DE60112051T2

DE60112051T2 - Il-8 rezeptor antagonisten

Info

Publication number: DE60112051T2
Application number: DE60112051T
Authority: DE
Inventors: R. Michael PALOVICH; Joseph Weinstock; L. Katherine WIDDOWSON
Original assignee: SmithKline Beecham Corp
Current assignee: SmithKline Beecham Corp
Priority date: 2000-03-01
Filing date: 2001-03-01
Publication date: 2006-04-27
Anticipated expiration: 2021-03-02
Also published as: CN1416339A; ATE299698T1; IL151429A0; PL358540A1; AR033803A1; BG107014A; EP1261328B1; UY26601A1; ZA200206988B; HUP0300599A2; ES2245976T3; NO20024133L; OA12184A; NO20024133D0; AU2001239970A1; DZ3309A1; BR0108866A; HUP0300599A3; DE60112051D1; CA2401659A1

Description

Gebiet der Erfindung
Diese Erfindung betrifft eine neue Gruppe von Dianilinosquaranverbindungen, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung in der Behandlung von durch IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 und ENA-78 vermittelten Krankheiten und pharmazeutische Zusammensetzungen zur Verwendung in einer solchen Therapie.
Hintergrund der Erfindung
Chen et al (Heching Huaxue, 6 (4), 1005 (1998)) beschreibt die Synthese von asymmetrischen Aryl-substituierten Amiden von Quadratsäure und Isosquaryliumamiden. Die Verbindungen 3-Cyclobuten-1,2-dion-3-[(2-hydroxyphenyl)amino]-4-(phenylamino), 3-Cyclobuten-1,2-dion-3-[(2-hydroxyphenyl)amino]-4-[(4-methylphenyl)amino], 3-Cyclobuten-1,2-dion-3-[(2-hydroxyphenyl)amino]-4-[(4-methoxyphenyl)amino] und 3-Cyclobuten-1,2-dion-3-[(4-chlorphenyl)amino]-4-[(2-hydroxyphenyl)amino] werden darin spezifisch offenbart.
Viele unterschiedliche Bezeichnungen werden für Interleukin-8 (IL-8) eingesetzt, wie z.B. Neutrophilattraktans/-Aktivierungsprotein-1 (NAP-1), aus Monozyten stammender chemotaktischer Neutrophilfaktor (MDNCF), Neutrophil-aktivierender Faktor (NAF) und chemotaktischer T-Zell-Lymphozytenfaktor. Interleukin-8 ist eine chemischer Lockstoff für Neutrophile, Basophile und eine Untergruppe von T-Zellen. Es wird durch eine Vielzahl von zellkernhaltigen Zellen erzeugt, einschließlich Makrophagen, Fibroblasten, Endothel- und Epithelzellen, die TNF, IL-1α, IL-1β oder LPS ausgesetzt werden, und durch Neutrophile selbst, wenn sie LPS oder chemotaktischen Faktoren wie FMLP ausgesetzt werden. M. Baggiolini et al., J. Clin. Invest. 84, 1045 (1989); J. Schroder et al., J. Immunol. 139, 3474 (1987) und J. Immunol. 144, 2223 (1990); Strieter et al., Science 243, 1467 (1989) und J. Biol. Chem. 264, 10621 (1989); Cassatella et al., J. Immunol. 148, 3216 (1992).
GROα, GROβ, GROγ und NAP-2 gehören ebenfalls zur Chemokin-α-Familie. Wie IL-8 werden diese Chemokine mit unterschiedlichen Bezeichnungen benannt. Zum Beispiel werden GROα, β und γ als MGSAα, β bzw. γ bezeichnet (Melamonwachstum-stimulierende Aktivität), siehe Richmond et al., J. Cell Physiology 129, 374 (1986) und Chang et al., J. Immunol. 148, 451 (1992). Alle Chemokine der α-Familie, die das ELR-Motiv besitzen, das direkt dem CXC-Motiv vorangeht, binden an den IL-8-B-Rezeptor.
IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 und ENA-78 stimulieren eine Anzahl von Funktionen in vitro. Es wurde gezeigt, daß sie alle chemische Lockstoffeigenschaften für Neutrophile besitzen, während gezeigt wurde, daß IL-8 und GROα chemotaktische Aktivität für T-Lymphozyten und Basophile zeigen. Zusätzlich kann IL-8 die Histaminfreisetzung aus Basophilen in sowohl normalen als auch atopischen Individuen induzieren. GROα und IL-8 können zusätzlich die lysozomale Enzymfreisetzung und den Respiratory Burst aus Neutrophilen induzieren. Es wurde auch gezeigt, daß IL-8 die Oberflächenexpression von Mac-1 (CD11b/CD18) an Neutrophilen ohne de-novo-Proteinsynthese erhöht. Dies kann zu einer erhöhten Adhäsion der Neutrophile an vaskulären Endothelzellen beitragen. Viele bekannte Krankheiten sind durch eine massive Neutrophilinfiltration gekennzeichnet. Da IL-8, GROα, GROβ, GROγ und NAP-2 die Ansammlung und Aktivierung von Neutrophilen fördern, wurden diese Chemokine mit einer großen Reihe von akuten und chronischen inflammatorischen Störungen in Verbindung gebracht, die Psoriasis und rheumatoide Arthritis einschließen, Baggiolini et al., FEBS Lett. 307, 97 (1992); Miller et al., Crit. Rev. Immunol. 12, 17 (1992); Oppenheim et al., Annu. Rev. Immunol. 9, 617 (1991); Seitz et al., J. Clin. Invest. 87, 463 (1991); Miller et al., Am. Rev. Respir. Dis. 146, 427 (1992); Donnely et al., Lancet 341, 643 (1993). Zusätzlich wurden die ELR-Chemokine (diejenigen, die das Motiv der Aminosäuren ELR gerade vor dem CXC-Motiv enthalten) mit Angiostase in Verbindung gebracht, Strieter et al., Science 258, 1798 (1992).
In vitro induzieren IL-8, GROα, GROβ, GROγ und NAP-2 eine Neutrophil-Formveränderung, Chemotaxis, Granulafreisetzung und Respiratory Burst, indem sie Rezeptoren der Sieben-Transmembran, G-Protein-gebundenen Familie binden und sie aktivieren, insbesondere durch Bindung an IL-8-Rezeptoren, am bemerkenswertesten an den B-Rezeptor, Thomas et al., J. Biol. Chem. 266, 14839 (1991) und Holmes et al., Science 253, 1278 (1991). Die Entwicklung von nicht-peptidischen kleinen Molekülen als Antagonisten für Mitglieder dieser Rezeptorfamilie hat Beispiele. Für eine Übersicht siehe R. Freidinger, Progress in Drug Research, Bd. 40, S. 33–98, Birkhauser Verlag, Basel 1993. Daher stellt der IL-8-Rezeptor ein vielversprechendes Ziel für die Entwicklung neuer antiinflammatorischer Mittel dar.
Zwei hochaffine humane IL-8-Rezeptoren (77% Homologie) wurden charakterisiert: IL-8Rα, das nur IL-8 mit hoher Affinität bindet, und IL-8RB, das hohe Affinität für IL-8 sowie für GROα, GROβ, GROγ und NAP-2 besitzt. Siehe Holmes et al., oben; Murphy et al., Science 253, 1280 (1991); Lee et al., J. Biol. Chem. 267, 16283 (1992); LaRosa et al., J. Biol. Chem. 267, 25402 (1992) und Gayle et al., J. Biol. Chem. 268, 7283 (1993).
Es gibt einen Behandlungsbedarf auf diesem Gebiet für Verbindungen, die an den IL-8α- oder -β-Rezeptor binden können. Deshalb würden Zustände, die mit einer Zunahme der IL-8-Produktion verbunden sind (die für die Chemotaxis von Neutrophilen und T-Zell-Untergruppen in den Entzündungsort verantwortlich ist), von Verbindungen profitieren, die Inhibitoren der IL-8-Rezeptorbindung sind.
Zusammenfassung der Erfindung
Diese Erfindung sieht die Verwendung der Verbindung der Formel (I) in der Herstellung eines Medikaments zur Verwendung in der Behandlung einer Chemokin-vermittelten Krankheit vor, worin das Chemokin eines ist, das an einen IL-8α- oder -β-Rezeptor bindet. Insbesondere ist das Chemokin IL-8.
Diese Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur Inhibierung der Bindung von IL-8 an seine Rezeptoren in einem Säugetier, das dies benötigt, welches das Verabreichen einer wirksamen Menge einer Verbindung der Formel (I) an das Säugetier umfaßt.
