DE69114519T2 - Anwendung von il-4 zur steigerung der immunantwort auf immunogene in impfstoffen. - Google Patents

Description

Hintergrund der Erfindung
• Diese Erfindung bezieht sich auf pharmazeutische Zusammensetzungen, die Interleukin-4 als Wirkstoff umfassen, um die primäre Immunantwort eines Säugers auf Immunogene in Impfstoffen zu verstärken. Die Erfindung bezieht sich auch auf die Verwendung von Interleukin-4 zur Herstellung eines Medikaments zur Verstärkung einer primären Immunantwort eines Säugers auf Immunogene, die in einem Impfstoff vorhanden sind, sowie auf Verfahren zur Verstärkung einer effektiven primären Immunantwort bei Säugern auf Immunogene, die in Impfstoffen vorhanden sind, durch Verabreichen einer wirksamen Menge Interleukin-4 in Verbindung mit dem Impfstoff an die Säuger.
Einleitung
• Interleukin-4 [im folgenden "TL-4", aber auch als B-Zellenstimulierender Faktor 1 (BSF-1) bekannt] wurde ursprünglich von M. Howard et al. im J. Exp. Med. (1982), Vol. 155, 5.914-23, als von T-Zellen abgeleiteter Wachstumsfaktor beschrieben, der sich von IL-2 unterscheiden läßt, eine Langzeitgewebekultur normaler Maus-B-Lymphocyten erlaubte und mit aktivierten B-Lymphocyten wechselwirkte, so daß deren Vermehrung 4 Monate lang aufrechterhalten wurde. Obwohl gemischte B-Lymphocyten-Explantate verwendet werden, um Kulturen zu starten, werden B-Lymphocyten mit unreifem Phänotyp anscheinend durch IL-4 in Gewebekultur spezifisch verstärkt. Siehe zum Beispiel C. Perchel et al., J. Immunol. (1989), Vol. 142, 1558-1568. Außerdem offenbaren G. Trenn et al., J. Immunol. (1988), Vol. 140, 1101-1106, daß IL-4 die Entwicklung cytotoxischer T-Zellen aus der Lyt-2+- Subpopulation ruhender Maus-T-Lymphocyten stimuliert. H. Spits et al., J. Immunol. (1987), Vol. 139, 1142-47, offenbaren, daß IL-4 in vitro von IL-2 unterscheidbar als T-Zellenwachstumsfaktor auf menschliche Zellen wirken kann.
• Das Maus-IL-4-Gen wurde kloniert und in COS-7-Zellen exprimiert [siehe T. Otsuka et al., Nuc. Acids Res. (1987), Vol. 15, 333-334]. Der klonierte Faktor hatte in Gewebekultur alle Wirkungen, die für den aus T-Zellkulturüberständen gereinigten Faktor gefunden wurden. Die Klonierung und Expression des Human- IL-4-Gens wurden von N. Arai et al., J. Immunol. (1989), Vol. 142, 274-282, und T. Yokota et al., Proc. Natl. Acad. Sci. (1986), Vol. 83, 5844-5848, beschrieben, wobei der in COS-7- Zellen erzeugte Faktor bei der Untersuchung in Gewebekultur ähnliche Wirkungen wie das native Molekül aufwies. Da IL-4 sowohl in menschlichen als auch in Maus-Zellsystemen untersucht wurde, wurden dem Molekül weitere in-vitro-Wirkungen zugeschrieben: (i) IL-4 spielte eine wichtige Rolle bei der Induktion und Regulation der IgE-Synthese, eines Vorgangs, der stattfindet, wenn bei B-Lymphocyt-Subpopulationen die Vermehrung induziert wird [siehe Pene, J., Proc. Natl. Acad. Sci. (1988), Vol. 85, 6880-6884]; (ii) IL-4 induzierte Fcε-Rezeptoren (CD23) mit geringer Affinität auf normalen Human-B-Lymphocyten in Gewebekultur [siehe T. DeFrance et al., J. Exp. Med. (1987), Vol. 165, 1459-1457]; (iii) IL-4 wechselwirkte mit anderen Lymphokinen, insbesondere γ-Interferon [siehe R.L. Coffman et al., Immunol. Res. (1988), Vol. 102, 5-27, und S. Romagnani et al., oben], und T-Zellen [siehe R.L. Coffman et al., oben, S. Romagnani et al., oben, und M.D. Widmer et al., Nature (1987), Vol. 326, 795-98], so daß die Vermehrung und Veränderung von B-Zellen bewirkt wurde; (iv) IL-4 verstärkte die Sekretion spezifischer Antikörperklassen, z.B. Ig, durch Human-B-Zellen [siehe J.E. Splawski et al., J. Immunol. (1989), Vol. 142, 1569-1572; (v) IL-4 hat stimulierende Wirkungen auf T-Zellen, Mastzellen und Makrophagen [siehe K.H. Grabstein et al., J. Immunol. (1987), Vol. 139, 1148- 1153; F. Lee et al., Proc. Natl. Acad. Sci. (1986), Vol. 83, 2061, und A. Zlotnik et al., J. Immunol. (1987), Vol. 138, 4275- 4279]; und (vi) IL-4 erhöhte die Expression von MHC-Klasse-II- Antigen bei ruhenden B-Zellen (R. Nöelle et al., PNAS 81.6149- 6153, 1984). T.R. Mosmann et al. in J. Immunol., Vol. 138, 1813- 1816, offenbarten, daß Human- und Maus-IL-4, die an der Aminosäuresequenz 1-90 und 129-149 zu 50% homolog sind, artspezifisch sind.
• Die Verwendung von IL-4 zur Verstärkung der Immunantwort auf infektiöse antigene Reizungen, z.B. von Viren, Bakterien, Pilzen oder Protozoen abgeleitete chronische Infektionen, ist in W091/14450 offenbart.
• W091/01143 offenbart Impfzusammensetzungen, die ein Antigen, wie ein Bakterium oder Virus, in Kombination mit einem Interleukin, wie IL-1, IL-2 oder IL-4, vorzugsweise IL-2, umfassen, wobei die Zusammensetzung auf einem Mineral, wie Alaun, adsorbiert wird und in Form einer Suspension vorliegt und außerdem einen zugesetzten Konservierungsstoff enthält.
• EP-A-0,351, 876 beschreibt Zusammensetzungen zur Potenzierung der Impfwirkung, die Human-B-Zellen-Differenzierungsfaktor ("Human- BCDF") als Wirkstoff enthalten, um die Erzeugung von Antikörpern gegen einen Impfstoff, wie Bakterien oder Viren, zu potenzieren.
• Neben Human-BCDF können die Zusammensetzungen auch ein oder mehrere Cytokine enthalten, wie IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, die Interferone und M-CSF oder G-CSF.
• WO88/00971 offenbart einen rekombinanten Impfstoff, der einen Impfstoffvektor umfaßt, der eine erste Nucleotidsequenz, die als das ganze oder ein Teil eines antigenen Polypeptids, z.B. Pockenvirus, Herpesvirus, Adenovirus, exprimiert werden kann, zusammen mit einer zweiten Nucleotidsequenz, die als das ganze oder ein Teil eines Lymphokins, z.B. eines Interleukins, wie IL- 1, -2, -3 oder -4 oder γ-Interferon, exprimiert werden kann und im Sinne einer Verstärkung der Immunantwort auf das antigene Polypeptid wirkt, beinhaltet.
• EP-A-0, 302,429 offenbart, daß Human-IL-4 die Immunantwort verbessert und sich zur Behandlung und Vorbeugung von Krankheiten wie Krebs, Infektionen, AIDS und funktioneller Immunschwäche eignet.
• Gemäß der vorliegenden Erfindung wird die Verwendung von aus E. coli abgeleitetem rekombinantem Human-IL-4 zur Herstellung eines Medikaments zur Verstärkung einer primären Immunantwort eines Säugers auf Immunogene, die in einem Toxoidimpfstoff vorhanden sind, vorgeschlagen, mit der Maßgabe, daß das Medikament frei von Human-B-Zellen-Differenzierungsfaktor (Human-BCDF) ist.
