EA016302B1

EA016302B1 - Способы снятия боли с использованием бензоконденсированных гетероциклических сульфамидных производных (варианты)

Info

Publication number: EA016302B1
Application number: EA200870091A
Authority: EA
Inventors: Вирджиния Л. Смит-Свинтоски; Аллен Б. Рейтц
Original assignee: Янссен Фармацевтика Н.В.
Priority date: 2005-12-19
Filing date: 2006-12-19
Publication date: 2012-04-30
Also published as: AU2006331734B2; EP1973540B1; HK1125039A1; CA2634115A1; US8716231B2; US20070155822A1; BRPI0620018A2; EA200870091A1; ATE447948T1; AU2006331734A1; PL1973540T3; KR20080077025A; RS51249B; DK1973540T3; DE602006010442D1; NI200800169A; CA2634115C; MY150903A; CN101378746B; WO2007075752A1

Abstract

Настоящее изобретение относится к способам снятия боли, включающим введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества одного или более новых бензоконденсированных гетероциклических сульфамидных производных формул (I) и (II), описанных в данном изобретении. Настоящее изобретение также относится к способу снятия боли, включающему совместную терапию обезболивающим средством и соединением формул (I) или (II), описанными в данном изобретении.

Description

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение направлено на применение бензоконденсированных гетероциклических сульфамидных производных для снятия острых, хронических, воспалительных и/или невропатических болей.

Уровень техники

Боль обычно определяется как неприятный сенсорный и эмоциональный опыт, связанный с фактическим или потенциальным повреждением ткани (АУйетап Б., Аскапсез ίη раш тападетепр 8спр Керог!, 2000).

Острая боль представляет собой физиологический ответ на неблагоприятный химический, тепловой или механический стимул, который может быть связан с хирургией, травмой или острой болезнью. Указанные состояния включают, без ограничения, постоперативную боль, спортивные травмы, синдром запястного канала, ожоги, скелетно-мышечные растяжения и напряжения, мышечно-сухожильное напряжение, шейно-плечевые болевые синдромы, диспепсию, язву желудка, язву двенадцатиперстной кишки, почечнокаменную колику, боль в желчном пузыре, желчекаменную колику, дисменорею, эндометриоз, родовую боль, ревматологическую боль, головную боль или зубную боль.

Хроническая боль представляет собой болезненное состояние за пределами обычной травмы или обычной причины заболевания и может являться последствием воспаления или тяжелых, прогрессирующих, болезненных стадий заболевания. Различные типы хронической боли включают, помимо прочих, головную боль, мигрень, невралгию тройничного нерва, синдром височно-нижнечелюстного сустава, фибромиалгический синдром, остеоартрит, ревматоидный артрит, боль в костях при остеоартрите, остеопорозе, метастазах в кости или боль неизвестного происхождения, подагру, фиброзит, миофасциальную боль, компрессионные синдромы верхней апертуры грудной клетки, боль в верхнем отделе позвоночника или боль в нижнем отделе позвоночника (где боли в позвоночнике возникают в результате системного, регионарного или первичного заболевания позвоночника (радикулопатии)), тазовую боль, сердечную грудную боль, несердечную грудную боль, боль, связанную с повреждением спинного мозга, центральную постинсультную боль, боль при раке, боль при СПИДе, боль при серповидноклеточной анемии или гериатрическую боль.

Невропатическая боль определяется как боль, вызванная оберрантным соматосенсорным процессингом в периферической или центральной нервной системе, и включает болезненную диабетическую периферическую невропатию, постгерпетическую невралгию, невралгию тройничного нерва, постинсультную боль, боль, связанную с рассеянным склерозом, боль, связанную с невропатиями, например при идиопатической или посттравматической невропатии и мононеврите, ВИЧ-ассоциированную невропатическую боль, невропатическую боль, связанную с раком, невропатическую боль, связанную с запястным каналом, боль, связанную с повреждением спинного мозга, комплексный регионарный болевой синдром, невропатическую боль, связанную с фибромиалгией, поясничную и шейную боль, рефлекторную симпатическую дистрофию, фантомный болевой синдром и другие болевые синдромы, связанные с хроническими и ослабленными состояниями.

В данной области техники сохраняется потребность в обеспечении эффективного лечения боли.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение относится к способу снятия боли, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) * ⁰ р¹

Л' Λ ι и Л

V К ;Мсн₂)_а-М-8-\ / II р²

О ^Р (!) где каждый В¹ и В² независимо выбран из группы, состоящей из водорода и низшего алкила; В⁴ выбран из группы, состоящей из водорода и низшего алкила;

а является целым числом от 1 до 2;

представляет собой

Ь является целым числом от 0 до 4;

с является целым числом от 0 до 2;

каждый В⁵ независимо выбран из группы, состоящей из галогена и С1_₄алкила; или его фармацевтически приемлемой соли.

Примером изобретения является способ снятия боли, где боль выбрана из группы, состоящей из острой боли или хронической боли, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества любого из соединений или фармацевтических композиций, описанных выше.

Также примером изобретения является способ снятия боли, где боль представляет собой воспалительную боль, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества любого из соединений или фармацевтических композиций, описанных выше.

- 1 016302

Также примером изобретения является способ снятия боли, где боль представляет собой невропатическую боль, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества любого из соединений или фармацевтических композиций, описанных выше.

Настоящее изобретение также относится к способам снятия боли, включающим одновременное введение нуждающемуся в этом субъекту по меньшей мере одного обезболивающего агента и соединения формулы (I), как описано в данном изобретении.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение относится к способу снятия боли, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) /<^\ к⁴ О _О1

Л 'Л ^{1 11} (а к У—(сн₂)_а-м-8-\ ₂ о ^к ₍₁₎ или его фармацевтически приемлемой соли, где а, К¹, К² и К⁴ определены выше.

Настоящее изобретение также относится к способам снятия боли, включающим совместную терапию по меньшей мере с одним обезболивающим агентом и соединением формулы (I) или (II), как описано в данном изобретении.

Используемый в данном описании термин боль должен включать острую, хроническую, воспалительную и невропатическую боль (предпочтительно диабетическую невропатию). Кроме того, боль может быть центрально-опосредованной, периферически-опосредованной, вызванной повреждением структурной ткани, вызванной повреждением мягкой ткани или вызванной прогрессирующей болезнью. Любая центрально-опосредованная, периферически-опосредованная, вызванная повреждением структурной ткани, вызванная повреждением мягкой ткани или вызванная прогрессирующей болезнью боль может быть острой или хронической.

Если не указано иное, используемая в данном описании боль должна включать воспалительную боль, центрально-опосредованную боль, периферически-опосредованную боль, висцеральную боль, структурную боль, боль при раке, боль, связанную с повреждением мягкой ткани, боль, связанную с прогрессирующей болезнью, невропатическую боль, острую боль при тяжелом ранении, острую боль при травме, острую боль при хирургической операции, головную боль, зубную боль, боль в спине (предпочтительно в нижних отделах позвоночника), хроническую боль при невропатических состояниях и хроническую боль при постинсультных СОСТОЯНИЯХ.

В варианте осуществления настоящего изобретения предлагается способ снятия боли, где боль является острой болью. В другом варианте осуществления настоящего изобретения предлагается способ снятия боли, где боль является хронической болью. В другом варианте осуществления настоящего изобретения предлагается способ снятия боли, где боль является невропатической болью, более предпочтительно диабетической невропатией. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения предлагается способ снятия боли, где боль является воспалительной болью,

В одном из вариантов осуществления боль выбрана из группы, состоящей из остеоартрита, ревматоидного артрита, фибромиалгии, головной боли, зубной боли, ожога, солнечного ожога, укуса животных (такого как укус собаки, укус кошки, укус змеи, укус паука, укус насекомого и т.п.), неврогенного мочевого пузыря, доброкачественной гиперплазии предстательной железы, интерстициального цистита, ринита, контактного дерматита/гиперчувствительности, зуда, экземы, фарингита, мукозита, энтерита, целлюлита, каузалгии, неврита седалищного нерва, невралгии нижнечелюстного сустава, периферического неврита, полиневрита, фантомной боли, фантомной боли в ампутированных конечностях, постоперационной непроходимости кишечника, холецистита, болевого синдрома после маммэктомии, невропатической боли ротовой полости, боли Шарко, симпатической рефлекторной дистрофии, синдрома Гийена-Барре, невралгии латерального кожного нерва бедра, синдрома жжения полости рта, постгерпетической невралгии, невралгии тройничного нерва, периферической невропатии, двусторонней периферической невропатии, диабетической невропатии, постгерпетической невралгии, невралгии тройничного нерва, оптических невритов, постлихорадочного неврита, мигрирующего неврита, сегментарного неврита, неврита Гомбо, нейронита, шейно-плечевой невралгии, черепной невралгии, коленной невралгии, невралгии языкоглоточного нерва, мигренозной невралгии, идиопатической невралгии, межреберной невралгии, грудной невралгии, Мортоновской метатарзальной невралгии, носоресничной невралгии, затылочной невралгии, ограниченного болезненного отека кожи, невралгии Сладера, невралгии крылонебного узла, надглазничной невралгии, невралгии видиана, воспалительной болезни кишечника, синдрома раздраженного кишечника, родового акта, родов, менструальных болей, рака, боли в спине, боли в нижних отделах позвоночника и боли при синдроме запястного канала.

-2016302

Острая боль включает боль, вызванную тяжелым ранением, травмой, болезнью или хирургической операцией (например, операцией со вскрытием грудной клетки (включая операцию на открытом сердце или шунтирование)). Острая боль также включает, без ограничения, головную боль, постоперационную боль, почечнокаменную колику, боль в желчном пузыре, желчекаменную колику, родовую боль, ревматологическую боль, зубную боль или боль, вызванную спортивно-медицинскими травмами, синдромом запястного канала, ожогами, скелетно-мышечными растяжениями и напряжениями, мышечносухожильным напряжением, боль при шейно-плечевых синдромах, диспепсию, язву желудка, язву двенадцатиперстной кишки, дисменорею или эндометриоз.

Хроническая боль включает боль, вызванную воспалительным заболеванием, остеоартритом, ревматоидным артритом или являющуюся последствием заболевания, тяжелого ранения или травмы. Хроническая боль также включает, без ограничения, головную боль, боль в верхних отделах позвоночника или боль в нижних отделах позвоночника (выбранные из боли в спине, которая является следствием системного, регионарного или первичного заболевания позвоночника (выбранного из радикулопатии)), боль в костях (выбранную из боли в костях, обусловленной остеоартритом, остеопорозом, метастазами в костной ткани или неизвестного происхождения), тазовую боль, боль, связанную с повреждением спинного мозга, сердечную грудную боль, несердечную грудную боль, центральную постинсультную боль, миофасциальную боль, боль при раке, боль при СПИДе, боль при серповидноклеточной анемии, гериатрическую боль или боль, вызванную головной болью, мигренью, невралгией тройничного нерва, синдром височно-нижнечелюстного сустава, фибромиалгический синдром, остеоартрит, ревматоидный артрит, подагру, фиброзит или компрессионные синдромы верхней апертуры грудной клетки.

Невропатическая боль включает боль, являющуюся следствием хронических или ослабленных состояний или нарушений. Хронические или ослабленные состояния или нарушения, которые могут привести к невропатической боли, включают, помимо прочих, болезненную диабетическую периферическую невропатию, постгерпетическую невралгию, невралгию тройничного нерва, постинсультную боль, боль, связанную с рассеянным склерозом, боль, связанную с невропатиями, например при идиопатической или посттравматической невропатии и мононеврите, ВИЧ-ассоциированную невропатическую боль, невропатическую боль, связанную с раком, невропатическую боль, связанную с запястным каналом, боль, связанную с повреждением спинного мозга, комплексный регионарный болевой синдром, невропатическую боль, связанную с фибромиалгией, поясничную и шейную боль, рефлекторную симпатическую дистрофию, фантомный болевой синдром и другие болевые синдромы, связанные с хроническими и ослабленными состояниями.

Используемый в данном описании термин обезболивающий агент должен означать любой фармацевтический агент, который обеспечивает облегчение боли и включает, без ограничения, опиоиды и их производные, нестероидные противоспалительные агенты, Тайленол-подобные соединения, соединениядоноры N0, трамадол и трамадол-подобные соединения, а также антидепрессанты, такие как амитриптилин. Предпочтительно обезболивающий агент является трамадолом или тайленолом.

Подходящие примеры включают, без ограничения, ацетаминофен; альфентанила гидрохлорид; аминобензоат калия; аминобензоат натрия; анидоксим; анилеридин; анилеридина гидрохлорид; анилопама гидрохлорид; аниролак; антипирин; аспирин; беноксапрофен; бензидамина гидрохлорид; бицифадина гидрохлорид; брифентанила гидрохлорид; бромадолина малеат; бромфенак натрия; бупренорфина гидрохлорид; бутацетин; бутиксират; буторфанол; буторфанола тартрат; карбамазепин; карбаспирин кальция; карбифена гидрохлорид; карфентанила цитрат; ципрефадола сукцинат; цирамадол; цирамадола гидрохлорид; клониксерил; клониксин; кодеин; кодеина фосфат; кодеина сульфат; конорфона гидрохлорид; циклазоцин; дексоксадрола гидрохлорид; декспемедолак; дезоцин; дифлюнизал; дигидрокодеина битартрат; димефадан; дипирон; докспикомина гидрохлорид; дриниден; энадолина гидрохлорид; эпиризол; эрготамина тартрат; этоксазена гидрохлорид; этофенамат; эвгенол; фенопрофен; фенопрофен кальция; фентанила цитрат; флоктафенин; флуфенизал; флюниксин; флюниксин меглюмин; флупиртина малеат; флупроквазон; флурадолина гидрохлорид; флурбипрофен; гидроморфона гидрохлорид; ибуфенак; индопрофен; кетазоцин; кеторфанол; кеторолака трометамин; летимида гидрохлорид; левометадила ацетат; левометадила ацетат гидрохлорид; левонантрадола гидрохлорид; леворфанола тартрат; лофемизола гидрохлорид; лофентанила оксалат; лорцинадол; ломоксикам; салицилат магния; мефенаминовая кислота; менабитана гидрохлорид; меперидина гидрохлорид; мептазинола гидрохлорид; метадона гидрохлорид; метадил ацетат; метофолин; метотримепразин; меткефамида ацетат; мимбана гидрохлорид; мирфентанила гидрохлорид; молиназон; морфина сульфат; моксазоцин; набитана гидрохлорид; налбуфина гидрохлорид; налмексона гидрохлорид; намоксират; нантрадола гидрохлорид; напроксен; напроксен натрия; напроксол; нефопама гидрохлорид; нексеридина гидрохлорид; норациметадола гидрохлорид; окфентанила гидрохлорид; октазамид; олванил; оксеторона фумарат; оксикодон; оксикодона гидрохлорид; оксикодона терефталат; оксиморфона гидрохлорид; пемедолак; пентаморфон; пентазоцин; пентазоцина гидрохлорид; пентазоцина лактат; феназопиридина гидрохлорид; фенирамидола гидрохлорид; пиценадола гидрохлорид; пинадолин; пирфенидон; пироксикам оламин; правадолина малеат; продилидина гидрохлорид; профадола гидрохлорид; пропирама фумарат; пропоксифена гидрохлорид; пропоксифена напсилат; проксазол; проксазола цитрат; проксорфана тартрат; пирролифена гидрохлорид; ремифентанила

- 3 016302 гидрохлорид; салколекс; салетамида малеат; салициламид; салицилат меглюмин; салсалат; салицилат натрия; спирадолина мезилат; суфентанил; суфентанила цитрат; талметацин; талнифлумат; талозалат; тазадолена сукцинат; тебуфелон; тетридамин; тифурак натрия; тилидин гидрохлорид; тиопинак; тоназоцина мезилат; трамадола гидрохлорид; трефентанила гидрохлорид; троламин; верадолина гидрохлорид; верилопама гидрохлорид; волазоцин; ксорфанола мезилат; ксилазина гидрохлорид; зеназоцина мезилат; зомепирак натрия и зукапсаицин.

Дополнительно анальгетик может являться комбинированным продуктом, включая, без ограничения, фиорицет (ΝοναΠίδ) или эсгик (Еогейк) или их дженерики (комбинацию ацетаминофена, буталбитала и кофеина), фиоринал или его дженерики (комбинацию аспирина, буталбитала и кофеина, ΝοναΠίδ). мигприв или его дженерики (комбинацию аспирина и метоклопрамида; 8апой-8уп1йе1аЬо), мидрин/мидрид или его дженерики (комбинацию ацетаминофена и дихлоралфеназона; Сагшек), парамакс (8апоП-8уп111е1аЬо) или мигренертон (Эо1огд1е1) или их дженерики (комбинацию парацетамол и метоклопрамида), викодин (АЬЬой) или его дженерики (комбинацию ацетаминофена и гидрокодона), стадол НС (буторфанол в форме назального спрея; Вп81о1-Муег8 8дшЬЬ), лонарид (Воейгшдег 1пде1йе1ш) или мигралив (ΡΓί/ег) или их дженерики (комбинацию парацетамола и кодеина) и т.п.

