощью Ν2. К смеси прибавляют трибутил(1-этоксивинил)олово (7,04 мл, 20,8 ммоль) и толуол (15 мл). Полученную реакционную смесь нагревают при 150°С в течение 30 мин в микроволновой печи. После завершения реакции реакционную смесь фильтруют через слой целита, промывают с помощью МеОН, и концентрируют и получают остаток. К этому остатку прибавляют НС1 (1н., 25 мл) и ТГФ (тетрагидрофуран) (25 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляют в вакууме и остаток растворяют в Е1ОАс. Органический слой промывают раствором №ьС'О3. сушат над №28О4, фильтруют, концентрируют и получают остаток, который очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (Е1ОАс:гексаны = 1:1) и получают 11 в виде светло-желтого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, 66-ДМСО) δ 8,75 (6, 1=1,6 Гц, 1Н), 8,52 (6, 1=3,2 Гц, 1Н), 7,74 (66, 1=1,6, 3,2 Гц, 1Н), 3,91 (5, 3Н), 2,64 (5, 3Н).
МС (т/ζ) (М+1)+: 152,1.
- 13 019524
3-(Диметиламино)-1-(5-метоксипиридин-3-ил)проп-2-ен-1-он 12 получают из 11 по реакции с диэтокси-Ы,И-диметилметанамином по методике, аналогичной использованной для получения 3.
'|| ЯМР (400 МГц, а6-ДМСО) δ 8,69 (ά, 1=2,0 Гц, 1Н), 8,37 (а, 1=2,8 Гц, 1Н), 7,76 (а, 1=12,0 Гц, 1Н), 7,70 (аа, 1=1,6, 2,8 Гц, 1Н), 5,86 (а, 1=12,0 Гц, 1Н), 3,89 (8, 3Н), 3,17 (8, 3Н), 2,95 (8, 3Н).
МС (т/ζ) (М+1)+: 207,1.
Конденсация 12 с И-(2-метил-5-нитрофенил)гуанидиннитратом 2 по методике, аналогичной использованной для получения 4, дает 4-(5-метоксипиридин-3-ил)-Ы-(2-метил-5-нитрофенил)пиримидин-2амин 13.
'|| ЯМР (400 МГц, а6-ДМСО) δ 9,23 (8, 1Н), 8,93 (а, 1=1,2 Гц, 1Н), 8,80 (а, 1=2,0 Гц, 1Н), 8,63 (а, 1=5,2 Гц, 1Н), 8,44 (а, 1=2,8 Гц, 1Н), 8,00 (8, 1Н), 7,91 (аа, 1=2,0, 8,4 Гц, 1Н), 7,62 (а, 1=5,2 Гц, 1Н), 7,52 (а, 1=8,4 Гц, 1Н), 3,90 (8, 3Н), 2,44 (8, 3Н).
МС (т/ζ) (М+1)+: 338,1.
И3-[4-(5-Метоксипиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]-4-метилбензол-1,3-диамин 14 получают гидрированием 3 по методике, аналогичной использованной для получения 10.
'|| ЯМР (400 МГц, а6-ДМСО) δ 8,90 (а, 1=1,6 Гц, 1Н), 8,71 (8, 1Н), 8,51 (а, 1=5,2 Гц, 1Н), 8,45 (а, 1=2,8 Гц, 1Н), 8,01 (аа, 1=2,0, 3,2 Гц, 1Н), 7,43 (а, 1=5,2 Гц, 1Н), 6,91 (а, 1=8,0 Гц, 1Н), 6,87 (а, 1=2,4 Гц, 1Н), 6,38 (аа, 1=2,4, 8,0 Гц, 1Н), 4,87 (8, 2Н), 3,95 (8, 3Н), 2,12 (8, 3Н).
МС (т/ζ) (М+1)+: 308,1
Синтез И1-(4-(5-(2-фторэтокси)пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил)-6-метилбензол-1,3-диамина 17
Соединение 13 (220 мг, 0,65 ммоль) растворяют в ДХМ (дихлорметан) и обрабатывают с помощью ВВЯ3 (3,25 ммоль) при -78°С в течение ночи. Смесь разбавляют с помощью ДХМ и промывают 1н. водным раствором ИаОН. Полученную водную фазу подкисляют избытком 1н. НС1 и экстрагируют с помощью ДХМ. Концентрирование дает 15, который используют без дополнительной очистки.
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 324,2.
Соединение 15 (87,0 мг, 0,27 ммоль) кипятят с обратным холодильником с С8НСО3 (103,6 мг, 0,54 ммоль) и 1-бром-2-фторэтаном (102,0 мг, 0,80 ммоль) в ацетонитриле (2,0 мл) в течение ночи. Смесь очищают с помощью препаративной ЖХ/МС (жидкостная хроматография/масс-спектрометрия) и получают 16.
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 370,1.
Соединение 16 (50,0 мг, 0,14 ммоль) кипятят с обратным холодильником с 8иС12-Н2О (77,2 мг, 0,41 ммоль) в ЕЮН (2,0 мл) в течение 1 ч. Смесь растворяют в ИаОН (1н., 50 мл) и экстрагируют с помощью ДХМ. Органический слой отделяют, сушат над Иа2О4, фильтруют, концентрируют и получают неочищенный продукт, который затем используют без очистки.
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 340,1.
Путем замены 1-бром-2-фторэтана на другие алкилгалогениды (например, бромметилциклопропан) можно синтезировать различные промежуточные продукты, аналогичные 16 и 17.
Синтез И-(2-метил-5-нитрофенил)-4-(5-метилпиридин-3-ил)пиримидин-2-амина 21
ОЕ1
20
5-Метилникотинонитрил (2,08 г, 17,6 ммоль) кипятят с обратным холодильником в сухом ТГФ (20 мл) с МдМеВг (3 М раствор в ЕьО. 10 мл, 30 ммоль) в течение 2 ч. После охлаждения медленно прибавляют водный раствор Иа2СО3 для остановки реакции. Экстракция с помощью ДХМ дает неочищен
- 14 019524 ную смесь, которую очищают с помощью хроматографии на силикагеле, и получают 1-(5-метилпиридин3-ил)этанон 18 (0,7 г, 30 %).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 136,1.
1-(5-Метилпиридин-3-ил)этанон 19 получают по методике, аналогичной использованной для получения 3, по реакции 18 с диэтокси-Ы,Ы-диметилметанамином.
Ή ЯМР (400 МГц, а6-ДМСО) δ 8,87 (а, 1=1,2 Гц, 1Н), 8,49 (а, 1=1,2 Гц, 1Н), 8,02-8,04 (т, 1Н), 7,75 (а, 1=12,0 Гц, 1Н), 5,85 (а, 1=12,0 Гц, 1Н), 3,16 (5, 3Н), 2,94 (5, 3Н), 2,35 (5, 3Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 191,2.
К 2-метил-5-нитрофенилгуанидину 2 (2,0 ммоль) в н-бутаноле (15 мл) прибавляют 19 (2,0 ммоль) и чешуйки гидроксида натрия (2,0 ммоль). Полученную смесь нагревают при 180°С в течение 40 мин в микроволновой печи. После охлаждения до 0°С продукт собирают фильтрованием и промывают эфиром (20 мл) и метанолом (10 мл) и получают 20 (90%).
Ή ЯМР (400 МГц, а6-ДМСО) δ 9,19 (5, 1Н), 9,13 (а, 1=1,6 Гц, 1Н), 8,91 (а, 1=2,0 Гц, 1Н), 8,63 (а, 1=5,2 Гц, 1Н), 8,57 (а, 1=1,2 Гц, 1Н), 8,37 (5, 1Н), 7,90 (аа, 1=8,0, 2,4 Гц, 1Н), 7,59 (а, 1=5,2 Гц, 1Н), 7,52 (а, 1=8,4 Гц, 1Н), 2,45 (5, 3Н), 2,41 (5, 3Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 322,2.
Соединение 21 получают гидрированием 20 в МеОН в присутствии 10% Ра/С с подачей водорода из баллона при КТ. Растворитель удаляют после фильтрования через целит и продукт используют без дополнительной очистки (95%).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 292,1.
Синтез 3-гидрокси-4-метансульфонил-Ы-[4-метил-3-(4-пиридин-3-илпиримидин-2иламино)фенил]бензамида 23
22
6-Метил-Ы1-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил)бензол-1,3-диамин 5 (578 мг, 2,09 ммоль), 4-йод-3гидроксибензойную кислоту (587 мг, 2,22 ммоль) и НАТИ (960 мг, 2,52 ммоль) растворяют в сухом ДМФ (5 мл) при КТ. К раствору по каплям прибавляют диизопропилэтиламин (0,732 мл, 4,2 ммоль). Через 30 мин смесь медленно прибавляют к насыщенному водному раствору ЫаНСО3. Твердое вещество отфильтровывают, промывают водой и сушат в вакууме в течение ночи и получают продукт 22 в виде желтовато-коричневатого твердого вещества (630 мг, 60%).