Beschreibung der Figuren
• Figur 1 veranschaulicht den zeitlichen Ablauf einer Immunantwort, die durch Verabreichung von rekombinantem Human-IL-4 und eines Tetanus-Toxoidimpfstoffs an Javaneraffen (Cynomolgus) im Einklang mit der vorliegenden Erfindung erreicht wird.
• Die Figuren 2-5 veranschaulichen graphisch das Erscheinen von Tetanus-Antikörpern gegen den Tetanus-Toxoidimpfstoff im Javaneraffenmodell als Funktion der Zeit durch Verabreichen von 0,5 ug/kg bzw. 20 ug/kg rekombinantes Human-IL-4 und eines Tetanus- Toxoidimpfstoffs im Einklang mit der vorliegenden Erfindung.
Ausführliche Beschreibung der Erfindung und der bevorzugten Ausführungsformen
• Wir fanden überraschenderweise, daß die Verabreichung von rekombinantem Human-IL-4 (im folgenden "rhIL-4") an Javaneraffen gleichzeitig mit einem Tetanus-Toxoidimpfstoff zu einer Verstärkung der primären Immunantwort bei den Affen führte. Dieses Ergebnis ist besonders überraschend, da keine anamnestische Antwort, d.h. sekundäre oder Erinnerungsantwort, beobachtet wurde, als rhIL-4 während der Auffrischungsimpfung mit rekombinantem Hepatitis-B-Virus (rHBVax) etwa zwei Monate nach dem Verabreichen von rHBVax-Impstoff an Javaneraffen verabreicht wurde, und auch nicht, als IL-4 während der Auffrischungsimpfung mit Salk-inaktiviertem Poliovirus-Impstoff etwa einen Monat nach dem Verabreichen von Salk-inaktiviertem Poliovirus-Impstoff an Javaneraffen verabreicht wurde. Das Verfahren dieser Erfindung zur Verabreichung von IL-4 mit einem Impfstoff hat die folgenden Vorteile. Die gesamte zu verabreichende antigene Impfstoffladung kann reduziert werden, da weniger Antigen in Gegenwart von IL-4 eine immunologische Reaktion mit sich bringt, die zu der durch Verabreichung des obigen Impfstoffs erreichten zumindest äquivalent ist. Da durch Verabreichen von IL-4 gemäß dieser Erfindung weniger Antigen pro Impfung erforderlich wäre, wäre die Wahrscheinlichkeit unerwünschter Nebenwirkungen, wie sie mit einigen zur Zeit gebräuchlichen Impfstoffen verbunden sind, geringer. Da weiterhin weniger Immunogen erforderlich ist, um einen wirksamen Schutz zu erreichen, würden die Gesamtkosten für den Impfstoff pro Patient gesenkt. Die Immunantwort bestimmter Typen von Personen, die nur schwach auf die Impfung ansprechen, würde durch Verabreichen von IL-4 gemäß dieser Erfindung verstärkt. Zu den Typen von Personen, die aus den Verfahren dieser Erfindung einen Nutzen ziehen sollten, gehören (1) die Typen mit einer beeinträchtigten Immunreaktion, wie Kinder, die mit bestimmten Immunschwächen geboren wurden, (2) anscheinend normale Personen, die auf bestimmte Impfstoffe nicht ansprechen, sowie (3) Personen, die sich immunsuppressiven Therapien unterziehen, wie Bestrahlung, Corticosteroiden usw.
• Wir haben also wirksame Verfahren gefunden, um (1) eine effektive primäre Immunantwort auf in einem Impfstoff vorhandene Immunogene bei solchen Säugern zu verstärken; (2) einen effektiven Antikörperspiegel bei Säugern, die Immunogenen in Impfstoffen ausgesetzt sind, zu verstärken; und (3) eine primäre Immunantwort auf in einem Impfstoff vorhandene Immunogene bei Säugern zu verstärken, deren Immunantwort in Abwesenheit von IL-4 nicht stark genug oder nicht schnell genug ist, um eine Krankheit zu verhindern. Die Immunantworten dieser Säuger in Abwesenheit von IL-4 können nicht stark genug oder nicht schnell genug sein, um eine Krankheit bei diesen Säugern zu verhindern, aber wir haben wirksame Verfahren gefunden, die das Verabreichen einer für jeden solchen Zweck wirksamen Menge von IL-4, vorzugsweise von rekombinantem Human- IL-4, an solche Säuger umfassen.