Используемый в данном описании термин субъект относится к животному, предпочтительно млекопитающему, наиболее предпочтительно человеку, который был объектом терапии, наблюдения или эксперимента.

Используемый в данном описании термин терапевтически эффективное количество обозначает то количество активного вещества или фармацевтического агента, которое проявляет биологический или лечебный ответ в системе тканей, животном или человеке, которое определяется исследователем, ветеринаром, врачом или другим клиницистом и включает облегчение симптомов заболевания или нарушения, подвергнутых терапии.

В случаях, когда настоящее изобретение направлено на совместную терапию или комбинированную терапию, включая введение одного или более соединений формулы (I) или формулы (II), а также одного или более обезболивающих агентов, терапевтически эффективное количество должно означать такую дозу комбинации агентов, взятых вместе, при которой общее воздействие обеспечивает желаемый биологический или лечебный эффект. Например, терапевтически эффективное количество при совместной терапии, включающее введение соединения формулы (I) или формулы (II) и по меньшей мере одного обезболивающего агента, является количеством соединения формулы (I) или формулы (II) и количеством обезболивающего агента, которые при одновременном или последовательном введении оказывают комбинированное действие, которое является терапевтически эффективным. Кроме того, специалист, квалифицированный в данной области техники, оценит, что в случае совместной терапии с терапевтически эффективным количеством, как в примере выше, количество соединения формулы (I) или формулы (II) и/или количество обезболивающего агента, введенные по отдельности, могут быть или могут не быть терапевтически эффективными.

Используемые в данном описании термины совместная терапия и комбинированная терапия должны означать лечение субъекта, нуждающегося в этом, осуществляемое посредством введения одного или более соединений формулы (I) или формулы (II) в комбинации с одним или более обезболивающими агентами, где соединение (соединения) формулы (I) или формулы (II) и обезболивающий агент (агенты) вводят любыми подходящими способами, одновременно, последовательно, раздельно или в одной фармацевтической композиции. Когда соединение (соединения) формулы (I) или формулы (II) и обезболивающий агент (агенты) вводят в раздельных лекарственных формах, число дозировок, которое вводят за день для каждого соединения, может быть одинаковым или различным. Соединение (соединения) формулы (I) или формулы (II) и обезболивающий агент (агенты) можно вводить одинаковыми или различными путями введения. Примеры подходящих способов введения включают, без ограничения, пероральный, внутривенный (в/в), внутримышечный (в/м), подкожный (п/к), трансдермальный и ректальный. Соединения можно также вводить непосредственно в нервную систему, включая, помимо прочих, интрацеребральный, интравентрикулярный, интрацеребровентрикулярный, интратекальный, интрацистернальный, интраспинальный и/или периспинальный пути введения при доставке с помощью интракраниальных или интравертебральных игл и/или катетеров с или без насосных устройств. Соединение (соединения) формулы (I) или формулы (II) и обезболивающий агент (агенты) можно вводить в одновременном или переменном режиме, в одно и тоже или разное время в течение курса терапии, одновременно в раздельных или единых формах.

В варианте осуществления настоящего изобретения В¹ выбран из группы, состоящей из водорода и метила. В другом варианте осуществления настоящего изобретения В² выбран из группы, состоящей из водорода и метила. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения каждый В¹ и В² представляет собой водород или каждый В¹ и В² представляет собой метил.

В варианте осуществления настоящего изобретения -(СН₂)_а выбран из группы, состоящей из -СН₂- и -СН₂-СН₂-. В другом варианте осуществления настоящего изобретения -(СН₂)_а представляет собой -СН₂-.

В варианте осуществления настоящего изобретения В⁴ выбран из группы, состоящей из водорода и метила, предпочтительно В⁴ представляет собой водород.

- 4 016302

В варианте осуществления настоящего изобретения а равно 1.

В варианте осуществления настоящего изобретения Ь является целым числом от 0 до 2. В другом варианте осуществления настоящего изобретения с является целым числом от 0 до 2. В другом варианте осуществления настоящего изобретения Ь является целым числом от 0 до 1. В другом варианте осуществления настоящего изобретения с является целым числом от 0 до 1. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения сумма Ь и с равна целому числу от 0 до 2, предпочтительно целому числу от 0 до 1. В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения Ь является целым числом от 0 до 2, а с равно 0.

В варианте осуществления настоящего изобретения χϋχ представляет собой

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения ЧгУ выбран из группы, состоящей из

2- (2,3 -дигидробензо [1,4]диоксинила), 2-(бензо [ 1,3] диоксо лила),

3- (3,4-дигидробензо[1,4]диоксепинила), 2-(6-хлоро-2,3-дигидробензо[1,4]-диоксинила), 2-(6-фторо-2,3-дигидробензо [1,4]диоксинила), 2-(хроманила),

2-(5-фторо-2,3-дигидробензо [1,4] диоксинила), 2-(7-хлоро-2,3-дигидробензо [1,4]диоксинила), 2-(6-хлоробензо[1,3]диоксолила), 2-(7-нитро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила), 2-(7-метил-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила), 2-(5-хлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила), 2-(6-бромо-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила), 2-(6,7-дихлор-2,3-дигидробензо[ 1,4]диоксинила), 2-(8-хлоро-2,3-дигидробензо [ 1,4] -диоксинила), 2-(2,3-дигидронафто [2,3 -Ь] [ 1,4]диоксинила) и 2-(4-метилбензо [ 1,3] диоксолила).

В другом варианте осуществления настоящего изобретения νίΑ выбран из группы, состоящей из 2-(бензо[1,3]диоксолила), 2-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила),

2-(6-хлоро-2,3-дигидробензо [ 1,4]диоксинила), 2-(7-хлоро-2,3 -дигидробензо [ 1,4]диоксинила), 2-(7-метил-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила), 2-(6-бромо-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила) и 2-(6,7-дихлоро-2,3 -дигидробензо [ 1,4] диоксинила).

В другом варианте осуществления настоящего изобретенияЧгУ выбран из группы, состоящей из 2-(2,3 -дигидробензо [1,4]диоксинила), 2-(7-метил-2,3 -дигидробензо [ 1,4]диоксинила) и 2-(6-бромо-2,3 -дигидробензо [ 1,4] диоксинила).

В варианте осуществления настоящего изобретения В⁵ выбран из группы, состоящей из галогена и низшего алкила. В другом варианте осуществления настоящего изобретения В⁵ выбран из хлора, фтора, брома и метила.

Дополнительные варианты осуществления настоящего изобретения включают варианты осуществления, в которых заместители, выбранные для одной или более переменных, определенных в данном описании (т.е. В¹, В², В³, В⁴, Х-Υ и А) независимо выбраны, чтобы быть любым индивидуальным заместителем или любой подгруппой заместителей, выбранных из полного списка, как определено в данном описании.

Типовые соединения по настоящему изобретению приведены в табл. 1. Дополнительные соединения по настоящему изобретению приведены в табл. 3. В табл. 1 и 2 колонка, озаглавленная стерео, определяет стереоконфигурацию атома углерода в гетероцикле, присоединенного к связи, помеченной звездочкой. Когда какое-либо обозначение не приведено, соединение было получено в виде смеси стереоконфигураций. Когда приведено обозначение В или 8, стереоконфигурация была основана на энантиомерно обогащенном стартовом материале.

-5016302

Типовые соединения формулы (I)

Таблица 1

№	О	стерео	(СН₂)_а	ΝΚ⁴	К¹	к²
1	2- (2,3-дигидробензо[1,4]- диоксинил)		СН₂	ΝΗ	Н	н
2	2-(бензо[1,3]-диоксолил)		сн₂	ΝΗ	н	н
3	3- (3,4-дигидро-2Нбензо[1,4]-диоксепинил)		сн₂	ΝΗ	н	н
4	2-(2,3-дигидробензо[1,4]- диоксинил)	3	сн₂	ΝΗ	н	н
5	2-(2,3-дигидробензо[1,4]- диоксинил)	К	сн₂	ΝΗ	н	н
6	2-(2,3-дигидробензо[1,4]- диоксинил)		сн₂	ΝΗ	метил	метил
7	2 - (2,3-дигидробензо[1,4]- диоксинил)		сн₂	М(СН₃)	Н	н
8	2-(6-хлоро-2,3дигидробензо[1,4]диоксинил)	3	сн₂	ΝΗ	Н	н
9	2- (6-фторо-2,3дигидробензо[1,4]диоксинил)	3	СИ,	ΝΗ	н	н
10	2-(хроманил)		сн₂	ΝΗ	н	н
13	2- (5-фторо-2,3дигидробензо[1,4]диоксинил)	3	сн₂	ΝΗ	н	н
14	2-(7-хлоро-2,3дигидробензо[1,4]диоксинил)	5	сн₂	ΝΗ	н	н
15	2-(6-хлоробензо[1,3]- диоксолил)		сн₂	ΝΗ	н	н
16	2-(2,3-дигидробензо[1,4] — диоксинил)		СН₂СН₂	ΝΗ	н	н
18	2-(7-нитро-2,3дигидробензо[1,4]диоксинил)	3	сн₂	ΝΗ	н	н
19	2-(7-метил-2,3дигидробензо[1,4] — диоксинил)	3	сн₂	ΝΗ	н	н

- 6 016302

20	2- (5-хлоро-2,3дигидробензо[1,4]диоксинил)..	3	СН₂	ΝΗ	Н	Н
22	2- (8-метокси-;² > 3дигидробензо[1,4]диоксинил)	3	СН,	ΝΗ	Н	Н
24	2- (6-бромо-2,3дигидробензо[1,4]диоксинил)	3	СН₂	ΝΗ	Н	Н
29	2-(6,7-дихлоро-2,3дигидробензо[1,4]диоксинил)	3	СН₂	ΝΗ	Н	Н
30	2- (8-хлоро-2,3дигидробензо[1,4]диоксинил)	3	СН,	ΝΗ	Н	Н
33	2 - (2,3-дигидронафто[2,3- Ь ] [1,4]-диоксинил)	3	сн.	ΝΗ	Н	Н
35	2-(4-метилбензо[1,3]— диоксолил)		сн₂	ΝΗ	Н	Н

Таблица 2

Дополнительные соединения по настоящему изобретению

в о р¹¹ I II / (' ^γ /'Н-Х—N—5—N И ©г < θ р12
№	©	стерео	X	ΝΒ.⁴	В¹	в.²
23	2-(5-метокси-2,3- дигидробензо[1,4]-диоксинил)	5	СН,	ΝΗ	н	н
26	2-(б-метилкарбонил-2,3дигидробензо[1,4]-диоксинил)	3	сн₂	ΝΗ	н	н
32	2-(б-метоксикарбонил-2,3дигидробензо[1,4]-диоксинил)	5	сн₂	ΝΗ	н	н
34	2-(6-гидроксиметил-2,3дигидробензо[1,4]-диоксинил)	3	сн.	ΝΗ	н	н
36	2-(7-амино-2,3дигидробензо[1,4]-диоксинил)	3	сн.	ΝΗ	н	н

Используемый в данном описании термин галоген, если не указано иное, означает хлор, бром, фтор и йод.

Используемый в данном описании термин алкил, если не указано иное, используемый либо отдельно, либо как часть замещающей группы, включает линейные и разветвленные цепи. Например, алкильные радикалы включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил и т.п. Если не указано иное, обозначение низший при использовании с алкилом означает углеродную цепь с 1-4 атомами углерода.

Используемый в данном описании алкокси, если не указано иное, должен обозначать кислородсодержащий эфирный радикал из вышеописанных алкильных групп с линейными или разветвленными цепями. Например, метокси, этокси, н-пропокси, втор-бутокси, трет-бутокси, н-гексилокси и т.п.

Используемый в данном описании символ * должен обозначать присутствие стереогенного центра.

Когда конкретная группа является замещенной (например, алкилом, арилом и т.д.), то данная группа может иметь один или несколько заместителей, предпочтительно от одного до пяти заместителей, более предпочтительно от одного до трех заместителей, наиболее предпочтительно от одного до двух заместителей, независимо выбранных из списка заместителей.

В отношении заместителей термин независимо означает, что, когда может присутствовать больше одного из указанных заместителей, такие заместители могут быть одинаковыми или различными.

- 7 016302

Согласно стандартной номенклатуре, используемой по всему описанию настоящего изобретения, вначале описывается терминальная часть определяемой цепи, а затем смежные функциональные группы по направлению к точке присоединения. Таким образом, например, фенил-алкил-амино-карбонилалкильный заместитель соответствует группе формулы

Сокращения, используемые в описании, в особенности в схемах и примерах, следующие: дцк

Дициклогексилкарбодиимид

ДХЭ

Дихлорэтан

ДХМ

Дихлорметан

ДИПЭА или ДИЭА

Диизопропилэтиламин

ДМФА

Ν,Ν-Диметилформамид

ДМСО

Диметилсульфоксид

ЭДК

Этилкарбодиимид

Ε63Ν или ТЭА = Триэтиламин

Диэтиловый эфир

ЕЪО

ЭА или ЕГОАс этилацетат

ЕТОН	= Этанол
ИПС	= 2-пропанол
Гепт	= Гептан
ГБТ	= 1-Гидроксибензотриазол
ВЭЖХ	— Высокоэффективная жидкостная хроматография
ЛАГ	= Алюмогидрид лития
М или МеОН	= Метанол
ЯМР	= Ядерный Магнитный Резонанс
Ρά-С	= палладиевый катализатор на угле Обращено-фазная высокоэффективная
ОФ ВЭЖХ	жидкостная хроматография
КТ или кт	= комнатная температура
ТЭА	= Триэтиламин
ТФУ	= Трифторуксусная кислота
ТГФ	= Тетрагидрофуран
тех	= Тонкслойная хроматография

Когда соединения согласно настоящему изобретению имеют по меньшей мере один хиральный центр, они соответственно могут существовать в виде энантиомеров. Когда соединения обладают двумя или более хиральными центрами, они дополнительно могут существовать в виде диастереомеров. Следует понимать, что все указанные изомеры и их смеси включены в объем настоящего изобретения. Кроме того, некоторые из кристаллических форм соединений могут существовать в виде полиморфных модификаций и, как предполагается, должны быть включены в настоящее изобретение. Кроме того, некоторые из соединений могут образовывать сольваты с водой (т.е. гидраты) или с обычными органическими растворителями, при этом указанные сольваты, как предполагается, также должны быть включены в объем настоящего изобретения.

В целях применения в медицине соли соединений настоящего изобретения относятся к нетоксичным фармацевтически приемлемым солям. Однако другие соли могут использоваться при получении соединений согласно настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемых солей. Подходящие фармацевтически приемлемые соли соединений включают соли присоединения кислот, которые могут быть получены, например, при смешивании раствора соединения с раствором фармацевтически приемлемой кислоты, такой как соляная кислота, серная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, уксусная кислота, бензойная кислота, лимонная кислота, винная кислота, угольная кислота или фосфорная кислота. Кроме того, когда соединения по настоящему изобретению несут кислотную группу, их подходящие фармацевтически приемлемые соли могут включать соли щелочных металлов, например соли натрия или калия; соли щелочно-земельных металлов, например соли кальция или магния; а также соли, образованные с подходящими органическими лигандами, например соли четвертичного аммония. Таким образом, примеры фармацевтически приемлемых солей включают ацетат, бензолсульфонат, бензоат, бикарбонат, бисульфат, битартрат, борат, бромид, эдетат кальция, камсилат, карбонат, хлорид, клавуланат, цитрат, дигидрохлорид, эдетат, эдисилат, эстолат, эзилат, фумарат,

- 8 016302 глюцептат, глюконат, глутамат, гликолиларсанилат, гексилрезорцинат, гидрабамин, гидробромид, гидрохлорид, гидроксинафтоат, йодид, изотионат, лактат, лактобионат, лаурат, малат, малеат, манделат, мезилат, метилбромид, метилнитрат, метилсульфат, мукат, напсилат, нитрат, аммониевая соль Ν-метилглюкамина, олеат, памоат (эмбонат), пальмитат, пантотенат, фосфат/дифосфат, полигалактуронат, салицилат, стеарат, сульфат, основной ацетат, сукцинат, таннат, тартрат, теоклат, тозилат, триэтио дид и валерат.

