KR101796779B1 - 다이하이드로프테리딘-온 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 pi3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 - Google Patents

다이하이드로프테리딘-온 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 pi3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 다이하이드로프테리딘-온 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 PI3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 다이하이드로프테리딘-온 유도체는 PI3 키나아제에 대하여 선택적으로 억제하는 효과가 우수하므로 혈액암, 난소암, 자궁경부암, 유방암, 대장암, 간암, 위암, 췌장암, 결장암, 복막 전이암, 피부암, 방광암, 전립선암, 폐암, 골육종, 섬유성 종양, 뇌종양 등과 같은 암, 류머티스성 관절염, 전신 홍반성 루푸스, 다발성 경화증, 제1형 당뇨병, 갑상선 기능 항진증, 근무력증, 크론병, 강직성 척추염, 건선, 자가면역성 악성빈혈, 쇼그렌 증후군 등과 같은 자가면역 질환, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 비염, 천식, 만성 기관지염, 만성 폐 염증성 질환, 규폐증, 폐형 사르코이드증, 흉막염, 폐포염, 혈관염, 기종, 폐렴, 기관지 확장증 등과 같은 호흡기 질환 등의 PI3 키나아제 관련 질환을 예방 또는 치료하는데 유용하게 사용할 수 있다.

Description

다이하이드로프테리딘-온 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 PI3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물{Dihydropteridin-one derivatives or pharmaceutically acceptable salts thereof, preparation method thereof and pharmaceutical composition for use in preventing or treating PI3 kinase related diseases}
본 발명은 다이하이드로프테리딘-온 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 PI3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
진핵세포의 세포막은 유동 모자이크 모델(fluid mosaic model)에서 제안된 것처럼 균일하지 않고, 떠다니거나(float) 정착하여(anchored) 특정 단위(specialized compartment)를 이루고 있으며, 이를 지질 뗏목 (lipid raft)이라고 부르기도 한다. 이 지질 뗏목은 세포막에서 콜레스테롤이 풍부한 부분으로서 계면활성제(detergent)에 의해 막이 용해되는 것을 막아준다. 어떤 단백질들은 소수성 막중간 폴리펩타이드 부착(hydrophobic transmembrane anchor)보다는 막에 지질 부착(lipid attachment)을 한다. 포스파티딜이노시톨(Phosphatidyl Inositol)은 세포막의 지질 뗏목에서 발견되는 세포 내 단백질로서, 지방산 또는 프레닐 연결 (prenyl link)에 의해 세포막에 부착한다. 지질 뗏목은 매우 역동적이어서, 단백질들을 응집시켜 강한 활성을 나타나게 한다.
키나아제에 의한 단백질의 인산화는 세포가 생리활성을 조절하는 중요한 수단이다. 많은 효소(enzyme)들이 키나아제에 의한 인산화에 의해 그 활성이 조절된다. 그러나, 키나아제에 의한 인산화의 또 다른 중요한 조절은 다른 단백질들의 결합부위를 제공한다는 것이다. 다른 단백질들의 결합부위를 제공하는 것은 인산화된 단백질의 내재적 특성은 변화시키지 않으면서, 단지 다른 단백질들을 불러 모아 인산화된 부위에 결합하게 하는 것이다. 신호전달에 관여하는 많은 인산화 효소들은 세포막의 세포 내 표면(intracellular surface)의 지질 뗏목부위에 있다. 세포 표면 수용체(cell surface receptor)가 활성화되어 막 연계 단백질들(membrane-associated protein)이 인산화되면, 이 인산화된 부위가 홀로 떠다니는 타겟 단백질들의 결합부위가 된다. 타겟 단백질들이 세포질 내에서 결합되지 않은 상태로 홀로 있을 때는 활성을 나타내지 않으나, 결합부위에 모이게 되면 농도가 높아져 인산화되고 활성화된다.
포스파티딜이노시톨 3-키나아제(PI3 kinase; PI3K)는 단백질 대신 지질 분자를 인산화하는 지질 키나아제(lipid kinase)이며, 세포생존(cell survival), 신호전달(signal transduction), 세포막 투과조절(control of membrane trafficking)등에서 중요한 역할을 한다. 이들 조절에 문제가 생기면, 암, 염증성 질환, 자가면역 질환 등이 발생한다.
3'-포스포릴화 포스포이노시티드를 통한 세포 신호전달은 다양한 세포 과정, 예를 들어 악성 세포전환, 성장 인자 신호전달, 염증 및 면역성과 관련된다. 이들 포스포릴화 신호전달 생성물을 생성하는 역할을 하는 효소인 PI3 키나아제는 본래, 이노시톨 고리의 3'-OH에서 포스파티딜이노시톨(PI) 및 그의 포스포릴화 유도체를 인산화시키는 바이러스성 종양단백질 및 성장 인자 수용체 티로신 키나아제와 연관된 활성으로 확인되었다.
PI3 키나아제 활성화의 1차 생성물인 포스파티딜이노시톨-3,4,5-트리포스페이트(PIP3)의 양은 다양한 자극으로 세포를 처리할 때 증가한다. 여기에는 대부분의 성장 인자 및 다수의 염증성 자극, 호르몬, 신경전달물질 및 항원에 대한 수용체를 통한 신호전달이 포함되고, 따라서 PI3 키나아제의 활성화는 가장 우세한 것은 아닐지라도 포유류의 세포 표면 수용체 활성화와 연관된 신호전달 중 하나를 나타낸다. 그러므로, PI3 키나아제 활성화는 세포 성장, 이동, 분화 및 세포자멸사를 비롯한 광범위한 세포 반응에 관여한다.
PI3 키나아제는 포스파티딜이노시톨의 이노시톨 링부분(inositol ring moiety)의 3번 위치(3-OH)를 ATP(adenosine triphosphate, 아데노신 트리포스페이트)를 이용하여 인산화시키는 효소이다. 구체적으로, PI3 키나아제는 포스파티딜 이노시타이드의 이노시톨 고리의 3'-OH 위치를 인산화하여 PIP2를 PIP3로 인산화 시키고, 이 PIP3가 플렉스트린 상동성(pleckstrin homology)을 포함하는 프로테인 키나아제(protein kinase)들의 부착부위로서 기능을 한다. 이들 프로테인 키나아제들이 차례로 중요한 세포기능을 조절하게 된다. PIP3 결합 프로테인 키나아제들 중 가장 중요한 것이 세린/트레오닌 키나아제인 AKT 또는 PKB(protein kinase B)이며, 이들은 다운스트림의 mTOR, GSK3β, Foxo 3a, p70S6K및 NF-κB를 통하여 세포의 성장, 생존, 분열등을 조절한다.
PI3 키나아제의 초기 정제 및 분자 클로닝을 통해 PI3 키나아제가 p85 및 p110 서브유닛으로 이루어진 이형이량체임을 알아냈다. 서열 상동성 및 기질 특이성을 기준으로 클래스 I이 있고, 클래스 I은 클래스 1A와 클래스 IB로 분류된다.
클래스 1A에는 PI3Kα, PI3Kβ, PI3Kδ가 있고, 클래스 1A는 수용체 타이로신 키나아제(RTK, receptor tyrosine kinase)의 다운스트림이다. 클래스 IB에는 PI3Kγ가 있고, G 프로테인 결합 수용체(G protein coupled receptor)의 다운스트림이다. 각각은 별개의 110 kDa 촉매 서브유닛 및 조절 서브유닛으로 이루어져 있다.
보다 구체적으로, 3개의 촉매 서브유닛, 즉 p110α, p110β 및 p110δ는 ATP 결합 도메인(ATP binding domain)을 포함하고, 각각 동일한 조절 서브유닛 p85와 상호작용하며, 수용체 티로신 키나아제에 의해 활성화되는 반면, PI3Kγ는 p110γ는 다른 조절 서브유닛 p101과 상호작용하며, 헤테로삼량체성 G-단백질에 의해 활성화된다. 조절 도메인은 세포 표면 수용체에 부착(anchoring)하게 하는 도메인을 포함한다.
ATP 결합이 억제되면, PIP2의 인산화가 억제되고, PIP3는 생성되지 않는다. 그러면 AKT와 같은 중요한 조절 단백질이 세포막에 부착(anchoring)하지 못하게 되어 기능을 하지 못하게 된다. 따라서, 이 촉매 서브유닛 및 이의 ATP 결합 부위를 억제하는 것이 약물개발의 주요 타겟 중 하나이다.
이하에 기재하는 바와 같이, 인간세포 및 조직에서의 이들 PI3K 각각의 발현 패턴 또한 전혀 상이하다. PI3Kα 및 PI3Kβ는 광범위한 조직 분포를 갖는 반면, PI3Kγ는 주로 백혈구에서 발현되나, 근육(skeleton muscle), 간, 췌장(panceas) 및 심장에서도 발견된다. PI3Kδ는 이자(spleen), 흉선(thymus) 및 말초혈액백혈구(peripheral blood lymphocyte)에서만 발현되고 있다. 이런 발현 패턴으로 보아 PI3Kα 및 PI3Kβ는 암과 상관관계가 크고, PI3Kγ와 PI3Kδ는 류마티스성 관절염(rheumatoid arthritis, RA), 루푸스(systemic lupus erythematosus, SLE) 및 혈액암(hematological malignance)와 같은 적응면역시스템(adaptive immune system)과 상관성이 크다.
구체적으로, p110α의 돌연변이가 몇몇 고형 종양에서 확인되었다. 예를 들어, 알파의 증폭 돌연변이는 난소암, 자궁경부암, 폐암 및 유방암의 50％와 연관이 있고, 활성화 돌연변이는 장암의 50％ 이상 및 유방암의 25％ 이상에서 연관이 있었다. p110β는 혈전 형성에 관여하고, p110γ에 관련된 화합물은 자가면역성 질환에 대한 면역억제제로서 개발되고 있으며, 상기 자가면역성 질환에는 류마티스성 관절염 또는 전신성 홍반성 루푸스 등이 있다.
또한, p110δ를 사용하여 B 및 T 세포 활성화에서 핵심적인 역할을 수행할 수 있으며, 나아가, δ가 또한 호중구 이동 및 준비된 호중구 호흡 급증에도 부분적으로 관여하며, 항원-IgE 매개 비만 세포 탈과립화의 부분적 차단도 유발함을 밝혀냈으므로, p110δ는 자가면역성 질환 및 알레르기를 포함하지만 이들로 한정되지는 않는 비정상적인 염증성 질병에 관여하는 것으로도 공지된 다수의 핵심적인 염증성 반응의 중요한 매개체로 부상하고 있다. 이러한 개념을 뒷받침하는 것으로서, 유전학적 도구 및 약리학적 작용제 둘 다를 사용한 연구로부터 얻어낸 p110δ 표적 평가용 데이터가 점차로 증가하고 있다. 또한, 델타의 억제는, 난백 알부민 유도성 기도 염증을 사용한 뮤린 천식 모델에서 염증 및 질환을 유의하게 개선시키는 것으로 나타났다. PI3Kδ의 단일클론 항체인 리툭시맵(Rituxlmab) 및 벨리브맵(Belimumab)이 RA 및 SLE에 각각 효과가 크다.
또한, 최근 PI3K가 폐 및 귀의 감염에 관여함이 밝혀졌다. 아직 기전이 다 밝혀진 것은 아니지만, 과발현된 p110δ-AKT-mTOR 경로가 호기성 글리코시스를 항진시키고, 림포사이트의 기능 및 생존을 저하시켜 면역 반응을 저하시킨다.
만성염증은 자가면역질환에서만 독특한 것은 아니지만 만성 폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)에서 PI3Kδ 및 인산화-AKT의 수준이 높아진 것을 발견하였다. 이는 PI3Kδ 및 인산화-AKT의 고수준 발현은 면역 질환 뿐만 아니라 염증과도 관련이 깊다는 것을 의미한다.
이에따라, PI3Kδ의 억제는 류마티스성 관절염(rheumatoid arthritis, RA), 루푸스(systemic lupus erythematosus, SLE)와 같은 자가면역질환 치료에 쓰일 뿐만 아니라 만성 폐쇄성 폐질환(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)과 같은 만성 비 자가면역질환의 치료에도 사용될 수 있다는 것을 의미한다.
최근 PI3 키나아제에 대하여 선택적으로 억제하는 효과를 나타낼 수 있는 신규한 구조의 화합물을 개발하는 연구결과가 보고되고 있으며, 구체적으로, 특허문헌 1에는 PI3K 효소 억제 활성을 보유하고 암치료에 유용한 화합물을 개시하고 있고, 특허문헌 2에는 4-모르폴리노-치환된 이환식 헤테로아릴 화합물이 PI3K 활성 억제 효과가 있음을 기재하고 있다.
이에, 본 발명자들은 신규한 구조를 가지면서 PI3 키나아제를 선택적으로 억제하는것에 우수한 효과를 나타내는 화합물을 개발하기 위해 노력하던 중, 특정 구조의 다이하이드로프테리딘-온 유도체가 PI3K α, β, δ 및 γ에 대하여 선택적으로 억제하는 효과를 보이며, 특히, PI3K δ 및 γ에 대하여 억제하는 효과가 우수한 것을 확인함으로써, PI3 키나아제 관련 질환의 예방 및 치료용 약학적 조성물로 사용될 수 있다는 것을 알아내고 본 발명을 완성하였다.
국제공개특허 WO 2004/048365호 유럽특허 1, 277, 738호
본 발명의 목적은 다이하이드로프테리딘-온 유도체, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 다이하이드로프테리딘-온 유도체, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염의 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 다이하이드로프테리딘-온 유도체, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 PI3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 다이하이드로프테리딘-온 유도체, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 PI3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.
하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 1]
Figure 112015125659615-pat00001
상기 화학식 1에서,
A는 -C(RaRb)- 또는 -CH2CH2-이고, 여기서, Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고, Ra 및 Rb는 이들이 각각 결합한 원자들과 함께 연결되어 3 내지 5 원자의 사이클로알킬을 형성할 수 있고;
D는 탄소 또는 질소이고;
R1는 수소, -NH2 또는 트리할로메틸이고;
R2는 수소 또는 C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고;
R3 및 R4는 각각 독립적으로 수소, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고;
R3 및 R4는 이들이 각각 결합한 원자들과 함께 연결되어 N의 헤테로원자를 하나 이상 포함하는 5 내지 7 원자의 비치환된 헤테로사이클로알킬을 형성할 수 있고; 및
R5는
Figure 112015125659615-pat00002
,
Figure 112015125659615-pat00003
,
Figure 112015125659615-pat00004
,
Figure 112015125659615-pat00005
,
Figure 112015125659615-pat00006
또는
Figure 112015125659615-pat00007
이고;
여기서, 상기 R6은 비치환 또는 치환된 C6-10의 아릴, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 치환된 5-10 원자 헤테로아릴이고,
상기 치환된 C6-10의 아릴 및 치환된 5 내지 10 원자 헤테로아릴은 독립적으로 할로겐, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬 및 C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬설포닐로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 치환기로 치환될 수 있고; 및
R7 및 R8은 각각 독립적으로 수소, 할로겐, -CN, -OH, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알콕시, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬옥시알킬, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬설포닐, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬티오 또는 -NR9R10이고, 여기서, 상기 R9 및 R10은 독립적으로 수소, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 디C1 -5의 직쇄 또는 측쇄 알킬아미노 C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 비치환 또는 치환된 C6-10의 아릴, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 헤테로 원자를 포함하는 비치환 또는 치환된 5-10 원자의 헤테로아릴, 또는 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 헤테로 원자를 포함하는 비치환 또는 치환된 3 내지 8 원자의 헤테로사이클로알킬이고,
상기 치환된 C6-10의 아릴, 치환된 5-10 원자의 헤테로아릴 및 치환된 3 내지 8 원자의 헤테로사이클로알킬은 독립적으로 할로겐 및 C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 치환기로 치환될 수 있다.
또한, 본 발명은 하기 반응식 1에 나타낸 바와 같이,
화학식 2로 표시되는 화합물과 화학식 3으로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 제조된 화학식 4로 표시되는 화합물과 화학식 5로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 6으로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 2);
상기 단계 2에서 제조된 화학식 6으로 표시되는 화합물과 화학식 7로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 8로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 3);
상기 단계 3에서 제조된 화학식 8로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 1a로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 4); 및
상기 단계 4에서 제조된 화학식 1a로 표시되는 화합물과 화학식 9로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 5);를 포함하는 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법을 제공한다:
[반응식 1]
Figure 112015125659615-pat00008
상기 반응식 1에서,
A, D, R1, R2, R3, R4 및 R5는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같고, R11은 C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고, X는 할로겐이다.