• Zu den Impfstoffen, die für die Verwendung gemäß dieser Erfindung in Betracht kommen, gehören bakterielle Impfstoffe, Toxoidimpfstoffe (inaktivierte Toxine) und virale Impfstoffe oder Gemische davon ("multiple Antigene"), die für die aktive Immunisierung beim Menschen verwendet werden. Siehe zum Beispiel Kapitel 75 mit dem Titel "Immunizing Agents" in Remington's Pharmaceutical Sciences, 14. Auflage, 1990, Mack Publishing Co., S. 1426-1441, sowie die Antitoxine, Toxoide, Impfstoffe und Lebendimpfstoffe, die von der amerikanischen Food and Drug Administration zugelassen wurden und auf S. 210 (Product Category Index) der Physicians' Desk Reference, 44. Auflage, 1990, aufgeführt sind. Zu den geeigneten bakteriellen Impfstoffen gehören bakterielle Impfstoffe gegen die folgenden Krankheitserreger oder -zustände: Cholera, Keuchhusten, Pest, Typhus, Hirnhautentzündung, pneumococcale Lungenentzündung, H. influenzae Typ B, Lepra, Gonorrhöe, Gruppe-B-Meningococcus und Gruppe-B-Streptococcus, gramnegative Sepsis, E.-coli-Sepsis und Pseudomonas aeruginosa. Zu den geeigneten Toxoiden gehören Diphtherie-Toxoid, Botulismus-Toxoid und Tetanus-Toxoid. Zu den geeigneten viralen Impfstoffen gehören lebende und inaktivierte virale Impfstoffe gegen die folgenden Krankheitserreger oder -zustände: Poliomyelitis, Masern, Rötein, Gelbfieber, Mumps und Hepatitis B.
• Zu den geeigneten "multiplen Antigenen" gehören Diphtherie- und Tetanus-Toxoid, das dreifache Antigen Diphtherie-, Pertussis- und Tetanus-Toxoid, wie sie von den Connaught Laboratories, Inc., Swiftewater, PA 18370, erhältlich sind. Die große Vielfalt an Virusstämmen und Zellsubstraten, die in verschiedenen Ländern verwendet werden, und eine Impftabelle sind in Tabelle 10-6 bzw. 10-7 von Kapitel 10 mit dem Titel "Immunization against viral diseases" auf Seite 4, Zeile 27, Seiten 283-301, eines Buchs von D.O. White & F. Fenner, Medical Virology (1986), 3. Auflage, Academic Press Inc., Orlando, Florida, offenbart.
• Der hier verwendete Ausdruck "in Verbindung mit" bezieht sich auf die gleichzeitige Verabreichung während oder unmittelbar bevor oder nach der Verabreichung des Impfstoffs. Zum Beispiel kann IL-4 während 10 bis 14 Tagen vor oder nach der Verabreichung des entsprechenden Impfstoffs verabreicht werden. Normalerweise würde man IL-4 vor der Verabreichung des entsprechenden Impfstoffs während einer Zeit, die ausreicht, um im Lymphgewebe des Säugers einen stationären IL-4-Spiegel zu erhalten, verabreichen. Diese Spiegel werden mit Hilfe von pharmakokinetischen Standardmessungen bestimmt. Nachdem der Impfstoff verabreicht wurde, würde die Verabreichung von IL-4 so lange fortgesetzt werden, wie die in dem Impfstoff vorhandenen Immunogene vom Immunsystem des Säugers verarbeitet werden, und zwar während einer Zeit, die ausreicht, daß IL-4 eine verstärkte primäre Immunantwort herbeiführen kann. Der Impfstoff wird auf einem Weg und in einer Stärke verabreicht, wie sie für jede verwendete Spezies empfohlen werden.
