EA004372B1

EA004372B1 - Пиразиноновые ингибиторы тромбина

Info

Publication number: EA004372B1
Application number: EA200200005A
Authority: EA
Inventors: Кристофер С. Берги; Кайл А. Робинсон; Питер Д. Уилльямс; Крэйг А. Коберн; Терри А. Лайл; Филип Э. Сандерсон
Original assignee: Мерк Энд Ко., Инк
Priority date: 1999-06-04
Filing date: 2000-06-01
Publication date: 2004-04-29
Also published as: JP4495377B2; DZ3264A1; NO20015887D0; UA58636C2; CN1353705A; HK1047277A1; EP1189899A1; IL146393A0; DE60001414D1; TR200103491T2; JP2010150275A; MXPA01012505A; ATE232527T1; CZ20014343A3; YU84301A; DE60001414T2; WO2000075134A1; HUP0202366A3; AU761982B2; ES2190417T3

Abstract

Соединения предлагаемого изобретения пригодны для ингибирования тромбина и связанных с ним тромботических окклюзий, имеют строение (I): где А представляет (II), (III) или (IV), где Yи Yнезависимо представляют водород, Салкил, Cалкокси, FHC(CH)O-, где u и v представляют либо 1, либо 2, при условии, что? когда u = 1, v = 2, и когда u = 2, v = 1, Сциклоалкил, тио Cалкил, Cсульфинилалкил, Cсульфонилалкил, галоген, циано или трифторметил, и где b = 0 или 1.

Description

Предпосылки создания изобретения

Тромбин является сериновой протеазой, присутствующей в плазме крови в форме предшественника - протромбина. Тромбин играет центральную роль в механизме коагуляции крови, превращая растворенный белок плазмы, фибриноген, в нерастворимый фибрин.

ЕсРгагсР с1 а1., I. Ашег. СНст. 8ос., (1992) νοί. 114, рр. 1854-63, описывает пептидил акетобензоксазолы, которые являются обратимыми ингибиторами сериновой протеазы эластазы лейкоцитов человека и эластазы поджелудочной железы свиньи.

В европейской публикации 363 284 раскрыты аналоги субстратов пептидазы, в которых атом азота расщепляющейся амидной группы белка субстрата был заменен водородом или замещенным карбонильным фрагментом.

В австралийской публикации 86245677 также раскрыты ингибиторы пептидазы, содержащие активированный электрофильный фрагмент кетона, такой как фторметиленкетон, или а-кетокарбоксильные производные.

В. 1. Вго\\п с1 а1., 1. Меб. СНст.. Уо1. 37, стр 1259-1261 (1994) раскрывает активные при пероральном введении, непептидные ингибиторы эластазы лейкоцитов человека, которые содержат трифторметилкетонные и пиридиноновые фрагменты.

Н. Маск с1 а1., 1. Еп/утс 1пЫЫ1юп, Уо1. 9, стр 73-86 (1995) раскрывает стойкие амидинофенилаланиновые ингибиторы тромбина, которые содержат пиридиноновый фрагмент в качестве центрального ядра структуры.

Краткое содержание изобретения

Настоящее изобретение включает составы для ингибирования потери тромбоцитов крови, ингибирования образования агрегаций тромбоцитов крови, ингибирования образования фибрина, ингибирования образования тромбов и ингибирования образования эмбол у млекопитающих, включающие соединение настоящего изобретения и фармацевтически приемлемый носитель. Эти соединения могут необязательно включать антикоагулянты, антитромбоцитные агенты и тромболитические агенты. Соединения можно вводить в кровь, продукты крови или в органы млекопитающих для достижения нужного эффекта ингибирования.

Изобретение включает также составы для профилактики или лечения нестабильной стенокардии, стабильной стенокардии, инфаркта миокарда, кратковременного ишемического приступа, фибрилляции предсердия, тромботического удара, эмболии, тромбоза глубоких вен, рассеянной внутрисосудистой коагуляции, наглядного образования фибрина и реокклюзии или рестеноза реканализованных сосудов у млекопитающих, включающие соединение настоящего изобретения в фармацевтически приемлемом носителе. Эти соединения могут необяза тельно включать антикоагулянты, антитромбоцитные агенты и тромболитические агенты.

Настоящее изобретение включает также способ снижения тромбогенности поверхности тела млекопитающих путем присоединения к поверхности, либо ковалентно, либо нековалентно, соединения настоящего изобретения.

Подробное описание изобретения и его предпочтительные варианты

Соединения настоящего изобретения полезны в качестве ингибиторов тромбина и обладают терапевтической ценностью, например, предотвращая заболевания коронарной артерии, и имеют следующую структуру:

где XV выбирают из группы, состоящей из

1) водорода,

2) 5-7-членного моно- или 9-10-членного конденсированного бициклического гетероциклического кольца, содержащего кольцевые атомы углерода, и кольцевые гетероатомы, которое может быть насыщенным или ненасыщенным, причем указанное кольцо содержит

a) от одного до четырех гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из Ν, О и 8, и где кольцо является незамещенным, или

b) от одного до четырех атомов Ν, где один или более из атомов кольца замещен одним или более из

ί) С1.₄алкила,

и) гидрокси, ίίί) СООК', где К' представляет водород или С1_₄алкил, ίν) 6ΌΝΗ₂.

ν) СН₂ОН, νί) 8Ο₂ΝΗ₂, νϋ) галогена, νπί) амино, ίχ) арил,

χ) С₃-7 циклоалкила, χί) СР₃, χίί) ОСР₃, χπί) М(СН₃)₂, χίν) -С1_з алкиларила, χν) гетероциклического кольца, χνί) С1_₄ алкокси, χνπ) Р_А¥Н_хС(СН₂)о.10-, где и и х представляют либо 1, либо 2, при условии, что когда \ν = 1, х = 2, и когда \ν = 2, х = 1, χνίίί) С1_₄ тиоалкокси или χίχ) циано,

3) 5-7-членного моно- или 9-10-членного конденсированного бициклического, негетероциклического насыщенного кольца, которое может быть незамещенным, или замещено одним или более из

a) С1_₄ алкила,

b) гидрокси,

с) СООЯ, где К' представляет водород или С1_4 алкил,

ά) <ΖΌΝΗ₂.

е) СН₂ОН,

ί) 8Ο₂ΝΗ₂,

д) галогена, И) амино,

ί) арила,

ί) С₃-7 циклоалкила,

k) СЕ₃,

l) ОСЕ₃,

ш) Ν(Οϊ₃)₂,

и) -С1_з алкиларила,

о) гетероциклического кольца, р) С1_₄ алкокси, с|) ЕзуНхС(СН₂)о.10-, где \ν и х представляют либо 1, либо 2, при условии, что когда \ν = 1, х = 2, и когда \ν = 2, х = 1,

г) С1_4 тиоалкокси или 8) циано,

4) 6-членного моно- или 9-10-членного конденсированного бициклического негетероциклического ненасыщенного кольца, которое может быть незамещенным или может быть замещено одним или более из

a) С1_4 алкила,

b) гидрокси,

c) СООК', где К представляет водород или С1_₄ алкил,

ά) ΟΟΝΗ₂,

е) СН₂ОН,

ί) 8Ο₂ΝΗ₂,

д) галогена, 11) амино,

ί) арила,

ί) Сз_7 циклоалкила,

к) СЕ₃,

1) ОСЕ₃,

ш) Ν(ΟΗ₃)₂,

и) -С1_з алкиларила,

o) гетероциклического кольца,

p) С1_₄ алкокси, с|) ЕдуН_хС(СН₂)о-1 Р-, где \ν и х представляют либо 1, либо 2, при условии, что когда \ν = 1, х = 2, и когда \ν = 2, х = 1,

г) С1_4 тиоалкокси или 8) циано,

5) СЕз,

6) Сз_7 циклоалкила, незамещенного, монозамещенного галогеном или арилом, или дизамещенного галогеном,

7) С₇_1₂ бициклического алкила,

8) Сю-16 трициклического алкила,

9) в¹²

Я^г(СН₂)_т-С-4 н’²где т представляет 0-3, и каждый из К¹² может быть одинаковым или различным,

Ю) в²

Н-С-(СНг)_р—|

ОР² где р представляет 1-4,

И) где т представляет 0-3,

12) а; у /з-е—^-еиг—[ а² X „ н’^{г/ в}

13)

А²(СН₂)_т—| , где т представляет 0 или 1,

14) ^-С-С-СНг— [

15) в¹²

Н¹² где т представляет 0-3 и каждый из К¹² одинаковы или различны, где заместители К¹², взятые вместе, могут образовывать кольцо с атомом С, с которым они связаны, образуя С₃.₇ циклоалкил,

16) в¹²

РЕсНг—С-ССНа), —ί В¹² где с| представляет 0-2, и каждый К¹² одинаковы или различны, где заместители К¹², взятые вместе, могут образовывать кольцо с атомом С, с которым они связаны, образуя С3.7 циклоалкил,

17)

Н-С-(СНа)_г —

Н² где г представляет 0-4, и каждый К² одинаковы или различны, где заместители К², взятые вместе, могут образовывать кольцо с атомом С, с которым они связаны, образуя С3.7 циклоалкил, С7_1₂ бициклический алкил, Сю-16 трициклический алкил, или 5-7-членное моно- или 9-10членное конденсированное бициклическое гетероциклическое кольцо, которое может быть насыщенным или ненасыщенным, и которое содержит от одного до трех гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из Ν, О и 8,

18)

В²(СН₂)_п-О-(СН_г)_р — где пир независимо представляют 1-4,

19)

где каждый из Я¹² одинаковы или различны,

20) н²сн₂

I >

н-с-| ,

Г^СНг и

21) ^(СН^

Ν-ίΟΗΛ—ί ^(СНг), где 1 представляет 1-4 ид представляет независимо 0-2; Я² выбирают из группы, состоящей из

1) водорода,

2) 5-7-членного моно- или 9-10-членного конденсированного бициклического гетероциклического кольца, содержащего кольцевые атомы углерода, и кольцевые гетероатомы, причем это кольцо может быть насыщенным или ненасыщенным, где указанное кольцо содержит

b) от одного до четырех атомов Ν, и где один или более из атомов кольца замещен одним или более из

ί) С_1-4 алкила, ίί) гидрокси, ϊϊΐ) СООК', где К' представляет водород или С_1-4 алкил, ίν) С‘О\1 Р.

ν) СН2ОН, νΐ) 8Ο2ΝΗ2, νίί) галогена, νίίί) амино, ίχ) арила,

х) С_3-7 циклоалкила, χί) СР₃, χίί) ОСР₃, χίίί) Ν№)2, χίν) -С_1-3алкиларила, χν) гетероциклического кольца, χνΐ) С_1-4 алкокси, χνίί) Р„Н,.С(СН₇)_0-|О-. где ν и х представляют либо 1, либо 2, при условии, что когда ν = 1, х =2, и когда ν = 2, х = 1, χνίίί) С1_-4 тиоалкокси или χίχ) циано,

3) 5-7-членное моно- или 9-10-членное конденсированное бициклическое негетероциклическое кольцо, которое может быть незамещенным или может быть замещено одним или более из

a) С1_-4 алкила,

b) гидрокси,

c) СООК', где К' представляет водород или С1_-4 алкил,

б) С‘О\1 Р.

е) СН2ОН,

ί) 8О₂ХН₂,

д) галогена,

11) амино,

ί) арила,

.)) С_3-7 циклоалкила,

k) СРз,

l) ОСР3,

т) ЖСНз)2,

п) -С1_-3 алкиларила,

о) гетероциклического кольца,

р) С1_4 алкокси,

с.|) Р„Н,.С(С.’Н₂)_0-|О-. где ν и х представляют либо 1, либо 2, при условии, что когда ν = 1, х = 2, и когда ν = 2, х = 1,

г) С1.4 тиоалкокси или

8) циано,

4) 6-членного моно- или 9-10-членного конденсированного бициклического, негетероциклического, ненасыщенного кольца, которое может быть незамещенным или может быть замещено одним или более из

a) С1.4 алкила,

b) гидрокси,

б) СОХИ;.

е) СН2ОН,

ί) 8О;\1 I;.

д) галогена,

1) амино,

ί) арила,

.)) С_3-7 циклоалкила,

k) СР3,

l) ОСР3,

т) ЖСНз)2,

п) -С1_-3 алкиларила,

о) гетероциклического кольца,

р) С1_4 алкокси,

с.|) Р„Н,._:С(СН₂)_0-|О-. где ν и х представляют либо 1, либо 2, при условии, что когда ν = 1, х = 2, и когда ν = 2, х = 1,

г) С1.4 тиоалкокси или

8) циано,

5) С_1-7 алкила, который может быть незамещенным или может быть замещен одним или более из

a) гидрокси,

b) СООН,

с) галогена,

6) амино,

е) арила,

ί) С_3-7 циклоалкила,

д) СРз,

1) Ν№)2,

ί) -С_1-3 алкиларила,

_)) гетероциклического кольца,

k) С1_-4 алкокси,

l) С1_-4 тиоалкокси или

т) циано,

6) СРз,

7) С_3-7 циклоалкила, который может быть незамещенным или может быть монозамещен галогеном или арилом, или дизамещен галогеном, ^{8) С}7-12 бициклического алкила или

9) Сю-1₆ трициклического алкила;

К³ и X независимо выбирают из группы, состоящей из

1) водорода,

2) галогена,

3) циано,

4) С1_4 алкилтио,

5) С1_-4 алкилсульфинила,

6) С1.4 алкилсульфонила,

7) С1.4 алкила,

8) С_3-7 циклоалкила, и

9) трифторметила;

А представляет о_ь Ορ о₆ где Υ¹ и Υ² независимо выбирают из группы, состоящей из

1) водорода,

2) С1_4 алкила,

3) С1_4 алкокси,

4) Е_иН_уС(СН₂)₀-1О-, где и и ν представляют либо 1, либо 2, при условии, что когда и = 1, ν = 2, и когда и = 2, ν = 1,

5) С₃_₇ циклоалкила,

6) С1_4 алкилтио,

7) С1_4 алкилсульфинила,

8) С1_4 алкилсульфонила,

9) галогена

10) циано и

11) трифторметила, и если Ь = 0 или 1; и

К¹² выбирают из группы, состоящей из

1) водорода,

2) галогена,

3) 5-7-членного моно- или 9-10-членного конденсированного бициклического гетероциклического кольца, содержащего углеродные кольцевые атомы и кольцевые гетероатомы, причем кольцо может быть насыщенным или ненасыщенным, и кольцо содержит

b) от одного до четырех атомов Ν, и где один или более из кольцевых атомов замещен одним или более из

ί) С1_4 алкила,

и) гидрокси, ίίί) СООК', где К' представляет водород или С1_4алкил, ίν) €ΌΝΗ₂.

