DE69630666T2 - Wirkstoff für verbesserten Fettstoffwechsel - Google Patents

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Description

  • Technisches Gebiet
  • Die vorliegende Erfindung betrifft ein den Lipid-Metabolismus verbesserndes Mittel und ein funktionelles Nahrungsmittel.
  • Hintergrund des Fachgebiets
  • Der Begriff Lipid-Metabolismus bezieht sich auf den In-vivo-Prozess von Katabolismus (Abbau) und Anabolismus (Anhäufung) von Lipiden, bei welchen es sich hauptsächlich um von Nahrungsmitteln abgeleitete Triglyceride handelt, und soll in breitem Sinne Reaktionen zum Umwandeln von Lipiden in Energie, Biosynthese von Fettsäuren, Biosynthese von Acylglycerol, Phospholipid-Metabolismus und Cholesterin-Metabolosmus einschließen [Akira Misaki, Biochemistry for Nutrition, Asakura Shoten (1993), S. 123–134].
  • In den letzten Jahren stieg die Sterblichkeit durch Erkrankungen bei Erwachsenen, insbesondere kardiovaskulären Erkrankungen, rapide an, und es wurde eine Wechselwirkung zwischen dem Auftreten solcher Störungen und der Cholesterinkonzentration im Blut aufgezeigt. Einige Versuche wurden bislang unternommen, um die Cholesterinkonzentration im Blut durch die Verwendung von spezifischen Nahrungsmittelkomponenten zu senken. Zum Beispiel sind die folgenden Proteine als die Cholesterinkonzentration im Blut senkende Proteine bekannt: Weizenprotein [Agric. Biol. Chem., 55, 813 (1991)]; Sojabohnenprotein [Atherosclerosis, 72, 115 (1988)]; Milchserumprotein (ungeprüfte veröffentlichte Japanische Patentanmeldung Nr. 176713/93); und Sojabohnen-Protein-Hydrolysat [J. Nutr., 120, 977 (1990)].
  • Es ist auch bekannt, dass Eigelb-Phospholipid die Cholesterinkonzentration im Blut senkt [Agric. Biol. Chem., 53, 2469 (1989)].
  • Ein Versuch wurde unternommen, um die Cholesterinkonzentration im Blut durch die Verwendung einer Kombination von Lactalbumin, Collagen, Sojabohnenprotein oder Weizengluten und Sojabohnenlecithin (0, 2,5 und 5%) zu senken [Nutr. Rep. Int., 28, 621 (1983)].
  • Auch ist ein Verfahren zum Senken der Cholesterinkonzentration im Blut durch die Verwendung eines strukturierten Sojabohnenproteins, das 6% Sojabohnenlecithin enthält, bekannt [Ann. Nutr. Metab., 29, 348 (1985)].
  • JP 61152632 offenbart ein medizinisches Arzneimittel, das menschlichen apo-A-I-Phospholipid-Komplex als Wirkstoff mit Cholesterin-entfernender Aktivität enthält.
  • Offenbarung der Erfindung
  • Die vorliegende Erfindung stellt einen Komplex aus entweder einem Protein/Phospholipid oder einem Protein-Hydrolysat/Phospholipid zur therapeutischen Verwendung, wobei der Komplex 10 Gew.-% oder mehr gebundenes Phospholipid enthält, die Verwendung eines solchen Komplexes bei der Herstellung eines Medikaments zur Verbesserung von Lipid-Metabolismus oder Cholesterin-Metabolismus und ein einen solchen Komplex umfassendes funktionelles Nahrungsmittel bereit.
  • Die Proteine zur Verwendung in der vorliegenden Erfindung sind Weizenprotein, Sojabohnenprotein, Maisprotein und Milchprotein, unter welchen Weizenprotein und Sojabohnenprotein bevorzugt sind. Als Weizenprotein wird gewöhnlich Weizengluten verwendet. Weizengluten, Sojabohnenprotein usw. kommerziellen Ursprungs sind leicht erhältlich.
  • Beispiele für die Phospholipide sind Phosphatidylcholin, Phosphatidylethanolamin, Phosphatidylinositol, Phosphatidylserin, Sphingomyelin, Phosphatidinsäure und Lecithin, das ein Gemisch aus den vorstehenden Vertretern ist.
  • Von Tieren, Pflanzen oder Mikroorganismen abgeleitetes Lecithin kann verwendet werden. Geeignete Beispiele sind: Hirn-Lecithin, Leber-Lecithin, Eigelb-Lecithin, Sojabohnen-Lecithin und Hefe-Lecithin, unter welchen Sojabohnen-Lecithin und Eigelb-Lecithin bevorzugt sind.
  • Lecithin kann als solches verwendet werden, jedoch wird vorzugsweise Enzym-modifiziertes Lecithin verwendet, das durch Behandeln von Lecithin mit einem Enzym wie Phospholipase erhalten wird. Lecithin und Enzym-modifiziertes Lecithin kommerziellen Ursprungs sind leicht erhältlich.
  • Der Begriff gebundenes Phospholipid bedeutet wie hier verwendet ein Phospholipid, das an ein Protein gebunden bleibt, nachdem es mit einem nichtpolaren organischen Lösungsmittel wie Petrolether behandelt wurde.
