DE60213386T2

DE60213386T2 - Geldanamycinderivate zur krebsbehandlung

Info

Publication number: DE60213386T2
Application number: DE60213386T
Authority: DE
Inventors: M. Kenneth Vero Beach SNADER; Rao B. Rockville VISHNUVAJJALA; G. Melinda Middletown HOLLINGSHEAD; A. Edward Silver Spring SAUSVILLE
Original assignee: US Department of Health and Human Services
Current assignee: US Department of Health and Human Services
Priority date: 2001-03-30
Filing date: 2002-03-28
Publication date: 2006-11-23
Anticipated expiration: 2022-03-29
Also published as: AU2002307020B2; DK1373215T3; ATE334119T1; EP1373215A1; JP4213472B2; ZA200304178B; DE60213386D1; US20040053909A1; PT1373215E; EP1373215B1; KR100831133B1; NZ526133A; IL156122A; ES2268068T3; CN1484639A; CA2430692A1; MXPA03007856A; WO2002079167A1; IL156122A0; US6890917B2

Description

QUERVERWEIS AUF VERWANDTE ANMELDUNGEN
Diese Anmeldung nimmt die Priorität der US provisional Patentanmeldung 60/280,078, eingereicht am 30. März 2001 in Anspruch.
GEBIET DER ERFINDUNG
Diese Erfindung betrifft Geldanamycin und insbesondere neue Geldanamycin-Derivate, pharmazeutische Zusammensetzungen davon sowie ein Verfahren zum Verwenden von Derivaten zur Prophylaxe und zur Behandlung von Krebs.
HINTERGRUND DER ERFINDUNG
Das ErbB2 Gen-Produkt, welches ein Mitglied der ErbB-Familie an Rezeptor-Tyrosin-Kinasen ist, soll angeblich eine bedeutende Rolle in der Bösartigkeit von Tumorzellen spielen. Untersuchungen haben gezeigt, dass die Überexpression von ErbB2 die Zelltransformation verursacht sowie die Tumorgenese und in vitro Experimente haben gezeigt, dass ErbB2 für die Induktion von Karzinom-Zell-Invasion durch andere Mitglieder der ErbB-Familie benötigt wird. Das Benzoquinon Ansamycin, Geldanamycin, weist Antitumor-Aktivität in vivo auf und es wurde gezeigt, dass es die rasche Verarmung von ErbB2 Protein-Spiegeln verursacht. Geldanamycin ist ein spezifischer Inhibitor bestimmter Chaperon-Proteine, einschließend das Heatshock-Protein-90 (Hsp90) wie auch das Glukose-regulierte Protein-94 (Grp94), welches im endoplasmatischen Retikulum lokalisiert ist. Man glaubt, das Geldanamycin auf das ErbB2 Protein wirkt durch die Inhibierung des Hsp90 Chaperon-Proteins, von welchem man glaubt, dass es notwendig ist für die richtige Funktion des ErbB2 Proteins. Hsp90 wurde auch als verknüpft mit der Tumorzell-Proliferation gezeigt (siehe L. Whitesell et al., Inhibition of Heat Shock Protein HSP-90-pp60v-src Heteroprotein Complex Formation by Benzoquinone Ansamycins: Essential Role for Stress proteins in Oncogenic Transformation, 91 Proc. Nal'l Acad. Sci. USA 8324–8328 (1994); T.W. Schulte et al., Antibiotic Radicicol Binds to the N-terminal Domain of Hsp90 and Shares Important Biologic Activities with Geldanamycin, 3 Cell Stress and Chaperone Proteins 100–108 (1998); J.L. Johnson et al., Binding of p 23 and Hsp90 During Assembly with the Progesterone Receptor, 9 Mol. Endocrinol. 670–678 (1995); W. Sullivan et al., Nucleotides and two functional states of Hsp90, 272 J. Biol. Chem. 8007–8012 (1997)).
Analoge von Geldanamycin wurden synthetisiert in Versuchen, die Bioverfügbarkeit zu erhöhen und die Toxizität assoziiert mit dem natürlichen Produkt zu vermindern. Geldanamycin-Derivate werden beispielsweise offenbart in US 4,261,989 , WO 9 501 342 und in J. Med. Chem. 1995, 38, 3806. Unter den am erfolgreichsten eingestuften Analogen ist 17-Allylaminogeldanamycin (17-AAG), welches sich derzeit in klinischen Phase IVersuchen am National Cancer Institute befindet. Andere ähnliche Geldanamycin-Derivate, substituiert an der 17. Position existieren als mögliche Krebsbekämpfungsmittel, beispielsweise diejenigen beschrieben in R. C. Schnur et al., Inhibition of the Oncogene Product p185^erB-2 in vitro und in vivo by Geldanamycin und Dihydrogeldanamycin Derivatives, 38 J. Med. Chem. 3806–3812 (1995). Während viele dieser Verbindungen eine relativ signifikante Aktivität in vitro zeigen, zeigen wenige eine ausreichende in vivo Aktivität bei vorläufigen Tests. Folglich repräsentieren diese Verbindungen schlechte Kandidaten als potentielle Mittel zur therapeutischen Behandlung. Darüber hinaus haben die bekannten Geldanamycin-Verbindungen bzw. Derivate davon keine in vivo Aktivität gezeigt, wenn sie oral verabreicht wurden.
Folglich besteht ein Bedürfnis für andere effektive Antikrebs-Verbindungen und Verfahren zum Verwenden solcher Verbindungen. Die vorliegende Erfindung versucht, dieses Bedürfnis zu befriedigen. Die speziellen Vorteile der vorliegenden Erfindung, wie auch zusätzliche erfinderische Eigenschaften werden aus der Beschreibung der Erfindung wie hier zur Verfügung gestellt offensichtlich werden.
KURZE ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
Die Erfindung stellt eine Verbindung der Formel (I) zur Verfügung,
wobei n = 0 oder 1 und wobei, wenn n = 1, jedes von R¹ und R² Wasserstoff ist und, wenn n = 0, eine Doppelbindung zwischen C₄ und C₅ existiert;
R³ Wasserstoff oder Hydroxyl ist;
R⁴ Wasserstoff oder Hydroxyl ist; wobei, wenn R³ Wasserstoff ist, R⁴ Hydroxyl ist, und wenn R³ Hydroxyl ist, R⁴ Wasserstoff ist; und
R⁵ Wasserstoff oder eine Gruppe der Formel (II) ist,
wobei jedes von R⁶, R⁷ und R⁸ unabhängig ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Halogen, Azido, Nitro, einem C₁-C₈-Alkyl, einem C₁-C₈ Alkoxy, Aryl und Cyano und Salzen davon.