Verbindungen der Formel (I), die in der vorliegenden Erfindung nützlich sind, werden durch die folgende Struktur dargestellt:
worin:
R aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus OH, SH und NHSO₂R_d besteht;
R_d aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus NR₆R₇, Alkyl, Aryl-C_1-4-alkyl, Aryl-C_2-4-alkenyl, Heteroaryl, Heteroaryl-C_1-4-alkyl, Heteroaryl-C_2-4-alkenyl, Heterocyclyl und Heterocyclyl-C_1-4-alkyl besteht;
R₆ und R₇ unabhängig Wasserstoff oder eine C_1-4-Alkylgruppe sind oder R₆ und R₇ zusammen mit dem Stickstoff, an den sie gebunden sind, einen 5- bis 7-gliedrigen Ring bilden, wobei der Ring gegebenenfalls ein zusätz liches Heteroatom enthält, das aus Sauerstoff, Stickstoff und Schwefel ausgewählt ist;
R₁ unabhängig aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus Wasserstoff, Halogen, Nitro, Cyano, Halogen-substituiertem C_1-10-Alkyl, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_1-10-Alkoxy, Halogen-substituiertem C_1-10-Alkoxy, Azid, (CR₈R₈)_qS(O)_tR₄, Hydroxy, Hydroxy-C_1-4-alkyl, Aryl, Aryl-C_1-4-alkyl, Aryloxy, Aryl-C_1-4-alkyloxy, Heteroaryl, Heteroarylalkyl, Heterocyclyl, Heterocyclyl-C_1-4-alkyl, Heteroaryl-C_1-4-alkyloxy, Aryl-C_2-10-alkenyl, Heteroaryl-C_2-10-alkenyl, Heterocyclyl-C_2-10-alkenyl, (CR₈R₈)_qNR₄R₅, C_2-10-AlkenylC(O)NR₄R₅, (CR₈R₈)_qC(O)NR₄R₅, (CR₈R₈)_qC(O)NR₄R₁₀, S(O)₃H, S(O)₃R₈, (CR₈R₈)_qC(O)R₁₁, C_2-10-AlkenylC(O)R₁₁, C_2-10-AlkenylC(O)OR₁₁(CR₈R₈)_qC(O)OR₁₂, (CR₈R₈)_qOC(O)R₁₁, (CR₈R₈)_qNR₄C(O)R₁₁, (CR₈R₈)_qNHS(O)₂R₁₇ und (CR₈R₈)_qS(O)₂NR₄R₅ besteht; oder zwei R₁-Einheiten zusammen O-(CH₂)_sO- oder einen 5- bis 6-gliedrigen ungesättigten Ring bilden;
q 0 oder eine ganze Zahl mit einem Wert von 1 bis 10 ist;
t 0 oder eine ganze Zahl mit einem Wert von 1 oder 2 ist;
s eine ganze Zahl mit einem Wert von 1 bis 3 ist;
R₄ und R₅ unabhängig aus der Gruppe ausgewählt sind, die aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, Aryl, Aryl-C_1-4-alkyl, Heteroaryl, Heteroaryl-C_1-4-alkyl, Heterocyclyl und Heterocyclyl-C_1-4-alkyl besteht, oder R₄ und R₅ zusammen mit dem Stickstoff, an den sie gebunden sind, einen 5- bis 7-gliedrigen Ring bilden, der gegebenenfalls ein zusätzliches Heteroatom umfaßt, das aus Sauerstoff, Stickstoff und Schwefel ausgewählt ist;
Y unabhängig aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus Wasserstoff, Halogen, Nitro, Cyano, Halogen-substituiertem C_1-10-Alkyl, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_1-10-Alkoxy, Halogen-substituiertem C_1-10-Alkoxy, Azid, (CR₈R₈)_qS(O)_tR₄, Hydroxy, Hydroxy-C_1-4-alkyl, Aryl, Aryl-C_1-4-alkyl, Aryloxy, Aryl-C_1-4-alkyloxy, Heteroaryl, Heteroarylalkyl, Heteroaryl-C_1-4-alkyloxy, Heterocyclyl, Heterocyclyl-C_1-4-alkyl, Aryl-C_2-10-alkenyl, Heteroaryl-C_2-10-alkenyl, Heterocyclyl-C_2-10-alkenyl, (CR₈R₈)_qNR₄R₅, C_2-10-AlkenylC(O)NR₄R₅, (CR₈R₈)_qC(O)NR₄R₅, (CR₈R₈)_qC(O)NR₄R₁₀, S(O)₃H, S(O)₃R₈, (CR₈R₈)_qC(O)R₁₁, C_2-10-AlkenylC(O)R₁₁, C_2-10-AlkenylC(O)OR₁₁, C(O)R₁₁, (CR₈R₈)_qC(O)OR₁₂, (CR₈R₈)_qOC(O)R₁₁, (CR₈R₈)_qNR₄C(O)R₁₁, (CR₈R₈)_qNHS(O)₂R_d und (CR₈R₈)_qS(O)₂NR₄R₅ besteht; oder zwei Y-Einheiten zusammen O-(CH₂)_sO- oder einen 5- bis 6-gliedrigen ungesättigten Ring bilden;
n eine ganze Zahl mit einem Wert von 1 bis 5 ist;
m eine ganze Zahl mit einem Wert von 1 bis 4 ist;
R₈ Wasserstoff oder C_1-4-Alkyl ist;
R₁₀ C_1-10-AlkylC(O)₂R₈ ist;
R₁₁ aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, Aryl, Aryl-C_1-4-alkyl, Heteroaryl, Heteroaryl-C_1-4-alkyl, Heterocyclyl und Heterocyclyl-C_1-4-alkyl besteht;
R₁₂ aus Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, Aryl und Arylalkyl ausgewählt ist; und
R₁₇ aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus C_1-4-Alkyl, Aryl, Arylalkyl, Heteroaryl, Heteroaryl-C_1-4-alkyl, Heterocyclyl und Heterocyclyl-C_1-4-alkyl besteht.
Ausführliche Beschreibung der Erfindung
Die Verbindungen der Formel (I) können auch in Verbindung mit der tierärztlichen Behandlung von anderen Säugetieren als Menschen verwendet werden, die eine Inhibierung von IL-8 oder anderen Chemokinen benötigen, die an die IL-8RA- und -RB-Rezeptoren binden. Chemokin-vermittelte Krankheiten zur therapeutischen oder prophylaktischen Behandlung in Tieren schließen Krankheitszustände wie die hier im Abschnitt Behandlungsverfahren aufgeführten ein.
Die folgenden Begriffe, wie sie hier verwendet werden, bezeichnen:

– "Halogen" – alle Halogene, d.h. Chlor, Fluor, Brom und Iod.
– "C_2-5-Alkyl" oder "Alkyl" – sowohl lineare als auch verzweigtkettige Einheiten mit 2 bis 5 Kohlenstoffatomen, es sei denn die Kettenlänge ist anderweitig beschränkt, einschließlich (aber nicht beschränkt auf) Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isopropyl, n-Butyl, sec-Butyl, Isobutyl, tert-Butyl, n-Pentyl und dergleichen.
– Der Begriff "Alkenyl" wird hier bei jedem Auftreten verwendet, um lineare oder verzweigtkettige Einheiten mit 2 bis 10 Kohlenstoffatomen zu bezeichnen, es sei denn die Kettenlänge ist darauf beschränkt, einschließlich (aber nicht beschränkt auf) Ethenyl, 1-Propenyl, 2-Propenyl, 2-Methyl-1-propenyl, 1-Butenyl, 2-Butenyl und dergleichen.
– "Aryl" – Phenyl und Naphthyl.
– "Heteroaryl" (alleinstehend oder in jeder Kombination, wie z.B. "Heteroaryloxy" oder "Heteroarylalkyl") – ein 5- bis 10-gliedriges aromatisches Ringsystem, in dem ein oder mehrere Ringe ein oder mehrere Heteroatome enthalten, die aus der Gruppe ausgewählt sind, die aus N, O und S besteht, wie z.B. (aber nicht beschränkt auf) Pyrrol, Pyrazol, Furan, Thiophen, Chinolin, Isochinolin, Chinazolinyl, Pyridin, Pyrimidin, Oxazol, Thiazol, Thiadiazol, Triazol, Imidazol oder Benzimidazol.
– "Heterocyclyl" (alleinstehend oder in jeder Kombination, wie z.B. "Heterocyclylalkyl") – ein gesättigtes oder teilweise ungesättigtes 4- bis 10-gliedriges Ringsystem, in dem ein oder mehrere Ringe ein oder mehrere Heteroatome enthalten, die aus der Gruppe ausgewählt sind, die aus N, O und S besteht; wie z.B. (aber nicht beschränkt auf) Pyrrolidin, Piperidin, Piperazin, Morpholin, Tetrahydropyran oder Imidazolidin.
– Der Begriff "Arylalkyl" oder Heteroarylalkyl" oder Heterocyclylalkyl" wird hier verwendet, um C_1-10-Alkyl wie oben definiert zu bezeichnen, das an eine Aryl-, Heteroaryl- oder Heterocyclyleinheit gebunden ist, ebenso wie hier definiert, wenn nichts anderes angegeben ist.

Bevorzugte Verbindungen der vorliegenden Erfindung sind aus der Gruppe ausgewählt, die aus:

1) 3-(4-Cyano-2-hydroxyanilino)-4-(2-bromanilino)cyclobut-3-en-1,2-dion,
2) 3-(4-Cyano-2-hydroxyanilino)-4-(2-chloranilino)cyclobut-3-en-1,2-dion,
3) 3-(4-Cyano-2-hydroxyanilino)-4-(2,3-dichloranilino)cyclobut-3-en-1,2-dion,
4) 3-(4-Nitro-2-hydroxyanilino)-4-(2-bromanilino)cyclobut-3-en-1,2-dion und
5) 3-(4-Chlor-2-hydroxyanilino)-4-(2-bromanilino)cyclobut-3-en-1,2-dion besteht.

Herstellungsverfahren
Die Verbindungen der Formel (I) können durch Einsatz von Syntheseverfahren erhalten werden, von denen einige in den nachfolgenden Schemata veranschaulicht werden. Die in diesen Schemata vorgesehene Synthese ist einsetzbar zur Herstellung von Verbindungen der Formel (I) mit einer Vielzahl unterschiedlicher R-, R₁- und Arylgruppen, die umgesetzt werden, wobei optionale Substituenten eingesetzt werden, die geeignet geschützt sind, um eine Kompatibilität mit den hier umrissenen Reaktionen zu erreichen. Ein anschließendes Entschützen in diesen Fällen liefert dann Verbindungen der allgemein offenbarten Natur. Sobald der Guanidinkern entwickelt ist, können weitere Verbindungen dieser Formeln durch Einsatz von Standardtechniken zur gegenseitigen Umwandlung funktioneller Gruppen hergestellt werden, die allgemein fachbekannt sind. Obwohl die Schemata nur mit Verbindungen der Formel (I) gezeigt sind, ist dies bloß für Zwecke der Veranschaulichung.
