-
Diese Erfindung bezieht sich auf eine neue Verbindung, in
welcher Prednisolon (11β,17α,21-Trihydroxy-1,4-pregnadien-3,20-
dion) durch ein Terpen modifiziert ist, und auf eine dieselbe
enthaltende entzündungshemmende Zusammensetzung und auf ein
Verfahren zur Herstellung derselben.
-
Bis jetzt ist es bekannt, daß in den Estern von Pregnanderivaten
wie etwa Cortison, Hydrocortison, Prednison, Prednisolon,
Dexamethason, Triamcinolon, Paramethason, Betamethason und
dergleichen, welche durch Verestern der entsprechenden Pregnanderivate,
welche entzündungshemmende Wirkungen besitzen, an der
21-Stellung, an welcher eine Hydroxylgruppe vorliegt, unter Verwendung
reaktionsfähiger Derivate wie etwa Säurehalogenide und
Säureanhydride von Terpensäuren wie etwa Geraniumsäure,
Homogeraniumsäure, Geranylessigsäure, Citronellsäure, Farnesinsäure,
Homofarnesinsäure und Farnesylessigsäure erhalten werden können,
deren Nebenwirkungen, welche die Pregnanderivate als
Ausgangsverbindungen zeigen, verringert sind und deren Aktivitäten im
Vergleich mit den Pregnanderivaten im allgemeinen erhöht sind,
wenn sie äußerlich angewendet werden (siehe US-Patent Nr. 3 488
421).
-
Einige der Erfinder berichteten, daß Prednisolon-21-farnesylat
[11β,17α,21-Trihydroxy-1,4-pregnadien-3,20-dion-21-(3,7,11-
trimethyl-2,6,10-dodecatrienoat)], welches in dem US-Patent
nicht spezifisch beschrieben worden war, eine Hemmwirkung gegen
den Thymidineinbau durch Humanlymphozyten besaß, welche eine
blastogene Transformation durch Phytohämagglutinin erfuhren
[siehe Medicina, Bd. 22, Nr. 7 (1985) S. 1174 - 1175 und Mebio,
Bd. 4, Nr. 8 (1987) S. 78 - 92] und daß
Prednisolon-21-farnesylat durch häufige Anwendungen in Tierentzündungsmodellen die
tiefe Stelle erreichte [The 8th Japan Inflammation Society
Conference Program Preliminary Draft Report (veröffentlicht am 30.
Juni 1987), S. 90, 27 und The 3rd Japan DDS Research Society
Conference Program Preliminary Draft Report S. 52. PS-16 (die am
11. Juli 1987 abgehaltene 3. Konferenz der Japan DDS Research
Society).
-
Die Erfinder fanden, daß Prednisolon-21-farnesylat eine höhere
entzündungshemmende Wirkung hat als Prednisolon und selten
solche Nebenwirkungen wie Atrophie der Thymusdrüse zeigt, welche
bei Prednisolon gefunden werden. Es ist wünschenswerter, Terpen-
modifizierte Verbindungen von Prednisolon bereitzustellen,
welche eine bessere entzündungshemmende Wirkung in bezug auf die
Behandlung von Entzündungen zeigen.
-
Somit ist es eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung, eine neue
Terpen-modifizierte Verbindung von Prednisolon bereitzustellen,
welche nicht nur eine höhere entzündungshemmende Aktivität und
weniger Nebenwirkungen zeigt, sondern auch in der
Dauerhaftigkeit der entzündungshemmenden Wirkung besser ist als
Prednisolon. Es ist eine weitere Aufgabe der vorliegenden Erfindung,
eine entzündungshemmende Zusammensetzung bereitzustellen, welche
die Terpen-modifizierte Verbindung enthält.
-
Prednisolon-21-farnesylat besitzt vier geometrische Isomere, da
es eine geometrische Isomerie an den Doppelbindungen in der 2-
Stellung und der 6-Stellung der
3,7,11-Trimethyl-2,6,10-dodecatrienoylgruppe besitzt. Aus den vorgenannten, Prednisolon-21-
farnesylat betreffenden Berichten ist es jedoch nicht
offensichtlich, ob das Prednisolon-21-farnesylat ein einziges
geometrisches Isomer oder ein Gemisch einer Mehrzahl geometrischer
Isomeren ist und auch das Verfahren zu dessen Herstellung ist
nicht offensichtlich.
-
Wenn Prednisolon-21-farnesylat als Arzneimittel wie etwa als ein
entzündungshemmender Wirkstoff verwendet wird, ist es unter dem
Gesichtspunkt, daß die Qualität des Arzneimittels konstant
bleibt, erwünscht, daß das Prednisolon-21-farnesylat als ein
einziges geometrisches Isomer verwendet wird. Obschon die
Erfinder unter diesem Gesichtspunkt verschiedene Verfahren zum
Verestern studierten, um 11β,17α,21-Trihydroxy-1,4-pregnadien-
3-20-dion-21-[(E,E)-3,7,11-trimethyl-2,6,10-dodecatrienoat]
[nachstehend als Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) bezeichnet],
welches eines der geometrischen Isomeren von Prednisolon-21-
farnesylat ist, aus (E,E)-3,7,11-Trimethyl-2,6,10-dodecatrien
säure (nachstehend als 2E,6E-Farnesylsäure bezeichnet), welches
eines der geometrischen Isomeren von 3,7,11-Trimethyl-2,6,10-
dodecatriensäure ist, und Prednisolon herzustellen, fanden sie,
daß es Probleme gab, wie etwa das Problem, daß in vielen Fällen
eine große Menge 11β,17α,21-Trihydroxy-1,4-pregnadien-3,20-dion-
21-[(Z,E)-3,7,11-trimethyl-2,6,10-dodecatrienoat] [nachstehend
als Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat) bezeichnet], welches ein
geometrisches Isomer von Prednisolon-21-(2E, 6E-farnesylat) ist,
als Nebenprodukt gebildet wurde, und das Problem, daß es
schwierig war, Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) mit hoher
Selektivität und in hoher Ausbeute herzustellen.
-
In Angewandte Chemie International Edition in English, Bd. 17,
Nr. 7 (1978), S. 522-524, wird berichtet, daß die entsprechenden
Ester durch Umsetzung einer Carbonsäure wie etwa
1-Phenylcyclohexan-1-carbonsäure, Zimtsäure, Malonsäure und so weiter mit
einem Alkohol wie etwa Methanol und tert-Butylalkohol in der
Anwesenheit von N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid beziehungsweise 4-
(Dimethylamino)pyridin erhalten wurden. Es gibt jedoch keinen
Bericht über die Veresterungsreaktion eines geometrischen
Isomeren von Carbonsäuren mit einer Methylethenylengruppe wie etwa
2E,6E-Farnesylsäure und die geometrische Isomerie von
Zimtsäuremethylester und Zimtsäure-tert-butylester, welche durch die
Veresterung von Zimtsäure hergestellt worden sind.
-
Somit ist die dritte Aufgabe der vorliegenden Erfindung, ein
Verfahren zum Herstellen von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat),
welches eines der geometrischen Isomeren von Prednisolon-21-
farnesylat ist, in hoher Selektivität und Ausbeute und mit
Leichtigkeit bereitzustellen.
-
Gemäß der vorliegenden Erfindung werden die vorgenannten
Aufgaben
durch Bereitstellen von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat),
das durch die Formel
-
dargestellt wird, und eine entzündungshemmende Zusammensetzung,
welche als wirksamen Bestandteil das
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) enthält, gelöst.
-
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) kann durch Umsetzen von
Prednisolon oder eines reaktionsfähigen Derivats desselben mit
2E,6E-Farnesylsäure oder einem reaktionsfähigen Derivat
derselben hergestellt werden. Die Reaktion von Prednisolon mit 2E,6E-
Farnesylsäure wird in Anwesenheit von
(Disubstituiert-amino)pyridinen und eines Kondensationsmittels ausgeführt.
-
Fig. 1 zeigt die Ergebnisse des Adjuvans-Arthritis-Tests in
Testbeispiel 2. Fig. 2 zeigt die Ergebnisse der Tests zur
Hemmung des Thymidineinbaus in Humanlymphozyten, die in
Testbeispiel 3 einer Blastentransformation unterzogen wurden.
-
Als reaktionsfähige Derivate von Prednisolon können Halogenide,
Alkansulfonate, Arensulfonate, Carboxylate und dergleichen
angeführt werden. Als reaktionsfähige Derivate von
2E,6E-Farnesylsäure können Niederalkylester, Säurehalogenide, gemischte
Säureanhydride, Alkalimetallsalze, Silbersalze, Salze organischer
tertiärer oder quaternärer Basen und dergleichen angeführt
werden. Die Reaktion von Prednisolon oder einem reaktionsfähigen
Derivat desselben mit 2E,6E-Farnesylsäure oder einem
reaktionsfähigen Derivat derselben kann im allgemeinen unter den
Bedingungen herkömmlicher, bisher bekannter Ester-Synthesereaktionen
ausgeführt werden. Nachstehend werden repräsentative Beispiele
der Ester-Synthesereaktionen beschrieben.
(Reaktionsbeispiel a)
Reaktion von Prednisolon mit einem Säurehalogenid von 2E,6E-
Farnesylsäure
-
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) kann durch Umsetzen von
Prednisolon mit einem Säurehalogenid, vorzugsweise Säurechlorid, von
2E,6E-Farnesylsäure in einer Menge von etwa 0,5 bis 10
Äquivalenten, vorzugweise 0,9 bis 2,0 Äquivalente, bezogen auf
Prednisolon in Anwesenheit oder in Abwesenheit eines inerten
Lösungsmittels in Anwesenheit einer organischen tertiären Base wie etwa
Pyridin oder Triethylamin in einer Menge von etwa 1,0
Äquivalenten bezogen auf das Säurehalogenid bis zu einer als
Lösungsmittel ausreichenden Menge bei etwa 0ºC bis Raumtemperatur erhalten
werden. Als inertes Lösungsmittel können zum Beispiel
Kohlenwasserstoffe wie etwa Toluol, Benzol und Hexan; halogenierte
Kohlenwasserstoffe wie etwa Tetrachlorkohlenstoff, Chloroform,
Dichlormethan, Dichlorethan und Trichlorethylen; Ether wie etwa
Diethylether, t-Butylmethylether, Diisopropylether,
Tetrahydrofuran und Dimethoxyethan; Ketone wie etwa Aceton und
Ethylmethylketon; aprotische polare Lösungsmittel wie etwa
Dimethylsulfoxid und Dimethylformamid verwendet werden.
(Reaktionsbeispiel b)
Reaktion von Prednisolon mit einem gemischten Säureanhydrid von
2E,6E-Farnesylsäure
-
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) kann durch Umsetzen von
Prednisolon mit einem gemischten Säureanhydrid von
2E,6E-Farnesylsäure mit Pivalinsäure, p-Toluolsulfonsäure oder dergleichen in
einer Menge von etwa 0,5 bis 10 Äquivalenten, vorzugsweise 0,9
bis 2,0 Äquivalente, bezogen auf Prednisolon in Anwesenheit oder
Abwesenheit derselben Lösungsmittel wie einem in
Reaktionsbeispiel a verwendbarem inerten Lösungsmittel, vorzugsweise in
Anwesenheit einer Säure wie etwa Schwefelsäure oder
p-Toluolsulfonsäure oder einem tertiären Amin wie etwa Pyridin oder
Triethylamin
in einer katalytischen Menge bis zu einer als
Lösungsmittel ausreichenden Menge bei etwa 0ºC bis Raumtemperatur
hergestellt werden.