나아가, 본 발명은 상기 다이하이드로프테리딘-온 유도체, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 PI3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 상기 다이하이드로프테리딘-온 유도체, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 PI3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 다이하이드로프테리딘-온 유도체는 PI3 키나아제에 대하여 선택적으로 억제하는 효과가 우수하므로 혈액암, 난소암, 자궁경부암, 유방암, 대장암, 간암, 위암, 췌장암, 결장암, 복막 전이암, 피부암, 방광암, 전립선암, 폐암, 골육종, 섬유성 종양, 뇌종양 등과 같은 암, 류머티스성 관절염, 전신 홍반성 루푸스, 다발성 경화증, 제1형 당뇨병, 갑상선 기능 항진증, 근무력증, 크론병, 강직성 척추염, 건선, 자가면역성 악성빈혈, 쇼그렌 증후군 등과 같은 자가면역 질환, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 비염, 천식, 만성 기관지염, 만성 폐 염증성 질환, 규폐증, 폐형 사르코이드증, 흉막염, 폐포염, 혈관염, 기종, 폐렴, 기관지 확장증 등과 같은 호흡기 질환 등의 PI3 키나아제 관련 질환을 예방 또는 치료하는데 유용하게 사용할 수 있다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 제공한다:
[화학식 1]
Figure 112015125659615-pat00009
상기 화학식 1에서,
A는 -C(RaRb)- 또는 -CH2CH2-이고, 여기서, Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고, Ra 및 Rb는 이들이 각각 결합한 원자들과 함께 연결되어 3 내지 5 원자의 사이클로알킬을 형성할 수 있고;
D는 탄소 또는 질소이고;
R1는 수소, -NH2 또는 트리할로메틸이고;
R2는 수소 또는 C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고;
R3 및 R4는 각각 독립적으로 수소, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고;
R3 및 R4는 이들이 각각 결합한 원자들과 함께 연결되어 N의 헤테로원자를 하나 이상 포함하는 5 내지 7 원자의 비치환된 헤테로사이클로알킬을 형성할 수 있고; 및
R5는
Figure 112015125659615-pat00010
,
Figure 112015125659615-pat00011
,
Figure 112015125659615-pat00012
,
Figure 112015125659615-pat00013
,
Figure 112015125659615-pat00014
또는
Figure 112015125659615-pat00015
이고;
여기서, 상기 R6은 비치환 또는 치환된 C6-10의 아릴, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 헤테로 원자를 하나 이상 포함하는 비치환 또는 치환된 5-10 원자 헤테로아릴이고,
상기 치환된 C6-10의 아릴 및 치환된 5 내지 10 원자 헤테로아릴은 독립적으로 할로겐, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬 및 C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬설포닐로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 치환기로 치환될 수 있고; 및
R7 및 R8은 각각 독립적으로 수소, 할로겐, -CN, -OH, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알콕시, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬옥시알킬, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬설포닐, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬티오 또는 -NR9R10이고, 여기서, 상기 R9 및 R10은 독립적으로 수소, C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 디C1 -5의 직쇄 또는 측쇄 알킬아미노 C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 비치환 또는 치환된 C6-10의 아릴, N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 헤테로 원자를 포함하는 비치환 또는 치환된 5-10 원자의 헤테로아릴, 또는 N, O 및 S로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 헤테로 원자를 포함하는 비치환 또는 치환된 3 내지 8 원자의 헤테로사이클로알킬이고,
상기 치환된 C6-10의 아릴, 치환된 5-10 원자의 헤테로아릴 및 치환된 3 내지 8 원자의 헤테로사이클로알킬은 독립적으로 할로겐 및 C1-5의 직쇄 또는 측쇄 알킬로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 치환기로 치환될 수 있다.
바람직하게는,
상기 화학식 1에서,
A는 -C(RaRb)- 또는 -CH2CH2-이고, 여기서, Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고, Ra 및 Rb는 이들이 각각 결합한 원자들과 함께 연결되어 3 내지 5 원자의 사이클로알킬을 형성할 수 있고;
D는 탄소 또는 질소이고;
R1는 수소, -NH2 또는 트리플루오로메틸이고;
R2는 수소 또는 C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고;
R3 은 수소이고;
R4는 수소 또는 C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고;
R3 및 R4는 이들이 각각 결합한 원자들과 함께 연결되어 N의 헤테로원자를 하나 포함하는 5 내지 7 원자의 비치환된 헤테로사이클로알킬을 형성할 수 있고; 및
R5는
Figure 112015125659615-pat00016
,
Figure 112015125659615-pat00017
,
Figure 112015125659615-pat00018
,
Figure 112015125659615-pat00019
,
Figure 112015125659615-pat00020
또는
Figure 112015125659615-pat00021
이고;
여기서, 상기 R6은 비치환 또는 치환된 페닐 또는 피리디닐이고,
상기 치환된 페닐 및 피리디닐은 독립적으로 할로겐, C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬 및 C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬설포닐로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 치환기로 치환될 수 있고; 및
R7 및 R8은 각각 독립적으로 수소, 할로겐, -CN, -OH, C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬, C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알콕시, C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬옥시알킬, C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬설포닐, C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬티오 또는 -NR9R10이고, 여기서, 상기 R9 및 R10은 독립적으로 수소, C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬, 디메틸아미노 C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬, N의 헤테로 원자를 포함하는 비치환 또는 치환된 5 내지 10 원자의 헤테로아릴, 또는 N 및 O로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 헤테로 원자를 포함하는 비치환된 3 내지 8 원자의 헤테로사이클로알킬이고,
상기 치환된 5 내지 10 원자의 헤테로아릴은 할로겐 및 C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1종 이상의 치환기로 치환될 수 있다.
보다 바람직하게는,
상기 화학식 1에서,
A는 -C(RaRb)- 또는 -CH2CH2-이고, 여기서, Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고, Ra 및 Rb는 이들이 각각 결합한 원자들과 함께 연결되어 3 원자의 사이클로알킬을 형성할 수 있고;
D는 탄소 또는 질소이고;
R1는 수소 또는 트리플루오로메틸이고;
R2는 수소 또는 메틸이고;
R3 은 수소이고;
R4는 수소 또는 메틸이고; 및
R5는
Figure 112015125659615-pat00022
,
Figure 112015125659615-pat00023
,
Figure 112015125659615-pat00024
,
Figure 112015125659615-pat00025
또는
Figure 112015125659615-pat00026
이고;
여기서, 상기 R6은 비치환 페닐이고,
R7 및 R8은 각각 독립적으로 수소, -F 또는 -Cl이다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물에서,
A 및 R2를 포함하는 고리의 바람직한 예로는,
Figure 112015125659615-pat00027
,
Figure 112015125659615-pat00028
,
Figure 112015125659615-pat00029
,
Figure 112015125659615-pat00030
또는
Figure 112015125659615-pat00031
가 있다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 바람직한 예로는 하기의 화합물들을 들 수 있다:
(1) (S)-8-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-3,4-다이하이드로피리도[2,3-b]피라진-2(1H)-온;
(2) (S)-8-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-3,4-다이하이드로피리도[2,3-b]피라진-2(1H)-온;
(3) (S)-4-(1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
(4) (S)-4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
(5) 4-(1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
(6) (S)-4-(1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-2-(트리플루오로메틸)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
(7) (S)-4-(1-(5-플루오로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)프로필아미노)-2-(트리플루오로메틸)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
(8) (S)-4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린 -3-일)에틸아미노)-5-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
(9) 7-메틸-4-(-1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
(10) 4-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
(11) (R)-4-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
(12) (S)-4-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
(13) 4'-((1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸)아미노)-5'H-스피로[사이클로프로판-1,7'-프테리딘]-6'(8'H)-온;
(14) (S)-4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-8,9-다이하이드로-5H-피리미도[5,4-b][1,4]디아제핀-6(7H)-온.
본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 약학적으로 허용가능한 염의 형태로 사용할 수 있으며, 염으로는 약학적으로 허용가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산 부가염이 유용하다. 산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산, 아질산, 아인산 등과 같은 무기산류, 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류 등과 같은 무독성 유기산, 아세트산, 안식향산, 구연산, 젖산, 말레인산, 글루콘산, 메탄설폰산, 4-톨루엔설폰산, 주석산, 푸마르산 등과 같은 유기산으로부터 얻는다. 이러한 약학적으로 무독한 염의 종류로는 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 디하이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥산-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, β-하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트, 만델레이트 등을 포함한다.
본 발명에 따른 산 부가염은 통상의 방법으로 제조할 수 있으며, 예를 들면 화학식 1의 유도체를 메탄올, 에탄올, 아세톤, 메틸렌클로라이드, 아세토니트릴 등과 같은 유기용매에 녹이고 유기산 또는 무기산을 가하여 생성된 침전물을 여과, 건조시켜 제조하거나, 용매와 과량의 산을 감압 증류한 후 건조시켜 유기용매 하에서 결정화시켜셔 제조할 수 있다.
또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하고, 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때, 금속염으로는 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하다. 또한, 이에 대응하는 염은 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염을 적당한 음염(예, 질산은)과 반응시켜 얻는다.
나아가, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 및 이의 약학적으로 허용가능한 염뿐만 아니라, 이로부터 제조될 수 있는 용매화물, 광학 이성질체, 수화물 등을 모두 포함한다.
또한, 본 발명은 하기 반응식 1에 나타낸 바와 같이,
화학식 2로 표시되는 화합물과 화학식 3으로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 1);
상기 단계 1에서 제조된 화학식 4로 표시되는 화합물과 화학식 5로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 6으로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 2);
상기 단계 2에서 제조된 화학식 6으로 표시되는 화합물과 화학식 7로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 8로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 3);
상기 단계 3에서 제조된 화학식 8로 표시되는 화합물을 환원제 존재 하에 반응시켜 화학식 1a로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 4); 및
상기 단계 4에서 제조된 화학식 1a로 표시되는 화합물과 화학식 9로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 5);를 포함하는 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법을 제공한다:
[반응식 1]
Figure 112015125659615-pat00032
상기 반응식 1에서,
A, D, R1, R2, R3, R4 및 R5는 상기 화학식 1에서 정의한 바와 같고, R11은 C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고, X는 할로겐이다.
이하, 본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법을 상세히 설명한다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법에 있어서, 상기 단계 1은 화학식 2로 표시되는 화합물과 화학식 3으로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계이다.
이때, 상기 화학식 3으로 표시되는 화합물에는 ZnCl2, SnCl2, SnCl4, FeCl2, FeCl3, POCl3 등이 있고, 이를 당량 또는 과량으로 사용할 수 있으며, POCl3를 사용하는 것이 바람직하다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법에 있어서, 상기 단계 2는 상기 단계 1에서 제조된 화학식 4로 표시되는 화합물과 화학식 5로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 6으로 표시되는 화합물을 제조하는 단계이다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법에 있어서, 상기 단계 3은 상기 단계 2에서 제조된 화학식 6으로 표시되는 화합물과 화학식 7로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 8로 표시되는 화합물을 제조하는 단계이다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법에 있어서, 상기 단계 4는 상기 단계 3에서 제조된 화학식 8로 표시되는 화합물을 환원제 존재 하에 반응시켜 화학식 1a로 표시되는 화합물을 제조하는 단계이다.
이때, 상기 환원제로는 팔라듐/차콜(Pd/C), 철(Fe), 소듐다이티오나이트(Na2S2O4), 틴(II) 클로라이드 다이하이드레이트(SnCl2.2H2O), 플래티늄(IV) 옥사이드, 라니니켈(Raney nickel), 하이드로겐 설파이드(Hydrogen sulfide), 티타늄(III) 클로라이드, 아연, 사마리움, 리튬 알루미늄 하이드라이드(LiAlH4)등이 있고, 이를 당량 또는 과량 사용할 수 있으며, 바람직하게는 팔라듐/차콜, 철, 소듐다이티오나이트, 틴(II) 클로라이드 다이하이드레이트를 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법에 있어서, 상기 단계 5는 상기 단계 4에서 제조된 화학식 1a로 표시되는 화합물과 화학식 9로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계이다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법에 있어서, 상기 반응식 1의 각 단계는 당 분야에서 잘 알려진 통상적인 제조방법을 수행할 수 있으며, 이때, 사용 가능한 염기로는 피리딘, 트리에틸아민, N,N-다이이소프로필에틸아민(DIPEA), 1,8-디아자비사이클로[5.4.0]-7-운테센(DBU) 등의 유기염기; 또는 소듐하이드록사이드, 소듐카보네이트, 포타슘카보네이트, 세슘카보네이트, 소듐하이드라이드 등의 무기염기가 있으며, 이를 당량 또는 과량, 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있고, 사용 가능한 반응 용매로는 테트라하이드로퓨란(THF); 디옥산; 에틸에테르, 1,2-다이메톡시에탄 등을 포함하는 에테르용매; 메탄올, 에탄올, 프로판올 및 부탄올을 포함하는 저급 알코올; 디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 디클로로메탄(DCM), 디클로로에탄, 물, 아세토나젠설포네이트, 톨루엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 에틸아세테이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시크레이트, 락테이트, 하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트, 만델레이트 등이 있으며, 이을 단독 또는 혼합하여 사용할 수 있다.
나아가, 본 발명은 상기 다이하이드로프테리딘-온 유도체, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 PI3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 다이하이드로프테리딘-온 유도체, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 PI3Kα, PI3Kβ, PI3Kδ 및 PI3Kγ로 이루어지는 군으로부터 선택되는 PI3 키나아제에 대하여 선택적으로 억제하는 것을 특징으로 한다.
구체적으로, 상기 PI3 키나아제 관련 질환은 암, 자가면역 질환, 호흡기 질환 등을 포함할 수 있다.
여기서, 상기 암은 골수화생, 만성 골수성 단구 백혈병, 급성 림프구성 백혈병, 급성 적백혈병, 호지킨 및 비 호지킨 질환, B-세포 림프종, 급성 T-세포 백혈병, 골수이형성 증후군, 형질 세포 장애, 모발상 세포 백혈병, 카복시 육종, 림프종 등과 같은 혈액암, 난소암, 자궁경부암, 유방암, 대장암, 간암, 위암, 췌장암, 결장암, 복막 전이암, 피부암, 방광암, 전립선암, 폐암, 골육종, 섬유성 종양, 뇌종양 등을 포함할 수 있다.
또한, 상기 자가면역 질환은 류머티스성 관절염, 전신 홍반성 루푸스, 다발성 경화증, 제1형 당뇨병, 갑상선 기능 항진증, 근무력증, 크론병, 강직성 척추염, 건선, 자가면역성 악성빈혈, 쇼그렌 증후군 등을 포함할 수 있다.
나아가, 상기 호흡기 질환은 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 비염, 천식, 만성 기관지염, 만성 폐 염증성 질환, 규폐증, 폐형 사르코이드증, 흉막염, 폐포염, 혈관염, 기종, 폐렴, 기관지 확장증 등을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 PI3K α, β, γ 및 δ에 대한 억제 활성을 검증한 결과, 본 발명의 실시예 1 내지 14 화합물이 PI3 키나아제 α, β, γ 및 δ에 대해 억제활성을 우수하게 나타내며, 특히, PI3 키나아제 γ 또는 δ에 대해 매우 낮은 값에서 억제 활성을 나타내는 것을 확인하였다. (실험예 1 내지 4 참조).
따라서, 본 발명에 따른 화합물은 PI3 키나아제 억제제로 작용함으로써 혈액암, 난소암, 자궁경부암, 유방암, 대장암, 간암, 위암, 췌장암, 결장암, 복막 전이암, 피부암, 방광암, 전립선암, 폐암, 골육종, 섬유성 종양, 뇌종양 등과 같은 암, 류머티스성 관절염, 전신 홍반성 루푸스, 다발성 경화증, 제1형 당뇨병, 갑상선 기능 항진증, 근무력증, 크론병, 강직성 척추염, 건선, 자가면역성 악성빈혈, 쇼그렌 증후군 등과 같은 자가면역 질환, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 비염, 천식, 만성 기관지염, 만성 폐 염증성 질환, 규폐증, 폐형 사르코이드증, 흉막염, 폐포염, 혈관염, 기종, 폐렴, 기관지 확장증 등과 같은 호흡기 질환 등의 PI3 키나아제 관련 질환을 예방 또는 치료하는데 유용하게 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 조성물에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염은 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충전제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제조될 수 있다.
경구 투여용 제형으로는 예를 들면 정제, 환제, 경/연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제, 엘릭시르제, 트로키제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및/또는 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및/또는 폴리에틸렌 글리콜)를 함유하고 있다. 정제는 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및/또는 폴리비닐피롤리딘 등과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염 등과 같은 붕해제 또는 비등 혼합물 및/또는 흡수제, 착색제, 향미제, 및 감미제를 함유할 수 있다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효 성분으로 하는 약학적 조성물은 비경구 투여할 수 있으며, 비경구 투여는 피하주사, 정맥주사, 근육 내 주사 또는 흉부 내 주사를 주입하는 방법에 의한다.
이때, 비경구 투여용 제형으로 제제화하기 위하여 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 안정제 또는 완충제와 함께 물에 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고, 이를 앰플 또는 바이알 단위 투여형으로 제조할 수 있다. 상기 조성물은 멸균되고/되거나 방부제, 안정화제, 수화제 또는 유화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제 등의 보조제, 및 기타 치료적으로 유용한 물질을 함유할 수 있으며, 통상적인 방법인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 따라 제제화할 수 있다.
