DK153589B - Latex-reagens til paavisning og bestemmelse af antistoffer eller antigener, et diagnostisk middel indeholdende reagenset, en fremgangsmaade til fremstilling af dette reagens samt fremgangsmaade til paavisning eller bestemmelse af et antigen eller antistof - Google Patents
Latex-reagens til paavisning og bestemmelse af antistoffer eller antigener, et diagnostisk middel indeholdende reagenset, en fremgangsmaade til fremstilling af dette reagens samt fremgangsmaade til paavisning eller bestemmelse af et antigen eller antistof Download PDFInfo
- Publication number
- DK153589B DK153589B DK198380AA DK198380A DK153589B DK 153589 B DK153589 B DK 153589B DK 198380A A DK198380A A DK 198380AA DK 198380 A DK198380 A DK 198380A DK 153589 B DK153589 B DK 153589B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- reagent
- latex
- approx
- antigen
- antibody
- Prior art date
Links
- 239000004816 latex Substances 0.000 title claims abstract description 52
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims abstract description 32
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims description 5
- 229940039227 diagnostic agent Drugs 0.000 title claims description 4
- 239000000032 diagnostic agent Substances 0.000 title claims description 4
- 229920000126 latex Polymers 0.000 claims abstract description 51
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 32
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 32
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 32
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 23
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 10
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 4
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 claims description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 abstract 1
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 13
- 230000000552 rheumatic effect Effects 0.000 description 12
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- -1 e.g. β-glycoprotein Proteins 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 108010003044 Placental Lactogen Proteins 0.000 description 1
- 102000004576 Placental Lactogen Human genes 0.000 description 1
- 239000000381 Placental Lactogen Substances 0.000 description 1
- 229920002845 Poly(methacrylic acid) Polymers 0.000 description 1
- 108010015078 Pregnancy-Associated alpha 2-Macroglobulins Proteins 0.000 description 1
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Natural products C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- XECAHXYUAAWDEL-UHFFFAOYSA-N acrylonitrile butadiene styrene Chemical compound C=CC=C.C=CC#N.C=CC1=CC=CC=C1 XECAHXYUAAWDEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000122 acrylonitrile butadiene styrene Polymers 0.000 description 1
- 239000004676 acrylonitrile butadiene styrene Substances 0.000 description 1
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 125000003700 epoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 238000004848 nephelometry Methods 0.000 description 1
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229920003048 styrene butadiene rubber Polymers 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 1
- 238000004879 turbidimetry Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/805—Optical property
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Non-Silver Salt Photosensitive Materials And Non-Silver Salt Photography (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
1 DK 153589B
O
Den foreliggende opfindelse angår et latex-rea-gens til påvisning og bestemmelse af antistoffer eller antigener, et diagnostisk middel indeholdende reagenset, en fremgangsmåde til fremstilling af dette 5 reagens samt en fremgangsmåde til påvisning og bestemmelse af et antigen eller antistof, dvs. klinisk relevante proteiner og peptider, med nephelornetriske eller turbidimetriske metoder. Foruden radio- og enzym-immunoanalyser kommer også nephelometriske metoder 10 til bestemmelse af antigener og antistoffer i betragtning.
Lysspredningen og dermed følsomheden af den nephelometriske metode kan forstærkes ved partikelstørrelsen· af antigenet eller antistoffet. En anvendelig metode består i at binde antigenet eller antistoffet til 15 latexpartikler, som selv spreder lyset.
. Som det fremgår af arbejdet af J. Grange og medarbejdere i J. Immunol. Meth. 18 (1977) 365-375, aftager spredningslyssignalet ved titreringen af et til latex bundet antistof med antigen til at begynde med, 20 fordi partikeltallet aftager med tiltagende agglutina tion. Derefter stiger aggregatstørrelsen på grund af en yderligere stigning af antigen-koncentrationen, hvormed spredningslysintensiteten tiltager, indtil spredningslyssignalet atter aftager ved yderligere 25 stigning af antigenmængden i antigenoverskuddet. Til det kvantitative forsøg er det vigtigt at kontrollere agglutinationsbetingelserne for latex således, at stigningen af agglutinationen ved en titrering af latex-bundne antistoffer med antigen eller af latex- ΟΛ -bundet antigen med antistoffer i stort omfang kan måles som stigning af spredningslysintensiteten.
