DK201300152Y3

DK201300152Y3 - Antimikrobiel blanding og et dække til at understøtte sårheling, og som har en antimikrobiel aktivitet

Info

Publication number: DK201300152Y3
Application number: DKBA201300152U
Authority: DK
Inventors: Zuzana Valentova; Sarka Duskova; Michal Zavadil; Veronika Hekrlova; Vladimir Velebny; Lubos Sobotka
Original assignee: Contipro Pharma A S
Priority date: 2011-03-11
Filing date: 2013-10-04
Publication date: 2014-02-14
Also published as: FR2972355B3; AT13850U1; WO2012122956A1; ITMI20120370A1; RU149063U1; CZ22394U1; BR112013023201A2; JP3196712U; AR088721A4; FR2972355A3; HU4499U; DK201300152U1; DE212012000057U1

Abstract

Opfindelsen angår en antimikrobiel blanding til heling af overfladiske sår baseret på et fysiologisk acceptabelt hyaluronsyresalt, valgfrit med et eller flere andre polysaccharider, og en forbindelse med en antimikrobiel aktivitet, som kan anvendes til at hele overfladiske sår, især kroniske sår, for eksempel varikøse ulcera, og et dække, som indeholder nævnte blanding.

Description

i DK 2013 00152 Y3

Antimikrobiel blanding og et dække, der understøtter sårheling, med en antimikrobiel aktivitet.

Opfindelsens område

Opfindelsen angår en blanding til heling af overfladiske sår baseret på et fysiologisk acceptabelt hyaluronsyresalt, valgfrit med en eller flere andre polysaccharider, og en forbindelse med en antimikrobiel aktivitet, som kan anvendes til at hele overfladiske sår, især kroniske sår, for eksempel varikøse ulcera, og et dække, som indeholder nævnte blanding.

Opfindelsens baggrund Sårheling, især anormal sårheling, er en kompliceret proces, som understøttes ved hjælp af et dække, som tilvejebringer tilstrækkelige helingsbetingelser og/eller indeholder aktive forbindelser. Anormal sårheling inkluderer tilstande med overdreven sårheling (såsom fibrose, adhæsion og kontrakturer), eller, hvilket er mere almindeligt, utilstrækkelig sårheling (såsom kroniske varikøse ulcera eller diabetiske sår) . På trods af mange nye, betydelige, fremskridt inden for området repræsenterer anormal sårheling stadig årsagen til høje omkostninger, sygdomsrater og dødelighed. Alt dette fremhæver vigtigheden af at tilvejebringe et optimalt miljø for sårheling, hvilket positivt kan påvirke helingsprocessen (Stephanie R. Goldberg, Robert F. Diegelmann: Wound Healing Primer, Surgical Clinics of North America, Bind 90, Udgave 6, December 2010, s. 1133-1146).

Et kort overblik over litteraturen, som omhandler emnet sårheling, er f.eks. fremført i publikationen af James R. Hanna, Joseph A. Giacopelli: A review of would healing and wound dressing products, The Journal of Foot and Ankle Surgery, Bind 36, Udgave 1, Januar-Februar 1997, s. 2-14. Forfatterne diskuterer især vigtigheden af et passende sårdække, som sikrer det optimale miljø for sårheling. Det er beskrevet, at moderne 2 DK 2013 00152 Y3 dækker som regel består af mere end ét lag, og at kontaktlaget har den største påvirkning på heling.

Der er mange kommercielle produkter på markedet nutildags som imidlertid ikke tilstrækkeligt opfylder de vigtige krav pålagt sårdækker, eller produktionsomkostningerne er høje, og derfor er anvendelse i stor stil begrænset. Som regel anvendes forskellige gel-dannende naturlige eller syntetiske substanser, som er i stand til at regulere fugtighed. Men disse substanser regulerer i hovedsagen kun fugtigheden inden i såret og understøtter ikke kroppens selvregenerationevne. Derudover reducerer anvendelsen af sådan substanser gaspermeabilitet, og derfor blokeres sårets respiration. Infektioner elimineres ved at anvende desinfektionsmidler før bandagen påføres, hvilket betyder, at desinfektionseffekten kun er kortvarig. Disse sårdækker kan ikke anvendes til kroniske sår, fordi der er risiko for at det fugtige miljø kan fremme infektionsmultiplikation og derved signifikant forværre patientens tilstand.

Mange patenter og publikationer beskriver anvendelsen af hyaluronan som hovedkomponenten i sårdækker, men som følge af de store omkostninger anvendes disse formuleringer ikke særligt meget kommercielt. Derfor forbliver den praktiske anvendelse af hyaluronan kun rettet mod intra-somatiske (intra-artikulære injektioner), valgfrit til specielle anvendelser (oftalmologi, øjendråber til ojenoverfladefugtning til patienter med kontaktlinser).