  • Die Menge an gebundenem Phospholipid wird wie folgt berechnet. Die Menge an gesamtem in einem Protein-Hydrolysat/Phospholipid-Komplex enthaltenen Phospholipid wird bestimmt. Dann wird der Komplex mit einem nichtpolaren organischen Lösungsmittel wie Petrolether behandelt und die Menge an in das Lösungsmittel extrahiertem Phospholipid (nachstehend als freies Phospholipid bezeichnet) bestimmt. Die Menge an gebundenem Phospholipid wird als die Differenz zwischen der Menge an gesamtem Phospholipid und derjenigen an freiem Phospholipid berechnet.
  • Der Gehalt an gebundenem Phospholipid eines Komplexes wird als die Prozentualität an gebundenem Phospholipid im Komplex (Gew.-%) berechnet.
  • Der Komplex der vorliegenden Erfindung enthält 10% oder mehr, vorzugsweise 10–50% gebundenes Phospholipid. Besonders bevorzugt ist der Komplex, der 20–50% gebundenes Phospholipid enthält.
  • Als Protein/Phospholipid-Komplex können diejenigen verwendet werden, die im Handel erhältlich sind. Der Protein/Phospholipid-Komplex kann auch durch Mischen von 100 Gewichtsteilen eines Proteins und 10–100 Gewichtsteilen eines Phospholipids unter Verwendung eines Rührmischers, vorzugsweise in Gegenwart von Wasser, hergestellt werden. Durch Mischen eines Proteins und eines Phospholipids mit einem Verhältnis von 100 : 20–50 (Gewicht), vorzugsweise 100 : 30–40, kann ein gewünschter Komplex erhalten werden, in welchem der Gehalt an gebundenem Phospholipid und das Verhältnis von gebundenem Phospholipid zu gesamtem Phospholipid hoch sind. In einem beispielhaften Herstellungsverfahren wird eine durch Dispergieren eines Phospholipids in Wasser hergestellte Lösung zu einem Protein gegeben, gefolgt von Mischen bei Raumtemperatur unter Verwendung eines Hochleistungsmischers (50–200 UpM) oder eines Homogenisators (5.000–15.000 UpM).
  • Der Protein-Hydrolysat/Phospholipid-Komplex kann durch Mischen eines Protein-Hydrolysats und eines Phospholipids oder durch Hydrolisieren der Proteineinheit eines durch Mischen eines Proteins und eines Phospholipids hergestellten Komplexes in einem wässrigen Medium hergestellt werden.
  • Als das Protein-Hydrolysat können hydrolisierte Produkte von Proteinen in einem wässrigen Medium unter Verwendung eines proteolytischen Enzyms oder einer Säure verwendet werden. Bevorzugt sind in Wasser etwas lösliche Hydrolysate mit einem Molekulargewicht von 5.000–30.000, insbesondere diejenigen mit einem Molekulargewicht von 10.000–20.000.
  • Ein typisches Beispiel für das Verfahren zur Herstellung solcher etwas wasserlöslichen Substanzen ist nachstehend angegeben. Ein Protein wird in Wasser dispergiert und Salzsäure oder Natriumhydroxid der Lösung zugesetzt, um sie auf den optimalen pH-Bereich für das einzusetzende proteolytische Enzym zu bringen. Das proteolytische Enzym wird der Lösung in einer Menge von 0,5–2%, bezogen auf das Substratprotein, zugesetzt, gefolgt von der Umsetzung bei dem optimalen pH-Wert und der optimalen Temperatur für das Enzym für eine Dauer von 20–30 Stunden. Die Enzym-Umsetzung wird durch Erwärmen auf 85–95°C für eine Dauer von etwa einer Stunde beendet. Nach Neutralisieren mit Natriumhydroxid oder Salzsäure wird das Reaktionsgemisch zentrifugiert, um die etwas wasserlösliche Substanz zu erhalten.
  • Als das wässrige Medium können Wasser, Puffer, Alkohole, Ester, Ketone, Amide usw. verwendet werden. Wasser wird vorzugsweise verwendet.
  • Als das proteolytische Enzym können Pepsin, Trypsin, Pankreatin, Papain usw. verwendet werden.
  • Der Protein-Hydrolysat/Phospholipid-Komplex kann durch Mischen von 100 Gewichtsteilen eines Protein-Hydrolysats und 10–100 Gewichtsteilen eines Phospholipids unter Verwendung eines Rührmischers, vorzugsweise in Gegenwart von Wasser, hergestellt werden. Durch Mischen eines Proteins und eines Phospholipids mit einem Verhältnis von 100 : 20–50 (Gewicht), vorzugsweise 100 : 30–40, kann ein gewünschter Komplex erhalten werden, in welchem der Gehalt an gebundenem Phospholipid und das Verhältnis an gebundenem Phospholipid zu gesamtem Phospholipid hoch sind. In einem beispielhaften Herstellungsverfahren wird eine durch Dispergieren eines Phospholipids in Wasser hergestellte Lösung zu einem Protein-Hydrolysat gegeben, gefolgt von Mischen bei Raumtemperatur unter Verwendung eines Hochleistungsmischers (50–200 UpM) oder eines Homogenisators (5.000–15.000 UpM).