(Reaktionsbeispiel c)
Reaktion von Prednisolon mit 2E,6E-Farnesylsäure
-
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) kann durch Umsetzen von
Prednisolon mit 2E,6E-Farnesylsäure in einem inerten Lösungsmittel
wie etwa Benzol, Toluol und Xylol in Anwesenheit eines
Kondensationsmittels wie etwa Dicyclohexylcarbodiimid oder 2-Chlor-1-
methylpyridiniumiodid und Triethylamin bei etwa 0ºC bis unter
Erhitzen oder unter Bedingungen zur azeotropen Dehydratisierung
erhalten werden.
(Reaktionsbeispiel d)
Reaktion von Prednisolon mit einem Niederalkylester von 2E,6E-
Farnesylsäure
-
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) kann durch Umsetzen von
Prednisolon mit einem Niederalkylester von 2E,6E-Farnesylsäure in
Anwesenheit eines Ester-Austauschkatalysators wie etwa
p-Toluolsulfonsäure oder einer Titanmetallverbindung wie etwa
Tetramethyltitanat in einem inerten Lösungsmittel wie etwa Toluol oder
Xylol unter Erhitzen, während der sich daraus ergebende Alkohol
mit einem niedrigeren Siedepunkt aus dem Reaktionssystem
entfernt wird, erhalten werden.
(Reaktionsbeispiel e)
Reaktion eines Halogenids, eines Alkansulfonats oder eines
Arensulfonats von Prednisolon mit einem Alkalimetallsalz, Silbersalz
oder einem Salz einer organischen tertiären oder quaternären
Base von 2E,6E-Farnesylsäure
-
Prednisolon-21-(2E, 6E-farnesylat)
kann durch Umsetzen eines
Halogenids, eines Alkansulfonats oder eines Arensulfonats von
Prednisolon mit einem Alkalimetallsalz, Silbersalz oder einem
Salz einer organischen tertiären oder quaternären Base von
2E,6E-Farnesylsäure in einem Lösungsmittel wie etwa
Dimethylformamid, Benzol, Aceton oder dergleichen bei etwa 0ºC bis unter
Erhitzen erhalten werden.
-
Wie vorstehend erwähnt, ist es unter dem Gesichtspunkt der
Selektivität und Ausbeute von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
als Produkt bevorzugt, daß die Reaktion von Prednisolon mit
2E,6E-Farnesylsäure in Anwesenheit von
(Disubstituiert-amino)pyridinen und eines Kondensationsmittels ausgeführt wird. Das
Herstellungsverfahren von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) durch
diese Reaktion wird nachstehend im einzelnen beschrieben.
-
Als gemäß der vorliegenden Erfindung zu verwendende
(Disubstituiert-amino)pyridine sind die Verbindungen der allgemeinen
Formel geeignet:
-
(worin R¹ und R² unabhängig eine Alkylgruppe oder kombiniert eine
Alkylengruppe bezeichnen, welche substituiert sein kann). Als
durch R¹ und R² in der allgemeinen Formel (I) dargestellte
Alkylgruppe sind Niederalkylgruppen bevorzugt, wie etwa Methyl,
Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl und sec-Butyl. Als durch
kombiniertes R¹ und R² dargestellte Alkylengruppe können zum
Beispiel Tetramethylen, Pentamethylen und 3-Methylpentamethylen
angeführt werden. Als substituierte Alkylengruppe kann zum
Beispiel Oxaalkylen, wie etwa 3-Oxapentamethylen, und
Bis(disubstituiert-amino)methylen, wie etwa Bis(dimethylamino)methylen und
Bis(diethylamino)methylen, angeführt werden. Als durch die
allgemeine Formel (I) dargestellte Verbindung werden
4-(Disubstituiert-amino)pyridine, wie etwa 4-(Dimethylamino)pyridin,
4-(Diethylamino)pyridin, 4-(N-Ethyl-N-methylamino)pyridin,
4-(Diisopropylamino)pyridin,
4-(Dibutylamino)pyridin,
4-(1-Pyrrolidinyl)pyridin, 4-Piperidinopyridin, 4-(4-Methyl-1-piperidinyl)pyridin,
4-(1-Morpholino)pyridin und
1,1,3,3-Tetramethyl-4-(4-pyridyl)guanidin, und 2-(Disubstituiert-amino)pyridine, wie etwa
2-(Dimethylamino)pyridin und 2-Piperidinopyridin, angeführt.
-
In der Reaktion gemäß der vorliegenden Erfindung können als
Kondensationsmittel solche organischen
Dehydratisierungs-Kondensationsmittel verwendet werden, wie sie üblicherweise in Ester-
Bildungsreaktionen zwischen Carbonsäuren und Alkoholen und
Kupplungsreaktionen wie etwa Peptidderivat-Bildungsreaktionen
zwischen zwei Arten von Peptidderivaten, zwei Arten von
Aminosäurederivaten oder einem Peptidderivat und einem Aminosäurederivat
verwendet werden, welche durch N,N'-disubstituierte
Carbodiimide, wie etwa N,N'-Dicylclohexylcarbodiimid,
1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimid,
N-Cyclohexyl-N'-(2-morpholinoethyl)carbodiimid,
N-Cyclohexyl-N'-(4-dimethylaminocyclohexyl)carbodiimid, N,N'-Diisopropylcarbodiimid und
N-Phenyl-N'-ethylcarbodiimid, 1-Alkoxycarbonyl-2-alkoxy-1,2-dihydrochinoline, wie
etwa 1-Ethoxycarbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydrochinolin,
1-Isobutoxycarbonyl-2-methoxy-1,2-dihydrochinolin, 1-Isobutoxycarbonyl-2-
ethoxy-1,2-dihydrochinolin und dergleichen veranschaulicht
werden.
-
Bei der Reaktion der vorliegenden Erfindung wird
2E,6E-Farnesylsäure im allgemeinen in einer Menge verwendet, welche von etwa
0,1 bis 10 Mol, vorzugsweise von etwa 1 bis 3 Mol, bezogen auf
1 Mol Prednisolon reicht. (Disubstituiert-amino)pyridine werden
normalerweise in einer Menge innerhalb des Bereichs von etwa
0,001 bis 0,5 Mol, vorzugsweise etwa 0,01 bis 0,1 Mol, bezogen
auf 1 Mol Prednisolon verwendet. Die Menge an zu verwendendem
Kondensationsmittel liegt üblicherweise im Bereich von etwa 0,1
bis 10 Mol, vorzugsweise etwa 0,5 bis 2 Mol, bezogen auf 1 Mol
2E,6E-Farnesylsäure.
-
Die vorstehende Reaktion wird im allgemeinen in einem
organischen Lösungsmittel ausgeführt. Als organisches Lösungsmittel
können Ketone, wie etwa Aceton und Methylethylketon, Ester, wie
etwa Essigsäureethylester und Essigsäuremethylester, Ether, wie
etwa Diethylether, Tetrahydrofuran, Dioxan und Dimethoxyethan,
halogenierte Kohlenwasserstoffe, wie etwa Dichlormethan,
Chloroform, Tetrachlorkohlenstoff, Dichlorethan, Kohlenwasserstoffe,
wie etwa Benzol, Toluol und Hexan, Nitrile, wie etwa
Acetonitril, Amine, wie etwa Pyridin und Triethylamin, einzeln oder in
einem Gemisch zweier oder mehrerer Arten verwendet werden.
Insbesondere ist es erwünscht, Ketone, Ether, Ester, halogenierte
Kohlenwasserstoffe und dergleichen einzeln oder in einem Gemisch
von zwei oder mehr Arten zu verwenden, da die Selektivität
gegenüber Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) und die
Reaktionsausbeute in diesen Lösungsmitteln hoch sind. Das organische
Lösungsmittel kann üblicherweise in einer Menge innerhalb des
Bereichs von 0,1 bis 1000 ml bezogen auf 1 g Prednisolon
verwendet werden. Im Fall, wo das organische Lösungsmittel in einer
Menge innerhalb des Bereichs von etwa 1 bis 100 ml bezogen auf
1 g Prednisolon verwendet wird, ist das Reaktionsverfahren
bequem und die Ausbeute an Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) ist
hoch. Die Reaktion kann üblicherweise bei einer Temperatur
innerhalb des Bereichs von etwa -70ºC bis etwa 100ºC, vorzugsweise
innerhalb des Bereichs von etwa -20ºC bis etwa 60ºC, ausgeführt
werden. Insbesondere bevorzugt wird die Reaktion bei einer
Temperatur innerhalb des Bereichs von etwa -10ºC bis etwa 30ºC,
unter dem Gesichtspunkt der Höhe der Ausbeute an Prednisolon-21-
(2E,6E-farnesylat) und der Bequemlichkeit des
Reaktionsverfahrens, ausgeführt. Obwohl die Reaktionszeit in Abhängigkeit von
den Bedingungen wie etwa der Reaktionstemperatur schwankt,
reicht sie üblicherweise von etwa 1 bis 200 Stunden.
-
Obschon es beim Durchführen der Reaktion keine Beschränkung in
der Reihenfolge des Mischens von Prednisolon,
2E,6E-Farnesylsäure, (Disubstituiert-amino)pyridinen, dem Kondensationsmittel
und dem organischen Lösungsmittel, welches verwendet wird, gibt,
ist es nötigenfalls in dem Fall, wo N,N'-disubstituierte
Carbodiimide und dergleichen als Kondensationsmittel verwendet
werden, bevorzugt, daß die Reaktion ausgeführt wird, während das
Kondensationsmittel oder dessen Lösung in dem organischen
Lösungsmittel langsam einem Gemisch von Prednisolon,
2E,6E-Farnesylsäure, (Disubstituiert-amino)pyridinen und dem organischen
Lösungsmittel, welches verwendet wird, nötigenfalls unter Rühren
zugesetzt wird und daß nach der Zugabe des Kondensationsmittels
oder dessen Lösung die Reaktion nach Bedarf fortgeführt wird, da
die Selektivität gegenüber Prednisolon-21-( 2E,6E-farnesylat)
manchmal hoch wird. Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) kann
ferner durch Umsetzen des Gemischs von 2E,6E-Farnesylsäure und
einem Kondensationsmittel und Mischen des sich daraus ergebenden
Produkts mit einem (Disubstituiert-amino)pyridin und Prednisolon
hergestellt werden.
-
Das durch die Reaktion von 2E,6E-Farnesylsäure und einem
Kondensationsmittel erhaltene, sich daraus ergebende Produkt wird
als ein Säureanhydrid angesehen, welches von 2E,6E-Farnesylsäure
abgeleitet ist, wie etwa ein symmetrisches Anhydrid von 2E,6E-
Farnesylsäure, nämlich
(E,E)-3,7,11-Trimethyl-2,6,10-dodecatrienanhydrid (nachstehend als 2E,6E-Farnelsylanhydrid
bezeichnet) oder ein gemischtes Anhydrid von 2E,6E-Farnesylsäure und
einem Kondensationsmittel. Das Verfahren zum Reagierenlassen von
2E,6E-Farnesylsäure und einem Kondensationsmittel und darauf
folgend dem Umsetzen des sich daraus ergebenden Produkts und
Prednisolon in Anwesenheit eines (Disubstituiert-amino)pyridins
wird nachstehend im einzelnen erklärt.
-
Bei der Reaktion eines Kondensationsmittels und
2E,6E-Farnesylsäure ist die Menge an zu verwendendem Kondensationsmittel nicht
immer bestimmt und schwankt in Abhängigkeit von der Art des
Kondensationsmittels. Wo ein derartiges Kondensationsmittel, wie
zum Beispiel N,N'-disubstituierte Carbodiimide, welches 2E,6E-
Farnesylanhydrid als Reaktionsprodukt liefert, verwendet wird,
liegt es vorzugsweise in dem Bereich von etwa 0,1 bis 2,0 Mol,
bevorzugter in dem Bereich von etwa 0,3 bis 1,0 Mol, bezogen auf
1 Mol 2E,6E-Farnesylsäure. In weiteren Fällen, wo ein
Kondensationsmittel, von dem angenommen wird, daß es zusammen mit 2E,6E-
Farnesylsäure ein gemischtes Anhydrid als Reaktionsprodukt
ergibt, z.B. 1-Alkoxycarbonyl-2-alkoxy-1,2-dihydrochinoline,
verwendet wird, liegt dessen Menge bevorzugt in dem Bereich von
etwa 0,2 bis 3,0 Mol, bevorzugter in dem Bereich von etwa 0,5
bis 1,5 Mol, gegenüber 1 Mol 2E,6E-Farnesylsäure.