En vigtig gruppe antistoffer er rheumafaktorerne.
Som rheumafaktorer betegnes anti-immunoglobuliner, rettet mod delvis ændrede immunoglobuliner i klasserne 35
IgG eller IgM., Rheumafaktorerne hører selv til immuno-
O
2 DK 153589 B
globulinklasserne I.gM, IgG og IgA. Forsøgsmetoder til påvisning af rheumatoide faktorer beror på agglutina-tionen af f.eks. erythrocyter eller latexpartikler, der er overtrukket med IgG. Disse fremgangsmåder tillader 5 kun en kvalitativ bestemmelse af rheumafaktoraktivi- teten/ og aflæsningen af resultaterne af dette aggluti-nations-forsøg er særdeles subjektiv. Den af G. Virella og fliedarbejdere i J. Immunol. Meth. 22 (1978) , 247-251 beskrevne metode dokumenterer teknikkens hidtidige 10 stade.
Til denne rheumafaktorbestemmelse må der derefter først udføres et screening-forsøg med en fortyndingsrække (1:10, 1:50, 1:250, 1:1250) af seraerne. Til nøje bestemmelse fremstilles der derpå yderligere for-15 tyndinger af seraerne for at opnå en måleværdi i det lineære område af målekurven. Det fremgår heraf, at denne fremgangsmåde er uegnet til rutinemæssig anvendelse. Ulemperne herved er et ikke-éntydigt forløb af spredningslysintensiteten ved titreringen, et særdeles 20 smalt måleområde, dvs. en brat stigning af reference kurven, samt høje blindværdier for latexreagenset.
Det har nu ifølge opfindelsen overraskende vist sig, at disse ulemper kan undgås véd, at der anvendes et latexreagens, der er ejendommeligt ved, at det inde-25 holder latexpartikler med en diameter på fra ca. 0,1 til 0,35 /am, som er belastet med den ca. 0,6 til 3,3--dobbelte vægtmængde af det korresponderende antigen eller det korresponderende antistof, samt latexpartikler med en diameter på ca. 0,5 til 2 /am, som er belastet med 30 ca. den 0,1-dobbelte vægtmængde af samme antigen eller antistof, i et volumenforhold fra ca. 4:1 til ca. 1:2.
Den ene komponent af reagenset består således af en suspension af latexpartikler med en diameter på ca.
0,1 /am til 0,35 /am, fortrinsvis 0,15 til 0,25 /am. Disse 35 partikler er belastet med 100 til 500 mg humant IgG pr.
150 mg latex, fortrinsvis 150 mg humant IgG pr. 150 mg
3 DK 153589 B
O
latex. Den anden komponent af reagenset består af en suspension af latexpartikler med en diameter på ca.
0/5 yum til 2 pm, fortrinsvis 0,5 pi til 0,8 pn, således som den f.eks. forhandles som latex-rheumafaktor-rea-5 gens til visuel agglutinationsteknik. Dette latex--rheumafaktor-reagens er ifølge sædvanlige metoder belastet med 0,1 mg IgG pr. mg latex. Det kan naturligvis også selv fremstilles ligesom komponent 1. De to komponenter blandes i rumfangsforholdet fra ca. 4:1 10 til ca. 1:2. Blandingen af de to enkeltkomponenter, der fortrinsvis foreligger som vandige suspensioner, som kan indeholde pufferstoffer, neutralsalte, stabilisatorer og konserveringsmidler, ultralydbehandles.
Eventuelt inkuberes der i ca. 1 uge ved stuetemperatur.
15 Derved opnås der en readsorption af eventuelt ved ultralydbehandlingen fra latex fraskilt IgG. Det på denne måde fremkomne latexreagens udmærker sig ved at kunne anvendes indenfor et stort måleområde. Heraf kan der eventuelt fremstilles et tørpulver, som kan 20 resuspenderes til anvendelse.