  • Der Protein-Hydrolysat/Phospholipid-Komplex kann auch durch dasselbe Verfahren wie bei der Herstellung eines Protein-Hydrolysats hergestellt werden, außer dass ein Protein/Phospholipid-Komplex statt eines Protein-Hydrolysats verwendet wird. Durch dieses Verfahren wird die Proteineinheit des Komplexes hydrolisiert, um den gewünschten Komplex als etwas wasserlösliche Substanz mit einem Molekulargewicht von 5.000–30.000, vorzugsweise 10.000–20.000 zu erhalten. Die Hydrolyse der Proteineinheit des Komplexes wird vorzugsweise durch die Behandlung mit einem proteolytischen Enzym in einem wässrigen Medium durchgeführt.
  • Als das Verfahren zur Herstellung des Protein-Hydrolysat/Phospholipid-Komplexes ist die Hydrolyse der Proteineinheit eines Protein/Phospholipid-Komplexes in einem wässrigen Medium gegenüber dem Mischen eines Protein-Hydrolysats und eines Phospholipids bevorzugt, da durch ersteres eine höhere Proteinausbeute erhalten wird.
  • Der Komplex der vorliegenden Erfindung kann ohne Isolieren aus dem Reaktionsgemisch oder nach Isolierung aus dem Reaktionsgemisch und Reinigung verwendet werden. Das durch Trocknen des Reaktionsgemischs oder des Komplexes durch Gefriertrocknen oder Sprühtrocknen und Pulverisieren des getrockneten Produkts erhaltene Produkt kann ebenso verwendet werden.
  • Der Protein-Hydrolysat/Phospholipid-Komplex ist gegenüber dem Protein-Hydrolysat/Phospholipid-Komplex hinsichtlich der den Lipid-Metabolismus verbessernden Wirkung höherwertig.
  • Das den Lipid-Metabolismus verbessernde Mittel der vorliegenden Erfindung kann in jeder beliebigen der Dosisformen wie Tabletten, Pulvern, feinen Körnern, Körnern, Kapseln, Sirupen, enterisch beschichteten Tabletten, Pastillen und Flüssigzubereitungen zur oralen Verabreichung vorliegen.
  • Der Verabreichungsweg für das den Lipid-Metabolismus verbessernde Mittel der vorliegenden Erfindung ist nicht besonders beschränkt, jedoch ist orale Verabreichung bevorzugt. Im Falle von oraler Verabreichung kann der Komplex der vorliegenden Erfindung so, wie er ist, oder in Form von Zusammensetzungen, die durch herkömmliche Verfahren unter Verwendung von als Zusatzstoffe für Nahrungsmittel oder Arzneimittel verträglichen Exzipienten hergestellt werden, verabreicht werden.
  • Als die Exzipienten können Saccharide wie Sorbit, Laktose und Glukose, anorganische Substanzen wie Dextrin, Stärke, Calciumcarbonat und Calciumsulfat, kristalline Cellulose, destilliertes Wasser, Sesamöl, Maisöl, Olivenöl, Baumwollsamenöl und andere allgemein eingesetzte Exzipienten verwendet werden.
  • Bei der Herstellung der Zusammensetzungen können Zusatzstoffe wie Bindemittel, Gleitmittel, Dispersionsmittel, Suspensionsmittel, Emulgatoren, Verdünnungsmittel, Puffer, Antioxidationsmittel und antibakterielle Mittel verwendet werden.
  • Die Dosis der Zusammensetzung variiert abhängig von verschiedenen Faktoren wie dem Alter, Geschlecht und physischen Zustand des Patienten, dem Verabreichungsweg, der Verabreichungseinteilung und der Zusammensetzungsform. Zum Beispiel ist es beim oralen Verabreichen der Zusammensetzung an einen Erwachsenen geeignet, die Zusammensetzung in einer Menge von 2–100 g/Tag in 1 bis 4 Teilen zu verabreichen. Falls es erforderlich ist, kann die Verabreichung mit einer Dosis außerhalb der vorstehenden Grenze durchgeführt werden.
  • Das den Lipid-Metabolismus verbessernde Mittel der vorliegenden Erfindung kann nicht nur als den Cholesterin-Metabolismus verbesserndes Mittel, sondern auch als ein Mittel zur Behandlung oder Verhütung von Erkrankungen wie Fettleber, Bluthochdruck, Hyperlipidämie, Arteriosklerose, Fettleibigkeit, Diabetes und Herzinfarkt verwendet werden.
  • Das funktionelle Nahrungsmittel der vorliegenden Erfindung kann durch Zugabe des 10% oder mehr gebundenes Phospholipid enthaltenden Protein-Hydrolysat/Phospholipid-Komplexes zu Nahrungsmittelmaterialen in einem herkömmilichen Verfahren zur Nahrungsmittelherstellung hergestellt werden. Das funktionelle Nahrungsmittel enthält 0,1% oder mehr, vorzugsweise 0,1–50%, stärker bevorzugt 0,5–30% des Komplexes. Das funktionelle Nahrungsmittel kann zusätzlich so formuliert werden, dass es ein Protein, einen Zucker, ein Fett, ein Spurenelement, ein Vitamin, einen Emulgator, einen Geschmacksstoff und dergleichen enthält.
  • Der Begriff funktionelles Nahrungsmittel bedeutet wie hier verwendet ein Nahrungsmittel, das so gestaltet und verarbeitet ist, dass Nahrungsmittelzusatzstoffe ihre Funktion für die Biophylaxe, Regulierung von Biorhythmus und Regulierung von physikalischem Zustand in Bezug auf die Verhütung und Genesung von Erkrankungen vollständig erfüllen können.