또한, 본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효 성분으로 하는 약학적 조성물의 인체에 대한 투여량은 환자의 나이, 몸무게, 성별, 투여형태, 건강상태 및 질환 정도에 따라 달라질 수 있으며, 몸무게가 70 Kg인 성인 환자를 기준으로 할 때, 일반적으로 0.1-1000 mg/일이며, 바람직하게는 1-500 mg/일이며, 또한 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정시간 간격으로 1일 1회 내지 수회로 분할 투여할 수도 있다.
나아가, 본 발명의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효 성분으로 하는 약학적 조성물은 PI3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 다이하이드로프테리딘-온 유도체, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 함유하는 PI3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.
여기서, 상기 PI3 키나아제 관련 질환은 혈액암, 난소암, 자궁경부암, 유방암, 대장암, 간암, 위암, 췌장암, 결장암, 복막 전이암, 피부암, 방광암, 전립선암, 폐암, 골육종, 섬유성 종양, 뇌종양 등과 같은 암, 류머티스성 관절염, 전신 홍반성 루푸스, 다발성 경화증, 제1형 당뇨병, 갑상선 기능 항진증, 근무력증, 크론병, 강직성 척추염, 건선, 자가면역성 악성빈혈, 쇼그렌 증후군 등과 같은 자가면역 질환, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 비염, 천식, 만성 기관지염, 만성 폐 염증성 질환, 규폐증, 폐형 사르코이드증, 흉막염, 폐포염, 혈관염, 기종, 폐렴, 기관지 확장증 등과 같은 호흡기 질환 등을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 PI3 키나아제 대한 억제제로 작용함으로써 상기 PI3 키나아제 관련 질환의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물로 식품, 음료 등의 건강기능보조 식품에 첨가할 수 있다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 식품에 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합량은 그의 사용 목적(예방 또는 개선용)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 건강식품 중의 상기 화합물의 양은 전체 식품 중량의 0.1 내지 15 중량부로 가할 수 있다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외의 향미제로서 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 g당 일반적으로 약 1 내지 20 g, 바람직하게는 약 5 내지 12 g이다.
나아가, 상기 외에 본 발명에 따른 화학식 1로 표시되는 화합은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예 및 실험예에 대하여 상세히 설명한다.
단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
< 제조예 1> 3-( 브로모메틸 )-8- 클로로 -2- 페닐아이소퀴놀린 -1(2H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00033
단계 1: 2 - 클로로 -6- 메틸벤조일 클로라이드의 제조
250 mL 둥근바닥플라스크에 2-클로로-6-메틸벤조익 애시드 10 g(58.62 mmol, 1.0 eq), 무수 디클로로메탄 150 mL를 첨가하고, 옥살릴클로라이드 10.23 mL(117.23 mmol, 2.0 eq), 디메틸포름아마이드를 1-2 방울 적하시킨 후 상온에서 2-4 시간 교반시켰다. 반응 종료된 후 감압 농축하여 2-클로로-6-메틸벤조일 클로라이드 11.662 g(61.69 mmol, 100% 수율)을 갈색 액체로 얻었다.
단계 2: 2 - 클로로 -6- 메틸 -N- 페닐벤즈아마이드의 제조
250 mL 둥근바닥플라스크에 아닐린 5.9 mL(74.78 mmol, 1.05 eq)을 무수 디클로로메탄 150 mL 에 용해시킨 후 0 ℃에서 트리에틸아민(TEA) 15 mL(107.96 mmol, 1.75 eq)를 첨가하고 30분간 교반시켰다. 2-클로로-6-메틸벤조일 클로라이드 11.662 g(61.69 mmol, 1.0 eq)를 천천히 적하시킨 후 0 ℃하에 교반시켰다(> 3시간). 반응 종료 후, 1N HCl과 물, 소듐바이카보네이트 수용액으로 한번 씩 세척한 후 유기층을 건조(황산나트륨). 재결정(에틸아세테이트와 헥산 이용)을 수행하여 2-클로로-6-메틸-N-페닐벤즈아마이드 10.715 g(43.61 mmol, 71 %)을 베이지색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ 10.56(s, 1H), 7.69-7.72(d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.27-7.37(m, 5H), 7.08-7.13(t, J = 7.3 Hz, 1H), 2.31(s, 3H).
단계 3: 에틸 3-(3- 클로로 -2-( 페닐카바모일 )페닐)-2- 옥소프로파노에이트의 제조
250 mL 둥근바닥플라스크에 2-클로로-6-메틸-N-페닐벤즈아마이드 4 g(16,28 mmol, 1.0 eq)을 테트라하이드로퓨란(THF) 100 mL에 용해시킨 후 -78 ℃에서 헥사메틸포스포아마이드(HMPA) 7.1 mL(40.70 mmol, 2.5 eq)를 첨가한 후, 부틸리튬(BuLi) 17.6 mL(43.96 mmol, 2.7 eq)을 무수 THF 20 mL에 희석한 후 캐뉼라를 이용하여 천천히 1시간에 걸쳐 천천히 적하시킨 후 30분간 교반시켰다. 디에틸 옥살레이트 6 mL(43.96 mmol, 2.7 eq)를 한 번에 넣어준 후 교반시켰다(> 1 시간). 반응 종료 후 물로 퀀칭하여 에틸 아세테이트로 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 컬럼 크로파토그래피(SiO2, 용리액: 10% 에틸 아세테이트-50% 헥산)로 정제하여 에틸 3-(3-클로로-2-(페닐카바모일)페닐)-2-옥소프로파노에이트 2.92 g(8.44 mmol, 52% 수율)로 베이지색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 7.28-7.41(m, 7H), 7.12-7.14(d, J = 7.0 Hz, 1H), 3.90-4.05(m, 2H), 3.83-3.88(d, J = 15.7 Hz, 1H), 3.11-3.16(d, J = 15.7 Hz, 1H), 0.98-1.03(t, J = 7.1 Hz, 3H).
단계 4: 에틸 8- 클로로 -1-옥소-2-페닐-1,2- 다이하이드로아이소퀴놀린 -3- 카복실레이트의 제조
100 mL 둥근바닥플라스크에 에틸 3-(3-클로로-2-(페닐카바모일)페닐)-2-옥소프로파노에이트 2.92 g(8.44 mmol, 1.0 eq)를 에탄올 20 mL에 용해시킨 후 HCl 가스를 버블링 시킨다. (250 mL 두 목 플라스크에 염화나트륨(NaCl)을 반 정도 첨가한 후 적하깔대기(dropping funnel)로 황산(H2SO4)을 천천히 적하시키고 환류시킨다. 반응 종료 후 물과 에틸 아세테이트로 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 컬럼 크로파토그래피(SiO2, 용리액: 10% 에틸 아세테이트-50% 헥산)로 정제하여 에틸 8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-카복실레이트 1.673 g(5.10 mmol, 60% 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ 7.85-7.87(d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.68-7.78(m, 2H), 7.42-7.48(m, 3H), 7.28-7.31(d, J = 10.2 Hz, 3H), 3.91-3.99(q, J = 14.2, 6.9 Hz, 2H), 0.88-0.93(t, J = 6.9 Hz, 3H).
단계 5: 8 - 클로로 -3-( 하이드록시메틸 )-2- 페닐아이소퀴놀린 -1(2H)-온의 제조
100 mL 둥근바닥플라스크에 -78 ℃에서 리튬알루미늄하이드라이드(LiAlH4) 0.48 g(12.76 mmol, 2.5 eq)를 THF 30 mL에 용해(N2 가스 분위기)시킨 후 THF 10 mL에 희석한 에틸 8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-카복실레이트 1.673 g(5.10 mmol, 1.0 eq)를 천천히 적하시킨다. -30 ℃까지 천천히 온도를 올려주면서 교반시킨다(> 1시간). 반응 종료 후 물과 THF로 퀀칭한 후 상온에서 용액이 투명해질 때까지 교반시켰다. 유기층을 분리하고 수용액층을 에틸 아세테이트로 추출하여 합한 유기층을 건조(황산나트륨), 여과하여 농축한 후 컬럼 크로파토그래피(SiO2, 용리액: 10% 에틸 아세테이트-50% 헥산)으로 정제하여 8-클로로-3-(하이드록시메틸)-2-페닐아이소퀴놀린-1(2H)-온 1.1 g(3.85 mmol, 75 %)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ 7.61-7.69(m, 2H), 7.47-7.56(m, 4H), 7.30-7.32(d, J = 6.8 Hz, 2H), 5.50-5.54(t, J = 4.9 Hz, 1H), 3.87-3.88(d, J = 4.6 Hz, 2H).
단계 6: 3 -( 브로모메틸 )-8- 클로로 -2- 페닐아이소퀴놀린 -1(2H)-온의 제조
100 mL 둥근바닥플라스크에 무수 아세토니트릴 20 mL 에 디메틸포름아마이드 0.24 mL(3.15 mmol, 2.0 eq)를 첨가하고 0 ℃에서 포스포러스옥시브로마이드(POBr3)0.54 g(1.89 mmol, 1.2 eq)를 천천히 적하시킨 후 30분간 교반시켰다. 8-클로로-3-(하이드록시메틸)-2-페닐아이소퀴놀린-1(2H)-온 0.45 g(1.57 mmol, 1.0 eq)을 천천히 적하시킨 후 상온에서 교반시켰다(> 3시간). 반응 종료 후 소듐바이카보네이트 수용액을 얼음수조 하에 천천히 넣어준 후 에틸 아세테이트로 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 3-(브로모메틸)-8-클로로-2-페닐아이소퀴놀린-1(2H)-온 0.5 g(1.43 mmol, 91% 수율)로 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ 7.68-7.70(m, 2H), 7.51-7.59(m, 4H), 7.39-7.42(m, 2H), 7.04(s, 1H), 4.25(s, 2H).
< 제조예 2> (S)-2-(1- 아미노에틸 )-5- 클로로 -3- 페닐퀴나졸린 -4(3H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00034
단계 1: 2 -아미노-6- 클로로벤조익 애시드의 제조
250 mL 둥근바닥플라스크에 2-아미노-6-클로로벤조니트릴 5 g(32.77 mmol, 1.0 eq)를 30 % 포타슘하이드록사이드(KOH) 50mL와 하이드로겐 퍼옥사이드(H2O2) 3 mL을 첨가한 후 밤샘 환류시켰다. 반응 종료 후 에테르와 디클로로메탄으로 종료되면 한번 씩 세척하고, 산성화시킨 후 디클로로메탄, 에틸아세테이트로 추출한 후 소금물으로 한번 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 2-아미노-6-클로로벤조익 애시드 5.31 g(30.95 mmol, 94 % 수율)로 주황색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ 8.24(s, 2H), 7.00-7.06(t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.63-6.65-(d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.54-6.57(d, J = 7.8 Hz, 1H).
단계 2: (S)- tert -부틸(1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸)카바메이트의 제조
25 mL 둥근바닥플라스크에 2-아미노-6-클로로벤조익 애시드 1 g(5.89 mmol, 1.0 eq)와 N-Boc-아날린 1.12 g(5.89 mmol, 1.0 eq)를 피리딘 5 mL에 용해시킨 후 트리페닐 포스파이트 1.85 mL(7.07 mmol, 1.2 eq)를 첨가하고 55 ℃에서 밤샘 교반시켰다. 상온에서 아닐린 0.54 mL(5.89 mmol, 1.0 eq)을 넣어준 후 다시 55 ℃에서 교반시켰다(> 3 시간). 반응 종료 후 감압농축하고 에틸 아세테이트와 1 N HCl로 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 컬럼 크로파토그래피(SiO2, 용리액: 10% 에틸 아세테이트-50% 헥산)로 정제하여 (S)-tert-부틸 (1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸)카바메이트 1.634 g(4.09 mmol, 69 % 수율)로 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 7.61-7.63(m, 2H), 7.46-7.57(m, 4H), 7.36-7.39(m, 1H), 7.29(s, 1H), 5.59(s, 1H), 4.50(s, 1H), 1.37-1.46(m, 9H), 1.24-1.26(d, J = 6.5 Hz, 3H).
단계 3: (S)-2-(1- 아미노에틸 )-5- 클로로 -3- 페닐퀴나졸린 -4(3H)-온의 제조
100 mL 둥근바닥플라스크에 tert-부틸 (S)-(1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸)카바메이트 1.634 g(4.09 mmol, 1.0 eq)을 디클로로메탄 15 mL에 용해시킨 후 트리플루오로아세틱 애시드(TFA) 5 mL을 첨가하고 40 ℃에서 환류시켰다(> 1 시간). 반응 종료 후 에틸 아세테이트와 소듐바이카보네이트 수용액으로 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 컬럼 크로파토그래피(SiO2, 용리액: 20% 디클로로메탄-1% 메탄올)로 정제하여 (S)-2-(1-아미노에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 1.046 g(3.49 mmol, 85 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 7.60-7.64(m, 2H), 7.51-7.59(m, 3H), 7.44-7.48(m, 1H), 7.27-7.29(m, 2H), 3.63-3.70(q, 1H), 1.83(s, 2H), 1.26-1.28(d, 3H)
단계 4: (S)-N-((R)-1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸)-2-메톡시-2-페닐아세트아마이드의 제조
50 mL 둥근바닥플라스크에 (R)-(-)-α-메톡시페닐 아세틱 애시드 18 mg(0.11 mmol, 1.1 eq)을 디클로로메탄 10 mL에 용해시킨 후, (S)-2-(1-아미노에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 30 mg(0.10 mmol, 1.0 eq), 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카보디이미드 하이드로클로라이드 (EDCI·HCl) 21 mg(0.11 mmol, 1.1 eq), 4-디메틸아미노피리딘(DMAP) 1.2 mg(0.01 mmol, 0.1 eq)를 첨가하고 상온에서 밤샘 교반시켰다. 반응 종료 후 디클로로메탄과 물로 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 컬럼 크로파토그래피(SiO2, 용리액: 10% 에틸 아세테이트-20% 헥산)로 정제하여 (S)-N-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸)-2-메톡시-2-페닐아세트아마이드 29 mg(0.06 mmol, 60 % 수율)로 무색 오일로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 7.62-7.64(m, 3H), 7.42-7.52(m, 6H), 7.29-7.32(m, 4H), 4.67-4.72(m, 1H), 4.59(s, 1H), 3.38(s, 3H), 1.35-1.38(d, J = 6.8 Hz, 3H).
< 제조예 3> (S)-2-(1- 아미노에틸 )-5- 클로로 -3-(m- 톨릴 ) 퀴나졸린 -4(3H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00035
단계 1: (S)- tert -부틸 (1-(5- 클로로 -4-옥소-3-(m- 톨릴 )-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸)카바메이트의 제조
상기 제조예 2의 단계 2와 동일한 제조방법으로 수행하여 (S)-tert-부틸 (1-(5-클로로-4-옥소-3-(m-톨릴)-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸)카바메이트를 5.1 g(12.29 mmol, 70 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 7.62(s, 2H), 7.39-7.47(m, 2H), 7.31-7.33(m, 1H), 7.15(s, 1H), 7.08(s, 1H), 5.61(s, 1H), 4.50-4.53(m, 1H), 2.42 (s, 3H), 1.42(s, 9H), 1.27(s, 3H).
단계 2: (S)-2-(1- 아미노에틸 )-5- 클로로 -3-(m- 톨릴 ) 퀴나졸린 -4(3H)-온의 제조
상기 제조예 2의 단계 3과 동일한 제조방법으로 수행하여 (S)-2-(1-아미노에틸)-5-클로로-3-(m-톨릴)퀴나졸린-4(3H)-온을 3 g(9.56 mmol, 79 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 7.61-7.63(m, 2H), 7.41-7.48(m, 2H), 7.30-7.33(d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.05-7.08(m, 2H), 3.66-3.73(q, J = 13.0, 6.5 Hz, 1H), 2.42(s, 3H), 1.27-1.29(d, J = 6.5 Hz, 3H).
< 제조예 4> (S)-2-(1- 아미노에틸 )-5- 클로로 -3-(3- 플루오로페닐 ) 퀴나졸린 -4(3H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00036
단계 1: (S)- tert -부틸 (1-(5- 클로로 -3-(3- 플루오로페닐 )-4-옥소-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸)카바메이트의 제조
상기 제조예 2의 단계 2와 동일한 제조방법으로 수행하여 (S)-tert-부틸 (1-(5-클로로-3-(3-플루오로페닐)-4-옥소-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸)카바메이트를 4.88 g(11.68 mmol, 67 % 수율)로 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 7.42-7.63(m, 4H), 7.14-7.23(m, 1H), 7.03-7.17(m, 2H), 5.44-5.55(m, 1H), 4.48-4.52(m, 1H), 1.42(s, 9H), 1.18-1.31(m, 3H).
단계 2: (S)-2-(1- 아미노에틸 )-5- 클로로 -3-(3- 플루오로페닐 ) 퀴나졸린 -4(3H)-온의 제조
상기 제조예 2의 단계 3과 동일한 제조방법으로 수행하여 (S)-2-(1-아미노에틸)-5-클로로-3-(3-플루오로페닐)퀴나졸린-4(3H)-온을 2.4 g(7.55 mmol, 64 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 1.64(s, 1H), 7.62-7.63(d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.46-7.60(m, 2H), 7.22-7.25(m, 1H), 7.04-7.10(m, 2H), 3.65-3.71(m, 1H), 1.29-1.32(dd, J = 6.5, 1.3 Hz, 3H).