ν) СН₂ОН, νί) 8Ο₂ΝΗ₂, νίί) галогена, νίπ) амино, ίχ) арила,

χ) С₃_₇ циклоалкила, χί) СЕ₃, χίί) ОСЕ₃, χίπ) Ν(ΟΗ₃)₂, χίν) -С1_₃алкиларила, χν) гетероциклического кольца, χνί) С1_4 алкокси, χνπ) Е„Н_хС(СН₂)о-10-, где \ν и χ представляют либо 1, либо 2, при условии, что когда \ν = 1, х = 2, и когда \ν = 2, χ = 1, χνίίί) С1_4 тиоалкокси или χίχ) циано,

4) 5-7-членного моно- или 9-10-членного конденсированного бициклического негетероциклического насыщенного кольца, которое может быть незамещенным или может быть замещено одним или более из

а) С1_4 алкила,

b) гидрокси,

c) СООК', где К' представляет водород или С1_4 алкил,

ά) ΟΟΝΗ₂,

е) СН₂ОН,

ί) 8Ο₂ΝΗ₂,

д) галогена,

й) амино,

ί) арила,

ί) С₃_₇ циклоалкила,

k) СЕ₃,

l) ОСЕ₃,

щ)М(СН₃)₂,

и) -С1_з алкиларила,

o) гетероциклического кольца,

p) С1_4 алкокси, с|) Е„Н_хС(СН₂)о-10-, где \ν и х представляют либо 1, либо 2, при условии, что когда \ν = 1, х = 2, и когда \ν = 2, х = 1,

г) С1_4 тиоалкокси или

8) циано.

5) 6-членного моно- или 9-10-членного конденсированного бициклического негетероциклического ненасыщенного кольца, которое может быть незамещенным или может быть замещено одним или более из

a) С1_4 алкила,

b) гидрокси,

ά) ΟΟΝΗ₂,

е) СН₂ОН,

ί) 8Ο₂ΝΗ₂,

д) галогена,

й) амино,

ί) арила,

.)) С₃_₇ циклоалкила,

к) СЕ₃,

1) ОСЕ₃,

щ)М(СН₃)₂,

и) -С1_з алкиларила,

o) гетероциклического кольца,

p) С1_4 алкокси, с|) Е„Н_хС(СН₂)о_10-, где \ν и х представляют либо 1, либо 2, при условии, что когда \ν = 1, х = 2, и когда \ν = 2, х = 1,

г) С1_4 тиоалкокси или

δ) циано,

6) бифенила,

7) СЕ₃,

8) С₃_₇ циклоалкила,

9) С7_1₂ бициклического алкила, и

10) Сю-16 трициклического алкила; или его фармацевтически приемлемые соли.

В этом классе соединений Υ¹ и Υ² независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, С1_4 алкила, галогена, С1_₄ алкилтио, С1_₄алкилсульфинила, С1_₄ алкилсульфонила и С1_₄алкокси.

В подклассе этого класса соединений Υ¹ и Υ² независимо выбирают из группы, состоящей из водорода, Е, СН₃, 8СН₃, 8ОСН₃, 8О₂СН₃ и осн₃.

В группе этого подкласса соединений А выбирают из группы, состоящей из

о„

где Ь представляет 0 или 1.

В подгруппе этой группы соединений X представляет водород, В³ представляет СН3, С1 или СЫ, и (V представляет В²СЕ2С(В¹²)2 или В²СН2С(В¹²)₂.

В семействе этой подгруппы соединений В¹² представляет водород.

В подсемействе этого семейства соединений В² выбирают из группы, состоящей из

1) 5-7-членного моно- или 9-10-членного конденсированного бициклического гетероцик лического кольца, содержащего углеродные кольцевые атомы и кольцевые гетероатомы, причем кольцо это может быть насыщенным или ненасыщенным, где кольцо это содержит

ί) С1_4 алкила,

и) гидрокси, ίίί) СООВ', где В' представляет водород или С1_4алкил, ίν) СОИН₂,

ν) СН₂ОН, νί) 8Ο₂ΝΗ₂, νίί) галогена, νίίί) амино, ίχ) арила,

χ) С₃.₇циклоалкила, χί) СЕ₃, χίί) ОСЕ₃, χίπ) Ν(ΟΗ₃)₂, χίν) -С1_₃ алкиларила, χν) гетероциклического кольца, χνί) С1_4 алкокси, χνίί) Е„Н_хС(СН₂)о-10-, где \ν и χ представляют либо 1, либо 2, при условии, что когда \ν = 1, х = 2, и когда \ν = 2, χ = 1, χνίίί) С1_4 тиоалкокси или χίχ) циано,

2) 6-членного моно- или 9-10-членного конденсированного бициклического негетероциклического ненасыщенного кольца, которое является незамещенным, или замещено одним или более из

a) С1_4 алкила,

b) гидрокси,

c) СООВ', где В' представляет водород или С1_4 алкил,

ά) ΟΟΝΗ₂,

е) СН₂ОН,

£) 8Ο₂ΝΗ₂,

§) галогена,

й) амино,

ί) арила,

.)) С₃_₇ циклоалкила,

k) СЕ₃,

l) ОСЕ₃,

ш) М(СН₃)₂,

и) -С1_з алкиларила,

o) гетероциклического кольца,

p) С1_4 алкокси, с|) Е„Н_хС(СН₂)₀.1О-, где \ν и х представляют либо 1, либо 2, при условии, что когда \ν = 1, х = 2, и когда \ν = 2, х = 1,

г) С1_4 тиоалкокси или

8) циано.

В подподсемействе этого подсемейства соединений, В² представляет пиридил, метоксипиридил или фенил.

Примеры семейства перечислены далее (следует отметить, что метильный заместитель обычно указывается как связь, присоединенная к атому). Ингибирующая активность соединений настоящего изобретения, представленная как указывает, что Κί больше или равно 1 нМ, или как *, указывает, что Κί меньше 1 нМ. Эти величины определены в соответствии с ίη νίίτο анализом, который приведен далее в описании.

СНз

МеО5

У соединений настоящего изобретения могут существовать хиральные центры, и это проявится в существовании рацематов, рацемических смесей и индивидуальных диастереоизомеров или энантиомеров, причем все эти изомерные формы включены в объем настоящего изобретения. Соединения настоящего изобретения могут также иметь полиморфные кристаллические формы, и все эти полиморфные кристаллические формы включены в объем настоящего изобретения.

Изобретение включает также метаболиты соединений настоящего изобретения, включая следующие соединения:

Если какие-либо переменные встречаются более одного раза в любом составляющем или в формуле I, их определения в каждом случае независимы от их определений в любом другом случае. Кроме того, комбинации заместителей и/или переменных допустимы только в том случае, если такие комбинации приводят к стабильным соединениям. Далее приводятся со13 кращения, которые могут встретиться в описании.

Сокращения

ВН₃ боргидрид;

СН₂С1₂ дихлорметан;

ЭА8Т диэтиламиносульфуртрифторид; ϋΒυ 1,8-диазабицикло [5.4.0]ундек-7-ей; ОСЕ 1,2-дихлорэтан;

ОМЕ диметилформамид;

ОМ 80 диметилсульфоксид;

ОРРА дифенилфосфорилазид;

ЕОС гидрохлорид 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида;

Е1₂О диэтиловый эфир;

Εΐ₃Ν триэтиламин;

ЕЮН этанол;

НС1 хлористо-водородная кислота;

НОВТ гидрат 1-гидроксибензотриазола; НО АТ 1-гидрокси-7-азабензотриазо л; ίΡτΟΗ 2-пропанол;

ЬОА литийдиизо пропиламид;

Ь1А1Н₄ литийалюминийгидрид;

Ме1 иодометан;

МеОН метанол;

МСРВА ш-хлорпероксибензойная кислота;

№1ВН| боргидрид натрия;

ΝηΝ₃ азид натрия;

№18Мс тиометоксид натрия; иВиЕ1 н-бутиллитий;

N08 Ν-хлорсукцинимид;

ΝΜΜ Ν-метилморфолин;

Ρά/С катализ, палладий на активир. угле;

Р11СН₃ толуол;

Р11₃Р трифенилфосфин;

Р0Вг₃ бромокись фосфора;

ТВАЕ тетрабутиламмонийфторид;

ТВ 8 С1 трет-бутилдиметилсилилхлорид;

ТЕ А триэтиламин;

ТНЕ тетрагидрофуран;

ΤΜ80Ν триметилсилилцианид;

В том смысле, как здесь использован (если нет других указаний) термин алкил включает как разветвленные, так и неразветвленные насыщенные алифатические углеводородные группы, содержащие указанное число атомов углерода. Обычно в настоящем изобретении используют сокращения для алкильных групп, например метил может быть представлен как Ме или СН₃, этил может быть представлен как Е1 или СН₂СН₃, пропил может быть представлен как Рг или СН₂СН₂СН₃, бутил может быть представлен как Ви или СН₂СН₂СН₂СН₃, и т.д..; алкокси представляет линейную или разветвленную алкильную группу с указанным числом атомов углерода, присоединенную через кислородный мостик; На1о, или галоген, в том смысле, как здесь использован, означает фтор (Е), хлор (С1), бром (Вг) и йод (I); и термин противоион используют для обозначения маленького, отрицательно заряженного объекта, такого как хлорид, бромид, гидроксид, ацетат, трифторацетат, перхлорат, нитрат, бензоат, ма леат, сульфат, тартрат, полутартрат, бензолсульфонат и т.п.

Термин С₃_7циклоалкил включает циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и цикло гептил, и т.п.

Термин С₇.1₂бициклический алкил включает бицикло[2.2.1]гептил (норборнил), бицикло[2.2.2]октил, 1,1,3-триметилбицикло [2.2.1] гептил (борнил), и т.п.

Термин арил в том смысле, как здесь использован (если нет других указаний) представляет стабильную 6-10-членную моно- или бициклическую кольцевую систему, такую как фенил или нафтил. Арильное кольцо может быть незамещенным или может быть замещено одним или более из С1_₄ низшего алкила, гидрокси, алкокси, галогена или амино.

Термин алкиларил, например С1_₃ алкиларил, представляет арильную группу, содержащую алкильный заместитель.

Термин бифенил означает единую систему из двух бензольных колец, например,

Термин гетероциклическое кольцо в том смысле, как здесь использован (если нет других указаний) представляет стабильную 5-7членную моноциклическую или стабильную 910-членную конденсированную бициклическую гетероциклическую кольцевую систему, любое из колец которой может быть насыщенным, таким как пиперидинил, частично насыщенным или ненасыщенным, таким как пиридинил, и которая состоит из атомов углерода и от одного до четырех гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из Ν, О и 8, и где гетероатомы азота и серы могут быть окисленными, и гетероатом азот может быть необязательно кватернизован, и включает любую бициклическую группу, в которой любое из вышеопределенных гетероциклических колец конденсировано с бензольным кольцом. Бициклические ненасыщенные кольцевые системы включают бициклические кольцевые системы, которые могут быть частично ненасыщенными или полностью ненасыщенными. Частично ненасыщенные бициклические кольцевые системы включают, например циклопентенопиридинильную, бензодиоксановую, метилендиоксифенильную группы. Особенно подходящими являются кольца, содержащие один атом кислорода или серы, от одного до четырех атомов азота, или один атом кислорода или серы вместе с одним или двумя атомами азота. Гетероциклическое кольцо может быть присоединено по любому из гетероатомов или по атому углерода, что приводит к созданию стабильной системы. Примеры таких гетероциклических групп включают пиперидинил, пиперазинил, 2-оксопиперазинил, 2-оксопиперидинил, 2-оксопирролодинил, 2-оксоазепинил, азепинил, пирролил, 4-пиперидонил, пирролидинил, пиразолил, пиразолидинил, имидазолил, имидазолинил, имидазолидинил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, оксазолил оксазолидинил, изоксазолил, изоксазолидинил, морфолинил, тиа-золил, тиазолидинил, изотиазолил, хинуклидинил, изотиазолиди-нил, индолил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, тиадиа-золил, бензопиранил, бензотиазолил, бензоксазолил, фурил, тетрагидрофурил, тетрагидропиранил, тетразол, тиенил, бензотиенил, тиаморфолинил, тиаморфолинил сульфоксид, тиаморфолинил сульфон и оксадиазолил. Морфолино представляет то же, что и морфолинил.

Термин негетероциклическое кольцо в том смысле, как здесь использован (если нет других указаний) представляет стабильную 5-7членную моноциклическую или стабильную 910-членную бициклическую кольцевую систему, содержащую только углеродные кольцевые атомы, и не содержащую ни одного кольцевого гетероатома, которая может быть насыщенной, такой как циклогексил, частично насыщенной или ненасыщенной, такой как фенил. Примеры таких негетероциклических колец включают фенил, нафтиленил, инденил и циклогексил.

Термины ингибитор циклооксигеназы-2, циклооксигеназы-2 ингибитор и СОХ-2 ингибитор в том смысле, как здесь использованы, охватывают соединения, которые селективно ингибируют циклооксигеназу-2 по сравнению с циклооксгеназой-1.

Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы I (в форме водо- или маслорастворимых или диспергируемых продуктов) включают обычные нетоксичные соли, такие как те, которые получают с неорганическими кислотами, такими как например хлористоводородная, бромисто-водородная, серная, фосфорная, азотная и т.п., или четвертичные аммониевые соли, которые получают, например с неорганическими или органическими кислотами или основаниями. Примеры солей присоединения кислот, включают ацетат, адипат, альгинат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, цитрат, камфорат, камфорсульфонат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, фумарат, глюкогептаноат, глицерофосфат, полусульфат, гептанат, гексаноат, гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактат, малеат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, оксалат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, тозилат и ундеканоат. Соли оснований включают аммонийные соли, соли щелочных металлов, такие, как соли натрия и калия, соли щелочно-земельных металлов, такие как соли кальция и магния, соли органических оснований, такие как соли дициклогексиламина, Νметил-ϋ -глюкамина, и соли аминокислот, такие как аргинин, лизин и т.д. Кроме того, основные азотсодержащие группы могут быть кватернизованы такими агентами, как низшие алкилгалогениды, такие как метил, этил, пропил и бутил хлориды, бромиды и иодиды; диалкилсульфатами, такими как диметил, диэтил, дибутил и диамил сульфаты, галогенидами с длинными цепями, такими как децил, лаурил, миристил и стеарил хлориды, бромиды и иодиды, аралкилгалогениды, такие как бензил и фенэтилбромиды, и другие.

В соединениях настоящего изобретения, содержащих пиридил Ν-оксидные фрагменты, пиридил-Ы-оксидную часть структурно представляют, используя обычные способы представления, такие как

о которые имеют эквивалентные значения.

При определении переменной А, если переменная Ь представляет ноль, А представляет

Если переменная Ь представляет 1, А представляет

ООО

Ингибиторы тромбина - Терапевтическое использование- Способы использования Антикоагулянтная терапия показана для лечения и профилактики различных тромботических состояний, особенно при заболеваниях коронарных артерий и цереброваскулярных заболеваниях. Специалисты в данной области легко определяют состояния, которые требуют антикоагулянтной терапии. Термин пациент в том смысле как здесь использован, означает млекопитающее, такое как приматы, включая людей, овец, лошадей, рогатый скот, свиней, собак, кошек, крыс и мышей.