  • Beispiele für das Nahrungsmittel sind Saft, alkoholfreie Getränke, Tee, Milchsäuregetränke, Eis, Milch, Molkereiprodukte (z. B. Butter, Käse, Joghurt, verarbeitete Milch und entrahmte Milch), Fleisch, Fleischprodukte (z. B. Schinken, Würstchen und Hamburger), Fisch, Fischprodukte (z. B. gedämpfte, gebackene oder frittierte Fischpaste), Ei, Eiprodukte (z. B. gebratene oder gekochte Nahrungsmittel, die aus geschlagenen Eiern hergestellt sind), Konfekt (z. B. Cookies, Gelees und Snacks), Brot, Nudeln, Pickles, geräucherter Fisch und geräuchertes Fleisch, getrockneter Fisch, konservierte Nahrungsmittel, die mit Soja eingekocht sind, gesalzene Nahrungsmittel, Suppe und Würzmittel.
  • Das funktionelle Nahrungsmittel der vorliegenden Erfindung kann in Form von gewöhnlichem Nahrungsmittel oder in Form eines flüssigen Nahrungsmittels, eines Nahrungsmittels mit vorher aufgeschlossenem Nährstoff, einer natürlichen Diät, eines Flüssignährstoff-Nahrungsmittels oder dergleichen vorliegen.
  • Das funktionelle Nahrungsmittel der vorliegenden Erfindung kann nicht nur zur Verbesserung von Lipid-Metabolismus, insbesondere Cholesterin-Metabolismus, sondern auch zur Behandlung, Verhütung oder Linderung von Erkrankungen, wie Fettleber, Bluthochdruck, Hyperlipidämie, Arteriosklerose, Fettleibigkeit, Diabetes und Herzinfarkt verwendet werden. Es ist geeignet, das funktionelle Nahrungsmittel einem Erwachsenen in einer Menge von 2 bis 100 g pro Tag zu verabreichen.
  • Die Wirkung der Komplexe der vorliegenden Erfindung ist nachstehend durch Testbeispiele dargestellt.
  • Testbeispiel 1
  • Testverfahren
  • Fünf Wochen alte, männliche Wistar-Ratten wurden als Testtiere verwendet. Die Ratten wurden mit einem im Handel erhältlichen festen Futterstoff (MF, Oriental Yeast Co., Ltd.) für eine Dauer von drei Tagen gefüttert und dann in solcher Weise in jeweils aus sechs Tieren bestehende Gruppen aufgeteilt, dass zwischen den Gruppen kein deutlicher Unterschied im Körpergewicht der Tiere vorlag. Die Testfutterzusammensetzungen wurden wie in Tabelle 1 dargestellt formuliert, um jeweils ein Protein mit einem Proteingehalt von 20% und Saccharose in Mengen zu enthalten, die so eingestellt waren, dass die Gesamtgewichte aller Zusammensetzungen gleich war. Nachdem die Testtiergruppen mit gleichen Mengen an den jeweiligen Futterzusammensetzungen für eine Dauer von zehn Tagen gefüttert waren, wurden die Gesamtcholesterinkonzentration im Serum, die Cholesterinkonzentration von Lipoprotein mit hoher Dichte (HDL) im Serum und die Gesamtkonzentration in der Leber für jede Ratte gemessen.
  • Tabelle 1
    Figure 00090001
  • Anmerkung
    • Gruppe 1
    Promic P (isoliertes Sojabohnenprotein) (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 1%)
    Gruppe 2
    Gemisch aus Promic P und SLP-White (Sojabohnenlecithin), erhalten in Vergleichsbeispiel 1, (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 0,8%, Gehalt an freiem Phospholipid: 20%)
    Gruppe 3
    Protein/Phospholipid-Komplex, erhalten in Beispiel 3 (Promic P/SLP-White-Komplex), (Gehalt an gebundenem Phospholipid 20%, Gehalt an freiem Phospholipid: 1,0%)
    Gruppe 4
    Protein/Enzym-modifizierter Phospholipid-Komplex, erhalten in Beispiel 2 (Promic P/Elmizer AC-Komplex), (Gehalt an gebundenem Phospholipid 20%, Gehalt an freiem Phospholipid 1,0%)
  • Die Ergebnisse sind in Tabelle 2 dargestellt.
  • Tabelle 2
    Figure 00100001
  • Wie in der vorstehenden Tabelle dargestellt, waren die Testgruppen 3 und 4 mit der Testgruppe 2 hinsichtlich Gesamtcholesterinkonzentration im Serum fast gleich, zeigten jedoch verglichen mit den Testgruppen 1 und 2 eine höhere HDL-Cholesterinkonzentration im Serum. Das Verhältnis zwischen der Gesamtcholesterinkonzentration im Serum und der HDL-Cholesterinkonzentration im Serum wurde als der Arteriosklerose-Index ausgedrückt. Die Testgruppen 3 und 4 zeigten verglichen mit den Testgruppen 1 und 2 höhere Arteriosklerose-Indizes, was anzeigt, dass der Cholesterin-Metabolismus im Serum in den Testgruppen 3 und 4 verbessert war. Die Testgruppen 3 und 4 zeigten verglichen mit den Testgruppen 1 und 2 auch eine niedrigere Gesamtcholesterinkonzentration in der Leber. Kein deutlicher Unterschied wurde hinsichtlich Futteraufnahme oder Erhöhung des Körpergewichts zwischen den Testgruppen beobachtet.
