DE69936396T2

DE69936396T2 - Il-5 hemmende 6-uracilderivate

Info

Publication number: DE69936396T2
Application number: DE69936396T
Authority: DE
Inventors: Eddy Jean Edgard Freyne; Frederik Dirk Deroose; Jean Fernand Armand Janssen-Cila LACRAMPE; Werner Constant Johan Embrechts; Jerome Michel Claude Janssen-Cila FORTIN
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 1998-12-18
Filing date: 1999-12-16
Publication date: 2008-06-19
Anticipated expiration: 2019-12-17
Also published as: AU773780B2; HUP0104641A3; NZ512748A; EA200100677A1; ES2289835T3; NO20012987L; HUP0104641A2; ATE365723T1; TWI249530B; AU2100100A; HK1042491A1; ID28880A; CN100343239C; UA73107C2; US6803364B1; JP2002533331A; IL143766A0; IL143766A; WO2000037451A1; KR20010080617A

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue IL-5-inhibierende 6-Azauracilderivate, die sich zur Behandlung von eosinophilabhängigen entzündlichen Krankheiten eignen, Verfahren zu ihrer Herstellung und Zusammensetzungen, die sie enthalten. Sie betrifft weiterhin die Verwendung derartiger Derivate als Medizin.
Der Einstrom von eosinophilen Zellen, der zu einer anschließenden Gewebeschädigung führt, ist ein wichtiges pathogenes Ereignis bei Bronchialasthma und allergischen Erkrankungen. Das Cytokin Interleukin-5 (IL-5), das vorwiegend von T-Lymphozyten als Glycoprotein produziert wird, induziert die Differenzierung von eosinophilen Zellen im Knochenmark, bereitet die eosinophilen Zellen auf die Aktivierung in peripherem Blut vor und unterstützt deren Überleben in Geweben. IL-5 spielt daher eine entscheidende Rolle bei dem Prozeß der eosinophilen Entzündung. Die Möglichkeit, daß Inhibitoren der IL-5-Produktion die Produktion, Aktivierung und/oder das Überleben von eosinophilen Zellen reduzieren könnten, bietet also einen therapeutischen Ansatz zur Behandlung von Bronchialasthma und allergischen Erkrankungen wie atopischer Dermatitis, allergischer Rhinitis, allergischer Konjunktivitis und auch anderen eosinophilabhängigen entzündlichen Krankheiten.
Seit langem werden Steroide, die die Produktion von IL-5 in vitro stark hemmen, als einzige Arzneimittel mit bemerkenswerter Wirksamkeit gegen Bronchialasthma und atopische Dermatitis eingesetzt; sie haben jedoch verschiedene schwere Nebenwirkungen wie Diabetes, Bluthochdruck und Katarakte. Es wäre daher wünschenswert, nicht-steroidale Verbindungen zu finden, die dazu in der Lage sind, die IL-5-Produktion in humanen T-Zellen zu hemmen und wenn überhaupt dann nur geringe Nebenwirkungen haben.
In US 4,631,278 und in US 4,767,760 werden α-Aryl-4-(4,5-dihydro-3,5-dioxo-1,2,4-triazin-2(3H)-yl)benzolacetonitrile bzw. 2-(substituiertes Phenyl)-1,2,4-triazin-3,5(2H, 4H)-dione offenbart, die jeweils gegen Protozoen und insbesondere gegen Kokzidien aktiv sind. In EP 831,088 (Takeda) werden 1,2,4-Triazin-3,5-dione als Mittel gegen Kokzidien offenbart. In EP 232,932 (Janssen) werden 1,2,4-Triazin-3,5-dionderivate mit Wirkung gegen Protozoen offenbart. In den PCT-Veröffentlichungen WO99/02505 und WO99/02504 werden ähnliche Verbindungen als IL-5-Inhibitoren offenbart. Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung unterscheiden sich davon in ihrer Struktur; die IL-5-hemmende Wirkung ist bei ihnen jedoch erhalten geblieben.
Die vorliegende Erfindung stellt Verbindungen bereit, die bislang noch nicht beschrieben wurden und die eine bemerkenswerte pharmakologische Wirkung als Inhibitoren der Produktion von IL-5 aufweisen.
Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen der Formel
deren N-Oxide, deren pharmazeutisch unbedenkliche Additionssalze, deren quaternäre Amine und deren stereochemisch isomere Formen, wobei:
p für eine ganze Zahl 2 steht;
q für eine ganze Zahl 1 steht;
X für S steht;
R¹ für Wasserstoff steht;
R² für durch einen Substituenten ausgewählt aus der aus
bestehenden Gruppe substituiertes Pyridinyl steht;
R⁴ für Chlor steht;
R⁵ für Chlor steht.
Eine besondere Gruppe von Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I) ausgewählt aus der aus

