SK2299A3 - Compounds having antihypertensive, cardioprotective, anti-ischemic and antilipolytic properties - Google Patents

Description

Oblasť techniky

Vynález sa dotýka zlúčenín, odvodených od adenozínu a jeho analógov, farmaceutických kompozícií, obsahujúcich také látky, ktorých použitie na liečbu hypertenzie a myokardovej ischémie ako kardioprotektívneho činidla zlepšuje ischemické problémy a rozsah infarktu myokardu v dôsledku myokardovej ischémie, ďalej ich použitie ako antilipolytického činidla, znižujúceho hladinu plazmových lipidov, hladinu sérových triglyceridov, hladinu plazmového cholesterolu a tiež prípravy takýchto zlúčenín aj použitých medziproduktov.

Doterajší stav techniky

Hypertenzia

Hypertenzia, teda stav zvýšeného krvného tlaku, zasahuje značnú časť ľudskej populácie. Dôsledky pretrvávajúcej hypertenzie sa prejavia vaskulárnym poškodením očného, ľadvinového, srdcového a mozgového systému a riziko týchto komplikácií sa zvyšuje, rovnako ako sa zvyšuje krvný tlak. Základnými faktormi kontrolujúcimi krvný tlak je prietok srdcom a periférnymi vaskulárnymi rezistenciami, pričom uvedený činiteľ je predominantným všeobecným mechanizmom, ktorý je kontrolovaný a ovplyvňovaný rôznymi vplyvmi. Sympatikový nervový systém reguluje periférnu vaskulárnu odolnosť rôznymi vplyvmi na a- a β-adrenergické receptory, rovnako aj nepriamymi účinkami na priepustnosť ľadvín. Terapia s použitím liečiv je zameraná na špecifické zložky tohto krvného tlakového systému z hľadiska regulácie a to rôznymi mechanizmami pôsobenia a vplyvu, čo definuje určité skupiny liečiv, napríklad diuretiká, antagonisty β-adrenergických receptorov (β-blokujúce látky), inhibítory angiotenzikonvertivných enzýmov a antagonisty prietoku vápnika.

Diuretiká typu tiazidov sú používané na hypertenziu na redukovanie vaskulárnych rezistencií a to vplyvom na vylučovanie sodíka a vody. Do tejto skupiny patrí hydrochlórtiazid, chlórtiazid, metyclotiazid a cyklotiazid, rovnako aj podobné, v tomto smere účinné látky: indapamid, metolazon a chlórtalidon. Aj keď existuje názor, že vplyvom β-blokujúceho mechanizmu dochádza k blokovaniu podtypov βadrenergických receptorov v srdci pri znížení rýchlosti tepu srdca a kardiálneho prietoku, novšie β-blokátory s vnútornou sympatikomimetickou účinnosťou (ISA, intrinsic sympatomimetic activity), rátajúc pindolol, acetobutolol, penbutolol a carteolol, sú účinné ako nie-ISA^-blokátory a spôsobujú menej redukovanú rýchlosť srdcového tepu a prietok srdcom. Ďalším žiaducim mechanizmom na tieto látky je inhibícia prietoku ľadvinami, centrálny efekt, rovnako ako efekt na pre-synaptické βadrenergické receptory s prejavom inhibície norepinefrinového uvoľnenia.

Kardioselektívne β-blokátory metoprolol (Lopressor-Geigy), acebutolol (SectralWyeth) a atenolol (Tenormin-ICI) majú v nízkych dávkach väčší účinok na βadrenergické receptory ako na subtypy β-2-adrenergických receptorov, rozmiestnených v dýchacom a krvnom systéme. Neselektívne β-blokátory pôsobia na oba subtypy β-adrenergických receptorov. Sem patrí propranolol (Inderal-Ayerst), timolol (Blocadren-Merck), nadolol (Corgard-Squibb), pindolol (Visken-Sandoz), penbutolol (Levatol-Hoechst-Roussel) a carteolol (Cartrol-Abbott). Opačný účinok βblokátorov zahŕňa asymptomatickú bradykardiu, podstatné zhoršenie možnosti kongestívneho srdcového zlyhania, poruchy gastrointestinálneho traktu, zvýšené problémy pri dýchaní, maskované symptómy hypoglykémie a depresie. Môžu spôsobiť zvýšenie triglyceridov v sére a môžu znížiť vysokú lipoproteínovú hladinu cholesterolu.

Inhibítory ACE sa vyznačujú prevenciou tvorby angiotenzínu II a inhibujú rozrušenie bradykinínu. Angiotenzín II je mohutným vazokonstriktorom a stimuluje aj vylučovanie aldosterónu. Tým, že dochádza k blokovaniu renín-angiotenzínualdosterónového systému, znižujú tieto činidlá periférne-vaskulárnu rezistenciu, rovnako aj zadržovanie sodíka a vody. Navyše inhibítory ICE ďalej zvyšujú hladinu bradykinínu a prostaglandínov, endogénnych vazodilátorov. Captopril (CapotenSquibb) a enalapril (Vasotec-Merck) sú vedúcimi ACE-inhibítormi. Medzi nežiaduce účinky ACE-inhibítorov patrí vyrážka, nechutenstvo, proteinúria a neutropénia.

Antagonisty vápnikovej cesty znižujú prívod vápnika do buniek vaskulárneho hladkého svalstva, výsledkom čoho je systémová vazodilatácia, ktorá vyústi v antihypertenzný účinok. Ďalšie vplyvy antagonistov vápnikovej cesty zahŕňajú interferencie reakcie angiotenzínu II a receptorov a₂-adrenergickej blokády, čo môže prispieť k zodpovedajúcim antihypertenzným účinkom. Antagonisty vápnikovej cesty nemajú opačné metabolické a farmakologické účinky a farmakologické účinky tiazidov alebo β-blokátorov a môžu byť preto použiteľné pre pacientov, trpiacich diabetom, periférnym vaskulárnym ochorením alebo chronickým obštrukčným pľúcnym ochorením. Dvaja antagonisty vápnikovej cesty verapamil a diltiazem majú vážne opačné kardiovaskulárne účinky na atrioventrikulárnu kondukciu u pacientov s predchádzajúcimi konduktívnymi abnormalitami a môžu zhoršiť bradykardiu, blokovanie srdca a kongestívne srdcové zlyhanie. Ďalšie menej závažné účinky antagonistov vápnikovej cesty zahŕňajú periférny edém, závrate, bolesti hlavy, pocit nevoľnosti a vracanie, najmä v spojitosti s nifedipinom a nicardipinom.

Na zvládnutie závažnej hypertenzie sú dostupné mnohé ďalšie činidlá. Patrí sem prazocín a terazocín, antagonisty cti-adrenergického receptora, ktorých antihypertenzné účinky sú dôsledkom vzniknutej arteriálnej vazodilatácie, ďalej klonidín, a₂-adrenergický agonista, pôsobiaci centrálne, rovnako i periférne na inhibičné a₂-adrenergické receptory pri znížení sympatickej odozvy. Medzi ďalšie centrálne pôsobiace látky patrí metyldopa, guanabenz a guanfacín; rezerpín, ktorý spôsobuje ochudobnie zásob katecholamínov; guanadrel, periférny adrenergický antagonista podobný guanetidínu s kratším časom pôsobenia; ďalej priamo pôsobiace vazodilátory, ako hydralazín a minoxidil. Tieto látky, aj keď sú účinné, sú spojené s pozoruhodnými symptomatickými vedľajšími účinkami, vrátane reflexného sympatického stimulovania a zadržiavania kvapalín, ortostatickou hypotenziou a impotenciou.

Mnohé antihypertenzné činidlá aktivujú kompenzačný tlakový mechanizmus, ako je zvýšenie uvoľňovania renínu, zvýšená sekrécia aldosterónu a zvýšený sympatický vazokonstrikčný stav, ktoré sú predurčené na návrat arteriálneho tlaku na hladinu pred vlastnou úpravou. To môže viesť k retencii solí a vody, edémom a potom k tolerancii voči antihypertenzným účinkom podávaných látok. Ďalej sú potom, so zreteľom na rôzne vedľajšie účinky, zaznamenané v súvislosti so súčasným stavom antihypertenzných činidiel a problémov, ktoré sa v súvislosti s nimi objavili u špeciálnych tried hypertenzných pacientov, kam patria prestarnutí, čierni a pacienti s chronickými ochoreniami pľúc, cukrovkou alebo periférnymi vaskulárnymi problémami, sú potrebné ďalšie látky na liečbu hypertenzie.

Ischémia

Myokardová ischémia je výsledkom nerovnováhy medzi prísunom myokardového kyslíka a jeho potrebou, a zahŕňa exercionálne a vazospastické myokardové dysfunkcie. Exercionálna ischémia je zvyčajne pripisovaná prítomnosti kritickej aterosklerotickej stenózy, čo sa týka silných koronárnych artérií s výsledkom redukcie subendokardiálneho toku. Vazospastická ischémia je spojená so spazmami rôznych ohnísk, čo nie je v žiadnej spojitosti s námahou alebo stresovými situáciami. Spazmy je lepšie definovať ako prerušenie zvýšeného vaskulárneho stavu. Mechanizmus vazospastickej ischémie zahŕňa:

(i) zvýšenie vaskulárneho stavu v mieste stenózy v dôsledku uvoľnenia katecholamínu, (ii) prechodné intraluminálne upchatie, a (iii) uvoľnenie vazoaktívnych látok, tvorenými krvnými doštičkami v mieste endoteliálnych lézií.

Koronárna cirkulácia je jednotná, pretože je spojená s perfúziou organizmu, ktorý generuje perfúzny tlak na všetku cirkuláciu. Preto zásah, ktorým sa zmení stav periférnej cirkulácie a prípadné sťaženie bude mať značný vplyv na koronárnu cirkuláciu. Regulačnou zložkou koronárnej vaskulatúry sú malé koronárne arterioly, ktorých vnútorný priemer sa môže veľmi meniť. Zmena vnútorného priemeru je výsledkom buď vnútornej kontrakcie vaskulárneho hladkého svalstva (autoregulovanie) alebo extravaskulárneho stlačenia, čo je dôsledkom ventrikulárnej kontrakcie. Výsledkom terapie ischemických problémov je komplexná interakcia protikladných faktorov, ktoré určujú prísun kyslíka a jeho spotrebu.

Srdcová ochrana a prevencia ischemických problémov

Zásadným postojom modernej kardiológie je nájdenie nových terapeutických činidiel, schopných inhibovať rozsah poškodenia myokardu, t. j. rozsah infarktu myokardu, čo je následkom akútnej ischémie myokardu.

Nástup trombolytickej terapie (rozpúšťanie zrazenín) počas posledného desaťročia je spojený so zistením, že včasný zásah počas srdcového záchvatu môže znamenať podstatné zníženie poškodenia tkaniva myokardu. Rozsiahle klinické zistenia v tom čase viedli k záverom, že trombolytická terapia znižuje riziko vývoja rušivých javov srdcového tepu a udržuje aj schopnosť srdca vo funkcii čerpadla. Toto uchovanie normálnej funkcie srdca silne znižuje dlhodobo možnosť úmrtia po infarkte.

Zaujímavý bol aj vývoj terapie s možnosťou ďalšej ochrany myokardu, čo by bolo možné kombinovať s trombolytickou terapiou, pretože retrospektívne epidemiologické štúdie viedli k zisteniu, že úmrtnosť počas niekoľkých málo rokov po infarkte sa zdá byť vo vzťahu k veľkosti pôvodného infarktu.

Pri predklinických štúdiách infarktu, vykonaných na mnohých živočíšnych modeloch, bolo preukázané, že mnohé typy farmakologicky účinných látok, ako sú zlúčeniny, blokujúce vápnikovú cestu, analógy prostacyklínu a látky schopné inhibovať niektoré metabolické pochody, sú schopné redukovať ischemické problémy na niekoľkých živočíšnych druhoch.

V najnovších štúdiách bolo preukázané, že ak je myokard vystavený na kratší čas ischémii (prerušenie toku krvi do srdca) s následnou reperfúziou (obnovenie krvného toku), je tým možné chrániť srdce pred následnými ischemickými problémami, ktoré by inak nasledovali po ďalšom pôsobení ischémie po dlhší čas. Tento jav bol označený ako myokardové predkondiciovanie a existuje domnienka, že je to možné čiastočne pripísať uvoľňovaniu adenozínu počas tohto časového, vyššie uvedeného obdobia.

Ďalšími štúdiami sa zistilo, že adenozín a jeho analógy znižujú rozsah poškodenia tkaniva, ako je to možné pozorovať po prerušení toku krvi do srdca pri rôznych modeloch ischemických problémov na niekoľkých species, viď napríklad Toombs C. a kol., „Myocardial protective effects of adenosine. Infarct size reduction with pretreatment and continued receptor stimulation during ischémia“, Circulation 86, 986-994 (1992), ďalej Thomton J. a kol., „Intravenous pretreatment with Ai-selective adenosine analogues protects the heart against infarction“, Circulation 85.659-665 (1992); a Downey J., „Ischemic proconditioning - nature’s own cardioprotective intervention“, Trends Cardiovasc. Med. 2_(5), 170-176 (1992).

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu napodobňujú predkondiciovanie myokardu, čím zlepšujú prípadné ischemické problémy alebo sú spojené s redukciou veľkosti infarktu myokardu v dôsledku myokardovej ischémie a preto sa hodia na použitie ako kardioprotektívne činidlá.

Antilipolýza

Hyperlipidémia a hypercholesterolémia sú - ako je známe - dva z hlavných rizikových faktorov pre aterosklerózu a koronárne srdcové ochorenie, čo je hlavnou príčinou úmrtia a neschopnosti v západných krajinách. Aj keď etiológia aterosklerózy je ovplyvnená mnohými faktormi, vývoj aterosklerózy a podmienok stavov, zahŕňajúcich ochorenie koronárnych artérií, periférne vaskulárne ochorenia a cerebrovaskulárne ochorenia sú dôsledkom obmedzeného prietoku krvi, je v spojitosti s abnormalitami s hladinou cholesterolu a lipidov v séru. Etiológia hypercholesterolémie a hyperlipidémie je primárne genetická, aj keď tu môžu veľmi * prispieť ďalšie faktory, ako je nadmiera skonzumovaných nasýtených tukov a cholesterolu.

Antilipolytická účinnosť adenozínu a jeho analógov plynie z aktivovania Ar receptorového subtypu, viď Lohse M. J. a kol., Recent Advances in Receptor Chemistry; Melchiorre C. a Gianella, vy d., Elsevier Science Publishers B. V., Amsterdam 1988,107-121. Stimulovanie tohto receptorového subtypu znižuje intercelulárnu koncentráciu cyklických AMP v adipocytoch. Cyklický AMP je potrebný kofaktor na enzýmovú lipoproteínovú lipázu, ktorá hydrolyticky štiepi triglyceridy na voľné mastné kyseliny a glycerol v adipocytoch, viď Egan J. J. a kol., Proc. Natl. Acad. Sci. 1992(89), 8357-8541. Podľa toho redukcia interacelulárneho cyklického AMP z hľadiska koncentrácie v adipocytoch znižuje aktivitu lipoproteínovej lipázy a tým aj hydrolýzu triglyceridov.

Zvýšený krvný tlak a zvýšený podiel lipidov v plazme sú dva známe rizikové faktory v spojitosti s úmrtnosťou v dôsledku kardiovaskulárnych ochorení.

Pre pacienta postihnutého cukrovkou je možnosť mortality po kardiovaskulárnom .· ochorení podstatne vyššia, riziko v spojitosti s týmito faktormi sa ďalej zvyšuje, viď Bierman E. L., Arteriosclerosis and Thrombosis, 1992 (12), 637-656. Ďalšie údaje sú v tom zmysle, že nadmerná lipolýza je charakteristikou diabetes závislej nie na inzulíne a asi veľmi prispieva k rezistencii na inzulín a hyperglykémii, viď Swislocki

A. L., Horm. Metab. Res. 1993 (25), 90-95.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu ako antihypertenzné a antilipolytické činidlá sú vhodné na liečbu a zlepšenie rizikových faktorov tak vaskulárnych, ako aj metabolických, majú teda zvláštnu cenu a použiteľnosť.

Tento vynález sa dotýka skupiny analógov adenozínu a ich použiteľnosti na liečbu hypertenzie, myokardovej ischémie, ďalej sa hodia ako činidlá na ochranu srdca, zlepšujúce ischemické problémy alebo rozsah infarktu myokardu v dôsledku ischémie myokardu, ďalej sa hodia ako antilipolytické činidlá, znižujúce hladinu lipidov v plazme, hladinu triglyceridov v plazme a tiež sa dotýka spôsobu prípravy týchto zlúčenín aj medziproduktov pri ich príprave.

Posledný vývoj na tomto úseku

Adenozín sa vyznačuje širokým rozsahom fyziologických a farmakologických účinkov, vrátane význačnej zmeny kardiovaskulárnych a renálnych funkcií. U zvierat aj ľudí spôsobujú intravenózne injekcie adenozínového nukleotidu hypotenziu.

