DE3306009C2 - Verfahren zur Herstellung von Proteinhydrolysaten - Google Patents
Verfahren zur Herstellung von ProteinhydrolysatenInfo
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Description
Die Erfindung betrifft Proteinhydrolysate ohne bitteren Ge
schmack, die mittels enzymatischer Hydrolyse aus solchen
Proteinen gewonnen werden, deren Hydrolyse den vorhandenen
Erfahrungen nach Hydrolyseprodukte mit bitterem Geschmack
ergeben.
Die der Technik zur Verfügung stehenden Proteine bedürfen zu
ihrer Nutzung häufig des hydrolytischen Aufschlusses. Die
Hydrolyse führt in der Regel zum Abbau der Protein-Makromole
küle zu kleineren Peptiden und gegebenenfalls bis zu Amino
säuren.
Gewisse Probleme, die bei der Verwertung von Proteinen auftre
ten können, seien am Beispiel des Caseins erläutert, das an
sich einen wertvollen Rohstoff beispielsweise für Zwecke der
Ernährung darstellt. Unmodifiziertes Gasein-Protein hat bei
spielsweise im pH-Bereich 4-5, den ein großer Teil der Kon
sum-Getränke und Früchtedesserts aufweist, eine sehr geringe
Löslichkeit. Die Folge ist ein Ausflocken des Proteins, was
einerseits das Aussehen der Getränke und infolge des Zusammen
brechens der Aufschlagmassen die Qualität der Desserts stark
beeinträchtigt und darüber hinaus einen unangenehmen, sandigen
Geschmack hervorruft.
Da die Hydrolyseprodukte der Proteine im allgemeinen im sauren
pH-Bereich besser löslich sind, lag der hydrolytische Abbau,
insbesondere der enzymatische Abbau der Proteine nahe.
Die Eigenschaften eines Protein-Hydrolysats hängen verständ
licherweise, außer von seiner Aminosäurezusammensetzung, noch
vom Abbaugrad ab. Ein Maß für den Abbaugrad ist z. B. der
Prozentsatz an Peptidbindungen, der beim Abbauvorgang gelöst
wird. (D.H. = Degree of hydrolysis).
In erster Näherung gilt, daß bei vorgegebenem Protein und
vorgegebenen proteolytischem Enzym die Eigenschaften des
Proteinhydrolysats durch den DH-Wert festgelegt sind, der durch
den Verbrauch an Lauge bei konstantem pH während der Hydrolyse
bestimmbar ist.
Eines der größten Hindernisse bei der Verwertung von Proteinhy
drolysaten in der Ernährung, insbesondere der menschlichen
Ernährung, liegt im Bereich des Geschmacks. Der Geschmack
reinen Proteins ist normalerweise ziemlich neutral. (Der mit
einem Protein bestimmter Herkunft gewöhnlich assoziierte
Geschmack rührt in der Regel von nicht-proteinartigen Geschmacks
stoffen her. Man kann diese Geschmacksstoffe im Bedarfsfall
entfernen um eine allgemeinere Verwendbarkeit von Proteinhydro
lysaten zu gewährleisten.)
Die gravierenden Schwierigkeiten beginnen jedoch beim bitteren
Geschmack vieler Proteinhydrolysate. Der intensive Bitterge
schmack von Proteinhydrolysaten läßt sich in den zum Konsum
bestimmten Nahrungsmitteln kaum maskieren. Tatsächlich hat
diese Bitterkeit bisher verhindert, daß es zu einer extensiven
Verwendung derartiger Proteinhydrolysate in der Ernährung kam.
In der DE-OS 30 03 679 wird zu diesem Problem ausgeführt, die
Anzeichen sprächen dafür, daß die Ursache des bitteren Ge
schmacks mit dem Proteinsubstrat zusammenhänge und nicht mit
den verwendeten Enzymen. Bestimmte Proteine wie Casein ergäben
fast ausnahmslos bitterschmeckende Hydrolysate, wo hingegen
Gelatine bei analoger Behandlung mit denselben Enzymen höch
stens geringfügig bitterschmeckende Hydrolysate liefert. In der
genannten Offenlegungsschrift wird als "Bitterpunkt"
derjenige Gehalt an löslichem Proteinhydrolysat (in Prozent des
Ausgangsproteins) definiert, bei dessen Degustation erstmalig
bitterer Geschmack festgestellt wird. Das Problem des bitteren
Geschmacks von Hydrolysaten ist bisher hauptsächlich bei Casein
sowie Soja-, Getreide- und Maisproteinen aufgetreten; es könnte
indessen auch bei intensiverer Untersuchung anderer alterna
tiver Proteinquellen in Erscheinung treten.