bestehenden Gruppe.
So, wie der Ausdruck in den obenstehenden Definitionen und im folgenden verwendet wird, steht „Halogen" allgemein für Fluor, Chlor, Brom und Iod.
Zu den oben erwähnten pharmazeutisch unbedenklichen Additionssalzen sollen die therapeutisch wirksamen, nicht toxischen Säureadditionssalzformen gehören, die von den Verbindungen der Formel (I) gebildet werden können. Letztere lassen sich einfach erhalten, indem man die Basenform mit geeigneten Säuren wie anorganischen Säuren, beispielsweise Halogenwasserstoffsäuren, z. B. Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure oder dergleichen; Schwefelsäure; Salpetersäure; Phosphorsäure und dergleichen; oder organischen Säuren, beispielsweise Essigsäure, Propionsäure, Hydroxyessigsäure, 2-Hydroxypropionsäure, 2-Oxopropionsäure, Ethandisäure, Propandisäure, Butandisäure, (Z)-2-Butendisäure, (E)-2-Butendisäure, 2-Hydroxybutandisäure, 2,3-Dihydroxybutandisäure, 2-Hydroxy-1,2,3-propantricarbonsäure, Methansulfonsäure, Ethansulfonsäure, Benzolsulfonsäure, 4-Methylbenzolsulfonsäure, Cyclohexansulfaminsäure, 2-Hydroxybenzoesäure, 4-Amino-2-hydroxybenzoesäure und ähnliche Säuren. Umgekehrt können die Salzformen durch Behandlung mit Alkali in die freie Basenform überführt werden.
Die ein azides Proton enthaltenden Verbindungen der Formel (I) können durch Behandlung mit geeigneten orga nischen und anorganischen Basen in ihre therapeutisch aktiven nicht toxischen Metall- oder Aminadditionssalzformen umgewandelt werden. Als Basensalzformen eignen sich beispielsweise die Ammoniumsalze, die Alkali- und Erdalkalisalze, z. B. die Lithiumsalze, Natriumsalze, Kaliumsalze, Magnesiumsalze, Calciumsalze und dergleichen, Salze mit organischen Basen, z. B. die Benzathinsalze, N-Methyl-D-glucaminsalze, 2-Amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propandiolsalze, Hydrabaminsalze und Salze mit Aminosäuren wie beispielsweise Arginin, Lysin, Cholin und dergleichen. Umgekehrt können die Salzformen durch Behandlung mit Säure in die freie Säureform überführt werden.
Der Ausdruck Additionssalz umfaßt weiterhin die Hydrate und Solvate, die von den Verbindungen der Formel (I) gebildet werden können. Bei diesen Formen handelt es sich beispielsweise um Hydrate, Alkoholate und dergleichen.
Die N-Oxidformen der vorliegenden Verbindungen sollen diejenigen Verbindungen der Formel (I) umfassen, in denen ein oder mehrere Stickstoffatome zum sogenannten N-Oxid oxidiert sind.
Einige der Verbindungen der Formel (I) können auch in ihren tautomeren Formen existieren. Derartige Formen sind zwar in der obigen Formel nicht explizit dargestellt, sollen jedoch in den Schutzbereich der vorliegenden Erfindung fallen. So kann beispielsweise eine hydroxysubstituierte Triazineinheit auch als die entsprechende Triazinoneinheit und eine hydroxysubstituierte Pyrimidineinheit auch als die entsprechende Pyrimidinoneinheit vorliegen.
Unter dem vorhergehend verwendeten Begriff „stereochemisch isomere Formen" sind alle möglichen stereoisomeren Formen, die die Verbindungen der Formel (I) annehmen können, zu verstehen. Sofern nichts anderes erwähnt bzw. angegeben ist, bezeichnet der chemische Name von Verbindungen das Gemisch aller möglichen stereochemisch isomeren Formen, wobei diese Gemische alle Diastereomere und Enantiomere der zugrundeliegenden Molekülstruktur enthalten. Insbesondere können stereogene Zentren R- oder S-Konfiguration – hier entsprechend der Chemical-Abstracts-Nomenklatur verwendet – aufweisen. Stereochemisch isomere Formen der Verbindungen der Formel (I) sollen selbstverständlich in den Schutzbereich der vorliegenden Erfindung fallen.
Die Verbindungen der Formel (I) und einige der Zwischenprodukte in der vorliegenden Erfindung enthalten ein oder mehrere asymmetrische Kohlenstoffatome. In den Schutzbereich der vorliegenden Erfindung sollen sowohl die reinen als auch die gemischten stereochemisch isomeren Formen der Verbindungen der Formel (I) fallen.
Wann immer der Ausdruck „Verbindungen der Formel (I)" im folgenden verwendet wird, schließt er auch deren N-Oxidformen, deren pharmazeutisch unbedenkliche Additionssalze, quaternäre Amine und deren stereochemisch isomere Formen ein.
Die Numerierung des den Substituenten R⁴ tragenden Phenylrings findet sich unten. Diese Numerierung wird hier als solche zur Angabe der Position der R⁴-Substituenten an diesem Phenylring verwendet, wenn diese nicht andersweitig bezeichnet sind.
Das die beiden Phenylringe und die R¹- und -X-R²-Substituenten tragende Kohlenstoffatom wird hier als das zentrale Kohlenstoffatom bezeichnet.
Eine interessante Gruppe von Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I), in denen die 6-Azauracilgruppierung in der para- oder meta-Stellung zum zentralen Kohlenatoffatom, vorzugsweise in der para-Stellung, an den Phenylring gebunden ist.
Bevorzugte Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I), in denen sich R⁴ in der 4-Stellung befindet.
Andere bevorzugte Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I), in denen p für 1 oder 2 steht und der eine oder die beiden R⁵-Substituenten sich in der ortho-Stellung zum zentralen Kohlenstoffatom befinden.
Zur einfacheren Wiedergabe der Struktur der Verbindungen der Formel (I) wird
im folgenden durch das Symbol D wiedergegeben.
Verbindungen der Formel (I) lassen sich allgemein darstellen, indem man ein Zwischenprodukt der Formel (II), in dem W¹ für eine geeignete Abgangsgruppe wie beispielsweise ein Halogenatom steht, mit einem geeigneten Reagens der Formel (III) umsetzt.
Diese Umsetzung läßt sich in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Acetonitril, N,N-Dimethylformamid, Essigsäure, Tetrahydrofuran, Ethanol oder einer Mischung davon durchführen. Alternativ dazu wird, wenn das Reagens der Formel (III) als Lösungsmittel fungiert, kein zusätzliches reaktionsinertes Lösungsmittel benötigt. Die Umsetzung erfolgt gegebenenfalls in Gegenwart einer Base wie zum Beispiel 1,8-Diazabicyclo[5,4,0]undec-7-en, Natriumhydrogencarbonat, Natriumethanolat und dergleichen. Zweckmäßige Reaktionstemperaturen liegen im Bereich zwischen –70°C und der Rückflußtemperatur.
In dieser und in den folgenden Darstellungen kann man die Reaktionsprodukte aus dem Reaktionsmedium isolieren und, falls erforderlich, nach im Stand der Technik allgemein bekannten Verfahren wie zum Beispiel Extraktion, Kristallisation, Destillation, Verreiben und Chromatographie weiter aufreinigen.
Alternativ dazu kann man Verbindungen der Formel (I) zum Beispiel allgemein darstellen, indem man ein Zwischenprodukt der Formel (IV), in welchem L für eine geeignete Abgangsgruppe wie zum Beispiel C_1-6-Alkyloxy oder Halogen steht und E für eine geeignete elektronenziehende Gruppe wie zum Beispiel einen Ester, ein Amid, ein Cyanid, C_1-6-Alkylsulfonyloxy und ähnliche Gruppen steht, cyclisiert; und die Gruppe E aus dem auf diese Weise erhaltenen Triazindion der Formel (V) eliminiert. Diese Reaktionsvorschrift ist analog zu der in EP-A-0,170,316 beschriebenen.
Einige der Verbindungen und Zwischenprodukte der vorliegenden Erfindung lassen sich nach bzw. analog den in EP-A-0,170,316 und EP-A-0,232,932 beschriebenen Vorschriften herstellen.
Schema 1 beispielsweise zeigt einen Reaktionspfad für die Darstellung von durch die Formel (I-a-1) wiedergegebenen Verbindungen, in denen R¹ für Wasserstoff und X für eine direkte Bindung steht. Ein Keton der Formel (VI) läßt sich in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Tetrahydrofuran oder Diethylether und in Gegenwart einer geeigneten Base wie zum Beispiel Butyllithium unter Bildung eines Zwischenprodukts der Formel (VIII) mit einem Reagens der Formel (VII), in welchem W² für eine geeignete Abgangsgruppe wie zum Beispiel ein Halogen steht, umsetzen. Die Hydroxylgruppe der Zwischenprodukte der Formel (VIII) läßt sich mit einem geeigneten Reagens wie zum Beispiel Formamid in Essigsäure oder Triethylsilan in Trifluoressigsäure abspalten, wodurch man ein Zwischenprodukt der Formel (IX) erhält, dessen Nitrogruppe anschließend zu einer Aminogruppe reduziert werden kann, die sich dann wiederum wie in EP-A-0,170,316 beschrieben in die 6-Azauracilgruppe umwandeln läßt, was Verbindungen der Formel (I-a-1) liefert.
Schema 1
Zusätzlich zu der im Schema 1 gezeigten Reaktionsvorschrift lassen sich auch andere Verbindungen, in denen X für eine direkte Bindung steht, ausgehend von einem Keton der Formel (X) darstellen (Schema 2). Eine Umsetzung dieses Ketons der Formel (X) mit einem durch die Formel (III-a) wiedergegebenen Zwischenprodukt der Formel (III), in welchem X für eine direkte Bidnung steht, führt zu einer durch die Formel (I-a-2) wiedergegebenen Verbindung, in welcher R¹ für Hydroxy und X für eine direkte Bindung steht. Diese Umsetzung kann in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Tetrahydrofuran, Diethylether, Diisopropylacetamid oder einer Mischung davon in Gegenwart einer Base wie zum Beispiel Butyllithium durchgeführt werden. Alternativ dazu kann man zunächst ein Zwischenprodukt der Formel (III-a) in ein Grignard-Reagens umwandeln, das dann mit dem Keton der Formel (X) umgesetzt werden kann. Diese Verbindungen der Formel (I-a-2) lassen sich nach im Stand der Technik bekannten Umwandlungsreaktionen weiter in durch die Formel (I-a-3) wiedergegebene Verbindungen überführen, in denen R¹ für eine C_1-6-Alkyloxygruppe steht. Die Verbindungen der Formel (I-a-2) lassen sich auch in durch die Formel (I-a-4) wiedergegebene Verbindungen, in denen R¹ für Halogen steht, umwandeln. Eine zweckmäßige Vorgehensweise ist die Umwandlung der Hydroxylgruppe in ein Chloratom unter Verwen dung eines geeigneten Reagens wie zum Beispiel Thionylchlorid. Diese Verbindungen der Formel (I-a-4) können unter Verwendung von Ammoniak oder einem funktionellen Derivat davon in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Tetrahydrofuran weiter in durch die Formel (I-a-5) wiedergegebene Verbindungen, in denen R¹ für Amino steht, umgewandelt werden; oder sie können unter Einsatz von im Stand der Technik bekannten Transformationsreaktionen in Verbindungen der Formel (I-a-3) überführt werden.
Die Reduktion des Ketons der Formel (X) zu seinem entsprechenden Hydroxylderivat der Formel (XI) unter Verwendung eines geeigneten Reduktionsmittels wie zum Beispiel Natriumborhydrid in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Wasser, einem Alkohol, Tetrahydrofuran oder einer Mischung davon; die anschließende Umwandlung dieser Hydroxylgruppe in eine geeignete Abgangsgruppe W⁴, bei der es sich zum Beispiel um ein Halogen handelt, unter Gewinnung eines Zwischenprodukts der Formel (XII) und schließlich die Umsetzung dieses Zwischenprodukts der Formel (XII) mit einem Zwischenprodukt der Formel (III) in einem geeigneten Lösungsmittel wie zum Beispiel Tetrahydrofuran, N,N-Dimethylformamid, Acetonitril, Essigsäure, Ethanol oder einer Mischung davon und gegebenenfalls in Gegenwart einer geeigneten Base wie zum Beispiel 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-en oder Natriumhydrogencarbonat liefert eine durch die Formel (I-b) wiedergegebene Verbindung der Formel (I), in welcher R¹ für Wasserstoff steht.
Alternativ dazu lassen sich Zwischenprodukte der Formel (XI) direkt in durch die Formel (I-b-1) wiedergegebene Verbindungen der Formel (I-b), in denen X für S steht, umwandeln, indem man ein geeignetes mercaptohaltiges Reagens der Formel R²-SH in einem geeigneten Reaktionslösungsmittel wie zum Beispiel. Trifluoressigsäure, Methansulfonsäure, Trifluormethansulfonsäure oder dergleichen einsetzt.