• Jedes geeignete IL-4 kann in der vorliegenden Erfindung verwendet werden. Komplementäre DNAS (cDNAS) für IL-4 wurden vor kurzem kloniert und von mehreren Labors sequenziert, z.B. Yokota et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1986) Vol. 83: 5894-5898 (Mensch); Lee et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1986) Vol. 83: 2061-2065 (Maus); Noma et al., Nature (1986) Vol. 319: 640-646 (Maus); und Genzyme Corporation, Boston, Massachusetts (Mensch und Maus) Außerdem wurde nicht-rekombinantes IL-4 aus verschiedenen Kulturüberständen gereinigt, z.B. Sanderson et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1986) Vol. 83: 437-440 (Maus); Grabstein et al., J. EXD. Med. (1985) Vol. 163: 1405-1413 (Maus); Ohara et al., J. Immunol. (1985) Vol. 135: 2518-2523 (Maus-BSF-1); Butler et al., J. Immunol. (1984) Vol. 133: 251-255 (Human-BCGF); und Farrar et al., J. Immunol. (1983) Vol. 131: 1838-1842 (Maus- BCGF). Auf die Offenbarungen aller obigen Artikel wird hier wegen ihrer Lehren in bezug auf DNA- und Aminosäuresequenzen und Verfahren zur Gewinnung geeigneter IL-4-Materialien zur Verwendung in der vorliegenden Erfindung ausdrücklich Bezug genommen.
• Vorzugsweise handelt es sich bei dem in der vorliegenden Erfindung verwendeten IL-4 um Human-IL-4, und am meisten bevorzugt handelt es sich um die Human-Version mit der Sequenz, die in Yokoto et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1986), Vol. 83: 5894-5898, und der PCT-Patentanmeldung Nr. 87/02990, die am 21. Mai 1987 veröffentlicht wurde, beschrieben ist und die in E. coli exprimiert und daraus isoliert wurde (WO89/01046 und US-A- 4,958,007) Die Herstellung von IL-4 aus CHO-Zellen ist in WO91/01744 beschrieben. Die Herstellung von IL-4 aus E. coli ist in WO91/06655 beschrieben.
• Der hier hinsichtlich der wirksamen Menge von IL-4, die gemäß dieser Erfindung verabreicht wird, verwendete Ausdruck "wirksame Menge" bedeutet eine Menge von IL-4, die einen Anstieg des Antikörperspiegels erzeugt, der ausreicht, um einen erhöhten Schutz vor einem Infektionserreger zu ergeben. Die genaue Brhöhung des Antikörperspiegels, die als signifikant betrachtet werden könnte, kann gering sein. Die verabreichte wirksame Menge von IL-4 beträgt typischerweise 0,25 bis 15 Mikrogramm IL-4 pro Kilogramm Körpergewicht pro Tag, vorzugsweise wird Human-IL-4, das rekombinant aus E.-coli- oder CHO-Zellen erzeugt wurde, verabreicht. Noch bevorzugter verabreicht man Säugern 0,25 bis 5 Mikrogramm rhIL-4 pro Kilogramm Körpergewicht pro Tag, und am meisten bevorzugt verabreicht man Säugern 0,25 bis 1 Mikrogramm hIL-4 pro Kilogramm Körpergewicht pro Tag.
• Die Menge, Häufigkeit und Zeit der Verabreichung variiert in Abhängigkeit von Faktoren wie dem Gehalt an spezifischen Antikörpern, der Klasse der zu induzierenden Antikörper, dem Typ des Impfstoffs sowie dem Alter des Patienten, der Ernährung usw. Gewöhnlich wird die Verabreichung von IL-4 anfangs täglich erfolgen, und sie kann periodisch fortgesetzt werden, solange der Patient lebt. Die Menge und Häufigkeit der Gaben kann am Anfang anhand von Voruntersuchungen des Gehalts an spezifischen Antikörpern und der Stärke der Wirkung von IL-4 auf die Erhöhung des Antikörpergehalts bestimmt werden.