I overensstemmelse med det ovenfor anførte er den her omhandlede fremgangsmåde til fremstilling af latexreagenset ejendommelig ved, at a) en suepension af latexpartikler med en 25 diameter på fra ca. 0,1 til 0,35 /am får lov at reagere med den ca. 0,6 til 3,3-dobbelte vægtmængde af et antigen eller antistof, og at b) denne suspension blandes med en suspension af latexpartikler, som er belastet med ca. den 30 0,1-dobbelte vægtmængde af samme antigen eller antistof, i et volumenforhold fra ca. 4:1 til ca. 1:2, hvorefter den nævnte suspension eventuelt ultralydbehandles og eventuelt får lov at henstå.
35 Det diagnostiske middel ifølge opfindelsen til påvisning og bestemmelse af antistoffer eller antigener
O
4 DK 153589 B
er, ligeledes i overensstemmelse med det foran anførte, ejendommeligt ved, at det indeholder et reagens som ovenfor defineret i en flydende fase samt eventuelt pufferstoffer, stabilisatorer, neutralsalte og/eller 5 konserveringsmidler.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen til påvisning og bestemmelse af et antigen eller antistof er ejendommelig ved, at et reagens ifølge opfindelsen, som er belastet med det tilsvarende antistof henholdsvis 10 antigen, i flydende fase sammenblandes med det antigen eller antistof, der skal bestemmes, hvorefter lysspredningen måles.
Latexreagenset ifølge den foreliggende opfindelse kan anvendes i nephelometrien og turbidimetrien samt i 15 "Particle Counting Immuno Assay" (PACIA) til dokumenta tion og til bestemmelse af stoffer såsom proteinagtige antigener og haptener, antistoffer, virusbestanddele, cellebestanddele, enzymer og hormoner. Latexreagenset anvendes fortrinsvis til bestemmelse af plasmaprotei-20 ner. Særlig egnet er latexreagenset til bestemmelse af sporproteiner, som på grund af ringe koncentrationer i serummet er vanskelige at påvise med andre metoder.
Endnu bedre egnet er latexreagenset til nephelometrisk bestemmelse af rheumafaktorer, af immunkomplekser og 25 af svangerskabsspecifikke proteiner som f.eks. svanger skabsspecifikt β^-glycoprotein, svangerskabsassocieret alfa2~glycoprotein og humant placentalactogen.
Latexreagenset er anvendeligt til bestemmelse af proteiner og peptider såvel ifølge kinetiske som ifølge qn siutpunktmetoder.
Latexpartiklerne kan belastes adsorptivt eller ved covalent binding af proteiner. Til den covalente binding kan latexderivater med de frie carboxylgrupper, aminogrupper, aldehydgrupper og epoxygrupper samt 35 vicinale hydroxylgrupper komme i betragtning. Endvidere kan mindre peptider, f.eks. hormoner, også bindes til
O
5 DK 1535898 latexen via et bæreprotein. Den adsorptive binding af proteiner til latexen har vist sig at være mest gunstig.
De til fremstilling af det her omhandlede reagens 5 anvendelige latexer .kan f.eks. opnås ved polymerisation af olefinisk umættede monomere. Foretrukne er styren-co-polymerisater, f.eks. styren-butadien-copolymerisater og acrylnitril-butadien-styren-copolymerisater, vinyl-acetat-acrylat-copolymerisater eller vinylchlorid-acry-10 lat-copolymerisater.
Polystyren-latex-suspensioner eller emulsioner med en egnet partikelstørrelse kan også opnås under forskellige handelsbetegnelser af en række fremstil-lere, f.eks. Lytron ^-latexer, Dylex ^-latexer og 15 Dow-Latex-partikler samt acrylpolymerisater, f.eks.
Acryl®-partikler (polymethacrylsyreestere) , og Ubatol U-7001.
Den foreliggende opfindelse beskrives nærmere ved hjælp af et udførelseseksempel.
20
Eksempel !>' Fremstilling af latexreagenset 150 mg polystyrenlatex fremstillet ifølge kendte metoder med en partikelstørrelse fra 0,1 til 0,35 jum, 25 fortrinsvis fra 0,15 til 0,25 pm, suspenderes i en koncentration på 3,8 mg latex pr. ml i et pufferstof indeholdende 0,1 M glycin og 0,17 M natriumchlorid og med pH=8,2. Der omrøres med 150 mg human-IgG (varme-aggregeret i 10 minutter ved 60°C) og 920 mg human-30 -albumin pr. 150 mg latex i 5 timer ved stuetemperatur, hvorefter der fortyndes til 0,5 mg latex pr. ml med fysiologisk kogsaltopløsning, som indeholder 2 mg/ml okseserumalbumin. Der fås således et med aggregeret XgG højtbelastet latexpræparat, som ganske vist alene 35 endnu ikke er egnet til en laser-nephelometrisk be stemmelse .