Ebenfalls ausgehend von einem Keton der Formel (X) lassen sich durch die Formel (I-c) wiedergegebene Verbindungen darstellen, in denen R¹ für Wasserstoff steht und -X-R² für -NH-C(=O)-(Aryl oder C_1-6-Alkyl) steht. Hierzu setzt man ein Keton der Formel (X) bei erhöhten Temperaturen mit Formamid in Ameisensäure oder einem funktionellen Derivat davon um. Das auf diese Weise erhaltene Zwischenprodukt der Formel (XIII) wird zum entsprechenden Amin der Formel (XIV) hydrolysiert, das dann in Gegenwart einer geeigneten Base wie zum Beispiel Pyridin, gegebenenfalls in Gegenwart eines reaktionsinerten Lösungsmittels wie zum Beispiel Dichlormethan weiter mit einem Zwischenprodukt der Formel (XV), in welchem W³ für eine geeignete Abgangsgruppe steht, umgesetzt werden kann.
Schema 2
Allgemein durch die Formel (I-d) wiedergegebene Verbindungen, in denen X für eine direkte Bindung und R² für einen Heterocyclus steht, lassen sich zweckmäßigerweise darstellen, indem man das entsprechende Zwischenprodukt cyclisiert. Es können Vorschriften zur intramolekularen Cyclisierung angewendet werden, von denen in Schema 3 mehrere Beispiele angeführt sind.
Ausgangspunkt ist die Umwandlung der Cyanogruppe einer durch die Formel (I-e) wiedergegebenen Verbindung, in welcher -X-R² für Cyano steht, in eine Carboxylgruppe unter Anwendung von im Stand der Technik bekannten Verfahren wie zum Beispiel unter Einsatz einer Kombination von Schwefelsäure und Essigsäure in Wasser, wodurch Zwischenprodukte der Formel (XVII) gebildet werden, die ihrerseits weiter zu Acylhalogeniden der Formel (XVIII) umgesetzt werden können; so läßt sich das Acylchloridderivat zum Beispiel mit Thionylchlorid darstellen.
Schema 3
Das Zwischenprodukt der Formel (XVIII) kann in Gegenwart einer Base wie zum Beispiel Pyridin mit einem Zwischenprodukt der Formel (XIX-a), in welchem Y für O, S oder NR³ steht, umgesetzt werden, wodurch ein Zwischenprodukt der Formel (XX) gebildet wird. Dieses Zwischenprodukt der Formel (XX) läßt sich in Gegenwart eines geeigneten Lösungsmittels wie zum Beispiel Essigsäure bei erhöhter Temperatur, vorzugsweise bei Rückflußtemperatur, weiter zu einer durch die Formel (I-d-1) wiedergegebenen Verbindung, in welcher -X-R² für ein gegebenenfalls substituiertes Benzothiazol oder Benzoxazol steht, cyclisieren. Es kann zweckmäßig sein, Verbindungen der Formel (I-d-1) ohne Isolieren der Zwischenprodukte der Formel (XX) darzustellen. Analog dazu kann man ein Zwischenprodukt der Formel (XVIII) mit einem Zwischenprodukt der Formel (XIX-b) zu einem Zwischenprodukt der Formel (XXI) umsetzen, das in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Toluol bei einer erhöhten Temperatur, vorzugsweise bei Rückflußtemperatur, zu einer durch die Formel (I-d-2) wiedergegebenen Verbindung, in welcher -X-R² für gegebenenfalls 3-substituiertes 1,2,4-Oxadiazol steht, cyclisiert wird. Ebenfalls analog dazu kann man ein Zwischenprodukt der Formel (XVIII) mit einem Zwischenprodukt der Formel (XIX-c), in welchem Y für O, S oder NR³ steht, umsetzen, wodurch ein Zwischenprodukt der Formel (XXII) gebildet wird, das in einem geeigneten Lösungsmittel wie zum Beispiel Phosphoroxychlorid zu einer durch die Formel (I-d-3) wiedergegebenen Verbindung cyclisiert wird, in welcher -X-R² für gegebenenfalls substituiertes 1,2,4-Triazol, 1,3,4-Thiadiazol oder 1,3,4-Oxadiazol steht.
Ebenfalls analog dazu läßt sich ein Zwischenprodukt der Formel (XVIII) mit einem Zwischenprodukt der Formel (XIX-d), in welchem Y für O, S oder NR³ steht, zu einem Zwischenprodukt der Formel (XXIII) umsetzen, das in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Toluol und in Gegenwart einer Säure zu einer durch die Formel (I-d-4) wiedergegebenen Verbindung der Formel (I), in welcher -X-R² für ein gegebenenfalls aminosubstituiertes 1,2,4-Triazol, 1,3,4-Thiadiazol oder 1,3,4-Oxadiazol steht, cyclisiert wird; oder zu einer durch die Formel (I-d-5) wiedergegebenen Verbindung, in welcher -X-R² für ein disubstituiertes 1,3,4-Triazol steht, cyclisiert wird.
Das Nitrilderivat der Formel (XVI) läßt sich ebenfalls mit Hydroxylaminhydrochlorid oder einem funktionellen Derivat davon umsetzen, wodurch ein Zwischenprodukt der Formel (XXIV) gebildet wird, das in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Methanol, Butanol oder einer Mischung davon und in Gegenwart einer Base wie zum Beispiel Natriummethanolat unter Bildung einer durch die Formel (I-d-6) wiedergegebenen Verbindung, in welcher -X-R² für gegebenenfalls 5-substituiertes 1,2,4-Triazol, 1,2,4-Thiadiazol oder 1,2,4-Oxadiazol steht, mit einem Zwischenprodukt der Formel (XXV) umgesetzt werden kann.
Durch die Formel (I-d-7) wiedergegebene Verbindungen der Formel (I-d), in denen es sich bei dem Heterocyclus um substituiertes 2-Thiazolyl handelt, lassen sich darstellen, indem man ein Zwischenprodukt der Formel (XVI) in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Pyridin und gegebenenfalls in Gegenwart einer geeigneten Base wie zum Beispiel Triethylamin mit Schwefelwasserstoff oder einem funktionellen Derivat davon zu einem Zwischenprodukt der Formel (XXVI) umsetzt, das anschließend mit einem Zwischenprodukt der Formel (XXVII) oder einem funktionellen Derivat davon wie dem Ketalderivat davon in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Ethanol und gegebenenfalls in Gegenwart einer Säure wie zum Beispiel, Chlorwasserstoff umgesetzt werden kann.
Durch die Formel (I-d-8) wiedergegebene Verbindungen der Formel (I-d), in denen es sich bei dem Heterocyclus um substituiertes 5-Thiazolyl handelt und R¹ für Wasserstoff steht, lassen sich nach der in Schema 4 gezeigten Reaktionsvorschrift darstellen.
Schema 4
Zunächst setzt man ein Zwischenprodukt der Formel (XXVIII), in welchem P für eine Schutzgruppe wie zum Beispiel eine C_1-6-Alkylcarbonylgruppe steht, in Gegenwart einer geeigneten Base wie zum Beispiel Butyllithium in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Tetrahydrofuran mit einem Thiazolderivat der Formel (XXIX) zu einem Zwischenprodukt der Formel (XXX) um. Es kann zweckmäßig sein, diese Umsetzung unter einer inerten Atmosphäre bei einer niedrigeren Temperatur, vorzugsweise bei etwa –70°C, durchzuführen. Die Hydroxylgruppe und die Schutzgruppe P dieser Zwischenprodukte (XXX) lassen sich nach im Stand der Technik bekannten Vorschriften wie zum Beispiel mit Zinn(II)chlorid und Salzsäure in Essigsäure abspalten, wodurch ein Zwischenprodukt der Formel (XXXI) gebildet wird, bei dem sich die Aminogruppe weiter nach der in EP-A-0,170,316 beschriebenen Vorschrift in eine 6-Azauracileinheit umwandeln läßt, wodurch eine Verbindung der Formel (I-d-8) gebildet wird.
Außerdem lassen sich durch die Formel (I-d-9) wiedergegebene Verbindungen der Formel (I-d), in denen es sich bei dem Heterocyclus um 4-Thiazolyl handelt, nach der in Schema 5 gezeigten Reaktionsvorschrift darstellen. Schema 5
Ein Zwischenprodukt der Formel (XVIII) wird mit einem Grignard-Reagens der Formel RCH₂MgBr oder einem funktionellen Derivat davon umgesetzt unter Bildung eines Zwischenprodukts der Formel (XXXII), das unter Anwen dung eines geeigneten Reagens wie Trimethylphenylammoniumtribromid in Tetrahydrofuran in der a-Stellung halogeniert, vorzugsweise bromiert, werden kann, wodurch ein Zwischenprodukt der Formel (XXXIII) gebildet wird. Dieses Zwischenprodukt (XXXIII) kann dann in einem reaktionsinerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Ethanol bei erhöhter Temperatur, vorzugsweise Rückflußtemperatur, mit einem Thioamid der Formel (XXXIV) zu einer Verbindung der Formel (I-d-9) umgesetzt werden.
Die Verbindungen der Formel (I) können auch nach im Stand der Technik bekannten Vorschriften zur Umwandlung von funktionellen Gruppen, von denen einige oben erwähnt sind, ineinander umgewandelt werden.
Die Verbindungen der Formel (I) lassen sich auch nach an sich bekannten Verfahren zur Umwandlung eines dreiwertigen Stickstoffs in seine N-Oxidform in die entsprechenden N-Oxidformen umwandeln. Diese N-Oxidation kann im allgemeinen dadurch durchgeführt werden, daß man das Ausgangsmaterial der Formel (I) mit 3-Phenyl-2-(phenylsulfonyl)oxaziridin oder einem geeigneten organischen oder anorganischen Peroxid umsetzt. Zu den geeigneten anorganischen Peroxiden zählen zum Beispiel Wasserstoffperoxid, Alkali- oder Erdalkaliperoxide, z. B. Natriumperoxid, Kaliumperoxid; zu geeigneten organischen Peroxiden können zum Beispiel Peroxysäuren wie zum Beispiel Benzolcarboperoxosäure oder durch Halogen substituierte Benzolcarboperoxosäure, z. B. 3-Chlorbenzolcarboperoxosäure, Peroxoalkansäuren, z. B. Peroxoessigsäure, Alkylhydroperoxide, z. B. tert.-Butylhydroperoxid, zählen. Geeignete Lösungsmittel sind zum Beispiel Wasser, niedere Alkanole, z. B. Ethanol usw., Kohlenwasserstoffe, z. B. Toluol, Ketone, z. B. 2-Butanon, halogenierte Kohlenwasserstoffe, z. B. Dichlormethan, sowie deren Mischungen.
Reine stereochemisch isomere Formen der Verbindungen der Formel (I) lassen sich durch Anwendung von im Stand der Technik bekannten Verfahren erhalten. Diastereomere können mit physikalischen Verfahren wie selektiver Kristallisation und chromatographischen Verfahren, z. B. Gegenstromverteilung, Flüssigchromatographie und dergleichen, getrennt werden.
Einige der Verbindungen der Formel (I) und einige der Zwischenprodukte in der vorliegenden Erfindung können ein asymmetrisches Kohlenstoffatom enthalten. Reine stereochemisch isomere Formen dieser Verbindungen und dieser Zwischenprodukte lassen sich durch Anwendung von im Stand der Technik bekannten Vorschriften erhalten. So kann man zum Beispiel Diastereoisomere durch physikalische Methoden wie selektive Kristallisierung oder chromatographische Methoden, z. B. Gegenstromverteilung, Flüssigchromatographie und ähnliche Methoden, trennen. Enantiomere lassen sich aus racemischen Mischungen erhalten, indem man zunächst die racemischen Mischungen mit für eine Racematspaltung geeigneten Mitteln wie zum Beispiel chiralen Säuren in Mischungen diastereomerer Salze bzw. Verbindungen umwandelt und dann diese Mischungen von diastereomeren Salzen bzw. Verbindungen zum Beispiel durch selektive Kristallisierung oder chromatographische Verfahren, z. B. Flüssigchromatographie und ähnliche Methoden, physisch trennt, und schließlich die getrennten diastereomeren Salze bzw. Verbindungen in die entsprechenden Enantiomere umwandelt. Reine stereochemisch isomere Formen lassen sich auch aus den reinen stereochemisch isomeren Formen der entsprechenden Zwischenprodukte und Ausgangsverbindungen erhalten, vorausgesetzt, die vorgenommenen Reaktionen verlaufen stereospezifisch.
Bei einem alternativen Verfahren zur Trennung enantiomerer Formen der Verbindungen der Formel (I) und von Zwischenprodukten wendet man Flüssigchromatographie an, insbesondere Flüssigchromatographie unter Verwendung einer chiralen stationären Phase.
Einige der in den oben erwähnten Reaktionsvorschriften eingesetzten Zwischenprodukte und Ausgangsstoffe sind bekannte Verbindungen, die im Handel erhältlich sind oder sich nach im Stand der Technik bekannten Vorschriften darstellen lassen.
IL-5, das auch als Eosinophil Differentiating Factor (EDF) bzw. Eosinophil Colony Stimulating Factor (Eo-CSF) bekannt ist, ist ein wichtiger Überlebens- und Differenzierungsfaktor für eosinophile Zellen, und man nimmt daher an, daß es bei der Infiltration von eosinophilen Zellen in Gewebe eine Schlüsselrolle spielt. Es gibt umfassende Belege dafür, daß der Einstrom von eosinophilen Zellen ein wichtiges pathogenes Ereignis bei Bronchialasthma und allergischen Krankheiten wie Lippenentzündungen, Reizkolon, Ekzemen, Nesselsucht, Gefäßentzündungen, Entzündungen der Vulva, Winterfüße, atopischer Dermatitis, Heuschnupfen, allergischer Rhinitis und allergischer Konjunktivitis ist; und anderen entzündlichen Erkrankungen wie eosinophilem Syndrom, allergischer Angiitis, eosinophilzelliger Faszienentzündung, eosinophilzelliger Pneumonie, PIE-Syndrom, idiopathischer Eosinophilie, eosinophilzelligen Muskelschmerzen, Morbus Crohn, ulzerativer Kolitis und ähnlichen Krankheiten.