Die vorliegende Erfindung stellt auch eine pharmazeutische Zusammensetzung zur Verfügung umfassend eine Verbindung der Erfindung und einen pharmazeutischen verträglichen Träger.
Ein Verfahren des Behandelns oder Varbeugens von Krebs in einem Wirt wird auch offenbart. Das Verfahren umfasst das Verabreichen der oben beschriebenen Verbindung an einen Wirt in einer Menge, welche hinreichend ist, in dem Wirt Krebs zu behandeln oder zu verhindern, woraufhin der Krebs in dem Wirt behandelt oder verhindert wird.
DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Die Erfindung stellt eine Verbindung der Formel (I) zu Verfügung,
wobei n = 0 oder 1 ist. Wenn n = 1 ist, ist jedes von R¹ und R² Wasserstoff, und, wenn n = 0 ist, existiert eine Doppelbindung zwischen C₄ und C₅. R³ und R⁴ sind jeweils unabhängig voneinander Wasserstoff oder Hydroxyl, wobei, wenn R³ Wasserstoff ist, R⁴ Hydroxyl ist, und wenn R³ Hydroxyl ist, R⁴ Wasserstoff ist. R⁵ ist Wasserstoff oder eine Gruppe der Formel (II),
wobei jedes von R⁶, R⁷ und R⁸ unabhängig ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Halogen, Azido, Nitro, einem C₁-C₈ Alkyl, einem C₁-C₈ Alkoxy, Aryl und Cyano. Die Erfindung stellt auch Salze der Verbindung von Formel I zur Verfü gung. Positionen, angezeigt durch die Nummern 1–21 auf dem Benzoquinon-Ansamycin-Ring in den Formeln (I) und (III) repräsentieren Kohlenstoffatome.
In einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung ist n = 0 und eine Doppelbindung existiert zwischen C₄ und C₅. Wasserstoff ist insbesondere bevorzugt für R⁵. Folglich ist eine besonders bevorzugte Verbindung der vorliegenden Erfindung eine Verbindung repräsentiert durch Formel (III) in (17-dimethylaminoethylamino-17-demethoxygeldanamycin.
Verbindungen der vorliegenden Erfindung können in der Form eines Salzes vorliegen, welches vorzugsweise ein pharmazeutisch verträgliches Salz ist. Geeignete pharmazeutisch verträgliche saure Additionssalze schließen diejenigen ein, abgeleitet von Mineralsäuren, wie z.B. Hydrochlor-, Hydrobrom-, Phosphor-, Metaphosphar-, Salpeter und Schwefelsäure, sowie von organischen Säuren, wie z.B. Weinsäure, Essigsäure, Zitronensäure, Äpfelsäure, Milchsäure, Fumarsäure, Benzolsäure, Glykolsäure, Glukonsäure, Succinsäure und Arylsulphonsäuren, wie z.B. p-Toluensulphonsäure.
Vorzugsweise weisen die Verbindungen der vorliegenden Erfindung verbesserte Wasserlöslichkeit im Vergleich zu Geldanamycin auf und/oder haben die Fähigkeit, Sal ze auszubilden (beispielsweise sauere Salze) mit verbesserter Wasserlöslichkeit im Vergleich zu Geldanamycin, während die in vitro oder in vivo gezeigte Antikrebs oder Antitumor-Aktivität erhalten bleibt. Beispielsweise haben bevorzugte Verbindungen der vorliegenden Erfindung Wasserlöslichkeiten von zumindest ungefähr 0,5 mg/ml oder zumindest ungefähr 1 mg/ml (beispielsweise zumindest ungefähr 1,5 mg/ml), vorzugsweise zumindest ungefähr 2 mg/ml (beispielsweise zumindest ungefähr 2,5 mg/ml). Am meisten bevorzugt haben die Verbindungen der vorliegenden Erfindung Wasserlöslichkeiten von zumindest ungefähr 3 mg/ml (beispielsweise zumindest ungefähr 3,5 mg/ml) oder sogar zumindest ungefähr 4 mg/ml (beispielsweise zumindest ungefähr 4,5 mg/ml) oder sogar größere Wasserlöslichkeiten (beispielsweise zumindest ungefähr 5 mg/ml). Wasserlöslichkeiten können bestimmt werden unter Verwendung von Standard-Techniken, welche im Stand der Technik bekannt sind. Während die Verbindungen in der vorliegenden Erfindung vorzugsweise verbesserte Wasserlöslichkeit aufweisen, können Techniken, welche im Stand der Technik bekannt sind, verwendet werden in Übereinstimmung mit der vorliegenden Erfindung, um die Wasserlöslichkeit dieser Verbindungen weiter zu verbessern. Beispielsweise kann der pH einer Formulierung umfassend die Verbindung eingestellt werden, um die Wasserlöslichkeit der Verbindung zu optimieren. Auch können verschiedene Additive eingebracht werden in eine Formulierung umfassend eine Verbindung der vorliegenden Erfindung. Bedeutsame Additive schließen Kosolventien (beispielsweise Polyethylenglycol), Oberflächen-aktive Agenzien, Komplexieren der Agenzien, Emulgieren der Agenzien, amphiphile Verbindungen, Liposome sowie Mikro- und Nanopartikel ein, welche die Löslichkeit einer Verbindung mit der vorliegenden Erfindung verbessern können.
Die Verbindungen in der vorliegenden Erfindung haben gezeigt, dass im Vergleich zu Verbindungen von ähnlicher Struktur eine signifikante in vivo Aktivität aufweisen. Die in vivo Aktivität kann gemessen werden durch irgendein geeignetes Verfahren, welches im Stand der Technik bekannt ist. Geeignete Verfahren schließen beispielsweise ein, einen Hohl-Faser-Assay (HFA) und/oder Xenograft-Tests. Ein bevorzugtes Verfahren zum Bestimmen der in vivo Aktivität, verwendet in Übereinstimmung mit der vorliegenden Erfindung ist ein Hohl-Faser-Assay, wie beschrieben in M.G. Hollingshead et al., In Vivo Cultivation of Tumor Cells in Hollow Fibers, (57)2 Life Sci. 131–141 (1995). Typischerweise wird ein Hohl-Faser-Assay verwendet als ein vorläufiger Screen, um Verbindungen zu identifizieren, welche moderat bis vorstechende Anti-Krebs-Aktivität aufweisen. Im Allgemeinen werden Verbindungen, welche signifikant positive Ergebnisse zeigen, als aufweisend moderate bis vorstechende Anti-Krebs-Aktivität eingestuft. HFA kann in Zusammenhang mit anderen Test-Verfahren eingesetzt werden, beispielsweise dem Xenograft-Test, um einen besseren Beleg mit Blick auf die in vivo Anti-Krebs-Aktivität der Verbindungen zu erhalten und folglich für ihre Eignung zur Behandlung einer speziellen Erkrankung.