Kommerciel anvendelse af hyaluronan er illustreret med det i US patent 4736024 beskrevne præparat baseret på hyaluronan kombineret med en andet aktivt substans beskrevet. Produktet er især beregnet til oftalmologi, og de anvendte farmakologiske aktive substanser indbefatter f.eks. kanamycin, neomycin, tetracyclin, chloramphenicol og kombinationer deraf.

3 DK 2013 00152 Y3 US patent 5128136 beskriver et præparat anvendt til forebyggelse af sårdehydrering og -infektion, dvs. til et lignende formål som det præsenterede præparat. Men i modsætning til præparatet ifølge opfindelsen indeholder det opløseligt collagen som hovedkomponenten, hvilket ikke påvirker sårhelingen, og det indeholder ikke hyaluronsyre eller salte deraf. Ulempen ved US patent 5128136 er, at collagen kan forårsage uønskede reaktioner, såsom inflammation. En anden ulempe er, at efter anvendelsen transformerer væsken sin fase til en fast gel, hvilket blokerer gaspermeabiliteten.

Opfindelsens indhold

De ovenfor nævnte ulemper ved de eksisterende sammensætninger, som understøtter sårheling, elimineres ved hjælp af blandingen ifølge opfindelsen, blandingen omfatter et fysiologisk acceptabelt hyaluronsyresalt og en antimikrobiel substans valgt fra gruppen bestående af octenidindihydrochlorid, cetrimid, benzalconiumchlorid, benzalconiumbromid, chlorhexidin, hibitane, polyhexamethylenbiguanid, carbethopendeciniumbromid, cetyltrimethylammoniumbromid, og en blanding deraf i ethvert forhold. Blandingen kan yderligere indeholde et eller flere polysaccharider valgt fra gruppen omfattende de naturligt forekommende eller modificerede polysaccharider hyaluronan, xanthan, schizofyllan, kitosan, glucan, alginat, cellulose, β-1-3-glucan og en blanding deraf; og valgfrit også et adjuvans, som øger den antimikrobielle effekt, for eksempel et chelateringsmiddel såsom EDTA, betain og 2-phenoxyethanol. Blandingen kan valgfrit også omfatte et saccharid valgt fra gruppen omfattende glucose, fructose og saccharose, og/eller en elektrolyt valgt fra gruppen omfattende natriumchlorid, kaliumchlorid, kaliumiodid, magnesiumchlorid, natriumhydrogenphosphat, natriumdihydrogenphosphat, zinksulfat, og/eller et planteekstrakt eller et andet naturligt produkt valgt fra gruppen omfattende bipropolis, olivenolie, tetræolie, ekstrakt fra egetræ, morgenfrue, mynte eller citrusfrugter, eller en blanding af enhver kombination af nævnte substanser.

4 DK 2013 00152 Y3

Blandingen ifølge opfindelsen omfatter fortrinsvis hyaluronan og octenidindihydrochlorid som den antimikrobielle substans, foretrukket i vægtforholdet 500:1.

Udtrykket modificeret polysaccharid betyder et polysaccharid med et covalent bundet molekyle eller en funktionel gruppe, hvori dette molekyle kan være det samme polysaccharid eller et andet polysaccharid, syntetisk polymer eller polymeriseret eller krydsbundet polysaccharid bestående af identiske eller forskellige molekyler.

Blandingen kan have formen af en kemisk eller fysisk blanding, hvori den kemiske blanding foretrukket er en vandig opløsning indeholdende alkohol, og den fysiske blanding foretrukket er et lag af polysaccharidfibre indeholdende en antimikrobiel substans i strukturen deraf.

Opfindelsen angår desuden dækket til at understøtte sårhelingen, hvilket dække er i form af en enkeltlags- eller multilagsformation. Multilagsformationen omfatter lag arrangerede på den følgende måde i retningen fra såret: kontaktlaget (K) , som på en side, som skal være i kontakt med såret, er tilvejebragt med coatingen (P) fremstillet af polysaccharider med en antimikrobiel substans, dvs. fremstillet af den ovenfor nævnte blanding ifølge opfindelsen (den kemiske eller den fysiske blanding) , derefter et eller flere absorptionslag (A) og overfladelaget (R). Det nedre kontaktlag (K) indeholder derfor ved en (nedre) side, bestemt til at komme i kontakt med såret, coatingen (P) fremstillet af blandingen af polysaccharider med en antimikrobiel substans, og den anden (øvre) side ligger an mod et eller flere absorptionslag (A, eller A-l, A-2 osv.). Den øvre side af det sidste øverste absorptionslag, som er det længst fra såret, ligger an mod overfladelaget (R) . Alle lag kan svejses sammen ved kanterne, dannende den såkaldte tepose med dimensioner på f.eks. 10 x 10 cm. I tilfældet af et-lagsdækket, består formationen kun af 5 DK 2013 00152 Y3 kontaktlaget (K) med coatingen (P) fremstillet af blandingen af polysaccharider med en antimikrobiel substans, hvori kontaktlaget (K) kan være sammensat af tekstil med en høj absorptionskapacitet (det kan også være et superabsorberende middel).