Die vorliegenden Verbindungen hemmen weiterhin die Produktion anderer Chemokine wie der monozytischen chemotaktischen Proteine 1 und 3 (MCP-1 und MCP-3). Von MCP-1 ist bekannt, daß es sowohl T-Zellen, in denen die IL-5-Produktion hauptsächlich abläuft, als auch Monozyten, von denen bekannt ist, daß sie synergistisch mit eosinophilen Zellen wirken (Carr et al., 1994, Immunology, 91, 3652–3656), anzieht. MCP-3 spielt ebenfalls eine Hauptrolle bei allergischen Entzündungen, da bekannt ist, daß es basophile und eosinophile Leukozyten mobilisiert und aktiviert (Baggiolini et al., 1994, Immunology Today, 15(3), 127–133).
Die vorliegenden Verbindungen haben wenn überhaupt nur eine geringe Wirkung auf die Produktion anderer Chemokine wie IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-10, γ-Interferon (IFN-γ) und Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor (GM-CSF), was darauf hindeutet, daß die vorliegenden IL-5-Inhibitoren nicht als Breitband-Immunosuppressiva wirken.
Die selektive chemokinhemmende Wirkung der vorliegenden Verbindungen läßt sich durch die in-vitro-Bestimmung von Chemokinen in menschlichem Blut zeigen. In-vivo-Befunde wie die Inhibierung von Eosinophilie im Mäuseohr, die Hemmung von Bluteosinophilie im Ascaris-Mausmodell, die Reduktion der durch Anti-CD3-Antikörper in Mäusen induzierten IL-5-mRNA-Expression in der Bauchspeicheldrüse und der Serum-IL-5-Proteinproduktion und die Inhibierung von Allergen- oder Sephadexinduziertem Einstrom von eosinophilen Zellen in die Meerschweinchenlunge sind indikativ für den Nutzen der vorliegenden Verbindungen bei der Behandlung von eosinophilabhängigen entzündlichen Krankheiten.
Die vorliegenden Inhibitoren der Produktion von IL-5 eignen sich insbesondere zur Verabreichung durch Inhalation.
Die Zwischenprodukte der Formel (XI-a) sind interessante Zwischenprodukte. Sie sind nicht nur besonders geeignet als Zwischenprodukte für die Herstellung der Verbindungen der Formel (I), sie haben auch wertvolle pharmakologische Wirkung.
Angesichts der oben aufgeführten pharmakologischen Eigenschaften können die Verbindungen der Formel (I) als Medizin zur Anwendung kommen. Die vorliegenden Verbindungen können insbesondere bei der Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von wie oben erwähnten eosinophilabhängigen entzündlichen Krankheiten, insbe sondere Bronchialasthma, atopischer Dermatitis, allergischer Rhinitis und allergischer Konjunktivitis eingesetzt werden.
Die vorliegende Erfindung stellt weiterhin Zusammensetzungen zur Behandlung von eosinophilabhängigen entzündlichen Krankheiten bereit, die eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung der Formel (I) und eines pharmazeutisch unbedenklichen Trägers oder Verdünnungsmittels umfassen.
Zur Herstellung der erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen vereinigt man eine therapeutisch wirksame Menge der jeweiligen Verbindung in Basen- oder Additionssalzform als Wirkstoff in Form einer innigen Mischung mit einem pharmazeutisch unbedenklichen Träger, der je nach der zur Verabreichung gewünschten Darreichungsform verschiedenste Formen annehmen kann. Diese pharmazeutischen Zusammensetzungen liegen wünschenswerterweise in Einzeldosisform vor, die sich vorzugsweise zur systemischen Verabreichung wie der parenteralen Verabreichung oder zur topischen Verabreichung wie der Verabreichung durch Inhalation, als Nasenspray oder dergleichen eignen. Die Verabreichung dieser Zusammensetzungen kann als Aerosol erfolgen, zum Beispiel mit einem Treibmittel wie Stickstoff, Kohlendioxid, einem Freon oder ohne Treibmittel wie bei Pumpsprays, als Tropfen, Lotionen oder als halbfeste Zusammensetzung, wie zum Beispiel eine verdickte Zusammensetzung, die mit einem Tupfer aufgetragen werden kann. Insbesondere halbfeste Zusammensetzungen wie Unguenta, Cremes, Gele und Salben und dergleichen lassen sich bequem anwenden.
Zwecks einfacher Verabreichung und einheitlicher Dosierung ist es besonders vorteilhaft, die obengenannten pharmazeutischen Zusammensetzungen in Einzeldosisform zu formulieren. Unter dem Begriff Einzeldosisform, wie er in der Beschreibung und den Ansprüchen verwendet wird, sind physikalisch diskrete Einheiten zu verstehen, die sich als Einzeldosen eignen, wobei jede Einheit eine vorbestimmte Menge Wirkstoff enthält, die so berechnet ist, daß in Verbindung mit dem erforderlichen pharmazeutischen Träger die gewünschte therapeutische Wirkung erzielt wird. Beispiele für solche Einzeldosisformen sind Tabletten (darunter Tabletten mit Bruchrille oder Dragees), Kapseln, Pillen, Pulverbeutel, Oblaten, Injektionslösungen, Injektionssuspensionen, Teelöffelvoll, Eßlöffelvoll und dergleichen sowie deren getrennt vorliegende Vielfache.
Zur Verbesserung der Löslichkeit und/oder der Stabilität der Verbindungen der Formel (I) in pharmazeutischen Zusammensetzungen kann es vorteilhaft sein, α-, β- oder γ-Cyclodextrine oder Derivate davon einzusetzen. Weiterhin können Kosolventien wie Alkohole die Löslichkeit und/oder die Stabilität der Verbindungen der Formel (I) in pharmazeutischen Zusammensetzungen verbessern. Bei der Zubereitung von wäßrigen Zusammensetzungen sind die Additionssalze der in Rede stehenden Verbindungen aufgrund ihrer größeren Löslichkeit in Wasser offensichtlich besser geeignet.
Geeignete Cyclodextrine sind α-, β-, γ-Cyclodextrine oder Ether sowie deren Mischether, wobei eine oder mehrere der Hydroxylgruppen der Anhydroglukoseeinheiten des Cyclodextrins substituiert sind durch C_1-6-Alkyl, insbesondere Methyl, Ethyl oder Isopropyl, z. B. statistisch methyliertes β-CD; Hydroxy-C_1-6-alkyl, insbesondere Hydroxyethyl, Hydroxypropyl oder Hydroxybutyl; Carboxy-C_1-6-alkyl, insbesondere Carboxymethyl oder Carboxyethyl; C_1-6-Alkylcarbonyl, insbesondere Acetyl; C_1-6-Alkyloxycarbonyl-C_1-6-alkyl oder Carboxy-C_1-6-alkyloxy-C_1-6-alkyl, insbesondere Carboxymethoxypropyl oder Carboxyethoxypropyl; C_1-6-Alkylcarbonyloxy-C_1-6-alkyl, insbesondere 2-Acetyloxypropyl. Besonders hervorzuheben als Komplexierungsmittel bzw. Löslichkeitsverbesserer sind β-CD, statistisch methyliertes β-CD, 2,6-Dimethyl-β-CD, 2-Hydroxyethyl-β-CD, 2-Hydroxyethyl- γ-CD, 2-Hydroxypropyl-γ-CD und (2-Carboxymethoxy)propyl-β-CD, und insbesondere 2-Hydroxypropyl-β-CD (2-HP-β-CD).
Der Ausdruck Mischether bedeutet Cyclodextrinderivate, bei denen mindestens zwei Cyclodextrin-Hydroxylgruppen mit unterschiedlichen Gruppen wie zum Beispiel Hydroxypropyl und Hydroxyethyl verethert sind.
Die durchschnittliche molare Substitution (M. S.) wird als Maß für die durchschnittliche Anzahl der Mol Alkoxyeinheiten pro Mol Anhydroglukose verwendet. Der M. S.-Wert läßt sich durch verschiedene analytische Verfahren bestimmen; die mittels Massenspektrometrie gemessene M. S. liegt vorzugsweise im Bereich von 0,125 bis 10.
Der durchschnittliche Substitutionsgrad (D. S.) bezieht sich auf die durchschnittliche Anzahl substituierter Hydroxylgruppen pro Anhydroglukoseeinheit. Der D. S.-Wert läßt sich durch verschiedene analytische Verfahren bestimmen; der mittels Massenspektrometrie gemessene D. S. liegt vorzugsweise im Bereich von 0,125 bis 3.
Aufgrund ihrer hohen Selektivität als IL-5-Inhibitoren eignen sich die wie oben definierten Verbindungen der Formel (I) auch zur Markierung und Identifizierung von Rezeptoren. Zu diesem Zweck müssen die Verbindungen der vorliegenden Erfindung markiert werden, insbesondere indem man ein oder mehrere Atome im Molekül teilweise oder vollständig durch ihre radioaktiven Isotope ersetzt. Beispiele für interessante markierte Verbindungen sind die Verbindungen, die wenigstens ein Halogen enthalten, bei dem es sich um einen radioaktiven Isotopen von Iod, Brom oder Fluor handelt; oder die Verbindungen mit wenigstens einem ¹¹C-Atom oder Tritiumatom.
Eine spezielle Gruppe besteht aus den Verbindungen der Formel (I), in denen R⁴ und/oder R⁵ für ein radioaktives Halogenatom stehen. Im Prinzip sind alle Verbindungen der Formel (I) mit einem Halogenatom für die radioaktive Markierung durch Ersetzen des Halogenatoms durch ein geeignetes Isotop prädestiniert. Für diesen Zweck geeignete Halogen-Radioisotope sind radioaktive Iodide, z. B. ¹²²I ¹²³I, ¹²⁵I, ¹³¹I, radioaktive Bromide, z. B. ⁷⁵Br, ⁷⁶Br, ⁷⁷Br und ⁸²Br und radioaktive Fluoride, z. B. ¹⁸F. Ein radioaktives Halogenatom läßt sich durch eine geeignete Austauschreaktion oder durch Anwendung einer der oben beschriebenen Vorschriften zur Darstellung von Halogenderivaten der Formel (I) einführen.
Eine andere interessante Form der radioaktiven Markierung ist die Substitution eines Kohlenstoffatoms durch ein ¹¹C-Atom oder die Substitution eines Wasserstoffatoms durch ein Tritiumatom.
Die radioaktiv markierten Verbindungen der Formel (I) können somit in einem Verfahren zur spezifischen Markierung von Rezeptorstellen in biologischem Material zur Anwendung kommen. Dieses Verfahren umfaßt die folgenden Schritte: (a) radioaktives Markieren einer Verbindung der Formel (I), (b) Verabreichung dieser radioaktiv markierten Verbindung an biologisches Material und anschließend (c) Nachweis der Emissionen der radioaktiv markierten Verbindung. Der Ausdruck „biologisches Material" soll alle Materialarten biologischen Ursprungs umfassen. Der Ausdruck bezieht sich insbesondere auf Gewebeproben, Plasma oder Körperflüssigkeiten, jedoch auch auf Tiere, insbesondere warmblütige Tiere, oder Teile von Tieren wie Organe.
Die radioaktiv markierten Verbindungen der Formel (I) eignen sich auch als Mittel für Untersuchungen dahingehend, ob eine Testverbindung dazu in der Lage ist, eine bestimmte Rezeptorstelle zu besetzen bzw. daran zu binden. Der Grad, zu dem eine Testverbindung eine Verbindung der Formel (I) von solch einer bestimmten Rezeptorstelle verdrängt, zeigt die Fähigkeit der Testverbindung, entweder als Agonist, als Antagonist oder als gemischter Agonist/Antagonist an dem Rezeptor zu wirken.
Bei einer Verwendung in in-vivo-Assays werden die radioaktiv markierten Verbindungen einem Tier in einer geeigneten Zusammensetzung verabreicht, und die Stelle, an der sich die radioaktiv markierten Verbindungen anreichern, wird mit Verfahren zur Bilddarstellung wie zum Beispiel Single Photon Emission Computerized Tomography (SPECT) oder Positronenemissionstomographie (PET) und dergleichen nachgewiesen. Auf diese Weise läßt sich die Verteilung der jeweiligen Rezeptorstellen im Körper aufzeigen, und Organe, die diese Rezeptorstellen enthalten, können durch die oben erwähnten Verfahren zur Bilddarstellung sichtbar gemacht werden. Dieses Verfahren zur Abbildung eines Organs durch Verabreichung einer radioaktiv markierten Verbindung der Formel (I) und Nachweis der Emissionen der radioaktiven Verbindung ist ebenfalls Gegenstand der vorliegenden Erfindung.
Im allgemeinen wird angenommen, daß eine therapeutisch wirksame Tagesdosis 0,01 mg/kg bis 50 mg/kg Körpergewicht, bevorzugt 0,05 mg/kg bis 10 mg/kg Körpergewicht, beträgt. Bei einer Behandlungsmethode kann man den Wirkstoff auch in einem Behandlungsprotokoll mit zwischen zwei und vier Gaben täglich verabreichen.
Experimenteller Teil
A. Darstellung von Verbindungen der Formel (I)
Beispiel A1

