DE69721776T2

DE69721776T2 - Verbindungen mit antihypertensiven, cardioprotektiven, antiischämischen und antilipolytischen eigenschaften

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Publication number: DE69721776T2
Application number: DE69721776T
Authority: DE
Inventors: R. Michael MYERS; P. Martin MAGUIRE; P. Alfred SPADA; R. William EWING; W. Henry PAULS; Yong-Mi Choi-Sledeski
Original assignee: Aventis Pharma Deutschland GmbH
Current assignee: Sanofi Aventis Deutschland GmbH
Priority date: 1996-07-08
Filing date: 1997-07-01
Publication date: 2004-03-25
Anticipated expiration: 2017-07-02
Also published as: ATE239725T1; EA001801B1; EA199900092A1; EP0912520A4; HUP9903815A3; JP2000514801A; CA2259538A1; SK2299A3; EP0912520B1; AU3645497A; NO990063L; NO313671B1; ES2199365T3; KR20000023635A; BR9710156A; CN1228770A; CZ2499A3; BG103135A; AP9801426A0; DE69721776D1

Description

Hintergrund der Erfindung
1. Gebiet der Erfindung
Diese Erfindung betrifft Verbindungen, die sich von Adenosin und Analoga davon ableiten, pharmazeutischen Zusammensetzungen, die solche Verbindungen enthalten, ihre Verwendung zur Behandlung von Hypertonie und Herzmuskel-Ischämie, ihre Verwendung als kardioprotektive Mittel, die eine ischämische Verletzung oder das Ausmaß eines Herzmuskelinfarkts infolge von Herzmuskel-Ischämie verbessern, und ihre Verwendung als antilipolytische Mittel, die die Plasmalipidspiegel, die Serumtriglyceridspiegel und die Plasmacholeresterinspiegel verringern, und Methoden und Zwischenverbindungen, die in der Herstellung von solchen Verbindungen verwendet werden.
Hypertonie
Hypertonie, ein Zustand von erhöhtem Blutdruck, betrifft einen beträchtlichen Teil der menschlichen Bevölkerung. Konsequenzen von andauernder Hypertonie beinhalten vaskulären Schaden an den Okularen, renalen, kardialen und zerebralen Systemen und die Gefahr von diesen Komplikationen nimmt mit steigendem Blutdruck zu. Die den Blutdruck kontrollierenden Grundfaktoren sind das Herzzeitvolumen und der periphere vaskuläre Widerstand, Letztgenannter ist der vorherrschende gemeinsame Mechanismus, der von zahheichen Einflüssen kontrolliert wird. Das symphatische Nervensystem reguliert den peripheren vaskulären Widerstand durch direkte Wirkungen auf α- und βadrenergen Rezeptoren sowie durch indirekte Wirkungen auf die Renin-Freisetzung. Die Arzneimitteltherapie zielt ab auf spezifische Komponenten dieser Blutdruckregulations-Systemen mit unterschiedlichen Wirkungsmechanismen, die mehrere Arzneimittelklassen definieren, einschließlich Diuretika, βadrenerge Rezeptorantagonisten (β-Blocker), Angiotensin-konvertierendes Enzym(ACE)-Inhibitoren und Kalziumkanalantagonisten.
Diuretika des Thiazid-Typs werden bei Hypertonie verwendet, um den peripheren vaskulären Widerstand durch ihre Wirkungen auf die Natrium- und die Wasserausscheidung zu verringern. In diese Arzneimittelklasse sind Hydrochlorthiazid, Chlorthiazid, Methyclothiazid und Cyclothiazid sowie die verwandten Wirkstoffe Indapamid, Metolazon und Chlorthalidon mit einbezogen. Obwohl man früher davon ausgegangen ist, dass der β-Blocker-Wirkmechanismus eine Blockade des β₁-adrenergen Rezeptor-Subtyps im Herzen bewirkt, um die Herzfrequenz und das Herzzeitvolumen zu verringern, sind jüngere β-Blocker mit intrinsischer sympathomimetischer Aktivität (ISA), einschließlich Pindolol, Acebutolol, Penbutolol und Karteolol, genauso wirksam wie nicht-ISA-β-Blocker, die eine geringere Reduktion der Herzfrequenz und des Herzzeitvolumens verursachen. Weitere vorgeschlagene Mechanismen für diese Arzneimittel schließen die Inhibition der Renin-Freisetzung, einen zentralen Effekt, und einen Effekt bei präsynaptischen β-adrenergen Rezeptoren, wodurch eine Unterdrückung der Noradrenalin-Freisetzung bewirkt wird, mit ein. Die kardioselektiven β-Blocker Methoprolol (Lopressor-Geigy), Acebutolol (Sectral-Wyeth) und Atenolol (Tenormin-ICl, bei niedrigen Dosen, haben eine größere Wirkung auf die β₁-adrenergen Rezeptoren als auf die β₂-adrenergen Rezeptor-Subtypen, die in den Bronchien und den Blutgefäßen lokalisiert sind. Nicht selektive β-Blocker wirken auf beide β-adrenergen Rezeptor-Subtypen und schließen Propranolol (Inderal-Ayerst), Timolol (Blocadren-Merck), Nadolol (Corgard-Squibb), Pindolol (Visken-Sandoz), Penputolol (Levatol-Hoechst-Roussel) und Carteolol (Cartrol-Abbott) mit ein. Nachteilige Effekte der β-Blocker beziehen asymptomatische Bradykardie, Exazerbation der kongestiven Herzinsuffizienz, gastrointestinale Störungen, zunehmender Atemwegswiderstand, verdeckte Symptome von Hypoglykämie und Depressionen mit ein. Sie können ein Ansteigen der Serumtriglyceride bewirken und können das hochdichte Lipoprotein (high-density lipoprotein) Cholesterin verringern.
ACE-Inhibitoren verhindern die Bildung von Angiotensin II und unterbinden den Abbau von Bradykinin. Angiotensin II ist ein starker Vasokonstriktor und stimuliert auch die Sekretion von Aldosteron. Indem das Renin-Angiotensin-Aldosteron-System blockiert wird, vermindern diese Wirkstoffe den peripheren vaskulären Widerstand sowie die Natrium- und Wasserretention. Zusätzlich erhöhen die ACE-Inhibitoren den Anteil an Bradykinin und Prostaglandinen, endogenen Vasodilatatoren. Captopril (Capoten-Squibb) und Enalapril (Vasotec-Merck) sind die führenden ACE-Inhibitoren. Nachteilige Effekte der ACE-Inhibitoren schließen Ausschlag, Geschmacksstörungen, Proteinurie und Neutropenie mit ein.
Die Kalziumkanal-Antagonisten verringern den Zufluss von Kalzium in die vaskulären glatten Muskelzellen und erzeugen systemische Vasodilatation, wodurch ihre antihypertensive Wirkung erzielt wird. Weitere Effekte der Kalziumkanal-Antagonisten schließen die Störung der Wirkung von Angiotensin II und die α₂-adrenerge Rezeptorblockade mit ein, die zu ihren antihypertensiven Wirkungen hinzukommen können. Kalziumkanal-Antagonisten haben nicht die nachteiligen metabolischen und pharmakologischen Wirkungen der Thiazide oder β-Blocker und können folglich bei Patienten mit Diabetes, peripherer vaskulärer Erkrankung oder chronisch obstruktiver Lungenerkrankung verwendet werden. Zwei Kalziumkanal-Antagonisten, Verapamil und Diltiazem haben ernsthafte nachteilige kardiovaskuläre Wirkungen auf die atrioventrikuläre kardiale Reizleitung bei Patienten mit bereits vorhandenen Reizleitungsabnormalitäten und sie können Bradykardie, Herzblockade und kongestive Herzinsuffizienz verschlechtern. Weitere geringfügig nachteilige Effekte der Kalziumkanal-Antagonisten schließen peripheres Ödem, Schwindel, leichte Verwirrtheit, Kopfschmerzen, Übelkeit und Hitzewallungen, insbesondere mit Nifedipin und Nicardipin, mit ein.
Viele andere Mittel sind zur Behandlung von essentieller Hypertonie erhältlich. Diese Mittel beziehen Prazosin und Terazocin, α₁-adrenerge Rezeptorantagonisten, deren antihypertensive Wirkungen aufgrund der resultierenden arteriellen Vasodilatation erfolgen; Clonidin, ein α₂-adrenerger Agonist, der sowohl zentral als auch peripher auf inhibitorische α₂-adrenergen Rezeptoren wirkt, um die sympathische Antwort zu verringern, mit ein. Weitere zentral wirkende Mittel schließen Methyldopa, Guanabenz und Guanfacin; Reserpin, das die Verringerung des Vorrats an Katecholaminen bewirkt; Guanadrel, ein peripher adrenerger Antagonist ähnlich zu Guanethidin mit einer kürzeren Wirkungsdauer; und direkt-wirkende Vasodilatatoren wie Hydralazin und Minoxidil, mit ein. Diese Mittel, obwohl wirksam, bewirken nennenswerte symptomatische Nebenwirkungen einschließlich die reflektorisch sympathische Stimulation und Flüssigkeitsretention, orthostatische Hypotonie und Impotenz.
Viele antihypertensive Mittel aktivieren die kompensatorischen Druckmechanismen, wie zunehmende Renin-Freisetzung, erhöhte Aldosteron-Sekretion und zunehmenden sympathischen Vasokonstriktor-Tonus, die dafür bestimmt sind, den arteriellen Druck auf ein Niveau von vor der Behandlung zurückzuführen und die zu Salz und Wasser-Retention, Ödemen und unweigerlich zur Toleranz der antihypertensiven Wirkung der Mittel führen können. Aufgrund der großen Breite von Nebenwirkungen, die für die vorliegende Ansammlung von antihypertensiven Wirkstoffen festgestellt wurde, und der Probleme, die damit bei speziellen Gruppen von Hypertonie-Patienten festgestellt wurden, einschließlich den Älteren, Schwarzen und Patienten mit chronischer obstruktiver Lungenkrankheit, Diabetes oder peripheren vaskulären Erkrankungen, gibt es darüber hinaus einen Bedarf an zusätzlichen Klassen von Arzneimitteln zur Behandlung von Hypertonie.
Ischämie
Herzmuskel-Ischämie ist das Ergebnis eines Ungleichgewichts der Herzmuskelsauerstoff-Zufuhr und des Bedarfs und schließt Belastungs- und vasospastische Herzmuskel-Dysfunktion mit ein. Belastungs-Ischämie wird generell der Gegenwart von kritischer arterosklerotischer Stenose zugeschrieben, worin große Koronararterien verwickelt sind, die eine Verringerung im subendokardialen Fluss ergeben. Vasospastische Ischämie wird mit einem Spasmus der fokalen Varietät in Verbindung gebracht, dessen Beginn nicht mit Belastung oder Stress assoziiert ist. Der Spasmus wird besser definiert als ein abruptes Ansteigen im vaskulären Tonus. Die Mechanismen für vasospastische Ischämie schließen mit ein: (i) zunehmender vaskulärer Tonus im Bereich der Stenose aufgrund von zunehmender Katecholamin-Freisetzung: (ii) vorübergehende intraluminale Verstopfung und (iii) Freisetzung von vasoaktiven Substanzen, die durch Blättchen im Bereich der endothelialen Schädigungen gebildet werden.
Der koronare Kreislauf ist einzigartig, weil er das Organ durchblutet, welches den Perfussionsdruck für den gesamten Kreislauf generiert. Somit werden Eingriffe, die den Zustand des peripheren Kreislaufs und der Kontraktilität verändern, einen einschneidenden Effekt auf den koronaren Kreislauf haben. Die Regulator-Komponente der Koronargefäße sind die kleinen koronaren Arteriolen, die beträchtlich ihren internen Durchmesser verändern können. Die Veränderung des internen Radius ist das Ergebnis von entweder intrinsischer Kontraktion des vaskulären Glattmuskels (Autoregulation) oder extravaskulärer Kompression aufgrund von ventrikulärer Kontraktion. Die Gesamtwirkung von Therapien hinsichtlich des Ischämie-Problems bezieht eine komplexe Wechselwirkung von gegensätzlichen Faktoren mit ein, die den Sauerstoffangebot und -bedarf bestimmen.
Kardioprotektion und Prävention von ischämischer Verletzung
Die Entwicklung von neuen therapeutischen Mitteln, die zu einer Begrenzung des Ausmaßes der Herzmuskelverletzung, d. h., des Ausmaßes eines Herzmuskelinfarkts, nachfolgend zu akuter Herzmuskel-Ischämie, in der Lage sind, ist ein Hauptanliegen der modernen Kardiologie.
Der Beginn von thrombolytischer (Gerinsel auflösender) Therapie während des letzten Jahrzehnts zeigt, dass frühes Eingreifen während einer Herzattacke eine beträchtliche Verringerung des Schadens am Herzmuskelgewebe ergeben kann. Große klinische Studien haben seitdem gezeigt, dass thrombolytische Therapie die Gefahr der Entwicklung von Störungen im Herzschlag verringert und auch die Fähigkeit des Herzens aufrechterhält, als Pumpe zu fungieren. Dieser Erhalt der normalen Herzfunktion hat eine Verringerung der Langzeitsterblichkeit infolge eines Infarktes gezeigt.
Auch auf Interesse gestoßen ist die Entwicklung von Therapien, die in der Lage sind, zusätzlichen Herzmuskelschutz bereitzustellen, die im Zusammenhang mit thrombolytischer Therapie verabreicht werden können oder alleine, weil retrospektiv epidemiologische Studien gezeigt haben, dass die Sterblichkeit während der ersten fünf Jahre infolge eines Infarktes einen Bezug zum ursprünglichen Infarktausmaß zu haben scheint. In präklinischen Infarktstudien, die an einer Vielzahl von Tiermodellen durchgeführt wurden, haben viele Arten von pharmakologischen Mitteln wie Kalziumkanal-Blocker, Prostacyclin-Analoga und Mittel, die zur Unterbindung von gewissen Stoffwechselwegen in der Lage sind, gezeigt, dass sie zu einer Verringerung der ischämischen Verletzung bei zahlreichen Tierarten in der Lage sind.
Jüngste Untersuchungen haben gezeigt, dass die Aussetzung des Herzmuskels für kurze Ischämie-Perioden (Unterbrechung des Blutflusses zum Herzen) mit nachfolgender Reperfusion (Wiederherstellung des Blutflusses) das Herz vor nachfolgender ischämischer Verletzung schützen kann, die ansonsten aus einer nachfolgenden Aussetzung für einen längeren Ischämie-Zeitraum resultieren würde. Dieses Phänomen wurde als Herzmuskel-Präkonditionierung bezeichnet und es wird davon ausgegangen, dass es teilweise der Freisetzung von Adenosin während der Präkonditionierungsperiode zuzuschreiben ist.
Andere Studien haben gezeigt, dass Adenosin und Adenosin-Analoga das Ausmaß von Gewebeschäden verringern können, das infolge der Unterbrechung des Blutflusses zum Herzen in einer Vielzahl von Modellen von ischämischer Verletzung in zahlreichen Arten beobachtet wurde, siehe beispielsweise Toombs, C. et al., „Myocardial protective effects of adenosine. Infarct size reduction with pretreatment and continued receptor stimulation during ischemia", Circulation 86, 986–994 (1992); Thornton, J. et al., "Intravenous pretreatment with Al-selective adenosine analogues protects the heart against infarction"., Circulation 85, 659–665/1992) und Downey, J., "Ischemic preconditioning-nature's own cardioprotective intervention"., Trends Cardiovasc. Med. 2(5), 170–176 (1992)).
Verbindungen der vorliegenden Erfindung ahmen die Herzmuskel-Präkonditiönierung nach, wodurch sie die ischämische Verletzung verbessern oder eine Verringerung des Ausmaßes des Herzmuskel-Infarktes infolge von Herzmuskel-Ischämie bewirken und sind somit nützlich als kardioprotektive Mittel.
Antilipolyse
Hyperlipidämie und Hypercholesterinämie gelten als zwei der Hauptfaktoren für Artherosklerose und koronarer Herzkrankheit, dem vorherrschenden Grund für Tod und Behinderung in den westlichen Ländern. Obwohl die Ethiologie von Artherosklerose von vielen Faktoren abhängig ist, werden die Entwicklung von Artherosklerose und Zuständen einschließlich koronarer Arterienkrankheit, peripher-vaskulärer Krankheit und cerebrovaskulärer Krankheit, resultierend aus einem begrenzten Blutfluss, mit Abnormalitäten im Serum-Cholesterin und den Lipidspiegeln in Verbindung gebracht. Die Ethiologie von Hypercholesterinämie und Hyperlipidämie ist hauptsächlich genetisch, obwohl Faktoren wie die diätetische Aufnahme von gesättigten Fetten und Cholesterin dazu beitragen können.
Die antilypolitische Aktivität von Adenosin und Adenosin-Analoga entsteht aus der Aktivierung des A₁-Rezeptor-Subtyps. (Lohse, M. J., et al., Recent Advances in Receptor Chemistrz, Melchiorre, C. and Gianella, Eds, Elsevier Science Publishers B. V., Amsterdam, 1988, 107–121). Die Stimulation dieses Rezeptor-Subtyps verringert die intrazelluläre cyclische AMP-Konzentration in Adipozyten. Cyclisches AMP ist ein notwendiger Co-Faktor für das Enzym Lipoprotein Lipase, das hydrolytisch Triglyceride zu freien Fettsäuren und Glycerol in Adipozyten spaltet (Egan, J. J., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 1992 (89), 8357–8541). Entsprechend verrigert die Reduktion von intrazellularer cyclischer AMP-Konzentration in den Adipozyten die Lipoprotein Lipase-Aktivität und somit die Hydrolyse der Triglyceride.
Erhöhter Blutdruck und Plasmalipide einschließlich Triglyceride sind zwei wohlbekannte Risikofaktoren, die mit der Sterblichkeit infolge von kardiovaskulärer Krankheit in Verbindung gebracht werden.