Примеры кислот и оснований, которые могут использоваться в получении фармацевтически приемлемых солей, включают следующее:

кислоты, включая уксусную кислоту, 2,2-дихлоруксусную кислоту, ацетилированные аминокислоты, адипиновую кислоту, альгиновую кислоту, аскорбиновую кислоту, Ь-аспарагиновую кислоту, бензолсульфоновую кислоту, бензойную кислоту, 4-ацетамидобензойную кислоту, (+)-камфорную кислоту, камфорсульфоновую кислоту, (+)-(18)-камфор- 10-сульфоновую кислоту, каприновую кислоту, капроновую кислоту, каприловую кислоту, коричную кислоту, лимонную кислоту, цикламовую кислоту, додецилсерную кислоту, этан-1,2-дисульфоновую кислоту, этансульфоновую кислоту, 2-гидроксиэтансульфоновую кислоту, муравьиную кислоту, фумаровую кислоту, галактаровую кислоту, гентизиновую кислоту, глюкогептоновую кислоту, Ώ-глюконовую кислоту, Ώ-глюкуроновую кислоту, Ь-глутаминовую кислоту, α-оксоглутаровую кислоту, гликолевую кислоту, гиппуровую кислоту, бромоводородную кислоту, хлороводородную кислоту, (+)-Ь-молочную кислоту, (±)-ОЬ-молочную кислоту, лактобионовую кислоту, малеиновую кислоту, (-)-Ь-яблочную кислоту, малоновую кислоту, (±)-ОЬ-миндальную кислоту, метансульфоновую кислоту, нафталин-2-сульфоновую кислоту, нафталин1,5-дисульфоновую кислоту, 1-гидрокси-2-нафтеновую кислоту, никотиновую кислоту, азотную кислоту, олеиновую кислоту, оротовую кислоту, щавелевую кислоту, пальмитиновую кислоту, памовую кислоту, фосфорную кислоту, Ь-пироглутаминовую кислоту, салициловую кислоту, 4-аминосалициловую кислоту, себациновую кислоту, стеариновую кислоту, янтарную кислоту, серную кислоту, дубильную кислоту, (+)-Ь-винную кислоту, тиоциановую кислоту, п-толуолсульфоновую кислоту и ундециленовую кислоту; и основания, включая аммиак, Ь-аргинин, бенетамин, бензатин, гидроксид кальция, холин, деанол, диэтаноламин, диэтиламин, 2-(диэтиламино)этанол, этаноламин, этилендиамин, Ν-метилглюкамин, гидрабамин, 1Н-имидазол, Ь-лизин, гидроксид магния, 4-(2-гидроксиэтил)морфолин, пиперазин, гидроксид калия, 1-(2-гидроксиэтил)пирролидин, вторичный амин, гидроксид натрия, триэтаноламин, трометамин и гидроксид цинка.

Соединения формулы (I) могут быть получены согласно способу, представленному на схеме 1.

(XI)

Таким образом, подходящим образом замещенное соединение формулы (X), известное соединение или соединение, полученное известными способами, реагирует с сульфамидом, известным соединением, где сульфамид предпочтительно присутствует в количестве в диапазоне приблизительно от 2 до приблизительно 5 экв. в органическом растворителе, таком как ТГФ, диоксан и т.п., предпочтительно при повышенной температуре в диапазоне приблизительно от 50 до приблизительно 100°С, более предпочтительно приблизительно при температуре дефлегмации, что приводит к соответствующему соединению формулы (1а).

Альтернативно, замещенное подходящим образом соединение формулы (X), известное соединение или соединение, полученное известными способами, реагирует с замещенным соединением формулы (XI), известным соединением или соединением, полученным известными способами, в присутствии основания, такого как ТЭА, ДИПЭА, пиридин и т.п., в органическом растворителе, таком как ДМФА, ДМСО и т.п., что приводит к соответствующему соединению формулы (I).

Соединения формулы (X), гдеСЗ^ представляет собой но способу, представленному на схеме 2.

, могут быть получены соглас-9016302

Таким образом, подходящим образом замещенное соединение формулы (XII), известное соединение или соединение, полученное известными способами (например, как описано в схеме 3 выше), реагирует с ΝΗ4ΟΗ, известным соединением, необязательно в органическом растворителе, таком как ацетонитрил и т.п., что приводит к соответствующему соединению формулы (XIII).

Соединение формулы (XIII) реагирует с правильно подобранным восстанавливающим агентом, таким как ЛАГ и т.п., в органическом растворителе, таком как ТГФ, диэтиловый эфир и т.п., что приводит к соответствующему соединению формулы (Ха).

Си)

Соединения формулы (X), где (₽0

ИЗ

(ί ^к')

Соединения формулы (X), где ζ^ζ выбран бу, представленному на схеме 3.

, могут быть получены согласно спосоСхема 3 (В^а)ь

(XIV) (СНг^да

ОН (НЭь

(XV) (СН_г)₀.,мн_г

(СНак,Таким образом, замещенное подходящим образом соединение формулы (XIV), известное соединение или соединение, полученное известными способами, реагирует с ΝΗ₄ΟΗ, в присутствии сшивающего агента, такого как ДЦК и т.п., необязательно в органическом растворителе, таком как ацетонитрил и т.п., что приводит к соответствующему соединению формулы (XV).

Соединение формулы (XV) реагирует с правильно подобранным восстанавливающим агентом, таким как ЛАГ и т.п., в органическом растворителе, таком как ТГФ, диэтиловый эфир и т.п., что приводит к соответствующему соединению формулы (ХЪ).

(бф

Соединения формулы (X), где Ατζ выбран из ны согласно способу, представленному на схеме 4.

и где а равно 2, могут быть получе-

Таким образом, замещенное подходящим образом соединение формулы (XVI), где I¹ является подходящей уходящей группой, такой как Вг, С1, I, тозил, мезил, трифлил и т.п., известное соединение или соединение, полученное известными способами (например, активацией соответствующего соединения, где I¹ представляет собой ОН), реагирует с цианидом, таким как цианид калия, цианид натрия и т.п., в органическом растворителе, таком как ДМСО, ДМФА, ТГФ и т.п., что приводит к соответствующему соединению формулы (XVII).

Соединение формулы (XVII) восстанавливают согласно известным способам, например реакцией с подходящим восстанавливающим агентом, таким как ЛАГ, боран и т.п., что приводит к соответствующему соединению формулы (Хе).

Соединения формулы (X), где

ны согласно способу, представленному на схеме 5.

и где а равно 1, могут быть получе- 10016302

Таким образом, подходящим способом замещенное соединение формулы (XVIII), известное соединение или соединение, полученное известными способами, активируют согласно известному способу, что приводит к соответствующему соединению формулы (XIX), где I² представляет собой подходящую уходящую группа, такую как тозилат, С1, Вг, I, мезилат, трифлат и т.п.

Соединение формулы (XIX) реагирует с фталимидной солью, такой как фталимид калия, фталимид натрия и т.п., в органическом растворителе, таком как ДМФА, ДМСО, ацетонитрил и т.п., предпочтительно при повышенной температуре в диапазоне от 50 до приблизительно 200°С, более предпочтительно приблизительно при температуре дефлегмации, что приводит к соответствующему соединению формулы (XX).

Соединение формулы (XX) реагирует с Ν₂Η₄, известным соединением, в органическом растворителе, таком как этанол, метанол и т.п., предпочтительно при повышенной температуре в диапазоне от приблизительно 50 до приблизительно 100°С, более предпочтительно приблизительно при температуре дефлегмации и т.п., что приводит к соответствующему соединению формулы (Χά). Специалист, квалифи-

цированный в данной области техники, будет понимать, что соединения формулы (X), где выбран из

или могут быть получены известными способами или, например, согласно способам, представленным на схемах 2-5 выше, выбирая и замещая соответствующие нафтил-конденсированные соединения для бензоконденсированных исходных материалов.

Специалист, квалифицированный в данной области техники, также будет понимать, что, когда необходим единственный энантиомер соединения формулы (X) (или смесь энантиомеров, где один энантиомер является обогащенным), вышеупомянутые способы, описанные в схемах 1-5, могут быть применены посредством замещения соответствующего единственного энантиомера (или смеси энантиомеров, где один энантиомер является обогащенным) для соответствующего исходного материала.

Специалист, квалифицированный в данной области техники, будет понимать, что стадия реакции настоящего изобретения может быть проведена в различных растворителях или системах растворителей, указанная стадия реакции может также быть проведена в смеси подходящих растворителей или систем растворителей.

- 11 016302

Когда способы получения соединений согласно изобретению дают смеси стереоизомеров, то указанные изомеры могут быть разделены обычными способами, такими как препаративная хроматография. Соединения могут быть получены в рацемической форме либо отдельные энантиомеры могут быть получены энантиоселективным синтезом или посредством выделения. Соединения могут, например, быть разделены на составляющие их энантиомеры стандартными способами, такими как образование диастереомерных пар путем образования соли с оптически активной кислотой, такой как (-)-ди-п-толуоил-Эвинная кислота и/или (+)-ди-п-толуоил-Ь-винная кислота, с последующей фракционной кристаллизацией и регенерацией свободного основания. Соединения могут также быть разделены посредством образования диастереомерных сложных эфиров или амидов, с последующим хроматографическим разделением и удалением хирального вспомогательного соединения. В качестве альтернативы соединения могут быть разделены с использованием хиральной ВЭЖХ-колонки.

При осуществлении любого из способов получения соединений по настоящему изобретению может быть необходимым и/или желательным защитить чувствительные или реакционноспособные группы на любой из соответствующих молекул. Это может быть достигнуто посредством обычных защитных групп, таких как описанные в Рго1ссйус Сгоирк ίη Огдаше СИсниЩу. еб. 1.Б.А. МеОт1е, Р1епит Ргекк, 1973 и ТА. Сгеепе & Р.С.М. АнК РгоЮсБсе Сгоирк ίη Огдаше 8упФек1к, ίοΐιη АПеу & 8опк, 1991. Защитные группы могут быть удалены в одной из удобных последующих стадий, используя способы, известные из уровня техники.

Настоящее изобретение дополнительно включает фармацевтические композиции, содержащие одно или более соединений формулы (I) с фармацевтически приемлемым носителем. Фармацевтические композиции, содержащие в качестве активного компонента одно или более соединений изобретения, описанных в данном описании, могут быть получены тщательным смешиванием соединения или соединений с фармацевтическим носителем согласно стандартным методикам составления фармацевтических композиций. Носитель может иметь большой диапазон форм в зависимости от желаемого пути введения (например, перорального, парентерального). Таким образом, в случае жидких препаратов для перорального применения, таких как суспензии, эликсиры и растворы, подходящие носители и добавки включают воду, гликоли, масла, спирты, ароматизаторы, консерванты, стабилизаторы, красители и т.п.; в случае твердых препаратов для перорального применения, таких как порошки, капсулы и таблетки, подходящие носители и добавки включают крахмалы, сахара, разбавители, гранулирующие агенты, скользящие вещества, связующие вещества, дезинтегрирующие добавки и т.п. Твердые препараты для перорального применения могут быть также покрыты такими веществами, как сахара, или покрыты энтеро-солюбильным покрытием, чтобы изменить основной участок абсорбции. В случае парентерального введения носитель обычно будет состоять из стерильной воды, при этом в целях повышения растворимости или для консервации могут быть добавлены другие компоненты. Суспензии или растворы для инъекций могут быть также приготовлены с использованием водных носителей наряду с соответствующими добавками.

Для приготовления фармацевтических композиций по настоящему изобретению одно или более соединений по настоящему изобретению в качестве активного компонента тщательно перемешивают с фармацевтическим носителем согласно обычным методикам составления фармацевтических композиций, где указанный носитель может иметь большой диапазон форм в зависимости от формы препарата, необходимой для введения, например, пероральной или парентеральной, такой как внутримышечная. В ходе приготовления композиций в лекарственной форме для перорального применения может использоваться любой из стандартных фармацевтических носителей. Таким образом, в случае жидких препаратов для перорального применения, таких как, например, суспензии, эликсиры и растворы, подходящие носители и добавки включают воду, гликоли, масла, спирты, ароматизаторы, консерванты, красители и т.п.; в случае твердых препаратов для перорального применения, таких как, например, порошки, капсулы, каплеты, желатиновые капсулы и таблетки, подходящие носители и добавки включают крахмалы, сахара, разбавители, гранулирующие агенты, скользящие вещества, связующие вещества, дезинтегрирующие добавки и т.п. Благодаря легкости введения таблетки и капсулы представляют собой наиболее выгодную лекарственную форму для перорального применения, и в данном случае, очевидно, применяются твердые фармацевтические носители. Если необходимо, таблетки могут быть покрытым сахаром или энтеросолюбильным покрытием с помощью стандартных методик. В случае препаратов для парентерального применения носитель обычно будет включать стерильную воду, хотя могут быть включены другие компоненты, предназначенные, например, для повышения растворимости или консервации. Также могут быть приготовлены суспензии для инъекций, при этом могут использоваться соответствующие жидкие носители, суспендирующие добавки и т.п. Фармацевтические композиции в данном описании будут содержать такое количество активного компонента в расчете на лекарственную форму, например таблетку, капсулу, порошок, инъекцию, чайную ложку и т. п., которое необходимо для доставки эффективной дозы, как описано выше. Фармацевтические композиции в данном описании будут содержать в расчете на лекарственную форму, например, таблетку, капсулу, порошок, инъекцию, свечу, чайную ложку и т.п., приблизительно 0,1-1000 мг и смогут приниматься в дозировке приблизительно 0,01-200,0 мг/кг/день, предпочтительно приблизительно 0,1-100 мг/кг/день, более предпочтительно приблизительно 0,5-50 мг/кг/день, более предпочтительно приблизительно 1,0-25,0 мг/кг/день или в любом указанном

- 12 016302 диапазоне. Дозировки, однако, могут быть различны в зависимости от потребности пациентов, тяжести заболевания, которое лечат, и применяемого соединения. Может использоваться либо ежедневное введение, либо постпериодическое дозирование.

Предпочтительно указанные соединения находятся в стандартных лекарственных формах, таких как таблетки, пилюли, капсулы, порошки, гранулы, стерильные растворы для парентерального введения или суспензии, дозированные аэрозоли или жидкие спреи, капли, ампулы, автоинжекторные устройства или свечи; для перорального, парентерального, интраназального, сублингвального или ректального введения или для введения посредством ингаляции или вдувания. В качестве альтернативы композиция может присутствовать в форме, подходящей для еженедельного или ежемесячного введения; например, нерастворимая соль активного соединения, такая как деканоат, может быть подходящей для обеспечения препарата пролонгированного действия для внутримышечной инъекции. Для приготовления твердых композиций, таких как таблетки, основной активный компонент смешивают с фармацевтическим носителем, например с обычными компонентами таблетирования, такими как кукурузный крахмал, лактоза, сахароза, сорбит, тальк, стеариновая кислота, стеарат магния, фосфат дикальция или камеди, а также с другими фармацевтическими разбавителями, например водой, что позволяет получить твердую предварительную композицию, содержащую гомогенную смесь соединения по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли. Когда указанные предварительные композиции упоминаются как гомогенные, это означает, что активный компонент равномерно диспергирован по всему объему композиции, и, таким образом, композиция может быть легко разделена на равноэффективные лекарственные формы, такие как таблетки, пилюли и капсулы. Затем указанную твердую предварительную композицию разделяют на стандартные лекарственные формы вышеописанного типа, содержащие от 0,1 до приблизительно 1000 мг активного компонента настоящего изобретения. Таблетки или пилюли новой композиции могут быть покрыты или составлены другим способом, что обеспечивает лекарственную форму, обладающую преимуществом пролонгированного действия. Например, таблетка или пилюля могут включать внутренний и внешний компоненты дозировки, причем последний присутствует в форме оболочки поверх основы. Указанные два компонента могут быть разделены энтеросолюбильным слоем, который служит для предотвращения распада в желудке и позволяет внутреннему компоненту проходить в исходном виде в двенадцатиперстную кишку или обеспечивает задержку высвобождения. Для указанных энтеросолюбильных слоев или покрытий могут использоваться различные материалы, которые включают ряд полимерных кислот, и такие материалы, как шеллак, цетиловый спирт и ацетат целлюлозы.

Жидкие формы для перорального введения или инъекций, в которые могут быть включены новые соединения по настоящему изобретению, включают водные растворы, ароматизированные сиропы, водные или масляные суспензии и ароматизированные эмульсии с пищевыми маслами, такими как хлопковое масло, кунжутное масло, кокосовое масло или арахисовое масло, а также эликсиры и подобные фармацевтические носители. Подходящие диспергирующие или суспендирующие добавки для водных суспензий включают синтетические и натуральные камеди, такие как трагакантовая камедь, гуммиарабик, альгинат, декстран, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, метилцеллюлоза, поливинилпирролидон или желатин.