ЖХ/МС (М+1): 524,1.
Соединение 22 (580 мг, 1,11 ммоль), Си1 (42 мг, 0,272 ммоль), Ь-пролин (61 мг, 0,444 ммоль), 1н. ЫаОН (0,5 мл) и Ыа8О2Ме (267 мг, 2,22 ммоль) суспендируют в ДМСО (3 мл) и нагревают при 180°С в микроволновой печи в течение 25 мин. Смесь разбавляют концентрированным водным раствором аммиака и промывают с помощью ЕЮАс. К водной фазе прибавляют 1н. водный раствор НС1 до установления рН 7 и твердый осадок собирают фильтрованием и получают продукт 23 (80%).
ЖХ/МС (М+1): 476,1.
Синтез конечных соединений.
Тип А.
N-(3 -(4-(Пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-3 -(метилсульфонил)бензамид А1
А1
6-Метил-Ы1-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил)бензол-1,3-диамин 5 (5 ммоль), 3-(метилсульфонил)бензойную кислоту (6 ммоль) и НАТИ (6 ммоль) растворяют в сухом ДМФ (5 мл) при КТ. Диизопропилэтиламин (6 ммоль) по каплям прибавляют к раствору. Через 30 мин смесь медленно прибавляют к насыщенному водному раствору ЫаНСО3. Твердое вещество отфильтровывают, промывают водой и сушат в вакууме в течение ночи и получают продукт А1 в виде светло-желтого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, а6-ДМСО) δ 10,5 (5, 1Н), 9,33 (5, 1Н), 9,04 (5, 1Н), 8,75 (а, 1=1,7 Гц, 1Н), 8,63 (а, 1=7,5 Гц, 1Н), 8,55 (а, 1=5,0 Гц, 1Н), 8,47 (5, 1Н), 8,29 (а, 1=8 Гц, 1Н), 8,13 (а, 1=8,6 Гц, 1Н), 8,11 (5, Н), 7,83 (1, 1=8 Гц, 1Н), 7,66 (аа, 1=7,3, 5,3 Гц, 1Н), 7,47 (т, 2Н), 7,25 (а, 1=8,4 Гц, 1Н), 3,29 (5, 3Н), 2,55 (5, 6Н,
- 15 019524
2Ме-НОАс), 2,24 (8, 3Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 460,2.
Аналогичную методику используют для получения соединений А2-А5 с применением ЖХ/МС для очистки.
№(3-(4-(Пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-4-(метилсульфонил)бензамид А2.
!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,52 (8, 1Н), 9,26 (8, 1Н), 8,90 (8, 1Н), 8,69 (8, 1Н), 8,61 (6, 1=8,0 Гц, 1Н), 8,50 (6, 1=4,8 Гц, 1Н), 8,08-8,14 (т, 3Н), 8,00-8,07 (т, 2Н), 7,65 (т, 1Н), 7,40 (т, 1Н), 7,23 (т, 1Н), 3,22 (8, 3Н), 2,21 (8, 3Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 460,2.
4-Хлор-3-метансульфонил-№[4-метил-3-(4-пиридин-3-илпиримидин-2-иламино)фенил]бензамид А3.
’Н ЯМР (400 МГц, 66-ДМСО) δ 10,6 (8, 1Н), 9,3 (8, 1Н), 9,04 (8, 1Н), 8,72 (6, 1=3,8 Гц, 1Н), 8,55 (т, 3Н), 8,3 (66, 1=8,3, 2,1 Гц, 1Н), 8,08 (6, 1=1,5 Гц, 1Н), 7,94 (6, 1=8,3 Гц, 1Н), 7,6 (66, 1=7,9, 4,8 Гц, 1Н), 7,48 (т, 2Н), 7,24 (6, 1=8,3 Гц, 1Н), 3,44 (8, 3Н), 2,24 (8, 3Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 494,1.
№(3-(4-(Пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)бензо[6]тиазол-6-карбоксамид А4.
’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,20 (8, 1Н), 9,31 (8, 1Н), 9,02 (8, 1Н), 8,74 (6, 1=3,2 Гц,1Н), 8,58 (т, 1Н), 8,53 (6, 1=4,8 Гц, 1Н), 8,06 (8, 1Н), 7,62 (т, 1Н), 7,45 (6, 1=5,2 Гц, 1Н), 7,41 (6, 1=7,2 Гц, 1Н), 7,15-7,22 (т, 3Н), 7,09-7,13 (т, 1Н), 2,22 (8, 3Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 439,2.
№(3-(4-(Пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-2-хлор-4-(метилсульфонил)бензамид А5.
’Н ЯМР (400 МГц, 66-ДМСО) δ 10,65 (8, 1Н), 9,29 (8, 1Н), 9,03 (8, 1Н), 8,72 (6, 1=4,4 Гц, 1Н), 8,55 (т, 2Н), 8,06 (8, 1Н), 8,00 (6, 1=9,2, 1Н), 7,87 (6, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,60 (т, 1Н), 7,45 (6, 1=4,8 Гц, 1Н), 7,37 (6, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,24 (6, 1=8,4 Гц, 1Н), 3,34 (8, 3Н), 2,24 (8, 3Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 494,1.
4-Метансульфонил-3-метил-№[4-метил-3 -(4-пиридин-3-илпиримидин-2-иламино)фенил]бензамид А6
в Ав
Промежуточный продукт 6 получают аналогично получению А1. Соединение 6 (0,1 ммоль), Си! (0,075 ммоль), Ь-пролин (0,1 ммоль), 1н. №ЮН (0,1 мл) и №8О2Ме (0,15 ммоль) суспендируют в ДМСО (0,5 мл) и нагревают при 180°С в микроволновой печи в течение 5 мин. Смесь очищают с помощью препаративной ЖХ/МС и получают А6.
’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,45 (8, 1Н), 9,24 (8, 1Н), 8,89 (8, 1Н), 8,67 (6, 1=2,0 Гц, 1Н), 8,49 (т, 2Н), 8,09 (8, 1Н), 8,01 (6, 1=8,4, 1Н), 7,90-7,93 (т, 2Н), 7,56 (т, 1Н), 7,39 (6, 1=5,6 Гц, 2Н), 7,23 (6, 1=8,4 Гц, 1Н), 3,32 (8, 3Н), 2,70 (8, 3Н), 2,21 (8, 3Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 474,2.
Аналогичную методику используют для получения соединений А7, А8. №(3-(4-(Пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-4-метил-3(метилсульфонил)бензамид А7.
’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,46 (8, 1Н), 9,23 (8, 1Н), 8,87 (6, 1=7,2 Гц, 1Н), 8,67 (т, 1Н), 8,50 (т, 2Н), 8,05 (6, 1=12,8 Гц, 1Н), 7,58 (т, 2Н), 7,39 (т, 2Н), 7,29 (т, 1Н), 7,22 (т, 2Н), 3,23 (8, 3Н), 2,69 (8, 3Н), 2,21 (8, 3Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 474,2. №(3-(4-(Пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-4-этокси-3(метилсульфонил)бензамид А8.
’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,37 (8, 1Н), 9,23 (8, 1Н), 8,89 (8, 1Н), 8,66 (6, 1=3,6 Гц, 1Н), 8,48 (т, 2Н), 8,37 (6, 1=2,0 Гц, 1Н), 8,25 (6, 1=8,8 Гц, 1Н), 8,05 (8, 1Н), 7,55 (т, 1Н), 7,39 (т, 3Н), 7,22 (6, 1=8,0 Гц, 1Н), 4,30 (т, 2Н), 3,27 (8, 3Н), 2,20 (8, 3Н), 1,41 (ΐ, 1=6,4 Гц, 3Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 504,2.
Тип В.
4-Метансульфонил-№[4-метил-3-[4-(5-пирролидин-1-илпиридин-3-ил)пиримидин-2иламино]фенил}бензамид В1
- 16 019524
ДИПЭА
Конечное соединение В1 получают из 10 по методике, аналогичной использованной для получения А1.
Ή ЯМР (400 МГц, 66-ДМСО) δ 10,5 (8, 1Н), 9,12 (8, 1Н), 8,6 (8, 1Н), 8,59 (8, 1Н), 8,18 (т, 3Н), 8,09 (т, 3Н), 7,89 (8, 1Н), 7,54 (6, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,5 (66, 1=8,2, 2,1 Гц, 1Н), 7,23 (6, 1=8,5 Гц, 1Н), 3,3 (т, 4Н), 3,29 (8, 3Н), 2,24 (8, 3Н), 1,86 (т, 4Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 530,1.
Тип С.
3-Метансульфонил-№[4-метил-3-(4-пиридин-3-илпиримидин-2-иламино)фенил]-4-морфолин-4илбензамид С1
А3 (20 мг, 0,04 ммоль) и морфолин (0,07 мл, 0,8 ммоль) нагревают при 130 С в микроволновой печи в течение 30 мин. Очистка с помощью препаративной ЖХ/МС дает С1.
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 545,3.
Тип Ό.