Für den Diabetes-Patienten, wo die Wahrscheinlichkeit der Sterblichkeit durch kardiovaskuläre Krankheiten beträchtlich größer ist, ist die Gefahr, die mit diesen Faktoren in Verbindung gebracht wird, weiter vergrößert (Biermann, E. L., Arteriosclerosis and Thrombois 1992 (12), 647–656). Die Daten deuten zusätzlich darauf hin, dass übermäßige Lipolyse charakteristisch ist für nicht insulinabhängige Diabetes und möglicherweise zur Insulinresistenz und Hyperglykämie beiträgt (Swislocki, A. L., Horm. Metab. Res. 1993 (25), 90–95).
Verbindungen der vorliegenden Erfindung als antihypertensive und antilipolytische Mittel sind nützlich in der Behandlung und Verbesserung von sowohl vaskulären als auch metabolischen Risikofaktoren und sind von besonderem Wert und Nützlichkeit.
Die vorliegende Erfindung betrifft eine Klasse von Adenosin-Analoga und deren Nutzen in der Behandlung von Hypertonie, Herzmuskel-Ischämie, als kardioprotektive Mittel, die eine ischämische Verletzung oder das Ausmaß eines Herzmuskelinfarkts infolge von Herzmuskel-Ischämie verbessern und als antilipolytische Mittel, die die Plasmalipidspiegel, die Serumtriglycerid-Spiegel und die Plasmacholesterin-Spiegel verringern und Methoden und Zwischenverbindungen, die bei der Herstellung von solchen Verbindungen verwendet werden.
2. Bekannte Entwicklungen
Adenosin hat eine große Bandbreite von physiologischen und pharmakologischen Wirkungen einschließlich einer merkbaren Veränderung der kardiovaskulären und renalen Funktion. In Tieren und im Menschen verursacht die intravenöse Injektion von Adenosinnukleotiden Hypotension. Die physiologischen und pharmakologischen Wirkungen von Adenosin werden durch spezielle Rezeptoren, die auf der Oberfläche der Zellen lokalisiert sind, vermittelt. Vier Adenosin-Rezeptor-Subtypen, die als A₁, A_2A, A_2B und A₃-Rezeptoren bezeichnet werden, sind identifiziert worden. Der A₁-Rezeptor verhindert die Bildung von cAMP durch Unterdrückung der Aktivität von Adenylatcyclase, während die Stimulation von A₂-Rezeptoren die Adenylatcyclase-Aktivität und intrazelluläres cAMP erhöht. Jeder Rezeptor scheint spezifische Wirkungen von Adenosin in unterschiedlichen Geweben herbeizuführen: Beispielsweise scheinen die vaskulären Wirkungen von Adenosin durch die Stimulation von A₂-Rezeptoren herbeigeführt zu werden, die durch die positive Korrelation zwischen cAMP-Bildung und Vasorelaxation in mit Adenosin behandelten isoliertem vaskulärem glatten Muskel unterstützt wird; während die Stimulierung von kardialen A₁-Rezeptoren die cAMP-Bildung im Herzen verringert, was zu den negativen dromotropen, inotropen und chronotropen kardialen Wirkungen beiträgt. In Gegensatz zu den meisten Vasodilatatoren erzeugt folglich die Verabreichung von Adenosin keine reflektorische Tachykardie.
Adenosin übt auch einen spürbaren Einfluss auf die renale Funktion aus. Intrarenale Infusion von Adenosin verursacht einen vorübergehenden Abfall im renalen Blutfluss und eine Zunahme im renalen vaskulären Widerstand. Bei fortgesetzter Infusion von Adenosin kehrt der renale Blutfluss auf die Kontroll-Spiegel zurück und der renale vaskuläre Widerstand wird verringert. Die anfänglichen renalen Vasokonstriktor-Antworten auf Adenosin erfolgen nicht aufgrund direkter Vaskokonstriktor-Wirkungen des Nukleotids, sondern beziehen eine Wechselwirkung zwischen Adenosin und dem Renin-Angiotensin-System mit ein.
Adenosin wird weithin als der vorherrschende physiologische Vermittler von reaktiver Hyperämie und Autoregulation des koronaren Betts als Antwort auf Herzmuskel-Ischämie betrachtet. Es wurde berichtet, dass das koronare Endothelium Adenosin-A₂-Rezeptoren besitzt, die mit Adenylatcyclase verknüpft sind, die parallel mit der Zunahme im koronaren Fluss aktiviert werden und das Kardiomyozyt-Rezeptoren vorherrschend vom Adenosin-A₁-Subtyp sind und mit Bradykardie in Verbindung gebracht werden. Demzufolge bietet Adenosin einen einzigartigen Mechanismus der ischämischen Therapie an.
Kardiovaskuläre Reaktionen auf Adenosin sind kurzlebig aufgrund der schnellen Aufnahme und Metabolisierung des endogenen Nukleotids. Im Gegensatz dazu sind Adenosin-Analoga widerstandsfähiger gegenüber dem metabolischen Abbau und es wird berichtet, dass sie anhaltende Veränderungen im arteriellen Druck und der Herzfrequenz bewirken.
Mehrere wirksame metabolisch stabile Analoga von Adenosin sind synthetisiert worden, was die unterschiedlichen Grade der Selektivität für die zwei Rezeptor-Subtypen darlegt. Adenosin-Agonisten haben im Allgemeinen eine größere Selektivität für A₁-Rezeptoren im Vergleich zu A₂-Rezeptoren gezeigt. Cyclopentyl-Adenosin (CPA) und R-Phenylisopropyl-Adenosin (R-PIA) sind Standard-Adenosin-Agonisten, die eine spürbare Selektivität für den A₁-Rezeptor (A₂/A₁-Verhältnis = 780 beziehungsweise 106) zeigen. Im Gegensatz dazu ist N-5'-Ethyl-carboxamido-enosin (NECA) ein wirksamer A₂-Rezeptor-Agonist (Ki-12 nM), hat aber gleiche Affinität für den A₁-Rezeptor (Ki-6,3 nM; A₂/A₁-Verhältnis = 1,87). Bis vor kurzem war CV-1808 der selektivste A₂-Agonist, der verfügbar war (A₂/A₁ = 0,19), obwohl die Verbindung 10-fach weniger wirksam war als NECA in seiner Affinität für den A₂-Rezeptor. In neueren Entwicklungen sind neuere Verbindungen offenbart worden, die sehr wirksame und selektive A₂-Agonisten sind (Ki = 3–8 nM für A₁; A₂/A₁ Verhältnis = 0,027–0,042) (C. E. Müller und T. Scior, Pharmaceutica Acta Hevetiae 68 (1993) 77–111).
In der Literatur wurde von zahlreichen N6-aryl- und N6-heteroatylalkyl-substituierten Adenosinen und substituierten-(2-amino- und 2-hydroxy)adenosinen berichtet, die unterschiedliche pharmakologische Aktivität besitzen, einschließlich kardialer und zirkulatorischer Aktivität (siehe beispielsweise Britische Patentbeschreibung 1,123,245, Deutsche Offenlegung 2,136,624, Deutsche Offenlegung 2,059,922, Deutsche Offenlegung 2,514,284, Südafrikanisches Patent Nr. 67/7630, US-Patent Nr. 4,501,735, EP-Veröffentlichung 0 139 358 (Offenbarung von N6-[geminal-diaryl-substituierten Alkyl]adenosinen), EP-A 0 305 643 (Offenbarung, dass N6-heterocyclisch-substituierte Adenosin-Derivate kardiale vasodilatatorische Aktivität zeigen), Deutsche Offenlegung 2,131,938 (Offenbarung von Aryl und Heteroaryl-alkyl-hydrazinyl-adenosin Derivaten), Deutsche Offenlegung 2,151,013 (Offenbarung von N6-Aryl und Heteroarylsubstituierten Adenosinen), Deutsche Offenlegung 2,205,002 (Offenbarung von Adenosinen mit N6-Substituenten, umfassend überbrückte Ringstrukturen, die den N6-Stickstoff mit Substituenten einschließlich Thienyl verknüpfen) und Südafrikanisches Patent Nr. 68/5477 (Offenbarung von N6-indolyl-substituierten 2-Hydroxy-adenosinen).
Das US-Patent Nr. 4,954,504 und die EP-Veröffentlichung Nr. 0 267 878 offenbaren gattungsmäßig, dass carbocyclische Ribose-Derivate von Adenosin und pharmazeutisch annehmbare Ester hiervon, die in den 2- und/oder N6-Stellungen durch Aryl-Niederalkylgruppen einschließlich Thienyl, Tetrahydropyranyl, Tetrahydrothiopyranyl und bicyclische, benzo-kondensierte 5- oder 6-gliedrige gesättigte heterocyclische Niederalkyl-Derivate substituiert sind, Adenosin-Rezeptor-Agonist-Eigenschaften zeigen. Adenosin-Analoga, die Substituenten von Thienyltyp haben, sind beschrieben in: der EP-Veröffentlichung Nr. 0 277 917 (Offenbarung: N6-substituierte-2-heteroarylalkylaminosubstituierte Adenosine einschließlich 2-[(2-[thien-2-yl]ethyl)amino]-substituiertes Adenosin), Deutsche Offenlegung 2,139,107 (Offenbarung von N6-[Benzothienylmethyl]-aenosin), PCT WO 85/04882 (Offenbarung, dass N6-heterocyclisch alkyl-substituierte Adenosin-Derivate einschließlich N6-[2-(2-Thienyl)ethyl]amino-9-(Dribofuranosyl)-9H-purin kardiovaskulär vasodilatatorische Aktivität zeigen und dass N6-Chirale-Substituenten eine verbesserte Aktivität zeigen), EP veröffentlichte Anmeldungsnummer 0 232 813 (Offenbarung, dass N6-(1-substituierte Thienyl)cyclopropylmethyl-substituierte Adenosine kardiovaskuläre Aktivität zeigen), US-Patent Nr. 4,683,223 (Offenbarung, dass in N6-benzothiopyranyl-substituierte Adenosine antihypertensive Eigenschaften zeigen), PCT WO 88/03147 und WO 88/03148 (Offenbarung, dass N6-[2-aryl-2-(thien-2-yl)]ethyl-substituierte Adenosine antihypertensive Eigenschaften zeigen), US-Patent Nr. 4,636,493 und Nr. 4,600,707 i (Offenbarung, dass N6-benzothienylethyl-substituierte Adenosine antihypertensive Eigenschaften zeigen).
Adenosin-5'-carbonsäureamide sind in dem US-Patent Nr. 3,914,415 offenbart als nützliche antihypertensive und antianginale Mittel, während US-Patent Nr. 4,738,954 offenbart, dass N6-substituierte Arzl- und Arylalkyl-Adenosin-5'-ethyl-carboxamide zahlreiche kardiale und antihypertensive Eigenschaften zeigen.
N⁶-alkyl-2'-O-alkyl-Adenosine sind in der EP-Veröffentlichung Nr. 0 378 518 und der UK-Patentanmeldung Nr. 2,226,027 mit einer antihypertensiven Aktivität offenbart. N⁶-alkyl-2',3'-di-O-alkyl-Adenosine werden auch als nützliche antihypertensive Mittel beschrieben, US-Patent 4,843,066.
Von Adenosin-5'-(N-substituierten)carboxamiden und Carboxylat-Estern und N1-Oxiden hiervon wird berichtet, dass sie koronare Vasodilatatoren sind (Stein, et al., J. Med. Chem. 1980, 23, 313–319 und J. Med. Chem. 19 (10), 1180 (1976)). Adenosin-5'carboxamide und N1-oxide hiervon sind im US-Patent Nr. 4,167,565 auch als Gift für Kleintiere beschrieben.
Die antilipolytische Aktivität von Adenosin wird beschrieben von: Dole, V. P., J. Biol. Chem. 236 (12), 3125–3130 (1961). Die Inhibition der Lipolyse durch (R)-N⁶-phenylisopropyl-Adenosin wird offenbart von: Westermann, E., et al., Adipose Tissue, Regulation and Metabolic Functions, Jeamenaud, B. und Hepp, D. Eds., George Thieme, Stuttgart, 47–54 (1970). N⁶-mono- und disubstituierte Adenosin-Analoga werden offenbart mit einer antilipolytischen, antihypercholesterinämischen_ und antihyperlipemischen Aktivität in den US-Patenten Nr. 3,787,391; US 3,817,981 , US 3,838,147, US 3,840,521; US 3,835,035; US 3,851,056; US 3,880,829; US 3,929,763; US 3,929,764; US 3,988,317 und US 5,032,583.
N6-substituierte Adenosine und Analoga, nützlich in der Behandlung von gastrointestinalen Motilitätserkrankungen, sind in den EP-Anmeldungen Nr. 0 423 776 und 0 423 777 beschrieben.
N6-Heterocyclyl-alkyl-Verbindungen, die sich von Adenosin und Derivaten hiervon ableiten, und ihre Verwendung zur Behandlung von Hypertension und Herzmuskel-Ischämie, ihre Verwendung als kardioprotektive Mittel, die eine ischämische Verletzung oder das Ausmaß eines Herzmuskelinfarkts infolge von Herzmuskel-Ischämie verbessern, ihre Verwendung als antilipolytische Mittel, die die Plasmalipid-Spiegel, die Serumtriglycerid-Spiegel und die Plasmacholesterin-Spiegel verringern, sind in US-A 5,561,134 und WO 95/28160 offenbart. N6-Heterocyclyl-Verbindungen, die von Adenosin und Derivaten hiervon abgeleitet sind, und ihre Verwendung in der Behandlung von Herzmuskel-Ischämie und Hypertonie sind auch in dem US-Patent Nr. 5,364,862, eingereicht am 2. Oktober 1992, offenbart und ist für den gleichen Anmelder angemeldet wie die vorliegende Anmeldung.
Man glaubt, dass die berichtete Toxizität, die CNS-Eigenschaften und die Herzfrequenz-Erhöhungen, die mit Adenosin-Analoga in Verbindung gebracht werden, zu den Schwierigkeiten beigetragen haben, die die Entwicklung eines kommerziellen Adenosin-Analogons als antihypertensives und anti-ischämisches Mittel verhindert haben. Die vorliegende Erfindung betrifft eine Klasse von metabolisch stabilen Adenosinanaloga und Derivaten hiervon, die über nicht erwartete wünschenswerte pharmakologische Eigenschaften verfügen, d. h. sie sind antihypertensive, kardioprotektive, anti-ischämische und antilipolytische Mittel, die ein einzigartiges therapeutisches Profil aufweisen.
Zusammenfassung der Erfindung
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung werden durch Formel I beschrieben.
wobei:
K ist N, N → O oder CH;
Q ist CH₂ oder O;
R₆ ist Wasserstoff, Alkyl, Allyl, 2-Methylallyl, 2-Butenyl oder Cycloalkyl;
wobei der Ringstickstoff von X mit Y substituiert ist;
E ist O oder S;
Y ist Wasserstoff, Alkyl, Aralkyl, substituiertes Aralkyl, Aryl, substituiertes Aryl, Heterocyclyl, substituiertes Heterocyclyl, Heterocyclylalkyl oder substituiertes Heterocyclylalkyl;
n und p sind unabhängig voneinander 0, 1, 2 oder 3, unter der Voraussetzung, dass n + mindestens 1 ist:
T ist Wasserstoff, Alkyl, Acyl, Thioacyl, Halo, Carboxyl,
oder R₃O-CH₂;
R₁, R₂ und R₃ sind unabhängig voneinander H, Alkyl oder Cycloalkyl;
A ist Wasserstoff, Alkyl, Hydroxyalkyl, Alkoxyalkyl oder OR';
B ist Wasserstoff, Alkyl, Hydroxyalkyl, Alkoxyalkyl oder OR'';
R' und R'' sind unabhängig voneinander Wasserstoff, Alkyl, Aralkyl, Carbamoyl, Alkyl-carbamoyl, Dialkylcarbamoyl, Acyl, Alkoxycarbonyl, Aralkoxycarbonyl, Aryloxycarbonyl oder, wenn A und B OR' bzw. OR'' sind, können R' und R'' zusammen bilden:
wobei Rc Wasserstoff oder Alkyl ist,
wobei R_d und R_e unabhängig voneinander Wasserstoff oder Alkyl sind oder sie können zusammen mit dem Kohlenstoff-Atom, an das sie geknüpft sind, eine 1,1-Cycloalkyl-Gruppe bilden;
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Diese Erfindung bezieht sich auch auf Methoden zur Behandlung von einer kardiovaskulären Krankheit, die durch Hypertonie oder Herzmuskel-Ischämie gekennzeichnet ist unter Verwendung von pharmazeutischen Zusammensetzungen einschließlich einer antihypertensiven wirksamen Menge oder einer anti-ischämisch wirksamen Menge einer Verbindung gemäß vorstehender Formel I, einer Methode zur Verbesserung einer ischämischen Verletzung oder des Herzmuskelinfarktausmaßes unter Verwendung von pharmazeutischen Zusammensetzungen einschließlich einer kardioprotektiven Menge einer Verbindung gemäß vorstehender Formel I, einer Methode zur Behandlung von Hyperlipidämie oder Hypercholesterinämie unter Verwendung von pharmazeutischen Zusammensetzungen einschließlich einer antilipolytischen Menge von Formel I und Methoden und Zwischenverbindungen, die zur Herstellung von solchen Verbindungen verwendet werden.
Detaillierte Beschreibung
Wie vorstehend und über die gesamte Beschreibung der Erfindung verwendet, sollen die nachfolgenden Begriffe, sofern nicht anderweitig bezeichnet, mit den nachfolgenden Bedeutungen verstanden werden:
„Acyl" bedeutet eine geradkettige oder verzweigte Alkyl-C=O-Gruppe. „Thioacyl" bedeutet eine geradkettige oder verzweigte Alkyl-C=S-Gruppe. Bevorzugte Acyl und Thioacyl-Gruppen sind nieder-alkanoyl und nieder-thioalkanoyl, die von 1 bis ungefähr 6 Kohlenstoffatome in der Alkylgruppe aufweisen.