-
Diese Reaktion wird üblicherweise in einem organischen
Lösungsmittel, wie etwa Ketone, Ester, Ether, halogenierte
Kohlenwasserstoffe, Kohlenwasserstoffe usw., durchgeführt, dessen zu
verwendende Menge üblicherweise in dem Bereich von etwa 0,1 bis
1000 ml, vorzugsweise im Bereich von etwa 0,5 bis 100 ml,
gegenüber 1 g 2E,6E-Farnesylsäure liegt. Die Reaktionstemperatur
liegt üblicherweise in dem Bereich von etwa -70 bis 100ºC,
vorzugsweise in dem Bereich von etwa -20 bis 60ºC, bevorzugter in
dem Bereich von etwa -10 bis 30 ºC. Die Reaktionszeit schwankt in
Abhängigkeit von den Reaktionsbedingungen, liegt aber
üblicherweise in dem Bereich von etwa 1 bis 30 Stunden.
-
Im Fall wo ein Kondensationsmittel, das 2E,6E-Farnesylanhydrid
als Reaktionsprodukt liefert, verwendet wird, ist es bevorzugt,
daß das Kondensationsmittel oder eine Lösung desselben in einem
organischen Lösungsmittel langsam unter Rühren einem Gemisch von
2E,6E-Farnesylsäure und einem organischen Lösungsmittel unter
Hervorrufen einer Reaktion zugesetzt wird und nach dem
Zugabevorgang die Reaktion nötigenfalls weiter fortgesetzt wird. Dies
kann die Selektivitätsrate gegenüber 2E,6E-Farnesylanhydrid
vorteilhaft erhöhen. Um die Selektivität gegenüber
2E,6E-Farnesylanhydrid und seine Ausbeute zu erhöhen, kann die Reaktion
andererseits in einem organischen Lösungsmittel, wie etwa
Kohlenwasserstoffe, Ether, Ketone, Ester usw., durchgeführt werden,
dem ein Salz eines tertiären Amins und einer starken Base, z. B.
4-(Dimethylamino)pyridin-hydrochlorid, in einer Menge von etwa
0,01 bis 0,1 Mol gegenüber 1 Mol 2E,6E-Farnesylsäure zugesetzt
ist.
-
Das durch die Reaktion von 2E,6E-Farnesylsäure und einem
Kondensationsmittel auf diese Weise erhaltene Reaktionsgemisch,
welches das Reaktionsprodukt enthält, kann für die
darauffolgende
Reaktion mit Prednisolon so wie es ist oder nachdem das
organische Lösungsmittel abdestilliert worden ist verwendet
werden. Wahlweise kann das aus dem Reaktionsgemisch durch
Unterziehen einem Trennvorgang, z.B. Säulenchromatographie, aus dem
Reaktionsgemisch abgetrennte Reaktionsprodukt zur Reaktion mit
Prednisolon verwendet werden.
-
2E,6E-Farnesylanhydrid ist verhältnismäßig stabil und kann
verhältnismäßig leicht aus dem Reaktionsgemisch isoliert werden,
wogegen das gemischte Ahhydrid von 2E,6E-Farnesylsäure und einem
Kondensationsmittel gegenüber der Zersetzung während des
Trennvorgangs anfällig ist. Wo demgemäß ein derartiges
Kondensationsmittel verwendet wird, von dem angenommen wird, daß es ein
derartiges gemischtes Anhydrid als Reaktionsprodukt liefert, wird
das Reaktionsgemisch vorzugsweise als solches der Reaktion mit
Prednisolon zugeführt.
-
Wenn man 2E,6E-Farnesylsäure und ein Kondensationsmittel in
Anwesenheit eines Salzes eines tertiären Amins und einer starken
Säure reagieren läßt, ist es unter dem Gesichtspunkt der
Selektivität gegenüber Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) bevorzugt,
das Salz zum Beispiel durch ein
Flüssig-Flüssig-Verteilungsverfahren zu entfernen, um das nachfolgende Reaktionssystem, in
welchem Prednisolon verwendet wird, nicht zu verunreinigen.
-
Bei der Reaktion zwischen dem vorangehenden Reaktionsprodukt von
2E,6E-Farnesylsäure und einem Kondensationsmittel und
Prednisolon in Gegenwart eines (Disubstituiert-amino)pyridins liegt die
Menge Prednisolon üblicherweise im Bereich von etwa 0,05 bis 2,0
Mol, vorzugsweise in dem Bereich von etwa 0,2 bis 1,1 Mol,
gegenüber 1 Mol anfänglich verwendeter 2E,6E-Farnesylsäure oder 1
Mol abgetrenntem 2E, 6E-Farnesylanhydrid.
-
Die Menge an zu verwendendem (Disubstituiert-amino)pyridin liegt
üblicherweise in dem Bereich von etwa 0,001 bis 0,5 Mol,
vorzugsweise in dem Bereich von etwa 0,01 bis 0,1 Mol, gegenüber 1
Mol Prednisolon wie zuvor angegeben. Diese Reaktion wird
üblicherweise
in Anwesenheit eines organischen Lösungsmittels, wie
etwa Ketone, Ester, Ethern halogenierte Kohlenwasserstoffe,
Nitrile, Amine usw., durchgeführt, dessen zu verwendende Menge
üblicherweise etwa 0,1 bis 1000 ml, vorzugsweise etwa 1 bis 100
ml, gegenüber 1 g Prednisolon beträgt. Die Reaktionstemperatur
liegt üblicherweise in dem Bereich von etwa -50 bis 100ºC,
vorzugweise etwa 0 bis 50ºC. Die Reaktionszeit schwankt in
Abhängigkeit von den Reaktionsbedingungen, liegt aber üblicherweise
in dem Bereich von etwa 5 bis 200 Stunden.
-
Die Trennung und Reinigung von durch die vorgenannten Ester-
Synthesereaktionen erhaltenem Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
kann durch ein herkömmliches Verfahren ausgeführt werden. Zum
Beispiel wird dem Reaktionsgemisch Wasser zugesetzt, gefolgt von
der Extraktion mit Essigsäureethylester oder dergleichen.
Nachdem der Extrakt mit Wasser gewaschen und getrocknet ist, wird
das Lösungsmittel abdestilliert. Der Rückstand wird der Trennung
zum Beispiel durch Säulenchromatographie unter Ergeben von
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) unterzogen. In dem Fall, wo das
auf diese Weise erhaltene Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) mit
geometrischen Isomeren von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat),
die bei der Ester-Synthesereaktion gebildet werden, verunreinigt
ist, kann das Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) durch zum
Beispiel Waschen mit Diethylether oder Umkristallisieren aus einem
Lösungsmittel wie etwa einem gemischten Lösungsmittel aus
Essigsäureethylester und Hexan oder Diethylether gereinigt werden.
-
Wenn die zum Herstellen von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) zu
verwendende 2E,6E-Farnesylsäure oder ihr reaktionsfähiges
Derivat frei von ihren geometrischen Isomeren als Verunreinigungen
und von hoher Reinheit sind, wird
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) manchmal in hoher Ausbeute auf der Grundlage von
Prednisolon hergestellt. Als 2E,6E-Farnesylsäure oder ihr
reaktionsfähiges Derivat kann jedoch ein Gemisch von 2E,6E-Farnesylsäure oder
ihrem reaktionsfähigen Derivat mit deren geometrischen Isomeren
verwendet werden.
-
2E,6E-Farnesylsäure, welche als Ausgangsverbindung in der
Reaktion gemäß der vorliegenden Erfindung verwendet wird, kann
leicht durch Oxidieren von
(E,E)-3,7,11-Trimethyl-2,6,10-dodecatrienal mit chloriger Säure gemäß dem in der japanischen
offengelegten Patentanmeldung (Kokai) Nr. 142137/1987 beschriebenen
Verfahren erhalten werden.
-
Als nächstes wird der Test und die Ergebnisse zu den
entzündungshemmenden Aktivitäten von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
der Verbindung der vorliegenden Erfindung und Prednisolon,
11β,17α,21-Trihydroxy-1,4-pregnadien-3,20-dion-21-[(Z,Z)-3,7,11-
trimethyl-2,6,10-dodecatrianoat)] [nachstehend als Prednisolon-
21-(2Z,6Z-farnesylat) bezeichnet] oder 11β,17α,21-Trihydroxy-
1,4-pregnadien-3,20-dion-21-[Z,E)-3,7,11-trimethyl-2,6,10-dodecatrianoat [nachstehend als Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat)
bezeichnet], welche als Vergleichsverbindung verwendet wurde,
dargestellt.
Testbeispiel 1
Baumwollpellet-Granulom-Test
-
Ein Baumwollpellet wurde mit der Ethanollösung einer zu
testenden Verbindung getränkt, getrocknet und im Autoklaven
sterilisiert. In einer Gruppe von 10 männlichen Wistar-Ratten (Gewicht
142 - 164 g) wurde jede Ratte entlang der Rückenmittellinie
unter Betäubung etwas eingeschnitten und 30±1 mg jedes der
vorgenannten Baumwollpellets wurde unter die Haut auf beiden Seiten
der Schulter eingeführt. Am 7. Tag nach der Einführung des
Baumwollpellets wurde die Ratte getötet, Granulom und Thymus wurden
entnommen und ihre Gewichte wurden gemessen. Was das Granulom
betraf, wurde es nach dem Trocknen gewogen und der nach Abziehen
des Gewichts des Baumwollpellets von dem gewogenen Gewicht
erhaltene Wert wurde als das Granulomgewicht angesehen (zwei links
und rechts). Als Kontrolle wurde ein ähnlicher Test mit einem
mit Ethanol ohne zu testende Verbindung getränkten
Baumwollpellet ausgeführt, das getrocknet und im Autoklaven sterilisiert
war. Tabelle 1 zeigt die Ergebnisse dieser Tests.
Tabelle 1
Testverbindung
Anwendungsmenge (ug/Pellet)
Körpergewichtszunahme (g)
Granulomgewicht (mg) Mittl.±S.A.
Granulomwachstumshemmrate (%)
Thymusgewicht
Kontrolle
Verbindung der Erfindung [Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)]
Vergleichsverbindung (Prednisolon)
*: bedeutsamer Unterschied zur Kontrolle, p< 0,001
#: bedeutsmer Unterschied zur Vergleichsverbindung, p< 0,001
-
Wie in Tabelle 1 gezeigt, war das
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) der vorliegenden Erfindung von bemerkenswert hoher
entzündungshemmender Aktivität, verglichen mit Prednisolon als
Vergleich, während die Rückbildungswirkung auf den Thymus
verringert war.