O
6 DK 153589 B
Endvidere fortyndes i handelen værende latex--rheumafaktor-reagens til bestemmelse af rheumafakto-rer ifølge den visuelle agglutinationsteknik (Behringwerke)· ligeledes med fysiologisk kogsaltop-5 løsning (2 mg/ml okseserumalbumirO-til 0,5 mg latex pr. ml. Det med IgG højtbelastede latexpræparat blandes med et i handelen værende latex-rheumafaktor-reagens i blandingsforholdet 4:1 til 0,5:1, fortrinsvis 2:1, og ultralydbehandles i 20 sekunder for hver 250 ml 10 udgangsmateriale. Reagenset inkuberes derpå i 1 uge ved stuetemperatur, hvorefter det oplagres ved +4°C.
2) Nephelometrisk bestemmelse af rheumafaktoren
Et rheumafaktor-reference-serum, som er en under-15 standard af WHO rteumafaktor-standarden og har en 150 iu/ml rheumafaktor-aktivitet, samt de sera, der skal undersøges, opvarmes til komplementinaktivering i 30 minutter til 56°C. Reference-serummet fortyndet i en geometrisk række fra 1:6 til 1:768. Dette giver rheumafaktor-aktiviteter fra 25 til 20 0,2 IU/ml i disse fortyndinger. Seraerne fortyndes 1:100.
50 μΐ serum- eller reference-serum-fortynding og 75 μΐ af det godt rystede latex-reagens blandes i LN- kuvetter (Sarstedt) .
Efter 1 times inkubationstid tilsættes der 25 100 μΐ fysiologisk kogsaltopløsning med 0,1 M borat ved pH=8,l, og efter yderligere 15 minutter måles lysspredningen i et laser-nephelometer.
Til bedømmelse overføres de for standardfortyndingerne opnåede voltværdier i en referencekurve på halv-30 logaritmisk papir. Ved hjælp af referencekurven bestemmes koncentrationerne af rheumafaktor-aktivitet til patientserum.
Det her beskrevne forsøg giver mulighed for en bestemmelse af rheumafaktor-aktiviteterne i et område 35 mellem 0,2 og 25 Ιϋ/ml for ufortyndet serum. Ved en for tynding af seraerne på 1:100 er en rheumafaktor-bestem-
O
7 DK 153589B
' ’ i melse mellem 20 og 2500 IU/ml rheumafaktor-aktivitet i serummet således mulig. Dette er det vigtige måleområde for diagnosen af rheumatiske sygdomme. Det beskrevne forsøg viser en god reproducerbarhed i serien VK = 3% 5 samt fra dag til dag VK = 7°/>, I overensstemmelse med udførelseseksemplet kan der bestemmes andre antistoffer eller antigener.
10 15 20 25 30 35
Claims (4)
1. Latex-reagens til påvisning og bestemmelse af antistoffer eller antigener, kendetegnet ved, at det indeholder latexpartikler med en diameter på 5 fra ca. 0,1 til 0,35 jam, som er belastet med den ca. 0,6 til 3,3-dobbelte vægtmængde af det korresponderende antigen eller det korresponderende antistof, samt latexpartikler med en diameter på ca. 0,5 til 2 /om, som er belastet med ca. den 0,1-dobbelte vægtmængde af 10 samme antigen eller antistof, i et volumenforhold fra ca. 4:1 til ca. 1:2.
2. Fremgangsmåde til fremstilling af et reagens ifølge krav 1, kendete. gnet ved, at a) en suspension af latexpartikler med en dia- 15 meter på fra ca. 0,1 til 0,35 /am får lov at reagere med den ca. 0,6 til 3,3-dobbelte vægtmængde af et antigen eller antistof, og at b) denne suspension blandes med en suspension af latexpartikler på ca. 0,5 til 2 /om, som er 20 belastet med ca. den 0,1-dobbelte vægtmængde af samme antigen eller antistof, i et volumenforhold fra ca. 4:1 til ca. 1:2, hvorefter den nævnte suspension eventuelt ultralydbehandles og eventuelt får lov at henstå.