„Alkyl" bedeutet eine gesättigte aliphatische Kohlenwasserstoffgruppe, die geradkettig oder verzweigt sein kann und von 1 bis ungefähr 20 Kohlenstoffatome in der Kette haben kann. Bevorzugte Alkylgruppen können geradkettig oder verzweigt sein und von 1 bis zu 10 Kohlenstoffatome in der Kette aufweisen. Verzweigt bedeutet, dass eine Nieder-Alkylgruppe, wie Methyl, Ethyl oder Propyl, an eine lineare Alkylkette angebracht ist.
„Nieder-Alkyl" bedeutet eine Alkylgruppe, die 1 bis ungefähr 6 Kohlenstoffatome aufweist.
„Cycloalkyl" bedeutet einen aliphatischen Ring, der von 3 bis ungefähr 10 Kohlenstoffatome in den Ring hat. Bevorzugte Cycloalkylgruppen haben von 4 bis ungefähr 7 Kohlenstoffatome in dem Ring.
„Carbamoyl" bedeutet eine
-Gruppe. Alkylcarbamoyl und Dialkylcarbamoyl bedeutet, dass der Stickstoff des Carbamoyls durch eine beziehungsweise zwei Alkylgruppen substituiert ist.
„Carboxyl" bedeutet eine COOH-Gruppe.
„Alkoxy" bedeutet eine Alkyl-O-Gruppe, in der „Alkyl" die vorstehend beschriebene Bedeutung hat. Nieder-Alkoxy-Gruppen sind bevorzugt. Als beispielhafte Gruppen sind Methoxy, Ethoxy, n-Propoxy, i-Propoxy und n-Butoxy einbezogen.
„Alkoxyalkyl" bedeutet eine Alkylgruppe wie vorstehend beschrieben, die mit einer Alkoxygruppe, wie vorstehend beschrieben, substituiert ist.
„Alkoxycarbonyl" bedeutet eine Alkoxy-C=O-Gruppe.
„Aralkyl" bedeutet eine Alkylgruppe, die mit einem Arylrest substituiert ist, wobei „Aryl" Phenyl oder Naphthyl bedeutet. „Substituiertes Aralkyl" und „substituiertes Aryl" bedeutet, dass die Arylgruppe oder die Arylgruppe der Aralkylgruppe mit einem oder mehreren Substituenten einschließlich Alkyl, Alkoxy, Amino, Nitro, Carboxy, Carboalkoxy, Cyano, Alkylamino, Halo, Hydroxy, Hydroxyalkyl, Mercaptyl, Alkylmercaptyl, Trihaloalkyl, Carboxyalkyl oder Carbamoyl substituiert ist.
„Aralkoxycarbonyl" bedeutet eine Aralkyl-O-C=O-Gruppe.
„Aryloxycarbonyl" bedeutet eine Aryl-O-C=O-Gruppe.
„Carbalkoxy" bedeutet einen Carboxyl-Substituenten, der mit einem Alkohol der Formel C_nH_2n+1OH verestert ist, wobei n von 1 bis ungefähr 6 ist.
„Halogen" (oder „halo") bedeutet Chlor (chloro), Fluor (fluoro), Brom (bromo) oder Iod (iodo).
„Heterocyclyl" bedeutet eine ungefähr 4 bis ungefähr 10-gliedrige Ringstruktur, in der eines oder mehrere der Ringatome ein anderes Element als Kohlenstoff ist, beispielsweise N, O oder S. Heterocyclyl kann aromatisch oder nicht-aromatisch sein, d. h. es kann gesättigt, teilweise oder ganz ungesättigt sein.
Als bevorzugte Heterocyclyl-Gruppen sind einbezogen: Pyridyl, Pyridazinyl, Pyrimidinyl, Isochinolinyl, Chinolinyl, Chinazolinyl Imidazolyl, Pyrrolyl, Furanyl, Thienyl, Thiazolyl, Benzothiazolyl, Piperidinyl, Pyrrolidinyl, Tetrahydrofuranyl, Tetrahydropyranyl und Morphonlinyl-Gruppen.
„Substituiertes Heterocyclyl" bedeutet, dass die Heterocyclyl-Gruppe mit einem oder mehreren Substituenten substituiert ist, wobei als Substituenten einbezogen sind: Alkoxy, Alkylamino, Aryl, Carbalkoxy, Carbamoyl, Cyano, Halo, Heterocyclyl, Trihalomethyl, Hydroxy, Mercaptyl, Alkylmercaptyl oder Nitro.
„Hydroxyalkyl" bedeutet eine Alkylgruppe, die mit einer Hydroxygruppe substituiert ist. Hydroxy-Niederalkyl-Gruppen sind bevorzugt. Als beispielhaft bevorzugte Gruppen sind einbezogen: Hydroxymethyl, 2-Hydroxyethyl, 2-Hydroxypropyl und 3-Hydroxypropyl.
„Prodrug" bedeutet eine Verbindung, die selbst biologisch aktiv sein kann, aber nicht muss, aber die in eine biologisch aktive chemische Einheit durch metabolische, solvolytische oder andere physiologische Mittel umgewandelt werden kann.
„Kardioprotektion" bezieht sich auf einen Effekt, worin die Herzmuskulatur für eine ischämische Verletzung und einen Herzmuskelinfarkt infolge von Herzmuskel-Ischämie weniger anfällig gemacht wird.
„Verbesserung einer ischämischen Verletzung" bedeutet die Verhinderung oder die Verringerung einer ischämischen Verletzung am Herzmuskel infolge von Herzmuskel-Ischämie.
„Verbesserung des Herzmuskelinfarktausmaßes" bedeutet die Verminderung des Herzmuskelinfarktausmaßes oder die Verhinderung eines Herzmuskelinfarkts infolge von Herzmuskel-Ischämie.
Die Verbindungen gemäß Formel I enthalten chirale (asymmetrische) Zentren. Die Erfindung bezieht die jeweiligen Stereoisomere und Mischungen davon mit ein. Die jeweiligen Isomere werden durch im Stand der Technik bekannte Methoden oder durch hier beschriebene Methoden hergestellt oder isoliert.
Die Verbindungen der Erfindung können in Form ihrer freien Base, in Form ihres sauren Zusatzsalzes oder als Hydrat verwendet werden. All diese Formen werden von der Erfindung mit umfasst. Die sauren Zusatzsalze sind einfach eine praktischere Verwendungsform. In der Praxis kommt die Verwendung der Salzform der Verwendung der Basenform gleich. Als Säuren, die zur Herstellung des sauren Zusatzsalzes verwendet werden können, sind vorzugsweise diese einbezogen, die, wenn sie mit der freien Base vereinigt werden, pharmazeutisch annehmbare Salze ergeben, d. h. Salze, deren Anionen für den Empfänger in pharmazeutischen Dosen der Salze nicht toxisch sind, so dass die vorteilhaften antihypertensiven, kardioprotektiven, anti-ischämischen und antilipolytische Effekte, die von der freien Base bewirkt werden, nicht verunreinigt werden durch Nebeneffekte, die den Anionen zugeschrieben werden. Obwohl pharmazeutisch annehmbare Salze von den Verbindungen der Erfindung bevorzugt sind, können alle sauren Zusatzsalze als Quelle für die freie Basenform verwendet werden, auch wenn das spezielle Salz per se nur als Zwischenprodukt gewünscht ist, zum Beispiel wenn das Salz nur zu Zwecken der Reinigung oder der Identifizierung gebildet wird, oder wenn es als Zwischenverbindung zur Herstellung eines pharmazeutisch annehmbaren Salzes bei Ionenaustauschverfahren verwendet wird. Pharmazeutisch annehmbare Salze im Rahmen dieser Erfindung sind diejenigen, die von den nachfolgenden Säuren abgeleitet werden: Mineralsäuren wie Salzsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure und Sulfaminsäure; und organische Säuren wie Essigsäure, Zitronensäure, Milchsäure, Weinsäure, Malonsäure, Methansulfonsäure, Fumarsäure, Ethansulfonsäure, Benzolsulfonsäure, p-Toluolsulfonsäure, Cyclohexylsulfamidsäure, Chinasäure und dergleichen. Die entsprechenden Säurezusatzsalze umfassen jeweils die Nachfolgenden: Hydrochlorid, Sulfat, Phosphat, Sulfamat, Acetat, Citrat, Lactat, Tartrat, Methansulfonat, Fumarat, Ethansulfonat, Benzolsulfonat, p-Toluolsulfonat, Cyclohexylsulfonat und Chinat.
Die sauren Zusatzsalze der Verbindungen der Erfindung werden günstigsterweise hergestellt entweder durch Auflösen der freien Base in wässriger oder wässrigeralkoholischer Lösung oder anderen passenden Lösungsmitteln, die die geeignete Säure enthalten und Isolierung des Salzes durch Verdampfung der Lösung oder durch Umsetzung der freien Base und der Säure in einem organischen Lösungsmittel, wobei das Salz direkt ausfällt oder durch Einkonzentrierung der Lösung erhalten werden kann.
Mit einbezogen in den Umfang der Formel I sind Verbindungsklassen, die generell als N6-substituierte Adenosine charakterisiert werden können; N6-substituierte carbocyclische Adenosine (oder alternativ Dihydroxy[N6-substituierte-9adenyl]cyclopentane) und N-Oxide davon; und N6-substituierte-N'-1-deazaaristeromycine (oder alternativ Dihydroxy[N7-substituierte[4,5-b]imidazopyridil]cyclopentane). Von Formel I sind auch umfasst die 5'-Alkylcarboxamid-Derivate der Adenosine, die carbocyclischen Adenosine und die 1-Deazaaristomycine, die Derivate von Verbindungen der vorgenannten Klassen, in denen eine oder beide der 2- oder 3-Hydroxylgruppen des Cyclopentan-Ringes oder in den Fällen, in denen die Verbindungsklassen den Ribose-Bestandteil enthalten, sind die 2'- oder 3'-Hydroxylgruppen des Ribose-Ringes substituiert. Solche Derivate können selbst die biologisch aktive chemische Einheit umfassen, verwendbar in der Behandlung von Hypertonie und Herzmuskel-Ischämie und als kardioprotektive und antilipolytische Mittel, oder sie können als Prodrugs zu solchen biologisch aktiven Verbindungen fungieren, die daraus unter physiologischen Bedingungen gebildet werden.
Als repräsentative Verbindungen dieser Erfindung sind einbezogen: (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl- 2-[6-[1-(5-chlorpyridin-2-yl)-pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(R)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-brompyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-(6-(1-(4-nitrophenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino)-purin-9-yl)tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-(5'-trifluormethyl-3,4,5,6-tetrahydro-2H-[1,2']bipyridinyl-3-ylamino)-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-(phenylpyrrolidin-3(S)-ylamino)-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-(1-pyridin-2-ylpyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(4-chlorphenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]- tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-methylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-thiophen-2-ylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-methylmercaptopyridin-2-yl) pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(6-methoxypyrimidin-4-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(6-chlorpyrimidin-4-yl)pyttolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl -2-[6-[1-(6-chlorpyridazin-3-yl)pyrrolidin-3-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Methoxymethyl-2-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyttolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (1S,2R,3S,4R)-2,3-Dihydroxy-4-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyttolidin-3-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-carbonsäureethylamid, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)piperidin-4-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-l,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-((3S)-pyttolidin-3-ylamino)-purin-9-yl] cyclopentan-1,2-diol-dihydrochlorid, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)pyttolidin-3-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyttolidin-3(R)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol,
(1R,2S,3R,5R)-S-Hydroxymethyl-3-[6-((3R)-pyrrlidin-3-ylamino)-purin-9-yl] cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyttolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, 4(R)-1-Benzyl-4-[9-((1R,2S,3R,5R)-1,2-dihydroxy-5-hydroxymethylcyclopent-3-yl)-9H-purin-6-ylamino]pyttolidin-2-on-hydrochlorid, (1R,2S,3R,5S)-5-Methyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Brompyridin-2-yl)pyttolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Chlorpyridin-2-yl)pyttolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-S-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)pyttolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, 4(S)-1-Benzyl-4-[9-((1R,2S,3R,5R)-1,2-dihydroxy-5-hydroxymethylcyclopent-3-yl)-9H-purin-6-ylamino]pyttolidin-2-on-hydrochlorid, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(chinolin-3-yl)pyttolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4,5-Bistrifluorpyridin-2-yl)pyttolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(phenyl)-pyttolidin- 3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, 4-[3(S)-[9-((1R,2S,3R,5R)-1,2-Dihydroxy-5-hydroxymethylcyclopent-3-yl)-9H-purin-6-ylamino]pyrrolidin-lyl]benzonitril, (1R,2S,3R,5R)-S-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(isochinolin-l-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Bromchinolin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Chlorphenyl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlor-5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Isopropoxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin2-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Isopropoxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin2-yl)pynolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyridazin-3-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-(6-methoxypyrtmidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyridazin-3-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-(-[6-[1-(4-Trifluormethylphenyl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl] -5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Brompyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-(6-[1-(5-Chlorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-S-Methoxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylphenyl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Chlorphenyl)pyrrolidin-3(S)-ylamino] -purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlorphenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlorphenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-phenylpyrrolidin-3-(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-Benzyl-pyrrolidin-3(S)-ylamino)purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-Benzyl-pyrrolidin-3(S)ylamino)purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1S,2R,3S,4R)-2,3-Dihydroxy-4-{6-[1-(5-trifluormethyl-pyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl} cyclopentancarbonsäure-1(S)-methylpropylamid und (1S,2R,3S,4R)-2,3-Dihydroxy-4-{6-[1-(5-trifluormethyl-pyridin-2-yl)-pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl}cyclopentancarbonsäure-1(R)-methylpropylamid.
Eine bevorzugte Klasse von Verbindungen dieser Erfindung ist durch Formel I beschrieben, wobei:
K ist N, T ist Hydroxymethyl ode Methoxymethyl, A und B sind Hydroxy, X ist
und n + p ist 3 oder 4 oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon. Als repräsentative Verbindungen dieser bevorzugten Klasse von Verbindungen sind einbezogen: (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-chlorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]- tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(R)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-S-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-S-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-brompyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-S-Hydroxymethyl-2-(6-(1-(4-nitrophenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino) – purin-9-yl) tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-S-Hydroxymethyl-2-[6-(5'trifluormethyl-3,4,5,6-tetrahydro-2H-[1,2']-bipyridinyl-3-ylamino)-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-(phenylpyrrolidin-3(S)-ylamino)-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-(1-pyridin-2-ylpyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-S-Hydroxymethyl -2-[6-[1-(4-chlorphenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]- tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-methylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-thiophen-2-ylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-methylmercaptopyridin-2-yl)-pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-S-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(6-methoxypyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-S-Hydroxymethyl -2-[6-[1-(6-chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]- tetrahydrofuran-3,4- diol, (2R,3R,4S,5R)-S-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(6-chlorpyridazin-3-yl)pyrrolidin-3-ylamino]-purin-9-yl]- tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Methoxymethyl-2-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)piperidin-4-ylamino]purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-((3S)-pyrrolidin-3-ylamino)-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol-dihydrochlorid, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)pyrrolidin-3-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-l,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(R)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-((3R)-pyrrolidin-3-ylamino)-purin-9-yl] cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Brompyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Chlorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-l,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(chinolin-3-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4,5-Bistrifluorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin2-yl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-S-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(phenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, 4-[3(S)-[9-((1R,2S,3R,5R)-1,2-Dihydroxy-5-hydroxymethylcyclopent-3-yl)-9H-purin-6-ylamino]pyrrolidin-l-yl]benzonitril, (1R,2S,3R,5R)-S-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(isochinolin-l-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Bromchinolin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Chlorphenyl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlor-5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyridazin-3-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-(6-methoxypyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyridazin-3-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Trifluormethylphenyl)– pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Brompyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Chlorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-S-Methoxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylphenyl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Chlorphenyl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlorphenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlorphenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-phenylpyrrolidin-3-(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-Benzyl-pynolidin-3(S)-ylamino)purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol und (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-Benzyl-pyrrolidin-3(S)ylamino)purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol.
Eine weitere bevorzugte Klasse von Verbindungen dieser Erfindung ist durch Formel I beschrieben, wobei
Q ist CH₂,
K ist N, T ist
wobei R₁ Teich H und R₂ Nieder-Alkyl ist
A und B sind Hydroxy,
und n + p ist 3 oder 4, oder pharmazeutisch annehmbare Salze hiervon.
Als repräsentative Verbindungen von dieser weiteren bevorzugten Klasse von Verbindungen sind einbezogen: (1S,2R,3S,4R)-2,3-Dihydroxy-4-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-carbonsäureethylamid, (1S,2R,3S,4R)-2,3-Dihydroxy-4-{6-[1-(5-trifluormethyl-pyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl}-cyclopentan-carbonsäure-1(S)-methylpropylamid und (1S,2R,3S,4R)-2,3-Dihydroxy-4-{6-[1-(5-trifluormethyl-pyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl}-cyclopentan-carbonsäure-1(R)-methylpropylamid.