Ингибиторы тромбина представляют ценность не только при антикоагулянтной терапии индивидуумов с тромботическими состояниями, но полезны во всех случаях, когда необходимо ингибировать свертывание крови, например, при хранении цельной крови и для предотвращения коагуляции в других биологических образцах для тестирования или хранения. Так, ингибиторы тромбина можно добавлять к любой среде или осуществлять контактирование с любой средой, содержащей или, как предполагают, могущей содержать тромбин, и в которой желательно ингибировать коагуляцию крови, например, при контактировании крови млекопитающих с материалом, выбранным из группы, со стоящей из сосудистых трансплантатов, стентов, ортопедических протезов, сердечных протезов и экстракорпоральных систем кровообращения.

Соединения настоящего изобретения полезны для лечения или профилактики венозной тромбоэмболии (например, закупорки или окклюзии вены оторвавшимся тромбом; закупорки или окклюзии легочной артерии оторвавшимся тромбом), кардиогенной тромбоэмболии (например, закупорки или окклюзии сердца оторвавшимся тромбом), артериального тромбоза (например, образования тромбов внутри артерий, которые могут вызвать разрушение тканей, питаемых артерией), атеросклероза (например, атеросклероза, характеризующегося неравномерно распределенными отложениями липидов) у млекопитающих и для снижения предрасположенности приспособлений, которые контактируют с кровью, вызывать образование кровяных сгустков.

Примеры венозной тромбоэмболии, которую можно лечить или предотвращать профилактически соединениями настоящего изобретения, включают закупорку вен, закупорку легочной артерии (легочная эмболия), тромбоз глубоких вен, тромбоз, связанный с раком и химиотерапией раковых заболеваний, тромбоз, связанный с наследственными тромбофильными заболеваниями, такими как дефицит протеина С, дефицит протеина 8, дефицит антитромбина III, и фактор V Ьс1бсп. и тромбоз, вызванный приобретенными тромбофильными заболеваниями, такими как красная волчанка (воспалительное заболевание соединительной ткани). Кроме того, в случае венозной тромбоэмболии, соединения настоящего изобретения полезны для поддержания постоянных катетеров в открытом состоянии.

Примеры кардиогенной тромбоэмболии, которые можно лечить и обрабатывать с целью профилактики соединениями настоящего изобретения, включают тромбоэмболический удар (отрыв тромба, вызывающий неврологическое нарушение, связанное с нарушением мозгового кровообращения), кардиогенную тромбоэмболию, связанную с фибрилляцией предсердия (быстрое, нерегулярное подергивание фибрилл мышц верхней камеры сердца), кардиогенную тромбоэмболию, связанную с протезами клапанов сердца, такими как механические клапаны сердца, и кардиогенную тромбоэмболию, связанную с болезнью сердца.

Примеры артериального тромбоза включают нестабильную стенокардию (жестокую сжимающую боль в грудной клетке коронарного происхождения), инфаркт миокарда (гибель клеток сердечной мышцы в результате недостаточного кровоснабжения), ишемическую болезнь сердца (локальная анемия, связанная с прекращением (таким как при сужении артерии) поступления крови), реокклюзию во время или после перкутанной транслюминальной коронарной ангиопластики, рестеноз после прескожной транслюминальной коронарной ангиопластики, окклюзию коронарной артерии после шунтирования артерии, и окклюзивное церебрососудистое заболевание. Кроме того, в отношении артериального тромбоза соединения настоящего изобретения полезны для поддержания артериовенозных канюль в открытом состоянии.

Примеры атеросклероза включают артериосклероз.

Примеры приспособлений, которые вступают в контакт с кровью, включают протезы сосудов, стенты, ортопедические протезы, сердечные протезы и экстракорпориальные системы кровообращения.

Ингибиторы тромбина настоящего изобретения можно вводить в такой форме для перорального приема, как таблетки, капсулы (каждая из которых включает композиции для замедленного выделения, или выделения в определенное время), пилюли, порошки, гранулы, эликсиры, микстуры, суспензии, сиропы и эмульсии. Аналогично, их можно вводить в формах для внутривенного (болюсы или вливания), внутрибрюшинного, подкожного или внутримышечного введения, причем все используемые формы хорошо известны специалистам в области фармации. В качестве антиагрегационного агента можно использовать эффективное, но не токсичное количество нужного соединения. Для обработки глаза, в котором накапливается фибрин, соединения можно вводить интраокулярно или наружно, также как перорально или парентерально.

Ингибиторы тромбина можно вводить в форме депо инъекций или имплантируемых препаратов, которые могут быть созданы таким образом, чтобы обеспечить замедленное выделение активного ингредиента. Активный ингредиент можно спрессовать в виде таблеток или небольших цилиндров и имплантировать подкожно или внутримышечно, как депо инъекции или имплантаты. В имплантатах можно использовать инертные материалы, такие как биоразлагаемые полимеры или синтетические силиконы, например, 811а841с, силиконовый каучук, или другие полимеры, производимые Ио^-Согпэпд СотрогаИоп.

Ингибиторы тромбина можно также вводить в форме систем с доставкой с липосомами, таких как маленькие однослойные пузырьки, крупные однослойные пузырьки и многослойные пузырьки. Липосомы можно создать из различных фосфолипидов, таких как холестерин, стеариламин или фосфатидилхолины.

Ингибиторы тромбина можно также доставлять, используя в качестве индивидуальных носителей моноклональные антитела, к которым присоединены молекулы соединений. Ингибиторы тромбина можно также соединить с рас19 творимыми полимерами, направляемыми носителями лекарства. Такие полимеры могут включать поливинилпирролидон, сополимеры пирана, полигидроксипропилметакриламидфенол, полигидроксиэтиласпартамидфенол или полиэтиленоксидполилизин, замещенный пальмитоиловыми остатками. Кроме того, ингибиторы тромбина можно соединять с классом биоразлагаемых полимеров, полезных для обеспечения контролируемого выделения лекарств, например, с полимолочной кислотой, полигликолевой кислотой, сополимерами полимолочной и полигликолевой кислот, с полиэпсилонкапролактоном, полигидроксимасляной кислотой, сложными полиортоэфирами, полиацеталями, полидигидропиранами, полицианоакрилатами и сшитыми или амфифатическими блоксополимерами гидрогелей.

Дозовый режим, используемый при введении ингибиторов тромбина, выбирают в соответствии с различными факторами, включающими тип, вид, возраст, вес, пол и состояние пациента; тяжесть подлежащего лечению состояния; способ введения; функции почек и печени пациента; и конкретно используемое соединение или его соль. Обычный квалифицированный врач или ветеринар может легко определить и прописать эффективное количество лекарства, необходимое для профилактики, ослабления или остановки развития такого состояния.

Дозы ингибиторов тромбина для перорального приема, если их используют для достижения указанных эффектов, должны находиться в интервале от около 0,01 мг/кг массы тела в день мг/кг/день до около 30 мг/кг/день, предпочтительно от 0,025 до 7,5 мг/кг/день, более предпочтительно от 0,1 до 2,5 мг/кг/день и наиболее предпочтительно от 0,1 до 0,5 мг/кг/день (если нет других указаний, количества активных ингредиентов рассчитаны для свободных оснований). Например, пациент массой 80 кг должен получать от около 0,8 мг/день до 2,4 г/день, предпочтительно от 2 до 600 мг/день, более предпочтительно от 8 до 200 мг/день и наиболее предпочтительно от 8 до 40 мг/день. Таким образом, соответствующим образом приготовленное для введения один раз в день лекарство должно содержать от 0,8 мг до 2,4 г, предпочтительно от 2 до 600 мг, более предпочтительно от 8 до 200 мг и наиболее предпочтительно от 8 до 40 мг, например 8, 10, 20 и 40 мг. Желательно вводить дозу ингибиторов тромбина в более мелких дозах два, три или четыре раза в день. Для введения дважды в день соответствующим образом приготовленное лекарство должно содержать от 0,4 мг до 1,2 г предпочтительно от 1 до 300 мг, более предпочтительно от 4 до 100 мг и наиболее предпочтительно от 4 до 20 мг, например 4, 5, 10 и 20 мг.

При внутривенном введении пациент должен получать активный ингредиент в дозах, достаточных для доставки 0,025-7,5 мг/кг/день предпочтительно 0,1-2,5 мг/кг/день, и более предпочтительно 0,1-0,5 мг/кг/день. Такие количества можно вводить целым рядом подходящих способов, например как большие объемы с низкими концентрациями активного ингредиента в течение длительного времени, или несколько раз в день, как небольшие объемы с высокой концентрацией активного ингредиента в короткий промежуток времени, например раз в день. Обычно можно приготовить такие общепринятые композиции для внутривенного введения, которые содержат концентрации активного ингредиента около 0,01-1,0 мг/мл, например 0,1 мг/мл, 0,3 и 0,6 мг/мл, и которые вводят в таких количествах в день, как от 0,01 мл/кг массы пациента до 10,0 мл/кг массы пациента, например 0,1 мл/кг, 0,2 мг/кг, 0,5 мл/кг. В одном из примеров пациент массой 80 кг, получая 8 мл дважды в день композиции для внутривенного введения с концентрацией активного ингредиента 0,5 мг/мл, получает 8 мг активного ингредиента в день. В качестве буферов можно использовать глюкуроновую кислоту, Ь-молочную кислоту, уксусную кислоту, лимонную кислоту или любой фармацевтически приемлемый коньюгат кислоты и основания с разумной буферирующей способностью в интервале значений рН, приемлемых для внутривенного введения. Следует учитывать растворимость лекарств при выборе соответствующего буфера и рН композиции; и специалист может легко сделать выбор в зависимости от растворимости подлежащего введению лекарства.

Соединения можно также вводить в интраназальных формах с помощью наружного применения, используя подходящие для интраназального введения носители или чрескожно, используя такие формы накожных пластырей для чрескожного введения, которые хорошо известны специалистам. Для введения в форме систем чрескожной доставки вводимая доза, естественно, должна быть непрерывной, а не кратковременной в соответствии с дозовым режимом.

Ингибиторы тромбина обычно вводят в качестве активных ингредиентов в смеси с соответствующими фармацевтическими разбавителями, эксципиентами или носителями (которые все вместе называют материалами - носителями), соответствующим образом выбранными для предполагаемой формы введения, то есть таблеток, капсул, эликсиров, сиропов и т.п. для перорального введения, в соответствии с принятой фармацевтической практикой.

Так например, для перорального введения в форме таблеток или капсул активный компонент лекарства можно объединить с нетоксичным, фармацевтически приемлемым инертным носителем для перорального введения, таким как лактоза, крахмал, сахароза, глюкоза, метилцеллюлоза, стеарат магния, дикальцийфосфат, сульфат кальция, маннит, сорбит и т.д.; для перорального введения в форме жидкости компоненты лекарства можно объединить с любым нетоксичным фармацевтически приемлемым носителем для перорального введения, таким как этанол, глицерин, вода и т.п. Более того, при желании, или в случае необходимости в смесь можно ввести подходящие связующие, смазывающие агенты, разрыхляющие агенты и красители. Подходящие связующие включают крахмал, желатин, природные сахара, такие как глюкоза, беталактоза, сахаристые вещества из кукурузы, природные и синтетические смолы, такие как аравийская камедь, трагакант или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлозу, полиэтиленгликоль, воски и т.п. Смазывающие агенты, которые используют в этих дозовых формах, включают олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.п. Разрыхляющие агенты включают (но ими не ограничиваются) крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановая смола т.п.

Настоящее изобретение включает также способ лечения воспалительных заболеваний у пациента, который включает введение пациенту композиции, включающей соединение настоящего изобретения. Такие заболевания включают (но ими не ограничиваются) нефрит, красную волчанку, ревматоидный артрит, гломерулонефрит и саркоидоз.

Настоящее изобретение включает также способ лечения воспалительного заболевания у пациента, который включает введение пациенту комбинации, включающей соединение настоящего изобретения и ΝδΆΙΌ, например, СОХ-2 ингибитор. Такие заболевания включают (но ими не ограничиваются) нефрит, красную волчанку, эритематоз, ревматоидный артрит, гломерулонефрит, васкулит и саркоидоз.

Настоящее изобретение предлагает также способ облегчения боли, лихорадки и воспалений, связанных с различными состояниями, включая нефрит, красную волчанку, эритематоз, ревматоидный артрит, гломерулонефрит, саркоидоз, ревматическую лихорадку, симптомы, связанные с гриппом или другими вирусными инфекциями, обычной простудой, болями в нижней части спины и в шее, дисменоррею, головную боль, зубную боль, растяжения и мышечное переутомление, миозиты, невралгию, синовиты, артриты, включая ревматоидный артрит, дегенеративные заболевания суставов (остеоартрит), подагру и анкилозный спондилит, бурситы, ожоги, поражения после хирургических и зубоврачебных процедур у пациента путем введения пациенту терапевтически эффективного количества соединения настоящего изобретения. Ингибиторы тромбина можно также использовать для лечения деменции, включая предстарческую и старческую деменцию, и особенно деменцию, связанную с болезнью Алцгеймера.

При воспалительных заболеваниях, в которых заметную роль играет образование фибрина, фибрин может быть детерминантой патологии. Фибрин служит матрицей, на которую могут мигрировать воспалительные клетки и прилипать к ней (см 8йегтап е! а1., 1977 1. Ехр. Меб. 145:76-85; АШег1 е! а1., 1986 1. С1т. 1пуек!. 78:968-976; \Угщ111 е! а1., 1983 Ргос. №И. Асаб. 8с1. 85:7734-7738; АШеп е! а1., 1993 1. Вю1. СНет. 268; 1847-1853). Фибрин также усиливает экспрессию воспалительного цитокина ΙΠ-1 бета и снижает экспрессию антагониста ΙΠ-1 рецептора человеческими одноядерными клетками периферической крови (см. Регех 1995 1. 1ттипо1. 154:1879-1887). Антикоагулянты варфарин ЩагЕагт) и гепарин ослабляют гипертензивные реакции замедленного типа и экспериментальный нефрит в опытах на животных (см. 1акаш е! а1., 1ттипора1йоцепек1к оЕ Кйеита!о1б АгТНгШз Ебк. 0.8. Рапау1 е! а1., 8иггеу, ИК, КеебЬоокк, Ь!б. апб На1рет е! а1., 1965 №!иге 205:257-259). Ферментативная дефибринация анкордом снижает степень экспериментального нефрита (Νηίδΐι е! а1., 1972 С1т. 8с1. 42:643-646), красной волчанки (Со1е е! а1., 1990 К1бпеу Ιη!. 37:29-35), и ревматоидного артрита (см. Викко е! а1., 1998 1. СИп.1пуек!. 102:41-50) у животных, и гломерулонефрита у человека (см. К1т е! а1., 1988 О. 1. Меб. 69:879-905). Кроме того, внутрисуставная инъекция фибрина вызывает артрит у кроликов, иммунизованных фибрином Эцтопбе е! а1., 1961 Вг111кН 1оита1 оЕ Ехрептеп!а1 Ра!йо1оду ХЬ111:373-383), и вызванный антигеном артрит обостряется у мышей с дефицитом урокиназы, где существует угроза фибринолиза синовиального фибрина (кее Викко е! а1., 1998 1. С1т. 1пуек!. 102:41-50).