< 제조예 5> (S)-2-(1-아미노프로필)-5- 플루오로 -3- 페닐퀴나졸린 -4(3H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00037
단계 1: (S)- tert -부틸 (1-(5- 플루오로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)프로필)카바메이트의 제조
상기 제조예 2의 단계 2와 동일한 제조방법으로 수행하여 (S)-tert-부틸 2-(5-클로로-3-(3-플루오로페닐)-4-옥소-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)피롤리딘-1-카복실레이트을 3.82 g(11.11 mmol, 76 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ 7.39-7.43(m, 1H), 7.07-7.19(m, 3H), 6.99-7.02(m, 2H), 6.72-6.88(m, 2H), 3.51-3.56(m, 1H), 2.92(s, 1H), 1.26-1.31(m, 1H), 1.10-1.17(m, 1H), 0.92(s, 9H), 0.19-0.23(t, J = 6.7 Hz, 3H).
단계 2: (S)-2-(1-아미노프로필)-5- 플루오로 -3- 페닐퀴나졸린 -4(3H)-온의 제조
상기 제조예 2의 단계 3과 동일한 제조방법으로 수행하여 (S)-2-(1-아미노프로필)-5-플루오로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온을 32.43 g(8.17 mmol, -78 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 7.66-7.73(m, 1H), 7.50-7.56(m, 4H), 7.27-7.28(m, 3H), 7.08-7.14(t, J = 5.1 Hz, 1H), 3.40-3.44(m, 1H), 1.75-1.84(m, 1H), 1.46-1.55(m, 1H), 0.77-0.82(t, J = 7.4 Hz, 3H).
< 제조예 6> 3-(1- 클로로에틸 )-2- 페닐퀴놀린의 제조
Figure 112015125659615-pat00038
단계 1: 2 - 페닐퀴놀린 - 카브알데하이드의 제조
500 mL 둥근바닥플라스크에 2-클로로-3-퀴놀린카브알데하이드 10 g(52.19 mmol, 1.0 eq)를 톨루엔(4):물(1) = 120 mL:30 mL에 용해시킨 후 페닐 보로닉 애시드 7 g(57.41 mmol, 1.1 eq)을 첨가하고, 소듐카보네이트(Na2CO3)12.17 g(114.82 mmol, 2.2 eq)을 첨가한 후, 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(0)(Pd(PPh3)4) 1.5 g(1.30 mmol, 2.5 %)을 첨가하고, 엘리쿼트(Aliquat) 336 7-8 방울을 첨가하여 밤샘 환류시켰다. 반응 종료 후 에틸 아세테이트와 물로 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 컬럼 크로파토그래피(SiO2, 용리액: 10% 디클로로메탄-10% 헥산)로 정제하여 2-페닐퀴놀린-3-카브알데하이드 12.156 g(52.11 mmol, 94 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 10.19(s, 1H), 8.86(s, 1H), 8.20-8.23(d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.01-8.04(d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.85-7.91(t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.64-7.71(m, 3H), 7.55-7.61(m, 3H).
단계 2: 1 -(2- 페닐퀴놀린 -3-일)에탄-1-올의 제조
500 mL 둥근바닥플라스크에 2-페닐퀴놀린-3-카브알데하이드 12.156 g(49.16 mmol, 1.0 eq)를 무수 THF 200 mL에 용해시킨 후 -78 ℃에서 메틸마그네슘브로마이드(3M CH3MgBr의 디에틸 에테르) 16.4 mL(49.16 mmol, 1.0 eq)을 천천히 적하한 후 교반시켰다(> 1시간). 반응 종료 후, 0 ℃에서 30분간 정도 교반시키고, 20 ℃에서 메탄올 5 mL 첨가하고 퀀칭 후 암모늄클로라이드(NH4Cl)를 첨가하고 상온에서 30분간 교반한 후 에틸 아세테이트로 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 재결정하여 1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에탄-1-올 12.141 g(48.70 mmol, 99 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 8.47(s, 1H), 8.12-8.15(d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.87-7.90(d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.69-7.74(t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.46-7.58(m, 6H), 5.19-5.21(m, 1H), 1.44-1.46(d, J = 6.3 Hz, 3H).
단계 3: 3 -(1- 클로로에틸 )-2- 페닐퀴놀린의 제조
250 mL 둥근바닥플라스크에 1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에탄-1-올 4 g(16.04 mmol, 1.0 eq)을 무수 디클로로메탄 100 mL에 용해시킨 후 0 ℃에서 티오닐클로라이드(SOCl2) 11.65 mL(160.44 mmol, 10 eq)을 천천히 적하후 교반시켰다(> 2시간). 반응 종료 후 반응물을 감압 농축한 후 톨루엔를 첨가하고 다시 한번 감압농축하여 3-(1-클로로에틸)-2-페닐퀴놀린 4.866 g(18.17 mmol, 100 % 수율)로 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ 9.21(s, 1H), 8.22-8.28(m, 2H), 7.96-8.01(t, J = 7.1 Hz, 1H), 7.81-7.84(t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.67-7.71(m, 2H), 7.61-7.63(m, 4H), 5.33-5.35(q, J = 6.6 Hz, 1H). 1H), 1.93-1.95(d, J = 6.8 Hz, 3H).
< 제조예 7> (S)-3-(1- 아미노에틸 )-8- 클로로 -2- 페닐아이소퀴놀린 -1(2H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00039
단계 1: 2 - 클로로 -6- 메틸벤조일 클로라이드의 제조
250 mL 둥근바닥플라스크에 2-클로로-6-메틸벤조익 애시드 10.073 g(59.04 mmol, 1.0 eq), 무수 디클로로메탄 150 mL를 첨가하고, 옥살릴클로라이드 10.3 mL(118.09 mmol, 2.0 eq), 디메틸포름아마이드를 1-2 방울 적하시킨 후 상온에서 2-4 시간 교반시켰다. 반응 종료된 후 감압 농축하여 2-클로로-6-메틸벤조일 클로라이드 11.479 g(59.04 mmol, 100% 수율)을 갈색 액체로 얻었다.
단계 2: 2 - 클로로 -6- 메틸 -N- 페닐벤즈아마이드의 제조
250 mL 둥근바닥플라스크에 아닐린 5.8 mL(63.76 mmol, 1.05 eq)을 무수 디클로로메탄 150 mL 에 용해시킨 후 0 ℃에서 트리에틸아민 14.8 mL(106.26 mmol, 1.75 eq)를 첨가하고 30분간 교반시켰다. 2-클로로-6-메틸벤조일 클로라이드 11.479 g(60.72 mmol, 1.0 eq)를 천천히 적하시킨 후 0 ℃를 유지하면서 교반시켰다(> 3시간). 반응 종료 후 1N HCl, 물, 소듐바이카보네이트 수용액으로 한번 세척한 후 유기층을 건조 (황산나트륨). 재결정으로 2-클로로-6-메틸-N-페닐벤즈아마이드 13g(52.91 mmol, 87 %)을 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ 10.56(s, 1H), 7.69-7.72(d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.27-7.37(m, 5H), 7.08-7.13(t, J = 7.3 Hz, 1H), 2.31(s, 3H).
단계 3: (S)- tert -부틸 (4-(3- 클로로 -2-( 페닐카바모일 )페닐)-3- 옥소부탄 -2-일)카바메이트의 제조
250 mL 둥근바닥플라스크에 2-클로로-6-메틸-N-페닐벤즈아마이드 6 g(24.42 mmol, 1.0 eq)를 무수 THF 50 mL에 용해시킨 후 -30 ℃에서 n-BuLi 24.42 mL(61.05 mmol, 2.5 eq)을 천천히 첨가하고 1 시간 교반시켰다. 100 mL 둥근바닥플라스크에 tert-부틸 (S)-(1-(메톡시(메틸)아미노)-1-옥소프로판-2-일)카바메이트 8.5 g(36.63 mmol, 1.5 eq)를 무수 THF 50 mL에 용해시킨 후 30 ℃에서 이소프로필 마그네슘 클로라이드 56.35 mL(73.26 mmol, 3.0 eq)를 천천히 첨가한 후 1 시간 교반시켰다. 용해시킨 2-클로로-6-메틸-N-페닐벤즈아마이드를 (S)-(1-(메톡시(메틸)아미노)-1-옥소프로판-2-일)카바메이트 반응 혼합물에 천천히 케뉼라로 적하한 후 15 ℃에서 교반시켰다(> 1 시간). 반응 종료 후 물로 퀀칭 후 1 N HCl로 pH 5로 맞춘 후 에틸 아세테이트로 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 재결정 또는 컬럼 크로파토그래피 (SiO2, 용리액: 20% 디클로로메탄-1% 메탄올)로 정제하여 (S)-tert-부틸 (4-(3-클로로-2-(페닐카바모일)페닐)-3-옥소부탄-2-일)카바메이트 8.8 g(21. 11 mmol, 86 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 7.90(s, 1H), 7.57-7.60(d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.29-7.35(m, 4H), 7.13-7.18(m, 2H), 5.01(s, 1H), 4.33-4.37(m, 1H), 3.91-4.06(m, 2H), 1.40(s, 9H), 1.22-1.25(d, J = 7.3 Hz, 3H).
단계 4: (S)-3-(1- 아미노에틸 )-8- 클로로 -2- 페닐아이소퀴놀린 -1(2H)-온의 제조
500 mL 둥근바닥플라스크에 tert-부틸 (S)-(4-(3-클로로-2-(페닐카바모일)페닐)-3-옥소부탄-2-일)카바메이트 8.8 g(21.11 mmol, 1.0 eq)을 아이소프로필알콜(IPA)(5) : conc HCl (3) = 100 mL : 60 mL에 용해시킨 후 65 ℃에서 교반시켰다(> 2 시간). 반응 종료 후 감압 농축 한 후 디클로로메탄와 소듐바이카보네이트 수용액으로 정제하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 컬럼 크로파토그래피 (SiO2, 용리액: 25% 디클로로메탄-1% 메탄올)로 정제하여 (S)-3-(1-아미노에틸)-8-클로로-2-페닐아이소퀴놀린-1(2H)-온 4.871 g(16.30 mmol, 77 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
단계 5: (S)-3-(1- 아미노에틸 )-8- 클로로 -2- 페닐아이소퀴놀린 -1(2H)-온의 제조
250 mL 둥근바닥플라스크에 (S)-3-(1-아미노에틸)-8-클로로-2-페닐아이소퀴놀린-1(2H)-온 4. 871 g(16.30 mmol, 1.0 eq)을 메탄올 100 mL에 용해시킨 후 (D)-타타릭 애시드 2.45 g(16.30 mmol, 1.0 eq)을 첨가하고 상온에서 30분간 교반시킨 후, 다시 90분간 환류시키고, 상온에서 밤샘 상온에서 교반시켰다. 반응 종료 후 메탄올 이용하여 필터한 후 고체를 물에 용해시켜 소듐바이카보네이트 수용액으로 pH 8로 맞춘 후 30분간 교반시켰다. 고체가 생성되면 물로 필터하여 (S)-3-(1-아미노에틸)-8-클로로-2-페닐아이소퀴놀린-1(2H)-온 3.74 g(12.50 mmol, 77 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 7.41-7.56(m, 7H), 7.28(s, 1H), 6.71(s, 1H), 3.68-3.74(q, J = 6.5 Hz, 1H), 1.31(s, 2H), 1.24-1.26(d, J = 6.5 Hz, 3H).
< 제조예 8> (S)-1-(2- 페닐퀴놀린 -3-일) 에탄아민의 제조
Figure 112015125659615-pat00040
단계 1: 2 - 페닐퀴놀린 -3- 카브알데하이드의 제조
500 mL 둥근바닥플라스크에 2-클로로-3-퀴놀린카브알데하이드 10 g(52.19 mmol, 1.0 eq)를 톨루엔 (4):물 (1) = 120 mL:30 mL에 용해시킨 후 페닐 보로닉 애시드 7 g(57.41 mmol, 1.1 eq), Na2CO3 12.17 g(114.82 mmol, 2.2 eq), Pd(PPh3)4 1.5 g(1.30 mmol, 2.5 %), Aliquat 336 7-8 drops를 순서대로 첨가한 후 밤샘 환류시켰다. 반응 종료 후 에틸 아세테이트와 물로 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 컬럼 크로파토그래피 (SiO2, 용리액: 10% 디클로로메탄-10% 헥산)로 정제하여 2-페닐퀴놀린-3-카브알데하이드 12.156 g(52.11 mmol, 94 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 10.19(s, 1H), 8.86(s, 1H), 8.20-8.23(d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.01-8.04(d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.85-7.91(t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.64-7.71(m, 3H), 7.55-7.61(m, 3H).
단계 2: (E)-2- 메틸 -N-((2- 페닐퀴놀린 -3-일)메틸렌)프로판-2- 설핀아마이드의 제조
250 mL 둥근바닥플라스크에 2-페닐퀴놀린-3-카브알데하이드 3 g(12.89 mmol, 1.1 eq)를 THF 100 mL에 용해시킨 후 티타늄 에톡사이드(Ti(OEt)4) 5 mL(23.43 mmol, 2 eq)와 (R)-설핀아마이드 1.42 g(11.72 mmol, 1.0 eq)을 첨가한 후 밤샘 환류시켰다. 반응 종료 후 소듐바이카보네이트 수용액을 첨가한 후 1 시간 이상 교반시킨후, 셀라이트 필터하여 에틸 아세테이트로 유기층을 분리하고 추출한 후 유기층을 소금물로 한번 세척한 후 건조 (황산나트륨), 여과, 농축하여 컬럼 크로파토그래피 (SiO2, 용리액: 10% 에틸 아세테이트-30% 헥산)로 정제하여 (E)-2-메틸-N-((2-페닐퀴놀린-3-일)메틸렌)프로판-2-설핀아마이드 3.96 g(11. 77 mmol, 91 % 수율)로 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 8.90(s, 1H), 8.80(s, 1H), 8.17-8.20(d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.95-7.98(d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.81(s, 1H), 7.50-7.61(m, 6H), 1.31(s, 9H).
단계 3: 2 - 메틸 -N-(1-(2- 페닐퀴놀린 -3-일)에틸)프로판-2- 설핀아마이드의 제조
250 mL 둥근바닥플라스크에 (S)-1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에탄-1-아민 (E)-2-메틸-N-((2-페닐퀴놀린-3-일)메틸렌)프로판-2-설핀아마이드 3.96 g(11.76mmol, 1.0 eq)를 무수 디클로로메탄 71 mL에 용해시킨 후 -48 ℃에서 MeMgBr 11.76 mL(23.53 mmol, 3 eq)를 천천히 적하한 후 5-6 시간 교반 후 상온에서 밤샘 교반시켰다. 반응 종료 후 디클로로메탄로 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조 (황산나트륨), 여과, 농축하여 컬럼 크로파토그래피 (SiO2, 용리액: 10% 에틸 아세테이트-20% 헥산-50% 디클로로메탄)로 정제하여 2-메틸-N-(1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸)프로판-2-설핀아마이드 2.52 g(7.15 mmol, 61 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 8.32(s, 1H), 8.14-8.17(d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.82-7.85(d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.68-7.74(t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.41-7.58(m, 6H), 4.90-4.98(m, 1H), 3.41-3.42(d, J = 3.1 Hz, 1H), 1.45-1.48(d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.20(s, 9H).
단계 4: (S)-1-(2- 페닐퀴놀린 -3-일) 에탄아민의 제조
250 mL 둥근바닥플라스크에 2-메틸-N-(1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸)프로판-2-설핀아마이드 2.42 g(7.15mmol, 1.0 eq)를 메탄올 50 mL에 용해시킨 후 상온에서 HCl 가스로 10-30분간 버블링시키고, 1-2 시간 교반시켰다. 반응 종료 후 소듐바이카보네이트 수용액과 에틸아세테이트로 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 컬럼 크로파토그래피(SiO2, 용리액: 20% 디클로로메탄-1% 메탄올)로 정제하여 (S)-1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에탄아민 1.65 g(6.64 mmol, 93 % 수율)로 노란색 액체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 8.43(s, 1H), 8.11-8.14(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.84-7.87(d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.66-7.71(t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.44-7.55(m, 6H), 4.42-4.48(q, J = 6.5 Hz, 1H), 1.58(s, 2H), 1.33-1.35(d, J = 6.5 Hz, 3H).