4-Метансульфонил-№{3-[4-(5-метоксипиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино] -4метилфенил}бензамид Ό1
Конечное соединение Ό1 получают из 14 по методике, аналогичной использованной для получения А1.
Ή ЯМР (400 МГц, 64-МеОН) δ 9,29 (8, 1Н), 8,82 (т, 1Н), 8,7 (6, 1=2,2 Гц, 1Н), 8,6 (6, 1=5,6 Гц, 1Н), 8,36 (8, 1Н), 8,17 (т, 2Н), 8,11 (т, 2Н), 7,66 (6, 1=5,6 Гц, 1Н), 7,35 (т, 2Н), 4,09 (8, 3Н), 3,19 (8, 3Н), 2,35 (8, 3Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 490,2.
№(3-{4-[5-(2-Фторэтокси)пиридин-3-ил]пиримидин-2-иламино}-4-метилфенил)-4метансульфонилбензамид Ό2
Конечное соединение Ό2 получают из 17 по методике, аналогичной использованной для получения А1.
Ή ЯМР (400 МГц, 66-ДМСО) δ 10,5 (8, 1Н), 9,04 (8, 1Н), 8,93 (6, 1=1,6 Гц, 1Н), 8,54 (6, 1=5,2 Гц, 1Н), 8,46 (6, 1=2,8 Гц, 1Н), 8,16 (т, 3Н), 8,07 (т, 3Н), 7,5 (т, 2Н), 7,24 (6, 1=8,5 Гц, 1Н), 4,7 (6, 1=47,8 Гц, 2Н),
- 17 019524
4,37 (6, 1=30 Гц, 2Н), 3,29 (8, 3Н), 2,24 (8, 3Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 522,2.
Тип Е.
4-Метансульфонил-№{4-метил-3-[4-(5-метилпиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино]фенил}бензамид
Е1
Конечное соединение Е1 получают из 21 по методике, аналогичной использованной для получения А1.
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 474,2.
Тип Е.
3-(2-Фторэтокси)-4-метансульфонил-№[4-метил-3-(4-пиридин-3-илпиримидин-2иламино)фенил]бензамид Е1
Соединение 23 (0,04 ммоль), С8НСО3 (0,1 ммоль) и 1-бром-2-фторэтан (0,04 ммоль) нагревают в сухом ацетонитриле (0,5 мл) при 150°С в микроволновой печи в течение 10 мин. Очистка с помощью препаративной ЖХ/МС дает конечное соединение Е1.
Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,41 (8, 1Н), 9,31 (8, 1Н), 9,01 (8, 1Н), 8,73 (8, 1Н), 8,55 (т, 2Н), 8,10 (8, 1Н), 7,95 (т, 1Н), 7,76 (8, 1Н), 7,71 (т, 1Н), 7,60 (т, 1Н), 7,46 (т, 2Н), 7,25 (6, 1=8,0 Гц, 1Н), 4,92 (т, 1Н), 4,80 (т, 1Н), 4,62 (т, 1Н), 4,55 (т, 1Н), 3,32 (8, 3Н), 2,25 (8, 3Н).
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1)+: 522,2.
Аналогичную методику используют для получения соединений Е2-Е5.
Тип С.
№(3-(4-(Изохинолин-4-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-3-(метилсульфонил)бензамид С1
ЗО2Ме
Конечное соединение С1 получают из 27 по методике, аналогичной использованной для получения А1.
ЖХ/МС (т/ζ) (М+1): 510,2.
Путем повторения методик, описанных в приведенных выше примерах (промежуточные продукты и конечные соединения), с использованием подходящих исходных веществ получают следующие соединения формулы I, приведенные в табл.1.
- 18 019524
Таблица 1
Пример № Структура МС [Μ+1]+
А1 сА-Д 460,2
А2 О 6^ Οι Ν и т N 460,1
АЗ О Ν й Т N 494,1
А4 сц. о —N 0 '—/ 440,2
А5 , то Д' βΎ N 494,2
А6 0 αΌ5 о Ог Ν πΎ Ν 474,2
А7 ду ΗΝθβζ'0 Οτ Ν η г Ν 474,2
- 19 019524
А8 Ν 0=8=0 1 504,2
Β1 СЬд ΡΌ о П? ΝΉν η 0 530,1
Β2 °^--0 ίη V 0-\ ηνΛα υ № Ή 8 ° 546,2
С1 £>=νη ο,? ο γτ<ν 545,3
Э1 50¾ · -,,ν ·' Ν 490,2
02 °<5( ΗΝ-Υ Н 0 ₽ %>е« ы—' '—' о 522,2
03 'ЧнЛЯ' 530,2
- 20 019524
Е1 О N 474,2
Р1 г,л хм о м Й т N 522,2
Р2 βΓ йМгпсА 0 518,2
РЗ 490,2
Р4 (/)77 с(гг- м 532,2
Р5 О б'8- О й 1 N 530,2
01 яЛя <ОМО« ΗΝ4 Ν—7 4—' О 510,2
Анализы.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, исследуют для определения их способности селективно подавлять пролиферацию клеток Ва/Р3 дикого типа и клеток Ва/Р3, трансформированных с киназой Те1 с-кй и со слитыми Те1 ТРФРР тирозинкиназами. Кроме того, соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, селективно подавляют зависимую от ФСК пролиферацию клеток Мо7е. Кроме того, соединения исследуют для определения их способности ингибировать киназы АЬ1, АВС, ВСВ-АЬ1, ВВК, ЕрйВ, Ртк, Руп, КБВ, с-кй, ЬСК, ТРФРР, Ь-ВаР, с-ВаР, 8АРК2, 8гс, Т1е2 и ТгкВ.
Исследование пролиферации: библиотека ВаР3 - протокол считывания Впдй! §1ο.
Соединения исследуют для определения их способности подавлять пролиферацию клеток дикого типа Ва/Р3 и клеток Ва/Р3, трансформированных с помощью слитых с Те1 тирозинкиназ. Нетрансформированные клетки Ва/Р3 держат в средах, содержащих рекомбинантный 1Ь3. Клетки помещают в 384луночные планшеты ТС при плотности 5000 клеток/лунка в 50 мкл среды на лунку и прибавляют исследуемое соединение в количестве от 0,06 нМ до 10 мкМ. Затем клетки инкубируют в течение 48 ч при 37°С, 5% СО2. После в каждую лунку прибавляют 25 мкл ВВ1СНТ ОБО® (Рготеда) в соответствии с инструкциями изготовителя и планшеты считывают с использованием Апа1ук1 СТ - режим люминесценции - 50000 интегрирований с представлением результата в виде интенсивностей люминесценции в относительных единицах. Значения 1С50, концентрацию соединения, необходимую для 50% подавления, определяют по зависимости доза-ответ.
Исследование Мо7е.
Соединения, описанные в настоящем изобретении, исследуют для определения их способности подавлять зависимую от ФСК пролиферацию с использованием клеток Мо7е, которые эндогенно экспрессируют с-кй, с использованием 96-луночных планшетов. Вкратце, методика заключается в следующем, для двукратных серийных разведений исследуемых соединений (Стах=10 мкМ) исследуют антипролиферативную активность по отношению к клеткам Мо7е, стимулированным с помощью рекомбинантного ФСК человека. После 48 ч инкубации при 37°С жизнеспособность клеток определяют с помощью колориметрического анализа МТТ фирмы Рготеда.
Методика исследования с-кй НТВР.
Аликвоту (5 мкл) 2х концентрации смеси для исследования фермента с-кй, содержащей 25 нг с-к11 (5 нг/мкл) и 2 мкМ пептида биотин-ЕЕЕРСУЕЕ1Р1УБЕББР-НН; в киназном буфере (20 мМ Тпк рН 7,5, 10 мМ МдС12, 0,01% БСА, 0,1% Вгу35, 1 мМ ДТТ (дитиотреитол), 5% глицерин, 0,05 мМ Ыа3УО4) при- 21 019524 бавляют в каждую лунку 384-луночного планшета ргох1р1а1е (Раекагб). Каждая лунка последнего ряда ргох1р1а1е содержит 5 мкл смеси для исследования фермента е-кй, не содержащей е-кй, и предназначена для оценки фона. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, прибавляют в каждую лунку и планшеты инкубируют в течение 30 мин при комнатной температуре. 2х АТФ (40 мкМ) в киназном буфере (5 мкл) прибавляют в каждую лунку и планшеты инкубируют при комнатной температуре в течение 3 ч. В каждую лунку прибавляют смесь для детектирования (50% КЕ, 40% киназного буфера, 10% ЭДТК, 1:100 разведенный МаЬ РТ66-К (еа!# 61Т66КЬВ) и 1:100 разведенный стрептавидин-ХЬ (еа!# 6118АХЬВ)0 (10 мкл) и планшеты дополнительно инкубируют в течение 1-2 ч при комнатной температуре. Затем сигнал НТКЕ считывают с детектора.
Исследование пролиферации ТО-НА-У8МС человека.
