DE3490427T

DE3490427T - 1,23-Dihydroxyvitamin-D-Verbindungen

Info

Publication number: DE3490427T
Application number: DE19843490427
Authority: DE
Inventors: Hector F. Deluca; Seok-Ho Madison Wis. Lee; Heinrich K. Schnoes
Original assignee: Wisconsin Alumni Research Foundation
Current assignee: Wisconsin Alumni Research Foundation
Priority date: 1983-09-14
Filing date: 1984-06-13
Publication date: 1986-09-18
Also published as: GB2156354A; GB2156354B; GB8711313D0; JPH0437074B2; GB8510513D0; JPS60502203A; WO1985001291A1; EP0157781B1; GB2190085A; GB2190085B; EP0157781A1; US4512925A; DE3490427C2; EP0157781A4

Description

Beschreibung

Die Erfindung betrifft hydroxylierte Vitamin D Analoga. Insbesondere betrifft die Erfindung neue 1o6,23-Dihydroxyvitamin D Verbindungen und Verfahren und neue Zwischenprodukte, die zu ihrer Herstellung geeignet sind.

Zur Regulierung des Calcium- und Phosphatmetabolismus beim Tier oder Menschen und zur Regulierung des normalen Wachstums, der normalen Entwicklung und Erhaltung von Knochen sind die Metaboliten von Vitamin D essentielle Wirkstoffe. Beim normalen Tier oder Menschen werden diese die Knochen betreffenden Prozesse durch 1oi,,25-Dihydroxyvitamin D₃ reguliert, einen Metaboliten, der aus Vitamin D-. durch Hydroxylierung am Kohlenstoffatom 25 und dann am Kohlenstoffatom 1 gebildet wird. Diese Entdeckung hat große Aktivität ausgelöst, die auf die Herstellung des natürlichen Metaboliten und seiner Strukturanaloga gerichtet war. Die Ergebnisse dieser Anstrengungen sind in mehreren Übersichtsartikeln zusammengefaßt (z.B. Yakhimovich, Russian Chem. Rev. _49_, 371 (1980); DeLuca et. al., Topics in Current Chemistry, Band 83, S.1 (1979); Ann. Rev, Biochem. _52_, 411 (1983)). Wichtige Beispiele der synthetischen Analoga des natürlichen Hormons umfassen 1oC-Hydroxyvitamin D₃ (US-PS 3 741 996), 1<*.-Hydroxyvitamin D₂ (US-PS 3 907 843), 3-Deoxy-1 <* ,25-dihydroxyvitamin D₃ (US-PS 4 264 512), 10,19-Dihydro-10^-hydroxyvita-

min D₃~Verbindungen (US-PS 4 159 326), 1 ,5C.,2 4-Dihydroxyvitamin D₃ (US-PS 4 022 891), 24,24-Difluoro-1 cL ,25-dihydroxyvitamin D₃ (US-PS 4 226 788, 4 284 577), 26,26,26,27,27,27-Hexafluoro-1cCf25-dihydroxyvitamin D₃ (US-PS 4 358 406) und andere Seitenketten- oder Ring-A-Fluoranaloga (US-PSen 4 069 321; 4 224 230; 4 307 025).

Eine Klasse von Analoga, die bisher nicht bekannt ist, sind die 1 cHr23-Dihydroxyvitamin D-Verbindungen. Diese Verbindungen, die durch Hydroxysubstitution an den Kohlenstoffatomen 1 und 23 (anstelle von Kohlenstoffatom 25) des Vitamin D-Gerüstes gekennzeichnet Verfahren hergestellt, wie sie hier beschrieben sind. Die erfindungsgemäßen neuen Verbindungen können durch die im folgenden gezeigten Formeln dargestellt werden!

und

in denen R₁ und R„ aus der Gruppe ausgewählt sind, die aus Wasserstoff und Alkylresten besteht, und in der X-, X« und X₃ aus Wasserstoff oder einer Hydroxyschutzgruppe ausgewählt sind.

Wichtige Beispiele solcher Analoga sind die Verbindungen, in denen R₁ ein Wasserstoffatom ist und R_ ein Isobutylrest ist (d.h. 1 OC,2 3-Dihydroxyvitamin D₃ und sein 5,6-trans-Iso-

mer), oder in denen R₁ ein Wasserstoffatom ist und R₂ ein Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Isopropyl- oder Butylrest ist, wie auch die Verbindungen, in denen sowohl R₁ und R- eine Alkylgruppe bedeutet, z.B. in denen Rj und R₂ Methylreste sind, oder in denen R₁ ein Methyl- und R- ein Ethyl-, Propyl-, Butyl- oder Isobutylrest ist.

In dieser Beschreibung und in den Ansprüchen bezeichnet das Wort "Alkylrest" einen niederen Kohlenwasserstoffrest mit bis 5 Kohlenstoffatomen in allen isomeren Formen, z.B. einen Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Butyl-, Isopropyl-, Isobutyl-, sec-Butyl-, Pentylrest usw. Eine Hydroxyschutzgruppe ist jede der bekannten organischen Gruppen, die zum Schutz von Hydroxyfunktionen verwendet werden, z.B. eine Acyl-, Alkylsilyl-, Methoxy-methyl- oder Tetrahydropyranylgrupoe. Von besonderem Interesse sind die Acylschutzgruppen, d.h. Alkanoylgruppen mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen, wie die Formyl-, Acetyl-, Propionylgruppe usw. oder aromatische Acylgruppen wie die Benzoylgruppe oder halogen-, nitro- oder alkylsubsitutierte Benzoylgruppen, oder Carboxyalkanoylgruppen mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, wie Oxalyl-, Malonyl-, Succinyl-, Valeryl-, Adipyl- oder Diglycolylgruppen.

Die oben bezeichneten Analoga sind also dadurch gekennzeichnet, daß sie die wichtige 1oC-Hydroxygruppe (oder die geschützte Hydroxygruppe) besitzen, und durch Seitenkettenstrukturen, die eine 23-Hydroxyfunktion (oder geschützte Hydroxyfunktion) aufweisen, welche primär, sekundär oder tertiär sein kann, d.h. die Kohlenwasserstoffsubstituenten R₁ und R₂ am Kohlenstoffatom 23 können beide Wasserstoffatome, oder ein Wasserstoffatom und ein Alkylrest oder beide Alkylreste sein, wie im folgenden gezeigt ist:

_oder f ■ OH _oder ^ OH

- \* - 3490A27

Es ist auch darauf hinzuweisen, daß, wenn in den obigen Strukturen die beiden Substituenten am Kohlenstoff 23 beide Alkylreste sind, dann diese Alkylgruppen identisch oder verschieden sein können, z.B. können R₁ und R„ beide Methyl-, Ethyl-, Isopropyl-, Butylgruppen usw. bedeuten, oder sie können jede Kombination aus zwei verschiedenen Substituenten bedeuten, wie Methyl- und Ethyl-, Methyl- und Isopropyl-, Ethyl- und Propylgruppe, usw.

In den erfindungsgemäßen Verbindungen befindet sich die Seitenkettenhydroxygruppe, welche sich in dem natürlichen Metaboliten 1OC,25-Dihydroxyvitamin D₃ in der Position befindet, in der Position 23. Trotz dieser bedeutenden strukturellen Änderung wurde gefunden, daß die erfindungsgemäßen 1,23-Dihydroxyanaloga ausgeprägte biologische Aktivität zeigen, was sich insbesondere in ihrer hohen Bindungsaktivität für das Cytosolrezeptorprotein im Darm ausdrückt, einer Eigenschaft, die bekanntermaßen für hohe in vivo Aktivität wichtig ist.

Die 1,23-Dihydroxyverbindungen können durch eine Reihe von Verfahrensstufen hergestellt werden, die im folgenden und in den Verfahrensschemata ausführlicher beschrieben sind.

Die Verbindungen können aus einem üblichen Ausgangsmaterial hergestellt werden, wie dem Cyclovitamin-D-23-Aldehyd der Struktur _1ja, die im Verfahrensschema I gezeigt ist. In dieser Formel bedeutet der Rest Z einen niederen Kohlenwasserstoff rest (Alkylrest), wie er oben definiert ist. Im allgemeinen und geeigneterweise bedeutet Z eine Methylgruppe, aber Homologe, in denen Z z.B. eine Ethyl-, Propyl-, Isopropylgruppe usw. ist, sind auch geeignete Ausgangsmaterialien für das vorliegende Verfahren. Dieses Ausgangsmaterial kann in die angestrebten, oben angegebenen Endprodukte durch drei hauptsächliche Verfahrensstufen

umgewandelt werden: a) Einführung der erwünschten C-23 Substituenten (R-, R-) durch Alkylierung oder Reduktion; b) Einführung der C-1-Hydroxyfunktion und c) .Solvolyse, um die 5,6-cis und 5,6-trans-1 fc£,23-Hydroxyvitamin-D-Produkte zu erhalten. Im Prinzip können diese drei Hauptverfahrensstufen in jeder beliebigen Reihenfolge ausgeführt werden (z.B. Einführung des C-2 3-Substituenten gefolgt von 1 OC-Hydroxylierung gefolgt von Solvolyse, oder 1^-Hydroxylierung gefolgt von Solvolyse gefolgt von Einführung des 23-Substituenten usw.), und die Wahl einer spezifischen Stufenfolge ist eine Frage der Bequemlichkeit, die zum Teil durch die Natur der besonderen Zielverbindung bestimmt wird, die hergestellt werden soll, wie für den Fachmann offensichtlich ist.

