DE3836006A1 - Monophosphoryllipid-a-derivate und verfahren zu deren herstellung - Google Patents
Monophosphoryllipid-a-derivate und verfahren zu deren herstellungInfo
- Publication number
- DE3836006A1 DE3836006A1 DE3836006A DE3836006A DE3836006A1 DE 3836006 A1 DE3836006 A1 DE 3836006A1 DE 3836006 A DE3836006 A DE 3836006A DE 3836006 A DE3836006 A DE 3836006A DE 3836006 A1 DE3836006 A1 DE 3836006A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- group
- mpl
- derivatives
- monophosphoryllipid
- acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 title claims abstract description 101
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 42
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 11
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims abstract description 17
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims abstract description 16
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims abstract description 16
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical class O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 230000008569 process Effects 0.000 claims abstract description 8
- 239000011149 active material Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- -1 6- (4'-azido-2'-nitrophenyl ) hexanoyl group Chemical group 0.000 claims description 22
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims description 16
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 13
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 13
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 12
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 11
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 11
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 11
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 11
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 10
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 10
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 claims description 10
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 9
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 6
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 6
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 5
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 claims description 5
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 claims description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 claims description 4
- 239000012620 biological material Substances 0.000 claims description 4
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 claims description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 3
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 3
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 claims description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims description 2
- HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N benzyl chloroformate Chemical compound ClC(=O)OCC1=CC=CC=C1 HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- IRXSLJNXXZKURP-UHFFFAOYSA-N fluorenylmethyloxycarbonyl chloride Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)Cl)C3=CC=CC=C3C2=C1 IRXSLJNXXZKURP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004816 latex Substances 0.000 claims description 2
- 229920000126 latex Polymers 0.000 claims description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000006242 amine protecting group Chemical group 0.000 claims 3
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 claims 2
- SUSQOBVLVYHIEX-UHFFFAOYSA-N phenylacetonitrile Chemical compound N#CCC1=CC=CC=C1 SUSQOBVLVYHIEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 abstract description 11
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 abstract description 7
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 abstract description 5
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 abstract description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 50
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 24
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 10
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 8
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 8
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010084754 Tuftsin Proteins 0.000 description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 6
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 102100029251 Phagocytosis-stimulating peptide Human genes 0.000 description 5
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 231100000284 endotoxic Toxicity 0.000 description 5
- 230000002346 endotoxic effect Effects 0.000 description 5
- 150000002148 esters Chemical group 0.000 description 5
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 description 5
- IESDGNYHXIOKRW-LEOABGAYSA-N tuftsin Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O IESDGNYHXIOKRW-LEOABGAYSA-N 0.000 description 5
- 229940035670 tuftsin Drugs 0.000 description 5
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 4
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 4
- BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N muramyl dipeptide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N 0.000 description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 4
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 4
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 3
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 3
- 230000000091 immunopotentiator Effects 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 3
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 3
- QQWYQAQQADNEIC-UHFFFAOYSA-N tert-butyl [[cyano(phenyl)methylidene]amino] carbonate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)ON=C(C#N)C1=CC=CC=C1 QQWYQAQQADNEIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IESDGNYHXIOKRW-YXMSTPNBSA-N (2s)-2-[[(2s)-1-[(2s)-6-amino-2-[[(2s,3r)-2-amino-3-hydroxybutanoyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O IESDGNYHXIOKRW-YXMSTPNBSA-N 0.000 description 2
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Chemical compound CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SOZNVTRORYUXFD-NPIQVXMPSA-N [1-[[(2r,3r,4r,5r)-5,6-dihydroxy-1-oxo-4-phosphonooxy-3-tetradecanoyloxyhexan-2-yl]amino]-1-oxotetradecan-3-yl] tetradecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)OC(CCCCCCCCCCC)CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@H]([C@H](OP(O)(O)=O)[C@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC SOZNVTRORYUXFD-NPIQVXMPSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 2
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 2
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 2
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 2
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 238000012746 preparative thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 2
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 150000003923 2,5-pyrrolediones Chemical class 0.000 description 1
- JFGZPQLGBYCBOL-UHFFFAOYSA-N 6-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexanoyl 6-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]hexanoate Chemical class CC(C)(C)OC(=O)NCCCCCC(=O)OC(=O)CCCCCNC(=O)OC(C)(C)C JFGZPQLGBYCBOL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical group CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 108010039939 Cell Wall Skeleton Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N D-cystine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CSSC[C@@H](N)C(O)=O LEVWYRKDKASIDU-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NNIVFXCKHNRSRL-VKHMYHEASA-N Hydroxyglutamic acid Chemical compound ON[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O NNIVFXCKHNRSRL-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N L-norVal-OH Natural products CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001222774 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Minnesota Species 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- JHIWVOJDXOSYLW-UHFFFAOYSA-N butyl 2,2-difluorocyclopropane-1-carboxylate Chemical compound CCCCOC(=O)C1CC1(F)F JHIWVOJDXOSYLW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 1
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 210000004520 cell wall skeleton Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000012461 cellulose resin Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- ZWIBGKZDAWNIFC-UHFFFAOYSA-N disuccinimidyl suberate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O ZWIBGKZDAWNIFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N ethyl chloroformate Chemical compound CCOC(Cl)=O RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N glucosamine group Chemical group OC1[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 1
- 150000002332 glycine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 125000001841 imino group Chemical group [H]N=* 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 239000000367 immunologic factor Substances 0.000 description 1
- 230000002584 immunomodulator Effects 0.000 description 1
- 230000002434 immunopotentiative effect Effects 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000014705 isoleucine Nutrition 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005772 leucine Nutrition 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 1
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 235000008729 phenylalanine Nutrition 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000003014 phosphoric acid esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 1
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XETCRXVKJHBPMK-MJSODCSWSA-N trehalose 6,6'-dimycolate Chemical compound C([C@@H]1[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COC(=O)C(CCCCCCCCCCC3C(C3)CCCCCCCCCCCCCCCCCC)C(O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)O2)O)O1)O)OC(=O)C(C(O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC)CCCCCCCCCCC1CC1CCCCCCCCCCCCCCCCCC XETCRXVKJHBPMK-MJSODCSWSA-N 0.000 description 1
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 1
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 235000002374 tyrosine Nutrition 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H13/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids
- C07H13/02—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids
- C07H13/04—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids having the esterifying carboxyl radicals attached to acyclic carbon atoms
- C07H13/06—Fatty acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/05—Immunological preparations stimulating the reticulo-endothelial system, e.g. against cancer
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K17/00—Carrier-bound or immobilised peptides; Preparation thereof
- C07K17/02—Peptides being immobilised on, or in, an organic carrier
- C07K17/06—Peptides being immobilised on, or in, an organic carrier attached to the carrier via a bridging agent
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K9/001—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence having less than 12 amino acids and not being part of a ring structure
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
Die Erfindung betrifft bestimmte neue Monophosphoryllipid-A-
Derivate. Es handelt sich dabei insbesondere um Monophosphoryllipid-
A-Derivate, die eine oder mehrere substituierte
oder unsubstituierte Aminogruppen enthalten.
Es handelt sich dabei weiterhin insbesondere um Derivate,
welche Monophosphoryllipid-A-Konjugate mit bestimmten biologisch
aktiven Materialien darstellen.
Die Erfindung betrifft ferner Verfahren zur Herstellung und die
Verwendung der erfindungsgemäßen Derivate.
In der Literatur sind bereits zahlreiche Veröffentlichungen
erschienen, welche die Umsetzung von Lipopolysaccharid (LPS)
mit cyclischen Anhydriden, insbesondere Phthal- und Bernsteinsäureanhydrid,
beschreiben. Nur in einer dieser Veröffnentlichungen
wird jedoch vorgeschlagen, Monophosphoryllipid-
A (MPL) mit diesen oder anderen Anhydriden zu
kombinieren.
In dem Artikel von A. Hasegawa et al., im J. Carbohydrate
Chem. 5:371 ist die kovalente Kopplung von Muramyldipeptid
(MDP) mit einem Lipid-A-Derivat entsprechend dem nicht-
reduzierenden Glucosaminrest offenbart. Dieses Lipid-A-Derivat,
das in dieser Veröffentlichung als GLA-27 bezeichnet ist,
war sowohl am Phosphat als auch an allen anderen Stellen,
die möglicherweise hätten reagieren können, geschützt, jedoch
nicht an der Hydroxygruppe, an welcher angekoppelt werden
sollte, d. h. der primären Hydroxygruppe am C-6. Zu der
in dieser Veröffentlichung angewandten Koppelungsstrategie
gehörte die Einführung einer freien Carboxylgruppe in GLA-27
am C 6 über Bernsteinsäureanhydrid und einer freien Aminogruppe
in MDP. Anschließend wurde eine Amidbindung zwischen
diesen beiden Gruppen gebildet. Der Hauptunterschied zwischen
der Lehre dieser Veröffentlichung und der erfindungsgemäßen
Lehre besteht darin, daß das Lipid-A-Derivat vollständig
geschützt bzw. blockiert sein mußte, um Nebenreaktionen
während der Kondensation (d. h. Bildung von Amidbindungen)
zu vermeiden. Erfindungsgemäß wird diese Schwierigkeit dadurch
vermieden, daß eine freie Aminogruppe in MPL eingeführt
wird. Man kann MPL dann an andere Komponenten koppeln,
indem man Reagentien bzw. Mittel zur Anwendung bringt, die
spezifisch mit Aminen (beispielsweise Aldehyde) reagieren.
Man kann auch auf andere Weise eine geeignete Gruppe an der
anderen Komponente vor der Kombination mit dem Amino-MPL
aktivieren.
Eine Acylierung von Lipopolysacchariden durch cyclische
Anhydride findet wahrscheinlich in den O-Antigen-Regionen
und in den Kernregionen (core regions) statt, die beim
Monophosphoryllipid-A fehlen. Die Acylierung von LPS in den
erschienenen Veröffentlichungen dient dem Zweck, dessen
Toxizität abzuschwächen, wobei keine funktionelle Gruppe
eingeführt werden sollte, die kovalente Konjugate mit anderen
Materialien bilden sollte.
Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, bestimmte Monophosphoryllipid-
A-Derivate und ein Verfahren zu deren Herstellung
bereitzustellen.
Bei dem erfindungsgemäßen Verfahren soll es insbesondere
nicht erforderlich sein, alle funktionellen Gruppen zu
schützen bzw. zu blockieren, um die gewünschten Gruppen in
das Molekül einführen zu können.
Es sollen Derivate bereitgestellt werden, welche Konjugate
von Monophosphoryllipid-A mit biologisch aktiven Materialien
beispielsweise Antigenen, Antikörpern, Immunomodulatoren und
dergleichen, darstellen. Auch sollen Konjugate dieser
Derivate mit biologischen Verbindungen, wie Antigenen,
bereitgestellt werden, welche eine verstärkte biologische
Aktivität besitzen.
Bei dem erfindungsgemäßen Verfahren sollen die Monophosphoryllipid-
A-Derivate in verhältnismäßig reiner Form
anfallen. Es sollen im wesentlichen keine ungewünschten
Reaktionsnebenprodukte auftreten.
Ferner sollen Verwendungsmöglichkeiten für die Konjugate
aufgezeigt werden.
Gegenstände der Erfindung sind somit bestimmte neue Monophosphoryllipid-
A-Derivate, bestimmte Zwischenverbindungen,
ein Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung.
Die erfindungsgemäßen Derivate besitzen die folgende
allgemeine Formel (I):
worin Z und R sowie der Kreis die nachstehend angegebenen
Bedeutungen besitzen.
Diese Derivate stellt man zweckmäßigerweise her, indem man
Monophosphoryllipid-A mit einer Verbindung umsetzt, welche
eine Gruppe oder Gruppen enthält, die eine Bindung mit
einer Gruppen oder mit Gruppen, die in MPL vorhanden ist
bzw. sind, bilden kann bzw. können. Durch den Einsatz einer
Verbindung, die vor der Umsetzung mit MPL aktiviert wird,
wird die Notwendigkeit vermieden, zuerst Schutzgruppen in
das MPL-Molekül einzuführen.
Monophosphoryllipid-A (MPL) ist eine Phosphor-enthaltende
polyheterocyclische Verbindung mit hängenden langkettigen
aliphatischen Ester- und Amidgruppen und wird als ein
endotoxischer Extrakt aus Enterobacteriaciae erhalten.
Diese Verbindung, die auch als MPL bezeichnet wird, stellt
man nach einer Arbeitsweise her, die in den US-Patenten
US-A 44 36 727 und 44 36 728 beschrieben ist, auf die hiermit
Bezug genommen wird. Endotoxinextrakte desjenigen
Typs, der hier als Ausgangsmaterial zur Herstellung von
MPL eingesetzt wird, kann man aus beliebigen Enterobacteriaciae
einschließlich der Ausgangsorganismen und
Mutanten erhalten. Die zuvor genannnten Patentschriften
beschreiben denjenigen Typ des Mikroorganismus, den man
zur Herstellung des Ausgangsmaterials zur Anwendung bringen
kann. Es sind dort auch verschiedene Verfahren zur Herstellung
des Ausgangsmaterials beschrieben. Man kann MPL
auch nach synthetischen Techniken und gemäß Genetic-
engineering-Techniken herstellen. Das derzeit bevorzugte
Verfahren zur Herstellung des endotoxischen Extrakts ist
dasjenige, das von Chen et al, J. Infect. Dis. 128,543
(1973) beschrieben ist.
MPL ist eine Zusammensetzung, die sich dadurch auszeichnet,
daß sie kein detektierbares 2-Keto-3-deoxyoctanoat enthält,
zwischen 350 bis 475 nmol/mg Phosphor und etwa
1700 bis etwa 2000 nmol/mg Fettsäuren besitzt. Obgleich
das Verfahren zur Herstellung raffinierten detoxifizierten
Endotoxins (MPL) in der oben genannten US-A 44 36 727 offenbart
und beansprucht ist, war die chemische Struktur zum
damaligen Zeitpunkt noch nicht vollständig bekannt. Es war
demgemäß erforderlich, MPL als Product-by-process zu beschreiben.
Die Gesamtstruktur der Hexacylform von MPL
(erhalten aus Lipopolysacchariden von Salmonella minnesota
R 595) ist nun bekannt und nachstehend wiedergegeben:
MPL stellt eine wesentliche Verbesserung im Vergleich zu
endotoxischen Extrakten aus Enterobacteriaciae dar, da MPL
detoxifiziert ist und somit keine hochtoxischen Komponenten
enthält, welche die endotoxischen Extrakte für eine
therapeutische Anwendung ungeeignet gemacht haben, man vergleiche
Peptides as Requirements for Immunotherapy of
Guinea Pig Line-10 Tumor with Endotoxins, Ribi et al,
Cancer Immunol. Immunother., Bd. 7, S. 43-58, 1979 (auf die
entsprechende Offenbarung wird hiermit Bezug genommen).
Die vorteilhaften Effekte von MPL im Vergleich mit anderen
endotoxischen Extrakte sind beispielsweise beschrieben in
US-A 44 36 727 und 44 36 728 sowie in Ribi, E., Journal
of Biological Response Modifiers, Bd. 3, S. 1-9, 1984 (auf
die entsprechende Offenbarung wird hiermit Bezug genommen).
Aufgrund der Tatsache, daß Monophosphoryllipid-A nicht-toxisch
ist, wurde kürzlich gefunden, daß es als Adjuvans
für Vakzine bzw. Impfstoffe und in anderen pharmazeutischen
Zusammensetzungen eingesetzt werden kann, die bei der
Behandlung von verschiedenen Krankheiten Anwendung finden,
wozu beispielsweise Krebstumore in Warmblütlern und dergleichen
zählen.
Die Wirksamkeit von MPL als Adjuvans für bestimmte Antigene
kann durch Koppeln von MPL direkt an diese Antigene verstärkt
werden. Außerdem können kovalente Konjugate, die aus MPL und
anderen immunpotenzierenden Verbindungen bestehen, biologische
Aktivitäten besitzen, welche stärker sind als die der freien
(nicht-konjugierten) Komponenten.
Die traditionellen Methoden zur Bildung kovalenter Konjugate
kann man in zwei Kategorien aufteilen, und zwar in Abhängigkeit
davon, ob die Moleküle bezüglich der Koppelung vor dem
Vermischen oder in situ nach dem Vermischen aktiviert werden.
Keine dieser Methoden ist für MPL aufgrund der strukturellen
Konfiguration geeignet. So führt man bei der vorherigen
Aktivierung eine Gruppe in eines der Moleküle ein, die mit
einer Gruppe leicht reagieren kann, welche lediglich im
zweiten Molekül vorhanden ist. Dazu zählen beispielsweise
eine Amino- oder eine Sulfhydrylgruppe. Diese Methode ist
für unmodifiziertes MPL nicht geeignet, da MPL keine funktionelle
Gruppe enthält, die aktiviert werden kann oder die mit
Gruppen leicht reagieren kann, welche zuvor an anderen
Molekülen aktiviert wurden. Auch die zweite Methode kann bei
MPL nicht eingesetzt werden, da bei den für eine in situ-
Aktivierung im allgemein angewandten Bedingungen MPL dazu
neigt, mit sich selber zu reagieren, so daß eine Vielzahl von
ungewünschten Nebenprodukten entsteht. Zudem wird die Ausbeute
an gewünschtem Konjugat beträchtlich reduziert. Es kann
sogar sein, daß überhaupt kein gewünschtes Konjugat erhalten
wird.
Mit Hilfe des erfindungsgemäßen Verfahrens ist es jedoch möglich,
eine geeignete funktionelle Gruppe, beispielsweise
ein primäres Amin, in MPL zu inkorporieren. Man kann dann
übliche Koppelungsverfahren zur Anwendung bringen, um andere
Materialien an das erhaltene modifizierte MPL anzuknüpfen.
Zu den funktionellen Gruppen, welche MPL enthält, zählen
eine primäre Hydroxygruppe bei C-6′, zwischen 3 bis 6
sekundäre Hydroxygruppen und eine Phosphatgruppe bei C-4′.
Aufgrund der komplexen Konfiguration des Monophosphoryllipid-
A-Moleküls und um die Reaktionen einfacher darstellen
zu können, welche beim erfindungsgemäßen Verfahren stattfinden,
wird das Monophosphoryllipid-A-Molekül im Rahmen
der vorliegenden Unterlagen wie folgt wiedergegeben:
wobei die einzelne primäre Hydroxygruppe im oberen Bereich
gezeigt ist, eine repräsentative sekundäre Hydroxygruppe
im unteren Bereich dargestellt ist, die Phosphatgruppe als
OPO₃H₂ gezeigt ist und der Kreis den übrigen Rest des Monophosphoryllipid-
A-Moleküls darstellt.
Die erfindungsgemäßen Derivate werden - wie oben ausgeführt -
zweckmäßigerweise durch die folgende allgemeine
Formel (I) wiedergegeben:
worin
Z für ein Wasserstoffatom oder die Gruppe
Z für ein Wasserstoffatom oder die Gruppe
steht, worin
R eine divalente Gruppe bedeutet, die aus Kohlenstoff, Wasserstoff und gewünschtenfalls einem oder mehreren Sauerstoff-, Stickstoff- oder Schwefelatomen aufgebaut ist und 2 bis 60 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise 2 bis 20 Kohlenstoffatome enthält,
A eine divalente Koppelungsgruppe bedeutet, welche in der Lage ist, die Gruppe R über mindestens zwei unabhängige funktionelle Gruppen an den Rest Y zu koppeln, und worin A 2 bis 60 Kohlenstoffatome und gewünschtenfalls ein oder mehrere Sauerstoff-, Stickstoff- oder Schwefelatome enthält,
Y ein biologisch aktives Material, beispielsweise Antigene, Antikörper, Immunomodulatoren und dergleichen, darstellt und
n für 0 oder 1 steht.
R eine divalente Gruppe bedeutet, die aus Kohlenstoff, Wasserstoff und gewünschtenfalls einem oder mehreren Sauerstoff-, Stickstoff- oder Schwefelatomen aufgebaut ist und 2 bis 60 Kohlenstoffatomen, vorzugsweise 2 bis 20 Kohlenstoffatome enthält,
A eine divalente Koppelungsgruppe bedeutet, welche in der Lage ist, die Gruppe R über mindestens zwei unabhängige funktionelle Gruppen an den Rest Y zu koppeln, und worin A 2 bis 60 Kohlenstoffatome und gewünschtenfalls ein oder mehrere Sauerstoff-, Stickstoff- oder Schwefelatome enthält,
Y ein biologisch aktives Material, beispielsweise Antigene, Antikörper, Immunomodulatoren und dergleichen, darstellt und
n für 0 oder 1 steht.
Gegenstand einer Ausführung der vorliegenden Erfindung sind
die Derivate der oben wiedergegebenen allgemeinen Formel,
worin Z ein Wasserstoffatom bedeutet. Diese Monophosphoryllipid-
A-Derivate enthalten eine Esterseitenkette, die an
das Kohlenstoffatom des Lipids-A gebunden ist, welches die
primäre Hydroxygruppe (d. h. das C-6′-Kohlenstoffatom) trägt.
Diese Verbindungen entsprechen der folgenden allgemeinen
Formel (III)
worin R eine Gruppe bedeutet, die zusammengesetzt ist aus
Kohlenstoff-, Wasserstoff- und gewünschtenfalls Sauerstoff-,
Stickstoff- und/oder Schwefelatomen und die 2 bis 60 Kohlenstoffatome,
vorzugsweise 2 bis 20 Kohlenstoffatome, enthält.
Im allgemeinen kann jede Art funktioneller Gruppe in MPL
oder verwandte Materialien mit Hilfe des erfindungsgemäßen
Verfahrens eingeführt werden, mit der Maßgabe, daß die
funktionelle Gruppe Teil eines Moleküls ist, das eine
Carboxyl- oder eine ähnliche Gruppe enthält, die vor der
Kombination mit MPL zum Zwecke der Herstellung einer
Esterbindung aktiviert werden kann. Funktionelle Gruppen,
die nach diesem Verfahren eingeführt werden können, sind
beispielsweise (diese Aufzählung ist nicht abschließend):
Amine, Thiole, Aldehyde, Carboxylgruppen, N-Hydroxyimidoester,
Iminoester, Arylazide, Maleimide, Pyridyldisulfide
und aktive Halogenatome.
Das Erfordernis der Aktivierung vor der Kombination mit
MPL ist von ausschlaggebender Bedeutung aufgrund der
zahlreichen Nebenreaktionen, die stattfinden können, falls
MPL den Aktivierungsbedingungen direkt ausgesetzt wird.
Als Beispiel einer derartigen Aktivierung sei die Umsetzung
von MPL mit Bernsteinsäureanhydrid näher ausgeführt, welche
zur Einfügung einer freien Carboxylgruppe in MPL führt.
Derivate, wie die der Formel (IV), worin R gemäß der
Formel (III) als Endgruppe eine freie Carboxylgruppe besitzt
und über die Estergruppe an das MPL-Molekül mit Hilfe
einer aliphatischen, aromatischen oder heterocyclischen
Gruppe angeknüpft ist, kann man gemäß der erfindungsgemäßen
Lehre herstellen.
Es kann gegebenenfalls (muß aber nicht) erforderlich sein,
bestimmte funktionelle Gruppen des in MPL einzuführenden
Moleküls vor der Aktivierungsstufe zu schützen bzw. zu
blockieren. Führt man beispielsweise mit Hilfe des erfindungsgemäßen
Verfahrens eine Aminogruppe in MPL ein,
dann ist es erforderlich, das Amin einer geeigneten Aminosäure
vor der Aktivierung der Carboxylgruppe zur Herstellung
der Esterbindung zu schützen. Bei dem oben erläuterten,
mit Hilfe von Bernsteinsäureanhydrid durchgeführten Beispiel
sind die Erfordernisse des Schützens bzw. Blockierens
und der zuvorigen Aktivierung durch Bildung des cyclischen
Anhydrids erfüllt. Geeignete Verfahren zum Schützen und Entschützen
bzw. zum Blockieren und Deblockieren sind dem
Fachmann gut bekannt und beispielsweise beschrieben in:
Theodora W. Green, "Protective Groups in Organic Synthesis",
John Wiley & Sons, New York, 1981, S. 349.
Bevorzugte Verbindungen, die nach dem erfindungsgemäßen
Verfahren hergestellt werden können, sind Amine und substituierte
Amine der folgenden allgemeinen Formel (V):
worin R³ eine divalente, Kohlenstoff-, Wasserstoff- und
gewünschtenfalls Sauerstoff-, Stickstoff- und/oder Schwefelatome
enthaltende divalente Kette und R¹ und R² unabhängig
voneinander ein Wasserstoffatom oder eine niedrige Alkylgruppe
bedeuten oder worin einer der Reste R¹ und R² den
Rest eines organischen Substrats oder eines Trägers einschließlich
Liposome, oder ein biologisches Material, beispielsweise
ein Antigen, einen Immunomodulator, einen Antikörper
und dergleichen, bedeuten kann.
Besonders bevorzugte Verbindungen der allgemeinen Formel
(V) sind solche, worin R¹ und R² ein Wasserstoffatom bedeuten
und R³ einen divalenten Rest mit 2 bis 60, vorzugsweise
mit 2 bis 20, Kohlenstoffatomen bedeutet und aufgebaut
ist aus Kohlenstoff, Wasserstoff und gewünschtenfalls
Sauerstoff-, Stickstoff- und/oder Schwefelatomen. Zu diesen
Derivaten zählen solche, worin R³ eine geradkettige oder
verzweigte Kohlenwasserstoffkette ist, sowie Polypeptide,
die eine oder mehrere wiederkehrende Amidgruppen, beispielsweise
Di- und Tripeptide von Glycinderivaten von MPL, bedeutet.
Dazu gehören ferner solche Verbindungen, bei denen
eine Aminosäure an der C-6′-Stellung in MPL eingeführt ist
und demzufolge MPL-Derivate darstellen, die eine Seitenkette
besitzen, welche eine primäre Amingruppe als Endgruppe besitzt.
Typische Verbindungen dieses Typs sind diejenigen
der nachstehend gezeigten allgemeinen Formel (VI):
worin x irgendeinen Wert von 1 bis etwa 20 und höher annehmen
kann. Als Beispiel sei eine Verbindung angeführt,
bei der x für 5 steht; in diesem Fall handelt es sich dann
um den Ester von 6-Aminocapronsäure. Diese Verbindung ist
als CAP-MPL bezeichnet. Deren Synthese ist in den Beispielen
1 bis 3 näher erläutert.
Weiterhin von Interesse ist dasjenige Derivat, bei dem
MPL in Form eines Esters an die freie Carboxylgruppe von
Peptiden gebunden ist, die aus Glycin oder verwandten
α-Aminosäuren bestehen. So besteht beispielsweise die nachfolgend
gezeigte Verbindung aus MPL, das in Form eines Esters
an ein Tripeptid aus Glycin gebunden ist:
Demzufolge kann eine Vielzahl von MPL-Derivaten aus bekannten
Aminosäuren hergestellt werden. Alternative Aminosäuren,
die in das MPL-Molekül mit Hilfe des erfindungsgemäßen
Verfahrens eingeführt werden können, sind unter
anderem Glycin, Alanin, Serin, Threonin, Methionin, Valin,
Norvalin, Leucin, Isoleucin, Phenylalanin, Tyrosin,
Cystein, Asparaginsäure, Glutaminsäure, Hydroxyglutaminsäure,
Arginin, Lysin, Cystin, Histidin, Prolin, Hydroxyprolin,
Tryptophan, Asparagin und Glutamin. Es kann erforderlich
sein, geeignete Verfahren zum Blockieren und
Deblockieren bzw. zum Schützen und Entschützen einzusetzen,
die dem Fachmann gut bekannt sind, wenn diese Aminosäuren
oder Kombinationen davon mit Hilfe des erfindungsgemäßen
Verfahrens an MPL gebunden werden sollen.
MPL-Derivate, bei denen eine primäre Aminogruppe nach dem
erfindungsgemäßen Verfahren eingeführt wird, können
weiter modifiziert werden, so daß sie an andere interessante
Verbindungen, beispielsweise Antigene, Antikörper und
Immunomodulatoren, auf einfache Weise gekoppelt werden
können. Derartige MPL-Derivate besitzen im allgemeinen
folgende allgemeine Formel:
worin R¹ und R³ die oben angegebenen Bedeutungen besitzen,
R² eine Gruppe darstellt, die aus Kohlenstoff-, Wasserstoff-
und gewünschtenfalls Sauerstoff-, Stickstoff- und/
oder Schwefelatomen aufgebaut ist und 1 bis 60 Kohlenstoffatome,
vorzugsweise 1 bis 20 Kohlenstoffatome enthält,
und R⁴ eine Gruppe bedeutet, die in der Lage ist,
eine kovalente Bindung zu bilden, entweder selektiv mit
Aminen oder Sulfhydrylverbindungen, oder nicht-selektiv
mit einer Vielzahl von Gruppen, und die aufgebaut ist
gewünschtenfalls aus Kohlenstoff-, Wasserstoff-, Stickstoff-,
Sauerstoff- und/oder Schwefelatomen. Der als R⁴-
R²-bezeichnete Rest steht beispielsweise für N-Succinimidylsuberoyl,
6-(4′-Azido-2′-nitrophenyl)hexanoyl,
3-(2-Pyridyldithio)propionyl und m-Maleimidobenzoyl.
Im Beispiel 4 ist die Herstellung der folgenden Verbindung
beschrieben:
worin R₄-R₂ für N-Succinimidylsuberoyl steht und R¹ und
R³ der in der Formel (VIII) gezeigten Bedeutung entsprechen,
wobei X = 5 ist.
Danach setzt man das Derivat, das MPL und eine Kopplungsgruppe
enthält, welche an MPL über eine Aminogruppe gebunden
ist, beispielsweise das oben gezeigte SSC-MPL-
Derivat, mit einem Peptid weiter um, das eine primäre
Aminogruppe enthält, um folgendes Konjugat zu bilden:
Das erfindungsgemäße Verfahren, das nachstehend näher erläutert
ist, stellt eine einzigartige Methode zur Einführung
einer oder mehrerer funktioneller Gruppen in
Monophosphoryllipid-A und verwandte Verbindungen dar. Diese
funktionellen Gruppen können einen Anknüpfungspunkt für
eine kovalente Koppelung von MPL und verwandten Verbindungen
mit anderen interessierenden Materialien darstellen. Das
Verfahren umfaßt folgende Stufen:
- (1) man schützt bzw. blockiert erforderlichenfalls die weitere funktionelle Gruppe oder die weiteren funktionellen Gruppen einer geeigneten Carbonsäure,
- (2) man aktiviert die freie Carboxylgruppe der geschützten Verbindung bezüglich der Bildung der Esterbindung,
- (3) man setzt die aktivierte Verbindung mit Monophosphoryllipid- A um und
- (4) man deblockiert bzw. entschützt erforderlichenfalls das erhaltene MPL-Derivat.
Das erfindungsgemäße Verfahren wird nachstehend durch die
dort gezeigte Reaktionsfolge näher erläutert, bei der
man ein Amino-MPL-Derivat des in der Formel (IV) gezeigten
Typs herstellt. Bei dieser Folge steht t-BOC-ON für
t-Butoxycarbonyloxyimino-2-phenylacetonitril, während MPL
die oben gezeigte Bedeutung besitzt:
(1) Blockieren bzw. Schützen
(2) Aktivierung
(3) Umsetzung mit MPL
(4) Entschützen bzw. Deblockierung
Obwohl man in der Stufe (1) t-BOC-ON für die dort gezeigte
Umsetzung als Blockierungsmittel einsetzt, können
auch andere Agentien eingesetzt werden. Typische
Blockierungs- bzw. Schutzagentien sind (diese Aufzählung ist
nicht abschließend) Benzylchlorformiat, 9-Fluorenylmethylchlorformiat
und 2,2,2-Trichlormethylchlorformiat.
Die Umsetzung zum Schützen der Aminosäuren oder anderer Verbindungen
führt man in einem geeigneten Lösungsmittel, beispielsweise
Wasser, Ethanol oder Dioxan, bei einer Temperatur
von etwa 0°C bis etwa 30°C je nach der Natur des eingesetzten
Schutzreagens durch. Die Aktivierung der geschützten
Säure in der Stufe (2) zur Herstellung des Anhydrids kann
man unter Anwendung einer Verbindung, beispielsweise Dicyclohexylcarbodiimid
oder weiterer Verbindungen, wie 1-Ethyl-3-
(3-dimethylaminopropyl)carbodiimid und Ethylchlorformiat,
durchführen. Diese Stufe führt man in Abwesenheit eines
inerten Lösungsmittels, beispielsweise Chloroform oder Dichlormethan
und bei einer Temperatur von etwa 0°C bis 30°C
in Abhängigkeit von dem eingesetzten Reagens durch.
Die Umsetzung des Anhydrids mit MPL in der dritten Stufe
führt man in einem Lösungsmittelgemisch, beispielsweise
Pyridin: Chloroform (1 : 1; V : V), bei einer Temperatur von
etwa 0°C bis etwa 30°C durch.
Zum Deblockieren bzw. Entschützen der Aminosäure oder
weiterer Verbindungen, die in das MPL-Molekül eingeführt
wurden, kann man ein Deblockierungsagens, wie die Trifluoressigsäure
oder Chlorwasserstoff(Gas) in einem geeigneten
Lösungsmittel bei Temperaturen von etwa -15°C bis etwa
0°C zur Anwendung bringen.
Wie bereits oben dargelegt, ist diese Ausführungsform des
erfindungsgemäßen Verfahrens besonders nützlich und stellt
eine einzigartige Methode zur Einführung freier Aminogruppen
in Monophosphoryllipid-A und verwandte Verbindungen dar, bei
denen andere funktionelle Gruppen die direkte Verwendung von
Standardkoppelungsmittel, wie Carbodiimiden, unmöglich machen.
So enthält MPL beispielsweise eine Phosphatgruppe, eine
primäre Hydroxygruppe und verschiedene sekundäre Hydroxygruppen.
In Anwesenheit von Carbodiimiden oder anderen
Kondensationsmitteln würden Nebenreaktionen stattfinden, die
zu Phosphorsäureanhydriden, Phosphatestern und anderen
Materialien führen würden. Beim erfindungsgemäßen Verfahren
werden derartige Nebenreaktionen ausgeschlossen. Mit dem
erfindungsgemäßen Verfahren könnnen somit die gewünschten
Derivate in verhältnismäßig reiner Form erhalten werden.
Eine weitere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung
betrifft Monophosphoryllipid A-Derivate, bei denen ein
Koppelungsagens an die Verbindung der allgemeinen Formel
(III) gebunden worden ist, so daß ein Derivat der
folgenden allgemeinen Formel (IX) erhalten wird:
worin R die oben angegebenen Bedeutungen besitzt und A
eine Koppelungsgruppe darstellt, über die eine Anknüpfung
an die Y-Gruppe wie zuvor erläutert vollzogen werden kann.
Als derartige A-Gruppen kann man erfindungsgemäß (diese
Aufzählung ist nicht abschließend) die N-Succinimidylsuberoylgruppe,
die 6-(4′-Azido-2′-nitrophenyl)-hexanoylgruppe,
die 3-(2-Pyridyldithio)propionyl-Gruppe, und die
m-Maleimidobenzoylgruppe nennen.
Die Umsetzung der Koppelungsagentien mit den Verbindungen
der allgemeinen Formel (III) kann man nach üblichen Verfahren
durchführen. Die Wahl der Reaktionsbedingungen hängt
von den eingesetzten Reaktanten ab.
Gemäß einer weiteren Ausführungsform werden Monophosphoryllipid-
A-Derivate bereitgestellt, welche die oben gezeigte
Verbindung (III) enthalten, die über die divalenten A-Gruppen
an biologisch aktiven Materialien gekoppelt ist. Diese
Derivate werden im Rahmen der vorliegenden Unterlagen als
Konjugate bezeichnet und besitzen die folgende allgemeine
Formel (X)
worin A und R die oben angegebenen Bedeutungen besitzen
und Y ein biologisch aktives Material darstellt. Derartige
Verbindungen des biologischen Materials als auch des Monophosphoryllipids-
A.
Als biologische Materialien, die an das MPL-Derivat der
Formel (III) mit Hilfe eines Koppelungsreagens bzw.
Koppelungsagens gekoppelt werden können, sind beispielsweise
(diese Aufzählung ist nicht abschließend): Immunopotentiatoren,
wie Tuftsin, Muramyldipeptid, Zellwandskelett,
Trehalosedimycolat und dergleichen; Cytokine,
wie Interleukine, Interferone, granulocyt-monocyt-
aktivierender Faktor, Tumornekrosefaktor und dergleichen;
Antigene, wie solche, die bei infektiösen Erkrankungen
eine Rolle spielen; tumor-spezifische Antikörper; Membranen,
wie Phosphorlipidmembranen, einschließlich Membrane darstellende
Strukturen, wie Liposome, und Carrier, Träger,
wie Latexkügelchen, Dextran, Celluloseharze und dergleichen.
Bei dem oben sowie in den Beispielen aufgeführten Immunopotentiator,
Tuftsin, handelt es sich um die Verbindung
L-Threonyl-L-lysyl-L-prolyl-L-arginin.
L-Threonyl-L-lysyl-L-prolyl-L-arginin.
Dessen pharmakologisch verträglichen Salze und Derivate
und bestimmte seiner optischen Isomere sind zur Stimulierung
und Inhibierung von Phagocytose oder Pincytose bei
Säugern nützlich. Weitere therapeutisch nützliche, nichtantigene
Polypeptide sind beispielsweise:
L-Thr-L-Lys-L-Pro-L-Arg-L-Thr-L-Lys-L-Pro-L-Arg,
D-Thr-L-Lys-L-Pro-D-Arg-D-Thr-L-Lys-L-Pro-D-Arg,
D-Thr-L-Lys-L-Pro-L-Arg-L-Thr-L-Lys-L-Pro-Arg
und die pharmakologisch verträglichen Salze und Derivate davon.
L-Thr-L-Lys-L-Pro-L-Arg-L-Thr-L-Lys-L-Pro-L-Arg,
D-Thr-L-Lys-L-Pro-D-Arg-D-Thr-L-Lys-L-Pro-D-Arg,
D-Thr-L-Lys-L-Pro-L-Arg-L-Thr-L-Lys-L-Pro-Arg
und die pharmakologisch verträglichen Salze und Derivate davon.
Die Koppelung der biologischen aktiven Komponente an das
MPL-Derivat der Formel (IX) kann man nach Verfahren durchführen,
die in der Literatur beschrieben sind. In einigen
Fällen und in Abhängigkeit von der an der R-Einheit verfügbaren
funktionellen Gruppen kann es möglich sein, die
biologisch aktive Komponente Y direkt an R zu binden. In
einem solchen Fall steht n in der allgemeinen Formel
(X) für O.
Wie bereits oben dargelegt, stellt Monophosphoryllipid-A
ein Immunostimulanz dar und kann den daran angekoppelten,
wünschenswerte biologische Eigenschaften besitzenden weiteren
Verbindungen eine verstärkte biologische Aktivität vermitteln.
So kann beispielsweise die Wirksamkeit von MPL als
Adjuvans für Antigene verstärkt werden, wenn man das
Antigen unter Anwendung der erfindungsgemäßen Derivate an
MPL koppelt. Diese Konjugate können als potentere immunopotentierende
Verbindungen, als bessere Adjuvantien für
relativ nicht-immunogene Antigene und als Mittel für die
immunologische Forschung eingesetzt werden. Die Konjugate
der oben gezeigten Formel sind somit bei der Detektion verschiedener
biologischer Komponenten, die in Körperflüssigkeiten,
wie Blut oder Urin, enthalten sind, und auch für die
biologische Forschung nützlich, Konjugate, wie
diejenigen von Phosphoryllipid-A, das an Immunopotentiatoren
oder Cytokine konjugiert ist, sind bei der Stimulierung eines
spezifischen oder nicht-spezifischen Immmunansprechens
nützlich. Konjugate, bei denen Antikörper an MPL gekoppelt
sind, sind bei der Stimulierung eines spezifischen Immunansprechens,
in der Affinitätschromatographie, in Immunoassays,
bei der cellulären Absorption an Festkörperträger
und dergleichen nützlich. Konjugate, bei denen Antikörper
an MPL gekoppelt sind, sind auch bei der Stimulierung eines
spezifischen Immunansprechens nützlich. Man kann MPL auch
an Carrier bzw. Träger zur Anwendung in der biologischen
Forschung und in Untersuchungsverfahren konjugieren. Die
folgenden Beispiele dienen zur Erläuterung der Herstellung
der erfindungsgemäßen Derivate.
N-t-Butoxycarbonyl-6-aminocapronsäure (t-BOC-CAP) stellt man
aus t-Butoxycarbonyloxyimino-2-phenylacetonitril (BOC-ON)
und 6-Aminocapronsäure gemäß dem Verfahren von W.J. Paleveda,
F.W. Holly, D.F. Veber, Organic Syntheses 63, 171 (1984)
her. 100 mg (4,32 × 10-4 Mol) der erhaltenen t-BOC-CAP überführt
man durch Behandeln mit 50 mg (2,42 × 10-4 Mol)
Dicyclohexylcarbodiimid in trockenem CHCl₃ in das Anhydrid.
Nach üblichen Aufarbeitungsverfahren und Umkristallisation aus
Diethylether/Hexan erhält man 76 mg t-BOC-CAP-Anhydrid (IR:
3480, 1821, 1751, 1719 cm-1; ¹H-NMR - keine Carboxylprotonen).
In einem 100 ml-Rundkolben gibt man 410 mg (etwa 2,7 × 10-4
Mol) Monophosphoryllipid-A, in Chloroform : Methanol (4 : 1;
V/V) gelöst. Man entfernt das Lösungsmittel durch Entspannungsverdampfen
und beläßt den Kolben über Nacht auf einer
Lyophilisierungsvorrichtung, um letzte Spuren von Lösungsmittel
und Feuchtigkeit zu entfernen. Zum getrockneten Rückstand
gibt man 171 mg t-BOC-CAP-Anhydrid (3,84 × 10-4 Mol) und
12 ml jeweils von Chloroform und Pyridin, wobei man die
beiden letzteren über Molekularsieb (4A) zuvor getrocknet
hat. Man rührt die Reaktionsmischung unter Stickstoffgas.
Man überwacht den Fortgang der Reaktion dünnschichtchromatographisch
(thin layer chromatography; TLC) auf
Silikagel 60 TLC-Platten (EM), wobei man ein Lösungsmittelsystem
zur Anwendung bringt, das aus Chloroform : Methanol :
Wasser : Ammoniumhydroxyd (50 : 31 : 6 : 2; V/V) besteht. Entwickelte
TLC-Platten macht man durch Ansprühen mit 5% Phosphomolybdat
in Ethanol und anschließendes Verkohlen bei 150°C "sichtbar".
Die Umsetzung scheint nach 24 h vollständig zu sein. Man
stoppt die Umsetzung nach 52 h, indem man 30 ml 0,10 M
Na₂CO₃ (pH 10) zugibt und 30 Min. lang heftig rührt. Man
überführt die Mischung dann in einen Schütteltrichter, gibt
12 ml jeweils Chloroform und Methanol zu und schüttelt den
Trichter. Man entnimmt die organische Phase und extrahiert
die wäßrige Phase erneut mit einer weiteren Portion Chloroform:
Methanol (2 : 1; V/V). Man vereinigt die organischen Phasen
und wäscht mit 1M HCl, bis man in der wäßrigen Phase einen
sauren pH-Wert erhält (erfordert 210 ml). Man wäscht die
organische Phase einmal mit Wasser, sprühevaporiert dann und
trocknet sie schließlich auf einer Lyophilisierungsvorrichtung.
Das Gewicht des erhaltenen Restes beträgt 491 mg.
468 mg t-BOC-CAP-MPL trocknet man in einem 50-l-Rundkolben
unter Verwendung einer Lyophilisiervorrichtung, um letzte
Spuren an Lösungsmittel und Feuchtigkeit zu entfernen. Man
stattet den Kolben dann mit einem Magnetrührstab aus und
stellt ihn in ein Trockeneis/Ethylenglykolbad (-15°C). Man
gibt dann 20 ml kalte Trifluoressigsäure (TFA) in den
Kolben, die man zuvor durch Abdestillieren über P₂O₅ im
Vakuum getrocknet hat (Destillationskolben bei -15°C,
Aufnahmekolben bei -77°C). Man rührt die Reaktionslösung
20 Min. lang heftig und destilliert danach die TFA ab.
Letzte Spuren von TFA entfernt man mit Chloroform. Man erhält
450 mg eines glasartigen, rötlich-bräunlichen Rückstandes.
Die rohe Produktmischung fraktioniert man durch Ionenaustauschchromatographie
auf einer 2,5 × 20 cm Säule von DEAE-
Cellulose in der Acetatform (Indion-HA-3). Nach Beschicken
mit 447 mg rohem CAP-MPL spült man die Säule mit 220 ml
von jeweils Chloroform:Methanol (4 :1; V/V) und Chloroform:
Methanol:Wasser (2 : 3 : 1; V/V). Anschließend eluiert man mit
einem linearen Salzgradienten, zusammengesetzt aus 900 ml
Chloroform : Methanol : Wasser (2 : 3 : 1; V/V) gegen 900 ml
Chloroform : Methanol : 0,2 M Ammoniumacetat (2 : 3 : 1; V/V). Man
erhält insgesamt 312 mg mono-substituiertes CAP-MPL in den
4 : 1 und 2 : 3 : 1 Vorläufen. Weitere 116 mg des Materials, das
vorwiegend nicht-umgesetztes MPL darstellt, gewinnt man
während der Salzgradienten-Elution.
Man führt eine weitere Fraktionierung von CAP-MPL in die
einzelnen Komponenten an Silikagel (BioSil HA) durch, indem
man einen linearen Gradienten von 1000 ml Chloroform gegen
1000 ml Chloroform : Methanol : Wasser (590 : 400 :10; V/V) zur
Anwendung bringt. Die Fraktionen, welche dem Hexaacylhomologen
von CAP-MPL entsprechen, vereinigt man und unterwirft
sie einer weiteren Reinigung an preparativen TLC-
Platten (500 µ Silikagel H; Analtech), wobei man Chloroform :
Methanol : Wasser : Ammoniumhydroxyd (50 : 31 : 6 : 2; V/V) als
Entwicklungslösungsmittel einsetzt. Eine Massenspektrumsanalyse
des erhaltenen gereinigten Hexaacyl-CAP-MPL zeigt
eine einzelne Komponente mit m/e von 1830; dies entspricht
der erwarteten Masse für Hexaacyl-MPL, das mit einer
6-Aminocaproylgruppe kombiniert ist.
In eine 4-ml-Ampulle mit einer Schraubkappe gibt man
14,8 mg Hexaacyl-CAP-MPL (8,09 × 10-6 Mol). Man füllt
1,0 ml trockenes Chloroform in die Ampulle, welches man
zuvor über Molekularsieb (4A) gelagert hat. Zu der Chloroformlösung
von CAP-MPL gibt man 12,6 mg Di-(N-Succinimidyl)
suberat (Pierce Chemical Co.; 3,23 × 10-5 Mol) und anschließend
1,0 ml Pyridin (Molekularsieb 4A) und einen
Rührstab. Man verschließt die Ampulle dicht und rührt dann
bei Raumtemperatur (24°C) mehrere Stunden, bis die Umsetzung
im Dünnschichtchromatogramm vollständig ist (das
Produkt wandert mit einem, R f -Wert von etwa 0,49 bei den
im Beispiel 2 angegebenen dünnschichtchromatographischen
Bedingungen). Zu diesem Zeitpunkt entfernt man das
gesamte Lösungsmittel durch Entspannungsverdampfung unter
Verwendung eines Aspirators, um Chloroform zu entfernen,
und unter Verwendung einer Vakuumpumpe, um Pyridin abzuführen.
Man hält die Temperatur zu allen Zeitpunkten unter
40°C. Man überführt den erhaltenen Rest in ein 30 ml-Corexröhrchen,
wobei man eine minimale Menge Chloroform verwendet.
Man präzipitiert das Produkt dann durch Zugabe von 20 ml
Aceton, wobei man mit einem Vortextrührer rührt. Das
Präzipitat pelletiert man durch 20-minütiges Zentrifugieren
bei 12.000 g. Man suspendiert das Pellet in 20 ml Aceton
und zentrifugiert dann wiederum 20 Min. bei 12 000 g. Die
Pelletfraktion ergibt nach Verdampfen der letzten Lösungsmittelspuren
10,7 mg Produkt (IR: 1780 (w), 1810 (w)
CM-1, TLC - R f = 0,49 an Silikagel-60 unter Verwendung
von Chloroform : Methanol : Wasser : Ammoniumhydroxyd (50 : 31 : 6 : 2).
Man trocknet 10,1 mg teilweise gereinigtes SSC-MPL in
einem 5-ml-Rundkolben, wobei man einen dünnen, klaren Film
erhält. Man löst 16,7 mg Tuftsin (Sigma; 3,34 × 10-5 Mol)
in 1,37 ml 100 cm HEPES-Puffer bei pH 7,85, den man zuvor
durch Titrieren der freien Säureform von HEPES (Sigma) mit
Triethylamin hergestellt hat. Man gibt die Gesamtmenge der
wäßrigen Tuftsinlösung und einen 10 × 3 ml-Magnetrührstab
in den Kolben und rührt die Lösung dann über Nacht kräftig.
Man beschallt die Lösung gelegentlich kurz (ca. 10 Sek.
lang) in einem Ultraschallbad, um das Aufbrechen des SSC-
MPL-Films zu begünstigen. Nach 24 h überführt die Lösung
in einen Dialysesack (Cutoff-6000 bis 8000 MW) und
dialysiert ausgiebig gegen destilliertes Wasser. Man
lyophilisiert das erhaltene Dialysat und erhält am Ende
12,3 mg eines weißen Pulvers (TLC - R f = 0,12, 0,21 (Hauptanteil)
und 0,45 (Nebenanteil) an Silikagel-60, entwickelt
mit Chloroform : Methanol : Wasser (65 : 25 : 4); SSC-MPL wandert
bei R f = 0,53 in diesem TLC-System).
Man fraktioniert die rohe Produktmischung mittels
präparativer Dünnschichtchromatographie an präparativen
Platten (500 µ Silikagel H; Analtech) unter Verwendung
des Lösungsmittelsystems (50 : 31 : 6 : 2), um die Platten zu entwickeln.
Die Banden macht man im Gegenlicht sichtbar. Die
Produkte gewinnt man gemäß üblicher Techniken. Man erhält
zwei relativ reine Produktbanden, entsprechend R f =0,12
(2,3 mg) und R f = 0,21 (4,5 mg) im 65 : 25 : 4 TLC-System.
In eine 2,0 ml Ampulle mit einer Schraubkappe gibt man eine
Chloroform : Methanol-Lösung (4 : 1; V/V), die 29 mg (1,68 ×
10-5 Mol) Hexaacyl-MPL enthält. Man zieht das gesamte
Lösungsmittel ab und entfernt letzte Spuren mit Hilfe einer
Lyophilisiervorrichtung. Man wiegt 3,4 mg (3,36 × 10-5 Mol)
Bernsteinsäureanhydrid in die Ampulle ein und gibt einen
Rührstab hinzu. Anschließend gibt man jeweils 0,2 ml
Chloroform und Pyridin zu (jeweils gereinigt durch Lagern
über Molekularsieb 4A). Man rührt die Lösung 5 h, überführt
sie dann in ein 15 ml Corex-Zentrifugenröhrchen und quencht
durch Rühren mit 1,0 ml 0,1 M Na₂CO₃ (pH 10,0) während eines
Zeitraumes von 30 Min. Man gibt 2 ml Chloroform und 1 ml
Methanol zur gequenchten Umsetzung und zentrifugiert dann
10 Min. bei 30000 rpm, um die Phasen zu trennen. Man wäscht
die organische Schicht 2 × mit 1N HCl, einmal mit Wasser und
verdampft dann unter einem Stickstoffstrom, wobei man 27,4 mg
eines glasartigen Rückstandes erhält. Dünnschichtchromatographisch
unter Verwendung von Silikagel (man vergleiche das
oben erläuterte Beispiel 2) stellt man fest, daß dieses
Material aus 50% Mono-Succinyl-MPL, 20% Di-Succinyl-MPL
und 30% nicht-umgesetztem MPL besteht.
Claims (6)
1. Monophosphoryllipid-A-Derivate der allgemeinen Formel (I)
worin
R eine divalente Gruppe bedeutet, die aus Kohlenstoff-, Wasserstoff- und gewünschtenfalls einem oder mehreren Sauerstoff-, Stickstoff- oder Schwefelatomen aufgebaut ist und 2 bis 60 Kohlenstoffatome enthält, und
Z für ein Wasserstoffatom oder für: steht, worin
A eine divalente Kopplungsgruppe, die in der Lage ist den Rest R über mindestens zwei unabhängige funktionelle Gruppen an den Rest Y zu koppeln, bedeutet, und worin A 2 bis 60 Kohlenstoffatome und gewünschtenfalls ein oder mehrere Sauerstoff-, Stickstoff- oder Schwefelatome enthält,
Y ein Wasserstoffatom oder ein biologisch aktives Material bedeutet,
n für 0 oder 1 steht und
der Kreis für einen Monophosphoryllipid-A-Kern steht, einschließlich der Hexaacylform des Monophosphoryllipids- A der Formel:
R eine divalente Gruppe bedeutet, die aus Kohlenstoff-, Wasserstoff- und gewünschtenfalls einem oder mehreren Sauerstoff-, Stickstoff- oder Schwefelatomen aufgebaut ist und 2 bis 60 Kohlenstoffatome enthält, und
Z für ein Wasserstoffatom oder für: steht, worin
A eine divalente Kopplungsgruppe, die in der Lage ist den Rest R über mindestens zwei unabhängige funktionelle Gruppen an den Rest Y zu koppeln, bedeutet, und worin A 2 bis 60 Kohlenstoffatome und gewünschtenfalls ein oder mehrere Sauerstoff-, Stickstoff- oder Schwefelatome enthält,
Y ein Wasserstoffatom oder ein biologisch aktives Material bedeutet,
n für 0 oder 1 steht und
der Kreis für einen Monophosphoryllipid-A-Kern steht, einschließlich der Hexaacylform des Monophosphoryllipids- A der Formel:
2. Derivate nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel (I),
worin die Gruppe R den Rest einer Dicarbonsäure
oder einer Aminosäure mit mindestens einer freien
Amingruppe darstellt, wobei es sich bei der Aminosäure
um Glycin, Alanin, Serin, Methionin,
6-Aminocapronsäure oder Tyrosin handelt.
3. Derivate nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel
worin die Gruppe A 2 bis 60 Kohlenstoffatome und
gewünschtenfalls ein oder mehrere Sauerstoff-,
Stickstoff- oder Schwefelatome enthält und worin es
sich bei der Gruppe A insbesondere um eine N-Succinimidylsuberoylgruppe
oder um eine 6-(4′-Azido-2′-
nitrophenyl)hexanoylgruppe, oder eine 3-(2-Pyridyldithio)
propionyl)gruppe, oder um eine m-Maleimidobenzoylgruppe
handelt und
R die oben angegebenen Bedeutungen besitzt.
R die oben angegebenen Bedeutungen besitzt.
4. Derivate nach Anspruch 1, worin Y ein organisches oder
anorganisches Substrat, wie Latexkügelchen, oder eine
Membran oder ein biologisches Material aus der Gruppe
der Immunomodulatoren Antikörper oder Antigene darstellt.
5. Verfahren zur Herstellung von Monophosphoryllipid-A-
Derivaten, wobei man
- 1) die Aminogruppe einer Aminosäure mit einer Aminschutzgruppe schützt,
- 2) die geschützte Aminosäure durch Überführen dieser geschützten Aminosäure zum entsprechenden Säureanhydrid aktiviert,
- 3) das Säureanhydrid mit Phosphoryllipid-A umsetzt,
- 4) die geschützten Aminogruppen mit einem Mittel zum Abspalten der Schutzgruppe entschützt und
- 5) das Monophosphoryllipid-A-Derivat gewinnt.
6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet,
daß man als Aminschutzgruppe t-Butoxycarbonyloxyimino-
2-phenylacetonitril, Benzylchloroformiat, 9-Fluorenylmethylchlorformiat
oder 2,2,2-Trichlormethylchlorformiat
und als Mittel zum Abspalten der Aminschutzgruppe Trifluoressigsäure
oder Chlorwasserstoff einsetzt und daß
man als Aminosäure Glycin, Alanin, Serin, Methionin,
6-Aminocapronsäure oder Tyrosin zum Einsatz bringt.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/112,742 US4987237A (en) | 1983-08-26 | 1987-10-22 | Derivatives of monophosphoryl lipid A |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE3836006A1 true DE3836006A1 (de) | 1989-05-03 |
| DE3836006C2 DE3836006C2 (de) | 1996-07-11 |
Family
ID=22345625
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE3836006A Expired - Lifetime DE3836006C2 (de) | 1987-10-22 | 1988-10-21 | Monophosphoryllipid-A-Derivate, Verfahren zur Herstellung von Monophosphoryllipid-A-Derivaten und Verwendung von Monophosphoryllipid-A-Derivaten |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4987237A (de) |
| JP (1) | JPH01146891A (de) |
| BE (1) | BE1003250A5 (de) |
| CA (1) | CA1308711C (de) |
| CH (1) | CH676715A5 (de) |
| DE (1) | DE3836006C2 (de) |
| FR (1) | FR2622192A1 (de) |
| GB (1) | GB2211502B (de) |
| IT (1) | IT1230592B (de) |
| NL (1) | NL8802595A (de) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0466838A1 (de) * | 1989-07-21 | 1992-01-22 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Lipid-a-derivate sowie deren verwendungen |
| EP0748327A1 (de) * | 1994-02-28 | 1996-12-18 | The University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Struktur eines lipids a und ein dieses verwendende verfahren |
Families Citing this family (53)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0482068A1 (de) * | 1989-07-14 | 1992-04-29 | American Cyanamid Company | Cytokin- und hormonträger zur verwendung bei konjugatimpfstoffen |
| US5498708A (en) * | 1989-07-18 | 1996-03-12 | Montefiore Medical Center | Method of synthesizing polyesters |
| US5278300A (en) * | 1990-04-12 | 1994-01-11 | Japan Tobacco, Inc. | 4,6-o-hydroxyphosphoryl-glucosamine derivatives |
| US5653974A (en) * | 1990-10-18 | 1997-08-05 | Board Of Regents,The University Of Texas System | Preparation and characterization of liposomal formulations of tumor necrosis factor |
| US5164375A (en) * | 1991-09-27 | 1992-11-17 | Merck & Company, Inc. | Antifungal agent |
| US6218166B1 (en) | 1994-12-09 | 2001-04-17 | John Wayne Cancer Institute | Adjuvant incorporation into antigen carrying cells: compositions and methods |
| US5681824A (en) * | 1995-06-05 | 1997-10-28 | Eisai Co., Ltd. | Substituted liposaccharides useful in the treatment and prevention of endotoxemia |
| US6290971B1 (en) * | 1995-06-15 | 2001-09-18 | Aventis Pasteur Limited | Adjuvant compositions comprising a mineral salt and another immunostimulating compound |
| GB9706957D0 (en) * | 1997-04-05 | 1997-05-21 | Smithkline Beecham Plc | Formulation |
| GB9820525D0 (en) * | 1998-09-21 | 1998-11-11 | Allergy Therapeutics Ltd | Formulation |
| GB0000891D0 (en) * | 2000-01-14 | 2000-03-08 | Allergy Therapeutics Ltd | Formulation |
| US20040002068A1 (en) | 2000-03-01 | 2004-01-01 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the detection, diagnosis and therapy of hematological malignancies |
| CN1606446A (zh) | 2000-05-19 | 2005-04-13 | 科里克萨有限公司 | 用单糖和二糖类化合物预防和治疗传染病和其他疾病的方法 |
| US20030139356A1 (en) * | 2001-05-18 | 2003-07-24 | Persing David H. | Prophylactic and therapeutic treatment of infectious and other diseases with mono- and disaccharide-based compounds |
| US20030138769A1 (en) * | 2000-08-16 | 2003-07-24 | Birkett Ashley J. | Immunogenic HBc chimer particles having enhanced stability |
| US20030175863A1 (en) * | 2001-08-15 | 2003-09-18 | Birkett Ashley J. | Influenza immunogen and vaccine |
| US20030185858A1 (en) * | 2001-08-15 | 2003-10-02 | Birkett Ashley J. | Immunogenic HBc chimer particles stabilized with an N-terminal cysteine |
| US7361352B2 (en) * | 2001-08-15 | 2008-04-22 | Acambis, Inc. | Influenza immunogen and vaccine |
| US6911434B2 (en) * | 2002-02-04 | 2005-06-28 | Corixa Corporation | Prophylactic and therapeutic treatment of infectious and other diseases with immunoeffector compounds |
| JP2005516980A (ja) * | 2002-02-04 | 2005-06-09 | コリクサ コーポレイション | 新規な免疫エフェクター化合物 |
| AU2003213640A1 (en) * | 2002-02-28 | 2003-09-16 | Corixa Corporation | Methods of modulating dendritic cells using adjuvants |
| US20030224013A1 (en) * | 2002-04-19 | 2003-12-04 | Cole Garry T. | Methods for protection against Coccidioides spp. infection using Coccidioides spp. urea amidohydrolase (Ure) protein |
| WO2004005308A2 (en) | 2002-07-08 | 2004-01-15 | Corixa Corporation | Processes for the production of aminoalkyl glucosaminide phosphate and disaccharide immunoeffectors, and intermediates therefor |
| ZA200505302B (en) | 2003-01-06 | 2007-03-28 | Corixa Corp | Certain aminoalkyl glucosaminide phosphate compounds and their use |
| US7960522B2 (en) | 2003-01-06 | 2011-06-14 | Corixa Corporation | Certain aminoalkyl glucosaminide phosphate compounds and their use |
| EP1449535B1 (de) * | 2003-02-18 | 2006-05-03 | Clinique La Prairie Research SA | Zusammensetzungen enthaltend fötales Hämoglobin und bakterielles Endotoxin und fakultativ zusätzliche fötale Leberkomponenten |
| WO2006073921A2 (en) * | 2004-12-30 | 2006-07-13 | The Rockefeller University | Compositions and methods for enhanced dendritic cell maturation and function |
| US20060210590A1 (en) | 2005-02-03 | 2006-09-21 | Alk-Abello A/S | Minor allergen control to increase safety of immunotherapy |
| US7622128B2 (en) * | 2005-12-13 | 2009-11-24 | University Of Washington | Porphyromonas gingivalis 1435/1449 LPS as an immune modulator |
| US20090181078A1 (en) * | 2006-09-26 | 2009-07-16 | Infectious Disease Research Institute | Vaccine composition containing synthetic adjuvant |
| LT2484375T (lt) | 2006-09-26 | 2018-07-10 | Infectious Disease Research Institute | Vakcinos kompozicija, turinti sintetinio adjuvanto |
| BRPI0815008B8 (pt) | 2007-08-02 | 2021-05-25 | Biondvax Pharmaceuticals Ltd | vacinas multiméricas com múltiplos epítopos contra influenza |
| US20090215908A1 (en) * | 2007-09-24 | 2009-08-27 | Reliance Life Sciences Pvt. Ltd. | Toll like receptor (tlr) signaling antagonist |
| US20090215710A1 (en) * | 2007-09-24 | 2009-08-27 | Reliance Life Sciences Pvt. Ltd. | Carbohydrate based toll-like receptor (tlr) antagonists |
| CA2744739A1 (en) | 2007-12-03 | 2009-06-11 | President And Fellows Of Harvard College | Chlamydia antigens |
| BRPI1011072B1 (pt) | 2009-06-05 | 2021-09-28 | Infectious Disease Research Institute | Composto de gla, composições de vacina e farmacêutica compreendendo dito composto, bem como uso dos mesmos para estimular, induzir ou acentuar uma resposta imune em um indivíduo |
| AU2011360572B2 (en) | 2011-02-22 | 2017-03-02 | Biondvax Pharmaceuticals Ltd. | Multimeric multiepitope polypeptides in improved seasonal and pandemic influenza vaccines |
| MX350795B (es) | 2011-04-08 | 2017-09-19 | Inmune Design Corp | Composiciones inmunogenicas y metodos para utilizar las composiciones para inducir respuestas inmunes humorales y celulares. |
| GB201106802D0 (en) | 2011-04-21 | 2011-06-01 | Allergy Therapeutics Ltd | Process for preparing vaccine composition |
| PL2850431T3 (pl) | 2012-05-16 | 2018-09-28 | Immune Design Corp. | Szczepionki przeciwko HSV-2 |
| AU2014214844B2 (en) | 2013-02-07 | 2017-12-14 | Children's Medical Center Corporation | Protein antigens that provide protection against pneumococcal colonization and/or disease |
| EP2958935B1 (de) | 2013-02-20 | 2019-07-03 | Bergen Teknologioverforing AS | Impfstoff |
| BR112015025709A2 (pt) | 2013-04-18 | 2017-07-18 | Immune Design Corp | monoterapia com gla para uso em tratamento de câncer |
| US9463198B2 (en) | 2013-06-04 | 2016-10-11 | Infectious Disease Research Institute | Compositions and methods for reducing or preventing metastasis |
| EP3632458A1 (de) | 2013-07-26 | 2020-04-08 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Verbindungen und pharmazeutische zusammensetzungen zur behandlung von bakterieninfektionen |
| WO2016180852A1 (en) | 2015-05-12 | 2016-11-17 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods for preparing antigen-specific t cells from an umbilical cord blood sample |
| EP3681534A1 (de) | 2017-09-13 | 2020-07-22 | Sanofi Pasteur | Immunogene zusammensetzung für humanes cytomegalovirus |
| TW201946650A (zh) | 2018-03-12 | 2019-12-16 | 美商詹森藥物公司 | 針對腹內感染之疫苗 |
| EP3841111A1 (de) | 2018-08-24 | 2021-06-30 | Vestlandets Innovasjonsselskap AS | Hitzestabile enterotoxin-mutanten als antidiarrhöische impfantigene |
| KR20220107166A (ko) | 2019-10-02 | 2022-08-02 | 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이. | 스타필로코커스 펩티드 및 사용 방법 |
| JP7485771B2 (ja) | 2020-01-16 | 2024-05-16 | ヤンセン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド | ＦｉｍＨ変異体、その組成物、及びその使用 |
| KR20230125842A (ko) | 2021-01-12 | 2023-08-29 | 얀센 파마슈티칼즈, 인코포레이티드 | FimH 돌연변이체, 이를 포함하는 조성물 및 이의 용도 |
| KR20230164108A (ko) | 2021-04-01 | 2023-12-01 | 얀센 파마슈티칼즈, 인코포레이티드 | E. coli O18 생물접합체의 생산 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4436727A (en) * | 1982-05-26 | 1984-03-13 | Ribi Immunochem Research, Inc. | Refined detoxified endotoxin product |
| US4436728A (en) * | 1982-05-26 | 1984-03-13 | Ribi Immunochem Research, Inc. | Refined detoxified endotoxin product |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0414725Y2 (de) * | 1980-09-30 | 1992-04-02 | ||
| JPS62129293A (ja) * | 1985-11-28 | 1987-06-11 | Toho Yakuhin Kogyo Kk | 親水性のリピドａ単糖類縁体 |
| JPS62195396A (ja) * | 1986-02-20 | 1987-08-28 | Toho Yakuhin Kogyo Kk | 親水性及び疎水性の基を置換したりピドａ単糖類縁体 |
-
1987
- 1987-10-22 US US07/112,742 patent/US4987237A/en not_active Expired - Lifetime
-
1988
- 1988-10-14 CA CA000580545A patent/CA1308711C/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-18 GB GB8824330A patent/GB2211502B/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-20 BE BE8801207A patent/BE1003250A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1988-10-21 DE DE3836006A patent/DE3836006C2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-10-21 IT IT8822399A patent/IT1230592B/it active
- 1988-10-21 FR FR8813812A patent/FR2622192A1/fr active Granted
- 1988-10-21 CH CH3921/88A patent/CH676715A5/de not_active IP Right Cessation
- 1988-10-21 NL NL8802595A patent/NL8802595A/nl active Search and Examination
- 1988-10-22 JP JP63265285A patent/JPH01146891A/ja not_active Withdrawn
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4436727A (en) * | 1982-05-26 | 1984-03-13 | Ribi Immunochem Research, Inc. | Refined detoxified endotoxin product |
| US4436728A (en) * | 1982-05-26 | 1984-03-13 | Ribi Immunochem Research, Inc. | Refined detoxified endotoxin product |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| Cancer Immunol., Immunother, 1979, 7, 43-58 * |
| GREEN, T. W.: "Protective Groups in Organic Synthesis", New York, John Wiley & Sons, 1981, S. 349 * |
| J. Carbohydr. Chem, 1971, 5, 371 * |
| J. Infect. Dis., 1973, 128, 543 * |
| J.Biol. Resp. Mod., 1984, 3, 1-9 * |
| Organic Syntheses, 1984, 63, S. 171 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0466838A1 (de) * | 1989-07-21 | 1992-01-22 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Lipid-a-derivate sowie deren verwendungen |
| EP0466838A4 (de) * | 1989-07-21 | 1995-02-22 | Wisconsin Alumni Res Found | |
| EP0748327A1 (de) * | 1994-02-28 | 1996-12-18 | The University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Struktur eines lipids a und ein dieses verwendende verfahren |
| EP0748327A4 (de) * | 1994-02-28 | 1997-06-18 | Univ Georgia Res Found | Struktur eines lipids a und ein dieses verwendende verfahren |
| US5952313A (en) * | 1994-02-28 | 1999-09-14 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | LPS antagonists and methods of making and using the same |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CH676715A5 (de) | 1991-02-28 |
| GB8824330D0 (en) | 1988-11-23 |
| FR2622192A1 (fr) | 1989-04-28 |
| GB2211502B (en) | 1992-02-19 |
| NL8802595A (nl) | 1989-05-16 |
| FR2622192B1 (de) | 1994-11-10 |
| JPH075623B1 (de) | 1995-01-25 |
| JPH01146891A (ja) | 1989-06-08 |
| IT1230592B (it) | 1991-10-28 |
| GB2211502A (en) | 1989-07-05 |
| IT8822399A0 (it) | 1988-10-21 |
| DE3836006C2 (de) | 1996-07-11 |
| CA1308711C (en) | 1992-10-13 |
| BE1003250A5 (fr) | 1992-02-11 |
| US4987237A (en) | 1991-01-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE3836006C2 (de) | Monophosphoryllipid-A-Derivate, Verfahren zur Herstellung von Monophosphoryllipid-A-Derivaten und Verwendung von Monophosphoryllipid-A-Derivaten | |
| DE2728324C2 (de) | ||
| DE2655500C2 (de) | ||
| EP0025495B1 (de) | Lipophile Muramylpeptide, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung | |
| EP0519327B1 (de) | N-Acyl-S-(2-hydroxyalkyl)-cysteine, deren Herstellung sowie deren Verwendung als Zwischenprodukte zur Herstellung von synthetischen Immunadjuvantien und synthetischen Impfstoffen | |
| DE3122479A1 (de) | N-(vinblastin-23-oyl)-aminosaeurederivate | |
| EP0114787A2 (de) | Neue Peptidderivate | |
| DD155984A5 (de) | Verfahren zur herstellung von muramylpeptiden | |
| HU193151B (en) | Process for producing ganglyoside derivatives and pharmaceutical compositions containing them as active agents | |
| EP0014815A2 (de) | Peptidderivate, Verfahren zu deren Herstellung und Zwischenprodukte sowie pharmazeutische Präparate mit einer dieser Verbindungen | |
| DE4411025A1 (de) | Lipopeptid-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung | |
| JPH02200691A (ja) | リゾスフィンゴ脂質誘導体 | |
| DE60027905T2 (de) | Glycokonjugate, glycoaminosäure, deren zwischenprodukte, und ihre verwendung | |
| DE60115051T2 (de) | Immunologische adjuvans verbindungen | |
| DE2718010C2 (de) | ||
| EP0483465A1 (de) | Langkettige Di(acyloxy)dialkylsilane, Di(acyloxy)diarylsilane, Di(acyloxy)dialkoxysilane und Tetra(acyloxy)silane, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung zur Herstellung von Vesikeln, aus ihnen hergestellte Vesikel (Siosomen) und deren Verwendung als träger von Wirkstoffen | |
| EP0060999B1 (de) | Galactopyranoside Verbindungen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Antigene oder Immunadsorbentien | |
| EP0316279A2 (de) | Veresterte azacyclische Hydroxyverbindungen | |
| DD210687A5 (de) | Verfahren zur herstellung von (+)-cyanidan-3-ol-derivaten | |
| DE3024355A1 (de) | Neue dipeptide, verfahren zu deren herstellung und diese enthaltende arzneimittel | |
| DE2912865A1 (de) | Acyl-n-acetylmuramylpeptidderivat- antigenkonjugat und verfahren zu seiner herstellung | |
| EP0267179A2 (de) | Neue Cystinverbindungen, ihre Herstellung und Verwendung | |
| DE3245269A1 (de) | N-(vinblastinoyl-23)-derivate von aminosaeuren, ihre herstellung und therapeutische anwendung | |
| WO2004083223A1 (de) | Proteinbindende derivate von platinkomplexen mit cyclobutan-1,1-dicarboxylatliganden | |
| CH640217A5 (en) | Polypeptides, their preparation and pharmaceutical preparations |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| OP8 | Request for examination as to paragraph 44 patent law | ||
| D2 | Grant after examination | ||
| 8364 | No opposition during term of opposition |