Клетки ТО-НА-У8МС человека (АТСС) выращивают в МИСД, к которой прибавлено 10% ФБС, до слияния 80-90% и затем повторно суспендируют в МИСД, к которой прибавлено 1% ФБС и 30 нг/мл рекомбинантного ТРФР-ВВ человека по 6е4 клеток/мл. Затем аликвоты клеток помещают в 384-луночные планшеты по 50 мкл/лунка, инкубируют в течение 20 ч при 37°С, затем обрабатывают с помощью 0,5 мкл 100х соединений в течение 48 ч при 37°С. После обработки в каждую лунку прибавляют 25 мкл Се11Тйет-О1о в течение 15 мин, затем планшеты считывают с использованием СЫРЕ (Мо1ееи1аг Оеу1еек).
Методика исследования РЭОЕЕа/β Баиее™.
Аликвоту (2,5 мкл) 2х концентрации пептида РЭОЕЕР и смеси, содержащей АТФ (аденозинтрифосфат) (4 мкМ пептида биотин-вА-вА-вА-АЕЕЕЕУУЕШАККК, 20 мкМ АТФ в буфере для исследования (20 мМ Нерек, 54 мМ МдС12, 0,01% БСА, 0,05% Ттееи-20, 1 мМ ДТТ, 10% глицерин, 50 мкМ №-1зУО4)) прибавляют в каждую лунку 384-луночного планшета ргох1р1а1е (Раекагб). Планшеты центрифугируют и соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, (50 нл) прибавляют в каждую лунку с помощью дозатора рш!оо1. В каждую лунку прибавляют (2,5 мкл) 2х концентрации смеси ферментов (РИОЕВа при концентрации 4,5 нг/мкл (еа!# РУ4117) или РЭОЕЕв при концентрации 1,5 нг/ мкл (еа!# РУ3591) в буфере для анализа) или только буфер для анализа без фермента РЭСЕЕав. Планшеты инкубируют в течение 1,5 ч при комнатной температуре. В каждую лунку прибавляют смесь для детектирования (5 мкл; 50% 1 М КЕ, 40% киназного буфера, 10% ЭДТК, 1:100 разведенный МаЬ РТ66-К (еа!# 61Т66КБВ) и 1:100 разведенный стрептавидин-ХЬ (еа!# 6118АХЬВ) и ргох1р1а1е инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре, затем сигнал НТЕЕ считывают с детектора.
Исследование пролиферации Ва/Е3 ЕЬ ЕЬТ3.
Используют линию клеток мышей Ва/Е3 рго-В, которая сверхэкспрессирует полноразмерную конструкцию ЕЬТ3. Эти клетки держат в ЕРМI 1640/10% фетальной бычьей сыворотки (ВРМЕФБС), к которой прибавлены пенициллин 50 мкг/мл, стрептомицин 50 мкг/мл и Ь-глутамин 200 мМ с прибавлением мышиного рекомбинантного ГЬЗ. Ва/Е3 полноразмерные клетки ЕЬТ3 выращивают при недостатке ГЬЗ в течение 16 ч и затем помещают в 384-луночные планшеты ТС при плотности 5000 клеток/лунка в 25 мкл среды на лунку и прибавляют исследуемое соединение в количестве от 0,06 нМ до 10 мкМ. После прибавления соединения прибавляют лиганд ЕЬТ3 или ГЬЗ для контроля цитотоксичности в 25 мкл среды/лунка при соответствующих концентрациях. Затем клетки инкубируют в течение 48 ч при 37°С, 5% СО2. После инкубации клеток в каждую лунку прибавляют 25 мкл ВВЮНТ ОБО® (Рготеда) в соответствии с инструкциями изготовителя и планшеты считывают с использованием Аиа1ук! ОТ - режим люминесценции - 50000 интегрирований с представлением результата в виде интенсивностей люминесценции в относительных единицах.
Подавление пролиферации клеток, зависимой от ВСЕ-АЬ1 (высокопроизводительная методика).
Используют линию клеток мышей, представляющую собой гемопоэтическую родительскую линию клеток 32Ό, трансформированную с помощью ВСВ-АЬ1 кДНК (32И-р210). Эти клетки выдерживают в МИСД (модифицированная Иглом среда Дульбекко)/10% фетальная телячья сыворотка (МИСД/ФТС) с прибавлением пенициллина 50 мкг/мл, стрептомицина 50 мкг/мл и Ь-глутамина 200 мМ. Нетрансформированные клетки 32Ό аналогичным образом выдерживают с прибавлением 15% кондиционированной среды ХУЕШ (\Уа11ег и ЕНха На11 [пк(1(и1е оГ МеФеа1 Еекеагей) в качестве источника [ЦЗ.
мкл суспензии клеток 32Ό или 32Э-р210 помещают в 384-луночные микропланшеты Отешет (черные) при плотности 5000 клеток/лунка. В каждую лунку прибавляют 50 нл исследуемого соединения (1 мМ исходного раствора в ДМСО) (8Ή571 включают в качестве положительного контроля). Клетки инкубируют в течение 72 ч при 37°С, 5% СО2. В каждую лунку прибавляют 10 мкл 60% раствора А1атаг В1ие (Тек Фадпок11ек) и клетки инкубируют в течение еще 24 ч. Интенсивность флуоресценции (возбуждение при 530 нм, испускание при 580 нм) количественно определяют с помощью системы Аедиек!™ (Мо1ееи1аг Оеу1еек).
Подавление пролиферации клеток, зависимой от ВСЕ-АЬ1.
Клетки 32Э-р210 помещают в 96-луночные планшеты ТС при плотности 15000 клеток/лунка. 50 мкл двукратных серийных разведений исследуемого соединения (Стах=40 мкМ) прибавляют в каждую лунку (8Ή571 включают в качестве положительного контроля). После инкубации клетки в течение 48 ч при 37°С, 5% СО2 15 мкл МТТ (Рготеда) прибавляют в каждую лунку и клетки инкубируют в течение
- 22 019524 еще 5 ч. Оптическую плотность при 570 нм количественно определяют с помощью спектрофотомерии и значения 1С50, концентрацию соединения, необходимую для 50% подавления, определяют по зависимости доза-ответ.
Влияние на распределение клеточного цикла.
Клетки 32Ό и 32И-р210 помещают в 96-луночные планшеты ТС по 2,5х106 клеток/лунка в 5 мл среды и прибавляют исследуемые соединения в количестве 1 или 10 мкМ (8Т1571 включают в качестве контроля). Затем клетки инкубируют в течение 24 или 48 ч при 37°С, 5% СО2. 2 мл суспензии клеток промывают с помощью ФБС (фетальная бычья сыворотка), фиксируют в 70% ЕЮН в течение 1 ч и обрабатывают с помощью ФБС/ЭДТК (этилендиаминтетрауксусная кислота)/КЫа8е А в течение 30 мин. Прибавляют пропидиййодид (0=10 мкг/мл) и интенсивность флуоресценции количественно определяют с помощью проточной цитометрии с использованием системы РАС8са11Ьиг™ (ВИ Вю^иепсек). Исследуемые соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, обнаруживают апоптозное воздействие в случае клеток 32И-р210, но не вызывают апоптоз родительских клеток 32Ό.
Влияние на клеточное аутофосфорилирование ВСК-АЬ1.
Аутофосфорилирование ВСК-АЬ1 количественно исследуют с помощью твердофазного иммуноферментного анализа с захватом с использованием специфического по отношению к с-аЬ1 антитела для захвата и антитела к антифосфотирозину. Клетки 32И-р210 помещают в 96-луночные планшеты ТС по 2х105 клеток/лунка в 50 мкл среды. 50 мкл двукратных серийных разведений исследуемых соединений (Стах=10 мкМ) прибавляют в каждую лунку (8Т1571 включают в качестве положительного контроля). Клетки инкубируют в течение 90 мин при 37°С, 5% СО2. Затем клетки в течение 1 ч на льду обрабатывают с помощью 150 мкл литического буфера (50 мМ Тгй-НС1 (Тгй -трис-(гидроксиметил)аминометан), рН 7,4, 150 мМ ЫаС1, 5 мМ ЭДТК, 1 мМ ЭГТК (этиленгликольтетрауксусная кислота) и 1% ΝΡ-40), содержащего ингибиторы протеазы и фосфатазы. 50 мкл лизата клеток помещают в 96-луночные планшеты для оптических исследований, предварительно покрытые специфическими анти-аЬ1 антителами, и блокируют. Планшеты инкубируют в течение 4 ч при 4°С. После промывки буфером ТВ8-Т\уееп-20 (ТВ8 - забуференный с помощью Тгщ физиологический раствор), прибавляют 50 мкл конъюгированных со щелочной фосфатазой антифосфотирозиновых антител и планшеты дополнительно инкубируют в течение ночи при 4°С. После промывки буфером ТВ8-Т\уееп-20 прибавляют 90 мкл люминесцентного субстрата и люминесценцию количественно исследуют с помощью системы АссщеН™ (Мо1еси1аг Эеу1се5). Исследуемые соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, которые ингибируют пролиферацию клеток, экспрессирующих ВСК-АЬ1, ингибируют клеточное аутофосфорилирование ВСК-АЬ1 зависимым от дозы образом.