При заболеваниях, когда заметны отложения фибрина, таких как (но ими не ограничиваясь) ревматоидный артрит, красная волчанка, гломерулонефрит, васкулит и саркоидоз, снижение концентрации фибрина в стабильном состоянии путем введения соединения настоящего изобретения должно в соответствии с настоящим изобретением уменьшить патологические воспалительные реакции, связанные с этими заболеваниями.

Аналогично, соединения настоящего изобретения будут полезны как частичная или полная замена обычных №Л1Эк (нестероидных противовоспалительных средств) в препаратах, в которых они в настоящее время присутствуют для совместного введения с другими агентами или ингредиентами. Так, в следующих аспектах настоящее изобретение охватывает фармацевтические композиции для лечения воспалительных заболеваний, как определено выше, включающие нетоксичное, терапевтически эффективное количество соединения настоящего изобретения, как раскрыто выше, и один или более из ингредиентов, таких как другие облегчающие боль агенты, включая ацетаминофен или фен ацетин; потенцирующие агенты, включая кофеин; Н2-антагонисты, гидроксиды алюминия или магния; симетикон, противоотечные агенты, включая фенилэприн, фенилпропаноламин, псевдофедрин, оксиметазолин, эпинефрин, нафазолин, ксилометазолин, пропилгекседрин или леводезоксиэфедрин; агенты против кашля, включая кодеин, гидрокодон, карамифен, карбэтапентан или декстраметорфан; седативные или неседативные антигистаминовые агенты. Кроме того, настоящее изобретение охватывает способ лечения воспалительных заболеваний, включающий введение нуждающемуся в таком лечении пациенту нетоксичного, терапевтически эффективного количества соединения настоящего изобретения необязательно совместно с одним или более из таких ингредиентов, которые были только что перечислены.

Настоящее изобретение включает также новую комбинированную терапию, включающую введение млекопитающему, и более конкретно человеку, терапевтически эффективного количества Ν8ΆΙΌ, такого как СОХ-2 ингибитор, в сочетании с терапевтически эффективным количеством соединения настоящего изобретения. Комбинированную терапию используют для лечения воспалительных заболеваний.

Фармацевтические комбинации немедленного действия, включающие соединение настоящего изобретения в сочетании с Ν8ΆΙΌ, таким как СОХ-2 ингибитор, включают введение единой фармацевтической дозовой формы, которая содержит как соединение настоящего изобретения, так и Ν8ΆΙΌ, также как и введение каждого из активных агентов в его собственной фармацевтической дозированной форме. Если используют отдельные дозовые формы, соединение настоящего изобретения и Ν8ΆΙΌ можно вводить практически одновременно, то есть вмете, или через некоторые промежутки времени. Под термином фармацевтическая комбинация немедленного действия следует понимать, что он включает все эти режимы. Введение такими различными способами пригодно для настоящего изобретения, если благоприятный фармацевтический эффект соединения настоящего изобретения и Ν8ΆΙΌ реализуется у пациента практически одновременно. Такой благоприятный эффект предпочтительно достигается, если нужные уровни концентраций активных лекарств поддерживаются практически одновременно. Предпочтительно вводить соединение настоящего изобретения и Ν8ΆΙΌ совместно по схеме одна доза в день; однако различные схемы введения доз, например, соединение настоящего изобретения один раз в день, а Ν8ΆΙΌ один, два или более раз в день, или Ν8ΆΙΌ один раз в день, а соединение настоящего изобретения один, два или более раз в день, также включены в объем настоящего изобретения. Предпочтительна единичная дозовая композиция для перорального введения, которая включает как соединение настоящего изобретения, так и Ν8ΆΙΌ. Такая единая доза обеспечивает пациенту удобство приема.

В настоящем изобретении предложены также фармацевтические композиции, включающие терапевтически эффективное количество Ν8ΆΙΌ, или его фармацевтически приемлемой соли, в сочетании с терапевтически эффективным количеством соединения настоящего изобретения, или его фармацевтически приемлемой соли, и фармацевтически приемлемый носитель. В одном из вариантов рассматриваемых композиций, она представляет единую композицию, адаптированную для перорального введения терапевтически эффективного количества СОХ-2 ингибитора в сочетании с терапевтически эффективным количеством соединения настоящего изобретения и фармацевтически приемлемым носителем. Такую комбинацию можно также вводить в отдельных дозированных формах, в каждой из которых содержится только один активный агент. При введении в раздельных дозированных формах, отдельные формы вводят таким образом, чтобы благоприятный эффект каждого из активных агентов реализовался бы у пациента практически одновременно.

Обычные ΝδΆΙΌκ включают салицилаты, такие как аспирин, салицилат натрия, салицилат холина, салициловую кислоту, дифлунисал и салсалат; индолуксусные кислоты, такие как индометацин и сулиндак; пиразолы, такие как фенилбутазон, оксифенбутазон; пирролалкановые кислоты, такие как толметин; фенилуксусные кислоты такие как ибупрофен, феропрофен, флурбипрофен и кетопрофен; фенаматы, такие как фенаминовая кислота, и меклофенамат; оксикамы, такие как пироксикам; и нафталинуксусные кислоты, такие как напроксен. Ингибиторы циклооксигеназы, такие как ингибиторы СОХ-1 и СОХ-2, также являются Ν8ΛΙΩ5.

Используя человеческую цельную кровь, провели анализ на СОХ-1 и анализ на СОХ-2, описанные у С. Впбсаи с1 а1., Ιηίίαιηιη. Кек. 45: 68-74 (1996), (включено сюда как ссылка), и предпочтительные соединения показали ИК₅₀для циклооксигеназы-2 менее, чем около 2 мкМ в анализе СОХ-2 в человеческой цельной крови, причем ИК₅₀ для циклооксигеназы-1 было больше 5 мкМ в анализе на СОХ-1 в человеческой полной крови. Предпочтительно также, чтобы отношение селективности ингибирования циклооксигеназы-2 к селективности ингибирования циклооксигеназы-1 составляло бы, по крайней мере, 10, и более предпочтительно, по крайней мере, 40. Полученные для селективностей значения могут свидетельствовать о способности снижать возникновение побочных эффектов, связанных с обычными Ν8ΆΙΌ.

Ингибитор циклооксигеназы-2 можно вводить в дозовом уровне вплоть до обычных дозовых уровней для ΝδΆΙΌκ. Подходящие уровни доз будут зависеть от противовоспалительного эффекта выбранного ингибитора циклооксигеназы-2, но обычно подходящие уровни составляют от около 0,001 до 50 мг/кг/день, предпочтительно от 0,005 до 30 мг/кг/день, и особенно предпочтительно от 0,05 до 10 мг/кг/день. Соединения можно вводить по схеме вплоть до 6 раз в день, предпочтительно от 1 до 4 раз в день, и особенно один раз в день.

Режим дозирования при использовании соединения настоящего изобретения в комбинации с N8 А ГО выбирают в соответствии с различными факторами, включая тип, вид, возраст, вес, пол и состояние пациента; тяжесть подлежащего лечению состояния; способ введения; функции почек и печени пациента; и конкретно используемое соединение или его соль, или его сложный эфир. Так как в комбинированной терапии используют два различных активных ингредиента, следует также учитывать эффективность каждого из агентов и эффект взаимодействия, достигаемый при их совместном введении. Учет этих факторов находится в компетенции специалистов-клиницистов для определения терапевтически эффективного или профилактически эффективного количества доз, необходимого для профилактики, ослабления или остановки развития такого состояния.

Способ введения комбинации лекарств пациенту включает как самостоятельный прием, так и введение лекарства пациенту другим человеком.

В сочетании с соединением настоящего изобретения можно использовать дополнительные активные агенты в стандартной дозированной форме, или их можно вводить пациенту в виде отдельных дозированных форм, что обеспечивает возможность одновременного или последовательного введения. Примеры дополнительных активных агентов, которые можно использовать, включают ингибиторы НМС-СоА синтазы; ингибиторы скваленэпоксидазы; ингибиторы скваленсинтетазы (известные также как ингибиторы скваленсинтазы), ацил кофермент А; ингибиторы холестерин ацилтрансферазы (АСАТ); пробу ко л; ниацин; фибраты, такие как клофибрат, фенофибраты и гемфибризол; ингибиторы адсорбции холестерина; секвестранты желчных кислот; индукторы рецепторов 1ГОЬ (липопротеин низкой плотности); витамин В₆(известный также как пиридоксин) и их фармацевтически приемлемые соли, такие как соли НС1; витамин Βι₂ (известный также как цианокобаламин); блокаторы β-адренергических рецепторов; фолевую кислоту или их фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры, такие как натриевые соли и соли метилглюкамина; и витамины антиоксиданты, такие как витамин С и Е, и бета-каротин.

Ингибиторы тромбина можно также вводить совместно с подходящими противотромбоцитными агентами, включая, (но ими не ограни чиваясь) антагонисты рецепторов фибриногена (например, для лечения или профилактики нестабильной стенокардии или для предотвращения реокклюзии после ангиопластики и рестеноза), антикоагулянты, такие как аспирин, тромболитические агенты, такие как активаторы плазминогена или стрептокиназа, для достижения синергического эффекта при лечении различных сосудистых патологий, или агенты, снижающие содержание липидов, включая антигиперхолестеринэмические агенты (например ингибиторы НМ С СоА редуктазы, такие как ловастатин и симвастатин, ингибиторы НМ С СоА синтазы и т.д.) для лечения или профилактики атеросклероза. Например, пациентам, страдающим заболеванием коронарной артерии и пациентам, подвергшимся процедуре ангиопластики, показано совместное введение антагонистов рецепторов фибриногена и ингибиторов тромбина. Кроме того, ингибиторы тромбина повышают эффективность тромболитической реперфузии опосредствованной тканевым плазминогеном. При образовании тромба можно сначала вводить ингибиторы тромбина, а после вводить активатор тканевого плазминогена, или активатор другого плазминогена.

Типичные дозы ингибиторов тромбина настоящего изобретения в комбинации с другими антитромбоцитными агентами, антикоагулянтами или тромболитическими агентами могут быть такими же, как и дозы ингибиторов тромбина, вводимого без совместного введения с дополнительными антитромбоцитными агентами, антикоагулянтами или тромболитическими агентами, или могут быть значительно ниже, чем дозы ингибиторов тромбина, вводимые без совместного введения с дополнительными антитромбоцитными агентами, антикоагулянтами или тромболитическими агентами, в зависимости от терапевтической необходимости для конкретного пациента.

Соединения общей формулы

где \У. X и К³ имеют вышеуказанные значения, и А представляет фторпиридил, можно получить, осуществляя взаимодействие

в условиях, подходящих для образования амидной связи между кислотой и амином.

Подходящие в качестве исходных материалов карбоновые кислоты

можно получить способом, описанным 8апс1сг8ои с1 а1., XV О 97/40024, конкретно способ 1 до стадии Г и соответствующий пример I, способ 2 и соответствующий пример III, способ 3 до стадии Е и соответствующий пример V, способ 5 до стадии Е и соответствующий пример ЬХХХП, на стр 29-58 и 108-111, (содержание заявки включено сюда для ссылки). В другом варианте их можно получить, используя этил 3бром-6-метилпиразин-2-он-1-ацетат (см. 8апс1сг8ои с1 а1., XV О 99/11267, соединения 7-4, стр. 3437 (содержание заявки включено сюда для ссылки); интересующее соединение обозначено как А) в реакции конденсации с \ν-ΝΗ_;. с последующим омылением, что приводит к получению соответствующей кислоты.

Затем соединения получают, осуществляя взаимодействие карбоновой кислоты с

как представлено далее

может быть, например, 2-аминометил-Зфторпиридином (в ссылке обозначается как соединение В) и родственными производными фторпиридина, для получения конечного продукта. 2-аминометил-З-фторпиридин получают следующим образом

На/РЙ-С ^2НС<

ЕЮН, 40пев

Синтез 2-аминометил-3-фторпиридина начинается с каталитического восстановления 2циано-3-фторпиридина (8акашо1о е1. а1., Сйст. Рйапи. Ви11. 33(2) 565-571 (1985)), с использованием палладия-на-угле, что приводит к получению 2-аминометил-3-фторпиридина В в виде дигидрохлоридной соли.

Реакцию сочетания 2-аминометил-3 фторпиридина В и 3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридил) этиламино)-6-метилпиразин-2-он-1-уксусной кислоты осуществляют в ДМФ, используя ЕОС, НОВТ и триэтиламин. Добавление воды вызывает осаждение продукта, который затем очищают на хроматографической колонке с силикагелем, получая указанное в заголовке соединение в виде бесцветного твердого вещества. Превращение его в хлористо-водородную соль можно осуществить, обрабатывая этилацетатный раствор двумя эквивалентами 1М НС1 в этилацетате, с последующим фильтрованием.

2-Аминометил-3-фторпиридин (В) в виде дигидрохлоридной соли.

Перемешиваемый раствор 6,11 г (50,1 ммоль) 2-циано-З-фторпиридина в 250 мл этанола и 12/5 мл (150 ммоль) конц. НС1 гидрируют над 1,90 г 10% палладия-на-угле при 40 ф/дм² в течение 16 ч. Катализатор удаляют фильтрованием и растворители удаляют при пониженном давлении. Полученное твердое вещество разбавляют ацетонитрилом, и фильтруют, получая 8,0 г указанного в заголовке соединения в виде грязно-белого твердого вещества.

^!Н ЯМР (СОзСЮ) δ 8,48 (д, 1Н, 4,8 Гц), 7,69 (тд, 1Н, 9,2, 1,1 Гц), 7,68 (ддд, 1Н, 8,8, 4,4, 4,4 Гц), 4,34 (с, 2Н).

Обычно сочетание амида в растворе можно использовать для получения конечного продукта, но вместо этого можно использовать твердофазный синтез по классическому способу Мэррифильда. Обычной практикой является также добавление или удаление одной или более из защитных групп.

Соединения, содержащие различные группы у переменной А, можно получить путем сочетания альтернативных коммерчески доступных аминопроизводных где Υ¹ и Υ² имеют указанные выше значения, используя реакцию сочетания, описанную для сочетания

с карбоновой кислотой. Альтернативные аминопроизводные и способы получения аминопроизводных известны специалистам, и раскры ты далее.

1)

коммерчески доступен.

2)

1) МСРВА Νθχν,

--- Ъг

2) ΤΜδΟΝ.Εΐ₃Ν γ¹

например,

1) ίΡΑ,-7Β°Ο

2) ΜθΙ, -78°С

1) МСРВА

2) ΤΜ5ΟΝ, Ε1₃Ν

ра/с, на

ЕЮН, 55пси Нз

СНз

1-7

КОН/ вод·. ЕЮН

ил1н₄

1-8 и также, например,

1^^1) МСРВА ^ЫС

Υ¹ 2) ΤΜ30Ν, Εΐ₃Ν

Если нет других указаний, все спектры

ЯМР получены на приборе 400 МГц.