Способ лечения боли, описанный в настоящем изобретении, может также осуществляться с использованием фармацевтической композиции, включающей любое из соединений, определенных в данном описании, и фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтическая композиция может содержать приблизительно от 0,1 до 1000 мг, предпочтительно приблизительно 50-500 мг соединения и может быть составлена в любой форме, подходящей для выбранного способа введения. Носители включают необходимые и инертные фармацевтические наполнители, включая, без ограничения, связующие вещества, суспендирующие добавки, скользящие вещества, ароматизаторы, подсластители, консерванты, красители и покрытия. Композиции, подходящие для перорального введения, включают твердые формы, такие как пилюли, таблетки, каплеты, капсулы (каждая форма включает композиции немедленного высвобождения, с регулирумым временем высвобождения и замедленным высвобождением), гранулы и порошки, а также жидкие формы, такие как растворы, сиропы, эликсиры, эмульсии и суспензии. Формы, применяемые для парентерального введения, включают стерильные растворы, эмульсии и суспензии.

Предпочтительно соединения по настоящему изобретению можно вводить в единственной ежедневной дозе либо полная ежедневная доза может быть введена в раздельных дозах, два, три или четыре раза в день. Кроме того, соединения по настоящему изобретению можно вводить в интраназальной форме посредством местного применения подходящих интраназальных носителей или посредством трансдермальных пластырей, известных средним специалистам в данной области техники. При введении в форме трансдермальной системы доставки введение дозы, безусловно, будет осуществляться непрерывно, а не периодически, на протяжении всего режима дозировки.

Например, для перорального введения в форме таблетки или капсулы активный компонент лекарственного средства может быть объединен с нетоксичным фармацевтически приемлемым инертным носителем для перорального применения, таким как этанол, глицерин, вода и т. п. Кроме того, когда желательно или необходимо, в смесь могут быть также включены подходящие связующие вещества, сколь

- 13 016302 зящие вещества, дезинтегрирующие добавки и красители. Подходящие связующие вещества включают, без ограничения, крахмал, желатин, натуральный сахар, такой как глюкоза или бета-лактоза, сахаристые вещества кукурузы, натуральные и синтетические камеди, такие как гуммиарабик, трагакант или олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.п. Дезинтеграторы включают, помимо прочих, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь и т.п.

В жидкие формы обычно добавляют суспендирующие или диспергирующие добавки, такие как синтетические и натуральные камеди, например трагакант, гуммиарабик, метилцеллюлозу и т.п. Для парентерального введения предпочтительными являются стерильные суспензии и растворы. Изотонические препараты, которые обычно содержат подходящие консерванты, применяются в случаях, когда предпочтительно внутривенное введение.

Соединения по настоящему изобретению можно вводить в составе любой из предыдущих композиций и в соответствии с режимами дозировки, установленными в уровне техники, во всех случаях, когда требуется лечение депрессии.

Ежедневная доза продуктов может варьировать в широком диапазоне от 0,01 до 200 мг/кг для взрослого человека в день. В случае перорального введения соединения предпочтительно обеспечиваются в форме таблеток, содержащих 0,01, 0,05, 0,1, 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 10,0, 15,0, 25,0, 50,0, 100, 150, 200, 250, 500 и 1000 мг активного компонента для симптоматического регулирования дозировки подвергнутого лечению пациента. Эффективное количество препарата обычно находится на уровне дозировки приблизительно от 0,01 до приблизительно 200 мг/кг массы тела в день. Предпочтительно диапазон дозировки составляет от приблизительно 0,1 до приблизительно 100 мг/кг массы тела в день, более предпочтительно приблизительно от 0,5 до приблизительно 50 мг/кг, более предпочтительно от приблизительно 1 до приблизительно 25 мг/кг массы тела в день. Соединения можно вводить в режиме 1-4 раза в день.

Оптимальные вводимые дозы могут быть легко определены специалистами, квалифицированными в данной области техники, и варьируют в зависимости от конкретного используемого соединения, способа введения, концентрации препарата и улучшения в течение заболевания. Кроме того, факторы, связанные с конкретным пациентом, подвергнутым лечению, включающие возраст пациента, вес, режим питания и время введения, приводят к необходимости коррекции дозировок.

Специалист, квалифицированный в данной области техники, будет понимать, что и испытания ΐπ νίνο и ΐπ νΐίΓΟ с использованием подходящих, известных и общепринятых клеточных и/или животных моделей позволяют прогнозировать способность испытываемого соединения при лечении или профилактике данного нарушения.

Специалист, квалифицированный в данной области техники, также будет понимать, что клинические испытания на людях, включая первичные испытания на человеке, испытания по подбору дозы и испытания на эффективность у здоровых пациентов и/или страдающих от данного нарушения, могут быть проведены согласно способам, известным в клинической и медицинской областях.

Следующие примеры изложены в целях помощи при понимании изобретения и не предназначены и не должны рассматриваться как ограничивающие каким-либо образом изобретение, изложенное в формуле, которая следует в дальнейшем.

Пример 1. (3,4-Дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]диоксепин-3-ил)метилсульфамид (соединение № 3)

Пирокатехин (5,09 г, 46,2 ммоль) и карбонат калия смешивали в ацетонитриле и нагревали с дефлегмацией в течение 1 ч. Затем добавляли 2-хлорметил-3-хлор-1-пропен (5,78 г, 46,2 ммоль) и реакцию продолжали с дефлегмацией в течение 24 ч. Раствор охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат выпаривали, а остаток разбавляли в воде и экстрагировали диэтиловым эфиром (3 раза). Объединенный органический раствор сушили над Мд80₄ и концентрировали. Хроматографическая очистка (2% диэтиловый эфир в гексане) приводила к получению 3-метилен-3,4-дигидро-2Нбензо[Ь][1,4]диоксепина в виде бесцветного масла.

М8 (Ε8Ι): 163,2 (М+Н⁺).

¹Н ЯМР (300 МГц, СПС1₃) δ: 6,94 (м, 4Н), 5,07 (с, 2Н), 4,76 (с, 4Н).

3-Метилен-3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]диоксепин (5,00 г, 30,8 ммоль) растворяли в сухом ТГФ (100 мл). Боран-ТГФ (1,0 М в ТГФ, 10,3 мл) добавляли при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 5 ч. Затем добавляли аминосульфоновую кислоту (6,97 г, 61,6 ммоль). Реакционную смесь нагревали с дефлегмацией в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли водный раствор гидроксида натрия (3,0 М, 100 мл). Раствор экстрагировали этилацетатом (3x100 мл). Объединенный органический раствор сушили над Мд80₄. Раствор концентрировали под вакуумом и очищали с помощью хроматографии (2-8% метанола в дихлорметане), в результате чего получали ((3,4-дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]диоксепин-3-ил)метил)амина в виде бесцветного масла.

М8 (Ε8Ι): 180, 1 (М+Н⁺).

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 6,92 (м, 4Н), 4,21 (м, 2Н), 4,07 (м, 2Н), 3,33 (широкий, 2Н), 3,16 (д, 1=4 Гц, 1Н), 2,72 (д, 1=4 Гц, 1Н), 2,30 (м, 1Н).

- 14 016302 ((3,4-Дигидро-2Н-бензо[Ь][1,4]диоксепин-3-ил)метил)амин (2,90 г, 16,2 ммоль) и сульфамид (3,11 г, 32,4 ммоль) смешивали в сухом диоксане (60 мл) и нагревали с дефлегмацией в течение ночи. Затем добавляли хлороформ, а осадок удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали в вакууме и очищали с помощью хроматографии (2-8% ацетона в дихлорметане), в результате чего получали указанное в заголовке соединение в виде не совсем белого твердого вещества.

258,8 (М+Н⁺) ¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 6,92 (м, 4Н), 6,71 (широкий, 1Н), 6,59 (широкий, 2Н), 4,19 (м, 2Н), 4,04 (м, 2Н), 3,00 (м, 2Н), 2,39 (м, 1Н).

Пример 2. N-(2,3-Дигидробензо [1,4]диоксин-2-илметил)сульфамид (соединение № 1).

Рацемический 2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-2-илметиламин (4,4 г, 26 ммоль) и сульфамид (5,1 г, 53 ммоль) смешивали в 1,4-диоксане (100 мл) и нагревали с дефлегмацией в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, после чего небольшое количество твердого вещества отфильтровывали и удаляли. Фильтрат выпаривали в вакууме, а остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ДХМ:метанол - 10:1) с получением белого твердого вещества. Твердое вещество перекристаллизовывали в ДХМ с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

Т.пл.: 97,5-98,5°С.

Элементный анализ:

Расчетный состав: С, 44,25; Н, 4,95; Ν, 11,47; 8, 13,13.

Полученный состав: С, 44,28; Н, 4,66; Ν, 11,21; 8, 13,15.

¹Н ЯМР (ДМСО-Й6) δ: 6,85 (м, 4Н), 6,68 (широкий с, 3Н, ΝΗ), 4,28 (м, 2Н), 3,97 (дд, ι=6,9, 11,4 Гц, 1Н), 3,20 (м, 1Н), 3,10 (м, 1Н).

Пример 3. (Бензо [1,3] диоксол-2-илметил)сульфамид (соединение № 2)

Пирокатехин (10,26 г, 93,2 ммоль), метоксид натрия (25 мас.% в метаноле, 40,3 г, 186 ммоль) и метил дихлорацетат (13,3 г, 93,2 ммоль) смешивали в безводном метаноле (100 мл). Раствор нагревали с дефлегмацией в течение ночи. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, подкисляли путем добавления концентрированной соляной кислоты, а затем концентрировали в вакууме до объема приблизительно 50 мл. Добавляли воду, после чего смесь экстрагировали диэтиловым эфиром (3x100 мл). Объединенный органический раствор сушили над Мд8О₄, концентрировали до получения коричневого твердого остатка и очищали с помощью хроматографии (2% этилацетат в гексане) с получением метилового эфира бензо[1,3]диоксол-2-карбоновой кислоты в виде бесцветного масла.

М8 (Ε8Ι): 195,10 (М+Н⁺).

¹Н ЯМР (300 МГц, С1)С1_;) δ: 6,89 (широкий, 4Н), 6,29 (с, 1Н), 4,34 (кв, 1=7 Гц, 2Н), 1,33 (т, .17 Гц, 3Н).

К метиловому эфиру бензо [1,3] диоксол-2-карбоновой кислоты (7,21 г, 40,0 ммоль) добавляли гидроксид аммония (29% в воде, 10 мл) и достаточное количество ацетонитрила для получения гомогенной смеси (~5 мл). Раствор перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре, а затем добавляли дистиллированную воду. Амид бензо [1,3] диоксол-2-карбоновой кислоты, выпавший в виде белого осадка, отделяли фильтрованием и использовали без дальнейшей очистки.

М8 (Ε8Ι): 160,00 (М+Н⁺).

¹Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ: 7,99 (с, широкий, 1Н), 7,72 (с, широкий, 1Н), 6,94 (м, 2Н) 6,86 (м, 2Н), 6,30 (с, 1Н).

Амид бензо [1,3] диоксол-2-карбоновой кислоты (5,44 г, 32,9 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (ТГФ, 100 мл). К раствору при комнатной температуре медленно добавляли алюмогидрид лития (ЛАГ, 1 М в ТГФ, 39,5 мл, 39,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Затем с целью гидролиза избытка ЛАГ добавляли дистиллированную воду. Добавляли водный раствор гидроксида натрия (3,0 М, 100 мл), после чего раствор экстрагировали этилацетатом (3x100 мл). Объединенный органический раствор промывали водой и сушили над Мд8О₄. Растворитель выпаривали с получением С-бензо[1,3]диоксол-2-илметиламин в виде бесцветного масла.

М8 (Ε8Ι): 152,1 (М+Н⁺).

¹Н ЯМР (300 МГц, СБСЕ) δ: 6,87 (м, 4Н), 6,09 (т, 1=4 Гц, 1Н), 3,13 (д, 1=4 Гц, 2Н)

С-Бензо[1,3]диоксол-2-илметиламин (2,94 г, 19,4 ммоль) и сульфамид (3,74 г, 38,9 ммоль) смешивали в сухом диоксане (50 мл), после чего полученный раствор нагревали с дефлегмацией в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали, а остаток очищали хроматографией (2-10% ацетона в дихлорметане) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.

М8 (Ε8Ι): 230,0 (М+Н⁺) ¹Н ЯМР (300 МГц, СБС1э) δ: 6,87 (м, 4Н), 6,25 (т, 1=4 Гц, 1Н), 4,79 (широкий, 1Н), 4,62 (широкий, 1Н), 3,64 (д, 1=4 Гц, 2Н).

- 15 016302

Пример 4. (28)-(-)-П-(2,3-Дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)сульфамид (соединение № 4)

Пирокатехин (13,2 г, 0,12 моль) и карбонат калия (16,6 г, 0,12 моль) смешивали в ДМФА (250 мл), после чего добавляли (2К)-глицидилтозилат (22,8 г, 0,10 моль) и перемешивали реакционную смесь при 60° С в течение 24 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ледяной водой (1 л) и экстрагировали диэтиловым эфиром (4 раза). Объединенный органический раствор промывали 3 раза 10%-ным раствором карбоната калия, однократно водой, однократно подсоленной водой и выпаривали в вакууме с получением белого твердого вещества, очищенного колоночной флэшхроматографией (ДХМ:метанол - 50:1), с получением ((28)-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-ил)метанола в виде твердого вещества.

Полученное твердое вещество (13,3 г, 68 ммоль) растворяли в пиридине (85 мл), охлажденном до 0°С, добавляли п-толуолсульфонилхлорид (13,0 г, 68 ммоль), после чего реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром (1 л) и 1н. НС1 (1,2 л). Органический слой выделяли и промывали 2 раза 1н. НС1 (500 мл), 4 раза водой (150 мл), однократно подсоленной водой, сушили (Мд8О₄) и выпаривали в вакууме с получением белого твердого вещества, очищенного с помощью колоночной флэш-хроматографии (гептан :ЭА - 2:1) с получением (28)-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметилового эфира толуол-4-сульфоновой кислоты в виде белого твердого вещества.

Белое твердое вещество смешивали с фталимидом калия (14,4 г, 78 ммоль) в ДМФА (250 мл) и нагревали с дефлегмацией в течение 1 ч, охлаждали до комнатной температуры, выливали полученную смесь в энергично перемешиваемую воду (1,5 л) и перемешивали 30 мин. Белое твердое вещество отфильтровывали и промывали несколько раз водой, 2%-ным раствором ΝαΟΗ, а затем снова водой, а затем сушили на воздухе с получением (28)-2-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)изоиндол-1,3диона в виде белого порошкообразного вещества.

Полученное белое порошкообразное вещество смешивали с гидразином (2,75 г, 86 ммоль) в ЕЮН (225 мл), после чего нагревали с дефлегмацией в течение 2 ч, а затем охлаждали до комнатной температуры, добавляли 1н. НС1 до рН 1,0 и перемешивали в течение 15 мин. Полученный белый осадок отфильтровывали и промывали дополнительным количеством ЕЮН (осадок удаляли), после чего фильтрат выпаривали в вакууме, а остаток разделяли между диэтиловым эфиром и водным раствором ΝαΟΙ I. Эфирный раствор сушили (Να₂8Ο₄) и выпаривали в вакууме, получив в качестве продукта светло-желтое масло. Полученное масло очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ДХМ: МеОН - 10:1), с получением масла. Часть полученного масла (4,82 г, 29 ммоль) в 2-пропаноле (250 мл) обрабатывали 1н. НС1 (30 мл) и нагревали на паровой бане до получения гомогенного раствора, а затем охлаждали до комнатной температуры. Спустя 3 ч смесь охлаждали на льду в течение 2 ч. Белый хлопьевидный осадок (соответствующая соль НС1 (28)-С-(2,3-дигидробензо[1,4]-диоксин-2-ил)етиламина) отфильтровывали, а затем перекристаллизовывали из 2-пропанола, с получением белого твердого вещества.

[α]_ο=-69,6° (с=1,06, ЕЮН).

Полученное белое твердое вещество разделяли между ДХМ и разбавленным раствором ΝαΟΙ I, после чего ДХМ сушили (Να8Ο₄) и выпаривали в вакууме с получением (28)-С-(2,3дигидробензо[1,4]диоксин-2-ил)метиламина в виде маслообразного вещества.

[α]_ο=-57,8° (с=1,40, СНСЬ).

Полученное маслообразное вещество (2,1 г, 12,7 ммоль) и сульфамид (2,44 г, 25,4 ммоль) нагревали с дефлегмацией в диоксане (75 мл) в течение 2 ч, неочищенный продукт очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ДХМ:ΜеΟΗ - 10:1) с получением белого твердого вещества, которое перекристаллизовывали из ДХМ, с получением в виде белого кристаллического вещества указанного в заголовке соединения.