Es hat sich auch überraschenderweise herausgestellt, dass die Verbindungen der vorliegenden Erfindung signifikante orale in vivo Aktivität erzeugen, wenn sie einem Wirt verabreicht werden. Durch signifikante orale in vivo Aktivität ist gemeint, dass die Verbindung oral an einen Wirt verabreicht werden kann, um eine HFA-Punktzahl zu erzeugen, und so weiteres Testen nahezulegen. Es sollte festgehalten werden, dass keine andere Klasse von Geldanamycin-Verbindungen oder Derivaten davon solch eine signifikante in vivo Aktivität gezeigt hat. Folglich werden die Verbindungen der vorliegenden Erfindung bevorzugt gegenüber anderen Optionen aufgrund der wenig invasiven Mittel, durch welche die Verbindung effizient verabreicht werden kann.
Die vorliegende Verbindung stellt auch eine pharmazeutische Zusammensetzung zur Verfügung umfassend die Geldanamycin-Verbindungen von Formel I wie hier beschrieben. Die pharmazeutische Zusammensetzung kann des Weiteren mehr als ein aktives Ingredienz umfassen. Beispielsweise kann die pharmazeutische Zusammensetzung mehr als eine Verbindung der vorliegenden Erfindung umfassen, sie kann eine Verbindung der vorliegenden Erfindung in Kombination mit einer anderen pharmazeutischen aktiven Verbindung oder Wirksubstanz umfassen oder dergleichen.
Die pharmazeutische Zusammensetzung umfasst auch einen geeigneten Träger. Vorzugsweise ist der Träger ein pharmazeutisch verträglicher Träger. Mit Blick auf die pharmazeutischen Zusammensetzungen können die Träger irgendwelche derjenigen sein, welche üblicherweise verwendet werden, um eine pharmazeutische Verbindung herzustellen. Die Wahl des pharmazeutisch verträglichen Trägers ist nur durch die chemo-physikalischen Betrachtungen limitiert, beispielsweise die Löslichkeit, die inerten Eigenschaften betreffend der Reaktivität mit aktiven Verbindungen und durch die Art der Verabreichung. Es wird von einem Fachmann auf dem Gebiet leicht erkannt werden, dass zusätzlich zu den im Folgenden beschriebenen pharmazeutischen Zusammensetzungen die Verbindungen der vorliegenden erfinderischen Verfahren als Einschluss- Komplexe, beispielsweise Zyklodextrin-Einschluss-Komplexe oder Liposomen formuliert werden können.
Die pharmazeutisch verträglichen Träger wie hierin beschrieben, beispielsweise Vehikel, Adjuvantien, Hilfsstoffe und Verdünnungsmittel sind denjenigen, die mit dem Gebiet vertraut sind, wohlbekannt und fertig verfügbar. Es ist bevorzugt, dass der pharmazeutisch verträgliche Träger einer ist, welcher chemische Inert gegenüber der aktiven Verbindung (den aktiven Verbindungen) ist und einer, der keine schädlichen Nebenwirkungen oder Toxizität unter den Anwendungs-Bedingungen aufweist.
Die Wahl des Trägers wird teilweise durch die spezielle Verbindung bestimmt, wie auch das spezielle Verfahren, verwendet um die Verbindung zu verabreichen. Dementsprechend besteht eine Vielzahl von geeigneten Formulierungen der pharmazeutischen Verbindung der vorliegenden Erfindung. Die folgenden Formulierungen zur oralen, aerosolen, parenteralen, subkutanen, intravenösen, intramuskulären, interperitonealen, rektalen und vaginalen Verabreichung sind exemplarisch und in keinster Weise limitierend.
Injizierbare Formulierungen sind unter denjenigen Formulierungen, welche in Übereinstimmung mit den vorliegenden erfinderischen Verfahren bevorzugt sind. Die Erfordernisse für effektive pharmazeutische Träger für injizierbare Zusammensetzungen sind den durchschnittlichen Fachleuten auf dem Gebiet wohlbekannt (siehe beispielsweise Pharmaceutics and Pharmacy Practice, J.B. Lippincott Company, Philadelphia, PA, Banker and Chalmers, eds., Seiten 238–250 (1982) und ASHP Handbook on Injectable Drugs, Toissel, 4th ed., Seiten 622–630 (1986)). Es ist bevorzugt, dass solche injizierbare Verbindungen intravenös verabreicht werden können oder im Zusammenhang mit der Behandlung von Krebs intratumoral (also innerhalb des Tumors) oder peritumoral (in der Nähe aber außerhalb des Tumors).
Topische Formulierungen sind den Fachleuten auf dem Gebiet wohlbekannt. Solche Formulierungen sind insbesondere geeignet im Zusammenhang mit der vorliegenden Erfindung für die Anwendung auf die Haut.
Formulierungen, geeignet zur oralen Verabreichung können aus (a) flüssigen Lösungen bestehen, beispielsweise einer effektiven Menge der Verbindung, aufgelöst in Verdünnen wie z.B. Wasser, Salzlösung oder Orangensaft; (b) Kapseln, Pillen, Tablet ten, Pastillen und Dragees, welche jeweils eine vorbestimmte Menge des aktiven Ingredienzes enthalten, als Feststoffe oder granuliert; (c) Pulver; (d) Suspensionen in geeigneter Flüssigkeit; und (e) geeignete Emulsionen. Flüssige Formulierungen können Verdünner einschließen, wie z.B. Wasser und Alkohole, beispielsweise Ethanol, Benzylalkohol und Polyethylenalkohol, entweder mit oder ohne die Zugabe von pharmazeutisch verträglichem Tensid. Kapsel-Formen können welche von herkömmlichem hart- oder weich-schaligen Gelatine-typartigen, enthaltend beispielsweise Tenside, Gleitmittel und inerte Füllstoffe, wie z.B. Laktose, Saccharose, Kalziumphosphat und Maisstärke sein. Tabletten-Formen können einschließen eine oder mehrere von Laktose, Saccharose, Mannitol, Maisstärke, Kartoffelstärke, Algininsäure, mikrokristalliner Zellulose, Akazie, Gelatine, Guargum, Kolloidales Siliziumdioxid, Croscarmellose-Natrium, Talk, Magnesiumstearat, Kalziumstearat, Zinkstearat, Stearinsäure und andere Hilfsstoffe, Farbstoffe, Verdünner, puffernde Agenzien, disintegrierende Agenzien, befeuchtende Agenzien, Konservierungsstoffe, geschmacksbildende Agenzien und pharmakologisch kompatible Hilfsstoffe. Pastill-Formen können das aktive Ingredienz in einer geschmacksbildenden Komponente, üblicherweise Saccharose und Akazie oder Tragakanth umfassend, wie auch Pastillen umfassend das aktive Ingredienz in einer inerten Matrix, beispielsweise Gelatine und Glycerin oder Saccharose und Akazie, Emulsionen, Gelen und dergleichen, enthaltend zusätzlich zum aktiven Ingredienz solche Hilfsstoffe wie sie im Stand der Technik bekannt sind.