3. Diagnostisk middel til påvisning og bestem melse af antistoffer eller antigener, kendetegnet ved, at det indeholder et reagens ifølge krav 1 i en flydende fase samt eventuelt pufferstoffer, stabilisatorer, neutralsalte og/eller konserveringsmidler.
4. Fremgangsmåde til påvisning og bestemmelse af et antigen eller antistof, kendetegnet ved, at et reagens ifølge krav 1, som er belastet med det tilsvarende antistof henholdsvis antigen, i flydende fase sammenblandes med det antigen eller antistof, der skal 35 bestemmes, hvorefter lysspredningen måles.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE2918342 | 1979-05-07 | ||
| DE19792918342 DE2918342A1 (de) | 1979-05-07 | 1979-05-07 | Latex-reagenz |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK198380A DK198380A (da) | 1980-11-08 |
| DK153589B true DK153589B (da) | 1988-07-25 |
| DK153589C DK153589C (da) | 1988-12-12 |
Family
ID=6070116
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK198380A DK153589C (da) | 1979-05-07 | 1980-05-06 | Latex-reagens til paavisning og bestemmelse af antistoffer eller antigener, et diagnostisk middel indeholdende reagenset, en fremgangsmaade til fremstilling af dette reagens samt fremgangsmaade til paavisning eller bestemmelse af et antigen eller antistof |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4305925A (da) |
| EP (1) | EP0019741B1 (da) |
| JP (1) | JPS55151264A (da) |
| AT (1) | ATE16130T1 (da) |
| AU (1) | AU527485B2 (da) |
| DE (2) | DE2918342A1 (da) |
| DK (1) | DK153589C (da) |
| ES (2) | ES491029A0 (da) |
Families Citing this family (58)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AU543007B2 (en) * | 1980-04-15 | 1985-03-28 | Technicon Instruments Corportion | Agglutination immunoassay |
| DE3265823D1 (en) * | 1981-06-02 | 1985-10-03 | Electro Nucleonics | Immunoprecipitation assay |
| US4792527A (en) * | 1981-07-17 | 1988-12-20 | Toray Industries, Inc. | Method of assaying biologically active substances and labelling agents therefor |
| EP0070527B1 (en) * | 1981-07-17 | 1985-06-19 | Toray Industries, Inc. | Method of assaying biologically active substances and labelling agents therefor |
| DE3145082A1 (de) * | 1981-11-13 | 1983-05-19 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | "ein latex, biologisch aktive latexkonjugate und verfahren zu ihrer herstellung" |
| US4543339A (en) * | 1982-03-16 | 1985-09-24 | Oneill Christopher | Early pregnancy detection by detecting enhanced blood platelet activation |
| US4766083A (en) * | 1982-04-04 | 1988-08-23 | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | Method for the photometric determination of biological agglutination |
| JPS58209994A (ja) * | 1982-05-10 | 1983-12-07 | Fujirebio Inc | 活性蛋白等固定化物を用いた抗原の測定方法 |
| US4459361A (en) * | 1982-06-04 | 1984-07-10 | Angenics, Inc. | Ligand assay with one or two particulate reagents and filter |
| GB2123146B (en) * | 1982-06-28 | 1985-09-25 | Abbott Lab | Dual parameter flow immunoassays |
| DE3366740D1 (en) * | 1982-08-06 | 1986-11-13 | Int Inst Cellular Molecul Path | Particle agglutination assay of antigens |
| FR2531718B1 (fr) * | 1982-08-16 | 1986-11-21 | Sanofi Sa | Reactif permettant un dosage de tres haute sensibilite de l'antigene caracteristique du virus de l'hepatite b dans les liquides biologiques humains |