Eine bevorzugtere Klasse von Verbindungen dieser Erfindung ist durch Formel I beschrieben, wobei:
Q ist CH₂,
K ist N,
T ist Hydroxymethyl oder Methoxymethyl,
A und B sind Hydroxy,
und n + p ist 3 oder 4,
oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Als repräsentative Verbindungen von dieser bevorzugteren Klasse von Verbindungen sind einbezogen: (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)piperidin-4-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-S-Hydroxymethyl-3-[6-((3S)pyrrolidin-3-ylamino)-purin-9-yl] cyclopentan-1,2-diol-dihydrochlorid, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)pyrrolidin-3-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(R)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-((3R)-pyrrolidin-3-ylamino)-purin-9-yl] cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R) -3-[6-[1-(5-Brompyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl] -5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5- Chlorpyridin-2-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(pyridin-2-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(chinolin-3-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)-pynolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4,5-Bistrifluorpyridin-2-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluonnethylpyridin2-yl)pynolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(phenyl)-pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, 4-[3(S)-[9-((1R,2S,3R,5R)-1,2-Dihydroxy-5-hydroxymethylcyclopent-3-yl)-9H-purin-6-ylamino]pynolidin-l-yl]benzonitril, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(isochinolin-1-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Bromchinolin-2-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Chlorphenyl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlor-5-trifluormethylpyridin-2-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyridazin-3-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-(6-methoxypyrimidin-4-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyridazin-3-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Trifluonnethylphenyl)– pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Brompyridin-2-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Chlorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1A,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluonnethylphenyl)pynolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Chlorphenyl)pynolidin-3(S)-ylamino] -purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3- [6-[1-(3-Chlorphenyl)-pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5- methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlorphenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-phenylpynolidin-3-(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-Benzyl-pynolidin-3(S)-ylamino)purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol und (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-Benzyl-pyrrolidin-3(S)ylamino)purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol.
Als bevorzugteste Verbindungen der vorliegenden Erfindung sind einbezogen: (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pynolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-S-Methoxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol und (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol.
Verbindungen gemäß dieser Erfindung können durch bekannte Methoden oder in Übereinstimmung mit den unten beschriebenen Reaktionssequenzen hergestellt werden. Die Ausgangsmaterialien, die für die Herstellung der Verbindungen dieser Erfindung verwendet werden, sind bekannt oder kommerziell erhältlich oder können mit bekannten Methoden oder durch die hier beschriebenen spezifischen Reaktionsschemata hergestellt werden.
Verbindungen der Formel I, wobei K = N ist, Q = O ist und T=R₃O-CH₂ ist, können hergestellt werden durch Reaktion von kommerziell erhältlichem 6-Chlorpurin Ribosid mit verschiedenen unsubstituierten Alkyl, Aralkyl, Aryl, substituiertes Aryl, Heterocyclyl oder substituiertes Heterocyclyl-Azacycloalkylaminen oder geschützten Derivaten davon (nachfolgend „geeignete Startamine"), wie nachfolgend beispielhaft aufgeführt.
Verbindungen der Formel I, wobei K = N ist, Q = O ist und T=R₁R₂N-C=O ist werden ähnlich hergestellt, beginnend mit dem Produkt des Reaktionsschemas A. In dieser Reaktion wird 6-Chlorpurin-Ribosid, wobei die 2'- und 3'-Hydroxylgruppen des Riboserings geschützt sind, mit einem Oxidant behandelt, zum Beispiel einer Jones-Reagenz, und das Produkt wird entweder mit Dicyclohexylcarbodümid (DCC) oder BOP-Cl in Gegenwart eines ausgewählten Amins säurebehandelt, wobei das 5'-Alkylcarboxamid-Derviat entsteht.
REAKTIONSSCHEMA A
(P = Schutzgruppe)
Geeignete Ausgangsmaterialien für Verbindungen gemäß Formel I, wobei K = N ist, Q = CH₂ ist und T = R₁R₂N-C=O ist, können hergestellt werden wie bei Chen et al., Tetrahedron Letters 30: 5543–46 (1989) beschrieben. Alternativ kann Reaktionsschema B verwendet werden, um solche Ausgangsmaterialien herzustellen. Bei der Durchführung von Reaktionsschemata B wird das 4-Ethylcarboxamid-Derviat von 2,3-Dihydroxycyclopentylamin, das hergestellt wird wie bei Chen et al., beschrieben, mit 3-Amino-2,4-dichlorpyrimidin umgesetzt. Das Produkt dieser Anfangsreaktion wird anschließend mit einem Aldehydylamidin-Acetat, zum Beispiel Formamidin-Acetat, in Dioxan und Methoxyethanol während einer Zeit, die ausreichend ist, um den Ringschluß zu bewirken (von ca. 30 min. bis ca. 4 Stunden), erhitzt, wobei ein Produkt entsteht, das günstigsterweise mit geeigneten Startaminen, wie nachfolgend beschrieben, umgesetzt wird, um die Verbindungen dieser Erfindung zu ergeben. Die Reaktionsreihenfolge ist nicht kritisch. Zum Beispiel könnte das Zwischenprodukt, das im Reaktionsschema B gebildet wird, mit einem geeigneten Startamin umgesetzt werden, gefolgt vom Ringschluß, um das gewünschte Endprodukt zu ergeben.
REAKTIONSSCHEMA B
Zahlreiche Amine, die bei der Bildung der Verbindungen dieser Erfindung verwendbar sind, können mit Methoden gemäß dem Stand der Technik oder mit den hier beschriebenen Methoden hergestellt werden.
Diastereomere Mischungen von Verbindungen oder Zwischenverbindungen, die zur Herstellung von Verbindungen der vorliegenden Erfindung verwendbar sind, können in einzelne racemische oder optisch aktive Enantiomere durch bekannte Methoden aufgetrennt werden, beispielsweise durch Chromatographie, fraktionelle Destillation oder fraktionelle Kristallisation von d- oder 1-(Tartrat, Dibenzoyltartrat, Mandelat oder Kampfersulfonat)salzen.
Die N6-substituierten Adenosine und carbocyclischen Adenosine der Erfindung können durch Reaktion von 6-Chlorpurin-Ribosid oder den Produkten der Reaktionsschemata A oder B mit zahlreichen Startaminen gebildet werden, wie in Reaktionsschema C beispielhaft aufgeführt. REAKTIONSSCHEMA C
worin X' und Y' = X und Y wie vorstehend definiert oder geschützte Derivate davon sind.
Die N6-substituierten N-Alkyl-deazaaristermycine der Erfindung können wie in Reaktionsschema D gezeigt, hergestellt werden.
REAKTIONSSCHEMA D
Als Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung, die als Prodrugs fungieren können, werden auch diejenigen Verbindungen mit einbezogen, worin die Hydroxylgruppe am Ribose- oder Cyclopentan-Ring mit den Gruppen R' und R" wie vorstehend für Formel I definiert, substituiert sind. Diese können durch bekannte Methoden hergestellt werden und sind beispielhaft im nachfolgenden Reaktionsschema E aufgeführt.
REAKTIONSSCHEMA E
Die Behandlung von Dihydroxy-Verbindungen mit einem Chlorformat-Ester in Gegenwart einer organischen Base, beispielsweise Triethylamin, wird das korrespondierende bis-Carbonat ergeben. Das Alkoxymethylenacetal kann durch Behandlung mit dem korrespondierenden Orthoester in Gegenwart einer katalytischen Menge von p-Toluolsulfonsäure hergestellt werden. Das Carbonat ist erhältlich durch die Behandlung mit 1,1'Carbonyldümidazol und das Thiocarbonat durch die Behandlung mit Thiocarbonyldümidazol. Die Alkyl- und Dialkylcarbamoyl-Derivate können jeweils durch Behandlung mit dem korrespondierenden Alkylisocyanat oder Dialkylcarbamoylchlorid in Gegenwart einer organischen Base hergestellt werden.
Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung, worin K = N → O, d. h. die N-Oxide können durch Oxidation des entsprechenden Adenosin- oder carbocyclischen Adenosins mit bekannten Methoden hergestellt werden, beispielsweise durch Behandlung mit Waserstoffperoxid in Essigsäure.
Die 2'-O-Alkyl-Derivate können mit bekannten Methoden hergestellt werden, beispielsweise durch Reaktion eines geeigneten Startamins mit 6-Chlor-9-(2'-O-methylb-D-ribofuranosyl)-9H-purin.
Funktionelle Gruppen der Ausgangsverbindungen und Zwischenverbindungen, die zur Herstellung der Verbindungen der Erfindung verwendet werden, können durch gewöhnliche Schutzgruppen gemäß dem Stand der Technik geschützt werden. Konventionelle Schutzgruppen für funktionelle Amino- und Hydroxylgruppen sind beispielsweise in T. W. Greene, „Protective Groups in Organic Synthesis", Wiley, New York (1984) beschrieben.
Hydroxylgruppen können als Ester, zum Beispiel als Acylderivate, oder in der Form eines Ethers geschützt werden. Hydroxylgruppen an benachbarten Kohlenstoffatomen können vorteilhafterweise in der Form von Ketalen oder Acetalen geschützt werden. In der Praxis werden die benachbarten 2'- und 3'-Hydroxylgruppen der Ausgangsverbindungen in den Reaktionsschemata A und B günstigsterweise durch die Bildung von 2'-, 3'-Isopropyliden-Derivaten geschützt. Die freien Hydroxyle können beispielsweise durch saure Hydrolyse wieder hergestellt werden oder durch andere Solvolyse oder Hydrogenolyse-Reaktionen, wie sie in der organischen Chemie gewöhnlich verwendet werden.
Im Anschluss an die Synthese werden die Verbindungen der Erfindung typischerweise durch Mitteldruck-Flüssigchromatographie (MPLC), auf einem Chromatotron, radial beschleunigter Dünnschichtchromatographie, Flash-Chromatographie oder Säulenchromatogaphie über Kieselgel oder einer Florisil-Matrix gereinigt, mit anschließender Kristallisation. Für Verbindungen gemäß Formel I, wobei K = N ist, Q = 0 ist und T=R₃O-CH₂ ist, beziehen typische Lösungsmittelsysteme Chloroform : Methanol, Ethylacetat : Hexan und Methylenchlorid : Methanol mit ein. Die Eluate können aus Methanol, Ethanol, Ethylacetat, Hexan, Chloroform und dergleichen kristallisiert werden.
Für Verbindungen gemäß Formel I, wobei K = N ist, Q = O ist und T = R₁R₂N-C=O ist, beziehen typische Lösungsmittelsysteme Chloroform : Methanol mit ein. Beispielsweise können die Eluate aus 50 bis 100% Ethanol (wässrig) kristallisiert werden.
Für Verbindungen gemäß Formel I, wobei Q = CH₂ ist, K = N oder CH ist und T = R₁R₂N-C=O ist, beziehen typische Lösungsmittelsysteme Methylenchlorid : Methanol mit ein. Beispielsweise können die Eluate aus Ethylacetat mit oder ohne Methanol, Ethanol oder Hexan auskristallisiert werden.
Verbindungen, die eine Neutralisation erfordern, können mit einer milden Base wie Natriumbicarbonat neutralisiert werden mit nachfolgendem Waschen mit Methylenchlorid und Lauge. Produkte, die als Öl gereinigt sind, werden manchmal mit Hexan/Ethanol vor der Endkristallisation trituriert (triturated).
Das Verfahren der vorliegenden Erfindung ist weiter dargestellt und erklärt durch die nachfolgenden Beispiele.
Beispiel 1
Herstellung von 5'N-ethyl-2',3'isopropyliden-N⁶-chloradenosin-5'-uronamid
Schritt 1: N⁶-Chlor-2',3'-isopropylidenadenosin
6-Chlorpurtn-ribosid (31,5 g), Triethylorthoformat (73 mL) und TsOH (19,8 g) werden in 600 mL Aceton für 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird im Vakuum eingeengt, mit Ethylacetat vereinigt und mit gesättigter NaHCO₃-Lösung und Lauge gewaschen, getrocknet (Na₂SO₄) und eingeengt, wobei N⁶-Chlor-2',3'isopropylidenadenosin als weißer Feststoff entsteht.
Schritt 2: N⁶-Chlor-2',3'-isopropylidenadenosin-5'-carbonsäure:
N⁶-Chlor-2',3'isopropylidenadenosin (4,5 g, 13, 8 mmol) und 4-Hydroxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidinyloxy-benzoat (4-Hydroxy-TEMP0-benzoat) (0,0381 g, 0,14 mmol) werden in Acetonitril vereinigt, 5% NaHCO₃ (87%) werden der Reaktionsmischung zugegeben und Natriumbromithydrat (10,41 g, 55,1 mmol) werden portionsweise bei 0 bis 5°C zugeführt. Anschließend lässt man die Reaktionsmischung auf Zimmertemperatur erwärmen und die Lösung wurde kräftig für ungefähr 3 Stunden gerührt. 10% Weinsäurelösung werden hinzugefügt und die wässrige Schicht abgetrennt und mit Ethylacetat (3x) ausgeschüttelt. Die vereinigten organischen Phasen werden mit 5% Natriumbicarbonatlösung (3x) gewaschen. Die basischen Phasen werden vereinigt und mit konzentrierter Salzsäure auf pH 3 rückversäuert. Die wässrigen Phasen werden mit Ethylacetat (3x) ausgeschüttelt. Die vereinigten organischen Phasen werden anschließend mit Lauge gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Filtrat wird zu einem amorphen weißen Feststoff eingeengt, mit 3 Teilen Toluol co-verdampft und im Vakuum getrocknet, woraus sich N⁶-Chlor-2',3'-isopropylidenadenosin-5'-carbonsäure ergibt.
Schritt 3: 5'-N-Ethyl-2',3'-isopropyliden-N⁶-chloradenosin-5'-uronamid
N⁶-Chlor-2',3'-isopropylidenadenosin-5'-carbonsäure (4,4 g, 12,9 mmol), Triethylamin (1,64 mL, 11,7 mmol), Isopropenylchlorformat (1,28 mL, 11,7 mmol) und Methylenchlorid (50 mL) werden unter Argon bei –10°C vereinigt und für ungefähr 2 Minuten gerührt. Ethylamin (0,77 mL, 11,7 mmol) wird der Reaktionsmischung hinzugefügt und das Rühren wird für eine zusätzliche Minute fortgesetzt. Die Reaktionsmischung wird zwischen Methylchlorid und gesättigtem Natriumbicarbonat aufgeteilt. Die wässrigen Phasen werden mit Methylenchlorid (3x) gewaschen. Die vereinigten organischen Phasen werden mit Lauge gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet, gefiltert, im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Flash-Chromatographie auf Kieselgel gereinigt, Elution mit 3% McOH/CHCl₃ ergibt 5'-N-Ethyl-2',3'-isopropyliden-NT⁶-chloradenosin-5'-uronamid, 1H NMR (300 MHz, (CDCl3) d 8,75 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 6,20 (d, 1H), 5,50 (dd, 2H), 4,73 (d, 1H), 3,01 (m, 2H), 1,63 (s,1H), 1,41 (s, 3H), 0,77 (t, 3H).
Beispiel 2
Herstellung von (1S,2R,3S,4R)-2,3-Dihydroxy-4-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]cyclopentan-carbonsäure-isopropylamid
Schritt (1)
15,5 g (54,6 mmol) N-BOC-5,6-Dimethylendioxy-2-azabicyclol[2.2.1]heptan-3-on (i) (hergestellt wie in Schritt (6) des nachfolgenden Beispiels 3) werden in 16 ml Isopropylamin aufgelöst und die Mischung bei Raumtemperatur für ungefähr 2 Stunden gerührt. Die Mischung wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Chloroform azeotropiert, woraus sich ein weißer Feststoff ergibt. Dieser Feststoff wird in 52 ml Ethylacetat aufgelöst, die Lösung auf 0°C gekühlt und Hydrogenchlorid-Gas in die Lösung unter Kühlung für ungefähr 15 Minuten eingeblasen. Die Lösung wird anschließend bei Raumtemperatur für ungefähr 4 Stunden gerührt. Die Lösung wird im Vakuum eingedampft und mit Methanol, anschließend mit Chloroform azeotropiert, woraus sich das Aminprodukt als Hydrochloridsalz ergibt. Das Hydrochloridsalz wird zwischen Chloroform unter Natriumbicarbonatlösung aufgeteilt und die organische Phase mit Lauge gewaschen, getrocknet, filtriert und ein Äquivalent von Benzoesäure hinzugegeben. Das Lösungsmittel wird im Vakuum entfernt und der Rückstand in Ether trituriert, woraus sich das gewünschte Amin (ii), wie obenstehend abgebildet, als Benzoatsalz ergibt, Smp. 183–184°C.
Schritt (2): Herstellung von
54 mmol des Produkts (ii) aus Beispiel 2, Schritt (1) werden in 110 ml n-Butanol und 9,7 g 5-Amino-4,6-dichlorpyrimidin aufgelöst, anschließend wurden 23 ml Triethylamin hinzugegeben und die Mischung und der Rückfluss für ungefähr 18 Stunden erhitzt. Die Mischung wird gekühlt, verdünnt mit Chloroform und gesättigter Ammoniumchloridlösung. Die wässrige Phase wird mit 3-facher Menge an Chloroform ausgeschüttelt, dann 2 mal mit 10% Isopropylalkohol/Chloroform. Die organischen Phasen werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und zu einem Öl (iii) eingeengt, das ohne weitere Behandlung für den nächsten Schritt verwendet wird.
Schritt (3): Herstellung von
Das Produkt (iii) aus Beispiel 2, Schritt (2) wird in 150 ml n-Butylacetat aufgenommen und 11,2 g Formamidinacetat werden hinzugeführt. Die Mischung wird bei Rückfluss unter Argon für ungefähr 9 Stunden erhitzt, wobei drei 5,56 g-Portionen von Formamidinacetat nach 2, 4 und 6 Stunden hinzugefügt werden. Die Mischung wird gekühlt, verdünnt mit Ethylacetat, gewaschen mit Lauge, Wasser, Lauge, getrocknet über Natriumsulfat, filtriert, eingeengt im Vakuum und der Rückstand mit Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit 40–80% Ethylacetat in Hexan, wobei sich das gewünschte Chlorpurin-Produkt (iv) wie oben abgebildet ergibt.