Пример 1. 3-Фтор-2-пиридилметил-3-(2,2дифтор-2-(2-пиридил)этиламино)-6-метилпираЗИН-2-ОН-1 -ацетамид.

оме

Синтез 2,2-дифтор-2-(2-пиридил)этиламина 1-6 включает получение 2-литийпиридина из 2-бромпиридина в эфире, с последующим взаимодействием с диэтилоксалатом, для получения сложного 2-пиридилкетоэфира 1-1.

В результате обработки избытком диэтиламиносульфуртрифторида получают этил дифтор-2-пиридилацетат 1-2, который восстанавливают без очистки, используя боргидрид натрия. Полученный 2,2-дифтор-2-пиридилэтанол

1-3 очищают хроматографически, и превращают в соответствующий трифлат 1-4, используя ангидрид трифторуксусной кислоты и 2,6-ди-третбутил-4-метилпиридин в виде основания. Сырой трифлат затем обрабатывают азидом натрия в ДМФ, получая 2,2-дифтор-2-пиридилэтил азид

1-5, который также очищают на хроматографической колонке с силикагелем. Восстановление азида каталитическим гидрированием приводит к получению 2,2-дифтор-2-пиридилэтиламина Ιό.

Конденсирование этого материала с этил 3-бром-6-метилпиразин-2-он-1-ацетатом А в смеси толуол/этанол дает этил 3-(2,2-дифтор-2(2-пиридил) этиламино)-6-метилпиразин-2-он-1 ацетат 1-7. Его омыление приводит к получению промежуточной 3-(2,2-дифтор-2-(2пиридил)этиламино)-6-метилпиразин-2-он-1 уксусной кислоты 1-8.

ЕОС/НОАТ ϋΜΕ/ΝΜΜ

Реакцию сочетания 2-аминометил-3фторпиридина В и 3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридил) этиламино)-6-метилпиразин-2-он-1-уксусной кислоты 1-8 осуществляют в ДМФ, используя ЕБС, НОАТ и Ν-метилморфолин. Добавление воды вызывает осаждение продукта, который затем очищают на хроматографической колонке с силикагелем, получая указанное в заголовке соединение в виде слегка окрашенного твердого вещества. Его превращение в соль хлористоводородной кислоты можно осуществить, обрабатывая этилацетатный раствор двумя эквивалентами 1М НС1 в этилацетате, с последующим фильтрованием.

Этил 2-пиридиноилформиат (1-1).

К перемешиваемому раствору 20 мл (210 ммоль) 2-бромпиридина в 500 мл сухого эфира при -78°С в атмосфере Аг медленно добавляют 85 мл 2,5М раствора н-бутиллития в гексане. После перемешивания на холоде в течение 30 мин, раствор переносят за 5 мин через две канюли в перемешиваемый при 0°С раствор 100 мл (7 36 ммоль) диэтилоксалата в 1,0 л сухого эфира в атмосфере Аг. После перемешивания в течение 2 ч на холоде, реакционную смесь промывают 600 мл насыщенного NаНСОз, водой и солевым раствором. Раствор сушат над Мд8О₄, растворители концентрируют при пониженном давлении, получая масло красного цвета, которое очищают на хроматографической колонке с 81О₂, (10 х 15 см), используя градиентное элюирование 1:4 до 35:65 ЕЮАс-гексан. Содержащие продукт фракции концентрируют при пониженном давлении, получая 1-1 в виде масла красноватого цвета.

'|| ЯМР (СБС1₃) δ 1,42 (т, 3Н), 4,45-4,55 (м, 2Н), 7,55-7,6 (м, 1Н), 7,9-7,95 (м, 1Н), 8,11 (д, 1Н), 8,78 (д, 1Н).

Этил дифтор-2-пиридилацетат (1-2).

Перемешиваемый раствор 22 г (123 ммоль) этил 2-пиридиноилформиата 1-1 и 75 г (465 ммоль) диэтиламиносульфуртрифторида (БА8Т) нагревают до 55°С в атмосфере Аг в течение ночи. Так как реакция не завершается, добавляют дополнительно 5 г БА8Т, и реакционную смесь нагревают дополнительно 24 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, и очень медленно выливают перемешиваемую смесь в 1 кг льда, 400 мл этилацетата и 500 мл насыщенного ΝαΗ0Ό₃. После добавления смесь подщелачивают, добавляя твердый NаНСОз. Водный слой экстрагируют Е1ОАс, и объединенные органические слои промывают насыщенным NаНСОз, солевым раствором, сушат над №₂8О₄, и растворители концентрируют при пониженном давлении, получая 1-2 в виде масла коричневого цвета.

Ή ЯМР (СБС1₃) δ 1,35 (т, 3Н), 4,35-4,4 (м, 2Н), 7,4-7,45 (м, 1Н), 7,75 (д, 1Н), 7,95 (д, 1Н),

8,45 (д, 1Н).

2,2-Дифтор-2-(2-пиридил)этанол (1-3).

К перемешиваемому раствору 19,5 г (97 ммоль) этил дифтор-2-пиридилацетата 1-2 в 200 мл абсолютного этанола при 0°С небольшими порциями добавляют 4,42 г 116 ммоль) боргидрида натрия. Через 30 мин реакцию гасят, добавляя 50 мл насыщенного ΝΗ₄ΟΊ. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, и остаток распределяют между 500 мл этилацетата и насыщенным NаНСОз. Органический слой промывают водой, солевым раствором, сушат над №₂8О₄, и концентрируют при пониженном давлении, получая масло коричневого цвета, которое очищают на 8Ю₂ (10 х 17 см), используя смесь 1:1 Е1О Ас-гексан. После повторной хроматографической обработки смешанных фракций, все чистые фракции объединяют и концентрируют при пониженном давлении, получая 1-3 в виде кристаллического твердого вещества бежевого цвета.

'Н ЯМР (СБС1₃) δ 3,6 (т, 1Н), 4,17-4,3 (м, 2Н), 7,4-7,45 (м, 1Н), 7,73 (д, 1Н), 7,84-7,91 (м, 1Н), 8,61 (д, 1Н).

2.2- Дифтор-2-(2-пиридил)этил трифторметансульфонат (1-4).

К перемешиваемому раствору 5 г (31,4 ммоль) 2,2-дифтор-(2-(2-пиридил)этанола 1-3 и 9,69 г (47,2 ммоль) 2,6-ди-трет-бутил-4метилпиридина в 110 мл метиленхлорида при -78°С в атмосфере Аг добавляют по каплям 7,93 мл (47,2 ммоль) ангидрида трифторуксусной кислоты. Через 1 ч, реакционную смесь разбавляют 100 мл пентана и фильтруют. Полученный фильтрат концентрируют, и снова обрабатывают пентаном и фильтруют. В результате концентрирования фильтрата получают 1-4 в виде масла коричневого цвета, содержащего примесь 2,6-ди-трет-бутил-4 -метилпиридина.

'|| ЯМР (СБС1₃) δ 5,12 (т, 2Н), 7,45-7,5 (м, 1Н), 7,75 (д, 1Н), 7,86-7,94 (м, 1Н), 8,65 (д, 1Н).

2.2- Дифтор-2-(2-пиридил)этилазид (1-5).

К перемешиваемому раствору 5,5 г 2,2дифтор-2-(2пиридил)этил трифторметансульфоната 1-4 в 70 мл ДМФ добавляют 6,74 г (104 ммоль)азида натрия в атмосфере Аг. Смесь нагревают до 60°С в течение ночи. Вторую порцию обрабатывают тем же способом, и после охлаждения до комнатной температуры обе реакционные смеси выливают в 600 мл воды, и экстрагируют 3 х 500 мл эфира. Объединенные экстракты промывают солевым раствором, сушат над №₂8О₄, и концентрируют при пониженном давлении, получая масло, которое очищают на 8Ю₂ (10 х 6 см), используя в качестве элюента гексан, 1:3 ЕЮ Ас-гексан и 1:1 ЕЮАсгексан. Фракции, содержащие продукт, концентрируют при пониженном давлении, получая 15 в виде масла желтого цвета.

' Н ЯМР (СБС1₃) δ 4,05 (т, 2Н), 7,4-7,45 (м, 1Н), 7,73 (д, 1Н), 7,83-7,89 (м, 1Н), 8,67 (д, 1Н).

2.2- Дифтор-2-(2-пиридил)этиламин (1-6).

Перемешиваемый раствор 100 мг 2,233 дифтор-2-(2-пиридил)этилазида 1-6 гидрируют в 10 мл этилацетата над 100 мт 10% палладия-наугле, используя баллон в течение 1 ч. Катализатор отфильтровывают, и растворители удаляют при пониженном давлении. Всего 1,8 г (9,7 ммоль) азида восстанавливают, используя этот способ для получения 1-6 в виде масла желтого цвета.

Ή ЯМР (СОС1₃) δ 8,66 (д, 1Н, 4,2 Гц), 7,82 (тд, 1Н, 7,7, 1,7 Гц), 7,68 (д, 1Н, 8,1 Гц), 7,377,40 (м, 1Н), 3,44 (т, 2Н, 14,3 Гц), 1,41 (шир., с, 2Н).

Этил-3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридилэтиламино)-6-метилпиразин-( 1Н)-2-он-1 -ацетат (1-7).

Раствор 7,13 г (45,1 ммоль) 2,2-дифтор-2(2-пиридил)этиламина и 12,4 г (45,1 ммоль) этил 3 -бром-6-метилпиразин-( 1Н)-2-он-1 -ацетата нагревают до 125°С в запаянной ампуле в течение ночи в 15 мл толуола и 15 мл этанола. Реакционную смесь концентрируют, остаток разбавляют этилацетатом, промывают 15% №1НСС)₃. и осуществляют обратную промывку водного слоя 3 порциями этилацетата. Объединенные органические слои сушат над Мд§О₄, и растворители удаляют при пониженном давлении, получая масло, которое обрабатывают на хроматографической колонке с 8Ю₂, используя 50:50 гексан-ЕЮАс, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества бледножелтого цвета.

Ή ЯМР (СОС1₃) δ 8,67 (д, 1Н, 4,8 Гц), 7,80 (т, 1Н, 7,9 Гц), 7,68 (д, 1Н, 7,9 Гц), 7,36-7,39 (м, 1Н), 6,71 (с, 1Н), 6,31 (шир. т, 1Н), 4,69 (с, 2Н), 4,35 (тд, 2Н, 14,1, 6,6 Гц), 4,24 (кв, 2Н, 7,1 Гц), 2,11 (с, ЗН), 1,29 (т, ЗН, 6,8 Гц).

3-(2,2-Дифтор-2-(2-пиридилэтиламино)-6метилпиразин(1Н)-2-он-1-уксусная кислота (18).

К перемешиваемому раствору 9,67 г (27,5 ммоль) этил 3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридилэтиламино)-6-метилпиразин(1Н)-2-он-1 -ацетата в 100 мл метанола добавляют 8,58 г (153,0 ммоль) гидроксида калия в 20 мл воды. Через 1 ч раствор концентрируют при пониженном давлении, и остаток растворяют в 25 мл воды. Этот раствор подкисляют до рН = 7, используя 1,ЗМ НС1, и концентрируют при пониженном давлении, получая твердое вещество желтого цвета, содержащее хлорид калия и указанное в заголовке соединение.

Ή ЯМР (СЭзОЭ) δ 8,65 (д, 1Н, 4,7Гц), 7,95 (тд, 1Н, 7,9, 1,8 Гц), 7,72-7,74 (м, 1Н), 7,50-7,54 (м, 1Н), 6,64 (д, 1Н, 1,09 Гц), 4,78 (с, 2Н), 4,31 (т, 2Н, 14,1 Гц), 2,16 (с, ЗН).

-Фтор-2-пиридилметил-3 -(2,2-дифтор-2(2-пиридил)этиламино)-6-метилпиразин-2-он-1 ацетамид (1-9).

К перемешиваемому раствору 300,1 г (0,418 ммоль) 3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридилэтиламино)-6-метилпиразин(1Н)-2-он-1-уксусной кислоты 1-8 и 99 мт (0,501 ммоль) дигидрохло рида 2-аминометил-З-фторпиридина В в 3 мл ДМФ добавляют 50,0 мт (0,26 ммоль) ЕОС, 35,0 мт (0,26 ммоль) НОВТ и 304 мт (3,0 ммоль) триэтиламина. После перемешивания в течение 1 ч летучую часть удаляют при пониженном давлении. Полученное темное масло разбавляют этилацетатом, промывают 5% №НСС)₃. и осуществляют обратную промывку водного слоя 3 порциями этилацетата. Объединенные органические слои сушат над Мд§О₄, и растворители удаляют при пониженном давлении, получая масло, которое очищают на хроматографической колонке с 8Ю₂, используя смесь 95:5 хлороформ-МеОН, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества бледножелтого цвета.

^!Н ЯМР (СОС1₃) δ 8,67 (дд, 1Н, 0,7, 4,8 Гц),

8,31 (ддд, 1Н, 1,3, 1,3, 4,6 Гц), 7,81 (ддд, 1Н, 1,7, 7,7, 7,7 Гц); 7,69 (ддд, 1Н, 0,9, 0,9, 8,1 Гц), 7,20 (шир. т, 1Н), 7,37 (м, 2Н), 7,23 (ддд, 1Н, 8,6, 4,3

4.3 Гц), 6,75 (д, 1Н, 0,9 Гц), 6,34 (шир. т, 1Н, 6,3 Гц), 4,73 (с, 2Н), 4,63 (дд, 2Н, 4,7, 1,6 Гц), 4,37 (тд, 2Н, 14,2, 6,5 Гц), 2,25 (д, ЗН, 0,9 Гц).

Превращение в дигидрохлоридную соль можно осуществить, обрабатывая диоксановый раствор двумя эквивалентами 4,ОМ НС1 в диоксане с последующим концентрированием.

^!Н ЯМР (СО₃ОО) δ 8,71 (шир. д, 1Н, 4,6 Гц), 8,56 (дд, 1Н, 0,9, 5,3 Гц), 8,15 (ддд, 1Н, 0,9, 8,9, 8,9 Гц), 8,05 (ддд, 1Н, 1,6, 7,8, 7,8 Гц), 7,83 (д, 1Н, 8,1 Гц), 7,81 (м, 1Н), 7,61 (дд, 1Н, 5,1, 7,3 Гц), 6,68 (д, 1Н, 0,9 Гц), 4,88 (с, 2Н), 4,74 (д, 2Н,

1.3 Гц), 4,44 (т, 2Н, 14,4 Гц), 2,25 (д, ЗН, 0,8 Гц).

Пример 2. В соответствии с представленным далее способом получают хлорпиразиноновое производное соединения 1-9.

^Ε4θΛ¥^α ° О 26

26. ^{+ Μ}®°ν^ΝΗ₂ 1РГОН

ОМе

£5

Этил 1\1-(этил карбоксиметил)оксамат (2-1).

К суспензии этил глицин · НС1 (38,4 г, 275 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (360 мл) добавляют триэтиламин (77,0 мл, 550 ммоль) при комнатной температуре. После 30 минутного перемешивания гетерогенную смесь охлаждают до 0°С, и по каплям добавляют этил оксалилхлорид (30,3 мл, 275 моль) в течение 1 ч. После завершения добавления, охлаждающую баню удаляют, и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи.