• Die Verabreichung der Dosis kann intravenös, nasal, parenteral, oral, subcutan, intramuskulär, topisch, transdermal oder nach irgendeinem anderen annehmbaren Verfahren erfolgen. Das IL-4 kann in beliebiger Anzahl herkömmlicher Darreichungsformen verabreicht werden. Zu den parenteralen Präparaten gehören sterile Lösungen oder Suspensionen. Eine Verabreichung durch Inhalation kann in Form eines Nasen- oder Mundsprays oder durch Insufflation erfolgen. Zu den topischen Darreichungsformen gehören Cremes, Salben, Lotionen, transdermale Vorrichtungen (z.B. des herkömmlichen Depot- oder Matrixpflastertyps) und dergleichen.
• Die für die obigen Darreichungsformen in Betracht kommenden Zubereitungen pharmazeutischer Zusammensetzungen können mit herkömmlichen pharmazeutisch annehmbaren Arzneimittelhilfsstoffen und Additiven mit Hilfe herkömmlicher Techniken hergestellt werden.
• Zur Zeit wird das IL-4 vorzugsweise auf intravenösem Weg verabreicht. Die zu verabreichenden Lösungen können rekonstituierte lyophilisierte Pulver sein und können zusätzlich Konservierungsstoffe, Puffer, Dispergierstoffe usw. enthalten.
• Vorzugsweise wird IL-4 mit 10 mM Citratpuffer eines geeigneten pH-Werts und konservierungsstofffreiem sterilem Wasser rekonstituiert, so daß die maximale Konzentration 100 Mikrogramm pro Milliliter nicht überschreitet, und durch kontinuierliche intravenöse Infusion oder durch intravenöse Injektion verabreicht. Für die kontinuierliche Infusion kann die Tagesdosis zu 5 ml normaler Kochsalzlösung gegeben und die Lösung durch eine mechanische Pumpe oder unter der Schwerkraft infundiert werden.
Materialien und Verfahren:
• Das in den folgenden Experimenten verwendete rekombinante Human- IL-4 war con CHO-Zellen abgeleitet, und das Verfahren seiner Herstellung ist in WO91/01744 beschrieben.
Ausführung der Experimente: Affen:
• Erwachsene männliche Javaneraffen (Cynomolgus), die aus Südostasien erhalten wurden, wurden im Handel erworben, z.B. von Hazelton and Charles River Laboratories. Alle Affen wurden vor der Verwendung mindestens 90 Tage lang in Quarantäne gehalten.
Tetanus-Toxoid und Impfung der Tiere:
• Der in diesem Experiment verwendete Tetanus-Toxoidimpfstoff war eine Tetanus-Toxoidflüssigkeit (tetanus toxoid purgonated ), die von Lederle Laboratories, Pearl River, NY 10965, erhalten wurde.
• Fünfzehn (15) erwachsene männliche Javaneraffen wurden vor dem Beginn dieser Untersuchung mit Primaten-Cytomegalovirus (PCMV) infiziert. Zu dieser Zeit zeigten alle Tiere einen meßbaren PCMV- Antikörpertiter. Der Zweck des Miteinbeziehens dieser internen Kontrolle war zu testen, ob die Behandlung mit IL-4 Antikörperspiegel nichtspezifisch beeinflussen würde. Wie würden nicht erwarten, daß IL-4 zu einer Erhöhung der Menge an Antikörpern gegen PCMV führen würde, da kein PCMV-Impfstoff verabreicht wurde. Die zur Messung von Antikörperreaktionen verwendeten Standardverfahren waren ein Radioimmunoassay für PCMV sowie ein Festphasen-Radioimmunoassay (siehe Berzofasky, J.A. et al. "Antigen-Antibody Interactions and Monoclonal Antibodies", S. 315-356, in "Fundamental Immunology" (1989), 2. Auflage (Hrsg. W.E. Paul), Raven Press N.Y., N.Y.) für den rHBVax- und den Salkinaktivierten Poliovirus-Impfstoff.