단계 5: (S)-3,3,3- 트리플루오로 -2- 메톡시 -2-페닐-N-((R)-1-(2- 페닐퀴놀린 -3-일)에틸)프로판아마이드의 제조
25 mL 둥근바닥플라스크에 (S)-1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에탄-1-아민 20 mg(0.08mmol, 1.0 eq)을 무수 디클로로메탄 5 mL에 용해시킨 후 0 ℃에서 트리에틸아민 30 μl (0.10 mmol, 2.5 eq)를 첨가하고, α-메톡시-α-(트리플루오로메틸)페닐아세틸 클로라이드 24 mg(0.10 mol, 1.2 eq)를 첨가한 후 상온에서 교반시켰다. 반응 종료 후 디메틸클로라이드와 물로 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 컬럼 크로마토그래피 (SiO2, 용리액: 10% 에틸 아세테이트- 30% 헥산)로 정제하여 (S)-3,3,3-트리플루오로-2-메톡시-2-페닐-N-((R)-1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸)프로판아마이드 30 mg(0.06 mmol, 75 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 8.18(s, 1H), 8.13-8.16(d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.83-7.85(d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.72-7.74(m, 1H), 7.64-7.67(m, 2H), 7.55-7.58(m, 1H), 7.41-7.48(m, 8H), 7.33-7.35(m, 1H), 5.38-5.43(m, 1H), 3.39(s, 3H), 1.34-1.36(d, J = 6.8 Hz, 3H).
< 제조예 9> 2-(1- 클로로에틸 )-3- 페닐퀴나졸린 -4(3H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00041
단계 1: 2 -아미노-N- 페닐벤즈아마이드의 제조
100 mL 둥근바닥플라스크에 이사토익 언하이드라이드(isatoic anhydride) 15 g(91.95 mmol, 1.0 eq)를 디메틸포름아마이드 10 mL에 용해시킨 후 아닐린 8.4 mL(91.95 mmol, 1.0 eq)를 첨가하고 130 ℃에서 2 시간 교반시켰다. 반응 종료 후 에틸 아세테이트와 물로 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조 (황산나트륨), 여과, 농축하여 컬럼 크로파토그래피 (SiO2, 용리액: 10% 디클로로메탄-10% 헥산)로 정제하여 2-아미노-N-페닐벤즈아마이드 로 베이지색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 7.74(s, 1H), 7.55-7.58(d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.46-7.48(d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.34-7.39(t, J = 7.9 Hz, 2H), 7.23-7.29(m, 1H), 7.12-7.17(t, J = 7.4 Hz, 1H), 6.69-6.74(m, 2H), 5.50(s, 2H).
단계 2: 2 -(2- 클로로프로판아미도 )-N- 페닐벤즈아마이드의 제조
100 mL 둥근바닥플라스크에 2-아미노-N-페닐벤즈아마이드 3.15 g(14.84 mmol, 1.0 eq)를 무수 디클로로메탄 30 mL에 용해시킨 후 0 ℃에서 피리딘 2.64 mL(32.65 mmol, 2.2 eq), 2-클로로프로피오닐 클로라이드 1.51 mL(15.58 mmol, 1.05 eq)를 첨가하고 교반시켰다(> 2시간). 반응 종료 후 1 N HCl, 소듐바이카보네이트 수용액, 물로 한 번씩 세척한 후 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조(황산나트륨), 여과, 농축하여 컬럼 크로파토그래피 (SiO2, 용리액: 100% 디클로로메탄)로 정제하여 2-(2-클로로프로판아미도)-N-페닐벤즈아마이드 4.2 g(13.78 mmol, 93 % 수율)로 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 11.43(s, 1H), 8.47-8.50(d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.15(s, 1H), 7.58-7.65(m, 3H), 7.38-7.49(m, 3H), 7.12-7.22(m, 2H), 4.45-4.52(q, J = 7.0 Hz, 1H), 1.80-1.82(d, J = 7.0 Hz, 3H)
단계 3: 2 -(1- 클로로에틸 )-3- 페닐퀴나졸린 -4(3H)-온의 제조
250 mL 둥근바닥플라스크에 2-(2-클로로프로판아미도)-N-페닐벤즈아마이드 4.2 g(13.78 mmol, 1.0 eq)를 톨루엔 100 mL에 용해시킨 후 p-톨루엔설포닉 애시드(p-TSA)를 첨가한 후 딘스탁 트랩을 이용하여 환류시켰다(> 2 day). 반응 종료 후 소듐바이카보네이트 수용액, 물로 한 번씩 세척한 후 유기층을 분리하여 추출한 후 유기층을 건조 (황산나트륨), 여과, 농축하여 재결정으로 2-(1-클로로에틸)-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 3.55 g(12.46 mmol, 90 % 수율)로 베이지색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 8.28-8.31(d, J = 3.9 Hz, 1H), 7.80-7.82(d, J = 1.2 Hz, 2H), 7.49-7.63(m, 5H), 4.54-4,61(q, J = 3.3, 1H), 1.86-1.88(d, J = 3.3 Hz, 3H).
< 제조예 10> 1-(7- 플루오로 -2-(3- 플루오로페닐 )퀴놀린-3-일) 에탄아민의 제조
Figure 112015125659615-pat00042
단계 1: (E)-N-((7- 플루오로 -2-(3- 플루오로페닐 )퀴놀린-3-일)메틸렌)-2- 메틸프로판 -2-설핀아마이드의 제조
7-플루오로-2-(3-플루오로페닐)퀴놀린e-3-카브알데하이드 (1.0 g, 3.71 mmol, 1.0 eq)의 THF (100 mL)에 티타늄에톡사이드(Ti(OEt)4)(1.6 mL, 7.43 mmol, 2.0 eq) 및 (R)-(+)-2-메틸-2-프로판설핀아마이드 (0.495 g, 4.09 mmol, 1.1 eq)를 상온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 3시간 환류시켰다. 반응 혼합물을 얼음 수조에 붓고 에틸아세테이트로 희석하였다. 현탁액을 10분간 교반시켰다. 혼합물을 셀라이트로 필터하고 에틸아세테이트로 세척하였다. 유기층을 에틸아세테이트로 2번 추출하고, 소금물로 세척, 황산나트륨으로 건조, 진공하에 농축하고, 플래시 컬럼 크로파토그래피 (에틸아세테이트:헥산, 1:3 -> 1:2)로 정제하여, (E)-N-((7-플루오로-2-(3-플루오로페닐)퀴놀린-3-일)메틸렌)-2-메틸프로판-2-설핀아마이드(1.3 g, 94% 수율)로 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 1.31(s, 9H), 7.18-7.54(m, 5H), 7.79-7.83(m, 1H), 7.98-8.03(m, 1H), 8.76(s, 1H), 8.91(s, 1H).
단계 2: N-((7- 플루오로 -2-(3- 플루오로페닐 )퀴놀린-3-일) 메틸 )-2- 메틸프로판 -2-설핀아마이드의 제조
(E)-N-((7-플루오로-2-(3-플루오로페닐)퀴놀린-3-일)메틸렌)-2-메틸프로판-2-설핀아마이드(1.3 g, 3.49 mmol, 1.0 eq)의 디클로로메탄 (560 mL)에 3.2 M MeMgBr의 2-메틸 테트라하이드로퓨란(2.2 mL, 6.98 mmol, 2.0 eq) -50 ℃하에 적하첨가한 후, 반응 혼합물을 상온으로 천천히 승온하였다. 3시간후, 혼합물을 얼음물로 퀀칭하였다. 유기층을 디클로로메탄으로 두번 추출하고, 소금물로 세척, 황산나트륨으로 건조, 진공하에 농축하여 플래시 컬럼 크로마토그래피 (에틸아세테이트:헥산, 4:1 -> 5:1)로 정제하여, N-((7-플루오로-2-(3-플루오로페닐)퀴놀린-3-일)메틸)-2-메틸프로판-2-설핀아마이드 (1.30 g, 96% 수율)로 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR(500 MHz, CDCl3) δ 1.23(s, 9H), 1.51-1.53(d, J = 10.0, 3H), 3.38-3.39(d, J = 5.0, 1H), 4.92-4.94(m, 1H), 7.17-7.21(m, 1H), 7.29-7.32(m, 1H), 7.38-7.41(m, 2H), 7.49-7.53(m, 1H), 7.78-7.80(m, 1H), 7.85-7.88(m, 1H), 8.35(s, 1H).
단계 3: 1 -(7- 플루오로 -2-(3- 플루오로페닐 )퀴놀린-3-일) 에탄아민의 제조
N-((7-플루오로-2-(3-플루오로페닐)퀴놀린-3-일)메틸)-2-메틸프로판-2-설핀아마이드 (0.52 g, 1.34 mmol, 1.0 eq)의 메탄올 (10 mL)에 4.0M HCl 의 1,4-다이옥산 (5 mL)을 첨가하였다. 혼합물을 40 ℃하에 2시간 교반시켰다. 혼합물을 진공하에 완벽하게 증발시켰다. 잔여물을 에틸아세테이트에 희석하고 포화 소듐바이카보네이트를 0 ℃하에 pH = 8-9이 될때까지 적하첨가하였다. 유기층을 에틸아세테이트로 두번 추출하고, 소금물로 세척, 황산나트륨으로 건조, 진공하에 농축하여 플래시 컬럼 크로마토그래피 (디클로로메탄:메탄올, 10:1)로 정제하여, 1-(7-플루오로-2-(3-플루오로페닐)퀴놀린-3-일)에탄아민을 (0.37 g, 97% 수율)로 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR(300 MHz, CDCl3) δ 1.33-1.36(d, J = 9.0, 3H), 1.53(br s, 2H), 4.41-4.45(t, J = 6.0, 1H), 4.92-4.94(m, 1H), 7.13-7.19(t, J = 9.0, 1H), 7309-7.36(m, 3H), 7.42-7.49(m, 1H), 7.71-7.75(d, J = 12.0, 1H), 7.82-7.87(m, 1H), 8.47(s, 1H).
< 실시예 1> (S)-5-(1-(8- 클로로 -1-옥소-2-페닐-1,2- 다이하이드로아이소퀴놀린 -3-일)에틸아미노)-1,2-다이하이드로피리도[4,3-b]피라진-3(4H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00043
단계 1: 2 ,4- 다이클로로 -3- 나이트로피리딘의 제조
3-나이트로피리딘-2,4-다이올 10.00 g(64.06 mmol)을 포스포릴 클로라이드(POCl3) 150mL에 용해시킨 후, 칼슘클로라이드 하에 72시간 환류시켰다. 반응 혼합물을 진공하에 제거하고, 셀라이트로 필터하고, 아세틱애시드 (3x10 mL)과 메탄올 (3x10 mL)로 세척하고, 농축한 후, 에틸아세테이트에 희석하고 소듐바이카보네이트로 중화(neutralization)시키고 셀라이트로 다시 필터하였다. 잔여물을 0℃하에 에틸 아세테이트에 희석하여 소듐바이카보네이트로 중화(neutralization)하고 에틸아세테이트로 두번 추출하고, 유기층을 소금물로 세척하고, 추출한 유기층을 건조(Na2SO4), 여과, 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 용리액: 에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 3 에서 1 : 2)로 분리하여 2,4-다이클로로-3-나이트로피리딘 9.0 g(73% 수율)을 연한 노란색의 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.46-7.48 (d, J = 6.0, 1H), 8.44-8.46 (d, J = 6.0, 1H).
단계 2: 에틸 2-(2- 클로로 -3- 나이트로피리딘 -4- 일아미노 )아세테이트의 제조
상기 단계 1에서 제조한 2,4-다이클로로-3-나이트로피리딘 0.236 g(1.222 mmol, 1.0 eq)을 무수 다이메틸포름아마이드 10 mL에 용해시킨 후, 0℃하에 다이아이소프로필에틸아민(DIPEA) 0.624 mL(3.67 mmol, 3.0 eq)와 에틸 2-아미노아세테이트 하이드로클로라이드 341 mg(2.444 mmol, 2.0 eq)을 첨가하여 0℃하에 30분간, 상온에서 3시간, 40-70℃하에 4시간 교반시켰다. 물을 사용하여 반응을 종결시킨 후, 에틸 아세테이트로 두 번 추출하고, 유기층을 소금물로 두 번 세척하였다. 추출한 유기층을 건조(Na2SO4), 여과, 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 용리액: 에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 2 에서 1 : 1)로 분리하여 에틸 2-(2-클로로-3-나이트로피리딘-4-일아미노)아세테이트 240 mg(76% 수율)을 연한 노란색의 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.31-1.35 (t, J = 6.0, 3H), 4.01-4.03 (d, J = 6.0, 2H), 4.27-4.33 (q, J = 6.0, 2H), 6.51-6.53 (d, J = 6.0, 1H), 7.01(br s,1H), 8.06-8.08 (d, J = 6.0, 1H).
단계 3: (S)-에틸 2-(2-(1-(8- 클로로 -1-옥소-2-페닐-1,2- 다이하이드로아이소퀴놀린 -3-일)에틸아미노)-3-나이트로피리딘-4-일아미노)아세테이트의 제조
20 mL 마이크로웨이브 바이알에서 상기 단계 2에서 제조한 에틸 2-(2-클로로-3-나이트로피리딘-4-일아미노)아세테이트 0.118 g(0.454 mmol, 1.0 eq)과 상기 제조예 7에서 얻은 (S)-3-(1-아미노에틸)-8-클로로-2-페닐아이소퀴놀린-1(2H)-온 0.163 g(0.545 mmol, 1.2 eq), 다이아이소프로필에틸아민(DIPEA) 0.17 mL(1.0 mmol, 2.2 eq)을 N-메틸피롤리돈(NMP) 5 mL에 용해시킨 후, 다이아이소프로필에틸아민(DIPEA)를 다시 첨가하여 반응 혼합물을 150℃하에 40분간 교반시켰다. 물을 사용하여 반응을 종결시킨 후, 다이클로로메탄으로 두번 추출하고, 유기층을 물과 소금물로 두번 세척하였다. 추출한 유기층을 건조(Na2SO4), 여과, 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 용리액: 에틸아세테이트 : 헥산 : 다이클로로메탄 = 1 : 2 : 2 에서 1 : 1 : 2)로 분리하여 (S)-에틸 2-(2-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-3-나이트로피리딘-4-일아미노)아세테이트 0.201 g(85% 수율)을 어두운 노란색의 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.31-1.35 (t, J = 6.0, 3H), 1.41-1.43 (d, J = 6.0, 3H), 4.02-4.04 (d, J = 6.0, 2H), 4.26-4.32 (q, J = 6.0, 2H), 4.83-4.91 (m, 1H), 5.77-5.79 (d, J = 6.0, 1H), 6.51 (s, 1H), 7.26-7.55 (m, 8H), 7.74-7.76 (d, J = 6.0, 1H), 9.08-9.10 (d, J = 6.0, 1H), 9.46(br s,1H).
단계 4: (S)-5-(1-(8- 클로로 -1-옥소-2-페닐-1,2- 다이하이드로아이소퀴놀린 -3-일)에틸아미노)-1,2-다이하이드로피리도[4,3-b]피라진-3(4H)-온의 제조
상기 단계 3에서 제조한 (S)-에틸 2-(2-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-3-나이트로피리딘-4-일아미노)아세테이트 95 mg(0.128 mmol, 1.0 eq)을 glacial 아세틱애시드 5 mL에 용해시킨 후, 100℃하에 철(Fe) (20. 0eq)을 첨가하여 100℃하에 1-2시간 교반시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트로 필터하고, 아세틱애시드 (3x10 mL)과 메탄올 (3x10 mL)로 세척하고, 농축한 후, 에틸아세테이트에 희석하고 소듐바이카보네이트로 중화(neutralization)시키고 셀라이트로 다시 필터하였다. 여액을 에틸아세테이트로 두번 추출하고, 유기층을 소금물로 세척하고 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 컬럼 크로마토그래피 (SiO2, 용리액: 다이클로로메탄 : 메탄올 = 20 : 1에서 15 : 1 및 10 : 1)로 분리하여 (S)-5-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-1,2-다이하이드로피리도[4,3-b]피라진-3(4H)-온 40 mg(50% 수율)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.23-1.25 (d, J = 6.0, 3H), 3.76 (s, 2H), 4.39(br s, 1H), 5.96-5.98 (d, J = 6.0, 1H), 6.29-6.31 (d, J = 6.0, 1H), 6.37 (s, 1H), 6.64 (s, 1H), 7.34-7.55 (m, 9H), 9.73 (s, 1H).
< 실시예 2> (S)-8-(1-(8- 클로로 -1-옥소-2-페닐-1,2- 다이하이드로아이소퀴놀린 -3-일)에틸아미노)-3,4-다이하이드로피리도[2,3-b]피라진-2(1H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00044
단계 1: (S)-8- 클로로 -3-(1-(2- 클로로 -3- 나이트로피리딘 -4- 일아미노 )에틸)-2-페닐아이소퀴놀린-1(2H)-온의 제조
2,4-다이클로로-3-나이트로피리딘 0.388 g(2.00 8mmol, 1.1 eq)과 상기 제조예 7에서 얻은 (S)-3-(1-아미노에틸)-8-클로로-2-페닐아이소퀴놀린-1(2H)-온 0.5 g(1.673 mmol, 1.0 eq) 을 무수 다이메틸포름아마이드(DMF) 10 mL에 용해시킨 후, 다이아이소프로필에틸아민(DIPEA) 0.626 mL(3.68 mmol, 2.2 eq)을 첨가하여 100℃하에 7시간 교반시켰다. 물을 사용하여 반응을 종결시킨 후, 에틸아세테이트로 두번 추출하고, 유기층을 물로 두번 세척하였다. 추출한 유기층을 건조(Na2SO4), 여과, 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 용리액: 에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 2 에서 1 : 1)로 분리하여 (S)-8-클로로-3-(1-(2-클로로-3-나이트로피리딘-4-일아미노)에틸)-2-페닐아이소퀴놀린-1(2H)-온 0.693 g(91% 수율)을 노란색의 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.50-1.52 (d, J = 6.0, 3H), 4.22-4.26 (m, 1H), 6.18-6.20 (d, J = 6.0, 1H), 6.44-6.46 (d, J = 6.0, 1H), 6.55 (s, 1H), 7.26-7.56 (m, 8H), 7.93-7.95 (d, J = 6.0, 1H).