Реакционную смесь разбавляют водой (250 мл), и слои разделяют. Осуществляют обратную промывку водного слоя 2 порциями дихлорметана (250 мл). Объединенные органические слои промывают водой (250 мл), затем солевым раствором (250 мл), сушат над Мд8О₄ и концентрируют, получая масло 2-1, которое непосредственно переносят на следующую стадию.

Ν-Отил карбоксиметил)-Ы'-(2,2-диметоксиэтил)оксамид (2-2).

К раствору оксамата (84,0 г, 414 ммоль) 21 в 2-пропаноле (500 мл) добавляют аминоацетальдегид диметилацеталь (45,7 г, 435 ммоль) одной порцией. После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре, реакционную смесь концентрируют до густого масла оранжевого цвета. Эту густую суспензию разбавляют

2-пропанолом (300 мл), и твердую часть извлекают шпателем. В результате фильтрования получают твердое вещество, которое далее промывают дополнительной порцией 2-пропанола. Удаление остатков 2-пропанола осуществляют в высоком вакууме, получая твердое вещество светло-оранжевого цвета 2-2 (89,9 г).

Ή ЯМР (СЭС1₃) δ 7,82 (шир. с, 1Н), 7,50 (шир. с, 1Н), 4,41 (т, 1Н, 5,3 Гц), 4,24 (кв, 2Н, 7,1 Гц), 4,09 (д, 2Н, 5,9 Гц), 3,47 (дд, 2Н, 5,3, 6,2 Гц), 3,40 (с, 6Н), 1,30 (т, ЗН, 7,1 Гц).

Этил 3 -гидроксипиразин( 1Н)-2-он-1 -ацетат (2-3).

Раствор оксамида (89,8 г, 343 ммоль) 2-2, уксусную кислоту (400 мл), и концентрированную НС1 (2 мл) нагревают до кипения с обратным холодильником. Через 1 ч черную реакционную смесь концентрируют до густого масла (высокий вакуум используют для полного удаления АсОН), которое разбавляют ЕЮН (150 мл) и МеОН (150 мл). Поцарапывание густого черного масла шпателем вызывает осаждение продукта. МеОН удаляют в роторном испарителе, и оставшуюся суспензию фильтруют и промывают Е1ОН (200 мл), получая твердое вещество желто-коричневого цвета. В результате перекристаллизации из кипящего с обратным холодильником Е1ОН (300 мл) получают грязнобелый порошок 2-3.

'Н ЯМР (СОзСЮ) δ 6,50 (д, 1Н, 5,9 Гц), 6,36 (д, 1Н, 5,9 Гц), 4,58 (с, 2Н), 4,23 (кв, 2Н, 7,1 Гц), 1,28 (т, ЗН, 7,1 Гц).

Дополнительный сырой ДИОН можно получить после концентрирования маточного раствора.

Этил 3-бромпиразин(1Н)-2-он-1-ацетат (24).

Раствор гидроксипиразинона (25,0 г, 126 ммоль) 2-3 и оксибромида фосфора (37,9 г, 132 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (250 мл) нагревают до кипения с обратным холодильником. Через 8 ч реакционную смесь обрабатывают насыщенным водным раствором №1₂СС)₃ (250 мл), и перемешивают в течение 1 ч. Эту смесь разбавляют водой (100 мл) и дихлорметаном (100 мл), слои разделяют, и осуществляют обратную промывку водного слоя ЕЮ Ас (3 х 200 мл). Объединенные органические слои сушат (Мд8О₄), и концентрируют, получая масло, которое хранят в высоком вакууме в течение ночи, получая твердое вещество коричневого цвета 2-4.

¹Н ЯМР (СЭС1₃) δ 7,17 (д, 1Н, 4,2 Гц), 7,07 (д, 1Н, 4,2 Гц), 4,65 (с, 2Н), 4,27 (кв, 2Н, 7,2 Гц),

1,31 (т, ЗН, 7,2 Гц).

Этил 3 -(2,2-дифтор-2-(2-пиридилэтиламино)пиразин( 1Н)-2-он-1 -ацетат (2-5).

Раствор 4,80 г (30,4 ммоль) 2,2-дифтор-2(2-пиридил)этиламина, 4,24 мл (30,4 ммоль) триэтиламин и 7,93 г (30,4 ммоль) этил 3бромпиразин(1Н)-2-он-1-ацетата 2-4 нагревают до 120°С в запаянной ампуле в течение ночи в 12 мл толуола и 4 мл этанола. Реакционную смесь концентрируют, и остаток разделяют между дихлорметаном и насыщенным водным раствором №1НС0₃. Осуществляют обратную промывку водного слоя 4 порциями дихлорметана. Объединенные органические слои сушат над Мд8О₄, и растворители удаляют при пониженном давлении, получая масло, которое обрабатывают на хроматографической колонке с 8Ю₂, используя градиентное элюирование 60:40 до 40:60 гексан-ЕЮ Ас, и получая 2-5 в виде твердого вещества желтого цвета.

¹Н ЯМР (СЭС1₃) δ 8,67 (дд, 1Н, 4,8, 0,7 Гц),

7,81 (ддд, 1Н, 7,8, 7,8, 1,7 Гц), 7,69 (дд, 1Н, 7,8, 1 Гц), 7,38 (дд, 1Н, 5,1, 7,0 Гц), 6,86 (д, 1Н, 4,8 Гц), 6,54 (шир. т, 1Н, 5,9 Гц), 6,40 (д, 1Н, 4,6 Гц), 4,54 (с, 2Н), 4,38 (тд, 2Н, 14,0, 6,4 Гц), 4,24 (кв, 2Н, 7,1 Гц), 1,29 (т, 3 Н, 7,1 Гц).

Эгид 3 -(2,2-дифтор-2-(2-пиридилэтиламино)-6-хлорпиразин-( 1Н)-2-он-1 -ацетат (2-6).

Перемешиваемый раствор 6,81 г (20,1 ммоль) этил 3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридилэтиламино)пиразин(1Н)-2-он-1-ацетата 2-5 и 2,42 г (18,1 ммоль) Ν-хлорсукцинимида в 100 мл 1,2дихлорэтана нагревают до кипения с обратным холодильником. К реакционной смеси добавляют дополнительно 242 мг (1,81 ммоль) и 75 мг (0,56 ммоль) N08 через 1 ч и 1,5 ч, соответственно. Всего через 2,5 ч раствор охлаждают до комнатной температуры и разделяют между дихлорметаном (150 мл) и насыщенным водным раствором №НС Оз (200 мл). Слои разделяют, и осуществляют обратную промывку водной фазы дихлорметаном (2 х 200 мл). Объединенные органические слои сушат над М§8СО₄, и раствор концентрируют до объема 10 мл. Эту жидкость непосредственно вводят в колонку с §ίθ₂и осуществляют градиентное элюирование, используя 65:35 до 55:45 гексан-ЕЮАс, получая 26 в виде твердого вещества желтого цвета.

Ή ЯМР (СОС1₃) δ 8,68 (д, 1Н, 4,8, Гц), 7,83 (ддд, 1Н, 7,7, 7,7, 1,6 Гц), 7,9 (дд, 1Н, 7,9 Гц), 7,40 (дд, 1Н, 4,9, 7,3 Гц), 6,96 (с, 1Н), 6,49 (шир. т, 1Н, 5,9 Гц), 4,89 (с, 2Н), 4,38 (тд, 2Н, 13,9, 6,5 Гц), 4,26 (кв, 2Н, 7,1 Гц), 1,30 (т, ЗН, 7,1 Гц).

3-(2,2-Дифтор-2-(2-пиридилэтиламино)-6хлорпиразин(1Н)-2-он-1-уксусная кислота (2-7).

К перемешиваемому раствору 7,27 г (19,5 ммоль) этил 3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридилэтиламино)-6-хлорпиразин(1Н)-2-он-1-ацетата 2-6 в 200 мл метанола добавляют 39 мл (39,0 ммоль) 1М водного гидроксида калия. Через 3 ч этот раствор подкисляют до рН = 7, используя концентрированную НС1, и концентрируют при пониженном давлении (азеотроп с Р11СН₃), получая твердое вещество белого цвета, содержащее хлорид калия и 2-7.

Ή ЯМР (ΓΌ₃ΟΟ) δ 8,64 (д, 1Н, 4,8 Гц), 7,93 (ддд, 1Н, 7,7, 7,7, 1,5 Гц), 7,70 (д, 1Н, 8,0 Гц), 7,49 (дд, 1Н, 5,2, 7,4 Гц), 6,80 (с, 1Н), 4,67 (с, 2Н), 4,27 (т, 2Н, 13,9 Гц).

3-фтор-2-пиридилметил-3-(2,2-дифтор-2(2-пиридил)этиламино)-6-хлорпиразин-2-опе-1 ацетамид (2-8).

К перемешиваемому раствору 330 мг (0,536 ммоль) 3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридилэтиламино)-6-хлорпиразин(1Н)-2-он-1-уксусной кислоты 2-7 и 160 мг (0,805 ммоль) дигидрохлорида 2-аминометил-З-фторпиридина в 2 мл ДМФ добавляют 128 мг (0,67 ммоль) ЕОС, 91 мг (0,67 ммоль) НО АТ и 0,30 мл (2,1 ммоль) триэтиламина. После перемешивания в течение ночи добавляют 80 мг дигидрохлорида 2аминометил-3-фторпиридина, 128 мг ЕЭС. 91 мг НО АТ и 0,08 мл (2,1 ммоль) триэтиламина. Реакционную смесь перемешивают в течение еще 24 часов, и летучую часть удаляют в вакууме. Остаток разбавляют насыщенным водным раствором №1НС 0₃ (10 мл) и водой (15 мл) и фильтруют, получая твердое вещество желтокоричневого цвета. Осуществляют градиентное элюирование этого материала на колонке с 8Ю₂, используя в качестве элюента 1:99 до 5:95 МеОН-СН₂С1₂; получая твердое вещество желтого цвета 2-8.

^!Н ЯМР (ΟϋΟ1₃) δ 8,67 (д, 1Н, 4,6 Гц), 8,32 (д, 1Н, 4,6 Гц), 7,81 (дд, 1Н, 7,8, 6,4 Гц), 7,69 (д, 1Н, 7,8 Гц), 7,41-7,37 (м, 2Н), 7,27-7,22 (м, 2Н), 6,97 (с, 1Н), 6,49 (шир. т, 1Н, 6,0 Гц), 4,93 (с, 2Н), 4,66 (д, 2Н, 4,0 Гц), 4,38 (тд, 2Н, 13,9, 6,5 ГЦ).

2-8 называют также 2-{3-[(2,2-дифтор-2-(2пиридил)этил)амино]-6-хлор-2-оксогидропиразинил}-М-{(3-фтор(2-пиридил))метил]ацетамидом. Превращение в гидрохлоридную соль можно осуществить, разбавляя продукт этилацетатом (2 мл), и обрабатывая 5 мл 1,5М НС1 в этилацетате, с последующим фильтрованием.

^!Н ЯМР (СО₃ОО) δ 8,72 (д, 1Н, 4,6 Гц), 8,56 (дд, 1Н, 0,9, 5,3 Гц), 8,16-8,11 (м, 2Н), 7,87 (д, 1Н, 8,1 Гц), 7,80 (ддд, 1Н, 4,8, 4,8, 9,0 Гц), 7,68 (дд, 1Н, 5,4, 7,2 Гц), 6,87 (с, 1Н), 4,95 (с, 2Н), 4,74 (д, 2Н, 1,1 Гц), 4,35 (т, 2Н, 13,8 Гц).

Пример 3. В соответствии с представленным далее способом синтеза получают тио-, сульфонильные и сульфинильные производные соединения 2-7.

Рй/С, НС1 меон 55псвН2

2-Циано-З-метилтиопиридин (3-1).

Перемешиваемый раствор 1,00 г (8,19 ммоль) 2-циано-З-фторпиридина и 0,631 г (9,01 ммоль)тиометоксида натрия в 8 мл ДМФ перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляют водой (80 мл) и перемешивают 5 мин. Полученное твердое вещество отфильтровывают и сушат в высоком вакууме, получая 3-1 в виде грязнобелого твердого вещества.

Ή ЯМР (СОС1₃) δ 8,46 (д, 1Н, 4,6 Гц), 7,66 (д, 1Н, 8,3 Гц), 7,44 (дд, 1Н, 4,6, 8,3 Гц), 2,58 (с, ЗН).

2-Аминометил-З-метилтиопиридин дигидрохлорид (3-2).

Перемешиваемый раствор 659 мг (4,39 ммоль) 2-циано-3-метилтиопиридина 3-1 в 25 мл метанола и 5 мл 6М водной НС1 гидрируют над 659 мг 10% палладия-на-угле при 55 ф/дм² в течение 5 ч. Катализатор удаляют фильтрованием, и растворители концентрируют при пониженном давлении. Полученный материал разбавляют метанолом и концентрируют (2х), получая 3-2 в виде грязно-белого твердого вещества.

Ή ЯМР (СОзСЮ): δ 2,58 (с, ЗН), 4,28 (с, 2Н), 7,43 (м, 1Н), 7,86 (дд, 1 = 1,3 и 8,1 Гц, 1Н), 8,43 (дд, 1 = 1,3 и 4,8 Гц, 1Н).

-Метилтио-2-пиридилметил-З -(2,2-дифтор-2 -(2 -пиридил)этиламино) -6 -хлорпиразин2-он-1-ацетамид (3-3).

К перемешиваемому раствору 545 мг (0,886 ммоль) 3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридилэтиламино)-6-хлорпиразин(1Н)-2-он-1-уксусной кислоты 2-7 и 144 мг (0,930 ммоль) 2-аминометил-3-метилтиопиридин дигидрохлорида 3-2 в 9 мл ДМФ добавляют 178 мг (0,930 ммоль) ЕОС, 126 мг (0,930 ммоль) НОВТ и 179 мг (1,77 ммоль) ΝΜΜ. После перемешивания в течение ночи, реакционную смесь разделяют между ЕЮАс и 10% водным №1НС0₃. и нерастворимый материал отфильтровывают. Органическую фазу промывают водой, солевым раствором, сушат (Мд8О |) и концентрируют. Этот остаток и отфильтрованную твердую часть объединяют, и на хроматографической колонке с 8Ю₂ осуществляют градиентное элюирование, используя в качестве элюента 1:99 до 5:95 МеОН-СНС1₃. Этот материал растворяют в 5 мл метанола, и добавляют 3 капли этанола, насыщенного НС1. В результате концентрирования получают 3-3 в виде твердого вещества светло-желтого цвета.

¹Н ЯМР (ΌβΟΜδΟ): δ 2,49 (нечеткий с, ЗН), 4,22 (м, 2Н), 4,42 (д, 1 = 4,9 Гц, 2Н), 4,82 (с, 2Н), 6,91 (с, 1Н), 7,34 (м, 2Н), 7,57 (м, 1Н), 7,70 (м, 2Н), 7,96 (м, 1Н), 8,32 (д, 1 = 3,9 Гц, 1Н), 8,69 (м, 2Н); Масс-спектр высокого разрешения (ЕАВ) рассчитано С_2нН_2иОЕ₂Н,0₂8 (М+1) рассчитано 481,1019, найдено 481,0999.