  • Testbeispiel 2
  • Der Test wurde in derselben Weise wie in Testbeispiel 1 durchgeführt, außer dass die in Tabelle 3 dargestellten Futterzusammensetzungen verwendet wurden. Die Ergebnisse sind in Tabelle 4 dargestellt.
  • Tabelle 3
    Figure 00110001
  • Anmerkung
    • Gruppe 5
    Gemisch aus Promic P Hydrolysat und SLP-White, erhalten im Vergleichsbeispiel 3, (Gehalt an gebundenem Phospholipid 0,8%, Gehalt an freiem Phospholipid 20%)
    Gruppe 6
    Protein-Hydrolysat/Phospholipid-Komplex, erhalten in Beispiel 9 (Promic P Hydrolysat/SLP-White Komplex), (Gehalt an gebundenem Phospholipid 20%, Gehalt an freiem Phospholipid 1,0%)
  • Tabelle 4
    Figure 00110002
  • Wie in der vorstehenden Tabelle dargestellt, war die Testgruppe 6 mit der Testgruppe 5 hinsichtlich Arteriosklerose-Index gleich, zeigte jedoch eine niedrigere Gesamtcholesterinkonzentration in der Leber. Kein deutlicher Unterschied wurde hinsichtlich Futteraufnahme oder Erhöhung im Körpergewicht zwischen den Testgruppen beobachtet.
  • Testbeispiel 3
  • Der Test wurde in derselben Weise wie in Testbeispiel 1 durchgeführt, außer dass die in Tabelle 5 dargestellten Futterzusammensetzungen verwendet wurden. Die Ergebnisse sind in Tabelle 6 dargestellt.
  • Tabelle 5
    Figure 00120001
  • Anmerkung
    • Gruppe 7
    Promic P (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 1%)
    Gruppe 8
    Hydrolysat an Sojabohnenprotein/Enzym-modifizierter Lecithinkomplex (Promic P/Elmizer AC Komplex), erhalten in Beispiel 5, (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 20%, Gehalt an freiem Phospholipid: 0,5%)
    Gruppe 9
    Sojabohnenprotein-Hydrolysat/Enzym-modifizierter Lecithinkomlex, erhalten in Beispiel 8 (Promic P Hydrolysat/Elmizer AC Komplex), (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 20%, Gehalt an freiem Phospholipid: 1,0%)
  • Tabelle 6
    Figure 00130001
  • Wie in der vorstehenden Tabelle dargestellt, waren die Arteriosklerose-Indizes der Testgruppen 8 und 9 höher als diejenigen der Testgruppe 7, was anzeigt, dass der Cholesterin-Metabolismus im Serum in den Testgruppen 8 und 9 verbessert war. Zudem zeigten die Testgruppen 8 und 9 eine Gesamtcholesterinkonzentration in der Leber, die viel geringer als diejenige der Testgruppe 7 war; die Gesamtcholesterinkonzentration in der Leber von Testgruppe 8 war niedriger als diejenige von Testgruppe 9. Kein deutlicher Unterschied wurde hinsichtlich Futteraufnahme oder Erhöhung im Körpergewicht zwischen den Testgruppen beobachtet.
  • Testbeispiel 4
  • Der Test wurde in derselben Weise wie in Testbeispiel 1 durchgeführt, außer dass die in Tabelle 7 dargestellten Futterzusammensetzungen verwendet wurden. Die Ergebnisse sind in Tabelle 8 dargestellt.
  • Tabelle 7
    Figure 00140001
  • Anmerkung
    • Gruppe 10
    Weizengluten (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 0,3%)
    Gruppe 11
    Gemisch aus Weizengluten und Enzym-modifiziertem Lecithin, erhalten in Vergleichsbeispiel 2, (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 0,3%, Gehalt an freiem Phospholipid: 10%)
    Gruppe 12
    Weizengluten/Enzym-modifizierter Lecithinkomplex, erhalten in Beispiel 1, (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 10%, Gehalt an freiem Phospholipid: 1,0%)
    Gruppe 13
    Hydrolysat von Weizengluten/Enzym-modifizierter Lecithinkomplex, erhalten in Beispiel 4, (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 10%, Gehalt an freiem Phospholipid: 0,3%)
    Gruppe 14
    Weizenglutenhydrolysat/Enzym-modifizierter Lecithinkomplex, erhalten in Beispiel 7, (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 10%, Gehalt an freiem Phospholipid: 1,0%)
  • Tabelle 8
    Figure 00150001
  • Wie in der vorstehenden Tabelle dargestellt, waren die Arteriesklerose-Indizes der Testgruppen 12 bis 14 höher als diejenigen der Testgruppen 10 und 11, was anzeigt, dass der Cholesterin im Serum in den Testgruppen 12 bis 14 verbessert war. Zudem zeigten die Testgruppen 12 bis 14 verglichen mit den Testgruppen 10 und 11 eine niedrigere Gesamtcholesterinkonzentration in der Leber; insbesondere war die Gesamtcholesterinkonzentration in der Leber von Testgruppe 13 die niedrigste. Kein deutlicher Unterschied wurde hinsichtlich Futteraufnahme oder Erhöhung im Körpergewicht zwischen den Testgruppen beobachtet.