Kontaktlaget er foretrukket fremstillet af vævet eller strikket tekstil fremstillet af polyamid (PAD) monofilamenter, valgfrit af stapelfibre; af ikke-vævet tekstil eller en porøs membran, polyurethan, polyester, viskose, blandinger af nævnte fibre eller andre materialer, for eksempel syntetiske fibre som polypropylen. Coatingen (P) kan foretrukket være i form af et frysetørret produkt eller en tørret coating, mere specifikt i form af et frysetørret eller tørret lag af den kemiske blanding eller et lag af den fysiske blanding. Absorptionslaget eller absorptionslagene (A) er foretrukket fremstillet af materialer valgt fra gruppen omfattende polyester, viskose, polyamid, polyethylen, polypropylen, polysaccharid, for eksempel xanthan eller cellulosederivat, superabsorberende materiale, en kombination af vævede eller ikke-vævede tekstilfibre og superabsorberingsmidler, eller en blanding af nævnte materialer. I tilfælde af flere absorptionslag (A) er det foretrukket at arrangere dem på en sådan måde, at absorptionskapacitetsgradienten øges i retningen fra såret, f.eks. er absorptionslaget (A-l) tæt på såret fremstillet af 100 % polyester, og absorptionslaget (A-2) længere væk fra såret er fremstillet af polyester- og viskoseblanding 1:1. Overfladelaget (R) , foretrukket fremstillet af ikke-vævet polyestertekstil, kan valgfrit have en antimikrobiel modifikation ved hjælp af imprægnering med en egnet antimikrobiel substans eller ved hjælp af indhold af antimikrobielle fibre, for eksempel opnået fra bambus, eller ved hjælp af indhold af sølv-mikropartikler.

Coatingen (P) kan være sammensat af et lag af bundfældede polysaccharidfibre coatede med et lag af en antimikrobiel 6 DK 2013 00152 Y3 opløsning af substans, hvori mængden af polysaccharidcoatingen er mindst 0,1 mg/m2, og mængden af coating af antimikrobiel substans er mindst 0,0001 mg/m2. Hvis hyaluronan anvendes som polysaccharidet, og octenidindihydrochlorid anvendes som den antimikrobielle substans, så er mængden af hyaluronancoating inden for intervallet fra 1 til 50 g/m2, og mængden af octenidindihydrochloridcoating er inden for intervallet fra 0, 0001 til 0,5 g/m2. Den mest foretrukne mængde af hyaluronancoatingen er inden for intervallet fra 5 til 20 g/m2 og mængden af octenidindihydrochloridcoatingen er inden for intervallet fra 10 til 40 mg/m2.

Kontaktlaget (K) og overfladelaget (R) kan fastgøres til hinanden ved deres kanter for at lukke absorptionslaget eller absorptionslagene (A) mellem kontaktlaget (K) og overfladelaget (R), f.eks. kan kontaktlagets (K) og overfladelagets (R) kanter svejses sammen.

Kort beskrivelse af figurerne

Figur 1 repræsenterer et tværsnit af dækket, den nedre side er kontaktlaget K sammensat af 100 % polyamid med coatingen P af blandingen af polysaccharider og de antimikrobielle substans, dernæst det første absorptionslag A-l sammensat af 100 % polyester, det anden absorptionslag A-2 sammensat af en blanding af 50 % polyester og 50 % viskose, og over dette overfladelaget R sammensat af 100 % polyester. Lagene K og R er svejset sammen som en "tepose", hvor der inden i er absorptionslag i stedet for te.

Figur 2 repræsenterer et udsnit af dækkeområdet fra retningen fra polysaccharidcoatingen. Kanten S er dannet af en svejsning (lagene markerede som K og R i Figur 1 er svejsede) , del N er coatingen sammensat af blandingen af polysacchariderne og den antimikrobielle substans.

7 DK 2013 00152 Y3

Figur 3 repræsenterer en graf, som viser sårhelingseffektiviteten på en rask rottemodel, hvor det helede sårområde blev målt versus helingstiden, anvendende dækket fra eksempel 1 og anvendende en bandage bestående af en gaze uden noget præparat (dvs. uden polysaccharider og uden antimikrobiel substans).