Влияние на пролиферацию клеток, экспрессирующих мутантные формы ВСК-аЬ1.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, исследуют для определения их антипролиферативного воздействия на клетки Ва/Р3, экспрессирующие форму дикого типа или мутантные формы ВСК-АЬ1 (С250Е, Е255У, Т3151, Р317Б, М351Т), которым придана резистентность или сниженная чувствительность по отношению к 8Т1571. Антипролиферативное воздействие этих соединений на клетки, экспрессирующие мутантную ВСК-аЬ1, и на ^трансформированные клетки исследуют при 10, 3,3, 1,1 и 0,37 мкМ, как это описано выше (в средах без 1Ь3). Значения 1С50 для соединений, нетоксичных для нетрансформированных клеток, определяют по зависимостям доза-ответ, полученным, как это описано выше.
РСРК3 (ферментный анализ).
Исследование активности киназы с использованием очищенного РСРК3 (Ьр51а1е) проводят при конечном объеме, равном 10 мкл, содержащем 0,25 мкг/мл фермента в киназном буфере (30 мМ ТП5-НС1 рН 7,5, 15 мМ МдС12, 4,5 мМ МпС12, 15 мкМ №3УО4 и 50 мкг/мл БСА (бычий сывороточный альбумин), и субстраты (5 мкг/мл биотин-поли-ЕУ(СЬи, Туг) (С18-И8, 1пс.) и 3 мкМ АТФ). Готовят два раствора: сначала первый раствор объемом 5 мкл, содержащий фермент РСРК3 в киназном буфере, помещают в 384-луночные планшеты Ргох1Р1а!е® (Регк1и-Е1тег) и затем прибавляют 50 нл соединений, растворенных в ДМСО, затем в каждую лунку прибавляют 5 мкл второго раствора, содержащего субстрат (поли-ЕУ) и АТФ в киназном буфере. Реакционные смеси инкубируют при комнатной температуре в течение 1 ч, реакции останавливают путем прибавления 10 мкл смеси для детектирования НТКР, которая содержит 30 мМ ТГ18-НС1 рН 7,5, 0,5 М КР, 50 мМ ЭДТК, 0,2 мг/мл БСА, 15 мкг/мл стрептавидин-ХЬ665 (С18-И8, 1пс.) и 150 нг/мл конъюгированных с криптатом антифосфотирозиновых антител (С18-И8, 1пс.). После инкубации в течение 1 ч при комнатной температуре для проведения взаимодействия стрептавидинбиотин с помощью АпаБ® СТ (Мо1еси1аг Эеу1се5 Согр.) считывают сигналы флуоресценции с разрешением по времени. Значения 1С50 рассчитывают с помощью линейного регрессионного анализа, выраженного в процентах подавления каждым соединением при 12 концентрациях (разведения 1:3 от 50 мкМ до 0,28 нМ). В этом исследовании соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, обладают значениями 1С50, находящимися в диапазоне от 10 нМ до 2 мкМ.
- 23 019524
ЕСЕК3 (исследование в клетках).
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, исследуют для определения их способности подавлять пролиферацию трансформированных Ва/Р3-ТЕЬ-ЕСЕК3 клеток, которая зависит от активности клеточной киназы ЕСЕК3. Ва/Р3-ТЕЬ-ЕСЕК3 выращивают вплоть до 800000 клеток/мл в суспензии с МИСД 1640 с прибавлением 10% фетальной бычьей сыворотки в качестве культуральной среды. Клетки помещают в 384-луночный планшет по 5000 клеток/лунка в 50 мкл культуральной среды. Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, растворяют и разводят в диметилсульфоксиде (ДМСО). Готовят 12 серийных разведений 1:3 в ДМСО для получения набора концентраций, обычно находящегося в диапазоне от 10 мМ до 0,05 мкМ. К клеткам прибавляли 50 нл разведенных соединений и инкубируют в течение 48 ч в инкубаторе для культур клеток. А1атагВ1ие® (ТКЕК О1адпо8Йс 8у81ет8). который можно использовать для мониторинга восстановительной среды, образованной пролиферирующими клетками, прибавляют к клеткам при конечной концентрации, равной 10%. После еще 4 ч инкубации при 37°С в инкубаторе для культур клеток сигналы флуоресценции восстановленного А1атагВ1ие® (возбуждение при 530 нм, испускание при 580 нм) измеряют с помощью Апа1у81 СТ (Мо1еси1аг Эеу1се8 Согр.). Значения 1С50 рассчитывают с помощью линейного регрессионного анализа, выраженного в процентах подавления каждым соединением при 12 концентрациях.
Ь-КаТ-ферментный анализ.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, исследуют для определения их способности ингибировать активность Ь-КаТ. Исследование проводят в 384-луночных планшетах Мах18огр (ΝϋΝΟ) с черными стенками и прозрачным дном. Субстрат, ΙκΒα разводят в ЗФФД (забуференный фосфатом физиологический раствор Дульбекко) (1:750) и в каждую лунку прибавляют 15 мкл. Планшеты инкубируют при 4°С в течение ночи и 3 раза промывают с помощью ТВ8Т (25 мМ ТЙ8, рН 8,0, 150 мМ №1С1 и 0,05% Т\уееп-20) с использованием устройства для промывки планшетов ЕМВЬА. Планшеты блокируют с помощью 8ирегЬ1оск (15 мкл/лунка) в течение 3 ч при комнатной температуре, 3 раза промывают с помощью ТВ8Т и сушат. В каждую лунку прибавляют буфер для анализа, содержащий 20 мкМ АТФ (10 мкл), и затем 100 или 500 нл соединения. Ь-КаТ разводят в буфере для анализа (1 мкл в 25 мкл) и в каждую лунку прибавляют 10 мкл разведенного Ь-КаТ (0,4 мкг/лунка). Планшеты инкубируют при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Реакцию киназы останавливают путем проводимой 6 раз промывки планшетов с помощью ТВ8Т. Антитела Р1о8р1-1кВар8ег32/36) разводят в 8ирегЬ1оск (1:10,000) и в каждую лунку прибавляют 15 мкл. Планшеты инкубируют при 4°С в течение ночи и 6 раз промывают с помощью ТВ8Т. АР-конъюгированный козий-анти-мышиный 1дС разводят в 8ирегЬ1оск (1:1,500) и в каждую лунку прибавляют 15 мкл. Планшеты инкубируют при комнатной температуре в течение 1 ч и 6 раз промывают с помощью ТВ8Т. В каждую лунку прибавляют 15 мкл флуоресцентного субстрата А11ор1ю8 АР (Рготеда) и планшеты инкубируют при комнатной температуре в течение 15 мин. Планшеты считывают с использованием Асс.|ие81 или Апа1у81 СТ с использованием программы определения интенсивности флуоресценции (возбуждение при 455 нм, испускание при 580 нм).
Ь-КаТ- исследование в клетках.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, исследуют в клетках А375 для определения их способности ингибировать фосфорилирование МЕК. Линию клеток А375 (АТСС) получают из клеток меланомы человека, и она содержит мутацию У599Е в гене Ь-КаТ. Содержание фосфорилированного МЕК повышено вследствие мутации Ь-КаТ. Субконфлюэнтные и конфлюэнтные клетки А375 инкубируют с соединениями в течение 2 ч при 37°С в бессывороточной среде. Затем клетки один раз промывают холодным ЗФФ (забуференный фосфатом физиологический раствор) и подвергают лизису в литическом буфере, содержащем 1% Тгйоп Х100. После центрифугирования надосадочные жидкости подвергают электрофорезу в полиакриламидном геле с использованием додецилсульфата натрия и затем переносят на мембраны из нитроцеллюлозы. Затем мембраны подвергают вестерн-блоттингу с анти-фосфо-МЕК антителами (8ег217/221) (Се11 81дпа1тд). За количеством фосфорилированного МЕК следят по плотности полос фосфо-МЕК на мембранах из нитроцеллюлозы.
ир81а1е Кта8еРгой1ег™ - радиоферментное исследование связывания с фильтром.