Т.пл.: 102-103°С;

[α]π=-45,1° (с=1,05, М);

¹Н ЯМР (ДМСО-ф,) δ: 6,86 (м, 4Н), 6,81 (широкий с, 3Н, ΝΚ), 4,3 (м, 2Н), 3,97 (дд, 1=6,9, 11,4 Гц, 1Н), 3,20 (дд, 1=5,5, 13,7 Гц, 1Н), 3,10 (дд, 1=6,9, 13,7 Гц, 1Н).

Элементный анализ:

Расчетный состав: С, 44,25; Н, 4,95; Ν, 11,47; 8, 13,13.

Полученный состав: С, 44,20; Н, 4,69; Ν, 11,40; 8, 13,22.

- 16 016302

Пример 5. №(2,3-Дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)-№,№-диметилсульфамид (соединение № 6)

О I

Рацемический 2,3-дигидро-1,4-бенздиоксин-2-илметиламин (8,25 г, 5,0 ммоль) и триэтиламин (1,52 г, 15 ммоль) смешивали в ДМФА (10 мл) и охлаждали в ледяной бане по мере добавления диметилсульфамоилхлорида (1,44 г, 10 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч с постоянным охлаждением. Реакционную смесь разделяли между этилацетатом и водой, после чего этилацетатный раствор промывали подсоленной водой, сушили (Мд80₄) и выпаривали в вакууме с получением маслообразного вещества. Полученное маслообразное вещество очищали с помощью колоночной флэшхроматографии (этилацетат: гептан - 1:1) с получением белого твердого вещества, которое перекристаллизовывали (этилацетат/гексан), с получением в виде белого хлопьевидного вещества указанного в заголовке соединения.

Т.пл.: 76-78°С.

М8 273 (МН⁺).

Элементный анализ:

Расчетный состав: С, 48,52; Н, 5,92; Ν, 10,29; 8, 11,78.

Полученный состав: С, 48,63; Н, 5,62; Ν, 10,20; 8, 11,90.

¹Н ЯМР (СЭСЬ) δ: 6,87 (м, 4Н), 4,59 (широкий м, 1Н, ΝΗ), 4,35 (м, 1Н), 4,27 (дд, 1=2,3, 11,4 Гц, 1Н), 4,04 (дд, 1=7,0, 11,4, 1Н), 3,36 (м, 2Н), 2,82 (с, 6Н).

Пример 6. №(2,3-Дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)-№-метилсульфамид (соединение № 7)

Рацемический 2,3-дигидро-1,4-бенздиоксин-2-илметиламин (825 мг, 5 ммоль) растворяли в этилформиате (15 мл), нагревали в течение 30 мин, после чего выпаривали в вакууме с получением №(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)формамида в виде маслообразного вещества. Полученное маслообразное вещество в диэтиловом эфире (25 мл) обрабатывали 1 М раствором ЛАГ в ТГФ (9,0 мл, 9,0 ммоль) при 0°С и перемешивали в течение 5 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали на ледяной бане и разбавляли водой (0,50 мл), после чего добавляли 3н. ΝαΟΗ (0,50 мл) и воду (0,50 мл). Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Осадок отфильтровывали и фильтрат выпаривали в вакууме с получением остатка, который разделяли между 1н. НС1 и диэтиловым эфиром. Водную фазу нейтрализовывали 1н. ΝαΟΗ и экстрагировали диэтиловым эфиром. Органическую фазу сушили (Мд80₄) и выпаривали в вакууме с получением (2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2илметил)метиламина в виде маслообразного вещества.

М8 180 (МН⁺).

¹Н ЯМР (СОС1₃) δ: 6,85 (м, 4Н), 4,30 (м, 2Н), 4,02 (дд, 1=7,9, 11,6 Гц, 1Н), 2,85 (м, 2Н), 2,50 (с, 3Н).

Полученное маслообразное вещество (380 мг, 2,1 ммоль) и сульфамид (820 мг, 8,5 ммоль) смешивали в диоксане (15 мл), нагревали с дефлегмацией в течение 1,5 ч и выпаривали в вакууме с получением неочищенного остатка. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (этилацетат/гептан 1:1), после чего полученное твердое вещество перекристаллизовывали из этилацетата/гексана с получением в виде белого твердого вещества указанное в заголовке соединение.

Т.пл.: 97-98°С.

М8 257 (М^-1).

Элементный анализ:

Расчетный состав: С, 46,50; Н, 5,46; Ν, 10,85; 8, 12,41.

Полученный состав: С, 46,48; Н, 5,65; Ν, 10,90; 8, 12,07.

¹Н ЯМР (СОС1₃) δ: 6,86 (м, 4Н), 4,52 (широкий с, 2Н), 4,46 (м, 1Н), 4,29 (дд, 1=2,3, 11,5 Гц, 1Н), 4,05 (дд, 1=6,5, 11,5 Гц, 1Н), 3,51 (дд, 1=6,7, 14,9 Гц, 1Н), 3,40 (дд, 1=5,9, 14,9 Гц, 1Н), 2,99 (с, 3Н).

Пример 7. (28)-(-)-№-(6-Хлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)сульфамид (соединение № 8)

В соответствии с методикой, представленной в примере 4 выше, в реакции участвовал 4-хлоркатехин, в результате чего получали смесь (28)-С-(7-хлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2ил)метиламина и (28)-С-(6-хлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-ил)метиламина (приблизительно в

- 17 016302 соотношении 3:1 6-хлоро:7-хлороизомеров, по данным ОФ ВЭЖХ).

Полученную смесь растворяли в 2-пропаноле (100 мл) и добавляли 1н. раствор НС1 в диэтиловом эфире до получения рН 1,0. Выпавший в осадок гидрохлорид отфильтровывали (2,65 г) и перекристаллизовывали из метанола/ИПС с получением белых кристаллов. Полученные белые кристаллы разделяли между ДХМ и разбавленным раствором ΝαΟΗ. ДХМ сушили и выпаривали в вакууме с получением очищенного (28)-С-(6-хлоро-2,3-дигидробензо[1,4]-диоксин-2-ил)метиламина в виде маслообразного вещества.

[α]π=-67,8° (с=1,51, СНС1з).

Полученное маслообразное вещество (7,75 ммоль) и сульфамид (1,50 г, 15,5 ммоль) смешивали в диоксане (50 мл) и нагревали с дефлегмацией в течение 2,0 ч, после чего смесь охлаждали до комнатной температуры и выпаривали в вакууме с получением твердого остатка. Продукт очищали на флэшколонке, используя ДХМ/метанол 20:1, с получением в виде белого твердого вещества указанное в заголовке соединение.

М8 277 (М^-1).

[α]ρ=-59,9° (с=1,11, М).

¹Н ЯМР (СЭС1з) δ: 6,90 (д, .12.2 Гц, 1Н), 6,81 (м, 2Н), 4,76 (м, 1Н), 4,55 (с, 2Н), 4,40 (м, 1Н), 4,29 (дд, 1=2,4, 11,5 Гц, 1Н), 4,05 (дд, 1=7,1,11,5 Гц, 1Н), 3,45 (м, 2Н).

Элементный анализ:

Расчетный состав: С, 38,78; Н, 3,98; Ν, 10,05.

Полученный состав: С, 38,80; Н, 3,67; Ν, 9,99.

Фильтраты кристаллизованного гидрохлорида (28)-С-(6-хлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2ил)метиламина, полученного выше, выделяли (соотношение 6-хлоро:7-хлороизомеров приблизительно 1:1) и выпаривали в вакууме с получением сухого остатка, который разделяли между ДХМ (200 мл) и разбавленным раствором ΝαΟΗ (0,5 М, 50 мл). Раствор в ДХМ промывали один раз подсоленой водой, сушили (Να₂8Ο₄) и выпаривали в вакууме с получением маслообразного вещества, которое очищали с помощью обращенно-фазовой ВЭЖХ (10-50% ацетонитрила с 0,16% ТФУ в воде и 0,20% ТФУ) с получением в качестве продукта (28)-С-(7-хлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-ил)метиламина в остатке.

Полученный остаток смешивали с сульфамидом (0,90 г, 9,4 ммоль) в диоксане (25 мл) и нагревали с дефлегмацией в течение 2,5 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры и выпаривали в вакууме с получением маслообразного вещества. Маслообразное вещество очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с использованием ДХМ/метанол - 10:1 с получением (28)-(-)-№-(7-хлоро-2,3дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)сульфамида в виде белого твердого вещества.

М8 277 (М^-1).

¹Н ЯМР (СЭС13/СЭ3ОП) δ: 6,88 (д, 1=0,7 Гц, 1Н), 6,81 (м, 2Н), 4,37 (м, 1Н), 4,30 (дд, 1=2,3, 11,6 Гц, 1Н), 4,04 (дд, 1=7,0, 11,6 Гц, 1Н), 3,38 (м, 2Н).

Пример 8. Хроман-2-илметилсульфамид (соединение № 10) н /Я // // ^νη₂о

Хроман-2-карбоновую кислоту (4,5 г, 25 ммоль) и ГБТ (3,86 г, 25 ммоль) смешивали в ДХМ (40 мл) и ДМФА (10 мл). Диметиламинопропилэтилкарбодиимид (ЭДК, 4,84 г, 25 ммоль) добавляли при комнатной температуре, после чего реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин. Затем добавляли гидроксид аммония (2,26 мл, 33,4 ммоль) и перемешивали реакционную смесь в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ДХМ (50 мл) и водой (50 мл), после чего рН смеси доводили с помощью 1н. НС1 до приблизительно рН 3,0. ДХМ отделяли, после чего водную фазу дважды экстрагировали ДХМ. Объединенную ДХМ фазу сушили (Να₂8Ο₄) и выпаривали в вакууме с получением маслообразного вещества, которое очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (этилацетат) с получением маслообразного вещества.

Полученное маслообразное вещество (5,35 г, 30 ммоль) в ТГФ (90 мл) перемешивали с 1 М раствором ЛАГ в ТГФ (36 мл, 36 ммоль), после чего реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Затем реакционную смесь разбавляли водой, перемешивали в течение 2 ч, полученный раствор декантировали, сушили (Να₂8Ο₄) и выпаривали в вакууме с получением С-хроман-2илметиламина в виде маслообразного амина.

Маслообразный амин (1,63 г, 10 ммоль) и сульфамид (1,92 г, 20 ммоль) смешивали в диоксане (50 мл) и нагревали с дефлегмацией в течение 2 ч. Затем раствор охлаждали и выпаривали в вакууме с получением маслообразного вещества, которое очищали с помощью колоночной хроматографии (ДХМ:метанол - 10:1) с получением белого твердого вещества. Полученное твердое вещество перекристаллизовывали из этилацетата/гексана с получением хроман-2-илметилсульфамида в виде белого твердого вещества.

Т.пл.: 100-101°С.

М8 241 (М^-1).

- 18 016302

Элементный анализ:

Расчетный состав: С, 49,57; Н, 5,82; Ν, 11,56; 8, 13,23.

Полученный состав: С, 49,57; Н, 5,80; Ν, 11,75; 8, 13,33.

Пример 9. 2-(2,3-Дигидробензо [1,4] диоксин-2-ил)этилсульфамид (соединение № 16)

Цианид калия (2,05 г, 31,5 ммоль) добавляли к 2-бромметил-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксину) (6,87 г, 30 ммоль) в ДМСО (90 мл) и перемешивали при температуре окружающей среды в течение 20 ч. Затем реакционную смесь разбавляли водой (250 мл) и дважды экстрагировали диэтиловым эфиром. Диэтиловый эфир промывали водой, затем дважды промывали подсоленной водой, сушили (Να₂8Ο₄) и выпаривали в вакууме с получением 2-цианометил-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксина) в виде белого твердого вещества.

‘Н ЯМР (СОС1₃) δ: 6,89 (м, 4Н), 4,50 (м, 1Н), 4,31 (дд, 1=2,3, 11,5 Гц, 1Н), 4,08 (дд, 1=6,2, 11,6 Гц, 1Н), 2,78 (д, 1=6,1 Гц, 2Н).

2-Цианометил-(2,3-дигидробензо [1,4] диоксин) растворяли в ТГФ (50 мл), после чего добавляли 1 М раствор ВН₃ в ТГФ (80 мл, 80 ммоль) и нагревали реакционную смесь с дефлегмацией в течение 5 ч, а затем перемешивали при температуре окружающей среды в течение 16 ч. При охлаждении на ледяной бане рН доводили до 1,0 с помощью 2н. НС1. Затем реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре, после чего выпаривали в вакууме с получением маслообразного вещества. Маслообразное вещество разделяли между 3н. ΝαΟΗ и диэтиловым эфиром, эфирный раствор промывали подсоленной водой, сушили (Να₂8Ο₄) и выпаривали в вакууме с получением неочищенного 2-(2,3-дигидробензо [1,4] диоксин-2-ил)этиламина.

М8 (М+Н)⁺ 180.

Неочищенный 2-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илэтиламин в диоксане (100 мл) смешивали с сульфамидом (3,0 г, 31 ммоль) и нагревали с дефлегмацией в течение 2 ч. Затем раствор охлаждали и выпаривали в вакууме с получением оранжевого остатка, который очищали с помощью колоночной хроматографии (ДХМ:МеОН - 10:1) с получением белого твердого вещества. Твердое вещество перекристаллизовывали из ДХМ с получением в виде твердого вещества указанного в заголовке соединения.

М8 (М^-1) 257.

Т.пл.: 101-103°С (разл.).

‘Н ЯМР (СРС1₃) δ: 6,86 (м, 4Н), 4,70 (м, 1Н), 4,52 (с, 2Н), 4,30 (м, 2Н), 3,94 (дд, 1=7,4, 11,3 Гц, 1Н), 3,43 (дд, 1=6,4, ‘2,9 Гц, 2Н), ‘,94 (дд, 1=6,5, 12,9, 2Н).

Элементный анализ:

Полученный: С, 46,48; Н, 5,60; Ν, 10,81; 8, 12,41.

Расчетный: С, 46,50; Н, 5,46; Ν, 10,85; 8, 12,41.

Пример 10. (28)-(-)^-(6,7-Дихлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)сульфамид (соединение № 29)

4,5-Дихлорокатехол (8,6 г, 48 ммоль) и карбонат калия (6,64 г, 48 ммоль) перемешивали в ДМФА (200 мл). Затем добавляли (2К)-глицидилтозилат (9,12 г, 40 ммоль), после чего реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 24 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем разбавляли ледяной водой (600 мл) и экстрагировали диэтиловым эфиром (4 раза). Объединенный органический раствор промывали 3 раза 10%-ным раствором карбоната калия, дважды подсоленной водой, сушили (Мд8О₄) и выпаривали в вакууме с получением вязкого маслообразного вещества, представляющего собой (28)-2-(6,7-дихлоро-2,3-дигидробензо [1,4] диоксин)метанол.

Маслообразный (28)-2-(6,7-дихлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин)метанол (6,4 г, 27 ммоль) растворяли в пиридине (50 мл), охлажденном до 0°С. Затем добавляли п-толуолсульфонилхлорид (5,2 г, 27 ммоль), после чего реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром и 1н. НС1 (750 мл), после чего органический слой отделяли и промывали 2 раза 1н. НС1 (250 мл), один раз водой (150 мл), дважды подсоленной водой, сушили (Мд8О₄) и выпаривали в вакууме с получением (28)-6,7-дихлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2илметилового эфира толуол-4-сульфоновой кислоты в виде светло-желтого твердого вещества.

‘Н ЯМР (СЭС1₃) δ: 7,79 (д, 1=8,3 Гц, 2Н), 7,36 (д, 1=8,0 Гц, 2Н), 6,94 (с, 1Н), 6,83 (с, 1Н), 4,37 (м, 1Н), 4,2 (м, 3Н), 4,03 (дд, 1=6,3, 11,7 Гц, 1Н), 2,47 (с, 3Н).

- 19 016302 (28)-6,7-Дихлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметиловый эфир толуол-4-сульфоновой кислоты (8,0 г, 20,5 ммоль) смешивали с фталимидом калия (6,1 г, 33 ммоль) в ДМФА (75 мл) и нагревали с дефлегмацией в течение 1 ч, после чего охлаждали до комнатной температуры и вливали в энергично перемешиваемую воду (0,5 л), а затем перемешивали 30 мин. Белый осадок отфильтровывали и промывали несколько раз водой, 2%-ным раствором №ΟΙ I и снова водой, а затем сушили на воздухе с получением (28)-2-(6,7-дихлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)изоиндол-1,3-диона (6,0 г, 80%) в виде белого порошкообразного вещества.