Die vorliegenden erfinderischen Verbindungen, allein oder in Kombination mit anderen geeigneten Komponenten können in Aerosol-Formulierungen eingebracht werden, welche über Inhalation verabreicht werden sollen. Diese Aerosol-Formulierungen können in verträgliche unter Druck gesetzte Treibgase, beispielsweise Dichlordifluoromethan, Propan, Stickstoff und dergleichen eingebracht werden. Sie können auch als Pharmazeutika formuliert werden als Präparierung, welche nicht unter Druck stehen, beispielsweise in einer Nebulizer- oder Atomizer-Formulierung. Solche Sprüh-Formulierungen können auch verwendet werden, um Schleimhäute zu besprühen.
Formulierungen geeignet zur parenteralen Verabreichung schließen wässrige und nicht-wässrige, isotonische sterile Injektions-Lösungen ein, welche Anti-Oxidanzien, Puffer, Bakteriostatika und Lösungsmittel einschließen können, welche die Formulierung isotonisch mit dem Blut des gewünschten Rezipienten machen sowie wässrige und nicht-wässrige sterile Suspensionen, welche suspendierende Wirksubstanzen, Löslich macher, eindickende Agenzien, Stabilisatoren und Konservierungsstoffe einschließen können. Die Erfindungen der vorliegenden Erfindung können in einem physiologisch verträglichen Verdünnungsmittel verabreicht werden in einem pharmazeutischen Träger, beispielsweise einer sterilen Flüssigkeit oder einer Mischung von Flüssigkeiten, einschließend Wasser, Salzlösung, wässrige Dextrose- und verwandte Zucker-Lösungen, einem Alkohol, beispielsweise Ethanol, Isopropanol oder Hexadecyl-Alkohol, Glykolen, beispielsweise Propylenglykol oder Polyethylenglykol, Dimethylsulfoxid, Glycerol-Ketale, beispielsweise 2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-methanol, Äther, beispielsweise Poly(ethylenglykol) 400, einem Öl, einer Fettsäure, einem Fettsäureester oder Glycerid, oder einem azetylierten Säureglyzerid mit oder ohne Zugabe eines pharmazeutisch verträglichen Tensids, beispielsweise einer Seife oder eines Detergenzes, von suspendierenden Wirksubstanzen, beispielsweise Peptin, Karbomere, Methylzellulose, Hydroxypropylmethylzellulose oder Carboxymethylzellulose oder emulgierenden Wirksubstanzen und andere pharmazeutischen Hilfsstoffen.
Öle, welche in parenteralen Formulierungen verwendet werden können, schließen Petroleum, tierische, pflanzliche oder synthetische Öle ein. Spezifische Beispiele von Ölen schließen Erdnußöl, Sojabohnenöl, Sesamöl, Baumwollöl, Maisöl, Olivenöl, Petrolatum und Mineral-Öl ein. Geeignete Fettsäuren zur Anwendung in parenteralen Formulierungen schließen Ölsäure, Stearinsäure und Isostearinsäure ein. Ethyloleat und Isopropylmyristat sind Beispiele geeigneter Fettsäure-Ester.
Geeignete Seifen zur Anwendung in parenteralen Formulierungen schließen Alkalimetall-, Ammonium- und Triethanolamin-Fettsäure-Salze ein, und geeignete Detergenzien schließen (a) kationische Detergenzien beispielsweise Dimethyldialkylammoniumhalide und Alkylpyridinumhalide ein, (b) anionische Detergenzien, beispielsweise Alkyl-, Aryl- und Olefin-Sulfonate, Alkyl-, Olefin-, Äther- und Monoglycerid-Sulfate und Sulfosuccinate, (c) nicht-ionische Detergenzien wie z.B. Aminoxid-Fette, Fettsäure-Alkanolamide, und Polyoxyethylen-Polypropylen-Copolymere, (d) amphotere Detergenzien wie z.B. Alkyl-b-aminopropionate und 2-Alkyl-imidazolin-quaternäre Ammoniumsalze sowie (e) Mischungen davon.
Die parenteralen Formulierungen werden typischerweise von ungefähr 0,5% bis ungefähr 25 Gew.-% des aktiven Ingredienz in Lösung enthalten. Konservierungsstoffe und Puffer können verwendet werden. Um Irritation an der Stelle der Injektion zu mini mieren oder zu eliminieren, können Verbindungen ein oder mehrere nicht-ionische Tenside enthalten, mit einer Hydrophil-Lipophil-Balance (HLLB) von von ungefähr 12 bis ungefähr 17. Die Quantität des Tensids in solchen Formulierungen wird typischerweise von ungefähr 5% bis ungefähr 15%, jeweils auf das Gewicht bezogen, reichen. Geeignete Tenside schließen Polyethylensorbit-Fettsäure-Ester, beispielsweise Sorbit-Monooleat und hochmolekular-gewichtige Addukte von Ethylenoxid mit hydrophoben Basen ein, ausgebildet durch die Kondensation von Polyopropylenoxid mit Propylenglykol. Die parenteralen Formulierungen können in Einheitsdosierung oder Multi-Dosierungs-versiegelten Containern präsentiert werden, beispielsweise in Ampullen oder Phiolen und können in gefriergetrockneter (lyophilisierter) Form gelagert werden, was nur den Zusatz des sterilen Flüssigkeits-Hilfsstoffes, beispielsweise Wasser für Injektionen, unmittelbar vor der Verwendung nötig macht. Extemporäre Injektions-Lösungen und Suspensionen können aus sterilen Pulvern, Granulaten und Tabletten, dergestalt, wie sie oben beschrieben wurden, hergestellt werden.
Darüber hinaus können die vorliegenden erfinderischen Verbindungen oder Zusammensetzungen enthaltend diese Verbindungen in Suppositorien eingebracht werden durch Mischen mit einer Vielzahl von Matrizen, beispielsweise emulgierenden Matrizen oder wasserlöslichen Matrizen. Formulierungen geeignet zur vaginalen Verabreichung können als Pessare, Tampons, Cremen, Gele, Pasten, Schäume oder Spray-Formulierungen dargereicht werden, enthaltend zusätzlich zum aktiven Ingredienz solche Träger, wie sie im Stand der Technik als geeignet bekannt sind.