| US4595661A (en) * | 1983-11-18 | 1986-06-17 | Beckman Instruments, Inc. | Immunoassays and kits for use therein which include low affinity antibodies for reducing the hook effect |
| US4590169A (en) * | 1983-11-18 | 1986-05-20 | Beckman Instruments, Inc. | Direct particle agglutination immunoassays avoiding false negatives at high antigen concentrations |
| WO1985004426A1 (en) * | 1984-03-26 | 1985-10-10 | International Health Services | A method of determining the clotting time of blood and particulate reagents therefor |
| US4665020A (en) * | 1984-05-30 | 1987-05-12 | United States Department Of Energy | Flow cytometer measurement of binding assays |
| US4762413A (en) * | 1984-09-07 | 1988-08-09 | Olympus Optical Co., Ltd. | Method and apparatus for measuring immunological reaction with the aid of fluctuation in intensity of scattered light |
| JPH0650314B2 (ja) * | 1984-09-08 | 1994-06-29 | オリンパス光学工業株式会社 | 免疫反応測定装置 |
| EP0189389B1 (fr) * | 1985-01-24 | 1989-04-05 | Institut International De Pathologie Cellulaire Et Moleculaire | Procédé de dosage immunologique d'anticorps de diverses classes dans un échantillon liquide |
| DE3507574A1 (de) * | 1985-03-04 | 1986-09-04 | Gödecke AG, 1000 Berlin | Zweistufiger agglutinationsschnelltest zum kombinierten nachweis "seropositiver" und "seronegativer" rheumafaktoren |
| GB8526355D0 (en) * | 1985-10-25 | 1985-11-27 | Alta Diagnostic Machines Ltd | Determination of antibody content of blood |
| US5770459A (en) * | 1986-04-30 | 1998-06-23 | Igen International, Inc. | Methods and apparatus for improved luminescence assays using particle concentration, electrochemical generation of chemiluminescence detection |
| GB8621495D0 (en) * | 1986-09-05 | 1986-10-15 | Acade Diagnostic Systems Sa Nv | Assay |
| JP2588174B2 (ja) * | 1986-09-08 | 1997-03-05 | 三菱化学株式会社 | 抗原−抗体反応の測定法 |
| US5935779A (en) * | 1988-11-03 | 1999-08-10 | Igen International Inc. | Methods for improved particle electrochemiluminescence assay |
| US6881589B1 (en) | 1987-04-30 | 2005-04-19 | Bioveris Corporation | Electrochemiluminescent localizable complexes for assay compositions |
| US5779976A (en) * | 1988-11-03 | 1998-07-14 | Igen International, Inc. | Apparatus for improved luminescence assays |
| US5962218A (en) * | 1988-11-03 | 1999-10-05 | Igen International Inc. | Methods and apparatus for improved luminescence assays |
| US5705402A (en) * | 1988-11-03 | 1998-01-06 | Igen International, Inc. | Method and apparatus for magnetic microparticulate based luminescence assay including plurality of magnets |
| US5746974A (en) * | 1988-11-03 | 1998-05-05 | Igen International, Inc. | Apparatus for improved luminescence assays using particle concentration, electrochemical generation of chemiluminescence and chemiluminescence detection |
| AU643454B2 (en) * | 1989-08-23 | 1993-11-18 | Canon Kabushiki Kaisha | Method for measuring an immunologically active material and apparatus suitable for practicing said method |
| AU6608490A (en) * | 1990-02-22 | 1991-09-18 | Royal Institution For The Advancement of Learning, The | A solid-phase interferometric immunoassay system |
| US5250186A (en) * | 1990-10-23 | 1993-10-05 | Cetus Corporation | HPLC light scattering detector for biopolymers |
| US5269937A (en) * | 1990-10-23 | 1993-12-14 | Cetus Corporation | HPLC light scattering detector for biopolymers |
| ZA92804B (en) | 1991-02-06 | 1992-12-30 | Igen Inc | Methods and apparatus for improved luminescence assays |