Белое порошкообразное вещество смешивали с гидразином (1,06 г, 33 ммоль) в ЕЮН (80 мл) и нагревали с дефлегмацией в течение 2 ч, а затем охлаждали до комнатной температуры. Затем добавляли 1н. НС1, доводя рН реакционной смеси до 1,0, после чего реакционную смесь перемешивали в течение 15 мин. Белый осадок отфильтровывали и промывали дополнительным количеством ЕЮН (осадок удаляли), после чего фильтрат выпаривали в вакууме с получением остатка, который затем разделяли между диэтиловым эфиром и водным раствором №ΟΙ I. Эфирный раствор сушили (Να₂8Ο₄) и выпаривали в вакууме с получением вязкого маслообразного вещества, представляющего собой (28)-2-аминометил-(6,7дихлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин).

¹Н ЯМР (СЭС1э) δ: 6,98 (с, 1Н), 6,96 (с, 1Н), 4,25 (дд, 1=2,0, 11,2 Гц, 1Н), 4,15 (м, 1Н), 4,0 (м, 1Н), 2,97 (д, 1=5,5 Гц, 2Н).

Часть полученного маслообразного вещества (3,8 г, 16 ммоль) и сульфамида (3,1 г, 32,4 ммоль) нагревали с дефлегмацией в диоксане (100 мл) в течение 2 ч и полученный в результате неочищенный продукт очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (ДХМ:МеОН - 20:1) с получением в виде белого твердого вещества указанного в заголовке соединения, которое затем перекристаллизовывали из этилацетата/гексана, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого кристаллического вещества.

М8 [М-Н]^- 311,0.

Т.пл.: 119-121°С.

[α]η=-53,4° (с=1,17, М).

¹Н ЯМР (ДМСО-б₆) δ: 7,22 (с, 1Н), 7,20 (с, 1Н), 6,91 (широкий с, 1Н), 6,68 (широкий с, 2Н), 4,35 (м, 2Н), 4,05 (дд, 1=6,5, 11,5 Гц, 1Н), 3,15 (м, 2Н).

Элементный анализ:

Полученный: С, 34,52; Н, 3,22; Ν, 8,95; С1, 22,64; 8, 10,24.

Расчетный: С, 34,64; Н, 2,68; Ν, 8,87; С1, 22,94; 8, 10,35.

Пример 12 (28)-(-)-№(7-Метил-2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)сульфамид (соединение № 19)

О \\ /ΝΗ₂

Указанное в заголовке соединение получали согласно методике, описанной в примере 4 выше, с использованием в качестве исходного соединения 4-метилкатехина, с получением белого твердого вещества, которое перекристаллизовывали из этилацетата/гексана, с получением в виде белого твердого вещества указанного в заголовке соединения.

М8 [М-Н]^- 257.

¹Н ЯМР (СЭС1э) δ: 6,76 (м, 1Н), 6,66 (м, 2Н), 4,80 (м, 1Н), 4,57 (широкий с, 1Н), 4,40 (м, 1Н), 4,28 (м, 1Н), 4,03 (дд, 1=6,9, 11,4 Гц, 1Н), 3,45 (м, 2Н), 2,25 (с, 3Н).

Элементный анализ:

Расчетный: С, 46,50; Н, 5,46; Ν, 10,85; 8, 12,41.

Полученный: С, 46,65; Н, 5,60; Ν, 10,84; 8, 12,61.

Пример 13. Формалиновое испытание на мышах (ΝΙΝΏ8).

Формалиновый тест на мышах представляет собой модель острых и хронических заболеваний, предназначенную для оценки способности тестируемого соединения к снятию боли.

В формалиновом тесте на мышах 0,5%-ный формалин вводили п/к в подошвенную область задней лапки взрослых самцов мыши с целью вызвать болевой ответ, опосредованный воспалением. Боль выражалась в вылизывании области введения в бимодальном режиме - острой и хронической фазе. Острая фаза проявлялась немедленно и длилась приблизительно 20 мин после инъекции, выражаясь в прямом возбуждении нервных волокон. Вылизывание возобновлялось приблизительно через 10 мин (~20 мин после инъекции), длилось 10-15 мин и представляло собой хроническую фазу, которая в соответствии с выдвигаемой гипотезой вызвана высвобождением медиаторов воспаления, таких как цитокины.

Активность в острой фазе формалинового теста является индикатором острой боли, которая, как полагают, связана с периферическими нервными путями. Активность в хронической фазе формалинового теста показательна для централизации и повышения чувствительности к боли в высших нервных путях и, как было показано, хорошо коррелирует с эффективностью в модели хронического спазма Беннет

- 20 016302 та, которая является моделью невропатической боли, и клинической эффективностью для хронической невропатической боли (У188ет8 и др., 2003).

Соединение № 8 оценивали в формалиновом тесте на мышах, как описано выше. Соединение № 8 вводили в дозировке 110 мг/кг, в/б за 15 мин до инъекции формалина, что, как наблюдали, значительно уменьшало ответы в острой и хронической фазах. Для острой фазы уменьшение составило 52% от контроля (р<0,01), тогда как для хронической фазы уменьшение составило 43% от контроля (р<0,01). Соединение № 8, введенное в дозировке 60 мг/кг в/б, показывало подобную анальгетическую активность с 30%-ным уменьшением от контроля (р<0,05) для острой фазы и 40%-ным уменьшением от контроля (р<0,01) для хронической фазы.

Таким образом, в данном испытании соединение № 8 показало анальгетическую активность, связанную в особенности с острой и хронической воспалительной болью.

Пример 14. Крысиная модель невропатической боли Чанга.

Крысиная модель Чанга представляет собой испытание, используемое при определении, можно ли применять соединение для снятия невропатической боли (К1т апб Сйипд, 1994; Сйар1ап е! а1., 1994).

В данном исследовании самцов крысы линии Спраг-Доули (145-165 г; Наг1аи) анестезировали, после чего нерв Ь₅ удалили и лигировали шелковым материалом, что привело к механической аллодинии. Через 6 недель после лигирования крысам быстро вводили носитель (0,5% водный раствор метилцеллюлозы) или соединение № 8 в дозировке 120 и 240 мг/кг п/о. Механическую (тактильную) аллодинию оценивали количественно, регистрируя давление, при котором затронутая лапка отдергивалась от градуируемого стимула (иглы фон Фрея) через 30 мин, 1, 2, 4, 6, 8 и 24 ч после введения. Результаты стандартизировали и представили в % от МРЕ (максимального защитного эффекта) препарата.

Введение соединения № 8 в дозировке 120 мг/кг п/о привело к 42%-ному увеличению % МРЕ по сравнению с контрольными животными. Эффективность наблюдалась при 30 мин, достигала максимума при 1 ч и поддерживалась в течение 4 ч после введения. Введение соединения № 8 в дозировке 240 мг/кг п/о привело к 66%-ному увеличению % МРЕ по сравнению с контрольными животными. Эффективность наблюдалась при 30 мин, достигала максимума при 2-4 ч и поддерживалась в течение 24 ч после введения. (При введении крысам носителя никакого эффекта не наблюдали.)

Следует отметить, что в данном испытании в качестве положительного контроля использовали габапентин в дозировке 480 мг/кг п/о. Эффект габапентина соответствовал активности, определенной для соединения № 8 в дозировке 240 мг/кг.

Таким образом, в данном испытании соединение № 8 показало анальгетическую активность, связанную в особенности с хронической воспалительной и/или невропатической болью.

Примеры. 15-18. Модель (Чанга) невропатической боли с лигированием люмбально-спинального нерва 5 (Ь₅).

Крысиная модель Чанга представляет собой испытание, используемое при определении, можно ли применять соединение для снятия невропатической боли (К1т апб Сйипд, 1994; Сйар1ап е! а1., 1994). В данном испытании повреждение седалищного нерва нетугой лигатурой хромированной кетгутовой нитью, тугой лигатурой спинального нерва Ь₅ шелковой нитью или частично тугой лигатурой шелковой нитью вызывает гиперчувствительность ко многим способам стимуляции (например, к прикосновению, давлению, температуре), которая длится в течение многих недель или месяцев. Гиперчувствительность, вызванная указанными повреждениями, напоминает аллодинию и гиперальгезию, наблюдаемую в клинических состояниях невропатической боли, вызванной механическим повреждением нервов, диабетом и химиотерапией. Данное испытание прогнозирует анальгетический, противоаллодийный и/или противогиперальгезивный эффект тестируемых соединений.

Тестируемое соединение и контрольные соединения были растворены в подходящем объеме 0,5%-ного раствора ГПМЦ или 10%-ного раствора солютола в 0,5%-ном растворе гидроксипропилметилцеллюлозы (ГПМЦ). ГПМЦ служила носителем при получении растворов габапентина, используемых в качестве положительного контроля. Были приготовлены растворы, обеспечивающие конечную дозу в объеме 2,5 или 5 мл/кг п/о для крыс. Самцы крысы линии Спраг-Доули от Наг1ап 1пби51пе5 (1пб1апаро118, ΙΝ) весом 150-250 г на момент операции использовались в Ь₅ 8ΝΕ исследованиях.

Все животные имели недельный период карантина/акклиматизации перед помещением в общую комнату. Крыс в 8ΝΕ исследованиях содержали и тестировали в одной и той же комнате. Животных содержали в клетках-микроизоляторах группами по 4 крысы в клетке или по 5 мышей в клетке с подстилкой из сердцевин кукурузных початков и свободным доступом к пище и воде. Окружающая среда выдерживалась при постоянной температуре 21°С, с 12-часовым циклом дня и ночи. Крысы, подвергающиеся Ь₅ 8ΝΕ операции, были размещены в индивидуальные клетки с подстилкой альфа драй и имели доступ к богатой пище, пищевым гранулам и воде без ограничения. Животным позволяли восстановиться в течение 4-6 недель после операции перед тестированием и не тестировали по прошествии восьми недель после операции. Для Ь₅ 8ΝΕ испытания только те животные, которые отвечали на воздействие меньше 4 грамм-сил, были включены в дальнейшее испытание и анализ и случайно распределены на опытные группы в день исследования. Во всех тестах исследователь, выполняющий анализ поведения, не был осведомлен об обработке, которую проводили в отношении каждого отдельного животного.

- 21 016302

Для Ь₅ 8ΝΣ операции крыс анестезировали и поддерживали анестезию ингаляцией изофлураном. Разрез кожи на 2 см был сделан слегка левее средней линии верхней части спинных долей Ь₄-8₂, с последующим отделением параспинных мышц от остистых отростков. Затем был тщательно удален поперечный отросток Ь₆, после чего был идентифицирован спинной нерв Ь₅. Затем левый спинной нерв Ь₅ был туго лигирован шелковыми нитками 6-0, мускул был сшит викрилом 4-0, а кожа была закрыта хирургическими скобками.

Исследование поведения было выполнено на крысах Ε₅8ΝΣ между 3-6 неделями после лигирования. В день исследования, следуя базовому значению тестов фон Фрея с целью проверки присутствия механической аллодинии, крысам Ε₅8ΝΕ перорально вводили дозу носителя, соединения № 8 или габапентина (в качестве положительного контроля). Тактильную аллодинию оценивали количественно при 30 мин, 1, 2, 4, 6, 8 и/или 24 ч после введения, регистрируя силу, при которой лапка, расположенная на той же стороне, что и лигатура нерва, отдергивалась при прикладывании ряда калиброванных игл фон Фрея (0,4, 0,7, 1,2, 2,0, 3,6, 5,5, 8,5 и 15,1 г; 8!оеШид; \Уооб Эа1е, 1Ь). Начиная со средней жесткости (2,0 г), иглы прикладывали к середине подошвы задней лапки в течение приблизительно 5 с. Резкое отдергивание лапки вело к приложению следующего более легкого стимула, а слабый ответ отдергивания приводил к приложению следующего более сильного стимула в целях определения порога чувствительности. В общей сложности после определения первого порога было получено четыре ответа. Значения 50%-ных порогов отдергивания были интерполированы методом Диксона (как описано в Меей Т.Е. апб Уеттеиъсй, Н.А., Рйаттасо1. Вюсйет. Вейау.; 2005, 80(2), р. 309-326), а когда пороги ответа поднимались или опускались соответственно выше или ниже диапазона обнаружения, приписывались соответствующие значения 15,0 или 0,25 г.

Пороговые данные тестов с иглами фон Фрея выражали как порог отдергивания в граммах или преобразовывали в проценты максимального возможного эффекта (%МРЕ) согласно формуле % МРЕ=[(порог после введения препарата)-(базовый порог)]/[(15 г отбрасываемое значение)-(базовый порог)] х 100.

Эффективное количество, вызывающее 50%-ный эффект (ΕΌ₅₀), и соответствующая статистика были получены с использованием программы РйаттТоок Р1и§ (Тйе МсСагу Сгоир). Статистические данные (двухфакторный дисперсионный анализ) для теста с уксусной кислотой были получены с использованием Сгарй Раб Ргйш ν4.0. Данные исследований в зависимости от времени в 8ΝΕ модели невропатической боли были проанализированы анализом дисперсии внутри выборки, повторными измерениями, однофакторным дисперсионным анализом. Существенные основные эффекты (р<0,05) были дополнительно проанализированы с использованием критерия множественного сравнения Даннетта. Данные представлены ниже как среднее значение +/-Ср.откл. Был проведен ряд исследований, соответствующие результаты подробно описаны ниже.

Пример 15. Исследование А.

В первом исследовании соединение № 8 оценивали при дозировке 120 и 240 мг/кг и сравнивали с габапентином при дозировке 480 мг/кг и носителем.

У крыс, которых не оперировали, средние пороги отдергивания были больше 13 г. Спустя 6 недель после операции, пороги отдергивания составляли от 1,0 до 1,6 г. Носитель не изменял пороги отдергивания за четырехчасовой период исследования.

Дозировка габапентина 480 мг/кг значительно повышает пороги при 1, 2 и 4 ч после введения (73,2±14,7 и 73,7±16,6% изменения при 2 и 4 ч соответственно). Эффект от введения дозы соединения № 8 при дозировке 120 мг/кг был немного ниже, чем эффект, наблюдаемый с габапентином, но значительно отличался от базового (время '0') при 1 ч (42,2±13,8% изменения) и 4 ч (45,4±12,2% изменения) после перорального введения. Введение соединения № 8 при дозировке 240 мг/кг вызывало эффект (65,6±21,1% изменения при 4 ч), подобный эффекту, наблюдаемому с габапентином (73,4±15,2 при 4 ч). Таким образом, и габапентин и соединение № 8 значительно повышали пороги отдергивания при 2, 4 и 6 ч после перорального введения. Эффекты снижались при 8 ч и были подобны значениям, полученным через 24 ч после введения носителя.

Пример 16. Исследование В.

Во втором исследовании ежедневно вводимая доза соединения № 8 в течение 7 дней была оценена в целях определения, изменит ли субхроническая дозировка пороги отдергивания. Через три недели после операции была оценена базовая тактильная гиперчувствительность. Крысы были случайно распределены на 5 групп и получали носитель (ГПМЦ) и 60, 120, 240 или 480 мг/кг соединения № 8. Пороги отдергивания были оценены при 1, 2, 4, 8 и 24 ч после введения в день 1 (начальная доза), день 3 (третья доза) и день 7 (седьмая доза).

После первого введения соединения № 8 в дозировке 480 мг/кг было вызвано существенное изменение тактильной гиперчувствительности с пиковым эффектом, наблюдаемым через 4 ч после введения (64,3±9,9% изменения). В других опытных группах при указанном значении времени не наблюдали каких-либо существенных различий, хотя были статистически несущественные тенденции для более низких доз соединения № 8 для изменения тактильной гиперчувствительности. В 3 и 7 день введения ни одна из опытных групп не показала существенного изменения тактильной гиперчувствительности.

- 22 016302

Пример 17. Исследование С.

В третьем исследовании соединение № 8 вводили в дозировке 100, 300 и 560 мг/кг п/о, габапентин вводили в качестве положительного контроля в дозировке 560 мг/кг, после чего механическая аллодиния оценивалась при 2, 4 и 6 ч после ведения, в течение 4 недель после операции.

В данном исследовании п/о введение соединения № 8 в дозировке 100, 300 или 560 мг/кг не вызывало статистически существенного эффекта до 6 ч. Введение габапентина в дозировке 560 мг/кг (положительный контроль) привело к наблюдаемому уменьшению механической аллодинии через 2 и 4 ч после введения (58,7 и 86,4% изменения соответственно) относительно базового уровня, но не через 6 ч после введения. (Следует отметить, что указанное поведение габапентина, по всей видимости, не совместимо с ожидаемым поведением габапентина в модели Чанга.)

Пример 18. Исследование Ό.