Wie zuvor diskutiert, inhibieren Geldanamycin-Derivate, wie die hier beschriebenen, bestimmte Chaperon-Proteine, einschließend das Heart-Shock-Protein-90 (Hsp90) wie auch das Glukose-regulierte Protein-94 (Grp94). Hsp90 ist als notwendig für die geeignete ErbB2-Funktion nachgewiesen worden. Darüber hinaus wurde für Hsp90 gezeigt, dass es mit der Tumorzell-Proliferation verknüpft ist und von ErbB2 glaubt man, dass es eine entscheidende Rolle in der Bösartigkeit von Tumorzellen spielt. In dieser Hinsicht offenbart die vorliegende Erfindung des Weiteren ein Verfahren zum Behandeln oder Vorbeugen von Krebs in einem Wirt. Das Verfahren umfasst das Verabreichen einer Verbindung der vorliegenden Erfindung an einen Wirt in einer geeigneten Menge, um Krebs zu behandeln oder zu verhindern im Wirt, worauf der Krebs in dem Wirt behandelt oder vorbeugend verändert wird.
Das Verfahren zum Behandeln von Krebs unter Verwendung der Verbindung der vorliegenden Erfindung kann verbessert werden durch Verabreichen von einer oder mehreren anderen Anti-Krebs-Verbindungen, zusammen mit einer oder mehreren anderen Verbindungen der vorliegenden Erfindung. Diese andere Anti-Krebs-Verbindungen schließen ein, sind jedoch nicht limitiert auf, die bekannten Anti-Krebs-Verbindungen zugelassen in den Vereinigten Staaten und diejenigen, welche in der Zukunft zugelassen werden werden. Siehe beispielsweise Tabelle 1 und Tabelle 2 von Boyd, Current Therapy in Oncology, Section I. Introduction to Cancer Therapy (J.E. Niederhuber, ed.), Chapter 2, by B.C. Decker, Inc., Philadelphia, 1993, pp. 11–22. Genauer gesagt, schließen Anti-Krebs-Verbindungen, welche bevorzugt zusammen mit den Geldanamycin-Derivaten, wie hier beschrieben, in Übereinstimmung mit der Erfindung verwendet werden, Doxorubicin, Bleomycin, Vincristin, Vinblastin, VP-16, VW-26, Cisplatin, Carboplatin, Procarbazin und Taxol für feste Tumore im Allgmeinen; alkylierende Agenzien wie z.B. BCNU, CCNU, Methyl-CCNU und DTIC für Gehirn oder Nieren-Krebs sowie Antimetabolite, wie z.B. 5-FU und Methotrexat für Darm-Krebs, ein.
Eine Verbindung der vorliegenden Erfindung wird wünschenswerterweise an eine Zelle verabreicht, welche ErbB2 in der Abwesenheit der Verbindung in der vorliegenden Erfindung exprimiert, oder an einen Wirt enthaltend solche Zellen, und zwar in einer Menge hinreichend, um die Expression des ErbB2-Proteins zu reduzieren oder zu eliminieren. Die Menge an Geldanamycin-Derivaten der vorliegenden Erfindung, welche verabreicht wird, ist eine Menge, hinreichend, um die Expression von ErbB2 zu reduzieren und zwar auf zumindest ungefähr 20%, bis hin zur vollständigen Reduktion im Vergleich zur Expression von ErbB2 in der Abwesenheit der Geldanamycin-Derivate der vorliegenden Erfindung. Es wird eingesehen werden von den Fachleuten auf dem Gebiet, dass die Reduktion in der Expression von ErbB2 um zumindest ungefähr 30%, zumindest ungefähr 40%, um zumindest ungefähr 50%, um zumindest ungefähr 60%, um zumindest ungefähr 70%, um zumindest ungefähr 80% oder um zumindest ungefähr 90% im Vergleich zur Expression von ErbB2 in der Abwesenheit des Geldanamycin-Derivats der vorliegenden Erfindung auch von Nutzen für den Wirt ist.
Irgendein geeignetes Verfahren um die Expressions-Spiegel von ErbB2 zu messen, kann im Zusammenhang mit der vorliegenden Erfindung eingesetzt werden. Geeignete Verfahren schließen beispielsweise differenzielle Darstellungen (differential display), serielle Analyse der Gen-Expression (SAGE), quantitativ reverse Transkriptions- Polymerase-Kettenreaktion (QRT-PCR), subtraktives Klonen, Macroarrays und Microarrays (beispielsweise DNA chips) ein. Expressions-Spiegel von ErbB2 können vor der Verabreichung der Verbindung gemessen werden, um geeignete Dosier-Pläne zu bestimmen, wie auch während und nach der Verabreichung der Verbindung, um die Bioverfügbarkeit und Effizienz in vivo der Verbindung zu bestimmen.
Ein Fachmann auf dem Gebiet wird leicht einsehen, dass geeignete Verfahren des Verabreichens von Geldanamycin-Derivaten der vorliegenden Erfindung sowie von Zusammensetzungen umfassend die Geldanamycin-Derivate der vorliegenden Erfindung an ein Tier, beispielsweise ein Säugetier, insbesondere einen Menschen, verfügbar sind. Obwohl mehr als ein Weg verwendet werden kann, um eine spezielle Verbindung zu verabreichen, kann ein spezieller Weg eine unmittelbarere und effizientere Reaktion als ein anderer Weg verabreichen. Dementsprechend sind die hier beschriebenen Verfahren exemplarisch und in keinster Weise limitierend.
Die Dosis, verabreicht an ein Tier, beispielsweise ein Säugetier, insbesondere an einen Menschen, sollte hinreichend sein, um Krebs zu verhindern, den Ausbruch zu verzögern oder das Voranschreiten zu verlangsamen (oder zu stoppen). Ein Fachmann auf dem Gebiet wird erkennen, dass die Dosierung von einer Vielzahl von Faktoren abhängen wird, einschließend der Stärke der speziellen Verbindung, welche eingesetzt wird, wie auch dem Alter, der Art, dem Zustand und dem Körpergewicht des Tieres. Die Größe der Dosis wird auch durch die Art und Weise der Verabreichung, die zeitliche Abstimmung sowie die Häufigkeit der Verabreichung, wie auch die Existenz, Natur und das Ausmaß irgendwelcher nachteiliger Nebenwirkungen bestimmt, welche die Verabreichung einer speziellen Verbindung begleiten könnten neben dem gewünschten physiologischen Effekt.
Geeignete Dosen bzw. Dosier-Pläne können bestimmt werden durch konventionelle Bereichs-findende Techniken, welche dem gewöhnlichen Fachmann auf dem Gebiet bekannt sind. Im Allgemeinen beginnt die Behandlung mit kleineren Dosierungen, welche geringer sind als die optimale Dosis für die Verbindung. Im Anschluss wird die Dosierung vergrößert um kleine Inkremente, bis der optimale Effekt unter den Umständen erzielt wird. Das vorliegende erfinderische Verfahren wird typischerweise die Verabreichung von ungefähr 0,1 bis ungefähr 100 mg von einer oder mehreren der Verbindungen, wie oben beschrieben, bezogen auf 1 kg Körpergewicht einschließen.