Schritt (4): Herstellung von
400 mg (1,05 mmol) des Produkts (iv) aus Beispiel 2, Schritt (3), 0,22 mL (1,57 mmol) Triethylamin und 270 mg (1,16 mmol) 2-[(3S)-3-Aminopyrrolidin-1-yl]-4-trifluormethylpyridin (hergestellt gemäß Beispiel 3, Schritte 1 bis 5) wurden zusammen in 3 ml Ethanol aufgelöst und die Lösung bei Rückfluss unter Argon für ungefähr 20 Stunden erhitzt. Die Mischung wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand zwischen Chloroform und gesättigter Natriumbicarbonatlösung aufgeteilt. Die wässrige Phase wird mit 4 Teilen Chloroform ausgeschüttelt und die vereinigten organischen Phasen über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird mit Flash-Chromatographie gereinigt, wobei die Probe in Methylenchlorid/Ethylacetat (1 : 1) aufgetragen wird und die Elution erfolgt mit 0 bis 3% Methanol in Ethylacetat, woraus sich das oben abgebildete Produkt (v) ergibt.
Schritt (5):
Das Produkt aus Beispiel 2, Schritt (4) wird in 2 ml Methanol/Tetrahydrofuran (1 : 1) aufgelöst und 3,3 ml 1,5 N wässrige Salzsäure wird hinzugegeben und die Lösung bei Raumtemperatur für ungefähr 20 Stunden gerührt. Die Mischung wird im Vakuum eingedampft. Dieser dabei erhaltene Rückstand wird in 10 ml 15% Isopropylalkohol/Chloroform, 1 ml 1 N Natriumhydroxidlösung und 9 ml gesättigte Natriumbicarbonatlösung aufgenommen. Die Phasen werden getrennt und die wässrige Phase mit 4 × 5 ml-Portionen von 15% Isopropylalkohol/Chloroform ausgeschüttelt. Die vereinigte organische Phase wird über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingedampft, woraus sich (1S,2R,3S,4R)-2,3-Dihydroxy-4-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]cyclopentan-carbonsäure-isopropylamid ergibt, Smp. 227–228°C.
Beispiel 3
Herstellung von (1R,2S,3R,5R)-S-Methoxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol
Schritt (1):
20 g (232 mmol) von (3S)-(-)-3-Aminopyrrolidin und 26 ml (255 mmol, 1,1 eq) Benzaldehyd werden in 250 ml Toluol vereinigt und für ungefähr 4,5 Stunden unter Rückfluss gehalten, wobei Wasser mit einer Dean-Stark-Falle entfernt wird. Die Mischung wird auf 0°C gekühlt und 55,7 g (255,2 mmol, 1,1 eq) Di-tert-butyldicarbonat werden hinzugefügt, anschließend wird bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wird im Vakuum eingeengt, mit KHSO₄-Lösung gerührt und 3 × mit Ether ausgeschüttelt. Die wässrige Phase wird alkalisch gemacht und mit Methylenchlorid ausgeschüttelt. Die organische Phase wird mit Lauge gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingedampft, wobei sich N1-BOC-(3S)-(–)-3-Aminopyrrolidin ergibt.
Schritt (2):
34,25 g (183,9 mmol) des Produktes aus Beispiel 3, Schritt (1) werden in 200 ml CH₂Cl₂ aufgelöst und 25 ml (183,9 mmol, 1 eq) Triethylamin werden hinzugefügt. Unter Stickstoffatmosphäre werden 34,7 ml (367,8 mmol, 2 eq) Essigsäureanhydrid tropfenweise hinzugegeben, die Mischung bei Raumtemperatur gerührt und mit NaHCO-₃ Lösung/CH₂Cl₂ getrennt. Die organische Phase wird mit Lauge gewaschen, über MgSO₄ getrocknet, gefiltert, im Vakuum verdampft und das Produkt wird mit Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit 2 bis 8% Methanol in Methylen, woraus sich N1-BOC-(3S)-(–)-3-Acetylaminpyrrolidin ergibt.
Schritt (3):
39,2 g (171,7 mmol) des Produktes aus Beispiel 3, Schritt (2) werden in 400 ml CH₂Cl₂ aufgelöst und 26,46 mmol (343,4 mmol, 2 eq) Trifluoressigsäure (nachfolgend „TFA) werden tropfenweise bei 0°C unter Stickstoffatmosphäre hinzugegeben. Die Mischung wird auf Rückfluss erhitzt, weitere 26 ml, dann nochmals 10 ml TFA hinzugegeben, für ungefähr weitere 3 Stunden unter Rückfluss gehalten, anschließend unter Hochvakuum eingedampft, um TFA zu entfernen. Der Rückstand wurde mit Amberlite IRA-400 basisches Harz (nachfolgend „basisches Harz") gerührt, filtriert, das Filtrat in Methanol aufgelöst, langsam durch das basische Harz filtriert und das Filtrat wurde eingedampft; woraus sich (3S)-(–)-3-Acetylaminopyrrolidin ergibt.
Schritt (4):
4 g (31,2 mmol) des Produktes aus Beispiel 3, Schritt (3) und 5,19 (40,6 mmol) 2-Chlor-5-trifluormethylpyridin werden im 50 ml Ethanol vereinigt und 13 ml (93,6 mmol, 3 eq) Triethylamin werden hinzugefügt. Die Mischung wird für ungefähr 18 Stunden unter Rückfluss gehalten, im Vakuum eingeengt und der Rückstand mit Methylenchlorid und Natriumbicarbonatlösung aufgetrennt. Die organische Phase wird mit Lauge gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert, im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit 2 bis 5% Methanol in Methylenchlorid, woraus sich als Feststoff 2-[(3S)-3-Acetylaminopyrrolidin-l-yl]-5-trifluormethylpyridin ergibt.
Schritt (5):
7,52 g (27,5 mmol) des Produkts aus Beispiel 3, Schritt (4) werden mit 75 ml 6Nwässriger Salzsäure vereinigt und die Mischung für ungefähr 18 Stunden auf Rückfluss gehalten. Die Mischung wird auf Raumtemperatur gekühlt, mit festem Natriumbicarbonat neutralisiert, mit verdünnter Natriumhydroxidlösung und Methylenchlorid aufgeteilt. Die organische Phase wird mit Lauge gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingedampft, woraus sich 2-[(3S)-3-Aminopyrrolidin-l-yl]-5-trifluormethylpyridin ergibt.
Schritt (6):
22,5 g (0,123 mol)(–)-5,6-Dimethylendioxy-2-azabicyclol[2.2.1]heptan-3-on (vi), 1,5 g 4-Dimethylaminopyridin, nachfolgend "DMAP", 12,4 g Triethylamin und 37,5 g Di-tertbutyldicarbonat werden in Methylenchlorid vereinigt und bei Raumtemperatur für ungefähr 18 Stunden geführt. Die Mischung wird mit 1 N Salzsäure, 5% Natriumbicarbonatlösung und Lauge gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert, im Vakuum eingeengt und der Rückstand aus Isopropylalkohol rückkristallisiert, woraus sich N-BOC-5,6-Dimethylendioxy-2-azabicyclol[2.2.1]heptan-3-on (i) ergibt.
Schritt (7):
35,6 g (0,125 mol) des Produktes (i) aus Beispiel 3, Schritt (6) werden mit 400 ml Methanol vereinigt. Unter schnellem Rühren und Kühlen mit einer Argonspülung werden insgesamt 23,8 g (0,63 mol) Natriumborhydrid in drei gleichen Teilen in einem Zeitraum von ungefähr 2 Stunden hinzugegeben. Die Mischung wird im Vakuum eingeengt und mit 200 ml Wasser und 300 ml Ethylacetat aufgetrennt. Die wässrige Phase wird 2 weitere Male mit Ethylacetat ausgeschüttelt und die vereinigte organische Lösung mit Wasser und Lauge gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt, woraus sich N-BOC-1-Amino-2,3-dimethylendioxy-4-hydroxymethylcyclopentan (vii) ergibt.
Schritt (8):
50 g des Produkts (vii) aus Beispiel 3, Schritt (7) werden in 150 ml Benzol vorgelegt. 8,8 ml Methyliodid und 33 g Silberoxid werden hinzugegeben und die Mischung für ungefähr 18 Stunden unter Rückfluss gehalten. Weitere 25 g Silberoxid und weitere 50 ml Methyliodid werden portionsweise über ungefähr 6 Stunden hinzugegeben und die Mischung für ungefähr 18 Stunden unter Rückfluss gehalten. Die Mischung wird durch Celite filtriert und der Filterkuchen mit Ethylacetat gewaschen. Das vereinigte Filtrat wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand aus Hexan auskristallisiert, woraus sich die gewünschte Methoxymethylverbindung (viii), wie oben abgebildet, ergibt.
Schritt (9):
31,6 g des Produkts (viii) aus Beispiel 3, Schritt (8) werden unter Argon in 250 ml warmem wasserfreiem Ethylacetat aufgelöst. Die Lösung wird in einem Eisbad gekühlt und Chlorwasserstoffgas wird durch die Lösung für ungefähr 6 Minuten geleitet. Die Mischung lässt man auf Raumtemperatur erwärmen und rührt sie für ungefähr 3 Stunden, anschließend wird im Vakuum eingeengt, woraus sich das gewünschte Aminhydrochlorid (ix), wie oben abgebildet, ergibt.
Schritt (10)
24,2 g des Produkts aus (ix), Beispiel 3, Schritt (9) und 42,8 g Natriumbicarbonat werden in 100 ml n-Butanol unter Argon vereinigt und 20,1 g 5-Amino-4,6-dichlorpyrimidin werden hinzugegeben. Die Mischung wird unter Rückfluss für ungefähr 20 Stunden erhitzt, anschließend im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird mit Ethylacetat und Wasser aufgetrennt und die Ethylacetatphase mit Lauge gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird in 30% Ethylacetat in Hexan gelöst, über eine große Flash-Kieselgel-Waschsäule geleitet und die Säule wird mit 50% Ethylacetat/Hexan gewaschen und die vereinigten Filtrate werden im Vakuum eingeengt, woraus sich das gewünschte Pyrimidinylaminocyclopentan-Produkt (xi), wie oben abgebildet, ergibt.
Schritt (11):
26,7 g des Produkts (xi) aus Beispiel 3, Schritt (10) werden unter Argon mit 125 ml n-Butylacetat vereinigt. 33,5 g Formamidinacetat werden hinzugegeben und die Mischung unter Rückfluss für ungefähr 3 Stunden erhitzt, bis die Dünnschichtchromatographie zeigt, dass die Reaktion vollständig ist. Die Mischung wird gekühlt, zwischen Ethylacetat und Lauge aufgeteilt und die Ethylacetatphase über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde mit Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit 30 bis 50% Ethylacetat in Hexan, woraus sich das Chlorpurin-Produkt (xii), wie oben abgebildet, ergibt.
Schritt (12): Herstellung von
7,75 g (22,9 mmol) des Produkts (xii) aus Beispiel 3, Schritt (11) und 6,35 g (27,4 mmol) 2-[(3S)-3-Aminopyrrolidin-1-yl]-5-trifluormethylpyridin werden in 20 ml Ethanol vereinigt und 6,33 ml Triethylamin hinzugefügt. Die Mischung wird in einem geschlossenen Gefäß bei 105°C für ungefähr 4 Stunden erhitzt. Die Mischung wird gekühlt, im Vakuum eingedampft und mit Methylchlorid und Natriumbicarbonatlösung aufgetrennt. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert, im Vakuum eingeengt und der Rückstand mit Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit 4% Methanol in Methylenchlorid, woraus sich das angezeigte Produkt (xiii) ergibt.
Schritt (13):
10,81 g (20,3 mmol) des Produkts (xiii) aus Beispiel 3, Schritt (12) werden mit 90 ml Trifluoracetat und 10 ml Wasser vereinigt, die Mischung wird bei Raumtemperatur für ungefähr 30 Minuten gerührt. Das TFA wird unter Hochvakuum abgedampft und der Rückstand mit Methylenchlorid und Natriumbicarbonatlösung aufgetrennt. Die Methylenchloridlösung wird mit Natriumbicarbonatlösung und Lauge gewaschen, Isopropylalkohol wird hinzugefügt und die Lösung über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert, im Vakuum eingeengt und der Rückstand einer Flash-Chromatographie unterzogen, Elution mit 5 bis 10% Methanol in Methylenchlorid. Die geeigneten Fraktionen werden gesammelt, eingeengt und der Rückstand aus Acetonitril kristallisiert, woraus sich (1R,2S,3R,5R)-S-Methoxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol ergibt, Smp. 166–168°C.
Beispiel 4
Herstellung von (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(R)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol
267 mg 2-[(3R)-3-Aminopyrrolidin-1-yl]-5-trifluormethylpyridin, 331 mg 6-Chlorpurinribosid, 233 mg Triethylamin und 0,5 mL Ethanol werden vereinigt und in einem geschlossenen Gefäß bei 100°C für ungefähr 5 Stunden erhitzt. Die Mischung wird gekühlt und zwischen Methylenchlorid (mit etwas hinzugefügtem Isopropylalkohol) und Natriumbicarbonat aufgeteilt. Die organische Phase wird mit Lauge gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, eingedampft und der Rückstand mit Flash-Chromatogaphie gereinigt, Elution mit 5% Methanol in Methylenchlorid, woraus sich (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(R)-ylamino]purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol als das Semihydrat ergibt, Smp.166–170°C.
Beispiel 5
Herstellung von (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Trifluormethylphenyl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol
Schritt (1):
1,00 g (11,6 mmol) 3(S)-(-)-3-Aminopyrrolidin, 1,35 ml (9,66 mmol) 4-Brombenzotrifluorid, 2,69 g (29 mmol) Natrium-tert-butoxid und 1,01 g (1,16 mmol) PdCl₂(P[o-tolyl]₃)₂, hergestellt gemäß US-Patent Nr. 4,196,135 werden in 30 ml Toluol vereinigt und die Mischung wird in einem geschlossenen Gefäß bei 100°C für ungefähr 40 Stunden erhitzt. Die Mischung wurde gekühlt, filtriert, im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit 10 : 1 bis 7 : 1 Methylenchlorid/Ethanol, woraus sich 1-(4-Trifluormethyl)phenyl-(3S)-pyrrolidin-3-ylamin ergibt.
Schritt (2):
Eine Lösung von 24,7 ml (0,61 mol) Methanol und 50 ml Ethylacetat werden unter Argon auf 0°C gekühlt. 43,3 ml (0,61 mol) Acetylchlorid werden portionsweise hinzugegeben und die Lösung lässt man über 45 Minuten sich auf Raumtemperatur erwärmen. Diese Lösung wird wiederum in Eis gekühlt und eine Lösung von 50,0 g N-BOC-1-Amino-2,3-dimethylendioxy-4-hydroxymethylcyclopentan (vii) in 100 ml Ethylacetat wird über einen Zeitraum von ungefähr 45 Minuten hinzugegeben. Die Lösung lässt man auf Raumtemperatur erwärmen, anschließend im Vakuum abdampfen, woraus sich das gewünschte Aminhydrochlorid (xiv), wie oben abgebildet, ergibt.
Schritt (3): Herstellung von
38,9 g des Produkts (xiv) aus Beispiel 5, Schritt (2) und 73 g Natriumbicarbonat werden in 150 mL l unter Argon vereinigt und die Mischung wird bei Raumtemperatur für ungefähr 30 Minuten gerührt. 34,2 g 5-Amino-4,6-dichlorpyrimidin werden hinzugegeben und die Mischung unter Rückfluss für ungefähr 19 Stunden gerührt. Die Mischung wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand in Ethylacetat und Wasser aufgenommen. Die wässrige Phase wird mit Ethylacetat ausgeschüttelt und die vereinigten organischen Phasen mit Lauge gewaschen, filtriert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wir mit Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit einem Gradienten von 30% bis 100% Ethylacetat in Hexan, woraus sich das gewünschte substituierte Chlorpyrimidin (xv), wie oben abgebildet, ergibt.
Schritt (4): Herstellung von
37,9 g des Produkts (xv) aus Beispiel s, Schritt (3) und 25,1 g Formamidinacetat werden in 250 mL n-Butylacetat vereinigt und die Mischung unter Argon für ungefähr 2 Stunden unter Rückfluss erhitzt, nach ungefähr 1 Stunde werden zusätzlich 12,5 g Formamidinacetat hinzugegeben und weitere 10 g nach ungefähr 1,5 Stunden. Die Mischung wird gekühlt, zwischen Ethylacetat und Lauge aufgetrennt, die Lauge mit 3 Teilen Ethylacetat ausgeschüttelt und die vereinigten organischen Phasen über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird durch Kristallisation aus Ethylacetat/Hexan gereinigt, woraus sich das oben abgebildete Chlorpurin (xvi) ergibt. Der Rückstand der konzentrierten Mutterlauge kann mit Flash-Chromatographie gereinigt werden, Elution mit 80 bis 100% Ethylacetat in Hexan, um die Rückgewinnung zu verbessern.
Schritt (5): Herstellung von
0,225 g (0,693 mmol) des Produkts (xvi) aus Beispiel 5, Schritt (4), 0,239 g (1,04 mmol) 1-(4-Trifluormethyl)phenyl-(3S)-pyrrolidin-3-ylamin, aus dem vorstehenden Schritt (1), und 0,582 g (6,93 mmol) Natriumbicarbonat werden in 20 ml Ethanol vereinigt und unter Rückfluss für ungefähr 60 Stunden erhitzt. Die Mischung wird filtriert, im Vakuum eingeengt und der Rückstand mit Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit einem Gradienten aus Methylenchlorid/Ethanol, 30 : 1 bis 10 : 1, woraus sich das Pyrrolidinylamin (xvii), wie oben abgebildet, ergibt.
Schritt (6):
0,234 g des Produkts aus Beispiel 5, Schritt (5) werden in 10 ml Trifluoressigsäure aufgelöst und die Lösung wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird im Vakuum eingedampft und der Rückstand mit Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit Methylenchlorid/Ethylacetat (10 : 1), woraus sich (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Trifluormethylphenyl)-pyyrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol ergibt, Smp. 111–114°C.