В четвертом исследовании оценивали эффект соединения № 8 в дозировке 560 мг/кг с применением 10% солютола в растворе ГПМЦ. В качестве положительного контроля вводили габапентин в дозировке 560 мг/кг, после чего оценивали механическую аллодинию в выбранных значениях времени вплоть до 6 ч после введения.

Через 4 недели после операции носитель (10%-ный солютол в ГПМЦ) соединение № 8 в дозировке 560 мг/кг или габапентин в дозировке 560 мг/кг перорально вводили крысам. В данном исследовании носитель вызывал статистически существенное повышение тактильной гиперчувствительности по сравнению с базовым уровнем в течение исследования, тогда как габапентин вызывал статистически существенное снижение (55%-ное изменение) тактильной гиперчувствительности в интервале между 2 и 6 ч после введения. Для крыс, которым вводили дозу соединения № 8, наблюдалась статистически несущественная тенденция к уменьшению гиперчувствительности в интервале между 4 и 6 ч после введения. Более конкретно, п/о введение соединения № 8 в дозировке 560 мг/кг вызывало снижение механической аллодинии через 4 и 6 ч после введения, но при р 0,054.

Следует отметить, что эффект положительного контроля был переменным в каждом из вышеописанных исследований в модели Чанга. Поэтому эффект соединения № 8 следует интерпретировать с учетом ответа положительного контроля каждого приведенного исследования.

Пример 19. Модель Таксол®-индуцированной периферической невропатии.

Периферические невропатии представляет собой хронические заболевания, которые возникают, когда нервы повреждены в результате травмы, болезни, нарушения метаболизма или некоторыми лекарственными средствами и токсинами. Сенсорные нарушения, связанные с химиотерапевтическими агентами, такими как паклитаксел (Таксол®), варьируют от умеренного покалывания до спонтанного жжения, обычно в руках и ногах. В процессе терапии симптомы становятся более интенсивными и могут привести к слабости, атаксии, онемению и боли, которые могут длиться недели или месяцы.

В предварительном исследовании соединение № 8 оценивали на его способность к снижению Таксол®-индуцированной механической аллодинии и нейродегенерации седалищного нерва (Ро1отапо, КС., Маппск, А.1., С1агк, И.8., ВсппсИ. С.1. А рашМ рсг1рПсга1 псигораФу ίη 1Пс та! ргобиссб Ьу 111с сЬстоШсгарсибс бгид, рас1йахс1. Рат, 94: 293-304, 2001; Иайсга, 8.1.Ь., Х1ао, ЭД'.-Н., Всппсй, С.1. АссМ-Ь-сатЬтс ргсгспЬ апб гсбисск рас1йахс1-тбиссб раш!и1 рспрЬсга1 псигораНу. №иго8с1 Ьсй. 397:219-223, 2006). Кроме того, были оценены эффекты соединения на спонтанную двигательную активность.

Методика.

Самцы крысы линии Спраг-Доули (полученные от Наг1ап 8ргадис ОаМсу, 1пс, возрастом 7 недель) были разделены на две опытные группы (п=10/группу): первой группе вводили Таксол® в дозировке 2 мг/кг, в/б+носитель 0,5% ГПМЦ (гидроксипропилметилцеллюлоза), п/о; второй группе вводили Таксол® в дозировке 2 мг/кг, в/б+соединение № 8 в дозировке 100 мг/кг (в носителе ГПМЦ), п/о. Животные содержались в клетках из поликарбоната, 2 животных на клетку, при температуре 18-26°С, влажности 30-70%, 12-часовом цикле дня и ночи, с пищей и водой, доступными без ограничения.

В дни 1, 3, 5 и 7 крысы получили в/б (внутрибрюшинную) инъекцию Таксола® (2 мг/кг). Кроме того, животные ежедневно получали п/о (перорально) дозы соединения № 8 или носителя в течение 12 дней, начиная с первого дня инъекций Таксола®.

Были выполнены два поведенческих теста: измерение тактильной чувствительности и спонтанной двигательной активности. Перед инъекцией и в дни 5 и 12 после инъекции Таксола® животные подверглись тесту фон Фрея на механическую аллодинию (согласно процедуре, описанной в СЬар1ап, 8.К, ВасЬ, Р.^., Родгс1, 1.А., СЬипд, 1.М., УаккЬ, Т.Ь. ОиапШайус аккскктсШ о! 1асЫс а11обуша ш !Ьс га! ра\\'. 1. №иго8с1 Мс!Ь, 53:55-63, 1994). Тактильная чувствительность (т.е. механическая аллодиния) была измерена с использованием калиброванных игл, прикладываемых к поверхности подошвы затронутой конечности с целью определения порога отдергивания лапки. Схематически, крыс поместили в клетку из плексигласа с дном из проволочной сетки и позволили акклиматизироваться в течение 10 мин. Как только животные успокоились, до подошвенной поверхности правой задней лапки дотронулись 2,0 г иглой фон Фрея. В отсутствии отдергивания лапки при использовании первоначально выбранной иглы был подобран более сильный стимул; в случае отдергивания лапы был выбран следующий более слабый стимул.

- 23 016302

Таким способом полученная выборка положительных и отрицательных ответов использовалась для определения порога отдергивания лапки. Данные были проанализированы с использованием двухфакторного дисперсионного анализа, однофакторного дисперсионного анализа и теста Даннетта, со статистической значимостью при р<0,05.

В день 11 после начала инъекции Таксола® животные подверглись испытанию в открытом поле с целью измерения уровней моторной активности. Предыдущие исследования показали, что введение Таксола® может привести к снижению спонтанной двигательной активности (оцениваемой, например, по числу пересечений луча) (Ра§сиа1, Ό., ОокоесЬеа, С., ЗиагШах. М., Магйп, М.1. А саппаЬшо1б адошй, νΐΝ 55, 212-2, гебисек пеигора1Ыс посюерйоп тбисеб Ьу рас111ахе1 ίη гаК Раш. 118: 23-34, 2005). Тест в открытом поле был выполнен путем помещения животного в открытые камеры 17х17 (43,2x43,2 см), которые включали полосы инфракрасного света, размещенные по стенкам камеры. Световые полосы пропускают пучки инфракрасного света таким образом, чтобы горизонтальное (двигательное) и вертикальное (подъем на задние лапки) движения животного автоматически регистрировались каждые 100 мс в результате прерывания луча. В данном исследовании уровни двигательной активности животного регистрировались каждые 20 мин в целях оценки спонтанной активности в новой окружающей среде. Данные были проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа и теста Даннетта, со статистической значимостью при р<0,05.

В день 13 животных умертвили асфиксией в углекислом газе. Седалищный нерв и правую заднюю лапку удалили и поместили в 10%-ный нейтральный буферный формалин. Взятые ткани зафиксировали, поместили в парафин, сделали срез и окрасили гематоксилином и эозином. Ткань исследовали с использованием оптической микроскопии, причем оценку производил специалист, неосведомленный о режиме обработки. Ткань оценивали по шкале от 0 до 3 на основании степени и количества аксональных разрывов, наблюдаемых на срезе, где 0 соответствовал нормальным аксонам, 1-2 соответствовали умеренному разрушению аксонов и 3 соответствовал полному разрушению и уоллеровской дегенерации аксонов (Сауа1еШ, 6., Тгебюц 6., Вгада, М., Таххагг 8. Ехрептеп1а1 репрйега1 пеигораШу тбисеб т аби11 гак Ьу гереа!еб т!гареп1опеа1 абттМгайоп о! Тахо1®. Ехрег №ига1. 133:64-72, 1995). Данные были проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа и теста Даннетта, со статистической значимостью при р<0,05.

Результаты.

Механическая аллодиния была оценена перед введением (базовый уровень) и в день 5 и день 12 после введения Таксола®. Какого-либо существенного различия между группами при базовом уровне или в день 5 не наблюдали; однако в день 12 и группа, которой вводили один Таксол® (р<0,05), и группа, которой вводили Таксол®+соединение № 8 в дозировке 100 мг/кг (р<0,001), были более чувствительными к боли по сравнению с их ответами на базовом уровне. Соединение № 8, по-видимому, потенциировало болевой ответ по сравнению с одним Таксолом®, однако указанное различие не было статистически значимым.

Спонтанная двигательная активность была протестирована в день 11 после начала введения Таксола®. Какого-либо существенного различия между опытными группами в горизонтальном движении не наблюдали; однако группа, которой вводили Таксол®+соединение № 8 (р<0,05), показывала снижение подъема животных на задние лапки по сравнению с одним Таксолом®.

Была выполнена оценка гистопатологических срезов правой задней лапки и седалищного нерва. Соединение № 8 не оказывало какого-либо эффекта на тяжесть Таксол®-индуцированной дегенерации в правой задней лапке, однако наблюдалась положительная тенденция к уменьшению дегенерации седалищного нерва, хотя различия не были статистически значимыми.

Обсуждение.

В целях оценки эффективности воздействия соединения № 8 на боль, изменения движения и повреждения нервов, которое может произойти в результате Таксол®-индуцированной периферической невропатии, было выполнено предварительное исследование. Как правило, крыс, которым вводили Таксол®, оценивали через несколько недель после инъекции, так как в результате механическая аллодиния развивается приблизительно между 12-21 днем после введения Таксола®. В настоящем исследовании эффективность соединения была оценена в дни 5 и 12 после введения Таксола®, т.е. продолжительность исследования была меньше, чем у ранее описанных исследований; однако отмечено, что существенная аллодиния могла развиваться в пределах указанного периода.

Результаты предполагают, что в день 12 механическая аллодиния развилась в результате введения Таксола, хотя величина эффекта не была статистически надежной (базовый уровень: 16,42±2,14 г, день 12: 12,11±4,92 г). Тем не менее, соединение № 8 было неэффективно в предотвращении аллодинии на тот же момент времени. Приведенный результат рассматривается как неокончательный. Увеличение продолжительности исследования, возможно, показало бы более явный эффект Таксола® и защитный эффект соединения № 8. Кроме того, отмечено, что положительный контроль не был включен в исследование.

- 24 016302

Оценка поведения в открытом поле показала, что крысы, которым ввели соединение № 8, показали уменьшение подъема на задние лапки по сравнению с одним Таксолом®, показывая более низкий уровень спонтанного вертикального исследования. Однако так как уровни горизонтальной активности не отличались при введении соединения № 8 от уровней горизонтальной активности в группе, которой вводили один Таксол®, то боль или седативный эффект являются маловероятными причинами для уменьшения подъема на задние лапки. Гистопатологический анализ показал тенденцию к снижению повреждения седалищного нерва при введении соединения № 8, однако указанное снижение не было статистически значимым.

В своей совокупности приведенное предварительное исследование предполагает, что соединение № 8 может оказывать благоприятные воздействия на Таксол®-индуцированную периферическую невропатию у крыс. Предложенные последующие исследования могли бы включать более длительный период испытания после введения Таксола® (например, приблизительно с 6-недельной продолжительностью), а также серии уровней дозировки (например, кривая зависимости эффекта от дозы) для соединения № 8.

Пример 20. Модель Таксол®-индуцированной периферической невропатии.

Периферические невропатии представляют собой хронические заболевания, которые возникают, когда нервы повреждены в результате травмы, болезни, нарушения метаболизма или некоторыми лекарственными средствами и токсинами. Сенсорные нарушения, связанные с химиотерапевтическими агентами, такими как паклитаксел (Таксол®), варьируют от умеренного покалывания до спонтанного жжения, обычно в руках и ногах. В процессе терапии симптомы становятся более интенсивными и могут привести к слабости, атаксии, онемению и боли, которые могут длиться недели или месяцы.

Данное второе, более длительное исследование с использованием модели Таксол®-индуцированной периферической невропатии было выполнено как продолжение предварительного исследования, описанного в примере 19 выше.

Методика.

Паклитаксел (Таксол®, Вп51о1-Мусг5-8с.|шЬЬ; 6 мг/мл в смеси 50:50 Кремофора и этанола) был разбавлен непосредственно перед прменением физиологическим раствором до концентрации 2 мг/мл и введен в/б в объеме 1 мл/кг в четыре последовательных дня (Ό0, Ό2, Ό4 и Ό6). Соединение № 8 было суспендировано в растворе 0,1н. НС1:0,5% метилцеллюлозы (1:9) непосредственно перед каждой инъекцией в концентрациях 60 и 120 мг/мл.

Взрослых самцов крысы линии Спраг-Доули (Наг1ап, 1ий1аиаро118, ΙΝ; Егсйспек. питомник по разведению лабораторных животных медицинского департамента) содержали в клетке на подстилке из опилок в группах по 3-4, с пищей и водой без ограничения и 12:12-часовым циклом дня и ночи.

Было сформировано три группы животных, которым вводили паклитаксел, в каждой группе и=12: группе 1 вводили соединение № 8 в дозировке 60 мг/кг, п/о (перорально через зонд), ежедневно в течение 20 дней, начиная в Ό0 (в тот же день, в который начали вводить паклитаксел). В те дни, когда было нужно вводить и соединение № 8, и паклитаксел, соединение № 8 давали в 9⁰⁰, а паклитаксел в 13⁰⁰. Группе 2 вводили соединение № 8 в дозировке 120 мг/кг, п/о (перорально через зонд), ежедневно, начиная в Ό0 (в тот же день, в который начали вводить паклитаксел). В те дни, когда было нужно вводить и соединение № 8, и паклитаксел, соединение № 8 давали в 9⁰⁰, а паклитаксел в 13⁰⁰. Группе 3 вводили эквивалентный объем носителя, ежедневно, начиная в Ό0 (в тот же день, в который начали вводить паклитаксел).

Животные были приучены к среде проведения испытаний в течение трех отдельных дней, а затем провели три ежедневные базовые сессии для измерения уровня нормального ответа на воздействие иглами фон Фрея, оказывающими давление 4 или 15 г (4 г УРН и 15 г УРН). Нормальные крысы редко, если вообще когда-либо, отдергивают лапку при воздействии 4 г УРН, таким образом, повышение ответа на данный стимул после введения паклитаксела указывает на развитие механической аллодинии. Нормальные крысы отдергивают лапку при воздействии 15 г УРН в 10-20% случаев; таким образом, повышение частоты ответов на данный стимул указывает на развитие механической гиперальгезии.

Животные были помещены под перевернутые пластмассовые клетки для мышей, расположенные наверху поднятой платформы с настилом из проволочной сетки. Каждая УРН был приложена к гладкой коже середины подошвы лапки, при этом регистрировали наличие или отсутствие отдергивания. Данную процедуру повторили 5 раз на каждой задней лапке, при этом ответы животного были суммированы и выражены в процентах (например, 5 положительных ответов с отдергиванием на воздействие 15 г УРН приводило бы к оценке 50%). Поведение оценивалось наблюдателем, который не был осведомлен относительно номера группы.

Поведенческие тесты эффектов паклитаксела начали в день 13 (013) и повторили в Ό15, Ό17, Ό21, Ό24, Ό28, Ό31, Ό35 и Ό38. Тесты в дни 13-17 проводились в течение 20-дневного периода введения соединения № 8. В течение указанного периода препарат давали в 9⁰⁰, а поведенческие тесты начали в 13⁰⁰. Как ожидали, существенная паклитаксел-индуцированная механическая аллодиния и механическая гиперальгезия разовьются через 10-14 дней после последней инъекции паклитаксела.

- 25 016302

Результаты.

Как ожидалось, у получавших инъекции носителя крыс, которым вводили паклитаксел, развивалась механическая аллодиния (тест с 4 г УРН) и механическая гиперальгезия (тест с 15 г УРН).

Дозы 120 и 60 мг/кг соединения № 8 подавляли развитие механической аллодинии и механической гиперальгезии. Эффект подавления был очевиден в начале болевого синдрома и продолжался в течение приблизительно 11 дней после последней инъекции соединения № 8, после чего аллодиния и гиперальгезия возвратились. Между двумя опытными группами не было никаких существенных различий. Введение соединения № 8 не вызывало никаких явных побочных эффектов. Блокада механической аллодинии, по-видимому, превосходила блокаду механической гиперальгезии.

Пример 21. Модель висцеральной боли на основе абдоминального спазма, индуцированного уксусной кислотой.

Цель данного испытания состояла в том, чтобы определить, изменяет ли соединение № 8 гиперчувствительность в моделях висцеральной, воспалительной и невропатической боли.

Тестируемое соединение и контрольные соединения растворяли в подходящем объеме 0,5%-ного раствора ГПМЦ или 10%-ного солютола в 0,5%-ном растворе гидроксипропилметилцеллюлозы (ГПМЦ). ГПМЦ служила носителем для приготовления растворов габапентина, используемых в качестве положительного контроля. Растворы были приготовлены таким образом, чтобы обеспечивать конечную дозу в объеме 10 мл/кг при пероральном введении (п/о) мышам. Для исследований вызванных уксусной кислотой абдоминальных спазмов использовались самцы мыши линии СО-1 от СЬаг1е8 РУсге ЬаЬога!опе8 (Ройаде, МЕ) весом от 25 до 30 г при исследовании.