BEISPIELE
Die folgenden Beispiele illustrieren des Weiteren die vorliegende Erfindung, sollten jedoch nicht so konstruiert werden, dass sie in irgendeiner Weise den Umfang limitieren. Die Verbindung der vorliegenden Erfindung (d.h. Verbindungen A und B) und eine Vergleichsverbindung (d.h. Verbindung C) wurden wie unten dargestellt, hergestellt. Jede dieser Verbindungen wurde nachfolgend in einem Hohl-Faser-Assay eingesetzt, um zu bestimmen, ob die Verbindung hinreichend in vivo-Aktivität erzeugte, um weitere Tests zu rechtfertigen.
Verbindung A
Herstellung von 17-Dimethylaminoethylamino-17-demethoxygeldanamycin
Eine Mischung von Geldanamycin (1,5g, 2,68 mmol) (NCI, Lot Nr. 3059-25-1) und N,N-Dimethylethylenediamin (1,5 mL, 13,7 mmol) (Aldrich, Lot Nr. 04216AL) in trockenem Methylenchlorid (30 mL) (Burdick & Jackson, Lot Nr. BH516) wurde bei Raumtemperatur über 1 Stunde gerührt und anschließend auf Eiswasser gegossen (50 mL). Nachdem die organische Schicht und die wässrige Schicht sichtbar voneinander getrennt waren, wurde die wässrige Schicht mit Methylen-Chlorid extrahiert (2 × 10 mL). Die vereinigte Methylen-Chlorid-Lösung wurde mit Wasser gewaschen (2 × 10 mL), mit MgSO₄ getrocknet (J.T. Baker, Lot Nr. E01098) und in einem Rotationsverdampfer eingedampft. Der verbleibende Rückstand wurde per Silica-Gel-Chromatographie (30 g) (EM Science, Lot Nr. 325TA509634) aufgereinigt, wobei zum Eluieren 10% Methanol (Chempure, Lot Nr. M178KMDH) in Methylen-Chlorid eingesetzt wurden. Die Fraktionen, welche das Produkt enthielten, wurden vereinigt und in einem Rotationsverdampfer konzentriert. Der Rückstand wurde anschließend in heißem Methylen-Chlorid aufgenommen (3 mL), auf Raumtemperatur abgekühlt und mit Hexan (60 mL) (Chempure, Lot Nr. M148KMRC) verdünnt. Diese Mischung wurde dann bei Raumtemperatur für 30 Minuten gerührt. Ein rotes Pulver bildete sich und wurde per Filtration gesammelt, mit Hexan (2 × 10 mL) gewaschen und bei 55°C/0,1 mmHg für 6 Stunden getrocknet, um eine reine Zielverbindung zu ergeben. Ungefähr 1,59 g an 17-Dimethylaminoethylamino-17-demethoxygeldanamycin (96%) wurden isoliert und in Beispiel 1 verwendet.
Verbindung B
Herstellung von (17-Dimethoxy-17-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]
Geldanamycin hydrochlorid
Eine Mischung von Geldanamycin (15 g, 26,75 mmol) (SAIC-Frederick, Lot Nr. 3155-28-1) und N,N-dimethyl-ethylendiamin (15 mL, 37,83 mmol) (Aldrich, Lot Nr. HNO4216AL) in trockenem Methylen-Chlorid (300 mL) (Mallinckrodt, Lot Nr. 4881KVJP) wurde bei Raumtemperatur für 1 Stunde gerührt und anschließend auf Eiswasser gegossen (500 mL). Nachdem die organische Schicht und die wässrige Schicht sichtbar voneinander getrennt waren, wurde die wässrige Schicht mit Methylen-Chlorid extrahiert (2 × 100 mL). Die vereinigte Methylen-Chlorid-Lösung wurde mit Wasser gewaschen (2 × 100 mL), mit MgSO₄ getrocknet (Spectrum, Lot Nr. HJ302) und in einer Diaphragma-Pumpe eingedampft. Der verbleibende Rückstand (16,5 g, 26,75 mmol) wurde in Methylen-Chlorid aufgenommen (130 mL). Aufgelöster Chlor-Wasserstoff (1,1 eq, 29,43 mmol) (Matheson Lot Nr. T410242) in Dioxan (Aldrich, Lot Nr. 16619CQ) wurde zu der Lösung hinzugegeben, was in einem unmittelbaren Ausfällen resultierte. Nach Rühren für 30 Minuten wurden die Feststoffe gesammelt, mit Methylen-Chlorid gespült (50 mL) und luftgetrocknet für 18 Stunden, um das rohe Chlorwasserstoff-Salz zu ergeben (17,2 g). Eine Lösung des Rohproduktes (17,2 g) in wässrigem Alkohol (50% v/v, 200 mL) (Aaper Alcohol, Lot. Nr. 97A28U28UARAT) wurde zum Rückfluss erhitzt, filtriert und für 30 Minuten zum Abkühlen stehen gelassen. Nach Abkühlen auf Eis für weitere 30 Minuten wurden die Feststoffe gesammelt, mit kaltem, wasserfreien Alkohol (50 mL) gewaschen und für 1 Stunde luftgetrocknet. Das Produkt wurde weiter bei 70°C/0,1 mmHg für 17 Stunden getrocknet, um eine reine Ziel-Verbindung zu ergeben. Ungefähr 13,4 g von 17-Demethoxy-17-[[2(dimethylamino)ethyl]amino] Geldanamycin Hydrochlorid wurden als violett kristalliner Feststoff isoliert und in den Beispielen 1 und 2 verwendet.