Schema 1
Das gewünschte Anilin 6-Schema-1 kann aus dem kommerziell erhältlichen Benzoxazolinon 1-Schema-1 hergestellt werden. Das Bromid 2-Schema-1 kann aus Benzoxazolinon 1-Schema-1 unter Verwendung von standardmäßigen Bromierungsbedingungen hergestellt werden, wie z.B. Brom und Natriumacetat in Essigsäure. Das Bromid 2-Schema-1 kann zum Cyanid 3-Schema-1 unter Verwendung von Standardverfahren umgewandelt werden, wie z.B. Kupfer(I)cyanid in refluxierendem DMF. Das Amid 3-Schema-1 kann zur BOC-geschützten Verbindung 4-Schema-1 unter Verwendung von Standardbedingungen umgewandelt werden, wie z.B. BOC-Anhydrid und Triethylamin mit einer katalytischen Menge Dimethylaminopyridin in Methylenchlorid oder einem anderen geeigneten organischen Lösungsmittel. Das Oxazolinon 4-Schema-1 kann zum gewünschten Anilin 6-Schema-1 durch zunächst Hydrolyse zum Phenol 5-Schema-1 unter Verwendung von Standardbedingungen wie Kaliumcarbonat in Methanol, gefolgt von Entfernung der BOC-Schutzgruppe unter Verwendung von Standardbedingungen wie Trifluoressigsäure in Methylenchlorid oder einem anderen geeigneten organischen Lösungsmittel umgewandelt werden, um das Anilin 6-Schema-1 zu ergeben.
Schema 2
Alternativ kann das gewünschte substituierte Hydroxyanilin 4 wie in Schema 2 umrissen hergestellt werden. Kommerziell erhältliche substituierte 3-Chloraniline 1 können zum Amid 2 unter Verwendung von allgemein fachbekannten Standardbedingungen umgewandelt werden, wie z.B. Pivaloylchlorid und Triethylamin in einem geeigneten organischen Lösungsmittel wie Methylenchlorid. Das Amid 2 kann zum Benzoxazol 3 unter Verwendung einer überschüssigen Menge einer starken Base wie Butyllithium in einem geeigneten organischen Lösungsmittel wie THF unter reduzierten Reaktionstemperaturen zwischen –20 und –40°C gefolgt von einer protischen Aufarbeitung umgewandelt werden. Das gewünschte Phenolanilin 5 kann aus dem Benzoxazol 4 unter Verwendung von allgemein fachbekannten standardmäßigen Hydrolysebedingungen wie Schwefelsäure in Wasser und Erwärmen auf 85°C erhalten werden.
Schema 3
Verbindungen der Struktur 5 werden aus dem kommerziell erhältlichen Dimethylethersquarat 1 wie in Schema 3 umrissen erhalten werden. Zwischenstufe 3 kann durch Umsetzen des Diethylethersquarats 1 mit dem gewünschten Anilin 2 in refluxierendem Ethanol oder einem anderen geeigneten organischen Lösungsmittel erhalten werden. Die gewünschte Squaranverbindung 5 kann durch Umsetzen von Squaran 3 mit einem zweiten Anilin 4 in refluxierendem Ethanol oder einem anderen geeigneten organischen Lösungsmittel erhalten werden.
Synthesebeispiele
Die Erfindung wird jetzt durch Verweis auf die folgenden Beispiele beschrieben werden, die bloß illustrativ sind und nicht als Beschränkung des Umfangs der vorliegenden Erfindung aufgefaßt werden sollen. Alle Temperaturen sind in Grad Celsius angegeben, alle Lösungsmittel sind von der höchsten verfügbaren Reinheit, und alle Reaktionen werden unter wasserfreien Bedingungen in einer Argonatmosphäre durchgeführt, wenn nichts anderes angegeben ist.
In den Beispielen sind alle Temperaturen in Grad Celsius (°C). Massenspektren wurden an einem VG Zab-Massenspektrometer unter Verwendung von Fast Atom Bombardment durchgeführt, wenn nichts anderes angegeben ist. ¹H-NMR-Spektren (nachfolgend "NMR") wurden bei 250 MHz unter Verwendung eines Bruker AM 250- oder Am 400-Spektrometers aufgezeichnet. Die angegebenen Multiplizitäten sind: s = Singulett, d = Dublett, t = Triplett, q = Quartett, m = Multiplett, und br zeigt ein breites Signal an. Ges. zeigt eine gesättig te Lösung an, äq. zeigt den Anteil eines molaren Äquivalents von Reagens relativ zum Hauptreaktanden an.
Beispiel 1
Synthese von 3-(4-Cyano-2-hydroxyanilino)-4-(2-bromanilino)-cyclobut-3-en-1,2-dion
3-Methoxy-4-(2-bromanilino)-cyclobut-2-en-1,2-dion
Zu einer Lösung aus 3,4-Dimethoxycyclobut-2-en-1,2-dion (1 mmol) in Ethanol (1 ml) wird 2-Bromanilin (1 mmol) gegeben. Nach Beendigung der Reaktion wird die Reaktionsmischung aufkonzentriert und durch entweder Umkristallisation oder Chromatografie gereinigt, um 3-Methoxy-4-(2-bromanilino)-cyclobut-2-en-1,2-dion zu ergeben.
3-(4-Cyano-2-hydroxyanilino)-4-(2-bromanilino)-cyclobut-3-en-1,2-dion
Zu einer Lösung aus 3-Methoxy-4-(2-bromanilino)-cyclobut-2-en-1,2-dion (1 mmol) in Ethanol (1 ml) wird 4-Cyano-2-hydroxyanilin (1 mmol) gegeben. Nach Beendigung der Reaktion wird die Reaktionsmischung aufkonzentriert und entweder durch Umkristallisation oder Chromatografie gereinigt, um 3-(4-Cyano-2-hydroxyanilino)-4-(2-bromanilino)cyclobut-3-en-1,2-dion zu ergeben.
Behandlungsverfahren
Die Verbindungen der Formel (I) oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz davon können in der Herstellung eines Medikaments zur prophylaktischen oder therapeutischen Behandlung jedes Krankheitszustand in einem Menschen oder anderen Säugetier verwendet werden, der durch übermäßige oder unregulierte IL-8-Cytokinproduktion durch die Zellen eines solchen Säugetiers verschlimmert oder verursacht wird, wie z.B. durch (aber nicht beschränkt auf) Monozyten und/oder Makrophagen, oder andere Chemokine, die an den IL-8α- oder -β-Rezeptor binden, der auch als Typ I- oder Typ II-Rezeptor bezeichnet wird.
Entsprechend stellt die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Behandlung einer Chemokin-vermittelten Krankheit bereit, worin das Chemokin eines ist, das an einen IL-8α- oder -β-Rezeptor bindet, und wobei das Verfahren das Verabreichen einer wirksamen Menge einer Verbindung der Formel (I) oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes davon umfaßt. Insbesondere sind die Chemokine IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 oder ENA-78.
Für die vorliegenden Zwecke haben die Verbindungen der Formel (I) alle die gleichen Dosierungen, und Formulierungen wie diejenige der Formel (I) werden austauschbar verwendet.
Die Verbindungen der Formel (I) werden in einer ausreichenden Menge verabreicht, um die Cytokinfunktion zu hemmen, insbesondere IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 oder ENA-78, so daß sie biologisch auf normale Niveaus der physiologischen Funktion oder in manchen Fällen auf subnormale Niveaus abreguliert werden, um den Krankheitszustand zu lindern. Abnormale Niveaus von IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 oder ENA-78 stellen zum Beispiel im Zusammenhang der vorliegenden Erfindung dar: (i) Spiegel von freiem IL-8 von mehr als oder gleich 1 Pikogramm pro ml; (ii) jedes zellassoziierte IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 oder ENA-78 oberhalb normaler physiologischer Spiegel; oder (iii) die Gegenwart von IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 oder ENA-78 oberhalb von Basisspiegeln in Zellen oder Geweben, in denen IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 bzw. ENA-78 produziert wird.
Es gibt viele Krankheitszustände, bei denen eine übermäßige oder unregulierte IL-8-Produktion mit der Verschlimmerung und/oder Verursachung der Krankheit in Verbindung gebracht wird. Chemokin-vermittelte Krankheiten schließen ein: Psoriasis, atopische Dermatitis, Osteoarthritis, rheumatoide Arthritis, Asthma, chronisch-obstruktive Lungenkrankheit, Atemnotsyndrom des Erwachsenen, entzündliche Darmkrankheit, Morbus Crohn, ulzeröse Kolitis, Schlag, septischer Schock, multiple Sklerose, endotoxischer Schock, Gram-negative Sepsis, toxisches Schocksyndrom, kardiale und renale Reperfusionsverletzung, Glomerulonephritis, Thrombose, Transplantat-Wirt-Reaktion, Alzheimer-Krankheit, Allotransplantatabstossungen, Malaria, Restenose, Angiogenese, Atherosklerose, Osteoporose, Gingivitis und unerwünschte hämatopoetische Stammzellfreisetzung und Krankheiten, die durch respiratorische Viren, Herpesviren und Hepatitisviren verursacht werden, Meningitis, Mukoviszidose, vorzeitige Wehen, Husten, Pruritus, Multiorgan-Dysfunktion, Trauma, Zerrungen, Verstauchungen, Prellungen, psoriatische Arthritis, Herpes, Enzephalitis, ZNS-Vaskulitis, traumatische Hirnverletzung, ZNS-Tumoren, subarachnoidale Blutung, postchirurgisches Trauma, interstitielle Pneumonitis, Überempfindlichkeit, Kristall-induzierte Arthritis, akute und chronische Pankreatitis, akute alkoholische Hepatitis, nekrotisierende Enterokolitis, chronische Sinusitis, Uveitis, Polymyositis, Vaskulitis, Akne, Magen- und Duodenalgeschwüre, Zöliakie, Ösophagitis, Glossitis, Atemwegsobstruktion, Atemwegsüberempfindlichkeit, Bronchiolitis obliterans mit organisierender Pneumonie, Bronchiektasie, Bronchiolitis, Bronchiolitis obliterans, chronische Bronchitis, Cor pulmonale, Dyspnoe, Emphysem, Hyperkapnie, Hyperinflation, Hypoxämie, Hyperoxie-induzierte Entzündungen, Hypoxie, chirurgische Reduktion des Lungenvolumens, Lungenfibrose, Lungenhochdruck, rechte Ventrikel-Hypertrophie, Sarkoidose, zentroazinäres Emphysem ("Small Airway Disease"), Ventilations-Perfusions-Fehlübereinstimmung, Keuchen, Erkältungen und Lupus.