Figur 4 repræsenterer en graf, som viser sårhelingseffektiviteten på en rask miniaturegrismodel, hvor det helede sårområde blev målt versus helingstiden, anvendende dækket fra Eksempel 1 og anvendende en kontrolbandage med den sammen struktur, fremstillet af de samme tekstilmaterialer, med uden nogen præparatcoating (dvs. uden polysaccharider og uden antimikrobiel substans).

Figur 5 repræsenterer en graf, som viser effektiviteten af den overordnede antimikrobielle effekt af præparatet fra Eksempel 1 og kontrolbandagen (se beskrivelsen relateret til Figur 4) på en miniaturegrismodel.

Figur 6 repræsenterer en graf, som viser den antimikrobielle effekt af præparatet fra Eksempel 1 og kontrolbandagen (se beskrivelsen relateret til Figur 4) på "G"-stave på en miniaturegrismodel.

Eksempler

Eksempel 1 Dække med hyaluronan, octenidindihydrochlorid og to forskellige absorptionsmiddellag, frysetørret

Octenidindihydrochlorid (10 mg) opløses i 1 ml absolut ethanol, derefter tages 30 μΐ af denne opløsning til 10 ml med sterilt vand til injektioner. Natriumhyaluronan (150 mg) med molekylevægt 1650000 g/mol tilføres gradvist til denne opløsning under omrøring og omrøres i 12 timer. Den resulterende viskøse opløsning påføres jævnt anvendende en 8 DK 2013 00152 Y3 skabelon med bredden 1 mm og hullet 10 x 10 cm på det understøttende tekstil (kontaktlag) med dimensionen 13 x 13 cm, det understøttende tekstil er en 40 g/m2 strikket tremmedug fremstillet af monofilamenter af 22 dtex-polyamid "M". Kontaktlaget med den påførte coating fastgjort til en egnet understøtning fryses straks til -70 °C og overføres derefter til frysetørrer (coatingen skal forblive frossen) og frysetørres. Det resulterende svampeagtige, porøse, elastiske frysetørrede produkt med hvid farve klæber fast til kontaktlaget, det er delvist inden i tekstilmaterialet, men størstedelen af det deponerede materiale er på tekstilets ene side. Kontaktlaget er placeret på en måde, at det frysetørrede produkt er i kontakt med basen, hvorpå det ligger, for eksempel med bordet eller rammen hvorpå tekstilet er strakt (dvs. den største del af coatingen er rettet mod basen), og et kvadrat på 10 x 10 cm af et 140 g/m2 ikke-vævet tekstil fremstillet af polyester (det første absorptionslag) er placeret derpå. På det første absorptionslag er det anden absorptionslag placeret (et kvadrat på 10 x 10 cm af et 140 g/m2 ikke-vævet tekstil fremstillet af polyester og viskose 1:1). På det anden absorptionslag er placeret overfladelaget, der er fremstillet af 30 g/m2 ikke-vævet polyester med dimensionerne 13 x 13 cm. Dækket fuldendes ved at svejse kontakt- og overfladelagene i en egnet afstand fra absorptionslagene for at forhindre at de beskadiges af varme. Det endelige produkt (et kvadrat på omkring 11 x 11 cm) produceres derefter ved at skære overflade-og kontaklagenes overskydende kanter af.

Det resulterende kvadratiske dække påføres såret med kontaktlaget mod såret og fæstnes derefter ved hjælp af et sekundært dække. På et meget eksuderende sår påføres et tørt dække. På lidt eksuderende sår fugtes kontaktlaget med 5 til 10 ml fysiologisk opløsning, sterilt vand eller drikkevand før påføringen. På tørre sår er det altid nødvendigt at fugte dækket med 10 ml af en egnet væske (eksempler nævnt ovenfor). Dette dække kan efterlades på såret i op til 3 eller 4 dage, 9 DK 2013 00152 Y3 hvorefter det forbindes igen. I tilfælde med massivt eksudat skiftes kun det sekundære dække så ofte som nødvendigt, det primære dække skiftes ikke. Det sekundære dækkes absorptionskapacitet kan øges ved at anvende et hvilket som helst kommercielt tilgængeligt superabsorberende middel eller et andet egnet system.

Eksempel 2 Dække med hyaluronan, octenidindihydrochlorid og to forskellige absorptionslag, tørret