Testbeispiel 2
Adjuvans-Arthritis-Test
-
Bei 30 männlichen Lewis-Ratten (Gewicht 195 - 245 g) rief die
Beimpfung mit 0,1 ml Adjuvans, das durch Suspendieren von toten
R&sub3;&sub5;H&sub5;-Tuberkelbazillen in einer Konzentration von 5 mg/ml in
Paraffinöl hergestellt wurde, in die Schwanzansatzhaut jeder
Ratte Arthritis hervor. Am 15. Tag nach der Beimpfung wurde das
Beinvolumen gemessen und Ratten mit ähnlichen Volumen des
rechten Hinterbeins wurden in drei Gruppen aufgeteilt (10 Ratten je
Gruppe). Jeweils 100 mg Gelsalbe, die eine zu testende
Verbindung enthielt und die gemäß dem Verfahren im später
beschriebenen Beispiel 34 hergestellt war, wurden auf das rechte
Hinterbein der Ratten auf einmal täglich vom 15. bis 22. Tag nach der
Beimpfung aufgebracht. Das Volumen des rechten Hinterbeins der
Ratten wurde am 18., 20., 22., 25., 27. und 29. Tag nach der
Beimpfung gemessen. Als Kontrolle wurde derselbe Test mit
Ausnahme der Anwendung der Gelsalbe ausgeführt. Fig. 1 zeigt die
Ergebnisse dieser Tests. In Fig. 1 zeigt die Längsachse das
durchschnittliche rechte Hinterbeinvolumen der Ratten in jeder
Gruppe an.
-
Wie in Fig. 1 gezeigt, ist Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) der
Erfindung in der Aktivität und Dauer der entzündungshemmenden
Wirkung bemerkenswert gut, verglichen mit dem Prednisolon-21-
(2Z,6Z-farnesylat) zum Vergleich.
Testbeispiel 3
Test zur Hemmung des Thymidineinbaus in Humanlymphozyten, die
der Blastentransformation unterzogen werden
-
Die Intensität des Steroids bei der Hemmwirkung gegen den
Thymidineinbau in Humanlymphozyten, die der Blastentransformation
unterzogen werden, wurde als Index der entzündungshemmenden
Aktivität des Steroids angesehen.
-
[Medicina, Bd. 22, Nr. 7 (1985) S. 1174 - 1175 und Medio, Bd. 4,
Nr. 8 (1987) S. 78 - 92]
-
Gemäß dem in Clinical and Experimental Immunology, Bd. 15
(1973), S. 203 - 212, beschriebenen Verfahren wurden
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) der Erfindung, Prednisolon-21-(2Z,6Z-
farnesylat) zum Vergleich und Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat)
zum Vergleich auf die Hemmwirkung gegenüber dem Thymidineinbau
in Humanlymphozyten, die der Blastentransformation durch
Phytohämagglutinin unterzogen wurden, bewertet. Aus arteriellem
Humanblut isolierte Lymphozyten wurden in einer Konzentration von
3,3 x 10&sup5; Lymphozyten/ml in RPMI-1640-Kulturlösung, die fetales
Rinderserum in einer Konzentration von 20 Vol.% enthielt,
geflutet. 2 ml des auf diese Weise erhaltenen Gemischs wurden 20 ul
der Ethanollösung einer zu testenden Verbindung zugesetzt und
das Gemisch wurde 30 Minuten bei 37ºC in einer Kohlendioxid in
einer Konzentration von 5 Vol.% enthaltenden Atmosphäre
kultiviert. Dem auf diese Weise erhaltenen Gemisch wurden 20 ul RPMI-
1640-Kulturlösung zugesetzt, die Phytohämagglutinin in einer
Konzentration von 1 mg/ml enthielt, und das Gemisch wurde 3 Tage
bei 37ºC in einer Kohlendioxid in einer Konzentration von 5
Vol.% enthaltenden Atmosphäre kultiviert. Dem auf diese Weise
erhaltenen Gemisch wurden 200 ul Thymidin zugesetzt, welches mit
³H (Radioaktivität: 10 Mikrocurie/ml) markiert war, und das
Gemisch wurde 4 Stunden weiter kultiviert. Die Lymphozyten in
dem auf diese Weise erhaltenen Gemisch wurden durch dreimal
Waschen mit physiologischer Kochsalzlösung als Niederschlag
erhalten. Dem auf diese Weise erhaltenen Niederschlag wurden
0,25 ml 0,5 normaler Toluollösung von quaternärem
Ammoniumhydroxid (von Packard Co., USA, hergestelltes Soluene-350) und 5 ml
des Pseudocumol enthaltenden Cocktailinittels (von Packard Co.,
USA, hergestelltes Hionic-Flour) zugesetzt, anschließend wurde
die Menge mit ³H markierten Thymidins, welche in die Lymphozyten
eingebaut wurde, durch einen Szintillationszähler gemessen. Auf
der Grundlage der Menge des in die Lymphozyten eingebauten
Thymidins wurde die Hemmrate gegen den Thymidineinbau auf der
Grundlage der in demselben Test mit Ausnahme des Zusatzes der zu
testenden Verbindung gemessenen Thymidinmenge berechnet. Fig. 2
zeigt diese Ergebnisse. Die waagrechte Achse zeigt die
Konzentration der Testverbindungen in dem Gemisch an, welches durch
Zusetzen mit ³H markierten Thymidins erhalten wurde.
-
Wie in Fig. 2 gezeigt, war Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) der
Erfindung bei der Hemmwirkung gegen den Thymidineinbau in
Humanlymphozyten, die der Blastentransformation durch
Phytohämagglutinin ausgesetzt wurden, stärker, verglichen mit Prednisolon-21-
(2Z,6Z-farnesylat) und Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat) zum
Vergleich.
-
Von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) ist bestatigt worden, daß
es ausgezeichnete Eigenschaften als entzündungshemmendes Mittel
und eine niedrige Toxizität im Toxizitätstest besitzt. Die akute
Toxizität von Prednisolon-21-(2E, 6E-farnesylat) [LD&sub5;&sub0; (männliche
ddy-Mäuse, Gewicht 23,6 - 26,2 g, 5 Mäuse je Gruppe, subkutane
Injektion)] war nicht geringer als 2000 mg/kg.
-
Aus den Ergebnissen des vorangehenden pharmakologischen Tests
wird von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) gefunden, daß es als
Arzneimittel zum Behandeln von durch verschiedene Faktoren
hervorgerufenen Entzündungen nützlich ist.
-
Gemäß dieser Erfindung können medizinische Zusammensetzungen,
die Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) enthalten, bereitgestellt
werden. Die medizinischen Zusammensetzungen können oral oder
parenteral verabreicht werden. Die Zusammensetzungen zur oralen
Verabreichung können in der Form von Pulvern, Tabletten,
Emulsionen, Kapseln, Granulaten, Flüssigkeiten (einschließlich
Tinkturen, Flüssigextrakten, Arzneimittellösungen mit Weingeist,
Suspensionen, Limonaden, Sirups und dergleichen) und so weiter
vorliegen. Die parenteralen Zusammensetzungen können in Formen
wie etwa injizierbaren Zubereitungen, Zubereitungen zum
Einträufeln, Salben, Pflaster, Flüssigkeiten (einschließlich
Arzneimittellösungen mit Weingeist, Tinkturen, Lotionen und dergleichen),
Breiumschlägen, auftragbaren Zubereitungen, Sprays,
Stäubepulvern, Einreibemittel, Cremes, Emulsionen, Lösungen und so weiter
vorliegen.
-
Obschon die Dosierung in Abhängigkeit von dem Symptom schwankt,
kann die tägliche Dosis im Fall von oralen Zusammensetzungen,
injizierbaren Zusammensetzungen und Zubereitungen zum
Einträufeln im Bereich von 1 bis 500 mg, vorzugsweise 5 bis 100 mg, je
Erwachsenem als Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) liegen. Die
Zusammensetzung kann in dieser Dosierung als Einzeldosis oder in
verteilten Dosen mehrmals am Tag verabreicht werden. Im Fall der
parenteralen, äußeren Anwendung kann die Zusammensetzung in
einer Konzentration von 0,01 bis 10%, vorzugsweise 0,1 bis 3%,
auf der Grundlage von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
verwendet werden.
-
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) der vorliegenden Erfindung
kann allein oder als pharmazeutische Zubereitung verwendet
werden, welche eine oder mehrere Arten geeigneter Grundlagen wie
etwa Träger und Arzneimittelhilfsstoffe enthält. Derartige
pharmazeutische Zubereitungen schließen orale Arzneimittel,
injizierbare Zubereitungen und äußerlich anwendbare Zubereitungen
und dergleichen ein. Diese pharmazeutischen Zubereitungen können
auf herkömmliche Weise mittels herkömmlicher Grundlagen
hergestellt werden.
-
Als Form für orale Arzneimittel können Tabletten, Kapseln,
Pulver, Granulate, Flüssigkeiten und dergleichen angeführt werden.
Die zur Herstellung dieser Formen pharmazeutischer Zubereitungen
zu verwendenden Arzneimittelhilfsstoffe schließen zum Beispiel
Lactose, Sucrose, Stärke, kristalline Cellulose, Weißzucker,
Natriumchlorid, Glucoselösung, Calciumcarbonat, Kaolin und
dergleichen
ein. Als zu verwendende Bindemittel können zum Beispiel
Polyvinylalkohol, Methylcellulose, Ethylcellulose,
Carboxymethylcellulose, Polyvinylpyrrolidon, Gummiarabicum, Schellack,
Weißzucker und dergleichen angeführt werden. Als zu verwendende
Gleitmittel können zum Beispiel Borsäurepulver, festes
Polyethylenglykol, Magnesiumstearat, Talg und dergleichen angeführt
werden. Weiterhin können diese pharmazeutischen Zubereitungen
Farbstoffe, Zerfallshilfsmittel, Korrigenzien und dergleichen
enthalten, welche herkömmlicherweise verwendet werden. Die
Tabletten können auf herkömmliche Weise überzogen sein.
-
Beim Herstellen injizierbarer Zubereitungen können als
Lösungsmittel zum Beispiel Wasser, Ethylalkohol, Polyethylenglykol,
Propylenglykol, Polyoxyethylensorbitan, Fettsäureester und
dergleichen verwendet werden. In diesem Fall können Natriumchlorid,
Glucose, Glycerin und dergleichen in einer zum Herstellen einer
isotonen Lösung ausreichenden Menge enthalten sein. Ferner
können pH-einstellende Mittel, Puffer, Stabilisatoren und
dergleichen, welche herkömmlicherweise verwendet werden, zugesetzt
werden. Die vorstehenden injizierbaren Zubereitungen können
topisch, zum Beispiel als intraartikuläre Injektionen in Form
injizierbarer Suspensionen verwendet werden.
-
Formen äußerlich anwendbarer Zubereitungen können Salben
(Fettsalbe, emulgierte Salbe, wasserlösliche Salbe und dergleichen),
flüssige Einreibemittel, Lotionen, Pulver, Heftpflaster, Sprays,
Inhalationsmittel, Suppositorien und dergleichen sein. Was die
Salben anbetrifft, ist es möglich, diese in geeigneter Form
durch Verwenden einer oder mehrerer Arten Fett, fettigem Öl,
Vaseline, Paraffin, Wachs, Lanolin, Alkohole, Tonmineralien,
Tenside, Wasser und dergleichen als Grundlage zu erhalten. Der
pH-Wert der Salben liegt unter dem Gesichtspunkt des Beschränken
auf das Färben vorzugsweise im Bereich von 6 bis 7,5, und
bevorzugterweise im Bereich von 6,5 bis 7. Es ist erwünscht, daß die
Salben, um das Eindringen von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
in den erkrankten Abschnitt zu erleichtern, das Eindringen
verstärkende Mittel enthalten, wie etwa einen Dicarbonsäurediester
(z. B.