Beispiel 6 Herstellung von 4(S)-1-Benzyl-4-[9-((1R,2S,3R,5R)-1,2-dihydroxy-5-hydroxymethylcyclopent-3-yl)-9H-purin-6-ylamino]pyrrolidin-2-on
Schritt (1): Herstellung von
7,1 g (24,5 mmol) N-t-BOC-L-Asparaginsäure-β-t-butylester wird in 120 ml Tetrahydrofuran aufgelöst. Die Lösung wird bei 0°C gekühlt und 2,73 g (27 mmol) Triethylamin und anschließend 2,66 g (24,5 mmol) Ethylchlorformat werden hinzugegeben. Die Lösung wird für ungefähr 30 Minuten gerührt und eine Lösung aus 3,71 g (98,2 mmol) Natriumborhydrid in Wasser wird hinzugegeben. Die Mischung wird bei Raumtemperatur für ungefähr 17 Stunden gerührt, im Vakuum eingeengt und der Rückstand mit Ethylacetat verdünnt und die organische Phase mit 1N Salzäure, 10% Natriumcarbonat und Lauge gewaschen, anschließend über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert, im Vakuum eingeengt und der Rückstand durch Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit 30% bis 50% Ethylacetat in Hexan, woraus sich 3(S)-t-Butyl-3-BOC-amino-4-hydroxy-n-butanoat (xix) ergibt.
Schritt (2): Herstellung von
Eine Lösung von 0,73 g Dimethylsulfoxid in 9 ml Methylenchlorid wird auf –70°C gekühlt und 31 ml einer 2M-Lösung von Oxalylchlorid in Methylenchlorid wird tropfenweise hinzugegeben. Die Lösung wird für ungefähr 15 Minuten gerührt und eine Lösung von 0,85 g 3(S)-t-Butyl-3-BOC-amino-4-hydroxy-n-butanoat (xix) in 5 mL Methylenchlorid wird hinzugefügt. Nach ungefähr 45-minütigem Rühren werden 1,88 g Triethylamin hinzugegeben. Die Lösung lässt man auf Raumtemperatur erwärmen, rührt für ungefähr 30 Minuten und verdünnt anschließend mit Ethylacetat. Die Lösung wird mit 1N Salzsäure, 10% Natriumcarbonat und Lauge gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt, woraus sich 3(S)-t-Butyl-3-BOC-amino-4-oxo-n-butanoat (xx) ergibt.
Schritt (3):
Das Produkt (xx) aus Beispiel 6, Schritt (2) wird in 9 ml Methanol aufgelöst und 1,34 g Benzylaminhydrochlorid, anschließend 0,94 g Triethylamin und anschließend 200 mg 3 Å Molekularsiebe werden hinzugegeben. Die Lösung wird für ungefähr 45 Minuten gerührt und eine Lösung von 0,23 g Zinkchlorid und 0,22 g Natriumcyanoborhydrid in 5 ml Methanol wird hinzugegeben. Die Lösung wird für ungefähr 4 Stunden gerührt, 2 ml 1N Natriumhydroxid und anschließend 10 ml Wasser werden hinzugegeben, die Mischung wird zu ungefähr dem halben Volumen eingeengt und mit Ethylacetat ausgeschüttelt. Die Ethylacetat-Lösung wird mit 10% Natriumcarbonatlösung und Lauge gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert, im Vakuum eingeengt und der Rückstand mit Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit 30% bis 40% Ethylacetat in Hexan, woraus sich das Benzylamin (xxi), wie oben abgebildet, ergibt.
Schritt (4):
0,90 g des Produkts aus Beispiel 6, Schritt (3) wird in 12 ml Toluol/Essigsäure (10 : 1) aufgelöst und die Lösung für ungefähr 1,5 Stunden unter Rückfluss gehalten. Die Mischung wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand mit Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit 25% bis 35% Ethylacetat in Methylenchlorid, woraus sich 1-Benzyl-4(S)-BOC-amino-2-pyrrolidinon ergibt.
Schritt (5):
0,64 g des Produkts aus Beispiel 6, Schritt (4) wird in 20 ml Ethylacetat aufgelöst und die Lösung auf 0°C abgekühlt. Chlorwasserstoffgas wird in die Lösung für ungefähr 5 Minuten eingeleitet und die Mischung wird für ungefähr 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Der Mischung wird Ether hinzugegeben und der Feststoff wird durch Filtration gesammelt, woraus sich 1-Benzyl-4(S)-amino-2-pyrrolidinon-hydrochlorid ergibt.
Schritt (6):
0,33 g des geschützten Chlorpurins aus Beispiel 5, Schritt (4), 0,26 g 1-Benzyl-4(S)amino-2-pyrrolidinonhydrochlorid und 0,29 g Triethylamin werden in 10 ml Ethanol vereinigt und die Mischung für ungefähr 50 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Die Mischung wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand in 20 ml 1 N Salzsäure aufgelöst und bei Raumtemperatur für ungefähr 1 Stunde gerührt. Die Mischung wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand durch präparative HPLC gereinigt, Elution mit einem Gradienten aus 10% Acetonitril bis 60% Acetonitril in Wasser enthaltend 0,1% Trifluoressigsäure. Die geeigneten Fraktionen wurden vereinigt, eingeengt und der Rückstand in 20 ml 1N Salzsäure aufgelöst, das Lösungsmittel im Vakuum abgedampft und das Ganze 2 × wiederholt. Dieser Rückstand wurde in Methanol aufgelöst, das Lösungsmittel im Vakuum abgedampft und der Rückstand in Ether trituriert, woraus sich 4(S)-1-Benzyl-4-]9-((1R,2S,3R,5R)-1,2-dihydroxy-5-hydroxymethylcyclopent-3-yl)-9H- purin-6-ylamino]pyyrolidin-2-on in Form des Hydrochloridtrihydrats ergibt, Smp. 100°C (dec.).
Beispiel 7
Herstellung von (1R,2S,3R,5R)-S-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)pyrrolidin-3-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol
Schritt (1):
4-Nitrophenol (1,0 g, 7,19 mmol) und Triethylamin (3 ml, 21,6 mmol) wurden zusammen in wasserfreiem Methylenchlorid (10 ml) aufgelöst und die Lösung wurde auf –15°C gekühlt. Trifluormethansulfonanhydrid (1,81 ml, 10,8 mmol) werden hinzugegeben und die Mischung bei –15°C für ungefähr 30 Minuten gerührt. Die Mischung wird mit Methylenchlorid verdünnt, mit Natriumbicarbonatlösung und Lauge gewaschen, die organische Phase über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt.
Der Rückstand wird mit Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit Methylenchlorid, woraus sich 4-Nitrophenyltrifluormethansulfonat als heller gelber Feststoff ergibt.
Schritt (2):
3(S)-Amino-l-benzylpyrrolidin (3,0 g, 17,0 mmol) und Triethylamin (2,50 ml, 17,9 mmol) werden zusammen in wasserfreiem Methanol (17 ml) unter Stickstoff gelöst und Ethyltrifluoracetat (2,53 ml, 21,3 mmol) wird tropfenweise hinzugegeben. Die Lösung wird für ungefähr 18 Stunden gerührt, im Vakuum eingedampft und der Rückstand in Methylenchlorid aufgenommen. Die Lösung wird mit Natriumbicarbonatlösung und Lauge gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingeengt, woraus sich 1-Benzyl-3(S)-trifluoracetylaminopyrrolidin ergibt.
Schritt (3):
Unter Stickstoff wird 1-Benzyl-3(S)-trifluoracetylaminopyrrolidin (4,59 g, 16,7 mmol) in wasserfreiem Methanol (50 ml) aufgelöst und di-tert-Butyldicarbonat (3,68 g, 16,7 mmol) und 10% Palladium auf Kohlenstoff (0,90 g) werden hinzugegeben. Die Mischung wird anschließend unter Wasserstoff unter Normaldruck für ungefähr 5 Stunden gerührt. Die Mischung wird durch Celite^® filtriert, mit Methanol gespült und das Filtrat im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wurde mit Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit 5% Methanol in Methylenchlorid, woraus sich 1-BOC-3(S)-trifluoracetylaminopyrrolidin ergibt.
Schritt (4):
1-BOC-3(S)-trifluoracetylaminopyrrolidin (4 g) werden in Methylenchlorid (130 ml) aufgelöst und Trifluoressigsäure (19 ml) werden hinzugegeben. Die Lösung wird bei Raumtemperatur für ungefähr 1 Stunde gerührt, anschließend im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird zwischen Methylenchlorid und gesättigter Bicarbonatlösung aufgetrennt. Die Phasen werden getrennt und die wässrige Phase mit Ethylacetat ausgeschüttelt. Die vereinigte organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingedampft, woraus sich 3(S)-Trifluoracetylaminopyrrolidin ergibt.
Schritt (5):
4-Nitrophenyltrifluormethansulfonat (0,423 g, 1,56 mmol) und Triethylamin (0,217 ml, 1,56 mmol) werden zusammen mit wasserfreiem Acetonitril (15 ml) gelöst und 3(S)-Trifluoracetylaminopyrrolidin (0,852 g, 4,68 mmol) wird hinzugegeben und die Mischung unter Rückfluss für ungefähr 18 Stunden erhitzt. Die Mischung wird gekühlt, im Vakuum eingeengt und der Rückstand mit Flash-Chromatographie gereinigt, Elution mit einem Gradienten aus 25% bis 50% Ethylacetat in Hexan, woraus sich 1-(4-Nitro)phenyl-3(S)trifluoracetylaminopynolidin ergibt.
Schritt (6):
1-(4-Nitro)phenyl-3(S)-trifluoracetylaminopynolidin (0,334 g, 1,10 mmol) wird mit einer gesättigten Lösung aus Kaliumcarbonat in Methanol/Wasser (2 : 3) (20 ml) vereinigt und die Mischung für ungefähr 2 Stunden bei 55°C erhitzt, anschließend für ungefähr 18 Stunden auf Raumtemperatur gehalten. Die Mischung wird im Vakuum eingeengt und der Rückstand in Wasser (10 ml) aufgenommen. Die wässrige Phase wird mit Ethylacetat ausgeschüttelt und die organische Phase über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert, im Vakuum eingedampft, woraus sich 3(S)-Amino-1-(4-nitro)phenylpynolidin ergibt.
Schritt (7):
Im Wesentlichen unter Verwendung der Verfahren aus Beispiel 3, Schritte 12 und 13 und Beispiel 5, Schritte 5 und 6 wird (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)pyrrolidin-3-ylamino]-purin-9-yl)cyclopental-1,2-diol, Smp. 119m20°C, aus 3(S)-Amino-1(4-nitro)phenylpyrrolidin hergestellt.
Unter prinzipieller Verwendung der vorstehend beschriebenen Reaktionsschemata und Beispiele wurden die nachfolgenden Verbindungen mit geeigneten Ausgangsmaterialien hergestellt:
Beispiel 8
(2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-chlorpyridin-2-yl)-pynolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, Smp.154–156°C;
Beispiel 9
(2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, Smp. 153–156°C;
Beispiel 10
(2R,3R,4S,5R)-S-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, Smp. 187–190°C;
Beispiel 11
(2R,3R,4S,5R) 5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-brompyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]pwin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, 153–154°C;
Beispiel 12
(2R,3R,4S,5R)-S-Hydroxymethyl-2-(6-(1-(4-nitrophenyl)-pynolidin-3(S)-ylamino) – purin-9-yl)tetrahydrofuran-3,4-diol, Smp. 230–232°C;
Beispiel 13
(2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-(5'-trifluormethyl-3,4,5,6-tetrahydro-2H-[1,2']bipyridinyl-3-ylamino)-purin-9-yl]tetrahydrofwan-3,4-diol; Smp. 113–116°C;
Beispiel 14
(2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-(phenylpynolidin-3(S)-ylamino)-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol;
Beispiel 15
(2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-(1-pyridin-2-ylpyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, Smp. 193–195°C;
Beispiel 16
(2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(4-chlorphenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]- tetrahydrofuran-3,4-diol, Smp. 121–124°C;
Beispiel 17
(2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-methylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, Smp. 164–166°C;
Beispiel 18
(2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-thiophen-2-ylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, 190–192°C;
Beispiel 19
(2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-methylmercaptopyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, Smp. 231–233°C;
Beispiel 20
(2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(6-methoxypyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, Smp. 251–253°C;
Beispiel 21
(2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(6-chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]- tetrahydrofuran-3,4-diol, 154–156°C;
Beispiel 22
(2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(6-chlorpyridazin-3-yl)pyrrolidin-3-ylamino]purin-9-yl]- tetrahydrofuran-3,4-diol, Smp. 130°C (dec.);
Beispiel 23
(2R,3R,4S,5R)-5-Methoxymethyl-2-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, Smp. 198–200°C;
Beispiel 24
(1S,2R,3S,4R)-2,3-Dihydroxy-4-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pynolidin-3-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentancarbonsäureethylamid, Smp. 135–138°C;
Beispiel 25
(1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)piperidin-4-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, Smp. 126–128°C;
Beispiel 26
(1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-((3S)-pyrrolidin-3-ylamino)-purin-9-yl] cyclopentan-1,2-diol-dihydrochlorid, Smp. 160°C (dec);
Beispiel 27
(1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluoromethylpyridin-2-yl)pynolidin-3(R)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, 175–177°C;
Beispiel 28
(1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-((3R)-pynolidin-3-ylamino)-purin-9-yl] cyclopentan-1,2-diol, Smp. 166°C (dec);
Beispiel 29
(1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, Smp. 110–111°C;
Beispiel 30
4(R)-1-Benzyl-4-[9-((1R,2S,3R,5R)-1,2-dihydroxy-5-hydroxymethylcyclopent-3-yl)-9Hpurin-6-ylamino]-pyrrolidin-2-on-hydrochlorid, Smp. 110°C (dec);
Beispiel 31
(1R,2S,3R,5S)-5-Methyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, Smp. 114–116°C;
Beispiel 32
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Brompyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl] -5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, Smp. 169–171°C;
Beispiel 33
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Chlorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, Smp. 118–121°C;
Beispiel 34
(1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, Smp. 135–137°C;
Beispiel 35
(1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl)cyclopentan-1,2-diol, Smp. 110–112°C;
Beispiel 36
(1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(chinolin-3-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, Smp. 135–138°C;
Beispiel 37
(1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol;
Beispiel 38
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4,5-Bistrifluorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, Smp. 123–126°C;
Beispiel 39
(1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(phenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, Smp. 97–99°C;
Beispiel 40
4-[3(S)-[9-((1R,2S,3R,5R)-1,2-Dihydroxy-5-hydroxymethylcyclopent-3-yl)-9H-purin-6-ylamino]pynolidin-l-yl]benzonitril, Smp.140°C;
Beispiel 41
(1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(isochinolin-l-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, Smp. 119–122°C;
Beispiel 42
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Bromchinolin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ytamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol;
Beispiel 43
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Chlorphenyl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol;
Beispiel 44
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlor-5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, Smp. 140–143°C;
Beispiel 45
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, Smp. 180–182°C;
Beispiel 46
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol;
Beispiel 47
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyridazin-3-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol;
Beispiel 48
(1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-(6-methoxypyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, Smp. 118–120°C;
Beispiel 49
(1R,2S,3R,5R)-5-Isopropoxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin2-yl)pynolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, Smp. 157–158°C;
Beispiel 50
(1R,2S,3R,5R)-5-Isopropoxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin2-yl)pynolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, 160–161°C;
Beispiel 51
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyridazin-3-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, Smp. 122–124°C;
Beispiel 52
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Brompyridin-2-yl)pyrtolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, Smp. 110–111°C;
Beispiel 53
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Chlorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, Smp. 110–112°C;
Beispiel 54
(1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylphenyl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, Smp. 128°C;
Beispiel 55
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Chlorphenyl)-pynolidin-3(S)-ylamino] -purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, Smp. 122–125°C;
Beispiel 56
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-(3-Chlorphenyl)-pynolidin-3(S)-ylamino] -purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, Smp. 127–130°C;
Beispiel 57
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlorphenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, Smp. 131–133°C; und
Beispiel 58
(1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-phenylpyrrolidin-3-(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, Smp. 106°C.
Beispiel 59
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-Benzyl-pynolidin-3(S)-ylamino)purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, Smp. 100–102°C;
Beispiel 60
(1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-Benzyl-pyrrolidin-3(S)-ylamino)purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, Smp. 95–96°C.
Beispiel 61
(1S,2R,3S,4R)-2,3-Dihydroxy-4-{6-[1-(5-trifluormethyl-pyridin-2-yl)-pynolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl}- cyclopentancarbonsäure-1(S)-methylpropylamid, Smp. 215°C (dec.); und
Beispiel 62
(1S,2R,3S,4R)-2,3-Dihydroxy-4-{6-[1-(5-trifluormethyl-pyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl}-cyclopentancarbonsäure-1(R)-methylpropylamid, Smp. 206–212°C (dec.).
Verbindungen der vorliegenden Erfindung sind nützlich als antihypertensive Mittel zur Behandlung von hohem Blutdruck; sie fördern auch den koronaren Blutfluss und sind folglich nützlich in der Behandlung von Herzmuskel-Ischämie; sie fungieren auch als kardioprotektive Mittel, die für die Verhinderung oder Verminderung von Verletzungen am Herzmuskel infolge von Herzmuskel-Ischämie nützlich sind; und sie fungieren auch als antilipolytische Mittel, die für die Behandlung von Hyperlipidämie und Hypercholsterinämie nützlich sind.
Verbindungen im Rahmen dieser Erfindung zeigen Aktivität in Standard A₁/A₂-Rezeptor-Bindungs-Assays zur Bestimmung der Adenosin-Rezeptor-Agonist-Aktivität in Säugern. Beispielhafte Testverfahren, die für die Bestimmung der Rezeptor-Bindungs-Aktivität von Verbindungen der vorliegenden Erfindung nützlich sind, werden nachfolgend beschrieben.