Verbindung C
Herstellung von 17-Dimethylaminopropylamino-17-demethoxygeldanamycin
Eine Mischung von Geldanamycin (1,5 g, 2,68 mmol) (NCI, Lot Nr. 3059-25-1) und 3-dimethylaminopropylamin (1,5 mL, 11,9 mmol) (Aldrich, Lot Nr. 08103CF) in trockenem Methylen-Chlorid (30 mL) (Burdick & Jackson, Lot Nr. BH516) wurde bei Raum temperatur für 30 Minuten gerührt und anschließend auf Eiswasser gegossen (50 mL). Nachdem sich die organische Schicht und die wässrige Schicht sichtbar voneinander getrennt hatten, wurde die wässrige Schicht mit Methylen-Chlorid extrahiert (2 × 100 mL). Die vereinigte Methylen-Chlorid-Lösung wurde mit Wasser gewaschen (2 × 100 mL), mit MgSO₄ getrocknet (J.T. Baker, Lot Nr. E01098) und in einem Rotationsverdampfer eingedampft. Der verbleibende Rückstand wurde per Silica-Gel-Chromatographie (30 g) aufgereinigt und dabei mit 10% Methanol in Methylen-Chlorid eluiert. Die Fraktionen, enthaltend das Produkt, wurden vereinigt und in einem Rotationsverdampfer aufkonzentriert. Der Rückstand wurde anschließend in heißem Methylen-Chlorid (3 mL) aufgenommen, auf Raumtemperatur abgekühlt und mit Hexan (60 mL) (Chempure, Lot Nr. M148KMRC) verdünnt. Die resultierende Mischung wurde bei Raumtemperatur für 30 Minuten gerührt. Ein rotes Pulver bildete sich aus und wurde durch Filtration eingesammelt, gewaschen mit Hexan (2 × 10 mL) und bei 55°C/0,1 mmHg für 5 Stunden getrocknet, um ein reines Ziel-Produkt zu ergeben. Ungefähr 1,64 g an 17-Dimethylaminopropylamino-17-demethoxygeldanamycin (97%) wurden isoliert und in Beispiel 1 verwendet.
Die HFA und MTT-Assays
Verbindungen A–C wurden in einem Hohl-Faser-Assay auf in vivo-Aktivität getestet. Jede Verbindung wurde gegen ein Standard-Panel von 12 menschlichen Tumorzell-Linien getestet, einschließend NCI-H23, NCI-H522, MDA-MB-231, MDA-MB-435, SW-620, COLO 205, LOX IMVI, UACC-62, OVCAR-3, OVCAR-5, 0251 und SF-295. Die Zell-Linien wurden kultiviert in RPMI-1640 enthaltend 10% FBS und 2 mM Glutamin. Am Tag, welcher der Hohl-Faser-Präparation vorranging, wurden die Zellen mit einem frischen Medium versorgt, um das Log-Phasen-Wachstum beizubehalten. Für die Faser-Herstellung wurden die Zellen geerntet durch Standard-Trypsinierungs-Technik und in der gewünschten Zelldichte resuspendiert. Die Zell-Suspensionen wurden in 1 mm Polyvinyliden-Fluorid (PVDF) Hohlfasern (MW Ausschluss von 500,000 Da) gegossen und anschließend hitze-versiegelt bei 2 cm Intervallen. Die Proben, erzeugt aus diesen Versiegelungen wurden im Gewebs-Kultur-Medium platziert und bei 37°C in 5% CO₂ für 24–48 Stunden vor der Implantation inkubiert. Insgesamt 3 verschiedene Tumorzell-Linien wurden für jedes Experiment präpariert, so dass jede Maus 3 intraperitoneale Implantate empfing (1 von jeder Tumorzell-Linie) und 3 subkutane Implantate (1 von jeder Tumor zell-Linie). Insgesamt 4 Experimente wurden mit jeder Maus durchgeführt (3 Zell-Linien/Experiment × 4 Experimente = 12 Zell-Linien).
Am Tag der Implantation wurden Proben von jeder Tumorzell-Linie quantifiziert auf die lebensfähige Zell-Masse durch stabile Endpunkt MTT-Assay, so dass die Zell-Masse zum Zeitpunkt 0 bekannt war. In dem MTT-Assay wurden die Fasern inkubiert in 6-Well-Platten (1–6 Fasern/Well) mit 3 mL an vorgewärmtem (37°C) vollständigem Medium, enthaltende MTT (1 mg/mL) (Sigma) für 4 Stunden bei 37°C in 5%CO₂. Die MTT-Lösung wurde begast, wurde mit 2 mL an Salzlösung, enthaltend 2,5% Protamin-Sulfat über Nacht bei 4°C gewaschen. Eine zweite Waschung wurde durchgeführt mit 2 mL an Salzlösung, enthaltend 2,5% Protamin-Sulfat, und die Fasern wurden beibehalten bei 4°C für ein Minimum von 2 Stunden. Die Fasern wurden dann aus dem Protamin-Sulfat entfernt, individuell getrocknet, platziert in einer 24-Well-Platte (1 Faser/Well), in Hälften geschnitten und über Nacht in einer Bio-Sicherheitsumgebung getrocknet. Um Formazan zu extrahieren, wurde DMSO (0,25 mL) zu jedem Well hinzugegeben, und die Platten wurden für 4 Stunden bei Raumtemperatur rotiert. Die extrahierten Proben wurden auf 96-Well-Platten transferiert und die OD wurde bei 540 nm bestimmt. Aus diesen spektrophotometrischen Messungen wurden die zytastatischen und zytozidalen Kapazitäten der Test-Verbindung ausgewertet.
Folgend auf die Implantation der Hohl-Fasern wurden die Mäuse behandelt mit einer der Verbindungen, wie in den Tabellen 1 und 2 aufgeführt, beginnend am Tag 3 oder 4 folgend auf die Faser-Implantation und fortgeführt einmal täglich für insgesamt 4 Dosen. Jede Verbindung wurde entweder durch intraperitoneale Injektion (Beispiel 1) oder orale Verabreichung (Beispiel 2) ausgewertet bei 2 Dosier-Graden mit 3 Mäusen/Dosis/Experiment. Vehikel-Kontrollen bestanden aus 6 Mäusen, welche nur den Verbindungs-Verdünner empfingen. Die Fasern wurden gesammelt von der Maus am Tag folgend auf die vierte Verbindungs-Behandlung und dem stabilen Endpunkt-MTT-Assay unterzogen. Die optische Dichte einer jeden Probe wurde bestimmt auf spektrophotometrischem Weg bei 540 nm und der Mittelwert einer jeden Behandlungsgruppe wurde berechnet. Das prozentuale Netto-Zell-Wachstum in jeder Behandlungs-Gruppe wurde bestimmt und mit dem prozentualen Netto-Zell-Wachstum in den Vehikel-behandelten Kontrollen verglichen.
Im Zusammenhang mit den folgenden Beispielen wurden die Verbindungen zum weiteren Testen ausgewählt (beispielsweise Zeit/Dosis-Expositions-Untersuchungen, vorläufige pharmakologische Untersuchungen, subkutane Xenograft-Effizienz-Studien) auf der Basis mehrer Hohl-Faser-Assay-Kriterien, einschließend (1) eine Reduktion im Netto-Zell-Wachstum von 50% oder mehr in 10 von 48 möglichen Test-Kombinationen; (2) eine Reduktion im Netto-Zell-Wachstum um 50% oder mehr in einem Minimum von 4 von 24 voneinander entfernten Orts-Kombinationen (SC-Punktzahl) und/oder (3) Zellabtöten von 1 oder mehreren Zell-Linien, entweder an der Implantationsstelle (Reduktion der lebensfähigen Massen unter ein Niveau, welches am Startpunkt des Experimentes vorlag).