Sebacinsäurediethylester, Sebacinsäurediisopropylester,
Adipinsäurediisopropylester, Adipinsäurediethylester), einen
Monocarbonsäureester (z. B. Myristinsäureisopropylester,
Palmitinsäureisopropylester), N-Ethyl-N-(2-methylphenyl)-2-butenamid,
1-Dodecylazacycloheptan-2-on, Squalan, Harnstoff, Lecithin und
so weiter. Es ist ferner bevorzugt, daß die Salben hinsichtlich
der guten Absorption von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) in
dem erkrankten Abschnitt als Gel vorliegen. Die Gelsalben
umfassen zum Beispiel Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat), ein
Glykol, wie etwa Propylenglykol, Butylenglykol, ein
Polyethylenglykol mit einem Molekulargewicht unter 1000 (z. B. Macrogol 400
usw.), einen Verdicker, wie etwa Carboxyvinylpolymer, ein
Cellulosepolymer (z. B. eine Hydroxypropylmethylcellulose, eine
Hydroxypropylcellulose usw.), ein Polyethylenglykol mit einem
Molekulargewicht von nicht weniger als 1000 (z. B. Macrogol
1500, Macrogol 4000, Macrogol 6000 usw.), einen Alkohol wie etwa
einen niederen Alkohol (z. B. Isopropylalkohol, Ethanol usw.),
das vorgenannte, das Eindringen verstärkende Mittel und
gereinigtes Wasser. Die Menge Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) in
den Gelsalben beträgt vorzugsweise 0,01 bis 10 Gew.-% und
bevorzugter 0,1 bis 3 Gew.-%. Die Menge Glykol in den Gelsalben
beträgt vorzugsweise 5 bis 30 Gew.-% und bevorzugter 10 bis 20
Gew.-%. Es ist ferner bevorzugt, daß ein Verdickungsmittel in
den Gelsalben in einer Menge von 0,1 bis 5 Gew.-% enthalten ist.
Als Verdickungsmittel wird ein Carboxyvinylpolymer allein oder
ein Carboxyvinylpolymer, ein Cellulosepolymer und ein
Polyethylenglykol mit einem Molekulargewicht von nicht weniger als 1000
kombiniert in einer Menge von 0,1 bis 4 Gew.-%, 0,1 bis 4 Gew.-%
beziehungsweise 0,1 bis 3 Gew.-% und bevorzugter in einer Menge
von 0,5 bis 2 Gew.-%, 0,5 bis 2 Gew.-% und 0,5 bis 1,5 Gew.-%
verwendet. Ein Alkohol wird vorzugsweise in einer Menge von 10
bis 70 Gew.-% auf die Gelsalben und bevorzugter in einer Menge
von 30 bis 60 Gew.-% verwendet. Ein das Eindringen verstärkendes
Mittel wird vorzugsweise in einer Menge von 1 bis 10 Gew.-% der
Gelsalben und bevorzugter in einer Menge von 3 bis 7 Gew.-%
verwendet. Die Menge gereinigtes Wasser beträgt bevorzugt 10 bis
50 Gew.-% der Gelsalben und bevorzugter 20 bis 40 Gew.-%. Die
pH-einstellenden Mittel, wie etwa ein Amin (z. B.
Triisopropanolamin, Diisopropanolamin usw.), Ammoniak, Natriumhydroxid und
so weiter und UV-Absorber, wie etwa
2-Hydroxy-4-methoxybenzophenon, p-Aminobenzoesäureethylester und so weiter, können wie
benötigt in den Gelsalben verwendet werden. Als flüssige
Einreibemittel können wäßrige Flüssigkeiten, wie sie zum Beispiel
durch Verwenden von Wasser und einem mit Wasser mischbaren
Lösungsmittel als Grundlage und nötigenfalls weiter durch
Verwenden eines geeigneten Hilfslösungsvermittlers hergestellt wurden,
durch Verwenden von Glycerin oder Propylenglykol als Grundlage
hergestellte Flüssigkeiten, durch Verwenden eines Alkohols als
Grundlage hergestellte Tinkturen und dergleichen angeführt
werden. Als Lotionen können Lotionen vom Suspensionstyp, Lotionen
vom Emulsionstyp und dergleichen angeführt werden, welche durch
Verwenden einer oder mehrerer Arten Emulgationsmittel,
Suspendierungsmittel (z. B. Dispergierungsmittel, Verdickungsmittel,
Feuchtmittel), Schutzmittel, zusammen mit Wasser hergestellt
werden können. Die Pulver können durch Verwenden geeigneter
Pulvergrundlagen wie etwa Talg, Kaolin, Stärke und Zinkoxid
hergestellt werden. Als Heftpflaster können zum Beispiel
Breiumschläge oder Klebebänder angeführt werden, in welche
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) der vorliegenden Erfindung
eingearbeitet ist. Als Sprays und Inhalationsmittel können Aerosole
angeführt werden, die durch Lösen oder Suspendieren von Prednisolon-
21-(2E,6E-farnesylat) der vorliegenden Erfindung in einem
geeigneten Lösungsmittel und Hinzufügen eines geeigneten
Treibmittels, wie etwa Fluorkohlenstoff, Kohlendioxidgas oder
verflüssigtes Erdölgas, Sprays, die unter Verwendung einer
geeigneten Sprühdose versprüht werden können, und dergleichen
hergestellt werden. Die Suppositorien können durch Verwenden von Fett
wie etwa Kakaobutter, Lanolin und Fettsäuretriglycerid,
Polyethylenglykol, Gelatine und dergleichen als Grundlage
hergestellt werden.
-
Wie aus den vorgenannten Ergebnissen der pharmakologischen Tests
ersichtlich ist, zeigt Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat), das
gemäß der vorliegenden Erfindung bereitgestellt werden kann,
eine bemerkenswert gute entzündungshemmende Wirkung, verglichen
mit Prednisolon und den anderen geometrischen Isomeren von
Prednisolon-21-farnesylat als Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) als
Kontrollverbindungen und zeigt daneben verringerte
Nebenwirkungen, die bei Prednisolon gefunden werden. Die Prednisolon-21-
(2E,6E-farnesylat) der vorliegenden Erfindung enthaltenden,
entzündungshemmenden Zusammensetzungen erlauben das wirksame
Zeigen der ausgezeichneten entzündungshemmenden Wirkung, welche
das Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) besitzt.
-
Ferner kann gemäß dem Herstellungsverfahren der vorliegenden
Erfindung Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) in hoher
Selektivität und guter Ausbeute und bequem hergestellt werden, wie aus
den später beschriebenen Beispielen deutlich wird.
Beispiele
-
Nachstehend wird die vorliegende Erfindung durch
veranschaulichende Beispiele genau beschrieben, welche nicht als
einschränkend aufzufassen sind.
Beispiel 1
-
Eine aus 37,14 g (190 mMol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid und 150
ml Tetrahydrofuran bestehende Lösung wurde tropfenweise einem
Gemisch von 36,05 g (100 mMol) Prednisolon, 44,91 g (190 mMol)
2E,6E-Farnesylsäure, 0,611 g (5,0 mMol) 4-(Dimethylamino)pyridin
und 150 ml Dichlormethan unter Rühren unter Eiskühlung über den
Zeitraum von 9 Stunden zugesetzt. Nach Vervollständigung der
tropfenweisen Zugabe wurde das Reaktionsgemisch 3 Tage weiter
bei Raumtemperatur gerührt. Ein Teil des auf diese Weise
erhaltenen Reaktionsgemischs wurde der Analyse durch Hochleistungs-
Flüssigkeitschromatographie unterzogen und es wurde gefunden,
daß die Restmenge Prednisolon im Reaktionsgemisch 0,03 g (0,07
mMol) betrug und die Ausbeute an Prednisolon-21-farnesylat 57,5
g (100 mMol) betrug. Als Ergebnis der Analyse eines Teils des
erhaltenen Prednisolon-21-farnesylats durch
Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie wurde gefunden, daß das Prednisolon-21-
farnesylat ein Gemisch aus Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) und
Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat) war (Molverhältnis: 89 zu 11).
Der erhaltene Dicyclohexylharnstoff wurde durch Filtration aus
dem Reaktionsgemisch entfernt. Das Filtrat wurde unter
vermindertem Druck eingeengt und dem erhaltenen Konzentrat wurden zum
Lösen 250 ml Essigsäureethylester unter Erhitzen zugesetzt. Die
Lösung wurde filtriert, während sie erhitzt wurde. Bei einer
Temperatur von etwa 60 bis 70 ºC wurden dem erhaltenen Filtrat
500 ml Hexan zugesetzt. Nach Vervollständigung der tropfenweisen
Zugabe wurde das Gemisch allmählich auf Raumtemperatur
abgekühlt. Die ausgefallenen Kristalle wurden durch Filtration
gesammelt und aus 160 ml Methanol unter Ergeben von 30,76 g (53,2
mMol) Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) als weiße Kristalle
umkristallisiert. Weiter wurde die gesamte Mutterlauge
zurückgewonnen und der Umkristallisation aus Essigsäureethylester-Hexan
und Methanol unterzogen, um 13,87 g (24,0 mMol) Prednisolon-21-
(2E,6E-farnesylat) als weiße Kristalle zu liefern. Das auf diese
Weise erhaltene Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) besaß die
folgenden Eigenschaften und seine Ausbeute betrug 77% auf der
Grundlage verbrauchten Prednisolons.
-
Schmp.: 152 - 154 ºC
-
FD-Massenspektrum: 578 (M&spplus;)
-
¹H-NMR-Spektrum (500 MHz) : δ (CDCl&sub3;/TMS):
7,29 (d, J=10Hz, 1H); 6,28 (d, J=10Hz, 1H); 6,02 (s, 1H); 5,81
(s, 1H); 5,10 (m, 2H); 5,05 (d, J=18Hz, 1H); 4,89 (d, J=18Hz,
1H); 4,49 (m, 1H); 2,17 (s, 3H); 1,70 (s, 3H); 1,63 (s, 6H);
1,47 (s, 3H); 1,00 (s, 3H)
-
¹³C-NMR-Spektrum (125 MHz) δ (CD&sub3;OD):
206,4, 187,9, 173,6, 166,5, 161,4, 159,0, 136,3, 131,2, 126,8,
124,4, 123,2, 121,5, 115,1, 89,7, 69,9, 67,5, 56,4, 51,9, 45,1,
40,9, 39,8, 39,3, 34,6, 33,7, 32,2, 31,7, 26,8, 26,0, 24,9,
23,9, 20,63, 20,57, 18,1, 16,8, 16,3, 15,2
Beispiel 2
-
Prednisolon [36,05 g (100 mMol)] und 44,91 g (190 mMol) 2E,6E-
Farnesylsäure wurden auf dieselbe Weise wie in Beispiel 1
umgesetzt.
Dicyclohexylharnstoff wurde durch Filtration des
erhaltenen Reaktionsgemischs entfernt. Das Filtrat wurde unter
vermindertem Druck eingeengt und das erhaltene Konzentrat wurde der
Kieselgel-Säulenchromatographie (Entwicklungslösungsmittel: ein
Lösungsmittelgemisch aus Essigsäureethylester und Hexan) unter
Ergeben von 56,6 g (97,9 mMol) Prednisolon-21-farnesylat
unterzogen. Ferner wurden 0,05 g (1,4 mMol) Prednisolon
zurückgewonnen. Als Ergebnis der Analyse eines Teils des erhaltenen
Prednisolon-21-farnesylats durch
Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie wurde gefunden, daß das Prednisolon-21-farnesylat ein
Gemisch aus Prednisolon-21-(2E, 6E-farnesylat) und Prednisolon-
21-(2Z,6E-farnesylat) (Molverhältnis: 89 zu 11) war. Dieses
Prednisolon-21-farnesylat wurde mit Diethylether gewaschen, um
45,1 g (78,0 mMol) Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) als weißen
Feststoff zu liefern. Die Ausbeute des isolierten Prednisolon-
21-(2E,6E-farnesylats) betrug 79% auf der Grundlage des
verbrauchten Prednisolons.
Beispiel 3
-
Einem Gemisch von 3,6 g (10 mMol) Prednisolon, 3,5 g (15 mMol)
2E,6E-Farnesylsäure, 0,085 g (0,70 mMol)
4-(Dimethylamino)pyridin und 15 ml Dichlormethan wurden auf einmal 3,1 g (15 mMol)
N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid zugesetzt und das Gemisch wurde 12
Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Als Ergebnis der Analyse
eines Teils des erhaltenen Reaktionsgemischs durch
Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie wurde gefunden, daß die
Restmenge Prednisolon im Reaktionsgemisch 0,36 g (1,0 mMol) und die
Ausbeute an Prednisolon-21-farnesylat 5,2 g (9,0 mMol) betrugen.