Diese Krankheiten sind primär durch eine massive Neutrophilinfiltration, T-Zell-Infiltration oder neovaskuläres Wachstum gekennzeichnet und sind mit einer erhöhten IL-8-, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2- bzw. ENA-78-Produktion verbunden, die für die Chemotaxis von Neutrophilen in den Entzündungsort oder das gerichtete Wachstum von Endothelzellen verantwortlich ist. Im Gegensatz zu anderen inflammatorischen Cytokinen (IL-1, TNF und IL-6) hat IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 oder ENA-78 die besondere Eigenschaft der Förderung der Neutrophil-Chemotaxis, Enzymfreisetzung (einschließlich, aber nicht beschränkt auf Elastasefreisetzung) sowie Superoxid-Produktion und -Aktivierung. Die α-Chemokine, aber insbesondere GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 oder ENA-78, die durch den IL-8-Typ I- oder II-Rezeptor arbeiten, können die Neovaskularisierung von Tumoren durch Förderung des gerichteten Wachstums von Endothelzellen fördern. Deshalb würde die Inhibierung von IL-8-induzierter Chemotaxis oder Aktivierung zu einer direkten Reduzierung der Neutrophilinfiltration führen.
Kürzliche Hinweise bringen die Rolle von Chemokinen ebenfalls mit der Behandlung von HIV-Infektionen in Verbindung, Littleman et al., Nature 381, S. 661 (1996) und Koup et al., Nature 381, S. 667 (1996).
Ein vorliegender Nachweis zeigt ebenfalls die Verwendung von IL-8-Inhibitoren in der Behandlung von Atherosklerose an. Der erste Verweis, Boisvert et al., J. Clin. Invest. 101, 353–363 (1998), zeigt durch Knochenmarktransplantation, daß die Abwesenheit von IL-8-Rezeptoren auf Stammzellen (und deshalb auf Monozyten/Makrophagen) zu einer Reduktion der Entwicklung von atherosklerotischen Plaques in LDL-Rezeptor-defizienten Mäusen führt. Zusätzliche stützende Verweise sind: Apostolopoulos et al., Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 16, 1007–1012 (1996); Liu et al., Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 17, 317–323 (1997); Rus et al., Atherosclerosis 127, 263–271 (1996); Wang et al., J. Biol. Chem. 271, 8837–8842 (1996); Yue et al., Eur. J. Pharmacol. 240, 81–84 (1993); Koch et al., Am. J. Pathol. 142, 1423–1431 (1993); Lee et al., Immunol. Lett. 53, 109–113 (1996) und Terkeltaub et al., Arterioscler. Thromb. 14, 47–53 (1994).
Die vorliegende Erfindung sieht ebenfalls ein Mittel zur Behandlung, in einer akuten Umgebung sowie zur Prävention (bei denjenigen Individuen, die als anfällig betrachtet werden), von ZNS-Verletzungen durch die Chemokinrezeptor-antagonistischen Verbindungen der Formel (I) vor.
ZNS-Verletzungen wie hier definiert schließen sowohl offenes oder durchdringendes Schädeltrauma, wie durch Operation, als auch eine geschlossene Schädeltraumaverletzung ein, wie durch eine Verletzung der Kopfregion. Ebenfalls eingeschlossen in dieser Definition ist ischämischer Schlaganfall, insbesondere im Hirngebiet.
Ischämischer Schlaganfall kann als eine fokale neurologische Störung definiert werden, die aus einer unzureichenden Blutzufuhr zu einem besonderen Hirngebiet resultiert, gewöhnlich als Ergebnis eines Embolus, Thrombus oder lokalen atheromatösen Verschlusses des Blutgefäßes. Die Rolle von inflammatorischen Cytokinen auf diesem Gebiet ist dabei hervorgetreten, und die vorliegende Erfindung stellt ein Mittel zur potentiellen Behandlung dieser Verletzungen bereit. Relativ wenig Behandlung für eine akute Verletzung wie diese ist derzeit verfügbar.
TNF-α ist ein Cytokin mit proinflammatorischen Wirkungen, einschließlich der Expression von endothelialen Leukozytenadhäsionsmolekülen. Leukozyten dringen in ischämische Hirnläsionen ein, und daher würden Verbindungen, die TNF-Spiegel inhibieren oder verringern, nützlich zur Behandlung von ischämischer Hirnverletzung sein. Siehe Liu et al., Stroke, Bd. 25, Nr. 7, S. 1481–88 (1994), deren Offenbarung hier durch Verweis eingeführt wird.
Modelle der geschlossenen Hirnverletzungen und Behandlung mit gemischten 5-LO/CO-Mitteln werden erörtert in Shohami et al., J. of Vaisc & Clinical Physiology and Pharmacology, Bd. 3, Nr. 2, S. 99–107 (1992), deren Offenbarung hier durch Verweis eingeführt wird. Es wurde festgestellt, daß die Behandlung mit reduzierter Ödembildung das funktionelle Ergebnis in den behandelten Tieren verbessert.
Die Verbindungen der Formel (I) werden in einer Menge verabreicht, die zur Hemmung von IL-8, das an die IL-8-α- oder -β-Rezeptoren bindet, an der Bindung an diese Rezeptoren ausreichend ist, wie durch eine Reduzierung der Neutrophil-Chemotaxis und -Aktivierung nachgewiesen wird. Der Befund, daß die Verbindungen der Formel (I) Inhibitoren der IL-8-Bindung sind, beruht auf den Wirkungen der Verbindungen der Formel (I) in den in-vitro-Rezeptorbindungstest, die hier beschrieben werden. Es wurde gezeigt, daß die Verbindungen der Formel (I) und (II) Inhibitoren von Typ II-IL-8-Rezeptoren sind.
Wie hier verwendet, bezeichnet der Begriff "IL-8-vermittelter Krankheit oder Krankheitszustand" jeden und alle Krankheitszustände, in denen IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 bzw. ENA-78 eine Rolle spielt, entweder durch Erzeugung von IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 oder ENA-78 selbst oder dadurch, daß IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 oder ENA-78 die Freisetzung eines anderen Monokins verursacht, wie z.B. (aber nicht beschränkt auf) IL-1, IL-6 oder TNF. Ein Krankheitszustand, in dem z.B. IL-1 eine Hauptkomponente ist, und dessen Erzeugung oder Wirkung als Reaktion auf IL-8 verschlimmert oder sekretiert wird, würde deshalb als ein durch IL-8 vermittelter Krankheitszustand betrachtet werden.
Wie hier verwendet, bezeichnet der Begriff "Chemokin-vermittelte Krankheit oder Krankheitszustand" jeden und alle Krankheitszustände, in denen ein Chemokin, das an einen IL-8α- oder -α-Rezeptor bindet, eine Rolle spielt, wie z.B. (aber nicht beschränkt auf) IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2 oder ENA-78. Dies würde einen Krankheitszustand einschließen, in dem IL-8 einer Rolle spielt, entweder durch Erzeugung von IL-8 selbst oder dadurch, daß IL-8 die Freisetzung eines anderen Monokins verursacht, wie z.B. (aber nicht beschränkt auf) IL-1, IL-6 oder TNF. Ein Krankheitszustand, in dem z.B. IL-I eine Hauptkomponente ist, und dessen Erzeugung als Reaktion auf IL-8 verschlimmert oder sekretiert wird, würde deshalb als ein durch IL-8-vermittelter Krankheitszustand betrachtet werden.
Wie hier verwendet, bezeichnet der Begriff "Cytokin" jedes sezernierte Polypeptid, das die Funktionen von Zellen beeinträchtigt und ein Molekül ist, das Wechselwirkungen zwischen Zellen in der Immun-, inflammatorischen oder hämatopoetischen Reaktion moduliert. Ein Cytokin schließt ein, aber ist nicht beschränkt auf Monokine und Lymphokine, unabhängig von den Zellen, die sie erzeugen. Z.B. wird ein Monokin allgemein als durch eine mononukleare Zelle, wie ein Makrophage und/oder Monozyt, erzeugt und sezerniert bezeichnet. Viele andere Zellen erzeugen jedoch ebenfalls Monokine, wie natürliche Killerzellen, Fibroblasten, Basophile, Neutrophile, Endothelzellen, Hirn-Astrozyten, Knochenmark-Stromazellen, epidermale Keratinozyten und B-Lymphozyten. Lymphokine werden allgemein als durch Lymphozytenzellen erzeugt bezeichnet. Beispiele für Cytokine schließen ein, aber sind nicht beschränkt auf Interleukin-1 (IL-1), Interleukin-6 (IL-6), Interleukin-8 (IL-8), Tumornekrosefaktor-alpha (TNF-α) und Tumornekrosefaktor-beta (TNF-β).