Zum Beispiel ergibt die 1oL-Hydroxylierung der Verbindung 1 a mit SeOj, und einem Hydroperoxid (z.B. H„0„, oder einem Alkylhydroperoxid) gemäß der Vorschrift der US-PS 4 195 027 das 1 ÖL-Hydroxyzwischenprodukt 2a (X₁=H). Diese Verbindung wird dann solvolysiert, vorzugsweise in einem Medium, das eine organische Carbonsäure enthält (z.B. Essig-, Ameisen-, Propionsäure, vgl. die US-PS 4 260 549), um als Mischung die 5,6-cis-Vitamin-D-Verbindung entsprechend der Struktur 3_a (X.=H; X₂=Acyl) und die 5,6-trans-Verbindung der

Struktur 4a (X₁=H, X_o=Acyl) zu erhalten, wobei die — ι ζ

Acylgruppe (X„) der Acyleinheit der bei der Solvolysereaktion verwendeten Säure entspricht. Diese eis- und trans-Verbindungen können an dieser Stelle getrennt werden (z.B. durch Chromatographie unter Verwendung von Dünnschichtplatten oder durch hochauflösende Säulen), um die Verbindungen 3_a und £a einzeln zu erhalten. Diese C-3-Monoacylate können direkt in der nächsten Stufe des Verfahrens verwendet werden, oder, falls erwünscht, können die 3-0-Acylgruppen in den Verbindungen 3_a oder 4_a durch basische Hydrolyse (z.B. 5% bis 10%-ige KOH) entfernt

? ■■;■■ ^:: j

werden, um jte und ^a_- zu erhalten, wobei X₁ und X_ = H, oder die freie 1-Hydroxygruppe kann unter konventionellen Bedingungen acyliert werden, um J3a. ^und A§. ^zu liefern, wobei X₁ und X₂ Acylgruppen sind, die gleich oder verschieden sein können.

Die Behandlung der Verbindung ^a. (in der X- und X„ eine Acylgruppe oder H sein können) mit einem Reduktionsmittel (z.B. NaBH. oder LiAlH. oder einem ähnlichen Reduktionsmittel) liefert eines der angestrebten Analoga, nämlich die Verbindung ^b (in der R₁ ein Wasserstoffatom ist und X₁ und X₂ in Abhängigkeit von der Natur von ^a_- und des verwendeten Reduktionsmittels eine Acylgruppe oder ein Wasserstoffatom sein können und X, ein Wasserstoffatom ist). Analoge Reduktion der trans-Verbindung 4a ergibt in analoger Weise die Verbindung _4b, in der R₁ ein Wasserstoffatom bedeutet (siehe Verfahrensschema I). Alle in den so hergestellten Verbindungen Jb oder jlb_ vorhandenen Acylgruppen können durch einfache Basenhydrolyse entfernt werden, um die entsprechenden freien Hydroxyverbindungen zu erhalten.

Eine geeignete alternative Sequenz zu den obigen Verbindungen ist z.B. die Reduktion von Jji, um das Zwischenprodukt 1b (R₁=H) zu erhalten, gefolgt von 1 (^-Hydroxylierung zu Zb (R₁=H) und Solvolyse und abschließende Acylhydrolyse. Gleichermaßen kann eine Sequenz, die die Reduktion von ^a. zu dem entsprechenden primären C-23-Alkohol (^b, R₁=H) gefolgt von Solvolyse beinhaltet, wirkungsvoll verwendet werden.

Die Herstellung der 23-Monoacylanaloga kann durch Alkylierung des Zwischenprodukts 3a. (X₁ und X₂=Acyl oder H) mit einem Alkyl-Grignard-Reagenz in einem Etherlösungsmittel bei einer Temperatur im Bereich von 0° bis zum Rückfluß oder mit den entsprechenden Alkyl-Lithium-Reagenzien

(Methyllithium, Ethyllithium usw.) erzielt werden, wobei die Analoga der allgemeinen Struktur Jb erhalten werden, in der R₁ eine Alkylgruppe ist, die durch das Grignard- oder Alkyl-Lithium-Reagenz eingeführt worden ist. Zum Beispiel:

„ ^ _(Ri=Propyl)
. ^ _{(Ri=Isopropyl)} ^ (R₁»Butyl)
_p ^ (R

In allen obigen Beispielen kann in der Verbindung 3<* ^xi X~ ein Wasserstoffatom oder eine Acylgruppe sein, während X₁, X„ und X₀ in dem Produkt vom Typ 3b alle Wasserstoffatome sind, da die Acylgruppen, (falls im Ausgangsmaterial vorhanden) während der Grignard-Reaktionsstufe entfernt werden.

Analoge Alkylierung der 5,6-trans-Verbindung ^a ergibt die 5,6-trans-1 ,23-Hydroxyanaloga der Struktur j[b, in der R₁ eine Alkylgruppe ist.

Wie in dem Verfahrensschema I gezeigt, können die C-23-A1-kylanaloga der Strukturen J3b oder Ah^ (in denen R..=Alkyl) in bequemer Weise auch auf einem alternativen Weg hergestellt werden. Zunächst ergibt eine Reaktion des Cyclovitamin D Ausgangsmaterials J_a mit dem geeigneten Grignard- oder Alkyllithiumreagenz das 23-Hydroxy-Cyclovitamin-Zwi-

s : -■■■-■ ■'.:.

~"~ 3A90A27

schenprodukt der Struktur 1b (in der R..=Alkyl und X^=H). Geeignete Grignard-Reagenzien sind z.B. Methylmagnesiumbromid, Ethylmagnesiumbromid, Propyl- und Isopropylmagnesiumbromid, Butyl- und Isobutylmagnesiumbromid oder sec.-Butylmagnesiumbromid, und die Verwendung solcher Reagenzien ergibt dann eine Reihe von 23-Hydroxyverbindungen der allgemeinen Struktur 1b, in der R₁ die durch das

Grignard-Reagenz eingeführte Alkylgruppe ist (d.h. eine Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Isopropyl-, Butyl-, Isobutyl- bzw. sec.-Butylgruppe).

Anschließend liefert 1 e>c-Hydroxylierung von JNd unter den oben genannten Bedingungen die entsprechende 1 tf.-23-Dihydroxycyclovitamin-D-Verbindung der Struktur Zb (in der R..=Alkyl und X. und X₃ Wasseratome sind). Solvolyse der Verbindung J2b unter Verwendung von Bedingungen, die den oben beschriebenen analog sind, ergibt die 3-0-Acylderivate der Verbindungen, die den Strukturen _3b und Ab^ entsprechen (R..=Alkyl, X₁ und X₃=H, X₂=Acyl), und zwar als Mischung. Die Trennung dieser Mischung liefert die Analoga _3b und das 5,6-trans-Analogon 4b in reiner Form (wobei R..=Alkyl, X₁ und X₃=H, X₂=Acyl). Acylhydrolyse ergibt dann die entsprechenden freien Hydroxyverbindungen. Falls erwünscht, kann die Mischung der 3-0-Acylderivate von 3t) und _4b, die durch Solvolysereaktion erhalten wird, auch direkt hydrolysiert werden, um eine Mischung aus J3k> und J^b (wobei X₁, X₂ und X₃=H) zu ergeben, die dann getrennt wird, um die angestrebte c_is-Verbindung 3b (R₁=AIkVl, X₁, X₃, X₃=H) und die trans-Verbindung 4h> (R^Alkyl, X₁, X₃, X₃=H) zu liefern.

Zur Herstellung von 1,23-Dihydroxyverbindungen, die eine tertiäre 23-Hydroxygruppe aufweisen, d.h. der Verbindungen, bei denen beide C-23-Substituenten R₁ und R₂ eine Alkylgruppe sind (und bei denen R₁ und R₂ gleich oder

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verschieden sein können), kann eine Erweiterung des obigen Verfahrens, die genauer in dem Verfahrensschema II angegeben ist, verwendet werden. Sie beinhaltet die Oxidation der sekundären 23-Hydroxygruppe in einem Cyclovitamin-D-Zwischenprodukt der allgemeinen Struktur JJd (in der R..=Alkyl und X₃=H), um das entsprechende 23-Keto-Zwischenprodukt zu erhalten, d.h. die Verbindungen der allgemeinen Struktur J_c, die im Verfahrensschema II gezeigt sind, in denen R₁ dieselbe Alkylgruppe ist, die in dem Vorläufer der Formel J_b vorhanden ist. Diese Oxidation wird mit milden Oxidantien erreicht, die für Umwandlungen von Hydroxy- in Ketofunktionen geeignet sind, z.B. mit Chromoxidreagenzien (z.B. Pyridiniumdichromat in Dimethylformamidlösung) oder einen Schwefeltrioxidpyridinkomplex in Dimethylsulfoxid und Triethylamin, und zwar ungefähr bei Raumtemperatur oder darunter. Man unterwirft dieses Ketozwischenprodukt der Struktur _1_c einer Reaktion mit einem Gridnard-Reagenz (Alkylmagnesiumhalogenxd) oder mit einem organometallischen Reagenz (Alkyllithium) unter Bedingungen, die denen für die Umwandlung von ^a nach J_b analog sind, und erhält dann ein tertiäres 23-Hydroxycyclovitaminzwischenprodukt, d.h. eine Verbindung der allgemeinen Struktur J_d, in der X₃ ein Wasserstoffatom und R- und R- beide eine Alkylgruppe bedeuten (wobei letztere in Abhängigkeit von der Natur von

R₁ in der Verbindung 1c und der Natur der Alkylgruppe in ι

dem Grignard-Reagenz oder dem organometallischen Reagenz, das für die Umwandlung von J_c zu J_d verwendet wird, gleich oder verschieden sein können).

Verfahrensschema I

CHO

Ια.

CHU

ο*.