In der genannten DE-OS 30 03 679 wird ein Verfahren zur Her
stellung von zur Ernährung geeigneten Hydrolysaten aus Protein
substraten durch Hydrolyse unter Verwendung proteolytischer
Enzyme vorgeschlagen, wobei gleichzeitig mit den proteolytischen
Enzymen wasserlösliche und/oder mit Wasser stark quell
bare Kohlenhydrate eingesetzt werden. Durch den Zusatz dieser
Kohlehydrate zu enzymatischen Ansätzen können die Proteine zu
Proteinhydrolysaten abgebaut werden, die bis zu einem hohen
hydrolytischen Abbaugrad keinen oder allenfalls einen vernach
lässigbar geringen Bittergeschmack aufweisen.
Aus der DE-PS 22 37 316 ist ein perlförmiges Trägermaterial für Enzyme
bekannt. Für diesen Typ von Perlen ist ein Aufquellen in Wasser auf das 5
bis 100fache des Schüttvolumens konstitutiv. Eine definierte Porenstruktur
des Trägermaterials unter Anwendungsbedingungen ist somit auszuschließen.
Das Verfahren des Standes der Technik macht somit den Zusatz
von Nicht-Proteinen erforderlich, die nicht in jedem Falle als
erwünscht gelten können. Es bestand daher weiterhin ein Bedarf
nach einem Verfahren zur Herstellung nicht bitterschmeckender
Proteinhydrolysate aus solchen Proteinen, die bei unmodifi
zierter enzymatischer Hydrolyse Verfahrensprodukte mit Bitter
geschmack ergeben.
Die Lösung der Aufgabe wird mit dem Verfahren gemäß den vor
liegenden Ansprüchen erreicht.
Es muß als besonders überraschend betrachtet werden, daß
mittels trägergebundener Proteasen ein Abbau von Proteinsub
straten über denjenigen Hydrolysegrad (Abbaugrad) hinweg
gelingt, der beim normalen enzymatischen Abbau gegebenenfalls
mit demselben, jedoch nicht trägergebundenen Enzymen
den Bitterpunkt markiert, ohne jedoch den erwarteten bitteren
Geschmack der dabei gewonnenen Hydrolyseprodukte hervorzurufen.
Als "Bitterpunkt" sei im Rahmen der vorliegenden Anmeldung
derjenige Gehalt an löslichem Proteinhydrolysat in Prozent der
Ausgangsproteine definiert, bei dessen Degustation erstmalig
bitterer Geschmack festgestellt wird. Obwohl die Degustation
individuell bedingten Schwankungen der Bitter-Empfindung bei
den Degustatoren unterworfen sein kann, bildet sich erfahrungs
gemäß bei einem Kollektiv mit ausreichender Zahl von Individuen
(z. B. mehr als 5 Degustatoren) ein recht verläßlicher Mittel
wert der Bitter-Empfindung heraus.
Die Degustation zum Zwecke des Vergleichs sollte von ein und
denselben Individuen, möglichst in vergleichbarem Zustand
vorgenommen werden.
Als Maß für den Abbaugrad wird der Prozentsatz an Peptidbin
dungen, der beim Abbauvorgang gelöst wurde (DH=Degree of
Hydrolysis), herangezogen. In erster Näherung gilt, daß bei
vorgegebenem Protein und vorgegebener Protease die Eigen
schaften des Proteinhydrolysats durch den DH-Wert festgelegt
sind, der durch den Verbrauch an Natronlauge während der Hydro
lyse bei Konstanthaltung des pH-Werts bestimmt werden kann.
Selbstverständlich kann der Grad der Hydrolyse und deren
Ergebnis hinsichtlich Zusammensetzung und Molgewicht der
entstandenen Produkte mit Hilfe der verschiedenen in der
Proteinchemie entwickelten Analyseverfahren (insbesondere
chromatographische Methoden, Elektrophorese, Ultrazentrifuge
u. a.) bestimmt werden.
Als Proteinsubstrate, die bei einem ausgedehnten hydroly
tischen Abbau bitterschmeckende Hydrolysate liefern, seien in
erster Linie das Casein, daneben aber auch Soja-, Getreide-
und Mais-Proteine genannt. (Bei intensiver Untersuchung könnte
sich der gleiche Sachverhalt auch für weitere alternative.
Proteine anderer Provenienz herausstellen.)
Mit Hilfe des erfindungsgemäßen Verfahrens gelingt es bei
spielsweise den Abbaugrad bei Casein auf
mindestens 5%, (bezogen auf die gesamten im Ausgangsprotein
vorhandenen Peptidbindungen bzw. Säureamidbindungen) zu
führen, ohne daß bitterer Geschmack der Produkte beobachtet
wird. In der Regel tritt sogar bis zu einem Abbaugrad von
15%, bezogen auf die Peptidbindungen des Ausgangsproteins,
kein bitterer Geschmack der Produkte auf.
Der Erfolg des erfindungsgemäßen Verfahrens scheint ursäch
lich mit der Verwendung trägergebundener Proteasen zusammen
zuhängen, insbesondere mit der Verwendung kovalent gebundener
Enzyme. Vorzugsweise verwendet man Pilzproteasen unter
Bedingungen, die auf deren (bekannte) Aktivitäts- und Stabi
litätseigenschaften abgestimmt sind. Besonders bevorzugt sind
Pilzproteasen des Genus Aspergillus. Geeignete Enzyme fallen
unter die Charakterisierung gemäß E.C. 3.4.21.15 und 3.4.24.4.
Besondere Eignung scheint den Enzymen zuzukommen, wenn Wir
kungsoptima im neutralen und im alkalischen Bereich
vorliegen. Von speziellem Interesse sind Vertreter der Art
Aspergillus flavusoryzae. Im Mittelpunkt steht die aus
Untergruppe Aspergillus sojae, Gruppe A.oryzae gewonnene
Pilzproteinase, beispielsweise das unter der Bezeichnung
Corolase PN® im Handel befindliche Enzym oder
Präparate aus Aspergillus melleus-Kulturen. Zur näheren
Charakterisierung können die folgenden Daten dienen:
Es handelt sich bei der Corolase PN® um ein Produkt mit einer
im neutralen und einer im alkalischen pH-Bereich aktiven
Enzymeinheit. Das Wirkungsoptimum des Enzyms gegenüber Casein
als Substrat liegt bei einem pH von 7-9, gegenüber Haemo
globin bei pH 6, Nebenoptimum 8.
Als Temperatur-Wirkungs-Optimum des freien Enzyms wurden 50°C
gefunden. Das Stabilitätsoptimum liegt bei pH 6-8. Der
isoelektrische Punkt des Enzyms liegt bei pH 4,5-5. Das
Enzym läßt sich durch Komplexbildner wie EDTA, durch OH-gruppen
reaktive Reagentien wie Phenylmethylsulfonylfluorid (PMSF)
sowie durch obenflächenaktiven Substanzen wie Natriumlauryl
sulfat u.ä. wenigstens partiell hemmen. Zur weiteren Charak
terisierung können gegebenenfalls die Begleitaktivitäten
bestehend aus Amylase-, Cellulase-, Pentosanase- und Galac
tomannanaseaktivität herangezogen werden.
Bei den erfindungsgemäß besonders interessanten Enzymen wird
in der Regel ein Verhältnis "Aktivität bei pH 5 zu Aktivität
bei pH 8 (gegenüber Haemoglobin als Substrat)" von 0,5 zu
bis 1,5 zu 1 festgestellt.
Definitionsgemäß handelt es sich bei den erfindungsgemäß zu
verwendenden Proteasen, insbesondere der Corolase PN® um trä
gergebundene Enzyme.
Als Trägermaterialien kommen die an sich bekannten Trägertypen
für immobilisierte Enzyme in Frage. (Vgl. O. Zaborsky "Immo
bilized Enzymes", Chemical Rubber Corporation Press, Cleveland,
Ohio, 1973).
Genannt seien einerseits hoch poröse, anorganische Trägerma
terialien wie z. B. Glas, Bentonit u. ä. neben porösen organi
schen polymeren Trägern.