Wie hier verwendet, bezeichnet der Begriff "Chemokin" jedes sezernierte Polypeptid, das die Funktionen von Zellen beeinträchtigt und ein Molekül ist, das Wechselwirkungen zwischen Zellen in der Immun-, inflammatorischen oder hämatopoetischen Reaktion moduliert, ähnlich dem obigen Begriff "Cytokin". Ein Chemokin wird primär durch Zelltransmembranen sezerniert und verursacht Chemotaxis und Aktivierung von spezifischen weißen Blutkörperchen und Leukozyten, Neutrophilen, Monozyten, Makrophagen, T-Zellen, B-Zellen, Endothelzellen und glatten Muskelzellen. Beispiele für Chemokine schließen ein, aber sind nicht beschränkt auf IL-8, GROα, GROβ, GROγ, NAP-2, ENA-78, IP-10, MIP-1α, MIP-β, PF4 und MCP-1, -2 und -3.
Die folgenden Verbindungen sind auch nützlich in der Normalisierung von Leukozytenzahlen sowie in der Normalisierung von Spiegeln von zirkulierenden Chemokinen.
Um eine Verbindung der Formel (I) oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz davon in der Therapie zu verwenden, wird sie normalerweise zu einer pharmazeutischen Zusammensetzung gemäß pharmazeutischer Standardpraxis formuliert werden. Diese Erfindung betrifft deshalb ebenfalls eine pharmazeutische Zusammensetzung, die eine effektive, nicht-toxische Menge einer Verbindung der Formel (I) und einen pharmazeutisch akzeptablen Träger oder Verdünnungsstoff umfaßt.
Verbindungen der Formel (I), pharmazeutisch akzeptable Salze davon und pharmazeutische Zusammensetzungen, die solche beinhalten, können zweckmäßig auf jedem der Wege verabreicht werden, die herkömmlich zur Wirkstoffverabreichung verwendet werden, z.B. oral, topisch, parenteral oder durch Inhalation. Die Verbindungen der Formel (I) können in herkömmlichen Arzneiformen verabreicht werden, die durch Kombinieren einer Verbindung der Formel (I) mit pharmazeutischen Standardträgern gemäß herkömmlichen Verfahren hergestellt werden. Die Verbindungen der Formel (I) können ebenfalls in herkömmlichen Dosierungen in Kombination mit einer bekannten, zweiten therapeutisch aktiven Verbindung verabreicht werden. Diese Verfahren können das Vermischen, Granulieren und Verpressen oder Auflösen der Bestandteile nach Bedarf für die gewünschte Zubereitung beinhalten. Man wird einsehen, daß die Form und Eigenschaft des pharmazeutisch akzeptablen Trägers oder Verdünnungsmittels durch die Menge des aktiven Bestandteils, mit dem er zu kombinieren ist, durch den Verabreichungsweg und andere allgemein bekannte Variablen diktiert werden. Der (die) Träger muß (müssen) "akzeptabel" in dem Sinne sein, daß er (sie) kompatibel mit den anderen Bestandteilen der Formulierung und nicht nachteilig für den Empfänger ist (sind).
Der eingesetzte pharmazeutische Träger kann z.B. entweder ein Feststoff oder eine Flüssigkeit sein. Exemplarisch für feste Träger sind Lactose, Kaolin, Saccharose, Talkum, Gelatine, Agar, Pectin, Gummi arabicum, Magnesiumstearat, Stearinsäure und dgl. Exemplarisch für flüssige Träger sind Sirup, Erdnußöl, Olivenöl, Wasser und dgl. In ähnlicher Weise kann der Träger oder das Verdünnungsmittel ein allgemein fachbekanntes Zeitverzögerungsmaterial einschließen, wie Glycerylmonostearat oder Glyceryldistearat, allein oder mit einem Wachs.
Eine große Vielzahl pharmazeutischer Formen kann eingesetzt werden. Falls ein fester Träger verwendet wird, kann die Zubereitung somit tablettiert werden, in eine Hartgelatinekapsel in Pulver- oder Pelletform gegeben werden oder in Form einer Pastille oder Lutschtablette sein. Die Menge von festem Träger wird weithin variieren, aber wird bevorzugt von ca. 25 mg bis ca. 1 g sein. Wenn ein flüssiger Träger verwendet wird, wird die Zubereitung in Form eines Sirups, einer Emulsion, einer Weichgelatinekapsel, einer sterilen injizierbaren Flüssigkeit, wie eine Ampulle, oder einer nicht-wäßrigen flüssigen Suspension sein.
Verbindungen der Formel (I) können topisch verabreicht werden, d.h. durch nicht-systemische Verabreichung. Dies schließt die externe Anwendung einer Verbindung der Formel (I) auf die Epidermis oder Backenhöhle und das Einträufeln einer solchen Verbindung in das Ohr, das Auge oder die Nase ein, so daß die Verbindung nicht signifikant in den Blutstrom eintritt. Im Gegensatz bezeichnet die systemische Verabreichung die orale, intravenöse, intraperitoneale und intramuskuläre Verabreichung.
Zur topischen Verabreichung geeignete Formulierungen schließen flüssige oder halbflüssige Zubereitungen ein, die zur Durchdringung der Haut zum Entzündungsort geeignet sind, wie Einreibemittel, Lotionen, Cremes, Salben oder Pasten, und Tropfen, die zur Verabreichung an das Auge, das Ohr oder die Nase geeignet sind. Der aktive Bestandteil kann zur topischen Verabreichung 0,001 bis 10% G/G umfassen, z.B. 1 bis 2 Gew.-% der Formulierung. Er kann jedoch so viel wie 10% G/G umfassen, aber wird bevorzugt weniger als 5% G/G umfassen, besonders bevorzugt 0,1 bis 1% G/G der Formulierung.
Erfindungsgemäße Lotionen schließen diejenigen ein, die zur Anwendung auf Haut oder Auge geeignet sind. Eine Augenlotion kann eine sterile wäßrige Lösung umfassen, die gegebenenfalls ein Bakterizid enthält, und kann durch Verfahren hergestellt werden, die ähnlich denjenigen zur Herstellung von Tropfen sind. Lotionen oder Einreibemittel zur Anwendung auf die Haut können ebenfalls ein Mittel zur Beschleunigung des Trocknens und zur Abkühlung der Haut einschließen, wie einen Alkohol oder Aceton, und/oder ein Feuchthaltemittel, wie Glycerin, oder ein Öl, wie Rizinusöl oder Erdnußöl.
Cremes, Salben oder Pasten gemäß der vorliegenden Erfindung sind halbfeste Formulierungen des aktiven Bestandteils zur äußeren Anwendung. Sie können durch Vermischen des aktiven Bestandteils in feinverteilter oder gepulverter Form, allein oder in Lösung oder Suspension in einer wäßrigen oder nicht-wäßrigen Flüssigkeit, mit Hilfe einer geeigneten Maschine mit einer fettigen oder nicht-fettigen Basis hergestellt werden. Die Basis kann Kohlenwasserstoffe umfassen, wie hartes, weiches oder flüssiges Paraffin, Glycerin, Bienenwachs, eine Metallseife; einen Schleim; ein Öl natürlichen Ursprungs, wie Mandel-, Mais-, Erdnuß-, Rizinus- oder Olivenöl; Wollfett oder seine Derivate, oder eine Fettsäure, wie Stearin- oder Oleinsäure, zusammen mit einem Alkohol, wie Propylenglykol, oder ein Makrogel. Die Formulierung kann jedes geeignete Tensid beinhalten, wie ein anionisches, kationisches oder nichtionisches Tensid, wie einen Sorbitanester oder ein Polyoxyethylenderivat davon. Suspendiermittel, wie natürliche Gummen, Cellulose-Derivate oder anorganische Stoffe, wie Kieselerden, und andere Bestandteile wie Lanolin können ebenfalls eingeschlossen werden.
Erfindungsgemäße Tropfen können sterile wäßrige oder ölige Lösungen oder Suspensionen umfassen und können durch Auflösen des aktiven Bestandteils in einer geeigneten wäßrigen Lösung eines bakteriziden und/oder fungiziden Mittels und/oder jedes anderen geeigneten Konservierungsmittels hergestellt werden und schließen bevorzugt ein Tensid ein. Die resultierende Lösung kann dann durch Filtration geklärt und in einen geeigneten Behälter überführt werden, der dann versiegelt und durch Autoklavieren oder Halten auf 98–100°C für eine halbe Stunde sterilisiert wird. Alternativ kann die Lösung durch Filtration sterilisiert und in den Behälter durch eine aseptische Technik übertragen werden. Beispiele für bakterizide und fungizide Mittel, die zum Einschluß in den Tropfen geeignet sind, sind Phenylquecksilbernitrat oder -acetat (0,002%), Benzalkoniumchlorid (0,01%) und Chlorhexidinacetat (0,01%). Geeignete Lösungsmittel zur Herstellung einer öligen Lösung schließen Glycerin, verdünnten Alkohol und Propylenglykol ein.
Verbindungen der Formel (I) können parenteral verabreicht werden, d.h. durch intravenöse, intramuskuläre, subkutane, intranasale, intrarektale, intravaginale oder intraperitoneale Verabreichung. Die subkutanen und intramuskulären Formen der parenteralen Verabreichung sind allgemein bevorzugt. Geeignete Arzneiformen für eine solche Verabreichung können durch herkömmliche Techniken hergestellt werden. Verbindungen der Formel (I) können ebenfalls durch Inhalation verabreicht werden, d.h. durch intra nasale und orale Inhalationsverabreichung. Geeignete Arzneiformen für eine solche Verabreichung, wie eine Aerosolformulierung oder ein Dosierinhalator, können durch herkömmliche Techniken hergestellt werden.