Fyziologické a farmakologické účinky adenozínu sú sprostredkované špecifickými receptormi, umiestnenými na povrchu buniek. Boli identifikované 4 subtypy adenozínových receptorov, označené A_1f A_2a, A₂b a A3. Receptor A! inhibuje tvorbu cAMP potlačením aktivity adenylátovej cyklázy, zatiaľ čo stimulovanie A₂ receptorov sa prejaví zvýšením aktivity adenylátovej cyklázy a zvýšením intracelulárneho cAMP. Zdá sa, že každý receptor sprostredkováva špecifické účinky adenozínu v rôznych tkanivách. Napríklad vaskulárne pôsobenie adenozínu sa zdá byť sprostredkované stimulovaním receptoru A₂, čo je podporované pozitívnym porovnaním medzi generovaním cAMP a vazorelaxáciou izolovaného vaskulárneho hladkého svalstva po pôsobení adenozínu; stimulácia kardiálnych A^receptorov redukuje generovanie cAMP v srdci, čo prispieva k negatívnym dromotropným, inotropným a chronotropným kardiálnym účinkom. V dôsledku toho, rovnako ako je tomu v prípade väčšiny vazodilátorov, podávanie adenozínu nie je spojené s reflexnou tachykardiou.

Adenozín sa tiež vyznačuje zrejmým pôsobením na renálnu funkciu. Intrarenálne infúzie adenozínu spôsobia prechodný pokles renálneho krvného toku a zvyšuje renálnu vaskulárnu rezistenciu; s pokračujúcimi infúziami adenozínu sa renálny krvný tok vráti na kontrolovanú hladinu a renálna vaskulárna rezistencia sa zníži. Počiatočné renálne vazokonstrikčné odozvy adenozínu nie sú spôsobené priamo vazokonstrikčným pôsobením nukleotidu, ale zahŕňajú interakcie medzi adenozínom a renín-angiotenzívnym systémom.

Adenozín je všeobecne pokladaný za primárny fyziologický mediátor reaktívnej hyperémie a autoregulovanie koronárneho usporiadania na odozvu na myokardovú ischémiu. Bolo už oznámené, že koronárny endotel obsahuje adenozín A₂ receptory viazané na adenylátovú cyklázu, ktorá sa aktivuje paralelne so zvýšením koronárneho toku a že kardíomyocytové receptory sú prevažne subtypu adenozín Ai a v spojitosti s bradykardiou. Podľa toho je adenozín vo vzťahu k jedinečnému mechanizmu ischemickej liečby.

Kardiovaskulárne odozvy na adenozín majú krátku životnosť v dôsledku rýchleho príjmu a metabolizmu endogénneho nukleotidu. Na rozdiel od toho sú analógy adenozínu podstatne odolnejšie pri metabolickom odbúravaní a zistilo sa, že vyvolávajú trvalé zmeny arteriálneho tlaku a srdcového tepu.

Synteticky bolo pripravených niekoľko silne účinných, metabolický stabilných analógov adenozínu, ktoré sa vyznačujú rôznymi stupňami selektivity pre dva receptorové subtypy. Adenozínové agonisty, ktoré majú väčšiu selektivitu na A, receptory v porovnaní s A₂ receptormi, teda cyklopentyladenozín (CPA) a Rfenylizopropyladenozín (R-PIA) sú štandardnými adenozínovými agonistami, u ktorých sa prejavuje nápadná selektivita na Ai receptor (pomer A2/A1 = 780 a 106 v tom ktorom prípade). Naopak, N-5’-etylkarboxyamidoadenozín (NECA) a mohutným A₂ receptorovým agonistom (Ki-12 nM) s rovnakou afinitou pre Ai receptor (Ki-6,3 nM; pomer A₂/Ai = 1,87). Až doposiaľ bol CV-1808 najselektívnejšie dostupný A₂ agonistom (A₂/Aí = 0,19), aj keď sa predpokladá, že zlúčenina je desať razy menej účinná ako NECA svojou aktivitou pre A₂ receptor. Pri ďalšom súčasnom vývoji boli objavené novšie zlúčeniny, ktoré sú veľmi účinnými a selektívnymi A₂ agonistami, (Ki = 3-8 nM pre A-ι, pomer A₂/Ai = 0,027 - 0,042), viď Muller C. E. a Scior T., Pharmaceutica Acta Hev. 68, 77-111 (1993).

V literatúre bolo oznámené, že mnohé N6-aryl- a N6-hetero-arylalkylsubstituované adenozíny a substituované (2-amino- a 2-hydroxy-)adenozíny sa vyznačujú rôznymi farmakologickými aktivitami, vrátane kardiálnej a cirkulačnej aktivity, viď napríklad Brit. pat. 1 123 245, Nem. vyl. spis 2 136 624, 2 059 922, 2 514 284, Jihoafr. pat. spis 67/7630, US. pat. spis 4 501 735, EP publ. 0139358, opisujúci N-6(geminálne diarylsubstituované alkyl)adenozíny, EP. pat. prihl. 88107818.3, opisujúce N6-heterocyklicky substituované adenozínové deriváty s kardiálnou vazodilatačnou aktivitou, Nem. vyl. spis 2 131 938, opisujúci aryl- a heteroaryl-alkylhydrazinyl-adenozínové deriváty, Nem. vyl. spis 1 151 013, opisujúce N6-aryl- a heteroaryl-substituované adenozíny, Nem. vyl. spis 2 205 002, opisujúci adenozíny s N6-substituentami s obsahom premosťujúcom cyklické štruktúry, viazané na N6-dusíkový atóm na substituenty so zahrnutím tienylových a Jihoafr. pat. spis 68/547 7, opisujúci N6-indolyl-substituované 2-hydroxyadenozíny.

US. pat. spis 4 954 504 a EP publ. 0267878 opisujú genericky, že karbocyklické ribózové analógy adenozínu a ich zodpovedajúce farmaceutický prijateľné estery, substituované v polohách 2- a/alebo N6 nižšími arylalkylovými skupina, vrátane

I tienylovej, tetrahydropyranylovej, tetrahydrotiopyranylovej a bicyklické napojené päťalebo šesťčlenné nasýtené heterocyklické substituované nižšie alkylové deriváty, sa vyznačujú vlastnosťami adenozín-receptorových agonistov. Adenozínové analógy so substituentami tienylového typu sú opisované v EP publ. 0277917. Dotýka sa to N6substituovaných-2-heteroarylalkylaminosubstituovaných adenozínov, vrátane 2-((2([tien-2-yl)etyl)amino) substituovaný adenozín, ďalej. Nem. vyl. spisu 2 139 107, opisujúcim N6-(benzotienylmetyl)-adenozín, v PCT WO 85/04882, opisujúcim N6heterocykloalkylsubstituované adenozínové deriváty, vrátane N6-[2-(2-tienyl)etyl]amino-9-(D-ribofuranozyl)-9H-purín, ktorý sa vyznačuje kardiovaskulárnou vazodilatačnou aktivitou a N6-chirálne substituenty sa vyznačujú ešte vyššou aktivitou, v EP publ. 0232812, opisujúcim N6-(1 -substituované tienyl)-cyklopropylmetylsubstituované adenozíny s vysokou kardiovaskulárnou aktivitou, US pat. spise 4 683 223, opisujúcim N6-benzotiopyranyl substituované adenozínové deriváty s antihypertenznými vlastnosťami, PCT WO 88/03148 a WO 88/13148, opisujúcimi N6-[2-aryl-2-(tien-2-yl)-etyl]-substituované adenozínové deriváty s antihypertenznými vlastnosťami, US. pat. 4 636 493 a 4 600 707, opisujúcimi N6benzotienyl-etyl-substituované adenozínové deriváty s antihypertenznými vlastnosťami.

Amidy adenozín-5’-karboxylovej kyseliny sú opisované s použiteľnosťou ako antihypertenzné a antianginálne činidlá v US. pat. 3 914 415, zatiaľ čo US. pat. spis 4 738 954 opisuje, že sa N6-substituované aryl- a arylalkyladenozín-5’-etylkarboxamidy vyznačujú rôznymi kardiálnymi a antihypertenznými vlastnosťami.

V EP publ. 0 378 518 a UK prihl. 2 226 027 sú opisované N⁶-alkyl-2’-Oalkyladenozíny s antihypertenznou účinnosťou, podľa US. pat. spisu 4 843 066 má N⁶-alkyl-2’,3’-di-O-alkyladenozín a látky tejto skupiny tiež použiteľnosť ako antihypertenzné činidlo.

Amidy a estery adenozín-5’-(N-substituovanej)-karboxylovej kyseliny, ako aj N1oxidy sú opisované ako koronárne vazodilátory, viď Stein a kol., J. Med. Chem. 23’. 313-319 (1980) a J. Med. Chem. 19, 1180 (1976). Adenozín-5’-karboxamidy a zodpovedajúce N1-oxidy sú opísané ako jedy pre malé zvieratá, viď US. pat. spis 4 167 565.

Antilipolytickú účinnosť adenozínu opísal Dole V. P., J. Biol. Chem. 236. 31253130 (1961). Inhibícia lipolýzy pôsobením (R)-N⁶-fenylizopropyladenozínu je diskutovaná Westermannom E. a kol., Adipose Tissue, Regulation and Metabolic Functions, vyd. Jeanrenaud B. a Hepp D., George Thieme, Stuttgart 47-54 (1970). Ako antilipolytiká sú opisované analógy N⁶-mono- a disubstituované adenozíny, ďalej potom ako látky s antihypercholesterolemickým a antihyperlipemickým účinkom, viď US. pat. spis 3 787 391, 3 817 981, 3 838 147, 3 840 521, 3 835 035, 3 · 851 056, 3 880 829, 3 929 763, 3 929 764, 3 988 317 a 5 032 583.

N6-substituované deriváty adenozínu a ich analógy, použiteľné látky pri gastrointestinálnych problémoch, sú v EP prihl. 0423 776 a 0423 777.

Ν-6-heterocyklylové zlúčeniny, odvodené od adenozínu a zodpovedajúce analógy a ich použitie na liečbu hypertenzie a myokardovej ischémie, ďalej ich použitie ako kardioprotektívnych činidiel, ktoré zlepšujú ischemické problémy alebo rozsah infarktu myokardu v dôsledku myokardovej ischémie, ich použitie ako antilipolytických činidiel, ktoré znižujú hladinu plazmových lipidov, hladinu sérových triglyceridov a hladinu plazmového cholesterolu, sú opisované v US. prihláške 08/316 761 z 3. 10. 1994 rovnakých autorov, ako tohto textu („Notice of Allowance“ odoslané 26. 3. 1996).

US. pat. spis 5 363 862 z 2.10.1992 rovnakých autorov ako tohto textu, opisuje N6-heterocyklyl-deriváty adenozínu a jeho analógov a ich použitie na liečbu myokardovej ischémie a hypertenzie.

Predpokladá sa, že hlásená toxicita, CNS-vlastnosti a zvýšenie tepu srdca v súvislosti s analógmi prispeli k problémom predchádzať vývoju komerčných adanozínových analógov ako antihypertenzných a antiischemických činidiel. Tento vynález sa vzťahuje na skupinu metabolický stabilných adenozínových analógov, ich derivátov, majúcich nečakane žiaducu farmakologickú vlastnosť, teda sú antihypertenzné, kardioprotektívne, antiischemické a antilipolytické látky s jedinečným terapeutickým profilom.

Podstata vynálezu

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu zodpovedajú všeobecnému vzorca I

Ä B kde

K znamená dusík, N £ O alebo skupinu CH

Q znamená metylénovú skupinu alebo kyslík,

Rs znamená vodík, skupinu alkylovú, alylovú, 2-metylalylovú, 2-butenylovú alebo

cykloalkylovú,
X znamená	(		/ N	í/vn
	)n
		(	. alebo	/ \
		)p	Vi
	/

kde dusíkový atóm kruhu X môže byť nahradený v zmysle Y

E znamená kyslík alebo síru,

Y znamená vodík, skupinu alkylovú, aralkylovú, substituovanú aralkylovú, arylovú, substituovanú arylovú, heterocyklylovú, substituovanú heterocyklylovú, heterocyklylalkylovú alebo substituovanú heterocyklylalkylovú, n a p znamenajú navzájom nezávisle 0,1, 2 alebo 3, za predpokladu a obmedzenia, že n + p zodpovedajú najmenej 1,

T znamená vodík, skupinu alkylovú, acylovú, tioacylovú, halogén, karboxylovú,

R3O-CH2 alebo

R₁ s

Ri, R2 a R₃ znamenajú navzájom nezávisle vodík, skupinu alkylovú alebo cykloalkylovú

A znamená vodík, skupinu alkylovú, hydroxyalkylovú, alkoxyalkylovú alebo OR’, B znamená vodík, skupinu alkylovú, hydroxyalkylovú, alkoxyalkylovú alebo OR”,

R’ a R” znamenajú navzájom nezávisle vodík, skupinu alkylovú, aralkylovú, karbamoylovú, alkylkarbamoylovú, dialkylkarbamoylovú, acylovú, alkoxykarbonylovú, araloxykarbonylovú, aryloxykarbonylovú, alebo keď A a B znamenajú v tom ktorom prípade OR’ a OR”, tvoria R’ a R” spolu

kde R_c znamená vodík alebo alkylovú skupinu,

R* kde R_d a R_e znamenajú navzájom nezávisle vodík, skupinu alkylovú alebo tvoria dohromady s uhlíkovým atómom, kde sú viazané 1,1-cykloalkylovú skupinu, rovnako aj ich farmaceutický prijateľné soli.

Vynález sa práve tak dotýka spôsobu liečenia kardiovaskulárnych ochorení, charakterizovaných hypertenziou alebo myokardovou ischémiou s použitím farmaceutických kompozícií, obsahujúcich antihypertenzne účinné množstvo alebo anti-ischemicky účinné množstvo zlúčeniny všeobecného vzorca I (vyššie), ako aj spôsobu zlepšenia ischemických problémov alebo veľkosti infarktu myokardu s použitím kompozícií, obsahujúcich kardioprotektívne množstvo zlúčeniny všeobecného vzorca I, uvedeného vyššie, spôsobov liečby hyperlipidémie alebo hypercholesterolémie s použitím farmaceutických kompozícií, obsahujúcich antilipolytické množstvo zlúčeniny vzorca I, spôsobov prípravy a medziproduktov, použitých na prípravu týchto zlúčenín.

Ak sú použité už skôr a potom v opise tohto vynálezu, majú ďalej uvedené pojmy - ak nie je výslovne uvedené inak - tieto významy:

„Acyľ znamená priamu alebo rozvetvenú skupinu vzorca alkyl-C=O.

„Tioacyľ znamená priamu alebo rozvetvenú skupinu alkyl-C=S.

Výhodnými acylovými a tioacylovými skupinami sú nižšie alkanoylové a nižšie tioalkanoylové skupiny s jedným až asi šiestimi atómami uhlíka v alkylovom zvyšku.

„Alkyľ znamená nasýtenú alifatickú uhľovodíkovú skupinu, ktorá môže byť priama alebo rozvetvená s asi jedným až asi dvadsiatimi atómami uhlíka v reťazci. Výhodné alkylové skupiny, či už priame alebo rozvetvené, obsahujú v reťazci jeden až asi 10 atómov uhlíka. Vetvením je myslené, že nižšia alkylová skupina, ako je metylová, . etylová alebo propylová je viazaná na lineárny alkylový reťazec.

„Nižšia alkylová skupina“ znamená alkylovú skupinu s 1 až 6 atómami uhlíka.

„Cykloalkyľ znamená alifatický cyklus s 3 až asi 10 atómami uhlíka v cykle, s tým, že výhodné skupiny majú 4 až asi 7 uhlíkových atómov v cykle.

Ο II „Karbamoylová skupina“ znamená skupinu vzorca H₂N-C; alkylkarbamoylovej alebo dialkylkarbamoylovej skupiny majú dusíkový atóm substituovaný jednou alebo dvoma alkylovými skupinami.

„Karboxyľ znamená skupinu vzorca -COOH.

„Alkoxy“ znamená alkyl-0 skupinu, kde alkyl má už vyššie uvedené významy s tým, že nižšie alkoxylové skupiny sú skupinami výhodnými a ako príklady je možné uviesť skupiny metoxylovú, etoxylovú, n-propoxylovú, izopropoxylovú a nbutoxylovú.

„Alkoxyalkylová skupina“ znamená alkylovú skupinu, ako bola opísaná vyššie, substituovanú alkoxylovou skupinou, ako už bolo opísané vyššie.

„Alkoxykarbonylová skupina“ znamená skupinu alkoxy-C=O.

„Aralkyl“ znamená alkylovú skupinu, substituovanú arylovým zvyškom s tým, že aryl znamená fenyl alebo naftyl. „Substituovaná aralkylová“ alebo „substituovaná arylová“ skupina znamená, že arylová skupina alebo arylová časť aralkylovej skupiny je substituovaná jeden alebo viackrát substituentami, ako sú skupiny alkylové, alkoxylové, aminoskupiny, nitroskupiny, skupiny karboxylové, karboalkoxylové, nitrilové, alkylaminoskupiny, halogény, skupiny hydroxylové, hydroxyalkylové, merkaptylové, alkylmerkaptylové, trihalogénalkylové, karboxyalkylové alebo karbomoylové.

„Aralkoxykarbonylová skupina je skupina aralkyl-O-C=O.

„Aryloxykarbonylová skupina“ je skupina vzorca aryl-O-C=O.

„Karbalkoxylová skupina“ je karboxylová skupina, esterifikovaná alkoholom vzorca C_nH₂n+iOH, kde n znamená celé kladné číslo od 1 do asi 6.

„Halogén“ znamená chlór, fluór, bróm alebo jód.

„Heterocyklylová skupina“ je cyklická štruktúra so 4 až 10 členmi, kde jeden alebo viacej členov cyklu má iný význam ako uhlík, napríklad znamená dusík, síru alebo kyslík. Heterocyklické skupiny môžu byť aromatické alebo nearomatické.

Za výhodné heterocyklické skupiny je potrebné pokladať tieto: pyridylovú, pyridazinylovú, pyrimidinylovú, izochinolinylovú, chinolinylovú, chinazolinylovú, imidazolylovú, pyrolylovú, furanylovú, tienylovú, tiazolylovú, benzotiazolylovú, piperidinylovú, pyrolidinylovú, tetrahydrofuranylovú, tetrahydropyranylovú a morfolinylovú.

„Substituovaná heterocyklylová skupina“ znamená heterocyklylovú skupinu, substituovanú jeden alebo viackrát substituentami, ako sú skupiny alkoxylové, alkylaminoskupiny, arylové, karbalkoxylové, karbamoylové, nitrilová, halogény, heterocyklylové, trihalogénmetylové, hydroxylová, merkaptylová, alkylmerkaptylová a nitroskupina.

„Hydroxyalkylová skupina“ znamená alkylovú skupinu, substituovanú skupinou hydroxylovou. Nižšie hydroxyalkylové skupiny je možné označiť za výhodnejšie a ako príklady je možné uviesť skupinu hydroxymetylovú, 2-hydroxyetylovú, 2hydroxypropylovú a 3-hydroxypropylovú.

„Prodrug“ znamená látku, ktorá môže, ale aj nemusí, byť sama aktívna, ale ktorú možno zmeniť na biologicky aktívnu chemickú látku, a to metabolický, solvolyticky alebo inými fyziologickými postupmi.

„Kardioprotekcia“ znamená jav, keď myokard je menej náchylný na ischemické poškodenie a infarkt myokardu v dôsledku myokardovej ischémie.

„Zlepšenie ischemických problémov“ znamená prevenciu alebo redukciu ischemických problémov v oblasti myokardu v dôsledku myokardovej ischémie.

„Zlepšenie rozsahu infarktu myokardu“ znamená buď redukciu rozsahu infarktu myokardu alebo prevenciu infarktu myokardu ako následok myokardovej ischémie.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I obsahujú chirálne (asymetrické) centrá, vynález sa dotýka individuálnych stereo izomérov a ich zmesí. Individuálne izoméry sa pripravujú alebo izolujú použitím odborníkom známymi postupmi, alebo s použitím postupov, opisovaných ďalej.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa môžu použiť vo forme voľných bází, adičných solí kyselín alebo hydrátov. Všetky tieto formy spadajú do rozsahu tohto vynálezu. Použitie adičných solí kyselín je jednoduchšie a vhodnejšie. V praxi to znamená, že použitie soli bezprostredne zahŕňa použiteľné množstvo vo forme báze. Kyseliny, ktoré sa dajú použiť na prípravu uvedených adičných solí, zahŕňajú najmä tie, ktoré v kombinácii s bázami poskytujú farmaceutický prijateľné soli, t. j. také, ktorých anióny nie sú toxické pre príjemcov vo farmaceutický podávaných dávkach, preto prospešný účinok antihypertenzný, kardioprotektívny, antiischemický a antilipolytický, spojený s voľnými bázami, nie je rušený vedľajšími účinkami, pripisovanými aniónu.

Aj keď farmaceutický prijateľné soli zlúčenín podľa tohto vynálezu je možné označiť za výhodné, sú všetky adičné soli kyselín vhodné ako zdroj voľných bází, aj keď niektorá soľ ako taká je vhodná iba ako medziprodukt, napríklad, ak vznikla taká soľ iba na účel čistenia a identifikovania, alebo ak je použitá ako medziprodukt na prípravu farmaceutický prijateľnej soli postupom iónovej výmeny. Farmaceutický prijateľné soli, spadajúce do rozsahu tohto vynálezu sú odvodené od týchto kyselín: z minerálnych chlorovodíková, sírová, fosforečná a sulfámová, z organicných octová, citrónová, mliečna, vínna, malónová, metánsulfónová, fumárová, etánsulfónová, benzénsulfónová, p-toluénsulfónová, cyklohexánsulfamová, chinová a pod. Zodpovedajúce adičné soli kyselín zahŕňajú teda hydrochloridy, sírany, fosforečnany, sulfamáty, octany, soli kyseliny citrónovej, mliečnany, tartronoyly, metánsulfonáty, fumaráty, etánsulfonáty, benzénsulfonáty, p-toluénsulfonáty, cyklohexylsulfonáty a soli kyseliny chinovej, v tom ktorom prípade.

Adičné soli kyselín a zlúčenín podľa tohto vynálezu sa bežne a jednoducho pripravujú rozpustením voľnej báze vo vodnom alebo vodno-alkoholickom roztoku, alebo inom vhodnom roztoku, obsahujúcom zodpovedajúcu kyselinu a izolovaním soli zahustením roztoku, alebo reakciou voľnej bázi s kyselinou v organickom rozpúšťadle a v tomto prípade sa soľ buď vylúči samovoľne, alebo sa izoluje koncetrovaním roztoku.

Do rozsahu všeobecného vzorca I sú zahrnuté skupiny zlúčenín, ktoré je možné všeobecne charakterizovať ako N6-substituované adenozíny, N6-substituované karbocyklické adenozíny, alebo inak dihydroxy-(N6-substituované-9-adenyl)cyklopentány a ich N-oxidy, ďalej N6-substituované-N’-1-deazaaristeromycíny, inak dihydroxy-(N7-substituované[4,5-b]imidazopyridyl)-cyklopentány. Do rozsahu zlúčenín vzorca I spadajú aj 5’-alkylkarboxamidové deriváty adenozínov, karbocyklické adenozíny a 1-deazaaristeromycíny, deriváty zlúčenín všetkých práve uvedených skupín, kde sú substituované jedna alebo obe 2- alebo 3-hydroxylové skupiny cyklopentánového kruhu, alebo v prípadoch zlúčenín, obsahujúcich ribózový podiel, skupiny hydroxylové v polohách 2’- alebo 3’-. Tieto deriváty môžu ako také predstavovať biologicky aktívny chemický celok, použiteľný na liečbu hypertenzie alebo myokardovej ischémie, ďalej ako kardioprotektívne a antilipolytické činidlá, alebo sa môžu používať vo forme pro-drugov na vznik biologicky aktívnych látok, ktoré z nich vznikajú za fyziologických podmienok.

Ako príklad zlúčeniny podľa tohto vynálezu je možné uviesť:

(2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-(6-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl)-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3S,4R,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1 -(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(R)ylaminoj-purín-S-ylJ-tetrahydrofurán-S^-diol, (2R_l3R_I4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R_l3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylaminoj-purín-G-ylJ-tetrahydrofurán-S^-diol, (2R,3R_l4S₎5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl)-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R_l3R_I4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R_l3R_l4S_I5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[5’-trifluórmetyl-3,4_I5,6-tetrahydro-2H-(1_I2’)bipyridinyl-3-yl]-purín-9-yl)-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R₁4S₁5R)-2-hydroxymetyl-5-[6-(fenylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl]tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S_I5R)-2-hydroxymetyl-5-[6-(1-pyridín-2-ylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9ylJ-tetrahydrofurán-S^-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4Chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-metylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylaminoJ-purín-g-ylJ-tetrahydrofurán-S^-diol, (2R_l3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-tiofén-2-ylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylaminoJ-purín-g-ylJ-tetrahydrofurán-S^-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-metylmerkaptopyridín-2-yl)-pyrolidín3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S_l5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(6-metoxypyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)ylaminoJ-purín-g-ylJ-tetrahydrofurán-S^-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)ylaminol-purín-g-ylJ-tetrahydrofurán-S^-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5{6-[1-(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3-ylamino]purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S_I5R)-2-metoxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín“2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (1 S,2R,3S,4R)-2, 3-dihydroxy-4-{6-[1 -(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3ylaminoj-purín-g-ylj-cyklopentánkarboxetylamid, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-nitrofenyl)-piperidín-4-yl]-purín-9-yl)cyklopentán-1,2-diol, dihydrochlorid (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-[6-((3S)-pyrolidín-3-ylamino)purín-9-yl]-cyklopentán-1,2-diolu, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(R)ylamino]-purín-9-yl)-cyklopentán-1,2-diol, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-[6-((3R)-pyrolidín-3-yl-amino)-purín-9-yl]cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl)-cyklopentán-1,2-diol, hydrochlorid 4(R)-1-benzyl-4-[9-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymetylcyklopentyl)-9Hpurín-6-ylamino]-pyrolidín-2-ónu, (1R,2S,3R,5S)-5-metyl-3-(6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(pyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl)-cyklopentán-1,2-diol, hydrochlorid 4(S)-1-benzyl-4-[9-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymetylcyklopentyl)-9Hpurín-6-ylamino]-pyrolidín-2-ónu, (1 R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1 -(ch inolín-3-y l)-py rol idín-3 (S)-y lam ino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(S)-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3(S)-ylaminoJpurín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S_I3R,5R)-5-{6-[1-(4,5-bistrifluórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9yl}-3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(fenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}cyklopentán-1,2-diol,

4-{3(S)-[9-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymetylcyklopentyl)-9H-purín-6-ylamino]pyrolidín-1 -y I}-benzonitril, (1 R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1 -(izochinolín-1 -yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-brómchinolin-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-{6-[1-(chlór-5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-izopropoxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín3(S)-ylamino]-purín-9-yl)-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-izopropoxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-

3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-yIamino]-purín-9-yl)3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1 -(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-(6-[1-(6-metoxypyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4-trifluórmetylfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl)-5-{6-[1-(4-trifluórmetylfenyl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(3-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(3-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-[6-(1-fenylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl]-5cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-[6-(1-benzylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl]-5hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-benzylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl]-5metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (S)-sek.-butylamid kyseliny (1 S,2R,3S,5R)-2,3-dihydroxy-4-{6-[1 -(5trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentánkarboxylovej a (R)-sek.-butylamid kyseliny (1S,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4-{6-[1-(5trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentánkarboxylovej.

Výhodnou skupinou zlúčenín podľa tohto vynálezu sú látky vzorca l, kde K, N a T znamenajú skupinu hydroxymetylovú alebo metoxymetylovú, A a B sú hydroxylové skupiny, X znamená /

( ' /-a súčet n + p znamená 3 alebo 4, rovnako aj ich farmaceutický prijateľné soli. Ako príkladné zlúčeniny tejto skupiny je možno uviesť:

(2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3S,4R,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(R)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-(6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-(6-[1-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5{6-[5’-trifluórmetyl-3,4,5,6-tetrahydro-2H-[1,2^,]bipyridinyl-3-yl)-purín-9-yl]-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-[6-fenylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl]tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-pyridín-2-ylpyrolidín-3(S)-ylamino]-purín9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-metylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-tiofén-2-ylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-metylmerkaptopyridín-2-yl)-pyrolidín3(S)-ylamino]-purín-9-yl)-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(6-metoxypyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purin-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-metoxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-nitrofenyl)-piperidín-4-yl]-purín-9-yl)cyklopentán-1,2-diol, dihydrochlorid (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-(6-[(3S)-pyrolidín-3-ylamino]purín-9-yl]-cyklopentán-1,2-diolu, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5{6-[1-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1S,2R_l3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(R)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol., (IS^R.SR.SRJ-S-hydroxymetyl-S-te-CCSRJ-pyrolidín-S-ylaminoJ-purín-íJ-yl]cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S_l3R,5R)-5-{6-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1 R^S.SR.SRJ-S-hydroxymetyl-S-fe-tl-Cpyridín^-yO-pyiOlidín-SíSJ-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(chinolín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylannino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-S-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1 R_l2S,3R_I5R)-5-{6-[1-(4,5-bistrifluórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9yl}-3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl]-cyklopentán-1,2-diol, (1R_l2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(fenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}cyklopentán-1,2-diol,

4-{3(S)-[9-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymetylcyklopentyl)-9H-purín-6-ylamino]- py rol idín-1 -yl}-benzon itril, (1 R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1 -(izochinolín-1 -yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R_I5R),5-{6-[1-(6-brómchinolín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S_I3R,5R)-3-{6-[1-(3-chlór-5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-3-metoxymetylcyklopentán-1,2-idol, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1 -(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl)3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (IR.žS.SR.SRJ-S-fe-n-Ce-chlórpyridazín-S-yO-pyrolidín-SCSJ-ylaminoj-purín-g-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(6-metoxypyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl)3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4-trifluórmetylfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylfenyl)- pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(3-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(3-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-[6-(1 -fenylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl]cyklopentán-1,2-diol a (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-benzylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl]-5metoxymetylcyklopentán-1,2-diol.

Ďalšia výhodná skupina zlúčenín podľa tohto vynálezu sú látky vzorca I, kde

Q znamená metylénovú skupinu

K znamená dusík _R \ ||

-r ' . · * n - c

T znamena skupinu vzorca / ^R<Z s tým, že Ri znamená vodík a R₂ nižšiu alkylovú skupinu, A a B sú hydroxylové skupiny

X znamená skupinu vzorca )p s tým, že súčet n + p sa rovná 3 alebo 4, rovnako aj ich farmaceutický prijateľné soli.

Ako príklady zlúčenín tejto výhodnej skupiny je možné uviesť:

2,3-dihydroxy-4-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl}cyklopentánkarboxetylamid, (S)-sek.-butylamid kyseliny (1 S,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4-(6-[1 -(5trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentánkarboxylovej, a (R)sek.-butylamid kyseliny (1S,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4-{6-[1-(5trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidin-3-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentánkarboxylovej.

Ešte výhodnejšia skupina zlúčenín vzorca I podľa tohto vynálezu sú látky, kde

Q znamená metylénovú skupinu,

K znamená dusík

T znamená hydroxymetylovú alebo metoxymetylovú skupinu,

A a B sú hydroxylové skupiny,

X je skupina vzorca /

( )p /

kde súčet (n + p) sa rovná 3 alebo 4, rovnako aj ich farmaceutický prijateľné soli. Ako reprezentatívne príklady tejto výhodnej skupiny je možno uviesť:

(1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-(6-[1-(4-nitrofenyl)-piperidín-4-y]l-purín-9-yl}cyklopentán-1,2-diol, dihydrochlorid (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-[6-((3S)-pyrolidín-3-ylamino)purín-9-yl]-cyklopentán-1,2-diolu, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3-ylamino)-purín-9yl]-cyklopentán-1,2-diol, (1 S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(R)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[(3R)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl)cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxycyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-4-{5-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(pyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl)-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(chinolín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl)-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-S-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl)-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S₍3R,5R)-5-{6-[1-(4,5-bistrifluórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9yl}-3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(fenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl)cyklopentán-1,2-diol,

3-{4(S)-[9-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymetylcyklopentyl)-9H-purín-6-ylamino]pyrolidín-1 -yl}-benzonitril, (1 R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1 -(izochinolín-1 -yl)pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-brómchinolín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-(6-[1-(4-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-{6-[1-(3-chlór-5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylaminoJpurín-9-yl}-3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R.2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-(6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S_I3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(6-metoxypyrimidin-4-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl)-cyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4-trifluórmetylfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylfenyl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-(6-[1-(4-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-(6-[1-(3-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-(6-[1-(3-chlórfenylpyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-fenylpyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl)cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-{6-(1-benzylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl}-5hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol a (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-benzylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl]-5metoxymetylcyklopentán-1,2-diol.

Najvýhodnejšími látkami podľa tohto vynálezu sú:

(1 R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl)-cyklopentán-1,2-diol, a (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}cyklopentán-1,2-diol.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu je možné pripravovať známymi postupmi alebo v zhode s reakčným sledom, ako je opisovaný ďalšej. Východiskové látky na prípravu týchto zlúčenín sú známe alebo obchodne dostupné, ďalej sa dajú pripravovať známymi postupmi alebo špecifickými reakciami podľa priložených schém.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde K znamená dusík, Q znamená kyslík a T znamená skupinu R3O-CH2, sa dajú pripraviť reakciou obchodne dostupného 6chlórpurínribozidu s rôznymi nesubstituovanými alebo substituovanými skupinami alkylovými, aralkylovými, arylovými, substituovanými arylovými, heterocyklylovými, substituovanými heterocyklylovými azacykloalkylamínmi alebo ich derivátmi s ochrannou skupinou (ďalej označované ako „vhodné východiskové amíny“). Príklad je uvedený ďalej.

Zlúčeniny všeobecného vzorca I, kde K znamená dusík, Q znamená kyslík a T znamená skupinu RiR₂N-C=O sa pripravujú obdobne s použitím produktu z reakčnej schémy A. Pri tejto reakcii sa pôsobí na 6-chlórpurínribozid, ktorého hydroxylové skupiny v polohách 2’ a 3’ na ribózovom kruhu sú chránené, oxidačným činidlom, napr. pôsobením reagens podľa Jonesa, a získaná látka kyslej povahy poskytne reakciou buď s dicyklohexylkarbodiimidom alebo s benzotriazol-1-yloxy-tris-(dimetylamino)-fosfóniumhexafluórfosfátom v prítomnosti zvoleného amínu 5’alkylokarboxamidový derivát.

Reakčná schéma A

oxidácia \ p²o op^{1 1 p2}° OP¹

DCC

R1R2NH

P = ochranná skupina (protecting group)

DCC = dicyklohexylkarbodiimid

Vhodné východiskové zlúčeniny pre látky vzorca I, kde K znamená dusík, Q metylénovú skupinu a T skupinu R₁R₂N-C=O, sa môžu pripravovať, ako to opísal Chen a kol., Tetrahedr. Letters 30, 5543-46 (1989). Tiež sa môže na prípravu východiskových zložiek využiť reakčná schéma B. Pri tomto postupe sa pôsobí na 4etylkarboxamidový derivát 2,3-dihydroxycyklopentylamínu, pripravený, ako to opísal Chen a kol., 3-amino-2,4-dichlórpyrimidínom. Produkt tejto reakcie sa potom zahrieva ďalej s aldehydylamidino-acetátom, napríklad acetátom formamidínu v dioxáne a metoxyetanolu počas doby postačujúcej na uzatvorenie cyklu (cca 30 minút až 4 hodiny), čím sa získa produkt, na ktorý sa potom pôsobí vhodným východiskovým amínom postupom, ktorý je opísaný ďalej, a tým sa získa zlúčenina podľa tohto vynálezu. Poradie použitých reakcií nie je rozhodujúce. Napríklad na medziprodukt vzniknutý podľa reakčnej schémy B, sa pôsobí vhodným amínom a nasledujúcou cyklizáciou sa dosiahne požadovaný konečný produkt.

Reakčná schéma B

Rôzne amíny, použiteľné na prípravu takýchto zlúčenín, sa môžu pripraviť použitím známych postupov alebo postupov tu opisovaných.

Diastereoizomérne zmesi zlúčenín alebo medziproduktov, použiteľných na prípravu týchto zlúčenín, sa môžu deliť na jednotlivé racemické alebo opticky aktívne enantioméry použitím známych postupov, napríklad chromatograficky, trakčnou destiláciou alebo trakčnou kryštalizáciou solí s kyselinou D- alebo L-vínnou, dibenzoylvínnou, mandľovou alebo gáforsulfónovou.

N₆-substituované adenozíny alebo karbocyklické adenozíny podľa tohto vynálezu sa môžu pripraviť reakciou 6-chlórpurínribozidu alebo produktov podľa reakčných schém A alebo B s použitím vhodných amínov, ako je to znázornené na schéme C.

Reakčná schéma C

X’ a Y’ majú významy, ako X a Y už skôr uvedené, alebo sú to ich ochranné deriváty.

Ne-substituované-N’-alkyldeazaaristeromycínu podľa tohto vynálezu sa môžu pripraviť podľa reakčnej schémy D.

Reakčná schéma D

ReN-X'-Y'-

HO OH

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu, použiteľné pre funkciu pro-drug, zahŕňajú také zlúčeniny, kde hydroxylové skupiny ribózy alebo cyklopentánového kruhu sú substituované skupinami R' a R, ako to bolo uvedené u vzorca I vyššie. Tieto je možné pripraviť známymi postupmi alebo použitím príkladov prípravy, ako sú zhrnuté v reakčnej schéme E ďalej:

Reakčná schéma E

Reakciou dihydroxy zlúčeniny s esterom kyseliny chlórmravčej v prítomnosti organickej bázy, napr. trietylamínu, sa pripraví zodpovedajúci bis-uhličitan. Alkoxymetylénacetal sa môže pripraviť reakciou zodpovedajúceho brtoesteru v prítomnosti katalytického množstva kyseliny p-toluénsulfónovej. Ester kyseliny uhličitej sa pripraví reakciou s l.ľ-karbonyldiimidazolom a podobne ester kyseliny tiouhličitej použitím tiokarbonyldiimidazolu. Alkyl- a dialkylkarbamoylové deriváty sa môžu získať reakciou so zodpovedajúcim alkylizokyanátanom alebo dialkylkarbamoylchloridom v prítomnosti organickej bázi.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu, kde K znamená N-EO, napríklad N-oxidy, sa môžu pripravovať oxidáciou zodpovedajúcich adenozínov alebo karbocyklických . adenozínov s použitím známych postupov, napríklad reakciou s peroxidom vodíka v kyseline octovej.

2’-O-alkylderiváty sa môžu pripraviť známymi postupmi, napríklad reakciou vhodného východiskového amínu s 6-chlór-9-(2’-O-metyl-p-D-ribofuranózyl)-9Hpurínom.

Funkčné skupiny východiskových zlúčenín a medziproduktov, ktoré sa použijú na prípravu zlúčenín podľa tohto vynálezu, môžu byť chránené bežne známymi ochrannými skupinami. Bežné ochranné skupiny pre amínové a hydroxylové funkčné skupiny opisuje napríklad Greene T. W., „Protective Groups in Organic Chemistry“, Wiley, New York, ZSA (1984).

Hydroxylové skupiny môžu byť chránené formou esterov, ako sú acylderiváty, alebo formou éterov. Hydroxylové skupiny na susediacich uhlíkových atómoch je možné chrániť formou ketalov alebo acetalov. V praxi sa hydroxylové skupiny v polohách 2', 3' východiskových zlúčenín na schémach A a B bežne chránia tvorbou 2', 3'-izopropylidénových derivátoch. Voľné hydroxylové skupiny je možné znovu obnažiť hydrolýzou v kyslom prostredí, ďalej solvolýzou alebo hydrogenolytickými reakciami aké sa používajú v organickej chémii.

Po syntetickej príprave sa zlúčeniny podľa tohto vynálezu typicky čistia kvapalinovou chromatografiou pri strednom tlaku (MPLC) na chromatotrone, radiálne zrýchlenou chromatografiou na tenkej vrstve, okamžitou chromatografiou alebo stĺpcovou chromatografiou na silikagéli alebo florisilovej matrici s následnou kryštalizáciou. Pre zlúčeniny vzorca I, kde K znamená dusík, Q znamená kyslík a T skupinu R3O-CH2 zahŕňajú typické rozpúšťadlové systémy kombinácie chloroform : metanol, etylacetát: hexán, a metylénchlorid : metanol. Eluáty je možné kryštalizovať z metanolu, etanolu, etylacetátu, hexánu, chloroformu atď.

Pre zlúčeniny vzorca I, kde K znamená dusík, Q znamená kyslík a T znamená skupinu R₁R₂N-C=O, je typickou rozpúšťadlovou sústavou zmes chloroform : metanol. Kryštalické podiely z eluovania je možné kryštalizovať ešte z 50 % až 100 % etanolu, v prípade vodného zriedenia.

Pre zlúčeniny vzorca I, kde Q znamená metylénovú skupinu, K znamená dusík alebo skupinu Ch a T znamená RiR₂N-C=O patrí medzi typické rozpúšťadlá zostava metylénchlorid : metanol. Eluáty je možné kryštalizovať z etylacetátu, prípadne s pridaním metanolu, etanolu alebo hexánu.

Zlúčeniny, vyžadujúce neutralizáciu, je možné neutralizovať miernou bázou, ako je hydrogenuhličitan sodný s následným prepláchnutím metylénchloridom a soľankou. Produkty, ktoré sa čistia vo forme oleja, sa často triturujú zmesou hexánu a etanolu pred konečnou kryštalizáciou.

Spôsob podľa tohto vynálezu bude teraz bližšie dokladovaný a vysvetlený formou pripojených príkladov.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Príprava 5'-N-etyl-2',3'-izopropylidén-N⁶-chlóradenozín-5'-uronamid

Stupeň (1): N⁶-chlór-2',3'-izopropylidénadenozín

V prostredí 600 ml acetónu sa 2 hodiny mieša (RT) zmes 31,5 g 6chlórpurínribozidu, 73 ml trietylesteru kyseliny ortomravčej a 19,8 g kyseliny ptoluénsulfónovej. Po zahustení reakčnou zmesou vo vákuu sa zvyšok rozpustí v etylacetáte, roztok sa prepláchne nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného, soľankou, vysuší sa bezvodým síranom sodným a zahustením filtrátu sa získa vo forme bielej pevnej látky N⁶-chlór-2',3'-izopropylidénadenozín.

Stupeň (2): Kyselina N⁶-chlór-2',3'-izopropylidénadenozín-5'-karboxylová

V prostredí acetonitrilu sa zmieša 4,5 g (13,8 mmol) N⁶-chlór-2',3'izopropylidénadenozínu a 0,0381 g (0,14 mmol) 4-hydroxy-2,2,6,6tetrametylpiperidinyloxybenzoátu, do reakčnej zmesi sa pridá 5 % roztok hydrogenuhličitanu sodného (87 %) a po častiach pri teplote 0 až 5 °C sa vnáša 10,41 g (55,1 mmol) hydrátu bromitanu sodného. Teplota reakčnej zmesi sa nechá vystúpiť na 20 °C, roztok sa energicky mieša asi 3 hodiny, pridá sa 10 % roztok kyseliny vínnej, vodný podiel sa oddelí a extrahuje tri razy do etylacetátu. Spojený organický roztok sa prepláchne 5 % roztokom hydrogenuhličitanu sodného a to tri razy. Alkalické roztoky sa spoja, všetko sa okyslí pridaním koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej na pH 3 a vodný podiel sa extrahuje tri razy do etylacetátu. Organický podiel sa spojí, všetko sa extrahuje soľankou, vysuší sa bezvodým síranom horečnatým a po filtrácii sa zhustením filtrátu získa biela pevná amorfná látka, ktorá sa tri razy odparí po pridaní toluénu, pričom sa sušením vo vákuu získa kyselina N⁶-chlór-2',3'-izopropylidénadenozín-5'-karboxylová.

Stupeň (3): 5'-N-etyl-2',3'-izopropylidén-N⁶-chlóradenozín-5'-uronamid

N⁶-chlór-2',3'-izopropylidénadenozín-5'-karboxylová kyselina sa v množstve 4,4 g (12,9 mmol), 1,64 ml trietylamínu, 1,28 ml (11,7 mmol) izopropenylesteru kyseliny chlórmravčej v prostredí 50 ml metylénchloridu zmieša pri -10 °C asi 2 minúty. Do reakčnej zmesi sa pridá 0,77 ml (11,7 mmol) etylamínu, v miešaní sa pokračuje minútu a reakčná zmes sa ďalej pretrepáva medzi metylénchloridom a nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného. Spojené vodné podiely sa pretrepú tri razy s metylénchloridom, spojené organické roztoky sa prepláchnu soľankou, sušia bezvodým síranom sodným a po filtrácii sa zahustením filtrátu vo vákuu získa zvyšok, ktorý sa čistí okamžitou chromatografiou na silikagéli eluovaním zmesi 3 % metanolom v chloromforme a získa sa tak 5'-N-etyl-2',3'-izopropylidén-N⁶chlóradenozín-5'-uronamid.

¹H-NMR (300 MHz, CDCI₃) δ 8,75 (s,1H), 8,23 (s,1H), 6,20 (d,1 H), 5,50 (dd,2H), 4,73 (D,1H), 3,01 (m,2H), 1,63 (s,1H), 1,41 (s,3H), 0,77 (t,3H).

Príklad 2

Príprava izopropylamidu kyseliny (1S,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4-{6-[1-(4trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}cyklopentánkarboxylovej

Stupeň (1)

V 16 ml izopropylamínu sa rozpustí 15,5 g (54,6 mmol) N-BOC-5,6dimetyléndioxy-2-azabicyklo[2,2,1]-heptán-3-ónu (i) (príprava viď stupeň 6 príkladu 3 uvedená ďalej), a reakčná zmes sa mieša asi 2 hodiny pri laboratórnej teplote. Po zahustení vo vákuu sa zvyšok azeotropne destiluje s chloroformom a získa sa tak biela pevná látka, ktorá sa rozpustí v 250 ml etylacetátu, roztok sa ochladí na 0 °C a pri chladení sa do tohto roztoku zavádza asi 15 minút plynný chlorovodík. Pri laboratórnej teplote sa roztok mieša 4 hodiny, zahustí sa vo vákuu, zvyšok sa azeotropne destiluje s metanolom, potom chloroformom, a amín sa tak získa vo forme soli s kyselinou chlorovodíkovou. Táto soľ sa pretrepáva medzi chloroform a roztok hydrogenuhličitanu sodného, organický podiel sa prepláchne soľankou, vysuší, filtruje a pridá sa ekvivalent kyseliny benzoovej. Rozpúšťadlo sa oddestiluje vo vákuu, zvyšok sa trituruje s éterom a očakávaný amín vzorca (ii) uvedený vyššie sa izoluje vo forme soli s kyselinou benzoovou, 11.183 -184 °C.

Stupeň (2) Príprava

V 110 ml n-butanolu sa rozpustí 54 mmol produktu (ii) z príkladu 2, stupeň 1, pridá sa 9,7 g 5-amino-4,6-dichlórpyrimidínu, potom 23 ml trietylamínu a reakčná zmes sa zahrieva 18 hodín pod spätných chladičom. Po chladení sa všetko zriedi chloroformom a nasýteným roztokom chloridu amónneho, vodný podiel sa extrahuje tri razy do chloroformu, potom dva razy do zmesi 10 % izopropylalkoholu v chloroforme. Organické podiely sa spoja, po vysušení bezvodým síranom sodným a filtráciou sa zahustením filtrátu získa olej (iii), ktorý sa použije bež akéhokoľvek čistenia v ďalšom stupni.

Stupeň (3)

Príprava

Produkt (iii) z príkladu 2, stupeň 2 uvedený vyššie sa rozpustí v 150 ml nbutylacetátu, pridá sa 11,2 g formamidín acetátu a reakčná zmes sa zahrieva pod spätných chladičom a pod argónom asi 9 hodín. V intervaloch 2, 4 a 6 hodín sa pridajú tri dávky po 5,56 g formamidín acetátu. Po ochladení sa reakčná zmes zriedi etylacetátom, roztok sa prepláchne soľankou, vodou, znovu soľankou a vysuší sa bezvodým síranom sodným. Zahustením filtrátu vo vákuu sa získa zvyšok, ktorý sa čistí okamžitou chromatografiou eluovaním 40 až 80 % etylacetátu v hexáne, tým sa

V 3 ml etanolu sa rozpustí 400 mg (1,05 mmol) produktu (iv) z príkladu 2, stupeň (3) uvedený vyššie, 0,22 ml (1,57 mmol) trietylamínu a 270 mg (1,16 mmol) 2-[(3S)3-aminopyrolidín-1-yl]-4-trifluórmetylpyridínu, pripraveného podľa príkladu 3, stupňa 1 až 5 uvedené ďalej. Reakčná zmes sa zahrieva pod argónom 20 hodín pod spätným chladičom, zahustí sa vo vákuu a zvyšok sa pretrepáva medzi chloroform a nasýtený roztok hydrogenuhličitanu sodného. Vodný podiel sa extrahuje štyri razy do chloroformu, spojený chloroformový roztok sa po vysušení bezvodným síranom sodným a filtrácii zahustí vo vákuu. Zvyšok sa prečistí okamžitou chromatografiou nanesením vzorky v zmesi metylénchloridu a etylacetátu (1:1) a eluovaním 0 až 3 % metanolu v etylacetáte. Získa sa tak vyššie uvedený produkt (v).

Stupeň (5)

Produkt z príkladu 2, stupeň (4) uvedený vyššie, sa rozpustí v 2 ml zmesi metanolu a tetrahydrofuránu (1:1), pridá sa 3,3 ml 1,5 N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej, roztok sa potom mieša asi 20 hodín pri laboratórnej teplote. Po zahustení reakčnej zmesi vo vákuu, sa takto získaný zvyšok rozpustí v 10 ml zmesi 15 % izopropylalkoholu v chloroforme, pridá sa 1 ml 1 N roztoku hydroxidu sodného, ml nasýteného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, vrstvy sa oddelia a vodný podiel sa extrahuje štyri razy do 5 ml zmesi 15 % izopropylalkoholu v chloroforme. Spojený organický roztok sa po vysušení bezvodým síranom sodným a filtrácii zahustí vo vákuu a získa sa tým izopropylamid kyseliny (1S,2R,3S,4R)-2,3dihydroxy-5-{6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}cyklopentánkarboxylovej, 1.1. 227 až 228 °C.

Príklad 3

Príprava (1 R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1 -(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diolu.

Stupeň (1)

V 250 ml toluénu sa rozpustí 20 g (232 mmol) (3S)-(-)-3-aminopyrolidínu a 26 ml (255 mmol), t. j. 1 ekv. benzaldehydu a reakčná zmes sa zahrieva pod spätným chladičom asi 4,5 hodiny s použitím Dean-Starkovho nadstavca. Po ochladení na 0 °C sa k reakčnej zmesi pridá 55,7 g (255,2 mmol), t. j. 1 ekv. di-terc.-butylesteru kyseliny uhličitej, reakčná zmes sa mieša pri laboratórnej teplote, zahustí vo vákuu, zvyšok sa premieša s roztokom hydrogensíranu draselného, nasleduje trojitá extrakcia do éteru. Vodná vrstva sa alkalizuje, potom sa extrahuje chloroformom, organický roztok sa prepláchne soľankou, vysuší sa bezvodým síranom horečnatým, po filtrácii sa filtrát zahustí vo vákuu a získa sa tak N₁-BOC-(3S)-(-)-3aminopyrolidín.

Stupeň (2)

K roztoku 34,25 g (183,9 mmol) produktu z príkladu 3, stupeň (1) uvedeného vyššie v 200 ml metylénchloridu sa pridá 25 ml (183,9 mmol, 1 ekv.) trietylamínu. Pod dusíkom sa prikvapkáva 34,7 ml (367,8 mmol., 2 ekv.) anhydridu kyseliny octovej, reakčná zmes sa po miešaní pri laboratórnej teplote pretrepáva medzi roztok hydrogenuhličitanu sodného a metylénchlorid. Organická vrstva sa po prepláchnutí soľankou vysuší bezvodým síranom horečnatým, po filtrácii sa filtrát zahustí vo vákuu a produkt sa čistí okamžitou chromatografiou eluovaním 2 % metanolu v metylénchloride za vzniku NrBOC-(3S)-(-)-3-acetylaminopyrolidínu.

Stupeň (3)

V 400 ml metylénchloridu sa rozpustí 39,2 g (171,7 mmol) produktu z príkladu 3, stupeň (2) uvedeného vyššie a pri chladení na 0 °C sa pod dusíkom prikvapkáva

26,46 ml (343,4 mmol), t. j. 2 ekv. kyseliny trifluóroctovej. Reakčná zmes sa zahrieva pod spätných chladičom, pridá sa znovu 26 ml, potom ešte 10 ml kyseliny trifluóroctovej, všetko sa zahrieva pod spätným chladičom 3 hodiny, pričom sa použitá kyselina trifluóroctová oddestiluje vo vysokom vákuu. Zvyšok sa premieša s alkalickou živicou Amberlite IRA-400, po filtrácii sa filtrát zriedi metanolom, filtruje sa pomaly uvedenou živicou a zahustením filtrátu sa takto izoluje (3S)-(-)-3acetylaminopyrolidín.

Stupeň (4)

V 50 ml etanolu sa zmiešajú 4 g (31,2 mmol) produktu z príkladu 3, stupeň (3) uvedených vyššie a 5,19 (40,6 mmol) 2-chlór-5-trifiuórmetylpyridínu; po pridaní 13 ml (93,6 mmol, 3 ekv.) trietylamínu sa reakčná zmes zahrieva pod spätným chladičom 18 hodín, zahustí sa vo vákuu a zvyšok sa pretrepáva medzi metylénchloridom a roztokom hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva sa po prepláchnutí soľankou, vysušení bezvodým síranom horečnatým a filtrácii zahustí vo vákuu a zvyšok sa čistí okamžitou chromatografiou eluovaním 2-5 % metanolu v metylénchloride. Ako pevná látka sa pripraví 2-[(3S)-3-acetylaminopyrolidín-1-ylj-

5-trifluórmetylpyridín.

Stupeň (5)

Zmes 7,52 g (27,5 mmol) produktu z príkladu 3, stupeň (4) uvedeného vyššie a 75 ml 6 N vodného roztoku kyseliny chlorovodíkovej sa zahrieva pod spätným chladičom asi 18 hodín. Potom sa reakčná zmes ochladí na laboratórnu teplotu, neutralizuje sa pridávaním pevného hydrogenuhličitanu sodného a pretrepáva medzi zriedený roztok hydroxidu sodného v metylénchloride. Organická vrstva sa prepláchne soľankou, vysuší sa bezvodým síranom horečnatým, po filtrácii sa filtrát zahustí vo vákuu za vzniku 2-[(3S)-3-aminopyrolidínu-1-yl]-5-trifluórmetylpyridínu.

Stupeň 6

V metylénchloride sa zmieša 22,5 g (0,123 mmol) (-)-5,6-dimetyléndioxy-2azabicyklo[2,2,1]heptán-3-ónu (vi), 1,5 g 4-dimetylaminopyridínu, 12,4 g trietylamínu a 37,5 g di-terc.-butylesteru kyseliny uhličitej a reakčná zmes sa mieša pri laboratórnej teplote asi 18 hodín. Prepláchne sa 1 N roztokom kyseliny chlorovodíkovej, 3 % roztokom hydrogenuhličitanu sodného, soľankou, po vysušení bezvodým síranom sodným a filtrácii sa filtrát zahustí vo vákuu a kryštalizáciou zvyšku z izopropylalkoholu sa izoluje N-BOC-5,6-dimetyléndioxy-2azabicyklo[2,2,1 ]-heptán-3-ón (i).

Stupeň (7)

0)

NHBOC

V 400 ml metanolu sa rozpustí 35,6 g (0,125 mol) produktu (i) z príkladu 3, stupeň (6) uvedeného vyššie, a pri prudkom miešaní, chladení a pod argónom sa pridá v troch rovnakých dávkach počas asi 2 hodín celkom 23,8 g (0,63 mol) hydridu boritosodného. Po zahustení vo vákuu sa zvyšok pretrepáva medzi 200 ml vody a 300 ml etylacetátu, vodný podiel sa ešte dva razy pretrepáva do etylacetátu, spojený organický podiel sa potom prepláchne vodou, soľankou a vysuší sa bezvodým síranom sodným. Zahustením filtrátu vo vákuu sa izoluje N-BOC-1-amino-2,3dimetyléndioxy-4-hydroxymetylcyklopentán (vii).

Stupeň (8)

NHBOC (VIII)

V 150 ml benzénu sa rozpustí 50 g produktu (vi) z príkladu 3, stupeň (7) uvedený vyššie, a po pridaní 8,8 ml metyljodidu a 33 g oxidu strieborného sa reakčná zmes zahrieva pod spätným chladičom 18 hodín. Počas asi šiestich hodín sa pridáva po častiach ďalších 25 g oxidu strieborného a ďalších 50 ml metyljodidu, reakčná zmes sa zahrieva pod spätným chladičom 18 hodín, filtruje sa celitom, a filtračná vrstva sa prepláchne etylacetátom. Spojené filtráty sa zahustia vo vákuu a kryštalizáciou zvyšku z hexánu sa získa predpokladaný metoxymetylderivát (viii), viď vzorec vyššie.

Stupeň (9)

NHBOC

(ix)

(viii)

Stupeň (10)

V 250 ml horúceho bezvodého etylacetátu sa rozpustí pod argónom 31,6 g produktu (viii) z príkladu 3, stupeň (8), roztok sa ochladí v ľadovom kúpeli a do roztoku sa zavádza asi 6 minút plynný chlorovodík. Teplota reakčnej zmesi sa nechá vystúpiť na 20 °C a po trojhodinovom miešaní sa zahustením reakčnej zmesi vo vákuu izoluje hydrochlorid očakávaného amínu vzorca (ix) uvedeného vyššie

’ ο σ _(xi)

X

V 100 ml n-butanolu sa pod argónom zmieša 24,2 g produktu (ix) z príkladu 3, stupeň (9) a 42,8 g hydrogenuhličitanu sodného, a po pridaní 20,1 g 5-amino-4,6dichlórpyrimidínu sa zahrieva reakčná zmes pod spätným chladičom 20 hodín, zahustí sa vo vákuu a zvyšok sa pretrepáva medzi etylacetát a vodu. Organický roztok s prepláchne soľankou, vysuší sa bezvodým síranom horečnatým a po filtrácii sa filtrát zahustí vo vákuu. Zvyšok sa rozpustí v zmesi 30 % etylacetátu v hexáne, prejde kolónou so silikagélom, kolóna sa prepláchne 50 % etylacetátom v hexáne a zahustením spojených filtrátov sa získa očakávaný pyrimidinylaminocyklopentánový produkt (xi), ako je uvedené vyššie.

Pod argónom sa rozpustí v 125 ml n-butylacetátu 26,7 g produktu (xi) z príkladu 3, stupeň (10), a po pridaní 33,5 g formámidínacetátu sa reakčná zmes zahrieva pod spätným chladičom 3 hodiny, až sa chromatografovaním na tenkej vrstve zistí, že reakcia prebehla kompletne. Zmes sa po ochladení rozdeľuje medzi etylacetát a soľanku, organický roztok sa vysuší bezvodým síranom horečnatým a po filtrácii sa filtrát zahustí vo vákuu, zvyšok sa čistí okamžitou chromatografiou eluovaním 30 až 50 % etylacetátu v hexáne, získa sa tým chlórpurínový derivát vzorca (xii) uvedený vyššie.

Stupeň (12)

Príprava látky vzorca (xiii):

Do roztoku 7,75 g (22,9 mmol) produktu (xii) z príkladu 3, stupeň (11) uvedeného vyššie a 6,35 g (27,4 mmol) 2-[(3S)-3-aminopyrolidín-1-yl]-5-trifluórmetylpyridínu v 20 ml etanolu sa pridá 6,33 ml trietylamínu. Reakčná zmes sa zahrieva v uzatvorenej nádobe asi 4 hodiny na 105 °C, potom sa ochladí, zahustí vo vákuu a zvyšok sa pretrepáva medzi metylénchlorid a roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organický roztok sa po vysušení bezvodým síranom horečnatým filtruje, filtrát sa zahustí vo vákuu a zvyšok sa čistí okamžitou chromatografiou eluovaním 4 % metanolu v metylénchloride, získa sa tak látka štruktúry (xiii).

Stupeň (13)

V roztoku 90 ml kyseliny trifluóroctovej v 10 ml vody sa rozpustí 10,81 g (20,3 mmol) produktu (xiii) z príkladu 3, stupeň (12) uvedeného vyššie a zmes sa mieša pri laboratórnej teplote asi 30 minút. Vo vysokom vákuu sa oddestiluje kyselina trifluóroctová a zvyšok sa pretrepáva medzi metylénchlorid a vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného. Metylénchloridový roztok sa prepláchne roztokom hydrogenuhličitanu sodného, soľankou a po zriedení organického roztoku izopropylalkoholom sa organický roztok vysuší bezvodým síranom horečnatým a po filtrácii sa filtrát zahustí vo vákuu, zvyšok sa potom čistí okamžitou chromatografiou eluovaním 5-10 % metanolu v metylénchloride. Vhodné frakcie sa spoja, celok sa zahustí a kryštalizáciou zvyšku z acetonitrilu sa takto získa (1R,2S,3R,5R)-342 metoxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9yl}cyklopentán-1,2-diol, 1.1.166-168 °C

Príklad 4

Príprava (2R,3S,4R,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetyl-pyridín-2-yl)pyrolidín-3(R)-ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diolu

Zmieša sa 267 mg 2-[(3R)-3-aminopyrolidín-1-yl]-5-trifluórmetylpyridínu, 331 mg

6-chlórpurínribozidu, 233 mg trietylamínu a 0,5 ml etanolu, reakčná zmes sa potom zahrieva v uzatvorenej nádobe asi 5 hodín na 100 °C. Po ochladení nasleduje pretrepávanie medzi metylénchlorid (s pridaním malého množstva izopropylakoholu) a roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva sa prepláchne soľankou, vysuší sa bezvodým síranom horečnatým, po filtrácii sa filtrát zahustí a zvyšok sa čistí okamžitou chromatografiou eluovaním 5 % metanolu v metylénchloride, vo forme hemihydrátu sa takto pripraví (2R,3S,4R,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(R)-ylamino]purín-9-yl}tetrahydrofurán-3,4-diol, t. t. 166-170 °C.

Príklad 5

Príprava (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1 -(4-trif luórmetylfenyl)pyrolidín-3(S)-ylamino]purín9-yl)-3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diolu.

Stupeň (1)

V 30 ml toluénu sa zmieša 1,00 g (11,6 mmol) 3(S)-(-)-3-amínopyrolidínu, 1,35 ml (9,66 mmol) 4-brómbenzotrifluoridu, 2,69 g (29 mmol) terc.-butoxidu sodného a 1,01 g (1,16 mmol) PdCI₂[P(o-tolyl]₃)₂; táto látka sa pripraví podľa US. pat. spisu 4 196 135, na ktorý sa tu odkazuje. Reakčná zmes sa zahrieva asi 40 minút v uzatvorenej nádobe na 100 °C, ochladí sa, filtruje, zahustí vo vákuu a zvyšok sa čistí okamžitou chromatografiou eluovaním zmesí metylénchloridu a etanolu 10 :1 až 7 :1; získa sa tak 1 -(4-trif luórmetyl)fenyl-3(S)-pyrolidín-3-ylamín.

Stupeň (2)

Zmes 24,7 ml (0,61 mmol) metanolu a 50 ml etylacetátu sa pod argónom ochladí na 0 °C, po častiach sa pridáva 43,4 ml (0,61 mmol) acetylchloridu a roztok sa potom mieša asi 45 minút pri laboratórnej teplote. Znova sa ochladí v ľade a počas asi 45 minút sa pomaly pridáva roztok 50,0 g N-BOC-1-amino-2,3-dimetyléndioxy-4hydroxycyklopentánu (vii) v 100 ml etylacetátu. Teplota roztoku sa potom nechá vystúpiť na 20 °C a odparením vo vákuu sa získa očakávaný hydrochlorid amínu (xiv), ako je uvedené vyššie.

Stupeň (3) Príprava látky (xv)

Pod argónom sa zmieša v 150 ml n-butanolu 38,9 g produktu (xvi) z príkladu 5, stupeň (2) uvedeného vyššie a 73 g hydrogenuhličitanu sodného a zmes sa mieša pri laboratórnej teplote asi 30 minút. Po pridaní 34,2 g 5-amino-4,6-dichlórpyrimidínu sa reakčná zmes zahrieva pod spätným chladičom 19 hodín, po zahustení vo vákuu sa k zvyšku pridá etylacetát a voda, vodný podiel sa extrahuje znovu do etylacetátu, spojený organický extrakt sa prepláchne soľankou, filtruje sa a zahustí sa vo vákuu. Zvyšok sa čistí okamžitou chromatografiou eluovaním gradientom od 30 % etylacetátu v hexáne až k čistému hexánu a tým sa získa očakávaný substituovaný chlórpyrimidínový derivát (xv), uvedený vyššie.

Stupeň (4)

Príprava

V 250 ml n-butylacetátu sa zmieša 37,9 g produktu (xv) z príkladu 5 (stupeň 3), uvedený vyššie a 25,1 g formamidínacetátu, reakčná zmes sa zahrieva pod argónom asi 2 hodiny pod spätným chladičom, po hodine sa pridá ďalší podiel 12,5 g formamidínacetátu a ešte ďalších 10 g po asi 1,5 hodine. Po ochladení sa-reakčná zmes pretrepáva medzi etylacetát a soľanku, podiel soľanky sa extrahuje 3x etylacetátom, spojený organický roztok sa vysuší bezvodým síranom horečnatým a po filtrácii sa filtrát zahustí vo vákuu. Kryštalizáciou zvyšku zo zmesi etylacetátu a hexánu sa získa chlórpurínový derivát vzorca (xvi), uvedený vyššie. Zvyšok po koncentrovaní matečného lúhu sa dá čistiť okamžitou chromatografiou eluovaním 80 až 100 % etylacetátu v hexáne; tým sa zvýši výťažok.

Stupeň (5) / \ / \ /

Príprava /χ ý-CF^

HNÝ //

(xvii).

V 20 ml etanolu sa zmieša 0,225 g (0,693 mmol) produktu (xvi) z príkladu 5, stupeň (4) uvedený vyššie, 0,239 g (1,04 mmol) 1-(4-trifluórmetyl)fenyl-(3S)pyrolidín-3-ylamínu zo stupňa (1) vyššie a 0,582 g (6,93 mmol) hydrogenuhličitanu sodného a reakčná zmes sa zahrieva pod spätným chladičom asi 60 hodín. Po filtrácii a zahustení vo vákuu sa zvyšok čistí okamžitou chromatografiou eluovaním gradientom metylénchloridu/metanol 30 :1 až 10 :1, a získa sa tak pyrolidinylamín vzorca (xvii) uvedený vyššie.

Stupeň (6)

Roztok 0,234 g produktu z príkladu 5, stupeň (5), sa rozpustí v 10 ml kyseliny trifluóroctovej a mieša sa pri laboratórnej teplote počas noci. Roztok sa potom zahustí vo vákuu a zvyšok sa čistí okamžitou chromatografiou eluovaním zmesí metylénchlorid a etylacetát (10 :1) za vzniku (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4trifluórmetylfenyOpyrolidín-SÍSJ-ylaminojpurín-S-ylJ-S-hydroxymetylcyklopentán-I.Ždiolu, t.t. 111-114 °C.

Príklad 6

Príprava 4(S)-1-benzyl-4-[9-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymetyl-cyklopentyl)-9H-purín-

O (xix)

Roztok 7,1 g (24,5 mmol) β-terc.-butylesteru kyseliny N-terc.-BOC-L-asparágovej v 120 ml tetrahydrofuránu sa ochladí na 0 ^eC a po pridaní 2,73 g (27 mmol) trietylamínu a potom 2,66 g (24,5 mmol) etylesteru kyseliny chlórmravčej sa roztok mieša asi 30 minút, pričom sa pridá roztok 3,71 g (98,2 mmol) hydridu boritosodného vo vode. Po miešaní reakčnej zmesi asi 17 hodín pri laboratórnej teplote sa zmes zahustí vo vákuu, zvyšok sa zriedi pridaním etylacetátu, pričom sa organický roztok prepláchne 1 N roztokom chlorovodíkovej kyseliny, 10 % roztokom . uhličitanu sodného, soľankou, vysuší sa bezvodým síranom horečnatým, a po filtrácii sa filtrát zahustí vo vákuu. Získaný zvyšok sa čistí okamžitou chromatografiou eluovaním 30 až 50 % etylacetátu v hexáne a získa sa tak 3(S)terc.-butylester kyseliny 3-BOC-amino-4-hydroxy-n-butánovej (xix).

Stupeň (8) Príprava

Roztok 0,73 g dimetylsulfoxidu v 9 ml metylénchloridu sa ochladí na 70 °C, príkvapkáva sa 31 ml 2 M roztoku dichloridu kyseliny oxalovej v metylénchloride, roztok sa ďalej mieša asi 15 minút, pričom sa pridá roztok 0,85 g predchádzajúceho produktu (xix) v 5 ml metylénchloridu. Po ďalšom miešaní asi 45 minút sa pridá 1,88 g trietylamínu, teplota reakčnej zmesi sa nechá vystúpiť na 20 °C a po miešaní asi 30 minút sa všetko zriedi pridaním etylacetátu. Získaný roztok sa prepláchne použitím 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkovej, 10 % roztokom uhličitanu sodného, soľankou, vysuší sa bezvodým síranom horečnatým a po filtrácii sa filtrát zahustí vo vákuu. Získa sa tak 3(S)-terc.-butylester kyseliny 3-BOC-amino-4-oxo-n-butánovej (xx)·

Produkt (xx) z príkladu 6, stupňa (2) uvedený vyššie sa rozpustí v 9 ml metanolu a po pridaní 1,34 g hydrochloridu benzylamínu, potom 0,94 g trietylamínu a potom ešte 200 mg molekulárneho sita 3A sa roztok mieša asi 45 minút s následným pridaním 0,23 g chloridu zinočnatého a roztoku 0,22 g kyanoborohydridu sodného v 5 ml metanolu. Po miešaní reakčnej zmesi asi 4 hodiny sa pridajú 2 ml 1 N roztoku hydroxidu sodného a potom sa pridá 10 ml vody, zmes sa zahustí na polovicu pôvodného objemu a extrahuje sa do etylacetátu. Tento organický roztok sa prepláchne 10 % roztokom uhličitanu sodného, soľankou, vysuší sa bezvodým síranom horečnatým a po filtrácii sa filtrát zahustí vo vákuu. Získaný zvyšok sa čistí okamžitou chromatografiou eluovaním 30 % až 40 % etylacetátu; získa sa tak benzylaminový derivát (xxi), uvedený už skôr.

Stupeň (4)

V 12 ml zmesi toluénu a kyseliny octovej (10:1) sa rozpustí 0,90 g produktu z príkladu 6, stupeň (3) a roztok sa zahrieva 90 minút pod spätným chladičom. Po zahustení vo vákuu sa zvyšok čistí okamžitou chromatografiou eluovaním 25 až 35 % etylacetátu v metylénchloride a získa sa tak 1-benzyl-4(S)-BOC-amino-2pyrolidinón.

Stupeň (5)

Z produktu podľa príkladu 6, stupeň (4) sa rozpustí 0,64 g v 20 ml etylacetátu, roztok sa ochladí na 0 °C. Asi 5 minút sa zavádza do roztoku plynný chlorovodík a reakčná zmes sa ďalej mieša asi 18 hodín pri laboratórnej teplote. Po pridaní éteru sa pevný podiel odsaje: hydrochlorid 1-benzyl-4(S)-amino-2-pyrolidinónu.

Stupeň (6)

V 10 ml etanolu sa zahrieva asi 50 hodín pod spätným chladičom zmes 0,33 g chráneného chlórpurínového derivátu z príkladu 5, stupeň 4 uvedeného vyššie, 0,26 g hydrochloridu 1-benzyl-4(S)-amino-2-pyrolidinónu a 0,29 g trietylamínu. Po zahustení reakčnej zmesi vo vákuu sa zvyšok rozpustí v 20 ml 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkovej a mieša sa pri laboratórnej teplote asi hodinu. Reakčná zmes sa ďalej zahustí vo vákuu a získa sa zvyšok, ktorý sa čistí preparatívnou vysokotlakovou kvapalinovou chromatografiou eluovaním gradientom 10 % až 60 % acetonitrilu vo vode s obsahom 0,1 % kyseliny trifluóroctovej. Vhodné frakcie sa spoja, celok sa zahustí a zvyšok sa rozpustí v 20 ml 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkovej, rozpúšťadlo sa oddestiluje vo vákuu, a to všetko sa dva razy opakuje. Získaný zvyšok sa rozpustí v metanole, rozpúšťadlo sa oddestiluje vo vákuu a triturovaním zvyšku s éterom sa získa trihydrát hydrochloridu 4(S)-1-benzyl4-[9-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymetylcyklopentyl)-9H-purín-6-ylamino]pyrolidín-2-ónu, 1.1.100 °C (rozkl.)

Príklad 7

Príprava (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diolu.

Stupeň (1)

V 10 ml bezvodého metylénchloridu sa rozpustí súčasne 1,0 g (7,19 mmol) 4nitrofenolu a 3 ml (21,6 mmol) trietylamínu, roztok sa ochladí na -15 °C, pridá sa

1,81 ml (10,8 mmol) anhydridu kyseliny trifluórmetánsulfónovej a pri uvedenej teplote sa reakčná zmes mieša asi 30 minút. Po zriedení metylénchloridom sa organický roztok prepláchne postupne roztokom hydrogenuhličitanu sodného a soľankou, vysuší sa bezvodým síranom horečnatým a po filtrácii sa filtrát zahustí vo vákuu. Zvyšok sa čistí okamžitou chromatografiou eluovaním metylénchloridom. Vo forme svetlo žltej pevnej látky sa takto pripraví trifluórmetánsulfonyloxy-4-nitrofenol.

Stupeň (2)

V 17 ml bezvodého metanolu sa rozpustí 3,0 g (17,0 mmol) 3(S)-amino-1benzylpyrolidínu a 2,50 ml (17,9 mmol) trietylamínu a pod dusíkom sa prikvapkáva

2,53 ml (21,3 mmol) etylesteru kyseliny trifluóroctovej. Roztok sa mieša asi 18 hodín, zahustí sa vo vákuu, zvyšok sa rozpustí v metylénchloride. Roztok sa po prepláchnutí roztokom hydrogenuhličitanu sodného a soľankou vysuší bezvodým síranom horečnatým, po filtrácii sa filtrát zahustí vo vákuu za vzniku 1-benzyl-3(S)trifluóracetylamino-pyrolidínu.

Stupeň (3)

Pod dusíkom sa rozpustí 4,59 g (16,7 mmol) 1-benzyl-3(S)trifluóracetylaminopyrolidínu v 50 ml bezvodého metanolu, pridá sa 3,68 g (16,7 mmol) di-terc.-butylesteru kyseliny uhličitej a 0,90 g 10 % paládia na uhlíku. Zmes sa ďalej mieša za pridávania vodíka pri atm. tlaku asi 5 hodín, filtruje sa potom celitom, ten sa prepláchne metanolom a filtrát sa zahustí vo vákuu. Zvyšok sa čistí okamžitou chromatografiou eluovaním 5 % metanolu v metylénchloride, výsledkom je 1 -BOC3(S)-trifluóracetylaminopyrolidín.

Stupeň (4)

V 130 ml metylénchloridu sa rozpustia 4 g 1-BOC-3-(S)trifluóracetylaminopyrolidínu, pridá sa 19 ml kyseliny trifluóroctovej, roztok sa mieša hodinu a zahustí sa potom vo vákuu. Zvyšok sa pretrepáva medzi metylénchlorid a nasýtený roztok hydrogenuhličitanu sodného, vrstvy sa oddelia a vodný podiel sa extrahuje do etylacetátu. Spojený organický extrakt sa vysuší bezvodým síranom horečnatým, po filtrácii sa filtrát zahustí vo vákuu a získa sa tak 3(S)trifluóracetylaminopyrolidín.

Stupeň (5)

V 15 ml bezvodého acetonitrilu sa rozpustí 0,423 g (1,56 mmol) trifluórmetánsulfonyloxy-4-nitrofenolu a 0,217 ml (1,56 mmol) trietylamínu, a po pridaní 0,852 g (4,68 mmol) 3(S)-trifluóracetylaminopyrolidínu sa reakčná zmes zahrieva asi 18 hodín pod spätným chladičom. Po ochladení a zahustení vo vákuu sa získaný zvyšok čistí okamžitou chromatografiou eluovaním gradientom 25 % až 50 % etylacetátu v hexáne. Získa sa tým 1-(4-nitro)-fenyl-3(S)trifluóracetylaminopyrolidín.

Stupeň (6)

Do 20 ml nasýteného roztoku uhličitanu draselného v zmesi metanolu a vody (2 :

3) sa pridá 0,334 g (1,10 mmol) 1-(4-nitro)-fenyl-3(S)-trifluóracetylaminopyrolidínu_I zmes sa zahrieva asi 2 hodiny na 55 °C, nechá sa asi 18 hodín pri laboratórnej teplote, zahustí sa vo vákuu a zvyšok sa rozpustí v 10 ml vody, vodný roztok sa extrahuje do etylacetátu, organický roztok sa vysuší bezvodým síranom horečnatým, a po filtrácii sa zahustením filtrátu vo vákuu takto získa 3(S)-amino-1-(4-nitro)fenylpyrolidín.

Stupeň (7)

V podstate s použitím postupov z príkladu 3, stupňa (12) a (13) a príkladu 5, stupňa (5) a (6) sa dá pripraviť (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-(6-[1-(4-nitrofenyl)pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-idol, 1.1.119 až 120 °C z 3(S)amino-1-(4-nitro)fenylpyrolidínu.

S použitím postupov z reakčných schém a príkladov, ako bolo uvedené vyššie, sa môžu pripraviť tieto ďalej uvedené zlúčeniny z vhodných východiskových látok:

(2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-(6-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, 1.1.154-156 °C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, 1.1. 153-156 °C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-(6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, 1.1.187-190 °C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, 1.1. 153-154 °C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, 11.230-232 °C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-[6-(5’-trifluórmetyl-3,4,5,6-tetrahydro-2H[1,2’]bipyridinyl-3-yl)-purín-9-yl]-tetrahydrofurán-3,4-diol, 1.1.113-116 °C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-[6-(fenylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl]tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-{5-[6-(1-pyridín-2-ylpyrolidín-3(S)-ylamino]-purín9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, 1.1. 193-195 °C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-(6-[1-(4-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl)-tetrahydrofurán-3,4-diol, 1.1. 121-124 °C.

(2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-metylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, 1.1.164-166 °C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-(6-[1-(5-tiofén-2-ylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, 1.1.190-912 °C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-(6-[1-(5-metylmerkaptopyridín-2-yl)-pyrolidín3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, 1.1. 231-233 °C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(6-metoxypirimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, 1.1. 251-253 °C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, 1.1. 154-156 °C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, 11.130 °C (rozkl.) (2R,3R,4S,5R)-2-metoxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, 1.1 198-200 °C, etylamid kyseliny (1 S,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2yl)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentánkarboxylovej, 1.1. 135-138 °C, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-(6-[1-(4-nitrofenyl)-piperidín-4-yl]-purín-9-yl}cyklopentán-1,2-diol, 1.1.126-128 °C, dihydrochlorid (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[(3S)-pyrolidín-3-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diolu, 1.1.160 °C (rozkl.) (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(R)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, 1.1.175-177 °C, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[(3R)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl}cyklopentán-1,2-diol, 1.1. 166 °C (rozkl.) (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-(6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, 1.1.110-111 °C, hydrochlorid 4(R)-1-benzyl-4-[9-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymetylcyklopentyl)-9Hpurín-6-ylamino]-pyrolidín-2-ón, 1.1. 110 °C, rozkl.

(1 R,2S,3R,5S)-5-metyl-3-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, 1.1.114-116 °C, (1R,2S,3R,5R)-5-(6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, 1.1. 169-171 °C, (1R,2S,3R,5R)-5-[6-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, 1.1.118-121 °C, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-(6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl)-cyklopentán-1,2-diol, 1.1.135-137 °C, (1 R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(pyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylarTiino]-purín9-yl)-cyklopentán-1,2-diol, 1.1.110-112 °C, (1 R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(chinolín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, 1.1.135-138 °C, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-(6-[1-S-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4,5-bistrifluórpyridín-2-yl]-pyrolidín-3(S)-ylamino}-purín-9yl}-3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, 1.1.123-126 °C, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-(6-[1-(fenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}cyklopentán-1,2-diol, 1.1 97-99 °C,

4-{3(S)-[9-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymetylcyklopentyl)-9H-purín-6-ylamino]pyrolidín-1 -ylj-benzonitril, 1.1.140 ^qC, (1 R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1 -(izochinolín-1 -yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, 1.1.119-122 °C, (1R,2S,3R,5R)-5-(6-[1-(6-brómizochinolín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylannino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-(6-[1-(4-chlórfeny)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-{6-[1-(3-chlór-5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, 11 140-143 °C, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, 1.1.180-182 °C, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, 1.1.125-127 °C, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-(6-[1-(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(6-metoxypyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, 1.1. 118-120 °C, (1 R,2S,3R,5R)-3-izopropoxymetyl)-5-(6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, 1.1.157-158 °C, (1R,2S,3R,5R)-3-izopropoxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín3(S)-ylamino]-purín-9-yl)-cyklopentán-1,2-diol, 1.1.160-161 °C, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, 1.1.122-124 °C, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, 1.1.110-111 °C, (1R,2S,3R,5R)-5-(6-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, 1.1.110-112 °C (1 R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylfenyl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, 1.1128 °C, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, 11.122-125 °C, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(3-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, 1.1.127-130 °C, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(3-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, 1.1131-133 °C, (1 R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-[6-(1-fenylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl}cyklopentán-1,2-diol, 1.1.106 °C, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-benzylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl]-5hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, 1.1.100-102 °C, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-benzylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl]-5metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, 1.1. 95-96 °C, sek.-butylamid kyseliny (1R,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4-(6-[1-(5trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentánkarboxylovej, t. t. 215 °C, a (R)-sek.-butylamid kyseliny (1 S,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4-{6-[1 -(5trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentánkarboxylovej, 1.1. 206-212 °C (rozkl.).

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa hodia ako antihypertenzné činidlá na liečenie vysokých krvných tlakov, teda zvyšujú koronárny krvný obeh a podľa toho sú použiteľné na liečenie myokardovej ischémie, tiež sú kardioprotektívnymi činidlami použiteľnými na prevenciu alebo zníženie poranení myokardu v dôsledku myokardovej ischémie, a pôsobia tiež ako antilipolytické činidlá, použiteľné na liečenie hyperlipidémie a hypercholesterolémie.

Zlúčeniny v rámci tohto vynálezu sa vyznačujú aktivitou pri štandardných testoch väzby Aí/A₂ receptorov na stanovenie agonistickej aktivity adenozínového receptora u cicavcov. Príkladné testovacie postupy, vhodné na stanovovanie receptorovej väzbovej afinity zlúčenín podľa tohto vynálezu sú opisované ďalej.

A. Stanovenie in vitro adenozínovej receptorovej väzbovej aktivity Ai receptorová väzbová afinita bola stanovená kompetitívnym testom, založeným na vytesnení ³H-CHA (cyklohexyladenozín, viď Research Biochemicals Inc., Natick, Mass., USA) z receptora s použitím membránového prípravku z celého krysieho mozgu, podľa postupu Bruns, R. F., a koľ, Mol. Pharmacol. 29, 331 (1986). Nešpecifická väzba bola zistená v prítomnosti 1 mM teofylínu.

A₂ receptorová väzbová afinita bola stanovená obdobným technickým testom, založeným na ligandovej náhrade ³H-CGS 21680, čo je známy recepotorovošpecifický adenozínový agonista, v receptore s použitím membrán zo žíhaných teliesok krysích mozgov. Nešpecifická väzba bola zistená v prítomnosti 20 μΜ 2chlóradenozínu.

Testy boli vykonávané v sklenených testovacích trubiciach pri 25 °C. Keď boli už raz membrány pridané, bol obsah trubíc zvírený a inkubovaný na rotačnej trepačke pri 25 °C 60 minút (Ai test) alebo 90 minút (A₂ test). Obsah testovacích trubíc bol znova zvírený v polovici inkubačného času a tesne pred koncom. Testy boli ukončené rýchlou filtráciou 2,4 cm filtrami GF/B s použitím „Brandel Celí Harvestor“. Testovacie trubice boli prepláchnuté tri razy 50 mM vychladeným pufrom tris-HCI (pH 7,7 alebo 7,4) s tým, že filtrácia bola dokončená počas 15 sekúnd. Vlhké filtračné kolieska boli premiestnené do sklenených scintilačných fľaštičiek, naplnených 10 ml Aquasol-u II (New England Natural). Fľaštičky boli pretrepávané počas noci na rotačnej trepačke a potom boli premiestnené do analyzátora kvapalnej scintilácie na dvojminútový prepočet. Hodnoty IC50 pre receptorovú väzbu, t. j. koncentrácie, pri ktorej zlúčenina podľa tohto vynálezu nahradila rádioaktívne označenú štandardnú látku, boli získané konštrukciou krivky počítačovým programom (RS/I, Bolt, Neranek and Newmann, Boston, Ma, USA).

A1 receptorová väzbová afinita bola stanovená aj s použitím prípravku z epididymických krysích membrán z tukových vankúšov.

Membránová príprava: Krysie epididymické tukové vankúše boli homogenizované použitím pufra tohto zloženia: 0,25 M sacharózy, 10 mM Tris, 2 mM kyseliny etyléndiamíntetraoctovej, 0,1 M fenylmetylsulfonylfluoridu a 1 pg/ml leupeptínu (200 mg vlhkého tkaniva na ml pufra). Homogénna zmes bola v 50 ml odstreďovacích skúmavkách odstreďovaná minútu pri 1 000 g (3 000 otáčok za minútu, supernatant bol odobratý a nasledovalo odstreďovanie 15 minút/38 000 g. Pelety boli resuspendované v testovacom pufri (30 mM Tris a 1 mM EDTA, pomer 300 mg pôvodnej hmotnosti tkaniva na ml testovacieho pufra) a k suspenzii boli pridané 2 μΙ/ml roztoku adenozínu-deaminázy (10 mg/ml), suspenzia sa potom inkubovala 30 minút pri 37 °C. Suspenzia sa odstreďovala 10 minút/38 000 g, pelety sa prepláchli raz 20 ml testovacieho pufra a resuspendovali ša v testovacom pufri (1,2 g pôvodnej hmotnosti vlhkého tkaniva/ml pufra.

Test a vyhodnotenie:

Trubice boli pripravené takto: obsah trubíc: 100 μΙ membránovej suspenzie (príprava viď hore), 50 μΙ roztoku ³H-cyklohexyladenozínu (pripravené riedením roztoku s obsahom asi 1 mCi/ml so špecifickou aktivitou asi 29,9 Ci/mmol, testovací pufer na 100 mM, ďalej označovaný ako roztok CHA), 350 μΙ testovacieho pufra; nešpecifické väzbové trubice: 100 μΙ membránovej suspenzie, 50 μΙ roztoku CHA, 50 μ1100 μΜ 2-chlóradenozínu v testovacom pufri, 300 μΙ testovacieho pufra; trubice so vzorkami: 100 μΙ membránovej suspenzie, 50 μΙ CHA roztoku, 50 μΙ roztoku testovanej zlúčeniny (je možné pripraviť sériovým riedením testovacieho pufra v roztoku dimetylsulfoxidu), 300 μΙ testovacieho pufra; trubice so slepým pokusom: 50 μΙ CHA-roztoku, 450 μΙ testovacieho pufra. Každá trubica bola zvírená 10 sekúnd, inkubovaná 2 hodiny pri 23 °C, filtrovaná „Brandel Filtration Uniť* s použitím filtračného papiera Whatman GF/B a prepláchnutá 2x 5 ml 50 mM Tris. Filtračné kolieska boli umiestnené vo scintilačných nádobkách 7 ml, ktoré boli naplnené asi 5 ml „Ready Safe Scintillation Cocktaiľ a bol vykonaný prepočet.

B. Stanovenie vazorelaxácie in vitro na izolovaných koronárnych artériách prasníc

Koronárne artérie prasníc boli zabezpečené z miestneho bitúnku, pozorne rozobrané a zbavené tuku, krvi a tkaniva. Boli vyrezané kolieska šírky asi 2 až 3 mm a tie boli potom prenesené do vodného kúpeľa vybaveného tkanivovým plášťom (10 mm), naplneným teplým (37 °C) oxidovaným (O₂/CO₂: 95%/96 %) Krebs-Henseleit pufrom a zavesené na vešiakoch tvaru L medzi tyčinky z nehrdzavejúcej ocele a prevodník sily. Zloženie Krebsovho pufra v mM: chlorid sodný 118, chlorid draselný 4,7, chlorid vápenatý 2,5, síran horečnatý 1,2, dihydrogenfosforečnan draselný 1,2, hydrogenuhličitan sodný 25,0, glukóza 10,0. Kolieska boli udržiavané v rovnovážnom stave počas 90 minút s častým menením pufra pri stálej tenzii 5 g. So zreteľom na zabezpečenie najlepšieho vývoja tenzie boli arteriálne kolieska vystavené 2x účinkom 36 mM chloridu draselného a 1x 10 μΜ PGF2a, skôr ako boli vystavené účinkom 3 μΜ PGF2a. Keď izometrická tenzia dosiahla ustálený stav, boli do kúpeľa pridané zvyšujúce sa dávky analógov adenozínu podľa tohto vynálezu (zvyčajne 1 mM až 100 μΜ v polovici času). Tenzia, dosiahnutá použitím 3 μΜ PGF2a bola pokladaná za rovnú 100 % a všetky ďalšie hodnoty boli vyjadrené ako % tohto maxima. Hodnoty IC50 pre relaxáciu, t. j. koncentráciu pri ktorej zlúčenina podľa tohto vynálezu spôsobí 50 % zníženie tenzie, bola stanovená použitím vyššie uvedeného počítačového programu pri doplnení lineárnej krivky.

C. Stanovenie stredného arteriálneho krvného tlaku (MAP, mean arterial blood pressure) a srdcového tepu (HR, heart rate) in vitro u normotenzných anestetizovaných krýs a spontánne hypertenzných krýs.

1. Anestetizované krysy

Normotenzné krysy boli uvedené do anestézie pentobarbitalnátriom (50 mg/kg, i. p.) a umiestnené na vyhriatom operačnom stolíku. Kanyly boli vsunuté do femorálnych žíl aj ciev, aby bolo možné zistiť krvný tlak a uľahčiť tak intravenózne podávanie testovaných zlúčenín. Zvieratka boli ponechané 10 minút po chirurgickom zákroku v pokoji, neustále bol sledovaný priemerný arteriálny tlak, zaznamenávaný, srdcový tep bol monitorovaný s použitím pulzu arteriálneho tlaku na spúšťanie kardiotachometru. Keď sa dostavili a boli zaznamenané základné parametre, boli podávané zvyšujúce sa dávky (1, 3, 10, 30, 100, 300 a 1 000 pg/kg) zlúčeniny, ktorá mala byť testovaná, a to intravenózne. Maximálne zmeny kardiovaskulárnych parametrov boli zisťované po podaní každej dávky adenozínového analógu. Iba jedna zlúčenina pripadla na podávanie jednej kryse. Spôsobilosť zlúčenín znížiť srdcový tep a stredný arteriálny tlak bola určená stanovením dávky činidla, ktorá bola potrebná na zníženie srdcového tepu alebo arteriálneho tlaku o 25 % (ED25).

2. Spontánne hypertenzné krysy (SHR, spontaneously hypertensive rat).

Orálna antihypertenzná účinnosť zlúčenín podľa tohto vynálezu bola zisťovaná na neovplyvnených, spontánne hypertenzných krysách. Anestézia krýs bola vykonávaná pentobarbitalnátriom (50 mg/kg, i. v.). Diaľkovo ovládaný snímač bol implantovaný do brucha krysy stredným rezom. Kanula snímača bola vsunutá do abdominálnej aorty, aby bolo možné priamo merať krvný tlak neovplyvnených SHR. Snímač bol napojený na abdomenálnu stenu. Po zotavení sa z chirurgického zákroku (minimálne po 7 dňoch) boli krysy SHR umiestnené na záznamovej doske a snímač / prenos bol aktivovaný. Arteriálny tlak systolický, diastolický a stredný, rovnako aj srdcový tep boli zaznamenané po 90 minútach na neovplyvnených krysách na zistenie stabilnej základnej línie. Každá z krýs dostala jednu dávku zlúčeniny podľa tohto vynálezu, ktorá sa mala testovať, pretože vehikulum a zmeny krvného tlaku aj tepu srdca boli monitorované počas 20 hodín a zaznamenávané.

Ak je prítok krvi do srdca prerušený na krátky čas (2 až 5 minút) s nasledujúcim obnovením prítoku krvi (reperfúzia), je srdce chránené pred vznikom poranenia, ku ktorému by mohlo dôjsť pri prerušení prítoku krvi na dlhšie časové obdobie (napríklad 30 minút).

D. Stanovenie tepu srdca in vitro

Izolovaná srdcová komora krysy

Samčekovia krýs „Sprague-Dawley“ boli anestetizovaní použitím Ketamín/Rompun, srdcia boli rýchlo vybrané excíziou a vložené do teplého, oxidovaného (95 % O₂/5 % CO₂) pufra Krebs-Henseleit tohto zloženia v mM: chlorid sodný 118, chlorid draselný 4,7, chlorid vápenatý 2,5, síran horečnatý 1,2, dihydrogenfosforečnan draselný 1,2, hydrogenuhličitan sodný 25,0 a glukóza 10,0 pH 7,4. Pravá, spontánne bijúca srdcová komora bola odrezaná a suspendovaná vo vodnom kúpeli vybavenom tkanivovým plášťom s použitím drôtikov z nehrdzavejúcej ocele. Srdcové komory boli udržiavané v rovnovážnom stave počas 60 minút pri ostávajúcej tenzii 2 g a so zmenou pufra každých 5 minút, počas prvých 15 minút a ďalej potom v intervaloch 5 minút. Zlúčeniny podľa tohto vynálezu, ktoré sa mali testovať, boli pridávané kumulatívne do kúpeľa a srdcový tep bol sledovaný s použitím polygrafu Grass Model 7D.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa vyznačujú účinnosťou pri testoch, použitých na stanovenie schopnosti takých látok napodobňovať kardioprotektívnu aktivitu myokardovej predúpravy. Príklady testovacích postupov, ktoré sa hodia na zistenie kardioprotektívnej aktivity zlúčenín podľa tohto vynálezu, sú opisované ďalej.

E. Stanovenie kardioprotektívnej aktivity u krýs.

1. Všeobecná chirurgická príprava

Dospelé krysy Sprague-Dawley boli anestetizované inaktínom (100 mg/kg, i. p.). Trachea bola intubovaná a pozitívny tlakový vzdušný priechod bol dosiahnutý s použitím malého respirátora pre zvieratá. Katétre boli umiestnené v stehennej véne aj artérii na podávanie zlúčenín podľa tohto vynálezu, ktoré sa mali testovať v spojitosti s meraním krvného tlaku, incízla bola vykonaná na ľavej strane hrudníka nad pektorálnym svalstvom a svalstvo bolo odtiahnuté, aby sa obnažil štvrtý medzirebrový priestor. Hrudník bol otvorený, srdce vybrané. V dĺžke 4-0 bol vykonaný prolinový šev ventrikulárnou stenou blízko ľavej hlavnej koronárnej artérie a použitý na prerušenie toku krvi koronárnej artérie utiahnutím posuvného uzlíčka. Na povrchu srdca bol umiestnený pulzný Doplerov prietokový sledovač (zariadenie meriace prietok krvi) na potvrdenie, že koronárna artéria bola vhodným spôsobom identifikovaná. Katéter bol tiež umiestnený do ľavej srdcovej komory na monitorovanie ľavej ventrikulárnej funkcie počas pokusu.

2. Predbežná úprava a testovacie postupy

Na predbežnú úpravu srdca bola koronárna artéria okludovaná (prietok bol prerušený) počas 2 minút. Posuvný uzol bol uvoľnený, aby sa obnovil prietok krvi (reperfúzia) počas 3 minút. Tento postup oklúzia/reperfúzia bol dva razy zopakovaný. 5 minút po ukončení konečnej predúpravy bola artéria znovu okludovaná na 30 minút s nasledujúcou reperfúziou na 3 hodiny. Ak bola testovaná zlúčenina podľa tohto vynálezu, potom namiesto vykonania postupu oklúzia/reperfúzia došlo k infúzii zlúčeniny 30 minút pred tridsaťminútovým oklúznym časom. Po ukončení trojhodinovej reperfúznej periódy bola artéria znovu zatvorená, do ľavého ventrikulárneho katétra bolo podané 1 ml farbiva „Patent Blue“ a činnosť srdca bola zastavená i. v. podávaním roztoku chloridu draselného. Tento postup umožňuje, aby farbivo preniklo perfúziou do normálnych priestorov srdca, zatiaľ čo časť srdca v ischemickom stave farbivo neprijme (to je tzv. rizikový priestor). Srdce sa rýchlo vyberie na analýzu veľkosti infarktu. Veľkosť infarktu sa zistí rozkrájaním srdca od apexu až dole na 4 až 5 rezov hrúbky 1-2 mm. Rezy sa inkubujú 15 minút v roztoku 1 % trifenyltetrazólia; toto vyfarbenie sa prejaví na žijúcom tkanive pri vývoji tehlovo-červeného zafarbenia. Infarktom postihnuté tkanivo sa nezafarbí týmto testom zafarbenia a je pri pohľade belavé. Tkanivové rezy sa umiestnia v analytickej sústave pre videozáznam a veľkosť infarktu sa zistí planimetricky. Účinok zlúčenín podľa tohto vynálezu pri testovaní na veľkosť infarktu myokardu sa tak zistí a použije sa na kvantitatívne vyhodnotenie rozsahu kardioprotektívnej aktivity. Výsledky sú uvedené v % rizikového priestoru postihnutého infarktom.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa vyznačujú aktivitou pri testoch, použitých na zistenie schopnosti zlúčenín inhibovať lipolýzu. Príkladné testovacie postupy, vhodné na stanovenie antilipolytickej aktivity zlúčenín podľa tohto vynálezu, sú uvedené ďalej.

F. Stanovenie antilipolytickej účinnosti na krysích adipocytoch

1. Izolovanie adipocytov z epididymálnych tukových vankúšov.

Adipózne tkanivo sa odoberie z anestetizovaných krýs a prepláchne dva razy v inkubačnom prostredí: hydrogenuhličitan sodný 2,09 g a kyselina etyléndiamíntetraoctová 0,04 g ako disodná soľ v litri Krebsovho pufra. Z každej krysy (300-500 g) sa získajú asi 4 ml adipózneho tkaniva. Adipózne tkanivo (35 ml) sa potom rozstrihá nožnicami na malé kúsky a po prepláchnutí 50 ml inkubačného prostriedku sa vleje do zásobníka injekčnej striekačky 50 ml, na ktorú je napojený krátky kúsok uzatvoreného vyústenia namiesto vlastnej ihly. Vodná fáza sa nechá zaschnúť a podiel druhého prepláchnutia inkubačným prostredím sa zavedie do injekčnej striekačky. Tkanivo sa vnesie do 50 ml roztoku kolagenázy (obsahuje 90 mg kolagenázy) s 500 mg albumínu z hovädzieho séra (BSA, bovine sérum albumín) a 1 ml 0,1 M roztoku chloridu vápenatého v 50 ml inkubačného prostredia v litrovej nádobe. Zmes sa pretrepáva asi 60 minút pri teplote okolo 37 °C v atmosfére 95 % kyslíka a 5 % oxidu uhličitého na dosiahnutie digescie tkaniva. Dispergované bunky sa lejú cez dve vrstvy dierovanej látky do 100 ml plastickej nádoby. Nedigestované zhluky na látke sa prepláchnu v 20 ml inkubačného prostredia. Bunky v uvedenej nádobke sa odstreďujú do dvoch plastových trubíc počas 30 sekúnd pri laboratórnej teplote a 300 otáčkach za minútu. Vodná fáza sa odsaje zdola voľne zo vznášajúcich sa vrstvených čiastočiek plávajúceho tuku a nie je potrebná. Adipocyty sa jemne vlejú do 250 ml plastovej nádoby, obsahujúcej 100 ml premývacieho roztoku (1 g . BSA na 100 ml inkubačného prostredia). Po miernom premiešaní sa postup odstreďovania opakuje. Nasleduje ďalšie premytie preplachovacím roztokom, bunky sa spoja a ich objem sa zistí pomocou odmerného valca. Adipocyty sa riedia dvojnásobným objemom testovacieho pufra, inkubačné prostredie (120 ml) obsahuje

1,2 g BSA a 13 mg kyseliny pyrohroznovej.

2. Test lipolýzy in vitro

Test sa vykoná v plastových 20 ml scintilačných nádobách s tým, že celkový testovaný objem je 4,2 ml. Inkubuje sa 2,5 ml testovacieho pufra, 1,5 ml zriedených adipocytov a 12,3 μΙ roztoku testovanej zlúčeniny a 12,3 μΙ agonistov adenozínu, (meniacej sa koncentrácie), a to v trepačke počas 15 minút, potom sa naštartuje reakcia roztokom norepinefrínu (41,2 μΙ) (10 nM v nosnom roztoku, obsahujúcom 10 ml vody, 4 mg BSA a 0,1 M kyseliny etyléndiamíntetraoctovej (20 μΙ) a adenozíndeaminázy (1 μΙ/ml, 41,2 μΙ). Po 60 minútach pretrepávania je reakcia ukončená a nádobky sa vylejú na ľad. Obsah každej z nádobiek sa prenesie do sklenej trubice 12 x 75 mm na odstreďovanie pri 8 až 10 °C, 20 minút a pri 3 600 otáčkach za minútu. Ťažká vrstva lipidov sa odoberie odsatím a vodný podiel sa testuje v prítomnosti glycerolu (400 μΙ vo vzorke). Pozitívna kontrola sa vykoná v neprítomnosti akéhokoľvek adenozínového agonistu, pričom sa namiesto testovacieho roztoku použije voda.

Antilipolytická aktivita adenozínu je sprostredkovaná aktivovaním Ai receptorového subtypu. Selektívni agonisty A₂-receptorového subtypu, ako je CGS 21680 sa neprejavujú antilipolytickou účinnosťou. Podľa toho zatiaľ čo niektorí A_r selektívni agonisty nemusia mať žiaducu antihypertenznú aktivitu a A₂-agonisty môžu byť neúčinnými antilipolytickými činidlami, zlúčeniny podľa tohto vynálezu, ak sú miešané agonisticky, sa jedinečne hodia na účinné zvládnutie oboch rizikových faktorov, diskutovaných vyššie, t. j. hypertenzie a hyperlipidémie.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa zvyčajne podávajú orálne alebo parentálne na liečbu pacientov, postihnutých hypertenziou, myokardovou ischémiou alebo v prípade pacientov, kde je potrebná kardioprotektívna alebo antilipolytická terapia. Výraz „pacient“ ako je tu užívaný, zahŕňa osoby aj ďalších cicavcov.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu, výhodne vo forme nejakej soli, sa môžu upravovať na podávanie akýmkoľvek vhodným postupom a vynález zahŕňa do svojho rozsahu farmaceutické kompozície, obsahujúce najmenej jednu zlúčeninu podľa tohto vynálezu, vhodnú na použitie v lekárstve alebo zverolekárstve. Takéto kompozície je možné pripravovať zvyčajnými postupmi s použitím jedného alebo viacerých farmaceutický vhodných nosičov alebo excipientov. Vhodné nosiče zahŕňajú rozpúšťadlá alebo plnivá, sterilné vodné prostredie a rôzne netoxické organické rozpúšťadlá. Kompozícia sa môže upraviť do formy tabliet, kapslí, práškov, vodných suspenzií alebo roztokov, injikovateľných roztokov, elixírov, sirupov a pod., a môžu obsahovať jedno alebo viacej činidiel zo skupiny, ktorú tvoria sladidlá, príchute, farbivá, konzervačné činidlá, vždy so zreteľom na prípravu farmaceutický prijateľného prípravku.

Ten ktorý nosič a jeho pomer k analógu adenozínu je daný rozpustnosťou a chemickými vlastnosťami zlúčenín, tým alebo oným spôsobom podávania štandardizovanou farmaceutickou praxou. Napríklad pri výrobe tabliet sa môžu používať ako excipienty laktóza, sodná soľ kyseliny citrónovej, uhličitan vápenatý a fosforečnan vápenatý, ďalej rôzne dezintegračné činidlá, ako je škrob, alginová kyselina alebo niektoré komplexné kremičitany spoločne s mazadlami, ako sú horečnatá soľ kyseliny stearovej, sodná soľ kyseliny laurylsírovej a mastenec. Na formulovanie kapslí sa výhodne používajú farmaceutické nosiče laktóza a vyššie molekulárne polyetylénglykoly. Ak sa pripravujú vodné suspenzie na orálne podávanie, môže byť nosičom emulzné alebo suspenzné činidlo. Rozpúšťadlá ako je etanol, propylénglykol, glycerol a chloroform, ako aj ich kombinácie, sú použiteľné, práve tak ako ďalšie materiály.

Na parenterálne podávanie sú roztoky alebo suspenzie týchto zlúčenín v sézamovom alebo podzemnicovom oleji použiteľné práve tak ako vodné roztoky v propylénglykolu, ako aj sterilné vodné roztoky farmaceutický prijateľných rozpustných solí. Roztoky solí týchto zlúčenín sú najmä použiteľné na podávanie intramuskulárnymi alebo subkutánnymi injekciami. Vodné roztoky, vrátane roztokov solí rozpúšťaných v destilovanej vode, sú vhodné pri intravenóznom injikovaní za predpokladu, že hodnota ich pH je správne nastavená alebo že sú vhodne pufrované, izotonicky použitím postačujúceho množstva chloridu sodného alebo glukózy a sterilizované zahrievaním alebo ultrafiltráciou.

Režim dávkovania, ktorý sa použije pri postupe podľa tohto vynálezu, je ten, ktorý zabezpečuje maximálnu terapeutickú odozvu až do dosiahnutia vylepšeného stavu s použitím minimálnej hladiny z hľadiska účinnosti. Teda všeobecne povedané dávkovaním je to, ktorým sa dosiahne zníženie krvného tlaku na liečenie hypertenzie, pri zvyšovaní koronárneho krvného toku na liečenie myokardovej ischémie, na dosahovanie kardioprotektívneho účinku, t. j. zlepšenie ischemických problémov alebo veľkosti infarktu myokardu v dôsledku myokardovej ischémie, alebo pri dosahovaní antilipolytického účinku. Všeobecne sa môže orálna dávka pohybovať od cca 0,1 do 100 (výhodne od cca 1 do 10 mg/kg), a intravenózna dávka sa môže pohybovať od cca 0,01 do 10 mg/kg, výhodne od 0,1 do 5 mg/kg. Pritom sa musí brať do úvahy voľba vhodného dávkovania v ktoromkoľvek špecifickom prípade s ohľadom na pacientovu hmotnosť, celkový zdravotný stav, vek a ďalšie faktory, ktoré by mohli vyvolať odozvu na podaný liek.

Zlúčeniny podľa tohto vynálezu sa môžu podávať tak často, ako je to potrebné na dosiahnutie a udržanie požadovaného terapeutického účinku. Odozva niektorých pacientov môže byť rýchla na pomerne veľké alebo malé dávky a vyžaduje iba malé dávkovanie alebo prerušenie dávkovania. Na druhej strane u iných pacientov môže trvať dávkovanie od asi raz až štyri krát denne v závislosti na fyziologickom stave pacienta. Zvyčaje sa liek podáva orálne od asi raz do asi štyri razy denne. Je možné predpokladať, že v prípade niektorých pacientov bude potrebná iba jedna alebo dve dávky denne.

Je tiež možné predpokladať, že tento vynález môže byť použiteľný na podávanie injekciami, čo je možné použiť v krajnom prípade pre pacienta postihnutého akútnou hypertenziou alebo myokardovou ischémiou, alebo v prípade pacienta, u ktorého sa prejavuje potreba kardioprotekcie alebo antilipolytickej terapie. Po takom zásahu môže nasledovať intravenózna infúzia aktívnej zlúčeniny a množstvo látky takto podanej infúziou pacientovi by malo byť účinné na dosiahnutie očakávanej terapeutickej odozvy.

Claims (17)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Zlúčenina všeobecného vzorca I kde K znamená dusík, N ZE O, alebo skupinu CH,

   Q znamená metylénovú skupinu alebo kyslík

   R₆ znamená vodík, skupinu alkylyovú, alylovú, 2-metylalylovú 2-butenylovú alebo cykloalkylovú a X znamená skupinu kde dusíkový atóm kruhu X môže byť substituovaný Y,

   E znamená kyslík alebo síru,

   Y znamená vodík, skupinu alkylovú, aralkylovú, substituovanú aralkyiovú, heterocyklylovú, prípadne substituovanú heterocyklylovú, heterocyklylalkylovú, prípadne substituovanú heterocyklylalkylovú.

   n a p znamená vzájomne nezávisle nulu, 1, 2 alebo 3 za predpokladu, že súčet n + p je najmenej 1

   T znamená vodík, skupinu alkylovú, acylovú, tioacylovú, halogén, karboxylovú alebo R₃O-CH₂

   Ri, R₂ a R₃ znamenajú navzájom nezávisle vodík, skupinu alkylovú alebo cykloalkylovú,

   A znamená vodík, skupinu alkylovú, hydroxyalkylovú, alkoxyalkylovú alebo OR’,

   B znamená vodík, skupinu alkylovú, hydroxyalkylovú alebo OR”,

   R* a R” znamenajú navzájom nezávisle vodík, skupinu alkylovú, aralkylovú, karbamoylovú, alkylkarbamoylovú, dialkylkarbamoylovú, acylovú, alkoxykarbonylovú, aralkoxykarbonylovú, aryloxykarbonylovú, alebo, ak A a B znamenajú OR’ alebo OR” v tom ktorom prípade, môžu R’ a R” spoločne tvoriť skupinu \ / c

   II o kde R_c znamená vodík alebo alkylovú skupinu

   Rd Re kde R_d a R_e znamenajú navzájom nezávisle vodík, skupinu alkylovú alebo spoločne s uhlíkovým atómom, na ktorom sú viazané, tvoria 1,1-cykloalkylovú skupinu alebo farmaceutický prijateľnú soľ.
2. 2. Zlúčenina podľa nároku 1, kde

   K znamená dusík,

   T znamená skupinu hydroxymetylovú alebo metoxymetylovú,

   A a B znamenajú po hydroxylovej skupine

   X znamená a (n + p) je 3 alebo 4 alebo farmaceutický prijateľnú soľ.
3. 3. Zlúčenina podľa nároku 2, totiž (2R,3R_I4S,5R)-2-hydroxymetyl·5-{6-[1·-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetraiiydrofurán-3,4-diol, (2R,3S,4R,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín3(R)-ylamino]-purin-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidínSCSJ-ylaminoJ-purín-S-ylJ-tetrahydrofurán-S^-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidínSíSJ-ylaminoj-purín-S-ylJ-tetrahydrofurán-S^-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-(6-[1-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-[6-(5’-trifluórmetyl-3,4,5,6-tetrahydro-2H-[1,2’]bipyridinyl-S-yO-purín-g-ylj-tetrahydrofurán-S^-diol, (2R_I3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-[6-(fenylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-ylJtetrahydrofurán-3,4-diol, (2R_l3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-[6-(1-pyridín-2-ylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín9-yl]-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-liydroxymetyl-5-{6-[1-(4-chlóľfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R_I4S_I5R)-2-hydroxymetyl-5-(6-[1-(5-metylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (ZR.SR^S.SRJ-Z-hydroxymetyl-S-íe-IHS-tiofén^-ylpyridín^-yO-pyrolidín-SCS)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R₎4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-metyJmerkaptopyridín“2-yl)-pyrolidín3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R_I4S_I5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(6-metoxypyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)ylaminoj-purín-g-ylJ-tetrahydrofurán-SAdiol, (2R_I3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymetyl-5-{6-[1-(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-metoxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-tetrahydrofurán-3,4-diol, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-nitrofenyl)-piperidín-4-yl]-purín-9-yl}cyklopentán-1,2-diol, dihydrochlorid (1S,2R,3R,5R)-3-hydiOxymetyl-5-{6-[(3S)-pyrolidín-3-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diolu, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-(6-[1-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3-ylamino]-purín9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín3(R)-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[(3S)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl}cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl]-pyrolidín3(S)-ylamino}-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(pyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(chinolín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1 -S-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-.

   purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4,5-bistrifluórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín9-y|}-3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(fenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9yl}-cyklopentán-1,2-diol,
4. 4-{3(S)-[9-(2_I3-dihydroxy-4-hydroxymetylcyklopentyl)-9H-purín-6-ylamino]pyrolidín-1 -ylj-benzonitril, (1 R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1 -(izochinolín-1 -yl)-pyrolidín-3(S)-ylaminojpurín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-brómchinolín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-(6-[1-(3-chlór-5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)“ylamino]-purin-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-[6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1 -(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(6-metoxypyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylannino]-purín-9-yl}3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4-trifluórmetylfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hyd roxymety Icykl opentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylfenyl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(3-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(3-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purin-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(fenylpyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}cyklopentán-1,2-diol, (1 R, 2S, 3R, 5R)-3-[6-(1-benzylpirolidín-3(S)-ylamino-purín-9-yl]-cyklopentán-1, 2-diol, (IR^S.SR.SRJ-S-ie-íl-benzylpyrolidín-SÍSJ-ylaminoJ-purín-g-ylJ-Shydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-benzylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl]-5metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ.

   4. Zlúčenina podľa nároku 1, kde

   Q znamená metylénovú skupinu, K znamená dusík,

   T znamená zoskupenie ⁰ z r₂ kde R, znamená vodík a R₂ nižšiu alkylovú skupinu, A a B znamenajú hydroxylové skupiny,

   X je zoskupenie vzorca )p a súčet (n + p) je 3 alebo 4 a ich farmaceutický prijateľná soľ.
5. 5. Zlúčeniny podľa nároku 4, totiž etylamid (1 S,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4-{6-[1 -(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentánkarboxylovej kyseliny, (S)-sek.-butylamid kyseliny (1 S,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4-{6-[1-(5trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentánkarboxylovej, a (R)-sek.-butylamid kyseliny (1 S,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4-{6-[1-(5trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentánkarboxylovej alebo ich farmaceutický prijateľná soľ.
6. 6. Zlúčeniny podľa nároku 1, kde

   Q znamená metylénovú skupinu,

   K znamená dusík,

   T znamená hydroxymetylovú alebo metoxymetylovú skupinu

   A a B znamenajú hydroxylové skupiny

   X znamená zoskupenie ( )p /-a súčet (n + p) je 3 alebo 4, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ.
7. 7. Zlúčeniny podľa nároku 6, totiž (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-nitrofenyl)-piperidín-4-yl]-purín-9-yl}cyklopentán-1,2-diol, dihydrochlorid (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-(6-[(3S)-pyrolidín-3-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diolu.

   (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-(6-[1-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3-ylamino]-purín9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín3(R)-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[(3R)-pyrolidín-3-ylamino]-purín-9-yl}cyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1 -(5-trif luórmety lpyridín-2-y l)-pyrolidín3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-(6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-(6-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-(6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(pyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(chinolín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-S-(4-nitrofenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4,5-bistrifluórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín9-yl}-3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(fenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9yl}-cyklopentán-1,2-diol,

   4-{3(S)-[9-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymetylcyklopentyl)-9H-purín-6-ylamino]pyro I idín-1 -yl}-benzonitril, (1 R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1 -(izochinolín-1 -yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-brómchinolín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-{6-[1-(3-chlór-5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-(6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl)3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(6-metoxypyrimidín-4-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S.3R,5R)-5-{6-[1-(6-chlórpyridazín-3-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4-trifluórmetylfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}3-hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(5-brómpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-(6-[1-(5-chlórpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, ’ (1 R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1 -(4-trif luórmetylfenyl)-pyrolidín-3(S)£ ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(4-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(3-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, (1 R,2S,3R,5R)-5-{6-[1-(3-chlórfenyl)-pyrolidín-3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-3hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, (IR^S.SR.SRJ-S-metoxyrnetyl-S-fe-O-fenylpyrolidín-SCSJ-ylaminoJ-purín-g-yl]cyklopentán-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-3-[6-(1-benzylpyrolidín-3(S)-ylamino)-purín-9-yl]-5hydroxymetylcyklopentán-1,2-diol, alebo (IR^S.SR.SRJ-S-ie-CI-benzylpyrolidín-SÍSJ-ylamino^purín-g-ylJ-S, metoxymetylcyklopentán-1,2-diol, t alebo ich farmaceutický prijateľná soľ.

   r
8. 8. Zlúčenina podľa nároku 6, totiž (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, alebo (1R,2S,3R,5R)-3-hydroxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín3(S)-ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ.
9. 9. Zlúčenina podľa nároku 6, totiž (1R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(5-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, alebo (1 R,2S,3R,5R)-3-metoxymetyl-5-{6-[1-(4-trifluórmetylpyridín-2-yl)-pyrolidín-3(S)ylamino]-purín-9-yl}-cyklopentán-1,2-diol, alebo ich farmaceutický prijateľná soľ.
10. 10. Zlúčenina vzorca kde Z znamená skupinu 4-trifluórmetylpyridín-2-ylovú alebo 5-trifluórmetylpyridín- ♦ 2-ylovú.
11. 11. Zlúčenina podľa nároku 10, totiž

    2-[(3S)-3-aminopyrolidín-1 -yl]-5-trifluórmetylpyridín alebo 2-[(3S)-3-aminopyrolidín-1-yl]-4-trifluórmetylpyridín.
12. 12. Kompozícia na liečenie kardiovaskulárnych ochorení charakterizovaných hypertenziou alebo myokardovou ischémiou s tým, že uvedená kompozícia obsahuje antihypertenzné účinné množstvo alebo antiischemicky účinné množstvo zlúčeniny podľa nároku 1 a farmaceutický prijateľný nosič.
13. 13. Kompozícia na zlepšenie ischemických problémov alebo zredukovanie veľkosti infarktu myokardu v dôsledku myokardovej ischémie, obsahujúca kardioprotektívne množstvo zlúčenín podľa nároku 1 a farmaceutický prijateľný nosič.
14. 14. Kompozícia na redukciu hladiny lipidov, triglyceridov alebo cholesterolu cicavca, obsahujúca antilipolytické množstvo zlúčeniny podľa nároku 1 a farmaceutický prijateľný nosič.
15. 15. Spôsob liečby pacientov trpiacich hypertenziou, spočívajúci v podávaní pacientovi množstva účinne znižujúceho krvný tlak zlúčeniny podľa nároku 1.
16. 16. Spôsob liečby pacienta trpiaceho myokardovou ischémiou, spočívajúci v podávaní pacientovi účinného množstva antiischemického činidla vo forme zlúčeniny podľa nároku 1.
17. 17. Spôsob liečby pacienta postihnutého hyperlipidémiou alebo hypercholesterolémiou, spočívajúci v tom, že sa pacientovi podáva antilipolyticky účinné množstvo zlúčeniny podľa nároku 1.