-Метилсульфонил-2-пиридилметил-З (2,2-дифтор-2-(2-пиридил)этиламино)-6-хлорпиразин-2-он-1-ацетамид (3-4).

-Метилтио-2-пиридилметил-З -(2,2-дифтор-2-(2-пиридил)этиламино)-6-хлорпиразин-

2- οη-Ι-ацетамид (15 мг, 0,031 ммоль) 3-3 суспендируют в 2,5 мл метанола и обрабатывают МСРВА (50-60%, 21,5 мг, 0,062 ммоль). После перемешивания в течение 3 ч добавляют дополнительный эквивалент МСРВА (50-60%, 10,75 мг, 0,031 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи, и добавляют насыщенный водный раствор Ν;ιΗΓΌ₃ до тех пор, пока раствор не становится нейтральным. Эту смесь концентрируют, а остаток разделяют между ЕЮАс и водой. Органическую фазу промывают водой, солевым раствором, сушат (М§80₄) и концентрируют. Этот материал обрабатывают на хроматографической колонке с 8Ю₂, используя градиентное элюирование 1:99 до 3:97 МеОН-СНС1₃, получая 3-4.

^!Н ЯМР (СОС1₃): δ 3,25 (с, ЗН), 4,38 (м, 2Н), 4,91 (с, 2Н), 4,96 (д, 1 = 5,3 Гц, 2Н), 6,50 (т, 1Н), 6,98 (с, 1Н), 7,26 (нечеткий м, 1Н), 7,45 (м, 2Н), 7,70 (дд, 1Н), 7,84 (т, 1Н), 8,32 (д, 1Н), 8,67 (м, 2Н), 8,74 (т, 1Н). Масс-спектр высокого разрешения (ЕАВ) рассчитано Ο₂₀Η₂₀Ο1Ε₂Ν₆Ο₄8 (М+1) 513,0923, найдено 513,0895.

[Я, 8] З-метилсульфинил-2-пиридилметил-

3- (2,2-дифтор-2-(2-пиридил)этиламино)-6хлорпиразин-2-он-1-ацетамид (3-5).

-Метилтио-2-пиридилметил-З -(2,2-дифтор-2-(2-пиридил)этиламино)-6-хлорпиразин-2он-1-ацетамид (50 мг, 0,104 ммоль) 3-3 суспендируют в 8 мл метанола и обрабатывают МСРВА (50-60%, 35,9 мг, 0,104 ммоль). После перемешивания в течение 1 ч добавляют насыщенный водный раствор №1НСС)₃ до тех пор, пока раствор не становится нейтральным. Затем эту смесь очищают с помощью ВЭЖХ, получая 3-5 в виде бесцветного твердого вещества.

^!Н ЯМР (ΌβϋΜδΟ): δ 2,76 (с, ЗН), 4,21 (м, 2Н), 4,45 (м, 2Н), 4,76 (с, 2Н), 6,90 (с, 1Н), 7,36 (м, 1Н), 7,55 (м, 1Н), 7,61 (м, 1Н), 7,69 (д, 1Н), 7,96 (т, 1Н), 8,25 (д, 1Н), 8,69 (м, 2Н), 8,96 (т, 1Н). Масс-спектр высокого разрешения НЯМ8 (РАВ) рассчитано С.ЧН2нС1Р₂М,Оз8 (М+1) 497,0969, найдено 497,0970.

Энантиомеры разделяют на колонке СЫга1рак АО, элюируя смесью 1:1 2-пропанол:гексан/0,1% диэтиламин (для получения ранее выходящего энантиомера в виде бесцветного твердого вещества), а затем 7:3 2пропанол:гексан/0,1% диэтиламин (для получения выходящего позже энантиомера в виде бесцветного твердого вещества).

Пример 4. Получение гидрохлорида 3фтор-2-пиридилметил 3 -(2,2-дифтор-2-(2-пиридилэтиламино)-6-цианопиразин-2-он-1 -ацетамида (4-7).

О

5еОг диоксан

ОЕ1

Стадия А.

Этил

6-формил-З -гидроксипиразин(1Н) -2-он-1-ацетат (4-1).

Суспензию гидроксипиразинона (5,0 г, 23,6 ммоль) и оксида селена)IV) (2,62 г, 23,6 ммоль), в 1,4-диоксане (100 мл) нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 24 ч. Темную реакционную смесь охлаждают и фильтруют через слой целита с помощью МеОН. В результате концентрирования и очистки остатка на колонке с силикагелем, осуществляя градиентное элюирование 3:97 до 10:90 МеОН:СН₂С1₂ получают 4-1 в виде твердого веще ства оранжевого цвета.

Ή ЯМР (СО₃ОЭ) δ 9,11 (с, 1Н), 7,39 (8,

1Н), 5,12 (с, 2Н), 4,22 (кв, 2Н, 7,1 Гц), 1,29 (т, 3

Н, 7,1 Гц).

4-1

ЫНгОННС! руг, ЕЮН

О

Стадия В. Этил +2

6-формо ксимил-3гидроксипиразин( 1Н)-2-он-1 -ацетат (4-2).

К суспензии формилпиразинона 4-1 (5,43 г, 24,0 ммоль) и гидрохлорида гидроксиламина (1,67 г, 24,0 ммоль) в этаноле (100 мл) добавля ют пиридин (1,90 мл, 24,0 ммоль). Через 2 ч при кипении с обратным холодильником, реакционную смесь охлаждают и концентрируют. Сырое твердое вещество перекристаллизовывают из этанола (100 мл), получая 4-2 в виде твердого вещества. Дополнительное количество продукта получают при концентрировании фильтрата и тщательном растирании его с водой (50 мл).

Ή ЯМР (ЭМ8О) δ 11,85 (Д, 1Н), 11,19 (С,

1Н), 7,82 (с, 1Н), 6,79 (д, 1Н, 5,9 Гц), 5,05 (с, 2Н), 4,12 (кв, 2Н, 7,1 Гц), 1,20 (т, ЗН, 7,1 Гц).

Ν^χ0Η ν V ⁰ РРЬз Ν-γ^ΟΝο

ΗΟ^γ^Ν'^'ΟΕΐ ОСЕ.СС1. ΗΟ^χ1γ^Ν·^ΟΒ О 4-2 О

Стадия С. Этил 6-циано-З-гидроксипиразин(1Н)-2-он-1-ацетат (4-3).

Суспензию гидроксипиразинона 4-2 (2,70 г, 11,2 ммоль) и связанного на полимере трифенилфосфина (1,55 ммоль/г смолы: 15,1 г, 23,5 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (90 мл) и четыреххлористом углероде (9 мл) нагревают при кипении с обратным холодильником в течение полутора часов. Реакционную смесь охлаждают, фильтруют, и смолу промывают 1:1 МеОН:СН₂С1₂(200 мл). Концентрирование фильтрата приводит к получению 4-3 в виде твердого вещества желто-коричневого цвета.

Ή ЯМР (СЭС1₃) δ 7,06 (с, 1Н), 4,73 (с, 2Н), 4,29 (кв, 2Н, 7,1 Гц), 1,33 (т, ЗН, 7,1 Гц).

Стадия Э. Этил З-хлор-6-цианопиразин(1Н)-2-он-1-ацетат (4-4).

Суспензию гидроксипиразинона 4-3 (450 мг, 2,02 ммоль) и аммонийхлорида (237 мг, 4,44 ммоль) в хлорокиси фосфора (2 мл) нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 1,5 ч. Реакционную смесь охлаждают, и ле тучую часть удаляют в роторном испарителе. Остаток гасят водой, и твердый №₂СО₃ добав ляют до тех пор, пока смесь не становится основной. Эту водную смесь экстрагируют дихлорметаном (Зх), и объединенные органические экстракты сушат (№ь8О|). и концентрируют, получая 4-4 в виде масла янтарного цвета.

Ή ЯМР (СЭС1₃) δ 7,60 (с, 1Н), 4,87 (с, 2Н),

ТЕА, 60°С

РНСН₃:Е10Н 3:1

Стадия Е. Этил 3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридил)этиламино)-6-цианопиразин( 1Н)-2-он-1 ацетат (4-5).

Смесь 0,300 г (1,9 ммоль) 2,2-дифтор-2-(2пиридил)этиламина 1-6, 0,35 мл (2,5 ммоль) триэтиламина и 0,42 г (1,75 ммоль) этил 3-хлор6-цианопиразин(1Н)-2-он-1-ацетата 4-4 в 3 мл толуола и 0,5 мл этанола нагревают до 60°С в течение 1 ч. Реакционную смесь концентриру ют, а остаток разделяют между дихлорметаном и насыщенным водным раствором №1НСС)₃. Осуществляют обратную промывку водной фазы дихлорметаном (2х), сушат и концентрируют. В результате обработки с помощью флешхроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента 25-50% ЕЮАс/-гексан получают

4-5 в виде порошка желто-коричневого цвета.

Ή ЯМР (СОС1₃) δ 8,67 (д, 1Н, 4,8 Гц), 7,86 (ддд, 1Н, 1,6, 7,8, 7,8 Гц), 7,71 (дд, 1Н, 0,9, 8,0 Гц), 7,43 (м, 2Н), 7,35 (шир. т, 1Н), 4,79 (с, 2Н), 4,62 (дт, 2Н, 6,5, 13,5 Гц), 4,29 (кв, 2Н, 7,1 Гц),

1,32 (т, ЗН, 7,1 Гц).

Стадия Е. 3-(2,2-Дифтор-2-(2-пиридил) этиламино)-6-цианопиразин(1Н)-2-он-1-уксусная кислота (4-6).

К перемешиваемому раствору 0,38 г (1,06 ммоль) этил 3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридил) этиламино)-6-цианопиразин(1Н)-2-он-1-ацетата 4-5 в диметоксиэтане (10 мл) добавляют 1,6 мл раствора гидроксида лития (1,0М в воде). Через 1 ч раствор нейтрализуют, используя 1М НС1. В результате концентрирования при пониженном давлении (азеотроп с Р11СН₃) получают грязнобелое твердое вещество, содержащее хлорид лития и 4-6, которое используют непосредственно на следующей стадии.

Стадия С. Гидрохлорид З-фтор-2пиридилметил 3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридил) этиламино)-6-цианопиразин-2-он-1 -ацетамида (47).

К перемешиваемому раствору 0,080 ммоль 3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридилэтиламино)-6-цианопиразин(1Н)-2-он-1-уксусной кислоты 4-6 и 24 мг (0,12 ммоль) дигидрохлорида 2-аминометил3-фторпиридина в 1 мл ДМФ добавляют 23 мг (0,12 ммоль) ЕОС, 16 мг (0,12 ммоль) НО АТ и 0,056 мл (0,40 ммоль) триэтиламина. После перемешивания в течение 24 ч добавляют 20 мг дигидрохлорида 2 -аминометил- 3 -фторпиридина, 25 мг ЕОС, и 0,050 мл триэтиламина. Реакционную смесь перемешивают дополнительно в течение 72 ч, и летучую часть удаляют в вакууме. Остаток разбавляют насыщенным водным раствором №1НС0₃ (5 мл), водой (5 мл), и фильтруют, получая твердое вещество желтокоричневого цвета. Этот материал очищают на хроматографической колонке с 8Ю₂, используя градиентное элюирование 2:98 до 4:96 МеОНСН₂С1₂, получая твердое вещество желтого цвета 4-7.

Ή ЯМР (СОС1₃) δ 8,66 (д, 1Н, 4,8 Гц), 8,34 (дд, 1Н, 4,8 Гц), 7,84 (ддд, 1Н, 1,5, 7,8, 7,8 Гц), 7,70 (дд, 1Н, 1, 7,9 Гц), 7,44-7,39 (м, ЗН), 7,33 (м, 2Н), 7,26 (м, 2Н), 4,83 (с, 2Н), 4,68 (д, 2Н, 4,4 Гц), 4,44 (дт, 2Н, 6,5, 13,1 Гц).

Пример 5. Получение 3-фтор-4-метил-2пиридилметил 3 -(2,2-дифтор-2-(2-пиридил)этиламино)-6-хлорпиразин-2-он-1-ацетамида (5-5).

З-Фтор-4-метилпиридин (5-1).

К перемешиваемому раствору ЬОА (5,5 ммоль) при -78°С добавляют по каплям 3фторпиридин (486 мг, 5,0 ммоль). После перемешивания в течение 4 ч при -78°С по каплям добавляют метилиодид (0,343 мл, 5,5 ммоль). Реакцию гасят после перемешивания при -78°С в течение 2 ч, добавляя 20 мл насыщенного водного ΝΗ₄α. Эту смесь экстрагируют ЕЮ Ас (3 х 25 мл), объединенные органические экстракты сушат и концентрируют, получая продукт в виде твердого вещества желтого цвета 5-1.

^!Н ЯМР (СОС1₃) δ 8,36 (шир. с, 1Н), 8,27 (д, 1Н, 4,8 Гц), 7,15 (шир, дд, 1Н, 5,7, 5,7 Гц),

2,32 (с, ЗН).

3-Фтор-4-метилпиридин-М-оксид (5-2).

К перемешиваемому раствору 3,17 г (28,6 ммоль) З-фтор-4-метилпиридина в 5-1 35 мл дихлорметана добавляют 4,83 г №1НС<Э₃ (57,5 ммоль, в 10 мл Н₂О). Эту смесь охлаждают до 0°С, и тремя порциями в течение 15 мин добавляют 9,85 г МСРВА (57,1 ммоль). Реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры в течение ночи. Слои двухфазной смеси разделяют, и водную фазу промывают хлороформом (3 х 100 мл). Объединенные органические слои сушат над Мд8О₄, и растворители удаляют при пониженном давлении, получая масло, которое очищают на хроматографической колонке с 8Ю₂, используя 95:5 ОСМ-МеОН, получая 5-2 в виде твердого вещества белого цвета.

Ή ЯМР (СОС1₃) δ 8,13 (д, 1Н, 4,6 Гц), 7,99 (д, 1Н, 6,6 Гц), 7,09 (шир. дд, 1Н, 7,6, 7,6 Гц), 2,30 (с, ЗН).

-Циано-3 -фтор-4-метилпиридин (5 -3).

К перемешиваемому раствору 0,95 г (7,48 ммоль) Ν-оксида З-фтор-4-метилпиридина 5-2 в 20 мл ацетонитрила добавляют 1,14 г (11,2 ммоль) триэтиламина, а затем 1,48 г (15,0 ммоль) триметилсилилцианида. Эту реакционную смесь нагревают при кипении с обратным холодильником в течение 48 ч, после чего этот раствор концентрируют при пониженном давлении. Темный остаток растворяют в СНС1з промывают насыщенным водным ΝηΗΕΌ,. и осуществляют обратную промывку водного слоя хлороформом (4х). Объединенные органические слои сушат над Мд8О₄, и растворители удаляют при пониженном давлении, получая масло, которое очищают на хроматографической колонке с δίθ₂, используя 75:25 гексанЕЮАс, получая 5-3 в виде масла желтого цвета.