a) Eine Mischung aus 2-[3,5-Dichlor-4-[(4-chlorphenyl)hydroxymethyl]phenyl-1,2,4-triazin-3,5(2H,4H)-dion (0,0063 mol) und 1,2-Dihydro-2-thioxo-3-pyridincarbonsäure (0,0063 mol) wurde portionsweise zu Methansulfonsäure (20 ml) gegeben, und die Mischung wurde 2 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung wurde in Eiswasser gegossen und mit Essigsäureethylester versetzt. Die organische Phase wurde abgetrennt, mit Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde in kochendem Ethanol gerührt, abfiltriert, mit Diisopropylether gewaschen und getrocknet, wodurch man 3,1 g (91%) an Zwischenprodukt (1) erhielt {MS (ES+) m/z 535 [MH⁺]}.
b) Umsetzung unter einer N₂-Atmosphäre. Eine Lösung von Zwischenprodukt (1) (0,00187 mol) in N,N-Dimethylformamid (20 ml) wurde mit 1,1'-Carbonylbis-1H-imidazol (0,00373 mol) versetzt, und die Mischung wurde 12 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. H₂S wurde 15 bis 30 Minuten lang durch die Mischung geleitet. Anschließend wurde die Reaktionsmischung 2 Stunden lang gerührt. Die Mischung wurde in Eiswasser (Kochsalzlösung) gegossen und 3 mal mit Essigsäureethylester extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde 3 mal zusammen mit Toluol eingedampft, wodurch man 1 g (100%) an Zwischenprodukt (2) erhielt {MS (ES+) m/z 551 [MH⁺]}.
c) Eine Lösung von 3-Bromdihydro-2(3H)-furanon (1 mmol) in N,N-Dimethylformamid (2 ml) wurde tropfenweise zu einer eiskalten Suspension von Zwischenprodukt 2 (0,91 mmol) und NaHCO₃ (1 mmol) in N,N-Dimethylformamid (5 ml) gegeben. Die Reaktionsmischung wurde 15 Minuten lang gerührt und dann zwischen Wasser (25 ml) und Essigsäureethylester (25 ml) verteilt. Die organische Phase wurde abgetrennt, mit Wasser (2 × 25 ml) gewaschen, getrocknet und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde durch Kieselgelchromatographie (Laufmittel: Essigsäureethylester/Hexan, Gradient von 20–80 bis 80–20% (v/v)) aufgereinigt. Die reinen Fraktionen wurden gesammelt und ihr Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 0,243 g (42%) an Verbindung (1) erhielt {MS (ES+) m/z 635 [MH⁺]}.