Соединения, предлагаемые в настоящем изобретении, исследуют для определения их способности ингибировать отдельные представители группы киназ. Соединения исследуют по два раза при конечных концентрациях, равных 10 мкМ, по этому типичному протоколу. Отметим, что составы киназного буфера и субстраты были разными для разных киназ, включенных в группу Ир81а1е Кта8еРгой1ег™. Киназный буфер (2,5 мкл, 10х - при необходимости содержащий МпС12), активную киназу (0,001-0,01 Ед; 2,5 мкл), специфический или Ро1у(С1и4-Туг) пептид (5-500 мкМ или 0,01 мг/мл) в киназном буфере и киназный буфер (50 мкМ; 5 мкл) смешивают в пробирке Эппендорфа на льду. Прибавляют смесь Мд/АТФ (10 мкл; 67,5 (или 33,75) мМ МдС12, 450 (или 225) мкМ АТФ и 1 мкКи/мкл [у-32Р]-АТФ (3000 Ки/ммоль)) и реакционную смесь инкубируют примерно при 30°С в течение примерно 10 мин. Реакционную смесь наносят (20 мкл) на квадратики бумаги 2x2 см Р81 (фосфоцеллюлоза, для положительно заряженных пептидных субстратов) или \УНа1тап №. 1 (для Ро1у(С1и4-Туг) пептидного субстрата). Исследуемые квадратики промывают 4 раза по 5 мин с помощью 0,75% фосфорной кислоты и промывают один раз
- 24 019524 ацетоном в течение 5 мин. Исследуемые квадратики переносят в сцинтилляционный сосуд, прибавляют 5 мл сцинтилляционной смеси и содержание 32Р (импульсов/мин) в пептидном субстрате количественно определяют с помощью сцинтилляционного счетчика Весктап. Для каждой реакции рассчитывают ингибирование, выраженное в процентах.
Соединения формулы I в свободной форме или в форме фармацевтически приемлемой соли обладают ценными фармакологическими характеристиками, например, как об этом свидетельствуют проведенные ίη νίΙΐΌ исследования, описанные в настоящем изобретении.
Следует понимать, что описанные в настоящем изобретении примеры и варианты осуществления предназначены только для иллюстрации и что в соответствии с сущностью и объемом настоящего изобретения и объемом прилагаемой формулы изобретения специалист в данной области техники может внести в нее различные модификации и изменения. Все публикации, патенты и заявки на патенты, цитированные в настоящем изобретении, включены в настоящее изобретение в качестве ссылки для всех объектов.

Claims (6)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы I в которой Ь выбран из -ХНС(О)- и -ί.’(Ό)ΝΗ-;
    В2а и В2Ь, каждый независимо, представляют собой водород;
    В| выбран из группы, включающей водород, гидроксил, 3-8-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, С1-С4-алкил, С1-С4-алкоксигруппу, галогензамещенную С1-С4-алкоксигруппу, галогензамещенный С1-С4-алкил, -ОХЩ8, где Х1 обозначает С1-С4-алкилен и В8 обозначает С3-С12-циклоалкил; или
    В1 и В2а вместе с атомами углерода, к которым В1 и В2а присоединены, образуют фенил;
    В3 и В7 независимо выбраны из водорода и галогена;
    В4 и В6 независимо выбраны из группы, включающей водород, С1-С6-алкил, С1-С6-алкоксигруппу, галогензамещенную С1-С6-алкоксигруппу, -ОХ2В9 и -8(О)2В9, где Х2 обозначает С1-С4-алкилен;
    В5 выбран из группы, включающей водород, галоген, С1-С6-алкил, С1-С6-алкоксигруппу, 3-8-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, и -8(О)2В9;
    каждый В9 независимо выбран из группы, включающей С1-С6-алкил, С3-С12-циклоалкил и 3-8-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, где указанный циклоалкил или гетероциклоалкил в качестве В9 необязательно может быть замещен 1-3 радикалами, которые независимо представляют собой С1-С6-алкил, при условии, что по меньшей мере один из В4, В5 или В6 обозначает -8(О)2В9, непосредственно связанный с фенильным кольцом, и его фармацевтически приемлемые соли.
  2. 2. Соединение по п.1, в котором
    Ь выбран из -ХНС(О)- и -С(О)ХН-;
    В2а и В2Ь, каждый независимо, представляют собой водород;
    В1 выбран из группы, включающей водород, гидроксил, 5-6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-2 гетероатома, независимо выбранных из N и О, С1-С2-алкил, С1-С2-алкоксигруппу, галогензамещенную С1-С2-алкоксигруппу, галогензамещенный С1-С2-алкил, -ОХЩ8, где Х1 обозначает С1-С4-алкилен и В8 обозначает С3-циклоалкил; или
    В1 и В2а вместе с атомами углерода, к которым В1 и В2а присоединены, образуют фенил;
    В3 и В7 независимо выбраны из водорода и галогена;
    В4 и В6 независимо выбраны из группы, включающей водород, С1-С6-алкил, С1-С6-алкоксигруппу, галогензамещенную С1-С6-алкоксигруппу и -8(О)2В9; и
    В5 выбран из группы, включающей водород, галоген, С1-С6-алкил, С1-С6-алкоксигруппу, 5-6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-2 гетероатома, независимо выбранных из Ν и О, и -8(О)2В9;
    каждый В9 независимо выбран из группы, включающей С1-С6-алкил, С3-С12-циклоалкил и 5-6-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатома, независимо выбранных из Ν, О и 8, где указанный циклоалкил или гетероциклоалкил в качестве В9 необязательно может быть замещен 1-3 радикалами, которые независимо представляют собой С1-С6-алкил, при условии, что по меньшей мере один из В4, В5 или В6 обозначает -8(О)2В9, непосредственно связанный с фенильным кольцом.
    - 25 019524
  3. 3. Соединение по п.2, в котором Κι выбран из группы, включающей водород, гидроксил, пирролидинил, морфолиновую группу, метоксигруппу, дифторметоксигруппу, 2-фторэтоксигруппу и метил; или В| и К2а вместе с атомами углерода, к которым Κ! и К2а присоединены, образуют фенил.
  4. 4. Соединение по п.3, в котором К4 и К6 независимо выбраны из группы, включающей водород, метилсульфонил, метил, 2-фторэтоксигруппу, метилпиперазинилсульфонил, пропоксигруппу, изобутоксигруппу, 2,2,2-трифторэтоксигруппу, 2,3-дифтор-2-(фторметил)пропоксигруппу, бутоксигруппу и циклопропилметоксигруппу; и К5 выбран из группы, включающей водород, галоген, метилсульфонил, метил, метоксигруппу, этоксигруппу и морфолиновую группу.
  5. 5. Соединение по п.1, выбранное из группы, включающей №(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-3-(метилсульфонил)бензамид; №(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4-(метилсульфонил)бензамид; 4-хлор-Ы-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-3(метилсульфонил)бензамид;
    2- хлор-Ы-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    3 -метил-Ы-(4-метил-3 -(4-(пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    4-метил-Ы-(4-метил-3 -(4-(пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-3 (метилсульфонил)бензамид;
    4-этокси-Ы-(4-метил-3 -(4-(пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-3 (метилсульфонил)бензамид;
    №(4-метил-3-(4-(5-морфолинопиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    №(4-метил-3-(4-(5-(пирролидин-1-ил)пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    №(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-3-(метилсульфонил)-4морфолинобензамид;
    №(3-(4-(5-метоксипиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    N-(3-(4-(5-(2-фторэтокси)пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    №(3-(4-(5-(циклопропилметокси)пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    №(4-метил-3-(4-(5-метилпиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    3- (2-фторэтокси)-Ы-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    №(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4-(метилсульфонил)-3пропоксибензамид;
    3 -метокси-Ы-(4-метил-3 -(4-(пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    3-бутокси-Ы-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    3- (циклопропилметокси)-Ы-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    №(3-(4-(изохинолин-4-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-3 -(метилсульфонил)бензамид;
    4- метокси-Ы-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-3- (метилсульфонил)бензамид;
    N-(3-(4-(5-(дифторметокси)пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    №(4-метил-3 -(4-(пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-3 -(4-метилпиперазин-1 илсульфонил)бензамид;
    №(3-(4-(5-гидроксипиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)-4-метилфенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    - 26 019524
    3 -изобутокси-Ы-(4-метил-3 -(4-(пиридин-3 -ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4(метилсульфонил)бензамид;
    Ы-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-иламино)фенил)-4-(метилсульфонил)-3-(2,2,2трифторэтокси)бензамид и
    3-(2,3-дифтор-2-(фторметил)пропокси)-Ы-(4-метил-3-(4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2иламино)фенил)-4-(метилсульфонил)бензамид.
  6. 6. Фармацевтическая композиция, включающая терапевтически эффективное количество соединения по п.1 в комбинации с фармацевтически приемлемым инертным наполнителем.