Für alle hier für die Verbindungen der Formel (I) offenbarten Verfahren der Verwendung wird das täglich orale Dosierungsschema bevorzugt von ca. 0,01 bis ca. 80 mg/kg Gesamtkörpergewicht sein. Das tägliche parenterale Dosierungsschema wird ca. 0,001 bis ca. 80 mg/kg Gesamtkörpergewicht sein. Das tägliche topische Dosierungsschema wird bevorzugt 0,1 bis 150 mg sein, verabreicht 1- bis 4-mal, bevorzugt 2- oder 3-mal täglich. Das tägliche Inhalationsdosierungsschema wird bevorzugt von ca. 0,01 bis ca. 1 mg/kg pro Tag sein. Ein Fachmann wird ebenfalls erkennen, daß die optimale Menge und der optimale Abstand der individuellen Dosierungen einer Verbindung der Formel (I) oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes davon durch die Natur und das Ausmaß des behandelten Zustands, die Form, den weg und den Ort der Verabreichung und den besonderen behandelten Patienten bestimmt werden, und daß solche Optima durch herkömmliche Techniken bestimmt werden können. Ein Fachmann wird ebenfalls einsehen, daß der optimale Behandlungsverlauf, d.h. die Anzahl von Dosen einer Verbindung der Formel (I) oder eines pharmazeutisch akzeptablen Salzes davon, die pro Tag für eine definierte Anzahl von Tagen abgegeben werden, durch die Fachleute unter Verwendung herkömmlicher Bestimmungsuntersuchungen für den Behandlungsverlauf festgestellt werden kann.
Die Erfindung wird jetzt durch Verweis auf die folgenden biologischen Beispiele beschrieben werden, die bloß illustrativ sind und nicht als Beschränkung des Umfangs der vorliegenden Erfindung aufgefaßt werden dürfen.
Biologische Beispiele
Die IL-8- und GROα-Chemokin-inhibitorischen Wirkungen der Verbindungen der vorliegenden Erfindung werden durch den folgenden in-vitro-Test bestimmt:
Rezeptorbindungstests:
[¹²⁵I]-IL-8 (human, rekombinant) wurde von Amersham Corp., Arlington Heights, IL, mit einer spezifischen Aktivität von 2000 Ci/mmol erhalten. GROα wurde von NEN-New England Nuclear erhalten. Alle anderen Chemikalien waren von Analysenqualität. Hohe Mengen von rekombinanten humanen IL-8-Rezeptoren vom Typ α und β wurden individuell in Ovarialzellen des Chinesischen Hamsters exprimiert, wie zuvor beschrieben (Holmes et al., Science, 1991, 253, 1278). Die Ovarialmembranen des Chinesischen Hamsters wurden gemäß einem zuvor beschriebenen Protokoll homogenisiert (Haour et al., J. Biol. Chem., 249, S. 2195–2205 (1974)), außer daß der Homogenisierungspuffer zu 10 mM Tris-HCl, 1 mM MgSO₄, 0,5 mM EDTA (Ethylendiamintetraessigsäure), 1 mM PMSF (α-Toluolsulfonylfluorid), 0,5 mg/l Leupeptin, pH 7,5 verändert wurde. Die Membranproteinkonzentration wurde unter Verwendung des Micro-Assay-Kits von Pierce Co. unter Verwendung von Rinderserumalbumin als Standard bestimmt. Alle Tests wurden in einem Mikroplattenformat mit 96 Vertiefungen durchgeführt. Jede Reaktionsmischung enthielt [¹²⁵I]-IL-8 (0,25 nM) oder [¹²⁵I]-GROα und 0,5 μg/ml von IL-8Rα- oder 1,0 μg/ml von IL-8Rβ-Membranen in 20 mM Bis-Trispropan und 0,4 mM Tris-HCl-Puffer, pH 8,0, enthaltend 1,2 mM MgSO₄, 0,1 mM EDTA, 25 mM NaCl und 0,03% CHAPS. Zusätzlich wurde interessierender Wirkstoff oder interessierende Verbindung hinzugegeben, der/die zuvor in DMSO gelöst wurde, um eine Endkonzentration zwischen 0,01 nM und 100 μM zu erreichen. Der Test wurde durch Zugabe von [¹²⁵I]-IL-8 begonnen. Nach 1 Stunde bei Raumtemperatur wurde die Platte unter Verwendung eines Tomtec-Ernters mit 96 Vertiefungen auf einer mit 1% Polyethylenimin/0,5% BSA geblockten Glasfaser-Filtermatte geerntet und 3-mal mit 25 mM NaCl, 10 mM Tris-HCl, 1 mM MgSO₄, 0,5 mM EDTA, 0,03% CHAPS, pH 7,4 gewaschen. Das Filter wurde dann getrocknet und auf dem Betaplate-Flüssigszintillationszähler gezählt. Der rekombinante IL-8-Rα- oder Typ I-Rezeptor wird hier ebenfalls als nicht-permissiver Rezeptor bezeichnet, und der rekombinante IL-8-Rβ- oder Typ II-Rezeptor wird als permissiver Rezeptor bezeichnet.
Alle der hier im Abschnitt Synthesechemie exemplarisch angegebenen Verbindungen der Formel (I), Beispiele 1 bis 5, zeigten einen IC₅₀-Wert von circa 45 bis circa < 1 μg/ml in den permissiven Modellen für die IL-8-Rezeptorinhibierung. Unter diesen Verbindungen wurde festgestellt, daß die Beispiele 1 bis 12 auch Inhibitoren der GROα-Bindung auf etwa der gleichen Höhe sind.
Chemotaxis-Test:
Die inhibitorischen Eigenschaften dieser Verbindungen in vitro werden im Neutrophil-Chemotaxis-Test bestimmt, wie beschrieben in Current Protocols in Immunology, Bd. I, Suppl. 1, Einheit 6.12.3, deren Offenbarung hier durch Verweis in ihrer Gesamtheit eingefügt wird. Neutrophile wurden aus menschlichem Blut isoliert, wie beschrieben in Current Protocols in Immunology, Bd. I, Suppl. 1, Einheit 7.23.1, deren Offenbarung hier durch Verweis in ihrer Gesamtheit eingeführt wird. Die chemischen Lockstoffe IL-8, GROα, GROβ, GROγ und NAP-2 werden in die untere Kammer einer 48-Multivertiefungs kammer (Neuro Probe, Cabin John, MD) mit einer Konzentration zwischen 0,1 und 100 nM gegeben. Die zwei Kammern werden durch ein 5 μm-Polycarbonatfilter getrennt. Wenn Verbindungen dieser Erfindung getestet werden, werden sie mit den Zellen (0,001–1000 nM) gerade vor der Zugabe der Zellen zur oberen Kammer vermischt. Man läßt die Inkubation für ca. 45 bis 90 min bei ca. 37°C in einem angefeuchteten Inkubator mit 5% CO₂ fortschreiten. Am Ende des Inkubationszeitraums wird die Polycarbonat-Membran entfernt und die obere Seite gewaschen und die Membran dann unter Verwendung des Diff-Quick-Anfärbeprotokolls angefärbt (Baxter Products, McGaw Park, IL, USA). Zellen, die sich durch Chemotaxis zum Chemokin bewegt haben, werden visuell unter Verwendung eines Mikroskops gezählt. Allgemein werden vier Felder für jede Probe gezählt, und diese Zahlen werden Bemittelt, um die Durchschnittszahl von Zellen zu ergeben, die gewandert sind. Jede Probe wird dreifach getestet und jede Verbindung wenigstens 4-mal wiederholt. Zu bestimmten Zellen (positive Kontrollzellen) wird keine Verbindung hinzugegeben, diese Zellen stellen die maximale chemotaktische Reaktion der Zellen dar. Für den Fall, daß eine negative Kontrolle (unstimuliert) gewünscht ist, wird kein Chemokin in die untere Kammer gegeben. Der Unterschied zwischen der positiven Kontrolle und der negativen Kontrolle stellt die chemotaktische Aktivität der Zellen dar.
Elastasefreisetzungstest:
Die Verbindungen dieser Erfindung werden auf ihre Fähigkeit zur Verhinderung der Elastasefreisetzung aus humanen Neutrophilen getestet. Neutrophile werden aus menschlichem Blut isoliert, wie beschrieben in Current Protocols in Immunology, Bd. I, Suppl. 1, Einheit 7.23.1. PMNs 0,88 × 10⁶ Zellen, suspendiert in Ringer-Lösung (NaCl 118, KCl 4,56, NaHCO₃ 25, KH₂PO₄ 1,03, Glucose 11,1, HEPES 5 mM, pH 7,4), werden in jede Vertiefung einer Platte mit 96 Vertiefungen in einem Volumen von 50 μl gegeben. Zu dieser Platte werden die Testverbindung (0,001–1000 nM) in einem Volumen von 50 μl, Cytochalasin B in einem Volumen von 50 μl (20 μg/ml) und Ringer-Puffer in einem Volumen von 50 μl gegeben. Diese Zellen läßt man für 5 Minuten erwärmen (37°C, 5% CO₂, 95% relative Feuchtigkeit), bevor IL-8, GROα, GROβ, GROγ oder NAP-2 mit einer Endkonzentration von 0,01–1000 nM hinzugegeben wurde. Die Reaktion läßt man für 45 min fortschreiten, bevor die Platte mit 96 Vertiefungen zentrifugiert wird (800 × g, 5 min) und 100 μl des Überstands entfernt werden. Dieser Überstand wird zu einer zweiten Platte mit 96 Vertiefungen gegeben, gefolgt von einem künstlichen Elastasesubstrat (MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC, Nova Biochem, La Jolla, CA) auf eine Endkonzentration von 6 μg/ml, gelöst in phosphatgepufferter Kochsalzlösung. Die Platte wird unmittelbar in einen Fluoreszenz-Plattenleser für 96 Vertiefungen gegeben (Cytofluor 2350, Millipore, Bedford, MA) und die Daten in 3-minütigen Intervallen gemäß dem Verfahren von Nakajima et al. gesammelt, J. Biol. Chem. 254, 4027 (1979). Die aus den PMNs freigesetzte Elastasemenge wird durch Messung der Geschwindigkeit des McOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-AMC-Abbaus berechnet.