Dicyclohexylharnstoff wurde durch Filtration des
Reaktionsgemischs entfernt. Das Filtrat wurde unter vermindertem Druck
eingeengt und das erhaltene Konzentrat wurde der
Kieselgel-Säulenchromatographie (Entwicklungslösungsmittel: ein
Lösungsmittelgemisch aus Essigsäureethylester und Hexan) unter Ergeben von 5,1
g (8,8 mMol) Prednisolon-21-farnesylat unterzogen. Als Ergebnis
der Analyse eines Teils des Prednisolon-21-farnesylats durch
Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie wurde gefunden, daß
das Prednisolon-21-farnesylat ein Gemisch aus Prednisolon-21-
(2E,6E-farnesylat) und Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat)
(Molverhältnis: 89 zu 11) war.
-
Das Prednisolon-21-farnesylat wurde mit Diethylether unter
Ergeben von 3,6 g (6,2 mMol) Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) als
einem weißen Feststoff gewaschen. Die Ausbeute an isoliertem
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) betrug 69% auf der Grundlage
des verbrauchten Prednisolons.
Beispiele 4 bis 11
-
Durch Ausführen der Reaktion und des
Trennungs-Reinigungs-Verfahrens in derselben Weise wie in Beispiel 3 wurde unter
Verwenden der (Disubstituiert-amino)pyridine in den in Tabelle 2
angegebenen Mengen beziehungsweise anstelle von 0,085 g (0,70
mMol) 4-(Dimethylamino)pyridin in Beispiel 3 Prednisolon-21-
(2E,6E-farnesylat) erhalten. Die Ergebnisse werden in Tabelle 2
dargestellt.
Tabelle 2
verwendetes (Disubstituiert-amino)pyridin
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
Beispiel
Art (chemische Struktur)
Menge
Restmenge Prednisolon (g) (Anmerkung 1)
Ausbeute an Prednisolon-21-farnesylat (g) (Anmerkung 2)
Ausbeute (g) (Anmerkung 3)
Ausbeute (%) (Anmerkung 4)
-
(Anmerkung 1) Eine quantitative Analyse wurde durch Unterziehen
eines Teils des Reaktionsgemischs der
Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie ausgeführt.
-
(Anmerkung 2) Es wird die Ausbeute eines Gemischs von
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) und Prednisolon-21-
(2Z,6E-farnesylat) gezeigt (das Molverhältnis
betrug in jedem Beispiel etwa 9 zu 1), wie es
durch Unterziehen des Konzentrats des Filtrats
des Reaktionsgemischs der
Kieselgel-Säulenchromatographie erhalten wurde.
-
(Anmerkung 3) Es wird die Ausbeute an isoliertem Prednisolon-
21-(2E,6E-farnesylat) dargestellt.
-
(Anmerkung 4) Es wird die Ausbeute des isolierten Prednisolon-
21-(2E,6E-farnesylats) auf der Grundlage des
verbrauchten Prednisolons dargestellt.
Beispiel 12
-
Einem Gemisch von 3,6 g (10 mMol) Prednisolon, 3,5 g (15 mMol)
2E,6E-Farnesylsäure, 60 mg (0,5 mMol) 4-(Dimethylamino)pyridin
und 20 ml Dichlormethan wurden 2,3 g (15 mMol)
1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimid zugesetzt und das Gemisch wurde
48 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wurde
aus dem Reaktionsgemisch abdestilliert. Der erhaltene Rückstand
wurde in Essigsäureethylester gelöst, mit verdünnter Salzsäure,
einer wäßrigen Natriumbicarbonatlösung und einer wäßrigen
Natriumchloridlösung in dieser Reihenfolge gewaschen und über
wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Das Lösungsmittel wurde unter
Ergeben eines Rückstands abdestilliert, welcher der Kieselgel-
Säulenchromatographie (Entwicklungslösungsmittel: ein
Lösungsmittelgemisch aus Essigsäureethylester und Hexan) unter Ergeben
von 4,8 g (8,3 mMol) Prednisolon-21-farnesylat unterzogen wurde.
Ferner wurden 0,18 g (0,5 mMol) Prednisolon zurückgewonnen. Als
Ergebnis der Analyse durch
Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie wurde gefunden, daß das erhaltene
Prednisolon-21-farnesylat
ein Gemisch aus Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) und
Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat) (Molverhältnis: 88 zu 12) war.
Dieses Prednisolon-21-farnesylat wurde aus einem
Lösungsmittelgemisch aus Essigsäureethylester und Hexan unter Ergeben von 3,6
g (6,2 mMol) Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) als weiße
Kristalle umkristallisiert. Die Ausbeute des isolierten
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylats) betrug 65% auf der Grundlage des
verbrauchten Prednisolons.
Beispiele 13 und 14
-
Durch Ausführen des Reaktionsverfahrens und des
Trennungs-Reinigungs-Verfahrens in derselben Weise wie in Beispiel 12 wurde
unter Verwendung der in Tabelle 3 angegebenen
Kondensationsmittel beziehungsweise anstelle von 2,3 g (15 mMol) 1-Ethyl-3-(3-
dimethylaminopropyl)carbodiimid
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) erhalten. Die erhaltenen Ergebnisse werden in Tabelle 3
dargestellt.
Tabelle 3
verwendetes Kondensationsmittel
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
Beispiel
Art
Menge
Ausbeute an Prednisolon-21-farnesylat (g) (Anmerkung 1)
Menge an zurückgewonnenem Prednisolon (g) (Anmerkung 2)
Ausbeute (g) (Anmerkung 3)
Ausbeute (%) (Anmerkung 4)
N-Cyclohexyl-N'-(2-morpholinoethyl)carbodiimid
N-Cyclohexyl-N'-(4-dimethylaminocyclohexyl)carbodiimid
-
(Anmerkung 1) Es wird die Ausbeute des Gemischs von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
und Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat) dargestellt (das Molverhältnis betrug in jedem
Beispiel etwa 9 zu 1), wie es durch Unterziehen des durch die Nachbehandlung des
Reaktionsgemischs erhaltenen Gemischs der Kieselgel-Säulenchromatographie erhalten
wurde.
-
(Anmerkung 2) Es wird die Menge an Prednisolon dargestellt, das durch Unterziehen
des durch Nachbehandlung des Reaktionsgemischs erhaltenen Gemischs der
Kieselgel-Säulenchromatographie zurückgewonnen wurde.
-
(Anmerkung 3) Es wird die Ausbeute an isoliertem Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
dargestellt.
-
(Anmerkung 4) Es wird die Ausbeute des isolierten Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylats)
auf der Grundlage des verbrauchten Prednisolons dargestellt.
Beispiele 15 bis 17
-
Durch Ausführen des Reaktionsverfahrens und des
Trennungs-Reinigungs-Verfahrens in derselben Weise wie in Beispiel 3 wurde
unter Verwenden von 15 ml der in Tabelle 4 angegebenen
organischen Lösungsmittel beziehungsweise anstelle von 15 ml
Dichlormethan als Reaktionslösungsmittel in Beispiel 3 Prednisolon-21-
(2E,6E-farnesylat) erhalten. Die erhaltenen Ergebnisse werden in
Tabelle 4 dargestellt.
Tabelle 4
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
Beispiel
Organisches Lösungsmittel
Restmenge Prednisolon (g) (Anmerkung 1)
Ausbeute an Prednisolon-21-farnesylat (g) (Anmerkung 2)
Ausbeute (g) (Anmerkung 3)
Ausbeute (%) (Anmerkung 4)
Lösungsmittelgemisch aus Dichlormethan und Tetrahydrofuran (Volumenverhältnis: 1 zu 1)
Lösungsmittelgemisch aus Dichlormethan und Essigsäureethylester (Volumenverhältnis: 1 zu 1)
-
(Anmerkung 1) Die quantitative Analyse wurde durch Unterziehen eines Teils des
Reaktionsgemischs der Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie ausgeführt
-
(Anmerkung 2) Es wird die Ausbeute des Gemischs von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
und Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat) dargestellt (das Molverhältnis betrug in jedem
Beispiel etwa 9 zu 1), wie es durch Unterziehen des Konzentrats des Filtrats des
Reaktionsgemischs der Kieselgel-Säulenchromatographie erhalten wurde.
-
(Anmerkung 3) Es wird die Ausbeute an isoliertem Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
dargestellt.
-
(Anmerkung 4) Es wird die Ausbeute des isolierten Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylats)
auf der Grundlage des verbrauchten Prednisolons dargestellt.
Beispiel 18
-
Einem Gemisch von 4,0 g (17 mMol) 2E,6E-Farnesylsäure, 3,6 g (10
mMol) Prednisolon, 85 mg (0,7 mMol) 4-(Dimethylamino)pyridin und
20 ml wasserfreiem Tetrahydrofuran wurden 4,2 g (17 mMol) 1-
Ethoxycarbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydrochinolin unter Eiskühlung
zugesetzt und das Gemisch wurde eine Stunde unter Eiskühlung
gerührt und weiter 72 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das
Lösungsmittel wurde aus dem Reaktionsgemisch unter Ergeben eines
Rückstands abdestilliert, welcher in Essigsäureethylester gelöst
wurde und mit verdünnter Salzsäure, einer wäßrigen
Natriumbicarbonatlösung und einer wäßrigen Natriumchloridlösung in dieser
Reihenfolge gewaschen wurde und über wasserfreiem Natriumsulfat
getrocknet wurde. Das Lösungsmittel wurde abdestilliert. Der
erhaltene Rückstand wurde der Kieselgel-Säulenchromatographie
(Entwicklungslösungsmittel: ein Lösungsmittelgemisch aus
Essigsäureethylester und Hexan) unter Ergeben von 2,73 g (4,7 mMol)
Prednisolon-21-farnesylat unterzogen. Ferner wurden 1,55 g (4,3
mMol) Prednisolon zurückgewonnen. Als Ergebnis der Analyse durch
Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie wurde gefunden, daß
das erhaltene Prednisolon-21-farnesylat ein Gemisch aus
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) und
Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat) (Molverhältnis: 90 zu 10) war. Dieses
Prednisolon-21-farnesylat wurde mit Ether unter Ergeben von 2,26 g (3,9 mMol)
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) als weißer Feststoff gewaschen.
Die Ausbeute des isolierten Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylats)
betrug 68% auf der Grundlage des verbrauchten Prednisolons.
Beispiele 19 und 20
-
Durch Ausführen des Reaktionsverfahrens und des
Trennungs-Reinigungs-Verfahrens in derselben Weise wie in Beispiel 18 wurde
unter Verwenden der in Tabelle 5 angegebenen Kondensationsmittel
beziehungsweise anstelle von 4,2 g (17 mMol) 1-Ethoxycarbonyl-2-
ethoxy-1,2-dihydrochinolin Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
erhalten. Die erhaltenen Ergebnisse werden in Tabelle 5
dargestellt.
Tabelle 5
Kondensationsmittel
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
Beispiel
Art (Strukturformel)
Menge
Restmenge Prednisolon (g) (Anmerkung 1)
Ausbeute an Prednisolon-21-farnesylat (g) (Anmerkung 2)
Ausbeute (g) (Anmerkung 3)
Ausbeute (%) (Anmerkung 4)
-
(Anmerkung 1) Die quantitative Analyse wurde durch Unterziehen eines Teils des
Reaktionsgemischs der Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie ausgeführt.