Beispiel A2

a) Eine Mischung aus Zwischenprodukt 1 (0,075 mol) in SOCl₂ (300 ml) wurde 2 Stunden lang unter Rückfluß gerührt. Das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde in Toluol gelöst und das Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 41,6 g an Zwischenprodukt 3 erhielt.
b) NaBH₄ (0,495 mol) wurde im Verlauf von 90 min portionsweise zu einer bei Raumtemperatur gerührten Mischung von Zwischenprodukt 3 (0,075 mol) in 1,4-Dioxan (500 ml) gegeben. Die auf diese Weise erhaltene Mischung wurde 48 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt und dann in einem Eisbad abgekühlt. HCl (2 N) wurde tropfenweise zugesetzt (bis pH = 2), und diese Mischung wurde mit CH₂Cl₂ extrahiert. Die abgetrennte organische Phase wurde getrocknet und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde an Kieselgel auf einem Glasfilter aufgereinigt (Laufmittel: CH₂Cl₂/CH₃OH 97/3). Die reinen Fraktionen wurden gesammelt und das Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 2,2 g an Zwischenprodukt 4 erhielt.
c) Eine Mischung aus Zwischenprodukt 4 (0,004 mol) und Triethylamin (0,005 mol) in CH₂Cl₂ (40 ml) wurde bei 0–5°C gerührt. Eine Lösung von Methylsulfonylchlorid (0,005 mol) in CH₂Cl₂ (10 ml) wurde im Verlauf von 15 min bei 0–5°C zugetropft, und die auf diese Weise erhaltene Reaktionsmischung wurde eine Stunde lang bei ±5°C gerührt. Triethylamin (0,70 ml) wurde zugesetzt und die auf diese Weise erhaltene Reaktionsmischung wurde eine Stunde lang bei 0°C gerührt, wodurch man 2,4 g an Zwischenprodukt 5 erhielt.
d) Eine Lösung von 1-Acetylpiperazin (0,03624 mol) in CH₂Cl₂ (30 ml) wurde tropfenweise zu einer bei 0°C gerührten Lösung von Zwischenprodukt 5 (0,01208 mol) und Triethylamin (0,0302 mol) in CH₂Cl₂ (150 ml) gegeben. Die Reaktionsmischung wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und dann mit einer gesättigten NaHCO₃-Lösung und mit Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Kieselgel (Laufmittel: CH₂Cl₂/CH₃OH Gradient von 98/2 bis 95/5) aufgereinigt. Die reinen Fraktionen wurden gesammelt und das Lösungsmittel wurde abgedampft und dann zusammen mit Essigsäureethylester abgedampft. Der Rückstand wurde in 2-Methoxy-2-methylpropan gerührt, abfiltriert und getrocknet, wodurch man 1,51 g (20%) an Zwischenprodukt 6 erhielt.
e) Zwischenprodukt 6 (0,00321 mol) wurde in 1,4-Dioxan (50 ml) gelöst. 2 N HCl (0,05 mol) wurde zugesetzt, und die Reaktionsmischung wurde 12 Stunden lang unter Rückfluß gerührt. Die Reaktionsmischung wurde abgekühlt, langsam in eine gesättigte wäßrige NaHCO₃-Lösung (150 ml) + Eis (100 g) gegossen, und diese Mischung wurde mit CH₂Cl₂/CH₃OH (90/10) extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft und dann zusammen mit Essigsäureethylester abgedampft. Bei der zweiten Zugabe von Essigsäureethylester erhielt man einen Niederschlag. Dieser Niederschlag wurde abfiltriert, mit Diisopropylether gewaschen und getrocknet, wodurch man 1,39 g (74%) an Zwischenprodukt 7 erhielt.
f) Eine Mischung aus Zwischenprodukt 7 (0,0034 mol) in CH₃CN (60 ml) wurde bei Raumtemperatur gerührt. Triethylamin (1,47 ml) wurde zugesetzt. Bromessigsäureethylester (0,0034 mol) wurde tropfenweise zugegeben, und die auf diese Weise erhaltene Reaktionsmischung wurde 90 min bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde in CH₂Cl₂ aufgenommen. Die organische Lösung wurde mit Wasser gewaschen. Die wäßrige Phase wurde mit CH₂Cl₂/CH₃OH 90/10 extrahiert. 2) Die organische Phase wurde mit Wasser gewaschen, mit der anderen organischen Phase vereinigt, getrocknet und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der wurde durch. Flash-Säulenchromatographie an Kieselgel (Laufmittel: CH₂Cl₂/CH₃OH 99/1) aufgereinigt. Die reinen Fraktionen wurden gesammelt und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde zusammen mit Essigsäureethylester abgedampft. Der Rückstand wurde in Diisopropylether gerührt, abfiltriert, gewaschen und getrocknet, wodurch man 0,44 g an Verbindung 2 erhielt.