TNF-α im traumatischen Hirnverletzungstest:
Der vorliegende Test sieht die Untersuchung der Expression von Tumornekrosefaktor-mRNA in spezifischen Hirnregionen vor, die einer experimentell induzierten lateralen Fluidperkussions-traumatischen Hirnverletzung (TBI) in Ratten folgt. Ausgewachsene Sprague-Dawley-Ratten (n = 42) wurden mit Natriumpentobarbital (60 mg/kg i.p.) anästhesiert und einer lateralen Fluidperkussions-Hirnverletzung moderater Schwere (2,4 atm), zentriert über dem linken temporaparietalen Cortex (n = 18), oder einer "Schein"-Behandlung (Anästhesie und Operation ohne Verletzung, n = 18) unterworfen. Die Tiere werden durch Köpfen zu 1, 6 und 24 h nach der Verletzung getötet, die Hirne entfernt und Gewebeproben des linken (verletzten) parietalen Cortex (LC), eines entsprechenden Gebietes im kontralateralen rechten Cortex (RC), des zum verletzten parietalen Cortex benachbarten Cortex (LA), des entsprechenden benachbarten Gebietes im rechten Cortex (RA), des linken Hippocampus (LH) und des rechten Hippocampus (RH) präpariert. Gesamt-RNA wurde isoliert, und Northern-Blot-Hybridisierung wird durchgeführt und relativ zu einer TNF-α-positiven Kontroll-RNA (Makrophage = 100%) quantifiziert. Eine deutliche Zunahme der TNF-α-mRNA-Expression wird in LH (104 ± 17% der positiven Kontrolle, p < 0,05, verglichen mit Schein), LC (105 ± 21%, p < 0,05) und LA (69 ± 8%, p < 0,01) in der traumatisierten Hemisphäre 1 Stunde nach der Verletzung beobachtet. Eine erhöhte TNF-α-mRNA-Expression wird ebenfalls in LH (46 ± 8%, p < 0,05), LC (30 ± 3%, p < 0,01) und LA (32 ± 3%, p < 0,01) zum Zeitpunkt 6 h beobachtet, die sich 24 h nach der Verletzung auflöst. In der kontralateralen Hemisphäre ist die Expression von TNF-α-mRNA in RH (46 ± 2%, p < 0,01), RC (4 ± 3%) und RA (22 ± 8%) zum Zeitpunkt 1 h und in RH (28 ± 11%), RC (7 ± 5%) und RA (26 ± 6%, p < 0,05) zum Zeitpunkt 6 h, aber nicht nach 24 h im Anschluß an die Verletzung erhöht. Bei Schein- (Operation ohne Verletzung) oder unbehandelten Tieren werden keine übereinstimmenden Veränderungen der Expression von TNF-α-mRNA in irgendeinem der 6 Hirnbereiche in jeder Hemisphäre zu jedem Zeitpunkt beobachtet. Diese Ergebnisse zeigen, daß die temporale Expression von TNF-α-mRNA im Anschluß an parasagittale Fluidperkussions-Hirnverletzung in spezifischen Hirnregionen verändert ist, einschließlich derjenigen der nicht-traumatisierten Hemisphäre. Da TNF-α Nervenwachstumsfaktor (NGF) induzieren und die Freisetzung anderer Cytokine aus aktivierten Astrozyten stimulieren kann, spielt diese posttraumatische Veränderung der Genexpression von TNF-α eine wichtige Rolle sowohl in der akuten als auch regenerativen Reaktion auf ZNS-Trauma.
ZNS-Verletzungsmodell für IL-β-mRNA:
Dieser Test charakterisiert die regionale Expression von Interleukin-1β(IL-1β)-mRNA in spezifischen Hirnregionen im Anschluß an eine experimentelle laterale Fluidperkussions-traumatische Hirnverletzung (TBI) in Ratten. Ausgewachsene Sprague-Dawley-Ratten (n = 42) werden mit Natriumpentobarbital (60 mg/kg, i.p.) anästhesiert und einer lateralen Fluidperkussions-Hirnverletzung moderater Schwere (2,4 atm), zentriert über dem linken temporaparietalen Cortex (n = 18), oder einer "Schein"-Behandlung (Anästhesie und Operation ohne Verletzung) unterworfen. Die Tiere werden zum Zeitpunkt 1, 6 und 24 h nach der Verletzung getötet, die Hirne entfernt und Gewebeproben des linken (verletzten) parietalen Cortex (LC), des entsprechenden Gebietes im kontralateralen rechten Cortex (RC), des zum verletzten parietalen Cortex benachbarten Cortex (LA), des entsprechenden benachbarten Gebietes im rechten Cortex (RA), des linken Hippocampus (LH) und des rechten Hippocampus (RH) präpariert. Gesamt-RNA wird isoliert, und Northern-Blot-Hybridisierung wurde durchgeführt, und die Menge der Hirngewebe-IL-1β-mRNA wird als relative prozentuale Radiaktivität von IL-1β-positiver Makrophagen-RNA dargestellt, die auf das gleiche Gel aufgetragen wurde. Zum Zeitpunkt 1 h nach der Hirnverletzung wird eine deutliche und signifikante Zunahme der Expression von Il-1β-mRNA in LC (20,0 ± 0,7% der positiven Kontrolle, n = 6, p < 0,05, verglichen mit Scheinbehandlungstieren), LH (24,5 ± 0,9%, p < 0,05) und LA (21,5 ± 3,1%; p < 0,05) in der verletzten Hemisphäre beobachtet, die bis zu 6 h nach der Verletzung in LC (4,0 ± 0,4%, n = 6, p < 0,05) und LH (5,0 ± 1,3%, p < 0,05) erhöht blieb. In scheinbehandelten oder unbehandelten Tieren wird keine Expression von IL-1β-mRNA in irgendeinem der jeweiligen Hirngebiete beobachtet. Diese Ergebnisse zeigen, daß im Anschluß an TBI die temporale Expression von IL-1β-mRNA regional in spezifischen Hirnregionen stimuliert wird. Diese regionalen Veränderungen der Cytokine wie IL-1β spielen eine Rolle in der posttraumatischen Reaktion.
Die obige Beschreibung offenbart die Erfindung vollständig, einschließlich bevorzugter Ausführungsformen davon. Modifikationen und Verbesserungen der hier spezifisch offenbarten Ausführungsformen sind im Umfang der folgenden Ansprüche. Ohne weitere Ausführung wird angenommen, daß ein Fachmann unter Verwendung der vorhergehenden Beschreibung die vorliegende Erfindung in ihrem weitesten Ausmaß nutzen kann. Deshalb sollen die vorliegenden Beispiele bloß als illustrativ und nicht als Beschränkung für den Umfang der vorliegenden Erfindung in irgendeiner Weise aufgefaßt werden. Die Ausführungsformen der Erfindung, in denen eine exklusive Eigenschaft oder ein Privileg beansprucht wird, sind wie folgt definiert.

Claims

Verbindung der Formel (I) zur Verwendung in der Therapie:
worin: R aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus OH, SH und NHSO₂R_d besteht; R_d aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus NR₆R₇, Alkyl, Aryl-C_1-4-alkyl, Aryl-C_2-4-alkenyl, Heteroaryl, Heteroaryl-C_1-4-alkyl, Heteroaryl-C_2-4-alkenyl, Heterocyclyl und Heterocyclyl-C_1-4-alkyl besteht; R₆ und R₇ unabhängig Wasserstoff oder eine C_1-4-Alkylgruppe sind oder R₆ und R₇ zusammen mit dem Stickstoff, an den sie gebunden sind, einen 5- bis 7-gliedrigen Ring bilden, wobei der Ring gegebenenfalls ein zusätzliches Heteroatom enthält, das aus Sauerstoff, Stickstoff und Schwefel ausgewählt ist; R₁ unabhängig aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus Wasserstoff, Halogen, Nitro, Cyano, Halogen-substituiertem C_1-10-Alkyl, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_1-10-Alkoxy, Halogen-substituiertem C_1-10-Alkoxy, Azid, (CR₈R₈)_qS(O)_tR₄, Hydroxy, Hydroxy-C_1-4-alkyl, Aryl, Aryl-C_1-4-alkyl, Aryloxy, Aryl-C_1-4-alkyloxy, Heteroaryl, Heteroarylalkyl, Heterocyclyl, Heterocyclyl-C_1-4-alkyl, Heteroaryl-C_1-4-alkyloxy, Aryl-C_2-10-alkenyl, Heteroaryl-C_2-10-alkenyl, Heterocyclyl-C_2-10-alkenyl, (CR₈R₈)_qNR₄R₅, C_2-10-AlkenylC(O)NR₄R₅, (CR₈R₈)_qC(O)NR₄R₅, (CR₈R₈)_qC(O)NR₄R₁₀, S(O)₃H, S(O)₃R₈, (CR₈R₈)_qC(O)R₁₁, C_2-10-AlkenylC(O)R₁₁, C_2-10-AlkenylC(O)OR₁₁(CR₈R₈)_qC(O)OR₁₂, (CR₈R₈)_qOC(O)R₁₁, (CR₈R₈)_qNR₄C(O)R₁₁, (CR₈R₈)_qNHS(O)₂R₁₇ und (CR₈R₈)_qS(O)₂NR₄R₅ besteht; oder zwei R₁-Einheiten zusammen O-(CH₂)_sO- oder einen 5- bis 6-gliedrigen ungesättigten Ring bilden; q 0 oder eine ganze Zahl mit einem Wert von 1 bis 10 ist; t 0 oder eine ganze Zahl mit einem Wert von 1 oder 2 ist; s eine ganze Zahl mit einem Wert von 1 bis 3 ist; R₄ und R₅ unabhängig aus der Gruppe ausgewählt sind, die aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, Aryl, Aryl-C_1-4-alkyl, Heteroaryl, Heteroaryl-C_1-4-alkyl, Heterocyclyl und Heterocyclyl-C_1-4-alkyl besteht, oder R₄ und R₅ zusammen mit dem Stickstoff, an den sie gebunden sind, einen 5- bis 7-gliedrigen Ring bilden, der gegebenenfalls ein zusätzliches Heteroatom umfaßt, das aus Sauerstoff, Stickstoff und Schwefel ausgewählt ist; Y unabhängig aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus Wasserstoff, Halogen, Nitro, Cyano, Halogen-substituiertem C_1-10-Alkyl, C_1-10-Alkyl, C_2-10-Alkenyl, C_1-10-Alkoxy, Halogen-substituiertem C_1-10-Alkoxy, Azid, (CR₈R₈)_qS(O)_tR₄, Hydroxy, Hydroxy-C_1-4-alkyl, Aryl, Aryl-C_1-4-alkyl, Aryloxy, Aryl-C_1-4-alkyloxy, Heteroaryl, Heteroarylalkyl, Heteroaryl-C_1-4-alkyloxy, Heterocyclyl, Heterocyclyl-C_1-4-alkyl, Aryl-C_2-10-alkenyl, Heteroaryl-C_2-10-alkenyl, Heterocyclyl-C_2-10-alkenyl, (CR₈R₈)_qNR₄R₅, C_2-10-AlkenylC(O)NR₄R₅, (CR₈R₈)_qC(O)NR₄R₅, (CR₈R₈)_qC(O)NR₄R₁₀, S(O)₃H, S(O)₃R₈, (CR₈R₈)_qC(O)R₁₁, C_2-10-AlkenylC(O)R₁₁, C_2-10-AlkenylC(O)OR₁₁, C(O)R₁₁, (CR₈R₈)_qC(O)OR₁₂, (CR₈R₈)_qOC(O)R₁₁, (CR₈R₈)_qNR₄C(O)R₁₁, (CR₈R₈)_qNHS(O)₂R_d und (CR₈R₈)_qS(O)₂NR₄R₅ besteht; oder zwei Y-Einheiten zusammen O-(CH₂)_sO- oder einen 5- bis 6-gliedrigen ungesättigten Ring bilden; n eine ganze Zahl mit einem Wert von 1 bis 5 ist; m eine ganze Zahl mit einem Wert von 1 bis 4 ist; R₈ Wasserstoff oder C_1-4-Alkyl ist; R₁₀ C_1-10-AlkylC(O)₂R₈ ist; R₁₁ aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus Wasserstoff, C_1-4-Alkyl, Aryl, Aryl-C_1-4-alkyl, Heteroaryl, Heteroaryl-C_1-4-alkyl, Heterocyclyl und Heterocyclyl-C_1-4-alkyl besteht; R₁₂ aus Wasserstoff, C_1-10-Alkyl, Aryl und Arylalkyl ausgewählt ist; und R₁₇ aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus C_1-4-Alkyl, Aryl, Arylalkyl, Heteroaryl, Heteroaryl-C_1-4-alkyl, Heterocyclyl und Heterocyclyl-C_1-4-alkyl besteht; und worin bei jedem obigen Auftreten – "Halogen" alle Halogene bezeichnet, d.h. Chlor, Fluor, Brom und Iod; – "C_2-5-Alkyl" oder "Alkyl" sowohl lineare als auch verzweigtkettige Einheiten mit 2 bis 5 Kohlenstoffatomen bezeichnet, es sei denn die Kettenlänge ist anderweitig beschränkt; – "Alkenyl" lineare oder verzweigtkettige Einheiten mit 2 bis 10 Kohlenstoffatomen bezeichnet, es sei denn die Kettenlänge ist darauf beschränkt; – "Aryl" Phenyl und Naphthyl bezeichnet; – "Heteroaryl" (alleinstehend oder in jeder Kombination, wie z.B. "Heteroaryloxy" oder "Heteroarylalkyl") ein 5- bis 10-gliedriges aromatisches Ringsystem bezeichnet, in dem ein oder mehrere Ringe ein oder mehrere Heteroatome enthalten, die aus der Gruppe ausgewählt sind, die aus N, O und S besteht; – "Heterocyclyl" (alleinstehend oder in jeder Kombination, wie z.B. "Heterocyclylalkyl") ein gesättigtes oder teilweise ungesättigtes 4- bis 10-gliedriges Ringsystem bezeichnet, in dem ein oder mehrere Ringe ein oder mehrere Heteroatome enthalten, die aus der Gruppe ausgewählt sind, die aus N, O und S besteht; – "Arylalkyl" oder "Heteroarylalkyl" oder "Heterocyclylalkyl" hier verwendet wird, um C_1-10-Alkyl wie oben definiert zu bezeichnet, das an eine Aryl-, Heteroaryl- oder Heterocyclyleinheit gebunden ist, ebenso wie hier definiert, wenn nichts anderes angegeben ist.
Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine wirksame Menge einer Verbindung der Formel (I) und einen pharmazeutisch akzeptablen Träger oder Verdünnungsstoff umfaßt.
Verwendung einer Verbindung der Formel (I) in der Herstellung eines Medikaments zur Verwendung in der Behandlung eines Chemokin-vermittelten Krankheitszustands, worin das Chemokin an einen IL-8-α- oder -β-Rezeptor in einem Säugetier bindet.
Verwendung gemäß Anspruch 3, worin die Chemokin-vermittelte Krankheit aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus Psoriasis, atopischer Dermatitis, Osteoarthritis, rheumatoider Arthritis, Asthma, chronisch-obstruktiver Lungenkrankheit, Atemnotsyndrom des Erwachsenen, entzündlicher Darmkrankheit, Morbus Crohn, ulzeröser Kolitis, Schlag, septischem Schock, multipler Sklerose, endotoxischem Schock, Gram-negativer Sepsis, toxischem Schocksyndrom, kardialer und renaler Reperfusionsverletzung, Glomerulonephritis, Thrombose, Transplantat-Wirt-Reaktion, Alzheimer-Krankheit, Allotransplantatabstossungen, Malaria, Restenose, Angiogenese, Atherosklerose, Osteoporose, Gingivitis und unerwünschter hämatopoetischer Stammzellfreisetzung und Krankheiten, die durch respiratorische Viren, Herpesviren und Hepatitisviren verursacht werden, Meningitis, Mukoviszidose, vorzeitigen Wehen, Husten, Pruritus, Multiorgan-Dysfunktion, Trauma, Zerrungen, Verstauchun gen, Prellungen, psoriatischer Arthritis, Herpes, Enzephalitis, ZNS-Vaskulitis, traumatischer Hirnverletzung, ZNS-Tumoren, subarachnoidaler Blutung, postchirurgischem Trauma, interstitieller Pneumonitis, Überempfindlichkeit, Kristall-induzierter Arthritis, akuter und chronischer Pankreatitis, akuter alkoholischer Hepatitis, nekrotisierender Enterokolitis, chronischer Sinusitis, Uveitis, Polymyositis, Vaskulitis, Akne, Magen- und Duodenalgeschwüren, Zöliakie, Ösophagitis, Glossitis, Atemwegsobstruktion, Atemwegsüberempfindlichkeit, Bronchiolitis obliterans mit organisierender Pneumonie, Bronchiektasie, Bronchiolitis, Bronchiolitis obliterans, chronischer Bronchitis, Cor pulmonale, Dyspnoe, Emphysem, Hyperkapnie, Hyperinflation, Hypoxämie, Hyperoxie-induzierten Entzündungen, Hypoxie, chirurgischer Reduktion des Lungenvolumens, Lungenfibrose, Lungenhochdruck, rechter Ventrikel-Hypertrophie, Sarkoidose, zentroazinärem Emphysem ("Small Airway Disease"), Ventilations-Perfusions-Fehlübereinstimmung, Keuchen, Erkältungen und Lupus besteht.
Verbindung der Formel (I) mit der Maßgabe, daß die Verbindung nicht: 3-Cyclobuten-1,2-dion-3-[(2-hydroxyphenyl)amino]-4-(phenylamino), 3-Cyclobuten-1,2-dion-3-[(2-hydroxyphenyl)amino]-4-[(4-methylphenyl)amino], 3-Cyclobuten-1,2-dion-3-[(2-hydroxyphenyl)amino]-4-[(4-methoxyphenyl)amino] oder 3-Cyclobuten-1,2-dion-3-[(4-chlorophenyl)amino]-4-[(2-hydroxyphenyl)amino] ist.
Verbindung, die aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus: 1) 3-(4-Cyano-2-hydroxyanilino)-4-(2-bromanilino)cyclobut-3-en-1,2-dion, 2) 3-(4-Cyano-2-hydroxyanilino)-4-(2-chloranilino)cyclobut-3-en-1,2-dion, 3) 3-(4-Cyano-2-hydroxyanilino)-4-(2,3-dichloranilino)cyclobut-3-en-1,2-dion, 4) 3-(4-Nitro-2-hydroxyanilino)-4-(2-bromanilino)cyclobut-3-en-1,2-dion und 5) 3-(4-Chlor-2-hydroxyanilino)-4-(2-bromanilino)cyclobut-3-en-1,2-dion besteht.