-
(Anmerkung 2) Es wird die Ausbeute des Gemischs von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
und Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat) dargestellt (das Molverhältnis betrug in jedem
Beispiel 9 zu 1), wie es durch Unterziehen des Konzentrats des Filtrats des
Reaktionsgemischs der Kieselgel-Säulenchromatographie erhalten wurde.
-
(Anmerkung 3) Dargestellt wird die Ausbeute an isoliertem Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat).
-
(Anmerkung 4) Dargestellt wird die Ausbeute des isolierten
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylats)
auf der Grundlage des verbrauchten Prednisolons.
Beispiel 21
-
Einer gemischten Lösung von 56,72 g (240 mMol)
2E,6E-Farnesylsäure, 0,381 g (2,4 mMol) 4-(Dimethylamino)pyridin-hydrochlorid
und 100 ml Hexan wurde eine Lösung von 26,00 g (126 mMol) N,N'-
Dicyclohexylcarbodiimid und 100 ml Hexan tropfenweise unter
Rühren und Eiskühlen über einen Zeitraum von 9 Stunden
zugesetzt. Nach dem Zugabevorgang wurde das Gemisch 12 Stunden
weiter bei Raumtemperatur gerührt. Das erhaltene Reaktionsgemisch
wurde filtriert, um dadurch Dicyclohexylharnstoff zu entfernen.
Das Filtrat wurde mit Wasser, 1%iger wäßriger
Natriumbicarbonatlösung und Wasser in dieser Reihenfolge gewaschen und über
wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Der durch Abdestillieren des
Lösungsmittels erhaltene Rückstand wurde in 50 ml
Tetrahydrofuran gelöst. Die sich daraus ergebende Lösung wurde tropfenweise
einem Gemisch von 36,05 g (100 mMol) Prednisolon, 0,611 g (5,0
mMol) 4-(Dimethylamino)pyridin und 50 ml Tetrahydrofuran über
einen Zeitraum von 6 Stunden zugesetzt. Nach der Zugabe wurde
das sich daraus ergebende Gemisch weitere 3 Tage bei
Raumtemperatur gerührt. Ein Teil der auf diese Weise erhaltenen
Reaktionsgemischlösung wurde durch
Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie analysiert und als Ergebnis wurde gefunden, daß die
Restmenge Prednisolon in dem Gemisch 0,11 g (0,3 mMol) betrug
und die Ausbeute an Prednisolon-21-farnesylat 57,2 g (99,0 mMol)
betrug. Das Prednisolon-21-farnesylat erwies sich als ein
Gemisch aus Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) und Prednisolon-21-
(2Z,6E-farnesylat) (Molverhältnis: 93 zu 7). Dem durch
Abdestillieren des Lösungsmittels aus dem Reaktionsgemisch erhaltenen
Rückstand wurden 250 ml Essigsäureethylester zugesetzt und der
Rückstand wurde unter Erhitzen gelöst und filtriert, während er
erhitzt wurde. Dem erhaltenen Filtrat wurden tropfenweise bei
etwa 60 bis 70ºC 500 ml Hexan zugesetzt und anschließend wurde
allmählich auf Raumtemperatur gekühlt. Die ausgefallenen
Kristalle wurden durch Filtration abgetrennt und der
Umkristallisation aus 160 ml Methanol unterzogen.
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat), 29,94 g (51,8 mMol), wurde als weiße Kristalle
erhalten. Die Ausbeute des isolierten
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylats) betrug 52% auf der Grundlage des verbrauchten
Prednisolons.
Beispiel 22
-
Einem Gemisch von 66,08 g (280 mMol) 2E,6E-Farnesylsäure und 100
ml Methylenchlorid wurde eine Lösung von 32,96 g (160 mMol)
N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid und 100 ml Methylenchlorid unter
Rühren unter Eiskühlen über einen Zeitraum von 9 Stunden
zugesetzt. Nach der Zugabe wurde das Gemisch weitere 12 Stunden bei
Raumtemperatur gerührt. Das sich daraus ergebende
Reaktionsgemisch wurde zum Entfernen von Dicyclohexylharnstoff filtriert.
Der durch Abdestillieren des Lösungsmittels aus dem Filtrat
erhaltene Rückstand wurde in 50 ml Tetrahydrofuran gelöst. Die
sich daraus ergebende Lösung wurde einem Gemisch von 36,05 g
(100 mMol) Prednisolon, 0,611 g (5,0 mMol)
4-(Dimethylamino)pyridin und 50 ml Tetrahydrofuran zugesetzt und anschließend 3
Tage bei Raumtemperatur gerührt.
-
Ein Teil des auf diese Weise erhaltenen Reaktionsgemischs wurde
durch Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie analysiert und
als Ergebnis wurde gefunden, daß die Restmenge Prednisolon in
dem Gemisch 0,14 g (0,4 mMol) betrug und die Ausbeute an
Prednisolon-21-farnesylat 56,9 g (98,4 mMol) betrug. Das Prednisolon-
21-farnesylat erwies sich als ein Gemisch aus Prednisolon-21-
(2E,6E-farnesylat) und Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat)
(Molverhältnis: 93 zu 7). Dem durch Abdestillieren des
Lösungsmittels aus dem Reaktionsgemisch erhaltenen Rückstand wurden 250 ml
Essigsäureethylester zugesetzt und der Rückstand wurde unter
Erhitzen gelöst und filtriert, während er erhitzt wurde. Dem
erhaltenen Filtrat wurden bei etwa 60 bis 70 ºC tropfenweise 500
ml Hexan zugesetzt und nach Beendigung der Zugabe allmählich auf
Raumtemperatur abgekühlt. Die ausgefallenen Kristalle wurden
durch Filtration abgetrennt, gefolgt von der Umkristallisation
aus 160 ml Methanol. Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat), 32,04 g
(55,4 mMol), wurde als weiße Kristalle erhalten. Die Ausbeute
des isolierten Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylats) betrug 56% auf
der Grundlage des verbrauchten Prednisolons.
Beispiele 23 und 24
-
Die Verfahren von Beispiel 22 zur Reaktion und
Trennung-Reinigung wurden wiederholt, mit Ausnahme daß die in Tabelle 6
nachstehend angegebenen Mengen Carbodiimid anstelle von 32,96 g (160
mMol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid verwendet wurden und
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) wurde erhalten. Die erhaltenen
Ergebnisse werden in Tabelle 6 dargestellt.
Tabelle 6
Carbodiimide
Beispiel
Art
Menge
Ausbeute an Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) (%) (Anmerkung 1)
-
(Anmerkung 1) Die Ausbeute des isolierten Prednisolon-21-
(2E,6E-farnesylats) auf der Grundlage des
verbrauchten Prednisolons.
Beispiel 25
-
Einer gemischten Lösung von 23,6 g (100 mMol)
2E,6E-Farnesylsäure, 0,159 g (1,0 mMol) 4-(Dimethylamino)pyridinhydrochlorid
und 50 ml Tetrahydrofuran wurde tropfenweise eine Lösung, die
12,1 g (59 mMol) N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid und 50 ml
Tetrahydrofuran enthielt, unter Rühren unter Eiskühlen über 10 Minuten
zugesetzt. Nach der Zugabe wurde das Gemisch bei Raumtemperatur
weitere 12 Stunden gerührt. Das sich daraus ergebende
Reaktionsgemisch wurde filtriert, um dadurch Dicylcohexylharnstoff zu
entfernen. Das Lösungsmittel wurde aus dem Filtrat abdestilliert
und der erhaltene Rückstand wurde der
Kieselgel-Säulenchromatographie (Entwicklungslösungsmittel: ein Lösungsmittelgemisch
aus Essigsäureethylester und Hexan) unter Ergeben von 21,8 g (48
mMol) 2E,6E-Farnesylanhydrid mit den folgenden Eigenschaften
unterzogen.
-
FD-Massenspektrum: 454 (M&spplus;)
-
¹H-NMR-Spektrum (90 MHz) δTMS: 5,65 (s, 2H); 5,03 (m, 4H); 2,17
(s, 6H), 2,3 - 1,85 (m, 16H); 1,62 (s, 6H); 1,55 (s, 12H)
Beispiele 26 - 29
-
Einer gemischten Lösung von 23,6 g (100 mMol)
2E,6E-Farnesylsäure und 50 ml eines in Tabelle 7 dargestellten Lösungsmittels
wurde eine Lösung, die eine vorgegebene Menge
N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid und 50 ml Tetrahydrofuran enthielt, tropfenweise
unter Rühren unter Eiskühlen über einen Zeitraum von 6 Stunden
zugesetzt. Nach der Zugabe wurde das Gemisch 12 Stunden bei
Raumtemperatur weitergerührt. Das sich daraus ergebende
Reaktionsgemisch wurde filtriert, um dadurch Dicyclohexylharnstoff
zu entfernen. Das Lösungsmittel wurde aus dem Filtrat
abdestilliert und der erhaltene Rückstand wurde der
Kieselgel-Säulenchromatographie (Entwicklungslösungsmittel: ein
Lösungsmittelgemisch aus Essigsäureethylester und Hexan) unter Ergeben von
2E,6E-Farnesylanhydrid unterzogen. Die erhaltenen Ergebnisse
werden in Tabelle 7 dargestellt.
Tabelle 7
Beispiel
Lösungsmittel
Menge an N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid
Ausbeute an 2E, 6E-Farnesylanhydrid
Hexan
Methylenchlorid
Essigsäureethylester
Tetrahydrofuran
Beispiel 30
-
Ein Gemisch von 3,60 g (10,0 mMol) Prednisolon, 0,061 g (0,5
mMol) 4-(Dimethylamino)pyridin, 5,0 g (11 mMol)
2E,6E-Farnesylanhydrid und 15 ml Methylenchlorid wurde 3 Tage bei
Raumtemperatur gerührt. Ein Teil des erhaltenen Reaktionsgemischs wurde
durch Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie analysiert und
als Ergebnis wurde gefunden, daß die Restmenge Prednisolon in
dem Gemisch 0,40 g (1,1 mMol) betrug und die Ausbeute an
Prednisolon-21-farnesylat sich als 4,90 g (8,5 mMol) erwies. Das
Prednisolon-21-farnesylat war ein Gemisch aus Prednisolon-21-(2E,6E-
farnesylat) und Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat)
(Molverhältnis: 93 zu 7). Das Lösungsmittel wurde aus dem Reaktionsgemisch
abdestilliert und der sich daraus ergebende Rückstand wurde der
Kieselgel-Säulenchromatographie (Entwicklungslösungsmittel: ein
Lösungsmittelgemisch aus Essigsäureethylester und Hexan) unter
Ergeben von 4,6 g (8,0 mMol) Prednisolon-21-farnesylat
unterzogen. Das Prednisolon-21-farnesylat wurde mit Diethylether
gewaschen, um 3,8 g (6,6 mMol) Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
als weißen Feststoff zu ergeben. Die Ausbeute des isolierten
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylats) betrug 74% auf der Grundlage
des verbrauchten Prednisolons.
Beispiel 31
-
Eine Lösung von 2,60 g (11,0 mMol) 2E,6E-Farnesylsäure, 2,72 g
(11,0 mMol) 1-Ethoxycarbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydrochinolin und 15
ml Methylenchlorid wurde 24 Stunden bei Raumtemperatur gerührt.