  • Bestimmte Ausführungsformen der Erfindung sind in den folgenden Beispielen und Vergleichsbeispielen veranschaulicht.
  • Beste Durchführungsart der Erfindung
  • Beispiel 1
  • Zu 1 kg Regular Gluten A (Weizengluten, Bunge, Gehalt an gebundenem Phospholipid: 0,3%) wurden 2,4 l einer 5%igen Lösung, hergestellt durch Dispergieren von Elmizer AC (Enzym-modifiziertes Lecithin, Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd) in Wasser, gegeben. Das Gemisch wurde unter Verwendung eines Baker-Mischers (100 UpM.) bei Raumtemperatur für eine Dauer von 10 Minuten geknetet. Das erhaltene Reaktionsgemisch wurde gefriergetrocknet und dann pulverisiert, um etwa 1,1 kg eines Protein/Phospholipid-Komplexes (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 10%, Gehalt an freiem Phospholipid: 1,0%) zu erhalten.
  • Beispiel 2
  • Zu 1 kg Promic P (isoliertes Sojabohnenprotein, Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd, Gehalt an gebundenem Phospholipid: 1,0%) wurden 10 l einer 2,5%igen Lösung, hergestellt durch Dispergieren von Elmizer AC in Wasser, gegeben. Das Gemisch wurde schnell (10.000 UpM) bei Raumtemperatur für eine Dauer von 10 Minuten gerührt. Das erhaltene Reaktionsgemisch wurde gefriergetrocknet und dann pulverisiert, um 1,1 kg eines Protein/Phospholipid-Komplexes (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 20%, Gehalt an freiem Phospholipid: 1,0%) zu erhalten.
  • Beispiel 3
  • Dasselbe Verfahren wie in Beispiel 2 wurde wiederholt, außer dass SLP-White (gereinigtes Sojabohnenlecithin, True Lecithin mfg. Co., Ltd.) anstelle von Elmizer AC verwendet wurde, wodurch etwa 1,1 kg eines Protein/Phospholipid-Komplexes (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 20%, Gehalt an freiem Phospholipid: 1,0%) erhalten wurden.
  • Beispiel 4
  • Der in Beispiel 1 erhaltene Protein/Phospholipid-Komplex (1 kg) wurde in 9 l Wasser dispergiert, gefolgt von der Zugabe von 2N Salzsäure zum Einstellen der Lösung auf einen pH-Wert von 2. Zu der erhaltenen Lösung wurde Pepsin [Aktivität 1 : 10.000 (dies bedeutet, dass 1 g des Pepsins 10.000 g Eiweißprotein bei 50°C innerhalb 2 Stunden unter sauren Bedingungen mit Salzsäure hydrolisieren kann), Nascalai Tesque, Inc.] in einer Menge von 1%, bezogen auf den Protein/Phospholipid-Komplex, gegeben. Man ließ das Gemisch bei 37°C für eine Dauer von 24 Stunden stehen, gefolgt von Erwärmen bei 90°C für eine Dauer von einer Stunde zum Stoppen der Reaktion. Das Reaktionsgemisch wurde mit 2N Natriumhydroxidlösung neutralisiert und dann zentrifugiert. Dem erhaltenen Niederschlag wurde Wasser zugesetzt und das Gemisch wieder zentrifugiert. Dieses Verfahren wurde zweimal wiederholt, wodurch der Niederschlag gewaschen wurde. Der Niederschlag wurde gefriergetrocknet und dann pulverisiert, um 200 g eines in Wasser etwas löslichen Hydrolysats des Protein/Phospholipid-Komplexes (Molekulargewicht: ca. 15.000, Gehalt an gebundenem Phospholipid: 10%, Gehalt an freiem Phospholipid: 0,3%) zu erhalten. Das Molekulargewicht wurde durch Natriumdodecylsulfat(SDS)-Polyacrylamidgel-Elektrophorese bestimmt (dasselbe Verfahren wurde für die Molekulargewichtsbestimmung in den folgenden Beispielen eingesetzt).
  • Beispiel 5
  • Dasselbe Verfahren wie in Beispiel 4 wurde wiederholt, außer dass der in Beispiel 2 erhaltene Protein/Phospholipid-Komplex anstelle des in Beispiel 1 erhaltenen Protein/Phospholipid-Komplexes verwendet wurde, wodurch 200 g eines in Wasser etwas löslichen Hydrolysats des Protein/Phospholipid-Komplexes (Molekulargewicht: ca. 15.000, Gehalt an gebundenem Phospholipid: 20%, Gehalt an freiem Phospholipid: 0,5%) erhalten wurde.
  • Die Stickstoffgehalte des als Ausgangsmaterial verwendeten Proteins und des in dem erhaltenen Hydrolysat des Protein/Phospholipid-Komplexes enthaltenen Proteins wurden jeweils durch das Kjeldahl-Verfahren bestimmt. Durch Multiplikation der erhaltenen Werte mit einem Umrechnungsfaktor von 6,25 wurden die Gewichte der Proteine erhalten, und die Proteinausbeute, die als das Verhältnis der Menge des in dem Hydrolysat erhaltenen Proteins zu denjenigen des als Ausgangsmaterial erhaltenen Proteins berechnet wurden, betrug 19,1%.