CHO

ChO

Al

Verfahrensschema II

Zum Beispiel:

Ib (R₁=Me) ^ ₍ , M

^x ' ld '

jb _(R ^) j

^X ld (R₁=Me,

(R₁=Me) J₅ J-^J ^ropylMgB^

ld (R₁=Me, R₂=* Propyl)

(p ^) oxidati^ ^ j

ld (R₁=Me,

Ib (R=Ethyl) lc (R₁=EtHyI)

ld (R₁= thyl,

ld

Ib (R₁=PTOPyI) ^Si^tiv^ ie (R^ropyl)

,. _/n . ... oxidativ ' , ._ _T ,. sec. B>utyIMqBr Ib (R₁=ISOPrOPyI) i lc (R₁=IsOPrOPyI)

ld (RJ[SOPrOPy

R_=sec .Butyl)

Ib (R₁=BUtYl) ^idativ^ (_{R =Eu}tyl)

ld

(R₁=BUtYl) lc (R₁=BUtYl) —

J- ld

Q^^^¹^^ lc (R,=sec. Butyl) E.thvlMgBi;

ld (B₁' Butyl,

ld

Die 23-Hydroxyfunktion kann acyliert werden, um das entsprechende Acyloxyderivat (1d, wobei X,=Acyl) zu liefern, aber diese Acylierung ist für die folgenden Umwandlungen nicht erforderlich. Anschließende allylische Hydroxylierung der tertiären Hydroxyverbindung vom Typ _1_d (R. und R₂=Alkyl und X₃=Wasserstoff oder Acyl) am Kohlenstoffatom 1 unter Verwendung der oben erwähnten Bedingungen (SeO,,/Hydroperoxid) liefert dann die entsprechende

1 ö^-,23-Dihydroxycyclovitamin-D-Verbindung (oder die 23-Acylate) der Struktur 7Λ (R₁ und R₂=Alkyl). Weitere Umwandlung des letzteren Zwischenprodukts auf die oben für den Fall des sekundären 23-Hydroxyanalogons beschriebenen Weise, nämlich Solvolyse, um eine Mischung der 5,6-cis- und 5,6-trans-1,23-Dihydroxyvitamin-D-Verbindungen als 3-0-Acylate zu erhalten, Trennung dieser Mischung, um die reinen 3-0-Acylate (Verbindungen ^d und ^d, wobei X-=Wasserstoff, X₂=ACyI und X₃=Wasserstoff oder Acyl) zu erhalten, und Hydrolyse der Acylgruppen in der jeweiligen Verbindung, um das 1 eC/23-Dihydroxyvitamin-D-Analogon der Struktur _3d und die 5,6-trans-1 Oi-,23-Dihydroxyvitamin-D-Verbindung der Struktur ^d_ (in der R₁ und R~ eine Alkylgruppe bedeutet und in der X₁, X₂ und X₃ Wasserstoffatome sind) zu erhalten.

Wie im Verfahrensschema II gezeigt, kann das 23-Ketozwischenprodukt (J_c, R..=Alkyl) auch direkt 1ö6-hydroxyliert werden, um die Verbindung 2£ (R..=Alkyl, X₁=H) zu erhalten, und die Solvolyse dieses Materials gefolgt von Trennung der eis- und trans-Isortieren (^£ und £c) und Alkylierung der beiden schafft dann einen alternativen Weg zu den tertiären

2 3-Hydroxy produkt en (^d und _4d., wobei R₁ und R₂ Alkylreste sind) , während die Hydridreduktion von 2c_ oder ^£ die sekundären 23-Hydroxyverbindungen der Strukturen ^k bzw. ^b liefern würde (Verfahrensschema I), in denen R₁ eine

Alkylgruppe ist. Diese Verfahrensstufen werden in analoger Weise zu den schon oben beschriebenen äquivalenten Verfahrensstufen (d.h. der Umwandlung 1a -» 2a -j> 3a/4a usw.)ausgeführt.

Die in den vorhergehenden Abschnitten beschriebenen und in den Verfahrensschemata I und II ausgeführten Reaktionsfolgen liefern also die gesamte Reihe der 23-primären, sekundären oder tertiären 1^,23-Dihydroxyvitamin-D-Verbindungen, die durch die oben gezeigten allgemeinen Strukturen bezeichnet sind. Es ist darauf hinzuweisen, daß bestimmte der oben diskutierten Analoga, z.B. die 23-primären oder die 23-tertiären 1O£,23-Dihydroxyvitamin-D-Analoga auch in bequemer Weise aus einem alternativen Ausgangsmaterial hergestellt werden können, nämlich den 1oC-Hydroxyvitamin-D-23-Estern (1cL,3ß-Dihydroxy-24-nor-9,1O-seco-5,7,10(19)-cholatrien-23-säure-alkylester), die der nachfolgend gezeigten Struktur entsprechen:

Diese Ester sind bekannte Verbindungen (US-PS 4 209 634). Die Reduktion der 23-Esterfunktion in der oben gezeigten Verbindung mit, zum Beispiel, Lithiumaluminiumhydrid, erzeugt direkt den entsprechenden 23-primären Alkohol, d.h. das 1 OC,2 3-Dihydroxyvitamin-D-Analogon der Struktur Jk> (Verfahrensschema I), in der R₁, X₁, X„ und X₃ Wasser-

stoffatome sind.

Alternativ führt die Behandlung des oben gezeigten Esters mit einem Alkyl-Grignard-Reagenz zu dem 23-tertiären Alkohol, d.h. der 1 c»i-,23-Dihydroxyvitamin-D-Verbindung der

Struktur 3d (Verfahrensschema II), in der R₁ und R₀ beides — ι ζ

Alkylgruppen sind, und wobei in diesem Fall die beiden eingeführten Alkylgruppen notwendigerweise identisch sind.

Die so aus dem oben gezeigten 23-Ester hergestellten 5,6-cis-Vitamin 1 t?C23-Dihydroxyvitamin-D-Analoga können in die entsprechenden 5,6-trans-Isomeren (allgemeine Struktur 4b oder Ad) durch das jodkatalysierte Doppelbindungsisomerisierungsverfahren umgewandelt werden [Rec. Trav. Chim. Pays-Bas 78., 1004 (1969)].

Falls die hydroxy-geschützten Derivate der Produkte 31o, 4b, 3d oder Jd. für therapeutische oder anderen Anwendungen benötigt werden, können sie aus den freien Hydroxyverbindungen durch konventionelle Derivatisierungsreaktionen hergestellt werden, die dem Fachmann bekannt sind. Zum Beispiel wird eine Verbindung der Struktur Jb oder 3d, wobei X₁, X„ und X, Wasserstoffatome bedeuten, leicht acetyliert, um die entsprechenden 1,3,23-Triacetate zu ergeben, indem man mit Acetanhydrid in Pyridin behandelt, und andere Acylate von .3Jb und 3d. oder j4b und ^d werden auf ähnliche Weise durch Behandlung mit dem geeigneten Acylanhydrid oder Acylchlorid bei Raumtemperatur oder erhöhter Temperatur gemäß bekannten Verfahren hergestellt.

Weiterhin ist darauf hinzuweisen, daß die 3-O-Acylderivate der Verbindungen der allgemeinen Strukturen 3 und 4 (X₁ und X-,=H, X =Acyl) natürlich als Zwischenprodukt bei der Solvolysereaktion erhalten werden und das andere partiell oder vollständig acylierte Derivate der Endprodukte, falls

erwünscht, durch Verwendung von acylierten Zwischenprodukten bei dem Reaktionsverfahren erhalten werden können. Zum Beispiel kann das Zwischenprodukt J_b oder J_d (wobei R₁ und R₂ Alkylreste bedeuten und X₃=H) durch Standardmethoden zu dem 23-Acylderivat (Verbindung JJd oder JjJ, in der X₃=ACyI) acyliert werden, und aus diesen Zwischenprodukten werden nach Hydroxylierung zu 2b_ bzw. 2Λ (X₁=H, X₃=ACyI) und Solvolyse die 3,23-Diacy!verbindungen ^b_ oder J3d. (wobei X„ und X₃ Acylgruppen sind, die gleich oder verschieden sein können, und X₁=H) und 4b oder 4d (X₀ und X-=Acyl, X₁=H) erhalten. In ähnlicher Weise liefert die Acylierung der 23-Acylate von 2b oder _2d (X₁=H, X₃=ACyI) zu dem entsprechenden 1,23-Diacylzwischenprodukt (Verbindungen 2k> oder 2ä_, wobei X- und X₃=ACyI) nach der Solvolyse die 1,3,23-tri-O-acylierten Produkte der Strukturen 3Jb' ^b oder 3d, 4d. Alternativ ergibt die selektive Acylierung der Dihydroxyverbindungen 2b. oder 2a. (X₁ und X₃=H) zu dem 1-O-Acylzwischenprodukt {2b. oder 7Λ, wobei X₁=ACyI, X₃=H) gefolgt von Solvolyse die 1,3-Di-O-acylderivate (X₁ und X_o=Acyl, X-,=H) der Endprodukte (3b, 4b, 3d, 4d) und die analogen 1,3-Diacylate können durch die 1,3-Diacylierung der Verbindungen vom Typ 3u3. und 3_c (oder ^a. und ^c) gefolgt von Borhydridreduktion der Aldehyd- oder Ketogruppe erhalten werden.