Dem sich daraus ergebenden Reaktionsgemisch wurden 3,60 g (10,0
mMol) Prednisolon und 0,061 g (0,5 mMol)
4-(Dimethylamino)pyridin zugesetzt und anschließend wurde das gesamte Gemisch 3 Tage
bei Raumtemperatur gerührt. Das erhaltene Reaktionsgemisch wurde
filtriert und das Filtrat wurde mit verdünnter Salzsäure,
wäßriger Natriumbicarbonatlösung und Wasser in dieser Reihenfolge
gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Das
Lösungsmittel wurde abdestilliert und der erhaltene Rückstand
wurde der Kieselgel-Säulenchromatographie
(Entwicklungslösungsmittel: Lösungsmittelgemisch aus Essigsäureethylester und Hexan)
unter Ergeben von 2,43 g (4,20 mMol) Prednisolon-21-farnesylat
unterzogen. Ein Teil des auf diese Weise erhaltenen Prednisolon-
21-farnesylats wurde durch
Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie analysiert, woraus gefunden wurde, daß das Prednisolon-
21-farnesylat ein Gemisch aus Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
und Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat) (Molverhältnis: 92 zu 8)
war. Dieses Prednisolon-21-farnesylat wurde mit Diethylether
gewaschen, um 2,02 g (3,49 mMol)
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) als einen weißen Feststoff zu ergeben. Die Ausbeute des
isolierten Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylats) betrug 35% auf der
Grundlage des verbrauchten Prednisolons.
Beispiel 32
Tabletten
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
Maisstärke
Carboxycellulose
Polyvinylpyrrolidon
Calciumstearat
Gesamtmenge
-
Durch ein herkömmliches Verfahren wurden 100-mg-Tabletten
hergestellt, die 10 mg Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) je
Tablette enthalten.
Beispiel 33
Pulver, Kapseln
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
kristalline Cellulose
Gesamtmenge
-
Die Pulverbestandteile wurden gemischt und zu Pulvern
verarbeitet. Diese Pulver wurden weiter in Hartkapseln Nr. 5 unter
Ergeben von Kapseln abgefüllt.
Beispiel 34
Gelsalbe
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
Carboxyvinylpolymer (Produkt von Wako Pure Chemical Industries Ltd. HIVISWAKO-104)
Hydroxypropylmethylcellulose 2910 (Produkt von Shin-Etsu Chemical Co., Ltd. Metolose 605H-50)
Macrogol
Sebacinsäurediethylester (Produkt von Nikko Chemicals Co., Ltd. Nikkol DES-SP)
Isopropylalkohol
Triisopropanolamin
gereinigtes Wasser
Gesamtmenge
-
In 22,8 g gereinigtem Wasser wurden 1,2 g Carboxyvinylpolymer
dispergiert. Dieser Dispersionsflüssigkeit wurde eine
Dispersionsflüssigkeit von 1,0 g Hydroxypropylmethylcellulose 2910 in
24,0 g Isopropylalkohol unter Ergeben eines Gemischs zugesetzt.
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) (1,6 g) wurde in einem Gemisch
aus 5,0 g Sebacinsäurediethylester und 24,0 g Isopropylalkohol
unter Ergeben einer Lösung gelöst. Die auf diese Weise erhaltene
Lösung wurde mit dem vorgenannten Gemisch vermischt. Das
erhaltene Gemisch wurde mit 14,0 g pf Macrogol 400 und 1,0 g Macrogol
4000 vermischt und anschließend mit einer Lösung von 0,55 g
Triisopropanolamin in 0,55 g gereinigtem Wasser und ferner mit
4,30 g gereinigtem Wasser vermischt.
Beispiel 35
Wassermischbare Creme
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
Bienenwachs (weiß)
Cetostearylalkohol BPC
Cetomacrogol 1000BPC
Paraffinöl BP
Chlorkresol
gereinigtes Wasser
die Menge, um die Gesamtmenge auf 100 Gewichtsteile auf zufüllen
-
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) und eine geringe Menge
Paraffinöl wurden einer Kugelmühlenbehandlung unterzogen, um auf eine
solche Teilchengröße zerkleinert zu werden, daß 95% der
Gesamtteilchen nicht größer als 5 u waren. Das verwendete Wasser wurde
auf 100ºC erhitzt und Chlorkresol wurde dazugesetzt, um unter
Rühren gelöst zu werden. Die Lösung wurde auf 65ºC gekühlt.
Bienenwachs, Cetostearylalkohol und Cetomacrogol wurden
zusammengeschmolzen und das Gemisch wurde bei 65ºC gehalten. Die
Suspension von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) wurde
dazugesetzt und das Gemisch wurde unter Verwendung des restlichen
Paraffinöls gewaschen. Die ölige Schicht von Prednisolon-21-
(2E,6E-farnesylat) bei 60ºC wurde der wäßrigen
Chlorkresolschicht bei 65ºC zugesetzt und unter raschem Rühren wurde diese
Emulsion unter den Gelierpunkt (40-45ºC) gekühlt. Man ließ das
Gemisch bei niedriger Geschwindigkeit rühren, bis die Creme fest
wurde.
Beispiel 36
Aerosolform
Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
Ethanol
Lecithin
Ein Gemisch aus Dichlordifluormethan und Dichlortetrafluorethan (70 : 30-Gemisch)
die Menge, um die Gesamtmenge auf 100 % zu bringen
-
Die vorgenannten Bestandteile wurden gemischt, um ein Aerosol
herzustellen.
Referenzbeispiel 1
-
Einem Gemisch von 20,0 g (55,5 mMol) Prednisolon, 6,0 g (75,8
mMol) Pyridin und 300 ml Tetrahydrofuran wurden tropfenweise
unter Eiskühlen 13,0 g (51,0 mMol) eines Gemischs von
3,7,11-Trimethyl-2,6,10-dodecatrienoylchlorid und (Z,E)-3,7,11-
Trimethyl-2,6,10-dodecatrienoylchlorid (Molverhältnis: etwa 6 zu
4) und 10 ml Tetrahydrofuran zugesetzt. Nach der
Vervollständigung der tropfenweisen Zugabe wurde das Gemisch 3 Stunden unter
Eiskühlen gerührt und anschließend über Nacht bei Raumtemperatur
gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde in Wasser gegossen und
anschließend mit Essigsäureethylester extrahiert. Die organische
Schicht wurde mit einer gesättigten wäßrigen
Ammoniumchloridlösung, einer gesättigten wäßrigen Natriumbicarbonatlösung und
einer gesättigten Natriumchloridlösung in dieser Reihenfolge
gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Der
Rückstand, welcher durch Abdestillieren der Verbindung mit
niedrigerem Siedepunkt erhalten wurde, wurde der
Kieselgel-Säulenchromatographie (Entwicklungslösungsmittel: ein
Lösungsmittelgemisch aus Essigsäureethylester und Hexan) unter Ergeben von
13,1 g eines Gemischs von Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) und
Prednisolon-21-(2Z,6E-farnesylat) als einem weißen Feststoff
unterzogen. Dieses Gemisch wurde mit 100 ml Diethylether
gewaschen, um 6,2 g (10,7 mMol) Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat)
als weiße Kristalle mit den folgenden Eigenschaften zu ergeben.
-
Ausbeute: 19 % (auf der Grundlage des verwendeten
Prednisolons)
-
Schmelzpunkt 152 - 154ºC
-
FD-Massenspektrum: 578 (M&spplus;)
-
¹H-NMR-Spektrum (500 MHz) δ (CDCl&sub3;/TMS):
7,29 (d, J=10Hz, 1H); 6,28 (d, J=10Hz, 1H); 6,02 (s, 1H); 5,81
(s, 1H); 5,10 (m, 2H); 5,05 (d, J=18Hz, 2H); 4,89 (d, J=18Hz,
1H), 4,49 (m, 1H); 2,17 (s, 3H); 1,70 (s, 3H); 1,63 (s, 6H);
1,47 (s, 3H); 1,00 (s, 3H)
-
¹³C-NMR-Spektrum (125 MHz) : δ (CD&sub3;OD):
206,4, 187,9, 173,6, 166,5, 161,4, 159,0, 136,3, 131,2, 126,8,
124,4, 123,2, 121,5, 115,1, 89,7, 69,9, 67,5, 56,4, 51,9, 45,1,
40,9, 39,8, 39,3, 34,6, 33,7, 32,2, 31,7, 26,8, 26,0, 24,9,
23,9, 20,63, 20,57, 18,1, 16,8, 16,3, 15,2
-
Als nächstes werden Beispiele pharmazeutischer Zubereitungen
gezeigt, welche Prednisolon-21-(2E,6E-farnesylat) der
vorliegenden Erfindung enthalten.
Referenzbeispiel 2
-
Die Diethyletherlösung, welche durch Waschen in Referenzbeispiel
1 erhalten wurde, wurde unter vermindertem Druck eingeengt und
6,9 g des erhaltenen Konzentrats wurden der
Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie (Säulenfüllmittel: Kieselgel;
Entwicklungslösungsmittel: ein Lösungsmittelgemisch aus Dichlormethan
und Dioxan) unter Ergeben von 1,0 g (1,7 mMol) Prednisolon-21-
(2Z,6E-farnesylat) als viskose, blaßgelbe Flüssigkeit mit den
folgenden Eigenschaften unterzogen.
-
Ausbeute: 3 % (auf der Grundlage des verwendeten
Prednisolons
-
FD-Massenspektrum: 578 (M&spplus;)
-
¹H-NMR-Spektrum (500 MHz) δ (CDCl&sub3;/TMS):
7,27 (d, J=10Hz, 1H); 6,28 (d, J=10Hz, 1H); 6,02 (s, 1H); 5,78
(s, 1H); 5,15 (m, 1H); 5,09 (m, 1H); 5,03 (d, J=18Hz, 1H); 4,87
(d, J=18Hz, 1H); 4,49 (m, 1H); 1,93 (s, 3H); 1,67 (s, 3H); 1,60
(s, 6H); 1,46 (s, 3H); 1,00 (s, 3H)
Referenzbeispiel 3
-
Ein Gemisch von 12,0 g (51,0 mMol) (Z,Z)-3,7,11-Trimethyl-
2,6,10-dodecatriensäure, 6,7 g (56 mMol) Thionylchlorid und 100
ml Benzol wurde 2 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Das erhaltene
Reaktionsgemisch wurde unter vermindertem Druck eingeengt, um
13,0 g (51,0 mMol) des Säurechlorids zu ergeben. Durch Ausführen
der Reaktion und der Behandlung des Reaktionsgemischs in
derselben Weise wie in Referenzbeispiel 1 wurden unter Verwenden von
13,0 g (51,0 mMol) des vorgenannten Säurechlorids anstelle von
13,0 g (51,0 mMol) eines Gemischs von (E,E)-3,7,11-Trimethyl-
2,6,10-dodecatrienoylchlorid und (Z,E)-3,7,11-Trimethyl-2,6,10-
dodecatrienoylchlorid, 11,5 g eines Gemischs von Prednisolon-21-
(2Z,6Z-farnesylat) und 11β,17α,21-Trihydroxy-1,4-pregnadien-
3,20-dion-21-[(E-Z)-3,7,11-trimethyl-2,6,10-dodecatrienoat] als
eine Fraktion durch Kieselgel-Säulenchromatographie erhalten.
Dieses Gemisch wurde der
Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie (Säulenfüllmaterial: octadecylsilyliertes Kieselgel;
Entwicklungslösungsmittel: ein Lösungsmittelgemisch aus Methanol
und Wasser) unter Ergeben von 1,5 g (2,6 mMol) Prednisolon-21-
(2Z,6Z-farnesylat) als viskose, blaßgelbe Flüssigkeit
unterzogen.
-
Ausbeute 5% (auf der Grundlage des verwendeten Prednisolons)
-
FD-Massenspektrum: 578 (M&spplus;)
-
¹H-NMR-Spektrum (500 MHz) δ (CDCl&sub3;/TMS):
7,26 (d, J=10Hz, 1H); 6,27 (d, J=10Hz, 1H); 6,01 (s, 1H); 5,78
(s, 1H); 5,15 (m, 2H); 5,03 (d, J=18Hz, 1H); 4,86 (d, J=18Hz,
1H); 4,48 (m, 1H); 1,93 (s, 3H); 1,68 (s, 6H); 1,61 (s, 3H);
1,46 (s, 3H); 0,99 (s, 3H)