  • Beispiel 6
  • Dasselbe Verfahren wie in Beispiel 4 wurde wiederholt, außer dass der in Beispiel 3 erhaltene Protein/Phospholipid-Komplex anstelle des in Beispiel 1 erhaltenen Protein/Phospholipid-Komplexes verwendet wurde, wodurch 200 g eines in Wasser etwas löslichen Hydrolysats des Protein/Phospholipid-Komplexes (Molekulargewicht: ca. 15.000, Gehalt an gebundenem Phospholipid: 20%, Gehalt an freiem Phospholipid: 0,5%) erhalten wurde.
  • Beispiel 7
  • Regular Gluten A (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 0,3%) (1 kg) wurde in 9 l Wasser dispergiert, gefolgt von der Zugabe von 2N Salzsäure zum Einstellen der Lösung auf einen pH-Wert von 2. Der erhaltenen Lösung wurde Pepsin (Aktivität 1 : 10.000, Nacalai Tesque, Inc.) in einer Menge von 1%, bezogen auf Regular Gluten A, zugesetzt. Man ließ das Gemisch bei 37°C für eine Dauer von 24 Stunden stehen, gefolgt von Erwärmen bei 90°C für eine Dauer von 1 Stunde zum Stoppen der Reaktion. Das Reaktionsgemisch wurde mit 2N Natriumhydroxidlösung neutralisiert und dann zentrifugiert. Dem erhaltenen Niederschlag wurde Wasser zugesetzt und das Gemisch wieder zentrifugiert. Dieses Verfahren wurde zweimal wiederholt, wodurch der Niederschlag gewaschen wurde. Der Niederschlag wurde gefriergetrocknet und dann pulverisiert, um 200 g eines Protein-Hydrolysats (Molekulargewicht: ca. 15.000) zu erhalten. Zu 200 g des erhaltenen Protein-Hydrolysats wurden 1,0 l einer 2,5%igen Lösung, hergestellt durch Dispergieren von Elmizer AC in Wasser, gegeben und das Gemisch schnell (10.000 UpM) gerührt. Das erhaltene Reaktionsgemisch wurde gefriergetrocknet und dann pulverisiert, um 220 g eines Protein-Hydrolysat/Phospholipid-Komplexes zu erhalten (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 10%, Gehalt an freiem Phospholipid 1,0%).
  • Beispiel 8
  • Promic P (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 1,0%) (1 kg) wurde in 9 l Wasser dispergiert, gefolgt von der Zugabe von 2N Salzsäure zum Einstellen der Lösung auf einen pH-Wert von 2. Der erhaltenen Lösung wurde Pepsin (Aktivität 1 : 10.000, Nacalai Tesque, Inc.) in einer Menge von 1%, bezogen auf Promic P, zugesetzt. Man ließ das Gemisch bei 37°C für eine Dauer von 24 Stunden stehen, gefolgt von Erwärmen bei 90°C für eine Dauer von 1 Stunde zum Stoppen der Reaktion. Das Reaktionsgemisch wurde mit 2N Natriumhydroxidlösung neutralisiert und dann zentrifugiert. Dem erhaltenen Niederschlag wurde Wasser zugesetzt und das Gemisch wieder zentrifugiert. Dieses Verfahren wurde zweimal wiederholt, wodurch der Niederschlag gewaschen wurde. Der Niederschlag wurde gefriergetrocknet und dann pulverisiert, um 200 g eines Protein-Hydrolysats (Molekulargewicht: ca. 15.000) zu erhalten. Zu 200 g des erhaltenen Protein-Hydrolysats wurden 2,0 l einer 2,5%igen Lösung, hergestellt durch Dispergieren von Elmizer AC in Wasser, zugesetzt und das Gemisch schnell (10.000 UpM) gerührt. Das erhaltene Reaktionsgemisch wurde gefriergetrocknet und dann pulverisiert, um 250 g eines Protein-Hydrolysat/Phospholipid-Komplexes (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 20%, Gehalt an freiem Phospholipid: 1,0%) zu erhalten.
  • Die Proteinausbeute, die als das Verhältnis der Menge des in dem erhaltenen Protein-Hydrolysat/Phospholipid-Komplex enthaltenen Protein zu dem als Ausgangsmaterial verwendeten Protein in derselben Weise wie in Beispiel 5 berechnet wurde, betrug 12,4%.
  • Beispiel 9
  • Dasselbe Verfahren wie in Beispiel 8 wurde wiederholt, außer dass SLP-White anstelle von Elmizer AC verwendet wurde, wodurch 250 g eines Protein-Hydrolysat/Phospholipid-Komplexes (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 20%, Gehalt an freiem Phospholipid: 1,0%) erhalten wurden.
  • Vergleichsbeispiel 1
  • Promic P (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 1,0%) (1 kg) wurde mit 250 g SLP-White gemischt, um 1.250 g eines Protein/Phospholipid-Gemischs (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 0,8%, Gehalt an freiem Phospholipid: 20%) zu erhalten.
  • Vergleichsbeispiel 2
  • Regular Gluten A (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 0,3%) (1 kg) wurde mit 110 g Elmizer AC gemischt, um 1.110 g eines Protein/Enzym-modifiziertes Lecithin-Gemischs (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 0,3%, Gehalt an freiem Phospholipid: 10%) zu erhalten.