단계 2: (S)-에틸 2-(4-(1-(8- 클로로 -1-옥소-2-페닐-1,2- 다이하이드로아이소퀴놀린 -3-일)에틸아미노)-3-나이트로피리딘-2-일아미노)아세테이트의 제조
상기 단계 1에서 제조한 (S)-8-클로로-3-(1-(2-클로로-3-나이트로피리딘-4-일아미노)에틸)-2-페닐아이소퀴놀린-1(2H)-온 50 mg(0.1098 mmol, 1.0 eq)과 에틸 2-아미노아세테이트 하이드로클로라이드 46 mg(0.33 mmol, 3.0 eq), 다이아이소프로필에틸아민(DIPEA) 0.112 mL(0.66 mmol, 6.0 eq)을 N-메틸피롤리돈(NMP) 3 mL에 용해시킨 후, 마이크로웨이브에서 반응 혼합물을 180℃하에 40분간 교반시켰다. 물을 사용하여 반응을 종결시킨 후, 에틸아세테이트로 두번 추출하고, 유기층을 물로 두번 세척하였다. 추출한 유기층을 건조(Na2SO4), 여과, 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 용리액: 에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 2)로 분리하여 (S)-에틸 2-(4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-3-나이트로피리딘-2-일아미노)아세테이트 50 mg(88% 수율)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.27-1.31 (t, J = 6.0, 3H), 1.50-1.52 (d, J = 6.0, 3H), 4.22-4.30 (m, 5H), 5.59-5.61 (d, J = 6.0, 1H), 6.54 (s, 1H), 7.26-7.56 (m, 8H), 7.72-7.74 (d, J = 6.0, 1H), 9.25 (br s, 2H).
단계 3: (S)-8-(1-(8- 클로로 -1-옥소-2-페닐-1,2- 다이하이드로아이소퀴놀린 -3-일)에틸아미노)-3,4-다이하이드로피리도[2,3-b]피라진-2(1H)-온의 제조
제법 1
상기 단계 2에서 제조한 (S)-에틸 2-(4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-3-나이트로피리딘-2-일아미노)아세테이트를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 4와 동일한 제조방법으로 수행하여 목적화합물 (S)-8-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-3,4-다이하이드로피리도[2,3-b]피라진-2(1H)-온 17 mg(40% 수율)을 하얀색 고체로 얻었다.
제법 2
상기 단계 2에서 제조한 (S)-에틸 2-(4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-3-나이트로피리딘-2-일아미노)아세테이트 32 mg(0.061 mmol, 1.0 eq)을 에탄올 5 mL에 용해시킨 후, 80℃하에 틴(II) 클로라이드 다이하이드레이트(SnCl2.2H2O) 70 mg(0.306 mmol, 5.0 eq)를 첨가하여 1시간 교반시켰다. 반응 혼합물을 포화 소듐바이카보네이트 수용액을 사용하여 중화(neutralization)시킨 후, 셀라이트로 필터하고 에틸아세테이트로 세척하였다. 유기층을 에틸아세테이트로 두번 추출하고, 소금물로 두번 세척하였다. 추출한 유기층을 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 용리액: 에틸아세테이트 : 메탄올 = 20 : 1 에서 15 : 1, 10 : 1)로 분리하여 목적화합물 (S)-8-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-3,4-다이하이드로피리도[2,3-b]피라진-2(1H)-온 14 mg(52% 수율)을 하얀색의 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.32-1.34 (d, J = 6.0, 3H), 3.75 (s, 2H), 3.84-3.87 (m, 1H), 5.58-5.60 (d, J = 6.0, 1H), 6.02-6.03 (d, J = 3.0, 1H), 6.69 (s, 1H), 7.30-7.32 (d, J = 6.0, 1H), 7.47-7.62 (m, 8H), 9.80 (s, 1H).
< 실시예 3> (S)-4-(1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00045
단계 1: 에틸 2-(6- 클로로 -5- 나이트로피리미딘 -4- 일아미노 )아세테이트의 제조
4,6-다이클로로-5-나이트로피리미딘 및 에틸 2-아미노아세테이트 하이드로클로라이드를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 제조방법으로 수행하여 에틸 2-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)아세테이트 247 mg(69% 수율)을 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.29-1.35 (t, J = 9.0, 3H), 4.24-4.32 (q, J = 9.0, 2H), 4.33-4.35 (d, J = 6.0, 2H), 7.92 (s, br, 1H), 8.42 (s, 1H).
단계 2: (S)-에틸 2-(6-(1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)아세테이트의 제조
상기 단계 1에서 얻은 에틸 2-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)아세테이트 및 상기 제조예 2의 단계 3에서 얻은 (S)-2-(1-아미노에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3와 동일한 제조방법으로 수행하여 (S)-에틸 2-(6-(1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)아세테이트 390 mg을 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.27-1.32 (t, J = 9.0, 3H), 1.44-1.46 (d, J = 6.0, 3H), 4.21-4.28 (q, J = 9.0, 2H), 4.31-4.33 (d, J = 6.0, 2H), 5.08-5.17 (m, 1H), 7.33-7.69 (m, 8H), 7.96 (s, 1H),9.46 (s, 1H), 9.98-10.00 (d, J = 6.0, 1H).
단계 3: (S)-4-(1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온의 제조
상기 단계 2에서 제조한 (S)-에틸 2-(6-(1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)아세테이트 200 mg(1.0 eq)을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 4와 동일한 제조방법으로 수행하여 목적화합물 (S)-4-(1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온 20.5 mg(12% 수율)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.31-1.33 (d, J = 6.0, 3H), 3.88 (s, 2H), 4.47-4.52 (m, 1H), 6.84-6.87 (d, J = 9.0, 1H), 6.92 (s, 1H), 7.50-7.74 (m, 9H), 9.79 (s, 1H).
< 실시예 4> (S)-4-(1-(8- 클로로 -1-옥소-2-페닐-1,2- 다이하이드로아이소퀴놀린 -3-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00046
단계 1: (S)-에틸 2-(6-(1-(5- 클로로 -1-옥소-2-페닐-1,2- 다이하이드로퀴놀린 -3-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)아세테이트의 제조
상기 실시예 3의 단계 1에서 제조한 에틸 2-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)아세테이트 및 상기 제조예 7에서 얻은 (S)-3-(1-아미노에틸)-8-클로로-2-페닐아이소퀴놀린-1(2H)-온을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 제조방법으로 수행하여 (S)-에틸 2-(6-(1-(5-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로퀴놀린-3-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)아세테이트 393 mg을 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.28-1.33 (t, J = 9.0, 3H), 1.45-1.47 (d, J = 6.0, 3H), 4.22-4.29 (q, J = 9.0, 2H), 4.32-4.34 (d, J = 6.0, 2H), 4.94-5.03 (m, 1H), 6.50 (s, 1H), 7.29-7.54 (m, 8H), 7.93 (s, 1H), 9.22-9.24 (d, J = 6.0, 1H), 9.41-9.44 (m, 1H).
단계 2: (S)-4-(1-(8- 클로로 -1-옥소-2-페닐-1,2- 다이하이드로아이소퀴놀린 -3-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온의 제조
제법 1
상기 단계 1에서 제조한 (S)-에틸 2-(6-(1-(5-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로퀴놀린-3-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)아세테이트를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 4와 동일한 제조방법으로 수행하여 목적화합물 (S)-4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온 167 mg(98% 수율)을 얻었다.
제법 2
상기 단계 1에서 제조한 (S)-에틸 2-(6-(1-(5-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로퀴놀린-3-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)아세테이트 200 mg(1.0 eq)을 에탄올:테트라하이드로퓨란:물 (3:1:1) 혼합용매 25 mL에 용해시킨 후, 소듐다이티오나이트(Na2S2O4)(6.0 eq)을 물 3 mL에 용해시켜 상온에서 반응 혼합물에 천천히 첨가하여 3-4시간 교반시켰다. 반응 혼합물에 에틸아세테이트와 물을 가하여 추출한 유기층을 건조(Na2SO4), 여과, 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 다이클로로메탄에 녹여 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 용리액: 다이클로로메탄 : 메탄올 = 20 : 1 에서 15 : 1 및 10 : 1)로 분리하여 목적화합물 (S)-4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온 18.8 mg(11% 수율)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.26-1.28 (d, J = 6.0, 3H), 3.88 (s, 2H), 4.46-4.50 (m, 1H), 6.67 (s, 1H), 6.70-6.72 (d, J = 6.0, 1H), 6.90 (s, 1H), 7.37-7.64 (m, 9H), 9.74 (s, 1H).
< 실시예 5> 4-(1-(2- 페닐퀴놀린 -3-일) 에틸아미노 )-7,8- 다이하이드로프테리딘 -6(5H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00047
단계 1: 에틸 2-(5-나이트로-6-(1-(2- 페닐퀴놀린 -3-일) 에틸아미노 )피리미딘-4-일아미노)아세테이트의 제조
상기 실시예 3의 단계 1에서 제조한 에틸 2-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)아세테이트 및 1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에탄아민을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 제조방법으로 수행하여 에틸 2-(5-나이트로-6-(1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸아미노)피리미딘-4-일아미노)아세테이트 348 mg을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.27-1.32 (t, J = 9.0, 3H), 1.50-1.52 (d, J = 6.0, 3H), 4.21-4.28 (d, J = 9.0, 2H), 4.30-4.32 (d, J = 6.0, 2H), 5.69-5.78 (m, 1H), 7.40-7.57 (m, 4H), 7.65-7.73 (m, 3H), 7.82-7.85 (d, J = 9.0, 1H), 7.93 (s, 1H), 8.12-8.16 (m, 1H), 9.45-9.50 (m, 2H).
단계 2: 4 -(1-(2- 페닐퀴놀린 -3-일) 에틸아미노 )-7,8- 다이하이드로프테리딘 -6(5H)-온의 제조
상기 단계 1에서 제조한 에틸 2-(5-나이트로-6-(1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸아미노)피리미딘-4-일아미노)아세테이을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 4의 단계 2의 제법 2와 동일한 제조방법으로 수행하여 목적화합물 4-(1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온 76 mg(45% 수율)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.30-1.32 (d, J = 6.0, 3H), 3.89 (s, 2H), 5.36-5.41 (m, 1H), 6.84-6.87 (m, 2H), 7.44-7.73 (m, 8H), 7.95-8.00 (m, 2H), 8.34 (s, 1H), 9.85 (s, 1H).
< 실시예 6> (S)-4-(1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸아미노)-2-(트리플루오로메틸)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00048
단계 1: 메틸 2-(6- 클로로 -5-나이트로-2-( 트리플루오로메틸 )피리미딘-4- 일아미노 )아세테이트의 제조
4,6-다이클로로-5-나이트로-2-(트리플루오로메틸)피리미딘 및 글리신메틸에스터 하이드로클로라이드를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 제조방법으로 수행하여 메틸 2-(6-클로로-5-나이트로-2-(트리플루오로메틸)피리미딘-4-일아미노)아세테이트 150 mg(35% 수율)을 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 3.89 (s, 3H), 4.39-4.41 (d, J = 6.0, 2H), 8.03(br s, 1H).
단계 2: (S)- 메틸 2-(6-(1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-5-나이트로-2-(트리플루오로메틸)피리미딘-4-일아미노)아세테이트의 제조
상기 단계 1에서 제조한 메틸 2-(6-클로로-5-나이트로-2-(트리플루오로메틸)피리미딘-4-일아미노)아세테이트 및 상기 제조예 2의 단계 3에서 얻은 (S)-2-(1-아미노에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 제조방법으로 수행하여(S)-메틸 2-(6-(1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-5-나이트로-2-(트리플루오로메틸)피리미딘-4-일아미노)아세테이트 131 mg(95% 수율)을 하얀색 고체로 얻었다.
1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1.43-1.45 (d, J = 6.0, 3H), 3.80 (s, 3H), 4.37-4.39 (d, J = 6.0, 2H), 5.25-5.32 (m, 1H), 7.34-7.64 (m, 8H), 9.57(br s, 1H), 10.04-10.06 (d, J = 6.0, 1H).
단계 3: (S)-4-(1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸아미노)-2-(트리플루오로메틸)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온의 제조
상기 단계 2에서 제조한 (S)-메틸 2-(6-(1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-5-나이트로-2-(트리플루오로메틸)피리미딘-4-일아미노)아세테이트를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 4와 동일한 제조방법으로 수행하여 목적화합물 (S)-4-(1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-2-(트리플루오로메틸)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온 35 mg(39% 수율)을 하얀색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.30-1.33 (d, J = 9.0, 3H), 3.97 (s, 2H), 4.62-4.67 (m, 1H), 7.15-7.17 (d, J = 6.0, 1H), 7.44-7.59 (m, 8H), 7.70-7.75 (m, 1H), 10.03 (s, 1H).
< 실시예 7> (S)-4-(1-(5- 플루오로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)프로필아미노)-2-(트리플루오로메틸)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00049
단계 1: (S)- 메틸 2-(6-(1-(5-플루오로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)프로필아미노)-5-나이트로-2-(트리플루오로메틸)피리미딘-4-일아미노)아세테이트의 제조
상기 실시예 6의 단계 1에서 제조한 메틸 2-(6-클로로-5-나이트로-2-(트리플루오로메틸)피리미딘-4-일아미노)아세테이트 및 (S)-2-(1-아미노프로필)-5-플루오로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 제조방법으로 수행하여 (S)-메틸 2-(6-(1-(5-플루오로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)프로필아미노)-5-나이트로-2-(트리플루오로메틸)피리미딘-4-일아미노)아세테이트 136 mg(99% 수율)을 하얀색 고체로 얻었다.
1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 0.7-0.83 (t, J = 9.0, 3H), 1.69-1.93 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 4.37-4.39 (d, J = 6.0, 2H), 5.24-5.30 (m, 1H), 7.10-7.16 (m, 1H), 7.32-7.73 (m, 7H), 9.58(br s, 1H), 9.96-9.99 (d, J = 9.0, 1H).
단계 2: (S)-4-(1-(5- 플루오로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)프로필아미노)-2-(트리플루오로메틸)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온의 제조
상기 단계 1에서 제조한 (S)-메틸 2-(6-(1-(5-플루오로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)프로필아미노)-5-나이트로-2-(트리플루오로메틸)피리미딘-4-일아미노)아세테이트를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 4와 동일한 제조방법으로 수행하여 목적화합물 (S)-4-(1-(5-플루오로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)프로필아미노)-2-(트리플루오로메틸)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온 27 mg(60% 수율)을 하얀색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.66-0.70 (t, J = 6.0, 3H), 1.60-1.63 (m, 1H), 1.86-1.97 (m, 1H), 3.97 (s, 2H), 4.49(br s, 1H), 7.05-7.08 (d, J = 9.0, 1H), 7.24-7.30 (m, 1H), 7.44-7.57 (m, 7H), 7.75-7.83 (m, 1H), 10.12 (s, 1H).
< 실시예 8> (S)-4-(1-(8- 클로로 -1-옥소-2-페닐-1,2- 다이하이드로아이소퀴놀린 -3-일) 에틸아미노 )-5- 메틸 -7,8- 다이하이드로프테리딘 -6(5H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00050
20 mL 마이크로웨이브 바이알에서 상기 실시예 4의 단계 2에서 제조한 (S)-4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온 44.7 mg(0.1 mmol, 1.0 eq)을 무수 다이메틸포름아마이드 3mL에 용해시킨 후, 5℃하에 1.0 M 소듐 비스(트리메틸실릴)아마이드(NaHMDS)의 테트라하이드로퓨란 용액 0.12 mL(0.12 mmol, 1.2 eq)을 첨가하여 10분간 교반시킨 후, 과량의 메틸아이오다이드를 첨가하여 1시간 교반시켰다. 얼음물을 사용하여 반응을 종결시킨 후, 에틸 아세테이트로 두번 추출하고, 유기층을 소금물로 두번 세척하였다. 추출한 유기층을 건조(Na2SO4), 여과, 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 용리액: 에틸아세테이트 : 메탄올 = 20 : 1 에서 15 : 1)로 분리하여 목적화합물 (S)-4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린 -3-일)에틸아미노)-5-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온 6.5 mg(14% 수율)을 하얀색의 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.38-1.41 (d, J = 9.0, 3H), 3.34(s ,3H), 3.92 (s, 2H), 4.48-4.50 (d, J = 6.0, 1H), 4.78-4.83 (m, 1H), 5.31 (s, 1H), 6.49 (s, 1H), 7.28-7.55 (m, 8H),7.86 (s, 1H).