    Евразийская патентная организация, ЕАПВ
    Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2
EA200901486A 2007-05-04 2008-05-02 СОЕДИНЕНИЯ И КОМПОЗИЦИИ КАК ИНГИБИТОРЫ КИНАЗЫ с-kit И PDGFR EA019524B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US91605107P 2007-05-04 2007-05-04
PCT/US2008/062568 WO2008137794A1 (en) 2007-05-04 2008-05-02 Compounds and compositions as c-kit and pdgfr kinase inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA200901486A1 EA200901486A1 (ru) 2010-06-30
EA019524B1 true EA019524B1 (ru) 2014-04-30

Family

ID=39595782

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA200901486A EA019524B1 (ru) 2007-05-04 2008-05-02 СОЕДИНЕНИЯ И КОМПОЗИЦИИ КАК ИНГИБИТОРЫ КИНАЗЫ с-kit И PDGFR

Country Status (11)

Country Link
US (1) US8338417B2 (ru)
EP (1) EP2152688A1 (ru)
JP (1) JP5160637B2 (ru)
KR (1) KR101145520B1 (ru)
CN (1) CN101720322A (ru)
AU (1) AU2008247442B2 (ru)
BR (1) BRPI0811516A2 (ru)
CA (1) CA2686382C (ru)
EA (1) EA019524B1 (ru)
MX (1) MX2009011951A (ru)
WO (1) WO2008137794A1 (ru)

Families Citing this family (68)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101687853A (zh) 2007-05-04 2010-03-31 Irm责任有限公司 作为c-kit和pdgfr激酶抑制剂的嘧啶衍生物和组合物
EA017392B1 (ru) 2007-08-22 2012-12-28 Айрм Ллк Производные 2-гетероариламинопиримидина в качестве ингибиторов киназ
RU2455288C2 (ru) 2007-08-22 2012-07-10 Айрм Ллк Соединения и композиции 5-(4-(галогеналкокси)фенил)пиримидин-2-амина в качестве ингибиторов киназ
CL2009000400A1 (es) 2008-02-22 2010-09-10 Irm Llc Compuestos heterociclicos derivados de 3-fenil-1,6- naftiridin-2-ona; moduladores de la actividad cinasa; composicion farmaceutica; y uso en el tratamiento de enfermedades tales como trastornos alergicos, trastornos autoinmunes, neoplasias, rechazo en trasplante de organos, entre otras.
US8450322B2 (en) 2008-09-22 2013-05-28 Array Biopharma Inc. Substituted imidazo[1,2b]pyridazine compounds as Trk kinase inhibitors
AR074052A1 (es) 2008-10-22 2010-12-22 Array Biopharma Inc Compuestos pirazolo{1,5-a}pirimidina sustituida como inhibidores de trk cinasa
JP2012508723A (ja) * 2008-11-14 2012-04-12 バイエル・クロップサイエンス・アーゲー 植物保護剤としての置換（ピリジル）−アジニルアミン誘導体
AR077468A1 (es) 2009-07-09 2011-08-31 Array Biopharma Inc Compuestos de pirazolo (1,5 -a) pirimidina sustituidos como inhibidores de trk- quinasa
CR20170098A (es) 2010-05-20 2017-07-17 Array Biopharma Inc Compuestos macrociclicos como inhibidores de quinasa trk
EA201390717A1 (ru) * 2010-11-17 2013-10-30 Новартис Аг 3-(аминоарил)пиридиновые соединения
CA2840029C (en) 2011-07-27 2021-07-20 Ab Science Oxazole and thiazole derivatives as selective protein kinase inhibitors (c-kit)
KR101699822B1 (ko) * 2011-12-21 2017-01-25 노비라 테라퓨틱스, 인코포레이티드 B형 간염의 항바이러스성 제제
AR092270A1 (es) 2012-08-28 2015-04-08 Janssen R&D Ireland Sulfamoilarilamidas y su uso como medicamentos para el tratamiento de la hepatitis b
JP6409001B2 (ja) * 2012-12-27 2018-10-17 ドレクセル ユニバーシティ Ｈｂｖ感染に対する新規抗ウイルス剤
EP3007689B1 (en) 2013-01-10 2018-03-07 Pulmokine, Inc. Non-selective kinase inhibitors
PT2961732T (pt) 2013-02-28 2017-06-26 Janssen Sciences Ireland Uc Sulfamoil-arilamidas e utilização das mesmas como medicamentos para o tratamento de hepatite b
WO2014165128A2 (en) 2013-03-12 2014-10-09 Novira Therapeutics, Inc. Hepatitis b antiviral agents
EA027068B1 (ru) 2013-04-03 2017-06-30 Янссен Сайенсиз Айрлэнд Юси Производные n-фенилкарбоксамида и их применение в качестве лекарственных препаратов для лечения гепатита b
JO3603B1 (ar) 2013-05-17 2020-07-05 Janssen Sciences Ireland Uc مشتقات سلفامويل بيرولاميد واستخدامها كادوية لمعالجة التهاب الكبد نوع بي
US10450270B2 (en) 2013-07-25 2019-10-22 Janssen Sciences Ireland Uc Glyoxamide substituted pyrrolamide derivatives and the use thereof as medicaments for the treatment of hepatitis B
CN104458674A (zh) * 2013-09-12 2015-03-25 中国药科大学 一种筛选血管内皮生长因子1激酶抑制剂高通量筛选方法
CN104458675A (zh) * 2013-09-12 2015-03-25 中国药科大学 一种筛选干细胞因子受体激酶抑制剂高通量筛选方法
JP6483714B2 (ja) 2013-10-11 2019-03-13 ローレンス エス． ジスマン， 噴霧乾燥製剤
MX368158B (es) 2013-10-23 2019-09-20 Janssen Sciences Ireland Uc Derivados de carboxamida y su uso como medicamentos para el tratamiento de la hepatitis b.
US9181288B2 (en) 2014-01-16 2015-11-10 Novira Therapeutics, Inc. Azepane derivatives and methods of treating hepatitis B infections
US9169212B2 (en) 2014-01-16 2015-10-27 Novira Therapeutics, Inc. Azepane derivatives and methods of treating hepatitis B infections
US10392349B2 (en) 2014-01-16 2019-08-27 Novira Therapeutics, Inc. Azepane derivatives and methods of treating hepatitis B infections
MX2016009449A (es) 2014-02-05 2016-10-13 Novira Therapeutics Inc Terapia de combinacion para el tratamiento de infecciones por virus de la hepatitis b (vhb).
EA035848B1 (ru) 2014-02-06 2020-08-20 Янссен Сайенсиз Айрлэнд Юси Производные сульфамоилпирроламида и их применение в качестве медикаментов для лечения гепатита b
US9400280B2 (en) 2014-03-27 2016-07-26 Novira Therapeutics, Inc. Piperidine derivatives and methods of treating hepatitis B infections
JP6914834B2 (ja) 2014-11-16 2021-08-04 アレイ バイオファーマ インコーポレイテッド （Ｓ）−Ｎ−（５−（（Ｒ）−２−（２，５−ジフルオロフェニル）−ピロリジン−１−イル）−ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）−３−ヒドロキシピロリジン−１−カルボキサミド硫酸水素塩の結晶形
WO2016149581A1 (en) 2015-03-19 2016-09-22 Novira Therapeutics, Inc. Azocane and azonane derivatives and methods of treating hepatitis b infections
EA201792679A1 (ru) 2015-06-01 2018-06-29 Локсо Онколоджи, Инк. Способы диагностики и лечения злокачественной опухоли
US10875876B2 (en) 2015-07-02 2020-12-29 Janssen Sciences Ireland Uc Cyclized sulfamoylarylamide derivatives and the use thereof as medicaments for the treatment of hepatitis B
CA2992586A1 (en) 2015-07-16 2017-01-19 Array Biopharma, Inc. Substituted pyrazolo[1,5-a]pyridine compounds as ret kinase inhibitors
AU2016330964B2 (en) 2015-09-29 2021-04-01 Novira Therapeutics, Inc. Crystalline forms of a hepatitis B antiviral agent
AU2016344058A1 (en) 2015-10-26 2018-05-17 Array Biopharma Inc. Point mutations in Trk inhibitor-resistant cancer and methods relating to the same
ES2938341T3 (es) 2016-03-07 2023-04-10 Enanta Pharm Inc Agentes antivirales contra la hepatitis B
US10045991B2 (en) 2016-04-04 2018-08-14 Loxo Oncology, Inc. Methods of treating pediatric cancers
LT3439663T (lt) 2016-04-04 2024-10-10 Loxo Oncology, Inc. Vaikų vėžio gydymo būdai
RU2751767C2 (ru) 2016-04-04 2021-07-16 Локсо Онколоджи, Инк. Жидкие составы (s)-n-(5-((r)-2-(2,5-дифторфенил)пирролидин-1-ил)пиразоло[1,5-a]пиримидин-3-ил)-3-гидроксипирролидин-1-карбоксамида