Octenidindihydrochlorid (10 mg) opløses i 1 ml absolut ethanol og 30 μΐ af denne opløsning tages til 10 ml med sterilt vand til injektioner og isopropanol 1:1 (dvs. 50 % opløsning af isopropanol) . Natriumhyaluronan (150 mg) med molekylærvægten 1650000 g/mol sættes gradvist til denne opløsning under omrøring og omrøres i 30 minutter. Den resulterende viskøse opløsning påføres jævnt anvendende en skabelon med bredden 1 mm og hullet på 10 x 10 cm på det undersstøttende tekstil (kontaktlag) med dimensionen 13 x 13 cm, det understøttende tekstil er en 40 g/m2 strikket tremmedug fremstillet af monofilamenter af 22 dtex-polyamid "M". Kontaktlaget med den deponerede opløsning fastgjort til en egnet understøtning ovntørres ved 40°C i 2,5 timer, eller en egnet tørreprofil anvendes (f.eks. tørring ved 40°C i 60 minutter, opvarmning til 70°C i 30 minutter, forsinkelse ved 70°C i 15 minutter, og derefter køling til 40°C). Den resulterende glasagtige, elastiske, klare (farveløse) film klæber fast til kontaktlaget, det er delvist inden i tekstilmaterialet, men størstedelen af det deponerede materiale er på tekstilets ene side og har den samme struktur som understøtningsoverfladen, hvortil tekstilet var fæstnet; hvis understøtningen er glat, er filmen også glat; en mere foretrukken er et relief med små fordybninger. Kontaktlaget er placeret på en sådan måde, at coatingen er i kontakt med basen (dvs. størstedelen af coatingen dirigeres mod basen) , og et kvadrat på 10 x 10 cm af et 140 g/m2 ikke-vævet 10 DK 2013 00152 Y3 tekstil fremstillet af polyester (det første absorptionslag) er placeret derpå. På det første absorptionslag placeres det anden absorptionslag, hvilket er et kvadrat på 10 x 10 cm af et 140 g/m2 ikke-vævet tekstil fremstillet af polyester og viskose 1:1. På det anden absorptionslag er placeret overfladelaget, fremstillet af 30 g/m2 ikke-vævet polyester med dimensionerne 13 x 13 cm. Dækket fuldendes ved at svejse kontakt- og overfladelagene i en egnet afstand fra absorptionslagene for at forhindre beskadigelse fra varme. Det endelige produkt (et kvadrat på omkring 11 x 11 cm) produceres derefter ved at skære overflade- og kontaktlagenes overskydende kanter af.

Det resulterende dække påføres såret med kontaktlaget rettet mod kroppen på den samme måde som i Eksempel 1. Forskellen mellem filmen og det frysetørrede produkt er, at filmen er mindre porøs for gasser og opløses hurtigere. Det foretrækkes derfor at anvende filmen særligt i den første fase af helingsprocessen, når det kroniske sår skal konverteres til standardhelingsprocessen. Når den anden fase begynder, dvs. når det massive granulationsvæv begynder at blive dannet, er det muligt at anvende det frysetørrede eller andre dækker i stedet, i tilfælde af sammenvoksning af granulationsvævet ind i dækket.

Eksempel 3 Dække med hyaluronan, octenidindihydrochlorid og to forskellige absorptionslag, fibrøst

Natriumhydroxid (6 g) opløses i 100 ml sterilt vand og derefter tilføres 8 g natriumhyaluronan med molekylærvægt 1650000 g/mol gradvist under omrøring, og opløsningen omrøres i 12 timer. Den resulterende viskøse opløsning fyldes i en sprøjte og ekstruderes ind i bundfældningsbadet, der er sammensat af 400 ml koncentreret eddikesyre (omkring 98 %) og 100 ml isopropanol (omkring 99 %) . De resulterende fibre efterlades i badet, og længden deraf kan modificeres for eksempel ved hjælp af hurtigt roterende knive (f.eks. i en maskine, som ligner den normale 11 DK 2013 00152 Y3 blander) . Opløsningen af kortere fibre filtreres derefter gennem kontakttekstilet og en egnet porøs membran (f.eks. et fast panel med borede huller, hvorpå tekstilet anbringes) for at danne et lag af fibre med kapaciteten på omkring 15 g/m2. Valgfrit kan coatingen af fibre klargøres på en porøs membran, hvorefter den overføres (f.eks. ved "genprint" på kontaktlaget). Fiberlaget på kontakttekstilet vaskes med en egnet væske, f.eks. en blanding af isopropanol og vand (koncentrationen af isopropanol skal være højere end 60 % for at sikre, at fibrene ikke opløses). Det vaskede lag presses derefter på en defineret måde for at fastgøre fibrene til basen og til hinanden, uden at skade den porøse struktur. Størrelsen af understøtningen eller kontakttekstilet og laget af fibre modificeres som følge deraf på en sådan måde, at et kvadrat på 13 x 13 cm af kontaktlaget med coatingen af fibre med størrelsen 10 x 10 cm opnås. Octenidindihydrchlorid (10 mg) opløses i 1 ml absolut ethanol, hvorefter 30 μΐ af denne opløsning tages til 2 ml af en blanding af sterilt vand til injektioner og isopropanol 1:1 (dvs. 50 % isopropanol). Octenidindihydrochloridopløsning påføres derefter homogent på hele fibercoatingens område, f.eks. ved sprøjtecoating, og valgfrit presses fibrene (en lille opløsning af fiberoverfladen forekommer, hvilket forbedrer fastgørelsen af fibrene til hinanden og fastgørelsen af fibrene til kontakttekstilet). På denne måde trænger octenidindihydrochlorid, dvs. den antimikrobielle substans, ind i polysaccharidfiberstrukturen, og en fysisk blanding af polysaccharid(er) og antimikrobiel substans dannes. Kontaktlaget med fibercoating fastgjort til en egnet understøtning ovntørres ved 40°C i 2,5 timer, eller en egnet tørreprofil anvendes (f.eks. tørring ved 40°C i 60 minutter, opvarmning til 70°C i 30 minutter, forsinkelse ved 70°C i 15 minutter, og derefter køling til 40°C). Yderligere behandling for at opnå sårdækket og anvendelsen deraf, er den samme som i Eksempel 1. Fibercoatingen er mere porøs end filmen fremstillet i Eksempel 2, men samtidig er porernes struktur forskellig fra den for det frysetørrede produkt beskrevet i 12 DK 2013 00152 Y3