| US5290707A (en) * | 1991-11-25 | 1994-03-01 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army | Method for detection of microorganisms |
| DE4202924A1 (de) * | 1992-02-01 | 1993-08-05 | Behringwerke Ag | Verfahren zur bestimmung von rheumafaktoren und mittel zur durchfuehrung des verfahrens |
| US6200820B1 (en) | 1992-12-22 | 2001-03-13 | Sienna Biotech, Inc. | Light scatter-based immunoassay |
| TW239881B (da) * | 1992-12-22 | 1995-02-01 | Sienna Biotech Inc | |
| US6290991B1 (en) | 1994-12-02 | 2001-09-18 | Quandrant Holdings Cambridge Limited | Solid dose delivery vehicle and methods of making same |
| US6019968A (en) * | 1995-04-14 | 2000-02-01 | Inhale Therapeutic Systems, Inc. | Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use |
| US5628432A (en) * | 1996-04-03 | 1997-05-13 | Mosley; Julius | Personal cooling system |
| JP3652029B2 (ja) * | 1996-10-16 | 2005-05-25 | 積水化学工業株式会社 | 高感度免疫測定法 |
| US5858648A (en) * | 1996-11-04 | 1999-01-12 | Sienna Biotech, Inc. | Assays using reference microparticles |
| WO2002003068A1 (fr) * | 2000-06-30 | 2002-01-10 | Kyowa Medex Co.,Ltd. | Reactif de dosage immunologique nephelometrique a particules-supports insolubles |
| EP1385001A4 (en) * | 2001-03-30 | 2007-07-25 | Mitsubishi Kagaku Iatron Inc | REAGENT AND METHOD FOR THE IMMUNE ANALYSIS OF ELASTASE 1 AND METHOD FOR DETECTING PANCREASCONDUCTIVE DISEASE |
| EP2023141B1 (en) * | 2001-07-02 | 2014-04-09 | Sekisui Medical Co., Ltd. | Assay reagent comprising carrier particle latex |
| CA2562800A1 (en) * | 2004-05-15 | 2005-12-01 | Genentech, Inc. | Cross-screening system and methods for detecting a molecule having binding affinity for a target molecule |
| JP4331073B2 (ja) * | 2004-08-31 | 2009-09-16 | デンカ生研株式会社 | 抗原の測定方法及びそのための試薬 |
| ES2675044T3 (es) * | 2005-06-03 | 2018-07-06 | Board Of Regents Of The University Of Texas System | Electroquímica y quimioluminiscencia electrogenerada con un único electrodo faradaico |
| US20100240150A1 (en) * | 2007-11-21 | 2010-09-23 | Arkray, Inc. | Measuring reagent and turbidimetric immunoassay and sample analysis tool using the same |
| CN105181962B (zh) * | 2015-09-02 | 2016-09-14 | 郁东 | 一种类风湿因子检测试剂 |
| EP3605099B1 (en) | 2017-03-28 | 2022-03-09 | Denka Company Limited | Membrane carrier, kit for testing liquid sample using same, and manufacturing method thereof |
| DE102021111494A1 (de) | 2021-05-04 | 2022-11-10 | Atral-Secal Gmbh | Nachweisgerät sowie ein Nachweisverfahren für in Luft enthaltene pathogene Substanzen |
| DE102021126818A1 (de) | 2021-10-15 | 2023-04-20 | Atral-Secal Gmbh | Nachweisgerät sowie ein Nachweisverfahren für in Luft enthaltene pathogene Substanzen |
| CN114935655B (zh) * | 2022-06-16 | 2024-02-20 | 安徽农业大学 | 一种猪il-17胶乳增强免疫比浊法检测试剂盒及其制备使用方法 |
| CN115754312A (zh) * | 2022-10-12 | 2023-03-07 | 湖南菲科生物技术有限公司 | 氧化型低密度脂蛋白检测试剂盒及其制备方法 |
| DE102022132609A1 (de) | 2022-12-08 | 2024-06-13 | Hager Safety Deutschland Gmbh | Nachweisgerät sowie ein Nachweisverfahren für in Luft enthaltene pathogene Substanzen |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1179435A (en) * | 1966-06-17 | 1970-01-28 | Ortho Pharma Corp | Stable Reagent for the Detection of Rheumatoid Arthritis |
| US3925018A (en) * | 1973-06-08 | 1975-12-09 | Technicon Instr | Method and apparatus for quantitative analysis utilizing particulate reagent material |