Beispiel A3

a) CH₂Cl₂ (20 ml) wurde bei Raumtemperatur gerührt. HCl (Gas) wurde 15 min durch die Lösung geleitet. Diese Lösung wurde tropfenweise zu einer Lösung von Zwischenprodukt 4 (0,01 mol) in CH₂Cl₂ (50 ml) gegeben. Das HCl-Salz fiel aus. SOCl₂ (0,05 mol) wurde zugegeben, und die Mischung wurde 2 Stunden lang unter Rückfluß gerührt. SOCl₂ (3,6 ml) wurde zugesetzt, und die Reaktionsmischung wurde 2 Stunden lang unter Rückfluß gerührt. Die Mischung wurde abgekühlt. Der Niederschlag wurde abfiltriert. Feststoff und Filtrat wurden vereinigt. Das Lösungsmittel wurde abgedampft. Weiteres CH₂Cl₂ (70 ml) und SOCl₂ (3,6 ml) wurden zugesetzt, und die Reaktionsmischung wurde 3 Stunden lang unter Rückfluß gerührt und dann abgekühlt, und der auf diese Weise erhaltene Niederschlag wurde abfiltriert, mit Diisopropylether gewaschen und getrocknet, wodurch man 4 g an Zwischenprodukt 8 erhielt.
b) Eine Lösung von 4-Methylamino-1-piperidincarbonsäure-1,1-dimethylethylester (0,02244 mol) in CH₃CN (20 ml) wurde zu einer Lösung von Zwischenprodukt 8 (0,00748 mol) in CH₃CN (60 ml) gegeben, und die auf diese Weise erhaltene Reaktionsmischung wurde 3 Stunden lang bei 60°C und dann über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde in kochendem Essigsäureethylester gerührt und dann abfiltriert und in CH₂Cl₂/CH₃OH 95/5 aufgenommen. Die organische Lösung wurde mit Kochsalzlösung gewaschen, getrocknet und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde durch HPLC an Kieselgel (Laufmittel: CH₂Cl₂/(CH₂Cl₂/CH₃OH 90/10)/CH₃OH (0 min) 100/0/0, (34 min) 65/35/0, (40 min) 50/0/50, (43 min) 0/0/100, (46,6–60 min) 100/0/0) aufgereinigt. Die reinen Fraktionen wurden gesammelt und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde in Diisopropylether gerührt, abfiltriert und getrocknet, wodurch man 3,42 g (64%) an Zwischenprodukt 9 erhielt.
c) Eine Mischung aus Zwischenprodukt 9 (0,00409 mol) in Methanol (30 ml) und HCl/2-Propanol (4 ml) wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Weiteres HCl/2-Propanol (2 ml) wurde zugesetzt, und es wurde weitere 2 Stunden lang gerührt. Die Reaktionsmischung wurde in Wasser (300 ml) gegossen und mit CH₂Cl₂/CH₃OH 90/10 (400 ml) versetzt. Die Reaktionsmischung wurde durch tropfenweise Zugabe einer gesättigten wäßrigen NaHCO₃-Lösung neutralisiert. Die Phasen wurden getrennt. Die wäßrige Phase wurde mit CH₂Cl₂/CH₃OH 90/10 extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen c wurden getrocknet und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Essigsäureethylester wurde zugesetzt und am Rotationsverdampfer azeotrop abgezogen. Der Rückstand wurde in kochendem CH₃CN gerührt, abgekühlt, abfiltriert, mit Diisopropylether gewaschen und getrocknet, wodurch man 2,27 g (90%) Zwischenprodukt 10 erhielt.
d) Triethylamin (1,42 ml) wurde zu Zwischenprodukt 10 (0,00304 mol) in Dimethylsulfoxid (100 ml) gegeben. Die Mischung wurde bei 60°C gerührt. Dann wurde mit Bromessigsäureethylester (0,00304 mol) versetzt, und die auf diese Weise erhaltene Lösung wurde auf Raumtemperatur abkühlen gelassen und über Nacht gerührt. Die Reaktionsmischung wurde in Wasser (300 ml) gegossen, und diese Mischung wurde mit Toluol extrahiert. Die Toluolphasen wurden vereinigt, getrocknet und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde durch HPLC an Kieselgel (Laufmittel: CH₂Cl₂/CH₃OH-Gradient) aufgereinigt. Zwei reine Fraktionsgruppen wurden gesammelt, und ihr Lösungsmittel wurde abgedampft. Die gewünschte Fraktion wurde in Essigsäureethylester gelöst und über einen gefalteten Papierfilter filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde in n-Hexan gerührt, abfiltriert und getrocknet, wodurch man 0,87 g (41%) an Verbindung 3 erhielt.

Beispiel A4

a) Eine Mischung aus 2-[3,5-Dichlor-4-[(4-chlorphenyl)-hydroxymethyl]phenyl]-1,2,4-triazin-3,5(2H,4H)-dion (0,05 mol) [CAS 219981-46-1] und 6-Mercapto-3-piperidincarbonsäure (0,05 mol) wurde im Verlauf von 1 Stunde portionsweise zu bei Raumtemperatur gerührter Methansulfonsäure (100 ml) gegeben. Der Ansatz wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und dann in Eiswasser gegossen, und diese Mischung wurde mit Essigsäureethylester extrahiert. Die organische Phase wurde abgetrennt, getrocknet und filtriert und das Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 26,8 g an Zwischenprodukt 11 erhielt.
b) Eine Mischung aus Zwischenprodukt 11 (0,05 mol) in SOCl₂ (250 ml) wurde 2 Stunden lang unter Rückfluß gerührt. Das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde in Toluol gelöst und das Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 27,7 g an Zwischenprodukt 12 erhielt.
c) NaBH₄ (0,33 mol) wurde im Verlauf von 60 min portionsweise zu einer bei Raumtemperatur gerührten Mischung aus Zwischenprodukt 12 (0,05 mol) in 1,4-Dioxan (350 ml) gegeben. Die auf diese Weise erhaltene Reaktionsmischung wurde 2 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt und dann auf einem Eisbad abgekühlt. HCl (konz.) wurde zugetropft, bis die Mischung sauer war. Es wurde mit Wasser versetzt, und diese Mischung wurde mit CH₂Cl₂ extrahiert. Die abgetrennte organische Phase wurde getrocknet und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde an Kieselgel auf einem Glasfilter (Laufmittel: CH₂Cl₂/CH₃OH von 98/2 bis 97/3) aufgereinigt. Die reinen Fraktionen wurden gesammelt und das Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 10,4 g an Zwischenprodukt 13 erhielt.
d) Eine Mischung aus SOCl₂ (0,2375 mol) in CH₂Cl₂ (200 ml) wurde bei Raumtemperatur gerührt. Eine Mischung aus Zwischenprodukt 13 (0,0475 mol) in CH₂Cl₂ (50 ml) wurde tropfenweise zugesetzt. Die Reaktionsmischung wurde 2 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde in Diisopropylether gerührt, abfiltriert und getrocknet, wodurch man 23,8 g Zwischenprodukt 14 erhielt.
e) Triethylamin (0,001388 mol) wurde zu einer Lösung von Zwischenprodukt 14 (0,000347 mol) und 3-Azetidinylcarbonsäure (0,000381 mol) in CH₃CN (4 ml) gegeben. Die Reaktionsmischung wurde 12 Stunden lang bei 60°C gerührt. Die gewünschte Verbindung wurde isoliert und durch HPLC (Laufmittelgradient: CH₃CN/H₂O) aufgereinigt. Die gewünschten Fraktionen wurden gesammelt und das Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 0,009 g (5%) an Verbindung 4 erhielt.