Eksempel 1. Egenskaberne for dækket med fibercoatingen er mere lig dem for det frysetørrede produkt end dem for filmen.

Eksempel 4

Substitution af en del af hyaluronan med en andet substans eller blanding af substanser

En tilsvarende proces anvendes som i Eksempel 1, 2 eller 3, men 0,1 til 99,9 % hyaluronan erstattes med et andet polysaccharid, for eksempel med cellulosederivater, xanthan, alginat, schizofyllan, chitosan, glucan, eller med et saccharid, for eksempel glucose, fructose, saccharose eller med en elektrolyt, for eksempel med natriumchlorid, kaliumchlorid, kaliumiodid, magnesiumchlorid, natriumhydrogenphosphat, natriumdihydrogen-phosphat, zinksulfat, eller et planteekstrakt, eller et egnet naturligt produkt, for eksempel propolis, olivenolie, tetræolie, ekstrakt fra egetræ, morgenfrue, mynte eller citrusfrugter, eller blanding af enhver kombination af nævnte substanser. Formuleringen kan modificeres let ved at anvende 0,1 til 99,9 % af startmængden af hyaluronan og en højere mængde af en anden substans eller blanding af substanser end den originale mængde hyaluronan. For eksempel anvendes kun 10 mg hyaluronan i stedet for 150 mg hyaluronan i formuleringen ifølge Eksempel 1, og 150 mg xanthan sættes dertil, sådan at den totale mængde polysaccharider er højere end den originale mængde hyaluronan (160 mg af blandingen sammenlignet med de originale 150 mg). Andre substanser eller blanding af substanser kan anvendes op til koncentrationerne svarende til deres mættede opløsninger. Formålet med denne modifikation er at opnå et hypertoniskt miljø, som er fordelagtigt for nogle faser af især sårheling, mest af kroniske sår (særligt nekroseopløsning).

Eksempel 5

Substitution af octenidindihydrochlorid med en anden substans eller blanding af substanser 13 DK 2013 00152 Y3

En tilsvarende proces anvendes i Eksempel 1, 2, 3 eller 4, men octenidindihydrochlorid erstattes med en anden egnet antimikrobiel substans i en egnet koncentration (her udregnet per areal på 10 x 10 cm) . For eksempel kan anvendes 1,5 mg benzalconiumchlorid; 3,5 mg chlorhexidin; 0,5 mg PHMB; eller en blanding af enhver kombination forskellige mængder af nævnte substanser med octenidindihydrochlorid, valgfrit uden octenidinhydrochlorid.

Eksempel 6

Evaluering af præparatets effektivitet (tests af antimikrobiel effektivitet, præklinisk vurdering)

Modeller anvendt, kort beskrivelse

Den antimikrobielle effektivitet blev testet in vitro. Prøverne blev testet batchvis i flere dage. Prøverne blev overført med sterile pincetter til sterile glasrør (i tilfælde af faste dækker), flydende blandinger blev overført til rør med en pipette. 15 ml dyrkningsmedium BHI (Brain Heart Infusion Broth; Hi-Media) blev sat til hvert rør, og prøverne blev podet med de følgende mikroorganismer: Staphylococcus areus subsp. aureus CCM 4516 (gram-positiv kok), Escherichia coli CCM 4517 (gramnegativ stav), Pseudomonas aeruginosa CCM 1969 (gram-negativ ikke-fermenterende stav), Bacillus subtilis subsp. spizizenii CCM 1999 (sporedannende gram-positiv stav), Aspergillus niger CCM 8222 (svamp). Dyrkningsmediets vækstegenskaber blev testet. Rørene blev lukket med et metaldække og overført til dyrkning i et kammer med konstant temperatur. Væskeprøver blev dyrket i 24 til 48 timer, faste dækkeprøver blev dyrket i en uge ved temperaturen inden for intervallet fra 30 til 35°C, og den efterfølgende uge ved 20 til 25°C. Efter nævnte periode blev tilstedeværelsen eller fraværet af uklarhed undersøgt. Uklare prøver blev udpladet med sterile inokulationsløkke i petriskåle med blodagar KA (Merck) til dyrkningsverifikation af de foreliggende mikroorganismer. Deres inkubation fortsatte i 5 dage ved 30 til 35°C.