Ή ЯМР (СЭС1₃) δ 8,39 (д, 1Н, 4,8 Гц), 7,09 (шир. дд, 1Н, 5,8, 5,8 Гц), 2,41 (с, ЗН).

Дигидрохлорид 2-амино метил-3-фтор-4метилпиридина (5-4).

Перемешиваемый раствор 332 мг (2,44 ммоль) 2-циано-3-фтор-4-метилпиридина 5-3 в 15 мл этанола и 0,61 мл (7,32 ммоль) концентрированной НС1 гидрируют над 175 мг 10% палладия-на-угле при 55 ф/дм² в течение 16 ч. Катализатор удаляют фильтрованием, и растворители удаляют при пониженном давлении, получая 5-4 в виде твердого вещества желтого цвета.

Ή ЯМР (СЭзОЭ) δ 8,41 (д, 1Н, 5,1 Гц), 7,54 (дд, 1Н, 5,5, 5,5 Гц), 4,40 (с, 2Н), 2,44 (с, ЗН).

-Фтор-4 -метил-2 -пиридилметил 3-(2,2дифтор-2-(2-пиридил)этиламино)-6-хлорпиразин-2-он-1-ацетамид (5-5).

К перемешиваемому раствору 80 мг (0,197 ммоль, остальное КС1) 3-(2,2-дифтор-2-(2пиридил)этиламино)-6-хлорпиразин(1Н)-2-он-1уксусной кислоты 2-7 и 63 мг (0,296 ммоль) дигидрохлорида 2-амино метил-3 -фтор-4-метилпиридина 5-4 в 1 мл ДМФ добавляют 77 мг (0,40 ммоль) ЕЭС, 54 мг (0,40 ммоль) НО АТ и 0,13 мл (0,89 ммоль) ТЕА. После перемешивания в течение ночи, летучую часть удаляют в вакууме. Остаток разбавляют насыщенным водным раствором №НСО₃. фильтруют и остаток промывают водой, получая твердое вещество коричневого цвета. Этот материал обрабатывают с помощью флеш-хроматографии, используя 2-4% МеОН:ЭСМ, получая указанное в заголовке соединение в виде твердого вещества белого цвета. Превращение его в соль НС1 осуществляют, разбавляя свободное основание МеОН (5 мл), обрабатывая 2,5М НС1 (2 мл) и концентрируя до твердого вещества 5-5.

Ή ЯМР (СЭзОЭ) δ 8,82 (д, 1Н, 4,1 Гц), 8,56 (д, 1Н, 5,1 Гц), 8,33 (дд, 1Н, 7,4, 7,4 Гц), 8,04 (д, 1Н, 7,8 Гц), 8,00 (шир. τ, 1Н), 7,87 (шир. τ, 1Н, 5,6 Гц), 6,92 (с, 1Н), 5,0 (с, 2Н), 4,80 (с, 2Н), 4,44 (τ, 2Н, 13,6 Гц), 2,621 (с, ЗН).

Типичные сердцевины таблеток, пригодных для введения ингибиторов тромбина, состоят из (но этим не ограничиваются) следующих количеств стандартных ингредиентов.

Предлагаемые интервалы для составов эксципиентов в сердцевине таблеток без оболочки

Эксципиент	общий интервал (%)	предпочтительный интервал (%)	наиболее предпочт. интервал (%)
маннит	10-90	25-75	30-60
микрокристаллическая	10-90	25-75	30-60
целлюлоза
стеарат магния	0,1-5,0	0,1-2,5	0,5-1,5

Маннит, микрокристаллическую целлюлозу и стеарат магния можно заменить альтернативными фармацевтически приемлемыми эксципиентами.

Ιη νίίτο анализ для определения ингибирования протеиназы

Анализы человеческого а-тромбина и человеческого трипсина осуществляют практически в соответствии со способами, раскрытыми в ТйготЬо818 Кезеагсй, 1в8ие Νο. 70, раде 173 (1993) Ьу 8.Э. Ье\¥18 с1 а1.

Эти анализы осуществляют при 25°С в 0,05М ΤΚΙ8 буфере рН 7,4, 0,15М №С1, 0,1% РЕС. Анализ для трипсина включает также 1 мМ СаС1₂. В анализах для определения скорости гидролиза р-нитроанилидного (рпа) субстрата используют считывающее устройство для 96луночных планшетов ТЬепиошах, для измерения (при 405 нм) зависимости от времени появления р-нитроанилида. Для анализа человеческого α-тромбина используют заг-РК-риа (К_т=125 мкМ) и бычий трипсин (К_т=125 мкМ). Концентрацию р-нитроанилидного субстрата определяют, измеряя поглощение при 342 нм, используя коэффициент экстинкции 8270 см ’М¹.

В некоторых исследованиях потенциальных ингибиторов (К; < 10 нМ), когда степень ингибирования тромбина высока, используют более чувствительный анализ активности. В этом анализе определяют скорость катализируемого тромбином гидролиза флюорогенного субстрата Ζ-СРЕ-аГс (К_т=27 мкМ) по возрастанию флуоресценции на 500 нм (возбуждение при 400 нм), которое связано с образованием 7амино -4 -трифторметилку марина.

Концентрации исходных растворов ΖСРВ-аГс определяют, измеряя поглощение при 380 нм 7-амино-4-трифторметилкумарина, образующегося после завершения гидролиза аликвоты исходного раствора под действием тромбина.

Анализы активности осуществляют, разбавляя исходный раствор субстрата, по крайней мере, в 10 раз до конечной концентрации <0,1 К_т в растворе, содержащем фермент, или фермент, уравновешенный ингибитором. Промежутки времени, необходимые для достижения равновесия между ферментом и ингибитором, определяют достижения равновесия между ферментом и ингибитором, определяют в контрольных экспериментах. Измеряют начальные скорости образования продукта в отсутствие (У_о) или в присутствии ингибитора (V;). Предполагая конкурентное ингибирование, и то, что единица пренебрежимо мала по сравнению с

К_т/|8|. [1]/е и [1]/е (где [8], [I], и е, соответственно, представляют полные концентрации субстрата, ингибитора и фермента), константу равновесия (К,) для диссоциации ингибитора от фермента можно получить из зависимости ν_ο/ν ₁от [I], что представлено уравнением 1.

Уо/У_; = 1 + [Ι]/Κί (1)

Активности, продемонстрированные в этом анализе, указывают на то, что соединения настоящего изобретения являются терапевтически полезными соединениями для лечения различных состояний у пациентов, страдающих нестабильной стенокардией, стабильной стенокардией, при инфарктах миокарда, кратковременных приступах ишемической болезни, фибрилляции предсердия, тромбозе, эмболии, тромбозе глубоких вен, рассеянной внутрисосудистой коагуляции, и реокклюзии или рестенозе реканализованных сосудов.

Ингибирующую активность соединений настоящего изобретения, выражают что указывает на то, что К, больше или равно 1 нМ, или *, что указывает на то, что К! меньше 1 нМ, измеряют, используя анализ, представленный выше.

Пример 6. Изготовление таблеток.

Таблетки, содержащие 8, 10, 20 и 40 мг, соответственно, следующих активных соединений, приготавливают как проиллюстрировано далее (композиции А-С). Активный ингредиент выбирают из группы соединений, включающей соединение 1-9 (3-фтор-2-пиридилметил-3-(2,2дифтор-2-(2-пиридил)этиламино)-6-метилпираЗИН-2-ОН-1-ацетамид), соединение 2-8 (3-фтор-2пиридилметил-3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридил)этиламино)-6-хлорпиразин-2-он-1 -ацетамид), соединение 3-5 ([К,8] 3 -метилсульфинил-2-пиридилметил-3-(2,2-дифтор-2-(2-пиридил)этиламино)-6-хлоропиразин-2-он- 1-ацетамид), соединение 4-7 (3-фтор-2-пиридилметил 3-(2,2-дифтор2-(2-пиридил)этиламино)-6-цианопиразин-2-он1-ацетамид гидрохлорид) и соединение 5-5 (3фтор-4-метил-2-пиридилметил 3 -(2,2-дифтор-2(2-пиридил)этиламино)-6-хлорпиразин-2-он-1 ацетамид). Представленные количества соответствуют количеству свободных оснований. Таблетки для доз, соответствующих 8-40 мг активного соединения

Количество-мг

Компонент	А	δ	С	ϋ
Активный Ингредиент	8	10	20	40
Микрокристаллическая	37,25	100	200	200
целлюлоза
Модифицированный	37,25	4,25	8,5	8,5
кукурузный крахмал
Стеарат магния	0,5	0,75	1,5	1,5

Все активные соединения, целлюлозу и часть кукурузного крахмала смешивают и гранулируют, получая 10% пасту кукурузного крахмала. Полученные гранулы просеивают, сушат и смешивают с остальной частью кукурузного крахмала и стеаратом магния. Затем полученные гранулы прессуют в таблетки, со держащие 25,0, 50,0, и 100,0 мг, соответственно, активного ингредиента в таблетке

Пример 7. Приготовление таблеток.

Примерные составы активных ингредиентов в таблетках представлены далее:

Компонент	0,25 мг	2 мг	10 мг	50 мг
Активн. ингредиент	0,500%	1,000%	5,000%	14,29%
маннит	49,50%	49,25%	47,25%	42,61%
микрокристаплж. целлюлоза	49,50%	49,25%	47,25%	42,61%
стеарат магния	0,500%	0,500%	0,500%	0,500%

В этой таблице таблетка, содержащая, например, 2 мг активного ингредиента, включает 98,5 мг маннита, 98,5 мг микрокристаллической целлюлозы и 1 мг стеарата магния. На таблетки весом 2, 10 и 50 мг наносят пленку, используя водную дисперсию гидроксипропилцеллюлозы, гидроксипропилметилцеллюлозы и диоксида титана, обеспечивая при этом увеличение номинального веса.

Приготовление таблеток прямым прессованием Активный ингредиент, маннит и микрокристаллическую целлюлозу просеивают через сито с конкретным размером пор (обычно от 250 до 750 мкм), и объединяют в подходящем смесителе. Эту смесь затем перемешивают (обычно 15-30 мин) до тех пор, пока лекарство не окажется равномерно распределенным в полученной смеси в виде сухого порошка. Просеивают стеарат магния и добавляют его в смеситель, после чего смесь для таблеток дополнительно перемешивают (обычно от 2 до 10 мин). Смесь для таблеток затем прессуют, прилагая давление, обычно в интервале от 0,5 до 2,5 метрических тонн, чего достаточно для получения таблеток достаточной физической прочности и подходящим временем разложения (спецификация меняется в зависимости от размера и эффективности прессуемых таблеток). В случае таблеток с содержанием активного ингредиента 2, 10 и 50 мг, таблетки освобождают от мелких частиц и наносят на них пленку с помощью водной дисперсии водорастворимого полимера и пигмента.

Приготовление таблеток способом сухого гранулирования

В другом варианте смесь в виде сухого порошка прессуют под небольшим давлением, и снова измельчают для получения гранул заранее определенного размера. Затем гранулы смешивают со стеаратом магния, и таблетируют указанным выше способом.

Пример 8. Композиции для внутривенного введения.

Композиции для внутривенного введения активного ингредиента получают в соответствии с общепринятыми процедурами приготовления композиций для внутривенного введения.

Компонент	Установленный интервал
Активный ингредиент	0,12 - 0,61 мг
О-глюкуроновая кислота*	0,5 - 5 мг
Маннит ΝΓ	50 - 53 мг
1н гидроксид натрия	ч.з. рН 3,9 - 4,1
Вода для инъекций	д.з. 1,0 мл

Примеры композиций А-С следующие:

Компонент	А	В	С
Активный ингредиент	0,61 мг*	0,30**	0,15***
Е-глюкуроновая кислота*	1,94 мг	1,94 мг	1,94 мг
Маннит ΝΕ	51,2 мг	51,2 мг	51,2 мг
1Н гидроксид натрия	д.з. рН 4,0	д.з. рН 4,0	д.з. рН 4,0
Вода для инъекций	д.з.1,0 мл	д.з.1,0 мл	д.з.1,0 мл

* 0,50 мг свободное основание; ** 0,25 мг свободное основание; *** 0,12 мг свободное основание.

Глюкуроновую кислоту можно заменить различными другими буферными кислотами, такими, как Ь-молочная кислота, уксусная кислота, лимонная кислота, или любым конюгатом фармацевтически приемлемой кислоты с основанием с разумной буферирующей способностью в интервале значений рН, приемлемым для внутривенного введения.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы где Я! выбирают из группы состоящей из галогена, предпочтительно фтора, С1_₄алкила, С1_₄алкилтио, С1_₄алкилсульфинила и С1_₄алкилсульфонила;

Я₂ выбирают из группы, состоящей из водорода и низшего алкила;

Я₃ выбирают из группы, состоящей из хлора, низшего алкила, формила и цианогруппы или его фармацевтически приемлемые соли.
2. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где Я² представляет водород.
3. Соединение по п.1 выбранное из группы, включающей или их фармацевтически приемлемые соли.
4. Соединение по π. 1 или его фармацевтически приемлемая соль формулы

Е Е

О
5. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль формулы
6. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль формулы
7. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль формулы
9. Фармацевтическая композиция для перорального введения, включающая соединение по п.1 и фармацевтически приемлемый носитель.
10. Фармацевтическая композиция для внутривенного введения, включающая соединение по п.1 и фармацевтически приемлемый носитель.
11. Способ ингибирования тромбина в крови, включающий введение в кровь композиции по и. 10.
12. Способ ингибирования образования агрегатов тромбоцитов в крови, включающий введение в кровь композиции по и. 10.
13. Способ ингибирования образования тромбов в крови, включающий введение в кровь композиции по и. 10.
14. Способ ингибирования образования тромбов в крови, включающий введение в кровь соединения по п.1 с антагонистом рецептора фибриногена.
15. Применение соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарства для ингибирования тромбина, ингибирования образования тромбов, лечения тромбообразования, или для профилактики тромбообразования у млекопитающих.
16. Способ лечения или профилактики венозной тромбоэмболии и легочной эмболии у млекопитающих, включающий введение млекопитающему композиции по и. 10.
17. Способ лечения или профилактики тромбоза глубоких вен у млекопитающих, включающий введение млекопитающему композиции по и. 10.
18. Способ лечения или профилактики кардиогенной тромбоэмболии у млекопитающих, включающий введение млекопитающему композиции по и. 10.
19. Способ лечения или профилактики тромбоэмболического удара у человека и других млекопитающих, включающий введение млекопитающему композиции по и. 10.
20. Способ лечения или профилактики тромбоза, связанного с раком и химиотерапией раковых заболеваний у млекопитающих, включающий введение млекопитающему композиции по и. 10.
21. Способ лечения или профилактики нестабильной стенокардии у млекопитающих, включающий введение млекопитающему композиции по и. 10.