Beispiel A5
Eine Mischung aus Zwischenprodukt 5 (0,004 mol), Glycinethylesterhydrochlorid (0,0044 mol) und Triethylamin (0,016 mol) in CH₃CN (50 ml) wurde 24 Stunden lang bei 50°C gerührt. Das. Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde in Wasser gerührt und mit CH₂Cl₂ extrahiert. Die abgetrennte organische Phase wurde getrocknet und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde durch Flash-Säulenchromatographie an Kieselgel (Laufmittel: CH₂Cl₂/CH₃OH von 99,5/0,5 bis 98/2) aufgereinigt. Die gewünschten Fraktionen wurden gesammelt und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde weiter durch HPLC (Laufmittel: (0,5% NH₄OAc in H₂O)/CH₃CN/CH₃OH-Gradient) aufgereinigt. Die reinen Fraktionen wurden gesammelt und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde getrocknet, wodurch man 0,11 g (4,5%) an Verbindung 5 erhielt.
Beispiel A6
Eine Lösung von 4-(Brommethyl)-5-methyl-1,3-dioxol-2-on (0,0062 mol) in N,N-Dimethylformamid (5 ml) wurde tropfenweise zu einer Lösung von Zwischenprodukt 1 (0,00373 mol) und 1H-Imidazol (0,007 mol) in N,N-Dimethylformamid (25 ml) gegeben. Die Mischung wurde über Nacht bei 60°C gerührt. Das Lösungsmittel wurde in abgedampft. Der Rückstand wurde in Essigsäureethylester aufgenommen und mit H₂O und einer gesättigten NaCl-Lösung gewaschen. Die organische Phase wurde abgetrennt, getrocknet und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Kieselgel (Laufmittel: Hexan/Essigsäureethylester 75/25) aufgereinigt. Die gewünschten Fraktionen wurden gesammelt und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde nochmals an Kieselgel auf einem Glasfilter (Laufmittel: Hexan/Essigsäureethylester 75/25 bis 50/50) aufgereinigt. Die reinen Fraktionen wurden gesammelt und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde in Diisopropylether gerührt. Der Niederschlag wurde abfiltriert, mit Diisopropylether gewaschen und getrocknet, wodurch man 0,595 g (25%) an Verbindung 6 erhielt.

Claims

Verbindungen der Formel
deren N-Oxide, deren pharmazeutisch unbedenkliche Additionssalze, deren quaternäre Amine und deren isomere Formen, wobei: p für eine ganze Zahl 2 steht; q für eine ganze Zahl 1 steht; X für S steht; R¹ für Wasserstoff steht; R⁴ für Chlor steht; R⁵ für Chlor steht; R² für durch einen Substituenten ausgewählt aus der aus
bestehenden Gruppe substituiertes Pyridinyl steht.
Verbindungen der Formel (I), ausgewählt aus der aus
bestehenden Gruppe.
Zusammensetzung, enthaltend einen pharmazeutisch unbedenklichen Träger und, als Wirkstoff, eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung nach Anspruch 1 oder 2.
Verfahren zur Herstellung einer Zusammensetzung nach Anspruch 2, bei dem man einen pharmazeutisch unbedenklichen Träger innig mit einer therapeutisch wirksamen Menge einer wie in Anspruch 1 definierten Verbindung mischt.
Verbindungen nach Anspruch 1 oder 2 zur Verwendung als Medizin.
Verbindungen nach Anspruch 1 oder 2, die bei der Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Bronchialasthma verwendet werden.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man a) ein Zwischenprodukt der Formel (II), in welchem W¹ für eine geeignete Abgangsgruppe steht, in einem reaktionsinerten Lösungsmittel und in Gegenwart einer Base mit einem entsprechenden Reagenz der Formel (III) umsetzt;
wobei R¹, R², R⁴, X und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D für
steht, wobei R⁵ und p wie in Anspruch 1 definiert sind; b) die Gruppe E eines Triazindions der Formel (V)
in welchem R¹, R², R⁴, R⁵, X und q wie in Anspruch 1 definiert sind, eliminiert; c) ein Keton der Formel (X) in Gegenwart einer Base und in einem reaktionsinerten Lösungsmittel mit einem Zwischenprodukt der Formel (III-a) umsetzt und so eine Verbindung der Formel (I-a-2) erhält;
wobei R², R⁴ und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D wie in Anspruch 7a) definiert ist; d) eine Verbindung der Formel (I-a-2) unter Anwendung von im Stand der Technik bekannten Gruppentransformationsreaktionen in eine Verbindung der Formel (I-a-3) umwandelt,
wobei R², R⁴ und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D wie in Anspruch 7a) definiert ist; e) eine Verbindung der Formel (I-a-2) unter Anwendung von im Stand der Technik bekannten Gruppentransformationsreaktionen in eine Verbindung der Formel (I-a-4) umwandelt,
wobei R², R⁴ und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D wie in Anspruch 7a) definiert ist; f) eine Verbindung der Formel (I-a-4) unter Anwendung von im Stand der Technik bekannten Gruppentransformationsreaktionen in eine Verbindung der Formel (I-a-5) umwandelt,
wobei R², R⁴ und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D wie in Anspruch 7a) definiert ist; g) ein Zwischenprodukt der Formel (XII), in welchem W⁴ für eine geeignete Abgangsgruppe steht, gegebenenfalls in Gegenwart einer geeigneten Base mit einem Zwischenprodukt der Formel (III) zu einer Verbindung der Formel (I-b) umsetzt;
wobei R², R⁴, X und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D wie in Anspruch 7a) definiert ist; h) ein Zwischenprodukt der Formel (XIV) in Gegenwart einer geeigneten Base und gegebenenfalls in Gegenwart eines reaktionsinerten Lösungsmittels mit einem Zwischenprodukt der Formel (XV), in welchem W³ für eine geeignete Abgangsgruppe steht, zu einer Verbindung der Formel (I-c) umsetzt;
wobei R⁴ und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D wie in Anspruch 7a) definiert ist; i) ein Zwischenprodukt der Formel (XX), in welchem Y für O, S oder NR³ steht, in Gegenwart eines geeigneten Lösungsmittels bei erhöhter Temperatur zu einer Verbindung der Formel (I-d-1) cyclisiert;
wobei R, R¹, R⁴ und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D wie in Anspruch 7a) definiert ist; j) ein Zwischenprodukt der Formel (XXI) in einem reaktionsinerten Lösungsmittel bei erhöhter Temperatur zu einer Verbindung der Formel (I-d-2) cyclisiert,
wobei R, R¹, R⁴ und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D wie in Anspruch 7a) definiert ist; k) ein Zwischenprodukt der Formel (XXII), in welchem Y für O, S oder NR³ steht, in einem geeigneten Lösungsmittel zu einer Verbindung der Formel (I-d-3) cyclisiert,
wobei R, R¹, R⁴ und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D wie in Anspruch 7a) definiert ist; l) ein Zwischenprodukt der Formel (XXIII), in welchem Y für O, S oder NR³ steht, in einem reaktionsinerten Lösungsmittel und in Gegenwart einer Säure zu einer Verbindung der Formel (I-d-4) cyclisiert
wobei R, R¹, R⁴ und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D wie in Anspruch 7a) definiert ist; m) ein Zwischenprodukt der Formel (XXIII), in welchem Y für O, S oder NR³ steht, in einem reaktionsinerten Lösungsmittel und in Gegenwart einer Säure zu einer Verbindung der Formel (I-d-5) cyclisiert,
wobei R, R¹, R⁴ und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D wie in Anspruch 7a) definiert ist; n) ein Zwischenprodukt der Formel (XXIV) in einem reaktionsinerten Lösungsmittel und in Gegenwart einer Base mit einem Zwischenprodukt der Formel (XXV), in welchem Y für O, S oder NR³ steht und W⁵ für eine geeignete Abgangsgruppe steht, umsetzt und so eine Verbindung der Formel (I-d-6) bildet,
wobei R, R¹, R⁴ und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D wie in Anspruch 7a) definiert ist; o) ein Zwischenprodukt der Formel (XXVI) in einem reaktionsinerten Lösungsmittel und in Gegenwart einer Säure mit einem Zwischenprodukt der Formel (XXVII), in welchem W⁶ für eine geeignete Abgangsgruppe steht, umsetzt und so_, eine Verbindung der Formel (I-d-7) bildet;
wobei R, R¹, R⁴ und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D wie in Anspruch 7a) definiert ist; p) ein Zwischenprodukt der Formel (XXXIII) in einem reaktionsinerten Lösungsmittel bei erhöhter Temperatur mit einem Thioamid der Formel (XXXIV) zu einer Verbindung der Formel (I-d-9) umsetzt;
wobei R, R¹, R⁴ und q wie in Anspruch 1 definiert sind und D wie in Anspruch 7a) definiert ist.
Verfahren zur in-vitro-Markierung eines Rezeptors, bei dem man a) eine wie in Anspruch 1 definierte Verbindung radioaktiv markiert; b) diese radioaktiv markierte Verbindung in vitro an biologisches Material verabreicht; c) die Emissionen der radioaktiv markierten Verbindung nachweist.
Verfahren zur in-vitro-Abbildung eines Organs, dadurch gekennzeichnet, daß man eine ausreichende Menge einer radioaktiv markierten Verbindung der Formel (I) in einer entsprechenden Zusammensetzung verabreicht und die Emissionen der radioaktiven Verbindung nachweist.