Всех животных подвергли недельному периоду карантина/акклиматизации перед переносом в общую комнату. Мышам в исследовании абдоминальных спазмов, вызванных уксусной кислотой, перед началом исследования позволили привыкнуть к комнате для испытаний в течение 1 ч. Животные содержались в клетках-микроизоляторах в группах по четыре крысы на клетку или 5 мышей на клетку с подстилкой из сердцевин кукурузных початков и доступом к пище и воде без ограничения. Окружающую среду поддерживали при постоянной температуре 21°С, с 12-часовым циклом дня и ночи.

Животные, используемые в тесте абдоминальных спазмов, вызванных уксусной кислотой, в течение периода исследования содержались с постоянными партнерами по клетке (4 крысы на клетку, 5 мышей на клетку; использовались клетки №11депе® с подстилкой из сердцевин кукурузных початков). Животные из нескольких клеток были случайным образом распределены в опытные группы; т.е. мыши в данной клетке были псевдослучайно распределены в различные опытные группы. Во всех тестах исследователь, выполняющий поведенческий анализ, не был осведомлен об обработке, которую проводили в отношении каждого конкретного животного.

В день исследования мышам перорально ввели либо носитель (Метоцел или 10%-ный Солютол:Метоцел), либо 560 мг/кг соединения № 8, либо 560 мг/кг габапентина в качестве положительного контроля. Затем мышам в/б ввели инъекцию 0,5 мл (2x0,25 мл на абдоминальный квадрат) 0,6%-ной уксусной кислоты с последующим введением через 1, 2, 3 или 4 ч носителя, соединения или положительного контроля. Через 5 мин после в/б инъекции уксусной кислоты 5 животных поместили под отдельные стеклянные колпаки, содержащие в качестве подстилки небольшое количество стружек, после чего в течение 5 мин регистрировали число абдоминальных спазмов у каждого животного. Описанную процедуру повторили для каждой группы (N=10 мышам на группу).

Эффективную дозу, вызывающую 50%-ный эффект (ΕΌ₅₀), и соответствующую статистику вычислили с использованием программы РйагшТоок Р1и§ (ТНе МсСагу Сгоир). Статистические данные (двухфакторный дисперсионный анализ) для испытания уксусной кислотой были получены с использованием СгарР Раб Ргып ν4.0. Данные от модели висцеральной боли, вызванной уксусной кислотой, были проанализированы двухфакторным дисперсионным анализом (ΑΝΟνΑ). Существенные основные эффекты (р<0,05) были дополнительно проанализированы с использованием критерия множественного сравнения Даннетта. Данные представлены ниже как среднее значение+стандартное среднеквадратичное отклонение (Ср. откл.).

Соединение № 8 было оценено в модели висцерально-химической боли, индуцированной уксусной кислотой. У мышей, которым вводили носитель, среднее число абдоминальных спазмов составляло от 13 до 16,2 среди четырех взятых групп. Хотя габапентин вызывал тенденцию к снижению числа спазмов в 2 ч (11,00±1,5 спазма) и 3 ч (10,0±1,6 спазма) после перорального введения, указанный эффект не являлся статистически значимым. По сравнению с мышами, которым ввели носитель или габапентин, введение соединения № 8 в дозировке 560 мг/кг существенно не влияло на картину спазмов, вызванных уксусной кислотой.

Соединение № 8 не влияло на картину абдоминальных спазмов, вызванных в/б инъекцией уксусной кислоты. Точно так же габапентин существенно не уменьшал спазмы, вызванные уксусной кислотой. Приведенные результаты позволяют предположить, что данное испытание может быть нечувствительным к анальгезирующим эффектам указанных противосудорожных средств.

- 26 016302

Пример 22. Модель воспалительной боли, индуцированной полным адъювантом Фрейнда (СЕЛ).

Внутриподошвенная инъекция СЕА приводит у крыс к длительной воспалительной реакции, которая характеризуется отеком и явной гиперчувствительностью к тепловым и механическим воздействиям. Гиперчувствительность достигает максимума между 24-72 ч после инъекции и может длиться в течение нескольких недель. Данное испытание позволяет прогнозировать анальгезирующий, противоаллодийный и/или противогиперальгезивный эффект тестируемых соединений.

Тестируемое соединение и контрольные соединения растворяли в подходящем объеме 0,5%-ного раствора ГПМЦ или 10% солютола в 0,5%-ном растворе гидроксипропилметилцеллюлозы (ГПМЦ). Растворы были приготовлены таким образом, чтобы обеспечивать конечную дозу в объеме 2,5 или 5 мл/кг при п/о введении крысам. Для исследований температуры лапки после введения СЕА посредством регистрации теплового излучения использовались самцы крысы линии Спраг-Доули от СИаг1ек РАегк ЬаЬогаЮпек (Ройаде, МЕ) весом от 250 до 350 г при исследовании.

Всех животных подвергли недельному периоду карантина/акклиматизации перед переносом в общую комнату. Крысы в СЕА-исследовании были перемещены в комнату для испытания в день инъекции СЕА, где они оставались на время исследования. Животные содержались в клетках-микроизоляторах группами по 4 крысы на клетку или 5 мышей на клетку с подстилкой из сердцевин кукурузных початков и доступом к пище и воде без ограничения. Окружающую среду поддерживали при постоянной температуре 21°С, с 12-часовым циклом дня и ночи.

Животных, используемых в тестах СЕА-РН (крысы), в течение периода исследования содержали с постоянными партнерами по клетке (4 крысы на клетку, 5 мышей на клетку; использовались клетки Ыа1депе® с подстилкой из сердцевин кукурузных початков). Животные из нескольких клеток были случайным образом распределены в опытные группы; т. е. грызуны в данной клетке были псевдослучайно распределены в различные опытные группы. Для СЕА-испытания только те крысы, которые показали по меньшей мере 25%-ное снижение времени ответа по сравнению с базовым уровнем (т.е. гиперальгезии), были включены в дальнейшее испытание и анализ. Во всех тестах исследователь, выполняющий поведенческий анализ, не был осведомлен об обработке, которую проводили в отношении каждого конкретного животного.

В день исследования крысам ввели внутриподошвенную инъекцию 100 мкл (1 мкг/мкл) СЕА (1:1 СЕА: физраствор) в левую заднюю лапку. После инкубационного периода продолжительностью 24 ч было получено время ответа на стимулятор теплового излучения лапки (РН), которое сравнили с базовым уровнем времени (до введения СЕА). Ответ автоматически регистрировали с помощью РН-датчика, когда крыса отрывала свою лапку от поверхности стекла. После оценки времени ответа после введения СЕА крысам перорально вводили соединение № 8 (2,5 мл/кг) или носитель (ГПМЦ). Процент снижения гиперальгезии был вычислен для каждого животного как [(ответ на обработку)-(ответ после введения СЕА)]/[(ответ до введения СЕА)-(ответ после введения СЕА)] х 100.

Затем для каждой опытной группы был вычислен средний % снижения гиперальгезии (п=5-6 крыс на группу).

Эффективную дозу, вызывающую 50%-ный эффект (ΕΌ₅₀), и соответствующую статистику вычислили с использованием программы РИагтТоо1к Р1ик (ТИе МсСагу Сгоир). Статистические данные (двухфакторный дисперсионный анализ) для испытания уксусной кислотой были получены с использованием СгарИ Раб Рпкт ν4.0. Данные исследований зависимости времени в модели воспалительной СЕАиндуцированной боли были проанализированы методом дисперсии внутри выборки, повторными измерениями, однофакторным дисперсионным анализом. Существенные основные эффекты (р<0,05) были дополнительно проанализированы с использованием критерия множественного сравнения Даннетта. Данные представлены ниже как среднее значение ± Ср.откл.

Соединение № 8 было оценено в СЕА-модели воспалительной боли. У нормальных крыс среднее время отрыва лапки составляло 14,6-15,6 с. Через 24 ч после введения СЕА среднее время отрыва лапки увеличилось от 6,0 до 6,8 с, что указывает на развитие тепловой гиперчувствительности.

Пероральное введение носителя существенно не меняло время отрыва лапки. Для сравнения, перорально введенная доза габапентина (560 мг/кг) снижала тепловую гиперчувствительность с максимальным значением 68,6% (по сравнению с базовым уровнем через 24 ч после введения СЕА), наблюдаемым через 4 ч после перорального введения. Пероральное введение дозы соединения № 8 (560 мг/кг) также снижало тепловую гиперчувствительность с максимальным значением 86,0% (по сравнению с базовым уровнем через 24 ч после введения СЕА), наблюдаемым через 4 ч после перорального введения.

Соединение № 8 снижало СЕА-индуцированную тепловую гиперчувствительность в зависимости от времени, что позволяет рассчитывать, что соединение № 8 могло бы применяться для снятия воспалительной боли.

- 27 016302

Пример 23. Модель формалин-индуцированной гиперальгезии.

Взрослые самцы мыши линии СБ-1 весом 20 г были получены от Сйаг1е§ К1уег (ШИттд1оп, М.А.). Все животные содержались с 12:12 циклом дня и ночи и имели доступ к пище и воде без ограничения, за исключением тех случаев, когда их удаляли из клетки, в которой они содержались, с целью проведения экспериментальных процедур.

Соединение № 8 смешивали с небольшим объемом 0,5%-ного раствора метилцеллюлозы, обработали ультразвуком в течение 10 мин и довели до конечного объема 0,5%-ным раствором метилцеллюлозы. Соединение № 8 вводили в/б в объеме 0,01 мл/10 г массы тела подвергнутых испытанию мышам. Через 2 ч после в/б введения соединения № 8 или носителя в подошвенную область правой задней лапки была произведена инъекция 0,5%-ного формалина.

В данной модели инъекция формалина выявляет четкий двухфазовый поведенческий профиль, который характеризуется тем, что мышь вылизывает затронутую лапку. Сразу после инъекции мышь вылизывает лапку в течение приблизительно 10 мин. Это соответствует фазе 1 (острый ответ) и сопровождается кратким периодом времени ожидания, в течение которого присутствует небольшая поведенческая активность. Затем следует более длительный период вылизывания лапки, длящийся приблизительно 20-30 мин, который составляет фазу 2 (воспалительную).

Перед введением соединения № 8 в дозировке 15 мг/кг (п=8), 30 мг/кг (п=8), 200 мг/кг (п=8), 300 мг/кг (п=4) или носителя (п=8) каждая мышь подвергалась 15-минутному периоду привыкания к условиям в одной из нескольких труб из плексигласа высотой 6 («15,2 см) диаметром 4 («10,2 см), которые были помещены перед зеркалом. После периода привыкания к условиям в/б вводили соединение № 8 или носитель, после чего мышь возвращали обратно в трубу. Через 2 ч после введения в подошвенную поверхность правой задней лапки п/к ввели формалин (20 мкл, игла номер 27). Иглу приложили скосом к поверхности кожи. После инъекции формалина за каждым животным наблюдали в течение первых 2 мин каждого 5-минутного периода, в общей сложности 45 мин. Регистрировалась совокупная продолжительность вылизывания в течение каждого 2-минутного периода. Животное, получающее необходимый объем носителя, чередовали с каждой мышью, которой вводили соединение № 8. После завершения эксперимента животных умертвили.

Значения площади под кривой (АИС) были получены с помощью бгарНРай Рпзш Уегзюп 3.03. Общая АИС была вычислена и для опытной группы, и для контрольной группы как при острой, так и при воспалительной фазах. АИС отдельных животных в каждой фазе также была вычислена и преобразована в проценты от общей контрольной АИС. Были вычислены и проверены на статистическую значимость средние процентные значения и Ср.откл. как при введении соединения № 8, так и при введении носителя.

Соединение № 8 являлось эффективным против острой фазы 1 боли, связанной с инъекцией формалина. Для этого среднее эффективное количество (ΕΌ₅₀) в 95%-ном доверительном интервале (С1), вызывающая 50%-ное или большее снижение АИС согласно расчетным данным должна составлять 111 мг/кг (с диапазоном 62,0-245 мг/кг) после в/б введения.

Соединение № 8 уменьшало вторичную фазу формалин-индуцированной гиперальгезии в дозозависимом режиме. Среднее эффективное количество (ΕΌ₅₀) в 95%-ном доверительном интервале (С1), вызывающая 50%-ное или большее снижение АИС согласно расчетным данным должна составлять 101 мг/кг (с диапазоном 53,6-225 мг/кг) после в/б введения.

Результаты данного исследования показывают, что соединение № 8 обладает способностью снижать формалин-индуцированную гиперальгезию, и указывают, что позволяет рассчитывать, что соединение № 8 могло бы применяться для снятия острой и хронической воспалительной боли.

Пример 24.

Соединение № 8, полученное согласно примеру 7, смешивается с достаточно тонкоизмельченной лактозой с обеспечением конечной дозы 580-590 мг и вводится в твердые желатиновые капсулы размера О.

Несмотря на то что предыдущее описание описывает принципы настоящего изобретения, в отношении примеров, приведенных в целях пояснения, следует понимать, что практическое осуществление изобретения охватывает все обычные варианты, изменения и/или модификации, находящиеся в объеме следующей формулы и ее эквивалентов.

Claims

1. Способ снятия боли, включающий введение нуждающемуся субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) где каждый из К¹ и К² независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С1_-4алкила;

К⁴ выбран из группы, состоящей из водорода и С1_-4алкила;

а является целым числом 1 или 2;

- 28 016302

Ь является целым числом от 0 до 4; каждый К⁵ независимо выбран из группы, состоящей из галогена и С1_₄алкила; или его фармацевтически приемлемой соли.

2. Способ по π. 1, где вводят соединение формулы (I), в которой каждый из Я¹ и Я² независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С1_4алкила; Я⁴ выбран из группы, состоящей из водорода и С1_4алкила;

а является целым числом 1 или 2;

представляет собой

Ь является целым числом 1 или 2;

каждый Я⁵ независимо выбран из группы, состоящей из галогена и С1_₄алкила; или его фармацевтически приемлемую соль.

3. Способ по п.2, где вводят соединение формулы (I), в которой каждый из Я¹ и Я² независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С1_₄алкила;

Я⁴ выбран из группы, состоящей из водорода и метила;

а является целым числом 1 или 2;

С”/ выбран из группы, состоящей из

2-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила), 2-(6-хлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила), 2-(6-фторо-2,3-дигидробензо [1,4] диоксинила), 2-(5-фторо-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила), 2-(7-хлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила), 2-(6-хлорбензо[1,3]диоксолила),

2-(7-метил-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила), 2-(5-хлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила), 2-(6-бромо-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила), 2-(6,7-дихлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила) и 2-(8-хлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила);

или его фармацевтически приемлемую соль.

4. Способ по п.З, где вводят соединение формулы (I), в которой каждый из Я¹ и Я² независимо выбран из группы, состоящей из водорода и метила;

а является целым числом 1 или 2;

выбран из группы, состоящей из

2-(2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила), 2-(6-хлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила), 2-(7-хлоро-2,3-дигидробензо [ 1,4]диоксинила), 2-(7-метил-2,3 -дигидробензо [ 1,4]диоксинила), 2-(6-бромо-2,3 -дигидробензо [1,4] диоксинила) и 2-(6,7-дихлоро-2,3-дигидробензо[1,4]диоксинила); или его фармацевтически приемлемую соль.

5. Способ по п.1, где соединение формулы (I) выбрано из группы, состоящей из (2§)-(-)-М-(6-хлоро2,3-дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)сульфамида и его фармацевтически приемлемой соли.

6. Способ снятия боли, включающий введение нуждающемуся субъекту терапевтически эффективного количества соединения, выбранного из группы, состоящей из (2§)-(-)-Ν-(6-χ4ορο-2,3дигидробензо[1,4]диоксин-2-илметил)сульфамида и его фармацевтически приемлемой соли.

7. Способ по π. 1, где боль представляет собой острую боль или хроническую боль.

8. Способ по π. 1, где боль представляет собой воспалительную боль.

9. Способ по π. 1, где боль представляет собой невропатическую боль.

10. Способ по п.9, где невропатическая боль представляет собой диабетическую невропатию.

11. Способ по п.6, где боль представляет собой острую боль или хроническую боль.

12. Способ по п.6, где боль представляет собой воспалительную боль.

13. Способ по п.6, где боль представляет собой невропатическую боль.

14. Способ по и. 13, где невропатическая боль представляет собой диабетическую невропатию.

15. Способ по п.1, дополнительно включающий введение нуждающемуся субъекту обезболивающе го агента.

Евразийская патентная организация, ЕАПВ

Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2