A. Bestimmung der in vitro Adenosin-Rezeptor-Bindungsaffinität A₁-Rezeptor-Bindungsaffinität wurde bestimmt über Kompetitionsassays, die auf Ligandenverdrängung von ³H-CHA (Cyclohexyladenosin)[Research Biochemicals Inc., Natick, Mass.] aus einem Rezeptor basieren, unter Verwendung einer Membranpräparation eines ganzen Rattenhirnes gemäß dem Verfahren von R. F. Bruns et al., Mol. Pharmacol., 29 : 331 (1986). Nicht spezifische Bindung wurde in der Gegenwart von 1 mM Theophyllin geschätzt.
A₂-Rezeptor-Bindungsaffinität wurde mit einer ähnlichen Assay-Technik bestimmt, die auf Ligandenverdrängung von ³H-CGS 21680, einem bekannten A₂-Rezeptorspezifischen Adenosinagonist aus einem Rezeptor basiert, unter Verwendung von Membranen aus Rattenhirnstriatum. Nicht spezifische Bindung wurde in Gegenwart von 20 μM 2-Chloradenosin geschätzt.
Die Assays wurden in zweifacher Ausführung bei 25°C in Glastestgefäßen durchgeführt. Sobald die Membranen hinzugefügt worden sind, wurden die Gefäße auf einem Vortex-Gerät vermischt und auf einer Rotations-Schüttelmaschine bei 25°C für 60 Minuten (A₁-Assay) oder 90 Minuten (A₂-Assay) inkubiert. Die Assay-Gefäße wurden zur Hälfte der Inkubationszeit und wiederum nahe dem Ende auf einem Vortex-Gerät vermischt. Die Assays wurden durch schnelle Filtration über 2,4 cm GFB-Filter unter Verwendung eines Brandel Cell Harvestors beendet. Die Testgefäße wurden 3 × mit kalter 50 mM tris-HCl (pH 7,7 oder 7.4) gewaschen, wobei die Filtration innerhalb von 15 Sekunden abgeschlossen wurde. Die feuchten Filter wurden in Szintillations-Glasgefäße überführt, die mit 10 ml Aquasol 1 (New England Nuclear) gefüllt waren. Die Gefäße wurden über Nacht auf einer Rotations-Schüttelmaschine geschüttelt und wurden in einen Flüssigszintillationsanalysator für 2-Minuten-Messungen gebracht. IC₅₀-Werte für Rezeptorbindung, d. h. die Konzentration, bei welcher eine Verbindung gemäß der Erfindung einen radio-gelabelten Standard verdrängt, wurden unter Verwendung eines Kurven-Fitting-Computerprogramms (RS/1, Bolt, Beranek and Newmann, Boston, MA) erhalten.
A₁-Rezeptorbindungsaffinität wurde auch unter Verwendung einer Zubereitung von epididymalen Fettpolstermembranen von Ratten bestimmt.
Membranherstellung: epididymale Fettpolster von Ratten werden in einem Puffer homogenisiert, der 0,25 M Saccharose, 10 mM Tris, 2 mM EDTA, 0,1 M Phenylmethylsulfonylfluorid und 1 μg/ml Leupeptin (200 mg Naß-Gewebegewicht pro ml Puffer) enthält. Dieses Homogenisat wird in 50 ml-Zentrifugengefäße überführt und bei 1000 g (3000 RPM) für 1 Minute zentrifugiert, das überstehende Zwischenprodukt wird entfernt und bei 38000 g für 15 Minuten zentrifugiert. Die Pellets sind resuspendierte Pellets im Assay-Puffer (50 mM Tris und 1 mM EDTA) (300 mg Originalgewebegewicht/mL Assay-Puffer) und 2 μl/ml einer Lösung von Adenosindeaminase (10 mg/ml) wird der Suspension zugefügt und die Suspension wird für 30 Minuten bei 37°C inkubiert. Die Suspension wird bei 38000 g für 10 Minuten zentrifugiert, das Pellet einmal mit 20 ml Assay-Puffer gewaschen und im Assay-Puffer (1,2 g des ursprünglichen Naß-Gewebegewichts/ml Puffer) resuspendiert.
Assay und Zählung: Die Gefäße werden wie folgt präpariert: Gesamtgefäße (Gesamtzählungen (total counts) gebunden), 100 μl Membransuspension (hergestellt wie oben beschrieben), 50 μl ³H-Cyclohexyladenosin-Lösung (hergestellt durch Verdünnung einer Lösung von ungefähr 1 mCi/ml, mit einer spezifischen Aktivität von ungefähr 29,9 Ci/mmol, mit einem Assay-Puffer bis zu 100 nM, nachfolgend „CHA-Lösung"), 350 μl Assay-Puffer; nicht spezifische Bindungsgefäße, 100 μl Membransuspension, 50 μl CHA-Lösung, 50 μl 100 μM 2-Chloradenosin im Assay-Puffer, 300 μl Assay-Puffer; Probengefäße, 100 μl Membransuspension, 50 μl CHA-Lösung, 50 μl einer Lösung der Testverbindung (die hergestellt werden kann durch serienmäßige Verdünnung in Assay-Puffer einer DMSO-Lösung), 300 μl Assay-Puffer; leere Gefäße, 50 μl CHA-Lösung, 450 μl Assay-Puffer. Jedes Gefäß wird für 10 Sekunden auf einem Vortex-Gerät vermischt, bei 23°C für zwei Stunden inkubiert und filtriert unter Verwendung einer Brandel-Filtrations-Einheit und Whatman GFB Filterpapier, es wird 2 × mit 5 ml 50 mM Tris gewaschen. Die Filterscheiben werden in 7 ml-Szintillationsgefäße gebracht, die anschließend mit ungefähr 5 ml „Ready Safe Scintillation Cocktail" gefüllt werden und es wird gezählt.
B. In vitro-Bestimmung der Vasorelaxation in isolierten Koronararterien von Schweinen
Koronararterien von Schweinen wurden von einem örtlichen Schlachthof erhalten, vorsichtig entnommen und von Fett, Blut und anhaftendem Gewebe gereinigt. Ungefähr 2 bis 3 mm breite Ringe wurden geschnitten und in Wasser-umhüllte Gewebebäder (10 ml) überführt, die mit warmem (37°C) oxygeniertem (O₂/CO₂ : 95%/5%) Krebs-Hanseleit-Puffer gefüllt und auf L-förmigen Haken zwischen rostfreien Stangen und einem Kraftübertrager befestigt waren. Die Zusammensetzung des Krebs-Puffers ist wie folgt (mM): NaCl, 118; KCl, 4,7; CaCl₂, 2,5; MgSO₄, 1,2; KH₂PO₄, 1,2; NaHCO₃, 25,0 und Glukose, 10,0. Die Ringe wurden für 90 Minuten bei zahlreichen Pufferwechseln mit einer Ruhespannung von 5 g equilibriert. Um eine optimale Spannungsentwicklung zu gewährleisten, wurden die arteriellen Ringe 2 × mit 36 mM KCl und 1 × mit 10 μM PGF2a vorbehandelt (primed), bevor sie 3 μM PGF2a ausgesetzt wurden. Als die isometrische Spannung einen konstanten Wert erreicht hatte, wurden die angesammelten Dosen der Adenosin-Analoga der Erfindung (gewöhnlich 1 mM bis 100 μM, in halben logs) in die Bäder hinzugegeben. Die Spannung, die mit 3 μM PGF2a erhalten wurde, wurde als 100% entsprechend betrachtet; alle anderen Werte wurden in % von diesem Maximum ausgedrückt. IC₅₀-Werte für die Relaxation, d. h. die Konzentration, bei welcher eine Verbindung der Erfindung eine 50%ige Verminderung der Spannung verursachte, wurden bestimmt unter Verwendung des oben erwähnten linearen Kurven-Fitting-Computerprogramms.
C. In vivo-Bestimmungen des durchschnittlichen arteriellen Blutdruckes (MAP) und der Herzfrequenz (HR) in normotensiven anästhesierten und spontan hypertensiven Ratten
1. Anästhesierte Ratte
Normotensive Ratten wurden anästhesiert mit Natriumpentobarbital (50 mg/Kg, i. p.) und auf einem beheizten Operationstisch platziert. Kanülen wurden in die femorale Arterie eingeführt und geädert, um die Messung des arteriellen Druckes zu ermöglichen und die intravenöse Verabreichung der Testverbindungen zu vereinfachen. Nach der Operation wurde den Tieren 10 Minuten Zeit gegeben, sich zu equilibrieren. Der arterielle Durchschnittsdruck wurde kontinuierlich gemessen und aufgenommen und die Herzfrequenz wurde unter Verwendung eines arteriellen Druckpulses zur Auslösung eines Kardiotachometers überwacht. Nachdem die Basislinien-Parameter festgelegt und aufgenommen wurden, wurden zunehmende Dosen (1, 3, 10, 30, 100, 300 und 1000 μg/kg) der zu testenden Verbindung gemäß der Erfindung intravenös verabreicht. Maximale Veränderungen in den kardiovaskulären Parametern wurden nach jeder Dosis des Adenosin-Analogs beobachtet. Pro Ratte wurde nur eine Verbindung verabreicht. Die Fähigkeit der Verbindungen, die Herzfrequerz und den arteriellen Durchschnittsdruck zu vermindern, wurde geschätzt, indem die Dosis des Mittels bestimmt wurde, die notwendig ist, die Herzfrequenz oder den arteriellen Druck um 25% (ED₂₅) zu erniedrigen.
2. Spontan hypertensive Ratte (SHR)
Die orale antihypertensive Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen wurde bei spontan hypertensiven Ratten bei Bewusstsein untersucht. Die Ratten wurden mit Natriumpentabarbatol (50 mg/kg i. p.) anästhesiert. Ein telemetrischer Umwandler (Transducer) wurde in den Unterleib der Ratten mittels eines Mittellinienschnitts implantiert. Die Kanülen des Transducers wurden in die Bauchaorta eingeführt, um eine direkte Messung des arteriellen Druckes in der SHR bei Bewusstsein zu ermöglichen. Der Transducer wurde an der Bauchwand gesichert. Nachdem sie sich von der Operation erholt haben (Minimum von 7 Tagen), wurden die SHR auf einer Empfängerplatte platziert und der Transducer/Transmitter wurde eingeschaltet. Systolischer, diastolischer und arterieller Durchschnittsdruck und die Herzfrequenz wurden für 1,5 Stunden bei der Ratte mit uneingeschränktem Bewusstsein aufgenommen, um eine stabile Basislinie zu erzeugen. Anschließend erhielt jede Ratte eine Einzeldosis der zu testenden erfindungsgemäßen Verbindung oder eine Trägersubstanz und Änderungen im arteriellen Druck und der Herzfrequenz wurden für 20 Stunden überwacht und aufgenommen.
Wenn der Blutfluss zum Herzen für kurze Zeitspannen (2 bis 5 Minuten) unterbrochen wurde mit nachfolgender Wiederherstellung des Blutflusses (Reperfusion), wird das Herz gegen die Entwicklung von Verletzungen geschützt, wenn der Blutfluss für längere Zeiträume (zum Beispiel 30 Minuten) unterbrochen ist.
D. In vitro-Bestimmung der Herzfrequenz
Isolierte Herzvorhöfe der Ratte
Männliche Sprague-Dawley-Ratten werden anästhesiert unter Verwendung von Ketamin/Rompun und die Herzen werden schnell herausgeschnitten und in warmen, oxygenierten (95 O₂/5% CO₂) Krebs-Henseleit-Puffer der nachfolgenden Zusammensetzung überführt [mM] : NaCl 118; KCl 4,7; CaCl₂ 2,5; MgSO₄ 1,2; KHP₂O₄ 1,2; NaHCO₃ 25,0 und Glukose 10,0 (pH 7,4). Die rechten, spontan schlagenden Vorhöfe werden herausgeschnitten und in Wasser-umspülten Gewebebädern unter Verwendung von rostfreien Stahldrähten suspendiert. Die Vorhöfe werden für 60 Minuten bei einer Ruhespannung von 2 g mit einem Pufferwechsel alle 5 Minuten für die ersten 15 Minuten, anschließend in 15-Minuten-Intervallen equilibriert. Die zu testenden Verbindungen der vorliegenden Erfindung werden gehäuft in die Bäder hinzugegeben und die Herzfrequenz unter Verwendung eines Grass^® Model 7D-Polygraph bestimmt.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen zeigen Aktivitäten in den Tests, die verwendet werden, um die Fähigkeit von Verbindungen, die kardioprotektive Aktivität der Herzmuskel-Präkonditionierung nachzuahmen, zu bestimmen. Beispielhafte Testverfahren, die zur Bestimmung der kardioprotektiven Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen nützlich sind, sind nachstehend beschrieben.
E. Bestimmung der kardioprotektiven Aktivität in Ratten
1. Generelle Operationsvorbereitung
Erwachsene Sprague-Dawley-Ratten werden mit Inactin (100 mg/kg i. p.) anästhesiert. Die Luftröhre wird intubiert und positive Druckbeatmung wird durch ein Kleintier-Beatmungsgerät gewährleistet. Katheder werden in die femorale Vene und Arterie zur Verabreichung der zu testenden erfindungsgemäßen Verbindungen beziehungsweise zur Messung des Blutdruckes platziert. Ein Schnitt wird auf der linken Seite des Brustkorbes über den pektoralen Muskeln durchgeführt und die Muskeln werden zurückgezogen, um den vierten interkostalen Raum freizulegen. Der Brustraum wird geöffnet und das Herz freigelegt. Eine Länge von 4–0 Prolin-Naht wird durch die ventrikulare Wand nahe der linken koronaren Hauptarterie platziert und wird verwendet, um den Blutfluss durch die Koronararterie durch Zuziehen eines Zugknotens zu unterbrechen. Ein gepulster Doppler-Flussmesser (ein Gerät, das den Blutfluss misst) wird auf der Oberfläche des Herzens platziert, um zu bestätigen, dass die Koronararterie korrekt identifiziert wurde. Ein Katheder wird auch im linken Ventrikel platziert, um die linke ventrikulare Funktion während des Experiments zu überwachen.
2. Präkonditionierung und Testverfahren
Zur Präkonditionierung des Herzens wird die Koronararterie für einen Zeitraum von 2 Minuten verschlossen (der Fluss wird unterbrochen). Der Zugknoten wird anschließend gelockert, um den Fluss (Reperfusion) für einen Zeitraum von 3 Minuten wieder herzustellen. Dieses Verfahren von Verschluss/Reperfusion wird 2 × wiederholt. 5 Minuten nach Beendigung des letzten Präkonditionierungsvorgangs wird die Arterie für 30 Minuten wieder verschlossen mit nachfolgender Reperfusion für 3 Stunden. Wenn eine Verbindung der vorliegenden Erfindung ausgetestet wird, wird anstelle der Durchführung des Verschluss/Reperfusionsverfahrens die Verbindung für 30 Minuten vor der 30-minütigen Verstopfungsphase infundiert. Am Schluss der 3-stündigen Reperfusionsperiode wird die Arterie wieder verschlossen und 1 ml Patentblau-Farbstoff wird in den linken ventrikularen Katheder verabreicht und das Herz wird durch intravenöse Verabreichung von Kaliumchlorid gestoppt. Dieses Verfahren ermöglicht dem Farbstoff, in die normalen Bereiche des Herzens zu fließen, während der Bereich des Herzens, der ischämisch gemacht wurde, den Farbstoff nicht aufnimmt (dies ist der Risikobereich). Das Herz wird schnell zur Analyse des Infarktausmaßes entfernt. Das Infarktausmaß wird bestimmt, indem das Herz von der Spitze zur Basis in 4 bis 5 Scheiben von 1 bis 2 mm Dicke geschnitten wird. Die Scheiben werden in einer Lösung von 1% Triphenyltetrazolium für 15 Minuten inkubiert. Dieses Färbemittel reagiert mit lebensfähigem Gewebe und verursacht dort die Entwicklung einer backsteinroten Farbe. Das vom Infarkt betroffene Gewebe reagiert nicht mit dem Färbemittel und erscheint blassweiß. Die Gewebescheiben werden in ein Videobild-Analyse-System überführt und das Infarktausmaß wird durch Planimetrie bestimmt. Die Wirkung der Verbindung der vorliegenden Erfindung, die auf das Ausmaß des Herzmuskelinfarktes getestet wurde, wird geschätzt und zur Quantifizierung des Ausmaßes der kardioprotektiven Aktivität verwendet. Die Ergebnisse werden als Prozentzahlen des Risikobereichs, der vom Infarkt betroffen ist, ausgedrückt.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung zeigen Aktivitäten in Tests, die zur Bestimmung der Fähigkeit von Verbindungen zur Verhinderung von Lipolyse verwendet werden. Beispielhafte Testverfahren, die in der Bestimmung der antilipolytischen Aktivität der Verbindungen der vorliegenden Erfindung nützlich sind, werden nachfolgend beschrieben.