Es ist auch darauf hinzuweisen, daß, wenn immer die Substituenten R₁ und R₂ an dem Kohlenstoffatom 23 in den oben beschriebenen Verbindungen nicht identisch sind, diese Verbindungen im allgemeinen als eine Mischung der Diastereomeren (der 23R und 23S-Epimeren) vorliegen und daher die Produkte 31> und ^b (oder 3_d und 4<|) oft als Mischungen von Epimeren erhalten werden, die durch die R oder £3 Stereochemie am Kohlenstoffatom 23 gekennzeichnet sind. Falls erwünscht, können diese Epimeren getrennt werden (vorzugsweise durch hoch—auflösende Flüssigchromatographie auf der Stufe der Endprodukte), um das 2 3R und das 23S^ Epimere in reiner Form zu erhalten. Zum Beispiel

4f

ergibt die Reaktion des Aldehyds J_a mit Isobutylmagnesiumbromid das Cyclovitamin-D-Zwischenprodukt _1Jd (R..=Isobutyl) als eine Mischung der 23R und 23S-Epimeren. Weitere Umwandlung dieser Mischung durch 1 «^"Hydroxylierung, Solvolyse und Acylhydrolyse wie oben beschrieben liefert dann vier Verbindungen, und zwar die 23R und Si Epimeren von 3b (R..=Isobutyl) und die 23R und S_ Epimeren von 4Jd (R..=Isobutyl). Diese Verbindungen können getrennt werden, vorteilhafterweise durch Hochdruckflüssigchromatographie, um jedes der Epimeren in reiner Form zu erhalten. In vielen pharmazeutischen Anwendungen können jedoch diese C-23-Epimeren von Jb und 4k> (oder 3d, und _4d.) auch als epimere Mischungen verwendet werden, und die Trennung ist nur dann wesentlich, wenn die reinen 23-R und S-Isomeren gewünscht werden.

Das Ausgangsmaterial, der Cyclovitamin-D-2 3-Aldehyd der Struktur J_a, der in dem Verfahrensschema I verwendet wird, ist selbst eine neue Verbindung. Seine Herstellung wird im folgenden anhand eines Ausführungsbeispiels beschrieben.

Die erfindungsgemäßen 1 oC,23-Dihydroxyvitamin-D-Analoga zeigen hohe Bindungsaffinität für das 1 OL-, 25-Dihydroxyvitamin-D^-Rezeptorprotein, das im Darm auftritt, und andere auf Vitamin D reagierende Gewebe. Die vorliegenden Anzeichen weisen darauf hin, daß die wirksame Bindung eines Vitamin-D-Metaboliten oder eines Analogon an dieses Protein eine Schlüsselstufe für das Auftreten von jLn vivo Aktivität ist. Konsequenterweise weist die bemerkenswerte Bindungsstärke der erfindungsgemäßen Verbindungen darauf hin, daß sie wirkungsvoll als Ersatzstoffe für die bekannten Vitamin-D-Metaboliten zur Regulierung des Calcium- und Phosphormetabolismus in Säugetieren und zur Verhinderung oder Heilung von Knochenkrankheiten verwendet werden können.

Die vorliegende Erfindung wird genauer anhand der folgenden Beispiele beschrieben, die nur der Veranschaulichung dienen sollen. In den Beispielen beziehen sich die chemischen Produkte, die durch Zahlen bezeichnet sind (z.B. Verbindung 1a, 2a, 3b, 4d usw.) auf die Strukturen, die in gleicher Weise in den Verfahrensschemata I oder II numeriert sind. Alle in den Verfahrensschemata I und II gezeigten Produkte und Zwischenprodukte sind neue Verbindungen.

Beispiel 1

Herstellung des Ausgangsmaterials Cyclovitamin-D-23-Aldehyd der Struktur J_a (Z=Me) :

Eine ethanolische etherische Lösung von Diazomethan (CH₂N₂), erzeugt aus N-Methyl-N-nitroso-p-toluolsulfonamid (CH₃CgH₄SO₂N(CH₃)NOf Diazald), wurde tropfenweise zu einer Suspension von (20S_)-3ß-Acetoxy-5-pregnen-20-carbonsäure (10,0 g, 25,7 mmol; Schmelzpunkt 228-231°C) in 1:9 Ethanol-Ether bei Raumtemperatur gegeben, bis alle Feststoffe aufgelöst waren und eine schwach gelbe Farbe aufgrund eines Überschusses an Diazomethan bestehen blieb. Das überschüssige Diazomethan wurde mit einem Stickstoffstrom entfernt, bis die Lösung farblos wurde. Die Entfernung des Lösungsmittels lieferte den benötigten Methylester (20S_)-3ß-Acetoxy-5-pregnen-20-carbonsäuremethylester (10,3 g; Rf 0,63 auf Kieselgel in 3:7 Ethylacetat-Hexan; Schmelzpunkt 140-142⁰C) in 99,4% Ausbeute. Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 402 (M , 0), 342 (100), 327 (10), 283 (4), 255 (6), 239 (5), 234 (11), 221 (12), 213 (5); NMR (CDCl₃)S 0,70 (s, 18-H₃), 1,02 (s, 19-H₃), 1,19 (d, J=6,8 Hz, 21-H₃), 2,03 (s, 3-OCOCH₃), 4,60 (m, 3-H), 5,37 (br d, J=4,8 Hz, 6-H).

Die Umwandlung dieses Produktes zu dem entsprechenden 5,7-Dienester wurde herbeigeführt durch Behandlung einer gerührten Lösung der obigen Verbindung (10,0 g, 24,8 mmol) in trockenem Hexan (150 ml), die feinverteiltes Natriumbicarbonat (10,0 g) enthielt, und Vorheizen auf 80 C unter Stickstoff mit 1,3-Dibrom-5,5-dimethylhydantoin (Dibromatin; 3,62 g, 12,4 mmol). Nach 20 Minuten wurde die Reaktion in der üblichen Weise aufgearbeitet. s-Collidin (2,4,6-Trimethylpyridin; 6 g, 49,6 mmol) wurde langsam zu der gerührten Lösung des 7-Bromzwischenprodukts in trockenem Xylol (100 ml) gegeben. Nach Erwärmen zum Rückfluß unter Stickstoff während 90 Minuten wurde die erhaltene Mischung, die das 5,7-Dien und das 4,6-Dien enthielt, in trockenem Dioxan (120 ml) aufgelöst und dann auf 70°C unter Stickstoff erhitzt. Nach Zugabe von p-Toluolsulfonsäure (1 g) in trockenem Dioxan (30 ml) wurde das Erhitzen 3 0 Minuten lang fortgesetzt. Die Aufarbeitung durch fraktionelle Kristallisation aus Ethylacetat-Hexan lieferte das 5,7-Dienprodukt (6,77 g; Rf 0,59 auf Kieselgel in 1:1 Ethylacetat-Hexan) in 68,0% Ausbeute: UV (C₂H₅OH) /V, 293 nm, 282, 272, 263; Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 400 (M , 2), 340 (100), 325 (19), 281 (7), 253 (15), 237 (14), 211 (8), 158 (61); NMR (CDCl₃) S 0,64 (s, 18-H₃), 0,96 (s, 19-H₃), 1,23 (d, J=6,6 Hz, 21-H₃), 2,04 (s, 3-OCOCH₃), 3,67 (s, 22-COOCH₃), 4,71 (m, 3-H), 5,40 (m(scharf), 7-H), 5,58 (m(scharf), 6-H).

Die Hydrolyse der 3ß-Acetoxyfunktion wurde durch Behandlung einer gerührten Lösung des obigen Produktes (2,4 g, 6,0 mmol) in 3:7 Methanol-Ether (70 ml) mit feinpulverisiertem wasserfreien Kaliumcarbonat (2,5 g, 18,0 mmol) beim Raumtemperatur unter Stickstoff während 5 Stunden herbeigeführt. Die mit Ether (100 ml) verdünnte Mischung wurde mit Wasser gewaschen (3x30 ml), die Waschlösungen wurden mit Ether (1x50 ml) rückextrahiert und die vereinten

— DP. —

Extrakte wurden mit gesättigter wäßriger Natiumchloridlösung (2x30 ml) gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum, konzentriert, worauf 2,14 g (99,6% Ausbeute) des Hydroxyesters mit der folgenden Struktur erhalten wurden:

UV (EtOH)A. 293 nm, 282, 272, 263; Massenspektrum, m/e in ei χ ,

(relative Intensität) 358 (M , 100), 343 (5), 340 (8), 325 (81), 299 (54), 253 (12), 237 (19), 211 (18), 143 (51); NMR (CDCl₃) S 0,64 (s, 18-H₃), 0,95 (s, 19-H₃), 1,21 (d, J=6,8 Hz, 21-H₃), 3,66 (s, 22-COOCH₃), 5,39 (m(scharf), 7-H), 5,57 (m(scharf), 6-H).

Eine Lösung des obigen 5,7-Dienesters (1,5 g; 2x0,75 g, 4,18 mmol) in 1:4 trockenem Benzol-Ether (150 ml) wurde unter Stickstoff in einem Mantelrohr bestrahlt, welches ein doppelwandiges, wasser-gekühltes Quarzimmersionsgefäß umschloß und mit einem Stickstoffblasenzähler, einem Magnetrührer und einem Vycor-Filter unter Verwendung einer Hanovia 608A36 Quarz-Mitteldruck-Quecksilberdampfultraviolettlampe versehen war. Die Reaktion wurde durch hochauflösende Flüssigchromatographie (HPLC; Zorbax SiI analytische Säule) unter Verwendung von 1%-igem Isopropanol-Hexan bei 265 nm verfolgt. Die Mischung des quasi-photostationären Zustands enthielt Lumisterol (8%), Previtamin (63%) und Provitamin (29%), die bei 31 ml, 43 ml bzw. 53 ml

eluiert wurden. Diese Mischung wurde in Ethanol, das frisch unter Stickstoff destilliert und direkt vor Gebrauch mit Stickstoff gesättigt worden war, auf 70⁰C während 3 Stunden unter Stickstoff erhitzt, dann abgekühlt und im Vakuum konzentriert. Die Reinigung durch Chromatographie auf Florisil (Magnesiumsilikat; MgO 15,5%, SiO₂ 84%, Na₃SO₄ 0,5%) unter Verwendung von Ethylacetat-Hexan (stufenweise Eluierung; 5 bis 25%-ig) lieferte den Vitaminester (0,774 g, 51,6% Ausbeute) der folgend gezeigten Struktur:

Diese Verbindung war durch die folgenden physikalischen Daten gekennzeichnet: UV (C₀H₁-OH) A:___ 265 nm; Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 358 (M , 75), 340 (8), 325 (26), 299 (13), 253 (14), 237 (10), 211 (10), 136 (100), 118 (98); NMR (CDCl₃) £ 0,56 (s, 18-H₃), 1,20 (d, J=6,8 Hz, 21-H₃), 3,65 (s, 22-COOCH₃), 3,94 (m, 3-H), 4,80 (d, J=1,2 Hz, 19Z-H), 5,04 (d, J=1,2 Hz, 19E-H), 6,03 (d, J=11,2 Hz, 7-H), 6,23 (d, J=11,2 Hz, 6-H).