Um die Auswertung zu vereinfachen, wurde ein Punkt-System eingesetzt, welches das schnelle Überschauen der Aktivität einer gegebenen Verbindung ermöglicht. Aus diesem Grund wurde ein Wert von 2 einer jeden Verbindungs-Dosis zugeordnet, welche in einer 50% oder größeren Reduktion in der überlebensfähigen Zell-Masse resultierte. Die intraperitonealen (IP) und subkutanen (SC) Proben wurde separat mit Pumpen versehen, so dass die Kriterien (1) und (2) unabhängig voneinander ausgewertet werden konnten.
BEISPIEL 1
Dieses Beispiel demonstriert die in vivo-Aktivität von Verbindungen der vorliegenden Erfindung im Vergleich zu einem Geldanamycin-Derivat von ähnlicher Struktur.
Ein Hohl-Faser-Assay wurde durchgeführt mit den Verbindungen A–C, wie oben beschrieben. Verbindungen A und B wurden vermischt mit Salzlösung und Tween 80 (0,05%), um zwei Dosier-Niveaus von 75 mg/kg/Dosis und 50 mg/kg/Dosis zu erhalten. Verbindung C wurde auch mit Salzlösung und Tween 80 (0,05%) vermischt, um zwei Dosier-Niveaus von 20 mg/kg/Dosis und 13,4 mg/kg/Dosis zu erhalten. Optimale Dosierungs-Niveaus wurden bestimmt aus früheren Toxizitäts-Untersuchungen und folglich repräsentieren die verwendeten Untersuchungen das obere Limit, welches einem Wirt verabreicht werden kann, ohne dass Toxizitäts-Effekte induziert werden. Alle drei Verbindungen wurden einmal täglich für vier Stunden via intraperitoneale Injektion verabreicht. Nach vier Tagen wurden die Hohlfasern entfernt aus der Maus und dem MTT-Assay, wie oben beschrieben, unterzogen. Die prozentuale Zell-Wachstums-Inhibition wurde berechnet [(1-(% behandeltes Netto-Wachstum/% Kontroll-Netto-Wachstum)) × 100] und eine HFA-Punktzahl wurde einer jeden Verbindung auf der Basis dieser Berechnung, wie in Tabelle 1 angegeben, zugeordnet.
Tabelle 1
Wie durch die Ergebnisse gezeigt, erzeugen die Verbindungen der vorliegenden Erfindung (beispielsweise Verbindungen A und B) jeweils signifikante höhere HFA-Punktzahlen und sind folglich signifikant stärker in ihrer in vivo Anti-Krebs-Aktivität im Vergleich zu einer Verbindung, die nicht in der vorliegenden Erfindung eingeschlossen ist (beispielsweise Verbindung C).
BEISPIEL 2
Dieses Beispiel demonstriert die orale in vivo-Aktivität einer Verbindung der vorliegenden Erfindung.
Eine Hohlfaser-Assay wurde durchgeführt mit Verbindung B der vorliegenden Erfindung, wie oben beschrieben. Verbindung B wurde vermischt mit Wasser, um zwei Dosierungs-Niveaus von 75 mg/kg/Dosis bzw. 50 mg/kg/Dosis zu erhalten. Die Verbindung B wurde anschließend oral (PO) einmal täglich für vier Stunden verabreicht. Nach vier Tagen wurden die Hohlfasern aus den Mäusen entfernt und dem MTT-Assay, wie oben beschrieben, unterzogen. Die prozentuale Zell-Wachstums-Inhibition wurde berechnet [(1-% behandeltes Netto-Wachstum/%-Kontroll-Netto-Wachstum)) × 100] und eine HFA-Punktzahl wurde einer jeden Verbindung auf der Basis dieser Berechnung wie in Tabelle 2 angegeben zugeordnet.
Tabelle 2
Basierend auf den oben angegeben Ergebnissen zeigte die Verbindung B der vorliegenden Erfindung signifikante in vivo-Anti-Krebs-Aktivität durch orale Verabreichung.
Alle der hier zitierten Verweise, einschließend Patente, Patentanmeldungen und Offenbarungen sind hier per Verweis in ihrer Gesamtheit eingeschlossen.
Während die Erfindung mit Betonung auf bevorzugte Ausführungsformen beschrieben worden ist, können Variationen der bevorzugten Ausführungsformen verwendet werden und es ist gewünscht, dass die Erfindung praktiziert werden kann, anderweitig als hier spezifisch beschrieben.

Claims

Ein Geldanamyzin-Derivat mit der folgenden Struktur.
wobei n = 0 oder 1 und wobei, wenn n = 1, jedes von R¹ und R² Wasserstoff ist und wenn n = 0, eine Doppelbindung zwischen C₄ und C₅ existiert; R³ Wasserstoff oder Hydroxyl ist; R⁴ Wasserstoff oder Hydroxyl ist; wobei, wenn R³ Wasserstoff ist, R⁴ Hydroxyl ist und wenn R³ Hydroxyl ist, R⁴ Wasserstoff ist; und R⁵ Wasserstoff ist oder eine Gruppe der Formel
wobei jedes von R⁶, R⁷ und R⁸ unabhängig voneinander ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff, Halogen, Azido, Nitro, einem C₁-C₈-Alkyl, einem C₁-C₈ Alkoxy, Aryl und Cyano; oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.
Die Verbindung von Anspruch 1, wobei n = 0 ist.
Die Verbindung gemäß Anspruch 2, wobei die Verbindung die Struktur wie folgt aufweist:
oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.
Eine pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend die Verbindung gemäß Anspruch 1 und einen pharmazeutisch verträglichen Träger.
eine pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend die Verbindung gemäß Anspruch 3 und einen pharmazeutisch verträglichen Träger.
Verwendung einer Verbindung von Anspruch 1 in der Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Krebs.
Verwendung gemäß Anspruch 6, wobei die Verbindung oral verabreicht werden soll.
Verwendung gemäß Anspruch 6, wobei die Verbindung intravenös verabreicht werden soll.
Verwendung gemäß Anspruch 6, wobei der Wirt ein Säugetier ist.
Verwendung gemäß Anspruch 9, wobei das Säugetier ein Mensch ist.
Verwendung einer Verbindung von Anspruch 3 in der Herstellung eines Medikaments zur Behandlung von Krebs.
Verwendung gemäß Anspruch 11, wobei die Verbindung oral verabreicht werden soll.
Verwendung gemäß Anspruch 11, wobei die Verbindung intravenös verabreicht werden soll.
Verwendung gemäß Anspruch 11, wobei der Wirt ein Säugetier ist.
Verwendung gemäß Anspruch 14, wobei das Säugetier ein Mensch ist.