| US4035316A (en) * | 1975-11-24 | 1977-07-12 | California Institute Of Technology | Cell specific, variable density, polymer microspheres |
| US4143203A (en) * | 1976-03-19 | 1979-03-06 | Amicon Corporation | Particulate support material |
| IT1087285B (it) * | 1976-11-10 | 1985-06-04 | Hoffmann La Roche | Procedimento di determinazione immunologico |
| GB1590525A (en) * | 1976-12-10 | 1981-06-03 | Technicon Instr | Biological analysis |
| CH628738A5 (de) * | 1977-08-03 | 1982-03-15 | Hoffmann La Roche | Immunologisches diagnose-reagenz. |
| US4191739A (en) * | 1977-10-17 | 1980-03-04 | General Electric Company | Antigen-antibody reaction assay employing particle aggregation and resistive pulse analysis |
-
1979
- 1979-05-07 DE DE19792918342 patent/DE2918342A1/de not_active Withdrawn
-
1980
- 1980-04-30 ES ES491029A patent/ES491029A0/es active Granted
- 1980-05-01 AT AT80102364T patent/ATE16130T1/de not_active IP Right Cessation
- 1980-05-01 EP EP80102364A patent/EP0019741B1/de not_active Expired
- 1980-05-01 DE DE8080102364T patent/DE3071183D1/de not_active Expired
- 1980-05-05 US US06/146,348 patent/US4305925A/en not_active Expired - Lifetime
- 1980-05-06 AU AU58130/80A patent/AU527485B2/en not_active Ceased
- 1980-05-06 DK DK198380A patent/DK153589C/da active
- 1980-05-07 JP JP5956280A patent/JPS55151264A/ja active Granted
- 1980-12-31 ES ES498270A patent/ES8201315A1/es not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE2918342A1 (de) | 1980-11-20 |
| JPS55151264A (en) | 1980-11-25 |
| JPS6314783B2 (da) | 1988-04-01 |
| DK198380A (da) | 1980-11-08 |
| AU527485B2 (en) | 1983-03-03 |
| AU5813080A (en) | 1980-11-13 |
| EP0019741B1 (de) | 1985-10-16 |
| ES8200770A1 (es) | 1981-11-01 |
| ATE16130T1 (de) | 1985-11-15 |
| DE3071183D1 (en) | 1985-11-21 |
| US4305925A (en) | 1981-12-15 |
| DK153589C (da) | 1988-12-12 |
| ES498270A0 (es) | 1981-12-01 |
| EP0019741A1 (de) | 1980-12-10 |
| ES491029A0 (es) | 1981-11-01 |
| ES8201315A1 (es) | 1981-12-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK153589B (da) | Latex-reagens til paavisning og bestemmelse af antistoffer eller antigener, et diagnostisk middel indeholdende reagenset, en fremgangsmaade til fremstilling af dette reagens samt fremgangsmaade til paavisning eller bestemmelse af et antigen eller antistof | |
| CN108490166B (zh) | 一种改良实验缓冲液及其应用 | |
| JP3623657B2 (ja) | 非特異反応抑制剤、免疫測定試薬及び免疫測定方法 | |
| EP0070527B1 (en) | Method of assaying biologically active substances and labelling agents therefor | |
| JPH04350559A (ja) | 特異抗体の測定法 | |
| JPH0795065B2 (ja) | 水不溶性試薬、それを含む要素及びその使用方法 | |
| CN109459570A (zh) | 一种快速检测人体血液中铅离子的胶体金免疫试纸条制备方法 | |
| Cuilliere et al. | Microparticle-enhanced nephelometric immunoassay (Nephelia) for immunoglobulins G, A, and M | |
| JPH02257063A (ja) | 免疫測定試薬および免疫測定法 | |
| CN106645749B (zh) | 溶血剂及应用 | |
| JP3476274B2 (ja) | 免疫測定法 | |
| JP3618797B2 (ja) | 免疫測定法 | |
| JP2000046828A (ja) | 免疫学的測定試薬及び免疫学的測定試薬の製造方法 | |
| JP3916189B2 (ja) | イムノアッセイ用試薬及びイムノアッセイ | |
| JP2004117068A (ja) | 免疫測定試薬および免疫測定方法 | |
| JP3968287B2 (ja) | 免疫分析方法 | |
| JPH08193999A (ja) | 免疫測定法 | |
| JPH0448265A (ja) | 免疫測定法 | |
| JPH02165052A (ja) | 免疫学的測定方法 | |
| JP2000258419A (ja) | 免疫測定試薬及び免疫測定法 | |
| JPS6262291B2 (da) | ||
| JPH01158354A (ja) | 免疫学的多成分測定用試薬と測定方法 | |
| JPH11183478A (ja) | 抗体測定試薬及びその製造法 | |
| JPH0454905B2 (da) | ||
| JPH08278308A (ja) | 免疫測定法 |