Eine Lösung des obigen Vitaminesters (500 mg, 1,4 mmol) in trockenem Pyridin (5 ml) wurde mit frisch umkristalliertem p-Toluolsulfonylchlorid (530 mg, 2,8 mmol) bei 5°C unter Stickstoff 24 Stunden behandelt. Die Mischung wurde auf Eis gegossen und dann mit Ether (3x2 0 ml) extrahiert. Die vereinten Extrakte wurden nacheinander mit 3%-iger wäßriger

ti ■ -----

Chlorwasserstoffsäure (2x10 ml), Wasser (1x10 ml), gesättigter wäßriger Natriumbicarbonatlösung (1x10 ml) und gesättiger wäßriger Natriumchloridlösung (2x10 ml) gewaschen, dann über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert, worauf das entsprechende 3-p-Toluolsulfonylderivat (690 mg; Rf 0,56 auf Kieselgel in 1:1 Ethylacetat-Hexan) in 96,4% Ausbeute erhalten wurde. Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 512 (M⁺, 7), 358 (16), 340 (88), 325 (23), 299 (5), 281 (6), 253 (30), 158 (63), 118 (88), 91 (100); NMR (CDCl₃) S 0,54 (s, 18-H₃), 1,20 (d, J=6,8 Hz, 21-H₃), 2,46 (s, 3-OSO₂C₆H₄CH₃), 3,66 (s, 22-COOCH₃), 4,70 (m, 3-HO), 4,81 (br s, 19^-H), 5,04 (br s, 19E-H), 5,97 (d, J=11,6 Hz, 7-H), 6,10 (d, J=11,6 Hz, 6-H), 7,34 (d, J=8,4 Hz, 3-OSO₂C₆H₄CH₃), 7,81 (d, J=8,4 Hz, 3-OSO₂C₆H₄CH₃).

Das obige Toluolsulfonylzwischenprodukt wurde dann durch Zugabe (600 mg, 1,17 mmol) zu einer gerührten Suspension von feinzerteiltem Natriumbicarbonat (600 mg) in wasserfreiem Methanol (10 ml) solvolisiert. Die Mischung wurde 15 Stunden auf 55°C unter Stickstoff erhitzt. Die übliche Aufarbeitung gefolgt von Chromatographie auf Kieselgel unter Verwendung von 30%-igem Ethylacetat-Hexan (doppelte Eluierung) lieferte 300 mg (68,8% Ausbeute) des Cyclovitamin-D-Esters mit der folgenden Struktur:

cooc

Das Produkt kann weiter durch HPLC (Zorbax SiI semipräparative Säule) unter Verwendung von 0,2%-igem Isopropanol-Hexan gereinigt werden. Das Produkt war durch die folgenden Daten gekennzeichnet: Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 372 (M⁺, 17), 340 (100), 253 (48), 221 (40), 135 (41), 119 (72); NMR (CDCl₃) £o,54 (s, 18-H₃), 0,74 (m, 3-H), 0,91 (m, 4-H), 1,20 (d, 7,2 Hz, 21-H₃), 3,25 (s, 6R-OCH-.), 3,65 (s, 22-COOCH-.), 4,15 (d, J=8,8 Hz, 6-H), 4,88 (br s, 19Z.-H), 5,00 (d, J=8,8 Hz, 7-H), 5,02 (br s, 19E-H) .

Eine gerührte Lösung des obigen Produkts (250 mg, 0,67 mmol; Rf 0,72 auf Kieselgel in 5:95 Methanol-Chloroform) in Ether wurde mit Lithiumaluminiumhydrid, gesättigt in Ether, bei Raumtemperatur unter Stickstoff 15 Minuten behandelt. Die übliche Aufarbeitung ergab den entsprechenden 22-Alkohol (200 mg; Rf 0,58 auf Kieselgel in 5:95 Methanol- Chloroform) in 86,5% Ausbeute. Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 344 (M⁺, 13), 312 (40), 253 (19), 193 (33), 135 (60), 119 (81); NMR (CDCl₃) cT 0,56 (s, 18-H₃), 0,74 (m, 3-H), 0,92 (m, 4-H), 1,06 (d, J=6,3 Hz, 21-H₃), 3,26 (s, 6R-OCH₃), 3,66 (dd, J=2,8 Hz und 10,4 Hz, 22-H₂), 4,17 (d, J=9,2 Hz, 6-H), 4,89 (br s, 19Z-H), 5,01 (d, J=9,2 Hz, 7-H), 5,04 (br s, 19E-H).

Eine gerührte Lösung des obigen Alkohols (160 mg, 0,46 mmol; Rf 0,26 auf Kieselgel in 3:7 in Ethylacetat-Hexan) in trockenem Pyridin (5 ml), die im Eisbad gekühlt wurde, wurde mit frisch umkristallisiertem p-Toluolsulfonylchlorid (130 mg, 0,9 2 mmol) unter Stickstoff 3 Stunden behandelt. Mehrere Stücke Eis wurden zugegeben und die Mischung wurde 5 Minuten gerührt, um überschüssiges p-Toluolsulfonylchlorid zu zersetzen. Die Mischung wurde dann in eiskaltes Wasser (5 ml) gegossen und mit Ether (3x20 ml) extrahiert. Die vereinten Extrakte wurden der

Reihe nach mit Wasser (3x10 ml), gesättigter wäßriger Natriumbicarbonatlösung (1x10 ml) und gesättigter wäßriger Natriumchloridlösung (2x10 ml) gewaschen, dann über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert, worauf das 22-p-Toluolsulfonatderivat (210 mg, Rf 0,46 auf Kieselgel in 3:7 Ethylacetat-Hexan) in 90,6% Ausbeute erhalten wurde: Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 498 (M⁺, 19)
(8) , 135 (36), 119 (55), 91 (100).

(relative Intensität) 498 (M⁺, 19), 483 (11), 466 (27), 294

Eine gerührte Lösung des obigen p-Toluolsulfonylzwischenprodukts (180 mg, 0,36 mmol) in trockenem Dimethylsulfoxid (10 ml) wurde mit Natriumcyanid (36 mg, 0,72 mmol) bei 8 0⁰C unter Stickstoff 2 Stunden behandelt. Man ließ die Mischung auf Raumtemperatur erwärmen, rührte eine Stunde und goß sie auf eine mit Eis gesättigte wäßrige Ammoniumchloridlösung (10 ml) und extrahierte mit Hexan (3x30 ml). Die vereinten Extrakte wurden mit Wasser (3x20 ml) und gesättigter wäßriger Natriumchloridlösung (2x20 ml) gewaschen, dann über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert (sie können auch mit aktivierter Holzkohle entfärbt und dann durch Celite als Filterhilfsmittel filtriert werden) und im Vakuum konzentriert. Die Reinigung durch Chromatographie auf Kieselgel unter Verwendung von 20%-igem Ethylacetat-Hexan (doppelte Eluierung) lieferte das erwünschte Cyclovitamin-D-22-Nitril (100mg; Rf 0,49 auf Kieselgel in 3:7 Ethylacetat-Hexan) in 78,3% Ausbeute. Diese Produkt hat die im folgenden gezeigte Struktur.

CO

Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 353 (M , 25), 338 (4), 321 (100), 306 (31), 135 (16), 119 (56); NMR (CDCl₃) B 0,57 (s, 18-H₃), 0,75 (m, 3-H), 0,92 (m, 4-H), 1,18 (d, J=6,8 Hz, 21-H₃), 3,26 (s, 6R-OCH₃), 4,15 (d, J=9,3 Hz, 6-H), 4,88 (br s, 19Z^-H), 5,02 (d, J=9,3 Hz, 7-H), 5,04 (br s, 19E-H).