Dabei können sowohl rein synthetische Polymere wie vernetztes
Polyacrylamid u. Derivate, Polystyrol, polymere Acrylate bzw.
Methacrylate, Äthylen-Maleinsäureanhydrid-Copolymere, Polypep
tide, Nylon als auch semisynthetische Polymere, Naturstoffe
und abgewandelte Naturstoffe wie Cellulose, Chitin, Alginsäure,
Kollodium, Dextran, und handelsübliche modifizierte Dextrane
Agarose, Stärke, Keratin,
Kollagen als Träger eingesetzt werden.
Als reaktive Gruppen zur Immobilisierung seien die in Ullmanns
Enzyklopädie der Technischen Chemie, 4. Auflage, Band 10,
Chemie, S. 540 genannten angeführt.
Bevorzugt werden Oxirangruppen. Weiter sind besonders bevor
zugt polymere Träger auf Acrylatbasis, insbesondere die
sogenannten Acrylharzperlen.
Herstellung und Handhabung der einschlägig verwendbaren Acryl
harzperlen kann der GB-PS 1 329 062, DE-OS 22 37 316, US-PS
4 070 3248, DE-PS 27 22 751 entnommen werden.
Die Ausführung der Erfindung kann nach den für hydrolytische
Reaktionen mit trägergebundenen Enzymen üblichen Methoden
vorgenommen werden. So wird das Trägermaterial zweckmäßig in
Verbindung mit einer Säule angewendet, wobei die Lösung des zu
hydrolysierenden Substrats über die mit dem polymeren Träger
beschickte Säule läuft.
Die Substratlösungen enthalten in der Regel zwischen 5 und
15 Gew.-% Substrat. Als Richtwert gelte beispielsweise
eine 5%ige (Gew.-%) Lösung, z. B. eine Caseinatlösung. Der
pH-Wert richtet sich in erster Näherung nach den Kenndaten des
Enzyms, wobei eine gewisse Flexibilität hinsichtlich des
pH-Werts angenommen werden kann. Bei der Verwendung des Enzyms
Corolase PN ist ein pH-Bereich von 6-9 zweckmäßig. Auch
hinsichtlich der anwendbaren Temperaturen ist in Abhängigkeit
von den Kenndaten des Enzyms eine gewisse Variationsbreite
möglich, die etwa mit dem Bereich von Raumtemperatur bis 60°C
angegeben werden kann. So kann die trägergebundene Corolase PN®
im Bereich von 20-60°C verwendet werden.
Durch die Wahl der Durchflußgeschwindigkeit (Verweilzeit)
ergibt sich bei Verwendung von Säulen eine gewisse Steuerungs
möglichkeit für das Hydrolysegeschehen. Es ist z. B. mit
geringem Aufwand möglich, die Hydrolyse so weit fortzuführen,
daß gerade noch keine bitterschmeckenden Produkte auftreten.
Mit Caseinatlösung als Substrat und trägergebundener Corolase PN®
als Protease erhält man z. B. auch bei Hydrolysegraden bis 15%
keine bitteren Casein-Hydrolysate. Dieses Ergebnis ist umso
überraschender als man bei Verwendung freier Corolase PN®
unter sonst vergleichbaren Bedingungen bitterschmeckende
Peptide ab einem Hydrolysegrad von 3% erhält.
Die Gründe für dieses Ergebnis sind nicht unmittelbar einzu
sehen. Einen Hinweis könnte der experimentelle Befund darstellen,
daß die nach dem erfindungsgemäßen Verfahren unter Verwendung
der trägergebundenen Protease hergestellten Hydrolyseprodukte
wenig bis keine Anteile an Peptiden mit Molgewichten von
1000-6000 Dalton aufweisen. Es käme folglich darauf an, die
Reaktionsbedingungen so einzurichten, daß der Anteil an
Peptiden in diesem Molgewichtsbereich minimiert wird.
Die Beladung der Träger mit dem erfindungsgemäß wirksamen
Enzym kann in an sich bekannter Weise vorgenommen werden,
beispielsweise durch Reagierenlassen mit den (oxirangruppen
haltigen) Acrylglasperlen.
Man wäscht in an sich bekannter Weise nach, z. B. mit de
stilliertem Wasser und anschließend mit einer (inerten)
Elektrolytlösung, beispielsweise mit 5%iger Natriumchlorid-
Lösung. Die so erhaltenen Enzym-Trägerpräparate sind unmittelbar
verwendungsfähig.
Im allgemeinen wird eine 1-20 Gew.-%ige Substratlösung
verwendet, beispielsweise eine wäßrige Caseinatlösung. Die
mittlere Verweilzeit der Substratlösung kann 1 bis 100 Minuten,
vorzugsweise 5-10 Minuten betragen.
100 g Pilzproteinase aus A. oryzae wie vorstehend charakterisiert
wurde in 1 Liter 1 Mol Kalium-
Phosphat-Puffer pH 8,5 gelöst. Die Enzymlösung wurde
mit 100 g Enzymträger auf Acrylharzbasis gekuppelt. Damit
eine gute Benetzung der Perlen gewährleistet war, rotierte
das Gefäß auf einer Rollbank ca. 50 Stunden lang bei
Raumtemperatur. Anschließend wurde der Träger auf einer
Glas-Fritte (Por. 2-3) mit dest. Wasser und danach mit
einer 5%igen Natrium-Chlorid-Lösung ausgewaschen.
5 g immobilisierte Pilzproteinase hydrolysierte in einer
doppelwandigen Säule (60°C) eine 5%ige Natrium-Caseinat-
Lösung, die kontinuierlich durch die Säule gepumpt wurde.
Die Durchflußgeschwindigkeit betrug 24 ml pro Stunde. Der
Hydrolysegrad lag bei 16%. Bittergeschmack konnte nicht
festgestellt werden.
10 g immobilisierte Pilzproteinase hydrolysierte wie oben
beschrieben eine 5%ige Natrium-Caseinat-Lösung bei einer
Durchflußgeschwindigkeit von 18 ml pro Stunde. Der Hydro
lysegrad betrug 37%. Bittergeschmack wurde festgestellt.
300 ml einer 5%igen Natrium-Caseinat-Lösung wurden 30
Minuten lang mit 300 mg der Protease gemäß Beispiel 1
inkubiert (Temperatur 60°C). Die Reaktion wurde durch
10minütiges Kochen der Substratlösung in einem Wasserbad
abgestoppt. Der Hydrolysegrad betrug 16%. Der Bitterge
schmack war sehr ausgeprägt.
Eine Auftrennung der Hydrolysate von Beispiel 2 und 24 an
Sephadex G 15, G 25 und G 50 hatte signifikante Unterschie
de in der Molekülgröße der Bruchstücke gezeigt zwischen dem
Hydrolysat, das mit freiem und jenem, das mit immobilisier
tem Enzym hergestellt wurde. Bei dem nicht bitter schmeckenden
Hydrolysat fehlen die Bruchstücke mit einem Molekularge
wicht von ca. 1000 bis 6000.
Die Bestimmung des Hydrolysegrades erfolgte durch Formolti
tration. Modifiziert nach "Methods in Enzymology",
Volume III, 457 (Academic Press Inc., New York 1957).
5 ml Probe wird in ein 100 ml Becherglas pipettiert und auf
pH 7,24 eingestellt. Nach Zugabe von 5 ml neutralisierter
40%iger Formalinlösung titriert man mit 0,01 n Natronlauge
auf pH 8,3.
In Bombenrohre wurden 100, 300 und 500 mg Natrium-Caseinat
der Firma De Melkindustrie Veghel BV, Holland mit 10 ml 3 n
HCL eingeschmolzen und 17 Stunden bei 121°C im Trocken
schrank stehen gelassen. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur
wurde von 0,5 ml Säurehydrolysat eine Formoltitration
durchgeführt.
Mit 5 ml 5%iger Natrium-Caseinat-Lösung wurde ebenfalls
eine Formoltitration durchgeführt.
0,5 ml (=5 mg Natrium-Caseinat) wurden mit 3,247 ml 0,01 n
NaOH titriert, d. h. 100 mg Natrium-Caseinat verbrauchen
69,40 ml.
5 ml (=250 mg Natrium-Caseinat) wurden mit 15,00 ml
0,01 n NaOH titriert, d. h. 100 mg Natrium-Caseinat ver
brauchen 6,00 ml.
Geht man davon aus, daß bei der Säurehydrolyse das Natrium-
Caseinat vollständig abgebaut worden war, so ergibt sich
nach Abzug des Blindwertes für die Totalhydrolyse von 100 mg
Natrium-Caseinat ein Natronlaugenverbrauch von 63,40 ml 0,01 n NaOH.
Daraus läßt sich der Abbaugrad der Hydrolysate im Vergleich
zum säurehydrolysierten Natrium-Caseinat berechnen.
Claims (15)
1. Verfahren zur modifizierten enzymatischen Hydrolyse von
Proteinsubstraten ohne Bildung bitterschmeckender
Hydrolyseprodukte,
dadurch gekennzeichnet,
daß man die enzymatische Hydrolyse der Proteinsubstrate
mittels Träger gebundener Proteinasen bis zu einem
hydrolytischen Abbaugrad von mindestens 5 und bis 15% der
Peptid-Bindungen im Molekül durchführt, wobei als Träger
hochporöse anorganische Träger und poröse organische
polymere Träger in Frage kommen.
2. Verfahren zur modifizierten enzymatischen Hydrolyse von
Proteinsubstraten gemäß Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet,
daß man Casein und/oder Caseinate als Substrat verwendet.
3. Verfahren zur modifizierten enzymatischen Hydrolyse von
Proteinsubstraten gemäß den Ansprüchen 1 und 2, dadurch
gekennzeichnet, daß man als trägergebundene Proteinase
Pilzprotease verwendet.
4. Verfahren zur modifizierten enzymatischen Hydrolyse von
Proteinsubstraten gemäß Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet,
daß man Pilzproteasen aus Aspergillus-Arten verwendet.
5. Verfahren zur modifizierten enzymatischen Hydrolyse von
Proteinsubstraten gemäß den Ansprüchen 3 und 4, dadurch
gekennzeichnet, daß das verwendete Enzymprodukt
Wirkungsoptima im neutralen und im alkalischen pH-Bereich
aufweist.
6. Verfahren zur modifizierten enzymatischen Hydrolyse von
Proteinsubstraten gemäß den Ansprüchen 1 bis 5, dadurch
gekennzeichnet, daß das Molekulargewicht der Proteasen im
Bereich 20 000-50 000 Dalton liegt.
7. Verfahren zur modifizierten enzymatischen Hydrolyse von
Proteinsubstraten gemäß den Ansprüchen 1 bis 6, dadurch
gekennzeichnet, daß man als Pilzprotease das Enzym Corolase
PN®, eine aus der Gruppe Aspergillus oryzae gewonnene
Protease, verwendet.
8. Verfahren zur modifizierten enzymatischen Hydrolyse von
Proteinsubstraten gemäß den Ansprüchen 1 bis 7, dadurch
gekennzeichnet, daß man die enzymatische Hydrolyse des
Proteinsubstrats im pH-Bereich 6-9 durchführt.
9. Verfahren zur modifizierten enzymatischen Hydrolyse von
Proteinsubstraten gemäß den Ansprüchen 1 bis 8, dadurch
gekennzeichnet, daß man die enzymatische Hydrolyse im
Temperaturbereich von 18-60 Grad C durchführt.
10. Verfahren gemäß den Ansprüchen 2 bis 9, dadurch
gekennzeichnet, daß man eine 1 bis 20 Gew.-%ige wäßrige
Caseinatlösung als Substrat verwendet.
11. Verfahren gemäß den Ansprüchen 1 bis 10, dadurch
gekennzeichnet, daß man die trägergebundenen Proteinasen
mittels eines Säulenreaktors anwendet.
12. Verfahren gemäß Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, daß die
mittlere Verweilzeit der Substratlösung 1 bis 100 Minuten,
vorzugsweise 5 bis 10 Minuten, beträgt.
13. Verfahren gemäß den Ansprüchen 1 bis 12, dadurch
gekennzeichnet, daß die polymeren Träger Acrylharzperlen mit
haftungsvermittelnden Gruppen darstellen.
14. Verfahren gemäß Anspruch 13, dadurch gekennzeichnet, daß die
polymeren Träger Acrylharzperlen mit Oxirangruppen als
haftungsvermittelnden Gruppen darstellen.
15. Nach dem Verfahren gemäß den Ansprüchen 1 bis 14
hergestellte Hydrolyseprodukte, dadurch gekennzeichnet, daß
die Produkte ein Minimum an Peptiden mit einem
Molekulargewicht im Bereich 1×103 bis 6×103 Dalton
aufweisen.
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