< 실시예 9> 7- 메틸 -4-(-1-(2- 페닐퀴놀린 -3-일) 에틸아미노 )-7,8- 다이하이드로프테리딘 -6(5H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00051
단계 1: 메틸 2-(6- 클로로 -5- 나이트로피리미딘 -4- 일아미노 ) 프로파노에이트의 제조
4,6-다이클로로-5-나이트로피리미딘 0.4 g(2.06 mmol)을 무수 다이메틸포름아마이드(DMF) 10mL에 용해시킨 후, 0℃하에 트리에틸아민 0.575 mL(4.12 mmol), 메틸 2-아미노프로파노에이트 하이드로클로라이드(1.0 eq)를 첨가하여 2시간 교반시켰다. 물로 반응을 종결시킨 후, 에틸 아세테이트로 두번 추출하였다. 유기층을 소금물로 세척하고, 건조(Na2SO4), 여과, 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 컬럼 크로마토그래피 (SiO2, 용리액: 에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 5에서 1 : 4)로 분리하여 메틸 2-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 283 mg(79% 수율)을 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.56-1.59 (m, 3H), 3.80 (s, 3H), 4.83-4.90 (m, 1H), 7.87 (s, br, 1H), 8.40 (s, 1H).
단계 2: 메틸 2-(5-나이트로-6-(-1-(2- 페닐퀴놀린 -3-일) 에틸아미노 )피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트의 제조
상기 단계 1에서 제조한 메틸 2-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 200 mg(1.0 eq), (S)-1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에탄아민 (1.2 eq) 트리에틸아민 (2.2 eq)을 무수 다이옥산 10 mL에 용해시킨 후, 65-70 ℃하에 1시간 교반시켰다. 물로 반응을 종결시킨 후, 에틸 아세테이트로 두번 추출하였다. 유기층을 소금물로 세척하고, 건조(Na2SO4), 여과, 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 컬럼 크로마토그래피 (SiO2, 용리액: 에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 3에서 1 : 2 및 1 : 1)로 분리하여 메틸 2-(5-나이트로-6-(-1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸아미노)피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 352 mg을 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.49-1.59 (m, 6H), 3.75-3.76 (d, J = 3.0, 3H), 4.82-4.91 (m, 1H), 5.70-5.74 (m, 1H), 5.69-5.78 (m, 1H), 7.40-7.57 (m, 4H), 7.65-7.73 (m, 3H), 7.81-7.85 (m, 1H), 7.91 (s, 1H), 8.12-8.17 (m, 2H), 9.40-9.50 (m, 2H).
단계 3: 7 - 메틸 -4-(-1-(2- 페닐퀴놀린 -3-일) 에틸아미노 )-7,8- 다이하이드로프테리딘 -6(5H)-온의 제조
상기 단계 2에서 제조한 메틸 2-(5-나이트로-6-(-1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸아미노)피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 200 mg(1.0 eq)을 메탄올 20 mL에 용해시킨 후, 질소 가스 하에 10 중량%의 팔라듐/차콜(Pd/C) 100mg을 조심스럽게 첨가한 후, 수소가스를 주입시켜 밤샘 교반시켰다. 반응 혼합물을 셀라이트로 필터하고, 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 컬럼 크로마토그래피 (SiO2, 용리액: 다이클로로메탄 : 메탄올 = 20 : 1에서 15 : 1 및 10 : 1)로 분리하여 목적화합물 7-메틸-4-(-1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온 33 mg(19% 수율)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.24-1.32 (m, 6H), 3.95-4.01 (m, 1H), 5.36-5.40 (m, 1H), 6.83-6.85 (d, J = 6.0, 1H), 6.98 (s, 1H), 7.43-7.73 (m, 8H), 8.34 (s, 1H), 9.80-9.81 (d, J = 3.0, 1H).
< 실시예 10> 4-((S)-1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00052
단계 1: 메틸 2-(6-((S)-1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트의 제조
상기 실시예 9의 단계 1에서 제조한 메틸 2-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 200 mg(1.0 eq)과 상기 제조예 2의 단계 3에서 얻은 (S)-2- (1-아미노에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온 (1.2 eq), 트리에틸아민 (2.2 eq)을 무수 다이옥산 10 mL에 용해시킨 후, 65-70 ℃하에 1시간 교반시켰다. 물로 반응을 종결시킨 후, 에틸 아세테이트로 두번 추출하였다. 유기층을 소금물로 세척하고, 건조(Na2SO4), 여과, 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 컬럼 크로마토그래피 (SiO2, 용리액: 에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 3에서 1 : 2 및 1 : 1)로 분리하여 메틸 2-(6-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 390 mg을 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.43-1.46 (dd, J = 3.0, J = 6.0, 3H), 1.54-1.56 (d, J = 6.0, 3H), 3.76-3.77 (d, J = 3.0, 3H), 4.82-4.92 (m, 1H), 5.06-5.16 (m, 1H), 7.32-7.70 (m, 8H), 7.95 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 9.98-10.00 (d, J = 6.0, 1H).
단계 2: 4 -((S)-1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온의 제조
상기 단계 1에서 제조한 (S)-메틸 2-(6-(1-(5-플루오로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)프로필아미노)-5-나이트로-2-(트리플루오로메틸)피리미딘-4-일아미노)아세테이트를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 4의 단계 2의 제법 2와 동일한 제조방법으로 수행하여 목적화합물 4-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온 47.6 mg(27% 수율)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.23-1.34 (m, 6H), 3.96-4.01 (m, 1H), 4.48-4.52 (m, 1H), 6.86-6.88 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 7.50-7.74 (m, 9H), 9.76 (s, 1H).
< 실시예 11> (R)-4-((S)-1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00053
단계 1: (R)- 메틸 2-(6- 클로로 -5- 나이트로피리미딘 -4- 일아미노 ) 프로파노에이트의 제조
4,6-다이클로로-5-나이트로피리미딘 및 (R)-메틸 2-아미노프로파노에이트 하이드로클로라이드를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 제조방법으로 수행하여 (R)-메틸 2-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 283 mg(79% 수율)을 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.56-1.59 (m, 3H), 3.80 (s, 3H), 4.83-4.90 (m, 1H), 7.87 (s, br, 1H), 8.40 (s, 1H).
단계 2: (R)- 메틸 2-(6-((S)-1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트의 제조
상기 단계 1에서 제조한 (R)-메틸 2-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 및 상기 제조예 2의 단계 3에서 얻은 (S)-2-(1-아미노에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3와 동일한 제조방법으로 수행하여 (R)-메틸 2-(6-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 390 mg을 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.43-1.46 (dd, J = 3.0, J = 6.0, 3H), 1.54-1.56 (d, J = 6.0, 3H), 3.76-3.77 (d, J = 3.0, 3H), 4.82-4.92 (m, 1H), 5.06-5.16 (m, 1H), 7.32-7.70 (m, 8H), 7.95 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 9.98-10.00 (d, J = 6.0, 1H).
단계 3: (R)-4-((S)-1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온의 제조
상기 단계 2에서 제조한 (R)-메틸 2-(6-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 4의 단계 2의 제법 2와 동일한 제조방법으로 수행하여 목적화합물 (R)-4-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온 47.6 mg(27% 수율)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.23-1.34 (m, 6H), 3.96-4.01 (m, 1H), 4.48-4.52 (m, 1H), 6.86-6.88 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 7.50-7.74 (m, 9H), 9.76 (s, 1H).
< 실시예 12> (S)-4-((S)-1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00054
단계 1: (S)- 메틸 2-(6- 클로로 -5- 나이트로피리미딘 -4- 일아미노 ) 프로파노에이트의 제조
4,6-다이클로로-5-나이트로피리미딘 및 (S)-메틸 2-아미노프로파노에이트 하이드로클로라이드을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 제조방법으로 수행하여 (S)-메틸 2-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 283 mg(79% 수율)을 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.56-1.59 (m, 3H), 3.80 (s, 3H), 4.83-4.90 (m, 1H), 7.87 (s, br, 1H), 8.40 (s, 1H).
단계 2: (S)- 메틸 2-(6-((S)-1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트의 제조
상기 단계 1에서 제조한 (S)-메틸 2-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 및 상기 제조예 2의 단계 3에서 얻은 (S)-2-(1-아미노에틸)-5-클로로-3-페닐퀴나졸린-4(3H)-온을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 제조방법으로 수행하여 (S)-메틸 2-(6-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 390 mg을 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.43-1.46 (dd, J = 3.0, J = 6.0, 3H), 1.54-1.56 (d, J = 6.0, 3H), 3.76-3.77 (d, J = 3.0, 3H), 4.82-4.92 (m, 1H), 5.06-5.16 (m, 1H), 7.32-7.70 (m, 8H), 7.95 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 9.98-10.00 (d, J = 6.0, 1H).
단계 3: (S)-4-((S)-1-(5- 클로로 -4-옥소-3-페닐-3,4- 다이하이드로퀴나졸린 -2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온의 제조
상기 단계 2에서 제조한 (S)-메틸 2-(6-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 4의 단계 2의 제법 2와 동일한 제조방법으로 수행하여 목적화합물 (S)-4-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온 47.6 mg(27% 수율)을 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.23-1.34 (m, 6H), 3.96-4.01 (m, 1H), 4.48-4.52 (m, 1H), 6.86-6.88 (m, 1H), 7.03 (s, 1H), 7.50-7.74 (m, 9H), 9.76 (s, 1H).
< 실시예 13> 4'-((1-(2- 페닐퀴놀린 -3-일)에틸)아미노)- 5'H - 스피로 [사이클로프로판-1,7'-프테리딘]-6'(8'H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00055
단계 1: 에틸 1-(6- 클로로 -5- 나이트로피리미딘 -4- 일아미노 ) 사이클로프로판카복실레이트의 제조
4,6-다이클로로-5-나이트로피리미딘 및 에틸 1-아미노사이클로프로판카복실레이트 하이드로클로라이드를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 2와 동일한 제조방법으로 수행하여 에틸 1-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)사이클로프로판카복실레이트 382 mg(97% 수율)을 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.17-1.26 (m, 5H), 1.73-1.77 (m, 2H), 4.12-4.19 (q, J = 6.0, 2H), 7.76 (s, br, 1H), 8.47 (s, 1H).
단계 2: 에틸 1-(5-나이트로-6-(1-(2- 페닐퀴놀린 -3-일) 에틸아미노 )피리미딘-4-일아미노)사이클로프로판카복실레이트의 제조
상기 단계 1에서 제조한 에틸 1-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)사이클로프로판카복실레이트 및 1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에탄아민을 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 3과 동일한 제조방법으로 수행하여 에틸 1-(5-나이트로-6-(1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸아미노)피리미딘-4-일아미노)사이클로프로판카복실레이트 344 mg을 연한 노란색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.14-1.23 (m, 5H), 1.50-1.53 (d, J = 9.0, 3H), 1.68-1.72 (m, 2H), 4.08-4.15 (m, 2H), 5.68-5.77 (m, 1H), 7.42-7.57 (m, 4H), 7.66-7.73 (m, 3H), 7.82-7.85 (d, J = 9.0, 1H), 7.98 (s, 1H), 8.12-8.17 (m, 2H), 9.36-9.44 (m, 2H).
단계 3: 4 '-((1-(2- 페닐퀴놀린 -3-일)에틸)아미노)- 5'H - 스피로 [사이클로프로판-1,7'-프테리딘]-6'(8'H)-온의 제조
상기 단계 2에서 제조한 에틸 1-(5-나이트로-6-(1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸아미노)피리미딘-4-일아미노)사이클로프로판카복실레이트를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 4와 동일한 제조방법으로 수행하여 목적화합물 4'-((1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸)아미노)-5'H-스피로[사이클로프로판-1,7'-프테리딘]-6'(8'H)-온 153 mg(90% 수율)을 얻었다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0.84 (s, 2H), 1.21-1.22 (d, J = 3.0, 2H), 1.29-1.31 (d, J = 6.0, 3H), 5.35-5.40 (m, 1H), 6.83-6.85 (d, J = 6.0, 1H), 6.99 (s, 1H), 7.43-7.73 (m, 8H), 7.95-8.01 (m, 1H), 9.86 (s, 1H).
< 실시예 14> (S)-4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-8,9-다이하이드로-5H-피리미도[5,4-b][1,4]디아제핀-6(7H)-온의 제조
Figure 112015125659615-pat00056
단계 1: 에틸 3-(6- 클로로 -5- 나이트로피리미딘 -4- 일아미노 ) 프로파노에이트의 제조
4,6-다이클로로-5-나이트로피리미딘 0.4 g(2.06 mmol, 1.5 eq)을 무수 다이메틸포름아마이드 10 mL에 용해시킨 후, 0℃하에 다이아이소프로필에틸아민(DIPEA) 0.7 mL(4.12 mmol, 3.0 eq)와 에틸 3-아미노프로파노에이트 하이드로클로라이드 211 mg(1.373 mmol, 1.0 eq)을 첨가하여 2시간 교반시켰다. 물을 사용하여 반응을 종결시킨 후, 에틸 아세테이트로 두번 추출하고, 유기층을 소금물로 두번 세척하였다. 추출한 유기층을 건조(Na2SO4), 여과, 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 용리액: 에틸아세테이트 : 헥산 = 1 : 5 에서 1 : 4)로 분리하여 에틸 3-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 306 mg(81% 수율)을 연한 노란색의 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.27-1.31 (t, J = 6.0, 3H), 2.66-2.70 (t, J = 6.0, 2H), 3.89-3.95 (q, J = 6.0, 2H), 4.16-4.23 (m, 2H), 7.98 br s, 1H), 8.39 (s, 1H).
단계 2: (S)-에틸 3-(6-(1-(8- 클로로 -1-옥소-2-페닐-1,2- 다이하이드로아이소퀴놀린 -3-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트의 제조
상기 단계 1에서 제조한 에틸 3-(6-클로로-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 0.22 g(0.8 mmol, 1.0 eq)와 상기 제조예 7에서 얻은 (S)-3-(1-아미노에틸)-8-클로로-2-페닐아이소퀴놀린-1(2H)-온 0.287 g(0.96 mmol, 1.2 eq), 다이아이소프로필에틸아민(DIPEA) 0.3 mL(1.76 mmol, 2.2 eq)을 무수 다이옥산 10 mL에 용해시킨 후, 70℃하에 30분간 동안 교반시켰다. 물을 사용하여 반응을 종결시킨 후, 다이클로로메탄으로 두번 추출하고, 유기층을 소금물로 두번 세척하였다. 추출한 유기층을 건조(Na2SO4), 여과, 농축하여 얻은 정제하지 않은 생성물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 용리액: 에틸아세테이트 : 헥산 : 다이클로로메탄 = 1 : 2 : 2 에서 1 : 1 : 2)로 분리하여 (S)-에틸 3-(6-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트 0.415 g(97% 수율)을 연한 노란색의 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.26-1.30 (t, J = 6.0, 3H), 1.44-1.46 (d, J = 6.0, 3H), 2.65-2.69 (t, J= 6.0, 2H), 3.87-3.93 (m, 2H), 4.15-4.22 (m, 2H), 4.94-5.03 (m, 1H), 6.49 (s, 1H), 7.26-7.51 (m, 8H), 7.93 (s, 1H), 9.27-9.29 (d, J = 6.0, 1H), 9.50(br s, 1H).
단계 3: (S)-4-(1-(8- 클로로 -1-옥소-2-페닐-1,2- 다이하이드로아이소퀴놀린 -3-일)에틸아미노)-8,9-다이하이드로-5H-피리미도[5,4-b][1,4]디아제핀-6(7H)-온의 제조
상기 단계 2에서 제조한 (S)-에틸 3-(6-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-5-나이트로피리미딘-4-일아미노)프로파노에이트를 사용한 것을 제외하고는 상기 실시예 1의 단계 4와 동일한 제조방법으로 수행하여 목적화합물 (S)-4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-8,9-다이하이드로-5H-피리미도[5,4-b][1,4]디아제핀-6(7H)-온 61 mg(41% 수율)을 흰색 고체로 얻었다.
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.27-1.29 (d, J = 6.0, 3H), 2.48(br s, 2H), 3.50(br s, 2H), 4.44-4.48 (m, 1H),6.67-6.69 (d, J = 6.0, 1H), 6.81 (s, 2H), 7.35-7.66 (m, 9H), 8.63 (s, 1H).
하기 표 1에 실시예 1 내지 14에서 제조한 화합물의 화학구조식을 정리하여 나타내었다.