Eine gerührte Lösung des obigen Nitrils (90 mg, 0,25 mmol) in trockenem Benzol (10 ml) wurde in einem Eisbad unter Stickstoff gekühlt, bevor Diisobutylaluminiumhydrid ([(CH₃J₂CHCH₂]₂A1H; 0,25 ml, 1,5 molare Lösung in Toluol) langsam zugegeben wurde. Das Eisbad wurde entfernt, nachdem die Zugabe vollständig war, und die Reaktion wurde bei Raumtemperatur 30 Minuten laufengelassen. Dann wurde eine genügende Menge Methanol vorsichtig zugegeben, um den Aluminiumsalzkomplex zu zersetzen, die Mischung wurde auf Eiswasser gegossen, die Phasen wurden getrennt, und die wäßrige Phase wurde mit Ether (3x10 ml) extrahiert. Die vereinten organischen Phasen wurden mit gesättigter wäßriger Natriumchloridlösung (2x10 ml) gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert. Die Chromatographie auf Kieselgel unter Verwendung von 25%-igem Ethylacetat-Hexan (doppelte Eluierung) lieferte den gewünschten Cyclovitamin-D-23-Aldehyd mit der Struktur J_a (Z=Me) (Verfahrensschema I) (81 mg; Rf 0,52 auf Kieselgel in 3:7 Ethylacetat-Hexan) in 89,2% Ausbeute: Massenspektrum m/e (relative Intensität) 356 (M⁺, 9) 324 (27), 135 (20), 119 (61); NMR (CDCl₃) £ 0,59 (s, 18-H₃), 0,75 (m, 3-H), 0,92 (m, 4-H), 1,03 (d, J=6,4 Hz, 21-H₃), 3,27 (s, 6R-OCH₃), 4,17 (d, J=9,3 Hz, 6-H), 4,89 (br s, 19Z.-H), 5,01 (d, J=9,3 Hz, 7-H), 5,04 (br s, 19E-H), 9,76 (m, 23-CHO).

Beispiel 2

Hydroxylierung von J_a zu 2a;.

Frisch destilliertes tert.-Butylhydroperoxid ((CH^)₃COOH; 13 mg, 0,14 mmol) wurde zu einer gerührten Suspension von Selendioxid (SeO₃; 3,9 mg, 0,035 mmol) in trockenem Methylenchlorid (10 ml) unter Stickstoff gegeben. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur gerührt, bis sie homogen war (30 Minuten), in einem Eisbad abgekühlt und der Cyclovitamin-D-Aldehyd J_a (Z=Me) (25 mg, 0,07 mmol) wurde in trockenem Methylenchlorid (1 ml) zugegeben. Das Eisbad wurde dann entfernt und die Reaktion wurde bei Raumtemperatur 1 Stunde laufengelassen. Die Reaktionsmischung wurde durch Zugabe von 10%-igem NaOH gequencht, mit Ether verdünnt und die Phasen (organisch und wäßrig) wurden getrennt. Der durch Eindampfen der organischen Phasen erhaltene Rückstand wurde anschließend auf Kieselgel unter Verwendung von 40%-igem Ethylacetat-Hexan chromatographiert, worauf der 1Λ-Hydroxycyclovitamin-D-Aldehyd der Struktur JZa, in der Z=Me, X₁=H, (10 mg) in 38,2% Ausbeute erhalten wurde: Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 372 (M⁺, 21), 340 (42), 299 (24), 135 (100).

Beispiel 3

Solvolyse von ^a zu 3a^ und 4a:

Eine gerührte Lösung in Eisessig (0,5 ml) des Produkts 2a, wie es in Beispiel 2 erhalten worden war (8 mg, 0,02 mmol), wurde auf 55°C unter Stickstoff 15 Minuten lang erwärmt.

Das erhaltene Reaktionsprodukt wurde auf Eis gegossen, mit Natriumbicarbonat neutralisiert und mit Ether extrahiert.

Eindampfen des Etherextrakts ergab die Mischung der 3ß-Acetate (enthaltend die Verbindungen j3a. ^und ifL' wobei X₁=H und X₂=Acetyl), die in Ether (1 ml) wieder aufgelöst und mit 10%-igem Kaliumhydroxid in Methanol bei Raumtempera-

tür unter Stickstoff 15 Minuten lang behandelt wurde. Die resultierende Produktmischung wurde durch hochauflösende Flüssigchromatographie (HPLCy Zorbax SiI semipräparative Säule, 6,2 mm χ 25 cm) unter Verwendung von 5%-igem Isopropanol-Hexan gereinigt, worauf die Verbindung 3_a (X₁ und X₀=H) erhalten wurde: UV (C₀H₁-OH)/^ 265 nm; Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 358 (M , 28), (15), 152 (49), 134 (100); NMR (CDCl₃)S 0,61 (s, 18-H₃), 1,04 (d, J=6,6 Hz, 21-H₃), 4,24 (m, 3-H), 4,44 (m, 1-H), 5,01 (d, J=1,2 Hz, 19Z-H), 5,34 (d, J=1,2 Hz, 19E-H), 6,03 (d, J=11,2 Hz, 7-H), 6,38 (d, J=11,2 Hz, 6-H), 9,76 (m, 23-CHO)? und Verbindung 4a (X₁ und X₂=H): UV (C₂H₅OH) Λ· 273 nm; Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 358

ITl el X

(M , 13), 340 (5), 152 (24), 134 (100); NMR (CDCl₃) £ 0,62 (s, 18-H₃), 1,04 (d, J=6,4 Hz, 21-H₃), 4,25 (m, 3-H), 4,50 (m, 1-H), 4,98 (br s, 19Z^-H), 5,13 (br s, 19E-H), 5,89 (d, J=10,8 Hz, 7-H), 6,58 (d, J=10,8 Hz, 6-H), 9,76 (m, 23-CHO).

Beispiel 4

Alkylierung von J_a zu 1b:

Isobutylmagnesiumbromid ((CH₃J₂CHCH₂MgBr) wurde wie folgt hergestellt: Die Apparatur wurde direkt vor Gebrauch in einem Ofen getrocknet. Ein 100 ml Dreihalsrundkolben wurde mit einem Schlangenkühler, einem Tropftrichter mit Druckausgleich in einem Magnetrührer versehen. Das obere Ende des Kühlers wurde durch ein Dreiwegrohr mit einer Falle verbunden. Hochreiner trockener Stickstoff wurde am oberen Ende des Kühlers eingeführt und man ließ ihn durch die Apparatur strömen und aus der Öffnung des Tropftrichters entweichen. Ein leichter Stickstoffüberdruck wurde aufrechterhalten, als der Tropftrichter geschlossen wurde, was durch Blasen in der Falle angezeigt wurde. Magnesiumspäne (1,2 g, 0,05 Mol) wurden in den Kolben eingebracht,

Stickstoff wurde 30 Minuten lang hindurchgeleitet, um die Luft zu verdrängen und die Entfernung aller Feuchtigkeit zu gewährleisten, und Isobutylbromid ((CH-KCHCH₂Br; 6,8 g, 0,05 Mol) in Ether wurde tropfensweise durch den Trichter unter Rühren eingeführt, nachdem der Stickstoffstrom auf eine kaum wahrnehmbare Geschwindigkeit erniedrigt worden war. Die Reaktion wurde 4 Stunden lang laufengelassen. Das Endvolumen wurde auf 50 ml eingestellt.

Das Isobutylmagnesiumbromid (0,5 ml, 0,5 mmol; 1,0 molare Lösung in Ether) wurde langsam zu einer gerührten Lösung von Jj. (35 mg, 0,1 mmol) (siehe Beispiel 1) in Ether (10 ml) unter Stickstoff gegeben. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur 24 Stunden lang rückflussiert und dann wurde langsam gesättigte wäßrige Ammoniumchloridlösung aus dem Tropftrichter mit einer Geschwindigkeit zugegeben, die durch die Rückflußgeschwindigkeit bestimmt war, bis ein Punkt erreicht war, an dem eine klare Trennung statt fand. Die Mischung wurde einige Minuten lang absetzen gelassen, der Überstand wurde abdekantiert und der Niederschlag wurde mit mehreren Portionen frischem Ether gewaschen. Die vereinten etherischen Lösungen wurden über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert. Chromatographie auf Kieselgel unter Verwendung von 20%-igem Ethylacetat-Hexan (doppelte Eluierung) ergab das Produkt JJb (R^Isobutyl, X₃=H, Z=Me) (27 mg; Rf 0,50 auf Kieselgel in 3:7 Ethyleacetat-Hexan) in 66,3% Ausbeute: Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 414 (M⁺, 16), 382 (83), 253 (50), 135 (45), 119 (95).

Die Behandlung der Verbindung J_a (Z=Methyl) mit Ethylmagnesiumbromid unter Bedingungen, die den oben beschriebenen analog waren, ergab das Produkt JJd (R..=Ethyl, X,=H, Z=Methyl).

Behandlung der Verbindung j_a (Z=Methyl) mit Isopropylmagnesiumbromid unter den oben beschriebenen Bedingungen ergab das Produkt Vb (R..=Isopropyl, X₃=H, Z=Methyl).

Beispiel 5

Hydroxylierung von JJb zu 2b;

Frisch destilliertes tert.-Buty!hydroperoxid ((CH₃KCOOHy 11 mg, 0,12 mmol) wurde zu einer gerührten Suspension von Selendioxid (SeO₂7 3,3 mg, 0,03 mmol) in trockenem Methylenchlorid (10 ml) unter Stickstoff gegeben. Die Mischung wurde bei Raumtemperatur gerührt, bis sie homogen war (30 Minuten), in einem Eisbad abgekühlt, und das Produkt 1b (R..=Isobutyl) aus Beispiel 4 (25 mg, 0,06 mmol) wurde als Lösung in trockenem Methylenchlorid (1 ml) zugegeben. Das Eisbad wurde dann entfernt, die Reaktion wurde bei Raumtemperatur 1 Stunde lang laufengelassen, und 10%-ige wäßrige Natriumhydroxidlösung (5 ml) wurde zugegeben, um die Reaktion zu quenchen. Die Mischung wurde mit Ether (30 ml) verdünnt, die Phasen wurden getrennt, und die organische Phase wurde der Reihe nach mit 10%-iger wäßriger Natriumhydroxidlosung (3x5 ml), Wasser (2x5 ml) und gesättigter wäßriger Natriumchloridlösung (2x5 ml) gewaschen, dann über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert. Die Reinigung durch Chromatographie auf Kieselgel unter Verwendung von 40%-igem Ethylacetat-Hexan lieferte 12,2 mg (41%) des Produkts 2b (R^Isobutyl, X₁ und X₃=H, Z=Me): Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 430 (M⁺, 22), (5), 398 (44), 380 (15), 357 (17), 135 (100)? NMR (CDCl₃) ξ 0,57 (s, 18-H₃), 0,64 (t, J=4,6 Hz, 3-H), 0,92 (d, J=6,5 Hz, 26-H₃ und 27-H₃), 0,98 (d, J=6,4 Hz, 21-H₃), 3,26 (s, 6R-OCH₃), 3,79 (m, 23-H), 4,20 (m, 6-H), 4,23 (m, 1-H), 4,98 (m, 7-H), 5,17 (d, J=1,2 Hz, 19£-H), 5,24 (d, J=1,2 Hz, 19E-H).