  • Vergleichsbeispiel 3
  • Promic P (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 1,0%) (1 kg) wurde in 9 l Wasser dispergiert, gefolgt von der Zugabe von 2N Salzsäure zum Einstellen der Lösung auf einen pH-Wert von 2. Der erhaltenen Lösung wurde Pepsin (Aktivität 1 : 10.000, Nacalai Tesque, Inc.) in einer Menge von 1%, bezogen auf Promic P, zugesetzt. Man ließ das Gemisch bei 37°C für eine Dauer von 24 Stunden stehen, gefolgt von Erwärmen bei 90°C für eine Dauer von 1 Stunde zum Stoppen der Reaktion. Das Reaktionsgemisch wurde mit 2N Natriumhydroxidlösung neutralisiert und dann zentrifugiert. Dem erhaltenen Niederschlag wurde Wasser zugesetzt und das Gemisch wieder zentrifugiert. Dieses Verfahren wurde zweimal wiederholt, wodurch der Niederschlag gewaschen wurde. Der Niederschlag wurde gefriergetrocknet und dann pulverisiert, um 200 g eines Protein-Hydrolysats (Molekulargewicht: ca. 15.000) zu erhalten. Das erhaltene Protein-Hydrolysat (1 kg) wurde mit 250 g SLP-White gemischt, um 1.250 g eines Protein-Hydrolysat/Phospholipid-Gemischs (Gehalt an gebundenem Phospholipid: 0,8%, Gehalt an freiem Phospholipid: 20%) zu erhalten.
  • Beispiel 10
  • Hamburger (zwei Portionen) werden aus den folgenden Zusatzstoffen hergestellt.
  • Figure 00200001
  • Beispiel 11
  • Cookies (30 Stück) werden aus den folgenden Zusatzstoffen hergestellt.
  • Figure 00210001
  • Beispiel 12
  • Ein in einer Flüssigzubereitung zu verwendendes pulverförmiges Protein wird aus den folgenden Zusatzstoffen hergestellt.
  • Figure 00210002
  • Eine Flüssigzubereitung wird durch Dispergieren von 20 g des pulverförmigen Proteins in 180 ml Wasser hergestellt.
  • Beispiel 13
  • Tabletten werden aus den folgenden Zusatzstoffen hergestellt.
  • Figure 00220001
  • Industrielle Anwendbarkeit
  • Die vorliegende Erfindung stellt ein den Lipid-Metabolismus verbesserndes Mittel und ein funktionelles Nahrungsmittel bereit.

Claims (16)

  1. Komplex zur therapeutischen Verwendung aus entweder einem Protein/Phospholipid oder einem Protein-Hydrolysat/Phospholipid, wobei der Komplex 10 Gew.-% oder mehr gebundenes Phospholipid enthält und wobei das Protein von Weizen, Sojabohne, Mais oder Milch abgeleitet ist.
  2. Komplex gemäß Anspruch 1, wobei der Komplex 10–50 Gew.-% gebundenes Phospholipid enthält.
  3. Komplex gemäß Anspruch 2, wobei der Komplex 20–50 Gew.-% gebundenes Phospholipid enthält.
  4. Komplex gemäß einem der vorstehenden Ansprüche, wobei das Phospholipid Lecithin ist.
  5. Komplex gemäß einem der vorstehenden Ansprüche, wobei das Phospholipid Enzymmodifiziertes Lecithin ist.
  6. Verwendung eines Komplexes aus entweder einem Protein/Phospholipid oder einem Protein-Hydrolysat/Phospholipid, wobei der Komplex 10 Gew.-% oder mehr gebundenes Phospholipid enthält und wobei das Protein von Weizen, Sojabohne, Mais oder Milch abgeleitet ist, zur Herstellung eines Medikaments zur Verbesserung des Lipid-Metabolismus oder Cholesterin-Metabolismus.
  7. Verwendung gemäß Anspruch 6, wobei der Komplex 10–50 Gew.-% gebundenes Phospholipid enthält.
  8. Verwendung gemäß Anspruch 7, wobei der Komplex 20–50 Gew.-% gebundenes Phospholipid enthält.
  9. Verwendung gemäß einem der Ansprüche 6 bis 8, wobei das Phospholipid Lecithin ist.
  10. Verwendung gemäß einem der Ansprüche 6 bis 9, wobei das Phospholipid Enzymmodifiziertes Lecithin ist.
  11. Funktionelles Nahrungsmittel, umfassend einen Komplex aus entweder einem Protein/Phospholipid oder einem Protein-Hydrolysat/Phospholipid, wobei der Komplex 10 Gew.-% oder mehr gebundenes Phospholipid enthält.
  12. Funktionelles Nahrungsmittel gemäß Anspruch 11, wobei der Komplex 10–50 Gew.-% gebundenes Phospholipid enthält.
  13. Funktionelles Nahrungsmittel gemäß Anspruch 12, wobei der Komplex 20–50 Gew.-% gebundenes Phospholipid enthält.
  14. Funktionelles Nahrungsmittel gemäß einem der Ansprüche 11 bis 13, wobei das Protein von Weizen, Sojabohne, Mais oder Milch abgeleitet ist.
  15. Funktionelles Nahrungsmittel gemäß einem der Ansprüche 11 bis 13, wobei das Phospholipid Lecithin ist.
  16. Funktionelles Nahrungsmittel gemäß einem der Ansprüche 11 bis 15, wobei das Phospholipid Enzym-modifiziertes Lecithin ist.
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