F. Bestimmung der antilipolytischen Aktivität in Adipozyten von Ratten
1. Isolation von Adipozyten aus epididymalen Fettpolstern
Fettgewebe wird aus anästhesierten Ratten entfernt und 2 × mit Inkubationsmedium (2,09 g Natriumbicarbonat und 0,04 g EDTA, Dinatriumsalz in 1 l Krebs-Puffer) gespült. Jede Ratte (300 bis 350 g) liefert ungefähr 4 ml Fettgewebe. Das Fettgewebe (35 ml) wird mit einer Schere in kleine Stücke geschnitten und mit Inkubationsmedium (50 ml) gewaschen. Die Mischung wird in das Vorratsgefäß einer 50 ml-Spritze geschüttet, an die ein kleines Stück eines abgeklemmten Schlauches anstelle einer Nadel befestigt ist. Die wässrige Phase lässt man ablaufen. Ein zweiter Waschvorgang mit Inkubationsmedium wird durch die Spritze durchgeleitet. Das Gewebe wird zu 50 ml Kollagenase-Lösung (Kollagenase (90 mg), Rinderserum Albumin (BSA) (500 mg) und 0,1 M Kalziumchloridlösung (1 ml) im Inkubationsmedium (50 ml)) in einer 11-Flasche hinzugegeben. Die Mischung wird in einer Umgebung von 37°C für ungefähr 60 Minuten bei einer Atmosphäre von 95% Sauerstoff/5% Kohlendioxid geschüttelt, um den Abbau des Gewebes zu bewirken. Die dispergierten Zellen werden durch zwei Schichten Käseleinen in einen 100 ml-Plastikbecher geschüttet. Die nicht abgebauten Klumpen in dem Leinen werden 1 × mit Inkubationsmedium (20 ml) gespült. Die Zellen im Becher werden in 2 Plastikgefäßen für 30 Sekunden bei Raumtemperatur und 300 rpm zentrifugiert. Die wässrige Phase wird von unter der locker gepackten Phase von umherschwimmenden Fettzellen angesaugt und verworfen. Die Adipozyten werden vorsichtig in einen 250 ml-Plastikbecher geschüttet, der 100 ml der Spüllösung (1 g BSA pro 100 ml Inkubationsmedium) enthält. Nach vorsichtigem Rühren wird der Zentrifugationsschritt wiederholt. Ein weiterer Waschvorgang mit der Spüllösung folgt. Die Zellen werden vereinigtt und ihr Volumen mit einem Messzylinder geschätzt. Die Adipozyten werden in ihrem zweifachen Volumen an Assay-Puffer (Inkubationsmedium (120 ml), BSA (1,2 g) und Brenztraubensäure (13 mg)) verdünnt.
2. In Vitro Lipolyse-Assay
Das Assay wird in 20 ml Plastik-Szintillationsgefäßen durchgeführt und das Gesamt-Assay-Volumen beträgt 4,2 ml. Assay-Puffer (2,5 ml), verdünnte Adipozyten (1,5 ml) und eine Lösung der zu testenden Verbindung (12,3 μl) Adenosin-Agonist (12,3 μl; unterschiedliche Konzentration) wird in einem umgebenden Schüttler für 15 Minuten inkubiert, anschließend wird die Reaktion mit Noradrenalin-Lösung (41,2 μl) (10 nM, in einer Trägerlösung enthaltend Wasser (100 ml), BSA (4 mg) und 0,1 M EDTA (20 μl)) und Adenosin-Deaminase (1 μg/ml, 41,2 μl) gestartet. Nach 60 Minuten in der Schüttelmaschine wird die Reaktion durch Platzieren der Gefäße auf Eis beendet. Der Inhalt eines jeden Gefäßes wird in ein 12 × 5 mm Glasgefäß überführt und bei 8 bis 10°C und 3600 rpm für 20 Minuten zentrifugiert. Die harte Lipidschicht wird durch Ansaugen entfernt und die wässrige Phase wird auf Glycerin geprüft (400 μl der Probe). Die positive Kontrolle wird in der Abwesenheit von Adenosin-Agonist durchgeführt, um die Substitution von Wasser anstelle der Lösung zu testen.
Die antilipolytische Aktivität von Adenosin wird durch Aktivieren des A₁-Rezeptor-Subtyps herbeigeführt. Selektive Agonisten des A₂-Rezeptor-Subtyps, wie CGS 21680, zeigen keine antilipolytische Aktivität. Während gewisse A₁-selektive Agonisten nicht die gewünschte antihypertensive Aktivität haben könnten und A₂-Agonisten keine wirksamen antilipolytischen Mittel sein könnten, sind folglich Verbindungen der vorliegenden Erfindung, die gemischte Agonisten sind, einzigartig geeignet, um effektiv beide Risikofaktoren, die vorstehend hier diskutiert wurden, d. h. Hypertonie und Hyperlipidämie, zu behandeln.
Bei der Behandlung von Patienten, die unter Hypertonie oder Herzmuskel-Ischämie leiden oder bei Patienten, die eine kardioprotektive Therapie oder eine antilipolytische Therapie benötigen, können die Verbindungen dieser Erfindung normalerweise oral oder parenteral verabreicht werden. So wie hier verwendet, bezieht der Begriff „Patienten" Menschen und andere Säugetiere mit ein.
Die Verbindungen dieser Erfindung, vorzugsweise in Form eines Salzes, können zur Verabreichung in jedem geeigneten Weg formuliert werden und die Erfindung schließt pharmazeutische Zusammensetzungen, die wenigstens eine Verbindung gemäß der Erfindung enthalten, mit ein, die der Verwendung in der Human- oder Veterinär-Medizin angepasst sind. Solche Zusammensetzungen können in konventioneller Art formuliert unter Verwendung eines oder mehrerer pharmazeutisch annehmbarer Träger oder Exzipienten sein. Geeignete Träger schließen Verdünner oder Füller, sterile wässrige Medien und zahlreiche nicht-toxische organische Lösungsmittel mit ein. Die Zusammensetzungen können in Form von Tabletten, Kapseln, Pastillen, Zäpfchen, harten Süßigkeiten, Puder, wässrigen Suspensionen oder Lösungen, injizierbaren Lösungen, Elixieren, Sirup und dergleichen formuliert sein und können eines oder mehrere Mittel enthalten, die aus der Gruppe einschließlich Süßstoffe, Geschmacksverstärker, Farbstoffe und Konservierungsstoffe ausgewählt wird, um eine pharmazeutisch annehmbare Formulierung bereitzustellen.
Die besonderen Träger und das Verhältnis der Adenosin-Analoga zum Träger werden durch die Löslichkeit und die chemischen Eigenschaften der Verbindungen, die besondere Art der Darreichung und der pharmazeutischen Standardpraxis bestimmt. Zum Beispiel können Exzipienten wie Laktose, Natriumcitrat, Kalziumcarbonat und Dikalziumphosphat und zahlreiche Zerfallsprodukte wie Stärke, Alginsäure und gewisse Silikatkomplexe zusammen mit Schmiermitteln wie Magnesiumstearat, Natriumlaurylsulfat und Talk bei der Herstellung von Tabletten verwendet werden. Für eine Kapselform sind Laktose und Polyethylenglykole mit hohem Molekulargewicht unter den bevorzugten pharmazeutisch annehmbaren Trägern. Wo wässrige Suspensionen zur oralen Verwendung formuliert werden, können die Träger emulgierende oder suspendierende Mittel sein. Verdünner wie Ethanol, Propylenglykol, Glycerin und Chloroform und ihre Kombinationen können genauso wie andere Materialien verwendet werden.
Zur parenteralen Darreichung können Lösungen oder Suspensionen von diesen Verbindungen in Sesam oder Erdnussöl oder wässrigen Propylenglykollösungen sowie steriler wässriger Lösungen der löslichen pharmazeutisch annehmbaren Salze, die hier beschrieben worden sind, verwendet werden. Die Lösungen der Salze von diesen Verbindungen sind besonders zur Darreichung durch intramuskuläre und subkutane Injektion geeignet. Die wässrigen Lösungen, einschließlich derjenigen der Salze, die in reinem destillierten Wasser gelöst sind, sind zur Darreichung durch intravenöse Injektion geeignet, vorausgesetzt, dass ihr pH-Wert korrekt angepasst ist, und dass sie geeignet gepuffert, mit genügend Saline oder Glukose isotonisch gemacht und durch Erhitzung oder Mikrofiltration sterilisiert sind.
Die Dosierung, die zur Durchführung der Verfahren dieser Erfindung verwendet wurde, ist diejenige, die das Maximum an therapeutischer Antwort gewährt, bis Verbesserung erzielt ist und danach der geringst wirksame Anteil, der Erleichterung bereitet. Im Allgemeinen sind somit die Dosen diejenigen, die therapeutisch wirksam in der Erniedrigung des Blutdrucks bei der Behandlung von Hypertonie, in der Erhöhung des koronaren Blutflusses bei der Behandlung von Herzmuskel-Ischämie, im Erzeugen eines kardioprotektiven Effektes, d. h. die Verbesserung einer ischämischen Verletzung oder des Herzmuskelinfarkt-Ausmaßes infolge von Herzmuskel-Ischämie, oder im Erzeugen eines antilipolytischen Effektes sind. Generell kann die orale Dosis zwischen ungefähr 0,1 und ungefähr 100 (bevorzugt im Bereich von 1 bis 10 mg/kg) und die intravenöse Dosis ungefähr 0,01 bis ungefähr 10 mg/kg (bevorzugt im Bereich von 0,1 bis 5 mg/kg) sein, wobei natürlich zu bedenken ist, dass bei der Auswahl der geeigneten Dosis im jeweils speziellen Fall das Gewicht des Patienten, der generelle Gesundheitszustand, Alter und andere Faktoren, die die Antwort auf das Arzneimittel beeinflussen können, in Betracht gezogen werden müssen.
Die Verbindungen der Erfindung können so oft dargereicht werden, wie es nötig ist, die gewünschte therapeutische Antwort zu erreichen und aufrechtzuerhalten. Manche Patienten können schneller auf eine relativ große oder kleine Dosis antworten und benötigen eine geringe oder keine Aufrechterhaltung der Dosis. Andererseits können andere Patienten eine fortgesetzte Dosierung von ungefähr 1x bis 4x am Tag erfordern in Abhängigkeit von den physiologischen Bedürfnissen des speziellen Patienten. Gewöhnlich kann das Arzneimittel oral ungefähr 1 bis 4x am Tag verabreicht werden. Es wird angenommen, dass viele Patienten nicht mehr als ungefähr 1 bis 2 Dosen täglich benötigen werden.
Es wird auch angenommen, dass die vorliegende Erfindung als eine injizierbare Form der Dosierung nützlich sein würde, die in einem Notfall einem Patienten verabreicht werden kann, der an akuter Hypertonie oder Herzmuskel-Ischämie leidet oder ein Patient, der Kardioprotektion oder antilipolytische Therapie benötigt. Solch einer Behandlung kann eine intravenöse Infusion der aktiven Verbindung nachfolgen und die Menge der in einen solchen Patienten infundierten Verbindung sollte wirksam sein, um die gewünschte therapeutische Antwort zu erreichen und aufrechtzuerhalten.

Claims

Verbindung gemäß der Formel
wobei: K ist N, N → O oder CH; Q ist CH₂ oder O; R₆ ist Wasserstoff, Alkyl, Allyl, 2-Methylallyl, 2-Butenyl oder Cycloalkyl;
wobei der Ringstickstoff von X mit Y substituiert ist; E ist oder S; Y ist Wasserstoff, Alkyl, Aralkyl, substituiertes Aralkyl, Aryl, substituiertes Aryl, Heterocyclyl, substituiertes Heterocyclyl, Heterocyclylalkyl oder substituiertes Heterocyclylalkyl; n und p sind unabhängig voneinander 0, 1, 2 oder 3, unter der Voraussetzung, dass n + p mindestens 1 ist; T ist Wasserstoff, Alkyl, Acyl, Thioacyl, Halo, Carboxyl,
oder R₃O-CH₂; R₁, R₂ und R₃ sind unabhängig voneinander H, Alkyl oder Cycloalkyl; A ist Wasserstoff, Alkyl, Hydroxyalkyl, Alkoxyalkyl oder OR'; B ist Wasserstoff, Alkyl, Hydroxyalkyl, Alkoxyalkyl oder OR' ; R' und R" sind unabhängig voneinander Wasserstoff, Alkyl, Aralkyl, Carbamoyl, Alkyl-carbamoyl, Dialkylcarbamoyl, Acyl, Alkoxycarbonyl, Aralkoxycarbonyl, Aryloxycarbonyl oder, wenn A und B OR' bzw. OR" sind, können R' und R" zusammen bilden:
wobei R_c Wasserstoff oder Alkyl ist,
wobei R_d und R_e unabhängig voneinander Wasserstoff oder Alkyl sind oder sie können zusammen mit dem Kohlenstoff-Atom, an das sie geknüpft sind, eine 1,1-Cycloalkyl-Gruppe bilden; oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei: K ist N; T ist Hydroxymethyl oder Methoxymethyl; A und B sind Hydroxy;
und n + p ist 3 oder 4; oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Verbindung nach Anspruch 2, die (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-chlorpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(R)ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-S-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-brompyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]- tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-(6-(1-(4-nitrophenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino) -purin-9-yl) tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-(5' trifluormethyl-3,4,5,6-tetrahydro-2H-[1,2']-bipyridinyl-3-ylamino)-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-(phenylpynolidin-3(S)-ylamino)-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-(1-pyridin-2-ylpyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl -2-[6-[1-(4-chlorphenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]- tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-methylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-thiophen-2-ylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(5-methylmercaptopyridin-2-yl)-pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(6-methoxypyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(6-chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Hydroxymethyl-2-[6-[1-(6-chlorpyridazin-3-yl)pyrrolidin-3-ylamino]-purin-9-yl]- tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-5-Methoxymethyl-2-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]tetrahydrofuran-3,4-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)piperidin-4-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-((3S)-pyrrolidin-3-ylamino)-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol-dihydrochlorid, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)pyrrolidin-3-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-l,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(R)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-((3R)-pyrrolidin-3-ylamino)-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R) -3-[6-[1-(5-Brompyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl] -5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Chlorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-l,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(chinolin-3-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)-pynolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4,5-Bistrifluorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin2-yl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(phenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, 4-[3(S)-[9-((1R,2S,3R,5R)-1,2-Dihydroxy-5-hydroxymethylcyclopent-3-yl)-9H-purin-6-ylamino]pyrrolidin-1-yl]benzonitril, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(isochinolin-1-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Bromchinolin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Chlorphenyl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlor-5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyridazin-3-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-S-Methoxymethyl-3-[6-[1-(6-methoxypyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol,(1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyridazin-3-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Trifluormethylphenyl)– pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Brompyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Chlorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-S-Methoxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylphenyl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Chlorphenyl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlorphenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlorphenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-phenylpyrrolidin-3-(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-Benzyl-pyrrolidin-3(S)-ylamino)purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol und (1R,2S,3R,5R)-3-(6-(1-Benzyl-pyrrolidin-3(S)ylamino)purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol ist; oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei: Q ist CH₂; K ist N;
wobei R₁ gleich H und R₂ Nieder-Alkyl ist A und B sind Hydroxy; X ist
und n + p ist 3 oder 4; oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Verbindung nach Anspruch 4, die (1S,2R,3S,4R)-2,3-Dihydroxy-4-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentancarbonsäure-ethylamid, (1S,2R,3S,4R)-2,3-Dihydroxy-4-{6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl}-cyclopentan-carbonsäure-1(S)methylpropylamid und (1S,2R,3S,4R)-2,3-Dihydroxy-4-{6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl}-cyclopentan-carbonsäure-1(R)methylpropylamid ist; oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei: Q ist CH₂; K ist N; T ist Hydroxymethyl oder Methoxymethyl; A und B sind Hydroxy;
und n + p ist 3 oder 4; oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon. T ist, wobei R₁ gleich H und R₂ Nieder-Alkyl ist, X ist,
Verbindung nach Anspruch 6, die (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)piperidin-4-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-((3S)-pyrrolidin-3-ylamino)-purin-9-yl] cyclopentan-1,2-dioldihydrochlorid, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-nitrophenyl)pyrrolidin-3-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(R)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-((3R)-pynolidin-3-ylamino)-purin-9-yl] cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Brompyridin-2-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Chlorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(pyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(chinolin-3-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-(1-(4-nitrophenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4,5-Bistrifluorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3- [6-[1-(5-trifluormethylpyridin2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-S-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(phenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, 4-[3(S)-[9-((1R,2S,3R,5R)-1,2-Dihydroxy-5-hydroxymethylcyclopent-3-yl)-9H-purin-6-ylamino]pyrrolidin-1-yl]benzonitril, (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-5-[6-[1-(isochinolin-1-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Bromchinolin-2-yl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Chlorphenyl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlor-5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyridazin-3-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-S-Methoxymethyl-3-[6-[1-(6-methoxypyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(6-Chlorpyridazin-3-yl)pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Trifluormethylphenyl)– pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Brompyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(5-Chlorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylphenyl)pynolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(4-Chlorphenyl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3- [6-[1-(3-Chlorphenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-[1-(3-Chlorphenyl)-pynolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-phenylpyrrolidin-3-(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-Benzyl-pyrrolidin-3(S)-ylamino)purin-9-yl]-5-hydroxymethylcyclopentan-1,2-diol und (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-Benzyl-pyrrolidin-3(S)ylamino)purin-9-yl]-5-methoxymethylcyclopentan-1,2-diol ist; oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Verbindung nach Anspruch 6, die (1R,2S,3R,5R)-5-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluonnethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol oder (1R,2S,3R,5R)-S-Hydroxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol ist oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Verbindung nach Anspruch 6, die (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-(5-trifluormethylpyridiri-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol oder (1R,2S,3R,5R)-5-Methoxymethyl-3-[6-[1-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yl]cyclopentan-1,2-diol ist oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz hiervon.
Verbindung gemäß der Formel
wobei Z 4-Trifluormethylpyridin-2-yl oder 5-Trifluormethypyridin-2-yl ist.
Verbindung nach Anspruch 10, die 2-[(3S)-3-Aminopyrrolidin-1-yl]-5-trifluormethylpyridin oder 2-[(3S)-3-Aminopyrrolidin-1-yl]-4-trifluormethylpyridin ist.
Zusammensetzung umfassend eine wirksame Menge einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 und ein pharmazeutisch annehmbarer Träger hiervon.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von Hypertonie bei einem Patienten.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von Herzmuskel-Ischämie bei einem Patienten.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 zur Herstellung eines Arzneimittels, um einem Patienten, der es benötigt, Kardioprotektion zur Verfügung zu stellen.
Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 zur Herstellung eines Arzneimittels, um einem Patienten, der es benötigt, eine anti-lipolytischen Wirkung zur Verfügung zu stellen.