Beispiel 6

Solvolyse von ^b_ zu ^b und 4b;

Eine gerührte Lösung des Produkts aus Beispiel 5 (10 mg, 0,023 mmol) in Eisessig (0,5 ml) wurde auf 55°C zum Rückfluß unter Stickstoff 15 Minuten lang erwärmt. Die Mischung wurde auf Eis gegossen, dann wurde vorsichtig eiskalte gesättigte Natriumbicarbonatlösung zur Neutralisation zugegeben, und die Mischung wurde mit Ether (3x10 ml) extrahiert. Die vereinten Extrakte wurden mit Wasser (1x5 ml) und gesättigter wäßriger Natriumchloridlösung (2x5 ml) gewaschen, dann über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert.

Die Mischung der 3ß-Acetate (Verbindungen ^b und 4b, wobei R^Isobutyl, X₁ und X₃=H, X₂=Acetyl) in Ether (1 ml) wurde mit 10%-iger Kaliumhydroxidlösung in Methanol bei Raumtemperatur unter Stickstoff 15 Minuten lang behandelt. Dann wurde gesättigte wäßrige Natriumchloridlösung (5 ml) zugegeben, und die Mischung wurde mit Ether (3x10 ml) extrahiert. Die vereinten Extrakte wurden mit Wasser (2x5 ml) und gesättigter wäßriger Natriumchloridlösung (2x5 ml) gewaschen, dann über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert. Die Isomeren eis und trans wurde durch hochauflösende Flüssigchromatographie (HPLCi Zorbax SiI semipräparative Säule, 6,2 mm χ 25 cm) unter Verwendung von 5-%igem Iso-propanol-Hexan getrennt, worauf die Verbindung j$b (R^Isobutyl, X₁, X₂' ^X3^=H' 23R-Stereochemie) erhalten wurde: UV (^C2^H5^OH^Anax^^^ ^inm'^r ^MassensP^e^trum, m/e,

25Anax
(relative Intensität) 416 (M⁺, 17), 398 (12), 380 (5), 152 (38), 134 (100); NMR (CDCl₃) S 0,58 (s, 18-H₃), 0,92 (d, J=6,4 Hz, 26-H₃ und 27-H₃), 0,98 (d, J=6,4 Hz, 21-H₃), 3,79 (m, 23-H), 4,24 (m, 3-H), 4,44 (m, 1-H), 5,01 (br s, 19!Z-H), 5,33 (br s, 19E-H), 6,03 (d, J=11,2 Hz, 7-H), 6,39

I¹. 3490A27

(d, J=I1,2 Hz, 6-H), und die 5,6-trans-Verbindunq 4b (R₁ = Isobutyl, X₁, X₂, X₃ =H, 23 R-Sterochemie): UV (C₂H₅OH) Λ, 273 nm, Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 416 (M⁺, 9), 398 (5), 152 (29), 134 (100); NMR (CDCl )S0,61 (s, 18-H₃), 0,93 (d, J=6,8 Hz, 26-H₃ und 27-H₃),³O,99 (d, J=6,8 Hz, 21-H₃), 3,79 (m, 23-H), 4,24 (m, 3-H), 4,50 (m,1-H), 4,98 (d, J=O,2 Hz, 19Z-H), 5,13 (d, J=1,2 Hz, 19E-H), 5,89 (d, J=11,2 Hz, 7-H), 6,59 (d, J=11,2 Hz, 6-H), sowie das 23S-Isomere von 3b: UV (C₀H₁-OH)^' 265 nm;

— ζ j max ,

Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 416 (M , 24), 398 (89), 380 (35), 152 (100), 134 (73).

Beispiel 7

Herstellung der Verbindung ^d_ (R₁=R^=Me) aus dem 23-Ester: Methylmagnesiumbromid (CH^MgBr; 0,05 ml, 3 molare Lösung in Ether) wurde tropfenweise zu einer Lösung von (5Z_,7E)-( 1S_,3R)-1 ,2-Dihydroxy-24-nor-9,1O-seco-5,7,10(19)-cholantrien-23-säuremethylester (1 mg) in Ether (5 ml) unter Stickstoff gegeben. Die Mischung wurde 10 Minuten zum Rückfluß erhitzt, abgekühlt, und dann wurde langsam gesättigte wäßrige Ammoniumchloridlösung zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde in der üblichen Weise aufgearbeitet, und das Produkt wurde durch hochauflösende Flüssigchromatographie (HPLCj Microporasil semipräparative Säule) unter Verwendung von 8%-igem Isopropanol gereinigt, worauf die Verbindung ^d (R₁=R₂=Me, X₁=X₂=X₃=H) erhalten wurde (Rf 0,48 auf Kieselgel in 15:85 Methanol-Chloroform): UV (C₀H₁-OH)X 265-

nmj Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 388 (M , 7), 370 (52), 352 (50), 337 (9), 269 (11), 267 (9), 251 (15), 152 (31), 134 ( 100)j NMR (CDCl₃)SO,60 (s, 18-H₃), 1,08 (d, J=6,4 Hz, 21-H₃), 1,24 (s, 26-H₃ und 27-H₃), 4,25 (m, 3-H), 4,45 (m, 1-H), 5,02 (br s, 19Z^-H), 5,35 (br s, 19E-H), 6,04, (d, J=12,0 Hz, 7-H), 6,40 (d, J=12,0 Hz, 6-H).

Beispiel 8

Herstellung der Verbindung Jb (R₁=H) aus dem 23-Ester: Lithiumaluminiumhydrid, gesättigt in Ether, wurde langsam zu einer gerührten Lösung von (5Ζ^7Ε)-( 1S^, 3R)-1,3-Dihydroxy-nor-9,10-seco-5_f7,10(19)-cholantrien-23-säure-methylester (1 mg) in Ether (2 ml) bei Raumtemperatur unter Stickstoff gegeben. Die Reaktion wurde 5 Minuten lang laufengelassen. Die übliche Aufarbeitung, gefolgt von hochauflösender Flüssigchromatographie (HPLC? Microporasil semipräparative Säule) unter Verwendung von 8%—igem Isopropanol-Hexan lieferte die Verbindung 3_b_ (R₁=H; X₁=X₂=X₃=H) (Rf 0,45 auf Kieselgel in 15:85 Methanol-Chloroform): UV (C₀H₁-OH)/ 265 nm; Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 360 (M , 8), 342 (51), 324 (49), 269 (11), 251 (25), 152 (33), 134 (100); NMR (CDCl₃)SO,58 (s, 18-H₃), 0,98 (d, J=6,2 Hz, 21-H₃), 3,71 (br m, 23-H₃), 4,25 (m, 3-H), 4,45 (m, 1-H), 5,03 (br s, 19£-Η), 5,34 (br s, 19E-H), 6,03 (d, J=11,2 Hz, 7-H), 6,40 (d, J=11,2 Hz, 6-H).

Beispiel 9

Oxidation von JJd zu 1c:

Eine gerührte Lösung des Cyclovitamin-D-23-Alkohols (3b, R..=Isobutyl, Z=Methyl) (1 Äquivalent) in trockenem Ν,Ν-Dimethylformamid (1 ml) wurde in einem Eisbad unter Stickstoff gekühlt, bevor Pyridiniumdichromat (7 Äquivalente) zugegeben wurde. Die Reaktion wurde bei 5°C unter Stickstoff 8 Stunden lang laufengelassen, dann wurde die Mischung auf Eiswasser (3 ml) gegossen und mit Ether (3x5 ml) extrahiert. Die vereinten Extrakte wurden der Reihe nach mit Wasser (1x3 ml) und gesättigter wäßriger Natriumchloridlösung gewaschen, dann über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum konzentriert. Chromatographie auf Kieselgel unter Verwen-

dung von 30%-igem Ethylacetat-Hexan lieferte das Keton j$£ (R.=Isobutyl, Z=Methyl)j Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 412 (M⁺, 25),. 380 (32), 365 (7), 161 (36), (66), 135 (20), 133 (19), 131 (21), 121 (27), 119 (46), (100). . : :

Beispiel 10

Alkylierung von Jjc zu 1d;

Methylmagnesiumbromid (CH₃MgBr, 2,8 M Lösung in Ether? 20 Äquivalente) wurde zu einer gerührten Lösung des Ketons Ic (R..=Isobutyl, Z=Methyl) in Ether (0,5 ml) bei Raumtemperatur unter Stickstoff gegeben. Die Mischung wurde über Nacht unter Rückfluß erwärmt, abgekühlt und dann mit gesättigter wäßriger Ammoniumchloridlösung behandelt, bis ein klarer Niederschlag ausfiel. Der Überstand wurde dann dekantiert, der Niederschlag wurde mit frischem Ether gewaschen, und die vereinten etherischen Lösungen wurden über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und im Vakuum eingedampft. Chromatographie auf Kieselgel unter Verwendung von 30%-igem Ethylacetat-Hexan lieferte den tertiären Alkohol Jd_- (R^Isobutyl, R₂=Methyl, X₃=H, Z=Methyl)? Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 428 (M⁺, 21) 410 (8), 396 (7), 381 (7), 150 (46), 135 (20), (26), 131 (27), 121 (26), 119 (49), 118 (75).