• Eine Blutabnahme, um Blut für Assays auf PCMV und Tetanus-Toxoid- Antikörper zu erhalten, wurde vor der Verabreichung von IL-4 neun Wochen lang einmal pro Woche (2 bis 7 in Figur 1) und für die 22 Wochen 8 bis 30 der Untersuchung zweimal pro Woche vorgenommen. Die intravenöse Verabreichung von rhIL-4 in zwei Tagesdosen (5,0 und 20,0 ug/kg/Tag B.I.D.) und des Placebos wurde in der Mitte von Woche 8 bis zur Mitte von Woche 12 begonnen und insgesamt 25 Tage lang fortgesetzt. Der Tetanus-Toxoidimpfstoff (0,5 ml, die 5 Lf-Einheiten Tetanus-Toxoid enthielten) wurde am 11. Tag der rhIL-4-Verabreichung durch intramuskuläre Injektion an alle 15 Affen verabreicht. Die Ergebnisse der Tetanus-Antikörper-Titerbestimmung für die drei Gruppen (Gruppenmittelwerte) sind in Figur 2 und Tabelle I gezeigt. Figur 2 veranschaulicht graphisch die verstärkte Reaktion der Gruppe mit 5 ug/kg/Tag im Vergleich zur Kontrollgruppe und zur Gruppe mit 20 ug/kg/Tag (siehe Figur 5). Die Reaktion der Gruppe mit 5 ug/kg (in Figur 2 und 4 gezeigt) war im Vergleich zu der in Figur 2 und 3 gezeigten Reaktion der Kontrollgruppe statistisch signifikant.
• Tabelle I zeigt, daß (1) die Gruppe, die 5 ug/kg IL-4 erhielt, in den Wochen 4-6 nach der Impfung mit Tetanus-Toxoid einen statistisch höheren Antikörpertiter hatte als die Placebo- Kontrollgruppe; (2) beide Gruppen, die IL-4 erhalten hatten (5,0 ug/kg und 20 ug/kg), in den Wochen 7-9 nach der Impfung einen höheren Tetanus-Antikörper-Titer hatten als die Placebo-Kontrollgruppen. Tabelle 1 Antikörperreaktion auf primären Tetanus-Impfstoff: Wirkung von IL-4 IL-4-Dosis (1) Gruppe Menge Woche (1) - ug/kg Tiergewicht. (2) - die Werte stellen den über die Zeit gemittelten Antikörpertiter dar; N = 5 Affen pro Gruppe (± = Standardabweichung des Mittelwerts).
• In Anbetracht der Ergebnisse der obigen Experimente wird erwartet, daß IL-4, vorzugsweise rhIL-4, nach primärer Impfung mit einem Impfstoff eine Immunantwort bei Säugern verstärken würde, wenn die Immunantwort dieser Säuger nicht stark genug ist oder nicht schnell genug erfolgt, um eine Krankheit zu verhindern.
• Ähnliche Ergebnisse wären für bakterielle und virale Impfstoffe und Gemische von beiden mit Toxoiden zu erwarten.

Claims (5)

1. Verwendung von aus E. coli abgeleitetem rekombinantem Human-IL-4 zur Herstellung eines Medikaments zur Verstärkung einer primären Immunantwort eines Säugers auf Immunogene, die in einem Toxoidimpfstoff vorhanden sind, mit der Maßgabe, daß das Medikament frei von Human-B-Zellen- Differenzierungsfaktor (Human-BCDF) ist.

2. Verwendung gemäß Anspruch 1, wobei das IL-4 dem Säuger gleichzeitig mit dem Impfstoff verabreicht wird.

3. Verwendung gemäß einem der vorangehenden Ansprüche, wobei das IL-4 parenteral verabreicht wird.

4. Verwendung gemäß einem der vorangehenden Ansprüche, wobei die verabreichte Menge des IL-4 im Bereich von 0,25 bis 15 Mikrogramm pro Kilogramm Körpergewicht pro Tag liegt.

5. Verwendung gemäß einem der vorangehenden Ansprüche, wobei es sich bei dem Toxoidimpfstoff um Tetanus-Toxoidimpfstoff handelt.