SG11201808949SA (en) 2016-04-15 2018-11-29 Novira Therapeutics Inc Combinations and methods comprising a capsid assembly inhibitor
KR102566858B1 (ko) 2016-05-18 2023-08-11 어레이 바이오파마 인크. (s)-n-(5-((r)-2-(2,5-디플루오로페닐)피롤리딘-1-일)-피라졸로[1,5-a]피리미딘-3-일)-3-히드록시피롤리딘-1-카르복사미드의 제조 방법
TWI704148B (zh) 2016-10-10 2020-09-11 美商亞雷生物製藥股份有限公司 作為ｒｅｔ激酶抑制劑之經取代吡唑并[1,5-a]吡啶化合物
JOP20190077A1 (ar) 2016-10-10 2019-04-09 Array Biopharma Inc مركبات بيرازولو [1، 5-a]بيريدين بها استبدال كمثبطات كيناز ret
JOP20190092A1 (ar) 2016-10-26 2019-04-25 Array Biopharma Inc عملية لتحضير مركبات بيرازولو[1، 5-a]بيريميدين وأملاح منها
WO2018081567A1 (en) 2016-10-27 2018-05-03 Pulmokine, Inc. Combination therapy for treating pulmonary hypertension
EP3333162A1 (en) * 2016-12-12 2018-06-13 Silesian Catalysts sp. z o.o. Metod for preparing n-(2-methyl-5-nitrophenyl)-4-(pyridin-3-yl)pyrimidin-2-amine
WO2018136663A1 (en) 2017-01-18 2018-07-26 Array Biopharma, Inc. Ret inhibitors
CA3049136C (en) 2017-01-18 2022-06-14 Array Biopharma Inc. Substituted pyrazolo[1,5-a]pyrazine compounds as ret kinase inhibitors
JOP20190213A1 (ar) 2017-03-16 2019-09-16 Array Biopharma Inc مركبات حلقية ضخمة كمثبطات لكيناز ros1
CA3073986A1 (en) 2017-08-28 2019-03-07 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis b antiviral agents
TWI791053B (zh) 2017-10-10 2023-02-01 美商亞雷生物製藥股份有限公司 6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈之結晶形式及其醫藥組合物
TW202410896A (zh) 2017-10-10 2024-03-16 美商絡速藥業公司 6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈之調配物
EP3700576A1 (en) 2017-10-26 2020-09-02 Array Biopharma Inc. Formulations of a macrocyclic trk kinase inhibitor
CN111971286B (zh) 2018-01-18 2023-04-14 阿雷生物药品公司 作为RET激酶抑制剂的取代的吡咯并[2,3-d]嘧啶化合物
US11472802B2 (en) 2018-01-18 2022-10-18 Array Biopharma Inc. Substituted pyrazolyl[4,3-c]pyridine compounds as RET kinase inhibitors
CN111630054B (zh) 2018-01-18 2023-05-09 奥瑞生物药品公司 作为RET激酶抑制剂的取代的吡唑并[3,4-d]嘧啶化合物
CA3090125A1 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Capsid assembly modulator dosing regimen
MA52218A (fr) 2018-03-29 2021-02-17 Loxo Oncology Inc Traitement de cancers associés à trk
CN113194928A (zh) 2018-07-31 2021-07-30 罗索肿瘤学公司 (s)-5-氨基-3-(4-((5-氟-2-甲氧基苯甲酰胺基)甲基)苯基)-1-(1,1,1-三氟丙-2-基)-1h-吡唑-4-甲酰胺的喷雾干燥的分散体和制剂
JP2022500383A (ja) 2018-09-10 2022-01-04 アレイ バイオファーマ インコーポレイテッド Ｒｅｔキナーゼ阻害剤としての縮合複素環式化合物
UY38483A (es) 2018-11-21 2020-06-30 Enanta Pharm Inc Heterociclos funcionalizados como agentes antivirales
CN113474337A (zh) 2018-12-19 2021-10-01 奥瑞生物药品公司 作为fgfr抑制剂用于治疗癌症的7-((3，5-二甲氧基苯基)氨基)喹喔啉衍生物
JP2022515198A (ja) 2018-12-19 2022-02-17 アレイ バイオファーマ インコーポレイテッド ＦＧＦＲチロシンキナーゼの阻害剤としての置換ピラゾロ［１，５－ａ］ピリジン化合物
US11096931B2 (en) 2019-02-22 2021-08-24 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Amide derivatives useful in the treatment of HBV infection or HBV-induced diseases
EP3966205A1 (en) 2019-05-06 2022-03-16 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Amide derivatives useful in the treatment of hbv infection or hbv-induced diseases
US11802125B2 (en) 2020-03-16 2023-10-31 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Functionalized heterocyclic compounds as antiviral agents

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006027795A1 (en) * 2004-09-09 2006-03-16 Natco Pharma Limited Novel phenylaminopyrimidine derivatives as inhibitors of bcr-abl kinase

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5516775A (en) * 1992-08-31 1996-05-14 Ciba-Geigy Corporation Further use of pyrimidine derivatives
ATE331519T1 (de) 2001-05-16 2006-07-15 Gpc Biotech Ag Pyridylpyrimidin-derivate als wirksame verbindungen gegen prionen-krankheiten
ATE339418T1 (de) * 2001-06-01 2006-10-15 Vertex Pharma Thiazolverbindungen, die sich als inhibitoren von proteinkinasen eignen
GB0215676D0 (en) 2002-07-05 2002-08-14 Novartis Ag Organic compounds
GB0222514D0 (en) 2002-09-27 2002-11-06 Novartis Ag Organic compounds
JP2006527230A (ja) * 2003-06-13 2006-11-30 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト Ｒａｆキナーゼ阻害剤としての２−アミノピリミジン誘導体
JP2008525502A (ja) 2004-12-23 2008-07-17 デシファラ ファーマスーティカルズ， エルエルシー 抗炎症薬
KR100674813B1 (ko) 2005-08-05 2007-01-29 일양약품주식회사 Ｎ-페닐-2-피리미딘-아민 유도체 및 그의 제조방법
KR20120049397A (ko) 2006-11-03 2012-05-16 노파르티스 아게 단백질 키나제 억제제로서의 화합물 및 조성물
US20100048597A1 (en) * 2006-12-22 2010-02-25 Novartis Ag Organic Compounds and Their Uses

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006027795A1 (en) * 2004-09-09 2006-03-16 Natco Pharma Limited Novel phenylaminopyrimidine derivatives as inhibitors of bcr-abl kinase

Also Published As

Publication number Publication date
CA2686382A1 (en) 2008-11-13
KR20090130427A (ko) 2009-12-23
JP5160637B2 (ja) 2013-03-13
BRPI0811516A2 (pt) 2014-11-18
EA200901486A1 (ru) 2010-06-30
US8338417B2 (en) 2012-12-25
KR101145520B1 (ko) 2012-05-16
AU2008247442A1 (en) 2008-11-13
MX2009011951A (es) 2009-12-11
CA2686382C (en) 2013-09-17
WO2008137794A1 (en) 2008-11-13
US20100234406A1 (en) 2010-09-16
CN101720322A (zh) 2010-06-02
AU2008247442B2 (en) 2013-01-10
JP2010526151A (ja) 2010-07-29
EP2152688A1 (en) 2010-02-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA019524B1 (ru) СОЕДИНЕНИЯ И КОМПОЗИЦИИ КАК ИНГИБИТОРЫ КИНАЗЫ с-kit И PDGFR
EA017269B1 (ru) ПРОИЗВОДНЫЕ ПИРИМИДИНА И СОДЕРЖАЩИЕ ИХ КОМПОЗИЦИИ КАК ИНГИБИТОРЫ КИНАЗЫ c-kit И PDGFR
ES2424642T3 (es) Compuestos y composiciones como inhibidores de la proteína quinasa
ES2351939T3 (es) Compuestos y composiciones como inhibidores de proteínas cinasas.
RU2383545C2 (ru) Соединения и композиции в качестве ингибиторов протеинкиназы
ES2368876T3 (es) Derivados de 2-heteroarilaminopirimidina como inhibidores de cinasa.
EP2498607B1 (en) Kinase inhibitors
RU2411242C2 (ru) Соединения и композиции в качестве ингибиторов протеинкиназ
AU2013366513B2 (en) Novel benzimidazole derivatives as kinase inhibitors
ES2375151T3 (es) Derivados de bencimidazol sustituidos con pirimidina como inhibidores de prote�?na cinasa.
EA016329B1 (ru) СОЕДИНЕНИЯ И КОМПОЗИЦИИ, КАК ИНГИБИТОРЫ КИНАЗЫ c-KIT И PDGFR
ES2477878T3 (es) Compuestos y composiciones de 5-(4-(aloalcoxi)fenil)pirimidin-2-amina como inhibidores de quinasas
JP6496301B2 (ja) Ｒａｓ／ｒａｆ／ｍｅｋ／ｅｒｋ経路およびｐｉ３ｋ／ａｋｔ／ｐｔｅｎ／ｍｔｏｒ経路の二重阻害剤としてのキナゾリンおよびアザキナゾリン
BRPI0617863A2 (pt) compostos e composições como inibidores da proteìna quinase
KR20230004612A (ko) 염증성 질병의 치료를 위한 치환된 피리딘
BR112019015278A2 (pt) compostos
WO2005039486A2 (en) Compounds and compositions as protein kinase inhibitors
JP2020505397A (ja) Ｌｒｒｋ２キナーゼ活性を阻害するための化合物
JP2018058863A (ja) キナーゼ阻害活性を有するトリプトリン誘導体及びその使用
JP2020505459A (ja) 化合物
KR102352637B1 (ko) 피리도[3,4-d]피리미딘 유도체 또는 그 용매화물의 결정

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU