CZ2499A3 - Sloučeniny s antihypertenzními kardioprotectivními, anti+ischemickými a antilipolytickými vlastnostmi - Google Patents

Description

Sloučeniny s antihypertenahími, kardioprotektivními, antiischemickými a antilipolytickými vlastnostmi.

Oblast techniky

Vynález se týká sloučenin, odvozených od adenosinu a jeho analog, farmaceutických kompozic, obsahujících taková látky, jejich použití při léčení hypertense a myokardiální ischemie, jejich použití jako kardioprotektivní činidla, zlepšující ischemické nesnáze a rozsah infarktu myokardu v důsledku ischemie myokardu, dále jejich použití jako antilipolytická činidla, snižující hladinu plasmových lipidů, hladin sérových triglyceridů, hladinu plasmového cholesterolu, jakož i způsobů přípravy takových sloučenin i použitých meziproduktů.

Dosavadní stav techniky

Hypertense

Hypertense, tedy stav zvýšeného krevního tlaku, zasahuje značnou část lidské populace. Důsledky trvající hypertense se projeví vaskulárním poškozením očního, ledI vínového, srdečního a mozkového systému a riziko těchto, komplikací se zvyšuje, jak se zvyšuje krevní tlak. Základními faktory, kontrolujícími krevní tlak, je průtok srdcem a periferální veskulární resistence, přičemž posléze uveděný činitel je pre dominant ním obecným mechanizmem, který je kontrolován a ovlivňován různými vlivy. Sympatetický nervový systém reguluje periferální vaskulární odolnost různými vlivy na cl- a p-adrenergické receptory, jakož i nepřímými účinky na propustnost ledvin. Therapie za použití léčiv je zaměřena na specifické složky tohoto krevního tlakového systému 3 hlediska regulace, to s různými mechanizmy půsdbení a vlivu, což definuje určité skupiny léčiv, tedy třeba diuretika, aniagonisty /?-adrenergických receptorů ( p-blokující látky), inhibitory angiotenzinkonvertivních enzymů a antagonisty průtoku vápníku.

• * · • ·« ···

-2Diuretika typu thiazidů jsou používána při hypertenzi k redukování vaskulární resistence, a to vlivwm na vyluhování sodíku a vody* Do této skupiny patří hydrochlorothiazid, chlorothiazid, methyclothiazid a cyklothiazid, jakož i podobné, v tomto směru účinné látky: indapamid, metolazon, a chlorthalidon» Ačkoliv zde bylo mínění, že vlivem ^-blokujícího mechanizmu dochází k blokování podtypů p-adrenergických receptorů v srdci za snížení rychlosti tepu srdce a kardiálního průtoku, novější (^-blokující látky s vnitřní sympatomimetickou účinností (ISA, intrinsic sympathomimetic activity), Čítaje v to pindolol, acetobutolol, penbutolol a cartelol,jsou účinné jako nikoli-ISA- ^-blokující látky, a způsobují méně redukovanou rychlost srdečních tepů a průtok ardcem. Dalším žádoucím mechanizmem na tyto léky je inhibování průtoku ledvinami, centrální efekt, jakož i efekt na -pre-synaptické p>-adrenergické receptory s projevem inhibování norepinefrinového uvolnění.

Kardioselektivní p-blokující látky metoprolol (Lopíessor-Geigy), acebutolol (Sectral-®yeth) a atenolol (TenorminICI) mají za nízkých dávek větší účinek na p-adrenergické receptory, než na subtypy p-2-adrenergických receptorů,, rozmístěné v dýchacím a krevním systému. Neselektivní (^-blokující látky působí na oba subtypy p-adrenergických receptorů, a sem patří propranolol (Inderal-Ayerst), timolol (Blocsdren-Merck), nadolol (Corgard-Squibb), pindolol (Visken-Sandoz), penbutolol (Levaton-Hoechst-Roussel) a carteolol (Cartrol- Abbott). Opačný účinek p-blokujících látek zahrnuje asymptometickou bradykardii, podstatné zhoršení možnosti kongestivního srdéčního selhání, poruchy gastrointestinálního traktu, zvýšené obtíže při dýchání, maskované symptomy hypoglykemie a deprese. Mohou způsobit zvýšení triglyceridů v séru a mohou snížit vysokou lipoproteinovou hladinu cholesterolu.

Inhibitory ACE $e vyznačují prevencí tvorby angiotensinu II a inhibují rozrušení bradyklninu. Angiotensin II je mohutným vasokonstriktorem a stilumuje rovněž vylučování aldoste-

• ·· ·· · ·	·· • a	a a a	w w a	« a «
a a ··	• · ♦	• »	a ·	a a a a
• ' a	a a	a		a a
a·· a·	• a	«·«	♦ ·	aa

-3ronu. Tím, že dochází k blokování renin-angiotensin-aldosteronového systému, snižují tato činidla resistenci pwiferálne-vaskulární, jakož i zadržování sodíku a vody*

Navíc dále Inhibitory ICE zvyšují hladiny bradykininu a prostaglandinů, endigenních vasodilátorů. Captopril (Capoten-Squibb) a $nalapril (Vasotec-Merck) jsou vedoucími ACE-inhibitory. Mezi nežádoucí účinky ACE-inhibitorů patří vyrážka, nechutenství, proteinurie a neutropenie.

Antagonisté vápníkové cesty snižují přívod vápníku do buněk vaskulárního hladkého svalstva, výsledkem je systemická vasodilatace, která vyústí v antihypertenzní účinek. Další vlivy antagonistů vápníkové cesty zahrnují interferenci reakce gngiotensinu XI a receptorů tXc-2-adrenergické blokády, což může přispět k odpovídajícím antihypertenznxm účinkům. Antagonisté vápníkové cesty nemají opačné metabolické a farmakologické účinky thiazidů nebo β?-blokujících látek a mohou být proto použitelné pro pacienty, trpící diabetes, periferálním vaskulárním onemocněním nebo chronickým obatruktivním plicním onemocněním. Dva antagonisté vápníkové cesty, verapamil a diltiazem, mají vážné opačné kardiovaskulární účinky na atrioventrikulární kondukci u pacientů s předcházejícími konduktivními ,abnormalitami, mohou zhoršit bradykardii, blokování srdce a kongestivní srdeční selhání. Další méně závažné účinky antagonistů vápníkové cesty zahrnují periferální edém, závratě, bolestifhlavy, pocit nevolnosti a zvracení, zvláště ve spojitosti s nifedipinem a nicardipinera.

Ke zvládnutí závažné hypertenze jsou dostupná četná další činidla. Sem patří prazosin a terazocin, antagonisté .-ί^-adrenergického receptorů, jejichž antihypertenzní účinky jsou důsledkem vzniklé arteriální vasodilatace, dále klonidin, d^-adrenergický agonista, působící centrálně, jakož i periferálne na inhibiční cA₂-aůrenergické receptory,

-4a»· ·· a* v • · *· • · * a * a a · a • a ··· w w a · · a • a a a a aa ··a • a aa aa to za snížení sympatetické odezvy. Mezi další centrálně působící látky patří methyldopa, guanabenz a guanfaoin; reserpin, který způsobuje ochuzení zásob kstecholaminů; guanadrel, periferální adrenergický antagonista podobný guanethidinu s kratší dobou působení; dále přímo působící vasodilatory, jako je hydralazin a minoxidil. Tyto látky, v* 4 byt účinné, jsou spojeny s pozoruhodnými symp tematickými postranními účinky, počítaje v to reflexní sympatetické stimulování a zadržování kapalin, orthostatickou hypotenzi a impotenci.

Četná antihypertenzní činidla aktivují kompenzační tlakový mechanizmus, jako je zvýšené uvolňování reninu, zvýšená sekrece aldosteronu a zvýšený sympatetický vasokonstriktorový stav, které jsou předurčeny k návratu arteriálního tlaku na hladinu před vlastní úpravou, to může vést k retenci soli a vody, edémům a posléze k toleranci vůči antihypertenzním účinkům podaných látek. Dále pak se zřetelem na různé postranní účinky, zaznamenané v souvislosri současného stavu antihypertenzních činidel a problému, které se v souvislosti s nimi objevilx u speciálních tříd hypertenzních pacientů, kam patří přestárlí, černí a pacienti s chronickými onemocněními plic, cukrovkou nebo periferálními vaskulárními nesnázemi je zde třeba dalších látek pro léčení hypertenze.

Ischeraie

Myokardiální ischemie je výsledkem nerovnováhy mezi přísunem myokardiálního kyslíku a jeho potřebou, a zahrnuje exercionální a vasospastické myokardiální dysfunkce. Exercionální ischemie je obvykle připisována přítomnosti kritické atherosklerotické stenosy, což se týká silných karonárních arterií s výsledkem redukce subendokardiálního toku. Vasospastická ischemie je spojena se spasmy různých ohnisek, což není v žádné spojitosti s náiaahou či stresovými situacemi. Spasmy je lépe definovat jako přerušení zvýšení vaskulárního stavu. Mechanizmus vasospasmové ischemie zahrnuje:

(i) zvýšení vaskulárního stavu v místě stenosy v důsledku

-4-^L·

• AA	A«	•	A 4·	AA AA A · 4 A
·* 4 «	•
• ···	• ·		A	A	• AA· ·· A
• ·			•	A	A ·
• •A AA		• A		AA·	«« ·*

uvolnění katecholaminu, (ii) přechodné intraluminální ucpání, a (iii) uvolnění vasoaktivních látek, tvořenými krevními destičkami v místě endotheliálních lesí.

Koronární cirkulace je jednotná, protože je spojena s perfusí organizmem, který generuje perfusní tlak pro veškerou cirkulaci. Takže zásah, jímž se změní stav periferální cirkulace a a případné stažení bude mít značný vliv na koronární cirkulaci. Regulační složkou koronární vaskulatury jsou malé koronární arterioly, jejíchž vnitřní průměr se může značně měnit «.Změna vnitřního průměru je výsledkem bud vnitřní kontrakce vaskulárního hladkého svalstva (autoregulování) nebo extravaskulárního stlačení, což je důsledkem ventrikulární kontrakce. Výsledkem therapie ischemických problémů je komplexní interakce protiklaáných faktorů, které určují přísun kyslíku a jeho spotřebu.

Srdeční ochrana a prevence ischemických potíží

Zásadním postojem moderní kardiologie je nalezení nových therapeutických činidel, schopných inhibovat rozsah poškození myokardu, tj. rozsah myokardiá,ního infarktu, což je následek akutní ischemie myokardu.

Nástup thyombolyttcké therapie (rozpuštění chuchvalečků) během posledního desetiletí je spojen se zjištěním, že včasný zásah během srdečního záchvatu může znamenat podstatné snížení poškození tkáně myokardu. Rozsáhlá klinická zjištění vedla tou dobou k uzávěrům, že thrombolytická therapie snižuje riziko vývoje rušivých jevů srdečního tepu a udržuje také schopnost srdce ve funkci čerpadla. Takové uchování normální funkce srdce silně snižuje na dlouho možnost úmrtí po infarktu.

Také byl zajímavý vývoj therapie s možností další ochrany myokardu, což by bylo možno kombinovat s thrombolytickou therapií, protože retrospektivní epidemilogické studie vedly ke zjištění, že úmrtnost během několika málo let po infarktu se zda. - být ve vztahu k velikosti původ-5-

•	00	*		00
»» 0 *	•	•	• *	0	0 0	0
						«
• 0 « · 0	0	•	• 0	0 0	0 0 0	0
0 0	•	•			0	»
• 00 00		0 0	0 V 0	0«	• 0

ního infarktu·

Při předklinických studiích infarktu, provedených na četných živočišných modelech, bylo prokázáno, Že četné typy farmakologicky účinných látek, jako jsou sloučeniny, blokující vápníkovou cestu, analoga prostaCyklinu a látky, schopné inhibovat některé metabolické pochody, jsou schopné redukovat ischemické nesnáze na několika živočišných species,

V nejnovějších studiích bylo prokázáno, že je-li myokard vystaven na krátkou dobu ischemii (přerušení toku krve do srdce) s následnou reperfuzí (obnovení krevního toku), je tím možno chránit srdce před následnými ischemickými nesnázemi, které by jinak následovaly pc dalším působením ischemie po delší dobu. Tento jev byl označen jako myokardové předkondiciování a má se za to, že to lze částečně připsat uvolňování adenosinu během tohoto Časového, výše zmíněného období.

Dalšími studiemi se zjistilo, že adenosin a jeho analoga snižují rozsah poškození tkáně, jak to lze pozorovat po přerušení toku krve do srdce při různých modelech ischemických nesnází na několika species, viz například

Toombs C. a spol., Myocardial protective effects of adenosine, Infarct size reduction with pretreatment and continued receptor stimulation during ischemia, Circulation 86, 986-994 (1992), dále Thornton J. a spol.,Intravenous pretreatment with 2^-selective _edenosine analogues protects the heart against infarction, Circulation 85, 659-665 (1992), a Downey J., Ischemie proconditioning — nátuře*s own cardioprotective intervention, Trende Cardiovasc*Med. 2, 170-176 (1992).

Sloučeniny dle tohoto vynálezu napodobují předkondiciování myokardu. Čímž zlepšují případné ischemické potíže nebo jsou spojeny s redukcí velikosti infarktu myokardu v důsledku myokardiální ischemie a hodí se proto k po užití

-69 9 9 «94 4

9

9« « 4 jakokardioprotektivní činidla.

Antilipolysa

Hyperlipidemie a hypercholesterolemie jsou - jak známo - dvěma z hlavních rizikových faktorů pro aiherosklerosu a koronární srdeční onemocnění, což je hlavní příčinou úmrtí a neschopnosti v západních zemích. Ačkoliv etiologie atherosklerosy je ovlivněna mnohými faktory, vývoj atherosklerosy a podmínek stavů, zahrnujících onemocnění koronárních arterií, periferální vaskulární onemocnění a cerebrovaskulární onemocnění jsou důsledkem omezeného průtoku krve, je ve spojitosti s abnormalitami s hladinou cholesterolu a lipidů v seru. Etiologie hypercholesterolemie a hyperlipidemie je primárně genetická, ač zde mohou značně přispět další faktory, jako je přemíra pozřených nasycených tuků a cholesterolu.

Antilipolytická účinnost adenosinu a jeho analog plyne z aktivování A^-receptorového subtypu, viz Lohse M.J, a spol., Recent Advances in Receptor Chemistry;

Melchiore C. a Gianella, vyd., Elsevier Science Publishers B.V., Amsterdam 1988, 107-121. Stimulování tohoto receptorového subtypu snižuje intercelulární koncentraci cyklických AMP v adipocytecho Cyklický AMP je nutný ko-faktor pro enzymovou lipoproteinovou lipasu, která hydrolyticky štěpí triglyceridy na volné mastné kyseliny a glycerol v adipocytech, viz Sgan J.J. a spol., Proč.Nati.Acad,Sci. 1992, 8357-8541. Podle toho redukce intracelulární cyklické AMP z hlediska koncentrace v adipocytech snižuje aktivitu lipoproteinové lipasy a tedy tím i hydrolysu triglyceridů.

Zvýšený krevní tlak a zvýšený podíl lipidů v plasmě jsou dva známé rizikové faktory ve spojitosti s úmrtností v důsledku kardiovaskulárních onemocnění.

Pro pacienta, postiženého cukrovkou, je možnost mortality po kardiovaskulárním onemocnění podstatně vyšší, riziko ve spojitosti s těmito faktory se dále zvyšuje, viz Bierman

4 *·	4»	• 4 4 · 4
• · 4 · ♦	4	• 9	f · · *
v »·· 4 4	4	9	4 444 ·♦«
9 * ·	•	9	« 4
* · « 44	44	49«	«4 4«

-ΊE.L., Arteriosclerosis and Thrombosis, 1992, 647-656,

Další údaje jsou v tom smyslu, že nadměrná lipolysa je charakteristikou diabetes závislé nikoli na insulinu a asi značně přispívá k resistenci na insulin a hyperglykemii, viz Swislocki A.L., Horm.Metab.Res* 1993, 90-95*

Sloučeniny dle tohoto vynálezu jako antihypertenzní a antilipolytioká činidla jsou vhodná pro léčení a zlepšení rizikových faktorů jak veskulárního, tak i metabolického, mají tedy obzvláštní cenu a použitelnost*

Tento vynález se týká skupiny analog adenosinu a jejich použitelnosti při léčení^hypertenze, myokardové ischemie,· dále se hodí jako činidla k ochraně srdce, zlepšující ischemické nesnáze nebo rozsah infarktu myokardu v důsledku ischemie myokardu, dále se hodí jako antilipolytioká činidla, snižující hladinu lipidů v plasmě, hladinu triglyceridů v plasmě a rovněž se týká způsobu přípravy těchto sloučenin i meziproduktů při jejich přípravě.

Poslední vývoj na tomto úgeku.

Adenosin se vyznačuje širokým rozsahem fyziologických ‘a farmakologických účinků, čítaje v to význačné změny kardiovaskulárních a renálních funkcí. U zvířat i lidí způsobí intravenozní injekce adenosinového nukleotidu hypotenzi.

Fyziologické a farmakologické účinky adenosinu jsou zprostředkovány specifickými receptory, umístěnými na povrchu buněk. Byly identifikovány 4 subtypy adenosinových receptorů, označené AJ, Ag_a, ^A2B ^a ^^eceP^°^r inhibuje tvorbu cAMP potlačením aktivity adenylatové cyklasy, zatím co stimulování Ag receptorů se projeví zvýšením aktivity adenylatové cyklasy a zvýšením intracelulární cAMP. Zdá se, že každý receptor zprostředkovává specifické účinky adenosinu v různých tkáních. Tak například vaskulární působení adenosinu se zdá být zprostředkováno stimulování receptorů Ag, což je podporováno pozitivním porovnáním mezi generováním cAMP a vasorelaxací izolovaného vaskulárního hladkého svalstva po působení adenosinu; stimulování kardiálních

-8• ί»« *· 0 *· 00 * « 0 t 0 · ♦* · * * « « « 0 · * · · · · · • ♦·· 3 · 0 · ··· ··· • · » * · * »*« 0· ·· ϋ·* ·* ··

A^-receptorů redukuje generování cAMP v srdci, což přispívá k negativním dromotropním, inotropním a chronotropním kardiálním účinkům· V důsledku toho, podobně jako je tomu v případe většiny vasodilátorů, podávání adenosinu není spojeno s reflexní tachykardií.

Adenosin se také vyznačuje patrným působením na renální funkci, Intrarenální infuze adenosinu způsobí přechodný pokles renálního krevního toku a zvyšuje renální vaskulární rezistenci; s pokračujícími infuzemi adenosinu se renální krevní tok vrátí na kontrolovanou hladinu a renální vaskulární rezistence se sníží. Počáteční renální vasokonstrikřní odezvy adenosinu nejsou způsobeny přímo vasokonstrukčním; působení^nukleotidu, ale zahrnují interakce mezi adenosinem á renin-angiotensinovým systémem.

Adenosin je obecně pokládán za primární fyziologický mediator reaktivní hyperemie a autoregulování koronárního uspořádání v odezvu na myokardiální ischemii. Bylo již oznámeno, že koronární endothelium obsahuje adenosin A₂ receptory vázané na adenylatovou cyklasu, která se aktivuje paralelně se zvýšením koronárního toku a že kardiomyocytové receptory jsou převážně subtypu adenosin A^ a ve spojitosti s bradykardií. Podle toho je adenosin ve vztahu k jedinečnému mechanizmu ischemické léčby..

Kardiovaskulární odezvy na adenosin mají krátkou životnost v důsledku rychlého příjmu a metabolismu endogenního nukleotidu. Na rozdíl od toho jsou analogy adenosinu podstatně odolnější při metabolickém odbourání a zjistilo se, že vyvolávají trvalé změny arteriálního tlaku a srdečního tepu.

Bylo synteticky připraveno několik silně účinných, metabolicky stabilních analog adenosinu, které ge vyznačují různými stupni selektivity pro dva receptorové subtypy. Adenosinové agonisty, které obecně mají větší selektivitu pro A-j- receptory ve srovnání s A₂ receptory, tedy

-9• «ti »· · • titi 4 · ♦*· • ti ti ti* · • ·«· · ti * * • « ti · tititi titi ·· ··· ti · ti ti ti ti

O ti ti ti « cyklopentyladenosin (CPA) a R-fenylisopropyladenosin (R-PIA) jsou standartními adenosinovými agonisty, u kterých se jeví nápadná selektivita pro A^ receptor (poměr Ag/A^ =

780 a 106 v tom kterém případě· Naopak, N-5'-ethylkarboxamidoadenosin (NECA) a mohutným Ag receptorový® agonistou (Ki-12nM) se stejnou afinitou pro A^ receptor

Ki-6,3nM (poměr Ag/A^ = 1,87)· Až dosud byl CV-1808 nejselektivnějším dostupným Ag agonistou Ug/A^ = 0,19), i když. se má za to, že sloučenina je desetkrát méně účinná než NECA svou aktivitou pro Ag receptor· Při dalším současném vývoji byly objeveny novější sloučeniny, které jsou velmi účinnými a selektivními Ag agonisty., Ki « 3-8 níí pro A^, poměr Ag/A^ = 0,027 -0,042, viz Muller 0·Ε· a Scior T., Pharmaceutica Acta Helv. 68, 77-111 (1993).

V literatuře bylo oznámeno, že četné N<?-aryl- a N6-heteroarylalkyl-substituované adenosiny a substituované (2-aminoa 2-hydroxy)-pdenosiny se vyznačují různými farmakologickými aktivitami, čítaje v to kardiální a cirkulační aktivitu, viz například Brit .pat. 1 123 245, Nim.vyl.spis 2 136 624,

059 922, 2 514 284, Jihoafr.pat.spis 67/7630,

US.pat.spis 4 501 735, EP publ. 0139358, popisující N6-((geminální diarylsubstituované alky)-adenosiny, EP.pat.přihl.

88106818.3, popisující N6-heterocykličky substituované adenosinové deriváty s kardiální vasodilateční aktivitou,

Něm.vyl.spis 2 131 938, popisující aryl- a heteroarylalkylhydrazinyl-adenosinové deriváty, Nem.vyl.spis 2 151 013, popisující N6-aryl- _R heteroaryl-substituované adenosiny,

Něm.vyl.spis 2 205 002, popisující adenosiny s N6-substituenty s obsahem přemosťujících cyklických struktur, vázaných na N6-dusíkový atom na substituenty se zahrnutím thienylových, a Jihoafr,pat.spis 68/547 7, popisující N6-indolyl-substituované

2-hydroxyadenosiny.

—10—

Ϊ · · • * · « «	·· *	« ·	«· ·» « · · ·
• ··♦ ·	•	« *	·«· ·»·
« i	•		• «
« · · · ·	««	• 99	• 9 · ·

US.pat.spis 4 954 504 a EP publ. 0267878 popisují genericky, že karboeyklická ribosová analoga adenosinu a odpovídající farmaceuticky přijatelné jejich estery, substituované v polohách 2- a/nebo N6 nižšími arylalkylovými skupinami, čítaje v to thienylovou, tetrahydropyranylovou, tetratyhrothiopyranylovou a bicyklické napojené pěti- nebo šestičlenné nasycené heterocyklisky substituované nižší alkylované deriváty se vyznačují vlastnostmi adenosin-receptorových agonistů. Adenosinová analoga se substituenty thienylového typu jsou popisována v EP publ. 0277917, týká se to N6-substituovaných-2-heteroaryllalkylaminosubstituovaných adenosinů, čítaje v to 2-^(2-[thien-2-ylj-ethyl)-aminojf-substituovaný gdenosin, dále Nem.vyl.spisu 2 139 107, popisujícím N6-( benzothienylmethyl)-adenosin, v PCT WO 85/04882, popisujícím N6-heterocykloalkylsubstituované adenosinové derivátx. počítaje v to N6-[2-(2-thiehyl)-ethyllamino-9-(B-ribofuranosyl)-9H-purin, který se vyznačuje kardiovaskulární vasodilatační aktivitou a N6-chirální substituetnty se vyznačují ještě vyšší aktivitou, v EP publ. 0232813, popisujícím N6-(l-substituované thienyl)-cyklopropylmethylsubstituované adenosiny s vysokou kardiovaskulární aktivitou, US pat,spise 4 683 223, popisujícím N6-benzothiopyranyl substituované adenosinové deriváty s anti- hypertenzními vlastnostmi, PCT WO 88/03148 a WO 88/13148, popisujícími N6-^2-aryl-2-(thien-2-yl)-ethyl^-substituované adenosinové deriváty s antihypertenzními vlastnostmi, US. pat. 4 636 493 a 4 600 707, popisujícími N6-benzothienylethyl-substituované adenosinové deriváty s antihypertenzními vlastnostmi.

Amidy ádenosin-5 ^ř-karboxylóvé kyselily jsou popisovány s použitelnosti jako antihypertenzní a antianginální Činidla V US.pat. 3 914 414, 2atím co US.pat.spis 4 738 9£4 popisuje, že se N6-substituované aryl- a arylalkyladenosin-5'-ethylkarboxamidy vyznačují různými kardiálními a antihypertenzními vlastnostmi.

« 4 · ·· · ·	V	• · •	•		·· * * *
• fc » · ·	«				9 *··
• ·	•	»			•
··· ··		• ·	«	• V

-11V EP publ. O 378 518 a UK přihl. 2 2 2 6 027 jsou po6 * . b pisovány W -alky1-2 -O-alkyladenosiny s antihypertenzní účinností, podle US.pat.spisu 4 843 066 má N^-alkyl-2 *,3 *di-O-alkyladenosin a látky této skupiny použitelnost jako antihypertenzní činidlo také.

Amidy a estery adenosin-5 *-(U-substituované)-karboxylové kyseliny, jakož i Wl-oxidy jsou popisovány jako koronární vasodilátory, viz Stein a spol., J.Med.Chem. 23? 313-319 (1980) a J.Med Chem. 19. 1180 (1976). Adenosin-5/-karboxamidy a odpovídající Wl-oxidy jsou popisovány jako jedy pro malá zvířata, viz'US.pat.spis 4 167 565.

Antilipofiy tickou úíinnost adenosití^popsal Dole V.P., J.Biol.Ghem. 236 , 3125-3130 (1961). Inhibování lipolysy působením (R)-W^-fenylisopropyladenosinu je diskutováno Westermann-em E. a spol., Adipose Tissue, Regulation and Metabolic Punctions, vyd. Jeanrenaud B. a Hepp D., George Thieme, Stuttgart 47-54 (197_O). Jako antilipolytika jsou popisována analoga W^-mfeno- a disubstituovaných adenosinů, dále pak jako látky s antihypercholesterolemickým a antiky per lip emickým účinkem, viz US.pat.spis 3 787 391, 3 817 981, 3 838 147, 3 840 521, 3 835 035, 3 851 056, 3 880 829,

939 763, 3 929 764, 3 988 317 a 5 032 583.

W6-Substituované deriváty adenosinu a jejich analoga, použitelné látky při gastrointestinálních nesnázích, jsou v EP přihl. 0423 776 a 0423 777.

W-6-Heterocyklylove sloučeniny, odvozené od adenosinu a odpovídajících analog a jejich použití při léčbě hypertenze a myokardiální ischemie, dále jejich použití jako kardioprotektivní činidla, která zlepšují ischemické obtíže nebo rozsah myokardiálního infarktu v důsledku myokardiální ischemie, jejich použití jako antilipo^ytická Činidla, která snižují hladinu plasmových lipidů, hladinu sérových triglyceridů a hladinu plasmového cholesterolu, jsou popisována v US.přihlášce 08/316 761 z 03.10.1994 těchže autorů, jako tohoto textu (Notice of Allowance” odeslána 26.03.1996\.

• ·· *· « » 4 «		• • ft	44 4 · ·
• · 4 · * ·	•	• ·	··«
• · ·	•	•	•
4 4·		·»»	• ·

US.pat.spis 5 364 862 z 02.10.1992 stejných autorů, jako tohoto textu, popisujeNé-heterocyklyl-deriváty adenosinu a jeho analog a jejich použití při léčení feyokardiální ischemie a hypertenze.

Má se za to, že hlášená toxicita, CNS-vlastnosti a zvýšení tepotu srdce v souvislosti s analogy adenosinu přispěly k obtížím předcházet vývoji komerčních adanosinových analogů jako antihypertenzních a antiischemických Činidel. Tento vynález se vztahuje na skupinu metabolicky stabilních adenosinových analog, jejich derivátů, majících neočekávaně žádoucí farmakologické vlastnosti, tedy jsou antihypertenzní, kardioprotektivní, antiischemické a antilipplytické látky s jedinečným therapeutickým profilem,,

Podstata vynálezu

Sloučeniny vzorci I dle tohoto vynálezu odpovídají obecnému

kde

K znamená dusík, N /-E0 nebo skupinu CH

Q znamená methylenovou skupinu nebo kyslík, znamená vodík, skupinu alkylovou, allylovou, 2-methylallylovou,,2-butenýlovou nebo cykloalkylovou,

X znamená

I

nebo • 4 • 4 ·· 4· » 4 « 4 » · 4 ·

44« 444 • 4 »4 4*

-13kde dusíkový atom kruhu X může být nahrazen ve smyslu Y E znamená kyslík nebo síru,

Y znamená vodík, skupinu alkylovou, aralkylovou, substituovanou aralkylovou, arylovou, substituovanou arylovou, heterocyklylovou, substituovanou heterocyklylovou, heterocyklylalkylovou nebo substituovanou heterocyklylalkylovou, nap znamenají vzájemn+ nezávisle 0, 1, 2 nebo 3, to za předpokladu a omezení, že n + p odpovídá nejméně 1,

T znamená vodík, skupinu alkylovou, acylovou, thioacylovou, halogen, karboxylovou

R-,. u Rh

S ^N-C ne boR^ 0-¾

V

Rj, R£ a R^ znamenají vzájemně nezávisle vodík, skupinu alkylovou nebo cykloalkylovou

A znamená vodík, skupinu alkylovou, hydroxyalkylovou, alkoxylovou nebo 0R^z,

B znamená vodík, skupinu alkylovou, hydroxyalkylovou, alkoxyalkylovou nebo 0R^z,^z

R* a R^zz znamenají vzájemně nezávisle vodík, skupinu alkylovou, aralkylovou, karbamoylovou, alkylkarbamoylovou, dialkylkarbamoylovou, acylovou, alkoxykarbonylovou, aralkoxykarbonylovou, aryloxykarbonylovou, nebo když A a B znamenají v tom kterém případě 0R^z a 0R^zz, tvoří R^za R^zz dohromady spolu

S X s

s vodík nebo alkylovou skupinu, ^R^^Re kde R^ a R_e znamenají vzájemně nezávisle vodík, skupinu alkylovou nebo tvoří dohrom_ady s uhlíkovým atomem, kde jsou vázány

1,1-cykloalkylovou skupinu, jakož i jejich farmaceuticky přijatelné soli·

V

II o

kde R_ znamená c

• · · « · «	··	« • «	99 • · «
•	*
« · · ·	• ·	•		• ···
• ·	•	•	•	•
« * · ·		» ·		« ·

Vynález se právě tak týká žpůsobů léčení kardiovaskulárních onemocnění, charakterizovaných hypertenzí nebo myokardiální ischemií za použití farmaceutických kompozic, obsahujících antihypertenzně-účinné množství nebo anti-ischemicky účinné množství sloučeniny obecného vzorce I zde výše, jakož i způsobu zlepšení ischemických nesnází nebo velikosti myokardiálního infarktu ua použití kompozic, obsahujících kardioprotektivní množství sloučeniny obecného vzorce I, uvedeného zde výše,, způsobů léčení hyperlipidemie nebo hypercholesterolemie použitím farmaceutických kompozic, obsahujících antilipolytické množství sloučeniny vzorce I, způsobů přípravy a meziproduktů, použitých při přípravě takových sloučenin.

Jak jsou použity zde již dříve a potom v .popisu tohoto * vynálezu mají dále uvedené pojmy - pokud není výslovně uvedeno jinak - tyto významy:

Acyl znamená přímku nebo větvenou skupinu vzorce alkyl-C=O. Thioacyl znamená přímou nebo větvenou skupinu alkyl-C=S. Výhodnými acylovými a thioaeylovými skupinami jsou nižší alkanoylové a nižší thioalkanoylové skupiny s jedním až asi šesti atomy uhlíku v alkylovem zbytku.

Alkyl znamená nasycenou alifatickou uhlovodíkovou skupinu, jež může být přímá nebo větvená s asi jedním až asi dvaceti atomy uhlíku vnřetezci. Výhodné alkylové skupiny, at přímé nebo větvené, obsahují v řetězci jeden až asi 10 atomů uhlíku. Větvením se mini, že nižší alkylová skupina, jako je methylová, ethylová nebo propylové je vázána na lineární alkylový řetězec, Nižší alkylová skupina znamená alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku.

Cykloalkyl znamená alifatický cyklus se třemi až asi deseti atomy uhlíku v cyklu s tím, že výhodné skupiny mají 4 až asi 7 uhlíkových atomů v cyklu. 0

Karbamoylová skupina znamená skupinu vzorce HgN-á; alkylkarbamoylové nebo dialkylksrbamoylové skupiny mají dusíkový atom substituovaný jednou či dvěma alkylovými skupinami.

• *· • · ·	•	• · •	t v	• · ·
» ··· «		•	• «	···
• ·	•			•
			·· ·	• ·

Karboxyl znamená skupinu vzorce C®OH.

Alkoxy znamená alkyl-0 skupinu, kde alkyl má zde již výše uvedené významy s tím, že nižší alkoxylové skupiny jsou skupinami výhodnými a jako příklady lze uvést skupiny methoxylovou, ethoxylovou, n-propoxylovou, isopropoxylovou, a n-butoxylovou.

Alkoxyalkylová skupina” znamená alkylovou skupinu, jak byla výše popsána, substituovanou alkoxylovou skupinou, jak zde byla výše popsána.

Alkoxykarbonylová skupina znamená skupinu alkoxy-C=0.

Aralkyl znamená alkylovou skupinu, substituovanou arylovým zbytkem s tím, že aryl znamená fenyl nebo naftyl. Substituovaná aralkylová nebo substituov_aná arylová skupina znamená že arylová skupina nebo arylová část aralkylové skupiny je substituována jednou Si vícekráte substituenty, jako jsou skupiny alkylové, alkoxylové, aminoskupiny, nitroskupiny, skupiny karboxylové, karboalkoxylové, nitrilovó, alkylaminoskupiny, halogeny, skupiny hydroxylové, hydroxyalkylové, merkaptylové, alkylmerkaptylové, trihalogenalkylové, karboxyalkylové nebo karbamoylové.

Aralkoxykarbonylové skupina je skupina aralkyl-O-C=O.

Aryloxykarbonylová skupina je skupina vzorce aryl-O-C=O, Karbalkoxylová skupina je karboxylovámskupina, esterifikovaná alkoholem vzorce kde n znamená celé kladné číslo od 1 do qSí 6.

Halogen znamená chlor, fluor, brom nebo jod.

Heterocyklylová skupina je cyklická struktura se čtyřmi až desati členy, kde jeden či více Členů cyklu má jiný význam než uhlík, například znamená dusík, síru nebo kyslík. Heterocyklické skupiny mohou být aromatické Si nearomatické, tedy mohou být nasycené, částečně nebo dokonale nenasycené.

Za výhodné heterocyklické skupiny je třeba pokládat tyto: pyridylovou, pyridazinylovou, pyrimidinylovou, isochinolinylovou, chinolinylovou, chinazolinylovou, imidazolylovou, pyrrolylovou, furanylovou, thienylovou, thiazolylovou, benzothiazolylovou, piperidinylovou, pyrrolidinylovoum tetrahydro-16-

• ·»	•	t·	• a · ·
• ··· · ·	♦	• «	aaa
• · ·	•		•
·· ·	·«	···	• ·

« * e

• · » ♦ · furánylovou, tetrahydropyranylovou a morfolinylovou.

•'Substituovaná heterocyklylová skupina znamená heterocyklilovou skupinu, substituovanou jednou ci vícekráte substituenty, jako jsou skupiny elkoxylové, alkylaminoskupiny, arylové, karbalkoxylove, karbamoylové, nitrilová, halogeny, heterocyklylová, trihalogenmethylová, .hydroxy lová, merkaptylová, alkylmerkaptylová a 'nitroskupina·

Hydroxyalkylová skupina znamená alkylovou skupinu, substituovanou skupinou hydroxylávou. Nižší hydroxyalkylová skupiny lze označit za výhodnější a jako příklady možno uvést skupinu hydroxymethylovou,. 2-hydroxyethylovou, 2-hydroxypropylovou a

3-hydroxypropylovou.

Prodrug znamená látku jež může, ale také nemusí být sama aktivně, ale kterou lze změnit na biologicky aktivní chemickou látku, a to metabolicky, sulvolyticky nebo jinými fyziologickými postupy.

Kardioprotekce znamená jev, kdy myokard je méně náchylný ischemickému poškození θ myokardiálnímu infarktu v důsledku myokardiální ischemie.

Zlepšení ischemických nesnází znamená prevenci nebo redukci ischemických nesnází v oblasti myokardu v důsledku myokardiální ischemie.

Zlepšení rozsahu myokardiálního infarktu znamená buď redukci rozsahu myokardiálního infarktu nebo prevenci myokardiálního infarktu jako následek myokardiální ischemie.

Sloučeniny obecného vzorce I obsahují chirální (asymetrická) centra, vynález se týká individuálních stereoisomerů i jejich směsic Individuální isomery se připravují nebo isolují použitím odborníkům známých postupů, nebo použitím postupů, popisovaných zde dále.

44	44 4	4· 44
4 4 4 4 4		4	4 4	4 4 4 4
4 ·44 · ·		*	4 4	«44 4*4
4 4 4		4	4	4 4
44 4 4	4 4		• 44	44 44

Slouceniny dle tohoto vynálezu se mohou použít ve formě volných bází, adičních solí kyselin nebo hydrátů*

Všechny tyto formy spadají do rozsahu tohoto vynálezu.

Použití adičních solí kyselin je jednodušší a vhodnější.

V praxi to znamená, že použití soli bezprostředně, zahrnuje použitelné množství ve formě báze. Kyseliny, které se dají použít při přípravě uvedených adičních solí, 'zahrnují hlavně ty, které při kombinaci s bázemi poskytují farmaceuticky přijatelné soli, to je takové, jejichž anionty nejsou toxické pro příjemce ve farmaceuticky podávaných dávkách, takže prospěšný účinek antihypertensní, kardioprotektivní, antiischemický a antilipolytický, spojený s volnými bázemi, není rušen postranními účinky, připisovanými aniontu.

Ačkoliv farmaceuticky přijatelné soli sloučenin dle tohoto vynálezu lze označit za výhodné, jsou všechny ediční soli kyselin vhodné jako zdroj volných bází, i když ta či ona sůl jako taková je vhodná'pouze jako meziprodukt, tedy například vznikla-li taková sůl jen pro účely čistění a identifikování, nebo je-li použita jako meziprodukt při přípravě farmaceuticky přijatelné soli postupem iontové výměny*. Farmaceuticky přijatelné soli, spadající do rozsahu tohoto vynálezu, jsou odvozeny od těchto kyselin: z minerálních chlorovodíková, sírová, fosforečná a sulfamová, z organických octová, citrónová, mléčná, vinná, malonová, methansulfonová, fumarová, ethansulfonová, benzensulfonové, p-toluensulfonová, cyklohexansulfamová, chinová apod. Odpovídající adicní soli kyselin zahrnují tedy hydrochloridy, sírany, fosforečnany, sulfamáty, octany,soli kyseliny citrónová, mléčnany, vínany, methansulfonáty, fumaráty, ethansulfonáty, benzensulfonáty, p-toluensulfonáty; cyklohexylsulfonáty a soli kyseliny chinové v tom kterém případě.

Adiční soli kyselin a sloučenin dle tohoto vynálezu se běžně a pohodlně připravují rozpuštěním volné báze ve vodném Či vodně-alkoholickém roztoku, či jiném vhodném roztoku, obsahujícím odpovídající kyselinu a izolováním soli

-18zahuštěním roztoku, nebo reakcí volné báze s kyselinou v organickém rozpouštědle a v tomto případě se sůl bud vyloučí samovofhně, nebo se izoluje koncentrováním roztoku.

Zahrnuty do rozsahu obecného vzorce I jsou skupiny sloučenin, které lze obecně charakterizovat jako N6-substituované adenosiny, Wč-substituované karbocyklické adenosiny, nebo jinak dihydroxy-(Nč-substituované-9-adenyl)cyklopentany a jejich W-oxidy, dále N6-substituované-W^z-ldeazaaristeromyciny,· jinak dihydroxy-(N7-substituované {4,5-cjimidazopyfidyl)-cyklopěntany.Do rozsahu sloučenin vzorce I spadají také 5^z-alkylkarboxamidové deriváty adenosinň, karbocyklické adenosiny a 1-deazaaristeromyciny, deriváty sloučenin všech právě uvedených skupin, kde jsou substituovány jedna nebo obě 2- nebo 3-hydroxylové.skupiny cyklopentanového kruhu, nebo v případech sloučenin, obsahujících ribosový podíl, skupiny hydroxylové v polohách 2^z- nebo 3^?-. Takové deriváty mohou co takové představovat biologicky aktivní chemický celek, použitelný při léčení hypertenze nebo myokardiální..lischemie, dále jako kardioprotektivní a antilipolytická činidla, nebo mohou se použít ve formě pro-drugů pro vznik biologicky aktivních látek, které z nich vznikají za fyziologických podmínek.

Jako příkladné sloučeniny dle tohoto vynálezu lze uvést: (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethy1-5-)6-tl-(5-chlorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylaminoj-purin-9-yl^-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2B,3S,4R,5R)-2-hydroxymethyl-5-l6- [l-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(R)-ylamino) -purin-9-yl\-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-[6- ]l-(5-trifluormethylpyridin2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoi] -purin-9-yl^-tetrahydrofuran3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2_Jhydroxymethyl-5-^6-|l-(4-trifluormethylpyridin2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoj-purin-9-yl^-tetrahydrofuran3,4-diol,

2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-j6-[l-(5-brompyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino)-purin-9-yiy-tetrahydrofuran-3,4-diol,

-194 44 4» 4 »· 44 ·»·· 4**4 4 4 4 4

4 4 4 · 4 4444

44« 4 4 4 4 4 44« 444

4 4 4 4 4 4

444 44 44 444 44 44 (2R, 3Rpi4S, 5R) -2-hy droxyme thyl-5 - ^6-£l-( 4- ni tro fe nyl) -pyrrolidin-3(S)-ylamino)-puri&-9-ylj-tetrahydrofuran-3,4-diol, £2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethy1-5-(6- (5 '-trifluormethyl3,4,5,6-tetrahydro-2H-(l,2 ^-bipyridinyl-3-yl)-pur in-9-yl)tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-|6-(fenylpyrrolidin-3(S)ylamino)-purin-9-yl)-tetrahydrofuran-3,4,diol, (2R,3R;j.4S,5R)-2vhyároxyme thyl-5- [6-(l-pyridin-2-ylpyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-ylJ-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxyme t hy1-5-(6-[l-(4-chlorfe ny1)-pyrrolidin-3(S)-y lamino) -purin-9-ylJ-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethy1-5-(6-(l-(5-methylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-y lamino) -purin-9-yll-tetrahydrofuran-3,4-diol, (23,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-Í6-Tl-(5-thiofen-2-ylpyridin-2yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino)-purin-9-ylJ-tetrahydrofuran-3,4-diol (2R,3R,4S,5R)-^-hydroxyme thyl-5-Ql- (5-methylmerkaptopyridin-2-yl)-pyrrolidin-3 (S)-ylamino)-purin-9-ylj -tetrahydrofuran-3;|4-diol, (2R,3R>4S,5R)-2-hydroxyme thyl-5-(6- [í-(6-methoxypyrimidin-4yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4ydiol (2R,3R,4S,5R)-3-hydroxymethyl-5-(6-jl-(6-chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino)-purin-9-yl\-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R_>3R,4S,5R)-2-hydroxymethy1-5-)6-(1-(č-chlorpyridazin-3-y1)pyrrolidin-3-ylamino)-purin-9-yly-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R, 3R, 4S_>5R)-2-methoxyraethyl-5-(6 - [l-(5-trifluormethylpyridin -2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino')-purin-9-yl^-te trahydrofuran-3,4-diol, (lS,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4-^6-[l-(5~trifluorniethylpyridin-2yl)-pyrrolidin~3-ylaminoJ-purin-9-yl|-cyklopentankarbo3:ethylamid, (lS,2R,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-^6“(_l-(4-nitrofenyl)-piperidin-4-yl)-purin-9-yl] -cyklopentan-l,2-diol, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-[6--((3S)-pyrrolidin-3-ylamino)purin-9-yl)-cyklopentan-l,2-diol)jako dihydrochlorid, (lS,2R_>3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-f 6- [l-(4-nitrofenyl)-pyrrolidin-3-ylaminoJ-purin-9-yll -cyklopentan-l,2-diol, *

* 4

-204« · · 4 • 44 ··*

4

4» (12,2R, 3R, 5R) -3-hydroxymethy1-5- £l-C 5-tr i fluorme thylpyridin-2-yl)-pyrxolidin-3(R)-ylamino^-purin-9-ylj-cyklopentan-l,2-diol, (lS,2R,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-[6-(C3R)-pyrrolidin-3-ylamino)-purin-9-yl]“cyklopentan 1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-}ý-ll-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino3-purin-S-ylj-cyklopentan-l,2-diol, hydrochlorid 4(R)-l-benzyl-4-j9-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymethylcyklopěntyl)-9H-purin-č_ylamino l-pyrrolidin-2-onu, (lg,2S,3R,5S)-5-methyl-£6-[l-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylaminqJ-purin-9-ylJ-cyklopěntan-l,2-diolu, (lR,2S,3R,5R)-5-^6- jl-(5~brompyridin-2-yl)-pyrrolidin-3 (S)ylamino' -purin-9-yl^-3-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, (1R,2S,3R,5R)“5-|6-Jl-(5-chlorpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylaminoJ-purin-9-yiy-3-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-^č-fl-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino2-purin-9-yl^-cyklopentan1,2-diol, (13,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-|6-[í-(pyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-y lamino] -purin-9-ylj-cyklopentan-l,2-diol, hydrochlorid 4(S)-l-benzy1-4-)9-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymethylcyklopěntyl)-9H-purin-6-ylaminoj-pyrrolidin-2-onu, (IR,2S,3R,5R)-3-hy droxyme thy 1-5-^6-£l-( chinolin-3-yl )-pyrrolidin-3 (S)-ylamino]-purin-9-yl$ -cyklopentan-l,2-diol, (lR.2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-j6-£l-CS)-(4-nitrofenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-yl]-cyklopěntan“l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-£6-jjL-(4,5-bistrifluorpyridin-Ž-yl)-pyrrolidin-3(S)-yiamino3-purin-9-yl^-3-hydroxymethylcyklofcentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3^methoxymethyl-5-Í6-Ll-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminq3-purin-9-ylJ-cyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-Jč- E-(fenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl|-cyklopentan-l,2-diol,

4-^3 (S)-^-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymethylcyklopenthl)-9H-pu~ 'rin-6-ylamino^-pyrrolidin-l-ylj-benzonitril, /

> 4· ” ·» 4 ' · * ·	·! ·	4 4 • «	44 « «
• »4 4 4 4 4		• ···	4 4 4
• · · ·		9	4
444 »4 ·♦	4 4 4	4·	• 4

(lR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-^6-Ll-(isochinolin-l-yl)-pyrroli din-3 (S ) -y lami no} -pur in-9-ylJ cy klopě nta n-1,2-d iol, (lR,2S,3R,5R)-5-j6-£l-(6-bromchinolin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino}-purin-9-yl j-3-hydroxymethylcy klopě ntan-1,2-diol, (lR,2S_p3R,5R)5-£6-[l-(4-chlorfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylaniinoJpurin-9-yl}-3-hydroxymethylcyklopěntan-1,2-diol, (1R,2S, 3R,5R)-3-jó-[l-(3chlor-5-trifluormethylpyridin-2-yi)pyrrolidin-3 (S )-ylamino}-purin-9-ylj -3-roe thoxyme thylcy klepe ntan-1,2-diol, (1R,2S, 3R,5R)-3-isopropoxymethyk-5- jfó-CÍ-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminó}-puxin-9-ylý-cyklopentan-1,2-diol, (lR.2Sm3R,5R)-3-isopropoxym®thyl-5- Jč- [l-(4-trifluprmethylpyridin-2-yl)-pyrroIidin-3(S)-ylamino2-purin-9-ylJ-cyklopentan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-J6-jl-(6-chlorpyrimidin-4-yl)-pyΓrolidin-3(S)y lami no} - puc i n-9-y l] -3 -hy dr o xy me t hy 1 cy klo p e n t a η-1,2, d io 1, (lR.2S,3R,5R)-5_.}6- [l-(é-chlorpyrimidin-4-yl)-pyrrolidin-3 (S)~ ylamino3-purih-9-.ylT-3-hydroxyme thylcy klopentan-1,2-diol, (lR,2S,3R,.5R-5-}6-u.-(6-chlorpyrimidin-4-yl)-pyrrolidin-3(S)ylemino}-purin-9-ylj -3-methoxymethylcyklopentan-1,1-diol, (lR,2S,3R,5R)-5—}6-[l-(6-chlorpyridazin-3-yl)-pyrrolidin-3(S')ylamino}-purin-9-ylj -3-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)~3Tme thoxyme thyl-5-{6-LÍ-(6-methoxypyrimÍdin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino}-purin-9-ylj-cy klopě nta n-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-£6- Ď.-(6-chlorpyridazin-3-yl)-pyrrolidin-3 (S)ylaminol-purin-9-y li-3-me thoxyme thylcy klopě ntan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-j6-fl-(5-brompyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-yl amino}-purin-9-y lj-3-methoxymethylcy klopě ntan*-l, 2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-£6-£l-(5-chlorpyridin-2-yl)-pyrroliain-3(S)-ylaraino j-purin-9-yl^-3-merhoxymethylcyklopentan-l,2-diol, -⁴ (lR,2S,3R,5R)-3-methoxymethyl)-5-{6-/_l-(4-trifluormethylfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino}-purin-9-ylj-cyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-^6-íí-(4-chlorfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino3pur i n-9^-y 1 j-3-m e t hoxy me ťhy 1 cy klo pe n t a n-1,2 - d i ol, (lR,2S,3R,5R)-5-^-(l-(3-chlprfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoJpurin-9-ylt-3-methoxymethylcyklopentan-1,2-diol,

-22a ·* · · · * * · •» « a * «·· « ·· « ··« · · · « * ··· ··· > « a · · a a #·« «a aa aaa ♦· a a (lR,2S,3R,5R)-5-[6-[l-(3-chlorfen^l)-pyrrolidin-3(S)-ylamino] -purin-9-ylj-3-hydroxymethylcyklopěntan-1,2_Tdiol, (lR,2S,3R,5R)-3-rmethoxymethyl-5-[č-(l-benzylpyrrolidin-3(S)ylamino)-páirin-9„yl}-5-hydroxymethylcyklopentan-l_>2-diol, (lR,2S-3R,5R)-3-[6-(l-henzylpyrrolidin-3(S)-ylamino)-purin-9-ylJ

5-methoxyme thylcy klopě ntan-l,2-diol, (S)-sek-butylamid kyseliny (lS,2R,3S,5R)-2,3~dihydroxy-4-£č-(_l~ (5-tr ifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3-y laminoJrpuri^-ylj cyklopentankarboxylové, a (R)-sek-butylamid kyseliny ClS,2R,3S,4R)-2^i3-dihydroxy-4-^é-(l(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3-ylaminoJ-pw?in-9-ylj cyklopentankarboxylové.

Výhodnou skupinu sloučenin dle tohoto vynálezu jsou látky vzorce I, kde K, W a T znamenají skupinu hydroxymethylovou nebo methoxymethylovou, A a B jsou hydroxylové skupiny Σ znamená a součet n + p znamená 3 nebo 4, jakož i jejich farmaceuticky přijatelné soli. Jako příkladné sloučeniny této skupiny lze uvést: __ (2R,3R,4S,5R)“2-hydroxymethyl-5-|£-Ll”(5-chlorpyridin-2-yl)pyrrolidin~3(S)-ylamino3-purin-9-yll[-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3S_#4R,5R)“2.hydroxymethyl-5-‘Í6-jjL-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3J?R)-ylaminol-purin-9-ylj-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-j6-[l-(5-trifluorpethylpyridin-2ř-yl)-pyrrolidin-3(S)-yiamino^-purin-9-ylj’-tetrahydrofuran-3?i4”diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxyme t hy1-5-^6-[l-C 4-tr ifluorme thylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-ylj-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R$3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-{6-/l“(5-brompyridin-2_yl)pyrrolidin-3 (S)-y lamino™]-purin-9-y li -tetrahydrofuran-3,4diol, '

• · *	• 0	» ··
	0 ·		0 0 »
0 ··· .·	• 0		0 0 0 0
• 0	0 0		0
»00 0«	0»	00 »	0 »

(2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-(6-£l-(4-nitrofenyl)-pyrrolid i n-3 (S)-y 1 amincQ - pur i n-9-y 1 j-1 e t r a hy d r o f ur a ϊΐ-3,4-d i o 1, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-j 6-(5 ^z-trifluormethyl-3,4,5,6tetrahydro-2H-[jL,2 J-bipyridinyl-3-yl)-pui^,in-9-yl| tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-^6-(fenylpyrrolidin-3(S)-ylsmino)-purin-9-yl) -teísahydrofuran-3,4-diol,

2R, 3Rm4S,5R)-2-hydroxymethy 1-5-/,6-&-(4-chlorf enyl)-pyrrolidin-3(S)-y lamino}- purin-9-yl^-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-j6-Ll-(5-methylpyz'idin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-y lamino}-purin-9-yll-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-}6-LÍ-(5-thipťře n-2-ylpyridin-2yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-yl|-teti^,ahydrofuran-3'^4diol, (2R,3R,4S, 5R)-2-hydroxyme thy 1-5-^6-Ll-(5-methy Imerkaptopyridin2 -y 1) - py r r o 1 idi n-3 (S) -y lamino} - puř i n- 9 -y 1 -1 e t r ahy dr o f uran-3,4-diol, (2R .3R ·43,5R) -2 -hydroxyme thyl-5 - |β- β- (6-me t hoxy pyr imidin-4yl)-pyrrolidin-3(S)-y lamino}-purin-9-yl|-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-(6-J5-(6-chlorpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino}-purin-9-yl| -tetrahydrofura n-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-^6-β-( 6-chlorpyridazin 3-yl)pyrrolidin-3-ylaminoj -purií>9-yl}-'t9trahyckrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-methoxymethyl-5-|6-H-(5-trifluormethylpyridin2-yl)-pyrrolidin-3 (S)-ylamino}-purin-9-yl^-tetrahydrofuran3,4-diol, (1S,2R,3R,5R )-3-hydroxyme thy 1-5-^6-(5-( 4-nitrofe nyl)-piperidin-4-yl} purin-9-yiy-cyklopentan-l,2-diol, (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxyme thyl-5-/6-C((3S )-pyrrolidin-3-y lamino )purin-9-yl^-cyklopentan-l,2-diol, jako dihydrochlorid, ((lS,2R,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-Í6-^l-(4-nitrofenyl)-pyrrolidin-3-y lamino}-purin-9-yl ^-cy klopě ntan-l,2-diol, (lS.2R,3R,5R)-3-hydroxymerhy 1-5-^6-jjL-(5-trifluormethylpyridin-2** * yl)-pyrrolidin-3 (R)-ylaminoJ-purin-9-yl)-cyklopěntan-l,2-diol, (lS,2R,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5- (6-(C3R)-pyrrolidin-3-ylamino)purin-9-yÍ -cyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethy 1-5-(6-15-( 5-tr ifluorme thylpyri-9-yl^-cyklopentanl,2_rdiol, din-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-y lamino} -purin

* · · • 00 0	• 0 e	0'	• ·	• 0 00 • ,>· *	0
					•
« ···	• *	•		• ·0β 00	•
0 v	«	0		*	»
·♦· 0*	• «		»·♦	«0 0·

(lR,2S,3R,5R)-5-^6-[l-(5-brompyridin-2-yl)-pyrrolidin-3 (S)-ylamino}-purin-9-yl^-3-hydroxymethylcyklopentan-1,2-diol, (XR,2S,3R,5R-5-jé- (l-(5-chlorpyridin-2-yl)-pyrrolidin=!3 (S)ylamino^-purin-9-ylj-3-hydroxymethylcyklopentan-l,2,diol, (13,2S,3R,5R)“3-hydroxynietkyl-5-/6-[l“C4-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidig-3(S)-ylaminoJ-purin-9-ylJ-výklope ntan-1,2-diol, (lR_f2§,3R,5Rř-3-hydroxymethyl-5-[6-[l-(py:ridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino^-purin-9-yl^-cyklopěntan-1,2-diol, (13,2S,3R,5R^-3-hydroxyrnethyl-5-[ý-IÍ-(l-chinolin-3-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino^-pu2^,in-9-yl]-cyklopentan-l,2-diol, . (IRj2S,3R,5R)-3-hydroxymethy1-5-^6-|lS-(4-nitrofenyl)-pyrrolidin-3 (S)-ylamino2“purin-9-ylS cyklopěntan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-[6-[l-(4,5-bistrifluor pyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino3Pui'in-9-ylj-3“hydroxymethylcyklopentan1.2- dial, (IR,2S,3R,5R)-3-methoxymethy 1-5-^6- íí-(5-trifluormethyl)-pyridin-2-yl)-pyrrolidin-3CS)-ylaminoj -purin-9-yl|-cyklopentan1.2- diol, (lR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-|6-[l-( fenylpyrrolidin-3(S).-ylamino3-purin-9-ylI-cyklopěntan-1,2-diol,

4-J3(S)- [§-(2,3-dihydroxy-4-hydroxyniethylcyklopentyl)-9H-purin-6-ylaminol-pyrřolidin-l-ylj-benzonitril, (l3,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-|6-[l-(isochinolin-l-yl)-pyrrolidin-3(S)-y lamino^ -purin-9-ylj -cyklopentan-1,2-diol, (lR,2'S,3R,5R),5~jj>-[l-(6-bronicIiinolin-2-yl)-pyrrolidin-’3 (S)-ylaminó]-purin-9-yl^-3-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-jý- jl-(4-chlorfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminQ3purin-9-ylj-3-hydroxymethylcyklopěntan-1,2-diol, (IR,2S,3R,5R)-3-^6-Ji-(3-chlor-5-trifluormethylpyridin-2-yl pyrrolidin-3 (S)-ylamin<0 -purin-9-yll-3-methoxymethylcyklopentan-l,2-diol,(lR,2S,3R,5R)-5-{6-[í-(6-chlorpyrimidin-4-yl)-pyrrolidin-3(S)-y lamino]-purin-9-yl!-3-hydroxymethylcyklopentan-l, 2-diol,

• ·« *4 • 4 · · *	4 4 4 4 4 4 4 4
• 4 44 4 4 4	4 4 4 4 4
» 4 4 4	• 4
44 *4 ·*	444 44

-25(lR,2S,3R,5R)-5-/č-£l-(6-chlorpyridiidin-4-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-ylj-3-hydroxymethylcyklopentan-l,2_ diol, (lR,2S,3R,5R)-5-jý-[l-(6-chlorpyrimidin,4-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino}-purin-9-yl/ -3-methoxymethylcyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-^6-[j-(6“Chlorpyridazin-3-yl)-pyr.rolidin-3 (S)ylaminoJ-purin-9-ylJ-3-hvdroxymethylcyklopentan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-methoxymethyl-5-^6-íj.-(6-methoxypyrimidin4-yl)-pyrrolÍdin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-yl|-cyklopemtan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-^6- /l-(6-chlorpyridazin-3-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-ylj -3-methoxymethylcyklopentan-l,2-diol,

- (lR,2S,3R,5R)-5-^6- ll-(4-triíluormethylfenyl)-pyrrolidin-3 (S)y lamino 3“pui^,in-9-yl^-3-hydroxymethylcyklopentÉn-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-U-[l-(5-brompyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino3-purin-9-yl{ -3-methoxymethylcyklopentan-l,2-diol, (IR,2S,3R,5R)-5-p- (í-(5”chlorpyridin-2-yi)-pyrrolidin-3 (S)ylamino^-puTin-9-ylj-3-me t hoxyme thylcy klo pe nt a n-1,2-diol, (IR ,23,3R, 5R)-3-rme thoxyme thy 1-5- fe>- Cl—( 4-trifluormethylfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-yl)-oyklopentan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5- j6-[j.-(4-chlorfenyl)-pyrrolidin-3 (S)-ylaminoJpurin-9-ylí-3-methoxymethylcyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-|6-El-(3-chlorfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoJpurin-9-yl|-3-methoxymethylcýklopentan-1,2-diol, (lB,2S,3R.5Ř)-5-{6-[l-(3-chlorfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino3-purin-9-ylj-3-hydroxymethylcyklopentan-1,2-dioí, (lR,2S,3R,5R)-3-methoxymethyl-5-T6-(l-fenylpyrrolidin-3(S)ylamino)-purin-9-ylJ-cyklopentan-1,2-diol, a (lR,2S,3R,5R)-3-£6-(l-benzylpyrrólidin-3(S)-ylamino^-pu_;rin-9-yl[_-5-me thoxyme thy lcy klopentan-1,2-diol,

Další výhodnou skupinou sloučenin dle tohoto vynálezu jsou látky vzorce I, kde Q znamená methylenovou skupinu K znamená dusík

T znamená skupinu vzorce í *2

9 9 · 9 ·		9 9	9 9
• 99 9 9 9	• 9	•	9 9	•
				•
9 999·· 9		9 9 9	9 99	9
• · 9 ·			•	9
99999 9·	• 9«	9 ·	• 9

s tím, že R^ znamená vodík a R2 nižší alkylovou skupinu, A a B jsou hydroxylové,skupiny X znamená skupinu vzorce s tím, že součet n + p se rovná 3 nebo 4, jakož i jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Jako příkladné sloučeniny této výhodné skupiny lze uvést:

2,3-dihydroxy-4- 6- l-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrro1idin-3-ylamino -purin-9-yl -cyklopentankarboxethylamid, (S)sek,butylamid kyseliny (lS,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4- 6- l-(5trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3-ylamino -purin-9-yl cyklopentankarboxylové, a (R)sek.butylamid kyseliny (lS,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4- 6- 1(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3-ylamino -purin9-yl -cyklopentankarboxylové.

Jeste výhodnější skupinou sloučenin vzorce I dle tohoto vynálezu jsou látky, kde Q znamená methylenovou skupinu,

K znamená dusík, . T znamená hydroxymwthylovou nebo methoxyraethylovou skupinu,

A a B jsou hydroxylové skupiny,

X je skuoina vzorce kde součet n + p se rovná 3 nebo 4, jakož i jejich farmaceuticky přijatelné soli. Jako representativní příklady této výhodné skupiny lze uvést:

(1S,2R,3R,5R) 3-hydroxymethyl-5- 6- l-(4-nitrofenyl)-piperidin4-yl -purin-9-yl -cyklopentan-l,2-diol, (lS,2R,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5- 6-((33)-pyrrolidin-3-ylamino purin-9-yl -cyklopentan-l,2-diol,jako dihydrochlorid, (lS^R^R^Rj-l-hydroxymethyl-S- 6- l-(4-nitrofenyl)-pyrrolidin-3-ylamino)-purin-9-yl“ cyklopentan-l,2-diol,

-27* *« »· « *· « · * · * · · · · · · 9

9 9 9 9 · 9 9 9 9

999 9 9 · · ♦ ·· · · · · • · ♦ « » » «·« ·· ·· 999 99 99 (lS,2E,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-^6-[l-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3 (íO-ylamincQ -purin-8-y 1^ -cy klopě ntan-l,2-diol, (1S,2R,3R, 5R)-3-hydroxymethy 1-5- jý- Q3Rí.Tpyrrolidin-3-ylaminoJ-puriSi-9-yl^-cyklopentan-Í,2^diol, (IR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-{6-/l-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-y lamino)-purin-9-yl|r^cyklopentan1,2-diol, lR,2S,3R,5R)-5-Jý-^l-(5-brompyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylaminoJ-pui^,in-9-yl%-3-hydroxycy klopě ntan-l,2-diol, (IR,2S,3R,5^)-5-^5-Tl“(5-chlorpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylaminoj-purin-9-ylj -3-hydroxymethylcyklopentan-1,2-diol, (1R,2S ,3R, 5R) -3-hy droxyme thy 1-5-^6- [í-(4-trifluorme thyIpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3 (S)-ylaminoJ-purin-9-ylj-cyklopentan1,2-diol, _t .

(1R,2S ,3R, 5R) -3-hydroxyme thy 1-5(pyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoj-purin-9-yl^-cyklopentan-1,2-diol, (]R,2S,ER,5R)-3-hydroxymethyl-5-j6-í3.-(l-chinolin-3-ylpyrrolidin-3(S)-ylamino2-purin-9-yl^-oyklopentan-l,2-diol, (IR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-jč-Ll-(S) (4-nitrofenyl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]~purin-9-yl) -cyklopentan-l,2-diol, (1R,2S,3R_p5R)-5-^6- [l-(4,5-bistrifluorpyridin-2-yl)-p_:vrrolidin-3 (S)-y lamino]-purin-9-ylj -3-hydroxymethylcyklopě ntan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3 -me thoxyme thyl-^6- (_1- (5- tr ifluorme thyIpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9yl^-cyklopentan-l,2-diol, (lR,2Sm3R>5R)-3-hydroxymethyl-5-{6-[l-(fenyl)-pyrrolidin-3(S)ylamino3-purin-9-yl ^-cyklopěntanl,2-diol,

4- 3-(S)-j[9-(2,3-d'ihydroxy-4-4iydroxymethylcyklopentyl)-9H-purinč-ylamino^-pyrrolidin-l-ylljbenzonitril, (lR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-{6-[l-(isochinolin-l-yl)pyrro1idin-3(S)-ylaminoj-purin- 9-ylJ -cyklopěntan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-t6-[jL-(6-bromchinolin-2-yi)-pyrrolidon-3(S)-yiamino]-puriln-9-yl^-3z»hydroxymethylcykle)pentan-l,2-diol,

-28* *9 4 4 4 4 4 44

4 · 9 9 949 4 44 4

994 49 4 9494 • 444 449 4 4 444 444

4 4 4 4 4 4

444 44 44 444 49 44 (lR,2S,3R,5R)-5-^6-jl-(4-chlorfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl]-3-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3- j6-tj_s-(3-chlor-5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-y lamino] - purin-9-ylJ-3-me thoxymethylcy klopentandiol, lR,2S,3R,5R)-5-^6-Cl-(6-chlorpyrimidin-4-yl)-pyrrolidin-3(S)ylaminoj-purin-9-yl^-3-hydroxymethylcyklopěntan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-|6-jl-(6-chlorpyrimidin-4-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-yly-3-hydroxymethylcyklopěntan-l,2-diol, ClR,2S,3R,5R-5-Í6“ fl-(6-chlorpyrimidin-4-yl)-pyrrolidin-3 (S)-yl· ami no ~|-pur in-9-y 1^' -3 -me thoxyme t hy kpe n t a n-1,2 - d iol, (lR,2S,3R,5R-5^6-jí-(6-chlorpyridazin-3-yl)-pyrrolidin-3 (S )ylaminoj -purin-9-ylj-3-hydroxymethylcyklopěntan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-methoxymethyl-5^,r ^6-[l-(6-methoxypyrimidÍn4-yl).-pyrrolidin-3(S)-ylaminoJpurin-9-ylf cyklopentan-1,2diol, (lR,2S,3R,5R)-5-{6-[í-(6-chlorpyridazin-3-yl)-pyrrolidin-3(S)ylaminoj-purin-9-yl}-3-methoxymethylcyklopentan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-^6-tl-(4-triflulíIrmethylfenyl)-pyrrolidin-3 (S)ylaminoJ-purin-9-yl}73-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, (lR,2S_>3R,5R)“5“^6-Ll-(5-brompyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino^J-purin-9-yl{^ř-3-methoxyraethylcyklopentan-l,2-diol, (1R,2S,3R,5R) 5^6-£l-(5-chlorpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9“ylj-3-methoxymethylcyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-methoxymethyl-5-[6-ÍÍ-(4-trifluormethylfenyl)pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-yljcyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-£6-[l-(4-chlorfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminq]purin-9- yl}-3 -me thoxýme thylcy klopě nta n-1,2-d iol, (lR,2S,3R,5R)-5-£č-[í-(3“Chlorfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminc3purin-9-yl]-3-methoxymethylcyklopentan-l,2~diol, (IR,2S,3R,5R)-5-{6-(l-(3.chlorfenylú.pyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-ylJ -3-hydroxymsthylcyklopentan-l,2-diol, (IR,2 S,3R,5R)-3-me thoxyme thy1-5-nylpyrrolidi n-3(S)-y 1amino] -purin-9-yltayklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-^6-(l“benzylpyrrolidin-3(S)-ylamino)~purin-9yllj-5“hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, a (lR,2S,3R,5R)-3-£6-(l-benzylpyrrolidin-3(S)-ylamino)purin-9-yl^ 5jrme thoxymethylcy klopentan-l,2-diol.

-29444 · *

• 44

44 • * ·

4 »

4 4 4 4 • 4

Nejvýhodnějšími látkami dle tohoto vynálezu jsou:

(IR,2S,3R,5R)-3-hydroxyméthy1-5-[6-^1-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-í(S)-ylaminoJ-purin-9-ylj-cyklopen t and iol,

ClR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5 <46-fl-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoj-purin-9-yl^-cyklopentan-l,2-diol, (13, 2S ,3R, 5R) -3 -me thoxyme thy1-5 - jé-G- (5 - tr if ludrme thy.lpy r idin-2-yi)-pyrrolidin-3(S)-ylamino3-purin-9-y]Jcyklopěntan1,2 _r diol, a (lR,2S,3R,5R)-3.methoxymethy1-5-^6-/l-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino^-purin-9-yl<cyklopantan-l,2-diol.

Sloučeniny dle tohoto vynálezu lze připravovat známými postupy nebo ve shodě s reakčním sledem, jak je popisován dále. Výchozí látky pro přípravu těchto sloučenin jsou známé nebo obchodné dostupné, dále se dají připravovat známými postupy nebo specifickými reakcemi dle připojených schémat.

Sloučeniny obecného,vzorce I, kde K znamená dusík,

Q znamená kyslík a T znamená skupinu R^O-CHg, se dají' připravit reakcí obchodně dostupného 6-chlorpurinribosidu s různými nesubstituovanými či substituovanými skupinami alkylovými, aralkylovými, arylovými, substituovanými arylovými, heterocyklylovými, substituovanými heterocyklylovými azacykloalkylaminy nebo jejich deriváty s chránící skupinou (nadále označovány jako vhodné výchozí aminy”). Příklad je uveden dále.

Sloučeniny obecného vzorce I, kde K znamená dusík, Q znamená kyslík a T znamená skupinu R^R₂N-C=O se připravují podobně za použití produktu z reakčního schématu A. Při této reakci se půfeobí na 6-chlorpurinribosid, jehož hydroxylové skupiny v polohách 2 * a 3'na ribosovém kruhu jsou chráněny, oxidačním činidlem, třeba působením reagens dle Jones-a,

-30a· ·· ♦ · · · a«a a · a získaná látka povahy kyselé poskytne reakcí bud s dicyklohexylkarbodiimidem nebo s benzotriazol-l-yloxy-tris-(dimethyl amino)-fosfoniumhexafluorofosfátu za přítomnosti zvoleného aminu 5*-alkylkarboxamidový derivát.

Reakční schéma A

r₁r₂nh

P = chránící skupina (protecting group)

DCC = dicyklohexylkarbodiimid

Vhodné výchozí sloučeniny pro látky vzorce I, kde K znamená dusík, Q methylenovou skupinu a T skupinu R^RgN-CÚO, se mohou připravovat, jak to popsal Chen a spol., Tetrahedr. Letters 30, 5543-46 (1989). Jinak se může pro přípravu výchozích složek využít reakční schéma B. Při tomto postupu se působí na 4-ethylkarboxamidový derivát 2,3*dihydroxycyklopěntylaminu, připravený, jak to popsal Chen a spol.,

3-amino-2,4-dichlorpyrimidinera. Produkt této reakce se pak dále zahřívá s aldehydylamidino-acetátem, například acetgtem formamidinu v dioxanu a methoxyethanolu po dobu dostačující k uzavření cyklu (asi 30 minut až asi 4 hodiny), čímž se získá produkt, na který se pak jednoduše působí vhodným výchozím aminem postupem, jak je dále popsán, a tím se získá sloučenina dle tohoto vynálezu. Pořadí použitých reakcí rozhodující není. Tak například, na meziprodukt, vzniklý dle

-31• ·· ·· • a a · a a aaa a a a aaa a « a a aaa •aa aa aa aa a a a a a a a a aaa aaa a · • a a a reakčního schématu B, se působí vhodným aminem a následující cyklizací se dospěle k požadovanému konečnému produktu. Reakční schéma B ¹

R-jRgN· 'V

Ol·¹

R-vRnN—*4 /\ ^vNíC 'N

R,R_ON H ¹² - s •ΙΟΙ

N..

// \í

Cl t

HO“ OH

Různé aminy, použitelné při přípravě takových sloučenin, se mohou připravit použitím známých postupů, nebo postupů, popisovaných zde.

Diastereoisomerní směsi sloučenin nebo meziproduků, * použitelných při přípravě těchto sloučenin, se mohou děli na jednotlivé racemické nebo opticky aktivní enantiomery použitím jinak známých postupů, například chromátograficky, frakční destilací nebo frakční krystalizací solí s kyselinou D- nebo L-vinnou, dibenzoylvinnou, mandlovou nebo kafrsulfonovou.

Ng-Substituované adenosiny nebo karbocyklické adenosiny dle tohoto vynáletu se dají připravit reakcí č-chlorpuťinribosidu nebo produktů dle reakčních schémat A či B použitím vhodných aminů, jak je to doloženo schématem 0.

-34.γ

Reakční schéma C * ·· «> · · · · • ··· I · φφφ ·· ·· · ·· ·· • · · * « · · φ φ · ΦΦΦΦ « · · · ·φ · ΦΦ Φ « « Φ Φ Φ φφ ΦΦΦ ·· ·· r₆w-x'-y

l'a Ϊ mají významy, jako X a ¥ zde již dříve, nebo jsou to jejich chráněné deriváty.

H₆-Substituované-K'-alkyldeazaaristeromyoinu dle tohoto vynálezu se dají připravit dle reakčního schématu D.

Reakční schéma D

r₆n-x^z-y^z-

Pd/C, ÍÍ2 φ nebo SnC.l₂ ' acetát formamidinu odstr.

chrán.skup.

Sloučeniny dle tohoto vynálezu, použitelné ve funkci pro-drug, zahrnují takové sloučeniny, kde hydroxylové skupiny ribosy nebo cyklopentanového kruhu jsou substituovány skupinami R a R^zz, jak to bylo uvedeno u vzorce I výše. Ty pak lze připravit známými postupy nebo použitím příkladů přípravy, jak jsou shrnuty v reakčním schématu E zde dále:

-35• η ·* » ♦· ·· «« · · ··«· ·«·· • ··· · · · · · *·· ··· • « · · · · · • Μ ·· · ·· ·· ··

Reakcí dihydroxysloučeniny s esterem.kyseliny chlormrevenčí za přítomnosti organické báze, třeba triethylaminu, se připraví odpovídající bis-uhličitan. Alkoxymethylenacetal se dá připravit reakcí s odpovídajícím orthoesterem na přítomnosti katalytického množství kyseliny p-toluensulfonové. Ester uhličité kyseliny se připraví reakcí s 1,1'-kar bony 1diimidazolem a podobně ester thiouhličité kyseliby použitím thiokarbonyldiimidazolu. Alkyl- a dialkylkarbamoylové deriváty

-36• * ♦ · ·« « « • * «ti se dají získat reakcí s odpovídajícím alkylisokyanatanem nebo dialkylkarbamoylchloridem za přítomnosti organické báze.

Sloučeniny dle tohoto vynálezu, kde K znamená N /EO, například N-oxidy, se mohou připravovat oxidací odpovídajících adenosinů nebo karocyklických adenosinů použitím známých postupů, třeba reakcí s peroxidem vodíku v kyselině ' octové.

2'-O-Alkylderivéty se dají připravit známými postupy, například reakcí vhodného výchozího aminu s 6-chlor-9-(2-0methyl- ^-D-ribofuranosylí-SH-purinem.

Punkční skupiny výchozích sloučenin a meziproduktů, které se použijí pro přípravu sloučenin dle.tohoto vynálezu, mohou být chráněny běžně známými chránícími skupinami. Běžné chránící skupiny pro aminové a hydroxylové funkční skupiny popisuje například Greene T.W., Protective Groups in Organic Chemistry“, Wiley, New York, ZSA (1984).

Hydroxylové skupiny mohou být chráněny formou esterů, jako jsou acylderiváty, nebo formou etherů. Hydroxylové skupiny na sousedících uhlíkových atomech lze chránit formou ketalů či acetalů. V praxi se hydroxylové skupiny v polohách 2 * a 3^Z výchozích sloučenin ve schématech A a B běžně chrání tvorbou 2 ',3 '-isopropylidenových derivátů. Volné hydroxylové skupiny lze opět obnažit hydrolyzou v kyselém prostředí, dále solvolyzou nebo hydrogenolytickými reakcemi, jek se používají v organické chemii.

Po syntetické přípravě se sloučeniby dle tohoto vynálezu typicky čistí kapalinovou chromatografii za středního tlaku (MPLC) na chromatotronu, radiálně zrychlenou chromstografií na tenké vrstvě, bleskovou chromatografii nebo sloupscovou chromatografii na silikagelu nebo florisilové matrici s následujícím krystalováním. Pro sloučeniny vzorce I, kde K znamená dusík, Q znamená kyslík a T skupinu R^O-CHg zahrnují typické rozpouŠtedlové systémy kombinace chloroformzmethanol, ethylester kyseliny octovéíhexan, a methylenchlorid:meth'anol. Eluáty je možno krystalovat z methanolu, ethanolu, ethylesteru

-37• ♦· ·· * »· ·· ♦ · · · · · · · · «· · ··· ·» · *«·· • ··· · » · « «·· ··· « · · · · · « ··· · · ·· ·♦· «· ·· kyseligy octové, hexanu, chloroformu atd.

Pro sloučeniny vzorce I, kde K znamená dusík, Q znamená kyslík a T znamená skupinu R^R₂N-C=0 3^e typickou rozpouštedlovou soustavou směs chloroform:methanol· Krystalické podíly z eluování lze krystalovat ještě z 50%no až 100%ního ethanolu, v případě zředění vodného.

Pro sloučeniny vzorce I, kde Q znamená methylenovou skupinu, K znamená dusík nebo skupinu CH a T znamená R^RgN-CsO patří mezi typická rozpouštědla sestava methylenohlorid:methanol. Eluáty lze krystalovat z šthylesteru kyseliny octové, případě za přidání methanolu, ethanolu nebo hexanu.

Sloučeniny, vyžadující neutralizaci, lze neutralizovat mírnoú bází, jako je hydrogenuhličitan sodný s následným promytím methylenchloridegi a solankou. Produkty, které ise čistí ve formě oleje, se často triturují se směsí hexanu a. ethanolu před konečným krystalováním₀

Způsob dle tohoto vynálezu bude nyní blíže doložen a vysvětlen formou připojených příkladů.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Příprava 5 ^z-N-ethyl-2 ^z,3 ^z-isopropyliden-N -chloradenosin5 ^z-uronamidu

Stupen 1: N^-Chlor-2^z,3^z-isopropylidenadenosin

V prostředí 600 ml acetonu se míchá 2 hodiny (RT) směs

31,5 g 6-chlorpurinribosidu, 73 ml triethylesteru kyseliny orthomravenčí a 19,8 g kyseliny p-toluensulfonové. Po zahuštění reakční směsi ve vakuu se zbytek rozpustí v ethylesteru kyseliny octové, roztok se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhiíčitanu sodného, solankou, vysuší se bezvodým síranem sodným a zahuštěním filtrátu se získá ve formě bílé pevné látky N^-chlor-2 ^z,3 ^z-isopropylidenadenosin.

Stupen 2: Kyselina H^-chlor-2 ^z,3 ^z-isopropylidenadenosin-5 karboxylová

V prostředí acetonitrilu se smíchá 4,5 g (13,8 mmol)

-38t «« ·· · ·· ·· ··*♦ ··♦· «»«* ··· · · · · * ♦ · • ««* · · · · * «· ·· • 9 · · · · « ··« «ί ·· ··· ·♦ ·«

N^-chlor-2 *,3 *-isopropylidenadenosinu a 0,0381 g (0,14 mmol)

4-hydroxy-2,2,6,6-tetramethylpiperidinyloxybenzoátu, do reakční směsi se přidá 5%ní roztok hydrogenuhlicitanu sodného (87%) a po částech za teploty 0 až 5° 0 se vnáší 10,41 g (55,1 mmol) hydrátu bromitanu sodného. Teplota reakční směsi se nechá vystoupit na 20° C, roztok se energicky míchá asi 3 hodiny, přidá se 10%ní roztok kyseliny vinné, vodný podíl se oddělí a extrahuje třikrát do ethylesteru kyseliny octové. Spojený organický roztok se promyje 5%ním roztokem hydrogenuhlicitanu sodného a to třikrát. Alkalické roztoky se spojí, vše se okyselí přidáním konc.kyseliny chlorovodíkové na pH 3 a vodný podíl se extrahuje třikrát do ethylesteru kyseliny octové. Organický podíl se spojí, vše se extrahuje solankou, vysuší se bezvodým síranem horečnatým a po filtraci se zahuštěním filtrátu získá bílá pevná amorfní látka, která se třikrát odpaří po přidání vždy toluenu, načež se sušením ve vaku získá takto kyseliny N^-chlor-2 *,3 '-isopropylidenadenosin5 '-karboxylová.

Stupen 3: 5 ^z-N-Ethyl-2 ',3 *-isopropyliden-N^-chloradenosin-5 uronamid

N^-6hlor-2 ',3^z-isopropylidenadenosin-5'-karboxylová kyselina v množství 4,4 g (12,9 mmol), 1,64 ml triethylaminu, 1,28 ml (11,7 mmol) isopropenylesteru kyseliny chlormravenčí se v prostředí 50 ml methylenchloridu posmíchání při -10° C míchá asi 2 minuty. Έο reakční směsi se přidá 0,77 ml (11,7 mmol) ethylaminu, v míchání se pokračuje minutu a reakční směs se dále roz^řepává mezi methylenchlorid a nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného.. Spojené vodné podíly se protřepají třikrát s methylenchloridem, spojené organické roztoky se promyjí solankou, suší bezvodým síranem sodným a po filtraci se zahuštěním filtrátu ve vakuu získá zbytek, který se čistí blekovou chromatografii na silikagelu za eluování směsí 3% methanolu v chloroformu a získá se tak 5'-N-ethyl-2',3'-iso-39• «·» * * · · ··* ··· * · · · · · · ··· ·* «* ··· ·· »· propyliden-N^-chloradenosin-5'-uronamid.

bí-NMR (300 MHz, CDCLj) J 8,75 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 6,20 (d, 1H), 5,50 (dd, 2H), 4,73 (d, 1H), 3,01 (m, 2H), 1,63 (s, 1H), 1,41 (s, 3H), 0,77 (t, 3H).

Příklad 2

Příprava isopropylamidu kyseliny (lS,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy4-Í6-jl-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino J-pur in-9-yl^cyklo pe nta nkar boxylove

Stupen (l)

(ii)

V 16 ml isopropylaminu se rozpustí 15,5 g (54,6 mmol) N-BOG-5,6-dimethylgřidioxy-2-asabicyklo[2,2,íl-heptan-3-onu (i) (příprava viz stupen 6 příkladu 3 zde dále), a reakční směs se míchá asi 2 hodiny za teploty místnosti. Po zahuštění ve vakuu se zbytek azeotr^ně destiluje s chloroformem a získá se tak bílá pevná látka, která se rozpustí v 250 ml ethylesteru kyseliny octové, roztok se ochladí na 0°C a za chlazení se do tohoto roztoku zavádí asi 15 minut plynný chlorovodík. 2a teploty místnosti se roztok míchá 4 hodiny, zahustí se ve vakuu, zbytek se azeotropně destiluje s methanoiem, potom chloroformem^ a amin se tak získá ve formě soli s kyselinou chlorovodíkovou. Tato sůl se roztřepává mezi chloroform a roztok hydrogenuhličitanu sodného, organický podíl se promyje solankou, vysuší, filtruje a přidá se ekvi• * ·· * · · *· * « · · · * « * » * • »·» · φ ·· * *·· ·· • » · · · · * «« f ·* **· ♦· *·

-40valent kyseliny benzoové. Rozpouštědlo se vydestiluje ve vakuu, zbytek se trituruje s etherem a očekávaný amin vzorce (ii) zde výše se izoluje ve formě soli s kyselinou benzoovou, t.t_e 183 - 184° C.

Stupen (2)

Příprava

V 110 ml n-butanolu se rozpustí 54 mmdtl produktu (ii) s příkladu 2, stupeň 1, přidá se 9,7 g 5-smino-4,6-diehlorpyrimidinu, potom 23 ml triethylaminu a reakční směs se vyhřívá 18 hodin do varu pod zpětným chladičem. Po ochlazení se vše zředí chloroformem a nasyceným roztokem chloridu amonného, vodný podíl se extrahuje třikrát do chloroformu, potom dvakrát do směsi 10% iropropylalkoholu v chloroformu. Organické podíly se spojí, po vysešení bezvodým síranem sodným a filtraci se zahuštěním filtrátu získá olej (iii), který se použije bez jakéhokoli čistění v dalším stupni.

Stupen (3) Příprava

H

(iv)

Produkt (iii) z příkladu 2, stupen 2 zde výše se rozpustí v 150 ml terc.-butylesteru kyseliny octové, přidá se

-41• · · a · a · · a* aaa a a aaa a aa a a a a aa a á « a * a aaa aaa a a aaa aaa a aaaa, a a aaa a· «· a·· aa aa

11,2 g formamidin-acetátu a reakční směs se vyhřívá pod argonem asi 9 hodin do varu pod zpětným chladičem s přidáním tří dávek po 5,56 g formamidin-acetátu za 2, 4 a 6 hogin. Po ochlazení se reakční směs zředí ethylesterem kyseliny octové, roztok se promyje solankou, vodou, znovu solankou a vysuší se bezvódým síranem sodným. Zahuštěním filtrátu ve vakuu se získá zbytek, který se čistí bleskovou chromatografií za eluování 40 až 80% ethylesteru kyseliny octové v hexanu, tím se získá chlorpurinový produkt vzorce (iv) sde výše.

Stup.en (4)

Příprava

Ve 3 ml ethanolu se rozpustí 400 mg (1,05 mmol) produktu (iv) z příkladu 2, stupen (3) zde výše, 0,22 ml (1,57 mmol) triethylaminu a 270 mg (1,16 mmol) 2-[í,3S)-3-aminopyrrrolidin-l-ylj-4-trifluórmethylpyridinu, připraveného dle příkladu 3, stupně 1 až 5 zde dále. Reakční směs se zahřívá pod argonem 20 hodim do varu pod zpětným chladičem, zahustí se ve vakuu a zbytek se roztřepává mezi chloroform a nasycený roztok hydrogenuhliČitanu sodného. Vodný podíl se extrahuje Čtyřikrát do chloroformu, spojený chloroformový roztqk se po vysušení bezvódým síranem sodným a filtraci zahustí ve vakuu. Zbytek se čistí bleskovou chromatografií za nanesení vzorku ve směsi methylenchloridu a ethylesteru kyseliny octové (1:1) a s eluováním O až 3% methanolu v ethylesteru

• ♦· • · * *	»· •	•	» • ·	• · • · » «
« · · ·	* ·		•	• ·	·♦ · « v ·
• t	•		•	»	• ·
·· · ·		« *		·· 4	·· ··

-41-CL· kyseliny octové. Získá se tak výše uvedený produkt (v).

Stupeň (5)

Produkt z příkladu 2, stupeň (4) zde výše se rozpustí v 2 ml směsi methanolu a tetrahydrofuranu (1:1), přidají se 3,3 mí 1,5 W vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, roztok se potom míchá asi 20 hodin za teploty místnosti.

Po zahuštění reakční směsi ve vakuu se takto získaný zbytek rozpustí v 10 ml směsi 15% isopropylalkoholu v chloroformu, přidá se 1 ml 1 W roztoku hydroxidu sodného, 9 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, vrstvy se oddělí a vodný podíl se extrahuje Čtyřikrát vždy do 5 ml směsi 15% isopropylalkoholu v chloroformu. Spojený organický roztok se po vysušení bezvodým síranem sodným a filtraci zahustí ve vakuu a.získá se tím isopropylamid kyseliny (lS,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4-j6-[l-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-yl^-cy klopě ntankarboxylové, t.t. 227 až 228° C.

Příklad 3

Příprava (lR,2S,3R,5R)-3-methoxymethyl-5-^6-[l-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino^-purin-9-yl^-cyklo pentan-l,2-diolu.

Stupen (1)

V 250 ml toluenu se rozpustí 20 g (232 mmol) (3S)-(-)-3·» aminopyrroldinu a 26mml (255 mmol), tj. 1 ekv.benz_aldehydu a reakční směs se zahřívá do varu pod zpětným chladičem asi

4,5 hodin za použití Dean-Stark-ova nástavce. Po ochlazení na 0° C se k reakční směsi přidá 55,7 g (255_ř2 mmol),tj. 1 ekv diterc.-butylesteru kyseliny uhličité, reakční směs se míchá za teploty místnosti, zahustí ve vakuu, zbytek se rozmíchá s roztokem hydrogensíranu draselného, následuje trojí extrakce do etheru. Vodná vrstva se alkalizuje, potom extrahuje chloro-42·· • · • ·· « · *· · *· ·· • ··* · » · · • « · · · « · • · * ♦ «····· • · · · · ·· ··· ·* ·« formem, organický roztok se promyje solankou, vysuší se bezvodým síranem horečnatým, po filtraci se filtrát zahustí ve vakuu a získá se tak N^-BOO-(3S)-(-)-3-aminopyrrolidin.

Stupeň (2)

K roztoku 34,25 g (183,9 mmol) produktu z příkladu 3, stupeň (1) zde výše v 200 ml methylenchloridu se přidá 25 ml (0,183,9 mmol, 1 ekv.) triethylaminu. Bod dusíkem se přikapává 34,7 ml (367,8 mmol, 2 ekv.) anhydridu kyseliny octové, reakční směs, se po míchání ze teploty místnosti roztřepává mezi roztok hydrogenuhličitanu sodného a methylenchlorid. Organická vrstva se po promytí solankou vysuší bezvodým síranem horečnatým, po filtraci se filtrát zahustí ve vakuu a produkt se Čistí bleskovou chromatografii za eluování 2% methanolu v methylendichloridu za vzniku N₁-BOC-(3S)-(-)-3acetylamino“ pyrrolidinu.

Stupeň(3)

V 400 ml methylendichloridu se rozpustí 39,2 g (171 mmol) produktu z příkladu 3, stupeň (2) zde výše a za chlazení na 0° C se pod dusíkem přikapává 26,46 ml (343,4 mmol), tj. 2 ekv. kyseliny trifluoroctové. Reakční směs se vyhřeje do varu pod zpětným chladičem, přidá se znovu 26 ml, pak ještě 10 ml kyseliny trifluoroctové, vše se zahřívá do varu pod zpětným chladičem 3 hodiny, načež se použitá kyselina trifluoroctová vydestiluje za vysokékého vakua. Zbytek se rozmíchá s alkalickou pryskyřicá Amberlite IRA.400, po filtraci se filtrát zředí methanolem, filtruje se pomylu uvedenou pryskyřicí a zahuštěním filtrátu se takto izoluje (3S)-(-)-3-acetylaminopyrrolidin.

Stupeň (4)

V 50 ml ethanolu se smíchají 4 g (31,2 mmol) produktu z příkladu 3, stupen (3) zde výše a. 5,19 (40,6 mmol) 2-chlor5-trifluormethylpyridinui po přidání 13 ml (9^,6 mmol, 3 ekv.) triethylaminu se rakční směs zahřívá 18 hodin do varu pod zpětným chladičem, zahustí se va vakuu a zbytek se roztřepává

• titi	ti*	•	• ti titi
tititi ·	ti ti	ti ti ,	• titi ti
• ti titi	• ti ti	• ti	• ti ti ti ti ti
• ·	ti ti	•	• ti
·«· ti*	• ti	tititi	• ti titi

mezi methylendichloridem a roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva se po promytí solankou, vysušení bezvodým síranem horečnatým a filtraci zahustí ve vakuu a zbytek se Čistí bleskovou chromatografii za eluování 2-5% methanolu v methylendichloridu. Jako pevná látka se tak připraví 2- L(3S)-3 -acetylaminopyrrolidin-l-yl3-5-trifluormethyl pyridin.

Stupeň (5)

Směs 7,52 G (27,5 mmoi) produktu z příkladu 3, stupeň (4) zde výše a 75 ml 6 H vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové se zahřívá asi 18 hodin do varu pod zpětným chladičem. Potom se reakční směs ochladí na teplotu místnosti, neutralizuje se přidáváním pevného hydrogenuhličitanu sodného a roztřepává mezi zředěný roztok hydroxidu sodného v methylendichlorid. Organická vrstva se promyje solankou, vysuší se bezvodým síranem horečnatým, po filtraci se filtrát zahustí ve vakuu za vzniku 2-[X3S)-3~aminopyrrolidin-l-y.l}-5-trifluormethylpyridinu.

Stupen 6

V methylendichloridu se smíchá 22,5 g (0,123 mol) (-)-5,6-dimethylendioxy-2-szabicyklof2,2,;íjheptan-3-onu (Vi)

1,5 g 4-dimethylaminopyridinu, 12,4 g triethylaminu a 37,5 g di-terc.-butylesteru kyseliny uhličité a reakční směs se míchá za teploty místnosti asi 18 hodin. Promyje se potom 1 N roztokem kyseliny chlorovodíkové, 3%ním roztokem hydrogenuhličitanu sodného, solankou, po vysušení bezvodým síranem

• ·« • · ·	·«	•	• a • · *
•	•
• ···	• ·	•	• ·	« · ·
• · »· *·	• • ·	•	• « ·	• ««

sodným a filtraci se filtrát zahustí ve vakuu a krystalováním zbyfeku z isopropylalkoholu se isoluje H-BOC-5,6-dimethylen'4

7.

V 400 ml methanolu se rozpustí 35,6 g (0,125 mol) produktu (i) z příkladu 3, stupen (6) zde výše, a za prudkého míchání^ chlazení a pod argonem se přidá ve 3 rovných dávkách během asi 2 hodin celkem 23,8 g (0,63 mol) hydridu boritosodného. Po zahuštění ve vakuu se zbytek roztřepává mězi 200 ml vody a 300 ml ethylesteru kyseliny octové, vodný podíl se ještě dvakrát vytřepátfá do ethylesteru kyseliny octové, spojený organický podíl se potom promyje vodou, solankou a vysuší se bezvodým síranem sodným. Zahuštěním filtrátu ve vakuu se takto izoluje N-BOO. -l-amino-2,3-dimethylendioxy-4-hýdroxyraethylcyklopentan (vii), Stupen (8)

(VIII)

V 150 ml benzenu se rozpustí 50 g produktu (vi) z příkladu 3, stupen (7) zde výše, a po přidání 8,8 ml methyljodidu a 33 g oxidu stříbrného se reakční směs zahřívá 18 hodin do varu pod zpětným chladiem. Během asi 6ti hodin pe přidává po

-45• 4 4 4 « · «4 •·4 · · I fl · 1 • 4» 44 ·· «· • 4 4 « · · «44 «4« • 4 * 44 ·· částech dalších 25 g oxidu stříbrného a dalších 50 ml methyljodidu, reakční směs se zahřívá 18 hodin do varu pod zpětným chladičem, filtruje se celitem, a filtrační vrstva se promyje ethylesterem kyseliny octové. Spojené filtráty se zahustí ve vakuu a krystalováním zbytku z hexanu se získá předpokládaný methoxymethylderivát (viii), viz vzored výše.

Stupen (9)

V 250 ml horkého bezvodého ethylesteru kyseliny octové se rozpustí pod argonem 31,6 g produktu (viii) s příkladu 3, stupeň (8), roztok se vychladí v ledové lázni a do roztoku se zavádí asi 6 minut plynný chlorovodík. Teplota reakční směsi se nechá vystoupit na 20° C a po tříhodinovém míchání se zahuštěním reakční směsi ve vakuu izoluje hydrochlorid očekávaného aminu vzorcfi. (ix) zde výše Stupeň (10)

Ve 100 ml h-butanolu se pod argonem smíchá 24,2 g produktu v

(ix) z příkladu 3, stupen (9) a 42,8 g hydrogenuhlicitanu sodného,

-46♦**· · ·* * · · · · · t · · ·»» ·· «'* ·*· a po přidání 20,1 g 5-amino-4,6-dichlorpyrimidinu se zahřívá reakční směs 20 hodin do varu pod zpětným chladičem, zahustí se ve vakuu a zbytek se roztřepává mezi ethylester kyseliny octové a vodu. Organický roztok se promyje solankou, vysuší se bezvodýij síranem hořečnatým a po filtraci se filtrát zahustí ve vakuu. Zbytek se rozpustí ve směsi 30% ethylesteru kyseliny octové v hexanu, prolije se velkou kolonou se silikagelem, kolona se promyje 50% ethylesteru kyseliny octové v hexanu a zahušřěním spojených filtrátů se získá očekávaný pyrimidylaminocyklopentanový produkt (xi), jak je uveden zde výše.

Stupen(ll)

(xi) (xii)

Pod argonem se rozpustí v 125 ml n-butylesteru kyseliny octové 26,7 g produktu (xi) z příkladu 3, stupen (10), a po přidání 33,5 g formamidinacetátu se reakční směs zahřívá 3 hodiny do varu pod fcpetným chladičem, až se chromatografováním na tenké vrstvě zjistí, že reakce kompletně proběhla. Směs se po ochlazení rozděluje mezi ethylester kyseliny octové a solanku, organický roztok se vysuší bezvodým síranem hořečnatým a po filtraci se filtrát zahustí ve vakuu, zbytek se čistí bleskovou chromátografií s eluováním 30 až 50% ethylesteru kyseliny octové v hexanu, získá se tím chlorpurinový derivát vzorce (xi) zde výše.

• «'« »·	• V »	99 y	·· « * ·
* · f · ·	•
« ··· · ·	•	• t	« ·
» *r ·	*	*		•
J «		» · «	* «	• 4

-47Stupen (12)

Příprava látky vzorce (xiii):

Do roztoku 7,75 g (22,9 mmol) produktu (xii) z příkladu 3, stupeň )11) zde výše a 6m35 g (27,4 mmol) 2-f_(3S)— 3 -aminopyrrolidin-lyí^-5-trifluormethylpyridinu v 20 ml ethanolu se přidá 6,33 ml trietfeylaminu. Reakční směs se zahřívá v uzavře né nádobě asi 4 hodiny na 105°C, potom se ochladí, zahustí ve vakuu a zbytek se roztřepává mezimmethylenchlorid a roztok hydrogenuhliČitanu sodného. Organický roztok se po vysušení bezvódým síranem horečnatým filtruje, filtrát se zahustí ve vakuu a zbytek sé čistí bleskovou chromatografií za eluování 4% methanolu v methylenchloridu, získá se tak látka struktury (xii).

Stupeň (xiii)

V roztoku 90 ml kyseliny trifluoroctové v 10 ml vody se rozpustí 10,81 g (20,3 mmol) produktu (xii) z příkladu 3, stu pen (12) zde výše, a smss se míchá za teploty místnosti asi 30 minut. Za vysokého vakua se vydestiluje kyselina trifluoroctová, a zbytek se roztřepává mezi methylenchlorid a vodný roztok hydrogenuhliČitanu sodného. Methylenchloridový roztok se promyje roztokem hydrogenuhliČitanu sodného, solankou, a *♦ ·

* * * * · »· · ♦ ♦ «· • ί · » ♦ ·· ««* • ·

C « 99 po zředění organického roztoku, isopropylalkoholem se organický roztok vysuší bezvodým síranem horečnatým a po filtracu se filtrát zahustí ve vakuu, zbytek se pak čistí bleskovou chromatografii za -použití eluování 5-10% methanolu v methylenchloridu. Vhodné frakce se jímají, celek se zahustí a krystalo váním' zbytku z acetonitrilu se takto získá (lR,2S,3R,5R)-3-methoxymethyl-5-í?6-£l-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin3(S)-ylaminoJ-purin-9-yl^cyklopentan*l,2»diol, t.t. 166-168° C Příklad 4

Příprava (2R,3S,4R,5R)-2-hydroxymethyl-5-\6-jFl-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3 (R)-ylaminoJ-purin-9-yl |-tetrahydrofuran-3,4-diolu

Smíchá se 267 mg 2-^(3R)-3-aminopyrrolióin-l-ylJ-5-trifluormethylpyridinu, 331 mg 6-chlorpurinribosidu, 233 mg triethylaminu a 0,5 ml ethanolu, reakční směs se potom zahřívá v uzavřené nádobě asi 5 hodin na 100° C. Po ochlazení následuje roztřepávání mezi methylendichloridíza přidání malého množství isopropylalkoholu) a roztok hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva se promyje solankou, vysuší se bezvodým síranem, horečnatým, po filtraci se filtrát zahustí a zbytek se čistí bleskovou chromatografii za eluování 5% methanolu v methylenchloridu; ve formě hemohydrátu se takto připraví (2R,3S,4R,5R)2- hydroxymethyl-5-j6- jl-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(R)-y lamino) -purin-9-yl\-tetrahydrofuran-35i4-diol, t.t. 166-170° C.

Příklad 5

Příprava (lR,2S,3R,5R)-5-j6-jl-(4-trifluormethylfenyl)-pyrrolidin-3(S)-y lamino] purin-9-yly3-hydroxyrae thylcyklopentan1,2-diolu.

Stupen (l)

V 39 ml toluenu se smíchá 1,00 g (11,6 mmol) 3(S)-(-)3- aminopyrrolidinu, 1,35 ml (9,66 mmol) 4-brombenzotrifluoridu,

O « 4 β··· * · * »

9 9 9 9 * »,*«4 «»· « · · · · ··* ··· • 4 · · · e . ·

Ι»Φ ·· ·4 ··· «4 **

-492,69 g (29 mmol) terc-butoxidu sodného a 1,01 g (1,16 mmol) PdCl^jPto-tolyl^g; tato látka se připraví dle US.pat,spisu 4 196 135, na který se zde odkazuje, Heakční smés se.zahřívá asi 40 minut v uzavřené nádobě na 100° C, ochladí se, filtruje, zahustí ve vakuu a zbytek se čistí bleskovou chromatografii za eluování směsí methylenchloridu a ethanolu 10 : 1 až 7 : 1; získá se tak 1-(.4.trifluormethyl)-fenyl-(3S)-pyrrolidin-3-ylqmin.

Stupeň (2)

Směs 24,7 ml (0,6l mmol) methanolu a 50 ml ethylesteru kyseliny octové se pod argonem vychladí na 0°C, po částech se přidává 43,4 ml (0,61 mmol) acetylchloridu a roztok se potom míchá asi 45 minut za teploty místnosti. Znovu se vychladí v ledu a během asi 45 minut se pomalu přidává roztok 50,0 g N-B0C-l-amino-2,3-dimethylendioxy-4-hydroxymethylcyklopentanu (vii) v 100 ml ethylesteru kyseliny octové. Teplota roztoku se potom nechá vystoupit na 20° C a odpařením ve vakuu se získá očekávaný hydrochlorid aminu (xiv), jak je uveden zde výše.

Stupeň (3)

Příprava látky (xv)

HO

-50Pod argonem se smíchá v 150 ml n-butanolu 38,9 g produktu (xvi) z příkladu 5, stupen (2) zde výše a 73 g hydrogenuhličitanu sodného a směs se míchá za teploty místnosti asi 30 \ minut. Po přidání 34,2 g 5-amino-4,6-dichlorpyrimidinu se reakční směs zahřívá 19 hodin do varu pod zpětným chaladičem, po zahuštěbí ve vakuu se ke zbytku přidá ethylester kyseliny octové a voda, vodný podíl se extrahuje znovu do e.thylesteru kyseliny octové, spojený organický extrakt se promyje solankou, filtruje a zahustí ve vakuu _e Zbytek se Čistí bleskovou chromatografií za eluování gradientem od 30% ethylesteru kyseliny octové v hexanu až do čistého hexanu, získá se tím očekávaný substituovaný chlorpyrimidinový derivát (xv), uvedený zde výše.

Stupeň (4)

V 250 ml n-butylesteru kyseliny octové se smíchá 37,9 g produktu (xv) z příkladu 5 (stupeň 3), zde výše a 25,1 g formamidinacetátu, reakční směs se zahřívá pod argonem asi 2 hodiny do varu pod zpětným chladičem, po hodině se přidá další podíl 12,5 g formamidinacetátu a ještě dalších 10 g za asi 1,5 hodin. Po ochlazení se reakční směs rostřepává mezi ethylester kyseliny octové a solanku, podíl solanky se extrahuje 3x do ethylesteru kyseliny octové, spojený organický roztok se vysuší bezvodým síranem horečnatým a po filtraci se filtrát zahustí ve vakuu , Krystalováním zbytku ze směsi ethylesteru kyseliny octové a hexanu se získá chlorpurinový derivát vzorce (xvi) zde výše. Zbytek po koncentrování matečného louhu se dá Čistit bleskovou chromatografií za eluování

-51·>:*· · · ♦ » ·· * ·,..·♦ *£<

• · * · * * · á «191 • «« · < · · * ·*·^·«<

• * · * * a i ··* «« ·» ··· η» «*» až 100% ethylesteru kyseliny octové v hexanu; zvýší se tímB vyterek.

Stupen (5)· Příprava

CP.

(xvii)

V 20 ml ethanolu se smíchá 0,225 g (0,693 mmol) produktu (xvi) z příkladu 5, stupen (4) zde výše, 0,239 g (1,04 mmol) l-(4-trifluormethyí)fenyl-(3S)-pyrrolidin-3-ylaminu ze stupně (1) zde výše a 0,582 g (6,93 mmol) hydrogenuhiíčitanu sodného a reakení směs se vyhřívá do varu pod zpětným chladičem asi 60 hodin. Po filtraci a zahuštění ve vakuu se zbytek čistí bleskovou chromatografií za eluování gradientem.methylenchloridu/methanol 30 : 1 až 10 : 1, a získá se tak pyrrolidinylamin vzorce (xvii) zde výše.

Stupen (6)

Roztok 0,234 g produktu z příkladu 5, stupen-(5) v 10 ml kyseliny trifluoroctové se míchá za teploty místnosti po dobu noci. Roztok se potom zahustí ve vakuu a zbytek se čisti bleskovou chromatografií za eluování směsí methylenchlorid a ethylester kyseliny octové (10 : 1) za vzniku (lR,2S,3R,5R)-5-^6-ll-(4-trifluormethylfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-ylj-3-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diolu, t.t. 111-114°C.

-52··· * * » · « 4 • · « · * · »

Φ • ·

Příklad 6

Příprava. 4(S)-l-benzyl-4- $-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymethy1cyklopentyl)-9H-purin-6-ylamino)-pyrrolidin-2-onu

Λ

HK

HO

(xviii)

Stupen (1) Příprava

(xix)

Roztok 7,1 ě (24,5 mmol) j^-terc.-butylesteru kyseliny N-terc.-BOC-L-asparagové v 120 ml tetrahydrofuranu se ochladí na 0°C a po přidání 2,73 g (27 mmol) triethylaminu a potom 2,66 g (24,5^100!) ethylesteru kyseliny chlormravencí se roztok míchá asi 30 minut, načeš se přidá roztok 3,71. g (98,2 mmo.l) hydridu boritosodného ve vodě. Po míchání reakční směsi asi 17 hodin za teploty místnosti se směs zahustí ve vakuu, zbytek se zředí přidáním ethylesteru kyseliny octové, načež se organický «· · · ·

-53roztok promyje 1 li roztokem chlorovodíkové .kyseliny, 10%ním roztokem uhličitanu sodného, solankou, vysušeí se bezvódým síranem horečnatým, a po filtraci se filtrát zahustí ve vakuu. Získaný zbytek se čistí bleskovou chromatografií za eluování 30% až 50% ethylesteru kyseliny octové v hexanu a získá se tak 3(3)-terc.butylester kyseliny 3-BOC-amino-4-hydroxy-n-butanové (xix)

Stupeň (2)

Příprava

0Roztok 0,73 g dimethylsulfoxidu v 9 ml methylenchloridu se vychladí na 70° C, přikapává se 31 ml 2M roztoku dichloridu kyseliny oxalové v methylenchloridu, roztok se dále míchá asi 15 minut, naces se přidá roztok 0,85 g předešlého produktu (xix) v 5 ml methylenchloridu. Ro dalším míchání asi 45 minut se přidá 1,88 g triethylaminu, teplota reakční směsi se nechá vystoupit na 20° C a po míchání asi 30 minut se vše zředí přidáním ethylesteru kyseliny octové. Získaný roztok se promyje použitím 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkové, 10%ním roztokem uhličitanu sodného, solankou, vysuší se bezvódým síranem horečnatým a po filtraci se filtrát zahustí ve vakuu . Získá se tak 3(3)-terc.-butylester kyseliny 3-B0C-amino-4-oxo-n-butanové (xx).

Stupeň (3)

(xxi)

-54• ·· titi ti ti* titi • ti ti ti ti ti titi ti ti ti ti ti*· ti · · · · ti ti ti «·· tititi titi ti*· ··· « * ti ti ti titi • titi titi titi tititi titi ··

Produkt (xx) z příkladu 6, stupeň (2) zde výše se rozpustí v 9 ml methanolu a po přidání 1,34 g hydrochloridu benzylaminu, potom 0,94 g triethylaminu a pak ještě 200 mg molekulárního síta 3 í se roztok míchá asi 45 minut s následným přidáním 0,23 g.chloridu zinečnatého a roztoku 0,22 g kyanborohydridu sodného v 5 ml methanolu. Po míchání reakční směsi asi 4 hodiny se přidají 2 ml 1 N roztoku hydroxidu sodného, potom 10 ml vody, směs se zahustí.na polovinu původního objemu, extrahuje do ethylesteru kyseliny octové; Tento orggnický roztok se promyje l0%ním roztokem uhličitanu sodného, solankou, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým a po filtraci se filtrát zahustí ve vakuu. Získaný zbytek se čistí bleskovou chromatografií ze eluování 30% až 40% ezhylesteru kyseliny octové;, získá se tak benzylaminový derivát (xxi), uvedený zde dříve.

Stupen (4)

V 12 ml směsi toluenu a kyseliny octové (10 : 1) se rozpustí 0,90 g produktu z příkladu 6, stupen (3) a roztok se zahřívá 90 minut do varu pod zpětným chladičem. Po zahuštění ve vakuu se zbytek čistí bleskovou chromatografii za eluování 25% až 35% ethylesteru kyseliny octové v methylenchloridu a získá se tak l-benzyl-4(S)-BOC-amino-2-pyrrolidinon.

Stupeň (5) v

Z produktu dle příkladu 6, stupen /(4) se rozpustí 0,64 g v 20 ml ethylesteru kyseliny octové, roztok se ochladí na 0° C, Asi 5 minut se zavádí do roztoku plynný chlorovodík a reakční směs se dále míchá asi 1θ hodin za teploty místnosti. Po přidání etheru se pevný podíl odsaje: hydrochlorid l-benzyl-4(S)-amino2-pyrroldinonu.

Stupen (6)

V 10 ml ethanolu se zahřívá asi 50 hodin do varu pod zpětným chladičem směs 0,33 g chráněného chlorpurinového derivátu z příkladu 5, stupeň 4 zde výše, 0,26 g hydrochloridu l-benzyl-4(S)-amino-2-pyrrolidinonu a 0,29 g triethylaminu.

-55► «9 4 > 9 9 4 • 99 99 4 • 1

9« 99

Po zahuštění reakční směsi.ve vakuu _se zbytek rozpustí v 20 ml 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkové e po míchání reakční směsi za teploty místnosti asi hodinu se zahuštěním ve vakuu získá zbytek a ten se čistí preparativní vysokotlakovou kapalinovou chromatografií za eluování gradientem 10% až 60% acetonitrilu ve vodě s obsahem 0,1% kyseliny trifluoroctové* Vhodné frakce se spojí, celek se zahustí a zbytek se rozpustí v 20 ml 1 K roztoku kyseliny chlorovodíkové, rozpouštědlo se vydestiluje ve vakuu , a to vše se opakuje dvakrát. Získaný zbytek se rozpustí v methanolu, rozpouštědlo se vydestiluje ve vakuu a triturováním zbytku s etherem se získá trihydrát hydrochloridu 4(S)-l-benzyl-4-[9-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymethylcyklopentyl)9H-purin-6-ylamino) -pyrrolidin-2-onu. T.t. 100° C (rozkl.)

Příklad 7

Příprava (lS,2R,3R,4R)-3-hydroxymethyl-5-[6-£l-(4-nitrofenyl)pyrrolidin-3-ylamino]-purin-9-ylJ-cyklopentan-l,2-d£olu.

Stupeň Cl)

V 10 ml bezvodého methylenchloridu se rozpustí současně 1,0 g (7,19 mmol) 4-nitrofenolu a 3 ml (21,6 mmol) triethylaminu, roztok se vychladí na -15° C, přidají se 1,81 ml (10,8 mmol) anhydridu kyseliny trifluormethansulfonové a za uvedené teploty se reakční směs míchá asi 39 minut. Po zředění methylenchloridem se organický roztok promyje postupně roztokem hydrogenuhličitsnu sodného a solankou, vysuší se bezvodým síranem horečnatým a po filtraci se filtrát zahustí ve vakuu. Zbytek se čistí bleskovou chromatografií s eluováním methylenchloridem. Ve formě lehce žluté pevné látky se takto připraví trifluormethansulfonyloxy-4nitrofenol.

Stupen (2)

V 17 ml bezvodého methanolu se rozpustí 3,0 g (17,0 mmol) 3(S)-amino-l-benzylpyrrólidinu a 2,50 ml (17,9 mmol) triethy1aminu a pod dusíkem se přikapává 2,53 ml (21,3 mmol) ethylesteru kyseliny trifluoroctové.' Roztok se mívhá asi 18 hodin, zahustí se

-56·· • 44 · 4 *4

4« ··

4 4 4 « 4 · ··« »44 ·

ve vakuu, zbytek se rozpustí v methylenchloridu. Roztok se po promytí roztokem hydrogenuhlicitanu sodného a solankou vysuší bezvodým síranem horečnatým, po filtraci se filtrát zahustí ve vakuu za vzniku l-benzyl-3(S)-trifluoracetylaminopyrrolidinu.

Stupeň (3)

Pod dusíkem se rozpustí 4,59 g (16,7 mmol) l-benzyl-3(S)trifluoracetylaminopyrrolidinu v 50 ml bezvodého methanolu, přidá se 3,68. g (16,7 mmol) diterc,-butylesteru kyseliny uhličité a 0,90 g 10%ního palladia na uhlík. Směs se dále míchá za přivádění vodíku za atm.tlaku asi 5 hodin, filtruje se potom celitem, ten se propláchne methanolem a filtrát se zahustí ve vakuu , Zbytek se čistí bleskovou chromatografii za eluování 5% methanolu v methylenchloridu, výsledkem je l-BOC-3(S)-trifluoracetylaminopyrrolidin.

Stupeň (4) v 130 ml methylenchloridu se rozpustí 4 g l-B0G-3(S)trifluoracetylpminopyrrolidinu, přidá se 19 ml kyseliny trifluoroctové, roztok se míchá hodinu a zahustí^ak ve vakuu z*

Zbytek se roztšepává mezi methylenchlorid a nasycený roztok hydrogenuhlicitanu sodného, vrstvy se oddělí a vodný podíl se extrahuje do ethylesteru kyseliny octové. Spojený organický extrakt se vysuší bezvodým síranem horečnatým,po filtraci se filtrát zahustí ve vakuu a získá se tak 3(S)-trifluoracetylaminopyrrolidin.

Stupeň (5) v 15 ml bezvodého acetonitrilu se rozpustí 0,423 g (1,56 mmol) 'trifluormethansulfonyloxy-4-nitrofenolu a Q,217 ml (1,56 mmol) triethylaminu, a po přidání 0,852 g (4,68 mmol) 3(S)-trifluoracetylaminopyrrolidinu se reakční směs zahřívá asi 18 hodin do varu pod zpětným chladičem. Po ochlazebí a zahuštění ve vakuu se získaný zbytek čistí bleskovou chromatografii za eluová ní gradientem 25% až 50% ethylesteru kyseliny octové v hexanu. Získá se tím l-(4-nitro)fenyl-3(S)~trifluoracetylaminopyrrolidin.

-57• 44 ··

4 4 · 4

444 44 4

4 4 4

4 · 4 4 4 • 44 44

4 4 4 4 * • · 4 4

4 ·· · 44 4 • 4 4

444 4 4 44

Stupen (6)

Do 20 ml nasyceného roztoku uhličitanu draselného ve směsi methanolu a vody (2:3) se přidá 0,334 g (1,10 mmol) l-(4-nitro)-fenyl-3(S)-trifluoracetylaminopyrrolidinu, směs se zahřívá asi 2 hodiny na 55° 0, ponechá se asi 18. hodin za teploty místnosti, zahustí se ve vakuu a zbytek se rozpustí v 10 ml vody, vodný roztok se extrahuje do ethylesteru kyseliny octové, organický roztoblse vysuší bezvodým síranem horečnatým, a po filtraci se zahuštěním filtrátu ve vakuu získá takto 3(S)-amino-l-(4-nitro)-fenylpyrrolidin.

Stupeň (7)

V podstatě za použití postupů, z příkladu 3, stupně (12) a (13) a příkladu 5, stupně (5) a (6) se dá připravit (lS,2R,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-^6-[l-(4-nitrofenyl)-pyrrolidin-3-ylaraino}-purin-9-yl^-cyklopentan-l,2-diol, t.t.

119 až 12O°C z 3(S)-amino-l-(4-nitro)-fenylpyrrolidinu.

Za použití postupů z reakčních schémat a příkladů, jak zde byly výše uvedeny, se dají připravit tyto dále uvedené sloučeniny z vhodných výchozích láteki (2R,3R,4S,5R)-2-hydr oxyme thy1-5 - fl-(5-chlorpyr idin-2-ylpyrrolidin-3(S)~ylaminoJ~puiin-9-ylr-tetrahydrofuran-3,4-diol, t.t. 154 - 156°C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-j6-(jL-(5-trifluormethylpyridin2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino^-purin-9-ylí-tetrahydrofuran-3,4diol, t.t. 153-156° G, ' (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-|6-[l-(4-trifluormethylpyridin2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-ylGetrahydrofuran-3,4diol, t.t. 187-190° C, (2R,3R,4S,5R)~2-hydroxymethyl-{6-[l-(5-brompyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino^-purin-9-yl|-tetrahydrofuran-3,4-diol, t.t. 153 -154° C, ‘ (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-{6-ÍÍ-(4-nitrofenyl)-pyrrolidin-3 (S)-ylaminoJ-purin-9-yll -tetrahydrofuran-3,4-diol, t.t. 230 -232° G, ⁾

-58• ·· ·· • · « · · · « • ·««·· · · • · · · · «· ·> »· ···' ♦ · ·· • » * • · · ··· ··· • « ·· «· (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethy1-5-jj-(5 ^z-trifluormethyl-3,4,5,6tetrahydro-2Hjj,2 J-bipyridinyl-3-ylj-purin-9-yl -tetrahydrofuran-3,4-diol, t.tf 113 - 116° 0, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-^6-(fenylpyrrolidin-3(S)-ylamino) - pÉr i n-9 - y 1^ -1 e tr a hy d r o f ur a n-3,4-d io 1, (2R, 3R,4S,5R)-2-hydroxymethy 1^-(^6-( l-pyridin-2-ylpyrrolidin3(S)-ylamino~í-purin-9-yl )-tetrahydrofuran-3,4-diol, t.t. 193195° C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5- j6-Ql-(4-chloríeryl)-pyrrolidin3(S)-ylamino^-purin-9-yl|-tetrahydrof‘u2^,an-3,4ffldiol, t.t. 121124° C.

(2R,3R.4S-5R)-2-hydroxymethyl-5-^6-JJL-(5-methylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino!-purin-9-ylftetrahydrofuran-3,4-diol, t.t. 164 - l66°C, (2R,3R,4S,5R)~2-hydroxymethyl-5-j6-[l-(5-thiofen-2-ylpyridin2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino2-purin-9-yl(-tetrahydrofuran3m4-diol, t.t. 190 - 192°C, J (2R, 3R,4S,5R)-2-hydroxyme thyl-5-|6-p-(5-me thy Imerkaptopyridin-2-yl)-pyrrolidin-3 (S)-ylaminoVrpurin-9-yl Γteΐrahydrof'ur^:an3,4-diol, t.t. 231-233°C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-^6-[l-(6-methoxyprimidin-’4-yl)pyrrolidin-3CS)-ylamino“J-purin-9-yl}-tetrahydrofuran-3,4-diol, t.to 251-253°C, ^r , (2R,33-4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-|6-fl-(6-chlorpyrimidin-4“yl)pyrrolidin-3(S)-ylaminoypurin-9-yll-tetrahydrofuran-3,4-diol, t.t. 154-156° C, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5- [l-(6-chlorpyridazin-3-yl)pyrrolidin-3-ylamino2-purin-9-yll-tetrahydrofuran-3,4-diol, t.t. 130° C (rozkl.) (2R, 3R-4S-5R) -2 -me thoxyme thy 1-5 - ^6- [l- (5 - tr if luor$e thylpyriain-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yll-tetrahydrofuran3,4-diol, t.t. 198-200° C, ' '

-59Φ φ» φφ φ φφ φφ φ · φ * * · *φ * · · φ • «4 · · · · Φ · φ φ ·Φ· · · · · · ♦·· Φ«· • Φ Φ · Φ Φ φ

ΦΦΦ ΦΦ Φ· ·ΦΦ ·· ΦΦ

Sthylamid kyseliny (lS,2R,3S,4R)-2,3-dihyároxy-4-j6-jjL-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3-ylaminoj-purin-9-ylJcyklopentankarboxylové, t.t. 135-138° C, (lS,2R,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-}6-[l-(4-!nitrof^,enyl)-piperidin-4-ylj-purin-9-ylj^>-cyklopentanf-l,2-diol, t.t.126 - 128°0, dihydrochlorid (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymethy 1-5-^6-Q(3S)-pyrrolidin-3-ylaminoJ-purin-9-yll-cyklopentan-l,2-diolu, t.t. l60° C (roakl.) (lS,2R,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-Jé-[Í-(5-trifluormethylpyridin 2-yl)~pyrrolidin-3(R)-ylaminoJ-purin-9-y.ll-cyklopentanl,2-diol, t.t. 175 - 177° C, >

(18,2R,3R,5R)-3-hydroxymethy l-5-^6-[(3R)-pyrrolidin-2-y laminoJ-pm'in-9-ylj’-cyklopentan-l,2-diol, t.t. 166° C (rozkl.) (lR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5—· 6-(l-(5-.trifluormethylpyridin-2-yl}-pyrrolidin-3(S)-ylaminoí-purin-9-ýl -cyklopentan1,2-diol, t.t. 110 - 111° C, ⁾ hydrochlorid 4(R),l-benzyl-4-[9-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymethy lcy klopě n ty l)-9H~pur i n-6-y lamino^}-pyrrolidin-2-on, t.t.

110° C, rozkl.

(lR,2S,3R,5S)-5Tinethyk-3-|6-[l-(5-trifÍuormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-ylj-cyklopentan-1,2-diol, t.t. 114 -116° 0, (lR,2S,3R,5R)-5-^6-fl-(5-brompyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylaminoj-purin-9-ylř-3-hydroxyme thylcyklopě nta n-1,2-diol, t.to 169-171° C, ^J (lR,2S,3R,5R)-5-Jjj-[l-C5-chlorpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3 (S)y lamino} -purin-9-yl}-3-hydr oxymethylcy klopě ntan-1,2-diol, t.t. 118-121° G, (lR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5- [l-(4-trifluormethylpyridin· 2-y l)-pyrrolidin-3(S)-y lamino}-purin-9-ylř-cy klopenta n-1,2diol, t.t. 135-137° C, )

• ·»	•	• »	• · ·· • · · ·
· ·	•
• ··· ·	•	•		» ·· ti*
• ·	•			• ·
··· *·			««·	·« ·«

(13,2S,3R,5R)-3rhydroxymethy¢-5-^6-fl-(pyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino^-purin-9-yl|-cyklopentan-l,2-diol, t.t, 110112°C, (IR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethy1-5-^6- ]l-(chinolin-3-yl)-py:rrolidin3(S)-ylaminoJ-purin-9-yl|-cyklopentan-l,2-diol, t.t. 135-138°C, (lR,2S,3R,5R}-3-hydroxymethyl-5-^6-[ji-S-(4-nitrofenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamin<^-pui^,in-9-ylJ-cy klopě ntan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5- j6- [l-(4m5-bistrifluorpyridin-2-yl)-pyrrolidin3(S)-ylar:iino^-purin-9-ylř-3-hydroxymethylcy klopěntan-l,2-diol, t.t. 123-126° C, ' (lR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-jó-[l-(fenyl)-pyrrolidin-3(S)ylamino)^purin-9-ylj-cyklopentan-l,2-diol, t.t. 97-99° C,

4-ή3(S)- [$-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymethylcyklopentyl)-9H-puriň-S-ylamincTJ-pyrrolidin-l-yl^ benzonitril, t.t. 140° C, (lR,2S,3R,5R)-3-hydroxyniethyl-5- (l-(isochinolin-l-yl)-pyriOlidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-ylr-cyklopentan-l,2-diol, t.t. 119-122° C, ' (lR.2S,3R,5R)-5-{č- Il-(6-bromisochÍnolÍn-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino^-purih-9-ylj-3-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-»^6t 1j.-(4-chlorfenyl)-pyrrolidÍn-3 (S)-ylaminojpurin-9-ylj-3-hydroxýmethylcyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-|6-jj.-(3-ciilor-5-ti‘ifluonnethylpyridin-2-yl)pyi^,rolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-ylř-3-methoxy5iethylcyklopentan-l,2-diol, t.t. 140-143° O, '

ClR,2S,3R,5R)-5-y6y lamino} -purin-9-yl 180-182°C, (lR,2S,3R,5R)-5-'|č-(i-(6-chlorpyrimidin-4-yl)-pyrrolidin-3 (Š)ylamin.oJ-purin-9-yl -3-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, t.t. 125-127° C, (lR,2S,3R,5R)-5-j6-[Í^(6-chlorpyrimidin-4-y^pyrrolidin-3 (S)-ylylaminoJ-purin-9-yl^-3-methoxymethykcyklopěntan-l,2-diol,

JL-(6-chlor pyr imidin-4-yl)-pyrrolidin-3 (S )-3-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, t.t.

-61- (i(lR,2S,3R,5R)-5- [6-p.-(6-chlorpyridazin-3-yl)-pyrrolidin-3 (S)ylamino^-purin-9-ylJ[“3-hydřoxymethyl -cyklopentan-l,2,diol, (lR,2S,3R,5R)-3-niethoxymethyl-5- j6-[l-(6-methoxypyriinidin-4-yl) pyrrolidin~3 (S)-ylamino^-purin-9-*yll-cy klopentan-1,2-diol, t.t. 118-12O°C, ' (lR,2S,3R,5R)-3-isopropoxymethyl)-5-j6-[í-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-yl^-čyklopěntan-l,2-diol, t.t. 157-158°C, (lR,2S,3R,5R)-3-isopropoxymethyl-5-^6“[l-(4-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-ylí-cyklopěntan1,2-diol, t.t. l6O-l6l°C, (IR, 2S,3R,5R) -5- ^6-[l-( 6-chlorpyrida zin-3-yl)-pyrrolidi$-3(S )y lamino} -purin-9-yl]-3-> ethoxymethylcy klopentan-1,2-diol, t.t. 122-124° C, (lR,2S,3R,5R)-5-^6-^l^(5~brorapyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino^ Tpurin-9-yl^-3“methoxymsthylcyklopentan-l,2-diol, t.t, 110-lll°C, (lR,2S,3R,5R)-5-j6-[í-(5-chlorpyridin-2-yl)-pyriOlidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-ylí -3-methoxymethylcy klopentan-1,2~diol, t.t. 110-112° C, ) (lR,2S,3R,5R)-3-methoxyniathyl-5“|6-Ll-(4-trifluormethylfenyl)pyrrolidin-3(S)-ylaminol-purin-9-yll-cyklopentan-l,2-diol, t.t. 128° C, ' ' (IR,2S,3R,5R)-5-^6-il-(4-chlorfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-yl|-3-methoxymethylcyklopentan-l,2-diol, t.t. 122-123°C, (lR,2S,3R,5R)-5-[6- [l-(4-chlorfenyl)“pyrrolidin-3(S)-ylamin<Jpurin-9-^yl-3-methoxymethylcyklopentan-l,2-diol, t.t, 127-13O°C,

ClR,2S,3R,5ÍQ-5-j6“[l-(3-chlorfenyl)-pyrroliúin-3(S)-ylaminoJpurin-9-yl\-3-hydroxymethylcyklopantan-l,2-diol,,t,t. 131-133°0, (lR,2S,3R,5R)-3-methoxymethyl-5~Í6-£í-(l-fenylpyrrolidin-3(S)-yl amino3“purin-9-yl}-cyklopentan-l,2-diol, t.t. 106°C, (lR,2S,3R,5R)-3-^6-j(l-benzylpyrrolidin-3 (S)-ylamino^-purin-9-ylJ' 5-hydroxymethJlcyklopentan-l,2-diol, t.t,100-102°C

-64(lR,2S,3R,5R)-3·* 16·»- (1-benzylpyrr olidin-3 (S )-y lamino )-purin-

(S) trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3-ylaminoJ-purin-9-y3j cyklopentankarboxylové, ý,ta’ 215° C, a (R)-sekbutylamid kyseliny (lS,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4-|_i6-CL·(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3-ylaminoj-purin-9-y l^J-cy klopě ntankarboxylove, t.t. 206-212° C (rozkl.).

Sloučeniny dle tohoto vynálezu se hodí jako antihypertenzní činidla pro léčení vysokých krevních tlaků, tedy zvyšují koronární krevní oběh a dle toho jsou použitelné při léčení myokardiální ischemie, také jsou kardioprotektivními Činidly použitelnými při prevenci nebo snížení poranění myokardu v

cholesterolemie.

Sloučeniny v rámci tohoto vynálezu se vyzbačují aktivitou při staádartních testech vazby A^/Ag receptorů pro stanovení agonistické aktivity adčnosinového receptorů u savců. Příkladné testovací postupy, vhodné při stanovování receptorové vazné afinity sloučenin dle tohoto vynáletu jsou popisovány zde dále.

A. Stanovení in vitro adenosinové receptorové vazné aktivity

A^ receptorové vazná afinita byla stanovena kompetitivním testem, založeným na vytěsnění ^H-CHA (cyklohexyladenosin, viz Research Biochemicals, lne., Natick, Mass., USA) z receptorů za použití membránového přípravku z celého krysího mozku, to dle postupu Bruns.e R.P. a spol., Mol.Pharmacol. 29, 331 (1986). Nespecifická vazba byla zjištěna za přítomnosti IraM theofylinu.

A_? receptorové vazná afinita byla stanovena podobným těchnickým testera, založeným na ligandové náhradě H_TCGS 21680, což je známý receptorově-specifický adenosinový agonista, v receptorů za použití membrán ze žíhaných tělísek krysích mozků. Nespecifická vazba byla zjištěna za přítomnosti 20 jjM 2-chloradenosinu.

-65,Ζ

··· ♦ «4

Testy byly prováděny veskleněných testovacích trubičkách při 25° C. Jakmile byly jiz jednou mambrány přidány; byl obsah, trubiček zvířen a inkubován na rotační třepačce při 25° C 60 minut ( A^ test) nebo 90 minut (Ag test). Testovací trubičky byly v polovině inkubační doby napůl,obráceny a znovu blízko ku konci. Testy byly skočeny rychlou filtrací 2,4 cm.filtry GR/B za použití Brandel Cell Harvestor”. Testovací trubičky byly vymyty třikrát 50 mM vychlazeného pufru tris-HCl (pH 7,7 nebo 7^4) s tím, že filtrace byla dokončena během 15 sekund.' Vlhká filtrační kolíčka byla přemístěna do skleněných scintilačních lahviček, naplněných použitím 10 ml Aquasol-u II (New England Natural). Lahvičky byly protřepávány po dobu noci na rotační třepačce a potom byly přemístěny do analyzátoru kapalné scintilace na dvouminutový propočet. Hodnoty IC^q pfo receptorovou vazbu, tj. koncentrace, za které sloučeniba dle tohoto vynálezu nahradila radioaktivně značenou standartní látku, byly získány konstrukcí křivky komputerovým programem (RS/I, Bolt, Neranek a Newmann, Boston, Ma, USA).

A^ receptorová vazná afinita byla stanovena také za použití přípravku z epididymických krysích membrán z tučných tlapek.

Membránová příprava:· Krysí epididymické tučné tlaky byly homogenizovány použitímpfefru tohoto složení: 0,25 M sacharosy, ml/I Tris, 2 mM kyseliny ethylendiamintetraoctové, 0,1 M fenylmethylsulfonylfluoridu a 1 ug/ml Leupeptinu (200 mg hmotnostně alhké tkáně na ml pufru). Homogenní směs byla v 50 ml odstřev v dovacích skumavkách odstředována minutu za lOOOg (3000 otáček za minutu, bezprostřední kapalina nad sedlinou byla odebrána a následovalo odstřelování 15 minut/38.000 g. Shluky byly resuspendovány v testovacím pufru (30 mM Tris a 1 mM kyseliny ethylendiamintetraoctové, poměr 300 mg původní hmotnosti· tkáně na ml testovacího pufru, a k suspenzi byly přidány 2 jil/ml roztoku adenosin-deaminasy (10 mg/ml), suspenze pak inkub,ována 30 minut při 37° C. Suspenze byla odstředována 10 minut/38.000 g, shluky byly promyty jednou za použití 20 ml testovacího pufru

-66i I ·♦ · ♦ Ϊ > » λ t í ·· ··· ♦ 9 *fe * ♦ · g původní hmotnosti a resuspendovány v testovacím pufru (1,2 vlhké tkáně/ml pufru.

Test a vyhodnocení:

Trubičky byly připraveny takto: obsah trubiček: 100 ul 3 membránové suspenze (příprava viz výše), 50 μΐ roztoku Έ-cyklohexyladenosinu (připraveno ředěním roztoku s obsahem asi mCi/ml se specifickou aktivitou asi 29,9 Ci/mmol,’ testovací pufr na 100 mM, nadále označováno jako roztok CHA)., 350 ul testovacího pufru; nespecifické vazbé trubičky: 100 membránové suspenze, 50 pl roztoku CHA, 50 ul 100 pM 2-chloradenosinu v testovacím pufru, 300 y¹ testovacího pufru; trubičky se vzorky:

100 yl membránové suspenze, -50 yl CHA roztoku, 50 yl roztoku testované sloučeninyt lze připravit sériovým ředěním testovacího pufru v roztoku dimethxlsulfoxidu), 300 jiL testovacího pufru; trubičky se slepým pokusem: 50 yl CHA-roztoku, 450 ^ul testovacího pufru. Každá trubička byla zviřována 10 sekund, inkubov&na na hodiny při 23° V filtrována použitím Brandel Piltration

Unit za použití filtračního papíru Whatman GP/B s promytím dvěkrát použitím 5 ml 50 mM Tris. Piltrační kolečka byla umístěna ve scintilačních nádobkách 7 ml, které byly naplněny použití asi 5 ml Heady Safe Scintillation Cocktail a proveden propočet.

B. Stanovení vasorelaxace in vitro na izolovaných koronárních arteriích prasnic.

Koronární arterie prasnic byly pořízeny z místních jatek, pečlivě rozebrány a zbaveny tuku, krve i nalehlých tkání. Byla vyříznuta kolečka o šířce asi 2 až 3 mm, ta pak přenesena do vodním pláštěm vybavených tkáňových lázní (10 mm), naplněných teplým (37° C) pufrem Krebs-Henseleit, okysličeným (O2/CO2 :

95%/5%), a zavěšena na věšáčcích tvaru L mezi tyčinky z nerezové oceli a přenosník síly. Složení Krebsova pufru v mM: chlorid sodný 118, chlorid draselný 4,7, chlorid vápenatý 2^5, síran horečnatý 1,2, dihydrogenfosforečnan draselný 1,2, hydrogenuhličitan sodný 25,0, glukosa 10,0. Kolečka byla udržována v rovnovážném stavu po 90 minut s častým měněním pufru za

-67stálé tenze 5g. Se zřetelem na zajištěhí nejlepšího vývoje tenze byla arteriální kolečka vystavena dvakrát účinkůgi 36 mM chloridu draselného a jednou 10 pM PGP2a, dříve než byla vystavena účinků, 3 pm PGP2a. Když isometrická tenze dosáhla ustáleného stavu, byly do lázní přidávány zvyšující se dávky analogů adenosinu dle tohoto vynálezu (obvykle 1 mM až 100 pM v polovině doby. Tenze, dosažená při použití 3 yM byla pokládána za rovnou 100% a všechny další hodnotýy byly vyjádřeny jako % tohoto maxima. Hodnoty IC^q pro relaxaci, tj. koncentraci za které sloučenina dle tohoto vynálezu Způsobí 50%-snížení tenze, byla stanovena použitím výše zmíněného komputerového programi za doplnění lineární křivky.

G. Stanovení středního arteriálního krevního tlaku (MAP, mean ařterial blood pressure) a srdečního tepu (HR, heart rate) in vivo u normotenzních anestetizovaných krys a spontánně hypertenzních krys.

1. Anestetizované krysy

Normotenzní.krysy byly uvedeny do anesteze pentobarbitalnatriem (50 mg/kg, i.p·) a umístěny na vyhřátém operačním stolku. Kanulky byly vsunuty do femorálních žil i cév, aby bylo možno zjistit krevní tlak a usnadnit tak intravenozní podávání testovaných sloučenin. Zvířátka byla ponechána 10 minut po, chirurgickém zákroku v klidu, nepřetržitě byl sledován průměrný arteriální tlak, zaznamenáván, srdeční tep byl monitorován za použití pulzu arteriálního tlaku pro spuštění kardiotachometru. Jakmile se ustavily a byly zaznamenány základní parametry, byly podávány zvyšující se dávky )1, 3, 10, 30, 100, 300 a 1000 ug/kg) sloučeniny, jež měla být testována, a to intravenozně. Maximální- změny kardiovaskulárních parametrů byly zjištovány po podání každé dávky adenosinového an^tga. Pouze jedna sloučenina připadala na podávání jedné kryse. Způsobilost sloučenin snížit srdeční tepy a střední arteriální klak byla určena stanovením dávky činidla, jež ního tlaku o • .· 9 * byla nutná ke sníženi srdečního tepu nebo arteriál25% (ed₂₅).

··· 4« <«» • · | · ·

-68* í

'· β<

9

9

999 9 • ·

ι : *:

: i i

04' Ml

99

9 9 f t t t i »·» ··»

2, Spontáně hypertenzní krysy (SHR, spontaneously hypertensive rat).

Orální antihypertenzní účinnost sloučenin ale tohoto vynálezu byla zjištována na neovlivněných, spontánně, hypertenzních krysách.. Anesteze krys byla provedena pentóbar.bitalnatriem (50 mg/kg, i.v.). Dálkově ovládaný snímač byl ..implantován do břicha krysy středním řezem. Kanula snímače byla vsunuta do abdominální aorty, aby bylo moŽko přímo měřit krevní tlak neovlivněných SHR. Snímač byl napojen na abdomenální stěnu. Po zotavení se ,z chirugického zákroku (minimálně po 7 dnech) byly krysy .SHR .umístěny na záznamové desce .a snímač/přenos byl aktivován Arteriální tlak systolický, diastolický a střední, jakož i srdeční tep byly zaznamenávány po 90 minut na neovlivněných krysách ke zjištění stabilní základní linie. Každá z krys dostala jednu dávku sloučeniny dle tohoto vynálezu, jež se mela testovat, nebo vehikulum, a změny krevního tlaku i tepotu srdce byly monitorovány po 20 hodin, a zaznamovány.

Je-li přítok krve do srdce přerušen na krátkou časovou periodu (2 až 5 minut) s následujícím obnovením přítoku krve. (reperfuse), je srdce chráněno před vznikem poranění, k němuž by došlo při přerušení přítoku krve na delší časový usek (například 30 minut).

D_o Stanovení tepotu srdce in vitro

Izolovaná srdeční komora krysy

Samci krys Sprague-Dawley” byli anestetizováni použitím Ketamin/Rompun, srdce byla rychle vejmuta excisí a vložena do teplého, prokysličeného (95 % 0₂/5% C0₂)pufru Krebs-Henseleit tohoto složení v mM: chlorid sodný 118, chlorid draselný 4,7, chlorid vápenatý 2,5, síran hořečnatý 1,2, dihydrogenfosforečnan draselný 1,2, hydrogenuhliČit^n sodný 25,0 a glukosa 10,0, pH 7,4. Pravá, spontánně bijící srdeční komora byla odříznuta a suspendována v tkáňové lázni s vnějším vodním vybavením, to za použití drátků z nerezové oseli. Srdeční komory byly udržovány v rovnovážném stavu po 60 min za zbývající tenze 2 g a se * »· * * *· * · « · « ♦ * * * ϊ i ··: · i l ««» «·. ·. ♦ ·

9· ·· ·' · · * b · » I «·· • 4 b# »'·'

-69změnou pufru každých 5 minut po prvých 15 minut a dále pak v intervalech 5 minut. Sloučeniny dle tohoto vynálezu, které se měly testovat, byly přidávány kumulativně do lázní a srdeční tep byl sledován použitím pólygrafu Grass Model 7D.

Sloučeniny dle tohoto vynálezu se vyznačují účinností při testech, použitých ke stanovení schopnosti takových látek napodobovat kardioprotektivní aktivitu myokardiální předúpravy. Příklady testovacích postupů, které se hodí pro zjištění ^ή kardioprotektivní aktivity sloučenin dle tohoto vynálezu, jsou 'popisovány dále,

E. Stanovení kardioprotektivní aktivity u krys.

1. Obecná chirurgická příprava

Dospělé krysy Sprague-Davjley byly anestetizovány inaktinem (100 mg/kg, i.p.)_o Trachea byla intubována a pozitivní' tlakový vzdušný průchod byl dosažen použitím malého respirátoru pr.o zvířata. Katetry byly umístěny ve stehenní véně i arterii pro podávání sloučenin dle tohoto vynálezu, které se měly testovat ve spojitosti s měřením krevního tlaku. Incise byla provedena na levé straně hrudníku nad pektorálním svalstvem a svalstvo bylo odtaženo, aby se obnažil čtvrtý mezižeherní prostor. Hrudník byl otevřen, srdce vyjmuto. V délce 4-0 bylí proveden prolinový šev ventrilulární stěnou blízko levé hlavní koronární arterie a použit k přerušení toku krve koronární arterii utažením posuvného uzlíčku. Na srdečním povrchu byl * umístěn pulzní Doplerův průtokový sledovaČ (zařízení, měřící průtok krvě)pro potvrzení, že koronární arterie byla vhodným * způsobem identifikována, Katetr byl také umístěn do levé srdeční komory k monitorování levé ventrikulární funkce během pokusu.

2. Předběžná úprava a testovací postupy

Pro předběžnou úpravu srdce byla koronární arterie okludována (průtok přerušen) na dobu 2 minut. Posuvný uzlíček byl

-70* ». » ·· * · e. * · 1 · “ ···» • · · I » »»·»

Í... * i t · · ·»* »«· . * * » ...·.· »·* »η ·» ,ι». ♦· uvolněn, a by se obnovil průtok krve (reperfuae) na dobu 3 minut· Tento postup okluze/reperfuze byl dvakrát-opakován.

minut po skončení konečné předúpravy byla arterie znovu okludována na 30 minut s následující reperfuzí na 3 Rodiny. Byla-li testována sloučenina dle tohoto vynálezu, pak místo provedení postupu okluze/reperfuze došlo k infuzi sloučeniny 30 minut před třicetiminutovou okluzní dobou. Po skočení tříhodinové reperfuzní periody byla arterie·'znovu uzavřena, do levého ventrikulárního katetru bylo podáno množství 1 ml barvivá Patent Blue a Činnost srdce byla zastavena i.v.podáv ním roztoku chloridu draselného. Tento postup umožňuje, aby barvivo proniklo perfuzí do normálních prostorů srdce, zatím co část srdce v ischemickém stavu barvivo nepřevezme (to je tzv.rizikový prostor). Srdce se rychle vyjme k analýze velikosti infarktu. Velikost infarktu se zjistí rozkrájením srdce od apexu až dolů na 4 až 5 řezů tloustkx 1-2 mm.

Řezy se inkubují 15 minut v roztoku 1% trifenyltetrazolia; toto vybervení se projeví na žijící tkáni za vývoje cihloveČerveného zbarvení. Tnfarktem postižená tkáň se nevybarví tímto testem zbarvení a je při pohledu bělavá. Tkáňové řezy se umístí v analytické soustavě pro video znánam a velikost infarktu se zjistí planimetricky. Účinek sloučenin dle tohoto' vynálezu při testování na velikost myokardiálního infarktu se tak zjistí a použije se pro kvantitativní vyhodnocení rozsahu kardioprotektivní aktivity. Výsledky jsou uvedeny v % rizikového prostoru, postiženého infarktem.

Sloučeniny dle tohoto vynálezu se vyznačují aktivitou při testech, použitých ze zjištěhí schopnosti sloučenin inhibovat lipolyzu. Příkladné testovací postupy, vhodné pro stanovení antilipolytické. aktivity sloučenin dle tohoto vynálezu, jsou uvedeny zde dále.

P. Stanovení antilipolytické účinnosti na krysích adipocytech.

1. Izolování adipocytů z epididymálních tukových tlapek.

-71ί* ♦ Λ ώ ·* • b < · b « * · • ··· · * ί«» ·* 4· «· «» « · s β · · « < ··· «·

Adipozní tkáň se odejme z anestetizovaných krys a promyje dvakrát v inkubačním prostředí: hydrogenuhličitan sodný 2,O9g a kyselina ethylendiamintetraoctová 0,04 g jako disodná sůl v litru Krebs-ova pufru. Z každé krysy (300-350 g) se získají asi 4 ml adipozní tkáně. Adipozní tkán (35 ml) se potom rozstříhá nůžkami na malé kousíčky a po promytí použitím 50 ml inkubačního prostředí se směsi vlije do zásobníčku injekční stříkačky 50 ml, na které je napojen krátký kousek uzavřeného vyústění místo vlastní jehly* Vodná fáze se ponechá zaschnout a podíl druhého promytí inkubačním prostředím se zavede do v

injekční stříkačky. Tkán se vnese do 50 ml roztoku kolagenasy (obsahuje 90 mg kolagenasy) s 500 mg albuminu z hovězího sera (BSA, bovine sérum albumin) a 1 ml 0,1 M roztoku chloridu vápenatého v 50 ml inkubačního prostředí v litrové nádobě. Směse se protřepává asi 60 minut za teploty v okolí 37° C v atmosféře 95% kyslíku a 5% oxidu uhličitého k dosažení digesce tkání. Dispergované buňky se vlijí dvěma vrstvami děrované látky do 100 ml plastické nádobky, iíedigerované shluky na látce se opláchnou použitím 20 ml inkubačního prostředí. Buňky v uvedené nádobce se odstřeďují do dvou plastových trubiček po 30 sekund za teploty místnosti a 300 otáček za minutu. Vodná fáze se odsaje odzpoda volně se vznášejících vrstvených částeček plovoucího tuku, není k potřebě. Adipocyty se něžně vlijí do 250 ml plastové nádobkyobsahující 100 ml promývacího roztoku (1 g BSA na 100 ml,inkubačního prostředí. Po mírném prov míchání se postup odstředování opakuje. Následuje další promytí promývacím eoztokem, buňky se spojí a jejich objem se zjistí pomocí graduovaného válce. Adipocyty se ředí dvojnásobným objemem testovacího pufru, inkukační prostřeďí(l20 ml) obsahuje

1,2 g BSA a 13 mg kyseliny pyrohroznové.

2. Test lipolyzy in vitro

Test se provede v plastových! scintilaČních nádobkách 20 ml s tím, že celkový testovaný objem Siní 4,2 ml. Inkubuje se 2,5 ml testovacího pufru, 1,5 ml zředěných adipocytů a 12,3 ul roztoku testované sloučeniny a 12,3 ^ul agonistů adenosinu, měnící se kont · « · * * ····♦ • ·» *· « · · i • 4 ·* ·· • · · . * * ·'

-72centrace, a to v třepačce po dobu 15 minut, potom se nastartuje reakce použitím roztoku norepinefrinu (41,2 ^0.)(10 nM v nosném roztoku, obsahujícím 100 ml vody, 4 mg BSA a 0,1 M kyseliny ethylendiamintetraoctové(20 ul) a adenosin-deaminasy (l ug/ml, 412 ml). Po 60 minutách protřepávání je reakce skončena.a nádobky se vylijí na led. Obsah každé z nádobek se přenese do skleněné trubičky 12 na 75 mm s odstřelováním při 8 až 10° C 20 minut za 3600 otáček za minutu. Tvrdá vrstva lipidů se odejme.odsátím a vodný podíl se testuje na přítomnost glycerolu (400 yl ve vzorku. Pozitivní kontrola se provede za nepřítomnosti jakéhokoli adenosinového agonisty, přičemž se místo testovaného roztoku použije voda.

Antilipolytická aktivita adenosinu je zprostředkována aktivováním S^-receptorového subtypu. Selektivní ^gonisté A^-receptorového subtypu, jako je GGS 21680 se neprojevují antilipolytickou účinností. Podle toho zatím coněkteré A^-selektivní agonisté nemusí mít žádoucí antihypertenzní aktivitu a A₂-agonisté mohou být neúčinnými antilipolytiokými činidly, sloučeniny dle tohoto vynálezu, jsou-li míchány agonisticky, se jedinečně hodí pro účinné zvládnutí obou rizikových faktorů, diskutovaných zde výše, tj. Hypertenze a Hyperlipidemie.

Sloučeniny dle tohoto vynálezu se obvykle podávají orálně nebo parenterálně při léčení pacientů, postižených hypertenzí, myokardiální ischemií nebo v případě pacientů, kde je nutná kardioprotektivní nebo antilipolytická therapie. Výraz pacient jak je zde používán,'zahrnuje lidi i další savce.

Sloučeniny dle tohoto vynálezu, s výhodou ve formě nějaké soli, se mohou upravovat pro podávání jakýmkoli vhodným postupem a vynález zahrnuje do svého rozsahu farmaceutické kompotice, obsahující nejméně jednu sloučeninu dle tohoto vynálezu, vhodné k použití v lékařství nebo zvěrolékařství. Takové kompozice lze připravovat obvyklými postupy za použití jednoho či více farmaceuticky vhodných nosičů Či excipientií. Vhodné nosiče zahrnují ředidla ři plniva, sterilní vodná prostředí a různá netoxická organická rozpouštědla. Kompozice se může upravit do formy tablet, kapslí, kapslí, prášků, vodných suspenzí či rozto* «« *4 « ·· <?e '•'•v 4 « ·· 9 » « *

4» V · · · » ·

4l ·«·<* « « 4 4 *M ·»«

4'h * * · 4 ·. · » ··· »4 44 ··« 4 4 4»

-73ků, injikovatelných roztoků, eelixírů, sirupů a pod., a mohou obsahovat jedno či více činidel ze skupiny, kterou tvoří sladidla, příchutě, barviva, konzervační činidla, vždy se zřetelem na přípravu farmaceuticky přijatelného přípravku.

Ten který nosič a jeho poměr k analogu adenosinu je dán rozpustností a chemickými vlastnostmi sloučenin, tím či oním způsobem podávání s standardizovanou farmaceutickou praxí.

Tak například při výrobě tablet se mohou použít jako excipientia laktosa, sodná sůl kyseliny citrónové, uhličitan vápenatý a fosforečnan vápenatý, dále různá desintegrační činidla, jako je škrob, alginové kyseliny nebo některé komplex ní křemičitany spolu s kluznými činidly, jako jsou horečnatá sůl kyseliny stearové, sodná sůl kyseliny laurylsírové a talek Pro formulování kapslí patří mezi výhodné farmaceutické nosiče laktosa a výšemolekulární pólyethylenglykoly. Pokud se připravují vodné suspenze pro orální podávání, mlže být nosiv čem emulgující nebo suspendující činidlo. Ředidla,,jako je ethanol, propylenglykol, glycerol a chloroform, jakož i jejich kombinace jsou použitelné, právě tak jako další materiály.

Pro parenterální podávání jsou roztoky nebo suspenze těchto sloučenin v sezamovém nebo podzemnicovém oleji použitelné právě tak jako vodné roztoky v propylenglykolu, jakož i sterilní-vodné roztoky farmaceuticky.přijatelných rozpustných solí. Roztoky solí těchto sloučenin jsou zvláště použitelné pro podávání intramuskulárními nebo subkutánními injekcemi. Vodné roztoky, čítaje v to roztoky solí, rozpuštěných v destilované vodě, se hodí při intravenozním injikování za předpokladu, že hodnota jejich pH je správně upravena, nebo že jsou vhodně upraveny, isotonické použitím dostačujícího množství chloridu sodného nebo glukosy a sterilizované zahříváním nebo ultrafiůtrací.

Režim dávkování, který se použije při postupu dle tohoto vynálezu, je ten, který zajišťuje maximální therapeutickou odezvu až do dosažení vylepšení stavu za použití minimální

99 '· *' 9 * • 9 9

9. 99 9 • ·

9»· *«

9 4 «9 9 4 · ·· · · « 9 * · 9 9 4 · 9 b 9 4 4 999 999 b9 9 9 9

4 994 ·9 «9

-74hladiny z hlediska účinnosti. Takže obecně řečeno dávkováním je to, kterým se dosáhne snížení krevního tlaku při léčení hypertenze, při zvyšování koronárního krevního toku při léčení myokardiální ischemie, při dosahování kardioprotektivního účinku, tj. zlepšení ischemických nesnází.nebo velikosti myokardiálního infarktu v důsledku myokardiální ischemie, nebo při dosahování antilipolytického účinku. Obecně.může orální dávka činit od asi 0,1 do asi 100 (s výhodou od asi 1 do 10 mg/kg), a intravenozní dávka se může pohybovat od asi 0,01 do asi 10 mg/kg, s výhodou od asi 0,1 do 5 mg/kg. Přitom se musí vzít v úvahu volba vhodného dávkování v kterémkoli specifickém případe s ohledem na pacientovu hmotnost, celkový zdravotní stav, věk a další faktory, které hy mohly vyvolat odezvu na podaný lék.

Sloučeniny dle tohoto vynálezu se mohou podávat tak často, jak je to třeba k dosažení a udržení požadovaného therapeutického účinku. Odezva některých pacientů může být rychlá na poměrně velké či malé dávky a vyžaduje jen malé dávkování, nebo přerušení dávkování. Na druhé straně u jiných pacientů může trvat dávkování od asi jednou až čtyřikrát denně v závislosti na fyziologickém stavu pacienta. Obvykle se lék podává orálně od asi jednou do asi Čtyřikrát denně. Lze předpokládat, že v případě některých pacientů bude třeba jen jedná nebo dvě dávky denně.

Lze také předpokládat, že tento vynálezu může být použitelný pro podávání injekcemi, což lze použít v krajním případě pro pacienta, postiženého akutní hypertenzí nebo myokardiální áschemií, nebo v případě pacienta, u kterého se jeví nutnost kardioprotekce nebo antilipolytické therapie. Po takovém zásahu může následovat intravenozní infuze aktivní sloučeniny a množství látky, použité takto pro infuzi pacientovi by melo být účinné k dosažení očekávané therapeutické odezvy.

Claims (16)

1. PATENTOVÍ' N X R O K Y

   1, Sloučenina obecného vzorce I kde

   K znamená dusík, N—tÉO, nebo skupinu CH,

   Q znamená methylenovou skupinu nebo kyslík,

   R^ znamená vodík, skupinu alkylovou, allylovou, 2-giethylallylovou 2-butenylovou nebo cykloalkylovou 8 X znamená skupinu kde dusíkový atom kruhu X může být substituován Y,

   E znamená kyslík nebo síru,

   Y znamená vodík, skupinu gtlkeloyou, aralkylovou, případně substituovanou, arylovou, případně substituovanou, heterocy^lylovou, případně substituovanou, heterocyklylelkylovou, případně substituovanou, nap znamenají vzájemně nezávisle nulu, 1, 2 nebo 3 za předpokladu, že součet n + p činí nejméně 1 T znamená vodík, skupinu alkylovou, acylovou, thioacylovou, halogen, karboxylovou, Q R, S neb R^O-CÍL·, >í S„8 ³

   V V

   • . ·· i *· v« ·'> · · · · i ··· «i * * 'i ··· ·»· • · ·' ♦ « * v fc· «' ♦ · · · ««« * · *·

   -76^R-j_, R₂ a R3 znamenají vzájemně nezávisle vodík, skupinu alkylovou nebo cykloalkylovou,

   A znamená vodík, skupinu alkylovou, hydroxyalkylovou, alkoxyalkylovou nebo OR*,

   B znamená vodík, skuoinu alkylovou, hydroxyalkylovou nebo 0R^z,^z R^z a R^zz znamenají vzájemně nezávisle vodík, skupinu alkylovou, aralkylovou, karbamoylovou, alkylkarbamoylovou, dialkylkarbamoylovou, acylovou, alkoxykarbonylovou, aralkoxykarbonylovou, aryloxykarbonylovou, nebo, pokud A a B znamenají 0R^z nebo 0R^zz v tom kterém případě, mohou H* a R*^z spolu dohromady tvořit skupinu x/ x/

   G ii

   Ξ kde R_c znamená vodík nebo alkylovou skupinu ^Rd ^RE kde R^ a Εθ znamenají vzájemně nezávisle vodík, skupinu alkylovou nebo spolu s-uhlíkovým atomem, na kterém jsou vázány, tvoří 1,1-cykloalkylovou skupinu nebo odpovídající, farmaceuticky vhodná sůl_o
2. 2„ Sloučenina podle nároku 1, kde

   K znamená dusík,

   T znamená skupinu hydroxymethylovou nebo methoxymethylovou, A a B znamenají po hydroxylové skupině známena kr-N

   9 n + p Činí součtem 3 nebo 4* nebo odpovídající farmaceuticky vhodná sůl.

   ΠΊ9 99 *«

   4 9 9 4 '4 *

   4' 4 4 4 ·

   4 4*4 * · · 4 4. ♦ ·· »» ·· «4 4

   99 44

   4 4 « ·

   4 4 4 4 * 44« ··»

   9 ·

   4* 4·
3. 3. Sloučenina podle nároku 2, to-tia(2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-t6- [l-(5-chlorpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-yl^-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2£,3S,4R,5R)-2-hydroxymethyl-5-Í6-[l-(5-trifluormethylpyridin-2~yl)-pyrrolidin-3(R)-ylamino)-purin-9-yí\-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5- [6-jl-(5-trifluormethylpyridin 2-yi)-pyrrolidin-3(S)-ylamino] -purin-9-yl^-tetrahydrofuran3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2_Jhydroxymethyl-5-[6-{l-(4-trifluormethylpyridin

   2-yl)-pyrroltdin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-yl^-tetrahydrofuran3,4-diol,

   2 R, 3R, 4 S, 5 R)-2 - hy d r o xy me t hy 1-5 - [0 ~ [l (5 - br ompy r id i o~2-y 1)pyrrolidin-3(S')-y lamino^ -purin-9-yíy~tetrahydrofuran-3,4-diol,

   -78..· 4 4 ** * 4 '4 · 4 *
4. 4 · 4 · ♦ * · 4*44* 4

   9.. 4 4 4 *44' »4 ·4

   4 44 *4

   44 4 4 « 4

   4 4 4 « 4 • 4 4*4 ·«·

   4 4 4

   44 4 4 4 - 44 (2R ,3R, ZfS, 5R) -2^hy dr oxyme thy 1-5-^6-^1-( 4- nitrofe nyl) -pyrrolidin-3 (S )-ylamino) -pur ifc-9-ylJ - te trahy drof uran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2~&ydroxymethyl-5-[6- (5 '-trifluorraethyl3,4,5,6-te trahydro-2H-^l,2 ^-bipyridinyl-3-yl )-pur.in-9-yl) tatrahydrofuran-3,4-diol, · (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5- l6-(fenylpyrrolidin-3(S)ylamino)-purin-9-yl)-tetrahydrofuran-3,4,diol, (2R,3R^.4S,5R)-2Thydroxymethyl-5- [6-(l-pyridin-2-ylpyrrolidin-3 (S)-ylamino^ -purin-9-ylJ-te trahy drof uran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-^-[l-(4-chlorfenyl)-pyrrolid i n-3 (S)-y lamino) -purin-9-yl}-tetrahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-[č-[l-(5-niethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3 (S)-y lamino)-purin-9-y ll-tetrahydrofuran-3,4-diol, (23,3R_s4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-L6-U-(5-thiofen-2-ylpyridin-2yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-ylJ-tetrahydrofuran-3,4-diol,_I.;

   (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-)6-[l-(5-niethylmerkaptopyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino^-purin-9-ylj-tetrahydrofuran-3^4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-|6- fí-C6-methoxypyrimidin-4yl)-pyrrolidin-3 (S )-ylamino)-purin-9-yl]-tetrahydrofuran-3,4rdiol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxyniethyl-5-Í6-[l--(6-chl^orpyrimidin-4-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl\-te trahydrofuran-3,4-diol, (2R,3R,4S,5R)-2-hydroxymethyl-5-U-[í-(6-chlorpyridazin-3-yl)pyrrolidin-3-ylamÍnoJ-purin-9-yly-te trahy drof uran-3,4-diol, (2R, 3R, 4S,5.R)-2-methoxymethyl-5-^ý - [l-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino^-purin-9-ylj-tetrahydrofuran-3,4-diol, , ~ (lS,2R,3R,5R)-3Thydroxymethyl-5-ι 6-|_l-(4-nitrofenyl)-piperidin4-yl^purin-9-yll-syklopentan-l,2-diol, (lS,2R,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-^6-[(3S)-pyrrolidin-3-ylaminojpurin-9-yl^-cyklopentan-l,2-diol, jako dihydrochlorid, (lS,2R,3R,'5R)-3-hydroxymethyl-5-j6-(jL-(4-nitrofenyl)-pýrrolidin-3-ylamino^-purin-9-ylj -cyklopentan-l,2-diol, (lS,2R,3R,5R)-3-hydroxymethy 1-5-)6- jl-(5-trifluormethylpyridin-2-yl) -pyrrolidin-3 (R)-ylaminoT-purin-9-yl?-cyklopentan-l,2diol, «« • · • φ

   -79(lS,2R,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-|6-£(3R)-pyxrolidin-3-ylamino]purin-9-ylJ-cyklopentan-l,2-aiol, (lR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-^-Ll-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidíti-3(S)-y laminoj-purin-S-yll-cyklopěntan1.2- diol, _ ⁼ J (lR,2S,3R,5R)-5-jč-ll-(5-brompyridÍn-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoj-purin-9-ylJ -3-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol,. (lR,2S,3R,5R)-5“^6-lj-(5-chlorpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino2-purin-9-^kylj-3-hydroxymethylcyklope ntan-1,2_Tdiol, (IR, 2S, 3R, 5R )-3*-hy droxymethy 1-5- {6-£l-(4-trifluormethy lpyridin2-ylj-pyrrolidin-3(S)-ylamino^-purin-9-yl -cyklopěntan-1,2-diol, (IR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethy1-5-ý>-/l-(pyridin~2-yi)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoj-purin-9-ylj-cyklopentan-l,2-aiol, (lR,2S,3R,5R)-3~hydroxymethyl-5-£6- /l-(chinolin-3-yl)-pyrrolidin-3 (S)-ylaminoJ -purin-9-ylj -cyklopěntan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-Í6-/_l-S-(4-nitrofenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-yiy~cyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5“[6- fi.-(4,5-bistrifluorpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-yl-aminoj-purin-9-ylí-3-hydroxyme thykcyklope ntan1.2- diol^ (lR,2S,3R,5R)-3-methoxymethyl~5-|6-fÍ-C5“trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin~3(S)-ylamino]-purin-9-ylj-cyklopentan-1,2-diol (IR,2S,3R,5Rú-3-hvdroxymethy1-5-{6-£l-(fenyl)-pyrrolidin-3(S)-yl aminoJ-purin-9-yl)-cyklopentan-l,2-diol,

   4-^3(S)-1^-(2,3-dihydroxy-4-hydroxymethylcyklopěntyl)-9H-purin-6-ylaminoVpyrrolidin-l~yl\ -bensonitril, (IR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethy1-5-[δ-£l-(isochinolin-l-yl)~pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ -purin-9-ylJ-cyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-j6- [j.-(6-bromchinolin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoj-purin-9-y^-3-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, (IR,2S,3R,5R)-5-*p-Q-(4-chlorfenyl)-pyrr olidin-3 (SJ-ylaminoJpurin-9-yij-3-hydroxymethylcyklopěntan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-|6-Q-(3-chlor-5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylamino1-purin-9-yl?-3-methox^m9thylcyklopentan-l,2«diol, /

   4 94 44 44 44 4 4 4 4 * 4 '4 4 4 4 4 4 4 >44 4 4 4 4 4 *44 444 4 4 4 4 4 4 94« 4« 44 *44 44 4 4

   -80(lR,2S,3R,5R)-5-^6-[l-(6-chlorpyrimidin-4-yl)-pyrrolidin-3(S)y lamino] -purin-9-yl]-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, (IR,2S,3R,5R)-5-^ 6-[l-(6-chlorpyrimidin-4-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino] -purin-9-ylt -3-hydroxymethylcyklopentan-l,2_Tdiol, (lR,2S,3R,5R)-5-j6-Jl-(6-chlorpyrimidin-4-yl)-pyrrolidin-3 (S)y lamino]-purin-9-yU-3-me thoxyme thylcy klope.ntan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-^6-Jl-(6-chlorpyridazin-3-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-purin-9-ylf-3-hyóroxymethylcy klopě ntan-l,2-ó.iol, (1R,2S,3R,5R)-3-methoxymethyl-5- ^6-[í-(6~iiiethoxypyrimidin-4-yl) pyrrolidin-3 (S)-ylamino] -purin-9-ylj -cyklopentan-l,2-diol, (lR_>2S_>3R,5R)-5-|6-[Í-(6-chlorpyridaZin-3-yl)“pyrrolidin-3(S)ylamino)-purin-9-yl(-3-methoxymethylcyklopěntan-1,2-diol, (IR,2S,3R,5R)-5-^6-(1-(4-trifluormethylfenyl)-pyrrolidin-3 (S)ylamino]-purin-9-yl V-3-hydroxyme thylcy klopě ntan-l,2-diol, (IR,2S,3R, 5R)-5-^č-[l-(5-brompyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)~ ylamino]-purin-9-ylj-3-methoxymethylcyklopěntan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-|ó-[l-(5-chlorpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)y lamino] <rpurin-9~yl^ -3*me thoxyme thylcy klopě nta n-1,2-d iol, (IR,2S,3R,5R)-3-me thoxyme thy1-5- jj>-jl-(4-trifluorme thylfe ny1)pyrrolidin-3(S)-y lamino]-purin-9-ylý-cyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-Í6-Íl-(4-chlorfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino] -purin-9_y1^-3-methoxymethylcyklopěntan-1,2-diol, (1R,2S,3R,5R)-5-j6-LL-C3_chlorfenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminojpurin-9-ylj -3-me thoxyme thylcy klopěnta'n-1,2-diol, (IR, 2S,3R,5R)-5-^6-H-(3-chlorfenyl)-pyrroliain-3(S)-ylaminoJpurin-9-ylJ-3-hydroxymethylcyklopentan-1,2-diol, (IR, 2S,3R,5R)-3-me thoxyme thyl-5-]6-j_l~(fenylpyrrolidin-3 (S)-ylamino]-purin-9-ylj-cyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-[6-(l-benzylpyrrolidin-3(S)-ylamino)-purin-r9~ yl]-cyklopentan~l,2-diol, (13,2S,3R,5R)_3-j6-(l-benzylpyrrolidin-3(S)-ylamino)-purin-9yl]-5-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, nebo (lR,2S,3R,5R)-3-]6-Cl-benzylpyrrolidin-3(S)-yiamino)-pBirin-9yl3-5-methoxymethylcyklopěntan-1,2-diol, nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl.

   ·· . ·· ♦Ί ·. a »· · · ·

   -814„ Sloučenina podle nároku 1, kde

   Q znamená methylenovou skupinu,

   K znamená dusík,

   T znamená seskupení R-, „ ¹ h-C

   V kde R^ znamená vodík a R₂ nižší alkylovou.skupinu, A a B znamenají hydroxylové skupiny,

   X je seskupení vzorce (

   a součet n + p je 3 nebo 4 a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
5. 5. Sloučenina podle nároku 4, totiž ethylamid (lS,2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4“^6-jl-(5-trifluormethylpyridin2-yl)-pyrrolidin-3-ylamino2“Purin-9-yl^- cyklopentankarboxylove kyseliny, (S)-sek.butylamid kyseliny (lS,2R,33,4R)-2,3-dihydroxy-4-^6-[í-(5trifluormethylpyridin-2-yl -pyrrolidin-3-ylamino^-purin-9-ylřcyklopentankarboxylové, a .

   (R)-sek-butylamid kyseliny (lS.2R,3S,4R)-2,3-dihydroxy-4-^6- [Í-C5trifluorinethylpyrídin-2-yl)-pyrrolidin-3-ylamInoj-purrn-9cyklopěnt_snkarboxylove nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
6. 6o Sloučenina podle nároku 1, kde Q znamená methylenovou skupinu,

   K znamená dusík,

   T znamená hydroxymethylovou nebo methoxymethylovou skupinu A a B znamenají hydroxylové skupiny X znamená seskupení yij- a součet n + p Činí 3 nebo 4, '

   Či jejich farmaceuticky přijatelné soli.

   -82·· · ··· ·« »·· · ♦ ·· *· • ·· · · · · ♦ · « · » • * · ··· ··· * · · · · «· ··« ·· ··

   Sloučenina podle nároku 6, totiž (1S,2R,3R,5R)-3-hydroxymethy1-5-(6-fl-(4-hitrofenyl)-piperidin-4-yl]-purin-9—y 1^-cy klopě ntan~l,2-diol, d ihy drochlorid (1S,2 R,3R,5R)-3-hy droxyme thy 1-5 - (δ- í(3 S )py r r o lid i n-3 -y 1 ami no} -pui i n- 9-y 1J- cy klopě n t a η-1,2 - d io lu. (lS,2R,3R,5R)-3_hydroxymethyl-5- [6- (l-(4-nitrofenyl)-pyrrolÍdin-3-ylamíno^-purin-9-ylj-cyklopentan-1,2-diol, (lS,2R,3R»5R)-3-hydroxymethyl-5-[6-[x-(5-trifluormethylpyridin-2-yl)-pyrjjolidin-3(R)Uy$aminoÍ-purin-9-yl|- cyklopentan1,2-diol, (1S,2S,3R,5R)-3-hydr oxyme thy 1-5-^6-[(3R)-pyrr olidin-3-y laminojpurin-9-yl|-cyklopentan-1,2-diol, (IR,23,3R,5R)-3hydroxymethyl-5-^6-[l-(5-trifluormethylpyridin2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-y]J -cyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)“5-|6-[í-(5~brompyridin-2_yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl^-3-hydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, (!R,2S,3R,5R)-5-j6-lj.-(5-chlorpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3 (S)ylaminoj-purin-9-ylj -3-hy droxyme thylcy klopě ntan-l,2-diol, (IR,23,3R,5R)-3-hydroxymethy1-5-^6-íl-(4-trifluormethylpyridin2-ýl)-pyrrolidin~3(S)-ylamino]-purin-9-ylf -cy klopentan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R4-3-hydroxymethyl-5-{6-/j-(pyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yl^-cyklopěntan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-[ý-íl-(chinolin-3-yl)-p^rrolidin-3(S)-ylamino]-purin-9-yll -cyklopentan-l,2-diol, (IR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethy1-5-Jl-3-(4-nitrofenyl)-pyrrolidin-3(S)-ylaminoj -purin-9-ylJ -cy klopentan-1,2-diol, (IR,2S,3R,5R)-5-76-(1-(^,5-bistrifluorpyridinv2-yl)-pyrrolidin3(S)-ylamino]-purin-9-yl)-3-hydroxymethylcyklopentan-1,2-diol, ClR,2S,3R,5R)-3-methoxymethyl-5- |δ-Ζΐ-(5. trifluormethylpyridin2-yl)-pyrrolidin~3(S)-ylamino[-purin-9-y]) -cyklopentan,1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-hydro:cymethyl-5-^6-t.l-(fenyl)-pyrrolidin~3 (S)-yl amino]-purin-9-yl}-cy klopě ntan-l,2-óiol,

   4-j3(S)-j_9-(2,3-dihydr°xy-4-hy droxyme thylcy klopentyl)-9H-pur in6-ylamino]-pyrrolidin-l-yl^-benzonitril, (IR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethy1-5-Jý-(l-(isochinolin-l-yl)-pyrrolidin-3 (S)-ylamino]-purin-9-yl í'-cyklopentan-l,2-diol,

   • ·· ·· « · • · • • « «· ·· • · · · ♦ « • ··♦ · • • * »· • · • • • « « ··· *fl • · • · · *« ♦ ·

   -83(lR,2S,3R,5R)-5-[ý- H-(6-bromchinolin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]-pw?in-S-y ij¹ -3-hydroxy,ethylcyklopěntan-1,2-diol,

   IR, 2S,3R, 5R)-5-jó-fl-U-chlor fenyl)-pyrrolidin-3(S )-y lamino}purin-9- yi}· -Xrhydrox_vmethylcyklopentan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3- Jž- £-(3-chlor-5-trifluormethylpyridin-2-yl)pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-ylj-3-methoxyme'thylcyklopenta

   1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-|6-[í-(6-chlorpyrimidin,4-yl)-pyr.rolidin-3 (S)y lamino]-purin-9-yl^3-»hydr oxyme thylcy klopě ntan-1,2Adiol, (lR,2S,3R,5R)-5-|6-jjL-(6-chlorpyrimidin-4-yl)-pyrrolidin-3(S)y lamino]-purin-9-ylj-3-hydroxyme thylcy klopě ntan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-j6-[l-(č-chlorpyrimidin-4-yl)-pyrrolidin-3(3)ylaraino]-purin-97ylj -3-methoxymethylcyklopěntan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-^6-£l-(6-chlorpyrida2in-3-yl)-pyrrolidin-3(S)ylamino]purin-9-ylj-3-hydroxymethylcyklepentan-1,2-diol, (lR,2S,3R,RR)-3-methoxymethyl-5- ^6-£l-r(6methoxypyrimidin.-4-yl) pyriOlidin-3(S)-ylamino]-purin-9_yiy -cyklopentan_l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5- j6-ll-(6-chlorpyridazin-3-yl)-pyrrólidin-3(S)yijfemino]-půrin-9-ylT-3-»methoxyme thylcy klopě ntan-1,2-diol, (lR,3S,3R,5R)-5-[č- [í-C4-trifluori£ethylfenyl)-pyrrolidin3 (S)-ylaminoJ -purin-9-yy· -3-hydroxymethylcyklopentsn-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-jé-íl-(5-brompyridin-2-yl)-pyriOlidin-3(S)-ylamino]-purin-9-y 1λ-3-methoxyme thylcy klopentan*·!, 2-diol, (1R,2S,3R,5R) -5-^6-/1-( 5-chlor pyr idin-2 -yl)-py rrolidin-3 (S )— ylamino]-puřin-9-ylf-3-methpxymethylcyklopěntan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-3-methoxymethyl-5-£6-(l-(4-Érifluormethylfenyl)pyrrolidin-3(S)-ylaminoJ-purin-9-yl^-cyklopentan-l,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-£6-/]-(4-chlorfenyl)-pyrrolidin-3 (S)-ylamino] -purirt“9-yl]^>-3-meJhoxyme thylcy klopě ntan-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-|6-/l-(3-chlorfenyl)-pyrrolÍdin-3(S)aminoJpurin-9-ylj -3-methoxymethylcyklopěntaft-1,2-diol, (lR,2S,3R,5R)-5-^-/í-(3-chlorfenyl)-pyrrólidin-3(S)-ylamino]purin-9-ylj-3-hydroxymethylcyklopěntan-1,2-diol, (l3,2S,3R,5R)-3-methoxymethyl-5-/6-(l-í^,enylpyrrolidin-3(S)ylamino)-purin-9-yjJ -cyklopentan-1,2-diol,

   • ·· 4 4·* 44 4 · 4 *4 44 44 4 4 4 4 T * 444 4 4 4 4 4 444 *44 4 4 444 44 4 · 4 4 4 44« • 4 • 4 4 4

   -84(lR,2S,3R»5R)-3- |6-(l-benzylpyrrolidin-3(S)-ylamino)Tpurin-9-yí] -5'rhydroxymethylcyklopentan-l,2-diol, nebo (lR,2S,3R,5R)-3-fč-(l-benzylpyrrolidin-3(S)-ylamino)-purin-9-yl )5-me tho^ymethy loy klopě ntan-l,2-diol, nebo farmaceuticky přijatelná odpovídající sůl.
7. 8. Sloučenina podle nároku 6, totiž (lR,2S,3R,5R)-3-hydroxymethyl-5-Í6-£l-(5-trifluBrmethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino}-purin-
8. 9~ylj-cyklopentan1,2-diol, nebo (lR,2Sm3R,5PO-3.hydroxymethyl-5-|6-£í-(4-ti‘.ifluormethylpyridin2-yl)-pyrrolidin-3(3)-ylamino]-purin-9-yl^-cyklopěntsn-l,2-diol či jejich farmaceuticky přijatelná sůl.

   5. Sloučenina podle nároku 6, totiž (1R,2S,3R,5R)-3~methoxymethy1-5-|δ-£l-(5-trifluormethylpyrία in-2 -y 1) -py r r o 1 id i n-3 (S) -y laminoj - pur i n-9-y ljj -cy klo pe n t a n1,2-diol nebo (IR,2S,3R,5R)-3-methoxymethy1-5- jo-(l-(4-1rif1uormethylpyridin-2-yl)-pyrrolidin-3(S)-ylamino]purin-9-ylj-cyklopěntan-l,2-diol> neeo odpovídající farmaceuticky přijatelná sul.
9. 10.

   Sloučenina vzorce

   H₂I1

   -O- kde Z znamená skupinu 4-trifluormethylpyridin-2-ylovou nebo

   5-trifluormethylpyrldin-2-ylovou.
10. 11. Sloučenina podle nároku 10, totiž 2-{(3S)-3-aminopyrrolidin-l-yJ-5-trifluorme¹thylpyridin nebo 2-((3S)-3-aminopyrrolidin-l-ylJ-4-trifluormethylpyridin.
11. 12. Kompozice pro léčení kardiovaskulárních onemocnění charakterizovaných hypertenzí nebo myokardiálni ischemii s tím, že uvedená kompozice obsahuje, antihypertenzně účinné množství nebo antiischemický účinné množství sloučeniny podle nároku 1 a farmaceuticky vhodný nosič.

    V.4

    • ·· ·· v * « 4 « 4 4 4 4 4 4 4 • 4 · 4 4 4 *4 4 4 4 4 4 4 4 *· ·* ·· 444 44

    a v
12. 13. Kompozice pro zlepšení iscfcemických nesnází nebo zredukování velikosti myokardíálního infarktu v důsledku myokardiální ischemie, obsahující kardioprotektivní množství sloučeniny podle nároku 1 a farmaceuticky přijatelný nosič.
13. 14. Kompozice pro redukci hladiny lipidů,triglyceridů nebo cholesterolu savce, obsahující antilipolytioká-množství sloučeniny podle nároku 1 a farmaceuticky vhodný nosič.
14. 15. Způsob léčení pacientů trpísích hypertenzí, záležející v podávání pacientovi množství účinně snižující krevní tlak sloučeniny podle nároku 1.
15. 16. Způsob léčení pacienta trpícího myokardiální ischemií, záležející v podávání pacientovi účinné množství antiischemického činidla ve formě sloučeniny podle nároku 1.
16. 17. Způsob léčení pacienta postiženého hyperlipidemií nebo hypercholesterolemií, záležející v tom, že se pacientovi podává antilipolyticky účinné množství sloučeniny podle nároku 1.