Beispiel 11

Umwandlung von Jd. ^zu .M ^un<^ 4d:

Die Behandlung der Verbindung Jjd (R^Isobutyl, R₂=Methyl, Z=Methyl), wie sie in Beispiel 10 erhalten worden war, mit Selendioxid und tert.-Butylhydroperoxid unter den in Beispiel 5 beschriebenen Bedingungen lieferte das entsprechende 1Λ-Hydroxy-Derivat ^d (R..=Isobutyl, R₃=Methyl, X-=H und Z=Methyl). Die Solvolyse dieses Materials,

gefolgt von Acylhydrolyse und Trennung des eis- und trans-Isomeren, wie in Beispiel 6 beschrieben, ergab die Verbindung 3d. (R^Isobutyl, R₂=Methyl, X₁=X₃=X₃=H) und die Verbindung 4d (R^Isobutyl, R₂=Methyl, X₁=X₃=X₃=H).

Beispiel 12

Umwandlung von ^c zu jlc_ und 4c;

Die Verbindung ^c (R..=Isobutyl, Z=Methyl), wie sie in Beispiel 9 erhalten worden war, wurde zu dem 1Ok-Hydroxyderivat 2c (R^Isobutyl, X₁=H, Z=Methyl) unter Bedingungen umgewandelt, die den in Beispiel 2 beschriebenen analog waren. Die Verbindung ^£ wurde unter Verwendung der in Beispiel 3 beschriebenen Bedingungen solvolysiert, um als Mischung die Acetate 3c_ und Ac^ (wobei R..=Isobutyl, X₁=H, X_=Acetyl) zu erhalten. Die Acetate wurden dann, wie in Beispiel 3 beschrieben, hydrolysiert, und die entsprechenden freien Hydroxyverbindungen wurden durch hochauflösende Flüssigchromatographie getrennt, um die Verbindung 3_£ (R^Isobutyl, X₁=X₃=H) und Ac_ (R^Isobutyl, X₁=X₃=H) zu erhalten.

Beispiel 13

Reduktion von j3a und ^a zu ^b_ und 4bt Der Aldehyd 3a. (X₁=X₃=H) in Diethylether wurde mit einer alkoholischen Lösung von NaBH. behandelt. Nach einer Stunde wurde die Reaktionsmischung in der üblichen Weise aufgearbeitet, um nach Reinigung durch Dünnschichtchromatographie das Produkt zu erhalten, nämlich den 23-Alkohol ^b (R₁=H, X₁=X₃=X₃=H), der mit dem in Beispiel 8 erhaltenen Material identisch war. Die genau analoge Reduktion des 5,6-trans-23-Aldehyds Aa_ (X₁=X₃=H) lieferte den 5,6-transAlkohol der Struktur 4b (R₁=H, X₁=X₃=X₃=H).

Beispiel 14

Alkylierung der Verbindung 3^ zu 3b; Eine gerührte Lösung des Aldehyds 3a. (X₁=X₂=H) Π Äquivalent) in Ether (0,5 ml) wurde mit Ethylmagnesiumbromid (C₃H₅MgBr, 2,8 M Lösung in Ether? 20 Äquivalente) bei Raumtemperatur unter Stickstoff 4 Stunden lang behandelt. Gesättigte wäßrige Ammoniumchloridlösung wurde tropfenweise zugegeben. Die übliche Aufarbeitung lieferte dann den 23-Alkohol Jb (R^Ethyl, X₁=X₃=X₃=H); Massenspektrum, m/e (relative Intensität) 388 (M⁺, 11), 370 (6), 357 (3), 152 (34), 134 (100).

Claims

UEXKÜLL & STOLBERG

PATENTANWÄLTE

BESELERSTRASSE 4 D-20OO HAMBURG 52

EUROPEAN PATENT ATTORNEYS

DR. J.-D. FRHR. von UEXKÜLL DR. ULRICH GRAF STOLBERG DIPL.-ING. JÜRGEN SUCHANTKE DIPL.-ING. ARNULF HUBER DR. ALLARD von KAMEKE

WISCONSIN ALUMNI
RESEARCH FOUNDATION
614, North Walnut Street Madison, Wisconsin 53705

V.St.A.

(Prio.: 14.9. 1983

US 531 ,964)

13. Juni 1984

PCT/US 84/00911

Mai 1985

1 , 23-Dihydroxyvitamin—D-Verbindungen

Patentansprüche

1. Verbindungen, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus

in denen R- und R₂ beide aus der Gruppe ausgewählt sind, die aus Wasserstoff und Alkylresten besteht, und in denen X^, X^ und X^ aus der Gruppe ausgewählt sind, die aus Wasserstoff und Acylresten besteht.

3 J

2. Verbindungen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß R₁ und R„ beide Wasserstoff sind.

3. Verbindung nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß

X₁, X„ und X₃ jeweils Wasserstoff sind.

4. Verbindungen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß R₁ und R„ Alkylreste sind.

5. Verbindung nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß

R₁ und R₂ Methylgruppen und X₁, X₂, und X₃ Wasserstoff sind.

6. Verbindungen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß R₁ ein Alkylrest und R₂ Wasserstoff ist.

7. Verbindungen nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet,

daß R₁ aus Methyl-, Ethyl- oder Propylresten ausgewählt ist.

8. Verbindungen nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß R₁ ein Isobutylrest ist.

9. 1,23-Dihydroxyvitarain D₃.

10. 1,23-Dihydroxy-5,6-trans-Vitamin D₃.

11. Verbindungen, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus

in denen Z ein Alkylrest ist und X.. und X₃ jeweils Wasserstoff oder Acylreste sind und in denen R₁ und R~ beide aus der Gruppe.ausgewählt sind, die aus Wasserstoff und Alkylresten besteht.

12. Verbindungen nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet,

daß Z ein Methylrest ist.

13. Verbindungen nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet,

daß R- und R₃ beide Wasserstoff sind.

14. Verbindungen nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet,

daß R₁ ein Alkylrest und R₃ Wasserstoff ist.

15. Verbindungen nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet,

daß R₁ und R₂ Alkylreste sind.

16. Verbindungen, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus

in denen Z ein Alkylrest, X₁ Wasserstoff oder ein Acylrest und R₁ Wasserstoff oder ein Alkylrest ist.

17. Verbindungen nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, daß Z ein Methylrest ist.

18. Verbindungen nach Anspruch 17, dadurch gekennzeichnet,

daß R₁ Wasserstoff ist.

19. Verbindungen nach Anspruch 17, dadurch gekennzeichnet,

daß R₁ ein Alkylrest ist.

20. Verbindungen nach Anspruch 19, dadurch gekennzeichnet, daß R₁ ein Isobutylrest ist.

21. Verbindungen, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus

in denen X₁ und X„ Wasserstoff oder Acylreste sind und R₁ Wasserstoff oder ein Alkylrest ist.

22. Verbindungen nach Anspruch 21, dadurch gekennzeichnet,

daß R₁ Wasserstoff ist.

23. Verbindungen nach Anspruch 21, dadurch gekennzeichnet,

daß R₁ ein Alkylrest ist.

24. Verbindung nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet,

daß X₁ und X₂ Wasserstoff sind.

H4 - - :

3490Λ27 -*" ί ^:i" ^{: :}

25. Verbindung nach Anspruch 23, dadurch gekennzeichnet

daß X. und X₂ Wasserstoff sind.

26. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Cyclovitamin-D-Verbindung mit der Formel

in der R- aus Wasserstoff oder Alkylresten ausgewählt ist und Z ein Alkylrest ist, einer Reduktion mit einem Hydridreduktionsmittel oder einer Reaktion mit einem Alkyl-Grignard-Reagenz unterwirft, wobei man eine Verbindung mit der Formel

ZO

-Hl

erhält, in der R₁ und R„ jeweils Wasserstoff oder Alkylreste sind und Z ein Alkylrest ist, diese Verbindung oder gegebenenfalls das 23-Acyloxyderivat, das man durch Acylierung dieser Verbindung erhält, einer 1eC-Hydroxylierungsbehandlung mit SeO₂ und einem Hydroperoxid unterwirft, um die entsprechende 1 *£.-hydroxylierte Verbindung zu erhalten, das 1c6-Hydroxyderivat einer Solvolyse in einem Medium unterwirft, das eine organische Säure enthält, wodurch die 5,6-cis- und 5,6-trans-Verbindungen mit den Formeln

und

o<~

in denen R₁ und R„ die oben angegebene Bedeutung haben, X₁ Wasserstoff ist, X₂ ein Acylrest ist und X~ Wasserstoff oder ein Acylrest ist, als Mischung erhalten werden, die Verbindungen trennt und gegebenenfalls entweder jegliche vorhandenen Acylgruppen entfernt, um die entsprechende freie Hydroxyverbindung zu erhalten, oder die freien Hydroxygruppen acyliert, um das entsprechende Acyloxyderivat zu erhalten.

Verfahren nach Anspruch 25, dadurch gekennzeichnet, daß die Entfernung der Acylgruppen der Trennung der 5,6-cis- und 5,6-trans-Verbindungen vorausgeht.

28. Verfahren nach Anspruch 25, dadurch gekennzeichnet, daß man die 1oC-Hydroxylierung/Solvolyse vor der Reduktion oder der Grignard-Reaktionsstufe ausführt.