14 DK 2013 00152 Y3

Helingseffekten blev vurderet ved at anvende excision-sårmodel i raske rotter (ZDF hanrotter). Sår 2 x 2 cm blev klargjort, og helingen blev målt to gange om ugen baseret på sårkoncentrationen anvendende computerevaluering af fotografisk optagelse af såret.

Helingseffekten blev desuden vurderet med minnesota-type miniaturegrismodel, med 5 dybe fuld-profil excisioner på 25 x 25 mm på hver side, klargjort under bedøvelse med fremgangsmåden beskrevet af Van Dorp Verhoeven MC, Koerten HK, Van Der Nat-Van Der Meij TH, Van Blitterswijk CA, Ponec M. Dermal regeneration in full-thickness wounds in Yucatan miniature pigs using a biodegradable copolymer, Wound Repair Regen, 1998, 6(6) :556-68. Sårene blev derefter dækket med et kontrol- og et eksperimentelt dække indtil helingen var fuldendt. Regelmæssige genanlæggelser af bandage, fotodokumentation og skrab til mikrobiologisk undersøgelse blev udført to gange om ugen. Baseret på billedanalysen, blev sårlukningshastigheden (koncentration, epithelisering) målt, og baseret på dyrkningstestene blev dækkets effekt på sårets mikrobiologiske kolonisering også målt.

Mikrobiel effektivitet af den aktive blanding (væske ifølge Eksempel 1)

En prøve af den flydende blanding (viskøs opløsning) anvendt til at coate ifølge Eksempel 1 viste den totale (dvs. 100 %) inhibering af vækst af E. coli stamme (startsuspension 20000 CFU/ml), S. aureus (20000 CFU/ml), P. aeruginosa (40000 CFU/ml) og B. Subtilis (1000 CFU/ml), når indholdet af octenidindihydrochlorid var 4 mg. Når 1 mg af octenidindihydrochlorid blev anvendt, var inhiberingen kun 100 % for B. subtilis og S. aureus-stammer, inhiberingen for E. coli stamme var 99,95 % og for P. aeruginosa stamme 90 %.

15 DK 2013 00152 Y3

En prøve af det færdiggjorte dække udviste en inhiberingszone omkring kontaktlaget, imidlertid blev mikroorganismevæksten ikke inhiberet i en større afstand fra dækket. På den anden side viser dette faktum bevis for, at den antimikrobielle substans ikke frigives fra dækket til det omgivende miljø, og derfor vil patienten ikke blive skadeligt påvirket.

Mikrobiel effektivitet af den aktive blanding (væske ifølge Eksempel 5)

En prøve af den flydende blanding (viskøs opløsning) anvendt til dækket ifølge Eksempel 5 viste total (dvs. 100 %) inhibering af vækst af E. coli stamme (startsuspension 1800 CFU/ml) , S. aureus (600 CFU/ml) og A. niger (65 CFU/ml) med indholdet 16 mg benzalconiumchlorid (BAC); eller 40 mg chlorhexidin eller 40 mg PHMB. Når 1,6 mg BAC blev anvendt, var inhiberingen kun 100 % for S. aureus stammer, inhiberingen af E. coli stamme var 16 % og inhibering af A. niger stamme var 89 %. Når 4 mg chlorhexidin blev anvendt, var inhiberingen af vækst af E. coli 61 %, S. aureus 95 % og A. niger 32 %. Når 4 mg polyhexamethylenbiguamid (PHMB) blev anvendt, var inhiberingen af E. coli vækst 44 % og af A. niger 57 %.

Prøver af de færdiggjorte dækker udviste inhiberingszoner på en lignende måde, som blev beskrevet for præpartatet i Eksempel 1. Når derfor en egnet mængde af en egnet antimikrobiel substans anvendes, har dækkerne lignende mikrobiologiske inhiberingsegenskaber, som er baserede på dækkets overordnede konstruktion og fremstllingsproces, ikke kun på den særlige antimikrobielle substans.