실시예 구조식 실시예 구조식
1
Figure 112015125659615-pat00057
 2
Figure 112015125659615-pat00058
3
Figure 112015125659615-pat00059
 4
Figure 112015125659615-pat00060
5
Figure 112015125659615-pat00061
 6
Figure 112015125659615-pat00062
7
Figure 112015125659615-pat00063
 8
Figure 112015125659615-pat00064
9
Figure 112015125659615-pat00065
 10
Figure 112015125659615-pat00066
11
Figure 112015125659615-pat00067
 12
Figure 112015125659615-pat00068
13
Figure 112015125659615-pat00069
 14
Figure 112015125659615-pat00070
< 실험예 1> 포스파티딜이노시톨 3-키나아제 알파( Phosphatidylinositol 3 kinase alpha, PI3K α)에 대한 억제 활성 검증
본 발명에 따른 실시예 1 내지 14의 포스파티딜이노시톨 3-키나아제 알파Phosphatidylinositol 3 kinase alpha, PI3K α)에 대한 억제 활성 검증 실험을 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다. 모든 화합물은 ATP = 10 uM, 샘플 농도 = 100 nM에서 효소(enzyme, PI3K α)의 저해를 측정하였다.
단계 1: 인간유방암세포(MDA-MB-453 cell)를 10% 우태아혈청(fetal bovine serum; Hyclone, 미국)이 포함된 DMEM배지(Dulbecco's Modified Eagle Medium, Hyclone, SH30243.01)를 이용하여, 12웰 플레이트에 웰당 1,000,000개 세포가 들어가도록 분주한다. 24시간동안 37℃ CO2 인큐베이터에서 안정화를 준 다음, 화합물을 1시간 30분 처리한다. 이후, PI3K알파의 세포내 활성을 증가시킬 수 있는 EGF(Epidermal Growth Factor)(10 μg/mL; R&D, 2150-C5)이 10 ng/mL이 되도록 처리한다. 5분 배양 후, 배지를 모두 버리고 차가운 PBS(인산완충용액, gibco, 14190-250)로 세포를 씻어준 후 파이펫을 이용하여 PBS를 완전히 제거한다. 이후, 하기 단계 2로 표시되는 웨스턴블랏 분석을 통해, 세포내 PI3K알파의 활성 정도를 평가한다.
단계 2: 웨스턴블랏 분석
자극이 주어진 세포를 1.5mL 튜브에 옮겨 3000 rpm에 1분 동안 원심분리하고, RIPA 버퍼(Radioimmunoprecipitation assay buffer)(50 mM Tris-HCl, 5 mM EDTA, 150 mM NaCl, 1% NP-40, 1 mM PMSF, pH 8.0; ELPIS, 한국)를 100 μL 넣고 4℃ 냉장고에 12시간동안 보관한다. 이후, 4℃에서 14000 rpm, 20분 동안 원심분리하여 상층액은 새로운 1.5mL 튜브에 옮긴다. BCA(Bicinchoninic acid)법으로 단백질을 정량하고 계산하여 샘플을 준비한다. 샘플 버퍼(ELPIS,EBA-1052)는 5X 사용, 단백질은 10 μg사용, 나머지는 1X 샘플버퍼를 사용하여 총량은 20 μL가 되도록 한다. 5분 동안 100℃에서 끓이고 기화된 수증기는 냉장고에서 응결시켰다. 기벽에 묻은 액체는 몇 초 동안 원심분리하여 다운시켰다. 이후, 시료는 10% SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)acrylamide gel에서 분리되도록 하고, 이후, 분리된 단백질은 PVDF(poly-vinyl difluoride) membrane(Millipore,ipvh00010)으로 옮겨지도록 하고, 이후, pAkt(phospho protein kinase B) 항체 (Ser473 또는 Thr308; Cell signaling, 9271s 또는 13038s)로 12시간 동안 4℃에서 반응시킨다. TBST(Tris-Buffered Saline with Tween 20)(10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 150 mM NaCl, 0.1% Tween-20)로 5분씩 3번 씻어주고, 2차 항체로 토끼항체(santacruz,sc-2004)를 분주하여 2시간 동안 실온에서 반응한다. TBST로 10분씩 3번 씻어주고 ECL(enhanced chemiluminescence)(thermo, NCI34095KR)을 뿌리고 LAS-3000을 이용하여 밴드를 확인한다.
< 실험예 2> 포스파티딜이노시톨 3- 키나아제 베타( Phosphatidylinositol 3 kinase beta, PI3K β)에 대한 억제 활성 검증
본 발명에 따른 실시예 1 내지 14의 포스파티딜이노시톨 3-키나아제 γ(Phosphatidylinositol 3 kinase gamma, PI3K γ)에 대한 억제 활성 검증 실험을 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다. 모든 화합물은 ATP = 10 uM, 샘플 농도 = 100 nM에서 효소(enzyme, PI3K γ)의 저해를 측정하였다.
인간전립선암세포(PC3 cell)를 10% 우태아혈청(fetal bovine serum; Hyclone, 미국)이 포함된 DMEM배지(Dulbecco's Modified Eagle Medium, Hyclone, SH30243.01)를 이용하여, 12웰 플레이트에 웰당 1,000,000개 세포가 들어가도록 분주한다. 24시간동안 37℃ CO2 인큐베이터에서 안정화를 준 다음, 화합물을 1시간 30분 처리한다. 이후, PI3K베타의 세포내 활성을 증가시킬 수 있는 LPA(lysophosphatidic acid)(10 μg/mL; R&D, 2150-C5)이 10 ng/mL이 되도록 처리한다. 5분 배양 후, 배지를 모두 버리고 차가운 PBS(인산완충용액, gibco, 14190-250)로 세포를 씻어준 후 파이펫을 이용하여 PBS를 완전히 제거한다. 이후, 상기 실험예 1의 단계 2(웨스턴블랏 분석)를 통해, 세포내 PI3K베타의 활성 정도를 평가한다.
< 실험예 3> 포스파티딜이노시톨 3-키나아제 γ( Phosphatidylinositol 3 kinase gamma, PI3K γ)에 대한 억제 활성 검증
본 발명에 따른 실시예 1 내지 14의 포스파티딜이노시톨 3-키나아제 γ(Phosphatidylinositol 3 kinase gamma, PI3K γ)에 대한 억제 활성 검증 실험을 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다. 모든 화합물은 ATP = 10 uM, 샘플 농도 = 100 nM에서 효소(enzyme, PI3K γ)의 저해를 측정하였다.
대식세포(RAW264.7 cell)를 10% 우태아혈청(fetal bovine serum; Hyclone, 미국)이 포함된 DMEM배지(Dulbecco's Modified Eagle Medium, Hyclone, SH30243.01)를 이용하여, 12웰 플레이트에 웰당 1,000,000개 세포가 들어가도록 분주한다. 24시간동안 37℃ CO2 인큐베이터에서 안정화를 준 다음, 화합물을 1시간 30분 처리한다. 이후, PI3Kγ의 세포내 활성을 증가시킬 수 있는 C5a(Complement component 5a)(10 μg/mL; R&D, 2150-C5)이 10 ng/mL이 되도록 처리한다. 5분 배양 후, 배지를 모두 버리고 차가운 PBS(인산완충용액, gibco, 14190-250)로 세포를 씻어준 후 파이펫을 이용하여 PBS를 완전히 제거한다. 이후, 상기 실험예 1의 단계 2(웨스턴블랏 분석)를 통해, 세포내 PI3Kγ의 활성 정도를 평가한다.
< 실험예 4> 포스파티딜이노시톨 3- 키나아제 델타( Phosphatidylinositol 3 kinase delta, PI3K δ)에 대한 억제 활성 검증
본 발명에 따른 실시예 1 내지 14의 포스파티딜이노시톨 3-키나아제 델타(Phosphatidylinositol 3 kinase delta, PI3K δ)에 대한 억제 활성 검증 실험을 위해 하기와 같은 실험을 수행하였다. 모든 화합물은 ATP = 10 uM, 샘플 농도 = 100 nM에서 효소(enzyme, PI3K δ)의 저해를 측정하였다.
라지 세포(Raji cell)를 10% 우태아혈청(fetal bovine serum; Hyclone, 미국)이 포함된 RPMI1640 배지(Hyclone, SH30027.02)를 이용하여, 12웰 플레이트에 웰당 1,000,000개 세포가 들어가도록 분주한다. 24시간동안 37℃ CO2 인큐베이터에서 안정화를 준 다음, 화합물을 1시간 30분 처리한다. 이후, PI3K델타의 세포내 활성을 증가시킬 수 있는 IgM(면역글로불린 M, immunoglobulin M, Southern Biotech, 미국)을 0.25 μg/mL이 되도록 처리한다. 30분 배양 후, 배지를 모두 버리고 차가운 PBS(인산완충용액, gibco, 14190-250)로 세포를 씻어준 후 파이펫을 이용하여 PBS를 완전히 제거한다. 이후, 상기 실험예 1의 단계 2(웨스턴블랏 분석)를 통해, 세포내 PI3K델타의 활성 정도를 평가한다.
실시예 1 내지 14의 상기 실험예 1 내지 4에서 얻은 포스파티딜이노시톨 3-키나아제 알파, 베타, γ 및 델타(PI3K α, β, γ 및 δ)에 대한 억제 활성 검증 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
실시예 PI3 Kinase
(p110α/p85α)(h) 		PI3 Kinase
(p110β/p85α)(h)		 PI3 Kinase
(p120γ)(h)		 PI3 Kinase
(p110δ/p85α)(h)
1 + +
2 ++ ++
3 +++ +++
4 + + ++ +++
5 + ++
6 + +
7 + +
8 ++ ++
9 + +
10 ++ ++
11 ++ ++
12 + +
13 + +
14 ++ ++
(상기 표 2에서,
+ 는 500 nM 초과이고;
++ 는 10 nM 초과 500 nM 이하이고;
+++ 는 10 nM 이하인 것을 나타낸다).
상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 PI3K α, β, γ 및 δ에 대한 억제 활성을 검증한 결과, 본 발명의 실시예 1 내지 14 화합물이 PI3 키나아제 α, β, γ 또는 δ에 대해 우수하게 억제 활성을 나타내며, 특히, PI3 키나아제 γ 또는 δ에 대해 매우 낮은 값에서 억제 활성을 나타내는 것을 확인하였다.
따라서, 본 발명에 따른 화합물은 PI3 키나아제 억제제로 작용함으로써 혈액암, 난소암, 자궁경부암, 유방암, 대장암, 간암, 위암, 췌장암, 결장암, 복막 전이암, 피부암, 방광암, 전립선암, 폐암, 골육종, 섬유성 종양, 뇌종양 등과 같은 암, 류머티스성 관절염, 전신 홍반성 루푸스, 다발성 경화증, 제1형 당뇨병, 갑상선 기능 항진증, 근무력증, 크론병, 강직성 척추염, 건선, 자가면역성 악성빈혈, 쇼그렌 증후군 등과 같은 자가면역 질환, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD), 비염, 천식, 만성 기관지염, 만성 폐 염증성 질환, 규폐증, 폐형 사르코이드증, 흉막염, 폐포염, 혈관염, 기종, 폐렴, 기관지 확장증 등과 같은 호흡기 질환 등의 PI3 키나아제 관련 질환을 예방 또는 치료하는데 유용하게 사용할 수 있다.
< 제제예 1> 산제의 제조
화학식 1로 표시되는 화합물 2g
유당 1g
상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
< 제제예 2> 정제의 제조
화학식 1로 표시되는 화합물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.
< 제제예 3> 캡슐제의 제조
화학식 1로 표시되는 화합물 100 ㎎
옥수수전분 100 ㎎
유당 100 ㎎
스테아린산 마그네슘 2 ㎎
상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
< 제제예 4> 주사제의 제조
화학식 1로 표시되는 화합물 100 ㎎
만니톨 180 ㎎
Na2HPO4ㆍ2H2O 26 ㎎
증류수 2974 ㎎
통상적인 주사제의 제조방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 함유시켜 주사제를 제조하였다.
< 제제예 5> 건강식품의 제조
화학식 1로 표시되는 화합물 500ng
비타민 혼합물 적량
비타민 A 아세테이트 70mg
비타민 E 1.0mg
비타민 0.13mg
비타민 B2 0.15mg
비타민 B6 0.5mg
비타민 B12 0.2mg
비타민 C 10mg
비오틴 10mg
니코틴산아미드 1.7mg
엽산 50mg
판토텐산 칼슘 0.5mg
무기질 혼합물 적량
황산제1철 1.75mg
산화아연 0.82mg
탄산마그네슘 25.3mg
제1인산칼륨 15mg
제2인산칼슘 55mg
구연산칼륨 90mg
탄산칼슘 100mg
염화마그네슘 24.8mg
상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.

Claims (15)

  1. 하기 화학식 1로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    [화학식 1]
    Figure 112017026656715-pat00071

    (상기 화학식 1에서,
    A는 -C(RaRb)- 또는 -CH2CH2-이고, 여기서, Ra 및 Rb는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고, Ra 및 Rb는 이들이 각각 결합한 원자들과 함께 연결되어 3 원자의 사이클로알킬을 형성할 수 있고;
    D는 -CH- 또는 질소이고;
    R1는 수소 또는 트리플루오로메틸이고;
    R2는 수소 또는 메틸이고;

    R3 은 수소이고;
    R4는 수소 또는 메틸이고; 및

    R5는
    Figure 112017026656715-pat00084
    ,
    Figure 112017026656715-pat00085
    또는
    Figure 112017026656715-pat00086
    이고;
    여기서, 상기 R6은 비치환 페닐이고,
    R7 및 R8은 각각 독립적으로 수소, -F 또는 -Cl인 것을 특징으로 하는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  2. 삭제
  3. 삭제
  4. 제1항에 있어서,
    상기 화학식 1에서, A 및 R2를 포함하는 고리는
    Figure 112015125659615-pat00089
    ,
    Figure 112015125659615-pat00090
    ,
    Figure 112015125659615-pat00091
    ,
    Figure 112015125659615-pat00092
    또는
    Figure 112015125659615-pat00093
    인 것을 특징으로 하는 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염.
  5. 하기 화합물 군으로부터 선택되는 어느 하나인 화합물, 이의 광학 이성질체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염:
    (1) (S)-5-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-1,2-다이하이드로피리도[4,3-b]피라진-3(4H)-온;
    (2) (S)-8-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-3,4-다이하이드로피리도[2,3-b]피라진-2(1H)-온;
    (3) (S)-4-(1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
    (4) (S)-4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
    (5) 4-(1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
    (6) (S)-4-(1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-2-(트리플루오로메틸)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
    (7) (S)-4-(1-(5-플루오로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)프로필아미노)-2-(트리플루오로메틸)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
    (8) (S)-4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린 -3-일)에틸아미노)-5-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
    (9) 7-메틸-4-(-1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸아미노)-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
    (10) 4-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
    (11) (R)-4-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
    (12) (S)-4-((S)-1-(5-클로로-4-옥소-3-페닐-3,4-다이하이드로퀴나졸린-2-일)에틸아미노)-7-메틸-7,8-다이하이드로프테리딘-6(5H)-온;
    (13) 4'-((1-(2-페닐퀴놀린-3-일)에틸)아미노)-5'H-스피로[사이클로프로판-1,7'-프테리딘]-6'(8'H)-온; 및
    (14) (S)-4-(1-(8-클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸아미노)-8,9-다이하이드로-5H-피리미도[5,4-b][1,4]디아제핀-6(7H)-온.
  6. 하기 반응식 1에 나타낸 바와 같이,
    화학식 2로 표시되는 화합물과 화학식 3으로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 4로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 1);
    상기 단계 1에서 제조된 화학식 4로 표시되는 화합물과 화학식 5로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 6으로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 2);
    상기 단계 2에서 제조된 화학식 6으로 표시되는 화합물과 화학식 7로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 8로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 3);
    상기 단계 3에서 제조된 화학식 8로 표시되는 화합물을 환원제 존재 하에 반응시켜 화학식 1a로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 4); 및
    상기 단계 4에서 제조된 화학식 1a로 표시되는 화합물과 화학식 9로 표시되는 화합물을 반응시켜 화학식 1로 표시되는 화합물을 제조하는 단계(단계 5);를 포함하는 제1항의 화학식 1로 표시되는 화합물의 제조방법:
    [반응식 1]
    Figure 112015125659615-pat00094

    (상기 반응식 1에서,
    A, D, R1, R2, R3, R4 및 R5는 제1항의 화학식 1에서 정의한 바와 같고, R11은 C1-3의 직쇄 또는 측쇄 알킬이고, X는 할로겐이다).
  7. 제6항에 있어서,
    상기 단계 4의 환원제는 팔라듐/차콜(Palladium on activated charcoal, 활성화된 차콜에 담지된 팔라듐, Pd/C), 철(Fe), 소듐다이티오나이트(Na2S2O4), 틴(II) 클로라이드 다이하이드레이트(SnCl2.2H2O), 플래티늄(IV) 옥사이드, 라니니켈(Raney nickel), 하이드로겐 설파이드(Hydrogen sulfide), 티타늄(III) 클로라이드, 아연, 사마리움 및 리튬 알루미늄 하이드라이드(LiAlH4)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 제조방법.
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WO2015011084A1 (de) 2013-07-23 2015-01-29 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Substituierte dihydropyrido[3,4-b]pyrazinone als duale inhibitoren von bet-proteinen und polo-like kinasen
WO2015193228A1 (de) 2014-06-19 2015-12-23 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Bet-proteininhibitorische 1,4-dihydropyrido[3,4-b]pyrazinone mit para-substituierter aromatischer amino- oder ethergruppe

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