Dække ifølge Eksempel 1, helingseffekt, rask rottemodel Når dækket i Eksempel 1 blev anvendt, blev en betydelig acceleration af sårkontraktion observeret, hvilket i den anvendte model repræsenterer skalaen for heling eller 16 DK 2013 00152 Y3 helingseffektivitet. Sammenlignet med det ikke-behandlede kontrolsår (se Figur 3) er det klart, at anvendelsen af dækket ifølge Eksempel 1 forkorter sårhelingstiden, særligt takket være det faktum, at sårhelingsprocessen starter straks efter skaden. I situationen med det ikke-behandlede sår starter helingsprocessen omkring tre dages efter skaden. Intensiteten af den efterfølgende sårheling er således magen til hinanden i begge tilfælde, hvilket kan ses i den lignende hældning af begge funktioner i Figur 3. Eftersom raske rotter blev anvendt, kan effektiviteten på kroniske sår ikke vurderes.

Dække ifølge Eksempel 1, helingseffekt, rask miniaturegrismodel

Det blev opdaget, at dækket ifølge Eksempel 1 påvirkede sårlukningshastigheden positivt (Figur 4) og også at det totale bakterieindhold i sårene aftog (Figur 5) , hvor især de gramnegative bakterier blev overvåget (Figur 6).

Claims

17 DK 2013 00152 Y3

1. Blanding til at understøtte sårheling omfattende et fysiologisk acceptabelt hyaluronsyresalt, kendetegnet ved at den omfatter et fysiologisk acceptabelt hyaluronsyresalt og octenidindihydrochlorid i vægtforhold 500:1.

2. Dække til at understøtte sårheling med en antimikrobiel effekt, kendetegnet ved at det er i form af en multilagsformation og yderligere omfatter et eller flere absorptionslag (A) og et overfladelag (R) , hvori alle lag er arrangeret i den følgende rækkefølge i retningen fra såret: kontaktlag (K) , som, på den side som skal være i kontakt med såret eller på begge sider, indeholder en coating (P) fremstillet af blandingen ifølge krav 1; et eller flere absorptionslag (A) og et overfladelag (R).

3. Dække ifølge krav 2, kendetegnet ved at kontaktlaget foretrukket er fremstillet af et vævet eller strikket tekstil fremstillet af polyamid (PAD) monofilamenter, valgfrit af stapelfibre; af ikke-vævede tekstiler eller porøs membran, polyurethan, polyester, viskose, blandinger af nævnte fibre eller af andre materialer, for eksempel af syntetiske fibre såsom polypropylen.

4. Dække ifølge krav 2 eller 3, kendetegnet ved at coatingen (P) fremstillet af blandingen ifølge krav 1 kan være i form af et frysetørret produkt eller en tørret coating.

5. Dække ifølge ethvert af kravene 2 til 4, kendetegnet ved at det omfatter et eller flere absorptionslag (A) fremstillet af materialer valgt fra gruppen omfattende polyester, viskose, polyamid, polyethylen, polypropylen, polysaccharid såsom xanthan eller cellulosederivat, superabsorberende materiale, en kombination af vævede eller ikke-vævede 18 DK 2013 00152 Y3 tekstilfibre og superabsorberende midler, eller en blanding af nævnte materialer.

6. Dække ifølge ethvert af kravene 2 til 4, kendetegnet ved at det omfatter flere absorptionslag (A) arrangerede på en måde, hvor absorptionskapacitetsgradienten stiger i retningen fra såret.

7. Dække ifølge krav 6, kendetegnet ved at det omfatter absorptionslag (A-l) og (A-2), hvori absorptionslaget (A-l) er tættere ved såret og er fremstillet af 100 % polyester, og absorptionslaget (A-2) er længere væk fra såret og er fremstillet af en 1:1 blanding af polyester og viskose.

8. Dække ifølge ethvert af kravene 2 til 7, kendetegnet ved at coatingen (P) er sammensat af bundfældet hyaluronanfiberlag, hvorpå et lag af octenidindihydrochlorid er påført, hvori mængden af hyaluronencoatingen er mindst 0,1 mg/m2, og mængden af coating af octenidindihydrochloridsubstans er mindst 0,0001 mg/m2.

9. Dække ifølge krav 8, kendetegnet ved at hyaluronancoatingmængden er inden for intervallet fra 1 til 50 g/m2, og mængden af octenidindihydrochloridcoating er inden for intervallet fra 0,0001 til 0,5 g/m2.

10. Dække ifølge krav 9, kendetegnet ved at mængden af hyaluronancoating er inden for intervallet fra 5 til 20 g/m2, og mængden af octenidindihydrochloridcoating er inden for intervallet fra 10 til 40 mg/m2.

11. Dække ifølge ethvert af kravene 2 til 10, kendetegnet ved at kontaktlaget (K) og overfladelaget (R) er fastgjort til hinanden ved deres kanter for at lukke absorptionslaget 19 DK 2013 00152 Y3 eller absorptionslagene (A) mellem kontaktlaget (K) og overfladelaget (R).